ES2744274T3 - Cepas probióticas para usar en la mejora del sistema nervioso entérico - Google Patents
Cepas probióticas para usar en la mejora del sistema nervioso entérico Download PDFInfo
- Publication number
- ES2744274T3 ES2744274T3 ES14173452T ES14173452T ES2744274T3 ES 2744274 T3 ES2744274 T3 ES 2744274T3 ES 14173452 T ES14173452 T ES 14173452T ES 14173452 T ES14173452 T ES 14173452T ES 2744274 T3 ES2744274 T3 ES 2744274T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- cncm
- group
- composition
- prevention
- ibs
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 210000000105 enteric nervous system Anatomy 0.000 title claims abstract description 33
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title description 8
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title description 8
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title description 5
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 113
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 88
- 102100023460 Choline O-acetyltransferase Human genes 0.000 claims abstract description 83
- 108010058699 Choline O-acetyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 82
- 108010003205 Vasoactive Intestinal Peptide Proteins 0.000 claims abstract description 80
- VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N invicorp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N 0.000 claims abstract description 79
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 71
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 31
- 102000055135 Vasoactive Intestinal Peptide Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 67
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 66
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 64
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 claims description 59
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 45
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 claims description 27
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 25
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 22
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 claims description 22
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 21
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 21
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 21
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 19
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 18
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 17
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 12
- 239000002356 single layer Substances 0.000 claims description 12
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 8
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 claims description 8
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 claims description 7
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 claims description 7
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 4
- 230000003870 intestinal permeability Effects 0.000 claims description 3
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 claims description 3
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 claims description 2
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 claims description 2
- 102000002808 Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide Human genes 0.000 claims 1
- 108010004684 Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide Proteins 0.000 claims 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102400000015 Vasoactive intestinal peptide Human genes 0.000 description 61
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 18
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 12
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 9
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 6
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 6
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 6
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 5
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 4
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 4
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 4
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 210000000470 submucous plexus Anatomy 0.000 description 4
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 102400000096 Substance P Human genes 0.000 description 3
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 2
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 102000005421 acetyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 2
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 2
- 230000000916 dilatatory effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 210000000268 efferent neuron Anatomy 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 210000005216 enteric neuron Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000027119 gastric acid secretion Effects 0.000 description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 2
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000007358 intestinal barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000005026 intestinal epithelial barrier Anatomy 0.000 description 2
- 210000003249 myenteric plexus Anatomy 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QEQDLKUMPUDNPG-UHFFFAOYSA-N 2-(7-amino-4-methyl-2-oxochromen-3-yl)acetic acid Chemical compound C1=C(N)C=CC2=C1OC(=O)C(CC(O)=O)=C2C QEQDLKUMPUDNPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001213452 Bifidobacterium longum NCC2705 Species 0.000 description 1
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102100021851 Calbindin Human genes 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 101710088172 HTH-type transcriptional regulator RipA Proteins 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- 241000917009 Lactobacillus rhamnosus GG Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000014415 Muscarinic acetylcholine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050003473 Muscarinic acetylcholine receptor Proteins 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 1
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 1
- 229940123257 Opioid receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010000059 abdominal discomfort Diseases 0.000 description 1
- 208000020560 abdominal swelling Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 230000008649 adaptation response Effects 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 210000003766 afferent neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940121376 cannabinoid receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000003537 cannabinoid receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002932 cholinergic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000003086 effect on acetylcholine Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000021121 fermented vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- 210000005095 gastrointestinal system Anatomy 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 210000001153 interneuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- 229940059406 lactobacillus rhamnosus gg Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000000111 lower esophageal sphincter Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000003183 myoelectrical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000003401 opiate antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000037324 pain perception Effects 0.000 description 1
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036378 peristaltic reflex Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 230000004648 relaxation of smooth muscle Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 210000003384 transverse colon Anatomy 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/10—Laxatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Obesity (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
Composición que comprende al menos una cepa de bacterias, seleccionada del grupo que consiste en - DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010), - DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010), - DN_116_047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010), - DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010), y - DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010), para su uso en: A) aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico, o B) aumento de los niveles de neuronas inmunorreactivas a colina acetil transferasa (ChAT) del sistema nervioso entérico, o C) reducción de los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico.
Description
DESCRIPCIÓN
Cepas probióticas para usar en la mejora del sistema nervioso entérico
Campo
La presente invención se refiere a composiciones que comprenden cepas de bacterias del ácido láctico para su uso en la modificación del sistema nervioso entérico. Dichas composiciones son especialmente adecuadas para tratar y/o prevenir trastornos intestinales tales como estreñimiento y/o enfermedad del intestino irritable.
Antecedentes
El síndrome del intestino irritable (SII) o colon espástico es un trastorno intestinal funcional caracterizado por dolor abdominal crónico, incomodidad, hinchazón y alteración de los hábitos intestinales en ausencia de cualquier causa orgánica detectable. En algunos casos, se informó de una inflamación intestinal de grado bajo. La diarrea o el estreñimiento pueden predominar o se pueden alternar (clasificados como SII-D, SII-C respectivamente). El SII puede comenzar después de una infección (postinfeccioso, SII-PI), un suceso vital estresante o comienzo de la madurez sin ningún otro indicador médico. En el SII, Las pruebas clínicas rutinarias no producen anomalías, aunque los intestinos pueden ser más sensibles a determinados estímulos, tales como la prueba de insuflación de globo.
El SII es una afección muy habitual que afecta a aproximadamente el 15 % de la población en cualquier momento. Hay aproximadamente el doble de mujeres que de hombres con esta afección. El SII es una fuente de dolor crónico, fatiga y otros síntomas, y aumenta los costes médicos del paciente, y contribuye al absentismo laboral. Los investigadores han informado de que la alta prevalencia del SII, junto con el aumento de los costes produce una enfermedad con un alto coste social. También se considera una enfermedad crónica y puede afectar drásticamente a la calidad de vida del enfermo.
Una teoría principal sobre la causa del SII lo relaciona con el sistema nervioso entérico (SNE). El sistema nervioso entérico (SNE) es una subdivisión del sistema nervioso periférico (SNP) que controla directamente las funciones gastrointestinales (GI) y está incluido en el revestimiento del sistema gastrointestinal. Incluye neuronas eferentes, neuronas aferentes e interneuronas. La función estructural y fisiológica del SNE es realizada por células gliales (astrocitos). El SNE está organizado en dos plexos principales con papeles funcionales específicos.
El plexo mientérico, localizado entre el músculo longitudinal y el circular, contiene neuronas implicadas principalmente en el control de la movilidad intestinal. A través de los músculos intestinales, las neuronas eferentes o motoras controlan el peristaltismo y la agitación del contenido intestinal. Las neuronas motoras que controlan la movilidad se componen de dos clases principales:
- neuronas excitadoras mientéricas que liberan acetilcolina (conocidas como neuronas inmunorreactivas a la colina acetiltransferasa ("ChAT-IR" o "ChAT" o "neuronas ChAT" o "nervios ChAT") y/o sustancia P (SP) para las contracciones, y
- neuronas inhibidoras mientéricas que liberan óxido nítrico (identificadas como neuronas de sintasa de óxido nítrico (NOS-IR)) y/o péptido intestinal vasoactivo (VIP) para la relajación.
La colina acetiltransferasa EC 2.3.1.6 es una enzima que se sintetiza dentro del cuerpo de una neurona y se transfiere al terminal nervioso. El papel de ChAT es unir Acetil-CoA a colina, lo que da como resultado la formación del neurotransmisor acetilcolina. Experimentalmente, el efecto sobre la producción de acetilcolina se extrapola a partir de la determinación del número de neuronas ChAT, normalmente un aumento en el número de nervios ChAT es indicativo de un aumento de la acetilcolina.
El plexo submucoso, localizado entre el músculo circular y la mucosa, contiene neuronas implicadas principalmente en el control de las funciones de la barrera epitelial intestinal (BEI), tales como la permeabilidad paracelular. En particular, la activación de neuronas entéricas en el plexo submucoso reduce la permeabilidad paracelular, mediante la liberación de VIP, mientras que la acetilcolina (Ach) aumenta la permeabilidad paracelular, estableciendo la base de un 'ajuste' fino de la permeabilidad de BEI por parte del SNE. Por tanto, con respecto al control neuronal de la permeabilidad paracelular, el aumento de la liberación de VIP por las neuronas submucosas aumenta la integridad de la BEI, mientras que el aumento de las neuronas ChAT del plexo submucoso reduce la resistencia de la BEI.
Aunque actualmente no hay cura para el SII, existen tratamientos que intentan aliviar los síntomas, incluyendo ajustes en la dieta, medicación e intervenciones psicológicas.
Se ha señalado que los probióticos, en particular cepas de bacterias del ácido láctico, son beneficiosos en el tratamiento y/o la prevención del SII. Son ejemplos de dichas descripciones los documentos WO 2007/036230, WO 03/010297, WO 2009/080800, Bixquert Jimenez M., Revista Española de Enfermedades Digestivas, vol. 101 n.° 8, agosto de 2009, Parkes GC et al., Proceedings of the nutrition society, vol. 69 n.° 2, mayo de 2010 y Moayyedi P. et al., Gut, British Medical Association, vol. 59, n.° 3, marzo de 2010. Sin embargo, las cepas bacterianas se seleccionan por su efecto en el sistema inmunitario, en la permeabilidad intestinal o en la microbiota intestinal y no por su efecto
en la mejora de la función del SNE. El documento WO 2008/064489 describe el uso de probióticos para bloquear una corriente de potasio dependiente de calcio de conductancia intermedia que da como resultado un efecto antiinflamatorio. El documento WO 2007/132359 describe el uso de Lactobacillus y un agonista del receptor cannabinoide y/o un antagonista del receptor opioide en relación con la percepción del dolor. El documento WO 2006/032542 describe el uso de Lactobacillus con fines analgésicos. Kamm et al., 2004, Neurogastrointest. Motil 16: 53-60 describió efectos de S. boulardii en la reducción de la calbindina-28 k (CALB) pero no en otros marcadores neuronales del yeyuno de cerdo. Metugriachuk et al, 2006, Rejuvenation Res. 9: 342-345 describen que una preparación simbiótica sobre la movilidad del intestino delgado y grueso en ratas Wistar viejas aumentó significativamente la actividad mioeléctrica del intestino delgado y el colon, una expresión aumentada de ARNm de VIP, pero sin efecto significativo en la concentración de VIP.
Thibault H. et al., Journal of pediatric gastroenterology and nutrition, vol. 39 n.°2, 1 de agosto de 2004 describe los efectos del consumo a largo plazo de fórmula infantil fermentada sobre la diarrea aguda en bebés sanos.
Por lo tanto, se necesita más investigación sobre cepas individuales de bacterias probióticas con un efecto beneficioso sobre el SNE para su uso en el SII, estreñimiento y/u otros trastornos.
Compendio de la invención
Los inventores emplearon un nuevo sistema modelo para explorar y seleccionar cepas de bacterias del ácido láctico y bifidobacterias que tienen un efecto mejorado sobre el sistema nervioso entérico (SNE). Este modelo contiene una (mono)capa de células epiteliales intestinales de carcinoma de colon humano y, en el lado basolateral de la monocapa, una mezcla de un cultivo primario de células del sistema nervioso entérico que incluye neuronas del plexo mientérico y submucoso. Usando este modelo los efectos de los componentes de calidad alimentaria, en particular cepas de bacterias del ácido láctico y bifidobacterias, en el SNE podrían evaluarse midiendo los efectos de la adición apical o luminal de estos componentes en la expresión del péptido vaso-intestinal (VIP) y/o los nervios liberadores de ChAT en el lado basolateral.
Por lo tanto, este modelo permitió detectar y seleccionar nuevas cepas de bacterias del ácido láctico y bifidobacterias para su uso en la mejora de la función del sistema nervioso entérico. Dichas cepas mejoran la movilidad intestinal y el peristaltismo. Con algunas cepas, el tiempo de tránsito intestinal puede reducirse, lo que puede abordar algunas afecciones tales como el estreñimiento. Con algunas cepas, se puede aumentar el tiempo de tránsito intestinal, los que puede abordar algunas afecciones tales como la diarrea. Las cepas de aumento de VIP también mejoran la integridad de la barrera epitelial intestinal. Dichas cepas son particularmente útiles y más eficaces que las cepas existentes en la prevención y/o el tratamiento del SII y/o el estreñimiento y otros trastornos asociados con una función reducida del SNE.
El aumento del fenotipo colinérgico, en particular la expresión de las neuronas ChAT, es de interés terapéutico en las patologías del tracto gastrointestinal asociadas con la inhibición del tránsito colónico. El uso de bacterias del ácido láctico o bifidobacterias seleccionadas para tener un efecto creciente en la mejora de la expresión colinérgica, es decir, ChAT, en neuronas es de interés terapéutico para pacientes con estreñimiento y pacientes que padecen SII-C. Por lo tanto, un grupo de cepas de bacterias del ácido láctico o bifidobacterias de la presente invención aumenta provechosamente el número de nervios ChAT, lo que es indicativo de un efecto mejorado en la movilidad intestinal, y especialmente es beneficioso para pacientes con SII, en particular pacientes con SII-C y pacientes que padecen estreñimiento. Este grupo se conoce como grupo B). La buena movilidad requiere una gran cantidad de nervios ChAT, que son responsables de la contracción y tienen un efecto procinético. En algunas realizaciones interesantes para este grupo, los niveles de TEER no se reducen, ya que la función de BEI y la capacidad para relajar los músculos preferiblemente no se ven afectadas. El subgrupo según estas realizaciones se conoce como grupo B3).
El aumento de VIP mejora beneficiosamente la relajación de los músculos del tracto GI y mejora la BEI, lo que es beneficioso para pacientes que padecen SII o enfermedad inflamatoria del intestino (EII) y también para personas mayores, bebés y personas obesas. Para dichos sujetos, una buena función de BEI es mejor, si no esencial. Aunque los pacientes que padecen SII o EII tienen una secreción excesiva de neuropéptidos tales como VIP, se supone que esta es una respuesta adaptativa del SNE para controlar la inflamación intestinal, para restablecer las funciones de barrera intestinal y para aumentar la neuroprotección. Un grupo de cepas de bacterias productoras de ácido láctico, en particular bifidobacterias, de la presente invención aumenta provechosamente VIP. Este grupo se conoce como grupo A). En una realización, el nivel de ChAT no aumenta. El grupo según esta realización se conoce como grupo A3). Por consiguiente, el nivel de ChAT puede permanecer sustancialmente sin cambios o puede disminuir.
Se han depositado todas las cepas bacterianas mencionadas en el presente documento, según el Tratado de Budapest, ante la CNCM ("Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos", 25 rue du Docteur Roux, París) como una autoridad internacional de depósito.
Son cepas que se descubrió con el método de exploración que pertenecían al grupo B) DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010), DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el l9 de mayo de 2010) y DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010). Son cepas que pertenecen al grupo A) DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000), DN_156_0032 (CNCM I- 4321 presentada el 19 de mayo de 2010),
DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) y DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010). La cepa DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000) se ha descrito en la solicitud internacional WO 02/02800 y la cepa DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) se ha descrito en la solicitud internacional W o 01/01785.
El alcance de la invención está definido por los términos de las reivindicaciones adjuntas.
En el presente documento se describen composiciones que comprenden al menos una de estas cepas seleccionadas. Se prefiere una composición que comprende una mezcla de al menos una cepa que pertenece al grupo B) y al menos una cepa que pertenece al grupo A). Dicha mezcla tendrá provechosamente un efecto mejorado sobre la movilidad al mejorar tanto las contracciones como las relajaciones y, además, tendrá un efecto ventajoso sobre la función de BEI. Por tanto, según un aspecto, la invención se refiere a una composición como se indica en la reivindicación 1.
Se describe en el presente documento una composición que comprende al menos una cepa de bacterias, preferiblemente seleccionada del grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias, para su uso en:
A) aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico, o
B) aumento de los niveles de neuronas inmunorreactivas a colina acetil transferasa (ChAT) del sistema nervioso entérico, o
C) reducción de los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico.
También se describe una composición que comprende al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)],
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)],
para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C,
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI y EII, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas.
Según un aspecto, la invención se refiere a una composición con se indica en la reivindicación 8.
La invención también se refiere a una composición como se indica en la reivindicación 21.
Se describe una composición que comprende al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)],
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)],
para su uso en la administración a sujetos que padecen un trastorno seleccionado del grupo que consiste en:
- estreñimiento, SII-C,
- diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI, EII,
- SII, y
-trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas.
Según un aspecto, la invención se refiere a una composición como se ha mencionado anteriormente para su uso en la mejora de la movilidad gastrointestinal, mejora del peristaltismo intestinal y/o reducción de la permeabilidad intestinal.
Se describen nuevas cepas de bacterias seleccionadas del grupo que consiste en:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)].
Se describen composiciones que comprenden las nuevas cepas.
Se describe una composición que comprende:
- al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias que B) aumenta los niveles de ChAT en el sistema nervioso entérico, y
- al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias que A) aumenta los niveles de péptido intestinal vaso-activo (VIP) en el sistema nervioso entérico.
Según un aspecto, la invención se refiere a un método para seleccionar cepas de bacterias, comprendiendo dicho método las etapas de:
a) Organizar un cocultivo de células epiteliales intestinales y células neuronales entéricas, en donde dichas células epiteliales intestinales están presentes como una monocapa y en donde dichas células neuronales entéricas están presentes en el lado basolateral de la monocapa,
b) Añadir cepas de bacterias al lado apical o luminal de la monocapa de células epiteliales intestinales, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 4 a 400 células bacterianas por cada célula epitelial,
c) Incubar el cocultivo con la cepa de bacterias del ácido láctico,
d) Preferiblemente aislar las células neuronales,
e) Medir la cantidad de VIP, ChAT, sustancia P, nervios de óxido de nitrógeno, ATP y/o péptido activador de la adenilato ciclasa hipofisario (PACAP) producido por las células neuronales y, opcionalmente, adicionalmente la resistencia eléctrica transepitelial (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales.
En este método, la cepa de bacterias pertenece preferiblemente al grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias. Descripción detallada
Definiciones
En la presente solicitud, se pretende que el uso de un compuesto o una composición abarque el uso en sí mismo, opcionalmente con la intención relacionada, pero también cualquier comunicación asociada al compuesto o composición con consecuencias comerciales o legales, por ejemplo publicidad, instrucciones o recomendaciones en el envase de las composiciones, instrucciones o recomendaciones en soporte comercial tal como folletos, panfletos, carteles, documentación presentada en apoyo de registros reguladores con fines de seguridad, fines de eficacia o para protección del consumidor, por ejemplo en administraciones tales como EFSA en Europa.
En la presente solicitud, los grupos de cepas se refieren a cepas que presentan una propiedad o un conjunto de propiedades específico. Por tanto, una cepa específica puede pertenecer a varios grupos. En la presente solicitud, el término "o" no es exclusivo.
En la presente solicitud, una propiedad tal como VIP y/o ChAT se considera sustancialmente sin cambios en comparación con un control si la variación no supera el 10 %, preferiblemente el 1 % en comparación con el control.
Realizaciones preferidas
En realizaciones preferidas, la composición es para su uso en:
A3) aumento de VIP, siempre que no se aumente ChAT, o
B3) aumento de ChAT, siempre que no se aumente VIP, no estando la resistencia eléctrica (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales reducida o
C3) reducción de ChAT, siempre que no se reduzca VIP, o
C2) reducción de ChAT y reducción de VIP.
Por ejemplo, la composición de la invención se puede usar en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o - tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI y EII, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés y personas obesas.
En realizaciones especialmente preferidas, las composiciones pueden:
A) aumentar los niveles de VIP del sistema nervioso entérico y usarse en el tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
B) aumentar los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico y usarse en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o
C) reducir los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico y usarse en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, SII-D, SII-PI, EII.
La cepa de bacterias se puede seleccionar, por ejemplo, del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000) [A) - A3)],
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)],
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada
mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada
mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada
mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 
de febrero de 2010) [B) - B3)].
En una realización, la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)], y
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
y la composición es para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas.
En una realización, la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)],
y la composición para su uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C.
En una realización, la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)], y
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
y la composición es para su uso en:
A) aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico, preferiblemente para su uso en A3) aumento de VIP, siempre que no se aumente ChAT.
En una realización particular de esta realización, la composición es para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas.
En una realización, la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)], y la composición es para su uso en: B) aumento de los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico, preferiblemente B3) aumento de ChAT, siempre que no se aumente VIP.
En una realización particular de esta realización, la composición es para su uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C.
Más detalles de las cepas de bacterias
Como se ha mencionado anteriormente, la composición comprende al menos una o dos cepas específicas de bacterias, preferiblemente bacterias del ácido láctico. Se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en el género Lactobacillus y Bifidobacterium, Lactococcus y Streptococcus. Se encontró que dicha cepa específica de bacterias es capaz de afectar a los niveles de VIP y/o afectar a los niveles de nervios ChAT en un modelo de cocultivo que representa la interacción entre el intestino y el SNE.
Un modelo de cocultivo, como se describe en más detalle a continuación, se usó para seleccionar in vitro cepas de bacterias del ácido láctico o bifidobacterias con estas propiedades. Se exploraron 102 cepas pertenecientes a los géneros Lactobacillus, Streptococcus o Bifidobacterium.
Las cepas del grupo B) con mayor efecto sobre ChAT normalmente mejorarán la movilidad intestinal. Las cepas del grupo B3) con mayor efecto sobre ChAT, excluyendo cepas en donde VIP no aumenta (es decir, VIP no cambia sustancialmente o VIP se reduce) representan una realización preferida específica. Las cepas de estos grupos son normalmente beneficiosas para el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C. Esto podría ser de interés particular adicional para el tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, que con frecuencia pueden padecer estreñimiento. Con respecto a la movilidad creciente, se favorecerían las cepas que aumenten la expresión de ChAT. Esta propiedad parece ser muy poco habitual. De manera interesante, solo se encontraron tres cepas que aumentaran estadísticamente ChAT. Estas se conocen como cepas del grupo B) o del grupo B3). Las cepas del grupo B) o del grupo B3) comprenden las cepas DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010), DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) y DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010). Dichas cepas mejoran beneficiosamente la movilidad, especialmente contracciones. Se prefiere que la resistencia eléctrica (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales no se reduzca. Dicha propiedad puede ser indicativa de una función de barrera adecuada. La cepa DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) redujo significativamente los niveles de VIP, mientras que las otras dos cepas no tuvieron un efecto significativo en los niveles de VIP. Ya que una reducción en VIP puede tener un efecto adverso en la BEI, se examinó con un modelo in vitro con una monocapa de células epiteliales intestinales si la incubación de esta cepa daba como resultado una disminución de la resistencia eléctrica transepitelial (TEER). Esto resultó no ser el caso, lo que indica que la función de BEI no está alterada.
Con respecto a la relajación de los músculos y el refuerzo de la función de BEI, que es beneficioso en pacientes con SII y EII, se favorecerían las cepas que aumenten la expresión de VIP (que tendrían además efectos antiinflamatorios). Dichas cepas se conocen como cepas del grupo A). En una realización preferida, las cepas del grupo A) no aumentan la expresión de ChAT (es decir, ChAT no cambia sustancialmente o ChAT se reduce). Dichas cepas se conocen como cepas del grupo A3). Las cepas de estos grupos son normalmente beneficiosas para el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o para el tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas. Las cepas del grupo A) o del grupo A3) comprenden las cepas DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000), DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010), DN_156_007 (CNCM I- 2219 presentada el 31 de mayo de 1999), DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010). Es interesante observar que todas las cepas que tienen esta propiedad son bifidobacterias, excepto una: DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010). Asimismo, utilizando otro modelo in vitro con una monocapa T84 y la resistencia eléctrica transepitelial (TEER), se descubrió que especialmente las cepas DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000), DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999), DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) y DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) del grupo A) o A3) tenían un efecto protector sobre la BEI en presencia de LPS. Por lo tanto, estas cepas particulares son especialmente preferidas.
Según una realización, las cepas permiten reducir los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico. El grupo correspondiente de cepas se conoce como grupo C). En una realización particular, las cepas permiten reducir ChAT, siempre que no se reduzca VIP (es decir, VIP no cambia sustancialmente o VIP aumenta). Este grupo se conoce como grupo C3). En una realización particular, las cepas permiten reducir ChAT con reducción de VIP. Estas cepas se conocen como grupo C2). Las cepas del grupo C3) son normalmente beneficiosas para el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, SII-D. Esto podría ser de interés particular adicional para el tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, que con frecuencia pueden padecer diarrea. Las cepas del grupo C2) son normalmente beneficiosas para el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, SII-D, SII-PI y EII. Esto podría ser de interés particular adicional para el tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores que con frecuencia pueden padecer dichas afecciones, especialmente diarrea.
La presente invención también abarca el uso de las cepas mencionadas anteriormente, pero también cepas mutantes o cepas genéticamente transformadas derivadas de una cualquiera de las cepas parentales que todavía tienen actividad en VIP y que afectan a los nervios ChAT. Estas cepas mutantes o transformadas genéticamente pueden ser cepas en donde uno o más genes endógenos de la cepa original se han mutado, por ejemplo, para modificar algunas de sus propiedades metabólicas (p. ej., su capacidad para fermentar azúcares, su resistencia a la acidez, su supervivencia al transporte en el tracto gastrointestinal, su post-acidificación o su producción de metabolitos). También pueden ser cepas resultantes de la transformación genética de la cepa parental por uno o más genes de interés, por ejemplo, para proporcionar a dicha cepa características fisiológicas adicionales o para permitirle expresar proteínas de interés terapéutico o vacunal que se desee administrar a través de dichas cepas.
Preferiblemente se usa una mezcla de al menos una cepa que pertenece al grupo B), preferiblemente grupo B3), y al menos una cepa que pertenece al grupo A), preferiblemente grupo A3). Dicha mezcla tendrá provechosamente un efecto mejorado en la movilidad, así como en BEI.
Modelo de cocultivo y ensayo de exploración
En una realización, la presente invención se refiere a un método para seleccionar cepas de bacterias del ácido láctico, comprendiendo dicho método las etapas de:
a) Usar un cocultivo de células epiteliales intestinales y células neuronales entéricas, en donde las células epiteliales intestinales están presentes como una monocapa y en donde las células neuronales entéricas están presentes en el lado basolateral de la monocapa,
b) Añadir bacterias del ácido láctico o el lado apical o luminal de la monocapa, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 4 a 400 células bacterianas por cada célula epitelial,
c) Incubar el cocultivo con la bacteria del ácido láctico,
d) Preferiblemente aislar las células neuronales, y
e) Medir la cantidad de al menos un neurotransmisor seleccionado del grupo que consiste en VIP, ChAT, sustancia P y óxido de nitrógeno, ATP, PACAP producido por las células neuronales y, opcionalmente, adicionalmente la resistencia eléctrica transepitelial (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales.
De acuerdo con el reflejo peristáltico, el SNE contiene circuitos cableados que consisten en neuronas motoras excitadoras ascendentes que liberan acetilcolina y sustancia P, que contrae el músculo liso a través de receptores muscarínicos y de neuronas inhibidoras descendentes que liberan un cóctel de transmisores, como NO, ATP, VIP y PACAP, todos los cuales inhiben el músculo circular.
Cultivo celular
Se proporciona una forma adecuada de establecer el cocultivo con una monocapa de células epiteliales intestinales polarizadas en el ejemplo 1 y también se describe en J. Chevalier et al., 2008, J. Physiol. 586 1963-1975.
Todos los cultivos de células epiteliales intestinales que forman monocapas son adecuados, tales como Caco-2, T84, HT29 y TC7. Preferiblemente se usan células T84.
Como células primarias del sistema nervioso entérico, preferiblemente se aíslan células de fetos de mamíferos no humanos, preferiblemente roedores, más preferiblemente ratas.
Preferiblemente, las cepas de bacterias ensayadas se cultivan hasta una fase exponencial tardía en un medio de cultivo adecuado y se lavan. Preferiblemente, las bacterias se añaden al lado apical del cocultivo en una cantidad de 4 a 400 bacterias / célula epitelial, más preferiblemente de 10 a 100 bacterias / célula epitelial, aún más preferiblemente de 30 a 50 bacterias / célula epitelial. Preferiblemente, como control, no se añaden bacterias. Preferiblemente, como control positivo se usa butirato 1 mM o KCl 40 mM.
Preferiblemente, la etapa de incubación se realiza a aproximadamente 37 °C. Preferiblemente, la etapa de incubación dura de 1 a 72 h, más preferiblemente de 2 a 36 h, aún más preferiblemente de 4 a 12 h.
Preferiblemente, después de la incubación conjunta, se retira el compartimento que contiene células epiteliales y bacterias y se incuban células neuronales primarias durante 12 a 48 h, más preferiblemente durante 20 a 28 h en una incubadora humidificada que contiene CO2 al 5 %.
Preferiblemente, la cantidad de nervios ChAT frente a nervios totales se mide usando tinción inmunohistoquímica, usando anti-enolasa específica de neurona (NSE) para contar el número total de neuronas y anti-colina acetil transferasa para contar los nervios ChAT.
Preferiblemente, VIP se determina mediante ELISA después de recoger las células neuronales y extraer las proteínas con la presencia de un cóctel inhibidor de proteasa.
Más detalles acerca de las composiciones
En el presente documento se describen composiciones con cepas de bacterias que permiten los usos o propiedades mencionados anteriormente. También se describen en el presente documento composiciones que comprenden una o más de las siguientes cepas (que abarcan mutantes o cepas transformadas genéticamente derivadas de los mismos): - DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)],
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)],
para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o - tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI y EII, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas, normalmente cuando se administran in vivo a un sujeto.
En las composiciones de la invención, dichas cepas pueden usarse en forma de bacterias enteras que pueden estar vivas o no. Como alternativa, pueden usarse en forma de un lisado bacteriano o en forma de fracciones bacterianas; se pueden elegir las fracciones bacterianas adecuadas para este uso, por ejemplo, ensayando sus propiedades para aliviar los efectos sobre los niveles de VIP y los niveles de nervios ChAT del modelo de cocultivo descrito en la presente invención. Preferiblemente las células bacterianas están presentes como células vivas, viables.
Las composiciones de la invención pueden estar en cualquier forma adecuada para su administración, en particular administración oral. Esto incluye, por ejemplo, sólidos, semisólidos, líquidos y polvos. Se prefieren en general composiciones líquidas para una administración más fácil, por ejemplo, como bebidas.
La composición puede comprender, por ejemplo, al menos 105, preferiblemente al menos 1x106, ufc por g de peso seco, de al menos una cepa de bacterias, preferiblemente de cepas de bacterias como se han mencionado anteriormente. Estas se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias.
Cuando las bacterias están en forma de bacterias vivas, la composición puede comprender normalmente de 105 a 1013 unidades formadoras de colonias (ufc), preferiblemente al menos 106 ufc, más preferiblemente al menos 107 ufc, aún más preferiblemente al menos 108 ufc, y lo más preferiblemente al menos 109 ufc por g de peso seco de la composición. En el caso de una composición líquida, esto corresponde en general a 104 a 1012 unidades formadoras de colonias (ufc), preferiblemente al menos 105 ufc, más preferiblemente al menos 106 ufc, aún más preferiblemente al menos 107 ufc y lo más preferiblemente al menos 109 ufc/ml.
Son ejemplos de las composiciones de la invención composiciones nutricionales, incluyendo productos alimenticios y en particular productos lácteos.
La composición puede ser, por ejemplo, un producto lácteo, preferiblemente un producto lácteo fermentado. La administración en forma de un producto lácteo fermentado tiene la ventaja adicional de bajos niveles de lactosa, lo que es más beneficioso para el SII. Opcionalmente, pueden estar presentes otras cepas de bacterias del ácido láctico. El producto fermentado puede estar presente en forma de líquido o presente en forma de polvo seco obtenido mediante la deshidratación del líquido fermentado. Preferiblemente, el producto fermentado es un producto fresco. Un producto fresco, que no ha sufrido etapas de tratamiento térmico intenso, tiene la ventaja de que las cepas bacterianas presentes están en forma viva. Preferiblemente, el producto fermentado es un producto lácteo, más preferiblemente leche fermentada y/o suero fermentado. Preferiblemente, la composición nutricional es yogur o leche fermentada en forma sólida, agitada o bebible. Preferiblemente, el producto fermentado es un queso. Preferiblemente, el producto fermentado es un vegetal fermentado, tal como soja, cereales y/o frutas fermentados en forma sólida, agitada o bebible.
Preferiblemente, la presente composición nutricional es un alimento para bebés, una fórmula de leche infantil o una fórmula infantil de continuación. Preferiblemente, la presente composición es un producto nutracéutico o farmacéutico, un complemento nutricional o alimento médico.
Las composiciones nutricionales de la invención también incluyen complementos alimenticios y alimentos funcionales. Un "complemento alimenticio" designa un producto hecho de compuestos habitualmente utilizados en productos alimentarios, pero que está en forma de comprimidos, polvo, cápsulas, poción o cualquier otra forma no asociada habitualmente con alimentos y que tiene efectos beneficiosos para la salud. Un "alimento funcional" es un alimento que también tiene efectos beneficiosos para la salud de un individuo. En particular, los complementos alimenticios y los alimentos funcionales pueden tener un efecto fisiológico, protector o curativo, contra una enfermedad, por ejemplo, contra una enfermedad crónica.
Se prefiere una composición que comprenda una mezcla de al menos una cepa de bacteria del ácido láctico bifidobacteria que aumentan los nervios ChAT y al menos una cepa de bacteria del ácido láctico o bifidobacteria que aumenta los niveles VIP. Dicha mezcla tendrá provechosamente un efecto mejorado en la movilidad, así como en BEI.
Se prefiere una mezcla de al menos una cepa que pertenece al grupo B), preferiblemente B3), y al menos una cepa que pertenece al grupo A), preferiblemente A3). Dicha mezcla tendrá provechosamente un efecto mejorado en la movilidad, así como en BEI. Por lo tanto, la presente invención también se refiere a composiciones que comprenden:
- al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)],
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) [B) - B3)], y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) [B) - B3)]; y
- al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000) [A) - A3)],
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)],
- DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) [A) - A3)], y
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) [A) - A3)].
Las composiciones de la invención también pueden comprender una o más cepas adicionales de bacterias del ácido
láctico, probióticas o no, por ejemplo una o más cepas bacterianas seleccionadas de los géneros Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus y bifidobacterias. En particular, esta(s) otra(s) cepa(s) puede(n) incluir una o más cepas de Streptococcus thermophilus y/o una o más cepas de Lactobacillus bulgaricus.
Aplicación
En una realización, se descubrió que las cepas de la presente invención aumentan el número de nervios ChAT. La colina acetiltransferasa EC 2.3.1.6 es una enzima que se sintetiza dentro del cuerpo de una neurona y se transfiere al terminal nervioso. El papel de la colina acetiltransferasa es unir Acetil-CoA a colina, lo que da como resultado la formación del neurotransmisor acetilcolina. Se usa como marcador inmunohistoquímico para las neuronas motoras. Los efectos sobre el nervio ChAT dan como resultado contracciones mejoradas que dan como resultado un peristaltismo mejorado. Por lo tanto, las cepas y composiciones de la presente invención capaces de aumentar los nervios ChAT se administran provechosamente para mejorar el SNE, para mejorar o potenciar el peristaltismo, para mejorar la movilidad intestinal y/o para reducir el tiempo de tránsito gastrointestinal. El aumento del fenotipo colinérgico es de interés terapéutico en las patologías gastrointestinales asociadas con la inhibición del tránsito colónico. En particular, diversos estudios han mostrado que el tránsito lento podría estar asociado con una expresión reducida de las neuronas ChAT. En particular, (i) los pacientes con estreñimiento grave tienen en general una menor cantidad de nervios ChAT, (ii) la producción de ACh mientérica disminuyó significativamente tanto durante el transcurso de la infección como después de la infección (PI), (iii) durante el envejecimiento, se ha señalado una reducción de la proporción de neuronas colinérgicas.
En este contexto, el uso de cepas de bacterias, preferiblemente bacterias del ácido láctico o bifidobacterias para potenciar la expresión colinérgica en las neuronas, podría ser de interés terapéutico futuro para pacientes con estreñimiento grave y SII-C. Por lo tanto, las cepas y composiciones de la presente invención se administran provechosamente a pacientes que padecen SII-C y/o estreñimiento. Son cepas más útiles las cepas del grupo B) o B3) mencionadas anteriormente.
En una realización particular, las cepas y composiciones de la presente invención son usadas por o para personas mayores. Las personas mayores en la presente invención se definen como seres humanos con una edad mayor de 65 años, preferiblemente mayor de 70 años, preferiblemente mayor de 75 años, preferiblemente mayor de 80 años, preferiblemente mayor de 85 años. Las personas mayores tienen normalmente un número reducido de neuronas ChAT en el sistema nervioso entérico localizado en el colon, lo más preferiblemente en el colon transversal. Por lo tanto, las cepas y composiciones de la presente invención se administran provechosamente para tratar y/o prevenir el SII, preferiblemente SII-C, y/o estreñimiento para personas mayores. Son cepas capaces de aumentar los nervios ChAT el grupo B), tal como la cepa DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010), DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010) y DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010). Preferiblemente, no reducen VIP, ya que VIP es necesario para una buena función de BEI y para la relajación del tracto gastrointestinal, otra parte importante de la movilidad del tracto gastrointestinal, tal como el peristaltismo. Las cepas que cumplieron este criterio fueron DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010) y DN_116_0047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010). Sin embargo, la cepa DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) tampoco afectó negativamente a la función de BEI según lo determinado por los experimentos de TEER, ya que TEER no disminuyó.
En una realización, se descubrió que las cepas de la presente invención aumentan los niveles de VIP. Con respecto al sistema digestivo, VIP induce la relajación del músculo liso (esfínter esofágico inferior, estómago, vesícula biliar), estimula la secreción de agua en el jugo pancreático y la bilis y provoca la inhibición de la secreción de ácido gástrico y la absorción en la luz intestinal. Su papel en el intestino es estimular en gran medida la secreción de agua y electrolitos, además de dilatar el músculo liso intestinal, dilatar los vasos sanguíneos periféricos, estimular la secreción de bicarbonato pancreático e inhibir la secreción de ácido gástrico estimulada por gastrina. Estos efectos actúan juntos para aumentar la movilidad. Por lo tanto, este hallazgo es indicativo de que estas cepas tienen un efecto mejorado sobre la movilidad intestinal, en particular la parte de relajación de la movilidad. VIP también aumenta beneficiosamente la función de BEI. Por lo tanto, las cepas y composiciones de la presente invención se administran provechosamente para mejorar el SNE, para mejorar o potenciar el peristaltismo, para reducir la permeabilidad, para mejorar la movilidad intestinal y/o para reducir el tiempo de tránsito gastrointestinal. Por lo tanto, las cepas y composiciones de la presente invención se administran provechosamente para su uso en pacientes que padecen:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI y EII, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII, o
- tratamiento y/o prevención de trastornos encontrados en personas mayores, bebés y personas obesas.
Son cepas más útiles las cepas del grupo A) o A3) mencionadas anteriormente.
Se pueden encontrar detalles o ventajas de la presente invención en los ejemplos no limitantes a continuación.
Ejemplos
EJEMPLO 1: EXPLORACIÓN DE PROBIÓTICOS EN UN MODELO DE COCULTIVO QUE IMPLICA CÉLULAS EPITELIALES Y CÉLULAS NEURONALES ENTERICAS
Cultivo celular
Se obtuvieron ratas gestantes Sprague-Dawley (CERJ, Le Genest St Isle, Francia y Janvier-Breeding Center, Bélgica) y se sacrificaron mediante una sobredosis de CO2, seguido de corte de las arterias carótidas. Los embriones (35-45 por aislamiento de 3 ratas gestantes) se retiraron y se sacrificaron por decapitación. Los intestinos delgados de los embriones se extrajeron y se picaron de forma fina en HBSS (Sigma, Francia). Se recogieron fragmentos tisulares en 5 ml de medio (medio DMEM-F12 1:1) y se digirieron a 37 °C durante 15 minutos en tripsina al 0,1 % (Sigma). La reacción de tripsina se detuvo mediante la adición de 10 ml de medio que contenía suero de ternero fetal al 10 % y después se trató con DNasa I (0,01 %, Sigma) durante 10 min a 37 °C. Después de triturar con una pipeta de 10 ml, las células se centrifugaron a 750 rpm durante 10 min. Se contaron las células y después se sembraron a una densidad de 2,4x105 células/cm2 en placas de 24 pocillos previamente recubiertas durante 6 h con una solución de gelatina (0,5 %, Sigma) en solución salina tamponada con fosfato (PBS) estéril. Después de 24 h, el medio se reemplazó con un medio sin suero (DMEM-F12 1:1 que contenía 1 % de complemento de N-2 (Life technologies, Francia). Las células se mantuvieron en cultivo durante 14 días para obtener un cultivo primario del sistema nervioso entérico (SNE). La mitad del medio fue reemplazada cada dos días. A los 14 días, las células neuronales primarias estaban listas para el establecimiento del modelo de cocultivo.
La línea celular T84 (EATCC) se cultivó en DMEM-F12 (1:1, GIBCO) complementado con FBS termoinactivado al 10 % y penicilina 50 Ul/ml y estreptomicina 50 pg/ml. Las células se sembraron en filtros Transwell® (Corning, NY EE.u U.) de 12 pocillos a una densidad de 2x105 células/inserto y se cultivaron para obtener confluencia.
Un día después de que las células epiteliales alcanzaran la confluencia, los filtros Transwell® se transfirieron a las placas de 12 pocillos sembradas en el fondo con células nerviosas entéricas. Las células epiteliales y neuronales se cocultivaron en el medio para células epiteliales.
Cultvo de cepas de bacterias
Se cultivaron bacterias durante 16 horas en TGYH para bifidobacterias y lactobacilos, excepto para la cepa DN_173_010 (CNCM I-2494 presentada el 20 de junio de 2000) que se cultivó en medio de MRS cisteína, se lavó en PBS dos veces y se ajustó a 4.108 ufc/ml para añadir uniformemente el mismo volumen de suspensión bacteriana al filtro. Las cepas se añadieron en el compartimento del filtro a una MOI de 40 bacterias/célula epitelial. Como control, no se añadieron bacterias.
Después de 8 horas de incubación conjunta, se retiró el compartimento del filtro que contenía células epiteliales y bacterias y se incubaron células neuronales primarias durante 24 h en una incubadora humidificada que contenía CO2 al 5 %. En los pocillos de control, las células neuronales se estimularon con butirato 1 mM y KCl 40 mM cuando se realizaron mediciones de ChAT y VIP, respectivamente.
Tinción inmunohistoquímica. Medición de los nervios ChAT
Después de la incubación, se realizó inmunohistoquímica para detectar poblaciones de células neuronales. Después de la fijación de células (en PBS 0,1 M que contenía paraformaldehído al 4 % durante 1 h a temperatura ambiente), las células se lavaron 3 veces en PBS, después se permeabilizaron durante 30 min en PBS/NaN3 que contenía Triton X-100 al 0,5 % y suero de caballo al 4 %. Anticuerpo primario: anti-enolasa específica de neurona (NSE) de conejo (1:2000; Biovalley, Francia) y anti-colina acetil transferasa de conejo se diluyeron en PBS/NaN3, Triton X-100 al 0,5 % y suero de caballo al 4 % y se incubaron durante una noche a temperatura ambiente. Después de la incubación con antisuero primario, las células se lavaron 3 veces con PBS y se incubaron durante 3 h con IgG anti-conejo de burro conjugada con isotiocianato de fluoresceína (FITC) (1:200 Immunotech, Francia) y 7-amino-4-metil-cumarina-3-acetato respectivamente. Las muestras se observaron bajo un microscopio de fluorescencia Olympus 1X50 equipado con una cámara de video blanca (Mod. 4910, Cohu Inc, Alemania) conectada a un ordenador Macintosh a través de una tarjeta de captura de fotogramas (Scion Image, SL Microtest).
Mediciones de VIP:
Para la determinación de VIP, se recogieron células neuronales de las placas de 12 pocillos, las proteínas se extrajeron usando tampón de lisis RIPA (Millipore, Francia) que contenía cóctel inhibidor de proteasa (Roche Diagnostics, Francia) y los niveles de VIP se midieron por ELISA (Bachem, Alemania).
Resultados
Se muestra la respuesta diferencial de neuronas entéricas primarias en marcadores de VIP y ChAT después de la interacción de algunas de las 102 cepas probióticas, incluyendo bacterias del ácido láctico y bifidobacterias, en la Tabla 1. Solo se muestran algunas cepas que pertenecen al grupo A3) o B3) o C3). Además, se menciona que se mostró que 26 cepas no tenían un efecto significativo sobre VIP y ChAT (incluyendo las cepas Bifidobacterium longum NCC 2705 (CNc M I-2618), Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC 53103) y Lactobacillus casei Shirota), Se mostró que 11 cepas que pertenecían al grupo C2) reducían tanto VIP como ChAT (incluyendo la cepa Bifidobacterium longum Wll de Alfa-Wass (LMG P-21586)), 10 cepas reducían VIP y no tuvieron ningún efecto sobre ChAT (incluyendo las cepas de referencia Bifidobacterium infantis UCC 3564, Bifidobacterium longum Bb536, Bifidobacterium animalis spp lactis Bb12 (DSM 15954) y Bifidobacterium animalis spp lactis Bi-07 (ATCC SD5220) y 41 cepas pertenecientes al grupo C3) reducían CHAT y no tenían ningún efecto en VIP, incluidas las cepas Lactobacillus johnsonii Lai (CNCM I-1225), Lactobacillus plantarum 299v (DSM 9843) Lactobacillus reuteri SD 2122 (ATCC 55730)).
Tabla 1: Efecto de la incubación con bacterias del ácido láctico y bifidobacterias en los niveles de VIP y ChAT en un modelo de cocultivo con monocapa de células epiteliales y células del SNE primarias.
* Los valores se proporcionan como una diferencia en comparación con el control, donde no se añadieron cepas bacterianas.
Aunque la cepa DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010) reduce los niveles de VIP, resultó con un modelo de TEER (Hirotani et al, 2008, Yakugaku Zasshi Sep; 128(9): 1363-8) que la incubación con la cepa durante 4 o 6 h no redujo significativamente los valores de TEER, incluso en presencia de daño frente a control. En resumen, las bacterias se cultivaron en TGYH. Las suspensiones de cultivo se lavaron con PBS. Posteriormente, las bacterias (100 ufc/célula) se añadieron al lado apical de las monocapas de células T84. Después de 2 h de incubación, se añadió LPS (L4516, - EPEC - 0127: B8) en el lado apical a 40 ng/ml o no se añadió. Después, tras 2 h y 4 h de incubación, el valor de TEER se midió para evaluar la función de barrera epitelial. Todos los experimentos se realizaron tres veces de forma independiente y por triplicado en presencia y en ausencia de LPS. El valor de T84 en t=0 se estableció en 100 %. En ausencia de l Ps la Te ER en T4 fue del 98,7 % y en T6 del 100,2 % con la cepa DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010); solo para T84 aún era del 100 %. En presencia de LPS, el control T84 en T4 fue 56,2 % comparado con t=0 y con la cepa DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de
2010) 47,9%; En T6, el control T84 fue de 46,7% y con la cepa DN_119_0118 (CNCM I- 4279 presentada el 25 de febrero de 2010) 52,2%.
Usando este mismo modelo de TEER especialmente la cepa DN_173_010 (CNCM I- 2494 presentada el 20 de junio de 2000), DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999), DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010) y DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010), todas pertenecientes al grupo A3), mostraron buenos resultados sobre la función de barrera intestinal evaluada por TEER en presencia de LPS. Véase tabla 2.
Tabla 2: Resultados de TEER en presencia de LPS de bacterias seleccionadas que muestran los mejores resultados
*** valor de p <0,05
Claims (21)
1. Composición que comprende al menos una cepa de bacterias, seleccionada del grupo que consiste en
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_116_047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010), y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010),
para su uso en:
A) aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico, o
B) aumento de los niveles de neuronas inmunorreactivas a colina acetil transferasa (ChAT) del sistema nervioso entérico, o
C) reducción de los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico.
2. Composición para su uso según la reivindicación 1, para su uso en:
A3) aumento de VIP, siempre que no se aumente ChAT, o
B3) aumento de ChAT, siempre que no se aumente VIP, preferiblemente no estando la resistencia eléctrica (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales reducida o
C3) reducción de ChAT, siempre que no se reduzca VIP, o
C2) reducción de ChAT y reducción de VIP.
3. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde dicha composición: A) aumenta los niveles de VIP del sistema nervioso entérico y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
B) aumenta los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o
C) disminuye los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, SII-D, SII-PI, EII.
4. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha composición:
A3) aumenta el VIP siempre que no se aumente ChAT,
y se usa en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII.
5. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha composición:
B3) aumenta ChAT, siempre que no se aumente VIP, preferiblemente no estando la resistencia eléctrica (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales reducida,
y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C.
6. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha composición:
C3) reduce ChAT, siempre que no se reduzca VIP,
y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea y SII-C.
7. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha composición:
C2) reduce ChAT y reduce VIP,
y se usa en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infecciones
intestinales, SII-D, SII-PI y EII.
8. Composición que comprende al menos una cepa de bacterias seleccionadas del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada e
mayo de 2010),
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada e
mayo de 2010),
- DN_116_047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada
mayo de 2010), y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010),
para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno intestinal, preferiblemente tratamiento y/o prevención de un trastorno de movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o - tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D, SII-PI y EII, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII.
9. Composición para su uso según la reivindicación 8, en donde la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada
mayo de 2010), y
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada e
mayo de 2010),
para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII.
10. Composición para su uso según la reivindicación 8, en donde la cepa de bacterias se selecciona del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_116_047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada
mayo de 2010), y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010),
para su uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C.
11. Composición para su uso según la reivindicación 8, que comprende al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_156_0032 (CNCM I-4321 presentada
mayo de 2010), y
- DN_121_0304 (CNCM I-4318 presentada e
mayo de 2010),
para su uso en:
A) aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico, preferiblemente para su uso en A3) aumento de VIP, siempre que no se aumente ChAT.
12. Composición para su uso según la reivindicación 11, para su uso en:
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII y EII.
13. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 12, para su uso en el tratamiento y/o prevención de dichos trastornos encontrados en personas mayores, bebés o personas obesas.
14. Composición para su uso según la reivindicación 8, que comprende al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en las siguientes cepas:
- DN_116_047 (CNCM I-4317 presentada el 19 de mayo de 2010),
- DN_154_0067 (CNCM I-4320 presentada el 19 de mayo de 2010), y
- DN_119_0118 (CNCM I-4279 presentada el 25 de febrero de 2010),
para su uso en:
B) aumento de los niveles de ChAT del sistema nervioso entérico, preferiblemente B3) aumento de ChAT, siempre que no se aumente VIP.
15. Composición según la reivindicación 14, para su uso en el tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C.
16. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, para su uso en la mejora de la movilidad gastrointestinal, mejora del peristaltismo intestinal y/o reducción de la permeabilidad intestinal.
17. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición es un producto lácteo, preferiblemente un producto lácteo fermentado.
18. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición comprende al menos 105, preferiblemente al menos 1x106, ufc de al menos una cepa de bacterias seleccionada del grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias por g de peso seco.
19. Método de selección de cepas de bacterias, comprendiendo dicho método las etapas de:
a) Organizar un cocultivo de células epiteliales intestinales y células neuronales entéricas, en donde dichas células epiteliales intestinales están presentes como una monocapa y en donde dichas células neuronales entéricas están presentes en el lado basolateral de la monocapa,
b) Añadir cepas de bacterias al lado apical o luminal de la monocapa de células epiteliales intestinales, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 4 a 400 células bacterianas por cada célula epitelial,
c) Incubar el cocultivo con la cepa de bacterias del ácido láctico,
d) Preferiblemente aislar las células neuronales,
e) Medir la cantidad de VIP, ChAT, sustancia P, nervios de óxido de nitrógeno, PACAP y/o ATP producidos por las células neuronales y, opcionalmente, adicionalmente por la resistencia eléctrica transepitelial (TEER) de la capa de células epiteliales intestinales.
20. Método según la reivindicación 19, en donde la cepa de bacterias pertenece al grupo que consiste en lactobacilos y bifidobacterias.
21. Composición que comprende al menos una cepa DN_156_007 (CNCM I-2219 presentada el 31 de mayo de 1999) para su uso en:
-tratamiento y/o prevención de un trastorno de la movilidad intestinal, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en estreñimiento y SII-C, o -tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en diarrea, infección intestinal, SII-D y SII-PI, o
- tratamiento y/o prevención de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en SII.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IB2010/001534 WO2011148219A1 (en) | 2010-05-28 | 2010-05-28 | Probiotic strains for use in improving the enteric nervous system |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2744274T3 true ES2744274T3 (es) | 2020-02-24 |
Family
ID=43302705
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES11731504.4T Active ES2508566T3 (es) | 2010-05-28 | 2011-05-27 | Cepas probióticas para su uso en mejorar el sistema nervioso entérico |
| ES14173452T Active ES2744274T3 (es) | 2010-05-28 | 2011-05-27 | Cepas probióticas para usar en la mejora del sistema nervioso entérico |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES11731504.4T Active ES2508566T3 (es) | 2010-05-28 | 2011-05-27 | Cepas probióticas para su uso en mejorar el sistema nervioso entérico |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9198940B2 (es) |
| EP (2) | EP2575837B1 (es) |
| JP (1) | JP5923492B2 (es) |
| KR (1) | KR101779832B1 (es) |
| CN (1) | CN103209698B (es) |
| BR (1) | BR112012030359B1 (es) |
| CA (1) | CA2800768C (es) |
| EA (1) | EA028015B1 (es) |
| ES (2) | ES2508566T3 (es) |
| MX (1) | MX345063B (es) |
| PL (1) | PL2575837T3 (es) |
| PT (1) | PT2575837E (es) |
| WO (2) | WO2011148219A1 (es) |
| ZA (1) | ZA201208977B (es) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2609813A1 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | Nestec S.A. | Lactobacillus reuteri DSM 17938 for the development of the enteric nervous system |
| UA118339C2 (uk) * | 2012-09-03 | 2019-01-10 | Біогайа Аб | Бактеріальний штам lactobacillus gasseri для лікування порушення моторики кишечнику (варіанти) |
| JP2016507216A (ja) | 2012-11-12 | 2016-03-10 | コンパニ・ジェルベ・ダノンＣｏｍｐａｇｎｉｅ Ｇｅｒｖａｉｓ Ｄａｎｏｎｅ | 体脂肪の蓄積を低減させるためのラクトバチルスラムノサス株 |
| WO2014096901A1 (en) * | 2012-12-18 | 2014-06-26 | Compagnie Gervais Danone | Strain of bifidobacterium animalis ssp. animalis |
| FR3004621B1 (fr) | 2013-04-19 | 2015-05-15 | Gervais Danone Sa | Souche de lactobacillus rhamnosus regulatrice du metabolisme lipidique |
| CN103898007B (zh) * | 2014-02-21 | 2016-08-17 | 刘洛贤 | 一株有活性的双歧杆菌菌株 |
| JP6402016B2 (ja) * | 2014-12-10 | 2018-10-10 | 国立大学法人岐阜大学 | 神経機能改善剤 |
| CN107847483A (zh) * | 2015-04-30 | 2018-03-27 | 益生菌股份公司 | 具有特定治疗活性的抗生素与具有相同治疗适应证的具有不可转移抗生素抗性的乳酸杆菌和/或双歧杆菌同时联用的应用 |
| US9730969B2 (en) | 2015-11-06 | 2017-08-15 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions for promoting gut barrier function and ameliorating visceral pain |
| WO2019066599A2 (ko) * | 2017-09-29 | 2019-04-04 | 경희대학교 산학협력단 | 신규 유산균 및 이의 용도 |
| CN108753670A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-11-06 | 西北工业大学 | 多功能复合微生态制剂纳米硒-重组表达血管活性肠肽-乳酸乳球菌及制备方法 |
| KR102238519B1 (ko) * | 2018-12-28 | 2021-04-13 | (주)메디톡스 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| KR102635553B1 (ko) * | 2018-12-28 | 2024-02-13 | 주식회사 리비옴 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| CN115066187A (zh) * | 2019-12-17 | 2022-09-16 | 麦特珍尼斯公司 | 多菌株益生菌组合物及其用途 |
| KR20210129516A (ko) | 2020-04-20 | 2021-10-28 | 주식회사 리비옴 | 혈관 작동성 장 펩티드를 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| KR102527953B1 (ko) * | 2021-03-29 | 2023-05-03 | 주식회사 리비옴 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| CN113248520A (zh) * | 2021-04-07 | 2021-08-13 | 浙江华显光电科技有限公司 | 一种有机化合物及使用该化合物的有机发光器件 |
| WO2024080918A1 (en) * | 2022-10-13 | 2024-04-18 | Baylor College Of Medicine | Secretin inducing bacteria |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07173188A (ja) * | 1993-12-17 | 1995-07-11 | Tsumura & Co | 新規アリソールおよびアリソール類を有効成分とする脳機能改善剤 |
| ID29150A (id) * | 1999-01-15 | 2001-08-02 | Entpr Ireland Cs | Penggunaan lactobacillus salivarius |
| FR2795917B1 (fr) | 1999-07-06 | 2001-08-31 | Gervais Danone Sa | Procede de preparation d'un produit lacte immunostimulant et ses applications |
| FR2811333B1 (fr) | 2000-07-04 | 2003-01-10 | Gervais Danone Sa | Microorganismes ayant une action modulatrice de la glycosylation de surface des cellules intestinales et methode de selection desdits microorganismes |
| US20030092163A1 (en) | 2001-07-26 | 2003-05-15 | Collins John Kevin | Probiotic bifidobacterium strains |
| FR2875406B1 (fr) | 2004-09-21 | 2007-01-05 | Danisco | Souche de lactobacillus acidophilus ayant des proprietes analgesiques au niveau du systeme gastro-intestinal |
| ITMI20042189A1 (it) * | 2004-11-16 | 2005-02-16 | Anidral Srl | Composizione a base di batteri probiotici e suo uso nella prevenzione e-o nel trattamento di patologie e-o infezioni respiratorie e nel miglioramento della funzionalita' intestinale |
| DK2277524T3 (en) | 2005-09-28 | 2016-02-08 | Nordisk Rebalance As | Treatment of IBS using both probiotic bacteria and fermented cereal as treatment effectors |
| US20090311227A1 (en) | 2006-05-12 | 2009-12-17 | Danisco A/S | Composition |
| CN101095698B (zh) * | 2006-06-26 | 2010-12-01 | 青岛东海药业有限公司 | 酪酸梭菌防治便臭毒素引起的相关症状和疾病的用途 |
| WO2008064489A1 (en) | 2006-12-01 | 2008-06-05 | Mcmaster University | Probiotics to inhibit inflammation |
| FR2921795B1 (fr) * | 2007-10-03 | 2011-04-29 | Gervais Danone Sa | Utilisation d'une souche de bifidobacterium,pour la preparation d'une composition destinee a la prevention et/ou au traitement de manifestations de type allergique |
| PL2072053T3 (pl) | 2007-12-21 | 2013-02-28 | Gervais Danone Sa | Sposób zmniejszania obwodu brzucha przez podawanie bakterii bifidobacterium |
| WO2010008272A1 (en) * | 2008-07-15 | 2010-01-21 | N.V. Nutricia | Treatment of gut motility disorders |
| US8685388B2 (en) * | 2009-11-02 | 2014-04-01 | Compagnie Gervais Danone | Method for reducing gastro-intestinal inflammation using Bifidobacterium animalis bacteria or a fermented dairy product comprising such bacteria |
| WO2011148220A1 (en) * | 2010-05-28 | 2011-12-01 | Compagnie Gervais Danone | Probiotic strains for use in improving transepithelial resistance |
-
2010
- 2010-05-28 WO PCT/IB2010/001534 patent/WO2011148219A1/en active Application Filing
-
2011
- 2011-05-27 ES ES11731504.4T patent/ES2508566T3/es active Active
- 2011-05-27 KR KR1020127034391A patent/KR101779832B1/ko active IP Right Grant
- 2011-05-27 ES ES14173452T patent/ES2744274T3/es active Active
- 2011-05-27 JP JP2013511783A patent/JP5923492B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-05-27 EA EA201291441A patent/EA028015B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2011-05-27 BR BR112012030359A patent/BR112012030359B1/pt active IP Right Grant
- 2011-05-27 US US13/700,485 patent/US9198940B2/en active Active
- 2011-05-27 CN CN201180036975.4A patent/CN103209698B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2011-05-27 EP EP11731504.4A patent/EP2575837B1/en active Active
- 2011-05-27 CA CA2800768A patent/CA2800768C/en active Active
- 2011-05-27 PL PL11731504T patent/PL2575837T3/pl unknown
- 2011-05-27 EP EP14173452.5A patent/EP2857027B1/en active Active
- 2011-05-27 WO PCT/IB2011/052344 patent/WO2011148355A1/en active Application Filing
- 2011-05-27 PT PT117315044T patent/PT2575837E/pt unknown
- 2011-05-27 MX MX2012013834A patent/MX345063B/es active IP Right Grant
-
2012
- 2012-11-28 ZA ZA2012/08977A patent/ZA201208977B/en unknown
-
2015
- 2015-10-29 US US14/927,333 patent/US20160045557A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2857027A1 (en) | 2015-04-08 |
| BR112012030359B1 (pt) | 2020-05-05 |
| JP2013528053A (ja) | 2013-07-08 |
| JP5923492B2 (ja) | 2016-05-24 |
| MX2012013834A (es) | 2013-04-08 |
| CN103209698A (zh) | 2013-07-17 |
| EA201291441A1 (ru) | 2013-05-30 |
| BR112012030359A2 (pt) | 2016-08-09 |
| PT2575837E (pt) | 2014-10-01 |
| ES2508566T3 (es) | 2014-10-16 |
| CN103209698B (zh) | 2015-09-02 |
| WO2011148355A1 (en) | 2011-12-01 |
| PL2575837T3 (pl) | 2015-03-31 |
| US9198940B2 (en) | 2015-12-01 |
| EP2575837A1 (en) | 2013-04-10 |
| EP2575837B1 (en) | 2014-06-25 |
| US20160045557A1 (en) | 2016-02-18 |
| WO2011148219A1 (en) | 2011-12-01 |
| CA2800768C (en) | 2020-07-21 |
| MX345063B (es) | 2017-01-16 |
| EP2857027B1 (en) | 2019-06-12 |
| EA028015B1 (ru) | 2017-09-29 |
| CA2800768A1 (en) | 2011-12-01 |
| ZA201208977B (en) | 2014-04-30 |
| KR101779832B1 (ko) | 2017-09-19 |
| KR20140000620A (ko) | 2014-01-03 |
| US20130195822A1 (en) | 2013-08-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2744274T3 (es) | Cepas probióticas para usar en la mejora del sistema nervioso entérico | |
| JP6197045B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・アニマリスｓｓｐ．アニマリスの株 | |
| JP5816273B2 (ja) | 経上皮抵抗の改善に用いるためのプロバイオティクス株 | |
| ES2763874B2 (es) | Phascolarctobacterium faecium para su uso en la prevencion y tratamiento de la obesidad y sus comorbilidades |