ES2910987T3 - Composiciones oftálmicas - Google Patents

Abstract

Una composición oftálmica que comprende: i) un aceite base que comprende un aceite de silicona; ii) un aditivo que comprende un primer segmento que facilita o modula la solubilidad en el aceite base conjugado con un segundo segmento que facilita o modula la solubilidad del fármaco y/o la liberación del fármaco en donde el primer segmento comprende un resto que contiene poli(dimetilsiloxano); y iii) un fármaco.

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones oftálmicas

La presente invención se dirige a composiciones oftálmicas y a los componentes de las mismas. Las composiciones se pueden administrar en el ojo, por ejemplo dentro del espacio vítreo del ojo, con fines terapéuticos. Se pueden usar en forma de o como parte de, taponamientos que tienen un efecto físico. Las composiciones se pueden usar para tratar el desprendimiento de retina y en procedimientos para tratar el desprendimiento de retina, tales como vitrectomías.

La retina es una capa sensible a la luz, que tiene un grosor de 0,1-0,32 mm y un diámetro aproximado de 30-40 mm y recubre la parte posterior del interior del ojo. La función principal de la retina es dirigir una imagen invertida mediante una señal luminosa, que después se convierte en una señal química transmisible por fototransducción. El patrón ordenado se envía después al cerebro a través del nervio óptico. El centro de la retina es la única parte capaz de visión fina detallada.

La estructura de la retina se puede dividir en dos capas: la neurorretina interna y la monocapa epitelial externa que consiste en el epitelio pigmentario de la retina, que es una capa de células compactadas hexagonalmente situada en la parte posterior del ojo humano. La neurorretina contiene fotorreceptores y el epitelio pigmentario de la retina forma una capa externa en la membrana de Bruch. El epitelio pigmentario de la retina tiene varias funciones, concretamente, la absorción de luz, el transporte epitelial, la amortiguación espacial de iones, el ciclo visual, la fagocitosis, la secreción y la inmunomodulación. En particular, el epitelio pigmentario de la retina proporciona nutrientes a las células visuales internas, además de transportar los desechos metabólicos a la coroides.

El desprendimiento de retina tiene lugar cuando la neurorretina interna se desprende del epitelio pigmentario de la retina que la soporta. Existen diversos factores causantes que pueden dar como resultado el desprendimiento de retina, tales como un suceso traumático, la retinopatía diabética proliferativa y la cirugía de cataratas. Si la retina permanece desprendida, esta se degenerará y perderá su capacidad de funcionar. Por lo tanto, la falta de tratamiento del desprendimiento de retina de forma rápida y eficaz puede conducir a la pérdida de visión localizada permanente (por ejemplo, se perderá la visión central si permanece el desprendimiento macular) o la pérdida permanente de la visión.

Existen diferentes clases de desprendimiento de retina: i) desprendimiento de retina regmatógeno, que está causado por un desgarro o rotura en la retina y la acumulación de humor vítreo entre la retina desprendida y el epitelio pigmentario de la retina que puede provocar más separación entre las dos capas; ii) desprendimiento de retina exudativo, que está causado por un aumento de los vasos sanguíneos detrás de la retina que puede estar provocado por afecciones tales como degeneración macular grave, presión sanguínea muy alta y determinados cánceres, tales como melanoma coroideo y iii) desprendimiento de retina por tracción, que está causado por un tirón en la retina que puede suceder como resultado de, o una complicación de, otras afecciones, tales como retinopatía diabética proliferativa y vitreorretinopatía proliferativa.

La vitreorretinopatía proliferativa es una afección que puede seguir a una rotura en la retina donde se produce una formación de membrana parecida a una cicatriz, análoga a la cicatrización dinámica de heridas. El tejido parecido a una cicatriz después crea tracción que tira de la neurorretina del epitelio pigmentario de la retina que lo soporta, lo que conduce a desprendimiento de retina por tracción.

La vitreorretinopatía traumática proliferativa tiene lugar en la interfaz vitreorretiniana y es el resultado de un traumatismo perforante en el segmento posterior del ojo o puede tener lugar después de una intervención quirúrgica. La vitreorretinopatía proliferativa es una complicación derivada del desprendimiento de retina regmatógeno, especialmente si ha sido un desgarro grave de la retina. La vitreorretinopatía proliferativa tiene lugar en aproximadamente el 5-10 % de todos los desprendimientos de retina regmatógenos y la vitreorretinopatía proliferativa también está implicada en el redesprendimiento después de la cirugía en el 75 % de los casos, haciendo que la vitreorretinopatía proliferativa sea la causa más común de fracaso de la cirugía de desprendimiento de retina regmatógeno.

Durante la lesión o el desprendimiento de retina regmatógeno, el epitelio pigmentario de la retina pierde el contacto con las células adyacentes y, en consecuencia, pierde la señalización celular. El epitelio pigmentario de la retina entra en contacto después con distintos factores de crecimiento y citocinas, provocando que las células proliferen, se desdiferencien y migren para reparar el defecto. Las células del epitelio pigmentario de la retina experimentan una transición epitelio-mesenquimatosa donde las microvellosidades se retraen provocando una pérdida de adhesión a la neurorretina y su matriz extracelular. Después las células se redondean y se separan de su membrana basal. Las células del epitelio pigmentario de la retina se desdiferencian después en los fenotipos de reparación de heridas, similares a los fibroblastos y macrófagos que construyen una membrana, a medida que migran hacia el espacio vítreo. Esta diferenciación está regulada por diversos factores de crecimiento (factor de crecimiento derivado de plaquetas, TGF-p, factor de crecimiento epidérmico, factor de necrosis tumoral alfa, FGF y otros), así como citocinas (interleucina 1, 6, 8, 10 e interferón gamma). Las células del epitelio pigmentario de la retina son el componente principal de las membranas. Sin embargo, otras células implicadas incluyen los fibroblastos, que son responsables de la reparación de los tejidos, en particular de la formación de cicatrices, los miofibroblastos y los macrófagos, así como cantidades menores de células gliales. Las membranas resultantes contraen y distorsionan/tiran de la retina causando el desprendimiento de retina por tracción.

Existen numerosas formas en las que se puede tratar el desprendimiento de retina, teniendo todas el objetivo subyacente de reinsertar la retina en el epitelio pigmentario de la retina y reparar cualquier desgarro o rotura que pueda estar presente en la retina. Uno de dichos tratamientos es la vitrectomía seguido de la inserción de un taponamiento, que rellena el espacio vítreo.

Una vitrectomía es la eliminación quirúrgica del humor vítreo del ojo, lo que implica la eliminación del humor vítreo a través de un pequeño corte en la esclera. El humor vítreo se reemplaza después por solución salina, que a su vez se puede sustituir posteriormente por aire, gas o un taponamiento de aceite de silicona. Los taponamientos evitan el acceso de ningún componente acuoso restante al lugar del desgarro, lo cual inhibe la migración de cualquier componente acuoso en el espacio subrretiniano, excluyendo cualquier factor inflamatorio y de inicio del desprendimiento de retina.

El aire y el gas son taponamientos temporales que duran desde días (por ejemplo, en el caso de aire) a semanas, dependiendo del gas usado (por ejemplo, los gases de perfluorocarbono tienen una permanencia de dos-tres semanas). Sin embargo, durante el uso de taponamientos de aire o gas, el paciente debe tumbarse predominantemente boca abajo durante un periodo de 4 semanas para asegurar que la burbuja de aire o gas se alinea con la región dañada y que cualquier material vitreo restante se mantiene fuera del lugar reparado dado que el movimiento del fluido viscoso puede conducir a una lesión mayor. Los aceites de silicona y los derivados de los mismos, por otro lado, son la única clase de taponamientos a largo plazo cuyos efectos no se disipan a lo largo del tiempo. Es necesario, sin embargo, eliminar el aceite de silicona después de la cirugía inicial (por ejemplo, de dos a ocho meses después de la cirugía inicial).

Se han investigado alternativas a los aceites de silicona. Una de dichas alternativas en el aceite de silicona fluorado. La gravedad específica del aceite de silicona fluorado se puede adaptar dependiendo de la proporción de aceite de silicona fluorado a aceite de silicona, pero la baja viscosidad del aceite de silicona fluorado puede causar una respuesta macrófaga. Tampoco es automáticamente seguro usar aceite de silicona fluorado de viscosidad elevada dado que se han observado depósitos de color blanco en la retina con materiales de 1750 mPas.

Se han investigado otros aditivos para el aceite de silicona, tales como alcanos semifluorados, que son transparentes y no miscibles en agua. Los alcanos semifluorados actúan como un tensioactivo anfifílico dado que el extremo hidrocarburo es altamente hidrófobo mientras que el extremo fluorocarburo es menos hidrófobo. La gravedad específica de los alcanos semifluorados se puede determinar mediante la longitud de la cadena alcano. El uso de alcanos semifluorados en un entorno clínico como el único agente de taponamiento se ha restringido debido a los efectos de dispersión, lo que puede inducir una respuesta macrófaga. Por consiguiente, se han emprendido estudios usando mezclas de alcanos semifluorados con aceites de silicona. En esos estudios, se descubrió que la solubilidad de los alcanos semifluorados estaba determinada por la viscosidad del aceite de silicona y por el peso molecular de los alcanos semifluorados y el aumento de cualquiera reducirá la solubilidad de los alcanos semifluorados.

Se ha descubierto que en algunas circunstancias se requieren tratamientos adicionales. Por ejemplo, cuando se trata la vitreorretinopatía proliferativa, se pueden administrar corticosteroides por vía intravítrea para combatir la respuesta inflamatoria provocada por una rotura o desgarro en la retina. Sin embargo, los corticosteroides también se pueden aplicar por vía tópica, inyecciones subconjuntivales y, con menos frecuencia, inyecciones subtenonianas, inyecciones en el suelo orbitario o inyecciones retrobulbares. Las fuerzas de tensión se pueden aliviar mediante cirugía, la cual elimina el tejido cicatrizado que se ha formado y se denomina pelado de la membrana. Normalmente se realiza una vitrectomía al mismo tiempo que el pelado de la membrana.

En el caso de que no se consiga la reinserción de la retina de manera rápida y eficaz, no existe un tratamiento preventivo eficaz para la vitreorretinopatía proliferativa. Esto se puede atribuir a la dificultad para conseguir niveles terapéuticos de fármaco en el espacio vítreo y la retina mediante las vías de administración convencionales. Es posible administrar fármacos por vía intravítrea o por vía subconjuntival, pero la vitreorretinopatía proliferativa es una afección a largo plazo que requiere tratamiento durante un periodo de varias semanas y la semivida de la mayoría de los fármacos en el espacio vítreo o la cavidad subconjuntival es corta. Además, las inyecciones repetidas pueden causar complicaciones, tales como infecciones, inflamación y presión intraocular elevada y/o un aumento del fármaco hasta niveles tóxicos.

A día de hoy, se han investigado diversos agentes farmacológicos para reducir y/o prevenir la vitreorretinopatía proliferativa. Las dos categorías principales son los fármacos antiinflamatorios y antiproliferativos, pero también se han realizado estudios con antioxidantes, antineoplásicos y factores anticrecimiento, solos y en forma de terapias de combinación de dos o más fármacos. No existe, sin embargo, un modo satisfactorio para administrar los fármacos. Los dispositivos de administración de fármacos existentes tienen una multitud de inconvenientes, tales como limitaciones del contenido de fármacos y las cantidades liberadas (en el caso de lentes de contacto), liberación de los fármacos demasiado deprisa o demasiado pronto (en el caso de liposomas e insertos), dificultad para revertir en el

caso de efectos secundarios (en el caso de micro y nanopartículas) y el potencial de causar infecciones (en el caso

de explantes, tales como bucles esclerales).

Persiste por tanto la necesidad de una composición nueva y mejorada que se puede usar para tratar trastornos

oculares, que no tengan los inconvenientes de la técnica anterior y los enfoques existentes. De manera específica,

persiste la necesidad de una composición que se pueda usar para prevenir o tratar trastornos, tales como

vitreorretinopatía proliferativa y que suministre los fármacos de manera eficaz durante un periodo de tiempo

prolongado. Ventajosamente, las cantidades suministradas durante un periodo de tiempo prologado son además no

tóxicas. Se ha descubierto que la composición de la presente invención, que comprende un aceite base, un aditivo

conjugado y un fármaco, logra los efectos deseados de fármacos de administración segura y eficaz durante un periodo

de tiempo prolongado.

Por lo tanto, de acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una composición que

comprende:

- un aceite base que comprende un aceite de silicona;

- un aditivo de aceite de silicona conjugado que comprende un segmento de poli(dimetilsiloxano), como se

establece en las reivindicaciones adjuntas y

- un fármaco.

La presente invención es particularmente ventajosa debido a que se pretende que los componentes que se usan no

sean tóxicos. Las composiciones también son ventajosas dado que tienen un efecto ventajoso en la solubilización y la

liberación de los fármacos además de un efecto de relleno físico.

Por consiguiente, la composición puede ser una composición oftálmica, por ejemplo una composición adecuada para

aplicación dentro del ojo o adecuada para aplicación a un taponamiento o un taponamiento oftálmico en sí misma.

En una disposición, se puede usar cualquier aceite base, tal como un aceite de silicona, un aceite de silicona fluorado

o un aceite de perfluorocarbono. El aceite base puede comprender uno o más aceites de silicona, aceites de silicona

fluorados, aceites de perfluorocarbono o mezclas de los mismos. Como alternativa, el aceite base puede comprender

exclusivamente aceite de silicona, aceite de silicona fluorado o aceite de perfluorocarbono. El aceite de silicona puede

ser poli(dimetilsiloxano). En una disposición, el aceite base puede comprender polidimetilsiloxano purificado, tal como

SiO¹⁰⁰⁰, SiO⁵⁰⁰⁰ o los productos comerciales Siluron® 2000, Siluron® 5000 y Siluron® 1000, que se obtienen de Fluron®

GmBH de Magirus-Deutz-StraB 10, 89077 Ulm, Alemania o los productos comerciales Sil-1000® y Sil-5000®, que se

obtienen de D.O.R.C. Dutch Oftalmic Research Center (International) B.V. de P.O. Box 43, 3214 ZG Zuidland, Países

Bajos o los productos comerciales Oxane 1300 y Oxane 5700, que se obtienen de Bausch Lomb, 106 London Road,

Kingston upon Thames, Surrey, KT2 6TN, Inglaterra o mezclas de los mismos. En otra disposición, el aceite base

comprende un aceite de silicona de alta densidad que comprende polidimetilsiloxano y perfluorohexiloctano, tal como

los productos comerciales Densiron® 68, Densiron® Xtra y Siluron® Xtra. Se entenderá que se pueden usar otros

productos comerciales equivalentes que consigan un efecto técnico similar.

La viscosidad cinemática de los distintos tipos de aceites base, tales como aceites base de polidimetilsiloxano o aceites

de silicona de alta densidad que comprenden polidimetilsiloxano y perfluorohexiloctano, se expresa en centistokes (1

cSt = 10-6 m2/s) y es el resultado del peso molecular y de la longitud del polímero; el aumento del peso molecular de

SiO da como resultado un aumento en la longitud de la cadena polimérica y, en consecuencia, un aumento de la

viscosidad. En una disposición, la viscosidad cinemática del aceite base puede variar de aproximadamente 100 a

aproximadamente 10.000 cSt, de aproximadamente 200 a aproximadamente 9.500 cSt, de aproximadamente 300 a

aproximadamente 9.000 cSt, de aproximadamente 400 a aproximadamente 8.500 cSt, de aproximadam aproximadamente 8.000 cSt,

aproximadamente 600

aproximadamente 8.500 cSt, de aproximadam aproximadamente 7.000 cSt, de aproximadamente 800 a aproximadamente 6.500 cSt, de aproximadam aproximadamente 6.000 cSt, de aproximadamente 950 a aproximadamente 5.500 cSt, de aproximadamente 1.000 a

aproximadamente 5.000 cSt, de aproximadamente 1.100 a aproximadamente 4.900 cSt, de aproximadamente 1.200

a aproximadamente 4.800 cSt, de aproximadamente 1.300 a aproximadamente 4.700 cSt, de aproximadamente 1.400

a aproximadamente 4.600 cSt, de aproximadamente 1.500 a aproximadamente 4.500 cSt, de aproximadamente 1.700

a aproximadamente 4.300 cSt, de aproximadamente 1.900 a aproximadamente 4.100 cSt, de aproximadamente 2.000

a aproximadamente 4.000 cSt, de aproximadamente 2.200 a aproximadamente 3.800 cSt, de aproximadamente 2.400

a aproximadamente 3.600 cSt, de aproximadamente 2.600 a aproximadamente 3.400 cSt o de aproximadamente

2.800 a aproximadamente 3.200 cSt. En otra disposición, la viscosidad cinemática del aceite base puede ser de

aproximadamente 500 cSt, de aproximadamente 600 cSt, de aproximadamente 700 cSt, de aproximadamente 800

cSt, de aproximadamente 900 cSt, de aproximadamente 1.000 cSt, de aproximadamente 1.100 cSt, de

aproximadamente 1.200 cSt, de aproximadamente 1.300 cSt, de aproximadamente 1.400 cSt, de aproximadamente

1.500 cSt, de aproximadamente 1.700 cSt, de aproximadamente 1.900 cSt, de aproximadamente 2.100 cSt, de

aproximadamente 2.300 cSt, de aproximadamente 2.500 cSt, de aproximadamente 2.700 cSt, de aproximadamente

2.900 cSt, de aproximadamente 3.100 cSt, de aproximadamente 3.300 cSt, de aproximadamente 3.500 cSt, de

aproximadamente 3.700 cSt, de aproximadamente 3.900 cSt, de aproximadamente 4.100 cSt, de aproximadamente

4.300 cSt, de aproximadamente 4.500 cSt, de aproximadamente 5.000 cSt, de aproximadamente 6.000 cSt, de aproximadamente 7.000 cSt, de aproximadamente 8.000 cSt, de aproximadamente 9.000 cSt, de aproximadamente 10.000 cSt.

La expresión "aditivo de aceite base conjugado" en el presente documento representa un aditivo que tiene segmentos que están conjugados, es decir unidos, por ejemplo unidos covalentemente, juntos. Un primer segmento facilita la solubilidad en el aceite base, mientras que un segundo segmento facilita la solubilidad del fármaco y/o modifica la liberación del fármaco u otro comportamiento.

En otras palabras, el aditivo puede contener al menos un aceite base- segmento o resto compatible y al menos un fármaco- segmento o resto compatible.

Opcionalmente, el aditivo también puede estar "conjugado" en un sentido diferente de la palabra, es decir, puede contener enlaces saturados e insaturados alternos, por ejemplo en el segundo segmento (por ejemplo, para ser similar a dicha conjugación en ciertos fármacos, para un efecto "similar disuelve a similar"), pero dicha conjugación es más bien opcional que esencial.

El uso de aditivos de aceite base conjugados con segmentos similares a la base es particularmente ventajoso debido a que reduce los problemas de solubilidad. En ausencia de un aditivo conjugado, el fármaco libre tendría que ser liberado únicamente por difusión a través del aceite, lo cual se ha descubierto que sucede de forma incontrolada durante el período de una semana in vivo en un estudio basado en un modelo de conejo.

En una disposición, la parte de aceite base del aditivo puede estar conjugada con un resto hidrófobo. Se puede usar cualquier resto hidrófobo adecuado, de modo que no sea tóxico y/o sea soluble en aceite y/o evitar la proliferación. En una disposición, el resto hidrófobo puede ser no tóxico. En otra disposición, el resto hidrófobo puede ser soluble en el aceite base. En una disposición más, el resto hidrófobo puede evitar la proliferación en el caso de que se escinda de la parte de aceite base del aditivo, la como la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo.

En una disposición, el resto hidrófobo se puede seleccionar de grupos alquilo C1-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquenilo C2-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquil C^7-25-arilo opcionalmente sustituidos o grupos alquenil C8-25-arilo opcionalmente sustituidos, grupos alquil C1-10-O-alquilo C1-10 opcionalmente sustituidos, grupos amina opcionalmente sustituidos (-NRR', en donde R y R' se seleccionan independientemente entre H, OH, un grupo alquilo C1-10, un grupo alquenilo C2-10, un grupo alquil C7-25-arilo o un grupo alquenil C8-25-arilo), grupos amida opcionalmente sustituidos (-C(=O)NRR', en donde R y R' se seleccionan independientemente entre H, un grupo alquilo C1-10, un grupo alquenilo C2-10, un grupo alquil C^7-25-arilo o un grupo alquenil C^8-25-arilo) o grupos éster opcionalmente sustituidos (-COOR, en donde R se selecciona de un grupo alquilo C1-10, un grupo alquenilo C2-10, un grupo alquil C^7-25-arilo o un grupo alquenil C^8-25-arilo). En otra disposición, el resto hidrófobo se puede seleccionar de grupos alquilo C1-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquenilo C2-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquil C^7-25-arilo opcionalmente sustituidos o grupos alquenil C^8-25-arilo opcionalmente sustituidos.

En una disposición más, el resto hidrófobo puede tener una acción de fármaco positiva, ser un fármaco y/o parecerse a un fármaco que se puede usar en el ojo, por ejemplo en el tratamiento de trastornos oculares.

En una disposición, el resto hidrófobo puede ser un fármaco. Se puede usar cualquier fármaco adecuado. El fármaco puede estar presente en forma del fármaco libre, por ejemplo en forma neutra, ácida o básica. El fármaco puede ser un fármaco antiinflamatorio, un fármaco antiproliferativo, un fármaco anti factor de crecimiento, tal como anticuerpo anti-VEGF (anti factor de crecimiento endotelial vascular), por ejemplo ranibizumab y bevacizumab y otros fármacos adecuados, por ejemplo aflibercept, un fármaco antioxidante, un fármaco antineoplásico o mezclas de los mismos. En una disposición, el fármaco se puede seleccionar de un fármaco antiinflamatorio, un antiproliferativo, un fármaco antioxidante o mezclas de los mismos. En otra disposición, el fármaco se puede seleccionar de fármacos antiproliferativos, tales como el ácido todo-trans retinoico o antiinflamatorios, tales como antiinflamatorios no esteroideos, por ejemplo ibuprofeno. En una disposición, el fármaco puede ser ácido todo-trans retinoico. En una disposición alternativa, el fármaco puede ser ibuprofeno.

El ácido retinoico es particularmente ventajoso cuando se usa en la presente invención debido a que tiene efectos antiproliferativos y antioxidantes y se sabe que reduce la vitreorretinopatía proliferativa y la proliferación celular del epitelio pigmentario de la retina, además de usarse para tratar la leucemia y el acné. El ácido retinoico es un derivado de la vitamina A, que ya está presente en el ojo y desempeña un papel en el ciclo visual y por eso su uso el particularmente ventajoso. El ácido retinoico además es menos agresivo que otros fármacos antiproliferativos, tales como 5-fluorouracilo y es soluble en aceite de silicona. El ácido todo-trans retinoico no solo es un antiproliferativo sino que tiene una variedad de otros efectos que incluyen actividad antiinflamatoria. El ibuprofeno es particularmente ventajoso debido a que es un antiinflamatorio no esteroideo que se usa ampliamente para aliviar el dolor. El ibuprofeno es soluble en aceite de silicona.

En una disposición, el resto hidrófobo puede ser estructuralmente similar a, o un derivado de, fármacos/agentes antiproliferativos, fármacos/agentes anti factor de crecimiento, tales como anticuerpos anti-VEGF (anti factor de crecimiento endotelial vascular), por ejemplo ranibizumab y bevacizumab y otros fármacos/agentes adecuados, por ejemplo aflibercept, fármacos/agentes antioxidantes, fármacos/agentes antineoplásicos o mezclas de los mismos. Por ejemplo, los agentes antiproliferativos pueden ser derivados de la vitamina A, tales como derivados del ácido todotrans retinoico y los agentes antiinflamatorios pueden ser derivados de agentes antiinflamatorios no esteroideos, tales como derivados del ibuprofeno.

En una disposición alternativa, el resto hidrófobo puede ser un fármaco. Se puede usar cualquier fármaco adecuado. El fármaco puede ser un agente antiproliferativo o un agente antiinflamatorio. Por ejemplo, el agente antiproliferativo puede ser un derivado de la vitamina A, tal como ácido todo-trans retinoico y el agente antiinflamatorio puede ser un agente antiinflamatorio no esteroideo, tal como ibuprofeno o un derivado del mismo.

En una disposición, el aditivo de aceite base conjugado puede comprender un aceite base adecuado, tal como un aceite de silicona, un aceite de silicona fluorado o un aceite de perfluorocarbono. El aditivo de aceite base conjugado puede comprender uno o más aceites de silicona, aceites de silicona fluorados, aceites de perfluorocarbono o mezclas de los mismos. Como alternativa, el aditivo conjugado puede comprender exclusivamente aceite de silicona, aceite de silicona fluorado o aceite de perfluorocarbono. En una disposición, el aditivo conjugado puede ser un aditivo de poli(dimetilsiloxano) conjugado.

En una disposición, la parte de aceite base del aditivo, tal como la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo, puede terminar en uno o más grupos funcionales para facilitar la conjugación del resto hidrófobo. Los grupos funcionales pueden ser cualquier grupo funcional adecuado que facilite la conjugación al resto hidrófobo. En una disposición, los grupos funcionales pueden ser uno o dos grupos hidroxil alquilo. En una disposición, la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo puede terminar en bis(hidroxialquilo).

La parte de aceite base del aditivo, tal como la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo puede estar unida covalentemente al resto hidrófobo. La parte de aceite base del aditivo, tal como la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo, puede estar covalentemente unida por cualquier grupo funcional adecuado, tal como un grupo éster, un grupo amida, un grupo carbamato, un grupo carbonato, un grupo anhídrido y un grupo imina o un grupo éter. En una disposición, la parte de aceite base del aditivo, tal como la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo, puede estar covalentemente unido al grupo no tóxico mediante un grupo éster. El grupo no tóxico y la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo pueden someterse a una reacción de esterificación para formar la unión covalente, por ejemplo mediante una reacción de esterificación entre un grupo ácido carboxílico del resto hidrófobo y un grupo alcohol de la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo, tal como un grupo alcohol del grupo hidroxil alquilo terminal. La reacción de esterificación puede ser una reacción de esterificación de Steglich o se puede proceder mediante una reacción de anhídrido, por ejemplo. Se entenderá que son factibles otras reacciones de esterificación posibles.

Sin desear quedar ligados a la teoría, se cree que las interacciones entre el grupo conjugado (es decir covalentemente unido) del aditivo y el fármaco libre ayudan a la solubilidad en el aceite base y/o modifican la liberación del fármaco del aceite base. De manera similar, se cree que una interacción análoga entre la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo y el aceite base ayuda a la solubilidad. Como alternativa, es posible que el aditivo conjugado traiga aparejado un gran cambio en el aceite base que ayuda a la solubilidad del fármaco.

El aditivo conjugado permite al fármaco libre mantenerse dentro del depósito del taponamiento, lo que significa que el fármaco se puede administrar directamente al área en la que es más probable que tenga el mayor beneficio terapéutico. La liberación del fármaco se puede modificar también mediante la presencia del aditivo conjugado.

El aditivo conjugado es ventajoso porque en el caso de que la cadena se pudiera escindir, sus productos de degradación, concretamente el aceite base y el resto hidrófobo, no son tóxicos. Además, la parte de aceite base del aditivo puede ser químicamente parecida al taponamiento circundante y/o la parte hidrófoba del aditivo puede ser similar al fármaco que está presente. En particular, una ventaja específica de la presente invención es que los productos de degradación no son tóxicos y además pueden tener una utilidad terapéutica.

Administración y tratamiento

La presente invención proporciona un método para prevenir o tratar un trastorno ocular en un ser humano o un sujeto animal. La presente invención también proporciona composiciones para su uso en un método para prevenir o tratar un trastorno ocular en un ser humano o un sujeto animal. La presente invención también proporciona composiciones para su uso en un método para fabricar un medicamento para prevenir o tratar un trastorno ocular en un ser humano o un sujeto animal. Los métodos, usos en métodos y composiciones divulgados en el presente documento pueden comprender administrar al ser humano o sujeto animal una cantidad terapéuticamente eficaz de la composición, como se define en la presente invención.

En una disposición, el trastorno ocular es una enfermedad, afección o trastorno de la retina, tal como enfermedades proliferativas del epitelio pigmentario de la retina, una retina desprendida, una retina desgarrada o una enfermedad, afección o trastorno asociado con una anomalía en el epitelio pigmentario de la retina o en su función. En otra disposición, el trastorno ocular puede ser vitreorretinopatía proliferativa, proliferación celular del epitelio pigmentario de la retina o retinopatía diabética proliferativa. En una disposición más, el desprendimiento o desgarro de la retina puede estar causado por un desprendimiento de retina regmatógeno, desprendimiento de retina exudativo o desprendimiento de retina por tracción.

La composición de la presente invención implica la administración de un fármaco de la presente invención a un sujeto. El fármaco se puede administrar en una cantidad terapéuticamente eficaz.

La composición de la invención puede actuar como un taponamiento. Sin embargo no es esencial que la composición actúe como un taponamiento o que actúe como un taponamiento en sí misma: opcionalmente una cantidad relativamente pequeña de la composición se puede usar con el fin de administrar un fármaco.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" o "dosis terapéuticamente eficaz", como se usa en el presente documento, se refiere a una cantidad de un fármaco necesaria para: tratar; mejorar; prevenir la patología diana; exhibir un efecto terapéutico o preventivo detectable. La toxicidad y la eficacia terapéutica de los fármacos se pueden determinar mediante procedimientos farmacéuticos convencionales en cultivos celulares o en animales de experimentación, por ejemplo, determinando la LD50 (la dosis letal para el 50 % de la población) y la ED50 (la dosis terapéuticamente eficaz en el 50 % de la población). La relación de dosis entre efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico, que se puede expresar como la proporción LD50/ED50. Se prefieren los agentes que exhiben índices terapéuticos elevados.

La cantidad terapéuticamente eficaz o la dosis terapéuticamente eficaz es la cantidad de fármaco que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que el investigador, veterinario, médico u otro facultativo está buscando. Por ejemplo, actividad antiproliferativa o actividad antiinflamatoria en el tratamiento y/o prevención de los trastornos oculares, por ejemplo vitreorretinopatía proliferativa.

Las dosis preferentemente están en un intervalo de concentraciones en circulación que incluye la ED50 con poca o ninguna toxicidad. Las dosis pueden variar dentro de este intervalo. La formulación y dosificación exactas se deben elegir de acuerdo con los métodos conocidos en la técnica, a la vista de las especificidades de la afección del paciente.

La cantidad de dosificación se puede ajustar de manera individual para proporcionar los niveles de resto activo que son suficientes para conseguir los efectos deseados, es decir, la concentración mínima eficaz (MEC). La MEC variará para cada compuesto pero se puede estimar a partir de, por ejemplo, datos in vitro y experimentos animales. Las dosis necesarias para conseguir la MEC dependerán de las características individuales y de la vía de administración.

En general, la dosis/cantidad terapéuticamente eficaz se puede estimar usando métodos y técnicas convencionales que se conocen en la técnica. La dosis inicial en estudios animales (por ejemplo, primates no humanos, ratones, conejos, perros o cerdos) se pueden basar en las concentraciones eficaces establecidas en los ensayos en cultivos celulares. También se puede usar el modelo animal para determinar el intervalo de concentración apropiado. Dicha información se puede usar para determinar las dosis útiles en los pacientes humanos.

El nivel de dosificación específico requerido para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores, que incluyen la gravedad de la afección que se está tratando, la salud general del paciente (es decir edad, peso y dieta), el género del paciente, el tiempo de administración, el criterio del médico prescriptor y la tolerancia/respuesta a la terapia. En general, sin embargo, el fármaco puede estar presente en una cantidad de desde aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 gg por ml, de aproximadamente 5 a aproximadamente 900 gg por ml, de aproximadamente 10 a aproximadamente 800 gg por ml, de aproximadamente 15 a aproximadamente 700 gg por ml, de aproximadamente 20 a aproximadamente 600 gg por ml, de aproximadamente 25 a aproximadamente 500 gg por ml o de aproximadamente 30 a aproximadamente 400 gg por ml.

En una disposición, el fármaco se puede liberar durante un periodo de tiempo de desde aproximadamente 2 a aproximadamente 10 semanas, de aproximadamente 3 a aproximadamente 9 semanas, de aproximadamente 4 a aproximadamente 8 semanas o de aproximadamente 5 a aproximadamente 7 semanas. En otra disposición, el fármaco se puede liberar durante un periodo de aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8, aproximadamente 9 o aproximadamente 10 semanas.

Las presentes composiciones pueden, si se desea, proporcionarse en un envase o dispositivo dispensador que contiene una o más formas farmacéuticas unitarias que contienen la composición. Dicho envase o dispositivo puede, por ejemplo, comprender tapones de metal o plástico o vidrio y goma, tal como en los viales. Como alternativa, el dispositivo puede ser una jeringa precargada y el envase puede comprender una o más jeringas precargadas. El envase o dispositivo dispensador puede estar acompañado por instrucciones para la administración. Las composiciones de la invención se pueden formular en un vehículo farmacéuticamente compatible o también se pueden preparar, colocar en un recipiente apropiado y etiquetar para el tratamiento de una afección indicada.

Se entenderá que cualquier combinación de dosis y periodos de tiempo está prevista por la divulgación en el presente documento. Por ejemplo, el fármaco puede estar presente en una cantidad de desde aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 pg por ml y liberarse durante un periodo de aproximadamente 2 a aproximadamente 10 semanas. De manera similar, el fármaco puede estar presente en una cantidad de desde aproximadamente 10 a aproximadamente 800 pg por ml y liberarse durante un periodo de aproximadamente 4 a aproximadamente 8 semanas.

Definiciones

En aras de la simplicidad, los términos que normalmente se usan para referirse a los grupos monovalentes (tales como "alquilo" o "alquenilo") también se usan en el presente documento para referirse a grupos puente divalentes, trivalentes o tetravalentes que se forman a partir del grupo monovalente correspondiente por la pérdida de uno o más átomos de hidrógeno. Si dicho término se refiere a un grupo monovalente o a un grupo polivalente será evidente a partir del contexto. Donde se forma un grupo puente polivalente a partir de un resto cíclico, los enlaces de unión pueden estar en un átomo adecuado del anillo, sujeto a las reglas de valencia normales.

La referencia en el presente documento a "ibuprofeno" es una referencia al ácido (RS)-2-(4-(2-metilpropil)fenil)propanoico, el cual se muestra a continuación.

La referencia en el presente documento a "ácido todo-trans retinoico" es una referencia al ácido (2E,4E,6E,8E)-3,7-dimetil-9-(2,6,6-trimetilciclohexen-1-il)nona-2,4,6,8-tetraenoico, el cual se muestra a continuación.

El uso de la palabra "un" o "uno", cuando se usa en conjunción con la expresión "que comprende" en las reivindicaciones y/o la memoria descriptiva, puede significar "uno", pero también es consistente con el significado de "uno o más", "al menos uno" y "uno o más de uno". A lo largo de esta memoria descriptiva, el término "aproximadamente" se usa para indicar que un valor incluye la variación inherente de error para el dispositivo, empleándose el método para determinar el valor.

Las palabras "que comprende" (y cualquier forma de que comprende, tal como "comprenden" y "comprende"), "que tiene" (y cualquier forma de que tiene, tal como "tienen" y "tiene"), "que incluye" (y cualquier forma de que incluye, tal como "incluye" e "incluyen") o "que contiene" (y cualquier forma de que contiene, tal como "contiene" y "contienen") son inclusivas o de final abierto y no excluyen elementos o etapas del método no mencionados, adicionales.

La expresión "que comprende" incluye la expresión "que consiste", por ejemplo, una composición "que comprende" X puede consistir exclusivamente en X o puede incluir algo más, por ejemplo X Y y "que consiste esencialmente en", por ejemplo una composición "que comprende" X puede consistir esencialmente en X o puede incluir X y una cantidad adicional de una o más impurezas por ejemplo.

"Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o las circunstancias descritos a continuación pueden ocurrir o no y que la descripción incluye casos donde dicho evento o circunstancia ocurre y casos en los que no.

"Puede" significa que el evento o circunstancias descritos a continuación pueden ocurrir o no y que la descripción incluye casos donde dicho evento o circunstancia ocurre y casos en los que no.

Donde los compuestos de acuerdo con esta invención tienen al menos un centro quiral, estos, en consecuencia, pueden existir en forma de enantiómeros. Donde los compuestos poseen dos o más centros quirales, estos pueden además existir en forma de diastereómeros. Donde los procesos para la preparación de los compuestos de acuerdo con la invención dan lugar a una mezcla de estereoisómeros, estos isómeros se pueden separar por técnicas convencionales tales como cromatografía preparativa. Los compuestos se pueden preparar en forma racémica o se pueden preparar enantiómeros individuales mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo, mediante síntesis enantioespecífica o resolución, formación de pares diastereoméricos mediante la formación de sal con un ácido ópticamente activo, seguido de cristalización fraccionada y regeneración de la base libre. Los compuestos también se pueden resolver por formación de ésteres o amidas diastereoméricas, seguido de separación cromatográfica y eliminación del auxiliar quiral. Como alternativa, los compuestos se pueden resolver usando una columna de HPLC quiral.

Debe apreciarse que todos esos isómeros y mezclas de los mismos están incluidos dentro del alcance de la presente invención.

Como se usa en el presente documento, se contempla que el término "sustituido" incluya todos los sustituyentes permitidos de los compuestos orgánicos. En un amplio aspecto, los sustituyentes permitidos incluyen sustituyentes acíclicos y cíclicos, ramificados y sin ramificar, carbocíclicos, aromáticos y no aromáticos de los compuestos orgánicos.

Los sustituyentes permitidos pueden ser uno o más e iguales o diferentes para los compuestos orgánicos apropiados.

En un aspecto de la invención, los sustituyentes pueden incluir, un grupo amina (-NR2, donde R se puede seleccionar independiente de H u OH), un grupo amida (-C(=O)NRR', en donde R y R' se seleccionan independientemente entre

H, un grupo alquilo C1-10, un grupo alquenilo C2-10, un grupo alquil C^7-25-arilo o un grupo alquenil C^8-25-arilo), un grupo ácido carboxílico (-COOH), un grupo éster (-COOR, en donde R se selecciona de un grupo alquilo C1-10, un grupo alquenilo C2-10, un grupo alquil C^7-25-arilo o un grupo alquenil C^8-25-arilo), un grupo alquilo C1-10 y un grupo alquenilo

C2-10. En otra disposición, los sustituyentes pueden incluir un grupo ácido carboxílico (-COOH), un grupo alquilo C1-10 y un grupo alquenilo C2-10. Donde tiene lugar más de una sustitución, esta puede estar en la misma posición, adyacente a otra o remota de la misma posición, es decir, separada por 0, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más átomos de carbono.

Donde se sustituye cualquier resto particular, por ejemplo un grupo fenilo que comprende un sustituyente en el anillo arilo, a menos que se especifique de otro modo, el término "sustituido" contempla todas las formas isoméricas posibles.

Por ejemplo, un grupo fenilo sustituido incluye todas las permutaciones orto-, meta- y para- a continuación:

Asimismo, el término "sustituido" comprende una sustitución que puede ser adyacente o remota al punto de unión del grupo que se sustituye con el resto de la molécula. Este también comprende que el grupo sea el punto de unión con el resto de la molécula.

Donde un grupo comprende dos o más restos definidos por un único número de átomos de carbono, por ejemplo, alquil C^7-25-arilo, el número de átomos de carbono indica el número total de átomos de carbono en el grupo.

Como se usa en el presente documento, el término "alquilo" se refiere a un radical hidrocarburo saturado monovalente, lineal o ramificado, cíclico, que tiene el número de átomos de carbono indicado. Por ejemplo, la expresión "alquilo C1-25" incluye los grupos alquilo C1, C2, C3, C4, C4, C5, C⁶, C7, C⁸, C9, C10, C11, C12, C13, C14, C15, C16, C17, C18, C19, C20,

C21, C22, C23, C24 y C25. De manera similar, "alquilo C1-10" incluye los grupos alquilo C1, C2, C3, C4, C4, C5, C⁶, C7, C⁸,

C9, C10. A modo de ejemplo no limitante, los grupos alquilo de cadena lineal y de cadena ramificada adecuados incluyen metilo, etilo, propilo, /so-propilo, butilo, /so-butilo, tere-butilo, pentilo, hexilo, octilo y nonilo, los grupos cíclicoalquilo adecuados incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, metilciclohexilo, dimetilciclohexilo, trimetilciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo y adamantilo, ciclopropilmetilo, ciclopropiletilo, ciclobutilmetilo, ciclobutiletilo, ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclopentilpropilo, ciclohexilmetilo, ciclohexiletilo, ciclohexilpropilo, ciclohexilbutilo, metilciclohexilmetilo, dimetilciclohexilmetilo, trimetilciclohexilmetilo, cicloheptilmetilo, cicloheptiletilo y cicloheptilpropilo. En un aspecto de la presente invención los intervalos de los grupos alquilo pueden ser: alquilo C1-25, alquilo C2-24, alquilo C3-23, alquilo C4-22, alquilo C5-21, alquilo C6-20, alquilo C7-20, alquilo C8-20, alquilo C9-20, alquilo C10-20, alquilo C11-20, alquilo C12-20, alquilo C13-20, alquilo C14-20, alquilo C15-20, alquilo C16-20, alquilo C17-20 y alquilo C18-20. En otro aspecto de la presente invención los intervalos de los grupos alquilo pueden ser: alquilo C1-10, alquilo C2-9, alquilo

C3-8, alquilo C4-7, alquilo C4-6 y alquilo C5-7.

Como se usa en el presente documento, el término "alquenilo" se refiere a un radical hidrocarburo insaturado monovalente, lineal o ramificado, cíclico, que tiene el número de átomos de carbono indicado y la característica distintiva de un doble enlace carbono-carbono que está en la configuración cis o trans. En un aspecto de la invención, la cadena de carbono puede comprender más de un doble enlace, por ejemplo uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve dobles enlaces, en donde el uno o más dobles enlaces pueden estar en la configuración cis, trans o una mezcla de los mismos. Por ejemplo, la expresión "alquenilo C2-25" incluye los grupos alquenilo C2, C3, C4, C4, C5, C⁶,

C7, C⁸ , C9, C10, C11, C12, C13, C14, C15, C16, C17, C18, C19, C20, C21, C22, C23, C24 y C2 10 incluye grupos alquenilo C2, C3, C4, C4, C5, C⁶ , C7, C⁸, C9, C10. A modo de ejemplo no limitante, los grupos alquinilo adecuados incluyen etenilo, propenilo, butenilo, penentilo, hexenilo, octenilo, nonenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, nonadienilo, nonatrienilo y nonatetraenilo, en donde el doble o los dobles enlaces pueden estar ubicados en cualquier

lugar en la cadena de carbono. En un aspecto de la presente invención los intervalos de los grupos alquenilo pueden ser: alquenilo C2-24, alquenilo C3-23, alquenilo C4-22, alquenilo C5-21, alquenilo C6-20, alquenilo C7-20, alquenilo C8-20, alquenilo C9-20, alquenilo C10-20, alquenilo C11-20, alquenilo C12-20, alquenilo C13-20, alquenilo C14-20, alquenilo C15-20, alquenilo C16-20, alquenilo C17-20 y alquenilo C18-20. En otro aspecto de la presente invención los intervalos de los grupos alquenilo pueden ser: alquenilo C2-10, alquenilo C3-9, alquenilo C4-8, alquenilo C5-7 y alquenilo C5-6.

Como se usa en el presente documento, el término "arilo" se refiere un radical carbocíclico monovalente, insaturado aromático que tiene uno, dos o tres anillos, que puede estar condensado o ser bicíclico. En un aspecto de la presente invención, el término "arilo" se refiere a un anillo aromático monocíclico que contiene 5 o 6 átomos de carbono, que puede estar sustituido en el anillo con 1,2, 3, 4 o 5 sustituyentes como se define en el presente documento; un sistema de anillo aromático bicíclico o condensado que contiene 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono, que puede estar sustituido en el anillo con 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o 9 sustituyentes como se define en el presente documento o un sistema de anillo aromático tricíclico que contiene 10 átomos de carbono, que puede estar sustituido en el anillo con 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 sustituyentes como se define en el presente documento. A modo de ejemplo no limitante, los grupos arilo adecuados incluyen fenilo, bifenilo, indanilo, azulenilo, tetrahidronaftilo, tolilo, tolilfenilo y benzocicloheptilo. En un aspecto de la presente invención los intervalos de los grupos arilo son: C^5-10-arilo, C5-9-arilo, C^6-8-arilo y C6-7-arilo.

Como se usa en el presente documento, el término "alquil-arilo" se refiere a un grupo alquilo con un sustituyente arilo. La unión es a través del grupo alquilo. Dichos grupos tienen el número de átomos de carbono indicado. Los restos arilo y alquilo de dicho grupo se pueden sustituir como se ha definido en el presente documento, con respecto a las definiciones de arilo y alquilo. El resto alquilo puede ser lineal o ramificado. Los ejemplos habituales de aril-alquilo incluyen bencilo, metilbencilo, etilbencilo, dimetilbencilo, dietilbencilo, metiletilbencilo, fenetilo, fenilpropilo, fenilbutilo, propilbencilo, tolilmetilo, feniletilbencilo, isopropilbencilo, difenilmetilo, propilbencilo, butilbencilo, dimetiletilbencilo, feniletilo, fenilpropilo, fenil-/so-propilo, fenil-n-butilo, fenil-/so-butilo, fenil-ferc-butilo, fenilpentilo, tetrametilbencilo, fenilhexilo, dipropilbencilo, trietilbencilo, ciclohexilbencilo, naftilmetilo, difeniletilo, trifenilmetilo y hexametilbencilo.

Con respecto al uno o más sustituyentes que se dice que están en la cadena de carbono principal de un grupo con una definición de compuesto, por ejemplo, "alquil-arilo", el sustituyente puede estar en cualquiera o en ambos de los restos del componente, por ejemplo, en los restos alquilo y/o arilo.

La referencia a los sistemas cíclicos, por ejemplo, arilo, cicloalquilo, etc., contempla sistemas monocíclicos y policíclicos. Dichos sistemas comprenden conformaciones condensadas, no condensadas y espiro, tales como biciclooctilo y adamantilo.

El experto comprenderá con facilidad otras definiciones de grupo de "compuesto" basándose en las definiciones anteriores y en las convenciones habituales de la nomenclatura.

El término "SiO" se refiere a aceite de silicona. Por ejemplo, SiO¹⁰⁰⁰ se refiere a un aceite de silicona que tiene una viscosidad cinemática de 1000 CSt y SiO5000 se refiere a un aceite de silicona que tiene una viscosidad cinemática de 5000 CSt. De manera similar, SiO1000-5000 se refiere a un aceite de silicona que tiene una viscosidad telemática de desde 1000-5000 CSt.

Todas las mediciones reológicas, incluyendo la medición de la velocidad cinemática, se realizaron usando un reómetro de tensión controlada Rheolyst AR 1000 N de TA Instruments (TA Instruments, Elstree, Reino Unido). Se usó geometría de cono de acero de 4°, de 50 mm de diámetro. Todas las mediciones se realizaron a 37 °C. El control de temperatura del reómetro se consiguió mediante una placa que utiliza el efecto Peltier para controlar la temperatura de la muestra en ± 0,1 °C. La viscosidad de cizallamiento se calculó a partir del gradiente de la gráfica de tensión de cizallamiento frente a la velocidad de cizallamiento.

La presente invención se describirá ahora a modo de ejemplo con referencia a los ejemplos y figuras a continuación:

La figura 1 es un espectro de RMN de ácido todo-trans retinoico conjugado de acuerdo con la presente invención; La figura 2 muestra una comparación de la concentración de saturación del atRA medida en SiO a través de mediciones de radioactividad o UV-vis. Los valores de la bibliografía se toman de J. J. Araiz, M. F. Refojo, M. H. Arroyo, F. L. Leong, D. M. Albert y F. I. Tolentino, Investigative Oftalmology & Visual Science, 1993, 34, 522-530. Las barras de error muestran una desviación estándar de ±1;

La figura 3 gráfico de tensión de cizallamiento frente a velocidad de cizallamiento para SiO⁵⁰⁰⁰, SiO1000, SiO1000 saturado con atRA;

La figura 4 muestra la liberación del atRA a una concentración por debajo de 10 pg/ml desde SiO1000 y mezclas de PDMS-atRA en SiO-1000 de distintas composiciones (0,1, 1,5 y 10 % v/v) tanto en aire (llenado) como en atmósfera al 10 % de CO2 (vacío) en el medio;

La figura 5 muestra la liberación del atRA a diversas concentraciones desde SiO1000 en el medio en presencia de células pre y postconfluyentes (llenado y vacío respectivamente) presentada en una escala de log+1. La figura 6 muestra las cantidades liberadas del atRA desde SiO1000 saturado y mezclas saturadas de PDMS-atRA en SiO1000 de distintas composiciones (1, 5 y 10 % v/v) en medio de cultivo, presentadas en una escala de log+1;

La figura 7 muestra la liberación del atRA (concentración de partida 32 pg/ml) desde SÍO1000 y mezcla de SÍO1000/5000 en medio de cultivo presentada en una escala de log+1.

Ejemplos

Lista de abreviaturas

5-FU 5-fluorouracilo

ACN Acetonitrilo

Ar Argón

atRA Ácido todo-trans retinoico

BA Ácido benzoico

bFGF Factor de crecimiento de fibroblastos básico

BrdU Bromodesoxirrubicina

CDCl3 Cloroformo deuterado

CDI 1,1 '-carbonildiimidazol

D²O Óxido de deuterio

DAPI Dianidin-2-fenilindol

DCC Diciclohexilcarbodiimida

DCI Cloruro de deuterio

DCM Dicolorometano

DCU Diciclohexilurea

DMAP 4-(dimetilamino)piridina

DMF Dimetilformamida

DMSO Sulfóxido de dimetilo

EPGF Factor de crecimiento epidérmico

FGF Factor de crecimiento de fibroblastos

FSiO Aceite de silicona fluorado

HCl Ácido clorhídrico

Ibu Ibuprofeno

IF-y Interferón-gamma

il ­ Interleucina

ipa Isopropanol

MeOH Metanol

MTT Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio

PDMS Poli(dimetilsiloxano)

PDMS-diOH Poli(dimetilsiloxano) terminado en bis(hidroxialquilo)

PDGF Factor de crecimiento derivado de plaquetas

RA Ácido retinoico

SFA Alcano semifluorado

SiO Aceite de silicona

TAA Acetónido de triamcinolona

TGF-p Factor de crecimiento tumoral -Beta

THF Tetrahidrofurano

VEGF Factor de crecimiento endotelial vascular

Preparación

Reacción de esterificación de Steglich

El resto hidrófobo se puede preparar mediante una reacción de esterificación entre el resto hidrófobo y la parte poli(dimetilsiloxano) del aditivo. La reacción de esterificación puede ser una reacción de esterificación de Steglich, que es una variación de una esterificación clásica, usando diciclohexilcarbodiimida como reactivo de acoplamiento y 4-dimetilaminopiridina como catalizador.

La diciclohexilcarbodiimida y el ácido carboxílico forman una O-acilisourea intermedia, que ofrece una reactividad similar a la del ácido carboxílico desprotonado correspondiente. Después se puede añadir el alcohol al ácido carboxílico activado para liberar la diciclohexilurea estable y el éster; sin embargo, esta reacción es muy lenta en comparación con las esterificaciones donde se usan nucleófilos fuertes tales como aminas. La reacción con alcohol es lo suficientemente lenta para permitir el aislamiento de la O-acilisourea que después se queda como producto secundario. El éxito de la reacción proviene de la adición de 4-dimetilaminopiridina, un nucleófilo más fuerte que un alcohol, que actúa como un agente de transferencia de acilo para formar una amida activada ("éster activo"). El alcohol reacciona después rápidamente con su producto intermedio para formar el éster deseado.

atRA-PDMS-atRA

El poli(dimetilsiloxano) terminado en bis(hidroxialquilo), (Mn = 4.700 gmol^-1, 4 g, OH 1,7 mmol) se disolvió en DCM desgasificado (10 ml), seguido de la adición de una solución desgasificada de atRA (0,6 g, 2 mmol) y DMAP (64 mg, 0,5 mmol) en DCM (30 ml). Finalmente se añadieron 10 ml de una solución desgasificada de DCC (0,41 g, 2 mmol) en DCM. Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente, en atmósfera de argón (Ar), en oscuridad, durante 4 días. Después de la filtración del resto de la DCU, el disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite de color amarillo residual se lavó tres veces con metanol frío después se secó al vacío. El aceite de color amarillo purificado se filtró a través de un filtro de PTFE de 0,45 gm, después se almacenó en atmósfera de Ar, en condiciones de oscuridad a temperatura ambiente. el atRA-PDMS-atRA se analizó por¹H NMR and FTIR. ¹H n Mr (400 MHz, CDCl³): 57.00 (q, 1 Hx2, =CH-CH=CH), 6.29-6.11 (4Hx2, =CH-C-CH³, -CH=C-CH³ and C-CH=CH-C-CH³), 5.82/5.69 (s, 1Hx2, -OCOCH=C), 4.26 (t, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.66 (t, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.44 (t, 2Hx2, Si-CHz-CH2-CH2-O), 2.35 (s, 3Hx2, C(CH³ )=CH-C(O)O), 2.02 (t, 2Hx2, CH2-C(CH³)=C), 2.00 (s, 3Hx2, C(CH³ )=CH-CH=CH), 1.71 (s, 3Hx2, CH2-C(CHa)=C), 1.61 (m, 2Hx2, 2Hx2, Si-CH2-CH2 -CH2-O, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.47 (m, 2Hx2, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.02 (s, 6Hx2, CH²-C(CH³)2-C). 0.54 (qt, 2Hx2, Si-CH2-CH2-CH2-O), 0.07 (s, 6Hxn, Si(CH³)2-O). IR: 1,738 cm^-1 u(C=O) en éster.

Ibu-PDMS-Ibu

El poli(dimetilsiloxano terminado en bis(hidroxialquilo) (Mn = 4.700 gmol^-1, 4 g, 1,7 mmol OH), ibuprofeno (0,4 g, 1,9 mmol) y DMAP (30 mg, 0,24 mmol) se disolvieron en DCM (15 ml), seguido de la adición de 10 ml de una solución de DCC (0,4 g, 1,9 mmol) en DCM. Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Después de la filtración del resto de la DCU, el disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite incoloro residual se lavó dos veces con metanol a temperatura ambiente, después se secó al vacío. El aceite purificado se filtró a través de un filtro de PTFE de 0,45 gm. El Ibu-PDMS-Ibu se analizó por ¹H NMR and FTIR. ¹H NMR (400 MHz, CDCl³): 5 7.21/7.08 (d, 4Hx2, CH del anillo aromático), 4.21 (m, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.73 (q, 1Hx2, OC(O)-CH(CH3)-C), 3.57 (t, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.35 (t, 2Hx2, Si-CH2-CH²-CH²-O), 2.43 (d, 2Hx2, C-C^-CH(CH ³)³), 1.83 (m, 1Hx2, C-CH2-CH(CH³)2), 1.57 (m, 2Hx2, Si-CH³-C ^-C H ³-O), 1.49 (d, 3Hx2, OC(O)-CH(CH³ )-C), 0.89 (d, 6Hx2, C-CH²-CH(CH³)²), 0.50 (t, 2Hx2, S i-C ^-C H 2-CH³-O), 0.07 (s, 6Hxn, Si(CH³)²-O). IR: 1.738 cm^-1 u(c =o) en éster.

Ruta del anhídrido

Preparación de anhídrido de atRA

El atRA (2 g, 66 mmol) y DCC (1 g, 34 mmol) se disolvieron en DCM (20 ml) y la mezcla de reacción se agitó suavemente a temperatura ambiente en oscuridad durante 2 días. Después de la filtración de la mezcla y la eliminación del DCM al vacío, el producto final se aisló con un rendimiento del 67 % y se analizó por espectroscopía de ¹H y ¹³C RMN. ¹H NMR (400 MHz, CDCl³): 57.00 (q, 1Hx2, =CH-CH=CH), 6.29-6.11 (4Hx2, =CH-C-CH³, -CH=C-CH³ and C-CH=CH-C-CH³), 5.82/5.69 (s, 1Hx2, -OCOCH=C), 2.35 (s, 3Hx2, C(CH³ )=CH-C(O)O), 2.02 (t, 2Hx2, CH2-C(CH³)=C), 2.00 (s, 3Hx2, C(CH³ )=CH-CH=CH), 1.71 (s, 3Hx2, CH2-C(CH)=C), 1.61 (m, 2Hx2, 2Hx2, CH2-CH2-CH2-O, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.47 (m, 2Hx2, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.02 (s, 6Hx2, CH²-C(CH³)²-C). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl³): 5 163 (C=O), 156 (CH²-C(CH³)=C), 141 (-C-C(CH)=C-), 138 (C=C(H)-C-), 137 (CH-C(CHa)=C-), 135 (CH=C(H)-C-), 132 (C-C(CH³)=C-), 130 (C=CH-C-, C), 118 (C=CH-C(O)), 40 (C-CH2-C), 35 (C-C(CH³)2), 34 (C-CH³-C=C), 29 (2 x CH³ fuera del anillo), 22 (Ch 3 fuera del anillo), 20 (CH2-CH2-CH2), 14 (CH³ cadena), 13 (cadena CH³ cerca de C=O).

Preparación de atRA-PDMS-atRA

El poli(dimetilsiloxano) terminado en bis(hidroxialquilo) (Mn = 4.700 gmol^-1, 3 g, 1,2 mmol OH) se disolvió en DCM desgasificado (10 ml), seguido de la adición de una solución desgasificada de atRA anhídrido sintetizado en la etapa anterior (1,06 g, 1,8 mmol) y DMAP (37 mg, 0,25 mmol) en DCM:piridina (30 ml 1:1 v/v). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente, en atmósfera de AR y en la oscuridad durante 4 días. Después de este tiempo se añadieron aproximadamente 2 ml de agua para inactivar en exceso de anhídrido y la mezcla se agitó durante otras 2 horas. El producto se purificó diluyendo la mezcla con DCM (150 ml) y lavándola con NaHSO⁴ 1 M (3 x 150 ml), NaHCO³1 M y después salmuera (2 x 150 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO⁴ y el disolvente se eliminó al vacío. El aceite restante se lavó con MeOH (5 x 30 ml) para eliminar el atRA sin unir, después se secó al vacío. El aceite de color amarillo purificado se filtró a través de un filtro de PTFE de 0,45 gm, después se almacenó en atmósfera de Ar en condiciones de oscuridad. El atRA-PDMS-atRA se analizó por ¹H Nm R. ¹H NMR (400 MHz, CDCl³): 57.00 (q, 1 Hx2, =CH-CH=CH), 6.29-6.11 (4Hx2, =CH-C-CH³, -CH=C-CH³ and C-CH=CH-C-CH³), 5.82/5.69 (s, 1Hx2, - OCOCH=C), 4.26 (t, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.66 (t, 2Hx2, O-CH2-CH2-OCO), 3.44 (t, 2Hx2, SLCH2-CH2-CH2-O), 2.35 (s, 3Hx2, C(CH2)=CH-C(O)O), 2.02 (t, 2Hx2, CH2-C(CH³)=C), 2.00 (s, 3Hx2, C(C^)=CH-CH=CH), 1.71 (s, 3Hx2, CH2-C(CH³)=C), 1.61 (m, 2Hx2, 2Hx2, Si-CH³-C ^-C H ³-O, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.47 (m, 2Hx2, CH2-CH2-CH2-C(CH³)=C), 1.02 (s, 6Hx2, CH2-C(CH³)2-O, 0.54 (qt, 2Hx2, S i-C ^-C H ³-CH³-O), 0.07 (s, 6Hxn, Si(CH³)²-O)

Medición de la solubilidad del fármaco en SiO y mezclas que utilizan radioisótopos

El proceso de usar fármacos radiomarcados para determinar la concentración de solubilidad en SiO es un protocolo más simple que el usado cuando se utilizó UV-Vis puesto que no existe la necesidad de la etapa de extracción.

Estudios de solubilidad del atRA

La concentración de saturación del atRA libre en SiO se investigó usando el atRA tritiado. Una solución saturada de atRA, enriquecida con atRA tritiado, en SiO se preparó y se agitó suavemente. Se recogieron muestras en diferentes puntos temporales usando una bomba de jeringa (4 ml/h) y filtros de PTFE de 0,45 gm. Para determinar la cantidad de atRA disuelta en SiO, se recogió una muestra de aceite de 20 gl, que era insoluble en la mezcla de centelleo, por lo tanto, se necesitó un codisolvente para solvatar completamente el material para un análisis preciso. Después de varios ensayos usando una actividad conocida de la muestra, se determinó que una proporción de éter dietílico/mezcla de centelleo (8:10 ml) permitía la medición precisa de la actividad mediante centelleo líquido.

Mientras que la solubilidad informada para el atRA en SiOi000 en la bibliografía es de 20 gg/ml, concentraciones mayores, del orden de 28 gg/ml (9,5 x 10^-5 M, s.d. = 1, n = 6) se midieron cuando se usó el mismo protocolo.⁷ Usando el atRA tritiado, la solubilidad medida fue más de 20 veces más elevada que los valores anteriores, alcanzando 450,6 gg/ml (1,5 x 10^-3 M, s.d. = 39,9, n = 4).

También se investigó la solubilidad del atRA en SiO⁵⁰⁰⁰ ya que ahora existía un protocolo más simple para tratar con una sustancia tan viscosa. Se determinó que la saturación era más alta que en SiO1000 a 610 gg/ ml (2,03 x 10-³ M, n = 1) en SiO⁵⁰⁰⁰. Los resultados se muestran en la figura 2, que representa una comparación de la concentración de saturación del atRA medida en SiO a través de mediciones de radioactividad o UV-vis. Barras de error ±1 desviación estándar.

El uso de isótopos radiomarcados ha proporcionado un método mucho más preciso para medir pequeñas concentraciones de fármaco en SiO en comparación con la extracción clásica combinada con instrumentación tradicional, por ejemplo espectroscopía UV-Vis. Sin embargo, no se anticipó una diferencia tan grande entre los métodos. Cuando los valores de la bibliografía se analizaron más, se observó que la curva de calibración usada estaba en el intervalo de 0,5 x 10^-4 M a 1 x 10^-6 M, estando los 20 gg/ml informados (0,6 x 10^-4 M) en la cúspide del valor máximo; por lo tanto, las concentraciones más elevadas necesitan extrapolación de la curva, dando lugar a posibles errores. En general se ha establecido un método preciso para medir la solubilidad del atRA en SiO usando técnicas de radiomarcado y se ha identificado una inexactitud fundamental en la bibliografía publicada.

Mezclas de atRA en SiO

El mismo protocolo usado para determinar de manera precisa la solubilidad del atRA en SiO se empleó para determinar la concentración del atRA libre en las mezclas de PDMS-atRA en SiO1000 al 1, 5 y el 10 % (v/v). A medida que aumentaba la cantidad de PDMS-atRA presente en la mezcla también aumentaba la concentración de saturación medida del atRA (véase la tabla 1). Se observó un aumento de 450,6 gg/ ml a 812,7 gg/ ml cuando se usó una mezcla de PDMS al 10 %-atRA en SiO1000. Esto indicó que las mezclas tienen un efecto positivo sobre la solubilidad del fármaco libre, aumentando su concentración de saturación en el aceite posiblemente debido a la presencia del fármaco unido y su afinidad al fármaco libre.

Tabla 1 - Cantidades de saturación del atRA (gg/ml) en SiO1000 y SiO1000 mezclado con PDMS-atRA al 1,5 y el 10 %

(v/v) después de 2 semanas a temperatura ambiente, al aire.

La viscosidad de cizallamiento del SiO¹⁰⁰⁰ y el SiO5000, así como las mezclas con PDMS modificado en el extremo, se midió a 37 °C (la temperatura del cultivo celular dentro del proyecto) y se calculó a partir del gradiente de la gráfica de tensión de cizallamiento frente a la velocidad de cizallamiento; los gráficos se muestran en la figura 3.

La figura 3 representa la tensión de cizallamiento frente a la velocidad de cizallamiento para SiO5000 (•), SiO¹⁰⁰⁰ (■), SiO¹⁰⁰⁰ saturado con atRA (♦), SiO¹⁰⁰⁰ mezclado con el 1 (▲), el 5 (x) y el 10 (▼) % (v/v) de PDMS-atRA a partir de los cuales se calculó la viscosidad de cizallamiento.

Las viscosidades medidas mostraron que hay un efecto insignificante de saturación de SiO¹⁰⁰⁰ con el atRA y la viscosidad de las mezclas no sigue una tendencia de disminución o aumento de la viscosidad, por lo tanto, no es una variación característica en la viscosidad que esté afectando el cambio de concentración de la saturación observado en las mezclas, Tabla 2.

Tabla 2 - Viscosidades de cizallamiento (mPa/s) calculadas a partir del gradiente de la gráfica de tensión de cizallamiento frente a la velocidad de cizallamiento a 37 °C.

Estudios de liberación

El efecto de la presencia de PDMS-fármaco en el patrón de liberación del fármaco libre se investigó en los sistemas de atRA, con el potencial de que la afinidad de la mezcla con el fármaco daría como resultado una liberación más lenta en comparación con los cortos periodos de tiempo establecidos en la bibliografía; esto es una eliminación del 98 % del atRA administrado al ojo mediante un taponamiento de SiO, en un periodo de tiempo de 7 días. Este periodo de tiempo también necesitaba ser confirmado, dado que la bibliografía ya ha demostrado ser imprecisa en las mediciones de la solubilidad del atRA en SiO y las mediciones posteriores también podrían estar afectadas por imprecisiones. El periodo de tiempo óptimo de liberación, perseguido por esta investigación, es de 6 semanas, dado que este es el periodo de tratamiento clínico para la PVR. Se investigaron las condiciones apropiadas de temperatura, contenido de CO² y presencia/ausencia de células para estos experimentos.

Diseño experimental para los estudios de liberación de fármaco

La liberación del atRA a partir de mezclas de S D ¹⁰⁰⁰ y SiO¹⁰⁰⁰ con PDMS-fármaco (usando soluciones que contenían diversas concentraciones iniciales) en medios de cultivo se controló usando versiones tritiadas de los fármacos. Los experimentos se diseñaron como sigue: 1 ml de aceite o mezcla que contenía el fármaco libre se puso sobre 0,5 ml de medio de cultivo en una placa de 24 pocillos. El medio de cultivo se cambió por medio de cultivo recién preparado cuando se recogieron las muestras y la cantidad de fármaco en el medio se determinó directamente mediante recuento por centelleo líquido. 1:1 DMEM:medio F12 que contenía Pen-Strep al 1 %, Se usó anfotericina B al 1 % y suplementada con FCS al 10 %.

Efecto de inactivación de los medios de cultivo en el centelleo líquido

Se sabe que las muestras muy coloreadas pueden interferir en proceso de recuento por centelleo mediante inactivación. El color de la muestra interfiere con las señales luminosas producidas por el centelleo, conduciendo así a discrepancias en los datos recogidos. Para descartar posibles inexactitudes, se ensayó el efecto de 250 gl de medio de cultivo en la mezcla de centelleo (10 ml) y no mostró un efecto significativo en los recuentos debido a que la solución estaba muy diluida (véase la tabla 3). Para cada muestra de medio de cultivo de 0,5 ml recogida a lo largo de los experimentos, se analizaron 250 gl y la cantidad total de fármaco liberado se dedujo de ello.

Tabla 3 - Desintegración por minuto (DPM) de las soluciones tritiadas de atRA de concentración alta y baja con y sin medio presente.

Efecto de la temperatura en el SiO

Las viscosidades de cizallamiento del SiO¹⁰⁰⁰ se midieron a 20, 30 y 37 °C (la temperatura aproximada del ojo) para determinar si la temperatura alteraría las propiedades reológicas del aceite. Las viscosidades de cizallamiento se calcularon a partir del gradiente de la gráfica tensión por cizallamiento frente a la velocidad de cizallamiento. Como se observó una diferencia (véase la tabla 4), todos los experimentos se liberación se llevaron a cabo a 37 °C, ya que esta es la temperatura usada para cultivar células, así como una temperatura similar observada en el ojo.

Tabla 4 - Viscosidades de cizallamiento (mPa/s) de SiO¹⁰⁰⁰ calculadas a partir del gradiente de la gráfica de tensión de cizallamiento frene a la velocidad de cizallamiento a 20, 30 y 37 °C

Efecto del CO 2 en la liberación

Se evaluó el efecto del contenido de CO² atmosférico en los experimentos sobre la velocidad de liberación del atRA desde el SiO y las mezclas en el medio de cultivo. Se llevó a cabo un experimento de liberación al 10 % de CO² (se usa CO² al 5 % para cultivar las células) debido a la disponibilidad de incubadoras que puedan contener radioisótopos. El mismo experimento se llevó a cabo al aire y se observaron y se compararon las diferentes velocidades de liberación observadas.

La figura 4 destaca las diferencias en la liberación a partir de experimentos realizados al aire y en presencia de CO² al 10 %. El día 1, se observó que se liberaba más atRA cuando el experimento se llevó a cabo al aire, sin embargo, esta diferencia disminuyó en el día 2 y en el día 8 se observó el efecto contrario, con más atRA liberado en atmósfera de CO² al 10 %. En general, este experimento mostró que las condiciones atmosféricas para los estudios de liberación precisos necesitan mantenerse constantes para permitir la comparación.

Como consecuencia de las investigaciones de las condiciones de experimentación óptimas, todos los experimentos siguientes se llevaron a cabo a 37 °C en atmósfera de CO² al 5 % (las mismas condiciones usadas para el cultivo de células ARPE-19).

La liberación del atRA a una concentración por debajo de 10 pg/ml desde SiO¹⁰⁰⁰ (• y o) y mezclas al 0,1 (▲ y A), 1 (■ y □), 5 (▼ y V) y 10 % (♦ y A) (v/v) tanto al aire (relleno) y en atmósfera de CO² al 10 % (vacío) en medio se muestra en la figura 4. Todos los experimentos se llevaron a cabo a 37 °C.

Efecto de la presencia de células

Se realizó un experimento de liberación de atRA en SiO¹⁰⁰⁰ en medio en presencia de células pre y postconfluyentes (cultivadas durante 1 día y 7 días respectivamente). Esto pretendía determinar si la presencia de células tenía impacto sobre la velocidad de liberación del fármaco, dado que las células podrían actuar como un drenaje para el atRA liberado y afectar posiblemente al equilibrio de las concentraciones. Como se ve en la figura 5, no se observaron diferencias obvias en las velocidades de liberación, por lo tanto, los experimentos futuros se podrían llevar a cabo en ausencia de células.

La liberación del atRA a las diferentes concentraciones desde SiO¹⁰⁰⁰ en el medio en presencia de células pre y postconfluyentes (relleno y vacío respectivamente) presentada en una escala log+1 se muestra en la figura 5. Todos los experimentos se llevaron a cabo a 37 °C en atmósfera de CO² al 5 %.

Estudios de liberación del atRA

Se estudió la liberación en el medio de cultivo del atRA desde SiO¹⁰⁰⁰ saturado y mezclas (contenidos de PDMS-atRA del 1, 5 y el 10 % en SiO¹⁰⁰⁰ (v/v)). Como se indicó anteriormente, la concentración de saturación del atRA aumenta con cantidades crecientes de PDMS-atRA, por lo tanto, todas las concentraciones de partida de los experimentos fueron ligeramente diferentes cuando se emplearon concentraciones de saturación. La figura 6 muestra la cantidad de atRA liberada durante un periodo de 50 días, presentado con una escala logarítmica a escala 1; esta escala se eligió para que los puntos de liberación fueran fácilmente comparables. En los primeros días se observa una liberación rápida del atRA, tras lo cual la liberación se ralentiza gradualmente y después se estabiliza durante los 20 días restantes. Parece liberarse más atRA de las mezclas, probablemente debido a que las concentraciones de saturación iniciales son más altas.

Las cantidades de liberación del atRA desde S D ¹⁰⁰⁰ saturado (•), mezclas al 1(A), 5(^) y 10(A) % (v/v) de PDMS-atRA en SiO¹⁰⁰⁰ en medio de cultivo presentadas en una escala de log+1 se muestran en la figura 6.

Al observar la cantidad del atRA liberado desde S D ¹⁰⁰⁰ y las mezclas en forma de un porcentaje acumulativo (Tabla 5), es muy interesante advertir que la diferencia en el tiempo empleado para liberar el 80 % del atRA solubilizado: 2 semanas para el S D ¹⁰⁰⁰ en comparación con las casi 7 semanas para la mezcla al 10 %. Esto también es interesante ya que se ha cuestionado el valor de la bibliografía de 7 días para eliminar el 98 % del atRA de una solución saturada de SiO5000 (aunque el punto temporal de 7 d se recogió de un modelo de conejo en vez de un modelo in vitro).

Aunque se observaron periodos de tiempo de liberación prometedores, las cantidades de atRA que se liberaron inicialmente estaban por encima del rango tóxico para las células ARPE-19 (10-4-10-5 M). Era importante determinar si el uso de las mezclas de SiO con PDMS-atRA podría impactar en la velocidad de liberación para concentraciones menores de atRA para evitar la posible toxicidad y, si la longevidad del periodo de liberación era dependiente de la cantidad de atRA inicialmente solubilizadas.

Tabla 5 - Número de días necesarios para alcanzar un porcentaje determinado (acumulativo) de liberación del atRA desde soluciones saturadas de S D ¹⁰⁰⁰ y mezclas al 1,5 y 10 % de PDMS-atRA Valores extrapolados en cursiva

Estudios de liberación usando concentraciones de no saturación del atRA en SiO y mezclas

En la sección anterior se observó que las concentraciones iniciales solubilizadas mayores de atRA mantenían los perfiles de liberación más prolongados, sin embargo, no se demostró de manera concluyente la capacidad de afinidad del atRA por PDMS-atRA para ralentizar la velocidad de liberación. Para investigar esto más a fondo, se llevó a cabo una serie de experimentos de liberación donde cantidades variables pero similares de atRA se solubilizaron en SiO¹⁰⁰⁰ y mezclas con PDMS-atRA. En la tabla 6 se presentan los valores de liberación porcentuales acumulativos. No se observaron diferencias de liberación destacables entre el S D ¹⁰⁰⁰ y las mezclas S iO^⁰⁰/PDMS-atRA, excepto cuando estaba presente PDMS al 10 %-atRA en la mezcla. El tiempo necesario para liberar el 80 % del atRA solubilizado en SiO¹⁰⁰⁰ y las mezclas al 1 y 5 % está en un promedio de 16 días (2 semanas) mientras que para la mezcla al 10 %, este aumenta hasta casi 51 días (>tres veces más largo, ~7 semanas).

Tabla 6 - Número de días necesarios para alcanzar un porcentaje determinado (acumulativo) de liberación del atRA desde S D ¹⁰⁰⁰ y mezclas al 1,5 y 10 % que contenían aproximadamente la misma cantidad inicial de atRA, es decir 50 pg/ ml. Valores extrapolados en cursiva.

Un problema subyacente con la liberación observada durante el intervalo de tiempo deseado (siete semanas) fue que la liberación en ráfaga inicial tomó las concentraciones por encima del intervalo tóxico para las células ARPE-19 (10-4 - 10-5 M). Para asegurar que el periodo de liberación era definitivamente independiente de las cantidades iniciales de atRA, se llevó a cabo un experimento utilizando cantidades variables de atRA en S D ¹⁰⁰⁰ (variando de 13,2 a 412,5 pg/ ml). A partir de este se determinó que el periodo de liberación era independiente de la concentración inicial del atRA.

Después de determinar que las velocidades de liberación eran independientes de la concentración de partida del atRA en SiO¹⁰⁰⁰, se estudió también el impacto de la presencia de mezclas de PDMS-atRA. Cuando se comparó la liberación desde mezclas saturadas con la liberación desde una mezcla con una concentración de partida de aproximadamente 50 pg/ ml, se vio que la cantidad de PDMS-atRA presente en la mezcla controlaba el tiempo de liberación como se muestra en la tabla 7. Si se compara el SiO¹⁰⁰⁰ con una mezcla de SiO¹⁰⁰⁰ con PDMS-atRA (vol del 10 %), el 80 % del atRA inicial presente en el S D ¹⁰⁰⁰ que contenía 40 o 400 pg/ ml se liberó en 10 y 14 días respectivamente, mientras que el 80 % del atRA en una mezcla de SiO¹⁰⁰⁰/PDMS-atRA al 10% que contenía o 45 u 800 pg/ml se liberó en 51 y 48 días respectivamente. Esto sugiere que la presencia de las mezclas puede aumentar el periodo de liberación en el periodo de 6 semanas que se requiere clínicamente.

Tabla 7 - Tabla para mostrar el tiempo (días) tardado en alcanzar un porcentaje determinado de liberación acumulativa de atRA desde soluciones de S D ¹⁰⁰⁰, mezclas al 5 y 10 % de PDMS-atRA en SiO¹⁰⁰⁰ (v/v) con diferentes concentraciones iniciales de atRA. Valores extrapolados en cursiva.

Esta es una perspectiva emocionante ya que se puede lograr el potencial de adaptar la concentración de partida inicial para evitar la toxicidad de las células ARPE-19 de liberación en ráfaga y mantener las cantidades de liberación sostenida por encima del nivel terapéutico para un efecto antiproliferativo.

Liberación del atRA desde mezclas de SiOsooorSiOiooo

Aunque algunos cirujanos prefieren usar S D 1000 como agente de taponamiento, algunos prefieren usar SiO⁵⁰⁰⁰. Debido a que el SiO⁵⁰⁰⁰ tiene una viscosidad más alta, este reduce el riesgo de formación de emulsión dentro del ojo después de su administración. Se llevó a cabo un experimento comparativo preliminar en el que se evaluó el perfil de liberación del atRA desde una solución de SiO1000 frente a la liberación desde una solución 50/50 de SiO¹⁰⁰⁰/SiO⁵⁰⁰⁰. Para conseguir la misma concentración de partida del atRA en ambos aceites, se preparó una solución de atRA en SiO1000, se agitó durante 2 semanas y se filtró siguiendo el mismo protocolo que se ha descrito anteriormente. Una vez filtrado, la solución se dividió en dos viales y se añadió el volumen apropiado de S D 5000 a uno para crear una mezcla 50/50 de SiO¹⁰⁰⁰/SiO⁵⁰⁰⁰, mientras que el segundo se diluyó con S D 1000. Los aceites resultantes tenían una concentración inicial de 32 pg/ml de atRA.

La liberación del atRA (concentración de partida de 32 pg/ml) desde SiO1000 (•) y la mezcla de SiO^1000/5000 (■) en medio de cultivo presentada en una escala de log+1 se muestra en la figura 7. Los experimentos se llevaron a cabo a 37 °C en atmósfera de CO2 al 5 %.

La figura 7 muestra que no hay diferencia aparente en la liberación del atRA desde S D 1000 o una mezcla 50/50 % en volumen de SiO^1000/5000. Parece, por lo tanto, que la viscosidad del aceite no parece afectar a la liberación del atRA.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Una composición oftálmica que comprende:

i) un aceite base que comprende un aceite de silicona;

ii) un aditivo que comprende un primer segmento que facilita o modula la solubilidad en el aceite base conjugado con un segundo segmento que facilita o modula la solubilidad del fármaco y/o la liberación del fármaco en donde el primer segmento comprende un resto que contiene poli(dimetilsiloxano); y

iii) un fármaco.

2. La composición de la reivindicación 1, en donde el aceite de silicona es poli(dimetilsiloxano).

3. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde el aceite base comprende además uno o más de otro aceite de silicona, un aceite de silicona fluorado, un aceite de perfluorocarbono o mezclas de los mismos.

4. La composición de cualquier reivindicación anterior, en donde el aceite base tiene una viscosidad cinemática de desde aproximadamente 100 a aproximadamente 10.000 10^-6 m²/s (cSt), de aproximadamente 1.000 a aproximadamente 5.000 10^-6 m²/s (cSt) o de aproximadamente 1.000 a aproximadamente 2.000 10^-6 m²/s (cSt).

5. La composición de cualquier reivindicación anterior, en donde el segundo segmento del aditivo comprende un resto hidrófobo y/o comprende un resto seleccionado de grupos alquilo C1-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquenilo C2-25 opcionalmente sustituidos, grupos alquil C^7-25-arilo opcionalmente sustituidos o grupos alquenil C^8-25-arilo opcionalmente sustituidos, grupos alquil C1-10-O-alquilo C1-10 opcionalmente sustituidos, grupos amina opcionalmente sustituidos, grupos amida opcionalmente sustituidos o grupos éster opcionalmente sustituidos.

6. La composición de cualquier reivindicación anterior, en donde el segundo segmento del aditivo comprende un resto que es una molécula del fármaco y/o parece una molécula del fármaco que se puede usar en el ojo.

7. La composición de cualquier reivindicación anterior, en donde el segundo segmento del aditivo comprende un resto que se selecciona de agentes antiproliferativos o es estructuralmente similar a un agente antiproliferativo, opcionalmente un derivado de la vitamina A, un derivado del ácido todo-trans retinoico o ácido todo-trans retinoico.

8. La composición oftálmica de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en donde el segundo segmento del aditivo comprende un reto que es, o que es estructuralmente similar a, un agente antiinflamatorio, opcionalmente en donde el agente antiinflamatorio se selecciona de un derivado de un agente antiinflamatorio no esteroideo, tal como ibuprofeno, o es ibuprofeno.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el fármaco se selecciona de un fármaco antiinflamatorio, un antiproliferativo, un fármaco antioxidante, un fármaco antineoplásico, un factor anticrecimiento o mezclas de los mismos.

10. La composición de la reivindicación 9, en donde el fármaco se selecciona entre ácido todo-trans retinoico y antiinflamatorios no esteroideos.

11. La composición de cualquier reivindicación anterior, en donde el fármaco está presente en una cantidad de desde aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 pg por ml; o de aproximadamente 5 a aproximadamente 900 pg por ml; o de aproximadamente 10 a aproximadamente 800 pg por ml; o de aproximadamente 15 a aproximadamente 700 pg por ml.

12. La composición según se reivindica en cualquier reivindicación anterior donde los segmentos o restos del aditivo se conjugan juntos usando un grupo seleccionado de un grupo éster, un grupo amida, un grupo carbamato, un grupo carbonato, un grupo anhídrido, un grupo imina o un grupo éter.

13. Una composición según se reivindica en cualquier reivindicación anterior en donde el aditivo comprende un segmento que facilita o modula la solubilidad en el aceite base y dos segmentos que facilitan o modulan la solubilidad del fármaco y/o la liberación del fármaco, en donde los segmentos que facilitan o modulan la solubilidad del fármaco y/o la liberación del fármaco se conjugan a sitios opuestos del segmento que facilita o modula la solubilidad en el aceite base, mediante dos grupos, que pueden ser iguales o diferentes, como se define en la reivindicación 12.

14. Una composición de acuerdo con la reivindicación 12 o la reivindicación 13 en donde el grupo es un grupo éster.

15. Una composición de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método para tratar o mejorar un trastorno ocular, opcionalmente en donde el trastorno ocular es una enfermedad proliferativa del epitelio pigmentario de la retina, una retina desprendida, una retina desgarrada o una enfermedad, una afección o trastorno asociado con una anomalía en el epitelio pigmentario de la retina o en su función, tal como vitreorretinopatía proliferativa o proliferación celular del epitelio pigmentario de la retina.