ES2354151T3 - Antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados. - Google Patents

Abstract

1. Un compuesto de la fórmula: **Fórmula** en la que: A es -CD2- o -CH2CH2- ; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Pueden usarse técnicas de formación de imágenes nucleares no invasivas para obtener información básica y de diagnóstico acerca de la fisiología y bioquímica de una diversidad de sujetos vivos, incluyendo animales de experimentación, seres humanos normales y pacientes. Estas técnicas dependen de instrumentación de formación 5 de imágenes sofisticada que es capaz de detectar la radiación emitida desde indicadores radiactivos administrados a dichos sujetos vivos. La información obtenida puede reconstruirse para proporcionar imágenes planares y tomográficas que pongan de manifiesto la distribución del indicador radiactivo en función del tiempo. El uso de indicadores radiactivos apropiadamente diseñados puede dar como resultado imágenes que contengan información de la estructura, de la función, y de lo que es más importante, la fisiología y bioquímica del sujeto. Mucha de esta 10 información no puede obtenerse por otros medios. Los indicadores radiactivos usados en estos estudios están diseñados para tener comportamientos definidos in vivo que permitan la determinación de información específica en relación con la fisiología o bioquímica del sujeto, o de los efectos que diversas enfermedades o fármacos tienen sobre la fisiología o bioquímica del sujeto. Actualmente, están disponibles indicadores radiactivos para obtener información útil en relación con cosas tales como la función cardiaca, el flujo sanguíneo miocárdico, la perfusión 15 pulmonar, la función hepática, el flujo sanguíneo cerebral, el metabolismo del oxígeno y de la glucosa cerebral regional.

Los compuestos pueden marcarse con radionúclidos emisores de positrones o rayos gamma. Para la formación de imágenes, los radionúclidos emisores de positrones (PET) usados más comúnmente son 11C, 18F, 15O y 13N, produciéndose todos ellos en aceleradores, y tienen semividas de 20, 110, 2 y 10 min, respectivamente. 20 Puesto que las semividas de estos radionúclidos son tan cortas, sólo es viable usarlos en instituciones que tengan un acelerador en las mismas para su producción, limitando por lo tanto su uso. Están disponibles varios indicadores radiactivos emisores de rayos gamma que pueden usarse por esencialmente cualquier hospital en los Estados Unidos y en la mayoría de hospitales en todo el mundo. Los más ampliamente usados de éstos son 18F, 99mTc, 201Tl y 123I. 25

En la última década, una de las áreas más activas de la investigación en medicina nuclear ha sido el desarrollo de indicadores radiactivos de formación de imágenes de receptores. Estos indicadores se unen con gran afinidad y especificidad a neurorreceptores y receptores de hormonas selectivos. Los receptores de neuropéptidos para sustancia P (neuroquinina-1; NK-1) están ampliamente distribuidos por todo el sistema nervioso de mamíferos (especialmente ganglios cerebrales y espinales), el sistema circulatorio y tejidos periféricos (especialmente el 30 duodeno y el yeyuno) y están implicados en la regulación de varios procesos biológicos diversos. La sustancia P (también denominada "SP" en el presente documento) es un undecapéptido de origen natural que pertenece a la familia de péptidos de la taquiquinina, denominándose así estos últimos porque dan lugar a la acción contráctil en el tejido muscular liso extravascular. Además de la SP, las taquiquininas de mamíferos conocidas incluyen neuroquinina A y neuroquinina B. La nomenclatura actual designa los receptores para SP, neuroquinina A y 35 neuroquinina B como NK-1, NK-2 y NK-3, respectivamente. Se están desarrollando antagonistas del receptor de neuroquinina-1 (NK-1; sustancia P) para el tratamiento de varios trastornos fisiológicos asociados con un exceso de o un desequilibrio de taquiquininas y, en particular, sustancia P. La sustancia P se ha implicado en trastornos gastrointestinales (GI) y enfermedades del tracto GI, tales como el vómito, y en trastornos psiquiátricos, tales como la depresión. El compuesto [2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina 40 se desvela en la Publicación de Patente PCT WO 96/21661 como un antagonista de taquiquinina. La Patente de Estados Unidos Nº 6.241.964 desvela el compuesto [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina.

Los indicadores radiactivos de PET (Tomografía por Emisión de Positrones) y la tecnología de formación de imágenes pueden proporcionar un procedimiento poderoso para la evaluación clínica y la selección de dosis de 45 antagonistas del receptor de neuroquinina-1. Usando un indicador radiactivo marcado con flúor-18 o carbono-11 que proporcione una imagen específica de receptor de neuroquinina-1 en el cerebro y otros tejidos, puede determinarse la dosis necesaria para saturar los receptores de neuroquinina-1 mediante el bloqueo de la imagen del indicador radiactivo de PET en seres humanos. El fundamento para este enfoque es el siguiente: la eficacia de un antagonista del receptor de neuroquinina-1 es una consecuencia del grado de inhibición del receptor, que a su vez está en 50 función del grado de ocupación del receptor con fármaco.

Por lo tanto, un objeto de la presente invención es desarrollar antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados que serían útiles, no sólo en aplicaciones de formación de imágenes exploratorias y de diagnóstico tradicionales, sino que también serían útiles en ensayos, tanto in vitro como in vivo, para marcar el receptor de neuroquinina-1 y para competir con antagonistas y agonistas del receptor de neuroquinina-1 no marcados. Un objeto 55 adicional de la presente invención es desarrollar nuevos ensayos que comprendan dichos compuestos radiomarcados.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a ciertos antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados. La presente invención se refiere además a procedimientos para el uso de dichos antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados para el marcaje y la formación de imágenes de diagnóstico de receptores de neuroquinina-1 en mamíferos. 5

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a ciertos antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados. En particular, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula:

en la que: 10

A es -CD2- o -CH2CH2-;

R1 es un radionúclido seleccionado entre el grupo que consiste en:

3H, 11C, 18F, 125I, 82Br, 123I, 131I, 75Br, 15O, 13N, 211At y 77Br;

y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

En otra realización de la presente invención, R1 es 11C o 18F. 15

En otra realización de la presente invención, R1 es 18F.

Otra realización la presente invención se refiere al compuesto

[18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina

que puede representarse como:

20

En otra realización, la presente invención se refiere al compuesto

[18F][3-fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina que puede representarse como:

Como se aprecia por los expertos en la materia, "D" o deutero, como se usa en el presente documento, pretende incluir el isótopo 2H o deuterio.

La presente invención también se refiere a una composición radiofarmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención y al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. 5

Los compuestos de la presente invención son útiles en procedimientos para marcar receptores de neuroquinina-1 en un mamífero; para la formación de imágenes de diagnóstico de receptores de neuroquinina-1 en un mamífero; para la formación de imágenes de diagnóstico de tejidos que tienen receptores de neuroquinina-1 en un mamífero; para la formación de imágenes de diagnóstico de sitios de unión a la sustancia P en tejidos de una especie de mamífero; para la formación de imágenes de diagnóstico del cerebro en un mamífero; y para la detección 10 o cuantificación de receptores de neuroquinina-1 en el tejido de un mamífero, que comprenden administrar a un mamífero una cantidad eficaz del compuesto radiomarcado de la presente invención.

En una realización preferida de los procedimientos de la presente invención, el mamífero es un ser humano.

Los radionúclidos adecuados que pueden incorporarse en los compuestos de la presente invención incluyen 3H (también escrito como T), 11C, 18F, 125I, 82Br, 123I, 131I, 75Br, 15O, 13N, 211At o 77Br. El radionúclido que se incorpora 15 en los compuestos radiomarcados de la presente invención dependerá de la aplicación analítica o farmacéutica específica de ese compuesto radiomarcado. Por lo tanto, para el marcaje in vitro de receptores de neuroquinina y ensayos de competición, generalmente los compuestos que incorporan 3H, 125I o 82Br serán los más útiles. Para agentes de formación de imágenes de diagnóstico, se prefieren los compuestos que incorporan un radionúclido seleccionado entre 11C, 18F, 123I, 131I, 75Br, 76Br o 77Br. En ciertas aplicaciones, también puede ser útil la incorporación 20 de un radionúclido quelante, tal como Tc99m. En la presente invención, 18F se prefiere particularmente sobre 11C porque con la semi-vida más prolongada de 18F, la formación de imágenes puede realizarse durante el tiempo suficiente para permitir un desarrollo de una señal más específica y mejores condiciones para los estudios de cuantificación de receptores.

Los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados, cuando están marcados con el 25 radionúclido apropiado, son potencialmente útiles para aplicaciones de formación de imágenes de diagnóstico, investigación básica y radioterapéuticas. Los ejemplos específicos de posibles aplicaciones de formación de imágenes de diagnóstico y radioterapéuticas incluyen determinar la localización, la actividad relativa y/o la abundancia de receptores de neuroquinina-1, el radioinmunoensayo de antagonistas del receptor de neuroquinina-1 y la autorradiografía para determinar la distribución de receptores de neuroquinina-1 en un mamífero o una muestra 30 de órgano o tejido del mismo.

En particular, los presentes antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados, cuando están marcados con el radionúclido emisor de positrones, F-18, son útiles para la formación de imágenes tomográficas de emisión de positrones (PET) de receptores de neuroquinina-1 en el cerebro de seres humanos y animales de experimentación vivos. Estos antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados pueden usarse como 35 herramientas de investigación para estudiar la interacción de antagonistas de neuroquinina-1 no marcados con receptores de neuroquinina-1 in vivo por competición entre el fármaco marcado y el compuesto radiomarcado por la unión al receptor. Este tipo de estudio es útil para determinar la relación entre la ocupación del receptor de neuroquinina-1 y la dosis de antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado, así como para estudiar la duración del bloqueo del receptor por diversas dosis del antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado. 40 Como herramienta clínica, los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados pueden usarse para ayudar a definir una dosis clínicamente eficaz de un antagonista del receptor de neuroquinina-1. En experimentos con animales, los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados pueden usarse para proporcionar información que sea útil para escoger entre candidatos a fármaco potenciales para su selección para el desarrollo

clínico. Los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados también pueden usarse para estudiar la distribución regional y la concentración de receptores de neuroquinina-1 en el cerebro humano vivo, así como en el cerebro de animales de experimentación vivos y en muestras tisulares. Los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados también pueden usarse para estudiar enfermedades o cambios farmacológicamente relacionados en las concentraciones del receptor de neuroquinina-1. 5

Por ejemplo, un indicador de tomografía por emisión de positrones (PET), tal como los presentes antagonistas del receptor de neuroquinina-1 radiomarcados que pueden usarse con la tecnología de PET disponible actualmente para obtener la información siguiente: relación entre el nivel de ocupación del receptor por un antagonista de neuroquinina-1 candidato y eficacia clínica en pacientes; selección de dosis para ensayos clínicos de antagonistas de neuroquinina-1 antes del inicio de estudios clínicos a largo plazo; potencias comparativas de 10 antagonistas de neuroquinina-1 estructuralmente novedosos; investigación de la influencia de antagonistas de neuroquinina-1 sobre la densidad y la afinidad de receptor in vivo durante el tratamiento de dianas clínicas con antagonistas del receptor de neuroquinina-1 y otros agentes; cambios en la densidad y distribución de receptores de neuroquinina-1 durante, por ejemplo, enfermedades psiquiátricas en sus fases activas, durante su tratamiento eficaz e ineficaz y durante su remisión; y cambios en la expresión y distribución del receptor de neuroquinina-1 en 15 trastornos del SNC (por ejemplo, depresión, traumatismo craneal y enfermedad de Parkinson); formación de imágenes de afecciones inflamatorias en las que está implicada la sustancia P y/o están regulados positivamente receptores de neuroquinina-1; formación de imágenes de enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer, la esclerosis múltiple y similares, que tienen un componente inflamatorio; formación de imágenes de tumores cancerosos que expresan receptores de neuroquinina-1; evaluación de tumores cancerosos 20 que expresan receptores de neuroquinina-1 para indicar la distribución de dichos tumores o proporcionar un índice de su crecimiento.

Para el uso de los presentes compuestos como agentes de formación de imágenes exploratorias o de diagnóstico, los compuestos radiomarcados pueden administrarse a mamíferos, preferentemente seres humanos, en una composición farmacéutica, en solitario o, preferentemente, junto con vehículos o diluyentes farmacéuticamente 25 aceptables, opcionalmente con adyuvantes conocidos, tales como alumbre, en una composición farmacéutica, de acuerdo con la práctica farmacéutica convencional. Dichas composiciones pueden administrarse por vía oral o parenteral, incluyendo las vías de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal y tópica. Preferentemente, la administración es intravenosa.

Los indicadores radiactivos marcados con radionúclidos emisores de positrones de semivida corta se 30 administran casi siempre por inyección intravenosa en menos de una hora desde su síntesis. Esto es necesario debido a la corta semivida de los radionúclidos implicados (20 y 110 minutos para C-11 y F-18, respectivamente).

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden usarse en forma de una preparación farmacéutica, por ejemplo, en forma sólida, semisólida o líquida, que contiene uno o más de los compuestos de la presente invención como principio activo, en una mezcla con un vehículo o excipiente orgánico o inorgánico 35 adecuado para aplicaciones externas, enterales o parenterales. El principio activo puede usarse para preparar un compuesto, por ejemplo, con los vehículos farmacéuticamente aceptables no tóxicos habituales para comprimidos, gránulos, cápsulas, supositorios, soluciones, emulsiones, suspensiones y cualquier otra forma adecuada para el uso. Los vehículos que pueden usarse son agua, glucosa, lactosa, goma arábiga, gelatina, manitol, pasta de almidón, trisilicato de magnesio, talco, almidón de maíz, queratina, sílice coloidal, almidón de patata, urea y otros vehículos 40 adecuados para su uso en la fabricación de preparaciones en forma sólida, semisólida o líquida, y pueden usarse además agentes auxiliares, estabilizantes, espesantes y colorantes y perfumes. El compuesto activo objeto se incluye en la composición farmacéutica en una cantidad suficiente para producir el efecto deseado en el proceso o afección patológica.

Para preparar composiciones sólidas tales como comprimidos, el principio activo principal se mezcla con un 45 vehículo farmacéutico, por ejemplo, ingredientes de preparación de comprimidos convencionales, tales como almidón de maíz, lactosa, sacarosa, sorbitol, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio, fosfato dicálcico o gomas, y otros diluyentes farmacéuticos, por ejemplo, agua, para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable no tóxica del mismo. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como 50 homogéneas, se entiende que el principio activo está disperso uniformemente por toda la composición, de modo que la composición puede subdividirse fácilmente en formas de dosificación unitarias igualmente eficaces tales como comprimidos, píldoras y cápsulas. Esta composición de preformulación sólida se subdivide después en formas de dosificación unitarias del tipo descrito anteriormente, que contienen de 0,1 a aproximadamente 500 mg del principio activo de la presente invención. Los comprimidos o píldoras de la nueva composición pueden revestirse o usarse 55 para preparar compuestos de otro modo para proporcionar una forma de dosificación que proporcione la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, el comprimido o píldora puede comprender un componente de dosificación interno y un componente de dosificación externo, estando este último en forma de una envoltura sobre el primero.

Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir a la disgregación en el estómago y permite que el componente interno pase intacto hacia el duodeno o que se retrase su liberación. Pueden usarse una diversidad de materiales para dichas capas o revestimientos entéricos, incluyendo dichos materiales varios ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como goma laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa. 5

Las formas líquidas en las que pueden incorporarse las nuevas composiciones de la presente invención para su administración por vía oral o por inyección incluyen soluciones acuosas, jarabes convenientemente aromatizados, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones con aceites aceptables tales como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, o con un agente solubilizante o emulsionante adecuado para su uso intravenoso, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares. Los agentes de dispersión 10 o suspensión adecuados para suspensiones acuosas incluyen gomas naturales y sintéticas tales como goma tragacanto, goma arábiga, alginato, dextrano, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, polivinilpirrolidona o gelatina.

Un nivel de dosificación mínimo para el antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado es de aproximadamente 1 mg por día, preferentemente de aproximadamente 5 mg por día y especialmente de 15 aproximadamente 10 mg por día. Un nivel de dosificación máximo para el antagonista del receptor de neuroquinina-1 es de aproximadamente 1500 mg por día, preferentemente de aproximadamente 1000 mg por día y especialmente de aproximadamente 500 mg por día. Se apreciará que la cantidad del antagonista del receptor de neuroquinina-1 necesaria para su uso en la presente invención variará, no sólo con los compuestos o composiciones particulares seleccionados, sino también con la vía de administración, la naturaleza de la afección que se esté tratando o 20 estudiando y la edad o el estado del paciente y, en última instancia, será a discreción del médico del paciente o del farmacéutico.

Cuando un antagonista del receptor de neuroquinina-1 radiomarcado de acuerdo con la presente invención se administra a un sujeto humano, la cantidad necesaria para la formación de imágenes de diagnóstico se determinará normalmente por el médico que la prescriba, variando generalmente la dosificación de acuerdo con la 25 edad, el peso y la respuesta del paciente individual, así como con la cantidad de emisión del radionúclido. Sin embargo, en la mayoría de los casos, una cantidad eficaz será la cantidad de compuesto suficiente para producir emisiones en el intervalo de aproximadamente 1-5 mCi.

En una aplicación ejemplar, la administración se produce en una cantidad de compuesto radiomarcado de entre aproximadamente 0,005 g/kg de peso corporal y aproximadamente 50 g/kg de peso corporal por día, 30 preferentemente de entre 0,02 g/kg de peso corporal y aproximadamente 3 g/kg de peso corporal. Una dosificación analítica particular que comprende la presente composición incluye de aproximadamente 0,5 g a aproximadamente 100 g de un antagonista del receptor de neuroquinina-1 marcado. Preferentemente, la dosificación comprende de aproximadamente 1 g a aproximadamente 50 g de un antagonista del receptor de neuroquinina-1 radiomarcado. 35

El procedimiento ilustrativo siguiente puede utilizarse al realizar estudios de formación de imágenes de PET en pacientes en la clínica. El paciente se premedica con antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado (a dosis de 300, 100 ó 30 mg/día) durante 2 semanas antes del día del experimento y se mantiene en ayunas durante al menos 12 horas, permitiendo la ingestión de agua ad libitum. Se inserta un catéter venoso de 5,08 cm de 20 G en la vena cubital contralateral para la administración de indicador radiactivo. 40

El paciente se coloca en la cámara de PET y se le administra mediante un catéter i.v. una dosis indicadora de [15O]H2O. La imagen obtenida de este modo se usa para asegurarse de que el paciente está colocado correctamente para incluir el cerebro y otras áreas de interés. Posteriormente, se administra el [18F]-antagonista del receptor de neuroquinina-1 (<20 mCi) mediante un catéter i.v. Después de la captura de la imagen de indicador radiactivo total, se comienza una infusión del antagonista del receptor de neuroquinina-1 que se está evaluando 45 clínicamente a uno de tres intervalos de dosis (0,1, 1 ó 10 mpk/día). Después de una infusión durante 2,5 h, el [18F]-antagonista del receptor de neuroquinina-1 se inyecta de nuevo mediante el catéter. Se capturan imágenes de nuevo durante hasta 90 min. En los diez minutos siguientes a la inyección de indicador radiactivo y al final de la sesión de formación de imágenes, se obtienen muestras de sangre de 1 ml para determinar la concentración plasmática del candidato clínico. 50

Para determinar la distribución de indicador radiactivo, se dibujan las regiones de interés (RDI) sobre la imagen reconstruida incluyendo, por ejemplo, el cerebro y el sistema nervioso central. Estas regiones se usan para generar curvas de tiempo-actividad obtenidas en ausencia de antagonista de receptor o en presencia del candidato clínico a las diversas dosis de infusión examinadas. Los datos se expresan como radiactividad por unidad de tiempo por unidad de volumen (mCi/cc/mCi de dosis inyectada). Se generan curvas de inhibición a partir de los datos 55 obtenidos en una región de interés, obtenidos comenzando a los 70 minutos postinyección del indicador radiactivo.

En este momento, el aclaramiento de la unión inespecífica ha alcanzado el estado estacionario. Los valores de DI50 se obtienen por ajuste de curva de las curvas de dosis-velocidad/inhibición con la ecuación iii:

B = A0 – A0*I/(DI50 + I) + NS

(iii)

en la que B es el % de dosis/g de indicador radiactivo en tejidos para cada dosis de candidato clínico, A0 es el 5 indicador radiactivo unido específicamente en un tejido en ausencia de un antagonista del receptor de neuroquinina-1, I es la dosis de antagonista inyectada, DI50 es la dosis de compuesto que inhibe el 50% de la unión específica de indicador radiactivo a un receptor de neuroquinina y NS es la cantidad de indicador radiactivo unido inespecíficamente.

Formación de Imágenes en Cámara de Rayos Gamma 10

Se anestesian dos ratas (ketamina/acepromacina), se colocan en el cabezal de cámara y se canulan sus venas de la cola para facilitar la inyección. Se preinyecta en una rata un antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado (EtOH al 10%/PEG al 27%/H2O al 63%) 30 min antes de la inyección de indicador radiactivo para demostrar la unión inespecífica. Se inyectan 150 uCi/rata de un antagonista del receptor de neuroquinina-1 marcado con 18F a través de su vena de la cola y los catéteres se aclaran bien con varios ml de solución salina normal. La 15 captura de imágenes comienza a medida que se inyecta el indicador radiactivo. Se capturan sesenta imágenes de un minuto y las ratas se sacrifican posteriormente con pentobarbital sódico. Las regiones de interés (RDI) se dibujan en la primera imagen que incluye el cerebro, después se usan para analizar las velocidades de recuento en las imágenes posteriores. Se define que las RDI permanecen bastante claras durante el transcurso del estudio y se asume que son representativas del órgano completo. Las velocidades de recuento se convierten en % de dosis/RDI 20 dividiendo la velocidad de recuento en las RDI por la de la rata completa, que después se multiplica por 100.

Formación de Imágenes de PET en Perros

Perros beagle hembra que pesan 7,7-14,6 kg (11,0  2,3 kg) se premedican con antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado (a dosis de 300, 100 ó 30 mg/día) durante 2 semanas antes del día del experimento, y se mantienen en ayunas durante al menos 12 horas, permitiendo la ingestión de agua ad libitum. Se coloca un 25 catéter venoso de 5,08 cm de 20 G en la vena cubital de la pata delantera derecha a través del que se introduce la anestesia mediante pentobarbital sódico 25-30 mg/kg en 3-4 ml, y se mantiene con pentobarbital adicional a una dosis promedio de 3 mg/kg/h. Se inserta otro catéter en la vena cubital contralateral para la administración de indicador radiactivo.

La saturación de oxígeno de la sangre circulante se mide con un oxímetro de pulso (Nellcor Inc., Hayward, 30 CA) colocado en la lengua del animal. Se mantiene el volumen circulatorio mediante infusión intravenosa de solución salina isotónica. Se inserta una cánula de 22 G en la arteria femoral distal o tibial anterior para el control continuo de la presión (Spacelabs™, modelo 90603A). Se controlan continuamente el ECG, la frecuencia cardiaca y la temperatura central. En particular, se observa el ECG para determinar cambios en el segmento ST y arritmias.

El animal se coloca en la cámara de PET y se administra una dosis indicadora de [15O]H2O mediante un 35 catéter i.v. La imagen obtenida de este modo se usa para asegurarse de que el perro está colocado correctamente para incluir el cerebro y otras áreas de interés. Posteriormente, se administra el [18F]-antagonista del receptor de neuroquinina-1 (<20 mCi) mediante un catéter i.v. Después de la captura de la imagen de indicador radiactivo total, se comienza una infusión del antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado a uno de tres intervalos de dosis (0,1, 1 ó 10 mpk/día). Después de una infusión durante 2,5 h, el [18F]-antagonista del receptor de neuroquinina-40 1 se inyecta de nuevo mediante el catéter. Se capturan imágenes de nuevo durante hasta 90 min. En los diez minutos siguientes a la inyección de indicador radiactivo y al final de la sesión de formación de imágenes, se obtienen muestras de sangre de 1 ml para determinar la concentración plasmática del compuesto de ensayo. En una sesión de formación de imágenes, se infunde una dosis de 10 mpk de otro antagonista del receptor de neuroquinina-1 durante 5 minutos. Se ha determinado que esta dosis bloquea completamente la unión de indicador radiactivo y, 45 por lo tanto, se usa para determinar la señal específica de receptor máxima obtenida con el indicador radiactivo de PET. A la finalización del estudio, los animales se recuperaron y se devolvieron al animalario.

Para una distribución de indicador radiactivo no inhibida, se dibujan las regiones de interés (RDI) sobre la imagen reconstruida incluyendo el cerebro. Estas regiones se usan para generar curvas de tiempo-actividad obtenidas en ausencia de compuesto de ensayo o en presencia de compuesto de ensayo a las diversas dosis de 50 infusión examinadas. Los datos se expresan como radiactividad por unidad de tiempo por unidad de volumen (mCi/cc/mCi de dosis inyectada). Se generan curvas de inhibición a partir de los datos obtenidos en una región de interés, obtenidos comenzando a los 70 minutos postinyección de indicador radiactivo. En este momento, el

aclaramiento de la unión inespecífica habrá alcanzado el estado estacionario. Los valores de DI50 se obtuvieron por ajuste de curva de las curvas de dosis-velocidad/inhibición con la ecuación iii anterior del presente documento.

Los compuestos de la presente invención poseen ventajas inesperadas con respecto al compuesto [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina que se desvela en la Patente de Estados Unidos Nº 6.241.964. 5

La [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina es metabólicamente más estable que la [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina. La [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina también posee una semivida en plasma más prolongada que la [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina, que da como resultado niveles cerebrales relativamente 10 superiores del indicador.

La [18F][3-fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina puede desplazarse del receptor de NK1 más rápidamente que la [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina cuando se administran compuestos no marcados. Un indicador con propiedades tales como las de la [18F][3-fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina que 15 esté en equilibrio con el receptor proporciona una medición más exacta de la verdadera ocupación del receptor, ya que su ocupación cambia con el tiempo.

Los antagonistas del receptor de neuroquinina-1 que incorporan un radionúclido pueden prepararse sintetizando primero un compuesto no marcado que opcionalmente incorpore un resto de yodo o bromo, e intercambiando después un resto de hidrógeno o halógeno con un radionúclido apropiado usando procedimientos 20 bien conocidos en la técnica. Como alternativa, puede prepararse un antagonista del receptor de neuroquinina-1 radiomarcado por alquilación con un agente alquilante radiomarcado. La síntesis de un antagonista del receptor de neuroquinina-1 no marcado se ha descrito en general en las publicaciones de patente citadas anteriormente en el presente documento. Las síntesis de antagonistas del receptor de neuroquinina-1 particulares se describen a continuación. Durante cualquiera de las secuencias de síntesis anteriores puede ser necesario y/o deseable proteger 25 grupos reactivos o sensibles en cualquiera de las moléculas afectadas. Esto puede conseguirse por medio de grupos protectores convencionales, tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T. W. Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991. Los grupos protectores pueden eliminarse en una fase posterior conveniente usando procedimientos conocidos en la técnica. 30

En particular, los restos de amino pueden protegerse mediante, por ejemplo, la formación de derivados de alcoxicarbonilo, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo y tricloroetoxicarbonilo, o derivados de bencilo, tritilo o benciloxicarbonilo. La eliminación posterior del grupo protector se consigue por procedimientos convencionales de modo que, por ejemplo, pueden eliminarse grupos terc-butoxicarbonilo, bencilo o benciloxicarbonilo por hidrogenolisis en presencia de un catalizador, por ejemplo paladio; puede eliminarse un grupo tricloroetoxicarbonilo 35 con polvo de cinc; y puede eliminarse un grupo tritilo en condiciones ácidas usando procedimientos convencionales.

Cuando los grupos hidroxilo requieren protección, ésta puede efectuarse mediante la formación de ésteres o éteres de trialquilsililo, tetrahidropirano o bencilo. Dichos derivados pueden desprotegerse mediante procedimientos convencionales de modo que, por ejemplo, un derivado de éter de tetrahidropirano puede desprotegerse usando ácido clorhídrico en metanol. 40

En algunos casos, el orden en que se llevan a cabo los esquemas de reacción siguientes puede variarse para facilitar la reacción o para evitar productos de reacción no deseados.

Los ejemplos siguientes se proporcionan únicamente con el fin de una ilustración adicional, y no pretender ser limitaciones de la invención desvelada.

EJEMPLO 1 45

(2S,3S)-(-)-3-Amino-2-fenilpiperidina

El compuesto del título se preparó esencialmente como se describe a continuación.

Etapa 1: 2-Fenil-3-nitropiridina

Un matraz de fondo redondo de 5 l equipado con un condensador, agitador mecánico y una entrada de nitrógeno se cargó con 152,3 g (0,96 mol) de 2-cloro-3-nitropiridina y 1,65 l de 1,2-dimetoxietano. La solución se desgasificó burbujeando nitrógeno a través de la solución durante 10 min y se añadieron 56,7 g (0,49 mol, 0,05 5 equiv.) de tetraquis(trifenilfosfina)-paladio (0). La mezcla se desgasificó durante 45 min más, tiempo durante el cual el catalizador se disolvió, dejando una solución de color rojo oscuro transparente. Se añadió una solución desgasificada de 180,3 g (1,48 mol, 1,54 equiv.) de ácido fenilborónico en 800 ml de etanol absoluto seguido de 1,65 l de una solución acuosa 2 M desgasificada de carbonato sódico. La mezcla turbia se calentó a reflujo y se mantuvo a reflujo durante 1,5 h. Mientras permanecía a la temperatura de reflujo, se formó una suspensión de color amarillo. 10 La suspensión se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con 1 l de acetato de etilo y se filtró a través de Celite®. La torta se lavó con 2 l de acetato de etilo y el filtrado se lavó con agua (2 x 3 l), una solución saturada de bicarbonato sódico (1 x 3 l) y una solución saturada de cloruro sódico (1 x 3 l). La fase orgánica se secó con sulfato de magnesio, se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en 1,5 l de éter y se lavó con NaOH 2,5 N (2 x 500 ml) y salmuera (500 ml). La solución se secó con sulfato de magnesio, se filtró a través de 400 g de sílice y la 15 torta se lavó con más cantidad de acetato de etilo. El filtrado se concentró hasta un aceite que se cromatografió [5 kg de Gel de Sílice 60, malla 70-230, hexanos/acetato de etilo 80:20 (12 l), 75:25 (8 l), 70:30 (11 l) y 60:40 (7 l)]. Las fracciones del producto se concentraron, produciendo 188,0 g (rendimiento del 97%) del compuesto del título 2-fenil-3-nitropiridina, en forma de un aceite de color amarillo pálido: RMN 1H (CDCl3)  7,39-7,49 (m, 4H), 753-7,95 (m, 2H), 8,12 (m, 1H) 8,84 (m, 1H). EM (IE) m/z 200. Anál. calc. para C11H8N2O4: C, 66,00; H, 4,03; N, 13,99. 20 Encontrado: C, 66,19; H, 4,09; N, 13,98:

Etapa 2: cis-2-Fenil-3-aminopiperidina

Una solución de 30 g (0,15 mol) de 2-fenil-3-nitropiridina en 190 ml de metanol se hidrogenó usando 5 g de óxido de platino con una presión inicial de 310,26 kPa (45 psi) de hidrógeno. Después de 2 h, se añadieron 50 ml de HCl conc., el recipiente se presurizó de nuevo a 310,26 kPa (45 psi) y la reducción continuó durante 6,25 h más. La 25 reacción se diluyó con agua (100 ml) y se filtró. En este momento se combinaron tres reacciones y la torta combinada se lavó con metanol (200 ml), agua (100 ml), metanol (200 ml), agua (100 ml) y metanol (200 ml). El filtrado se concentró y el residuo se trató con 500 ml de NaOH 5 N y se extrajo con éter (3 x 1 l) y cloruro de metileno (2 x 1 l). Los extractos combinados se secaron con sulfato sódico, se filtraron y el filtrado se concentró, proporcionando 80,9 g de un aceite de color amarillo pálido. La cromatografía (5 kg de Gel de Sílice 60, malla 70-30 230, cloruro de metileno/metanol/hidróxido de amonio 92,5:7,5:0,75) proporcionó 62 g (rendimiento del 78%) de cis-2-fenil-3-aminopiperidina en forma de un aceite de color amarillo pálido: RMN 1H (CDCl3)  1,35-1,55 (m, 4H), 1,65-1,98 (m, 3H), 2,75 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 3,8 (s a,1H), 7,19-7,37 (m, 5H). EM (IE) m/z 176.

Etapa 3: [2R,3R]-bis(4-Metil-benciloxi)-succinato de [2S]-fenil-piperidin-[3S]-il-amina

A una solución de 41 g (0,23 mol) de cis-2-fenil-3-amino-piperidina en etanol (3,25 l) y agua (440 ml) a 60ºC se le añadieron 88 g (0,23 mol) de ácido di-p-toluoil-L-tartárico. El ácido se disolvió rápidamente, dejando una solución de color amarillo pálido transparente. Después de unos minutos, se formó una suspensión. El calentamiento se continuó durante 20 min. La suspensión se dejó enfriar, con agitación, a temperatura ambiente durante una 5 noche. El producto se recogió por filtración, se lavó con etanol (200 ml) y éter (200 ml) y se secó al aire, proporcionando 60,0 g del compuesto del título (86% del valor teórico). []20D = -54º (c = 0,5, MeOH). El análisis por HPLC (columna Chiracel OD-R, de 4,6 x 250 mm, 0,5 ml/min de 55:45 de TFA al 0,1%-agua/acetonitrilo a 35ºC,  245) mostró que el material tenía una pureza óptica muy alta sin ninguna cantidad detectable del otro enantiómero: Calc. para C31H34N2O8,:H2O: C, 64,13; H, 6,25; N, 4,83. Encontrado: C, 6,22; H, 6,33; N, 4,75, FK = 3,48% (valor 10 teórico 3,1%).

Etapa 4: (2S,3S)-(-)-3-amino-2-fenilpiperidina

Se repartió [2R,3R]-bis(4-metil-benciloxi)-succinato de [2S]-fenil-piperidin-[3S]-il-amina (5 g, 8,33 mmol) entre 100 ml de cloruro de metileno y 25 ml de NaOH 1 N. La fase acuosa se extrajo de nuevo con 50 ml de cloruro de metileno y la fase orgánica combinada se secó con sulfato sódico, se filtró y se concentró. 15

EJEMPLO 2

(2S,3S)-1-t-Butoxicarbonil-2-fenil-3-[2-hidroxi-5-(5'-trifluorometiltetrazo-1-il)fenilmetilenoamino] piperidina

El compuesto del título se preparó esencialmente como se indica a continuación.

Etapa 1: (2S,3S)-3-Benciloxicarbonilamino-2-fenilpiperidina

A una solución de (2S,3S)-(-)-3-amino-2-fenilpiperidina (152 mg, 0,86 mmol) (sal del ácido L-tartárico, []D = -57,1 (EtOH, c = 0,1138)) en cloruro de metileno (10 ml) a temperatura ambiente se le añadieron cloroformiato de bencilo (0,123 ml, 0,86 mmol) y diisopropiletilamina (0,45 ml, 2,58 mmol). La reacción se agitó durante 16 horas y 5 después se diluyó con cloruro de metileno y se interrumpió mediante la adición de agua. La mezcla se separó y la fase acuosa se extrajo de nuevo con 2 alícuotas más de cloruro de metileno. Las fases orgánicas se lavaron sucesivamente con una parte de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico, se combinaron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (metanol al 5% en cloruro de metileno), proporcionando 214 mg (80%) del compuesto del título. RMN (CDCl3):  1,55 (d a, J = 9 Hz, 1 H), 1,6-1,9 (m, 2 H), 2,02 (d a, J = 9 Hz, 1 H), 10 2,79 (dd, J = 9 y 10 Hz, 1 H), 3,22 (dd, J = 1 y 10 Hz, 1 H), 3,91 (s a, 1 H), 4,01 (dd, J = 1 y 8 Hz, 1 H), 4,89 (s, 2 H), 5,65 y 5,88 (2 s a, 1 H), 7,1-7,4 (m, 10 H).

Etapa 2: (2S,3S)-3-Benciloxicarbonilamino-1-t-butoxicarbonil-2-fenilpiperidina

A una solución de (2S,3S)-3-benciloxicarbonilamino-2-fenilpiperidina (210 mg, 0,68 mmol) en cloruro de metileno (10 ml) a temperatura ambiente se le añadieron diisopropiletilamina (0,35 ml, 2,0 mmol) y dicarbonato de di-15 t-butilo (221 mg, 1,0 mmol). La reacción se agitó durante 16 horas y se añadió una alícuota más de dicarbonato de di-t-butilo (221 mg). Después de agitar durante 2 días más, la reacción se diluyó con cloruro de metileno y se interrumpió mediante la adición de agua. La mezcla se separó y la fase acuosa se extrajo de nuevo con 2 alícuotas más de cloruro de metileno. Las fases orgánicas se lavaron sucesivamente con una parte de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico, se combinaron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (acetato 20 de etilo al 50% en hexanos), proporcionando 248 mg (90%) del compuesto del título. RMN (CDCl3):  1,30 (s, 9 H), 1,5-1,8 (m, 2 H), 1,8-2,0 (m, 2 H), 3,15 (m, 1 H), 3,9-4,2 (m, 2 H), 4,32 (d, J = 9 H), 5,05 (s, 2 H), 5,30 (m, 1 H), 7,2-7,4 (m, 10 H).

Etapa 3: (2S,3S)-3-Amino-1-t-butoxicarbonil-2-fenilpiperidina

Una solución de (2S,3S)-3-benciloxicarbonilamino-1-t-butoxi-carbonil-2-fenilpiperidina (240 mg, 0,59 mmol) 25 en metanol (5 ml) se hidrogenó con paladio al 10% sobre carbono (25 mg) a presión de globo durante 2 horas. El catalizador se retiró por filtración y el disolvente se evaporó, dando 151 mg del compuesto del título. Esto se usó directamente en la siguiente etapa.

Etapa 4: (2S,3S)-1-t-Butoxicarbonil-2-fenil-3-[2-hidroxi-5-(5'-trifluoro-metiltetrazo-1-il)fenilmetileno-amino]piperidina

Una solución de (2S,3S)-3-amino-1-t-butoxicarbonil-2-fenilpiperidina (151 mg, 0,55 mmol), 2-hidroxi-5-(5'-30 trifluoro-metiltetrazo-1-il)benzaldehído (94 mg, 0,36 mmol) (preparado como se ha descrito en el Ejemplo 1) y ácido acético (0,034 ml, 0,58 mmol) en dicloroetano (4 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos antes de

que se añadiera triacetoxiborohidruro sódico (154 mg, 0,73 mmol). Después de agitar durante 3 días, la reacción se vertió en una solución saturada de carbonato sódico y se extrajo con tres partes de cloruro de metileno. Las fases orgánicas se lavaron sucesivamente con una parte de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico, se combinaron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (acetato de etilo al 25% en hexanos), proporcionando 165 mg (87%) del compuesto del título. RMN (CDCl3):  1,35 (s, 9 H), 1,5-1,7 (m, 2 H), 1,7-1,9 (m, 1 5 H), 1,9-2,0 (m, 1 H), 2,0-2,2 (m, 1 H), 3,15 (m, 2 H), 3,9-4,2 (s y m, 3 H), 5,45 (s a, 1 H), 6,96 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,05 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 7,21 (dd, J = 2,5 y 9 Hz), 7,25-7,4 (m, 3 H), 7,45 (d, J = 7 Hz, 2 H).

EJEMPLO 3

Síntesis de [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-metil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina

El compuesto del título se preparó esencialmente como se indica a continuación. 10

Se obtuvo 18F por la reacción nuclear 18O(p,n)18F. Esto se consiguió bombardeando una diana de plata que contenía agua enriquecida con 18O con protones acelerados (17 MeV). El 18F se cargó sobre una resina para el transporte. La resina se eluyó con 1,5 ml de una solución 80:20 de acetonitrilo:oxalato potásico acuoso que se preparó mediante la adición de 0,05 ml de una solución de 200 mg de oxalato potásico/3 mg de carbonato potásico/5 15 ml de H2O a 0,25 ml de H2O y dilución con 12 ml de acetonitrilo. A esto se le añadieron 0,2 ml de una solución de Kryptofix222 (36 mg/ml de acetonitrilo) y el acetonitrilo:H2O se retiró a 95ºC en un flujo de argón y vacío. Se usaron 3 alícuotas más de 0,7 ml de acetonitrilo para secar el 18F-. El baño de aceite se redujo y, después de ~1 minuto, se añadió una solución de 0,05 ml de CD2Br2 en 1 ml de acetonitrilo, el baño de aceite se aumentó y se usó un flujo de argón para destilar el [18F]FCD2Br que se formó en un vial a 0ºC que contenía 0,3 mg de (2S,3S)-1-t-butoxicarbonil-20 2-fenil-3-[2-hidroxi-5-(5'-trifluorometiltetrazo-1-il)fenilmetileno-amino]-piperidina) en 0,2 ml de DMF y ~1-2 mg de carbonato de cesio. Después de que la cantidad de radiactividad en el vial de reacción alcanzara el pico, la destilación se interrumpió y el vial de reacción se calentó a 100ºC durante 7 minutos. La DMF se retiró durante cinco minutos usando un flujo de argón a 100ºC y después se añadieron 0,1 ml de TFA y se dejó en reposo a 100ºC durante 30 segundos. La mezcla de reacción se diluyó con 0,2 ml de etanol y 0,6 ml de H2O y se purificó por HPLC 25 preparativa [Waters C18 Bondapak, 7,8 x 300 mm, 3 ml/minuto, gradiente lineal de 20 minutos de 20:80 a 90:10 de acetonitrilo:H2O (95:5:0,1 de H2O:MeCN:TFA)]. El producto eluyó en ~12 minutos.

EJEMPLO 4

Síntesis de [2-Fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenilpiperidin-3-il)amina

El compuesto del título se preparó esencialmente como se indica a continuación. 30

Una solución a temperatura ambiente de (2S,3S)-2-fenil-3-[2-hidroxi-5-(5'-trifluorometiltetrazo-1-il)fenilmetileno-amino]-piperidina), sal HCl (50 mg, 0,102 mmol) en DMF (2 ml) se trató con carbonato de cesio (230 mg, 0,714 mmol). Después de agitar durante varios minutos, se añadió bromofluoroetano (9 ml, 0,122 mmol) y la

reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche, dando una suspensión de color amarillo. La reacción se diluyó con NH4Cl acuoso saturado/salmuera/H2O y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con H2O, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío, dando 44 mg de un aceite de color amarillo. La purificación por cromatografía rotatoria (de MeOH al 5%/EtOAc a MeOH al 10%/EtOAc) dio 33,2 mg (70%) de [2-Fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-5 tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina: RMN 1H (, CDCl3): 7,25 (2H, m), 7,17 (1H, d x d, J = 8,7 Hz, 2,8 Hz), 7,14 (2H, m), 7,02 (1H, m), 6,87 (1H, d, J = 2,8 Hz), 6,82 (1H, d, J = 8,7 Hz), 4,64 (1H, m), 4,63 (1H, m), 4,2-4,0 (2H, m), 3,87 (1H, d, J = 2,4 Hz), 3,75 (1H, d, J = 16 Hz), 3,58 (1H, d, J = 16 Hz), 3,25 (1H, m), 2,80 (1H, m), 2,74 (1H, m), 2,10 (1H, m), 1,89 (1H, m), 1,59 (1H, m), 1,48 (1H, m). EM m/z (intensidad relativa) para C22H24F4N6O: 465 (M+1, 100%). 10

EJEMPLO 5

Síntesis de [18F][2-Fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)amina

El compuesto del título se preparó esencialmente como se indica a continuación.

Se obtuvo 18F- por la reacción nuclear 18O(p,n)18F. Esto se consiguió bombardeando una diana de plata que 15 contenía agua enriquecida con 18O con protones acelerados (17 MeV). El 18F- se cargó sobre una resina y se transportó al laboratorio. La resina se eluyó con 1,5 ml de una solución 80:20 de acetonitrilo:oxalato potásico acuoso que se preparó mediante la adición de 0,05 ml de una solución de 200 mg de oxalato potásico/3 mg de carbonato potásico/5 ml de H2O a 0,25 ml de H2O y dilución con 12 ml de acetonitrilo. A esto se le añadieron 0,2 ml de una solución de Kryptofix222 (36 mg/ml de acetonitrilo) y el acetonitrilo:H2O se retiró a 120ºC en un flujo de argón y 20 vacío. Se usaron 3 alícuotas más de 0,7 ml de acetonitrilo para secar el 18F-. El baño de aceite se redujo y, después de ~30 segundos, se añadió una solución de 0,02 ml de triflato de bromoetilo (Dae Yoon Chi, Michael R Kilbourn, John A Katzenellenbogen, Michael J Welch, J. Org. Chem., 1987, 52(4), 658-664) en 0,7 ml de o-diclorobenceno, el baño de aceite se aumentó y se usó un flujo de argón para destilar el [18F] FCH2CH2Br que se formó en un vial a 0ºC que contenía 0,3 mg de (2S,3S)-1-t-butoxicarbonil-2-fenil-3-[2-hidroxi-5-(5'-trifluoro-metiltetrazo-1-il)fenilmetileno-25 amino]-piperidina) en 0,2 ml de DMF y ~1-2 mg de carbonato de cesio. Después de que la cantidad de radiactividad en el vial de reacción alcanzara el pico, la destilación se interrumpió y el vial de reacción se calentó a 110ºC durante 10 minutos. La DMF se retiró durante cinco minutos usando un flujo de argón a 110ºC y después se añadieron 0,1 ml de TFA y se dejó en reposo a 110ºC durante 30 segundos. La mezcla de reacción se diluyó con 0,2 ml de etanol y 0,6 ml de H2O y se purificó por HPLC preparativa [Waters C18 Bondapak, 7,8 x 300 mm, 3 ml/minuto, gradiente 30 lineal de 20 minutos de 20:80 a 90:10 de acetonitrilo:H2O (95:5:0,1 de H2O:MeCN:TFA)]. El producto eluyó en ~12 minutos.

EJEMPLO 6

Semivida plasmática de la [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina 35

Para comparar la semivida plasmática de la [18F][2-fluorometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina (Compuesto A) y la [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina (Compuesto B) en mono rhesus, se inyectaron 5 mCi de cada indicador radiactivo (en solución salina) por vía iv en un mono anestesiado. A diversos puntos temporales, se extrajo sangre completa, se mezcló con 0,02 ml de acetonitrilo y se centrifugó durante 3-5 minutos a 5000 rpm. Una alícuota de 40 0,02 ml del extracto de acetonitrilo se aplicó puntualmente en una placa de CCF de 5 x 7 cm junto con el patrón frío, y se reveló usando acetato de etilo:metanol:trietilamina 60:40:0,1. La placa de CCF se cortó en cuatro secciones, la perteneciente al origen, para determinar la cantidad de fluoruro presente, la sección entre el origen y en la que se eluía el patrón, para determinar los metabolitos polares, la sección en la que se eluía el compuesto precursor, para determinar la cantidad de compuesto precursor restante y el área entre el compuesto precursor y el frente de 45 disolvente para los metabolitos no polares. Las tiras de CCF se contaron después en un contador gamma para

determinar el número de recuentos para cada sección de la placa de CCF. Se determinó el porcentaje de los recuentos totales que era debido al compuesto precursor restante. A todos los puntos temporales examinados hay más del indicador deuterado restante en el plasma que del indicador protonado, y al final del experimento (3 horas), hay el doble del indicador deuterado restante. Con los niveles plasmáticos más prolongados del indicador deuterado, hay más tiempo disponible para que se desarrolle una señal específica mayor y para que el indicador se acumule en 5 regiones del cerebro que tengan una baja concentración de receptores, y de las que podría ser difícil obtener imágenes usando el indicador protonado.

Tabla 1. Porcentaje de indicador precursor restante en plasma de mono

Tiempo (minutos)

% Compuesto A restante % Compuesto B restante

5

72 91

15

55 87

30

38 75

45

35 39

60

25 41

120

16 23

180

9 20

EJEMPLO 7 10

Facilidad de seguimiento de la [18F][2-fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina en comparación con la [18F][2-fluorodideutero-metoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina

La Tabla 2 muestra una comparación de la [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina (Compuesto B) en comparación con la [18F][2-fluoroetoxi-5-(5-15 trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina (Compuesto C) en un estudio de seguimiento usando un antagonista de NK1 no marcado en el mismo mono. Se administró un bolo de un antagonista de NK1 no marcado 180 minutos después de una inyección en embolada de cualquier indicador. A partir de las imágenes resultantes, se dibujaron las regiones de interés para determinar la cantidad de radiactividad presente en diferentes regiones del cerebro. Como se muestra en la Tabla 2, en el estriado comienza el seguimiento del compuesto 20 fluoroetoxi, es decir, se desplaza del receptor por el antagonista no marcado, casi inmediatamente, mientras que el seguimiento del análogo de dideuterofluorometoxi no comienza hasta aproximadamente 30 minutos después de la administración del antagonista no marcado. Además, usando el nivel de seguimiento del 70% como comparación (unión específica restante del 30%), el compuesto fluoroetoxi alcanza este nivel -50 minutos antes de que el análogo de dideuterofluorometoxi alcance este mismo nivel. Debido a que el compuesto fluoroetoxi [18F][2-fluoroetoxi-5-(5-25 trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina se sigue desde el estriado más rápidamente que el análogo de fluorometoxi, puede obtenerse una representación más exacta de cuál es la verdadera ocupación del receptor usando el análogo de fluoroetoxi.

Tabla 2. Unión Específica Restante* en Mono Rhesus después de un Seguimiento de 1 mpk a los 180 Minutos con 30 un Antagonista de NK1

*Unión específica restante = 100%*[unión específica (tiempo) – unión específica (180 min)]/unión específica (180 min). Unión específica = recuentos en el estriado - recuentos en el cerebelo.

Tiempo (minutos)

[18F]Compuesto C [18F]Compuesto B

195

85% 96%

205

55% 85%

220

30%

230

55%

270

30%

Pueden ser aplicables dosificaciones eficaces distintas de las dosificaciones particulares expuestas anteriormente en el presente documento como consecuencia de variaciones en la sensibilidad del mamífero que se esté tratando para cualquiera de las indicaciones con el compuesto de la invención indicado anteriormente. Asimismo, las respuestas farmacológicas específicas observadas pueden variar de acuerdo con y dependiendo del compuesto activo particular seleccionado, o de si están presentes vehículos farmacéuticos, así como del tipo de 5 formulación y del modo de administración empleado, y se contemplan dichas variaciones o diferencias esperadas en los resultados. Se pretende que la invención se defina por el alcance de las reivindicaciones siguientes.

Claims (8)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de la fórmula:

   en la que:

   A es -CD2- o -CH2CH2-; 5

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2. Un compuesto que es:

   [18F][2-fluorodideuterometoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina;

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
3. 3. Un compuesto que es: 10

   [18F][3-fluoroetoxi-5-(5-trifluorometil-tetrazol-1-il)-bencil]-([2S,3S]-2-fenil-piperidin-3-il)-amina;

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
4. 4. Una composición radiofarmacéutica que comprende el compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.
5. 5. Uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparación de un medicamento 15 para la formación de imágenes de diagnóstico de receptores de neuroquinina-1, el cerebro, tejidos que tienen receptores de neuroquinina-1, afecciones inflamatorias en las que está implicada la sustancia P y/o los receptores de neuroquinina-1 están regulados positivamente, enfermedad de Alzheimer o esclerosis múltiple en un mamífero.
6. 6. El uso de la reivindicación 5 en el que el mamífero es un ser humano.
7. 7. Procedimiento para la detección o cuantificación de receptores de neuroquinina-1 en el tejido de un mamífero que 20 comprende poner en contacto dicho tejido del mamífero en el que se desea dicha detección o cuantificación con una cantidad eficaz del compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y detectar o cuantificar los receptores de neuroquinina-1 usando tomografía por emisión de positrones.
8. 8. El procedimiento de la reivindicación 7 en el que el tejido del mamífero es el tejido de un ser humano.