ES2344993T3 - Medios y metodos para la diferenciacion de la necrosis de miocardio aguda y cronica en pacientes sintomaticos. - Google Patents
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Abstract
Un método para la diferenciación entre un episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca crónica, el cual método comprende los pasos de: a) determinación de la cantidad de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo; b) determinación de la cantidad de un péptido natriurético en una muestra de dicho individuo, y c) diferenciación entre un episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca crónica, por comparación de las cantidades determinadas en el paso a) y b) con cantidades de referencia; c1) en donde una cantidad de referencia para la troponina cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml son indicativas de una insuficiencia cardíaca crónica; y c2) en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
Description
Medios y métodos para la diferenciación de la
necrosis de miocardio aguda y crónica en pacientes sintomáticos.
La presente invención se refiere a un método
para diagnosticar un episodio cardiovascular agudo que comprende
los pasos de determinación de la cantidad de una troponina cardíaca
en una muestra de un individuo, la determinación de la cantidad de
un péptido natriurético en una muestra de dicho individuo y el
diagnóstico de un episodio cardiovascular agudo comparando las
cantidades determinadas en los pasos previos, con cantidades de
referencia. Además, la presente invención abarca un método para la
diferenciación entre un episodio cardiovascular agudo y una
insuficiencia cardíaca crónica, el cual comprende los pasos de,
determinación de la cantidad de una troponina cardíaca en una
muestra de un individuo, determinación de la cantidad de un péptido
natriurético en una muestra de dicho individuo y diferenciación
entre un episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca
crónica, mediante la comparación de las cantidades determinadas en
los pasos previos, con cantidades de referencia. También están
comprendidos en la presente invención los dispositivos y kits para
llevar a cabo dichos métodos.
Una reivindicación de la medicina moderna es la
de proporcionar regímenes de tratamientos personalizados o
individualizados. Estos, son regímenes de tratamiento que toman en
cuenta las necesidades o riesgos individuales del paciente. Un
riesgo particularmente importante es la presencia de una
complicación cardiovascular, en particular una complicación
cardiovascular que no había sido reconocida anteriormente, o una
prevalencia para dichas complicaciones cardiovasculares. Las
complicaciones cardiovasculares, particularmente enfermedades
cardíacas, son la causa conductora de morbilidad y mortalidad en el
hemisferio oeste. Las complicaciones cardiovasculares pueden
permanecer asintomáticas durante largos períodos de tiempo. Por lo
tanto, un diagnóstico diferencial seguro, de la presencia de una
complicación cardiovascular es más difícil y tendente al error, de
lo que generalmente se cree.
Específicamente, los pacientes que sufren de
síntomas de un episodio cardiovascular agudo (por ejemplo, un
infarto de miocardio), como un dolor en el pecho, se someten
habitualmente a un diagnóstico basado en la troponina T. Con esta
finalidad, se determinan los niveles de troponina T de los
pacientes. Si la cantidad de troponina T en sangre es elevada, es
decir, por encima de 0,1 ng/ml, se asume un episodio cardiovascular
agudo, y el paciente se trata correspondientemente.
Sin embargo, cuando se emplea el test habitual
de troponina T, una parte significativa de pacientes se
diagnostican como falsos positivos de sufrir un episodio
cardiovascular agudo. Debe comprenderse que la terapia subsiguiente
es menos efectiva o incluso ineficaz, produciendo como resultado
muchas complicaciones graves o incluso la muerte.
Por lo tanto, hay una clara necesidad ya
antigua, de medios y métodos que permitan un diagnóstico diferencial
exacto de los episodios cardiovasculares agudos. Dichos medios y
métodos permitirán un seguro y eficaz diagnóstico diferencial y
evitarán los inconvenientes de las técnicas habituales.
Así pues, el problema técnico que subyace en la
presente invención debe verse como la provisión de medios y métodos
para cumplir con las anteriormente citadas necesidades.
El problema técnico se soluciona mediante las
versiones caracterizadas en las reivindicaciones y que figuran a
continuación.
En consecuencia, la presente invención se
refiere a un método de utilidad para el diagnóstico para un episodio
cardiovascular agudo, que comprende los pasos de:
a) determinación de la cantidad de troponina
cardíaca en una muestra de un individuo;
b) determinación de la cantidad de un péptido
natriurético en una muestra de dicho individuo, y
c) diagnóstico de un episodio cardiovascular
agudo mediante la comparación de las cantidades determinadas en el
paso a) y b) con cantidades de referencia; en donde (i) es una
cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos
0,01 ng/ml, y una cantidad de referencia del péptido natriurético
inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia de la
troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de
referencia del péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son
indicativos de un episodio cardiovascular agudo.
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El método de la presente invención, es de
preferencia, un método in vitro. Además, puede comprender
pasos adicionales a los explícitamente mencionados más arriba. Por
ejemplo, más pasos pueden significar
pre-tratamientos de las muestras o evaluación de
datos diagnósticos.
El término "diagnosticar" como se emplea en
la presente, se refiere al dictamen de la probabilidad, de acuerdo
con la cual, un individuo está sufriendo un episodio cardiovascular
agudo o cualquier otra enfermedad referida en esta especificación.
Como comprenderán los expertos en la especialidad, no se pretende
que dicho dictamen sea habitualmente correcto para un 100% de los
individuos que se diagnostican. El término, sin embargo, requiere
que una parte estadísticamente significativa de los individuos (por
ejemplo un grupo en un estudio de grupo) pueda ser diagnosticada
que sufre de una insuficiencia cardíaca o que tiene el riesgo de
sufrir la enfermedad en el futuro. Si una parte es estadísticamente
significativa, puede ser determinada sin más preámbulos por la
persona experta en la especialidad empleando varias herramientas de
evaluación estadística ya bien conocidas, por ejemplo,
determinación de los intervalos de confianza, determinación del
valor p, test t de Student, test de Mann-Whitney,
etc.. Detalles de los mismos pueden encontrarse en Dowdy y Wearden,
Statistics for Research ("Estadística para Investigación"),
John Wiley & Sons, Nueva York 1983. Los intervalos de confianza
preferidos son por lo menos el 90%, por lo menos el 95%, por lo
menos el 97%, por lo menos el 98% ó por lo menos el 99%. Los valores
p son de preferencia, 0,1, 0,05, 0,01, 0,005, ó 0,0001.
El diagnóstico, de acuerdo con la presente
invención, incluye la monitorización, la confirmación, la
subclasificación y predicción de la enfermedad principal, síntomas
o riesgos para la misma. La monitorización se refiere al
seguimiento de una enfermedad o complicación ya diagnosticada, por
ejemplo para analizar la progresión de la enfermedad o la
influencia de un tratamiento particular sobre la progresión de la
enfermedad o complicación. La confirmación se refiere al
fortalecimiento o substanciamiento de un diagnóstico ya efectuado
empleando otros indicadores o marcadores. La subclasificación se
refiere a una mayor definición de un diagnóstico de acuerdo con
diferentes subclases de la enfermedad diagnosticada, por ejemplo,
definición de acuerdo con formas leves o graves de la enfermedad.
La predicción se refiere a la prognosis de una enfermedad o
complicación antes de que otros síntomas o marcadores la hagan
evidente o hayan sido significativamente alterados.
El término "episodio cardiovascular agudo"
se refiere a todos los episodios que aparecen de repente, es decir
sin previos signos o síntomas clínicos, los cuales afectan
gravemente la velocidad del flujo diastólico o sistólico de la
sangre. Desde el punto de vista histopatológico, el episodio
cardiovascular agudo, con referencia a la presente, va siempre
acompañado de una súbita isquemia de las células del músculo
cardiaco acompañado de una grave necrosis de dichas células. De
preferencia, el individuo que sufre un episodio cardiovascular
agudo sufre también de síntomas típicos de malestar o dolor en el
pecho, epigástrico, brazo, muñeca o mandíbula, en donde en
particular el dolor de pecho puede irradiar al brazo, espada u
hombro. Otros síntomas de un episodio cardiovascular agudo pueden
ser la náusea o vómito inexplicable, persistente falta de
respiración, debilidad, mareo, sensación de mareo o síncope así
como también cualquier combinación de los mismos. De preferencia,
el episodio cardiovascular agudo referido a la presente es un
síndrome coronario agudo (ACS), es decir, una angina pectoris
inestable (UAP) ó un infarto del miocardio (MI). Con mayor
preferencia, el episodio cardiovascular agudo es un MI que incluye
un MI con el ST elevado y un MI con el ST no elevado. Además el
episodio cardiovascular abarca también la apoplejía. Otros detalles
sobre las definiciones, síntomas o signos clínicos como por ejemplo,
los signos electrocardiográficos, se encuentran en Joint European
Society of Cardiology/American Society of Cardiology, 2000, J
American College of Cardiology, vol 36, nº
3:959-969. Los síntomas pueden clasificarse de
acuerdo con el sistema de clasificación de la New York Heart
Association. Los pacientes de clase I no tienen ningún síntoma
obvio de enfermedad cardiovascular. La actividad física no está
limitada, y la actividad física ordinaria no causa fatiga indebida,
palpitación, o disnea (falta de respiración). Los pacientes de la
clase II tiene una ligera limitación de la actividad física. Se
sienten cómodos cuando descansan, pero la actividad física
ordinaria da como resultado, fatiga, palpitación, o disnea. Los
pacientes de la clase III muestran una marcada limitación de la
actividad física. Están cómodos cuando descansan, pero menos que la
actividad física ordinaria, causa fatiga, palpitación, o disnea.
Los pacientes de la clase IV son incapaces de efectuar cualquier
actividad física sin molestias. Muestran síntomas de insuficiencia
cardíaca en el descanso. Si emprenden cualquier actividad física,
el malestar aumenta. En consecuencia, los pacientes pueden dividirse
en individuos que no muestran ningún síntoma clínico e individuos
con síntomas (por ejemplo, disnea).
El término "individuo" como se emplea en la
presente se refiere a animales, de preferencia mamíferos, y, con
mayor preferencia, humanos. Sin embargo, está previsto por la
presente invención que el individuo presente de preferencia,
síntomas conocidos por ir asociados con un episodio cardiovascular
agudo, es decir, dolor de pecho, disnea y otros como se ha descrito
más arriba. Con mayor preferencia, el individuo exhibe por lo menos,
síntomas de acuerdo con NYHA clase II, con mayor preferencia de
acuerdo con la clase III ó IV.
La determinación de la cantidad de un péptido
natriurético o una troponina cardíaca, en la presente invención, se
refiere a la medición de la cantidad o concentración, de preferencia
semicuantitativamente o cuantitativamente. La medición puede estar
hecha directamente o indirectamente. La medición directa se refiere
a la medición de la cantidad o concentración de un péptido
natriurético o troponina cardíaca, basada sobre una señal que se
obtiene del mismo péptido natriurético o de la misma troponina
cardíaca, y la intensidad de la cual está directamente
correlacionada con el número de moléculas del péptido presente en la
muestra. Dicha señal, algunas veces referida en la presente como una
señal de intensidad, puede obtenerse, por ejemplo, midiendo el valor
de la intensidad de una propiedad específica física o química del
péptido natriurético o troponina cardíaca. La medición indirecta
incluye la medición de una señal obtenida de un componente
secundario (es decir un componente que no es el propio péptido
natriurético), o un sistema biológico de lectura, por ejemplo,
respuestas celulares mensurables, ligandos, marcas, o productos de
reacción enzimática.
De acuerdo con la presente invención, la
determinación de la cantidad del péptido natriurético o de la
troponina cardíaca puede efectuarse por todos los medios ya
conocidos para la determinación de la cantidad de un péptido en una
muestra. Dichos medios comprenden los dispositivos y métodos de
inmunoensayo que pueden utilizar moléculas marcadas en varios
formatos sandwiches, competición, u otros ensayos. Dichos ensayos
desarrollan una señal que es indicativa de la presencia o ausencia
del péptido natriurético o la troponina cardíaca. Además, la
intensidad de la señal puede, de preferencia, estar correlacionada
directa o indirectamente (por ejemplo en proporción inversa) a la
cantidad de polipéptido presente en una muestra. Otros métodos
adecuados comprenden la medición de una propiedad específica física
o química para el péptido natriurético, como por ejemplo, su peso
molecular exacto o el espectro de la RMN. Estos métodos comprenden,
de preferencia, biosensores, dispositivos ópticos acoplados a los
inmunoensayos, biochips, dispositivos analíticos como por ejemplo,
espectrómetros de masas, analizadores de RMN, ó dispositivos de
cromatografía. Otros métodos incluyen los métodos basados en una
micro placa ELISA, inmunoensayos totalmente automatizados o
robóticos (adquiribles por ejemplo en Elecsys^{TM} analizers), CBA
(como un Cobalt Binding Assay, adquiribles por
ejemplo en Roche-Hitachi^{TM} analizers), y
ensayos de aglutinación de látex (adquiribles por ejemplo en
Roche-Hitachi^{TM} analyzers).
En una versión preferida, el método para la
determinación de la cantidad de un péptido natriurético o troponina
cardíaca, comprende los pasos de (a) puesta en contacto de una
célula capaz de provocar una respuesta celular, la intensidad de la
cual es indicativa de la cantidad de péptido con el péptido durante
un adecuado período de tiempo, (b) medición de la respuesta
celular.
Para la medición de las respuestas celulares, la
muestra o muestra procesada, se añade de preferencia a un cultivo
celular, y se mide la respuesta celular interna o externa. La
respuesta celular puede incluir la expresión mensurable de un gen
informador o la secreción de una substancia como por ejemplo un
péptido, un polipéptido o una molécula pequeña. La expresión o
substancia generará una intensidad de señal que está correlacionada
con la cantidad de péptido.
En otra versión preferida, el método para la
determinación de la cantidad de un péptido natriurético o de la
troponina cardíaca, comprende el paso de medición de una señal de
intensidad específica, obtenible a partir del péptido natriurético o
de la troponina cardíaca de la muestra.
Como se describe más arriba, dicha señal puede
ser la intensidad de señal observada a una m/z variable específica
del péptido natriurético o de la troponina cardíaca observados en el
espectro de masas de un espectro RMN específico del péptido
natriurético o de la troponina cardíaca.
En otra versión preferida, el método para la
determinación de la cantidad de un péptido natriurético comprende
los pasos de (a) puesta en contacto del péptido con un ligando
específico, (b) eliminación (opcionalmente) del ligando sin unir,
(c) medición de la cantidad de ligando unido.
El ligando unido generará una señal de
intensidad. La unión de acuerdo con la presente invención incluye
tanto el enlace covalente como el no covalente. Un ligando de
acuerdo con la presente invención puede ser cualquier compuesto, por
ejemplo un péptido, un polipéptido, un ácido nucleico o una molécula
pequeña, que se une al péptido natriurético o a la troponina
cardíaca descritos en la presente. Los ligandos preferidos incluyen
los anticuerpos, ácidos nucleicos, péptidos o polipéptidos como por
ejemplo, los receptores de los péptidos natriuréticos o socios de
unión para las troponinas cardíacas y fragmentos de las mismas que
comprenden los dominios de unión para los péptidos, y aptámeros, por
ejemplo el ácido nucleico o péptidos aptámeros. Los métodos para
preparar estos ligandos son ya bien conocidos en la técnica. Por
ejemplo, la identificación y producción de anticuerpos o aptámeros
adecuados están también ofertadas por los suministradores
comerciales. La persona experta en la especialidad está
familiarizada con los métodos para desarrollar derivados de dichos
ligandos con una mayor afinidad o especificidad. Por ejemplo, pueden
introducirse mutaciones aleatorias en los ácidos nucleicos, péptidos
o polipéptidos. Estos derivados pueden ser ensayados para determinar
la unión, de acuerdo con procedimientos de cribado ya conocidos en
la técnica, por ejemplo, la exposición de fagos. Los anticuerpos
como se refieren en la presente, incluyen tanto los anticuerpos
policlonales como los anticuerpos monoclonales, así como también
fragmentos de los mismos, como por ejemplo, fragmentos Fv, Fab y
F(ab)_{2} que son capaces de unirse a antígenos o
haptenos. La presente invención incluye también anticuerpos híbridos
humanizados, en donde las secuencias de aminoácidos de un anticuerpo
dador no humano, que presentan una especificidad para un antígeno
deseada, se combinan con secuencias de un anticuerpo receptor
humano. Las secuencias del dador incluirán habitualmente por lo
menos los radicales de aminoácidos del dador que se unen al
antígeno, pero pueden comprender también otros residuos aminoácidos,
estructuralmente y/o funcionalmente importantes del anticuerpo
dador. Estos híbridos pueden prepararse por diferentes métodos ya
bien conocidos en la técnica. De preferencia, el ligando o agente se
une específicamente al péptido natriurético. La unión específica, de
acuerdo con la presente invención, significa que el ligando o agente
no se une substancialmente a ("reacción cruzada" con) otro
péptido, polipéptido o substancia presente en la muestra que va a
analizarse. De preferencia, el péptido natriurético unido
específicamente debe estar unido con una afinidad por lo menos tres
veces mayor, con más preferencia por lo menos 10 veces mayor, e
incluso con mayor preferencia por lo menos 50 veces mayor, que
cualquier otro péptido o polipéptido importante. La unión no
específica puede ser tolerada, si todavía puede distinguirse y
medirse inequívocamente, por ejemplo, de acuerdo con su tamaño, en
un Western Blot, o por su relativamente mayor abundancia en la
muestra. La unión del ligando puede medirse por cualquier método ya
conocido en la técnica. De preferencia dicho método es
semicuantitativo o cuantitativo. Métodos adecuados se describen a
continuación.
En primer lugar, la unión de un ligando puede
medirse directamente, por ejemplo, mediante una RMN ó una resonancia
plasmón de superficie.
En segundo lugar, si el ligando sirve también
como substrato de una actividad enzimática del péptido o polipéptido
de interés, puede medirse un producto de reacción enzimático (por
ejemplo, la cantidad de una proteasa puede medirse, midiendo la
cantidad de substrato escindido, por ejemplo sobre un Western Blot).
Alternativamente, el ligando puede él mismo exhibir propiedades
enzimáticas, y el ligando/péptido natriurético o el complejo
ligando/troponina cardíaca, o el ligando que se unió mediante el
péptido natriurético o la troponina cardíaca respectivamente, puede
ponerse en contacto con un substrato adecuado que permite la
detección mediante la generación de una señal de intensidad. Para la
medición de los productos de la reacción enzimática, se satura de
preferencia la cantidad de substrato. El substrato puede también
marcarse con una marca detectable antes de la reacción. De
preferencia, la muestra se pone en contacto con el substrato durante
un adecuado período de tiempo. Un adecuado período de tiempo se
refiere al tiempo necesario para que se produzca una cantidad de
producto detectable, de preferencia mensurable. En lugar de la
medición de la cantidad de producto, puede medirse el tiempo
necesario para la aparición de una cantidad dada de producto (por
ejemplo, una cantidad detectable).
En tercer lugar, el ligando puede copularse
covalentemente o no covalentemente a una marca que permita la
detección y la medición del ligando. El marcado puede hacerse por
métodos directos o indirectos. El marcado directo implica la
copulación de la marca directamente (covalentemente o no
covalentemente) al ligando. El marcado indirecto implica la unión
(covalentemente o no covalentemente) de un ligando secundario al
primer ligando. El ligando secundario debe unirse específicamente al
primer ligando. Dicho ligando secundario puede ser copulado con una
marca adecuada y/o ser el objetivo (receptor) de un ligando
terciario que se une al ligamento secundario. El empleo de un
ligando secundario, terciario o incluso ligandos de un orden más
alto, se utiliza a menudo para aumentar la señal. Ligandos
secundarios adecuados y de orden más alto pueden incluir
anticuerpos, anticuerpos secundarios, y el bien conocido sistema
estreptavidina-biotina (Vector Laboratories, Inc).
El ligando o substrato puede ser también "tagged"
("etiquetado") con una o más etiquetas como ya es conocido por
la técnica. Dichas etiquetas puede ser a continuación objetivos para
ligandos de orden más alto. Etiquetas adecuadas incluyen la biotina,
la digoxigenina, la His-Tag, la
glutation-S-transferasa, FLAG, GFP,
myc-tag, haemagglutinina del virus de la gripe A
(HA), proteína unida a maltosa, y similares. En el caso de un
péptido o polipéptido, la etiqueta está de preferencia en el
terminal N y/o en el terminal C. Marcas adecuadas son cualesquiera
marcas detectables mediante un método apropiado de detección. Marcas
típicas incluyen partículas de oro, perlas de látex, éster acridan,
luminol, rutenio, marcas enzimáticamente activas, marcas
radioactivas, marcas magnéticas ("por ejemplo, perlas
magnéticas", incluyendo marcas paramagnéticas y
superparamagnéticas), y marcas fluorescentes. Las marcas
enzimáticamente activas incluyen por ejemplo la peroxidasa de rábano
silvestre, la fosfatasa alcalina, la
beta-galactosidasa, la luciferasa y derivados de los
mismos. Substratos adecuados para la detección incluyen la
di-amino-benzidina (DAB), la
3,3'-5,5'-tetrametilbenzidina,
NBT-BCIP (4-nitro azul de cloruro de
tetrazolio y
5-bromo-4-cloro-3-indolil-fosfato,
adquirible como solución en stock lista para usar, de Roche
Diagnostics), CDP-Star^{TM} (Amersham
Biosciences), ECF^{TM} (Amersham Biosciences). Una combinación
enzima-substrato adecuada puede dar por resultado un
producto de reacción coloreado, de fluorescencia, o
quimioluminiscencia, el cual puede medirse de acuerdo con los
métodos ya conocidos en la técnica (por ejemplo empleando una
película sensible a la luz o un sistema de cámara adecuado). Como
para la medición de la reacción enzimática, los criterios dados más
arriba se aplican análogamente. Las marcas fluorescentes típicas
incluyen proteínas fluorescentes (como por ejemplo la GFP y sus
derivados), Cy3, Cy5, rojo Texas, fluoresceína, y los colorantes
Alexa (por ejemplo, Alexa 568). Otras marcas fluorescentes pueden
adquirirse por ejemplo en Molecular Probes (Oregon). También está
contemplado el empleo de puntos quantum como marcas fluorescentes.
Las marcas radioactivas típicas incluyen el ^{35}S, ^{125}I,
^{32}P, ^{33}P y similares. Una marca radioactiva puede ser
detectada por cualquier método ya conocido y apropiado, por ejemplo
una película sensible a la luz o una imagen fosforada. Los métodos
de medición adecuados de acuerdo con la presente invención incluyen
también la precipitación (particularmente la inmunoprecipitación),
electroquimioluminiscencia (quimioluminiscencia generada
eléctricamente), RIA (radioinmunoensayo), ELISA (inmunoensayo
adsorbente de unión a enzimas), ensayos sándwich inmunoenzimáticos,
inmunoensayos sándwich de electroquimioluminiscencia (ECLIA),
inmunoensayo de flúor lantánidas potenciado por disociación
(DELFIA), ensayo por centelleo de proximidad (SPA), turbidimetría,
nefelometría, turbidimetría o nefelometría potenciadas con látex, o
inmunoensayos en fase sólida. Otros métodos ya conocidos en la
técnica (como por ejemplo la electroforesis sobre gel,
electroforesis sobre gel 2D, electroforesis sobre gel de
poliacrilamida SDS (SDS-PAGE). Western Blotting y
espectrometría de masas), pueden emplearse solos o en combinación
con el marcado u otros métodos de detección como se ha descrito más
arriba.
En otra versión preferida, el método para la
determinación de la cantidad de un péptido natriurético comprende
(a) puesta en contacto de un soporte sólido que comprende un ligando
para el péptido natriurético o troponina cardíaca como se ha
especificado más arriba, con una muestra que comprende el péptido
natriurético o la troponina cardíaca, y (b) la medición de la
cantidad de péptido natriurético o troponina cardíaca que se ha
unido al soporte.
El ligando, de preferencia escogido del grupo
formado por los ácidos nucleicos, péptidos, polipéptidos,
anticuerpos y aptámeros, está de preferencia presente sobre un
soporte sólido en forma inmovilizada. Los materiales para la
fabricación de soportes sólidos son ya bien conocidos en la técnica
e incluyen, entre otros, materiales para columna comercialmente
adquiribles, perlas de poliestireno, perlas de látex, perlas
magnéticas, partículas coloidales de metal, chips y superficies de
vidrio y/o silicio, tiras de nitrocelulosa, membranas, hojas,
"duracytes", pocillos y paredes de bandejas de reacción, tubos
de plástico, etc.. El ligando o agente puede estar unido a muchos
diferentes soportes. Ejemplos de soportes ya bien conocidos
incluyen, el vidrio, poliestireno, cloruro de polivinilo,
polipropileno, polietileno, policarbonato, dextrano, nylon,
amilosas, celulosas naturales y modificadas, poliacrilamidas,
agarosas y magnetita. La naturaleza del soporte puede ser o bien
soluble o bien insoluble para la finalidad de la invención. Métodos
adecuados para la fijación/y la inmovilización de dichos ligandos
son ya bien conocidos, e incluyen, pero no están limitados a,
interacciones iónicas, hidrofóbicas, covalentes, y similares. Está
también contemplado el empleo de "conjuntos de suspensión" como
conjuntos de acuerdo con la presente invención (Nolan JP, Sklar LA
(2002). Suspension array technology: evolution of the
flat-array paradigm ("Tecnología de los conjuntos
de suspensión: evolución del paradigma del conjunto plano").
Trends Biotechnol. 20 (1): 9-12). En dichos
conjuntos de suspensión, el soporte, por ejemplo microperlas o
microesferas, está presente en suspensión. El conjunto consiste en
diferentes microperlas o microesferas, posiblemente marcadas, que
llevan diferentes ligandos. Los métodos para producir dichos
conjuntos, por ejemplo basados sobre la química de fase sólida y
grupos de protección fotolábiles, son ya generalmente conocidos (US
5.744.305).
El término "cantidad" como se emplea en la
presente, abarca la cantidad absoluta de péptidos natriuréticos o
troponinas cardíacas, la cantidad relativa o concentración de los
péptidos natriuréticos o troponinas cardíacas así como también
cualquier valor o parámetro que correlaciona con los mismos. Estos
valores o parámetros comprenden valores de la señal de intensidad de
todas las propiedades específicas físicas o químicas obtenidas de
dichos péptidos por mediciones directas, por ejemplo valores de la
intensidad en el espectro de masas o espectro de RMN. Además, abarca
todos los valores o parámetros que se han obtenido mediante
mediciones indirectas especificadas en otra parte de esta
descripción, por ejemplo niveles de expresión determinados a partir
de sistemas de lectura biológica en respuesta a los péptidos o
señales de intensidad obtenidas de los ligandos unidos
específicamente. Debe comprenderse que los valores que correlacionan
con las cantidades o parámetros antes mencionados pueden también
obtenerse mediante todas las operaciones matemáticas estándar.
El término "troponina cardíaca" se refiere
a todas las isoformas de troponina expresadas en las células del
corazón, y de preferencia las células subendocardíacas. Estas
isoformas están bien caracterizadas en la técnica como está descrito
por ejemplo en Anderson 1995, Circulation Research, vol. 76, nº 4:
681-686 y Ferrieres 1998, Clinical Chemistry, 44:
487-493.
De preferencia, la troponina cardíaca se refiere
a la troponina T y/o la troponina I.
En consecuencia, ambas troponinas pueden ser
determinadas en el método de la presente invención juntamente, es
decir simultáneamente o secuencialmente, o individualmente, es
decir, sin la determinación de la otra isoforma en absoluto.
Las secuencias de aminoácidos de la troponina T
humana y la troponina I humana, están descritas en Anderson, loc
cit, y Ferrieres 1998, Clinical Chemistry ("Química clínica"),
44: 487-493. El término "troponina cardíaca"
abarca también variantes de la antes mencionada troponina
específica, es decir, de preferencia la troponina T ó la troponina
I. Estas variantes tienen por lo menos las mismas propiedades
esenciales biológicas e inmunológicas que las troponinas cardíacas
específicas. En particular, comparten las mismas propiedades
esenciales biológicas e inmunológicas si son detectables por los
mismos ensayos específicos referidos a esta especificación, por
ejemplo, mediante ensayos ELISA empleando anticuerpos policlonales o
monoclonales que reconocen específicamente dichas troponinas
cardíacas. Además debe comprenderse que una variante como se ha
referido de acuerdo con la presente invención debe tener una
secuencia de aminoácidos que difiera debido por lo menos a una
substitución, supresión y/o adición de un aminoácido, en donde la
secuencia de aminoácidos de la variante es todavía, de preferencia,
por lo menos el 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, ó
99% idéntico a la secuencia amino de la troponina específica. Las
variantes pueden ser variantes alélicas o cualquier otras especies
de homólogos específicos, paralogos u ortologos. Además, las
variantes referidas a la presente incluyen fragmentos de las
troponinas cardíacas específicas o los tipos antes mencionados de
variantes siempre que estos fragmentos tengan las propiedades
esenciales inmunológicas y biológicas como se ha referido más
arriba. Estos fragmentos pueden ser por ejemplo, productos de
degradación de las troponinas. Además, están incluidas variantes que
difieren debido a las modificaciones posttranslacionales como por
ejemplo, la fosforilación o la miristilación.
El término "péptidos natriuréticos"
comprende el tipo de péptido natriurético
atrial (ANP) y el tipo de péptido natriurético
brain (cerebral) (BNP), y variantes de los mismos con el
mismo potencial predictivo. Los péptidos natriuréticos de acuerdo
con la presente invención, comprenden los péptidos del tipo ANP y
del tipo BNP y variantes de los mismos (ver por ejemplo, Bonow, R.O.
(1996). New insights into the cardiac natriuretic peptides
("Nuevas ideas sobre los péptidos natriuréticos cardíacos").
Circulation 93: 1946-1950).
Los péptidos del tipo ANP comprenden el
pre-proANP, proANP, NT-proANP, y el
ANP.
Los péptidos del tipo BNP comprenden el
pre-proBNP, proBNP, NT-proBNP, y el
BNP.
Los péptidos pre-pro (134
aminoácidos en el caso del pre-proBNP), comprenden
un péptido de señal corto, el cual se escinde enzimáticamente para
liberar el pro péptido (108 aminoácidos en el caso del proBNP). El
pro péptido se escinde además en un pro péptido
N-terminal (NT-pro péptido, 76
aminoácidos en el caso del NT-proBNP), y la hormona
activa (32 aminoácidos en el caso del BNP, 28 aminoácidos en el caso
del ANP).
Los péptidos natriuréticos preferidos de acuerdo
con la presente invención son el NT-proANP, ANP,
NT-proBNP, BNP, y variantes de los mismos. El ANP y
BNP son las hormonas activas, y tienen una semivida más corta que
sus respectivas contrapartidas inactivas, el
NT-proANP y NT-proBNP. El BNP se
metaboliza en la sangre mientras que el NT-proBNP
circula en la sangre como una molécula intacta y como tal es
eliminado por vía renal. La semivida in-vivo
del NTproBNP es 120 minutos más larga que la del BNP, la cual es de
20 minutos (Smith MW, Espiner EA, Yandle TG, Charles CJ, Richards
AM. El metabolismo retrasado del péptido natriurético cerebral
humano refleja una resistencia a la endopeptidasa neutra. J.
Endocrinol. 2000; 167: 239-46).
La preanalítica es más robusta con
NT-proBNP y permite un más fácil transporte de la
muestra a un laboratorio central (Mueller, Gegenhuber A, Dieplinger
B, Poelz W, Haltmayer M. "Long-term stability of
endogenoues B-type natriuretic peptide (BNP) and
amino terminal proBNP (NT-proBNP) in frozen plasma
samples" ("Estabilidad a largo plazo del péptido natriurético
del tipo B (BNP) endógeno y el amino terminal proBNP
(NT-proBNP) en muestras de plasma congeladas"),
Clin Chem Lab Med 2004; 42: 942-4). Las muestras de
sangre pueden almacenarse a temperatura ambiente durante varios días
o pueden ser enviadas por correo o transportadas sin pérdida de
recuperación. En contraste, el almacenamiento del BNP durante 48
horas a temperatura ambiente ó a 4º Celsius conduce a una pérdida de
concentración de por lo menos un 20% (Mueller T, Gegenhuber et
al., Clin Chem Lab Med 2004; 42: 942-4, ver más
arriba; Wu AH, Packer M, Smith A, Bijou R, Fink D, Mair J, Wallentin
L, Johnston N, Feldcamp CS, Haverstick DM, Ahnadi CE, Grant A,
Despres N, Bluestein B, Ghani F. "Analytical and clinical
evaluation of the Bayer ADVIA Centaur automated
B-type natriuretic peptide assay in patients with
heart failure: a multisite study" ("Evaluación analítica y
clínica del ensayo del péptido natriurético del tipo B automatizado
con el Bayer ADVIA Centaur, en pacientes con insuficiencia cardíaca:
un estudio multicentros". Clin Chem 2004; 50:
867-73). Por lo tanto, en función del curso del
tiempo o de las propiedades que interesen, puede ser ventajoso o
bien la medición de las formas activas o bien la medición de las
formas inactivas del péptido natriurético.
Los péptidos natriuréticos preferidos de acuerdo
con la presente invención, son el NT-proBNP ó
variantes del mismo. Como se ha descrito brevemente más arriba, el
NT-proBNP humano, referido de acuerdo con la
presente invención es un polipéptido que comprende, de preferencia,
76 aminoácidos de longitud, correspondientes a la parte
N-terminal de la molécula de
NT-proBNP humano. La estructura del BNP y del
NT-proBNP humanos ha sido ya descrita con detalle en
la técnica anterior, por ejemplo en las patentes WO 02/089657, WO
02/083913, Bonow 1996, New Insights into the cardiac natriuretic
peptides ("Nuevos puntos de vista sobre los péptidos natriuréticos
cardíacos"). Circulation 93: 1946-1950. De
preferencia, el NT-proBNP humano como se emplea en
la presente, es el NT-proBNP humano como se describe
en la patente EP 0 648 228 B1. Estos documentos de la técnica se
incorporan a la presente como referencia con respecto a las
secuencias específicas del NT-proBNP y variantes del
mismo descritas en la presente.
El NT-proBNP referido de acuerdo
con la presente invención, abarca además las variantes alélicas y
otras variantes de dicha secuencia específica para el
NT-proBNP humano descrita más arriba.
Específicamente, están previstas variantes de polipéptidos que están
en un nivel de aminoácidos idéntico por lo menos en un 60%, con más
preferencia por lo menos un 70%, por lo menos un 80%, por lo menos
un 90%, por lo menos un 95%, por lo menos un 98%, ó por lo menos un
99% idéntico al NT-proBNP humano. Substancialmente
similares y también previstos son los productos de degradación
proteolítica que pueden todavía reconocerse mediante los medios de
diagnóstico o mediante ligandos dirigidos contra el respectivo
péptido de longitud completa. También están comprendidas las
variantes de polipéptidos que tienen supresiones, substituciones,
y/o adiciones de aminoácidos, comparadas con la secuencia de
aminoácidos del NT-proBNP humano, siempre que dichos
polipéptidos tengan las propiedades del NT-proBNP.
Las propiedades del NT-proBNP referidas en la
presente son propiedades inmunológicas y/o biológicas. De
preferencia, las variantes del NT-proBNP tienen
propiedades inmunológicas (es decir, composición del epítopo)
comparables con las del NT-proBNP. Así, las
variantes serán reconocibles mediante los medios o ligandos antes
citados empleados para la determinación de la cantidad de péptidos
natriuréticos. Las propiedades biológicas y/o inmunológicas del
NT-proBNP pueden detectarse mediante el ensayo
descrito en Karl et al., (Karl 1999). "Development of a
novel, N-Terminal-proBNP
(NT-proBNP)assay with a low detection
limit" ("Desarrollo de un nuevo ensayo
N-Terminal-proBNP
(NT-proBNP) con un bajo límite de detección").
Scand J Clin Invest 59: 177-181), Yeo et al.
(Yeo 2003. Multicenter evaluation of the Roche
NT-proBNP assay and comparison to the Biosite Triage
assay ("Evaluación multicentro del ensayo Roche del
NT-proBNP y comparación con el ensayo Biosite
Triage"), Clinica Chimica Acta 338: 107-115), y
en el ejemplo 1, más adelante. Las variantes incluyen también
péptidos modificados posttranslacionalmente como por ejemplo, los
péptidos glicosilados.
Una variante de acuerdo con la presente
invención es también un péptido o polipéptido que ha sido modificado
después de la recogida de la muestra, por ejemplo mediante la unión,
covalente o no covalente, de una marca, particularmente una marca
radioactiva o fluorescente, al péptido.
El término "muestra" se refiere a una
muestra de un fluido corporal, a una muestra de células separadas o
una muestra de un tejido o un órgano. Las muestras de los fluidos
corporales puede obtenerse por técnicas ya bien conocidas, e
incluyen de preferencia muestras de sangre, plasma, suero, u orina.
Las muestras de tejidos u órganos puede obtenerse de cualquier
tejido o cualquier órgano, mediante por ejemplo una biopsia. Las
células separadas puede obtenerse de los fluidos corporales o de los
tejidos u órganos, por técnicas de separación, como por ejemplo la
centrifugación o la clasificación de las células. De preferencia,
las muestras de células, tejidos u órganos se obtienen de aquellas
células, tejidos u órganos que expresan o producen los péptidos
referidos en la presente (es decir los péptidos natriuréticos y las
troponinas cardíacas).
La comparación como se emplea en la presente,
abarca la comparación de la cantidad del péptido natriurético o
troponina cardíaca contenida en la muestra que hay que analizar, con
una cantidad de una fuente de referencia adecuada especificada en
otra parte, en esta descripción. Debe comprenderse que la
comparación como se emplea en la presente, se refiere a una
comparación de los correspondientes parámetros o valores, como por
ejemplo, una cantidad absoluta se compara con una cantidad de
referencia absoluta, mientras que una concentración se compara con
una concentración de referencia, o una señal de intensidad obtenida
a partir de la muestra de ensayo se compara con el mismo tipo de
señal de intensidad de una muestra de referencia. La comparación
referida en el paso (b) del método de la presente invención, puede
efectuarse manualmente o asistida por un ordenador. Para una
comparación asistida por ordenador, el valor de la cantidad
determinada puede compararse con los valores correspondientes a las
referencias adecuadas que están almacenadas en una base de datos por
un programa de ordenador. El programa de ordenador puede además
evaluar el resultado de la comparación, es decir proporciona
automáticamente el diagnóstico deseado en un formato de salida
adecuado.
El término "cantidad de referencia" como se
emplea en la presente se refiere a una cantidad que permite
dictaminar si un individuo sufre de un episodio cardiovascular agudo
u otra enfermedad referida a esta especificación, mediante una
comparación como se ha referido más arriba. De acuerdo con esto, la
referencia puede o bien derivarse a partir de un individuo que sufre
un episodio cardiovascular agudo o de un individuo sano por lo menos
con respecto a episodios cardiovasculares agudos. La cantidad de
referencia aplicable a un sujeto individual, puede variar en función
de varios parámetros fisiológicos como por ejemplo, la edad, el
género, o la subpoblación. Así, una cantidad de referencia adecuada
puede determinarse por el método de la presente invención a partir
de una muestra de referencia que hay que analizar conjuntamente, es
decir, simultánea o subsiguientemente, con la muestra de ensayo. En
principio, se ha descubierto, de acuerdo con la presente invención,
que durante la progresión de la insuficiencia cardíaca crónica la
cantidad de troponinas cardíacas encontradas, por ejemplo en el
plasma también aumentará. Además, cuanto más grave sea la
insuficiencia cardíaca crónica, tanto mayor será la cantidad de
péptidos natriuréticos en el plasma. Así, con respecto a un
individuo sano, las cantidades elevadas en plasma de la troponina
cardíaca y el péptido natriuréticos se asociarán a una mayor
probabilidad de sufrir una insuficiencia cardíaca crónica. Por otro
lado una elevación, meramente, de la cantidad en plasma de las
troponinas cardíacas se asociará a un mayor riesgo de sufrir un
episodio cardiovascular agudo. Con mayor preferencia, se ha
descubierto, de acuerdo con la presente invención, que una cantidad
de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml
y una cantidad de referencia de péptidos natriuréticos inferior a
500 pg/ml son indicativos de un episodio cardiovascular agudo.
Además, una cantidad de referencia de troponina cardíaca de por lo
menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido
natriuréticos de por lo menos 500 pg/ml es
también indicativa (es decir asociada a una alta probabilidad de desarrollo), de un episodio cardiovascular agudo.
también indicativa (es decir asociada a una alta probabilidad de desarrollo), de un episodio cardiovascular agudo.
Sorprendentemente, se ha descubierto en los
estudios subyacentes a la presente invención, que los resultados
falsos positivos en relación con el diagnóstico de un episodio
cardiovascular agudo, pueden evitarse tomando en cuenta dos
marcadores bioquímicos, por ejemplo, una troponina cardíaca y un
péptido natriurético más bien que el actual marcador estándar de
oro, la troponina T, solo. Ventajosamente, los individuos que sufren
un episodio cardiovascular agudo pueden ser exactamente
diagnosticados y diferenciados de los individuos que sufren de otros
trastornos. Hay que comprender que los individuos se beneficiarán en
gran manera de este diagnóstico más fiable y que por lo tanto podrán
ser fácilmente aplicadas, unas terapias específicas y efectivas.
Las definiciones y explicaciones de los términos
efectuadas más arriba y más adelante se aplican de acuerdo con todas
las versiones descritas en esta especificación y en las
reivindicaciones que se acompañan.
Se deriva de lo anterior que en una versión
particularmente preferida del método de la presente invención, (i)
una cantidad de referencia de la troponina cardíaca de por lo menos
0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético
inferior a 500 pg/ml, ó (ii) una cantidad de referencia de la
troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de
referencia del péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son
indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
Además, la presente invención se refiere a un
método para la diferenciación entre un episodio cardiovascular agudo
y una insuficiencia cardíaca crónica, el cual comprende los pasos
de:
a) determinación de la cantidad de una troponina
cardíaca en una muestra de un individuo;
b) determinación de la cantidad de un péptido
natriurético en una muestra de dicho individuo, y
c) diferenciación entre un episodio
cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca crónica mediante
la comparación de las cantidades determinadas en el paso a) y b),
con las cantidades de referencia;
- c1)
- en donde una cantidad de referencia de troponina cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml son indicativas de una insuficiencia cardíaca crónica; y
- c2)
- en donde (i) una cantidad de referencia de troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriuréticos inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia de troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético de por lo menos 500 ng/ml son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
\vskip1.000000\baselineskip
El término "diferenciación" como se emplea
en la presente, significa la distinción entre un individuo que sufre
de un episodio cardiovascular agudo y un individuo que sufre de
insuficiencia cardíaca crónica, en condiciones en las que los
individuos muestran esencialmente los mismos signos y síntomas
clínicos y son ambos positivos para un episodio cardiovascular agudo
en el ensayo habitualmente aplicado de troponina T. El término, como
se emplea en la presente, incluye preferentemente el diagnóstico de,
o bien un episodio cardiovascular agudo, o bien una insuficiencia
cardíaca crónica, o ambas enfermedades juntas, como se ha referido
en esta especificación.
El término "insuficiencia cardíaca
crónica", como se emplea en la presente se refiere a una
insuficiencia cardíaca crónica, es decir permanente. La
insuficiencia cardíaca se caracteriza por una disminuida velocidad
de flujo sanguíneo diastólico o sistólico, y por lo tanto, por una
función disminuida del corazón. Sin embargo, más que presentar
repentinamente una isquemia acompañada por una grave necrosis de las
células del músculo del corazón, la insuficiencia cardíaca crónica
como se refiere la presente, va acompañada de preferencia por
continuos episodios necróticos de las células del músculo del
corazón, lo cual da como resultado un desarrollo continuo de la
disminución de la función cardíaca.
Ventajosamente, la presente invención, al
promover el método antes citado para el diagnóstico diferenciado
entre un episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca
crónica, permite distinguir fielmente en menos tiempo y menos coste,
entre dichas condiciones de enfermedad. Por lo tanto, los individuos
que sufren de dichas enfermedades pueden ser tratados con toda
garantía mediante terapias específicas y efectivas más bien que con
terapias inespecíficas e ineficaces.
A continuación, se describen versiones
específicamente preferidas del método de la presente invención:
En una versión preferida del método de la
presente invención, una cantidad de referencia de la troponina
cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia
del péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml son indicativas
de una insuficiencia cardíaca crónica.
En otra versión preferida del método de la
presente invención, (i) una cantidad de referencia de la troponina
cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del
péptido natriurético inferior a 500 pg/ml, ó (ii) una cantidad de
referencia de la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una
cantidad de referencia del péptido natriurético de por lo menos 500
pg/ml son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
En una versión preferida del método de la
presente invención, el péptido natriurético es el BNP, con más
preferencia el NT-proBNP.
En otra versión preferida del método de la
presente invención, el péptido natriurético es el ANP, con mayor
preferencia, el NT-proANP.
En otra versión preferida del método de la
presente invención, dicha troponina cardíaca es la troponina T y/o
la troponina I.
Así, en una versión preferida del método de la
presente invención dicho individuo es un humano.
La presente invención se refiere además a un
dispositivo para el diagnóstico de un episodio cardiovascular agudo
el cual comprende:
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada que comprende una
base de datos que contiene las cantidades de referencia
- c1)
- en donde una cantidad de referencia de la troponina cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia de péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de una insuficiencia cardíaca crónica; y
- c2)
- en donde (i) una cantidad de referencia de la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia de la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son de indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
\vskip1.000000\baselineskip
El término "dispositivo" como se emplea en
la presente, se refiere a un sistema de medios que comprende por lo
menos los medios antes mencionados operativamente unidos entre sí
para permitir la predicción. Los medios preferidos para la
determinación de la cantidad de péptidos natriuréticos o troponinas
cardíacas y medios para llevar a cabo la comparación, están
descritos más arriba en conexión con el método de la invención. La
forma de unir los medios de una manera operativa, dependerá del tipo
de medios incluidos en el dispositivo. Por ejemplo en donde se
aplican medios para la determinación automática de la cantidad de
péptidos, los datos obtenidos por dichos medios de operación
automática, pueden ser procesados, mediante, por ejemplo un programa
de ordenador con el fin de diagnosticar un episodio cardiovascular
agudo u otra enfermedad referida a la presente. De preferencia, los
medios están comprendidos en un dispositivo único en tal caso. Dicho
dispositivo puede incluir una unidad de análisis para la medición de
la cantidad de péptidos en una muestra y una unidad de ordenador
para el procesado de los datos resultantes para el diagnóstico
diferencial. Alternativamente, en donde se emplean medios tales como
tiras de ensayo para la determinación de la cantidad de péptidos,
los medios para el diagnóstico comprenden unas tiras o tablas de
control que sirven para comparar la cantidad determinada con la
cantidad conocida que va acompañada de un episodio cardiovascular
agudo u otras enfermedades referidas a la presente, o con la
cantidad conocida por ser indicativa de un individuo sano. Las tiras
de ensayo están de preferencia copuladas a un ligando que se une
específicamente con el péptido natriurético o con la troponina
cardíaca. La tira o dispositivo, comprende de preferencia unos
medios para la detección de la unión de dichos péptidos a dicho
ligando. Los medios preferidos para la detección están descritos en
conexión con versiones relativas al método de la invención de más
arriba. En dicho caso, los medios están operativamente unidos de
forma que el usuario del sistema obtiene juntamente el resultado de
la determinación de la cantidad y el valor del diagnóstico del
mismo, debido a las instrucciones e interpretaciones dadas en un
manual. Los medios pueden aparecer como dispositivos separados en
dicha versión y están, de preferencia, empaquetados juntamente como
un kit. La persona experta en la técnica se dará cuenta de como unir
los medios sin más. Los dispositivos preferidos son aquellos que
pueden aplicarse sin un conocimiento particular de un clínico
especializado, por ejemplo las tiras de ensayo o los dispositivos
electrónicos que meramente requieren la carga con una muestra. Los
resultados se dan como datos en bruto como salida del diagnóstico,
los cuales necesitan la interpretación por el clínico. De
preferencia, a la salida del dispositivo, se procesan sin embargo
los datos brutos del diagnóstico, la interpretación de los cuales no
requiere de ningún clínico, es decir, debe estar indubitablemente
claro desde la salida, si el individuo sufre de una insuficiencia
cardíaca suave o moderada. Los dispositivos más preferidos
comprenden las unidades/dispositivos de análisis (por ejemplo,
biosensores, montajes, soportes sólidos copulados a ligandos
específicos para reconocer el péptido natriurético, dispositivos de
resonancia de superficie plasmón, espectrómetros de RMN,
espectrómetros de masas, etc.) o equipos/dispositivos de evaluación
ya mencionados anteriormente, de acuerdo con el método de la
invención.
Además, abarcado por la presente invención
figura también un dispositivo para la diferenciación entre un
episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca, el cual
comprende:
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada que comprende una
base de datos que contiene las cantidades de referencia
- c1)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativos de un episodio cardiovascular agudo.
\vskip1.000000\baselineskip
Finalmente, la presente invención se refiere a
un kit para llevar a cabo el método de la presente invención, el
cual comprende:
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada que comprende una
base de datos que contiene las cantidades de referencia
- c1)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
\vskip1.000000\baselineskip
El término "kit" como se emplea en la
presente, se refiere a un conjunto de los medios antes citados, de
preferencia contenidos en recipientes separados o bien dentro de un
recipiente único. El recipiente, también de preferencia, comprende
instrucciones para llevar a cabo el método de la presente
invención.
Todas las referencias citadas en esta
especificación se incorporan adjuntas a la misma, como referencia
con respecto al contenido completo de la descripción y al contenido
de la descripción específicamente mencionado en esta
especificación.
El siguiente ejemplo ilustra simplemente la
invención. No debe ser tomado para que sirva para limitar el ámbito
de la invención.
\vskip1.000000\baselineskip
En el estudio de este caso, 12 pacientes han
sido confirmados que sufren de un síndrome coronario agudo, de
acuerdo con el método de la presente invención. Todos los pacientes
han sido investigados después de haber mostrado los síntomas de un
episodio cardiovascular agudo mediante un ensayo inicial de
troponina T, y más tarde mediante un ensayo de troponina T de alta
sensibilidad. Los resultados están mostrados en la tabla adjunta
1.
Como resulta evidente a través de la tabla,
todos los pacientes son positivos para la troponina T mediante el
empleo del ensayo de alta sensibilidad. Además, se muestran también
los valores NT-proBNP de los pacientes. En la última
columna se indica el diagnóstico final. Los datos mostrados para 12
pacientes en la tabla adjunta demuestran que la troponina T, así
como también los valores de NT-proBNP, pueden ser
empleados en combinación, para diagnosticar un síndrome coronario
agudo, como por ejemplo la infección miocárdica con elevación del ST
ó la no elevación del ST (STEMI ó NSTEMI).
Para un grupo de 73 pacientes que sufren de un
episodio cardiovascular agudo con una anterior insuficiencia
cardíaca conocida, se han medido el NT-proBNP, el
BNP, el NT-proANP, así como también la troponina T.
La medición, se ha efectuado en el momento en el cual los pacientes
llegaron al hospital de emergencia, y a continuación, después de 12
horas y después de 24 horas. Los pacientes que no mostraron ninguna
elevación de la cantidad de troponina T entre los momentos antes
citados de medición, han sido considerados que presentan una
necrosis crónica. Estos pacientes han sido subdivididos en grupos de
acuerdo con los siguientes criterios: troponina T por debajo del
nivel de detección, troponina T por encima del nivel de detección
aunque sin embargo por debajo del corte clínico de 0,1 ng/ml, y la
troponina T por encima del valor del corte clínico de 0,1 ng/ml.
Como es evidente a partir de la tabla 2, un elevado valor de la
troponina T va acompañado de unas significativas elevadas cantidades
de BNP, NT-proBNP y NT-proANP.
Debe
hacerse notar que aparece raramente una elevación continua de la troponina T por encima del valor de 3 ng/ml.
hacerse notar que aparece raramente una elevación continua de la troponina T por encima del valor de 3 ng/ml.
\vskip1.000000\baselineskip
En otro grupo de pacientes (n = 235) que sufren
de una enfermedad cardiaca coronaria, se ha investigado el
NT-proBNP y la troponina T. Los pacientes no sufren
de un episodio cardiovascular agudo, es decir, el último episodio
cardiovascular agudo habría aparecido por lo menos una semana antes.
Los pacientes se agruparon como se ha descrito en el ejemplo 2, de
más arriba.
Los resultados del estudio están mostrados en la
tabla 3 que figura a continuación.
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Claims (11)
1. Un método para la diferenciación entre un
episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca crónica,
el cual método comprende los pasos de:
a) determinación de la cantidad de una troponina
cardíaca en una muestra de un individuo;
b) determinación de la cantidad de un péptido
natriurético en una muestra de dicho individuo, y
c) diferenciación entre un episodio
cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca crónica, por
comparación de las cantidades determinadas en el paso a) y b) con
cantidades de referencia;
- c1)
- en donde una cantidad de referencia para la troponina cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml son indicativas de una insuficiencia cardíaca crónica; y
- c2)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
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2. Un método útil para el diagnóstico de un
episodio cardiovascular agudo, el cual método comprende los pasos
de:
a) determinación de la cantidad de una troponina
cardíaca en una muestra de un individuo;
b) determinación de la cantidad de un péptido
natriurético en una muestra de dicho individuo, y
c) diagnóstico de un episodio cardiovascular
agudo por comparación de las cantidades determinadas en el paso a) y
b) con cantidades de referencia; en donde (i) significa una cantidad
de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml
y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500
pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca
de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el
péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de
un episodio cardiovascular agudo.
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3. El método de la reivindicación 1 ó 2, en
donde el péptido natriurético es el BNP.
4. El método de la reivindicación 3, en donde el
BNP es el NT-proBNP.
5. El método de la reivindicación 1 ó 2, en
donde el péptido natriurético es el ANP.
6. El método de la reivindicación 5, en donde el
ANP es el NT-proANP.
7. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, en donde dicha troponina cardíaca es la
troponina T y/o la troponina I.
8. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, en donde dicho individuo es un humano.
9. Un dispositivo para el diagnóstico de un
episodio cardiovascular agudo, el cual dispositivo comprende
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada, el cual programa
comprende una base de datos que contiene las cantidades de
referencia,
- c1)
- en donde una cantidad de referencia para la troponina cardíaca entre 0,01 ng/ml y 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml son indicativas de una insuficiencia cardíaca crónica; y
- c2)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
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10. Un dispositivo para la diferenciación entre
un episodio cardiovascular agudo y una insuficiencia cardíaca, el
cual dispositivo comprende
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada, el cual programa
comprende una base de datos que contiene las cantidades de
referencia,
- c1)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
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11. Un kit para efectuar el método de una
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, el cual comprende
a) medios para la determinación de la cantidad
de una troponina cardíaca en una muestra de un individuo;
b) medios para la determinación de la cantidad
de un péptido natriurético en una muestra; y
c) un programa de ordenador para la comparación
de dichas cantidades con una referencia adecuada, el cual programa
comprende una base de datos que contiene las cantidades de
referencia,
- c1)
- en donde (i) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 0,01 ng/ml y una cantidad de referencia del péptido natriurético inferior a 500 pg/ml ó (ii) una cantidad de referencia para la troponina cardíaca de por lo menos 3,5 ng/ml y una cantidad de referencia para el péptido natriurético de por lo menos 500 pg/ml, son indicativas de un episodio cardiovascular agudo.
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| WO2011060361A1 (en) * | 2009-11-13 | 2011-05-19 | Bg Medicine, Inc. | Risk factors and prediction of myocardial infarction |
| EP3246708A3 (en) * | 2009-12-18 | 2018-01-03 | Roche Diagnostics GmbH | Troponins for predicting kidney failure in heart surgery patients |
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| US11931207B2 (en) | 2018-12-11 | 2024-03-19 | Eko.Ai Pte. Ltd. | Artificial intelligence (AI) recognition of echocardiogram images to enhance a mobile ultrasound device |
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| US6461828B1 (en) * | 2001-09-04 | 2002-10-08 | Syn X Pharma | Conjunctive analysis of biological marker expression for diagnosing organ failure |
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| CA2511269A1 (en) * | 2004-07-07 | 2006-01-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Multimarker panel based on p1gf for diabetes type 1 and 2 |
| EP1731910A1 (en) * | 2005-06-07 | 2006-12-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Use of NT-proANP and NT-proBNP for diagnosing cardiac diseases |
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