ES2710932T3 - Inhibidores de neprilisina - Google Patents

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ES2710932T3
ES2710932T3 ES13733129T ES13733129T ES2710932T3 ES 2710932 T3 ES2710932 T3 ES 2710932T3 ES 13733129 T ES13733129 T ES 13733129T ES 13733129 T ES13733129 T ES 13733129T ES 2710932 T3 ES2710932 T3 ES 2710932T3
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Melissa Fleury
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Theravance Biopharma R&D IP LLC
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Abstract

Un compuesto de fórmula X:**Fórmula** (i) Ra es F; Rb es Cl; X es**Fórmula** y cuando X es:**Fórmula** R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, - C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)- alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O- alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2,- CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y**Fórmula** o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2, -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2, y R7 es H; y cuando X es:**Fórmula** R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona entre -CH2OC(O)CH3 y -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NH2; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o**Fórmula** (ii) Ra es F; Rb es Cl; X es y R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, - CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, - CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2, -CH2OC(O)- CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y**Fórmula** o R2 se selecciona entre -C(O)- alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2, -C(O)CHRd-NHC(O)O- alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2, y R7 es H; o (iii) Ra es F; Rb es Cl; X es**Fórmula** y R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, - CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, - CHRcO(O)O-alquilo C2-4,-CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2, -CH2OC(O)CHRd- NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y**Fórmula** R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2, -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2, y R7 es H; o (iv) Ra es F; Rb es Cl; X es R es H o -CH3; y R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3,-C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, - CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)-COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)Oalquilo C2-4, -CHRcOC(O)-O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2, -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O- alquilo C1-6, bencilo,

Description

DESCRIPCION
Inhibidores de neprilisina
Antecedentes de la invencion
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a nuevos compuestos que se metabolizan in vivo a compuestos que tienen actividad como inhibidores de la neprilisina. La invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden estos compuestos y procesos e intermedios para preparar estos compuestos y encuentra utilidad en los metodos de uso de estos compuestos para tratar enfermedades tales como hipertension, insuficiencia cardfaca, hipertension pulmonar y enfermedad renal.
Estado de la tecnica
El documento WO 2010/136474 A2 describe compuestos que tienen actividad de inhibicion de la neprilisina.
La Publicacion de Patente Estadounidense No. 2012/0157386, asignada en comun el 14 de diciembre de 2011 a Smith et al., describe compuestos novedosos que tienen actividad como inhibidores de la neprilisina. En particular, se describen los compuestos del genero:
Figure imgf000002_0001
Dependiendo de las variables, los compuestos dentro de este genero pueden referirse como la forma activa o como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para generar la forma activa del compuesto.
Sin embargo, a pesar de estos compuestos, sigue existiendo la necesidad de compuestos y profarmacos dentro de este genero que tengan diferentes propiedades metabolicas y de escision. Por ejemplo, sigue existiendo la necesidad de compuestos activos y/o compuestos profarmacos que tengan una absorcion oral mejorada y de compuestos profarmacos que experimenten una escision rapida para formar el compuesto activo. Esta invencion esta dirigida a esa necesidad.
Resumen de la invencion
Un aspecto de la invencion se refiere a un compuesto de la fórmula X:
Figure imgf000002_0002
en donde:
(i) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000003_0001
y cuando X es:
Figure imgf000003_0002
R2 es H y R7 se selecciona de-CFhCFb, -CH2CH(CH3)2 , -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3,-CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000003_0003
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6 , -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6 , y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; y
cuando X es:
Figure imgf000003_0004
R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona entre-CH2OC(O)CH3 y -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NH2; o selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o
(ii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000003_0005
y
R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CHa)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)-CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000004_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(iii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000004_0002
y R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH(CHa)2 , -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2 , -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000004_0003
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(iv) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000004_0004
R es H o -CH3 ; y
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)-COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)-O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRdNH-C(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000004_0005
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o R2 es -C(O)CH2NH2 y R7 es -CH2CH3 ; o
(v) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000005_0001
y
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 , -CH2CH(CHa)2 , -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CHa)(CFa)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcO-C(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000005_0002
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6 , -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6 , y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(vi) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000005_0003
y
R2 y R4 son H, y R7 se selecciona entre H, -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000005_0004
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es H, y R7 es H; o R2 es H, R4 es -CH2OP(O)(ORe)2 o -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2; o R2 es -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R4 es H, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2; o
(vii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000006_0001
y
R2 y R4 son H, y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)-COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000006_0002
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y
R7 se selecciona de H y -CH2CH3 ; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R4 y R7 son H; o
(viii) Ra es H; Rb es Cl; X es
Figure imgf000006_0003
y
R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona de -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R3 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000006_0004
y R7 es H; o
(ix) Ra es Cl; Rb es Cl; X es
Figure imgf000006_0005
y
R2 es H, R4 es -OH y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -C(CHa)(CFa)2 , -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)- alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O- ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y
Figure imgf000007_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R4 se selecciona de -OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000007_0002
y R7 es H;
donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo;
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
La presente invencion proporciona compuestos que se metabolizan in vivo a compuestos que se ha encontrado que poseen actividad inhibidora de la enzima neprilisina (NEP). Por consiguiente, se espera que los compuestos de la invencion sean utiles y ventajosos como agentes terapeuticos para tratar pacientes que padecen una enfermedad o trastorno que se trata inhibiendo la enzima NEP o aumentando los niveles de sus sustratos peptidicos. Por lo tanto, la invencion encuentra utilidad en un metodo para tratar la hipertension, la insuficiencia cardfaca o la enfermedad renal, que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la invencion.
Otro aspecto de la invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden un vehteulo farmaceuticamente aceptable y un compuesto de la invencion.
Otro aspecto mas de la invencion se refiere a procedimientos y productos intermedios utiles para preparar compuestos de la invencion. Otro aspecto de la invencion se refiere a un proceso para preparar una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de fórmula I, que comprende poner en contacto un compuesto de formula I en forma de acido o base libre con una base o acido farmaceuticamente aceptable. En otros aspectos, la invencion se refiere a productos preparados por cualquiera de los procesos descritos en el presente documento, asf como a nuevos productos intermedios utilizados en dicho proceso.
Otro aspecto mas de la invencion se refiere al uso de un compuesto de formula I o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para la fabricacion de un medicamento, especialmente para la fabricacion de un medicamento util para tratar la hipertension, la insuficiencia cardfaca o la enfermedad renal. La invencion tambien encuentra utilidad en el uso de un compuesto de la invencion para inhibir una enzima NEP en un mairnfero, y en el uso de un compuesto de la invencion como herramienta de investigacion.
Descripcion detallada de la invencion
Cuando se describen los compuestos, composiciones, metodos y procesos de la invencion, los siguientes terminos tienen los siguientes significados a menos que se indique lo contrario. Ademas, como se usa en este documento, las formas singulares "un", "una" y "el/la" incluyen las formas plurales correspondientes, a menos que el contexto de uso indique claramente lo contrario. Los terminos "que comprende", "que incluye" y "que tiene" tienen la intencion de ser inclusivos y significan que puede haber elementos adicionales distintos a los elementos enumerados. Todos los numeros que expresan cantidades de ingredientes, propiedades como el peso molecular, las condiciones de reaccion, etc., que se usan en este documento deben entenderse como modificados en todos los casos por el termino "aproximadamente", a menos que se indique lo contrario. Por consiguiente, los numeros que se exponen en el presente documento son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se buscan obtener por la presente invencion. Al menos, y no como un intento de limitar la aplicacion de la doctrina de equivalentes al alcance de las reivindicaciones, cada numero debe interpretarse al menos a la luz de los dfgitos significativos informados y mediante la aplicacion de tecnicas de redondeo ordinarias.
El termino "alquilo" significa un grupo hidrocarbonado saturado monovalente que puede ser lineal o ramificado. A menos que se defina lo contrario, tales grupos alquilo tipicamente contienen de 1 a 10 atomos de carbono e incluyen, por ejemplo, -alquilo Ci-6, lo que significa un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 atomos de carbono donde los atomos de carbono estan en cualquier configuracion aceptable. Los grupos alquilo representativos incluyen, a modo de ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, isobutilo, t-butilo, n-pentilo, n-hexilo, y similares.
Como se usa en el presente documento, la expresion "que tiene la formula" o "que tiene la estructura" no pretende ser limitante y se usa de la misma manera en que el termino "que comprende" se usa comunmente. Por ejemplo, si se representa una estructura, se entiende que todas las formas de estereoisomeros y tautomeros estan englobadas, a menos que se indique lo contrario.
El termino "farmaceuticamente aceptable" se refiere a un material que no es biologicamente o de otra manera inaceptable cuando se usa en la invencion. Por ejemplo, el termino "portador farmaceuticamente aceptable" se refiere a un material que puede incorporarse a una composicion y administrarse a un paciente sin causar efectos biologicos inaceptables o interactuar de manera inaceptable con otros componentes de la composicion. Dichos materiales farmaceuticamente aceptables tipicamente han cumplido con los estandares requeridos de pruebas toxicologicas y de fabricacion, e incluyen aquellos materiales identificados como ingredientes inactivos adecuados por la U.S. Food and Drug Administration.
El termino "sal farmaceuticamente aceptable" significa una sal preparada a partir de una base o un acido que es aceptable para la administracion a un paciente, tal como un mairnfero (por ejemplo, sales que tienen una seguridad de mamfferos aceptable para un regimen de dosificacion dado). Sin embargo, se entiende que no se requiere que las sales cubiertas por la invencion sean sales farmaceuticamente aceptables, tales como sales de compuestos intermedios que no estan destinados a la administracion a un paciente. Las sales farmaceuticamente aceptables pueden derivarse de bases inorganicas u organicas farmaceuticamente aceptables y de acidos inorganicos u organicos farmaceuticamente aceptables. Ademas, cuando un compuesto de fórmula I contiene tanto una unidad estructural basica, como una amina, piridina o imidazol, como una unidad estructural acida, como un acido carboxflico o tetrazol, se pueden formar zwitteriones y se incluyen dentro del termino "sal" como se utiliza aqrn. Las sales derivadas de bases inorganicas farmaceuticamente aceptables incluyen sales de amonio, calcio, cobre, ferrico, ferroso, litio, magnesio, manganicas, manganosas, potasio, sodio y zinc, y similares. Las sales derivadas de bases organicas farmaceuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, incluidas aminas sustituidas, aminas dclicas, aminas naturales y similares, como arginina, betama, cafema, colina, N,N'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperadina, resinas de poliamina, procama, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares. Las sales derivadas de acidos inorganicos farmaceuticamente aceptables incluyen sales de acidos borico, carbonico, hidrohalico (bromhfdrico, clorhndrico, fluorhfdrico o yodhndrico), mtrico, fosforico, sulfamico y sulfurico. Las sales derivadas de acidos organicos farmaceuticamente aceptables incluyen sales de acidos hidroxflicos alifaticos (por ejemplo, acidos dtrico, gluconico, glicolico, lactico, lactobionico, malico y tartarico), acidos monocarboxflicos alifaticos (por ejemplo, acidos acetico, butmco, formico, propionico y trifluoroacetico), aminoacidos (por ejemplo, acidos aspartico y glutamico), acidos carboxflicos aromaticos (por ejemplo, acidos benzoico, p-clorobenzoico, difenilacetico, gentisico, hipurico y trifenilacetico), acidos hidroxflicos aromaticos (por ejemplo, acidos o-hidroxibenzoico p-hidroxibenzoico, l-hidroxinaftaleno-2-carboxflico y 3-hidroxinaftaleno-2-carboxflico), acidos ascorbico, dicarboxflico (por ejemplo, acido fumarico, maleico, oxalico y succmico), acidos ascorbicos, dicarboxflicos (por ejemplo, acido fumarico, maleico, oxalico y succmico), acidos glucoronico, mandelico, mucico, nicotmico, orotico, pamoico, pantotenico, sulfonico (por ejemplo, acidos bencenosulfonico, canfosulfonico, edisflico, etanosulfonico, isetonico, metanosulfonico, naftalensulfonico, naftaleno-1,5-disulfonico, naftaleno-2,6-disulfonico y p-toluensulfonicos), acido xinafoico y similares.
Como se usa en este documento, el termino "profarmaco" pretende significar un precursor inactivo (o significativamente menos activo) de un medicamento que se convierte en su forma activa en el cuerpo en condiciones fisiologicas, por ejemplo, por procesos metabolicos normales. Dichos compuestos pueden no poseer necesariamente actividad farmacologica en la NEP, pero pueden administrarse por via oral o parenteral y posteriormente metabolizarse en el cuerpo para formar un compuesto que sea farmacologicamente activo en la NEP.
El termino "cantidad terapeuticamente efectiva" significa una cantidad suficiente para efectuar el tratamiento cuando se administra a un paciente que lo necesita, es decir, la cantidad de farmaco necesaria para obtener el efecto terapeutico deseado. Por ejemplo, una cantidad terapeuticamente efectiva para tratar la hipertension es una cantidad de compuesto necesario para, por ejemplo, reducir, suprimir, eliminar o prevenir los smtomas de la hipertension, o para tratar la causa subyacente de la hipertension. En una realización, una cantidad terapeuticamente efectiva es la cantidad de farmaco necesaria para reducir la presion sangumea o la cantidad de farmaco necesaria para mantener la presion sangumea normal. Por otro lado, el termino "cantidad efectiva" significa una cantidad suficiente para obtener un resultado deseado, que puede no ser necesariamente un resultado terapeutico. Por ejemplo, cuando se estudia un sistema que comprende una enzima NEP, una "cantidad efectiva" puede ser la cantidad necesaria para inhibir la enzima.
El termino "tratar" o "tratamiento" como se usa en este documento significa tratar o tratamiento de una enfermedad o afeccion medica (como la hipertension) en un paciente, como un mairnfero (particularmente un ser humano) que incluye uno o mas de los siguientes: (a) prevenir que ocurra la enfermedad o condicion medica, es decir, prevenir la recurrencia de la enfermedad o condicion medica o el tratamiento profilactico de un paciente que esta predispuesto a la enfermedad o condicion medica; (b) mejorar la enfermedad o condicion medica, es decir, eliminar o causar la regresion de la enfermedad o condicion medica en un paciente; (c) suprimir la enfermedad o condicion medica, es decir, retardar o detener el desarrollo de la enfermedad o condicion medica en un paciente; o (d) aliviar los smtomas de la enfermedad o condicion medica en un paciente. Por ejemplo, el termino "tratar la hipertension" incluina prevenir la hipertension, mejorar la hipertension, suprimir la hipertension y aliviar los smtomas de la hipertension (por ejemplo, reducir la presion arterial). El termino "paciente" pretende incluir aquellos m ai^eras, como los humanos, que necesitan tratamiento o prevencion de enfermedades o que se estan tratando actualmente para la prevencion de enfermedades o el tratamiento de una enfermedad o condicion medica espedfica, asf como a los sujetos de prueba en el cual el compuesto cristalino esta siendo evaluado o usado en un ensayo, por ejemplo, un modelo animal.
Se pretende que todos los demas terminos usados en el presente documento tengan su significado habitual tal como los entienden los expertos en la materia a la que pertenecen.
El compuesto de la invencion contiene uno o mas centros quirales y, por lo tanto, estos compuestos pueden prepararse y usarse en diversas formas estereoisomericas. En algunas realizaciónes, para optimizar la actividad terapeutica de los compuestos de la invencion, por ejemplo, para tratar la hipertension, puede ser deseable que los atomos de carbono tengan un particular configuracion (R,R), (S,S), (S,R) o (R,S) o esta enriquecida en una forma estereoisomerica que tiene dicha configuracion. En otras realizaciónes, los compuestos de la invencion estan presentes como mezclas racemicas. En consecuencia, la invencion tambien se refiere a mezclas racemicas, estereoisomeros puros (por ejemplo, enantiomeros y diastereoisomeros), mezclas enriquecidas con estereoisomeros, y similares, a menos que se indique lo contrario. Cuando se describe una estructura qmmica en el presente documento sin ninguna estereoqmmica, se entiende que todos los estereoisomeros posibles estan incluidos en dicha estructura. De manera similar, cuando un estereoisomero particular se muestre o se nombre aqrn, los expertos en la tecnica entenderan que en las composiciones de la invencion pueden estar presentes cantidades menores de otros estereoisomeros, a menos que se indique lo contrario, siempre que la utilidad de la composicion en su totalidad no se elimina por la presencia de otros isomeros. Los estereoisomeros individuales pueden obtenerse mediante numerosos metodos que son bien conocidos en la tecnica, incluida la cromatograffa quiral utilizando una fase estacionaria quiral o un soporte adecuados, o convirtiendolos qmmicamente en diastereoisomeros, separando los diastereoisomeros por medios convencionales tales como cromatograffa o recristalizacion, luego regenerando el estereoisomero original.
Ademas, cuando sea aplicable, todos los isomeros cis-trans o E/Z (isomeros geometricos), formas tautomericas y formas topoisomericas de los compuestos de la invencion estan incluidos dentro del alcance de la invencion, a menos que se especifique lo contrario.
Los compuestos de la invencion, asf como los compuestos usados en su smtesis, tambien pueden incluir compuestos marcados con isotopos, es decir, donde uno o mas atomos se han enriquecido con atomos que tienen una masa atomica diferente de la masa atomica predominantemente encontrada en la naturaleza. Ejemplos de isotopos que pueden incorporarse en los compuestos de fórmula I, por ejemplo, incluyen, pero no se limitan a, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 35S, 36Cl y 18F. De particular interes son los compuestos de fórmula I enriquecidos en tritio o carbono-14 que se pueden usar, por ejemplo, en estudios de distribucion de tejidos; compuestos de la invencion enriquecidos en deuterio, especialmente en un sitio de metabolismo que resulta, por ejemplo, en compuestos que tienen una mayor estabilidad metabolica; y compuestos de fórmula I enriquecidos en un isotopo emisor de positrones, tales como 11C, 18F, 15O y 13N, que se pueden usar, por ejemplo, en estudios de Topograffa por Emision de Positrones (PET).
La nomenclatura utilizada en este documento para nombrar los compuestos de la invencion se ilustra en los Ejemplos en este documento. Esta nomenclatura se ha derivado utilizando el software AutoNom disponible comercialmente (MDL, San Leandro, California).
La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 describio espedficamente acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico, que esta representado por la fórmula I':
Figure imgf000010_0001
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula I'. Este compuesto tambien puede existir en su forma de tautomero, acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenil)-5-hidroxi-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico.
Un aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula I'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000010_0002
En una realización, estos compuestos están representados por la fórmula Ia o Ib:
Figure imgf000010_0003
Para los compuestos de fórmula la, R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcCOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000010_0004
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo Ci-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Para los compuestos de fórmula Ib, R2 es H, R3 es -OH, y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula la, R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 y -CH2CH(CH3)2. En una realización particular de los compuestos de Formula Ib, R2 es H, R3 es -OH, y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H.
El compuesto acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-hidroxitiazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico tambien se describe espedficamente en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos No.
2012/0157386, y esta representado por la fórmula II':
Figure imgf000011_0001
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula II'. La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 tambien describio el profarmaco de ester isobutflico del compuesto de fórmula II'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula II'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000011_0002
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula II:
Figure imgf000011_0003
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3 , -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000012_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo Ci-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo Ci-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula II, R2 es H y R7 es -CH2CH3.
El compuesto acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]-hidrazino}-2-hidroxipropionico tambien se describe espedficamente en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos No.
2012/0157386, y esta representado por la fórmula III':
Figure imgf000012_0002
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula III'. La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 tambien describe los profarmacos de ester etflico y ester mofetflico del compuesto de fórmula III'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula III'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000012_0003
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula III:
Figure imgf000012_0004
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000013_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula III, R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CF3, -(CH2)2OCH3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O-ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000013_0002
o R2 es -P(O)(OH)2 y R7 es H.
El compuesto acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico tambien se describe espedficamente en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos No.
2012/0157386, y esta representada por la fórmula IV':
Figure imgf000013_0003
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula IV'. La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 tambien describio los profarmacos de ester etflico, ester isopropflico y ester isobutflico del compuesto de fórmula IV'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula IV'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000013_0004
donde R es H o -CH3. En una realización, estos compuestos estan representados por IV:
Figure imgf000014_0001
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000014_0002
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o R2 es -C(O)CH2NH2 y R7 es -CH2CH3 ; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula IV, R es -CH3 , R2 es H, y R7 se selecciona de CH2CF2CF3 , -(CH2)2OCH3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)-(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O- ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2,-CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NHC(O)OCH3,
Figure imgf000014_0003
En otra realización particular de los compuestos de Formula IV, R es -CH3 ; R2 se selecciona entre -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2NH2 , -C(O)CH(CH3)NH2, -C(O)CH[CH(CH3)2]-NH2, y -C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; y R7 es H. En otra realización particular mas de los compuestos de Formula IV, R es -CH3 , R2 es -C(O)CH2NH2 , y R7 es -CH2CH3.
El compuesto acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico se describe especficamente en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos No.
2012/0157386, y esta representado por la fórmula V':
Figure imgf000015_0001
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula V'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula V'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000015_0002
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula V:
Figure imgf000015_0003
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcO-C(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquilen C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000015_0004
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula V, R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CF3 , -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)-(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O-ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000016_0001
Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos de fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl, y X es:
Figure imgf000016_0002
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula Via o VIb:
Figure imgf000016_0003
donde R2 y R4 son H, y R7 se selecciona entre H, -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)-CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo Ci-4,-CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)-CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000016_0004
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o R2 se selecciona entre-C(O)-alquiloCi-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es H, y R7 es H; o R2 es H, R4 es -CH2OP(O)(ORe)2 o -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2; o R2 es -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R4 es H, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2;
donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula Via y VIb, R2 es H, R4 es H, y R7 se selecciona de H, -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CH3, -(CH2)2O-CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -(CH2)2-N(CH3)2, -(CH2)3-N(CH3)2, -(CH2)4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2,
Figure imgf000017_0001
En aun otra realización de los compuestos de Formula Via y VIb, R2 es H, R4 se selecciona de CH2OC(O)CH[CH(CHa)2]-NHC(O)OCHa y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NH2 , y R7 es H. En otra realización particular mas de los compuestos de Formula Via y VIb, R2 se selecciona de -C (0 )c H3, -C(O)CH(CH3)2, y -C(O)CH2cH(CH3)2, R4 es H, y R7 es H.
En aun otra realización de los compuestos de Formula Via y VIb, R2 es H, R4 es -CH2-OP(O)(OH)2 o -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2.
En aun otra realización de los compuestos de Formula Via y VIb, R2 es -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R4 es H, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2.
El compuesto acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico se describe espedficamente en Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386, y esta representada por la fórmula VII':
Figure imgf000017_0002
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula VII'. Compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico.
La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No.2012/0157386 tambien describio los profarmacos de ester etflico, ester isopropflico y ester isobutilico del compuesto de fórmula VII'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula VII'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es F, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000017_0003
En una realización, estos compuestos están representados por la fórmula VIIa o VIIb:
Figure imgf000018_0001
donde R2 y R4 son H, y R7 se selecciona entre -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CF3 , -C(CHa)(CFa)2 , -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000018_0002
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 se selecciona de H y -CH2CH3 ; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R4 y R7 son H; donde cada Rc es independientemente H o -alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, -alquilo C1-6, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula Vila y VIIb, R2 y R4 son H, y R7 se selecciona de -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000018_0003
En esta realización, R7 puede ser, por ejemplo, como se define en la Reivindicacion 8. En otra realización de los compuestos de Formula Vila y VIIb, R2 es H, R4 es -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2 y R7 es -CH2CH3. En aun otra realización de los compuestos de Formula Vila y VIIb, o R2 se selecciona de -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3,-C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -C(O)CH[CH(CH3)2]NHC(O)OCH3, y R4 y R7 son H. En esta realización, R2 puede ser, por ejemplo, como se define en la Reivindicacion 8.
El compuesto acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxi-isoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico se describe espedficamente en Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386, y esta representada por la fórmula VIII'
Figure imgf000019_0001
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza
in vivo para formar el compuesto de fórmula VIII'. La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 tambien revelo el ester etflico, el ester isopropflico, el ester butilico, el ester isobutilico, el ester hex^lico, el ester heptilico, el ester bendlico, el ester medoxoirnlico, el ester 2-fluoro-1-fluorometil-etilico y profarmacos de ester 2,2,3,3,3-pentafluoropropflico del compuesto de fórmula VIII'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula VIII'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es H, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000019_0002
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula VIII:
Figure imgf000019_0003
donde R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona entre -CH2CF3 , -(CH2)2CFa, -C(CHa)(CFa) CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo
C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R3 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000019_0004
y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula VIII, R2 es H, R3 es -OH, y R7 se selecciona deCH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.En otra realización particular de los compuestos de Formula VIII, R2 se selecciona de C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH(CH3)2, -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, R3 es -OH, y R7 es H. En aun otra realización particular de los compuestos de Formula VIII, R2 es H, R3 se selecciona de: -0 c H2OC(O)CH3, -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)OCH2CH3, -OCH2OC(O)OCH(CH3)2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000020_0004
y R7 es H.
El compuesto acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxMH-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico se describe espedficamente en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386, y esta representado por la fórmula IX':
Figure imgf000020_0001
En una realización, este compuesto se denomina forma activa y se administra como un profarmaco, que se metaboliza in vivo para formar el compuesto de fórmula IX'. La Publicacion de Patente de los Estados Unidos No. 2012/0157386 tambien describe los profarmacos de isopropil ester, isobutil ester y heptil ester del compuesto de fórmula IX'.
Otro aspecto de la invencion se refiere a otros profarmacos del compuesto de fórmula IX'. Estos profarmacos estan representados por la fórmula X, donde Ra es Cl, Rb es Cl y X es:
Figure imgf000020_0002
En una realización, estos compuestos estan representados por la fórmula IXa o IXb:
Figure imgf000020_0003
donde R2 es H, R4 es -OH y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -C(CHa)(CFa)2 , -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2-OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOCC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y
Figure imgf000021_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2, -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R4 se selecciona de -OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000021_0002
y R7 es H; donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo; y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realización particular de los compuestos de Formula IXa y IXb, R2 es H, R4 es -OH y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)-OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O-ciclohexilo, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000021_0003
En aun otra realización de los compuestos de Formula IXa y IXb, R2 es H, R4 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3, -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000021_0004
y R7 es H.
Procedimientos sinteticos generales
Los compuestos de la invencion pueden prepararse a partir de materiales de partida facilmente disponibles usando los siguientes metodos generales, los procedimientos expuestos en los Ejemplos, o utilizando otros metodos, reactivos y materiales de partida que son conocidos por los expertos en la materia. Aunque los siguientes procedimientos pueden ilustrar una realización particular de la invencion, se entiende que otras realizaciónes de la invencion pueden prepararse de manera similar utilizando los mismos metodos o metodos similares o utilizando otros metodos, reactivos y materiales de partida conocidos por los expertos en la materia. T ambien se apreciara que cuando se dan condiciones de proceso tfpicas o preferidas (por ejemplo, temperaturas de reaccion, tiempos, relaciones molares de reactivos, disolventes, presiones, etc.), tambien se pueden usar otras condiciones de proceso a menos que se indique lo contrario. En algunos casos, las reacciones se realizaron a temperatura ambiente y no se tomo ninguna medida de temperatura real. Se entiende que la temperatura ambiente puede tomarse como una temperatura dentro del rango comunmente asociado con la temperatura ambiente en un entorno de laboratorio, y tipicamente estara en el rango de aproximadamente 18°C a aproximadamente 30°C. En otros casos, las reacciones se llevaron a cabo a temperature ambiente y la temperatura realmente se midio y registro. Si bien las condiciones de reaccion optimas tipicamente variaran dependiendo de diversos parametros de reaccion, tales como los reactivos particulares, los disolventes y las cantidades utilizadas, los expertos en la tecnica pueden determinar facilmente las condiciones de reaccion adecuadas usando procedimientos de optimizacion de rutina.
Adicionalmente, como sera evidente para los expertos en la tecnica, los grupos protectores convencionales pueden ser necesarios o deseados para evitar que ciertos grupos funcionales sufran reacciones no deseadas. La eleccion de un grupo protector adecuado para un grupo funcional particular, asf como las condiciones y reactivos adecuados para la proteccion y desproteccion de tales grupos funcionales es bien conocida en la tecnica. Si se desea, se pueden usar grupos protectores diferentes a los ilustrados en los procedimientos descritos aqrn. Por ejemplo, numerosos grupos protectores, y su introduccion y eliminacion, se describen en T. W. Greene y G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley, New York, 2006, y las referencias citadas en el mismo.
Los grupos protectores de carboxi son adecuados para prevenir reacciones no deseadas en un grupo carboxi, y los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, t-butilo, bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 9-fluorenilmetilo (Fm), trimetilsililo (TMS), t-butildimetilsililo (TBDMS), difenilmetilo (benzhidrilo, DPM) y similares. Los grupos protectores de amino son adecuados para prevenir reacciones no deseadas en un grupo amino, y los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, t-butoxicarbonilo (BOC), tritilo (Tr), benciloxicarbonilo (Cbz), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), formilo, trimetilsililo (TMS), t-butildimetilsililo (TBDMS), y similares.
Se utilizan tecnicas y reactivos de desproteccion estandar para eliminar los grupos protectores, y pueden variar segun el grupo que se utilice. Por ejemplo, el hidroxido de sodio o litio se usa comunmente cuando el grupo protector de carboxi es metilo, un acido como TFA o HCl (por ejemplo, HCl 4.0 M en 1,4-dioxano) se usa comunmente cuando el grupo protector de carboxi es etilo o t-butilo, y se puede usar H2/Pd/C cuando el grupo protector del carboxi es bencilo. Un grupo protector de amino BOC puede eliminarse utilizando un reactivo acido como el TFA en DCM o HCl en 1,4-dioxano, mientras que un grupo protector de amino Cbz puede eliminarse empleando condiciones de hidrogenacion catalftica como H2 (1 atm) y 10% de Pd/C en un disolvente alcoholico ("H2/Pd/C").
Los grupos salientes son grupos funcionales o atomos que pueden ser desplazados por otro grupo funcional o atomo en una reaccion de sustitucion, tal como una reaccion de sustitucion nucleofila. A modo de ejemplo, grupos salientes representativos incluyen grupos cloro, bromo y yodo; grupos ester sulfonicos, tales como mesilato, tosilato, brosilato, nosilato y similares; y grupos aciloxi, tales como acetoxi, trifluoroacetoxi y similares.
Las bases adecuadas para uso en estos esquemas incluyen, a modo de ilustracion y no de limitacion, carbonato de potasio, carbonato de calcio, carbonato de sodio, trietilamina (EfeN), piridina, 1,8-diazabiciclo-[5.4.0]undec-7-eno (DBU), N,N-diisopropiletilamina (DIPEA), 4-metilmorfolina, hidroxido de sodio, hidroxido de potasio, t-butoxido de potasio e hidruros metalicos.
Diluyentes o disolventes inertes adecuados para uso en estos esquemas incluyen, a modo de ilustracion y sin limitacion, tetrahidrofurano (THF), acetonitrilo (MeCN), N,N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMA), dimetilsulfoxido (DMSO), tolueno, diclorometano (DCM), cloroformo (CHCb), tetracloruro de carbono (CCb), 1,4-dioxano, metanol, etanol, agua, dietil eter, acetona y similares.
Reactivos de acoplamiento de acido carboxflico/amina adecuados incluyen hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio, hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxipropirrolidinofosfonio, (BOP), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidinofosfonio (PyBOP), N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)hexafluorofosfato de uronio (HATU), 1,3-diciclohexilcarbodiimida (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC), carbonildiimidazol (CDI), 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), y similares. Las reacciones de acoplamiento se llevan a cabo en un diluyente inerte en presencia de una base tal como DIPEA, y se realizan en condiciones convencionales de formacion de enlaces amida.
Normalmente, todas las reacciones se llevan a cabo a una temperatura dentro del rango de aproximadamente -78°C a 100°C, por ejemplo, a temperatura ambiente. Las reacciones pueden controlarse mediante el uso de cromatograffa en capa fina (TLC), cromatograffa lfquida de alto rendimiento (HPLC) y/o LCMS hasta su finalizacion. Las reacciones pueden completarse en minutos, o pueden tomar horas, generalmente de 1 a 2 horas y hasta 48 horas. Una vez completado, la mezcla resultante o el producto de reaccion se pueden tratar adicionalmente para obtener el producto deseado. Por ejemplo, la mezcla o producto de reaccion resultante puede someterse a uno o mas de los siguientes procedimientos: concentracion o reparto (por ejemplo, entre EtOAc y agua o entre 5% de THF en EtOAc y acido fosforico 1 M); extraccion (por ejemplo, con EtOAc, CHCb, DCM, cloroformo); lavado (por ejemplo, con NaCl acuoso saturado, NaHCO3 acuoso saturado, Na2CO3 (5%), CHCb o NaOH 1M); secado (por ejemplo, sobre MgSO4, sobre Na2SO4, o en vado); filtracion; cristalizacion (por ejemplo, a partir de EtOAc y hexanos); estando concentrado (por ejemplo, en vado); y/o purificacion (por ejemplo, cromatograffa en gel de sflice, cromatograffa instantanea, HPLC preparativa, HPLC en fase reversa o cristalizacion).
A modo de ilustracion, los compuestos de la invencion, as ^como sus sales, pueden prepararse como se muestra en los Esquemas I-IV.
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El esquema I es una reaccion de transesterificacion. En general, esta reaccion implica hacer reaccionar el ester con calor, el alcohol deseado (HO-R7) y un catalizador acido adecuado, por ejemplo, acido clortndrico. Los alcoholes HO-R7 estan disponibles comercialmente o pueden prepararse mediante tecnicas que se conocen en el arte o se describen en el presente documento. Compuestos HO-R7 de ejemplo incluyen HO-CH2CF3 , HO-(CH2)2CF3, HO-CH2CF2CH3 , HO-CH2CF2CF3 , HO-C(CH3)(CF3)2, HO-CH(CH2CH3)CF3, HO-CH(CH3)CF2CF3, alcohol bendlico, y
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El esquema II es una reaccion de sustitucion nucleofila, donde L es un grupo saliente adecuado. Generalmente, esta reaccion se lleva a cabo en presencia de una base adecuada, tal como trietilamina, en un diluyente o disolvente inerte adecuado, tal como acetona. Los compuestos L-R7 estan disponibles comercialmente o pueden prepararse mediante tecnicas que se conocen en el arte o se describen en el presente documento. Compuestos de ejemplo de L-R7 incluyen Br-(CH2)2OH, Br-(CH2)3OH, Br-(CH2)2OCH3, Br-CH2OC(O)CH3, Cl-CH2OC(O)(CH2)2CH3, Cl-CH2OC(O)OCH2CH3, Cl-CH2OC(O)OCH(CH3)2, Cl-CH2Oc(O)O-ciclohexilo, ester clorometilico del acido (S)-2-benciloxicarbonilamino-3-metilbutrnco, y ester clorometflico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metil-butmco.
Alternativamente, en el Esquema II, se ha usado un alcohol en lugar de L-R7, por ejemplo, alquileno HO-C2-4-N(CH3)2 en una reaccion de acoplamiento usando HOBt y EDC.
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El Esquema III es una reaccion de sustitucion nucleofila, donde L es un grupo saliente adecuado. Generalmente, esta reaccion se realiza en presencia de una base adecuada tal como N,N-diisopropiletilamina en un diluyente o disolvente inerte adecuado tal como diclorometano. El compuesto L-R2 esta disponible comercialmente o puede prepararse mediante tecnicas que se conocen en el arte o se describen en el presente documento. Ejemplos de compuestos de L-R2 incluyen Cl-C(O)-CHa, Cl-C(O)-CH(CH3)2 , y Cl-C(O)-CH2CH(CHa)2.
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El esquema IV es una reaccion de acoplamiento, donde P es H o un grupo protector de amino adecuado. Cuando P es un grupo protector de amino, el proceso comprende ademas desproteger el compuesto antes o in situ con la etapa de acoplamiento. Los reactivos de acoplamiento de ejemplo incluyen HATU y HOBt con EDC. Generalmente, estas reacciones se llevan a cabo en presencia de una base tal como DIPEA o 4-metilmorfolina, y un diluyente inerte o disolventes tales como DMF o DMA. Los materiales de partida de acido carboxflico estan generalmente disponibles comercialmente o pueden prepararse usando procedimientos que se conocen en la tecnica.
Detalles adicionales con respecto a las condiciones de reaccion espedficas y otros procedimientos para preparar compuestos representativos de la invencion o intermedios de los mismos se describen en los ejemplos que se exponen a continuacion.
Utilidad
Los compuestos de fórmula I'-V' y VII'-IX' tienen actividad como inhibidores de neprilisina, y se espera que tengan utilidad terapeutica como inhibidores de neprilisina. Se espera que los profarmacos de estos compuestos, una vez metabolizados in vivo, tengan la misma utilidad. De este modo, cuando se discute la actividad de los compuestos de la invencion, se entiende que estos profarmacos tienen la actividad esperada una vez que se metabolizan.
Los ensayos de ejemplo incluyen a modo de ilustracion y no de limitacion, los ensayos que miden la inhibicion de la NEP. Los ensayos secundarios utiles incluyen ensayos para medir la inhibicion de la ACE y la inhibicion de la aminopeptidasa P (APP) (por ejemplo, como se describe en Sulpizio et al. (2005) JPET 315: 1306-1313). Un ensayo farmacodinamico para evaluar las potencias inhibitorias in vivo de la ACE y la NEP en ratas anestesiadas se describe en Seymour et al. (1985) Hypertension 7(Suppl I): I-35-1-42 y Wigle et al. (1992) Can. J. Physiol. Pharmacol. 70: 1525­ 1528), donde la inhibicion de la ACE se mide como el porcentaje de inhibicion de la respuesta supresora de la angiotensina I y la inhibicion de la NEP se mide como la salida aumentada de guanosina dclica urinaria 3',5'-monofosfato (cGMP).
Tambien hay muchos ensayos in vivo que pueden usarse. El modelo consciente de rata espontaneamente hipertensa (SHR) es un modelo de hipertension dependiente de renina. Vease, por ejemplo, Intengan et al. (1999) Circulation 100 (22): 2267-2275 y Badyal et al. (2003) Indian Journal of Pharmacology 35: 349-362. El modelo de rata de acetato de sal de desoxicorticosterona consciente (DOCA-sal) es un modelo de hipertension dependiente del volumen que es util para medir la actividad de NEP. Vease, por ejemplo, Trapani et al. (1989) J. Cardiovasc. Pharmacol. 14: 419-424, Intengan et al. (1999) Hypertension 34(4): 907-913, y Badyal et al. (2003) supra). El modelo de sal de DOCA es particularmente util para evaluar la capacidad de un compuesto de prueba para reducir la presion arterial, asf como para medir la capacidad de un compuesto de prueba para prevenir o retrasar un aumento de la presion arterial. El modelo de rata hipertensiva con sensibilidad a la sal (DSS) de Dahl es un modelo de hipertension que es sensible a la sal dietetica (NaCl) y se describe, por ejemplo, en Rapp (1982) Hypertension 4: 753-763. El modelo monocrotalino en ratas de la hipertension arterial pulmonar descrito, por ejemplo, en Kato et al. (2008) J. Cardiovasc. Pharmacol.
51(1): 18-23, es un predictor confiable de eficacia clmica para el tratamiento de la hipertension arterial pulmonar. Los modelos animales de insuficiencia cardfaca incluyen el modelo de rata DSS para la insuficiencia cardfaca y el modelo de ffstula aorto-cava (derivacion AV), el ultimo de los cuales se describe, por ejemplo, en Norling et al. (1996) J. Amer. Soc. Nephrol. 7: 1038-1044. Se pueden utilizar otros modelos animales, como las pruebas de placa caliente, deslizamiento de la cola y formalina, para medir las propiedades analgesicas de un compuesto, asf como el modelo de dolor neuropatico de ligadura del nervio espinal (s Nl ). Vease, por ejemplo, Malmberg et al. (1999) Current Protocols in Neuroscience 8.9.1-8.9.15. Se pueden demostrar otras propiedades y utilidades de los compuestos usando diversos ensayos in vitro e in vivo bien conocidos por los expertos en la tecnica.
Se espera que los compuestos de la invencion sean utiles para el tratamiento y/o prevencion de afecciones medicas que respondan a la inhibicion de la NEP. Por lo tanto, se espera que los pacientes que padecen una enfermedad o trastorno que se trata inhibiendo la enzima NEP o aumentando los niveles de sus sustratos peptfdicos, puedan tratarse administrando una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la invencion. Por ejemplo, al inhibir la NEP, se espera que el compuesto potencie los efectos biologicos de los peptidos endogenos que son metabolizados por la NEP, tales como los peptidos natriureticos, bombesina, bradicininas, calcitonina, endotelinas, encefalinas, neurotensina, sustancia P y peptidos vasoactivos. Por lo tanto, se espera que los compuestos tengan otras acciones fisiologicas, por ejemplo, en los sistemas renal, nervioso central, reproductor y gastrointestinal.
Enfermedades cardiovasculares
Al potenciar los efectos de peptidos vasoactivos como los peptidos natriureticos y la bradiquinina, se espera que los compuestos de la invencion encuentren utilidad en el tratamiento y/o prevencion de afecciones medicas tales como enfermedades cardiovasculares. Vease, por ejemplo, Roques et al. (1993) Pharmacol. Rev. 45: 87-146 y Dempsey et al. (2009) Amer. J. of Pathology 174(3): 782-796. Las enfermedades cardiovasculares de particular interes incluyen la hipertension y la insuficiencia cardfaca. La hipertension incluye, a modo de ilustracion y no como limitacion: la hipertension primaria, que tambien se conoce como hipertension esencial o hipertension idiopatica; hipertension secundaria; hipertension con enfermedad renal acompanante; hipertension grave con o sin enfermedad renal acompanante; hipertension pulmonar, incluyendo hipertension arterial pulmonar; y la hipertension resistente. La insuficiencia cardfaca incluye, a modo de ilustracion y no como limitacion: insuficiencia cardfaca congestiva; insuficiencia cardiaca aguda; insuficiencia cardfaca cronica, por ejemplo con reduccion de la fraccion de eyeccion del ventnculo izquierdo (tambien denominada insuficiencia cardfaca sistolica) o con fraccion de eyeccion del ventnculo izquierdo preservada (tambien conocida como insuficiencia cardfaca diastolica); y la insuficiencia cardfaca descompensada aguda y cronica, con o sin enfermedad renal acompanante. Por lo tanto, la invencion encuentra utilidad en un metodo para tratar la hipertension, particularmente hipertension primaria o hipertension arterial pulmonar, que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la invencion.
Para el tratamiento de la hipertension primaria, la cantidad terapeuticamente efectiva es tfpicamente la cantidad que es suficiente para disminuir la presion arterial del paciente. Esto incluina hipertension leve a moderada e hipertension severa. Cuando se usa para tratar la hipertension, el compuesto se puede administrar en combinacion con otros agentes terapeuticos como los antagonistas de la aldosterona, los inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina y la enzima convertidora de la angiotensina de accion doble/inhibidores de la neprilisina, los activadores y estimuladores de la enzima convertidora de la angiotensina 2 (ACE2), vacunas contra la angiotensina-II, agentes antidiabeticos, agentes antilfpidos, agentes antitromboticos, antagonistas del receptor AT1 y antagonistas del receptor AT1 de doble accion/inhibidores de la neprilisina, antagonistas del receptor p1-adrenergico, antagonista del receptor padrenergico/antagonistas de los receptores a1, bloqueadores de los canales de calcio, diureticos, antagonistas de los receptores de endotelina, inhibidores de la enzima convertidora de endotelina, inhibidores de la neprilisina, peptidos natriureticos y sus analogos, antagonistas del receptor de depuracion del peptido natriuretico, donantes de oxido rntrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, inhibidores de la fosfodiesterasa (espedficamente los inhibidores de la PDE-V), los agonistas de los receptores de prostaglandina, inhibidores de la renina, estimuladores y activadores solubles de guanilato ciclasa, y combinaciones de los mismos. En una realización particular de la invencion, un compuesto de la invencion se combina con un antagonista del receptor AT1, un diuretico, un bloqueador de canales de calcio, o una combinacion de los mismos, y se usa para tratar la hipertension primaria. En otra realización particular de la invencion, un compuesto de la invencion se combina con un antagonista del receptor ATi, y se usa para tratar la hipertension con enfermedad renal acompanante.
Para el tratamiento de la hipertension arterial pulmonar, la cantidad terapeuticamente efectiva es tipicamente la cantidad que es suficiente para disminuir la resistencia vascular pulmonar. Otros objetivos de la terapia son mejorar la capacidad de ejercicio de un paciente. Por ejemplo, en un entorno clmico, la cantidad terapeuticamente efectiva puede ser la cantidad que mejora la capacidad del paciente para caminar comodamente durante un penodo de 6 minutos (cubriendo una distancia de aproximadamente 20 a 40 metros). Cuando se usa para tratar la hipertension arterial pulmonar, el compuesto se puede administrar en combinacion con otros agentes terapeuticos como los antagonistas a-adrenergicos, los antagonistas de los receptores pi-adrenergicos, los agonistas de los receptores p2-adrenergicos, los inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina, los anticoagulantes, los bloqueadores de los canales de calcio, los diureticos, antagonistas de los receptores de endotelina, inhibidores de la PDE-V, analogos de prostaglandinas, inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina y combinaciones de los mismos. En una realización particular de la invencion, un compuesto de la invencion se combina con un inhibidor de PDE-V o un inhibidor selectivo de la recaptacion de serotonina y se usa para tratar la hipertension arterial pulmonar.
La invencion tambien encuentra utilidad en un metodo para tratar la insuficiencia cardfaca, en particular la insuficiencia cardfaca congestiva (que incluye tanto la insuficiencia cardfaca congestiva sistolica como la diastolica), que comprende administrar a un paciente una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la invencion. Tfpicamente, la cantidad terapeuticamente efectiva es la cantidad que es suficiente para disminuir la presion arterial y/o mejorar las funciones renales. En un contexto clmico, la cantidad terapeuticamente efectiva puede ser la cantidad que sea suficiente para mejorar la hemodinamica cardfaca, como por ejemplo la reduccion de la presion de cuna, la presion auricular derecha, la presion de llenado y la resistencia vascular. El compuesto se puede administrar como una forma de dosificacion intravenosa. Cuando se usa para tratar la insuficiencia cardfaca, el compuesto se puede administrar en combinacion con otros agentes terapeuticos como los antagonistas de los receptores de adenosina, los rompedores del producto final de la glicacion avanzada, los antagonistas de aldosterona, los antagonistas de los receptores ATi, los antagonistas de los receptores pi-adrenergicos, el receptor p-adrenergico de doble efecto, antagonistas/antagonistas de los receptores ai, inhibidores de la quinasa, digoxina, diureticos, inhibidores de la enzima convertidora de endotelina (ECE), antagonistas de los receptores de endotelina, peptidos natriureticos y sus analogos, antagonistas del receptor de depuracion del peptido natriuretico, donantes de oxido mtrico, analogos de la prostaglandina, inhibidores de la PDE-V activadores y estimuladores solubles de guanilato ciclasa, y antagonistas de los receptores de vasopresina. En una realización particular de la invencion, un compuesto de la invencion se combina con un antagonista de aldosterona, un antagonista del receptor pi-adrenergico, un antagonista del receptor ATi, o un diuretico, y se usa para tratar la insuficiencia cardfaca congestiva.
Diarrea
Como inhibidores de la NEP, se espera que los compuestos de la invencion inhiban la degradacion de las encefalinas endogenas y, por lo tanto, tales compuestos tambien pueden encontrar utilidad para el tratamiento de la diarrea, incluida la diarrea infecciosa y secretora/acuosa. Vease, por ejemplo, Baumer et al. (i992) Gut 33: 753-758; Farthing (2006) Digestive Diseases 24: 47-58; y Margais-Collado (i987) Eur. J. Pharmacol. i44(2): i25-i32. Cuando se usan para tratar la diarrea, los compuestos de la invencion se pueden combinar con uno o mas tratamientos antidiarreicos adicionales.
Enfermedades renales
Al potenciar los efectos de los peptidos vasoactivos como los peptidos natriureticos y la bradiquinina, se espera que los compuestos de la invencion aumenten la funcion renal (vease Chen et al. (i999) Circulation i00: 2443-2448; Lipkin et al. (i997) Kidney Int. 52: 792-80i y Dussaule et al. (i993) Clin. Sci. 84: 3i-39) y encuentran utilidad en el tratamiento y/o prevencion de enfermedades renales. Las enfermedades renales de interes particular incluyen la nefropatfa diabetica, la enfermedad renal cronica, la proteinuria y, en particular, la lesion renal aguda o la insuficiencia renal aguda (vease Sharkovska et al. (20 ii) Clin. Lab. 57: 507-5i5 y Newaz et al. (20i0) Insuficiencia renal 32: 384-390). Cuando se usa para tratar la enfermedad renal, el compuesto se puede administrar en combinacion con otros agentes terapeuticos, como los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, los antagonistas del receptor ATi y los diureticos.
Terapia preventiva
Al potenciar los efectos de los peptidos natriureticos, tambien se espera que los compuestos de la invencion sean utiles en la terapia preventiva, debido a los efectos antihiperoticos y antihiperoticos de los peptidos natriureticos (vease Potter et al. (2009), Handbook of Experimental Pharmacology). i9 i : 34i-366), por ejemplo, en la prevencion de la progresion de la insuficiencia cardfaca despues del infarto de miocardio, la prevencion de la restenosis arterial despues de la angioplastia, la prevencion del engrosamiento de las paredes de los vasos sangumeos despues de las operaciones vasculares, la prevencion de la aterosclerosis y la prevencion de la angiopatfa diabetica.
Glaucoma
Al potenciar los efectos de los peptidos natriureticos, se espera que los compuestos de la invencion sean utiles para tratar el glaucoma. Vease, por ejemplo, Diestelhorst et al. (1989) International Ophthalmology 12: 99-101. Cuando se usan para tratar el glaucoma, los compuestos de la invencion se pueden combinar con uno o mas agentes antiglaucoma adicionales.
Alivio del dolor
Como inhibidores de NEP, se espera que los compuestos de la invencion inhiban la degradacion de las encefalinas endogenas y, por lo tanto, tales compuestos tambien pueden encontrar utilidad como analgesicos. Vease, por ejemplo, Roques et al. (1980) Nature 288: 286-288 y Thanawala et al. (2008) Current Drug Targets 9: 887-894. Cuando se usan para tratar el dolor, los compuestos de la invencion se pueden combinar con uno o mas farmacos antinociceptivos adicionales como la aminopeptidasa N o inhibidores de la dipeptidil peptidasa III, agentes antiinflamatorios no esteroideos, inhibidores de la recaptacion de monoamina, relajantes musculares, antagonistas del receptor de NMDA, opioides agonistas de los receptores, agonistas de los receptores de serotonina 5-HT1D y antidepresivos tridclicos.
Otras utilidades
Debido a sus propiedades de inhibicion de la NEP, tambien se espera que los compuestos de la invencion sean utiles como agentes antitusivos, asf como que encuentren utilidad en el tratamiento de la hipertension portal asociada con la cirrosis hepatica (vease Sansoe et al. (2005) J. Hepatol. 43: 791-798), cancer (vease Vesely (2005) J. Investigative Med. 53: 360-365), depresion (vease Noble et al. (2007) Exp. Opin. Ther. Targets 11: 145-159), trastornos menstruales, parto prematuro, preeclampsia, endometriosis, trastornos reproductivos (por ejemplo, infertilidad masculina y femenina, smdrome de ovario poliqmstico, fracaso de la implantacion) y disfuncion sexual masculina y femenina, incluida la disfuncion erectil masculina y el trastorno de la excitacion sexual femenina. Mas espedficamente, se espera que los compuestos de la invencion sean utiles en el tratamiento de la disfuncion sexual femenina (vease Pryde et al. (2006) J. Med. Chem. 49: 4409-4424), que a menudo se define como la dificultad de una paciente femenina o incapacidad para encontrar satisfaccion en la expresion sexual. Esto cubre una variedad de diversos trastornos sexuales femeninos, que incluyen, a modo de ilustracion y sin limitacion, el trastorno del deseo sexual hipoactivo, el trastorno de la excitacion sexual, el trastorno orgasmico y el trastorno del dolor sexual. Cuando se usan para tratar tales trastornos, especialmente la disfuncion sexual femenina, los compuestos de la invencion se pueden combinar con uno o mas de los siguientes agentes secundarios: inhibidores de la PDE-V, agonistas de la dopamina, agonistas y/o antagonistas de los receptores de estrogenos, androgenos y estrogenos. Debido a sus propiedades de inhibicion de la NEP, tambien se espera que los compuestos de la invencion tengan propiedades antiinflamatorias, y se espera que tengan utilidad como tales, particularmente cuando se usan en combinacion con estatinas.
Estudios recientes sugieren que la NEP desempena un papel en la regulacion de la funcion nerviosa en la diabetes deficiente en insulina y la obesidad inducida por la dieta. Coppey et al. (2011) Neuropharmacology 60: 259-266. Por lo tanto, debido a sus propiedades de inhibicion de la NEP, tambien se espera que los compuestos de la invencion sean utiles para proporcionar proteccion contra el deterioro nervioso causado por la diabetes o la obesidad inducida por la dieta.
La cantidad del compuesto de la invencion administrada por dosis o la cantidad total administrada por dfa puede estar predeterminada o puede determinarse sobre la base de un paciente individual teniendo en cuenta numerosos factores, incluida la naturaleza y la gravedad de la afeccion del paciente, la afeccion que se trata, la edad, el peso y la salud general del paciente, la tolerancia del paciente al agente activo, la via de administracion, consideraciones farmacologicas como la actividad, eficacia, farmacocinetica y perfiles toxicologicos del compuesto y cualquier agente secundario que se administre, y similares. El tratamiento de un paciente que sufre una enfermedad o condicion medica (como hipertension) puede comenzar con una dosis predeterminada o una dosis determinada por el medico tratante, y continuara durante un penodo de tiempo necesario para prevenir, mejorar, suprimir o aliviar la enfermedad. Smtomas de la enfermedad o condicion medica. Los pacientes que se someten a dicho tratamiento generalmente seran monitoreados de manera rutinaria para determinar la efectividad de la terapia. Por ejemplo, en el tratamiento de la hipertension, se pueden usar mediciones de la presion arterial para determinar la efectividad del tratamiento. Indicadores similares para otras enfermedades y afecciones descritas en este documento, son bien conocidos y estan facilmente disponibles para el medico tratante. La supervision continua por parte del medico asegurara que la cantidad optima del compuesto de la invencion se administrara en cualquier momento dado, asf como facilitar la determinacion de la duracion del tratamiento. Esto es de particular valor cuando tambien se administran agentes secundarios, ya que su seleccion, dosificacion y duracion de la terapia tambien pueden requerir un ajuste. De esta manera, el regimen de tratamiento y el programa de dosificacion se pueden ajustar a lo largo del tratamiento para que se administre la menor cantidad de agente activo que muestre la efectividad deseada y, ademas, esa administracion continue solo mientras sea necesario para tratar con exito la enfermedad o condicion medica.
Herramientas de investigacion
Dado que los compuestos de la invencion se metabolizan in vivo a compuestos que tienen actividad como inhibidores de la neprilisina, tambien son utiles como herramientas de investigacion para investigar o estudiar sistemas biologicos o muestras que tienen una enzima NEP, por ejemplo, para estudiar enfermedades en las que la enzima NEP o sus sustratos peptfdicos juegan un papel. Por consiguiente, la invencion encuentra utilidad en un metodo para usar un compuesto de la invencion como una herramienta de investigacion, que comprende realizar un ensayo biologico usando un compuesto de la invencion. Cualquier sistema o muestra biologica adecuada que tenga una enzima NEP puede emplearse en dichos estudios que pueden realizarse in vitro o in vivo. Los sistemas o muestras biologicos representativos adecuados para dichos estudios incluyen, entre otros, celulas, extractos celulares, membranas plasmaticas, muestras de tejidos, organos aislados, mairnferos (como ratones, ratas, cobayas, conejos, perros, cerdos, humanos) y asf sucesivamente, y similares, con los nam^eras de particular interes. Por ejemplo, la actividad de la enzima NEP en un mamffero puede inhibirse administrando una cantidad inhibidora de NEP de un compuesto de la invencion. Estos compuestos tambien se pueden utilizar como herramientas de investigacion mediante la realización de ensayos biologicos que utilizan dichos compuestos.
Cuando se usa como herramienta de investigacion, un sistema biologico o una muestra que comprende una enzima NEP se pone en contacto tfpicamente con una cantidad inhibidora de la enzima NEP de un compuesto de la invencion. Despues de que el sistema biologico o la muestra se expone al compuesto, los efectos de la inhibicion de la enzima NEP se determinan utilizando procedimientos y equipos convencionales, como medir el enlace del receptor en un ensayo de union o medir los cambios mediados por ligando en un ensayo funcional. La exposicion abarca poner en contacto celulas o tejido con el compuesto, administrar el compuesto cristalino a un m ai^ero, por ejemplo, mediante i.p., p.o, i.v., s.c., o administracion por inhalacion, y asf sucesivamente. Este paso determinante puede implicar medir una respuesta (un analisis cuantitativo) o puede implicar hacer una observacion (un analisis cualitativo). Medir una respuesta implica, por ejemplo, determinar los efectos del compuesto sobre el sistema biologico o la muestra utilizando procedimientos y equipos convencionales, como los ensayos de actividad enzimatica y la medicion del sustrato enzimatico o los cambios mediados por el producto en ensayos funcionales. Los resultados del ensayo pueden usarse para determinar el nivel de actividad, asf como la cantidad de compuesto necesaria para lograr el resultado deseado, es decir, una cantidad inhibidora de enzima NEP. Tfpicamente, el paso determinante implicara determinar los efectos de inhibir la enzima NEP.
Ademas, los compuestos de la invencion pueden usarse como herramientas de investigacion para evaluar otros compuestos qmmicos, y por lo tanto tambien son utiles en ensayos de deteccion para descubrir, por ejemplo, nuevos compuestos que tienen actividad inhibidora de NEP. Por lo tanto, la invencion encuentra utilidad en un metodo para evaluar un compuesto de prueba en un ensayo biologico, que comprende: (a) llevar a cabo un ensayo biologico con un compuesto de prueba para proporcionar un primer valor de ensayo; (b) realizar el ensayo biologico con un compuesto de la invencion para proporcionar un segundo valor de ensayo; en el que la etapa (a) se realiza antes, despues o al mismo tiempo que la etapa (b); y (c) comparar el primer valor de ensayo del paso (a) con el segundo valor de ensayo del paso (b). Los ensayos biologicos de ejemplo incluyen un ensayo de inhibicion de la enzima NEP. De esta manera, los compuestos de la invencion se usan como estandares en un ensayo para permitir la comparacion de los resultados obtenidos con un compuesto de prueba y con el compuesto de la invencion para identificar aquellos compuestos de prueba que tienen una actividad aproximadamente igual o superior, si la hay. Por ejemplo, los datos de pKi para un compuesto de prueba o un grupo de compuestos de prueba se comparan con los datos de pKi de un compuesto de la invencion para identificar aquellos compuestos de prueba que tienen las propiedades deseadas, por ejemplo, compuestos de prueba que tienen un valor de pKi aproximadamente igual o superior al compuesto de la invencion, en su caso. Este aspecto de la invencion incluye, como realizaciónes separadas, tanto la generacion de datos de comparacion (usando los ensayos apropiados) como el analisis de los datos de prueba para identificar compuestos de prueba de interes.
La invencion tambien encuentra utilidad en un metodo para estudiar un sistema biologico o muestra que comprende una enzima NEP, comprendiendo el metodo: (a) poner en contacto el sistema biologico o muestra con un compuesto de la invencion; y (b) determinar los efectos causados por el compuesto en el sistema biologico o muestra.
Composiciones y formulaciones farmaceuticas
Los compuestos de la invencion se administran tfpicamente a un paciente en forma de una composicion o formulacion farmaceutica. Dichas composiciones farmaceuticas pueden administrarse al paciente por cualquier via de administracion aceptable que incluye, entre otros, los modos de administracion oral, rectal, vaginal, nasal, inhalado, topico (incluso transdermico), ocular y parenteral. Ademas, los compuestos de la invencion se pueden administrar, por ejemplo, por via oral, en dosis multiples por dfa (por ejemplo, dos, tres o cuatro veces al dfa), en una sola dosis diaria o en una sola dosis semanal. Se entendera que cualquier forma de los compuestos de la invencion, (es decir, base libre, acido libre, sal farmaceuticamente aceptable, solvato, etc.) que sea adecuada para el modo particular de administracion se puede usar en las composiciones farmaceuticas analizadas en el presente documento.
Por consiguiente, en una realización, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende un vehuculo farmaceuticamente aceptable y un compuesto de la invencion. Las composiciones pueden contener otros agentes terapeuticos y/o formuladores si se desea. Cuando se discuten composiciones, el "compuesto de la invencion" tambien se puede denominar en el presente documento como el "agente activo", para distinguirlo de otros componentes de la formulacion, como el vehuculo. Por lo tanto, se entiende que el termino "agente activo" incluye compuestos de fórmula I, asf como sales, solvatos y profarmacos farmaceuticamente aceptables de ese compuesto.
Las composiciones farmaceuticas de la invencion contienen tfpicamente una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la invencion. Los expertos en la materia reconoceran, sin embargo, que una composicion farmaceutica puede contener mas que una cantidad terapeuticamente efectiva, como en composiciones a granel, o menos que una cantidad terapeuticamente efectiva, es decir, dosis unitarias individuales disenadas para administracion multiple para lograr una cantidad terapeuticamente efectiva. Tfpicamente, la composicion contendra desde aproximadamente el 0.01-95% en peso de agente activo, incluyendo, desde aproximadamente el 0.01-30% en peso, tal como desde aproximadamente el 0.01-10% en peso, con la cantidad real que depende de la formulacion en sf, la ruta de administracion, la frecuencia de la dosificacion, etc. En una realización, una composicion adecuada para una forma de dosificacion oral, por ejemplo, puede contener aproximadamente 5-70% en peso, o desde aproximadamente 10-60% en peso de agente activo.
Se puede usar cualquier vehmulo o excipiente convencional en las composiciones farmaceuticas de la invencion. La eleccion de un portador o excipiente particular, o combinaciones de portadores o excipientes, dependera del modo de administracion que se use para tratar a un paciente particular o el tipo de condicion medica o estado de enfermedad. A este respecto, la preparacion de una composicion adecuada para un modo particular de administracion esta dentro del alcance de los expertos en la tecnica farmaceutica. Adicionalmente, los vehmulos o excipientes usados en tales composiciones estan disponibles comercialmente. A modo de ilustracion adicional, las tecnicas de formulacion convencionales se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (2000); y H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & white, Baltimore, Maryland (1999).
Los ejemplos representativos de materiales que pueden servir como vehmulos farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: azucares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidon de mafz y almidon de patata; celulosa, tal como celulosa microcristalina, y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa sodica, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; aceites, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodon, aceite de cartamo, aceite de sesamo, aceite de oliva, aceite de mafz y aceite de soja; glicoles, tales como propilenglicol; polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; esteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar agentes reguladores, tales como hidroxido de magnesio e hidroxido de aluminio; acido algmico; agua libre de pirogenos; solucion salina isotonica; solucion de Ringer; alcohol etilico; soluciones regulador de fosfato; gases propulsores comprimidos, tales como clorofluorocarbonos e hidrofluorocarbonos; y otras sustancias compatibles no toxicas empleadas en composiciones farmaceuticas.
Las composiciones farmaceuticas se preparan tfpicamente mezclando o combinando completa e mtimamente el agente activo con un vehmulo farmaceuticamente aceptable y uno o mas ingredientes opcionales. La mezcla combinada uniformemente resultante puede luego moldearse o cargarse en tabletas, capsulas, pfldoras, contenedores, cartuchos, dispensadores y similares, utilizando procedimientos y equipos convencionales.
En una realización, las composiciones farmaceuticas son adecuadas para administracion oral. Las composiciones adecuadas para administracion oral pueden estar en forma de capsulas, comprimidos, pfldoras, pastillas, sellos, grageas, polvos, granulos; soluciones o suspensiones en un lfquido acuoso o no acuoso; emulsiones lfquidas de aceite en agua o agua en aceite; elixires o jarabes; y similares; cada uno contiene una cantidad predeterminada del agente activo.
Cuando se destina a la administracion oral en una forma de dosificacion solida (capsulas, comprimidos, pfldoras y similares), la composicion comprendera tfpicamente el agente activo y uno o mas vehmulos farmaceuticamente aceptables, como el citrato de sodio o el fosfato dicalcico. Las formas de dosificacion solidas tambien pueden comprender: rellenos o extensores, tales como almidones, celulosa microcristalina, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y/o acido silfcico; aglutinantes, tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y/o acacia; humectantes, tales como glicerol; agentes disgregantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidon de patata o tapioca, acido algmico, ciertos silicatos y/o carbonato de sodio; agentes retardantes de la solucion, tales como parafina; aceleradores de la absorcion, tales como compuestos de amonio cuaternario; agentes humectantes, tales como alcohol cetflico y/o monoestearato de glicerol; absorbentes, tales como caolm y/o arcilla bentonita; lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles solidos, laurilsulfato de sodio y/o mezclas de los mismos; agentes colorantes; y agentes de regulacion.
Agentes de liberacion, agentes humectantes, agentes de recubrimiento, edulcorantes, aromatizantes y perfumantes, conservantes y antioxidantes tambien pueden estar presentes en las composiciones farmaceuticas. Agentes de recubrimiento de ejemplo para tabletas, capsulas, pfldoras y similares, incluyen aquellos utilizados para recubrimientos entericos, tales como ftalato de acetato de celulosa, ftalato de acetato de polivinilo, ftalato de hidroxipropil metilcelulosa, copolfmeros de ester de acido metacnlico-acido metacnlico, trimelitato de acetato de celulosa, carboximetil etilcelulosa celulosa, hidroxipropilo acetato de metil celulosa succinato, y similares. Ejemplos de antioxidantes farmaceuticamente aceptables incluyen: antioxidantes solubles en agua, tales como acido ascorbico, clorhidrato de cistema, bisulfato de sodio, metabisulfato de sodio, sulfito de sodio y similares; antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol y similares; y agentes quelantes de metales, tales como acido dtrico, etilendiamina, acido tetraacetico, sorbitol, acido tartarico, acido fosforico y similares.
Las composiciones tambien pueden formularse para proporcionar una liberacion lenta o controlada del agente activo usando, a modo de ejemplo, hidroxipropil metil celulosa en proporciones variables u otras matrices de polfmeros, liposomas y/o microesferas. Ademas, las composiciones farmaceuticas de la invencion pueden contener agentes opacificantes y pueden formularse de modo que liberen el agente activo solo, o preferentemente, en una cierta porcion del tracto gastrointestinal, opcionalmente, de una manera retardada. Ejemplos de composiciones de inclusion que pueden usarse incluyen sustancias polimericas y ceras. El agente activo tambien puede estar en forma microencapsulada, opcionalmente con uno o mas de los excipientes descritos anteriormente.
Las formas de dosificacion lfquidas adecuadas para administracion oral incluyen, a modo de ilustracion, emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elfxires farmaceuticamente aceptables. Las formas de dosificacion lfquidas comprenden tipicamente el agente activo y un diluyente inerte, como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes, como alcohol etilico, alcohol isopropflico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bendlico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, aceites (por ejemplo, semillas de algodon, mam, mafz, germen, aceite de oliva, ricino y sesamo), glicerol, alcohol tetrahidrofunlico, polietilenglicoles y esteres de acidos grasos de sorbitan, y mezclas de los mismos. Las suspensiones pueden contener agentes de suspension tales como, por ejemplo, alcoholes isoesteanlicos etoxilados, polioxietilen sorbitol y esteres de sorbitan, celulosa microcristalina, metahidroxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos.
Cuando se destina a la administracion oral, las composiciones farmaceuticas de la invencion pueden envasarse en una forma de dosificacion unitaria. El termino "forma de dosificacion unitaria" se refiere a una unidad ffsicamente discreta adecuada para dosificar a un paciente, es decir, cada unidad que contiene una cantidad predeterminada del agente activo calculado para producir el efecto terapeutico deseado ya sea sola o en combinacion con una o mas unidades adicionales. Por ejemplo, tales formas de dosificacion unitaria pueden ser capsulas, comprimidos, pfldoras y similares.
En otra realización, las composiciones de la invencion son adecuadas para administracion inhalada, y tfpicamente estaran en forma de un aerosol o un polvo. Dichas composiciones se administran generalmente usando dispositivos de administracion bien conocidos, tales como un nebulizador, polvo seco o inhalador de dosis medida. Los dispositivos nebulizadores producen una corriente de aire a alta velocidad que hace que la composicion se pulverice como una neblina que se transporta al tracto respiratorio del paciente. Una formulacion nebulizante de ejemplo comprende el agente activo disuelto en un portador para formar una solucion, o micronizado y combinado con un portador para formar una suspension de partfculas micronizadas de tamano respirable. Los inhaladores de polvo seco administran el agente activo como un polvo de flujo libre que se dispersa en la corriente de aire de un paciente durante la inspiracion. Una formulacion de polvo seco de ejemplo comprende el agente activo mezclado en seco con un excipiente tal como lactosa, almidon, manitol, dextrosa, acido polilactico, polilactida-co-glicolida y combinaciones de los mismos. Los inhaladores de dosis medidas descargan una cantidad medida del agente activo utilizando gas propulsor comprimido. Una formulacion de dosis medida de ejemplo comprende una solucion o suspension del agente activo en un propelente licuado, tal como un clorofluorocarbono o hidrofluoroalcano. Los componentes opcionales de tales formulaciones incluyen codisolventes, como etanol o pentano, y surfactantes, como trioleato de sorbitan, acido oleico, lecitina, glicerina y laurilsulfato de sodio. Tales composiciones se preparan tfpicamente anadiendo hidrofluoroalcano enfriado o presurizado a un recipiente adecuado que contiene el agente activo, etanol (si esta presente) y el surfactante (si esta presente). Para preparar una suspension, el agente activo se microniza y luego se combina con el propelente. Alternativamente, se puede preparar una formulacion en suspension secando por pulverizacion un recubrimiento de surfactante sobre partfculas micronizadas del agente activo. La formulacion luego se carga en un bote de aerosol, que forma una porcion del inhalador.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse por via parenteral (por ejemplo, mediante inyeccion subcutanea, intravenosa, intramuscular o intraperitoneal). Para dicha administracion, el agente activo se proporciona en una solucion, suspension o emulsion esteril. Los disolventes de ejemplo para preparar tales formulaciones incluyen agua, solucion salina, alcoholes de bajo peso molecular tales como propilenglicol, polietilenglicol, aceites, gelatina, esteres de acidos grasos tales como oleato de etilo, y similares. Las formulaciones parenterales tambien pueden contener uno o mas antioxidantes, solubilizantes, estabilizantes, conservantes, agentes humectantes, emulsionantes y agentes dispersantes. Los tensioactivos, agentes estabilizantes adicionales o agentes de ajuste del pH (acidos, bases o reguladores) y antioxidantes son particularmente utiles para proporcionar estabilidad a la formulacion, por ejemplo, para minimizar o evitar la hidrolisis de enlaces ester y amida, o la dimerizacion de tioles que pueden estar presente en el compuesto. Estas formulaciones pueden volverse esteriles mediante el uso de un medio inyectable esteril, un agente esterilizante, filtracion, irradiacion o calor. En una realización particular, la formulacion parenteral comprende una solucion acuosa de ciclodextrina como el vehfculo farmaceuticamente aceptable. Las ciclodextrinas adecuadas incluyen moleculas dclicas que contienen seis o mas unidades de a-D-glucopiranosa unidas en las posiciones 1,4 mediante enlaces como la amilasa, la p-ciclodextrina o la cicloheptaamilosa. Las ciclodextrinas de ejemplo incluyen derivados de ciclodextrina tales como hidroxipropilo y sulfobutil eter ciclodextrinas tales como hidroxipropil-p-ciclodextrina y sulfobutil eter p-ciclodextrina. Ejemplos de reguladores para tales formulaciones incluyen reguladores basados en acido carboxflico tales como soluciones de regulador de citrato, lactato y maleato.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse por v^a transdermica usando sistemas de administracion transdermica conocidos y excipientes. Por ejemplo, el compuesto se puede mezclar con potenciadores de la permeacion, como propilenglicol, monolaurato de polietilenglicol, azacicloalcano-2-onas y similares, e incorporarse en un parche o sistema de administracion similar. Se pueden usar excipientes adicionales que incluyen agentes gelificantes, emulsionantes y reguladores, en tales composiciones transdermicas, si se desea.
Agentes secundarios
Los compuestos de la invencion pueden ser utiles como unico tratamiento de una enfermedad o pueden combinarse con uno o mas agentes terapeuticos adicionales para obtener el efecto terapeutico deseado. Por lo tanto, en una realización, las composiciones farmaceuticas de la invencion contienen otros farmacos que se administran conjuntamente con un compuesto de la invencion. Por ejemplo, la composicion puede comprender ademas uno o mas farmacos (tambien denominados "agentes secundarios"). Dichos agentes terapeuticos son bien conocidos en la tecnica e incluyen antagonistas de los receptores de adenosina, antagonistas de los receptores a-adrenergicos, antagonistas de los receptores pi-adrenergicos, agonistas de los receptores p2-adrenergicos, antagonistas de los receptores p-adrenergicos de accion doble/antagonistas de los receptores ai, glicacion avanzada, interruptores avanzados del producto final de la glicacion, antagonistas de aldosterona, inhibidores de la aldosterona sintasa, inhibidores de la aminopeptidasa N, androgenos, inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina y enzima convertidora de la angiotensina de doble efecto/inhibidores de la neprilisina, activadores y estimuladores de la enzima convertidora de angiotensina 2, vacunas contra la angiotensina II, anticoagulantes, agentes antidiabeticos, agentes antidiarreicos, agentes antiglaucoma, agentes anti-lfpidos, agentes anticonceptivos agentes anti-tromboticos, antagonistas del receptor ATi y antagonistas del receptor ATi de doble efecto/inhibidores de la neprilisina y bloqueadores multifuncionales del receptor de la angiotensina, antagonistas del receptor de la bradiquinina, calcio bloqueadores de canales, inhibidores de la quinasa, digoxina, diureticos, agonistas de la dopamina, inhibidores de la enzima convertidora de endotelina, antagonistas de los receptores de la endotelina, inhibidores de la HMG-CoA reductasa, estrogenos, agonistas y/o antagonistas de los receptores de estrogenos, inhibidores de la recaptacion de monoaminas, relajantes musculares, peptidos natriureticos y sus analogos, antagonistas de los receptores de peptidos natriureticos, inhibidores de la neprilisina, donantes de oxido mtrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, antagonistas del receptor de N-metil d-aspartato, agonistas de los receptores opioides, inhibidores de la fosfodiesterasa, analogos de la prostaglandina, agonistas del receptor de la prostaglandina, inhibidores de la renina, inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina, bloqueantes del canal de sodio, guanilato ciclasa soluble estimuladores y activadores, antidepresivos tridclicos, antagonistas de los receptores de vasopresina y combinaciones de los mismos. Ejemplos espedficos de estos agentes se detallan aqrn.
Por consiguiente, en otro aspecto mas de la invencion, una composicion farmaceutica comprende un compuesto de la invencion, un segundo agente activo y un vehfculo farmaceuticamente aceptable. Los agentes activos tercero, cuarto, etc. tambien pueden incluirse en la composicion. En terapia de combinacion, la cantidad de compuesto de la invencion que se administra, asf como la cantidad de agentes secundarios, puede ser menor que la cantidad administrada tfpicamente en monoterapia.
Los compuestos de la invencion se pueden mezclar ffsicamente con el segundo agente activo para formar una composicion que contiene ambos agentes; o cada agente puede estar presente en composiciones separadas y distintas que se administran al paciente simultaneamente o en momentos separados. Por ejemplo, un compuesto de la invencion se puede combinar con un segundo agente activo utilizando procedimientos y equipos convencionales para formar una combinacion de agentes activos que comprenden un compuesto de la invencion y un segundo agente activo. Ademas, los agentes activos pueden combinarse con un vehfculo farmaceuticamente aceptable para formar una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion, un segundo agente activo y un vehfculo farmaceuticamente aceptable. En esta realización, los componentes de la composicion se mezclan o se mezclan tfpicamente para crear una mezcla ffsica. La mezcla ffsica se administra luego en una cantidad terapeuticamente efectiva utilizando cualquiera de las rutas aqrn descritas.
Alternativamente, los agentes activos pueden permanecer separados y distintos antes de la administracion al paciente. En esta realización, los agentes no se mezclan ffsicamente juntos antes de la administracion, sino que se administran simultaneamente o en momentos separados como composiciones separadas. Dichas composiciones se pueden empaquetar por separado o se pueden empaquetar juntas en un kit. Cuando se administra en momentos separados, el agente secundario se administrara tfpicamente menos de 24 horas despues de la administracion del compuesto de la invencion, variando desde la concurrencia con la administracion del compuesto de la invencion hasta aproximadamente 24 horas despues de la dosis. Esto tambien se conoce como administracion secuencial. Por lo tanto, un compuesto de la invencion se puede administrar por via oral de forma simultanea o secuencial con otro agente activo usando dos tabletas, con una tableta para cada agente activo, donde secuencial puede significar que se administre inmediatamente despues de la administracion del compuesto de la invencion o en algun momento predeterminado mas tarde (por ejemplo, una hora mas tarde o tres horas mas tarde). Tambien se contempla que el agente secundario puede administrarse mas de 24 horas despues de la administracion del compuesto de la invencion. Alternativamente, la combinacion puede administrarse por diferentes vfas de administracion, es decir, una por via oral y la otra por inhalacion.
En una realización, el kit comprende una primera forma de dosificacion que comprende un compuesto de la invencion y al menos una forma de dosificacion adicional que comprende uno o mas de los agentes secundarios expuestos en el presente documento, en cantidades suficientes para llevar a cabo los metodos de la invencion. La primera forma de dosificacion y la segunda (o tercera, etc.) forma de dosificacion comprenden juntas una cantidad terapeuticamente efectiva de agentes activos para el tratamiento o la prevencion de una enfermedad o afeccion medica en un paciente.
El agente o agentes secundarios, cuando se incluyen, estan presentes en una cantidad terapeuticamente efectiva, de manera que tipicamente se administran en una cantidad que produce un efecto terapeuticamente beneficioso cuando se coadministran con un compuesto de la invencion. El agente secundario puede estar en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, estereoisomero opticamente puro, etc. El agente secundario tambien puede estar en forma de un profarmaco, por ejemplo, un compuesto que tiene un grupo acido carboxflico que se ha esterificado. Por lo tanto, los agentes secundarios enumerados en este documento pretenden incluir todas estas formas, y estan disponibles comercialmente o pueden prepararse utilizando procedimientos y reactivos convencionales.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor de adenosina, cuyos ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, naxifilina, rolofilina, SLV-320, teofilina y tonapofilina.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor a-adrenergico, cuyos ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, doxazosina, prazosina, tamsulosina y terazosina.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor pi adrenergico ("bloqueadores pi"). Los bloqueadores pi representativos incluyen, pero no se limitan a, acebutolol, alprenolol, amosulalol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaxolol, bevantolol,bisoprolol, bopindolol, bucindolol, bucumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, bubridina, butofilolol, carazolol, carteolol, carvedilol, celiprolol, cetamolol, cloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetolol, levobunolol, mepindolol, metipranolol, metoprolol tal como succinato de metoprolol y tartrato de metoprolol, moprolol, nadolol, nadoxolol, nebivalol, nipradilol, oxprenolol, penbutolol, perbutolol, pindolol, practolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sufinalol, talindol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol, xibenolol, y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el antagonista pi se selecciona de atenolol, bisoprolol, metoprolol, propranolol, sotalol y combinaciones de los mismos. Tfpicamente, el bloqueador pi se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 2-900 mg por dosis.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agonista del receptor p2-adrenergico, cuyos ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, albuterol, bitolterol, fenoterol, formoterol, indacaterol, isoetarina, levalbuterol, metaproterenol, pirbuterol, salbutamol, salmefamol, salmeterol, terbutalina, vilanterol y similares. Tfpicamente, el agonista del receptor p2-adrenergico se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 0.05-500 |jg por dosis.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un rompedor avanzado de producto final de la glicacion (AGE), cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y no de limitacion, alagebrio (o A L T -7 ii) y TRC4i49.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista de aldosterona, cuyos ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, eplerenona, espironolactona y combinaciones de los mismos. Tfpicamente, el antagonista de aldosterona se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 5 a 300 mg por dfa.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con una aminopeptidasa N o dipeptidil peptidasa III inhibidor, cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y no de forma limitativa, bestatina y PCi8 (2-amino-4-metilsulfonil butano tiol, metionina tiol).
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina (ACE). Los inhibidores representativos de la ACE incluyen, pero no se limitan a, accupril, alacepril, benazepril, benazeprilat, captopril, ceranapril, cilazapril, delapril, enalapril, enalaprilat, fosinopril, fosinoprilat, imidapril, lisinopril, moexipril, monopril, moveltipril, pentopril, perindopril, quinapril, quinaprilato, ramipril, ramiprilato, acetato de saralasin, espirapril, temocapril, trandolapril, zofenopril, y combinaciones de los mismos.
En una realización particular, el inhibidor de la ACE se selecciona de: benazepril, captopril, enalapril, lisinopril, ramipril y combinaciones de los mismos. Normalmente, el inhibidor de la ACE se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente i- i50 mg por dfa. Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina de doble efecto/neprilisina (ACE/NEP), cuyos ejemplos incluyen, entre otros: AVE-0848 acido ((4S,7S,i2bR)-7-[3-metil-2(S)-sulfanilbutramido]-6-oxoi,2,3,4,6,7,8,i2b-octahidropirido[2,i-a][2]-benzazepina-4-carboxflico); AVE-7688 (ilepatril) y su compuesto original; BMS-i82657 acido (2- [2-oxo-3 (S)-[3-fenil-2(S)-sulfanilpropionamido]-2,3,4,5-tetrahidro-iH-i-benzazepin-iil]acetico); CGS-3560i (N-[i-[4-metil-2(S)-sulfanilpentanamido]ciclopentil-carbonil]-L-triptofano); fasidotril; fasidotrilato; enalaprilato; ER-32935 acido ((3R,6S,9aR)-6-[3(s)-metil-2(S)- sulfanilpentanamido]-5 oxoperhidrotiazolo[3,2-a]azeprna-3-carboxflico); gempatrilato; MDL-101264 acido ((4S,7S,12bR)-7-[2(S)-(2-morfolinoacetiltio)-3-fenilpropionamido]-6-oxo-1,2,3,4,6,7,8,12Br- octahidropirido[2,1-a][2]benzazepina-4-carbox^lico); MDL-101287 acido ([4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[2-(carboximetil)-3-fenilpropionamido]-6-oxo-1,2,3,4,6,7,8,12b octahidropirido[2,1-a][2] benzazepina-4-carbox^lico); omapatrilat; RB-105 (N-[2(S)-(mercaptometil)-3(R)-fenilbutil]-L-alanina); sampatrilato SA-898 ((2R,4R)-N-[2-(2-hidroxifenil)-3-(3-mercaptopropionil)tiazolidin-4-ilcarbonil]-L-fenilalanina); Sch-50690 (N-[1(S)-carboxi-2-[N2-(metanosulfonil)-L-lisilamino]etil]-L-valil-L-tirosina); y combinaciones de los mismos, tambien pueden ser incluidos. En una realización particular, el inhibidor de ACE/n Ep se selecciona entre: AVE-7688, enalaprilato, fasidotrilo, fasidotrilato, omapatrilato, sampatrilato y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un activador o estimulador de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2).
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con una vacuna de angiotensina-II, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, ATR12181 y CYT006-AngQb.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un anticoagulante, cuyos ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a: cumarinas tales como warfarina; heparina e inhibidores directos de la trombina, tales como argatroban, bivalirudina, dabigatran y lepirudina.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agente antidiabetico. Los agentes antidiabeticos representativos incluyen farmacos inyectables, asf como farmacos eficaces por via oral y combinaciones de los mismos. Ejemplos de medicamentos inyectables incluyen, pero no se limitan a, insulina y derivados de insulina. Ejemplos de medicamentos eficaces por via oral incluyen, entre otros, biguanidas como la metformina; antagonistas del glucagon; inhibidores de la a-glucosidasa tales como acarbosa y miglitol; inhibidores de la dipeptidil peptidasa IV (inhibidores de la DPP-IV) tales como alogliptina, denagliptina, linagliptina, saxagliptina, sitagliptina, y vildagliptina; meglitinidas tales como repaglinida; oxadiazolidinedionas; sulfonilureas tales como clorpropamida, glimepirida, glipizida, gliburida y tolazamida; tiazolidinedionas tales como pioglitazona y rosiglitazona; y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con tratamientos antidiarreicos. Las opciones de tratamiento representativas incluyen, entre otras, soluciones de rehidratacion oral (SRO), loperamida, difenoxilato y subsalicilato de bismuto.
Un compuesto de la invencion se puede administrar en combinacion con un agente antiglaucoma. Los agentes antiglaucoma representativos incluyen, pero no se limitan a: agonistas a-adrenergicos, como la brimonidina; antagonistas del receptor p1-adrenergico; bloqueadores p1 topicos, tales como betaxolol, levobunolol y timolol; inhibidores de la anhidrasa carbonica tales como acetazolamida, brinzolamida o dorzolamida; agonistas colinergicos tales como cevimelina y DMXB-anabasema; compuestos de epinefrina; mioticos como la pilocarpina; y los analogos de la prostaglandina.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un agente antilfpido. Agentes antilipfdicos representativos incluyen, pero no se limitan a: inhibidores de la protema de transferencia de ester de colesterilo (CETP), tales como anacetrapib, dalcetrapib y torcetrapib; estatinas tales como atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, rosuvastatina y simvastatina; y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un agente antitrombotico. Los agentes antitromboticos representativos incluyen, pero no se limitan a: aspirina; agentes antiplaquetarios tales como clopidogrel, prasugrel y ticlopidina; heparina, y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un antagonista del receptor ATi, tambien conocido como bloqueadores del receptor de angiotensina II tipo 1 (ARB). Los ARB representativos incluyen, entre otros, abitesartan, azilsartan (por ejemplo, azilsartan medoxomil), benzilosartan, candesartan, candesartan cilexetil, elisartan, embusartan, enoltasosartan, eprosartan, EXP3174, fonsartan, forasartan, glicilosartan, irbesartan, isoteolina, losartan, medoxomilo, milfasartan, olmesartan (por ejemplo, olmesartan medoxomil), opomisartan, pratosartan, ripisartan, saprisartan, saralasin, sarmesin, TAK-591, tasosartan, telmisartan, valsartan, zolasartan y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el ARB se selecciona de azilsartan medoxomilo, candesartan cilexetilo, eprosartan, irbesartan, losartan, olmesartan medoxomilo, saprisartan, tasosartan, telmisartan, valsartan y combinaciones de los mismos. Las sales y/o profarmacos de ejemplo incluyen candesartan cilexetil, mesilato de eprosartan, sal de potasio de losartan y oloxartil medoxomilo. Tfpicamente, el ARB se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 4-600 mg por dosis, con dosis diarias de ejemplo que vanan de 20­ 320 mg por dfa.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con un agente de doble accion, como un antagonista del receptor AT 1/inhibidor de la neprilisina (ARB/NEP), cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, los compuestos descritos en las publicaciones de los Estados Unidos Nos. 2008/0269305 y 2009/0023228, ambas de Allegretti et al. presentada el 23 de abril de 2008, como el compuesto acido 4'-{2-etoxi-4-etil-5-[((S)-2-mercapto-4-metilpentanoilamino)-metil]imidazol-1-ilmetil}-3'-fluorobifeml-2-carboxflico.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con bloqueadores de receptores de angiotensina multifuncionales como se describe en Kurtz & Klein (2009) Hypertension Research 32: 826-834.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un antagonista del receptor de bradiquinina, por ejemplo, icatibant (HOE-140). Se espera que esta terapia de combinacion pueda presentar la ventaja de prevenir el angioedema u otras consecuencias no deseadas de los niveles elevados de bradiquinina.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un bloqueador de canales de calcio. Los bloqueadores de los canales de calcio representativos incluyen, pero no se limitan a, amlodipina, anipamilo, aranipina, bamidipina, benciclano, benidipina, bepridil, clentiazem, cilnidipina, cinarizina, diltiazem, efonidipina, elgodipina, etafenona, felodipina, fendilina, flunarizina, gallopamil, isradipina, lacidipina, lercanidipina, lidoflazina, lomerizina, manidipina, mibefradil, nicardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nilvadipina, nimodipina, nisoldipina, nitrendipina, nivaldipina, perhexilina, prenilamina, riosidina, semotiadil, terodilina, tiapamilo, verapamilo y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el bloqueador del canal de calcio se selecciona entre amlodipina, bepridil, diltiazem, felodipina, isradipina, lacidipina, nicardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nimodipina, nisoldipina, riosidina, verapamilo, y sus combinaciones. Tfpicamente, el bloqueador del canal de calcio se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 2-500 mg por dosis.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de la quinasa, tal como TPC-806 y 2-(5-formilamino-6-oxo-2-fenil-1,6-dihidropirimidina-1-il)-N-[{3,4-dioxo-1-fenil-7-(2-piridiloxi)}-2-heptil]acetamida (NK3201).
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un diuretico. Diureticos representativos incluyen, pero no se limitan a: inhibidores de la anhidrasa carbonica tales como acetazolamida y diclorfenamida; diureticos de asa, que incluyen derivados de sulfonamida tales como acetazolamida, ambusida, azosemida, bumetanida, butazolamida, cloraminofenamida, clofenamida, clopamida, clorexolona, disulfamida, etoxzolamida, furosemida, mefrusida, metazolamida, piretanida, torsemida, tripamida y xipamida, asf como diureticos no sulfonairndicos tales como acido etacrmico y otros compuestos de acido fenoxiacetico tales como acido tiemlico, indacrinona y quincarbato; diureticos osmoticos tales como manitol; diureticos ahorradores de potasio, que incluyen antagonistas de la aldosterona como la espironolactona, e inhibidores de los canales de Na+ como la amilorida y el triamtereno; tiazida y diureticos similares a la tiazida, tales como: altiazida, bendroflumetiazida, bencilhidroclorotiazida, benzotiazida, butiazida, clortalidona, clorotiazida, ciclopentiazida, ciclotiazida, epitiazida, etiazida, fenquizona, flumetiazida, hidroclorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilclotiazida, meticrana, metolazona, paraflutizida, politiazida, quinetazona, teclotiazida y triclorometiazida; y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el diuretico se selecciona de amilorida, bumetanida, clorotiazida, clortalidona, diclorfenamida, acido etacrmico, furosemida, hidroclorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilclotiazida, metolazona, torsemida, triamtereno, y combinaciones de los mismos. El diuretico se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 5 a 50 mg por dfa, mas tfpicamente de 6 a 25 mg por dfa, con dosis comunes de 6.25 mg, 12.5 mg o 25 mg por dfa.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de la enzima convertidora de endotelina (ECE), cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, fosforamidon, CGS 26303 y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor de endotelina. Los antagonistas del receptor de endotelina representativos incluyen, pero no se limitan a: antagonistas selectivos del receptor de endotelina que afectan a los receptores de endotelina A, tales como avosentan, ambrisentan, atrasentan, BQ-123, clazosentan, darusentan, sitaxentan y zibotentan; y antagonistas duales del receptor de endotelina que afectan tanto a los receptores de endotelina A como a B, tales como bosentan, macitentan, tezosentan.
Un compuesto de la invencion se puede administrar en combinacion con uno o mas inhibidores de la HMG-CoA reductasa, que tambien se conocen como estatinas. Las estatinas representativas incluyen, pero no se limitan a, atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pitavastatina, pravastatina, rosuvastatina y simvastatina.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de la recaptacion de monoaminas, cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y sin limitacion, inhibidores de la recaptacion de norepinefrina, tales como atomoxetina, buproprion y el metabolito de buproprion hidroxibuproprion, maprotilina, reboxetina y viloxazina; inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina ( is Rs ) como el citalopram y el metabolito de citalopram desmetilcitalopram, dapoxetina, escitalopram (por ejemplo, oxalato de escitalopram), fluoxetina y la fluoxetina desmetil metabolito norfluoxetina, fluvoxamina (por ejemplo, maleato de fluvoxamina), paroxetina, sertralina y la sertralina metabolito demetilsertralina; inhibidores duales de la recaptacion de serotonina y norepinefrina (IRSN) como bicifadina, duloxetina, milnacipran, nefazodona y venlafaxina; y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un relajante muscular, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a: carisoprodol, clorzoxazona, ciclobenzaprina, diflunisal, metaxalona, metocarbamol y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un peptido natriuretico o un analogo, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a: carperitida, CD-NP (Nile Therapeutics), CU-NP, nesiritida, PL-3994 (Palatin Technologies, Inc.), ularitida, cenderitida y compuestos descritos en Ogawa et al (2004) J.Biol. Chem. 279: 28625-31. Estos compuestos tambien se conocen como agonistas del receptor A del peptido natriuretico (NPR-A). Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un antagonista del receptor de depuracion del peptido natriuretico (NPR-C), como SC-46542, cANF (4-23) y AP-811 (Vease (2000) Bioorg Med Chem Lett 10: 1949­ 52). Por ejemplo, el AP-811 ha mostrado sinergia cuando se combina con el inhibidor de NEP, tiorfan (Wegner (1995) Clin.Exper.Hypert 17: 861-876).
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un inhibidor de la neprilisina (NEP). Los inhibidores de NEP representativos incluyen, pero no se limitan a: AHU-377; candoxatril; candoxatrilato; ester bendlico de dexecadotril ((+)-N-[2(R)-(acetiltiometil)-3-fenilpropionil]glicina); CGS-24128 (acido 3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino)propionamido]propionico); CGS-24592 (acido (S)-3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino) propionamido]propionico); CGS-25155 (N-[9(R)-(acetiltiometil)-10-oxo-1-azaciclodecan-2(S)-carbonil]-4(R)-hidroxi-L-prolina bencil ester); derivados del acido 3-(1-carbamoilciclohexil)propionico descritos en el documento WO 2006/027680 de Hepworth et al. (Pfizer Inc.); Jm V-390-1 (2(R)-bencil-3-(N-hidroxicarbamoil)propionil-L-isoleucil-L-leucina); ecadotril; fosforamidon; retrotiorfano; RU-42827 (2-(mercaptometil)-N-(4-piridinil)bencenopropionamida); RU-44004 (N-(4-morfolinil)-3-fenil-2-(sulfanilmetil)propionamida); SCH-32615 ((S)-N-[N-(1-carboxi-2-feniletil)-L-fenilalanil]-p-alanina) y su profarmaco Sc H-34826 ((S)-N-[N-[1-[[(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi]carbonil]-2-feniletil] L-fenilalanil]-p-alanina); sialorfina SCH-42495 (N-[2 (S)-(acetilsulfanilmetil)-3-(2-metilfenil)propionil]-L-metionina etil ester); espinorfina Sq -28132 (N-[2-(mercaptometil)-1-oxo-3-fenilpropil]leucina); SQ-28603 (N-[2-(mercaptometil)-1-oxo-3-fenilpropil]-p-alanina); SQ-29072 (acido 7-[[2-(mercaptometil)-1-oxo-3-fenilpropil]amino]heptanoico); tiorfano y su profarmaco racecadotril; UK-69578 (acido cis-4-[[[1-[2-carboxi-3-(2-metoxietoxi)propil]ciclopentil]carbonil]amino] ciclohexanocarboxflico); UK-447,841 (acido 2-{1-[3-(4-clorofenil)propilcarbamoil]-ciclopentilmetil}-4-metoxibutmco); UK-505,749 ((R)-2-metil-3-{1-[3-(2-metilbenzotiazol-6-il)propilcarbamoil]ciclopentil}propionico); acido 5-bifenil-4-il-4-(3-carboxipropionilamino)-2-metilpentanoico y ester etilico del acido 5-bifenil-4-il-4-(3-carboxipropionilamino)-2-metilpentanoico (documento Wo 2007/056546); daglutril acido [(3S,2'R)-3-{1-[2'-(etoxicarbonil)-4'-fenilbutil]-ciclopentan-1-carbonilamino}-2,3,4,5-tetrahidro-2-oxo-1H-1-benzazepina-1-acetico] descrito en el documento WO 2007/106708 de Khder et al. (Novartis AG); y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el inhibidor de NEP se selecciona de AHU-377, candoxatril, candoxatrilato, CGS-24128, fosforamidon, SCH-32615, SCH-34826, SQ-28603, tiorfano y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el inhibidor de NEP es un compuesto tal como daglutril o CGS-26303 acido ([N-[2-(bifenil-4-il)-1 (S)-(1H-tetrazol-5-il)etil]amino] metilfosfonico), que tienen actividad tanto como inhibidores de la enzima convertidora de endotelina (ECE) como de NEP. Tambien se pueden usar otros compuestos ECE/NEP de doble accion. El inhibidor de NEP se administrara en una cantidad suficiente para proporcionar de aproximadamente 20-800 mg por dfa, con dosis diarias tfpicas que oscilan entre 50-700 mg por dfa, mas comunmente 100-600 o 100-300 mg por dfa.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un donante de oxido mtrico, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a nicorandil; nitratos organicos tales como tetranitrato de pentaeritritol; y sidnoniminas tales como linsidomina y molsidomina.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agente antiinflamatorio no esteroideo (AINE). Los AINEs representativos incluyen, entre otros: acemetacina, acido acetilsalidlico, alclofenac, alminoprofeno, amfenac, amiprilosa, aloxiprina, anirolac, apazona, azapropazona, benorilato, benoxaprofeno, beziperilon, broperamol, acido bucolico, carprofeno, clidanac, diclofenaco, diflunisal, diftalone, enolicam, etodolac, etoricoxib, fenbufen, fenclofenaco, acido fenclazico, fenoprofeno, fentiazaco, feprazona, acido flufenamico, flufenisal, fluprofeno, flurbiprofeno, furofenaco, ibufenaco, ibuprofeno, indometacina, indoprofeno, isoxepaco, isoxicam, ketoprofeno, ketorolac, lofemizole, lomoxicam, meclofenamato, acido meclofenamico, acido mefenamico, meloxicam, mesalamina, miroprofeno, mofebutazona, nabumetona, naproxeno, acido niflumico, oxaprozina, oxpinac, oxifenbutazona, fenilbutazona, piroxicam, pirprofeno, pranoprofeno, salsalato, sudoxicam, sulfasalazina, sulindac, suprofeno, tenoxicam, tiopinac, acido tiaprofenico, tioxaprofeno, acido tolfenamico, tolmetina, triflumidato, zidometacina, zomepirac, y combinaciones de los mismos. En una realización particular, el AINE se selecciona entre etodolaco, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, ketoprofeno, ketorolaco, meloxicam, naproxeno, oxaprozina, piroxicam y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor de N-metil daspartato (NMDA), cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y sin limitacion, incluyendo amantadina, dextrometorfano, dextropropoxifeno, ketamina, cetobemidona, memantina, metadona, etcetera.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agonista del receptor de opioides (tambien denominados analgesicos opioides). Agonistas de receptores opioides representativos incluyen, pero no se limitan a: buprenorfina, butorfanol, codema, dihidrocodema, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, levallorfano, levorfanol, meperidina, metadona, morfina, nalbufina, nalmefeno, nalorfina, naloxona, naltrexona, nalorfina, oxicodona, oximorfona, pentazocina, propoxifeno, tramadol, y combinaciones de los mismos. En ciertas realizaciónes, el agonista del receptor opioide se selecciona de codema, dihidrocodema, hidrocodona, hidromorfona, morfina, oxicodona, oximorfona, tramadol y combinaciones de las mismas.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de la fosfodiesterasa (PDE), particularmente un inhibidor de la PDE-V. Los inhibidores representativos de la PDE-V incluyen, entre otros, avanafil, lodenafil, mirodenafil, sildenafil (Revatio®), tadalafil (Adcirca®), vardenafil (Levitra®) y udenafil.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un analogo de prostaglandina (tambien denominados prostanoides o analogos de prostaciclina). Los analogos representativos de la prostaglandina incluyen, entre otros, beraprost sodico, bimatoprost, epoprostenol, iloprost, latanoprost, tafluprost, travoprost y treprostinil, con bimatoprost, latanoprost y tafluprost que son de particular interes.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agonista del receptor de prostaglandinas, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, bimatoprost, latanoprost, travoprost, etc.
Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse en combinacion con un inhibidor de renina, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a, aliskiren, enalkiren, remikiren, y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un inhibidor selectivo de la recaptacion de serotonina (ISRS). Los ISRS representativos incluyen, entre otros: citalopram y el metabolito desmetilcitalopram del citalopram, dapoxetina, escitalopram (por ejemplo, oxalato de escitalopram), fluoxetina y el metabolito fluoxetina desmetil norfluoxetina, fluvoxamina (por ejemplo, maleato de fluvoxamina), paroxetina, sertralina y el metabolito de sertralina, demetilsertralina, y sus combinaciones.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un agonista del receptor de serotonina 5-HTid, cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y sin limitacion, triptanos tales como almotriptan, avitriptan, eletriptan, frovatriptan, naratriptan, rizatriptan, sumatriptan, y zolmitriptan.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un bloqueador de canales de sodio, cuyos ejemplos incluyen, a tttulo ilustrativo y no limitativo, carbamazepina, fosfenitoma, lamotrigina, lidocama, mexiletina, oxcarbazepina, fenitoma y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar en combinacion con un estimulador o activador de guanilato ciclasa soluble, cuyos ejemplos incluyen, pero no se limitan a ataciguat, riociguat, y combinaciones de los mismos.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antidepresivo tridclico (TCA), cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y no de forma limitativa, amitriptilina, amitriptilinoxido, butriptilina, clomipramina, demexiptilina, desipramina, dibenzepina, dimetacrina, dosilipina, doxepina, imipramina, imipraminoxido, lofepramina, melitraceno, metapramina, nitroxazepina, nortriptilina, noxiptilina, pipofezina, propizepina, protriptilina, quinupramina y combinaciones de las mismas.
Los compuestos de la invencion pueden administrarse en combinacion con un antagonista del receptor de vasopresina, cuyos ejemplos incluyen, a modo de ilustracion y no de limitacion, conivaptan y tolvaptan.
Los agentes terapeuticos secundarios combinados tambien pueden ser utiles en una terapia de combinacion adicional con los compuestos de la invencion. Por ejemplo, los compuestos de la invencion pueden combinarse con un diuretico y un ARB, o un bloqueador de canales de calcio y un ARB, o un diuretico y un inhibidor de la ECA, o un bloqueador de canales de calcio y una estatina. Ejemplos espedficos incluyen una combinacion del enalapril inhibidor de la ACE (en forma de sal de maleato) y la hidroclorotiazida diuretica, que se vende bajo la marca Vaseretic®, o una combinacion del bloqueador de los canales de calcio amlodipina (en la forma de sal de besilato) y ARB olmesartan (en forma de profarmaco de medoxomilo), o una combinacion de un bloqueador de canales de calcio y una estatina, tambien se pueden usar con los compuestos de la invencion. Otros agentes terapeuticos, como los agonistas del receptor adrenergico a2 y los antagonistas del receptor de vasopresina, tambien pueden ser utiles en la terapia de combinacion. Agonistas de receptores adrenergicos a2 de ejemplo incluyen clonidina, dexmedetomidina y guanfacina.
Las siguientes formulaciones ilustran composiciones farmaceuticas representativas de la invencion.
Capsulas de gelatina dura de ejemplo para administracion oral
Un compuesto de la invencion (50 g), 440 g de lactosa secada por pulverizacion y 10 g de estearato de magnesio se mezclan completamente. La composicion resultante se carga luego en capsulas de gelatina dura (500 mg de composicion por capsula). Alternativamente, un compuesto de la invencion (20 mg) se mezcla completamente con almidon (89 mg), celulosa microcristalina (89 mg) y estearato de magnesio (2 mg). La mezcla se pasa luego a traves de un tamiz de malla U.S. No. 45 y se carga en una capsula de gelatina dura (200 mg de composicion por capsula).
Como alternativa, un compuesto de la invencion (30 g), un agente secundario (20 g), 440 g de lactosa secada por pulverizacion y 10 g de estearato de magnesio se mezclan completamente y se procesan como se describe anteriormente.
Formulacion de ejemplo de capsula de gelatina para administracion oral
Un compuesto de la invencion (100 mg) se mezcla completamente con monooleato de polioxietileno sorbitan (50 mg) y polvo de almidon (250 mg). La mezcla se carga luego en una capsula de gelatina (400 mg de composicion por capsula). Alternativamente, un compuesto de la invencion (70 mg) y un agente secundario (30 mg) se mezclan a fondo con monooleato de polioxietileno sorbitan (50 mg) y polvo de almidon (250 mg), y la mezcla resultante se carga en una capsula de gelatina (400 mg de composicion por capsula).
Como alternativa, un compuesto de la invencion (40 mg) se mezcla a fondo con celulosa microcristalina (Avicel PH 103; 259.2 mg) y estearato de magnesio (0.8 mg). Luego, la mezcla se carga en una capsula de gelatina (Tamano # 1, blanco, opaco) (300 mg de composicion por capsula).
Formulacion de tableta de ejemplo para administracion oral
Un compuesto de la invencion (10 mg), almidon (45 mg) y celulosa microcristalina (35 mg) se pasa a traves de un tamiz de malla U.S. No. 20 y se mezcla completamente. Los granulos producidos de este modo se secan a 50-60°C y se pasan a traves de un tamiz de malla U.S. No. 16.
Se mezcla una solucion de polivinilpirrolidona (4 mg como una solucion al 10% en agua esteril) con carboximetil almidon sodico (4.5 mg), estearato de magnesio (0.5 mg) y talco (1 mg), y luego se pasa esta mezcla a traves de un tamiz de malla U.S. No. 16. El carboximetil almidon sodico, el estearato de magnesio y el talco se anaden luego a los granulos. Despues de la mezcla, la mezcla se comprime en una maquina de tabletas para obtener una tableta que pesa 100 mg.
Alternativamente, un compuesto de la invencion (250 mg) se mezcla a fondo con celulosa microcristalina (400 mg), dioxido de silicio ahumado (10 mg) y acido estearico (5 mg). La mezcla luego se comprime para formar tabletas (665 mg de composicion por tableta).
Alternativamente, un compuesto de la invencion (400 mg) se mezcla completamente con almidon de mafz (50 mg), croscarmelosa de sodio (25 mg), lactosa (120 mg) y estearato de magnesio (5 mg). A continuacion, la mezcla se comprime para formar un comprimido de calificacion unica (600 mg de composicion por comprimido).
Alternativamente, un compuesto de la invencion (100 mg) se mezcla completamente con almidon de mafz (100 mg) con una solucion acuosa de gelatina (20 mg). La mezcla se seca y se muele hasta obtener un polvo fino. La celulosa microcristalina (50 mg) y el estearato de magnesio (5 mg) se mezclan luego con la formulacion de gelatina, se granulan y la mezcla resultante se comprime para formar tabletas (100 mg del compuesto de la invencion por tableta).
Formulacion de suspension de ejemplo para administracion oral
Los siguientes ingredientes se mezclan para formar una suspension que contiene 100 mg del compuesto de la invencion por 10 mL de suspension:
Ingredientes Cantidad
Compuestos de la invencion 1.0 g
Acido fumarico 0.5 g
Cloruro de sodio 2.0 g
Metil parabeno 0.15 g
Propil parabeno 0.05 g
Azucar granulada 25.5 g
Sorbitol (solucion al 70%) 12.85 g
Veegum® K silicato de magnesio y aluminio 1.0 g
Saborizante 0.035 mL
Colorantes 0.5 mg
Agua destilada c.s. para 100 mL
Formulacion Ifquida de ejemplo para administracion oral
Una formulacion Uquida adecuada es una con un regulador con base en acido carboxflico tal como soluciones de regulador de citrato, lactato y maleato. Por ejemplo, un compuesto de la invencion (que se puede mezclar previamente con DMSO) se mezcla con un regulador de citrato de amonio 100 mM y el pH se ajusta a pH 5, o se mezcla con una solucion de acido dtrico 100 mM y el pH se ajusta a pH 2. Dichas soluciones tambien pueden incluir un excipiente solubilizante tal como una ciclodextrina, por ejemplo, la solucion puede incluir 10% en peso de hidroxipropil-pciclodextrina.
Otras formulaciones adecuadas incluyen una solucion de NaHCO3 al 5%, con o sin ciclodextrina.
Formulacion inyectable de ejemplo para administracion por inyeccion
Un compuesto de la invencion (0.2 g) se mezcla con una solucion regulador de acetato de sodio 0.4 M (2.0 mL). El pH de la solucion resultante se ajusta a pH 4 usando acido clorhfdrico acuoso 0.5 N o hidroxido de sodio acuoso 0.5 N, segun sea necesario, y luego se agrega suficiente agua para inyeccion para proporcionar un volumen total de 20 mL. La mezcla se filtra luego a traves de un filtro esteril (0.22 micrones) para proporcionar una solucion esteril adecuada para la administracion por inyeccion.
Composiciones de ejemplo para administracion por inhalacion
Un compuesto de la invencion (0.2 mg) se microniza y luego se mezcla con lactosa (25 mg). Esta mezcla combinada luego se carga en un cartucho de inhalacion de gelatina. Los contenidos del cartucho se administran utilizando un inhalador de polvo seco, por ejemplo.
Alternativamente, un compuesto micronizado de la invencion (10 g) se dispersa en una solucion preparada disolviendo lecitina (0.2 g) en agua desmineralizada (200 mL). La suspension resultante se seca por pulverizacion y luego se microniza para formar una composicion micronizada que comprende partfculas que tienen un diametro medio inferior a aproximadamente 1.5 pm. La composicion micronizada se carga luego en cartuchos inhaladores de dosis medidas que contienen 1,1,1,2-tetrafluoroetano presurizado en una cantidad suficiente para proporcionar aproximadamente 10 pg a aproximadamente 500 pg del compuesto de la invencion por dosis cuando se administra por el inhalador. Alternativamente, un compuesto de la invencion (25 mg) se disuelve en solucion salina isotonica tamponada con citrato (pH 5) (125 mL). La mezcla se agita y se somete a sonicacion hasta que el compuesto se disuelve. El pH de la solucion se verifica y se ajusta, si es necesario, a pH 5 agregando lentamente NaOH 1 N acuoso. La solucion se administra utilizando un dispositivo nebulizador que proporciona aproximadamente 10 pg a aproximadamente 500 pg del compuesto de la invencion por dosis.
Ejemplos
Se proporcionan las siguientes preparaciones y ejemplos para ilustrar realizaciónes espedficas de la invencion. Estas realizaciónes espedficas, sin embargo, no pretenden limitar el alcance de la invencion de ninguna manera a menos que se indique espedficamente.
Las siguientes abreviaturas tienen los siguientes significados, a menos que se indique lo contrario y cualquier otra abreviatura utilizada en este documento y no definida tiene su significado estandar, generalmente aceptado:
AcOH acido acetico
BOC f-butoxicarbonil (-C(O)OC(CH3)3)
DCM diclorometano o cloruro de metileno
DIPEA W,W-diisopropiletilamina
DMA W,W-dimetilacetamida
DMF W,W-dimetilformamida
EDC 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
Et3N trietilamina
Et2O dietil eter
EtOAc acetato de etilo
EtOH etanol
Et3SiH trietilsilano
HATU Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronio
HCTU (2-(6-cloro-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilamonio hexafluorofosfato)
HEPES Acido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfonico
HOBt 1-hidroxibenzotriazol
MeCN acetonitrilo
MeOH metanol
MeTHF 2-metiltetrahidrofurano
Pd(dppf)2Cl2 Cloruro de 1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno paladio
Pd(PPh3)4 tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0)
PE eter de petroleo
PMB p-metoxibencilo
PyBOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1 -iloxitris(pirrolidino)fosfonio
SilicaCat®DPP-Pd catalizador de difenilfosfina paladio (II) a base de sflice
TFA Acido trifluoroacetico
THF tetrahidrofurano
A menos que se indique lo contrario, todos los materiales, tales como reactivos, materiales de partida y disolventes, se compraron a proveedores comerciales (como Sigma-Aldrich, Fluka Riedel-de Haen y similares) y se usaron sin purificacion adicional.
Las reacciones se llevaron a cabo en atmosfera de nitrogeno, a menos que se indique lo contrario. El progreso de las reacciones se controlo mediante cromatograffa en capa fina (TLC), cromatograffa ftquida analftica de alto rendimiento (HPLC analftica) y espectrometna de masas, cuyos detalles se proporcionan en ejemplos espedficos. Los disolventes utilizados en la HPLC analftica fueron los siguientes: el disolvente A fue 98% de H2O/2% de MeCN/1.0 mL/L de TFA; el disolvente B fue 90% de MeCN/10% de H2O /I .0 mL/L de TFA.
Las reacciones se elaboraron como se describe espedficamente en cada preparacion, por ejemplo; comunmente, las mezclas de reaccion se purificaron por extraccion y otros metodos de purificacion, como la cristalizacion dependiente de la temperatura y el disolvente, y la precipitacion. Ademas, las mezclas de reaccion se purificaron rutinariamente mediante HPLC preparativa, ffpicamente utilizando las empaquetaduras de columna Microsorb C18 y Microsorb BDS y los eluyentes convencionales. El progreso de las reacciones se midio ffpicamente mediante cromatograffa ftquida de espectrometna de masas (LCMS). La caracterizacion de los isomeros se realizo mediante espectroscopfa de efecto Nuclear Overhauser (NOE). La caracterizacion de los productos de reaccion se llevo a cabo rutinariamente por espectrometna de masas y 1H-RMN. Para la medicion de RMN, las muestras se disolvieron en disolvente deuterado (CD3OD, CDCl3 o DMSO-d6), y los espectros de 1H-RMN se adquirieron con un instrumento Varian Gemini 2000 (400 MHz) en condiciones de observacion estandar. La identificacion espectrometrica de masas de los compuestos se llevo a cabo ffpicamente utilizando un metodo de ionizacion por electroaspersion (ESMS) con un instrumento modelo Applied Biosystems (Foster City, CA) API 150 EX o un instrumento Agilent (Palo Alto, CA) modelo 1200 LC/MSD. Preparacion 1 : Acido (R)-3-[N-(4-bromobencil)-N'-t-butoxicarbonilhidracino]-2-hidroxipropionico metil ester
Figure imgf000040_0001
Se disolvieron bromuro de 4-bromobencilo (5.0 g, 20 mmol) y DIPEA (3.5 mL, 20.0 mmol) en DMF (20 mL). Se anadio carbazato de t-butilo (7.9 g, 60.0 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente hasta que se completo la reaccion. La mezcla se concentro parcialmente, luego el residuo se sometio a particion entre EtOAc y una solucion acuosa saturada de NaHCO3. La capa de EtOAc se seco luego sobre Na2SO4 y se concentro. El producto crudo se purifico por cromatograffa instantanea para producir el Compuesto 1 (3.8 g).
Figure imgf000040_0002
El compuesto 1 (1.9 g, 6.3 mmol) se disolvio en alcohol isopropflico (26.4 mL). Se anadio (2R)-glicidato de metilo (1.1 mL, 12.6 mmol) y la mezcla se calento a 90°C hasta que se completo la reaccion (~4 dfas). La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se concentro para dar el compuesto del tttulo en forma de un solido blanco (2.5 g).
Preparacion 2: Ester t-butilico del acido N'-(4-bromobencil)hidrazinacarboxflico
Figure imgf000040_0003
A una solucion en agitacion de carbazato de t-butilo (50 g, 0.4 mol) en THF seco (400 mL) se anadio gota a gota una solucion de 4-bromobenzaldelddo (70 g, 0.4 mol) en THF seco (200 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentro al vado para producir el Compuesto 1 en forma de un solido amarillo (113.8 g). LC-MS: 243 [M-tBu+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (113.8 g, 0.4 mol) en THF seco (1 L) se anadio NaCNBH3 (36 g, 0.6 mol) en porciones a 0°C. Se anadio gota a gota AcOH (180 mL) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. Se anadieron agua (2 L) y EtOAc (1.5 L) y la fase acuosa se ajusto a pH=7 con una solucion acuosa saturada de Na2CO3. La capa organica se separo, se lavo con NaCl acuoso saturado y agua (200 mL), se seco sobre Na2SO4 anhidro y se concentro al vado. El residuo se trato con MeOH (2 L) y NaOH 1N (1.5 L) y luego se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Despues de la eliminacion del disolvente MeOH, el precipitado se recogio por filtracion para producir el compuesto del tttulo en forma de un solido blanco (112 g). LC-MS: 245 [M-tBu+H]+.
Preparacion 3: Acido (R)-3-[N'-t-Butoxicarbonil-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico metil ester
Figure imgf000041_0001
A una solucion de acido N'-(4-bromobencil)hidrazinacarboxflico t-butil ester (60 g, 0.2 mol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) se anadio acido 5-cloro-2-fluorofenilboronico (38 g, 0.2 mol) y Pd(dppf)Cl2 (7.3 g). La mezcla se agito a temperatura ambiente bajo nitrogeno durante 10 minutos, y luego se anadio K2CO3 (55.2 g, 0.4 mol) en agua (240 mL). La mezcla resultante se agito a 60°C durante 3 horas, y luego se enfrio a temperatura ambiente y se concentro al vado. El residuo se extrajo con EtOAc (3x300 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El producto se purifico por cromatograffa en columna (hexanos/EtOAc=10:1~5:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un solido de color rosa (56 g). LC-MS: 701 [2M+H]+.
Figure imgf000041_0002
A una solucion del Compuesto 1 (20 g, 57 mmol) en alcohol isopropflico (250 mL) se anadio glicidato de metilo (2R) (8.7 g, 86 mmol) bajo nitrogeno. La mezcla se agito a 85°C durante 3 dfas, luego se enfrio a temperatura ambiente. El solido precipitado se recogio por filtracion para dar el compuesto del tftulo en forma de un solido blanquecino (18.5 g). LC-MS: 397 [M-tBu+H]+.
Preparacion 4: Ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000041_0003
Ester metflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobendl)-N'-t-butoxicarbonilhidracino]-2-hidroxipropionico (1.0 g, 2.5 mmol), acido 5-cloro-2-fluorofenilboronico (865 mg, 5.0 mmol), y K2CO3 (857 mg, 6.2 mmol), se combinaron en EtOH (30 mL, 500 mmol) y agua (8 mL, 400 mmol), seguido de la adicion de SilicaCat®DPP-Pd (carga de 0.28 mmol/g; 886 mg, 248 |jmol). La mezcla se calento a 90°C hasta que se completo la reaccion (2 horas). El precipitado se separo por filtracion y el filtrado se concentro y se purifico por cromatograffa en fase reversa (MeCN al 30-95% en agua con TFA al 0.5%). Las fracciones limpias se recogieron, se liofilizaron y se combinaron con HCl 4 M en dioxano (8 mL, 30 mmol) y EtOH (10 mL, 200 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente hasta que se completo la reaccion (7 horas). La mezcla se concentro para producir un aceite, que se agito en eter con algunas gotas de EtOH durante la noche. El precipitado se separo por filtracion y se enjuago con eter para dar el compuesto del tftulo (140 mg).
Preparacion alternativa de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etil ester
Figure imgf000042_0001
Una solucion de ester metflico del acido (R)-3-[N'-t-butoxicarbonil-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20 g, 16 mmol) en HCl/EtOH (1.1 M, 200 mL) se agito durante la noche y luego se concentro al vado. El residuo se disperso en EtOAc (2x40 mL) y el precipitado se recogio por filtracion para dar el compuesto del tftulo en forma de una sal de HCl solida blanquecina (8.8 g). LC-MS: 367 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) 81.05 (t, J = 7.2 Hz, 3 H), 3.05-3.03 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 4.06-3.95 (m, 4 H), 4.42 (br, 1 H), 6.46 (br, 1 H), 7.62-7.40 (m, 7 H), 9.42 (s, 3 H).
Preparacion 5: Acido 1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carboxflico
Figure imgf000042_0002
Una mezcla de ester etflico del acido 1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-3-carboxflico (200.0 mg, 747 pmol), LiOH (71.6 mg, 1.5 mmol) en agua (2 mL) y MeOH (10.0 mL, 247 mmol) se agito a temperatura ambiente durante la noche y luego se concentro. El residuo se acidifico con HCl 1N a pH 3-4, formando un precipitado, que se filtro, se lavo con agua (2x5 mL) y se seco al vacfo para producir el compuesto del tftulo (100.6 mg).
Preparacion 6: Ester etflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobencil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000042_0003
Una solucion de ester metflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobencil)-N'-t-butoxicarbonilhidracino]-2-hidroxipropionico (25 g, 62 mmol) en EtOH/HCl (1M, 310 mL, 0.3 mol) se agito durante la noche hasta que se completo la reaccion. La mezcla se concentro y el residuo se lavo con EtOAc (120 mL) y se filtro. Los solidos se recogieron para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de HCl solida blanca (15 g).
Preparacion 7: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3] dioxol-4 ilmetil ester
Figure imgf000043_0001
Se anadio hidrato de LiOH (3 g, 73 mmol) en agua (60 mL) a ester medico del acido (R)-3-[N'-t-butoxicarbonil-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (16.5 g, 36.5 mmol) en MeOH (300 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, y el MeOH se evaporo al vado. La mezcla se ajusto a pH=5 con HCl acuoso 1 M, y el residuo se extrajo con EtOAc (2x300 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado para producir el Compuesto 1 en forma de un solido blanco (18 g). LC-MS: 383 [M-tBu+H]+.
Figure imgf000043_0002
A una solucion del Compuesto 1 (1.5 g, 3.42 mmol), K2CO3 (0.95 g, 6.84 mmol) y yoduro de potasio (20 mg) en DMF (40 mL) se agrego 4-(bromometil)-5-metil-1,3-dioxol-2-ona (0.8 g, 4.1 mmol) en DMF (15 mL). La mezcla resultante se agito durante 4 horas a temperatura ambiente. Se anadio NaCl acuoso saturado (30 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (2x50 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (hexanos/EtOAc = 1:1) para producir el Compuesto 2 en forma de un solido amarillo (930 mg). LC-MS: 495 [M-tBu+H]+.
Figure imgf000043_0003
El compuesto 2 (400 mg, 0.73 mmol) se disolvio en MeCN (20 mL) y se enfrio a 0°C. Se anadio gota a gota N-trimetilsililimidazol (290 mg, 1.46 mmol) y la mezcla resultante se agito durante 2 horas. Se anadio MeOH (50 mL) para apagar la reaccion. La mezcla se lavo con NaCl acuoso saturado (2x50 mL) y se extrajo con DCM (2x80 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El producto se recogio para dar el compuesto del tftulo en forma de un solido amarillo (200 mg). LC-MS: 451 [M+H]+.
Preparacion 8: Acido 5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carboxflico
Figure imgf000044_0001
2,5-dihidro-5-oxo-1-fenil-1h-1,2,4-triazol-3-carboxilato de metilo (300.0 mg, 1.4 mmol) se mezclo con MeOH (4.5 mL, 110 mmol) y agua (0.5 mL, 30 mmol) a temperatura ambiente, luego fue tratado con LiOH monohidrato (0.1 g, 2.7 mmol) a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo resultante se acidifico a pH ~1 con HCl acuoso 1N. Los solidos resultantes se filtraron y se enjuagaron con agua, luego se secaron al vado para dar el compuesto del tftulo como un solido amarillento (185 mg), que se uso sin purificacion adicional.
Preparacion 9: Sal de litio de 2-tritil-2H-tetrazol-5-carboxilato
Figure imgf000044_0002
La sal sodica de etil-5-tetrazolcarboxilato (2.3 g, 14 mmol) se disolvio en DMF (20 mL, 200 mmol). La mezcla se enfrio a 0°C. Se anadio cloruro de trifenilmetilo (3.9 g, 14.1 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche, produciendo una suspension. La suspension se vertio lentamente en agua agitada fna (200 mL). La suspension resultante se agito durante 15 minutos (se anadio bicarbonato para mantener el pH basico), luego se filtro y se seco para producir un solido blanco (5.1 g). El solido se suspendio en MeOH (50 mL, 1.0 mol), seguido de la adicion de monohidrato de LiOH (886 mg, 21.1 mmol) disuelto en agua (10 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. Los solidos se separaron por filtracion y el filtrado se concentro por evaporacion rotatoria. Se anadio EtOAc (50 mL) y la mezcla se seco. Esto se repitio dos veces mas. El producto se seco luego a alto vado a temperatura ambiente para producir el compuesto del tftulo.
Preparacion 10: Acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-tritil-2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000044_0003
La sal de litio de 2-tritil-2H-tetrazol-5-carboxilato (385.2 mg, 1.1 mmol) y HATU (404.3 mg, 1.1 mmol) en DMF (5.9 mL, 76 mmol) se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se anadio ester eftlico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (300 mg, 818 pmol) seguido de DIPEA (285 pL, 1.6 mmol). La mezcla resultante se agito a temperature ambiente durante la noche. La mezcla se sometio a particion entre EtOAc (10.0 mL) y agua (2.0 mL). La capa organica se lavo con agua (2.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para dar un aceite amarillento. El residuo oleoso se purifico luego por cromatograffa instantanea (EtOAc al 0-50%/hexanos). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron para dar un aceite ligeramente amarillento (combinado con otros lotes para un total de 147.2 mg). Este residuo se disolvio en MeOH (5.0 mL, 120 mmol) y agua (0.5 mL, 30 mmol) a temperatura ambiente. Se anadio monohidrato de LiOH (17.5 mg, 417 pmol) y se dejo reposar durante 30 minutos. La mezcla se concentro y el residuo resultante se trato con EtOAc (10.0 mL) y se acidifico con HCl 1N hasta pH ~3. La capa organica se lavo con NaCl acuoso saturado (3x3.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para producir el compuesto del tttulo en forma de una espuma blanca (99.4 mg).
Preparacion 11: 1-Alil-1H-tetrazol-5-carboxilato de litio
Figure imgf000045_0001
A una solucion en agitacion de ester etflico del acido 1H-tetrazol-5-carboxflico (2.0 g, 14.1 mmol) en DMF (20 mL) se agrego K2CO3 (2.3 g, 16.9 mmol) y 3-bromoprop-1-eno (1.9 g, 15.4 mmol) a 0°C. La mezcla se calento a temperatura ambiente, se agito durante la noche y luego se vertio en agua (200 mL). La solucion resultante se extrajo con EtOAc (3x100 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado para producir el Compuesto 1 en forma de un aceite amarillo (2.3 g). LC-MS: 183 [M+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (2.3 g, 12.6 mmol) en EtOH (20 mL) se anadio una solucion de L iO H ^ O (636 mg, 15.2 mmol) en agua (10 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 horas, los solidos se separaron por filtracion y el filtrado se concentro al vado para producir el compuesto del tttulo en forma de un solido amarillo (2.0 g), que se uso sin mas purificacion.
Preparacion 12: Ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000045_0002
A una solucion en agitacion de carbazato de t-butilo (50 g, 0.4 mol) en THF seco (400 mL) se anadio gota a gota una solucion de 4-bromobenzaldehndo (70 g, 0.4 mol) en THF seco (200 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentro al vado para producir el Compuesto 1 en forma de un solido amarillo (113.8 g). LC-MS: 243 [M-tBu+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (113.8 g, 0.4 mol) en THF seco (1 L) se anadio NaCNBH3 (36 g, 0.6 mol) en porciones a 0°C. Se anadio gota a gota AcOH (180 mL) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. Se anadieron agua (2 L) y EtOAc (1.5 L) y la fase acuosa se ajusto a pH 7 con una solucion acuosa saturada de Na2CO3. La capa organica se separo, se lavo con NaCl acuoso saturado y agua (200 mL), se seco sobre Na2SO4 anhidro y se concentro al vado. El residuo se trato con MeOH (2 L) y NaOH 1N (1.5 L) y luego se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Despues de la eliminacion del disolvente MeOH, el precipitado se recogio por filtracion para proporcionar el Compuesto 2 en forma de un solido blanco (112 g). LC-MS: 245 [M-tBu+H]+.
Figure imgf000046_0001
A una solucion del Compuesto 2 (60 g, 0.2 mol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) se anadio acido 5-cloro-2-fluorofenilboronico (38 g, 0.2 mol) y Pd(dppf)Cl2 (7.3 g). La mezcla se agito a temperature ambiente bajo nitrogeno durante 10 minutos, y se anadio K2CO3 (55.2 g, 0.4 mol) en agua (240 mL). La mezcla resultante se agito a 60°C durante 3 horas, luego se enfrio a temperatura ambiente y se concentro al vado. El residuo se extrajo con EtOAc (3x300 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El producto se purifico por cromatograffa en columna (PE:EtOAc=10:1~5:1) para dar el Compuesto 3 en forma de un solido rosa (56 g). LC-MS: 701 [2M+H]+.
Figure imgf000046_0002
A una solucion del Compuesto 3 (20 g, 57 mmol) en alcohol isopropflico (250 mL) se anadio glicidato de metilo (2R) (8.7 g, 86 mmol) bajo nitrogeno. La mezcla se agito a 85°C durante 3 dfas, luego se enfrio a temperatura ambiente. El solido precipitado se recogio por filtracion para dar el Compuesto 4 en forma de un solido blanquecino (18.5 g). LC-MS: 397 [M-tBu+H]+.
Una solucion de Compuesto 4 (20 g, 16 mmol) en HCl/EtOH (1.1 M, 200 mL) se agito durante la noche y luego se concentro al vado. El residuo se disperso en EtOAc (2x40 mL) y el precipitado se recogio por filtracion para dar el compuesto del tftulo en forma de una sal de HCl solida blanquecina (8.8 g). LC-MS: 367 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) 81.05 (t, J = 7.2 Hz, 3 H), 3.05-3.03 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 4.06-3.95 (m, 4 H), 4.42 (br, 1 H), 6.46 (br, 1 H), 7.62-7.40 (m, 7 H), 9.42 (s, 3 H).
Preparacion 13: (R)-3-(2-(1-alil-1H-tetrazol-5-carbonil)-1-((5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)metil)hidrazinil)-2-hidroxipropanoato de litio
Figure imgf000046_0003
A una solucion de ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (3.4 g, 8.3 mmol) y 1-alilo-1H-tetrazol-5-carboxilato de litio (2.0 g, 12.50 mmol) en DMF (40 mL) se anadieron PyBOP (8.7 g, 16.7 mmol) y DIPEA (2.1 g, 16.7 mmol) gota a gota a 0°C bajo nitrogeno. La mezcla resultante se agito durante 2.5 horas y luego se vertio en agua (400 mL). La solucion resultante se extrajo con EtOAc (2x200 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE:EtOAc = 5:1 —4:1 ~3:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un aceite amarillo (2.5 g). LC-MS: 503 [M+H]+.
Figure imgf000047_0001
A una solucion del Compuesto 1 (2.5 g, 4.97 mmol) en EtOH (25 mL) se agrego una solucion de L iO H ^ O (250 mg, 6.0 mmol) en agua (10 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 horas, los solidos se separaron por filtracion y el filtrado se concentro al vado para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido amarillo (2.2 g), que se uso sin mas purificacion.
Preparacion 14: Acido (R)-3-{N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(4-metoxibenciloxi)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico isopropil ester
Figure imgf000047_0002
Ester t-butilico del acido N'-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)hidrazinacarboxflico (400.0 g, 1.2 mol) se combino con IPA (7.0 L, 91 mol) y ester medico del acido (R)-oxirano-2-carboxflico (105.2 mL, 1.2 mol) bajo nitrogeno. La mezcla se calento a 83°C durante 51 horas. Se anadio ester medico del acido (R)-oxirano-2-carboxflico adicional (52.61 mL, 600.9 mmol) y la mezcla se calento a 84°C durante 48 horas. Se anadio cianoborohidruro de sodio (1.0 g, 16 mmol) y la mezcla se calento a 80°C y la reaccion se controlo (aproximadamente 48 horas). Se anadio cianoborohidruro de sodio adicional (1 g) y la mezcla se calento a reflujo (“ 3 dfas). La mezcla se enfrio luego lentamente a 15°C; se filtro y se seco para dar el Compuesto 1 (470 g).
Figure imgf000047_0003
El compuesto 1 (880 mg, 1.9 mmol) se combino con HCl 3 M en CPME (7 mL, 20 mmol). A continuacion, la mezcla se agito en un bano de hielo y la reaccion se controlo para completarla (aproximadamente 2.5 horas). Los solidos se recogieron, se lavaron con CPME (0.5 mL) y se secaron para producir un polvo blanco (0.6 g; sal de HCl). El polvo se disolvio luego en IPA (15 mL) y se calento a reflujo. La suspension resultante se dejo enfriar a temperatura ambiente y se agito durante 1 hora. Los solidos se recogieron para dar el Compuesto 2 como un solido blanco.
Figure imgf000048_0001
A una solucion en agitacion de 3-hidroxiisoxazol-5-carboxilato de metilo (5.0 g, 35 mmol) en DMF (20 mL, 300 mmol) a 0°C se anadio K2CO3 (5.4 g, 39.4 mmol). Despues de 10 minutos a temperatura ambiente, se anadio cloruro de pmetoxibencilo (5.5 mL, 40.2 mmol) en una porcion. La mezcla resultante se calento a 60°C durante 2 horas y luego se enfrio a temperatura ambiente y se agito durante la noche. Se anadieron HCl 1.0 M en agua (150 mL) y EtOAc (150 mL) y se separaron las fases. La capa organica se lavo con NaCl acuoso saturado (10 mL), se seco sobre Na2SO4 y el disolvente se elimino mediante evaporacion rotatoria para producir un aceite espeso. El aceite se disolvio en THF (35 mL) y MeOH (35 mL), seguido de la adicion de monohidrato de LiOH (2.9 g, 69.9 mmol) disuelto en agua (35 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente y la reaccion se controlo para completar (aproximadamente 3 horas). El disolvente se elimino mediante evaporacion rotatoria a 30°C para producir un solido pastoso. Se anadio tolueno (100 mL) y el volumen se redujo (a ~50 mL). Se anadio EtOAc (200 mL) y el volumen se redujo (hasta ~50 mL). La filtracion y el secado produjeron un solido (10 g), que se disolvio en agua (200 mL), y el pH se ajusto lentamente con HCl concentrado a “ 2. Se anadio EtOAc (200 mL) y las fases se separaron. La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (200 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, seguido de la eliminacion del disolvente. El producto se volvio a suspender en EtOAc:hexanos (1:1) seguido de filtracion para dar el Compuesto 3 (pureza >99%).
Figure imgf000048_0002
El Compuesto 2 (18.0 g, 26.8 mmol) en DMF (90 mL) se combino con el Compuesto 3 (7.3 g, 29 mmol) en DIPEA (12 mL, 67 mmol). La mezcla se enfrio a 0°C seguido de la adicion en porciones de PyBOP (18 g, 35 mmol) y la reaccion se controlo para completar (“ 30 minutos a 0°C). Se anadieron agua (540 mL) y EtOAc (540 mL) y se separaron las fases. La capa organica se lavo con NaCl acuoso saturado (500 mL) y se seco sobre Na2SO4, seguido de la eliminacion del disolvente. El producto crudo se purifico (cromatograffa SiG; 300 g de columna, 10-30-50% de EtOAc/hexanos) para producir el compuesto del tttulo (9 g, pureza >98%).
Preparacion 15: Acido (R)-3-[N-(3-Clorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-feniletil ester
Figure imgf000048_0003
Acido (R)-3-{N-(3-Clorobifenil-4-ilmetil)-N-[3-(4-metoxibenciloxi)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico isopropil ester (2.0 g, 3.4 mmol) se combino con MeOH (40 mL, 1.0 mol). Se anadio monohidrato de LiOH (170 mg, 4.0 mmol) disuelto en agua (5 mL, 300 mmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria. El residuo se mezclo con MeOH y se concentro de nuevo por evaporacion rotatoria. El residuo se seco luego a alto vado a temperatura ambiente para producir el Compuesto 1 crudo (2 g).
Figure imgf000049_0001
Se anadio 2-bromoacetofenona (44.6 mg, 224 jm ol) a una mezcla del Compuesto 1 (100.0 mg, 179.2 jm ol) y K2CO3 (49.5 mg, 358.5 jm ol) en DMF (2.0 mL, 26 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos, se concentro y se purifico por cromatograffa instantanea (EtOAc-hexanos=20-80%) para producir un solido (107.7 mg). El solido se combino con TFA (82.86 j L, 1.075 mmol) y anisol (194.8 j L, 1.8 mmol) en DCM (5.0 mL, 78 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tttulo (79.4 mg).
Preparacion 16: Ester clorometilico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutmco
Figure imgf000049_0002
A una mezcla de acido (S)-2-(t-butoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (28.6 g, 130 mmol) y NaHCO3 (44 g, 520 mmol) y Bu4NHSO4 (4.4 g, 13 mmol) en DCM (200 mL) y agua (200 mL) se anadio clorometil sulfocloridato (26 g, 158 mmol) a 0°C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 24 horas y luego se extrajo con DCM (3x150 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (2x300 mL) y la capa de DCM se purifico por columna instantanea (PE:EtOAc= 15:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido amarillo (35 g). LC-MS: 266 [M+H]+.
Preparacion 17: Ester clorometflico del acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco
Figure imgf000049_0003
Se anadio gota a gota una solucion de ester clorometflico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutmco (35 g, 132 mmol) en DCM (200 mL) una solucion de TFA (50 mL) en DCM (100 mL) a 0°C. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche y luego se concentro al vado para producir el Compuesto 1 crudo en forma de un aceite amarillo (21.8 g). LC-MS: 166 [M+H]+.
Figure imgf000049_0004
A una mezcla de Compuesto 1 (21.8 g, 139 mmol) y cloroformiato de metilo (12 mL, 157 mmol) en THF (1 L) se anadio TEA (38 mL, 278 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 12 horas, luego se concentro al vado. El residuo se purifico por columna instantanea (PE:EtOAc = 6:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido amarillo (20.3 g). LC-MS: 224 [M+H]+. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): 80.97-1.02 (m, 6H), 2.16-2.21 (m, 1H), 3.68 (s, 1H), 4.14 (d, J = 4Hz, 1H), 5.76-5.91 (m, 2H).
Preparacion 18 Acido: (R)-3-[N-(4-Bromobenal)hidrazinol]-2-hidroxipropionico metil ester
Figure imgf000050_0001
Ester metflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobencN)-N-t-butoxicarbomlhidracino]-2-hidroxipropi6mco (1.1 g, 2.8 mmol) se disolvio en MeCN (10 mL) y Hcl 4N en dioxano (6 mL, 20 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente hasta que se completo la desproteccion (1 hora). El precipitado se filtro y se seco para producir el compuesto del tftulo (840 mg) en forma de una sal HCl.
Preparacion 19: Acido 1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico
Figure imgf000050_0002
A una solucion de ester eftlico del acido 1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbox^lico (5 g, 31.8 mmol) en DMF (20 mL) se anadio K2CO3 (5.3 g, 38.2 mmol) a temperatura ambiente. Despues de 10 minutos, se anadio bromuro de alilo (4 g, 33.4 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante la noche. Se anadio agua (150 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x50 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (50 mL) y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La solucion se evaporo y el residuo se purifico por cromatografta en gel de sflice (gel de sflice: malla 200-300, se eluyo con PE:EA = 10:1 a 5:1 a 1:1) para dar el Compuesto 1 como un aceite amarillo (4.3 g). LC-MS: 198 [M+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (4.3 g, 22.0 mmol) en EtOH (30 mL) se anadio una solucion de LiOH (1.2 g, 28.5 mmol) en agua (10 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro, se anadio agua (10 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (2x20 mL). La capa acuosa se acidifico mediante HCl 1N hasta pH 3 y se extrajo con EtOAc (3x30 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (30 mL) y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La solucion se evaporo para dar el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (3.5 g). LC-MS: 170 [M+H]+.
Preparacion 20: Acido (R)-3-[N'-(1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)-N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000050_0003
A una solucion de ester etflico del acido (R)-3-[N-(2',5'-didorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (sal de HCl, 4 g, 9.9 mmol) y 1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico acido (1.7 g, 9.9 mmol) en DMF (30 mL) se anadio PyBOP (5.2 g, 9.9 mmol) y DIPEA (3.2 g, 24.8 ml) a 0°C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas. Se anadio agua (200 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x100 mL) y las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (100 mL) y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La mezcla se concentro y el residuo se purifico por cromatograffa en gel de sflice (gel de s l^ice: malla 200-300; se eluyo con PE:EtOAc = 10:1 a 5:1 a 1:1) para dar el Compuesto 1 como un solido amarillo claro (4.2 g). LC-MS: 534 [M+H]+, 536 [(M+2)+H]+.
Figure imgf000051_0001
A una solucion del Compuesto 1 (4.2 g, 7.9 mmol) en THF (20 mL) y agua (5 mL) se anadio LiOH (0.5 g, 11.8 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro, se anadio agua (50 mL) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2x20 mL). La capa acuosa se acidifico mediante HCl 1N hasta pH 3 y se extrajo con EtOAc (3x50 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (50 mL) y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La solucion se evaporo para dar el compuesto del tftulo en forma de un solido amarillo (3.5 g). LC-MS: 506 [M+H]+, 508 [(M+2)+H]+.
Ejemplo 1A: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico
Figure imgf000051_0002
El acido 1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carboxflico (75.8 mg, 316 pmol) y HCTU (131 mg, 316 pmol) fueron combinados en DMF (1.3 mL, 17.2 mmol) y se agita a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se anadieron ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (105 mg, 287 pmol) y DIPEA (150 pL, 862 pmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla se evaporo a presion reducida. El residuo se disolvio en EtOH (1.0 mL, 17.2 mmol) y se anadio una solucion de LiOH 1 M en agua (1.4 mL, 1.4 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se evaporo a presion reducida. El residuo se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (75 mg, pureza del 100%) como una sal de TFA. m S m/z [M+H]+ calculado para C25H20Cl2FN5O5, 560.08; encontrado 559.6.
Ejemplo 1B y 1C: Ester etflico del acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (Compuesto 1) e isobutil ester del acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenilo-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (Compuesto 2)
Figure imgf000052_0001
El acido 1-(3-clorofeml)-5-oxo-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carboxflico (27.6 mg, 115 jm ol) y HATU (52.5 mg, 138 |jmol) fueron agitados en DMA (1.0 mL, 11 mmol) durante 10 minutos. Se anadio ester etilico del acido (R)-3-[N-(5'-doro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (42.2 mg, 115 jm ol) y DIPEA (60.1 jL , 345 jmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se concentro a presion reducida y el residuo se disolvio en EtOAc (20 mL). La capa organica se lavo con agua (2x5 mL), se seco sobre MgSO4 y se concentro. La mitad del material se disolvio en acido acetico al 50% en agua (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el Compuesto 1 (1.3 mg, pureza del 96%) como una sal de TFA. MS m/z [m H]+ calculado para C27H24CbFN5O5, 588.11; encontrado 588.4.
La mitad restante del material se combino con alcohol isobutflico (0.5 mL, 6 mmol) y 4.0 M de HCl en 1,4-dioxano (115 jL , 460 jm ol) y se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro luego a presion reducida y el residuo se disolvio en acido acetico al 50% en agua (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el Compuesto 2 (1.8 mg, pureza del 100%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C29H28Cl2FN5O5, 616.15; encontrado 616.4.
Ejemplo 1D: Acido (S)-2-amino-3-metilbutrnco (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-clorofenilo)-5-hidroxi-1 H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000052_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo.
Ejemplo 1E: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(3-dorofenil)-5-hidroxi-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil] hidrazino}-2-hidroxipropi6nico acetoximetil ester
Figure imgf000053_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 1F: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco 5-(N)-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4 ilmetil)hidrazinocarbonil]-2-(3-clorofenil)-2H-[1,2,4]triazol-3-iloximetil ester
Figure imgf000053_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 1G: Acido (R)-3-[N'-[5-Acetometoxi-1-(3-clorofenil)-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil]-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000053_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo.
Ejemplo 2A: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-hidroxitiazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000054_0001
Se agitaron acido 2-hidroxi-5-tiazolcarboxflico (43.5 mg, 0.3 mmol) y HCTU (124 mg, 0.3 mmol) en DMF (1.3 mL, 16.4 mmol) durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se anadieron ester etilico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (100 mg, 0.3 mmol) y DIPEA (142 pl, 818 pmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se evaporo luego a presion reducida. El residuo se disolvio en EtOH (955 pl, 16.4 mmol). Se anadio una solucion de LiOH 1.0 M en agua (1.4 mL, 1.4 mmol) y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 3 horas. La LC/MS mostro la finalizacion. El disolvente se elimino al vado y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (22 mg) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C20H17CFN 3O5S, 466.06; encontrado 466.0.
Ejemplo 2B: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-hidroxitiazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etil ester
Figure imgf000054_0002
Se agitaron acido 2-hidroxi-5-tiazolcarboxflico (9.0 mg, 62 pmol) y HATU (28.3 mg, 74 pmol) en DMA (0.5 mL, 5 mmol) durante 10 minutos. Se anadio ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (22.7 mg, 62 pmol) y DIPEA (32.4 pL, 186 pmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se concentro luego a presion reducida y el residuo se disolvio en AcOH al 50% en agua (1.5 mL), se filtro, se purifico por HPLC preparativa en fase reversa y se liofilizo para producir el compuesto del tftulo (11.9 mg, pureza del 96%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H21CFN 3O5S, 494.09; encontrado 494.4.
E je m p lo 3A : A c id o (R ) -3 - {N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- [3 - (2 - f lu o ro fe n il) is o x a z o l-5 -c a rb o n il]h id ra z in o } -2 -h id ro x ip ro p io n ic o
Figure imgf000055_0001
Se combinaron el ester etflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobencil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (580 mg, 1.8 mmol), HCTU (756 mg, 1.8 mmol) y DMF (850 mL, 110 mmol). Despues de 15 minutos, se agregaron DIPEA (956 jL , 5.5 mmol) y acido 3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carboxflico (417 mg, 2.0 mmol). La mezcla resultante se agit6 a temperatura ambiente durante 15 minutos. El disolvente se elimin6 a presi6n y el residuo crudo se purific6 (cromatograffa en fase reversa) para producir el Compuesto 1 (5695 mg).
Figure imgf000055_0002
Compuesto 1 (700 mg, 1 mmol) y acido 5-cloro-2-fluorofenilbor6nico (273 mg, 1.6 mmol) se combinaron con K2CO3 (541 mg, 3.9 mmol), EtOH (4.6 mL, 78.3 mmol), tolueno (13.9 mL, 130 mmol) y agua (1.2 mL, 65.2 mmol). Luego se anadi6 Pd(PPh3)4 (151 mg, 130 jm ol) bajo nitr6geno, y la mezcla se agit6 a 90°C durante 3 horas. La mezcla se filtr6 y se evapor6 y se purific6 por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (40 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H19CFN 3O6 , 464.09; encontrado 464.0.
Ejemplo 3B: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropi6nico isobutil ester
Figure imgf000055_0003
Se agitaron acido 3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carboxflico (15.4 mg, 74 jm ol) y HATU (33.9 mg, 89 jm ol) en DMA (0.5 ml, 5 mmol) durante 10 minutos. Se anadieron ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (27.3 mg, 74 jm ol) y DIPEA (38.9 jL , 223 jmol), y la mezcla resultante se agit6 a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentr6 luego a presi6n reducida y el residuo se disolvi6 en EtOAc (20 mL) y se lav6 con agua (2x2 mL). La capa organica se sec6 sobre MgSO4, se filtr6 y se concentr6. El producto se mezcl6 luego con alcohol isobutflico (0.5 mL, 5 mmol) y HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (93 jL , 372 jmol), y se agit6 a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentr6 a presi6n reducida y el residuo se disolvi6 en AcOH al 50% en agua (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (1.7 mg, pureza del 100%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C30H28C F 2N3O5 , 584.17; encontrado 584.4.
Ejemplo 3C: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico 5-Metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester
Figure imgf000056_0001
Se anadio EDCI (92 mg, 480 jm ol) y HOBT (65 mg, 480 jm ol) a una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester (108 mg, 240 jm ol) y acido 3-(2-fluorofenil) isoxazol-5-carbox^lico (50 mg, 240 jm ol) en DMF (20 mL). Se anadio DIPEA (62 mg, 480 jm ol) y la mezcla se agito durante 5 horas a temperatura ambiente. La mezcla se lavo con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) y se extrajo con EtOAc (2x50 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (hexanos/EtOAc = 1:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (58 mg). LC-MS: 640,2 [M+H]+. 1H-RMN: (CDC13) 2.07 (s, 3H), 3.43 (br, 2H), 4.4­ 4.2 (m, 2H), 4.3 (br, 1H), 4.94-4.86 (m, 2H), 7.24 -6.85 (m, 5 H), 7.97-7.27 (m, 8 H).
Ejemplo 3D: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico 2,2,3,3,3-pentafluoropropil ester
Figure imgf000056_0002
Una mezcla de acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (30.0 mg, 57 jmol), EDC HCl (65.4 mg, 341 jm ol) y el hidrato de HOBt (52.2 mg, 341 jm ol) en DCM (0.5 mL, 8 mmol) se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se anadio 2,2,3,3,3-pentafluoro-1-propanol (45.3 |j L, 455 jmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico mediante HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (4.8 mg, pureza 90.2%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C29H21C F 7N3O5 , 660.11; encontrado 660.3.
E je m p lo 3 E : A c id o (R ) -3 - {N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- [3 - (2 - f lu o ro fe n il) - is o x a z o l-5 -c a rb o n i l]h id ra z in o } -2 -h id ro x ip ro p io n ic o a c e to x im e t il e s te r
Figure imgf000057_0001
Se anadio acetato de bromometilo (11.9 j L, 121 jm ol) a una mezcla de acido (R)-3-{N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3- (2-fluorofenilo)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (40.0 mg, 76 jm ol) y Et3N (21.1 j L, 152 jm ol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparada en fase reversa. Las fracciones deseadas se congelaron y se liofilizaron para producir el compuesto del tftulo (8.5 mg, pureza 98.5%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C29H24C F 2N3O7 , 600.13; encontrado 600.1.
Ejemplo 3F: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico 2-metoxietil ester
Figure imgf000057_0002
Se anadio 1-bromo-2-metoxietano (5.7 j L, 0.1 mmol) a una mezcla de acido (R)-3-{N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'- [3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil] hidrazino}-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 38 jm ol) y Et3N (13.2 j L, 0.1 mmol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol) y la mezcla resultante se agito a 50°C durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (10.7 mg, pureza del 95.7%) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C29H26C F 2N3O6 , 586.15; encontrado 585.8.
E je m p lo 3 G : A c id o b u t f t ic o e s te r d e (R ) -3 - {N - (5 '- c lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- [3 - (2 - f lu o ro fe n il) is o x a z o l-5 -c a rb o n il]h id ra z in o } - 2 -h id ro x ip ro p io n ilo x im e t i lo
Figure imgf000058_0001
Butirato de clorometilo (11.4 j L, 0.1 mmol) y Nal (13.6 mg, 0.1 mmol) se combinaron en acetona (0.7 mL, 10 mmol) y se calentaron a 65°C durante 1 hora. La mezcla se enfrio luego a temperatura ambiente. Se anadio una mezcla de acido (R)-3-{N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazinol-2-hidroxipropionico (16.0 mg, 30 jm ol) disuelto en acetona (0.2 mL) y se trato con Et3N (8.5 j L, 61 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 25 minutos. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (2.0 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar un solido amarillento. Este solido se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tftulo (5.7 mg, pureza del 100%) en forma de un solido blanco sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C31H28C F 2N3O7 , 628.16; encontrado 628.
Ejemplo 3H: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico isopropoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000058_0002
Se combinaron isopropilcarbonato de clorometilo (17.3 mg, 114 jm ol) y Nal 17.0 mg, 114 jm ol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol) y se calentaron a 60°C durante 1 hora. La mezcla se enfrio luego a temperatura ambiente. Se anadio una mezcla de acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 38 jm ol) disuelto en acetona (1.0 mL) y se trato con Et3N (10.6 jl, 76 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (2.0 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. El producto se liofilizo y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (1.8 mg, pureza del 100%). MS m/z [M+H]+ calculado para C31H28C F 2N3O8 , 644.15; encontrado 644.1.
E je m p lo 3 I: A c id o (R ) -3 - {N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '[3 - (2 - f lu o ro fe n i l) is o x a z o l-5 -c a rb o n il]h id ra z in o } -2 -fo s fo n o o x ip ro p io n ic o
Figure imgf000059_0001
Se combino acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (12.0 mg, 22.7 jmol) en EtOH (80 jL , 1.4 mmol) con una solucion de HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (227 |jL, 909 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se elimino al vado y el residuo se disolvio en piridina (20 jl, 250 jmol). La solucion resultante se anadio a una solucion de cloruro de fosforilo (19 jL , 0.2 mmol) en acetona (67 jL , 0.9 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. El disolvente se elimino al vado y el residuo se disolvio en EtOH (80 jL , 1.4 mmol). Luego se anadio una solucion de LiOH 1.0 M en agua (1.4 mL, 1.4 mmol) hasta que el pH alcanzo ~12. La mezcla se agito durante 1 hora y el disolvente se elimino a vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tttulo (5 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C26H21C F 2N3O8P, 608.07; encontrado 608.0.
Ejemplo 3J: Acido (S)-2-Metoxicarbonilamino-3-metilbinlico (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenilo)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000059_0002
A una solucion de acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2 hidroxipropionico (200 mg, 380 jm ol) en DMF (10 mL) se anadio 2,6-lutidina (407 mg, 3.8 mmol), ester clorometilico del acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (170 mg, 760 jm ol) y Nal (114 mg, 760 jmol). La mezcla resultante se agito durante la noche a temperatura ambiente. La solucion se lavo con NaCl acuoso saturado (2x20 mL) y se extrajo con EtOAc (2x30 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE/EA = 4/1 ~ 1/2) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (90 mg). LC-MS: 714,8 [M+H]+. 1H-RMN (CDaOD-d4): 80.91 (d, J = 9.6 Hz, 6H), 2.05­ 2.13 (m, 1H), 3.39-3.45 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 4.06- 4.08 (m, 1 H), 4.23-4.25 (m, 2 H), 4.66-4.48 (m, 1 H), 5.79-5.86 (m, 2 H), 7.15-7.26 (m, 1 H), 7.24- 7.55 (m, 10 H), 7.97-7.95 (m, 1 H).
E je m p lo 3K : A c id o (R ) -3 - {N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- [3 - (2 - f lu o ro fe n il) is o x a z o l-5 -c a rb o n il]h id ra z in o } -2 -h id ro x ip ro p io n ic o e to x ic a rb o n ilo x im e t il e s te r
Figure imgf000060_0001
Se anadio 2,6-lutidina (407 mg, 3.8 mmol) a una solucion de acido (R)-3-{N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico (200 mg, 380 pmol), ester etflico del ester clorometilico del acido carbonico (105 mg, 760 pmol) y Nal (114 mg, 760 pmol) en DMF (10 mL). La mezcla se agito durante la noche a temperatura ambiente. Se anadio agua (30 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x40 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa (MeCN-H2O (TFA al 0.1%); Gradiente 60-70) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (56 mg). LC-MS: 630.1 [M+H]+. 1H-RMN: (CDaOD-d4, 400 MHz) 8 1.24 (t, J = 5.9Hz, 3H), 3.30-3.33 (m, 2H), 4.17-4.32 (m, 4H), 4.45 (t, J = 4.2 Hz, 1H), 5.78 (br, 2H), 7.20-7.28 (m, 1H), 7.57-7.29 (m, 10H), 7.92-7.95 (m, 1H).
Ejemplo 3L: Acido (R)-3-{N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico 1-Ciclohexiloxicarboniloxietil ester
Figure imgf000060_0002
A una solucion de ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (1.5 g, 3.7 mmol), EDC (928 mg, 4.8 mmol), HOBt (653 mg, 4.8 mmol) y acido 3-(2-fluorofenil)isoxazol-5-carboxflico (848 mg, 4.1 mmol) en DCM (20 mL) se agrego DIPEA (1.9 mL, 11.2 mmol) bajo nitrogeno. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentro a sequedad. El residuo se disolvio en EtOAc (20 mL), se lavo con HCl acuoso 0.5N (10 mL), NaHCO3 acuoso saturado (10 mL) y NaCl acuoso saturado (10 mL), se seco sobre Na2SO4 anhidro, se filtro y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE:EtOAc, 10:1-3:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un solido (1.4 g). LC-MS: 556 [M+H]+.
Figure imgf000061_0001
A una solucion del Compuesto 1 (1.4 g, 2.5 mmol) en MeOH (15 mL) se anadio una solucion de L iO H ^ O (317 mg, 7.6 mmol) en agua (3 mL). La mezcla se agito a temperature ambiente durante 1 hora, y el solido insoluble se separo por filtracion y el filtrado se concentro a vado para dar un solido amarillo (1.2 g). LC-MS: 528 [M+H]+. El solido amarillo (400 mg, 760 pmol) se disolvio en 2,6-lutidina (814 mg, 7.6 mmol) y se anadio acido 1 -cloroetil ester ciclohexil ester del acido carbonico (1.6 g, 7.6 mmol). El vial se sello y la mezcla resultante se irradio luego durante 30 minutos a 90°C con irradiacion de microondas. Se anadio agua (10 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x10 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con HCl acuoso 0.5N (5x5 mL) y NaCl acuoso saturado (10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El producto crudo se purifico por cromatografta en columna (PE:EtOAc, 10:1-2:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (60 mg). LC-MS: 698 [M+H]+.
1H RMN: (CDCla, 400MHz) 81.28-1.37 (m, 6H), 1.54 (d, 3H), 1.72-1.75 (m, 2H), 1.90-1.95 (m, 2H), 3.33-3.38 (m, 2H ), 4.24-4.30 (m, 2H), 4.38-4.40 (m, 1H), 4.61-4.66 (m, 1H), 6.60 (t, 0.5H), 6.80 (t, 0.5H), 7.00-7.10 (m , 1H), 7.20-7.26 (m, 3H) 7.36-7.41 (m, 2H), 7.48-7.52 (m, 5H), 7.85 (s, 0.5H), 8.00-8.04 (m, 1H), 8.15 (s , 0.5H).
Ejemplo 4A: Acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000061_0002
A una mezcla de acido 3-metoxi-isoxazol-5-carboxflico (140 mg, 1.0 mmol) y HATU (373 mg, 1.0 mmol) en DMF (5.0 mL, 64 mmol) se anadio ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-doro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (300.0 mg, 1.0 mmol) y DIPEA (0.3 mL, 1.6 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche hasta que se completo la reaccion. La mezcla se sometio a particion entre EtOAc (10.0 mL) y agua (3.0 mL). La capa organica se lavo con agua (2x3.0 mL), NaCl acuoso saturado (3.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para producir un aceite amarillento. El aceite se purifico por cromatografta instantanea (columna apiladora de 2x4 g, EtOAc al 0-100%/hexanos). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron para dar un aceite ligeramente amarillento. El residuo oleoso se trato luego con una mezcla de MeOH (5.0 mL, 120 mmol) y agua (1.0 mL, 56 mmol). Se anadio monohidrato de LiOH (68.6 mg, 1.6 mmol). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla se concentro. El residuo se trato con EtOAc (10.0 mL) y se acidifico con HCl 1N hasta pH -3. La capa organica se lavo con NaCl acuoso saturado (2x3.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para producir el compuesto del tftulo en forma de una espuma blanca (289.7 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H19CFN 3O6 , 464.09; encontrado 464.0.
E je m p lo 4 B : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '- c lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (3 -m e to x iis o x a z o l-5 -c a rb o n il)h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o 5 -m e t ilo -2 -o x o - [1 ,3 ]d io x o l-4 - i lm e t i l e s te r
Figure imgf000062_0001
Se anadio EDCI (169 mg, 880 pmol) y HOBT (119 mg, 880 pmol) a una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester (200 mg, 440 pmol) y acido 3-metoxiisoxazol-5-carbox^lico (63 mg, 440 pmol) en DMF (10 mL). Se anadio DIPEA (114 mg, 880 pmol) y la mezcla se agito durante 5 horas a temperatura ambiente. La mezcla se lavo con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) y se extrajo con EtOAc (2x50 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (hexanos/EtOAc=1:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (60 mg). LC-MS: 576.1 [M+H]+. 1H-RMN: (DMSO-d6) 2.14 (s, 3H), 3.21-3.19 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.17-4.11 (m, 2 H), 4.31 (br, 1 H), 4.98 (s, 2 H), 5.57 (br, 1 H), 6.73 (s, 1 H), 7.57-7.34 (m, 7 H), 10.07 (s, 1 H).
Ejemplo 4C: Acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2,2,3,3,3-pentafluoropropil ester
Figure imgf000062_0002
Acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxilsoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (20 mg, 43 pmol), EDC (40.16 mg, 0.2587 mmol) e hidrato de HOBt (39.62 mg, 0.2587 mmol) se combinaron en DCM (0.5 mL, 8 mmol) y se agitaron a temperatura ambiente. Despues de 10 minutos, se anadio 2,2,3,3,3-pentafluoro-1-propanol (51.8 mg, 345 pmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche para producir el compuesto del tftulo (5.9 mg, pureza del 100%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H20C F 6N3O6 , 596.09; encontrado 596.
E je m p lo 4 D : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '- c lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (3 -m e to x iis o x a z o l-5 -c a rb o n il)h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o a c e t ilm e t il e s te r
Figure imgf000063_0001
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (40.0 mg, 0.1 mmol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol) se anadio acetato de bromometilo (16.9 jL , 172 |jmol) seguido de Et3N (24.0 jL , 172 jm ol) y la mezcla resultante se agito durante 90 minutos. La reaccion se detuvo con AcOH (19.6 jL , 345 jm ol) y la mezcla se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (3 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron. El solido se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para dar el compuesto del tttulo (14.3 mg, pureza del 97.8%) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H23CFN 3O8 , 536.12; encontrado 536.2.
Ejemplo 4E: Acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-metoxi-etil ester
Figure imgf000063_0002
Se anadio 1-bromo-2-metoxietano (12.2 jL , 129 jm ol) a una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43 jm ol) y DIPEA (45.1 jL , 259 jmol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol). La mezcla resultante se calento a 60°C durante 4 horas. Se anadio Nal (19.4 mg, 129 jmol) y la reaccion se controlo durante 2 horas. Se anadieron 1-bromo-2-metoxietano (3 eq.), DIEA (4 eq.) y Nal (3 eq.) adicionales y el calentamiento continuo durante la noche. Se anadieron 1-bromo-2-metoxietano adicional (3 eq.), Nal (3 eq.) y DIEA (3 eq.) y el calentamiento continuo durante la noche. La mezcla se concentro luego, y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (2.6 mg, pureza 99%). MS m/z [M+H]+ calculado para C24H25CFN 3O7 , 522.14; encontrado 522.4.
Ejemplo 4F: Acido butmco (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000064_0001
Una mezcla de butirato de clorometilo (16.2 j L, 129 jm ol) y Nal (19.4 mg, 129 jm ol) en acetona (0.7 mL, 10 mmol) se calento a 65°C durante 1 hora. La mezcla se enfrio luego a temperatura ambiente y se anadio una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg) y DIPEA (15.0 j L, 0.1 mmol) en acetona (0.3 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (2.0 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar un solido blanco. El solido se disolvio en acido acetico (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLc preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (6.5 mg, pureza del 100%). MS m/z [M+H]+ calculado para C26H27CFN 3O8 , 564.15; encontrado 564.
Ejemplo 4G: Acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000064_0002
Una mezcla de clorometil carbonato de etilo (17.9 mg, 129 jm ol) y Nal (19.4 mg, 129 jm ol) en acetona (0.7 mL, 10 mmol) se calento a 65°C durante 1 hora. La mezcla se enfrio luego a temperatura ambiente y se anadio una mezcla de acido (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg) y DIPEA (15.0 j L, 0.1 mmol) en acetona (0.3 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (2.0 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar un solido blanco. El solido se disolvio en acido acetico (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (5.8 mg, pureza del 94%). m S m/z [M+H]+ calculado para C25H25CFN 3O9 , 566.13; encontrado 566.
Ejemplo 4H: Acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-Morfolino-4-iletil ester
Figure imgf000065_0001
Una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43 pmol), EDC (45.8 pl, 259 pmol) y HOBt hidrato (39.6 mg, 259 pmol) en DCM (0.5 mL, 8 mmol) se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se anadio 4-morfolinetanol (41.8 pL, 345 pmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (14.1 mg) como una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C27H30CFN 4O7 , 577.18; encontrado 577.
Ejemplo 4I: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5)carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000065_0002
Una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 430 pmol), ester clorometilico del acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (193 mg, 860 pmol), Nal (129 mg, 860 pmol) y piridina (136 mg, 1.7 mmol) en DMF (5.0 mL) se agito a 25°C durante la noche. La mezcla se vertio luego en agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (30 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vacfo. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE:EtOAc=1:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un lfquido incoloro (7 mg). LC-MS: 651.1 [M+H]+. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz): 80.95-0.97 (m, 6H), 2.06-2.14 (m, 1H), 3.34-3.39 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.08-4.11 (m, 1H), 4.22-4.24 (m, 2H), 4.38-4.40 (m, 1H), 5.78-5.91 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 7.18-7.22 (m, 1H), 7.34-7.36 (m, 1H), 7.46-7.55 (m, 5H).
E je m p lo 4J : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '- c lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (3 -m e to x iis o x a z o l-5 -c a rb o n il)h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o is o p ro p o x ic a rb o n ilo x im e t il e s te r
Figure imgf000066_0001
Una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 430 pmol), isopropilcarbonato de clorometilo (132 mg, 860 pmol), Nal (129 mg, 860 pmol) y piridina (136 mg, 1.7 mmol) en DMF (5.0 mL) se agito a 25°C durante la noche. La mezcla se vertio luego en agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (30 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE:EtOAc=1:1) para producir el compuesto del tttulo en forma de un lfquido incoloro (10 mg). LC-MS: 580 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 8 1.28 (d, J = 6 Hz, 6 H), 3.37-3.39 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.22-4.24 (m, 2H), 4.38­ 4.40 ( m, 1H), 5.78-5.91 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 7.22-7.18 (t, J = 9 Hz, 1H), 7.34-7.36 (m, 1H), 7.46-7.55 (m, 5H).
Ejemplo 4K: Acido (R)-2-(2-Aminoacetoxi)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino] propionico etil ester
Figure imgf000066_0002
A una mezcla de ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (300.0 mg, 818 mmol) y acido 3-metoxi-isoxazol-5-carboxflico (140.4 mg, 981 pmol) en DMF (4.0 mL, 52 mmol) a temperatura ambiente se anadio HATU (373.2 mg, 981 pmol) y DIPEA (427 pL, 2.4 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se sometio a particion entre EtOAc (10.0 mL) y agua (2.0 mL). La capa organica se lavo con agua (2x2.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para dar un aceite amarillento. El aceite se purifico por cromatograffa instantanea (columna apiladora de 2x4 g, EtOAc al 0-100%/hexanos). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron para producir un aceite incoloro.
El aceite (28.8 mg, 58.5 pmol) se combino con DIPEA (30.6 pL, 176 pmol) y se agrego a una mezcla de N-a-(tbutoxicarbonil)glicina (12.3 mg, 70.2 pmol) y HATU (26.7 mg, 70.2 pmol) en Dm F (0.5 mL, 6 mmol) a temperatura ambiente. Despues de agitar a temperatura ambiente durante la noche, la mezcla se sometio a particion entre EtOAc (10.0 mL) y agua (2.0 mL). La capa organica se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para dar un aceite amarillento claro. El residuo oleoso se disolvio luego en DCM (0.2 mL) y se trato con HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.2 mL, 0.8 mmol) a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentro y el residuo resultante se evaporo junto con EtOAc (3x2.0 mL) para producir un solido blanco. El solido se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA solida blanca ( 8 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H26CFN 4O7 , 549.15; encontrado 549.
Ejemplo 4L: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-propioniloxipropionico
Figure imgf000067_0001
Se anadio cloruro de propanoilo (7.3 j L, 84 jm ol) a una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (17.0 mg, 36.7 jm ol) y DIPEA (12.8 j L, 73 jm ol) en DCM (0.5 mL, 8 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tttulo en forma de un solido blanco (1.2 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C24H23CFN 3O7 , 520.12; encontrado 520.1.
Ejemplo 4M: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5) carbonil)-hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000067_0002
Una mezcla de Nal (19.4 mg, 129 jm ol) y ester clorometilico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutmco (34.4 mg, 129 jm ol) en acetona (0.5 mL, 7 mmol) se calento a 65°C durante 1 hora. La mezcla se enfrio luego a temperatura ambiente y se trato con una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonilo-hidrazino-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43.1 jm ol) y DIPEA (15.0 j L, 86.2 jm ol) en acetona (0.3 mL, 4 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, luego se concentro. El residuo se sometio a particion entre EtOAc (5.0 mL) y agua (2.0 mL). La capa organica se lavo con agua (2.0 mL), NaCl acuoso saturado (2.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para producir un aceite incoloro. El aceite se seco adicionalmente al vado durante 30 minutos y luego se almaceno en congelador durante la noche. El aceite se trato luego con una mezcla 1:1 de DCM/TFA (0.3 mL) a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA solida blanca (7.3 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C27H30CFN 4O8 , 593.17; encontrado 593.1.
Ejemplo 4N: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3- metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000068_0001
Se agitaron acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico (5.7 mg, 32.3 jm ol) y HATU (12.3 mg, 32.3 jm ol) en DMA (1.0 mL, 11 mmol) durante 15 minutos. Se anadieron acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (10.0 mg, 21.6 jm ol) y DIPEA (11.3 jL , 64.7 jmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (2.7 mg). Ms m/z [M+H]+ calculado para C28H30ClFN4O9, 621.17; encontrado 621.3.
Ejemplo 4O: Acido (S)-2-Aminopropionico (R)-1-Carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5 carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000068_0002
Se agitaron acido (S)-2-t-butoxicarbonilaminopropionico (12.2 mg, 64.7 jm ol) y HATU (24.6 mg, 64.7 jmol) en DMA (1.0 mL, 11 mmol) durante 10 minutos. Se anadieron acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43.1 jm ol) y DIPEA (22.5 j L, 129 jmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche y luego se concentro. Se anadio HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.2 mL, 0.8 mmol) y la mezcla resultante se dejo reposar durante 1 hora, luego se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (3.9 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C24H24CFN 4O7 , 535.13; encontrado 535.4.
Ejemplo 4P: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000069_0001
Se agitaron N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (14.0 mg, 64.7 pmol) y HATU (24.6 mg, 64.7 pmol) en DMA (1.0 mL, 11 mmol) durante 10 minutos. Se anadieron acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43.1 pmol) y DIPEA (22.5 pL, 129 pmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche y luego se concentro. Se anadio HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.2 mL, 0.8 mmol) y la mezcla resultante se dejo reposar durante 1 hora, luego se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (3.5 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C26H28CFN 4O7 , 563.16; encontrado 563.4.
Ejemplo 40: Acido (R)-2-(2-Aminoacetoxi)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]propionico
Figure imgf000069_0002
Se agitaron N-a-(t-butoxicarbonil)glicina (11.3 mg, 64.7 pmol) y HATU (24.6 mg, 64.7 pmol) en DMA (1.0 mL, 11 mmol) durante 10 minutos. Se anadieron acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 43.1 pmol) y DIPEA (22.5 pL, 129 pmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche y luego se concentro. Se anadio HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.2 mL, 0.8 mmol) y la mezcla resultante se dejo reposar durante 1 hora, luego se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (5.8 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C23H22CFN 4O7 , 521.12; encontrado 521.6.
Ejemplo 4R: Acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-metoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazinol-2-hidroxipropionico 1-ciclohexiloxicarboniloxietil ester
Figure imgf000070_0001
A una solucion del compuesto acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico ester etflico (1.2 g, 3.0 mmol), EDC (742 mg, 3.9 mmol), HOBt (523 mg, 3.9 mmol) y acido 3-metoxiisoxazol-5-carboxflico (468 mg, 3.3 mmol) en DCM (20 mL) se anadio DIPEA (1.48 mL, 8.9 mmol) bajo nitrogeno. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentro a sequedad. El residuo se disolvio en EtOAc (20 mL), se lavo con HCl acuoso 0.5N (10 mL), NaHCO3 acuoso saturado (10 mL) y NaCl acuoso saturado (10 mL), se seco sobre Na2SO4 anhidro, se filtro y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc, 10: 1 —3:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un solido (970 mg). Lc -MS: [M+H]+: 492.
Figure imgf000070_0002
A una solucion del Compuesto 1 (970 mg, 2.0 mmol) en MeOH (15 mL) se anadio una solucion de L iO H ^ O (248 mg, 5.9 mmol) en agua (3 mL). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, y el solido insoluble se separo por filtracion y el filtrado se concentro al vado para dar un solido amarillo (780 mg). LC-MS: 464 [M+H]+. El solido amarillo (200 mg, 430 jm ol) se disolvio en 2,6-lutidina (460 mg, 4.3 mmol) y se anadio acido carbonico 1 -cloro-etil ester ciclohexil ester (888 mg, 4.3 mmol). El vial se sello y la mezcla resultante se irradio luego durante 30 minutos a 90°C con irradiacion de microondas. Se anadio agua (10 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x10 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con HCl acuoso 0.5N (4x5 mL) y NaCl acuoso saturado (10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa (Gemini-C18, 150x21.2 mm, 5|j, MeCN-H2O (TFA al 0.1%); de 43% a 43%) para producir el compuesto del tftulo como un solido blanco (7 mg). LC-MS: 634 [M+H]+, 1H RMN: (CDCla, 400MHz) 8 1.28-1.37 (m, 6H), 1.54 (d, 3H), 1.70-1.73 (m, 2H), 1.84-1.87 ( m, 2H), 3.26-3.29 (m, 2H), 3.38-3.43 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.19-4.20 (m, 2H), 4.38-4.50 (m, 1H), 4.50-4.57 (m, 1H), 6.50 (m, 1H), 6.75 (t, 1H), 7.18-7.20 (m, 1H), 7.35-7.37 (m, 1H), 7.48-7.52 (m, 4H).
E je m p lo 5A : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (5 -o x o -1 - fe n i l-4 ,5 -d ih id ro -1 H - [1 ,2 ,4 ] t r ia z o l-3 -c a rb o n il) h id ra z in o ]-2 - h id ro p ro p io n ic o
Figure imgf000071_0001
El acido 5-oxo-1-feml-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carboxflico (56.4 mg, 275 jm ol) se combino con HCTU (154 mg, 371 pmol) en DMF ( 852 j L, 11 mmol) y se agito durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se anadieron DIPEA (72 j L, 413 jm ol) y etil ester del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobftenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (50 mg, 0.1 mmol), y la mezcla resultante se agito durante la noche a temperatura ambiente. Se agregaron EtOH (402 j L, 6.9 mmol) y LiOH 1 M en agua (1.1 mL, 1.1 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (39.8 mg, pureza del 100%). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H21CFN 5O5 , 526.12; encontrado 526.0.
Ejemplo 5B: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester
Figure imgf000071_0002
Se agregaron EDC (127 mg, 660 jm ol) y HOBt (89 mg, 660 jm ol) a una solucion de acido 5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4] triazol-3-carbox^lico (150 mg, 330 jmol) y acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester (68 mg, 330 jm ol) en DMF (10 mL). Se anadio DIPEA (86 mg, 660 jm ol) y la mezcla resultante se agito durante 5 horas a temperatura ambiente. La mezcla se lavo luego con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) y se extrajo con EtOAc (2x50 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vacfo. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc=1:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (67 mg). LC-MS: 638.2 [M+H]+. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 82.13 (s, 3 H), 3.31-3.16 (m, 2 H), 4.18-4.21 (q, 2 H), 4.35 (br, 1 H), 4.98 -5.01 (m, 2 H), 5.54 (br, 1 H), 7.26-7.90 (m, 12 H), 9.98 (s, 1 H), 12.74 (s, 1 H).
E je m p lo 5C : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (5 -o x o -1 - fe n i l-4 ,5 -d ih id ro -1 H - [1 ,2 ,4 ] t r ia z o l-3 -c a rb o n il) -h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o e til e s te r
Figure imgf000072_0001
Se combino acido 5-oxo-1-feml-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]tnazol-3-carboxflico (89.5 mg, 436 jm ol) con HCTU (244 mg, 589 |jmol) en DMF (1.0 mL, 13 mmol) y se agito durante 10 minutos. Se anadieron ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (80.0 mg, 0.2 mmol) y DIPEA (0.1 mL, 0.7 mmol), y la mezcla resultante se agito durante la noche. La mezcla se diluyo con EtOAc (10.0 mL) y se lavo con agua (3.0 mL), NaHCO3 acuoso saturado (2x3.0 mL) y NaCl acuoso saturado (3.0 mL), luego se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para dar un color amarillento solido. Una porcion (20 mg) del solido se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico mediante HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (1.6 mg, pureza del 100%). Ms m/z [M+H]+ calculado para C27H25CFN 5O5 , 554.15; encontrado 554.4.
Ejemplo 5D: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico isobutil ester
Figure imgf000072_0002
Se combino acido 5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4] triazol-3-carboxflico (89.5 mg, 436 jm ol) con HCTU (244 mg, 589 jm ol) en DMF (1.0 mL, 13 mmol) y se agito durante 10 minutos. Se anadieron ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (80.0 mg, 0.2 mmol) y DIPEA (0.1 mL, 0.7 mmol), y la mezcla resultante se agito durante la noche. La mezcla se diluyo con EtOAc (10.0 mL) y se lavo con agua (3.0 mL), NaHCO3 acuoso saturado (2x3.0 mL) y NaCl acuoso saturado (3.0 mL), luego se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro para dar un solido de color amarillento. Una porcion (20 mg) del solido se trato con alcohol isobutflico (170 jL , 1.8 mmol) y HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (36.0 jL , 144 jm ol) a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (1.6 mg, pureza del 100%). MS m/z [M+H]+ calculado para C29H29CFN 5O5 , 582.18; encontrado 5 8 2.4.
E je m p lo 5E : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (5 -o x o -1 - fe n i l-4 ,5 -d ih id ro -1 H - [1 ,2 ,4 ] t r ia z o l-3 -c a rb o n il) h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o 2 ,2 ,3 ,3 ,3 -p e n ta f lu o ro p ro p il e s te r
Figure imgf000073_0001
Una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 380 pmol), 2,2,3,3,3-pentafluoropropan-1-ol (114 mg, 760 pmol), HOBT (103 mg, 7 6 0 pmol), EDC (145 mg, 760 pmol) y DIPEA (200 mg, 1.5 mmol) en DMF (5.0 mL) se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se vertio luego en agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (30 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatografta en columna (PE: EtOAc=2:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (20 mg). LC-MS: 658 [M+H]+. Rm N 1H (400 MHz, CDCl3) 63.44­ 3.40 (m, 2H), 4.25 (br, 2H), 4.58-4.61 (m, 3H), 7.14-7.08 (m, 1H), 7.41-7.55 (m, 8H), 7.84-7.92 (m, 3H).
Ejemplo 5F: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico acetoximetil ester
Figure imgf000073_0002
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (200 mg, 335 pmol) en DMF seco (6 mL) se anadio acetato de bromometilo (76 mg, 503 pmol), Nal (101 mg, 670 pmol) y 2,6-dimetilpiridina (143 mg, 1.3 mmol) en porciones a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio agua (12 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x10 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc=3:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (15 mg). LC-MS: 597,7 [M+H]+. 1H RMN (CDCla, 400 MHz) 62.02 (s, 3H), 3.37 (br, 2H), 4.22 (br, 2H), 4.38 (br, 1H), 5.78-6.02 (m, 2H), 7.15-7.20 (m, 1H), 7.40-7.45 (m, 2H), 7.50-7.91 (m, 7H), 8.15-8.17 (m, 2H).
E je m p lo 5G : A c id o b u tf t ic o (R ) -3 - [N - (5 '- c lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (5 -o x o -1 - fe n il-4 ,5 -d ih id ro -1 H - [1 ,2 ,4 ] t r ia z o l-3 -c a rb o n il) -h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ilo x im e t i l e s te r
Figure imgf000074_0001
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (200 mg, 335 pmol) en DMF seco (6 mL) se anadio butirato de clorometilo (68 mg, 503 pmol), Nal (101 mg, 670 pmol) y 2,6-dimetilpiridina (143 mg, 1.3 mmol) en porciones a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio agua (12 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc=3:1) para producir el compuesto del fftulo en forma de un solido blanco (21 mg). LC-MS: 625.9 [M+H]+. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 80.84 (t, J=7.4 Hz, 3H), 1.45-1.56 (m, 2H), 2.29 (t, J=7.3 Hz, 2H), 3.31-3.17 (m, 2H), 4.18-4.35 (m, 2H), 4.35 (t, J=5.3 Hz, 1H), 5.68-5.79 (m, 2H), 7.28 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.34-7.40 (m, 1H), 7.43-7.55 (m, 7H), 7.58 (dd, J=6.8, 2.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J=7.6 Hz, 2H), 9.98 (s, 1H), 12.76 (s, 1H).
Ejemplo 5H acido: (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropi6nico etoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000074_0002
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 335 pmol) en DMF seco (10 mL) se anadio carbonato de clorometil etilo(69 mg, 503 pmol), Nal (101 mg), 670 pmol) y 2,6-dimetilpiridina (143 mg, 1.3 mmol) en porciones a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio agua (15 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc=3:1~1:100) para producir el compuesto del fftulo en forma de un solido blanco (9.5 mg). LC-MS: 627.9 [M+H]+. 1H RMN: (CDCla, 400 MHz) 81.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H)., 3.44 (br, 2H), 4.17-4.35 (m, 4H), 4.50 (s, 1H), 5.75-5.78 (m, 2H), 7.10 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 7.28-7.40 (m, 1H), 7.42­ 7.52 (m, 7H), 7.87 (s, 2H), 8.37 (s, 1H).
E je m p lo 51 : A c id o (R ) -3 - [N - (5 '-C lo ro -2 '- f lu o ro b ife n il-4 - i lm e t i l) -N '- (5 -o x o -1 - fe n i l-4 ,5 -d ih id ro -1 H - [1 ,2 ,4 ] t r ia z o l-3 -c a rb o n il) h id ra z in o ]-2 -h id ro x ip ro p io n ic o is o p ro p o x ic a rb o n ilo x im e t il e s te r
Figure imgf000075_0001
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 335 pmol) en DMF seco (6 mL) se anadio carbonato de clorometil isopropilo (76 mg, 503 pmol), Nal (101 mg, 670 pmol) y 2,6-dimetilpiridina (143 mg, 1.3 mmol) en porciones a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio agua (12 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x10 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna ((PE:EtOAc=1:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (12.8 mg). LC-MS: 641.9 [M+H]+. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 8 1.21 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 3.21-3.28 (m, 2H), 4.12-4.30 (m, 2H), 4.40-4.52 (m, 1H), 4.77-4.79 (m, 1H), 5.68-5.76 (m, 2H), 7.41-7.45 (m, 1H), 7.50-7.87 (m, 9H), 7.90 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 9.98 (s, 1H), 12.76 ( s, 1H).
Ejemplo 5J: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000075_0002
A una solucion de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (200 mg, 335 pmol) en DMF seco (6 mL) se anadio ester clorometilico del acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (112 mg, 503 pmol), Nal (101 mg, 670 pmol), 2,6-dimetilpiridina (143 mg, 1.3 mmol) en porciones a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio agua (12 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron al vacfo. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc=3:1) para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (8.4 mg). LC-MS: 712,9 [M+H]+. 1H RMN: (MeOD, 400 MHz) 80.85 (dd, J = 14.1, 6.8 Hz, 6H), 2.01-2.17 (m, 1H), 3.42-3.51 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 4.00 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.23 (br, 2H), 4.42 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 5.83 (dd, J = 31.5, 5.6 Hz, 2H), 7.19 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 7.32­ 7.39 (m, 3H), 7.47-7.51 (m, 4H), 7.56-7.58 (m, 2H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 2H).
Ejemplo 5K: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-carbonil) hidrazinol-2-hidroxipropionico 1-ciclohexiloxicarboniloxietil ester
Figure imgf000076_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo.
Ejemplo 6A: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-
Figure imgf000076_0002
Se combinaron acido 3-acetil-1H-pirazol-5-carbox^lico (69.3 mg, 450 jm ol) y HCTU (186 mg, 450 jm ol) en DMF (1.9 ml, 24.5 mmol) y se agito a temperatura ambiente. Despues de 15 minutos, se anadieron DIPEA (214 j L, 1.2 mmol) y ester etilico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (150 mg, 0.4 mmol). La mezcla se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente, luego se evaporo a presion reducida. El residuo se disolvio en EtOH (1.4 mL, 24.5 mmol). Se anadio una solucion de LiOH 1.0 M en agua (2.0 mL, 2.0 mmol) y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 3 horas. El disolvente se elimino a presion y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (110 mg, pureza del 100%) en forma de una sal de TFA. MS m/z [m H]+ calculado para C22H20CFN 4O5 , 475.11; encontrado 475.1.
-('5EJEMPLO 6B: Acido (R)-3-[N'-('5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-('5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etil ester
Figure imgf000076_0003
Se combinaron acido 3-acetil-1H-pirazol-5-carboxflico (168 mg, 1.1 mmol) y el HCTU (451 mg, 1.1 mmol) en DMF (6.8 ml, 87.2 mmol) y se agito a temperatura ambiente. Despues de 15 minutos, se anadieron DIPEA (570 j L, 3.3 mmol) y ester etflico del acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (400 mg, 1.1 mmol). La mezcla se agito durante 20 minutes a temperatura ambiente, luego se evaporo a presion reducida para producir el compuesto del tttulo. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H24CFN 4O5 , 503.14; encontrado 503.2.
Ejemplo 6C: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-Morfolin-4-iletil ester
Figure imgf000077_0001
Se combinaron acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (41.0 mg, 86 pmol), HOBt (70.0 mg, 518 pmol) y Ed C (92 pl, 520 pmol) en DCM (0.7 mL, 10 mmol). La solucion resultante se agito durante 10 minutos. Se anadio 4-morfolinetanol (84 pL, 691 pmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente hasta que se complete la reaccion (aproximadamente 2 horas). La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y se purifico (columna en fase reversa) para producir el compuesto del tttulo (7.5 mg, pureza del 98%) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C28H31CFN 5O6 , 588.19; encontrado 588.1.
Ejemplo 6D: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico isobutil ester
Figure imgf000077_0002
Acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (15.0 mg, 32 pmol) se combino con alcohol isobutflico (876 pL, 9.5 mmol). Se anadio una solucion de HCl 4 M en dioxano (282 pl, 1.1 mmol) y la mezcla resultante se agito durante 15 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y el producto se liofilizo para producir el compuesto del tftulo (19 mg, pureza 99%) como una sal de TFA en polvo blanco. Ms m/z [M+H]+ calculado para C26H28CFN 4O5 , 531.17; encontrado 531.1.
Ejemplo 6E: Acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester
Figure imgf000078_0001
Se combinaron acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (30.0 mg, 63 jmol), HoBt (26 mg, 190 jm ol) y EDC (34 j L, 190 jm ol) en DCM (243 j L, 3.8 mmol) y se agitaron durante 10 minutos. Se agregaron 4-hidroximetil-5-metil-[1,3]dioxol-2-ona ( 6 6 mg, 0.5 mmol) y 4-metilmorfolina (28 j L, 250 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se evaporo a presion reducida, produciendo un aceite marron, que se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tttulo (4.6 mg, pureza del 97%) como una sal de TFA. Ms m/z [M+H]+ calculado para C27H24CFN 4O8 , 587.13; encontrado 587.1.
Ejemplo 6 F: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2 ,2 -difluoropropil ester
Figure imgf000078_0002
Se combinaron acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (15.0 mg, 32 jmol), HOBt (12.8 mg, 95 jmol) y Ed C (16 .8 j L, 95 jmol) en DCM (121 j L, 1.9 mmol) y se agitaron durante 10 minutos. Se anadio 2,2-difluoropropanol (24.3 mg, 253 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente hasta que la reaccion se completo (aproximadamente 48 horas). La mezcla se evaporo a presion reducida y el producto se purifico (columna en fase reversa) para producir el compuesto del tftulo (13.8 mg, pureza del 96%) como una sal de TfA. MS m/z [M+H]+ calculado para C25H24CFN 4O5 , 553.14; encontrado 553.1.
Ejemplo 6 G: 2-Metoxietil ester del acido (R)-3-[N'-('5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2 -hidroxipropionico
Figure imgf000078_0003
Se combino acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (10.0 mg, 21 jm ol) con 2-metoxietanol (0.1 mL, 1.3 mmol). Se anadio una solucion de HCl 4 M en dioxano (53 j L, 0.2 mmol) y la mezcla resultante se agito durante 1 hora a temperature ambiente. La LC/MS mostro la masa del producto deseado. La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y se purifico (columna en fase reversa) para producir el compuesto del tftulo (2.7 mg, pureza del 95%) en forma de una sal de TFA solida blanca. MS m/z [M+H]+ calculado para C25H26ClFN4O6, 533.15; encontrado 533.1.
Ejemplo 6H: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco 3-Acetil-5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]pirazol-1-ilmetil ester
Figure imgf000079_0001
Se disolvio acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (95.5 mg, 0.2 mmol) en acetona (886 j L, 12.1 mmol). Se anadieron Et3N (70 j L, 503 jm ol) y ester clorometilico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metil-butmco (56.1 mg, 211 jmol) y la mezcla resultante se agito a 60°C durante 6 horas. El disolvente se elimino al vado y el residuo se purifico usando cromatograffa instantanea (fase normal; MeOH: EtOAc=0:50). Las fracciones puras se recolectaron, se concentraron y luego se disolvieron en MeCN (630 j L, 12.1 mmol). Se anadio una solucion de HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (503 j L, 2.0 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. El disolvente se elimino a vado para dar el compuesto del tftulo (90 mg).
Ejemplo 61 acido: (S)-2-Metoxicarbonilamino-3-metilbutftico 3-acetil-5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]pirazol-1-ilmetil ester
Figure imgf000079_0002
Se combino acido (S)-2-amino-3-metilbutftico 3-acetil-5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenilo)-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]pirazol-1-ilmetil ester (21.0 mg, 35 jm ol) con DCM (134 j L, 2.1 mmol) y Et3N (15 j L, 0.1 mmol). Se anadio cloroformiato de metilo (2.7 j l, 35 jm ol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos. El disolvente se elimino al vado y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (0.7 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C30H33CFN 5O9 , 662.20; encontrado 662.1.
Ejemplo 6J: Acido isobutmco (R)-2-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-1-carboxietil ester
Figure imgf000080_0001
Se combinaron cloruro de isobutirilo (23.4 j L, 221.1 jm ol) y acido (R)-3-[N'-(5-acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetilo)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (10.5 mg, 22.1 jm ol) en THF (108 j L, 1.3 mmol) y se agito durante la noche a temperatura ambiente. El disolvente se evaporo y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo (4.9 mg) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C26H26CFN 4O6 , 545.15; encontrado 545.1.
Ejemplo 6K: Acido 3-metilbutftico (R)-2-[N'-(5-acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino]-1-carboxietil ester
Figure imgf000080_0002
Cloruro de isovalerilo (51.4 j L, 421.2 jmol) y acido (R)-3-[N'-(5-acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetilo) hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 42.1 jmol) se combinaron en THF (205 j L, 2.5 mmol) y se agito durante la noche a temperatura ambiente. El disolvente se evaporo y el residuo se purifico (columna de HPLC en fase reversa) para producir el compuesto del tftulo (11.8 mg) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C27H28CFN 4O6 , 559.17; encontrado 559.1.
Ejemplo 6L: Acido (R)-2-Acetoxi-3-[N'-(5-acelil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]propionico
Figure imgf000080_0003
Cloruro de acetilo (30 j L, 421.2 jmol) y acido (R)-3-[N'-(5-acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetilo)hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 42.1 jm ol) se combinaron en THF (205 j L, 2.5 mmol) y se agito durante la noche a temperatura ambiente. El disolvente se evaporo y el residuo se purifico (columna de HPLc en fase reversa) para producir el compuesto del tftulo (12.2 mg) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H22CFN 4O6 , 517.12; encontrado 517.2.
Ejemplo 6 M: Acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico 3-dimetilaminopropil ester
Figure imgf000081_0001
Se combinaron acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (10.0 mg, 2 l jmol) con HOBt (17.1 mg, 126 jm ol) y EDC (22 jL , 130 jm ol) en DCM (0.2 mL, 3 mmol) y se agito durante 10 minutos. Se anadio 3-dimetilamino-1-propanol (19.9 jl, 168 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente y se controlo su finalizacion (aproximadamente 4 horas). La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (6.4 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C27H31CFN 5O5, 560.20; encontrado 560.1.
Ejemplo 6 N: Acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico 4-dimetilaminobutil ester
Figure imgf000081_0002
Se combinaron acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (10.0 mg, 21 jmol) con HOBt (17.1 mg, 126 jm ol) y EDC (22 jL , 130 jm ol) en DCM (0.2 mL, 3 mmol) y se agito durante 10 minutos. Se anadio 4-dimetilamino-1-butanol (22.4 jL , 168 jmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente y se controlo su finalizacion (aproximadamente 4 horas). La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (4.2 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C28H33CFN 5O5574.22; encontrado 574.1.
Ejemplo 6 O: Acido (R)-3-[N-(5-Acelil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico 3-Morfolin-4-il-propil ester
Figure imgf000081_0003
Se combinaron acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (10.0 mg, 21 jmol) con HOBt (17.1 mg, 126 jm ol) y EDC (22 jL , 130 jm ol) en DCM (0.2 mL, 3 mmol) y se agito durante 10 minutos. Se anadio 3-morfolinopropanol (24.5 mg, 16 8 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente y se controlo su finalizacion (aproximadamente 4 horas). La mezcla se concentro por evaporacion rotatoria y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tttulo como una sal de TFA (4.9 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C29H33ClFN5O6, 602.21; encontrado 602.1.
Ejemplo 6P: Acido (R)-3-[N'-(5-Acelil-2H-pirazol-3-carboal)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-dimetilaminoetil ester
Figure imgf000082_0001
El compuesto del tftulo se puede preparar como sigue: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetilo)-hidrazino]-2-hidroxipropi6nico (10.0 mg, 21 jm ol) se combina con HOBt (17.1 mg, 126 jm ol) y EDC (22 |jL, 130 jm ol) en DCM (0.2 mL, 3 mmol) y se agita durante 10 minutos. Se agrega N,N-Dimetilaminoetanol (16.9 j L, 168 jm ol) y la mezcla resultante se agita a temperatura ambiente y se controla para su finalizacion. La mezcla se concentra por evaporacion rotatoria y el residuo se purifica por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA.
Ejemplo 6Q: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico 4-Morfolin-4-il-butil ester
Figure imgf000082_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6R: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-2-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-bifenil-4-ilmetilhidrazino]-1-isobutoxicarboniletil ester
Figure imgf000082_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6S: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco 3-Acetil-5-[N'-bifenil-4-ilmetil-N'-((R)-2-hidroxi-2-isobutoxicarboniletil) hidrazinocarbonil]pirazol-1-ilmetil ester
Figure imgf000083_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6T: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-2-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-bifenil-4-ilmetilhidrazino]-1-etoxicarboniletil ester
Figure imgf000083_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6U: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico 3-Acetil-5-[N'-bifenil-4-ilmetil-N'-((R)-2-etoxicarbonil-2-hidroxietil) hidrazinocarbonil]pirazol-1-ilmetil ester
Figure imgf000083_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6V: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000084_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6W: Acido (R)-3-[N'-(5-Acetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000084_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 6X: Acido (R)-3-[N-(5-Acetil-2-fosfonoximetil-2H-pirazol-3-carbonil)-N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico isobutil ester
Figure imgf000084_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 7A: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metilo-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester
Figure imgf000085_0001
Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-tritil-2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (30.0 mg, 44 pmol) se combino con 4-clorometil-5-metil-1,3-dioxol-2-ona (9.9 mg, 66 pmol) y DIPEA (15.4 pL, 89 pmol) en acetona (0.4 mL, 5 mmol) . La mezcla se mantuvo a 56°C durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se combino con DCM (0.2 mL) y HCl 2M en una mezcla de dioxano y DCM (0.2 mL) a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en agua al 50%/AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA solida blanca (3.3 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C23H20CFN 6O7 , 547.11; encontrado 547.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester.
Ejemplo 7B: Acido (R)-3-[N-(5-Cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropi6nico 2,2,3,3,3-pentafluoropropil ester
Figure imgf000085_0002
Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-tritil-2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (42.4 mg, 63 pmol) se combino con EDC (66.5 pL, 376 pmol) y HOBt hidrato (57.5 mg, 376 pmol) en DCM (0.7 mL, 10 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se anadio 2,2,3,3,3-pentafluoro-1-propanol (75.2 mg, 501 pmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en DCM (0.4 mL, 6 mmol) a temperatura ambiente y se trato con HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.2 mL, 0.8 mmol) durante 2 horas. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA solida blanca (8.3 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H17C F 6N6O4, 567.09; encontrado 567.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en una forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2,2,3,3,3-pentafluoropropflico
Ejemplo 7C: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico 5-[N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-((R)-2-etoxicarbonil-2)-hidroxietil)-hidrazinocarbonil]tetrazol-2-ilmetil ester
Figure imgf000086_0001
Ester etflico del acido (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N-(2-tritil-2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (15.1 mg, 21.4 jmol) se agito en una mezcla de DCM (0.2 mL, 3 mmol) y HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (0.1 mL, 0.4 mmol) a temperature ambiente durante 1 hora, luego se concentro. A esto se anadio CS2CO3 (14.0 mg, 42.8 jm ol) en acetona (0.5 mL) y una mezcla de ester clorometilico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutftico (17.1 mg, 64.2 jm ol) y Nal (9.6 mg, 64.2 jm ol) que se habfa agitado en acetona (0.5 j L, 7 jm ol) a 60°C durante 1 hora. La mezcla resultante se agito a 60°C durante 4 horas, luego se concentro. Se anadieron TFA (0.1 mL, 1 mmol) y DCM (0.1 mL, 2 mmol) al residuo y se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. A continuacion, la mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de t Fa solida blanca (4.3 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C26H31CFN 7O6 , 592.20; encontrado 592.4.
Ademas, se encontro que tambien se produjo el regioisomero del compuesto del tftulo, acido (S)-2-amino-3-metilbutftico 5-[N'-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4 -ilmetil)-N'-((R)-2-etoxicarbonil-2-hidroxietil)hidrazinocarbonil]tetrazol-1-ilmetil ester, como una sal de TFA solida blanca (2.7 mg):
Figure imgf000086_0002
Ambos regioisómeros se aislaron y caracterizaron por RMN, HPLC y LCMS.
Ejemplo 7D: Acido butírico (R)-3-[N-(5-cloro-2-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000087_0001
Una mezcla de butirato de clorometilo (6.8 pl, 54.5 pmol) y Nal (8.2 mg, 54.5 pmol) en acetona (0.5 mL, 7 mmol) se agito a 60°C durante 1 hora, luego se anadio a una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2-tritil-2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (12.3 mg, 18.2 pmol) y DIPEA (4.8 pL, 27.2 pmol) en acetona (0.5 mL). La mezcla resultante se agito a 40°C durante 2 horas, se concentro y se sometio a particion entre EtOAc (10 mL) y agua (2 mL). La capa organica se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro. Se anadio HCl 4.0 M en 1,4-dioxano (40.0 pL, 160 pmol) en MeCN (0.2 mL, 4 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (1.3 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C23H24CFN 6O6 , 535.14; encontrado 535.1.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido butrnco (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetilo)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester.
Ejemplo 7E: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifeal-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico acetoximetil ester
Figure imgf000087_0002
A una solucion de (R)-3-(2-(1-alil-1H-tetrazol-5-carbonil)-1-((5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)metil)hidrazinilo)-2-hidroxipropanoato de litio (300 mg, 624 pmol) en DMF (3 mL) se anadio acetato de bromometilo (144 mg, 936 pmol), Nal (140 mg, 936 pmol) y 2,6-lutidina (134 mg, 1.2 mmol) gota a gota a 0°C bajo nitrogeno. La mezcla resultante se agito durante 3.5 horas y luego se vertio en agua (30 mL). La solucion resultante se extrajo con EtOAc (2x15 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (15 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico por TLC preparativa (PE: EtOAc~1: 2) para producir el Compuesto 1 en forma de un aceite amarillo (170 mg). LC-MS: 547 [M+H]+.
A una solucion del Compuesto 1 (80 mg, 146 pmol) en DCM seco (3 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (50 mg, 43.9 pmol), trietilsilano (51 mg, 439 pmol) y AcOH (26 mg, 439 pmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente bajo nitrogeno durante 30 horas. Los solidos se separaron por filtracion y el filtrado se concentro al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Gemini-C18, 150 x 21.2 mm, 5 p; MeCN-H2O (0.1% de TFA) de 43% a 43%] para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (10 mg). LC-MS: 507 [M+H]+. 1H RMN (CDCb): 8 1.27 (s, 3H), 3.41-3.53 (m, 2H), 4.21-4.24 (dd, 2H), 4.51-4.53 (t, 1H), 5.68-5.75 (dd, 2H), 7.05-7.09 (t, 1H), 7.25-7.26 (m, 1H), 7.36-7.38 (dd, 1H), 7.48 (s, 4H), 8.84 (s, 1H).
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico acetoximetil ester.
Ejemplo 7F: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5)carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000088_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (S)-2-amino-metilbutftico (R)-3-[N-(5'-cloro]-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester.
Ejemplo 7G: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico Isopropoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000088_0002
A una solucion de (R)-3-(2-(1-alil-1H-tetrazol-5-carbonil)-1-((5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)metil)-hidrazinilo-2-hidroxipropanoato de litio (250 mg, 526 pmol) en isopropilcarbonato de clorometilo (2 mL) se anadio Nal (113 mg, 1.1 mmol) y 2,6-lutidina (158 mg, 1.1 mmol). La mezcla resultante se agito a 80°C durante 3 horas, se enfrio a temperatura ambiente y luego se vertio en agua (10 mL). La solucion resultante se extrajo con EtOAc (2x10 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatograffa en columna (PE: EtOAc = 5:1—4:1—3:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un aceite incoloro (165 mg). LC-MS: 591 [M+H]+.
A una solucion del Compuesto 1 (150 mg, 254 pmol) en DCM seco (5 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (88 mg, 76 pmol), trietilsilano (148 mg, 1.3 mmol) y AcOH (76). mg, 1.3 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente bajo nitrogeno durante 2 dfas y luego se concentro al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Gemini-C18, 150 x 21.2 mm, 5 p; MeCN-H2O (TFA al 0.1%) del 50% al 80%] para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (15 mg). LC-MS: 551 [M+H]+, 1H RMN (CDCla) 8 1.25-1.29 (d, 6H), 3.44-3.56 (m, 2H), 4.23-4.31 (dd, 2H), 4.54-4.56 (t , 1H), 4.85-4.91 (m, 1H), 5.74 (s, 2H), 7.04-7.08 (t, 1H), 7.23-7.25 (m, 1H), 7.35-7.36 (m, 1H), 7.46 (s , 4H), 9,06 (s, 1H).
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en una forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico isopropoxicarboniloximetil ester.
Ejemplo 7H: Acido (S)-2-Amino-3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000089_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tttulo. Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil) hidrazino] etil ester.
Ejemplo 71: Acido (R)-2-Acetoxi-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino] propionico
Figure imgf000089_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tttulo. Notese que, como se explica aqrn, los compuestos como este pueden existir en una forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-2-acetoxi-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]propionico.
Ejemplo 7J: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico etoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000090_0001
A una suspension de (R)-3-(2-(1-alil-1H-tetrazol-5-carbonil)-1-((5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)metil)hidrazinilo-2-hidroxipropanoato de litio (250 mg, 526 pmol) en clorometil etil carbonato (2 mL) se anadio Nal (158 mg, 1.1 mmol) y 2,6-lutidina (113 mg, 1.1 mmol). La mezcla resultante se agito a 50°C durante 4 horas, se enfrio a temperatura ambiente y luego se vertio en agua (10 mL). La solucion resultante se extrajo con EtOAc (2x10 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (PE: EtOAc = 4:1 ~3:1 —2:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un solido amarillo (170 mg). LC-MS: 577 [M+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (160 mg, 277 pmol) en DCM seco (5 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (96 mg, 83 pmol), trietilsilano (161 mg, 1.4 mmol) y AcOH (83 mg, 1.4 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente bajo nitrogeno durante 2 dfas y luego se concentro al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Gemini-C18, 150 x 21,2 mm, 5 p; MeCN-H2O (0.1% de TFA) del 50% al 60%] para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (7 mg). LC-MS: 537 [M+H]+. 1H RMN (CDCla) 8 1.28-1.33 (t, 3H), 3.47-3.50 (t, 2H), 4.21-4.24 (m, 4H), 4.50­ 4.52 (t, 1H), 5.72-5.77 (dd, 2H), 7.06-7.11 (t, 1H), 7.25-7.27 (m, 1H), 7.28-7.38 (m, 1H), 7.49 (s, 4H), 8.69 (s, 1H).
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etoxicarboniloximetil ester.
Ejemplo 7K: Acido (S)-2-Metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)-hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000090_0002
A una suspension de acido (R)-3-[N'-(1-alil-1H-tetrazol-5-carbonil)-N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico y metano (200 mg, 421 pmol) en THF (5 mL), se anadio acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco clorometil ester (1.88 g, 8.42 mmol), Nal (126 mg, 842 pmol) y 2,6-lutidina (90 mg, 842 pmol). La mezcla se sometio a reflujo bajo nitrogeno durante 30 horas, luego se enfrio a temperatura ambiente y se vertio en agua (20 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (2x10 mL). Las capas organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vado. El residuo se purifico luego por cromatograffa en columna (PE: EtOAc, 5:1 —4:1 ~3:1) para producir el Compuesto 1 en forma de un aceite amarillo (110 mg). LC-MS: 662 [M+H]+.
A una solucion de Compuesto 1 (110 mg, 166 jm ol) en DCM seco (3 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (57 mg, 50 jmol), Et3SiH (97 mg, 831 jm ol) y AcOH (50 mg). mg, 831 jmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente bajo nitrogeno durante 2 dfas, luego se concentro al vado. El residuo se purifico por HPLC preparativa (Gemini-C18, 150x21.2 mm, 5 |j, MeCN-H2O (TFA al 0.1%); de 50% a 60%) para producir el compuesto del titulo como un solido blanco (20 mg). LC-MS: 622 [M+H]+. 1H RMN (CDCb, 400MHz): 81.02-1.05 (d, 6H), 2.06-2.09 (m, 1H), 3.47 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 4.23­ 4.37 (dd, 2H), 4.42 (s, 1H), 4.70 (t, 1H), 5.27-5.28 (d, 1H), 5.69-5.74 (dd, 2H), 7.06-7.08 (m, 1H). 7.24-7.26 (m, 1H), 7.34-7.34 (d, 1H), 7.42-7.44 (dd, 2H), 7.50-7.52 (dd, 2H).
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como el acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-3-[N-(5'-cloro]-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester.
Ejemplo 7L: Acido (R)-3-[N-(5'-Cloro-2'-fluorobifeal-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-propioniloxipropionico
Figure imgf000091_0001
Se anadio cloruro de propionilo (24 mg, 55 jm ol) a una mezcla de acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5)-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (6.1 mg, 66 jm ol) y DCM (2 mL), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se calento luego a 60°C durante 1 hora. La reaccion se detuvo y la mezcla se concentro y se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (1 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H20CFN 6O5 , 491.12; encontrado 491.2.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en forma de tautomero, por ejemplo, como acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-propioniloxipropionico.
Ejemplo 7M: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000091_0002
Se combino acido (S)-2-(metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoico (12.9 mg, 73 jm ol) con HOBt (12.4 mg, 92 jm ol) y EDC (11.4 mg, 73 jm ol) en DCM (2 mL) y se agito durante 15 minutos. Se agregaron acido (R)-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(2H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (26.6 mg, 61 jm ol ) y 4-metilmorfolina (7.4 mg, 73 jm ol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se evaporo y el residuo se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (6 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H27ClFN7O7, 592.16; encontrado 592.2.
Notese que, como se explica en el presente documento, los compuestos como este pueden existir en una forma de tautomero, por ejemplo, como el acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico (R)-1-carboxi-2-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1H-tetrazol-5-carbonil)hidrazino]etil ester.
Ejemplo 8A: Acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-propioniloxipropionico
Figure imgf000092_0001
Se anadio cloruro de propanoilo (3.5 jL , 40 jm ol) a una mezcla de acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-feniletil ester (20.0 mg, 36.4 jm ol) y Et3N (12.7 jl, 90.9 jm ol) en DCM (0.5 mL, 8 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, se concentro y se purifico por cromatograffa instantanea (EtOAc-hexanos = 0-100%) para dar un solido (15.5 mg). El solido se disolvio en AcOH (1.5 mL, 26 mmol). Se agrego zinc (119 mg, 1.8 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se filtro y el polvo de zinc se lavo con AcOH (0.5 mL). Los lavados combinados se purificaron mediante HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (3.9 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C23H22ClN3O7, 488.11; encontrado 488.3.
Ejemplo 8B: Acido 3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil) hidrazino]etil ester
Figure imgf000092_0002
Se anadio cloruro de isovalerilo (15.5 jL , 127 jmol) a una mezcla de acido (R)-3-[N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (25.0 mg, 58 jm ol) y Et3N (40.3 jL , 289 jmol) en DCM (0.5 mL, 8 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y se concentro. El residuo se combino con NaHCO3 acuoso saturado (10:90, NaHCO3: agua, 0.1 mL, 0.1 mmol) en MeOH (1.0 mL), se agito durante 15 minutos y luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (2.4 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H21ClN3O7, 516.15; encontrado 516.5.
Ejemplo 8C: Acido (R)-3-[N'-(3-Acetoximetoxiisoxazol-5-carbonil)-N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000093_0001
Una mezcla de acetato de bromometilo (16.0 j L, 164 jm ol) y Nal (24.5 mg, 164 jm ol) en acetona (2.0 mL, 27 mmol) se agito a 60°C durante 1 hora, luego se enfrio a temperatura ambiente. Una mezcla de acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-feniletil ester (30.0 mg, 54.5 jm ol) y Et3N (38.0 j L, 273 jm ol) en acetona (1 mL) se agregaron. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, se concentro, se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron para dar un solido (19.2 mg). El solido se combino con zinc (178 mg, 2.7 mmol) en AcOH (1.0 mL, 18 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron, se liofilizaron, se disolvieron en AcOH (1.5 mL) y se purificaron por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (3.8 mg) en forma de una sal de TFA. MS m/z [M+h ]+ calculado para C23H22ClN3Os, 504.11; encontrado 504.0.
Ejemplo 8D: Acido butrnco 5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]isoxazol-3-iloximetil ester
Figure imgf000093_0002
Una mezcla de butirato de clorometilo (20.5 j L, 164 jm ol) y Nal (24.5 mg, 164 jm ol) en acetona (2.0 mL, 27 mmol) se agito a 60°C durante 1 hora, luego se enfrio a temperatura ambiente y se agrego a una mezcla del ester 2-oxo-2-feniletflico del acido (R)-3-[N-(3-clorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (30.0 mg, 54.5 jm ol) y Et3N (38.0 jl, 273 jm ol) en acetona (1 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, se concentro, se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se liofilizaron. Se anadio zinc (178 mg, 2.7 mmol) y AcOH (1.0 mL, 18 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (2.5 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H26ClN3O8, 532.14; encontrado 532.2.
Ejemplo 8E: Acido (R)-3-[N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-etoxicarboniloximetoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000094_0001
Una mezcla de clorometil etil carbonato (22.7 mg, 164 pmol) y Nal (24.5 mg, 164 pmol) en acetona (2.0 mL, 27 mmol) se agito a 60°C durante 1 hora, luego se enfrio a temperatura ambiente y se agrego a mezcla de ester 2-oxo-2-feniletilico del acido (R)-3-[N-(3-clorobifenil-4-ilmetil)-N-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 30.0 mg, 54.5 pmol) y carbonato de cesio (17.8 mg, 0.054.5 pmol) en acetona (1 mL). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas, se concentro, se disolvio en AcOH (2 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron. Se agregaron zinc (178 mg, 2.7 mmol) y AcOH (1.0 mL, 18 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (2.2 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C24H24ClNaOg, 534.12; encontrado 534.3.
Ejemplo 8F: Acido (R)-3-[N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-isopropoxicarboniloximetoxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000094_0002
Una mezcla de isopropilcarbonato de clorometilo (15.6 mg, 102 pmol) y Nal (15.3 mg, 102 pmol) en acetona (0.7 mL, 10 mmol) se agito a 65°C durante 1 hora, luego se agrego 2-oxo-2-feniletil ester de acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil) hidrazino]-2-hidroxipropionico (20.0 mg, 36.4 pmol) que habfa sido disuelto en acetona (0.4 mL, 5 mmol) a temperatura ambiente y se trato con carbonato de cesio (13.0 mg, 40 pmol). La mezcla resultante se calento luego a 40°C durante 1 hora. Se anadio DIPEA (0.2 mL, 1 mmol) y se continuo calentando durante 1 hora. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se concentro. El residuo se sometio a particion entre EtOAc (10.0 mL) y agua (2.0 mL). La capa organica se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (3.0 mL), NaCl acuoso saturado (3.0 mL), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro. Se agregaron zinc (90.8 mg, 1.4 mmol) y AcOH (0.5 mL, 9 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Los solidos se lavaron con AcOH (1.0 mL) y luego se filtraron. Los filtrados se combinaron y se purificaron por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tftulo (3.8 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H26CbO9548.14; encontrado 548.5.
Ejemplo 8G: Acido (R)-3-{N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-[3-(5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetoxi)-isoxazol-5-carbonil] hidrazino}-2-hidroxipropionico
Figure imgf000095_0001
Una mezcla de 4-clorometil-5-metil-1,3-dioxol-2-ona (11.9 pl, 109 pmol) y Nal (16.4 mg, 109 pmol) en acetona (2.0 mL, 27 mmol) se agito a 60°C durante 1 hora, luego se enfrio a temperatura ambiente y se agrego a una mezcla de acido (R)-3-[N- (3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-feniletil ester (20.0 mg, 36.4 pmol) y carbonato de cesio (14.2 mg, 43.6 pmol) en acetona (1 mL). La mezcla resultante se agito a 60°C durante 2 horas, se concentro, se purifico por cromatograffa instantanea (EtOAc/hexanos=0-100%). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron. Se agregaron zinc (178 mg, 2.7 mmol) y AcOH (1.0 mL, 18 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Los solidos se lavaron con AcOH (0.5 mL) y luego se filtraron. Los filtrados se combinaron y se purificaron por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del fftulo (2.8 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C25H22ClN3Og, 544.10; encontrado 544.5.
Ejemplo 8H: Acido (S)-2-amino-3-metilbutirico 5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(3'-cloro-bifenil-4-ilmetilo) hidrazinocarbonil]isoxazol-3-iloximetil ester
Figure imgf000095_0002
Una mezcla de ester cloromefflico del acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutmco (52.8 mg, 198 pmol) y Nal (29.8 mg, 198 pmol) en acetona (1.0 mL, 14 mmol) se calento a 65°C durante 1 hora, se anadieron entonces acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-ester fenilefflico (36.4 mg, 66.2 pmol) y carbonato de cesio (25.9 mg, 79.4 pmol). La mezcla resultante se agito a 65°C durante 3 horas, se concentro, se purifico por cromatograffa instantanea (EtOAc/hexanos = 0-100%). Se agregaron zinc (216 mg, 3.3 mmol) y AcOH (1.0 mL, 18 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se concentro por evaporacion rotatoria. Se anadieron TFA (0.1 mL, 1 mmol) y DCM (0.1 mL, 2 mmol) y la mezcla se agito durante 30 minutos y luego se concentro. El residuo se disolvio en AcOH (1.5 mL), se filtro y se purifico por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del fftulo en forma de una sal de TFA (3.0 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C26H29ClN4Os, 561.17; encontrado 561.2.
Ejemplo 81: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (R)-1-carboxi-2-[N-(3'-cloro-bifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5)-carbonil)hidrazino]etil ester
Figure imgf000096_0001
El acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutmco (9.6 mg, 54.5 jm ol) y HATU (23.5 mg, 62 jm ol) se agitaron en DCM (1.0 mL, 16 mmol) durante 10 minutos. Se anadieron acido (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 2-oxo-2-feniletil ester (20.0 mg, 36.4 jm ol) y DIPEA (31.7 jL , 182 jmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. A continuacion, la mezcla se concentro y se purifico por cromatograffa instantanea (EtOAc/hexanos = 0-100%). Se agregaron zinc (119 mg, 1.8 mmol) y AcOH (0.5 mL, 9 mmol). La mezcla se agito durante 2 horas y se filtro. Los solidos se lavaron con AcOH (1 mL) y se filtraron. Los filtrados combinados se purificaron por HPLC preparativa en fase reversa para producir el compuesto del tttulo (0.8 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C27H29ClN4Og, 589.16; encontrado 589.3.
Ejemplo 8J: Acido (S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbinlico 5-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(3'-clorobifenil-4-ilmetilo)hidrazinocarbonil]isoxazol-3-iloximetil ester
Figure imgf000096_0002
Se disolvio acido (R)-3-[N'-t-butoxicarbonil-N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (406 mg, 965 jmol) en DMF (5 mL). Se anadio carbonato de potasio (333 mg, 2.4 mmol) seguido de 2-bromo-1-feniletanona (230 mg, 1.2 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se elimino al vado y el residuo se purifico (columna de fase normal CombiFlash). Las fracciones limpias se recogieron y combinaron para producir el Compuesto 1 (280 mg).
Figure imgf000096_0003
El compuesto 1 (200 mg, 371 jmol) se disolvio en MeCN (3 mL). Se anadio una solucion de HCl 4.0 M en dioxano (928 jl, 3.7 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se elimino al vado y el residuo, el Compuesto 2, se uso en la siguiente etapa sin ninguna purificacion adicional.
Figure imgf000097_0001
El acido 3-((S)-2-t-butoxicarbomlamino-3-metilbutmloximetoxi)isoxazol-5-carboxflico (44.1 mg, 123 jm ol) y HATU (78 mg, 205 jm ol) se combinaron en DMF (1 mL) y se agitaron a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se agregaron el Compuesto 2 (45 mg, 103 jm ol) y DIPEA (54 j L, 307 jmol), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 15 minutos. El disolvente se elimino al vado y el residuo se purifico (columna de fase normal CombiFlash). Las fracciones limpias se recogieron y combinaron para dar el Compuesto 3 (41 mg).
Figure imgf000097_0002
El Compuesto 3 (41 mg, 53 jm ol) se disolvio en AcOH (1 mL) y se anadio zinc (172 mg, 2.6 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 45 minutos a 1 hora hasta que se completo la reaccion. El zinc se retiro por filtracion y la solucion se purifico (columna en fase reversa) para producir el compuesto del tttulo (7 mg). MS m/z [M+H]+ calculado para C31H37ClN4O10, 661.22; encontrado 661.2.
Ejemplo 8K: Acido (R)-3-[N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico acetoximetil ester
Figure imgf000097_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 8L: Acido (S)-2-amino-3-metilbutmco (R)-3-[N-(3'-Clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonil)-hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000098_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 8M: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico (R)-3-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidromisoxazol-5-carbonil)hidrazino]- 2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000098_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 8N: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico (R)-1-carboxi-2-[N-(3'-clorobifenil-4-ilmetil)-N'-(3-hidroxiisoxazol-5-carbonilo)hidrazino]etil ester
Figure imgf000098_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 9A: Acido (R)-3-[N-(2',5'-Diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000099_0001
El acido 1-hidroxi-1H-1,2,3-triazol-4-carboxflico (42.6 mg, 330 jm ol) y HATU (125 mg, 330 jm ol) se combinaron en DMF (2 mL) y se agitaron durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se anadio DIPEA (86 jL , 495 jm ol) y ester metflico del acido (R)-3-[N-(4-bromobencil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (50 mg, 0.2 mmol) y la mezcla resultante se agito durante 30 minutos. La mezcla se evaporo a presion reducida y el producto se disolvio en EtOH (0.8 mL, 10 mmol) y agua (0.2 mL, 10 mmol). Se anadieron acido 2,5-diclorofenilboronico (57 mg, 297 jmol), K2CO3 (68 mg, 495 jm ol) y SilicaCat®DPP-Pd (0.28 mmol/g de carga; 58.9 mg, 16.5 jm ol) y la mezcla resultante se calento a 120°C durante 10 minutos. La mezcla se filtro y se anadio LiOH acuoso 1M (1.2 mL, 1.2 mmol) al filtrado. La mezcla se agito hasta que la reaccion se completo (1 hora), luego se aspiro a sequedad y se purifico por HPLC preparativa para producir el compuesto del tftulo en forma de una sal de TFA (14 mg, pureza del 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C49H17Cl2N5O5, 466.06; encontrado 466.2.
Ejemplo 9B: Acido (R)-3-[N'-(1-Acetoximetoxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)-N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroxipropionico
Figure imgf000099_0002
Se anadio acetato de bromometilo (15.3 mg, 100 jm ol) a una solucion de acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-1,2,3-triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (31.2 mg, 66.8 jm ol) en acetona (0.5 mL, 6.8 mmol) seguido de Et3N (18.6 jl, 134 jmol). La mezcla resultante se agito a 55°C durante 1 hora. La mezcla se concentro entonces al vacfo para dar un ftquido amarillo. El ftquido crudo se purifico (cromatograffa en columna preparativa a escala C18, columna pequena, usando 30-90% de MeCN en agua con 0.05% de TFA) para producir el compuesto del tftulo (5.2 mg, pureza del 96%) como un solido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H21CbN5O7, 538.08; encontrado 538.1.
Ejemplo 9C: Acido butftico 4-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil-[1,2,3 ] triazol-1-iloximetil ester
Figure imgf000099_0003
Se anadio butirato de clorometilo (13.7 mg, 100 pmol) a una solucion de acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-1,2,3-triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (31.2 mg, 66.8 pmol) en acetona (0.5 mL, 6.8 mmol) seguido de Et3N (18.6 pl, 134 pmol). La mezcla resultante se agito a 65°C durante 2 horas. La mezcla se concentro entonces al vado para dar un ftquido amarillo. El ftquido crudo se purifico (cromatograffa en columna preparativa a escala C18, columna pequena, usando 30-90% de MeCN en agua con 0.05% de TFA) para producir el compuesto del tftulo (6.1 mg, pureza 99%) como un solido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H25CbN5O7, 566.11; encontrado 566.1.
Ejemplo 9D: Acido (R)-3-{N-2',5'-Diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-[1-(5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetoxi)-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil]hidrazino}-2-hidroxipropionico
Figure imgf000100_0001
Se anadio 4-clorometil-5-metil-1,3-dioxol-2-ona (14.9 mg, 100 pmol) a una solucion de acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4- acido ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-1,2,3-triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico (31.2 mg, 66.8 pmol) en acetona (0.5 mL, 6.8 mmol) seguido de Et3N (18.6 pL, 134 pmol). La mezcla resultante se agito a 65°C durante 2 horas. La mezcla se concentro entonces al vacfo para dar un ftquido amarillo. El ftquido crudo se purifico (cromatograffa en columna C18 a escala preparativa, columna pequena, usando MeCN al 30-90% en agua con TFA al 0.05%) para producir el compuesto del tftulo (10.0 mg, pureza 99%) como un solido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C24H21CbN5Os, 578.08; encontrado 578.1.
Ejemplo 9E: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]-triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000100_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo.
Ejemplo 9F: Acido (R)-3-[N-(2',5'-Diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico isopropoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000101_0001
A una mezcla de acido (R)-3-[N'-(1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)-N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetilo)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (400 mg, 790 pmol) y clorometil ester isopropil ester del acido carbonico (1.5 mL) se anadieron Nal (237 mg, 1.6 mmol) y lutidina (166 mg, 1.6 mmol). La mezcla se agito a 50°C durante 3 horas. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyo con agua (15 mL) y se extrajo con EtOAc (2x15 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se concentraron y se purificaron por cromatograffa en columna (PE:EtOAc = 5:1 a 2:1) para dar el Compuesto 1 como un solido amarillo claro (230 mg). LC-MS: 622 [M+H]+.
Figure imgf000101_0002
A una solucion del Compuesto 1 (230 mg, 370 pmol) en THF (5 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (64 mg, 56 pmol) y acido 1,3-dimetilbarbiturico (577 mg, 3.7 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentro. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Daisogel-C18, 250 x 50 mm, 10 p; MeCN-H2O (TFA al 0.1%) del 50% al 90%] para producir el compuesto del tttulo en forma de un solido blanco (120 mg). LC-MS: 582 [M+H]+. 1H-RMN (MeOD, 400 Hz): 81.13-1.24 (d, 6H), 3.33-3.36 (m, 2H), 4.08-4.11 (m, 2H), 4.34-4.35 (m, 1H), 5.66 (s, 2H), 7.15­ 7.38 (m, 4H), 7.39-7.44 (m, 3H), 8.11 (s, 1H).
Ejemplo 9G: Acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico acetoximetil ester
Figure imgf000101_0003
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tttulo. Ejemplo 9H: Acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 5-metil-2-oxo-[1,3]dioxol-4-ilmetil ester
Figure imgf000102_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 9I: Acido (R)-3-[N-(2',5-Diclorobifenil-4-ilmetil)-N-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico etoxicarboniloximetil ester
Figure imgf000102_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 9J: Acido butftico (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonilo)hidrazino]-2-hidroxipropioniloximetil ester
Figure imgf000102_0003
A una mezcla de acido (R)-3-[N'-(1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)-N-(2',5-diclorobftenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (300 mg, 590 pmol) y butirato de clorometilo (1.5 mL) se anadieron Nal (178 mg, 1.2 mmol) y lutidina (124 mg, 1,2 mmol). La mezcla se agito a 50°C durante 5 horas. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyo con agua (15 mL) y se extrajo con EtOAc (2x15 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se concentraron y se purificaron mediante cromatograffa en gel de sflice (gel de sflice: malla 200-300; elucion con PE:EtOAc = 5:1 a 2:1) para dar el Compuesto 1 como un solido amarillo claro (220 mg). LC-MS: 606 [M+H]+, 608 [(M+2) H]+.
Figure imgf000103_0001
A una solucion del Compuesto 1 (220 mg, 360 pmol) en THF (5 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (22 mg, 20 pmol) y acido 1,3-dimetilbarbiturico (525 mg, 3.6 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentro. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Daisogel-C18, 250 x 50 mm, 10 p; MeCN-H2O (0.1% de TFA) del 60% al 90%] para producir el compuesto del tttulo en forma de un solido blanco (80 mg). LC-MS: 566 [M+H]+, 568 [(M+2) H]+. 1H-RMN (CD3OD, 400 Hz): 80.93 (t, 3H), 1.62 (q, 2H), 2.31 (t, 2H), 3.32-3.37 (m, 2H), 4.20 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 5.75 (dd, 2H), 7.35 (m, 4H), 7.47-7.54 (m, 3H), 8.20 (s, 1H).
Ejemplo 9K: Acido (R)-3-[N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)-N'-(1-hidroxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)hidrazino]-2-hidroxipropionico 1-ciclohexiloxicarboniloxietil ester
Figure imgf000103_0002
A una mezcla de acido (R)-3-[N'-(1-aliloxi-1H-[1,2,3]triazol-4-carbonil)-N-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetilo)-hidrazino]-2-hidroxipropionico (300 mg, 590 pmol) y acido carbonico 1 -cloro-etil ester ciclohexil ester (1.5 mL) se anadieron Nal (178 mg, 1.2 mmol) y lutidina (124 mg, 1.2 mmol). La mezcla se agito a 50°C durante 5 horas. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyo con agua (15 mL) y se extrajo con EtOAc (2x15 mL). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se concentraron y se purificaron mediante cromatograffa en gel de sflice (PE: EtOAc = 5:1 a 2:1) para dar el Compuesto 1 como un solido amarillo claro. (200 mg). LC-MS: 676 [M+H]+.
Figure imgf000103_0003
A una solucion del Compuesto 1 (200 mg, 296 pmol) en THF (5 mL) se anadio Pd(PPh3)4 (46 mg, 40 pmol) y acido 1,3-dimetilbarbiturico (461 mg, 3.0 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentro. El residuo se purifico por HPLC preparativa [Daisogel-C18, 250 x 50 mm, 10 p; MeCN-H2O (0.1% de TFA) del 60% al 90%] para producir el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (60 mg). LC-MS: 636 [M+H]+. 1H-RMN (MeOD, 400 Hz): 8 1.29-1.55 (m, 9H), 1.70-1.74 (m, 2H), 1.85-1.89 (m, 2H), 3.33-3.40 (m, 2H), 4.19-4.22 (m, 2H), 4.37-4.40 (m, 1H), 4.57-4.60 (m, 1H), 6.67-6.74 (q, 1H), 7.33-7.36 (m, 4H), 7.46-7.53 (m, 3H) , 8.19 (s, 1H). Ejemplo 9L: Acido (S)-2-amino-3-metilbutftico 4-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]-[1,2,3]triazol-1-iloximetil ester
Figure imgf000104_0001
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ejemplo 9M: Acido (S)-2-metoxicarbonilamino-3-metilbutftico 4-[N'-((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)-N'-(2',5'-diclorobifenil-4-ilmetil)hidrazinocarbonil]-[1,2,3]triazol-1-iloximetil ester
Figure imgf000104_0002
Usando los procedimientos descritos en el presente documento, tambien se puede preparar el compuesto del tftulo. Ensayo - Ensayos in vitro para la cuantificacion de las potencias inhibidoras (IC50) en NEP humana y de rata, y ACE humana
Las actividades inhibidoras de los compuestos en la neprilisina humana y de rata (EC 3.4.24.11; NEP) y la enzima convertidora de angiotensina humana (ACE) se determinaron usando ensayos in vitro como se describe a continuacion.
Extraccion de la actividad NEP de los rinones de rata
Se preparo NEP de rata a partir de los rinones de ratas Sprague Dawley adultas. Se lavaron rinones completos en solucion salina tamponada con fosfato fno (PBS) y se llevaron en regulador de lisis helado (Triton X-114 al 1%, NaCl 150 mM, tris(hidroximetil) aminometano (Tris) 50 mM (Tris) pH 7.5; Bordier (1981) J. Biol. Chem. 256: 1604-1607) en una proporcion de 5 mL de regulador por cada gramo de rinon. Las muestras se homogeneizaron en hielo utilizando un triturador de tejidos de mano Polytron. Los homogeneizados se centrifugaron a 1000 x g en un rotor de cubeta oscilante durante 5 minutos a 3°C. El sedimento se resuspendio en 20 mL de regulador de lisis helado y se incubo en hielo durante 30 minutos. Las muestras (15-20 mL) se colocaron en capas sobre 25 mL de regulador amortiguador helado (6% p/v de sacarosa, 50 mM pH 7.5 Tris, 150 mM NaCl, 0.06%, Triton X-114), se calentaron a 37°C durante 3­ 5 minutos y centrifugado a 1000 x g en un rotor de cubeta giratoria a temperatura ambiente durante 3 minutos. Las dos capas superiores se retiraron por aspiracion, dejando un precipitado aceitoso viscoso que contema la fraccion de membrana enriquecida. Se anadio glicerol a una concentracion del 50% y las muestras se almacenaron a -20°C. Las concentraciones de protema se cuantificaron utilizando un sistema de deteccion de BCA con albumina de suero bovino (BSA) como estandar.
Ensayos de inhibicion enzimatica
La NEP humana recombinante y la ACE humana recombinante se obtuvieron comercialmente (R&D Systems, Minneapolis, MN, numeros de catalogo 1182-ZN y 929-ZN, respectivamente). El sustrato peptidico fluorogenico Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH (Medeiros et al., (1997) Braz. J. Med. Biol. Res. 30: 1157-62; Anaspec, San Jose, CA) y Abz-Phe-Arg-Lys(Dnp) -Pro-OH (Araujo et al. (2000) Biochemistry 39: 8519-8525; Bachem, Torrance, CA) se utilizaron en los ensayos NEP y ACE respectivamente.
Los ensayos se realizaron en placas opacas blancas de 384 pozos a 37°C utilizando los sustratos peptidicos fluorogenicos a una concentracion de 10 pM en regulador de ensayo (NEP: HEPES 50 mM, pH 7.5, NaCl 100 mM, monolaurato de polietilenglicol sorbitano al 0.01%. (Tween-20), ZnsO410 pM; ACE: HEPES 50 mM, pH 7.5, NaCl 100 mM, Tween-20 al 0.01%, ZnSO4 1 pM). Las enzimas respectivas se usaron en concentraciones que dieron como resultado una proteolisis cuantitativa de 1 pM de sustrato despues de 20 minutos a 37°C.
Los compuestos de ensayo se ensayaron en el intervalo de concentraciones de 10 pM a 20 pM. Los compuestos de ensayo se agregaron a las enzimas y se incubaron durante 30 minutos a 37°C antes de iniciar la reaccion mediante la adicion de sustrato. Las reacciones se terminaron despues de 20 minutos de incubacion a 37°C mediante la adicion de acido acetico glacial hasta una concentracion final de 3.6% (v/v).
Las placas se leyeron en un fluorometro con longitudes de onda de excitacion y emision ajustadas a 320 nm y 405 nm, respectivamente. Las constantes de inhibicion se obtuvieron mediante regresion no lineal de los datos mediante la ecuacion (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA):
Figure imgf000105_0001
donde v es la velocidad de reaccion, v0 es la velocidad de reaccion no inhibida, I es la concentracion del inhibidor y K' es la constante de inhibicion aparente.
El compuesto de fórmula I' (Ejemplo 1A) se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 1B y 1C no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que estos profarmacos tengan actividad de n Ep in vivo.
El compuesto de fórmula II' (Ejemplo 2A) se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. El compuesto profarmaco del Ejemplo 2B no inhibio la enzima en este ensayo in vitro, o no se probo ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.
El compuesto de fórmula III' (Ejemplo 3A) se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 3B-L no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.
El compuesto de fórmula IV' (Ejemplo 4A) se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 4B-Q no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que estos profarmacos tengan actividad de n Ep in vivo.
El compuesto de fórmula V' (Ejemplo 5A) se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. El compuesto profarmaco de los Ejemplos 5B-K no inhibio la enzima en este ensayo in vitro, o no se probo ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.
El compuesto del Ejemplo 6A se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 6B-P no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que estos profarmacos tengan actividad de n Ep in vivo.
El compuesto de fórmula VII' se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 7A-E y 7J no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.
El compuesto de fórmula VIII' se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi a la NEP humana de >9.0. Los compuestos profarmacos de los Ejemplos 8A-I no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.
El compuesto del Ejemplo 9A se probo en este ensayo y se encontro que tema un valor de pKi en la NEP humana de >9.0. El/los compuestos profarmaco de los Ejemplos 9B-K no inhibieron la enzima en este ensayo in vitro, o no se probaron ya que no se esperana actividad en este ensayo; sin embargo, con base en la actividad de la forma activa, se espera que este profarmaco tenga actividad de NEP in vivo.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula X:
Figure imgf000107_0001
(i) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000107_0002
y cuando X es:
Figure imgf000107_0003
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O- alquilo C2-4 , -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 ,-CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000107_0004
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; y
cuando X es:
Figure imgf000107_0005
R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona entre -CH2OC(O)CHa y -CH2OC(O)-CH[CH(CHa)2]NH2 ; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o
(ii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000108_0001
y
R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3 , -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)-CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000108_0002
o R2 se selecciona entre -C(O)- alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O- alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(iii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000108_0003
y
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcO(O)O-alquilo C2-4,-CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000108_0004
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(iv) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000108_0005
R es H o -CH3 ; y
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CFa, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3,-C(CH3)(CFa)2, -CH(CH2CHa)CFa, -CH(CHa)CF2CFa, -(CH2)m OH, -CH2CH(NH2)-COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)-O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000109_0001
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o R2 es -C(O)CH2NH2 y R7 es -CH2CH3 ; o
(v) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000109_0002
y R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O-ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 ,-CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000109_0003
o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R7 es H; o
(vi) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000109_0004
y
R2 y R4 son H, y R7 se selecciona entre H, -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3 , -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O- ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo,
Figure imgf000110_0001
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o
R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo Ci-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo Ci-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es H, y R7 es H; o R2 es H, R4 es -CH2-OP(O)(ORe)2 o -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es -CH2C R2 es -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R4 es H, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2; o
(vii) Ra es F; Rb es Cl; X es
Figure imgf000110_0002
y
R2 y R4 son H, y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -CH2CF2CF3 , -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)-COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O- ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHRd-NH2 , -CH2OC(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, bencilo, y
Figure imgf000110_0003
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 se selecciona de H y -CH2CH3 ; o R2 se selecciona entre -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo
C1-6, y -P(O)(ORe)2 , y R4 y R7 son H; o
(viii) Ra es H; Rb es Cl; X es
Figure imgf000110_0004
y
R2 es H, R3 es -OH y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O- ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; o R2 se selecciona de -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R3 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000111_0001
y R7 es H; o
(ix) Ra es Cl; Rb es Cl; X es
Figure imgf000111_0002
y
R2 es H, R4 es -OH, y R7 se selecciona de -CH2CF3 , -(CH2)2CF3, -C(CHa)(CFa)2 , -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHRcOC(O)-alquilo C1-4, -CHRcOC(O)O-alquilo C2-4, -CHRcOC(O)O- ciclohexilo, -alquileno C2-4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; y
Figure imgf000111_0003
o R2 se selecciona de -C(O)-alquilo C1-6, -C(O)CHRd-NH2 , -C(O)CHRd-NHC(O)O-alquilo C1-6, y -P(O)(ORe)2 , R4 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R4 se selecciona de OCHRcOC(O)-alquilo C1-4, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000111_0004
y R7 es H;
donde cada Rc es independientemente H o alquilo C1-3; cada Rd es independientemente H, -CH3 , -CH(CH3)2, fenilo o bencilo;
y cada Re es independientemente H, alquilo C1-6 o fenilo;
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
2. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula Via o VIb:
Figure imgf000112_0001
en donde:
R2 es H, R4 es H, y R7 se selecciona de H, -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CH3 , -(CH2)2OCH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -(CH2)2-N(CH3)2, -(CH2)3-N(CH3)2, -(CH2)4-N(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2,
Figure imgf000112_0002
o R2 es H, R4 se selecciona de -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H; o R2 se selecciona de -C(O)CH3, -C(O)CH(CH3)2, y -C(O)CH2CH(CH3)2, R4 es H, y R7 es H; o
R2 es H, R4 es -CH2-OP(O)(OH)2 o -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2; o
R2 es -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R4 es H, y R7 es -CH2CH3 o -CH2CH(CH3)2.
3. El compuesto de la reivindicación 1, de fórmula la o Ib:
Figure imgf000112_0003
donde X es:
Figure imgf000112_0004
R2 es H y R7 se selecciona de -CH2CH3 y -CH2CH(CH3)2; o X es:
Figure imgf000113_0001
R2 es H, R3 es -OH, y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3 y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3 y -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 es H.
4. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula II:
Figure imgf000113_0002
donde R2 es H y R7 es -CH2CH3.
5. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula III:
Figure imgf000113_0003
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CF3 , -(CH2)2OCH3,-CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2,-CH(CH3)OC(O)O-ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000113_0004
o R2 es -P(O)(OH)2 y R7 es H.
6. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula IV:
Figure imgf000114_0001
donde R es -CH3, R2 es H, y R7 se selecciona entre -CH2CF2CF3 , -(CH2)2OCHa,-CH2OC(O)CHa, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2,-CH(CH3)OC(O)O-ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3,
Figure imgf000114_0002
o R es -CH3 ; R2 se selecciona de -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2NH2 , -C(O)CH(CH3)NH2, -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; y R7 es H; o R es -CH3, R2 es -C(O)CH2NH2 , y R7 es -CH2CH3.
7. El compuesto de la reivindicación 1, de fórmula V:
Figure imgf000114_0003
donde R2 es H y R7 se selecciona entre -CH2CH3 , -CH2CH(CH3)2, -CH2CF2CF3,-CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2,-CH(CH3)OC(O)O- ciclohexilo, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000115_0001
8. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula Vila o VIIb:
Figure imgf000115_0002
donde R2 y R4 son H, y R7 se selecciona entre -CH2CF2CF3 , -CH2OC(O)CH3,-CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y
Figure imgf000115_0003
o R2 es H, R4 es -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R7 se selecciona de H y -CH2CH3 ; o R2 se selecciona de -C(O)CH3 y -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y R4 y R7 son H.
9. El compuesto de la reivindicación 1, de la fórmula VIM:
Figure imgf000115_0004
donde R2 es H, R3 es -OH, y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3,-CH2C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; o R2 se selecciona de -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH(CH3)2, -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y-C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, R3 es -OH, y R7 es H; o R2 es H, R3 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3, -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)OCH2CH3,-OCH2OC(O)OCH(CH3)2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, y
Figure imgf000116_0001
y R7 es H.
10. El compuesto de la reivindicación 1, de la formula IXa o IXb:
Figure imgf000116_0002
donde R2 es H, R4 es -OH y R7 se selecciona de -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3,-CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O- ciclohexilo,-CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000116_0003
o R2 es H, R4 se selecciona de -OCH2OC(O)CH3, -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, y
Figure imgf000116_0004
y R7 es H.
11. Un proceso para preparar un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que comprende la etapa de:
(a) hacer reaccionar un compuesto de formula
Figure imgf000117_0001
con un compuesto de formula HO-R7 en una reaccion de transesterificacion; o
(b) hacer reaccionar un compuesto de formula
Figure imgf000117_0002
con un compuesto de formula L-R7 en una reaccion de sustitucion nucleofila, donde L es un grupo saliente; o (c) hacer reaccionar un compuesto de formula
Figure imgf000117_0003
con un compuesto de formula L-R2 en una reaccion de sustitucion nucleofila, donde L es un grupo saliente; o (d) hacer reaccionar un compuesto de formula
Figure imgf000117_0004
con un compuesto de formula HOOC-X en una reaccion de acoplamiento, donde P es H o un grupo amino protector; para producir un compuesto de formula X.
12. Una composicion farmaceutica que comprende un vehnculo farmaceuticamente aceptable y un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, y opcionalmente
que ademas comprende un agente terapeutico seleccionado entre antagonistas del receptor de adenosina, antagonistas del receptor a-adrenergico, antagonistas del receptor p1-adrenergico, agonistas del receptor p2-adrenergico, antagonistas del receptor p-adrenergico de accion doble/antagonistas del receptor ai, disruptores avanzados del producto final de glicacion, antagonistas de la aldosterona, inhibidores de la aldosterona sintasa, inhibidores de la aminopeptidasa N, androgenos, inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina e inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina de accion doble/neprilisina, activadores y estimuladores de la enzima convertidora de la angiotensina 2, vacunas de la angiotensina II, anticoagulantes, agentes antidiabeticos, agentes antidiarreicos, agentes antiglaucoma, agentes antilfpidos, agentes antinconceptivos, agentes antitromboticos, antagonistas del receptor ATi y antagonistas del receptor ATi de doble accion/inhibidores de la neprilisina y bloqueadores multifuncionales del receptor de angiotensina, antagonistas del receptor de bradiquinina, bloqueadores de los canales de calcio, inhibidores de la quinasa, digoxina, diureticos, agonistas de la dopamina, inhibidores de la enzima convertidora de endotelina, antagonistas de los receptores de endotelina, inhibidores de la HMG-CoA reductasa, estrogenos, agonistas y/o antagonistas de los receptores de estrogenos, inhibidores de la recaptacion de monoaminas, relajantes musculares, peptidos natriureticos y sus analogos, antagonistas del receptor de la deposicion de peptidos natriureticos, inhibidores de la nepilisina donantes de oxido mtrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, antagonistas del receptor de N-metil d-aspartato, agonistas del receptor de opioides, inhibidores de la fosfodiesterasa, analogos de la prostaglandina, agonistas del receptor de la prostaglandina, inhibidores de la renina, inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina, bloqueadores de los canales de sodio, inhibidores y activadores de la ciclizacion de guanilato soluble, antidepresivos tridclicos, antagonistas de los receptores de vasopresina y combinaciones de los mismos.
13. La composicion farmaceutica de la reivindicación 12, en donde el agente terapeutico adicional opcional es un antagonista del receptor AT1.
14. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para uso en terapia.
15. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 14, para uso en el tratamiento de hipertension, insuficiencia cardfaca o enfermedad renal.
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