ES2409710T3

ES2409710T3 - Dispositivo de análisis de fluido corporal con muestra de confirmación integrada

Info

Publication number: ES2409710T3
Application number: ES03771928T
Authority: ES
Inventors: Raphael C. Wong; Dequn Wang
Original assignee: Branan Medical Corp
Current assignee: Branan Medical Corp
Priority date: 2002-07-29
Filing date: 2003-07-29
Publication date: 2013-06-27
Anticipated expiration: 2023-07-29
Also published as: CA2493699C; EP1549210A2; AU2009200282A1; US20040019301A1; WO2004010940A3; US6875185B2; AU2003254203A1; AU2009200282B2; CA2493699A1; WO2004010940A2; EP1549210B1; EP1549210A4

Abstract

Un dispositivo de analisis para determinar la presencia de un analito en un fluid°corporal, en que dicho dispositivo integra una recogida de muestra de analisis depreseleccion y de analisis de confirmacion con el dispositivo, en el que el dispositivocomprende: una almohadilla de recogida de muestras (13), en que dicha almohadilla derecogida de muestras (13) tiene un primer extremo y un segundo extremo, y en que laalmohadilla de recogida de muestras (13) esta adaptada para absorber el fluido corporal;un soporte (26) con un extremo frontal (31), una parte central y un extremoposterior (35), en que el extremo frontal (31) del soporte (26) sujeta de forma extraibleel segundo extremo de la almohadilla de recogida de muestras (13) y en que el primerextremo de la almohadilla de recogida de muestras (13) sobresale del soporte (26) paraabsorber el fluido corporal; un tapon flexible (54), en que dicho tapOn (54) tiene una parte del primerextremo y una parte del segundo extremo, en que la parte del segundo extremo estaapoyada sobre el soporte (26); y en que la almohadilla de recogida de muestras (13) puede moverse en relacioncon el soporte (26) entre una primera configuraciOn en la cual la almohadilla derecogida de muestras (13) no se ha movido y la parte del primer extremo del tapon (54)esta separada de la almohadilla de recogida de muestras (13), y una segundaconfiguracion en que la almohadilla de recogida de muestras (13) ha sido retirada ymovida en relaciOn con el soporte (26).

Description

Antecedentes de la invención

5 J. Ámbito de la invención

La invención se refiere en gen1eral a dispositivos y métodos de análisis de fluidos corporales, y específicamente a análisis orales de uso de drogas.

10 2. Descripción de Invenciones Anteriorl~s e Información Relativa

Algunos de los análisis de fluidos corporales más comunes incluyen los análisis de inmunoensa)Q. Generalmente, los análisis de inmunoensa)Q se basan en la competencia entre un antígeno objetivo y una cantidad conocida de derivado de

15 antígeno. El derivado de antígeno es gcneralmente el antígeno o un análogo apropiado del mismo. Una cantidad predetenninada de un anticuerpo específico proporciona un número limitado dc puntos de enlace para hs cuales compiten el antígeno y el derivado de antígeno. Estos tipos de inmunoensayos han sido utilizados de forma extensa en dispositivos y métodos de análisis de orin,a.

20 Algunos dispositivos de inmunoensayo son dispositivos de flujo lateral, y los anticuerpos son soportados de forma movible en un soporte sólido, como por ejemplo una almohadilla porosa. Los derivados del antígeno se depositan como líneas de indicador inmovilizadas aguas abajo de los anticuerpos, de manera que los antígenos objetivo en una muestra de fluido fluy(:n lateralmente como una matriz líquida por

25 acción capilar a través del soporte sólido. En este caso, normalmente los anticuerpos están coloreados para obtener una indicación visual. La muestra de fluido arrastra los anticuerpos aguas abajo hacia las líneas de indicador de los derivados de antígeno inmovi lizados mientras tiene lugar una reacción entre los antígenos objetivo y los anticuerpos. Cualquier anticuerpo que ,no haya reaccionado con cl antígeno en la

30 muestra se enlaza con los derivados de antígeno en las líneas del indicador. Cuando la presencia de antígeno objetivo en la muestra es escasa o nula, la mayor parte o la totalidad de los anticuerpos coloreados son arrastrados aguas abajo a las líneas de indicador de los derivados de antígeno inmovilizados. En los derivados de antígeno inmovilizados, )os anticuerpos coloreados se enlazan junto con los derivados de antígeno en unas concentraciones tales que el colorante de los anticuerpos se convierte en visible con facilidad. También es s;abido que los derivados de antígeno y los anticuerpos pueden ser intercambiados. Es decir, los derivados de antígeno pueden ser etiquetados con colorante y ser situados d(~ forma movible en el soporte sólido, mientras que los anticuerpos se sitúan como líneas de indicador depositado inmovilizado aguas abajo.

La mayor parte de los dispositivos y métodos de análisis de inmunoensayo del pasado son para análisis de orina. Aunque el análisis de orina presenta muchas ventajas y es un tipo de aná lisis ampliamente aceptado, el análisis de orina presenta algunos inconvenientes.

Los díSJXJsitivos de análisis de orina tal vez se han hecho populares debido a la relativa facilidad a la hora de obtener la muestra, en comparación con la toma de sangre. Históricamente, las muestras de orina podían tomarse con una contaminación reducida o nula de las muestras. Sin embargo, en los análisis de sobredosis de droga, existen preocupaciones adicionales de adulteración intencional de la muestra JXJr parte del donante.

El análisis de orina ha presentado SIempre el inconveniente de requerir la manipulación de la orina, que muchos operadores consideran objetablc. Otro de los inconvenientes de utilizar muestras de orina es que los riñones funcionan como un filtro para la sangre. Por lo tanto, las muestras de orina varían con los estados fisiológicos y patológicos, y no muestran un parecido próximo con las concentraciones qu(micas dinám icas en la sangre.

Típicamente, los aná lisis de orina utilizan tamaños de muestra grandes. Como tales, los análisis de orina a menudo presentan la desventaja de que los contenedores de muestras ocupan demasiado espacio. Los tamaños de muestra más grandes que se proporcionan habitualmente para las muestras de análisis de orina presentan ventajas para algunos análisis. Por ejemplo, el análisis de sobredosis de droga requiere un análisis de confirmación además de un análisis de preselección. Por lo tanto, habitualmente la muestra global debe ser más grande. En algunos casos, sin embargo, la muestra recogida es insuficiente tanto para un análisis de preselección inicial como para el aná lisis de confirmación. En estos casos, resulta necesaria una segunda muestra. Sin embargo, los resultados de la segunda muestra pueden no ser adecuadamente comparables con los resultados del análisis de preselección a partir de la muestra original, ya que la segu nda muestra muy probablemente no tenga la misma constitución

que la muestra original, lo cual podría llevar a impugnaciones legales por parte del donante. Por consiguiente, las muestras tanto del análisis de presclección co mo de confirmación deben repetirse sobre la base de una muestra común.

Uno de los inconvenientes de los dispositivos de análisis de orma de inmunoensayo de flujo lateral convencionales es que requieren unas medidas de privacidad durante la recogida de las muestras. Corro tal, el grado de contaminación de la muestra no puede ser deb idamente supervisado durante la recogida de la muestra. Con el fin de evitar esta deficiencia, algunas agencias gubernamentales han establecido la política de tener un asistente del misrr~ sexo observando durante la recogida de la muestra con el fin de identificar una contaminación accidental o intencional de la muestra. Por supuesto, dichas disposiciones resultan embarazosas para el donante y el observador, a la vez que incrementan el coste de los análisis.

A la vista de los muchos inconvenientes del análisis de orina, resulta evidente que alternativas viables para analizar otros fluidos corporales pueden resultar de gran interés. Por ejemplo, los inmunoensayos sobre fluidos orales resultan particularmente ventajosos a la hora de solucionar la necesidad de privacidad durante la toma de muestras en los análisis de orina.

Se han desarrollado unos pocos dispos itivos para el análisis del flujo lateral de fluidos orales. Incluso aurque los disposi'livos desarro llados para análisis de fluido oral hayan superado algunos inconvenientes del análisis de orina convencional, e incluso algunos inconvenientes relacionados con el aná lisis de orina de flujo lateral, los dispositivos de análisis de inmunoensayo orales presentan todavía algunas deficiencias propias. Por ejemplo, los dispositivos de análisis de inmuooensayo de flujo lateral para fluido oral poseen medios tanto para la recogida como para el análisis de preselección del fluido oral. Sin embargo, resultan deficientes a la hora de proporcionar una estructura para la preservación de UTUI parte de la muestra para un análisis de confirmación en un solo dispositivo. Asi mismo, estos dispositivos son deficientes a la hora de mostrar un método para preservar una parte de la muestra para un análisis de confirmación.

Citados como alternativa, los di,spositivos del pasado requieren una cantidad complicada de equipamiento de distintas clases para conseguir la recogida y el aná lisis de preselección y de confirmación de las muestras. Ello es debido al hecho de que los análisis de confirmación no están previstos en los dispositivos de aná lisis de fluido oral,

y debido a los demás inconvenientes indicados anterionnente para los dispositivos y métodos de análisis de orina.

Uno de los inconveni~ntes de .los análisis de inmunoensayo de los fluidos orales es que generalmente tienen unas concentraciones más bajas de los antígenos que se pretende detectar. Asimismo, la naturaleza viscosa del fluido oral impide el flujo del fluido oral hacia o alrededor de cualquier reactivo. Otro inconveniente de los métodos y dispositivos de análisis oral del pasado es que el tamaño de las muestras es pequeño, y solamente sirve para un análisis de pr'leselección. Por el contrario, las nonnativas gubernamentales requieren un análisis de conftrmación antes de confiar en el resultado positivo de un análisis de preselección. Así, si se desea un análisis de confirmación, es necesario lomar una segunda muestra.

Tomar dos muestras separadas para preselección y confirmación resulta problematico, ya que no queda claro si ambas muestras contendrán las mismas sustancias, tal com:> se ha comentado anterionnente en relación COn la toma de una segunda muestra de análisis de orina. Resulta más probable que exista una diferencia en el contenido de una segunda muestra en relación con una primera muestra si pasa un cierto espacio de tiempo entre las mu.estras, por ejemplo cuando un análisis de preselección es positivo y el sujeto en cuestión debe ser llamado de nuevo para tomar una segunda muestra. Además, conseguir una segunda muestra requiere un tiempo adicional, y presenta una serie de inconvenientes. La utilización limitada de inmunoensayos de fluido oral es una evidencia de que los métodos y dispositivos de análisis oral del pasado no han encontrado la forma de aprovechar los aspectos positivos inherentes asociados con los análisis orale~s. Aparentemente, los dispositivos del pasado no han proporcionado soluciones adecuadas a los problemas que se han planteado anterionnente.

Los dispositivos del pasado también presentan deficiencias a la hora de proporcionar reactivos tanto para las sustancias químicas adulterantes añadidas al fluido corporal en el momento del análisis como para los antígenos que se encontraban presentes en el fluido corporal antes del momento del análisis. De la misma manera, los dispositivos del pasado también presentan deficiencias a la hora de proporcionar un gran número de reactivos con el fin de detectar múltiples antígenos en la muestra con un solo análisis.

Debido a las muchas deficiencias e inconvenientes de los dispositivos de análisis del pasado, resulta evidente que e'xiste una necesidad en el estado de la técnica de un dispositivo senc illo que incorpore todos los elementos de análisis que sea ¡:osible en un solo dispositivo, a la vez que reduzca el número de fases necesarias. Además, existe una necesidad adicional de un d:ispositivo de análisis oral viable, así como soluciones a las demás deficiencias que se' han expuesto anterionnente.

La patente US 6 372 516 BI revela un dispositivo de análisis que comprende un alojamiento, una tira de análisis, una membrana, un medio para retener dicha tira de análisis en dicho alojamiento, un med:io para retener dicha membrana en dicho alojamiento, un soporte fijado a dicho alojamiento, y un tapón fijado de forma extraíble a dicho tapón.

La patente WO 93/11434 revela un método para recoger e identificar la saliva para realizar análisis, y dicho método comprende las fases de aplicar un espécimen de fluido a un elemento absorbente, proporcionando un componente de análisis que, en contacto con dicho espécimen, proporciona una indicación de la presencia de saliva en dicho espécimen; y que a continuación de dicha fase de aplicar un espécimen fluido a un elemento absorbente, pone en contacto dicho elemento con dicho componente por el cual la presencia de saliva en el espécimen tiene como resultado dicha indicación.

Resumen de la invención

De acuerdo con la presente invención, se proporciona un dispositivo de análisis para detenninar la presencia de un analito en un fluido corporal, tal como se define en la reivindicación 1. Un método para detectar una sustanc ia en un fluido corporal de acuerdo con la presente invención se reivindica en la reivindicación 5. Las subreivindicaciones muestran algunos ejc::mplos de dicho dispositivo o método, respectivamente.

El dispositivo y el método presentes superan las deftciencias del pasado y cumplen las necesidades anteriormente indicadas a través de un dispositivo de análisis sencillo que puede reducirse en tamaño y que puede ser utilizado de manera fácil y eficiente.

El dispositivo de análisis sirve particularmente para determinar la presencia de una o más sustancias objeti vo en fluido oral, e integra una recogida de muestra de anál ¡sis de preselección y una recogida de muestra de análisis de confirmación en un único dispositivo.

Para una mayor claridad, las sustancias objetivo serán referidas en el presente documento con el ténnino de ejemplo "antígenos", las sustancias colocadas en el dispositivo para simular los antígenos serán referidas como "derivados de antígeno", y las sustancias que son conjugados de los antígenos y de los derivados de antígeno serán referidas como "anticuerpos". Debe ent.enderse de forma expresa que los ténninos antígeno / anticuerpo se refieren a un tipo particular de sustancia objetivo y a su conjugado de enlace. Pueden utilizarse términos análogos en lugar de cada uno de dichos términos, tal como puede apreciarse a partir de la información suministrada de la patente US 6 365 417 de Fteming et al. y la patente US 6 248 598 de Bogema. Por ejemplo, el término antígeno puede ser sustituido por ana Jito O sustancia objetivo; O ligando, y el término anticuerpo, pueden ser sustituidos por receptor, molécula de enlace

o agente de enlace a lo largo de la memoria sin que por ello pierdan su significado. De la misma manera, el término deri vado de antígeno podria ser sustituido por análogo de ana lito u otro término que denote un sustituto funcional de la sustancia objetivo. La finalidad de esta revelación de información es cubrir todas estas sust ituciones.

El dispositivo inclu ye una almohadilla de recogida de muestras con un primer extremo y un segundo extremo. La almohadilla de recogida de muestras está adaptada para absorber fluido oral. El dispositivo también incluyc un soporte con un extremo frontal, una ¡::ertc central y un extremo posterior. El extremo posterior del soporte sujeta de forma extraíble el segundo extremo de la almohadilla de recogida de muestras con el primer extremo de la almohadilla de recogida de muestras que sobresale del soporte, con el fin de absorber el fluido oral en una primera configuración. El dispositivo también tiene un tapón flexible con una parte del primer extremo separada de la almohadilla de recogida de muestras y un segundo extremo soportado en el soporte en la primera configuración. El dispositivo tiene una segunda configuración en la cual la almohadilla de recogida de muestras ha sido extraída y movida en relación con el soporte.

El disJXlsitivo y el método de análisis incluyen la almohadilla de recogida de muestra, que está sujetada entre las pared(:s interiores del tapón por medio de una acción de sujeción, y que se mue ve hacia la segunda configuración. La almohadilla de recogida de muestras puede dejarse en el tapón, y (:1 tapón puede ser sustituido en el SOJXlrtc para la protección de la almohadilla de recogida de muestras en la segunda configuración.

El soporte puede tener por lo menos un canal que se extiende desde el extremo frontal a 10 largo de la parte central y hacia el extremo posterior del sOJXlrte. El soporte puede sujetar el segundo extremo de la almohadilla de recogida de muestras en contacto con una alm:)hadilla de transferencia de muestras y la almohadilla de transferencia de muestras en contacto con una almohadilla de conjugado. La ahrohadilla de conjugado puede tener un conjugado de anticuerpo coloreado del antígeno, dc manera que se producirá una reacción cuando el antígeno en la muestra pase a través de la ahoohadilla de conjugada. Un derivado de antígeno que contiene la membrana puede tener un primer y un segundo extremo, y la almohadilla de conjugado se mantiene en contacto con el primcr extremo de la membrana. En este caso, el derivado de antígeno es un depósito inmovilizado del antígeno o un derivado del ant/geno. Un miembro absorbente con primeros y segundo s extremos puede tener su primer extremo sujeto en contacto con el segundo extremo de la membrana. Tanto las almohadillas de transferencia de muestra como la almohadilla de conjugado, la membrana y el miembro absorbente pueden estar sujetos en el por lo menos un canal del soporte y formar una vía de filtrado a través de la cual un fluido de muestra migra por acción capilar.

Debe entenderse que el posicionamiento de los derivados de antígenos y los anticuerpos puede ser invertido. Es decir, los anticuerpos pueden ser inmovilizados en la membrana y los derivados de antígeno pueden ser coloreados y colocados de forma movible en la almohadilla de conjugado.

El soporte del dispositivo de análisis tiene preferentemente un hueco en la parte central y por lo menos una ventana dispuesta en el hueco. La ventana es para visualizar los efectos de las reacciones químicas de'ntro del soporte y para la recogida de datos a través de la ventana por observación visual. Aunque el hueco no es indispensable, el hueco facilita la recogida de datos por parte de una cámara o un lector que se coloca en el hueco, a mu y poca distancia de los efectos de las reacciones químicas.

Uno o más elcmemos, incluyendo la almohadilla de transferencia de muestras, la almohadilla de conjugado, y la almohadilla de recogida de muestras del disjXlsitivo de análisis pueden tener un tensioactivo para facilitar el filtrado del fluido oral a través de los elementos.

A modo de ejemplo, y sin qW! ello implique limitación, el disposrtivo de análisis puede tener una sensibilidad anal:itica que permita la detección de una sustancia en concentraciones inferiores o iguales a 500 nglmL con el fin de resultar eficaz a la hora de detectar algunos de los antigenos en fluido oral. Otro ejemplo de umbral de concentración es 50 ng/mL o menos. Para: otros antígenos, una sensibilidad analítica del dispositivo permite la detección de las sustancias en concentraciones inferiores o iguales a 5 ng/mL.

El dispositivo de análisis puede ser utilizado más generalmente para otros fluidos de muestra además de los fluidos orales. Es decir, el dispositivo de análisis puede ser utilizado para orina, sangre u otros fluidos. Asimismo, tal como se ha indicado anteriormente, el dispositivo de análisis puede ser utilizado para detectar sustancias objetivo distintas de los antíg(:nos. Es decir, el dispositivo de análisis puede ser utilizado para determinar la presencia de cualquier variedad de sustancias en un fluido corporal. De la misma manera, el dispositivo puede integrar de forma ventajosa la recogida de muestras de un análisis de preselección y un análisis de confirmación con un único dispositivo y mediante una única recogida de muestra. En el caso má s general de analizar otros fluidos de muestra, el dispositivo de análisis puede tener la almohadilla de recogida de muestras, el soporte y los diversos elementos que torman la vía de filtrado, tal como se ha indicado más arrioo. Sin embargo, el derivado de antígeno de la membrana puede ser sustituido por cualquier sustancia objetivo o derivado de la misma, y el anticuerpo coloreado puede ~er sustituido por un reactivo conjugado correspondiente de la sustancia objetivo.

El método de análisis de acuerdo con la invención puede incluir una fase inicial de muestreo empapando la almohadilla de recogida de muestras en una muestra del fluido corporal. A continuación puede tener lugar la fase aruilisis de preselección de la muestra, permitiendo el movimiento de un fluido de la muestra para migrar a lo largo de una vía de filtrado desde la almohadilla de recogida de muestras a través de la almohadilla de conjugado y hacia la membrana. Una vez que se ha recogido una cantidad suficiente de la muestra, la migración del fluido puede ser detenida con el fin de retener una muestra de confirmación suficiente en la almohadilla de recogida de muestras. Ello puede conseguirse separando la almohadilla de recogida de muestras de la vía de filtrado después del muestreo y del aruilisis de preselección. Esto puede implementarse de forma ventajosa mientras la migración se encuentra en la dirección &ontal-posterior con el fin de evitar cualquier posibilidad de reflujo. A continuación, la almohadilla de recogida de muestras puede almacenarse para el posterior análisis de confIrmación en la muestra de confirmación retenida en la almohadilla de recogida de muestras.

Como ventaja, el soporte tiene una funda que sujeta de fonna extraíble la almohadilla de recogida de muestras en la primera configuración. El dispositivo también

incluye un tapón para incluir la almohadilla de recogida de muestras en el soporte. El soporte puede también incluir una almohadilla de transferencia de muestra entre la almohadi lla de recogida de muestras y la membrana. Como tal, la fase de detener la migración también puede incluir sujetar la almohadi lla de recogida de mueStras entre las 5 paredes intcriores de un tapón y retirar la almohadi lla de recogida de muestras para que no esté en contacto con la almohadilla de transferencia de muestra. Aunque simplemente separar la almohadilla de recogida de muestras de la almohadilla de transferencia de muestra y la vía de filtrado generalmente resulta suficiente, esta fase también puede incluir retirar la almohadilla de recogida de· muestras de la funda del

10 soporte para colocar el dispositivo en la segunda co nfiguración.

La fase de almacenamiento puede incluir dejar la almohadilla de recogida en una primera parte del tapón, colocar el tapón de nuevo en el dispositivo de análisis y sellar el tapón en el dispositivo con una cinta a prueba de manipulacio nes.

Cuando el fluido de muestra es fluido oral, la fase de muestra puede inclu ir

15 también colocar el dispositivo en la boca de la persona durante un período de tiempo detenninado, de manera que la almohad i,lla de recogida de muestras absorba el fluido oral. A modo de ejemplo, y sin que ello signifique una limitación, debería ser suficiente un período de tiempo de entre 1 y 20 minutos en la boca de la persona, si bicn pueden ser necesarios períodos más largos o más cortos en función de los materiales

20 absorbentes utilizados en el dispositivo y de los análisis específicos que se lleven a cabo. Otro aspecto continuado del métodQ puede ser la supervisión durante la recogida, el análisis de preselección y el almacenamiento de la muestra de conflfmaci6n. También a modo de ejemplo y sin que ello signifique una limitación, el método de uso también incluye detectar inicialmente una concentración de antígenos de 500

25 ng/mL o menos en el análisis de preselección para algunas aplicaciones. Asimismo, ya modo de ejemplo únicamente, el método incluye la fase de detectar una concentraci6n de antígeno de 5 ng/mL o menos en el análisis de presclección, que cs necesario para algunos antígenos en fluido oral. Tal como puede apreciarse a partir de la descripción de más arriba, el único

30 equipamiento que necesita contactar la muestra antes del análisis de co nfirmación es el propio dispositivo, incluyendo la almohadilla de recogida de muestras y el soporte. Asimismo, el único contacto humano necesario con la muestra para una muestra de fluido oral es el de la roca de la persona de la cual se toma la muestr a. El dispositivo de análisis puede sustituir el análisis de orina de inmunoensayo de flujo lateral alternativo y, por lo tanto, superar las respuestas humanas que generalmente son negativas en relación con el manejo de orina.

El dispositivo de análisis también ayuda a superar los otros inconvenientes relacionados con el análisis de orina. Es decir, el dispositivo de análisis, cuando se utiliza en una aplicación de muestra de fluido oral, no requiere ningún tipo de privacidad durante la recogida de la muestra. Por lo tanto, la persona a quien se realiza la prueba y el dispositivo pueden ser supervisados de fonna continua durante la recogida de la muestra y el análisis de: preselección. Este aspecto de la invención permite evitar completamente la adu lt€:ración y la contaminación de la muestra. Asimisroo, no existe la necesidad de que el testigo sea del mismo sexo que la persona a la cual se le realiza la prueba. Por lo tanto, los costes globales de reanálisis y de personal adicional se ven reducidos.

Para que las pruebas y los amllisis de fluido oral sean una alternativa viable a los análisis de orina u otros análisis, la presente invención implementa características para superar los inconvenientes históricamente asociados con las muestras y el análisis de fluido oral. Es decir, el presente dispositivo utiliza tensioactivos y otras sustancias químicas para tratar con la naturaleza viscosa del fluido oral. Asimismo, el dispositivo también ha aumentado la sensibilidad para tratar con las concentraciones de antígenos sustancialmente inferiores en el fluido oral.

Una de las ventajas de utili7..ar fluido oral coroo muestra es que los constituyentes del fluido oral pueden tener un parecido más próximo con las concentraciones químicas dinámicas en la. sangre, en contraposición con las muestras de orina tradicionales, en las cuales los riTiones actúan para filtrar cantidades relativamente grandes de impurezas. De esta manera, la aplicación oral del dispositivo y el método de análisis puede superar el inconveniente de la presencia de cantidades no represenlalivas de algunos antígenos en los análisis de orina.

El presente dispositivo y el presente método también superan la necesidad de unos contenedores más grandes y de unas muestras más grandes. Ello es debido a que la muestra es llevada a los lugares de las reacciones químicas (líneas de indicador inmovilizado), por filtrado. Puede dejarse una cantidad suficiente de la muestra en la almohadilla de recogida de muestras para el análisis de confirmación. La cantidad suficiente de la muestra se preserva moviendo la almohadilla de recogida de muestras a la segunda configuración. Estas caracteristicas del dispositivo de análisis también superan Jos inconvenientes y las necesidades de inmersión, extracción y vertido, que

generalmente implican la utilización dI! equipamiento adicional e incrementan las posibilidades de contaminación de la muestra. De forma parecida, el dispositivo de análisis supera los inconvenientes de las varillas y dispositivos similares que introducen reactivos en las muestras. El presente

5 dispositivo de análisis evita cualquier ne<:esidad de introducirlos, lo que podría teñir la muestra. De hecho, el dispositivo y método instantáneo tiene un método para evitar el reflujo de una parte de la muestra a la cual se haya realizado un análisis de preselección. Este medio de prevención se consigue separando la almohadilla de recogida de muestras

de la vía de filtrado, lo cual proporciona una parte no tenida de la muestra para el

10 análisis de confirmación. Realmente, el dispositivo y el método instantáneo superan los inconvenientes que supone la necesidad de diversos equipamientos y diversas fases. Es decir, el presente dispositivo recoge automáticamente una muestra y realiza un análisis de preselección a la vez que proporcion.a el almacenaje de una parte no tenida de la muestra para el análisis de confirmación.

15 Globalmente, el dispositivo insta.ntáneo está proporcionadO JX)r un aparato que puede estar fabricado de forma compacta, a la vez que tiene la capacidad de identificar un gran número de antígenos por parte del dispositivo individual. El dispositivo implementa este dispositivo con1O una so nda que emula un termóID:tro oraL Es decir, t:1 dispositivo se coloca en la boca de una persona que va a ser analizada y se deja allí

20 durante un período de tiempo para que absorba el fluido oral. El análisis de preselección se ejecuta automáticamente mientras el fluido oral migra a lo largo de la vía de finrado. Cualquier antígeno que se encuentre presente en el fluido oral se combina con un anticuerpo coloreado móvil que se propo:rciona en la vía de filtrado, y el anticuerpo se convierte en no disponible para enlazar c~on un depósito inmovilizado del derivado de

25 amígeno aguas abajo. Cuando un antígeno determinado no se encuentra presente en la muestra, el anticuerpo cobreado correspondiente es llevado al depósito inmovilizado del derivado de antígeno en una posición determinada en una membrana de tira de análisis junto al filtrado. Aquí el anticuerpo se enla7..3 con el derivado de antigeno inmovilizado en una masa concentrada. En ese momento, la tira de análisis puede ser

30 leída a través de una ventana del dispositivo. Pueden proporcionarse una pluralidad de depósitos inmovilizados y una pluralidad de membranas de tira de análisis en un dispositivo que todavía es lo bastante compacto como para encajar en la boca de una persona para la recogida de muestras.

Los anticuerlX's y los derivados de antígenos inmovilizados pueden incluir

cualquier combinación de sustancias que se encontrasen en la muestra con anterioridad al momento del análisis y cualquier sustancia adulterante que pudiera ser añadida en el momento del análisis. La adulteración intencional se consigue con mayor facilidad durante los análisis de orina convencionales, ya que la persona objeto del análisis puede no ser supervisada durante la toma de muestras. El dispositivo de análisis permite un seguimiento constante durante la toma de muestras y el análisis de preselección, por medio de un inmunoensayo de fluido oral. Resulta dificil, cuando no directamente peligroso, que una persona sometida a un análisis intente adultem.r una muestra de nuido oral. Sin embargo, el dispositivo y el método de prueba pueden utilizarse en otros nuidos corporales. En cualquier caso, el dispositivo instantáneo supera las deficiencias del pasado por medio de un aparato que puede manejar la detección de múltiples antígenos y sustancias adulterantes con un solo dispositivo compacto.

Esta invención, que acaba de ser brevemente resumida, puede visualizarse mejor pasando a los dibujos siguientes. en los cuales los elementos referidos están referenciados por Jos números correspondientes.

Breve descripción de los dibujos

La FlO. I es una vista en perspc·ctiva del dispositivo de análisis que muestra la colocación y [a extracción de la boca de una persona; La FIO. 2A es una vista en secc:ión tomada a [o largo de las líneas 2-2 de la FIO.I; La FIG. 28 es una vista en sección tomada a lo largo de las líneas 2-2 de la FIG. I que muestra una realización ahernativa; La F1G. 2e es una vista en sección tomada a lo largo de las líneas 2-2 de la FIG. I que muestra otra realización alternativa; La FIG. 3 es una vista en detalle de la tira de análisis de la FIG. 1 Y la FIG. 2A. e incluye un tapón; La FIG. 4 es un diagrama de flujo que ilustra un método preferente para detectar un antígeno en una muestra; La FIG. 5 es una vista en perspe(:tiva del dispositivo de análisis que muestra la colocación y la sustitución del tapón del dispositivo en el soporte;

La FIG. 6 es una vista en perspectiva que muestra la extracción por sujeción del tapón y la almohadilla de recogida de muestras del dispositivo de análisis; La FIG. 7 es una vista en perspectiva del tapón extraído y de la almohadilla de recogida de muestras del dispositivo de análisis; y

La FIG. 8 es una vista ·de plano superior que muestra el almacenaje de la almohadilla de recogida de muestras en el tapón para su ¡x>sterior análisis de confirmación.

La invención y sus diversas n!alizaciones pueden ser mejor comprendidas pasando a la siguiente descripción detallada, donde se describen las realizaciones ilustradas. Debe entenderse ex.presamenH: que las realizaciones ilustradas se muestran a título de ejemplo y sin carácter limitativo sobre la invención, tal como sc define

finalmente en las reivindicaciones.

Descripción Detallada de las Realizaciones Preferentes

Con el fin de aclarar conceptos, las sustancias objetivo son referidas en el prescnte documento mediante el término ejemplar de antígenos., las sustancias colocadas en el dispositivo para simular los antígenos son referidas como derivados de antígenos, y las sustancias que son conjugados de los antfgenos y de los derivados de antfgenos son referidas como anticuerpos. Debe entenderse expresamente que los ténninos antígeno I anticuerpo se refieren a un tipo detennin,ado de sustancia objetivo y a su conjugado de enlace. Sin embargo, el término antígen.o podría ser sustituido por analito, sustancia objetivo o ligando, y el término anticuerpo podría ser sustituido por receptor, molécula de enlace o agente de enlace a lo largo de esta memoria descriptiva sin perder su significado. De forma similar, el término derivado de antígeno podría ser sustituido por análogo de analito u otro ténnino que denote un sustituto funcional de la sustancia objetivo. De hecho, el objetivo de esta aclaración es cubrir las anteriores sustituciones.

Una realización preferente del dispositivo de análisis se encuentra ilustrada en la Fig. I Y designada de forma general por el número de referencia 5, que es un dispositivo de análisis químico de contacto que utiliza el flujo lateral de una muestra de fluido. E l dispositivo de análisis 5 está adaptado para ser colocado en la boca de una persona 8. Tal como se muestra, se ¡nsena una almohadilla de recogida de muestras 13 con el fin de absorber el fluido oral 16 de la boca de una persona. Tal como se indica mediante una flecha en dos sentidos 20, la Fig. 1 también muestra la extracción del dispositivo de análisis 5 de la boca de l~l persona. Aunque de acuerdo con la presente invención, el dispositivo puede ser implementado para muestras de diferentes nuidos corporales, en la realización preferente la muestra es fluido oral. Tal como se muestra en la Fig. 1, el dispositivo 5 puede ser utilizado de manera similar a la colocación y extracción de un tennómetro oral.

El dispositivo de análisis 5 se coloca preferiblemente en la boca de la persona durante entre uno y veintc minutos, tiempo durante el cual el fluido oral es absorbido a través de la almohadilla de recogida de' mucstras 13. Para decirlo con sencillez, los antígenos del nuido oral reaccionan con sus anticuerpos durante el fihrado, de manera que se impide que los anticuerpos puedan reaccionar también con derivados de antígeno inmovilizados predispuestos que se encuentran localizados en las ventanas 23 y 25 del dispositivo 5. Por otro lado, si no se encuentra presente ningún antígeno en el nuido oral, los anticuerpos son libres de reaccionar con los derivados de antígeno inmovilizados y previamente dispuestos, y los resultados de la/s reacción/es pueden visualizarse a traves de las ventanas 23 y 25.

Tal como se muestra en la Fig. 1, el dispositivo 5 comprende un soporte 26 que consta de una parte superior 28 y una parte inferior 30. Generalmente, el soporte 26 tiene un extremo frontal 31 que incluye soportes 32 que generalmente ayudan a mantener la forma de la almohadilla de recogida de muestras 13. Los soportes 32 definen un hueco en forma de U 33 que se encuentra entre los mismos. Este hueco 33 presenta la ventaja de permitir la sujeción de la almohadilla de recogida de muestras 13 entre los soportes 32 cuando se extrae la almohadilla de recogida de muestras 13. El soporte 26 también tiene una parte central 34 y un extremo posterior 35.

La Fig. 2A muestra los elementos internos que pcnniten la fihración del nuido oral. Un respaldo 36 mantiene unidos otr.a scrie de elementos. Es decrr, una almohadilla de transferencia de muestras 39, una almohadilla de conjugado 42, una membrana 45 con un extremo frontal 46 y un extremo posterior 47, y un miembro absorbentc 48. Cada uno de estos elementos se encuentra en contacto con por lo menos uno de los clementos restantes con la finalidad de formar una vía continua para la filtración del fluido oral. Tanto la almohadilla de recogida de muestras 13 como la almohadilla de transferencia de muestras 39, la almohadilla de conjugado 42 y el miembro absorbente 48 comprenden cualquier variedad dc materiales absorbentes adecuados para el análisis químico de los fluidos corporales. La membrana 45 puede comprender una tira de membrana de nitrocelulosa o un equivalente. La almohadilla de recogida de muestras 13 también está en contacto con el elemento que se encuentra en la pane más aguas arriba de todos ellos, y forma parte de la vía de nitrado.

El fluido oral 16 es absorbido por la almohadilla de recogida de muestras 13 y

5 es filtrado a partir del extremo frontal 31 hacia el extrerro posterior 35 del dispositivo 5. Un segundo extremo 15 de la alJT'k)hadilla de recogida de muestras 13 está en contacto con la almohadilla de transferencia de muestras 39 en una relación de solapado. A su vez, la almohadilla de transferencia de muestras 39 está en contacto con la almohadilla de conjugado 42 en una relación de solapado. La almohadilla de conjugado 42 se apoya

lOen un primer extremo 46 de la membrana 45. El filtrado continúa a través de la membrana 45 a un segundo extremo 47 de la membrana 45 que se encuentra solapada por el miembro absorbente 48. El miembro absorbente 48 actúa como un desagüe de humedad para atraer más hacia atrás la muestra de fluido en el dispositivo de análisis 5 por acción capilar.

15 Aunque la almohadilla de transferencia de muestras 39 sirve para transferir el fluido de muestra desde la almohadilla de recogida de muestras 13 hacia la almohadilla de conjugado 42 en la configuración preff:rente, una configuración alternativa elimina la almohadilla de transferencia de muestras y tiene la almohadilla de recog ida de muestras 13 en contacto directo con la almohadill,a de conjugado 42 tal como se muestra en la

20 Fig. 2B. De forma similar, la almohadilla de conjugado 42 puede ser eliminada y uno o más anticuerpos pueden ser colocados en la membrana 45 tal como se muestra en la Fig. 2e. En este caso, los anticuerpos se colocan en el primer extremo 46 de la membrana 45 para proporcionar el tiempo necesario para la reacción con cualquier antígeno en la muestra, mientras migra hacia los depósitos inmovilizados de Jos derivados de antígeno

25 más aguas abajo en la membrana 45. En la Fig. 2e también se muestra una protección opcional 49 situada entre el segundo e;i(fremo 15 de la almohadilla de recogida de muestras 13 y la membrana 45. Debe entenderse que dicha protección 49 puede ser aplicada a cualquiera de las realizaciones que se indican en el presente documento, y actúa para detener la migración del fluido de muestra hasta que se extrae la protección

30 49. Esta caracteristica resulta importante It:n análisis en los cuales el momento de inicio es crítico. Asimismo, por motivos prácticos, a menudo resulta preferible realizar el análisis de preselección después de abandonar la presencia de la persona 8 a quien se está practicando el análisis. De esta maner'a, la protección 49 podría dejarse intacta hasta que la persona 8 a quien se está practicando el análisis ya no se encuentre presente.

Cada uno de los elementos que fonnan la vía de filtrado se se leccionan en base a sus cualidades de absorción, y puede ser seleccionado o modificado con el fin de proporcionar cualidades adicionales. Por ejemplo, tanto la almohadilla de recogida de muestras 13 como la almohadilla de transferencia de muestras 39 y la almohadilla de conjugado 42 poseen cualidades de absorción. Estas almohadillas 13, 39 Y 42 pueden scr seleccionadas o modificadas para proporcionar el filtrado de la muestra. Esto puede resultar importante a la hora de evitar que las impurezas, las enzimas o las bacterias interfieran en la reacción química y, por Jo tanto, en los resultados del aná lisis. Por otro lado, estas almohadillas 13, 39 Y 42 pueden ser seleccionadas o modificadas para mejorar todavía más el flujo de la muestra a través de las mismas. Ello puede conseguirse añadiendo cualquiera de una variedad de surfactantcs y otras sustancias químicas con las cuales puede tratarse una o más de las almohaditlas 13, 39 y 42. De forma similar, esto puede mejorar las capacidades del dispositivo de anál isis a la hora de manejar fluidos que, de lo contrario, tendrían viscosidades demasiado altas para permitir una migración correcta por acción capilar.

Otra configuración alternativa implica el intercambio de posiciones del anticuerpo y del derivado de antígeno inmovilizado previamente dispuesto en la membrana 45. En este caso, los derivados de antígeno son coloreados y se colocan de forma extraíble en la almohad illa de con:¡ugado 42. Como alternativa, los derivados de antígeno coloreados pueden simplemente ser colocados aguas arriba de los anticuerpos no coloreados. En este caso, los anticuerpos son inmovilizados en la membrana, y cualquier antígeno que se encuentre en la muestra compite con los derivados de antígeno coloreados que se han colocado de forma cxtraíble aguas arriba para reaccionar con los anticuerpos inmovilizados. Como tal, la intensidad de la coloración en las líneas de indicador de anticuerpos inmovilizados permite una detección precisa de los niveles de antígenos en la muestra.

En la realización preferente de la Fig. 2A, la almohadilla de conjugado 42 comprende un miembro absorbente con una composición reactiva dispuesta en la misma. La composición del reactivo es reactiva con cienos antígenos o sustancias químicas, que pueden encontrarse en la muestra. La almohadilla de conjugado 42 puede incluir uno o más conjugados de sustancias de adulteración como composiciones de reactivos para indicar si la muestra ha sido adulterada. Sin embargo, en la realización preferente que utiliza una muestra de fluido oral, la adulteración resulta más dificil. Realmente, uno de los principales benefidos de la realización preferente de un análisis oral es que el análisis no requiere ninguna privacidad durante la toma de muestras, y todo el análisis de preselección puede ser supervisado por un administrador del análisis. Por otro lado, el dispositivo de acuerdo con la presente invención puede ser aplicado con otras muestras, como por ejemplo la orina, y todavía presentar de forma ventajosa algunas de las mismas ventajas que se consiguen en los análisis y la recogida de fluidos orales. En cualquier caso, la almohadilla de conjugado puede incluir conjugados de ciertos adulterantes que no son constituyentes normales de la muestras que se toma. Dichos constituyentes pueden incluir, sin limitación, la lejía o glutaraldehído. Como alternativa, la almohadilla de conjugado puede incluir un anticuerpo de una sustancia que normalmente se encuentra presente (:n la muestra, pero cuyo anticuerpo se incluye con el fin de detectar una presencia anormal de la sustancia, como por ejemplo un nivel excesivamente alto o excesivamente bajo. Por ejemplo, un nivel anormalmente a lto de creatinina puede ser el objetivo para el cual se proporciona un conjugado en la almohadilla de conjugado.

En la configuración preferente, los reactivos en la almohadilla de conjugado incluyen anticuerpos coloreados que son conjugados de los antígenos en las muestras que se van a analizar. Preferiblemente, los anticuerpos se colocan de forma extraíble en la almohadilla de conjugado, y son arrastrados por el fluido de la muestra en la dirección de la migración del fluido durante el filtrado. Como tales, los anticuerpos que no han experimentado una reacción con un antígeno en la muestra son arrastrados y enlazados con los derivados de antígeno previamente dispuestos e inmovilizados en la membrana 45. Debe entenderse que los d<:rivados de antígenos previamente dispuestos e inmovilizados pueden ser sustituidos como alternativa por otros reactivos que reaccionen con los anticuerpos seleccionados de los antígenos objetivo.

En la realización preferente, el fluido oral de muestra que migra por filtrado llevará anticuerpos de los antígenos objetivo desde la almohadilla de conjugado de anticuerpos coloreados hacia la membrana 45. Aquí, en una posición 50 inmediatamente debajo de las ventanas 23 y 25 los derivados de antígenos previamente dispuestos e inmovilizados proporcionarán reacciones con cualquiera de los anticuerpos restantes que se arrastran desde la almohadilla d(~ conjugado de anticuerpo coloreado 42. Los anticuerpos están coloreados para una detección visua l más fácil cuando reaccionan y se enlazan con los derivados de antigeno previamente dispuestos e inmovilizados que se encuentran en locali7.3ciones específicas en la membrana 45.

La Fig. 2A también muestra un tope 51 que actúa como freno para un taJXSn 54 que se muestra en la Fig. 3. El tapón 54 t iene una parte frontal 55 y una parte PJsterior

56. Las piezas del soPJrte supcrior e inferior 28 y 30 fonnan respectivamente las partes de recepción del tapón superior e inferior 57 y 58. Cuando están montados, el soporte 26 recibe el tapón 54 tal como se indica mediante las flechas 59 que se muestran en la Fig. 5. El taJXSn 54 puede ser transparente o translúcido para visualizar el contenido o la configuración del contenido. Como alternativa, el taJXSn puede ser tintado u opaco para impedir que la luz dañe o afecte la muestra y los resultados del análisis. Las piezas del soporte superior e inferior 28 y 30 también comprenden las partes del soporte superior e inferior60y61.

La vista en detalle de la Fig. 3 t.ambién muestra cómo las piezas 28 y 30 Y los elementos internos del dispositivo 5 encajan entre si. Específicamente, el sopo rte forma una parte del apoyo de la almohadilla de recogida de muestras 62 para sujctar de forma extraíble la almohadilla de recogida de muestras 13 en una relación de solapado con la almohadilla de recog ida de muestras 39 durante la recogida de muestras y el análisis de prcselección. Las paredes 63 y 64 de la p~!l.rte inferior 30 delimitan la parte de soporte de la almohadilla de recogida de muestras 62 y conectan la estructura de encaje en la pieza superior 28 del soporte 26. Las protrusiones 65 dc la pieza inferior 30 ayudan a retener la almohadilla de recogida de muestras 13 en la parte de apoyo 62. La parte de aPJYo de la almohadilla de recogida de muestras 62 generalmente ocupa todo el ancho del sopo rte

26.

Por otro lado, el soporte forma e l primer y el segundo canal, 66 y 69, cada uno de los cuales solamente ocupa una fracción de la anchura del soporte. Los canales 66 y 69 alojan y sujetan los respectivos montajes 70 de elementos para el análisis de preselección. En la Fig. 3 solamente se muestra un montaje 70. Sin embargo, debe entenderse que la realización de la Fig. 3 abja dos de dichos montajes 70 en una relación de lado a lado del dispositivo 5. Asimismo, se contempla que pueda proporcionarse de forma similar cualquier numero de los montajes 70 y asimilarse en el dispositivo de acuerdo con la presente invención. En la configuración preferente, las paredes de separación 72 y 74 separan el soporte en el primer y segundo canal 66 y 69. Las paredes externas 76 y 78 impiden que los montajes 70 se muevan hacia afuera. La pared del extremo 80 impide que los montajes se muevan hacia atrás. Los tacos 84 en la pieza inferior 30 del soporte 26 COnectan la estructura de encaje en la pieza superior 28 en una relación de encaje por fricción que sujeta las piezas 28 y 30 juntas en una configuración de montaje.

El montaje 70 comprende los diferentes elementos que se necesitan para el análisis de preselección, incluyendo la abmohadilla de transferencia de muestras 39, la almohadilla de conjugado de anticuerpos coloreados 42, la membrana 45 yel miembro absorbente 48. Estos elementos están también acoplados al respaldo 36 para fonnar una unidad integral con el mismo. Estos elementos también están acoplados entre sí en la relación referida anteriormente con el fin de proporcionar la vía de filtrado para el fluido oral. La Fig. 3 muestra el derivado de antígeno previamente dispuesto e inmovilizado en la membrana 45 en la forma de las líne~as 92. Debe entenderse que dichas líneas 92 generalmente no resultan visibles o por lo menos son relativamente incoloras hasta que se ha llevado a cabo el análisis de preselección. Las líneas 92 permanecerán invisibles o incoloras después del análisis de preselección hasta el punto que los antígenos correspondientes se encontraran presentes en la muestra. Es decir, cada antígeno en la muestra reaccionará con un anticuerpo correspondiente en la almohadilla de conjugado de anticuerpos coloreados 42. El anticuerpo coloreado correspondiente que participa en la reacción ya no se encontrará disponibl,e para reaccionar con el derivado de antígeno inroovilizado localizado en una línea respectiva 92. Por lo lanto, después de reaccionar con el antígeno en la muestra, quedan pocos o ningún anticuerpo, y JX)cos o ningún color aparecerá en la línea 92 correspondiente.

La Fig. 4 es un diagrama de flujo que muestra las fases del método de análisis de la presencia de antígenos en una mu.estra de fluido corporal. En primer lugar, se permite que el dispositivo se empape de un fluido corporal, tal como se muestra en el bloque 105. A continuación, y de alguna manera de forma simultánea, se permite proceder al análisis de preseleeción de acuerdo con el bloque 108. Este paso se produce automáticamente siempre y cuando el fluido de muestra pueda filtrarse a través de los elementos esenciales del dispositivo. Si los resultados del análisis de preselección son negativos, el dispositivo 5 queda descartado y no es necesario realizar ningún análisis posterior, tal como se indica en 111. Por otro lado, si alguno de los análisis de presclccción es positivo, es necesario J'ealizar un análisis de conflfmación. Así, la almohadilla de recogida de muestras 13 es separada del resto de la vía de filtrado con el tin de evitar la migración del resto de la muestra, de acuerdo con el paso 114. De esta manera, la parte restante de la muestra queda preservada para el análisis de confirmación. Después de este paso 114 de extracción de la almohadilla de recogida de muestras, se almacena la almohadilla de recogida de muestras para realizar el análisis de confIrmación de acuerdo con Jo que se indica en el bloque 117. El método también puede incluir la fase del análisis de confirmación mediante po r lo menos un análisis de cromatografia de gas y de espectrometría de masa.

El método de análisis incluye recoger una cantidad suficiente del fluido de muestra tanto para el análisis de preselección como para el análisis de confirmación. A modo de ejemplo, y sin que sirva de limitación, una cantidad suficiente se encontrará normalmente en un espectro de entre 0.5 ml y 2.0 ml, por ejemplo. Se ha descubierto que aproximadamente un ml resulta suficiente para esta finalidad. Como tal, la almohadilla de recogida de muestras 13 debe tener una capacidad suficiente para absorber un mL de la muestra. Con una muestra de un ml, se utilizan aproximadamente 200 microlitros durante el análisis de preselección. Esto deja aproximadamente 800 microlitros para el análisis de confirmación. Debe entenderse que puede recogerse y utilizarse una muestra total superior o inferior a la que se ha especificado más arriba.

La Fig. 5 muestra la colocación o sustitución del tapón 54. Generalmente, el tapón 54 se coloca en el soporte haciendo fuerza en la dirección de las flechas 59 simplemente con el fin de proteger la almohadilla de recogida de muestras 13 contra la contaminación. Otro momento en el cual el tapón 54 se coloca en el soporte 26 es después de que se haya extraído la a-Imohadilla de recogida de muestras 13. La almohadilla de recogida de muestras 13 puede ser extra(da y almacenada por separado del dispositivo para el posterior análisis de confirmación. Sin embargo, en el método preferente, la almohadilla de recogida d,: muestras 13 se separa de la vía de filtrado, aunque queda retenida en el tapón 54. En este caso, el tapón 54 puede ser sustituido en el soporte 26 co n la almohadilla de recogida de muestras que se encuentra allí. Este método de almacenaje de la almohadilla de recogida de muestras resulta ventajoso, ya que las posibilidades de contaminación se reducen en gran medida.

Aunque la extracción de la almohadilla de recogida de muestras puede ser implementada en un gran número de formas sanitarias, el dispositivo y método presentes proporcionan de forma ventajosa una manera fácil y eficieme de hacerlo. Esta característica se muestra en la Fig. 6, Y reduce en gran medida las posibil idades de contaminación. La Fig. 6 muestra las manos de un usuario 122 y 123, presionando el tapón 54 y la almohadilla de recogida dc~ muestras 13 entre las paredes interiores del tapón 54 en 125. Mientras se presiona el t.apón 54 y la almohadilla 13 un usuario tira del tapón 54 en la dirección de la flecha 128 y simultáneamente tira del soporte 26 en la

dirección de la flecha 130. Esta acción se'para la almohadilla de recogida de muestras 13 de la vía de filtrado y puede utilizarse para separar completamente la almohadilla de recogída de muestras 13 de los soportes 32.

La Fig. 7 muestra la almohadilla de recogida de muestras dentro del tapón 54. Tal como se muestra, se ha permitido que la almohadilla de recogida de muestras 13 caiga dentro de la primera parte 55 del tapón. A continuación, el tapón 54 es sustituido en el soporte, y se utiliza una cinta a prueba de manipulación 140 para fijar el tapón 54 al soporte 26 tal como se muestra en la Fig. 8. En la representación de ejemplo de la Fig. 8 el análisis ha mostrado un resultado positivo para una de las ocho líneas 92. Es decir, una de las líneas 92 permanece invisible o no coloreada. De esta manera, la Fig. 8 muestra un caso típico en el que sería necesario realizar un análisis de confirmación. Tal como se muestra en las Fig. 3 Y 8, se proporcionan cuatro lineas 92 en cada una de las tiras 45 de la membrana. Una de esta s lineas 92 en cada una de las tiras 45 de la membrana es un control para asegurar al administrador del análisis que el dispositivo está funcionando correctamente durante el análisis. Así, por ejemplo, el dispositivo puede realizar el aná lisis de hasta 6 antígenos. Algunos de estos antígenos pueden ser adulterantes, o pueden ser todos drogas o metabolítos de drogas que van a ser detectados. Cualquier número de líneas adicional que resulte razonable puede ser añadido a las tiras 45 de la membrana de manera que puede detectarse una multitud de antígenos. Como alternativa, o de forma adicional, pueden proporcionarse más canales para recibir montajes adicionales con otra.s líneas adicionales.

Puede aprec iarse que con c\ dispositivo y método presentes. el único contacto con la almohadilla de recogida de muestras es con el soporte 26, el tapón 54 y la boca o muestra de la persona 8 a quien se realiza el análisis. Este contacto mínimo puede ser limitado a tener lugar únicamente en presencia del administrador del análisis, y puede evitarse cualquier posibi lidad adicional de contaminación de la muestra antes del análisis de confirmación.

Debe entenderse de forma expresa que la composición del reactivo puede estar localizada en la membrana como un depósito inmovilizado de un ligando de conjugado del antígeno y del derivado de antígeno. En este caso, el derivado de antígeno puede estar localizado en la al mohadilla de conjugado como derivado de antígeno coloreado movible que va a ser llevado por la muest['a al ligando de conjugado inmovilizado.

Tal como se ha indicado más arriba, el antigeno/anticucrpo utilizado a lo largo de la descripción arriba indicada es un ejemplo específico de un concepto más amplio

en el cual el término antígeno es sustituido ¡:x>r el término general analito y el término

anticuerpo es sustituido por receptor. Ejemplos de analito son una droga, una hormona,

un antígeno, un hapteno, una lectina, una apoproteina o un cofactor. Ejemplos más

específicos serían metabolitos de droga, por ejempb eotinina como marcador del uso de

5: nicotina, o una hormona como la gonadotropina coriónica humana (HCG) como

marcador de embarazo. Aunque la presente invención tiene una aplicación particular e n

el campo de la detección de droga, y es especialmente útil para detectar el uso de drogas

para determinar la empleabilidad o para determinar el estado de consumo de drogas de

una persona en libertad condicional, el d.ispositivo y el método son o pueden ser útiles

lO: también en muchas otras aplicaciones. Por ejemplo, la almohadilla de conjugado 42

también puede incluir una almohadilla de detección de sustancias corporales con una

reacción O reacciones de reactivos para detectar sustancias corporales como la glucosa,

la bilirrubina, la ketona, la sangre, la proteína, los urobilinógenos, nitrito, leucocitos y

más. Resultan particularmente interesantes las sustancias objetivo que permiten la

15: identificación de enfermedades infecciosas, drogas terapéuticas, marcadores de cáncer y

marcadores cardiacos. La almohadil1a de detección de sustancias corporales puede

también medir el pH y la gravedad específica de la muestra. La detección de estas

sustancias adicionales tiene un gran potencial a la hora de diagnosticar enfermedades o

prevenir la salud futura.

20: Pueden realizarse muchas alteraciones y modificaciones p:Jr parte de aquellas

personas que tienen unos conocimientos generales en el tema, sin apartarse del espíritu

y del ámbito de la invención. Por lo tanto, debe entenderse que las realizaciones

ilustradas han sido presentadas únicamente con finalidad de ejemplo y que no debe

considerarse que limiten la inve nción tal como se define a través de las reivindicacio nes

25: siguientes. De esta manera, debe entenderse que las reivindicacio nes incluyen b que se

ilustra y describe específicamente más arriba, 10 que es equivalente conceptualmente y

lo que puede ser sustituido de Forma obvia.

Claims

Reivindicaciones

1. Un dispositivo de análisis para determinar la presencia de un analito en un fluido corporal, en que dicho dispositivo integra una recogida de muestra de análisis de preselección y de análisis de confirmación con el dispositivo, en el que el dispositivo comprende:

una almohadilla de recogida di: muestras (13), en que dicha almohadilla de recogida de muestras (13) tiene un primer extremo y un segundo extremo, y en que la almohadilla de recogida de muestras (13) está adaJl:ada para absorber el fluido corporal;

un soporte (26) con un extremo frontal (31), una parte central y un extremo posterior (35), en que el extremo frontal (3 1) del soporte (26) sujeta de forma extraíble el segundo extremo de la almohadilla de recogida de muestras (13) y en que el primer extremo de la almohadilla de recogida di: muestras (13) sobresale del soporte (26) para absorber el fluido corporal;

un tapón flexible (54), en que dicho tapón (54) tiene una parte del primer extremo y una parte del segundo extremo, en que la parte del segundo extremo está apoyada so bre el soporte (26); y

en que la almohadilla de recogida de muestras (13) puede moverse en relación con el soporte (26) emre una primera configuración en la cual la almohadilla de recogida de muestras (13) no se ha movido y la parte del primer extremo del tapón (54) está separada de la almohadilla de recogida de muestras (13), y una segunda configuración en que la almohadilla de recogida de muestras (13) ha sido retirada y movida en relación con el so¡xme (26), en que

la almohadilla de recogida de muestras (13) puede sujetarse entre las paredes interiores del tapón (54) y puede moverse hacia la segunda configuración apretando y retirando el tapón (54). en que el tapón (54) tiene un espacio hueco en la parte del primer extremo, ajustado para recibir la almohadilla de recogida de muestras (13) después de la separación de la almohadi lla de recogida de muestras (13) del soporte (26), la segunda configuración comprende una separación de la almohadi lla de recogida de muestras (13) del soporte (26) y en que el tapón (54) con la almohadil la de recogida de muestras (13) restante puede ser sustituido en el soporte (26) para la protección de la almohadilla de recogida de muestras ( 13) en la segunda configuración.
2.

El dispositivo de análisis según la reivindicación 1, en que el analito lo es de una droga, una hormona, un antígeno, un anticuerpo, un hapteno, una lectina, una apoproleína o un cofactor.
3.

El dis[Xlsitivo de análisis según la reivindicación 1, que comprende una funda en el extremo frontal del ~oporte (26) que sujeta de forma extraíble la almohadilla de recogida de muestras (13), en que la funda está envuelta de un asiento (5 1) que soporta de forma extraíble el tapón (54).
4.

El dispositivo de análisis según la reivindicación 1, en que el soporte (26) tiene una ventana (23, 25) en la parte central para visualizar los efectos de las reacciones químicas dentro del soporte (26) y para I.a recogida de datos a través de la ventana (23. 25) por parte de una cámara o un lector acercado a poca distancia de los efectos.
5.

Un método para detectar una sustancia en un fluido corporal, en que el método comprende:

absorber una muestra del fluido corporal con una almohadilla de recogida de muestras (13) sujetada por un soporte (26), en que el soporte sujeta de forma extraíble la almohadilla de recogida de muestras con una parte de la almohadilla de recogida de muestras que sobresale del soporte para absorber el fluido corporal;

realizar un análisis de pn:selección de la muestra permitiendo que un fluido de la muestra migre a lo largo dc~ una vía de filtrado desde la almohadilla de recogida dc muestras (13) a través de una almohadilla de conjugado (42) y hacia una membrana (45);

detener la migrac ión y por lo tanto retener una muestra de confirmación en la almohadilla de recogida de muestras ( 13), separando la almohadilla de recogida de muestras (13) de la vía de filtrado después de la absorción y del análisis de preselección y sujetando la almohadilla de recogida d~~ muestras (13) entre las paredes interiores de un tapón (54) y separando la almohadilla de recogida de muestras (13) del contacto con una almohadilla de transferencia de muestras (39) y retirando la almohadilla de recogida de muestras del soporte; y

almacenar la almohadilla de recogida de muestras (13) para el posterior análisis de confirmación sobre la muestra de confrrmación que se ha retenido;
6. El método según la reivindicación 5, que además comprende la fase de supervisar de forma continuada la membrana (45) durante las fases de absorción de la muestra, análisis de preselección, detención de la migración y almacenaje de la almohadilla de recogida de muestras (13).
7. El método según la reiv indicación 5. en que la fase de almacenaje también comprende: dejar la ahmhadilla de recogida (13) en la parte del primer extremo del tapón (54); colocando el tapón (54) otra vez en el dispositivo de análisis; y

10 sellar el tapón (54) en el dispositivo de análisis con una cinta a prueba de manipulación.
8. El metodo según la reivindicación S, en que el fluido corporal es fluido oral (16) Y la fase de absorción también comprende colocar el dispositivo en la boca (7)

15 de una persona (8), de manera que la almohadilla de recogida de muestras (13) absorba el fluido oral (16).
9. El método según la reivindicación 5, que también comprende la fase de

análisis de confirmación por parte de al menos una cromatografia de gas o una 20 espectrometría de masa.

2A

FIG. I

FIG. 2A

"

3',

RG.2B

5,

RG.2C

RETIRAR AtH:W401HA DE"Rftl:lGID4 DE HLEsrRAS DEL CONTACrOCXJN LA AJ.H();W)1/.1A DE HUESm4S

F/G. 4

F/G. 5

IS

-

IJ

F/G. B

REFERENCIAS CITADAS EN LA DESCRIPCIÓN

Esta lista de referencias citada porel solicitante es solamente para filcilitar la lectura. No

5 forma parte del documento de Patente Europea. Aunque se ha tenido un cuidado

extremado a la hora de recopilar las referencias, no pueden descartarse errores u omisiones, y la EPO se descarga de cualquier responsabilidad a este respecto.

Documentos de patente citados en la descripción
10 . US 63725 16 B I [0016[ . US 636541 7 B, Fleming [0021[ . WO 93 11 434 A [0017[ . US 6248598 B, Bogema [0021[