ES2807907T3

ES2807907T3 - Extracto de Terminalia bellerica para la inhibición de xantina oxidasa y disminución de ácido úrico en suero

Info

Publication number: ES2807907T3
Application number: ES14180717T
Authority: ES
Inventors: Sanyasi Kalidindi
Original assignee: Natreon Inc
Current assignee: Natreon Inc
Priority date: 2013-08-13
Filing date: 2014-08-12
Publication date: 2021-02-24
Anticipated expiration: 2034-08-12
Also published as: CA2859099A1; EP2898891B1; US20150050369A1; EP2898891A3; PT2898891T; US9750778B2; EP2898891A2; CA2859099C

Abstract

-Una composición que comprende un extracto de Terminalia bellerica para el uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad inducida por radicales libres mediante la inhibición de la actividad de xantina oxidasa en un individuo, en la que la composición de extracto de Terminalia bellerica comprende no menos del 2% en peso de ácido chebulínico basado en el peso total del extracto, no menos del 2% en peso de ácido chebulágico peso total del extracto, y no menos del 10% en peso de otros tanoides hidrolizables de bajo peso molecular basado en el peso total del extracto, y en el que la enfermedad inducida por radicales libres se selecciona del grupo que consiste en gota, uricemia, e hiperuricemia.

Description

DESCRIPCIÓN

Extracto de Terminalia bellerica para la inhibición de xantina oxidasa y disminución de ácido úrico en suero

Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de EE.UU. anteriormente presentada N° 61/865.233, presentada el 13 de agosto de 2013.

Campo de la invención

La presente descripción se refiere a extractos de Terminalia chebula y Terminalia bellerica, o combinaciones de los mismos. Esta descripción se refiere además al uso de dichas composiciones de extractos para el tratamiento de la hiperuricemia y la gota mediante la inhibición de la xantina oxidasa (XO).

Antecedentes

Terminalia bellerica (Gaertn.) Roxb. (también conocida como Terminalia bellirica) ("TB") se cultiva de manera generalizada en toda la India, Sri Lanka, y el sudeste asiático. T. bellerica se ha usado durante siglos en el Ayurveda, y contiene varios constituyentes químicos en común con T. chebula (Saraswathi, et al., Intl. J. Res. Pharm. Biomed Sci. (2012) 3(1):97-99).

Terminalia chebula Retz. (Combretaceae) ("TC") se ha usado ampliamente en los sistemas de medicina del Ayurveda, Unani y homeopatía para la mejora de diferentes afecciones de la salud, p.ej., estreñimiento, diarrea, úlceras, gastroenteritis, asma, tos, disnea, dispepsia, hemorroides, candidiasis, parásitos, síndrome de malabsorción, hepatomegalia, cálculos biliares y renales, secreciones urinarias, tumores, enfermedades cutáneas, lepra, fiebre intermitente, reumatismo, artritis, gota, neuropatía, parálisis, pérdida de memoria, epilepsia, depresión, leucorrea, diabetes, enfermedades cardiovasculares, anorexia, y heridas, entre otros (Véase, B. Das, Materia Medica o f Ayurveda (Nueva Delhi: B. Jain Publishers, 1991), pág. 8; K.R. Kirtikar y B.D. Basu, "Terminalia chebula." En: Indian Medicinal Plants, (2a Ed., Allahabad, India: Publicación de Lolit Mohan Basu, 1935), págs. 1020-23; y P. V. Sharma, Dravya Guna Vigyana (vol. 2, Benarés: Academia Chaukhamba Bharati, 1995), págs. 753-58). Se informó que el fruto de T. chebula y sus extractos en diferentes disolventes exhiben actividades hepatoprotectoras, cardioprotectoras, antimutagénicas/anticarcinogénicas, citoprotectoras, radioprotectoras, antioxidantes y adaptogénicas, antimicrobianas, antifúngicas, antivirales, antiamebianas, inmunomoduladoras, antidiabéticas, cicatrizantes de heridas, antiespasmódicas, y purgantes en diversos modelos animales (S.S. Tasduq, et al., Human and Exp. Toxicol. (2006) 25: 11-18; H. Y. Cheng, et al., Biol. Pharm. Bull. (2003) 26:1331-5; S. Kaur, et al., Mutagen Res. (1998) 419: 169-79; Suthienkul, et al., South-East Asian Journal Trop. Med., Public Health (1993) 24: 751-5; Ahmad, et al., J. Ethnopharmacol. (1998) 62: 183-93; y N.K. Rao, et al., b Mc Complement Altern. Med. (2006) 6: 127-32).

Terminalia chebula (T. chebula) es rica en principios tanoides. Los tanoides constituyentes principales en el fruto son ácido chebulínico, ácido chebulágico, corilagina y un metabolito tanoide, ácido gálico (J. Bruneton. Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants. (París, Francia: Laviosier Publishing, 1995), pág. 333). Otros tanoides hidrolizables menores informados en T. chebula incluyen punicalagina, chebulanina, ácido neochebulínico, 1,2,3,4,6-penta-O-galoilp-D-glucosa, 1,6,-di-O-galoil-D-glucosa, casuarinina, 3,4,6-tri-O-galoil-D-glucosa, y terchebulina (L.J. Juang, et al., J. Sep. Sci. (2004) 27: 718-24). Una fuente indica que T. chebula tiene un contenido de tanoides de alrededor del 32% en peso (W. Evans. Trease and Evan’s Pharmacology. (14a Ed., W.B. Saunders Co. Pvt. Ltd., 1996), pág. 493). Otros constituyentes informados en T. chebula incluyen fructosa, aminoácidos, ácido succínico, beta-sitosterol, resina y principios purgantes de antroquinona, senósido, glucósidos de flavonol, triterpenoides y cumarina conjugados con ácido gálico (E. Creencia, et al., KIMIKA (1996) 12: 1-10).

Los constituyentes químicos aislados de T. chebula pueden variar considerablemente en tipo y/o concentración debido a varios factores, p.ej., la variación ecológica, la variación de suelos, y la variación de nutrientes, así como las variaciones en el proceso de extracción.

La xantina oxidasa ("XO") es una enzima que cataliza la oxidación de hipoxantina hasta xantina, y además puede catalizar la oxidación de xantina hasta ácido úrico. Esta enzima desempeña un papel importante en el catabolismo de purinas en algunas especies, que incluyen los seres humanos. Sin embargo, la elevación sostenida del ácido úrico en sangre puede provocar diversas enfermedades, que incluyen la gota. En los pacientes que tienen gota, el ácido úrico en exceso da como resultado cristales de ácido úrico que se acumulan en el cartílago, los ligamentos y los tejidos circundantes, lo que provoca una inflamación grave y dolor.

Un inhibidor de xantina oxidasa (inhibidor de XO) es cualquier sustancia que inhibe la actividad enzimática de XO, una enzima implicada en el metabolismo de purinas. En los seres humanos, la inhibición de XO reduce la producción de ácido úrico, y varias medicaciones que inhiben XO están indicadas para el tratamiento de la hiperuricemia y las afecciones médicas relacionadas, que incluyen la gota. Los inhibidores de XO también se están investigando para el tratamiento de la lesión por reperfusión. Por tanto, el área terapéutica relevante para los inhibidores de XO puede incluir el ictus, la isquemia miocárdica, hipertensión, diabetes, reperfusión del hígado, riñón y pulmones, aterosclerosis, hipercolesterolemia, enfermedad inflamatoria intestinal (EII), entre otros (Soni, et al., Intl. Pharm. Scientia (2011) 1(1):107-114).

Las clases de inhibidores de XO incluyen los análogos de purina (tales como alopurinol y oxipurinol), inositoles (ácido fítico y mio-inositol), y febuxostat (un feniltiazol). El documento WO 1992/009279 describe el efecto inhibitorio de los tiazoles y los derivados de fenilo contra la xantina oxidasa, y el documento WO 2008/126898 informa de que los compuestos de indol exhiben un efecto inhibitorio contra la xantina oxidasa. Recientemente, el documento WO 2010/093191 informó de una serie de compuestos de indol-tiazol que tienen propiedades de disminución de ácido úrico y que tienen una potencia similar a febuxostat. Estos productos, sin embargo, tienen efectos secundarios, algunos de ellos graves, y sería deseable tener productos atóxicos derivados de plantas, corroborados mediante pruebas de la eficacia clínica, para tratar la hiperuricemia.

En vista de lo anterior, se estudiaron in vitro los productos ayurvédicos de Terminalia bellerica para determinar su actividad inhibitoria de xantina oxidasa y clínicamente en seres humanos para determinar su eficacia en la disminución de los niveles de ácido úrico en suero.

Sumario

La presente invención se define en las reivindicaciones.

Descripción detallada

Como se describió anteriormente, los frutos de Terminalia bellerica (TB) se han usado en el Ayurveda, el sistema de medicina tradicional india, durante muchos siglos. Se sabe que los constituyentes químicos de este fruto son antioxidantes excelentes. La xantina oxidasa (XO) es un generador clave de radicales libres derivados de oxígeno en la piel y el cuerpo a través de la generación de aniones superóxido (O²"). En una realización, se ensayaron in vitro las actividades de TB para determinar el efecto sobre la actividad de XO, tal como se mide mediante la cuantificación de las especies reactivas de oxígeno generadas por XO.

Como se describió anteriormente, la gota está provocada por un nivel elevado de ácido úrico en el cuerpo, lo que indica una afección en la que se acumulan cristales de ácido úrico en el cartílago, el ligamento y el tejido circundante, lo que induce una inflamación grave y dolor. La gota es un tipo de enfermedad articular inflamatoria, y su tasa de incidencia se ha incrementado constantemente durante los últimos 40 años (N. L. Edwards, Arthritis & Rheumatism (2008) 58:2587-2590).

Desde la década de 1960 hasta la mitad de la década de 1990, los pacientes de gota en occidente exhibieron un asombroso incremento de alrededor del 200-300%, principalmente en hombres. La tasa incrementada de pacientes de gota se puede atribuir a la obesidad, el envejecimiento, el deterioro de la función renal, la hipertensión, etc. La tasa de incidencia de la gota parece darse a un nivel de alrededor de 1,4/1.000 personas, pero también depende del nivel de ácido úrico. Es decir, aunque la tasa de incidencia de la gota es del 0,5% en un grupo de pacientes con un nivel de ácido úrico sanguíneo de 7,0 mg/dl o más, la tasa de incidencia de la gota es del 5,5% en un grupo de pacientes con un nivel de ácido úrico de 9,0 mg/dl o más (G. Nuki, Medicine (2006) 34:417-423). Al considerar la tasa de incidencia como se describió anteriormente, se descubre que el nivel de ácido úrico en sangre es un factor causal importante para la gota. Además, los hábitos alimentarios, el alcohol, los lípidos y la obesidad pueden servir como factores inductores importantes de la gota. Recientemente, muchos investigadores han investigado exhaustivamente la correlación del ácido úrico con la insuficiencia cardiaca, la hipertensión, la diabetes y las enfermedades cardiovasculares, y por lo tanto se ha incrementado la importancia de controlar el ácido úrico (D. I. Feig et al., New Engl. J. Med. (2008) 23:1811 -1821). Además, como inhibidor de la xantina oxidasa, se sabe que el alopurinol tiene un efecto sobre la colitis ulcerosa (Aliment. Pharmacol. Ther. (2000) 14:1159-1162; documento Wo 2007/043457).

El incremento reciente en la prevalencia y la incidencia de la hiperuricemia se podría explicar por incrementos similares de hábitos adversos del estilo de vida tales como dietas ricas en purina y el consumo de alcohol en exceso, y otros factores importantes son la obesidad, el uso creciente de diuréticos, y el envejecimiento creciente de la población. La hiperuricemia asintomática es habitual, y se halla en alrededor del 5 al 8% de hombres adultos. Cuando el nivel de ácido úrico en suero es mayor de 9,0 mg/dl, la probabilidad de progresión hasta una gota clínica es seis veces mayor. La hiperuricemia no es solamente un factor de riesgo para la progresión de una enfermedad renal, sino que también puede afectar a la supervivencia del paciente induciendo o agravando una enfermedad cardiovascular. El ácido úrico incrementado puede reflejar la hipoxia tisular o la formación incrementada de radicales libres de oxígeno, lo que está relacionado estrechamente con la patología cardiovascular. La mayoría de los estudios han asociado la hiperuricemia con malos resultados clínicos debido a su asociación notable con la enfermedad cardiovascular (ECV) y la enfermedad renal.

Terminalia bellerica, junto con otras especies exóticas, han mostrado efectos supuestamente contra problemas que implican secreciones urinarias, sensación de ardor y micción dolorosa, inflamación y hemorragia en el riñón, y eliminación del bloqueo por cálculos urinarios y renales (Basant Ballabh, O.P., et al., Journal o f Ethnopharmacology, volumen 118, ejemplar 2, 23 de julio de 2008, páginas 331 -9).

La propiedad anti-oxidante de Terminalia bellerica se ha demostrado en varios estudios (Hazra et al., "Comparative study of the antioxidant and reactive oxygen species scavenging properties in the extracts of the fruits of Terminalia chebula, Terminalia belerica and Emblica officinalis", BMC Complementary and Alternative Medicine (2010) 10:20; y Kishwar Hayat Khan, "The effect of regular intake of Terminalia chebula on oxidative stress in mice originated from Salmonella typhimurium," EurAsia J. BioSci. (2009) 3:113-21). Sin embargo, los estudios in vitro no siempre son predictivos de la eficacia clínica de un producto. Por tanto, se han llevado a cabo estudios in vitro de la actividad inhibitoria de xantina oxidasa, así como de la eficacia clínica de los extractos de Terminalia bellerica.

Los hallazgos para la planta T. bellerica son similares, y los perfiles fitoquímicos incluyen componentes comunes.

Los estudios citados en la presente memoria usaron extractos de pericarpio del fruto de T. chebula. Sin embargo, T. chebula contiene varios componentes bioactivos, que incluyen ácido chebulágico, ácido chebulínico, ácido chebúlico y otros tanoides hidrolizables de bajo peso molecular (THBPms). Muchos estudios, algunos de los cuales se describen más adelante, también se han realizado sobre compuestos bioactivos individuales de T. chebula.

Los taninos se pueden dividir en dos grupos: (a) tanoides hidrolizables (HTs), que son ésteres de un poliol o carbohidrato, normalmente glucosa, con uno o más ácidos trihidroxibencenocarboxílicos (es decir, galatos), y (b) derivados de procianidinas, flavanoles o flavanonas, denominados taninos condensados. Los HTs son moléculas con un poliol (alcoholes polifuncionales, en general D-glucosa o sus derivados y fenoles, concretamente restos de galoílo y elagoílo) como núcleo central. Los grupos hidroxilo de estos carbohidratos están parcialmente o completamente esterificados con ácidos fenólico-carboxílicos como ácido gálico (galotaninos), ácido elágico (elagitaninos), o ambos (galo-elagitaninos).

El ácido chebulágico, representado en el compuesto de fórmula (1), es un miembro tanoide (polifenólico de bajo Pm) de la familia de los taninos, y se ha hallado como constituyente en muchas plantas medicinales. El ácido chebulágico se denomina químicamente beta-1-O-galoil-2,4-chebuloil-3,6-(R)-hexahidroxidifenoil-D-glucosa.

Los tanoides hidrolizables se han informado como componentes bioactivos clave de T. chebula. El ácido chebulágico y el ácido chebulínico son los dos tanoides hidrolizables bioactivos principales de T. chebula. El ácido chebulágico ("AC"), un antioxidante natural, ha mostrado efectos antiinflamatorios potentes en RAW 264.7, una línea celular de macrófagos de ratón, estimulada con LPS. Estos efectos se ejercieron por medio de la inhibición de la producción de NO y PGE²y la inhibición de iNOS, COX-2, 5-LOX, TNF-a e IL-6. AC inhibió la activación de NF-kB mediante LPS, y esto se asoció a la inhibición de la fosforilación de kB-a y las disminuciones posteriores de los niveles de proteínas p50 y p65 nucleares (D.B. Reddy, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications. (2009) 381: 112 117).

El ácido chebulágico ha mostrado una actividad potente de inhibición doble de COX-LOX, con valores de CI⁵⁰de 15 ± 0,288, 0,92 ± 0,011 y 2,1 ± 0,057 pM para COX-1, COX-2 y 5-LOX, respectivamente. AC también exhibió una actividad anti-proliferativa contra las líneas celulares HCT-15, COLO-205, MDA-MB-231, DU-145 y K562. Los estudios mecanísticos adicionales sobre las células COLO-205 revelaron la inducción de la apoptosis mediante ácido chebulágico (D.B. Reddy, et al., J Ethnopharmacol. (2009) 124: 506-12).

El ácido chebulágico, aislado de Terminalia chebula Retz, demostró ser un inhibidor reversible y no competitivo de la maltasa, con un valor de K(i) de 6,6 pM. La influencia inhibitoria del ácido chebulágico sobre el complejo maltasaglucoamilasa fue más potente que sobre el complejo sacarasa-isomaltasa. La magnitud de la inhibición de la alfaglucosidasa mediante ácido chebulágico se vio afectada enormemente por su origen. Estos resultados muestran la utilidad del ácido chebulágico en el tratamiento de la diabetes tipo 2 (Y.N. Huang et al., Biosci. Biotechnol. Biochem. (2008) 72: 601-3).

También se ha mostrado que el ácido chebulágico actúa sinérgicamente con la citotoxicidad de doxorrubicina en el carcinoma hepatocelular humano a través de la modulación de MDR-1 dependiente de COX-2. El ácido chebulágico incrementó la acumulación de doxorrubicina de una manera dependiente de la concentración, y también incrementó 20 veces la citotoxicidad de doxorrubicina en células HepG2. La cuantificación de la interacción calculando el índice de combinación (IC) mostró una interacción sinérgica intensa entre ácido chebulágico y doxorrubicina desde el punto de vista de la inhibición del crecimiento celular (C. Achari, et al., Med Chem. (2011) 7: 432-42).

El virus herpes simplex 1 (HSV-1) es un patógeno humano habitual que provoca una infección latente durante toda la vida de las neuronas sensoriales. Los inhibidores no nucleósidos que pueden limitar la recidiva de HSV-1 son especialmente útiles para tratar a individuos inmunodeprimidos o casos de cepas emergentes resistentes a aciclovir de herpes virus. Se ha descubierto que el ácido chebulágico y la punicalagina, dos tanoides hidrolizables aislados de los frutos secados de Terminalia chebula Retz. (Combretaceae), inhiben la entrada de HSV-1 a dosis no citotóxicas en las células pulmonares humanas A549 bloqueando las interacciones entre los glicosaminoglicanos de la superficie celular y las glicoproteínas de HSV-1 (L.T. Lin, et al., J. Virol. (2011) 85: 4386-98).

Se ha informado que el ácido chebulágico inhibe el inicio y la progresión de la artritis inducida por colágeno en ratones a través de la inhibición inmunitaria (IgG anticolágeno, IL-10, IL-6) por medio de la inducción de TGFbeta y células T CD4+, CD25+ (P.M. Lee, S.I. Hyun, et al., Arthritis Rheum. (2005) 52: 345-53).

Se ha informado que el ácido chebulágico posee propiedades citotóxicas contra las células de melanoma PRMI-7951 (Y. Kashiwada, et al., J. Nat. Prod. (1992) 55: 1033-43).

El ácido chebulínico, representado en el compuesto de fórmula (2), es otro miembro tanoide de la familia de taninos derivada de galoil glucosa. El ácido chebulínico se nombra químicamente como 1,3,6-tri-O-galoil-2,4-chebuloil-beta-D-glucosa.

Se ha demostrado que el ácido chebulínico y la telimagrandina I ejercen propiedades anti-tumorales en células HeLa de carcinoma de cuello uterino humano (Z. C. Yi, et al., CancerLett. (2006) 242: 77-87).

El ácido chebulínico inhibió la síntesis de hemoglobina de células K562 tratadas con ácido butírico y hemina de una manera dependiente de la concentración. También se ha informado que el ácido chebulínico inhibe la diferenciación eritroide, probablemente a través del cambio de la activación transcripcional de genes relacionados con la diferenciación (Z.C. Yi, et al., Acta Pharmacol Sin. (2004) 25: 231 -8).

Se informó que el ácido chebulínico, ácido tánico y ácido elágico son los compuestos fenólicos inhibidores del crecimiento de los frutos de T. chebula contra líneas celulares malignas que incluyen una línea celular de cáncer de mama humana (MCF-7) y de ratón (S115), una línea celular de osteosarcoma humano (HOS-1), una línea celular de cáncer de próstata humano (PC-3) y una línea celular de próstata humana no tumorigénica inmortalizada (PNT1A) (A. Saleem, et al., J Ethnopharmacol. (2002) 81: 327-36).

Se ha demostrado que el ácido chebulínico provoca un efecto de disminución de la tensión arterial en ratas, probablemente mediado a través de la disminución del gasto cardiaco resultante de una contracción reducida del ventrículo izquierdo (Y.Y. Guan, et al., Clin Exp Pharmacol Physiol. (1996) 23: 747-50).

El ácido chebulínico y la punicalina fueron capaces de bloquear la unión de rgp120 de VIH a CD4. Estos compuestos no fueron tóxicos para los linfocitos de sangre periférica humana estimulados a concentraciones diez veces por encima de su concentración eficaz máxima (J.L. Weaver, et al., Biochem. Pharmacol. (1992) 43: 2479-80).

El ácido gálico (AG) y el ácido chebúlico (AC) se aislaron del extracto de una planta medicinal, Kashi (mirobálano, el fruto de T. chebula) como principio activo que bloquea la citotoxicidad mediada por linfocitos T citotóxicos (CTL). La exocitosis de gránulos en respuesta a la estimulación anti-CD3 también se bloqueó mediante AG y AC a las concentraciones equivalentes (S-I. Hamada, et al., Biological& PharmaceuticalBulletin. (1997) 20: 1017-1019).

Se ha demostrado que el ácido chebulágico y el ácido chebulínico poseen actividad antifibrótica a través de la inhibición de la ruta Smad (H.Y. Chuang, et al., J. Sci. Food Agric. (2011) 91:2777-84). El ácido chebulágico, ácido chebulínico, y otros compuestos fenólicos aislados de T. chebula mostraron una captación de radicales de DPPH y actividades inhibitorias de melanina más fuertes que el ácido ascórbico, hidroxitolueno butilado, alfa-tocoferol, arbutina y ácido kójico (A. Manosroi, et al., Nat. Prod. Res. (2010) 24: 1915-26).

Tal como se demuestra mediante la actividad farmacológica extensa y significativa de los constituyentes y/o componentes bioactivos de T. chebula y/o T. bellerica, existe la necesidad de optimizar el procedimiento de extracción para alcanzar los niveles más altos posibles de estos compuestos bioactivos.

En una realización, el procedimiento de extracción de la presente invención incluye las etapas de: proporcionar el pericarpio de los frutos de T. bellerica; pulverizar o moler el pericarpio hasta un polvo; extraer el polvo con un disolvente de extracción o mezcla de disolventes, opcionalmente con calentamiento, para proporcionar un extracto enriquecido; y concentrar o secar el extracto enriquecido para proporcionar un polvo enriquecido en tanoides hidrolizables. Se prefiere un disolvente acuoso. Un disolvente especialmente preferido es el agua. Las temperaturas de extracción útiles pueden oscilar de alrededor de 25 °C (ambiente) a alrededor de 90 °C. Las temperaturas de extracción especialmente útiles pueden oscilar de alrededor de 25 °C a alrededor de 80 °C.

Los tiempos de extracción útiles junto con el mantenimiento de las temperaturas útiles pueden oscilar de alrededor de 2 horas a alrededor de 16 horas. Un intervalo de tiempo de extracción especialmente útil a alrededor de 25 °C es de alrededor de 12 horas a alrededor de 16 horas. La duración y la temperatura de la extracción se pueden variar a presión atmosférica (es decir, aprox. 1 atm). Se contempla que se puede variar la presión en el procedimiento de extracción, por ejemplo, mediante el uso de un aparato reactor a presión comercial.

El proceso de extracción puede incluir además secar la muestra extraída. Los métodos de secado adecuados incluyen el secado por atomización, la liofilización, el secado a vacío (con o sin calentamiento), la evaporación (con o sin calentamiento), y la concentración a vacío.

La presente invención proporciona un extracto de T. bellerica que incluye una mezcla de tanoides hidrolizables optimizados que contienen no menos de alrededor del 2-3% de ácido chebulínico, no menos de alrededor del 2-3% de ácido chebulágico, y no menos de alrededor del 10% de otros tanoides hidrolizables de bajo peso molecular.

Se determinó la actividad inhibitoria de xantina oxidasa in vitro y la eficacia clínica de los extractos de T. bellerica como se ejemplifica a continuación:

EJEMPLO 1

Actividad antioxidante comparativa de extractos de T. chebula y T. bellerica en modelos in vitro de inhibición de XO.

Se ensayó un extracto basado en T. chebula (TC) a tres diluciones diferentes de 5, 25 y 50 pg/mL, y se ensayó un extracto basado en T. bellerica (TB) a las mismas tres diluciones. El patrón de control positivo fue alopurinol (AP) ensayado a 1,5 y 10 pg/mL.

Fuente de los materiales ensayados. Los extractos de T. chebula y T. bellerica los proporcionó Natreon, Inc., New Brunswick, Nueva Jersey, EE.Uu ., y se adquirió alopurinol de Sigma Chemicals, Australia.

Antecedentes con respecto a los radicales libres y los antioxidantes.

Los radicales libres son átomos o grupos de átomos que contienen al menos un electrón desapareado en sus orbitales, y, en una ruta ejemplar, se puede formar cuando el oxígeno interacciona con ciertas moléculas. Una vez formadas en abundancia (o cuando tienen una concentración localizada elevada), estas especies altamente reactivas pueden iniciar una reacción en cadena, que provoca daños en muchas biomoléculas. Su principal peligro proviene del daño que pueden provocar cuando reaccionan con componentes celulares importantes, tales como ADN, mitocondrias, proteínas celulares o los lípidos presentes en la membrana celular (S.F. Pala, et al., Adv. Mol. Biol. (2007) 1: 63-69). Por otra parte, desempeñan un papel importante en diferentes procesos celulares, están implicados en la citotoxicidad, y actúan como defensa contra microorganismos y en la neurotransmisión, cuando están presentes en cantidades bajas/moderadas (M. Valko, et al., Int. J. Biochem. Cell Biol. (2007) 39: 44-84). Existen diversos tipos de radicales libres que se pueden formar en el cuerpo. Las especies reactivas de oxígeno (ROS) y las especies reactivas de nitrógeno (RNS) son componentes importantes de este sistema de "radicales libres". Los ROS más perjudiciales incluyen el radical hidroxilo, el radical superóxido, el oxígeno singlete, y similares. Los RNS más perjudiciales incluyen el óxido nítrico y el anión peroxinitrito. Además de estos dos tipos de radicales libres, el hidrógeno atómico, muchos metales de transición pesados (p.ej. hierro, cobre, zinc y manganeso), los compuestos halogenados, muchos fármacos, la radiación ionizante, y los residuos ambientales (p.ej. CO, amianto, ozono, disolventes, etc.) también se comportan como fuentes de radicales libres (G.S. Timmins y M.J. Davies, En: Electron Paramagnetic Resonance, The Royal Society of Chemistry, (Cambridge, R.U.), (1998) 1-49). Los radicales libres y/u oxidantes más habituales presentes en los sistemas biológicos se describen en la Tabla 1 a continuación.

Para los fines de la presente descripción, XO puede generar el radical superóxido O²".

Información general sobre los ROS y RNS más habituales presentes en los sistemas biológicos.

TABLA 1

Varios sistemas enzimáticos del cuerpo neutralizan los radicales libres en exceso. Un componente importante del sistema de defensa que previene el daño por radicales libres en el cuerpo incluye los antioxidantes que pueden servir como captadores o neutralizadores químicos de radicales libres. Los antioxidantes son moléculas que pueden interaccionar con seguridad con los radicales libres y finalizar la reacción en cadena antes de que se dañen o se modifiquen químicamente moléculas vitales o sitios reactivos. Los antioxidantes son de dos tipos: antioxidantes enzimáticos y antioxidantes no enzimáticos. Los antioxidantes enzimáticos incluyen la superóxido dismutasa (SOD), glutation peroxidasa (GPx) y catalasa (CAT). Los antioxidantes no enzimáticos incluyen metabolitos bioactivos concretos y varias clases amplias de agentes, tales como: ácido ascórbico (Vitamina C), a-tocoferol (Vitamina E), glutation (GSH), carotenoides, flavonoides, polifenoles, y moléculas de otras fuentes naturales. En condiciones fisiológicas normales, hay un equilibrio entre las actividades y los niveles intracelulares de estos antioxidantes en un sujeto u organismo vivo. Sin embargo, durante el estrés, puede haber un desequilibrio entre los niveles protectores beneficiosos necesarios y los niveles fisiológicos reales de estos antioxidantes en el sujeto. En estas situaciones, pueden ser necesarios antioxidantes de una o más fuentes exógenas para superar el efecto de una agresión por parte de uno o más tipos de radicales libres. Un antioxidante ideal debería captar/neutralizar diferentes tipos de radicales libres, p.ej. OH, O²", OOH, NO ^y ONOO-(o mezclas de los mismos), presentes en los sistemas biológicos.

Por lo tanto, en las realizaciones de la presente invención, se puede usar una batería de cribados de antioxidantes in vitro para estudiar las actividades antioxidantes comparativas de muestras de T. chebula y T. bellerica preparadas según los principios de la presente invención. Los ensayos útiles pueden incluir: el ensayo de decoloración de cationes radicales de ABTS (N. Pellegrini, et al., J. Nutr. (2003) 133: 2812-2819); el ensayo de decoloración del radical DPPH (I. Gulcin, et al., J. Ethnopharmacol. (2004) 90: 205-215); el ensayo de reducción férrica, FRAP, para plasma: el ensayo de la potencia de reducción (N. Pellegrini, et al.); el ensayo de captación de radicales hidroxilo mediante el método de degradación de 2-desoxirribosa (S.K. Chung, et al., Biosci. Biotech. Biochem. (1997) 61: 118-123); el ensayo de captación de peróxido de hidrógeno (I. Gulcin, et al.); la estimación del contenido fenólico total mediante el método de Folin-Ciocalteu (S.A.L. Morais, et al., J. Braz. Chem. Soc. (1999) 10:447-452); el ensayo de captación de radicales de óxido nítrico (R. Sundararajan, et al., Complementary & Alternative Medicine (2006) 6: 8-14); el ensayo de captación de peroxinitrito (L.B. Valdez, et al., Medicina (Lituania), (2007) 43: 306-309); la inhibición de la peroxidación de lípidos de la membrana de eritrocitos de rata (T. Moriguchi, et al., J. Nutr. (2001) 131: 1016S-1019S); y la inhibición de la peroxidación de lípidos de homogeneizado de cerebro de cabra (S.K. Mondal, et al., Ind. J. Exp. Biol. (2006) 44: 39 44^).

EJEMPLO 1A

Ensayo de captación de radicales superóxido mediante el método NBT (nitroazul de tetrazolio) - hipoxantina/XO (Palanisamy, et al., "Rind of the rambutan, Nephelium lappaceum, a potential source of natural antioxidants". Food Chemistry (2008) 109:54-63).

Se prepararon disoluciones de reserva de los materiales de ensayo a 20 mg/ml en agua (TB y TC) o inmediatamente antes del experimento. Se hicieron diluciones adicionales en agua estéril de tipo I y se estudió el efecto de los materiales de ensayo sobre la generación de radicales libres mediada por XO (superóxido) como se describió previamente (Palanisamy et al., 2008), mediante el uso del sistema hipoxantina/XO/NBT (sal de tetrazolio), y se detectó el producto de reacción (formazano) a 570 nm con el espectrofotómetro de microplacas BioRad 3550-UV. Alopurinol (AP) fue el control positivo, el agua doblemente destilada fue el control negativo (blanco). Los valores de p, que representan la significación estadística, se calcularon mediante el uso de una prueba t para datos emparejados, y se fijó el umbral de significación estadística a p=0,05 y al menos un 15% de diferencia en comparación con el control de agua.

Se determinó el efecto de diferentes productos sobre la generación de superóxido mediante XO.

TABLA 2

Como se ilustra en la Tabla 2, TB y TC exhibieron una actividad inhibitoria intensa dependiente de la dosis hacia la actividad de generación de superóxido de XO.

Dosis eficaz al 50% (DE50 = dosis necesaria para una inhibición del 50% de XO) de los materiales ensayados.

TABLA 3

La Tabla 3 muestra que la DE50 (dosis necesaria para una inhibición del 50%) fue equivalente a la del medicamento sintético para la gota, alopurinol. Estos experimentos demostraron que los extractos tanto de T. chebula como de T. bellerica fueron materiales eficaces y potentes para la inhibición de XO. Se espera que los extractos de T. chebula y T. bellerica, o las mezclas de los mismos, serán útiles como medicamentos naturales para el tratamiento de la hiperuricemia y la gota, entre otras afecciones.

EJEMPLO 1B

Ensayo de captación de radicales superóxido mediante el método de NBT (nitroazul de tetrazolio)-NADH (dinucleótido reducido de nicotinamida-adenina)-PMS (metosulfato de fenazonio) (I. Gulcin, et al., J. Ethnopharmacol. (2004) 90: 205-215, como anteriormente).

Los radicales superóxido se generan en las mitocondrias como moléculas útiles, pero a concentraciones muy bajas. A concentraciones altas, son potencialmente tan perjudiciales como los radicales hidroxilo. Los radicales generados se pueden ensayar junto con ciertos antioxidantes que pueden estar presentes en los extractos de T. chebula y/o T. bellerica preparados según los principios de la presente invención, para estudiar las capacidades antioxidantes.

Método analítico. Se prepara la disolución de muestras de ensayo disolviendo la muestra en agua destilada a una concentración de 1 mg/ml. Se mezclan 20, 40, 60 o 80 pl de la disolución de muestra con 500 pl de cada disolución de NADH (300 pM en TRIS-HCl), disolución de NBT (100 pM en TRIS-HCl) y disolución de PMS (20 pM en TRIS-HCl) para proporcionar un volumen final de 2000 pl. El volumen restante se completa con TRIS-HCl. La mezcla se incuba durante 30 minutos a temperatura ambiente para que tenga lugar la reacción. Después se mide la absorbancia del formazano azul, desarrollado durante la reacción, a 560 nm respecto de un blanco de reactivo. Se prepara una muestra de control con agua y sin material de TC (o TB). El experimento se lleva a cabo por duplicado.

Se calcula la captación en porcentaje, tal como se usa en la presente memoria, del radical a partir de la siguiente fórmula, en la que DO = densidad óptica.

Captación en porcentaje = ----------DOc°ntro^ o- D° muestra---------- x 100 Ecuación (1)

La captación en porcentaje del radical se calcula como en la Ecuación 1 anterior. Los valores de CI⁵⁰(concentración que capta un 50% del radical) se calculan representando la captación en porcentaje en el eje Y y la concentración de la muestra en el eje X. Después los resultados se expresan en valores de CI⁵⁰. Debido a que trolox habitualmente no muestra sensibilidad en este modelo experimental, no se usó como patrón para el cálculo de los equivalentes de trolox.

Se esperaría que los extractos de Terminalia chebula y/o T. bellerica neutralizasen los radicales superóxido (O²") generados a partir de la mezcla de reacción de PMS-NADH. Se espera que los resultados indiquen que los extractos son buenos neutralizadores de radicales O²". Por tanto se espera que el resultado indique que los extractos de TC y/o TB son materiales eficaces y potentes para la captación de radicales, y también para la inhibición de XO.

En conclusión, los resultados del estudio demostraron que tanto el extracto de Terminalia chebula como el extracto de Terminalia bellerica mostraron una actividad antioxidante significativa contra los radicales superóxido generados por XO.

Se espera además que un extracto de Terminalia chebula, o un extracto de Terminalia bellerica, o las combinaciones de los mismos, hechos de acuerdo con los principios de la invención, sean eficaces en el tratamiento de la uricemia, la hiperuricemia y la gota.

EJEMPLO 2

Estudio clínico

Se llevó a cabo un estudio aleatorizado, con doble enmascaramiento, controlado con placebo, de grupos paralelos, para determinar el efecto de Terminalia chebula y Terminalia bellerica en comparación a Febuxostat y un placebo sobre los niveles de ácido úrico en suero en pacientes con hiperuricemia.

Lugar del ensayo clínico: Departamento de Farmacología Clínica y Terapéutica; Instituto de Ciencias Médicas de Nizam; Punjagutta, Hyderabad, India. Patrocinador: Natreon Inc., New Brunswick, NJ, EE.UU.

Objetivo principal: Comparar la eficacia de Terminalia chebula, Terminalia bellerica en comparación con Febuxostat y un placebo desde el punto de vista de la reducción de los niveles de ácido úrico en suero en pacientes hiperuricémicos.

Objetivo secundario: Evaluar la seguridad y tolerabilidad de Terminalia chebula y Terminalia bellerica en pacientes hiperuricémicos.

Diseño del estudio

El presente estudio fue un ensayo prospectivo, aleatorizado, con doble enmascaramiento, controlado con placebo. Se incorporaron un total de 52 pacientes para recibir el tratamiento del estudio de una manera aleatorizada. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética Institucional, y todos los sujetos proporcionaron su consentimiento informado por escrito antes de su participación en el estudio.

Se seleccionaron pacientes con hiperuricemia de ambos sexos con edades de entre 18 y 70 años, con un nivel de ácido úrico en suero > 6,0 mg/dL y < 12,0 mg/dL, después de haber interrumpido todas las terapias de disminución de ácido úrico durante al menos 10 días. Los pacientes que estuvieron dispuestos a cumplir los requisitos del estudio y proporcionar un consentimiento informado voluntario y por escrito se incorporaron al estudio. Los pacientes con un ataque de gota durante la visita de cribado o inicial se excluyeron. Los pacientes que usaban actualmente aspirina u otros NSAIDS, diuréticos, otras medicaciones con efectos de disminución de urato conocidos también se excluyeron del estudio. Se excluyeron los pacientes con antecedentes o presencia de nefrolitiasis o hipertensión incontrolada o diabetes, deterioro hepático y renal, mujeres embarazadas o lactantes, o con hiperuricemia secundaria (p.ej. debido a un trastorno mieloproliferativo, o trasplante de órganos).

Después del cribado, todos los pacientes elegibles se aleatorizaron en uno de los cuatro grupos de tratamiento con doble enmascaramiento durante un periodo de 8 semanas, prospectivamente 12 semanas.

Grupo 1 - Terminalia chebula 500 mg - 1 cápsula de 500 mg de manera oral dos veces al día (BID) después de las comidas.

Grupo 2 - Terminalia bellerica 500 mg - 1 cápsula de 500 mg de manera oral dos veces al día (BID) después las comidas.

Grupo 3 - Febuxostat - 1 comprimido de 40 mg (encapsulado en una cápsula similar a las cápsulas de Terminalia chebula/Terminalia bellerica/placebo) una vez al día (OD) de manera oral por la mañana después de la comida y una cápsula de placebo idéntica en por la noche después de la cena.

Grupo 4 - Cápsulas de placebo (idénticas a Terminalia chebula y Terminalia bellerica) - 1 cápsula de manera oral dos veces al día (BID) después de las comidas.

Se pidió a los sujetos que acudiesen a visitas de seguimiento a las 4 semanas, 8 semanas, y (prospectivamente) 12 semanas de terapia. En cada visita se les evaluó con respecto a las medidas de eficacia y los estudios de seguridad. Se midieron los niveles de ácido úrico en suero inicialmente, al final de 4 semanas, y al final de 8 semanas.

Se realizaron investigaciones de seguridad en el laboratorio de los parámetros bioquímicos hematológicos, hepáticos y renales inicialmente y al final del estudio (8 semanas) y también como y cuando fue necesario (en caso de cualquier reacción adversa al medicamento (ADR)). Los sujetos se entrevistaron con respecto a la presencia de ADR, y se registró en el cuaderno de recogida de datos (CRF). El cumplimiento de la terapia se estudió mediante el método de recuento de píldoras.

Para los fines del presente estudio, Terminalia chebula es un extracto acuoso de los frutos comestibles de Terminalia chebula que contiene: no menos del 15% de ácido chebulínico, no menos del 10% de ácido chebulágico, y no menos del 15% de otros taninos hidrolizables de bajo peso molecular, tal como se estandariza mediante HPLC.

Para el presente estudio, Terminalia bellerica es un extracto acuoso de los frutos comestibles de Terminalia bellerica que contiene taninos hidrolizables de bajo peso molecular que incluyen ácido chebulínico y ácido chebulágico como compuestos bioactivos, y ácido gálico y ácido elágico.

Procedimiento del estudio

Los pacientes se incorporaron al estudio tras haber leído, entendido y firmado el documento de consentimiento informado. A continuación se cribaron y se evaluaron con respecto a los criterios de inclusión/exclusión (visita 1). En la visita de inicio/aleatorización (visita 2, día 1), se estudiaron los signos vitales, se realizó un examen general, análisis rutinarios de laboratorio, los niveles de ácido úrico en suero, y todos los sujetos elegibles se aleatorizaron en la medicación del estudio para recibir uno de los cuatro tratamientos según el calendario de aleatorización previo. Las medicaciones del estudio se dispensaron en la visita de aleatorización, y se comprobó el cumplimiento mediante el método de recuento de píldoras en la visita siguiente, es decir, al final de las 4 semanas.

Las 2 visitas posteriores se planificaron a intervalos de 4 semanas (visita 3, después de 4 semanas de tratamiento, visita 4, después de 8 semanas de tratamiento), y se estudiaron los signos vitales, se realizó un examen general, y se midieron los niveles de ácido úrico en suero. Se determinó el recuento de píldoras para estudiar la medicación. En la finalización (prospectiva) del estudio, visita 5 (después de 12 semanas de tratamiento), se estudiarán los signos vitales, se realizará un examen general, se analizará el ácido úrico en suero, se realizarán investigaciones de seguridad en el laboratorio. En cada visita, se entrevistó al paciente en relación con cualquier incidencia de un efecto adverso, especialmente la intolerancia GI, y se anotó en un cuaderno de registro de casos. La monitorización de los efectos adversos / SAE se realizaría a lo largo del transcurso del estudio. Se realizarán los parámetros de seguridad en el laboratorio antes y después del tratamiento, y como y cuando sea necesario. Al participante se le proporciona un número de contacto para informar y acceder a asistencia médica con respecto a cualquier evento adverso.

Criterios de valoración primarios (tal como se determina en la presente memoria):

1. Cambio absoluto en los niveles de ácido úrico en suero desde el inicio hasta 4 semanas, 8 semanas, y (prospectivamente) 12 semanas de tratamiento.2

2. Reducción media en porcentaje en los niveles de ácido úrico en suero desde el inicio hasta las 4 semanas, 8 semanas, y (prospectivamente) 12 semanas de tratamiento.

Criterios de valoración secundarios (tal como se determina en la presente memoria):

1. Proporción de pacientes cuyos niveles de ácido úrico en suero han disminuido a < 6,0 mg/dl tras el tratamiento al final de las 8 semanas/12 semanas.

2. Las medidas de la tolerabilidad se estudiarán al final de las 8 semanas/12 semanas como: Buena - sin efectos secundarios; Regular - efectos secundarios leves a moderados; y/o Mala - efectos secundarios graves y retirada de la terapia.

Análisis Estadístico

Los datos del estudio se expresan como la media ± DE. Se analizaron las medidas de resultado primario y secundario como la reducción media en porcentaje y el cambio absoluto en los niveles de ácido úrico en suero desde el inicio hasta las 4 semanas, 8 semanas, y (prospectivamente) 12 semanas de tratamiento. Se usó una prueba t para datos emparejados ANOVA para comparar el cambio medio desde el inicio hasta después del tratamiento (4, 8 semanas) dentro del grupo y una prueba t para datos independientes para las comparaciones entre grupos. Todo el análisis estadístico se llevó a cabo mediante el uso del programa informático Graph Pad PRISM 4 (Graph Pad Software Inc. San Diego, California, EE.UU.).

Resultados del Estudio Clínico

Se incorporaron un total de 52 pacientes aptos al estudio, y se completaron 8 semanas de tratamiento hasta ahora. Trece pacientes en el grupo de 500 mg de Terminalia chebula, 13 pacientes en el grupo de 500 mg de Terminalia bellerica, 13 pacientes en el grupo de 40 mg de Febuxostat, y 13 pacientes en el grupo de placebo han completado las 8 semanas de tratamiento del estudio.

TABLA 4 (Datos Demográficos)

Las características demográficas detalladas de los cuatro grupos de estudio se muestran en la Tabla 4. No hubo diferencias significativas entre grupos de tratamiento en las características iniciales, que incluyen la edad, el peso y el índice de masa corporal.

Niveles de ácido úrico en suero desde el inicio hasta el final del tratamiento de 4 semanas

TABLA 5

Reducción media en % de los niveles de ácido úrico en suero al final del tratamiento de 4 semanas:

NSB frente a C (p=ns), *B frente a D (p<0,001), *A frente a C, (p <0,001), #A frente a D (p<0,01)

Como se muestra en la Tabla 5, no hubo una diferencia estadística entre los niveles iniciales de ácido úrico en suero de los cuatro grupos de tratamiento.

Sin embargo, cuando la reducción media en porcentaje de los niveles de ácido úrico en suero al final del tratamiento de 4 semanas se compararon entre los 4 grupos de tratamiento, la dosificación BID de 500 mg de T. bellerica mostró una diferencia muy significativa (p<0,001) en comparación con el placebo, pero no con febuxostat, lo que significa que T. bellerica funciona tan bien como febuxostat, y mucho mejor que el placebo, desde el punto de vista estadístico. Por otra parte, la dosis BID de 500 mg de T. chebula mostró una diferencia significativa solamente a un nivel p<0,01 en comparación con el placebo, y a un nivel p<0,001 en comparación con febuxostat. Esto significa que T. chebula, aunque es eficaz, no es tan eficaz como T. bellerica para reducir los niveles de ácido úrico en suero.

Niveles de ácido úrico en suero desde el inicio hasta el final del tratamiento de 8 semanas

TABLA 6

Reducción media en % de los niveles de ácido úrico en suero al final del tratamiento de 8 semanas:

*A frente a D, A frente a C, B frente a D, B frente a C (p <0,001)

Como se observa a partir de la Tabla 6, cuando la reducción media en porcentaje de los niveles de ácido úrico en suero al final del tratamiento de 8 semanas se comparó entre los 4 grupos de tratamiento, se descubrió que la disminución de los niveles de ácido úrico en suero fue muy significativa para las dos dosis BID de 500 mg de T. chebula y BID de 500 mg de T. bellerica frente al placebo, así como frente a febuxostat (p<0,001). Es interesante indicar que la diferencia entre las dosis BID de 500 mg de T. chebula y BID de 500 mg de T. bellerica también es muy significativa estadísticamente (p<0,001), aunque la actividad inhibitoria de xantina oxidasa de estos dos extractos es similar (Tablas 2 y 3). Esto significa que la eficacia clínica de estos dos extractos para reducir los niveles de ácido úrico en suero no es la misma, a pesar de su actividad antioxidante similar in vitro. Por tanto, los estudios in vitro no siempre pueden predecir la eficacia clínica de un producto.

Evaluación de la seguridad

Todos los parámetros de seguridad hematológicos y bioquímicos estuvieron dentro de los límites normales en los cuatro grupos de tratamiento en el registro inicial. Dos pacientes del grupo de Febuxostat tuvieron una bilirrubina total ligeramente elevada, y 1 paciente se había quejado de náuseas y vómitos. Un paciente del grupo de Terminalia chebula tuvo una intolerancia GI leve. Ninguno de los pacientes del grupo de Terminalia bellerica informaron de ningún efecto adverso. No obstante, ningún sujeto abandonó el estudio debido a eventos adversos.

Se puede concluir a partir del presente estudio que el tratamiento durante 8 semanas con dosis BID de 500 mg de Terminalia chebula y BID de 500 mg de Terminalia bellerica tuvo un efecto significativo de disminución de los niveles de ácido úrico en suero en comparación con el valor inicial, y en comparación con el placebo. El estudio clínico continúa, y se espera además que después de 12 semanas de tratamiento el grupo de 500 mg de Terminalia bellerica y el grupo de 500 mg de Terminalia chebula muestren una mejora adicional en la reducción del ácido úrico, tal como se indica mediante una caída significativa de las 4 semanas a las 8 semanas. Se espera además que después de 12 semanas, el grupo BID de 500 mg de Terminalia bellerica y el grupo BID de 500 mg de Terminalia chebula produzcan niveles de ácido úrico en suero mejorados a alrededor de < 6,0 mg/dl. Además, ambos extractos también pueden funcionar razonablemente bien a dosis inferiores.

Se ha demostrado que los extractos de T. chebula y T. Bellerica pueden proporcionar cada uno independientemente mejoras sustanciales en los niveles de ácido úrico como tratamiento para la hiperuricemia. Por tanto, se ha establecido que los extractos de T. chebula y T. Bellerica son inhibidores eficaces de la xantina oxidasa.

Las dosificaciones adecuadas de los extractos de T. chebula y T. Bellerica como se describen en la presente memoria pueden oscilar de alrededor de 250 mg a alrededor de 2000 mg para la administración oral a pacientes humanos diariamente. Otro intervalo de dosificación adecuado para los extractos de T. chebula y T. Bellerica como se describe en la presente memoria puede oscilar de alrededor de 500 mg a alrededor de 1000 mg para la administración oral a pacientes humanos diariamente.

Las composiciones de la presente invención se pueden formular en formas sólidas orales nutracéuticas o farmacéuticas, tales como comprimidos, cápsulas, polvos o en formulaciones líquidas, tales como disoluciones y suspensiones, mediante el uso de excipientes adecuados.

Aunque en la anterior memoria descriptiva esta invención se ha descrito con relación a ciertas realizaciones de la misma, y se han expuesto muchos detalles con fines ilustrativos, será evidente para los expertos en la técnica que la invención es susceptible de realizaciones adicionales, y que algunos de los detalles descritos en la presente memoria se puede variar de manera considerable sin apartarse de los principios básicos de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende un extracto de Terminalia bellerica para el uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad inducida por radicales libres mediante la inhibición de la actividad de xantina oxidasa en un individuo, en la que la composición de extracto de Terminalia bellerica comprende no menos del 2% en peso de ácido chebulínico basado en el peso total del extracto, no menos del 2% en peso de ácido chebulágico basado en el peso total del extracto, y no menos del 10% en peso de otros tanoides hidrolizables de bajo peso molecular basado en el peso total del extracto, y en el que la enfermedad inducida por radicales libres se selecciona del grupo que consiste en gota, uricemia, e hiperuricemia.

2. La composición para el uso según la reivindicación 1, en la que la composición del extracto de Terminalia bellerica tiene una dosis eficaz (DE50) de 5 pg/ml para la inhibición de la xantina oxidasa.

3. Una composición que comprende un extracto de Terminalia bellerica que contiene no menos del 2% en peso de ácido chebulínico basado en el peso total del extracto, no menos del 2% en peso de ácido chebulágico basado en el peso total del extracto, y no menos del 10% en peso de otros tanoides hidrolizables de bajo peso molecular basado en el peso total del extracto, para el uso en el tratamiento o la prevención de la hiperuricemia disminuyendo el ácido úrico en suero en un individuo humano, y en la que la composición es para administración oral.

4. La composición para el uso según la reivindicación 3, en la que la composición del extracto de Terminalia bellerica se proporciona en un intervalo de dosis diarias de 250 mg a 2000 mg.

5. La composición para el uso según la reivindicación 3, en la que la composición del extracto de Terminalia bellerica se proporciona en un intervalo de dosis diarias de 500 mg a 1000 mg.

6. La composición para el uso según la reivindicación 5, en la que se disminuye el ácido úrico en suero hasta menos de 6,8 mg/dl.

7. La composición para el uso según la reivindicación 5, en la que se disminuye el ácido úrico en suero hasta menos de 6,0 mg/dl.