ES2321800T5 - Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua - Google Patents

Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua Download PDF

Info

Publication number
ES2321800T5
ES2321800T5 ES00986602.1T ES00986602T ES2321800T5 ES 2321800 T5 ES2321800 T5 ES 2321800T5 ES 00986602 T ES00986602 T ES 00986602T ES 2321800 T5 ES2321800 T5 ES 2321800T5
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
poly
group
water
protected
peptide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES00986602.1T
Other languages
English (en)
Other versions
ES2321800T3 (es
Inventor
Antoni Kozlowski
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nektar Therapeutics
Original Assignee
Nektar Therapeutics
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22625322&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2321800(T5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Nektar Therapeutics filed Critical Nektar Therapeutics
Application granted granted Critical
Publication of ES2321800T3 publication Critical patent/ES2321800T3/es
Publication of ES2321800T5 publication Critical patent/ES2321800T5/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/333—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6901—Conjugates being cells, cell fragments, viruses, ghosts, red blood cells or viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/91—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/34—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from hydroxy compounds or their metallic derivatives
    • C08G65/48—Polymers modified by chemical after-treatment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polyethers (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
DESCRIPCION
Procedimiento de preparacion de esteres de 1-benzotriazolil carbonato de poKmeros solubles en agua
La presente invencion versa acerca de un procedimiento para la preparacion de un derivado de aminoacido de ciertos poKmeros no peptfdicos solubles en agua.
La fijacion covalente del poKmero hidrofilo de poli(etilenglicol), abreviado como PEG, tambien conocido como poli(oxido de etileno), abreviado como PEO, a moleculas y superficies es de una utilidad considerable en la biotecnologfa y la medicina. En su forma mas comun, PEG es un polfmero lineal terminado en cada extremo con grupos hidroxilo:
Ho-CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH
El anterior polfmero, alfa-, omega-dihidroxilpoli(etilenglicol), puede estar representado de forma abreviada como HO- PEG-OH en la que se comprende que el sfmbolo -PEG- representa la siguiente unidad estructural:
-CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-
en la que n vana normalmente desde aproximadamente 3 hasta aproximadamente 4000.
El PEG se utiliza normalmente como metoxi-PEG-OH, o abreviado a mPEG, en el que un termino es el grupo metoxi relativamente inerte, mientras que el otro termino es un grupo hidroxilo que esta sometido a una modificacion qmmica preparada. A continuacion se muestra la estructura de mPEG:
CHaO-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH
Los copolfmeros aleatorios o en bloque de oxido de etileno y de oxido de propileno, mostrados a continuacion, estan relacionados estrechamente al PEG en su qmmica, y pueden ser sustituidos por PEG en muchas de sus aplicaciones.
HO-CH2CHRO(CH2CHRO)nCH2CHR-OH en el que cada R es H o CH3, independientemente.
El PEG es un polfmero que tiene las propiedades de solubilidad en agua y en muchos disolventes organicos, carece de toxicidad, y carece de inmunogenicidad. Un uso del PEG es para fijar de manera covalente el polfmero a moleculas insolubles para hacer que la molecula resultante de PEG soluble en “conjugado”. Por ejemplo, se ha mostrado que el farmaco paclitaxel insoluble en agua, cuando esta acoplado a PEG, se vuelve soluble en agua. Greenwald, et al., J. Org. Chem., 60:331-336 (1995).
Para acoplar PEG a una molecula, tal como una protema, es a menudo necesario “activar” el PEG al preparar un derivado del PEG que tiene un grupo funcional en un termino del mismo. El grupo funcional puede reaccionar con ciertas porciones en la protema, tal como un grupo amino, formando de esta manera un conjugado de PEG-protema.
En la patente U.S. n° 5.650.234, que se incorpora por referencia en el presente documento en su totalidad, esta descrito un ester de 1-benzotriazolilcarbonato de polietilenglicol. El proceso de multiples etapas descrito en la patente 5.650.234 para formar el ester de 1-benzotrazolilcarbonato de PEG incluye la reaccion de una molecula de PEG con el compuesto volatil y peligroso, fosgeno, para asf formar un producto intermedio de PEG cloroformiato. El uso de fosgeno en el proceso resulta en la formacion de HCl, que puede causar la degradacion de la cadena principal de PEG. Debido a la naturaleza volatil del fosgeno, y los problemas de seguridad y de calidad asociados con su uso, hay una necesidad en la tecnica para un procedimiento para preparar esteres de 1- benzotriazolilcarbonato de PEG sin utilizar fosgeno.
La invencion proporciona un procedimiento para la preparacion de un derivado de aminoacido de un polfmero no peptfdico soluble en agua, segun se define en las reivindicaciones. Utilizando la invencion, el ester de 1- benzotriazolilcarbonato puede estar formado en una unica etapa y sin utilizar fosgeno, evitando de ese modo los problemas de seguridad y calidad asociados con ese compuesto.
El procedimiento de la invencion incluye proporcionar un polfmero no peptfdico soluble en agua que tiene al menos un grupo hidroxilo terminal y reaccionando el grupo hidroxilo terminal del polfmero no peptfdico soluble en agua con di(1-benzotriazolil)carbonato para formar el ester de 1-benzotriazolilcarbonato del polfmero no peptfdico soluble en agua. El polfmero no peptfdico soluble en agua esta seleccionado de entre poli(alquilenglicol), poli(poliol oxietilado), poli(alcohol olefmico), poli(vinilpirrolidona), poli(acido hidroxi-a), polifosfaceno, polioxazolina, poli(N-acriloilmorfolina), y copolfmeros, terpolfmeros, y mezclas de los mismos. En una realizacion, el polfmero es poli(etilenglicol) que tiene un peso molecular medio desde aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da.
La etapa de la reaccion puede ser llevada a cabo en la presencia de un disolvente organico y una base. Ejemplos de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
disolventes organicos incluyen cloruro de metileno, cloroformo, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dimetil sulfoxido, y mezclas de los mismos. La base puede ser, por ejemplo, piridina, dimetilaminopiridina, quinolina, trialquilaminas, y mezclas de las mismas.
El ester de 1-benzotriazolilcarbonato puede ser reaccionado con un aminoacido, tal como lisina, para formar un derivado de aminoacido polimerico.
Los terminos “grupo funcional”, “porcion activa”, “grupo activador”, “emplazamiento reactivo”, “grupo reactivo qmmicamente” y “porcion reactiva qmmicamente” son utilizados en la tecnica y en el presente documento para hacer referencia a porciones o unidades definibles precisas de una molecula. Los terminos son un tanto sinonimos en las tecnicas qmmicas y son utilizados en el presente documento para indicar las porciones de las moleculas que realizan alguna funcion o actividad y son reactivas con otras moleculas. El termino “activo”, cuando es utilizado en conjunto con grupos funcionales, se pretende que incluya aquellos grupos funcionales que reaccionan facilmente con grupos electrofflicos o nucleofflicos en otras moleculas, en contraste con aquellos grupos que requieren catalizadores fuertes o condiciones de reaccion muy poco viables para reaccionar. Por ejemplo, segun se entendena en la tecnica, el termino “ester activo” incluina aquellos esteres que reaccionan facilmente con grupos nucleofflicos tales como aminas. Normalmente, un ester activo reaccionara con una amina en un medio acuoso en cuestion de minutos, mientras que ciertos esteres, tal como esteres de metilo o etilo, requieren un catalizador fuerte para reaccionar con un grupo nucleofflico.
El termino “enlace” o “enlazante” se utilizan en el presente documento para hacer referencia a grupos o enlaces que estan formados normalmente como el resultado de una reaccion qmmica y normalmente son enlaces covalentes. Enlaces hidrolfflcamente estables significa que los enlaces son sustancialmente estables en agua y no reaccionan con agua a pH utiles, por ejemplo, bajo condiciones fisiologicas durante un periodo de tiempo extendido, quizas incluso indefinidamente. Enlaces hidrolfflcamente inestables o degradables significa que los enlaces son degradables en agua o en disoluciones acuosas, incluyendo, por ejemplo, sangre. Enlaces enzimaticamente inestables o degradables significa que el enlace puede ser degradado por una o mas enzimas. Segun se entiende en la tecnica, el PEG y polfmeros relacionados pueden incluir enlaces degradables en la cadena principal del polfmero o en el grupo enlazante entre la cadena principal del polfmero y uno o mas de los grupos funcionales terminales de la molecula polimerica.
El termino “molecula activa biologicamente”, “porcion activa biologicamente” o “agente activo biologicamente” cuando se utilizan en el presente documento significan cualquier sustancia que pueda afectar cualquier propiedad ffsica o bioqmmica de un organismo biologico, incluyendo pero sin estar limitada a virus, bacterias, hongos, plantas, animales y humanos. En particular, segun se utiliza en el presente documento, las moleculas activas biologicamente incluyen cualquier sustancia prevista para un diagnostico, la mitigacion de la cura, el tratamiento, o la prevencion de enfermedad en humanos u otros animales, o para mejorar de otra manera el bienestar ffsico o mental de humanos o animales. Ejemplos de moleculas activas biologicamente incluyen, pero no estan limitadas a, peptidos, protemas, enzimas, farmacos de moleculas pequenas, colorantes, lfpidos, nucleosidos, oligonucleotidos, celulas, virus, liposomas, micropartfflulas y micelas. Las clases de agentes activos biologicamente que son adecuadas para su uso con la invencion incluyen, pero no estan limitadas a, antibioticos, fungicidas, agentes antivfflicos, agentes antiinflamatorio, agentes antitumorales, agentes cardiovasculares, agentes antiansiedad, hormonas, factores de crecimiento, agentes esteroideos, y similares.
Se describe un procedimiento para la preparacion de un ester de 1-benzotriazolilcarbonato (tambien llamado un ester de BTC) de un polfmero no peptfdico soluble en agua, en el que un grupo hidroxilo terminal de un polfmero no peptfdico soluble en agua reacciona con di(1-benzotriazolil)carbonato, cuya estructura se muestra a continuacion, para formar el ester de 1-benzotriazolilcarbonato.
El di(1-benzotriazolil)carbonato, que no debena plantear problemas significativos de seguridad ni de manipulacion como un reactivo y que no debena provocar la degradacion de la cadena principal del polfmero, puede ser adquirido como una mezcla del 70% (en peso) con 1,1,2-tricloroetano de Fluka Chemical Corporation de Milwaukee, Wisconsin, EE. UU.
5
10
15
20
25
30
35
40
imagen1
di(1 -benzotnazolil)carbonato (diBTC)
La cadena principal polimerica del polfmero no peptidico soluble en agua puede ser poli(etMenglicol) (o sea, PEG). Sin embargo, se debena comprender que tambien son adecuados otros polfmeros relacionados para su uso en la practica de esta invencion y que se pretende que el uso del termino PEG o poli(etilenglicol) sea inclusivo y no exclusivo en este sentido. El termino PEG incluye poli(etilenglicol) en cualquiera de sus formas, incluyendo PEG alcoxi, PEG difuncional, PEG de brazos multiples, PEG bifurcado, PEG ramificado, PEG pendiente (o sea, PEG o polfmeros relacionados que tienen uno o mas grupos funcionales pendientes a la cadena principal del polfmero), o PEG con enlaces degradables en su interior.
El PEG es normalmente transparente, incoloro, inodoro, soluble en agua, estable al calor, inerte a muchos agentes qmmicos, no se hidroliza ni deteriora, y es normalmente no toxico. Se considera que el poli(etilenglicol) es biocompatible, lo que significa que el PEG es capaz de coexistir con tejidos vivos u organismos sin hacerles dano. Mas espedficamente, el PEG es sustancialmente no inmunogenico, lo que significa que el PEG no tiende a producir una respuesta inmune en el cuerpo. Cuando se fija a una molecula que tiene alguna funcion deseable en el cuerpo, tal como un agente activo biologicamente, el PEG tiende a enmascarar el agente y puede reducir o eliminar cualquier respuesta inmune de forma que el organismo pueda tolerar la presencia del agente. Los conjugados de PEG tienden a no producir una respuesta inmune sustancial ni provocar coagulacion u otros efectos no deseables. Teniendo el PEG la formula -CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-, en la que n es desde aproximadamente 3 hasta aproximadamente 4000, normalmente desde aproximadamente 3 hasta aproximadamente 2000, es un polfmero util en la practica de la invencion. Los PEG que tienen un peso molecular de desde aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da son particularmente utiles como la cadena principal del polfmero.
La cadena principal del polfmero puede ser lineal o ramificada. Las cadenas principales ramificadas de los polfmeros son normalmente conocidas en la tecnica. Normalmente, un polfmero ramificado tiene una porcion del nucleo central ramificado y una pluralidad de cadenas lineales de polfmeros enlazadas al nucleo central ramificado. El PEG se utiliza normalmente en formas ramificadas que pueden ser preparadas con la adicion de oxido de etileno a diversos polioles, como glicerol, pentaeritritol y sorbitol. La porcion central ramificada tambien puede estar derivada de diversos aminoacidos, tal como lisina. El poli(etilenglicol) ramificado puede estar representado en forma general como R(-PEG-OH)m en la que R representa la porcion central, como el glicerol o el pentaeritritol, y m representa el numero de brazos. Las moleculas de PEG de brazos multiples, como las descritas en la patente U.S. n° 5.932.462, que se incorpora en el presente documento a modo de referencia en su totalidad, tambien se pueden utilizar como la cadena principal del polfmero.
Tambien son adecuados para la invencion muchos otros polfmeros seleccionados de entre los mencionados anteriormente. Las cadenas principales de los polfmeros que son no peptfdicos y solubles en agua, con desde 2 hasta aproximadamente 300 terminaciones, son particularmente utiles en la invencion. Los polfmeros adecuados son otros poli(alquilenglicoles), como el poli(propilenglicol) (“PPG”), copolfmeros de etilenglicol y propilenglicol y similares, poli(poliol oxietilado), poli(alcohol olefrnico), poli(vinilpirrolidona), poli(acido hidroxi-a), polifosfaceno, polioxazolina, poli(N-acriloilmorfolina), como se describe en la patente U.S. n° 5.629.384, y copolfmeros, terpolfmeros, y mezclas de los mismos. Aunque el peso molecular de cada cadena de la cadena principal del polfmero puede variar, se encuentra normalmente en el rango de desde aproximadamente 100 Da hasta aproximadamente 100.000 Da, a menudo desde aproximadamente 6.000 Da hasta aproximadamente 80.000 Da.
Para fines ilustrativos, a continuacion se muestra un esquema simplificado de reaccion.
imagen2
en la que BT es
imagen3
siendo L el punto de la union del atomo de oxfgeno.
En una realizacion, la reaccion entre el poUmero y diBTC tiene lugar en un disolvente organico y en la presencia de 5 una base. Ejemplos de disolventes organicos adecuados incluyen cloruro de metileno, cloroformo, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dimetil sulfoxido, y mezclas de los mismos. Las bases amina, como piridina, dimetilaminopiridina, quinolina, trialquilaminas, incluyendo trietilamina, y mezclas de las mismas, son ejemplos de bases adecuadas. En un aspecto de la invencion, la relacion molar de di(1-benzotriazolil)carbonato a polfmero no peptfdico soluble en agua es de aproximadamente 30:1 o menos.
10 En una realizacion, el polfmero no peptfdico soluble en agua tiene la estructura R'-POLI-OH y el ester de 1- benzotriazolilcarbonato del polfmero no peptfdico soluble en agua tiene la estructura
imagen4
en la que POLI es una cadena principal del polfmero no peptfdico soluble en agua, tal como PEG, y R' es un grupo terminal. R' puede ser cualquier grupo terminal adecuado conocido en la tecnica para polfmeros de este tipo. Por 15 ejemplo, R' puede ser un grupo terminal relativamente inerte, tal como un grupo alcoxi (por ejemplo, metoxi). De manera alternativa, R' puede ser un grupo funcional. Ejemplos de grupos funcionales incluyen hidroxilo, hidroxilo protegido, ester activo, tal como esteres de N-hidroxisuccinimidilo y esteres de 1-benzotriazolilo, carbonato activo, tal como carbonatos de N-hidroxisuccinimidilo y carbonatos de 1-benzotriazolilo, acetal, aldehfdo, hidratos de aldehfdo, alquenilo, acrilato, metacrilato, acrilamida, sulfona activa, amina protegida, hidrazida protegida, tiol, tiol protegido, 20 acido carboxflico, acido carboxflico protegido, isocianato, isotiocianato, maleimida, vinilsulfona, ditiopiridina, vinilpiridina, yodoacetamida, epoxido, glioxales, dionas, mesilatos, tosilatos y tresilato. El grupo funcional esta escogido normalmente para su fijacion a un grupo funcional en un agente activo biologicamente.
Como se entendena en la tecnica, el termino “protegido” se refiere a la presencia de un grupo o porcion protector que previene la reaccion del grupo funcional reactivo qmmicamente bajo ciertas condiciones de reaccion. El grupo 25 protector variara dependiendo del tipo de grupo reactivo qmmicamente que este siendo protegido. Por ejemplo, si el grupo reactivo qmmicamente es una amina o una hidrazida, el grupo protector puede estar seleccionado de entre el grupo de tert-butiloxicarbonilo (t-Boc) y 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc). Si el grupo reactivo qmmicamente es un tiol, el grupo protector puede ser ortopiridildisulfuro. Si el grupo reactivo qmmicamente es un acido carboxflico, tal como acido butanoico o propionico, o un grupo hidroxilo, el grupo protector puede ser un bencilo o un grupo alquilo 30 tal como metilo o etilo. Tambien se pueden utilizar en la invencion otros grupos protectores conocidos en la tecnica.
En otra realizacion, el polfmero no peptfdico soluble en agua tiene la estructura HO-POLIa-R(POLIb-X)q y el ester de 1-benzotriazolilcarbonato del polfmero no peptfdico soluble en agua tiene la estructura
5
10
15
20
25
30
imagen5
en la que POLIa y POLIb son cadenas principales de poKmeros no peptidicos solubles en agua, tal como PEG, que pueden ser los mismos o distintos;
R es una molecula de nucleo central, tal como glicerol o pentaeritritol; q es un numero entero desde 2 hasta aproximadamente 300; y siendo cada X un grupo terminal.
Los grupos terminales X pueden ser los mismos que se mencionaron anteriormente para R'.
La invencion supone la reaccion de esteres de BTC de polfmeros no peptfdicos solubles en agua con aminoacidos para formar derivados de aminoacidos. En una realizacion, los esteres de PEG-BTC reaccionan con lisina para formar un derivado polimerico de lisina. Por ejemplo, dicho derivado de lisina es una lisina doblemente PEGada, en el que dos PEG estan enlazados a las aminas de lisina por medio de enlaces de carbamato, como se muestra a continuacion.
O
NH-------(CH,)4 -------CH-------C-------O-------Z
NH
c=o
O
PEG
en la que PEG es poli(etilenglicol) y Z esta seleccionado de entre el grupo que consiste en H, N-succinimidilo o 1- benzotriazolilo.
Dichos derivados de PEG de lisina son utiles como reactivos para la preparacion de derivados PEG de protemas. Estos derivados PEG ofrecen a menudo ventajas sobre las protemas no PEGadas, tal como duraciones de vida in vivo de mayor circulacion, tasas reducidas de proteolisis, y menor inmunogenicidad. En otro aspecto, los derivados PEG BTC se utilizan directamente para fijar pEg a protemas por medio de enlaces de carbamato y pueden ofrecer ventajas similares a las descritas para los derivados PEG de lisina.
Los esteres de BTC de polfmeros no peptfdicos solubles en agua tambien se pueden reaccionar con agentes activos biologicamente para formar conjugados de polfmeros activos biologicamente. Ejemplos de agentes activos biologicamente incluyen peptidos, protemas, enzimas, farmacos de molecula pequena, colorantes, lfpidos, nucleosidos, oligonucleotidos, celulas, virus, liposomas, micropartmulas y micelas.
Como se ha mencionado anteriormente, se cree que los derivados polimericos preparados conforme a la invencion exhiben una mayor calidad porque se evita la degradacion de la cadena principal del polfmero causada por el fosgeno. Ademas, dado que el procedimiento solamente requiere una etapa y menos reactantes, se aumenta el rendimiento del proceso y se reduce el coste.
Se dan los siguientes ejemplos para ilustrar la invencion, pero no se debenan considerar como limitantes de la invencion.
PARTE EXPERIMENTAL
imagen6
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Ejemplo 1
Preparacion de mPEG5nnnBTC (ejemplo de referencia)
Se agito durante la noche una disolucion de mPEG5nnn-OH (PM 5000, 15 g, 0,003 moles), di(1- benzotriazolil)carbonato (4,0 g de una mezcla 70%, 0,000945 moles), y piridina (2,2 ml) en acetonitrilo (30 ml) a temperature ambiente bajo nitrogeno. Se elimino el disolvente mediante destilacion, se disolvio el residuo en 80 ml de cloruro de metileno, y la disolucion resultante se anadio a 850 ml de etil eter. Se enfrio la mezcla a 0-5°C y se recogio el precipitado mediante filtracion. Entonces, se repitio el proceso de precipitacion para obtener un solido blanco que fue secado al vado a temperatura ambiente para producir 13,5 g de producto que fue mostrado mediante 1H nmr que va a ser 100% sustituido. 1H nmr (dmso d-6): 3,23 ppm, CH3O; 3,5l ppm, O-CH2CH2-O; 4,62 ppm, m, mPEG-O-CH2-OCO2-; 7,41-8,21, complejo mult., protones de benzotriazola.
Ejemplo 2
Preparacion de mPEG2nnnnBTC (ejemplo de referencia)
Se agito durante la noche una disolucion de IT1PEG20.000-OH (PM 20.000, 20 g, 0,001 moles), di(1- benzotriazolil)carbonato (3,4 g de mezcla 70%, 0,00803 moles), y piridina (3,0 ml) en acetonitrilo (40 ml) a temperatura ambiente bajo nitrogeno. Se elimino el disolvente mediante destilacion y se disolvio el residuo en 80 ml de cloruro de metileno, y la disolucion resultante se anadio a 800 ml de etil eter. Se recogio el precipitado mediante filtracion y fue secado al vado a temperatura ambiente para producir 16,8 g de producto que fue mostrado mediante 1H nmr que va a ser 100% sustituido. 1H nmr (dmso d-6): 3,23 ppm, CH3O; 3,51 ppm, O-CH2CH2-O; 4,62 ppm, m, mPEG-O-CH2-OCO2-; 7,41-8,21, complejo mult., protones de benzotriazola.
Ejemplo 3
Derivacion de lisina con mPEG2nnnnBTC
Se disolvio lisina.HCl (0,0275 g, 0,000151 moles) en 26 ml de tampon borato de 0,1 M y se ajusto el pH a 8,0 con 0,1 M de NaOH. A la disolucion resultante se le anadio mPEG20.000BTC (7,0 g, 0,00350 moles) a lo largo de 15 minutos y se mantuvo el pH en 8 con la adicion de 0,1 M de NaOH. Despues de agitar la disolucion resultante durante 3 h, se anadieron 15 g de H2O y 4 g de NaCl y se ajusto el pH a 3,0 con un 10% de acido fosforico. Se extrajo el producto con cloruro de metilenoy el extracto se seco sobre MgSO4. Despues de concentrar la disolucion a 30 ml, se vertio la disolucion en 300 ml de etil eter y se recogio el producto mediante filtracion y se seco al vado a temperatura ambiente para producir 5,9 g de producto como un solido blanco. El analisis mediante cromatograffa de impregnacion de gel (Ultrahydrogel 250, temperatura de la columna de 75°C, tampon acuoso de pH 7,2) mostro que el producto era una mezcla de di-N- PEGada lisina (PM - 40 KDa, 63,05%), mono-N- PEGada lisina (PM-20 KDa, 36,95%) y mPEG20.000.
Ejemplo 4 (no dentro de las reivindicaciones)
Derivacion de lisozima con mPEG5nnnBTC
Se anadieron 20,3 mg de mPEG5000BTC (exceso quintuple de mPEG5000 BTC) a 4 ml de disolucion de lisozima (3 mg/ml en 50 mM de tampon de fosfato sodico, pH 7,2) y se mezclo continuamente la mezcla a temperatura ambiente. El analisis mediante electroforesis capilar (columna de 57 cm x 76 um; 30 mM tampon fosfato; voltaje de funcionamiento de 25 kV) despues de 4 horas mostro que permaneda un 6,94% de lisozima sin reaccionar, mientras que se hada formado un 33,99% de mono- PEGada lisozima, un 43,11% de di- PEGada lisozima, un 13,03% detri- PEGada lisozima y un 2,92% de tetra- PEGada lisozima.
Ejemplo 5 (no dentro de las reivindicaciones)
Ester bencilico de acido PEG?Kna-a-hidroxi-c»-propionico
Se anadieron 1-hidroxibenzotriazola (0,30 g), 4-(dimetilamino)piridina (1,0 g), alcohol bendlico (10,8 g, 0,100 moles) y 1,3-diciclohexilcarbodiimida (1,0 M de disolucion en cloruro de metileno, 7,5 ml, 0,0075 moles) a una disolucion de acido PEG2KDa-a-hidroxi-ro-propionico (10 g, 0,0050 moles) (Shearwater Corp.) en cloruro de metileno anhidro (100 ml). Se agito durante la noche la mezcla de reaccion a temperatura ambiente bajo argon. Entonces, se concentro la mezcla a aproximadamente 50 ml, fue filtrada y anadida a 800 ml de dietil eter frio. El producto precipitado fue filtrado y secado a una presion reducida. Produccion 8,2 g. NMR (d6-DMSO): 2,60 ppm (t, -CH2 - cOo-), 3,51 ppm (s, cadena principal de PEG), 4,57 ppm (t, -OH-), 5,11 ppm (s, -CH2- (bencilo)), 7,36 ppm (m, -C6H5 (bencilo)).
Ejemplo 6 (no dentro de las reivindicaciones)
Ester bencilico de acido PEG2Kna-a-benzotriazola carbonato-ro-propionico
Se anadieron piridina (0,98 ml) y di(1-benzotriazolil)carbonato (1,48 g) a una disolucion de ester bendlico de acido
7
PEG2KDa-a-hidroxi-o-propiomco (8,2 g, 0,0025 moles) en acetonitrilo (82 ml), y se agito durante la noche la mezcla de reaccion a temperatura ambiente bajo una atmosfera de argon. Luego, se filtro la mezcla y se evaporo el disolvente hasta conseguir la sequedad. El producto crudo fue disuelto en cloruro de metileno y fue precipitado con alcohol isopropilo. El producto mojado fue secado a una presion reducida. Produccion 6,8 g. NMR (d6-DMSO): 2,60 5 ppm (t, -CH2-COO-), 3,51 ppm (s, cadena principal de PEG), 4,62 ppm (m, -CH2-O(C=O)-), 5,11 ppm (s, -CH2- (bencilo)), 7,36 ppm (m, -C6H5 (bencilo)), 7,60 ppm - 8,50 ppm (4 m, protones aromaticos de benzotriazola).

Claims (28)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    REIVINDICACIONES
    1. Un procedimiento de preparation de un derivado de aminoacido de un potimero no peptidico soluble en agua, que comprende:
    proporcionar un potimero no peptidico soluble en agua que tiene al menos un grupo hidroxilo terminal seleccionado de entre el grupo que consiste en poli(alquilenglicol), poli(poliol oxietilado), poli(alcohol oletinico), poli(vinilpirrolidona), poli(acido hidroxi-a), polifosfaceno, polioxazolina, poli(N-acriloilmorfolina) y copotimeros, terpotimeros y mezclas de los mismos, y
    hacer reaccionar el grupo hidroxilo terminal del potimero no peptidico soluble en agua con di(1- benzotriazolil)carbonato para formar un ester de 1-benzotriazolilcarbonato del potimero no peptidico soluble en agua, que comprende, ademas, la etapa de hacer reaccionar el ester de 1-benzotriazolilcarbonato del potimero no peptidico soluble en agua con un aminoacido para formar un derivado de aminoacido.
  2. 2. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el potimero no peptidico soluble en agua es poli(etilenglicol).
  3. 3. El procedimiento de la Reivindicacion 2, en el que el poli(etilenglicol) tiene un peso molecular medio desde aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da.
  4. 4. El procedimiento de la Reivindicacion 2, en el que el poli(etilenglicol) tiene un numero de subunidades de 34.000.
  5. 5. El procedimiento de la Reivindicacion 2, en el que el poli(etilenglicol) tiene un numero de subunidades de 32.000.
  6. 6. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el potimero no peptidico soluble en agua tiene desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 300 terminaciones.
  7. 7. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el potimero no peptidico soluble en agua tiene la estructura R’-POLI-OH y el ester de 1-benzotriazolilcarbonato del potimero no peptidico soluble en agua tiene la estructura
    imagen1
    en la que POLI es una cadena principal del potimero no peptidico soluble en agua y R’ es un grupo terminal o un grupo funcional.
  8. 8. El procedimiento de la Reivindicacion 7, en el que POLI es poli(etilenglicol).
  9. 9. El procedimiento de la Reivindicacion 8, en el que el poli(etilenglicol) tiene un peso molecular medio desde
    aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da.
  10. 10. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 7 a 9, en el que R’ es metoxi.
  11. 11. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 7 a 9, en el que R’ es un grupo funcional
    seleccionado de entre el grupo que consiste en hidroxilo, hidroxilo protegido, ester activo, carbonato activo, acetal, aldehido, hidratos de aldehido, alquenilo, acrilato, metacrilato acrilamida, sulfona activa, amina protegida, hidrazida protegida, tiol, tiol protegido, acido carboxflico, acido carboxtiico protegido, isocianato, isotiocianato, maleimida, vinilsulfona, ditiopiridina, vinilpiridina, yodoacetamida, epoxido, glioxales, dionas, mesilatos, tosilatos y tresilato.
  12. 12. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el potimero no peptidico soluble en agua tiene la estructura HO-POLIa-R(POLIb-X)q y el ester de 1 -benzotriazolilcarbonato del potimero no peptidico soluble en agua tiene la estructura
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    imagen2
    en la que POLIa y POLIb son cadenas principales de polfmeros no peptidicos solubles en agua que pueden ser los mismos o diferentes,
    R es una molecula de nucleo central;
    q es un numero entero desde 2 hasta aproximadamente 300; y cada X es un grupo terminal o un grupo funcional.
  13. 13. El procedimiento de la Reivindicacion 12, en el que POLIa y POLIb son poli(etilenglicol).
  14. 14. El procedimiento de la Reivindicacion 13, en el que POLIa y POLIb tienen cada uno un peso molecular medio desde aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da.
  15. 15. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 12 a 14, en el que cada X esta seleccionada de manera independiente de entre el grupo que consiste en alcoxi, hidroxilo, hidroxilo protegido, ester activo, carbonato activo, acetal, aldehfdo, hidratos de aldehfdo, alquenilo, acrilato, metacrilato, acrilamida, sulfona activa, amina protegida, hidrazida protegida, tiol, tiol protegido, acido carboxflico, acido carboxflico protegido, isocianato, isotiocianato, maleimida, vinilsulfona, ditiopiridina, vinilpiridina, yodoacetamida, epoxido, glioxales, dionas, mesilatos, tosilatos y tresilato.
  16. 16. El procedimiento de la Reivindicacion 13, en el que R esta derivado a partir de un poliol.
  17. 17. El procedimiento de la Reivindicacion 16, en el que el poliol esta seleccionado de entre el grupo que consiste en glicerol, pentaeritritol y sorbitol.
  18. 18. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 17, en el que dicha etapa de reaccion se lleva a cabo en un disolvente organico.
  19. 19. El procedimiento de la Reivindicacion 18, en el que el disolvente organico esta seleccionado de entre el grupo que consiste en cloruro de metileno, cloroformo, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dimetil sulfoxido, y mezclas de los mismos.
  20. 20. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 19, en el que dicha etapa de reaccion se lleva a cabo en presencia de una base.
  21. 21. El procedimiento de la Reivindicacion 20, en el que la base esta seleccionada de entre el grupo que consiste en piridina, dimetilaminopiridina, quinolina, trialquilaminas, y mezclas de las mismas.
  22. 22. El procedimiento de una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 21, en el que la relacion molar de di(1- benzotriazolil)carbonato al polfmero no peptfdico soluble en agua es de aproximadamente 30:1 o menor.
  23. 23. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el aminoacido es lisina.
  24. 24. El procedimiento de la Reivindicacion 1, en el que el derivado del aminoacido tiene la estructura
    5
    10
    15
    I
    PEG--------O--------C---------NH--------(CH,)4 --------CH
    NH
    c=o
    O
    PEG
    en la que PEG es poli(etilengMcol) y Z esta seleccionado de entre el grupo que consiste en H, N-succinimidilo o 1-benzotriazolilo.
  25. 25. El procedimiento de la Reivindicacion 24, que comprende ademas conjugar el derivado del aminoacido con una protema para formar un derivado polimerico de la protema.
  26. 26. El procedimiento de la Reivindicacion 1, que comprende:
    proporcionar una molecula de poli(etilenglicol) con un grupo hidroxilo terminal y un peso molecular medio desde aproximadamente 200 Da hasta aproximadamente 100.000 Da y que tiene la estructura
    R'-PEG-OH
    en la que R' es un grupo terminal o un grupo funcional; y hacer reaccionar el grupo hidroxilo terminal con di(1- benzotriazolil)carbonato para formar un ester de 1-benzotriazolilcarbonato del poli(etilenglicol) que tiene la estructura
    imagen3
    imagen4
    en la que R es como se ha definido anteriormente.
  27. 27. El procedimiento de la Reivindicacion 26, en el que R' es metoxi.
  28. 28. El procedimiento de la Reivindicacion 26, en el que R' es un grupo funcional seleccionado de entre el grupo que consiste en hidroxilo, hidroxilo protegido, ester activo, carbonato activo, acetal, aldehfdo, hidrato de aldehfdo, alquenilo, acrilato, metacrilato, acrilamida, sulfona activa, amina protegida, hidrazida protegida, tiol, tiol protegido, acido carboxflico, acido carboxflico protegido, isocianato, isotiocianato, maleimida, vinilsulfona, ditiopiridina, vinilpiridina, yodoacetamida, epoxido, glioxal, diona, mesilato, tosilato y tresilato.
ES00986602.1T 1999-12-22 2000-12-18 Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua Expired - Lifetime ES2321800T5 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17183499P 1999-12-22 1999-12-22
US171834P 1999-12-22
PCT/US2000/034590 WO2001045796A2 (en) 1999-12-22 2000-12-18 Method for the preparation of 1-benzotriazolyl carbonate esters of poly(ethylene glycol)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2321800T3 ES2321800T3 (es) 2009-06-12
ES2321800T5 true ES2321800T5 (es) 2017-02-17

Family

ID=22625322

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES00986602.1T Expired - Lifetime ES2321800T5 (es) 1999-12-22 2000-12-18 Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua

Country Status (14)

Country Link
US (15) US6376604B2 (es)
EP (2) EP2070968A3 (es)
JP (2) JP5095061B2 (es)
KR (1) KR100729977B1 (es)
AT (1) ATE424431T2 (es)
AU (1) AU781729B2 (es)
CA (1) CA2393638C (es)
CY (1) CY1109102T1 (es)
DE (1) DE60041715D1 (es)
DK (1) DK1259563T4 (es)
ES (1) ES2321800T5 (es)
MX (1) MXPA02006215A (es)
PT (1) PT1259563E (es)
WO (1) WO2001045796A2 (es)

Families Citing this family (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100361933B1 (ko) * 1993-09-08 2003-02-14 라 졸라 파마슈티칼 컴파니 화학적으로정의된비중합성결합가플랫폼분자및그것의콘주게이트
US6057287A (en) 1994-01-11 2000-05-02 Dyax Corp. Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof
US6458953B1 (en) * 1998-12-09 2002-10-01 La Jolla Pharmaceutical Company Valency platform molecules comprising carbamate linkages
AU779887B2 (en) * 1999-06-08 2005-02-17 La Jolla Pharmaceutical Company Valency platform molecules comprising aminooxy groups
MXPA02006215A (es) * 1999-12-22 2003-10-15 Nektar Therapeutics Al Corp Metodo para preparar esteres de 1-benzotriazolil carbonato de poli(etilenglicol).
US7829074B2 (en) 2001-10-18 2010-11-09 Nektar Therapeutics Hydroxypatite-targeting poly(ethylene glycol) and related polymers
US6436386B1 (en) * 2000-11-14 2002-08-20 Shearwater Corporation Hydroxyapatite-targeting poly (ethylene glycol) and related polymers
US6765069B2 (en) * 2001-09-28 2004-07-20 Biosurface Engineering Technologies, Inc. Plasma cross-linked hydrophilic coating
US7157277B2 (en) 2001-11-28 2007-01-02 Neose Technologies, Inc. Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII
EP2298354B1 (en) 2001-10-10 2014-03-19 ratiopharm GmbH Remodelling and glycoconjugation of interferon-beta
US8008252B2 (en) * 2001-10-10 2011-08-30 Novo Nordisk A/S Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII
US7214660B2 (en) 2001-10-10 2007-05-08 Neose Technologies, Inc. Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin
US7173003B2 (en) * 2001-10-10 2007-02-06 Neose Technologies, Inc. Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF
SG159381A1 (en) 2001-10-10 2010-03-30 Novo Nordisk As Remodeling and glycoconjugation of peptides
US7153829B2 (en) 2002-06-07 2006-12-26 Dyax Corp. Kallikrein-inhibitor therapies
CA2488558C (en) 2002-06-07 2013-08-20 Dyax Corp. Prevention and reduction of blood loss
MXPA04012496A (es) * 2002-06-21 2005-09-12 Novo Nordisk Healthcare Ag Glicoformos del factor vii pegilados.
US8663650B2 (en) 2003-02-21 2014-03-04 Ac Immune Sa Methods and compositions comprising supramolecular constructs
CA2519092C (en) * 2003-03-14 2014-08-05 Neose Technologies, Inc. Branched water-soluble polymers and their conjugates
US20060276618A1 (en) * 2003-03-18 2006-12-07 Defrees Shawn Activated forms of water-soluble polymers
EP1615945B1 (en) 2003-04-09 2011-09-28 BioGeneriX AG Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods
WO2006127896A2 (en) 2005-05-25 2006-11-30 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor ix
US8791070B2 (en) 2003-04-09 2014-07-29 Novo Nordisk A/S Glycopegylated factor IX
ATE540055T1 (de) * 2003-05-09 2012-01-15 Biogenerix Ag Zusammensetzungen und verfahren zur herstellung von glykosylierungsmutanten des menschlichen wachstumshormons
TR201907313T4 (tr) * 2003-05-23 2019-06-21 Nektar Therapeutics İki PEG zinciri içeren PEG türevleri.
US7947261B2 (en) 2003-05-23 2011-05-24 Nektar Therapeutics Conjugates formed from polymer derivatives having particular atom arrangements
US8604159B2 (en) 2003-07-22 2013-12-10 Nektar Therapeutics Method for preparing functionalized polymers from polymer alcohols
US20080026995A1 (en) * 2003-07-25 2008-01-31 Ac Immune Sa Therapeutic vaccine targeted against p-glycoprotein 170 for inhibiting multidrug resistance in the treatment of cancers
US9005625B2 (en) 2003-07-25 2015-04-14 Novo Nordisk A/S Antibody toxin conjugates
US7807171B2 (en) 2003-07-25 2010-10-05 Ac Immune Sa Therapeutic vaccine targeted against P-glycoprotein 170 for inhibiting multidrug resistance in the treatment of cancers
WO2005021557A2 (en) * 2003-08-29 2005-03-10 Dyax Corp. Poly-pegylated protease inhibitors
CA2547140A1 (en) * 2003-11-24 2005-06-09 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin
US20080305992A1 (en) 2003-11-24 2008-12-11 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin
US8633157B2 (en) * 2003-11-24 2014-01-21 Novo Nordisk A/S Glycopegylated erythropoietin
US7956032B2 (en) 2003-12-03 2011-06-07 Novo Nordisk A/S Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
NZ547554A (en) * 2003-12-03 2009-09-25 Biogenerix Ag Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
US20060040856A1 (en) 2003-12-03 2006-02-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor IX
CA2551495A1 (en) * 2004-01-07 2005-07-28 Ambit Biosciences Corporation Conjugated small molecules
CN101072789B (zh) * 2004-01-08 2013-05-15 生物种属学股份公司 肽的o-连接的糖基化
NZ548256A (en) 2004-02-02 2010-02-26 Ambrx Inc Modified human four helical bundle polypeptides and their uses
SI2465533T1 (sl) * 2004-02-20 2015-07-31 Ac Immune S.A. Postopki in sestavki, ki obsegajo supramolekulske konstrukte
US7588745B2 (en) * 2004-04-13 2009-09-15 Si Options, Llc Silicon-containing products
WO2005111116A1 (en) * 2004-05-17 2005-11-24 Mcmaster University Biological molecule-reactive hydrophilic silicone surface
KR20070034512A (ko) * 2004-06-18 2007-03-28 암브룩스, 인코포레이티드 신규 항원-결합 폴리펩티드 및 이의 용도
US20080300173A1 (en) 2004-07-13 2008-12-04 Defrees Shawn Branched Peg Remodeling and Glycosylation of Glucagon-Like Peptides-1 [Glp-1]
AU2005275062A1 (en) 2004-07-14 2006-02-23 University Of Utah Research Foundation Netrin-related compositions and uses
KR20070039593A (ko) * 2004-07-21 2007-04-12 암브룩스, 인코포레이티드 비천연적으로 코딩된 아미노산을 이용한 생합성 폴리펩티드
US20090292110A1 (en) * 2004-07-23 2009-11-26 Defrees Shawn Enzymatic modification of glycopeptides
WO2006031811A2 (en) * 2004-09-10 2006-03-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated interferon alpha
US7235530B2 (en) 2004-09-27 2007-06-26 Dyax Corporation Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof
HUE026826T2 (en) 2004-10-29 2016-07-28 Ratiopharm Gmbh Modeling and glycopegylation of fibroblast growth factor (FGF)
CN102719366B (zh) 2004-12-22 2014-07-16 Ambrx公司 氨酰基-tRNA合成酶的组合物及其用途
WO2006073846A2 (en) 2004-12-22 2006-07-13 Ambrx, Inc. Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
CN103690936A (zh) 2004-12-22 2014-04-02 Ambrx公司 经修饰的人类生长激素
BRPI0519170A8 (pt) 2004-12-22 2018-05-08 Ambrx Inc formulações de hormônio de crescimento humano que compreendem um aminoácido não naturalmente codificado
JP2008526864A (ja) * 2005-01-06 2008-07-24 ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド 糖断片を用いる糖結合
ES2449195T3 (es) 2005-01-10 2014-03-18 Ratiopharm Gmbh Factor estimulante de colonias de granulocitos glicopegilado
WO2006121569A2 (en) * 2005-04-08 2006-11-16 Neose Technologies, Inc. Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants
EP1888098A2 (en) * 2005-05-25 2008-02-20 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin formulations
US20110003744A1 (en) * 2005-05-25 2011-01-06 Novo Nordisk A/S Glycopegylated Erythropoietin Formulations
AU2006255122B2 (en) 2005-06-03 2010-10-21 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
EP1731133B1 (en) * 2005-06-10 2008-05-28 3M Espe AG Dental composition containing a prepolymer and a crosslinker, process for producing and use thereof
EP2412744B1 (en) 2005-07-18 2014-01-22 Nektar Therapeutics Method for preparing branched functionalised polymers using branched polyol cores
AU2006275473B2 (en) * 2005-07-29 2012-07-05 Nektar Therapeutics Methods for preparing carbonate esters of poly(ethylene glycol)
US20090305967A1 (en) * 2005-08-19 2009-12-10 Novo Nordisk A/S Glycopegylated factor vii and factor viia
US20070105755A1 (en) * 2005-10-26 2007-05-10 Neose Technologies, Inc. One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides
US20090048440A1 (en) * 2005-11-03 2009-02-19 Neose Technologies, Inc. Nucleotide Sugar Purification Using Membranes
AU2006315347A1 (en) 2005-11-16 2007-05-24 Ambrx, Inc. Methods and compositions comprising non-natural amino acids
ES2516694T3 (es) 2006-07-21 2014-10-31 Ratiopharm Gmbh Glicosilación de péptidos a través de secuencias de glicosilación con unión en O
CA2663083A1 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
NZ574960A (en) 2006-09-08 2012-02-24 Ambrx Inc Suppressor trna transcription in vertebrate cells
WO2008030613A2 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Hybrid suppressor trna for vertebrate cells
US8969532B2 (en) 2006-10-03 2015-03-03 Novo Nordisk A/S Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography
KR101556248B1 (ko) * 2006-10-04 2015-09-30 노보 노르디스크 에이/에스 글리세롤이 연결된 페길화된 당 및 글리코펩티드
US8101729B2 (en) * 2007-03-19 2012-01-24 Henry Joseph Niemczyk Pegylated amino acid derivatives and the process to synthesize the same
WO2008121563A2 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Ambrx, Inc. Modified fgf-21 polypeptides and their uses
PL2144923T3 (pl) 2007-04-03 2013-12-31 Biogenerix Ag Sposoby leczenia z użyciem glikopegilowanego G-CSF
NZ580686A (en) 2007-05-02 2012-11-30 Ambrx Inc Modified interferon beta polypeptides and their uses
US20110177029A1 (en) * 2007-06-04 2011-07-21 Novo Nordisk A/S O-linked glycosylation using n-acetylglucosaminyl transferases
US9493499B2 (en) * 2007-06-12 2016-11-15 Novo Nordisk A/S Process for the production of purified cytidinemonophosphate-sialic acid-polyalkylene oxide (CMP-SA-PEG) as modified nucleotide sugars via anion exchange chromatography
US7968811B2 (en) * 2007-06-29 2011-06-28 Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. Integrated ignition and key switch
CA2696208A1 (en) * 2007-08-21 2009-02-26 Genzyme Corporation Treatment with kallikrein inhibitors
US8207112B2 (en) * 2007-08-29 2012-06-26 Biogenerix Ag Liquid formulation of G-CSF conjugate
NZ603812A (en) 2007-11-20 2014-06-27 Ambrx Inc Modified insulin polypeptides and their uses
CN103694337B (zh) 2008-02-08 2016-03-02 Ambrx公司 经修饰瘦素多肽和其用途
WO2009108806A1 (en) 2008-02-27 2009-09-03 Novo Nordisk A/S Conjugated factor viii molecules
EP3225248B1 (en) 2008-07-23 2023-06-07 Ambrx, Inc. Modified bovine g-csf polypeptides and their uses
EP2344200A2 (en) * 2008-09-19 2011-07-20 Nektar Therapeutics Modified therapeutics peptides, methods of their preparation and use
EP2340046A2 (en) * 2008-09-19 2011-07-06 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of ziconotide peptides
WO2010033221A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of protegrin peptides
EP2334336A1 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of osteocalcin peptides
US20110165113A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-07 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of v681-like peptides
EP2340050A2 (en) * 2008-09-19 2011-07-06 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of aod-like peptides
US20110171162A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of thymosin alpha 1 peptides
US20110165112A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-07 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of c-peptides
AU2009292643B2 (en) 2008-09-19 2016-02-18 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of therapeutic peptides
WO2010042145A1 (en) * 2008-09-19 2010-04-15 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of glp-2-like peptides
US20110171160A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of kiss1 peptides
EP2334334A1 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of nesiritide peptides
WO2010033223A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of opioid growth factor peptides
CA2737026C (en) 2008-09-26 2019-12-24 Ambrx, Inc. Modified animal erythropoietin polypeptides and their uses
CA2738033C (en) 2008-09-26 2019-11-26 Ambrx, Inc. Non-natural amino acid replication-dependent microorganisms and vaccines
WO2010080833A1 (en) 2009-01-06 2010-07-15 Dyax Corp. Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors
WO2010115855A1 (en) * 2009-04-06 2010-10-14 Solvay Solexis S.P.A. Process for the manufacture of functional pfpe derivative
TWI626057B (zh) 2009-06-09 2018-06-11 普龍製藥有限責任公司 血紅素組成物
US10584181B2 (en) 2009-12-04 2020-03-10 Genentech, Inc. Methods of making and using multispecific antibody panels and antibody analog panels
CN104017063A (zh) 2009-12-21 2014-09-03 Ambrx公司 经过修饰的猪促生长素多肽和其用途
MX349301B (es) 2009-12-21 2017-07-21 Ambrx Inc Polipéptidos de somatotropina bovina modificados y sus usos.
SI2521568T1 (sl) 2010-01-06 2019-01-31 Dyax Corp. Proteini, ki vežejo plazemski kalikrein
WO2012020124A1 (en) 2010-08-12 2012-02-16 Ac Immune S.A. Vaccine engineering
DK2605789T3 (da) 2010-08-17 2019-09-16 Ambrx Inc Modificerede relaxinpolypeptider og anvendelser deraf
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
WO2012054822A1 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Nektar Therapeutics Pharmacologically active polymer-glp-1 conjugates
KR101854943B1 (ko) 2010-10-26 2018-05-04 에이씨 이뮨 에스.에이. 소수성 부분을 통해 변형된 펩티드를 포함하는 리포솜 기반 구조체
IL269565B2 (en) 2011-01-06 2024-06-01 Dyax Corp KALLIKREIN PLASMA BINDING PROTEINS
SI2859017T1 (sl) 2012-06-08 2019-05-31 Sutro Biopharma, Inc. Protitelesa, ki vsebujejo specifične nenaravne aminokislinske ostanke, postopki njihove priprave in postopki njihove uporabe
EP2863955B1 (en) 2012-06-26 2016-11-23 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
ES2728864T3 (es) 2012-08-31 2019-10-29 Sutro Biopharma Inc Aminoácidos modificados que comprenden un grupo azido
ES2865473T3 (es) 2013-07-10 2021-10-15 Sutro Biopharma Inc Anticuerpos que comprenden múltiples residuos de aminoácidos no naturales sitio-específicos, métodos para su preparación y métodos de uso
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
BR112016022318A2 (pt) 2014-03-27 2017-10-31 Dyax Corp método, composição farmacêutica para uso no tratamento de doenças de retina e uso de um anticorpo
MX2017004947A (es) 2014-10-24 2017-06-29 Bristol Myers Squibb Co Polipeptidos del factor de crecimiento de fibroblastos 2 (fgf-21) modificados y usos de los mismos.
JP7003354B2 (ja) 2015-12-11 2022-03-04 武田薬品工業株式会社 遺伝性血管性浮腫の発作を治療するための血漿カリクレイン阻害薬およびその用途
KR102670432B1 (ko) 2017-02-08 2024-05-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 약동학적 인핸서를 포함하는 변형된 렐락신 폴리펩티드 및 그의 용도
KR20210057124A (ko) 2018-09-11 2021-05-20 암브룩스, 인코포레이티드 인터류킨-2 폴리펩타이드 접합체 및 그의 용도
AU2019358201A1 (en) * 2018-10-11 2021-05-20 Nektar Therapeutics Method of making releasable polymeric reagents
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
AU2020223031A1 (en) 2019-02-12 2021-08-19 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods and uses of antibody-TLR agonist conjugates
CN115243726A (zh) 2020-03-11 2022-10-25 北京泰德制药股份有限公司 白介素-2多肽偶联物及其使用方法
EP4199968A1 (en) 2020-08-20 2023-06-28 Ambrx, Inc. Antibody-tlr agonist conjugates, methods and uses thereof
MX2023011480A (es) 2021-04-03 2023-12-06 Ambrx Inc Conjugados anticuerpo anti-her2-fármaco y usos de estos.

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE287951C (es)
KR850001206B1 (ko) 1984-04-27 1985-08-20 한국과학기술원 세펨 유도체의 제조 방법
JPS62181269A (ja) * 1986-02-06 1987-08-08 Haruo Ogura 新規な活性エステル化剤化合物
DD287951A5 (de) * 1989-09-15 1991-03-14 Adw Zi F. Molekularbiologie,De Verfahren zur immobilisierung biologisch aktiver verbindungen an polyoxyalkylenglykole und ihre monoalkoxyderivate
US5281698A (en) † 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation
US5629384A (en) 1994-05-17 1997-05-13 Consiglio Nazionale Delle Ricerche Polymers of N-acryloylmorpholine activated at one end and conjugates with bioactive materials and surfaces
US5650234A (en) * 1994-09-09 1997-07-22 Surface Engineering Technologies, Division Of Innerdyne, Inc. Electrophilic polyethylene oxides for the modification of polysaccharides, polypeptides (proteins) and surfaces
US5932462A (en) * 1995-01-10 1999-08-03 Shearwater Polymers, Inc. Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces
US6229002B1 (en) 1995-06-07 2001-05-08 Nexstar Pharmaceuticlas, Inc. Platelet derived growth factor (PDGF) nucleic acid ligand complexes
US5985263A (en) † 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
WO1999045964A1 (en) * 1998-03-12 1999-09-16 Shearwater Polymers, Incorporated Poly(ethylene glycol) derivatives with proximal reactive groups
US6348558B1 (en) * 1999-12-10 2002-02-19 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom
MXPA02006215A (es) 1999-12-22 2003-10-15 Nektar Therapeutics Al Corp Metodo para preparar esteres de 1-benzotriazolil carbonato de poli(etilenglicol).
US6436386B1 (en) * 2000-11-14 2002-08-20 Shearwater Corporation Hydroxyapatite-targeting poly (ethylene glycol) and related polymers
TW593427B (en) * 2000-12-18 2004-06-21 Nektar Therapeutics Al Corp Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives
BRPI0407511A (pt) * 2003-02-19 2006-02-14 Pharmacia Corp ésteres de polietilenoglicol ativados
FR2876461B1 (fr) * 2004-10-07 2006-12-29 Commissariat Energie Atomique Systeme optique a extension de propagation de faisceau.

Also Published As

Publication number Publication date
US20140051845A1 (en) 2014-02-20
US20080227872A1 (en) 2008-09-18
CA2393638A1 (en) 2001-06-28
DE60041715D1 (de) 2009-04-16
US8299173B2 (en) 2012-10-30
US8563651B2 (en) 2013-10-22
MXPA02006215A (es) 2003-10-15
EP2070968A2 (en) 2009-06-17
US20110237746A1 (en) 2011-09-29
US20150191568A1 (en) 2015-07-09
EP1259563B1 (en) 2009-03-04
WO2001045796A3 (en) 2002-05-10
EP1259563A2 (en) 2002-11-27
US9839695B2 (en) 2017-12-12
KR100729977B1 (ko) 2007-06-20
US7378469B2 (en) 2008-05-27
US9346917B2 (en) 2016-05-24
US7977427B2 (en) 2011-07-12
US20010056171A1 (en) 2001-12-27
AU781729B2 (en) 2005-06-09
CA2393638C (en) 2009-10-20
US7544738B2 (en) 2009-06-09
EP2070968A3 (en) 2013-07-24
JP2012122080A (ja) 2012-06-28
US20060264578A1 (en) 2006-11-23
ATE424431T2 (de) 2009-03-15
JP5095061B2 (ja) 2012-12-12
EP1259563B2 (en) 2016-08-10
US6624246B2 (en) 2003-09-23
US20020086939A1 (en) 2002-07-04
WO2001045796A2 (en) 2001-06-28
CY1109102T1 (el) 2014-07-02
US20130053514A1 (en) 2013-02-28
US10456476B2 (en) 2019-10-29
US6376604B2 (en) 2002-04-23
US7723432B2 (en) 2010-05-25
ES2321800T3 (es) 2009-06-12
US20020099133A1 (en) 2002-07-25
AU2281001A (en) 2001-07-03
US20200009260A1 (en) 2020-01-09
US7101932B2 (en) 2006-09-05
DK1259563T3 (da) 2009-04-20
US20090215910A1 (en) 2009-08-27
US20160310606A1 (en) 2016-10-27
US20040157991A1 (en) 2004-08-12
JP2003518151A (ja) 2003-06-03
PT1259563E (pt) 2009-04-14
KR20020074460A (ko) 2002-09-30
US20180064822A1 (en) 2018-03-08
US20100197806A1 (en) 2010-08-05
DK1259563T4 (en) 2016-11-21
US8816002B2 (en) 2014-08-26
US6710125B2 (en) 2004-03-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2321800T5 (es) Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua
JP4861586B2 (ja) 水溶性ポリマーの立体的に妨害される誘導体
US20130253207A1 (en) N-maleimidyl polymer derivatives