ES2710498T3 - Formulaciones de colágeno para la mejora del cuidado de la piel - Google Patents

Abstract

Un liposoma que comprende una proteína de colágeno de menos de 10 Kd, en donde dicha proteína de colágeno tiene una secuencia de aminoácidos que es al menos 85% idéntica a SEQ ID NO: 1 o a SEQ ID NO: 2.

Description

DESCRIPCION

Formulaciones de colageno para la mejora del cuidado de la piel

Antecedentes de la invencion

La piel es el organo mas grande del cuerpo humano y consiste esencialmente en dos capas principales: la epidermis y la dermis. La epidermis es la capa mas externa y, entre otras cosas, controla la perdida de agua de las celulas y los tejidos. La dermis es la capa de debajo de la epidermis y contiene vasos sangumeos, vasos linfaticos, folmulos pilosos y glandulas sudonparas. Debajo de la dermis se encuentra la hipodermis. Aunque la hipodermis se considera parte del sistema tegumentario, generalmente no se considera una capa de la piel. La hipodermis se utiliza principalmente para el almacenamiento de grasa.

La epidermis mas externa esta formada por un epitelio escamoso estratificado con una membrana basal subyacente. No contiene vasos sangumeos y se nutre mediante la difusion de la dermis. El principal tipo de celulas que forman la epidermis son los queratinocitos, con melanocitos y celulas de Langerhans tambien presentes. La epidermis se puede subdividir adicionalmente en los siguientes estratos (comenzando con la capa mas externa): corneo, lucido, granuloso, espinoso, basal. Las celulas se forman a traves de la mitosis en las capas mas internas. Mueven hacia arriba los estratos cambiando de forma y composicion a medida que se diferencian y se llenan de queratina. Eventualmente llegan al estrato corneo y se desprenden. Este proceso se llama queratinizacion y se lleva a cabo en aproximadamente 30 dfas.

La dermis consiste en gran parte en la protema colageno, que forma una red de fibras entrecruzadas que proporciona un marco para los vasos sangumeos y el crecimiento celular. Debido a que es el componente principal de la dermis, el colageno actua como estructura de soporte para la piel. La salud y la estabilidad del colageno son factores cnticos para determinar el contorno, las arrugas y las lmeas de la piel.

El colageno, una protema fibrosa de origen natural que se encuentra tanto en seres humanos como en animales, proporciona un soporte estructural para los huesos, tendones, ligamentos y vasos sangumeos, ademas de su papel en la piel. El colageno es la protema mas abundante en el organismo.

Existen varios tipos principales de colageno, que dan lugar a la variedad de propiedades estructurales y funcionales que el colageno muestra en todo el organismo. Con la edad o las lesiones, el colageno en una persona comienza a debilitarse y a perder su elasticidad. En la piel, este proceso eventualmente da como resultado la aparicion de arrugas.

La unidad estructural basica de una fibra de colageno es el tropocolageno. Consiste en una triple helice de tres cadenas peptfdicas entrelazadas de aproximadamente 1.000 residuos de aminoacido. La unidad polipeptfdica basica de la cadena peptfdica es una secuencia repetitiva de 3 aminoacidos, donde cada tercer residuo es una glicina, y los otros dos alternan entre prolina e hidroprolina. Es importante para la caractenstica de estabilizacion de la fibra de colageno que el residuo de glicina sea cada tercer residuo porque su pequena cadena lateral permite enrollar estrechamente las tres helices, proporcionando una estructura estabilizadora fuerte.

En la piel joven, el colageno permanece intacto y elastico; sin embargo, a medida que la piel envejece, la estructura de soporte se debilita, la piel pierde elasticidad y el soporte de colageno se desgasta debido al estres acumulado, por ejemplo, de las expresiones faciales. Esto hace que aparezcan lmeas y arrugas en la piel.

La terapia de reemplazo de colageno se puede utilizar para tratar afecciones asociadas con la descomposicion o perdida de colageno. Por ejemplo, las arrugas de la piel se pueden tratar inyectando colageno altamente purificado en la dermis. La inyeccion de colageno tambien se ha utilizado para suavizar el tejido cicatricial y crear labios mas carnosos.

Las terapias actuales de reemplazo de colageno incluyen inyecciones de colageno en las cuales se utiliza colageno animal purificado para reemplazar el tejido perdido. Zyderm® y Zyplast® son implantes de colageno bovino que se inyectan en la dermis. Allf se incorporan al marco de colageno humano y reponen el colageno natural de la piel, restaurando asf la estructura de soporte y el contorno de la piel. Esta terapia de inyeccion potencia y mejora el aspecto natural de la piel y suaviza las lmeas faciales y las cicatrices.

Los procedimientos que implican la inyeccion de colageno no estan exentos de riesgos. Por ejemplo, las inyecciones de colageno bovino pueden causar reacciones alergicas como enrojecimiento, hinchazon, firmeza, picazon y, en casos raros, formacion de abscesos. Peor aun, algunos medicos han informado sobre la aparicion de enfermedades del tejido conectivo tales como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistemico, dermatomiositis (DM) y polimiositis (MP) posteriores a las inyecciones de colageno en pacientes sin antecedentes previos de estos trastornos.

Ademas, el proceso de inyeccion en sf mismo plantea ciertos desaffos. Por ejemplo, el profesional que inyecta colageno (y/o acido hialuronico) debe controlar la profundidad, la orientacion y la posicion de la aguja en un sitio de inyeccion en particular, a la vez que proporciona una fuerza hacia adentro sobre el embolo que es suficiente para forzar una velocidad de flujo controlada de colageno de alta viscosidad fuera de la aguja y en la ubicacion exacta en la dermis que proporcionara el efecto cosmetico deseado. La ubicacion de la punta de la aguja en la profundidad adecuada dentro de la dermis tambien es diffcil para el profesional. Para situar la punta de la aguja a la profundidad de inyeccion adecuada, el profesional puede mover la aguja hacia adentro y hacia afuera con respecto a la superficie de la piel (epidermis). Sin embargo, no hay un punto de referencia visual, aparte del extremo del cuerpo de la jeringa, desde el cual el profesional puede determinar facilmente hasta que punto la aguja se extiende hacia la dermis. Por lo tanto, la punta de la aguja se puede colocar demasiado profunda o demasiado superficial para la aplicacion prevista. Se debe apreciar que la persona (profesional) que inyecta el colageno debe tener un buen control constante de los dedos, la mano y el brazo y tambien una excelente coordinacion ojo-mano para ser un proveedor eficaz de inyecciones de colageno cosmetico. Estas cualidades no siempre estan presentes en los individuos, y esto ha limitado la disponibilidad de la terapia con colageno para los pacientes.

Ademas de la inyeccion, el colageno se puede suministrar en la piel mediante una aplicacion topica. Desafortunadamente, se ha demostrado que tal terapia de colageno topico es menos eficaz que las formas convencionales de colageno que no parecen penetrar en la dermis. Como se senalo anteriormente, la piel consiste en multiples capas y es extremadamente compleja en terminos de su funcion y de su composicion qmmica. La aplicacion transdermica (a traves de la piel) de medicamentos y otras sustancias plantea una amplia gama de obstaculos de formulacion. La capacidad de suministrar las sustancias deseadas a una capa dentro de la piel es igualmente diffcil, o incluso mas diffcil.

Se han propuesto diversos medios para el suministro de sustancias a la piel.

La Patente de Estados Unidos Num. 5.354.564 describe productos para el cuidado personal que comprenden una dispersion acuosa de parffculas de silicona en donde dichas parffculas tienen un modificador de superficie adsorbido sobre su superficie en una cantidad suficiente para lograr un tamano de parffcula inferior a aproximadamente 400 nanometros (nm).

La Patente de Estados Unidos Num. 5.660.839 describe la incorporacion de parffculas huecas deformables en composiciones cosmeticas y/o dermatologicas que contienen sustancias grasas, para reducir o eliminar notablemente la sensacion pegajosa y/o grasa atribuida a estas sustancias grasas.

La Patente de Estados Unidos Num. 5.667.800 describe una suspension acuosa de nanoparffculas lipoides solidas, que comprende al menos un lfpido y preferiblemente tambien al menos un emulsionante, para aplicacion topica en el organismo.

La Patente de Estados Unidos Num. 5.780.060 describe microcapsulas con una pared de polifenoles vegetales entrecruzados y composiciones que las contienen. Las microcapsulas se obtienen mediante entrecruzamiento interfacial de polifenoles vegetales, particularmente flavonoides.

Las Patentes de Estados Unidos Num. 5.851.517 y 5.945.095 describen composiciones que incluyen una dispersion de parffculas de polfmero en un medio no acuoso. Se puede utilizar una dispersion de parffculas polimericas estabilizadas en la superficie en un medio no acuoso, en una composicion cosmetica, de higiene o farmaceutica. Las dispersiones pueden estar, en particular, en forma de nanoparffculas de poffmeros en dispersion estable en un medio no acuoso.

Las Patentes de Estados Unidos Num. 5.759.526 y 5.919.487 describen nanoparffculas recubiertas con una fase lamelar basada en tensioactivo de silicona y composiciones que las contienen. Las nanoparffculas, y en particular las nanocapsulas, provistas de un recubrimiento lamelar obtenido a partir de un agente tensioactivo de silicona, se pueden utilizar en una composicion, en particular una composicion topica, para el tratamiento de la piel, las mucosas, las unas, el cuero cabelludo y/o el cabello.

La Patente de Estados Unidos Num. 5.188.837 describe un sistema de microsuspension y un metodo para su preparacion. La microsuspension contiene liposferas que son microparffculas solidas insolubles en agua que tienen una capa de fosfolfpido incluida en su superficie. El nucleo de la liposfera es una sustancia solida que se va a suministrar o una sustancia que se va a suministrar que se dispersa en un velffculo solido inerte tal como una cera. La Patente de Estados Unidos Num. 4.919.841 describe un proceso para preparar parffculas activas encapsuladas mediante las etapas de: dispersion de materiales activos en cera fundida; emulsion del material activo/dispersion de cera en una solucion acuosa de tensioactivo durante no mas de 4 minutos; extincion de las capsulas por enfriamiento; y recuperacion de las capsulas solidificadas. Los ejemplos de materiales activos son las fragancias. Cada uno de estos metodos tiene desventajas, concretamente con respecto al suministro de colageno y/o acido hialuronico.

Los liposomas son estructuras de membrana lipfdica vesiculares que encierran, por ejemplo, un volumen de agua. La existencia de liposomas se conoce desde hace muchos anos. A principios de la decada de los 90, los investigadores estudiaron lecitina aislada (fosfatidilcolina), cefalina (fosfatidiletanolamina/fosfatidilserina), frenosina (galactosil ceramida) y kerasina (glucosil ceramida), encontraron que todas estas moleculas se hinchaban en agua para formar capas multilamelares hidratadas, consistentes en bicapas lipfdicas separadas por agua. Ademas, se encontro que las mezclas de Kpidos ionicos y no ionicos dispersados en agua forman "emulsiones" estables en las cuales las moleculas de lfpidos toman posiciones lado a lado para formar una fase mixta homogenea. Estas emulsiones fueron los equivalentes de lo que ahora se llaman liposomas multilamelares.

Los estudios físicos y qmmicos han demostrado que las sustancias anfffilas forman ciertas matrices preferidas en presencia de agua. La formacion de estas matrices, que incluye micelas, monocapas y capas bimoleculares, se debe a la necesidad de que los grupos de cabeza polar, que pueden ser ionogenos o no, se asocien con el agua y la necesidad de que la cola apolar e hidrofoba se excluya del agua. Exactamente que tipo de estructura adoptan depende de la naturaleza de la sustancia anfffila, de su concentracion, de la presencia de otras sustancias anfffilas, de la temperatura y de la presencia de sal y otros solutos en la fase acuosa.

Hasta hace poco, la tecnologfa de los liposomas se ha relacionado principalmente con las vesmulas compuestas por fosfolfpidos, predominantemente fosfatidilcolina, y estos siguen siendo el foco de la mayona de las publicaciones y patentes. Sin embargo, aunque los fosfolfpidos son adecuados para ciertas aplicaciones farmaceuticas, la tecnologfa de liposomas de fosfolfpidos se ha visto afectada por serios problemas, por ejemplo, los fosfolfpidos experimentan recambio rapidamente in vivo y son inestables en el almacenamiento. Ademas, son labiles y costosos de purificar o sintetizar, y la fabricacion de liposomas de fosfolfpidos es diffcil y su aumento a escala resulta costoso.

Aunque los liposomas son bien conocidos en la tecnica, no hay informes previos de su uso para suministrar eficazmente colageno y/o acido hialuronico en una formulacion para el cuidado de la piel.

Breve compendio de la invencion

La presente invencion se refiere a composiciones nuevas y ventajosas para el cuidado de la piel. En una realizacion preferida, la presente invencion proporciona formulaciones ventajosas para suministrar protemas de colageno a la piel. En una realizacion espedfica, las formulaciones de la presente invencion se utilizan para suministrar eficazmente protemas de colageno a la piel facial.

La presente invencion proporciona formulaciones ventajosas para el cuidado de la piel por medio de las cuales las protemas de colageno se pueden suministrar de manera facil y eficaz a la piel facial para mejorar la salud y el aspecto de la piel, las protemas de colageno se pueden administrar en una formulacion que es tan simple como una protema de colageno en una solucion salina. Sin embargo, en realizaciones preferidas, la formulacion comprende adicionalmente uno o mas agentes emulsionantes y/o potenciadores de la penetracion. Estos agentes adicionales pueden mejorar las caractensticas de la formulacion para evitar, por ejemplo, la separacion de fases. Estos agentes tambien pueden mejorar el transporte de los agentes hacia la piel en terminos de eficiencia y consistencia.

En una realizacion, la presente invencion proporciona una composicion para el cuidado de la piel con una cantidad segura y eficaz de uno o mas fragmentos de colageno, y/o variantes de los mismos, en donde la formulacion facilita el paso de la protema de colageno a traves de la epidermis y, por lo tanto, se suministra a la dermis de la piel. En una realizacion adicional, las protemas de colageno tambien se pueden suministrar a la epidermis. Por consiguiente, la presente invencion es util para regular y/o mejorar el estado de la piel (incluyendo el aspecto y/o la sensacion de la piel) al suministrar eficazmente protemas de colageno en la ubicacion apropiada dentro de la piel.

En una realizacion espedficamente lustrada en la presente memoria, la presente invencion proporciona formulaciones para administrar fragmentos de colageno de 8,5 Kd concretos a la piel. Las realizaciones adicionales se refieren al uso de protemas de colageno bioactivas que proporcionan una actividad biologica util ademas de actuar como un relleno dermico.

Ademas, el uso de las protemas de colageno concretas como se describe en la presente memoria es ventajoso para evitar efectos secundarios no deseados tales como reacciones alergicas o autoinmunitarias.

La presente invencion tambien se refiere a un metodo cosmetico de utilizacion de tales composiciones para regular y/o mejorar el estado de la piel. El metodo cosmetico de la presente invencion generalmente incluye la etapa de aplicar topicamente las composiciones a la piel (epidermis) del paciente que necesita tal tratamiento, en donde se aplica una cantidad eficaz de dicha composicion. En una realizacion preferida, la composicion se aplica al rostro. Ventajosamente, la presente invencion proporciona composiciones y metodos cosmeticos para combatir el envejecimiento de la piel, en donde combatir el envejecimiento de la piel puede incluir, por ejemplo, la hidratacion de la piel, el tratamiento de la aparicion de arrugas, lmeas finas y otras formas de textura no deseable de la piel. Al presentar protemas de colageno en las una o mas capas dermicas y/o epidermicas de la piel, se mejoran la forma, la fuerza y la funcion de la piel.

En ciertas realizaciones, las composiciones de la presente invencion comprenden una dispersion de vesmulas lipfdicas que contienen agentes, ademas de las protemas de colageno, que son utiles para retrasar, minimizar o eliminar el envejecimiento de la piel, las arrugas y/u otros cambios histologicos tfpicamente asociados con las condiciones intrmsecas (tales como el envejecimiento, la menopausia, el acne, etc.) y las condiciones extrmsecas (tales como la contaminacion ambiental, el viento, el calor, la baja humedad, los tensioactivos fuertes, etc.).

En una realizacion ilustrativa de la invencion, se utilizan vesmulas lipidicas paucilamelares no fosfolip^dicas que incorporan fragmentos de colageno humano para suministrar protemas de colageno a la piel de un sujeto humano. Las vesmulas lip^dicas paucilamelares no fosfolipidicas son particularmente ventajosas para su uso en la invencion ya que tales vesmulas son estables y poco costosas de fabricar, y tambien presentan un gran tamano de cavidad para contener la protema de colageno. En una realizacion alternativa, se utilizan ciclodextrinas para suministrar los agentes activos a la capa de la dermis de la piel.

Description detallada de las secuencias

SEQ ID NO: 1 es una protema de colageno util segun la presente invencion.

SEQ ID NO: 2 es una protema de colageno util segun la presente invencion.

Descripcion detallada

La presente invencion esta dirigida a materiales y metodos cosmeticos para la administration topica de una cantidad eficaz de protemas de colageno a la piel con el fin de mejorar el estado de la piel.

La presente invencion proporciona formulaciones ventajosas para el cuidado de la piel por medio de las cuales se pueden administrar de manera facil y eficaz una o mas protemas de colageno en la piel facial para mejorar la salud y el aspecto de la piel. De acuerdo con la presente invencion, se pueden administrar una o varias protemas de colageno en una formulation que comprende colageno en una solution salina. En realizaciones preferidas, la formulation comprende adicionalmente uno o mas agentes emulsionantes y/o mejoradores de la penetration. Estos agentes adicionales pueden mejorar las caracteristicas de la formulacion para evitar, por ejemplo, la separation de fases. Estos agentes tambien pueden mejorar el transporte de los agentes hacia la piel en terminos de eficacia y consistencia.

En una realizacion preferida, la presente invencion proporciona composiciones y metodos cosmeticos para utilizar tales composiciones, que comprenden una dispersion de vesmulas lipidicas que contienen al menos una protema de colageno (y, opcionalmente, otros agentes para el cuidado de la piel), en donde las vesmulas lipidicas promueven la estabilidad de la formulacion y/o facilitan la penetracion a traves de la epidermis y la dispersion del contenido de la vesmula, en la capa de la dermis de la piel.

La protema de colageno es inferior a 10 kd. En una realizacion espetificamente ilustrada en la presente memoria, la protema de colageno que se administra de acuerdo con la presente invencion es un fragmento de colageno de aproximadamente 8,5 Kd. Este fragmento puede tener, por ejemplo, una de las siguientes secuencias de aminoacidos:

Glu-Ala-Gly-Leu-Pro-Gly-Ala-Lys360

Gly-Leu-Thr-Gly-Ser-Pro-Gly-Ser-Pro-Gly-Pro-Asp-Gly-Lys-Thr-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro380

Ala-Gly-Gln-Asp-Gly-Arg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Ala-Arg-Gly-Gln-Ala-Gly400

Val-Met-Gly-Phe-Pro-Gly-Pro-Lys-Gly-Ala-Ala-Gly-Glu-Pro-Gly-Lys-Ala-Gly-Glu-Arg420

Gly-Val-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Ala-Val-Gly-Pro-Ala-Gly-Lys-Asp-Gly-Glu-Ala-Gly-Ala440

Gln-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Arg (SEQIDNO:l)

0

Glu-Ala-Gly-Leu-Pro-Gly-Ala-Lys-Gly-Leu-Ala-Gly-Ala-Pro-Gly-Ala-Pro-Gly-Pro-Asp-Gly-Lys-Ala-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro-Ala-Gly-Gin-Asp-Gly-Arg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Ala-Arg-Gly-Gin-Ala-Gly-Pro-Pro-Gly-Phe-Pro-Gly-Pro-Lys-Gly-Ala-Ala-Gly-Glu-Pro-Gly-Lys-Ala-Gly-Glu-Arg-Gly-Val-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Ala-Val-Gly-Pro-Ala-Gly-Lys-Asp-Gly-Glu-Ala-Gly-Ala-Gin-Gly-Pro-Pro-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Arg

(SEQIDNO:2)

La protema de colageno utilizada de acuerdo con la presente invencion comprende una portion (que tiene al menos 10 aminoacidos, preferiblemente al menos 25 aminoacidos, y mas preferiblemente al menos 50 aminoacidos, e incluso mas preferiblemente 75 aminoacidos, 90 aminoacidos, o la secuencia completa) que es al menos 85% identica a, preferiblemente al menos 90% identica a, y lo mas preferiblemente al menos 95% identica a SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 2.

En una realizacion adicional de la presente invencion, la protema de colageno que se administra es una protema de colageno de triple helice bioactiva que es un ligando para la integrina a2Pi. La administracion de esta protema se puede utilizar para promover la adherencia de fibroblastos, la cicatrization y la regulation al alza de algunas MMP (que eliminan enzimaticamente el colageno danado), la production de colageno y la fibronectina. Ventajosamente, esta protema es biologicamente activa incluso a bajas concentraciones.

A menudo se desea mejorar el estado de la piel debido a condiciones que pueden ser inducidas o causadas por factores internos y/o externos al organismo. Los ejemplos incluyen, entre otros, dano ambiental, habito de fumar, exposition a la radiation (incluida la radiation ultravioleta), envejecimiento cronologico, estado menopausico (p.ej., cambios postmenopausicos en la piel), estres, enfermedades, etc.

La presente invencion es util para mejorar terapeuticamente y/o profilacticamente las caracteristicas visibles y/o tactiles de la piel. Por ejemplo, en una realizacion, se reducen la longitud, la profundidad y/u otras dimensiones de las lmeas y/o arrugas y se logra la hidratacion.

La "mejora del estado de la piel" incluye la prevencion profilactica o el tratamiento terapeutico de una afeccion de la piel, y puede implicar uno o mas de los siguientes beneficios: engrosamiento de la piel, prevencion de la perdida de elasticidad de la piel y reduccion de lmeas o arrugas.

Las siguientes son definiciones adicionales relevantes para la presente invencion. A menos que se defina de otro modo, todos los terminos tecnicos utilizados en la presente memoria tienen el mismo significado que el entendido comunmente por un experto en la tecnica a la que pertenece esta invencion.

El termino "epidermis" o "epidermico", como se emplea en la presente memoria, se refiere a la capa mas externa de la piel.

El termino "aplicacion topica", como se emplea en la presente memoria, significa aplicar o extender las composiciones de la presente invencion sobre la superficie del tejido de la epidermis.

El termino "dermatologicamente aceptable", como se emplea en la presente memoria, significa que las composiciones o componentes de los mismas asf descritos son adecuados para su uso en contacto con tejido epidermico de mairnferos sin toxicidad, incompatibilidad, inestabilidad, respuesta alergica indebidas y similares. El termino "cantidad terapeuticamente eficaz", como se emplea en la presente memoria, se refiere a una cantidad de un compuesto (tal como una protema de colageno) o una composicion suficiente para inducir un beneficio positivo, preferiblemente una apariencia y/o sensacion positiva en la piel. De acuerdo con la presente invencion, la cantidad terapeuticamente eficaz es una cantidad de colageno, ya sea solo o combinado con otros agentes, que regula y/o mejora la piel, pero donde la cantidad es lo suficientemente baja como para evitar efectos secundarios graves, es decir, para proporcionar una razon entre beneficio y riesgo razonable, dentro del alcance del buen juicio del experto en la tecnica.

El termino "flacidez" como se emplea en la presente memoria significa la laxitud, flojedad o afeccion similar de la piel que se produce como resultado de la perdida, dano, alteraciones y/o anomalfas en la estructura y/o funcion dermicas.

Los terminos "alisar" y "suavizar", como se emplean en la presente memoria, se refieren a alterar la superficie del tejido epidermico de modo que mejore su sensacion tactil.

Los "signos de envejecimiento de la piel" incluyen, pero no se limitan a, todas las manifestaciones visibles desde el punto de vista visual y tactil, asf como cualquier otro macro- o micro- efecto debido al envejecimiento de la piel. Tales signos pueden ser inducidos o causados por factores intrmsecos o factores extrmsecos, p.ej., envejecimiento cronologico y/o dano ambiental. Estos signos pueden deberse a procesos que incluyen, entre otros, el desarrollo de discontinuidades en la textura, tales como arrugas y arrugas profundas, lmeas de la piel, grietas, bultos, poros grandes (p.ej., asociados con estructuras anexas tales como conductos de las glandulas sudonparas, glandulas sebaceas o folmulos pilosos), o irregularidad o aspereza, perdida de elasticidad de la piel, flacidez (incluida hinchazon en el area de los ojos y papadas), perdida de la firmeza de la piel, perdida de la tension de la piel, perdida de retroceso de la piel por deformacion, decoloracion (incluidas las ojeras), manchas, piel cetrina, regiones hiperpigmentadas de la piel tales como manchas y pecas por la edad, queratosis, diferenciacion anormal, hiperqueratinizacion, elastosis, descomposicion del colageno y otros cambios histologicos en el estrato corneo, la dermis, la epidermis, el sistema vascular de la piel (p. ej., telangiectasia o aranas vasculares) y tejidos subyacentes, especialmente los que estan cerca de la piel.

Como se emplea en la presente memoria, "mezcla de cizallamiento" significa la mezcla de una fase lipofila con una fase acuosa en condiciones turbulentas o de cizallamiento que proporcionan una mezcla adecuada para hidratar el lfpido y formar vesmulas lipfdicas

Por los terminos "disperso" y "dispersion" se entiende la disolucion o la formacion de una suspension o coloide para producir una fase autosuspensible.

Como se emplea en la presente memoria, un "acido nucleico" o una "molecula de acido nucleico" significa una cadena de dos o mas nucleotidos, tales como el ARN (acido ribonucleico) y el ADN (acido desoxirribonucleico). Una molecula de acido nucleico "recombinante" es aquella formada por una combinacion artificial de dos segmentos de secuencia separados de otra manera, p. ej., por smtesis qmmica o por la manipulacion de segmentos aislados de acidos nucleicos mediante tecnicas de ingeniena genetica.

Los terminos "protema" y "polipeptido" se utilizan de manera sinonima para significar cualquier cadena de aminoacidos unida por enlaces peptfdicos, independientemente de la longitud o la modificacion post-traduccional, p. ej., glicosilacion o fosforilacion. Un polipeptido "purificado" es aquel que se ha separado o aislado sustancialmente de otros polipeptidos en una celula u organismo en los que el polipeptido se encuentra naturalmente (p. ej., 90, 95, 98, 99, 100% libre de contaminantes).

Cuando se refiere a un acido nucleico o polipeptido, el termino "nativo" se refiere a un acido nucleico o polipeptido de origen natural.

Las composiciones de la presente invencion, que permiten la dispersion en la capa dermica de una protema de colageno, son utiles para mejorar la piel, incluyendo mejorar el aspecto y/o la sensacion de la piel. Por ejemplo, las composiciones de la presente invencion son utiles para mejorar la apariencia del estado de la piel proporcionando una mejora visual en la apariencia de la piel despues de la aplicacion de la composicion a la piel.

Ventajosamente, las composiciones de la presente invencion pueden tener propiedades deseables adicionales, que incluyen estabilidad, larga vida util, ausencia de irritacion cutanea significativa y buena estetica. En ciertas realizaciones, para lograr tales beneficios adicionales, las composiciones de la invencion comprenden adicionalmente agentes, ademas de la protema de colageno, que promueven la estabilidad de la composicion, reducen la irritacion de la piel y/o mejoran el atractivo estetico de la composicion.

Los ejemplos de buena estetica incluyen composiciones, tales como cremas y lociones lujosas, que (i) son ligeras y no grasas, (ii) tienen un tacto suave y sedoso sobre la piel, (iii) se extienden facilmente y/o (iv) se absorben rapidamente. Otros ejemplos de buena estetica incluyen composiciones que tienen un aspecto aceptable para el consumidor (es decir, que no presentan olor desagradable o decoloracion), y proporcionan una buena sensacion en la piel.

Como se emplea en la presente memoria, la referencia a "que comprende" contempla adicionalmente los escenarios alternativos de "que consisten en" y "que consiste esencialmente en". Ademas, el autor de la presente invencion contempla espedficamente composiciones que tienen solo un subconjunto de los diversos ingredientes expuestos en la presente memoria. En una realizacion, la composicion no comprende un agente para aclarar la piel.

Las realizaciones concretas comentadas a continuacion son solo ilustrativas.

Colageno

Las composiciones de la invencion pueden incluir una o mas protemas de colageno purificadas, sinteticas o recombinantes.

El uso de colageno humano sintetico o recombinante en las composiciones y metodos de la invencion se prefiere cuando el sujeto a tratar es un ser humano con el fin de evitar una respuesta inmunitaria al material de colageno. Los derivados de colageno pueden variar entre los colagenos de origen natural en varios aspectos. Los derivados de colageno pueden ser no glicosilados o glicosilados de manera diferente a los colagenos de origen natural. Los patrones de glicosilacion deseados se pueden producir mediante una variedad de metodos, que incluyen modificacion qmmica directa y reacciones de glicosilacion y desglicosilacion catalizadas enzimaticamente. Los patrones de glicosilacion deseados tambien se pueden producir inhibiendo o eliminando las enzimas necesarias para producir los patrones de glicosilacion naturales que se encuentran en los colagenos.

Los derivados de colageno pueden contener una o mas diferencias de residuos de aminoacidos en comparacion con las posiciones de residuos de aminoacidos correspondientes en un colageno de origen natural. Las variantes de colageno que contienen tales sustituciones de residuos de aminoacidos se pueden producir por medio de una variedad de metodos que incluyen tecnicas de ingeniena genetica y smtesis de peptidos in vitro. Se pueden producir variantes de colageno adicionales variando la cantidad de hidroxilisinas y/o hidroxiprolinas presentes en una molecula dada, mediante la expresion variada de lisina hidroxilasas y/o prolina hidroxilasas, en donde los genes de hidroxilasa (recombinante o de otro tipo) tambien se expresan en una celula anfitriona para la expresion de colageno recombinante, o derivados del mismo.

Se puede encontrar una descripcion de como producir protemas de colageno mediante tecnologfa de ADN recombinante, entre otros lugares, en las Patentes de Estados Unidos 5.405.757; 5.593.859; 6.617.431; 6.428.978; las solicitudes de patente PCT publicadas WO 93/07889 y WO94/16570, y patentes y solicitudes relacionadas. El colageno para su uso en la invencion puede ser colageno recombinante expresado y purificado a partir de fibroblastos humanos. Los fibroblastos utilizados para cultivar colageno en este metodo se escrutan en busca de patogenos conocidos y el material de colageno resultante se analiza en busca de contaminantes. Una vez que el colageno se afsla de las celulas, se somete a una inactivacion viral para mayor seguridad. Los metodos para expresar genes recombinantes en fibroblastos humanos son bien conocidos en la tecnica.

Dos materiales de colageno adicionales que se pueden utilizar de acuerdo con la presente invencion son FG-5017 y FG-5016 (FibroGen, South San Francisco, CA). FG-5017 esta elaborado a partir de colageno humano recombinante tipo III formulado por su seguridad y eficacia como un gel inyectable. FG-5016 es un colageno humano recombinante tipo III (rhClII) desarrollado para reemplazar el colageno derivado de animales en una variedad de aplicaciones farmaceuticas y dispositivos medicos. FG-5016 es un biomaterial altamente purificado y completamente caracterizado, que se produce utilizando metodologfa recombinante en un sistema de expresion de levadura libre de componentes animales. Esta metodologfa implica la expresion de genes que codifican colageno y que codifican prolil 4-hidroxilasa que permite la formacion de colageno de triple helice termicamente estable.

Los metodos para expresar genes recombinantes en celulas de levadura son bien conocidos en la tecnica y se describen en muchas referencias que incluyen Romanos et al., Yeast 8:423-488, 1992; Cohen et al., Nature 366: 698-701, 1993; y A. Wiseman, Genetically Engineered Proteins and Enzymes From Yeast: Production Control, 1991, Ellis Norwood Press, Nueva York. Los metodos para producir colageno de triple helice en celulas de levadura se describen en la Patente de Estados Unidos 6.451.557. Los productos de protemas de triple helice producidos en las celulas de levadura se pueden purificar a partir de las celulas mediante mecanismos bien conocidos en la tecnica, incluyendo tecnicas cromatograficas y de precipitacion convencionales (veanse, p. ej., Miller y Rhodes, Meth Enzymol., 82:33-64, 1982; y R.L. Trelstad, Native Collagen Fractionation, en: Immunochemistry of the Extracellular Matrix, vol. 1, H. Furthmayr, ed., CRC Press, Boca Raton, FL, 1982, pag. 31-41).

Independientemente de la fuente de colageno, el colageno y los derivados de colageno preferidos para su uso en la invencion son aquellos que estan dimensionados para encajar dentro de las vesmulas lipfdicas de la invencion, p. ej., de menos de aproximadamente 800 nm. Debido a que las fibrillas de colageno tienen un tamano de 20-150 nm, se prefieren las fibrillas en lugar de las fibras (que tienen 1.000-50.000 nm). Para mantener el colageno en forma de fibrilla, el pH y/o la fuerza ionica de la solucion que contiene las fibrillas se pueden manipular adecuadamente. Existen varios metodos para reducir el tamano del colageno, incluyendo la descomposicion enzimatica utilizando una proteasa. El colageno tambien se puede descomponer mecanicamente. Por ejemplo, el colageno se puede procesar mecanicamente despues del secado para producir partmulas finas que tienen un tamano inferior a 800 nm. Ademas, se puede utilizar la hidrolisis exhaustiva de una solucion que contiene colageno para prevenir la formacion de fibras. Acido hialuronico

El acido hialuronico (HA) tambien se puede incluir en la formulacion de la invencion. El HA esta presente en toda la naturaleza y es una combinacion de unidades de disacaridos repetidas de acido glucuronico y N-acetil glucosamina. Es poli-ionico y tiene una parte hidrofoba axial y una parte hidrofila central. El acido hialuronico es muy sensible a las hialuronidasas y, por lo tanto, tiene una vida media corta en el organismo. Con el fin de convertirlo en un producto que rellene las arrugas quetenga suficiente sostenibilidad a lo largo del tiempo, se puede entrecruzar.

Se pueden utilizar numerosas sustancias para entrecruzar el acido hialuronico, incluyendo formaldehndo, epoxidos, compuestos de poliaziridilo, divinil sulfona y otros. Un agente de entrecruzamiento es la divinil sulfona. Esta sustancia reacciona facilmente con el acido hialuronico en soluciones alcalinas acuosas, proporcionando de ese modo geles de HA entrecruzados. Estos geles se hinchan en el agua. La razon de hinchamiento depende del grado de entrecruzamiento del gel. El grado de entrecruzamiento se puede controlar cambiando varios factores, incluido el peso molecular del HA, su concentracion en la mezcla de reaccion, la concentracion de alcali y la razon de polfmero/DVS. La razon de hinchamiento de estos geles puede ser de 20 a 8.000, y mas, dependiendo de los parametros de la reaccion.

Un agente de entrecruzamiento aun mas preferido es el diglicidil eterde 1,4-butanodiol (BDDE).

La razon de hinchamiento de los geles de HA entrecruzados es sustancialmente mayor que la razon de hinchamiento de los geles entrecruzados de otros polisacaridos obtenidos en las mismas condiciones de reaccion. Probablemente, esto puede explicarse por la naturaleza unica del HA (en comparacion con otros polisacaridos) y sus soluciones acuosas. En el agua, una gran molecula de HA forma una bobina aleatoria muy flexible y larga que ocupa un gran volumen en la solucion.

Se puede utilizar la propiedad unica del HA para proporcionar geles entrecruzados altamente hinchados para efectuar la modificacion de las propiedades de geles entrecruzados elaborados de mezclas de HA con otros polfmeros hidrofilos. Estos polfmeros incluyen otros polisacaridos, sinteticos y naturales, tales como hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, goma de xantana, glicosaminoglicanos, protemas y glicoprotemas de diversos tipos, tales como colageno, elastina, albumina, globulina, etc., protemas sulfatadas, polfmeros solubles en agua sinteticos, tales como poli(alcohol vimlico) y sus copolfmeros, copolfmeros de poli(metacrilato de hidroxietilo) y similares. Se puede utilizar cualquier polfmero soluble en agua o soluciones alcalinas acuosas y que contienen grupos capaces de reaccionar con DVS, es decir, grupos hidroxilo, amino o sulfhidrilo, para obtener geles mixtos entrecruzados de HA altamente hinchados.

Otro metodo conveniente para obtener acido hialuronico entrecruzado o acido hialuronico mixto y otros geles polimericos comprende el tratamiento de preparaciones polimericas secas, es decir, en forma de una pelmula con un agente de entrecruzamiento y el posterior hinchamiento del producto en el medio deseado.

En una realizacion, se puede utilizar un HA lineal de menos de 500.000 Da.

Como se describe en la presente memoria, se puede utilizar la administracion de HA para mejorar ventajosamente el estado de la piel. Ademas, debido a su estructura molecular, el HA se puede utilizar para atrapar y suministrar agentes activos adicionales (farmacos). Existen varios metodos para combinar un farmaco con el gel de HA y, en consecuencia, se pueden obtener varios tipos de productos. Uno de los metodos comprende difundir un farmaco en un gel de HA cuando el gel se coloca en una solucion del farmaco. El producto obtenido por este metodo es un gel en el que se dispersa uniformemente una sustancia farmaceutica.

El mismo tipo de producto se puede obtener deshidratando un gel de acido hialuronico y volviendolo a hinchando en una solucion de farmaco. Para deshidratar un gel, se puede utilizar un disolvente organico miscible con agua o, alternativamente, se puede eliminar el agua de un gel mediante secado. Los disolventes preferibles son etanol e isopropanol, y cetonas tales como la acetona, aunque tambien se pueden utilizar otros disolventes.

Se puede utilizar otro metodo mas para obtener productos de este tipo. Este metodo comprende permitir que un gel de acido hialuronico concentrado resultante de una reaccion de entrecruzamiento previamente realizada en una solucion relativamente concentrada de acido hialuronico se hinche en una solucion de una sustancia farmaceutica. Si bien estos tres metodos dan como resultado productos que son esencialmente iguales, cada uno de los metodos tiene ciertas ventajas en comparacion con cualquiera de los otros metodos para un producto espedfico y, por lo tanto, la eleccion del metodo debe realizarse teniendo en cuenta estos parametros, tales como la naturaleza del farmaco, la concentracion deseada del farmaco en el sistema, la tasa de suministro, etc.

Un sistema de suministro de farmacos de otro tipo es aquel en el que un farmaco se une covalentemente a macromoleculas de acido hialuronico y/u otros polfmeros que forman un gel. Estos sistemas se caracterizan por una tasa de suministro sustancialmente mas lenta que la de los descritos anteriormente. El suministro de un farmaco a partir de estos sistemas se produce cuando el gel se degrada en el organismo vivo. El proceso de degradacion suele ser mas lento que la difusion. La velocidad del proceso de degradacion se puede controlar por varios medios, incluyendo el ajuste de la densidad de los entrecruzamientos en el gel o el entrecruzamiento del acido hialuronico con polfmeros que pueden degradarse en el organismo mas facilmente que el acido hialuronico, p. ej., protemas. Al cambiar la concentracion de tales componentes polimericos en los geles mixtos, se puede controlar convenientemente su velocidad de degradacion y, por lo tanto, la velocidad de suministro del farmaco.

Otra posibilidad de suministro de farmacos para este tipo de producto implica el uso de tales enlaces qrnmicos para la union de un farmaco a moleculas polimericas que forman un gel que tiene una tasa de hidrolisis controlable en un entorno fisiologico.

Para obtener este tipo de producto, se puede utilizar una sustancia farmaceutica que pueda reaccionar con un agente de entrecruzamiento. Se puede utilizar otro metodo mas para obtener este producto. Este metodo comprende modificar qmmicamente un gel entrecruzado despues de su formacion, utilizando los grupos hidroxilo reactivos del acido hialuronico o los grupos reactivos de los polfmeros co-entrecruzados con el acido hialuronico al que se puede unir una sustancia farmaceutica mediante numerosas reacciones qrnmicas. Alternativamente, se pueden introducir grupos reactivos adicionales mediante tratamiento qrnmico de un gel entrecruzado que afecta a las macromoleculas de acido hialuronico o polfmeros co-entrecruzados y se puede unir un farmaco covalentemente a estos grupos reactivos recien formados.

Los agentes activos pueden ser agentes activos cosmeticos, dermatologicos y farmaceuticos. Los agentes activos adecuados incluyen, pero no se limitan a, ceramidas; vitaminas; antioxidantes; captadores de radicales libres; agentes hidratantes; agentes anti-seborreicos; agentes anti-UV; agentes queratolfticos; agentes antiinflamatorios; melanorreguladores; liporreguladores; agentes antienvejecimiento; agentes antibacterianos; agentes para combatir la cafda del cabello; protectores vasculares; agentes antifungicos; acondicionadores de la piel; inmunomoduladores; nutrientes y aceites esenciales; retinoides anestesicos; conservantes antisepticos; emolientes; lubricantes humectantes; pigmentos; colorantes hidroxiacidos, tales como alfa hidroxiacidos y beta hidroxiacidos; elastina; productos hidrolizados; factor de crecimiento epidermico; saponinas de soja; y mucopolisacaridos.

Se han desarrollado varias formas de acido hialuronico mediante el entrecruzamiento del acido con otros acidos naturales o compuestos qrnmicos para formar geles que mejoran el estado de la piel.

En la actualidad estan disponibles varias preparaciones comerciales. Estas incluyen Hylaform®, extrafdo de cresta de gallo y comercializado por Genzyme Company y Restylane®, que se produce mediante un proceso de fermentacion bacteriana utilizando la especie Streptococcus equi y entrecruzado con BDDE. Estas dos composiciones tienen la caractenstica comun de ser sustancias inyectables bifasicas, con partfculas de acido hialuronico entrecruzadas en mayor o menor grado y suspendidas en una preparacion mas fluida o incluso no entrecruzada.

Las preparaciones de gel monofasico de acido hialuronico estan contenidas en otros productos tales como Juvederm®, Hydra Fille y Esthelis®. Al igual que con el Reslylane®, cada uno de estos se produce con BDDE, aunque el proceso es diferente, lo que da como resultado un gel monofasico.

En una realizacion, el acido hialuronico entrecruzado se produce en forma de una composicion monofasica. Despues de linealizar la cadena principal del acido hialuronico nativo, se inicia el entrecruzamiento mediante la adicion de BDDE. El entrecruzamiento dinamico permite obtener un producto que macroscopicamente tenga un aspecto homogeneo y microscopicamente tenga un aspecto heterogeneo. Esta tecnica permite obtener lo que se denomina una Matriz Polidensificada Cohesiva.

Colocado en presencia de 1 ml de agua durante 2 minutes, el gel sigue siendo cohesivo, que no es el caso de los productos bifasicos en los que el componente "micropartteula" aparece inmediatamente. Este producto esta disponible bajo el nombre comercial de Esthe'lis®.

Las propiedades viscoelasticas de Esthe'lis® lo convierten en una sustancia que esculpe bien el tejido, con un masaje muy suave para posicionarlo correctamente. No deja una sensacion de "cordon implantado" e incluso se puede considerar que tiene un efecto de estiramiento.

En una realizacion de la presente invencion, el acido hialuronico se incorpora a las vesteulas liptelicas para administrar acido hialuronico a la piel de un paciente. Ventajosamente, cuando se utiliza de acuerdo con la presente invencion, este producto puede tener un efecto hidratante en el area tratada, por ejemplo, con la abolicion de las patas de gallo durante el tratamiento de los ojos. Los pliegues nasolabiales se encuentran en las areas tratadas en las mejillas.

Vesteulas liptelicas que contienen colageno

En una realizacion, la invencion proporciona composiciones que incluyen vesteulas liptelicas que incorporan colageno humano (y/o un fragmento del mismo) o un derivado de colageno. Las vesteulas que contienen el agente o los agentes activos son utiles para administrar el agente o los agentes activos a un sujeto. Se puede utilizar cualquier vesteula liptelica adecuada para actuar como agente emulsionante y/o encapsular colageno y/o acido hialuronico, y para administrar a la piel de un sujeto humano.

Las vesteulas de la invencion son vesteulas que tienen una o mas membranas de bicapa liptelica que rodean una cavidad. Las vesteulas liptelicas para su uso en la invencion tiene tfpicamente un tamano en el intervalo de aproximadamente 50 a aproximadamente 950 nm (p. ej., 50, 100, 200, 3O0, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 950 nm). Los metodos para producir y utilizar vesteulas liptelicas son bien conocidos en la tecnica y se describen, p. ej., en las Patentes de Estados Unidos 4.917.951 y 5.013.497; Walde P. e Ichikawa S., Biomol Eng., 18: 143-177, 2001; Hunter D.G. y Frisken B.J., Biophys J., 74: 2996-3002, 1998; y Cevc G., Adv Drug Deliv Rev., 56: 675-711, 2004.

El colageno que se debe encapsular, o asociar de otro modo, con las vesteulas liptelicas, puede ser de cualquier forma adecuada, p. ej., una preparacion de colageno tipo I, colageno tipo III, una mezcla de colageno tipo I y colageno tipo III, un derivado de colageno o una combinacion de las mismas.

El acido hialuronico puede ser como se ha descrito anteriormente. Las vesteulas pueden contener solo colageno o una combinacion de colageno y HA u otro agente activo. Por lo tanto, las composiciones de la presente invencion pueden comprender vesteulas que contienen solo un agente activo, o multiples agentes activos.

Las vesteulas liptelicas de la invencion pueden incluir tensioactivos no fosfolipfdicos. Tambien pueden incluir un agente productor de carga y una molecula de direccionamiento. Por lo tanto, las vesteulas elaboradas de anfffilos "mimeticos de membrana" no fosfoliptelicos son utiles en la invencion. Estas son moleculas que tienen un grupo de cabeza hidrofila unido a una cola hidrofoba e incluyen acidos grasos de cadena larga, alcoholes de cadena larga y derivados, grupos amino de cadena larga y glicerolfpidos. En las bicapas, las colas de los acidos grasos apuntan hacia el interior de la membrana y los grupos de la cabeza polar apuntan hacia afuera. Los grupos polares en una superficie de la membrana apuntan hacia el interior de la vesteula y los de la otra superficie apuntan hacia el ambiente externo. A medida que se forma una vesteula durante su fabricacion, cualquier molecula soluble en agua que se haya agregado al agua se incorpora a los espacios acuosos en el interior de las esferas, mientras que cualquier molecula soluble en lfpidos agregada durante la formacion de la vesteula se incorpora al nucleo de las vesteulas

Las vesteulas paucilamelares que se pueden formar a partir de muchos anfffilos biocompatibles de cola untea se prefieren para su uso en la invencion. Tales vesteulas liptelicas paucilamelares incluyen vesteulas no fosfoliptelicas que tienen una o varias membranas de bicapa liptelica que rodean un gran nucleo amorfo en el que se encapsula una entidad qmmica de interes (es decir, colageno y/o HA).

Las vesteulas liptelicas paucilamelares no fosfolipfdicas se comercializan con el nombre comercial Novasome® (IGI Inc., Buena, NJ). Existen varias formulaciones de Novasome® (p. ej., Novasome® A, Novasome® D), Novasome® Day Cream).

Las vesteulas de Novasome® son utiles para encapsular ingredientes qmmicos para ayudar a la formulacion, aumentar el suministro en el sitio de accion y estabilizar los ingredientes qmmicos en la formulacion. Estas vesteulas liptelicas tienen generalmente un tamano de aproximadamente 200-700 nanometros, dependiendo de una amplia variedad de constituyentes de membrana elegidos individualmente para cada proposito particular. Su distribucion de tamano es uniforme, y la eficacia de encapsulacion puede ser casi de 100% para la carga liptelica y de 85% para materiales acuosos. Las partteulas insolubles finamente divididas (p. ej., productos farmaceuticos insolubles) tambien se pueden encapsular.

Las vesteulas de Novasome® son inherentemente estables, y pueden adaptarse para que sean estables a niveles de pH que vanan de 2 a 13, asf como a intervalos de temperatura desde tan bajos como el nitrogeno lfquido hasta por encima del punto de ebullicion del agua. Pueden ser estables a los disolventes, incluidos alcoholes, eteres, esteres, gasolina, diesel y otros combustibles. Pueden encapsular fragancias y sabores que contienen eteres, esteres, aldelffdos, etc. volatiles y fragiles. Estas vesfculas pueden liberar su carga en diferentes circunstancias ffsicas y qmmicas, incluyendo el calor, la luz, los cambios de pH, la degradacion enzimatica, la difusion transmembrana por secado, etc.

Los protocolos para producir y administrar las formulaciones de Novasome® se describen, por ejemplo, en las Patentes de Estados Unidos 4.855.090; 4.911.928; 5.474.848; 5.628.936; 6.387.373; Holick et al., British Journal of Dermatology 149: 1365-2133, 2003; Gupta et al., Vaccine 14: 219-225, 1996; y Wallach DFH y Philippot J., New Type of Lipid Vesicle: Novasome™ En: Liposome Technology, 2a ed., Gregorriadis G., CRC Press, Boca Raton, FL, 1982, pag. 141-151; Niemiec et al., Pharmaceutical Research 12:1184-1188, 1995; y Alfieri DR, Cosmetic Dermatology 10:42-52, 1997.

En una realizacion, los liposomas son los utilizados en las "Cremas de Dfa".

En ciertas realizaciones de la presente invencion, las vesfculas lipfdicas (p. ej., vesfculas lipfdicas paucilamelares no fosfolipfdicas) tambien pueden incluir moleculas de direccionamiento, ya sean hidrofilas o anfffilas, que se pueden utilizar para dirigir las vesfculas a una diana concreta con el fin de permitir la liberacion del HA, el colageno o el derivado de colageno desde el interior de la vesfcula en una ubicacion biologica espedfica. Si se utilizan moleculas de direccionamiento hidrofilas, se pueden acoplar directamente o mediante un espaciador a un residuo de OH de la porcion de polioxietileno del tensioactivo, o se pueden acoplar, utilizando mecanismos de la tecnica, a moleculas tales como acido palirfftico, aminas de cadena larga, o fosfatidil etanolamina. Si se utilizan espaciadores, las moleculas de direccionamiento se pueden encajar en el nucleo hidrofilo de la membrana de bicapa a traves de las cadenas de acilo de estos compuestos. Las moleculas de direccionamiento hidrofilas preferidas incluyen anticuerpos monoclonales, otras inmunoglobulinas, lectinas y hormonas pepffdicas.

Ademas de las moleculas de direccionamiento hidrofilas, tambien es posible utilizar moleculas de direccionamiento anfffilas. Las moleculas de direccionamiento anfffilas normalmente no estan acopladas qmmicamente a las moleculas de tensioactivo, sino que interactuan con las porciones lipofilas o hidrofobas de las moleculas que constituyen las lamelas bicapa de las vesfculas lipfdicas. Las moleculas de direccionamiento anfffilas preferidas son glicoffpidos neutros, galactocerebrosidos (p. ej., para receptores de galactosilo hepaticos), o glicoffpidos cargados tales como gangliosidos.

En algunas realizaciones, se utilizan materiales productores de carga y esteroides tales como colesterol o hidrocortisona o sus analogos y derivados en la formacion de las vesfculas lipfdicas (p. ej., vesfculas lipfdicas paucilamelares). Los materiales productores de carga preferidos incluyen materiales productores de carga negativa, tales como fosfato de dicetilo, sulfato de cetilo, acido fosfaffdico, fosfatidil serina, acido oleico, acido palirfftico o mezclas de los mismos. Con el fin de proporcionar una carga neta positiva a las vesfculas, se pueden utilizar aminas de cadena larga, p. ej., estearil aminas u oleil aminas, compuestos de piridinio de cadena larga, p. ej., cloruro de cetil piridinio, compuestos de amonio cuaternario, o mezclas de estos. Otro ejemplo de un material productor de carga positiva es el bromuro de hexadecil trimetilamonio, un potente desinfectante.

Preparacion de vesfculas lipfdicas

Las vesfculas lipfdicas utilizadas de acuerdo con la presente invencion pueden ser cualquiera de una gran variedad de vesfculas lipfdicas conocidas en la tecnica y se pueden fabricar de acuerdo con cualquiera de los numerosos metodos de produccion. Los materiales y procedimientos para formar vesfculas lipfdicas son bien conocidos por los expertos en la tecnica. En general, los ffpidos o sustancias lipofilas se disuelven en un disolvente organico. Cuando se elimina el disolvente, por ejemplo al vacfo por evaporacion rotatoria, el residuo lipfdico forma una peffcula sobre la pared del recipiente. A continuacion se anade a la peffcula una solucion acuosa que ffpicamente contiene electrolitos o materiales de agentes biologicamente hidrofilos. Se producen grandes vesfculas multilamelares con agitacion. Cuando se desean vesfculas multilamelares mas pequenas, las vesfculas mas grandes se someten a sonicacion, filtracion secuencial a traves de filtros con un tamano de poro decreciente o se reducen mediante otras formas de cizallamiento mecanico. Las vesfculas lipfdicas tambien pueden adoptar la forma de vesfculas unilamelares, que se preparan por sonicacion mas exhaustiva de vesfculas multilamelares, y consisten en una unica bicapa lipfdica esferica que rodea una solucion acuosa. Una revision exhaustiva de todas las vesfculas lipfdicas mencionadas y de los metodos para su preparacion se describen en "Liposome Technology", ed. G. Gregoriadis, CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, Vol. I, II y III (1984)). Para los metodos de preparacion de vesfculas lipfdicas, veanse tambien las Patentes de Estados Unidos 4.485.054, 4.761.288, 5.013.497, 5.653.996 y 6.855.296.

Para preparar vesfculas lipfdicas paucilamelares no fosfolipfdicas formadas por material tensioactivo no fosfoffpidico y que contienen un material de colageno y/o HA con una base acuosa, se puede utilizar cualquier metodo adecuado conocido en la tecnica. Los metodos para preparar vesfculas lipfdicas paucilamelares no fosfolipfdicas ffpicamente implican primero formar una fase lipofila combinando varios componentes lipofilos, incluido el material tensioactivo, y a continuacion calentar y combinar esta mezcla. Los ejemplos de materiales tensioactivos adecuados incluyen polioxietilen (2) cetil eter, polioxietilen (4) lauril eter, monoestearato de glicerilo y estearato de polioxietilen (9) glicerilo. La fase lipofila resultante se combina despues con una fase acuosa que tiene un tampon acuoso y una formulacion acuosa de colageno soluble, bajo condiciones de mezcla de cizallamiento, para formar las vesmulas lipfdicas paucilamelares. En este metodo, la temperatura de la fase lipofila se eleva para hacer que fluya, seguido de la mezcla de cizallamiento entre la fase lipofila y la fase acuosa a una temperatura tal que ambas fases sean lfquidas. Si bien a menudo es deseable utilizar la misma temperatura para ambas fases, esto no siempre es necesario. Tambien se puede utilizar cualquier otro metodo conocido por el experto en la tecnica. Los metodos preferidos para elaborar las vesmulas lipfdicas paucilamelares de la invencion se describen en la Patente de Estados Unidos 4.911.928.

Para encapsular el colageno o las formulaciones que contienen colageno con una base oleosa dentro de las vesmulas lipfdicas paucilamelares, el colageno o la formulacion que contiene colageno se dispersan en un aceite o cera que forma una fase oleosa. El aceite o cera es una solucion oleosa inmiscible en agua seleccionada de un grupo que consiste en aceites, ceras, trigliceridos naturales y sinteticos, esteres de acilo y derivados del petroleo, y sus analogos y derivados. La fase oleosa que contiene el material dispersable en aceite se mezcla con la fase lipfdica y la fase de aceite-lfpido combinada se mezcla bajo condiciones de mezcla de cizallamiento con la fase acuosa. Los tensioactivos utiles en el proceso de encapsulacion son los mismos que los utilizados para elaborar vesmulas lipfdicas paucilamelares con un nucleo acuoso.

Las vesmulas lipfdicas paucilamelares se pueden fabricar mediante una variedad de dispositivos que proporcionan un cizallamiento suficientemente alto para el mezclado por cizallamiento. Muchos de estos dispositivos estan disponibles en el mercado, incluyendo un Microfluidizer®, tal como el fabricado por MicroFluidics Corp. (Newton, MA), una prensa “francesa" o algun otro dispositivo que proporcione una fuerza de cizallamiento lo suficientemente alta y la capacidad de manipular lfpidos semiviscosos, calentados. Si se utiliza un dispositivo de cizallamiento muy alto, puede ser posible microemulsificar los lfpidos en polvo, a presion, a una temperatura por debajo de sus puntos de fusion normales y aun formar las vesmulas lipfdicas paucilamelares que contienen colageno de la presente invencion.

Micro Vesicular Systems, Inc., (Vineland, NJ) ha desarrollado un dispositivo que es particularmente util para elaborar las vesfculas lipfdicas paucilamelares de la presente invencion y se describe con mas detalle en la Patente de Estados Unidos 4.895.452. Brevemente, este dispositivo tiene una camara de mezcla sustancialmente cilmdrica con al menos un orificio de entrada localizado tangencialmente. Uno o mas orificios conducen a un reservorio para la fase lipofila, mezclada con una fase oleosa si se van a formar vesmulas lipfdicas paucilamelares de nucleo lipfdico, y al menos uno de los otros orificios esta unido a un reservorio para la fase acuosa. Las diferentes fases se introducen en la camara cilmdrica a traves de bombas, p. ej., bombas de desplazamiento positivo, y se cruzan de tal manera que forman un flujo turbulento dentro de la camara. Las vesmulas lipfdicas paucilamelares se forman rapidamente, p. ej., menos de 1 segundo, y se eliminan de la camara a traves de un orificio de descarga localizado axialmente. Preferiblemente, existen cuatro orificios de entrada localizados tangencialmente y las fases lipfdica y acuosa se extraen de los reservorios, a traves de bombas de desplazamiento positivo, a orificios alternos. La corriente de fluido a traves de los orificios tangenciales se grna en una trayectoria de flujo en espiral desde cada orificio de entrada o inyeccion hasta el orificio de descarga. Los recorridos de flujo estan controlados por la orientacion o colocacion de los orificios de entrada o inyeccion para crear una zona de mezcla por la interseccion de las corrientes de lfquido. Las velocidades de la bomba, asf como los diametros del orificio y la lmea de alimentacion, se seleccionan para lograr una mezcla adecuada de cizallamiento para la formacion de vesmulas lipfdicas. En la mayona de las circunstancias, se selecciona el flujo turbulento para proporcionar una mezcla adecuada.

No importa que dispositivo se utilice para formar las vesmulas lipfdicas paucilamelares, si se logra una mezcla adecuada de cizallamiento, tienen una estructura que implica un gran centro amorfo no estructurado rodeado por una pluralidad de bicapas lipfdicas que tienen capas acuosas intercaladas entre ellas. Aproximadamente la norma es cuatro bicapas lipfdicas siendo posibles 2-8. El centro amorfo puede estar completamente lleno con un material acuoso, p. ej., un tampon y cualquier material acuoso que se vaya a encapsular, o puede estar parcial o totalmente lleno con un material oleoso, formando vesmulas lipfdicas paucilamelares de nucleo lipfdico. Si se utiliza un centro acuoso, las vesmulas lipfdicas paucilamelares normalmente tendran un diametro de aproximadamente 0,5-2 p, mientras que si se utiliza un centro oleoso, el tamano puede aumentar hasta aproximadamente 15-20 p segun la cantidad de aceite utilizada.

Utilizacion de ciclodextina como portador

Adicionalmente, las ciclodextrinas son una opcion alternativa para un sistema portador de colageno y/o HA en la dermis de la piel. Las ciclodextrinas son carbohidratos complejos de 6, 7 u 8 residuos de D-glucopiranosa que estan unidos por enlaces glicosfdicos 1,4. Las tres formas dependen del numero de residuos de D-glucopiranosa, la forma alfa tiene 6, la beta tiene 7 y la gamma tiene 8. La estructura alfa forma un anillo perimetral con una cavidad interna hidrofoba y una superficie externa hidrofila. Cada ciclodextrina se asocia con un compuesto invitado encajando el compuesto en la cavidad hidrofoba formando un complejo de inclusion. De esta manera, las ciclodextrinas se pueden utilizar como un sistema de suministro para suministrar una cantidad deseada de material en una ubicacion diana.

En una realizacion, se pueden utilizar hidroxipropil beta ciclodextrinas. Las ciclodextrinas se utilizan porque tienen la capacidad de alterar las propiedades ffsicas, qmmicas y biologicas de un compuesto invitado asociado a traves de la formacion del complejo de inclusion. Este complejo mejora la solubilidad, la estabilidad y la biodisponibilidad del compuesto invitado para que el material se pueda aislar y utilizar en un sistema de suministro controlado. La formacion de un complejo de inclusion de colageno con una alfa-ciclodextrina permite un sistema de suministro dirigido a la dermis.

El metodo principal para el aislamiento y la purificacion de la a/fa-ciclodextrina aprovecha su capacidad de formacion de complejos. Al terminar la reaccion, se anade 1-decanol a la mezcla de reaccion para formar un complejo de inclusion de a/fa-ciclodextrina: 1-decanol 1:1. El complejo se mezcla continuamente con agua y se separa de la mezcla de reaccion por centrifugacion. El complejo recuperado se resuspende en agua y se disuelve por calentamiento. El enfriamiento posterior conduce a una nueva precipitacion del complejo. El producto precipitado se recupera por centrifugacion y el 1-decanol se elimina por destilacion con vapor de agua. Al enfriarse, la a/fa-ciclodextrina cristaliza a partir de la solucion. Los cristales se eliminan por filtracion y se secan, produciendo un polvo cristalino de color blanco con un contenido de agua por debajo de 11%. La pureza sobre una base seca es de al menos 98%.

Portador dermatologicamente aceptable

Las composiciones topicas de la presente invencion, ademas del colageno y/o HA contenidos en la vesfcula, pueden comprender adicionalmente un portador dermatologicamente aceptable. Una cantidad segura y eficaz de portador es tipicamente de aproximadamente 50% a aproximadamente 99,99%, preferiblemente de aproximadamente 80% a aproximadamente 99,9%, mas preferiblemente de aproximadamente 90% a aproximadamente 98%, e incluso mas preferiblemente de aproximadamente 90% a aproximadamente 95% de la composicion.

El portador puede estar en una amplia variedad de formas. Por ejemplo, los portadores de emulsion, que incluyen, pero no se limitan a, emulsiones de aceite en agua, de agua en aceite, de agua en aceite en agua y de aceite en agua en silicona son utiles en la presente memoria.

Las emulsiones de acuerdo con la presente invencion pueden contener una solucion como se ha descrito anteriormente y un lfpido o aceite. Los lfpidos y aceites pueden obtenerse de animales, plantas o petroleo y pueden ser naturales o sinteticos (es decir, artificiales). Las emulsiones preferidas tambien contienen un humectante, tal como glicerina. Las emulsiones preferiblemente contendran adicionalmente de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 5%, de un emulsionante, basado en el peso del portador. Los emulsionantes pueden ser no ionicos, anionicos o cationicos. Los emulsionantes adecuados se describen, por ejemplo, en la Patente de Estados Unidos Num. 3.755.560, expedida el 28 de agosto de 1973 de Dickert et al.; la Patente de Estados Unidos Num. 4.421.769, expedida el 20 de diciembre de 1983 de Dixon et al.; y McCutcheon's Detergents and Emulsifiers. America del Norte Ed., paginas 317-324 (1986).

La emulsion tambien puede contener un agente antiespumante para minimizar la formacion de espuma tras la aplicacion al tejido epidermico. Los agentes antiespumantes incluyen siliconas de alto peso molecular y otros materiales bien conocidos en la tecnica para tal uso.

Las emulsiones adecuadas pueden tener un amplio intervalo de viscosidades, dependiendo de la forma del producto deseado. Las emulsiones ilustrativas de baja viscosidad, que se prefieren, tienen una viscosidad de aproximadamente 0,00005 m2/s (50 centistokes) o menos, mas preferiblemente aproximadamente 0,00001 m2/s (10 centistokes) o menos, aun mas preferiblemente aproximadamente 0,000005 m2/s (5 centistokes) o menos.

Las emulsiones de agua en silicona pueden contener una fase continua de silicona y una fase dispersa acuosa. La fase continua de silicona existe como una fase externa que contiene o rodea la fase discontinua acuosa que se describe a continuacion. La fase continua de silicona puede contener uno o mas aceites que no sean de silicona. Los ejemplos de aceites que no son de silicona adecuados para su uso en la fase continua de silicona son aquellos bien conocidos en la tecnica qmmica en productos topicos para el cuidado personal en forma de emulsiones de agua en aceite, p. ej., aceite mineral, aceites vegetales, aceites sinteticos, aceites semisinteticos, etc.

En la tecnologfa de emulsiones, el termino "fase dispersa" es un termino bien conocido por los expertos en la tecnica que significa que la fase existe en forma de pequenas partfculas o gotitas que estan suspendidas y rodeadas por una fase continua. La fase dispersa tambien se conoce como la fase interna o discontinua. La fase acuosa dispersa es una dispersion de pequenas partfculas o gotitas acuosas suspendidas y rodeadas por la fase continua de silicona descrita anteriormente.

La fase acuosa puede ser agua, o una combinacion de agua y uno o mas ingredientes solubles o dispersables en agua. Los ejemplos no limitantes de tales ingredientes incluyen espesantes, acidos, bases, sales, quelantes, gomas, alcoholes y polioles solubles o dispersables en agua, tampones, conservantes, agentes de proteccion solar, colorantes y similares.

Las emulsiones de agua en silicona pueden contener un emulsionante. En una realizacion, la composicion contiene de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10% de emulsionante, mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 7,5%, aun mas preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 5%, de emulsionante en peso de la composicion. El emulsionante ayuda a dispersar y suspender la fase acuosa dentro de la fase continua de silicona.

Otros portadores topicos incluyen emulsiones de aceite en agua, que tienen una fase acuosa continua y una fase hidrofoba, insoluble en agua ("fase oleosa") dispersada en ella. Los ejemplos de portadores de emulsion de aceite en agua adecuados se describen en la Patente de Estados Unidos Num. 5.073.371, de Turner, D. J. et al., expedida el 17 de diciembre de 1991 y la Patente de Estados Unidos Num. 5.073.372, de Turner, D. J. et al., expedida el 17 de diciembre de 1991.

Una emulsion de aceite en agua puede contener un agente estructurante para ayudar a la formacion de una estructura de red de gel cristalino lfquido. Los agentes estructurantes incluyen acido estearico, acido palmttico, alcohol esteanlico, alcohol cetflico, alcohol behemlico, acido estearico, acido palmftico, polietilenglicol eter de alcohol esteanlico que tiene un promedio de aproximadamente 1 a aproximadamente 21 unidades de oxido de etileno, polietilenglicol eter de alcohol cetflico que tiene un promedio de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 unidades de oxido de etileno, y mezclas de los mismos.

En ciertas realizaciones, las emulsiones de aceite en agua contienen al menos un tensioactivo hidrofilo que puede dispersar los materiales hidrofobos en la fase acuosa (porcentajes en peso del portador topico). El tensioactivo, como mmimo, debe ser lo suficientemente hidrofilo como para dispersarse en agua. Entre los tensioactivos no ionicos que son utiles en la presente memoria se encuentran los que se pueden definir ampliamente como productos de condensacion de alcoholes de cadena larga, p. ej. alcoholes C8-30, con polfmeros de azucar o almidon, es decir, glucosidos.

Otros tensioactivos adecuados utiles en la presente memoria incluyen una amplia variedad de tensioactivos cationicos, anionicos, zwitterionicos y anfoteros, tales como los que se conocen en la tecnica. Vease, por ejemplo, McCutcheon's, Detergents and Emulsifiers, Edicion Norteamericana (1986), publicado por Allured Publishing Corporation.; Patente de Estados Unidos Num. 5.011.681 de Ciotti et al., expedida el 30 de abril de 1991; Patente de Estados Unidos Num. 4.421.769 de Dixon et al., expedida el 20 de diciembre de 1983; y Patente de Estados Unidos Num. 3.755.560 de Dickert et al., expedida el 28 de agosto de 1973. Los tensioactivos hidrofilos utiles en la presente memoria pueden contener un unico tensioactivo, o cualquier combinacion de tensioactivos adecuados. El tensioactivo (o tensioactivos) exacto elegido dependera del pH de la composicion y de los otros componentes presentes.

Tambien son utiles en la presente memoria los tensioactivos cationicos, tales como compuestos de dialquil-amonio cuaternario, cuyos ejemplos se describen en las Patentes de Estados Unidos Num. 5.151.209; 5.151.210; 5.120.532; 4.387.090; 3.155.591; 3.929.678; 3.959.461; McCutcheon's, Detergents & Emulsifiers, (Edicion Norteamericana 1979) M.C. Publishing Co.; y Schwartz, et al., Surface Active Agents, Their Chemistry and Technology, Nueva York: Interscience Publishers, 1949.

Tambien es util en la presente memoria una amplia variedad de tensioactivos anionicos. Vease, p. ej., la Patente de Estados Unidos Num. 3.929.678, de Laughlin et al., expedida el 30 de diciembre, 1975. Los ejemplos no limitantes de tensioactivos anionicos incluyen los isetionatos de alquilo, y los alquil y alquil eter sulfatos.

Los ejemplos de tensioactivos anfoteros y zwitterionicos son aquellos que se describen ampliamente como derivados de aminas secundarias y terciarias alifaticas en las que el radical alifatico puede ser de cadena lineal o ramificada y en donde uno de los sustituyentes alifaticos contiene de aproximadamente 8 a aproximadamente 22 atomos de carbono (preferiblemente Ca-C-ia) y otro contiene un grupo anionico de solubilizacion en agua, p. ej., carboxi, sulfonato, sulfato, fosfato o fosfonato.

Las composiciones topicas de la presente invencion, que incluyen, pero no se limitan a, lociones y cremas, pueden contener un emoliente dermatologicamente aceptable. Tales composiciones contienen preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 50% de emoliente. Como se emplea en la presente memoria, "emoliente" se refiere a un material util para la prevencion o el alivio de la sequedad, asf como para la proteccion de la piel. Se conoce una amplia variedad de emolientes adecuados y se pueden utilizar en la presente memoria. Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2a Edicion, Vol. 1, pag. 32-43 (1972), contiene numerosos ejemplos de materiales adecuados como emoliente. Un emoliente preferido es la glicerina. La glicerina se utiliza preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 30%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 20%, aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10%, p. ej., 5%.

Las cremas son generalmente mas espesas que las lociones debido a niveles mas altos de emolientes o niveles mas altos de espesantes.

Los unguentos de la presente invencion pueden contener una base portadora simple de aceites animales o vegetales o hidrocarburos semisolidos (oleaginosos); bases de unguento de absorcion que absorben agua para formar emulsiones; o portadores solubles en agua, p. ej., un portador de solucion soluble en agua. Los unguentos pueden contener adicionalmente un agente espesante, como se describe en Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2a Edicion, vol. 1, pag. 72-73 (1972), y/o un emoliente. Por ejemplo, un unguento puede contener de aproximadamente 2% a aproximadamente 10% de un emoliente; de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 2% de un agente espesante; y la vesfcula-colageno en las cantidades descritas anteriormente.

Agentes adicionales para el cuidado de la piel

Las composiciones de la presente invencion pueden contener uno o mas agentes adicionales para el cuidado de la piel, ademas de colageno y, opcionalmente, HA.

Los agentes adicionales deben ser adecuados para su aplicacion al tejido epidermico, es decir, cuando se incorporan a la composicion, son adecuados para su uso en contacto con tejido epidermico humano sin toxicidad, incompatibilidad, inestabilidad, respuesta alergica indebidas y similares. El CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Segunda Edicion (1992) describe una amplia variedad de ingredientes cosmeticos y farmaceuticos no limitantes comunmente utilizados en la industria del cuidado de la piel, que son adecuados para su utilizacion en las composiciones de la presente invencion.

Los ejemplos de tales clases de ingredientes incluyen: abrasivos, absorbentes, componentes esteticos tales como fragancias, pigmentos, agentes de coloracion/colorantes, aceites esenciales, sensaciones para la piel, astringentes, etc. (p. ej., aceite de trebol, mentol, alcanfor, aceite de eucalipto, eugenol, lactato de mentilo, producto destilado de hamamelis), agentes antiacne, agentes antiapelmazantes, agentes antiespumantes, agentes antimicrobianos (p. ej., butilcarbamato de yodopropilo), antioxidantes, aglutinantes, aditivos biologicos, agentes tamponantes, agentes para conferir volumen, agentes quelantes, aditivos qmmicos, colorantes, astringentes cosmeticos, biocidas cosmeticos, desnaturalizantes, medicamentos astringentes, analgesicos externos, formadores de pelfcula o materiales, p. ej., polfmeros, para ayudar a las propiedades de formacion de pelfcula y la sustantividad de la composicion (p. ej., copolfmero de eicoseno y vinilpirrolidona), agentes opacificantes, ajustadores de pH , propelentes, agentes reductores, secuestrantes, agentes blanqueadores y aclaradores de la piel (p. ej., hidroquinona, acido kojico, acido ascorbico, ascorbil fosfato de magnesio, ascorbil glucosamina), agentes acondicionadores de la piel (p. ej., humectantes, incluidos los diversos y oclusivos), agentes calmantes y/o curativos de la piel (p. ej., pantenol y derivados (p. ej., etil pantenol), aloe vera, acido pantotenico y sus derivados, alantoma, bisabolol, y glicirricinato dipotasico), agentes para el tratamiento de la piel, espesantes y vitaminas y derivados de los mismos.

En cualquier realizacion de la presente invencion, sin embargo, los agentes utiles en la presente memoria se pueden clasificar por el beneficio que proporcionan o por su modo de accion postulado. Sin embargo, se debe entender que los agentes adicionales para su uso en la presente memoria pueden, en algunos casos, proporcionar mas de un beneficio o funcionar a traves de mas de un modo de accion. Por lo tanto, las clasificaciones de la presente memoria se realizan por razones de conveniencia y no se pretende que limiten el agente a esa aplicacion o aplicaciones enumeradas en particular.

Agentes de descamacion

Se puede agregar una cantidad segura y eficaz de un agente de descamacion a las composiciones de la presente invencion, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, incluso mas preferiblemente de aproximadamente 0,2% a aproximadamente 5%, tambien preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 4%, en peso de la composicion. Los agentes de descamacion mejoran los beneficios de apariencia de la piel de la presente invencion. Por ejemplo, los agentes de descamacion tienden a mejorar la textura de la piel (p. ej., suavidad). Un sistema de descamacion que es adecuado para su uso en la presente memoria contiene compuestos sulfhidrilo y tensioactivos zwitterionicos y se describe en la Patente de Estados Unidos Num.

5.681.852, de Bissett. Otro sistema de descamacion que es adecuado para su uso en la presente invencion contiene acido salidlico y tensioactivos zwitterionicos y se describe en la Patente de Estados Unidos Num. 5.652.228 de Bissett. Los tensioactivos zwitterionicos tales como los descritos en estas solicitudes tambien son utiles como agentes de descamacion en la presente memoria, siendo particularmente preferida la cetil betama.

Agentes anti-acne

Las composiciones de la presente invencion pueden contener una cantidad segura y eficaz de uno o mas agentes anti-acne. Los ejemplos de agentes anti-acne utiles incluyen resorcinol, azufre, acido salidlico, peroxido de benzoilo, eritromicina, cinc, etc. Otros ejemplos de agentes anti-acne adecuados se describen con mas detalle en la Patente de Estados Unidos Num. 5.607.980, expedida por McAtee et al., el 4 de marzo de 1997.

Agentes antiarrugas/Agentes antiatrofia

Las composiciones de la presente invencion pueden contener adicionalmente una cantidad segura y eficaz de uno o mas agentes antiarrugas o agentes anti-atrofia. Los agentes antiarrugas/anti-atrofia ilustrativos adecuados para su uso en las composiciones de la presente invencion incluyen aminoacidos D y L que contienen azufre y sus derivados y sales, particularmente los derivados N-acetilados, un ejemplo preferido de los cuales es la N-acetil -L-cistema; tioles, p. ej., etano tiol; hidroxiacidos (p. ej., alfa-hidroxiacidos tales como acido lactico y acido glicolico o betahidroxiacidos tales como acido salidlico y derivados de acido salidlico tales como el derivado de octanoMo), acido ftico, acido lipoico; acido lisofosfatfdico, agentes para desprender la piel (p. ej., fenol y similares), compuestos de vitamina B3, retinoides y acido hialuronico, que mejoran los beneficios del aspecto del tejido epidermico de la presente invencion, especialmente regulando el estado del tejido epidermico, p. ej., el estado de la piel.

Compuestos de Vitamina B3

Las composiciones de la presente invencion pueden contener una cantidad segura y eficaz de un compuesto de vitamina B3. Los compuestos de vitamina B3 son particularmente utiles para regular el estado de la piel como se describe en la solicitud de Estados Unidos Num. de Serie 08/834.010, presentada el 11 de abril de 1997 (correspondiente a publicacion internacional WO 97/39733 A1, publicada el 30 de octubre de 1997). Los ejemplos de compuestos de vitamina B3 adecuados son bien conocidos en la tecnica y estan disponibles comercialmente de varias fuentes, p. ej., Sigma Chemical Company (St. Louis, MO); ICN Biomedicals, Inc. (Irvin, California) y Aldrich Chemical Company (Milwaukee, Wis.). Los compuestos vitammicos se pueden incluir como material sustancialmente puro, o como un extracto obtenido por aislamiento ffsico y/o qmmico adecuado de fuentes naturales (p. ej., plantas). Retinoides

Las composiciones de la presente invencion tambien pueden contener un retinoide. Como se emplea en la presente memoria, "retinoide" incluye todos los analogos naturales y/o sinteticos de la Vitamina A o compuestos similares al retinol que poseen la actividad biologica de la Vitamina A en la piel, asf como los isomeros geometricos y estereoisomeros de estos compuestos. El retinoide es preferiblemente retinol, esteres de retinol (p. ej., esteres alqrnlicos C2-C22 de retinol, incluyendo palmitato de retinilo, acetato de retinilo, propionato de retinilo), retinal y/o acido retinoico (incluyendo acido retinoico todo trans y/o acido 13-cis-retinoico), mas preferiblemente retinoides distintos del acido retinoico. Estos compuestos son bien conocidos en la tecnica y estan disponibles comercialmente de varias fuentes, por ejemplo, Sigma Chemical Company (St. Louis, MO) y Boerhinger Mannheim (Indianapolis, Ind.). Otros retinoides que son utiles en la presente memoria se describen en la Patente de Estados Unidos Num.

4.677.120, expedida el 30 de junio de 1987 de Parish et al.; la Patente de Estados Unidos Num. 4.885.311, expedida el 5 de diciembre de 1989 de Parish et al.; la Patente de Estados Unidos Num. 5.049.584, expedida el 17 de septiembre de 1991 de Purcell et al.; la Patente de Estados Unidos Num. 5.124.356, expedida el 23 de junio de 1992 de Purcell et al.; y la Patente de Estados Unidos Num. Re-edicion 34.075, expedida el 22 de septiembre de 1992 de Purcell et al. Otros retinoides adecuados son retinoato de tocoferilo [ester de tocoferol de acido retinoico (trans o cis), adapaleno {acido 6-[3-(1-adamantil) -4-metoxifenil]-2-naftoico} y tazaroteno (6-[2-(4,4-dimetiltiocroman-6-il)etinil]nicotinato de etilo). Los retinoides preferidos son retinol, palmitato de retinilo, acetato de retinilo, propionato de retinilo, retinal y combinaciones de los mismos.

Hidroxiacidos

Las composiciones de la presente invencion pueden contener una cantidad segura y eficaz de un hidroxiacido. Los hidroxiacidos preferidos para su uso en las composiciones de la presente invencion incluyen acido salidlico y derivados de acido salidlico.

Anti-Oxidantes/Captadores de Radicales

Las composiciones de la presente invencion pueden incluir una cantidad segura y eficaz de un antioxidante/captador de radicales. El antioxidante/captador de radicales es especialmente util para proporcionar proteccion contra la radiacion UV que puede causar un aumento a escala de la descamacion o cambios en la textura en el estrato corneo y contra otros agentes ambientales que pueden causar dano a la piel.

Se puede anadir una cantidad segura y eficaz de un antioxidante/captador de radicales a las composiciones de la presente invencion, preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 5%, de la composicion.

Los anti-oxidantes/captadores de radicales tales como el acido ascorbico (vitamina C) y sus sales, esteres de ascorbilo de acidos grasos, derivados de acido ascorbico (p. ej., ascorbil fosfato de magnesio, ascorbil fosfato de sodio, sorbato de ascorbilo), tocoferol (vitamina E), sorbato de tocoferol, acetato de tocoferol, otros esteres de tocoferol, acidos hidroxibenzoicos butilados y sus sales, acido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2-carboxflico (disponible comercialmente con el nombre comercial Trolox®), acido galico y sus esteres alqrnlicos, especialmente galato de propilo, acido urico y sus sales y esteres alqrnlicos, acido sorbico y sus sales, acido lipoico, aminas (p. ej., N, N-dietilhidroxilamina, amino-guanidina), compuestos de sulfhidrilo (p. ej., glutation), acido dihidroxi fumarico y sus sales, pidolato de licina, pilolato de arginina, acido nordihidroguayaretico, bioflavonoides, curcumina, lisina, metionina, prolina, superoxido dismutasa, silimarina, extractos de te, extractos de piel/semilla de uva, melanina y extractos de romero. Los antioxidantes/captadores de radicales preferidos se seleccionan entre sorbato de tocoferol y otros esteres de tocoferol, mas preferiblemente sorbato de tocoferol. Por ejemplo, el uso de sorbato de tocoferol en composiciones topicas y aplicables a la presente invencion se describe en la Patente de Estados Unidos Num.

4.847.071, expedida el 11 de julio de 1989 de Donald L. Bissett, Rodney D. Bush y Ranjit Chatterjee.

Quelantes

Las composiciones de la presente invencion tambien pueden contener una cantidad segura y eficaz de un quelante o agente quelante. Como se emplea en la presente memoria, "quelante" o "agente quelante" significa un agente activo capaz de eliminar un ion metalico de un sistema formando un complejo de modo que el ion metalico no pueda participar en, o catalizar facilmente, reacciones qmmicas. La inclusion de un agente quelante es especialmente util para proporcionar proteccion contra la radiacion UV que puede contribuir a una descamacion excesiva o a cambios en la textura de la piel y contra otros agentes ambientales que pueden causar dano a la piel.

Se puede anadir una cantidad segura y eficaz de un agente quelante a las composiciones de la presente invencion, preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 5%, de la composicion. Los quelantes ilustrativos que son utiles en la presente memoria se describen en la Patente de Estados Unidos Num. 5.487.884, expedida el 30 de enero de 1996 de Bissett et al.; la Publicacion Internacional Num. 91/16035, Bush et al., publicada el 31 de octubre de 1995; y la Publicacion Internacional Num. 91/16034, Bush et al., publicada el 31 de octubre de 1995. Los quelantes preferidos utiles en las composiciones de la presente invencion son furildioxima, furilmonoxima, y derivados de las mismas.

Flavonoides

Las composiciones de la presente invencion pueden contener opcionalmente un compuesto flavonoide. Los flavonoides son ampliamente descritos en las Patentes de Estados Unidos Num. 5.686.082 y 5.686.367. Los flavonoides adecuados para su uso en la presente invencion son flavanonas seleccionadas entre flavanonas no sustituidas, flavanonas monosustituidas y mezclas de las mismas; chalconas seleccionadas entre chalconas no sustituidas, chalconas monosustituidas, chalconas disustituidas, chalconas trisustituidas y mezclas de las mismas; flavonas seleccionadas entre flavonas no sustituidas, flavonas monosustituidas, flavonas disustituidas y mezclas de las mismas; una o mas isoflavonas; cumarinas seleccionadas entre cumarinas no sustituidas, cumarinas monosustituidas, cumarinas disustituidas y mezclas de las mismas; cromonas seleccionadas entre cromonas no sustituidas, cromonas monosustituidas, cromonas disustituidas y mezclas de las mismas; uno o mas dicumaroles; una o mas cromanonas; uno o mas cromanoles; isomeros (p. ej., isomeros cis/trans) de los mismos; y mezclas de los mismos. Por el termino "sustituido", como se emplea en la presente memoria, se quiere significar flavonoides en los que uno o mas atomos de hidrogeno del flavonoide se han reemplazado independientemente con hidroxilo, alquilo C1-C8, alcoxilo C1-C4, O-glucosido y similares o una mezcla de estos sustituyentes.

Los ejemplos de flavonoides adecuados incluyen, pero no se limitan a, flavanona no sustituida, mono-hidroxi flavanonas (p. ej., 2'-hidroxi flavanona, 6-hidroxi flavanona, 7-hidroxi flavanona, etc.), monoalcoxi flavanonas (p. ej., 5-metoxi-flavanona, 6-metoxi-flavanona, 7-metoxi-flavanona, 4'-metoxi-flavanona, etc.), chalcona no sustituida (especialmente trans-chalcona no sustituida), mono-hidroxi chalconas (p. ej., 2'-hidroxi chalcona, 4'-hidroxi chalcona, etc.), dihidroxi chalconas (p. ej., 2',4-dihidroxi chalcona, 2',4'-dihidroxi chalcona, 2,2'-dihidroxi chalcona, 2',3-dihidroxi chalcona, 2',5'-dihidroxi chalcona, etc.), y tri-hidroxi chalconas (p. ej., 2',3',4'-trihidroxi chalcona, 4,2',4'-trihidroxi chalcona, 2,2',4'-trihidroxi chalcona, etc.), flavona no sustituida, 7,2'-dihidroxi flavona, 3',4'-dihidroxi naftoflavona, 4'-hidroxiflavona, 5,6-benzoflavona y 7,8-benzoflavona, isoflavona no sustituida, daidzema (7,4'-dihidroxi isoflavona), 5,7-dihidroxi-4'-metoxi isoflavona, isoflavonas de soja (una mezcla extrafda de soja), cumarina no sustituida, 4-hidroxi cumarina, 7-hidroxi cumarina, 6-hidroxi-4-metil-cumarina, cromona no sustituida, 3-formil cromona, 3-formil-6-isopropil cromona, dicumarol no sustituido, cromanona no sustituida, cromanol no sustituido y mezclas de los mismos.

Se prefieren para su uso en la presente invencion flavanona no sustituida, metoxi flavanonas, chalcona no sustituida, 2',4-dihidroxi chalcona y mezclas de las mismas. Son mas preferidas flavanona no sustituida, chalcona no sustituida (especialmente el isomero trans) y mezclas de las mismas.

Pueden ser materiales sinteticos u obtenidos como extractos de fuentes naturales (p. ej., plantas). El material de origen natural tambien puede ser derivatizado adicionalmente (p. ej., un derivado ester o eter preparado despues de la extraccion de una fuente natural). Los compuestos flavonoides utiles en la presente memoria estan disponibles comercialmente de varias fuentes, p. ej., Indofine Chemical Company, Inc. (Somerville, NJ), Steraloids, Inc. (Wilton, NH) y Aldrich Chemical Company, Inc. (Milwaukee, Wis.).

Agentes antiinflamatorios

Se puede anadir una cantidad segura y eficaz de un agente antiinflamatorio a las composiciones de la presente invencion, preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 5%, de la composicion. El agente antiinflamatorio aumenta los beneficios sobre la apariencia de la piel de la presente invencion, p. ej., tales agentes contribuyen a un tono o color de la piel mas uniforme y aceptable. La cantidad exacta de agente antiinflamatorio que se utilizara en las composiciones dependera del agente antiinflamatorio concreto utilizado, ya que dichos agentes tienen una potencia ampliamente variable.

Se pueden utilizar agentes antiinflamatorios esteroideos, que incluyen pero no se limitan a, corticosteroides tales como hidrocortisona, hidroxitriamcinolona, alfa-metil dexametasona, fosfato de dexametasona, dipropionatos de beclometasona, valerato de clobetasol, desonida, desoximetasona, acetato de desoxicorticosterona, dexametasona, diclorisona, diacetato de diflorasona, valerato de diflucortolona, fluadrenolona, acetonido de fluclorolona, fludrocortisona, pivalato de flumetasona, acetonido de fluocinolona, fluocinonida, esteres butflicos de flucortina, fluocortolona, acetato de fluprednideno (fluprednilideno), flurandrenolona, halcinonida, acetato de hidrocortisona, butirato de hidrocortisona, metilprednisolona, acetonido de triamcinolona, cortisona, cortodoxona, flucetonido, fludrocortisona, diacetato de difluorosona, fluradrenolona, fludrocortisona, diacetato de diflurosona, acetonido de fluradrenolona, medrisona, amcinafel, amcinafida, betametasona y el resto de sus esteres, cloroprednisona, acetato de clorprednisona, clocortelona, clescinolona, diclorisona, diflurprednato, flucloronida, flunisolida, fluorometalona, fluperolona, fluprednisolona, valerato de hidrocortisona, ciclopentilpropionato de hidrocortisona, hidrocortamato, meprednisona, parametasona, prednisolona, prednisona, dipropionato de beclometasona, triamcinolona, y mezclas de los mismos. El anti-inflamatorio esteroideo preferido para su uso es la hidrocortisona.

Una segunda clase de agentes antiinflamatorios que es util en las composiciones incluye los agentes antiinflamatorios no esteroideos. La variedad de compuestos abarcados por este grupo es bien conocida por los expertos en la tecnica. Para una descripcion detallada de la estructura qmmica, la smtesis, los efectos secundarios, etc. de los agentes antiinflamatorios no esteroideos, se puede hacer referencia a textos convencionales, incluyendo Anti-inflammatory and Anti-Rheumatic Drugs, K. D. Rainsford, Vol. I-III, CRC Press, Boca Raton, (1985), y Anti­ inflammatory Agents, Chemistry and Pharmacology, 1, R. A. Scherrer, et al., Academic Press, Nueva York (1974). Los agentes antiinflamatorios no esteroideos espedficos utiles en la invencion de la composicion incluyen, pero no se limitan a:

1) los oxicam, tales como piroxicam, isoxicam, tenoxicam, sudoxicam y CP-14,304;

2) los salicilatos, tales como aspirina, disalcid, benorilato, trilisato, safaprin, solprin, diflunisal y fendosal; 3) los derivados de acido acetico, tales como diclofenaco, fenclofenaco, indometacina, sulindac, tolmetina, isoxepac, furofenaco, tiopinac, zidometacina, acematacina, fentiazac, zomepirac, clindanac, oxepinac, felbinac, y cetorolaco;

4) los fenamatos, tales como acidos mefenamico, meclofenamico, flufenamico, niflumico y tolfenamico;

5) los derivados de acido propionico, tales como el ibuprofeno, naproxeno, benoxaprofeno, flurbiprofeno, cetoprofeno, fenoprofeno, fenbufeno, indoprofeno, pirprofeno, carprofeno, oxaprozm, pranoprofeno, miroprofeno, tioxaprofeno, suprofeno, alminoprofeno, y tiaprofenico; y

6) los pirazoles, tales como fenilbutazona, oxifenbutazona, feprazona, azapropazona y trimetazona.

Tambien se pueden emplear mezclas de estos agentes anti-inflamatorios no esteroideos, asf como las sales y esteres dermatologicamente aceptables de estos agentes. Por ejemplo, el etofenamato, un derivado de acido flufenamico, es particularmente util para la aplicacion topica. De los agentes anti-inflamatorios no esteroideos se prefieren, ibuprofeno, naproxeno, acido flufenamico, etofenamato, aspirina, acido mefenamico, acido meclofenamico, piroxicam y felbinac; son mas preferidos ibuprofeno, naproxeno, cetoprofeno, etofenamato, aspirina y acido flufenamico.

Finalmente, los llamados agentes anti-inflamatorios "naturales" son utiles en los metodos de la presente invencion. Tales agentes se pueden obtener adecuadamente como un extracto mediante aislamiento ffsico y/o qrnmico adecuado de fuentes naturales (p. ej., plantas, hongos, subproductos de microorganismos) o se pueden preparar sinteticamente. Por ejemplo, se puede utilizar cera de candelilla, bisabolol (p. ej., alfa bisabolol), aloe vera, esteroles de plantas (p. ej., fitosterol), Manjistha (extrafdo de plantas del genero Rubia, concretamente Rubia Cordifolia) y Guggal (extrafdo de plantas del genero Commifora, concretamente Commiphora Mukul), extracto de nuez de cola, manzanilla, extracto de trebol rojo y extracto de latigo de mar.

Otros agentes antiinflamatorios utiles en la presente memoria incluyen compuestos de la familia del regaliz (el genero/especie vegetal Glycyrrhiza glabra), incluyendo acido glicirretico, acido glicinicico y derivados de los mismos (p. ej., sales y esteres). Las sales adecuadas de los compuestos anteriores incluyen sales metalicas y de amonio. Los esteres adecuados incluyen esteres saturados o insaturados C2-C24 de los acidos, preferiblemente C10-C24, mas preferiblemente C16-C24. Los ejemplos espedficos de lo anterior incluyen el extracto de regaliz soluble en aceite, los propios acidos glicirncico y glicirretico, el glicirricinato monoamonico, el glicirricinato monopotasico, el glicirricinato dipotasico, el acido 1 -beta-glicirretico, el glicirretinato de estearilo, y el acido 3-esteariloxi-glicirretmico, y el 3-succiniloxi-beta-glicirretinato disodico. Se prefiere el glicirretinato de estearilo.

Agentes anticelulfticos

Las composiciones de la presente invencion tambien pueden contener una cantidad segura y eficaz de un agente anticelulftico. Los agentes adecuados pueden incluir compuestos de xantina (p. ej., cafema, teofilina, teobromina y aminofilina).

Anestesicos topicos

Las composiciones de la presente invencion tambien pueden contener una cantidad segura y eficaz de un anestesico topico. Los ejemplos de farmacos anestesicos topicos incluyen benzocama, lidocama, bupivacama, clorprocama, dibucama, etidocama, mepivacama, tetracama, diclonina, hexilcama, procama, cocama, ketamina, pramoxina, fenol y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos.

Agentes bronceadores

Las composiciones de la presente invencion pueden contener un agente bronceador. Cuando esta presente, es preferible que las composiciones contengan de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 20%, mas preferiblemente de aproximadamente 2% a aproximadamente 7%, y aun mas preferiblemente de aproximadamente 3% a aproximadamente 6%, en peso de la composicion, de dihidroxiacetona como agente bronceador artificial. Agentes para aclarar la piel

Las composiciones de la presente invencion pueden contener un agente para aclarar la piel. Cuando se utilizan, las composiciones contienen preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,2% a aproximadamente 5%, tambien preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 2%, en peso de la composicion, de un agente para aclarar la piel. Los agentes para aclarar la piel adecuados incluyen los conocidos en latecnica, que incluyen acido kojico, arbutina, acido ascorbico y sus derivados (p. ej., ascorbil fosfato de magnesio o ascorbil fosfato de sodio) y extractos (p. ej., extracto de morera, extracto de placenta). Los agentes para aclarar la piel adecuados para su uso en la presente memoria tambien incluyen los descritos en la Publicacion PCT Num. 95/34280, a nombre de Hillebrand, correspondiente a la Solicitud PCT de Estados Unidos Num. 95/07432, presentada el 12 de junio de 1995; y la Solicitud de Estados Unidos en tramitacion con la presente Num. de Serie 08/390.152 presentada a nombre de Kvalnes, Mitchell A. DeLong, Barton J. Bradbury, Curtis B. Motley, y John D. Carter, correspondiente a la Publicacion PCT Num. 95/23780, publicada el 8 de septiembre de 1995.

Agentes calmantes y curativos de la piel

Las composiciones de la presente invencion pueden comprender un agente calmante o curativo de la piel. Los agentes calmantes de la piel o curativos de la piel adecuados para su uso en la presente memoria incluyen derivados de acido pantenoico (que incluyen pantenol, dexpantenol, etil pantenol), aloe vera, alantoma, bisabolol y glicirricinato dipotasico. Se puede anadir una cantidad segura y eficaz de un agente calmante de la piel o curativo de la piel a la presente composicion, preferiblemente, de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 30%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 20%, aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 10% en peso de la composicion formada.

Agentes antimicrobianos y antifungicos

Las composiciones de la presente invencion pueden contener un agente antimicrobiano o antifungico. Tales agentes son capaces de destruir microbios, impidiendo el desarrollo de microbios o impidiendo la accion patogena de los microbios. Se puede anadir una cantidad segura y eficaz de un agente antimicrobiano o antifungico a las presentes composiciones, preferiblemente, de aproximadamente 0,001% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 5%, y aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,05% a aproximadamente 2%.

Los ejemplos de agentes antimicrobianos y antifungicos incluyen farmacos B-lactamicos, farmacos de quinolona, ciprofloxacina, norfloxacina, tetraciclina, eritromicina, amikacina, 2,4,4'-tricloro-2'-hidroxi difenil eter, 3,4,4'-triclorobanilida, fenoxietanol, fenoxi propanol, fenoxi isopropanol, doxiciclina, capreomicina, clorhexidina, clortetraciclina, oxitetraciclina, clindamicina, etambutol, isetionato de hexamidina, metronidazol, pentamidina, gentamicina, kanamicina, lineomicina, metaciclina, metenamina, minociclina, neomicina, netilmicina, paromomicina, estreptomicina, tobramicina, miconazol, hidrocloruro de tetraciclina, eritromicina, eritromicina cinc, estolato de eritromicina, estearato de eritromicina, sulfato de amikacina, hidrocloruro de doxiciclina, sulfato de capreomicina, gluconato de clorhexidina, hidrocloruro de chlorhexidina, hidrocloruro de clortetraciclina, hidrocloruro de oxitetraciclina, hidrocloruro de clindamicina, hidrocloruro de etambutol, hidrocloruro de metronidazol, hidrocloruro de pentamidina, sulfato de gentamicina, sulfato de kanamicina, hidrocloruro de lineomicina, hidrocloruro de metaciclina, hipurato de metenamina, mandelato de metenamina, hidrocloruro de minociclina, sulfato de neomicina, sulfato de netilmicina, sulfato de paromomicina, sulfato de estreptomicina, sulfato de tobramicina, hidrocloruro de miconazol, ketaconazol, hidrocloruro de amanfadina, sulfato de amanfadina, octopirox, paraclorometa xilenol, nistatina, tolnaftato, cinc piritiona y clotrimazol.

Adicionalmente se pueden utilizar peptidos antimicrobianos.

Agentes de proteccion solar

La exposicion a la luz ultravioleta puede ocasionar un exceso de descamacion y cambios en la textura del estrato corneo. Por lo tanto, las composiciones de la presente invencion pueden contener opcionalmente un agente de proteccion solar. Como se emplea en la presente memoria, "agente de proteccion solar" incluye agentes de proteccion solar y bloqueadores solares físicos. Los agentes de proteccion solar adecuados pueden ser organicos o inorganicos.

Los protectores solares inorganicos utiles en la presente memoria incluyen los siguientes oxidos metalicos; dioxido de titanio que tiene un tamano de partfcula primario promedio de aproximadamente 15 nm a aproximadamente 100 nm, oxido de cinc que tiene un tamano de partfcula primario promedio de aproximadamente 15 nm a aproximadamente 150 nm, oxido de zirconio que tiene un tamano de partfcula primario promedio de aproximadamente 15 nm a aproximadamente 150 nm, oxido de hierro que tiene un tamano de partfcula primario promedio de aproximadamente 15 nm a aproximadamente 500 nm, y mezclas de los mismos. Cuando se utilizan en la presente memoria, los filtros solares inorganicos estan presentes en una cantidad de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 20%, preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 10%, mas preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 5%, en peso de la composicion.

Una amplia variedad de agentes de proteccion solar organicos convencionales es adecuada para su uso en la presente memoria. Sagarin, et al., en el Capftulo VIII, paginas 189 y siguientes de Cosmetics Science and Technology (1972), describen numerosos agentes adecuados. Los agentes protectores solares adecuados espedficos incluyen, por ejemplo: acido p-aminobenzoico, sus sales y sus derivados (esteres de etilo, isobutilo, glicerilo; acido p-dimetilaminobenzoico); antranilatos (es decir, o-amino-benzoatos; esteres de metilo, mentilo, fenilo, bencilo, feniletilo, linalilo, terpinilo y ciclohexenilo); salicilatos (esteres de amilo, fenilo, octilo, bencilo, mentilo, glicerilo y di-propilenglicol); derivados de acido cinamico (esteres de mentilo y bencilo, a-fenil cinamonitrilo; piruvato de butil cinamoilo); derivados del acido dihidroxicinamico (umbeliferona, metilumbeliferona, metilaceto-umbeliferona); derivados del acido trihidroxi-cinamico (esculetina, metilesculetina, dafnetina y los glucosidos, esculina y dafina); hidrocarburos (difenilbutadieno, estilbeno); dibenzalacetona y benzalacetofenona; naftolsulfonatos (sales de sodio de acido 2-naftol-3,6-disulfonico y de acido 2-naftol-6,8-disulfonico); acido di-hidroxinaftoico y sus sales; o- y phidroxibifenildisulfonatos; derivados de cumarina (7-hidroxi, 7-metilo, 3-fenilo); diazoles (2-acetil-3-bromoindazol, fenilbenzoxazol, metilnaftoxazol, diversos arilbenzotiazoles); sales de quinina (bisulfato, sulfato, cloruro, oleato y tanato); derivados de quinolina (sales de 8-hidroxiquinolina, 2-fenilquinolina); benzofenonas sustituidas con hidroxi o metoxi; acidos urico y violurico; acido tanico y sus derivados (p. ej., hexaetileter); (butil carbotol) (6-propil piperonil) eter; hidroquinona; benzofenonas (oxibenceno, sulisobenzona, dioxibenzona, benzorresorcinol, 2,2',4,4'-tetrahidroxibenzofenona, 2,2'-dihidroxi-4,4'-dimetoxibenzofenona, octabenzona; 4-isopropildibenzoilmetano; butilmetoxidibenzoilmetano; etocrileno; octocrileno; [3-(4'-metilbenciliden bornan-2-ona), acido tereftaliliden dicanfor sulfonico y 4-isopropil-di-benzoilmetano.

Agentes acondicionadores

Las composiciones de la presente invencion pueden contener un agente acondicionador seleccionado entre agentes hidratantes, humectantes o acondicionadores para la piel. Se puede emplear una variedad de estos materiales y cada uno puede estar presente a un nivel de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 20%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, y aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 7% en peso de la composicion. Estos materiales incluyen, pero no se limitan a, guanidina; urea; Acido glicolico y sales de glicolato (p. ej., amonio y alquil amonio cuaternario); acido salidlico; acido lactico y sales de lactato (p. ej., amonio y alquil amonio cuaternario); aloe vera en cualquiera de su variedad de formas (p. ej., gel de aloe vera); alcoholes polihidroxilados tales como sorbitol, manitol, xilitol, eritritol, glicerol, hexanotriol, butanotriol, propilenglicol, butilenglicol, hexilenglicol y similares; polietilenglicoles; azucares (p. ej., melibiosa) y almidones; derivados de azucar y almidon (p. ej., glucosa alcoxilada, fucosa, glucosamina); acido hialuronico; lactamida monoetanolamina; acetamida monoetanolamina; pantenol; alantoina; y mezclas de los mismos. Tambien son utiles en la presente memoria los gliceroles propoxilados descritos en la Patente de Estados Unidos Num. 4.976.953, de Orr et al., expedida el 11 de diciembre de 1990.

Agentes Estructurantes

Las composiciones de este documento, y especialmente las emulsiones de este documento, pueden contener un agente estructurante. Los agentes estructurantes son particularmente preferidos en las emulsiones de aceite en agua de la presente invencion. Sin estar limitado por la teona, se cree que el agente estructurante ayuda a proporcionar caractensticas reologicas a la composicion que contribuyen a la estabilidad de la composicion. Por ejemplo, el agente estructurante tiende a ayudar en la formacion de las estructuras de la red de gel cristalino ftquido. El agente estructurante tambien puede funcionar como un emulsionante o tensioactivo. Las composiciones preferidas de esta invencion contienen de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 20%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 10%, aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 9%, de uno o mas agentes estructurantes.

Los agentes estructurantes preferidos de la presente invencion se seleccionan entre acido estearico, acido palmftico, alcohol esteanlico, alcohol cetflico, alcohol behemlico, acido estearico, acido palmftico, polietilenglicol eter del alcohol esteanlico que tiene un promedio de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 unidades de oxido de etileno, polietilenglicol eter de alcohol cetflico que tiene un promedio de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 unidades de oxido de etileno, y mezclas de los mismos. Los agentes estructurantes mas preferidos de la presente invencion se seleccionan entre alcohol esteanlico, alcohol cetflico, alcohol behemlico, polietilenglicol eter de alcohol esteanlico que tiene un promedio de aproximadamente 2 unidades de oxido de etileno (estearet-2), polietilenglicol eter de alcohol cetflico que tiene un promedio de aproximadamente 2 unidades de oxido de etileno, y mezclas de los mismos. Los agentes estructurantes aun mas preferidos se seleccionan entre acido estearico, acido palmftico, alcohol esteanlico, alcohol cetilico, alcohol behemlico, estearet-2 y mezclas de los mismos.

Agente espesante (Incluyendo espesantes y agentes gelificantes)

Las composiciones de la presente invencion pueden contener uno o mas agentes espesantes, preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 5%, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 4%, y aun mas preferiblemente de aproximadamente 0,25% a aproximadamente 3% en peso de la composicion.

Las clases no limitantes de agentes espesantes para su uso en las composiciones de la invencion incluyen aquellas seleccionadas entre las siguientes: polfmeros de acido carboxflico (tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos Num. 5.087.445, de Haffey et al., expedida el 11 de febrero de 1992; la Patente de Estados Unidos Num. 4.509.949, de Huang et al., expedida el 5 de abril de 1985; la Patente de Estados Unidos Num. 2.798.053, de Brown, expedida el 2 de julio de 1957; y en CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary, Cuarta edicion, 1991, pags. 12 y 80); polfmeros de poliacrilato entrecruzados (tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos Num. 5.100.660, de Hawe et al., expedida el 31 de marzo de 1992; la Patente de Estados Unidos Num. 4.849.484, de Heard, expedida el 18 de julio de 1989; la Patente de Estados Unidos Num. 4.835.206, de Farrar et al., expedida el 30 de mayo de 1989; la Patente de Estados Unidos Num. 4.628.078 de Glover et al. expedida el 9 de diciembre de 1986; la Patente de Estados Unidos Num. 4.599.379 de Flesher et al. expedida el 8 de julio de 1986; y el documento EP 228.868, de Farrar et al., publicado el 15 de julio de 1987); polfmeros de poliacrilamida (tales como polfmeros de poliacrilamida no ionicos que incluyen polfmeros sustituidos ramificados o no ramificados y copolfmeros de multiples bloques de acrilamidas y acrilamidas sustituidas con acidos acnlicos y acidos acnlicos sustituidos); polisacaridos (que se refiere a agentes gelificantes que contienen una cadena principal de unidades de azucar repetitivas (es decir, unidades de carbohidratos), que incluyen celulosa, carboximetil hidroxietilcelulosa, acetato propionato carboxilato de celulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxietil etilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metil hidroxietilcelulosa, celulosa microcristalina, sal de sodio de sulfato de celulosa y mezclas de los mismos); y gomas (tales como goma arabiga, agar, algina, acido algmico, alginato de amonio, amilopectina, alginato de calcio, carragenano de calcio, carnitina, carragenano, dextrina, gelatina, goma gellan, goma guar, cloruro de guar hidroxipropiltrimonio, hectorita, acido hialuronico, sflice hidratada, hidroxipropil-quitosano, hidroxipropil-guar, goma karaya, kelp, goma de algarrobo, goma natto, alginato de potasio, carragenano de potasio, alginato de propilenglicol, goma de esclerocio, sal de sodio de carboximetil dextrano, carragenano de sodio, goma de tragacanto, goma de xantano, y mezclas de los mismos).

Preparacion de la composicion

Las composiciones utiles para los metodos de la presente invencion se preparan generalmente mediante metodos convencionales tales como los que se conocen en la tecnica de fabricacion de composiciones topicas. Tales metodos tfpicamente implican mezclar los ingredientes en una o mas etapas hasta un estado relativamente uniforme, con o sin calentamiento, enfriamiento, aplicacion de vado y similares.

Conservantes

Se pueden incorporar conservantes en las composiciones de la presente invencion para proteger contra el crecimiento de microorganismos potencialmente daninos. Mientras que es en la fase acuosa en la que los microorganismos tienden a crecer, los microorganismos tambien pueden residir en la fase anhidra u oleosa. Como tales, los conservantes, que tienen solubilidad tanto en agua como en aceite, se emplean preferiblemente en las presentes composiciones. Los conservantes tradicionales adecuados para las composiciones de esta invencion son los esteres alqrnlicos de acido parahidroxibenzoico. Otros conservantes que se pueden utilizar incluyen derivados de hidantoma, sales de propionato y una variedad de compuestos de amonio cuaternario.

Los conservantes particularmente preferidos son metilparabeno, imidazolidinilurea, deshidroacetato de sodio, propilparabeno, etilendiamino tetraacetato trisodico (EDTA) y alcohol bendlico. El conservante se puede seleccionar para evitar posibles incompatibilidades entre el conservante y otros ingredientes. Los conservantes se emplean preferiblemente en cantidades que vanan de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 2% en peso de la composicion. Se pueden utilizar en la presente invencion otros conservantes conocidos en la tecnica.

Metodos de Administracion

Otro aspecto de la invencion consiste en proporcionar un uso de una composicion de la invencion, en donde se proporcionan vesfculas lipfdicas dispersas y/o ciclodextrinas que comprenden colageno a la capa dermica de la piel de un paciente. El metodo incluye la etapa de poner en contacto la piel u otro sitio diana del sujeto con una composicion que incluye una vesfcula lipfdica (p. ej., vesfcula lipfdica paucilamelar no fosfolipfdica) que tiene una cavidad que contiene colageno humano.

Las composiciones de la presente invencion son utiles para regular y/o mejorar el estado de la piel de un marnffero. Semejante regulacion de las condiciones del tejido epidermico puede incluir la regulacion profilactica y terapeutica. Por ejemplo, tales metodos de regulacion estan dirigidos a engrosar el tejido dermico y a prevenir y/o retardar la atrofia de la piel de un marnffero, prevenir y/o retardar la aparicion de aranas vasculares y/o manchas rojas en la piel de un mairnfero, prevenir y/o retardar la aparicion de drculos oscuros bajo el ojo de un mairnfero, prevenir y/o retardar la piel cetrina de un mairnfero, prevenir y/o retardar el descolgamiento de la piel de un mairnfero, alisar y/o suavizar los labios de un mairnfero, prevenir y/o aliviar la picazon de la piel de un mairnfero, regular la textura de la piel (p. ej., arrugas y lmeas finas), y mejorar el color de la piel (p. ej., enrojecimiento, pecas).

La regulacion del estado del tejido epidermico implica la aplicacion topica al tejido epidermico de una cantidad segura y eficaz de una composicion de la presente invencion. La cantidad de la composicion que se aplica, la frecuencia de aplicacion y el penodo de uso variaran ampliamente dependiendo del nivel de colageno (y, cuando esten presentes, de otros agentes para el cuidado de la piel) de una composicion dada y del nivel de regulacion deseado, p. ej., a la luz del nivel de dano tisular epidermico presente o que se espera que se produzca.

En una realizacion preferida, la composicion se aplica cronicamente a la piel. Por "aplicacion topica cronica" se entiende la aplicacion topica continua de la composicion a lo largo de un penodo prolongado durante la vida del sujeto, preferiblemente durante un penodo de al menos aproximadamente una semana, mas preferiblemente durante un penodo de al menos aproximadamente un mes, incluso mas preferiblemente durante al menos aproximadamente tres meses, incluso mas preferiblemente durante al menos aproximadamente seis meses, y aun mas preferiblemente durante al menos aproximadamente un ano. Si bien los beneficios se pueden obtener despues de varios penodos maximos de uso (p. ej., cinco, diez o veinte anos), se prefiere que la aplicacion cronica continue durante toda la vida del sujeto. Normalmente, las aplicaciones senan del orden de aproximadamente una vez al dfa durante penodos tan prolongados, sin embargo, las tasas de aplicacion pueden variar desde aproximadamente una vez por semana hasta aproximadamente tres veces por dfa o mas.

Se puede emplear un amplio intervalo de las composiciones de la presente invencion para proporcionar un beneficio para el aspecto y/o la sensacion de la piel. Las cantidades de las presentes composiciones que se aplican tipicamente por aplicacion son, en mg de composicion/cm2 de piel, de aproximadamente 0,1 mg/cm2 a aproximadamente 10 mg/cm2. Una cantidad de aplicacion particularmente util es de aproximadamente 1 mg/cm2 a aproximadamente 2 mg/cm2.

La mejora y/o regulacion del estado del tejido epidermico se pone en practica preferiblemente aplicando una composicion en forma de locion, crema, gel, espuma, unguento, pasta, emulsion, pulverizacion, acondicionador, tonico, cosmetico, lapiz labial, base, locion para despues del afeitado, o similares, que preferiblemente se pretende dejar en la piel u otra estructura de queratina para algun beneficio estetico, profilactico, terapeutico u otro (es decir, una composicion de permanencia ("leave-on"). Despues de aplicar la composicion a la piel, preferiblemente se deja sobre la piel durante un penodo de al menos aproximadamente 15 minutos, mas preferiblemente al menos aproximadamente 30 minutos, incluso mas preferiblemente al menos aproximadamente 1 hora, aun mas preferiblemente durante al menos varias horas, p. ej., hasta aproximadamente 12 horas. Se puede tratar cualquier parte de la porcion externa del organismo, p. ej., labios, area de debajo de los ojos, parpados, cuero cabelludo, cuello, torso, brazos, manos, piernas, pies, etc. La composicion se puede aplicar con los dedos o con un implemento o dispositivo (p. ej., almohadilla, bola de algodon, bolfgrafo aplicador, aplicador de pulverizacion y similares).

Otro enfoque para asegurar una dispersion continua de al menos un nivel mmimo de colageno (y, cuando este presente, al menos un agente para el cuidado de la piel) a la capa dermica consiste en aplicar el compuesto mediante el uso de un parche aplicado, p. ej., a la cara. Este enfoque es particularmente util para zonas problematicas de la piel que requieren un tratamiento mas intensivo (p. ej., area de patas de gallo faciales, lmeas de expresion, zona de debajo de los ojos y similares). El parche puede ser oclusivo, semi-oclusivo o no oclusivo y puede ser adhesivo o no adhesivo. La composicion puede estar contenida dentro del parche o aplicarse a la piel antes de la aplicacion del parche. El parche tambien puede incluir agentes adicionales tales como iniciadores qrnmicos para reacciones exotermicas tales como los que se describen en las Patentes de Estados Unidos Num.

5.821.250, 5.981.547 y 5.972.957 de Wu, et al. El parche se deja preferiblemente sobre la piel durante un penodo de al menos aproximadamente 5 minutos, mas preferiblemente al menos aproximadamente 15 minutos, aun mas preferiblemente al menos aproximadamente 30 minutos, incluso mas preferiblemente al menos aproximadamente 1 hora, aun mas preferiblemente en la noche como una forma de terapia nocturna.

Ejemplo 1 -Absorcion de colageno en la piel.

El estudio evaluo la farmacocinetica de absorcion percutanea de colageno 14C enriquecido a un liposoma. La absorcion se midio en piel de rostro humano extirpado, in vitro, utilizando la tecnica de dosis finita y Celulas de Difusion de Franz.

El modelo de piel de cadaver humano in vitro ha demostrado ser una herramienta valiosa para el estudio de la absorcion percutanea y la determinacion de la farmacocinetica de los farmacos de aplicacion topica. El modelo utiliza piel de cadaver humano montada en celulas de difusion especialmente disenadas que permiten mantener la piel a una temperatura y humedad que coinciden con las condiciones tfpicas in vivo. Se aplica una dosis finita (p.ej. 4-7 mg/cm2) de formulacion a la superficie externa de la piel y se mide la absorcion del farmaco al controlar su tasa de aparicion en la solucion receptora que bana la superficie interna de la piel.

Artfculo de prueba - Crema de d^ a

Trazador Colageno 14C (ARC 2005) (metil-14C)

El producto se sometio a prueba en secciones de piel repetidas de tres donantes de piel diferentes, para la absorcion percutanea de formulacion enriquecida en colageno 14C durante un penodo de dosis de 48 horas. En los tiempos preseleccionados despues de la dosificacion, la solucion del reservorio dermico se elimino en su totalidad, se reemplazo por una solucion receptora de nueva aportacion y se guardo una aKcuota para el analisis posterior. Al finalizar el estudio, tambien se evaluaron los contenidos dermicos y epidermicos. Las muestras fueron analizadas para determinar el contenido de isotopo 14C por medio de espectroscopia de centelleo Kquido.

Tabla resumen: Resultados de absorcion total de Novasome enriquecido con colageno en [14C] entre donantes

Absorcion percutanea de colageno 14C como radioisotopo a traves de la piel extirpada de rostro humano durante 48 horas con una sola aplicacion. Media ± ET (n = 3) como masa total (pg) y porcentaje de dosis aplicada

Origen de la piel Pen. total * (pg) Pen. total (%) Parpado 3,83 ±2,40 42,96 ±21,21 Preauricular 2,63 ± 0,56 19,63 ± 1,27 Datos combinados 3,03 ± 0,51 27,40 ± 7,81

* "Pen" es la penetracion

El colageno radiomarcado fue preparado por American Radiolabeled Chemicals, Inc. (ARC; St. Louis, MO 63143). Brevemente, el patrocinador del estudio envio su colageno a ARC para su marcaje. ARC marco el colageno por metilacion utilizando [14C] formaldelddo y cianoborohidruro de sodio. Se indico que el material radiomarcado tema una actividad espedfica de 25 pCi/mg y se proporciono en un volumen de 1 ml de tampon de fosfato de potasio 0,01 M (pH 7,2).

El material radiomarcado se seco primero mediante centrifugacion a vad o (Speed Vac, Savant, Inc.) durante aproximadamente 3 horas, seguido de su reconstitucion en 50 pl de la crema de dfa Novasome y se mezclo con una jeringa doble (100 pL) mediante extrusion cruzada a traves de una valvula de llave de paso de tres vfas 20 veces. Se dejo que la crema enriquecida se equilibrara durante 24 horas a temperatura ambiente antes de su uso. La actividad esped fica final se midio como una formulacion de crema de 0,1 pCi/pL con 3,82 pg/pL de colageno radiomarcado que contribuye a la base de la crema.

Estudio de preparacion de la piel:

En este estudio se utilizo la piel extirpada de rostro humano (parpado y pre-auricular) sin signos evidentes de enfermedad de la piel, obtenida despues de la cirugfa estetica. Se elimino todo el tejido subcutaneo y ~25% inferior de la dermis, se sello en bolsas de plastico impermeables al agua y se almaceno a < -70°C hasta su uso. Antes del experimento, la piel se descongelo y a continuacion se enjuago con agua para eliminar la sangre adherida u otro material de la superficie.

Se corto la piel de un solo donante en varias secciones mas pequenas, lo suficientemente grandes como para caber en las celulas de difusion de Franz (0,4 cm2 - 0,8 cm2). La camara dermica se lleno a su capacidad con una solucion de reservorio de solucion salina isotonica tamponada con fosfato (PBS), pH 7,4 ± 0,1, y la camara epidermica se dejo abierta al entrono ambiental del laboratorio. A continuacion, las celulas se colocaron en un aparato de difusion en el que la solucion del reservorio dermico se agito magneticamente a aproximadamente 600 RPM y la temperatura de la superficie de la piel se mantuvo a 32,0° ± 1,0°C.

Para asegurar la integridad de cada seccion de piel, se determino su permeabilidad al agua tritiada antes de la aplicacion de los productos de prueba. Despues de un breve penodo de equilibrio (0,5-1 horas), se coloco en capas 3H2O (NEN, Boston, MA, sp. Act. ~ 0,5 pCi/mL) a traves de la parte superior de la piel con un gotero de manera que se cubrio toda la superficie expuesta (aproximadamente 100-500 pL). Despues de 5 minutos se elimino la capa acuosa de 3H2O. A los 30 minutes, se recogio la solucion del receptor y se analizo el contenido radiactivo mediante recuento de centelleo en Kquido. Tras la prueba de integridad, la solucion del receptor se cambio varias veces para eliminar cualquier tritio residual medible.

Dosificacion y recogida de muestras

Antes de la administracion de las formulaciones de prueba topicas a las secciones de la piel, se retiro la chimenea de la Celula de Franz para permitir el acceso completo a la superficie epidermica de la piel y la solucion de reservorio se reemplazo por una solucion de nueva aportacion de PBS.

Posteriormente, el producto de prueba se aplico para replicar secciones de piel del mismo donante. La dosificacion se realizo utilizando un juego de pipetas de desplazamiento positivo para administrar formulaciones de 5 pL/cm2. Dada la piel disponible, se utilizaron tres tamanos de camara con diferentes zonas de dosificacion (0,4, 0,5 y 0,8 cm2). La dosis se extendio por toda la superficie con la punta de la pipeta. Cinco a diez minutos despues de la aplicacion, se reemplazo la parte de la chimenea de la celula de Franz. Las celulas de repuesto no se dosificaron, sino que se tomaron muestras, para evaluar las sustancias que interfenan durante el estudio analftico.

A intervalos de tiempo preseleccionados despues de la aplicacion de la formulacion de prueba (0,5, 1, 3, 7, 19, 26, 43, 48 h), la solucion del receptor se elimino en su totalidad y se reemplazo por una solucion de nueva aportacion, y se tomo una alteuota para el analisis.

Despues de que se recogiera la ultima muestra, la superficie de la piel se lavo con agua desionizada doblemente destilada para recoger la formulacion no absorbida de la superficie de la piel. Despues del lavado, la piel se retiro de la camara, se separo en epidermis y dermis, y cada una se proceso para un analisis posterior del contenido de isotopos.

Metodos analtticos

El analisis para determinar el contenido de isotopo 14C de cada muestra se realizo mediante espectroscopia de centelleo en lfquido. Los volumenes de un mililitro de cada solucion receptora y cada solucion de lavado de superficie recibieron 5-7 mL de lfquido de centelleo. El tejido (epidermis y dermis) se disolvio en Soluene-350 (PerkinElmer; Lote num. 24-060203) durante la noche, despues de lo cual cada muestra recibio 5-7 ml de lfquido de centelleo.

Las muestras fueron cuantificadas para determinar el contenido de 14C por espectroscopia de centelleo en lfquido utilizando un contador de centelleo lfquido PerkinElmer Tri-Carb 3100TR. Cada muestra se conto durante no menos de 5 minutos cada una, por duplicado. Las cuentas por minuto (CPM) se convirtieron automaticamente en desintegraciones por minuto (DPM) utilizando el metodo de correccion de la extincion basada en patrones externos. Todos los datos se corrigieron para el fondo de isotopos a partir de muestras en blanco.

Tabla 1: Tasa de penetracion como Flujo Medio (pg/cm)2/h) Resultados

Absorcion percutanea de colageno 14C como radioisotopo a traves de piel de cadaver humano durante 48 horas a partir de una aplicacion unica (Media ± DT parpado, media ± DT preauricular, n = 1-2 Donantes).

Tiempo (h) * Parpado Preauricular Datos combinados

0,25 0,14± 0,10 0,04 ± 0,02 0,07 ± 0,04

0,75 0,20 ± 0,02 0,12 ± 0,00 0,15 ± 0,03

2,0 0,18 ± 0,01 0,15 ± 0,06 0,16 ± 0,03

5,0 0,21 ± 0,09 0,10 ± 0,04 0,14 ± 0,04

13,0 0,17 ± 0,07 0,07 ± 0,01 0,11 ± 0,03

22,5 0,23 ± 0,18 0,08 ± 0,00 0,13 ± 0,05

35,0 0,10± 0,01 0,07 ± 0,00 0,08 ± 0,01

45,5 0,30 ± 0,30 0,07 ± 0,01 0,15 ± 0,08

* Tiempo como punto medio entre muestras.

Tabla 2: Absorcion total y resultados del equilibrio de masa

Absorcion percutanea de Colageno 14C como radioisotopo a traves de piel de cadaver humano durante 48 horas con una sola aplicacion. Media ± DT parpado y media ± DT preauricular como porcentaje de dosis aplicada y masa total (|jg). (n = 1-2 Donantes)

Parametro Parpado Preauricular Datos combinados Absorcion total (pg) 3,83 ±2,40 2,63 ± 0,56 3,03 ± 0,51

Dermis (pg) 0,02 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,02 ± 0,01 Epidermis (pg) 0,13 ± 0,06 0,28 ± 0,13 0,23 ± 0,09 Lavado de superficie (pg) 5,37 ± 0,25 9,73 ± 1,65 8,28 ± 1,74 Absorcion Total (5) 42,96 ±21,21 19,63 ± 1,27 27,40 ± 7,81

Dermis (%) 0,20 ± 0,11 0,18 ± 0,03 0,19 ± 0,02 Epidermis (%) 151 ± 0,48 2,01 ± 0,66 1,84 ± 0,42 Lavado de superficie (%) 63,14 ± 7,04 74,10 ± 0,48 70,45 ± 3,67 Recuperacion Total (%) 107,81 ± 14,76 95,92 ±2,44 99,88 ±4,21

Los datos indicaron que cuando se incorpora colageno 14C a la formulacion base de crema de d^ a Novasome, el radioisotopo penetra en y a traves de la piel extirpada de rostro humana.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Un liposoma que comprende una protema de colageno de menos de 10 Kd, en donde dicha protema de colageno tiene una secuencia de aminoacidos que es al menos 85% identica a SEQ ID NO: 1 o a SEQ ID NO: 2.

2. El liposoma, segun la reivindicacion 1, que comprende adicionalmente acido hialuronico o al menos uno del grupo que consiste en agentes de descamacion, agentes antiacne, agentes antiarrugas, compuestos de vitamina B3, retinoides, acidos hidrcwlicos, antioxidantes, captadores de radicales, quelantes, flavonoides, agentes antiinflamatorios, agentes anticelulfticos, anestesicos topicos, agentes bronceadores, agentes para aclarar la piel, agentes calmantes y para la curacion de la piel, agentes antimicrobianos y antifungicos, agentes de proteccion solar, agentes acondicionadores, agentes estructurantes, agentes espesantes y conservantes.

3. El liposoma, segun la reivindicacion 1, en donde la protema de colageno deriva de colageno humano, producido de forma recombinante o producido sinteticamente.

4. El liposoma, segun la reivindicacion 1, en donde dicha protema de colageno tiene aproximadamente 8,5 kd.

5. El liposoma, segun la reivindicacion 4, en donde dicha protema de colageno se selecciona entre SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 2.

6. El liposoma, segun la reivindicacion 1, que es paucilamelar.

7. El liposoma, segun la reivindicacion 1, en donde la protema de colageno es un ligando para a2p1 integrina.

8. Una composicion cosmetica que comprende un liposoma o ciclodextrina que comprende una protema de colageno de menos de 10 kd, en donde dicha protema de colageno tiene una secuencia de aminoacidos que es al menos 85% identica a SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 2.

9. Un metodo cosmetico para administrar un agente a la piel de un sujeto, comprendiendo el metodo la etapa de poner en contacto la piel del sujeto con una composicion que comprende un portador que comprende una cavidad que tiene encapsulada en su interior una protema de colageno de menos de 10 kd, en donde dicha protema de colageno tiene una secuencia de aminoacidos que es al menos 85% identica a SEQ ID NO: 1 o a SEQ ID NO: 2, en donde dicho portador es un liposoma o una ciclodextrina.

10. El metodo cosmetico, segun la reivindicacion 9, en donde dicho portador es un liposoma.

11. El metodo cosmetico, segun la reivindicacion 10, en donde el liposoma comprende adicionalmente acido hialuronico o al menos uno del grupo que consiste en agentes de descamacion, agentes antiacne, agentes antiarrugas, compuestos de vitamina B3, retinoides, acidos hidroxflicos, antioxidantes, captadores de radicales, quelantes, flavonoides, agentes antiinflamatorios, agentes anticelulfticos, anestesicos topicos, agentes bronceadores, agentes para aclarar la piel, agentes calmantes y para la curacion de la piel, agentes antimicrobianos y antifungicos, agentes de proteccion solar, agentes acondicionadores, agentes estructurantes, agentes espesantes y conservantes.

12. Un metodo cosmetico para administrar colageno a la piel de un sujeto, en donde el metodo comprende poner en contacto la piel del sujeto con una composicion que comprende un fragmento de colageno de menos de 10 kd, en donde dicha protema de colageno tiene una secuencia de aminoacidos que es al menos 85% identica a SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 2.

13. El metodo cosmetico, segun la reivindicacion 12, en donde la piel esta en el rostro del sujeto.

14. El metodo cosmetico, segun la reivindicacion 12, en donde la composicion comprende adicionalmente uno o mas agentes emulsionantes y/o potenciadores de la penetracion.

15. El metodo cosmetico, segun la reivindicacion 12, en donde el colageno se suministra a la capa de la dermis de la piel.