ES2376459T3 - Procedimiento de diagnóstico de la hipertensión arterial pulmonar. - Google Patents

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Abstract

Procedimiento in vitro de detección de una hipertensión arterial pulmonar (HAP), o de un riesgo de desarrollar una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C en una muestra biológica procedente de un paciente, siendo la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C indicadora de una HAP o de un riesgo de desarrollar una HAP.

Description

Procedimiento de diagnóstico de la hipertensión arterial pulmonar.
La presente invención se refiere al diagnóstico y al seguimiento de una hipertensión arterial pulmonar.
Estado de la técnica:
La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una patología rara responsable de la aparición de descompensación cardiaca derecha que puede dar lugar la muerte. La HAP se define por la puesta en evidencia por cateterismo derecho de una presión arterial pulmonar media superior o igual a 25 mm de Hg en reposo o a 30 mm de Hg con esfuerzo en ausencia de subida de la presión capilar pulmonar (Rubin, 1997). La aparición de una HAP es la consecuencia de una obstrucción crónica de las pequeñas arterias pulmonares secundaria a la proliferación de células endoteliales, de células musculares lisas vasculares y de fibroblastos (Dorfmuller et al, 2003). En particular, durante la HAP severa, se forma una capa de miofibroblastos y de matriz extracelular que se localiza entre el endotelio y el limitante elástico interno, denominada neoíntima, que es característica de esta afección.
La HAP puede aparecer en la evolución de patologías de componente autoinmune que son los conectivos, en particular, la esclerodermia sistémica (Hachulla el al, 2005), el síndrome de Sharp y el lupus eritematoso sistémico. Además, durante la HAP idiopática, se encuentra de vez en cuando otros estigmas de autoinmunidad, a saber anticuerpos antinucleares o anticuerpos antitiroglobulina.
Se relacionó la presencia de anticuerpos anticélulas endoteliales (Tamby et al, 2005) y de anticuerpos antifibroblastes (Tamby et al, 2006) durante la HAP idiopática o se asoció a la esclerodermia sistémica. Sin embargo no se estudió el valor predictivo de estos anticuerpos en la aparición de la HAP y la función potencial de los fenómenos autoinmunes en la patogenia de la HAP idiopática sigue siendo incierta (Mouthon et al, 2005).
En la mayoría de los casos, la HAP se detecta cuando el paciente presenta una disnea de fase III o IV. Cuando se sigue al paciente por una enfermedad crónica como la esclerodermia sistémica, la HAP se detecta por una ecografía cardiaca anual.
Sin embargo, un ensayo simple y fiable de detección de una HAP falta siempre, y sería preciosa para un diagnóstico lo más precoz posible, que permitiría establecer rápidamente estrategias terapéuticas para mejorar el estado del paciente y sus posibilidades de supervivencia.
Resumen de la invención:
La invención proporciona ahora un procedimiento in vitro de detección de una HAP, o de un riesgo de desarrollar una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C (TN-C) en una muestra biológica procedente de un paciente, siendo la presencia de anticuerpos anti-TN-C indicadora de una HAP o de un riesgo de desarrollar una HAP.
Preferentemente, la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C en la muestra biológica se compara con un valor de control, la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C en una cantidad superior al valor de control siendo indicadora de una HAP o de un riesgo de desarrollar una HAP.
Otro objeto de la invención es un procedimiento in vitro de pronóstico o de seguimiento de una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C en una muestra biológica procedente de un paciente, en distintos tiempos, siendo el aumento de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C a lo largo del tiempo indicativo de una agravación de la HAP.
Otro objeto de la invención es un procedimiento in vitro de evaluación de la eficacia de un tratamiento hacia una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C en una muestra biológica procedente de un paciente, en distintos tiempos antes, a lo largo o después del tratamiento, siendo la disminución de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C a lo largo del tiempo indicativo de una mejora de la HAP.
Descripción detallada de la invención:
La TN-C se expresa en el interior y alrededor de los vasos sanguíneos en el pulmón fetal (Rettig et al, 1994), pero no se expresa a continuación ya en las arterias pulmonares adultas normales (Jones et al, 1996). Por otra parte, la pérdida de señalización mediante BMPRII, en el origen de un defecto de células T reguladoras que pueden predisponer a la aparición de una HAP (Nicoles et al, 2005), puede también inducir la expresión de la TN-C in vivo y sobre células vasculares en cultivo (Ihida-Stansbury et al, 2006). Sobre esta base, los inventores emitieron la hipótesis que pacientes que tienen una HAP pueden desarrollar una respuesta inmune dirigida contra la TN-C. Por eso decidieron buscar anticuerpos anti-TN-C en el suero de pacientes afectados por la HAP.
Los inventores así pudieron poner de relieve una correlación entre la aparición de una HAP y la producción de anticuerpos anti-TN-C. Sobre esta base, proponen un procedimiento in vitro de diagnóstico o de pronóstico de una HAP, o de un riesgo de desarrollar una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C en una muestra biológica procedente de un paciente. Los anticuerpos anti-TN-C detectados son preferentemente immunoglobulinas G (IgG).
Definiciones
La Tenascina C (o TN-C) es una glicoproteína de la matriz extracelular. Se conoce también bajo el nombre de hexabraquion o citotactina. Se recoge una secuencia de la TN-C humana en anexo (SEQ ID n° 1).
El término “muestra biológica” se refiere a cualquier muestra biológica procedente de un paciente. Ejemplos de muestras incluyen líquidos biológicos, biopsias de los tejidos orgánicos. De manera preferente, la muestra puede ser de sangre, de suero, de saliva, de orina o de esperma. De manera más preferente, la muestra biológica es una muestra de sangre o de suero.
El término “paciente” se refiere a cualquier sujeto susceptible de ser ensayado. Preferentemente se trata de un humano, pero el término incluye a cualquier otro mamífero, tal como perros, gatos, roedores, ganado, caballos, monos, etc. El paciente puede ser ensayado cualquiera que sea su sexo o su edad. El paciente puede ser un sujeto de riesgo, ser asintomático o presentar signos precoces o avanzadas de una HAP. Por ejemplo, el paciente puede ser un sujeto predispuesto a desarrollar una HAP, en particular un sujeto que lleva uno o varios cambios en el gene codificador para BMPRII.
El término “diagnóstico” significa la identificación de la patología o la evaluación del estado de severidad de la patología.
El término “pronóstico” significa la evaluación del riesgo de agravación, y de sus consecuencias.
El término “valor de control” se refiere a un valor basal que corresponde a la media de los valores obtenidos con la muestra biológica de sujetos sanos, no afectados por una HAP o una enfermedad susceptible de implicar una HAP. Puede tratarse de un valor estadístico de referencia.
Para evaluar la evolución de la patología, puede ser útil ensayar a un paciente y controlar el efecto de un tratamiento
o la evolución de la patología, ensayando de nuevo al paciente, por ejemplo de varios meses de intervalo. En este caso, los resultados del segundo ensayo se comparan con los resultados del primer ensayo, así como a menudo al valor denominado “control”.
Una cantidad de anticuerpos anti-TN-C “superior al valor de control” significa generalmente un aumento estadísticamente significativo, por ejemplo de al menos dos desviaciones estándares por encima de la media de las densidades ópticas de las reactividades IgG del conjunto de los sujetos sanos.
Por “antígeno de captura”, se entiende un antígeno, preferentemente fijado sobre una fase sólida, que es capaz de retener el anticuerpos anti-TN-C presente en una muestra biológica, por enlace afin. El antígeno de captura se puede marcar.
El término “marcado” se refiere tanto a un marcado directo (por medio de enzimas, radioisótopos, fluorocromos, compuestos luminiscentes, etc…) como a un marcado indirecto (por ejemplo, por medio de anticuerpos ellos mismos marcados de manera directa o con la ayuda de reactivos de un “par de afinidad” marcado, tal cual, pero no exclusivamente, el par avidina marcada-biotina, etc…).
Dosificación de los anticuerpos:
La muestra biológica es preferentemente una muestra de suero, diluida a 1/100, o más, por ejemplo a 1/200 o a 1/400.
De manera ventajosa, la cantidad de anticuerpos anti-TN-C puede venir determinada por un inmunoensayo.
La muestra biológica se puede tratar eventualmente en una etapa previa, o se pone directamente en presencia de al menos un antígeno de captura.
El procedimiento según la invención se puede realizar según distintos formatos bien conocidos por el experto en la técnica: en fase sólida o en fase homogénea; en un tiempo o en dos tiempos; en método competitivo, como ejemplos no limitativos.
Según un modo de realización preferido, el antígeno de captura se inmoviliza sobre una fase sólida. Se puede utilizar, como ejemplos no limitativos de fase sólida, microplacas, en particular, microplacas de poliestireno, tales como las comercializadas por la sociedad Nunc, Dinamarca. Se pueden también utilizar partículas o bolas sólidas, bolas paramagnéticas, tales como las proporcionadas por Dynal o Merck-Eurolab (Francia) (bajo la marca EstaporTM), o también tubos de ensayo de poliestireno o polipropileno, etc.
Un formato de inmunoensayo de detección de los anticuerpos por competición es también posible. Otras modalidades de inmunoensayo son también posibles y bien conocidas por el experto en la técnica.
Dosificaciones ELISA, radioinmunoensayos, o cualquier otra técnica de detección se pueden emplear para revelar la presencia de los complejos antígenos-anticuerpos formados.
Según un modo de realización preferido, el procedimiento de la invención incluye la puesta en contacto de una muestra biológica con una proteína que incluye el fragmento de aminoácidos 181 a 290 de la secuencia TN-C humana tal como se representa en SEQ ID N: 1.
En un ejemplo particular, el antígeno de captura, que puede ser una proteína que incluye el fragmento de aminoácidos 181 a 290 de la secuencia TN-C humana, se puede acoplar a un glutatión S transferasa (GST), antes de ser depositado sobre una microplaca.
Se ponen a incubar algunas muestras de suero que se deben probar, previamente diluidos a 1/100, sobre la microplaca. Después del lavado, se añaden algunos anticuerpos anti FCV humano marcados (por ejemplo con una fosfatasa alcalina), siendo los complejos revelados (por ejemplo por adición de un substrato de la fosfatasa cuya incisión se puede detectar por lectura de la absorbancia).
Pacientes contemplados:
Los pacientes contemplados son los susceptibles de desarrollar una HAP.
Se puede tratar de un paciente que sufre un conectivo, tal como una esclerodermia sistémica, de un síndrome de Sharp (que es un conectivo mixto), de un lupus eritematoso sistémico.
El paciente puede también sufrir una HAP idiopática o familiar.
Más generalmente, cualquier paciente afectado por una enfermedad vascular pulmonar puede ser sometido ventajosamente al procedimiento de detección de una HAP tal como se define en la invención.
Por otra parte, la HAP detectada puede ser también una hipertensión porto-pulmonar (es decir, una HAP asociada a una hipertensión portal), o puede estar asociada a una cardiopatía congénita, o a una infección por el virus de la immunodeficiencia humana (VIH), o también puede ser una hipertensión pulmonar post embólica, que complica la evolución de una bronquitis crónica obstructiva o de una cardiopatía cianógena.
Otros pacientes contemplados son los expuestos a algunos medicamentos supresores del apetito tal como la fenfluramina cuya prescripción puede contribuir a la aparición de una HAP.
Otras personas susceptibles de beneficiarse de este tipo de ensayo son las portadoras de una mutación en el gen codificador para BMPRII y que eventualmente no presentan HAP detectable con la ecografía, de tal modo que detecten a los individuos susceptibles de desarrollar posteriormente una HAP.
Evaluación de la eficacia de un tratamiento
Otro objeto de la invención es un procedimiento in vitro de evaluación de la eficacia de un tratamiento hacia una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C en una muestra biológica procedente de un paciente, en distintos tiempos antes, a lo largo o después del tratamiento, siendo la disminución de la cantidad de anticuerpos anti-TN-C a lo largo del tiempo indicativo de una mejora de la HAP.
El tratamiento clásico actual de la HAP asocia un tratamiento sintomático y un tratamiento vasodilatador. El tratamiento sintomático asocia anticoagulantes, una oxigenoterapia y diuréticos. El tratamiento vasodilatador se basa en las siguientes moléculas: bloqueadores de canales calcio, epoprostenol (prostaciclina) prescrito por vía intravenosa en perfusión continua, los inhibidores de los receptores de la endotelina, selectivos o no, en particular el bosentan, el sitaxentan y el ambrisentan, los inhibidores de las fosfodiesterasas de tipo 5 en particular el sildenafil, siendo el conjunto de estos medicamentos administrados por vía oral, el iloprost inhalado, similar a la prostaciclina administrado por vía inhalada. Estos tratamientos se pueden combinar eventualmente. En caso de fracaso de estas terapias, se puede proponer un trasplante pulmonar o de corazón-pulmón.
Las figuras y ejemplos siguientes ilustran la invención sin limitar el alcance.
Leyenda de las figuras:
La figura 1 es un gráfico que muestra la detección de los anticuerpos anti-TN-C por dosificación ELISA. Los IgG serosos de los pacientes afectados por HAP idiopática, de los pacientes afectados por esclerodermia sistémica y los sujetos sanos apareados por sexo y edad, se ensayaron frente a un fragmento de TN-C que recombinante, a una dilución de 1/100. Los límites inferiores y superiores de la zona en punteado representan los umbrales definidos por dos y tres veces la desviación tipo por encima de la media de las densidades ópticas obtenidas en los sujetos sanos.
Se estiman las diferencias significativas entre los grupos de enfermos y los sujetos sanos con la ayuda de un ensayo de rango de Mann Whitney y se indican como:
*: p < 0,01
**: p< 0,001.
La figura 2 representa curvas de supervivencia según Kaplan y Meier en función de la presencia o la ausencia de anticuerpos anti-TN-C. En abscisa, el tiempo en meses; en ordenada, la supervivencia acumulada en porcentaje.
Ejemplo: Detección de anticuerpos anti-Tenascina C en pacientes afectados de hipertensión arterial pulmonar.
Materiales y procedimientos:
Pacientes
La HAP fue detectada por la puesta en evidencia por ecografía cardíaca trans-torácica de una presión arterial pulmonar sistólica superior a 40 mm de Hg. En todos los casos, la HAP fue confirmada por la realización de un cateterismo derecho y la puesta en evidencia de una presión arterial pulmonar media superior o igual a 25 mm de Hg en reposo y a 30 mm de Hg en esfuerzo. Por convenio, se calificaba la HAP de idiopática si el paciente no mostraba ninguna patología asociada, pudiendo la HAP entonces corresponder a una HAP esporádico, familiar o asociada a una exposición a la fenfluramina. Se incluyeron 91 pacientes en el estudio que comprendía a 66 (72,5%) pacientes que tenían una HAP idiopática (IHAPI) y 25 pacientes que tenían una esclerodermia sistémica que respondía a los criterios del American College of Rheumatology (ACR) y/o a los criterios de LeRoy y Medsger (Masi et al, 1980; LeRoy et al, 2001).
Todos los pacientes que tenían una esclerodermia sistémica difusa sin HAP tenían un ataque intersticial pulmonar puesto en evidencia por un escáner torácico de alta resolución y una capacidad vital inferior al 80% del valor predicho y/o un coeficiente de transferencia del monóxido de carbono (KCO) inferior a 75% del valor predicho. Ninguno de los pacientes que no recibió corticoides o inmunosupresores en el momento de las extracciones, ningún de ellos tenían tumor sólido u otro conectivo asociado. Se utilizaron 46 sujetos sanos apareados por sexo y edad como controles.
Dosificación ELISA
La Tenascina C (TN-C) se obtuvo ante la sociedad Abnova (Abnova Corporation, Taipei City, Taiwán). El antígeno utilizado fue constituido del fragmento 181 a 290 de la TN-C (SEQ ID n° 1), acoplado a un resto GST. Se diluyó la TN-C en un tampón de bicarbonato y se depositó sobre placas 96 pocillos (Maxisorb, NalgeNunc Int. Rochester, NY, EE.UU.) a una concentración final de 4 µg/mL a 4°C. Los sueros de pacientes y sujetos sanos se diluyeron a 1/100 en un tampón fosfato (PBS) a 1% de albúmina y se incubaron durante una hora a 37°C. Después de un lavado, de
los anticuerpos de conejo antiFcV humano conjugados con fosfatasa alcalina (Oakocytomation, Golstrup,
Dinamarca), se han añadido y se han incubado durante una hora a temperatura ambiente. Las reactividades fueron reveladas por adición de p-nitrofenilfosfato a 0,05 M en un tampón de carbonato de magnesio (pH 9,8) y se determinó la absorbencia a 405 nm utilizando un lector de placas ELISA (Fusión, Packard BioScience, Meriden, CT, EE.UU.). Con el fin de tener en cuenta la variabilidad entre los pocillos, la densidad óptica de un suero de referencia se definía arbitrariamente como un 100% de la actividad anti-TN C. los resultados de las muestras ensayadas se calculó a partir de la media de la absorbencia de pocillos duplicados y expresada como un porcentaje de este valor de referencia. Se ensayaron todas las muestras por duplicado.
Análisis estadísticos
Se efectuaron todos los análisis estadísticos utilizando el programa informático Systat (versión 11.0 Systat Software Inc, Point Richmond, CA, EE.UU.). Se utilizó un ensayo de Mann-Whitney para comparar las densidades ópticas relativas de los distintos grupos. Se consideran algunos valores de P inferiores a 0,05 como estadísticamente significativos. La supervivencia fue calculada por el método de Kaplan y Meier (Kaplan and Meier, 1958).
Resultados:
Las reactividades de los IgG de los pacientes afectados por HAP idiopática, de los pacientes afectados por esclerodermia sistémica con o sin HAP y de los sujetos controles frente a la TN-C se han estudiado por ELISA. Al utilizar un umbral definido por dos desviaciones estándares por encima de la media de las densidades ópticas de las reactividades IgG del conjunto de los sujetos sanos, 36/66 (54,5%) pacientes que tienen una HAP idiopática y 2/25 (8%) de los pacientes esclerodérmicos tenían IgG anti-TN-C. Ningún de los sujetos sanos tenía IgG anti-TN-C (Figura 1). Cuando el umbral se desplazaba a tres desviaciones estándares por encima de la media de las reactividades IgG de los individuos sanos, 12/66 (18,1%) de los pacientes que tenían una HAP idiopática tenía IgG anti TN C y ningún paciente esclerodérmico tenía IgG anti TN C. Las reactividades del IgG séricas de los anticuerpos anti TN C de pacientes que tenían una HAP idiopática eran significativamente más elevadas que las de los pacientes esclerodérmicos (p < 0,001), y que las de los sujetos sanos (p < 0,001). De la misma forma, las reactividades de los IgG séricas de los anticuerpos anti TN C de pacientes esclerodérmicos eran significativamente más elevadas que las de los individuos sanos (p = 0,021) (Figura 1).
No se puso en evidencia una diferencia significativa en la presentación clínica y los datos de la ecografía cardíaca, el cateterismo derecho y el ensayo de marcha de 6 minutos entre los dos grupos de pacientes. La supervivencia disminuyó en el grupo de los enfermos que tenían anticuerpos anti TN C comparativamente con los enfermos que no tenían anticuerpos anti TN C sin que por ello esta diferencia no sea significativa aquí (p = 0,17).
La aparición de una respuesta inmune dirigida contra la TN C podría resultar de los mismos mecanismos que la que conduce a la inducción de la expresión de la TN C y a la proliferación de las células musculares lisas. La presencia de anticuerpos anti TN C se correlacionaría por lo tanto con la aparición de un remodelado vascular, que constituye un marcador de la aparición de una HAP.
Referencias bibliográficas
-
Dorfinuller et al, 2003, Eur Respir J, 22 (2): 358-63
-
Hachulla et al, 2005, Arthritis Rheum 52 (12): 3792-3800
-Ihida-Stansbury et al, 2006, Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 291 (4): L694-702
-
Jones et al, 1996, Circ Res 79 (6): 1131-42
-
Kaplan and Meier, 1958, J Am Stat Assoc 53: 457-81
-
LeRoy et al, 2001, J Rheumatol 28 (7): 1573-76
-
Masi et al, 1980, Arthr Rheum 23: 581-90
-
Mouthon et al, 2005, Eur Respir J 26 (6): 986-8
-
Nicolls et al, 2005, Eur Respir J 26 (6) 1110-8
-
Rettig et al, 1994, J Cell Sci; 107 (Pt 2): 487-97
-
Rubin, 1997, N Engl J Med, 336 (2): 111-7
-
Tamby et al, 2005, Thorax 60 (9): 765-72
-
Tamby et al, 2006, Eur Respir J 28 (4): 799-807 LISTA DE SECUENCIAS
<110> Asistencia pública Hospitales de Paris
<120> Procedimiento de diagnóstico de una hipertensión arterial pulmonar
<130> B0700
<160> 1 10 <170> PatentIn versión 3.3
<210> 1
<211> 2201
<212> PRT 15 <213> Homo sapiens
<220>
<221> CARACTER�?STICA MISCEL�?NEA
<222> (181)… (290) 20 <223> fragmento antigénico
<400> 1

Claims (15)

  1. REIVINDICACIONES
    1.-Procedimiento in vitro de detección de una hipertensión arterial pulmonar (HAP), o de un riesgo de desarrollar una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C en una muestra biológica procedente de un paciente, siendo la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C indicadora de una HAP o de un riesgo de desarrollar una HAP.
  2. 2.-Procedimiento según la reivindicación 1, en el cual la muestra biológica es una muestra de sangre o de suero.
  3. 3.-Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en el cual la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C en la muestra biológica se compara con un valor de control, siendo la presencia de anticuerpos anti-Tenascina C en una cantidad superior al valor de control indicadora de una HAP o de un riesgo de desarrollar una HAP.
  4. 4.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el cual la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C viene determinada por un inmunoensayo.
  5. 5.-Procedimiento según la reivindicación 4, en el cual el inmunoensayo es una dosificación ELISA.
  6. 6.-Procedimiento según la reivindicación 4 ó 5, que incluye la puesta en contacto de una muestra biológica con una proteína que incluye el fragmento de aminoácidos 181 a 290 de la secuencia Tenascina C humana tal como se representa en SEQ ID N: 1.
  7. 7.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el cual el paciente es un humano.
  8. 8.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual el paciente sufre de una esclerodermia sistémica.
  9. 9.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual el paciente sufre de un síndrome de Sharp.
  10. 10.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual el paciente sufre de un lupus eritematoso sistémico.
  11. 11.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual el paciente sufre de una HAP idiopática.
  12. 12.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual la HAP se asocia a una hipertensión portal, a una cardiopatía congénita o a una infección por el virus de la immunodeficiencia humana (VIH),
    o es una hipertensión pulmonar post embólica.
  13. 13.-Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el cual el paciente es un sujeto predispuesto a desarrollar una HAP, siendo dicho sujeto preferentemente portador de una o varias mutación(ones) en el gen codificador para BMPRII.
  14. 14.-Procedimiento in vitro de pronóstico o seguimiento de una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C en una muestra biológica procedente de un paciente, en distintos tiempos, siendo el aumento de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C a lo largo del tiempo indicativa de una agravación de la HAP.
  15. 15.-Procedimiento in vitro de evaluación de la eficacia de un tratamiento para una HAP, que incluye la determinación de la presencia y/o de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C en una muestra biológica procedente de un paciente, en distintos tiempos antes, a lo largo o después del tratamiento, siendo la disminución de la cantidad de anticuerpos anti-Tenascina C a lo largo del tiempo indicativa de una mejora de la HAP.
    Densidad óptica relativa
    Figura 1
    Sujeto Sano
    Supervivencia acumulada (negativa)
    Eventos (negativo)
    Supervivencia acumulada (positiva)
    Eventos (positivo)
    Tiempo (meses)
    Figura 2
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2964314B1 (fr) * 2010-09-02 2013-06-28 Assist Publ Hopitaux De Paris Score predictif du risque de survenue d'hypertension arterielle pulmonaire chez des patients atteints de sclerodermie systemique.
CA2894746A1 (en) * 2011-12-12 2013-06-20 Isis Innovation Limited Biomarker and use thereof
WO2014067965A1 (en) * 2012-10-29 2014-05-08 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Methods of predicting or diagnosing a pulmonary arterial hypertension
US9603890B2 (en) 2012-12-03 2017-03-28 Vascular Biosciences Methods for increasing the selective efficacy of gene therapy using CAR peptide and heparan-sulfate mediated macropinocytosis
JP6116938B2 (ja) * 2013-02-28 2017-04-19 学校法人順天堂 新規な肺高血圧症のマーカー

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4880750A (en) * 1987-07-09 1989-11-14 Miragen, Inc. Individual-specific antibody identification methods
WO1999043308A2 (en) * 1998-02-27 1999-09-02 Marlene Rabinovitch Treating pulmonary hypertension through tenascin suppression and elastase inhibition
DE19939575C1 (de) * 1999-08-20 2001-08-02 Orgentec Diagnostika Gmbh Verfahren zur Diagnose von Sjögren-Syndrom
JP3646159B2 (ja) * 2001-02-08 2005-05-11 国立大学法人三重大学 抗テネイシンｃモノクローナル抗体及び当該抗体を産生するハイブリドーマ
US6989276B2 (en) * 2001-05-10 2006-01-24 Battelle Energy Alliance, Llc Rapid classification of biological components
SI1478667T1 (sl) * 2002-02-26 2010-12-31 Sigma Tau Ind Farmaceuti Monoklonski protitelesni anti-äśloveĺ ki tenascin
WO2005009366A2 (en) * 2003-07-24 2005-02-03 Cornell Research Foundation, Inc. Restoring vascular function
WO2007123976A2 (en) * 2006-04-18 2007-11-01 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Antibody profiling for determination of patient responsiveness
WO2009123730A1 (en) * 2008-04-02 2009-10-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for diagnosis and prognosis of pulmonary hypertension

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