ES2606289T3

ES2606289T3 - Derivados de piperazinilo para el tratamiento de cánceres

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Publication number: ES2606289T3
Application number: ES12808851.5T
Authority: ES
Inventors: Denis Carniato; Jean-François BRIAND; Mathieu Gutmann; Olivier Busnel; Cécile BOUGERET; Benoit Deprez; Karine Jaillardon
Original assignee: PITTY MARC-HENRY
Current assignee: PITTY MARC-HENRY
Priority date: 2011-12-30
Filing date: 2012-12-28
Publication date: 2017-03-23
Anticipated expiration: 2032-12-28
Also published as: PL2797898T3; EP2797898B1; KR20140117456A; BR112014015991B1; US9321778B2; WO2013098393A1; US20140356360A1; JP6105625B2; CA2859721A1; BR112014015991A8; NZ627149A; HUE030951T2; FR2985256A1; IL233414A; SG11201403727YA; KR102086732B1; ZA201405068B; FR2985256B1; CN104053648A; EP2797898B9

Abstract

Compuesto de fórmula general (I) siguiente:**Fórmula** así como sus sales farmacéuticamente aceptables, sus estereoisómeros o mezclas de estereoisómeros en cualquier proporción, en particular una mezcla de enantiómeros, y en particular una mezcla racémica, en la que: - X representa un grupo alquilo (C1-C6), fenilo, bencilo, C(O)OR5, o C(O)NHR5, - R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo C(O)H, C(O)R6, o C(O)OR6, - R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), o R2 forma con R1 o X una cadena hidrocarbonada saturada de manera que se forme un anillo de 5 o 6 miembros, en particular de 5 miembros, - R3 representa un átomo de hidrógeno o un halógeno o un grupo alquilo (C1-C6) o alcoxi (C1-C6), - R4 representa un átomo de hidrógeno o de halógeno, CN, NO2, o un grupo alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), ariloxi, benciloxi, o heteroariloxi, estando eventualmente dicho grupo sustituido con uno o varios átomos de halógeno, - Ar representa un grupo tiofenilo o un grupo fenilo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno, y - R5 y R6 representan, independientemente el uno del otro, un grupo alquilo (C1-C6), aril-alquilo (C1-C6) o arilo, estando dicho grupo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de piperazinilo para el tratamiento de cánceres.

5 La presente invención se refiere a compuestos piperazinilos útiles en particular para el tratamiento del cáncer, así como a las composiciones que los contienen y a su procedimiento de preparación.

Con el alargamiento de la vida, el cáncer, una de las principales causas de mortalidad en el mundo, afecta cada vez a más personas y sigue siendo difícil de curar.

10 El desarrollo de resistencia a los agentes anticancerosos es un problema serio que restringe considerablemente el tratamiento de numerosos tipos de cánceres. La baja tolerancia a un agente va frecuentemente acompañada de resistencia cruzada a una variedad de otros agentes. Esta resistencia múltiple a los agentes anticancerosos (Multidrug Resistance, MDR), es causada por numerosos mecanismos de los cuales sólo un pequeño número está

15 bien caracterizado. Estos mecanismos incluyen un aumento del eflujo de los medicamentos, un aumento de las capacidades de desintoxicación de la célula, una alteración de las dianas moleculares afectadas por estos agentes anticancerosos, una modificación del sistema de reparación del ADN, así como una modificación de las vías apoptóticas (Baguley, Mol. Biotechnol., 2010, 46, 308-316; Gatti et al., Methods Mol. Med. 2005, 111, 127-148; Longley et al., J. Pathol. 2005, 205, 275-292; Kohno et al., Eur. J. Cancer 2005, 41, 2577-2586).

20 El desarrollo de tratamientos anticancerosos que pueden evitar estos mecanismos de resistencia es un desafía importante y hasta ahora los ensayos iniciados han dado pocos resultados.

Unos agentes anticancerosos más particularmente destinados al tratamiento de un cáncer resistente a una 25 quimioterapia se describen en el documento WO 2009/150248. Responden a la fórmula general (I) siguiente:

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en la que R1 y R2 pueden formar, con el átomo de nitrógeno que los lleva, un heterociclo tal como un grupo 30 piperazinilo eventualmente sustituido, estando los únicos compuestos ejemplificados eventualmente sustituidos sobre el átomo de nitrógeno de la piperazina.

Los inventores de la presente solicitud de patente han descubierto de manera sorprendente que la introducción de un sustituyente X en alfa del segundo átomo de nitrógeno de la piperazina (véase la fórmula (I) más adelante) 35 permitía mejorar las propiedades fisicoquímicas de los compuestos, en particular sus solubilidades, sus propiedades farmacocinéticas así como sus actividades biológicas.

La presente solicitud de patente tiene por lo tanto más particularmente por objeto un compuesto piperazinilo sustituido de fórmula general (I) siguiente: 40

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así como sus sales farmacéuticamente aceptables, sus estereoisómeros o mezclas de estereoisómeros en cualquier proporción, en particular una mezcla de enantiómeros, y en particular una mezcla racémica, en la que: -X representa un grupo alquilo (C1-C6), fenilo, bencilo, C(O)OR5, o C(O)NHR5,

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(1): los hidratos y los solvatos,

(2): las sales de adición de ácido formadas con unos ácidos inorgánicos tales como el ácido clorhídrico, el ácido

5 bromhídrico, el ácido sulfúrico, el ácido nítrico, el ácido fosfórico y similares; o formadas con unos ácidos orgánicos tales como el ácido acético, el ácido bencenosulfónico, el ácido benzoico, el ácido alcanforsulfónico, el ácido cítrico, el ácido etano-sulfónico, el ácido fumárico, el ácido glucoheptónico, el ácido glucónico, el ácido glutámico, el ácido glicólico, el ácido hidroxinaftoico, el ácido 2-hidroxietanosulfónico, el ácido láctico, el ácido maleico, el ácido málico, el ácido mandélico, el ácido metanosulfónico, el ácido mucónico, el ácido

10 2-naftalenosulfónico, el ácido propiónico, el ácido salicílico, el ácido succínico, el ácido dibenzoil-L-tártrico, el ácido tártrico, el ácido p-toluenosulfónico, el ácido trimetilacético, el ácido trifluoroacético y similares, ventajosamente, será el ácido clorhídrico; y

(3) las sales formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto original está o bien sustituido con un

15 ión metálico, por ejemplo un ión de metal alcalino (Na+, K+ o Li+ por ejemplo), un ión de metal alcalinotérreo (como Ca2+ o Mg2+) o un ión de aluminio; o bien coordinándose con una base orgánica o inorgánica. Las bases orgánicas aceptables comprenden la dietanolamina, la etanolamina, la N-metilglucamina, la trietanolamina, la trometamina y similares. Las bases inorgánicas aceptables comprenden el hidróxido de aluminio, el hidróxido de calcio, el hidróxido de potasio, el carbonato de sodio y el hidróxido de sodio.

20 En la presente invención, se entiende designar por “estereoisómeros”, en el sentido de la presente invención, unos diaestereoisómeros o unos enantiómeros. Se trata por lo tanto de isómeros ópticos. Los estereoisómeros que no son unas imágenes en un espejo el uno del otro se designan así como “diaestereoisómeros”, y los estereoisómeros que son unas imágenes no superponibles en un espejo se designan como “enantiómeros”.

25 Un átomo de carbono unido a cuatro sustituyentes no idénticos se denomina centro quiral.

Una mezcla equimolar de dos enantiómeros se denomina mezcla racémica.

30 Los compuestos según la presente invención podrán en particular responder a la fórmula (I-bis) siguiente:

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siendo el átomo de nitrógeno que lleva el grupo X entonces de configuración (S). 35 Ventajosamente, X representará un grupo alquilo (C1-C6), en particular alquilo (C1-C4), fenilo o bencilo.

Ventajosamente, R1 representará un átomo de hidrógeno o un grupo C(O)R6, o C(O)OR6, en particular un átomo de hidrógeno. 40 Ventajosamente, R2 representará un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), tal como metilo.

Ventajosamente, R3 representará un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), tal como metilo.

45 Ventajosamente, R4 representará un átomo de hidrógeno o de halógeno, o un grupo alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), o ariloxi, estando dicho grupo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno, en particular de flúor.

Ventajosamente, Ar representará un grupo tiofenilo o un grupo fenilo sustituido con uno o varios átomos de flúor tal como el 4-flúoro-fenilo.

50 Según un modo de realización particular de la invención, X representa un grupo alquilo (C1-C6), fenilo, bencilo, C(O)OR5, C(O)NHR5; R1 representa un átomo de hidrógeno; R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), ventajosamente alquilo (C1-C4) o forma, con R1 o X, una cadena hidrocabonada saturada con el fin de formar un anillo de 5 miembros; R3 representa un átomo de hidrógeno o de halógeno o un grupo alquilo (C1-C6),

55 en particular alquilo (C1-C3), o alcoxi (C1-C6), tal como metoxi; R4 representa un átomo de halógeno, CN, NO2 o un

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como productos de combinación para una utilización simultánea, separada o espaciada en el tiempo.

En efecto, es habitual tratar el cáncer por bi-o triterapia. Podría ser en particular útil asociar las moléculas de la 5 invención con uno o varios compuestos anticancerosos que permiten así tratar el cáncer, por un lado, y prevenir la aparición de células cancerosas resistentes, por otro lado.

En particular, este o estos principio(s) activo(s) podrá(n) ser unos agentes anticancerosos utilizados clásicamente en el tratamiento del cáncer. Estos agentes anticancerosos se podrán seleccionar en particular de entre el cisplatino y 10 sus derivados tales como el carboplatino y el oxaliplatino; unos taxanos tales como el taxol, el taxotere, el paclitaxel y el docetaxel; unos alcaloides de vinca tales como la vinblastina, la vincristina y la vinorelbina; unos análogos de purina tales como la mercaptopurina, la tioguanina, la pentoestatina y la 2-clorodesoxiadenosina; unos inhibidores de topoisomerasa I tales como unos compuestos de camptotecina como el irinotecán y el topotecán; unos inhibidores de topoisomerasa II tales como la epipodofilotoxina, la podofilotoxina y sus derivados como el etopósido y el 15 tenipósido; unos derivados nucleósidos antitumorales tales como el 5-fluorouracilo, la leucovorina, la gemcitabina o la capecitabina; unos agentes alquilantes tales como mostazas de nitrógeno como la ciclofosfamida, la mecloretamina, la clorambucila y el melfalán, unas nitroso-ureas como la carmustina, la lomustina y la estreptozocina, unos alquilsulfonatos como el busulfán, unas etileniminas y unas metilmelaminas como la tiotepa y la hexametilmelamina, y unas tetrazinas como la dacarbazina; unos derivados de antraciclinas antitumorales tales 20 como la daunorrubicina, la adriamicina, el doxil, la idarrubicina y la mitoxantrona; unas moléculas que tienen como diana el receptor IGF-I tales como la picropodofilina; unos derivados de tetracarcina tales como la tetrocarcina A; unos corticoesteroides tales como la prednisona; unos anticuerpos tales como el trastuzumab (anticuerpo anti-HER2), el rituximab (anticuerpo anti-CD20), el gemtuzamab, el cetuximab, el pertuzumab y el bevacizumab; unos antagonistas o unos moduladores selectivos de los receptores de los estrógenos tales como el tamoxifeno, el 25 fulvestrant, el toremifeno, el droloxifeno, el faslodex y el raloxifeno; unos inhibidores de aromatasa tales como el exemestano, el anastrozol, el letrozol y el vorozol; unos agentes de diferenciación tales como los retinoides como el ácido retinoico y la vitamina D y unos agentes que bloquean el metabolismo del ácido retinoico tales como el accutano; unos inhibidores de ADN metilo-transferasa tales como la azacitidina y la decitabina; unos antifolatos tales como el permetrexed disódico; unos antibióticos tales como la antinomicina D, la bleomicina, la mitomicina C, la 30 actinomicina D, la carminomicina, la daunomicina y la plicamicina; unos antimetabolitos tales como la clofarabina, la aminopterina, la citosina arabinósida, la floxuridina y el metotrexato; unos agentes que inducen la apoptotis y unos agentes antiangiogénicos, unos inhibidores de Bcl-2 tales como YC 137, BH 312, ABT 737, el gosipol, HA 14-1, TW 37 y el ácido decanoico; unos agentes que se unen a la tubulina tales como la combrestatina, unos derivados de colchicina y el nocodazol; unos inhibidores de quinasa tales como el flavoperidol, el mesilato de imatinib, el erlotinib

35 y el gefitinib; unos inhibidores de farnesil transferasa tales como el tipifarnib; unos inhibidores de histonadesacetilasas tales como el butirato de sodio, el ácido suberoilanilida hidroxámico, el depsipéptido, NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585 y la tricostatina A; unos inhibidores del sistema ubiquitina-proteasoma tales como MLN.41, el bortezomib y el yondelis; y unos inhibidores de telomerasa tales como la telomestatina.

40 La presente invención tiene también por objeto una composición farmacéutica tal como se ha definido anteriormente, para su utilización como medicamento, destinado en particular al tratamiento o a la prevención del cáncer, en particular al tratamiento de un cáncer resistente a la quimioterapia.

La presente invención se refiere también a un procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula (I) tal 45 como se ha definido anteriormente, que comprende las etapas sucesivas siguientes:

a) hacer reaccionar una amina de fórmula (II) siguiente:

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50: en la que X, R1, R2, R3, R4 y Ar son tales como se han definido anteriormente, no representando R1 un átomo de hidrógeno,

55: con cloruro de cloroacetilo en presencia de una base para dar un compuesto de fórmula (1) con R1 ≠ H, y

b) eventualmente desproteger el átomo de nitrógeno que lleva el grupo R1 ≠ H para dar un compuesto de fórmula (I) con R1 = H. Etapa a): La base utilizada para esta etapa será preferentemente una base débil tal como NaHCO3. La amina de fórmula (II) se podrá obtener por reacción de una piperazina de la fórmula (III) siguiente:

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10

con X, R1 y R2 tales como se han definido anteriormente, no representando R1 un átomo de hidrógeno, con un ácido de la fórmula (IV) siguiente:

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con R3, R4 y Ar tales como se han definido anteriormente.

20 Esta reacción se puede realizar en condiciones de acoplamiento peptídico bien conocidas por el experto en la materia.

El acoplamiento se realiza así preferentemente en presencia de un agente de acoplamiento, tal como como la

diisopropilcarbodiimida (DIC), la diciclohexilcarbodiimida (DCC), el clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-325 etilcarbodiimida (EDC), el carbonildiimidazol (CDI), el 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio

hexafluorofosfato (HBTU), el 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TBTU) o también el

O-(7-azobenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HATU), eventualmente asociado a un auxiliar

de acoplamiento tal como la N-hidroxisuccinimida (NHS), el N-hidroxibenzotriazol (HOBt), el 3,4-dihidro-3-hidroxi-4

oxo-1,2,3-benzotriazol (HOOBt), el 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (HAt) o la N-hidroxisilfosuccinimida (sulfo NHS). 30 Preferentemente, se tratará del HBTU.

También puede estar presente una base tal como la diisopropiletilamina (DIPEA).

La piperazina de la fórmula (III) es o bien comercial, o bien preparada según unos métodos bien conocidos por el 35 experto en la materia.

El ácido de la fórmula (IV) se puede preparar según las etapas sucesivas siguientes:

i) hacer reaccionar un cetoéster de la fórmula (V) siguiente: 40

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con Ar tal como se ha definido anteriormente y representando R un grupo alquilo (C1-C6), tal como etilo, con una anilina de fórmula (VI) siguiente:

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5: con R3 y R4 tales como se han definido anteriormente, para dar una imina de fórmula (VII) siguiente:

10 15: con R, R3, R4 y Ar tales como se han definido anteriormente, ii) reducir la imina de la fórmula (VII) obtenida en la etapa anterior para dar una amina de fórmula (VIII) siguiente:

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con R, R3, R4 y Ar tales como se han definido anteriormente, y 20 iii) saponificar la función éster del compuesto de fórmula (VIII) obtenido en la etapa anterior para dar el ácido de la fórmula (IV).

La etapa i) se puede realizar en presencia de un ácido como el ácido para-tolueno sulfónico (APTS). La reacción se 25 puede realizar en un disolvente polar tal como el tolueno. Preferentemente, el medio de reacción se calentará a reflujo utilizando un DeanStark con el fin de eliminar el agua formada durante la reacción.

El cetoéster (V) utilizado para esta reacción es o bien comercial, o bien preparado por una reacción de Friedel-Crafts a partir de cloruro de oxalato de etilo y del aromático correspondiente, en presencia de un ácido de Lewis como el 30 cloruro de aluminio AlCl3.

La alanina (VI) utilizada para esta reacción es bien o comercial, o bien preparada mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia.

35 La etapa ii) de reducción se puede realizar en presencia de un agente reductor bien conocido por el experto en la materia tal como el cianoborohidruro de sodio.

La etapa iii) de saponificación se puede realizar en condiciones bien conocidas por el experto en la materia, en particular en presencia de una base tal como NaOH, KOH o LiOH. 40

Etapa b):

Esta etapa se realizará preferentemente con un compuesto de fórmula (I) para el cual R1 = CO2R6, tal como CO2tBu, por tratamiento con un ácido tal como HCl.

5 El compuesto así obtenido podrá ser separado del medio de reacción mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia, como por ejemplo por extracción, evaporación del disolvente o también por precipitación y filtración.

10 El compuesto podrá ser, por otro lado, purificado si es necesario, mediante técnicas bien conocidas por el experto en la materia, como por recristalización si el compuesto es cristalino, por destilación, por cromatografía sobre columna sobre gel de sílice o también por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC).

El procedimiento según la presente invención para preparar unos compuestos según la presente invención con R1 ≠ 15 H se representa en el esquema de reacción siguiente:

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Los ejemplos siguientes ilustran la invención sin, no obstante, limitarla. 20

Figura:

La figura 1 presenta las curvas tiempo-concentración plasmática para un ratón que ha recibido el compuesto I-43 dia2 administrado por vía intravenosa (IV) a la dosis de 10 mg/kg o por vía oral (PO) a la dosis de 30 mg/kg. 25

Ejemplos: I – Síntesis de compuestos según la invención

30 A continuación, se han adoptado dos nomenclaturas distintas cuando se han separado los dos diaestereoisómeros de un compuesto según la invención: -designando a / b cada uno la estructura particular de un diaestereoisómero único, 35 -designando dia1 / dia2 respectivamente el diaestereoisómero menos polar y más polar en el sistema

cromatográfico utilizado. En efecto, la estereoquímia particular de cada uno de los diaestereoisómeros no se ha podido determinar. Por lo tanto, es imposible atribuir a cada uno de los diaestereoisómeros dia1 y dia2 aislados la estructura particular a y b.

40 Por eso, se ha utilizado una doble nomenclatura. En esta parte, se han utilizado las abreviaturas siguientes: CCM Cromatografía sobre capa delgada

45 DCM Diclorometano DIEA Diisopropiletilamina

50 HBTU 2-(1H-Benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato

LCMS Cromatografía líquida acoplada a un espectro de masa RMN Resonancia magnética nuclear TA Temperatura ambiente

Ejemplos I-1a y I-1b: Diaestereoisómeros del éster terc-butílico del ácido 4-[2-[(2-cloro-acetil)-(4-fenoxi-fenil)amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(S)-2-isopropil-piperazina-1-carboxílico.

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Etapa 1: éster etílico del ácido (4-fluoro-fenil)-oxo-acético (1):

A una solución de cloruro de aluminio (21,13 g; 160 mmoles) en el DCM (200 ml) a 0°C bajo argón, se aña de gota a

15 gota durante 10 minutos el cloruro de oxalato de etilo (17,9 ml; 160 mmoles). El medio se deja bajo agitación durante 10 minutos. El fluorobenceno (14,7 ml; 160 mmoles) diluido en 30 ml de DCM, se añade gota a gota a 0°C. El medio se deja bajo agitación a temperatura ambiente durante 12 horas. El medio se lava con agua y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 90-10.

20 Recuperación de un aceite amarillo (17,08 g; 54%).

RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 8,04-8,14 (m; 1,8 H); 7,15-7,24 (m; 1,9 H); 4,46 (q; J = 7.2 Hz; 2,0 H); 1,44 (t; J = 7.2 Hz; 3,0 H).

25 Etapa 2: Éster etílico del ácido (4-fluoro-fenil)-[(Z)-4-fenoxi-fenilimino]-acético (2):

A una solución de 1 (3,92 g; 20 mmoles) en tolueno (25 ml), se añaden sucesivamente el ácido para-tolueno sulfónico (200 mg; 1 mmoles) y la 4-fenoxifenilo-anilina (3,70 g; 20 mmoles) en presencia de tamiz molecular. El

30 medio se lleva a reflujo en un DeanStark durante 20 horas. El medio se lava con agua y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 90-10.

Recuperación de un aceite amarillo (6,27 g; 86%).

35 LCMS [M+H] = 364 (C22H18FNO3)

Etapa 3: Éster etílico del ácido (4-fluoro-fenil)-(4-fenoxi-fenilamino)-acético (3):

40 A una solución de 2 (6,27 g; 17,26 mmoles) en el metanol (75 ml) y el ácido acético (7,5 ml), se añade el cianoborohidruro de sodio (1,63 g; 26 mmoles). El medio se deja bajo agitación durante 1 hora a TA. El metanol se evapora parcialmente, la solución se neutraliza con Na2CO3 con adición de agua si es necesario. Se extrae el medio con DCM y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 95-5.

45 Recuperación de un aceite amarillo (5,91 g; 93%).

LCMS [M+H] = 366 (C22H20FNO3)

50 RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 7,45-7,5 (m; 1,9 H); 7,23-7,31 (m; 1,9 H); 6,97-7,11 (m; 2,9 H); 6,81-6,94 (m; 3,9 H);

imagen15

Ejemplos I-2a y I-2b: Diaestereoisómeros del éster terc-butílico del ácido 4-[-2-[(2-cloro-acetil)-(4-fenoxifenil)-amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(R)-2-isopropil-piperazina-1-carboxílico.

imagen16

5 Etapa 1: Éster terc-butílico del ácido 4-[2-(4-fluoro-fenil)-2-(4-fenoxi-fenilamino)-acetil]-(R)-2-isopropil-piperazina-1carboxílico (6):

A una solución de ácido (4-fluoro-fenil)-(4-fenoxi-fenilamino)-acético 4 (253 mg; 0,75 mmoles) en el DCM (10 ml) en

10 presencia de un equivalente de DIEA (131 µL) se añade una solución de la Boc-alfa-(R)-isopropilo-piperazina (171 mg; 0,75 mmoles) en presencia de 1 eq. de DIEA (131 µl) en 5 ml de DCM, seguido del HBTU (285 mg; 0,75 mmoles). El medio se deja bajo agitación durante 12 horas. El medio se lava con agua y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 80-20.

15 Recuperación de una espuma blanca (369 mg; 90%).

LCMS [M+H] = 548 (C32H38FN3O4)

20 Etapa 2: Éster terc-butílico del ácido 4-[-2-[(2-cloro-acetil)-(4-fenoxi-fenil)-amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(R)-2isopropil-piperazina-1-carboxílico:

Los dos diaestereoisómeros se han preparado a partir de 6 siguiendo el mismo modo de realización que para la preparación del ejemplo 1 (etapa 6). 25 Recuperación separada de los dos diaestereoisómeros en forma de espuma incolora:

Diaestereoisómero menos polar (I-2 dia1) (195 mg; 42%)

30 LCMS [M+H] = 625 (C34H39ClFN3O5)

RMN 1H (300 MHz, CD2Cl2): δ 7,85-8,00 (m; 1,0 H); 7,36 (t; J = 7,6 Hz; 2,0 H); 6,99-7,21 (m; 3,1 H); 6,81-6,98 (m; 4,9 H); 6,63 (br; 1,0 H); 6,35-6,55 (m; 2,1 H); 4,65 (d; J = 13,0 Hz; 0,7 H) 4,42 (d; J = 13,0 Hz; 0,2 H); 3,50-4,16 (m; 4,9 H); 3,00-3,43 (m; 0,8 H); 2,57-3,90 (m; 2,0 H); 1,98-2,18 (m; 0,8 H); 1,36-1,49 (m; 10,5 H); 1,73 (d; J = 6,5 Hz;

35 2,0 H); 0,90 (d; J = 6,5 Hz; 2,0 H); 0,63 (d; J = 6,5 Hz; 0,8 H) ;0,20 (d; J = 6,5 Hz; 0,8 H).

Diaestereoisómero más polar (I-2 dia2) (122 mg; 26%)

LCMS [M+H] = 625 (C34H39ClFN3O5)

40 RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 7,92-8,0 (m; 1,0 H); 7,30-7,40 (m; 2,0 H); 7,10-7,18 (m; 1,0 H); 7,01-7,09 (m; 1,1 H); 6,84-7,00 (m; 6,0 H); 6,55-6,65 (m; 1,1 H); 6,32-6,48 (m; 2,1 H); 4,72 (d; J = 13,5 Hz; 0,4 H) 4,63 (d; J = 13,5 Hz; 0,3 H); 3,52-3,96 (m; 4,7 H); 3,10-3,27 (m; 0,7 H); 2,85-3,07 (m; 0,5 H); 2,23-2,85 (m; 0,5 H + 0,6 H + 0,8 H); 1,87-2,14 (m; 0,9 H); 1,42 (s; 8,6 H); 1,17 (d; J = 6,6 Hz; 1,4 H); 1,03 (d; J = 6,6Hz; 2,1 H); 0,88 (d; J = 6,6 Hz; 2,1 H) ;0,69 (d;

45 J = 6,6 Hz; 1,6 H).

Ejemplos I-3a y I-3b: Clorhidrato de los diaestereoisómeros de 2-cloro-N-[1-(4-fluoro-fenil)-2-((S)-3-isopropilpiperazin-1-il)-2-oxo-etil]-N-(4-fenoxi-fenil)-acetamida.

imagen17

5 A una solución de diaestereoisómero I-1 dia2 (3,24 g; 5,2 mmoles) en 50 ml de DCM se añade el HCl gas por burbujeo. El medio de reacción se deja bajo agitación durante 12 horas a TA. El DCM se evapora y el aceite residual se precipita en éter.

10 Se obtiene el ejemplo I-3 dia2 en forma de un polvo blanco después de la filtración: (2,53 g; 87%).

LCMS [M+H] = 524 (C29H32Cl2FN3O3)

RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,60-9,35 (m; 1,6 H); 7,77 (br; 0,8 H); 7,30-7,40 (m; 2,0 H); 7,00-7,23 (m; 5,1 H); 6,8015 7,00 (m; 3,1 H); 6,54-6,76 (m; 3,0 H); 4,56 (d; J = 13,3 Hz; 1,0 H); 3,88-4,16 (m; 3,0 H); 3,00-3,30 (m; 3,1 H); 2,652,96 (m; 1,7 H); 1,52-2,00 (m; 1,6 H); 1,00 (t; J = 7,4 Hz; 2,4 H); 0,59 (dd; J = 15,6 Hz; J = 6,7 Hz; 3,5 H).

Aplicando el mismo procedimiento a partir del ejemplo I-1 dia1, se obtiene el ejemplo I-3 dia1 en forma de un polvo blanco después de la filtración: (63 mg). 20 LCMS [M+H] = 524 (C29H32Cl2FN3O3)

RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,65-9,6 (br; 1,2 H); 7,77 (br; 0,8 H); 7,30-7,40 (m; 2,0 H); 6,36-7,25 (m; 11,7 H); 4,404,60 (m; 0,8 H); 4,00-4,12 (m; 2,0 H); 3,76-3,98 (m; 0,9 H); 3,37-3,63 (m; 0,9 H); 2,65-3,30 (m; 4,0 H); 1,77-2,06 (m; 25 1,6 H); 0,89-1,06 (m; 6,1 H).

Ejemplos I-4a y I-4b: Clorhidrato de los diaestereoisómeros de la 2-Cloro-N-[1-(4-fluoro-fenil)-2-((R)-3isopropil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-N-(4-fenoxi-fenil)-acetamida.

imagen18

se ha utilizado el mismo protocolo que el de los ejemplos I-3a y I-3b a partir de cada uno de los diaestereoisómeros I-2a y I-2b.

35 A partir del primer diaestereoisómero del ejemplo I-2 (I-4 dia1):

Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (95 mg)

LCMS [M+H] = 524 (C29H32Cl2FN3O3)

5 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,65-9,6 (br; 1,3 H); 7,77 (br; 0,4 H); 7,30-7,40 (m; 2,0 H); 6,36-7,25 (m; 11,8 H); 4,40-4,60 (m; 0,9 H); 4,00-4,12 (m; 2,0 H); 3,76-3,98 (m; 1,0 H); 3,37-3,63 (m; 1,0 H); 2,65-3,30 (m; 3,8 H); 1,77-2,06 (m; 1,8 H); 0,89-1,06 (m; 6,1 H).

10 A partir del segundo diaestereoisómero del ejemplo I-2 (I-4 dia2):

Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (95 mg)

LCMS [M+H] = 524 (C29H32Cl2FN3O3)

15 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,60-9,35 (m; 1,7 H); 7,77 (br; 0,9 H); 7,30-7,40 (m; 2,0 H); 7,00-7,23 (m; 5,0 H); 6,807,00 (m; 3,0 H); 6,54-6,76 (m; 2,9 H); 4,56 (d; J = 13,3 Hz; 1,0 H); 3,88-4,16 (m; 3,0 H); 3,00-3,30 (m; 3,1 H); 2,652,96 (m; 1,7 H); 1,52-2,06 (m; 1,9 H); 1,00 (t; J = 7,2 Hz; 2,4 H); 0,59 (dd; J = 15,4 Hz; J = 6,7 Hz; 3,3 H).

20 Ejemplos I-5a y I-5b: Diaestereoisómeros del éster terc-butílico del ácido 4-[-2-[(2-cloro-acetil)-(2-metil-4fenoxi-fenil)-amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(S)-2-isopropil-piperazina-1-carboxílico.

imagen19

25 Etapa 1: Éster terc-butílico del ácido 4-[2-(4-fluoro-fenil)-2-(2-metil-4-fenoxi-fenilamino)-acetil]-(S)-2-isopropilpiperazina-1-carboxílico (8):

A una solución de ácido (4-fluoro-fenil)-(2-metil-4-fenoxi-fenilamino)-acético (9,29 g; 26,4 mmoles) en el DCM (150 ml) en presencia de un equivalente de DIEA (4,6 ml) se añade una solución del clorhidrato de la Boc-alpha-(S)

30 isopropilo-piperazina (7,00 g; 26,4 mmoles) en presencia de 1 eq. de DIEA (4,6 ml) en 50 ml de DCM, seguido del HBTU (10,00 g; 26,4 mmoles). El medio se deja bajo agitación durante 12 horas. El medio se lava con agua y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 80-20.

35 Recuperación de una espuma blanca (14,13 g; 95%).

LCMS [M+H] = 562 (C33H40FN3O4)

Etapa 2: Éster terc-butílico del ácido 4-[-2-[(2-cloro-acetil)-(2-metil-4-fenoxi-fenil)-amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(S)40 2-isopropil-piperazina-1-carboxílico

A una solución de 8 (14,13 g; 25,1 mmoles) en 250 ml de DCM en presencia de NaHCO3 (8,40 g; 100,0 mmoles), se añade el cloruro de cloroacetilo (4,00 ml; 50,0 mmoles). El medio se deja bajo agitación durante 12 horas. El medio se lava con agua y la fase orgánica se seca sobre MgSO4. Después de la evaporación, el aceite recuperado se

45 purifica por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice con el eluyente ciclohexano-acetato de etilo 90-10 hasta 50-50 progresivamente.

Recuperación de los dos diaestereoisómeros en forma de espuma incolora:

50 Diaestereoisómero menos polar (I-5 dia1) (3,83 g; 24%)

LCMS [M+H] = 639 (C35H41ClFN3O5)

RMN 1H (300 MHz, CD2Cl2): δ 7,94-8,57 (m; 1,0 H); 7,35 (t; J = 7,9 Hz; 2,0 H); 7,07-7,27 (m; 3,0 H); 6,74-6,95 (m;

5 5,0 H); 6,58 (br d; J = 2,6 Hz; 1,1 H); 6,51 (br s; 0,2 H); 6,41 (s; 0,8 H); 6,31 (br s; 0,3 H); 4,62 (d; J= 13,5 Hz; 0,7 H) 4,39 (d; J = 13,5 Hz; 0,3 H); 3,53-4,05 (m; 4,8 H); 3,04-3,46 (m; 0,8 H); 2,41-2,96 (m; 2,1 H); 2,04-2,23 (m; 0,8 H); 1,82-1,95 (m; 2,2 H); 1,43 (br s; 10,1 H); 1,07 (d; J = 6,5 Hz; 2,1 H); 0,90 (d ;J = 6,5 Hz; 2,3 H); 0,63 (d; J = 6,5 Hz; 1,0 H) ;0,29 (d; J = 6,5 Hz; 0,8 H).

10 Diaestereoisómero más polar (I-5 dia2) (4,40 g; 27%)

LCMS [M+H] = 639 (C35H41ClFN3O5)

RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 8,00-8,10 (m; 1,0 H); 7,30-7,40 (m; 2,1 H); 6,98-7,18 (m; 3,2 H); 6,73-6,90 (m; 5,3 H);

15 6,52-6,58 (m; 1,0 H); 6,34-6,39 (m; 1,0 H); 4,71 (d; J= 13,5 Hz; 0,7 H); 4,49 (d; J= 13,5 Hz; 0,4 H); 3,50-4,00 (m; 4,7 H); 3,10-3,30 (m; 0,7 H); 2,86-3,07 (m; 0,4 H); 2,54-2,85 (m; 1,5 H); 2,30-2,47 (m; 0,4 H); 1,80-1,87 (m; 2,8 H); 1,541,60 (m; 2,5 H); 1,42 (br s; 8,8 H); 1,19 (d; J= 6,6 Hz; 1,1 H); 1,00 (d; J = 6,6 Hz; 1,5 H); 0,88 (d; J = 6,6 Hz; 1,2 H) ;0,64 (d; J = 6,6 Hz; 1,5 H).

20 Ejemplos I-6a y I-6b: Diaestereoisómeros del éster terc-butílico del ácido 4-[-2-[(2-cloro-acetil)-(4-fenoxifenil)-amino]-2-(4-fluoro-fenil)-acetil]-(R)-2-isopropil-piperazina-1-carboxílico

imagen20

25 Estos dos diaestereoisómeros se han preparado de la misma manera que en el ejemplo anterior, en forma de espuma incolora:

Diaestereoisómero menos polar (I-6 dia1) (97 mg; 30%)

30 LCMS [M+H] = 639 (C35H41ClFN3O5)

RMN 1H (300 MHz, CD2Cl2): δ 7,94-8,57 (m; 0,9 H); 7,35 (t; J = 7,9 Hz; 1,9 H); 7,05-7,25 (m; 3,1 H); 6,72-6,93 (m; 5,0 H); 6,58 (br d; J = 2,6 Hz; 1,1 H); 6,41 (s; 0,8 H); 6,31 (br s; 0,3 H); 4,63 (d; J = 13,5 Hz; 0,8 H) 4,40 (d; J = 13,5 Hz; 0,3 H); 3,51-4,06 (m; 4,8 H); 3,03-3,45 (m; 1,0 H); 2,41-2,96 (m; 1,6 H); 2,02-2,21 (m; 0,8 H); 1,82-1,95 (m; 2,1

35 H); 1,43 (br s; 10,1 H); 1,07 (d; J = 6,5 Hz; 2,1 H); 0,90 (d; J = 6,5 Hz; 2,3 H); 0,63 (d; J = 6,5 Hz; 1,0 H) ;0,29 (d; J = 6,5 Hz; 0,8 H).

Diaestereoisómero más polar (I-6 dia2) (90 mg; 28%)

40 LCMS [M+H] = 639 (C35H41ClFN3O5)

RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 8,00-8,10 (m; 1,0 H); 7,30-7,40 (m; 2,1 H); 6,98-7,18 (m; 3,1 H); 6,73-6,90 (m; 5,1 H); 6,52-6,58 (m; 1,0 H); 6,34-6,39 (m; 1,0 H); 4,70 (d; J = 13,5 Hz; 0,7 H); 4,49 (d; J = 13,5 Hz; 0,4 H); 3,50-4,00 (m; 4,8 H); 3,10-3,30 (m; 0,7 H); 2,86-3,07 (m; 0,4 H); 2,54-2,85 (m; 1,5 H); 2,30-2,47 (m; 0,4 H); 1,80-1,87 (m; 2,8 H); 1,54

45 1,60 (m; 2,6 H); 1,42 (br s; 8,6 H); 1,20 (d; J = 6,6 Hz; 1,1 H); 1,01 (d; J = 6,6Hz; 1,5 H); 0,89 (d; J = 6,6 Hz; 1,2 H) ;0,64 (d; J = 6,6 Hz; 1,5 H).

Ejemplos I-7a y I-7b: Clorhidrato de los diaestereoisómeros de 2-cloro-N-[-1-(4-fluoro-fenil)-2-((S)-3-isopropilpiperazin-1-il)-2-oxo-etil]-N-(2-metil-4-fenoxi-fenil)-acetamida

imagen21

5 A una solución de uno de los diaestereoisómeros I-5a y I-5b en 50 ml de DCM se añade el HCl gas por burbujeo. El medio de reacción se deja bajo agitación durante 12 horas a TA. El DCM se evapora y el aceite residual se precipita en éter etílico.

10 A partir del primer diaestereoisómero del ejemplo I-5 (1-7 dia1):

Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (26 mg)

LCMS [M+H] = 538 (C30H34Cl2FN3O3)

15 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,79-9,33 (m; 1,3 H); 7,83 (t; J = 9,0 Hz; 1,0 H); 7,24-7,40 (m; 4,0 H); 6,97-7,15 (m; 3,1 H); 6,73-6,89 (m; 3,2 H); 6,64 (d; J = 2,7 Hz; 0,9 H); 6,51-6,59 (m; 1,0 H); 4,40-4,55 (br m; 1,1 H); 3,86-4,09 (m; 3,6 H); 3,45-3,60 (m; 0,7 H); 2,78-3,05 (m; 2,8 H); 1,79-2,00 (m; 4,5 H); 1,61-1,77 (m; 0,7 H); 0,97 (d; J = 6,7 Hz; 6,0 H).

20 A partir del segundo diaestereoisómero del ejemplo I-5 (I-7 dia2):

Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (2,62 g)

LCMS [M+H] = 538 (C30H34Cl2FN3O3)

25 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,78-9,51 (m; 1,9 H); 7,82 (t; J = 8,9 Hz; 0,9 H); 7,20-7,41 (m; 4,0 H); 6,97-7,16 (m; 3,1 H); 6,71-6,90 (m; 3,1 H); 6,61-6,70 (m; 1,9 H); 4,46-4,60 (br m; 1,0 H); 3,85-4,15 (m; 3,1 H); 3,00-3,30 (m; 3,0 H); 2,57-2,96 (m; 1,8 H); 1,43-1,98 (m; 4,3 H); 1,00 (dd; J = 8,8 Hz; J = 7,0 Hz; 2,7 H); 0,71 (d; J = 6,8 Hz; 1,6 H); 0,65 (d; J= 6,8 Hz; 1,5 H).

30

Ejemplo I-8: Clorhidrato du 2-cloro-N-[-1-(4-fluoro-fenil)-2-((R)-3-isopropil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-N-(2-metil4-fenoxi-fenil)-acetamida

imagen22

Se ha utilizado el mismo protocolo que el del ejemplo anterior a partir de cada uno de los diaestereoisómeros del ejemplo I-6.

A partir del primer diaestereoisómero del ejemplo I-6 (I-8 dia1): 5 Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (34 mg; 56%)

LCMS [M+H] = 538 (C30H34Cl2FN3O3)

10 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,79-9,33 (m; 1,3 H); 7,83 (t; J= 9,0 Hz; 0,9 H); 7,24-7,40 (m; 4,0 H); 6,97-7,15 (m; 3,1 H); 6,73-6,89 (m; 3,1 H); 6,64 (d; J= 2,7 Hz; 1,0 H); 6,51-6,59 (m; 1,0 H); 4,41-4,56 (br m; 1,1 H); 3,86-4,09 (m; 3,4 H); 3,45-3,60 (m; 0,7 H); 2,78-3,05 (m; 2,8 H); 1,79-2,00 (m; 4,4 H); 1,61-1,77 (m; 0,8 H); 0,97 (d; J = 6,7 Hz; 6,0 H).

A partir del segundo diaestereoisómero del ejemplo I-6 (I-8 dia2):

15 Recuperación de un polvo blanco después de la filtración: (30 mg; 54%)

LCMS [M+H] = 538 (C30H34Cl2FN3O3)

20 RMN 1H (300 MHz, DMSO): δ 8,78-9,51 (m; 1,5 H); 7,82 (t; J = 8,9 Hz; 1,0 H); 7,20-7,41 (m; 4,0 H); 6,97-7,16 (m; 3,1 H); 6,71-6,90 (m; 3,2 H); 6,61-6,70 (m; 1,9 H); 4,46-4,60 (br m; 1,0 H); 3,85-4,15 (m; 3,1 H); 3,00-3,30 (m; 2,9 H); 2,57-2,96 (m; 1,8 H); 1,43-1,98 (m; 4,3 H); 1,00 (dd; J = 8,8 Hz; J = 7,0 Hz; 2,7 H); 0,71 (d; J = 6,8 Hz; 1,6 H); 0,65 (d; J= 6,8 Hz; 1,5 H).

25 Utilizando los mismos modos de realización y los mismos modos de separación por cromatografía sobre sílice que antes, se han preparado los ejemplos siguientes a partir de analinas y de piperazinas diversamente sustituidas. Se han aislado o bien en forma de mezcla de dos o cuatro diaestereoisómeros (un número de ejemplo para la misma estructura química), o bien en forma de diaestereoisómeros separados. En este último caso, se ha utilizado la nomenclatura a / b para designar cada uno de los diaestereoisómeros.

30

I-9: I-10

I-11: I-12

I-13: I-14

I-15a: I-15b

I-16a: I-16b

I-17a: I-17b

I-18a: I-18b

I-19a: I-19b

I-20a: I-20b

I-21a: I-21b

I-22a: I-22b

I-23: I-24

I-25a: I-25b

I-26a: I-26b

I-27a: I-27b

Se obtuvieron los ejemplos siguientes sustituyendo el éster etílico del ácido (4-fluoro-fenil)-oxo-acético por el tiofen2-glioxilato de etilo y utilizando los mismos modos de realización que anteriormente.

I-28: I-29

I-30: I-31

I-32: I-33

I-34: I-35

I-36: I-37

I-38: I-39

I-40a: I-40b

I-41a: I-41b

I-42a: I-42b

I-43a: I-43b

I-44: I-45

I-46a: I-46b

I-47a: I-47b

I-48: I-49

I-50a: I-50b

I-51a: I-51b

I-52a: I-52b

I-53a: I-53b

I-54a: I-54b

I-55a: I-55b

I-56a: I-56b

I-57: I-58

I-59: I-60

I-61: I-62

1-63

II – Estudio farmacológico de los compuestos según la presente invención

1) Ensayos de citotoxicidad

5 Los efectos de los compuestos de la invención sobre la proliferación de células cancerosas se estudiaron sobre diferentes líneas celulares cancerosas humanas de orígenes tisulares diferentes (MCF-7: cáncer de mama, MCF7/adr: cáncer de mama resistente a la adriamicina, HL-60: leucemia aguda de promielocito, HL-60/R10: leucemia aguda de promielocito resistente a la doxorrubicina, HT29: adenocarcinoma del colon, Mia Paca2: tumor de

10 páncreas, Panc-1: tumor de páncreas exocrino, SK-OV-3: tumor de ovario resistente al cis-platino y a la adriamicina). Las células cancerosas utilizadas para este estudio se incubaron a 37°C en presencia de uno de los compuestos de la invención añadido en el medio de cultivo a diferentes concentraciones.

Las líneas celulares cancerosas provienen de ATCC (American Type Culture Collection) en el caso de MCF-7, del

15 hospital de la Pitié Salpetrière para MCF-7/adr y de Oncodesign (Dijon, France) para HL-60, HL-60/R10, HT29, MiaPaCa2, Panc-1 y SK-OV-3. Se cultivaron en medio RPMI 1640 que contiene 2 mM L-Glutamina y suplementado con el 10% de suero fetal de ternera (Lonza; Verviers, Bélgica). Todas las líneas celulares se mantuvieron en cultivo a 37°C en una atmósfera húmeda que contiene un 5% d e CO2. La proliferación celular se evaluó utilizando el reactivo ViaLight® Plus Assay Kit (Lonza; Verviers, Bélgica) respetando las instrucciones del fabricante. Las células

20 se inocularon en placas de cultivo de 96 pocillos compatibles con la lectura de la luminiscencia (placas blancas de fondo transparente) a razón de 5.000 a 10.000 células por pocillo en 100 µl de medio de cultivo. Después de 24 horas de preincubación a 37°C, los compuestos de la invención disueltos en dimetilsulfóxido (DMSO) se añadieron individualmente en cada uno de los pocillos a razón de 0,5 µl por pocillo. Después de 72 horas de incubación a 37°C en una atmósfera húmeda que contiene un 5% de CO2, se añaden 50 µl de tampón de lisis en cada pocillo, 15

25 minutos después, se añade 100 µl de agente de medición de ATP. Las placas se leyeron con luminómetro a fin de evaluar la viabilidad celular. Los datos obtenidos se trataron por ordenador a fin de obtener el EC50, es decir el valor de la concentración de cada uno de los compuestos que induce el 50% de viabilidad celular en comparación con el control (0,5% DMSO solo).

30 Los resultados obtenidos se presentan en las tablas 1 y 2 siguientes.

Tabla 1: Resultados obtenidos con las líneas celulares HL-60, HL60/R10, MCF-7 y MCF-7/adr (EC50 expresados en nM)

Ejemplo n°: EC 50 (nM)

HL-60: HL60/R10 MCF-7 MCF-7 /adr

I-1 dia1: 1799 -219 -2500 338

I-1 dia2: 824 23 1304 39

I-2 dia1: 728 40 2091 49

Ejemplo n°: EC 50 (nM)

HL-60: HL60/R10 MCF-7 MCF-7 /adr

I-2 dia2: 2061 472 2500 645

I-3 dia1: 1311 15 927 55

I-3 dia2: 504 2 301 9

I-4 dia1: 648 4 315 13

I-4 dia2: 1321 62 863 166

I-7 dia1: 2500 604 2500 618

I-7 dia2: 1938 26 1954 98

I-8 dia1: 2029 54 1740 148

I-8 dia2: 1737 312 2410 477

I-9: 771 99 2500 108

I-10: 641 131 2500 151

I-11: 939 68 2500 102

I-12: 2321 82 1787 421

I-13: 1989 88 2500 532

I-14: 1848 95 2500 232

I-16 dia1: 1478 450 2500 527

I-16 dia2: 1913 317 2500 443

I-17 dia1: 2313 353 2500 898

I-17 dia2: 1604 49 1994 152

I-18 dia1: 1596 140 2500 485

I-18 dia2: 352 44 591 152

I-19 dia1: 516 97 2500 128

I-19 dia2: 453 24 2500 35

I-20 dia1: 196 80 1571 73

I-20 dia2: 1478 139 2500 165

I-21 dia1: 2447 13 1950 93

I-21 dia2: 630 8 869 10

I-22 dia1: 1995 17 569 131

I-22 dia2: 1149 18 430 34

I-23: 559 12 nd nd

I-24: 626 15 nd nd

I-25 dia1: 1122 43 nd nd

I-25 dia2: 819 103 nd nd

I-26 dia1: 2447 13 1950 93

I-26 dia2: 630 8 869 10

I-27 dia1: 1995 17 569 131

I-27 dia2: 1149 18 430 34

I-28: 623 206 nd nd

I-29: 939 38 1032 54

I-30: 202 10 1006 44

I-31: 766 64 2500 89

I-32: 175 78 2500 58

I-33: 2500 157 2500 394

I-34: 1123 30 1775 100

I-35: 300 249 632 863

I-36: 372 28 2500 24

I-37: 967 154 2500 156

I-38: 2500 189 2500 851

I-39: 1814 9 776 52

I-40 dia1: 2129 248 2500 371

I-40 dia2: 2500 487 2500 827

I-43 dia2: 1886 20 1424 126

I-44: 215 7 nd nd

I-45: 2136 17 nd nd

I-46 dia1: 2500 318 2500 544

I-46 dia2: 449 10 1184 58

I-47 dia1: 936 54 nd nd

I-47 dia2: 849 8 nd nd

I-48: 1991 10 nd nd

I-49: 1166 321 nd nd

I-50 dia1: 2102 259 nd Nd

imagen23

imagen24

imagen25

Tabla 5: Solubilidad acuosa obtenida con diferentes sustituciones de la piperazina

Ejemplo: Solubilidad (µg/ml)

Ej. comparativo: 68

I-58: 203

Ej. comparativo: 105

I-59: 152

imagen26

imagen27

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuesto de fórmula general (I) siguiente:

imagen1

así como sus sales farmacéuticamente aceptables, sus estereoisómeros o mezclas de estereoisómeros en cualquier proporción, en particular una mezcla de enantiómeros, y en particular una mezcla racémica,

10 en la que:

-X representa un grupo alquilo (C1-C6), fenilo, bencilo, C(O)OR5, o C(O)NHR5,

-R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo C(O)H, C(O)R6, o C(O)OR6, 15 -R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), o R2 forma con R1 o X una cadena hidrocarbonada saturada de manera que se forme un anillo de 5 o 6 miembros, en particular de 5 miembros,

-R3 representa un átomo de hidrógeno o un halógeno o un grupo alquilo (C1-C6) o alcoxi (C1-C6), 20

-R4 representa un átomo de hidrógeno o de halógeno, CN, NO2, o un grupo alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), ariloxi, benciloxi, o heteroariloxi, estando eventualmente dicho grupo sustituido con uno o varios átomos de halógeno,

25 -Ar representa un grupo tiofenilo o un grupo fenilo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno, y

-R5 y R6 representan, independientemente el uno del otro, un grupo alquilo (C1-C6), aril-alquilo (C1-C6) o arilo, estando dicho grupo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno. 30
2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado por que responde a la fórmula (I-bis) siguiente:

imagen2

35 3. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado por que Ar representa un grupo tiofenilo

o un grupo fenilo sustituido con uno o varios átomos de flúor, tal como el 4-fluoro-fenilo.
4. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que R4 representa un átomo de

hidrógeno o de halógeno, o un grupo alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), o ariloxi, estando dicho grupo eventualmente 40 sustituido con uno o varios átomos de halógeno, en particular de flúor.
5. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado por que R3 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), tal como metilo.
6. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por que X representa un grupo alquilo (C1-C6), fenilo, o bencilo; R1 y R2 representan un átomo de hidrógeno; R3 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6), en particular (C1-C3)alquilo; R4 representa un átomo de halógeno, o un grupo alquilo (C1-C6),

5 alcoxi (C1-C6), ariloxi, o benciloxi, estando dicho grupo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno; Ar representa un grupo tiofenilo o un grupo fenilo eventualmente sustituido con un átomo de flúor, tal como el 4-fluoro-fenilo; y R5 y R6 representan, independientemente el uno del otro, un grupo alquilo (C1-C6), arilalquilo (C1-C6), o arilo, estando dicho grupo eventualmente sustituido con uno o varios átomos de flúor.

10 7. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado por que el compuesto se selecciona de entre:

I-1a

I-1b

I-2a

I-2b

I-3a

I-3b

I-4a

I-4b

I-5a

I-5b

I-6a

I-6b

I-7a

I-7b

I-8a

I-8b

I-9

I-10

I-11

I-12

I-13

I-14

I-15a

I-15b

I-16a

I-16b

I-17a

I-17b

I-18a

I-18b

I-19a

I-19b

I-20a

I-20b

I-21a

I-21b

I-22a

I-22b

I-23

I-24

I-25a

I-25b

I-26a

I-26b

I-27a

I-27b

I-28

I-29

I-30

I-31

I-32

I-33

I-34

I-35

I-36

I-37

I-38

I-39

I-40a

I-40b

I-41a

I-41b

I-42a

I-42b

I-43a

I-43b

I-44

I-45

I-46a

I-46b

I-47a

I-47b

1-48

I-49

I-50a

I-50b

I-51a

I-51b

I-52a

I-52b

I-53a

I-53b

I-54a

I-54b

I-55a

I-55b

5

I-56a

I-56b

I-57

I-58

I-59

I-60

I-61

I-62

10

15

20

25

30

35

40

45

50

imagen3
8.

Compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su utilización como medicamento.
9.

Compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su utilización en el tratamiento o la prevención de un cáncer y en particular, de un cáncer resistente a la quimioterapia.
10.

Composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en asociación con uno o varios excipientes farmacéuticamente aceptables.
11.

Composición farmacéutica según la reivindicación 10, caracterizada por que comprende por lo menos otro principio activo, tal como un agente anticanceroso.
12.

Composición farmacéutica según la reivindicación 11, caracterizada por que el o los principio(s) activo(s) se selecciona(n) de entre el cisplatino y sus derivados, tales como el carboplatino y el oxaliplatino; unos taxanos, tales como el taxol, el taxotere, el paclitaxel y el docetaxel; unos alcaloides de vinca, tales como la vinblastina, la vincristina y la vinorelbina; unos análogos de purina, tales como la mercaptopurina, la tioguanina, la pentostatina y la 2-clorodesoxiadenosina; unos inhibidores de topoisomerasa I, tales como unos compuestos de la camptotecina como el irinotecán y el topotecán; unos inhibidores de topoisomerasa II, tales como la epipodofilotoxina, la podofilotoxina y sus derivados como el etopósido y el tenipósido; unos derivados nucleósidos antitumorales, tales como el 5-fluorouracilo, la leucovorina, la gemcitabina o la capecitabina; unos agentes alquilantes, tales como mostazas con nitrógeno como la ciclofosfamida, la mecloretamina, la clorambucila y el melfalán, unas nitroso-ureas como la carmustina, la lomustina y la estreptozocina, unos alquilsulfonatos como el busulfán, unas etileniminas y unas metilmelaminas como la tiotepa y la hexametilmelamina, y unas tetrazinas como la dacarbazina; unos derivados de antraciclinas antitumorales, tales como la daunorrubicina, la adriamicina, el doxil, la idarrubicina y la mitoxantrona; unas moléculas que tienen como diana el receptor IGF-I, tales como la picropodofilina; unos derivados de tetracarcina, tales como la tetrocarcina A; unos corticoesteroides, tales como la prednisona; unos anticuerpos, tales como el trastuzumab (anticuerpo anti-HER2), el rituximab (anticuerpo anti-CD20), el gemtuzamab, el cetuximab, el pertuzumab y el bevacizumab; unos antagonistas o unos moduladores selectivos de los receptores de los estrógenos, tales como el tamoxifeno, el fulvestrant, el toremifeno, el droloxifeno, el faslodex y el raloxifeno; unos inhibidores de aromatasa, tales como el exemestano, el anastrozol, el letrozol y el vorozol; unos agentes de diferenciación, tales como los retinoides como el ácido retinoico y la vitamina D y unos agentes que bloquean el metabolismo del ácido retinoico tales como el accutano; unos inhibidores de ADN metilo-transferasa tales como la azacitidina y la decitabina; unos antifolatos, tales como el permetrexed disódico; unos antibióticos, tales como la antinomicina D, la bleomicina, la mitomicina C, la actinomicina D, la carminomicina, la daunomicina y la plicamicina; unos antimetabolitos tales como la clofarabina, la aminopterina, la citosina arabinósida, la floxuridina y el metotrexato; unos agentes que inducen la apoptotis y unos agentes antiangiogénicos, unos inhibidores de Bcl-2, tales como YC 137, BH 312, ABT 737, el gosipol, HA 14-1, TW 37 y el ácido decanoico; unos agentes que se unen a la tubulina tales como la combrestatina, unos derivados de colchicina y el nocodazol; unos inhibidores de quinasa tales como el flavoperidol, el mesilato de imatinib, el erlotinib y el gefitinib; unos inhibidores de farnesil transferasa tales como el tipifarnib; unos inhibidores de histona-desacetilasas tales como el butirato de sodio, el ácido suberoilanilido hidroxámico, el depsipéptido, NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585 y la tricostatina A; unos inhibidores del sistema ubiquitina-proteasoma, tales como MLN.41, el bortezomib y el yondelis; y unos inhibidores de telomerasa, tales como la telomestatina.
13.

Composición farmacéutica que comprende:

(i)

por lo menos un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, y

(ii)

por lo menos otro principio activo, tal como un agente anticanceroso

como productos de combinación para una utilización simultánea, separada o espaciada en el tiempo.
14. Composición farmacéutica según la reivindicación 13, caracterizada por que el o los principio(s) activo(s) se seleccionan de entre el cisplatino y sus derivados, tales como el carboplatino y el oxaliplatino; unos taxanos, tales como el taxol, el taxotere, el paclitaxel y el docetaxel; unos alcaloides de vinca, tales como la vinblastina, la 5 vincristina y la vinorelbina; unos análogos de purina, tales como la mercaptopurina, la tioguanina, la pentostatina y la 2-clorodesoxiadenosina; unos inhibidores de topoisomerasa I, tales como unos compuestos de la camptotecina como el irinotecán y el topotecán; unos inhibidores de topoisomerasa II, tales como la epipodofilotoxina, la podofilotoxina y sus derivados como el etopósido y el tenipósido; unos derivados nucleósidos antitumorales, tales como el 5-fluorouracilo, la leucovorina, la gemcitabina o la capecitabina; unos agentes alquilantes, tales como 10 mostazas con nitrógeno como la ciclofosfamida, la mecloretamina, la clorambucila y el melfalán, unas nitroso-ureas como la carmustina, la lomustina y la estreptozocina, unos alquilsulfonatos como el busulfán, unas etileniminas y unas metilmelaminas como la tiotepa y la hexametilmelamina, y unas tetrazinas como la dacarbazina; unos derivados de antraciclinas antitumorales, tales como la daunorrubicina, la adriamicina, el doxil, la idarrubicina y la mitoxantrona; unas moléculas que tienen como diana el receptor IGF-I, tales como la picropodofilina; unos derivados 15 de tetracarcina, tales como la tetrocarcina A; unos corticoesteroides, tales como la prednisona; unos anticuerpos, tales como el trastuzumab (anticuerpo anti-HER2), el rituximab (anticuerpo anti-CD20), el gemtuzamab, el cetuximab, el pertuzumab y el bevacizumab; unos antagonistas o unos moduladores selectivos de los receptores de los estrógenos, tales como el tamoxifeno, el fulvestrant, el toremifeno, el droloxifeno, el faslodex y el raloxifeno; unos inhibidores de aromatasa, tales como el exemestano, el anastrozol, el letrozol y el vorozol; unos agentes de 20 diferenciación, tales como los retinoides como el ácido retinoico y la vitamina D y unos agentes que bloquean el metabolismo del ácido retinoico, tales como el accutano; unos inhibidores de ADN metilo-transferasa, tales como la azacitidina y la decitabina; unos antifolatos, tales como el permetrexed disódico; unos antibióticos, tales como la antinomicina D, la bleomicina, la mitomicina C, la actinomicina D, la carminomicina, la daunomicina y la plicamicina; unos antimetabolitos, tales como la clofarabina, la aminopterina, la citosina arabinósida, la floxuridina y el 25 metotrexato; unos agentes que inducen la apoptotis y unos agentes antiangiogénicos unos inhibidores de Bcl-2, tales como YC 137, BH 312, ABT 737, el gosipol, HA 14-1, TW 37 y el ácido decanoico; unos agentes que se unen a la tubulina, tales como la combrestatina, unos derivados de colchicina y el nocodazol; unos inhibidores de quinasa, tales como el flavoperidol, el mesilato de imatinib, el erlotinib y el gefitinib; unos inhibidores de farnesil transferasa, tales como el tipifarnib; unos inhibidores de histona-desacetilasas, tales como el butirato de sodio, el ácido

30 suberoilanilido hidroxámico, el depsipéptido, NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585 y la tricostatina A; unos inhibidores del sistema ubiquitina-proteasoma, tales como MLN.41, el bortezomib y el yondelis; y unos inhibidores de telomerasa, tales como la telomestatina.
15. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 14, para su utilización como

35 medicamento destinado al tratamiento o a la prevención de un cáncer, y en particular al tratamiento de un cáncer resistente a una quimioterapia.
16. Procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende las etapas sucesivas siguientes:

40 a) hacer reaccionar una amina de fórmula (II) siguiente:

imagen4

45 con X, R1, R2, R3, R4 y Ar tales como se definen la reivindicación 1, no representando R1 un átomo de hidrógeno,

con cloruro de cloroacetilo en presencia de una base para dar un compuesto de fórmula (1) con R1 ≠ H, y

50 b) eventualmente desproteger el átomo de nitrógeno que lleva el grupo R1 ≠ H para dar un compuesto de fórmula (I) con R1 = H.
17. Procedimiento según la reivindicación 16 que comprende las etapas sucesivas siguientes: 55 i) hacer reaccionar un cetoéster de fórmula (V) siguiente:

imagen5

con Ar tal como se define en la reivindicación 1, y representando R un grupo alquilo (C1-C6), tal como etilo, con una analina de la fórmula (VI) siguiente:

imagen6

imagen7

15

con R tal como se define anteriormente y R3, R4 y Ar tales como se definen en la reivindicación 1,

20

ii) reducir la imina de la fórmula (VII) obtenida en la etapa anterior para dar una amina de fórmula (VIII) siguiente:

imagen8

con R tal como se define anteriormente y R3, R4 y Ar tales como se definen en la reivindicación 1,

iii) saponificar la función éster del compuesto de fórmula (VIII) obtenida en la etapa anterior para dar un ácido de la fórmula (IV) siguiente:

imagen9

con R3, R4 y Ar tales como se definen en la reivindicación 1,

iv) hacer reaccionar el ácido de la fórmula (IV) obtenido en la etapa anterior con una piperazina de la fórmula (III) siguiente:

imagen10

10 con X, R1 y R2 tales como se definen en la reivindicación 1, no representando R1 un átomo de hidrógeno,

para dar una amina de fórmula (II) según la reivindicación 16,

v) hacer reaccionar la amina de fórmula (II) obtenida en la etapa anterior con cloruro de cloroacetilo en

15 presencia de una base para dar un compuesto de fórmula (I) con R1 ≠ H, y vi) eventualmente desproteger el átomo de nitrógeno que lleva el grupo R1 ≠ H para dar un compuesto de fórmula (I) con R1 = H.