EP0698016A1 - Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same - Google Patents

Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same

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Publication number
EP0698016A1
EP0698016A1 EP94915592A EP94915592A EP0698016A1 EP 0698016 A1 EP0698016 A1 EP 0698016A1 EP 94915592 A EP94915592 A EP 94915592A EP 94915592 A EP94915592 A EP 94915592A EP 0698016 A1 EP0698016 A1 EP 0698016A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
oyl
temperature
reduced pressure
under reduced
acetoxylup
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP94915592A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Norbert Dereu
Michel Evers
Christèle Poujade
Françoise Soler
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aventis Pharma SA
Original Assignee
Rhone Poulenc Rorer SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rhone Poulenc Rorer SA filed Critical Rhone Poulenc Rorer SA
Publication of EP0698016A1 publication Critical patent/EP0698016A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C07D257/06—Five-membered rings with nitrogen atoms directly attached to the ring carbon atom

Definitions

  • the present invention relates to lupane derivatives, of general formula:
  • R and R are hydroxy or acyloxy and R is in particular methyl. These derivatives are useful in the field of anticancer agents.
  • R represents a radical of general formula: (CH 2 ) n X - (CH 2 ) m - Y (II)
  • X is a bond or represents a carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl radical,
  • Y is a bond or represents a meta or para phenylene radical
  • R ° and R °° identical or different are hydrogen atoms or methyl radicals (it being understood that all the units -CR ° R °° are not necessarily identical to each other) and,
  • n is an integer from 6 to 12
  • m is an integer from 0 to 3
  • p is an integer from 0 to 2 on the understanding that m + n + p is between 6 and 14, and
  • R- ] is a methyl or hydroxymethyl radical or a -CH2OR 'or -CH2SR' radical for which R 'is alkyl or hydroxyalkyl,
  • HIV virus Human Immunodeficiency Virus
  • alkyl radicals are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms.
  • the lupane derivatives of general formula (I) can also be prepared by the action of an azide on a nitrile of general formula: CN
  • R- * R °, R °°, X, Y, n, m, and p are defined as above.
  • the azide is advantageously chosen from tri-n.butyltin azide, trimethylsilyl azide or an alkali azide.
  • tri-n.butyltin azide the reaction is carried out in an organic solvent such as 1,2-dimethoxyethane, 2-ethoxyethanol or a mixture of such solvents, at reflux temperature. of the reaction mixture.
  • the trimethylsilyl azide is acted on, the operation is carried out in the presence of aluminum trichloride, in a chlorinated solvent such as, for example, dichloromethane, at a temperature between 10 and 40 ° C.
  • the lupane derivative of general formula (I) for which X (in the radical R) represents a carbamoyl or aminocarbonyl radical optionally N-methylated and the other radicals are defined as above, can also be obtained from a lupane derivative of general formula:
  • R- * is defined as above and R "represents a radical of general formula: (CH 2 ) n — COOH (IVa) or (CH 2 ) n-NH — R '" (IVb)
  • n is defined as above and R "'is a hydrogen atom or a methyl radical, by the action of an amine or an acid of general formulas respectively:
  • R °, R °°, m and p are defined as above and R "'is defined as above.
  • the hydroxyl radicals of the lupane derivative of general formula (IV) are preferably protected by compatible radicals which can be put in place and eliminated without touching the rest of the molecule.
  • the protective groups can be chosen from the radicals described by T.W. GREENE, Protective Groups in Organic Synthesis, J. ILEY-Interscience Publication (1991) or by Me 0MIE, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press (1973). We will choose radicals which can be eliminated in neutral, basic or acidic medium.
  • the hydroxy radicals can be protected in the ester state (formyloxy, acetoxy, i.butoxy, trichloracetyloxy, phenoxyacetyloxy, benzyloxy); in this case, the elimination is carried out by hydrolysis in a basic medium, in particular in the presence of soda at a temperature of between 10 and 50 ° C. Protection can also be effected in the form of a ketone, in the form of carbonate by a radical -COOR a in which R a is an alkyl or benzyl radical optionally substituted or also by a trialkylsilyl radical.
  • the reaction is carried out according to the usual methods of condensation of an amine on an acid.
  • an acid acceptor such as a nitrogenous organic base (trialcoylamine, pyridine, N-methyl-morpholine, diaza-1,8 bicyclo [5.4.0] undecene-7, diaza-1,5 bicyclo [4.3.0] nonene-5 for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (dichloromethane, dichlorethane, chloroform for example) or an amide (dimethylformamide for example).
  • a condensing agent such as a carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride for example) and optionally in the presence of a catalyst such as N-hydroxybenzotriazole or N-hydroxysuccinimide, at a temperature between -20 and 40 ° C.
  • a condensing agent such as a carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride for example)
  • a catalyst such as N-hydroxybenzotriazole or N-hydroxysuccinimide
  • the amine of the general formula (Va) is preferably condensed from the hydrochloride of the amine.
  • the nitrile of general formula (III) can be prepared by dehydration of the corresponding amide, by any known method which does not alter the rest of the molecule.
  • One operates in particular by means of trifluoroacetic anhydride in an ether (tetrahydrofuran for example), at a temperature between 10 and 66 ° C.
  • the amide corresponding to the nitrile of general formula (III) can itself be obtained from the acid according to the known methods and / or cited below in the examples.
  • the corresponding acid can be prepared by the action of an amino acid of general formula:
  • R ** is defined as above and in which the hydroxyl radicals are previously protected, followed by the removal of the protective radical (s).
  • the reaction of the amine with the chloride of lupen-20 (29) oic-28 acid of general formula (VII) is carried out according to the usual methods which do not alter the rest of the molecule.
  • One operates in particular in the presence of an organic nitrogenous base such as a trialkylamine (triethylamine for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (chloroform, 1,2-dichloroethane, dichloromethane) or in the tetrahydrofuran or in a mixture of these solvents, at a temperature between 15 and 30 ° C.
  • hydroxy radical (s) are preferably previously protected.
  • the protection and the release of the protective radicals are carried out as described above.
  • the acid protecting radicals can be chosen from alkyl (methyl, ethyl, t.butyl), substituted alkyl (trichlorethyl, haloethyl, p.toluenesulfonylethyl, benzyl, benzyl substituted by a nitro, benzhydryl, triphenylmethyl, benzyloxymethyl—), alkyloxyalkyl (methoxymethyl), tetrahydropyranyl or trimethylsilyl radical.
  • alkyl methyl, ethyl, t.butyl
  • substituted alkyl trichlorethyl, haloethyl, p.toluenesulfonylethyl
  • benzyl benzyl substituted by a nitro, benzhydryl, triphenylmethyl, benzyloxymethyl—
  • alkyloxyalkyl methoxymethyl
  • the radical X (in R) is a carbamoyl or aminocarbonyl radical optionally N-methylated
  • the nitrile of general formula (III) can also be prepared by condensation of an amine or of an acid of general formula: (Vlla ) or
  • reaction is carried out under conditions identical to those of the preparation of a lupane derivative of general formula (I) from an amine or an acid of general formula (Va) or (Vb) and a lupane derivative of general formula (IV).
  • the acid derived from lupane, of general formula (IVa) can be prepared by analogy with the reaction of the amino acid of general formula (VI) on the chloride of the acid derived from lupane of general formula (VII), by action an amino acid of general formula:
  • n is defined as above and whose acid function is previously protected.
  • the amine derived from lupane, of general formula (IVb), for which R '' 'is a hydrogen atom, can be prepared from a lupane derivative of general formula (VII), by the action of a diamine of general formula:
  • n is defined as above.
  • the lupane derivatives of general formula (IV) or (VII) for which R * 1 is a hydroxymethyl radical can be prepared by the action of silver acetate on the corresponding bromine derivative for which R-
  • the reaction is advantageously carried out in an organic solvent such as, for example, toluene, at a temperature between 20 ° C. and the reflux temperature of the reaction mixture.
  • the starting bromine derivative can be obtained by the action of a brominating agent such as, for example, tetrabutylammonium tribromide or N-bromosuccinimide on the corresponding derivative of lup-20 (29) - en-28-oic acid.
  • the reaction is carried out in a chlorinated solvent such as methylene chloride, chloroform, or carbon tetrachloride at a temperature in the region of 25 ° C.
  • the lupane derivatives of general formula (VII) for which R- * is a radical -CH 2 0R 'or -CH 2 SR' can be prepared from the derivative of lupane for which R- * is bromomethyl, by action the corresponding alcoholate or thiolate.
  • the acid chloride of the lupane derivative of general formula (VII) can be prepared according to known methods.
  • the reaction is carried out by the action of oxalyl chloride or thionyl chloride, in a chlorinated solvent such as chloroform, d chloroethane or dichloromethane.
  • the new lupane derivatives of general formula (I) can be purified if necessary by physical methods such as crystallization or chromatography.
  • the preparation is carried out by means of derivatives chirals of general formula (Va), (Vb), (VI), (Vlla) or (Vllb). It is understood that when it is desired to obtain a chiral intermediate, the separation is carried out according to the usual methods which do not affect the rest of the molecule, such as for example chromatography on the chiral phase, or by conversion of the racemic mixture of diastereoisomers and separation by crystallization or chromatography.
  • the products according to the invention can be transformed into metallic salts with strong bases according to the methods known per se. These salts can be obtained by the action of a metal base in an appropriate solvent. The salt formed precipitates after optional concentration of the solution; it is separated by filtration.
  • salts with alkali metals sodium, potassium, lithium.
  • the new lupane derivatives according to the present invention are particularly useful for the prophylaxis and treatment of AIDS (acquired immunodeficiency syndrome) and associated syndromes [ARC (AIDS related complex)].
  • prophylaxis we mean the treatment of subjects who have been exposed to HIV viruses, in particular asymptomatic seropositive people who are at risk of developing the disease in the months or years to come after primary infection.
  • the products according to the invention which are inhibitors of the cytopathogenic effect of HIV and inhibitors of the production of reverse transcriptase in cell culture at concentrations devoid of cytotoxic or cytostatic effect, are of particular interest.
  • Herpes family is indeed the cause of many ailments, some of which can be very serious. It includes Herpes simplex, varicella-zoster, cytomegalovirus and Epstein-Barr virus. Herpes simplex can vary from mild forms like cold sores with more serious forms such as genital herpes and can even be responsible for life-threatening encephalitis. Varicella zoster is the virus responsible for chickenpox and shingles, it can also cause more serious conditions including encephalitis.
  • Cytomegalovirus infections are generally asymptomatic in healthy subjects, but can become the cause of serious ophthalmic infections (retinitis) which can lead to blindness, morbidity and mortality in immunodeficient subjects (patients with AIDS or any other immunodeficiency, for example after organ transplantation or after cancer chemotherapy). Cytomegalovirus is also responsible for severe clinical manifestations for the fetus or newborn in the case of a primary infection during pregnancy or during the transfusion of seropositive blood into an HIV-negative newborn.
  • the powdered products were dissolved in a proportion of 2 mg of product per 2 ml (approximately 4 ⁇ 10 M) in dimethylformamide (DMF) to obtain a stock solution of product with 100% DMF.
  • the test is carried out on the CEM 4 lymphoblastoid line.
  • 25 ⁇ l / well of a solution of product to be tested is deposited in isotonic phosphate buffer (TPI) or TPI alone in the case of the controls.
  • TPI isotonic phosphate buffer
  • the products are studied at 8 concentrations, at the rate of 6 wells per concentration. 125 ⁇ l of a suspension are then added
  • the first series is then infected with HIV-1 (100 ⁇ l per well of a suspension of LAV-1-BRU virus containing 200-300 TCID50) while the other series receives 100 ⁇ l of RPMI medium as defined above. After 5 days of incubation, 100 ⁇ l of cells are removed to measure cell viability [determined according to a modification of the technique described by R. Pauwels et al., J. Virol. Meth., ⁇ , 309-321 (1988)]. 10 ⁇ l of a solution containing 7 mg of MTT [3- (4,5-dimethyl 2-thiazolyl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide] per ml of isotonic phosphate buffer are added to this sample.
  • MTT 3- (4,5-dimethyl 2-thiazolyl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide
  • the protection rate (in%) of a given product is determined from the optical densities (OD) by the formula:
  • D0 (treated and inf. Cells) -D0 (untreated and inf. Cells) D0 (treated and non-inf. Cells) -DO (untreated and inf. Cells)
  • the inhibitory concentration 50% is determined.
  • the protection rate provided by the products according to the invention is between 20 and 100%.
  • the 50% inhibitory concentration of the products according to the invention is between 0.05 and 50 ⁇ g / ml when it can be determined.
  • the reverse transcriptase activity is measured in 10 ⁇ l of culture supernatant. Using the poly r (A) reverse transcriptase [ 3 H] -SPA enzyme assay assay kit (RPQN 0100, Amersham, GB) according to the procedure recommended by the manufacturer. The reaction time is 6 hours and the radioactivity counted using a microbeta counter [TOPCOUNT®PACKARD].
  • the technique used consists in measuring the cytopathogenic effect of the virus and its protection by using products of general formula (I).
  • the antiviral activity is assessed by measuring the EC50 (concentration necessary to inhibit 50% of the cytopathic effect induced by the virus).
  • the residue obtained (600 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) first eluted with 2 liters of a mixture of cyclohexane and ethyl acetate (30-70 by volume), then with 2 liters of a mixture of methanol and ethyl acetate (30-70 by volume); the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C.
  • the residue obtained (600 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) first eluted with 2 liters of a mixture of cyclohexane and ethyl acetate (30-70 by volume), then with 2 liters of a mixture of methanol and ethyl acetate (30-70 by volume); the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoic acid can be prepared in the following manner:
  • 5-aminomethyl-tetrazole hydrochloride can be prepared according to the method described in patent application DE 3,626,130.
  • the organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to
  • the residue obtained (140 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is
  • the solvent is evaporated under reduced pressure (22 kPa) and at a temperature in the region of 40 ° C. 600 mg of a white meringue are obtained which is used without further purification.
  • 3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -en-28-oic acid can be prepared according to BRUCKNER, KOVACS and KOCZKA, J. Chem. Soc, 948 (1948).
  • Example 4
  • N- [3 ⁇ -acetoxylup-30- (2'-acetoxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] - 8-ammooctano ⁇ que acid can be obtained in the following manner:
  • reaction mixture 15 cm of pyridme and 15 cm of water and stirred for 12 hours at a temperature in the region of 20 ° C.
  • the reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of
  • N- [3 ⁇ -acetoxylup-30- (2 '-hydroxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] 8-ammooctanoic acid can be obtained in the following manner:
  • N- [3 ⁇ -acetoxylup-30-bromo-20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoic acid can be obtained in the following way:
  • N- [3 ⁇ -acetoxylup-30-bromo-20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoic acid is prepared as described in Example 1.
  • Sodium hydroxyethanethiolate is prepared by the action of sodium ethylate on 2-hydroxyethanth ⁇ ol in solution in ethanol.
  • 3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride is prepared according to J. PROVITA and A. VYSTRCIL, Collect. Czech. Che. Common. Al, 1200 (1976).
  • 5- (4-aminophenyl) tetrazole can be prepared according to J.M. McMANUS and R. HERBST, J. Org. Chem. , 24, 1044 (1959).
  • the organic phase is dried over sodium sulfate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C.
  • 2.2 g of a solid are thus obtained which is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and ammonia (24-6-1 by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C.
  • 5- (3-aminophenyl) tetrazole can be prepared according to J.M. McMANUS and R. HERBST, J. Org. Che. , 24, 1044 (1959).
  • Tributyltin azide can be prepared from HR KRICHELDORF and E. LEPPERT, Synthesis, 329 (1976).
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11 -aminoundécanenitrile can be obtained in the following way:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundécanamide can be obtained as follows:
  • reaction mixture is cooled to room temperature, poured into a solution of 100 cm of hydrochloric acid
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanenitrile can be obtained in the following way:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanamide can be obtained in the following manner:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanenitrile can be obtained in the following way:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododecanamide can be obtained as follows:
  • N'- [N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-aminopropanenitrile can be obtained in the following way:
  • N '- [N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino propanamide can be obtained in the following way:
  • N '- [N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3- aminopropanoic acid can be obtained in the following way:
  • N '- [N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl] -3-am ⁇ no methyl propionate can be prepared as follows:
  • the combined organic phases are washed 3 times with 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 30 ° C.
  • the residue obtained (1.9 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume) .
  • the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C.
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarbamoylacetonitrile can be obtained in the following way:
  • N- (3 ⁇ -aceto: ⁇ ylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 8-d ⁇ am ⁇ nooctane can be obtained in the following way *:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoyl-acetonitrile can be obtained in the following way:
  • the organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C.
  • the residue obtained (2.7 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichlorome ⁇ thane and methanol (99-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C.
  • N- [3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following manner:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-ammoheptylcarbamoylprop ⁇ o- nitrile can be obtained in the following manner:
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following manner:
  • the solid is filtered, washed with 3 times 200 cm of distilled water, then dissolved in 500 cm of ethanol.
  • the solution is filtered, the solid is washed twice with 50 cm of ethanol and the filtrates are evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of -50 ° C.
  • the residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C.
  • N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl ⁇ -3- aminobutanoic acid (R, S) ⁇ can be prepared by analogy with [N- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl ⁇ -methyl- a ino] acetic (Example 11).
  • N-methyl-N'- (3 ⁇ -acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following way:
  • the organic phase is then dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C.
  • the residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02 - 0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and methanol 19-1 (by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C.
  • the present invention also relates to the pharmaceutical compositions containing at least one product of general formula (I) possibly in the form of salt, in the pure state or in the form of a combination with one or more diluents or adjuvants compatible and pharmaceutically acceptable, or with another agent intended for the treatment of AIDS, an antiviral, immunomodulatory or anti-crobial agent.
  • product of general formula (I) possibly in the form of salt, in the pure state or in the form of a combination with one or more diluents or adjuvants compatible and pharmaceutically acceptable, or with another agent intended for the treatment of AIDS, an antiviral, immunomodulatory or anti-crobial agent.
  • composition according to the invention is capable of keeping cells infected with an HIV virus alive and therefore of reducing the progression to AIDS or of reducing its severity in subjects already infected by reducing the mortality of the infected cells.
  • the compositions can be used orally, parenterally or rectally.
  • compositions can be used for curative or preventive purposes in subjects with immunodeficiency and / or infected with an HIV virus.
  • constitution of these compositions will be adapted to the particular case of the digestive tract of the immu ⁇ nodeprimes.
  • compositions for oral administration tablets, pills, capsules, powders or granules can be used.
  • the active product according to the invention is mixed with one or more inert diluents or adjuvants, such as sucrose, lactose or starch.
  • these compositions can include substances other than diluents, for example a lubricant such as magnesium stearate or a coating intended for controlled release.
  • compositions for oral administration it is possible to use pharmaceutically acceptable solutions, suspensions, emulsions, syrups and elixirs containing inert diluents such as water or paraffin oil.
  • inert diluents such as water or paraffin oil.
  • These compositions can also include substances other than diluents, for example wetting, sweetening or flavoring products.
  • compositions for parenteral administration can be sterile solutions or emulsions.
  • solvent or vehicle propylene glycol, a polyethylene glycol, vegetable oils, in particular olive oil, injectable organic esters, for example ethyl oleate can be used.
  • compositions can also contain adjuvants, in particular wetting agents, isotonizers, emulsifiers, dispersants and stabilizers.
  • Sterilization can be done in several ways, for example using a bacteriological filter, by irradiation or by heating. They can also be prepared in the form of sterile solid compositions which can be dissolved at the time of use in sterile water or any other sterile injectable medium.
  • compositions for rectal administration are suppositories or rectal capsules, which contain, in addition to the active principle, excipients such as cocoa butter, semi-synthetic glycerides or polyethylene glycols.
  • the doctor will determine the dosage he considers most appropriate based on preventive or curative treatment, depending on the age, weight, degree of infection and other factors specific to the subject to treat. Generally, the doses are between 10 and 100 mg / kg orally for an adult.
  • the present invention also relates to combinations consisting of one or more lupane derivatives of general formula (I), and / or where appropriate their salts, and of another active principle known for its anti-retrovirus activity, optionally in the presence pharmaceutically acceptable excipients.
  • anti-retrovirus agents which can be combined are chosen from agents which are compatible and inert with respect to the lupane derivative of general formula (I).
  • these agents are chosen from reverse transcriptase inhibitors [zidovudine (AZT), didanosine (DDI), dideoxycytidine (DDC), TIBO, nevirapine, PMEA, D4T, pyridones, ⁇ -APA, HEPT ...] , among protease inhibitors [such as RO 31-8959 or A 77003], or among inhibitors of the tat protein [such as RO 24-7429].
  • reverse transcriptase inhibitors zidovudine (AZT), didanosine (DDI), dideoxycytidine (DDC), TIBO, nevirapine, PMEA, D4T, pyridones, ⁇ -APA, HEPT ...
  • protease inhibitors such as RO 31-8959 or A 77003
  • Active product tablets having the following composition are prepared according to the usual technique:

Abstract

Lupane derivatives of general formula (I) in which R is: (II), wherein X is a bond or an optionally substituted carbamoyl or aminocarbonyl, Y is a bond or phenylene, R° and R°°, which are the same or different, are H or methyl and n is 6 to 12, m is 0 to 3 and p is 0 to 2, with 6 « m+n+p « 14, and R1 is methyl, hydroxymethyl, -CH2OR' or -CH2SR' (R' is alkyl or hydroxyalkyl), the alkyl radicals (1 to 4C) are straight or branched. The invention also concerns the salts of said derivatives and their preparation. The products according to the invention are especially useful in the treatment of AIDS and in infections induced by the herpes family of viruses.

Description

NOΓTVEAUY DÉRIVES DU LΠPANE . T.EΓTR PRÉPARATION ET LES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES QUI LES CONTIENNENT NOΓTVEAUY DERIVATIVES OF LΠPANE. T.EΓTR PREPARATION AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IT
La présente invention concerne des dérivés du lupane, de formule générale :The present invention relates to lupane derivatives, of general formula:
H3C CH3 H 3 C CH 3
leurs sels, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.their salts, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them.
Dans la demande de brevet japonais J 01 143 832 ont été décrits des dérivés de la bétuline de formule générale :In Japanese patent application J 01 143 832, betulin derivatives of the general formula have been described:
dans laquelle R et R sont hydroxy ou acyloxy et R est notamment méthyle. Ces dérivés sont utiles dans le domaine des anticancéreux.in which R and R are hydroxy or acyloxy and R is in particular methyl. These derivatives are useful in the field of anticancer agents.
Il a été maintenant trouvé que les dérivés du lupane de formule géné¬ rale (I) dans laquelle :It has now been found that the lupane derivatives of general formula (I) in which:
R représente un radical de formule générale : (CH2) n X — (CH2 ) m — Y ( II ) R represents a radical of general formula: (CH 2 ) n X - (CH 2 ) m - Y (II)
X est une liaison ou représente un radical carbamoyle, N-méthyl carbamoyle, aminocarbonyle ou N-méthylaminocarbonyle,X is a bond or represents a carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl radical,
Y est une liaison ou représente un radical meta ou para phénylène,Y is a bond or represents a meta or para phenylene radical,
R° et R°° identiques ou différents sont des atomes d'hydrogène ou des radicaux méthyle (étant entendu que tous les motifs -CR°R°° ne sont pas nécessairement identiques entre eux) et,R ° and R °° identical or different are hydrogen atoms or methyl radicals (it being understood that all the units -CR ° R °° are not necessarily identical to each other) and,
n est un nombre entier de 6 à 12, m est un nombre entier de 0 à 3 et p est un nombre entier de 0 à 2 étant entendu que m + n + p est com- pris entre 6 et 14, etn is an integer from 6 to 12, m is an integer from 0 to 3 and p is an integer from 0 to 2 on the understanding that m + n + p is between 6 and 14, and
R-] est un radical méthyle, hydroxyméthyle ou un radical -CH2OR' ou -CH2SR' pour lequel R' est alcoyle ou hydroxyalcoyle,R- ] is a methyl or hydroxymethyl radical or a -CH2OR 'or -CH2SR' radical for which R 'is alkyl or hydroxyalkyl,
ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables, manifestent un effet cytoprotecteur de cellules infectées par un virus HIV (Human Immunodeficiency Virus) ainsi qu'une activité inhibitrice de la production de transcriptase inverse d'un virus HIV.as well as their pharmaceutically acceptable salts, manifest a cytoprotective effect of cells infected with an HIV virus (Human Immunodeficiency Virus) as well as an activity inhibiting the production of reverse transcriptase of an HIV virus.
Dans la formule générale ci-dessus, il est entendu que les radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de car¬ bone.In the general formula above, it is understood that the alkyl radicals are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms.
Dans les cas où R° et R°° sont différents, les produits de formule générale (I) présentent des formes stéréoisomères, il est également entendu que les formes stéréoisomères ainsi que leurs mélanges en¬ trent aussi dans le cadre de la présente invention.In cases where R ° and R °° are different, the products of general formula (I) have stereoisomeric forms, it is also understood that the stereoisomeric forms as well as their mixtures also fall within the scope of the present invention.
Selon l'invention, les dérivés du lupane de formule générale (I) peu- vent également être préparés par action d'un azoture sur un nitrile de formule générale : CNAccording to the invention, the lupane derivatives of general formula (I) can also be prepared by the action of an azide on a nitrile of general formula: CN
dans laquelle R-* R°, R°°, X, Y, n, m, et p sont définis comme précédemment.in which R- * R °, R °°, X, Y, n, m, and p are defined as above.
L'azoture est avantageusement choisi parmi l'azoture de tri n.butyletain, l'azoture de triméthylsilyle ou un azoture alcalin. Lorsque l'on utilise l'azoture de tri n.butyletain la réaction s'effectue dans un solvant organique tel que le diméthoxy-1 ,2 éthane, l'éthoxy-2 éthanol ou un mélange de tels solvants, à la température de reflux du mélange réactionnel. Lorsque l'on fait agir l'azoture de triméthylsilyle, on opère en présence de trichlorure d'aluminium, dans un solvant chloré comme par exemple le dichlorométhane, à une température comprise entre 10 et 40°C.The azide is advantageously chosen from tri-n.butyltin azide, trimethylsilyl azide or an alkali azide. When tri-n.butyltin azide is used, the reaction is carried out in an organic solvent such as 1,2-dimethoxyethane, 2-ethoxyethanol or a mixture of such solvents, at reflux temperature. of the reaction mixture. When the trimethylsilyl azide is acted on, the operation is carried out in the presence of aluminum trichloride, in a chlorinated solvent such as, for example, dichloromethane, at a temperature between 10 and 40 ° C.
Selon l'invention le dérivé du lupane de formule générale (I) pour lequel X (dans le radical R) représente un radical carbamoyle ou aminocarbonyle éventuellement N-méthylé et les autres radicaux sont définis comme précédemment, peut être également obtenu à partir d'un dérivé du lupane de formule générale :According to the invention the lupane derivative of general formula (I) for which X (in the radical R) represents a carbamoyl or aminocarbonyl radical optionally N-methylated and the other radicals are defined as above, can also be obtained from a lupane derivative of general formula:
H3C CH3 dans laquelle R-* est défini comme précédemment et R" représente un radical de formule générale : (CH2)n—COOH (IVa) ou (CH2)n-NH—R'" (IVb)H 3 C CH 3 in which R- * is defined as above and R "represents a radical of general formula: (CH 2 ) n — COOH (IVa) or (CH 2 ) n-NH — R '" (IVb)
dans lesquelles n est défini comme précédemment et R"' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, par action respectivement d'une aminé ou d'un acide de formules générales :in which n is defined as above and R "'is a hydrogen atom or a methyl radical, by the action of an amine or an acid of general formulas respectively:
ouor
dans lesquelles R°, R°°, m et p sont définis comme précédemment et R"' est défini comme ci-dessus.in which R °, R °°, m and p are defined as above and R "'is defined as above.
II est entendu que les radicaux hydroxy du dérivé du lupane de for¬ mule générale (IV) sont de préférence protégés par des radicaux compatibles qui peuvent être mis en place et éliminés sans toucher au reste de la molécule. A titre d'exemple les groupements protecteurs peuvent être choisis parmi les radicaux décrits par T.W. GREENE, Protective Groups in Organic Synthesis, J. ILEY-Interscience Publication (1991) ou par Me 0MIE, Protective Groups in Organic Chemistry, Plénum Press (1973). On choisira des radicaux pouvant être éliminés en milieu neutre, basique ou acide.It is understood that the hydroxyl radicals of the lupane derivative of general formula (IV) are preferably protected by compatible radicals which can be put in place and eliminated without touching the rest of the molecule. By way of example, the protective groups can be chosen from the radicals described by T.W. GREENE, Protective Groups in Organic Synthesis, J. ILEY-Interscience Publication (1991) or by Me 0MIE, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press (1973). We will choose radicals which can be eliminated in neutral, basic or acidic medium.
Notamment, les radicaux hydroxy peuvent être protégés à l'état d'es- ter (formyloxy, acétoxy, i.butoxy, trichloracétyloxy, phénoxyacétyl- oxy, benzyloxy) ; dans ce cas, l'élimination s'effectue par hydrolyse en milieu basique, notamment en présence de soude à une température comprise entre 10 et 50°C. La protection peut également être effec¬ tuée à l'état de cétone, sous forme de carbonate par un radical -COORa dans lequel Ra est un radical alcoyle ou benzyle éventuelle¬ ment substitués ou encore par un radical trialcoylsilyle.In particular, the hydroxy radicals can be protected in the ester state (formyloxy, acetoxy, i.butoxy, trichloracetyloxy, phenoxyacetyloxy, benzyloxy); in this case, the elimination is carried out by hydrolysis in a basic medium, in particular in the presence of soda at a temperature of between 10 and 50 ° C. Protection can also be effected in the form of a ketone, in the form of carbonate by a radical -COOR a in which R a is an alkyl or benzyl radical optionally substituted or also by a trialkylsilyl radical.
La réaction s'effectue selon les méthodes habituelles de condensation d'une aminé sur un acide. Notamment, on opère en présence d'un accep- teur d'acide tel qu'une base organique azotée (trialcoylamine, pyri- dine, N-méthyl-morpholine, diaza-1,8 bicyclo[5.4.0]undécène-7, diaza- 1,5 bicyclo[4.3.0] nonène-5 par exemple) dans un solvant organique comme un solvant chloré (dichloromethane, dichlorethane, chloroforme par exemple) ou un amide (diméthylformamide par exemple) . Il est éga- lement possible d'opérer en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, chlorhydrate de 1-(3- diméthylaminopropyl) -3-éthylcarbodiimide par exemple) et éventuelle¬ ment en présence d'un catalyseur tel que le N-hydroxybenzotriazole ou le N-hydroxysuccinimide, à une température comprise entre -20 et 40°C.The reaction is carried out according to the usual methods of condensation of an amine on an acid. In particular, one operates in the presence of an acid acceptor such as a nitrogenous organic base (trialcoylamine, pyridine, N-methyl-morpholine, diaza-1,8 bicyclo [5.4.0] undecene-7, diaza-1,5 bicyclo [4.3.0] nonene-5 for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (dichloromethane, dichlorethane, chloroform for example) or an amide (dimethylformamide for example). It is also possible to operate in the presence of a condensing agent such as a carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride for example) and optionally in the presence of a catalyst such as N-hydroxybenzotriazole or N-hydroxysuccinimide, at a temperature between -20 and 40 ° C.
La condensation de l'aminé de formule générale (Va) s'effectue de préférence à partir du chlorhydrate de l'aminé.The amine of the general formula (Va) is preferably condensed from the hydrochloride of the amine.
Le nitrile de formule générale (III) peut être préparé par deshydratation de l'amide correspondant, par toute méthode connue qui n'altère pas le reste de la molécule.The nitrile of general formula (III) can be prepared by dehydration of the corresponding amide, by any known method which does not alter the rest of the molecule.
On opère notamment au moyen d'anhydride trifluoracétique dans un éther (tétrahydrofuranne par exemple) , à une température comprise entre 10 et 66°C.One operates in particular by means of trifluoroacetic anhydride in an ether (tetrahydrofuran for example), at a temperature between 10 and 66 ° C.
L'amide correspondant au nitrile de formule générale (III) peut être lui-même obtenu à partir de l'acide selon les méthodes connues et/ou citées ci-après dans les exemples.The amide corresponding to the nitrile of general formula (III) can itself be obtained from the acid according to the known methods and / or cited below in the examples.
L'acide correspondant peut être préparé par action d'un aminoacide de formule générale :The corresponding acid can be prepared by the action of an amino acid of general formula:
.H2N- (CH2)n-χ- (CH2)m~Y- (C)p~C00H (VI).H 2 N- (CH 2 ) n-χ- (CH 2 ) m ~ Y- (C) p ~ C00H (VI)
R° R°° dans laquelle R°, ROD, X, Y, n, m, et p sont définis comme précédem¬ ment et dont la fonction acide est préalablement protégée, sur le chlorure de l'acide de formule générale :R ° R °° in which R °, R OD , X, Y, n, m, and p are defined as above and whose acid function is previously protected, on the acid chloride of general formula:
H3C CH3 H 3 C CH 3
dans laquelle R** est défini comme précédemment et dont les radicaux hydroxy sont préalablement protégés, suivie de l'élimination du/des radicaux protecteurs.in which R ** is defined as above and in which the hydroxyl radicals are previously protected, followed by the removal of the protective radical (s).
La réaction de l'aminé sur le chlorure de l'acide lupèn-20 (29)oïque- 28 de formule générale (VII) s'effectue selon les méthodes habi- tuelles qui n'altèrent pas le reste de la molécule. On opère notam¬ ment en présence d'une base organique azotée telle qu'une trialcoyla- mine (triethylamine par exemple) dans un solvant organique tel qu'un solvant chloré (chloroforme, dichloro-1,2 éthane, dichloromethane) ou dans le tétrahydrofurane ou dans un mélange de ces solvants, à une température comprise entre 15 et 30°C.The reaction of the amine with the chloride of lupen-20 (29) oic-28 acid of general formula (VII) is carried out according to the usual methods which do not alter the rest of the molecule. One operates in particular in the presence of an organic nitrogenous base such as a trialkylamine (triethylamine for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (chloroform, 1,2-dichloroethane, dichloromethane) or in the tetrahydrofuran or in a mixture of these solvents, at a temperature between 15 and 30 ° C.
Il est entendu que le/les radicaux hydroxy sont de préférence préalablement protégés. La protection et la libération des radicaux protecteurs s'effectuent comme décrit précédemment.It is understood that the hydroxy radical (s) are preferably previously protected. The protection and the release of the protective radicals are carried out as described above.
A titre d'exemple, les radicaux protecteurs d'acide peuvent être choisis parmi les radicaux alcoyle (méthyle, éthyle, t.butyle) , al¬ coyle substitué (trichloréthyle, haloéthyle, p.toluènesulfonyl- éthyle, benzyle, benzyle substitué par un radical nitro, benzhydryle, triphénylméthyle, benzyloxyméthyle—), alcoyloxyalcoyle (méthoxymé- thyle) , tétrahydropyranyle ou triméthylsilyle. La mise en place et l'élimination de ces radicaux s'effectue selon les méthodes habituelles citées précédemment. Lorsque le radical X (dans R) est un radical carbamoyle ou aminocarbonyle éventuellement N-méthylé, le nitrile de formule géné¬ rale (III) peut aussi être préparé par condensation d'une aminé ou d'un acide de formule générale : (Vlla) ouBy way of example, the acid protecting radicals can be chosen from alkyl (methyl, ethyl, t.butyl), substituted alkyl (trichlorethyl, haloethyl, p.toluenesulfonylethyl, benzyl, benzyl substituted by a nitro, benzhydryl, triphenylmethyl, benzyloxymethyl—), alkyloxyalkyl (methoxymethyl), tetrahydropyranyl or trimethylsilyl radical. The establishment and elimination of these radicals is carried out according to the usual methods mentioned above. When the radical X (in R) is a carbamoyl or aminocarbonyl radical optionally N-methylated, the nitrile of general formula (III) can also be prepared by condensation of an amine or of an acid of general formula: (Vlla ) or
(Vllb) (Vllb)
dans lesquelles R" ' , R°, R°°, Y, m, et p sont définis comme précédem¬ ment, sur un dérivé du lupane de formule générale (IVa) ou (IVb).in which R "', R °, R °°, Y, m, and p are defined as above, on a lupane derivative of general formula (IVa) or (IVb).
La réaction s'effectue dans des conditions identiques à celles de la préparation d'un dérivé du lupane de formule générale (I) à partir d'une aminé ou d'un acide de formule générale (Va) ou (Vb) et d'un dérivé du lupane de formule générale (IV) .The reaction is carried out under conditions identical to those of the preparation of a lupane derivative of general formula (I) from an amine or an acid of general formula (Va) or (Vb) and a lupane derivative of general formula (IV).
L'acide dérivé du lupane, de formule générale (IVa) peut être préparé par analogie avec la réaction de l'aminoacide de formule générale (VI) sur le chlorure de l'acide dérivé du lupane de formule générale (VII), par action d'un aminoacide de formule générale :The acid derived from lupane, of general formula (IVa) can be prepared by analogy with the reaction of the amino acid of general formula (VI) on the chloride of the acid derived from lupane of general formula (VII), by action an amino acid of general formula:
H2N-(CH2)n-COOH (VIII)H 2 N- (CH 2 ) n -COOH (VIII)
dans laquelle n est défini comme précédemment et dont la fonction acide est préalablement protégée.in which n is defined as above and whose acid function is previously protected.
L'aminé dérivée du lupane, de formule générale (IVb) , pour laquelle R' ' ' est un atome d'hydrogène, peut être préparée à partir d'un dérivé du lupane de formule générale (VII) , par action d'une diamine de formule générale :The amine derived from lupane, of general formula (IVb), for which R '' 'is a hydrogen atom, can be prepared from a lupane derivative of general formula (VII), by the action of a diamine of general formula:
H2N-(CH2)n-NH2 (IX)H 2 N- (CH 2 ) n -NH 2 (IX)
dans laquelle n est défini comme précédemment.in which n is defined as above.
Les dérivés (IVb) pour lesquels R' ' ' est un radical méthyle peuvent être obtenus par N-méthylation selon la méthode décrite par A. KATRITSKY, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 2539 (1987), à partir du produit de formule générale (IVb) pour lequel R' ' ' est un atome d'hydrogène.The derivatives (IVb) for which R '''is a methyl radical can be obtained by N-methylation according to the method described by A. KATRITSKY, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 2539 (1987), from the product of general formula (IVb) for which R '''is a hydrogen atom.
Les produits de formule générale (Va) ou (Vb) peuvent être préparés selon ou par analogie avec les méthodes citées ou décrites ci-après dans les exemples.The products of general formula (Va) or (Vb) can be prepared according to or by analogy with the methods cited or described below in the examples.
Les dérivés du lupane de formule générale (IV) ou (VII) pour lesquels R*l est un radical hydroxyméthyle peuvent être préparés par action de l'acétate d'argent sur le dérivé brome correspondant pour lequel R-| est bromométhyle et pour lequel, le radical hydroxy est préalablement protégé. La réaction s'effectue avantageusement dans un solvant orga¬ nique comme par exemple le toluène, à une température comprise entre 20°C et la température de reflux du mélange réactionnel. Le dérivé brome de départ peut être obtenu par action d'un agent de bromation comme par exemple le tribromure de tétrabutylammonium ou le N- bromosuccinimide sur le dérivé correspondant de l'acide lup-20(29)- èn-28-oïque. La réaction s'effectue dans un solvant chloré comme le chlorure de méthylène, le chloroforme, ou le tétrachlorure de carbone à une température voisine de 25°C.The lupane derivatives of general formula (IV) or (VII) for which R * 1 is a hydroxymethyl radical can be prepared by the action of silver acetate on the corresponding bromine derivative for which R- | is bromomethyl and for which the hydroxy radical is previously protected. The reaction is advantageously carried out in an organic solvent such as, for example, toluene, at a temperature between 20 ° C. and the reflux temperature of the reaction mixture. The starting bromine derivative can be obtained by the action of a brominating agent such as, for example, tetrabutylammonium tribromide or N-bromosuccinimide on the corresponding derivative of lup-20 (29) - en-28-oic acid. The reaction is carried out in a chlorinated solvent such as methylene chloride, chloroform, or carbon tetrachloride at a temperature in the region of 25 ° C.
Les dérivés du lupane de formule générale (VII) pour lesquels R-* est un radical -CH20R' ou -CH2SR' peuvent être préparés à partir du dé¬ rivé du lupane pour lequel R-* est bromométhyle, par action de l'alcoolate ou du thiolate correspondant.The lupane derivatives of general formula (VII) for which R- * is a radical -CH 2 0R 'or -CH 2 SR' can be prepared from the derivative of lupane for which R- * is bromomethyl, by action the corresponding alcoholate or thiolate.
Le chlorure d'acide du dérivé du lupane de formule générale (VII) peut être préparé selon les méthodes connues. A titre d'exemple, on opère par action du chlorure d'oxalyle ou du chlorure de thionyle, dans un solvant chloré comme le chloroforme, le d chloroéthane ou le dichloromethane.The acid chloride of the lupane derivative of general formula (VII) can be prepared according to known methods. For example, the reaction is carried out by the action of oxalyl chloride or thionyl chloride, in a chlorinated solvent such as chloroform, d chloroethane or dichloromethane.
Les nouveaux dérivés du lupane de formule générale (I) peuvent être purifiés le cas échéant par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chromatographie.The new lupane derivatives of general formula (I) can be purified if necessary by physical methods such as crystallization or chromatography.
Lorsque le dérivé du lupane de formule générale (I) présente des formes stéréoisomères, la préparation s'effectue au moyen de dérivés chiraux de formule générale (Va) , (Vb) , (VI) , (Vlla) ou (Vllb) . Il est entendu que lorsque l'on veut obtenir un intermédiaire chiral, la séparation s'effectue selon les méthodes habituelles qui n'affectent pas le reste de la molécule, telles que par exemple la chromatogra- phie sur phase chirale, ou par conversion du mélange racémique en diastéréoisomères et séparation par cristallisation ou chromatogra- phie.When the lupane derivative of general formula (I) has stereoisomeric forms, the preparation is carried out by means of derivatives chirals of general formula (Va), (Vb), (VI), (Vlla) or (Vllb). It is understood that when it is desired to obtain a chiral intermediate, the separation is carried out according to the usual methods which do not affect the rest of the molecule, such as for example chromatography on the chiral phase, or by conversion of the racemic mixture of diastereoisomers and separation by crystallization or chromatography.
Les produits selon l'invention peuvent être transformés en sels mé¬ talliques avec les bases fortes selon les méthodes connues en soi. Ces sels peuvent être obtenus par action d'une base métallique dans un solvant approprié. Le sel formé précipite après concentration éventuelle de la solution ; il est séparé par filtration.The products according to the invention can be transformed into metallic salts with strong bases according to the methods known per se. These salts can be obtained by the action of a metal base in an appropriate solvent. The salt formed precipitates after optional concentration of the solution; it is separated by filtration.
Comme exemples de sels pharmaceutiquement acceptables peuvent être cités les sels avec les métaux alcalins (sodium, potassium, lithium) .Examples of pharmaceutically acceptable salts which may be mentioned are the salts with alkali metals (sodium, potassium, lithium).
Les nouveaux dérivés du lupane selon la présente invention sont particulièrement utiles pour la prophylaxie et le traitement du SIDA (syndrome d'immunodéficience ac-quise) et de syndromes associés [ARC (AIDS related complex) ] . Par prophylaxie nous sous-entendons le traitement des sujets qui ont été exposés aux virus HIVs, en particu- lier les séropositifs asymptomatiques qui présentent le risque de développer la maladie dans des mois ou les années à venir après la primoinfection.The new lupane derivatives according to the present invention are particularly useful for the prophylaxis and treatment of AIDS (acquired immunodeficiency syndrome) and associated syndromes [ARC (AIDS related complex)]. By prophylaxis we mean the treatment of subjects who have been exposed to HIV viruses, in particular asymptomatic seropositive people who are at risk of developing the disease in the months or years to come after primary infection.
Les produits selon l'invention, qui sont inhibiteurs de l'effet cytopathogène du HIV et inhibiteurs de la production de transcriptase inverse en culture cellulaire à des concentrations dépourvues d'effet cytotoxique ou cytostatique, sont particulièrement intéressants.The products according to the invention, which are inhibitors of the cytopathogenic effect of HIV and inhibitors of the production of reverse transcriptase in cell culture at concentrations devoid of cytotoxic or cytostatic effect, are of particular interest.
Il a été également démontré que les produits selon l'invention sont actifs pour le traitement des affections dans lesquelles interviennent des virus de la famille des herpès.It has also been demonstrated that the products according to the invention are active for the treatment of conditions in which viruses of the herpes family are involved.
La famille des herpès est en effet à l'origine de nombreuses affections dont certaines peuvent être très graves. Elle comprend l'Herpès simplex, le varicella-zoster, le cytomégalovirus et le virus d'Epstein-Barr. L'Herpès simplex peut varier de formes bénignes comme l'herpès labial aux formes plus sérieuses comme l'herpès génital et peut même être responsable d'encéphalites mettant la vie du patient en danger. Le varicella zoster est le virus responsable de la varicelle et du zona, il peut également être à l'origine d'affections plus graves parmi lesquelles des encéphalites. Les infections à cytomégalovirus sont en général asymptomatiques chez les sujets sains, mais peuvent devenir la cause d'infections ophtalmiques graves (retinites) pouvant conduire à la cécité, de morbidité et de mortalité chez des sujets immunodeprimes (malades atteints du SIDA ou de toute autre immunodéficience, par exemple après transplantation d'organes ou après chimiothérapie anticancéreuse) . Le cytomégalovirus est également responsable de manifestations cliniques sévères pour le foetus ou le nouveau-né dans le cas d'une primo-infection pendant la grossesse ou lors de la transfusion de sang séropositif à un nouveau- né séronégatif.The herpes family is indeed the cause of many ailments, some of which can be very serious. It includes Herpes simplex, varicella-zoster, cytomegalovirus and Epstein-Barr virus. Herpes simplex can vary from mild forms like cold sores with more serious forms such as genital herpes and can even be responsible for life-threatening encephalitis. Varicella zoster is the virus responsible for chickenpox and shingles, it can also cause more serious conditions including encephalitis. Cytomegalovirus infections are generally asymptomatic in healthy subjects, but can become the cause of serious ophthalmic infections (retinitis) which can lead to blindness, morbidity and mortality in immunodeficient subjects (patients with AIDS or any other immunodeficiency, for example after organ transplantation or after cancer chemotherapy). Cytomegalovirus is also responsible for severe clinical manifestations for the fetus or newborn in the case of a primary infection during pregnancy or during the transfusion of seropositive blood into an HIV-negative newborn.
Les activités ont été mises en évidence dans les tests suivants :The activities were highlighted in the following tests:
Activité vis-à-vis de l'effet cytopathogène du virus HIVActivity vis-à-vis the cytopathogenic effect of the HIV virus
Les produits en poudre ont été mis en solution à raison de 2 mg de produit par 2 ml (environ 4 x 10 M) dans du diméthylformamide (DMF) pour obtenir une solution stock de produit à 100 % de DMF. Le test est réalisé sur la lignée lymphoblastoïde CEM 4. Dans une microplaque de 96 puits on dépose 25 μl/puits d'une solution de produit à tester dans du tampon phosphate isotonique (TPI) ou de TPI seul dans le cas des contrôles. Les produits sont étudiés à 8 concentrations, à raison de 6 puits par concentration. On ajoute alors 125 μl d'une suspensionThe powdered products were dissolved in a proportion of 2 mg of product per 2 ml (approximately 4 × 10 M) in dimethylformamide (DMF) to obtain a stock solution of product with 100% DMF. The test is carried out on the CEM 4 lymphoblastoid line. In a 96-well microplate, 25 μl / well of a solution of product to be tested is deposited in isotonic phosphate buffer (TPI) or TPI alone in the case of the controls. The products are studied at 8 concentrations, at the rate of 6 wells per concentration. 125 μl of a suspension are then added
4 de cellules CEM (8 x 10 cellules par ml) dans le milieu RPMI contenant 10 % de sérum de veau foetal, 100 Ul/ml de pénicilline, 100 μg/ml de streptomycine et 2 μmoles/ml de glutamine et les microplaques sont incubées une heure à 37°C, sous une atmosphère contenant 5 % de gaz carbonique. Pour chaque concentration, l'essai est partagé en deux parties : une partie (3 puits) sur cellules infectées, pour la détermination de l'activité antivirale et l'autre partie (3 puits) sur cellules non infectées, pour déterminer la cytotoxicité des produits. On infecte alors la première série avec HIV-1 (100 μl par puits d'une suspension de virus LAV-1-BRU contenant 200-300 TCID50) tandis que l'autre série reçoit 100 μl de milieu RPMI tel que défini précédemment. Au bout de 5 jours d'incubation, 100 μl de cellules sont prélevés pour mesurer la viabilité cellulaire [déterminée selon une modification de la technique décrite par R. Pauwels et coll., J. Virol. Meth., Û, 309-321 (1988)]. On ajoute à ce prélèvement 10 μl d'une solution contenant 7 mg de MTT [bromure de 3-(4,5-diméthyl 2-thiazolyl)-2,5-diphényltétrazolium] par ml de tampon phosphate isotonique. Après 3 heures d'incubation à 37°C le surnageant est enlevé. Le MTT est converti en un sel de formazan (bleu) uniquement à l'intérieur des cellules vivantes. On ajoute alors 100 μl d'isopropanol (contenant 0,04 mole/1 d'acide chlorhydrique) et les microplaques sont agitées jusqu'à la solubilisation du bleu de formazan. L'absorbance à 540 nm est lue avec un lecteur automatique de réactions ELISA en microplaques. Cette absorbance est proportionnelle à la quantité de cellules vivantes.4 CEM cells (8 x 10 cells per ml) in RPMI medium containing 10% fetal calf serum, 100 IU / ml of penicillin, 100 μg / ml of streptomycin and 2 μmoles / ml of glutamine and the microplates are incubated one hour at 37 ° C, under an atmosphere containing 5% carbon dioxide. For each concentration, the test is divided into two parts: one part (3 wells) on infected cells, for determining the antiviral activity and the other part (3 wells) on non-infected cells, to determine the cytotoxicity of the products. The first series is then infected with HIV-1 (100 μl per well of a suspension of LAV-1-BRU virus containing 200-300 TCID50) while the other series receives 100 μl of RPMI medium as defined above. After 5 days of incubation, 100 μl of cells are removed to measure cell viability [determined according to a modification of the technique described by R. Pauwels et al., J. Virol. Meth., Û, 309-321 (1988)]. 10 μl of a solution containing 7 mg of MTT [3- (4,5-dimethyl 2-thiazolyl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide] per ml of isotonic phosphate buffer are added to this sample. After 3 hours of incubation at 37 ° C the supernatant is removed. MTT is converted to a formazan salt (blue) only inside living cells. 100 μl of isopropanol (containing 0.04 mol / 1 of hydrochloric acid) are then added and the microplates are agitated until the formazan blue is dissolved. The absorbance at 540 nm is read with an automatic microplate ELISA reaction reader. This absorbance is proportional to the quantity of living cells.
Le taux de protection (en %) d'un produit donné est déterminé à par¬ tir des densités optiques (DO) par la formule :The protection rate (in%) of a given product is determined from the optical densities (OD) by the formula:
D0(cell. traitées et inf.) -D0(cell. non traitées et inf.) D0(cell. traitées et non inf.) -DO(cell. non traitées et inf.)D0 (treated and inf. Cells) -D0 (untreated and inf. Cells) D0 (treated and non-inf. Cells) -DO (untreated and inf. Cells)
Le cas échéant la concentration inhibitrice 50 % est déterminée.If necessary, the inhibitory concentration 50% is determined.
Les résultats démontrent que pour des concentrations de produit testé comprises entre 0,01 et 10 μg/ml, on obtient une diminution signifi¬ cative de l'effet cytopathogène.The results demonstrate that for concentrations of tested product of between 0.01 and 10 μg / ml, a significant reduction in the cytopathogenic effect is obtained.
Le taux de protection procuré par les produits selon l'invention est compris entre 20 et 100 %.The protection rate provided by the products according to the invention is between 20 and 100%.
La concentration inhibitrice 50 % des produits selon l'invention est comprise entre 0,05 et 50 μg/ml lorsqu'elle peut être déterminée.The 50% inhibitory concentration of the products according to the invention is between 0.05 and 50 μg / ml when it can be determined.
Détermination de la multiplication virale par dosage de la transcrip¬ tase inverse du virus HIVDetermination of viral multiplication by assaying the reverse transcript of the HIV virus
L'activité de la transcriptase inverse est mesurée dans 10 μl de surnageant de culture. A l'aide du kit de dosage poly r(A) reverse transcriptase [3H]-SPA enzyme assay (RPQN 0100, Amersham, GB) selon la procédure préconisée par le fabricant. Le temps de réaction est de 6 heures et la radioactivité comptée à l'aide d'un compteur microbeta [TOPCOUNT®PACKARD] .The reverse transcriptase activity is measured in 10 μl of culture supernatant. Using the poly r (A) reverse transcriptase [ 3 H] -SPA enzyme assay assay kit (RPQN 0100, Amersham, GB) according to the procedure recommended by the manufacturer. The reaction time is 6 hours and the radioactivity counted using a microbeta counter [TOPCOUNT®PACKARD].
On observe des inhibitions de la production de transcriptase inverse associée au virus, comprises entre 20 et 100 % aux concentrations testées (0,01 à 10 μg/ml).Inhibitions of the production of reverse transcriptase associated with the virus are observed, between 20 and 100% at the concentrations tested (0.01 to 10 μg / ml).
Action sur les virus de la famille des herpès :Action on viruses of the herpes family:
L'action des dérivés de formule générale (I) sur les virus de la famille des herpès a été mise en évidence dans la technique décrite par NEYTS et coll., Virology, 122., 41-50 (1990).The action of derivatives of general formula (I) on viruses of the herpes family has been demonstrated in the technique described by NEYTS et al., Virology, 122., 41-50 (1990).
La technique employée consiste dans la mesure de l'effet cytopathogène du virus et de sa protection par utilisation des produits de formule générale (I). L'activité antivirale est appréciée par la mesure de la CE50 (concentration nécessaire pour inhiber 50 % de l'effet cytopathogène induit par le virus).The technique used consists in measuring the cytopathogenic effect of the virus and its protection by using products of general formula (I). The antiviral activity is assessed by measuring the EC50 (concentration necessary to inhibit 50% of the cytopathic effect induced by the virus).
Les résultats obtenus dans cette technique sont donnés ci-après :The results obtained in this technique are given below:
L'activité sur cytomégalovirus a été étudiée sur les souches Davis et DER 648 (souche résistante au Ganciclovir) :The activity on cytomegalovirus was studied on the Davis and DER 648 strains (strain resistant to Ganciclovir):
Souche DavisDavis strain
N° de l'exemple DER 648Example number DER 648
CE50 (μg/ml) CE50 (μg/ml)EC 50 (μg / ml) EC 50 (μg / ml)
1 0,86 0,571 0.86 0.57
5 0,8 0,765 0.8 0.76
13 sup. 2 sup.0,513 sup. 2 extra 0.5
14 sup. 2 214 sup. 2 2
Tableau ITable I
L'activité sur varicella zoster a été étudiée sur la souche résistante thymidine-kinase négative (TK~) YS/R : N° de l'exemple Souche YS/RThe activity on varicella zoster was studied on the resistant thymidine kinase negative (TK ~ ) YS / R strain: N ° of the example YS / R strain
CE50 (μg/ml)EC 50 (μg / ml)
1 sup. 21 sup. 2
13 sup. 213 sup. 2
14 414 4
Tableau IITable II
Les exemples suivants donnés à titre non limitatif illustrent la pré¬ sente invention.The following examples, given without implied limitation, illustrate the present invention.
Exemple 1Example 1
A une solution de 0,5 g d'acide N-(3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-8-To a solution of 0.5 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- acid
3 aminooctanoïque dans 90 cm de dichloromethane, on ajoute 125 mg de chlorhydrate de 5-aminométhyl-tétrazole, 141 mg d'hydrate de3 aminooctanoic acid in 90 cm of dichloromethane, 125 mg of 5-aminomethyl-tetrazole hydrochloride, 141 mg of hydrate are added.
1-hydroxybenzotriazole, 380 mg de chlorhydrate de 1-(3-diméthylamino-1-hydroxybenzotriazole, 380 mg of 1- (3-dimethylamino-) hydrochloride
3 propyl) -3-éthylcarbodiimide et 0,48 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant 24 heures à 20°C puis le mélange réactionnel est lavé 5 fois avec 100 cm d'eau distillée. La phase organique est en¬ suite séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (600 mg) est chromatographié sur une colonne de silice (0,02- 0,045 mm) éluée d'abord avec 2 litres d'un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle (30-70 en volumes), puis avec 2 litres d'un mé¬ lange de méthanol et d'acétate d'éthyle (30-70 en volumes) ; les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le3 propyl) -3-ethylcarbodiimide and 0.48 cm of triethylamine. The solution is stirred for 24 hours at 20 ° C. then the reaction mixture is washed 5 times with 100 cm of distilled water. The organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (600 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) first eluted with 2 liters of a mixture of cyclohexane and ethyl acetate (30-70 by volume), then with 2 liters of a mixture of methanol and ethyl acetate (30-70 by volume); the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The
3 résidu est repris avec 10 cm d'éther éthylique, filtré, lavé 2 fois avec 5 cm d'éther éthylique et séché sous pression réduite (13,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 290 mg de 5-{N'-[N- (3β-acétoxylup-20(29)-en- 28-oyl)-8-aminooctanoyl]-aminométhyl}-tétrazole sous la forme d'une poudre blanche (Rf = 0,26 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlorofor e-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) ) .3 residue is taken up with 10 cm of ethyl ether, filtered, washed twice with 5 cm of ethyl ether and dried under reduced pressure (13.5 Pa) at 20 ° C. 290 mg of 5- {N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en- 28-oyl) -8-aminooctanoyl] -aminomethyl} -tetrazole in the form of a white powder (Rf = 0.26; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chlorofor e-methanol-ammonia at 20% (12- 3-0.5 by volume)).
Une solution de 1,07 g de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-A 1.07 g solution of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -
8-aminooctanoyl]-aminométhyl}-tétrazole obtenu comme décrit ci-des-8-aminooctanoyl] -aminomethyl} -tetrazole obtained as described above
3 3 3 sus, 5,7 cm de soude 5N, 18,4 cm de tétrahydrofurane et 36,9 cm de methanol est agitée 20 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est refroidi à 5°C, puis acidifié avec de l'acide chlorhy- drique 5N, et dilué avec 100 cm d'eau distillée. Après 1 heure sous agitation à 5°C, le solide obtenu est séparé par filtration, lavé 53 3 3 sus, 5.7 cm of 5N sodium hydroxide, 18.4 cm of tetrahydrofuran and 36.9 cm of methanol is stirred for 20 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is cooled to 5 ° C., then acidified with 5N hydrochloric acid, and diluted with 100 cm of distilled water. After 1 hour with stirring at 5 ° C, the solid obtained is separated by filtration, washed 5
3 fois avec 25 cm d'eau distillée et séché sous pression réduite3 times with 25 cm of distilled water and dried under reduced pressure
(15,5 Pa) à une température voisine de 20°C. On obtient ainsi 880 mg de 5-{N' - [N- (3β-hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-amino- methyl}-tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers(15.5 Pa) at a temperature in the region of 20 ° C. 880 mg of 5- {N '- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -amino-methyl} -tetrazole are thus obtained, in the form of a solid white melting towards
154°C.154 ° C.
L'acide N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoïque peut être préparé de la manière suivante :N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoic acid can be prepared in the following manner:
Après avoir chauffé au reflux pendant 3 heures un mélange de 330 mg d'acide 8-ammooctanoïque et 410 mg de chlorotriméthylsilane dansAfter heating at reflux for 3 hours, a mixture of 330 mg of 8-ammooctanoic acid and 410 mg of chlorotrimethylsilane in
3 50 cm de dichloromethane, la solution est refroidie vers 20°C et on ajoute 1 g de chlorure de 3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyle (préparé à3 50 cm of dichloromethane, the solution is cooled to around 20 ° C. and 1 g of 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride (prepared at
3 partir d'acide 3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oïque) puis 0,81 cm de triethylamine. L'agitation est maintenue pendant 15 heures à une tem- pérature voisine de 20°C et le solvant est évaporé à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. Le résidu est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle (60-40 en vo¬ lumes) . Les fractions contenant le produit sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 1,1 g d'acide N-(3β-acétoxylup- 20 (29)-èn-28-oyl) -8-aminooctanoïque sous la forme d'un meringue blanche (Rf = 0,4 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane, acétate d'éthyle (60-40 en volumes)). Le chlorhydrate de 5-aminométhyl-tétrazole peut être préparé selon la méthode décrite dans la demande de brevet DE 3 626 130.3 from 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oic acid) then 0.81 cm of triethylamine. Stirring is continued for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C and the solvent is evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. The residue is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of cyclohexane and ethyl acetate (60-40 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 1.1 g of N- (3β-acetoxylup- 20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoic acid are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.4; layer chromatography thin silica; eluent: cyclohexane, ethyl acetate (60-40 by volume)). 5-aminomethyl-tetrazole hydrochloride can be prepared according to the method described in patent application DE 3,626,130.
Exemple 2Example 2
A une solution de 640 mg d'acide N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-To a solution of 640 mg of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) acid -
3 8-aminooctanoïque dans 50 cm de chloroforme, on ajoute 134 mg de3 8-aminooctanoic in 50 cm of chloroform, 134 mg of
5-amino-1H-tétrazole, 168 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole,5-amino-1H-tetrazole, 168 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate,
50 cm de diméthylformamide, 692 mg de chlorhydrate de 1-(3-diméthy- laminopropyl) -3-éthylcarbodiimide, et 0,70 cm de triethylamine en50 cm of dimethylformamide, 692 mg of 1- (3-dimethyl-laminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride, and 0.70 cm of triethylamine as
3 solution dans 5 cm de chloroforme. La solution est agitée pendant 2 jours à 20°C puis le mélange réactionnel est lavé 3 fois avec 50 cm d'acide chlorhydrique 1N, puis 5 fois avec 100 cm d'eau distillée.3 solution in 5 cm of chloroform. The solution is stirred for 2 days at 20 ° C. then the reaction mixture is washed 3 times with 50 cm of 1N hydrochloric acid, then 5 times with 100 cm of distilled water.
La phase organique est séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine deThe organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to
40°C. Le résidu obtenu (730 mg) est chromatographie sur une colonne40 ° C. The residue obtained (730 mg) is chromatographed on a column
3 de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec 800 cm d'acétate d'éthyle puis3 of silica (0.02-0.045 mm) eluted with 800 cm of ethyl acetate then
3 avec 800 cm d'un mélange de dichloromethane et de methanol (95-5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concen¬ trées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris dans 15 cm d'oxyde d'isopropyle, filtré, séché sous pression réduite (13,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 265 mg de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-amino}- tétrazole sous la forme d'une poudre beige (Rf = 0,40 ; chromatogra¬ phie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammo- niaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 with 800 cm of a mixture of dichloromethane and methanol (95-5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 15 cm of isopropyl ether, filtered, dried under reduced pressure (13.5 Pa) at 20 ° C. 265 mg of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -amino} - tetrazole is thus obtained in the form of a beige powder ( Rf = 0.40; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 260 mg de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-260 mg solution of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -
8-aminooctanoyl] -amino}-tétrazole, 0,92 cm-3 d'hydroxyde de li-8-aminooctanoyl] -amino} -tetrazole, 0.92 cm- 3 of hydroxide
-, 3 thium 1N, 2,5 cm-3 de tétrahydrofurane et 5 cm de methanol est agitée-, 3 thium 1N, 2.5 cm- 3 of tetrahydrofuran and 5 cm of methanol is stirred
20 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié20 hours at a temperature close to 20 ° C. The mixture is acidified
3 avec de l'acide chlorhydrique 1N, et dilué avec 80 cm d'eau distil- lée. On extrait ensuite le mélange par 100 cm d'acétate d'éthyle puis 2 fois par 25 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées, lavées 4 fois par 40 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 45°C. Le résidu obtenu (170 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02- 0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 5 cm d'oxyde d'isopropyle, filtré, lavé 2 fois par 1 cm d'oxyde d'isopropyle et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 80 mg de 5-{N'-[N-(3β-hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8- aminooctanoyl]-amino}-tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 165-170"C.3 with 1N hydrochloric acid, and diluted with 80 cm of distilled water. The mixture is then extracted with 100 cm of ethyl acetate and then twice with 25 cm of ethyl acetate. The organic phases are combined, washed 4 times with 40 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 45 ° C. The residue obtained (170 mg) is chromatographed on a silica column (0.02- 0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 5 cm of isopropyl ether, filtered, washed twice with 1 cm of isopropyl ether and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 80 mg of 5- {N '- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl] -amino} -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid melting around 165-170 "C.
Exemple 3Example 3
A une solution de 100 mg d'acide N- (3β,30-diacétoxylup-20 (29)-èn-28-To a solution of 100 mg of N- (3β, 30-diacetoxylup-20 (29) -en-28- acid
3 oyl) -8-aminooctanoïgue dans 50 cm de dichloromethane, on ajoute3 oyl) -8-aminooctanoïgue in 50 cm of dichloromethane, we add
22 mg de chlorhydrate de 5-aminométhyl-tétrazole, 25 mg d'hydrate de22 mg 5-aminomethyl-tetrazole hydrochloride, 25 mg hydrate
1-hydroxybenzotriazole, 70 mg de chlorhydrate de 1- (3-diméthylamino-1-hydroxybenzotriazole, 70 mg of 1- (3-dimethylamino-) hydrochloride
3 propyl) -3-éthylcarbodiimide et 0,09 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant 24 heures à 20°C puis le mélange réactionnel est lavé successivement 3 fois avec 50 cm d'eau distillée, 2 fois avec3 propyl) -3-ethylcarbodiimide and 0.09 cm of triethylamine. The solution is stirred for 24 hours at 20 ° C. then the reaction mixture is washed successively 3 times with 50 cm of distilled water, 2 times with
25 cm d'acide chlorhydrique 1N, puis 3 fois avec 50 cm d'eau distillée . La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (110 mg) est chromato¬ graphie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mé¬ lange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en vo¬ lumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concen- trées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 65 mg de 5-{N'-[N-(3β,30-diacétoxylup-20(29) - èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -aminométhyl}-tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) ) .25 cm of 1N hydrochloric acid, then 3 times with 50 cm of distilled water. The organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (110 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by vo¬ lumes). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 65 mg of 5- {N '- [N- (3β, 30-diacetoxylup-20 (29) - en-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -aminomethyl} -tetrazole are thus obtained in the form of a meringue. white (Rf = 0.40; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 160 mg de 5-{N'-[N-(3β,30-diacétoxylup-20 (29) -èn-28- oyl)-8-aminooctanoyl] -aminométhyl}-tétrazole, 1,3 cm de soude 5N,A 160 mg solution of 5- {N '- [N- (3β, 30-diacetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -8-aminooctanoyl] -aminomethyl} -tetrazole, 1.3 cm soda 5N,
3 33 3
6 cm de tétrahydrofurane et 3 cm de methanol est agitée 20 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est refroidi à 5°C, puis acidifié avec de l'acide chlorhydrique 5N, et dilué avec 30 cm d'eau 3 distillée. Après 1 heure sous agitation à 5°C, on ajoute 150 cm d'eau distillée et le mélange est extrait 5 fois par 50 cm d'un mé¬ lange de dichloromethane et de methanol (9-1 en volumes) . Les phases organiques sont rassemblées, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (140 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045mm) éluée avec un mélange de chloro¬ forme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes). Les frac¬ tions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est6 cm of tetrahydrofuran and 3 cm of methanol are stirred for 20 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is cooled to 5 ° C, then acidified with 5N hydrochloric acid, and diluted with 30 cm of water 3 distilled. After 1 hour with stirring at 5 ° C., 150 cm of distilled water are added and the mixture is extracted 5 times with 50 cm from a mixture of dichloromethane and methanol (9-1 by volume). The organic phases are combined, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (140 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is
3 repris par 2 cm d'acétonitrile, filtré et séché sous pression ré¬ duite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 48 mg de 5-{N'- [N-(3β,30-di- hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl] -aminométhyl}-tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 145-150°C.3 taken up in 2 cm of acetonitrile, filtered and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 48 mg of 5- {N'- [N- (3β, 30-di-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -aminomethyl} -tetrazole are thus obtained, in the form of '' a white solid melting around 145-150 ° C.
L'acide N- (3β,30-diacétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoïque est synthétisé par analogie avec l'acide N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl)-8-aminooctanoïque à partir de chlorure de 3β,30-diacétoxylup- 20(29)-ën-28-oyle et de 8-aminooctanoate de méthyle (R = 95 %; Rf = 0,34 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclo- hexane-acétate d'éthyle (50-50 en volumes)).N- (3β, 30-diacetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoic acid is synthesized by analogy with N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28 acid - oyl) -8-aminooctanoic from 3β, 30-diacetoxylup- 20 (29) -ën-28-oyl chloride and methyl 8-aminooctanoate (R = 95%; Rf = 0.34; layer chromatography thin silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (50-50 by volume)).
Le chlorure de 3β,30-diacétoxylup-20(29)*-èn-28-oyle est préparé de la manière suivante :3β, 30-diacetoxylup-20 (29) * - en-28-oyl chloride is prepared in the following manner:
A une solution de 560 mg d'acide 3β,30-diacétoxylup-20(29)-èn-28-To a solution of 560 mg of 3β acid, 30-diacetoxylup-20 (29) -èn-28-
3 3 oïque dans 25 cm de dichloromethane, on ajoute 0,22 cm de chlorure d'oxalyle. Après 15 heures d'agitation à une température voisine de3 3 oic in 25 cm of dichloromethane, 0.22 cm of oxalyl chloride is added. After 15 hours of stirring at a temperature close to
20°C, le solvant est évaporé sous pression réduite (22 kPa) et à une température voisine de 40°C. On obtient 600 mg d'une meringue blanche qui est utilisée sans autre purification.20 ° C, the solvent is evaporated under reduced pressure (22 kPa) and at a temperature in the region of 40 ° C. 600 mg of a white meringue are obtained which is used without further purification.
L'acide 3β, 30-diacétoxylup-20 (29) -èn-28-oïque est obtenu de la ma- nière suivante :The 3β, 30-diacetoxylup-20 (29) -en-28-oic acid is obtained in the following manner:
Une suspension de 1,8 g d'acide 3β-acétoxy-30-bromolup-20(29)-èn-28-A suspension of 1.8 g of 3β-acetoxy-30-bromolup-20 (29) -èn-28-
3 oïque et 800 mg d'acétate d'argent dans 50 cm de toluène est acicée3 oic and 800 mg of silver acetate in 50 cm of toluene is acicée
48 heures à une température voisine de 20°C puis filtrée. La solution obtenue est ensuite concentrée à sec sous pression réduite (2 kPa) . Le résidu est mis en solution dans 50 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase organique est décantée et lavée par 60 cm au total d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium anhydre, puis concen¬ trée sous pression réduite (2,7 kPa) à une température vosine de 40°C. Le solide blanc obtenu (1,7 g) est chromatographie sur une co¬ lonne de 1,7 cm de diamètre et contenant 35 g de silice (0,02-48 hours at a temperature close to 20 ° C then filtered. The solution obtained is then concentrated to dryness under reduced pressure (2 kPa). The residue is dissolved in 50 cm3 of ethyl acetate. The organic phase is decanted and washed with a total of 60 cm of distilled water, dried over anhydrous magnesium sulfate, then concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at an Vosine temperature of 40 ° C. The white solid obtained (1.7 g) is chromatographed on a column 1.7 cm in diameter and containing 35 g of silica (0.02-
0,045 mm) éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle0.045 mm) eluted with a mixture of cyclohexane and ethyl acetate
3 80-20 (en volumes), en recueillant des fractions de 15 cm . Les 4 premières fractions obtenues sont éliminées, les 10 suivantes sont concentrées à sec sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,1 g d'acide 3β,30-dιacétoxylup-3 80-20 (by volume), collecting 15 cm fractions. The first 4 fractions obtained are eliminated, the following 10 are concentrated to dryness under reduced pressure (13.5 Pa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.1 g of 3β, 30-dιacétoxylup- acid are thus obtained.
20 (29)-èn-28-oιque sous forme d'une meringue blanche suffisamment pure pour les transformations ultérieures.20 (29) -èn-28-oιque in the form of a white meringue sufficiently pure for subsequent processing.
L'acide 3β-acétoxy-30-bromolup-20 (29) -èn-28-oïque est obtenu de la manière suivante :The 3β-acetoxy-30-bromolup-20 (29) -en-28-oic acid is obtained in the following manner:
Une solution de 2,5 g d'acide 3β-acétoxy-lup-20 (29) -èn-28-oïque et 2,41 g de tribromure de tétrabutylammonium dans 50 cm de chloroforme est agitée 5 ours à une température voisine de 25°C. Le mélange ré- actionnel est lavé successivement 2 fois par 25 cm d'eau distillée,A solution of 2.5 g of 3β-acetoxy-lup-20 (29) -en-28-oic acid and 2.41 g of tetrabutylammonium tribromide in 50 cm of chloroform is stirred 5 bears at a temperature in the region of 25 ° C. The reaction mixture is washed successively 2 times with 25 cm of distilled water,
3 2 fois par 25 cm d'une solution de thiosulfate de sodium 0,1N et par3 2 times with 25 cm of a 0.1N sodium thiosulfate solution and with
2 fois 25 cm d'eau distillée puis séché sur du sulfate de magnésium anhydre. La phase organique est concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) et à une température voisine de 40°C. On obtient un solide pâteux }aune (4 g) qui est chromatographie sur une colonne de 3,2 cm de diamètre contenant 100 g de silice (0,02-0,045 mm) et éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle 85-15 (en volumes) en recueillant des fractions de 20 cm . Les 5 premières fractions obtenues sont éliminées, les 10 suivantes sont évaporées sous pression réduite (13,5 Pa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 2,7 g d'acide 3β-acétoxy-30-bromolup-20 (29)-èn-28-oïque sous forme d'un solide blanc fondant à une température voisine de 190°C.2 times 25 cm of distilled water and then dried over anhydrous magnesium sulfate. The organic phase is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) and at a temperature in the region of 40 ° C. A solid pasty solid is obtained (4 g) which is chromatographed on a column 3.2 cm in diameter containing 100 g of silica (0.02-0.045 mm) and eluted with a mixture of cyclohexane and acetate. ethyl 85-15 (by volume), collecting 20 cm fractions. The first 5 fractions obtained are eliminated, the following 10 are evaporated under reduced pressure (13.5 Pa) at a temperature in the region of 40 ° C. 2.7 g of 3β-acetoxy-30-bromolup-20 (29) -en-28-oic acid are thus obtained in the form of a white solid melting at a temperature in the region of 190 ° C.
L'acide 3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oïque peut être préparé selon BRUCKNER, KOVACS et KOCZKA, J. Chem. Soc, 948 (1948). Exemple 43β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oic acid can be prepared according to BRUCKNER, KOVACS and KOCZKA, J. Chem. Soc, 948 (1948). Example 4
A une solution de 400 mg d'acide N- [3β-acétoxylup-30- (2'-acétoxyé- thylthio) -20 (29) -èn-28-oyl]-8-amιnooctanoïque, 90 mg de chlorhydrate de 5-amιnométhyltétrazole, 100 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotria- zole, 250 mg de chlorhydrate de 1- (3-dιméthylammopropyl)-3-éthyl-To a solution of 400 mg of N- [3β-acetoxylup-30- (2'-acetoxyethylthio) -20 (29) -en-28-oyl] -8-aminoquinanoic acid, 90 mg of 5- hydrochloride amnomethyltetrazole, 100 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate, 250 mg of 1- (3-dimethylammopropyl) -3-ethyl- hydrochloride
3 carbodiimide dans 100 cm de dichloromethane, est ajouté en environ3 carbodiimide in 100 cm of dichloromethane, is added in approximately
10 minutes, 0,32 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant10 minutes, 0.32 cm of triethylamine. The solution is stirred for
15 heures à une température voisine de 20°C, additionnée de 50 cm d'eau distillée puis acidifiée à pH voisin de 1 par 15 cm d'une so- lution aqueuse d'acide chlorhydrique N. La phase organique est décan¬ tée, la phase aqueuse est extraite par 3 fois 50 cm de dichlorome¬ thane. Les phases organiques réunies sont ensuite séchées sur du sul¬ fate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (400 mg) est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichloromethane et de methanol (90-10 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrés sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 300 mg de 5-{N' -[N-(3β-acétoxylup-30-(2'-acétoxyéthylthio)- 20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl]amιnométhyl}-tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).15 hours at a temperature in the region of 20 ° C, supplemented with 50 cm of distilled water and then acidified to a pH in the region of 1 by 15 cm of an aqueous solution of hydrochloric acid N. The organic phase is decanted, the aqueous phase is extracted with 3 times 50 cm of dichlorome¬ thane. The combined organic phases are then dried over magnesium sul¬ fate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (400 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichloromethane and methanol (90-10 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 300 mg of 5- {N '- [N- (3β-acetoxylup-30- (2'-acetoxyethylthio) - 20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl] amnomethyl} -tetrazole are thus obtained. the form of a white meringue (Rf = 0.40; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 300 mg de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-30- (2 '-acétoxyé- thylthio)-20(29)-èn-28-oyl)-8-amιnooctanoyl]amιnométhyl}-tétrazole,A 300 mg solution of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-30- (2 '-acetoxyethylthio) -20 (29) -en-28-oyl) -8-amιnooctanoyl] amιnomethyl} - tetrazole,
2,2 cm 3 de soude N, 10 cm3 de tétrahydrofurane et 20 cm3 de methanol est agitée 48 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié à pH 1 par addition de 4 cm d'une solution aqueuse2.2 cm 3 of N sodium hydroxide, 10 cm3 of tetrahydrofuran and 20 cm3 of methanol is stirred for 48 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is acidified to pH 1 by addition of 4 cm of an aqueous solution
3 d'acide chlorhydrique 4N puis diluée par 70 cm d'eau distillée. Après 2 heures sous agitation à une température voisine de 20°C, le solide est filtré et lavé 5 fois par 10 cm d'eau distillée. Le so¬ lide est dissout dans 20 cm d'éthanol. La solution est filtrée et le filtrat est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (300 mg) est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chlo¬ roforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les frac- tions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le solide obtenu3 of 4N hydrochloric acid then diluted with 70 cm of distilled water. After 2 hours with stirring at a temperature in the region of 20 ° C, the solid is filtered and washed 5 times with 10 cm of distilled water. The solid is dissolved in 20 cm of ethanol. The solution is filtered and the filtrate is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (300 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The frac- tions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The solid obtained
3 (150 mg) est traité par 5 cm d'oxyde d'isopropyle, le solide est filtré, lavé 2 fois avec 1 cm d'oxyde d'isopropyle puis séché sur hydroxyde de potassium. On obtient ainsi 100 mg de 5-{N'- [N- (3β- hydroxylup-30- (2'-hydroxyéthylthio) -20(29)-èn-28-oyl) -8-ammoocta- noyl]-ammométhyl}-tétrazole sous la forme d'un solide blanc fondant vers 140°C.3 (150 mg) is treated with 5 cm of isopropyl ether, the solid is filtered, washed twice with 1 cm of isopropyl ether and then dried over potassium hydroxide. 100 mg of 5- {N'- [N- (3β-hydroxylup-30- (2'-hydroxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammoocta- noyl] -ammomethyl} are thus obtained. -tetrazole in the form of a white solid melting at around 140 ° C.
L'acide N- [3β-acétoxylup-30- (2'-acétoxyéthylthio) -20 (29) -èn-28-oyl]- 8-ammooctanoιque peut être obtenu de la manière suivante :N- [3β-acetoxylup-30- (2'-acetoxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] - 8-ammooctanoιque acid can be obtained in the following manner:
A une solution de 500 mg d'acide N- [3β-acétoxylup-30- (2'-hydroxyé¬ thylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoιque et 600 mg d'acétate deTo a solution of 500 mg of N- [3β-acetoxylup-30- (2'-hydroxyé¬ thylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoic acid and 600 mg of acetate
3 sodium dans 35 cm d'anhydride acétique est porté à une température proche du reflux durant environ 3 heures. Le mélange réactionnel est refroidi à 20°C puis concentré sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est traité par un mélange de3 sodium in 35 cm of acetic anhydride is brought to a temperature close to reflux for approximately 3 hours. The reaction mixture is cooled to 20 ° C and then concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is treated with a mixture of
3 33 3
15 cm de pyridme et 15 cm d'eau et agité durant 12 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de15 cm of pyridme and 15 cm of water and stirred for 12 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of
3 3 50°C. Le résidu est traité par 50 cm d'eau distillée et 10 cm d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N. La phase organique est3 3 50 ° C. The residue is treated with 50 cm of distilled water and 10 cm of an aqueous solution of hydrochloric acid N. The organic phase is
3 décantée, la phase aqueuse est extraite par 3 fois 40 cm de dichloromethane. Les phases organiques réunies sont lavées 3 fois3 decanted, the aqueous phase is extracted with 3 times 40 cm of dichloromethane. The combined organic phases are washed 3 times
3 avec 20 cm d'eau distillée, séchées sur sulfate de magnésium puis évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. Le résidu obtenu (500 mg) est recristallisé dans 5 cm d'un mélange éthanol-eau (75-25 en volumes) . Le solide obtenu est3 with 20 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. The residue obtained (500 mg) is recrystallized from 5 cm from an ethanol-water mixture (75-25 by volume). The solid obtained is
3 filtré, puis lavé 2 fois par 1 cm d'un mélange éthanol-eau (75-25 en volumes) et séché sous pression réduite (13,5 Pa) sur pentoxyde de phosphore. On obtient ainsi 400 mg d'acide N-[3β-acétoxylup-30-(2'- acétoxyéthylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] -8-amιnooctanoïque sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) . L ' acide N- [3β-acétoxylup-30- (2 ' -hydroxyéthylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] 8-ammooctanoïque peut être obtenu de la manière suivante :3 filtered, then washed twice with 1 cm of an ethanol-water mixture (75-25 by volume) and dried under reduced pressure (13.5 Pa) on phosphorus pentoxide. 400 mg of N- [3β-acetoxylup-30- (2'- acetoxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] -8-amino-octanoic acid are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.25; thin layer chromatography on silica; eluent: 20% chloroform-methanol-ammonia (24-6-1 by volume)). N- [3β-acetoxylup-30- (2 '-hydroxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] 8-ammooctanoic acid can be obtained in the following manner:
A une solution de 1 , 3 g d' acide N- [3β-acétoxylup-30-bromo-20 (29) -èn-To a solution of 1.3 g of N- [3β-acetoxylup-30-bromo-20 (29) -en- acid
3 28-oyl]-8-amιnooctanoïque dans 10 cm d'éthanol, on ajoute une soluî-- 3 tion de 0,60 g de 2-hydroxyéthaneth olate de sodium dans 35 cm" d'éthanol. On laisse agiter le mélange réactionnel 48 heures à une température voisine de 20°C. On ajoute goutte à goutte en 10 minutes3 28-oyl] -8-amιnooctanoïque in 10 cm of ethanol, a solution is added-- 3 tion of 0.60 g of sodium 2-hydroxyethaneth olate in 35 cm " of ethanol. The reaction mixture is allowed to stir. 48 hours at a temperature close to 20 ° C. It is added dropwise over 10 minutes
3 environ, 5 cm d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N puis3 approximately, 5 cm of an aqueous solution of hydrochloric acid N then
3 dilue par 350 cm d'eau. Le mélange réactionnel est extrait 3 fois par 50 cm de dichloromethane. Les phases organiques réunies sont lavée 3 fois par 30 cm d'eau distillée puis séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. L'huile obtenue (1,1 g) est chromatogra¬ phie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichloromethane et de methanol (98-2 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrés sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 500 mg d'acide N- [3β-acétoxylup-30-(2'-hydroxyéthylthio) -20 (29) -èn-28-oyl]- 8-amιnooctanoιque sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme- méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 diluted with 350 cm of water. The reaction mixture is extracted 3 times with 50 cm of dichloromethane. The combined organic phases are washed 3 times with 30 cm of distilled water and then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The oil obtained (1.1 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichloromethane and methanol (98-2 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 500 mg of N- [3β-acetoxylup-30- (2'-hydroxyethylthio) -20 (29) -èn-28-oyl] - 8-amιnooctanoιque acid are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.40; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
L'acide N-[3β-acétoxylup-30-bromo-20(29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoïque peut être obtenu de la manière suivante :N- [3β-acetoxylup-30-bromo-20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoic acid can be obtained in the following way:
A un mélange de 640 mg d'acide N- [3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl]-8- ammooctanoique et de 30 cm de tétrachlorure de carbone, ajouter en une seule fois 350 mg de N-bromosuccmimide. La suspension est agitée 12 heures à une température voisine de 20°C. Le solide est filtré, lavé par 3 fois 10 cm de tétrachlorure de carbone. Le filtrat est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient 800 mg d'acide N-[3β-acétoxylup-30-bromo-20(29)-èn- 28-oyl]-8-ammooctanoïque sous la forme d'une meringue blanche (Rf -= 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlo- roforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) .To a mixture of 640 mg of N- [3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -8- ammooctanoic acid and 30 cm of carbon tetrachloride, add 350 mg of N- all at once bromosuccmimide. The suspension is stirred for 12 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The solid is filtered, washed with 3 times 10 cm of carbon tetrachloride. The filtrate is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 800 mg of N- [3β-acetoxylup-30-bromo-20 (29) -èn- 28-oyl] -8-ammooctanoic acid are obtained in the form of a white meringue (Rf - = 0.25; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
L'acide N- [3β-acétoxylup-30-bromo-20(29)-èn-28-oyl] -8-ammooctanoïque est préparé comme décrit dans l'exemple 1. L'hydroxyéthanethiolate de sodium est préparé par action de l'éthy- late de sodium sur le 2-hydroxyéthanthιol en solution dans l'éthanol.N- [3β-acetoxylup-30-bromo-20 (29) -èn-28-oyl] -8-ammooctanoic acid is prepared as described in Example 1. Sodium hydroxyethanethiolate is prepared by the action of sodium ethylate on 2-hydroxyethanthιol in solution in ethanol.
Le chlorure de 3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyle est préparé d'après J. PROVITA et A. VYSTRCIL, Collect. Czech. Che . Commun. Al, 1200 (1976).3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride is prepared according to J. PROVITA and A. VYSTRCIL, Collect. Czech. Che. Common. Al, 1200 (1976).
Exem le 5Example 5
A une solution de 1 ,9 g d'acide N-[ [3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl]-To a solution of 1.9 g of N- [[3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] acid -
8-ammooctanoιque dans 55 cm 3 de dichloromethane, on ajoute 2,2 cm3 de chlorure de thionyle. La solution est agitée pendant 24 heures à 20°C puis le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. Le résidu obtenu est mis en solution dans 25 cm de dichloromethane et la solution est à nouveau évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une tempé¬ rature voisine de 35°C. Le solide obtenu (1,97 g) et 485 mg de 5- (4- ammophényltétrazole) sont mis en solution dans 60 cm de dichloromé-8-ammooctanoιque in 55 cm 3 of dichloromethane, 2.2 cm3 of thionyl chloride are added. The solution is stirred for 24 hours at 20 ° C. then the reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. The residue obtained is dissolved in 25 cm of dichloromethane and the solution is again evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 35 ° C. The solid obtained (1.97 g) and 485 mg of 5- (4-ammophenyltetrazole) are dissolved in 60 cm of dichlorome-
3 thane et 1,41 cm de triethylamine sont ajoutes goutte à goutte. La solution obtenue est agitée 24 heures à une température voisine de3 thane and 1.41 cm of triethylamine are added dropwise. The solution obtained is stirred for 24 hours at a temperature close to
20°C. La solution obtenue est concentrée sous pression réduite20 ° C. The solution obtained is concentrated under reduced pressure
(2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. Au solide obtenu est(2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. To the solid obtained is
3 3 ajouté 50 cm de dichloromethane et 25 cm d'une solution d'acide chlorhydrique N. La phase organique est décantée, lavée 2 fois avec3 3 added 50 cm of dichloromethane and 25 cm of a hydrochloric acid N solution. The organic phase is decanted, washed twice with
10 cm d'une solution d'acide chlorhydrique N puis 2 fois avec 10 cm d'eau distillée. La phase organique est sechée sur sulfate de sodium puis concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 2,0 g d'un solide qui est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée, avec un mélange de methanol et d'acétate d'éthyle (10-90 en volumes), les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu (280 mg) est chromatographie sur colonne de silice (0,02- 0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, de methanol et d'ammoniaque (24-6-1 en volumes) , les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 310 mg de 5-[4-{N-[N'- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl] -ammo}-phényl]-té- trazole sous la forme d'une poudre blanche (Rf = 0,32 ; chromatogra¬ phie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-am- moniaque à 20 % (24-6-1 en volumes)).10 cm of an N hydrochloric acid solution then 2 times with 10 cm of distilled water. The organic phase is dried over sodium sulfate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 2.0 g of a solid are thus obtained which is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of methanol and ethyl acetate (10-90 by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue (280 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and ammonia (24-6-1 by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. This gives 310 mg of 5- [4- {N- [N'- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl] -ammo} -phenyl] -té- trazole in the form of a white powder (Rf = 0.32; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
Une solution de 0,31 g de 5-[4-{N- [N' (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl) -8-aminoctyl] -amino}-phényl] -tétrazole, 1 cm 3 de soude 4N, 3 cm3 de tétrahydrofurane et 1 ,5 cm de methanol est agitée 26 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C, puis dilué avecA solution of 0.31 g of 5- [4- {N- [N '(3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -8-aminoctyl] -amino} -phenyl] -tetrazole, 1 cm 3 of 4N sodium hydroxide, 3 cm3 of tetrahydrofuran and 1.5 cm of methanol is stirred for 26 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C, then diluted with
3 33 3
20 cm d'eau distillée et acidifié avec 1,2 cm d'une solution d'acide chlorhydrique 4N. Après 1 heure d'agitation, à une tempéra¬ ture voisine de 20°C, le solide est séparé par filtration, lavé 6 fois avec 5 cm d'eau distillée et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à une température voisine de 30°C. On obtient ainsi 250 mg de 5- [4-{N- [ '- (3β-hydroxyluρ-20 (29)-èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl]- amino}-phényl] -tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 200°C.20 cm of distilled water and acidified with 1.2 cm of a 4N hydrochloric acid solution. After 1 hour of stirring, at a temperature close to 20 ° C., the solid is separated by filtration, washed 6 times with 5 cm of distilled water and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at a temperature close to 30 ° C. 250 mg of 5- [4- {N- ['- (3β-hydroxyluρ-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] - amino} -phenyl] -tetrazole are thus obtained. of a white solid melting at around 200 ° C.
Le 5- (4-aminophényle) tétrazole peut être préparé d'après J.M. McMANUS et R. HERBST, J. Org. Chem. , 24, 1044 (1959).5- (4-aminophenyl) tetrazole can be prepared according to J.M. McMANUS and R. HERBST, J. Org. Chem. , 24, 1044 (1959).
Exemple 6Example 6
A une solution de 1,9 g d'acide N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanoïque dans 55 cm de dichloromethane, on ajoute 2,2 cm de chlorure de thionyle. La solution est agitée pendant 24 heures à 20°C puis le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. Le résidu obtenu est mis en solution dans 25 cm de dichloromethane et la solution est à nouveau concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une tempé¬ rature voisine de 35°C. Le solide obtenu (1,97 g) et 485 mg de 5-(3-To a solution of 1.9 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoic acid in 55 cm of dichloromethane, 2.2 cm of thionyl chloride is added. The solution is stirred for 24 hours at 20 ° C. then the reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. The residue obtained is dissolved in 25 cm of dichloromethane and the solution is again concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. The solid obtained (1.97 g) and 485 mg of 5- (3-
3 aminophényltétrazole) sont mis en solution dans 60 cm de dichlorome¬ thane et 1,41 cm de triethylamine sont ajoutés goutte à goutte. La solution obtenue est agitée 24 heures à une température voisine de 20°C. La solution obtenue est concentrée sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. Au solide obtenu est ajouté 50 cm de dichloromethane et 25 cm d'une solution d'acide chlorhydrique N. La phase organique est décantée, lavée 2 fois avec 10 cm 3 d'une solution d'acide chlorhydrique N puis 2 fois avec 10 cm3 d'eau distillée. La phase organique est sechée sur sulfate de sodium puis concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 2,2 g d'un solide qui est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée, avec un mélange de chloroforme, de methanol et d'ammoniaque (24-6-1 en volumes) , les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 840 mg d'un solide qui est à nouveau chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée, en premier lieu avec de l'acétate d'éthyle puis avec un mélange de chloroforme, de methanol et d'ammoniaque (24-6-1 en volumes) , les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C. On obtient ainsi 390 mg de 5- [3-{N- [N'- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)- 8-aminooctanoyl] -amino}-phényl] -tétrazole sous la forme d'une poudre blanche (Rf = 0,36 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) .3 aminophenyltetrazole) are dissolved in 60 cm of dichlorome¬ thane and 1.41 cm of triethylamine are added dropwise. The solution obtained is stirred for 24 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The solution obtained is concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. To the solid obtained is added 50 cm of dichloromethane and 25 cm of a hydrochloric acid solution N. The organic phase is decanted, washed 2 times with 10 cm 3 of a hydrochloric acid solution N then 2 times with 10 cm 3 distilled water. The organic phase is dried over sodium sulfate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 2.2 g of a solid are thus obtained which is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and ammonia (24-6-1 by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 840 mg of a solid are thus obtained which is again chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted, firstly with ethyl acetate and then with a mixture of chloroform, methanol and d ammonia (24-6-1 by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 390 mg of 5- [3- {N- [N'- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) - 8-aminooctanoyl] -amino} -phenyl] -tetrazole are thus obtained. of a white powder (Rf = 0.36; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
Une solution de 380 mg de 5-[3-{N-[N'-(3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-A solution of 380 mg of 5- [3- {N- [N '- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-
3 oyl)-8-aminooctanoyl]-amino}-phényl]-tétrazole, 1,2 cm de soude 4N,3 oyl) -8-aminooctanoyl] -amino} -phenyl] -tetrazole, 1.2 cm 4N sodium hydroxide,
3 3 4 cm de tétrahydrofurane et 2 cm de methanol est agitée 22 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35°C, puis dilué avec3 3 4 cm of tetrahydrofuran and 2 cm of methanol is stirred for 22 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C, then diluted with
3 33 3
25 cm d'eau distillée et acidifié avec 1,4 cm d'une solution d'acide chlorhydrique 4N. Après 1 heure d'agitation, à une tempéra- ture voisine de 20°C, le solide est séparé par filtration, lavé 6 fois avec 5 cm d'eau distillée et séché sous pression réduite25 cm of distilled water and acidified with 1.4 cm of a 4N hydrochloric acid solution. After 1 hour of stirring, at a temperature in the region of 20 ° C., the solid is separated by filtration, washed 6 times with 5 cm of distilled water and dried under reduced pressure
(15,5 Pa) à une température voisine de 30°C. On obtient ainsi 270 mg de 5- [3-{N- [N'- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]- amino}-phényl] -tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 170°C.(15.5 Pa) at a temperature in the region of 30 ° C. 270 mg of 5- [3- {N- [N'- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -amino} -phenyl] -tetrazole are thus obtained. form a white solid, melting around 170 ° C.
Le 5- (3-aminophényle) tétrazole peut être préparé d'après J.M. McMANUS et R. HERBST, J. Org. Che . , 24, 1044 (1959).5- (3-aminophenyl) tetrazole can be prepared according to J.M. McMANUS and R. HERBST, J. Org. Che. , 24, 1044 (1959).
Exemple 7Example 7
670 mg de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-11-aminoundécanenitrile et 1 g d'azoture de tributylétain sont mis en solution dans 5 cm de 1 ,2-diméthoxyéthane. Le mélange est chauffé au reflux pendant670 mg of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundécanenitrile and 1 g of tributyltin azide are dissolved in 5 cm of 1, 2-dimethoxyethane. The mixture is heated at reflux for
48 heures. On rajoute 0,5 g d'azoture de tributyletain et le mélange est à nouveau chauffé au reflux pendant 48 heures. Le mélange réac-48 hours. 0.5 g of tributyltin azide are added and the mixture is again heated at reflux for 48 hours. The mixture reacts
3 tionnel est dilué par 50 cm d eau distillée puis extrait avec3 tional is diluted with 50 cm of distilled water then extracted with
3 100 cm d'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée avec3,100 cm of ethyl acetate. The organic phase is then washed with
75 cm d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium et évapo¬ rée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,2 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, mé- thanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression ré¬ duite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 700 mg de 5- [N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) -10-aminodécyl] -té¬ trazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,32 ; chromato- graphie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol- ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).75 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.2 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume) . The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 700 mg of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -10-aminodecyl] -té¬ trazole are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.32 ; thin layer chromatography on silica; eluent: chloroform-methanol-20% ammonia (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 290 mg de 5- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-10-A 290 mg solution of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -10-
3 3 aminodécyl] -tétrazole, 0,82 cm de soude 5N, 3 cm de tétrahydrofu- rane et 6 cπH de methanol est agitée 20 heures à une température voi- sine de 20°C. Le mélange est acidifié avec de l'acide chlorhydrique3 3 aminodecyl] -tetrazole, 0.82 cm of 5N sodium hydroxide, 3 cm of tetrahydrofuran and 6 cπH of methanol is stirred for 20 hours at a temperature close to 20 ° C. The mixture is acidified with hydrochloric acid
5N, et dilué avec 40 cm d'eau distillée. Le mélange est extrait par5N, and diluted with 40 cm of distilled water. The mixture is extracted by
50 cm , puis 2 fois 25 cm , d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées, lavées par 100 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu50 cm, then twice 25 cm, of ethyl acetate. The organic phases are combined, washed with 100 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained
(280 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-(280 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-
0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 30 cm-^ d'oxyde d'isopropyle, filtré, lavé avec 10 cm d'oxyde d'isopropyle et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 30 cm 3 of isopropyl ether, filtered, washed with 10 cm of isopropyl ether and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. We thus obtain
185 mg .de 5- [N- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl)-10-aminodécyl]- tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 200°C.185 mg. Of 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -10-aminodecyl] - tetrazole, in the form of a white solid melting at around 200 ° C.
L'azoture de tributyletain peut être préparé d'après H.R. KRICHELDORF et E. LEPPERT, Synthesis, 329 (1976). Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11 -aminoundécanenitrile peut être obtenu de la façon suivante :Tributyltin azide can be prepared from HR KRICHELDORF and E. LEPPERT, Synthesis, 329 (1976). N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11 -aminoundécanenitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 2,5 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-ami-To a solution of 2.5 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-ami-
3 noundécanamide dans 300 cm de tétrahydrofurane sec, on ajoute goutte 3 à goutte 1,92 cm d'anhydride trifluoroacetique. La solution est agi-3 noundecanamide in 300 cm of dry tetrahydrofuran, one adds drop by drop 1.92 cm of trifluoroacetic anhydride. The solution is agi-
3 tée 15 heures à température ambiante puis 1 ,9 cm supplémentaires d'anhydride trifluoroacetique sont ajoutés et la solution est agitée3 t 15 hours at room temperature then an additional 1.9 cm of trifluoroacetic anhydride are added and the solution is stirred
48 heures à température ambiante. La solution est neutralisée par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium puis concentrée sous pression réduite (2,7 kPa) . Le résidu est repris par48 hours at room temperature. The solution is neutralized by adding a saturated solution of sodium bicarbonate and then concentrated under reduced pressure (2.7 kPa). The residue is taken up by
100 cm d'eau distillée et le mélange est extrait 2 fois avec 150 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées, lavées 3100 cm of distilled water and the mixture is extracted twice with 150 cm of ethyl acetate. The organic phases are combined, washed 3
3 fois avec 100 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magné¬ sium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une tempé- rature voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,5 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec du dichlorome¬ thane. Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,6 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11- aminoundécanenitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,6 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane- acétate d'éthyle (60-40 en volumes)) .3 times with 100 cm of distilled water, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.5 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with dichlorome¬ thane. The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.6 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11- aminoundecanenitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.6; thin layer chromatography of silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (60-40 by volume)).
Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-11-aminoundécanamide peut être obtenu de la manière suivante :N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundécanamide can be obtained as follows:
A une solution de 2,6 g d'acide N- [3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -To a solution of 2.6 g of N- [3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] acid -
3 11 -aminoundécanoïque dans 240 cm de dichloromethane, on ajoute3 11 -aminoundecanoic acid in 240 cm of dichloromethane, add
3,5 cm d'ammoniaque a 20 %, 580 mg d'hydrate de 1-hy- droxybenzotriazole, et 1,45 g de chlorhydrate de 1-(3- diméthylaminopropyl) -3-éthylcarbodiimide. La solution est agitée pen- dant 2 jours à 20°C puis la phase organique est décantée, lavée suc-3.5 cm of 20% ammonia, 580 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate, and 1.45 g of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride. The solution is stirred for 2 days at 20 ° C. then the organic phase is decanted, washed successively
3 3 cessivement avec 50 cm d'eau distillée, 3 fois 25 cm d'acide chlor-3 3 discontinuously with 50 cm of distilled water, 3 times 25 cm of chlorine acid
3 hydrique 1N, 2 fois 40 cm d'eau distillée, puis séchée sur du sul¬ fate de magnésium, filtrée et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 2,7 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundécanamide sous la forme d'une meringue couleur crème (Rf ≈ 0,15 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (30-70 en volumes) ) .3 1N water, 2 times 40 cm of distilled water, then dried over magnesium sul¬ fate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 2.7 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundecanamide are thus obtained under the form of a cream-colored meringue (Rf ≈ 0.15; chromatography on a thin layer of silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (30-70 by volume)).
L'acide N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-11-aminoundécanoïque est synthétisé par analogie avec l'acide N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl) -8-aminooctanoïque à partir de chlorure de 3β-acétoxylup-20(29)- èn-28-oyle et de 11-aminoundécanoate de méthyle (R = 38 % ; Rf = 0,57 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : dichlorométhane-méthanol (90-10 en volumes)).N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundecanoic acid is synthesized by analogy with N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl acid ) -8-aminooctanoic from 3β-acetoxylup-20 (29) - en-28-oyl chloride and methyl 11-aminoundecanoate (R = 38%; Rf = 0.57; thin layer chromatography on silica; eluent: dichloromethane-methanol (90-10 by volume)).
Exemple 8Example 8
1 g de N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanenitrile et1 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanenitrile and
1,6 g d'azoture de tributyletain sont mis en solution dans 25 cm de1.6 g of tributyltin azide are dissolved in 25 cm of
1 ,2-diméthoxyéthane. Le mélange est chauffé au reflux pendant1, 2-dimethoxyethane. The mixture is heated at reflux for
3 24 heures. On ajoute 35 cm de 2-éthoxyéthanol, distille le 1,2-dimé- thoxyéthane et le mélange est à nouveau chauffé au reflux pendant3 24 hours. 35 cm of 2-ethoxyethanol are added, the 1,2-dimethoxyethane is distilled and the mixture is again heated under reflux for
48 heures. Le mélange réactionnel est refroidi à température ambiante, versé dans une solution de 100 cm d'acide chlorhydrique48 hours. The reaction mixture is cooled to room temperature, poured into a solution of 100 cm of hydrochloric acid
1N. Après 15 minutes d'agitation, le mélange est extrait avec 3 fois1N. After 15 minutes of stirring, the mixture is extracted with 3 times
50 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées,50 cm of ethyl acetate. The organic phases are gathered,
3 lavées avec 7 fois 30 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,7 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est lavé avec 5 fois 75 cm de pentane, filtré, séché sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient ainsi 920 mg de 5- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -7-aminoheptyl]- tétrazole sous la forme d'une poudre blanc crème (Rf = 0,28 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme- méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 washed with 7 times 30 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.7 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained is washed with 5 times 75 cm of pentane, filtered, dried under reduced pressure (2.7 kPa) at 40 ° C. 920 mg of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a creamy white powder (Rf = 0.28; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 900 mg de 5-[N-(3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-7- aminoheptyl] -tétrazole, 2,7 cm 3 de soude 5N, 10 cm3 de tétrahydrofu-A 900 mg solution of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7- aminoheptyl] -tetrazole, 2.7 cm 3 of 5N sodium hydroxide, 10 cm3 of tetrahydrofu-
3 rane et 20 cm de methanol est agitée 15 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié avec de l'acide chlorhy-3 rane and 20 cm of methanol is stirred for 15 hours at a temperature close to 20 ° C. The mixture is acidified with chlorhy-
3 drique 1N, et dilué avec 175 cm d'eau distillée. Le mélange est ex-3 drique 1N, and diluted with 175 cm of distilled water. The mixture is ex-
3 trait par 3 fois 100 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques3 lines with 3 times 100 cm of ethyl acetate. Organic phases
3 sont rassemblées, lavées par 250 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et concentrées à sec sous pression réduite3 are combined, washed with 250 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure
(2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu(2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. The residue obtained
(865 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-(865 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-
0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) to
3 une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 10 cm3 a temperature close to 40 ° C. The residue is taken up by 10 cm
3 d'oxyde d'isopropyle, filtré, lavé avec 6 cm d oxyde d'isopropyle et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. La poudre obtenue (510 mg) est à nouveau chromatographiée sur une colonne de silice (0,02- 0,045 mm) éluée avec un mélange de dichloromethane et de methanol3 of isopropyl ether, filtered, washed with 6 cm of isopropyl ether and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. The powder obtained (510 mg) is again chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and methanol
(95-5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine(95-5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to
3 de 40°C. Le résidu est repris par 5 cm d'oxyde d'isopropyle, filtré, lavé avec 2 cm d'oxyde d'isopropyle et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 224 mg de 5-[N-(3β-hydroxylup-3 of 40 ° C. The residue is taken up in 5 cm of isopropyl ether, filtered, washed with 2 cm of isopropyl ether and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 224 mg of 5- [N- (3β-hydroxylup-
20(29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptyl] -tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 150-155°C.20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptyl] -tetrazole, in the form of a white solid, melting at around 150-155 ° C.
Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanenitrile peut être obtenu de la façon suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanenitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 2,4 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanamide dans 200 cm de tétrahydrofurane sec, on ajouteTo a solution of 2.4 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanamide in 200 cm of dry tetrahydrofuran, the following is added
3 goutte à goutte 1,97 cm d anhydride trifluoroacetique. La solution3 drip 1.97 cm of trifluoroacetic anhydride. The solution
3 est agitée 15 heures a température ambiante puis 5,0 cm supplémentaires d'anhydride trifluoroacetique sont ajoutés et la solution est agitée 48 heures à température ambiante. La solution est neutralisée par addition d'une solution saturée de bicarbonate de3 is stirred for 15 hours at room temperature and then an additional 5.0 cm of trifluoroacetic anhydride are added and the solution is stirred for 48 hours at room temperature. The solution is neutralized by adding a saturated solution of bicarbonate of
3 sodium, puis diluée par 100 cm d'eau distillée. Le tétrahydrofurane est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. Le mélange est ensuite repris par 200 cm d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est extraite par 50 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées, lavées 2 fois avec 100 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium, filtrées et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi3 sodium, then diluted with 100 cm of distilled water. The tetrahydrofuran is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at 40 ° C. The mixture is then taken up in 200 cm of ethyl acetate. The aqueous phase is extracted with 50 cm of ethyl acetate. The organic phases are combined, washed twice with 100 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. We thus obtain
2.2 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanenitrile sous la forme d'une meringue blanc crème (Rf = 0,23 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (80-20 en volumes) ) .2.2 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanenitrile in the form of a creamy white meringue (Rf = 0.23; chromatography on a thin layer of silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (80-20 by volume)).
Le N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanamide peut être obtenu de la manière suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanamide can be obtained in the following manner:
A une solution de 2,4 g d'acide N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-To a solution of 2.4 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- acid
3 3 aminooctanoïque dans 240 cm de dichloromethane, on ajoute 3,8 cm d'ammoniaque à 20 %, 580 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole, et3 3 aminooctanoic acid in 240 cm of dichloromethane, 3.8 cm of 20% ammonia, 580 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate are added, and
1,45 g de chlorhydrate de 1- (3-diméthylaminopropyl) -3-éthylcarbodii- mide. La solution est agitée 24 heures à température ambiante puis la phase organique est décantée, lavée avec 5 fois 25 cm d'eau distil- lée, séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 2,4 g de N-(3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooc- tanamide sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,1 ; chromato¬ graphie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (50-50 en volumes)).1.45 g of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride. The solution is stirred for 24 hours at room temperature then the organic phase is decanted, washed with 5 times 25 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. 2.4 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooc-tanamide are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.1; chromatography) on a thin layer of silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (50-50 by volume)).
Exemple 9Example 9
1.3 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -12-aminododécanenitrile et 1,27 g d'azoture de tributyletain sont mis en solution dans 50 cm de 2-éthoxyéthanol. Le mélange est chauffé au reflux pendant1.3 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanenitrile and 1.27 g of tributyltin azide are dissolved in 50 cm of 2-ethoxyethanol. The mixture is heated at reflux for
3 48 heures. Le mélange réactionnel est versé dans 300 cm d'eau dis¬ tillée glacée. Après 5 minutes d'agitation, le mélange est acidifié avec une solution d'acide chlorhydrique 2N puis extrait avec 3 fois 80 cm de dichloromethane. Les phases organiques sont réunies, lavées jusqu'à neutralité par de l'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (1,4 g) est chromato¬ graphie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mé¬ lange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en vo¬ lumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concen- trées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,2 g de 5-[N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl)-11-aminoundécyl] -tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,45 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 48 hours. The reaction mixture is poured into 300 cm of ice-cold distilled water. After 5 minutes of stirring, the mixture is acidified with a 2N hydrochloric acid solution and then extracted with 3 times 80 cm of dichloromethane. The organic phases are combined, washed until neutral with distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (1.4 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 in vo¬ lumes). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. 1.2 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -11-aminoundecyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.45 ; thin layer chromatography on silica; eluent: 20% chloroform-methanol-ammonia (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 1,2 g de 5-[N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-11-A solution of 1.2 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-
3 3 aminoundécyl] -tétrazole, 3,3 cm de soude 5N, 12 cm de tétrahydrofu- rane et 24 cm 3 de methanol est agitée 20 heures a une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié avec de l'acide chlorhy-3 3 aminoundecyl] -tetrazole, 3.3 cm of 5N sodium hydroxide, 12 cm of tetrahydrofuran and 24 cm 3 of methanol is stirred for 20 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is acidified with chlorhy-
3 drique 5N, et dilué par 150 cm d eau distillée. Le mélange est ex- trait par 3 fois 60 cm de dichloromethane. Les phases organiques sont rassemblées, lavées jusqu'à neutralité par de l'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (1,1 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de dichloromethane, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une tempéra-3 drique 5N, and diluted with 150 cm of distilled water. The mixture is extracted with 3 times 60 cm of dichloromethane. The organic phases are combined, washed until neutral with distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (1.1 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature
3 ture voisine de 40°C. Le résidu est repris par 15 cm d'éther éthy¬ lique, filtré, lavé avec 12 cm d'éther éthylique et séché sous pres- sion réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 340 mg de 5-[N-(3β- hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl)-11-aminoundécyl]-tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 200-205°C.3 ture close to 40 ° C. The residue is taken up in 15 cm of ethyl ether, filtered, washed with 12 cm of ethyl ether and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 340 mg of 5- [N- (3β- hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -11-aminoundecyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid, melting at around 200-205 ° C. .
Le N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -12-aminododécanenitrile peut être obtenu de la façon suivante :N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanenitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 1 , 5 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -12-ami-To a solution of 1.5 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-ami-
3 nododécanamide dans 150 cm de tétrahydrofurane sec, on ajoute goutte à goutte 1 ,9 cm d'anhydride trifluoroacetique. La solution est agi-3 nododecanamide in 150 cm of dry tetrahydrofuran, 1.9 cm of trifluoroacetic anhydride are added dropwise. The solution is agi-
3 tée 60 heures a température ambiante, puis diluée par 30 cm d'eau distillée. Le tétrahydrofurane est évaporé à sec sous pression ré- duite (2,7 kPa) à 40°C. Le mélange est repris par 100 cm d'eau dis¬ tillée, neutralisé par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium puis extrait par 3 fois 50 cm de dichloromethane. Les phases organiques sont rassemblées, lavées par 3 fois 40 cm d'eau distillée, séchées sur du sulfate de magnésium et évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,36 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -12-ami- nododécanenitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,35 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane- acétate d'éthyle (80-20 en volumes)).3 teas 60 hours at room temperature, then diluted with 30 cm of distilled water. The tetrahydrofuran is evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at 40 ° C. The mixture is taken up in 100 cm of distilled water, neutralized by the addition of a saturated sodium bicarbonate solution and then extracted with 3 times 50 cm of dichloromethane. The organic phases are combined, washed with 3 times 40 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. We 1.36 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-amino-nododecanenitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.35; thin layer chromatography silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (80-20 by volume)).
Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanamide peut être obtenu de la façon suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododecanamide can be obtained as follows:
A une solution de 1,5 g d'acide N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) -To a solution of 1.5 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) acid -
3 12-aminododécanoïque dans 250 cm de dichloromethane, on ajoute3 12-aminododecanoic acid in 250 cm of dichloromethane, we add
2,15 cm d'ammoniaque à 20 %, 330 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzo- triazole, et 826 mg de chlorhydrate de 1- (3-diméthylaminopropyl) -3- éthylcarbodiimide. La solution est agitée 15 heures à température ambiante puis la phase organique est décantée, lavée successivement2.15 cm of 20% ammonia, 330 mg of 1-hydroxybenzo triazole hydrate, and 826 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride. The solution is stirred for 15 hours at room temperature then the organic phase is decanted, washed successively
3 3 avec 5 fois 80 cm d'eau distillée, 3 fois 80 cm d'acide chlorhy¬ drique 1N, 5 fois 80 cm d'eau distillée, puis séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,5 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanamide sous la forme d'une meringue couleur crème (Rf = 0,47 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : dichlorométhane-méthanol (90-10 en volumes) ) .3 3 with 5 times 80 cm of distilled water, 3 times 80 cm of 1N hydrochloric acid, 5 times 80 cm of distilled water, then dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to dryness under reduced pressure ( 2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.5 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododecanamide are thus obtained in the form of a cream-colored meringue (Rf = 0.47; thin layer chromatography silica; eluent: dichloromethane-methanol (90-10 by volume)).
L'acide N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododécanoïque est synthétisé par analogie avec l'acide N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28- oyl) -8-aminooctanoïque à partir de chlorure de 3β-acétoxylup-20 (29)- èn-28-oyle et de 12-aminododécanoate de méthyle (R = 75 %; Rf = 0,45 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : dichlorométhane-méthanol (90-10 en volumes)).N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -12-aminododecanoic acid is synthesized by analogy with N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl acid ) -8-aminooctanoic from 3β-acetoxylup-20 (29) - en-28-oyl chloride and methyl 12-aminododecanoate (R = 75%; Rf = 0.45; thin layer chromatography on silica; eluent: dichloromethane-methanol (90-10 by volume)).
Exemple 10Example 10
490 mg de N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3- aminopropanenitrile et 700 mg d'azoture de tributyletain sont mis en490 mg of N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3- aminopropanenitrile and 700 mg of tributyltin azide are
3 solution dans 10 cm de 1 ,2-dimethoxyethane. Le mélange est chauffé au reflux pendant 6 jours. Le mélange réactionnel est refroidi à tem-3 solution in 10 cm of 1,2-dimethoxyethane. The mixture is heated at reflux for 6 days. The reaction mixture is cooled to tem-
3 pérature ambiante, dilué avec 100 cm de dichloromethane et acidifié3 ambient temperature, diluted with 100 cm of dichloromethane and acidified
3 avec 25 cm d'acide chlorhydrique 2N. Après 5 minutes d'agitation, la phase organique est décantée, lavée par 5 fois 40 cm 3 d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de3 with 25 cm of 2N hydrochloric acid. After 5 minutes of stirring, the organic phase is decanted, washed with 5 times 40 cm 3 of water distilled, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to
3 40°C. Le résidu obtenu est lavé par 5 fois 10 cm de pentane, chroma¬ tographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de methanol (80-20 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 435 mg de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooc- tanoyl]aminoéthyl}-tétrazole sous la forme d'une meringue blanche. (Rf = 0,39 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 40 ° C. The residue obtained is washed with 5 times 10 cm of pentane, chroma¬ tography on a column of silica (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of ethyl acetate and methanol (80-20 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 435 mg of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooc- tanoyl] aminoethyl} -tetrazole are thus obtained in the form of a white meringue . (Rf = 0.39; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Une solution de 600 mg de 5-{N'- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-A 600 mg solution of 5- {N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -
3 33 3
8-aminooctanoyl]amιnoéthyl}-tétrazole, 1,6 cm de soude 5N, 10 cm de tétrahydrofurane et 20 cm de methanol est agitée 15 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié avec de l'acide8-aminooctanoyl] amιnoéthyl} -tétrazole, 1.6 cm of 5N sodium hydroxide, 10 cm of tetrahydrofuran and 20 cm of methanol is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is acidified with acid
3 chlorhydrique 1N, et dilué avec 120 cm d'eau distillée. Le mélange est agité 1 heure à 20°C, filtré, lavé jusqu'à neutralité par de3 hydrochloric 1N, and diluted with 120 cm of distilled water. The mixture is stirred for 1 hour at 20 ° C., filtered, washed until neutral with
3 l'eau distillé, puis par 5 fois 5 cm de pentane, et séché sous pres¬ sion réduite (15,5 Pa) à 20°C. La poudre obtenue (553 mg) est chroma- tographiée sur une colonne de silice (0,02-0,045mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concen¬ trées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 15 cm d'oxyde d'isopropyle, filtré, et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 430 mg de 5-{N'- [N- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl) -8-aminoocta- noyl]aminoéthyl}-tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 155-160°C.3 distilled water, then with 5 times 5 cm of pentane, and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. The powder obtained (553 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 15 cm of isopropyl ether, filtered, and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 430 mg of 5- {N'- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminoocta- noyl] aminoethyl} -tetrazole are thus obtained in the form of a solid. white melting around 155-160 ° C.
Le N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3-ami- nopropanenitrile peut être obtenu de la façon suivante :N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-aminopropanenitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 960 mg de N'- [N-(3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-8-To a solution of 960 mg of N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-
3 aminooctanoyl] -3-aminopropanamide dans 70 cm de tétrahydrofurane3 aminooctanoyl] -3-aminopropanamide in 70 cm of tetrahydrofuran
3 sec, on ajoute goutte à goutte 0,94 cm d'anhydride trifluoroace¬ tique. La solution est agitée 15 heures à température ambiante, puis le tétrahydrofurane est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à 3 40°C. Le mélange est ensuite repris par 70 cm de dichloromethane. La3 sec, 0.94 cm of trifluoroaceic anhydride is added dropwise. The solution is stirred for 15 hours at room temperature, then the tetrahydrofuran is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at 3 40 ° C. The mixture is then taken up in 70 cm of dichloromethane. The
3 phase organique est décantée, lavée par 3 fois 50 cm d'eau distil¬ lée, séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (887 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02- 0,045 mm) éluée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de cyclohexane (70-30 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. On obtient ainsi 692 mg de N'-[N- (3β-acétoxylup-20(29)- èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl] -3-amino propanenitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,27 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (30-70 en volumes) ) .3 organic phase is decanted, washed with 3 times 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (887 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of ethyl acetate and cyclohexane (70-30 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. 692 mg of N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) - en-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino propanenitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0 , 27; thin layer chromatography on silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (30-70 by volume)).
Le N' -[N-(3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-ami- nopropanamide peut être obtenu de la manière suivante :The N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino propanamide can be obtained in the following way:
A une solution de 967 mg d'acide N'-[N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28- oyl) -8-aminooctanoyl] -3-aminopropanoïque dans 150 cm de dichloro-To a solution of 967 mg of N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -8-aminooctanoyl] -3-aminopropanoic acid in 150 cm of dichloro-
3 méthane, on ajoute 1 cm d'ammoniaque à 20 %, 208 mg d'hydrate de3 methane, 1 cm of 20% ammonia, 208 mg of hydrate
1-hydroxybenzotriazole, et 521 mg de chlorhydrate de 1-(3- diméthylaminopropyl) -3-éthylcarbodiimide. La solution est agitée1-hydroxybenzotriazole, and 521 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride. The solution is agitated
50 heures à température ambiante puis la phase organique est50 hours at room temperature then the organic phase is
3 3 décantée, lavée avec 60 cm d'acide chlorhydrique 1N, 5 fois 50 cm d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 960 mg de N'-[N-(3β-acétoxylup-Decanted, washed with 60 cm of 1N hydrochloric acid, 5 times 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. This gives 960 mg of N '- [N- (3β-acetoxylup-
20(29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl]-3-aminopropanamide sous la forme d'une meringue blanc crème (Rf = 0,68 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 %20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-aminopropanamide in the form of a creamy white meringue (Rf = 0.68; thin layer chromatography on silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20%
(12-3-0,5 en volumes)).(12-3-0.5 by volume)).
L'acide N' - [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3- aminopropanoïque peut être obtenu de la manière suivante :N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3- aminopropanoic acid can be obtained in the following way:
3 A une solution anhydre de 2,3 g de iodure de lithium et de 100 cm de collidine, on ajoute 1,3 g de N- [ (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanoyl]-3-aminopropionate de méthyle. La solution est chauffée au reflux pendant 3 heures, puis concentrée sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par3 To an anhydrous solution of 2.3 g of lithium iodide and 100 cm of collidine, 1.3 g of N- [(3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- are added. methyl aminooctanoyl] -3-aminopropionate. The solution is heated at reflux for 3 hours, then concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. The residue is taken up by
150 cm 3 d'eau distillée et 150 cm3 d'acétate d'éthyle, puis refroidii à 0°C. La phase organique est extraite, lavée par 3 fois 50 cm3 d'acide chlorhydrique 1N, puis par de l'eau distillée jusqu'à neutra- lité, séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 20 cm d'acétate d'éthyle et le mélange est concentré sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1 ,07 g d'acide N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) - 8-ammooctanoyl] -3-ammopropanoιque sous la forme d'une meringue beige (Rf = 0,22 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlorofor e-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5)).150 cm 3 of distilled water and 150 cm 3 of ethyl acetate, then cooled to 0 ° C. The organic phase is extracted, washed with 3 times 50 cm3 of 1N hydrochloric acid, then with distilled water to neutral, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness under reduced pressure (2, 7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 20 cm of ethyl acetate and the mixture is concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.07 g of N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) - 8-ammooctanoyl] -3-ammopropanoιque is thus obtained in the form of a beige meringue ( Rf = 0.22; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chlorofor e-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5)).
Le N' - [N- (3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl]-3-amιno propionate de méthyle peut être préparé de la manière suivante :The N '- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl] -3-amιno methyl propionate can be prepared as follows:
A une solution de 2 g d'acide N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- ammooctanoique dans 260 cm de dichloromethane, on ajoute 524 mg de chlorhydrate d'amino-3 propionate de méthyle, 480 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotnazole, 1,2 g de chlorhydrate de 1- (3-dιméthylammo- propyl) -3-éthylcarbodιιmιde, et 1,1 g de triethylamine en solution dans 15 cm de dichloromethane. La solution est agitée 50 heures à température ambiante puis la phase organique est décantée, lavée avecTo a solution of 2 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8- ammooctanoic acid in 260 cm of dichloromethane, 524 mg of 3-amino propionate hydrochloride is added methyl, 480 mg of 1-hydroxybenzotnazole hydrate, 1.2 g of 1- (3-dimethylammopropyl) -3-ethylcarbodιιmιde hydrochloride, and 1.1 g of triethylamine dissolved in 15 cm of dichloromethane. The solution is stirred for 50 hours at room temperature then the organic phase is decanted, washed with
3 6 fois 150 cm d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une tem¬ pérature voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,4 g) est chromatogra- phié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de cyclohexane (50-50 en volumes). Les frac¬ tions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 2 g de N'- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-amιnooctanoyl] -3- amino propionate de méthyle sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,62 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : acé¬ tate d'éthyle)3 6 times 150 cm of distilled water, dried over magnesium sulphate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. The residue obtained (2.4 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of ethyl acetate and cyclohexane (50-50 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 2 g of N'- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl] -3- methyl amino propionate are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.62; thin layer chromatography on silica; eluent: ethyl acetate)
Exemple 11Example 11
720 mg de [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl-méthyl- amino] -acétonitrile et 1,1 g d'azoture de tributyletain sont mis en solution dans 15 cm de 1 ,2-dιméthoxyéthane. Le mélange est chauffé au reflux pendant 3 jours. Le mélange réactionnel est dilué avec 40720 mg of [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl-methyl-amino] -acetonitrile and 1.1 g of tributyltin azide are added solution in 15 cm of 1, 2-dιméthoxyéthane. The mixture is heated at reflux for 3 days. The reaction mixture is diluted with 40
3 3 cm d'eau distillée et 15 cm d'acide chlorhydrique 2N, puis extrait avec 3 fois 80 cm de dichloromethane. La phase organique est séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu3 3 cm of distilled water and 15 cm of 2N hydrochloric acid, then extracted with 3 times 80 cm of dichloromethane. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained
(1,8 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 %(1.8 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia
(12-3-0,5 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une(12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a
3 température voisine de 40°C. Le résidu est lavé 5 fois avec 20 cm de pentane, puis séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 820 mg de 5- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl-mét yl-aminométhyl] -tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,33 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) ) .3 temperature close to 40 ° C. The residue is washed 5 times with 20 cm of pentane, then dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 820 mg of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl-met yl-aminomethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.33; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
A une solution de 800 mg de 5- [N- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl) -8-To a solution of 800 mg of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-
3 am nooctanoyl-méthyl-aminométhyl] -tétrazole, 2,7 cm de soude 5N, 103 am nooctanoyl-methyl-aminomethyl] -tetrazole, 2.7 cm 5N sodium hydroxide, 10
3 3 cm de tétrahydrofurane et 20 cm de methanol est agitée 48 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est acidifié avec de33 cm of tetrahydrofuran and 20 cm of methanol are stirred for 48 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is acidified with
3 1 acide chlorhydrique 1N, et dilué avec 100 cm d'eau distillée. Le mélange est agité 1 heure à 20°C, filtré, lavé jusqu'à neutralité par de l'eau distillé, puis par 5 fois 5 cm de pentane, et séché sous pression réduite ( 15,5 Pa) à 20°C. Le produit obtenu (740 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20% (12-3-0,5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est repris par 15 cm d'oxyde d'isopropyle, filtré, et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à 20°C. On obtient ainsi 360 mg de 5- [N- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl-méthyl-aminométhyl] -tétrazole, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 151°C.3 1 hydrochloric acid 1N, and diluted with 100 cm of distilled water. The mixture is stirred for 1 hour at 20 ° C., filtered, washed until neutral with distilled water, then with 5 times 5 cm of pentane, and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. The product obtained (740 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 15 cm of isopropyl ether, filtered, and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at 20 ° C. 360 mg of 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl-methyl-aminomethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid melting towards 151 ° C.
Le [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-méthyl-ammo] - acétonitrile peut être obtenu de la façon suivante : A une solution de 1,2 g de [N-(3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-8- aminooctanoyl-méthyl-ammo]-acétamide dans 70 cm de tétrahydrofuraneThe [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-methyl-ammo] - acetonitrile can be obtained in the following way: To a solution of 1.2 g of [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl-methyl-ammo] -acétamide in 70 cm of tetrahydrofuran
3 sec, on ajoute goutte à goutte 1 cm d anhydride trifluoroacetique.3 sec, 1 cm of trifluoroacetic anhydride is added dropwise.
La solution est agitée 15 heures à température ambiante, puis neutralisée par une solution saturée de bicarbonate de sodium. Le tétrahydrofurane est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C.The solution is stirred for 15 hours at room temperature, then neutralized with a saturated solution of sodium bicarbonate. The tetrahydrofuran is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at 40 ° C.
3 Le mélange est ensuite repris par 200 cm d'eau distillée et extrait3 The mixture is then taken up in 200 cm of distilled water and extracted
3 par 3 fois 80 cm de dichloromethane. Les phases organiques sont ré-3 by 3 times 80 cm of dichloromethane. The organic phases are re-
3 unies, lavées par 3 fois 50 cm d'eau distillée, séchée sur du sul- fate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (1,0 g) est chroma¬ tographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de cyclohexane (30-70 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pres- sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 720 mg de [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl- méthyl-amino] -acétonitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,32 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (50-50 en volumes)).3 units, washed with 3 times 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (1.0 g) is chromographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of ethyl acetate and cyclohexane (30-70 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 720 mg of [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl- methyl-amino] -acetonitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.32 ; thin layer chromatography on silica; eluent: cyclohexane-ethyl acetate (50-50 by volume)).
Le [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-méthyl-amιno] - acétamide peut être obtenu de la manière suivante :The [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-methyl-amιno] - acetamide can be obtained in the following way:
A une solution de 700 mg d'acide [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)- 8-amιnooctanoyl-méthyl-amιno] -acétique dans 100 cm de di¬ chloromethane, on ajoute 0,72 cm d'ammoniaque à 20 %, 150 mg d'hy- drate de 1-hydroxybenzotriazole, et 380 mg de chlorhydrate de 1-(3- diméthylammopropyl) -3-éthylcarbodιιmide. La solution est agitée 15 heures à température ambiante puis la phase organique est décantée, lavée avec 30 cm d'acide chlorhydrique 1N puis avec 5 foisTo a solution of 700 mg of acid [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) - 8-amιnooctanoyl-methyl-amιno] -acetic in 100 cm of dichloromethane, 0 is added , 72 cm of 20% ammonia, 150 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate, and 380 mg of 1- (3-dimethylammopropyl) -3-ethylcarbodιιmide hydrochloride. The solution is stirred for 15 hours at room temperature then the organic phase is decanted, washed with 30 cm of 1N hydrochloric acid and then with 5 times
3 40 cm d'eau distillée, séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 0°C. Le résidu obtenu (630 mg) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de di¬ chloromethane et de methanol (97-3 en volumes) . Les fractions conte¬ nant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 500 mg de [N-(3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-méthyl-amιno] - acétamide sous la forme d'une meringue blanc crème (Rf = 0,32 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : dichloromé¬ thane-méthanol (95-5 en volumes)).3 40 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 0 ° C. The residue obtained (630 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and methanol (97-3 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 500 mg of [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctanoyl-methyl-amιno] are thus obtained - acetamide in the form of a creamy white meringue (Rf = 0.32; chromatography on a thin layer of silica; eluent: dichloromé¬ thane-methanol (95-5 by volume)).
L'acide [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl-methyl- amino] -acétique peut être obtenu de la manière suivante :The [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl-methyl-amino] -acetic acid can be obtained in the following manner:
Une solution de 167 mg de sarcosine, 406 mg de chlorotriméthylsilaneA solution of 167 mg of sarcosine, 406 mg of chlorotrimethylsilane
3 et 75 cm de dichloromethane est chauffée au reflux pendant3 and 75 cm of dichloromethane is heated at reflux for
15 heures. Cette solution est ensuite ajoutée à une solution conte¬ nant 1 g d'acide N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammoocta- noïque, 239 mg d'hydrate de 1 -hydroxybenzotriazole, 600 mg de chlor-15 hours. This solution is then added to a solution containing 1 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoic acid, 239 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate , 600 mg of chlor-
3 hydrate de 1 - (3-dιméthylammopropyl) -3-éthylcarbodιιmιde, et 75 cm3 hydrate of 1 - (3-dimethylammopropyl) -3-ethylcarbodιιmιde, and 75 cm
3 de dichloromethane. On ajoute ensuite 1 ,5 cm de triethylamine en solution dans 10 cm de dichloromethane. La solution est agitée3 of dichloromethane. 1.5 cm of triethylamine dissolved in 10 cm of dichloromethane are then added. The solution is agitated
50 heures à température ambiante puis le mélange réactionnel est lavé par 70 cm d'acide chlorhydrique 2N, puis par 3 fois 80 cm d'eau distillée, séché sur du sulfate de magnésium, filtré et concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,4 g) est chromatographie sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de dichloromethane, methanol et ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression ré¬ duite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 712 mg d'acide [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl- méthyl-ammo] -acétique sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,32 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).50 hours at room temperature then the reaction mixture is washed with 70 cm of 2N hydrochloric acid, then with 3 times 80 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.4 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane, methanol and 20% ammonia (12-3-0.5 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 712 mg of [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ammooctanoyl- methyl-ammo] -acetic acid are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0 , 32; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Exemple 12Example 12
A une solution de 1,4 g de N-(3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- ammooctylcarbamoylacétonitrile dans 20 cm de dichloromethane, on ajoute 0,8 cm d'azoture de triméthylsilyle et 270 mg de trichlorure d'aluminum. Le mélange réactionnel est agité pendant 72 heures à 20°C puis versé goutte à goutte en 30 minutes sur 50 cm d'une solution aqueuse à 10 % d'hydrogénocarbonate de sodium. La phase organique est décantée, la phase aqueuse est extraite par 2 fois 50 cm de dichloromethane. Les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec 50 cm d'eau distillée, séchées sur sulfate de magnésium puis évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 30°C. Le résidu obtenu (1,9 g) est chromatographie sur co¬ lonne de silice (0,02-0,045 mm) , éluée avec un mélange de chloro- forme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les frac¬ tions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1 g de 5- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarba- moylméthyl] -tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloro- forme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes)) .To a solution of 1.4 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- ammooctylcarbamoylacetonitrile in 20 cm of dichloromethane, 0.8 cm of trimethylsilyl azide and 270 mg of aluminum trichloride. The reaction mixture is stirred for 72 hours at 20 ° C. and then poured dropwise over 30 minutes onto 50 cm of a 10% aqueous solution of sodium hydrogencarbonate. The organic phase is decanted, the aqueous phase is extracted with 2 times 50 cm of dichloromethane. The combined organic phases are washed 3 times with 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 30 ° C. The residue obtained (1.9 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume) . The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarba- moylmethyl] -tetrazole is thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.25 ; thin layer chromatography on silica; eluent: 20% chloroform-methanol-ammonia (24-6-1 by volume)).
Une solution de 1 g de 5- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ami-A solution of 1 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ami-
3 3 nooctylcarbamoylméthyl] -tétrazole, 5,4 cm de soude N, 20 cm de tétrahydrofurane et 40 cm de methanol est agitée 72 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange est versé dans 10 cm d'une solution d'acide chlorhydrique N puis dilué avec 250 cm d'eau dis¬ tillée. Après 1 heure sous agitation à une température voisine de3 3 nooctylcarbamoylmethyl] -tetrazole, 5.4 cm of sodium hydroxide, 20 cm of tetrahydrofuran and 40 cm of methanol is stirred for 72 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture is poured into 10 cm of a hydrochloric acid N solution and then diluted with 250 cm of distilled water. After 1 hour with stirring at a temperature close to
3 20°C, le solide est filtré et lavé 4 fois par 10 cm d'eau distillée puis dissout dans 30 cm d'éthanol. La solution est filtrée, le fil- trat est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 50°C. Le résidu obtenu (140 mg) est repris par 15 cm d'oxyde d' isopropyle. Le solide obtenu est fitré, lavé par 2 fois3 20 ° C, the solid is filtered and washed 4 times with 10 cm of distilled water and then dissolved in 30 cm of ethanol. The solution is filtered, the filtrate is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 50 ° C. The residue obtained (140 mg) is taken up in 15 cm of isopropyl ether. The solid obtained is lumpy, washed twice
3 5 cm d'oxyde d' isopropyle puis séché sous vide (13,5 Pa) à une tem¬ pérature voisine de 40°C. On obtient ainsi 700 mg de 5-[N-(3β-hy- droxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarbamoylméthyl] -tétrazole sous la forme d'un solide blanc fondant vers 175°C.35 cm of isopropyl ether then dried under vacuum (13.5 Pa) at a temperature close to 40 ° C. 700 mg of 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarbamoylmethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid, melting at around 175 ° C.
Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarbamoylacétoni- trile peut être obtenu de la manière suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctylcarbamoylacetonitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 3,6 g de N- [3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -1 ,8- diaminooctane, 500 mg d'acide cyanoacetique, 1,06 g d'hydrate deTo a solution of 3.6 g of N- [3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -1, 8- diaminooctane, 500 mg of cyanoacetic acid, 1.06 g of hydrate
1-hydroxybenzotriazole, 2,76 g de chlorhydrate de 1- (3-diméthylamino- propyl) -3-éthylcarbodiimide dans 75 cm de dichloromethane, est1-hydroxybenzotriazole, 2.76 g of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride in 75 cm of dichloromethane, is
3 ajouté en environ 10 minutes, 3,6 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant 15 heures à une température voisine de 20°C puis le mélange réactionnel est lavé 3 fois avec 40 cm d'eau distillée. La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. Le résidu obtenu (4,8 g) est chromatographie sur co¬ lonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichloromé- thane et de methanol (99-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrés sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 3,7 g de N-(3β- acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctylcarbamoylacétonitrile sous la forme d'une meringue jaune (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 added in about 10 minutes, 3.6 cm of triethylamine. The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C., then the reaction mixture is washed 3 times with 40 cm of distilled water. The organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. The residue obtained (4.8 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichloromethane and methanol (99-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 3.7 g of N- (3β- acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amιnooctylcarbamoylacetonitrile are thus obtained in the form of a yellow meringue (Rf = 0.40; thin layer chromatography of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Le N- (3β-acéto:<ylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1 ,8-dιamιnooctane peut être obtenu de la manière* suivante :N- (3β-aceto: <ylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 8-dιamιnooctane can be obtained in the following way *:
50 cm d'une solution dans le dichloromethane de chlorure de 3β-acé- toxylup-20 (29) -èn-28-oyle (préparée à partir de 5 g d'acide 3β-acé- toxylup-20 (29) -èn-28-oïque) sont ajoutés goutte à goutte en environ 3 heures à une solution de 8,6 g de 1 ,8-dιamιnooctane dans 20 cm de dichloromethane. Le mélange réactionnel est agité durant 2 heures à une température voisine de 20°C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concen¬ trées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 5,9 g de N- [3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl]- 1 ,8-dιamιnooctane sous la forme d'une meringue jaune (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme- méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) .50 cm of a solution in dichloromethane of 3β-aceto-toxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride (prepared from 5 g of 3β-aceto-toxylup-20 (29) -en acid -28-oic) are added dropwise over about 3 hours to a solution of 8.6 g of 1,8-dιamιnooctane in 20 cm of dichloromethane. The reaction mixture is stirred for 2 hours at a temperature in the region of 20 ° C and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 5.9 g of N- [3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] - 1, 8-dιamιnooctane are thus obtained in the form of a yellow meringue (Rf = 0.25; layer chromatography thin silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia 20% (24-6-1 by volume)).
Exemple 13Example 13
A une solution de 2,1 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-7-ami- noheptycarbamoylacétomtrile dans 25 cm de dichloromethane, onTo a solution of 2.1 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-amino-noheptycarbamoylacetomtrile in 25 cm of dichloromethane, we
3 ajoute 1,07 cm d'azoture de triméthylsilyle et 410 mg de trichlorure d'alummum. Le mélange réactionnel est agité pendant 72 heures à 20°C puis versé goutte à goutte en 30 minutes sur 50 cm d'une solution aqueuse à 10 % d'hydrogénocarbonate de sodium. La phase organique est 3 décantée, la phase aqueuse est extraite par 2 fois 60 cm de dichloromethane. Les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec 50 cm d'eau distillée, séchées sur sulfate de magnésium puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,5 g) est chromatographie sur co¬ lonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloro¬ forme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les frac¬ tions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,4 g de 5-[N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarba- oylméthyl] -tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant: chloro- forme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) .3 adds 1.07 cm of trimethylsilyl azide and 410 mg of alummum trichloride. The reaction mixture is stirred for 72 hours at 20 ° C. and then poured dropwise over 30 minutes onto 50 cm of a 10% aqueous solution of sodium hydrogencarbonate. The organic phase is 3 decanted, the aqueous phase is extracted with 2 times 60 cm of dichloromethane. The combined organic phases are washed 3 times with 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.5 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume) . The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.4 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarba- oylmethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0 , 25; chromatography on a thin layer of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
Une solution de 1 g de 5- [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-A solution of 1 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-
3 3 aminoheptylcarba oylméthyl] -tétrazole, 8 cm de soude N, 25 cm de tétrahydrofurane et 50 cm de methanol est agitée 48 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange réactionnel est évaporé par¬ tiellement sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C jusqu'à l'apparition d'un trouble. Le mélange est alors aci- difié à un pH compris entre 1 et 2 par addition d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N. Après 2 heures sous agitation à une température voisine de 20°C, le solide est filtré et lavé 5 fois par3 3 aminoheptylcarba oylmethyl] -tetrazole, 8 cm of sodium hydroxide, 25 cm of tetrahydrofuran and 50 cm of methanol is stirred for 48 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The reaction mixture is partially evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C until a cloudy appearance occurs. The mixture is then acidified to a pH of between 1 and 2 by addition of an aqueous solution of hydrochloric acid N. After 2 hours with stirring at a temperature in the region of 20 ° C, the solid is filtered and washed 5 times through
5 cm 3 d'eau distillée puis dissout dans 50 cm3 d'éthanol. La solution est filtrée, le filtrat est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est repris par5 cm 3 of distilled water and then dissolved in 50 cm3 of ethanol. The solution is filtered, the filtrate is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained is taken up by
20 cm d'oxyde d'isopropyle. Le solide obtenu est fitré, lavé par 220 cm of isopropyl ether. The solid obtained is lumpy, washed in pairs
3 fois 5 cm d'oxyde d'isopropyle puis séché sous pression réduite3 times 5 cm of isopropyl ether and then dried under reduced pressure
(13,5 Pa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine(13.5 Pa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to
3 de 40°C. Le solide obtenu est mis en solution dans 20 cm de chloroforme, la solution est filtrée, le filtrat est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est repris par 20 cm d'oxyde d'isopropyle. Le solide3 of 40 ° C. The solid obtained is dissolved in 20 cm of chloroform, the solution is filtered, the filtrate is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained is taken up in 20 cm of isopropyl ether. The solid
3 obtenu est fitre, lavé par 2 fois 5 cm d'oxyde d'isopropyle puis séché sous vide (13,5 Pa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 900 mg de 5- [N-(3β-hydroxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-7- aminoheptylcarbamoylméthyl] -tétrazole sous la forme d'un solide blanc fondant vers 160°C.3 obtained is filter, washed with 2 times 5 cm of isopropyl ether then dried under vacuum (13.5 Pa) at a temperature close to 40 ° C. 900 mg of 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7- aminoheptylcarbamoylmethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid, melting at around 160 ° C.
Le N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-7-aminoheptylcarbamoyl-acéto- nitrile peut être obtenu de la manière suivante :N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoyl-acetonitrile can be obtained in the following way:
A une solution de 2,45 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1 ,7- diaminoheptane, 340 mg d'acide cyanoacetique, 730 g d'hydrate deTo a solution of 2.45 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7- diaminoheptane, 340 mg of cyanoacetic acid, 730 g of hydrate of
1-hydroxybenzotriazole, 1,9 g de chlorhydrate de 1- (3-diméthylamino-1-hydroxybenzotriazole, 1.9 g of 1- (3-dimethylamino-) hydrochloride
3 propyl) -3-éthylcarbodiimide dans 120 cm de dichloromethane, est3 propyl) -3-ethylcarbodiimide in 120 cm of dichloromethane, is
3 ajouté en environ 10 minutes, 2, 5 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant 15 heures à une température voisine de 20°C puis le mélange réactionnel est lavé 3 fois avec 50 cm d'eau distillée.3 added in about 10 minutes, 2.5 cm of triethylamine. The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C., then the reaction mixture is washed 3 times with 50 cm of distilled water.
La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. Le résidu obtenu (2,7 g) est chromatographie sur co¬ lonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichlorome¬ thane et de methanol (99-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrés sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 3,7 g de N-(3β- acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-7-aminoheptylcarbamoylacétonitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).The organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. The residue obtained (2.7 g) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichlorome¬ thane and methanol (99-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 3.7 g of N- (3β- acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoylacetonitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.40; thin layer chromatography of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Le N- [3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl] -1 ,7-diaminoheptane peut être obtenu de la manière suivante :The N- [3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following manner:
1000 cm d'une solution dans le dichloromethane de chlorure de 3β- acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyle .(préparée à partir de 30 g d'acide 3β- acétoxylup-20 (29) -èn-28-oïque) sont ajoutés goutte à goutte, en envi- ron 10 heures, à une solution de 46,8 g de 1 ,7-diaminoheptane dans1000 cm of a solution in dichloromethane of 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride. (Prepared from 30 g of 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28- acid oic) are added dropwise over approximately 10 hours to a solution of 46.8 g of 1,7-diaminoheptane in
120 cm de dichloromethane. Le mélange réactionnel est agité durant120 cm of dichloromethane. The reaction mixture is stirred for
15 heures à une température voisine de 20°C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le ré-15 hours at a temperature in the region of 20 ° C and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The re-
3 sidu est repris par 2000 cm d'eau distillée. Le solide est filtré, lavé par 3 fois 200 cm d'eau distillée, puis mis en solution dans 500 cm d'éthanol. La solution est filtrée, le solide est lavé 2 fois3 sidu is taken up in 2000 cm of distilled water. The solid is filtered, washed with 3 times 200 cm of distilled water, then dissolved in 500 cm of ethanol. The solution is filtered, the solid is washed 2 times
3 avec 50 cm d'éthanol et les filtrats sont évaporés à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 50°C. Le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. On obtient ainsi 28 g de N-(3β-acétoxylup-20(29) -èn-28- oyl) -1 ,7-diaminoheptane sous la forme d'une meringue jaune (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloro- forme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes)).3 with 50 cm of ethanol and the filtrates are evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 50 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. 28 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -1, 7-diaminoheptane are thus obtained in the form of a yellow meringue (Rf = 0.25; thin layer chromatography of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
Exemple 14Example 14
A une solution de 2,3 g de N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-ami- noheptylcarbamoylpropionitrile dans 25 cm de dichloromethane, onTo a solution of 2.3 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -7-amino-noheptylcarbamoylpropionitrile in 25 cm of dichloromethane,
3 ajoute 1,30 cm d'azoture de triméthylsilyle et 450 mg de trichlorure d'aluminium. Le mélange réactionnel est agité pendant 48 heures à 20°C puis 32 heures à une température proche du reflux. On ajoute à nouveau 1,30 cm d'azoture de triméthylsilyle et 450 mg de trichlo¬ rure d'aluminium et on chauffe 24 heures à une température voisine du reflux. Le mélange réactionnel est refroidi à 20°C puis versé goutte3 adds 1.30 cm of trimethylsilyl azide and 450 mg of aluminum trichloride. The reaction mixture is stirred for 48 hours at 20 ° C. and then 32 hours at a temperature close to reflux. Again, 1.30 cm of trimethylsilyl azide and 450 mg of aluminum trichloride are added and the mixture is heated for 24 hours at a temperature close to reflux. The reaction mixture is cooled to 20 ° C. and then poured dropwise
3 à goutte en 30 minutes sur 40 cm d'une solution aqueuse à 10 % d'hy- drogénocarbonate de sodium. La phase organique est décantée, la phase aqueuse est extraite par 3 fois 50 cm de dichloromethane. Les phases3 dropwise over 30 minutes on 40 cm of a 10% aqueous solution of sodium hydrogen carbonate. The organic phase is decanted, the aqueous phase is extracted with 3 times 50 cm of dichloromethane. The phases
3 organiques réunies sont lavées 3 fois avec 50 cm d'eau distillée, séchées sur sulfate de magnésium puis évaporées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (2,5 g) est traité par 25 cm d'oxyde d'isopropyle, puis lavé 3 fois par 5 cm d'oxyde d' isopropyle. Le solide obtenu (1,8 g) est mis en solution dans 25 cm de dichloromethane. La solution est filtrée sur celite. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le solide est traité par 20 cm d'oxyde d'isopropyle puis séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 1,5 g de 5- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-7-aminoheptylcarbamoylé- thyl] -tétrazole sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme- méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) ) .3 combined organics are washed 3 times with 50 cm of distilled water, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (2.5 g) is treated with 25 cm of isopropyl ether, then washed 3 times with 5 cm of isopropyl ether. The solid obtained (1.8 g) is dissolved in 25 cm of dichloromethane. The solution is filtered through celite. The filtrate is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The solid is treated with 20 cm of isopropyl ether and then dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 1.5 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoylethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0 , 25; thin layer chromatography on silica; eluent: 20% chloroform-methanol-ammonia (24-6-1 by volume)).
Une solution de 1 g de 5- [N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-7-A solution of 1 g of 5- [N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-
3 3 am oheptylcarbamoyléthyl]-tétrazole, 20 cm de soude N, 25 cm de3 3 am oheptylcarbamoylethyl] -tetrazole, 20 cm of sodium hydroxide, 25 cm of
3 tétrahydrofurane et 50 cm de methanol est agitée 72 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange dilué par 250 cm d'eau dis¬ tillée et acidifié à pH 1 par addition d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N. Après 1 heure sous agitation à une température voi-3 tetrahydrofuran and 50 cm of methanol is stirred for 72 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The mixture diluted with 250 cm of distilled water and acidified to pH 1 by addition of an aqueous solution of hydrochloric acid N. After 1 hour with stirring at a temperature
3 sine de 20°C, le solide est filtré et lavé 5 fois par 10 cm d'eau distillée puis traité par 5 fois 40 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont évaporées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu (700 mg) est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le solide obtenu (600 mg) est traité par 15 cm3 sine at 20 ° C, the solid is filtered and washed 5 times with 10 cm of distilled water and then treated with 5 times 40 cm of ethyl acetate. The combined organic phases are evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (700 mg) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The solid obtained (600 mg) is treated with 15 cm
3 d oxyde d'isopropyle, le solide est filtré, lavé 2 fois avec 5 cm d'oxyde d'isopropyle puis séché sur hydroxyde de potassium. On obtient ainsi 140 mg de 5-[N- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl) -7- ammoheptylcarbamoyléthyle] -tétrazole sous la forme d'un solide blanc fondant vers 110°C.3 d isopropyl oxide, the solid is filtered, washed twice with 5 cm of isopropyl oxide and then dried over potassium hydroxide. 140 mg of 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7- ammoheptylcarbamoylethyl] -tetrazole are thus obtained in the form of a white solid, melting at around 110 ° C.
Le N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-7-ammoheptylcarbamoylpropιo- nitrile peut être obtenu de la manière suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-ammoheptylcarbamoylpropιo- nitrile can be obtained in the following manner:
A une solution de 2,45 g de N- (3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-1 ,7- diaminoheptane, 400 mg d'acide 2-cyanopropιonιque, 730 g d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole, 1,9 g de chlorhydrate de 1- (3-dιméthylammo- propyl) -3-éthylcarbodιιmιde dans 120 cm de dichloromethane, estTo a solution of 2.45 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7- diaminoheptane, 400 mg of 2-cyanopropιonιque acid, 730 g of hydrate of 1 -hydroxybenzotriazole, 1.9 g of 1- (3-methylmethylpropopropyl) -3-ethylcarbodide hydrochloride in 120 cm of dichloromethane, is
3 ajouté en environ 10 minutes, 2, 5 cm de triethylamine. La solution est agitée pendant 15 heures à une température voisine de 20°C. Le mélange réactionnel est lavé 3 fois avec 50 cm d'eau distillée. La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. Le résidu obtenu (3,5 g) est chromatographie sur co- lonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichloromé- thane et de methanol (99-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrés sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 2,3 g de N-(3β- acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-7-aminoheptylcarbamoylpropionitrile sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,40 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (12-3-0,5 en volumes)).3 added in about 10 minutes, 2.5 cm of triethylamine. The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C. The reaction mixture is washed 3 times with 50 cm of distilled water. The organic phase is then dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. The residue obtained (3.5 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichlorome- thane and methanol (99-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 2.3 g of N- (3β- acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoylpropionitrile are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.40; thin layer chromatography of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (12-3-0.5 by volume)).
Le N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-1 ,7-diaminoheptane peut être obtenu de la manière suivante :The N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following manner:
3 1000 cm d'une solution dans le dichloromethane de chlorure de 3β- acétoxylup-20(29)-èn-28-oyle (préparée à partir de 30 g d'acide 3β- acétoxylup-20(29)-èn-28-oïque) sont ajoutés goutte à goutte en envi¬ ron 10 heures à une solution de 46,8 g de 1 ,7-diaminoheptane dans 120 cm de dichloromethane. Le mélange réactionnel est agité durant 15 heures à une température voisine de 20°C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le ré¬ sidu est repris par 2000 cm d'eau distillée. Le solide est filtré, lavé par 3 fois 200 cm d'eau distillée, puis mis en solution dans 500 cm d'éthanol. La solution est filtrée, le solide est lavé 2 fois avec 50 cm d'éthanol et les filtrats sont évaporés à sec sous pres¬ sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de- 50°C. Le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, methanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes) . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi¬ sine de 40°C. On obtient ainsi 28 g de N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl)-1 ,7-diaminoheptane sous la forme d'une meringue jaune (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloro- forme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes)).3 1000 cm of a dichloromethane solution of 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride (prepared from 30 g of 3β-acetoxylup-20 (29) -en-28- acid oic) are added dropwise over about 10 hours to a solution of 46.8 g of 1,7-diaminoheptane in 120 cm of dichloromethane. The reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 20 ° C and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue is taken up in 2000 cm of distilled water. The solid is filtered, washed with 3 times 200 cm of distilled water, then dissolved in 500 cm of ethanol. The solution is filtered, the solid is washed twice with 50 cm of ethanol and the filtrates are evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of -50 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and 20% ammonia (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of around 40 ° C. 28 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -1, 7-diaminoheptane are thus obtained in the form of a yellow meringue (Rf = 0.25; thin layer chromatography of silica; eluent: chloroform-methanol-ammonia at 20% (24-6-1 by volume)).
Exemple 15Example 15
En opérant par analogie avec l'exemple 10, le 5-{N-{ [3β-hydroxylup- 20(29)-èn-28-oyl]-8-aminooctanoyl}-2-aminopropyl (R,S)} tétrazole a été préparé à partir de l'acide N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanoyl}-2-aminobutanoïque (R,S)}. Le produit se présente sous la forme d'une poudre blanche; pF=130°C. L'acide N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl}-3- aminobutanoïque (R,S)} peut être préparé par analogie avec 1'acide [N- (3β-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl}-méthyl- a ino]acétique (exemple 11). L'acide N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl)-8-aminooctanoyl}-3-aminobutanoïque (R,S)} se présente sous la forme d'une meringue blanche (Rf=0,44 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : dichloromethane, acétate d'éthyle et methanol 40-40-20 (en volumes)).Using analogy with Example 10, 5- {N- {[3β-hydroxylup- 20 (29) -èn-28-oyl] -8-aminooctanoyl} -2-aminopropyl (R, S)} tetrazole a was prepared from N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8- aminooctanoyl} -2-aminobutanoic acid (R, S)}. The product is in the form of a white powder; mp = 130 ° C. N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl} -3- aminobutanoic acid (R, S)} can be prepared by analogy with [N- (3β -acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl} -methyl- a ino] acetic (Example 11). N- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28- oyl) -8-aminooctanoyl} -3-aminobutanoic acid (R, S)} is in the form of a white meringue (Rf = 0 , 44; thin layer chromatography on silica; eluent: dichloromethane, ethyl acetate and methanol 40-40-20 (by volume)).
Exemple 16Example 16
En opérant par analogie avec l'exemple 13, le 5-{N-[3β-hydroxylup- 20(29)-èn-28-oyl]-7-aminoheptyl- (N-méthylcarbamoyl) }méthyltétrazole a été préparé à partir de N-méthyl N-(3β-acétoxylup-20(29) -èn-28-oyl) - 1 ,7-diaminoheptane, pF=183°C.Using an analogy with Example 13, 5- {N- [3β-hydroxylup- 20 (29) -èn-28-oyl] -7-aminoheptyl- (N-methylcarbamoyl)} methyltetrazole was prepared from N-methyl N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) - 1,7-diaminoheptane, mp = 183 ° C.
Le N-méthyl-N'- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl) -1 ,7-diaminoheptane peut être obtenu de la manière suivante :N-methyl-N'- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1, 7-diaminoheptane can be obtained in the following way:
A une solution de 15,2 g d'iodure de N-méthyl 2-méthylthiobenzothia- zolium dans 300 cm' de dichloromethane, on ajoute une solution de 28,7 g de N-(3β-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-1 ,7-diaminoheptane dans 50 cm-* de dichloromethane puis en approximativement 15 minutes, 6,6 cm-* de triethylamine. La solution est agitée à une température voisine de 20°C durant 2 heures puis le mélange réactionnel est concentré sous pression atmosphérique à une température voisine de 60°C. A l'huile obtenue (35,6 g), on ajoute 150 cm-* d'iodure de méthyle et le mélange réactionnel est porté durant 30 heures à une température voisine du reflux. Le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 50°C. Le résidu huileux est repris par 300 cm-* d'oxyde de diéthyle et trituré. On obtient ainsi 39,8 g d'un solide orangé qui est mis en solution dans 100 cm-* de dichloromethane. A la solution obtenue, on ajoute 4,3 cm-* de n-butylamine. Le miélange réactionnel est agité 4 heures à une température voisine de 25°C, puis dilué par 300 cm-* de dichloromethane et lavé par 450 cm-* d'eau distillée. La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de magnésium et concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu obtenu est chromatographie sur une colonne de silice (0,02 - 0,045 mm) éluée avec un mélange de dichloromethane et de methanol 19-1 (en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40°C. On obtient ainsi 7,1 g (26%) de N- méthyl-N'- (3β-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyl)-1 ,7-diaminoheptane sous la forme d'une meringue blanche, pF=158°C.To a solution of 15.2 g of N-methyl 2-methylthiobenzothiazolium iodide in 300 cm 'of dichloromethane, a solution of 28.7 g of N- (3β-acetoxylup-20 (29) -en is added. -28-oyl) -1,7-diaminoheptane in 50 cm- * of dichloromethane then in approximately 15 minutes, 6.6 cm- * of triethylamine. The solution is stirred at a temperature in the region of 20 ° C for 2 hours and then the reaction mixture is concentrated under atmospheric pressure at a temperature in the region of 60 ° C. To the oil obtained (35.6 g), 150 cm 3 of methyl iodide are added and the reaction mixture is brought for 30 hours to a temperature close to reflux. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 50 ° C. The oily residue is taken up in 300 cm- * of diethyl ether and triturated. 39.8 g of an orange solid are thus obtained which is dissolved in 100 cm- * of dichloromethane. To the solution obtained, 4.3 cm- * of n-butylamine is added. The reaction mixture is stirred for 4 hours at a temperature in the region of 25 ° C, then diluted with 300 cm- * of dichloromethane and washed with 450 cm- * of distilled water. The organic phase is then dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 40 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02 - 0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and methanol 19-1 (by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 7.1 g (26%) of N-methyl-N'- (3β-acetoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -1,7-diaminoheptane are thus obtained in the form of a white meringue, mp = 158 ° C.
Exemple 17Example 17
En opérant par analogie avec l'exemple 14, on prépare le 5-{3-[N-(3β- hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoyl] -2,2-diméthylpro- pyl}tétrazole sous forme d'un solide blanc ; pF = 155°C.By operating by analogy with Example 14, 5- (3- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -en-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoyl] -2-2-dimethylpropyl) is prepared. } tetrazole as a white solid; mp = 155 ° C.
La présente invention concerne également les compositions pharmaceu¬ tiques contenant au moins un produit de formule générale (I) éven¬ tuellement sous forme de sel, à l'état pur ou sous forme d'une asso- ciation avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables, ou avec un autre agent destiné au traitement du SIDA, un agent antiviral, immunomodulateur ou antimi¬ crobien.The present invention also relates to the pharmaceutical compositions containing at least one product of general formula (I) possibly in the form of salt, in the pure state or in the form of a combination with one or more diluents or adjuvants compatible and pharmaceutically acceptable, or with another agent intended for the treatment of AIDS, an antiviral, immunomodulatory or anti-crobial agent.
La composition selon l'invention est capable de maintenir en vie les cellules infectées par un virus HIV et donc de réduire la progression vers le SIDA ou de diminuer sa gravité chez les sujets déjà infectés en réduisant la mortalité des cellules infectées. Les compositions peuvent être utilisées par voie orale, parentérale ou rectale.The composition according to the invention is capable of keeping cells infected with an HIV virus alive and therefore of reducing the progression to AIDS or of reducing its severity in subjects already infected by reducing the mortality of the infected cells. The compositions can be used orally, parenterally or rectally.
Les compositions peuvent être utilisées à titre curatif ou à titre préventif chez des sujets présentant une immunodéficience et/ou in¬ fectés par un virus HIV. Bien entendu, la constitution de ces compo¬ sitions sera adaptée au cas particulier du tractus digestif des immu¬ nodeprimes.The compositions can be used for curative or preventive purposes in subjects with immunodeficiency and / or infected with an HIV virus. Of course, the constitution of these compositions will be adapted to the particular case of the digestive tract of the immu¬ nodeprimes.
Comme compositions solides pour administration orale peuvent être utilisés des comprimés, des pilules, des gélules, des poudres ou des granulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention est mélangé à un ou plusieurs diluants ou adjuvants inertes, tels que saccharose, lactose ou amidon. Ces compositions peuvent comprendre des substances autres que les diluants, par exemple un lubrifiant tel que le stéarate de magnésium ou un enrobage destiné à une libération contrôlée.As solid compositions for oral administration, tablets, pills, capsules, powders or granules can be used. In these compositions, the active product according to the invention is mixed with one or more inert diluents or adjuvants, such as sucrose, lactose or starch. These compositions can include substances other than diluents, for example a lubricant such as magnesium stearate or a coating intended for controlled release.
Comme compositions liquides pour administration orale, on peut utiliser des solutions pharmaceutiquement acceptables, des suspen¬ sions, des émulsions, des sirops et des élixirs contenant des diluants inertes tels que l'eau ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple des produits mouillants, édulcorants ou aromatisants.As liquid compositions for oral administration, it is possible to use pharmaceutically acceptable solutions, suspensions, emulsions, syrups and elixirs containing inert diluents such as water or paraffin oil. These compositions can also include substances other than diluents, for example wetting, sweetening or flavoring products.
Les compositions pour administration parentérale, peuvent être des solutions stériles ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer le propylèneglycol, un polyéthylèneglycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques injectables, par exemple 1 'oléate d'éthyle.The compositions for parenteral administration can be sterile solutions or emulsions. As solvent or vehicle, propylene glycol, a polyethylene glycol, vegetable oils, in particular olive oil, injectable organic esters, for example ethyl oleate can be used.
Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants.These compositions can also contain adjuvants, in particular wetting agents, isotonizers, emulsifiers, dispersants and stabilizers.
La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple à l'aide d'un filtre bactériologique, par irradiation ou par chauffage. Elles peuvent également être préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent être dissoutes au moment de l'emploi dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable.Sterilization can be done in several ways, for example using a bacteriological filter, by irradiation or by heating. They can also be prepared in the form of sterile solid compositions which can be dissolved at the time of use in sterile water or any other sterile injectable medium.
Les compositions par administration rectale sont les suppositoires ou les capsules rectales, qui contiennent outre le principe actif, des excipients tels que le beurre de cacao, des glycérides semi- synthétiques ou des polyéthylèneglycols.The compositions for rectal administration are suppositories or rectal capsules, which contain, in addition to the active principle, excipients such as cocoa butter, semi-synthetic glycerides or polyethylene glycols.
En thérapeutique humaine, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction d'un traitement préventif ou curatif, en fonction de l'âge, du poids, du degré de l'infection et des autre facteurs propres au sujet à traiter. Généralement, les doses sont comprises entre 10 et 100 mg/kg par voie orale pour un adulte. La présente invention concerne également les associations constituées d'un ou plusieurs dérivés du lupane de formule générale (I) , et/ou le cas échéant leurs sels, et d'un autre principe actif connu pour son activité anti-rétrovirus, éventuellement en présence d'excipients pharmaceutiquement acceptables.In human therapy, the doctor will determine the dosage he considers most appropriate based on preventive or curative treatment, depending on the age, weight, degree of infection and other factors specific to the subject to treat. Generally, the doses are between 10 and 100 mg / kg orally for an adult. The present invention also relates to combinations consisting of one or more lupane derivatives of general formula (I), and / or where appropriate their salts, and of another active principle known for its anti-retrovirus activity, optionally in the presence pharmaceutically acceptable excipients.
Les agents anti-rétrovirus pouvant être associés sont choisis parmi des agents compatibles et inertes vis-à-vis du dérivé du lupane de formule générale (I) . A titre non limitatif ces agents sont choisis parmi des inhibiteurs de la reverse transcriptase [zidovudine (AZT) , didanosine (DDI) , didéoxycytidine (DDC) , TIBO, névirapine, PMEA, D4T, pyridones, α-APA, HEPT... ], parmi des inhibiteurs de la protéase [comme par exemple le RO 31-8959 ou le A 77003], ou parmi des inhibi¬ teurs de la protéine tat [comme par exemple le RO 24-7429] .The anti-retrovirus agents which can be combined are chosen from agents which are compatible and inert with respect to the lupane derivative of general formula (I). Without limitation, these agents are chosen from reverse transcriptase inhibitors [zidovudine (AZT), didanosine (DDI), dideoxycytidine (DDC), TIBO, nevirapine, PMEA, D4T, pyridones, α-APA, HEPT ...] , among protease inhibitors [such as RO 31-8959 or A 77003], or among inhibitors of the tat protein [such as RO 24-7429].
L'exemple suivant illustre une composition selon l'invention.The following example illustrates a composition according to the invention.
ExempleExample
On prépare selon la technique habituelle des comprimés de produit actif ayant la composition suivante :Active product tablets having the following composition are prepared according to the usual technique:
- 5-[N'- [N-[3β-hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl] -8-aminooctanoyl] - aminométhyl] -tétrazole ' * 100 mg- 5- [N'- [N- [3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl] -8-aminooctanoyl] - aminomethyl] -tetrazole '* 100 mg
- amidon 332 mg- starch 332 mg
- silice 120 mg- silica 120 mg
- stéarate de magnésium 12 mg - magnesium stearate 12 mg

Claims

REVENΓJTCATTONSREVENΓJTCATTONS
1 - Un dérivé du lupane de formule générale :1 - A lupane derivative of general formula:
H3C CH3 H 3 C CH 3
dans laquelle :in which :
R représente un radical de formule générale :R represents a radical of general formula:
X est une liaison ou représente un radical carbamoyle, N-méthyl carbamoyle, aminocarbonyle ou N-méthylaminocarbonyle,X is a bond or represents a carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl radical,
Y est une liaison ou représente un radical meta ou para phénylène,Y is a bond or represents a meta or para phenylene radical,
R° et R°° identiques ou différents sont des atomes d'hydrogène ou des radicaux méthyle (étant entendu que tous les motifs -CR°R°° ne sont pas nécessairement identiques entre eux) et,R ° and R °° identical or different are hydrogen atoms or methyl radicals (it being understood that all the units -CR ° R °° are not necessarily identical to each other) and,
n est un nombre entier de 6 à 12, m est un nombre entier de 0 à 3 et p est un nombre entier de 0 à 2 étant entendu que m + n + p est com- pris entre 6 et 14, etn is an integer from 6 to 12, m is an integer from 0 to 3 and p is an integer from 0 to 2 on the understanding that m + n + p is between 6 and 14, and
R*- est un radical méthyle, hydroxyméthyle ou un radical -CH2OR' ou -CH2SR' pour lequel R' est alcoyle ou hydroxyalcoyle,R * - is a methyl or hydroxymethyl radical or a -CH2OR 'or -CH2SR' radical for which R 'is alkyl or hydroxyalkyl,
étant entendu que les radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbone, ainsi que leurs sels et le cas échéant leurs formes stéréoisomères et leurs mélanges. 2 - Un dérivé du lupane selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu'il s'agit du 5-{N"- [N- (3β-hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl)-8-amino- octanoyl]-aminométhyl}-tétrazole.it being understood that the alkyl radicals are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms, as well as their salts and, where appropriate, their stereoisomeric forms and their mixtures. 2 - A lupane derivative according to claim 1, characterized in that it is 5- {N "- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-amino - octanoyl] -aminomethyl} -tetrazole.
3 - Un dérivé du lupane selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu'il s'agit du 5- [4-{N- [N'- (3β-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-amino- octanoyl] -amino}-phényl] -tétrazole.3 - A lupane derivative according to claim 1, characterized in that it is 5- [4- {N- [N'- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) - 8-amino-octanoyl] -amino} -phenyl] -tetrazole.
4 - Un dérivé du lupane selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu'il s'agit du 5-[N- (3β-hydroxylup-20(29) -èn-28-oyl)-7-aminoheptyl- carbamoylméthyl] -tétrazole.4 - A lupane derivative according to claim 1, characterized in that it is 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptyl- carbamoylmethyl] - tetrazole.
5 - Un dérivé du lupane selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu'il s'agit du 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl)-7-aminoheptyl- carbamoylméthyl] -tétrazole.5 - A lupane derivative according to claim 1, characterized in that it is 5- [N- (3β-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -7-aminoheptyl- carbamoylmethyl] - tetrazole.
6 - Procédé de préparation d'un dérivé du lupane selon la revendica¬ tion 1, caractérisé en ce que l'on fait agir un azoture sur un nitrile de formule générale :6 - Process for the preparation of a lupane derivative according to claim 1, characterized in that an azide is made to act on a nitrile of general formula:
CNCN
H3C CH3 H 3 C CH 3
dans laquelle R-| R°, R°°, X, Y, n, m, et p sont définis comme dans la revendication 1 , puis élimine le cas échéant des radicaux protecteurs et transforme éventuellement le produit obtenu en un sel.in which R- | R °, R °°, X, Y, n, m, and p are defined as in claim 1, then if necessary eliminates protective radicals and optionally transforms the product obtained into a salt.
7 - Procédé de préparation d'un dérivé du lupane selon la revendica¬ tion 1 , pour lequel X (dans le radical R) représente un radical car¬ bamoyle ou aminocarbonyle éventuellement N-méthylé et les autres radicaux sont définis comme dans la revendication 1 , caractérisé en ce que l'on fait agir une aminé ou un acide de formules générales : 517 - Process for the preparation of a lupane derivative according to claims 1, for which X (in the radical R) represents a caramoyl or aminocarbonyl radical optionally N-methylated and the other radicals are defined as in claim 1 , characterized in that an amino or an acid of general formulas is made to act: 51
ouor
dans lesquelles R°, R°°, m et p sont définis comme dans la revendi¬ cation 1 et R" ' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, sur un dérivé du lupane de formule générale :in which R °, R °°, m and p are defined as in claims 1 and R "'is a hydrogen atom or a methyl radical, on a lupane derivative of general formula:
H3C CH3 H 3 C CH 3
dans laquelle R** est défini comme dans la revendication 1 et R" représente un radical de formule générale' : (CH2)n—COOH ou (CH2)n-NH—R"'in which R ** is defined as in claim 1 and R "represents a radical of general formula ': (CH 2 ) n — COOH or (CH 2 ) n-NH — R"'
dans lesquelles n est défini comme dans la revendication 1 et R"' est défini comme ci-dessus, puis élimine le cas échéant des radicaux protecteurs et transforme éventuellement le produit obtenu en un sel.in which n is defined as in claim 1 and R "'is defined as above, then if necessary eliminates protective radicals and optionally transforms the product obtained into a salt.
8 - Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient au moins un produit selon la revendication 1, à l'état pur ou en as¬ sociation avec tout diluant ou adjuvant compatible et pharmaceuti- quement acceptable et/ou en association avec un autre principe actif antiviral, immunomodulateur ou antimicrobien. 8 - Pharmaceutical composition characterized in that it contains at least one product according to claim 1, in the pure state or in combination with any compatible and pharmaceutically acceptable diluent or adjuvant and / or in combination with another principle antiviral, immunomodulatory or antimicrobial active.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5658947A (en) * 1995-03-21 1997-08-19 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Method and composition for selectively inhibiting melanoma using betalinic acid
US5869535A (en) * 1995-03-21 1999-02-09 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Method and composition for selectively inhibiting melanoma
US5750578A (en) * 1997-02-11 1998-05-12 Regents Of The University Of Minnesota Use of betulin and analogs thereof to treat herpesvirus infection
EP1473301A3 (en) * 1997-06-04 2005-01-26 Cornell Research Foundation, Inc. Betulinol derivatives
US6482857B1 (en) 1998-07-17 2002-11-19 The University Of Texas Southwestern Medical Center Compositions which contain triterpenes for regulating hair growth
US6124362A (en) 1998-07-17 2000-09-26 The Procter & Gamble Company Method for regulating hair growth
US6369101B1 (en) 1999-02-26 2002-04-09 Regents Of The University Of Minnesota Therapeutic method to treat herpes virus infection
NZ524087A (en) * 2000-08-18 2004-08-27 Univ Illinois Prodrugs of betulinic acid derivatives for the treatment of cancer and HIV
EP1802648A2 (en) 2004-09-10 2007-07-04 Cornell Research Foundation, Inc. Betulinol derivatives as anti-cancer agents
JP2008543945A (en) * 2005-06-22 2008-12-04 ミリアド ジェネティクス， インコーポレイテッド Antiviral compounds

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01143832A (en) * 1987-12-01 1989-06-06 Toa Nenryo Kogyo Kk Carcinostatic agent

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01143832A (en) * 1987-12-01 1989-06-06 Toa Nenryo Kogyo Kk Carcinostatic agent

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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