ES2371877A1 - Célula electrolítica para estudio de la interfase formada por un implante metálico en medio celular y procedimiento de utilización de dicha célula electrolítica. - Google Patents
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Abstract
Célula electrolítica para estudio de la interfase formada por un implante metálico en medio celular y procedimiento de utilización de dicha célula electrolítica.Célula electrolítica (1) para estudio de la interfase formada por un implante metálico en medio celular y procedimiento de utilización de dicha célula electrolítica (1), comprendiendo la célula electrolítica (1) una base (2), un electrodo de trabajo (4) horizontal; una conexión eléctrica para el electrodo de trabajo (4); unos medios de sujeción del electrodo de trabajo (4); una cubierta (5) hermética; y una pluralidad de bocas para electrodos (6) y para adición (9) del medio celular. El procedimiento comprende esterilizar los componentes de la célula electrolítica (1); montarla en una campana de flujo laminar, añadiendo parte del medio celular; introducirla en un incubador; volver a introducirla en la campana de flujo laminar, añadiendo el resto del medio celular; conectar unos medios de termostatización; suministrar una atmósfera de aire con CO2; y conectar los electrodos (4, 20, 21) a un potenciostato.
Description
Célula electrolítica para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular y
procedimiento de utilización de dicha célula electrolítica.
El objeto principal de la presente invención
consiste en una célula electrolítica para estudio de la interfase
formada por un implante metálico en medio celular y procedimiento de
utilización de dicha célula electrolítica, utilizables para evaluar
el comportamiento frente a la corrosión y las propiedades de la
interfase electroquímica de biomateriales metálicos mediante medidas
electroquímicas in situ.
Las medidas electroquímicas in situ para
evaluar el comportamiento frente a la corrosión y las propiedades de
la interfase electroquímica de biomateriales metálicos y los medios
fisiológicos son métodos muy utilizados.
Los biomateriales metálicos se emplean en
diversas aplicaciones: como vástagos de prótesis parciales o totales
de cadera, implantes dentales, sustituciones en las uniones de
vértebras, placas craneales, etc.
Entre los distintos tipos de biomateriales
metálicos convencionales, se pueden utilizar el Ti y sus aleaciones,
acero inoxidable y aleaciones de base Co. El Cu modificado
superficialmente, micro y/o nanoestructurado se puede utilizar en
aplicaciones en dispositivos intrauterinos. Como materiales
metálicos en vías de desarrollo, también se estudia el Mg y sus
aleaciones en aplicaciones como dispositivos cardiovasculares, para
sintetizar fracturas y/o como material de relleno en cavidades
óseas.
Es necesario experimentar y estudiar la
interfase que se forma entre los posibles biomateriales metálicos y
los distintos medios celulares donde pueden ser utilizados. Así por
ejemplo, se ensayan líneas celulares que se encuentran en el entorno
fisiológico en el que va a ser implantado el biomaterial, tales como
líneas celulares procedentes de tejido óseo, líneas establecidas de
fibroblastos, líneas celulares endoteliales, líneas celulares
procedentes del endometrio (CHO-K1, procedentes de
ovario de hamster) y/o líneas celulares del sistema inmune. En
general, cualquier biomaterial metálico (modificado, recubierto o
funcionalizado) debería ser ensayado en presencia de las células del
entorno biológico (osteoblastos, fibroblastos, etc).
Los estudios de comportamiento frente a la
corrosión de biomateriales metálicos se llevan a cabo mediante
células electrolíticas convencionales, que básicamente constan de un
recipiente en el que se dispone un electrodo de trabajo del
biomaterial en contacto directo con una solución que contiene las
células, estudiando la interfase que se forma entre el biomaterial y
la solución, mediante la medición de diversos parámetros
electroquímicos, tales como el potencial de corrosión, resistencia
de polarización y/o impedancia electroquímica. En la actualidad,
estas células electrolíticas comprenden un cuerpo de vidrio con dos
partes consistentes en un tronco y una cabeza, ubicándose en la
cabeza los necesarios electrodos de referencia y auxiliar que se
emplean para efectuar las mediciones electroquímicas.
Las células electrolíticas con la configuración
descrita no permiten el estudio in situ del comportamiento
frente a la corrosión de biomateriales metálicos en contacto con el
medio celular, ya que el electrodo de referencia, normalmente de
calomelanos o de cloruro de plata, no soporta las elevadas
temperaturas de esterilización y la experimentación no se realiza en
un medio completamente esterilizado.
Otro inconveniente de las células electrolíticas
convencionales es la disposición vertical del electrodo de trabajo
objeto de estudio, es decir el biomaterial metálico, que
imposibilita la adhesión celular y por tanto el estudio del
mecanismo y cinética de corrosión del biomaterial en contacto con el
medio celular.
La célula electrolítica de la invención sirve de
una manera óptima para llevar a cabo estudios de la interfase de un
biomaterial con el medio celular en el que está destinado a
implantarse, subsanando las deficiencias descritas.
La célula electrolítica de la invención
presenta, entre otras, las siguientes ventajas:
- 1)
- El electrodo de trabajo, esto es el biomaterial metálico a estudiar, se coloca horizontalmente, lo cual favorece la adhesión celular.
- 2)
- Toda la célula electrolítica con los electrodos de referencia y auxiliar pueden ser esterilizados en un autoclave para evitar la contaminación bacteriana.
- 3)
- Es posible estudiar in situ la proliferación, crecimiento y recubrimiento de las células sobre las superficies de los implantes metálicos durante varios días puesto que dispone de medios para mantener las células vivas durante este tiempo.
\vskip1.000000\baselineskip
De acuerdo con la invención, la célula
electrolítica comprende una base; al menos, un electrodo de trabajo
de biomaterial metálico sujetable horizontalmente en dicha base; una
conexión eléctrica accesible exteriormente para el electrodo de
trabajo; unos medios de sujeción horizontal del electrodo de trabajo
en la base de modo que quede en contacto eléctrico con la conexión
eléctrica accesible exteriormente; una cubierta de cierre dispuesta
sobre el electrodo de trabajo, provista de medios de cierre
herméticos; y una pluralidad de bocas para electrodos y adición del
medio celular.
Por cada electrodo de trabajo de biomaterial
metálico a estudiar, se emplea un electrodo de referencia, y un
electrodo auxiliar, para su conexión a un potenciostato en una
configuración de tres electrodos. Así, el electrodo de referencia
mide el potencial al que está el implante, y el electrodo auxiliar
recoge la corriente procedente del electrodo de trabajo. El
electrodo de trabajo es fácilmente desmontable y montable desde el
exterior de la célula electrolítica.
La célula electrolítica de la invención también
puede comprender unas bocas de entrada y salida para gases, que
serán utilizadas para proporcionar una atmósfera con un porcentaje
en CO_{2} conveniente para la preservación con vida de las
células; y también unos medios de termostatización del medio
celular, mediante los que igualmente se consigue mantener la vida de
las células hasta finalizar el ensayo.
Para complementar la descripción que se está
realizando y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las
características de la invención, de acuerdo con un ejemplo
preferente de realización práctica de la misma, se acompaña como
parte integrante de dicha descripción, un juego de dibujos en donde
con carácter ilustrativo y no limitativo, se ha representado lo
siguiente:
Figura 1.- Muestra un alzado de conjunto montado
de la célula electrolítica de la invención, seccionado por un plano
vertical que pasa por dos bocas para electrodos.
Figura 2.- Muestra una vista en planta de la
base de la célula electrolítica de la invención.
Figura 3.- Muestra una vista en planta del
prensor de la célula electrolítica de la invención.
Figura 4.- Muestra una vista en alzado
seccionado de un despiece del conjunto
base-prensor-conexión eléctrica o
chapa de cobre-electrodo de
trabajo-junta del prensor.
Figura 5.- Muestra una vista en alzado de la
cubierta de la célula electrolítica de la invención.
Figura 6.- Muestra una vista en planta de la
cubierta de la célula electrolítica de la invención.
Figura 7.- Muestra una vista de la cubierta de
la célula electrolítica de la invención según un alzado seccionado
por un plano que pasa por las conexiones de entrada y salida de la
cámara de circulación del fluido termostatizador.
La célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular de la
invención comprende: una base (2); un electrodo de trabajo (4), que
se trata concretamente de una porción del biomaterial metálico a
estudiar, sujetable horizontalmente en dicha base (2); una conexión
eléctrica accesible exteriormente para dicho electrodo de trabajo
(4), e implementada en este ejemplo de la invención mediante una
chapa de cobre (3), dispuesta inferiormente y en contacto respecto a
dicho electrodo de trabajo (4), y que sobresale exteriormente de la
base (2); unos medios de sujeción horizontal en la base (2) del
electrodo de trabajo (4), de modo que quede en contacto con la
conexión eléctrica accesible exteriormente con la chapa de cobre
(3); una cubierta (5) de cierre dispuesta sobre el electrodo de
trabajo (4), y provista de medios de cierre herméticos; y una
pluralidad de bocas para electrodos (6), y bocas de adición (9) del
medio celular. Esta configuración permite a la célula electrolítica
(1) realizar el cultivo celular y las medidas electroquímicas
simultáneamente.
Adicionalmente también puede comprender unos
medios de termostatización del medio celular y/o unas bocas de
entrada y salida (7) para gases, que cooperen en mantener unas
condiciones de temperatura y atmósfera favorables para mantener las
células vivas durante varios días y por tanto realizar las medidas
que requiera el análisis durante este período. A través de las bocas
de entrada y salida (7) para gases se suministra una atmósfera con
un porcentaje adecuado en CO_{2} para mantener la vida celular.
Este porcentaje en CO_{2} en general es del 5% en cualquier línea
celular.
La conexión eléctrica del electrodo de trabajo
se realiza a través de una pinza, no representada, acoplable con
comodidad a la chapa de cobre (3) por el exterior de la célula
electrolítica (1).
Los medios de sujeción horizontal del electrodo
de trabajo (4) en la base (2) comprenden un prensor (10) horizontal
que lo sujeta firmemente en contacto con la chapa de cobre (3).
Dicho prensor (10) implementa una ventana de exposición (11)
superior, y cubre íntegramente el electrodo de trabajo (4) por el
interior de la célula electrolítica (1), a excepción del área
coincidente con la ventana de exposición (11). También se ha
previsto la disposición de una junta del prensor (12), dispuesta
sobre dicho electrodo de trabajo (4) y circundando la ventana de
exposición (11), y unos medios de apriete del prensor (10) sobre la
base (2). De este modo se puede delimitar el área del electrodo de
trabajo (4) que queda expuesta al medio celular, y que será la
definida por el contorno de la junta del prensor (12). Además, la
ventana de exposición (11) tiene sus paredes (11a) inclinadas
formando un ángulo de, al menos, 45 grados con la horizontal.
Gracias a esta pendiente las células presentes en el medio celular
deslizan hacia la superficie expuesta de la electrodo de trabajo
(4), con el fin de asegurar que todas las células se encuentran
sobre el electrodo de trabajo o biomaterial metálico objeto de
estudio. Su forma es preferentemente circular, para evitar la
aparición de aristas en sus paredes (11a).
Los medios de apriete del prensor (10)
comprenden unas bridas (13) previstas en la base (2) y en el prensor
(10), y unos vástagos de apriete, no representados, que pasan por
dichas bridas (13).
Por su parte, los medios de cierre herméticos de
la cubierta (5) comprenden una rosca (14) implementada en la
cubierta (5), otra rosca complementaria (15) implementada en el
prensor (10) y, al menos, una junta de la cubierta (16). En este
ejemplo de la invención, la rosca complementaria (15) comprende una
rosca hembra implementada en un cuello (30) emergente del prensor
(10), donde se acopla la rosca (14) macho implementada en la parte
extrema inferior exterior de la cubierta (5). Gracias al cuello
(30) se permite introducir una primera parte del volumen del medio
celular antes de acoplar la cubierta (5).
Los medios de termostatización del medio celular
comprenden una cámara (17) de circulación de un fluido
termostatizador, dotada de conexiones de entrada (18) y conexiones
de salida (19) para dicho fluido, procedente de un baño
termostatizado. Esta cámara se encuentra idealmente implementada
periféricamente en la cubierta (5), en constitución monobloque,
mientras que las conexiones de entrada (18) se encuentran
prolongadas en sentido descendente por el interior de la misma para
que se favorezca la circulación del fluido (la circulación es
forzada por una bomba) y el intercambio homogéneo de calor.
Para trabajar con aplicaciones electroquímicas,
la célula electrolítica (1) de la invención, según el ejemplo
mostrado en las figuras, comprende la disposición de un electrodo de
referencia (20) y un electrodo auxiliar (21), en las bocas para
electrodos (6). Electrodo de referencia (20) comprende un alambre
esencialmente recto, esto es, sin cambios bruscos o significativos
de dirección a lo largo del mismo más que para adaptarse a la forma
interior de la célula electrolítica (1); mientras que el electrodo
auxiliar (21) comprende un alambre enrollado sobre sí mismo, para
que su área sea varias veces mayor que la del electrodo de trabajo
(4) a fin de evitar polarizaciones. Ambos tipos de electrodos se
encuentran sustentados y sellados en tapones (22) con medios de
acoplamiento sin fugas en las bocas para electrodos (6), disponiendo
de terminales exteriores (23) para conexión. Los medios de
acoplamiento sin fugas de los tapones (22) comprenden normalmente
conos (24) para ajuste en las bocas para electrodos (6). Así se
permite sustituir con facilidad y repetidamente los electrodos (20,
21).
Los elementos comprendidos en la constitución de
la célula electrolítica (1) de la invención, y descritos
anteriormente, están preferentemente constituidos en materiales
resistentes a temperaturas de esterilización en autoclave, esto es,
de al menos 120 grados centígrados. De este modo, la cubierta (5) y
la cámara (17) de circulación del fluido termostatizador,
implementada conjuntamente con la misma en constitución monobloque,
está constituida en vidrio borosilicatado, que además permite ver la
superficie del electrodo de trabajo (4) durante los trabajos,
utilizando preferentemente agua o cualquier otro fluido transparente
como fluido termostatizador. Igualmente, los tapones (22) están
constituidos en vidrio borosilicatado.
Por su parte, la base (2) y el prensor (10)
están constituidos en politetrafluoretileno, material que además
presenta una adherencia celular muy baja.
La junta de cubierta (16) y la junta de prensor
(12) están constituidas en silicona, que es un material que además
propicia una alta supervivencia celular en comparación con otros
materiales.
El electrodo de referencia (20) y el electrodo
auxiliar (21) están constituidos en metales preferentemente inertes,
y muy preferentemente en platino de 99,99% de pureza. El electrodo
de trabajo (4) requerirá esterilización por otros medios.
El procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) de la invención comprende:
- Esterilizar los componentes de la célula
electrolítica (1).
- Montar la célula electrolítica (1) en
condiciones de esterilidad en una campana de flujo laminar,
añadiendo durante el montaje una primera parte del volumen del medio
celular.
- Extraer la célula electrolítica (1) montada, e
introducirla en un incubador durante, al menos, 30 minutos para
favorecer las etapas iniciales de adhesión.
- Extraer la célula electrolítica (1) del
incubador y volver a introducirla en la campana de flujo laminar,
añadiendo resto de volumen del medio celular.
- Conectar los medios de termostatización.
- Suministrar atmósfera de aire con CO_{2},
idealmente al 5% de CO_{2} en volumen, a través de las bocas de
entrada y salida (7) para gases.
- Conectar los electrodos (4, 20, 21) a un
potenciostato en configuración de tres electrodos, para proceder con
las medidas electroquímicas.
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Dichas medidas electroquímicas comprenden la
medición del potencial de corrosión, resistencia de polarización y/o
impedancia electroquímica.
La etapa de montaje de la célula electrolítica
(1) en el interior de la campana de flujo laminar comprende las
etapas de:
- Montar la chapa de cobre (3) y sobre ella el
electrodo de trabajo (4), y fijar el prensor (10).
- Añadir la primera parte del volumen del medio
celular.
- Acoplar la cubierta (5).
- Insertar el electrodo de referencia (20) y el
electrodo auxiliar (21).
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La esterilización de la célula electrolítica (1)
comprende las etapas de:
- Envolver los componentes de la célula,
incluyendo el electrodo de referencia (20) y el electrodo auxiliar
(21) en papel de aluminio, disponiendo cinta adhesiva
termoseñaladora de alcance de la temperatura de esterilización.
- Esterilizar en autoclave a 120 grados
centígrados durante, al menos, 20 minutos.
- Esterilizar el electrodo de trabajo (20) bajo
luz ultravioleta durante un tiempo comprendido entre 4 y 6
horas.
Claims (30)
1. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular
caracterizada porque comprende: una base (2), un electrodo de
trabajo (4) de biomaterial metálico sujetable horizontalmente en
dicha base (2); una conexión eléctrica accesible exteriormente para
dicho electrodo de trabajo (4); unos medios de sujeción horizontal
en la base (2) del electrodo de trabajo (4) en contacto eléctrico
con la conexión eléctrica accesible exteriormente; una cubierta (5)
de cierre dispuesta sobre el electrodo de trabajo (4), y provista de
medios de cierre herméticos; y una pluralidad de bocas para
electrodos (6) y de bocas de adición (9) del medio celular.
2. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 1 caracterizada porque adicionalmente
comprende bocas de entrada y salida (7) para gases.
3. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicaciones 1 o 2 caracterizada porque adicionalmente
comprende unos medios de termostatización del medio celular.
4. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque los medios de sujeción horizontal en la base (2) del
electrodo de trabajo (4) comprenden: un prensor (10) horizontal que
se encuentra cubriendo íntegramente el electrodo de trabajo (4); una
ventana de exposición (11) superior implementada en dicho prensor
(10); una junta del prensor (12), dispuesta sobre dicho electrodo de
trabajo (4) y circundando la ventana de exposición (11) en orden a
exponer un área determinada de dicha electrodo de trabajo (4) al
medio celular; y unos medios de apriete del prensor (10) sobre la
base (2).
5. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 4 caracterizada porque los medios de apriete
del prensor (10) comprenden unas bridas (13) dispuestas en la base
(2) y en el prensor (10), y unos vástagos de apriete que pasan por
dichas bridas (13).
6. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicaciones 4 o 5 caracterizada porque la ventana de
exposición (11) tiene sus paredes (11a) inclinadas formando un
ángulo de, al menos, 45 grados con la horizontal.
7. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6 caracterizada porque
la ventana de exposición (11) tiene forma circular.
8. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque los medios de cierre herméticos de la cubierto (5) comprenden
una rosca (14) implementada en la cubierta (5), otra rosca
complementaria (15) implementada en el prensor (10) y, al menos, una
junta de la cubierta (16).
9. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 8 caracterizada porque la rosca complementaria
(15) comprende una rosca hembra implementada en un cuello (30)
emergente del prensor (10), donde se acopla la rosca (14) macho que
se encuentra implementada en la parte extrema inferior exterior de
la cubierta (5).
10. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 3 a 9 caracterizada porque
los medios de termostatización del medio celular comprenden una
cámara (17) de circulación de un fluido termostatizador, dotada de
conexiones de entrada (18) y conexiones de salida (19) para dicho
fluido.
11. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 10 caracterizada porque la cámara (17) se
encuentra implementada periféricamente en la cubierta (5) en
constitución monobloque.
12. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicaciones 10 o 11 caracterizada porque las conexiones
de entrada (18) de la cámara (17) se encuentran prolongadas en
sentido descendente por el interior de la misma.
13. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque comprende, al menos, un electrodo de referencia (20) y, al
menos, un electrodo auxiliar (21) dispuestos en dos de las bocas
para electrodos (6).
14. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 13 caracterizada porque el electrodo de
referencia (20) comprende un alambre esencialmente
recto.
recto.
\newpage
15. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicaciones 13 o 14 caracterizada porque el electrodo
auxiliar (21) comprende un alambre enrollado sobre sí mismo.
16. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15 caracterizada
porque el electrodo de referencia (20) y el electrodo auxiliar (21)
se encuentran sustentados y sellados en tapones (22) con medios de
acoplamiento sin fugas en las bocas para electrodos (6), disponiendo
de terminales exteriores (23).
17. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 16 caracterizada porque los medios de
acoplamiento sin fugas de los tapones (22) comprender conos (24)
para ajuste en las bocas para electrodos (6).
18. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque las bocas para electrodos (6), las bocas de adición (9) y/o
las bocas de entrada y salida (7) de gases se encuentran
implementadas en la cubierta (5).
19. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque la base (2), la cubierta (5), el prensor (10), el electrodo
de referencia (20), el electrodo auxiliar (21), la junta del prensor
(12) y/o la junta de la cubierta (16) están constituidas en
materiales resistentes a temperaturas de esterilización en
autoclave.
20. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicación 19 caracterizada porque la cubierta (5) está
constituida en vidrio borosilicatado.
21. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
reivindicaciones 19 o 20 caracterizada porque los tapones
(22) están constituidos en vidrio borosilicatado.
22. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 19 a 21 caracterizada
porque la base (2) y el prensor (10) están constituidos en
politetrafluoretileno.
23. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22 caracterizada
porque la junta de cubierta (16) y la junta de prensor (12) están
constituidas en silicona.
24. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23 caracterizada
porque el electrodo de referencia (20) y el electrodo auxiliar (21)
están constituidos en platino de 99,99% de pureza.
25. Célula electrolítica (1) para estudio de la
interfase formada por un implante metálico en medio celular según
cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada
porque la conexión eléctrica accesible exteriormente para el
electrodo de trabajo (4) comprende una chapa de cobre (3) dispuesta
inferiormente y en contacto respecto a dicho electrodo de trabajo
(4), y que se encuentra sobresaliendo exteriormente de la base
(2).
26. Procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) caracterizado porque comprende:
- Esterilizar los componentes de la célula
electrolítica (1).
- Montar la célula electrolítica (1) en
condiciones de esterilidad en una campana de flujo laminar,
añadiendo durante el montaje una primera parte del volumen del medio
celular.
- Extraer la célula electrolítica (1) montada, e
introducirla en un incubador durante, al menos, 30 minutos.
- Extraer la célula electrolítica (1) del
incubador y volver a introducirla en la campana de flujo laminar,
añadiendo resto de volumen del medio celular.
- Conectar los medios de termostatización.
- Suministrar una atmósfera de aire con CO_{2}
a través de las bocas de entrada y salida (7) para gases.
- Conectar los electrodos (4, 20, 21) a un
potenciostato en configuración de tres electrodos, para proceder con
las medidas electroquímicas.
\vskip1.000000\baselineskip
27. Procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) según reivindicación 26 caracterizado
porque la atmósfera de aire con CO_{2} contiene un 5% de CO_{2}
en volumen.
28. Procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) según reivindicaciones 26 o 27
caracterizado porque las medidas electroquímicas comprenden
la medición del potencial de corrosión, resistencia de polarización
y/o impedancia electroquímica.
29. Procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28
caracterizado porque la etapa de montaje de la célula
electrolítica (1) en el interior de la campana de flujo laminar
comprende las etapas de:
- Colocar el electrodo de trabajo (4) en la base
(2) de modo que quede superiormente y en contacto con una conexión
eléctrica accesible exteriormente, y fijar el prensor (10).
- Añadir la primera parte del volumen del medio
celular.
- Acoplar la cubierta (5).
- Insertar el electrodo de referencia (20) y el
electrodo auxiliar (21).
\vskip1.000000\baselineskip
30. Procedimiento de utilización de la célula
electrolítica (1) según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 29
caracterizado porque la etapa de esterilización de la célula
electrolítica (1) comprende las etapas de:
- Envolver los componentes de la célula,
incluyendo el electrodo de referencia (20) y el electrodo auxiliar
(21), en papel de aluminio, disponiendo cinta adhesiva
termoseñaladora de alcance de la temperatura de esterilización.
- Esterilizar en autoclave a 120 grados
centígrados durante, al menos 20 minutos.
- Esterilizar el electrodo de trabajo (4) bajo
luz ultravioleta durante un tiempo comprendido entre 4 y 6
horas.
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CN102735604B (zh) * | 2012-06-13 | 2014-07-30 | 上海大学 | 用于腐蚀电化学测量的电解池 |
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