ES2238285T3 - Uso de bacterias acidolacticas en la preparacion de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios reducidos. - Google Patents
Uso de bacterias acidolacticas en la preparacion de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios reducidos.Info
- Publication number
- ES2238285T3 ES2238285T3 ES00935083T ES00935083T ES2238285T3 ES 2238285 T3 ES2238285 T3 ES 2238285T3 ES 00935083 T ES00935083 T ES 00935083T ES 00935083 T ES00935083 T ES 00935083T ES 2238285 T3 ES2238285 T3 ES 2238285T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- lactobacillus casei
- lactobacillus
- individuals
- fermented
- milk
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Abstract
Uso de Lactobacillus casei en la preparación de una leche fermentada para la prevención y el tratamiento de niveles inmunitarios reducidos de forma temporal asociados con un descenso en células NK en sangre en individuos sometidos a estrés fisiológico.
Description
Uso de bacterias acidolácticas en la preparación
de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios
reducidos.
Esta invención se refiere al uso de bacterias
acidolácticas para la preparación de leches fermentadas pretendidas
para la prevención y el tratamiento de niveles de actividad
inmunitaria reducidos de forma temporal y niveles de actividad
inmunitaria normalizantes que están reducidos en comparación con los
que se pueden considerar normales, especialmente en individuos sanos
que están sometidos a ejercicio intenso o en general a una gran
fatiga fisiológica, causada directamente por el esfuerzo físico o
inducida por situaciones de tensión fisiológica. En concreto, se
refiere al uso de Lactobacillus casei en la preparación de
leche fermentada para aliviar la reducción fisiológica de los
niveles inmunitarios en humanos.
Más específicamente, esta invención se refiere a
medios para mejorar los estados inmunitarios de individuos sanos
cuando están sometidos a diferentes tipos de estrés
fisiológicos.
La presente invención se ha desarrollado como
resultado de las investigaciones llevadas a cabo por los inventores
para descubrir algunos medios preventivos y/o terapéuticos para
asegurar una rápida recuperación de una actividad inmunitaria
temporalmente reducida, inducida por estrés físico o
psicológico.
Esta invención logrado la siguiente investigación
en los efectos de leches fermentadas con bacterias acidolácticas,
tales como Lactobacillus casei en individuos que realizan
ejercicio intenso y, especialmente, atletas y, en general,
individuos sometidos a estados de estrés fisiológico. Como es bien
conocido, existe un interés creciente en la comunidad científica
especializada sobre los efectos favorables producidos por el
ejercicio. No obstante, se ha observado que en condiciones de
ejercicio muy intenso tales como en atletas, tanto durante periodos
de entrenamiento como durante periodos de ejercicio competitivo,
ocurre un efecto inverso al normalmente esperado en el sistema
inmunitario en forma de una reducción en la actividad de dicho
sistema inmunitario, y se han producido informes que describen
enfermedades infecciosas leves en atletas como resultado de la caída
en un nivel de inmunidad tras ejercicio exhaustivo, medido por un
descenso en el número y actividad de las células conocidas como
células NK ("asesinas naturales") tras ejercicio intenso y
prolongado.
Como es bien conocido, en las condiciones de
ejercicio intenso y prolongado tales como, por ejemplo, en atletas y
otros individuos que desempeñan un esfuerzo muy grande, y, en
general, individuos sometidos a estados de estrés fisiológico, ha
habido una corriente para ayudar a la recuperación de individuos
mediante bebidas isotónicas y/o bebidas vitaminadas de diversas
clases.
No obstante, los inventores han observado que no
ha habido serios intentos en la comunidad científica por conseguir
una rápida restauración de los niveles inmunitarios en individuos
que desempeñan tal ejercicio intensivo y prolongado, con el
resultado de que en tales personas se inicia una situación en la
que, aunque la restauración natural pueda permitir al individuo
recuperar la capacidad de desempeñar mayores esfuerzos tras un
periodo de agotamiento, los niveles de actividad inmunitaria
permanecen bajos durante un extenso periodo hasta que la
recuperación natural los restablece lentamente. Es precisamente la
existencia de estos periodos de baja respuesta inmunitaria en
aquellos individuos que están generalmente en un estado
satisfactorio de salud, como puede ser el caso de los atletas, lo
que les expone a contraer determinadas infecciones como resultado de
su situación temporal de tener un bajo nivel de actividad
inmunitaria.
Los inventores han realizado de forma específica
unas investigaciones y unos experimentos para superar la desventaja
mencionada anteriormente, es decir, la baja actividad inmunitaria
temporal en individuos que desempeñan ejercicio intenso.
Sorprendentemente, en el transcurso de las investigaciones
realizadas por los inventores se ha descubierto que es posible
conseguir, de forma simultánea, un descenso menos pronunciado en el
nivel de actividad inmunitaria y una restauración más rápida de
dicho nivel en individuos con un estado de salud generalmente
satisfactorio, tales como atletas que desempeñan un entrenamiento
intensivo y/o pruebas deportivas, y, en general, individuos
sometidos a estados de estrés fisiológico, mediante la
administración a los mismos de leches fermentadas que contienen
Lactobacillus casei. Este efecto sorprendente se ha
confirmado por las pruebas realizadas y será explicado durante esta
descripción. La importancia de esta invención necesita explicarse
debido a sus efectos de gran alcance y eficacia y porque no está
alineado con el uso conocido de leches fermentadas, con el objeto
especial de aumentar los niveles de calcio en el cuerpo, flora
intestinal y otros factores similares, considerando que hasta ahora
su uso en personas con un estado de salud generalmente
satisfactorio, e incluso menor en el caso de individuos que
desempeñan un ejercicio intenso y prolongado, no se ha considerado
por ser de especial interés.
Se ha publicado previamente que en pacientes
expuestos a patógenos, la absorción de leche fermentada que contiene
Lactobacillus casei reduce la gravedad de infecciones,
concretamente infecciones intestinales.
Por ejemplo, Reinert y col. (Anales Españoles de
Pediatría, 1997) han demostrado que la duración de la diarrea aguda
en niños se redujo mediante el consumo de leche fermentada con
Lactobacillus casei. Sin embargo, no se reveló un efecto
preventivo.
\newpage
Por otra parte, se ha demostrado que la ingestión
de productos de leche fermentada induce cambios en la microflora
intestinal y puede ejercer una influencia sobre las funciones
digestivas (Guerin-Danan y col., 1998).
Sorprendentemente, los inventores han descubierto
ahora que la ingestión de leche fermentada que contiene al menos una
bacteria acidoláctica tal como Lactobacillus casei puede
contribuir a una reducción en el nivel de descenso de la función
inmunitaria sistémica en individuos sanos en estados de estrés
fisiológico y pueda permitir también una restauración más rápida de
los niveles normales, consiguiendo de este modo una acción
preventiva, limitando la reducción temporal del nivel inmunitario y
acelerando la restauración de los niveles que existían antes de la
situación de estrés fisiológico.
Dicho estrés fisiológico puede ocurrir, por
ejemplo, después de una actividad física o intelectual intensa,
durante el embarazo, como resultado de estrés psicológico, etc.
Por lo tanto, uno de los propósitos de esta
invención es el uso de leches fermentadas administradas por vía oral
para los propósitos de conseguir un efecto significativo en la
restauración de la actividad inmunitaria; otro propósito de la
invención es el uso de las leches fermentadas para la prevención y
reducción de la función inmunitaria sistémica en sujetos sanos en
estado de estrés fisiológico. Por lo tanto se adaptará de forma
concreta en los casos en los que existe una reducción temporal
principal en tales niveles cuando el individuo desempeña actividad
física intensa y prolongada.
Las leches fermentadas contienen al menos una
cepa de Lactobacillus casei. En una forma de realización
preferida de la presente invención, dicha cepa es la cepa depositada
en la CNCM (Collection Nationale de Culture de
Microorganismes, Instituto Pasteur, 25 rue Docteur Roux) con el
número 1-1518 el 30 de diciembre de 1994.
Las leches fermentadas que contienen
Lactobacillus casei pueden contener además otras bacterias
acidolácticas que pertenecen a los géneros Lactobacillus,
Lactococcus, Streptococcus y Bifidobacterium.
Dichas bacterias acidolácticas se seleccionan preferiblemente de un
grupo constituido por:
- Lactobacillus delbrueckii subespecie
bulgaricus
- Bifidobacterium longum y/o
De acuerdo con la invención, la leche fermentada
puede contener también otras bacterias acidolácticas, tales como las
descritas en la solicitud PCT WO 96/20607.
En una forma de realización preferida, la cepa de
Lactobacillus casei estará presente en el producto en una
concentración mínima de 10^{5} u.f.c./ml, más preferiblemente
entre 10^{6} y 10^{9} u.f.c./ml. Los productos que proporcionan
buenos resultados de acuerdo con la invención contendrán
Lactobacillus casei en concentraciones por encima de 10^{7}
u.f.c./ml.
Lactobacillus casei se puede usar para la
preparación de leches fermentadas en forma semisólida o pastosa,
similares al yogur, o en forma líquida, para el tratamiento de
estados temporales caracterizados por un bajo nivel de actividad
inmunitaria.
Los experimentos se llevaron a cabo en grupos de
atletas que mostraron un descenso en el número de células NK tras un
esfuerzo intenso.
El acuerdo para tomar parte en el estudio se
obtuvo a partir de un grupo de 99 personas de ambos sexos. Los
individuos se comprometieron como atletas que desempeñaban actividad
aeróbica física al menos tres veces por semana durante un periodo de
más de 30 minutos, con una intensidad de 60% de su VO_{2} máximo o
más. Todos los individuos fueron requeridos para abstenerse de tomar
las ayudas ergogénicas que estuvieron usando durante un periodo
mínimo de dos meses previos al comienzo de la prueba. Se excluyeron
los individuos con hipersensibilidad o intolerancia conocida a
productos lácteos, así como los individuos con dietas especiales,
tales como dietas de reducción de peso o dietas vegetarianas.
También se excluyeron los individuos que habían experimentado
episodios de asma inducida por ejercicio y aquellos que habían
recibido antibióticos u otro tratamiento médico durante un periodo
de hasta un mes antes del día 35.
La tabla 1 indica las características de los
individuos comprometidos en el experimento.
El experimento comprendía dos partes. En la
primera parte cada individuo desempeñó una cantidad prefijada de
ejercicio en un cicloergómetro para alcanzar su VO_{2} máximo.
Tras un periodo de calentamiento de 5 minutos con una potencia
generada de 50 vatios, la potencia se aumentó en 30 vatios cada 3
minutos hasta que se alcanzó el nivel de comienzo de fatiga. Los
valores de VO_{2}, frecuencia cardíaca, pCO_{2}, ventilación de
pO_{2} y cociente respiratorio se midieron cada 30 segundos en
aire exhalado hasta el final de la prueba. También se midió el valor
de ECC de forma continua. La concentración sanguínea de lactato y la
temperatura de la membrana timpánica se midieron también antes de la
prueba y cinco minutos después con la ayuda de la evaluación de la
temperatura en el sistema nervioso central. Las muestras de sangre
venosa se recogieron del lóbulo de la oreja para el análisis de
lactato. El análisis se realizó usando un procedimiento
fotoenzimático usando un fotómetro Hitachi/Boehringer Mannheim 4020.
La temperatura de la membrana timpánica se midió usando un escáner
de temperatura por infrarrojos (Ototemp 3000 SD Natick, MA). Tras
un descanso durante un periodo de entre una semana y 10 días, se
realizó una segunda prueba de ejercicio en el cicloergómetro al 75%
del VO_{2} máximo durante 60 minutos. Antes de la prueba de
esfuerzo máximo se obtuvieron los historiales clínicos de los
individuos y la salud de sus familiares, junto con un completo
análisis sanguíneo incluyendo el recuento sanguíneo, colesterol,
HDL, LDL, glucosa, ácido úrico, urea, GOT, GPT y proteínas.
Los individuos asistieron al laboratorio tras un
desayuno ligero (sin leche u otros productos lácteos). Tras
descansar durante unos 20 minutos, cada uno de los individuos
desempeñaron ejercicio con una potencia de 50 vatios durante 5
minutos y posteriormente al 75% de VO_{2} durante 60 minutos a 60
r.p.m. Durante la ventilación de prueba, el uso de O_{2}
(VO_{2}) y la emisión de CO_{2} (VCO_{2}) se controlaron
durante periodos de 30 minutos, 45 minutos y 60 minutos usando el
equipo Jaeger Bos-Sprint (Erich Jaeger GmbH,
Wurzburg, Alemania) calibrado antes de cada prueba. El equipo estaba
formado por un analizador de oxígeno paramagnético y un equipo de
infrarrojos para el dióxido de carbono (CO_{2}) y un
neumotacógrafo de tipo Fleisch. Del mismo modo se registraron la
frecuencia cardíaca y el ECC de forma continua hasta el final de la
prueba. Se extrajo sangre de la vena antecubital derecha con el
individuo recostado antes de la prueba y de nuevo 5 minutos y 2
horas tras la prueba, para el análisis de células NK y otros
parámetros relacionados con el nivel inmunitario. La concentración
de lactatos en sangre y la temperatura de la membrana timpánica se
midieron antes de la prueba y 5 minutos después. Los investigadores
creyeron que sería útil medir la temperatura ya que se ha mostrado
que la hipertermia puede inducir cambios inmunitarios que son
similares a los cambios observados en relación con el ejercicio (B.
K. Pedersen y col., 1994, M. M. Hammami y col., 1998).
Se seleccionaron veinticinco individuos de un
grupo de 94 (5 individuos no desearon continuar) para la segunda
fase de la investigación. La selección se basó en el hecho de que
los individuos mostraban una reducción significativa (más del 3%) en
el número de células NK en comparación con sus niveles plasmáticos
basales 2 horas después de la prueba. Durante la segunda fase de la
investigación los individuos se incluyeron en dos grupos paralelos.
El grupo 1 recibió 500 ml al día de leche fermentada con
Lactobacillus casei administrada por vía oral durante un
periodo de un mes y el grupo 2 recibió 500 ml de leche administrada
por vía oral durante un periodo de un mes. La leche fermentada que
contenía Lactobacillus casei se proporcionó a diferentes
intervalos y se mantuvo a una temperatura de 2-6ºC.
Al final de cada periodo se sometió a todos los individuos a una
prueba de ejercicio de 60 minutos al 75% de su VO_{2} máximo en el
cicloergómetro a 60 r.p.m. Se obtuvieron muestras de sangre de la
vena antecubital antes de la prueba y de nuevo en periodos de 5
minutos y 2 horas después de cada prueba para un análisis de los
parámetros inmuni-
tarios.
tarios.
Se obtuvo el historial dietético de cada
individuo dos días antes de las pruebas (tras beber leche fermentada
con Lactobacillus casei y leche) y se analizó usando el
programa de ordenador Professional Diet Balancer (Nutridata Software
Co., Wappingers Falls, NY, EE.UU.). Este programa de ordenador tiene
una base de datos de 1600 elementos de comida con 23 valores de
nutrientes para cada tipo de alimento. El programa compara el total
de cada nutriente indicado por los individuos con la cantidad diaria
recomendada (CDR) en EE.UU. en función del peso, edad, sexo y
actividad física o consumo de energía. Fue útil para medir el
porcentaje de hidratos de carbono en su ingesta total de calorías.
Esto es importante ya que Nieman y col. (1997) han demostrado que
los hidratos de carbono afectan a la redistribución de las células
NK.
La leche fermentada con Lactobacillus
casei se preparó usando cultivos tradicionales de yogur (L.
bulgaricus y. S. thermophilus) además de Lactobacillus
casei (cepa DN-114001). Se confirmó la presencia
de un mínimo de 10^{7} de unidades formadoras de colonia por ml
(u.f.c./ml) de bacterias de yogur, encontrándose con un contenido de
3,2\cdot10^{8} u.f.c./ml de Lactobacillus casei.
La composición del nutriente fue: 3,7 g de
proteínas, 3,3 g de grasas y 5,2 g de hidratos de carbono por 100
g.
Se extrajeron 20 ml de sangre venosa de cada
atleta. Se recogieron 10 ml en tubos heparinizados comerciales
(Sarstedt, Alemania) y se dejaron coagular 10 ml durante 30 minutos
a temperatura ambiente en tubos de 10 ml
(Sarstedt, Alemania). Los tubos se centrifugaron (1500g) a temperatura ambiente y se retiró el suero. Todas las muestras se analizaron respecto a inmunoglobulinas dentro de las siguientes 3 horas y luego se almacenaron a -30ºC antes de la prueba de citoquinas.
(Sarstedt, Alemania). Los tubos se centrifugaron (1500g) a temperatura ambiente y se retiró el suero. Todas las muestras se analizaron respecto a inmunoglobulinas dentro de las siguientes 3 horas y luego se almacenaron a -30ºC antes de la prueba de citoquinas.
En las gráficas adjuntas:
La figura 1 muestra los resultados con sangre
entera con tinción
CD3-FITC/CD16+CD56-PE y analizados
en un citómetro de flujo Epics XL-MCL;
La figura 2 muestra la temperatura de la membrana
timpánica medida por termografía infrarroja antes y después de la
prueba de ejercicio. Las dos columnas claras de la izquierda de la
gráfica muestran las temperaturas con administración de leche, antes
y 5 minutos después, respectivamente, y los dos gráficas oscuras
[sic] en la derecha muestran la situación correspondiente a
Lactobacillus casei;
La figura 3 muestra la concentración sanguínea de
lactato antes y después de una prueba de ejercicio tras la ingestión
de leche fermentada que contiene Lactobacillus casei y leche,
representando las columnas, respectivamente: antes, 3 minutos
después y 5 minutos después, correspondiendo las columnas oscuras a
leche fermentada que contiene Lactobacillus casei y las
columnas claras a leche;
La figura 4 muestra un diagrama de valores
promedio NKL, correspondiendo la línea oscura a leche fermentada con
Lactobacillus casei y la línea clara a leche; y
La figura 5 muestra, de manera similar a la
figura 4, el diagrama de valores promedio NKA.
Para determinar subconjuntos de linfocitos, se
mezclaron 100 \mul de sangre heparinizada con 10 \mul de
anticuerpos monoclonales seleccionados (mab) conjugados con
isocianato de fluoresceína (FITC), ficoeritrina (PE) o rojo de
ficoeritrina Texas (ECD) en las siguientes combinaciones de tinte:
anti-CD4 mab (PE)/anti-CD8 mab
(FITC)/anti-CD3 mab (ECD) de la compañía Coulter
(Coulter Corp. EE.UU.), anti-CD19 mab
(PE)/anti-HLADR mab (FITC)/anti-CD3
mab (ECD), anti-CD14
mab(PE)/anti-CD64 mab (FITC) de la compañía
Immunotech (Immunotech, Francia) y anti-CD16+CD56
mab (PE)/anti-CD3 mab (FITC) de la compañía Becton
Dickinson (Becton Dickinson, EE.UU.) (Figure 1). Tras 15 minutos de
incubación en la oscuridad, las muestras se lisaron con una
disolución Immunoprep en la unidad Qprep (Coulter Corp., EE.UU.). El
lisado se analizó de forma inmediata usando un citómetro de flujo
Coulter Epics XL-MCL. El número de células contadas
fue de 10.000 por muestra. Los descubrimientos se expresaron como
porcentajes de células que ocasionaron una fluorescencia específica
en una región controlada de linfocitos, con la excepción de que
CD14/CD64 se controló en la región de monocitos.
Se aislaron células mononucleares de sangre
periférica y sangre heparinizada por centrifugación en gradiente de
densidad. Se diluyeron 8 ml de sangre entera 1:1 con PBS. Esta se
dispuso en forma de capas sobre 5 ml de
Lymphoprep (Nycomed, Noruega) y se centrifugó (600 g) durante 20 minutos a 20ºC. La capa de células mononucleares se retiró y se lavó dos veces con RPMI 1640 (GIBCO) suplementado con 10% de suero AB humano (GIBCO). El sedimento se reconstituyó con una concentración de 2\cdot10^{6} células/ml (células efectoras).
Lymphoprep (Nycomed, Noruega) y se centrifugó (600 g) durante 20 minutos a 20ºC. La capa de células mononucleares se retiró y se lavó dos veces con RPMI 1640 (GIBCO) suplementado con 10% de suero AB humano (GIBCO). El sedimento se reconstituyó con una concentración de 2\cdot10^{6} células/ml (células efectoras).
La actividad NK se evaluó usando la prueba de
citotoxicidad EuTDA (Wallac, Finlandia). Se añadieron 2 ml de K562
(ATCC-CCL 243) a 1\cdot10^{6} células/ml y se
cargaron con 5 \mul de un ligando para activar la fluorescencia
(BATDA) a 20ºC durante 15 minutos. Las células se lavaron 6 veces
con PBS con 10% de BSA. Por último el sedimento se ajustó con RPMI
1640 hasta 5\cdot10^{4} células/ml (células diana). Se
dispusieron 100 \mul de estas células en cada pocillo de una placa
de microtitulación (Sarstedt, EE.UU.) que contenía células efectoras
para proporcionar una proporción diana:efector de 40:1, 20:1, 10:1 y
5:1. La placa de microtitulación se incubó a 37ºC durante 2 horas en
una incubador con 5% de CO_{2}. Cuando se completó la incubación,
la placa se centrifugó durante 5 minutos a 500g. Después se
transfirieron 20 \mul del sobrenadante en una placa de fondo plano
(placa de microtitulación DELFIA); Se añadieron 200 \mul de
solución Eu a cada pocillo y se incubaron luego a temperatura
ambiente durante 15 minutos en un dispositivo Sacudidas. Por último
se midió la fluorescencia en un fluorómetro de resolución de tiempos
DELFIA 1232 (Wallac). Los controles incluyeron liberación espontánea
(100 \mul de medio RPMI 1640 añadido a las células diana marcadas)
y liberación total (100 \mul de medio RPMI 1640 suplementado con
Tween al 10%, añadido a las células diana marcadas). El porcentaje
de lisis se calculó usando los recuentos para cada proporción
E:T:
% de lisis =
\frac{(\text{liberación desde las muestras} - \text{liberación
espontánea})}{(\text{liberación total} - \text{liberación
espontánea})} x
100
Los resultados se estandarizaron en unidades
líticas (UL), calculadas como el número de células efectoras
requeridas para lisis del 20% de 5\cdot10^{3} células diana, y
consideradas por ser el número de unidades líticas incluidas en
1\cdot10^{7} células. El coeficiente interno de varianza para la
prueba fue 3%.
Las inmunoglobulinas (IgG, IgA e IgM) se
determinaron cuantitativamente por nefelometría usando el equipo BN
II (Behring Nephelometer II). Las curvas de referencia se
construyeron mediante calibración multipunto basada en el patrón
IFCC CRM-470. En el protocolo para el ensayo de
sueros, se diluyeron automáticamente las muestras de suero y se
midieron; las diluciones usadas fueron 1:20 (IgA e IgM) y 1:400
(IgG). Los resultados se expresan en
mg/dl.
mg/dl.
Las pruebas se realizaron para
IL-1\beta, sIL-2R y
IL-6 mediante el ensayo inmunométrico enzimático
quimioluminiscente usando un analizador automático IMMULITE
(Diagnostic Products Corp. DPC, EE.UU.). Los límites de detección
fueron: 5 pg/ml para IL-1\beta, 10 U/ml para
sIL-2R y 2 pg/ml para IL-6.
IL-2 e INF\gamma se realizaron mediante ELISA
Immunotech (Immunotech, Francia) de acuerdo con las instrucciones
del fabricante. Los límites de detección fueron 10 pg/ml para
IL-2 y 0,5 U/ml para
INF-\gamma.
Las pruebas de ejercicio realizadas para el
tratamiento con leche y leche fermentada mostraron el mismo nivel de
aumento en la temperatura del tímpano respecto a los valores de
línea base en 5 minutos (figura 2). En ningún caso la temperatura
superó los 37ºC. Se ha mostrado que la temperatura rectal es 1ºC
mayor que la temperatura del tímpano. B. K. Pedersen y col. 1994
mostraron que una temperatura básica de 39ºC puede ocasionar cambios
en el sistema inmunitario que son similares a los cambios
experimentados en relación con el ejercicio. Por tanto ninguna
interferencia con el sistema inmunitario tras el ejercicio podría
deberse al aumento en la temperatura observado en la investigación
realizada por los inventores.
La concentración en sangre de lactato de línea
base y el aumento a 3 y 5 minutos tras ejercicio no mostró
diferencias significativas entre los dos programas de tratamiento
(figura 3).
Células NK.- No hubo diferencia en la
concentración de células NK en ninguno de los puntos
correspondientes a la línea base 5 minutos y 2 horas después del
tratamiento entre leche fermentada con Lactobacillus casei y
leche (figura 2). Se observó una diferencia significativa después de
ejercicio en respuesta a la concentración de células NK entre 5
minutos y 2 horas, ambas en el grupo que había tomado leche
fermentada que contenía Lactobacillus casei y el grupo que
había tomado leche. El descenso en las células NK observado tras 2
horas fue significativamente menor en el grupo que había tomado
leche fermentada con Lactobacillus casei (3,14 para leche
fermentada con Lactobacillus casei en comparación con 5,24
para leche; p < 0,0035) (figura 4).
Hasta el punto que concierne la actividad de las
células NK, se observó una tendencia hacia una actividad aumentada
en ambos grupos (leche fermentada con Lactobacillus casei y
leche) entre la línea base y 5 minutos. También se observó un
descenso entre 5 minutos y 2 horas en el caso de leche fermentada
con Lactobacillus casei y leche, siendo la tendencia para la
leche fermentada con Lactobacillus casei menor que para la
leche (figura 5).
La función inmunitaria reducida tras periodos de
ejercicio intenso y entrenamiento excesivo está relacionado en parte
con una secreción aumentada de cortisona y una fase proteica aguda
mediada por IL-6 (J. A. Woods y col., 1999). El
descubrimiento de que la ingestión de leche fermentada con
Lactobacillus casei puede modular el descenso en el nivel de
células NK puede ayudar en parte a contrarrestar la acción
inmunosupresora de la cortisona en atletas durante el entrenamiento
intenso y competición.
De acuerdo con los experimentos realizados para
certificar el efecto más eficaz del nuevo uso para Lactobacillus
casei en la preparación de leches fermentadas, el contenido de
Lactobacillus casei estará presente en una cantidad por
encima de 1\cdot10^{7} u.f.c. por mililitro.
Todo lo que afecte, modifique, cambie o corrija
la esencia del nuevo uso descrito se puede variar para los
propósitos de esta invención.
Claims (5)
1. Uso de Lactobacillus casei en la
preparación de una leche fermentada para la prevención y el
tratamiento de niveles inmunitarios reducidos de forma temporal
asociados con un descenso en células NK en sangre en individuos
sometidos a estrés fisiológico.
2. Uso de la reivindicación 1, en el que dicho
estrés fisiológico procede de esfuerzo físico intenso.
3. Uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 ó
2, en el que dicha leche fermentada comprende más de
1\cdot10^{5} u.f.c. por mililitro de Lactobacillus
casei.
4. Uso de la reivindicación 3, en el que dicha
leche fermentada comprende más de 1\cdot10^{7} u.f.c. por
mililitro de Lactobacillus casei.
5. Uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a
5, w en el que dicha leche fermentada comprende además al menos otra
bacteria acidoláctica seleccionada entre Lactobacillus
helveticus, Lactobacillus delbrueckii subespecie
bulgaricus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus
acidophilus, Lactococcus lactis, Streptococcus
thermophilus,
Bifidobacterium longum y/o Bifidobacterium breve.
Bifidobacterium longum y/o Bifidobacterium breve.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ES009901036A ES2155782B1 (es) | 1999-05-07 | 1999-05-07 | Utilizacion de bacterias acidolacticas pra preparar leches fermentadas para el tratamiento de niveles de actividad inmunitaria transitoriamente reducidos. |
ES9901037 | 1999-05-07 | ||
ES009901037A ES2155783B1 (es) | 1999-05-07 | 1999-05-07 | Nueva utilizacion de lactobacillus casei para la preparacion de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios deprimidos. |
ES9901036 | 1999-05-07 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2238285T3 true ES2238285T3 (es) | 2005-09-01 |
Family
ID=26155225
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES00935083T Expired - Lifetime ES2238285T3 (es) | 1999-05-07 | 2000-05-05 | Uso de bacterias acidolacticas en la preparacion de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios reducidos. |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP1178730B1 (es) |
AT (1) | ATE291353T1 (es) |
AU (1) | AU5069500A (es) |
DE (1) | DE60018919T2 (es) |
ES (1) | ES2238285T3 (es) |
MX (1) | MXPA01011336A (es) |
PT (1) | PT1178730E (es) |
WO (1) | WO2000067583A2 (es) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010103132A1 (es) * | 2009-03-10 | 2010-09-16 | Hero España, S.A. | Aislamiento, identificación y caracterización de cepas con actividad probiótica a partir de heces de lactantes alimentados exclusivamente con leche materna |
BR112018013501B1 (pt) * | 2015-12-29 | 2022-12-20 | N.V. Nutricia | Uso de um ingrediente fermentado e oligossacarídeo não digerível |
CN109924506B (zh) * | 2019-03-04 | 2021-06-04 | 山东环亿生物科技有限公司 | 一种具有减肥功能的益生菌组合物及其制备方法和应用 |
CN111944727B (zh) | 2020-08-24 | 2021-12-03 | 汤臣倍健股份有限公司 | 一种短双歧杆菌207-1及其应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2922013B2 (ja) * | 1991-04-17 | 1999-07-19 | 雪印ローリー株式会社 | 耐酸性及び酸素耐性を有する新規ビフィズス菌 |
WO1994026133A1 (en) * | 1993-05-11 | 1994-11-24 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Antioxidant food, antioxidant preparation and antioxidization method |
WO1998023727A1 (en) * | 1996-11-29 | 1998-06-04 | Bio K + International Inc. | Lactic ferment comprising a particular strain of lactobacillus acidophilus and use thereof |
CN1150314C (zh) * | 1997-08-21 | 2004-05-19 | 纽西兰乳品局 | 增强免疫的乳酸菌 |
-
2000
- 2000-05-05 AT AT00935083T patent/ATE291353T1/de active
- 2000-05-05 WO PCT/EP2000/004593 patent/WO2000067583A2/en active IP Right Grant
- 2000-05-05 PT PT00935083T patent/PT1178730E/pt unknown
- 2000-05-05 ES ES00935083T patent/ES2238285T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-05 DE DE60018919T patent/DE60018919T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-05 AU AU50695/00A patent/AU5069500A/en not_active Abandoned
- 2000-05-05 EP EP00935083A patent/EP1178730B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-05 MX MXPA01011336A patent/MXPA01011336A/es active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2000067583A2 (en) | 2000-11-16 |
EP1178730B1 (en) | 2005-03-23 |
DE60018919D1 (de) | 2005-04-28 |
DE60018919T2 (de) | 2006-05-18 |
WO2000067583A3 (en) | 2001-03-01 |
ATE291353T1 (de) | 2005-04-15 |
MXPA01011336A (es) | 2002-11-04 |
PT1178730E (pt) | 2005-06-30 |
EP1178730A2 (en) | 2002-02-13 |
AU5069500A (en) | 2000-11-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kadooka et al. | Effect of Lactobacillus gasseri SBT2055 in fermented milk on abdominal adiposity in adults in a randomised controlled trial | |
Montes et al. | Effect of milks inoculated with Lactobacillus acidophilus or a yogurt starter culture in lactose-maldigesting children | |
ES2437940T3 (es) | Composición probiótica para uso en el tratamiento de la inflamación del intestino | |
ES2399775T3 (es) | Composiciones farmacéuticas que comprenden L. acidophilus y bifidobacterium lactis para el uso en el tratamiento de un trastorno intestinal funcional | |
WO2015129281A1 (ja) | 機能性消化管障害予防及び/又は改善剤 | |
WO2022269539A1 (en) | Method for favoring wellness and facilitating self-control before, during and/or after a restrictive diet | |
JP5816273B2 (ja) | 経上皮抵抗の改善に用いるためのプロバイオティクス株 | |
ES2238285T3 (es) | Uso de bacterias acidolacticas en la preparacion de leches fermentadas para el tratamiento de niveles inmunitarios reducidos. | |
EP1300472A1 (en) | A method for testing the effect of nutrients on gastrointestinal colonisation resistance of humans | |
Higashikawa et al. | Lactobacillus plantarum SN13T cells improve hepatic dysfunction and fecal microbiota: A randomized pilot study | |
TAkII et al. | Effects of intake of pickles containing Lactobacillus brevis on immune activity and bowel symptoms in female students | |
US20220241357A1 (en) | Composition for amelioration of anxiety and/or stress | |
US20140205571A1 (en) | Strain of L. Bulgaricus Capable of Inhibiting the Adhesion of H. Pylori Strains to Epithelial Cells | |
Pawan et al. | Systemic immunomodulation and hypocholesteraemia by dietary probiotics: a clinical study | |
Moneim et al. | Dietary Intervention in Clinical Improvement of Nonalcoholic Fatty Liver Patients | |
RU2815833C2 (ru) | Композиция для облегчения тревожности и/или стресса | |
JP7225364B1 (ja) | 乳酸菌 | |
US12005087B2 (en) | Probiotic (Bacillus subtilis) supplementation for improvement of body composition in female athletes | |
CN110384719B (zh) | 可改善高血压的罗伊氏乳杆菌菌株gmnl-263及其组合物 | |
EP3630128B1 (en) | Compositions and methods for decreasing a population of bilophila wadsworthia or inhibiting the growth thereof | |
WO2018124003A1 (ja) | 胃内菌叢の占有率測定による機能性消化管障害の検出方法及び胃内菌叢改善剤 | |
He | The intestinal microbiota of the elderly | |
BG63963B1 (bg) | Закваска за пробиотичен хранителен продукт и приложението му като имуномодулиращо средство | |
POPESCU et al. | STUDY ON IMMUNOMODULATORY EFFECTS OF PROBIOTICS IN ASTHMA | |
McCoy | Effects of feeding Lactobacillus reuteri X-18 on blood chemistry and immune parameters in beagle (Canis familiaris) puppies |