ES2244977T3 - Fermentos lacticos y su uso para la obtencion de productos hipocolesterolemicos. - Google Patents

Fermentos lacticos y su uso para la obtencion de productos hipocolesterolemicos.

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Christine Bouley
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Abstract

LA PRESENTE INVENCION ESTA RELACIONADA CON UNA CEPA DE LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS, Y CON LOS FERMENTOS LACTICOS Y LOS PRODUCTOS LACTEOS FERMENTADOS QUE UTILIZAN DICHA CEPA DOTADOS DE PROPIEDADES HIPOCOLESTEROLEMICAS.

Description

Fermentos lácticos y su uso para la obtención de productos hipocolesterolémicos.
La presente invención se refiere a la obtención de productos fermentados que permiten disminuir la tasa de colesterol sanguíneo.
Se sabe que la composición del régimen alimentario puede influir en el metabolismo de los lípidos, y desempeña consiguientemente un papel importante entre los factores de riesgo de desarrollo de enfermedades cardiovasculares en el hombre.
Actualmente, las estrategias dietéticas de prevención de estas enfermedades apelan a la reducción del consumo de materias grasas, y particularmente de materias grasas saturadas, que son conocidas por aumentar el nivel de colesterol sanguíneo.
Sin embargo, se fomenta igualmente cada vez más actuar cualitativamente sobre la ingesta alimentaria incorporando a ésta alimentos dotados de una acción benéfica sobre el metabolismo lipídico, y que tienen como efecto disminuir el colesterol sanguíneo y particularmente el colesterol LDL.
Se sabe, por ejemplo, que el enriquecimiento en fibras de la alimentación tendría como efecto disminuir la lipidemia y la colesterolemia.
Se conocen igualmente oligosacáridos que comprenden 2 a 20 monómeros, denominados oligosacáridos no digeribles (NDO) ya que no se digieren al nivel gastrointestinal. Estos oligosacáridos son fermentables al nivel del colon, y se ha mostrado que algunos de ellos pueden reducir el nivel de colesterol y triglicéridos séricos en animales. Entre estos oligosacáridos, los fructooligosacáridos (FOS) parecen particularmente interesantes.
Sin embargo, la mayoría de los estudios que tienen en cuenta un efecto hipocolesterolémico e hiperlipidémico de los FOS se han efectuado por una parte en animales y por otra parte en sujetos diabéticos o hiperlipidémicos; este efecto no se ha confirmado en sujetos sanos [revisión bibliográfica, páginas 17 y 18 del folleto de información "NUTRITIONAL PROPERTIES OF ACTILIGHT®", distribuido por Béghin-Mejii Industries).
Por otra parte, se ha supuesto que ciertas cepas de bacterias pueden ejercer efectos hipocolesterolémicos [SANDERS, J. Dairy Sci. 76, 1819-1828 (1993)]. Se ha mostrado que estas bacterias fijaban el colesterol in vitro [KHEDKAR et al., Indian J. Dairy Sci., 46, 12, 577-580, (1993)], y se ha planteado la hipótesis de que podrían actuar igualmente al nivel intestinal, desviando así una parte del colesterol aportado por la alimentación.
La solicitud de patente europea 0101209 a nombre de KABUSHIKI KAISYA ADVANCE KAIHATSU KENKYUJO cita las propiedades hipocolesterolémicas e hipotrigliceridémicas de un estreptococo, Streptococcus faecium.
ZACCONI et al. [Microbiologica 15, 413-418, 1992)] han observado en el ratón que la Enterococcus faecium (denominación actual de Streptococcus faecium) podía inducir una reducción del nivel de colesterol sanguíneo; han constatado igualmente un efecto del mismo tipo, pero menor, inducido por ciertas cepas de Lactobacillus acidophilus.
Sin embargo, trabajos más recientes efectuados en rata [ODA y HASHIBA, J. Nut. Sci. Vitaminol. 40, 617-621, (1994)] o en ratón [TANNOCK y McCONNELL, Microbial Ecology in Health and Disease, vol. 7: 331-334 (1994)] no muestran ningún efecto de los lactobacilos sobre el colesterol sanguíneo.
GILLILAND y SPECK [Appl. Environ. Microbiol. 33, 15-18 (1977)] han planteado la hipótesis de una relación entre la capacidad de ciertas cepas de desconjugar los ácidos biliares (taurocolato y/o glicocolato) y de crecer en presencia de bilis, y sus propiedades hipocolesterolémicas.
Posteriormente, el mismo equipo de GILLILAND et al. [Appl. Environ. Microbiol. 49, 377-381 (1985)] ha estudiado el efecto hipocolesterolémico de diferentes cepas de Lactobacillus acidophilus en el cerdo, con relación a su capacidad de asimilación in vitro de colesterol y el crecimiento en presencia de bilis. Estos autores han constatado también que las cepas dotadas de propiedades hipocolesterolémicas eran aquellas capaces de crecer en presencia de bilis y asimilar el colesterol a la vez.
Por otro lado, la solicitud EP 0671468, a nombre de CALPIS FOOD INDUSTRY CO. LTD, describe cepas de Lactobacillus acidophilus que son capaces de crecer en presencia de bilis y de absorber el colesterol, pero no desconjugan los ácidos biliares in vitro. Efectivamente, se considera en la solicitud EP 0671468 que la desconjugación de ácidos biliares constituye una característica desfavorable, ya que supone una inhibición de la absorción de los nutrientes. Cuando se administran estas cepas a ratas, se observa en éstas una disminución de la tasa de colesterol sanguíneo, acompañada de un mantenimiento del peso, lo que atestigua una absorción normal de los nutrientes.
Estos resultados se han obtenido en animales, y no pueden extrapolarse fácilmente al hombre dadas las especificidades de especie que existen al nivel metabólico.
Los estudios efectuados en el hombre han conducido igualmente a resultados variables:
-
LIN et al., [J. Dairy. Sci.. 72, 2885-2899 (1989)] relatan una ausencia de efecto de la ingestión de comprimidos que comprenden Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus sobre la concentración de lipoproteínas y de colesterol sanguíneo, aunque estas mismas bacterias absorben el colesterol in vitro. Los autores atribuyen al menos en parte esta divergencia a la baja viabilidad de estas cepas en el tracto digestivo; por otro lado AGER-BAEK et al. [EUROPEAN JOURNAL OF CLINICAL NUTRITION, 49, 346-352 (1995)] describen el efecto hipocolesterolémico sobre sujetos sanos de una leche fermentada en presencia de Enterococcus faecium y de dos cepas de Streptococcus thermophilus.
KHEDKAR et al. [CULTURED DAIRY PRODUCTS JOURNAL, agosto de 1993, páginas 14-18] han efectuado una revisión de diversos trabajos referidos al efecto de leches fermentadas sobre el colesterol sanguíneo, y concluyen que este efecto es inconstante.
Parece por tanto que, aunque se puede suponer un efecto hipocolesterolémico de ciertos productos lácteos fermentados, el conjunto de factores que son responsables no se ha identificado con precisión.
Los inventores han constatado ahora que, independientemente de sus capacidades de absorber o asimilar el colesterol y de desconjugar o no los ácidos biliares, ciertas cepas de L. acidophilus poseían en un grado más o menos importante propiedades inhibidoras de la lipasa pancreática. Ahora bien, esta enzima hidroliza los triglicéridos para producir ácidos grasos libres que son absorbidos más fácilmente al nivel del intestino que los triglicéridos, y se utilizan por el organismo para la síntesis de lípidos, entre ellos el colesterol. Una inhibición parcial de la actividad de esta enzima puede por tanto provocar indirectamente una disminución del colesterol sanguíneo.
Entre las diferentes cepas ensayadas basándose no solamente en sus propiedades de crecimiento en presencia de bilis y asimilar el colesterol, sino igualmente en sus propiedades inhibidoras de la lipasa pancreática, los inventores han seleccionado cepas sensiblemente inhibidoras de esta enzima, y que poseen una buena capacidad in vitro de crecer en presencia de bilis y de asimilar el colesterol sanguíneo.
Además, los inventores han constatado que estas cepas, aunque sean capaces de desconjugar los ácidos biliares, no disminuyen la absorción de nutrientes.
Estas cepas constituyen la base de un nuevo producto lácteo fermentado que favorece la reducción de la tasa de colesterol sanguíneo. Pueden asociarse ventajosamente entre ellas o a otras cepas de bacterias lácticas.
La presente invención tiene como objeto la cepa de Lactobacillus acidophilus depositada el 6 de julio de 1990 en la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes) mantenida por el INSTITUT PASTEUR, 25 rue du Docteur Roux, París, con el número I-967.
Particularmente, la presente invención tiene como objeto un fermento láctico que comprende una mezcla de la cepa de Lactobacillus acidophilus I-967 citada anteriormente con al menos otra cepa de Lactobacillus acidophilus.
Según un modo de realización preferido de un fermento láctico según la presente invención, la cepa de Lactobacillus acidophilus I-967 está asociada a la cepa de Lactobacillus acidophilus que se ha depositado el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1633.
Ventajosamente, un fermento láctico según la presente invención puede comprender además al menos un lactococo mesófilo; se trata preferiblemente de la cepa de Lactococcus lactis ssp. lactis, que se ha depositado el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1631.
El fermento láctico según la invención puede asociarse a diferentes especies de bacterias utilizables en la fabricación de yogur o de otros productos lácticos fermentados; preferiblemente se asociará, por ejemplo, al menos a una cepa de Streptococcus thermophilus, y/o al menos a una cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus.
Las cepas de Streptococcus thermophilus y de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus que pueden utilizarse ventajosamente para la aplicación de la presente invención son las siguientes:
-
la cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus depositada el 30 de diciembre de 1994 en la CNCM con el número I-1519;
-
la cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus depositada el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1632;
-
la cepa de Streptococcus thermophilus depositada el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1630.
La presente invención tiene igualmente como objeto un procedimiento de preparación de un producto fermentado, estando caracterizado dicho procedimiento por que comprende la aplicación de un fermento láctico según la invención eventualmente asociado al menos a una cepa de Streptococcus thermophilus y/o al menos a una cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus.
La presente invención tiene igualmente como objeto productos fermentados, en particular productos lácteos fermentados, susceptibles de obtenerse mediante un procedimiento según la invención, tal como se define anteriormente.
Según un modo de realización preferido de un producto fermentado según la invención, contiene después de la fermentación al menos 1 x 10^{5} UFC (unidades formadoras de colonia) por ml de cada una de las especies bacterianas que constituyen el fermento.
Se ha observado una eficacia óptima de un producto fermentado según la invención para una concentración mínima de aproximadamente 1 x 10^{6} a 1 x 10^{7} UFC por ml de cada especie bacteriana del fermento.
Según otro modo de realización preferido de un producto lácteo fermentado según la invención, comprende además fructooligosacáridos (FOS). Según una disposición preferida de este modo de realización, dicho producto lácteo fermentado comprende entre 0,1 y 20 g por 100 ml, y preferiblemente entre 1 y 10 g por 100 ml de fructooligosacáridos.
Los fructooligosacáridos son oligómeros glucídicos que pueden obtenerse mediante la acción de una transfructosidasa sobre la sacarosa.
Están constituidos por fructosa (F) y glucosa (G), y responden a la fórmula general G(Fn), en la que n, que es superior o igual a 2, representa el número de moléculas de fructosa.
Para la aplicación de la presente invención, se utilizarán ventajosamente fructooligosacáridos en los que n sea inferior o igual a 8, preferiblemente inferior o igual a 4.
Según otro modo más de realización preferida, un producto lácteo fermentado según la invención comprende entre 0,05 y 20 g por 100 ml, preferiblemente entre 0,1 y 10 g por 100 ml, de materia grasa de origen vegetal, y/o entre 0,05 y 15 g por 100 ml, y preferiblemente entre 0,1 y 5 g por 100 ml, de materia grasa de origen animal.
La materia grasa de origen vegetal puede aportarse mediante la utilización de a menos un aceite vegetal tal como aceite de colza, aceite de soja, aceites de oliva, de germen de trigo, de maíz, de girasol, de pepitas de uva, de pepitas de grosella negra, etc., la materia grasa de origen animal puede ser materia grasa láctea, aportada por ejemplo mediante la adición de nata y/o aceites de pescado.
Esta materia grasa puede enriquecerse igualmente en vitaminas liposolubles, particularmente en vitamina E, de manera que el producto fermentado listo para el consumo contenga entre 0,03 mg y 10 mg por 100 ml.
El consumo regular de productos lácteos fermentados según la invención induce una disminución significativa de la tasa de colesterol sanguíneo, y particularmente del colesterol LDL.
La presente invención abarca igualmente la utilización de cepas bacterianas, de fermentos lácticos o de productos fermentados según la invención para la obtención de productos inductores de una disminución de la tasa de colesterol sanguíneo.
La presente invención se comprenderá mejor con la ayuda del complemento de descripción siguiente, que se refiere a ejemplos de preparación y utilización de productos fermentados según la invención.
Debe entenderse, sin embargo, que estos ejemplos se dan únicamente a modo de ilustración del objeto de la invención, de la que no constituyen en manera alguna una limitación.
Ejemplo 1 Obtención de un producto lácteo fermentado según la invención
Se prepara una mezcla cuya composición (en % p/p) se da en la Tabla I siguiente:
TABLA I
Ingrediente Cantidad (%)
Leche desnatada 90
Nata (40% de MG) 1,3
Leche en polvo, 0% de MG 5,5
Aceite de soja^{a} 0,25
TABLA I (continuación)
Ingrediente Cantidad (%)
Aceite de colza^{a} 0,25
ACTILIGHT®950Pb (fructooligosacáridos) 2,50
Estabilizante (gelatina) 0,20
^{a} \begin{minipage}[t]{150mm} Los aceites de soja y colza están enriquecidos en vitamina E y aportan en total 0,35 mg de vitamina E (expresada en forma de \alpha-ditocoferol) para 100 g de mezcla \end{minipage}
^{b} \begin{minipage}[t]{150mm} ACTILIGHT\registrado 950P: preparación de más de 90% de fructooligosacáridos comercializada por BEGHIN-MEIJII INDUSTRIES. \end{minipage}
Los ingredientes se mezclan durante 1 hora con agitación, de manera que se obtenga una buena rehidratación de la leche en polvo y una mezcla homogénea.
A continuación, se calienta la mezcla a 75ºC previamente a la homogeneización. Después de homogeneización a 20 MPa, se pasteuriza la mezcla y se enfría antes de sembrarse a 38ºC con los cultivos activos de diferentes cepas.
La fermentación se efectúa en una estufa regulada a 38ºC\pm1ºC, hasta un pH de 4,75\pm0,15. La detención de la fermentación se efectúa mediante enfriamiento de la preparación hasta aproximadamente 20ºC. A continuación, se acondiciona el producto y se refrigera a 4ºC.
Se indican las concentraciones al inicio de la fermentación (concentración inicial) y al final de la fermentación (concentración final) (en UFC por ml) en la Tabla II a continuación.
TABLA II
Cepa Concentración
Inicial Final
Lactobacillus acidophilus (I-1633) + (I-967) 3,3 x 10^{6} 1,2 x 10^{8}
Lactobacilos totales 4,8 x 10^{6} 3,7 x 10^{8}
Lactobacillus lactis ssp. lactis (I-1631) 1,4 x 10^{6} 6,7 x 10^{7}
Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus (I-1519) + (I-1632) 1,5 x 10^{6} 2,5 x 10^{8}
Streptococcus thermophilus (I-1630) 1,5 x 10^{5} 1,6 x 10^{9}
Los procedimientos utilizados para el recuento de las bacterias son los siguientes:
Lactobacilos totales: sembrado en masa sobre gelosa MRS ácida (pH= 5,4), incubación 72 horas a 37ºC en anaerobiosis.
Lactobacillus acidophilus: sembrado en masa sobre gelosa MRS ácida OXGALL (0,2%), incubación 72 horas a 37ºC en anaerobiosis.
Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus: la población se evalúa calculando la diferencia: (lactobacilos totales) - (Lactobacillus acidophilus).
Streptococcus thermophilus: sembrado en masa sobre gelosa M17, incubación 48 horas a 44ºC.
Lactococcus lactis: sembrado en masa sobre gelosa M17, incubación 5 días a 17ºC.
Ejemplo 2 Acción de un producto lácteo fermentado según la invención sobre el colesterol sanguíneo en el hombre
Se ha estudiado el efecto hipocolesterolémico de un producto fermentado según la invención utilizando como muestra un yogur que comprende 1% de grasa animal, y fermentado únicamente con fermentos de yogur.
El producto fermentado según la invención se ha obtenido según el procedimiento descrito en el ejemplo 1, y comprende 0,5% de grasa vegetal, 0,5% de grasa animal y 2,5% de fructooligosacáridos.
Se ha efectuado el estudio del efecto hipocolesterolémico en un ensayo aleatorizado cruzado de doble ciego en 30 sujetos masculinos con buena salud, de 30 a 65 años de edad. Se han repartido estos sujetos en dos grupos: cada uno de estos grupos comprende 60% de homocigóticos y 40% de heterocigóticos de la apolipoproteína E3; los sujetos homocigóticos de la apolipoproteína E3, que está implicada en el metabolismo de los lípidos, se suponen más sensibles a la influencia de la composición de materia grasa del régimen alimentario sobre este metabolismo.
Un primer grupo de 15 sujetos sanos ha recibido durante 3 semanas un producto fermentado según la invención, después de una interrupción de una semana, los mismos sujetos han recibido durante 3 semanas el yogur de control; paralelamente, el segundo grupo de sujetos sanos ha recibido durante las 3 primeras semanas el yogur de control, después de una interrupción de una semana, ha recibido durante 3 semanas el producto fermentado según la invención.
Durante cada uno de los periodos de tratamiento, cada sujeto ha consumido, además de su régimen habitual, 3 x 125 g de producto repartido en 3 ingestas al día, en el marco de las comidas habituales (desayuno, comida y cena).
Se ha determinado el colesterol sanguíneo a los sujetos al inicio del tratamiento, al final del primer periodo y al final del segundo periodo; se resumen en la tabla III a continuación los resultados, que representan la media de las determinaciones efectuadas después del consumo de yogur de control y después del consumo del producto fermentado según la invención.
TABLA III
Tratamiento
Control Ensayo
Colesterol total (mmol/l) 5,41 5,17
Colesterol LDL (mmol/l) 3,52 3,33
Colesterol HDL (mmol/l) 1,23 1,21
Relación colesterol LDL/Colesterol HDL 3,02 2,86
El análisis estadístico de los resultados al final del primer periodo y al final del segundo periodo, y de la media de las relaciones (colesterol LDL/colesterol HDL) obtenidas para cada uno de los individuos al final de los dos periodos ha permitido poner en evidencia una disminución significativa del colesterol sérico total (-4,3%, p<0,001), así como del colesterol sérico LDL (-5,4%, p< 0,005) o de la relación colesterol LDL/colesterol HDL (-5,4%, p< 0,05) en sujetos que han absorbido el producto fermentado de la invención, con relación a aquellos que han consumido el yogur de control.
Estos resultados, que se han observado en sujetos que no habían sido objeto de restricciones alimentarias, son del mismo orden de magnitud, particularmente en lo que se refiere a la disminución de la relación LDL/HDL, que los que se han observado anteriormente en sujetos sometidos a un régimen restrictivo (que ha supuesto una disminución de aproximadamente 7% de la relación colesterol LDL/colesterol HLD) [VAN DOKKUM, et al., Eur. J. Clin. Nutr., 45, 431-439, (1991)].
En contraposición, no se ha observado ninguna diferencia significativa en lo que se refiere al colesterol HDL, e igualmente para el nivel de triglicéridos y el nivel de glucosa sanguínea (resultados no mostrados).
Por otro lado, los sujetos homocigóticos de apolipoproteína E3 no han reaccionado diferentemente de los heterocigóticos.
Ejemplo 3 Caracterización de cepas de lactobacillus acidophilus utilizadas para la obtención de productos lácteos según la invención 1) Crecimiento y metabolismo
Se han ensayado las propiedades de las cepas I-967 e I-1633 en la colección API 50 CH.
Los resultados se ilustran mediante la tabla IV siguiente.
TABLA IV
I-1633 I-967
A B
Coloración Gram + +
Producción de gas a partir de glucosa - -
Crecimiento a 45ºC + +
Tipo de colonia Rugosa Rugosa
Catalasa - -
Fermentación de:
- Arabinosa - -
- Xilosa - -
- Ramnosa - -
- Ribosa - -
- Manosa + +
- Fructosa + +
- Galactosa + +
- Sacarosa + +
- Maltosa + +
- Celobiosa + +
- Lactosa + +
- Trehalosa + -
- Melibiosa + +
- Rafinosa + +
- Melecitosa - -
- Dextrina, Almidón - +
- Manitol - +
- Sorbitol - -
- Esculina + +
- Salicina + +
- Amigdalina + +
- D-glucosa + +
- N-acetilglicosamina + +
- Arbutina + -
- B-gentiobiosa + +
2) Desconjugación de ácidos biliares
Se ha evaluado la capacidad de las cepas de desconjugar el ácido taurodesoxicólico (TDCA) y el ácido glicodesoxicólico (GDCA) utilizando el protocolo descrito por DASHKEVICZ y FEIGHNEIR [Appl. and Environ Microbiol. 55, 1, pág. 11-16 (1989)]. En el caso del GDCA, este protocolo se ha modificado utilizando 0,15% de GDCA en lugar del 0,5% descrito en la publicación.
Las cepas I-967 e I-1633 desconjugan el TDCA. El GDCA se desconjuga igualmente, pero de manera menos importante y menos reproducible.
3) Inhibición in vitro de la lipasa pancreática
Se han puesto en cultivo las cepas de Lactobacillus acidophilus I-967 e I-1633, así como las cepas de referencia 1 y 2.
Después del cultivo, se han recogido y recontado las células. Se han lavado y puesto en suspensión en suero fisiológico a concentraciones del orden de 10^{6}-10^{8} células/ml y se han utilizado en las horas siguientes.
La dosificación de la lipasa pancreática se realiza de la manera siguiente:
Se mantiene la mezcla de reacción que contiene 14,5 ml de NaCl 150 mM a pH 7,5 y 0,5 ml de tributirina con agitación mecánica a una temperatura regulada a 25ºC. Se miden los ácidos grasos liberados mediante valoración con sosa con ayuda de un valorador pH-stato.
Se utiliza una lipasa pancreática purificada de cerdo (Boehringer) a razón de 10 a 20 unidades enzimáticas por determinación (una unidad= un \mumol de ácido graso liberado/min) en presencia de una colipasa pancreática purificada de cerdo (Boehringer) en cantidad saturante.
Se mide la cinética de la reacción hasta la obtención de un registro lineal.
Se efectúa la determinación en dos condiciones diferentes:
- en presencia de sales biliares purificadas, con una concentración final de 8 mM,
- en presencia de bilis de cerdo dializada, con una concentración final de sales biliares totales de 8 mM.
Se determina la potencia inhibidora de las cepas de Lactobacillus acidophilus frente a la lipasa pancreática mediante la adición de cantidades crecientes de células al medio de reacción. Se efectúan las medidas por duplicado.
Se traza la curva de inhibición y se calcula la actividad inhibidora según la definición siguiente: una unidad inhibidora es la cantidad de células que reduce el 50% de la actividad de la lipasa pancreática en las condiciones de determinación.
Resultados y discusión
Se ilustra la adición de células de diferentes cepas de Lactobacillus acidophilus sobre la actividad enzimática de la lipasa pancreática mediante la tabla V siguiente.
TABLA V
Cepas Cantidad de células (x10^{6}) para 50% de inhibición
Con sales biliares Con bilis
Referencia 1 80,00 68,20
I-967 24,50 23,60
I-1633 10,12 10,87
Referencia 2 74,10 48,20
Las cepas I-967 e I-1633, para las que una unidad inhibidora corresponde a una cantidad de células inferior a 50 x 10^{8}, se definen como sensiblemente inhibidoras, con referencia a las cepas de referencia 1 y 2, para las que una unidad inhibidora corresponde a una cantidad de células superior a 50 x 10^{8}.
1
2
3
4
5
6

Claims (16)

  1. \global\parskip0.950000\baselineskip
    1. Cepa de Lactobacillus acidophilus elegida entre:
    -
    la cepa depositada el 6 de julio de 1990 en la CNCM con el número I-967,
    -
    la cepa depositada el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1633.
  2. 2. Fermento láctico que comprende una mezcla de la cepa de Lactobacillus acidophilus I-967 según la reivindicación 1 con al menos otra cepa de Lactobacillus acidophilus.
  3. 3. Fermento láctico según la reivindicación 2, caracterizado porque comprende una mezcla de las cepas de Lactobacillus acidophilus I-967 e I-1633 según la reivindicación 1.
  4. 4. Fermento láctico según una cualquiera de las reivindicaciones 2 ó 3, caracterizado porque comprende además al menos un lactococo mesófilo.
  5. 5. Fermento láctico según la reivindicación 4, caracterizado porque dicho lactococo mesófilo está constituido por la cepa de Lactococcus lactis ssp. lactis que se ha depositado el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1631.
  6. 6. Procedimiento de preparación de un producto fermentado, caracterizado porque comprende la aplicación de una cepa según la reivindicación 1 o de un fermento láctico según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, eventualmente asociado al menos a una cepa de Streptococcus thermophilus y/o al menos a una cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus.
  7. 7. Procedimiento según la reivindicación 6, caracterizado porque dicho fermento láctico está asociado al menos a una cepa del grupo constituido por:
    -
    la cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus depositada el 30 de diciembre de 1994 en la CNCM con el número I-1519,
    -
    la cepa de Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus depositada del 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1632,
    -
    la cepa de Streptococcus thermophilus depositada el 24 de octubre de 1995 en la CNCM con el número I-1630.
  8. 8. Producto fermentado, caracterizado porque es susceptible de obtenerse mediante un procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 7, y porque contiene las bacterias de un fermento láctico según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5.
  9. 9. Producto fermentado según la reivindicación 8, caracterizado porque contiene, después de la fermentación, al menos 1 x 10^{5} UFC por ml de cualquiera de las bacterias que constituyen el fermento según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5.
  10. 10. Producto fermentado según una cualquiera de las reivindicaciones 8 ó 9, caracterizado porque se trata de un producto lácteo y porque comprende además fructooligosacáridos (FOS).
  11. 11. Producto lácteo fermentado según la reivindicación 10, caracterizado porque comprende 0,1 a 20 g de fructooligosacáridos por 100 ml.
  12. 12. Producto lácteo fermentado según una cualquiera de las reivindicaciones 10 u 11, caracterizado porque comprende fructooligosacáridos que responden a la fórmula general G(Fn), en la que G representa glucosa, F representa fructosa y n representa el número de moléculas de fructosa, que es superior o igual a 2, e inferior o igual a 8.
  13. 13. Producto lácteo fermentado según una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 12, caracterizado porque comprende 0,05 a 20 g por 100 ml de materia grasa de origen vegetal y/o 0,05 a 15 g por 100 ml de materia grasa de origen animal.
  14. 14. Utilización de una cepa bacteriana según la reivindicación 1 para la obtención de productos inductores de una disminución de la tasa de colesterol sanguíneo.
  15. 15. Utilización de un fermento láctico según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5 para la obtención de productos inductores de una disminución de la tasa de colesterol sanguíneo.
  16. 16. Utilización de un producto fermentado según una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 13 para la obtención de productos inductores de una disminución de la tasa de colesterol sanguíneo.
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