ES2218528T3

ES2218528T3 - Peptidos lineales y ciclicos para el tratamiento o prevencion de eczema/dermatitis.

Info

Publication number: ES2218528T3
Application number: ES94928213T
Authority: ES
Inventors: Jurgen Michaelis; Timothy Elliot Trigg
Original assignee: Advanced Immuni T Inc
Current assignee: Advanced Immuni T Inc
Priority date: 1993-09-24
Filing date: 1994-09-26
Publication date: 2004-11-16
Anticipated expiration: 2014-09-26
Also published as: EP0871466A1; DK0871466T3; US5798335A; WO1995008338A1; DE69433763D1; EP0871466A4; CA2172491A1; AU7735094A; JP3623231B2; EP0871466B1; AU697847B2; DE69433763T2; JPH09506860A

Abstract

LA PRESENTE INVENCION DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO PARA EL TRATAMIENTO O LA PREVENCION DEL ECCEMA/DERMATITIS. ESTE PROCEDIMIENTO IMPLICA LA ADMINISTRACION DEL PEPTIDO T O SUS DERIVADOS O ANALOGOS. LOS COMPUESTOS PREFERIDOS QUE SE UTILIZAN EN ESTE PROCEDIMIENTO INCLUYEN: 1) D - ALA - SER - THR - THR THR - ASN - TYR - THR - NH 2 ; 2) ALA - SER - THR - THR - THR - ASN - TYR - THR; 3) D - ALA - SER - THR - THR - THR - ASN - TYR THR; 4) D - ALA - SER - SER - ASN - TYR - MET; 5) THR - ASP ASN - TYR - THR; 6) THR - THR - SER - TYR - THR; 7) THR - THR ASN - TYR - THR; 8) D - THR - THR - TYR - D - THR; 9) D - ALA SER - D - THR - THR - D - THR - ASN - TYR - D - THR - NH 2 ; 10) D - SER - SER - D - THR - THR - D - THR - THR - TYR - D - THR - NH 2 .

Description

Péptidos lineales y cíclicos para el tratamiento o prevención de eczema/dermatitis.

La presente invención se refiere al tratamiento o la prevención de eczema/dermatitis.

Los términos "eczema" y "dermatitis" son sinónimos y se utilizan indiferentemente en toda esta memoria.

Eczema es un término que es ampliamente utilizado, pero a menudo no de forma consecuente, en numerosas dolencias relacionadas con la piel. Esencialmente, es una reacción de la piel a una amplia gama de estimulantes e irritantes, algunos de los cuales son conocidos, pero muchos otros son desconocidos. Los dos criterios clásicos de la erupción en el eczema son que produce prurito y que ocasiona formación de vesículas o de ampollas en la piel. Si persiste la enfermedad, la piel puede llegar a hacerse más gruesa y comenzar a desprenderse.

Las tres formas corrientes de eczema son el eczema numular, el eczema infeccioso y el eczema atópico. El eczema numular (o eczema discoidal) consiste en áreas de eczema en forma de moneda en los limbos que tienden a picar intensamente. El eczema infeccioso es una forma de eczema que puede aparecer de repente y propagarse rápidamente en la zona de una quemadura o de un corte. El eczema atópico es una de las formas de eczema más propagadas y molestas; comienza con frecuencia en la infancia, en cuya etapa sus efectos son particularmente molestos, tanto más cuanto que la perspectiva de una curación es escasa y el único tratamiento local eficaz es la aplicación de hidrocortisona.

El eczema se puede comparar claramente con la psoriasis. La psoriasis es un trastorno crónico de la piel de etiología desconocida. Procede de la sobreproducción de células en la piel que conduce al aumento de grosor de la piel y al desprendimiento. Aparecen con más frecuencia placas plateadas en el cuero cabelludo, codos, rodillas y parte inferior de la espalda. En algunos casos la enfermedad es tan leve que las personas nunca saben que la padecen. En los peores, la enfermedad puede cubrir el cuerpo entero con enrojecimiento y descamación.

La terapia de corticoesteroides, por consiguiente, es hasta la fecha el tratamiento curativo más exitoso para el eczema. Sin embargo, la quimioterapia de esteroides no está exenta de inconvenientes y riesgos. Goodman y Gilman indican en "The Pharmacological Basis of Therapeutics", séptima edición, 1985:

Desde el punto de vista clínico, la administración de corticoesteroides para sus efectos antiinflamatorios es una terapia paliativa; la causa esencial de la enfermedad permanece; las manifestaciones inflamatorias son meramente suprimidas. Es esta supresión de la inflamación y su consecuencia lo que ha hecho a los corticoesteroides tales agentes terapéuticos valiosos realmente, a veces salvavidas. Es también esta propiedad la que les da un potencial casi único para el desastre terapéutico.

Se ha descubierto ahora que un grupo de compuestos no esteroideos, a saber el péptido T y sus derivados y análogos, son útiles para la prevención y tratamiento del eczema.

Originalmente, muchos de los péptidos útiles en la invención se describieron como eficaces en la prevención de la infección y en la replicación del VIH in vitro, véase los documentos EP-A-0249390, EP-A-0249394 y WO-A-8809338, todos los cuales se incorporan como referencia en la máxima extensión permitida por la ley, como son todos los demás documentos referidos en esta memoria. Los compuestos útiles en la invención son también el tema de la solicitud de patente PCT pendiente y todavía no publicada nº PCT/GB93/00649, presentada el 29 de marzo de 1993. Todos los compuestos descritos en estas memorias son útiles para la presente invención. El péptido original tiene su punto básico de origen en el octapéptido Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr. Se denomina Péptido T porque el 50% de los restos de aminoácido son de treonina.

Por consiguiente en un primer aspecto la presente invención consiste en un método de tratamiento o de prevención del eczema en un sujeto, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéutica de un péptido lineal o cíclico de Fórmula General I:

I-A-B-C-D-E-F-G-H-II (Fórmula General 1)

en la que A es Ala, Gly, Val, Ser, Thr o está ausente,

B es Ala, Gly, Val, Ser, Thr o está ausente,

C es Ser, Thr o está ausente,

D es Ser, Thr, Asn, Glu, Arg, Ile, Leu o está ausente,

E es Ser, Thr, Asp o está ausente,

F es Thr, Ser, Asn, Arg, Gln, Lys, Trp o está ausente,

G es Tyr, Phe, Trp, Leu, Met, Ile o está ausente,

H es Thr, Arg, Gly, Met, Met(O), Cys, Thr, Gly o está ausente,

I es Cys o está ausente,

II es Cys o está ausente,

estando al menos uno de los aminoácidos opcionalmente sustituido por un carbohidrato monomérico o polimérico o su derivado, realizándose dicha sustitución mediante los grupos hidroxilo y/o amino y/o amido de los aminoácidos,

y en la que el péptido comprende al menos cuatro restos de aminoácido,

o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Cada uno de los aminoácidos referidos a la Fórmula General 1 puede estar en la configuración estereoisomérica L- o D- y los candidatos para H pueden estar esterificados o amidados. El péptido comprende al menos 4 aminoácidos.

Tetra-, penta-, hexa-, hepta-, octa-, y no-péptidos útiles en la invención todos son péptidos seleccionados de la secuencia:

I-A-B-C-D-E-F-G-H-II

por eliminación de restos, por ejemplo, uno a uno, del terminal carboxilo o amino o de dentro de la secuencia.

Se valora que los péptidos que tienen la secuencia central Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr- pueden tener en ambos extremos restos de aminoácido adicionales, alguno de los cuales están representados por la Fórmula General 2:

X-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Y (Fórmula General 2)

en la que X es un resto de aminoácido terminal seleccionado de Ala y D-Ala e Y es un resto con terminal carboxi seleccionado de Thr y Thr-amida.

Un determinado péptido preferido del grupo de péptidos tiene la secuencia central mencionada anteriormente de -Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-. Estos péptidos de la Fórmula General 2 anterior y en particular una variante del Péptido T de fórmula -Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-, se observó que eran muy útiles para inhibir la unión del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) a las células humanas bloqueando los sitios del receptor en las superficies celulares. El término Péptido T se utiliza en toda la memoria como referencia, a menos que el contexto lo requiera de otra forma los péptidos de Fórmula General 2 incluyen todos la secuencia central del péptido. Se pretende por lo tanto que el Péptido T comprenda todos los compuestos de Fórmula General 2, donde se entiende que todos los dichos compuestos son variantes del octapéptido T comprendido normalmente, denominado también Péptido T prototipo de la fórmula particular D-Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr- amida.

La invención puede ser útil tanto en medicina clínica (humana) como veterinaria. La invención, por lo tanto, tiene aplicación en un método para tratar o prevenir el eczema, comprendiendo el método administrar a un ser humano u otro sujeto animal, por ejemplo sobre una base repetida, un péptido de Fórmula General 1. El péptido se administrará generalmente en una cantidad eficaz, no tóxica o en una cantidad tal que se alcance un equilibrio aceptable entre la eficacia y la toxicidad, con respecto a las circunstancias del caso.

Los péptidos preferidos útiles en la invención tienen como fracción activa, una secuencia de aminoácido de fórmula:

-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-

Los péptidos más preferidos útiles en la invención son los siguientes:

1. D-Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-NH_{2}(Péptido T prototipo)

2. Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

3. D-Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

4. D-Ala-Ala-Ser-Ser-Ser-Asn-Tyr-Met

5. Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr

6. Thr-Thr-Ser-Tyr-Thr

7. Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

8. D-Thr-Thr-Tyr-D-Thr

9. D-Ala-Ser-D-Thr-Thr-D-Thr-Asn-Tyr-D-Thr-NH_{2}

10 D-Ser-Ser-D-Thr-Thr-D-Thr-Thr-Tyr-D-Thr-NH_{2}

Con mucha frecuencia puede ser ventajoso tener un aminoácido amino terminal como D-estereoisómero, para proteger la molécula de la degradación por aminopeptidasas; como alternativa o además, el terminal carboxi del aminoácido puede ser una amida de aminoácido que proteja la molécula de la degradación por carboxipeptidasas. En relación con esto, los compuestos 5, 6 y 7 relacionados anteriormente, incluyen análogos con D-Thr como el resto aminoterminal y/o un derivado de amida en el terminal carboxi.

Además, debe entenderse que uno o más de los aminoácidos en los péptidos pueden ser aminoácidos N-alquil sustituidos (p. ej. alquilo (C_{1}-C_{4})) en lugar de aminoácidos primarios; los ejemplos incluyen metilo y etilo. Las cadenas laterales con grupo hidroxilo de uno o más de los aminoácidos (Ser, Thr, Tyr) pueden derivarse de un grupo éter o éster. Se puede formar cualquier éster o éter alquílico (opcionalmente sustituido), tal como ésteres, éteres, tioésteres y tioéteres de alquilo (C_{1}-C_{4}), arilo o alquilo (C_{1}-C_{4}) arilo, por ejemplo éster fenílico, éter bencílico o éster etílico de tiofenol. Los éteres preferidos actualmente son los éteres metílico, etílico y propílico y los ésteres preferidos actualmente son los ésteres metílico, etílico y propílico.

Además, debe entenderse que la amida C-terminal puede ser una alquilamida con C_{1}-C_{6} (lineal, ramificada o cíclica), el propio resto de alquilo puede estar sustituido con grupos únicos o múltiples tales como hidroxi, fluoro, etc. Igualmente, el grupo amino N-terminal puede estar acetilado con ácidos carboxílicos de C_{1}-C_{6} (lineales, ramificados o cíclicos) que pueden estar sustituidos con grupos únicos o múltiples, tales como hidroxi, fluoro, etc. Dichas derivaciones son para mejorar las propiedades tales como la solubilidad, biodisponibilidad y estabilidad (física, química, metabólica), más bien que la actividad biológica.

Las cadenas laterales de hidroxilo de los aminoácidos Ser, Thr y/o Tyr y los grupos amido de los aminoácidos Asn y/o Gln pueden estar sustituidas con diferentes carbohidratos o derivados de carbohidratos. Los derivados de carbohidrato pueden ser como se describió anteriormente.

Los péptidos lineales útiles en esta invención se pueden preparar por cualquier procedimiento adecuado, tal como las técnicas de síntesis de péptidos en fase sólida, véase "Solid Phase Peptide Synthetic Techniques", 2ª ed. J.M. Stewart, J.D. Young, Pierce Chemical Company, 1984, ISBN: 0-935940-03-0. Un método en fase sólida utilizado frecuentemente es la técnica de Merrifield. Otra posibilidad son las técnicas en fase de solución. El péptido preferido, Péptido T prototipo, se puede adquirir fácilmente en Peptech (Europe), Hillesod, Dinamarca.

Los péptidos cíclicos útiles en la invención se pueden preparar mediante técnicas conocidas, tales como, por ejemplo, las descritas en Y. Hamada en Tetrahedron Letters, 26 5155 (1985). Los péptidos cíclicos pueden estar constituidos en forma de un puente disulfuro entre dos restos Cys y/o haciendo reaccionar el resto de aminoácido carboxi terminal con el resto amino terminal y/o haciendo reaccionar el resto amino terminal, por ejemplo, con el grupo 9-carboxilo de Glu, cuando Glu está en la posición D.

Los derivados de carbohidrato se pueden preparar por los métodos conocidos en la técnica. El Péptido T glicosilado se describe en Urge et al., Biochem. Biophys. Res. Comms. 184(2) 1125-1132 (1992), publicado el 30 de abril de 1992, pero la utilidad de la presente invención no está descrita ni sugerida.

Se pueden administrar los péptidos útiles en la invención como una composición juntamente con un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Se pueden utilizar péptidos o formulaciones de péptido solos o en combinación con cualquier otro compuesto farmacéuticamente activo, tal como un agente anti-infeccioso, por ejemplo un antibiótico y/o un agente antivírico y/o un agente antimicótico u otro compuesto farmacéuticamente activo tal como un agente antineoplásico.

Los péptidos se pueden administrar por vía tópica, oral, bucal, parenteral, rectal, vaginal, mediante atomizador de inhalación intranasal, por inhalación intrapulmonar o por otras vías. En particular, los péptidos según la invención se pueden formular para la aplicación tópica, p.ej. como atomizadores o cremas. Además, los péptidos según la invención se pueden formular para inhalación con atomizador o en polvo, para inyección (por ejemplo inyección subcutánea, intramuscular, intravenosa, intra-articular o intracisternal), para infusión o para administración oral y se pueden presentar en forma de monodosis en ampollas o comprimidos o en viales multidosis o en otros recipientes con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones o geles en vehículos aceitosos o acuosos y pueden contener agentes formuladores tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes. Como alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo y/o liofilizado para la administración directa o para la redisolución en un vehículo adecuado (por ejemplo agua esterilizada, exenta de pirógenos, solución salina normal o dextrosa al 5%) antes de su uso. Las composiciones farmacéuticas que contienen péptido(s) pueden contener también otros ingredientes activos tales como agentes antimicrobianos o conservantes.

Las composiciones pueden contener de 0,001 a 99% (p/v o, preferentemente, p/p) de material activo. El Péptido T que se puede adquirir en Peptech (Europe) se formula generalmente y se envasa de forma estéril en solución de dextrosa al 5% en viales multidosis. Se valorará que el péptido se pueda envasar en otros excipientes, tales como solución salina. Preferentemente, la concentración de péptido en cada dosis es del orden de 8,5 mg/ml para inyección subcutánea en dosis de un ml.

Las composiciones se administran en dosis profilácticas o terapéuticamente eficaces, es decir 0,05-10.000 mg de péptido al día, en particular 5-1.000 mg al día. Se pueden utilizar dosis muy grandes, ya que el péptido según la invención no es tóxico. Sin embargo, normalmente esto no se requiere. La dosis administrada diariamente, desde luego, depende del grado de control requerido.

Para la administración de la composición por inyección o infusión, la dosis diaria empleada para el tratamiento de adultos de aproximadamente 70 kg de peso corporal, variará con frecuencia de 0,2 mg a 20 mg de material activo que se puede administrar en forma de 1 a 4 dosis cada día, dichos intervalos de dosificación dependen de la vía de administración y de la enfermedad del paciente.

Las composiciones descritas anteriormente se pueden preparar mezclando o si no poniendo conjuntamente los ingredientes.

Los compuestos útiles en la invención se pueden utilizar para tratar o prevenir cualquier forma de eczema, incluyendo pero sin limitarse al eczema numular, al eczema infeccioso y al eczema atópico.

Para que la presente invención se pueda entender más claramente se describen a continuación sus formas preferidas con referencia a los siguientes ejemplos.

Ejemplo

La utilidad del método de la presente invención se evaluó en experimentos utilizando perros. Los resultados de estos experimentos se indican a continuación.

I. Sujeto: Perro

Evaluación	El animal presentaba tres lesiones inflamatorias (gravedad 1*) en el lomo.
	Las lesiones eran aproximadamente de 2 cm de diámetro y de forma circular.

Tratamiento	Atomización dérmica con Péptido T en preparación acuosa.

Frecuencia del tratamiento	Por la mañana y por la tarde.

Resultados	Las lesiones habían desaparecido después de tres días.

II. Sujeto: Perra esterilizada

Evaluación	\begin{minipage}[t]{115mm} Inflamación grave (gravedad 2) en la pata trasera izquierda, lado interno y a lo largo de la linea media. Ninguna escamación o deshidratación, pero obviamente mucho picor. Inflamación de la linea media superior del ombligo que se extiende desde la vulva ventralmente a lo largo de 6 pulgadas y 2 a 3 pulgadas a cada lado (gravedad 1).\end{minipage}
	\begin{minipage}[t]{115mm}*Sin descamación, pero centros claros de inflamación aracterizados por manchas rojas intensas.\end{minipage}
	\begin{minipage}[t]{115mm} *Bordes inferiores inflamados de los labios superiores y de la mandíbula inferior (superficie dérmica).\end{minipage}

Tratamiento y Resultados	\begin{minipage}[t]{115mm} 0,5 ml de Péptido T (HCl) en resultados glucosa administrada por vía subcutánea el día 0, a continuación 0,2 ml por vía subcutánea una vez al día durante 6 días más.\end{minipage}
	\begin{minipage}[t]{115mm} Atomización dérmica los días 12 y 13.\end{minipage}

*Escala 0-3: En la que 0 = sin inflamación y 3 = inflamación muy grave

Resultados

1

III. Sujeto: perra esterilizada (El mismo animal que en II)

Evaluación	Pata izquierda interna inflamada (gravedad 1).
	También dos manchas rojas en la linea media central del ombligo, con ligera
	inflamación circundante.

Tratamiento	Pulverización dérmica con Péptido T (HCl) en agua.

Resultados

2

Siguiendo estas pruebas iniciales se realizó otra prueba durante 20 días. Estos animales presentaban todos una variedad de enfermedades de la piel que no había respondido bien a otros regímenes de tratamiento y en mayor extensión todos los animales se consideraron "incurables".

La prueba fue una prueba doble a ciegas, controlada por placebo en la que se comparó el compuesto con el tratamiento con placebo. El placebo es la misma formulación que el material del tratamiento, pero sin el compuesto activo. El estudio se realizó de la forma siguiente:

1.: Evaluación por un veterinario.

2.: Periodo de tratamiento A: 14 días.

3.: Evaluación por un veterinario.

4.: Sin tratamiento durante siete días como periodo de lavado.

5.: Evaluación por un veterinario.

6.: Periodo de tratamiento B: 14 días.

7.: Evaluación por un veterinario.

8.: Sin tratamiento durante siete días.

9.: Evaluación por un veterinario.

Ni el veterinario, ni el propietario sabían qué tratamiento A o B contenía el compuesto, hasta después de acabada la prueba.

De esta prueba había un caso de mejora con el placebo, cinco casos de mejora leve en un parámetro con péptido T que era normalmente eritema y una mejora significativa en dos perros tratados con Péptido T. Se observó que estos dos perros tenían dermatitis atópica. No hubo ningún cambio en diez de los perros.

Los expertos en la materia valorarán que se puedan realizar numerosas variaciones y/o modificaciones a la invención como se muestra en las realizaciones específicas sin apartarse del espíritu o del alcance de la invención descrita ampliamente. Las presentes realizaciones, se deben considerar, por lo tanto, desde todos los puntos de vista como ilustrativas y no limitativas.

Claims

1. Utilización de un péptido lineal o cíclico de Fórmula General I: I-A-B-C-D-E-F-G-H-II (Fórmula General 1)

en la que A es Ala, Gly, Val, Ser, Thr o está ausente,

B es Ala, Gly, Val, Ser, Thr o está ausente,

C es Ser, Thr o está ausente,

D es Ser, Thr, Asn, Glu, Arg, Ile, Leu o está ausente,

E es Ser, Thr, Asp o está ausente,

F es Thr, Ser, Asn, Arg, Gln, Lys, Trp o está ausente,

G es Tyr, Phe, Trp, Leu, Met, Ile o está ausente,

H es Thr, Arg, Gly, Met, Met(O), Cys, Thr, Gly o está ausente,

I es Cys o está ausente,

II es Cys o está ausente,

estando al menos uno de los aminoácidos opcionalmente sustituido por un carbohidrato monomérico o polimérico o uno de sus derivados, realizándose dicha sustitución mediante los grupos hidroxilo y/o amino y/o amido de los aminoácidos,

y en la que el péptido comprende al menos cuatro restos de aminoácido,

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables para la preparación de un medicamento para el tratamiento o prevención del eczema y o la dermatitis.

2. Utilización según la reivindicación 1, en la que dicho péptido tiene la Fórmula General 2:

X-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Y (Fórmula General 2)

en la que X es un resto de aminoácido terminal seleccionado de Met, Thr y Thr-amida.

3. Utilización según la reivindicación 1, en la que el péptido se selecciona de:

1.: D-Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-NH_{2}

2.: Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

3.: D-Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

4.: D-Ala-Ala-Ser-Ser-Asn-Tyr-Met

5.: Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr

6.: Thr-Thr-Ser-Tyr-Thr

7.: Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr

8.: D-Thr-Thr-Tyr-D-Thr

9.: D-Ala-Ser-D-Thr-Thr-D-Thr-Asn-Tyr-D-Thr-NH_{2}

10: D-Ser-Ser-D-Thr-Thr-D-Thr-Thr-Tyr-D-Thr-NH_{2}.

4. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que uno o más de los aminoácidos en el péptido es un aminoácido N-alquil (p. ej. alquilo (C_{1}-C_{4})) sustituido.

5. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que las cadenas laterales con grupo hidroxilo de uno o más de los aminoácidos Ser, Thr y/o Tyr se modifica para dar un grupo éter o éster.