ES2357580T3 - VEHICLES FOR THE ADMINISTRATION OF PHARMACOS BASED ON REVERSE LIQUID-CRYSTALINE PHASE MATERIALS. - Google Patents

Abstract

Partícula cargada de manera iónica, no recubierta estabilizada de un material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa, mediante lo cual dicha partícula tiene un potencial zeta de 25 mV o < - 25 mV.Ionic-charged, uncoated, stabilized particle of an inverse cubic phase or inverse hexagonal phase material, whereby said particle has a zeta potential of 25 mV or <- 25 mV.

Description

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN BACKGROUND OF THE INVENTION

Campo de la invención Field of the Invention

La invención se refiere generalmente a partículas no recubiertas de material de fase cúbica inversa o fase 5 hexagonal inversa que contienen un agente activo. En particular, la invención proporciona partículas no recubiertas que tienen una carga iónica que es suficiente para estabilizar las partículas en dispersión en un líquido, por ejemplo un disolvente polar. La invención también contempla formulaciones de fármacos que contienen fases hexagonal inversa y cúbica inversa que pueden aplicarse para aumentar significativamente la duración de acción farmacológica y/o proporcionar la misma duración y eficacia a una dosis significativamente inferior. 10 The invention generally relates to particles not coated with inverse cubic phase or inverse hexagonal phase material containing an active agent. In particular, the invention provides uncoated particles having an ionic charge that is sufficient to stabilize the particles dispersed in a liquid, for example a polar solvent. The invention also contemplates drug formulations containing inverse hexagonal and inverse cubic phases that can be applied to significantly increase the duration of pharmacological action and / or provide the same duration and efficacy at a significantly lower dose. 10

Antecedentes de la invención Background of the invention

Muchos compuestos activos usados en usos farmacéuticos, nutricionales, nutricéuticos, medioambientales e industriales son o bien insolubles en agua, o bien responden mejor cuando se administran en alguna clase de matriz protectora, direccionable y/o de otro modo funcional. En el caso de los productos farmacéuticos, se reconoce generalmente que las micropartículas pueden proporcionar matrices robustas para fármacos mediante diversas vías de 15 administración, siempre que sean del tamaño apropiado, estables en dispersión y estén compuestas por excipientes que son aceptables para esa vía. Sin embargo, además de solubilizar y/o proteger el compuesto activo para su administración y/o en circulación, sería ventajoso que una micropartícula desempeñase un papel activo en la administración y la absorción del agente activo, un objetivo que ha sido un impedimento para varios vehículos particulados y basados en gotas potencialmente útiles. 20 Many active compounds used in pharmaceutical, nutritional, nutritional, environmental and industrial uses are either water insoluble, or respond better when administered in some kind of protective, addressable and / or other functional matrix. In the case of pharmaceutical products, it is generally recognized that microparticles can provide robust matrices for drugs by various routes of administration, provided they are of the appropriate size, stable in dispersion and are composed of excipients that are acceptable for that route. However, in addition to solubilizing and / or protecting the active compound for administration and / or circulation, it would be advantageous for a microparticle to play an active role in the administration and absorption of the active agent, an objective that has been an impediment to several particulate vehicles and based on potentially useful drops. twenty

Para el caso de los agentes activos farmacéuticos que son de baja solubilidad en agua, la solubilización de compuestos de fármacos de este tipo se convierte en un reto por la selección muy limitada de disolventes y líquidos estructurados que están aprobados por organismos reguladores para su uso a los niveles que se requerirían para solubilizar el fármaco. Además, los excipientes líquidos miscibles en agua, más particularmente etanol, son de valor limitado dado que, incluso cuando el fármaco es insoluble en etanol puro, por ejemplo, a menudo precipitará tras el 25 contacto con el agua, tal como con o bien agua para inyección como diluyente o bien en el medio acuoso de líquidos corporales, tales como la sangre. In the case of pharmaceutical active agents that are of low water solubility, solubilization of drug compounds of this type becomes a challenge due to the very limited selection of solvents and structured liquids that are approved by regulatory bodies for use in the levels that would be required to solubilize the drug. In addition, water-miscible liquid excipients, more particularly ethanol, are of limited value since, even when the drug is insoluble in pure ethanol, for example, it will often precipitate after contact with water, such as with or with water. for injection as a diluent or in the aqueous medium of body fluids, such as blood.

Se han desarrollado fases líquido-cristalinas liotrópicas nanoestructuradas de las fases cúbica inversa y hexagonal inversa concretamente de tipo inverso, como matrices de solubilización excelentes tanto para compuestos escasamente solubles, como para compuestos delicados de este tipo tales como proteínas y otras biomacromoléculas. 30 El documento U.S. 6.482.517 (Anderson, 19 de noviembre de 2002) y el documento U.S. 6.638.621 (Anderson, 28 de octubre de 2003), cuyo contenido se incorpora en su totalidad como referencia, dan a conocer, entre otras cosas, composiciones y métodos eficaces para producir matrices líquido-cristalinas liotrópicas de este tipo. Estas partículas se recubren con materiales sólidos. Nanostructured liotropic liquid-crystalline phases of the inverse cubic and inverse hexagonal phases, specifically of the inverse type, have been developed as excellent solubilization matrices for both sparingly soluble compounds, and for delicate compounds of this type such as proteins and other biomachromolecules. 30 The U.S. document 6,482,517 (Anderson, November 19, 2002) and U.S. 6,638,621 (Anderson, October 28, 2003), the content of which is incorporated in its entirety as a reference, discloses, among other things, compositions and effective methods for producing liotropic liquid-crystalline matrices of this type. These particles are coated with solid materials.

Un pionero en el comportamiento de fases de tensioactivos, P.A. Winsor, describió partículas de fase cúbica 35 recubiertas con una fase líquida nanoestructurada, que según el conocimiento actual era probablemente una fase L3. Véase Liquid Crystals & Plastic Crystals, Vol. 1, ediciones G.W. Gray y P.A. Winsor (1974), Ellis Horwood Ltd., página 224, así como Balinov, Olsson y Soderman (1991) J. Phys. Chem. 95:5931. Larsson, en 1989, describió partículas de fase cúbica inversas con recubrimientos de fase líquido-cristalina laminar. Véase Larsson (1989) J. Phys. Chem. 93(21) 7304. 40 A pioneer in the behavior of surfactant phases, P.A. Winsor described cubic phase particles coated with a nanostructured liquid phase, which according to current knowledge was probably an L3 phase. See Liquid Crystals & Plastic Crystals, Vol. 1, G.W. Gray and P.A. Winsor (1974), Ellis Horwood Ltd., page 224, as well as Balinov, Olsson and Soderman (1991) J. Phys. Chem. 95: 5931. Larsson, in 1989, described inverse cubic phase particles with laminar liquid-crystalline phase coatings. See Larsson (1989) J. Phys. Chem. 93 (21) 7304. 40

El documento U.S. 5.531.925 (Landh et al., 2 de julio de 1996) describe asimismo partículas de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa que requieren una fase superficial de o bien fase líquido-cristalina laminar, cristalina laminar, o bien L3, con el fin de dispersar las partículas. El recubrimiento se denomina en esta descripción “fase superficial”, o “fase dispersable”, enseñando de ese modo, en primer lugar, que es una fase separada, distinta del interior líquido-cristalino inverso, y en segundo lugar, que el propio interior de la fase líquido-cristalina inversa no es una 45 fase dispersable. La fase superficial L3 en esta descripción se describe como que se “anclaje a la bicapa o monocapa de la fase interior” (columna 7, líneas 59-60). The U.S. document 5,531,925 (Landh et al., July 2, 1996) also describes particles of the inverse cubic phase or inverse hexagonal phase that require a surface phase of either laminar liquid-crystalline phase, laminar crystalline phase, or L3, in order of dispersing the particles. The coating is referred to in this description as "surface phase," or "dispersible phase," thereby teaching, first, that it is a separate phase, distinct from the inverse liquid-crystalline interior, and secondly, than the interior itself. of the inverse liquid-crystalline phase is not a dispersible phase. The surface phase L3 in this description is described as "anchoring to the bilayer or monolayer of the inner phase" (column 7, lines 59-60).

La patente estadounidense 6.071.524 describe composiciones en forma de dispersiones que contienen: (a) del 60 al 98% en peso de una fase acuosa y (b) del 2 al 40% en peso de una fase oleosa dispersa en la fase acuosa, dispersándose y estabilizándose la fase oleosa usando partículas de gel cúbicas. Las partículas están formadas 50 esencialmente por del 0,1 al 15% en peso (en relación con el peso total de la composición) de al menos un monoglicérido de ácido graso insaturado que tiene una cadena grasa insaturada C16-C22 en mezcla con fitanetriol, y del 0,05 al 3% en peso en relación con el peso total de la composición de un agente dispersante y estabilizante. El agente es una sustancia activa en superficie, soluble en agua a temperatura ambiente, que contiene una cadena grasa, saturada o insaturada, lineal o ramificada que tiene de 8 a 22 átomos de carbono. La patente también describe métodos 55 de preparación de composiciones de este tipo. Un mínimo de tres fases termodinámicamente distintas están presentes en una mezcla de este tipo, concretamente la fase exterior acuosa, las partículas de gel cúbicas y la fase oleosa que US 6,071,524 discloses compositions in the form of dispersions containing: (a) 60 to 98% by weight of an aqueous phase and (b) 2 to 40% by weight of an oil phase dispersed in the aqueous phase, dispersing and stabilizing the oil phase using cubic gel particles. The particles are formed essentially from 0.1 to 15% by weight (in relation to the total weight of the composition) of at least one unsaturated fatty acid monoglyceride having a C16-C22 unsaturated fatty chain in admixture with fitanetriol, and from 0.05 to 3% by weight in relation to the total weight of the composition of a dispersing and stabilizing agent. The agent is a surface active substance, soluble in water at room temperature, which contains a linear, branched or saturated, saturated or unsaturated fatty chain having 8 to 22 carbon atoms. The patent also describes methods of preparing compositions of this type. A minimum of three thermodynamically distinct phases are present in such a mixture, namely the aqueous outer phase, the cubic gel particles and the oil phase that

contiene el agente activo. El principio activo (fármaco, compuesto cosmecéutico, etc.) está presente en la fase oleosa dispersa, y de hecho ubicado sustancialmente en la fase oleosa. Sistemas de este tipo, emulsiones en las que monocapas de lípido o tensioactivo, múltiples capas, dominios cristalinos líquido laminares o no laminares o dominios cristalinos laminares estabilizan las gotas de un fluido en otro, presentan escasa idoneidad para el direccionamiento, limitaciones del término de caducidad (flotación, ruptura de las emulsiones, etc.), y otros problemas bien conocidos en la 5 técnica de emulsiones. Y sistemas de emulsiones o gotas en los que cada gota está rodeada por una pluralidad de partículas de otro material o fase, que experimentan todas difusión independiente alrededor de la gota (y, por definición, están separadas unas de otras por capas de fluido intermedias), presentan espacios entre las partículas que comprometen la capacidad del material para controlar la salida del agente activo hacia fuera, o la entrada de factores de confusión al interior de la gota. Además, con un sistema de este tipo en el que la pluralidad de partículas que rodean la 10 gota se deriva de cristales líquidos liotrópicos, tal como en el documento U.S. 6.071.524, en el organismo de un animal estas partículas pueden volverse fácilmente independientes de las gotas, de manera que las gotas, que contienen la amplia mayoría del agente activo, no obtengan los beneficios potenciales (tal como se tratan en el presente documento) de las partículas líquido-cristalinas. Aunque las “partículas de gel cúbicas” del documento 6.071.524 se diseñan para agregarse en la superficie de las gotas de aceite, en una aplicación farmacéutica, los factores de dilución y las fuerzas 15 de cizallamiento, junto con la pluralidad de condiciones y procesos bioquímicos con que se encuentra una gota, podrían separar fácilmente las gotas de su recubrimiento destinado. Otra limitación de la invención descrita en el documento 6.071.524 es que ni los monoglicéridos ni el fitanetriol (ni muchos de los otros tensioactivos usados en las realizaciones notificadas) están aprobados para su uso en productos farmacéuticos inyectables, y en efecto se sabe que los monoglicéridos son extremadamente tóxicos tras su inyección. 20 Contains the active agent. The active ingredient (drug, cosmeceutical compound, etc.) is present in the dispersed oil phase, and in fact located substantially in the oil phase. Systems of this type, emulsions in which lipid or surfactant monolayers, multiple layers, laminar or non-lamellar liquid crystalline domains or lamellar crystalline domains stabilize the drops of one fluid in another, have poor suitability for addressing, limitations of the expiration term (flotation, rupture of emulsions, etc.), and other problems well known in the technique of emulsions. And emulsion systems or drops in which each drop is surrounded by a plurality of particles of another material or phase, which all undergo independent diffusion around the drop (and, by definition, are separated from each other by intermediate fluid layers) They present spaces between the particles that compromise the ability of the material to control the exit of the active agent out, or the entry of confounding factors into the drop. In addition, with such a system in which the plurality of particles surrounding the drop is derived from liotropic liquid crystals, such as in U.S. 6,071,524, in the organism of an animal these particles can easily become independent of the drops, so that the drops, which contain the vast majority of the active agent, do not obtain the potential benefits (as discussed herein) of the liquid-crystalline particles. Although the "cubic gel particles" of document 6,071,524 are designed to aggregate on the surface of the oil droplets, in a pharmaceutical application, the dilution factors and shear forces, together with the plurality of conditions and processes biochemicals with which a drop is found, could easily separate the drops from their intended coating. Another limitation of the invention described in document 6,071,524 is that neither the monoglycerides nor the fitanetriol (nor many of the other surfactants used in the reported embodiments) are approved for use in injectable pharmaceutical products, and it is indeed known that Monoglycerides are extremely toxic after injection. twenty

La solicitud estadounidense 2002/0153509 (Lynch et al., publicada el 24 de octubre de 2002) describe composiciones en las que se usan compuestos cargados como “anclajes” (“enlaces”), que sirven para anclar los compuestos activos o compuestos de direccionamiento a fases cúbicas, algunas veces en material particulado para. Por ejemplo, se afirma en la descripción del documento 2002/0153509 que la inclusión de un anclaje tal como un tensioactivo catiónico podría aumentar la cantidad del fármaco activo en la fase cúbica en proporción a la cantidad de 25 tensioactivo (por ejemplo, párrafo 0099), según la imagen esquemática mostrada en la figura 2 de esta descripción que representa una molécula de ketoprofeno aniónica asociada con el grupo de cabeza de un tensioactivo catiónico (y situado en el lado polar de la interfase polar-apolar). El fin del anclaje es unir una molécula de fármaco, en una base molecular de 1 a 1. US application 2002/0153509 (Lynch et al., Published October 24, 2002) describes compositions in which charged compounds are used as "anchors" ("bonds"), which serve to anchor active compounds or targeting compounds to cubic phases, sometimes in particulate material for. For example, it is stated in the description of document 2002/0153509 that the inclusion of an anchor such as a cationic surfactant could increase the amount of the active drug in the cubic phase in proportion to the amount of surfactant (e.g., paragraph 0099) , according to the schematic image shown in Figure 2 of this description representing an anionic ketoprofen molecule associated with the head group of a cationic surfactant (and located on the polar side of the polar-apolar interface). The purpose of the anchor is to bind a drug molecule, on a molecular basis of 1 to 1.

En el documento WO 03/000236 A1, se dan a conocer partículas con capacidad de solubilización mejorada. En 30 ese documento, se describen partículas bifásicas, sin embargo, los sistemas bifásicos son más inestables que los sistemas monofásicos con el tiempo. In WO 03/000236 A1, particles with improved solubilization capacity are disclosed. In that document, biphasic particles are described, however, biphasic systems are more unstable than monophasic systems over time.

El documento WO 03/106589 A1, un solicitud de patente presentada antes de la presente solicitud pero que se publicó tras la fecha de presentación de la presente invención se refiere a partículas nanoporosas con una diana retenida. 35 WO 03/106589 A1, a patent application filed before the present application but which was published after the date of presentation of the present invention refers to nanoporous particles with a retained target. 35

Sería deseable tener micropartículas mejoradas para la solubilización y protección de fármacos que son de un tamaño apropiado, estables en dispersión y están compuestas por excipientes que son aceptables para su administración mediante una variedad de vías. Además, sería deseable tener micropartículas mejoradas que también presenten un papel activo en la administración y la absorción del fármaco, de manera que características que incluyen la biodisponibilidad, duración de acción, dosificación requerida, seguridad y otros factores podrían influenciarse de manera 40 favorable mediante la asociación del fármaco con el vehículo. It would be desirable to have improved microparticles for solubilization and protection of drugs that are of an appropriate size, stable in dispersion and composed of excipients that are acceptable for administration by a variety of routes. In addition, it would be desirable to have improved microparticles that also have an active role in the administration and absorption of the drug, so that features that include bioavailability, duration of action, required dosage, safety and other factors could be favorably influenced by the association of the drug with the vehicle.

En particular, se han usado varios métodos en el intento para aumentar la duración de acción de anestésicos locales. In particular, several methods have been used in the attempt to increase the duration of action of local anesthetics.

Un método usado en la actualidad en la práctica médica es la coadministración de vasoconstrictores tales como epinefrina (adrenalina), fenilefrina o norepinefrina, lo que aumenta el tiempo de permanencia del fármaco en el 45 sitio de administración, debido a la inducción de vasoconstricción con posterior reducción de la captación sistémica del anestésico local. Aunque puede aumentarse la duración aproximadamente dos veces para los anestésicos locales de acción rápida, tales como lidocaína, procaína, cloroprocaína y prilocaína, esto tiende a no ser el caso con los anestésicos locales de acción más prolongada tales como bupivacaína. La documentación del producto de Astra-Zeneca sobre su formulación Marcaine® actualmente comercializada declara: “El efecto de prolongación de la duración 50 de la adrenalina no es tan pronunciado con la bupivacaína como con los AL de acción rápida. Puede observarse una prolongación de hasta el 50%, dependiendo del modo de administración.” Se han notificado sólo rara vez datos reproducibles que demuestran sistemáticamente bloqueos nerviosos con anestésicos locales que duran más de 10 horas a partir de una única inyección del anestésico local a dosis subtóxicas, incluso con la coadministración de agentes vasoconstrictores. 55 One method currently used in medical practice is the co-administration of vasoconstrictors such as epinephrine (adrenaline), phenylephrine or norepinephrine, which increases the residence time of the drug at the administration site, due to the induction of vasoconstriction with subsequent reduction of the systemic uptake of the local anesthetic. Although the duration can be increased approximately twice for fast-acting local anesthetics, such as lidocaine, procaine, chloroprocaine and prilocaine, this tends not to be the case with longer-acting local anesthetics such as bupivacaine. The Astra-Zeneca product documentation on its currently marketed Marcaine® formulation states: “The effect of prolonging the duration of adrenaline 50 is not as pronounced with bupivacaine as with fast-acting LAs. A prolongation of up to 50% can be observed, depending on the mode of administration. ”Only reproducible data that systematically demonstrate nerve blockages with local anesthetics lasting more than 10 hours after a single injection of the local anesthetic at doses have been reported rarely. sub-toxic, even with the co-administration of vasoconstrictor agents. 55

La epinefrina, junto con otros agentes vasoactivos, tienen sus propias toxicidades y deben usarse con precaución en determinados pacientes, tales como arritmias cardiacas e hipertensión. Específicamente con bupivacaína, las pruebas en ratas Sprague-Dawley han demostrado que la cardiotoxicidad de la bupivacaína (que se conoce bien que es limitante de la dosis, y ha dado como resultado muertes humanas) se aumenta significativamente por la epinefrina, así como por otros compuestos de vasocontricción. Véase J.R. Kambam, W.W. Kinney, F. Matsuda, 60 Epinephrine, together with other vasoactive agents, have their own toxicities and should be used with caution in certain patients, such as cardiac arrhythmias and hypertension. Specifically with bupivacaine, tests on Sprague-Dawley rats have shown that the cardiotoxicity of bupivacaine (which is well known to be dose-limiting, and has resulted in human deaths) is significantly increased by epinephrine, as well as by others. vasocontriction compounds. See J.R. Kambam, W.W. Kinney, F. Matsuda, 60

W. Wright y D.A. Holaday (1990) Anesth. Analg. 70(5):543-5. Aunque puede usarse un pretratamiento con propanolol para proteger frente a la cardiotoxicidad de la bupivacaína, este efecto protector se suprime en gran medida por la coadministración de epinefrina. Véase W.W. Kinney, J.R. Kambam y W. Wright (1991) Can. J. Anaesth. 38(4 Pt 1): 533-6. Otras contraindicaciones a la adición de epinefrina a los anestésicos locales incluyen angina inestable, tratamiento con inhibidores de la MAO o antidepresivos tricíclicos, insuficiencia uteriplacentaria y bloqueos nerviosos periféricos en 5 zonas que pueden carecer de flujo sanguíneo colateral (oído, nariz, pene, dedos). De manera significativa, se ha demostrado recientemente que la adición de epinefrina a tetracaína aumenta en gran medida su neurotoxicidad, aparentemente debido a la inducción de grandes concentraciones de glutamato, en el líquido cefalorraquídeo para una administración intratecal; esto representa una toxicidad sistemática peligrosa. Véase S. Oka, M. Matsumoto, K. Ohtake, T. Kiyoshima, K. Nakakimura y T. Sakabe (2001) Anesth. Analg. 93(4):1050-7. 10 W. Wright and D.A. Holaday (1990) Anesth. Analg. 70 (5): 543-5. Although a pre-treatment with propanolol can be used to protect against the cardiotoxicity of bupivacaine, this protective effect is largely suppressed by the co-administration of epinephrine. See W.W. Kinney, J.R. Kambam and W. Wright (1991) Can. J. Anaesth. 38 (4 Pt 1): 533-6. Other contraindications to the addition of epinephrine to local anesthetics include unstable angina, treatment with MAO inhibitors or tricyclic antidepressants, uteriplacental insufficiency and peripheral nerve blocks in 5 areas that may lack collateral blood flow (ear, nose, penis, fingers) . Significantly, it has recently been shown that the addition of epinephrine to tetracaine greatly increases its neurotoxicity, apparently due to the induction of large concentrations of glutamate, in the cerebrospinal fluid for intrathecal administration; This represents a dangerous systematic toxicity. See S. Oka, M. Matsumoto, K. Ohtake, T. Kiyoshima, K. Nakakimura and T. Sakabe (2001) Anesth. Analg. 93 (4): 1050-7. 10

Adicionalmente, varios estudios han demostrado la ausencia de prolongación por epinefrina en diferentes bloqueos nerviosos. Véase H. Renck y H.G. Hassan (1992) 36(5):387-92, y también A. Weber, R. Fournier, E. Van Gessel, N. Riand y Z. Gamulin (2001) Anesth. Analg. 93(5):1327-31. Additionally, several studies have demonstrated the absence of epinephrine prolongation in different nerve blocks. See H. Renck and H.G. Hassan (1992) 36 (5): 387-92, and also A. Weber, R. Fournier, E. Van Gessel, N. Riand and Z. Gamulin (2001) Anesth. Analg. 93 (5): 1327-31.

Se ha usado clonidina para prolongar la acción de determinados anestésicos locales, pero la prolongación es minoritaria, menos de aproximadamente el 50% y casi nada en el caso de los anestésicos locales de acción prolongada, 15 lo que produce duraciones de bloqueo nervioso de menos de 8 horas esencialmente en todos los casos. Por tanto su uso se limita principalmente a casos en los que están contraindicados los agentes vasoconstrictores. De manera bastante amplia, las combinaciones de dos principios activos farmacéuticos (API) están desfavorecidas cuando un único agente puede lograr el mismo fin. Clonidine has been used to prolong the action of certain local anesthetics, but the prolongation is minor, less than about 50% and almost nothing in the case of long-acting local anesthetics, 15 which produces nerve block durations of less than 8 hours essentially in all cases. Therefore its use is mainly limited to cases in which vasoconstrictor agents are contraindicated. Quite broadly, combinations of two pharmaceutical active ingredients (APIs) are disadvantaged when a single agent can achieve the same end.

Las preparaciones liposómicas de anestésicos locales han demostrado acción sostenida, pero sólo a dosis que 20 superan ampliamente la dosis tóxica del AL. Un ejemplo representativo se facilita en Grant et al., en el que se logró una duración de aproximadamente 24 horas en ratones, pero a una dosis supertóxica de más de 150 mg/kg, es decir, 50 veces la dosis cardiotóxica. Véase G.J. Grant, B. Piskou y M. Bansinath (2003) Clin. Exp. Harm. Physiol. 30:966. Un resultado casi idéntico se notificó en la solicitud de patente estadounidense 2003/0185873 concedida a Chasin et al., en la que el ejemplo 12 notifica una dosis de 150 mg/kg. Esta dosis también representa 150 veces la dosis recomendada (1 25 mg/kg), para su uso en seres humanos. Se han publicado resultados similares de Grant et al. usando neostigmina. Resultados previos de Grant et al. reivindicaron analgesia prolongada, pero los bloqueos sensoriales en ratones usando bupivacaína duraron sólo un promedio de sólo aproximadamente 2 horas a dosis que fueron superiores a 3 mg/kg. Véase Grant et al. (1994) Regional Anesthesia 19(4):264. Aunque estos investigadores señalaron que se redujo la toxicidad debido a la encapsulación del fármaco, el aumento de la dosis en dos órdenes de magnitud por encima de la 30 dosis letal sería un impedimento grave, y casi de hecho insuperable, para su aprobación por los organismos reguladores y su aceptación por la comunidad médica. Esto es particularmente cierto en el caso de una preparación liposómica, porque se conoce bien que los liposomas son estructuras metaestables, no estables. En efecto, una dosis de 10 veces, o incluso dos veces, la dosis letal sería gravemente problemática en cualquier vehículo. Liposomal preparations of local anesthetics have shown sustained action, but only at doses that far exceed the toxic dose of AL. A representative example is given in Grant et al., In which a duration of approximately 24 hours was achieved in mice, but at a super-toxic dose of more than 150 mg / kg, that is, 50 times the cardiotoxic dose. See G.J. Grant, B. Piskou and M. Bansinath (2003) Clin. Exp. Harm. Physiol 30: 966. An almost identical result was reported in US patent application 2003/0185873 granted to Chasin et al., In which example 12 reports a dose of 150 mg / kg. This dose also represents 150 times the recommended dose (1 25 mg / kg), for use in humans. Similar results from Grant et al. using neostigmine. Previous results of Grant et al. they claimed prolonged analgesia, but sensory blockages in mice using bupivacaine lasted only an average of only about 2 hours at doses that were greater than 3 mg / kg. See Grant et al. (1994) Regional Anesthesia 19 (4): 264. Although these researchers pointed out that toxicity was reduced due to the encapsulation of the drug, increasing the dose by two orders of magnitude above the lethal dose would be a serious, and almost in fact insurmountable, impediment for approval by the agencies. regulators and their acceptance by the medical community. This is particularly true in the case of a liposomal preparation, because it is well known that liposomes are metastable structures, not stable. Indeed, a dose of 10 times, or even twice, the lethal dose would be seriously problematic in any vehicle.

Se notificaron niveles en sangre sostenidos de bupivacaína en una formulación de microesferas de 35 policaprolactona administrada o bien por vía subcutánea o bien por vía intraperitoneal, pero de nuevo, las dosis eran bastante superiores a la dosis cardiotóxica. Se administraron aproximadamente 9,8 mg/kg (2,46 mg por rata de 250 g) de bupivacaína, claramente una dosis supertóxica, lo que dio como resultado concentraciones plasmáticas máximas de aproximadamente 240 ng/ml. Véase, M.D. Blanco et al. (2003) Eur. J. Pharm. Biopharm. 55:229. Se obtuvieron resultados similares usando otras microesferas de polímero, concretamente anhídrido del ácido bis-policarboxifenoxi-40 propano-sebácico (véase D.B. Masters et al., 1993, Pharm. Res. 10:1527) y polilactida-glicolida (véase P. IeCorre et al., 1994, Int. J. Pharm. 107:41). Sustained blood levels of bupivacaine were reported in a microsphere formulation of polycaprolactone administered either subcutaneously or intraperitoneally, but again, the doses were well above the cardiotoxic dose. Approximately 9.8 mg / kg (2.46 mg per 250 g rat) of bupivacaine, clearly a super-toxic dose, was administered, which resulted in peak plasma concentrations of approximately 240 ng / ml. See, M.D. Blanco et al. (2003) Eur. J. Pharm. Biopharm 55: 229. Similar results were obtained using other polymer microspheres, specifically bis-polycarboxyphenoxy-40 propane-sebacic acid anhydride (see DB Masters et al., 1993, Pharm. Res. 10: 1527) and polylactide-glycolide (see P. IeCorre et al., 1994, Int. J. Pharm. 107: 41).

Se ha notificado que una emulsión lipídica que contiene bupivacaína aumenta la duración del bloqueo nervioso en aproximadamente un 30-40%, aunque curiosamente los bloqueos nerviosos con este sistema tuvieron una duración de sólo aproximadamente 73 minutos (promedio de 3 animales). Véase Lazaro et al. (1999) Anesth. Analg. 89:121. Se 45 obtuvieron estos tiempos de duración con anestesia general con fenobarbital y a dosis de bupivacaína (de aproximadamente 3,2 - 3,6 mg/kg) que son potencialmente cardiotóxicos para bupivacaína. Además, su formulación contiene oleato de sodio, que en la actualidad no está aprobado para formulaciones inyectables ni pertenece a ninguna clase de compuestos que contenga un miembro que esté aprobado para una formulación inyectable. It has been reported that a lipid emulsion containing bupivacaine increases the duration of the nerve block by approximately 30-40%, although curiously the nerve blocks with this system lasted only about 73 minutes (average of 3 animals). See Lazaro et al. (1999) Anesth. Analg. 89: 121. These duration times were obtained with general anesthesia with phenobarbital and at doses of bupivacaine (approximately 3.2-3.6 mg / kg) that are potentially cardiotoxic for bupivacaine. In addition, its formulation contains sodium oleate, which is currently not approved for injectable formulations or belongs to any class of compounds containing a member that is approved for an injectable formulation.

Langerman et al. han notificado una formulación de anestésicos locales que consiste en una disolución del 50 fármaco en iofendilato. Sin embargo, se redujo la intensidad del bloqueo nervioso, en otras palabras, la eficacia en la formulación, en comparación con la intensidad usando una disolución acuosa sencilla a la misma dosis. Véase Langerman et al. (1992) Anesthesiology 77: 475-81. Por tanto, parece que obtener un bloqueo igualmente intenso requeriría un aumento de la dosis, en comparación con la disolución acuosa habitual del anestésico local aprobado y comercializado actualmente. También, se notificó aracnoiditis aséptica tras la administración intratecal de iofendilato. En 55 efecto, se han observado frecuentemente aracnoiditis y reacciones de irritación graves, incluyendo muerte, con iofendilato, que se ha declarado más irritante y tóxico que el Lipiodol, un predecesor del iofendilato que se abandonó tras reacciones adversas graves. Véase E. Lindgren y T. Greitz (1995) Am. J. Euroradiology 16(2):351-60. Langerman et al. have reported a formulation of local anesthetics consisting of a solution of the drug in iofendilate. However, the intensity of the nerve block was reduced, in other words, the effectiveness in the formulation, compared to the intensity using a simple aqueous solution at the same dose. See Langerman et al. (1992) Anesthesiology 77: 475-81. Therefore, it seems that obtaining an equally intense blockage would require a dose increase, compared to the usual aqueous solution of the local anesthetic currently approved and marketed. Also, aseptic arachnoiditis was reported after intrathecal administration of iofendilate. In fact, arachnoiditis and severe irritation reactions, including death, have been observed frequently with iofendilate, which has been declared more irritating and toxic than Lipiodol, a predecessor of the iofendilate that was abandoned after serious adverse reactions. See E. Lindgren and T. Greitz (1995) Am. J. Euroradiology 16 (2): 351-60.

Dyhre et al. han publicado un estudio de lidocaína en una formulación lipídica polar, en algunos casos junto con dexametasona que es un API que se sabe que prolonga la analgesia. Se registraron bloqueos del nervio ciático de 60 Dyhre et al. They have published a study of lidocaine in a polar lipid formulation, in some cases together with dexamethasone which is an API known to prolong analgesia. Sciatic nerve blockages of 60 were recorded

duración aumentada, pero sólo a dosis de más de 20 mg/kg. Esto es bastante superior a la dosis máxima recomendada de 7 mg/kg. En efecto, dosis de aproximadamente 6 mg/kg produjeron duraciones de acción más cortas que con la misma dosis de clorhidrato de lidocaína en disolución. Los niveles en sangre de lidocaína tras la administración perineural de la formulación fueron muy altos, en algunos puntos de tiempo dos órdenes de magnitud superiores a con la disolución acuosa de lidocaína, que para muchos fármacos se traduciría en un riesgo aumentado de toxicidad. Véase 5 Dyhre et al., Acta Anesth. Scand. (2001) 45(5):583. Además, los diglicéridos de lípidos polares de girasol usados en la formulación de ese estudio, y los diglicéridos no son farmacéuticamente aceptables para la inyección intravenosa (ni son monoglicéridos). increased duration, but only at doses of more than 20 mg / kg. This is well above the maximum recommended dose of 7 mg / kg. Indeed, doses of approximately 6 mg / kg produced shorter duration of action than with the same dose of lidocaine hydrochloride in solution. Blood levels of lidocaine after perineural administration of the formulation were very high, in some time points two orders of magnitude greater than with the aqueous lidocaine solution, which for many drugs would result in an increased risk of toxicity. See 5 Dyhre et al., Acta Anesth. Scand. (2001) 45 (5): 583. In addition, the sunflower polar lipid diglycerides used in the formulation of that study, and the diglycerides are not pharmaceutically acceptable for intravenous injection (nor are they monoglycerides).

SUMARIO DE LA INVENCIÓN SUMMARY OF THE INVENTION

Tal como se trata en más detalle en el presente documento, las partículas de materiales de fase cristalina 10 liotrópica inversa pueden presentar un alto potencial para transportar compuestos activos a través de una variedad de barreras tales como membranas celulares, particularmente en el caso de fases cúbicas bicontinuas inversas, en virtud de sus estructuras nanoporosas únicas y propiedades de curvatura asociadas. Las fases líquido-cristalinas cúbica inversa y hexagonal inversa pueden ser de muy baja solubilidad en agua, lo que significa que mantienen su integridad como vehículos tras la entrada en el organismo evitando así la precipitación del fármaco. Por tanto, con propiedades de 15 solubilización y de secuestro superiores, así como integridad en agua, estos materiales son prometedores en campos tales como la administración de fármacos. Sin embargo, este potencial se ha dejado en gran medida sin explotar debido a la suposición tácita de que las partículas de este tipo deben recubrirse con el fin de ser estables en dispersión. As discussed in more detail herein, particles of reverse liotropic crystalline phase materials 10 may have a high potential for transporting active compounds across a variety of barriers such as cell membranes, particularly in the case of cubic phases. Inverse bicontinuous, by virtue of its unique nanoporous structures and associated curvature properties. The liquid-crystalline inverse cubic and inverse hexagonal phases can be of very low solubility in water, which means that they maintain their integrity as vehicles after entering the organism thus avoiding the precipitation of the drug. Therefore, with superior solubilization and sequestration properties, as well as integrity in water, these materials are promising in fields such as drug administration. However, this potential has largely been left untapped due to the unspoken assumption that particles of this type must be coated in order to be stable in dispersion.

En la presente invención, el potencial completo de esta actividad de transporte puede explotarse dentro del contexto de dispersiones de partículas estables, en primer lugar mediante la comprensión de que las partículas no 20 recubiertas de fases de este tipo son sumamente deseables por sus propiedades de potenciación del transporte y la absorción, y en segundo lugar mediante la comprensión de que los compuestos asociados a bicapa, cargados de manera iónica, con químicas y concentraciones apropiadas pueden estabilizar tales partículas como partículas no recubiertas creando fuertes potenciales de superficie electrostáticos, potenciales zeta de partícula. En particular, en el presente documento se enseña que el potencial zeta es un parámetro clave para establecer una estabilización de este 25 tipo, y que un potencial zeta superior a o igual a aproximadamente 25 mV, o más preferiblemente superior a aproximadamente 30 mV, de magnitud es un requisito importante para un sistema de este tipo. De igual manera, un potencial zeta inferior a -25 mV o inferior a -30 mV de magnitud es útil para su estabilización. In the present invention, the full potential of this transport activity can be exploited within the context of stable particle dispersions, firstly by understanding that non-phase-coated particles of this type are highly desirable for their potentiating properties. of transport and absorption, and secondly by understanding that bilayer-associated compounds, charged in an ionic manner, with chemical and appropriate concentrations can stabilize such particles as uncoated particles creating strong electrostatic surface potentials, potential zeta particles . In particular, this document teaches that the zeta potential is a key parameter for establishing a stabilization of this type, and that a zeta potential greater than or equal to approximately 25 mV, or more preferably greater than approximately 30 mV, of magnitude It is an important requirement for such a system. Similarly, a potential zeta less than -25 mV or less than -30 mV magnitude is useful for stabilization.

Por tanto, la invención proporciona partículas no recubiertas, estables formadas por materiales líquido-cristalinos liotrópicos inversos, por ejemplo material líquido-cristalino cúbico inverso o hexagonal inverso. Las partículas 30 están “no recubiertas” porque el material líquido-cristalino a partir del cual se forman las partículas está en contacto directo con el medio en el que las partículas se dispersan, es decir, la periferia externa de una partícula dispersa, individual no está protegida del medio (por ejemplo, una fase líquida acuosa) en el que las partículas se dispersan. Ningún recubrimiento se interpone entre la partícula y el medio, o entre una partícula y otras partículas. Más bien, las partículas se repelen entre sí y se mantienen en dispersión en el medio mediante fuertes potenciales de superficie 35 electrostáticos. Se crean fuertes potenciales de superficie electrostáticos de este tipo mediante la elección apropiada de los “componentes” que se combinan para componer el material líquido-cristalino a partir del cual se forman las partículas, tal como se enseña en el presente documento. En general, la razón en peso de la partícula con respecto a medio de fase líquida está en el intervalo de entre aproximadamente 1:2 y aproximadamente 1:1000. El tamaño de partícula está entre aproximadamente 10 nanómetros (el orden de magnitud de una única celda unidad de material 40 líquido-cristalino inverso) y 100 micras, preferiblemente entre aproximadamente 40 nm y 10 micras, y lo más preferiblemente (al menos para productos inyectables) submicras, lo que significa menos de una micra de diámetro eficaz. Se prefieren especialmente partículas que puedan hacerse pasar a través de un filtro de 0,22 micras, o extruirse de manera similar, dado que esto esteriliza el producto. Therefore, the invention provides stable, uncoated particles formed by inverse liotropic liquid-crystalline materials, for example reverse cubic liquid-crystalline or inverse hexagonal material. The particles 30 are "uncoated" because the liquid-crystalline material from which the particles are formed is in direct contact with the medium in which the particles are dispersed, that is, the outer periphery of a dispersed, individual particle. it is protected from the medium (for example, an aqueous liquid phase) in which the particles disperse. No coating interposes between the particle and the medium, or between a particle and other particles. Rather, the particles repel each other and remain dispersed in the medium by strong electrostatic surface potentials. Strong electrostatic surface potentials of this type are created by the appropriate choice of the "components" that combine to compose the liquid-crystalline material from which the particles are formed, as taught herein. In general, the weight ratio of the particle with respect to liquid phase medium is in the range of between about 1: 2 and about 1: 1000. The particle size is between about 10 nanometers (the order of magnitude of a single unit cell of inverse liquid-crystalline material 40) and 100 microns, preferably between about 40 nm and 10 microns, and most preferably (at least for injectable products ) submicras, which means less than one micron in diameter effective. Particularly preferred are particles that can be passed through a 0.22 micron filter, or extruded in a similar manner, since this sterilizes the product.

En algunas realizaciones de la invención, un compuesto activo, normalmente aunque no siempre un compuesto 45 farmacéutico, se disuelve o se dispersa o se incorpora de otro modo dentro del propio material de fase líquido-cristalina. Preferiblemente, en esta realización, el compuesto activo y el material líquido-cristalino forman una unidad integrada, íntimamente asociada, es decir, el compuesto activo es parte del cristal líquido. Una ventaja de una partícula de este tipo es que el compuesto activo obtiene el beneficio de las capacidades de promoción de la absorción del cristal líquido, de una manera que es superior a las configuraciones de partículas descritas en otra parte, en las que el agente activo 50 está presente principalmente fuera del cristal líquido, o dentro de una partícula de cristal líquido que está recubierta con un recubrimiento de interferencia. En efecto, se prevé que en muchos casos, la mayoría de agentes activos permanecerán asociados con el cristal líquido hasta el punto en el que el cristal líquido se integre con, por ejemplo, una membrana celular seleccionada como diana, eliminando de ese modo la necesidad de disolver el agente activo en un líquido biológico acuoso (por ejemplo, sangre, líquido intestinal) de camino a la captación celular. Si la partícula se capta 55 mediante endocitosis, entonces la misma capacidad para fusionarse con las biomembranas podría desempeñar un papel clave en la superación de una limitación que se aplica a los liposomas, concretamente la del atrapamiento dentro de los compartimentos endosómicos y que da lugar a una escasa administración al/a los sitio(s) intracelular(es). También tiene un gran impacto en el presente documento que todo esto puede llevarse a cabo dentro del contexto, y restricciones extremas, de las formulaciones inyectables incluyendo formulaciones farmacéuticas intravenosas. 60 In some embodiments of the invention, an active compound, usually but not always a pharmaceutical compound, is dissolved or dispersed or otherwise incorporated into the liquid-crystalline phase material itself. Preferably, in this embodiment, the active compound and the liquid-crystalline material form an integrated, intimately associated unit, that is, the active compound is part of the liquid crystal. An advantage of such a particle is that the active compound obtains the benefit of the promotion abilities of liquid crystal absorption, in a manner that is superior to the particle configurations described elsewhere, in which the active agent 50 is present primarily outside the liquid crystal, or within a liquid crystal particle that is coated with an interference coating. Indeed, it is anticipated that in many cases, most active agents will remain associated with the liquid crystal to the point where the liquid crystal is integrated with, for example, a cell membrane selected as a target, thereby eliminating the need of dissolving the active agent in an aqueous biological liquid (for example, blood, intestinal fluid) on the way to cellular uptake. If the particle is captured by endocytosis, then the same ability to merge with the biomembranes could play a key role in overcoming a limitation that applies to liposomes, specifically that of entrapment within the endosomal compartments and that results in poor administration to the intracellular site (s). It also has a great impact in the present document that all this can be carried out within the context, and extreme restrictions, of injectable formulations including intravenous pharmaceutical formulations. 60

En otra realización de la invención, el agente o compuesto activo no es parte del material líquido-cristalino que forma la partícula no recubierta, sino que es o bien un líquido que se incluye dentro de la partícula no recubierta, o bien se solubiliza en un líquido que se incluye, se disuelve, se dispersa o se incorpora de otro modo dentro de la partícula no recubierta. Aún en otra realización, el agente activo se dispersa dentro de partícula no recubierta en forma de microcristales del compuesto. 5 In another embodiment of the invention, the active agent or compound is not part of the liquid-crystalline material that forms the uncoated particle, but is either a liquid that is included within the uncoated particle, or is solubilized in a liquid that is included, dissolved, dispersed or otherwise incorporated into the uncoated particle. In yet another embodiment, the active agent is dispersed within an uncoated particle in the form of microcrystals of the compound. 5

Por tanto, es un objeto de esta invención proporcionar micropartículas cargadas con agente activo que pueden administrarse, que se benefician completamente del potencial de promoción de la absorción y solubilización del fármaco de las micropartículas de fase líquido-cristalina cúbica inversa y hexagonal inversa, no disminuido por los efectos de los recubrimientos. Therefore, it is an object of this invention to provide microparticles loaded with active agent that can be administered, which fully benefit from the potential for promoting the drug absorption and solubilization of the liquid-crystalline inverse and inverse hexagonal, non-diminished crystalline phase microparticles. by the effects of the coatings.

Es un objeto de esta invención proporcionar micropartículas cargadas con agente activo que pueden 10 administrarse, que presentan interacciones no impedidas, directas con biomembranas que pueden promover fuertemente la absorción y/o permitir el direccionamiento. It is an object of this invention to provide microparticles loaded with active agent that can be administered, which have unimpeded, direct interactions with biomembranes that can strongly promote absorption and / or allow addressing.

Es otro objeto de esta invención proporcionar dispersiones estables de micropartículas líquido-cristalinas liotrópicas cargadas con agente activo de este tipo para inyección. It is another object of this invention to provide stable dispersions of liotropic liquid-crystalline microparticles loaded with active agent of this type for injection.

En el presente documento, se proporcionan las composiciones y los criterios de diseño que producirán 15 dispersiones de partículas estabilizadas de material de fase líquido-cristalina inversa. Hereby, the compositions and design criteria that will produce 15 dispersions of stabilized particles of inverse liquid-crystalline phase material are provided.

En el presente documento, se proporcionan los criterios y procedimientos experimentales mediante los que se determina si una composición particular producirá dispersiones de partículas estabilizadas de material de fase líquido-cristalina inversa. Here, experimental criteria and procedures are provided by which it is determined whether a particular composition will produce dispersions of stabilized particles of inverse liquid-crystalline phase material.

Es otro objeto de esta invención proporcionar composiciones con propiedades fisicoquímicas necesarias para 20 producir suficiente estabilización de la carga superficial. It is another object of this invention to provide compositions with physicochemical properties necessary to produce sufficient stabilization of the surface charge.

En el presente documento, se proporcionan métodos para estabilizar partículas no recubiertas de materiales de fase líquido-cristalina inversa. Here, methods are provided for stabilizing uncoated particles of liquid-crystalline reverse phase materials.

En el presente documento, se proporcionan formulaciones de nanocristales de fármacos en las que la matriz de estabilización puede servir para las funciones adicionales de potenciación de la absorción de fármacos y solubilización 25 de otros excipientes útiles para su asociación íntima con el fármaco. Herein, nanocrystal formulations of drugs are provided in which the stabilization matrix can serve the additional functions of enhancing drug absorption and solubilization of other excipients useful for intimate association with the drug.

Es otro objeto de esta invención proporcionar composiciones que producen partículas de carga estabilizada y dispersiones de las mismas tras la reconstitución con agua. It is another object of this invention to provide compositions that produce stabilized filler particles and dispersions thereof after reconstitution with water.

Además, es un objeto importante de esta invención proporcionar nuevas composiciones para la administración de agentes terapéuticos contra el cáncer, agentes anestésicos locales y anestésicos generales, y agentes de reversión 30 de la anestesia. Éstos incluyen en particular propofol, alfaxalona, alfatalona, alfadolona, eltanolona, propanidid, ketamina, pregnanolona, etomidato, y otros anestésicos generales; bupivacaína, lidocaína, procaína, tetracaína, mepivacaína, etidocaína, oxibuprocaína, cocaína, benzocaína, pramixinina, prilocaína, proparacaína, ropivicaínas, cloroprocaína, dibucaína y anestésicos locales relacionados; SN-38 y camptotecinas relacionadas; paclitaxel y taxanos relacionados; doxorubicina, idarubicina, daunorubicina y rubicinas relacionadas; anfotericina B; coenzima Q10; 35 esteroides y agentes antiinflamatorios esteroideos; antiinflamatorios no esteroideos (por ejemplo, salicilatos, derivados de para-aminofenol (por ejemplo, paracetamol), fenomatos, derivados de ácido propiónico (por ejemplo, naproxeno, ibuprofeno, etc.); analgésicos; antipiréticos; sedantes (por ejemplo, benzodiazepinas tales como diazepam); hipnóticos (por ejemplo, anestésicos intravenosos y barbitúricos); opiáceos; cannabinoides; y proteínas (por ejemplo, insulina y eritropoyetina) (ha de entenderse que una amplia variedad de amidas y ésteres pueden tener aplicación en la presente 40 invención). De importancia particular es el agente anestésico general propofol, que se suministra en formulaciones que presentan problemas de ardor en la inyección, contaminación microbiana y altas cargas de lípidos. Furthermore, it is an important object of this invention to provide new compositions for the administration of cancer therapeutic agents, local anesthetic agents and general anesthetics, and anesthetic reversal agents. These include in particular propofol, alfaxalone, alfatalone, alfadolone, eltanolone, propanidid, ketamine, pregnanolone, etomidate, and other general anesthetics; bupivacaine, lidocaine, procaine, tetracaine, mepivacaine, etidocaine, oxybuprocaine, ***e, benzocaine, pramixinin, prilocaine, proparacaine, ropivicains, chloroprocaine, dracaine and related local anesthetics; SN-38 and related camptothecins; paclitaxel and related taxanes; doxorubicin, idarubicin, daunorubicin and related rubicins; amphotericin B; coenzyme Q10; 35 steroids and steroidal anti-inflammatory agents; non-steroidal anti-inflammatories (e.g. salicylates, para-aminophenol derivatives (e.g., paracetamol), pheromates, propionic acid derivatives (e.g., naproxen, ibuprofen, etc.); analgesics; antipyretics; sedatives (e.g., benzodiazepines such as diazepam); hypnotics (for example, intravenous and barbiturate anesthetics); opiates; cannabinoids; and proteins (for example, insulin and erythropoietin) (it is understood that a wide variety of amides and esters may have application in the present invention) Of particular importance is the general anesthetic agent propofol, which is supplied in formulations that present problems of burning in the injection, microbial contamination and high lipid loads.

La invención también contempla formulaciones de fase líquido-cristalina inversa que aumentan la duración de acción de los agentes farmacológicos sin aumento de la dosis, y/o proporcionan la misma duración y eficacia a la dosis recomendada habitual. En el caso de administración de fármacos de acción sostenida que implica fármacos de índice 45 terapéutico relativamente bajo, es crucial observar que el aumento de la dosificación, que se asume tácitamente que es inevitable en la mayoría de los casos, es muy peligroso. Esto se ilustra particularmente bien mediante el caso de los anestésicos locales, tales como bupivacaína. En particular, la dosis cardiotóxica es, para la mayoría de anestésicos locales, sólo moderadamente superior a la dosificación recomendada habitual para los bloqueos nerviosos. Específicamente en el caso de la bupivacaína, uno de los anestésicos locales de acción más prolongada y por tanto una 50 de las mejores elecciones de fármaco para una formulación de acción prolongada, la dosificación recomendada para el bloqueo nervioso es de un máximo de 1,5 mg/kg basándose en el peso del animal/ser humano, mientras que dosis superiores a 3 mg/kg pueden ser cardiotóxicas o inducir convulsiones. Este índice terapéutico bastante bajo significa que los métodos habituales para lograr una acción sostenida, basados en el envasado de cantidades más grandes del fármaco en una formulación que lo libera lentamente, de modo que se mantienen los niveles del fármaco en o por 55 encima del nivel umbral para una acción eficaz, requieren inevitablemente dosis próximas a, o superiores a, la dosis tóxica en una única administración. Debido al peligro siempre presente de una inyección involuntaria en una vena o The invention also contemplates inverse liquid-crystalline phase formulations that increase the duration of action of the pharmacological agents without increasing the dose, and / or provide the same duration and efficacy at the usual recommended dose. In the case of administration of drugs of sustained action involving drugs of relatively low therapeutic index, it is crucial to note that the increase in dosage, which is tacitly assumed to be unavoidable in most cases, is very dangerous. This is particularly well illustrated by the case of local anesthetics, such as bupivacaine. In particular, the cardiotoxic dose is, for most local anesthetics, only moderately higher than the usual recommended dosage for nerve blocks. Specifically in the case of bupivacaine, one of the longest acting local anesthetics and therefore 50 of the best drug choices for a long acting formulation, the recommended dosage for nerve block is a maximum of 1.5 mg / kg based on the weight of the animal / human being, while doses greater than 3 mg / kg can be cardiotoxic or induce seizures. This rather low therapeutic index means that the usual methods for achieving sustained action, based on the packaging of larger quantities of the drug in a formulation that slowly releases it, so that the drug levels are maintained at or above the level. threshold for effective action, inevitably require doses close to, or greater than, the toxic dose in a single administration. Due to the ever present danger of an involuntary injection into a vein or

arteria, una administración de este tipo puede ser potencialmente mortal, incluso en el caso en el que la acción pretendida del vehículo sea liberar el fármaco de manera suficientemente lenta para reducir el riesgo de cardiotoxicidad y convulsiones. Un vehículo que requiere, por ejemplo, más de 3 mg/kg de bupivacaína, con el fin de lograr un aumento significativo en la duración del bloqueo nervioso por encima de las 2-5 horas normales, introducirá un riesgo de letalidad que no justificará su uso rutinario, ni en los pensamientos de los organismos reguladores ni en la comunidad médica, 5 independientemente de lo que se declara en cuanto a la seguridad del vehículo. Cualquier inestabilidad de un vehículo de este tipo, ya sea física, química, inducida por cizallamiento, inducida por la temperatura, inducida por una mala aplicación o asociada con el término de caducidad pueden provocar en principio la liberación prematura del fármaco, y si una parte sustancial alcanza el corazón o el cerebro, esto sería correr el riesgo de un acontecimiento adverso grave, incluyendo la muerte. 10 artery, such an administration can be life-threatening, even in the case where the intended action of the vehicle is to release the drug slowly enough to reduce the risk of cardiotoxicity and seizures. A vehicle that requires, for example, more than 3 mg / kg of bupivacaine, in order to achieve a significant increase in the duration of the nerve block above normal 2-5 hours, will introduce a lethality risk that will not justify its Routine use, neither in the thoughts of the regulatory bodies nor in the medical community, 5 regardless of what is stated as to the safety of the vehicle. Any instability of a vehicle of this type, whether physical, chemical, induced by shear, induced by temperature, induced by a bad application or associated with the expiration term may in principle cause premature release of the drug, and if a part substantial reaches the heart or brain, this would be the risk of a serious adverse event, including death. 10

En el transcurso de esta invención, se hizo el descubrimiento sorprendente de que determinadas composiciones farmacéuticamente aceptables basadas en fases líquido-cristalinas hexagonales inversas y, más preferiblemente, cúbicas inversas pueden aumentar la duración de acción de un principio activo farmacéutico (API) mientras se evita el aumento de la dosis que corresponde normalmente a las formulaciones de acción sostenida. Una composición de este tipo puede tener la propiedad de que aumenta la duración de acción normal de este fármaco, 15 preferiblemente en más de aproximadamente un 50%, más preferiblemente en un 100% y lo más preferiblemente en un 200%, y de tal manera que este aumento en la duración de acción se produzca con dosis que no son supertóxicas, y preferiblemente subtóxicas, cuando no se introducen API ni compuestos vasoconstrictores adicionales. La prueba preferida es evaluar la duración del bloqueo nervioso, según un procedimiento descrito en detalle en el presente documento (véase el ejemplo 2), de una formulación de bupivacaína en la composición; la duración, a una dosis de 1 20 mg/kg, debe representar un aumento, preferiblemente de más de aproximadamente un 50%, de la duración de 4 horas normal, en el caso en el que no esté presente ningún API adicional. Lo más preferiblemente esta dosis en una formulación de este tipo producirá una duración de acción de más de aproximadamente 10 horas. Adicionalmente, la administración de la mitad de la dosis normal (que en el caso de la bupivacaína significa 0,5 mg/kg) debe proporcionar al menos la misma eficacia y duración que 1 mg/kg de la formulación (agente único) habitual (por ejemplo, clorhidrato de 25 bupivacaína en disolución acuosa). El descubrimiento sorprendente en el núcleo de esta invención es que cuando se invocan estas composiciones tal como se reivindican en el presente documento, puede lograrse la duración de acción farmacológica significativamente prolongada sin aumento de la dosis, en efecto, incluso con dosis drásticamente inferiores, lo que es particularmente importante en el caso de fármacos con bajo índice terapéutico tales como muchos anestésicos locales. 30 In the course of this invention, the surprising discovery was made that certain pharmaceutically acceptable compositions based on inverse hexagonal liquid-crystalline phases and, more preferably, inverse cubic can increase the duration of action of a pharmaceutical active ingredient (API) while avoiding the dose increase that normally corresponds to sustained action formulations. Such a composition may have the property that the duration of normal action of this drug increases, preferably by more than about 50%, more preferably by 100% and most preferably by 200%, and thereby that this increase in the duration of action occurs with doses that are not super-toxic, and preferably sub-toxic, when no API or additional vasoconstrictor compounds are introduced. The preferred test is to evaluate the duration of the nerve block, according to a procedure described in detail herein (see example 2), of a formulation of bupivacaine in the composition; the duration, at a dose of 1 20 mg / kg, should represent an increase, preferably more than about 50%, of the normal 4-hour duration, in the case where no additional API is present. Most preferably this dose in such a formulation will produce a duration of action of more than about 10 hours. Additionally, administration of half of the normal dose (which in the case of bupivacaine means 0.5 mg / kg) should provide at least the same efficacy and duration as 1 mg / kg of the usual formulation (single agent) ( for example, bupivacaine hydrochloride in aqueous solution). The surprising discovery at the core of this invention is that when these compositions are invoked as claimed herein, the significantly prolonged duration of pharmacological action can be achieved without increasing the dose, in fact, even with drastically lower doses, which is particularly important in the case of drugs with low therapeutic index such as many local anesthetics. 30

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

La figura 1 muestra un esquema de una dispersión según la presente invención. Figure 1 shows a scheme of a dispersion according to the present invention.

La figura 2 muestra un esquema de la situación electroestática en una partícula representativa de la presente invención, con una carga superficial negativa neta. Figure 2 shows a schematic of the electrostatic situation in a representative particle of the present invention, with a net negative surface charge.

La figura 3 muestra la distribución de potencial zeta medida resultante, usando tres ángulos de medición para 35 la dispersión descrita en el ejemplo 1. Figure 3 shows the resulting measured zeta potential distribution, using three measuring angles for the dispersion described in example 1.

La figura 4 muestra la distribución de potencial zeta medida para una dispersión en presencia de agua en exceso descrita en el ejemplo 2. Figure 4 shows the distribution of zeta potential measured for a dispersion in the presence of excess water described in example 2.

La figura 5 muestra el comportamiento de fase en presencia de agua en exceso tal como se analiza con un microscopio óptico de polarización para la dispersión descrita en el ejemplo 2. 40 Figure 5 shows the phase behavior in the presence of excess water as analyzed with an optical polarization microscope for the dispersion described in Example 2. 40

La figura 6 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 5. Figure 6 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 5.

La figura 7 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 6. Figure 7 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 6.

La figura 8 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 7. Figure 8 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 7.

La figura 9 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 8. Figure 9 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 8.

La figura 10 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 10. 45 Figure 10 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 10. 45

La figura 11 muestra los datos de potencial zeta para el dantroleno sódico sólo con benzalconio (es decir, no está presente ninguna fase cúbica) tal como se describe en el ejemplo 10. Figure 11 shows zeta potential data for sodium dantrolene with benzalkonium only (i.e. no cubic phase is present) as described in example 10.

La figura 12 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 11. Figure 12 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 11.

La figura 13 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 12. Figure 13 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 12.

La figura 14 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 13. 50 Figure 14 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 13. 50

La figura 15 muestra los datos de tamaño de partícula para la dispersión descrita en el ejemplo 21. Figure 15 shows the particle size data for the dispersion described in example 21.

La figura 16 muestra los datos de potencial zeta para la dispersión descrita en el ejemplo 21. Figure 16 shows the zeta potential data for the dispersion described in example 21.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS REALIZACIONES PREFERIDAS DE LA INVENCIÓN DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS OF THE INVENTION

El inventor ha demostrado la relación entre las propiedades de curvatura de los lípidos, y su tendencia a promover la porosidad en bicapas y a formar fases cúbicas inversas y otras fases inversas. Véase Anderson D.M., Wennerstrom, H. y Olsson, U., J. Phys. Chem. 1989, 93:4532-4542. Para resumir un aspecto crucial de esto, si se supone un modelo matemático en el que el espesor de bicapa es constante, y que el plano medio de la bicapa puede 5 diferenciarse dos veces, puede demostrarse en primer lugar que, con el fin de minimizar las energías de curvatura desfavorables, el plano medio debe tener en todas partes curvatura media de cero. A continuación, en estas condiciones, entonces puede demostrarse que si la curvatura media promedio en la interfase polar-apolar es hacia el agua, como lo es en una fase líquido-cristalina inversa, entonces la curvatura gaussiana integral es significativamente negativa. Entonces, la curvatura gaussiana integral negativa implica porosidad en el sistema de bicapa. Una conclusión 10 del análisis completo extraído por el inventor es que, si una composición que se ensambla en una fase de bicapa porosa, tal como una fase cúbica inversa, comienza a intercambiar material con una membrana, tal como una biomembrana, puede inducir una tendencia local a la curvatura inversa (curvatura hacia el agua en la interfase polar-apolar), e induce de ese modo porosidad en la biomembrana. Esto puede ser de gran importancia en la administración de fármacos a través de barreras de biomembrana para la absorción, lo que constituye una ventaja inherente de una 15 fase cúbica inversa o hexagonal inversa con respecto a un material laminar o liposómico en la práctica de la administración de fármacos, particularmente en la administración de fármacos anticancerígenos y otros fármacos cuando las barreras de absorción son problemas muy significativos en el tratamiento terapéutico. The inventor has demonstrated the relationship between the properties of lipid curvature, and his tendency to promote porosity in bilayers and to form inverse cubic phases and other inverse phases. See Anderson D.M., Wennerstrom, H. and Olsson, U., J. Phys. Chem. 1989, 93: 4532-4542. To summarize a crucial aspect of this, if a mathematical model is assumed in which the thickness of bilayer is constant, and that the average plane of the bilayer can be differentiated twice, it can first be demonstrated that, in order to minimize Unfavorable curvature energies, the average plane must have average zero curvature everywhere. Then, under these conditions, then it can be shown that if the average average curvature at the polar-apolar interface is towards the water, as it is in an inverse liquid-crystalline phase, then the integral Gaussian curvature is significantly negative. Then, the negative integral Gaussian curvature implies porosity in the bilayer system. A conclusion 10 of the complete analysis extracted by the inventor is that, if a composition that is assembled in a porous bilayer phase, such as an inverse cubic phase, begins to exchange material with a membrane, such as a biomembrane, it can induce a tendency local to the inverse curvature (curvature towards the water in the polar-apolar interface), and thereby induces porosity in the biomembrane. This can be of great importance in the administration of drugs through biomembrane barriers for absorption, which constitutes an inherent advantage of an inverse cubic phase or inverse hexagonal with respect to a laminar or liposomal material in the practice of administration. of drugs, particularly in the administration of anticancer drugs and other drugs when absorption barriers are very significant problems in therapeutic treatment.

En vista de esta relación, la tendencia a inducir o formar microestructuras porosas se considera en el presente contexto que es ventajosa con respecto a la administración de fármacos y nutrientes en particular, así como en otras 20 aplicaciones, porque promueve la integración de micropartículas basadas en lípidos (o basadas en tensioactivos) administradas con las biomembranas que forman de otra manera barreras para la absorción. Esto está en marcado contraste con las estructuras lipídicas laminares tales como liposomas que muestran baja curvatura, y poca o ninguna porosidad, y no muestran generalmente tendencias fuertes a integrarse con las biomembranas. Un aspecto muy importante de esto es que también puede permitir que materiales de fase cúbica superen proteínas de flujo de salida 25 tales como glicoproteína P (gp-p). El inventor reconoce que es crucial prever un contacto lo más íntimo posible entre el material de fase líquido-cristalina inversa y cualquier barrera biológica (u otra) inherente en la aplicación de la invención. Los ejemplos de barreras de este tipo que son de interés particular como barreras que pueden superarse mediante la presente invención incluyen: membranas plasmáticas de células que son sitios de acción farmacológica; la barrera hematoencefálica; membranas apicales de células epiteliales intestinales; membranas de macrofases; membranas de 30 células neuronales, membranas intracelulares tales como la membrana mitocondrial o la membrana nuclear; y membranas celulares de la mucosa bucal o nasal. In view of this relationship, the tendency to induce or form porous microstructures is considered in the present context that is advantageous with respect to the administration of drugs and nutrients in particular, as well as in other 20 applications, because it promotes the integration of microparticles based on lipids (or surfactant-based) administered with biomembranes that otherwise form barriers to absorption. This is in stark contrast to laminar lipid structures such as liposomes that show low curvature, and little or no porosity, and generally do not show strong tendencies to integrate with biomembranes. A very important aspect of this is that it can also allow cubic phase materials to overcome outflow proteins such as P-glycoprotein (gp-p). The inventor recognizes that it is crucial to provide as intimate contact as possible between the reverse liquid-crystalline phase material and any biological (or other) barrier inherent in the application of the invention. Examples of barriers of this type that are of particular interest as barriers that can be overcome by the present invention include: plasma membranes of cells that are sites of pharmacological action; the blood brain barrier; apical membranes of intestinal epithelial cells; macrophage membranes; 30 neuronal cell membranes, intracellular membranes such as the mitochondrial membrane or the nuclear membrane; and cell membranes of the oral or nasal mucosa.

Sin embargo, aunque se han desarrollado varios métodos para formular micropartículas de fases líquido-cristalinas inversas, la inclusión de una fase de recubrimiento de estabilización ha conducido al desarrollo de partículas con propiedades de promoción de la absorción atenuadas, dado que las interacciones con las biomembranas se ven 35 afectadas entonces por las propiedades del recubrimiento, en vez de la propia fase líquido-cristalina inversa. Por tanto, aunque a menudo los recubrimientos de este tipo sirven como una función útil, en algunos casos el recubrimiento puede ser indeseable. However, although several methods have been developed to formulate microparticles of inverse liquid-crystalline phases, the inclusion of a stabilization coating phase has led to the development of particles with attenuated absorption promotion properties, given that interactions with biomembranes they are then affected by the properties of the coating, instead of the inverse liquid-crystalline phase itself. Therefore, although coatings of this type often serve as a useful function, in some cases the coating may be undesirable.

En esta invención, se dispersan micropartículas cargadas con fármaco de fases líquido-cristalinas cúbica inversa y hexagonal inversa en un líquido tal como agua, sin ningún recubrimiento, permitiendo así interacciones 40 directas entre el cristal líquido y las barreras biológicas. Además, esto puede lograrse usando sólo componentes que son farmacéuticamente aceptables para inyección, incluyendo inyección intravenosa, un requisito necesario para el uso de dispersiones de este tipo en determinadas aplicaciones críticas de administración de fármacos. Esto se logra en la presente invención mediante composiciones que contienen componentes asociados a bicapa, cargados de manera iónica, que producen un potencial electroestático en las partículas lo suficientemente fuerte como para estabilizar las 45 dispersiones de partículas frente a la agregación, floculación y fusión; concretamente que tienen un potencial zeta superior a o igual a aproximadamente 25 mV de magnitud, o más preferiblemente superior a aproximadamente 30 mV de magnitud. Por tanto, la invención representa un punto de partida fundamental a partir de las partículas, y enseñanzas, de la técnica anterior basada en las fases líquido-cristalinas inversas con un recubrimiento, es decir, en la que una fase adicional en el exterior de la partícula estabiliza las dispersiones de partículas de este tipo. 50 In this invention, microparticles loaded with liquid-crystalline inverse and inverse hexagonal phase crystalline drug are dispersed in a liquid such as water, without any coating, thus allowing direct interactions between the liquid crystal and the biological barriers. In addition, this can be achieved using only components that are pharmaceutically acceptable for injection, including intravenous injection, a necessary requirement for the use of such dispersions in certain critical drug delivery applications. This is achieved in the present invention by compositions containing bilayer-associated components, charged in an ionic manner, which produce an electrostatic potential in the particles strong enough to stabilize the dispersions of particles against aggregation, flocculation and fusion; specifically that they have a zeta potential greater than or equal to approximately 25 mV in magnitude, or more preferably greater than approximately 30 mV in magnitude. Therefore, the invention represents a fundamental starting point from the particles, and teachings, of the prior art based on the inverse liquid-crystalline phases with a coating, that is, in which an additional phase on the outside of the particle stabilizes dispersions of particles of this type. fifty

La patente estadounidense 5.531.925 proporciona un ejemplo de la suposición tácita con respecto a las enseñanzas previas de que un recubrimiento a) se requiere para estabilizar partículas líquido-cristalinas, y b) no interfiere con la función de la partícula. Las partículas descritas en el documento U.S. 5.531.925 se recubren con fases superficiales que comprenden fases L3 y fases líquido-cristalinas laminares o fases cristalinas laminares que son obstrucciones inherentes a la función. Estas fases superficiales, en analogía próxima con los liposomas basados en 55 fases líquido-cristalinas laminares y fases cristalinas laminares, presentan varias desventajas y limitaciones, más particularmente interacciones desfavorables con biomembranas que limitan su capacidad para administrar su carga útil a las células. En efecto, no sólo se hace que estas fases superficiales intermedias impidan la entrada del vehículo en la célula diana, sino que además, tras la entrada, que normalmente requiere endocitosis, la partícula queda atrapada en un endosoma que representa todavía otra barrera para la administración. Se conocen muy bien limitaciones de este tipo en 60 el campo de la administración de fármacos basada en liposomas. Son particularmente limitativas en el caso de formulaciones de fármacos inyectables, en las que las barreras para la captación del vehículo por parte de la célula US Patent 5,531,925 provides an example of the unspoken assumption regarding prior teachings that a coating a) is required to stabilize liquid-crystalline particles, and b) does not interfere with the function of the particle. The particles described in U.S. 5,531,925 are coated with surface phases comprising L3 phases and laminar liquid-crystalline phases or laminar crystalline phases that are inherent obstructions to the function. These surface phases, in close analogy with liposomes based on lamellar liquid-crystalline phases and laminar crystalline phases, present several disadvantages and limitations, more particularly unfavorable interactions with biomembranes that limit their ability to administer their payload to cells. In fact, not only are these intermediate surface phases prevented from entering the vehicle in the target cell, but also, after entry, which normally requires endocytosis, the particle is trapped in an endosome that still represents another barrier to administration. . Limitations of this type are well known in the field of liposome-based drug administration. They are particularly limiting in the case of injectable drug formulations, in which the barriers to vehicle uptake by the cell

diana aumentan la probabilidad de que se capte el vehículo mediante mecanismos alternativos desfavorables o incluso que provocan toxicidad, tal como mediante el hígado o el sistema inmunitario. target increase the likelihood of the vehicle being captured by alternative mechanisms that are unfavorable or even cause toxicity, such as by the liver or the immune system.

En el caso de recubrimientos que consisten en fases superficiales L3, la tendencia a que la fase L3 presente sólo interacciones que favorecen la absorción muy limitadas con biomembranas se debe probablemente a su estructura altamente dinámica, y/o su capacidad, y tendencia, a reorganizarse muy rápidamente en una estructura laminar o de 5 tipo laminar, que se correlaciona con su birrefringencia de cizallamiento observada, la presencia de un desdoblamiento en las mediciones de la forma de banda de RMN de pulsos, y su transformación en una fase laminar con el tiempo (véase el documento U.S. 5.531.925 columna 7, líneas 37-48 y columna 15, líneas 5-36). En efecto, el efecto “de lubricación” de las fases L3, que es lo que aparentemente las hacen eficaces como “fases dispersables” en los métodos del documento 5.531.925, pueden describirse como que inducen una tendencia a que las partículas recubiertas con L3 10 entren en contacto próximo para evitar la fusión, debido en parte a la naturaleza térmicamente enrollada, fluctuante de la fase L3 líquida que produce una fuerza de repulsión efectiva de considerable intensidad. La misma repulsión parece aplicarse a las partículas que entran en contacto próximo con las paredes de un recipiente, que se correlaciona con una falta de adhesión y flujo “deslizante” observado por Landh con sus dispersiones de partículas recubiertas con L3. Por extensión, se deduciría que las partículas recubiertas con L3 deben experimentar por su propia naturaleza una fuerza de 15 repulsión inducida por fluctuación intensa cuando se aproxima a una biomembrana, y por tanto presentar limitaciones que han afectado a la tecnología de los liposomas, particularmente con respecto a la entrada a la célula y la falta de promoción de la absorción. La naturaleza de larga circulación de las partículas recubiertas con L3, notificadas en el ejemplo de somatostatina intravenosa en conejos del documento 5.531.925 soporta la noción de que estas partículas no tienden a interaccionar íntimamente con las biomembranas, sino que prefieren permanecer en circulación evitando la 20 integración con las membranas. In the case of coatings consisting of surface phases L3, the tendency for phase L3 to present only interactions that favor very limited absorption with biomembranes is probably due to its highly dynamic structure, and / or its capacity, and tendency, to reorganize very quickly in a laminar or laminar type structure, which correlates with its observed shear birefringence, the presence of a doubling in the measurements of the pulse NMR band shape, and its transformation into a laminar phase over time (See US 5,531,925 column 7, lines 37-48 and column 15, lines 5-36). Indeed, the "lubrication" effect of the L3 phases, which is what apparently makes them effective as "dispersible phases" in the methods of document 5,531,925, can be described as inducing a tendency for the particles coated with L3 10 come into close contact to avoid melting, due in part to the thermally wound, fluctuating nature of the liquid phase L3 that produces an effective repulsive force of considerable intensity. The same repulsion seems to apply to particles that come into close contact with the walls of a container, which correlates with a lack of adhesion and "sliding" flow observed by Landh with its dispersions of particles coated with L3. By extension, it would be deduced that particles coated with L3 must by their own nature experience a force of repulsion induced by intense fluctuation when approaching a biomembrane, and therefore present limitations that have affected liposome technology, particularly with regarding the entrance to the cell and the lack of promotion of absorption. The long-circulating nature of the particles coated with L3, reported in the example of intravenous somatostatin in rabbits of document 5,531,925 supports the notion that these particles do not tend to interact intimately with the biomembranes, but prefer to remain in circulation avoiding the 20 integration with membranes.

Contribuyendo además a esta fuerza inducida por la fluctuación (que en el estudio de fases laminares estrechamente relacionadas se denomina “fuerza de ondulación”, bien estudiada por W. Helfrich) están las fuerzas inducidas por la hidratación que surgen de la fase L3 altamente hidratada. La fase L3 existe de manera bastante general a altos contenidos en agua, casi siempre a contenidos en agua superiores que cualquier fase cúbica que esté próxima 25 en el espacio de la composición; Landh y Larsson observan, de hecho, que cuando una fase L3 y una fase cúbica están en equilibro, que las dimensiones características de la fase L3 son aproximadamente el doble que las de la fase cúbica, y esto corresponde a un contenido en agua considerablemente superior, una conclusión que se vuelve obvia adicionalmente mediante el propio diagrama de fases en el que el contenido en agua en la fase L3 es superior al de la fase cúbica. Se conoce bien en la técnica que las superficies fuertemente hidratadas experimentan una fuerza de 30 repulsión considerable tras aproximarse a una biomembrana. Se conoce que los tensioactivos de alto HLB, altamente polioxietilados (pegilados), que están presentes en grandes proporciones de fracciones en peso en las fases L3 de las realizaciones notificadas en el documento U.S. 5.531.925 están fuertemente hidratadas a temperaturas ambientales o corporales. En la presente invención, en el caso en el que las partículas se estabilizan mediante un potencial zeta negativo, esto dará lugar a una fuerza de repulsión tras el contacto próximo con una biomembrana típica, pero debido a 35 la baja magnitud del potencial zeta de una biomembrana típica, la fuerza será débil en comparación con las fuerzas inducidas por la hidratación y la fluctuación combinadas en el caso de partículas recubiertas con L3. En casos de la presente invención en los que un potencial zeta positivo estabiliza las partículas, esto dará lugar a una fuerza de atracción. Las fuerzas de hidratación en el caso de partículas de la presente invención pueden mantenerse débiles, tal como se manifiesta mediante bajos contenidos en agua de las fases líquido-cristalinas inversas incluso cuando se 40 incorpora el compuesto asociado a bicapa, cargado, directamente en la fase líquido-cristalina, tal como se muestra en varios de los casos notificados en la sección de ejemplos, más adelante. Also contributing to this force induced by fluctuation (which in the study of closely related laminar phases is called "undulation force", well studied by W. Helfrich) are the forces induced by hydration that arise from the highly hydrated phase L3. The L3 phase exists quite generally at high water contents, almost always at higher water contents than any cubic phase that is close to 25 in the composition space; Landh and Larsson observe, in fact, that when an L3 phase and a cubic phase are in equilibrium, that the characteristic dimensions of the L3 phase are approximately double that of the cubic phase, and this corresponds to a considerably higher water content , a conclusion that becomes additionally obvious by the phase diagram itself in which the water content in phase L3 is higher than that of the cubic phase. It is well known in the art that strongly hydrated surfaces experience considerable repulsion force after approaching a biomembrane. It is known that high polyoxyethylated (pegylated) high HLB surfactants, which are present in large proportions of fractions by weight in phases L3 of the embodiments reported in U.S. document. 5,531,925 are strongly hydrated at ambient or body temperatures. In the present invention, in the case where the particles are stabilized by a negative zeta potential, this will result in a repulsive force after close contact with a typical biomembrane, but due to the low magnitude of the zeta potential of a Typical biomembrane, the force will be weak compared to the forces induced by hydration and fluctuation combined in the case of particles coated with L3. In cases of the present invention in which a positive zeta potential stabilizes the particles, this will result in an attractive force. The hydration forces in the case of particles of the present invention can be kept weak, as manifested by low water contents of the inverse liquid-crystalline phases even when the bilayer-associated compound, charged, is incorporated directly into the phase. liquid-crystalline, as shown in several of the cases reported in the examples section, below.

La presencia de otra fase que recubre la superficie de las partículas mencionadas anteriormente no sólo puede interponerse e interrumpir las interacciones potencialmente favorables entre el cristal líquido y las barreras de biomembrana para la absorción, sino que también pueden crear numerosos problemas prácticos y experimentales. La 45 interpretación del rendimiento in vivo y la elucidación del mecanismo de acción de la formulación están complicadas por supuesto por la presencia de un recubrimiento, que puede tener un impacto considerable en el desarrollo y la aplicación de una formulación farmacéutica inyectable. En el caso de recubrimientos de fase L3, incluso la existencia de la fase L3 es difícil de validar de manera experimental, mucho menos caracterizar, tal como se indica por ejemplo en las líneas 29-33 de la columna 15 del documento U.S. 5.531.925; además, tal como se indica en las líneas 41-45 de la columna 7, la 50 fase L3 a menudo es metaestable, y esto puede dar lugar a cambios farmacéuticamente inaceptables en la estructura con el tiempo, tal como se demuestra en las publicaciones que tratan sobre partículas de Landh y Larsson. Véase Gustafsson, Ljusberg-Wahren, Almgren y Larsson (1996), Langmuir, 12(20):4611. Además, en el caso de partículas de la patente estadounidense 5.531.925, las composiciones que producen partículas de este tipo se limitan a las que se encuentran en regiones de 3 fases del diagrama de fases en el que la fase acuosa interior, de recubrimiento, y exterior 55 están en equilibrio termodinámico. Regiones de 3 fases de este tipo a menudo son difíciles de encontrar de manera experimental y normalmente son sensibles a la pureza del material y otras variables intensivas. The presence of another phase that covers the surface of the aforementioned particles can not only interpose and interrupt the potentially favorable interactions between the liquid crystal and the biomembrane barriers to absorption, but can also create numerous practical and experimental problems. The interpretation of in vivo performance and elucidation of the mechanism of action of the formulation are of course complicated by the presence of a coating, which can have a considerable impact on the development and application of an injectable pharmaceutical formulation. In the case of phase L3 coatings, even the existence of phase L3 is difficult to validate experimentally, much less characterize, as indicated for example in lines 29-33 of column 15 of U.S. document. 5,531,925; in addition, as indicated in lines 41-45 of column 7, the L3 phase is often metastable, and this may result in pharmaceutically unacceptable changes in the structure over time, as demonstrated in the publications that they deal with particles of Landh and Larsson. See Gustafsson, Ljusberg-Wahren, Almgren and Larsson (1996), Langmuir, 12 (20): 4611. In addition, in the case of particles of US Patent 5,531,925, the compositions that produce particles of this type are limited to those found in 3-phase regions of the phase diagram in which the inner aqueous, coating phase, and outside 55 are in thermodynamic equilibrium. 3-phase regions of this type are often difficult to find experimentally and are usually sensitive to the purity of the material and other intensive variables.

Otro aspecto valioso de la presente invención con respecto a partículas recubiertas de este tipo como las del documento 5.531.925 es el hecho de que la fase líquido-cristalina inversa es la única matriz basada en lípidos en la partícula y, por tanto, la única ubicación disponible dentro de la partícula para un compuesto activo, en contraposición 60 con las partículas recubiertas con otra fase basada en lípidos (o basada en tensioactivos), particularmente una fase L3. Cuando también está disponible una segunda fase, la fase de recubrimiento, para el agente activo, se pierde un grado de control y esto puede comprometer o incluso anular el efecto de una o más de las características que hacen la fase Another valuable aspect of the present invention with respect to coated particles of this type such as those of document 5,531,925 is the fact that the inverse liquid-crystalline phase is the only lipid-based matrix in the particle and, therefore, the only one location available within the particle for an active compound, as opposed to particles coated with another lipid-based (or surfactant-based) phase, particularly an L3 phase. When a second phase is also available, the coating phase, for the active agent, a degree of control is lost and this can compromise or even cancel out the effect of one or more of the characteristics that make the phase

líquido-cristalina inversa la matriz de elección en primer lugar. Por ejemplo, si se usa el tamaño de poro controlado de la fase líquido-cristalina inversa para controlar o bien el flujo de salida de un agente activo de molécula grande fuera del cristal líquido, o bien la penetración de una proteína de proteína de adsorción (por ejemplo, albúmina) o de degradación (por ejemplo, proteasa, nucleasa, glicosidasa), entonces esto se ve comprometido si una fracción significativa del agente activo está presente en la fase de recubrimiento; se sabe que el tamaño de poro efectivo del recubrimiento de 5 fase L3 es mayor que el de la fase interior en un factor de dos, normalmente. Es importante observar en un caso de este tipo que en general, los componentes de estas fases líquido-cristalinas que incluyen el agente activo difunden a su alrededor dentro de la partícula, de modo que el agente activo se ubicará en la fase de recubrimiento una determinada fracción del tiempo, y durante estos periodos puede ser susceptible al ataque. Inverse liquid-crystalline matrix of choice first. For example, if the controlled pore size of the reverse liquid-crystalline phase is used to control either the outflow of a large-molecule active agent outside the liquid crystal, or the penetration of an adsorption protein protein ( for example, albumin) or degradation (for example, protease, nuclease, glycosidase), then this is compromised if a significant fraction of the active agent is present in the coating phase; It is known that the effective pore size of the 5 phase L3 coating is larger than that of the inner phase by a factor of two, normally. It is important to observe in such a case that in general, the components of these liquid-crystalline phases that include the active agent diffuse around them within the particle, so that the active agent will be located in the coating phase a certain fraction of the time, and during these periods may be susceptible to attack.

La figura 1 muestra un esquema de una dispersión de partículas no recubiertas según la presente invención. 10 Las letras “D” indican que el fármaco (o más generalmente, el agente activo) está presente en la fase cúbica inversa o la fase hexagonal inversa. En realizaciones alternativas, el fármaco o agente activo D se disuelve o se dispersa o se inserta o se incorpora de otro modo dentro de la partícula. En una variación, el fármaco o el agente activo D puede incorporarse en una fase de aceite que se coloca dentro de la partícula. Figure 1 shows a scheme of a dispersion of uncoated particles according to the present invention. 10 The letters "D" indicate that the drug (or more generally, the active agent) is present in the inverse cubic phase or the inverse hexagonal phase. In alternative embodiments, the active drug or agent D is dissolved or dispersed or inserted or otherwise incorporated into the particle. In a variation, the drug or active agent D can be incorporated into an oil phase that is placed within the particle.

La figura 2 muestra un esquema de la configuración electrostática en una partícula no recubierta representativa 15 de la presente invención, con una carga iónica superficial negativa neta. Los signos “+” representan restos catiónicos y los signos “-” representan restos aniónicos, que en este caso incluiría los compuestos asociados a bicapa, cargados, utilizados en la invención. A medida que se aleja de la superficie (cargada de manera aniónica) de la partícula, la preponderancia de las cargas negativas disminuye. La medición del potencial zeta mide el potencial debido al exceso de cargas iónicas (en este caso, aniónicas) en el plano de cizallamiento, que se desplaza desde la superficie de la 20 partícula. Sin embargo, al menos en las condiciones usadas en los ejemplos a continuación y de manera bastante amplia en la práctica de esta invención, el plano de a base de aceite aún se encuentra dentro de la capa de Debye, que está a una distancia (la longitud de Debye) de la superficie de la partícula en la que ya no existe un exceso neto de aniones. Figure 2 shows a schematic of the electrostatic configuration in a representative uncoated particle 15 of the present invention, with a net negative surface ionic charge. The "+" signs represent cationic moieties and the "-" signs represent anionic moieties, which in this case would include the bilayer-associated, charged compounds used in the invention. As you move away from the surface (anionically charged) of the particle, the preponderance of negative charges decreases. The zeta potential measurement measures the potential due to the excess of ionic charges (in this case, anionic) in the shear plane, which travels from the surface of the particle. However, at least under the conditions used in the examples below and quite broadly in the practice of this invention, the oil-based plane is still within the Debye layer, which is at a distance (the Debye length) of the surface of the particle in which there is no longer a net excess of anions.

En el presente documento, se proporcionan métodos que son útiles para sostener la acción de los API 25 (principio activo farmacéutico) en un paciente sin aumentar, en muchos casos disminuyendo, la dosis administrada. La aplicación de estos métodos para la administración de anestésicos locales produce resultados que confirman el efecto de las composiciones logrando aumentos en la duración no logrados hasta ahora a una dosis normal, y/o la misma duración a una dosis significativamente inferior, y al mismo tiempo proporciona métodos de administración de anestésicos locales que son de alta utilidad potencial en sí mismos. De importancia particular es la descripción en el 30 presente documento de las formulaciones líquido-cristalinas inversas de bupivacaína que producen bloqueos nerviosos de más de 16 horas de duración, cuando en condiciones idénticas la formulación comercializada actualmente produce una duración de 2-5 horas del bloqueo nervioso. Una formulación líquido-cristalina, estrechamente relacionada, del fármaco anticancerígeno paclitaxel produce excelente absorción oral que conduce a niveles en sangre de paclitaxel de duración ampliada. 35 In this document, methods are provided that are useful for sustaining the action of API 25 (active pharmaceutical ingredient) in a patient without increasing, in many cases decreasing, the administered dose. The application of these methods for the administration of local anesthetics produces results that confirm the effect of the compositions achieving increases in duration not achieved so far at a normal dose, and / or the same duration at a significantly lower dose, and at the same time provides methods of administration of local anesthetics that are of high potential utility in themselves. Of particular importance is the description in the present document of the inverse liquid-crystalline formulations of bupivacaine that produce nerve blocks of more than 16 hours duration, when under identical conditions the currently marketed formulation produces a duration of 2-5 hours of blockage nervous. A closely related liquid-crystalline formulation of the anticancer drug paclitaxel produces excellent oral absorption leading to extended blood levels of paclitaxel. 35

La simple encapsulación y otras metodologías de liberación lenta simplistas han enseñado anteriormente que el aumento de la dosis es aceptable siempre que la liberación lenta supere los problemas de toxicidad aguda (sin mencionar que en muchos casos se ha realizado la suposición tácita de que el aumento de la dosis es inevitable). Sin embargo, tal como se señaló anteriormente, ésta es una suposición ingenua, al menos en el caso de los anestésicos locales y otros fármacos de estrecha razón terapéutica, porque un aumento de la dosis requiere dosis a o por encima de 40 las dosis tóxicas umbral, demasiado graves en consecuencia para ser aceptables en la práctica médica, particularmente una práctica de uso rutinario, que no es de urgencia, electiva. Simple encapsulation and other simplistic slow-release methodologies have previously taught that increasing the dose is acceptable as long as the slow release overcomes acute toxicity problems (not to mention that in many cases the tacit assumption that the increase in the dose is inevitable). However, as noted above, this is a naive assumption, at least in the case of local anesthetics and other drugs of narrow therapeutic reason, because an increase in dose requires doses at or above 40 threshold toxic doses, too serious accordingly to be acceptable in medical practice, particularly a routine use practice, which is not urgent, elective.

Las realizaciones preferidas de la presente invención, que pueden lograr una acción farmacológica altamente prolongada sin disminuir la eficacia o la introducción de fármacos adicionales, en un método que es farmacéuticamente aceptable incluso para la inyección intravenosa, ofrecen fases líquido-cristalinas nanoestructuradas de las fases líquido-45 cristalinas cúbica inversa o hexagonal inversa, concretamente de tipo inverso. Éstas pueden ser de muy baja solubilidad en agua o mostrar cinéticas de disolución muy lentas, lo que significa que mantienen su integridad como vehículos, durante al menos algún periodo de tiempo sustancial, tras la entrada en el organismo evitando de ese modo la precipitación o liberación prematura del fármaco, y se muestran prometedoras en campos tales como la administración de fármacos de liberación controlada. En trabajo motivado por la naturaleza anfífila y las nanoestructuras porosas de 50 estos materiales, que pueden conducir a interacciones muy ventajosas con las biomembranas, mucho más íntimas que en el caso de los liposomas y las gotas de emulsión, y por las altas viscosidades de estas fases que puede ser una ayuda importante en el procesamiento, se han desarrollado varias técnicas para dispersar y encapsular materiales de este tipo. Preferred embodiments of the present invention, which can achieve highly prolonged pharmacological action without decreasing the efficacy or introduction of additional drugs, in a method that is pharmaceutically acceptable even for intravenous injection, offer nanostructured liquid-crystalline phases of the liquid phases. -45 inverse cubic crystals or inverse hexagonal, specifically of the inverse type. These can be of very low solubility in water or show very slow dissolution kinetics, which means that they maintain their integrity as vehicles, for at least some substantial period of time, after entering the body thereby preventing precipitation or release premature drug, and show promise in fields such as the administration of controlled release drugs. In work motivated by the amphiphilic nature and the porous nanostructures of these materials, which can lead to very advantageous interactions with the biomembranes, much more intimate than in the case of liposomes and emulsion drops, and by the high viscosities of these phases that can be an important aid in the processing, several techniques have been developed to disperse and encapsulate materials of this type.

Las siguientes definiciones serán de ayuda. 55 The following definitions will be helpful. 55

Partícula no recubierta: tal como se usa en el presente documento, una partícula no recubierta de fase cúbica (o hexagonal) inversa es una partícula en la que el material de la fase más externa de la partícula es una fase cúbica (o hexagonal) inversa, de modo que no existe ninguna otra fase presente exterior a y en contacto con este material más externo excepto por una fase líquida (habitualmente acuosa) individual en la que las partículas se dispersan (fase de dispersión), y en la que el material de esta fase cúbica [hexagonal] inversa es una masa contigua y aislada, individual, 60 Uncoated particle: as used herein, an uncoated particle of the inverse (or hexagonal) cubic phase is a particle in which the material of the outermost phase of the particle is an inverse (or hexagonal) cubic phase , so that there is no other phase present outside and in contact with this more external material except for an individual (usually aqueous) liquid phase in which the particles disperse (dispersion phase), and in which the material of this Inverse [hexagonal] cubic phase is a contiguous and isolated mass, individual, 60

de material definiendo así una partícula individual. En esta definición “aislado” significa sustancialmente no en contacto con otras partículas de este tipo excepto por las colisiones partícula-partícula normales en el transcurso del movimiento browniano. of material thus defining an individual particle. In this definition "isolated" means substantially not in contact with other particles of this type except for normal particle-particle collisions in the course of Brownian motion.

La partícula no recubierta así definida contrasta con el documento U.S. 6.482.517 en el que hay un recubrimiento cristalino exterior a la fase líquido-cristalina, y también en contraposición con el documento U.S. 5 5.531.925 y el trabajo de P.A. Winsor citado anteriormente en los que hay una fase L3, fase laminar, o fase laminar cristalina distinta exterior a (es decir, recubrimiento) la fase líquido-cristalina inversa. Tal como se trata en el presente documento, los recubrimientos laminares y L3 en particular son antitéticos para el fin del empleo de las partículas en la potenciación de la permeabilidad para la administración de fármacos mejorada, además pueden introducir otras limitaciones y problemas prácticos. 10 The uncoated particle thus defined contrasts with U.S. 6,482,517 in which there is a crystalline coating external to the liquid-crystalline phase, and also in contrast to U.S. 5 5,531,925 and the work of P.A. Winsor cited above in which there is an L3 phase, laminar phase, or crystalline laminar phase other than (ie, coating) the inverse liquid-crystalline phase. As discussed herein, the laminate coatings and L3 in particular are antithetical for the purpose of the use of the particles in the enhancement of permeability for improved drug administration, in addition they may introduce other limitations and practical problems. 10

Debe observarse que esta definición no excluye la posibilidad de que, a una escala que es pequeña en comparación con el espesor de la fases del material más externo (habitualmente el radio de la partícula, a menos que por ejemplo esté presente un núcleo de aceite según la solicitud estadounidense n.º 10/176.112, que se incorpora al presente documento como referencia, o la partícula contiene un cristal incluido), el aspecto a escala nanométrica en la superficie de la fase del material más externo no representa el aspecto típico en la masa de esta fase del material, 15 debido al reordenamiento superficial o efectos relacionados, siempre que no exista ninguna fase extraña presente exterior a la fase líquido-cristalina en el sentido de la regla de las fases de Gibbs. Tal como se conoce bien en la técnica, las energías superficiales pueden inducir reordenamiento en la superficie de un material que puede cambiar el aspecto microscópico, como por ejemplo un remate de extremo hemisférico que cubre lo que sería una abertura de poro en el extremo de un cilindro en la fase hexagonal inversa. Sin embargo, esta dosis no indica la presencia de otra fase, en el 20 sentido termodinámico estricto de una fase. Para ilustrar, a una temperatura y presión dadas, mediante la regla de las fases de Gibbs una mezcla de lípido/agua de dos componentes puede sólo presentar dos fases en equilibrio, y aunque la superficie de una parte o partícula de fase hexagonal inversa podría mostrar una región de espesor a escala nanométrica que es rica en remates de extremo hemisféricos, con grupos polares del lípido en contacto con una fase rica en agua exterior (la segunda fase de las dos presentes), esta región no constituye una tercera fase. (Aunque se ha 25 usado el término “interfase” para describir regiones de este tipo, incluso los usuarios de este término estarán de acuerdo en que no representa una fase termodinámica distinta tal como se determina mediante la regla de las fases; más bien, una interfase, o zona interfacial, describe la superficie de la fase del material más externo). En general, el espesor de esta región reordenada en superficie será aproximadamente igual a o menor que el parámetro de red de la celda unidad, en el caso de los materiales de fase hexagonal inversa y fase cúbica inversa. Por tanto, en particular, el espesor 30 de una región reordenada en superficie de este tipo (o “interfase”) será generalmente menor que aproximadamente 30 nm, y habitualmente menor que aproximadamente 20 nm. It should be noted that this definition does not exclude the possibility that, on a scale that is small compared to the thickness of the phases of the outermost material (usually the radius of the particle, unless for example an oil core is present according to US application No. 10 / 176,112, which is incorporated herein by reference, or the particle contains a crystal included), the nanometric scale aspect on the surface of the outermost material phase does not represent the typical aspect in the mass of this phase of the material, 15 due to surface rearrangement or related effects, provided that there is no foreign phase present outside the liquid-crystalline phase within the meaning of the Gibbs phase rule. As is well known in the art, surface energies can induce rearrangement on the surface of a material that can change the microscopic appearance, such as a hemispherical end cap covering what would be a pore opening at the end of a cylinder in the inverse hexagonal phase. However, this dose does not indicate the presence of another phase, in the strict thermodynamic sense of one phase. To illustrate, at a given temperature and pressure, by means of the Gibbs phase rule a two-component lipid / water mixture can only have two equilibrium phases, and although the surface of a part or particle of the inverse hexagonal phase could show a region of thickness on a nanometric scale that is rich in hemispherical end auctions, with polar groups of the lipid in contact with a phase rich in outside water (the second phase of the two present), this region does not constitute a third phase. (Although the term “interface” has been used to describe regions of this type, even users of this term will agree that it does not represent a different thermodynamic phase as determined by the phase rule; rather, a interface, or interfacial zone, describes the phase surface of the outermost material). In general, the thickness of this reordered surface region will be approximately equal to or less than the network parameter of the unit cell, in the case of the materials of inverse hexagonal phase and inverse cubic phase. Thus, in particular, the thickness 30 of such a rearranged surface region (or "interface") will generally be less than about 30 nm, and usually less than about 20 nm.

En el caso de las partículas recubiertas con sólido dadas a conocer en el documento U.S. 6.482.517, en el que la fase interior es una fase cúbica inversa o hexagonal inversa, será obvio para cualquier experto en la técnica que el material que constituye el recubrimiento sólido es una fase distinta del interior líquido-cristalino. 35 In the case of solid coated particles disclosed in U.S. 6,482,517, in which the inner phase is an inverse cubic or inverse hexagonal phase, it will be obvious to any person skilled in the art that the material constituting the solid coating is a different phase from the liquid-crystalline interior. 35

Polar, apolar, anfífilo, tensioactivo, interfase polar-apolar, bicontinuo: se toman los términos “polar”, “apolar”, “anfífilo”, “tensioactivo”, “interfase polar-apolar” y “bicontinuo” tal como se usan en el presente documento como que tienen el significado proporcionado en la patente estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia. Polar, apolar, amphiphilic, surfactant, polar-apolar interface, bicontinuous: the terms "polar", "apolar", "amphiphile", "surfactant", "polar-apolar interface" and "bicontinuous" are used as used in this document as having the meaning provided in US Patent 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference.

Asociado a bicapa, asociado a membrana: un compuesto o resto está asociado a bicapa si se reparte 40 preferentemente en una bicapa sobre un compartimiento acuoso. Por tanto, si un material rico en bicapa tal como un material de fase cúbica inversa existe en equilibrio con agua en exceso y se pone en contacto con agua en exceso, y se permite que un compuesto o resto asociado a bicapa se equilibre entre las dos fases, entonces la mayoría predominante del compuesto o resto se ubicará en la fase rica en bicapa. La concentración del compuesto o resto en la fase rica en bicapa será de al menos aproximadamente 100 veces, y preferiblemente al menos aproximadamente 1.000 veces, 45 mayor que en la fase acuosa. Associated with bilayer, associated with membrane: a compound or remainder is associated with bilayer if it is distributed preferably in a bilayer over an aqueous compartment. Therefore, if a bilayer-rich material such as an inverse cubic phase material exists in equilibrium with excess water and contacts excess water, and a bilayer-associated compound or residue is allowed to equilibrate between the two. phases, then the predominant majority of the compound or remainder will be located in the bilayer-rich phase. The concentration of the compound or residue in the bilayer-rich phase will be at least about 100 times, and preferably at least about 1,000 times, greater than in the aqueous phase.

Es importante observar que aunque las fases hexagonales inversas y fases cúbicas discretas o discontinuas inversas no tiene una verdadera bicapa como la unidad estructural fundamental, en la presente descripción se usará, no obstante, la expresión “asociado a bicapa” para describir componentes que se reparten en los microdominios ricos en lípidos (o ricos en tensioactivos) independientemente de si los dominios de este tipo se consideran “monocapas” o 50 “bicapas”. Por tanto, la expresión “asociado a bicapa” se refiere más al reparto del compuesto en cuestión que a la naturaleza precisa de la región de lípidos (o tensioactivos). It is important to note that although the inverse hexagonal phases and discrete or inverse discontinuous cubic phases do not have a true bilayer as the fundamental structural unit, in the present description, however, the term "bilayer associated" will be used to describe components that are distributed in lipid-rich microdomains (or surfactant-rich) regardless of whether domains of this type are considered "monolayers" or 50 "bilayers." Therefore, the term "bilayer associated" refers more to the distribution of the compound in question than to the precise nature of the lipid (or surfactant) region.

Además de los compuestos de direccionamiento y de carga de bicapa, otro componente de la partícula que puede asociarse a bicapa es el propio fármaco (o más generalmente, agente activo). Esto se prefiere para moléculas pequeñas, dado que significa que el fármaco tenderá a permanecer con la partícula incluso cuando se expone la 55 partícula a grandes volúmenes de líquidos biológicos. Sin embargo, los fármacos que se reparten preferentemente en los canales acuosos de material líquido-cristalino inverso, incluyendo muchas si no la mayoría de proteínas y otras biomacromoléculas, pueden incorporarse en las partículas de la presente invención, como pueden los fármacos que se localizan en concentraciones comparables en los compartimentos acuoso e hidrófobo. En efecto, un aspecto importante de la invención que la distingue de las emulsiones típicas, por ejemplo, son las áreas superficiales polar-apolar muy 60 In addition to bilayer targeting and loading compounds, another component of the particle that can be associated with bilayer is the drug itself (or more generally, active agent). This is preferred for small molecules, since it means that the drug will tend to remain with the particle even when the particle is exposed to large volumes of biological liquids. However, drugs that are preferably distributed in the aqueous channels of inverse liquid-crystalline material, including many if not most proteins and other biomachromolecules, can be incorporated into the particles of the present invention, as can the drugs that are located in comparable concentrations in the aqueous and hydrophobic compartments. Indeed, an important aspect of the invention that distinguishes it from typical emulsions, for example, are very polar-apolar surface areas.

grandes, que proporcionan un amplio volumen para los fármacos que tienen epítopos o grupos apolares que prefieren un medio hidrófobo así como grupos polares que prefieren el medio hidrófilo de los canales acuosos y regiones ricas en grupos de cabeza. large, which provide a large volume for drugs that have epitopes or apolar groups that prefer a hydrophobic medium as well as polar groups that prefer the hydrophilic medium of aqueous channels and regions rich in head groups.

Gota rica en agentes hidrófobos; fase rica en agentes hidrófobos: en algunas realizaciones de la presente invención, el material de fase líquido-cristalina inversa contendrá, en su interior, una gota de una fase rica en agentes 5 hidrófobos que es distinta de la fase líquido-cristalina inversa; esto no debe confundirse con los dominios hidrófobos que son elementos estructurales de la propia fase líquido-cristalina inversa. Esta gota rica en agentes hidrófobos será de un tamaño de entre aproximadamente 20 nm y 100 micras, que contendrá como componente mayoritario un agente hidrófobo, por tanto un componente de baja solubilidad en agua (menos de aproximadamente el 3%), y/o de alto coeficiente de reparto octanol-agua (Kow superior a o igual a aproximadamente 10, más preferiblemente superior a 10 aproximadamente 100), en el que se solubilizan el agente activo y alguna fracción (quizás muy pequeña) de cada uno de los componentes del segundo volumen. Por tanto, mientras que la termodinámica dicta que este primer volumen debe contener al menos una traza de lípido y el segundo volumen al menos una traza de líquido hidrófobo, la característica definitiva de la química del primer volumen es que la razón del líquido hidrófobo con respecto al lípido es significativamente mayor que en el segundo volumen. La solubilidad de un agente activo dado en una mezcla de agente 15 hidrófobo y lípido es normalmente una función que aumenta de manera muy marcada de una razón de agente hidrófobo:lípido creciente, porque el agente hidrófobo puede generalmente elegirse específicamente por su capacidad para solubilizar el agente activo particular mientras que la elección del lípido tiene mucho más que ver con su capacidad para formar cristales líquidos (en presencia del agente hidrófobo, en particular). Por ejemplo, mientras que la solubilidad del fármaco paclitaxel en eugenol es de más del 15% en peso, su solubilidad en una mezcla del 42% de fosfatidilcolina 20 de huevo, el 35% de eugenol y el 23% de agua es inferior al 1,5%; por tanto, la adición de fosfolípido y agua a la disolución de paclitaxel en eugenol induce la precipitación del paclitaxel. Por tanto, la presencia del primer volumen puede aumentar drásticamente la solubilidad global del agente activo en la partícula, y puede producir una concentración farmacéuticamente apropiada y sustancial del agente activo en casos en los que la solubilidad del agente activo en una fase líquido-cristalina rica en lípidos (en ausencia del primer volumen) sería prohibitivamente baja, es 25 decir, en casos en los que una cantidad terapéutica del fármaco no podría solubilizarse en una cantidad farmacéuticamente aceptable del cristal líquido. Estos requisitos pueden expresarse en términos de comportamiento de fase tal como sigue. Debe existir una fase líquido-cristalina en equilibrio con una fase líquida que es rica en un líquido hidrófobo que solubiliza el agente activo. Además, preferiblemente debe existir un equilibrio trifásico con estas dos fases en equilibrio con una fase rica en disolvente polar, que es habitualmente una fase rica en agua, a menudo más del 90% 30 de agua. Drop rich in hydrophobic agents; phase rich in hydrophobic agents: in some embodiments of the present invention, the reverse liquid-crystalline phase material will contain, within it, a drop of a phase rich in hydrophobic agents that is different from the reverse liquid-crystalline phase; This should not be confused with hydrophobic domains that are structural elements of the inverse liquid-crystalline phase itself. This drop rich in hydrophobic agents will be of a size between about 20 nm and 100 microns, which will contain as a major component a hydrophobic agent, therefore a component of low water solubility (less than about 3%), and / or high octanol-water partition coefficient (Kow greater than or equal to approximately 10, more preferably greater than approximately 10), in which the active agent and some fraction (perhaps very small) of each of the components of the second volume are solubilized . Therefore, while thermodynamics dictates that this first volume must contain at least one trace of lipid and the second volume at least one trace of hydrophobic liquid, the definitive characteristic of the chemistry of the first volume is that the ratio of the hydrophobic liquid to The lipid is significantly higher than in the second volume. The solubility of a given active agent in a mixture of hydrophobic and lipid agent is normally a function that increases very markedly from a ratio of hydrophobic agent: increasing lipid, because the hydrophobic agent can generally be specifically chosen for its ability to solubilize the Particular active agent while the choice of lipid has much more to do with its ability to form liquid crystals (in the presence of the hydrophobic agent, in particular). For example, while the solubility of the drug paclitaxel in eugenol is more than 15% by weight, its solubility in a mixture of 42% egg phosphatidylcholine 20, 35% eugenol and 23% water is less than 1 ,5%; therefore, the addition of phospholipid and water to the solution of paclitaxel in eugenol induces the precipitation of paclitaxel. Therefore, the presence of the first volume can dramatically increase the overall solubility of the active agent in the particle, and can produce a pharmaceutically appropriate and substantial concentration of the active agent in cases where the solubility of the active agent in a rich liquid-crystalline phase in lipids (in the absence of the first volume) it would be prohibitively low, that is, in cases where a therapeutic amount of the drug could not be solubilized in a pharmaceutically acceptable amount of the liquid crystal. These requirements can be expressed in terms of phase behavior as follows. There must be a liquid-crystalline phase in equilibrium with a liquid phase that is rich in a hydrophobic liquid that solubilizes the active agent. In addition, preferably a three-phase equilibrium must exist with these two phases in equilibrium with a phase rich in polar solvent, which is usually a phase rich in water, often more than 90% water.

Esta fase líquida será continua de material hidrófobo, que es la generalización de la expresión de la técnica “continua de aceite” para el caso en el que el agente hidrófobo puede ser bastante diferente químicamente de lo que se denomina de manera común como “aceite”. Termodinámicamente, esta fase líquida puede ser una disolución micelar inversa, una disolución de tensioactivo (ya sea diluida o no, teniendo en cuenta que cada tensioactivo tendrá cierta 35 solubilidad distinta de cero incluso si es extremadamente pequeña), una microemulsión rica en aceite, o una fase L3 (del tipo denominado L3*, en publicaciones en las que se distinguen L3 y L3*). Estas fases se conocen bien en la técnica, y se tratan en el documento U.S. 6.482.517. This liquid phase will be continuous of hydrophobic material, which is the generalization of the expression of the "continuous oil" technique for the case in which the hydrophobic agent can be quite chemically different from what is commonly referred to as "oil" . Thermodynamically, this liquid phase may be a reverse micellar solution, a surfactant solution (whether diluted or not, taking into account that each surfactant will have a certain non-zero solubility even if it is extremely small), an oil-rich microemulsion, or a phase L3 (of the type called L3 *, in publications in which L3 and L3 * are distinguished). These phases are well known in the art, and are discussed in U.S. 6,482,517.

Farmacéuticamente aceptable: en el contexto de esta invención, “farmacéuticamente aceptable” generalmente designa compuestos o composiciones en los que cada excipiente está aprobado por la Administración de 40 Alimentos y Fármacos (Food and Drug Administration), o un organismo similar en otro país, para su uso en una formulación farmacéutica, o pertenece a una clase concisa de compuestos para la cual se ha presentado un Drug Master File (Archivo Maestro del Fármaco) en una agencia reguladora gubernamental, habitualmente la FDA. Esto también incluye compuestos que son componentes mayoritarios de excipientes aprobados, que se sabe que son de baja toxicidad tomados internamente. Se publicó una lista de excipientes aprobados, cada uno con las diversas vías de 45 administración para las que están aprobados, por la División de Recursos de Información sobre Fármacos de la FDA en enero de 1996 y titulada “Guía de Principios Inactivos”. La existencia de un Drug Master File en la FDA es prueba adicional de que un excipiente dado es aceptable para su uso farmacéutico, al menos para determinadas vías de administración. Para productos inyectables, se publicó una lista de excipientes aprobados en 1997. Véase Nema, Washkuhn y Brendel (1997) PDA J. of Pharm. Sci. & Technol. 51(4):166. Debe añadirse que existen determinados 50 compuestos, tales como vitaminas y aminoácidos, que están en productos inyectables (normalmente para nutrición parenteral) como “agentes activos”, y por tanto se sabe que son seguros con la inyección, y compuestos de este tipo se consideran en el presente documento como farmacéuticamente aceptables como excipientes también, para inyección. Un ejemplo particularmente importante de una clase concisa de compuestos sobre los que se ha presentado un Drug Master File (DMF) es la clase de tensioactivos Pluronic (poloxámero), para los que BASF tiene un DMF presentado. En 55 este caso, aunque sólo unos pocos miembros de esta clase se han usado explícitamente en formulaciones inyectables, para los fines de esta invención, la homogeneidad de la clase, la presencia de un DMF y la existencia de formulaciones para inyección aprobadas usando varios miembros de la clase es suficiente para incluir cada uno de los miembros de la clase Pluronics como farmacéuticamente aceptables para productos inyectables. Pharmaceutically acceptable: in the context of this invention, "pharmaceutically acceptable" generally designates compounds or compositions in which each excipient is approved by the Food and Drug Administration, or a similar body in another country, for its use in a pharmaceutical formulation, or belongs to a concise class of compounds for which a Drug Master File has been submitted to a government regulatory agency, usually the FDA. This also includes compounds that are major components of approved excipients, which are known to be of low toxicity taken internally. A list of approved excipients, each with the various routes of administration for which they are approved, was published by the FDA's Division of Drug Information Resources in January 1996 and entitled "Guide to Inactive Principles." The existence of a Drug Master File at the FDA is additional evidence that a given excipient is acceptable for pharmaceutical use, at least for certain routes of administration. For injectable products, a list of excipients approved in 1997 was published. See Nema, Washkuhn and Brendel (1997) PDA J. of Pharm. Sci. & Technol. 51 (4): 166. It should be added that there are certain 50 compounds, such as vitamins and amino acids, that are in injectable products (usually for parenteral nutrition) as "active agents", and therefore are known to be safe with injection, and compounds of this type are considered herein as pharmaceutically acceptable as excipients also, for injection. A particularly important example of a concise class of compounds on which a Drug Master File (DMF) has been presented is the Pluronic surfactant class (poloxamer), for which BASF has a presented DMF. In this case, although only a few members of this class have been explicitly used in injectable formulations, for the purposes of this invention, the homogeneity of the class, the presence of a DMF and the existence of approved injection formulations using several members of the class is sufficient to include each of the members of the Pluronics class as pharmaceutically acceptable for injectable products.

En el contexto específico de los anestésicos locales, a veces se comete el error de que sólo es necesario que 60 una formulación de anestésico local sea farmacéuticamente aceptable para inyección subcutánea, u otra instilación local. Sin embargo, tal como se señaló en otra parte en el presente documento, el peligro constante de una inyección intravenosa o intraarterial involuntaria de una formulación de este tipo conduce directamente al requisito de que la In the specific context of local anesthetics, the mistake is sometimes made that it is only necessary that a local anesthetic formulation be pharmaceutically acceptable for subcutaneous injection, or other local instillation. However, as noted elsewhere in this document, the constant danger of an involuntary intravenous or intra-arterial injection of such a formulation leads directly to the requirement that the

formulación sea farmacéuticamente aceptable para inyección intravenosa. Para un vehículo particulado, esto también conlleva el requisito importante de que el tamaño de partícula sea aceptable para inyección i.v., lo que significa habitualmente submicrométrico, o preferiblemente de menos de aproximadamente 0,5 micras. formulation is pharmaceutically acceptable for intravenous injection. For a particulate vehicle, this also entails the important requirement that the particle size be acceptable for i.v. injection, which usually means submicron, or preferably less than about 0.5 microns.

Partícula estabilizada. Para los fines de esta descripción, por brevedad la expresión “partícula estabilizada” significará una partícula que puede, en pluralidad, formar una dispersión estable en un líquido, preferiblemente un 5 líquido que comprende un disolvente polar, y lo más preferiblemente que comprende agua o glicerol. Una dispersión estable significa que la dispersión de partículas no muestra efectos perjudiciales de floculación o fusión con escalas temporales de al menos varios días, preferiblemente varias semanas y lo más preferiblemente de más de varios meses. Stabilized particle. For the purposes of this description, briefly the term "stabilized particle" will mean a particle that can, in plurality, form a stable dispersion in a liquid, preferably a liquid comprising a polar solvent, and most preferably comprising water or glycerol. A stable dispersion means that the dispersion of particles shows no harmful effects of flocculation or fusion with time scales of at least several days, preferably several weeks and most preferably more than several months.

Diana, célula diana: en algunos casos estas expresiones tendrán significados ligeramente diferentes en esta descripción tal como se usan a menudo en la técnica. Por “diana”, se entiende la célula, u otro resto, al que el agente 10 activo debe suministrarse mediante la partícula con el fin de que se absorba o se vuelva disponible de otro modo, ya corresponda o no al sitio de acción final del agente activo. Por ejemplo, si se administra un fármaco por vía oral dentro de las partículas de la invención, la diana normalmente sería una célula epitelial intestinal de absorción, sin importar cuál es el sitio de acción del fármaco tras su absorción sistémica. Si la partícula lleva a cabo la tarea de conseguir que se absorba el agente activo en el sitio diana, entonces ha tenido éxito en su tarea farmacéutica. 15 Diana, target cell: in some cases these expressions will have slightly different meanings in this description as they are often used in the art. By "target" is meant the cell, or other residue, to which the active agent 10 must be supplied by the particle in order for it to be absorbed or otherwise made available, whether or not it corresponds to the site of final action of the active agent. For example, if a drug is administered orally within the particles of the invention, the target would normally be an intestinal epithelial absorption cell, regardless of the site of action of the drug after its systemic absorption. If the particle carries out the task of getting the active agent absorbed at the target site, then it has succeeded in its pharmaceutical task. fifteen

Resto de direccionamiento, compuesto de direccionamiento: en esta descripción, esta frase tendrá un significado que es bastante distinto del de “diana” o “célula diana” tal como se definió anteriormente. Un resto de direccionamiento es un grupo químico que es parte de la partícula de la presente invención, situado o bien dentro del cristal líquido o bien unido a la superficie de la partícula, y sirve como una diana molecular para algún compuesto fuera de la partícula en la aplicación, normalmente aunque no siempre una biomolécula en el cuerpo de un mamífero. 20 Entonces, un compuesto de direccionamiento es un compuesto que contiene un resto de direccionamiento. Es importante señalar que se incorpora el resto de direccionamiento en la presente invención sin la introducción de otra fase en la superficie de la partícula. En otras palabras, tal como se trató en otra parte en el presente documento, no se aumenta el número de fases termodinámicas. Un ejemplo de un resto de direccionamiento sería un anticuerpo que se une a la partícula, por ejemplo mediante enlaces covalentes a un espaciador flexible que está anclado a lípido en la 25 partícula, de manera que el anticuerpo contiene un resto de direccionamiento que se unirá a una molécula biológica (el antígeno) en el cuerpo y por tanto ubica la partícula en el sitio de acción deseado. En este caso, el resto de direccionamiento puede entenderse como o bien un motivo de unión en el anticuerpo, o bien el propio anticuerpo completo. Rest of addressing, composed of addressing: in this description, this phrase will have a meaning that is quite different from that of "target" or "target cell" as defined above. A targeting moiety is a chemical group that is part of the particle of the present invention, located either within the liquid crystal or attached to the surface of the particle, and serves as a molecular target for some compound outside the particle in the application, usually although not always a biomolecule in the body of a mammal. Then, an addressing compound is a compound that contains an addressing residue. It is important to note that the rest of addressing is incorporated in the present invention without the introduction of another phase on the surface of the particle. In other words, as discussed elsewhere in this document, the number of thermodynamic phases is not increased. An example of an targeting moiety would be an antibody that binds to the particle, for example by covalent bonds to a flexible spacer that is lipid-anchored in the particle, so that the antibody contains an targeting moiety that will bind to a biological molecule (the antigen) in the body and therefore locates the particle at the desired site of action. In this case, the rest of the addressing can be understood as either a binding motif in the antibody, or the entire antibody itself.

Disolución: mediante el término “disolución” se entiende que está disolviéndose un compuesto en 30 consideración, o está “experimentando disolución”. Dissolution: by the term "dissolution" it is understood that a compound is being dissolved under consideration, or "experiencing dissolution".

Solubilizar: este término se entiende que es esencialmente sinónimo al término “disolver” o “disolución”, aunque con una diferente connotación. Se solubiliza un compuesto en consideración en un material líquido o líquido-cristalino si y sólo si las moléculas del compuesto pueden difundir dentro del material líquido o líquido-cristalino como moléculas individuales, y que el material de este tipo con el compuesto en el mismo forman una única fase 35 termodinámica. Debe tenerse en cuenta que se asocian connotaciones ligeramente diferentes con los términos “disolver” y “solubilizar”. Normalmente, el término “disolver” se usa para describir el simple acto de poner un compuesto cristalino en un material líquido o líquido-cristalino y permitir o estimular que el compuesto se descomponga y se disuelva en el material, mientras que los términos “solubilizar” y “solubilización” generalmente se refieren a un esfuerzo concertado para encontrar un material líquido o líquido-cristalino apropiado que pueda disolver tal compuesto. Criterios 40 químicos: se han presentado en forma de tabla varios criterios y Robert Laughlin los ha tratado en detalle para determinar si un grupo polar dado es funcional como un grupo de cabeza de tensioactivo, en el que la definición del tensioactivo incluye la formación en agua de fases nanoestructuradas incluso a concentraciones bastante bajas. R. Laughlin, Advances in Liquid Crystals, págs. 3-41, 1978. Una discusión adicional y una lista de temas que incluyen: grupos polares que no funcionan como grupos de cabeza de tensioactivo; grupos polares que funcionan como grupos 45 de cabeza de tensioactivo; grupo apolar; y copolímeros de bloque de un único componente; véase la patente estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia. Solubilize: this term is understood to be essentially synonymous with the term "dissolve" or "dissolution", although with a different connotation. A compound under consideration is solubilized in a liquid or liquid-crystalline material if and only if the molecules of the compound can diffuse into the liquid or liquid-crystalline material as individual molecules, and that such material with the compound in it form a single phase 35 thermodynamics. It should be noted that slightly different connotations are associated with the terms "dissolve" and "solubilize." Normally, the term "dissolve" is used to describe the simple act of putting a crystalline compound in a liquid or liquid-crystalline material and allowing or stimulating the compound to decompose and dissolve in the material, while the terms "solubilize" and "solubilization" generally refers to a concerted effort to find an appropriate liquid or liquid-crystalline material that can dissolve such a compound. Chemical criteria 40: Several criteria have been presented in table form and Robert Laughlin has treated them in detail to determine if a given polar group is functional as a surfactant head group, in which the definition of the surfactant includes water formation of nanostructured phases even at fairly low concentrations. R. Laughlin, Advances in Liquid Crystals, p. 3-41, 1978. An additional discussion and a list of topics that include: polar groups that do not function as surfactant head groups; polar groups that function as surfactant head groups 45; apolar group; and single component block copolymers; see US Patent 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference.

Agente farmacológico: un material se considerará un agente farmacológico siempre que la industria farmacéutica y los organismos reguladores (concretamente, la FDA en los Estados Unidos) lo consideren un principio activo farmacéutico (API), a diferencia de un principio inactivo (también conocido como excipiente). El término “fármaco” 50 se usará de manera intercambiable con “agente farmacológico”, por brevedad. Pharmacological agent: a material will be considered a pharmacological agent provided that the pharmaceutical industry and regulatory bodies (specifically, the FDA in the United States) consider it a pharmaceutical active ingredient (API), as opposed to an inactive principle (also known as an excipient ). The term "drug" 50 will be used interchangeably with "pharmacological agent" for short.

Eficacia: La eficacia es la habilidad o capacidad específica del producto farmacéutico para efectuar el resultado para el cual se ofrece cuando se usa en las condiciones recomendadas por el fabricante. (Esta definición se toma literal del Título 9 del Código de Reglamentos Federales de los Estados Unidos). En el caso de formulaciones orales de fármacos activos de manera sistémica, la eficacia del fármaco naturalmente se ve afectada fuertemente por el 55 grado de absorción sistémica, que se mide mediante la AUC (“área bajo la curva”), una integración de los niveles en sangre con el tiempo de duración de estos niveles en sangre. Efficacy: Efficiency is the specific ability or ability of the pharmaceutical product to effect the result for which it is offered when used under the conditions recommended by the manufacturer. (This definition is taken literally from Title 9 of the United States Code of Federal Regulations). In the case of oral formulations of systemically active drugs, the effectiveness of the drug is naturally strongly affected by the degree of systemic absorption, which is measured by the AUC ("area under the curve"), an integration of the levels in blood with the duration of these blood levels.

Dosis terapéutica habitual; dosis recomendada: estas expresiones, usada de manera intercambiable en el presente documento, se refieren a la dosis que, en el momento de aplicación del agente farmacológico, se recomienda Usual therapeutic dose; Recommended dose: These terms, used interchangeably herein, refer to the dose that, at the time of application of the pharmacological agent, is recommended

para su uso en un entorno dado por fuentes autorizadas en la comunidad farmacéutica, incluyendo el Vademécum de Especialidades Farmacéuticas (Physician’s Desk Reference), prospectos del medicamento, y la Administración de Alimentos y Fármacos. La intención en el presente documento es que esto haga referencia a la dosis cuando se administra en su vehículo habitual, tal como la disolución acuosa de la forma de clorhidrato en el caso de la mayoría de anestésicos locales, en vez de en las formulaciones que se enseñan en esta invención, para lo que se usa la 5 formulación habitual en el vehículo habitual como punto de referencia. for use in an environment given by authorized sources in the pharmaceutical community, including the Vademecum of Pharmaceutical Specialties (Physician’s Desk Reference), medication prospects, and the Food and Drug Administration. The intention herein is that this refers to the dose when administered in your usual vehicle, such as the aqueous solution of the hydrochloride form in the case of most local anesthetics, rather than in the formulations that are they teach in this invention, for which the usual formulation in the usual vehicle is used as a reference point.

Dosis subtóxica: Una dosis administrada se considerará “subtóxica” en esta descripción si y sólo si satisface dos criterios: 1) la cantidad de fármaco administrado es menor que o aproximadamente igual a la mayor dosis recomendada generalmente aceptada para la práctica médica; y 2) la dosis administrada en la composición indicada no introduce toxicidad sistémica significativa superior a la de la dosis recomendada en su vehículo habitual. Con respecto al 10 criterio 1, en el caso de la bupivacaína, este criterio requeriría una dosis menor que aproximadamente 2 mg/kg; en el Vademécum de Especialidades Farmacéuticas se proporcionan dosificaciones máximas recomendadas, (véase, por ejemplo, 55a edición, página 601), y para un paciente de 70 kg estas dosis se traducen en un máximo de aproximadamente 2 mg/kg. Sub-toxic dose: A dose administered will be considered “sub-toxic” in this description if and only if it meets two criteria: 1) the amount of drug administered is less than or approximately equal to the highest recommended dose generally accepted for medical practice; and 2) the dose administered in the indicated composition does not introduce significant systemic toxicity higher than the recommended dose in your usual vehicle. With respect to criterion 1, in the case of bupivacaine, this criterion would require a dose less than about 2 mg / kg; Maximum recommended dosages are provided in the Vademecum of Pharmaceutical Specialties (see, for example, 55th edition, page 601), and for a 70 kg patient these doses translate to a maximum of approximately 2 mg / kg.

Dosis supertóxica: Una dosis administrada se considerará “supertóxica” en esta descripción si y sólo si 15 satisface cualquiera de los dos criterios: 1) la cantidad de fármaco administrado es superior a o aproximadamente igual a la dosis que se acepta generalmente que provoca toxicidades sistémicas peligrosas; o 2) la dosis administrada en la composición indicada introduce toxicidades sistémicas peligrosas. (Se observará que “supertóxico” no es sinónimo de “no supertóxico”; sino que hay un punto intermedio que no es ni lo suficientemente seguro como para satisfacer la definición de “subtóxico”, ni lo suficientemente peligroso como para cumplir con la definición de “supertóxico”). Con 20 respecto al criterio 1, en el caso de la bupivacaína, este criterio para supertóxico se traduce en una dosis superior a 3 mg/kg. Supertotoxic dose: A dose administered will be considered "super-toxic" in this description if and only if it satisfies either of the two criteria: 1) the amount of drug administered is greater than or approximately equal to the dose that is generally accepted that causes dangerous systemic toxicities ; or 2) the dose administered in the indicated composition introduces dangerous systemic toxicities. (It will be noted that "super-toxic" is not synonymous with "non-super-toxic"; rather, there is an intermediate point that is neither safe enough to meet the definition of "sub-toxic", nor dangerous enough to meet the definition of "Super-toxic"). With respect to criterion 1, in the case of bupivacaine, this criterion for super-toxic results in a dose greater than 3 mg / kg.

Duración de referencia: La duración de referencia de un agente activo farmacéutico significa el promedio o la duración típica de la acción eficaz para la dosificación de base de este fármaco, que en la mayoría de contextos en el presente documento se entenderá que significa la dosis recomendada publicada. En el caso de un anestésico local, esto 25 significa la duración promedio de la acción analgésica o anestésica, definida en el presente documento como que es bloqueo nervioso sensorial a menos que se indique de otro modo, de este fármaco cuando se administra en su formulación de disolución acuosa de clorhidrato habitual según el procedimiento que es la práctica médica habitual (véase el procedimiento descrito a continuación). Para la bupivacaína, por ejemplo, esta duración de referencia para una dosis terapéutica normal de 1 mg/kg es de aproximadamente 4 horas. 30 Reference duration: The reference duration of a pharmaceutical active agent means the average or typical duration of the effective action for the basic dosage of this drug, which in most contexts herein will be understood to mean the recommended dose published. In the case of a local anesthetic, this means the average duration of the analgesic or anesthetic action, defined herein as sensory nerve block unless otherwise indicated, of this drug when administered in its formulation. of usual aqueous hydrochloride solution according to the procedure that is the usual medical practice (see the procedure described below). For bupivacaine, for example, this reference duration for a normal therapeutic dose of 1 mg / kg is approximately 4 hours. 30

Administración única: Se considerará que una formulación del fármaco se administra mediante una administración única si y sólo si se deposita la formulación del fármaco completa en o sobre el organismo durante una escala temporal que es al menos un orden de magnitud menor que la duración de referencia de esta cantidad de fármaco cuando se administran en su vehículo habitual, que en el caso de un anestésico local es una disolución acuosa. Single administration: A drug formulation will be considered to be administered by a single administration if and only if the complete drug formulation is deposited in or on the body for a time scale that is at least an order of magnitude less than the reference duration of this amount of drug when administered in your usual vehicle, which in the case of a local anesthetic is an aqueous solution.

Aumento en la duración: el aumento en duración de un fármaco dado en una formulación particular es la 35 razón (expresada como porcentaje) del incremento en el aumento de la duración de tiempo de la acción eficaz (en particular, para el caso de un anestésico local, ésta es la duración del bloqueo nervioso, medida mediante procedimientos descritos en el presente documento) del fármaco en esta formulación con respecto a la duración de referencia de esta misma dosis del mismo fármaco. Increase in duration: the increase in duration of a given drug in a particular formulation is the reason (expressed as a percentage) of the increase in the duration of time of effective action (in particular, in the case of an anesthetic local, this is the duration of the nerve block, measured by procedures described herein) of the drug in this formulation with respect to the reference duration of this same dose of the same drug.

Duración relativa: esto es el aumento en duración, más el 100%. Es decir, es la razón (expresada como 40 porcentaje) de la duración de tiempo de la acción eficaz del fármaco en esta formulación con respecto a la duración de referencia de esta misma dosis del mismo fármaco. Una formulación con un aumento en la duración de desde, digamos, 4 horas hasta 6 horas tendría un aumento en la duración del 50%, y una duración relativa del 150%. Relative duration: this is the increase in duration, plus 100%. That is, it is the ratio (expressed as 40 percent) of the duration of the effective action of the drug in this formulation with respect to the reference duration of this same dose of the same drug. A formulation with an increase in duration of, say, 4 hours to 6 hours would have an increase in duration of 50%, and a relative duration of 150%.

Dosis relativa: esto se define simplemente que es la razón (expresada como porcentaje) de la dosis dada en una formulación particular con respecto a la dosis terapéutica normal (en particular, la dosis a la que se hace referencia 45 en la definición de duración de referencia). Para el caso de la bupivacaína, cuando se toma en el presente documento que la dosis terapéutica habitual es de 1 mg/kg, la dosis relativa de una formulación de interés es simplemente la dosis dividida entre 1 mg/kg, expresada como porcentaje (es decir, multiplicado por el 100%). Relative dose: this is simply defined as the ratio (expressed as a percentage) of the dose given in a particular formulation with respect to the normal therapeutic dose (in particular, the dose referred to in the definition of duration of reference). In the case of bupivacaine, when it is taken herein that the usual therapeutic dose is 1 mg / kg, the relative dose of a formulation of interest is simply the dose divided by 1 mg / kg, expressed as a percentage (it is say, multiplied by 100%).

Factor de amplificación: esto se define que es la duración relativa dividida entre la dosis relativa. Como ejemplo, en el caso de la formulación de bupivacaína liposómica de Grant et al. revisada anteriormente, la dosis relativa 50 era de [150 mg/kg]/[1 mg/kg] x 100% = 15.000% y la duración relativa era de [24 h]/[4 h] x 100% = 600%, y de ese modo el factor de amplificación era de 600%/15.000% = 0,04. Amplification factor: this is defined as the relative duration divided by the relative dose. As an example, in the case of the liposomal bupivacaine formulation of Grant et al. reviewed above, the relative dose 50 was [150 mg / kg] / [1 mg / kg] x 100% = 15,000% and the relative duration was [24 h] / [4 h] x 100% = 600%, and thus the amplification factor was 600% / 15,000% = 0.04.

Bajo índice terapéutico; estrecha razón terapéutica: Se usarán estas expresiones de manera intercambiable. La estrecha razón terapéutica se define en los reglamentos en 21 CFR 320.33(c). Esta subsección se ocupa de los criterios y la evidencia para evaluar problemas de bioequivalencia reales o potenciales. En la Sección 55 320.33(c) del Código de Registro Federal 21, la FDA de los Estado Unidos define un medicamento que tiene una estrecha razón terapéutica tal como sigue: existe una diferencia de menos de 2 veces en la mediana de la dosis letal y la mediana de los valores de dosis eficaz, o existe una diferencia de menos de 2 veces en las concentraciones tóxicas mínimas y concentraciones eficaces mínimas en la sangre. Para los fines de esta descripción, la expresión se Low therapeutic index; narrow therapeutic reason: These expressions will be used interchangeably. The narrow therapeutic reason is defined in the regulations in 21 CFR 320.33 (c). This subsection deals with the criteria and evidence to assess actual or potential bioequivalence problems. In Section 55 320.33 (c) of Federal Registration Code 21, the United States FDA defines a drug that has a narrow therapeutic reason as follows: there is a difference of less than 2 times in the median lethal dose and the median of effective dose values, or there is a difference of less than 2 times in the minimum toxic concentrations and minimum effective concentrations in the blood. For the purposes of this description, the expression is

interpretará más ampliamente, para indicar fármacos para los que la ventana terapéutica es lo suficientemente estrecha como para que las mejoras en el índice terapéutico obtenidas mediante la reformulación del fármaco se consideren un avance significativo en el campo. will interpret more broadly, to indicate drugs for which the therapeutic window is narrow enough so that improvements in the therapeutic index obtained by drug reformulation are considered a significant advance in the field.

Excipiente: compuesto y mezclas de compuestos que se usan en formulaciones farmacéuticas que no son los propios principios activos farmacéuticos. El término “excipiente” es sinónimo de “principio inactivo”. 5 Excipient: compound and mixtures of compounds that are used in pharmaceutical formulations that are not the pharmaceutical active ingredients themselves. The term "excipient" is synonymous with "inactive principle." 5

Fases líquido-cristalinas inversas, incluyendo fase hexagonal inversa y fase cúbica inversa (incluyendo esta última tanto fase cúbica bicontinua inversa y fase cúbica discreta inversa) se entienden que son tal como se describen en detalle en otra parte (por ejemplo, en la patente estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia). Estas fases se conocen en la técnica de autoasociación de tensioactivos. Inverse liquid-crystalline phases, including inverse hexagonal phase and inverse cubic phase (including the latter both inverse bicontinuous cubic phase and inverse discrete cubic phase) are understood to be as described in detail elsewhere (for example, in US Pat. 6,638,621, whose complete content is incorporated herein by reference). These phases are known in the art of surfactant self-association.

En resumen, las fases líquido-cristalinas nanoestructuradas se caracterizan por estructuras de dominios, 10 compuestas de dominios de al menos un primer tipo y un segundo tipo (y en algunos casos tres o incluso más tipos de dominios) que tienen las siguientes propiedades: In summary, the nanostructured liquid-crystalline phases are characterized by domain structures, 10 composed of domains of at least a first type and a second type (and in some cases three or even more types of domains) that have the following properties:

a) los restos químicos en los dominios del primer tipo son incompatibles con aquellos en los dominios del segundo tipo (y en general, cada par de tipos de dominios diferentes son incompatibles entre sí) de manera que no se mezclan en las condiciones dadas sino que permanecen como dominios separados; (normalmente, 15 los dominios del primer tipo podrían estar compuestos sustancialmente por restos polares tales como agua y grupos de cabeza lipídicos, mientras que los dominios del segundo tipo podría estar compuestos sustancialmente por restos apolares tales como cadenas hidrocarbonadas, sistemas de anillos condensados, cadenas de poli(óxido de propileno), cadenas de polisiloxanos, etc.); a) chemical residues in the domains of the first type are incompatible with those in the domains of the second type (and in general, each pair of different domain types is incompatible with each other) so that they do not mix under the given conditions but rather they remain as separate domains; (Normally, domains of the first type could be composed substantially of polar moieties such as water and lipid head groups, while domains of the second type could be substantially composed of apolar moieties such as hydrocarbon chains, condensed ring systems, chains of poly (propylene oxide), polysiloxane chains, etc.);

b) el ordenamiento atómico dentro de cada dominio es de tipo líquido más que de tipo sólido, carece 20 de ordenamiento reticular de los átomos; (esto se manifestaría por la ausencia de reflexiones de picos de Bragg marcadas en la difracción de rayos X de ángulo ancho); b) the atomic ordering within each domain is of the liquid type rather than of the solid type, lacks the reticular ordering of atoms; (This would be manifested by the absence of reflections of Bragg peaks marked in the wide-angle X-ray diffraction);

c) la dimensión más pequeña (por ejemplo, el espesor en el caso de capas, el diámetro en el caso de cilindros o esferas) de sustancialmente todos los dominios es del orden de los nanómetros (a saber, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 100 nm); y 25 c) the smallest dimension (for example, the thickness in the case of layers, the diameter in the case of cylinders or spheres) of substantially all domains is of the order of nanometers (namely, from about 1 to about 100 nm ); and 25

d) la organización de los dominios se ajusta a una red cristalina, que puede ser uni, bi o tridimensional, y que tiene un parámetro de red (o tamaño de celda unidad) del orden de los nanómetros (a saber, desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 200 nm); por tanto, la organización de los dominios se ajusta a uno de los 230 grupos espaciales presentados en forma de tabla en las Tablas Internacionales de Cristalografía, y se manifestaría en una medición de difusión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS) bien 30 diseñada por la presencia de reflexiones de Bragg agudas estando los espaciados d de las reflexiones de menor orden en el intervalo de 3-200 nm. d) the organization of the domains conforms to a crystalline network, which can be uni, bi or three-dimensional, and which has a network parameter (or unit cell size) of the order of nanometers (namely, from about 5 to approximately 200 nm); therefore, the organization of the domains conforms to one of the 230 spatial groups presented in the form of a table in the International Tables of Crystallography, and would be manifested in a measurement of diffusion of X-ray diffusion of small angle (SAXS) well designed by the presence of acute Bragg reflections being spaced d of the lower order reflections in the 3-200 nm range.

Fase hexagonal inversa: La fase hexagonal inversa, un tipo de fase líquido-cristalina liotrópica, se caracteriza por: Inverse hexagonal phase: The inverse hexagonal phase, a type of liotropic liquid-crystalline phase, is characterized by:

1. Los rayos X de ángulo pequeño muestran picos que se indexan como 1:√3:2:√7:3.... en general, 35 √(h2 + hk - k2), en la que h y k son números enteros, los índices de Miller del grupo de simetría hexagonal bidimensional, 1. The small angle X-rays show peaks that are indexed as 1: √3: 2: √7: 3 .... in general, 35 √ (h2 + hk - k2), in which hyk are integers, Miller's indices of the two-dimensional hexagonal symmetry group,

2. A simple vista, la fase generalmente transparente cuando está completamente equilibrada, y por tanto, por ejemplo, a menudo considerablemente más clara que cualquier fase laminar cercana. 2. At first glance, the generally transparent phase when fully balanced, and therefore, for example, often considerably clearer than any nearby laminar phase.

3. En el microscopio óptico de polarización, la fase es birrefringente, y Rosevear y Winsor han descrito 40 bien las texturas bien conocidas (por ejemplo, Winsor (1968) Chem. Rev., pág. 1). 3. In the polarizing optical microscope, the phase is birefringent, and Rosevear and Winsor have described well-known textures well (for example, Winsor (1968) Chem. Rev., p. 1).

4. La viscosidad es generalmente bastante alta; la viscosidad limitante de cizallamiento cero es del orden de millones e incluso miles de millones de centipoises. 4. The viscosity is generally quite high; The zero shear limiting viscosity is of the order of millions and even billions of centipoise.

5. El coeficiente de autodifusión del agua es lento en comparación con el de la fase laminar, al menos inferior en un factor de dos; el del tensioactivo es comparable al de las fases laminar y cúbica inversa. 45 5. The self-diffusion coefficient of water is slow compared to that of the laminar phase, at least lower by a factor of two; that of the surfactant is comparable to that of the laminar and inverse cubic phases. Four. Five

6. La forma de banda del 2H-RMN usando tensioactivo deuterado muestra un desdoblamiento, que es la mitad del desdoblamiento observado para la fase laminar. 6. The 2H-NMR band form using deuterated surfactant shows a split, which is half of the split observed for the laminar phase.

7. En cuanto al comportamiento de fase, la fase hexagonal inversa se produce generalmente a altas concentraciones de tensioactivo en sistemas de agua/tensioactivo de dos colas, que a menudo se extienden a, o cerca de, el 100% de tensioactivo. Habitualmente, la región de fase hexagonal inversa es adyacente a la 50 región de fase laminar, lo que se produce a una concentración de tensioactivo inferior, aunque a menudo se producen fases cúbicas inversas bicontinuas entremedias. 7. Regarding the phase behavior, the inverse hexagonal phase generally occurs at high concentrations of surfactant in two-tailed water / surfactant systems, which often extend to, or near, 100% surfactant. Usually, the inverse hexagonal phase region is adjacent to the laminar phase region, which occurs at a lower surfactant concentration, although bicontinuous inverse cubic phases often occur in between.

Fase cúbica inversa: La fase cúbica inversa se caracteriza por: Inverse cubic phase: The inverse cubic phase is characterized by:

1. Los rayos X de ángulo pequeño muestran picos que se indexan a un grupo espacial tridimensional con un aspecto cúbico. Los grupos espaciales más comúnmente encontrados, junto con sus indexaciones son: Ia3d (n.º 230), con indexación √6:√8:√14:4..... Pn3m (n.º 224), con indexación √2:√3:2:√6:√8... e Im3m (n.º 229), con indexación √2:√4:√6:√8:√10.... También se han observados los grupos espaciales cúbicos n.º 212 5 (derivados del grupo espacial n.º 230 mediante una ruptura de simetría) y n.º 223 (correspondiente a micelas cerradas dispuestas en una red cristalina cúbica). 1. The small angle X-rays show peaks that are indexed to a three-dimensional spatial group with a cubic aspect. The most commonly found spatial groups, along with their indexations are: Ia3d (# 230), with indexing √6: √8: √14: 4 ..... Pn3m (# 224), with indexing √2 : √3: 2: √6: √8 ... and Im3m (# 229), with indexing √2: √4: √6: √8: √10 .... Space groups have also been observed cubic no. 212 5 (derived from the spatial group # 230 by a symmetry break) and no. 223 (corresponding to closed micelles arranged in a cubic crystalline network).

2. A simple vista, la fase es generalmente transparente cuando está completamente equilibrada, por tanto a menudo considerablemente más clara que cualquier fase laminar cercana. 2. At first glance, the phase is generally transparent when fully balanced, therefore often considerably clearer than any nearby laminar phase.

3. En el microscopio óptico de polarización, la fase no es birrefringente, y por tanto no existe ninguna textura 10 óptica. 3. In the polarizing optical microscope, the phase is not birefringent, and therefore there is no optical texture.

4. La viscosidad es muy alta, mucho más viscosa que la fase laminar. La mayoría de las fases cúbicas inversas tienen viscosidades de cizallamiento cero del orden de miles de millones de centipoises. 4. The viscosity is very high, much more viscous than the laminar phase. Most inverse cubic phases have zero shear viscosities of the order of billions of centipoise.

5. No se observa ningún desdoblamiento en la forma de banda de RMN, sólo un pico individual, correspondiente al movimiento isotrópico. 15 5. No splitting is observed in the form of NMR band, only an individual peak, corresponding to isotropic movement. fifteen

6. En cuanto al comportamiento de fase, se encuentra la fase cúbica bicontinua inversa o bien entre la fase laminar y la fase hexagonal inversa, o bien para un contenido en agua inferior a la fase hexagonal inversa. Una buena regla es que si la fase cúbica se encuentra a concentraciones de agua superiores a las de la fase laminar, entonces es normal, mientras que si se encuentra a concentraciones de tensioactivo superiores a las de la laminar entonces es inversa (siendo una excepción notable el caso de la fase cúbica inversa en monoglicéridos insaturados de cadena 20 larga). 6. Regarding the phase behavior, the inverse bicontinuous cubic phase is found either between the laminar phase and the inverse hexagonal phase, or for a water content lower than the inverse hexagonal phase. A good rule is that if the cubic phase is at concentrations of water higher than those of the laminar phase, then it is normal, while if it is at concentrations of surfactant higher than those of the laminar then it is reverse (being a notable exception the case of the inverse cubic phase in long chain unsaturated monoglycerides 20).

Variantes deshidratadas. Una variante deshidratada de un cristal líquido inverso es una composición que produce una fase líquido-cristalina inversa tras el contacto con el agua (o más rara vez, otro disolvente polar), ya sea o no esta misma composición deshidratada una fase líquido-cristalina inversa. Dehydrated variants. A dehydrated variant of an inverse liquid crystal is a composition that produces an inverse liquid-crystalline phase after contact with water (or more rarely, another polar solvent), whether or not this same composition dehydrates an inverse liquid-crystalline phase .

MATERIALES Y MÉTODOS 25 MATERIALS AND METHODS 25

En esta invención, el procedimiento normalmente comienza con la selección de una composición de cristal líquido que preferiblemente solubiliza, o de otro modo atrapa (por ejemplo, incorpora) el agente activo, y tiene las características fisicoquímicas apropiadas para las interacciones deseadas tal como se describen en el presente documento. Un agente activo puede describirse como “atrapado” por la composición de cristal líquido si, por ejemplo, el agente activo se solubiliza en una gota de aceite que se ubica en última instancia dentro de la partícula, o si el agente 30 activo está en forma cristalina, y los cristales se dispersan en última instancia por toda la partícula. Las composiciones para fases líquido-cristalinas inversas se tratan extensamente en el documento U.S. 6.452.517 cuyo contenido se incorpora al presente documento como referencia, y en las solicitudes de patente estadounidense números 09/994.937 y 10/460.659, que se incorporan al presente documento como referencia. Tal como se tratará en mayor detalle a continuación, en la forma más preferida, el agente activo forma un componente de la fase cúbica inversa o hexagonal 35 inversa. In this invention, the process normally begins with the selection of a liquid crystal composition that preferably solubilizes, or otherwise traps (for example, incorporates) the active agent, and has the appropriate physicochemical characteristics for the desired interactions as described. in the present document. An active agent can be described as "trapped" by the liquid crystal composition if, for example, the active agent is solubilized in a drop of oil that is ultimately located within the particle, or if the active agent is in form crystalline, and crystals ultimately disperse throughout the particle. Compositions for inverse liquid-crystalline phases are discussed extensively in U.S. 6,452,517 whose content is incorporated herein by reference, and in US Patent Applications Nos. 09 / 994,937 and 10 / 460,659, which are incorporated herein by reference. As will be discussed in greater detail below, in the most preferred form, the active agent forms a component of the inverse cubic phase or inverse hexagonal.

Una consideración importante en la selección de una composición de cristal líquido, que puede no ser obvia para los expertos en la técnica tradicional, es que la composición elegida para al cristal líquido deber ser lo suficientemente robusta, en particular, debe tener un punto de fusión lo suficientemente alto (la mejor medida individual de esta característica) que pueda albergar la incorporación de un componente asociado a bicapa, cargado, tal como un 40 tensioactivo iónico. Tales componentes a menudo (aunque no de manera universal) tienen el efecto de fundir materiales tales como fases cúbicas inversas. Cuando una fase cúbica inversa se funde, por ejemplo, mediante la adición de un componente asociado a bicapa cargado, habitualmente se fundirá para dar o bien una fase L2, o bien una fase L3, presentando ambas interacciones limitadas con las barreras biológica, tal como se describe en el presente documento. An important consideration in the selection of a liquid crystal composition, which may not be obvious to those skilled in the traditional art, is that the composition chosen for the liquid crystal must be sufficiently robust, in particular, it must have a melting point. high enough (the best individual measure of this characteristic) that it can accommodate the incorporation of a bilayer-associated component, charged, such as an ionic surfactant. Such components often (although not universally) have the effect of melting materials such as reverse cubic phases. When an inverse cubic phase is melted, for example, by the addition of a component associated with a charged bilayer, it will usually melt to give either an L2 phase or an L3 phase, both of which have limited interactions with the biological barriers, such as It is described in this document.

Las excepciones a la regla general de que altas cargas (superiores a aproximadamente el 8%, o especialmente 45 superiores al 15%) de un tensioactivo cargado funden habitualmente las fases líquido-cristalinas inversas, se producen más menudo cuando el tensioactivo tiene dos (o más) cadenas hidrófobas largas (mayores que o iguales a 12 carbonos cada una) y un grupo de cabeza polar de PM relativamente bajo, en particular PM<300, particularmente si las cadenas hidrófobas son cadenas de alcano saturadas. Por tanto, un tensioactivo de doble cadena tal como bromuro de didodecildimetilamonio normalmente no provocará la fusión de un material de fase líquido-cristalina inversa, ni de una 50 molécula de fosfolípido cargada si está saturada. Estos fosfolípidos de doble cadena que están cargados de manera suficientemente fuerte para esta aplicación incluyen fosfatidilglicerol, fosfatidilserina, fosfatidilinositol y ácido fosfatídico, pero no fosfatidilcolina ni fosfatidiletanolamina. The exceptions to the general rule that high loads (greater than about 8%, or especially greater than 15%) of a charged surfactant usually melt the reverse liquid-crystalline phases, occur most often when the surfactant has two (or more) long hydrophobic chains (greater than or equal to 12 carbons each) and a relatively low polar head group of PM, in particular PM <300, particularly if the hydrophobic chains are saturated alkane chains. Therefore, a double chain surfactant such as didodecyl dimethyl ammonium bromide will normally not cause the melting of a reverse liquid-crystalline phase material, or of a charged phospholipid molecule if saturated. These double-chain phospholipids that are sufficiently charged for this application include phosphatidylglycerol, phosphatidylserine, phosphatidylinositol and phosphatidic acid, but not phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine.

Tras, o simultáneamente con, la selección de la composición de cristal líquido, se selecciona(n) uno o más componentes asociados a bicapa, cargados de manera iónica, basándose en propiedades tales como coeficiente de 55 reparto (generalmente alto es lo mejor, preferiblemente superior a aproximadamente 1.000), baja toxicidad, estado After, or simultaneously with, the selection of the liquid crystal composition, one or more bilayer-associated components, charged in an ionic manner, are selected based on properties such as partition coefficient (generally high is best, preferably greater than approximately 1,000), low toxicity, condition

regulador favorable (dependiente de la vía de administración), y solubilidad y compatibilidad con los otros componentes de la formulación. En el presente documento, se proporciona una selección de componentes de este tipo. favorable regulator (dependent on the route of administration), and solubility and compatibility with the other components of the formulation. In this document, a selection of components of this type is provided.

En el transcurso de este trabajo, se estableció que una vez que el potencial zeta de un conjunto de estas partículas de fase líquido-cristalina inversa es igual o superior a aproximadamente 25 milivoltios de magnitud (es decir, más positivo que 25 mV o más negativo que -25 mV), o preferiblemente superior a aproximadamente 30 mV de 5 magnitud (o más negativo que -30 mV), entonces no se requiere ningún otro mecanismo para la estabilización de la dispersión frente a la floculación. En algunos casos, otras fuerzas de atracción excepcionales, tales como entremezclado de cadenas poliméricas asociadas a superficie, condiciones iónicas inusuales, redistribuciones dependientes del tiempo dentro de las partículas, pueden impedir la formación de partículas estabilizadas mediante este método solo. 10 In the course of this work, it was established that once the zeta potential of a set of these inverse liquid-crystalline phase particles is equal to or greater than approximately 25 millivolts of magnitude (i.e., more positive than 25 mV or more negative than -25 mV), or preferably greater than about 30 mV of 5 magnitude (or more negative than -30 mV), then no other mechanism is required for stabilization of the dispersion against flocculation. In some cases, other exceptional attractive forces, such as intermingling of surface-associated polymer chains, unusual ionic conditions, time-dependent redistributions within the particles, can prevent the formation of stabilized particles by this method alone. 10

Generalmente se está de acuerdo en la técnica en que las diferencias en los potenciales zeta no son significativas a menos que difieran en aproximadamente 5 mV o más. Expresado de otro modo, con poca pérdida de información, los potenciales zeta pueden notificarse como múltiplos de 5 mV. Por tanto, la regla de que 30 mV (positivo o negativo) o superior es suficiente para la estabilización de la carga se expresará, para los fines de esta descripción, como el criterio de que un potencial zeta superior a aproximadamente 25 mV de magnitud es lo que la invención 15 requiere como carga superficial, prefiriéndose especialmente un valor superior a aproximadamente 30 mV. It is generally agreed in the art that differences in zeta potentials are not significant unless they differ by approximately 5 mV or more. In other words, with little loss of information, zeta potentials can be reported as multiples of 5 mV. Therefore, the rule that 30 mV (positive or negative) or higher is sufficient for load stabilization shall be expressed, for the purposes of this description, as the criterion that a zeta potential greater than approximately 25 mV in magnitude is what the invention requires as a surface charge, with a value greater than about 30 mV being especially preferred.

Es importante optimizar la razón de tensioactivo cargado con respecto a cristal líquido, cuando se estabiliza la carga de partículas líquido-cristalinas para inyección. La eliminación o minimización de las poblaciones de partículas que se encuentran por debajo del potencial zeta crítico para su estabilización es importante para su estabilidad y establece un valor mínimo para la razón, y esto se ilustra en los ejemplos a continuación con mediciones cuantitativas, 20 según el método preferido. Se prefiere que la fracción de intensidad ponderada de las partículas con potencial zeta menor que 25 mV de magnitud sea menor que aproximadamente el 10%, y más preferiblemente menor que aproximadamente el 3%. Obsérvese que esto hace referencia a la distribución de intensidad ponderada determinada mediante un método de dispersión de la luz, y en casos en los que, por ejemplo, el 10% de la distribución notificada se encuentre por debajo de 25 mV de magnitud, debe recordarse que el ensanchamiento por difusión exagera este valor 25 notificado, y por tanto la población de intensidad ponderada real a valores inferiores a 30 mV de hecho será considerablemente menor que esto. It is important to optimize the ratio of surfactant charged with respect to liquid crystal, when the charge of liquid-crystalline particles for injection is stabilized. The elimination or minimization of the populations of particles that are below the critical zeta potential for stabilization is important for their stability and establishes a minimum value for the reason, and this is illustrated in the examples below with quantitative measurements, 20 according to The preferred method. It is preferred that the weighted intensity fraction of particles with zeta potential less than 25 mV magnitude be less than about 10%, and more preferably less than about 3%. Note that this refers to the weighted intensity distribution determined by a light scattering method, and in cases where, for example, 10% of the notified distribution is below 25 mV in magnitude, it should be remembered that diffusion widening exaggerates this reported value, and therefore the population of real weighted intensity at values below 30 mV will in fact be considerably less than this.

Estos requisitos del potencial zeta deben reunirse sin utilizar concentraciones excesivas de tensioactivo cargado. Una razón para esto es que la introducción de mayores cargas de tensioactivo cargado puede conducir a un aumento en la toxicidad de la formulación. Aunque los tensioactivos iónicos tales como SDS, docusato y cloruro de 30 benzalconio (un conservante bien conocido) están presentes en la actualidad en formulaciones inyectables aprobadas por la FDA, esto no quiere decir que estén desprovistos de efectos tóxicos incluso a dosis mayores, particularmente en el caso de los compuestos catiónicos. Las normas de la FDA recomiendan generalmente el uso de la menor cantidad de excipiente requerido para el trabajo, en este caso para la estabilización. These zeta potential requirements must be met without using excessive concentrations of charged surfactant. One reason for this is that the introduction of higher loads of charged surfactant can lead to an increase in the toxicity of the formulation. Although ionic surfactants such as SDS, docusate and benzalkonium chloride (a well-known preservative) are presently present in injectable formulations approved by the FDA, this does not mean that they are devoid of toxic effects even at higher doses, particularly in the case of cationic compounds. FDA standards generally recommend the use of the least amount of excipient required for work, in this case for stabilization.

El uso de tensioactivos con grupos polares hidrófilos poliméricos, particularmente polietilenglicol (PEG), tales 35 como Pluronics (poloxámeros) o ésteres de glicerol o sorbitol pegilados, con valores de HLB superiores a aproximadamente 8 o un peso molecular de PEG total superior a aproximadamente 2.000 debe minimizarse en la práctica de esta invención dado que, al igual que las razones excesivas de tensioactivo cargado con respecto a fase cúbica, tienen un fuerte tendencia a inducir recubrimientos de fase laminar o L3. También se sabe que los tensioactivos de este tipo presentan un “efecto de apilamiento” sobre las superficie; mediciones de dispersión de la luz casi elásticas 40 en las partículas dispersas con Pluronic de alto HLB, por ejemplo, muestran un aumento en el diámetro de partícula a medida que aumenta la concentración de Pluronic de alto HLB, lo que indica el apilamiento de las moléculas de tensioactivo en la superficie de la partícula, lo que claramente interferirá con las interacciones partícula-célula tal como se trata en el presente documento. The use of surfactants with polymeric hydrophilic polar groups, particularly polyethylene glycol (PEG), such as Pluronics (poloxamers) or pegylated glycerol or sorbitol esters, with HLB values greater than about 8 or a total PEG molecular weight greater than about 2,000 It should be minimized in the practice of this invention since, like the excessive ratios of surfactant charged with respect to cubic phase, they have a strong tendency to induce laminar phase or L3 coatings. It is also known that surfactants of this type have a "stacking effect" on the surfaces; Nearly elastic light scattering measurements 40 in particles dispersed with high HLB Pluronic, for example, show an increase in particle diameter as the concentration of high HLB Pluronic increases, indicating the stacking of the molecules of surfactant on the surface of the particle, which will clearly interfere with the particle-cell interactions as discussed herein.

Incorporación del agente activo. Existen tres formas generales en las que puede incorporarse el agente 45 activo en la partícula no recubierta de la presente invención. Éstas se describen a continuación. Incorporation of the active agent. There are three general ways in which the active agent can be incorporated into the uncoated particle of the present invention. These are described below.

Primera forma: en esta forma, la forma preferida, se disuelve el agente activo en el material de fase líquido-cristalina inversa. Expresado más precisamente, el agente activo es uno de los componentes, que, junto con los otros componentes, forman el cristal líquido en las condiciones usadas (temperatura, presión, etc.), como una fase de equilibrio termidinámico. Obsérvese que esto no es necesariamente lo mismo que decir que el agente activo se “añade 50 a” a la fase líquido-cristalina inversa, porque la fase a la que se añade el agente activo podría ser totalmente diferente antes de la adición del agente activo; la adición del agente activo puede promover la formación de la fase líquido-cristalina inversa. Por ejemplo, en los ejemplos proporcionados en el presente documento que implican propofol se solubiliza el agente activo propofol en el cristal líquido como una “primera forma” es decir, se solubiliza el propofol en el material de fase líquido-cristalina inversa, y es uno de los componentes que forman el material líquido-cristalino. 55 First form: in this form, the preferred form, the active agent is dissolved in the reverse liquid-crystalline phase material. Expressed more precisely, the active agent is one of the components, which, together with the other components, form the liquid crystal under the conditions used (temperature, pressure, etc.), as a thermodynamic equilibrium phase. Note that this is not necessarily the same as saying that the active agent is "added 50 a" to the reverse liquid-crystalline phase, because the phase to which the active agent is added could be totally different before the active agent is added. ; the addition of the active agent can promote the formation of the inverse liquid-crystalline phase. For example, in the examples provided herein that involve propofol the active agent propofol is solubilized in the liquid crystal as a "first form" that is, the propofol is solubilized in the liquid-crystalline reverse phase material, and is one of the components that form the liquid-crystalline material. 55

Segunda forma: en esta forma, el agente activo se dispersa en el material de fase líquido-cristalina inversa, en forma de o bien cristal, que están preferiblemente del orden de las submicras, o bien una forma sólida amorfa. En este caso, por definición, la parte del agente activo que se dispersa, y no se disuelve, no afecta al comportamiento de fase del material líquido-cristalino. Este tipo de realización puede realizarse de al menos tres maneras. En el método Second form: in this form, the active agent is dispersed in the liquid-crystalline reverse phase material, in the form of either a crystal, which is preferably of the order of submicras, or an amorphous solid form. In this case, by definition, the part of the active agent that disperses, and does not dissolve, does not affect the phase behavior of the liquid-crystalline material. This type of embodiment can be done in at least three ways. In the method

preferido, se mezcla físicamente el agente activo con el material de fase líquido-cristalina inversa, y entonces se dispersa el material resultante en agua tal como se da a conocer en otra parte en el presente documento. Antes del mezclado, el agente activo puede someterse a micronización, o incluso hacerse submicrométrico. Si esto requiere el uso de tensioactivo u otro agente estabilizante, entonces debe controlarse que este agente estabilizante no altere la fase líquido-cristalina inversa, a los niveles usados. Se han descrito métodos para producir cristales submicrométricos de 5 material de fármaco de una manera farmacéuticamente aceptable, por ejemplo en la patente estadounidense 5.510.118 citada anteriormente. En un segundo método de esta forma, se dispersan las partículas activas sólidas junto con la fase líquido-cristalina inversa, con la intención de que el cristal líquido cubrirá el agente activo sólido debido a la menor tensión interfacial, una suma más favorable de interacciones entre el agente activo sólido y el cristal líquido, y el cristal líquido y la fase continua líquida polar. En el tercer método, en primer lugar se solubiliza el agente activo, o bien en el 10 líquido, preferiblemente un disolvente polar, o bien, preferiblemente, en el cristal líquido o un precursor del mismo, a, por ejemplo, temperatura elevada o un pH favorable, y entonces se cambian las condiciones para precipitar o cristalizar el agente activo, preferiblemente en el interior de la matriz líquido-cristalina. preferred, the active agent is physically mixed with the reverse liquid-crystalline phase material, and then the resulting material is dispersed in water as disclosed elsewhere herein. Before mixing, the active agent can undergo micronization, or even become submicrometric. If this requires the use of surfactant or other stabilizing agent, then it should be checked that this stabilizing agent does not alter the reverse liquid-crystalline phase, to the levels used. Methods for producing submicron crystals of drug material have been described in a pharmaceutically acceptable manner, for example in US Patent 5,510,118 cited above. In a second method in this way, the solid active particles are dispersed together with the inverse liquid-crystalline phase, with the intention that the liquid crystal will cover the solid active agent due to the lower interfacial tension, a more favorable sum of interactions between the solid active agent and the liquid crystal, and the liquid crystal and the polar liquid continuous phase. In the third method, the active agent is first solubilized, either in the liquid, preferably a polar solvent, or, preferably, in the liquid crystal or a precursor thereof, at, for example, elevated temperature or a Favorable pH, and then the conditions for precipitating or crystallizing the active agent are changed, preferably inside the liquid-crystalline matrix.

Tercera forma: el agente activo está en forma líquida, o bien como un agente activo líquido (por ejemplo, en el caso de un fármaco líquido) o bien como una disolución del fármaco en una fase líquida que es (necesariamente) 15 distinta de e interior al material de fase líquido-cristalina. Se incluye este líquido en el material líquido-cristalino, rodeado por una matriz contigua y continua del material líquido-cristalino. Third form: the active agent is in liquid form, either as a liquid active agent (for example, in the case of a liquid drug) or as a solution of the drug in a liquid phase that is (necessarily) other than e interior to the liquid-crystalline phase material. This liquid is included in the liquid-crystalline material, surrounded by a contiguous and continuous matrix of the liquid-crystalline material.

Son posibles las combinaciones de estas tres formas. Por ejemplo, podría solubilizarse una parte del agente activo en el cristal líquido, mientras que el resto podría estar en forma cristalina dispersa en el cristal líquido. Combinations of these three forms are possible. For example, a part of the active agent could be solubilized in the liquid crystal, while the rest could be in crystalline form dispersed in the liquid crystal.

Tal como se acaba de describir en la primera forma, cuando se disuelve el agente activo en la fase líquido-20 cristalina cúbica inversa o hexagonal inversa, es sumamente deseable que en la dispersión final, se ubique la mayoría del agente activo en la fase líquido-cristalina, es decir en las partículas, en lugar de en el exterior acuoso. De esta manera, el uso de la invención puede beneficiarse completamente de las características de la fase líquido-cristalina inversa tal como se describe en el presente documento: el secuestro y la protección del fármaco tanto en almacenamiento como frente al ataque de los componentes biológicos del organismo; las interacciones íntimas entre las 25 partículas y las membranas biológicas; cualquier capacidad de direccionamiento incorporada en las partículas tales como anticuerpos o lectinas; cualquier antioxidante (por ejemplo, tocoferol) o componentes protectores de otro modo en las partículas; conformación favorable y más fisiológica y presentación de compuestos bioactivos especialmente proteínas; naturaleza biomimética del vehículo en relación con las biomembranas, etc. Además, tal como se trata en el presente documento, se cree que varios fármacos presentan un efecto dañino (por ejemplo, ardor en la inyección) 30 cuando están presentes, incluso en cantidades minúsculas, en la fase exterior acuosa de una microgota o un sistema microparticulado, aún cuando no se ubica dentro de una partícula o gota hidrófoba. De hecho, generalmente se prefiere en estas realizaciones que más de aproximadamente el 90% del fármaco se ubique preferentemente en las partículas, y, tal como se observa en el ejemplo 18 y la discusión a su alrededor, se prefiere especialmente que más de aproximadamente el 99% del fármaco se ubique preferentemente en las partículas (véase el ejemplo 18), 35 particularmente en el caso en el que el fármaco es propofol. As just described in the first form, when the active agent is dissolved in the inverse liquid or inverse hexagonal crystalline liquid phase, it is highly desirable that in the final dispersion, the majority of the active agent is located in the liquid phase -crystalline, that is in the particles, rather than in the aqueous exterior. In this way, the use of the invention can fully benefit from the characteristics of the inverse liquid-crystalline phase as described herein: the sequestration and protection of the drug both in storage and against the attack of the biological components of the organism; the intimate interactions between the 25 particles and the biological membranes; any addressing capability incorporated into the particles such as antibodies or lectins; any antioxidant (for example, tocopherol) or other protective components in the particles; favorable and more physiological conformation and presentation of bioactive compounds especially proteins; biomimetic nature of the vehicle in relation to biomembranes, etc. In addition, as discussed herein, several drugs are believed to have a harmful effect (eg, burning on injection) 30 when they are present, even in tiny amounts, in the aqueous outer phase of a micro drop or system. microparticulate, even if it is not located within a hydrophobic particle or drop. In fact, it is generally preferred in these embodiments that more than about 90% of the drug is preferably located in the particles, and, as seen in example 18 and the discussion around it, it is especially preferred that more than about 99% of the drug is preferably located in the particles (see example 18), particularly in the case where the drug is propofol.

En la tercera forma, cuando el agente activo es un líquido incluido en el material líquido-cristalino, rodeado por una matriz contigua y continua del material líquido-cristalino, puede esperarse de manera razonable que el fármaco permanecerá con el material líquido-cristalino en el organismo y de ese modo obtener las ventajas de la asociación. Esto debe contrastarse con el documento U.S. 6.071.524 en el que las partículas de gel cúbicas se sitúan en la interfase 40 entre las microgotas de aceite y la fase exterior acuosa. Con el gran área superficial de las interfases de aceite-agua en el organismo, y esta relación espacial débil topológicamente entre las partículas de gel y las gotas de aceite, existe una buena razón para creer (y no se proporciona ninguna prueba de lo contrario en el documento 6.071.524) que las partículas de gel se separarán de las gotas de aceite en su curso a través del organismo, en una aplicación farmacéutica del documento 6.071.524. Tampoco existe una razón convincente para creer que se transportarán las 45 gotas de aceite a través de una barrera de biomembrana incluso si son las mismas partículas de gel cúbicas. In the third form, when the active agent is a liquid included in the liquid-crystalline material, surrounded by a contiguous and continuous matrix of the liquid-crystalline material, it can reasonably be expected that the drug will remain with the liquid-crystalline material in the organism and thereby obtain the advantages of the association. This should be contrasted with U.S. 6,071,524 in which the cubic gel particles are located at the interface 40 between the oil droplets and the aqueous outer phase. With the large surface area of the oil-water interfaces in the organism, and this topologically weak spatial relationship between the gel particles and the oil droplets, there is a good reason to believe (and no evidence to the contrary is provided in 6,071,524) that the gel particles will be separated from the oil droplets in their course through the body, in a pharmaceutical application of 6,071,524. Nor is there a compelling reason to believe that the 45 drops of oil will be transported through a biomembrane barrier even if they are the same cubic gel particles.

Incorporación de un componente asociado a bicapa, cargado. Un aspecto clave de la invención es la incorporación de un compuesto asociado a bicapa, cargado de manera iónica, que induce una carga en toda la bicapa, y crea una carga superficial sobre las partículas del material líquido-cristalino. Existen dos métodos generales para incorporar este compuesto cargado, aunque el resultado neto normalmente no se ve afectado por la elección del 50 método. En un método, se mezcla el compuesto cargado junto con el material líquido-cristalino, o en algunos casos, la fase líquido-cristalina inversa requiere la presencia del compuesto cargado. En otro método, el compuesto cargado está presente en la fase líquida, preferiblemente solubilizado en la misma, y se dispersa el cristal líquido en esta mezcla. Al final, los componentes tenderán hacia la equilibración, que tenderá a minimizar las diferencias entre estos enfoques, de manera que se repartirá el componente cargado entre las partículas líquido-cristalinas y la fase polar según una 55 distribución que eventualmente llegará a una distribución en equilibrio, o casi en equilibrio. Incorporation of a component associated with bilayer, loaded. A key aspect of the invention is the incorporation of a bilayer-associated compound, charged in an ionic manner, which induces a charge throughout the bilayer, and creates a surface charge on the particles of the liquid-crystalline material. There are two general methods to incorporate this charged compound, although the net result is not normally affected by the choice of method. In one method, the charged compound is mixed together with the liquid-crystalline material, or in some cases, the reverse liquid-crystalline phase requires the presence of the charged compound. In another method, the charged compound is present in the liquid phase, preferably solubilized therein, and the liquid crystal is dispersed in this mixture. In the end, the components will tend towards equilibrium, which will tend to minimize the differences between these approaches, so that the charged component will be distributed between the liquid-crystalline particles and the polar phase according to a distribution that will eventually reach an equilibrium distribution , or almost in balance.

El compuesto asociado a bicapa, cargado a menudo, aunque no siempre, será un tensioactivo cargado, o bien un tensioactivo aniónico o bien, más rara vez, un tensioactivo catiónico. A continuación se proporcionan ejemplos de tensioactivos de este tipo, farmacéuticamente aceptable para diversas vías de administración. Sin embargo, en muchas realizaciones de la invención, el compuesto cargado no satisfará la definición (proporcionada anteriormente) de un 60 tensioactivo, pero no obstante se adecuará perfectamente bien como un compuesto asociado a bicapa, cargado que The bilayer-associated compound, often charged, but not always, will be a charged surfactant, either an anionic surfactant or, more rarely, a cationic surfactant. Examples of such pharmaceutically acceptable surfactants for various routes of administration are given below. However, in many embodiments of the invention, the charged compound will not meet the definition (provided above) of a surfactant, but will nevertheless fit perfectly well as a bilayer-associated, charged compound that

puede producir partículas de la presente invención. El compuesto asociado a bicapa, cargado puede ser el agente activo. It can produce particles of the present invention. The bilayer associated compound, charged can be the active agent.

Compuestos asociados a bicapa, aniónicos. Para las formulaciones destinadas para su administración por inyección u otras vías no orales, los restos aniónicos especialmente preferidos para establecer la carga en las micropartículas de esta invención son: docusato, dodecilsulfato, ácido desoxicólico (y colatos relacionados, tales como 5 glicocolato), succinato de tocoferol, ácido esteárico y otros ácidos grasos de 18 carbonos incluyendo ácidos oleico, linoleico y linolénico, ácido gentísico, aminoácidos hidrófobos incluyendo triptófano, tirosina, leucina, isoleucina, ácido aspártico, cistina, y sus derivados N-metilados, particularmente N-acetiltriptófano, cloruro de miristil-gamma-picolinio, fosfatidilserina, fosfatidilinositol, fosfatidilglicerol (particularmente dimiristoil-fosfatidilglicerol), y otros fosfolípidos aniónicos y ácidos. El experto en la técnica reconocerá el docusato como el resto aniónico del tensioactivo docusato de 10 sodio (también conocido como Aerosol OT), y dodecilsulfato como el resto aniónico del tensioactivo dodecilsulfato de sodio, o SDS. También pueden usarse polipéptidos y proteínas tensioactivas, tales como caseína y albúmina, aunque debe prestarse mucha atención al pH que tendrán un efecto sobre la carga de la molécula. Compounds associated with bilayer, anionic. For formulations intended for administration by injection or other non-oral routes, the especially preferred anionic moieties for establishing the charge on the microparticles of this invention are: docusate, dodecyl sulfate, deoxycholic acid (and related strata, such as glycocholate), succinate of tocopherol, stearic acid and other 18-carbon fatty acids including oleic, linoleic and linolenic acids, gentysic acid, hydrophobic amino acids including tryptophan, tyrosine, leucine, isoleucine, aspartic acid, cystine, and their N-methylated derivatives, particularly N-acetyltriptophan , myristyl-gamma-picolinium chloride, phosphatidylserine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol (particularly dimiristoyl phosphatidylglycerol), and other anionic and acidic phospholipids. The person skilled in the art will recognize docusate as the anionic moiety of the docusate 10 sodium surfactant (also known as Aerosol OT), and dodecyl sulfate as the anionic moiety of the sodium dodecyl sulfate surfactant, or SDS. Polypeptides and surfactant proteins, such as casein and albumin, can also be used, although a lot of attention must be paid to the pH that will have an effect on the molecule's loading.

Para las formulaciones destinadas para su administración oral, pueden usarse los compuestos aniónicos anteriores, pero además existen varios otros compuestos que pueden proporcionar el anión. Éstos incluyen palmitato de 15 ascorbilo, lactilato de estearoílo, glicirrizina, citrato de monoglicérido, citrato de estearilo, estearilfumarato sodio, ramnolípido JBR-99 (y otros biotensioactivos de Jeneil Biosurfactant), ácido glicocólico, ácido taurocólico y ácido tauroquenodesoxicólico. For formulations intended for oral administration, the above anionic compounds may be used, but in addition there are several other compounds that can provide the anion. These include 15 ascorbyl palmitate, stearoyl lactylate, glycyrrhizine, monoglyceride citrate, stearyl citrate, sodium stearyl fumarate, JBR-99 ramnolipid (and other Jeneyl Biosurfactant biotensives), glycocolic acid, tauroquenoic acid and taurocholic acid.

Los tensioactivos aniónicos especialmente preferidos son: oleato de sodio, dodecilsulfato de sodio, dietilhexil-sulfosucinato de sodio, dimetilhexil-sulfosuccinato de sodio, di-2-etilacetato de sodio, 2-etilhexil-sulfato de sodio, 20 undecano-3-sulfato de sodio, etilfenilundecanoato de sodio, jabones de carboxilato de la forma ICn, en los que la longitud de la cadena n está entre 8 y 20 e I es un contraión monovalente tal como sodio, potasio, amonio, etc. Especially preferred anionic surfactants are: sodium oleate, sodium dodecyl sulfate, sodium diethylhexyl sulphosuccinate, sodium dimethylhexyl sulphosuccinate, sodium di-2-ethyl ethyl acetate, sodium 2-ethylhexyl sulfate, sodium undecano-3-sulfate sodium, sodium ethylphenylundecanoate, carboxylate soaps of the ICn form, in which the length of the chain n is between 8 and 20 and I is a monovalent counterion such as sodium, potassium, ammonium, etc.

Compuestos asociados a bicapa, catiónicos. Tal como se trató en el presente documento, en la actualidad la selección de los tensioactivos catiónicos farmacéuticamente aceptables para inyección se limita principalmente a cloruro de miristil-gamma-picolinio y cloruro de benzalconio. Sin embargo, varios otros lípidos y tensioactivos catiónicos 25 están en la actualidad en investigación como excipientes farmacéuticos para productos inyectables, que incluyen: clorhidrato de dimetilaminoacetato de tocoferilo, Cytofectin gs, 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-trimetilamonio-propano, colesterol unido a lisinamida u ornitinamida, bromuro dimetildioctadecilamonio, 1,2-dioleoil-sn-3-etilfosfocolina y otros lípidos de doble cadena con una carga catiónica llevada por un átomo de fósforo o arsénico, yoduro de trimetilaminoetanocarbamoil-colesterol, cloruro de O,O’-ditetradecanoil-N-(alfa-trimetil-amonioacetil)dietanolamina (DC-30 6-14), cloruro de N-[(1-(2,3-dioleiloxi)propil)]-N-N-N-trimetilamonio, cloruro de N-metil-4-(dioleil)metilpiridinio (“saint-2”), glicósidos lipídicos con grupos colgantes aminoalquilo, bromuro de 1,2-dimiristiloxipropil-3-dimetilhidroxietil-amonio, bromuro de bis[2-(11-fenoxiundecanoato)etil]-dimetilamonio, bromuro de N-hexadecil-N-10-[O-(4-acetoxi)-fenilundecanoato]etil-dimetilamonio, 3-beta-[N-(N’,N’-dimetilaminoetano)-carbamoílo. Compounds associated with bilayer, cationic. As discussed herein, the selection of pharmaceutically acceptable cationic surfactants for injection is currently limited mainly to myristyl-gamma-picolinium chloride and benzalkonium chloride. However, several other cationic lipids and surfactants are currently under investigation as pharmaceutical excipients for injectable products, including: tocopheryl dimethylaminoacetate hydrochloride, Cytofectin gs, 1,2-dioleoyl-sn-glycerol-3-trimethylammonium-propane , cholesterol linked to lysinamide or ornithinamide, dimethyldioctadecylammonium bromide, 1,2-dioleoyl-sn-3-ethylphosphocholine and other double-chain lipids with a cationic charge carried by a phosphorus or arsenic atom, trimethylaminoethanecarbamoyl-cholesterol iodide, O chloride , O'-ditetradecanoyl-N- (alpha-trimethyl-ammoniumacetyl) diethanolamine (DC-30 6-14), N - [(1- (2,3-dioleyloxy) propyl)] - NNN-trimethylammonium chloride N-methyl-4- (dioleyl) methylpyridinium ("saint-2"), lipid glycosides with aminoalkyl pendant groups, 1,2-dimiristyloxypropyl-3-dimethylhydroxyethyl ammonium bromide, bis [2- (11-phenoxyundecanoate) bromide ethyl] -dimethylammonium, N-hexadecyl-N-10- [O- (4- acetoxy) -phenylundecanoate] ethyl-dimethylammonium, 3-beta- [N- (N ’, N’-dimethylaminoethane) -carbamoyl.

Otros compuestos asociados a bicapa útiles. Otros compuestos asociados a bicapa, cargados, adecuados 35 para su uso en la presente invención, que pueden captar una carga en al menos algunas condiciones, incluye: ácidos grasos, compuestos fenólicos tales como eugenol, isoeugenol, quinolinas, hidroxiquinolinas y benzoquinolinas, compuestos tricíclicos tales como carbazol, fenotiazina, etc., pigmentos, clorofila, determinados extractos de aceites naturales particularmente aquellos que son fenólicos (tales como aceite de clavo, aceite de jengibre, aceite de albahaca), biotensioactivos (tales como “JBR-99” de Jeneil), una amplia gama de colorantes. Pueden usarse proteínas y 40 polipéptidos anfífilos, incluyendo gramicidina, caseína, albúmina, glicoproteínas, proteínas ancladas a lípidos, proteínas receptoras y otras proteínas de membrana tales como proteinasa A, amiloglucosidasa, encefalinasa, dipeptidilpeptidasa IV, gamma-glutamiltransferasa, galactosidasa, neuraminidasa, alfa-manosidasa, colinesterasa, arilamidasa, surfactina, ferroquelatasa, espiralina, proteínas de unión a penicilina, glicotransferasas microsomales, cinasas, proteínas de membrana externa bacteriana, y antígenos de histocompatibilidad. Tal como se conoce bien, cada proteína tiene una 45 carga neta, excepto en su punto isoeléctrico (pI), y por tanto una proteína asociada a membrana farmacéuticamente aceptable es adecuada para su uso en la presente invención siempre que el pH esté alejado de su punto isoeléctrico. En la actualidad se aceptan unas pocas proteínas de este tipo como componentes inactivos para preparaciones farmacéuticas, al menos con algunas condiciones, y éstas incluyen gluten, caseína y albúmina. Other useful bilayer associated compounds. Other bilayer-associated compounds, charged, suitable for use in the present invention, which can capture a charge under at least some conditions, include: fatty acids, phenolic compounds such as eugenol, isoeugenol, quinolines, hydroxyquinolines and benzoquinolines, tricyclic compounds such as carbazole, phenothiazine, etc., pigments, chlorophyll, certain natural oil extracts, particularly those that are phenolic (such as clove oil, ginger oil, basil oil), biotensives (such as "JBR-99" from Jeneil ), a wide range of dyes. Amphiphilic proteins and 40 polypeptides may be used, including gramicidin, casein, albumin, glycoproteins, lipid-anchored proteins, receptor proteins and other membrane proteins such as proteinase A, amyloglucosidase, enkephalinase, dipeptidylpeptidase IV, gamma-glutamyltransferase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, galactosidase, -manosidase, cholinesterase, arylamidase, surfactin, ferrokelatase, spiralin, penicillin-binding proteins, microsomal glyotransferases, kinases, bacterial outer membrane proteins, and histocompatibility antigens. As is well known, each protein has a net charge, except at its isoelectric point (pI), and therefore a pharmaceutically acceptable membrane associated protein is suitable for use in the present invention as long as the pH is far from its isoelectric point A few proteins of this type are currently accepted as inactive components for pharmaceutical preparations, at least with some conditions, and these include gluten, casein and albumin.

Tensioactivos y lípidos. Los lípidos y tensioactivos, de baja toxicidad, de manera especial farmacéuticamente 50 aceptables, forman la base de las fases líquido-cristalinas liotrópicas que son un bloque estructural fundamental de la presente invención. Los tensioactivos preferidos que están aprobados por la FDA como productos inyectables y otros tensioactivos y lípidos de baja toxicidad, que tienen solubilidad al menos relativamente baja en agua, que se prefieren para la presente invención para productos destinados para varias vías de administración, incluyen aquellos indicados en la patente estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia. El 55 inventor ha encontrado que los siguientes tensioactivos farmacéuticamente aceptables son particularmente útiles en la formación de fases cúbicas y hexagonales inversas insolubles: fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, Arlatone G, Tween 85, monooleato de glicerol y otros monoglicéridos insaturados de cadena larga (sólo aplicaciones orales, tópicas y bucales), monooleato de sorbitano, docusato de zinc y calcio, y Pluronics con menos de aproximadamente el 30% de grupos PEO en peso, especialmente Pluronic L122 y en un menor grado L101; Pluronic P123 (y de igual manera 60 Pluronic 103) también forma fases cúbicas y hexagonales inversas pero tiene una solubilidad en agua significativa que Surfactants and lipids. Lipids and surfactants, of low toxicity, especially pharmaceutically acceptable, form the basis of the liotropic liquid-crystalline phases that are a fundamental structural block of the present invention. Preferred surfactants that are approved by the FDA as injectable products and other low toxicity surfactants and lipids, which have at least relatively low solubility in water, which are preferred for the present invention for products intended for various routes of administration, include those indicated in US Patent 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference. The inventor has found that the following pharmaceutically acceptable surfactants are particularly useful in the formation of insoluble inverse cubic and hexagonal phases: phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, Arlatone G, Tween 85, glycerol monooleate and other unsaturated long chain monoglycerides (oral applications only, topical and oral), sorbitan monooleate, zinc and calcium docusate, and Pluronics with less than about 30% PEO groups by weight, especially Pluronic L122 and to a lesser extent L101; Pluronic P123 (and likewise 60 Pluronic 103) also forms inverse cubic and hexagonal phases but has a significant water solubility that

puede limitar su utilidad en algunas aplicaciones. Los tensioactivos etoxilados de bajo PM OE-2 y OE-5 (éter de alcohol oleílico unido a o bien 5 o bien 2 grupos PEG) son útiles en este respecto pero su aprobación en formulaciones de fármacos es limitada, dependiendo de la vía de administración. It may limit its usefulness in some applications. The low PM ethoxylated surfactants OE-2 and OE-5 (oleyl alcohol ether attached to either 5 or 2 PEG groups) are useful in this regard but their approval in drug formulations is limited, depending on the route of administration.

Disolvente polar. Los disolventes polares se requieren en la presente invención para la creación del material de fase líquido-cristalina liotrópica, y se prefieren como una fase continua para dispersar dicho material. Habitualmente, 5 al menos en el caso de una fase cúbica bicontinua, que es la realización preferida, la composición de disolvente polar en el cristal líquido y en la fase continua (exterior) será en última instancia igual, o casi igual, porque los dos están esencialmente en continuidad hidráulica. También debe observarse que la elección de un disolvente polar no volátil como el glicerol puede ser importante en procesos tales como secado por pulverización. El disolvente polar puede ser: agua; glicerol; formamida, N-metilformamida, o dimetilformamida; etilenglicol u otro alcohol polihidroxilado; nitrato de 10 etilamonio; otros disolventes polares no acuosos tales como N-metilsidnona, N-metilacetamida, dimetilacetamida, cloruro de piridinio, etc.; o una mezcla de dos o más de los anteriores, siendo agua-glicerol la más importante de las mezclas. Polar solvent. Polar solvents are required in the present invention for the creation of the liotropic liquid-crystalline phase material, and are preferred as a continuous phase for dispersing said material. Usually, at least in the case of a bicontinuous cubic phase, which is the preferred embodiment, the polar solvent composition in the liquid crystal and in the continuous (outer) phase will ultimately be the same, or almost the same, because the two They are essentially in hydraulic continuity. It should also be noted that the choice of a non-volatile polar solvent such as glycerol may be important in processes such as spray drying. The polar solvent can be: water; glycerol; formamide, N-methylformamide, or dimethylformamide; ethylene glycol or other polyhydric alcohol; ethylammonium nitrate; other non-aqueous polar solvents such as N-methylsidnone, N-methylacetamide, dimethylacetamide, pyridinium chloride, etc .; or a mixture of two or more of the above, with water-glycerol being the most important of the mixtures.

Para el caso de la administración de fármacos, los disolventes polares preferidos son agua, glicerol, N,N-dimetilacetamida, y N-metilacetamida, así como mezclas de los mismos. Las mezclas de agua-glicerol son de toxicidad 15 extremadamente baja y son muy compatibles con muchos tensioactivos incluyendo fosfolípidos. Las mezclas de dimetilacetamida-glicerol son excelentes para disolver compuestos farmacéuticos solubles con dificultad. In the case of drug administration, the preferred polar solvents are water, glycerol, N, N-dimethylacetamide, and N-methylacetamide, as well as mixtures thereof. Water-glycerol mixtures are extremely low toxicity and are very compatible with many surfactants including phospholipids. The dimethylacetamide-glycerol mixtures are excellent for dissolving soluble pharmaceutical compounds with difficulty.

Puede ser ventajoso en determinadas circunstancias usar, como una forma alternativa de esta invención, una composición que produzca una dispersión de carga estabilizada de partículas de fase líquido-cristalina inversa al contacto con el agua (o con menor frecuencia, otro disolvente o líquido polar), sea o no esta misma composición 20 deshidratada una fase líquido-cristalina inversa (es decir, un material que puede reconstituirse que forma partículas no recubiertas cuando se combinan con medio (agua o algún otro fluido) en el que las partículas así formadas tengan una carga iónica que las estabiliza como una disolución o dispersión en un líquido (por ejemplo, agua)). En particular, este contacto con el agua o una mezcla que contienen agua puede ser o bien durante una etapa de reconstitución, o bien durante la aplicación de la partícula, cuando la partícula entra en contacto con una disolución acuosa tal como sangre, 25 líquido extracelular, líquido intracelular, mucosa, líquido intestinal, etc. Esto puede estar en forma de partículas, o un líquido precursor, tal como se observa en el ejemplo 17, o una matriz sólida o semisólida. Existen varias razones por las que esto puede ser ventajoso, incluyendo las siguientes sin limitación: proteger agentes activos o excipientes hidrolíticamente inestables; limitar la liberación prematura de agentes activos solubles en agua; y como un resultado natural de un proceso de producción tal como secado por pulverización o liofilización que pueden inducir la 30 deshidratación. Eliminar la mayoría, o la totalidad, del agua de una fase líquido-cristalina inversa a menudo producirá otra fase líquido-cristalina o líquida nanoestructurada, pero a veces puede producir una disolución sin estructura, precipitado, o una mezcla de estos con una o más fases líquido-cristalinas o líquidas nanoestructuradas. En cualquier caso, para muchas aplicaciones, es la forma hidratada la que es importante en la aplicación de las partículas, y por tanto si esta forma hidratada es una fase líquido-cristalina inversa, entonces la composición de la materia cae dentro del 35 alcance de la presente invención. It may be advantageous in certain circumstances to use, as an alternative form of this invention, a composition that produces a stabilized charge dispersion of liquid-crystalline phase particles reversed upon contact with water (or less frequently, another solvent or polar liquid) , whether or not this same composition 20 dehydrated is a reverse liquid-crystalline phase (i.e., a material that can be reconstituted that forms uncoated particles when combined with medium (water or some other fluid) in which the particles thus formed have a ionic charge that stabilizes them as a solution or dispersion in a liquid (for example, water). In particular, this contact with water or a mixture containing water can be either during a reconstitution stage, or during the application of the particle, when the particle comes into contact with an aqueous solution such as blood, extracellular liquid , intracellular fluid, mucosa, intestinal fluid, etc. This may be in the form of particles, or a precursor liquid, as seen in example 17, or a solid or semi-solid matrix. There are several reasons why this can be advantageous, including the following without limitation: protecting active agents or hydrolytically unstable excipients; limit premature release of water soluble active agents; and as a natural result of a production process such as spray drying or lyophilization that can induce dehydration. Removing most, or all, of the water from an inverse liquid-crystalline phase will often produce another nanostructured liquid-crystalline or liquid phase, but sometimes it can produce an unstructured solution, precipitate, or a mixture of these with one or more liquid-crystalline or nanostructured liquid phases. In any case, for many applications, it is the hydrated form that is important in the application of the particles, and therefore if this hydrated form is an inverse liquid-crystalline phase, then the composition of the matter falls within the scope of The present invention.

Métodos preferidos de preparación. El método preferido para poner en práctica la presente invención es tal como sigue, centrándose en el caso de un agente activo farmacéutico. Puede elegirse emplear o bien el material líquido-cristalino de fase cúbica bicontinua inversa, o bien menos preferiblemente, un material de fase hexagonal inversa (menos preferible debido tanto a menos interacciones favorables con biomembranas como a riesgo aumentado de 40 efectos tóxicos y/o antigénicos). Se prepara un cristal líquido que contiene el agente activo mezclando el agente activo, un tensioactivo o lípido, agua, y si es necesario un excipiente de solubilización, y mezclando exhaustivamente de manera que el material resultante sea ópticamente isotrópico y de alta viscosidad. Los métodos para ubicar y mezclar la composición apropiada para lograr esto se proporcionan en detalle en las patentes estadounidenses 6.482.517 y 6.638.621 junto con las solicitudes estadounidenses 09/994.937 y 10/460.659 cuyo contenido se incorpora al presente 45 documento como referencia. Para resumir, estos métodos implican el desarrollo de diagramas de fases con la ayuda de microscopía óptica de polarización y dispersión de rayos X de ángulo pequeño, la aplicación de los componentes de ayuda a la solubilización que no son parafínicos y normalmente contienen uno o más grupos polares que no funcionan son como tensioactivos (en combinación con tensioactivos verdaderos que son, por supuesto, necesarios para el comportamiento líquido-cristalino), y el uso acertado de técnicas útiles para acelerar la disolución tal como 50 calentamiento, sonicación, agitación/amasado vigoroso, etc. La concentración del agente activo debe ser lo suficientemente alta para que una cantidad terapéutica eficaz (una “dosis”, para generalizar un término de productos farmacéuticos) no requiera más de aproximadamente 10 gramos de cristal líquido, y más preferiblemente no más de aproximadamente 2 gramos. Si el tensioactivo o lípido no está fuertemente cargado, y esto será normalmente el caso en aplicaciones farmacéuticas, especialmente formulaciones inyectables, porque la mayoría de los tensioactivos y lípidos 55 aprobados por la FDA aprobados para su uso en concentración relativamente alta (tal como se necesita en el cristal líquido) no están altamente cargados, entonces debe incorporarse una cantidad relativamente pequeña del compuesto asociado a bicapa, cargado, y esto es preferiblemente un tensioactivo cargado. Para los casos en los que se necesita este aditivo (es decir, en el que la propia fase cúbica no tiene un tensioactivo cargado como su componente tensioactivo principal), la razón en peso del compuesto asociado a bicapa, cargado, con respecto al cristal líquido debe ser de entre 60 aproximadamente 0,01:1 y 0,15:1, o más preferiblemente entre aproximadamente 0,02:1 y 0,08:1. Razones en peso mayores que 0,08:1, y especialmente razones mayores que 0,15:1, tendrán una tendencia a inducir una fase L3 o fase laminar que puede convertirse en un recubrimiento de interferencia. Razones inferiores a 0,01:1 no producirán suficiente Preferred methods of preparation. The preferred method of practicing the present invention is as follows, focusing on the case of a pharmaceutical active agent. It may be chosen to use either the reverse bicontinuous cubic phase liquid-crystalline material, or less preferably, a reverse hexagonal phase material (less preferable due to both less favorable interactions with biomembranes and an increased risk of 40 toxic and / or antigenic effects ). A liquid crystal containing the active agent is prepared by mixing the active agent, a surfactant or lipid, water, and if necessary a solubilization excipient, and thoroughly mixing so that the resulting material is optically isotropic and high viscosity. The methods for locating and mixing the appropriate composition to achieve this are provided in detail in US Patents 6,482,517 and 6,638,621 together with US applications 09 / 994,937 and 10 / 460,659 whose content is incorporated herein by reference. To summarize, these methods involve the development of phase diagrams with the help of optical microscopy of polarization and small angle X-ray scattering, the application of the solubilization aid components that are not paraffinic and usually contain one or more groups Polar that do not work are as surfactants (in combination with true surfactants that are, of course, necessary for liquid-crystalline behavior), and the successful use of useful techniques to accelerate dissolution such as vigorous heating, sonication, stirring / kneading , etc. The concentration of the active agent should be high enough so that an effective therapeutic amount (a "dose", to generalize a term of pharmaceutical products) does not require more than about 10 grams of liquid crystal, and more preferably no more than about 2 grams. . If the surfactant or lipid is not heavily charged, and this will normally be the case in pharmaceutical applications, especially injectable formulations, because most of the FDA-approved surfactants and lipids approved for use in relatively high concentration (as needed) in the liquid crystal) they are not highly charged, then a relatively small amount of the bilayer-associated compound, charged, must be incorporated, and this is preferably a charged surfactant. For cases where this additive is needed (that is, in which the cubic phase itself does not have a charged surfactant as its main surfactant component), the weight ratio of the bilayer-associated compound, charged, with respect to the liquid crystal it should be between about 60 0.01: 1 and 0.15: 1, or more preferably between about 0.02: 1 and 0.08: 1. Weight ratios greater than 0.08: 1, and especially ratios greater than 0.15: 1, will have a tendency to induce an L3 phase or laminar phase that can become an interference coating. Reasons less than 0.01: 1 will not produce enough

potencial superficial para estabilizar las partículas en dispersión. Aunque el método preferido de incorporación de un aditivo tensioactivo cargado, siempre que sea soluble en agua, es disolviéndolo en el agua que se usa para dispersar la fase cúbica, en primer lugar debe controlarse que la fase cúbica no se funda mediante la adición de pequeñas cantidades del tensioactivo. surface potential to stabilize dispersed particles. Although the preferred method of incorporating a charged surfactant additive, provided that it is soluble in water, is to dissolve it in the water used to disperse the cubic phase, it must first be checked that the cubic phase is not melted by the addition of small quantities of the surfactant.

Entonces se dispersa la fase cúbica en la disolución de tensioactivo, o en el otro caso se dispersa la fase 5 cúbica cargada en agua o alguna clase de tampón/disolución acuosa, usando homogeneización u otros medios mecánicos, preferiblemente seguido de microfluidización. En la producción de partículas de esta invención y su reducción de tamaño, pueden usarse varios métodos de emulsificación como entradas de energía. Éstos incluyen sonicación, microfluidización, homogeneización en válvulas, agitación con paletas, etc. Cuando se requieren partículas del orden de las submicras (por ejemplo, en aplicaciones intravenosas), la microfluidización es el método preferido dado 10 que las velocidades de cizallamiento y los picos de temperatura pueden controlarse mejor en este método. La filtración o extrusión, en combinación con estos métodos, pueden ser de gran ayuda en la reducción del tamaño de partícula, y pueden servir a un fin de esterilización al mismo tiempo. La homogeneización del tamaño de partícula hasta unas pocas micras seguido de filtración a 0,45 ó 0,2 micras es otro medio preferido de producción de partículas finas de esta invención. En casos en los que la rigidez del cristal líquido inverso interfiere con la filtración, puede ayudar elevar la 15 temperatura de modo que se lleve a cabo la filtración a una temperatura en la que el cristal líquido se funde para dar una fase líquida (normalmente fase L2, L3 o de microemulsión), haciendo más fácil el dimensionamiento mediante filtración, y entonces reducir la temperatura de vuelta a la ambiente para devolver las partículas a la forma líquido-cristalina. The cubic phase is then dispersed in the surfactant solution, or in the other case the cubic phase charged in water or some kind of buffer / aqueous solution is dispersed, using homogenization or other mechanical means, preferably followed by microfluidization. In the production of particles of this invention and their reduction in size, various emulsification methods can be used as energy inputs. These include sonication, microfluidization, valve homogenization, paddle agitation, etc. When particles of the order of submicras are required (for example, in intravenous applications), microfluidization is the preferred method given that shear rates and temperature peaks can be better controlled in this method. Filtration or extrusion, in combination with these methods, can be of great help in reducing the particle size, and can serve a sterilization purpose at the same time. Homogenization of the particle size to a few microns followed by filtration at 0.45 or 0.2 microns is another preferred means of producing fine particles of this invention. In cases where the stiffness of the reverse liquid crystal interferes with the filtration, it may help to raise the temperature so that the filtration is carried out at a temperature at which the liquid crystal melts to give a liquid phase (usually phase L2, L3 or microemulsion), making sizing easier by filtration, and then reducing the temperature back to the environment to return the particles to the liquid-crystalline form.

La esterilización del producto terminado puede ser o bien mediante filtración, preferiblemente a 0,2 micras, o 20 bien mediante otros métodos conocidos en la técnica, tales como luz UV o UV de pulsos, irradiación gamma, esterilización con haz de electrones, esterilización con vapor, o cuando sea posible mediante esterilización por calor terminal. Dado que muchos de los componentes usados en la práctica de esta invención serán líquidos a o cerca de la temperatura ambiente (por ejemplo, muchos de los de Pluronics, tocoferol, aceites esenciales, disoluciones acuosas, y fases L2 que resultan de mezclar composiciones de fase cúbica menos agua u otro componente líquido), también existe 25 la posibilidad de empezar con componentes líquidos esterilizados (por ejemplo, mediante filtración estéril) y procesar en condiciones estériles. The sterilization of the finished product can be either by filtration, preferably at 0.2 microns, or by other methods known in the art, such as UV or UV pulse light, gamma irradiation, electron beam sterilization, sterilization with steam, or when possible by terminal heat sterilization. Since many of the components used in the practice of this invention will be liquid at or near room temperature (for example, many of those of Pluronics, tocopherol, essential oils, aqueous solutions, and L2 phases that result from mixing cubic phase compositions less water or other liquid component), there is also the possibility of starting with sterilized liquid components (for example, by sterile filtration) and processing under sterile conditions.

Los fluidos supercríticos también pueden proporcionar otros medios mediante los cuales preparar la invención, siendo el dióxido de carbono supercrítico el disolvente preferido. Pueden usarse métodos que aplican sonicación y otra energía de alta frecuencia a las composiciones disueltas en dióxido de carbono supercrítico, desprendiéndose el dióxido 30 de carbono como un gas que deja micropartículas. Supercritical fluids can also provide other means by which to prepare the invention, with supercritical carbon dioxide being the preferred solvent. Methods that apply sonication and other high frequency energy can be used to compositions dissolved in supercritical carbon dioxide, with carbon dioxide being released as a gas leaving microparticles.

Validación y cuantificación de la estabilización de la carga. En el contexto de la presente invención, la medición de la carga superficial, preferiblemente en forma de potencial zeta de partículas, es crucial para validar que las partículas de la invención están en efecto presentes, predecir las características de estabilidad a largo plazo, y para cuantificar la repulsión electroestática. En particular, tal como se trató anteriormente, en el transcurso de este trabajo se 35 estableció que una vez que el potencial zeta de un conjunto de estas partículas de fase líquido-cristalina inversa es igual o superior a aproximadamente 25 mV, o más preferiblemente 30 milivoltios, de magnitud (o es inferior a -25 mV o -30 mV de magnitud), entonces no se requiere ningún otro mecanismo para la estabilización de la dispersión frente a la floculación, siempre que no exista ninguna fuerza de atracción excepcional, tales como el entremezclado de cadenas poliméricas asociadas a superficie, condiciones iónicas inusuales, redistribuciones dependientes del tiempo dentro de 40 las partículas, etc. Validation and quantification of load stabilization. In the context of the present invention, the measurement of the surface charge, preferably in the form of a zeta potential of particles, is crucial to validate that the particles of the invention are indeed present, predict long-term stability characteristics, and to Quantify electrostatic repulsion. In particular, as discussed above, in the course of this work it was established that once the zeta potential of a set of these particles of inverse liquid-crystalline phase is equal to or greater than about 25 mV, or more preferably 30 millivolts, of magnitude (or is less than -25 mV or -30 mV of magnitude), then no other mechanism is required for stabilization of the dispersion against flocculation, provided there is no exceptional attraction force, such as intermingling of surface-associated polymer chains, unusual ionic conditions, time-dependent redistributions within the particles, etc.

En la presente técnica, se han reemplazado en gran medida estimaciones basadas en microscopía histórica de la movilidad electroforética por métodos de dispersión de la luz más cuantitativos. Esto no quiere decir que los métodos basados en microscopía sean inútiles, pero en el presente contexto, centrándose en micropartículas del orden de las submicras e incluso a escala nanométrica, se adecuan mucho mejor los métodos de dispersión de la luz. No obstante se 45 da el hecho de que para sistemas que contienen partículas más grandes, tales como formulaciones subcutáneas, determinaciones basadas en microscopía usando celdas de observación electroforética pueden ser muy útiles y producir información intuitiva, más directa, y métodos de este tipo pueden incluso extenderse a partículas del orden de las submicras particularmente con ópticas especializados tales como por contraste de interferencia diferencial (DIC, también conocido como óptica de Nomarski). En cualquier caso, las mediciones de DELSA 440SX notificadas en el 50 presente documento han sido cruciales para optimizar las composiciones usadas en la presente invención, particularmente la razón de tensioactivo cargado con respecto a cristal líquido, y especialmente en la tarea de eliminación o reducción al mínimo de poblaciones de partículas que se encuentran por debajo del potencial zeta crítico requerido para su estabilización sin utilizar concentraciones excesivas de tensioactivo cargado. In the present technique, estimates based on historical microscopy of electrophoretic mobility have been largely replaced by more quantitative methods of light scattering. This does not mean that microscopy-based methods are useless, but in the present context, focusing on microparticles of the order of submicras and even on a nanometric scale, light scattering methods are much better suited. However, there is the fact that for systems containing larger particles, such as subcutaneous formulations, determinations based on microscopy using electrophoretic observation cells can be very useful and produce intuitive, more direct information, and methods of this type can even extending to particles of the order of submicras particularly with specialized optics such as differential interference contrast (DIC, also known as Nomarski optics). In any case, the DELSA 440SX measurements reported herein have been crucial to optimize the compositions used in the present invention, particularly the ratio of surfactant charged with respect to liquid crystal, and especially in the task of elimination or reduction to the minimum of populations of particles that are below the critical zeta potential required for stabilization without using excessive concentrations of charged surfactant.

En los ejemplos proporcionados en el presente documento, las condiciones/parámetros aplicados fueron 55 representativos del procedimiento preferido para determinar el potencial zeta. Se cargaron las muestras en una celda de muestra recubierta de plata, no diluida o sólo diluida levemente, lo que es importante porque la dilución puede afectar a los potenciales zeta por varios efectos. Las conductividades fueron normalmente del orden de 0,1 mS/cm, y la corriente en miliamperios se estableció a un valor algo mayor que la mitad del valor de la conductividad en mS/cm; por ejemplo, en un ejemplo, la conductividad era de 0,311 mS/cm y la corriente se estableció a 0,2 mA. El cambio de frecuencia se 60 estableció en primer lugar a 500 Hz, y si la medición indicaba que un parámetro de 250 Hz sería aceptable entonces se In the examples provided herein, the conditions / parameters applied were representative of the preferred procedure for determining zeta potential. The samples were loaded into a sample cell coated with silver, undiluted or only slightly diluted, which is important because dilution can affect zeta potentials for various effects. The conductivities were normally of the order of 0.1 mS / cm, and the current in milliamps was set at a value somewhat greater than half the value of the conductivity in mS / cm; for example, in one example, the conductivity was 0.311 mS / cm and the current was set at 0.2 mA. The frequency change was first set to 500 Hz, and if the measurement indicated that a 250 Hz parameter would be acceptable then

tomaba una segunda medición a 250 Hz. En el último cambio de frecuencia, el ensanchamiento experimental se redujo a menudo considerablemente en comparación con la lectura a 500 Hz; sin embargo, particularmente a ángulos de medición superiores, la forma del pico podía parecer que tenía una cola en el extremo de magnitud zeta superior, debido al denominado efecto “homodino”. it took a second measurement at 250 Hz. At the last frequency change, the experimental widening was often reduced considerably compared to the reading at 500 Hz; however, particularly at higher measurement angles, the shape of the peak could appear to have a tail at the end of the upper zeta magnitude due to the so-called "homodyne" effect.

Este instrumento mide el potencial zeta a hasta cuatro ángulos simultáneamente: 8,9, 17,6, 26,3 y 35,2 grados. 5 Tal como se conoce en la técnica de la dispersión de luz, ángulos más pequeños resaltan partículas más grandes, y viceversa. Esto significa que a los ángulos más grandes, dado que las partículas más pequeñas se resaltan más, el ensanchamiento difusional es más pronunciado. This instrument measures the zeta potential at up to four angles simultaneously: 8.9, 17.6, 26.3 and 35.2 degrees. 5 As is known in the art of light scattering, smaller angles highlight larger particles, and vice versa. This means that at larger angles, since smaller particles stand out more, diffusional widening is more pronounced.

La presencia de un pico marcado a un potencial zeta indicado de cero, al menos en el presente contexto, es casi siempre debido al material que o bien se adhiere a las paredes de la celda, o bien se depositan al fondo. En los 10 ejemplos de la presente descripción, esto tiene mucho más que ver con el tamaño de las partículas que con cualquier otro parámetro, excepto por el hecho de que las partículas catiónicas tienen una tendencia ligeramente más grande a adherirse al cuarzo (el material de la celda de muestra DELSA) debido a una interacción con la carga aniónica débil del cuarzo a los valores de pH investigados en el presente documento. The presence of a peak marked at a indicated zeta potential of zero, at least in the present context, is almost always due to the material that either adheres to the cell walls, or is deposited at the bottom. In the 10 examples of the present description, this has much more to do with particle size than with any other parameter, except for the fact that cationic particles have a slightly larger tendency to adhere to quartz (the material of the DELSA sample cell) due to an interaction with the weak anionic charge of quartz at the pH values investigated herein.

La medición simultánea a diferentes ángulos también es importante en la validación de la medición. En 15 resumen, dado que esta medición (como con casi cualquier medición científica o por ingeniería) tiene ruido asociado, la cuestión de que un pico o característica dada sea real o un artefacto puede resultar más fácil y más substancial controlando si el pico o la característica está presente o no sólo en una curva, o en varias curvas (y preferiblemente todas) correspondientes a los diferente ángulos de medición. Simultaneous measurement at different angles is also important in the validation of the measurement. In summary, since this measurement (as with almost any scientific or engineering measurement) has associated noise, the question that a given peak or characteristic is real or an artifact may be easier and more substantial by controlling whether the peak or the characteristic is present or not only in one curve, or in several curves (and preferably all) corresponding to the different measurement angles.

Sistemas que puede reconstituirse o secos. Materiales secos, parcialmente secos, que pueden 20 reconstituirse y otros materiales que forman o se vuelven partículas del tipo dado a conocer en el presente documento están dentro del espíritu y el alcance de la presente invención. Pueden prepararse sistemas de este tipo mediante varios métodos. Por un lado, pueden obtenerse liofilizando partículas líquido-cristalinas, o secando partículas de este tipo mediante otros medios que implican vacío y/o entrada de calor. También pueden aplicarse secado por pulverización, secadores de lecho fluidizado y técnicas similares a o bien dispersiones acuosas de partículas, o bien disoluciones 25 precursoras de los componentes no acuosos de las partículas disueltos en un disolvente orgánico volátil. Las tres formas de la invención tratadas anteriormente pueden deshidratarse mediante al menos algunos de estos medios para producir sistemas que puede reconstituirse. Systems that can be reconstituted or dried. Dry, partially dry materials that can be reconstituted and other materials that form or become particles of the type disclosed herein are within the spirit and scope of the present invention. Systems of this type can be prepared by various methods. On the one hand, they can be obtained by lyophilizing liquid-crystalline particles, or by drying particles of this type by other means that involve vacuum and / or heat input. Spray drying, fluidized bed dryers and techniques similar to either aqueous particle dispersions, or precursor solutions of the non-aqueous components of the particles dissolved in a volatile organic solvent may also be applied. The three forms of the invention discussed above can be dehydrated by at least some of these means to produce systems that can be reconstituted.

Este enfoque es especialmente útil cuando se puede aprovechar el hecho de que muchos cristales líquidos liotrópicos inversos se vuelven sólidos tras la eliminación de su agua. Ejemplos de tensioactivos y lípidos que forman 30 fases líquido-cristalinas inversas tras la hidratación pero son sólidas (de manera eficaz) en forma seca son monoelaidina, docusato de sodio (y otras sales de docusato), determinados fosfolípidos dependiendo de la insaturación de la cadena de acilo, y mezclas de bromuro de didodecildimetilamonio con tetradecanol. This approach is especially useful when you can take advantage of the fact that many reverse liotropic liquid crystals become solid after the removal of their water. Examples of surfactants and lipids that form 30 reverse liquid-crystalline phases after hydration but are solid (effectively) in dry form are monoelaidine, sodium docusate (and other docusate salts), certain phospholipids depending on the unsaturation of the chain of acyl, and mixtures of didodecyldimethylammonium bromide with tetradecanol.

Alternativamente, el secado de una dispersión puede producir un sistema que puede reconstituirse de varias clases. Si existen cantidades relativamente pequeñas de componentes no volátiles en la fase exterior de la dispersión, 35 entonces el secado dejará o bien una masa fundida, esencialmente el cristal líquido contiguo original, o bien un conjunto de partículas distintas que puede, al menos en principio, dispersarse con una introducción de energía relativamente baja. Puede promoverse el último escenario mediante la selección de un tensioactivo u otro componente de superior punto de fusión. Alternatively, drying a dispersion can produce a system that can be reconstituted of various kinds. If there are relatively small amounts of non-volatile components in the outer phase of the dispersion, then drying will leave either a melt, essentially the original adjacent liquid crystal, or a set of distinct particles that can, at least in principle, disperse with a relatively low energy introduction. The last scenario can be promoted by selecting a surfactant or other higher melting point component.

Al incorporar un aditivo no volátil en la fase exterior, preferiblemente disuelto pero alternativamente disperso, el 40 secado puede dar como resultado partículas que se mantienen a partir del cristal líquido, fusión de cristal líquido por la presencia de un sólido de intervención. La selección de un aditivo que está cargado de manera opuesta a las partículas líquido-cristalinas puede ayudar en el establecimiento de la ubicación adecuada del sólido resultante. Dado que el sólido es o bien soluble, o bien puede dispersase fácilmente, en el líquido original (habitualmente agua), entonces la adición de este líquido generalmente dará como resultado la reconstitución rápida de una dispersión. El tamaño de partícula de la 45 dispersión reconstituida puede ser el mismo que el de la dispersión original, pero en caso de ser más grande, entonces pueden usarse métodos sencillos tal como se describe en el presente documento para reducir el tamaño de partícula; en particular, en muchos casos una etapa de filtración o extrusión inducirá el tamaño de partícula deseado al tiempo que también la esterilización, y una etapa filtración en jeringa es un procedimiento bien aceptado incluso en el caso de una reconstitución en la cabecera de la cama. 50 By incorporating a non-volatile additive in the outer phase, preferably dissolved but alternatively dispersed, drying can result in particles that are maintained from the liquid crystal, melting of liquid crystal by the presence of an intervention solid. The selection of an additive that is charged opposite to the liquid-crystalline particles can help in establishing the proper location of the resulting solid. Since the solid is either soluble, or easily dispersed, in the original liquid (usually water), then the addition of this liquid will generally result in rapid reconstitution of a dispersion. The particle size of the reconstituted dispersion may be the same as that of the original dispersion, but if it is larger, then simple methods can be used as described herein to reduce the particle size; in particular, in many cases a filtration or extrusion stage will induce the desired particle size while also sterilization, and a syringe filtration stage is a well accepted procedure even in the case of a reconstitution at the head of the bed. fifty

Inducción de la fase líquido-cristalina inversa. En algunos casos, el agente activo de interés es tal que induce una fase líquido-cristalina inversa en un sistema lípido-agua o tensioactivo-agua que forma láminas seleccionado. Como caso particularmente importante y preferido de esto, el sistema lípido-agua es un sistema fosfolípido-agua, especialmente un sistema fosfatidilcolina-agua en el que el fosfolípido está lo suficientemente insaturado como para formar un sistema líquido-cristalino laminar a o cerca de la temperatura ambiente. Se sabe bien 55 que la fosfatidilcolina purificada de la mayoría de fuentes vegetales, así como varias PC sintéticas con cadenas insaturadas, forma fases líquido-cristalinas laminares a temperatura ambiente. Sin embargo, se conoce mucho menos que la adición de determinados compuestos hidrófobos o anfífilos puede inducir que la fase laminar se convierta en una fase cúbica inversa, o menos comúnmente hexagonal inversa. Muchos aceites de solubilización, tales como varios Induction of the reverse liquid-crystalline phase. In some cases, the active agent of interest is such that it induces an inverse liquid-crystalline phase in a lipid-water or surfactant-water system that forms selected sheets. As a particularly important and preferred case of this, the lipid-water system is a phospholipid-water system, especially a phosphatidylcholine-water system in which the phospholipid is unsaturated enough to form a lamellar liquid-crystalline system at or near temperature. ambient. It is well known that purified phosphatidylcholine from most plant sources, as well as several synthetic PCs with unsaturated chains, forms lamellar liquid-crystalline phases at room temperature. However, it is much less known that the addition of certain hydrophobic or amphiphilic compounds can induce the laminar phase to become an inverse cubic phase, or less commonly inverse hexagonal. Many solubilization oils, such as several

aceites esenciales (en efecto, la mayoría de estos), inducen fases cúbicas inversas, normalmente a niveles de entre aproximadamente el 10 y el 35% de la composición final. Determinados agentes activos, incluyendo agentes activos farmacéuticos tales como propofol, también inducen fases cúbicas en sistemas de fosfatidilcolina-agua, tal como ha encontrado el inventor actual. Estos casos sorprendentes, en los que se encuentra que el fármaco, o una combinación fármaco/diluyente, tal como una mezcla de propofol y tocoferol, induce una fase líquido-cristalina inversa en una mezcla 5 de tensioactivo-agua que forma láminas de otro modo, se adecuan especialmente bien para esta invención. Esto se ilustra mediante las grandes cargas (29% en peso) que pueden lograrse en la fase cúbica PC-propofol-agua en los ejemplos mostrados a continuación, que dieron como resultado que se suministraran bajos niveles de excipientes en el transcurso del tratamiento de un mamífero con la formulación. Essential oils (in fact, most of these), induce reverse cubic phases, usually at levels between about 10 and 35% of the final composition. Certain active agents, including pharmaceutical active agents such as propofol, also induce cubic phases in phosphatidylcholine-water systems, as found by the current inventor. These surprising cases, in which it is found that the drug, or a drug / diluent combination, such as a mixture of propofol and tocopherol, induces an inverse liquid-crystalline phase in a surfactant-water mixture 5 that forms sheets otherwise , are especially well suited for this invention. This is illustrated by the large loads (29% by weight) that can be achieved in the PC-propofol-water cubic phase in the examples shown below, which resulted in low levels of excipients being supplied in the course of treating a mammal with the formulation.

Preparación de formulaciones de acción prolongada basada en materiales de fase líquido-cristalina 10 inversa. Tal como se declaró anteriormente, también se consideran en esta invención preparaciones basadas en materiales de fase líquido-cristalina inversa, de varios tipos que incluyen, y se representan bien mediante, pero no se limitan a partículas no recubiertas de carga estabilizada, que pueden aumentar significativamente y en algunos casos drásticamente la duración de acción de fármacos sin requerir aumento de la dosis; o puede mantenerse la duración de acción a una dosis sustancialmente disminuida. 15 Preparation of long acting formulations based on reversed liquid-crystalline phase materials. As stated above, preparations based on inverse liquid-crystalline phase materials of various types that are included in this invention are also considered, and are well represented by, but not limited to, uncoated particles of stabilized charge, which may increase significantly and in some cases drastically the duration of action of drugs without requiring dose increase; or the duration of action can be maintained at a substantially decreased dose. fifteen

En la práctica de este aspecto de la invención, la composición debe preferiblemente ser de tal manera que lleve a cabo la solubilización del fármaco a concentraciones lo suficientemente altas que se mantengan de manera razonable volúmenes de vehículo, desde el punto de vista tanto de un volumen de administración como de una toxicidad. (Es decir, a medida que disminuye la concentración del fármaco en el vehículo, aumenta la cantidad de cada excipiente requerido para administrar una dosis dada, alcanzando eventualmente niveles en los que se compromete baja 20 toxicidad). En el caso de anestésicos locales con grupos amino, se prefiere que el anestésico local se solubilice sustancialmente en su forma no protonada (o “base libre”). Esto aumenta el coeficiente de reparto del fármaco en los dominios hidrófobos del vehículo. La metodología y composiciones para solubilizar anestésicos locales así como una amplia gama de otros fármacos en materiales líquido-cristalinos se tratan en su extensión en la solicitud de patente estadounidense con n.º de serie , titulada Treatment Methods with Low-Dose, Longer-Acting Formulations of Local 25 Anesthetics and Other Agents, presentada el 8 de octubre de 2004, así como en los documentos U.S. 6.482.517 y 6.638.621 ambos de Anderson, cuyo contenido se incorpora al presente documento como referencia. Debe observarse que la solubilización no es necesaria para la invención, dado que de hecho existen razones para creer que la administración de un fármaco en asociación con un material de fase líquido-cristalina inversa puede lograr aumento de la duración de la acción farmacológica, o la misma duración a una dosis inferior. 30 In the practice of this aspect of the invention, the composition should preferably be such that it solubilizes the drug at concentrations high enough that reasonable volumes of vehicle are maintained, from the point of view of both a volume of administration as of a toxicity. (That is, as the concentration of the drug in the vehicle decreases, the amount of each excipient required to administer a given dose increases, eventually reaching levels at which low toxicity is compromised). In the case of local anesthetics with amino groups, it is preferred that the local anesthetic be substantially solubilized in its non-protonated form (or "free base"). This increases the distribution coefficient of the drug in the hydrophobic domains of the vehicle. The methodology and compositions for solubilizing local anesthetics as well as a wide range of other drugs in liquid-crystalline materials are discussed in their extension in the US patent application with serial number, entitled Treatment Methods with Low-Dose, Longer-Acting Formulations of Local 25 Anesthetics and Other Agents, filed on October 8, 2004, as well as in US documents 6,482,517 and 6,638,621 both of Anderson, whose content is incorporated herein by reference. It should be noted that solubilization is not necessary for the invention, since in fact there are reasons to believe that the administration of a drug in association with a reversed liquid-crystalline phase material can achieve an increase in the duration of the pharmacological action, or same duration at a lower dose. 30

La forma física de estas fases líquido-cristalinas inversas puede adoptar varias formas útiles. Puede aplicarse el cristal líquido en masa de varias maneras, que incluyen: por vía tópica, como una crema o ungüento; por vía bucal o por vía sublingual; mediante inyección tal como subcutánea o intramuscular; y por vía oral, como por ejemplo dentro de una cápsula de gel. Se prefieren las formulaciones de micropartículas, suspensiones o dispersiones de partículas, particularmente dado que pueden, si se preparan apropiadamente como se muestra a modo de ejemplo en los ejemplos 35 en el presente documento, inyectarse por vía intravenosa (lo que puede ser de enorme importancia en el caso de anestésicos locales y otros agentes activos inyectables que pueden ser tóxicos tras la administración intravenosa o intraarterial involuntaria); las formulaciones de micropartículas son especialmente versátiles porque pueden administrarse por vía subcutánea, intramuscular, intratecal, intraperitoneal, intrapleural, intralinfática, intralesional, intradérmica, subdérmica, intraocular, epidural, etc., o administrarse por vía oral, intranasal, mediante inhalación, o por 40 vía rectal, además de por vía intravenosa en las condiciones tratadas en el presente documento. The physical form of these reverse liquid-crystalline phases can take several useful forms. Mass liquid crystal can be applied in several ways, including: topically, such as a cream or ointment; orally or sublingually; by injection such as subcutaneous or intramuscular; and orally, such as in a gel capsule. Microparticle formulations, suspensions or particle dispersions are preferred, particularly since they can, if properly prepared as shown by way of example in examples 35 herein, be injected intravenously (which can be of enormous importance in the case of local anesthetics and other injectable active agents that may be toxic after involuntary intravenous or intraarterial administration); Microparticle formulations are especially versatile because they can be administered subcutaneously, intramuscularly, intrathecally, intraperitoneally, intrapleurally, intralymphatically, intralesionally, intradermally, subdermally, intraocularly, epidurally, etc., or administered orally, intranasally, by inhalation, or by 40 rectally, in addition to intravenously under the conditions discussed herein.

Las formulaciones de micropartículas de materiales de fase líquido-cristalina inversa pueden ser del tipo de carga estabilizada, no recubierto, descrito en detalle en el presente documento, o del tipo recubierto descrito en detalle en las patentes estadounidenses 6.482.517 y 6.638.621, cuyo contenido se incorpora al presente documento como referencia. 45 The microparticle formulations of reversed liquid-crystalline phase materials may be of the type of stabilized, uncoated filler, described in detail herein, or of the coated type described in detail in US Patents 6,482,517 and 6,638,621, whose content is incorporated herein by reference. Four. Five

APLICACIÓN DE LA INVENCIÓN APPLICATION OF THE INVENTION

Las partículas de la presente invención tienen aplicación en una variedad de campos. Las partículas pueden adaptarse para absorber uno o más materiales a partir de un entorno seleccionado, adsorber uno o más materiales a partir de un entorno seleccionado o, lo más preferiblemente, para liberar uno o más materiales, tales como agentes activos, en un entorno seleccionado. 50 The particles of the present invention have application in a variety of fields. The particles may be adapted to absorb one or more materials from a selected environment, adsorb one or more materials from a selected environment or, most preferably, to release one or more materials, such as active agents, in a selected environment. . fifty

Con respecto a la absorción, las partículas pueden usarse, por ejemplo, para recoger productos o eliminar residuos en procesos de reacción biológicos o químicos; o para eliminar toxinas, antígenos o productos de desecho en aplicaciones médicas. With respect to absorption, the particles can be used, for example, to collect products or remove residues in biological or chemical reaction processes; or to eliminate toxins, antigens or waste products in medical applications.

Con respecto a la adsorción, por ejemplo, las partículas pueden usarse como medios cromatográficos y como agentes adsorbentes. En aplicaciones en las que el agente activo es una molécula diana que puede capturar un analito, 55 tal como una molécula biológica o químicamente importante u otro compuesto del medio circundante las partículas no recubiertas de esta invención tienen una ventaja sobre las partículas recubiertas de cualquier clase porque el cristal líquido se presenta directamente al medio con la menor cantidad de interferencia. With respect to adsorption, for example, the particles can be used as chromatographic media and as adsorbent agents. In applications where the active agent is a target molecule that can capture an analyte, such as a biologically or chemically important molecule or other compound of the surrounding medium, the uncoated particles of this invention have an advantage over coated particles of any kind. because the liquid crystal is presented directly to the medium with the least amount of interference.

Con respecto a la liberación, las partículas pueden usarse para la liberación controlada de agentes farmacéuticos tales como agentes anticancerígenos o agentes de terapia fotodinámicos, agentes anestésicos locales y generales, agentes de reversión anestésica, o materiales cosméticos, nutricionales, nutricéuticos o cosmicéuticos. Un agente activo puede ubicarse dentro de las partículas para su liberación tras la activación de la liberación. With respect to the release, the particles can be used for the controlled release of pharmaceutical agents such as anti-cancer agents or photodynamic therapy agents, local and general anesthetic agents, anesthetic reversal agents, or cosmetic, nutritional, nutritional or cosmic therapeutic materials. An active agent can be located within the particles for release after activation of the release.

Un aspecto muy valioso de la invención se aplica en particular a agentes activos altamente insolubles, 5 fármacos insolubles en particular. Un enfoque principal en el desarrollo de fármacos es la solubilidad en agua de candidatos a fármacos, y se gastan considerables recursos midiendo, optimizando y evaluando esta solubilidad, incluso en casos en los que es muy baja. La noción frecuente es, de hecho, que éste es un parámetro crucial porque, en algún punto en la ruta de absorción, el fármaco tendrá que disolverse en agua en camino a la membrana celular diana. Sin embargo, se reconoce en esta invención que las partículas no recubiertas tal como se dan a conocer en el presente 10 documento, que interaccionan de manera íntima con membranas diana, puede reducir en gran medida o incluso superar la necesidad de difusión de fármaco “desnudo” (fármaco que ya no está en el núcleo de la partícula) a través de rutas acuosas para alcanzar la membrana diana, las rutas acuosas que por sí mismas representan barreras, de manera eficaz. En efecto, se considera que desde el momento en el que una molécula de fármaco se disuelve en una partícula de la presente invención, hasta el punto en el que se ubica en la membrana celular diana, nunca necesita cruzar una 15 ruta acuosa; la partícula puede incorporar el agente activo como componente hasta la células diana, punto en el que la fase líquido-cristalina inversa puede fusionarse e integrarse con la membrana celular diana, depositando el fármaco directamente en la membrana celular. A very valuable aspect of the invention applies in particular to highly insoluble active agents, in particular insoluble drugs. A primary focus on drug development is the water solubility of drug candidates, and considerable resources are spent measuring, optimizing and evaluating this solubility, even in cases where it is very low. The frequent notion is, in fact, that this is a crucial parameter because, at some point in the route of absorption, the drug will have to dissolve in water on the way to the target cell membrane. However, it is recognized in this invention that uncoated particles as disclosed herein, which interact intimately with target membranes, can greatly reduce or even overcome the need for "naked" drug diffusion. ”(A drug that is no longer in the nucleus of the particle) through aqueous routes to reach the target membrane, the aqueous routes that by themselves represent barriers, effectively. Indeed, it is considered that from the moment a drug molecule dissolves in a particle of the present invention, to the point where it is located in the target cell membrane, it never needs to cross an aqueous route; The particle can incorporate the active agent as a component to the target cells, at which point the inverse liquid-crystalline phase can fuse and integrate with the target cell membrane, depositing the drug directly on the cell membrane.

Las proteínas, polipéptidos, ácidos nucleicos, polisacáridos, lectinas, anticuerpos, receptores y otras biomacromoléculas son agentes activos que pueden adecuarse particularmente bien para la presente invención. La fase 20 líquido-cristalina inversa puede proporcionar las propiedades de potenciación de la absorción tratadas en el presente documento, que pueden ser especialmente importantes en el caso de las macromoléculas, mientras que al mismo tiempo proporcionan protección frente a las proteínas de degradación (proteasas, nucleasas, glicosidasas, anticuerpos, etc.) y células que de otro modo inactivarían o secuestrarían el agente activo; de hecho, puede proporcionarse protección de este tipo mediante el efecto del tamaño de poro controlado de las fases líquido-cristalinas inversas, o en 25 virtud de la carencia de poros accesibles en la fase cúbica discreta (no bicontinua), aunque esta fase es menos eficaz que la fase cúbica bicontinua para potenciar el transporte. El tamaño de poro uniforme en la fase cúbica bicontinua inversa y la fase hexagonal inversa probablemente puede utilizarse para liberar una molécula grande en respuesta a un estado fisiológico u otro (por ejemplo, temperatura o hidratación, en una aplicación de detergente de lavado de ropa) que induce una microestructura con tamaño de poro lo suficientemente grande para liberar la macromolécula. Como con 30 las moléculas pequeñas, la liberación del agente activo también puede activarse mediante cambios en condiciones iónicas, tales como un cambio en el pH, salinidad, concentración de iones divalentes, especies de unión a hidrógeno, o incluso escisión de enlaces entre el agente activo y un componente del cristal líquido mediante acción o bien química o bien bioquímica (por ejemplo, enzimática). En algunos casos, no será necesario liberar el agente activo, si es un compuesto reactivo o catalítico, particularmente una proteína, siempre que el sustrato u otro(s) reactivo(s) pueda(n) 35 pasar a través de los poros del material de fase líquido-cristalina inversa. En el caso de ácidos nucleicos en particular, pero también en otros casos, las partículas de la presente invención pueden ser de gran utilidad en la administración de agentes activos a sitios intracelulares, tales como el núcleo o la membrana nuclear, el aparato de Golgi, el retículo endoplasmático, la mitocondria, etc., y en un caso de este tipo las propiedades de potenciación del transporte de los materiales de fase líquido-cristalina inversa, particularmente las fase cúbicas bicontinuas inversas, pueden ser de alta 40 utilidad en el contexto de una partícula no recubierta. Proteins, polypeptides, nucleic acids, polysaccharides, lectins, antibodies, receptors and other biomachromolecules are active agents that can be particularly well suited for the present invention. The reverse liquid-crystalline phase 20 can provide the absorption enhancement properties discussed herein, which may be especially important in the case of macromolecules, while at the same time providing protection against degradation proteins (proteases, nucleases, glycosidases, antibodies, etc.) and cells that would otherwise inactivate or sequester the active agent; in fact, protection of this type can be provided by the effect of the controlled pore size of the inverse liquid-crystalline phases, or by virtue of the lack of accessible pores in the discrete cubic phase (not bicontinuous), although this phase is less effective than the bicontinuous cubic phase to enhance transport. The uniform pore size in the inverse bicontinuous cubic phase and the inverse hexagonal phase can probably be used to release a large molecule in response to one physiological or another state (e.g. temperature or hydration, in a laundry detergent application) which induces a microstructure with pore size large enough to release the macromolecule. As with small molecules, the release of the active agent can also be activated by changes in ionic conditions, such as a change in pH, salinity, concentration of divalent ions, hydrogen-binding species, or even cleavage of bonds between the agent. active and a component of the liquid crystal by action either chemical or biochemical (for example, enzymatic). In some cases, it will not be necessary to release the active agent, if it is a reactive or catalytic compound, particularly a protein, provided that the substrate or other reagent (s) can pass through the pores of the material of liquid-crystalline phase inverse. In the case of nucleic acids in particular, but also in other cases, the particles of the present invention can be of great utility in the administration of active agents to intracellular sites, such as the nucleus or the nuclear membrane, the Golgi apparatus, the endoplasmic reticulum, the mitochondria, etc., and in such a case the transport enhancement properties of the reverse liquid-crystalline phase materials, particularly the reverse bicontinuous cubic phase, can be of high utility in the context of an uncoated particle.

En casos de aplicación farmacéutica de la invención, en los que el fármaco se dispone en la partícula en forma cristalina (a diferencia de solubilizada), dentro de una micropartícula líquido-cristalina inversa, y por tanto rodeada por una matriz contigua y continua del material líquido-cristalino, y particularmente cuando las partículas también son del orden de las submicras en tamaño, entonces la parte del material líquido-cristalino inverso de la partícula puede servir a 45 varias funciones simultáneamente, incluyendo pero, sin limitarse a: estabilizar las partículas en dispersión; potenciar la absorción mejorando las interacciones con biomembranas y otras barreras; servir como una matriz para la solubilización de otros excipientes o cofactores; servir como una matriz para la solubilización de inhibidores de proteínas circulantes en particular, proporcionando un medio mediante el cual modular, e incluso invertir, la carga eficaz en el fármaco; proporcionar la compatibilidad mejorada con determinados enfoques de formulación de fármacos; proporcionar la 50 modulación de las características de deposición de los fármacos mediante la presencia de un bioadhesivo y/o matriz de alta viscosidad; proporcionar una protección selectiva del tamaño de poro frente a, o el acceso de, biomacromoléculas (por ejemplo, albúmina, proteasas, nucleasas, esterasas) al fármaco sólido; en el caso de un profármaco, proporcionar una administración de liberación controlada o direccionamiento de fármaco mediante el acceso por permeación selectiva y/o disolución controlada de la matriz; y proporcionar la estabilización mejorada de la dispersión del fármaco en líquidos 55 biológicos mediante el uso de cristales líquidos que tienen solubilidades mucho más bajas que la mayoría de los tensioactivos previamente usados en la estabilización de nanocristales. In cases of pharmaceutical application of the invention, in which the drug is arranged in the particle in crystalline form (as opposed to solubilized), within an inverse liquid-crystalline microparticle, and therefore surrounded by a contiguous and continuous matrix of the material liquid-crystalline, and particularly when the particles are also of the order of submicras in size, then the part of the inverse liquid-crystalline material of the particle can serve several functions simultaneously, including but not limited to: stabilizing the particles in dispersion; enhance absorption by improving interactions with biomembranes and other barriers; serve as a matrix for solubilization of other excipients or cofactors; serve as a matrix for the solubilization of circulating protein inhibitors in particular, providing a means by which to modulate, and even reverse, the effective load on the drug; provide improved compatibility with certain drug formulation approaches; provide the modulation of the deposition characteristics of the drugs through the presence of a bio-adhesive and / or high viscosity matrix; provide selective protection of the pore size against, or access of, biomachromolecules (eg, albumin, proteases, nucleases, esterases) to the solid drug; in the case of a prodrug, provide a controlled release administration or drug targeting through access by selective permeation and / or controlled dissolution of the matrix; and providing improved stabilization of the drug dispersion in biological liquids by using liquid crystals that have much lower solubilities than most of the surfactants previously used in the stabilization of nanocrystals.

Una aplicación potencial particularmente importante de la invención es para alojar moléculas, tales como anticuerpos, receptores, ligandos, ácidos nucleicos, oligosacáridos, u otros compuestos que pueden unirse a una molécula analito en una situación de diagnóstico. En una realización preferida de una aplicación de este tipo, se reparte 60 un compuesto diana que puede unirse a un producto químico de interés en una partícula de la presente invención. En un ensayo competitivo o una aplicación de segregación sencilla de la invención, el producto químico de interés difundirán en la partícula líquido-cristalina inversa porosa y se unirá a la diana. En ensayos competitivos, un producto A particularly important potential application of the invention is to house molecules, such as antibodies, receptors, ligands, nucleic acids, oligosaccharides, or other compounds that can bind to an analyte molecule in a diagnostic situation. In a preferred embodiment of such an application, a target compound that can be attached to a chemical of interest is distributed in a particle of the present invention. In a competitive assay or a simple segregation application of the invention, the chemical of interest will diffuse into the porous inverse liquid-crystalline particle and bind to the target. In competitive trials, a product

químico que puede desplazarse tal como un grupo enzimático o similares se desplazará mediante el producto químico de interés y difundirá fuera de la una partícula líquido-cristalina inversa porosa y reaccionará con un compuesto marcador para indicar que se ha producido la unión dentro de la partícula; véase en particular la solicitud estadounidense 10/170.214. Por tanto, la partícula líquido-cristalina nanoestructurada mantiene la enzima u otros grupos que pueden desplazarse separados del compuesto marcador hasta que se liberan de la diana, permitiendo de 5 ese modo la detección precisa sin procedimientos complejos de lavado, aspiración y otros usados en muchos analizadores de inmunoensayos automatizados con mucho equipo. Esto permite que los médicos lleven a cabo pruebas de manera rápida y precisa, sin formación o instrumentación sofisticada. En una aplicación de ensayo de tipo sándwich de la invención, se une un ligando a la diana dentro de la partícula líquido-cristalina inversa porosa, o puede llegar a unirse a la diana mediante difusión a través del material líquido-cristalino poroso. Además, se añade una segunda diana 10 que puede difundir a través del material líquido-cristalino inverso que se une a otro epítopo del ligando. Una vez que se une la segunda diana, se proporciona una indicación que demuestra la unión. En aplicaciones de este tipo en las que la diana debe unirse a una moléculas de un medio de interés, de nuevo la presencia de un recubrimiento es intrusiva, incluso una fase L3 porosa debido a su tendencia (descrita anteriormente) para formar dominios de fase laminar, que pueden ser de muy baja permeabilidad para una amplia gama de compuestos. En efecto, esta es la razón porqué la 15 naturaleza usa bicapas para compartimentalizar las células. chemical that can be displaced such as an enzymatic group or the like will be displaced by the chemical of interest and diffuse out of the porous inverse liquid-crystalline particle and react with a marker compound to indicate that binding within the particle has occurred; see in particular US application 10 / 170,214. Therefore, the nanostructured liquid-crystalline particle keeps the enzyme or other groups that can move separately from the marker compound until they are released from the target, thereby allowing precise detection without complex washing, aspiration and other procedures used in many automated immunoassay analyzers with a lot of equipment. This allows doctors to carry out tests quickly and accurately, without sophisticated training or instrumentation. In a sandwich-type test application of the invention, a ligand is bound to the target within the porous inverse liquid-crystalline particle, or it can become bound to the target by diffusion through the porous liquid-crystalline material. In addition, a second target 10 is added which can diffuse through the inverse liquid-crystalline material that binds to another epitope of the ligand. Once the second target is attached, an indication is provided that demonstrates the binding. In applications of this type in which the target must bind to a medium of interest molecules, again the presence of a coating is intrusive, even a porous L3 phase due to its tendency (described above) to form laminar phase domains. , which can be of very low permeability for a wide range of compounds. Indeed, this is the reason why nature uses bilayers to compartmentalize cells.

Usos alternativos de la invención son en el aislamiento químico y la limpieza, o en la administración de enzimas, u otro agente bioactivo, por ejemplo, agentes radioactivos y toxinas químicas. En la aplicación del aislamiento químico, las partículas de la presente invención se ponen en contacto con un medio en el que se desea la segregación y el aislamiento de un producto químico de interés. Durante un periodo de tiempo, y con o sin operaciones tales como 20 remover, agitar, etc., el producto químico se difunde dentro de la partícula líquido-cristalina inversa porosa y se une mediante la diana. Este procedimiento puede usarse en la limpieza del agua contaminada, o en la limpieza ex vivo de la sangre, por ejemplo. En el modo de administración, la partícula líquido-cristalina porosa incorporará un producto químico que va a administrarse (por ejemplo, un agonista, antagonista, medicamento, toxina, etc.). Este producto químico se protegerá del entorno, por ejemplo, el organismo en una aplicación in vivo, mediante la partícula líquido-cristalina 25 porosa, hasta que esté en posición para administrar el producto químico. Una vez que está en posición, un compuesto del entorno se difundirá a través de la partícula líquido-cristalina porosa, interaccionará de manera competitiva con la diana y desplazará el producto químico que va a administrarse, y, después de eso, el producto químico que va a administrarse se difundirá fuera de la partícula líquido-cristalina inversa porosa y en el entorno en el que debe actuar. Alternative uses of the invention are in chemical isolation and cleaning, or in the administration of enzymes, or other bioactive agent, for example, radioactive agents and chemical toxins. In the application of chemical isolation, the particles of the present invention are contacted with a medium in which segregation and isolation of a chemical of interest is desired. Over a period of time, and with or without operations such as stirring, stirring, etc., the chemical diffuses into the porous inverse liquid-crystalline particle and is joined by the target. This procedure can be used in cleaning contaminated water, or in ex vivo cleaning of blood, for example. In the mode of administration, the porous liquid-crystalline particle will incorporate a chemical to be administered (for example, an agonist, antagonist, medicament, toxin, etc.). This chemical will be protected from the environment, for example, the organism in an in vivo application, by means of the porous liquid-crystalline particle, until it is in position to administer the chemical. Once in position, a compound from the environment will diffuse through the porous liquid-crystalline particle, interact competitively with the target and displace the chemical to be administered, and, after that, the chemical that it will be administered it will spread outside the porous inverse liquid-crystalline particle and in the environment in which it should act.

Se conocen otras diversas aplicaciones de micropartículas en general, incluyendo las indicadas en la patente 30 estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia. Various other microparticle applications are known in general, including those indicated in US Patent 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference.

En vista de los requisitos exigentes para la administración de agentes farmacéuticos, las ventajas y la flexibilidad de la presente invención la hacen particularmente atractiva en la administración y liberación de muchos compuestos farmacéuticos, particularmente para la administración y liberación de cantidades terapéuticas de sustancias de este tipo. Los compuestos farmacéuticos que se adecuan particularmente bien para su incorporación como agentes 35 activos en la presente invención, y presentan problemas o limitaciones en las formulaciones actualmente comercializadas, incluyen propofol, alfaxalona, alfadolona, eltanolona, propanidid, ketamina, pregnanolona, etomidato, y otros anestésicos generales; bupivacaína, lidocaína, procaína, tetracaína, mepivacaína, etidocaína, oxibuprocaína, cocaína, benzocaína, pramixinina, prilocaína, proparacaína, ropivicaínas, cloroprocaína, dibucaína, y anestésicos locales relacionados; SN-38 y camptotecinas relacionadas; paclitaxel y taxanos relacionados; doxorubicina, idarubicina, 40 daunorubicina y rubicinas relacionadas; anfotericina B; coenzima Q10; esteroides y agentes antiinflamatorios esteroideos; antiinflamatorios no esteroideos (por ejemplo, salicilatos, derivados de paraminofenol (por ejemplo, acetaminofén), fenomatos, derivados de ácido propiónico (por ejemplo, naproxeno, ibuprofeno, etc.); analgésicos; antipiréticos; sedantes (por ejemplo, benzodiazepinas tales como diazepam); agentes hipnóticos (por ejemplo, anestésicos intravenosos y barbituratos); opiáceos; cannabinoides y proteínas (por ejemplo, insulina y eritropoyetina) 45 (entendiéndose que una amplia variedad de amidas y ésteres pueden tener aplicación en la presente invención). Además, diversos agentes antineoplásicos y otros compuestos farmacéuticos indicados en la patente estadounidenses 6.638.537 y 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia. In view of the demanding requirements for the administration of pharmaceutical agents, the advantages and flexibility of the present invention make it particularly attractive in the administration and release of many pharmaceutical compounds, particularly for the administration and release of therapeutic amounts of substances of this type. . Pharmaceutical compounds that are particularly well suited for incorporation as active agents in the present invention, and present problems or limitations in the currently marketed formulations, include propofol, alphaxalone, alfadolone, eltanolone, propanidid, ketamine, pregnanolone, etomidate, and others. general anesthetics; bupivacaine, lidocaine, procaine, tetracaine, mepivacaine, etidocaine, oxybuprocaine, ***e, benzocaine, pramixinin, prilocaine, proparacaine, ropivicaines, chloroprocaine, dracaine, and related local anesthetics; SN-38 and related camptothecins; paclitaxel and related taxanes; doxorubicin, idarubicin, daunorubicin and related rubicins; amphotericin B; coenzyme Q10; steroids and steroidal anti-inflammatory agents; non-steroidal anti-inflammatories (for example, salicylates, paraminophenol derivatives (for example, acetaminophen), pheromates, propionic acid derivatives (for example, naproxen, ibuprofen, etc.); analgesics; antipyretics; sedatives (for example, benzodiazepines such as diazepam ); hypnotic agents (for example, intravenous anesthetics and barbiturates); opiates; cannabinoids and proteins (for example, insulin and erythropoietin) 45 (it being understood that a wide variety of amides and esters may have application in the present invention). antineoplastic agents and other pharmaceutical compounds indicated in US Patent 6,638,537 and 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference.

Obsérvese que la presente invención también se adecua muy bien para la incorporación de excipientes funcionales, tales como aceites esenciales que mejoran la absorción de fármacos poco absorbidos, en algunos caso 50 inhibiendo las en proteínas circulantes de fármaco. Tal como se trata en más detalle en otra parte en el presente documento, existen varios sitios dentro, y en la superficie de las partículas, en los que pueden ubicarse los agentes activos, excipientes y excipientes funcionales dentro del contexto de esta invención. Note that the present invention is also very well suited for the incorporation of functional excipients, such as essential oils that improve the absorption of poorly absorbed drugs, in some cases by inhibiting those in circulating drug proteins. As discussed in more detail elsewhere herein, there are several sites within, and on the surface of the particles, where active agents, excipients and functional excipients can be located within the context of this invention.

En el área de los productos farmacéuticos y nutricéuticos, las partículas de la presente invención pueden administrarse a un mamífero (incluyendo un ser humano), u otro animal, mediante cualquiera de una variedad de vías 55 de administración que están bien establecidas y los expertos en la técnica conocen bien. Éstas incluyen, pero no se limitan a, vías orales (por ejemplo, mediante píldoras, comprimidos, pastillas, cápsulas, trociscos, jarabes y suspensiones, y similares) y no orales (por ejemplo parenteral, intravenosa, intraperitoneal, intratecal, intramuscular, subcutánea, intraarterial, rectal, intravaginal, sublingual, intraocular, transdérmica, intranasal, mediante inhalación, en un supositorio, y similares). Las composiciones de la presente invención son particularmente adecuadas para su 60 administración interna (es decir, no tópica) pero en algunas aplicaciones pueden proporcionarse por vía tópica. La presente invención es especialmente útil en aplicaciones en las que un agente activo farmacéutico soluble con dificultad In the area of pharmaceutical and nutritional products, the particles of the present invention can be administered to a mammal (including a human being), or another animal, by any of a variety of well-established routes of administration and those skilled in the art. The technique know well. These include, but are not limited to, oral routes (for example, by pills, tablets, pills, capsules, troches, syrups and suspensions, and the like) and non-oral (for example parenteral, intravenous, intraperitoneal, intrathecal, intramuscular, subcutaneous , intraarterial, rectal, intravaginal, sublingual, intraocular, transdermal, intranasal, by inhalation, in a suppository, and the like). The compositions of the present invention are particularly suitable for internal administration (ie, non-topical) but in some applications they can be provided topically. The present invention is especially useful in applications where a soluble pharmaceutical active agent with difficulty

va administrarse por vía interna (es decir, no tópica), incluyendo por vía oral y parenteral, en el que dicha formulación se ha de mezcla con un medio continuo acuoso tal como suero, orina, sangre, mucosa, saliva, líquido extracelular, etc. En particular, un aspecto útil importante de muchos de los líquidos estructurados de atención en el presente documento es que pueden prestarse para la formulación como vehículos continuos acuosos, normalmente de baja viscosidad. It is to be administered internally (i.e. non-topically), including orally and parenterally, in which said formulation is mixed with a continuous aqueous medium such as serum, urine, blood, mucosa, saliva, extracellular fluid, etc. . In particular, an important useful aspect of many of the structured care liquids herein is that they can be provided for formulation as aqueous continuous vehicles, usually of low viscosity.

Debe observarse que, en el caso de formulaciones inyectables, las composiciones de esta clase notificadas en 5 los documentos U.S. 5.756.108 y 6.071.524, en particular, no son aplicables, porque se centran en el uso de monoglicéridos insaturados, que son altamente tóxicos en inyección y no están aprobados para su uso en formulaciones inyectables. De manera similar, la solicitud estadounidense 2002/0153509 enseña alejándose de partículas inyectables con su atención casi exclusiva en la monooleína. It should be noted that, in the case of injectable formulations, the compositions of this class notified in 5 U.S. documents. 5,756,108 and 6,071,524, in particular, are not applicable, because they focus on the use of unsaturated monoglycerides, which are highly toxic in injection and are not approved for use in injectable formulations. Similarly, US application 2002/0153509 teaches away from injectable particles with its almost exclusive attention on monoolein.

Incorporación de grupos de direccionamiento y compuestos bioactivos. En la presente invención, puede 10 ser muy eficaz incorporar productos químicos o grupos químicos, a menudo proteínas u otras biomacromoléculas, que pueden emplearse para dirigir partículas de manera temporal y espacial, por ejemplo, para dirigir partículas a sitios específicos en el organismo. De manera similar, otros compuestos bioactivos incorporados sobre o en las partículas podría servir a funciones importantes, tales como: pueden estar presentes potenciadores de la absorción tales como mentol de modo que aumente la permeabilidad de las barreras de absorción (bicapas lipídicas, unión de huecos) antes 15 de o de manera concomitante con la liberación del fármaco; pueden incorporarse proteínas u otros materiales moduladores de la adsorción que inhibirán la unión desfavorable de proteínas endógenas tales como albúmina; pueden incorporarse adyuvantes que potenciarán el efecto de componentes vacuna u otros materiales de modulación inmunitaria. Anticuerpos, esteroides, hormonas, oligo o polisacáridos, ácidos nucleicos, vitaminas, inmunógenos, e incluso nanosondas son todos ejemplos de una amplia gama de materiales que pueden unirse a partículas de la 20 presente invención, o bien mediante solubilización o compartimentalización en el material líquido-cristalino, o bien mediante unión covalente, unión iónica, unión coordinada, puentes de hidrógeno, adsorción, interacciones bioquímicas específicas (tales como unión avidina-biotina), u otras interacciones químicas con componentes en la partícula. Incorporation of addressing groups and bioactive compounds. In the present invention, it can be very effective to incorporate chemicals or chemical groups, often proteins or other biomachromolecules, which can be used to direct particles temporarily and spatially, for example, to direct particles to specific sites in the body. Similarly, other bioactive compounds incorporated on or in the particles could serve important functions, such as: absorption enhancers such as menthol may be present so as to increase the permeability of absorption barriers (lipid bilayers, hollow junction ) before 15 or concomitantly with drug release; proteins or other adsorption modulating materials that will inhibit the unfavorable binding of endogenous proteins such as albumin may be incorporated; adjuvants that will enhance the effect of vaccine components or other immune modulation materials can be incorporated. Antibodies, steroids, hormones, oligo or polysaccharides, nucleic acids, vitamins, immunogens, and even nanosongs are all examples of a wide range of materials that can bind to particles of the present invention, or by solubilization or compartmentalization in the liquid material -crystalline, or by covalent bonding, ionic bonding, coordinated bonding, hydrogen bonds, adsorption, specific biochemical interactions (such as avidin-biotin binding), or other chemical interactions with components in the particle.

Aunque no siempre es crucial para una aplicación dada conocer la ubicación exacta (o más precisamente, la distribución de probabilidad espacial) de un resto de direccionamiento dentro de o en asociación con una partícula, esto 25 puede ser una consideración importante en el diseño de una combinación de partícula-resto de direccionamiento, y la presente invención se presta a mucha flexibilidad y potencia en este respecto. Normalmente, los restos de direccionamiento pueden ubicarse sustancialmente en uno o más de los siguientes sitios con referencia a la micropartícula: Although it is not always crucial for a given application to know the exact location (or more precisely, the spatial probability distribution) of a remainder of addressing within or in association with a particle, this may be an important consideration in the design of a combination of particle-rest addressing, and the present invention lends itself to much flexibility and power in this regard. Typically, the address residues can be located substantially at one or more of the following sites with reference to the microparticle:

1) en la partícula, es decir, disuelta o dispersa en el interior la fase líquido-cristalina inversa; esta ubicación 30 puede ofrecer la ventaja distintiva de proporcionar un medio “biomimético” para el resto de direccionamiento, un medio que puede comprender una bicapa lipídica así como dominios hidrófobos cada uno de los cuales puede ajustarse para optimizar el entorno; además, ésta es la ubicación preferida en el caso en el que la micropartícula se usa en la metodología de diagnóstico descrita en la solicitud de patente estadounidense 10/170.214; 35 1) in the particle, that is, dissolved or dispersed inside the inverse liquid-crystalline phase; This location 30 can offer the distinctive advantage of providing a "biomimetic" means for the rest of addressing, a means that can comprise a lipid bilayer as well as hydrophobic domains each of which can be adjusted to optimize the environment; furthermore, this is the preferred location in the case where the microparticle is used in the diagnostic methodology described in US patent application 10 / 170,214; 35

2) en la superficie de la partícula; y/o 2) on the surface of the particle; I

3) unido a, pero a una distancia de, la superficie mediante unión a través de un espaciador flexible, por ejemplo, un polímero que se une (por ejemplo mediante unión covalente) en un extremo a un componente de la partícula y en el otro extremo al resto de direccionamiento. La experiencia con otros tipos de micropartículas en la técnica ha mostrado que esto es generalmente un enfoque excelente para lograr buen direccionamiento 40 porque conserva grados de libertad conformacionales y difusionales importantes que algunas veces se requieren para el buen anclaje de un resto de direccionamiento con un receptor o diana. 3) attached to, but at a distance from, the surface by bonding through a flexible spacer, for example, a polymer that binds (for example by covalent bonding) at one end to a particle component and at the other end to the rest of addressing. Experience with other types of microparticles in the art has shown that this is generally an excellent approach to achieve good addressing 40 because it retains significant degrees of conformational and diffusional freedom that are sometimes required for good anchoring of a rest of addressing with a receiver. or target

También es posible en la presente invención crear un resto de direccionamiento sensible ajustando las condiciones de la formulación de manera que el resto de direccionamiento se ubique preferentemente en el interior protector de la partícula hasta el momento en que sea necesario para su tarea de direccionamiento, punto en el que las 45 condiciones locales tales como pH o concentraciones de ligando puedan inducir que el resto deje el interior de la partícula y se presente en, o fuera de (mediante un espaciador) la superficie de la partícula. Por ejemplo, si un resto de direccionamiento tenía una carga neta, por ejemplo catiónica, a los valores de pH encontrados durante el almacenamiento del producto e incluso en tránsito al sitio de acción, secuestrando de ese modo el resto diana en el interior de la partícula en la que hay compuesto(s) aniónico(s) presente(s); durante la aplicación, tras alcanzar el sitio de 50 acción, un cambio en el pH, la fuerza iónica, la concentración iónica específica, capacidad como tensioactivo, concentración del ligando u otro parámetro puede liberar el resto de direccionamiento interrumpiendo la unión iónica o liberando de otro modo el resto (posiblemente mediante la acción de masa), de manera que el resto puede venir a la superficie de la partícula y volverse disponible para su unión a la diana. El secuestro del resto puede potenciar en gran medida la estabilidad del resto particularmente en vista de los tamaños de poro pequeños de las fases líquido-cristalinas 55 inversas, que son lo suficientemente pequeños como para ocluir el paso de determinadas moléculas tales como proteasas, nucleasas, etc. It is also possible in the present invention to create a sensitive addressing remainder by adjusting the conditions of the formulation so that the remaining addressing is preferably located in the protective interior of the particle until such time as is necessary for its addressing task, point wherein the local conditions such as pH or ligand concentrations can induce the rest to leave the interior of the particle and be present at, or outside (by a spacer) the surface of the particle. For example, if a addressing remainder had a net charge, for example cationic, at the pH values found during product storage and even in transit to the site of action, thereby hijacking the target residue inside the particle in which an anionic compound (s) are present; during application, after reaching the 50 action site, a change in pH, ionic strength, specific ionic concentration, surfactant capacity, ligand concentration or other parameter can release the rest of the direction by disrupting the ionic binding or releasing from otherwise, the rest (possibly by mass action), so that the rest can come to the surface of the particle and become available for binding to the target. Sequestration of the remainder can greatly enhance the stability of the remainder particularly in view of the small pore sizes of the inverse liquid-crystalline phases, which are small enough to occlude the passage of certain molecules such as proteases, nucleases, etc.

Pueden usarse potencialmente varios compuestos como restos de direccionamiento en una aplicación farmacéutica de partículas de la presente invención. Para comenzar, determinados lípidos, tales como lípido A, tienen Several compounds can potentially be used as targeting moieties in a pharmaceutical particle application of the present invention. To begin, certain lipids, such as lipid A, have

interacciones muy específicas con componentes del sistema inmunitario, por ejemplo, y pueden incorporarse en las partículas. De manera similar, pueden utilizarse copolímeros de bloque en los que uno de los bloques puede tener potencial de direccionamiento, tal como glicógeno y heparina. Moléculas pequeñas que pueden estar presentes en la partícula para lograr un grado de direccionamiento incluyen esteroles, ácidos grasos, gramicidina, fragmentos o agentes que simulan epítopos de proteínas apropiados, y aminoácidos incluyendo ácido aspártico, cisteína, triptófano, leucina y 5 otros. very specific interactions with components of the immune system, for example, and can be incorporated into the particles. Similarly, block copolymers in which one of the blocks may have targeting potential, such as glycogen and heparin, can be used. Small molecules that may be present in the particle to achieve a degree of targeting include sterols, fatty acids, gramicidin, fragments or agents that simulate epitopes of appropriate proteins, and amino acids including aspartic acid, cysteine, tryptophan, leucine and 5 others.

La capacidad de las fases líquido-cristalinas inversas de la presente invención para permitir la solubilización y estabilización de biomoléculas, tales como los restos de direccionamiento de interés en este caso, se ha descrito anteriormente, en la que se proporcionan varios ejemplos de proteínas de membrana (proteínas receptoras, proteínas tales como proteinasa A, amiloglucosidasa, encefalinasa, dipeptidil-peptidasa IV, gamma-glutamiltransferasa, 10 galactosidasa, neuraminidasa, alfa-manosidasa, colinesterasa, arilamidasa, surfactina, ferroquelatasa, espiralina, proteínas de unión a penicilina, glicotransferasas microsómicas, cinasas, proteínas de membrana externa bacteriana y antígenos de histocompatibilidad), muchos de los cuales podrían servir a un papel de direccionamiento si se incorporan en las partículas de la presente invención. The ability of the inverse liquid-crystalline phases of the present invention to allow solubilization and stabilization of biomolecules, such as the targeting moieties of interest in this case, has been described above, in which several examples of membrane proteins are provided. (receptor proteins, proteins such as proteinase A, amyloglucosidase, enkephalinase, dipeptidyl peptidase IV, gamma-glutamyltransferase, 10 galactosidase, neuraminidase, alpha-mannosidase, cholinesterase, arylamidase, surfactin, ferrokelatase, spiralotransferase, microsomal-binding proteins , kinases, bacterial outer membrane proteins and histocompatibility antigens), many of which could serve a targeting role if incorporated into the particles of the present invention.

Aún en otra realización de la invención, puede lograrse el “direccionamiento dirigido de manera externa” de las 15 partículas. Esto puede llevarse a cabo dirigiendo partículas que contienen determinados materiales magnéticamente sensibles (por ejemplo, óxido férrico), dispersos en la partícula o enlazados a ésta, mediante la aplicación de campos magnéticos. In yet another embodiment of the invention, the "externally directed addressing" of the particles can be achieved. This can be done by directing particles containing certain magnetically sensitive materials (for example, ferric oxide), dispersed in the particle or bound to it, by applying magnetic fields.

Los anticuerpos son ampliamente útiles para el direccionamiento a sitios o moléculas específicas en el organismo u otros entornos, y pueden incorporarse en diversos sitios en una partícula tal como se trató anteriormente. 20 En particular, los anticuerpos intactos con sus fragmentos Fc más hidrófobos son propensos a repartirse en las matrices del tipo usado en esta invención, y además se conoce bien que los anticuerpos pueden adsorberse o unirse (incluyendo de manera covalente) a superficies con retención de unión y especificidad de unión. Las fuentes comerciales suministran una gran abundancia de tipos de anticuerpos, por ejemplo, los indicados en la patente estadounidense 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia, y otros que están 25 constantemente en desarrollo. Antibodies are widely useful for targeting specific sites or molecules in the organism or other environments, and can be incorporated into various sites in a particle as discussed above. In particular, intact antibodies with their more hydrophobic Fc fragments are prone to spread in matrices of the type used in this invention, and it is also well known that antibodies can be adsorbed or bound (including covalently) to surfaces with retention of binding and binding specificity. Commercial sources provide a great abundance of antibody types, for example, those indicated in US Patent 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference, and others that are constantly being developed.

Alternativamente, muchas sustancias (por ejemplo folato, Gp-p, citocromo P450, y EGF) pueden en y por sí mismas ser útiles como sustancias de direccionamiento y pueden incorporarse en las partículas de la presente invención. Alternatively, many substances (for example folate, Gp-p, cytochrome P450, and EGF) can in and of themselves be useful as targeting substances and can be incorporated into the particles of the present invention.

Es importante señalar que además de los compuestos de direccionamiento per se, pueden incorporarse 30 compuesto activos, excipientes funcionales tales como potenciadores de la absorción, y otros materiales bioactivos que se extraen de las listas de materiales proporcionadas en el presente documento en cualquiera de estos sitios de ubicación. It is important to note that in addition to the addressing compounds per se, active compounds, functional excipients such as absorption enhancers, and other bioactive materials that are extracted from the lists of materials provided herein can be incorporated into any of these sites. of location.

Además del direccionamiento de las partículas a sitios específicos para la liberación del fármaco, tal como se mencionó anteriormente podrían usarse por sí mismas partículas que incorporan determinados materiales radiopacos u 35 ópticamente densos para la obtención de imágenes, y cuando se acoplan a compuestos de direccionamiento tal como describe en el presente documento podrían seleccionar como diana sitios específicos en el organismo y permitir su visualización. Como un ejemplo, se sabe que los receptores de somatostatina se ubican en determinados sitios tumorales, de modo que la unión de una diana a las partículas según la presente invención que se unirá de manera electiva a receptores de somatostatina puede seleccionar como diana un tumor y permitir su visualización mediante, por 40 ejemplo, rayos X, obtención de imágenes de RM, u obtención de radioimágenes. Para extender esta idea, una partícula dirigida de manera similar puede llevar entonces un material radioactivo que emitirá radiación destinada a inducir la necrosis del tumor. In addition to addressing the particles to specific sites for drug release, as mentioned above, particles incorporating certain radiopaque or optically dense materials could be used for imaging, and when coupled to such targeting compounds As described herein, they could select specific sites in the organism as target and allow their visualization. As an example, it is known that somatostatin receptors are located at certain tumor sites, so that the binding of a target to the particles according to the present invention that will electively bind to somatostatin receptors can select a tumor and target allow viewing by, for example, X-rays, obtaining MR images, or obtaining radio images. To extend this idea, a similarly directed particle can then carry a radioactive material that will emit radiation intended to induce tumor necrosis.

Cristales líquidos polimerizados como fases. La patente estadounidense 5.244.799 (cuyo contenido se incorpora al presente documento como referencia en su totalidad) notifica la polimerización de cristales líquidos de fase 45 cúbica y hexagonal nanoestructurados, con retención de su nanoestructura. La retención de la estructura se demostró mediante dispersión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS) y microscopía electrónica de transmisión (MET). Liquid crystals polymerized as phases. US Patent 5,244,799 (the content of which is incorporated herein by reference in its entirety) notifies the polymerization of nanostructured liquid cubic and hexagonal phase 45 crystals, with retention of their nanostructure. Structure retention was demonstrated by small angle X-ray scattering (SAXS) and transmission electron microscopy (MET).

La posibilidad de la polimerización de la fase cúbica de una partícula de la presente invención abre varias posibilidades, particularmente en relación con el aumento de la estabilidad de la fase líquido-cristalina inversa y la modulación de su interacción con el organismo, y membranas celulares en particular. Para un ejemplo de lo último, 50 mientras que puede esperarse que una fase cúbica no polimerizada se disperse de manera molecular cuando entra en contacto con una biomembrana, la polimerización puede crear una partícula que conservará su integridad durante toda su interacción con la misma biomembrana, y esto puede tener consecuencias drásticas con respecto al destino de la partícula y a un fármaco dentro de la partícula. Además, la retención de un fármaco unido a bicapa (molécula hidrófoba pequeña, proteína de membrana, etc.) puede aumentarse enormemente mediante polimerización, lo que produce una 55 partícula de liberación lenta. Y la presencia de una estructura porosa definida de manera precisa, más permanente, con un tamaño de poro que puede ajustarse con precisión, puede hacer posible una liberación controlada mejorada de un fármaco, y/o el secuestro del fármaco de enzimas degradadoras u otras enzimas mediante exclusión de tamaño de los poros de la matriz polimerizada. The possibility of the polymerization of the cubic phase of a particle of the present invention opens several possibilities, particularly in relation to the increase of the stability of the inverse liquid-crystalline phase and the modulation of its interaction with the organism, and cell membranes in particular. For an example of the latter, while it can be expected that a non-polymerized cubic phase will be molecularly dispersed when it comes into contact with a biomembrane, the polymerization can create a particle that will retain its integrity throughout its interaction with the same biomembrane, and this can have drastic consequences regarding the fate of the particle and a drug within the particle. In addition, the retention of a bilayer-bound drug (small hydrophobic molecule, membrane protein, etc.) can be greatly increased by polymerization, which produces a slow-release particle. And the presence of a precisely defined, more permanent, porous structure with a pore size that can be adjusted with precision can make possible an improved controlled release of a drug, and / or drug sequestration of degrading enzymes or other enzymes. by exclusion of pores size from the polymerized matrix.

Control de reparto. En el contexto de esta invención, a veces es posible ajustar el reparto de uno o más compuestos, el agente activo en particular, dentro o fuera de las partículas, de modo que, por ejemplo, se reducen significativamente los niveles de fármaco libre en la fase acuosa exterior. Ejemplos de compuesto farmacéuticos en los que esto es importante incluyen diazepam, y propofol, en los que se cree que la presencia de propofol en la fase exterior es responsable del ardor que muchos experimentan tras la inyección. Esto es a pesar del hecho de que, en el caso de 5 propofol, la cantidad de fármaco que está en la fase acuosa es inferior al 1% de la cantidad de propofol que está en las partículas, es decir, en la fase cúbica, en todos los casos (véase el ejemplo 18, en particular), o, expresado de otro modo, que más del 99% del propofol está en las partículas. Otros casos incluirán en los que el compuesto activo es sensible a hidrólisis, oxidación, electrólisis, cavitación, o de manera amplia cualquier forma de ataque químico de especies (iones, nucleófilos, electrófilos, radicales, etc.) que son más polares y se ubican preferentemente en la fase 10 acuosa. El enfoque general es diluir el fármaco en las partículas con un compuesto, preferiblemente un líquido o al menos un compuesto de bajo punto de fusión, que tiene un alto coeficiente de reparto, preferiblemente superior a aproximadamente 10, más preferiblemente superior a aproximadamente 100, y lo más preferiblemente superior a aproximadamente 1.000. Esto aumento el volumen del material hidrófobo en las partículas y en la dispersión en relación con la masa del fármaco, independientemente de si el compuesto diluyente tiene una afinidad o potencial de 15 solubilización particular para el fármaco (siempre que el fármaco sea soluble en, o miscible con, el diluyente). Lo que hace que este enfoque trabaje eficaz y eficientemente en el contexto de esta invención es el hecho de que el diluyente de alto Kow puede elegirse de manera que imite la razón molecular de grupo polar con respecto a grupo apolar del fármaco, de manera que la fase cúbica inversa o hexagonal inversa pueda encontrarse con la combinación diluyente-fármaco a la misma fracción en volumen, o similar, que la del sistema sin diluyente. Por ejemplo, en el ejemplo 19 a 20 continuación, se encuentra una fase cúbica inversa en el sistema Pluronic L-122/propofol/agua con el fármaco propofol a aproximadamente el 19% en volumen, o alternativamente, en el sistema con diluyente, a una fracción en volumen total de propofol (10%) más tocoferol (9%) también de aproximadamente el 19%. De manera similar, en el ejemplo 20, se encuentra una fase cúbica inversa en el sistema fosfatidilcolina/propofol/agua con el fármaco propofol a aproximadamente el 29% en volumen, o alternativamente, en el sistema con diluyente, a una fracción en volumen total 25 de propofol (10%) más tocoferol (19%) también de aproximadamente el 29%. Esto es particularmente importante en casos en los que el grado de la región de fase líquido-cristalina deseada en el espacio de la composición (es decir, el diagrama de fases) sea relativamente pequeño. En la preparación de esta dilución, es sumamente preferible cuando el diluyente se elige de modo que se imite la molécula del fármaco en cuanto a la razón de grupos polares con respecto a grupos apolares. Por ejemplo, el tocoferol, con su grupo benzopiranol (2 oxígenos) como parte de un compuesto de PM 30 430 es similar en cuanto a la razón polar/apolar con respecto a propofol, con su grupo fenólico individual (1 oxígeno) como parte de una molécula de PM 178. Se cree que los grupos polares tales como hidroxilo se unen fuertemente a la interfase polar-apolar de sistemas tensioactivo-agua, y dado que esto tiene implicaciones importantes para el comportamiento de fase [véase, por ejemplo, P. Strom y D. M. Anderson, Langmuir (1992) 8:691-702], el diluyente debe tener preferiblemente un contenido similar de grupos polares similares, en la medida de lo posible. 35 Distribution control In the context of this invention, it is sometimes possible to adjust the distribution of one or more compounds, the particular active agent, in or out of the particles, so that, for example, the levels of free drug in the drug are significantly reduced. outer water phase Examples of pharmaceutical compounds in which this is important include diazepam, and propofol, in which it is believed that the presence of propofol in the outer phase is responsible for the burning that many experience after injection. This is despite the fact that, in the case of 5 propofol, the amount of drug that is in the aqueous phase is less than 1% of the amount of propofol that is in the particles, that is, in the cubic phase, in all cases (see example 18, in particular), or, in other words, that more than 99% of the propofol is in the particles. Other cases will include in which the active compound is sensitive to hydrolysis, oxidation, electrolysis, cavitation, or broadly any form of chemical attack of species (ions, nucleophiles, electrophiles, radicals, etc.) that are more polar and are located preferably in the aqueous phase. The general approach is to dilute the drug in the particles with a compound, preferably a liquid or at least a low melting point compound, which has a high partition coefficient, preferably greater than about 10, more preferably greater than about 100, and most preferably greater than about 1,000. This increases the volume of the hydrophobic material in the particles and in the dispersion in relation to the mass of the drug, regardless of whether the diluent compound has a particular affinity or solubilization potential for the drug (provided that the drug is soluble in, or miscible with, the diluent). What makes this approach work effectively and efficiently in the context of this invention is the fact that the high Kow diluent can be chosen so as to mimic the molecular ratio of the polar group with respect to the apolar group of the drug, so that the Inverse cubic or inverse hexagonal phase can be found with the diluent-drug combination at the same volume fraction, or similar, as that of the system without diluent. For example, in example 19-20 below, an inverse cubic phase is found in the Pluronic L-122 / propofol / water system with the drug propofol at about 19% by volume, or alternatively, in the diluent system, at a total volume fraction of propofol (10%) plus tocopherol (9%) also of approximately 19%. Similarly, in example 20, an inverse cubic phase is found in the phosphatidylcholine / propofol / water system with the drug propofol at approximately 29% by volume, or alternatively, in the diluent system, at a fraction in total volume 25 of propofol (10%) plus tocopherol (19%) also of approximately 29%. This is particularly important in cases where the degree of the desired liquid-crystalline phase region in the space of the composition (ie, the phase diagram) is relatively small. In the preparation of this dilution, it is highly preferable when the diluent is chosen so as to mimic the drug molecule in terms of the ratio of polar groups to apolar groups. For example, tocopherol, with its benzopyranol group (2 oxygen) as part of a PM 30 430 compound is similar in polar / apolar ratio with respect to propofol, with its individual phenolic group (1 oxygen) as part of a PM 178 molecule. Polar groups such as hydroxyl are believed to bind strongly to the polar-apolar interface of surfactant-water systems, and since this has important implications for phase behavior [see, for example, P. Strom and DM Anderson, Langmuir (1992) 8: 691-702], the diluent should preferably have a similar content of similar polar groups, as far as possible. 35

En casos en los que el agente activo es propofol, y con otros fármacos y nutrientes que se proporcionan a pacientes para quienes debe controlarse la entrada de lípidos, una ventaja importante de muchas de las formulaciones notificadas en el presente documento es que puede hacerse que las cargas de lípido sean muy bajas. Particularmente en las formulaciones de fase cúbica a base de Pluronic, notificadas en los ejemplos 1-4 y 13-17, la carga de lípido es significativamente menor que en las formulaciones actualmente comercializadas, y además esto puede reducirse 40 incorporando hasta el 19% de propofol en la fase cúbica sin ningún alfa-tocoferol. Particularmente en aplicaciones de propofol, en las que se usa repetida o continuamente a lo largo del tiempo como un sedante, las cargas de lípido de la formulación pueden interferir significativamente con el régimen nutricional del paciente o incluso provocar complicaciones graves. In cases where the active agent is propofol, and with other drugs and nutrients that are provided to patients for whom lipid entry should be controlled, an important advantage of many of the formulations reported herein is that it can be done that Lipid loads are very low. Particularly in Pluronic-based cubic phase formulations, reported in examples 1-4 and 13-17, the lipid load is significantly lower than in currently marketed formulations, and this can also be reduced by incorporating up to 19% of Propofol in the cubic phase without any alpha-tocopherol. Particularly in propofol applications, in which it is used repeatedly or continuously over time as a sedative, the lipid loads of the formulation can significantly interfere with the patient's nutritional regimen or even cause serious complications.

El alfa-tocoferol, u otras formas de vitamina E tales como acetato de tocoferol y succinato de tocoferol, es una 45 elección sumamente preferida como un diluyente de alto coeficiente de reparto para productos inyectables debido a su larga historia de uso seguro en productos inyectables, así como el grupo OH unido a la interfase citado anteriormente. Otros diluyentes preferidos incluyen aceites esenciales de origen vegetal, así como varios otros líquidos que se indican en la lista de la FDA titulada Inactive Ingredients for Currently Marketed Drugs Products (Componentes inactivos para medicamentos comercializados en la actualidad) y/o las secciones apropiadas de la Food Additives Status List (Lista de 50 la situación de aditivos alimentarios). Entre estos están: benzoato de bencilo, aceite de casia, aceite de ricino, ciclometicona, polipropilenglicol (de bajo PM), polisiloxano (de bajo PM), aceite de coñac (oenantato de etilo), toronjil, bálsamo de Perú, oleorresina de cardamomo, estragol, geraniol, acetato de geraniol, acetato de mentilo, eugenol, isoeugenol, aceite de pepitas, aceite de pino, aceite de ruda, trifurano, extracto de achiote, oleorresina de cúrcuma, y oleorresina de pimentón. Aceites esenciales de fuentes vegetales (incluyendo sus extractos y componentes, y mezclas 55 de las mismos) comprenden un grupo bastante grande y químicamente diverso de líquidos que incluyen muchos agentes hidrófobos de baja toxicidad con grupos polares. La expresión “aceites esenciales” pretende incluir aceites esenciales de las siguientes fuentes: baya de pimienta de Jamaica, esencia de ámbar, semilla de anís, árnica, bálsamo de Perú, albahaca, laurel, hojas de laurel, bergamota, bois de rose (palisandro), cajeput, caléndula (margarita), alcanfor blanco, semilla de alcaravea, cardamomo, semilla de zanahoria, madera de cedro, apio, manzanilla alemana o húngara, 60 manzanilla romana o inglesa, canela, citronela, salvia, brote de clavo, cilantro, comino, ciprés, eucalipto, hinojo, aguja de pino siberiano, franquincienso (aceite de olíbano), ajo, geranio rosa, jengibre, pomelo, hisopo, jazmín, jojoba, bayas de enebro, lavanda, limón, limoncillo, lima, mejorana, artemisa, flor de verbasco, goma de mirra, bigarade neroli, nuez moscada, naranja amarga, naranja dulce, orégano, palmarosa, pachulí, poleo, pimienta negra, menta, petitegrain, aguja Alpha-tocopherol, or other forms of vitamin E such as tocopherol acetate and tocopherol succinate, is a highly preferred choice as a diluent of high partition coefficient for injectable products due to its long history of safe use in injectable products, as well as the OH group linked to the interface mentioned above. Other preferred diluents include essential oils of plant origin, as well as several other liquids indicated on the FDA list entitled Inactive Ingredients for Currently Marketed Drugs Products and / or the appropriate sections of the Food Additives Status List (List of 50 food additives situation). Among these are: benzyl benzoate, cassia oil, castor oil, cyclomethicone, polypropylene glycol (low PM), polysiloxane (low PM), cognac oil (ethyl oenantate), melissa, Peru balm, cardamom oleoresin , estragol, geraniol, geraniol acetate, mentyl acetate, eugenol, isoeugenol, pips oil, pine oil, rue oil, trifuran, achiote extract, turmeric oleoresin, and paprika oleoresin. Essential oils from plant sources (including their extracts and components, and mixtures thereof) comprise a fairly large and chemically diverse group of liquids that include many low toxicity hydrophobic agents with polar groups. The term "essential oils" is intended to include essential oils from the following sources: allspice berry, amber essence, anise seed, arnica, balsam of Peru, basil, bay leaf, bay leaves, bergamot, rose bois (rosewood ), cajeput, marigold (margarita), white camphor, caraway seed, cardamom, carrot seed, cedar wood, celery, German or Hungarian chamomile, 60 Roman or English chamomile, cinnamon, citronella, sage, clove bud, coriander , cumin, cypress, eucalyptus, fennel, Siberian pine needle, frankincense (olive oil), garlic, pink geranium, ginger, grapefruit, hyssop, jasmine, jojoba, juniper berries, lavender, lemon, lemongrass, lime, marjoram, Artemis, verbasco flower, myrrh gum, neroli bigarade, nutmeg, bitter orange, sweet orange, oregano, palmarosa, patchouli, pennyroyal, black pepper, mint, petitegrain, needle

de pino, raíz de carmín, absoluto de rosa, semillas de rosa mosqueta, romero, salvia, salvia dálmata, aceite de sándalo, sasafrás (libre de safrol), menta verde, nardo, píceo (cicuta), tangerina, árbol de té, thuja (hoja de cedro), tomillo, extracto de vainilla, vetiver, gaulteria, extracto de olmo escocés (hamamelia), o ilang ilang (cananga). También se prefieren los siguientes componentes de aceites esenciales: 2,6-dimetil-2,4,6-octatrieno; 4-propenilanisol; ácido bencil-3-fenilpropenoico; 1,7,7-trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ol; 2,2-dimetil-3-metilenbiciclo[2.2.1]heptano; 1,7,7-5 trimetilbiciclo[2.2.1]heptano; trans-8-metil-n-vanilil-6- nonenamida; 2,2,5-trimetilbiciclo[4.1.0]hept-5-eno; 5-isopropil-2-metilfenol; p-menta-6,8-dien-2-ol; p-menta-6,8-dien-2-ona; beta-cariofileno; 3-fenilpropenaldehído; 3,7-dimetil-6-octenal; 3,7-dimetil-6-octen-1-ol; 4-alilanisol; ácido etil-3-fenilpropenoico; 3-etoxi-4-hidroxibenzaldehído; 1,8-cineol; 4-alil-2-metoxifenol; 3,7,11-trimetil-2,6,10-dodecatrien-1-ol; 1,3,3-trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ol; 1,3,3-trimetilbiciclo[2.2.1]heptan-2-ona; trans-3,7-dimetil-2,6-octadien-1-ol; acetato de trans-3,7-dimetil-2,6-octadien-1-ilo; 3-10 metil-2-(2-pentenil)-2-cilopenten-1-ona; p-menta-1,8-dieno; 3,7-dimetil-1,6-octadien-3-ol; acetato de 3,7-dimetil-1,6-octadien-3-ilo; p-mentan-3-ol; p-mentan-3-ona; 2-aminobenzoato de metilo; acetato de metil-3-oxo-2-(2-pentenil)-ciclopentano; 2-hidroxibenzoato de metilo; 7-metil-3-metilen-1,6-octadieno; cis-3,7-dimetil-2,6-octadien-1-ol; 2,6,6-trimetilbiciclo[3.1.1] hept-2-eno; 6,6-dimetil-2-metilenbiciclo[3.1.1]heptano; p-ment-4(8)-en-3-ona; p-ment-1-en-4-ol; p-menta-1,3-dieno; p-ment-1-en-8-ol; metilfenilglicidato de etilo; y 2-isopropil-5-metilfenol. 15 pine, carmine root, rose absolute, rosehip seeds, rosemary, sage, Dalmatian sage, sandalwood oil, sassafras (safrol free), spearmint, tuberose, spruce (hemlock), tangerine, tea tree, thuja (cedar leaf), thyme, vanilla extract, vetiver, gaulteria, Scottish elm extract (witch hazel), or ilang ilang (cananga). The following essential oil components are also preferred: 2,6-dimethyl-2,4,6-octatriene; 4-propenylanisol; benzyl-3-phenylpropenoic acid; 1,7,7-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-ol; 2,2-dimethyl-3-methylenebicyclo [2.2.1] heptane; 1,7,7-5 trimethylbicyclo [2.2.1] heptane; trans-8-methyl-n-vanylyl-6- nonenamide; 2,2,5-trimethylbicyclo [4.1.0] hept-5-eno; 5-isopropyl-2-methylphenol; p-mint-6,8-dien-2-ol; p-mint-6,8-dien-2-one; beta-cariophilene; 3-phenylpropenaldehyde; 3,7-dimethyl-6-octenal; 3,7-dimethyl-6-octen-1-ol; 4-alilanisol; ethyl-3-phenylpropenoic acid; 3-ethoxy-4-hydroxybenzaldehyde; 1,8-cineole; 4-allyl-2-methoxyphenol; 3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrien-1-ol; 1,3,3-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-ol; 1,3,3-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-one; trans-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-ol; trans-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl acetate; 3-10 methyl-2- (2-pentenyl) -2-cylopenten-1-one; p-mint-1,8-diene; 3,7-dimethyl-1,6-octadien-3-ol; 3,7-dimethyl-1,6-octadien-3-yl acetate; p-mentan-3-ol; p-mentan-3-one; Methyl 2-aminobenzoate; methyl-3-oxo-2- (2-pentenyl) -cyclopentane acetate; Methyl 2-hydroxybenzoate; 7-methyl-3-methylene-1,6-octadiene; cis-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-ol; 2,6,6-trimethylbicyclo [3.1.1] hept-2-ene; 6,6-dimethyl-2-methylenebicyclo [3.1.1] heptane; p-ment-4 (8) -en-3-one; p-ment-1-en-4-ol; p-mint-1,3-diene; p-ment-1-en-8-ol; ethyl methylphenylglycidate; and 2-isopropyl-5-methylphenol. fifteen

Diluyentes especialmente preferidos, debido a una combinación favorable de buenas propiedades de solubilización del fármaco, baja toxicidad, baja solubilidad de agua, intervalo de temperatura útil como líquido, historia de uso, y compatibilidad con (o inducción de) fases cúbicas y hexagonales, son: tocoferoles, benzoato de bencilo, estragol, eugenol, isoeugenol, linalool, aldehído de fresas, terpineol, y los siguientes aceites esenciales: bálsamo de Perú, albahaca, laurel, bois de rose (palisandro), semilla de zanahoria, brote de clavo, eucalipto, jengibre, pomelo, hisopo, 20 limón, artemisa, goma de mirra, naranja amarga, orégano, palmarosa, pachulí, menta, petitgrain, romero, aceite de sándalo, menta verde, thuja (hoja de cedro), tomillo, vainilla, y ilang ilang (cananga). De estos, el presente inventor ha encontrado que tocoferoles, linalool, y aldehído de fresa (metilfenilglicidato de etilo) son los más preferido en el caso de productos inyectables. Especially preferred diluents, due to a favorable combination of good drug solubilization properties, low toxicity, low water solubility, useful temperature range as a liquid, history of use, and compatibility with (or induction of) cubic and hexagonal phases, are : tocopherols, benzyl benzoate, estragol, eugenol, isoeugenol, linalool, strawberry aldehyde, terpineol, and the following essential oils: balsam of Peru, basil, bay leaf, bois de rose (rosewood), carrot seed, clove bud, eucalyptus, ginger, grapefruit, hyssop, 20 lemon, sagebrush, myrrh gum, bitter orange, oregano, palmarosa, patchouli, mint, petitgrain, rosemary, sandalwood oil, spearmint, thuja (cedar leaf), thyme, vanilla, and ilang ilang (cananga). Of these, the present inventor has found that tocopherols, linalool, and strawberry aldehyde (ethyl methylphenylglycidate) are the most preferred in the case of injectable products.

El ejemplo 18 muestra un resultado experimental que indica que la concentración de fase exterior del fármaco 25 anestésico general propofol en varias fases cúbicas equilibradas con agua se reduce fuertemente sustituyendo aproximadamente la mitad del propofol con alfa-tocoferol. En los ejemplos 19 y 20, se inyectaron por vía intravenosa en perros las formulaciones de propofol de la presente invención en las que se usó la misma mezcla de tocoferol-propofol en las partículas de fase cúbica, y no se observó ninguna molestia con la inyección en ninguno de los animales. Tal como se observó anteriormente, el consenso en la técnica es que el picor en la inyección de muchas formulaciones 30 propofol se debe al propofol presente en la fase acuosa. Esto pone en relieve la importancia del control del reparto aceite-agua que es posible en la presente invención, mediante un medio sencillo. El mismo método también puede aplicarse a otros sistemas que contienen tensioactivos o lípidos, tales como liposomas, dispersiones, microemulsiones, y emulsiones de partículas de cristal líquido recubiertas. No es necesario que el diluyente tenga alguna afinidad particular para el fármaco, tal como se ilustra mediante los ejemplos en el presente documento en los que el tocoferol es 35 el diluyente, dado que este compuesto no tiene ninguna afinidad especial por el propofol (no obstante, tal como se trató anteriormente, el propofol y tocoferol comparten una similitud estructural que es importante en el contexto de esta invención). Más bien el efecto es el resultado matemático de la razón aumentada del volumen hidrófobo con respecto a la masa del fármaco. Tal como se observa mediante los datos en el ejemplo 18, el aumento de la razón del volumen hidrófobo (fracción en volumen de dominios hidrófobos) con respecto al contenido del fármaco (fracción en volumen del 40 fármaco) en el 50%, o más preferiblemente en el 100%, puede tener un fuerte efecto sobre la concentración del fármaco en la fase exterior. Los tocoferoles son particularmente útiles como diluyentes en una amplia gama de sistemas posibles debido a sus cadenas hidrófobas largas, bajos puntos de fusión, y naturaleza no alergénica, segura. Aunque el uso de diluyentes oleosos se conoce en la técnica de las emulsiones, su uso en el contexto de liposomas y dispersiones basadas en cristal líquido ha sido prácticamente desconocido, particularmente en el campo de los productos 45 farmacéuticos, con la excepción de determinadas descripciones de patentes del presente inventor (solicitudes estadounidenses 10/176.112 y 60/387.909). Example 18 shows an experimental result indicating that the outer phase concentration of propofol general anesthetic drug in several cubic phases equilibrated with water is strongly reduced by replacing approximately half of the propofol with alpha-tocopherol. In Examples 19 and 20, the propofol formulations of the present invention were injected intravenously into dogs in which the same tocopherol-propofol mixture was used in the cubic phase particles, and no discomfort was observed with the injection. in any of the animals. As noted above, the consensus in the art is that the itching in the injection of many propofol formulations is due to the propofol present in the aqueous phase. This highlights the importance of oil-water distribution control that is possible in the present invention, by a simple means. The same method can also be applied to other systems containing surfactants or lipids, such as liposomes, dispersions, microemulsions, and emulsions of coated liquid crystal particles. It is not necessary for the diluent to have any particular affinity for the drug, as illustrated by the examples herein in which the tocopherol is the diluent, since this compound has no special affinity for propofol (however , as discussed above, propofol and tocopherol share a structural similarity that is important in the context of this invention). Rather the effect is the mathematical result of the increased ratio of the hydrophobic volume to the mass of the drug. As observed by the data in Example 18, the increase in the ratio of the hydrophobic volume (volume fraction of hydrophobic domains) with respect to the content of the drug (volume fraction of the drug) by 50%, or more preferably at 100%, it can have a strong effect on the concentration of the drug in the outer phase. Tocopherols are particularly useful as diluents in a wide range of possible systems due to their long hydrophobic chains, low melting points, and safe, non-allergenic nature. Although the use of oily diluents is known in the art of emulsions, their use in the context of liquid crystal-based liposomes and dispersions has been virtually unknown, particularly in the field of pharmaceutical products, with the exception of certain descriptions of patents of the present inventor (US applications 10 / 176,112 and 60 / 387,909).

Otro hallazgo sorprendente en el transcurso de la preparación de las muestras notificadas en el presente documento fue que la oxidación del propofol a lo largo del tiempo se redujo fuertemente mediante el uso del método con diluyente tocoferol descrito anteriormente. Esto puede deberse a una combinación, quizás una sinérgica, de varios 50 factores. El mismo tocoferol puede actuar como antioxidante, y en particular puede proteger al propofol cuando está en los dominios hidrófobos de la dispersión. Además, la reducción del propofol acuoso por el método con diluyente puede reducir la velocidad de oxidación debido a la cinética de oxidación más lenta en los dominios hidrófobos en comparación con la fase acuosa, debido a la viscosidad superior y/o concentración inferior de oxígeno. El segundo factor se aplicará incluso en casos en los que el diluyente no sea específicamente un antioxidante. 55 Another surprising finding in the course of preparing the samples notified herein was that the oxidation of propofol over time was strongly reduced by the use of the tocopherol diluent method described above. This may be due to a combination, perhaps a synergistic one, of several 50 factors. Tocopherol itself can act as an antioxidant, and in particular it can protect propofol when it is in the hydrophobic domains of the dispersion. In addition, the reduction of the aqueous propofol by the diluent method can reduce the oxidation rate due to the slower oxidation kinetics in the hydrophobic domains compared to the aqueous phase, due to the higher viscosity and / or lower oxygen concentration. The second factor will apply even in cases where the diluent is not specifically an antioxidant. 55

Ajuste de la tonicidad. En el transcurso de esta invención, el inventor ha encontrado que aminoácidos solubles, por ejemplo glicina, prolina y valina, en particular, son excelentes agentes de ajuste de la tonicidad para formulaciones que incorporan tensioactivos que contienen grupos polares de poli(óxido de etileno) (o PEG), tales como poloxámeros (Pluronics), particularmente en el caso de la formulación de propofol. Las razones por las que los aminoácidos solubles, y especialmente hidrófilos neutros son particularmente útiles en estos casos son: 1) no presentan 60 la tendencia a precipitar partículas que incorporan tensioactivo pegilado, como lo hacen las sales iónicas; 2) no aumentan de manera apreciable, y de hecho pueden disminuir, la concentración de propofol en la fase acuosa exterior, lo que tal como se trata en el presente documento es importante en la reducción del ardor en la inyección; y 3) parecen Tonicity adjustment. In the course of this invention, the inventor has found that soluble amino acids, for example glycine, proline and valine, in particular, are excellent tonicity adjusting agents for formulations that incorporate surfactants containing polar groups of poly (ethylene oxide) (or PEG), such as poloxamers (Pluronics), particularly in the case of the formulation of propofol. The reasons why soluble amino acids, and especially neutral hydrophiles are particularly useful in these cases are: 1) they do not have the tendency to precipitate particles that incorporate pegylated surfactant, as do ionic salts; 2) they do not increase appreciably, and in fact they can decrease, the concentration of propofol in the outer aqueous phase, which as discussed herein is important in reducing the burning in the injection; and 3) they seem

tener el efecto de mejorar la compatibilidad de las fases cúbicas y hexagonales inversas con la fase acuosa. El ejemplo 18 demuestra la reducción de propofol acuoso con la adición de glicina para hacer la dispersión isotónica (aproximadamente 300 mOsm/l). Por el contrario, se encontró que los sacáridos que se usan comúnmente para ajustar la tonicidad, tales como dextrosa, aumentaron los niveles acuosos de propofol. Incluso el cloruro de sodio al 0,8% tuvo el efecto de precipitación de las partículas de Pluronic L-122/desoxicolato de la presente invención durante un periodo 5 de aproximadamente una semana. También se descubrió que la glicina produce una fase cúbica más transparente, lo que indica un orden de largo alcance más perfecto, en estos experimentos. Se encontró que la glicina y la valina y la prolina no tenían efectos adversos sobre las partículas de fase cúbica basadas en L-122, que contenían propofol, de la presente invención. La glutamina y asparagina alteraron la misma formulación. Se usa glicina en grandes cantidades (superiores a 100 mg/kg) en inyecciones del producto farmacéutico Humate-P, y una dosis individual del producto 10 nutricional inyectable Nephramine contiene más de 2 gramos de valina, haciendo que ambas sean especialmente preferidas para productos parenterales. Los aminoácidos preferidos para este fin, en orden decreciente de preferencia, son: glicina, alanina, prolina, serina, glutamina, valina, asparagina; los aminoácidos ácidos, básicos e hidrófobos son mucho menos preferidos (y algunos de estos no son solubles en agua hasta niveles de ajuste de la tonicidad), como son los aminoácidos que contienen azufre debido a problemas de hipersensibilidad. Los aminoácidos indicados como 15 preferidos también tienen un efecto de estabilización del pH y pueden actuar como antioxidantes hasta algún grado. Se prefiere el uso de glicina a niveles de entre aproximadamente el 1 y el 3%, y más preferiblemente entre aproximadamente el 1,3 y el 2,2%, para ajustar la tonicidad, a menos que estén presentes otros componentes que aumenten la osmolalidad en cuyo caso pueden ser útiles niveles inferiores. La sinergia entre las diversas funcionalidades de estos aminoácidos, concretamente su compatibilidad con grupos de cabeza de PEG, su efecto 20 positivo sobre el reparto del fármaco (al menos en el caso de fármacos fenólicos tales como propofol), y su tonicidad, capacidad de tamponamiento, y actividad antioxidante es particularmente importante en el caso de productos farmacéuticos, en los que hay un alto ímpetu para mantener el número de componentes en la formulación a un mínimo. La tonicidad también puede lograrse con el uso de zwitteriones, incluyendo fosfatidilcolina. have the effect of improving the compatibility of the inverse cubic and hexagonal phases with the aqueous phase. Example 18 demonstrates the reduction of aqueous propofol with the addition of glycine to make the isotonic dispersion (approximately 300 mOsm / l). In contrast, it was found that saccharides that are commonly used to adjust tonicity, such as dextrose, increased aqueous propofol levels. Even 0.8% sodium chloride had the effect of precipitation of the Pluronic L-122 / deoxycholate particles of the present invention over a period of about one week. It was also discovered that glycine produces a more transparent cubic phase, indicating a more perfect long-range order, in these experiments. It was found that glycine and valine and proline had no adverse effects on L-122-based cubic phase particles, containing propofol, of the present invention. Glutamine and asparagine altered the same formulation. Glycine is used in large quantities (greater than 100 mg / kg) in injections of the Humate-P pharmaceutical product, and a single dose of the injectable nutritional product Nephramine contains more than 2 grams of valine, making both of them especially preferred for parenteral products . Preferred amino acids for this purpose, in decreasing order of preference, are: glycine, alanine, proline, serine, glutamine, valine, asparagine; acidic, basic and hydrophobic amino acids are much less preferred (and some of these are not soluble in water until tonicity adjustment levels), such as sulfur-containing amino acids due to hypersensitivity problems. The amino acids indicated as preferred also have a pH stabilization effect and can act as antioxidants to some degree. The use of glycine at levels between about 1 and 3%, and more preferably between about 1.3 and 2.2%, is preferred to adjust the tonicity, unless other components that increase osmolality are present. in which case lower levels may be useful. The synergy between the various functionalities of these amino acids, specifically their compatibility with PEG head groups, their positive effect on the distribution of the drug (at least in the case of phenolic drugs such as propofol), and their tonicity, buffering capacity , and antioxidant activity is particularly important in the case of pharmaceutical products, in which there is a high impetus to keep the number of components in the formulation to a minimum. Tonicity can also be achieved with the use of zwitterions, including phosphatidylcholine.

Un método especialmente útil de producción de partículas de la presente invención implica fases relacionadas 25 de viscosidad inferior. En particular, y tal como se ilustra en el ejemplo 17 a continuación, a menudo se da el caso de que cuando se elimina el agua de una fase cúbica o hexagonal inversa, se forma una fase L2 líquida, de viscosidad muy inferior o en casos más raros una fase L3 líquida. Es decir, en algunos casos, simplemente una reflexión del hecho de que grupos de cabeza de tensioactivo requieren hidratación con el fin de que la segregación en los dominios hidrófobos e hidrófilos sea lo suficientemente pronunciada, en cuanto a la energía, para que se desarrolle el comportamiento de 30 fase líquido-cristalina completo. Dado que la fase L2 líquida es de baja viscosidad se dispersa mucho más fácilmente en agua, y después de que las gotas resultantes se hidraten con agua, experimentan el cambio de fase para dar la fase líquido-cristalina inversa buscada. Esta hidratación es generalmente un proceso rápido porque los tiempos de difusión se reducen en gran medida, asumiendo que se logra un tamaño de gota de fase L2 razonablemente fino, preferiblemente inferior a aproximadamente 100 micras y más preferiblemente inferior a aproximadamente 20 micras. El 35 mismo resto cargado que induce la estabilización de la carga en la dispersión de partícula líquido-cristalina final puede de igual manera proporcionar la estabilización de la carga de las gotas de líquido en dispersión. Pueden usarse otros métodos para convertir las gotas de líquido precursor (habitualmente L2, o en otros casos la fase L3) en partículas de fase líquido-cristalina. Éstos incluyen, por ejemplo, incorporar un compuesto de bajo coeficiente de reparto en el cristal líquido lo que provoca que se licue, en el que Kow bajo implica que el compuesto dejará preferentemente las gotas de 40 líquido tras la dispersión, lo que induce que el líquido vuelva a un cristal líquido como una partícula. Un compuesto de este tipo puede encontrarse fácilmente añadiendo simplemente la cantidad suficiente de un compuesto de bajo Kow a un cristal líquido hasta que el cristal líquido se licúe, lo que no es una tarea difícil en vista del intervalo de la composición normalmente pequeño de las fases líquido-cristalinas inversas. An especially useful method of producing particles of the present invention involves related phases of lower viscosity. In particular, and as illustrated in example 17 below, it is often the case that when the water is removed from an inverse hexagonal or cubic phase, a liquid phase L2 is formed, of much lower viscosity or in cases more rare a liquid L3 phase. That is, in some cases, simply a reflection of the fact that surfactant head groups require hydration so that segregation in the hydrophobic and hydrophilic domains is sufficiently pronounced, in terms of energy, for the development of behavior of 30 complete liquid-crystalline phase. Since the liquid phase L2 is of low viscosity it disperses much more easily in water, and after the resulting drops are hydrated with water, they undergo the phase change to give the desired reverse liquid-crystalline phase. This hydration is generally a rapid process because diffusion times are greatly reduced, assuming that a reasonably fine phase drop size L2 is achieved, preferably less than about 100 microns and more preferably less than about 20 microns. The same charged residue that induces the stabilization of the charge in the final liquid-crystalline particle dispersion can likewise provide stabilization of the charge of the drops of liquid in dispersion. Other methods can be used to convert the precursor liquid drops (usually L2, or in other cases the L3 phase) into liquid-crystalline phase particles. These include, for example, incorporating a compound of low partition coefficient in the liquid crystal which causes it to liquefy, in which low Kow implies that the compound will preferably leave the liquid drops after dispersion, which induces that the liquid return to a liquid crystal as a particle. A compound of this type can be easily found by simply adding a sufficient amount of a low Kow compound to a liquid crystal until the liquid crystal is liquefied, which is not a difficult task in view of the range of the normally small composition of the phases. reverse liquid-crystalline.

Los estudios de estabilidad notificados en el ejemplo 22 demuestran que las partículas de la presente invención 45 son estables a largo plazo en dispersión, con muy poca agregación o crecimiento del tamaño de partícula a lo largo del tiempo, tal como se muestra mediante la medición de dispersión de la luz dinámica, que se conoce bien que es muy sensible a la agregación de partículas. Debe observarse que esto contradice las partículas de gel cúbicas del documento U.S. 6.071.524, que de hecho se diseñan para agregarse en la superficie de las gotas de aceite en esa invención. En el documento 6.071.524 no se proporcionaron estudios de estabilidad con resultados de 50 dimensionamiento de partículas a lo largo del tiempo. The stability studies reported in Example 22 demonstrate that the particles of the present invention are stable in the long term in dispersion, with very little aggregation or growth of the particle size over time, as shown by measuring Dynamic light scattering, which is well known to be very sensitive to particle aggregation. It should be noted that this contradicts the cubic gel particles of U.S. 6,071,524, which are in fact designed to aggregate on the surface of the oil drops in that invention. In document 6,071,524 no stability studies were provided with results of 50 particle sizing over time.

Aplicación de formulaciones que contienen cristal líquido inverso para lograr duración de acción aumentada y/o dosis disminuida. En el transcurso de este trabajo se hizo el descubrimiento inesperado de que las formulaciones que contienen cristal líquido inverso de determinados fármacos presentaron, en algunos casos, duración en gran medida aumentada de la acción eficaz sin aumento de la dosis, y/o duración y eficacia equivalente a una dosis 55 significativamente inferior, en comparación con las formulaciones habituales (tales como disoluciones acuosas sencillas) del mismo fármaco. Esto puede aplicarse a una amplia gama de fármacos y productos nutricéuticos tal como se describe a continuación. El caso específico de los anestésicos locales es representativo de muchas realizaciones de este tipo y a continuación se describen con cierto detalle. Application of formulations containing inverse liquid crystal to achieve increased duration of action and / or decreased dose. In the course of this work, the unexpected discovery was made that formulations containing inverse liquid crystal of certain drugs presented, in some cases, greatly increased duration of effective action without dose increase, and / or duration and efficacy equivalent to a significantly lower dose, compared to the usual formulations (such as simple aqueous solutions) of the same drug. This can be applied to a wide range of drugs and nutritional products as described below. The specific case of local anesthetics is representative of many embodiments of this type and is described in some detail below.

La introducción (o colocación) de anestésicos locales en o en proximidad al tejido neural da como resultado 60 anestesia o analgesia y denomina ampliamente como anestesia regional. Se han desarrollado técnicas específicas para establecer la anestesia quirúrgica, analgesia posoperatoria, así como diversas terapias de tratamiento del dolor agudo y crónico. Estas técnicas continúan desarrollándose a medida que se realizan avances en agentes farmacéuticos, The introduction (or placement) of local anesthetics in or in proximity to the neural tissue results in 60 anesthesia or analgesia and is widely referred to as regional anesthesia. Specific techniques have been developed to establish surgical anesthesia, postoperative analgesia, as well as various therapies for the treatment of acute and chronic pain. These techniques continue to develop as advances are made in pharmaceutical agents,

dispositivos médicos, y el entendimiento de la fisiología y función celular. Algunas de estas técnicas específicas se denominan ocasionalmente “bloqueo nervioso”, “bloqueo de raíz nerviosa”, “bloqueo neural”, “bloqueo neuraxial”, “bloqueo intratecal”, “bloqueo subaracnoideo” “bloqueo epidural”, “bloqueo de ganglio”, “bloqueo del plexo”, “bloqueo de campo”, “bloqueo incisional”, “bloqueo por infiltración” entre otros. La presente invención tiene importancia potencial en todos estos bloqueos. 5 medical devices, and the understanding of cell physiology and function. Some of these specific techniques are occasionally called "nerve block", "nerve root block", "neural block", "neuraxial block", "intrathecal block", "subarachnoid block" "epidural block", "ganglion block", "Plexus block", "field block", "incisional block", "infiltration block" among others. The present invention has potential importance in all these blockages. 5

La expresión “bloqueo diferencial” se usa para describir los diversos efectos observados cuando se usan diversos anestésicos locales para establecer anestesia regional con los diferentes tipos de fibras nerviosas. El uso de cada agente anestésico local producirá resultados característicos variados basados en gran parte en las propiedades hidrófilas o hidrófobas inherentes del agente. De igual importancia que el fármaco seleccionado para su uso es el tipo de fibra nerviosa cuya actividad va bloquearse. Algunos otros factores pueden afectar a la calidad o la característica de un 10 tipo específico de bloqueo nervioso. Históricamente, la rapidez del comienzo y la duración del bloqueo de conducción pueden manipularse aumentando la dosis total del anestésico local así como el volumen de administración. La adición de epinefrina, norepinefrina, y fenilefrina puede aumentar la duración del bloqueo debido en gran parte a sus efectos vasoconstrictores que reducen la absorción del anestésico local lejos de la fibra nerviosa. La proximidad de la fibra nerviosa y otras estructuras anatómicas ubicadas cerca del sitio de la inyección pueden afectar al comienzo y la 15 duración del bloqueo. Cualquier número de factores independientes incluyendo, pero sin limitarse a, pH, bicarbonatación, carbonatación, temperatura, baricidad, la hormona progesterona, pueden efectuar el comienzo característico, la calidad y latencia de diversas técnicas de conducción nerviosa. The term "differential blockage" is used to describe the various effects observed when various local anesthetics are used to establish regional anesthesia with different types of nerve fibers. The use of each local anesthetic agent will produce varied characteristic results based largely on the hydrophilic or hydrophobic properties inherent in the agent. Equally important that the drug selected for use is the type of nerve fiber whose activity is to be blocked. Some other factors may affect the quality or characteristic of a specific type of nerve block. Historically, the speed of onset and the duration of the conduction block can be manipulated by increasing the total dose of the local anesthetic as well as the volume of administration. The addition of epinephrine, norepinephrine, and phenylephrine may increase the duration of the blockage due in large part to its vasoconstrictor effects that reduce the absorption of the local anesthetic away from the nerve fiber. The proximity of the nerve fiber and other anatomical structures located near the injection site can affect the onset and duration of the blockage. Any number of independent factors including, but not limited to, pH, bicarbonatation, carbonation, temperature, baricity, the hormone progesterone, can effect the characteristic onset, quality and latency of various nerve conduction techniques.

En el ser humano, puede realizarse el bloqueo del nervio ciático para producir anestesia distal en la extremidad inferior distal para la rodilla y el pie. Existen varias técnicas de anestesia regional prescritas que dan como resultado el 20 bloqueo de la conducción satisfactorio, principalmente usando o bien el enfoque periférico o bien el clásico. Cada serie de técnicas puede realizarse o bien con o bien sin la ayuda de un simulador de nervio periférico, provocando parestesias combinadas con el conocimiento de marcas anatómicas y de superficie. In humans, sciatic nerve block can be performed to produce distal anesthesia in the distal lower limb for the knee and foot. There are several prescribed regional anesthesia techniques that result in satisfactory conduction block, mainly using either the peripheral approach or the classical approach. Each series of techniques can be performed either with or without the help of a peripheral nerve simulator, causing paresthesias combined with the knowledge of anatomical and surface marks.

El uso de un simulador de nervio facilita la administración precisa de un agente anestésico local en proximidad directa a o incluso dentro del nervio o la vaina nerviosa. Esto se lleva a cabo aplicando una cantidad pequeña y 25 ajustable de corriente eléctrica a una aguja de búsqueda de bloqueo por aislamiento para provocar la despolarización del nervio una vez que la punta de la aguja no aislada avanza a una ubicación cerca de o contra el nervio. Esta técnica ayuda al médico entrenado en la identificación y el aislamiento del/de los nervio(s) destinado(s) a bloquearse. The use of a nerve simulator facilitates the precise administration of a local anesthetic agent in direct proximity to or even within the nerve or nerve sheath. This is accomplished by applying a small, adjustable amount of electrical current to an isolation blocking search needle to cause nerve depolarization once the non-insulated needle tip advances to a location near or against the nerve. . This technique helps the doctor trained in the identification and isolation of the nerve (s) destined to block.

En el ejemplo de un bloqueo del nervio ciático que va a realizarse en la posición de Sim lateral, se flexionará la pierna destinada a bloquearse en la rodilla y la extremidad más superior, descansando sobre la extremidad inferior 30 dependiente. Mediante palpación, se identificará el trocánter mayor y la tuberosidad isquiática con el fin de identificar la escotadura anatómica entre las dos marcas claves. El nervio ciático se encuentra casi en el punto medio dentro de esta escotadura. Se anestesiará la superficie correspondiente de la piel por encima de este punto inyectando una pequeña cantidad de un anestésico local elevando un habón de piel. Entonces se une el cable negativo del estimulador de nervio cerca del centro de la aguja, y entonces se avanza la punta de la aguja de bloqueo en la escotadura ciática. A medida 35 que la aguja avanza, se observará tanto la dorsiflexión como la flexión plantar del pie una vez que se ha establecido la proximidad de la punta de la aguja al nervio. La confirmación de la colocación de la aguja puede realizarse o bien disminuyendo la estimulación eléctrica hasta menos de 0,2 miliamperios o bien inyectando de 1 a 2 mililitros de anestésico local, que abolirá suficiente estímulo eléctrico y provocará una disminución y pérdida eventual del movimiento motor. Entonces puede completarse el bloqueo ciático administrando una cantidad apropiada de la 40 disolución de anestésico local al adulto sedado o al niño anestesiado. In the example of a sciatic nerve block to be performed in the lateral Sim position, the leg intended to be blocked in the knee and the uppermost limb will be flexed, resting on the dependent lower limb 30. By palpation, the greater trochanter and the ischial tuberosity will be identified in order to identify the anatomical recess between the two key marks. The sciatic nerve is almost midway within this recess. The corresponding surface of the skin will be anesthetized above this point by injecting a small amount of a local anesthetic by raising a skin habon. Then the negative nerve stimulator cable is attached near the center of the needle, and then the tip of the blocking needle is advanced in the sciatic recess. As the needle advances, both dorsiflexion and plantar flexion of the foot will be observed once the proximity of the needle tip to the nerve has been established. Confirmation of needle placement can be done either by decreasing the electrical stimulation to less than 0.2 milliamps or by injecting 1 to 2 milliliters of local anesthetic, which will abolish enough electrical stimulation and cause a decrease and eventual loss of motor movement . The sciatic block can then be completed by administering an appropriate amount of the local anesthetic solution to the sedated adult or anesthetized child.

Lo siguiente son ejemplos de bloqueos nerviosos que pueden ofrecer un nivel mejorado de comodidad con un anestésico local de mayor duración tal como se proporciona mediante esta invención. The following are examples of nerve blocks that can offer an improved level of comfort with a longer-lasting local anesthetic as provided by this invention.

CABEZA Y CUELLO  HEAD AND NECK

Amígdalas y adenoides  Tonsils and adenoids

Bloqueo de fosa palatina * * *  Palatine fossa block * * *

Biopsia de ganglio linfático, cuello  Lymph node biopsy, neck

Bloqueo del plexo cervical superficial * *  Superficial cervical plexus block * *

Endarterectomía carotídea  Carotid endarterectomy

Bloqueo del plexo cervical profundo/superficial * *  Deep / superficial cervical plexus block * *

Control del dolor posoperatorio general  General postoperative pain control

Inyección incisional superficial y profunda *  Deep and superficial incisional injection *

RSD/Causalgia/Raynaud  RSD / Causalgia / Raynaud

Bloqueo de ganglio estrellado * * *  Crashed ganglion block * * *

EXTREMIDAD SUPERIOR  UPPER EXTREMITY

Artroscopía de hombro, diagnóstico  Shoulder arthroscopy, diagnosis

Plexo braquial, enfoque interescalénico *  Brachial plexus, interscalenic approach *

Reparación con manguito de rotación, abierto o de alcance  Repair with rotating sleeve, open or reach

p.b., enfoque interescalénico * * *  p.b., interscalenic approach * * *

Artoplastía  Arthroplasty

p.b., enfoque interescalénico * * *  p.b., interscalenic approach * * *

Fx humeral con RAFI  Humeral fx with RAFI

p.b., enfoque interescalénico *  p.b., interscalenic approach *

Fx de olécranon con RAFI de brazo (codo)  Olecranon fx with arm RAFI (elbow)

Plexo braquial, enfoque axilar * *  Brachial plexus, axillary approach * *

Bursa de olécranon  Olecranon Bursa

Plexo braquial, axilar/intraclavicular * *  Brachial, axillary / intraclavicular plexus * *

Radio con RAFI de antebrazo  Radio with forearm RAFI

Plexo de cúbito braquial, axilar/infraclavicular * * *  Brachial ulna plexus, axillary / infraclavicular * * *

Inserción de derivación con diálisis  Bypass insertion with dialysis

“ “ “ *  "" "*

Muñeca, mano, dedos  Wrist, hand, fingers

Bloqueo(s) de sitio(s) selectivo(s) De * a **  Blocking (s) of selective site (s) From * to **

TÓRAX Y PARED ABDOMINAL  THORAX AND ABDOMINAL WALL

Pecho, toracotomía (pecho abierto)  Chest, thoracotomy (open chest)

Bloqueo paravertebral (T1 - T6 o T8) * * * (#)  Paravertebral block (T1 - T6 or T8) * * * (#)

Control del dolor, fx de costilla(s)  Pain control, rib fx (s)

paravertebral/intercostales * * * (#)  paravertebral / intercostal * * * (#)

Herpes (dermatoma)  Herpes (dermatome)

Bloqueo(s) de nervio(s) intercostal(es) *  Intercostal nerve (s) block (s) *

Mastectomía/ganglio linfático axilar  Mastectomy / axillary lymph node

paravertebral (T1 - T6) * * *  paravertebral (T1 - T6) * * *

Reconstrucción de mama sin parte abdominal  Breast reconstruction without abdominal part

Colgajo TRAM “ * * * (#)  TRAM flap “* * * (#)

Reconstrucción de mama con parte abdominal  Breast reconstruction with abdominal part

Colgajo TRAM “ ninguno  TRAM flap “none

Parche y conexión de hernia inguinal, abierto  Inguinal hernia patch and connection, open

Con malla *  With mesh *

PELVIS, PERINEO UROGENITAL  PELVIS, UROGENITAL PERINEUS

Diversos bloqueos específicos de sitio  Various site specific locks

*     *

EXTREMIDAD INFERIOR  LOWER EXTREMITY

Artroscopía de rodilla, diagnóstico  Knee arthroscopy, diagnosis

Plexo lumbar, bloqueo n femoral *  Lumbar plexus, femoral n block *

Alcance de rodilla con reparación de ligamentos  Knee reach with ligament repair

“ “ * *  ““ * *

Artroplastía de rodilla total  Total knee arthroplasty

“ “ * * * (#)  ““ * * * (#)

Rótula con RAFI  Ball joint with RAFI

“ “ * *  ““ * *

Artroplastía de cadera total  Total hip arthroplasty

“ “ *  "" *

Amputación, por encima/por debajo de la rodilla  Amputation, above / below the knee

Bloqueo de nervio ciático * *  Sciatic nerve block * *

RAFI de pierna distal, tibia  RAFI of distal leg, tibia

“ “ * *  ““ * *

Pies, tobillo, tendones  Feet, ankle, tendons

Nervio ciático poplíteo, bloqueo de tobillo De * a ***  Popliteal sciatic nerve, ankle block From * to ***

Leyenda  Legend

* alguna mejora ofrecida durante de 4 a 6 h de bloqueo con marcaine™ * * buena mejora probable en comparación con el bloqueo con marcaine™ * * * mejora significativa ofrecida durante bloqueo con marcaine™ de inyección individual # Catéter permanente epidural a nivel torácico o lumbar ofrece ventajas significativas sobre Marcaine™ de inyección individual o la presente invención, aunque presentan determinados problemas.  * any improvement offered during 4 to 6 h of blockage with Marcaine ™ * * Good probable improvement compared to blockade with Marcaine ™ * * * Significant improvement offered during blocking with Marcaine ™ of individual injection # Thoracic epidural permanent catheter or Lumbar offers significant advantages over individual injection Marcaine ™ or the present invention, although they present certain problems.

Aplicación de formulaciones que contienen cristal líquido inverso de baja dosis, de larga duración con respecto a otros agentes activos. Los compuesto farmacéuticos que bien adecuados para su incorporación como agentes activos en formulaciones de larga duración y/o dosis reducida que contienen los materiales líquido-cristalinos de fase cúbica inversa de las realizaciones preferidas, y que pueden obtener potencialmente beneficio de los métodos de la presente invención, incluyen propofol, alfaxalona, alfadolona, eltanolona, propanidid, ketamina, pregnanolona, 5 etomidato, y otros anestésicos generales; dexametasona, clonidina, loperamida, antagonistas de serotonina como Application of formulations containing inverse liquid crystal of low dose, of long duration with respect to other active agents. Pharmaceutical compounds that are well suited for incorporation as active agents in formulations of long duration and / or reduced dose containing the liquid-crystalline materials of the reverse cubic phase of the preferred embodiments, and which can potentially obtain benefit from the methods herein. invention, include propofol, alphaxalone, alfadolone, eltanolone, propanidid, ketamine, pregnanolone, etomidate, and other general anesthetics; dexamethasone, clonidine, loperamide, serotonin antagonists such as

ondansatrón, especialmente en conjunto con determinados anestésicos locales; anfotericina B; coenzima Q10; esteroides y agentes antiinflamatorios esteroideos; epoyetina; mitoxantrona; dacarbazina; antiinflamatorios no esteroideos (por ejemplo, salicilatos, derivados de paraminofenol (por ejemplo, acetaminofén); calcitonina; sucralfato; danazol y otros esteroides; megace; L-dopa; ketamina; aciclovir y otros antivirales; anakinra; flavanoides (productos nutricéuticos); fenomatos; pentafusida; derivados de ácido propiónico (por ejemplo, naproxeno, ibuprofeno, etc.); 5 analgésicos; antipiréticos; agentes de bloqueo neuromuscular tales como rocuronio, vecuronio, y pancuronio; antihipertensores, tales como sulfinalol, oxiprenolol, hidroclorotiazida, captopril, felodipino, guanazodina, cadralazina, tolonidina, bromuro de pentametonio, bunazosina, ambusida, metildopa, etc.; antitusivos, tales como mutamirato, etc.; sedantes (por ejemplo, benzodiazepinas tales como diazepam); hipnóticos (por ejemplo, anestésicos intravenosos y barbituratos); opiáceos; cannabinoides y proteínas (por ejemplo, insulina y eritropoyetina). Por supuesto los anestésicos 10 locales se prefieren especialmente dentro del contexto de esta invención, e incluyen bupivacaína, lidocaína (que tiene un bajo índice terapéutico, a pesar de su uso contra arritmias ventriculares) procaína, tetracaína, mepivacaína, etidocaína, oxibuprocaína, cocaína, benzocaína, pramixinina, prilocaína, proparacaína, ropivicaína, levobupivacaína, amilocaína, dibucaína, diperodón, hexilcaína, leucinocaína, meprilcaína, cloroprocaína, dibucaína, oxibutacaína, propanocaína, propipocaína, pseudococaína, butacaína, QX-314, y anestésicos locales relacionados; anestésicos 15 dentales tales como clorobutanol, eugenol, y aceite de clavo; y una mezcla eutéctica 1:1 en peso de lidocaína y prilocaína. Los fármacos antineoplásicos tienen generalmente estrechas razones terapéuticas y pueden beneficiarse especialmente de esta invención; éstos incluyen SN-38 y camptotecinas relacionadas tales como irinotecán; paclitaxel y taxanos relacionados; gencitabina; colchicina; doxorubicina, idarubicina, daunorubicina y rubicinas relacionadas; iludinas y el ptaquilosin relacionado; filgrastima; vincristina y vinblastina; perindopril; epotilonas; Photofrin y otros agentes PDT; 20 ciclofosfamida; ácido 13-cis-retinoico; clotrimazol (para candidiasis oral); cisplatino, carboplatino, y otros fármacos basados en platino. Además, otros compuestos farmacéuticos indicados en las patentes estadounidenses 6.638.537 y 6.638.621, cuyo contenido completo se incorpora al presente documento como referencia, son adecuados para su incorporación en la invención descrita en el presente documento, y preferiblemente en las fases líquido-cristalinas inversas de las realizaciones preferidas; uno de los ejemplos a continuación expone en detalle una aplicación de la 25 invención para un agente antineoplásico, concretamente un taxano, paclitaxel. Además, otros fármacos y productos nutricéuticos que son de bajo índice terapéutico y se prefieren especialmente para la presente invención incluyen warfarina y otros anticoagulantes, ciclosporina y otros inmunosupresores incluyendo basiliximab, agentes antifúngicos, dioxina, fenitoína, teofilina, aminofilina, litio, antibióticos aminoglicósidos, insulina, dimercaprol, mercaptopurina, fluoroquinolonas, fármacos antiepilépticos, anticonceptivos orales, fenilpropanolamina, compuestos tripanocidas, 30 vitaminas A y D, quinidina, miltefosina, terfenadina, hormonas, cisaprida, inhibidores de 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A reductasa, analgésicos narcóticos potentes tales como fentanilo y buprenorfina, muchos fármacos psicotrópicos tales como butaclamol, muchos inhibidores de la MAO, y depresores tricíclicos, y en cierto grado los barbituratos. De manera geeral, cualquier fármaco para el que se han llevado a cabo separaciones quirales con el fin de eliminar el enantiómero de bajo índice terapéutico es probable que sea un candidato preferido para esta invención. En 35 general, los fármacos con un bajo índice terapéutico (agentes anticancerígenos en particular) son buenos candidatos para aprovechar el aspecto de dosis reducida de formulaciones que contienen cristal líquido inverso, aunque existen casos (tales como quizás antihipertensores o antidepresivos) en los que la dosis se mantendrá lo más probablemente igual y se aprovechará el aspecto de duración aumentada. ondansatron, especially in conjunction with certain local anesthetics; amphotericin B; coenzyme Q10; steroids and steroidal anti-inflammatory agents; epoetin; mitoxantrone; dacarbazine; non-steroidal anti-inflammatories (e.g. salicylates, paraminophenol derivatives (e.g., acetaminophen); calcitonin; sucralfate; danazol and other steroids; megace; L-dopa; ketamine; acyclovir and other antivirals; anakinra; flavanoids (nutritional products); pheromatos) ; pentafuside; propionic acid derivatives (for example, naproxen, ibuprofen, etc.); 5 analgesics; antipyretics; neuromuscular blocking agents such as rocuronium, vecuronium, and pancuronium; antihypertensives, such as sulfinalol, oxyprenolol, hydrochlorothiazide, captopril, feline , guanazodine, cadralazine, tolonidine, pentamethonium bromide, bunazosin, ambuside, methyldopa, etc .; antitussives, such as mutamirate, etc .; sedatives (for example, benzodiazepines such as diazepam); hypnotics (for example, intravenous anesthetics and barbiturates) ; opiates; cannabinoids and proteins (for example, insulin and erythropoietin) .Of course local anesthetics are preferred. within the context of this invention, and include bupivacaine, lidocaine (which has a low therapeutic index, despite its use against ventricular arrhythmias) procaine, tetracaine, mepivacaine, etidocaine, oxybuprocaine, ***e, benzocaine, pramixinin, prilocaine, proparacaine, ropivicaine, levobupivacaine, amylocaine, dibucaine, diperodon, hexylcaine, leucinocaine, meprilcaine, chloroprocaine, dibucaine, oxybutacaine, propanocaine, propipocaine, pseudo***e, butacaine, QX-314, and related local anesthetics; dental anesthetics such as chlorobutanol, eugenol, and clove oil; and a 1: 1 eutectic mixture of lidocaine and prilocaine by weight. Antineoplastic drugs generally have narrow therapeutic reasons and may especially benefit from this invention; these include SN-38 and related camptothecins such as irinotecan; paclitaxel and related taxanes; gencitabine; colchicine; doxorubicin, idarubicin, daunorubicin and related rubicins; iludins and related ptaquilosin; filgrastima; vincristine and vinblastine; perindopril; epothilones; Photofrin and other PDT agents; 20 cyclophosphamide; 13-cis-retinoic acid; clotrimazole (for oral candidiasis); cisplatin, carboplatin, and other platinum-based drugs. In addition, other pharmaceutical compounds indicated in US Patents 6,638,537 and 6,638,621, the complete content of which is incorporated herein by reference, are suitable for incorporation into the invention described herein, and preferably in the liquid phases. reverse crystallines of the preferred embodiments; One of the examples below sets forth in detail an application of the invention for an antineoplastic agent, specifically a taxane, paclitaxel. In addition, other drugs and nutritional products that are of low therapeutic index and are especially preferred for the present invention include warfarin and other anticoagulants, cyclosporine and other immunosuppressants including basiliximab, antifungal agents, dioxin, phenytoin, theophylline, aminophylline, lithium, aminoglycoside antibiotics, Insulin, dimercaprol, mercaptopurine, fluoroquinolones, antiepileptic drugs, oral contraceptives, phenylpropanolamine, trypanocidal compounds, 30 vitamins A and D, quinidine, miltefosine, terfenadine, hormones, cisapride, 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme reductase inhibitors, analgesic potent narcotics such as fentanyl and buprenorphine, many psychotropic drugs such as butaclamol, many MAO inhibitors, and tricyclic depressants, and to some extent barbiturates. Generally speaking, any drug for which chiral separations have been carried out in order to eliminate the low therapeutic index enantiomer is likely to be a preferred candidate for this invention. In general, drugs with a low therapeutic index (anticancer agents in particular) are good candidates to take advantage of the reduced dose aspect of formulations containing inverse liquid crystal, although there are cases (such as perhaps antihypertensives or antidepressants) in which The dose will most likely remain the same and the aspect of increased duration will be used.

También debe señalarse que la presente invención puede desempeñar un papel en la facilitación del uso de 40 determinados agentes farmacéuticos activos que han caído en desuso o presentan una falta de desarrollo debido a problemas de abuso de fármacos, problemas de toxicidad o duración de la acción inaceptable, tales como la cocaína. Al cambiar la forma física y la farmacocinética del fármaco mediante el uso de esta invención, puede conservarse la eficacia farmacéutica, o mejorarse, mientras que se disuade o impide la posibilidad de su abuso. It should also be noted that the present invention may play a role in facilitating the use of certain active pharmaceutical agents that have fallen into disuse or have a lack of development due to drug abuse problems, toxicity problems or unacceptable duration of action , such as ***e. By changing the physical form and pharmacokinetics of the drug through the use of this invention, pharmaceutical efficacy can be preserved, or improved, while the possibility of its abuse is discouraged or prevented.

Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención pero no deben interpretarse como limitativos de la 45 invención. The following examples illustrate the present invention but should not be construed as limiting the invention.

EJEMPLOS EXAMPLES

Ejemplo 1. Se preparó en primer lugar una fase cúbica inversa que contenía el anestésico propofol mezclando 0,952 gramos (g) de propofol (obtenido de Albemarle Corporation), 1,308 g de agua destilada (todas las referencias al agua en esta sección significan agua destilada) y 2,756 g del tensioactivo Pluronic L122 (obtenido de Ethox 50 Corporation). Después de mezclar meticulosamente esta composición, se comprobó que el material fuera ópticamente isotrópico y de alta viscosidad. Entonces, se disolvieron 0,319 g del tensioactivo aniónico docusato de sodio (también conocido como Aerosol OT, o simplemente AOT) en 100 ml de agua. Después, se añadieron 1,088 g de la fase cúbica a un vaso de precipitados de 100 ml que contenía 20 ml de la disolución de tensioactivo, y se homogeneizó la mezcla usando un homogeneizador Brinkmann PT 10/35, después de lo cual se microfluidizó la dispersión homogeneizada en 55 un microfluidizador de alta presión modelo 110L de Microfluidics, usando tres ejecuciones de 30 segundos cada una a aproximadamente 10.000 psi. La observación en un microscopio de contraste de fase Olympus BHC demostró que se había logrado un tamaño de partícula del orden de 300 nanómetros (nm). Entonces se analizó la dispersión usando un aparato DELSA 440SX de Beckman-Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, fijado en modo de medición de potencial zeta. 60 Example 1. A reverse cubic phase containing the anesthetic propofol was first prepared by mixing 0.952 grams (g) of propofol (obtained from Albemarle Corporation), 1.308 g of distilled water (all references to water in this section mean distilled water) and 2,756 g of Pluronic L122 surfactant (obtained from Ethox 50 Corporation). After meticulously mixing this composition, it was found that the material was optically isotropic and of high viscosity. Then, 0.319 g of the sodium docusate anionic surfactant (also known as Aerosol OT, or simply AOT) was dissolved in 100 ml of water. Then, 1.088 g of the cubic phase was added to a 100 ml beaker containing 20 ml of the surfactant solution, and the mixture was homogenized using a Brinkmann PT 10/35 homogenizer, after which the dispersion was microfluidized homogenized in a Microfluidics model 110L high pressure microfluidizer, using three executions of 30 seconds each at approximately 10,000 psi. Observation in an Olympus BHC phase contrast microscope showed that a particle size of the order of 300 nanometers (nm) had been achieved. The dispersion was then analyzed using a Beckman-Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, set in zeta potential measurement mode. 60

La figura 3 muestra la distribución de potencial zeta medida resultante, usando tres ángulos de medición. En los tres ángulos, la distribución está centrada alrededor de -67 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso Figure 3 shows the resulting measured zeta potential distribution, using three measurement angles. At all three angles, the distribution is centered around -67 mV, which is a sufficiently intense zeta potential

como para aportar una dispersión estable. Debe observarse que aunque hay una propagación con respecto a la distribución, contribuciones importantes a esta propagación notificada provienen del ensanchamiento instrumental y ensanchamiento por difusión. Por tanto, la distribución es de hecho significativamente más estrecha que la indicada. Particularmente teniendo esto en cuenta, la fracción de partículas con un potencial zeta inferior a 30 mV de magnitud es bastante pequeña. 5 as to provide a stable dispersion. It should be noted that although there is a spread with respect to distribution, important contributions to this reported spread come from instrumental widening and widening by diffusion. Therefore, the distribution is in fact significantly narrower than indicated. Particularly taking this into account, the fraction of particles with a zeta potential less than 30 mV in magnitude is quite small. 5

La razón de tensioactivo (docusato) con respecto a fase cúbica en este ejemplo era de 0,06:1, y resultó una dispersión estable, con un potencial zeta promedio de -67 mV. Cuando esta razón se disminuyó a 0,02:1, manteniendo todo lo demás constante, el potencial zeta promedio se desplazó a aproximadamente -20 mV, y esa dispersión no era estable. The surfactant ratio (docusate) with respect to the cubic phase in this example was 0.06: 1, and a stable dispersion resulted, with an average zeta potential of -67 mV. When this ratio was lowered to 0.02: 1, keeping everything else constant, the average zeta potential shifted to approximately -20 mV, and that dispersion was not stable.

Ejemplo 2. El agente hipnótico y anestésico general propofol, en la cantidad 0,57 gramos, se combinó con 0,78 10 g de agua estéril y 1,65 g de Pluronic L122 (en el que la fracción en peso de cadenas de polioxietileno es del 20%), trabajando en una campana de flujo laminar. Después de mezclar esto para formar una fase cúbica inversa, se disolvieron 0,105 g de desoxicolato de sodio en 40 ml de agua estéril. Se dispersó entonces una cantidad de 2,1 g de la fase cúbica en los 40 ml de disolución, usando en primer lugar el homogeneizador Brinkmann, usando entonces el microfluidizador de Microfluidics durante un total de 15 minutos de microfluidización a alta presión. La dispersión, 15 denominada posteriormente en lo sucesivo “Lyotropic/PF1”, se filtró con un filtro de jeringa de 0,8 micras antes de su uso en las pruebas con animales descritas en el ejemplo 4 a continuación. Example 2. The hypnotic and general anesthetic agent propofol, in the amount 0.57 grams, was combined with 0.78 10 g of sterile water and 1.65 g of Pluronic L122 (in which the weight fraction of polyoxyethylene chains is 20%), working on a laminar flow hood. After mixing this to form an inverse cubic phase, 0.105 g of sodium deoxycholate was dissolved in 40 ml of sterile water. An amount of 2.1 g of the cubic phase was then dispersed in the 40 ml solution, using the Brinkmann homogenizer first, then using the Microfluidics microfluidizer for a total of 15 minutes of high pressure microfluidization. The dispersion, hereinafter referred to as "Lyotropic / PF1", was filtered with a 0.8 micron syringe filter before use in the animal tests described in example 4 below.

La figura 4 muestra la distribución de potencial zeta medida para esta dispersión. El potencial zeta promedio, concretamente de aproximadamente -48 mV, es de mayor magnitud que 30 mV y por tanto consecuente con la estabilización debida principalmente al potencial de superficie. 20 Figure 4 shows the distribution of zeta potential measured for this dispersion. The average zeta potential, specifically about -48 mV, is of greater magnitude than 30 mV and therefore consistent with stabilization due mainly to surface potential. twenty

Se preparó también una mezcla con sólo 1 ml de agua pero la misma cantidad de desoxicolato de sodio. Por tanto, todas las razones fueron las mismas que en párrafo anterior, excepto la cantidad de agua. El propósito de esto es comprobar el comportamiento de la fase en presencia de agua en exceso (esto es suficiente para proporcionar un exceso), pero sin el efecto de dispersión/dilución que viene con la razón agua:fase cúbica 20:1 normal. Esto significa que si cualquier fase laminar o L3 estuviera presente, aunque podría ser difícil de detectar en la dispersión diluida, sería 25 bastante más fácil de detectar en esta forma concentrada. Esto se analizó en un microscopio óptico de polarización Olympus BHC, y el resultado se muestra en la figura 5. A la izquierda, hay una línea gruesa de birrefringencia, que es un sólo cabello, puesto deliberadamente en el campo de visión para mostrar a qué se parecería un material birrefringente en estas condiciones óptica/fotográficas. El contraste muestra claramente que el material de esta invención no es birrefringente. Tampoco había birrefringencia cuando la muestra se cortó entre vidrio y cubreobjetos, 30 mostrando que no hay L3 presente. Además, cuando se centrifugó la muestra, no parecía tener algún signo de un L3 por separado en la muestra centrifugada, más bien pareció ser simplemente una mezcla de fase cúbica más disolución acuosa en exceso. A mixture was also prepared with only 1 ml of water but the same amount of sodium deoxycholate. Therefore, all the reasons were the same as in the previous paragraph, except the amount of water. The purpose of this is to check the behavior of the phase in the presence of excess water (this is sufficient to provide an excess), but without the dispersion / dilution effect that comes with the water: normal 20: 1 cubic phase ratio. This means that if any laminar phase or L3 were present, although it could be difficult to detect in the diluted dispersion, it would be much easier to detect in this concentrated form. This was analyzed in an Olympus BHC polarization optical microscope, and the result is shown in Figure 5. On the left, there is a thick birefringence line, which is a single hair, deliberately placed in the field of vision to show what It would resemble a birefringent material in these optical / photographic conditions. The contrast clearly shows that the material of this invention is not birefringent. There was also no birefringence when the sample was cut between glass and coverslip, 30 showing that no L3 is present. In addition, when the sample was centrifuged, it did not appear to have any sign of an L3 separately in the centrifuged sample, rather it seemed to be simply a cubic phase mixture plus excess aqueous solution.

Ejemplo 3. Se combinó propofol, en la cantidad de 0,57 gramos, con 0,78 g de agua estéril y 1,65 g de Pluronic P123 (en el que la fracción en peso de cadenas de polioxietileno es del 30%), trabajando en una campana de 35 flujo laminar. Después de mezclar esto para formar una fase cúbica inversa, se disolvieron 0,105 g de desoxicolato de sodio en 40 ml de agua estéril. Entonces se dispersó una cantidad de 2,1 g de la fase cúbica en los 40 ml de disolución, usando en primer lugar el homogeneizador Brinkmann, usando entonces el microfluidizador de Microfluidics durante un total de 15 minutos de microfluidización a alta presión. La dispersión, denominada posteriormente en lo sucesivo “Lyotropic/PF4” se filtró con un filtro de jeringa de 0,8 micras antes de usar las pruebas con animales descritas en el 40 ejemplo 4 a continuación. Análisis DELSA mostró una distribución de potencial zeta unimodal centrada en aproximadamente -36 mV. Example 3. Propofol, in the amount of 0.57 grams, was combined with 0.78 g of sterile water and 1.65 g of Pluronic P123 (in which the weight fraction of polyoxyethylene chains is 30%), working on a laminar flow hood. After mixing this to form an inverse cubic phase, 0.105 g of sodium deoxycholate was dissolved in 40 ml of sterile water. An amount of 2.1 g of the cubic phase was then dispersed in the 40 ml solution, using the Brinkmann homogenizer first, then using the Microfluidics microfluidizer for a total of 15 minutes of high pressure microfluidization. The dispersion, hereinafter referred to as "Lyotropic / PF4" was filtered with a 0.8 micron syringe filter before using the animal tests described in Example 4 below. DELSA analysis showed a distribution of unimodal zeta potential centered at approximately -36 mV.

Ejemplo 4. En este ejemplo, se dosificaron a ratas las formulaciones notificadas anteriormente en el ejemplos 2 y 3, y se encontró que estas formulaciones funcionaban mejor que una formulación de propofol a base de emulsión, comercializada actualmente, produciendo una vuelta más rápida a l consciencia normal después de la anestesia, en 45 contraposición con la vuelta más lenta observada para la marca comercializada. A un total de 18 ratas Sprague Dawley se les administró Lyotropic/PF1, Lyotropic/PF4 o Propoflo® (la formulación de propofol disponible comercialmente) mediante la vena lateral de la cola una vez a niveles de dosis que oscilaban desde 0,5 hasta 12 mg/kg en un modo de arriba a abajo. Se alojaron las ratas en jaulas de acero inoxidable con suelos de tela metálica suspendidos sobre bandejas alineadas e identificadas por un número único marcado en su cola con tinta indeleble además de una tarjeta 50 de jaula inscrita con el número del animal, número de estudio, número de grupo y nivel de dosis codificado por colores. Se mantuvieron los animales en un sala de animales de temperatura aislada (16-23ºC) y humedad (53%-71%) controlada con un suministro de aire filtrado (10-15 cambios de aire/hora) e iluminación en ciclos (12 horas diarias). Dieta para roedores certificada (5002) de PMI y agua del grifo sometida a prueba estuvieron disponibles a voluntad. Se ocultó la comida durante la noche antes de la dosificación. Se aclimataron las ratas usadas en este estudio a las 55 condiciones de laboratorio durante al menos 5 días antes de la iniciación de la fase con animales. Se seleccionaron las ratas basándose en el peso corporal y el aspecto general antes de la prueba y se asignaron al azar a los siguientes grupos: Example 4. In this example, the formulations previously reported in Examples 2 and 3 were dosed to rats, and these formulations were found to work better than an emulsion-based propofol formulation, currently marketed, producing a faster return to consciousness. normal after anesthesia, in contrast with the slowest return observed for the commercialized brand. A total of 18 Sprague Dawley rats were administered Lyotropic / PF1, Lyotropic / PF4 or Propoflo® (the commercially available propofol formulation) using the lateral tail vein once at dose levels ranging from 0.5 to 12 mg / kg in a top to bottom mode. The rats were housed in stainless steel cages with wire cloth floors suspended on lined trays and identified by a unique number marked on their tail with indelible ink in addition to a cage card 50 inscribed with the animal number, study number, number group and dose level color coded. The animals were kept in an animal room of isolated temperature (16-23 ° C) and humidity (53% -71%) controlled with a supply of filtered air (10-15 air changes / hour) and lighting in cycles (12 hours daily). PMI certified rodent diet (5002) and tap water tested were available at will. The food was hidden overnight before dosing. The rats used in this study were acclimatized to the laboratory conditions for at least 5 days before the initiation of the animal phase. Rats were selected based on body weight and general appearance before the test and were randomized to the following groups:

Número de grupo  Group number

Artículo de prueba Dosis mg/kg Conc. de dosis mg/ml N.º de ratas/nivel de dosis  Test article Dose mg / kg Conc. Of dose mg / ml No. of rats / dose level

CBF1  CBF1

Lyotropic/PF1 0,5, 1, 2, 4, 8 1 ó 10 2  Lyotropic / PF1 0.5, 1, 2, 4, 8 1 or 10 2

CBF3  CBF3

Propoflo 4, 8 10 2  Propoflo 4, 8 10 2

CBF4  CBF4

Lyotropic/PF4 2, 4, 8 10 2  Lyotropic / PF4 2, 4, 8 10 2

Para las ratas a las que se les dosificó 0,5, 1 y 2 mg/ml, se diluyó el artículo de prueba con agua estéril para inyección para una concentración de dosis final de 1 mg/ml. La concentración de dosis final para las ratas a las que se les dosificó 4 y 8 mg/ml era de 10 mg/ml.  For rats dosed 0.5, 1 and 2 mg / ml, the test article was diluted with sterile water for injection for a final dose concentration of 1 mg / ml. The final dose concentration for rats dosed 4 and 8 mg / ml was 10 mg / ml.

Se obtuvieron los pesos corporales justo antes de la administración de la dosis y se usaron como la base para la dosificación. Se observaron los animales inmediatamente después de la dosis y de manera continua durante 30 minutos, y de nuevo aproximadamente a las 1, 2 y 24 horas tras la dosis para determinar la salud general, el aspecto físico y para detectar señales de efecto clínico, incluyendo cambios de conducta. Los parámetros para la evaluación 5 incluyeron observaciones tras la dosis y observaciones macroscópicas en la necropsia. Body weights were obtained just prior to dose administration and used as the basis for dosing. The animals were observed immediately after the dose and continuously for 30 minutes, and again approximately at 1, 2 and 24 hours after the dose to determine general health, physical appearance and to detect signs of clinical effect, including behavior changes The parameters for evaluation 5 included post-dose observations and macroscopic observations at necropsy.

No se produjo mortalidad durante el periodo de observación tras la dosis de 24 horas. Los signos relevantes de efecto incluyeron ataxia, estado comatoso, actividad disminuida, y entrecerrado de párpado(s), que estuvieron todos resueltos en 24 horas tras la dosificación. En la mayoría de los casos, el tiempo del estado comatoso fue rápido tras la inyección intravenosa y generalmente aumentó de una manera dependiente de la dosis. Las observaciones 10 macroscópicas de la necropsia no revelaron hallazgos notables. En particular, no se encontraron signos de émbolos pulmonar en ninguno de los animales de prueba, incluyendo aquellos tratados con las formulaciones de dispersión de fase cúbica. There was no mortality during the observation period after the 24-hour dose. Relevant signs of effect included ataxia, comatose status, decreased activity, and squaring of eyelid (s), which were all resolved within 24 hours after dosing. In most cases, the time of comatose state was rapid after intravenous injection and generally increased in a dose-dependent manner. The macroscopic observations of the autopsy revealed no notable findings. In particular, no signs of pulmonary emboli were found in any of the test animals, including those treated with the cubic phase dispersion formulations.

De manera significativa, a los animales a los que se les dosificó Lyotropic/PF1 parecieron, para un observador entrenado en anestesiología, salir del coma con mayor claridad y “lucidez” que los animales a los que se les dosificó 15 Propoflo®. Sin desear limitarse por la teoría, se cree que esto se debió a la integración del vehículo de fase cúbica inversa no recubierta con estructuras de biomembrana en el cuerpo, dando como resultado la eliminación del vehículo como un “depósito”, o reservorio, para el fármaco. En comparación, se cree que la formulación de emulsión comercializada experimenta efectos debidos a un efecto de reservorio prolongado de las gotas de aceite. Significantly, the animals that were dosed with Lyotropic / PF1 seemed, for an observer trained in anesthesiology, to leave the coma more clearly and "lucidly" than the animals that were dosed with 15 Propoflo®. Without wishing to be limited by theory, it is believed that this was due to the integration of the reverse cubic phase vehicle not coated with biomembrane structures in the body, resulting in the removal of the vehicle as a "reservoir", or reservoir, for the drug. In comparison, it is believed that the commercialized emulsion formulation experiences effects due to a prolonged reservoir effect of the oil drops.

Los registros de peso corporal y dosificación (tabla 1), signos clínicos tras la dosis individual (tabla 2) y tiempo 20 de estado comatoso (tabla 3) se facilitan a continuación. The records of body weight and dosage (table 1), clinical signs after the individual dose (table 2) and time 20 of comatose state (table 3) are given below.

Tabla 1: Registros de peso corporal y dosificación Table 1: Body weight and dosage records

Lyotropic/PF1  Lyotropic / PF1

Prefijo n. animal: CBF  Animal prefix n.: CBF

Peso corporal (g) Dosis (mg/kg) Concentración de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml/kg)  Body weight (g) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml / kg)

1M1  1M1

259,2 0,5 1 0,5  259.2 0.5 1 0.5

1F17  1F17

222,5 0,5 1 0,5  222.5 0.5 1 0.5

1M5  1M5

265,5 1 1 1  265.5 1 1 1

1F21  1F21

221,1 1 1 1  221.1 1 1 1

1M9  1M9

265,4 2 1 2  265.4 2 1 2

1F25  1F25

231,9 2 1 2  231.9 2 1 2

1M13  1M13

273,1 4 10 0,4  273.1 4 10 0.4

1F29  1F29

235,8 4 10 0,4  235.8 4 10 0.4

1M33  1M33

299,1 8 10 0,8  299.1 8 10 0.8

1F34  1F34

203,2 8 10 0,8  203.2 8 10 0.8

Propoflo  Propoflo

Prefijo n. animal: CBF  Animal prefix n.: CBF

Peso corporal (g) Dosis (mg/kg) Concentración de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml/kg)  Body weight (g) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml / kg)

3M3  3M3

237,7 4 10 0,4  237.7 4 10 0.4

3F19  3F19

220,1 4 10 0,4  220.1 4 10 0.4

3M7  3M7

253,8 8 10 0,8  253.8 8 10 0.8

3F23  3F23

222,5 8 10 0,8  222.5 8 10 0.8

Lyotropic/PF4  Lyotropic / PF4

Prefijo n. animal: CBF  Animal prefix n.: CBF

Peso corporal (g) Dosis (mg/kg) Concentración de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml/kg)  Body weight (g) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml / kg)

4M12  4M12

275,3 2 10 0,2  275.3 2 10 0.2

4F28  4F28

229,2 2 10 0,2  229.2 2 10 0.2

4M16  4M16

271,8 4 10 0,4  271.8 4 10 0.4

4F32  4F32

242,0 4 10 0,4  242.0 4 10 0.4

4M35  4M35

283,3 8 10 0,8  283.3 8 10 0.8

4F36  4F36

215,3 8 10 0,8  215.3 8 10 0.8

Tabla 2: Signos clínicos tras la dosis individual Table 2: Clinical signs after the individual dose

Prefijo n. animal: CBF  Animal prefix n.: CBF

Artículo de prueba Dosis (mg/kg) 0-30 tras la dosifi-cación 1 hora tras la dosifi-cación 2 horas tras la dosifi-cación 24 horas tras la dosifi-cación  Test article Dose (mg / kg) 0-30 after dosing 1 hour after dosing 2 hours after dosing 24 hours after dosing

1M1  1M1

Lyotropic/PF1 0,5 AD, EP NN NN NN  Lyotropic / PF1 0.5 AD, EP NN NN NN

1F17  1F17

Lyotropic/PF1 0,5 AD, EP NN NN NN  Lyotropic / PF1 0.5 AD, EP NN NN NN

1M5  1M5

Lyotropic/PF1 1 AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 1 AD NN NN NN

1F21  1F21

Lyotropic/PF1 1 AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 1 AD NN NN NN

1M9  1M9

Lyotropic/PF1 2 AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 2 AD NN NN NN

1F25  1F25

Lyotropic/PF1 2 AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 2 AD NN NN NN

1M13  1M13

Lyotropic/PF1 4 CT, AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 4 CT, AD NN NN NN

1F29  1F29

Lyotropic/PF1 4 CT, AD NN NN NN  Lyotropic / PF1 4 CT, AD NN NN NN

1M33  1M33

Lyotropic/PF1 8 AT, CT NN NN NN  Lyotropic / PF1 8 AT, CT NN NN NN

1F34  1F34

Lyotropic/PF1 8 AT, CT NN NN NN  Lyotropic / PF1 8 AT, CT NN NN NN

3M3  3M3

Propoflo 4 AT NN NN NN  Propoflo 4 AT NN NN NN

3F19  3F19

Propoflo 4 AT, CT NN NN NN  Propoflo 4 AT, CT NN NN NN

3M7  3M7

Propoflo 8 AT, CT NN NN NN  Propoflo 8 AT, CT NN NN NN

3F23  3F23

Propoflo 8 AT, CT NN NN NN  Propoflo 8 AT, CT NN NN NN

4M12  4M12

Lyotropic/PF4 2 AD NN NN NN  Lyotropic / PF4 2 AD NN NN NN

4F28  4F28

Lyotropic/PF4 2 AD NN NN NN  Lyotropic / PF4 2 AD NN NN NN

4M16  4M16

Lyotropic/PF4 4 AT, AD AD NN NN  Lyotropic / PF4 4 AT, AD AD NN NN

4F32  4F32

Lyotropic/PF4 4 AT, CT NN NN NN  Lyotropic / PF4 4 AT, CT NN NN NN

4M35  4M35

Lyotropic/PF4 8 AT, CT, AD NN NN NN  Lyotropic / PF4 8 AT, CT, AD NN NN NN

4F36  4F36

Lyotropic/PF4 8 AT, CT NN NN NN  Lyotropic / PF4 8 AT, CT NN NN NN

Explicación de las observaciones: AT = ataxia CT = estado comatoso AD = actividad disminuida EP = entrecerrado de párpado(s) NA = no aplicable NN = no notable Justo antes de la necropsia  Explanation of the observations: AT = ataxia CT = comatose state AD = decreased activity EP = eyelid interlock (s) NA = not applicable NN = not noticeable  Just before necropsy

Tabla 3: Duración del estado comatoso Table 3: Duration of comatose state

Prefijo n. animal: CBF  Animal prefix n.: CBF

Artículo de prueba Dosis (mg/kg) Tiempo de estado comatoso (min)  Test article Dose (mg / kg) Comatose state time (min)

1M13  1M13

Lyotropic/PF1 4 3  Lyotropic / PF1 4 3

1F29  1F29

Lyotropic/PF1 4 4  Lyotropic / PF1 4 4

1M33  1M33

Lyotropic/PF1 8 4,5  Lyotropic / PF1 8 4,5

1F34  1F34

Lyotropic/PF1 8 5,5  Lyotropic / PF1 8 5.5

3F19  3F19

Propoflo 4 1  Propoflo 4 1

3M7  3M7

Propoflo 8 5  Propoflo 8 5

3F23  3F23

Propoflo 8 5,5  Propoflo 8 5.5

4M35  4M35

Lyotropic/PF4 8 4  Lyotropic / PF4 8 4

4F36  4F36

Lyotropic/PF4 8 8  Lyotropic / PF4 8 8

4F32  4F32

Lyotropic/PF4 4 2  Lyotropic / PF4 4 2

Ejemplo 5. Se preparó una fase líquido-cristalina cúbica inversa mezclando meticulosamente 0,962 g de propofol, 0,706 g de agua y 1,329 g de fosfatidilcolina de soja (de lípidos polares Avanti). Se puso una cantidad de 1,002 g de esta fase cúbica en un vaso de precipitados de 100 ml que contenía 20 ml de docusato de sodio acuoso (Aerosol 5 OT), en el que la razón de docusato con respecto a fase cúbica era de 0,06:1. Se homogeneizó la mezcla a alta velocidad durante 45 segundos, entonces se microfluidizó durante 6 minutos, produciendo una dispersión fina, con una población submicrométrica sustancial. Esto se analizó con el instrumento DELSA y se encontró que tenía un potencial zeta promedio de aproximadamente -67 mV, tal como se muestra en la figura 6. Debe observarse que en las condiciones (en particular, de pH) usadas, la fase cúbica de fosfatidilcolina/propofol/agua estaría, como en los ejemplos 10 anteriores, sustancialmente sin carga, de manera que se requiere el docusato para lograr una dispersión de partículas de fase cúbica de carga estabilizada. En efecto, es imposible dispersar esta fase cúbica sin el uso de un compuesto cargado, desasociado a bicapa incluso a las mayores velocidades de cizallamiento posibles con esta instrumentación. Rápidamente después de cualquier intento, sin importar cómo de enérgico, para dispersar esta fase cúbica, el material de fase cúbica se aglomera de vuelta en agrupaciones macroscópicas. Todos los componentes (excepto el fármaco) en 15 esta formulación están en la lista de la FDA de excipientes aprobados para productos inyectables. Example 5. A reverse liquid-crystalline crystalline phase was prepared by meticulously mixing 0.962 g of propofol, 0.706 g of water and 1.329 g of soy phosphatidylcholine (from Avanti polar lipids). An amount of 1.002 g of this cubic phase was placed in a 100 ml beaker containing 20 ml of aqueous sodium docusate (Aerosol 5 OT), in which the docusate ratio with respect to the cubic phase was 0, 06: 1. The mixture was homogenized at high speed for 45 seconds, then microfluidized for 6 minutes, producing a fine dispersion, with a substantial submicron population. This was analyzed with the DELSA instrument and found to have an average zeta potential of approximately -67 mV, as shown in Figure 6. It should be noted that under the conditions (in particular, of pH) used, the cubic phase of Phosphatidylcholine / propofol / water would be, as in the previous examples, substantially unloaded, so that docusate is required to achieve a dispersion of stabilized charge cubic phase particles. Indeed, it is impossible to disperse this cubic phase without the use of a charged, disassociated bilayer compound even at the highest possible shear rates with this instrumentation. Quickly after any attempt, no matter how energetic, to disperse this cubic phase, the cubic phase material clusters back into macroscopic clusters. All components (except the drug) in this formulation are on the FDA list of approved excipients for injectable products.

Ejemplo 6. Se dispersaron otros 1,002 g de la fase cúbica del ejemplo 5 en 20 ml de una disolución de cloruro de benzalconio usando la misma metodología que en el ejemplo 5. Se midió entonces el potencial zeta promedio y se encontró que era de aproximadamente +74 mV, tal como se muestra en la figura 7. Example 6. Another 1.002 g of the cubic phase of Example 5 was dispersed in 20 ml of a solution of benzalkonium chloride using the same methodology as in Example 5. The average zeta potential was then measured and found to be approximately + 74 mV, as shown in Figure 7.

Ejemplo 7. El anestésico local bupivacaína, en su forma de base libre, y en la cantidad de 0,176 g, se combinó con 0,700 g de linalool, 0,333 g de aceite de sándalo, 1,150 g de agua y 2,65 g del tensioactivo Pluronic L122. La fase cúbica resultante se compone por tanto de excipientes de toxicidad muy baja; incluso el aceite de sándalo ha mostrado ser de baja toxicidad por vías inyectables (aunque no está aprobado en sentido estricto para su uso en productos inyectables). Usando la metodología de los ejemplos anteriores, se dispersó esta fase cúbica usando docusato de sodio 5 (a una razón de 0,06:1), y se tomó la medición del potencial zeta. La figura 8 muestra el resultado, que indica una distribución centrada alrededor de -64 mV, y casi todas las partículas más negativas que -30 mV. Example 7. The local anesthetic bupivacaine, in its free base form, and in the amount of 0.176 g, was combined with 0.700 g of linalool, 0.333 g of sandalwood oil, 1,150 g of water and 2.65 g of the Pluronic surfactant L122. The resulting cubic phase is therefore composed of excipients of very low toxicity; Even sandalwood oil has shown to be of low toxicity by injectable routes (although it is not strictly approved for use in injectable products). Using the methodology of the previous examples, this cubic phase was dispersed using sodium docusate 5 (at a rate of 0.06: 1), and the zeta potential measurement was taken. Figure 8 shows the result, which indicates a distribution centered around -64 mV, and almost all particles more negative than -30 mV.

Ejemplo 8. Se dispersó la fase cúbica del ejemplo 7, usando métodos físicos similares, usando el tensioactivo catiónico cloruro de benzalconio. La distribución de potencial zeta resultante, mostrada en la figura 9, estaba centrada alrededor de +55 mV, para la dispersión de partículas de carga estabilizada. 10 Example 8. The cubic phase of Example 7 was dispersed, using similar physical methods, using the cationic surfactant benzalkonium chloride. The resulting zeta potential distribution, shown in Figure 9, was centered around +55 mV, for the dispersion of stabilized charge particles. 10

Ejemplo 9. Se preparó una fase cúbica que contenía el agente activo vitamina E mezclando 1,12 g de vitamina E (alfa-tocoferol), 1,593 g de fosfatidilcolina de soja y 0,788 g de agua. Esto se dispersó usando cloruro de benzalconio, y se registró un promedio de potencial zeta de aproximadamente +70 mV. Example 9. A cubic phase containing the active agent vitamin E was prepared by mixing 1.12 g of vitamin E (alpha-tocopherol), 1,593 g of soy phosphatidylcholine and 0.788 g of water. This was dispersed using benzalkonium chloride, and an average zeta potential of approximately +70 mV was recorded.

Ejemplo 10. Se agitó vigorosamente la misma fase cúbica que en el ejemplo 9 junto con una décima parte de su peso en dantroleno sódico, un relajante de músculo esquelético. Esto se dispersó entonces en cloruro de 15 benzalconio acuoso, con una razón 20:1 de agua con respecto a fase cúbica, y una razón 0,06:1 de tensioactivo con respecto a fase cúbica. Esto se homogeneizó a alta velocidad durante 3 minutos. Example 10. The same cubic phase as in example 9 was vigorously stirred together with one tenth of its weight in dantrolene sodium, a skeletal muscle relaxant. This was then dispersed in aqueous benzalkonium chloride, with a 20: 1 ratio of water to the cubic phase, and a 0.06: 1 ratio of surfactant to the cubic phase. This was homogenized at high speed for 3 minutes.

Potencial zeta es particularmente significativo en este caso, puesto que el fármaco es aniónico, mientras que la fase cúbica dispersa (como en el ejemplo 9) es catiónica. Por tanto, si está presentedantroleno “libre” entonces aparecerá un pico con un potencial zeta negativo, junto con el pico de las partículas estabilizadas de manera catiónica, 20 indicando que no se han producido partículas de esta invención. Zeta potential is particularly significant in this case, since the drug is anionic, while the dispersed cubic phase (as in example 9) is cationic. Therefore, if "free" is present, then a peak with a negative zeta potential will appear, along with the peak of the cationically stabilized particles, indicating that no particles of this invention have been produced.

De hecho, se analizó la dispersión de color intenso (por el dantroleno sódico) con el DELSA, y no se encontró ningún pico a potencial zeta negativo. La figura 10 muestra el análisis, con un único pico (en los cuatro ángulos) centrado en +72 mV. Por tanto, se produjeron en efecto partículas de la presente invención, con cristales de tamaño nanométrico del relajante de músculo esquelético escasamente soluble estabilizados al estar incluidos en una partícula 25 de fase cúbica estabilizada de manera catiónica de la presente invención. In fact, the intense color dispersion (by sodium dantrolene) was analyzed with the DELSA, and no peak was found at negative zeta potential. Figure 10 shows the analysis, with a single peak (at all four angles) centered at +72 mV. Thus, particles of the present invention were indeed produced, with nanometer-sized crystals of the poorly soluble skeletal muscle relaxant stabilized by being included in a cationically stabilized cubic phase particle 25 of the present invention.

Se hizo un intento de dispersar dantroleno sódico con sólo el cloruro de benzalconio, sin usar la fase cúbica o cualquier otro cristal líquido, con el fin de evaluar la importancia de la fase cúbica en este ejemplo. Por tanto, se disolvió dantroleno sódico en la fase acuosa a la misma concentración, lo que dio como resultado una razón 0,06:1 de tensioactivo con respecto a dantroleno sódico, y se aplicó el mismo protocolo de homogeneización. La medición DELSA, 30 mostrada en la figura 11, muestra claramente un potencial zeta mucho menor que en el caso en el que se usó la fase cúbica. Esta carga enormemente aumentada en el caso de la partícula de fase cúbica está probablemente relacionada con la carga de benzalconio mucho mayor posible con la fase cúbica (tal como se expresa en la superficie de partícula) en comparación con la superficie de dantroleno sódico. An attempt was made to disperse sodium dantrolene with only benzalkonium chloride, without using the cubic phase or any other liquid crystal, in order to assess the importance of the cubic phase in this example. Therefore, sodium dantrolene was dissolved in the aqueous phase at the same concentration, which resulted in a 0.06: 1 ratio of surfactant to sodium dantrolene, and the same homogenization protocol was applied. The DELSA measurement, 30 shown in Figure 11, clearly shows a much lower zeta potential than in the case in which the cubic phase was used. This greatly increased charge in the case of the cubic phase particle is probably related to the much greater possible benzalkonium charge with the cubic phase (as expressed in the particle surface) compared to the surface of sodium dantrolene.

El dantroleno sódico se usa actualmente en el tratamiento de hipertermia maligna, una situación de crisis, 35 potencialmente mortal. La formulación comercializada actualmente debe reconstituir un vial cada vez, requiriéndose hasta 36 viales para un único tratamiento. Se han notificado muertes de pacientes causadas por el médico que no pudo reconstituir e inyectar estos muchos viales durante la crisis MH creciente. La presente invención puede proporcionar medios mediante los cuales podría inyectarse una dispersión concentrada, estable del fármaco en lugar de la formulación actual. Aunque están disponibles otros métodos de estabilización de nanocristales de compuestos tales 40 como dantroleno, la presente invención puede tener ventajas sobre éstos en casos en los que las propiedades de potenciación de la absorción de la presente invención son deseables. Todos los componentes de esta formulación son farmacéuticamente aceptables para inyección intravenosa. Dantrolene sodium is currently used in the treatment of malignant hyperthermia, a crisis situation, potentially fatal. The formulation currently marketed must reconstitute one vial at a time, requiring up to 36 vials for a single treatment. There have been reported deaths of patients caused by the doctor who could not reconstitute and inject these many vials during the growing MH crisis. The present invention can provide means by which a stable, concentrated dispersion of the drug could be injected instead of the current formulation. Although other methods of stabilizing nanocrystals of compounds such as dantrolene are available, the present invention may have advantages over these in cases where the absorption enhancement properties of the present invention are desirable. All components of this formulation are pharmaceutically acceptable for intravenous injection.

Ejemplo 11. Se dispersó una cantidad de 0,999 gramos de la fase cúbica L122/propofol/agua usada en el ejemplo 1 en una disolución de dodecilsulfato de sodio (SDS), a una razón de SDS:fase cúbica de 0,06:1. Esto produjo 45 una dispersión estable de micropartículas con un potencial zeta centrado a aproximadamente -63 mV, tal como se muestra en la figura 12. SDS no es sólo un tensioactivo de muy baja toxicidad, que está aprobado para su uso en productos inyectables, sino que también es uno de los tensioactivos disponibles más estudiado y caracterizado, sino el que más. Example 11. An amount of 0.999 grams of the cubic phase L122 / propofol / water used in example 1 was dispersed in a solution of sodium dodecyl sulfate (SDS), at a rate of SDS: cubic phase of 0.06: 1. This produced a stable dispersion of microparticles with a zeta potential centered at approximately -63 mV, as shown in Figure 12. SDS is not only a very low toxicity surfactant, which is approved for use in injectable products, but which is also one of the most studied and characterized surfactants available, but the most.

Ejemplo 12. El fármaco antineoplásico paclitaxel, en la cantidad de 40 mg, se combinó con 0,372 g de aceite 50 de sándalo y 0,725 g de aldehído de fresa, entonces se calentó para disolver el paclitaxel. Esto se combinó entonces con 1,855 g de Pluronic L122 (HLB=4) y 0,905 g de agua, y se mezcló para formar una fase cúbica inversa. Esto se dispersó entonces en una disolución acuosa de docusato de sodio en una razón de docusato:fase cúbica de 0,06:1, homogeneizando a alta velocidad durante 30 segundos, entonces se microfluidizó durante 1,5 minutos, y finalmente se centrifugó durante 5 minutos en una centrífuga de mesa a aproximadamente 5.000 rpm. El análisis DELSA (usando una 55 corriente de 0,18 mA, y un desplazamiento de frecuencia de 500 Hz) indicó entonces una distribución de potencial zeta centrado alrededor de -53 mV, tal como se muestra en la figura 13. Esta formulación de paclitaxel libre de Cremophor Example 12. The paclitaxel antineoplastic drug, in the amount of 40 mg, was combined with 0.372 g of sandalwood oil and 0.725 g of strawberry aldehyde, then heated to dissolve paclitaxel. This was then combined with 1,855 g of Pluronic L122 (HLB = 4) and 0.905 g of water, and mixed to form an inverse cubic phase. This was then dispersed in an aqueous solution of sodium docusate in a docusate: cubic phase ratio of 0.06: 1, homogenizing at high speed for 30 seconds, then microfluidized for 1.5 minutes, and finally centrifuged for 5 minutes in a tabletop centrifuge at approximately 5,000 rpm. DELSA analysis (using a current of 0.18 mA, and a frequency shift of 500 Hz) then indicated a zeta potential distribution centered around -53 mV, as shown in Figure 13. This paclitaxel formulation Cremophor free

podría ser bastante adecuada para varias vías de administración, incluyendo instilación vesical, intraperitoneal, oral, o posiblemente mediante inyección. It could be quite suitable for several routes of administration, including bladder, intraperitoneal, oral instillation, or possibly by injection.

Ejemplo 13. Se preparó en primer lugar una fase cúbica inversa que contenía anestésico propofol mezclando 0,9501 gramos de propofol (obtenido de Albemarle Corporation), 1,2970 g de agua destilada y 2,7575 g del tensioactivo Pluronic P-123 (un tensioactivo de poloxámero obtenido de BASF Corporation). Después de un mezclado meticuloso, se 5 comprobó la composición para asegurarse de que tenía alta viscosidad y era ópticamente isotrópica. Se cargó entonces en una jeringa desechable de 10 ml para facilitar la pesada de una muestra de 1 g . En otro vaso de precipitados, se disolvieron 0,3192 g de Aerosol OT (AOT, también denominado docusato de sodio) en 100 ml de agua destilada. Se puso una varilla de agitación en el vaso de precipitados y se agitó la disolución durante 1 hora usando un aparato Fischer Thermix modelo 210T. Se añadió entonces una cantidad de 1,0199 g de la fase cúbica a la disolución de AOT y 10 agua en una cantidad equivalente a 0,0638 g de AOT y 20,0 g de agua destilada. Esto dio como resultado una razón de tensioactivo con respecto a fase cúbica de 0,06:1 y una razón de agua destilada con respecto a fase cúbica de 20:1. Se homogeneizó la mezcla usando un homogeneizador Brinkman PT 10/35 en modo alto durante 20 segundos. La dispersión homogeneizada se microfluidizó entonces con un aparato M110L de Microfluidics durante 3 ejecuciones, cada una de las cuales duró 30 segundos. Después, se recogió la dispersión en un tubo de ensayo y se centrifugó 15 durante 2 minutos usando una centrífuga de mesa. La dispersión se visualizó bajo un microscopio Olympus BHC para comprobar el tamaño y el aspecto de partícula. Example 13. A reverse cubic phase containing propofol anesthetic was first prepared by mixing 0.9501 grams of propofol (obtained from Albemarle Corporation), 1.2970 g of distilled water and 2.7575 g of Pluronic P-123 surfactant (a poloxamer surfactant obtained from BASF Corporation). After thorough mixing, the composition was checked to ensure that it had high viscosity and was optically isotropic. It was then loaded into a 10 ml disposable syringe to facilitate weighing a 1 g sample. In another beaker, 0.3192 g of Aerosol OT (AOT, also called sodium docusate) was dissolved in 100 ml of distilled water. A stir bar was placed in the beaker and the solution was stirred for 1 hour using a Fischer Thermix model 210T apparatus. An amount of 1.0199 g of the cubic phase was then added to the AOT solution and 10 water in an amount equivalent to 0.0638 g of AOT and 20.0 g of distilled water. This resulted in a surfactant ratio with respect to the cubic phase of 0.06: 1 and a distilled water ratio with respect to the cubic phase of 20: 1. The mixture was homogenized using a Brinkman PT 10/35 homogenizer in high mode for 20 seconds. The homogenized dispersion was then microfluidized with a Microfluidics M110L apparatus for 3 runs, each lasting 30 seconds. Then, the dispersion was collected in a test tube and centrifuged for 2 minutes using a tabletop centrifuge. The dispersion was visualized under an Olympus BHC microscope to check particle size and appearance.

Se analizó entonces la dispersión usando el aparato DELSA 440SX de Beckmann-Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, con las movilidades electroforéticas convertidas en potenciales zeta mediante las ecuaciones convencionales, tal como se observa en la figura 14. Se notificaron cuatro ángulos de medición 20 de dispersión, con la distribución en cada caso centrada alrededor de menos 39 mV. Este análisis de movilidad electroforética se ejecutó a un desplazamiento de frecuencia, de acuerdo con la metodología DELSA de Beckmann-Coulter, de 500 Hz, con un tiempo de ejecución de 180 segundos. El docusato aparece en la Guía de Principios Inactivos de la FDA de 1996 como aprobable para su uso en productos inyectables. The dispersion was then analyzed using the Beckmann-Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, with electrophoretic mobilities converted into zeta potentials by conventional equations, as shown in Figure 14. Four angles were reported 20 measurement of dispersion, with the distribution in each case centered around minus 39 mV. This electrophoretic mobility analysis was performed at a frequency shift, according to the Beckmann-Coulter DELSA methodology of 500 Hz, with a run time of 180 seconds. Docusate appears in the 1996 FDA Inactive Principles Guide as approvable for use in injectable products.

Ejemplo 14. Usando métodos similares a los empleados en la preparación del ejemplo 13, se añadió una 25 cantidad de 1,0135 gramos de la fase cúbica idéntica a la del ejemplo 13 a un equivalente de 0,0638 g de dodecilsulfato de sodio (SDS) (obtenido de EM Science Corporation) y 20,0 g de agua destilada tal como se describió en el ejemplo 13. Example 14. Using methods similar to those used in the preparation of example 13, an amount of 1.0135 grams of the cubic phase identical to that of example 13 was added to an equivalent of 0.0638 g of sodium dodecyl sulfate (SDS ) (obtained from EM Science Corporation) and 20.0 g of distilled water as described in example 13.

De nuevo, usando métodos similares al ejemplo 13, la dispersión se homogeneizó, se microfluidizó y se analizó bajo el microscopio. Se encontró que el potencial zeta era de menos 41 mV, tal como se midió desde cuatro ángulos a 30 500 Hz durante 180 segundos. Debe observarse que se ha usado SDS en el producto farmacéutico inyectable Proleukin. Again, using methods similar to example 13, the dispersion was homogenized, microfluidized and analyzed under a microscope. The zeta potential was found to be less than 41 mV, as measured from four angles at 30,500 Hz for 180 seconds. It should be noted that SDS has been used in the injectable pharmaceutical product Proleukin.

Ejemplo 15. De nuevo, usando métodos similares a los empleados en el ejemplo 13, se añadió una cantidad de 1,0001 gramos de la fase cúbica idéntica a la del ejemplo 13 a un equivalente de 0,0638 g de cloruro de benzalconio (obtenido de Sigma Corporation) y 20,0 g de agua destilada tal como se describió en el ejemplo 13. Se ha usado cloruro 35 de benzalconio en el producto inyectable Celestrone Soluspan. Example 15. Again, using methods similar to those employed in Example 13, an amount of 1,0001 grams of the identical cubic phase to that of Example 13 was added to an equivalent of 0.0638 g of benzalkonium chloride (obtained from Sigma Corporation) and 20.0 g of distilled water as described in example 13. Benzalkonium chloride has been used in the Celestrone Soluspan injectable product.

Siguiendo los métodos descritos en el ejemplo 13, la dispersión se homogeneizó, se microfluidizó y se analizó bajo el microscopio. Se encontró que el potencial zeta para esta dispersión era de 36 mV y por tanto indicaba estabilidad de carga. Se ejecutó a 500 Hz durante 180 segundos desde cuatro ángulos de dispersión diferentes. Following the methods described in Example 13, the dispersion was homogenized, microfluidized and analyzed under a microscope. It was found that the zeta potential for this dispersion was 36 mV and therefore indicated load stability. It was run at 500 Hz for 180 seconds from four different dispersion angles.

Ejemplo 16. En este caso se usaron los mismos métodos que se usaron para el ejemplo anterior para preparar 40 una fase cúbica similar excepto que se usaron 0,9520 gramos de Pluronic L-122 en lugar de los 0,9501 g de Pluronic 123. Se añadió entonces una cantidad de 0,9989 g de la fase cúbica a 0,0638 g de cloruro de benzalconio (obtenido de Sigma Corporation) y 20,0 g de agua destilada. Example 16. In this case, the same methods that were used for the previous example were used to prepare a similar cubic phase except that 0.9520 grams of Pluronic L-122 were used instead of 0.9501 g of Pluronic 123. An amount of 0.9898 g of the cubic phase was then added to 0.0638 g of benzalkonium chloride (obtained from Sigma Corporation) and 20.0 g of distilled water.

Se usaron métodos similares a los utilizados en el ejemplo 13 para microfluidizar, homogeneizar y analizar la dispersión bajo el microscopio. El potencial zeta de la dispersión, tomado en cuatro ángulos diferentes y ejecutado a 500 45 Hz durante 180 segundos, promedió +47 mV, lo que indicó estabilidad de carga de acuerdo con la presente invención. Methods similar to those used in Example 13 were used to microfluidize, homogenize and analyze the dispersion under the microscope. The zeta potential of the dispersion, taken at four different angles and executed at 500 45 Hz for 180 seconds, averaged +47 mV, which indicated load stability in accordance with the present invention.

Ejemplo 17. Este ejemplo ilustra el método de producción tratado anteriormente, en el que se preparó y dispersó una fase líquida de baja viscosidad precursora de la fase líquido-cristalina inversa, y las partículas se convirtieron en la fase líquido-cristalina tras el contacto con agua. Se preparó en primer lugar una fase L2 mezclando 2,2009 gramos de propofol, 1,9883 gramos de alfa-tocoferol y 12,0964 gramos del tensioactivo de poloxámero Ethox L-50 122 en un tubo de ensayo de 50 ml y agitando con vórtex hasta que estuvo todo en una fase. La fase L2 líquida que se formó era transparente pero amarilla y de baja viscosidad. En un vaso de precipitados de 150 ml, se pusieron 0,9032 gramos de ácido desoxicólico de sodio, 2,0017 gramos de glicina, 70 ml de agua destilada y 13,345 gramos de la fase L2. Esto se homogeneizó hasta que el material se dispersó. Bajo observación en contraste de interferencia diferencial (DIC) en un microscopio Polyvar de Reichert-Jung, fue evidente que la fase L2 se había convertido en una fase cúbica 55 viscosa y rígida, con partículas angulares de forma irregular en contraposición con gotas líquidas que son generalmente bastante redondas. Esto se homogeneizó entonces adicionalmente durante 60 minutos más, y el tamaño de partícula entonces fue lo suficientemente pequeño como para que el material pudiera filtrarse fácilmente a través de un filtro de Example 17. This example illustrates the production method discussed above, in which a liquid phase of low precursor viscosity of the inverse liquid-crystalline phase was prepared and dispersed, and the particles became the liquid-crystalline phase after contact with Water. An L2 phase was first prepared by mixing 2,2009 grams of propofol, 1,9883 grams of alpha-tocopherol and 12.0964 grams of the Ethox L-50 122 poloxamer surfactant in a 50 ml test tube and vortexing until it was all in one phase. The liquid phase L2 that formed was transparent but yellow and of low viscosity. In a 150 ml beaker, 0.9032 grams of sodium deoxycholic acid, 2.0017 grams of glycine, 70 ml of distilled water and 13.345 grams of the L2 phase were placed. This was homogenized until the material dispersed. Under differential interference contrast (DIC) observation on a Reichert-Jung Polyvar microscope, it was evident that the L2 phase had become a viscous and rigid cubic phase, with irregularly shaped angular particles as opposed to liquid drops that are Generally quite round. This was then further homogenized for an additional 60 minutes, and the particle size was then small enough that the material could easily seep through a filter of

0,22 micras. La distribución de potencial zeta medida tal como se describió anteriormente fue unimodal y centrada en aproximadamente -34 mV. 0.22 microns The distribution of zeta potential measured as described above was unimodal and centered at approximately -34 mV.

Ejemplo 18. Se prepararon cuatro fases cúbicas inversas con propofol (Albemarle Corporation), alfa-tocoferol (vitamina E, de Aldrich Chemical Company), agua destilada y Pluronic L122 (Ethox Corporation). Se combinaron el propofol y la vitamina E en diversas razones en peso hasta un 19% total, el agua se mantuvo constante al 26% y el 5 Pluronic L-122 al 55%. Se combinaron los componentes en tubos de ensayo de 8 ml y se mezclaron meticulosamente hasta ser ópticamente isotrópicos y de alta viscosidad. Se preparó un total de tres gramos de cada una de las siguientes composiciones (todos los pesos figuran en la lista en gramos): Example 18. Four inverse cubic phases were prepared with propofol (Albemarle Corporation), alpha-tocopherol (vitamin E, from Aldrich Chemical Company), distilled water and Pluronic L122 (Ethox Corporation). Propofol and vitamin E were combined in various reasons by weight up to a total of 19%, the water was kept constant at 26% and the Pluronic L-122 at 55%. The components were combined in 8 ml test tubes and mixed thoroughly to be optically isotropic and high viscosity. A total of three grams of each of the following compositions was prepared (all weights are listed in grams):

10% de propofol 13% de propofol 16% de propofol 19% de propofol  10% propofol 13% propofol 16% propofol 19% propofol

Propofol  Propofol

0,302 0,388 0,478 0,570  0.302 0.388 0.478 0.570

Vitamina E  Vitamin E

0,273 0,189 0,105 0  0.273 0.189 0.105 0

Agua destilada  Distilled water

0,777 0,792 0,786 0,784  0,777 0,792 0,786 0,784

Pluronic L122  Pluronic L122

1,657 1,649 1,658 1,647  1,657 1,649 1,658 1,647

Se extendió una capa delgada de cada fase cúbica inversa sobre la pared interior de cuatro tubos de ensayo, y 10 se añadió una cantidad apropiada de solvente (o bien agua destilada o bien disolución al 2,2% de glicina, esta última preparada añadiendo 48,9 ml de agua destilada a 1,1 g de glicina, Spectrum Chemical Company) a cada tubo para obtener una concentración de propofol global del 1% o del 2%. Por tanto, resultaron las dieciséis combinaciones siguientes: A thin layer of each inverse cubic phase was spread over the inner wall of four test tubes, and an appropriate amount of solvent was added (either distilled water or 2.2% glycine solution, the latter prepared by adding 48 , 9 ml of distilled water to 1.1 g of glycine, Spectrum Chemical Company) to each tube to obtain a global propofol concentration of 1% or 2%. Therefore, the following sixteen combinations resulted:

Concentración de propofol global del 1%  1% global propofol concentration

Q Disol. de glicina Q agua  Q Dissol. of glycine Q water

10% de propofol  10% propofol

0,51 4,50 0,51 4,50  0.51 4.50 0.51 4.50

13% de propofol  13% propofol

0,41 4,65 0,41 4,65  0.41 4.65 0.41 4.65

16% de propofol  16% propofol

0,32 4,69 0,31 4,71  0.32 4.69 0.31 4.71

19% de propofol  19% propofol

0,29 4,72 0,28 4,73  0.29 4.72 0.28 4.73

Concentración de propofol global del 2%  2% global propofol concentration

Q Disol. de glicina Q agua  Q Dissol. of glycine Q water

10% de propofol  10% propofol

1,01 4,08 1,01 4,06  1.01 4.08 1.01 4.06

13% de propofol  13% propofol

0,77 4,32 0,78 4,28  0.77 4.32 0.78 4.28

16% de propofol  16% propofol

0,62 4,38 0,60 4,42  0.62 4.38 0.60 4.42

19% de propofol  19% propofol

0,53 4,48 0,55 4,48  0.53 4.48 0.55 4.48

15  fifteen

Se permitió que se asentara cada tubo durante la noche a temperatura ambiente (aproximadamente 23 grados centígrados), tiempo durante el cual las fases cúbicas inversas rodeadas por agua se volvieron blancas opacas, mientras que las fases cúbicas inversas rodeadas por glicina permanecieron claras y transparentes. Se invirtió entonces cada tubo dos veces, y el contenido líquido se transfirió a matraces volumétricos de 50 ml separados y se enrasaron con fase móvil (50% de acetonitrilo, 40% de agua, 10% de metanol, 0,5% de ácido fosfórico, todos disolventes de calidad 20 para HPLC). Se mezclaron meticulosamente las muestras y se transfirió una porción de cada una a viales de HPLC separados. Se preparó una disolución patrón disolviendo 59,4 mg de reactivo propofol en 100 ml de fase móvil, mezclando bien, y transfiriendo a viales. Se preparó una disolución de comprobación para el patrón de la misma manera, usando 52,1 mg de propofol. Each tube was allowed to settle overnight at room temperature (approximately 23 degrees Celsius), during which time the reverse cubic phases surrounded by water turned opaque white, while the reverse cubic phases surrounded by glycine remained clear and transparent. Each tube was then inverted twice, and the liquid content was transferred to separate 50 ml volumetric flasks and flush with mobile phase (50% acetonitrile, 40% water, 10% methanol, 0.5% phosphoric acid , all solvents of quality 20 for HPLC). The samples were mixed thoroughly and a portion of each was transferred to separate HPLC vials. A standard solution was prepared by dissolving 59.4 mg of propofol reagent in 100 ml of mobile phase, mixing well, and transferring to vials. A test solution for the standard was prepared in the same manner, using 52.1 mg of propofol.

Se analizaron los patrones y las muestras en un sistema HPLC SCL-10A VP de Shimadzu con las siguientes 25 condiciones cromatográficas: columna C18 Phenomenex Luna de 25 cm x 4,6 mm, velocidad de flujo isocrática de 2,0 Patterns and samples were analyzed in a Shimadzu HPLC SCL-10A VP system with the following 25 chromatographic conditions: Phenomenex Luna C18 column 25 cm x 4.6 mm, isocratic flow rate 2.0

ml/minuto, volumen de inyección de 20 ul, duración de ejecución de 14 minutos (elución de propofol a los 12 minutos), y detección UV a 270 nm. ml / minute, injection volume of 20 ul, run time of 14 minutes (elution of propofol at 12 minutes), and UV detection at 270 nm.

El sistema demostró ser adecuado para la cuantificación con una desviación patrón relativa inferior al 0,5% de cinco inyecciones reproducidas de la disolución patrón y todas las inyecciones de patrón posteriores. Además, el patrón de comprobación se sometió a ensayo al 100% de la disolución patrón. 5 The system proved to be suitable for quantification with a relative standard deviation of less than 0.5% of five reproduced injections of the standard solution and all subsequent standard injections. In addition, the test standard was tested at 100% of the standard solution. 5

Se calculó la concentración de propofol en la fase acuosa con la siguiente ecuación: The concentration of propofol in the aqueous phase was calculated with the following equation:

propofolmlugxmldeovolumétricmatrazacuosadisolucióndevolumenmlmgpatróndisoldeconcxpromediopatróndelpicodeáreamuestraladepicodeárea100501004,59..   propofolmlugxmldeovolumétricmatraza cuosadol volume dissolutionmlmgpatterndiscondeconcxp averagepredic whereofa sampleof the area area100501004.59 ..

Se representaron gráficamente estos datos como microgramos/ml de propofol en la fase acuosa frente al porcentaje de propofol en la fase cúbica. El valor para el 13% de propofol en la fase cúbica al 1% con glicina es claramente un valor atípico. 10 These data were plotted as micrograms / ml of propofol in the aqueous phase versus the percentage of propofol in the cubic phase. The value for 13% propofol in the 1% cubic phase with glycine is clearly an outlier. 10

% propofol en Q  % propofol in Q

1% (glicina) 2% (glicina) 1% (agua) 2% (agua)  1% (glycine) 2% (glycine) 1% (water) 2% (water)

10  10

18,6 19,3 25,1 19,5  18.6 19.3 25.1 19.5

13  13

(34,9) 25 29,6 28,8  (34.9) 25 29.6 28.8

16  16

30,1 29,3 39,1 34,2  30.1 29.3 39.1 34.2

19  19

35,5 35,9 46,9 45,6  35.5 35.9 46.9 45.6

Este ejemplo muestra por tanto que el nivel de propofol acuoso puede reducirse sustancialmente mediante el uso de diluyente de alto coeficiente de partición (Kow alto) tal como se describió anteriormente, así como muestra el resultado sorprendente de que el uso de glicina no sólo puede reducir el nivel de fármaco acuoso, sino que también mejora la compatibilidad de la fase cúbica inversa con la fase acuosa, tal como se manifiesta por la transparencia de las 15 muestras de glicina en contraposición con las muestras sin glicina que mostraron una turbidez importante en la fase cúbica. This example thus shows that the level of aqueous propofol can be substantially reduced by the use of high partition coefficient diluent (Kow high) as described above, as well as showing the surprising result that the use of glycine can not only reduce the level of aqueous drug, but also improves the compatibility of the inverse cubic phase with the aqueous phase, as manifested by the transparency of the 15 glycine samples as opposed to the glycine-free samples that showed significant turbidity in the phase cubic

Ejemplo 19. En este ejemplo, se les dosificó a perros la formulación notificada en el ejemplo 1 anteriormente, y se encontró que esta formulación funcionaba tan bien como, y de manera similar a, una formulación de propofol basada en emulsión, comercializada actualmente, Propoflo®. La formulación de fase cúbica, sin embargo, ofrece las ventajas de 20 estar esencialmente libre de componentes que fomentan el crecimiento microbiano. Example 19. In this example, the formulation reported in Example 1 above was dosed to dogs, and this formulation was found to work as well as, and similar to, an emulsion-based propofol formulation, currently marketed, Propoflo ®. The cubic phase formulation, however, offers the advantages of being essentially free of components that promote microbial growth.

En 3 días consecutivos, se dosificó a seis perros Beagle (de aproximadamente 1,5-3,5 años de edad) Propoflo® (una formulación de propofol disponible comercialmente) y Lyotropic PF1 en un diseño cruzado de 3 vías. Los perros estuvieron en un programa de alimentación controlada, recibiendo aproximadamente 500 gramos de dieta canina certificada (5507) durante aproximadamente 7 días antes de la iniciación de la dosificación. Se ocultó la comida durante 25 la noche antes de cada sesión de dosificación. Se pensó que los niveles de contaminantes que se sabía que estaban presentes en el pienso y el agua no podrían interferir en este estudio. Se aclimataron los adultos jóvenes usados en este estudio a las condiciones de laboratorio durante al menos 14 días antes de la iniciación de la fase con animales. Se seleccionaron seis perros basándose en el aspecto general y se designaron a los siguientes grupos: On 3 consecutive days, six Beagle dogs (approximately 1.5-3.5 years old) Propoflo® (a commercially available propofol formulation) and Lyotropic PF1 were dosed in a 3-way cross design. The dogs were in a controlled feeding program, receiving approximately 500 grams of certified canine diet (5507) for approximately 7 days before dosing initiation. The food was hidden for 25 the night before each dosing session. It was thought that the levels of contaminants that were known to be present in feed and water could not interfere in this study. Young adults used in this study were acclimatized to laboratory conditions for at least 14 days before the initiation of the animal phase. Six dogs were selected based on the overall appearance and the following groups were designated:

Número de grupo  Group number

Artículo de prueba Dosis mg/kg Concentración de dosis mg/ml N. de animales  Test article Dose mg / kg Dose concentration mg / ml N. of animals

CBG1  CBG1

Lyotropic PF1 6,0 10 2  Lyotropic PF1 6.0 10 2

CBG3  CBG3

Propoflo 6,0 10 2  Propoflo 6.0 10 2

30  30

Se almacenaron los artículos de prueba de dispersión de fase cúbica (Lyocell ®”) de la presente invención a aproximadamente 2-8C y protegidos de la luz. Se obtuvo Propoflo® de Abbott Laboratories y se almacenó a temperatura ambiente. Se obtuvieron los pesos corporales justo antes de la administración de la dosis y se usaron como base para la dosificación. Se realizaron observaciones clínicas para determinar la mortalidad y el aspecto general al menos dos veces al día tras la administración de la dosis. Los parámetros para la evaluación incluyeron observaciones 35 tras la dosificación. Todos los animales estuvieron constantemente atendidos desde la inducción de anestesia hasta el The cubic phase dispersion test items (Lyocell®) of the present invention were stored at approximately 2-8C and protected from light. Propoflo® was obtained from Abbott Laboratories and stored at room temperature. Body weights were obtained just prior to dose administration and were used as the basis for dosing. Clinical observations were made to determine mortality and overall appearance at least twice a day after dose administration. The parameters for the evaluation included observations 35 after dosing. All animals were constantly treated from the induction of anesthesia to the

despertar (es decir, erguirse sobre las cuatro patas). Se registraron para cada perro la duración de tiempo desde la inyección (de inicio a fin; aproximadamente 30 segundos) hasta la inducción, tiempo hasta el despertar y tiempo para erguirse sobre las cuatro patas). Se monitorizaron los animales de manera continua para evaluar el nivel de anestesia usando el tono mandibular, reflejos palpebral y flexor. wake up (that is, stand on all four legs). The duration of time from injection (from start to finish; approximately 30 seconds) to induction, time to wake up and time to stand on all four legs were recorded for each dog. The animals were monitored continuously to assess the level of anesthesia using the jaw tone, palpebral reflexes and flexor.

No se produjo mortalidad durante los periodos de dosificación o tras la dosificación. Las alteraciones o 5 características de respiración relevantes incluyeron la aparición de respiración irregular, apnea, disnea y regurgitación leve (sólo en 2 perros). Sin embargo, ninguna de estas alteraciones podría considerarse que sea específica del artículo de prueba puesto que todos estos se produjeron a una frecuencia igual con los tres artículos de prueba. Después del inicio de la inyección, la inducción de anestesia se produjo en el plazo de 1 minuto después del inicio de la inyección y podría describirse como una inducción sin complicaciones independientemente del artículo de prueba. En la mayoría de 10 casos, los perros a los que se les inyectaron las preparaciones de fase cúbica se comportaron de manera similar (es decir, características de respiración, acontecimientos reflejos y observaciones tras la dosificación) a aquellos a los que se les inyectó la preparación Propoflo® disponible comercialmente. No mortality occurred during dosing periods or after dosing. Relevant alterations or characteristics of breathing included the occurrence of irregular breathing, apnea, dyspnea and mild regurgitation (only in 2 dogs). However, none of these alterations could be considered to be specific to the test article since all of these occurred at an equal frequency with the three test articles. After the start of the injection, the induction of anesthesia occurred within 1 minute after the start of the injection and could be described as an uncomplicated induction regardless of the test article. In the majority of 10 cases, the dogs that were injected with the cubic phase preparations behaved similarly (i.e., breathing characteristics, reflex events and observations after dosing) to those who were injected with the Propoflo® preparation commercially available.

Registros de peso corporal individual y dosificación Individual body weight and dosage records

Día 1  Day 1

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Peso corporal (kg) Dosis (mg/kg) Concentra-ción de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml)  USDA number Test article Body weight (kg) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml)

1M1  1M1

3643590 PF1 19,80 6 10 11,9  3643590 PF1 19.80 6 10 11.9

1F2  1F2

4220196 PF1 7,60 6 10 4,6  4220196 PF1 7.60 6 10 4.6

3M5  3M5

3645771 Propoflo 12,60 6 10 7,6  3645771 Propoflo 12.60 6 10 7.6

3F6  3F6

4119177 Propoflo 10,05 6 10 6,1  4119177 Propoflo 10.05 6 10 6.1

Día 2  Day 2

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Peso corporal (kg) Dosis (mg/kg) Concentración de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml)  USDA number Test article Body weight (kg) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml)

2M3  2M3

3771687 Propoflo 15,25 6 10 9,2  3771687 Propoflo 15.25 6 10 9.2

2F4  2F4

4121538 Propoflo 9,10 6 10 5,5  4121538 Propoflo 9.10 6 10 5.5

3M5  3M5

3645771 PF1 12,25 6 10 7,4  3645771 PF1 12.25 6 10 7.4

3F6  3F6

4119177 PF1 10,15 6 10 6,1  4119177 PF1 10.15 6 10 6.1

Día 3  Day 3

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Peso corporal (kg) Dosis (mg/kg) Concentración de dosis (mg/ml) Volumen de dosis (ml)  USDA number Test article Body weight (kg) Dose (mg / kg) Dose concentration (mg / ml) Dose volume (ml)

1M1  1M1

3643590 Propoflo 19,85 6 10 12,0  3643590 Propoflo 19.85 6 10 12.0

1F2  1F2

4220196 Propoflo 7,55 6 10 4,6  4220196 Propoflo 7.55 6 10 4.6

2M3  2M3

3771687 PF1 15,25 6 10 9,2  3771687 PF1 15.25 6 10 9.2

2F4  2F4

4121538 PF1 9,00 6 10 5,4  4121538 PF1 9.00 6 10 5.4

15  fifteen

Frecuencia cardiaca individual tras la dosis Individual heart rate after dose

Día 1  Day 1

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Frecuencia cardiaca (LPM)  USDA Number Test Item Heart Rate (LPM)

1F1  1F1

3643590 PF1 90  3643590 PF1 90

1F2  1F2

4220196 PF1 120  4220196 PF1 120

3M5  3M5

3645771 Propoflo 126  3645771 Propoflo 126

3F6  3F6

4119177 Propoflo 90  4119177 Propoflo 90

Día 2  Day 2

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Frecuencia cardíaca (LPM)  USDA Number Test Item Heart Rate (LPM)

1M1  1M1

3643590 PF1 90  3643590 PF1 90

1F2  1F2

4220196 PF1 120  4220196 PF1 120

3M5  3M5

3645771 Propoflo 120  3645771 Propoflo 120

3F6  3F6

4119177 Propoflo 90  4119177 Propoflo 90

Día 3  Day 3

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Frecuencia cardíaca (LPM)  USDA Number Test Item Heart Rate (LPM)

1M1  1M1

3643590 Propoflo 102  3643590 Propoflo 102

1F2  1F2

4220196 Propoflo 60  4220196 Propoflo 60

2M3  2M3

3771687 PF1 76  3771687 PF1 76

2F4  2F4

4121538 PF1 102  4121538 PF1 102

Características de respiración individual tras la dosis Characteristics of individual breathing after dose

Día 1  Day 1

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Características de respiración  USDA number Test article Breathing characteristics

1M1  1M1

3643590 PF1 Respiración irregular, inicialmente rápida; luego regular  3643590 PF1 Irregular, initially rapid breathing; then regulate

1F2  1F2

4220196 PF1 Periodo de dipnea, respiración irregular, apnea  4220196 PF1 Period of dipnea, irregular breathing, apnea

3M5  3M5

3645771 Propoflo Respiración regular en todo el episodio  3645771 Propoflo Regular breathing throughout the episode

3F6  3F6

4119177 Propoflo Respiración regular con apnea esporádica  4119177 Propoflo Regular breathing with sporadic apnea

Se observó regurgitación aproximadamente a los 2 minutos tras la inyección.  Reg Regurgitation was observed approximately 2 minutes after injection.

Día 2  Day 2

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Características de respiración  USDA number Test article Breathing characteristics

2M3  2M3

3771687 Propoflo Respiración regular en todo el episodio  3771687 Propoflo Regular breathing throughout the episode

2F4  2F4

4121538 Propoflo Periodo inicial de apnea  4121538 Propoflo Initial period of apnea

3M5  3M5

3645771 PF1 Respiración irregular seguida por apnea. Respiración regular durante el resto del episodio.  3645771 PF1 Irregular breathing followed by apnea. Regular breathing during the rest of the episode.

3F6  3F6

4119177 PF1 Respiración regular en todo el episodio.  4119177 PF1 Regular breathing throughout the episode.

Episodio leve de regurgitación   Mild regurgitation episode

Día 3  Day 3

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba Características de respiración  USDA number Test article Breathing characteristics

1M1  1M1

3643590 Propoflo Respiración regular en todo el episodio  3643590 Propoflo Regular breathing throughout the episode

1F2  1F2

4220196 Propoflo Respiración regular en todo el episodio  4220196 Propoflo Regular breathing throughout the episode

2M3  2M3

3771687 PF1 Inicialmente, periodo marcado de apnea seguido por respiración regular  3771687 PF1 Initially, marked period of apnea followed by regular breathing

2F4  2F4

4121538 PF1 Respiración regular en todo el episodio  4121538 PF1 Regular breathing throughout the episode

Registro de anestesia Anesthesia registry

Día 1  Day 1

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND IND a DESP DESP a ESTER ESTER a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND IND to DESP DESP to ESTER ESTER to ERGUIRSE

1M1  1M1

3643590 PF1 0:00:34 0:18:49 0:00:00 0:06:42  3643590 PF1 0:00:34 0:18:49 0:00:00 0:06:42

1F2  1F2

4220196 PF1 0:00:41 0:10:27 0:00:00 0:04:26  4220196 PF1 0:00:41 0:10:27 0:00:00 0:04:26

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:00:40 0:07:33 0:00:16 0:03:31  3645771 Propoflo 0:00:40 0:07:33 0:00:16 0:03:31

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:00:29 0:10:29 0:00:10 0:01:23  4119177 Propoflo 0:00:29 0:10:29 0:00:10 0:01:23

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND IND a DESP DESP a ESTER ESTER a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND IND to DESP DESP to ESTER ESTER to ERGUIRSE

1M1  1M1

3643590 PF1 0:00:34 0:19:23 0:19:23 0:26:05  3643590 PF1 0:00:34 0:19:23 0:19:23 0:26:05

1F2  1F2

4220196 PF1 0:00:41 0:11:08 0:11:08 0:15:34  4220196 PF1 0:00:41 0:11:08 0:11:08 0:15:34

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:00:40 0:08:13 0:08:29 0:12:00  3645771 Propoflo 0:00:40 0:08:13 0:08:29 0:12:00

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:00:29 0:10:53 0:11:08 0:12:31  4119177 Propoflo 0:00:29 0:10:53 0:11:08 0:12:31

INY = tiempo de inyección (inicio) IND = tiempo de inducción DESP= tiempo hasta el despertar ESTER = tiempo de postura esternal ERGUIRSE = tiempo para erguirse (cuatro patas) Formato = HH:MM:SS  INY = injection time (onset) IND = induction time DESP = time until awakening ESTER = sternal posture time ERGUIR = time to stand (four legs) Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Registro de anestesia individual Individual anesthesia registry

Día 1  Day 1

TONO MANDIBULAR  MANDIBULAR TONE

Prefijo n.  Prefix n.

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

animal: CBG  animal: CBG

1M1  1M1

3643590 PF1 0:00:48 0:19:23 0:18:35  3643590 PF1 0:00:48 0:19:23 0:18:35

1F2  1F2

4220196 PF1 0:01:48 0:04:53 0:03:05  4220196 PF1 0:01:48 0:04:53 0:03:05

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:00:55 0:05:57 0:05:02  3645771 Propoflo 0:00:55 0:05:57 0:05:02

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:00:52 0:07:14 0:06:22  4119177 Propoflo 0:00:52 0:07:14 0:06:22

PALPEBRAL  PALPEBRAL

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 PF1 0:01:08 0:05:54 0:04:46  3643590 PF1 0:01:08 0:05:54 0:04:46

1F2  1F2

4220196 PF1 0:01:29 0:04:34 0:03:05  4220196 PF1 0:01:29 0:04:34 0:03:05

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:01:55 0:03:50 0:01:55  3645771 Propoflo 0:01:55 0:03:50 0:01:55

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:01:10 0:05:28 0:04:18  4119177 Propoflo 0:01:10 0:05:28 0:04:18

FLEXOR  FLEXOR

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 PF1 0:00:57 0:18:59 0:18:02  3643590 PF1 0:00:57 0:18:59 0:18:02

1F2  1F2

4220196 PF1 0:02:39 0:04:46 0:02:07  4220196 PF1 0:02:39 0:04:46 0:02:07

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:01:15 0:05:30 0:04:15  3645771 Propoflo 0:01:15 0:05:30 0:04:15

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:00:56 0:06:54 0:05:58  4119177 Propoflo 0:00:56 0:06:54 0:05:58

INY = tiempo de inyección (inicio) AUSENCIA = pérdida de reflejo PRESENCIA = recuperación del reflejo tras la pérdida Formato = HH:MM:SS  INY = injection time (onset) ABSENCE = loss of reflex PRESENCE = recovery of the reflex after loss Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Registro de anestesia individual Individual anesthesia registry

Día 2  Day 2

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND IND a DESP DESP a ESTER ESTER a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND IND to DESP DESP to ESTER ESTER to ERGUIRSE

2M3  2M3

3771687 Propoflo 0:00:15 0:09:35 0:02:52 0:2:40  3771687 Propoflo 0:00:15 0:09:35 0:02:52 0: 2: 40

2F4  2F4

4121538 Propoflo 0:00:30 0:05:05 0:00:30 0:01:45  4121538 Propoflo 0:00:30 0:05:05 0:00:30 0:01:45

3M5  3M5

3645771 PF1 0:00:25 0:16:31 0:07:04 0:03:54  3645771 PF1 0:00:25 0:16:31 0:07:04 0:03:54

3F6  3F6

4119177 PF1 0:00:20 0:19:47 0:02:47 0:02:20  4119177 PF1 0:00:20 0:19:47 0:02:47 0:02:20

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND INY a EMER INY a ESTER INY a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND INY to EMER INY to ESTER INY to ERGUIRSE

2M3  2M3

3771687 Propoflo 0:00:15 0:09:50 0:12:42 0:15:22  3771687 Propoflo 0:00:15 0:09:50 0:12:42 0:15:22

2F4  2F4

4121538 Propoflo 0:00:30 0:05:35 0:06:05 0:07:50  4121538 Propoflo 0:00:30 0:05:35 0:06:05 0:07:50

3M5  3M5

3645771 PF1 0:00:25 0:16:56 0:24:00 0:27:54  3645771 PF1 0:00:25 0:16:56 0:24:00 0:27:54

3F6  3F6

4119177 PF1 0:00:20 0:20:07 0:22:54 0:25:14  4119177 PF1 0:00:20 0:20:07 0:22:54 0:25:14

INY = tiempo de inyección (inicio) IND = tiempo de inducción DESP= tiempo hasta el despertar ESTER = tiempo de postura esternal ERGUIRSE = tiempo para erguirse (cuatro patas) Formato = HH:MM:SS  INY = injection time (onset) IND = induction time DESP = time until awakening ESTER = sternal posture time ERGUIR = time to stand (four legs) Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Registro de anestesia individual Individual anesthesia registry

Día 2  Day 2

TONO MANDIBULAR  MANDIBULAR TONE

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 PF1 0:00:57 0:18:59 0:18:02  3643590 PF1 0:00:57 0:18:59 0:18:02

1F2  1F2

4220196 PF1 0:02:39 0:04:46 0:02:07  4220196 PF1 0:02:39 0:04:46 0:02:07

3M5  3M5

3645771 Propoflo 0:01:15 0:05:30 0:04:15  3645771 Propoflo 0:01:15 0:05:30 0:04:15

3F6  3F6

4119177 Propoflo 0:00:56 0:06:54 0:05:58  4119177 Propoflo 0:00:56 0:06:54 0:05:58

PALPEBRAL  PALPEBRAL

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

2M3  2M3

3771687 Propoflo 0:00:43 0:06:24 0:05:41  3771687 Propoflo 0:00:43 0:06:24 0:05:41

2F4  2F4

4121538 Propoflo 0:01:35 0:05:05 0:03:30  4121538 Propoflo 0:01:35 0:05:05 0:03:30

3M5  3M5

3645771 PF1 0:01:57 0:09:30 0:07:33  3645771 PF1 0:01:57 0:09:30 0:07:33

3F6  3F6

4119177 PF1 0:01:37 0:15:37 0:14:00  4119177 PF1 0:01:37 0:15:37 0:14:00

FLEXOR  FLEXOR

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

2M3  2M3

3771687 Propoflo 0:00:58 0:06:24 0:05:26  3771687 Propoflo 0:00:58 0:06:24 0:05:26

2F4  2F4

4121538 Propoflo 0:00:45 0:05:05 0:04:20  4121538 Propoflo 0:00:45 0:05:05 0:04:20

3M5  3M5

3645771 PF1 0:00:50 0:09:20 0:08:30  3645771 PF1 0:00:50 0:09:20 0:08:30

3F6  3F6

4119177 PF1 0:00:40 0:16:00 0:15:20  4119177 PF1 0:00:40 0:16:00 0:15:20

INY = tiempo de inyección (inicio) AUSENCIA = pérdida de reflejo  INY = injection time (onset) ABSENCE = loss of reflex

PRESENCIA = recuperación del reflejo tras la pérdida Formato = HH:MM:SS  PRESENCE = recovery of the reflex after loss Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Registro de anestesia individual Individual anesthesia registry

Día 3  Day 3

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND IND a DESP DESP a ESTER ESTER a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND IND to DESP DESP to ESTER ESTER to ERGUIRSE

1M1  1M1

3643590 Propoflo 0:00:24 0:13:42 0:00:13 0:00:24  3643590 Propoflo 0:00:24 0:13:42 0:00:13 0:00:24

1F2  1F2

4220196 Propoflo 0:00:29 0:08:41 0:01:00 0:00:19  4220196 Propoflo 0:00:29 0:08:41 0:01:00 0:00:19

2M3  2M3

3771687 PF1 0:00:22 0:16:01 0:06:45 0:00:31  3771687 PF1 0:00:22 0:16:01 0:06:45 0:00:31

2F4  2F4

4121538 PF1 0:00:42 0:13:00 0:05:56 0:00:22  4121538 PF1 0:00:42 0:13:00 0:05:56 0:00:22

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a IND IND a DESP DESP a ESTER ESTER a ERGUIRSE  USDA number Test article INY to IND IND to DESP DESP to ESTER ESTER to ERGUIRSE

1M1  1M1

3643590 Propoflo 0:00:24 0:14:06 0:14:19 0:14:43  3643590 Propoflo 0:00:24 0:14:06 0:14:19 0:14:43

1F2  1F2

4220196 Propoflo 0:00:29 0:09:10 0:10:10 0:10:29  4220196 Propoflo 0:00:29 0:09:10 0:10:10 0:10:29

2M3  2M3

3771687 PF1 0:00:22 0:16:23 0:23:08 0:23:39  3771687 PF1 0:00:22 0:16:23 0:23:08 0:23:39

2F4  2F4

4121538 PF1 0:00:42 0:13:42 0:19:38 0:20:00  4121538 PF1 0:00:42 0:13:42 0:19:38 0:20:00

INY = tiempo de inyección (inicio) IND = tiempo de inducción DESP = tiempo hasta el despertar ESTER = tiempo de postura esternal ERGUIRSE = tiempo para erguirse (cuatro patas) Formato = HH:MM:SS  INY = injection time (onset) IND = induction time DESP = time until awakening ESTER = sternal posture time ERGUIR = time to stand (four legs) Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Registro de anestesia individual Individual anesthesia registry

Día 3  Day 3

TONO MANDIBULAR  MANDIBULAR TONE

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 Propoflo 0:01:06 0:12:45 0:11:39  3643590 Propoflo 0:01:06 0:12:45 0:11:39

1F2  1F2

4220196 Propoflo 0:01:30 0:07:07 0:05:37  4220196 Propoflo 0:01:30 0:07:07 0:05:37

2M3  2M3

3771687 PF1 0:00:44 0:14:15 0:13:31  3771687 PF1 0:00:44 0:14:15 0:13:31

2F4  2F4

4121538 PF1 0:02:26 0:13:02 0:10:36  4121538 PF1 0:02:26 0:13:02 0:10:36

PALPEBRAL  PALPEBRAL

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 Propoflo 0:00:45 0:16:25 0:15:40  3643590 Propoflo 0:00:45 0:16:25 0:15:40

1F2  1F2

4220196 Propoflo 0:01:15 0:07:07 0:05:52  4220196 Propoflo 0:01:15 0:07:07 0:05:52

2M3  2M3

3771687 PF1 0:00:44 0:13:00 0:12:16  3771687 PF1 0:00:44 0:13:00 0:12:16

2F4  2F4

4121538 PF1 0:01:20 0:09:05 0:07:45  4121538 PF1 0:01:20 0:09:05 0:07:45

FLEXOR  FLEXOR

Prefijo n. animal: CBG  Animal prefix n.: CBG

Número USDA Artículo de prueba INY a AUSENCIA INY a PRESENCIA Duración  USDA Number INY test item to ABSENCE INY to PRESENCE Duration

1M1  1M1

3643590 Propoflo 0:00:53 0:09:54 0:09:01  3643590 Propoflo 0:00:53 0:09:54 0:09:01

1F2  1F2

4220196 Propoflo     4220196 Propoflo   

2M3  2M3

3771687 PF1 0:00:44 0:13:15 0:12:31  3771687 PF1 0:00:44 0:13:15 0:12:31

2F4  2F4

4121538 PF1 0:01:18 0:09:50 0:08:32  4121538 PF1 0:01:18 0:09:50 0:08:32

El reflejo flexor siguió siendo positivo en todo el episodio INY = tiempo de inyección (inicio) IND = tiempo de inducción DESP = tiempo hasta el despertar ESTER = tiempo de postura esternal ERGUIRSE = tiempo para erguirse (cuatro patas) Formato = HH:MM:SS  The flexor reflex remained positive throughout the episode INY = injection time (onset) IND = induction time DESP = time to wake up ESTER = sternal posture time ERGUIRSE = time to stand up (four legs) Format = HH: MM :H.H

Ejemplo 20. Se preparó en primer lugar una fase cúbica inversa que contenía el anestésico propofol mezclando 1,496 gramos de propofol (Albemarle Corporation, Baton Rouge, LA) 1,346 g de vitamina E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI), 3,902 g de agua estéril (Abbott Laboratories, Chicago, IL) y 8,255 g de Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). Después de mezclar meticulosamente esta composición, se comprobó que el 5 material fuera ópticamente isotrópico y de alta viscosidad. A continuación, se disolvieron 0,504 g del tensioactivo aniónico de sal de sodio del ácido desoxicólico (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) y 1,500 g de glicina (Spectrum Chemical Company, Gardena, CA) en 88 ml de agua. Después, se añadieron 10,101 g de la fase cúbica a un vaso de precipitados de 250 ml que contenía la disolución de tensioactivo y se dispersó usando un homogeneizador (Brinkmann Polytron PT 3000) a 29k rpm durante 20 minutos. Se ajustó el pH de la mezcla a 7,40 mediante la adición 10 de 5 gotas de pipeta de ácido clorhídrico 1 M (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). Se inyectó la dispersión en viales estériles usando una aguja de calibre 27 unida a un filtro de jeringa de PVDF de 0,22 m (Millipore, Irlanda). Se burbujeó cada vial con nitrógeno durante 5 minutos para eliminar el oxígeno de la dispersión. La observación en un microscopio Polyvar de Reichert-Jung funcionando en modo de contraste de interferencia diferencial (DIC) demostró que se había logrado un tamaño de partícula del orden de 200 nanómetros. Se analizó entonces la dispersión usando 15 un aparato DELSA 440SX de Beckman Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, fijado en el modo de medición de potencial zeta. Se diluyó 4:1 la dispersión con agua para dispersión con el fin de conseguir que los niveles del detector estén en la escala. La distribución de potencial zeta medida resultante, usando cuatro ángulos de medición, muestra la distribución centrada alrededor de -34 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso como para producir una dispersión estable. La concentración de propofol en esta dispersión, denominado a continuación 20 Lyotropic PF1(1%), era del 1% o 10 mg/ml. Example 20. A reverse cubic phase containing the propofol anesthetic was first prepared by mixing 1,496 grams of propofol (Albemarle Corporation, Baton Rouge, LA) 1,346 g of vitamin E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI), 3,902 g of water sterile (Abbott Laboratories, Chicago, IL) and 8,255 g of Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). After thoroughly mixing this composition, it was found that the material was optically isotropic and of high viscosity. Next, 0.504 g of the anionic surfactant of sodium salt of deoxycholic acid (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) and 1,500 g of glycine (Spectrum Chemical Company, Gardena, CA) were dissolved in 88 ml of water. Then, 10,101 g of the cubic phase was added to a 250 ml beaker containing the surfactant solution and dispersed using a homogenizer (Brinkmann Polytron PT 3000) at 29k rpm for 20 minutes. The pH of the mixture was adjusted to 7.40 by the addition of 5 drops of 1 M hydrochloric acid pipette (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). The dispersion was injected into sterile vials using a 27 gauge needle attached to a 0.22 µm PVDF syringe filter (Millipore, Ireland). Each vial was bubbled with nitrogen for 5 minutes to remove oxygen from the dispersion. Observation in a Reichert-Jung Polyvar microscope operating in differential interference contrast (DIC) mode showed that a particle size of the order of 200 nanometers had been achieved. The dispersion was then analyzed using a Beckman Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, set in the zeta potential measurement mode. The dispersion was diluted 4: 1 with dispersion water in order to ensure that the detector levels are on the scale. The resulting measured zeta potential distribution, using four measurement angles, shows the distribution centered around -34 mV, which is a zeta potential intense enough to produce a stable dispersion. The concentration of propofol in this dispersion, referred to below as Lyotropic PF1 (1%), was 1% or 10 mg / ml.

Se preparó en primer lugar una fase cúbica inversa que contenía el anestésico propofol mezclando 2,206 gramos de propofol (Albemarle’ Corporation, Baton Rouge, LA) 1,982 g de vitamina E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI), 5,739 g de agua estéril (Abbott Laboratories, Chicago, IL) y 12,100 g de Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). Después de mezclar meticulosamente esta composición, se comprobó que el material fuera 25 ópticamente isotrópico y de alta viscosidad. Después, se disolvieron 1,003 g del tensioactivo aniónico de sal de sodio del ácido desoxicólico (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) y 1,502 g de glicina (Spectrum Chemical Company, Gardena, CA) en 77,5 ml de agua. Entonces, se añadieron 19,989 g de la fase cúbica al vaso de precipitados de 250 ml que contenía la disolución de tensioactivo y se dispersó usando un homogeneizador (Brinkmann Polytron PT 3000) a A reverse cubic phase containing the propofol anesthetic was first prepared by mixing 2,206 grams of propofol (Albemarle 'Corporation, Baton Rouge, LA) 1,982 g of vitamin E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI), 5,739 g of sterile water ( Abbott Laboratories, Chicago, IL) and 12,100 g of Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). After meticulously mixing this composition, it was found that the material was optically isotropic and of high viscosity. Then, 1.003 g of the anionic surfactant of sodium salt of deoxycholic acid (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) and 1.502 g of glycine (Spectrum Chemical Company, Gardena, CA) were dissolved in 77.5 ml of water. Then, 19,989 g of the cubic phase was added to the 250 ml beaker containing the surfactant solution and dispersed using a homogenizer (Brinkmann Polytron PT 3000) to

29k rpm durante 30 minutos. Se ajustó el pH de la mezcla a 7,40 mediante la adición de 6 gotas de pipeta de ácido clorhídrico 1 M (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). Se inyectó la dispersión en viales estériles usando una aguja de calibre 27 unida a un filtro de jeringa de PVDF de 0,22 m (Millipore, Ireland). Se burbujeó cada vial con nitrógeno durante 5 minutos para eliminar el oxígeno de la dispersión. La observación en un microscopio Polyvar de Reichert-Jung funcionando en modo de contraste de interferencia diferencial (DIC) demostró que se había logrado un tamaño de 5 partícula del orden de 200 nanómetros. Se analizó entonces la dispersión usando un aparato DELSA 440SX de Beckman Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, fijado en el modo de medición de potencial zeta. Se diluyó 4:1 la dispersión con agua para dispersión con el fin de conseguir que los niveles del detector estén en la escala. La distribución de potencial zeta medida resultante, usando cuatro ángulos de medición, muestra la distribución centrada alrededor de -32 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso como para producir una 10 dispersión estable. La concentración de propofol en esta dispersión, denominado a continuación Lyotropic PF1(2%), era del 2% ó 20 mg/ml. 29k rpm for 30 minutes. The pH of the mixture was adjusted to 7.40 by the addition of 6 drops of 1 M hydrochloric acid pipette (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). The dispersion was injected into sterile vials using a 27 gauge needle attached to a 0.22 µm PVDF syringe filter (Millipore, Ireland). Each vial was bubbled with nitrogen for 5 minutes to remove oxygen from the dispersion. Observation in a Reichert-Jung Polyvar microscope operating in differential interference contrast (DIC) mode showed that a particle size of the order of 200 nanometers had been achieved. The dispersion was then analyzed using a Beckman Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, set in the zeta potential measurement mode. The dispersion was diluted 4: 1 with dispersion water in order to ensure that the detector levels are on the scale. The resulting measured zeta potential distribution, using four measurement angles, shows the distribution centered around -32 mV, which is a zeta potential intense enough to produce a stable dispersion. The concentration of propofol in this dispersion, referred to below as Lyotropic PF1 (2%), was 2% or 20 mg / ml.

Se les dosificaron a perros las dos formulaciones anteriores, y se encontró que cada una funcionaba tan bien como o mejor que, y manera similar a, una formulación de propofol basada en emulsión, comercializada actualmente, Propoflo® (Abbot Labs). 15 The two previous formulations were dosed to dogs, and each was found to work as well as or better than, and similar to, an emulsion-based propofol formulation, currently marketed, Propoflo® (Abbot Labs). fifteen

En 3 días consecutivos, se dosificó a seis perros Beagle (de aproximadamente 1,5-3,5 años de edad) Propoflo® (una formulación de propofol disponible comercialmente) o Lyotropic PF1 (1%) o Lyotropic PF1 (2%) en un diseño cruzado aleatorizado de 3 vías. Los perros estuvieron en un programa de alimentación controlada, recibiendo aproximadamente 500 gramos de dieta canina certificada (5507) durante aproximadamente 7 días antes de la iniciación de la dosificación. Se ocultó la comida durante la noche antes de cada sesión de dosificación. Se pensó que los niveles 20 de contaminantes que se sabía que estaban presentes en el pienso y el agua no podrían interferir en este estudio. Se aclimataron los animales usados en este estudio a las condiciones de laboratorio durante al menos 14 días antes de la iniciación de la fase con animales. Se seleccionaron seis perros (3 machos y 3 hembras) basándose en el aspecto general. On 3 consecutive days, six Beagle dogs (approximately 1.5-3.5 years of age) Propoflo® (a commercially available propofol formulation) or Lyotropic PF1 (1%) or Lyotropic PF1 (2%) were dosed in a randomized 3-way cross design. The dogs were in a controlled feeding program, receiving approximately 500 grams of certified canine diet (5507) for approximately 7 days before dosing initiation. The food was hidden overnight before each dosing session. It was thought that 20 levels of contaminants that were known to be present in feed and water could not interfere in this study. The animals used in this study were acclimatized to the laboratory conditions for at least 14 days before the initiation of the animal phase. Six dogs (3 males and 3 females) were selected based on the overall appearance.

Se almacenaron los artículos de prueba de dispersión de fase cúbica (“LyoCell®”) de la presente invención a 25 aproximadamente 2-8°C y se protegieron de la luz. Se obtuvo Propoflo® de Abbott Laboratories y se almacenó a temperatura ambiente. Se obtuvieron los pesos corporales justo antes de la administración de la dosis y se usaron como base para la dosificación, y a todos los perros se les dosificó 6,0 mg/ml por cada una de las tres formulaciones. Se realizaron observaciones clínicas para determinar la mortalidad y el aspecto general al menos dos veces al día tras la administración de la dosis. Los parámetros para la evaluación incluyeron observaciones tras la dosificación. Todos los 30 animales estuvieron constantemente atendidos desde la inducción de anestesia hasta el despertar (es decir, erguirse sobre las cuatro patas). Se registraron para cada perro la duración de tiempo desde la inyección (de inicio a fin; aproximadamente 30 segundos) hasta la inducción, despertar, postura esternal y para erguirse sobre las cuatro patas. Los animales se monitorizaron de manera continua para evaluar el nivel de anestesia usando el tono mandibular, los reflejos palpebral y flexor. No se produjo mortalidad durante los periodos de dosificación o tras la dosificación. Las 35 alteraciones o características de respiración relevantes incluyeron la aparición de respiración irregular, apnea, disnea y regurgitación leve (sólo en 1 perro). Se produjo inducción de anestesia en el plazo de 1 minuto después del inicio de la inyección y podría describirse como una inducción sin complicaciones los perros a los que se les inyectaron las preparaciones de fase cúbica se comportaron de manera similar (es decir, características de respiración, acontecimientos reflejos y observaciones tras la dosificación) a aquellos a los que se les inyectó la preparación 40 Propoflo® disponible comercialmente. The cubic phase dispersion test articles ("LyoCell®") of the present invention were stored at approximately 2-8 ° C and protected from light. Propoflo® was obtained from Abbott Laboratories and stored at room temperature. Body weights were obtained just prior to dose administration and used as a basis for dosing, and all dogs were dosed 6.0 mg / ml for each of the three formulations. Clinical observations were made to determine mortality and overall appearance at least twice a day after dose administration. The parameters for the evaluation included observations after dosing. All 30 animals were constantly treated from the induction of anesthesia until waking up (that is, standing on all four legs). The duration of time from the injection (from start to finish; approximately 30 seconds) to induction, awakening, sternal posture and to stand on all four legs was recorded for each dog. Animals were monitored continuously to assess the level of anesthesia using the mandibular tone, palpebral reflexes and flexor. No mortality occurred during dosing periods or after dosing. The 35 relevant changes or breathing characteristics included the appearance of irregular breathing, apnea, dyspnea and mild regurgitation (only in 1 dog). Anesthesia induction occurred within 1 minute after the start of the injection and could be described as an uncomplicated induction the dogs that were injected with the cubic phase preparations behaved similarly (i.e. breathing characteristics , reflex events and observations after dosing) to those who were injected with the commercially available Propoflo® preparation 40.

Características de respiración individual tras la dosis Characteristics of individual breathing after dose

Día  Day

Número USDA Artículo de prueba Frecuencia cardiaca después de la dosis (lpm) Características de respiración  USDA number Test article Heart rate after dose (bpm) Breathing characteristics

1  one

4365500 PF1 (1%) 90 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4365500 PF1 (1%) 90 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

1  one

4175654 PF1 (1%) 96 Patrón de respiración regular.  4175654 PF1 (1%) 96 Regular breathing pattern.

1  one

4169859 PF1 (2%) 108 Patrón de respiración regular. Regurgitación a los 30 s tras la dosis, a los 35 min. 45 s, y 1:17:00 tras la dosis.  4169859 PF1 (2%) 108 Regular breathing pattern. Regurgitation at 30 s after the dose, at 35 min. 45 s, and 1:17:00 after the dose.

1  one

4372646 PF1 (2%) 72 Periodo inicial de apnea, luego patrón de respiración regular.  4372646 PF1 (2%) 72 Initial period of apnea, then regular breathing pattern.

2  2

4365500 Propoflo 90 Patrón de respiración regular.  4365500 Propoflo 90 Regular breathing pattern.

2  2

4175654 Propoflo 96 Patrón de respiración regular.  4175654 Propoflo 96 Regular breathing pattern.

2  2

4169859 PF1 (1%) 102 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4169859 PF1 (1%) 102 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

2  2

4372646 PF1 (1%) 66 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4372646 PF1 (1%) 66 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

2  2

4361270 PF1 (2%) 96 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4361270 PF1 (2%) 96 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

2  2

4360206 PF1 (2%) 78 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4360206 PF1 (2%) 78 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

3  3

4365500 PF1 (2%) 102 Periodo inicial de apnea, luego patrón de respiración regular.  4365500 PF1 (2%) 102 Initial period of apnea, then regular breathing pattern.

3  3

4175654 PF1 (2%) 78 Periodo inicial de respiración superficial rápida; luego patrón de respiración regular.  4175654 PF1 (2%) 78 Initial period of rapid surface respiration; then regular breathing pattern.

3  3

4169859 Propoflo 90 Patrón de respiración regular.  4169859 Propoflo 90 Regular breathing pattern.

3  3

4372646 Propoflo 72 Patrón de respiración regular.  4372646 Propoflo 72 Regular breathing pattern.

3  3

4361270 PF1 (1%) 66 Periodo inicial de apnea, luego respiración superficial rápida, luego patrón de respiración regular.  4361270 PF1 (1%) 66 Initial period of apnea, then rapid shallow breathing, then regular breathing pattern.

3  3

4360206 PF1 (1%) 84 Patrón de respiración regular.  4360206 PF1 (1%) 84 Regular breathing pattern.

4  4

4361270 Propoflo 78 Patrón de respiración regular.  4361270 Propoflo 78 Regular breathing pattern.

4  4

4360206 Propoflo 72 Patrón de respiración regular.  4360206 Propoflo 72 Regular breathing pattern.

Registro de anestesia Anesthesia registry

Propoflo  Propoflo

Número de animal  Animal number

Número USDA Artículo de prueba INY a IND INY a DESP  USDA Number Test Article INY to IND INY to DESP

1M1 1F4 2M2 2F5 3M3 3F6  1M1 1F4 2M2 2F5 3M3 3F6

4365500 4175654 4169859 4372646 4361270 4360206 Propoflo Propoflo Propoflo Propoflo Propoflo PROMEDIO DESV. EST. 0:00:33 0:00:25 0:00:32 0:00:24 0:00:25 0:00:24 0:00:27 0:00:04 0:08:09 0:06:58 0:20:49 0:15:43 0:13:22 0:08:05 0:12:11 0:05:27  4365500 4175654 4169859 4372646 4361270 4360206 Propoflo Propoflo Propoflo Propoflo Propoflo AVERAGE DEV. ITS T. 0:00:33 0:00:25 0:00:32 0:00:24 0:00:25 0:00:24 0:00:27 0:00:04 0:08:09 0:06:58 0:20:49 0:15:43 0:13:22 0:08:05 0:12:11 0:05:27

PF1 (1%)  PF1 (1%)

Número de animal  Animal number

Número USDA Artículo de prueba INY a IND INY a DESP  USDA Number Test Article INY to IND INY to DESP

1M1 1F4 2M2 2F5  1M1 1F4 2M2 2F5

4365500 4175654 4169859 4372646 PF1 (1%) PF1 (1%) PF1 (1%) PF1 (1%) 0:00:33 0:00:30 0:00:30 0:00:27 0:22:30 0:19:01 0:17:00 0:18:01  4365500 4175654 4169859 4372646 PF1 (1%) PF1 (1%) PF1 (1%) PF1 (1%) 0:00:33 0:00:30 0:00:30 0:00:27 0:22:30 0 : 19: 01 0:17:00 0:18:01

3M3 3F6  3M3 3F6

4361270 4360206 PF1 (1%) PF1 (1%) PROMEDIO DESV. EST. 0:00:25 0:00:37 0:00:30 0:00:04 0:19:23 0:18:38 0:19:05 0:01:52  4361270 4360206 PF1 (1%) PF1 (1%) AVERAGE DEV. ITS T. 0:00:25 0:00:37 0:00:30 0:00:04 0:19:23 0:18:38 0:19:05 0:01:52

PF1 (2%)  PF1 (2%)

Número de animal  Animal number

Número USDA Artículo de prueba INY a IND INY a DESP  USDA Number Test Article INY to IND INY to DESP

2M2 2F5 3M3 3F6 1M1 1F4  2M2 2F5 3M3 3F6 1M1 1F4

4169859 4372646 4361270 4360206 4365500 4175654 PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PROMEDIO DESV. EST. 0:00:44 0:00:26 0:00:40 0:00:35 0:00:34 0:00:26 0:00:34 0:00:07 0:34:19 0:33:50 0:20:39 0:29:12 0:09:22 0:17:06 0:24:05 0:10:02  4169859 4372646 4361270 4360206 4365500 4175654 PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) PF1 (2%) AVERAGE DEV. ITS T. 0:00:44 0:00:26 0:00:40 0:00:35 0:00:34 0:00:26 0:00:34 0:00:07 0:34:19 0:33:50 0:20:39 0:29:12 0:09:22 0:17:06 0:24:05 0:10:02

Resumen del registro de anestesia Summary of anesthesia registration

Propoflo PF1 (1%) PF1 (2%)  Propoflo PF1 (1%) PF1 (2%)

INY a IND  INY to IND

0:00:27 0:00:30 0:00:34  0:00:27 0:00:30 0:00:34

INY a DESP  INY to DESP

0:12:11 0:19:05 0:24:05  0:12:11 0:19:05 0:24:05

INY = tiempo de inyección (inicio) IND = tiempo de inducción DESP = tiempo hasta el despertar Formato = HH:MM:SS  INY = injection time (start) IND = induction time DESP = time to wake up Format = HH: MM: SS

Se inyectó cada artículo de prueba durante aproximadamente 30 segundos. Each test article was injected for approximately 30 seconds.

Ejemplo 21. El siguiente ejemplo describe una dispersión líquido-cristalina de carga estabilizada que contiene el fármaco anestésico local bupivacaína. Trabajando en una campana de flujo laminar, se disolvieron 0,900 gramos del 5 anestésico local bupivacaína, en su forma de base libre, en 3,64 g de alfa-tocoferol (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) calentando hasta 55°C. Tras la disolución, se añadieron 1,820 g de agua estéril (Abbott Laboratories, Chicago, IL) y 3,640 g de Pluronic P123 (BASF Corporation, Mt. Olive, NJ) a la vitamina E. Se mezclaron los componentes para formar una fase cúbica inversa que fuera ópticamente isotrópica y de alta viscosidad. A continuación, se disolvieron 0,402 g de desoxicolato de sodio (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) se disolvieron en 39,6 ml 10 de agua estéril. Se dispersó una cantidad de 8,048 g de fase cúbica en la disolución de desoxicolato de sodio, usando en primer lugar el homogeneizador (Brinkmann Polytron PT 3000) a 29k rpm durante 1 minuto, usando entonces el microfluidizador (Micofluidics modelo M110L) a aproximadamente 15.000 psi durante cinco ejecuciones de 1,5 minutos. La dispersión, denominada “Lyotropic/F4C,” se inyectó en viales estériles usando una aguja de calibre 27 unida a un filtro de jeringa de PVDF de 0,45 m (Millipore, Ireland). 15 Example 21. The following example describes a stabilized liquid-crystalline dispersion containing the local anesthetic drug bupivacaine. Working in a laminar flow hood, 0.900 grams of the local anesthetic bupivacaine, in its free base form, was dissolved in 3.64 g of alpha-tocopherol (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) by heating up to 55 ° C. After dissolution, 1,820 g of sterile water (Abbott Laboratories, Chicago, IL) and 3,640 g of Pluronic P123 (BASF Corporation, Mt. Olive, NJ) were added to vitamin E. The components were mixed to form an inverse cubic phase. that was optically isotropic and high viscosity. Then, 0.402 g of sodium deoxycholate (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) was dissolved in 39.6 ml of sterile water. A quantity of 8.048 g of cubic phase was dispersed in the sodium deoxycholate solution, using the homogenizer (Brinkmann Polytron PT 3000) first at 29k rpm for 1 minute, then using the microfluidizer (Micofluidics model M110L) at approximately 15,000 psi for five executions of 1.5 minutes. The dispersion, called "Lyotropic / F4C," was injected into sterile vials using a 27 gauge needle attached to a 0.45 µm PVDF syringe filter (Millipore, Ireland). fifteen

Se analizó Lyotropic/F4C usando un analizador de tamaño de partícula submicrométrico N4 PLUS de Beckman Coulter. Se diluyó una gota de la dispersión con agua hasta que se obtuvo un nivel de intensidad de medición adecuado. La figura 15 ilustra los resultados de un análisis de tamaño de partícula con un tiempo de equilibración de cinco minutos y un tiempo de ejecución de tres minutos. Todas las partículas de la dispersión son menores que 400 nm. Además, se analizó Lyotropic/F4C usando un aparato DELSA 440SX de Beckman Coulter para análisis de dispersión de 20 luz por electroforesis Doppler, fijado en modo de medición de potencial zeta. La figura 16 muestra la distribución de potencial zeta medida, usando cuatro ángulos de medición. En los cuatro ángulos, la distribución está centrada en -31 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso como para producir una dispersión estable. Lyotropic / F4C was analyzed using a Beckman Coulter N4 PLUS submicron particle size analyzer. A drop of the dispersion was diluted with water until an adequate level of measurement intensity was obtained. Figure 15 illustrates the results of a particle size analysis with an equilibration time of five minutes and an execution time of three minutes. All particles in the dispersion are less than 400 nm. In addition, Lyotropic / F4C was analyzed using a Beckman Coulter DELSA 440SX apparatus for 20 light scattering analysis by Doppler electrophoresis, set in zeta potential measurement mode. Figure 16 shows the distribution of measured zeta potential, using four measurement angles. At all four angles, the distribution is centered at -31 mV, which is a zeta potential intense enough to produce a stable dispersion.

Se sometió a prueba la formulación anterior en el modelo de “retirada de la pata” en rata para determinar la duración de la analgesia. Se estudiaron ratas Spraque-Dawley macho, que pesaban 400-450 g, en dos niveles de dosis: 1,0 mg/kg y 3,0 mg/kg. Se alojaron todas las ratas en condiciones habituales de acuerdo con las directrices AALAC, con acceso a comida y agua a voluntad. Se ocultó la comida, seis horas antes de la evaluación. The above formulation was tested in the "leg removal" model in rat to determine the duration of analgesia. Male Spraque-Dawley rats, weighing 400-450 g, were studied at two dose levels: 1.0 mg / kg and 3.0 mg / kg. All rats were housed under usual conditions in accordance with the AALAC guidelines, with access to food and water at will. The food was hidden six hours before the evaluation.

PROCEDIMIENTOS: Se anestesió brevemente cada rata mediante exposición al agente por inhalación 5 halotano con el fin de facilitar el manejo del animal y asegurar la inyección precisa de los agentes de control y prueba. Una vez inconsciente, se realizó una pequeña incisión en la zona de la fosa poplítea de la extremidad posterior. Se obtuvo la exposición del nervio ciático con retracción mínima. Utilizando una jeringa y aguja de tamaño apropiado, se inyectó o bien la formulación de bupivacaína-LyoCell® o bien el clorhidrato de bupivacaína patrón al perineurio del nervio ciático. Se cerró entonces la incisión con una grapa quirúrgica de tamaño apropiado. 10 PROCEDURES: Each rat was briefly anesthetized by exposure to the halothane by inhalation agent in order to facilitate the handling of the animal and ensure the precise injection of the control and test agents. Once unconscious, a small incision was made in the area of the popliteal fossa of the posterior limb. Sciatic nerve exposure was obtained with minimal retraction. Using a syringe and needle of appropriate size, either the bupivacaine-LyoCell® formulation or the standard bupivacaine hydrochloride was injected into the perineurium of the sciatic nerve. The incision was then closed with a surgical clip of appropriate size. 10

Se determinó el bloqueo del anestésico local para la nocicepción térmica mediante la exposición de la pata trasera de la extremidad posterior tratada a la superficie calentada de un aparato de prueba plantar térmica. Se mantuvieron las temperaturas de superficie en un intervalo de desde 50 hasta 54ºC. Se registró mediante un cronómetro digital el periodo de latencia para presentar la retirada de la superficie calentada. Se encontró que el periodo de latencia inicial era de aproximadamente 1 a 3 segundos en patas traseras no anestesiadas. En un intento de minimizar la lesión 15 térmica en la pata trasera, se limitó la exposición al aparato de prueba plantar térmica a 12 segundos. Los periodos de latencia que superaron los 6 segundos se consideraron indicativos de analgesia frente a la prueba térmica. The local anesthetic block for thermal nociception was determined by exposing the hind leg of the treated hind limb to the heated surface of a thermal plantar test apparatus. Surface temperatures were maintained in a range of from 50 to 54 ° C. The latency period was recorded using a digital stopwatch to present the removal of the heated surface. The initial latency period was found to be approximately 1 to 3 seconds on non-anesthetized hind legs. In an attempt to minimize the thermal injury in the hind leg, exposure to the thermal plantar test apparatus was limited to 12 seconds. Latency periods that exceeded 6 seconds were considered indicative of analgesia versus thermal testing.

Se sometió a prueba a seis ratas para determinar la retirada de latencia de la extremidad posterior tratada después de 30 minutos y 60 minutos, y entonces cada hora durante unas cinco horas adicionales. A una dosis de 1 mg/kg de dosis de la formulación de fase cúbica, el efecto de bloqueo sensorial duró más de 5 horas, para 4 de las 6 20 ratas sometidas a prueba y más de 6 horas para dos de las seis ratas sometidas a prueba. Esta formulación mostró por tanto un aumento de la duración en comparación con la misma dosis de la formulación de disolución acuosa comercializada actualmente. Six rats were tested for latency withdrawal from the treated hind limb after 30 minutes and 60 minutes, and then every hour for an additional five hours. At a dose of 1 mg / kg of dose of the cubic phase formulation, the sensory blocking effect lasted more than 5 hours, for 4 of the 6 20 rats tested and more than 6 hours for two of the six rats subjected testing. This formulation thus showed an increase in duration compared to the same dose of the aqueous solution formulation currently marketed.

Ejemplo 22. Este ejemplo demuestra la estabilidad física a largo plazo de dispersiones de la presente invención. Se preparó en primer lugar una fase cúbica mezclando 5,7176 gramos de propofol, 7,8170 gramos de agua y 25 16,5300 gramos del tensioactivo de poloxámero Ethox L-122 en un tubo de ensayo de 50 ml y se agitó con una espátula hasta que estuvo todo en una fase. Se pusieron en un vaso de precipitados de 600 ml 1,0533 gramos de ácido desoxicólico de sodio, 400 ml de agua destilada y 21,0682 gramos de la fase cúbica. Esto se homogeneizó con un homogeneizador Brinkmann PT 10/35 hasta que el material se dispersó. Entonces se microfluidizó esto usando un aparato M1 10L de Microfluidics durante 10 ejecuciones de 1,5 minutos cada ejecución. Se inyectó entonces la 30 dispersión en viales estériles mediante una aguja de calibre 18. Example 22. This example demonstrates the long-term physical stability of dispersions of the present invention. First, a cubic phase was prepared by mixing 5.7176 grams of propofol, 7.8170 grams of water and 25 16.5300 grams of the Ethox L-122 poloxamer surfactant in a 50 ml test tube and stirred with a spatula until it was all in one phase. 1.0533 grams of sodium deoxycholic acid, 400 ml of distilled water and 21.0682 grams of the cubic phase were placed in a 600 ml beaker. This was homogenized with a Brinkmann PT 10/35 homogenizer until the material dispersed. This was then microfluidized using a Microfluidics M1 10L apparatus for 10 runs of 1.5 minutes each run. The dispersion was then injected into sterile vials by an 18 gauge needle.

Se realizaron análisis de pH, tamaño de partícula (medido tal como se describe en el presente documento mediante un aparato de medición del tamaño de partícula Beckmann N4 Plus) y potencial zeta (tal como se describió, con un analizador DELSA) a intervalos regulares durante un periodo de seis meses. Los datos a los seis meses, notificados en la tabla a continuación, indican una excelente estabilidad para la dispersión de partículas. 35 PH, particle size (measured as described herein was analyzed by a Beckmann N4 Plus particle size measuring device) and zeta potential (as described, with a DELSA analyzer) at regular intervals during A period of six months. The six-month data, reported in the table below, indicate excellent stability for particle dispersion. 35

Prueba  Proof

Día 0 6 meses  Day 0 6 months

pH  pH

8,1 7,9  8.1 7.9

Tamaño de partícula  Particle size

132 nm 135 nm  132 nm 135 nm

Potencial zeta  Zeta potential

-48 mV -34 mV  -48 mV -34 mV

Ejemplo 23. Se preparó una fase cúbica inversa que contenía el anestésico etomidato disolviendo 0,0200 gramos de etomidato (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO) en 0,300 g de vitamina E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) y añadiendo 0,190 g de agua destilada y 0,488 g de Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). Después de mezclar meticulosamente esta composición, se comprobó que el material fuera ópticamente isotrópico y de 40 alta viscosidad. A continuación, se disolvieron 0,024 g de tensioactivo aniónico docusato de sodio (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) en 5,992 g de agua destilada. Entonces, se añadieron 0,605 g de la fase cúbica al vaso de precipitados de 50 ml que contenía la disolución de tensioactivo y se dispersó usando un homogeneizador (Brinkmann PT 10/35) a velocidad 10 durante 10 minutos. Se inyectó la dispersión a un vial estéril usando una aguja de calibre 27 unida a un filtro de jeringa de PTFE de 0,20 m (Millipore, Ireland). La observación en un microscopio Polyvar de 45 Reichert-Jung funcionando en modo de contraste de interferencia diferencial (DIC) demostró que se había logrado un tamaño de partícula del orden de 200 nanómetros. Se analizó entonces la dispersión usando un aparato DELSA 440SX de Beckman Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, fijado en modo de medición de potencial zeta. La distribución de potencial zeta medida resultante, usando cuatro ángulos de medición, muestra la distribución centrada en -48,5 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso como para producir una 50 dispersión estable. La concentración de etomidato en esta dispersión era del 0,2% ó 2 mg/ml. Example 23. A reverse cubic phase containing the anesthetic ethomidate was prepared by dissolving 0.0200 grams of etomidate (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO) in 0.300 g of vitamin E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) and adding 0.190 g of distilled water and 0.488 g of Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). After thoroughly mixing this composition, it was found that the material was optically isotropic and of high viscosity. Next, 0.024 g of sodium docusate anionic surfactant (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) was dissolved in 5,992 g of distilled water. Then, 0.605 g of the cubic phase was added to the 50 ml beaker containing the surfactant solution and dispersed using a homogenizer (Brinkmann PT 10/35) at speed 10 for 10 minutes. The dispersion was injected into a sterile vial using a 27 gauge needle attached to a 0.20 µm PTFE syringe filter (Millipore, Ireland). The observation in a Polyvar 45 Reichert-Jung microscope operating in differential interference contrast (DIC) mode showed that a particle size of the order of 200 nanometers had been achieved. The dispersion was then analyzed using a Beckman Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, set in zeta potential measurement mode. The resulting measured zeta potential distribution, using four measurement angles, shows the distribution centered at -48.5 mV, which is a zeta potential intense enough to produce a stable dispersion. The concentration of etomidate in this dispersion was 0.2% or 2 mg / ml.

Ejemplo 24. Se preparó una fase cúbica inversa que contenía el anestésico alfaxolona (5-pregnan-3-ol-11,20-diona) en primer lugar disolviendo 0,071 gramos de alfaxolona (Steraloids, Inc, Newport, RI) en 0,304 g de vitamina E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) y 0,302 g linalool (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI). Tras la disolución, se añadieron 0,385 g de agua destilada y 0,961 g de Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC). Después de mezclar meticulosamente esta composición, el material era ópticamente isotrópico y de alta 5 viscosidad. A continuación, se disolvieron 0,061 g del tensioactivo aniónico desoxicolato de sodio (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) y 0,090 g de glicina (Spectrum Chemical, Gardena, CA) en 4,150 g de agua destilada. Entonces, se añadieron 1,728 g de la fase cúbica al vaso de precipitados de 50 ml que contenía la disolución de tensioactivo y se dispersó usando un homogeneizador (Brinkmann PT 10/35) a velocidad 10 durante 6 minutos. Se filtró la dispersión de alfaxolona usando un filtro de jeringa de PVDF de 0,22 m (Millipore, Ireland). La observación en un 10 microscopio Polyvar de Reichert-Jung funcionando en modo de contraste de interferencia diferencial (DIC) demostró que se había logrado un tamaño de partícula del orden de 200-300 nanómetros. La concentración de alfaxolona en esta dispersión era del 1% ó 10 mg/ml. Example 24. A reverse cubic phase containing the anesthetic alfaxolone (5-pregnan-3-ol-11,20-dione) was prepared first by dissolving 0.071 grams of alphaxolone (Steraloids, Inc, Newport, RI) in 0.304 g of vitamin E (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) and 0.302 g linalool (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI). After dissolution, 0.385 g of distilled water and 0.961 g of Pluronic L122 (Ethox Chemicals, Greenville, SC) were added. After meticulously mixing this composition, the material was optically isotropic and of high viscosity. Next, 0.061 g of the sodium deoxycholate anionic surfactant (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI) and 0.090 g of glycine (Spectrum Chemical, Gardena, CA) were dissolved in 4,150 g of distilled water. Then, 1,728 g of the cubic phase was added to the 50 ml beaker containing the surfactant solution and dispersed using a homogenizer (Brinkmann PT 10/35) at speed 10 for 6 minutes. The alphaxolone dispersion was filtered using a 0.22 µm PVDF syringe filter (Millipore, Ireland). Observation in a Reichert-Jung Polyvar microscope operating in differential interference contrast (DIC) mode showed that a particle size of the order of 200-300 nanometers had been achieved. The concentration of alphaxolone in this dispersion was 1% or 10 mg / ml.

Se analizó la dispersión de alfaxolona usando un analizador de tamaño de partícula submicrométrico N4 PLUS de Beckman Coulter. Se diluyó una gota de la dispersión con agua hasta que se obtuvo un nivel de intensidad de 15 medición adecuado. Tras un tiempo de ejecución de cinco minutos, este instrumento indicó que todas las partículas en la dispersión eran menores que 300 nm, de acuerdo por completo con los resultados de la microscopía óptica de contraste de interferencia diferencial. Se analizó entonces la dispersión de alfaxolona usando un aparato DELSA 440SX de Beckman Coulter para análisis de dispersión de luz por electroforesis Doppler, fijado en modo de medición de potencial zeta. Se diluyó 1:25 la dispersión con agua para lograr niveles del detector apropiados. La distribución de 20 potencial zeta resultante, usando cuatro ángulos de medición, muestra la distribución centrada en -35,5 mV, que es un potencial zeta lo suficientemente intenso como para producir una dispersión estable. Aproximadamente 6 semanas después, se analizó de nuevo la dispersión de alfaxolona usando un analizador de tamaño de partícula submicrométrico N4 PLUS de Beckman Coulter. PCS indicó que la mayoría de las partículas en la dispersión eran menores que 350 nm. La observación en el microscopio DIC reveló partículas pequeñas, uniformes y sin precipitación de alfaxolona. Se midió 25 de nuevo el potencial zeta y se encontró que no se distinguía de los datos originales. The alphaxolone dispersion was analyzed using a Beckman Coulter N4 PLUS submicrometer particle size analyzer. A drop of the dispersion was diluted with water until an appropriate intensity level of 15 measurement was obtained. After an execution time of five minutes, this instrument indicated that all the particles in the dispersion were less than 300 nm, completely in accordance with the results of the differential contrast optical microscopy. The alphaxolone dispersion was then analyzed using a Beckman Coulter DELSA 440SX apparatus for Doppler electrophoresis light scattering analysis, set in zeta potential measurement mode. The dispersion was diluted with water to achieve appropriate detector levels. The resulting zeta potential distribution, using four measurement angles, shows the distribution centered at -35.5 mV, which is a zeta potential intense enough to produce a stable dispersion. Approximately 6 weeks later, the alphaxolone dispersion was analyzed again using a Beckman Coulter N4 PLUS submicron particle size analyzer. PCS indicated that most of the particles in the dispersion were less than 350 nm. Observation in the DIC microscope revealed small, uniform particles without precipitation of alphaxolone. The zeta potential was measured again and found not to be distinguished from the original data.

Ejemplo 25. Se preparó la dispersión líquido-cristalina que contenía el fármaco anestésico local bupivacaína del ejemplo 21 (“F4C”). Se sometió a prueba la formulación en ratas Sprague-Dawley macho, que pesaban 210-260 g, en el modelo de “retirada de la pata” en rata del ejemplo 3 a un nivel de dosis, 1,0 mg/kg, como era la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón (Marcaine® comercializada por Astra-Zeneca). Con el fin de evitar cualquier sesgo por 30 el traumatismo térmico, se evaluaron los grupos de prueba en dos segmentos: Example 25. The liquid-crystalline dispersion containing the local anesthetic drug bupivacaine from example 21 ("F4C") was prepared. The formulation was tested in male Sprague-Dawley rats, weighing 210-260 g, in the "leg removal" model in rat of example 3 at a dose level, 1.0 mg / kg, as it was the standard bupivacaine hydrochloride solution (Marcaine® marketed by Astra-Zeneca). In order to avoid any bias due to thermal trauma, the test groups in two segments were evaluated:

Segmento 1. Se sometieron a prueba seis ratas para determinar la retirada de latencia de la extremidad posterior tratada c hora durante seis horas. Segment 1. Six rats were tested to determine latency withdrawal from the hind limb treated c hour for six hours.

Segmento 2. Si cualquier animal(es) en el segmento 1 presentó analgesia continuada frente a la prueba térmica a las 6 horas, se inyectó a un segundo grupo de seis ratas y se evaluó cada hora sobre el aparato de prueba 35 plantar térmica a las 16, 17 y 18 horas tras la administración. Se sometió a seguimiento a todas las ratas hasta la normalización de los periodos de latencia para asegurarse de que la lesión nerviosa inducida térmicamente no era un factor en periodos de latencia prolongados. Segment 2. If any animal (s) in segment 1 had continuous analgesia against the thermal test at 6 hours, a second group of six rats was injected and the thermal plantar test apparatus was evaluated every hour at 16, 17 and 18 hours after administration. All rats were monitored until normalization of latency periods to ensure that thermally induced nerve injury was not a factor in prolonged latency periods.

Los resultados resumen se exponen en las tres tablas en la tabla conjunta 1. En cada tiempo de medición , el grupo al que se le administró F4C contenía igual o más animales que presentaban bloqueo nervioso que el grupo al que 40 se le administró la disolución patrón. Comenzando a las 4 horas tras la administración, el número de animales en el grupo de disolución patrón que experimentaron bloqueo disminuyó significativamente, mientras que todos los animales en el grupo de F4C permanecieron con bloqueo. Este también fue el caso a las 5 horas tras la administración. A las 16 horas tras la administración, experimentaron bloqueo por lo menos la mitad de los animales del grupo de F4C, y a las 18 horas experimentaron bloqueo 2 de 6 animales en el grupo de F4C. Debido a la intensa disminución de animales con 45 bloqueo en el grupo de disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón (sólo de 1 a 6 horas tras la administración), no se sometieron a prueba los animales en este grupo a de 16 a 18 horas. La duración relativa en este ejemplo era de aproximadamente [16 h]/[4 h] x 100% = 400%, y la dosis relativa del 100%, haciendo el factor de amplificación de aproximadamente 4,0. The summary results are shown in the three tables in the joint table 1. At each measurement time, the group that was administered F4C contained the same or more animals that had a nerve block than the group to which the standard solution was administered. . Starting at 4 hours after administration, the number of animals in the standard dissolution group that underwent blockade decreased significantly, while all animals in the F4C group remained with blockage. This was also the case at 5 hours after administration. At 16 hours after administration, at least half of the animals in the F4C group experienced blockade, and at 18 hours they experienced 2 blockade of 6 animals in the F4C group. Due to the intense decrease of animals with blockage in the standard bupivacaine hydrochloride solution group (only 1 to 6 hours after administration), the animals in this group were not tested at 16 to 18 hours. The relative duration in this example was approximately [16 h] / [4 h] x 100% = 400%, and the relative dose was 100%, making the amplification factor approximately 4.0.

Tabla conjunta 1 50 Joint table 1 50

RESUMEN: NUMERO DE BLOQUEOS SUMMARY: NUMBER OF BLOCKS

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F4C  F4C

6 6 6 6 6 3 3 1 2  6 6 6 6 6 3 3 1 2

Marcaine  Marcaine

6 6 4 3 3 1 NP NP NP  6 6 4 3 3 1 NP NP NP

RESUMEN: PUNTUACIONES TOTALES (en segundos) SUMMARY: TOTAL SCORES (in seconds)

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F4C  F4C

71 71 66 72 65 49 43 31 33  71 71 66 72 65 49 43 31 33

Marcaine  Marcaine

69 66 51 44 40 31 NP NP NP  69 66 51 44 40 31 NP NP NP

RESUMEN: PUNTUACIONES PROMEDIO SUMMARY: AVERAGE SCORES

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F4C  F4C

11,38 11,83 11,00 12,00 10,83 8,17 7,17 5,17 5,50  11.38 11.83 11.00 12.00 10.83 8.17 7.17 5.17 5.50

Marcaine  Marcaine

11,50 11,00 8,50 7,33 6,67 5,17 NP NP NP  11.50 11.00 8.50 7.33 6.67 5.17 NP NP NP

NP = no sometido a prueba  NP = not tested

Ejemplo 26. Se preparó la dispersión líquido-cristalina que contenía el fármaco anestésico local bupivacaína del ejemplo 21 (“F4C”). Se sometió a prueba la formulación en ratas Sprague-Dawley macho, que pesaban 200-275 g, en el modelo de “retirada de la pata” en rata del ejemplo 3 en tres niveles de dosis, 1,0 mg/kg, 0,67 mg/kg y 0,33 mg/kg, 5 sometiéndose a prueba seis ratas por cada formulación para cada dosis. La disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón (Marcaine®) también se sometió a prueba en los mismos tres niveles de dosis. Se suministraron los artículos de prueba a una concentración del 1,5% de agente activo, y se diluyó según se requirió con agua estéril para inyección para administrar las dosis de 0,67 mg/kg y 0,33 mg/kg. Se suministró la bupivacaína patrón a una concentración del 0,75%, y se diluyó según se requirió con agua estéril para inyección para administrar la dosis de 0,33 mg/kg. Se 10 sometieron a prueba las ratas para determinar la latencia de retirada de la pata a las dos horas tras la administración, y entonces comenzando las cuatro horas tras la administración cada hora hasta ocho horas tras la administración. Example 26. The liquid-crystalline dispersion containing the local anesthetic drug bupivacaine of example 21 ("F4C") was prepared. The formulation was tested in male Sprague-Dawley rats, weighing 200-275 g, in the "leg removal" model in rat of example 3 at three dose levels, 1.0 mg / kg, 0, 67 mg / kg and 0.33 mg / kg, 5 testing six rats for each formulation for each dose. The standard bupivacaine hydrochloride solution (Marcaine®) was also tested at the same three dose levels. The test items were supplied at a concentration of 1.5% active agent, and diluted as required with sterile water for injection to administer the doses of 0.67 mg / kg and 0.33 mg / kg. Standard bupivacaine was supplied at a concentration of 0.75%, and diluted as required with sterile water for injection to administer the dose of 0.33 mg / kg. The rats were tested to determine the latency of paw withdrawal two hours after administration, and then starting four hours after administration every hour up to eight hours after administration.

Los resultados resumen se exponen en las tres tablas en la tabla conjunta 2. A las ocho horas tras la administración, más de la mitad de los animales a los que se les administró F4C, en los tres niveles de dosis, experimentaron un efecto de bloqueo sensorial, mientras que ninguno de los animales a los que se les administró la 15 disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón lo hizo (tabla 1). De hecho, ninguno de los animales a los que se les administró la disolución patrón experimentó bloqueo a las 5 horas o después. Esta diferencia de efecto entre la formulación F4C y la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón a lo largo de los grupos de dosis también se manifiesta en las puntuaciones totales (en segundos) (tabla 2) y la puntuación promedio (tabla 3): todos los animales a los que se les administró F4C experimentaron bloqueo con una duración considerablemente más larga que aquellos a 20 los que se les administró la disolución patrón a cualquiera de las dosis administradas. Por tanto, los animales a los que se les administró F4C a 0,33 mg/kg mostraron un bloqueo más largo y considerablemente mayor que los animales a los que se les administró la disolución patrón, incluso a tres veces la dosis. Además, entre los animales a los que se les administró F4C, los dos grupos de menor nivel de dosis mostraron un efecto de bloqueo sensorial importante. Ellos también mostraron puntuaciones totales y puntuaciones promedio similares, si acaso algo menores, en comparación 25 con el grupo de dosis de 1,0 mg/kg, particularmente en comparación con los animales a los que se les administró disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón. El grupo al que se le administró F4C a la menor dosis de prueba, 0,33 mg/kg, mostraron el mismo número de animales con bloqueo que el grupo al que se le administró dos veces la dosis (0,67 mg/kg), y mostraron incluso puntuaciones totales y puntuaciones promedio mayores que el grupo de 0,67 mg/kg. The summary results are presented in the three tables in the joint table 2. At eight hours after administration, more than half of the animals given F4C, at the three dose levels, experienced a blocking effect. sensory, while none of the animals to which the standard bupivacaine hydrochloride solution was administered (table 1). In fact, none of the animals given the standard solution experienced blockage at 5 hours or later. This difference in effect between the F4C formulation and the standard bupivacaine hydrochloride solution throughout the dose groups is also manifested in the total scores (in seconds) (table 2) and the average score (table 3): all Animals that were administered F4C experienced blockage with a considerably longer duration than those at 20 which were administered the standard solution at any of the administered doses. Therefore, the animals that were administered F4C at 0.33 mg / kg showed a longer and considerably larger blockage than the animals to which the standard solution was administered, even at three times the dose. In addition, among the animals that were given F4C, the two lower dose groups showed an important sensory block effect. They also showed similar overall scores and average scores, if somewhat lower, compared to 25 with the 1.0 mg / kg dose group, particularly compared to the animals that were given standard bupivacaine hydrochloride solution. The group that was given F4C at the lowest test dose, 0.33 mg / kg, showed the same number of animals with blockage as the group that was given the dose twice (0.67 mg / kg) , and even showed total scores and average scores higher than the 0.67 mg / kg group.

Tabla conjunta 2 Joint Table 2

RESUMEN: NUMERO DE BLOQUEOS  SUMMARY: NUMBER OF BLOCKS

2 h 4h 5 h 6 h 7 h 8 h  2 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h

F4C 0,33  F4C 0.33

6 6 6 5 5 4  6 6 6 5 5 4

F4C 0,67  F4C 0.67

6 6 6 4 4 4  6 6 6 4 4 4

F4C 1,0  F4C 1.0

6 6 6 6 6 6  6 6 6 6 6 6

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

4 0 0 0 0 0  4 0 0 0 0 0

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

6 3 0 0 0 0  6 3 0 0 0 0

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

6 5 0 0 0 0  6 5 0 0 0 0

RESUMEN: PUNTUACIONES TOTALES (en segundos)  SUMMARY: TOTAL SCORES (in seconds)

2 h 4h 5 h 6 h 7 h 8 h  2 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h

F4C 0,33  F4C 0.33

69 66 65 61 57 53  69 66 65 61 57 53

F4C 0,67  F4C 0.67

70 61 56 49 46 46  70 61 56 49 46 46

F4C 1,0  F4C 1.0

70 69 66 64 61 59  70 69 66 64 61 59

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

46 24 0 0 0 0  46 24 0 0 0 0

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

69 37 25 0 0 0  69 37 25 0 0 0

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

61 48 30 24 0 0  61 48 30 24 0 0

RESUMEN: PUNTUACIONES PROMEDIO  SUMMARY: AVERAGE SCORES

2 h 4h 5 h 6 h 7 h 8 h  2 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h

F4C 0,33  F4C 0.33

11,50 11,00 10,83 10,17 9,50 8,83  11.50 11.00 10.83 10.17 9.50 8.83

F4C 0,67  F4C 0.67

11,67 10,17 9,33 8,17 7,67 7,67  11.67 10.17 9.33 8.17 7.67 7.67

F4C 1,0  F4C 1.0

11,67 11,50 11,00 10,67 10,17 9,83  11.67 11.50 11.00 10.67 10.17 9.83

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

7,67 4,00 0 0 0 0  7.67 4.00 0 0 0 0

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

11,50 6,17 4,17 0 0 0  11.50 6.17 4.17 0 0 0

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

10,17 8,00 5,00 4,00 0 0  10.17 8.00 5.00 4.00 0 0

Ejemplo 27. Se encontró que el tensioactivo Pluronic 123, combinado con agua y varios hidrófobos no parafínicos, formaban fases cúbicas inversas en composiciones específicas. Las composiciones encontradas incluyeron las siguientes composiciones de fases cúbicas inversas: Example 27. It was found that Pluronic 123 surfactant, combined with water and various non-paraffinic hydrophobes, formed inverse cubic phases in specific compositions. The compositions found included the following inverse cubic phase compositions:

Pluronic 123 (47,8%) / aceite de naranja (26,1%) / agua (26,1%); Pluronic 123 (47.8%) / orange oil (26.1%) / water (26.1%);

Pluronic 123 (45,7%) / isoeugenol (21,7) / agua (32,6%); y 5 Pluronic 123 (45.7%) / isoeugenol (21.7) / water (32.6%); and 5

Pluronic 123 (47,8%) / aceite de limón (26,1%) / agua (26,1%). Pluronic 123 (47.8%) / lemon oil (26.1%) / water (26.1%).

Además, estas fases cúbicas pueden solubilizar fármacos de baja solubilidad. Se preparó bupivacaína como base libre (solubilidad en agua inferior al 0,1% en peso) disolviendo 1,00 g de clorhidrato de bupivacaína en 24 ml de agua. Se añadió una cantidad equimolar de NaOH 1 N para precipitar bupivacaína como base libre, que se liofilizó entonces. Se combinaron en un tubo de ensayo de vidrio, 0,280 g bupivacaína como base libre, 0,685 g agua y 0,679 g 10 linalool y se sonicaron para descomponer las partículas de bupivacaína. Entonces se añadieron 0,746 g del tensioactivo Pluronic P 123 (poloxámero 403). Se agitó y calentó la muestra para disolver el fármaco cristalino. Se centrifugó la muestra durante quince minutos. La muestra había formado una fase transparente, altamente viscosa que era ópticamente isotrópica en microscopía de polarización. In addition, these cubic phases can solubilize low solubility drugs. Bupivacaine was prepared as a free base (water solubility of less than 0.1% by weight) by dissolving 1.00 g of bupivacaine hydrochloride in 24 ml of water. An equimolar amount of 1 N NaOH was added to precipitate bupivacaine as a free base, which was then lyophilized. They were combined in a glass test tube, 0.280 g bupivacaine as a free base, 0.685 g water and 0.699 g 10 linalool and sonicated to decompose the bupivacaine particles. Then 0.746 g of the Pluronic P 123 surfactant (poloxamer 403) was added. The sample was stirred and heated to dissolve the crystalline drug. The sample was centrifuged for fifteen minutes. The sample had formed a transparent, highly viscous phase that was optically isotropic in polarization microscopy.

Se preparó también una segunda muestra usando el mismo cristal líquido, entonces formulándola en 15 micropartículas recubiertas con triptofanato de zinc. Estas micropartículas cargadas de bupivacaína son adecuadas para A second sample was also prepared using the same liquid crystal, then formulated in 15 microparticles coated with zinc tryptophanate. These bupivacaine-loaded microparticles are suitable for

inyección subcutánea, como una formulación de liberación lenta del anestésico local con el propósito de prolongar la acción farmacológica y bajar su perfil de toxicidad. subcutaneous injection, as a slow-release formulation of the local anesthetic with the purpose of prolonging the pharmacological action and lowering its toxicity profile.

Se examinaron entonces estas dos muestras por dispersión de rayos X de ángulo pequeño. Se recopilaron los datos en una línea de rayos X de ángulo pequeño con radiación de cobre, espejos de Frank, una cámara de muestra y trayectoria de vuelo evacuada, un detector de área de múltiples hilos Bruker, y una distancia de muestra a detector de 5 58 cm (intervalo de espaciado d de 172 a 15 angstroms). Puesto que el mayor espaciado d observado en esta muestra estaba cerca al límite de detección con esta cámara, se ejecutó también en una línea de rayos X de ángulo pequeño 2D de 6 metros con radiación de cobre, óptica multicapa Osmic, colimación con agujero puntual, una cámara de muestra llena de helio de trayectoria de vuelo evacuada y un detector de área de hilos múltiples Bruker y una distancia de muestra a detector de 328 cm. A 328 cm, el detector tiene un intervalo de 90 a 700 angstroms. Se cargó el primer 10 material en un capilar de rayos X de d.i. de 1,5 mm de Charles Supper Corp. La muestra se ejecutó a 18ºC. Las imágenes bidimensionales desde la distancia de 58 cm se integraron con un tamaño de escalón de 0,02 grados dos-theta. Se integraron datos desde la línea de 6 metros con un tamaño de escalón de 0,002 grados dos-theta y esas representaciones gráficas se superpusieron con las ejecuciones en la distancia más corta, y se obtuvo una excelente concordancia entre las posiciones de pico registradas con las dos cámaras. 15 These two samples were then examined by small angle X-ray scattering. Data were collected on a small angle X-ray line with copper radiation, Frank mirrors, a sample chamber and evacuated flight path, a Bruker multi-wire area detector, and a sample-to-detector distance of 5 58 cm (spacing range d from 172 to 15 angstroms). Since the greatest spacing d observed in this sample was close to the detection limit with this camera, it was also executed in a 6-meter 2D small angle X-ray line with copper radiation, Osmic multilayer optics, point hole collimation, a sample chamber filled with evacuated flight path helium and a Bruker multi-wire area detector and a sample-to-detector distance of 328 cm. At 328 cm, the detector has a range of 90 to 700 angstroms. The first 10 material was loaded into an x-ray capillary of d.i. 1.5 mm from Charles Supper Corp. The sample was run at 18 ° C. Two-dimensional images from the distance of 58 cm were integrated with a step size of 0.02 degrees two-theta. Data were integrated from the 6-meter line with a step size of 0.002 degrees two-theta and those graphical representations overlapped with executions in the shortest distance, and excellent agreement was obtained between the peak positions recorded with the two cameras fifteen

Se usó el programa de software de análisis de picos de rayos X JADE, de Materials Data Analysis, Inc., para analizar los datos resultantes para determinar la presencia y posición de los picos. Dentro de ese programa, se aplicó la opción “ajuste de centroide”. The JADE X-ray analysis software program from Materials Data Analysis, Inc. was used to analyze the resulting data to determine the presence and position of the peaks. Within that program, the option "centroid adjustment" was applied.

Los datos de SAXS muestran picos Bragg determinados por JADE en las posiciones 154,6, 80,6, 61,6 y 46,3 angstroms. Estos picos se indexan para una estructura de fase cúbica del grupo espacial de fase cúbica observado 20 comúnmente de Pn3m (ver Pelle Ström y D. M. Anderson, Langmuir, 1992, vol. 8, pág. 691 para una discusión detallada de las estructuras de fase cúbica observadas más comúnmente y sus patrones de SAXs). Estos cuatro picos de hecho se indexan como los picos (110), (211), (222) y (420) de este grupo espacial (n.º 229), con un parámetro de red de 210 angstroms. La segunda muestra presenta un pico, a 104,6 angstroms, que parece indexarse como el pico (200) de la misma red. La segunda muestra también presenta tres picos con espaciados d menores que 25 angstroms que se 25 deben claramente a la cubierta de triptofanato de zinc cristalina. SAXS data shows Bragg peaks determined by JADE at positions 154.6, 80.6, 61.6 and 46.3 angstroms. These peaks are indexed for a cubic phase structure of the commonly observed cubic phase space group 20 of Pn3m (see Pelle Ström and DM Anderson, Langmuir, 1992, vol. 8, p. 691 for a detailed discussion of the cubic phase structures most commonly observed and their patterns of SAXs). These four peaks are in fact indexed as peaks (110), (211), (222) and (420) of this spatial group (# 229), with a network parameter of 210 angstroms. The second sample shows a peak, at 104.6 angstroms, which seems to be indexed as the peak (200) of the same network. The second sample also presents three peaks with spacing d less than 25 angstroms that are clearly due to the crystalline zinc tryptophanate shell.

El isoeugenol es un componente mayoritario del aceite de ilang-ilang y de otros aceites esenciales, y ha sido el centro de varios estudios de toxicidad demostrando su baja toxicidad. El linalool es un componente mayoritario del aceite de cilantro así como también de otros aceites esenciales tales como aceites de naranja y canela, y se considera no parafínico según la definición facilitada anteriormente porque la longitud máxima de cadena hidrocarbonada saturada 30 es de sólo 5; la naturaleza no parafínica de este compuesto se pone de relieve por la presencia de no sólo enlaces insaturados sino además ramificación, carbonos terciarios y un grupo hidroxilo. El linalool ha sido también el objeto de estudios intensivos sobre toxicidad que muestran casi universalmente baja toxicidad y mutagenicidad, y en particular se notificó que la DL50 para inyección subcutánea en ratones era de 1,470 mg/kg. Ver el informe NIEHS preparado por Technical Resources International, Inc. con el n.º de contrato NO2-CB-50511, junio de 1997, revisado en sept. de 1997. 35 Isoeugenol is a major component of ilang-ilang oil and other essential oils, and has been the center of several toxicity studies demonstrating its low toxicity. Linalool is a major component of coriander oil as well as other essential oils such as orange and cinnamon oils, and is considered non-paraffinic according to the definition provided above because the maximum length of saturated hydrocarbon chain 30 is only 5; The non-paraffinic nature of this compound is highlighted by the presence of not only unsaturated bonds but also branching, tertiary carbons and a hydroxyl group. Linalool has also been the subject of intensive toxicity studies that show almost universally low toxicity and mutagenicity, and in particular it was reported that the LD50 for subcutaneous injection in mice was 1,470 mg / kg. See the NIEHS report prepared by Technical Resources International, Inc. with contract number NO2-CB-50511, June 1997, revised on Sept. of 1997. 35

Los Pluronic (también denominados poloxámeros) son una clase abundante de tensioactivos que incluyen variantes que cubren una amplia gama de pesos moleculares y HLB (equilibrio hidrófilo-hidrófobo). Aquellos con bajos HLB son de baja solubilidad al agua, especialmente si son de alto PM, y P123 es un ejemplo de un tensioactivo de este tipo que, no obstante, tiene un grupo PEG suficientemente grande como para formar estructuras de autoasociación en una amplia gama de condiciones. Además, su PM relativamente alto también fomenta la formación de fases líquido-40 cristalinas (en contraposición a líquidas), lo que es muy favorable en el presente contexto. También se sabe que los Pluronic interaccionan fuertemente con biomembranas de modo que mejora la absorción celular de fármacos, y de hecho pueden inhibir determinadas proteínas de flujo de salida, tales como glicoproteína P y otras proteínas MDR que son responsables de la resistencia a múltiples fármacos. La fosfatidilcolina, por ejemplo, no ha demostrado, o ni siquiera se ha especulado que sepa este autor, que desempeña esta última función en la administración de fármacos. Los 45 Pluronic como una clase son el objeto de un Drug Master File con la FDA, y un número figura en una lista explícitamente en la lista de Principios Inactivos de 1996 como que están aprobados para formulaciones inyectables, lo que indica su baja toxicidad. Pluronic (also called poloxamers) are an abundant class of surfactants that include variants that cover a wide range of molecular weights and HLB (hydrophilic-hydrophobic balance). Those with low HLB are of low water solubility, especially if they are high PM, and P123 is an example of such a surfactant that, however, has a PEG group large enough to form self-association structures in a wide range of conditions. In addition, its relatively high PM also promotes the formation of liquid-crystalline phases (as opposed to liquids), which is very favorable in the present context. It is also known that Pluronic interacts strongly with biomembranes so that it improves the cellular absorption of drugs, and in fact can inhibit certain outflow proteins, such as P glycoprotein and other MDR proteins that are responsible for resistance to multiple drugs. Phosphatidylcholine, for example, has not been shown, or even speculated to know by this author, who plays the latter role in drug administration. The Pluronic 45s as a class are the subject of a Drug Master File with the FDA, and a number is explicitly listed in the Inactive Principles list of 1996 as being approved for injectable formulations, indicating their low toxicity.

Ejemplo 28. Se formuló la fase cúbica del ejemplo 1 como micropartículas recubiertas (de acuerdo con la patente estadounidense 6.482.517 que se incorpora al presente documento como referencia), y mostró en pruebas en 50 ratas que la formulación aumenta fuertemente la duración de acción de bupivacaína. Se combinó una cantidad de 10,930 g de Pluronic P123 con 2,698 g de bupivacaína como base libre, 10,912 g de linalool y 5,447 g de agua estéril, y se agitó para formar una fase cúbica inversa. De esto, se combinaron 24,982 gramos de fase cúbica en un matraz con 62,807 g de una disolución de dietanolamina-N-acetiltriptófano; esta última se preparó mezclando 16,064 g de dietanolamina, 36,841 g de agua estéril y 22,491 g de N-acetiltriptófano y se sonicó para combinarse. Se agitó en primer 55 lugar la mezcla de fase cúbica/dietanolamina-NAT, entonces se homogeneizó, y finalmente se procesó en un microfluidizador de Microfluidics hasta un tamaño de partícula menor que 300 nm. Mientras que el material aún estaba en el microfluidizador, se añadieron 47,219 g de una disolución al 25% en peso de acetato de zinc y 5,377 g de dietanolamina, y la mezcla total se microfluidizó durante 20 ejecuciones de 1,5 minutos cada una. Se inyectaron entonces cinco ml de una mezcla caliente (60ºC) de agua y sorbitano-monopalmitina (6%) durante la microfluidización, y 60 a continuación 5 ml de una disolución acuosa de albúmina al 14%. Después de microfluidización adicional, se dividió la Example 28. The cubic phase of Example 1 was formulated as coated microparticles (according to US Patent 6,482,517 which is incorporated herein by reference), and showed in tests in 50 rats that the formulation strongly increases the duration of action of bupivacaine. An amount of 10,930 g of Pluronic P123 was combined with 2,698 g of bupivacaine as a free base, 10,912 g of linalool and 5,447 g of sterile water, and stirred to form an inverse cubic phase. Of this, 24,982 grams of the cubic phase were combined in a flask with 62,807 g of a solution of diethanolamine-N-acetyltryptophan; The latter was prepared by mixing 16,064 g of diethanolamine, 36,841 g of sterile water and 22,491 g of N-acetyl tryptophan and sonicated to combine. The cubic phase / diethanolamine-NAT mixture was stirred first, then homogenized, and finally processed in a Microfluidics microfluidizer to a particle size less than 300 nm. While the material was still in the microfluidizer, 47,219 g of a 25% by weight solution of zinc acetate and 5,377 g of diethanolamine were added, and the total mixture was microfluidized for 20 runs of 1.5 minutes each. Five ml of a hot mixture (60 ° C) of water and sorbitan-monopalmitin (6%) were then injected during microfluidization, and then 5 ml of a 14% aqueous solution of albumin. After additional microfluidization, the

dispersión en 42 tubos de centrífuga de 3,5 ml de dispersión cada uno, y se añadieron aproximadamente 0,14 g de carbón activado Norit a cada tubo, y se agitó el tubo durante 15 minutos en un oscilador. Se centrifugó entonces cada tubo durante 5 minutos en una centrífuga de mesa a 6000 rpm. Se prefiltró entonces la dispersión, se filtró luego a 0,8 micras usando filtros Millex AA, se puso entonces en una vial sellado y se envió a una instalación para pruebas con animales. 5 dispersion in 42 centrifuge tubes of 3.5 ml dispersion each, and approximately 0.14 g of Norit activated carbon was added to each tube, and the tube was stirred for 15 minutes on an oscillator. Each tube was then centrifuged for 5 minutes in a tabletop centrifuge at 6000 rpm. The dispersion was then prefiltered, then filtered to 0.8 microns using Millex AA filters, then placed in a sealed vial and sent to an animal testing facility. 5

Se sometió a prueba la formulación en ratas Spraque-Dawley macho, que pesaban 220-250 g. Se mantuvieron los animales en condiciones habituales, con acceso a comida y agua a voluntad. Se les anestesió brevemente con halotano para facilitar la inyección. Entonces se sometió a prueba el bloqueo del nervio ciático realizando en primer lugar una pequeña incisión en el espacio de la fosa poplítea sobre la región del nervio ciático; se visualizó entonces el nervio ciático, se identificó y se inyectó entonces el agente de prueba o control Marcaine en la vaina del nervio ciático y 10 se cerró quirúrgicamente la incisión. Se determinó el bloqueo de la nocicepción térmica poniendo la rata sobre la superficie de vidrio de un aparato de prueba plantar térmica (modelo 336, IITC Inc.), con la superficie mantenida a 30ºC. Se enfocó una fuente de calor radiante móvil debajo del vidrio sobre la pata trasera de la rata, y se registró la latencia de retirada de la pata mediante un cronómetro digital. Se encontró que la latencia inicial era de 10 segundos. Se sometieron a prueba las ratas para determinar la latencia a los 30 minutos y cada hora después de eso. 15 The formulation was tested in male Spraque-Dawley rats, which weighed 220-250 g. The animals were kept in usual conditions, with access to food and water at will. They were briefly anesthetized with halothane to facilitate injection. The blockage of the sciatic nerve was then tested by first making a small incision in the space of the popliteal fossa over the region of the sciatic nerve; The sciatic nerve was then visualized, the Marcaine test or control agent was then injected and injected into the sciatic nerve sheath and the incision was surgically closed. The thermal nociception block was determined by placing the rat on the glass surface of a thermal plantar test apparatus (model 336, IITC Inc.), with the surface maintained at 30 ° C. A mobile radiant heat source was focused under the glass on the rat's hind leg, and the leg withdrawal latency was recorded by a digital stopwatch. The initial latency was found to be 10 seconds. The rats were tested for latency at 30 minutes and every hour after that. fifteen

Se encontró que el efecto de bloqueo sensorial con el patrón bupivacaína HCl al 0,5%, a una dosis de 3 mg/kg, era de 4-5 horas, en completa concordancia con la duración bien conocida de bloqueo nervioso de Marcaine®. Por el contrario, a la misma dosis de 3 mg/kg de la formulación de fase cúbica, el efecto de bloqueo sensorial duró aproximadamente 22-26 horas. Además, el propio tiempo de latencia aumentó enormemente en el caso de la fase cúbica con relación al caso de la disolución, indicando un profundo bloqueo del dolor. La eficacia del fármaco, por tanto, 20 no sólo no se vio disminuida sino que en realidad mejoró mediante esta formulación. Se observa que mientras que esta dosis de 3 mg/kg no era supertóxica y en efecto, no hubo muertes o tampoco secuelas graves, tampoco era subtóxica según la definición anterior; es decir, con respecto a esta última, ésta no sería una dosis que se encontraría dentro del intervalo recomendado de uso rutinario. La duración relativa en este ejemplo era de aproximadamente el 600% y la dosis relativa (basada en la dosis terapéutica convencional de 1 mg/kg) era del 300%, haciendo el factor de 25 amplificación de aproximadamente 2,0. The sensory block effect with the 0.5% bupivacaine HCl pattern, at a dose of 3 mg / kg, was found to be 4-5 hours, in full accordance with the well-known duration of Marcaine® nerve block. On the contrary, at the same dose of 3 mg / kg of the cubic phase formulation, the sensory blocking effect lasted approximately 22-26 hours. In addition, the latency time itself increased greatly in the case of the cubic phase in relation to the case of dissolution, indicating a deep blockage of pain. The efficacy of the drug, therefore, not only was not diminished but actually improved by this formulation. It is observed that while this dose of 3 mg / kg was not super-toxic and in fact, there were no deaths or serious sequelae, it was not sub-toxic according to the previous definition; that is, with respect to the latter, this would not be a dose that would be within the recommended range of routine use. The relative duration in this example was approximately 600% and the relative dose (based on the conventional therapeutic dose of 1 mg / kg) was 300%, making the amplification factor approximately 2.0.

Ejemplo 29. Se combinó una cantidad de 15,027 g de Pluronic P123 con 2,703 g de bupivacaína como base libre, 10,972 g de toceferol (vitamina E) y 5,464 g de agua estéril, y se agitó para formar una fase cúbica inversa. De esto, se combinaron 25,018 gramos de fase cúbica en un matraz con 62,872 g de una disolución de dietanolamina-N-acetiltriptófano; esta última se preparó mezclando 16,037 g de dietanolamina, 36,838 g de agua estéril y 22,5031 g de 30 N-acetiltriptófano y se sonicó para combinarse. Se agitó en primer lugar la mezcla de fase cúbica/dietanolamina-NAT, entonces se homogeneizó y finalmente se procesó en un microfluidizador de Microfluidics hasta un tamaño de partícula menor que 300 nm. Mientras que el material aún estaba en el microfluidizador, se añadieron 47,279 g de una disolución de acetato de zinc al 25 % en peso y 5,371 g de dietanolamina, y se microfluidizó la mezcla total durante 21 ejecuciones de 1,5 minutos cada una. Se inyectaron entonces cinco ml de una mezcla caliente (60ºC) de agua y sorbitano-35 monopalmitina (6%) durante la microfluidización, y a continuación 5 ml de una disolución acuosa de albúmina al 15%. Después de microfluidización adicional, se dividió la dispersión en tubos de centrífuga de 3,5 ml de dispersión cada uno, y se añadieron aproximadamente 0,14 g de carbón activado Norit a cada tubo, y se agitó el tubo durante 15 minutos en un oscilador. Se centrifugó entonces cada tubo durante 5 minutos en una centrífuga de mesa a 6000 rpm. Entonces se prefiltró la dispersión, luego se filtró a 0,8 micras usando filtros Millex AA, se puso entonces en una vial sellada y se 40 envió a una instalación para pruebas con animales. A esta formulación se le dio la referencia “F2V”. Example 29. An amount of 15,027 g of Pluronic P123 was combined with 2,703 g of bupivacaine as a free base, 10,972 g of toceferol (vitamin E) and 5,464 g of sterile water, and stirred to form an inverse cubic phase. Of this, 25,018 grams of cubic phase were combined in a flask with 62,872 g of a solution of diethanolamine-N-acetyl tryptophan; The latter was prepared by mixing 16,037 g of diethanolamine, 36,838 g of sterile water and 22,5031 g of 30 N-acetyl tryptophan and sonicated to combine. The cubic phase / diethanolamine-NAT mixture was first stirred, then homogenized and finally processed in a Microfluidics microfluidizer to a particle size of less than 300 nm. While the material was still in the microfluidizer, 47,279 g of a 25% by weight zinc acetate solution and 5,371 g of diethanolamine were added, and the total mixture was microfluidized for 21 runs of 1.5 minutes each. Five ml of a hot mixture (60 ° C) of water and sorbitan-35 monopalmitin (6%) were then injected during microfluidization, and then 5 ml of a 15% aqueous albumin solution. After further microfluidization, the dispersion was divided into centrifuge tubes of 3.5 ml dispersion each, and approximately 0.14 g of Norit activated carbon was added to each tube, and the tube was stirred for 15 minutes on an oscillator . Each tube was then centrifuged for 5 minutes in a tabletop centrifuge at 6000 rpm. The dispersion was then prefiltered, then filtered at 0.8 microns using Millex AA filters, then placed in a sealed vial and sent to an animal testing facility. This formulation was given the reference "F2V".

Se sometieron a prueba estas formulaciones en ratas Sprague-Dawley macho en el modelo de “retirada de la pata” para determinar la duración de la analgesia. Se estudiaron ratas Sprague-Dawley macho, que pesaban 200-260 g a un nivel de dosis, 1,0 mg/kg. Se mantuvieron las temperaturas de superficie en un intervalo de desde 50 hasta 54ºC. Se registró mediante cronómetro digital el periodo de latencia para presentar retirada de la pata de la superficie 45 calentada. Se encontró que el periodo de latencia de referencia era de aproximadamente 1 a 3 segundos en patas traseras no anestesiadas. En un intento de minimizar la lesión térmica de la pata trasera, se limitó la exposición máxima al aparato de pruebas plantares térmicas a 12 segundos. Los periodos de latencia que superaron los 6 segundos se consideraron indicativos de analgesia frente a la prueba térmica. Cada grupo comprendía seis ratas, y se sometieron a prueba para determinar la latencia de retirada de la pata de la extremidad posterior tratada cada hora comenzando una 50 hora tras la administración y continuando durante seis horas tras la administración. Con el fin de evitar cualquier sesgo por el traumatismo térmico, se evaluaron los grupos de prueba en dos segmentos, tal como se describió anteriormente. These formulations were tested in male Sprague-Dawley rats in the "leg removal" model to determine the duration of analgesia. Male Sprague-Dawley rats, weighing 200-260 g at a dose level, 1.0 mg / kg were studied. Surface temperatures were maintained in a range of from 50 to 54 ° C. The latency period was recorded by digital stopwatch to present removal of the leg from the heated surface 45. The reference latency period was found to be approximately 1 to 3 seconds on non-anesthetized hind legs. In an attempt to minimize the thermal injury of the hind leg, the maximum exposure to the thermal plantar test apparatus was limited to 12 seconds. Latency periods that exceeded 6 seconds were considered indicative of analgesia versus thermal testing. Each group comprised six rats, and were tested to determine the withdrawal latency of the hind limb treated every hour starting 50 hours after administration and continuing for six hours after administration. In order to avoid any bias due to thermal trauma, the test groups were evaluated in two segments, as described above.

Los resultados resumen se exponen en tres tablas en la tabla conjunta 3. En cada tiempo de medición, todos los grupos a los que se les administró F2V contenían igual o más animales que mostraban bloqueo nervioso que los grupos a los que se les administró la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón. Comenzando a las 4 horas tras la 55 administración, el número de animales en el grupo de la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón que experimentaron bloqueo disminuyó significativamente, mientras que todos los animales en los grupos de F2V permanecieron con bloqueo. Este también fue el caso a las 5 horas tras la administración y continuó siendo el caso para el grupo de F2V a las 6 horas tras la administración. A las 16 horas tras la administración, experimentaron bloqueo más de la mitad del grupo de F2V. A las 17 horas experimentaron bloqueo 5 de los seis animales en el grupo de F2V. Debido 60 a la intensa disminución de animales con bloqueo en el grupo de disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón (sólo de 1 a 6 horas tras la administración), no se sometieron a prueba los animales en este grupo a de 16 a 18 horas. Las The summary results are presented in three tables in the joint table 3. At each measurement time, all the groups that were administered F2V contained the same or more animals that showed nerve block than the groups to which the solution was administered of standard bupivacaine hydrochloride. Starting at 4 hours after administration, the number of animals in the standard bupivacaine hydrochloride solution group that experienced blockage decreased significantly, while all animals in the F2V groups remained blocked. This was also the case at 5 hours after administration and continued to be the case for the F2V group at 6 hours after administration. At 16 hours after administration, they experienced blockage of more than half of the F2V group. At 5 pm they experienced 5 blockade of the six animals in the F2V group. Due to the sharp decline in animals with blockage in the standard bupivacaine hydrochloride solution group (only 1 to 6 hours after administration), animals in this group were not tested at 16 to 18 hours. The

puntuaciones totales (en segundos) y las puntuaciones promedio para cada grupo son sistemáticas, y muestran puntuaciones significativamente mayores para el grupo de F2V que la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón a las cinco horas tras la administración y después. La duración relativa en este ejemplo era de aproximadamente [17 h]/[4 h] x 100% = 425%, y la dosis relativa del 100%, haciendo el factor de amplificación de aproximadamente 4,25. Total scores (in seconds) and average scores for each group are systematic, and show significantly higher scores for the F2V group than the standard bupivacaine hydrochloride solution at five hours after administration and after. The relative duration in this example was approximately [17 h] / [4 h] x 100% = 425%, and the relative dose was 100%, making the amplification factor approximately 4.25.

Tabla conjunta 3 5 Joint table 3 5

RESUMEN: NUMERO DE BLOQUEOS SUMMARY: NUMBER OF BLOCKS

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F2V  F2V

6 6 6 6 6 6 4 5 1  6 6 6 6 6 6 4 5 1

Marcaine  Marcaine

6 6 4 3 3 1 NP NP NP  6 6 4 3 3 1 NP NP NP

RESUMEN: PUNTUACIONES TOTALES (en segundos) SUMMARY: TOTAL SCORES (in seconds)

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F2V  F2V

72 71 68 71 70 64 53 56 37  72 71 68 71 70 64 53 56 37

Marcaine  Marcaine

69 66 51 44 40 31 NP NP NP  69 66 51 44 40 31 NP NP NP

RESUMEN: PUNTUACIONES PROMEDIO SUMMARY: AVERAGE SCORES

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 16 h 17 h 18 h

F2V  F2V

12,00 11,83 11,33 11,83 11,67 10,67 8,83 9,33 6,17  12.00 11.83 11.33 11.83 11.67 10.67 8.83 9.33 6.17

Marcaine  Marcaine

11,50 11,00 8,50 7,33 6,67 5,17 NP NP NP  11.50 11.00 8.50 7.33 6.67 5.17 NP NP NP

NP = no sometido a prueba  NP = not tested

10  10

Ejemplo 30. Se preparó la dispersión líquido-cristalina de partículas recubiertas que contenía el fármaco anestésico local bupivacaína del ejemplo 29 (“F2V”). Se sometió a prueba la formulación en ratas Sprague-Dawley macho, que pesaban 200-275 g, en el modelo de “retirada de la pata” en rata del ejemplo 103 en tres niveles de dosis, 1,0 mg/kg, 0,67 mg/kg y 0,33 mg/kg, sometiéndose a prueba seis ratas para cada formulación para cada dosis. La disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón (Marcaine®) también se sometió a prueba en los mismos tres niveles de 15 dosis. Se suministraron los artículos de prueba a una concentración de agente activo del 1,5%, y se diluyó según se requirió con agua estéril para inyección para administrar las dosis de 0,67 mg/kg y 0,33 mg/kg. Se suministró la bupivacaína patrón a una concentración del 0,75%, y se diluyó según se requirió con agua estéril para inyección para administrar la dosis de 0,33 mg/kg. Se sometieron a prueba las ratas para determinar la latencia de retirada de la pata a las dos horas tras la administración, y entonces comenzando a las cuatro horas tras la administración cada hora durante 20 siete horas tras la administración. Example 30. The liquid-crystalline dispersion of coated particles containing the local anesthetic drug bupivacaine of example 29 ("F2V") was prepared. The formulation was tested in male Sprague-Dawley rats, weighing 200-275 g, in the "leg removal" model in rat of example 103 at three dose levels, 1.0 mg / kg, 0, 67 mg / kg and 0.33 mg / kg, six rats being tested for each formulation for each dose. The standard bupivacaine hydrochloride solution (Marcaine®) was also tested at the same three levels of 15 doses. Test items were supplied at an active agent concentration of 1.5%, and diluted as required with sterile water for injection to administer doses of 0.67 mg / kg and 0.33 mg / kg. Standard bupivacaine was supplied at a concentration of 0.75%, and diluted as required with sterile water for injection to administer the dose of 0.33 mg / kg. The rats were tested to determine the latency of paw withdrawal at two hours after administration, and then starting at four hours after administration every hour for 20 seven hours after administration.

Los resultados resumen se exponen en tres tablas en la tabla conjunta 4. A las siete horas tras la administración, más de la mitad de los animales a los que se les administró F2V, en los tres niveles de dosis, experimentaron un efecto de bloqueo sensorial, mientras ninguno de los animales a los que se les administró disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón lo hizo (tabla 1). De hecho, ninguno de los animales a los que se les administró 25 disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón experimentó bloqueo a las 6 horas o después. Esta diferencia en el efecto entre la formulación F2V y la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón a lo largo de los grupos de dosis se manifiesta también en las puntuaciones totales (en segundos) (tabla 2) y la puntuación promedio (tabla 3): todos los animales a los que se les administró F2V experimentaron bloqueo con una duración significativamente más prolongada que aquellos a los que se les administró la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón a cualquiera de las dosis 30 administradas. Por tanto, los animales a los que se les administró F2V a 0,33 mg/kg mostraron un bloqueo más prolongado y significativamente mayor que los animales a los que se les administró la disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón, incluso a tres veces la dosis. Además, entre los animales a los que se les administró F2V, los dos grupos de menor nivel de dosis mostraron un efecto de bloqueo sensorial importante. Además mostraron puntuaciones totales y puntuaciones promedio similares o mayores en comparación con el grupo de dosis de 0,67 mg/kg y 1,0 mg/kg, 35 particularmente en comparación con los animales a los que se les administró disolución de clorhidrato de bupivacaína patrón. El grupo al que se le administró F2V a la menor dosis de prueba, 0,33 mg/kg, mostraron el mismo número de animales con bloqueo que el grupo al que se le administró dos veces la dosis (0,67 mg/kg) y uno más que el grupo al que se le administró tres veces la dosis (1,0 mg/kg). The summary results are presented in three tables in the joint table 4. At seven hours after administration, more than half of the animals that were administered F2V, at the three dose levels, experienced a sensory blocking effect. , while none of the animals that were administered standard bupivacaine hydrochloride solution did so (table 1). In fact, none of the animals given the standard bupivacaine hydrochloride solution experienced blockage at 6 hours or later. This difference in the effect between the F2V formulation and the standard bupivacaine hydrochloride solution throughout the dose groups is also manifested in the total scores (in seconds) (table 2) and the average score (table 3): all the animals that were administered F2V experienced blockage with a significantly longer duration than those that were administered the standard bupivacaine hydrochloride solution at any of the doses administered. Therefore, the animals that were administered F2V at 0.33 mg / kg showed a longer and significantly greater blockade than the animals that were administered the standard bupivacaine hydrochloride solution, even at three times the dose. . In addition, among the animals to which F2V was administered, the two groups with the lowest dose level showed an important sensory blocking effect. They also showed similar or higher total scores and average scores compared to the 0.67 mg / kg and 1.0 mg / kg dose group, 35 particularly compared to the animals that were given bupivacaine hydrochloride solution. Pattern. The group that was administered F2V at the lowest test dose, 0.33 mg / kg, showed the same number of animals with blockade as the group that was administered twice the dose (0.67 mg / kg) and one more than the group to which the dose was administered three times (1.0 mg / kg).

Centrándose en los resultados a 0,33 mg/kg, se observa que la duración de acción fue de más de 7 horas (el tiempo máximo permitido debido a restricciones experimentales), puesto que 5 de 6 ratas experimentaron bloqueo aún después de 7 horas. Esto permite poner un límite inferior en el factor de amplificación. Usando esta cifra de 7 horas, la duración relativa en este ejemplo era de [7 h]/[4 h] x 100% = 175%, y la dosis relativa del 33%, haciendo el factor de amplificación de aproximadamente 5,25. 5 Focusing on the results at 0.33 mg / kg, it is observed that the duration of action was more than 7 hours (the maximum time allowed due to experimental restrictions), since 5 of 6 rats experienced blockage even after 7 hours. This allows to set a lower limit on the amplification factor. Using this 7-hour figure, the relative duration in this example was [7 h] / [4 h] x 100% = 175%, and the relative dose of 33%, making the amplification factor approximately 5.25. 5

Tabla conjunta 4 Joint Table 4

RESUMEN: NUMERO DE BLOQUEOS SUMMARY: NUMBER OF BLOCKS

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h

FV2 0,33  FV2 0.33

6 6 6 5 5 5 5  6 6 6 5 5 5 5

FV2 0,67  FV2 0.67

6 6 6 6 6 5 5  6 6 6 6 6 5 5

FV2 1,0  FV2 1.0

6 6 6 6 5 5 4  6 6 6 6 5 5 4

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

6 6 3 2 0 0 NP  6 6 3 2 0 0 NP

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

6 6 1 0 1 0 NP  6 6 1 0 1 0 NP

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

6 5 5 3 3 0 NP  6 5 5 3 3 0 NP

RESUMEN: PUNTUACIONES TOTALES (en segundos) SUMMARY: TOTAL SCORES (in seconds)

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h

FV2 0,33  FV2 0.33

70 66 58 61 57 58 55  70 66 58 61 57 58 55

FV2 0,67  FV2 0.67

72 63 72 67 66 55 56  72 63 72 67 66 55 56

FV2 1,0  FV2 1.0

72 63 70 65 60 54 52  72 63 70 65 60 54 52

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

72 54 46 36 28 28 NP  72 54 46 36 28 28 NP

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

72 58 33 27 29 24 NP  72 58 33 27 29 24 NP

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

68 53 52 46 39 24 NP  68 53 52 46 39 24 NP

RESUMEN: PUNTUACIONES PROMEDIO SUMMARY: AVERAGE SCORES

1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h  1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h

FV2 0,33  FV2 0.33

11,67 11,00 9,67 10,17 9,50 9,67 9,17  11.67 11.00 9.67 10.17 9.50 9.67 9.17

FV2 0,67  FV2 0.67

12,00 10,50 12,00 11,17 11,00 9,17 9,33  12.00 10.50 12.00 11.17 11.00 9.17 9.33

FV2 1,0  FV2 1.0

12,00 10,50 11,67 10,83 10,00 9,00 8,67  12.00 10.50 11.67 10.83 10.00 9.00 8.67

Marcaine 0,33  Marcaine 0.33

12,00 9,00 7,67 6,00 4,67 4,67 NP  12.00 9.00 7.67 6.00 4.67 4.67 NP

Marcaine 0,67  Marcaine 0.67

12,00 9,67 5,50 4,50 4,83 4,00 NP  12.00 9.67 5.50 4.50 4.83 4.00 NP

Marcaine 1,0  Marcaine 1.0

11,33 8,83 8,67 7,67 6,50 4,00 NP  11.33 8.83 8.67 7.67 6.50 4.00 NP

NP = no sometido a prueba  NP = not tested

10  10

Ejemplo 31. En este ejemplo, se solubilizó el fármaco anticancerígeno paclitaxel en una fase cúbica de Pluronic-aceite esencial-agua, que se encapsuló mediante una cubierta zinc-NAT como en el ejemplo 2. Se preparó la fase cúbica mezclando 0,070 g de goma benjuí, 0,805 g de aceite esencial de albahaca y 0,851 g de aceite de ilang-ilang, calentando para disolver la goma benjuí, entonces añadiendo 265 mg de paclitaxel, 3,257 g de aceite de menta verde, 0,640 g de aldehído de fresa, 0,220 g de ácido etilhexanoico, 1,988 g de agua desionizada y finalmente 3,909 g 15 de Pluronic 103. Se realizó el encapsulamiento de manera similar a como en el ejemplo anterior, excepto que se usó una homogeneización corta en lugar de microfluidización. No se incorporó monopalmitina, y se omitió saltándose la etapa de purificación con carbón Norit. Se puso la dispersión en viales y se enviaron para pruebas de absorción oral en perros. Example 31. In this example, the anticancer drug paclitaxel was solubilized in a cubic phase of Pluronic-essential oil-water, which was encapsulated by a zinc-NAT coating as in example 2. The cubic phase was prepared by mixing 0.070 g of rubber benzoin, 0.805 g of basil essential oil and 0.851 g of ilang-ilang oil, heating to dissolve the benzoin gum, then adding 265 mg of paclitaxel, 3,257 g of spearmint oil, 0.640 g of strawberry aldehyde, 0.220 g of ethylhexanoic acid, 1,988 g of deionized water and finally 3,909 g of Pluronic 103. Encapsulation was performed in a similar manner as in the previous example, except that a short homogenization was used instead of microfluidization. Monopalmitin was not incorporated, and was omitted by skipping the purification stage with Norit coal. The dispersion was placed in vials and sent for oral absorption tests in dogs.

Se les realizó una canulación a perros Beagle, de 10-12 kg de peso, para permitir la administración de la formulación directamente en el duodeno. Se sabe que paclitaxel muestra una absorción muy baja administrado por vía oral o por vía intraduodenal. En efecto, incluso en la formulación de TaxolR, que incluye un gran volumen de tensioactivo (Cremophor EL) y etanol, que son ambos agentes de fluidización de membrana, la biodisponibilidad es menor que aproximadamente el 10%. 5 Cannulation was performed on Beagle dogs, weighing 10-12 kg, to allow administration of the formulation directly into the duodenum. It is known that paclitaxel shows a very low absorption administered orally or intraduodenally. Indeed, even in the formulation of Taxol®, which includes a large volume of surfactant (Cremophor EL) and ethanol, which are both membrane fluidizing agents, the bioavailability is less than about 10%. 5

Se midieron los niveles en sangre de paclitaxel antes de la dosis, a los 20 minutos, 40 minutos, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 8 horas, 10 horas y 24 horas. Los resultados de un experimento con la formulación de fase cúbica fueron tal como siguen: Blood levels of paclitaxel were measured before the dose, at 20 minutes, 40 minutes, 1 hour, 2 hours, 3 hours, 4 hours, 8 hours, 10 hours and 24 hours. The results of an experiment with the cubic phase formulation were as follows:

Punto de tiempo  Time point

Concentración en sangre (ng/ml)  Blood concentration (ng / ml)

20 min.  20 min.

79,4  79.4

40 min.  40 min

149  149

1 hora  1 hour

122  122

2 horas  2 hours

100  100

3 horas  Three hours

79,5  79.5

4 horas  4 hours

70,1  70.1

8 horas  8 hours

43,2  43.2

10 horas  10 hours

31,1  31.1

24 horas  24 hours

17,6  17.6

Estos niveles en sangre, que se prolongan durante muchas horas, indican un alto grado de absorción de paclitaxel y niveles sistémicos sostenidos, y por tanto una mejora muy fuerte de la eficacia debido al vehículo de fase 10 cúbica en el que se disolvió el paclitaxel. Como comparación, la patente estadounidense 6.730.698 concedida a Broder et al. muestra resultados de administración oral en ratas de 9 mg/kg, es decir, una dosis 9 veces mayor que la usada en este presente ejemplo, en el que se alcanzaron niveles en sangre máximos de aproximadamente 30 ng/ml, y después de sólo 4 horas disminuyeron hasta menos de 10 ng/ml. Si se toma que la duración de acción relativa del fármaco viene dada aproximadamente (y de manera bastante conservadora, se podría argumentar) por [24 h]/[4 h] x 100% = 600%, y 15 que la dosis relativa es de [1 mg/kg]/[9 mg/kg] = 11%, entonces el factor de amplificación en este caso es de aproximadamente el 600% / 11% = 54,0. Aunque este resultado drástico fue un resultado de fase temprana y no debe tomarse como un resultado reproducible sistemáticamente, sí que proporciona una indicación en cuanto al potencial inherente en las formulaciones de esta invención en el campo de la administración oral de fármacos. Por supuesto, el paclitaxel se conoce bien por mostrar toxicidades sistémicas dependientes de la dosis importantes. 20 These blood levels, which last for many hours, indicate a high degree of paclitaxel absorption and sustained systemic levels, and therefore a very strong improvement in efficacy due to the cubic phase 10 vehicle in which paclitaxel was dissolved. As a comparison, U.S. Patent 6,730,698 issued to Broder et al. shows oral administration results in rats of 9 mg / kg, that is, a dose 9 times higher than that used in this example, in which maximum blood levels of approximately 30 ng / ml were reached, and after only 4 hours decreased to less than 10 ng / ml. If it is taken that the relative duration of action of the drug is given approximately (and quite conservatively, one could argue) for [24 h] / [4 h] x 100% = 600%, and 15 that the relative dose is [1 mg / kg] / [9 mg / kg] = 11%, so the amplification factor in this case is approximately 600% / 11% = 54.0. Although this drastic result was an early stage result and should not be taken as a systematically reproducible result, it does provide an indication as to the potential inherent in the formulations of this invention in the field of oral drug administration. Of course, paclitaxel is well known for showing important dose-dependent systemic toxicities. twenty

Aunque se ha descrito la invención en cuanto a sus realizaciones preferidas, los expertos en la técnica reconocerán que la invención puede ponerse en práctica con modificación dentro del espíritu y alcance de las reivindicaciones adjuntas. Por consiguiente, la presente invención no debe limitarse a las realizaciones tal como se describieron anteriormente, sino que debe incluir además todas las modificaciones y equivalentes de las mismas dentro del espíritu y alcance de la descripción proporcionada en el presente documento. 25 Although the invention has been described in terms of its preferred embodiments, those skilled in the art will recognize that the invention can be practiced with modification within the spirit and scope of the appended claims. Therefore, the present invention should not be limited to the embodiments as described above, but should also include all modifications and equivalents thereof within the spirit and scope of the description provided herein. 25

Claims (35)

REIVINDICACIONES

1. Partícula cargada de manera iónica, no recubierta estabilizada de un material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa, mediante lo cual dicha partícula tiene un potencial zeta de  25 mV o < - 25 mV. 1. Ionic-charged, uncoated, stabilized particle of an inverse cubic phase or inverse hexagonal phase material, whereby said particle has a zeta potential of  25 mV or <- 25 mV.

2. Partícula cargada de manera iónica, no recubierta de un material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa según la reivindicación 1, en la que dicho material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa está 5 formado por al menos un componente activo y al menos un segundo componente, en la que al menos uno del grupo que consiste en 2. An ionically charged particle, not coated with a material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase according to claim 1, wherein said material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase is formed by at least one active component and at at least a second component, in which at least one of the group consisting of

(i) dicho al menos un componente activo, y (i) said at least one active component, and

(ii) dicho al menos un segundo componente (ii) said at least a second component

tiene una carga catiónica o aniónica. 10 It has a cationic or anionic charge. 10

3. Composición que comprende una partícula cargada de manera iónica, no recubierta de un material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa y un líquido que comprende un disolvente polar, estabilizándose dicha partícula cargada de manera iónica, no recubierta en dispersión en dicho líquido mediante lo cual dicha partícula tiene un potencial zeta de  25 mV o < - 25 mV. 3. Composition comprising a particle charged in an ionic manner, not coated with a material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase and a liquid comprising a polar solvent, said charged particle stabilizing in an ionic manner, not coated in dispersion in said liquid by which said particle has a zeta potential of  25 mV or <- 25 mV.

4. Composición según la reivindicación 3, que comprende: 15 4. Composition according to claim 3, comprising:

una partícula cargada de manera iónica, no recubierta de un material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa en la que dicho material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa está formado por al menos un componente activo y al menos un segundo componente, en la que al menos uno del grupo que consiste en an ionically charged particle, not coated with a material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase in which said material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase is formed by at least one active component and at least a second component, in the that at least one of the group consisting of

(i) dicho al menos un componente activo, y (i) said at least one active component, and

(ii) dicho al menos un segundo componente 20 (ii) said at least a second component 20

tiene una carga catiónica o aniónica; y It has a cationic or anionic charge; Y un líquido que comprende un disolvente polar, estabilizándose dicha partícula cargada de manera iónica, no recubierta en dispersión en dicho líquido. a liquid comprising a polar solvent, said ionically charged particle stabilizing, not coated in dispersion in said liquid.

5. Partícula o composición según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, mediante lo cual dicha partícula tiene un potencial zeta de > 30 mV o < - 30 mV. 25 5. Particle or composition according to any one of the preceding claims, whereby said particle has a zeta potential of> 30 mV or <- 30 mV. 25

6. Partícula o composición según las reivindicaciones 1–5, en la que la carga iónica de dicha partícula se debe a la presencia de al menos un compuesto asociado a bicapa, cargado. 6. Particle or composition according to claims 1–5, wherein the ionic charge of said particle is due to the presence of at least one bilayer-associated compound, charged.

7. Partícula o composición según la reivindicación 6, en la que el compuesto asociado a bicapa, cargado se selecciona del grupo que consiste en albúmina, caseína, estearilamina, succinato de tocoferol, azul de metileno, monoesterato de aluminio, sal de ácido glicocólico, sal de ácido desoxicólico, sal de ácido 2-30 etilhexanoico, sal de riboflavina, sal de fosfato de riboflavina, dodecilsulfato de sodio, cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, sal de N-acetiltriptófano, sal de triptófano, sal de tirosina, sal de fenilalanina, sal de oxiquinolina y sal de docusato. 7. Particle or composition according to claim 6, wherein the bilayer-associated compound, charged is selected from the group consisting of albumin, casein, stearylamine, tocopherol succinate, methylene blue, aluminum monosterate, glycolic acid salt, deoxycholic acid salt, 2-30 ethylhexanoic acid salt, riboflavin salt, riboflavin phosphate salt, sodium dodecyl sulfate, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, N-acetyl tryptophan salt, tryptophan salt, tyrosine salt, salt of phenylalanine, oxyquinoline salt and docusate salt.

8. Partícula o composición según la reivindicación 6, en la que la razón en peso del compuesto asociado a bicapa, cargado con respecto al material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa es de entre 0,01:1 y 35 0,15:1. 8. Particle or composition according to claim 6, wherein the weight ratio of the bilayer-associated compound, charged with respect to the material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase is between 0.01: 1 and 0.15: one.

9. Partícula o composición según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la razón en peso del compuesto asociado a bicapa cargado con respecto al material de fase cúbica inversa o hexagonal inversa es de entre 0,02:1 y 0,08:1. 9. Particle or composition according to any one of the preceding claims, wherein the weight ratio of the bilayer-associated compound loaded with respect to the inverse cubic or inverse hexagonal phase material is between 0.02: 1 and 0.08: one.

10. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que el agente activo es un compuesto 40 farmacéutico o nutricéutico. 10. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein the active agent is a pharmaceutical or nutritional compound.

11. Partícula o composición según la reivindicación 10, en la que el compuesto farmacéutico se elige del grupo que consiste en anestésicos generales, anestésicos locales, compuestos anticancerígenos, relajantes musculares, hipnóticos, sedantes, analgésicos, antipiréticos, antiinflamatorios no esteroideos, esteroides, antiinflamatorios esteroideos, opiáceos, cannabinoides, antibióticos y proteínas. 45 11. Particle or composition according to claim 10, wherein the pharmaceutical compound is selected from the group consisting of general anesthetics, local anesthetics, anti-cancer compounds, muscle relaxants, hypnotics, sedatives, analgesics, antipyretics, nonsteroidal anti-inflammatories, steroids, anti-inflammatories Steroids, opiates, cannabinoids, antibiotics and proteins. Four. Five

12. Partícula o composición según la reivindicación 11, en la que el anestésico general se selecciona del grupo que consiste en propofol, eugenol, alfaxalona, alfadolona, eltanolona, propanidid, ketamina, etomidato y pregnanolona. 12. Particle or composition according to claim 11, wherein the general anesthetic is selected from the group consisting of propofol, eugenol, alfaxalone, alfadolone, eltanolone, propanidid, ketamine, etomidate and pregnanolone.

13. Partícula o composición según la reivindicación 12, en la que dicho agente activo es propofol. 13. Particle or composition according to claim 12, wherein said active agent is propofol.

14. Partícula o composición según la reivindicación 12, en la que dicho agente activo es etomidato. 14. Particle or composition according to claim 12, wherein said active agent is etomidate.

15. Partícula o composición según la reivindicación 11, en la que dicho anestésico local se selecciona del grupo que consiste en bupivacaína, lidocaína, procaína, tetracaína, mepivacaína, etidocaína, ropivacaína, cloroprocaína, cocaína, benzocaína, pramoxina, prilocaína, proparacaína, dibucaína y oxibuprocaína. 5 15. Particle or composition according to claim 11, wherein said local anesthetic is selected from the group consisting of bupivacaine, lidocaine, procaine, tetracaine, mepivacaine, etidocaine, ropivacaine, chloroprocaine, ***e, benzocaine, pramoxine, prilocaine, proparacaine, dibucaine and oxyuprocaine. 5

16. Partícula o composición según la reivindicación 15, en la que dicho anestésico local es bupivacaína. 16. Particle or composition according to claim 15, wherein said local anesthetic is bupivacaine.

17. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 4, en la que la carga iónica de dicha partícula es catiónica y el potencial zeta de dicha partícula no recubierta es más positivo que +25 milivoltios. 17. Particle or composition according to claims 1 to 4, wherein the ionic charge of said particle is cationic and the zeta potential of said uncoated particle is more positive than +25 millivolts.

18. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 4, en la que la carga iónica de dicha partícula es aniónica y dicho potencial zeta es más negativo que -25 milivoltios. 10 18. Particle or composition according to claims 1 to 4, wherein the ionic charge of said particle is anionic and said zeta potential is more negative than -25 millivolts. 10

19. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que el agente activo es un compuesto nutricéutico. 19. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein the active agent is a nutritional compound.

20. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, que comprende además un diluyente de alto coeficiente de reparto en dichas partículas no recubiertas. 20. Particle or composition according to claims 1 to 5, further comprising a diluent of high partition coefficient in said uncoated particles.

21. Partícula o composición según la reivindicación 20, en la que dicho diluyente de alto coeficiente de reparto es 15 la vitamina E. 21. Particle or composition according to claim 20, wherein said high partition coefficient diluent is vitamin E.

22. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicho material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa comprende un tensioactivo o lípido. 22. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein said material of inverse cubic phase or inverse hexagonal phase comprises a surfactant or lipid.

23. Partícula o composición según la reivindicación 22, en la que dicho tensioactivo se selecciona del grupo que consiste en fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, Arlatone G, Tween 85, monooleato de glicerol, monoglicéridos 20 insaturados de cadena larga, monooleato de sorbitano, docusato de calcio, Pluronics con menos de aproximadamente el 30% de grupos PEO en peso, Pluronic L122, Pluronic 123 y Pluronic L101. 23. Particle or composition according to claim 22, wherein said surfactant is selected from the group consisting of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, Arlatone G, Tween 85, glycerol monooleate, unsaturated long chain monoglycerides, sorbitan monooleate, calcium docusate , Pluronics with less than about 30% of PEO groups by weight, Pluronic L122, Pluronic 123 and Pluronic L101.

24. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicho material de fase cúbica inversa o fase hexagonal inversa comprende fosfatidilcolina y uno o más de fosfatidilglicerol, fosfatidilinositol, ácido fosfatídico y fosfatidilserina. 25 24. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein said material of the inverse cubic phase or inverse hexagonal phase comprises phosphatidylcholine and one or more of phosphatidylglycerol, phosphatidylinositol, phosphatidic acid and phosphatidylserine. 25

25. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicha partícula, composición o material es farmacéuticamente aceptable para inyección. 25. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein said particle, composition or material is pharmaceutically acceptable for injection.

26. Partícula o composición según las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicha partícula, composición o material es farmacéuticamente aceptable para su aplicación tópica o intraocular. 26. Particle or composition according to claims 1 to 5, wherein said particle, composition or material is pharmaceutically acceptable for topical or intraocular application.

27. Partícula o composición según la reivindicación 6, mediante lo cual el compuesto asociado a bicapa, cargado 30 se selecciona de ácido desoxicólico y colatos relacionados, y ácido glicocólico y colatos relacionados. 27. Particle or composition according to claim 6, whereby the bilayer-associated compound, charged 30 is selected from deoxycholic acid and related strata, and glycocolic acid and related strata.

28. Partícula o composición según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además un aminoácido soluble zwitteriónico en una cantidad suficiente para ajustar la tonicidad, preferiblemente glicina, valina o prolina. 28. Particle or composition according to any one of the preceding claims, further comprising a soluble zwitterionic amino acid in an amount sufficient to adjust the tonicity, preferably glycine, valine or proline.

29. Uso de una partícula, composición o material según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para la 35 preparación de un producto farmacéutico. 29. Use of a particle, composition or material according to any one of claims 1 to 5, for the preparation of a pharmaceutical product.

30. Formulación farmacéuticamente aceptable que comprende una composición o partícula de fase líquido-cristalina liotrópica cúbica inversa o hexagonal inversa según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una combinación de las mismas, y uno o más agentes farmacológicos en asociación con dicho material de fase líquido-cristalina liotrópica cúbica inversa o hexagonal inversa o combinación del mismo, que tiene una 40 duración de acción aumentada de una dosis dada de dicho uno o más agentes farmacológicos en relación con la duración de acción de dicha dosis dada de dicho uno o más agentes farmacológicos en ausencia de dicha formulación farmacéuticamente aceptable, en un factor de amplificación, calculado como una duración relativa dividida entre una dosis relativa del 100%, igual o superior a 2. 30. Pharmaceutically acceptable formulation comprising a composition or particle of liquid-crystalline reverse phase or reverse hexagonal crystalline phase according to any one of claims 1 to 5, or a combination thereof, and one or more pharmacological agents in association with said material of the liquid-crystalline phase inverse cubic or inverse hexagonal or combination thereof, which has an increased duration of action of a given dose of said one or more pharmacological agents in relation to the duration of action of said given dose of said one or more pharmacological agents in the absence of said pharmaceutically acceptable formulation, in an amplification factor, calculated as a relative duration divided by a relative dose of 100%, equal to or greater than 2.

31. Formulación farmacéuticamente aceptable que comprende la composición o partícula de fase líquido-cristalina 45 liotrópica cúbica inversa o hexagonal inversa según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una combinación de las mismas, y uno o más agentes farmacológicos en asociación con dicho material de fase líquido-cristalina liotrópica cúbica inversa o hexagonal inversa o combinación del mismo, que tiene una dosis disminuida de dicho uno o más agentes farmacológicos que provocan una determinada duración de acción en relación con una dosis de dicho uno o más agentes farmacológicos que provocan dicha determinada duración 50 31. Pharmaceutically acceptable formulation comprising the composition or particle of liquid-crystalline phase inverse cubic liotropic or inverse hexagonal according to any one of claims 1 to 5, or a combination thereof, and one or more pharmacological agents in association with said liquid-inverse cubic liotropic or inverse hexagonal crystalline phase material or combination thereof, having a decreased dose of said one or more pharmacological agents that cause a certain duration of action in relation to a dose of said one or more pharmacological agents that cause said certain duration 50

de acción en ausencia de dicha formulación farmacéuticamente aceptable, en un factor de amplificación, calculada como una duración relativa dividida entre una dosis relativa, igual o superior a 2. of action in the absence of said pharmaceutically acceptable formulation, in an amplification factor, calculated as a relative duration divided by a relative dose, equal to or greater than 2.

32. Formulación farmacéuticamente aceptable según las reivindicaciones 30 ó 31, en la que el factor de amplificación es igual o superior a 4. 32. Pharmaceutically acceptable formulation according to claims 30 or 31, wherein the amplification factor is equal to or greater than 4.

33. Formulación farmacéuticamente aceptable según las reivindicaciones 30 a 31, en la que la formulación está en 5 forma de una suspensión de partículas compuestas por material líquido-cristalino liotrópico cúbico inverso o hexagonal inverso o una combinación del mismo. 33. Pharmaceutically acceptable formulation according to claims 30 to 31, wherein the formulation is in the form of a suspension of particles composed of reverse cubic liotropic liquid or inverse hexagonal crystalline material or a combination thereof.

34. Formulación farmacéuticamente aceptable según las reivindicaciones 30 a 33, en la que uno de dicho uno o más agentes farmacológicos es un anestésico local. 34. Pharmaceutically acceptable formulation according to claims 30 to 33, wherein one of said one or more pharmacological agents is a local anesthetic.

35. Formulación farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 34, en la que el anestésico local es 10 bupivacaína. 35. Pharmaceutically acceptable formulation according to claim 34, wherein the local anesthetic is bupivacaine.