EA044996B1 - USE OF ANTI-CD70 ANTIBODY, ARGX-110 FOR THE TREATMENT OF ACUTE MYELOID LEUKEMIA - Google Patents
USE OF ANTI-CD70 ANTIBODY, ARGX-110 FOR THE TREATMENT OF ACUTE MYELOID LEUKEMIA Download PDFInfo
- Publication number
- EA044996B1 EA044996B1 EA202090061 EA044996B1 EA 044996 B1 EA044996 B1 EA 044996B1 EA 202090061 EA202090061 EA 202090061 EA 044996 B1 EA044996 B1 EA 044996B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- patient
- dose
- aml
- antigen
- Prior art date
Links
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 title claims description 170
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 121
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 title description 157
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 116
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 106
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 claims description 91
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 87
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 87
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 87
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 87
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 86
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 claims description 84
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 70
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 69
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 59
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 56
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims description 56
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims description 54
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 claims description 49
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 49
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 49
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 claims description 45
- 101150000157 ARHGEF1 gene Proteins 0.000 claims description 43
- 238000000506 liquid--solid chromatography Methods 0.000 claims description 43
- 101150055452 lsc gene Proteins 0.000 claims description 43
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 claims description 41
- 208000036676 acute undifferentiated leukemia Diseases 0.000 claims description 40
- XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 5-aza-2'-deoxycytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 36
- 229960003603 decitabine Drugs 0.000 claims description 36
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 36
- 238000011368 intensive chemotherapy Methods 0.000 claims description 32
- 229940075628 hypomethylating agent Drugs 0.000 claims description 31
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 30
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 claims description 30
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 claims description 27
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 27
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 claims description 20
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 17
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 claims description 12
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 claims description 12
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 claims description 10
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000011134 hematopoietic stem cell transplantation Methods 0.000 claims description 7
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 5
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 claims description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012664 BCL-2-inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 229940123711 Bcl2 inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 101000617830 Homo sapiens Sterol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100021993 Sterol O-acyltransferase 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 101000697584 Streptomyces lavendulae Streptothricin acetyltransferase Proteins 0.000 claims description 3
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 229940097396 Aminopeptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 229940126074 CDK kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 102100034770 Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945639 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Proteins 0.000 claims description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 claims description 2
- 102000015689 E-Selectin Human genes 0.000 claims 1
- 101000932478 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Proteins 0.000 claims 1
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 claims 1
- 102100020718 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Human genes 0.000 claims 1
- 208000026784 acute myeloblastic leukemia with maturation Diseases 0.000 claims 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 claims 1
- 231100001023 lymphopenia Toxicity 0.000 claims 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims 1
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 52
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 48
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 48
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 45
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 33
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 31
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 28
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 26
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 26
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 25
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 23
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 20
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 20
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 19
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 19
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 18
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 18
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 15
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 15
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 15
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 13
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 13
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 13
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 101150103927 Numb gene Proteins 0.000 description 10
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 10
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 10
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 10
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 206010033661 Pancytopenia Diseases 0.000 description 9
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 9
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 9
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 9
- 208000024389 cytopenia Diseases 0.000 description 9
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 9
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 8
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 8
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 7
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 102000053826 human CD70 Human genes 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 7
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 6
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 6
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 6
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 6
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 6
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 6
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 208000016586 myelodysplastic syndrome with excess blasts Diseases 0.000 description 6
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 6
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 5
- 101000800116 Homo sapiens Thy-1 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 5
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 5
- 208000033501 Refractory anemia with excess blasts Diseases 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 5
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 4
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 4
- BXTJCSYMGFJEID-XMTADJHZSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[6-[3-[(2r)-2-amino-2-carboxyethyl]sulfanyl-2,5-dioxopyrrolidin-1-yl]hexanoyl-methylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methoxy-5-methylheptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-3-met Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C)[C@@H](OC)[C@@H]1CCCN1C(=O)C[C@H]([C@H]([C@@H](C)CC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CCCCCN1C(C(SC[C@H](N)C(O)=O)CC1=O)=O)C(C)C)OC)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BXTJCSYMGFJEID-XMTADJHZSA-N 0.000 description 3
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 3
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 3
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 3
- 101000740070 Homo sapiens BMP and activin membrane-bound inhibitor homolog Proteins 0.000 description 3
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 208000013685 acquired idiopathic sideroblastic anemia Diseases 0.000 description 3
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 3
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 231100000371 dose-limiting toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 3
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 3
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007499 CD27 Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 description 2
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 102100037241 Endoglin Human genes 0.000 description 2
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 2
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102000003964 Histone deacetylase Human genes 0.000 description 2
- 108090000353 Histone deacetylase Proteins 0.000 description 2
- 101100220044 Homo sapiens CD34 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000881679 Homo sapiens Endoglin Proteins 0.000 description 2
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 2
- 101001008874 Homo sapiens Mast/stem cell growth factor receptor Kit Proteins 0.000 description 2
- 101000835093 Homo sapiens Transferrin receptor protein 1 Proteins 0.000 description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000012011 Isocitrate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108010075869 Isocitrate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102100027754 Mast/stem cell growth factor receptor Kit Human genes 0.000 description 2
- 208000035490 Megakaryoblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000035489 Monocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 206010038270 Refractory anaemia with an excess of blasts Diseases 0.000 description 2
- 208000009527 Refractory anemia Diseases 0.000 description 2
- 206010072684 Refractory cytopenia with unilineage dysplasia Diseases 0.000 description 2
- 208000032411 Refractory with Excess of Blasts Anemia Diseases 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000013593 acute megakaryoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000020700 acute megakaryocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000011418 maintenance treatment Methods 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- -1 or both) Substances 0.000 description 2
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000011536 re-plating Methods 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 208000019112 therapy-related myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000016557 Acute basophilic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010000871 Acute monocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010000890 Acute myelomonocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 1
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000033775 Basophilic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000001805 Bromodomains Human genes 0.000 description 1
- 108050009021 Bromodomains Proteins 0.000 description 1
- 102100029380 CMRF35-like molecule 2 Human genes 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010008583 Chloroma Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 102100030886 Complement receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 108010043471 Core Binding Factor Alpha 2 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 230000007067 DNA methylation Effects 0.000 description 1
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 1
- 206010014950 Eosinophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 1
- 101000990046 Homo sapiens CMRF35-like molecule 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000727061 Homo sapiens Complement receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000914496 Homo sapiens T-cell antigen CD7 Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 101000679907 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 27 Proteins 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000019025 Hypokalemia Diseases 0.000 description 1
- 206010051792 Infusion related reaction Diseases 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 208000032376 Lung infection Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000016397 Methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000033835 Myelomonocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 1
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 206010059361 Pleuropericarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000006093 RNA methylation Effects 0.000 description 1
- 102100025373 Runt-related transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 description 1
- 206010048762 Tooth infection Diseases 0.000 description 1
- 102100022202 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 27 Human genes 0.000 description 1
- 102000016548 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010053096 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1 Proteins 0.000 description 1
- GUWXKKAWLCENJA-WGWHJZDNSA-N [(2r,3s,5r)-5-(2-amino-6-oxo-3h-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2r,3s,5r)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)C1 GUWXKKAWLCENJA-WGWHJZDNSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000011912 acute myelomonocytic leukemia M4 Diseases 0.000 description 1
- 238000011226 adjuvant chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000017047 asymmetric cell division Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000033026 cell fate determination Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 201000010902 chronic myelomonocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000002809 confirmatory assay Methods 0.000 description 1
- 238000011441 consolidation chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000007821 culture assay Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 230000003583 cytomorphological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000000375 direct analysis in real time Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000012063 dual-affinity re-targeting Methods 0.000 description 1
- 230000002888 effect on disease Effects 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004049 epigenetic modification Effects 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 229950001546 guadecitabine Drugs 0.000 description 1
- 231100000226 haematotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001096 hypoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011419 induction treatment Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 238000007798 limiting dilution analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 238000002624 low-dose chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012083 mass cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 208000012846 myelodysplastic syndrome with excess blasts-1 Diseases 0.000 description 1
- 208000012847 myelodysplastic syndrome with excess blasts-2 Diseases 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005987 myeloid sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 208000024896 potassium deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000013102 re-test Methods 0.000 description 1
- 206010067959 refractory cytopenia with multilineage dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012128 staining reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007755 survival signaling Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 229950000302 vadastuximab Drugs 0.000 description 1
- BNJNAEJASPUJTO-DUOHOMBCSA-N vadastuximab talirine Chemical compound COc1ccc(cc1)C2=CN3[C@@H](C2)C=Nc4cc(OCCCOc5cc6N=C[C@@H]7CC(=CN7C(=O)c6cc5OC)c8ccc(NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN9C(=O)C[C@@H](SC[C@H](N)C(=O)O)C9=O)C(C)C)cc8)c(OC)cc4C3=O BNJNAEJASPUJTO-DUOHOMBCSA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Description
Область изобретенияField of invention
Настоящее изобретение относится к способам лечения острого миелоидного лейкоза (AML) и миелодиспластического синдрома (MDS), а также к композициям и комбинациям, подходящим для использования в указанных способах.The present invention relates to methods for treating acute myeloid leukemia (AML) and myelodysplastic syndrome (MDS), as well as compositions and combinations suitable for use in these methods.
Уровень техникиState of the art
Острый миелоидный лейкоз (AML) является гетерогенным заболеванием, характеризующимся неконтролируемой клональной экспансией гемопоэтических клеток-предшественников. AML является наиболее распространенным острым лейкозом, поражающим взрослых, с ежегодной заболеваемостью среди взрослых в Европе от 5 до 8 случаев на 100000 человек и резким увеличением популяции в возрасте старше 70 лет, где заболеваемость достигает 15-25/на 100000 в год.Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous disease characterized by uncontrolled clonal expansion of hematopoietic progenitor cells. AML is the most common acute leukemia affecting adults, with an annual incidence among adults in Europe of 5 to 8 cases per 100,000 people and a sharp increase in the population over the age of 70 years, where the incidence reaches 15-25/per 100,000 per year.
Статистика выживания, опубликованная компанией Cancer Research UK для AML, диагностированного в Англии в период между 2008 и 2010 годами, для всех возрастов показывает, что приблизительно 20% пациентов выживают в течение 5 или более лет после постановки диагноза. Прогностические факторы неблагоприятного исхода включают возраст пациента, AML, индуцированный лечением, и миелодиспластический синдром в анамнезе или другое предшествующие гематологическое расстройства. Пятилетняя выживаемость среди людей в возрасте 65 лет и старше составляет приблизительно 5%.Survival statistics published by Cancer Research UK for AML diagnosed in England between 2008 and 2010, for all ages, show that approximately 20% of patients survive 5 years or more after diagnosis. Predictors of poor outcome include patient age, treatment-induced AML, and a history of myelodysplastic syndrome or other preexisting hematologic disorder. The five-year survival rate for people age 65 and older is approximately 5%.
Химиотерапия, либо как единственный агент или как комбинированное лечение, используется для лечения большинства типов лейкозов. При соответствующих условиях может также применяться химиотерапия в высоких дозах с последующей трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Приблизительно от 60% до 70% взрослых с AML получат статус полной ремиссии (CR) после соответствующей индукционной терапии, и можно ожидать, что около 45% тех, кто достигнет CR, выживут 3 или более лет и могут быть излечены (Американское онкологическое общество). Тем не менее, нежелательные явления химиотерапии могут наложить значительное бремя на пациента, и многим пациентам не подходит стандартная интенсивная химиотерапия. Поэтому желательны альтернативные методы лечения AML.Chemotherapy, either as a single agent or as a combination treatment, is used to treat most types of leukemia. Under appropriate conditions, high-dose chemotherapy followed by hematopoietic stem cell transplantation may also be used. Approximately 60% to 70% of adults with AML will achieve complete remission (CR) status after appropriate induction therapy, and about 45% of those who achieve CR can be expected to survive 3 years or more and may be cured (American Cancer Society) . However, adverse events of chemotherapy can impose a significant burden on the patient, and many patients are not suitable for standard intensive chemotherapy. Therefore, alternative treatments for AML are desirable.
Сущность изобретенияThe essence of the invention
CD70 представляет собой антиген клеточной поверхности, который обычно экспрессируется в небольшом подмножестве активированных В- и Т-лимфоцитов, а также в зрелых дендритных клетках и участвует в дифференцировке лимфоцитов и передаче сигналов выживания при связывании с его родственным рецептором на клеточной поверхности, CD27. Индуцированная CD70 передача сигналов CD27 приводит к увеличению продукции и активации регуляторных Т-клеток, которые экспрессируют CD27.CD70 is a cell surface antigen that is typically expressed on a small subset of activated B and T lymphocytes, as well as mature dendritic cells, and is involved in lymphocyte differentiation and survival signaling upon binding to its cognate cell surface receptor, CD27. CD70-induced CD27 signaling leads to increased production and activation of regulatory T cells that express CD27.
CD70 экспрессируется на низком уровне или не экспрессируется в нормальных тканях, включая все жизненно важные органы. CD70 сверхэкспрессируется в нескольких типах опухолей, часто вместе с CD27 в гематологических злокачественных опухолях, предполагая его участие в пролиферации и выживание злокачественных клеток. CD70 также, по-видимому, играет роль в уклонении от иммунного надзора, индуцируя Treg, тем самым способствуя росту опухоли.CD70 is expressed at low levels or not expressed in normal tissues, including all vital organs. CD70 is overexpressed in several tumor types, often together with CD27 in hematological malignancies, suggesting its involvement in the proliferation and survival of malignant cells. CD70 also appears to play a role in immune evasion by inducing Tregs, thereby promoting tumor growth.
Считается, что ингибирование сигнального пути CD70-CD27 на регуляторных Т-клетках препятствует рекрутированию и/или активации регуляторных Т-клеток, тем самым потенциально восстанавливая иммунологический контроль пациента в микроокружении опухоли.Inhibition of the CD70-CD27 signaling pathway on regulatory T cells is thought to prevent the recruitment and/or activation of regulatory T cells, thereby potentially restoring patient immunological control in the tumor microenvironment.
Настоящее изобретение впервые демонстрирует эффективное лечение AML и MDS у людей антителом против CD70. Лечение согласно изобретению эффективно даже после однократного введения антитела против CD70 и даже в неожиданно низкой дозе. Не только антитело против CD70, вводимое в качестве монотерапии, является удивительно эффективным, но в настоящем описании также продемонстрировано, что комбинированная терапия антитела против CD70 вместе с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI) приводит к дополнительной эффективности. Используемая в настоящем описании комбинированная терапия согласно изобретению не требует одновременного введения двух или более активных агентов или того, чтобы два или более агентов были включены в одну композицию.The present invention demonstrates for the first time the effective treatment of AML and MDS in humans with an anti-CD70 antibody. The treatment according to the invention is effective even after a single administration of the anti-CD70 antibody and even at a surprisingly low dose. Not only is anti-CD70 antibody administered as monotherapy remarkably effective, but the present disclosure also demonstrates that combination therapy of anti-CD70 antibody along with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI) results in additional efficacy. As used herein, the combination therapy of the invention does not require the simultaneous administration of two or more active agents or that two or more agents be included in one composition.
У пациентов с AML, получавших терапию, представленную в настоящем описании, частота ответа была выше чем 90%, причем у 2 из каждых 3 пациентов достигнута полная ремиссия. Эти результаты представляют собой значительный прогресс в лечении AML для всех пациентов.In patients with AML treated with the therapy described herein, the response rate was greater than 90%, with 2 out of every 3 patients achieving complete remission. These results represent significant advances in the treatment of AML for all patients.
Как показано в прилагаемых примерах, лечение согласно изобретению значительно снижает процент бластов костного мозга у пациента. Как уже отмечалось, лечение согласно изобретению значительно уменьшало количество бластов до такой степени, что у пациентов наступала полная ремиссия. Кроме того, существенное снижение процента бластов костного мозга у пациента важно, если пациент рассчитывает на успешную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток (HSCT), терапию, которая может привести к излечению. Важно отметить, что лечение согласно изобретению привело к прогрессированию пациента для трансплантации.As shown in the accompanying examples, the treatment according to the invention significantly reduces the percentage of bone marrow blasts in the patient. As already noted, treatment according to the invention significantly reduced the number of blasts to such an extent that patients went into complete remission. In addition, a significant reduction in the patient's bone marrow blast percentage is important if the patient expects to receive a successful hematopoietic stem cell transplant (HSCT), a therapy that can lead to a cure. It is important to note that treatment according to the invention resulted in the patient progressing to transplantation.
Примечательно, что лечение согласно изобретению эффективно лечит AML без какой-либо наблюдаемой повышенной токсичности по сравнению с той, о которой сообщалось при обычном лечении NMI.Notably, the treatment of the invention effectively treats AML without any observed increased toxicity compared to that reported with conventional NMI treatment.
Это важно для всех пациентов с AML. Стандартная интенсивная химиотерапия для AML сопровождается значительной токсичностью, и многие пациенты испытывают серьезные побочные эффекты. Ограниченная токсичность, связанная с эффективным лечением в соответствии с настоящим изобретением, демонстрирует потенциал описанных в настоящем документе способов лечения для обеспеченияThis is important for all AML patients. Standard intensive chemotherapy for AML is associated with significant toxicity, and many patients experience serious side effects. The limited toxicity associated with effective treatment in accordance with the present invention demonstrates the potential of the treatments described herein to provide
- 1 044996 улучшенного лечения AML для всех пациентов.- 1,044,996 improved AML treatment for all patients.
Удивительная эффективность лечения в соответствии с изобретением имеет дальнейшее значение с учетом особенностей пациентов, вовлеченных в исследование. Подвергаемым лечению пациентам не подходила стандартная химиотерапия, потому что они не были достаточно приспособлены, чтобы переносить токсичность, связанную с обычной интенсивной химиотерапией.The surprising effectiveness of the treatment according to the invention is of further significance given the characteristics of the patients involved in the study. The treated patients were not eligible for standard chemotherapy because they were not fit enough to tolerate the toxicity associated with conventional intensive chemotherapy.
Поскольку считается, что стандартная интенсивная химиотерапия необходима для достаточного уменьшения количества бластов в костном мозге, HSCT в настоящее время недоступна для этих пациентов. Однако, как показано в настоящем документе, монотерапия и комбинированная терапия согласно настоящему изобретению значительно снижают бласты AML у пациентов, которые не могут получить стандартную интенсивную химиотерапию. Соответственно, методы лечения, предлагаемые в соответствии с изобретением, открывают перспективу успешной HSCT в популяции пациентов, для которых HSCT ранее не рекомендовали. Еще одним значительным преимуществом того факта, что антитела против CD70 могут эффективно лечить AML как в качестве монотерапии, так и в качестве мощной комбинированной терапии с нуклеозидным метаболическим ингибитором, является то, что они позволяют использовать целый ряд моделей лечения. Например, комбинированная терапия с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI) обеспечивает мощную терапию, возникающую из-за эффектов антител CD70, усиливающихся за счет положительной регуляции CD70 на бластах в ответ на NMI (in vitro и in vivo (фиг. 1)). Это обеспечивает эффективную терапию с пониженной токсичностью по сравнению со стандартной интенсивной химиотерапией, что особенно важно для пациентов, которые недостаточно здоровы, чтобы переносить стандартную интенсивную химиотерапию. Монотерапия антителами против CD70 обеспечивает эффективное лечение без необходимости даже в NMI. Это дополнительно снижает токсичность, избегая влияния NMI на небластные клетки, что может привести к снижению риска развития цитопении у пациента. Снижая риск возникновения цитопении, пациент менее подвержен риску заражения и требует меньше переливаний крови.Because standard intensive chemotherapy is thought to be necessary to sufficiently reduce the number of blasts in the bone marrow, HSCT is not currently available for these patients. However, as shown herein, monotherapy and combination therapy according to the present invention significantly reduce AML blasts in patients who cannot receive standard intensive chemotherapy. Accordingly, the treatment methods proposed in accordance with the invention open the prospect of successful HSCT in a population of patients for whom HSCT has not previously been recommended. Another significant benefit of the fact that anti-CD70 antibodies can effectively treat AML either as monotherapy or as a potent combination therapy with a nucleoside metabolic inhibitor is that it allows for a range of treatment models. For example, combination therapy with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI) provides potent therapy resulting from the effects of CD70 antibodies enhanced by the upregulation of CD70 on blasts in response to NMI (in vitro and in vivo (Figure 1)). This provides an effective therapy with reduced toxicity compared to standard intensive chemotherapy, which is especially important for patients who are not healthy enough to tolerate standard intensive chemotherapy. Anti-CD70 monotherapy provides effective treatment without the need for even NMI. This further reduces toxicity by avoiding the effects of NMI on non-blast cells, which may result in a reduced risk of the patient developing cytopenia. By reducing the risk of cytopenia, the patient is less likely to become infected and requires fewer blood transfusions.
Другой моделью лечения, доступной по настоящему изобретению, является индукционная и поддерживающая модель. Таким образом, индукционное лечение с использованием комбинации антител против CD70 вместе с нуклеозидным метаболическим ингибитором (с необязательной нагрузочной дозой антитела против CD70) может быть использовано для мощного снижения процента бластов AML в костном мозге. Затем пациент может перейти на поддерживающее лечение антителами против CD70 индивидуально или в комбинации с более низкими дозами NMI. Преимущество этой модели состоит в том, что уменьшение бластов может поддерживаться без необходимости подвергать пациента потенциальной накопленной токсичности при длительном введении нуклеозидного метаболического ингибитора.Another treatment model available with the present invention is the induction and maintenance model. Thus, induction treatment using a combination of anti-CD70 antibodies together with a nucleoside metabolic inhibitor (with an optional loading dose of anti-CD70 antibody) can be used to potently reduce the percentage of AML blasts in the bone marrow. The patient can then switch to maintenance treatment with anti-CD70 antibodies alone or in combination with lower doses of NMI. The advantage of this model is that blast reduction can be maintained without the need to expose the patient to the potential accumulated toxicity of long-term administration of a nucleoside metabolic inhibitor.
Более того, такое поддерживающее лечение индивидуально антителом против CD70 специфически подавляет бластные клетки (которые экспрессируют CD70) с минимальным воздействием на другие типы клеток (которые имеют минимальный уровень CD70 или не экспрессируют его). Поскольку введение нуклеозидного метаболического ингибитора может быть прекращено или уменьшено, цитотоксическое давление на небластные типы клеток снижается, что позволяет этим клеткам пролиферировать. Преимущество этого заключается в снижении риска цитопении, возникающей в результате длительного лечения NMI, поскольку клетки других типов (например, тромбоциты, эритроциты, нейтрофилы) могут восстанавливаться, в то время как на бласты AML нацеливается антитело против CD70.Moreover, such maintenance treatment with an individual anti-CD70 antibody specifically suppresses blast cells (which express CD70) with minimal effect on other cell types (which have minimal or no CD70 expression). Since the administration of the nucleoside metabolic inhibitor can be stopped or reduced, the cytotoxic pressure on non-blast cell types is reduced, allowing these cells to proliferate. This has the advantage of reducing the risk of cytopenia resulting from long-term NMI treatment, since other cell types (eg, platelets, red blood cells, neutrophils) can be regenerated while AML blasts are targeted by anti-CD70 antibody.
Кроме того, в настоящем описании продемонстрировано, что введение антитела против CD70, индивидуально или в комбинации с NMI, способствует дифференцировке LSC в миелоидные клетки. Стимулирование такой дифференцировки снижает популяцию LSC, способных к самообновлению. LSC вносят значительный вклад в распространение и поддержание заболевания, обеспечивая самообновление пула злокачественных клеток. Таким образом, индуцируя дифференцировку LSC, введение антитела против CD70, индивидуально или в комбинации с NMI, уменьшает популяцию LSC, тем самым увеличивая вероятность ремиссии и снижая риск рецидива.In addition, the present description demonstrates that administration of an anti-CD70 antibody, alone or in combination with NMI, promotes the differentiation of LSCs into myeloid cells. Stimulating such differentiation reduces the population of LSCs capable of self-renewal. LSCs make a significant contribution to the spread and maintenance of the disease by ensuring the self-renewal of the malignant cell pool. Thus, by inducing LSC differentiation, administration of anti-CD70 antibody, alone or in combination with NMI, reduces the LSC population, thereby increasing the likelihood of remission and reducing the risk of relapse.
Соответственно, в одном аспекте изобретение относится к способу лечения острого миелоидного лейкоза (AML) или миелодиспластического синдрома (MDS) у пациента, включающему: введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.Accordingly, in one aspect, the invention provides a method of treating acute myeloid leukemia (AML) or myelodysplastic syndrome (MDS) in a patient, comprising: administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте предложен способ уменьшения процента бластов в костном мозге и/или периферической крови пациента с AML или MDS, причем способ включает введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In a further aspect, there is provided a method of reducing the percentage of blasts in the bone marrow and/or peripheral blood of a patient with AML or MDS, the method comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте предложен способ подготовки пациента с AML или MDS для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT), включающий введение пациенту одной или более терапевтически эффективных доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In an additional aspect, there is provided a method of preparing a patient with AML or MDS for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), comprising administering to the patient one or more therapeutically effective doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте изобретение относится к антителу против CD70 или его антигенсвязывающему фрагменту для применения в способе лечения острого миелоидного лейкоза (AML) или миелодиспластического синдрома (MDS) у пациента, включающем введение пациенту одной или более доз антитело против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In a further aspect, the invention provides an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof for use in a method of treating acute myeloid leukemia (AML) or myelodysplastic syndrome (MDS) in a patient, comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте изобретение относится к антителу против CD70 или его антигенсвязывающему фрагменту для применения в способе уменьшения количества бластных клеток AML у пациенIn a further aspect, the invention provides an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof for use in a method for reducing the number of AML blast cells in patients
- 2 044996 та, причем способ включает введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.- 2 044996 that, the method comprising administering to a patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте изобретение относится к антителу против CD70 для применения в способе подготовки пациента с AML или MDS для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT), включающем введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In a further aspect, the invention provides an anti-CD70 antibody for use in a method of preparing a patient with AML or MDS for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции для применения в способе лечения острого миелоидного лейкоза (AML) или миелодиспластического синдрома (MDS) у пациента, включающем введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента, причем фармацевтическая композиция содержит антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или носитель.In a further aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition for use in a method of treating acute myeloid leukemia (AML) or myelodysplastic syndrome (MDS) in a patient, comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof, wherein the pharmaceutical composition comprises an anti-CD70 antibody or an antigen binding fragment thereof and a pharmaceutically acceptable excipient or carrier.
В дополнительном аспекте предложена фармацевтическая композиция для применения в способе уменьшения бластных клеток AML у пациента, причем способ включает введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In an additional aspect, a pharmaceutical composition is provided for use in a method of reducing AML blast cells in a patient, the method comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте предложена фармацевтическая композиция для применения в способе подготовки пациента с AML или MDS для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT), включающая введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In an additional aspect, a pharmaceutical composition is provided for use in a method of preparing a patient with AML or MDS for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте предложено антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент для применения при лечении AML, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент вводят в комбинации с гипометилирующим агентом, предпочтительно азацитидином.In a further aspect, an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is provided for use in the treatment of AML, wherein the antibody or antigen-binding fragment is administered in combination with a hypomethylating agent, preferably azacitidine.
В некоторых вариантах осуществления способов по изобретению антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 0,1 до 25 мг/кг на дозу, необязательно в дозе в диапазоне от 1 до 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг или 20 мг/кг. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 10 мг/кг.In some embodiments of the methods of the invention, the anti-CD70 antibody or antigen binding fragment thereof is administered at a dose ranging from 0.1 to 25 mg/kg per dose, optionally at a dose ranging from 1 to 20 mg/kg. In some embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose of 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg, or 20 mg/kg. In some preferred embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose of 10 mg/kg.
В некоторых вариантах осуществления всех аспектов способов по изобретению способ дополнительно включает введение нуклеозидного метаболического ингибитора (NMI), например гипометилирующего агента (НМА). В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой азацитидин или децитабин.In some embodiments of all aspects of the methods of the invention, the method further comprises administering a nucleoside metabolic inhibitor (NMI), such as a hypomethylating agent (HMA). In some embodiments, the NMI is azacitidine or decitabine.
В некоторых вариантах осуществления способы согласно изобретению включают: (i) первую стадию, включающую введение антитела против CD70 и нуклеозидного метаболического ингибитора в качестве комбинированной терапии в соответствии со схемами дозирования, описанными в настоящем документе, и (ii) вторую стадию, включающую введение антитела против CD70 в соответствии со схемами дозирования, описанными в настоящем документе, и введение более низкой дозы нуклеозидного метаболического ингибитора, чем доза нуклеозидного метаболического ингибитора, вводимая на первой стадии.In some embodiments, the methods of the invention comprise: (i) a first step comprising administering an anti-CD70 antibody and a nucleoside metabolic inhibitor as a combination therapy in accordance with the dosing regimens described herein, and (ii) a second step comprising administering an anti-CD70 antibody. CD70 in accordance with the dosing regimens described herein, and administering a lower dose of nucleoside metabolic inhibitor than the dose of nucleoside metabolic inhibitor administered in the first stage.
В некоторых вариантах осуществления пациенту не подходит стандартная интенсивная химиотерапия до лечения согласно изобретению.In some embodiments, the patient is not eligible for standard intensive chemotherapy prior to treatment according to the invention.
В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно включают проведение трансплантации гемопоэтических стволовых клеток пациенту.In some embodiments, the methods further comprise performing a hematopoietic stem cell transplant into a patient.
В некоторых вариантах осуществления возраст пациента составляет 60 лет или старше, необязательно 75 лет или старше.In some embodiments, the patient's age is 60 years or older, optionally 75 years or older.
В некоторых вариантах осуществления изобретение дополнительно включает введение одного или более из активных агентов, выбранных из антитела против CD33, антитела против CD123, ингибитора Еселектина, ингибитора FLT3, ингибитора циклин-зависимой киназы, ингибитора BCL-2, ингибитора аминопептидазы и ингибитора JAK/STAT как часть комбинированной терапии.In some embodiments, the invention further includes administering one or more active agents selected from an anti-CD33 antibody, an anti-CD123 antibody, an Eselectin inhibitor, a FLT3 inhibitor, a cyclin-dependent kinase inhibitor, a BCL-2 inhibitor, an aminopeptidase inhibitor, and a JAK/STAT inhibitor as part of combination therapy.
В дополнительном аспекте изобретение относится к комбинации, содержащей антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI. В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой гипометилирующий агент. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления гипометилирующий агент представляет собой азацитидин или децитабин, предпочтительно азацитидин.In an additional aspect, the invention relates to a combination comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and an NMI. In some embodiments, NMI is a hypomethylating agent. In some preferred embodiments, the hypomethylating agent is azacitidine or decitabine, preferably azacitidine.
В дополнительном аспекте изобретение относится к комбинации, содержащей антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI, для применения в способе лечения AML или MDS. В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой гипометилирующий агент. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления гипометилирующий агент представляет собой азацитидин или децитабин, предпочтительно азацитидин.In an additional aspect, the invention provides a combination comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and NMI, for use in a method of treating AML or MDS. In some embodiments, NMI is a hypomethylating agent. In some preferred embodiments, the hypomethylating agent is azacitidine or decitabine, preferably azacitidine.
В дополнительном аспекте изобретение относится к комбинации, содержащей антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI, для применения в способе согласно изобретению.In a further aspect, the invention relates to a combination comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and an NMI for use in the method of the invention.
Во всех аспектах изобретения антитело против CD70 может ингибировать взаимодействие CD70 с его рецептором CD27. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвяIn all aspects of the invention, an anti-CD70 antibody can inhibit the interaction of CD70 with its receptor CD27. In some embodiments, an anti-CD70 antibody or antigen thereof
- 3 044996 зывающий фрагмент могут ингибировать связывание CD70-CD27. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент могут ингибировать передачу сигналов, индуцированную CD70-CD27.- 3 044996 calling fragment can inhibit CD70-CD27 binding. In some embodiments, an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof can inhibit CD70-CD27-induced signaling.
Во всех аспектах изобретения антитело против CD70 может обладать эффекторной функцией антитела, например антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичностью (ADCC), комплементзависимой цитотоксичностью (CDC) и/или антителозависимым клеточным фагоцитозом (ADCP). В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент могут истощать экспрессирующие CD70 клетки, например, через эффекторную функцию антитела.In all aspects of the invention, the anti-CD70 antibody may have an antibody effector function, such as antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC), complement-dependent cytotoxicity (CDC), and/or antibody-dependent cellular phagocytosis (ADCP). In some embodiments, an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof can deplete CD70-expressing cells, for example, through an antibody effector function.
В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может представлять собой модифицированное антитело, например конъюгат лекарственное средство-антитело (ADC). Как описано в настоящем документе в другом месте, ADC представляют собой антитела, конъюгированные с активным агентом, таким как цитотоксический агент. ADC могут также обладать одной или более эффекторными функциями антитела в дополнение к доставке активного агента к мишени.In some embodiments, the anti-CD70 antibody may be a modified antibody, such as an antibody drug conjugate (ADC). As described elsewhere herein, ADCs are antibodies conjugated to an active agent, such as a cytotoxic agent. ADCs may also have one or more antibody effector functions in addition to delivering the active agent to the target.
В некоторых вариантах осуществления всех аспектов изобретения антитело против CD70 содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), где домены VH и VL содержат CDR:In some embodiments of all aspects of the invention, the anti-CD70 antibody comprises a heavy chain variable domain (VH) and a light chain variable domain (VL), wherein the VH and VL domains contain CDRs:
HCDR3, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 3 (DAGYSNHVPIFDS) HCDR2, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 2 (DINNEGGTTYYADSVKG) HCDR1, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 1 (VYYMN) LCDR3, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 7 (ALFISNPSVE) LCDR2, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 6 (NTNTRHS), и LCDR1, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 5 (GLKSGSVTSDNFPT). В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат домен VH, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% идентичный SEQ ID NO: 4 и/или содержат домен VL, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% идентичный SEQ ID NO: 8. Для вариантов осуществления, в которых домены антител или антигенсвязывающих фрагментов определяются по определенному проценту идентичности последовательности с эталонной последовательностью, домены VH и/или VL могут сохранять последовательности CDR, идентичные тем, которые присутствуют в эталонной последовательности, так что присутствует вариация только в каркасных областях.HCDR3 containing or consisting of SEQ ID NO: 3 (DAGYSNHVPIFDS) HCDR2 containing or consisting of SEQ ID NO: 2 (DINNEGGTTYYADSVKG) HCDR1 containing or consisting of SEQ ID NO: 1 (VYYMN) LCDR3 containing or consisting of SEQ ID NO: 7 (ALFISNPSVE) LCDR2 containing or consisting of SEQ ID NO: 6 (NTNTRHS), and LCDR1 containing or consisting of SEQ ID NO: 5 (GLKSGSVTSDNFPT). In some embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen binding fragment thereof comprises a VH domain that is at least 80%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99% identical SEQ ID NO: 4 and/or contain a VL domain that is at least 80%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99% identical to SEQ ID NO : 8. For embodiments in which antibody or antigen binding fragment domains are defined by a certain percentage of sequence identity to a reference sequence, the VH and/or VL domains may retain CDR sequences identical to those present in the reference sequence such that variation is only present in frame areas.
В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 представляет собой антитело IgG1.In some embodiments, the anti-CD70 antibody is an IgG1 antibody.
Во всех аспектах изобретения антитело против CD70 предпочтительно представляет собой ARGX110.In all aspects of the invention, the anti-CD70 antibody is preferably ARGX110.
Во всех аспектах изобретения предпочтительным вариантом осуществления является комбинация ARGX-110 и азацитидина.In all aspects of the invention, the preferred embodiment is the combination of ARGX-110 and azacitidine.
Во всех аспектах изобретения пациентом является человек.In all aspects of the invention, the patient is a human.
Краткое описание чертежейBrief description of drawings
Фиг. 1: αCD70/децитабин комбинированная терапия уничтожает человеческие CD34+CD38- AML стволовые клетки/клетки-предшественники в мышиных ксенотрансплантатах. (a-i) 5x106 очищенных FACS клеток CD45dimSSClQ из ВМ вновь диагностированных пациентов с AML (пациент Р10 и Р21) инъецировали внутривенно в хвостовую вену мышей NSG, облученных сублетально. После приживления (день 32 (Р10) и день 97 (Р25) после трансплантации) мышей рандомизировали и подвергали обработке контрольным mAb и 10 мг/кг aCD70 mAb (41D12-D) внутрибрюшинно (всего 3 инъекции) или децитабином и (1,5 мг/кг/день) в течение пяти дней подряд индивидуально или в комбинации. Через один день после последней обработки животных умерщвляли и анализировали кровь, селезенку и ВМ. (а) Экспериментальная установка. (b) экспрессия CD70 на стволовых клетках/клетках-предшественниках CD34+CD38- AML. Изотип изображен серым цветом; окрашивание CD70 в черный (Р10) и синий (Р25). Сплошные линии представляют носитель и пунктирные линии - лечение децитабином на стволовых клетках/клетках-предшественниках AML. AMFI: окрашивание MFI - изотип MFI (с) кратное изменение экспрессии CD70 на не-CD34+CD38’ суммарных и CD34+CD38’стволовых клетках/клеткахпредшественниках AML (Veh против D). (d) Типичные графики FACS приживления клеток CD45+ AML человека в ВМ мышей PDX. (е) Частота клеток CD45+ AML человека в ВМ мышей PDX AML. (f) Абсолютное количество CD45dimSSClolin’CD90’CD34+ стволовых клеток/клеток-предшественников AML в ВМ. (g) Репрезентативные графики FACS и (h) количественная оценка, указывающая частоту CD38- клеток AML в популяции CD45dimSSClolin’CD90’CD34+ AML стволовых/клеток-предшественников, (i) Частота клеток CD45RA+ в популяции CD45dimSSClolin’CD90’CD34+CD38’ AML стволовых клеток/клетокпредшественников. Данные представлены как среднее ± SD Статистика: (b, с) t-критерий Стьюдента; (е, f, h, i) однофакторный ANOVA; Пост-тест Тьюки; Р<0,05; **, Р<3,01; ***, Р<0,001.Fig. 1: αCD70/decitabine combination therapy depletes human CD34+CD38 - AML stem/progenitor cells in murine xenografts. (ai) 5x106 FACS purified CD45 dim SSC lQ cells from the BM of newly diagnosed AML patients (patient P10 and P21) were injected intravenously into the tail vein of sublethal irradiated NSG mice. After engraftment (day 32 (P10) and day 97 (P25) after transplantation), mice were randomized and treated with control mAb and 10 mg/kg aCD70 mAb (41D12-D) intraperitoneally (3 injections total) or decitabine and (1.5 mg /kg/day) for five consecutive days, individually or in combination. One day after the last treatment, animals were sacrificed and blood, spleen, and BM were analyzed. (a) Experimental setup. (b) CD70 expression on CD34+CD38 - AML stem/progenitor cells. The isotype is shown in gray; CD70 staining black (P10) and blue (P25). Solid lines represent vehicle and dotted lines decitabine treatment on AML stem/progenitor cells. AMFI: MFI staining - MFI isotype (c) fold change in CD70 expression on non-CD34 + CD38' total and CD34 + CD38' AML stem/progenitor cells (Veh vs. D). (d) Representative FACS plots of human CD45 + AML cell engraftment in the VM of PDX mice. (f) Frequency of human CD45 + AML cells in the VM of PDX AML mice. (f) Absolute number of CD45 dim SSC lo lin'CD90'CD34 + AML stem/progenitor cells in VM. (g) Representative FACS plots and (h) quantification indicating the frequency of CD38 − AML cells in the CD45 dim SSC lo lin'CD90'CD34 + AML stem/progenitor cell population, (i) Frequency of CD45RA + cells in the CD45 dim SSC lo population lin'CD90'CD34 + CD38' AML stem/progenitor cells. Data are presented as mean ± SD Statistics: (b, c) Student's t test; (e, f, h, i) one-way ANOVA; Tukey post test; P<0.05; **, P<3.01; ***, P<0.001.
Фиг. 2: Обработка НМА индуцирует экспрессию CD70 в первичных стволовых клетках/клеткахпредшественниках AML. (а) Репрезентативные графики FACS экспрессии CD70 на стволовых/клеткахпредшественниках lin’CD90+CD34+CD38 AML после культивирования в присутствии или в отсутствие 0,5 мМ децитабина (D) или носителя (Veh). Изотип: серый; CD70: черный. (b) жизнеспособность клеток,Fig. 2: HMA treatment induces CD70 expression in primary AML stem/progenitor cells. (a) Representative FACS plots of CD70 expression on lin'CD90 + CD34 + CD38 AML stem/progenitor cells after culture in the presence or absence of 0.5 mM decitabine (D) or vehicle (Veh). Isotype: gray; CD70: black. (b) cell viability,
- 4 044996 (с) кратное изменение AMFI CD70 и (d) экспрессия мРНК CD70 (AML: n=9-15; здоровые: n=3). (е) Репрезентативный график FACS и (f) кратное изменение MFI CD70 на стволовых клетках/клеткахпредшественниках периферической крови пациентов с AML при диагностике и после 1 цикла лечения децитабином или азацитидином (D (5), 20 мг/кг, ежедневно для 5 дней; А (7), 75 мг/м2, ежедневно в течение 7 дней).- 4 044996 (c) AMFI CD70 fold change and (d) CD70 mRNA expression (AML: n=9-15; healthy: n=3). (e) Representative FACS plot and (f) fold change in CD70 MFI on peripheral blood stem/progenitor cells of AML patients at diagnosis and after 1 cycle of treatment with decitabine or azacitidine (D(5), 20 mg/kg, daily for 5 days; A (7), 75 mg/ m2 , daily for 7 days).
Фиг. 3: Совместная обработка α-CD70/децитабином снижает способность к повторному посеву стволовых клеток-предшественников CD34+CD38- AML человека, (ab) FACS-очищенные linCD90 CD34+CD38-стволовые клетки/клетки-предшественники из ВМ недавно диагностированных пациентов с AML (Р6, Р8, Р11) культивировали в течение ночи в трех экземплярах в присутствии или в отсутствие 10 мг/мл анти-CD70 (CD70) mAb или 0,5 мМ децитабина индивидуально или в комбинации с последующим посевом в метилцеллюлозу, содержащую aCD70 и децитабин или их оба. Колонии и клетки подсчитывали через 14 дней, (а) Колонии на 1x103 посеянных клеток. (b) Клетки на колонию, (с) Эксперименты по серийному повторному посеву, (df) FACS-очищенные стволовые клетки/клетки-предшественники linCD90+CD34+CD38- из ВМ здоровых доноров культивировали и высевали в метилцеллюлозу, как описано в (ас), (d) Колонии на 1x103 клеток покрытия, (d) Клетки на колонию, (f) Эксперименты серийного повторного посева.Данные представлены в виде среднего значения ± SD Статистика: однофакторныйANOVA. Пост-тест Даннетта (против aCD70/D); *, Р<0,05; **, Р<0,01; ***, Р<0,001.Fig. 3: α-CD70/decitabine co-treatment reduces the reseeding capacity of human CD34+CD38 - AML stem/progenitor cells, (ab) FACS-purified linCD90 CD34 + CD38 - stem/progenitor cells from the VM of newly diagnosed AML patients ( P6, P8, P11) were cultured overnight in triplicate in the presence or absence of 10 mg/ml anti-CD70 (CD70) mAb or 0.5 mM decitabine alone or in combination, followed by plating in methylcellulose containing aCD70 and decitabine or both of them. Colonies and cells were counted after 14 days, (a) Colonies per 1x103 plated cells. (b) Cells per colony, (c) Serial replating experiments, (df) FACS-purified linCD90+CD34+CD38 - stem/progenitor cells from BM of healthy donors were cultured and seeded in methylcellulose as described in (ac) , (d) Colonies per 1x103 coating cells, (d) Cells per colony, (f) Serial replating experiments. Data are presented as mean ± SD Statistics: one-way ANOVA. Dunnett's post test (against aCD70/D); *, P<0.05; **, P<0.01; ***, P<0.001.
Фиг. 4: Схематическое изображение схемы лечения пациентов, включенных в открытое исследование с повышением дозы, с подтверждением концептуальной когорты ARGX-110 в комбинации с AZA.Fig. 4: Schematic representation of the treatment regimen of patients enrolled in the open-label, dose-escalation study supporting the proof-of-concept cohort of ARGX-110 in combination with AZA.
Фиг. 5 (а): Окончание лечения (EOT): дата EOT является последней датой, в которую вводят ARGX110. Визит планируется в течение 7 дней после EOT. (b) Временные интервалы следующие: - в момент времени до введения дозы: до 4 ч до инфузии ARGX-110 (день-14 и день 17 в каждом цикле) или введения AZA (дни 1, 3 и 7) - в 0 ч (в конце инфузии ARGX-110) ±30 мин и в 2 ч (после окончания инфузии ARGX-110): ±30 мин - в 24 ч: ±4 ч - в момент времени после введения дозы (день X): в течение 2 ч после окончания инфузии ARGX-110; (с) за 4 часа до инфузии ARGX-110 в день-14 и в день 3 и день 17 в циклах 1-4 и в цикле 8 (если применимо), а также в EOT и последующих визитах; (d) Образец молекулярной генетики может быть использован для характеристики метилирования промоторов CD70 и CD11а и для анализа геномной ДНК эффекта лечения на заболевание и патологию-мишень. Начиная с цикла >3, отбор проб следует проводить перед введением AZA в каждом нечетном цикле в день 1 (т.е. C3D1, C5D1,...) до полной ремиссии (CR, CRi); (e) Образец генной экспрессии будет использоваться для характеристики уровней мРНК CD70, маркеров болезни и лекарственного эффекта. Начиная с цикла >3, отбор проб следует проводить перед введением AZA в каждом нечетном цикле в день 1 (т.е. C3D1, C5D1,...) до полной ремиссии (CR, CRi); (f) Образец проточной цитометрии (FACS) может использоваться для дополнительной характеристики минимального анализа остаточных заболеваний, экспрессии CD70 и CD27 и действия лекарственного средства (например, бласт, NK и Т-клетки). Начиная с цикла >3, отбор проб следует проводить перед введением AZA в каждом нечетном цикле в день 1 (т.е. C3D1, C5D1,...) до полной ремиссии (CR, CRi); (g) Образец сыворотки может быть использован для дополнительной характеристики sCD27, маркеров болезни и лекарственного эффекта, анализа воспалительных цитокинов. Начиная с цикла >3, отбор проб следует проводить перед введением AZA в каждом нечетном цикле в день 1 (т.е. C3D1, C5D1,...) до полной ремиссии (CR, CRi); (h) Определение стволовости будет проводиться на мононуклеарных клетках, очищенных из крови или костного мозга. В зависимости от количества собранных клеток, считывание данных может включать окрашивание Numb (определить соотношение асимметричного/симметричного деления), клеточные и in vivo исследования (оценить потенциал стволовых клеток, например, с помощью анализа колонии с CFU метилцеллюлозой или исследования выживания мышей NSG, которым инъецировали мононуклеарные клетки пациента); (i) Сроки отбора проб биопсии аспиратов для оценки реакции комбинированного лечения должны проводиться при каждом нечетном цикле в 1-й день (т.е. C3D1, C5D1,...) до полной ремиссии (CR, CRi) и в EOT, если клинически не противопоказано. Для пациентов, достигших CRmrd_, дополнительная аспирация/биопсия ВМ будет собрана не ранее, чем через 4 недели после CRmrd_, чтобы подтвердить ответ. Дополнительные образцы аспирата/биопсии могут быть взяты, как указано лечащим врачом, и будут рассматриваться как связанные с исследованием образцы; (j) Если получены доказательства уменьшения воздействия ARGX-110 на сыворотку и/или увеличения ADA при длительном лечении, могут быть получены дополнительные образцы PK и/или ADA; (k) образец костного мозга, который необходимо взять, если это не противопоказано с медицинской точки зрения; (l) Образец супернатанта костного мозга можно использовать для оценки концентрации sCD27 и влияния лечения на заболевание и патологию-мишень.Fig. 5(a): End of Treatment (EOT): The EOT date is the last date on which ARGX110 is administered. The visit is scheduled within 7 days of EOT. (b) Time intervals are as follows: - at the predose time point: up to 4 hours before ARGX-110 infusion (day-14 and day 17 in each cycle) or AZA administration (days 1, 3 and 7) - at 0 hours ( at the end of the ARGX-110 infusion) ±30 min and at 2 hours (after the end of the ARGX-110 infusion): ±30 min - at 24 hours: ±4 hours - at the post-dose time point (day X): within 2 hours after completion of ARGX-110 infusion; (c) 4 hours before ARGX-110 infusion on day-14 and on day 3 and day 17 in cycles 1-4 and cycle 8 (if applicable), and at EOT and subsequent visits; (d) A molecular genetics sample can be used to characterize CD70 and CD11a promoter methylation and to analyze genomic DNA of the effect of treatment on the disease and target pathology. From cycle >3 onwards, sampling should be done before AZA administration on every odd cycle on day 1 (ie C3D1, C5D1,...) until complete remission (CR, CRi); (e) Gene expression patterns will be used to characterize CD70 mRNA levels, disease markers, and drug effect. From cycle >3 onwards, sampling should be done before AZA administration on every odd cycle on day 1 (ie C3D1, C5D1,...) until complete remission (CR, CRi); (f) Flow cytometry (FACS) sample can be used to further characterize minimal residual disease analysis, CD70 and CD27 expression, and drug effects (eg, blast, NK, and T cells). From cycle >3 onwards, sampling should be done before AZA administration on every odd cycle on day 1 (ie C3D1, C5D1,...) until complete remission (CR, CRi); (g) The serum sample can be used for further characterization of sCD27, markers of disease and drug effect, and inflammatory cytokine analysis. From cycle >3 onwards, sampling should be done before AZA administration on every odd cycle on day 1 (ie C3D1, C5D1,...) until complete remission (CR, CRi); (h) Stemness determination will be performed on mononuclear cells purified from blood or bone marrow. Depending on the number of cells collected, readouts may include Numb staining (to determine the ratio of asymmetric/symmetric division), cellular and in vivo studies (to evaluate stem cell potential, e.g. using a CFU methylcellulose colony assay or a survival study of NSG injected mice patient's mononuclear cells); (i) Timing of sampling of biopsy aspirates to assess response to combination treatment should be performed at every odd cycle on day 1 (i.e. C3D1, C5D1,...) until complete remission (CR, CRi) and at EOT if not clinically contraindicated. For patients achieving CR mrd _, additional VM aspiration/biopsy will be collected no earlier than 4 weeks after CR mrd _ to confirm response. Additional aspirate/biopsy specimens may be collected as directed by the treating physician and will be considered study-related specimens; (j) If there is evidence of decreased serum exposure to ARGX-110 and/or increased ADA with long-term treatment, additional PK and/or ADA samples may be obtained; (k) a bone marrow sample to be taken unless medically contraindicated; (l) A bone marrow supernatant sample can be used to assess sCD27 concentration and the effect of treatment on the disease and target pathology.
Фиг. 6: Бластную нагрузку костного мозга (ВМ) оценивали с помощью цитоморфологии (А.) и проточной цитометрии с использованием связанного с лейкозом иммунофенотипа (LAIP), гейтинга (В.) и бласт-гейтинга (SSClow CD45dim; С). Последний метод был использован для определения измеримого/минимального остаточного заболевания (MRD) статуса пациента.Fig. 6: Bone marrow (BM) blast load was assessed by cytomorphology (A) and flow cytometry using leukemia-associated immunophenotype (LAIP), gating (B), and blast gating (SSClow CD45dim; C). The latter method was used to determine the measurable/minimal residual disease (MRD) status of the patient.
Фиг. 7: Бластную нагрузку периферической крови (РВ) оценивали с помощью цитоморфологии (А.) и проточной цитометрии с использованием связанного с лейкозом иммунофенотипа (LAIP), гейтинга (В.)Fig. 7: Peripheral blood blast load (PB) was assessed by cytomorphology (A.) and flow cytometry using leukemia-associated immunophenotype (LAIP), gating (B.)
- 5 044996 и бласт-гейтинга (SSClow CD45 dim; С). Последний метод был использован для определения измеримого/минимального остаточного заболевания (MRD) статуса пациента.- 5 044996 and blast gating (SSClow CD45 dim; C). The latter method was used to determine the measurable/minimal residual disease (MRD) status of the patient.
Фиг. 8: Очищенные бласты AML (FACS гейтинг: CD45dimSSClowAVCD4’CD8’CD19) фиксировали, пермеабилизовали и клетки инкубировали в течение ночи с антителом α-Numb с последующим окрашиванием флуоресцентно меченным вторичным антителом. DAPI использовали для контрастного окрашивания ДНК. Образцы собирали на проточном цитометре ImageStreamX® Mark II (Amnis/EMD Millipore) и анализировали с использованием программ INSPIRE™ и IDEAS® (Amnis/EMD Millipore).А.) Суммарную экспрессию Numb (Средняя интенсивность флуоресценции) определяли через препарат для образцов костного мозга одного пациента, собранных на исходном уровне (скрининг), после монотерапии ARGX-110 (C1D1) и после комбинированного лечения (C4D1).B.) Симметрично (SD) и асимметрично делящиеся (AD) клетки оценивали для образца пациента с костным мозгом в начале исследования (до) и после монотерапии ARGX-110 (после aCD70).Fig. 8: Purified AML blasts (FACS gating: CD45 dim SSC low AVCD4'CD8'CD19) were fixed, permeabilized and cells incubated overnight with α-Numb antibody followed by staining with fluorescently labeled secondary antibody. DAPI was used for DNA counterstaining. Samples were collected on an ImageStreamX® Mark II flow cytometer (Amnis/EMD Millipore) and analyzed using INSPIRE™ and IDEAS® software (Amnis/EMD Millipore). A.) Total Numb expression was determined through a bone marrow sample preparation one patient collected at baseline (screening), after ARGX-110 monotherapy (C1D1), and after combination treatment (C4D1). B.) Symmetrically dividing (SD) and asymmetrically dividing (AD) cells were assessed for the patient's bone marrow sample at baseline studies (before) and after ARGX-110 monotherapy (after aCD70).
Фиг. 9: Обработка aCD70 mAb уменьшает CD34+CD38- AML частоту встречаемости стволовых клеток/клеток-предшественников у пациентов с AML. (а) Формирование колонии Р2. 104 ВМ MNC пациента Р002 при диагностике (SCR) и через 14 дней после введения ARGX110 (1 мг/кг внутривенно, момент времени 0 или C1D1) высевали в метилцеллюлозу, и образование колоний оценивали через 2 недели. (b) кратное изменение формирования колоний у разных пациентов, получавших указанные дозы ARGX110. (с) Образование колоний при лимитированном разведении из Р2. (d) Частоты встречаемости стволовых клеток в SCR и момент времени 0, определенные в экспериментах с усиленным лимитиированным разведением для Р2 и разных пациентов, получавших указанные дозы ARGX110. Данные представлены как среднее ± SD Статистика: (а, b, е) t-критерий Стьюдента; (г): χ2 теста; **, Р<0,01; ***, Р<0,001. (f) Формирование колонии Р2. 104, 5±103, 103 и 102 ВМ MNC пациента Р002 при диагностике (SCR), через 14 дней после введения ARGX110 (1 мг/кг внутривенно, момент времени 0 или C1D1) и после комбинированного лечения (комбинированная терапия) высевали на метилцеллюлозу, и образование колоний оценивали через 2 недели.Fig. 9: Treatment with aCD70 mAb reduces CD34+CD38 - AML stem/progenitor cell frequency in AML patients. (a) Formation of the P2 colony. 10 4 BM MNC of patient P002 at diagnosis (SCR) and 14 days after administration of ARGX110 (1 mg/kg IV, time point 0 or C1D1) were plated in methylcellulose, and colony formation was assessed after 2 weeks. (b) fold change in colony formation among patients receiving the indicated doses of ARGX110. (c) Colony formation during limited dilution from P2. (d) SCR stem cell frequencies and time point 0 determined from enhanced limited dilution experiments for P2 and different patients receiving the indicated doses of ARGX110. Data are presented as mean ± SD Statistics: (a, b, e) Student's t test; (d): χ 2 tests; **, P<0.01; ***, P<0.001. (f) Formation of the P2 colony. 10 4 , 5 ± 10 3 , 103 and 10 2 VM MNC of patient P002 at diagnosis (SCR), 14 days after administration of ARGX110 (1 mg/kg IV, time point 0 or C1D1) and after combination treatment (combination therapy) were cultured for methylcellulose, and colony formation was assessed after 2 weeks.
Фиг. 10: Образцы сыворотки анализировали с использованием ИФА (Duoset ELISA, CD27/TNFRSF7 человека (кат: DY382-05, R & D Systems). Концентрация растворимого CD27 в образце рассчитывается по калибровочной кривой. Метод позволяет измерять сывороточную концентрацию человеческого растворимого CD27 с помощью метода сэндвич-ИФА. Козье антитело захвата против человеческого CD27 наносят на микропланшет, и сайты неспецифического связывания блокируются. Образцы человеческой сыворотки наносят, и связанный человеческий растворимый CD27 выявляют и визуализируют последующими добавлениями биотинилированного козьего детектирующего антитела против человеческого CD27, стрептавидина-HRP и смеси окрашивающего реагента Н2О2 и хромогенного субстрата тетраметилбензидина (ТМВ),Fig. 10: Serum samples were analyzed using an ELISA (Duoset ELISA, human CD27/TNFRSF7 (cat: DY382-05, R&D Systems). The concentration of soluble CD27 in the sample is calculated from the calibration curve. The method allows the measurement of the serum concentration of human soluble CD27 using the method sandwich ELISA Goat anti-human CD27 capture antibody is applied to a microplate and non-specific binding sites are blocked Human serum samples are applied and bound human soluble CD27 is detected and visualized by subsequent additions of biotinylated goat anti-human CD27 detection antibody, streptavidin-HRP and a mixture of staining reagent H 2 O 2 and chromogenic substrate tetramethylbenzidine (TMB),
Фиг. 11: Концентрацию ARGX-110 в сыворотке крови анализировали с использованием проверенного метода иммуноферментного анализа (ИФА). PK графики индивидуальных пациентов предоставляются для 10 мг/кг когорты. График PK представляет данные для цикла 1 ARGX-110 (предварительная доза D-14 до предварительной дозы 1 цикла D1).Fig. 11: Serum concentration of ARGX-110 was analyzed using a validated enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. Individual patient PK charts are provided for the 10 mg/kg cohort. The PK plot represents data for cycle 1 ARGX-110 (D-14 predose to cycle 1 predose D1).
Подробное описание изобретенияDetailed Description of the Invention
Традиционное лечение AML с использованием так называемой стандартной интенсивной химиотерапии 7+3 (т.е. интенсивные дозы цитарабина в течение 7 дней плюс 3 дня антрациклина, обычно сопровождаемые консолидационной химиотерапией или трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток (HSCT)) является стандартной терапией в течение многих лет. Однако при этой схеме большинство пациентов с AML в возрасте до 60 лет не выживают более 5 лет. У пожилых людей, которым не подходит стандартная интенсивная химиотерапия, результаты лечения с меньшей интенсивностью не являются лечебными, HSCT, как правило, не подходит, и медиана общей выживаемости составляет менее года. AML является гетерогенным заболеванием, и рецидив заболевания часто происходит из-за одного или более клонов лейкозных стволовых клеток (LSC), которые были устойчивы к терапии. Несмотря на многочисленные доклинические исследования альтернативных методов лечения, очень немногие из них переведены на клинический уровень. Таким образом, существует потребность в новых эффективных методах лечения AML, особенно тех, которые подходят для пациентов, не подходящих для стандартной интенсивной химиотерапии. В идеале, новые методы лечения не только снимают заболевание, уменьшая бластную нагрузку в костном мозге и крови, но также уменьшают или даже уничтожают гетерогенные популяции LSC.Conventional treatment of AML using so-called standard intensive 7+3 chemotherapy (i.e., intensive doses of cytarabine for 7 days plus 3 days of an anthracycline, usually followed by consolidation chemotherapy or hematopoietic stem cell transplant (HSCT)) has been the standard therapy for many years . However, with this regimen, most AML patients under 60 years of age do not survive beyond 5 years. In older adults who are not suitable for standard intensive chemotherapy, less-intensity treatments are not curative, HSCT is generally not suitable, and median overall survival is less than a year. AML is a heterogeneous disease, and disease relapse often occurs due to one or more leukemia stem cell (LSC) clones that have been resistant to therapy. Despite numerous preclinical studies of alternative treatments, very few have been translated to the clinical level. Thus, there is a need for new effective treatments for AML, especially those suitable for patients unsuitable for standard intensive chemotherapy. Ideally, new treatments not only reverse the disease by reducing the blast load in the bone marrow and blood, but also reduce or even eliminate heterogeneous LSC populations.
Как впервые продемонстрировано в настоящем документе, людей, имеющих AML или MDS, эффективно лечат путем введения антитела против CD70. Такое лечение пациентов с AML или MDS особенно желательно, так как обычное лечение стандартной интенсивной химиотерапией связано со значительной токсичностью и побочными эффектами. Кроме того, многие пациенты (например, пожилые пациенты) имеют сопутствующие заболевания, так что они не переносят стандартную интенсивную химиотерапию, а это означает, что им доступны только менее эффективные методы лечения. В настоящем документе представлены способы лечения AML, которые эффективны даже в низких дозах и с ограниченAs demonstrated for the first time herein, people with AML or MDS are effectively treated by administering an anti-CD70 antibody. Such treatment of patients with AML or MDS is particularly desirable since conventional treatment with standard intensive chemotherapy is associated with significant toxicity and side effects. In addition, many patients (eg, elderly patients) have comorbidities such that they cannot tolerate standard intensive chemotherapy, meaning that only less effective treatments are available to them. This document presents treatments for AML that are effective even at low doses and with limited
- 6 044996 ными побочными эффектами и токсичностью, что означает, что они подходят для введения всем пациентам. Это особенно полезно для лечения пациентов, которые в противном случае не имели бы возможности для стандартной интенсивной химиотерапии.- 6 044996 no side effects and toxicity, which means that they are suitable for administration to all patients. This is especially useful for treating patients who would not otherwise have access to standard intensive chemotherapy.
Следовательно, лечение AML в соответствии с изобретением обеспечивает удивительные и значительные преимущества по сравнению с доступными в настоящее время методами лечения. Аспекты и варианты осуществления изобретения теперь будут дополнительно описаны. Если не указано иное или это технически несовместимо, каждый вариант осуществления изобретения может быть взят в комбинации с любым другим вариантом осуществления изобретения.Therefore, treatment of AML in accordance with the invention provides surprising and significant advantages over currently available treatments. Aspects and embodiments of the invention will now be further described. Unless otherwise indicated or technically incompatible, each embodiment of the invention may be taken in combination with any other embodiment of the invention.
ОпределенияDefinitions
Острый миелоидный лейкоз (AML) относится к гемопоэтическим новообразованиям с участием миелоидных клеток. AML характеризуется клональной пролиферацией миелоидных предшественников со сниженной способностью к дифференцировке. У пациентов с AML наблюдается скопление бластных клеток в костном мозге. Бластные клетки обычно также накапливаются в периферической крови пациентов с AML. Обычно AML диагностируется, если у пациента обнаруживается 20% или более бластных клеток в костном мозге или периферической крови.Acute myeloid leukemia (AML) refers to hematopoietic neoplasms involving myeloid cells. AML is characterized by clonal proliferation of myeloid progenitors with reduced differentiation capacity. Patients with AML have an accumulation of blast cells in the bone marrow. Blast cells also commonly accumulate in the peripheral blood of patients with AML. AML is usually diagnosed when a patient has 20% or more blast cells in the bone marrow or peripheral blood.
Термины бластные клетки или просто бласты в контексте настоящего описания относятся к клональным миелоидным клеткам-предшественникам, проявляющим нарушенный потенциал дифференцировки. Подмножество бластных клеток представляет собой лейкозные стволовые клетки (LSC). Это бластные клетки, обладающие свойствами стволовых клеток, так что при трансплантации иммунодефицитному реципиенту способны вызывать лейкоз. LSC могут самообновляться, вызывая лейкоз, а также частично дифференцироваться в обычные бластные клетки, не являющиеся LSC, что напоминает исходное заболевание, но они не способны к самообновлению. LSC встречаются с частотой в диапазоне от 1 на 10000 до 1 на 1 млн в виде доли первичных бластных клеток AML (Pollyea and Jordan, Blood 2017 129: 1627-1635, включено в настоящий документ в качестве ссылки). LSC могут быть охарактеризованы как клетки, которые являются CD34+, CD38., необязательно также CD45- и/или CD123+. LSC также могут быть охарактеризованы как CD45dim, SSC|0, CD90+ CD34+ клетки.The terms blast cells or simply blasts as used herein refer to clonal myeloid progenitor cells exhibiting impaired differentiation potential. A subset of blast cells are leukemia stem cells (LSC). These are blast cells that have the properties of stem cells, so that when transplanted into an immunodeficient recipient, they can cause leukemia. LSCs can self-renew to cause leukemia and also partially differentiate into normal non-LSC blast cells, reminiscent of the original disease, but they are not capable of self-renewal. LSCs occur at frequencies ranging from 1 in 10,000 to 1 in 1 million as a proportion of primary AML blast cells (Pollyea and Jordan, Blood 2017 129: 1627-1635, incorporated herein by reference). LSCs can be characterized as cells that are CD34+, CD38, optionally also CD45 - and/or CD123+. LSCs can also be characterized as CD45 dim , SSC |0 , CD90+ CD34+ cells.
AML можно классифицировать и диагностировать в соответствии с классификацией ВОЗ 2008 года в сочетании с обновлением этой классификации в 2016 г. (Arber et al.Blood, 19 May 2016 vol. 127, no. 20, включено в настоящее описание в качестве ссылки). Согласно классификации ВОЗ AML в целом охватывает следующие подтипы: острый миелоидный лейкоз с рецидивирующими генетическими аномалиями; AML с изменениями, связанными с миелодисплазией; связанные с терапией миелоидные новообразования; миелоидная саркома; миелоидные пролиферации, связанные с синдромом Дауна; бластное плазмоцитоидное новообразование дендритных клеток; и AML, не отнесенные к другим категориям (например, острый мегакариобластный лейкоз, острый базофильный лейкоз).AML can be classified and diagnosed according to the 2008 WHO classification in combination with the 2016 update of this classification (Arber et al. Blood, 19 May 2016 vol. 127, no. 20, incorporated herein by reference). According to the WHO classification, AML generally covers the following subtypes: acute myeloid leukemia with recurrent genetic abnormalities; AML with changes associated with myelodysplasia; therapy-related myeloid neoplasms; myeloid sarcoma; myeloid proliferations associated with Down syndrome; blast plasmacytoid neoplasm of dendritic cells; and AML not elsewhere classified (eg, acute megakaryoblastic leukemia, acute basophilic leukemia).
AML также можно классифицировать в соответствии с франко-американо-британской (FAB) классификацией, охватывающей подтипы: М0 (острый миелобластный лейкоз, минимально дифференцированный); M1 (острый миелобластный лейкоз, без созревания); М2 (острый миелобластный лейкоз, с гранулоцитарным созреванием); М3 (промиелоцитарный или острый промиелоцитарный лейкоз (APL)); M4 (острый миеломоноцитарный лейкоз); М4ео (миеломоноцит вместе с эозинофилией костного мозга); М5 (острый монобластный лейкоз (М5а) или острый моноцитарный лейкоз (М5Ь)); М6 (острая эритроидная лейкемия, включая эритролейкемию (М6а) и очень редкий чистый эритроидный лейкоз (М6Ь)); или М7 (острый мегакариобластный лейкоз).AML can also be classified according to the French-American-British (FAB) classification, covering subtypes: M0 (acute myeloid leukemia, minimally differentiated); M1 (acute myeloblastic leukemia, without maturation); M2 (acute myeloblastic leukemia, with granulocytic maturation); M3 (promyelocytic or acute promyelocytic leukemia (APL)); M4 (acute myelomonocytic leukemia); M4eo (myelomonocyte together with bone marrow eosinophilia); M5 (acute monoblastic leukemia (M5a) or acute monocytic leukemia (M5b)); M6 (acute erythroid leukemia, including erythroleukemia (M6a) and very rare pure erythroid leukemia (M6b)); or M7 (acute megakaryoblastic leukemia).
Используемый в настоящем описании термин AML относится к любому из состояний, охватываемых классификациями ВОЗ и/или FAB, если не указано иное. Считается, что некоторые подтипы AML имеют более благоприятный прогноз, некоторые - промежуточный прогноз, а некоторые - плохой или неблагоприятный прогноз. Специалисту известно, какие подтипы попадают в какую категорию риска.As used herein, the term AML refers to any of the conditions covered by the WHO and/or FAB classifications unless otherwise specified. Some AML subtypes are considered to have a more favorable prognosis, some to have an intermediate prognosis, and some to have a poor or unfavorable prognosis. The specialist knows which subtypes fall into which risk category.
Миелодиспластический синдром (MDS) характеризуется дисплазией, цитопенией и/или аномальными изменениями в насыщенности клетками костного мозга и/или миелоидной дифференцировкой, например усиленной инфильтрацией бластных клеток. MDS можно классифицировать и диагностировать в соответствии с классификацией ВОЗ 2008 г. Согласно классификации ВОЗ, MDS в целом включает следующие подтипы: MDS с дисплазией одной линии (ранее называемой рефрактерная цитопения с однолинейной дисплазией, которая включает рефрактерную анемию, рефрактерную нейтропению и рефрактерную тромбоцитопению), MDS с кольцевыми сидеробластами, которые включают подгруппы с односторонней дисплазией и мультилинейной дисплазией (ранее называемой рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами); MDS с мультилинейной дисплазией (ранее называемой рефрактерная цитопения с мультилинейной дисплазией); MDS с избытком бластов (MDS-EB, ранее называемый рефрактерная анемия с избытком бластов), который может быть в дальнейшем подразделен на MDS-EB-1 и MDS-EB-2 на основе процента бластов; MDS с выделенной del(5q); и MDS, не классифицированный.Myelodysplastic syndrome (MDS) is characterized by dysplasia, cytopenia, and/or abnormal changes in bone marrow cellularity and/or myeloid differentiation, such as increased blast cell infiltration. MDS can be classified and diagnosed according to the 2008 WHO classification. According to the WHO classification, MDS broadly includes the following subtypes: MDS with single lineage dysplasia (previously called refractory cytopenia with single lineage dysplasia, which includes refractory anemia, refractory neutropenia and refractory thrombocytopenia), MDS with ring sideroblasts, which includes subgroups with unilateral dysplasia and multilineage dysplasia (formerly called refractory anemia with ring sideroblasts); MDS with multilineage dysplasia (formerly called refractory cytopenia with multilineage dysplasia); MDS with excess blasts (MDS-EB, formerly called refractory anemia with excess blasts), which can be further subdivided into MDS-EB-1 and MDS-EB-2 based on the percentage of blasts; MDS with del(5q) highlighted; and MDS, unclassified.
MDS также можно классифицировать в соответствии с франко-американо-британской (FAB) классификацией, включающей подтипы: М9980/3 (рефрактерная анемия (RA)); M9982/3 (рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами (RARS)); М9983/3 (рефрактерная анемия с избытком бластовMDS can also be classified according to the French-American-British (FAB) classification, which includes subtypes: M9980/3 (refractory anemia (RA)); M9982/3 (refractory anemia with ring sideroblasts (RARS)); M9983/3 (refractory anemia with excess blasts
- 7 044996 (RAEB)); M9984/3 (рефрактерная анемия с избытком бластов в процессе трансформации (RAEB-T)); и М9945/3 (хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML)).- 7 044996 (RAEB)); M9984/3 (refractory anemia with excess blasts during transformation (RAEB-T)); and M9945/3 (chronic myelomonocytic leukemia (CMML)).
Используемый в настоящем описании термин MDS относится к любому из состояний, охватываемых классификациями ВОЗ и/или FAB, если не указано иное. Как для AML, так и для MDS, в настоящем описании предпочтительна классификация ВОЗ.As used herein, the term MDS refers to any of the conditions covered by the WHO and/or FAB classifications unless otherwise specified. For both AML and MDS, the WHO classification is preferred herein.
Особенно желательно лечить пациентов с MDS высокого риска, то есть пациентов с MDS с высоким риском развития AML и плохим прогнозом выживаемости. Вопрос о том, является ли пациент с MDS пациентом высокого риска, можно определить с помощью пересмотренной Международной системы оценки прогностических показателей для MDS или IPSS-R (Greenberg et al., Blood. 2012 Sep 20; 120 (12): 2454-2465, включено в настоящее описание в качестве ссылки). IPSS-R учитывает процент бластов костного мозга пациента, цитогенетические аномалии, количество и степень цитопении, чтобы поместить пациента в прогностическую категорию. Пациент с оценкой IPSS-R выше 4,5 считается пациентом с MDS высокого риска.It is particularly desirable to treat patients with high-risk MDS, that is, patients with MDS with a high risk of developing AML and a poor survival prognosis. Whether a patient with MDS is at high risk can be determined using the revised International Prognostic Score System for MDS or IPSS-R (Greenberg et al., Blood. 2012 Sep 20; 120(12): 2454-2465, incorporated herein by reference). The IPSS-R takes into account the patient's bone marrow percentage of blasts, cytogenetic abnormalities, number and degree of cytopenia to place the patient in the prognostic category. A patient with an IPSS-R score greater than 4.5 is considered to have high-risk MDS.
Ответ пациента на терапию AML может быть клинически охарактеризован в соответствии с критериями табл. 1.The patient's response to AML therapy can be clinically characterized according to the criteria in Table 1. 1.
Таблица 1Table 1
Используемый в настоящем описании термин доза означает эффективное количество активного агента. Введение дозы пациенту представляет собой введение эффективного количества конкретного активного агента в день. Доза может быть введена в виде одного введения или в виде многократного введения в день, при условии, что пациенту вводится указанное эффективное количество дозы. Например, доза 1 мг/кг может быть введена в виде одного ежедневного введения 1 мг/кг или двух приемов в день, причем общее количество двух введений достигает 1 мг/кг.As used herein, the term dose means an effective amount of the active agent. Dosing a patient is the administration of an effective amount of a particular active agent per day. The dosage may be administered as a single administration or as multiple administrations per day, provided that the indicated effective amount of the dose is administered to the patient. For example, a dose of 1 mg/kg may be administered as one daily administration of 1 mg/kg or two administrations per day, the total amount of the two administrations reaching 1 mg/kg.
Используемые в настоящем описании термины белок CD70 или антиген CD70, или CD70, или TNFSF7, или CD27L используются взаимозаменяемо и относятся к члену семейства человеческих лигандов TNF, который является лигандом для TNFRSF27/CD27. Конкретные примеры CD70 человека включают в себя полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную под номером доступа эталонной последовательности NCBI № NP_001243, или его внеклеточный домен.As used herein, the terms CD70 protein or CD70 antigen, or CD70, or TNFSF7, or CD27L are used interchangeably and refer to a member of the human TNF ligand family that is a ligand for TNFRSF27/CD27. Specific examples of human CD70 include a polypeptide having the amino acid sequence represented by NCBI reference sequence accession number NP_001243, or an extracellular domain thereof.
Используемый здесь термин антитело включает иммуноглобулин, имеющий комбинацию двух тяжелых и двух легких цепей, которые обладают значительной специфической иммунореактивной активностью в отношении антигена, представляющего интерес (например, CD70 человека). Термин антитела к CD70 используется в настоящем описании для обозначения антитела, которые проявляют иммунологическую специфичность к белку CD70 человека. Специфичность для человеческого CD70 не исключает перекрестной реактивности с видовыми гомологами CD70. Антитела содержат легкие и тяжеAs used herein, the term antibody includes an immunoglobulin having a combination of two heavy and two light chains that have significant specific immunoreactive activity against an antigen of interest (eg, human CD70). The term anti-CD70 antibodies is used herein to refer to antibodies that exhibit immunological specificity for the human CD70 protein. Specificity for human CD70 does not preclude cross-reactivity with CD70 species homologues. Antibodies contain light and heavy
- 8 044996 лые цепи с ковалентной связью между ними или без нее. Антигенсвязывающий фрагмент антитела включает пептидные фрагменты, которые проявляют специфическую иммунореактивную активность к тому же антигену, что и антитело (например, CD70). Примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: вариабельный домен легкой цепи антитела (VL); вариабельный домен тяжелой цепи антитела; одноцепочечный вариабельный фрагмент или одноцепочечное антитело (scFv); Fab-фрагмент; фрагмент F(ab')2; фрагмент Fd; фрагмент Fv; (моновалентное) антитело с одним плечом; димеры; триатела; тетратела; или любую антигенсвязывающую молекулу, образованную комбинацией, сборкой или конъюгацией таких антигенсвязывающих фрагментов. Фрагменты могут быть получены, например, химической или ферментативной обработкой интактного или полного антитела или цепи антитела или рекомбинантными способами.- 8 044996 long chains with or without a covalent bond between them. The antigen-binding fragment of an antibody includes peptide fragments that exhibit specific immunoreactive activity to the same antigen as the antibody (eg, CD70). Examples of antigen binding fragments include: antibody light chain variable domain (VL); antibody heavy chain variable domain; single chain variable fragment or single chain antibody (scFv); Fab fragment; fragment F(ab')2; fragment Fd; fragment Fv; (monovalent) single-arm antibody; dimers; triatela; tetrabodies; or any antigen-binding molecule formed by the combination, assembly or conjugation of such antigen-binding fragments. The fragments can be produced, for example, by chemical or enzymatic treatment of an intact or complete antibody or antibody chain, or by recombinant methods.
Используемый в настоящем описании термин нуклеозидные метаболические ингибиторы (NMI) относится к молекулам, которые препятствуют эпигенетической модификации (например, метилированию, деметилированию, ацетилированию или деацетилированию) нуклеотидов (ДНК и/или РНК). Примеры нуклеозидных метаболических ингибиторов включают гипометилирующие агенты (НМА), ингибиторы изоцитратдегидрогеназы (IDH), ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC) и бромодомен и экстратерминальный (BET) ингибитор. Предпочтительными нуклеозидными метаболическими ингибиторами являются гипометилирующие агенты. Гипометилирующие агенты ингибируют нормальное метилирование ДНК и/или РНК. Примерами гипометилирующих агентов являются азацитидин, децитабин и гуадецитабин.As used herein, the term nucleoside metabolic inhibitors (NMI) refers to molecules that interfere with epigenetic modification (eg, methylation, demethylation, acetylation or deacetylation) of nucleotides (DNA and/or RNA). Examples of nucleoside metabolic inhibitors include hypomethylating agents (HMAs), isocitrate dehydrogenase (IDH) inhibitors, histone deacetylase (HDAC) inhibitors, and bromodomain and extra-terminal (BET) inhibitor. Preferred nucleoside metabolic inhibitors are hypomethylating agents. Hypomethylating agents inhibit normal DNA and/or RNA methylation. Examples of hypomethylating agents are azacitidine, decitabine and guadecitabine.
При использовании в настоящем описании, когда два или более активных агента вводят в виде комбинированной терапии, это не требует или не исключает того, что активные агенты вводятся одновременно или включены в одну композицию. Комбинированная терапия имеет общепринятую интерпретацию двух или более активных агентов, вводимых таким образом, что пациент может извлечь пользу от каждого агента. Во избежание сомнений, комбинированная терапия не требует совместного введения, одновременного введения или фиксированной дозы препарата.As used herein, when two or more active agents are administered as a combination therapy, this does not require or preclude that the active agents be administered simultaneously or included in the same composition. Combination therapy has the generally accepted interpretation of two or more active agents administered in such a way that the patient can benefit from each agent. For the avoidance of doubt, combination therapy does not require coadministration, concurrent administration, or a fixed dose of drug.
Используемый в настоящем описании термин стандартная интенсивная химиотерапия относится к так называемой индукционной химиотерапии 7+3, характеризующейся 7-дневной высокой дозой цитарабина и 3-дневным введением антрациклина (например, даунорубицина или идарубицина). Интенсивная химиотерапия проводится с целью вызвать полную ремиссию AML, обычно в отношении пациента, перенесшего трансплантацию стволовых клеток после успешной химиотерапии.As used herein, the term standard intensive chemotherapy refers to so-called 7+3 induction chemotherapy, characterized by 7 days of high dose cytarabine and 3 days of an anthracycline (eg daunorubicin or idarubicin). Intensive chemotherapy is given to induce complete remission of AML, usually in a patient who has undergone a stem cell transplant after successful chemotherapy.
Стандартная интенсивная химиотерапия связана со значительной токсичностью и побочными эффектами, что означает, что она не подходит для пациентов, неспособных переносить эти эффекты. При использовании в настоящем описании, эти пациенты называются не подходящими для стандартной интенсивной химиотерапии. Пациент может не подходить для стандартной интенсивной химиотерапии, потому что, например, у него проявляется одно или более сопутствующих заболеваний, указывающих, что он не переносит токсичность, или прогностические факторы, характеризующие его заболевание, указывают на неблагоприятный исход стандартной интенсивной химиотерапии. Определение права отдельного пациента на стандартную интенсивную химиотерапию будет осуществляться клиницистом с учетом истории болезни отдельного пациента и клинических руководств (например, руководящих принципов Национальной комплексной онкологической сети (NCCN), включенных в настоящий документ в качестве ссылки). Пациенты с AML в возрасте старше 60 лет часто оцениваются как не подходящие для стандартной интенсивной химиотерапии, при этом следует учитывать и другие факторы, включая цитогенетику и/или молекулярные аномалии AML, подвергаемого лечению.Standard intensive chemotherapy is associated with significant toxicity and side effects, meaning it is not suitable for patients unable to tolerate these effects. As used herein, these patients are referred to as unsuitable for standard intensive chemotherapy. A patient may not be suitable for standard intensive chemotherapy because, for example, he exhibits one or more comorbidities that indicate he cannot tolerate toxicity, or prognostic factors characterizing his disease indicate an unfavorable outcome with standard intensive chemotherapy. Determination of an individual patient's eligibility for standard intensive chemotherapy will be made by the clinician based on the individual patient's medical history and clinical guidelines (eg, National Comprehensive Cancer Network (NCCN) guidelines, incorporated herein by reference). Patients with AML over the age of 60 years are often assessed as unsuitable for standard intensive chemotherapy, and other factors must be considered, including cytogenetics and/or molecular abnormalities of the AML being treated.
Пациент, которому не подходит стандартная интенсивная химиотерапия, может вместо этого получать химиотерапию пониженной интенсивности, такую как цитарабин в низкой дозе (LDAC). Пациенты, которым не подходит стандартная интенсивная химиотерапия и для которых не подходит LDAC, могут получить наилучшую поддерживающую помощь (BSC), включая гидроксимочевину (HU) и поддержку в виде переливании крови.A patient who is not a candidate for standard intensive chemotherapy may instead receive lower-intensity chemotherapy such as low-dose cytarabine (LDAC). Patients who are not suitable for standard intensive chemotherapy and for whom LDAC is not suitable can receive best supportive care (BSC), including hydroxyurea (HU) and transfusion support.
Используемые в настоящем описании термины субъект и пациент используются взаимозаменяемо для обозначения человека.As used herein, the terms subject and patient are used interchangeably to refer to a person.
Подробное описаниеDetailed description
Как показано в настоящем описании, пациенты, страдающие от миелоидных новообразований, таких как AML и MDS, могут подвергаться лечению антителом против CD70. После однократного введения антитела против CD70 количество лейкозных стволовых клеток, которые можно выделить из костного мозга пациентов, значительно снижалось, равно как и количество бластных клеток, обнаруженных в костном мозге и периферической крови. Этот результат наблюдался даже при неожиданно низких дозах антитела.As shown herein, patients suffering from myeloid neoplasms such as AML and MDS can be treated with an anti-CD70 antibody. After a single dose of anti-CD70 antibody, the number of leukemia stem cells that could be isolated from patients' bone marrow was significantly reduced, as was the number of blast cells found in the bone marrow and peripheral blood. This result was observed even at unexpectedly low doses of the antibody.
Следовательно, в первом аспекте изобретение относится к способу лечения острого миелоидного лейкоза (AML) или миелодиспластического синдрома (MDS) у пациента, включающему введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента. Изобретение относится к способу лечения острого миелоидного лейкоза (AML) или миелодиспластического синдрома (MDS) у пациента, включающему введение пациенту одной или более терапевтически эффективных дозTherefore, in a first aspect, the invention relates to a method of treating acute myeloid leukemia (AML) or myelodysplastic syndrome (MDS) in a patient, comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof. The invention relates to a method of treating acute myeloid leukemia (AML) or myelodysplastic syndrome (MDS) in a patient, including administering to the patient one or more therapeutically effective doses
- 9 044996 антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.- 9 044996 antibodies against CD70 or its antigen-binding fragment.
В дополнительном аспекте предложен способ снижения процента бластов в костном мозге и/или периферической крови пациента с AML или MDS, причем способ включает введение пациенту одной или более терапевтически эффективных доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент.In a further aspect, there is provided a method of reducing the percentage of blasts in the bone marrow and/or peripheral blood of a patient with AML or MDS, the method comprising administering to the patient one or more therapeutically effective doses of an anti-CD70 antibody or antigen binding fragment thereof.
В дополнительном аспекте предложено антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент для применения в способах, представленных в настоящем документе.In an additional aspect, an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is provided for use in the methods presented herein.
Монотерапия антителами против CD70 и комбинированная терапия aCD70+NMI уменьшают количество бластных клеток костного мозга и периферической кровиMonotherapy with anti-CD70 antibodies and combination therapy with aCD70+NMI reduce the number of blast cells in the bone marrow and peripheral blood
Как описано в настоящем документе, способы по изобретению уменьшают количество и/или долю бластных клеток в костном мозге и/или в периферической крови, предпочтительно как в костном мозге, так и в периферической крови.As described herein, the methods of the invention reduce the number and/or proportion of blast cells in the bone marrow and/or peripheral blood, preferably in both the bone marrow and peripheral blood.
Доля бластных клеток в костном мозге или периферической крови может быть оценена способами, известными в данной области техники и описанными в настоящем документе, например, проточной цитометрикой или клеточной морфологической оценкой клеток, полученных из биопсии костного мозга пациента, или мазка периферической крови. Доля бластов определяется по отношению к общему количеству клеток в образце. Например, проточная цитометрия может быть использована для определения доли бластных клеток, используя количество CD45dim, SSClow клеток по отношению к общему количеству клеток. В качестве дополнительного примера, морфологическая оценка клеток может быть использована для определения количества морфологически идентифицированных бластов относительно общего количества клеток в исследуемой зоне визуализации.The proportion of blast cells in bone marrow or peripheral blood can be assessed by methods known in the art and described herein, for example, flow cytometry or cellular morphological assessment of cells obtained from a patient's bone marrow biopsy or peripheral blood smear. The proportion of blasts is determined in relation to the total number of cells in the sample. For example, flow cytometry can be used to determine the proportion of blast cells using the number of CD45 dim , SSC low cells relative to the total number of cells. As an additional example, morphological assessment of cells can be used to determine the number of morphologically identified blasts relative to the total number of cells in the imaging area of interest.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы уменьшения доли бластных клеток в костном мозге по меньшей мере на 5% в абсолютном выражении, то есть снижения доли бластных клеток в костном мозге, например, с 30 до 25% или менее. В некоторых вариантах осуществления лечение можно охарактеризовать как уменьшение доли бластных клеток в костном мозге, по меньшей мере на 10% в абсолютном выражении, предпочтительно, по меньшей мере на 15%, предпочтительно по меньшей мере на 20%, предпочтительно по меньшей мере на 25%, предпочтительно по меньшей мере на 30%, предпочтительно по меньшей мере на 40%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, предпочтительно по меньшей мере на 55%, предпочтительно по меньшей мере на 60% в абсолютном выражении. В некоторых вариантах осуществления доля бластных клеток в костном мозге снижается по меньшей мере на 50% по сравнению с моментом до лечения.In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in the bone marrow by at least 5% in absolute terms, that is, reducing the proportion of blast cells in the bone marrow, for example, from 30 to 25% or less. In some embodiments, the treatment can be characterized as reducing the proportion of blast cells in the bone marrow by at least 10% in absolute terms, preferably by at least 15%, preferably by at least 20%, preferably by at least 25% , preferably at least 30%, preferably at least 40%, preferably at least 50%, preferably at least 55%, preferably at least 60% in absolute terms. In some embodiments, the proportion of blast cells in the bone marrow is reduced by at least 50% compared to before treatment.
В некоторых вариантах осуществления доля бластов в костном мозге измеряется путем морфологической оценки клеток. В некоторых вариантах осуществления доля бластов в костном мозге измеряется с помощью проточной цитометрии. В некоторых вариантах осуществления доля бластов в костном мозге измеряется в соответствии с оценкой минимального остаточного заболевания (MRD).In some embodiments, the proportion of blasts in the bone marrow is measured by morphological assessment of the cells. In some embodiments, the proportion of blasts in the bone marrow is measured using flow cytometry. In some embodiments, the proportion of blasts in the bone marrow is measured according to a minimal residual disease (MRD) score.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы уменьшения доли бластных клеток в периферической крови по меньшей мере на 5% в абсолютном выражении, то есть снижения доли бластных клеток в периферической крови, например, с 30 до 25% или менее. В некоторых вариантах осуществления предложены способы лечения для уменьшения доли бластных клеток в периферической крови по меньшей мере на 5% в абсолютных показателях, необязательно по меньшей мере на 10% в абсолютном выражении, предпочтительно по меньшей мере на 15%, предпочтительно по меньшей мере на 20%, предпочтительно по меньшей мере 25% в абсолютном выражении. В некоторых вариантах осуществления доля бластов периферической крови (РВ) измеряется путем морфологической оценки клеток. В некоторых вариантах осуществления доля РВ-бластов измеряется с помощью проточной цитометрии. В некоторых вариантах осуществления доля РВ-бластов измеряется в соответствии с оценкой минимального остаточного заболевания (MRD).In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in peripheral blood by at least 5% in absolute terms, that is, reducing the proportion of blast cells in peripheral blood, for example, from 30 to 25% or less. In some embodiments, treatments are provided to reduce the proportion of blast cells in peripheral blood by at least 5% in absolute terms, optionally by at least 10% in absolute terms, preferably by at least 15%, preferably by at least 20% %, preferably at least 25% in absolute terms. In some embodiments, the percentage of peripheral blood blasts (PB) is measured by morphological assessment of the cells. In some embodiments, the proportion of PB blasts is measured using flow cytometry. In some embodiments, the proportion of PB blasts is measured according to the minimal residual disease (MRD) score.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы снижения доли бластных клеток в костном мозге до менее чем 40%, необязательно до менее чем 20%, например, менее чем на 10%. В некоторых вариантах осуществления предоставлены способы снижения доли бластных клеток в костном мозге до менее чем 5%.In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in the bone marrow to less than 40%, optionally less than 20%, such as less than 10%. In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in the bone marrow to less than 5%.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы снижения доли бластных клеток в периферической крови до менее чем 40%, необязательно менее чем 20%, например менее чем 10%. В некоторых вариантах осуществления предложены способы снижения доли бластных клеток в периферической крови до менее чем 5%.In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in peripheral blood to less than 40%, optionally less than 20%, such as less than 10%. In some embodiments, methods are provided for reducing the proportion of blast cells in peripheral blood to less than 5%.
В некоторых вариантах осуществления пациент имеет процент бластов костного мозга, по меньшей мере 20%, необязательно по меньшей мере 40%, необязательно по меньшей мере 60%, необязательно по меньшей мере 70%, до лечения.In some embodiments, the patient has a bone marrow blast percentage of at least 20%, optionally at least 40%, optionally at least 60%, optionally at least 70%, prior to treatment.
В некоторых вариантах осуществления пациент имеет процент бластов периферической крови, по меньшей мере 5% до лечения, необязательно по меньшей мере 8%, необязательно по меньшей мере 10%, необязательно по меньшей мере 15%, необязательно по меньшей мере 20%, необязательно по меньшей мере 30%, необязательно по меньшей мере 40%, необязательно по меньшей мере 50%, необязательно по меньшей мере 60% до лечения.In some embodiments, the patient has a peripheral blood blast percentage of at least 5% pre-treatment, optionally at least 8%, optionally at least 10%, optionally at least 15%, optionally at least 20%, optionally at least at least 30%, optionally at least 40%, optionally at least 50%, optionally at least 60% before treatment.
- 10 044996- 10 044996
Для клинического определения процента бластных клеток обычно предпочтительна морфологическая оценка клеток (также известная как цитоморфология).For clinical determination of blast cell percentage, cell morphological assessment (also known as cytomorphology) is usually preferred.
Монотерапия антителами против CD70 и комбинированная терапия aCD70+NMI снижают уровень лейкозных стволовых клеток и способствуют дифферениировкеAnti-CD70 antibody monotherapy and aCD70+NMI combination therapy reduce leukemia stem cell levels and promote differentiation
Важным подмножеством бластов при AML являются лейкозные стволовые клетки (LSC). LSC представляют собой опухолевые стволовые клетки, способные инициировать лейкоз. LSC могут самообновляться, вызывая лейкоз, а также частично дифференцироваться в обычные бластные клетки, не являющиеся LSC, которые напоминают исходное заболевание, но не способны самообновляться. LSC могут быть охарактеризованы как клетки, которые являются CD34+, CD38-, необязательно также CD45 и/или CD123+. LSC также могут быть охарактеризованы как CD45dim, SSClQ, lin-CD90+CD34+ клетки. Уменьшение количества LSC у пациента с AML должно значительно улучшить перспективу ремиссии и снизить вероятность рецидива.An important subset of blasts in AML are leukemia stem cells (LSC). LSCs are tumor stem cells capable of initiating leukemia. LSCs can self-renew to cause leukemia, and also partially differentiate into regular non-LSC blast cells, which resemble the original disease but are unable to self-renew. LSCs can be characterized as cells that are CD34+, CD38-, optionally also CD45 and/or CD123+. LSCs can also be characterized as CD45dim, S.S.C.lQlin-CD90+CD34+ cells. Reducing the number of LSCs in a patient with AML should significantly improve the prospect of remission and reduce the likelihood of relapse.
Как показано в настоящем описании, монотерапия и комбинированное лечение согласно изобретению снижают долю LSC у пациента по меньшей мере в 2 раза, а в некоторых случаях в гораздо большей степени. Поэтому ожидается, что лечение согласно изобретению не только уменьшит общий процент бластов у пациента, но также уменьшит вероятность последующего рецидива заболевания.As shown herein, monotherapy and combination treatment according to the invention reduce the proportion of LSC in a patient by at least 2-fold, and in some cases to a much greater extent. It is therefore expected that treatment according to the invention will not only reduce the total percentage of blasts in the patient, but also reduce the likelihood of subsequent relapse of the disease.
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления способы по изобретению уменьшают количество LSC в виде доли мононуклеарных клеток (также упоминается как уменьшение частоты LSC). В некоторых вариантах осуществления предложены способы снижения частоты LSC по меньшей мере в 2 раза.Therefore, in some embodiments, the methods of the invention reduce the number of LSCs as a proportion of mononuclear cells (also referred to as reducing the frequency of LSCs). In some embodiments, methods are provided to reduce the LSC frequency by at least a factor of 2.
В некоторых вариантах осуществления оценка доли LSC в костном мозге может быть определена путем посева последовательных разведений, например, на метилцеллюлозу.In some embodiments, an estimate of the proportion of LSCs in the bone marrow can be determined by plating serial dilutions, for example, on methylcellulose.
Монотерапия и комбинированное лечение согласно изобретению также способствуют дифференцировке LSC в миелоидные клетки. Стимулирование такой дифференцировки снижает популяцию LSC, способных к самообновлению, тем самым увеличивая вероятность ремиссии и снижая риск рецидива.Monotherapy and combination treatment according to the invention also promote the differentiation of LSCs into myeloid cells. Promoting such differentiation reduces the population of LSCs capable of self-renewal, thereby increasing the likelihood of remission and reducing the risk of relapse.
Миелоидная дифференцировка LSC характеризуется асимметричным делением клеток, в отличие от симметричного деления клеток, которое приводит к двум дочерним стволовым клеткам. Асимметричное деление может оцениваться с помощью методов микроскопии или путем измерения маркеров предопределения клеток, таких как белок Numb. Как показано в настоящем описании, LSC от пациентов, которые получали монотерапию антителом против CD70, проявляют повышенную экспрессию Numb (и, следовательно, повышенную дифференцировку) по сравнению с предшествующим лечением. Экспрессия Numb (и, следовательно, дифференцировка) дополнительно увеличивается, когда пациентов лечат антителом против CD70 в комбинации с NMI. Эти данные представляют собой первую клиническую демонстрацию увеличения дифференцировки LSC антителом против CD70 in vivo и, таким образом, опережают данные in vitro, представленные Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380.Myeloid differentiation of LSCs is characterized by asymmetric cell division, as opposed to symmetric cell division, which results in two daughter stem cells. Asymmetric division can be assessed using microscopy techniques or by measuring markers of cell commitment such as the Numb protein. As shown herein, LSCs from patients who received anti-CD70 monotherapy exhibit increased Numb expression (and therefore increased differentiation) compared to prior treatment. Numb expression (and hence differentiation) is further increased when patients are treated with anti-CD70 antibody in combination with NMI. These data represent the first clinical demonstration of enhancement of LSC differentiation by an anti-CD70 antibody in vivo and are thus ahead of the in vitro data reported by Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380.
В некоторых вариантах осуществления способы согласно изобретению способствуют дифференцировке лейкозных стволовых клеток. В некоторых вариантах осуществления способы согласно изобретению способствуют асимметричному делению лейкозных стволовых клеток. В некоторых вариантах осуществления способы согласно изобретению способствуют экспрессии Numb на лейкозных стволовых клетках.In some embodiments, the methods of the invention promote the differentiation of leukemia stem cells. In some embodiments, the methods of the invention promote asymmetric division of leukemia stem cells. In some embodiments, the methods of the invention promote the expression of Numb on leukemia stem cells.
AML эффективно подвергается лечению даже при низких дозах антитела против CD70AML is effectively treated even with low doses of anti-CD70 antibody
Данные клинического испытания, представленные в настоящем описании, демонстрируют, что процентное содержание бластных клеток было снижено у пациентов, которых лечат антителами против CD70, даже в самой низкой дозе. Целью введения пациентам антител в этой дозе было просто подтвердить безопасность лечения антителами и определить дозолимитирующую токсичность (DLT). Поэтому было очень удивительно, что даже после однократного введения самой низкой дозы антитела процент бластных клеток значительно снижался.The clinical trial data presented herein demonstrate that the percentage of blast cells was reduced in patients treated with anti-CD70 antibodies, even at the lowest dose. The purpose of administering the antibody to patients at this dose was simply to confirm the safety of the antibody treatment and determine dose-limiting toxicity (DLT). It was therefore very surprising that even after a single injection of the lowest dose of antibody, the percentage of blast cells decreased significantly.
Таким образом, данные, представленные в настоящем описании, демонстрируют, что AML или MDS можно лечить всеми протестированными дозами антитела против CD70, включая неожиданно низкие дозы.Thus, the data presented herein demonstrate that AML or MDS can be treated with all doses of anti-CD70 antibody tested, including unexpectedly low doses.
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления всех способов по изобретению антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 0,1 до 25 мг/кг на дозу, например в диапазоне от 0,1 до 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 1 до 20 мг/кг на дозу. Описанные в настоящем документе диапазоны включают конечные точки диапазона, если не указано иное, например введение в дозе в диапазоне 0,1-25 мг/кг включает введение в дозе 0,1 мг/кг и введение в дозе 25 мг/кг, а также все дозы между двумя конечными точками.Therefore, in some embodiments of all methods of the invention, the anti-CD70 antibody or antigen binding fragment thereof is administered at a dose in the range of 0.1 to 25 mg/kg per dose, such as in the range of 0.1 to 20 mg/kg. In some embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose ranging from 1 to 20 mg/kg per dose. The ranges described herein include the end points of the range unless otherwise indicated, for example, dosing in the range of 0.1-25 mg/kg includes dosing at 0.1 mg/kg and dosing at 25 mg/kg, and all doses between the two endpoints.
В некоторых вариантах осуществления способов по изобретению антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 0,1 до 15 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе в диапазоне от 0,5 до 2 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг или 20 мг/кг. В некоторых предпочтительныхIn some embodiments of the methods of the invention, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose ranging from 0.1 to 15 mg/kg. In some embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose ranging from 0.5 to 2 mg/kg. In some embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose of 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg, or 20 mg/kg. In some preferred
- 11 044996 вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 1 мг/кг. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 10 мг/кг.- 11 044996 embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose of 1 mg/kg. In some preferred embodiments, the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered at a dose of 10 mg/kg.
В некоторых вариантах осуществления вводят множественные дозы антитела против CD70 или антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых таких вариантах осуществления каждая доза антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента отстоит на 10-20 дней, необязательно на 12-18 дней. В некоторых вариантах осуществления каждая доза антитела против CD70 отстоит на 14-17 дней.In some embodiments, multiple doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment are administered. In some such embodiments, each dose of the anti-CD70 antibody or antigen binding fragment thereof is spaced 10-20 days apart, optionally 12-18 days apart. In some embodiments, each dose of anti-CD70 antibody is spaced 14-17 days apart.
В некоторых вариантах осуществления лечение согласно изобретению приводит по меньшей мере к частичной ремиссии. В некоторых вариантах осуществления лечение приводит к тому, что у пациента наблюдается состояние без лейкоза. В некоторых вариантах осуществления лечение приводит по меньшей мере к полной ремиссии с неполным выздоровлением (CRi). В некоторых вариантах осуществления лечение приводит по меньшей мере к полной ремиссии.In some embodiments, treatment according to the invention results in at least partial remission. In some embodiments, the treatment results in the patient being in a non-leukemia state. In some embodiments, treatment results in at least complete remission with partial recovery (CRi). In some embodiments, treatment results in at least complete remission.
Таким образом, лечение согласно изобретению позволяет лечить AML или MDS путем уменьшения количества бластных клеток (включая лейкозные стволовые клетки) в костном мозге и в периферической крови. Лечение также особенно эффективно при снижении уровня LSC.Thus, the treatment according to the invention makes it possible to treat AML or MDS by reducing the number of blast cells (including leukemia stem cells) in the bone marrow and in the peripheral blood. The treatment is also particularly effective in reducing LSC levels.
Характеристики пациентаPatient characteristics
Лечение в соответствии с изобретением особенно выгодно, поскольку оно обеспечивает эффективные средства индукции ремиссии (частичной или полной) AML без значительной токсичности и заболеваемости, связанных со стандартной интенсивной химиотерапией. Обеспечение терапии без этих побочных эффектов является существенным преимуществом изобретения.Treatment in accordance with the invention is particularly advantageous because it provides an effective means of inducing remission (partial or complete) of AML without the significant toxicity and morbidity associated with standard intensive chemotherapy. Providing therapy without these side effects is a significant advantage of the invention.
Уменьшение побочных эффектов терапии AML явно желательно для лечения пациентов с AML в целом. Кроме того, это особенно выгодно для пациентов, которые обычно не могли бы получить более мощное лечение AML. Существует необходимость в эффективной терапии для пациентов, которым не подходит стандартная интенсивная химиотерапия из-за сопутствующих заболеваний пациента, например, в возрасте 60 лет или старше. Хотя для этих пациентов доступны альтернативные методы лечения (например, низкодозированный цитарабин (LDAC)), они снижают вероятность достижения ремиссии и по-прежнему связаны со значительными побочными эффектами. Напротив, лечение согласно изобретению обеспечивает эффективную терапию AML, которую могут переносить пациенты, которые при этом не могут переносить токсичность стандартной интенсивной химиотерапии.Reducing the side effects of AML therapy is clearly desirable for the treatment of AML patients in general. In addition, it is especially beneficial for patients who would not normally receive more powerful AML treatments. There is a need for effective therapy for patients who are not suitable for standard intensive chemotherapy due to patient comorbidities, such as those aged 60 years or older. Although alternative treatments (eg, low-dose cytarabine (LDAC)) are available for these patients, they reduce the likelihood of achieving remission and are still associated with significant side effects. In contrast, the treatment of the invention provides an effective therapy for AML that can be tolerated by patients who cannot tolerate the toxicity of standard intensive chemotherapy.
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту не подходит стандартная интенсивная химиотерапия перед лечением. В некоторых таких вариантах осуществления пациенту по меньшей мере 60 лет, необязательно по меньшей мере 70 лет.Therefore, in some embodiments, the patient is not eligible for standard intensive pre-treatment chemotherapy. In some such embodiments, the patient is at least 60 years old, optionally at least 70 years old.
Еще одной традиционной терапией для AML является трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (HSCT) с использованием аллогенных или аутологичных стволовых клеток. Пациенты, которым не подходит стандартная интенсивная химиотерапия, обычно не могут получать HSCT. Это связано с тем, что вероятность успешной трансплантации снижается у пациентов, получающих химиотерапию только в низких дозах, поскольку они не могут получить стандартную интенсивную химиотерапию, предназначенную для удаления бластов костного мозга при подготовке к получению трансплантата. В то время как HSCT может проводиться с использованием химиотерапии с пониженной интенсивностью, вероятность успеха ниже из-за большей вероятности остаточных бластов, остающихся в костном мозге.Another traditional therapy for AML is hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) using allogeneic or autologous stem cells. Patients who are not suitable for standard intensive chemotherapy usually cannot receive HSCT. This is because the likelihood of successful transplantation is reduced in patients receiving only low-dose chemotherapy because they cannot receive standard intensive chemotherapy designed to remove bone marrow blasts in preparation for receiving a transplant. While HSCT can be performed using reduced-intensity chemotherapy, the success rate is lower due to the greater likelihood of residual blasts remaining in the bone marrow.
Пригодность отдельного пациента для HSCT будет зависеть от индивидуальной оценки клинициста с учетом вероятности успешной трансплантации и других факторов, таких как оставшиеся варианты лечения и качество жизни. Примером, но важным фактором, который следует учитывать, является процент бластов костного мозга, демонстрируемых пациентом.An individual patient's suitability for HSCT will depend on the clinician's individual assessment, taking into account the likelihood of successful transplantation and other factors such as remaining treatment options and quality of life. An example but important factor to consider is the percentage of bone marrow blasts exhibited by the patient.
Как показано здесь, лечение согласно изобретению способно значительно снизить процент бластов костного мозга. Обеспечивая средства для снижения процента бластов в костном мозге у пациентов, которым не подходит стандартная интенсивная химиотерапия, способы по изобретению открывают перспективу успешного HSCT в популяции пациентов, для которых HSCT ранее не рекомендовался.As shown here, the treatment according to the invention is able to significantly reduce the percentage of bone marrow blasts. By providing a means to reduce the percentage of bone marrow blasts in patients who are unsuitable for standard intensive chemotherapy, the methods of the invention open the prospect of successful HSCT in a population of patients for whom HSCT has not previously been recommended.
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления всех аспектов изобретения пациенту не подходит стандартная интенсивная химиотерапия перед лечением, а лечение снижает процент бластов костного мозга, так что пациент имеет право на HSCT. В некоторых вариантах осуществления лечение дополнительно включает проведение трансплантации гемопоэтических стволовых клеток пациенту.Therefore, in some embodiments of all aspects of the invention, the patient is not eligible for standard intensive chemotherapy before treatment, and the treatment reduces the percentage of bone marrow blasts such that the patient is eligible for HSCT. In some embodiments, the treatment further includes performing a hematopoietic stem cell transplant into the patient.
В настоящем описании предложен способ подготовки пациента с AML или MDS для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT), включающий введение пациенту одной или более доз антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.Provided herein is a method of preparing a patient with AML or MDS for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), comprising administering to the patient one or more doses of an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В некоторых вариантах осуществления и как описано в другом месте в настоящем документе, способ может дополнительно включать введение NMI (например, НМА, такого как азацитидин) пациенту.In some embodiments, and as described elsewhere herein, the method may further comprise administering an NMI (eg, an NMA such as azacitidine) to the patient.
В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает проведение HSCT пациенту.In some embodiments, the method further includes performing an HSCT on the patient.
Ожидается, что лечение согласно изобретению будет особенно эффективным при лечении пациентов с аномально высокими уровнями растворимого CD27 в сыворотке.It is expected that the treatment according to the invention will be particularly effective in the treatment of patients with abnormally high levels of soluble CD27 in serum.
Не желая быть связанными теорией, считается, что связывание CD27-CD70 приводит к высвобожWithout wishing to be bound by theory, it is believed that CD27-CD70 binding results in the release of
- 12 044996 дению растворимого CD27 (sCD27) путем шеддинга. Следовательно, растворимый CD27 может служить биомаркером для степени взаимодействия CD70/CD27 (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380, включено в настоящее описание в качестве ссылки). В частности, sCD27, как полагают, коррелирует с процентом бластных клеток в костном мозге, а также служит в качестве маркера для стволовости бластов пациента, при этом повышенный уровень sCD27 указывает на повышенный уровень стволовости (Rietheret al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380).- 12 044996 denition of soluble CD27 (sCD27) by shedding. Therefore, soluble CD27 may serve as a biomarker for the extent of CD70/CD27 interaction (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380, incorporated herein by reference). In particular, sCD27 is believed to correlate with the percentage of blast cells in the bone marrow and also serves as a marker for the stemness of a patient's blasts, with increased levels of sCD27 indicating increased levels of stemness (Rietheret al. J. Exp. Med. 2017 Feb ;214(2):359-380).
Считается, что опосредованная CD70/CD27 передача сигналов способствует аберрантному делению клеток, а высокий уровень sCD27 в сыворотке коррелирует с плохим прогнозом у пациентов с AML. Использование антитела против CD70 в соответствии с изобретением снижает процент бластных клеток в костном мозге (см. Примеры) и блокирует взаимодействия CD27/CD70, тем самым снижая уровни бластной стволовости и способствуя дифференцировке. Соответственно, ожидается, что пациенты с AML, имеющие повышенный sCD27, получат особую пользу от лечения антителом против CD70 согласно изобретению.CD70/CD27-mediated signaling is thought to promote aberrant cell division, and high serum levels of sCD27 correlate with poor prognosis in AML patients. Use of an anti-CD70 antibody according to the invention reduces the percentage of blast cells in the bone marrow (see Examples) and blocks CD27/CD70 interactions, thereby reducing blast stemness levels and promoting differentiation. Accordingly, AML patients having elevated sCD27 are expected to particularly benefit from treatment with the anti-CD70 antibody of the invention.
Образцы здоровых людей демонстрируют уровни sCD27 в сыворотке от 10 до 200 ед/мл, а у пациентов с AML - повышенный уровень sCD27 в сыворотке (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359380). Следовательно, в некоторых вариантах осуществления изобретения у пациента, подлежащего лечению, концентрация sCD27 в сыворотке превышается до более чем 200 ед/мл. Также было установлено, что для всех пациентов с AML в возрасте и по категориям риска подтипа AML (то есть среди пациентов с благоприятной, промежуточной и высокого риска/неблагоприятной цитогенетической классификацией) пациенты с уровнем sCD27 в сыворотке, превышающим порог 577 Ед/мл имеют худший прогноз, чем пациенты с уровнями sCD27 ниже этого порога. Поэтому в некоторых вариантах осуществления пациент, подлежащий лечению, имеет концентрацию sCD27 в сыворотке, превышающую 577 Ед/мл.Samples from healthy individuals show serum sCD27 levels of 10 to 200 U/mL, and AML patients show elevated serum sCD27 levels (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359380). Therefore, in some embodiments, the patient being treated has a serum sCD27 concentration elevated to greater than 200 U/mL. It was also found that for all AML patients aged and across AML subtype risk categories (i.e., among patients with favorable, intermediate, and high risk/unfavorable cytogenetic classification), patients with a serum sCD27 level greater than the threshold of 577 U/mL had worse prognosis than patients with sCD27 levels below this threshold. Therefore, in some embodiments, the patient being treated has a serum sCD27 concentration greater than 577 U/mL.
Когда уровни sCD27 в сыворотке были проанализированы в категориях риска подтипа AML, было выявлено, что у пациентов с AML подходящего подтипа с уровнем sCD27 в сыворотке, превышающим порог в 470 Ед/мл, прогноз хуже, чем у пациентов с AML подходящего подтипа и с sCD27 с уровнем ниже этого порога. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления пациент, подлежащий лечению, имеет подтип AML благоприятного или низкого риска и имеет концентрацию sCD27 в сыворотке, превышающую 470 Ед/мл.When serum sCD27 levels were analyzed within AML subtype risk categories, patients with subtype-matched AML with serum sCD27 levels above the threshold of 470 U/mL were found to have a worse prognosis than patients with subtype-matched AML and sCD27 with levels below this threshold. Therefore, in some embodiments, the patient to be treated has a favorable or low risk AML subtype and has a serum sCD27 concentration greater than 470 U/mL.
У пациентов с AML подтипа промежуточного риска с уровнем sCD27 в сыворотке, превышающим порог 586 Ед/мл, прогноз хуже, чем у пациентов с AML промежуточного подтипа и уровнем sCD27 ниже этого порога. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления пациент, подлежащий лечению, имеет подтип AML промежуточного риска и имеет концентрацию sCD27 в сыворотке, превышающую 586 Ед/мл.Patients with intermediate-risk AML with serum sCD27 levels above the threshold of 586 U/mL have a worse prognosis than patients with intermediate-risk AML and sCD27 levels below this threshold. Therefore, in some embodiments, the patient to be treated has an intermediate risk AML subtype and has a serum sCD27 concentration greater than 586 U/mL.
У пациентов с AML подтипа высокого риска с уровнем sCD27 в сыворотке, превышающим порог 714 Ед/мл, прогноз хуже, чем у пациентов с AML подтипа высокого риска и уровнями sCD27 ниже этого порога. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления пациент, подлежащий лечению, имеет подтип AML высокого риска и имеет концентрацию sCD27 в сыворотке, превышающую 714 Ед/мл.Patients with high-risk subtype AML with serum sCD27 levels above a threshold of 714 U/mL have a worse prognosis than patients with high-risk subtype AML and sCD27 levels below this threshold. Therefore, in some embodiments, the patient to be treated has a high-risk AML subtype and has a serum sCD27 concentration greater than 714 U/mL.
Очевидно, что у пациента, подлежащего лечению в соответствии с изобретением, концентрация sCD27 в сыворотке может быть предварительно определена как превышающая или как являющаяся ниже любого из описанных пороговых значений. Тем не менее, в некоторых вариантах осуществления лечение и способы по изобретению дополнительно включают стадию измерения концентрации CD27 в сыворотке пациента.It will be appreciated that in a patient to be treated in accordance with the invention, the serum concentration of sCD27 may be predetermined to be above or below any of the described threshold values. However, in some embodiments, the treatments and methods of the invention further include the step of measuring the concentration of CD27 in the patient's serum.
Как уже описано в настоящем документе, введение антитела против CD70 в соответствии с изобретением уменьшает количество бластов костного мозга и может блокировать взаимодействие CD27 и CD70. Сокращение бластных клеток наряду с ингибированием взаимодействия CD27/CD70 значительно снижает уровень шеддинга sCD27, как показано в примерах.As already described herein, administration of an anti-CD70 antibody according to the invention reduces the number of bone marrow blasts and can block the interaction of CD27 and CD70. Reduction of blast cells along with inhibition of CD27/CD70 interaction significantly reduces the level of sCD27 shedding as shown in the examples.
В некоторых вариантах осуществления способы согласно изобретению (например, монотерапия антителом против CD70 или комбинированная терапия антителом против CD70+NMI) снижают уровень sCD27 в сыворотке по сравнению с предшествующим лечением. В некоторых вариантах осуществления уровень sCD27 в сыворотке снижается, по меньшей мере, на 200 пг/мл, необязательно по меньшей мере на 500 пг/мл. В некоторых вариантах осуществления уровень CD27 в сыворотке снижается по меньшей мере на 1000 пг/мл, по меньшей мере на 1500 пг/мл или по меньшей мере на 10000 пг/мл по сравнению с предшествующим лечением.In some embodiments, the methods of the invention (eg, anti-CD70 antibody monotherapy or anti-CD70+NMI antibody combination therapy) reduce serum sCD27 levels compared to prior treatment. In some embodiments, the serum level of sCD27 is reduced by at least 200 pg/ml, optionally by at least 500 pg/ml. In some embodiments, the serum CD27 level is reduced by at least 1000 pg/ml, by at least 1500 pg/ml, or by at least 10,000 pg/ml compared to prior treatment.
Далее в примерах, приведенных в настоящем описании, продемонстрировано, что уровень sCD27 может быть использован в качестве коррелята взаимодействия антитела против CD70 с его антигеноммишенью. Уровень растворимого CD27 может уменьшаться в ответ на введение антитела против CD70, а затем увеличиваться после прекращения терапии. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления способы дополнительно включают мониторинг эффективности лечения путем детектирования сывороточного sCD27.The examples provided herein further demonstrate that the level of sCD27 can be used as a correlate of the interaction of an anti-CD70 antibody with its target antigen. Soluble CD27 levels may decrease in response to anti-CD70 antibody and then increase after discontinuation of therapy. Accordingly, in some embodiments, the methods further include monitoring the effectiveness of treatment by detecting serum sCD27.
Введение антитела против CD70 в соответствии с изобретением не только уменьшает процент бластов, но предпочтительно уменьшает количество бластных клеток, которые экспрессируют CD70 (CD70+ бластов). Понятно, что аберрантные бластные клетки AML сверхэкспрессируют CD70 относительно здоAdministration of an anti-CD70 antibody according to the invention not only reduces the percentage of blasts, but preferably reduces the number of blast cells that express CD70 (CD70+ blasts). It is clear that aberrant AML blast cells overexpress CD70 in a relatively healthy manner.
- 13 044996 ровых клеток-предшественников. Таким образом, нацеливание на бластные клетки, экспрессирующие CD70, уменьшает количество патогенных бластов, но оказывает незначительное влияние на здоровые клетки-предшественники, тем самым снижая риск развития цитопении у пациента.- 13 044996 cellular progenitors. Thus, targeting CD70-expressing blast cells reduces the number of pathogenic blasts but has little effect on healthy progenitor cells, thereby reducing the patient's risk of developing cytopenia.
В некоторых вариантах осуществления изобретения процент CD70+ бластов снижается. В некоторых вариантах осуществления процентное содержание бластов CD70+ уменьшается по меньшей мере на 5%, необязательно по меньшей мере на 10% в абсолютном выражении. В некоторых вариантах осуществления процент клеток CD70+ уменьшается до менее чем 20%, необязательно менее чем до 10%. В некоторых вариантах осуществления процент бластных клеток CD70+ снижается до менее чем 5%. Процент бластов CD70+ может быть уменьшен до указанного количества в костном мозге и/или периферической крови.In some embodiments, the percentage of CD70+ blasts is reduced. In some embodiments, the percentage of CD70+ blasts is reduced by at least 5%, optionally by at least 10%, in absolute terms. In some embodiments, the percentage of CD70+ cells is reduced to less than 20%, optionally less than 10%. In some embodiments, the percentage of CD70+ blast cells is reduced to less than 5%. The percentage of CD70+ blasts can be reduced to a specified amount in the bone marrow and/or peripheral blood.
Что касается лечения MDS, особенно желательно лечить пациентов с MDS высокого риска, то есть пациентов с MDS с плохим прогнозом выживаемости, более быстрым прогрессированием заболевания и более высокой вероятностью прогрессирования до AML. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления пациент является пациентом с MDS высокого риска. В некоторых вариантах осуществления пациент имеет оценку IPSS-R более 4,5.With regard to the treatment of MDS, it is particularly desirable to treat patients with high-risk MDS, that is, patients with MDS with a poor survival prognosis, faster disease progression, and a higher likelihood of progression to AML. Therefore, in some embodiments, the patient is a high-risk MDS patient. In some embodiments, the patient has an IPSS-R score greater than 4.5.
Терапия антителом против CD70 в комбинации с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI)Anti-CD70 antibody therapy in combination with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI)
Как уже описано в настоящем документе, монотерапия антителом против CD70 обеспечивает эффективное лечение AML или MDS, что приводит к значительному снижению процента бластных клеток. Также как обеспечение эффективной монотерапим, данные настоящего описания демонстрируют дальнейшую терапевтическую эффективность антитела против CD70 при введении в качестве части комбинированной терапии с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI), например гипометилирующим агентом (НМА), таким как азацитидин (также называемый здесь азацитидин, AZA или аза) или децитабин.As already described herein, anti-CD70 monotherapy provides effective treatment for AML or MDS, resulting in a significant reduction in the percentage of blast cells. As well as providing an effective monotherapy, the data herein demonstrate the further therapeutic efficacy of an anti-CD70 antibody when administered as part of a combination therapy with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI), e.g., a hypomethylating agent (HMA), such as azacitidine (also referred to herein as azacitidine, AZA, or aza ) or decitabine.
Таким образом, в дополнительном аспекте предложена комбинация, содержащая антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI. В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой гипометилирующий агент, предпочтительно азацитидин.Thus, in an additional aspect, a combination is provided comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and an NMI. In some embodiments, the NMI is a hypomethylating agent, preferably azacitidine.
В дополнительном аспекте предложена комбинация, содержащая антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI для применения в способе лечения AML или MDS. В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой гипометилирующий агент, предпочтительно азацитидин.In an additional aspect, a combination is provided comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and an NMI for use in a method of treating AML or MDS. In some embodiments, the NMI is a hypomethylating agent, preferably azacitidine.
В дополнительном аспекте предложена комбинация, содержащая антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент и NMI для применения в способе по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления NMI представляет собой гипометилирующий агент, предпочтительно азацитидин.In an additional aspect, a combination is provided comprising an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof and an NMI for use in the method of the present invention. In some embodiments, the NMI is a hypomethylating agent, preferably azacitidine.
Следующие варианты осуществления применимы ко всем аспектам и способам изобретения, представленным в данном документе, если не указано иное.The following embodiments apply to all aspects and methods of the invention presented herein unless otherwise indicated.
Азацитидин является аналогом цитидина, а децитабин - его дезоксипроизводным. AZA и децитабин являются ингибиторами ДНК-метилтрансфераз (DNMT), которые, как известно, активируют экспрессию генов посредством гипометилирования промотора. Такое гипометилирование нарушает функцию клеток, что приводит к цитотоксическим эффектам.Azacitidine is an analogue of cytidine, and decitabine is its deoxy derivative. AZA and decitabine are inhibitors of DNA methyltransferases (DNMTs), which are known to activate gene expression through promoter hypomethylation. This hypomethylation impairs cell function, leading to cytotoxic effects.
Не желая ограничиваться какой-либо теорией, полагают, что терапевтический эффект, возникающий при лечении антителом к CD70 и нуклеозидным метаболическим ингибиторм, таким как AZA, обусловлен усилением эффекта от объединения двух активных агентов. Как уже было описано, одно только антитело против CD70 истощает бласты костного мозга и циркулирующие бласты (т. е. в костном мозге, периферической крови или в обоих), а нуклеозидный метаболический ингибитор (такой как AZA) индивидуально нарушает клеточную активность.Without wishing to be bound by theory, it is believed that the therapeutic effect produced by treatment with an anti-CD70 antibody and a nucleoside metabolic inhibitor such as AZA is due to the enhanced effect of combining the two active agents. As previously described, anti-CD70 antibody alone depletes bone marrow blasts and circulating blasts (i.e., bone marrow, peripheral blood, or both), and a nucleoside metabolic inhibitor (such as AZA) individually impairs cellular activity.
Кроме того, активация CD70 на поверхности бластов AML и LSC индуцируется лечением нуклеозидным метаболическим ингибитором (азацитидин или децитабин) (см. примеры и фиг. 1). Этот эффект активации антигена коррелирует с увеличением эффективности антитела против CD70 при использовании в комбинации с нуклеозидным метаболическим ингибитором, таким как азацитидин, как показано в прилагаемых примерах. Это приводит к тому, что количество бластных клеток уменьшается в большей степени, чем после введения одного активного агента, и может объяснить удивительную эффективность комбинированного лечения, когда антитело против CD70 вводят в виде низкой дозы.In addition, activation of CD70 on the surface of AML and LSC blasts is induced by treatment with a nucleoside metabolic inhibitor (azacytidine or decitabine) (see examples and Fig. 1). This antigen activation effect correlates with increased potency of the anti-CD70 antibody when used in combination with a nucleoside metabolic inhibitor such as azacitidine, as shown in the accompanying Examples. This results in the number of blast cells being reduced to a greater extent than after administration of a single active agent and may explain the surprising effectiveness of combination treatment when anti-CD70 antibody is administered as a low dose.
Следовательно, в определенных предпочтительных вариантах осуществления способы лечения и способы по изобретению дополнительно включают введение пациенту метаболического нуклеозидного ингибитора. В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор представляет собой гипометилирующий агент. В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор представляет собой азацитидин или децитабин. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор представляет собой азацитидин.Therefore, in certain preferred embodiments, the treatments and methods of the invention further comprise administering a metabolic nucleoside inhibitor to the patient. In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is a hypomethylating agent. In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is azacitidine or decitabine. In some preferred embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is azacitidine.
В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор (например, азацитидин) вводят в дозе в диапазоне 50-100 мг/м в день. Как уже отмечалось, диапазоны, описанные вIn some embodiments, a nucleoside metabolic inhibitor (eg, azacitidine) is administered at a dose in the range of 50-100 mg/m per day. As noted, the ranges described in
- 14 044996 настоящем документе, включают конечные точки диапазона, если не указано иное - например, введение в дозе в диапазоне 50-100 мг/м в день включает введение в дозе 50 мг/м в день и введение в дозе 100 мг/м в день, а также все дозы между двумя конечными точками. В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в дозе в диапазоне 70-80 мг/м в день. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в дозе 75 мг/м в день.- 14 044996 herein include range endpoints unless otherwise specified - for example, administration in the range of 50-100 mg/m per day includes administration at a dose of 50 mg/m per day and administration at a dose of 100 mg/m at day, as well as all doses between the two endpoints. In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered at a dose in the range of 70-80 mg/m per day. In some preferred embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered at a dose of 75 mg/m per day.
В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в течение периода дозирования суточной дозы в течение 5-9 дней. То есть дозу нуклеозидного ингибитора вводят каждый день в течение 5, 6, 7, 8 или 9 дней. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в течение периода дозирования суточной дозы в течение 7 дней.In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered over a daily dosing period of 5-9 days. That is, a dose of the nucleoside inhibitor is administered every day for 5, 6, 7, 8 or 9 days. In some preferred embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered over a daily dosing period of 7 days.
В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в соответствии с режимом дозирования повторяющихся периодов дозирования, при этом конец одного периода дозирования и начало следующего периода дозирования отстоят друг от друга на 18-25 дней. То есть режим дозирования включает по меньшей мере 2 периода дозирования, в которых дозу нуклеозидного ингибитора вводят каждый день (например, в течение периода 5, 6, 7, 8 или 9 дней), где конец одного периода дозирования и начало следующего периода дозирования отстоят друг от друга на 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 дней. В некоторых вариантах осуществления конец одного периода дозирования и начало следующего периода дозирования отстоят друг от друга на 21 день.In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered according to a dosing regimen of repeated dosing periods, with the end of one dosing period and the beginning of the next dosing period spaced 18-25 days apart. That is, the dosing regimen includes at least 2 dosing periods in which a dose of the nucleoside inhibitor is administered every day (for example, over a period of 5, 6, 7, 8 or 9 days), where the end of one dosing period and the beginning of the next dosing period are spaced apart from each other for 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 or 25 days. In some embodiments, the end of one dosing period and the beginning of the next dosing period are spaced 21 days apart.
В некоторых вариантах осуществления каждый период дозирования имеет одинаковую продолжительность (например, 7 дней). В некоторых вариантах осуществления конец каждого периода дозирования и начало следующего периода дозирования отстоят друг от друга на одинаковое количество дней (например, 21 день).In some embodiments, each dosing period is of the same length (eg, 7 days). In some embodiments, the end of each dosing period and the beginning of the next dosing period are separated by the same number of days (eg, 21 days).
В некоторых вариантах осуществления первую дозу нуклеозидного метаболического ингибитора вводят через 7-21 день после первой дозы антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых вариантах осуществления первую дозу нуклеозидного метаболического ингибитора вводят через 10-17 дней после первой дозы антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых вариантах осуществления первую дозу нуклеозидного метаболического ингибитора вводят через 14 дней после первой дозы антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In some embodiments, the first dose of the nucleoside metabolic inhibitor is administered 7 to 21 days after the first dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof. In some embodiments, the first dose of the nucleoside metabolic inhibitor is administered 10-17 days after the first dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof. In some embodiments, the first dose of the nucleoside metabolic inhibitor is administered 14 days after the first dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
В некоторых вариантах осуществления одну из суточных доз нуклеозидного метаболического ингибитора вводят в тот же день, что и дозу антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента. То есть в вариантах осуществления способов по изобретению, в которых пациенту вводят как антитело против CD70 (или его антигенсвязывающий фрагмент), так и нуклеозидный метаболический ингибитор, режимы дозировки как антитела против CD70, так и нуклеозидного метаболического ингибитора таковы, что по меньшей мере одна из запланированных доз антитела против CD70 вводится в тот же день, что и одна из запланированных суточных доз нуклеозидного метаболического ингибитора. Этот день может быть первым, вторым, третьим, четвертым, пятым, шестым или седьмым днем периода дозирования нуклеозидного метаболического ингибитора.In some embodiments, one of the daily doses of the nucleoside metabolic inhibitor is administered on the same day as the dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof. That is, in embodiments of the methods of the invention in which both an anti-CD70 antibody (or an antigen-binding fragment thereof) and a nucleoside metabolic inhibitor are administered to a patient, the dosage regimens of both the anti-CD70 antibody and the nucleoside metabolic inhibitor are such that at least one of scheduled doses of the anti-CD70 antibody are administered on the same day as one of the planned daily doses of the nucleoside metabolic inhibitor. This day may be the first, second, third, fourth, fifth, sixth, or seventh day of the nucleoside metabolic inhibitor dosing period.
В некоторых вариантах осуществления дозу антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента вводят каждые 14-17 дней, а нуклеозидный метаболический ингибитор вводят в соответствии с режимом дозирования повторяющихся периодов введения суточной дозы в течение 7 дней, где конец одного периода дозирования и начало следующего периода дозирования отстоят друг от друга на 21 день, причем первая суточная доза первого периода дозирования вводится через 14 дней после первой дозы антитела против CD70 или его антигенсвязывающего фрагмента.In some embodiments, a dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered every 14-17 days, and the nucleoside metabolic inhibitor is administered according to a dosing regimen of repeated daily dosing periods over 7 days, where the end of one dosing period and the beginning of the next dosing period are spaced apart 21 days apart, with the first daily dose of the first dosing period administered 14 days after the first dose of the anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof.
Еще одним преимуществом изобретения является то, что после начального периода комбинированной терапии введение NMI (например, aza) может быть остановлено или прекращено. Например, как показано в настоящем описании, начальный период комбинированной терапии с антителом к CD70 и НМИ может значительно снизить процент бластов у пациента. Однако существует потенциал для накопленной токсичности, возникающей в результате длительных периодов лечения NMI, например, цитопении, возникающей в результате воздействия NMI на типы небластных клеток. Уменьшая или прекращая введение дозы NMI после начального периода, риск такой токсичности будет снижен, и типы небластных клеток могут восстановиться. Однако процент бластов все еще будет контролироваться путем поддержания дозы антитела против CD70. Другими словами, пациент может подвергаться лечению с помощью индукционной терапии уже описанного комбинированного лечения и затем может быть переведен на поддерживающую терапию, включающую терапию антителом против CD70 с уменьшающимися дозами NMI или терапию антителом против CD70 индивидуально в качестве монотерапии.Another advantage of the invention is that after the initial period of combination therapy, the administration of NMI (eg, aza) can be stopped or discontinued. For example, as shown herein, an initial period of combination therapy with anti-CD70 antibody and NMI can significantly reduce a patient's blast percentage. However, there is the potential for cumulative toxicity resulting from long periods of NMI treatment, such as cytopenia resulting from the effects of NMI on non-blast cell types. By reducing or stopping the NMI dose after the initial period, the risk of such toxicity will be reduced and non-blast cell types may recover. However, the percentage of blasts will still be controlled by maintaining the dose of anti-CD70 antibody. In other words, the patient can be treated with induction therapy of the combination treatment already described and can then be switched to maintenance therapy including anti-CD70 antibody therapy with tapering doses of NMI or anti-CD70 antibody therapy alone as monotherapy.
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления лечение согласно изобретению включает введение пациенту антитела против CD70 и NMI в качестве комбинированной терапии в соответствии с любым из вариантов осуществления, описанных выше, на первой стадии (индукционная терапия) и на последующей второй стадии введение пациенту антитела против CD70 и введение дозы NMI ниже, чем доза NMI, вводимая на первой стадии (поддерживающая терапия). Доза NMI на второй стадии может быть нулевой, то есть вторая стадия может включать введение только антитела против CD70.Therefore, in some embodiments, treatment according to the invention includes administering to the patient an anti-CD70 antibody and NMI as a combination therapy in accordance with any of the embodiments described above in a first step (induction therapy) and in a subsequent second step administering to the patient an anti-CD70 antibody and administration of the NMI dose is lower than the NMI dose administered in the first stage (maintenance therapy). The dose of NMI in the second stage may be zero, that is, the second stage may include the administration of only the anti-CD70 antibody.
- 15 044996- 15 044996
В таких вариантах осуществления доза антитела против CD70, вводимая на второй стадии (т.е. поддерживающей терапии), представляет собой любую дозу в соответствии с уже описанными вариантами осуществления. То есть в некоторых вариантах осуществления доза находится в диапазоне от 0,1 до 25 мг/кг, например от 0,1 до 20 мг/кг, например от 1 до 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза находится в диапазоне от 0,1 до 15 мг/кг на дозу. В некоторых вариантах осуществления доза находится в диапазоне от 0,5 до 2 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет 1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг или 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет 1 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет 10 мг/кг.In such embodiments, the dose of anti-CD70 antibody administered in the second stage (ie, maintenance therapy) is any dose in accordance with the embodiments already described. That is, in some embodiments, the dose is in the range of 0.1 to 25 mg/kg, such as 0.1 to 20 mg/kg, such as 1 to 20 mg/kg. In some embodiments, the dosage is in the range of 0.1 to 15 mg/kg per dose. In some embodiments, the dose is in the range of 0.5 to 2 mg/kg. In some embodiments, the dose is 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg, or 20 mg/kg. In some embodiments, the dose is 1 mg/kg. In some embodiments, the dose is 10 mg/kg.
Продолжительность первой стадии (т.е. индукционная терапия), сроки перехода ко второй стадии (т.е. поддерживающая терапия) и степень, до которой доза NMI уменьшается или полностью прекращается ее введение, являются факторами, которые будут адаптированы для конкретного пациента, и определяется их врачом в зависимости от реакции пациента на терапию и истории болезни. Следовательно, следующие варианты осуществления представлены в качестве неограничивающих примеров.The duration of the first stage (i.e., induction therapy), timing of transition to the second stage (i.e., maintenance therapy), and the extent to which the NMI dose is reduced or discontinued are factors that will be tailored to the individual patient, and determined by their physician based on the patient's response to therapy and medical history. Therefore, the following embodiments are presented as non-limiting examples.
В некоторых вариантах осуществления индукционная терапия вводится пациенту до тех пор, пока процентная доля бластов его костного мозга и/или периферической крови не станет меньше чем 10%, необязательно меньше чем 5%. В некоторых вариантах осуществления индукционная терапия вводится в течение по меньшей мере 5 периодов дозирования NMI, необязательно по меньшей мере 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 периодов дозирования NMI.In some embodiments, induction therapy is administered to a patient until the percentage of blasts in his bone marrow and/or peripheral blood is less than 10%, not necessarily less than 5%. In some embodiments, the induction therapy is administered over at least 5 NMI dosing periods, optionally at least 6, 7, 8, 9, or at least 10 NMI dosing periods.
В некоторых вариантах осуществления доза NMI в период поддержания составляет не более чем 50 мг/м в день, необязательно не более чем 40 мг/м в день, необязательно не более чем 30 мг/м в день, необязательно не более чем 20 мг/м в день.In some embodiments, the NMI dose during the maintenance period is no more than 50 mg/m per day, optionally no more than 40 mg/m per day, optionally no more than 30 mg/m per day, optionally no more than 20 mg/m in a day.
Фармацевтические композицииPharmaceutical compositions
В соответствии с изобретением также предложены фармацевтические композиции для применения в способах, описанных в настоящем документе. Поэтому в следующем аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая антитело против CD70 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или носитель для применения в способе согласно изобретению. Подходящие фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные вещества известны специалисту в данной области. Примеры фармацевтически приемлемых носителей и вспомогательных веществ, подходящих для включения в фармацевтические композиции по изобретению, включают цитрат натрия, глицин, полисорбат (например, полисорбат 80) и солевой раствор.The invention also provides pharmaceutical compositions for use in the methods described herein. Therefore, in a further aspect of the invention there is provided a pharmaceutical composition comprising an anti-CD70 antibody and a pharmaceutically acceptable excipient or carrier for use in the method according to the invention. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and excipients are known to one skilled in the art. Examples of pharmaceutically acceptable carriers and excipients suitable for inclusion in the pharmaceutical compositions of the invention include sodium citrate, glycine, polysorbate (eg, polysorbate 80) and saline.
Для комбинаций по изобретению антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть включены в состав для введения тем же путем или другим путем по сравнению с нуклеозидным метаболическим ингибитором.For the combinations of the invention, an anti-CD70 antibody or an antigen-binding fragment thereof may be formulated for administration by the same route or a different route than the nucleoside metabolic inhibitor.
В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 вводят пациенту парентерально, предпочтительно внутривенно (iv). В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 вводят в виде непрерывной внутривенной инфузии до достижения желаемой дозы.In some embodiments, the anti-CD70 antibody is administered to the patient parenterally, preferably intravenously (iv). In some embodiments, the anti-CD70 antibody is administered as a continuous intravenous infusion until the desired dose is achieved.
В некоторых вариантах осуществления нуклеозидный метаболический ингибитор вводят парентерально, предпочтительно подкожно (s.c).In some embodiments, the nucleoside metabolic inhibitor is administered parenterally, preferably subcutaneously (s.c.).
Комбинированная терапияCombination therapy
Лечение в соответствии с изобретением может быть включено в комбинированную терапию с одним или более дополнительными активными агентами, такими как терапевтические или паллиативные агенты (например, радиотерапия, анальгетики или антибиотики). Такие активные агенты могут вводиться в качестве терапевтических средств для улучшения реакции пациента на терапию и/или качества их жизни. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 (необязательно в комбинированной терапии с NMI) вводят в соответствии с изобретением в комбинированной терапии с одним или более дополнительными активными агентами.Treatment in accordance with the invention may be included in combination therapy with one or more additional active agents, such as therapeutic or palliative agents (eg, radiotherapy, analgesics or antibiotics). Such active agents may be administered as therapeutic agents to improve a patient's response to therapy and/or their quality of life. Therefore, in some embodiments, an anti-CD70 antibody (optionally in combination therapy with NMI) is administered in accordance with the invention in combination therapy with one or more additional active agents.
Неожиданно было показано, что лечение AML или MDS с помощью антитела против CD70 (в виде монотерапии или комбинированной терапии с NMI, таким как aza) особенно эффективно для уменьшения бластов в костном мозге и периферической крови. Конкретное преимущество заключается в том, что антитела против CD70 избирательны в отношении бластов по сравнению с клетками других типов (поскольку CD70 обладает минимальной экспрессией в нормальных тканях) и могут индуцировать дифференцировку стволовых клеток/снижать их стволовость (например, путем препятствия передачи сигналов, опосредованной CD27/CD70).Surprisingly, treatment of AML or MDS with an anti-CD70 antibody (as monotherapy or combination therapy with an NMI such as aza) has been shown to be particularly effective in reducing blasts in the bone marrow and peripheral blood. A specific advantage is that anti-CD70 antibodies are selective for blasts over other cell types (since CD70 has minimal expression in normal tissues) and can induce stem cell differentiation/reduce stemness (e.g. by interfering with CD27-mediated signaling /CD70).
Эти эффекты на бласты и лейкозные стволовые клетки указывают на то, что лечение в соответствии с изобретением будет преимущественно сочетаться с агентами, которые также нацелены на бласты и LSC. CD33 является рецептором, который экспрессируется на большинстве миелоидных бластов и LSC, но отсутствует или присутствует только на низком уровне в нормальных гемопоэтических стволовых клетках. В то время как CD33 экспрессируется на множестве других типов клеток, менее связанных с AML, CD33 экспрессируется на большинстве клеток AML, и уровень С D33, по-видимому, коррелирует с прогнозом заболевания. Антитела к CD33, такие как биспецифическое антитело AMG330 и конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC) вадастуксимаб талирин, были описаны как эффективные средства для лечения AML, и вадатуксимаб талирин (также известный как SGN-CD33A от Seattle Genetics)These effects on blasts and leukemia stem cells indicate that treatments according to the invention will advantageously be combined with agents that also target blasts and LSCs. CD33 is a receptor that is expressed on most myeloid blasts and LSCs, but is absent or present only at low levels in normal hematopoietic stem cells. While CD33 is expressed on a variety of other cell types less associated with AML, CD33 is expressed on the majority of AML cells, and D33 C level appears to correlate with disease prognosis. Antibodies to CD33, such as the bispecific antibody AMG330 and the antibody-drug conjugate (ADC) vadastuximab thalirine, have been described as effective treatments for AML, and vadatuximab thalirine (also known as SGN-CD33A from Seattle Genetics)
- 16 044996 тестируется в исследованиях фазы III. Следовательно, ожидается, что антитела против CD33 будут комбинироваться с лечением согласно изобретению (монотерапия антителом против CD70 или комбинацией антитела против CD70 и NMI (например, aza)), обеспечивая особенно эффективную терапию для AML. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту вводят агент против CD33, например антитело против CD33, как часть комбинированной терапии с антителом против CD70 (и необязательно NMI) в соответствии с изобретением.- 16 044996 is being tested in phase III studies. Therefore, it is expected that anti-CD33 antibodies will be combined with the treatment of the invention (anti-CD70 monotherapy or a combination of anti-CD70 antibody and NMI (eg, aza)), providing a particularly effective therapy for AML. Therefore, in some embodiments of the invention, an anti-CD33 agent, such as an anti-CD33 antibody, is administered to a patient as part of a combination therapy with an anti-CD70 antibody (and optionally NMI) in accordance with the invention.
CD123 является другим рецептором, связанным с миелоидными бластами и LSC, но с низким уровнем экспрессии в других типах клеток, таких как здоровые гемопоэтические стволовые клетки и лимфоциты. Клетки AML с высокой экспрессией CD123 демонстрируют более высокую пролиферацию, а более высокая экспрессия CD123 среди бластов AML связана с более низкими показателями полной ремиссии и меньшей общей выживаемостью. Следовательно, агенты, нацеленные на CD123, представляют собой другую подходящую комбинацию для применения при лечении согласно настоящему изобретению. Агенты против CD123, подходящие для применения при лечении AML, включают связанный с токсином природный лиганд (например, DT388IL3) и антитела, такие как CSL360, CSL362 и MGD006 (модифицированное антитело (DART)). Следовательно, в некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту вводят анти-CD123-агент, например антитело против CD123, как часть комбинированной терапии с антителом против CD70 (и необязательно NMI) в соответствии с изобретением.CD123 is another receptor associated with myeloid blasts and LSCs, but with low levels of expression in other cell types such as healthy hematopoietic stem cells and lymphocytes. AML cells with high CD123 expression exhibit higher proliferation, and higher CD123 expression among AML blasts is associated with lower rates of complete remission and poorer overall survival. Therefore, agents targeting CD123 are another suitable combination for use in the treatment of the present invention. Anti-CD123 agents suitable for use in the treatment of AML include a toxin-associated natural ligand (eg, DT388IL3) and antibodies such as CSL360, CSL362 and MGD006 (modified antibody (DART)). Therefore, in some embodiments of the invention, an anti-CD123 agent, such as an anti-CD123 antibody, is administered to a patient as part of a combination therapy with an anti-CD70 antibody (and optionally NMI) in accordance with the invention.
Лечение AML антителом против CD70 (в виде монотерапии или вместе с NMI (например, aza)) может быть дополнительно выгодно объединено в комбинированной терапии с другими терапевтическими агентами AML, например, ингибиторами Е-селектина, ингибиторами рецептора 3 FMS-подобной тирозинкиназы (FLT3), ингибиторами циклинзависимой киназы, ингибиторами BCL-2, ингибиторами аминопептидазы и ингибиторами JAK/STAT.Anti-CD70 antibody treatment for AML (as monotherapy or together with an NMI (eg, aza)) may be further advantageously combined in combination therapy with other AML therapeutic agents, e.g., E-selectin inhibitors, FMS-like tyrosine kinase receptor 3 (FLT3) inhibitors , cyclin-dependent kinase inhibitors, BCL-2 inhibitors, aminopeptidase inhibitors and JAK/STAT inhibitors.
Как уже описано, другие терапевтические агенты AML включают цитарабин, антрациклиновые соединения (например, даунорубицин, идарубицин) и гидроксимочевину.As already described, other therapeutic agents for AML include cytarabine, anthracycline compounds (eg, daunorubicin, idarubicin), and hydroxyurea.
Антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагментAnti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof
Во всех аспектах изобретения, описанного в настоящем документе, пациенту, подлежащему лечению, вводят антитело против CD70 или его антигенсвязывающий фрагмент. Используемый в настоящем описании термин антитело относится к иммуноглобулинам, имеющим комбинацию двух тяжелых и двух легких цепей, которые обладают специфической иммунореактивной активностью к интересующему антигену (например, человеческому CD70). Термин антитела к CD70 или антитела против CD70 используются здесь взаимозаменяемо для обозначения антител, которые проявляют иммунологическую специфичность к белку CD70 человека. Специфичность для человеческого CD70 в этом контексте не исключает перекрестной реактивности с видовыми гомологами CD70.In all aspects of the invention described herein, an anti-CD70 antibody or antigen-binding fragment thereof is administered to the patient to be treated. As used herein, the term antibody refers to immunoglobulins having a combination of two heavy and two light chains that are specifically immunoreactive to an antigen of interest (eg, human CD70). The term anti-CD70 antibodies or anti-CD70 antibodies are used interchangeably herein to refer to antibodies that exhibit immunological specificity for the human CD70 protein. Specificity for human CD70 in this context does not preclude cross-reactivity with CD70 species homologues.
Антитело в контексте настоящего описания охватывает человеческие антитела любого класса (например, IgG, IgM, IgA, IgD, IgE), а также их подклассы/изотипы (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1). Используемое в настоящем описании антитело также относится к модифицированным антителам. Модифицированные антитела включают синтетические формы антител, которые изменены таким образом, что они не встречаются в природе, например, антитела, которые содержат по меньшей мере две части тяжелой цепи, но не две полные тяжелые цепи (такие как антитела с делецией домена или мини-тела); полиспецифичные формы антител (например, биспецифичные, триспецифичные и т.д.), измененные для связывания с двумя или более различными антигенами или с различными эпитопами на одном антигене); молекулы тяжелых цепей, соединенные с молекулами scFv и т.п. Кроме того, термин модифицированное антитело включает поливалентные формы антител (например, трехвалентные, четырехвалентные и т.д. антитела, которые связываются с тремя или более копиями одного и того же антигена).Antibody as used herein includes human antibodies of any class (eg, IgG, IgM, IgA, IgD, IgE), as well as their subclasses/isotypes (eg, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1). The antibody used herein also refers to modified antibodies. Modified antibodies include synthetic forms of antibodies that are altered so that they do not occur naturally, such as antibodies that contain at least two portions of a heavy chain, but not two complete heavy chains (such as domain deletion or minibody antibodies ); polyspecific forms of antibodies (eg, bispecific, trispecific, etc.), modified to bind to two or more different antigens or to different epitopes on the same antigen); heavy chain molecules linked to scFv molecules and the like. In addition, the term modified antibody includes multivalent forms of antibodies (eg, trivalent, quadrivalent, etc. antibodies that bind to three or more copies of the same antigen).
Антитела, описанные в настоящем документе, могут обладать эффекторной функцией антитела, например, одной или более из антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC), комплементзависимой цитотоксичности (CDC) и антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP).Antibodies described herein may have an antibody effector function, such as one or more of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC), complement-dependent cytotoxicity (CDC), and antibody-dependent cellular phagocytosis (ADCP).
Антитело к CD70, подходящее для использования согласно всем аспектам изобретения, включает ARGX-110, описанное в WO 2012123586 (включенный в настоящее описание в качестве ссылки), и SGN70 (WO 2006113909, а также McEarChern et al. Clin Cancer Res 2008; 14 (23) p7763, оба включены в настоящее описание в качестве ссылки).Anti-CD70 antibody suitable for use in all aspects of the invention includes ARGX-110, described in WO 2012123586 (incorporated herein by reference), and SGN70 (WO 2006113909, and McEarChern et al. Clin Cancer Res 2008; 14 ( 23) p7763, both incorporated herein by reference).
Антитело против CD70, подходящее для использования по всем аспектам изобретения, также может представлять собой конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC). ADC представляют собой антитела, присоединенные к активным агентам, например ауристатинам и майтанзинам или другим цитотоксическим агентам. Некоторые ADC поддерживают блокирование антител и/или эффекторную функцию (например, ADCC, CDC, ADCP), а также доставляют конъюгированный активный агент в клетки, экспрессирующие мишень (например, CD70). Примеры анти-CD70 ADC включают в себя ворсетузумаб мафодотин (также известный как SGN-75, Seattle Genetics), SGN-70A (Seattle Genetics) и MDX1203/BMS936561 (Britsol-Myers Squibb), каждый из которых может использоваться в соответствии с изобретением. Подходящие анти-CD70 ADC также описаны в WO 2008074004 и WO 2004073656, каждый из которых включен в настоящее описание в качестве ссылки).An anti-CD70 antibody suitable for use in all aspects of the invention may also be an antibody-drug conjugate (ADC). ADCs are antibodies attached to active agents such as auristatins and maytansines or other cytotoxic agents. Some ADCs support antibody blocking and/or effector function (eg, ADCC, CDC, ADCP) and also deliver the conjugated active agent to cells expressing the target (eg, CD70). Examples of anti-CD70 ADCs include vorsetuzumab mafodotin (also known as SGN-75, Seattle Genetics), SGN-70A (Seattle Genetics), and MDX1203/BMS936561 (Britsol-Myers Squibb), each of which can be used in accordance with the invention. Suitable anti-CD70 ADCs are also described in WO 2008074004 and WO 2004073656, each of which is incorporated herein by reference).
Антигенсвязывающий фрагмент относится к полипептидному фрагменту антитела, который подAntigen binding fragment refers to a polypeptide fragment of an antibody that is
- 17 044996 держивает специфичность связывания для CD70 и включает вариабельный домен легкой цепи антитела (VL); вариабельный домен тяжелой цепи антитела; вариабельный фрагмент с одной цепью или одноцепочечное антитело (scFv); Fab фрагмент; фрагмент F(ab')2; фрагмент Fd; фрагмент Fv; антитело с одним плечом (одновалентное); димеры; триатела; тетратела; или любая антигенсвязывающая молекула, включая такие антигенсвязывающие фрагменты (например, химерный антигенный рецептор), или любая антигенсвязывающая молекула, образованная комбинацией, сборкой или конъюгацией таких антигенсвязывающих фрагментов. Фрагменты могут быть получены, например, химической или ферментативной обработкой интактного или полного антитела или цепи антитела или рекомбинантными способами.- 17 044996 maintains binding specificity for CD70 and includes the antibody light chain variable domain (VL); antibody heavy chain variable domain; single chain variable fragment or single chain antibody (scFv); Fab fragment; fragment F(ab')2; fragment Fd; fragment Fv; single arm antibody (monivalent); dimers; triatela; tetrabodies; or any antigen binding molecule, including such antigen binding fragments (eg, a chimeric antigen receptor), or any antigen binding molecule formed by the combination, assembly or conjugation of such antigen binding fragments. The fragments can be produced, for example, by chemical or enzymatic treatment of an intact or complete antibody or antibody chain, or by recombinant methods.
Как показано в примерах, было продемонстрировано эффективное лечение пациентов с AML с помощью антитела против CD70, ARGX-110. ARGX-110 является антителом IgG1 против CD70, которое, как было показано, ингибирует взаимодействие CD70 с его рецептором CD27 (Silence et al. MAbs 2014 Mar-Apr;6(2):523-32, включено в настоящее описание в качестве ссылки). В частности, было показано, что ARGX-110 ингибирует индуцированную CD70 передачу сигналов CD27. Уровни передачи сигналов CD27 могут быть определены, например, путем измерения в сыворотке растворимого CD27, как описано в Riether et al. (J. Exp. Med. 2017 Feb; 214 (2): 359-380), или экспрессии IL-8, как описано в Silence et al (MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2):523-32). He ограничиваясь какой-либо теорией, полагают, что ингибирование передачи сигналов CD27 уменьшает активацию и/или пролиферацию Treg-клеток, тем самым уменьшая ингибирование противоопухолевых эффекторных Т-клеток.As shown in the examples, the anti-CD70 antibody, ARGX-110, has been demonstrated to be effective in treating patients with AML. ARGX-110 is an anti-CD70 IgG1 antibody that has been shown to inhibit the interaction of CD70 with its receptor CD27 (Silence et al. MAbs 2014 Mar-Apr;6(2):523-32, incorporated herein by reference) . Specifically, ARGX-110 has been shown to inhibit CD70-induced CD27 signaling. Levels of CD27 signaling can be determined, for example, by measuring serum soluble CD27, as described in Riether et al. (J. Exp. Med. 2017 Feb; 214 (2): 359-380), or IL-8 expression as described in Silence et al (MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2):523-32). Without being limited to any theory, it is believed that inhibition of CD27 signaling reduces the activation and/or proliferation of Treg cells, thereby reducing the inhibition of antitumor effector T cells.
Следовательно, во всех аспектах изобретения антитело против CD70 может представлять собой антитело, которое ингибирует взаимодействие CD70 с его рецептором CD27. В некоторых таких вариантах осуществления антитело против CD70 может конкурировать с CD27 за связывание с CD70. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может ингибировать индуцированную CD70 передачу сигнала CD27. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может ингибировать активацию и/или пролиферацию Treg.Therefore, in all aspects of the invention, an anti-CD70 antibody may be an antibody that inhibits the interaction of CD70 with its receptor CD27. In some such embodiments, the anti-CD70 antibody may compete with CD27 for binding to CD70. In some embodiments, an anti-CD70 antibody may inhibit CD70-induced CD27 signaling. In some embodiments, an anti-CD70 antibody may inhibit Treg activation and/or proliferation.
Также было продемонстрировано, что AGRX-110 истощает CD70-экспрессирующие опухолевые клетки. В частности, было показано, что ARGX-110 лизирует экспрессирующие CD70 опухолевые клетки посредством антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC) и комплементзависимой цитотоксичности (CDC), а также усиливает антителозависимый клеточный фагоцитоз (ADCP) экспрессирующих CD70 клеток. (Silence et al, MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2):523-32).AGRX-110 has also been demonstrated to deplete CD70-expressing tumor cells. Specifically, ARGX-110 has been shown to lyse CD70-expressing tumor cells through antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) and complement-dependent cytotoxicity (CDC), and also enhances antibody-dependent cellular phagocytosis (ADCP) of CD70-expressing cells. (Silence et al, MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2):523-32).
Следовательно, в некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может представлять собой антитело, которое истощает CD70-экспрессирующие клетки. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может индуцировать лизис клеток, экспрессирующих CD70. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может обладать функциональностью ADCC и/или CDC. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 может индуцировать ADCP.Therefore, in some embodiments, the anti-CD70 antibody may be an antibody that depletes CD70-expressing cells. In some embodiments, an anti-CD70 antibody may induce lysis of cells expressing CD70. In some embodiments, an anti-CD70 antibody may have ADCC and/or CDC functionality. In some embodiments, an anti-CD70 antibody may induce ADCP.
Fc-область ARGX-110 представляет собой дефукозилированную Fc-область в соответствии с системой Potelligent™, и ARGX-110 было описано как проявляющее повышенную функциональность ADCC по сравнению с фукозилированным аналогом (Silence et al. MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2):523-32). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 полностью или частично дефукозилировано.The Fc region of ARGX-110 is a defucosylated Fc region according to the Potelligent™ system, and ARGX-110 has been described as exhibiting increased ADCC functionality compared to its fucosylated counterpart (Silence et al. MAbs. 2014 Mar-Apr;6(2 ):523-32). Thus, in some embodiments, the anti-CD70 antibody is fully or partially defucosylated.
В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 содержит домен Fc, домен СН3 или шарнир Fc, полученный из человеческого IgG1, включающего Lys433, Phe434 и Tyr436 (согласно нумерации EU). В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 дополнительно содержит один или более из Tyr252, Thr254 и Glu256 (согласно нумерации EU). Было показано, что эти остатки в этих положениях увеличивают время циркуляции антител.In some embodiments, the anti-CD70 antibody comprises an Fc domain, CH3 domain, or Fc hinge derived from human IgG1 comprising Lys433, Phe434, and Tyr436 (as defined by EU numbering). In some embodiments, the anti-CD70 antibody further comprises one or more of Tyr252, Thr254, and Glu256 (as designated by EU numbering). These residues at these positions have been shown to increase antibody circulation time.
В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 представляет собой антитело IgG, предпочтительно антитело IgG3.In some embodiments, the anti-CD70 antibody is an IgG antibody, preferably an IgG3 antibody.
Как уже описано и в свете данных, впервые представленных в настоящем описании, антитела против CD70, отличные от ARGX-110, как ожидается, будут эффективными способами лечения в соответствии с изобретением, например, с использованием антител к CD70, которые ингибируют взаимодействие CD70 с CD27, конкурируют с CD27 за связывание CD70, ингибируют CD70-индуцированную передачу сигналов CD27, ингибируют активацию и/или пролиферацию Treg, истощают CD70-экспрессирующие клетки, индуцируют лизис CD70-экспрессирующих клеток, обладают ADCC, функциональностью CDC и/или индуцируют ADCP. Альтернативные антитела против CD70, которые, как ожидается, будут полезны при лечении согласно изобретению, известны в данной области, например, SGN-70 и те, которые описаны в WO 2006044643 и WO 2007038637, каждый из которых включен в настоящее описание в качестве ссылки. Модифицированные антитела против CD70, такие как ADC SGN-75, SGN-70A и MDX1203/BMS936561, являются дополнительными примерами антител против CD70, которые, как ожидается, будут эффективными при лечении согласно изобретению.As already described and in light of the data first presented herein, anti-CD70 antibodies other than ARGX-110 are expected to be effective treatments according to the invention, for example, using anti-CD70 antibodies that inhibit the interaction of CD70 with CD27 , compete with CD27 for CD70 binding, inhibit CD70-induced CD27 signaling, inhibit Treg activation and/or proliferation, deplete CD70-expressing cells, induce lysis of CD70-expressing cells, have ADCC, CDC functionality, and/or induce ADCP. Alternative anti-CD70 antibodies that are expected to be useful in treatment according to the invention are known in the art, for example, SGN-70 and those described in WO 2006044643 and WO 2007038637, each of which is incorporated herein by reference. Modified anti-CD70 antibodies, such as the ADCs SGN-75, SGN-70A and MDX1203/BMS936561, are additional examples of anti-CD70 antibodies that are expected to be effective in the treatment of the invention.
В некоторых вариантах осуществления, не ограничивающих варианты осуществления, антитело против CD70 может содержать последовательности CDR ARGX-110. То есть в некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), где домены VH и VL содержат CDR (по определению Kabat):In some non-limiting embodiments, the anti-CD70 antibody may comprise ARGX-110 CDR sequences. That is, in some embodiments, the anti-CD70 antibody comprises a heavy chain variable domain (VH) and a light chain variable domain (VL), wherein the VH and VL domains comprise a CDR (as defined by Kabat):
- 18 044996- 18 044996
HCDR3, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 3 (DAGYSNHVPIFDS) HCDR2, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 2 (DINNEGGTTYYADSVKG) HCDR1, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 1 (VYYMN) LCDR3, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 7 (ALFISNPSVE) LCDR2, содержащую или состоящую из SEQ ID NO: 6 (NTNTRHS), и LCDR1, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 5 (GLKSGSVTSDNFPT). В некоторых вариантах осуществления домены VH и/или VL антитела против CD70 имеют по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 99% идентичности последовательности с доменами VH и/или VL ARGX-110, соответственно (VH: SEQ ID NO: 4; VL: SEQ ID NO: 8). Для вариантов осуществления, в которых домены антител или антигенсвязывающих фрагментов определяются определенным процентом идентичности последовательности с эталонной последовательностью, домены VH и/или VL могут сохранять последовательности CDR, идентичные тем, которые присутствуют в эталонной последовательности, так что присутствует вариация только в каркасных областях. В некоторых вариантах осуществления антитело против CD70 представляет собой ARGX-110.HCDR3 containing or consisting of SEQ ID NO: 3 (DAGYSNHVPIFDS) HCDR2 containing or consisting of SEQ ID NO: 2 (DINNEGGTTYYADSVKG) HCDR1 containing or consisting of SEQ ID NO: 1 (VYYMN) LCDR3 containing or consisting of SEQ ID NO: 7 (ALFISNPSVE) LCDR2 containing or consisting of SEQ ID NO: 6 (NTNTRHS), and LCDR1 containing or consisting of SEQ ID NO: 5 (GLKSGSVTSDNFPT). In some embodiments, the VH and/or VL domains of the anti-CD70 antibody have at least 70%, at least 80%, at least 90%, at least 95%, at least 99% sequence identity with the VH and/or VL domains. or VL ARGX-110, respectively (VH: SEQ ID NO: 4; VL: SEQ ID NO: 8). For embodiments in which antibody or antigen binding fragment domains are defined by a certain percentage of sequence identity to a reference sequence, the VH and/or VL domains may retain CDR sequences identical to those present in the reference sequence such that variation is present only in the framework regions. In some embodiments, the anti-CD70 antibody is ARGX-110.
Таблица 2table 2
ПримерыExamples
Пример 1. Эффект монотерапии антителом против CD70 или в комбинации с децитабином на LSC AML человека, трансплантированных мышамExample 1 Effect of Anti-CD70 Antibody Monotherapy or in Combination with Decitabine on Human AML LSCs Transplanted into Mice
Мышам NSG трансплантировали 5х106 CD45dimSSClo клеток AML человека. Через 32 дня после приживления (приживление в РВ: 14,45 +/- 0,95%) мышей NSG рандомизировали для обработки носителем (Veh), mCD dCD70 (aCD70, ARGX-110, 10 мг/кг), децитабином (D, 1,5 мг/кг/сут) или комбинации (aCD70/D) в течение 5 дней и анализировали костный мозг, селезенку и кровь.NSG mice were transplanted with 5x10 6 CD45 dim SSCl o human AML cells. At 32 days post-engraftment (RT engraftment: 14.45 +/- 0.95%), NSG mice were randomized to vehicle (Veh), mCD dCD70 (aCD70, ARGX-110, 10 mg/kg), decitabine (D, 1.5 mg/kg/day) or combination (aCD70/D) for 5 days and bone marrow, spleen and blood were analyzed.
Как антитело против CD70, так и только децитабин приводили к снижению общего приживления в костном мозге, селезенке и крови (фиг. 1). Комбинация антитела против CD70 и децитабина привела к усиленному снижению процента приживленных клеток человека по сравнению с какой-либо одной терапией (фиг. 1).Both anti-CD70 antibody and decitabine alone resulted in decreased overall engraftment in bone marrow, spleen, and blood ( Fig. 1 ). The combination of anti-CD70 antibody and decitabine resulted in an enhanced reduction in the percentage of engrafted human cells compared with either therapy alone (Fig. 1).
Комбинированная терапия также уменьшала количество клеток CD34+ AML (маркер клетокпредшественников) в костном мозге лучше, чем только децитабин или антитело против CD70 индивидуально (фиг. 1). Кроме того, обработка антитело против CD70 снижала как количество CD34+CD38- клеток, так и CD34+CD45- клеток, причем обе клеточные популяции считались маркерами лейкозных стволовых клеток (LSC). В то время как один децитабин демонстрировал минимальный эффект при уменьшении количества LSC, комбинация анти-CD70 и децитабина приводила к значительному усилению снижения LSC (фиг. 1).The combination therapy also reduced the number of CD34+ AML cells (a marker of progenitor cells) in the bone marrow better than decitabine or anti-CD70 alone (Figure 1). In addition, anti-CD70 treatment reduced both the number of CD34+CD38 - cells and CD34+CD45 - cells, both cell populations considered markers of leukemia stem cells (LSC). While decitabine alone showed minimal effect in reducing LSC numbers, the combination of anti-CD70 and decitabine resulted in a significant increase in LSC reduction (Fig. 1).
Пример 2. Гипометилирующие агенты (НМА) усиливают экспрессию CD70 на первичных стволовых клетках AML ex vivo и in vivo, коррелируя с усилением снижения образования колонии AML антителом против CD70 в комбинации с НМА.Example 2 Hypomethylating agents (HMAs) enhance CD70 expression on primary AML stem cells ex vivo and in vivo, correlating with increased reduction of AML colony formation by anti-CD70 antibody in combination with HMAs.
Обнаружение того факта, что лечение антителом против CD70 в комбинации с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI), например гипометилирующим агентом децитабином, приводит к усиленному уменьшению приживления бластных клеток AML у мышей, было дополнительно исследовано на первичных LSC AML человека.The finding that treatment with an anti-CD70 antibody in combination with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI), such as the hypomethylating agent decitabine, results in an enhanced reduction in AML blast cell engraftment in mice was further explored in primary human AML LSCs.
Было исследовано влияние обработки NMI (например, НМА, таких как азацитидин или децитабин) на экспрессию CD70 LSC AML. CD34+CD38- клетки выделяли у пациентов с AML и культивировали в присутствии 0,5 мМ децитабина или носителя.The effect of NMI treatment (eg, NMAs such as azacitidine or decitabine) on CD70 expression of AML LSCs was examined. CD34+CD38 − cells were isolated from patients with AML and cultured in the presence of 0.5 mM decitabine or vehicle.
Данные на фиг. 2А демонстрируют, что экспрессия CD70 клетками LSC AML увеличивается, когда клетки культивируют с децитабином. Это увеличение экспрессии CD70 в ответ на децитабин происходит в клетках, взятых у пациентов с AML по всем категориям риска заболевания (благоприятный, промежуData in Fig. 2A demonstrate that CD70 expression by LSC AML cells is increased when the cells are cultured with decitabine. This increase in CD70 expression in response to decitabine occurs in cells taken from patients with AML across all disease risk categories (favorable, intermediate)
- 19 044996 точный и неблагоприятный) и при измерении на уровне белка или транскрипции (фиг. 2С и 2D).- 19 044996 accurate and unfavorable) and when measured at the protein or transcription level (Fig. 2C and 2D).
Существенно, что увеличение экспрессии CD70 в ответ на гипометилирующие агенты (НМА) наблюдалось in vivo. LSC, взятые у пациентов, недавно диагностированных с AML и получавших децитабин или азацитидин, показано увеличение экспрессии CD70 в ответ на лечение НМА по сравнению с уровнем экспрессии при диагностике (фиг. 2Е и 2F).Significantly, an increase in CD70 expression in response to hypomethylating agents (HMAs) was observed in vivo. LSCs collected from patients newly diagnosed with AML and treated with decitabine or azacitidine showed increased CD70 expression in response to HMA treatment compared with expression levels at diagnosis (Figures 2E and 2F).
В свете повышенной экспрессии CD70 в ответ на НМА эффект комбинации антитело против CD70/децитабин на LSC AML был исследован ex vivo.In light of the increased expression of CD70 in response to HMA, the effect of the anti-CD70 antibody/decitabine combination on AML LSCs was examined ex vivo.
На фиг. 3А показано, что как монотерапия антителом против CD70, так и децитабином снижают количество колоний, образованных LSC AML, в анализе посева колоний. Примечательно, что комбинация антитела против CD70 и децитабина снижала образование колоний больше, чем любая монотерапия. Этот эффект наблюдался для всех категорий риска заболевания (благоприятный (Р6), промежуточный (Р8) и неблагоприятный (р11)). Способность к повторному посеву LSC AML также была снижена (фиг. 3С).In fig. 3A shows that both anti-CD70 monotherapy and decitabine reduce the number of colonies formed by AML LSCs in a colony culture assay. Notably, the combination of anti-CD70 antibody and decitabine reduced colony formation more than either monotherapy. This effect was observed for all disease risk categories (favorable (P6), intermediate (P8) and unfavorable (P11)). The reseeding ability of AML LSCs was also reduced (Figure 3C).
Важно отметить, что антитело против CD70 не оказывало неблагоприятного воздействия на здоровые стволовые клетки. На фиг. 3D-F показано, что антитело против CD70 в качестве монотерапии не оказывал влияния на здоровые клетки по сравнению с одним носителем, и при использовании в комбинации не оказывало влияния по сравнению с децитабином, используемым индивидуально.Importantly, the anti-CD70 antibody had no adverse effects on healthy stem cells. In fig. 3D-F shows that anti-CD70 monotherapy had no effect on healthy cells compared to vehicle alone, and when used in combination had no effect compared to decitabine used alone.
Эти данные подтверждают использование антитела против CD70 в качестве монотерапии для AML, а также в комбинации с нуклеозидным метаболическим ингибитором (NMI), например, НМА, таким как азацитидин или децитабин.These data support the use of anti-CD70 antibody as monotherapy for AML, as well as in combination with a nucleoside metabolic inhibitor (NMI), such as NMA, such as azacitidine or decitabine.
Пример 3. Фаза I/II испытания антитела против CD70 ARGX-110 в комбинации со стандартными дозами AZA у пациентов с ранее нелеченными AML и MDS высокого рискаExample 3: Phase I/II Trial of Anti-CD70 Antibody ARGX-110 in Combination with Standard-Dose AZA in Patients with Previously Untreated AML and High-Risk MDS
Фаза I/II клинических испытаний была начата для изучения эффективности/клинических преимуществ, безопасности и переносимости ARGX-110 в сочетании со стандартными дозами AZA у пациентов с ранее нелеченными AML и MDS высокого риска, которым подходит лечение AZA.A Phase I/II clinical trial was initiated to examine the efficacy/clinical benefits, safety and tolerability of ARGX-110 in combination with standard-dose AZA in patients with previously untreated AML and high-risk MDS eligible for AZA treatment.
Протокол режима испытаний и образцыTest report and samples
Исследование включало в себя этап скрининга (между днем - 35 и днем - 14), загрузочную дозу ARGX-110 (день - 14) и открытую фазу лечения, во время которой пациенты посещали центр исследования для введения исследуемого препарата (День - 14 до прогрессирования заболевания) и оценки завершения периода терапии (EOT), проведенные в течение 7 дней после последнего лечения ARGX-110. Дополнительные последующие оценки были запланированы через 30 и 60 дней (± 7 дней) после даты EOT. Последующее 60-дневное посещение было также посещением после завершения периода исследования (EOS).The study included a screening phase (between Day 35 and Day 14), a loading dose of ARGX-110 (Day 14), and an open-label treatment phase during which patients attended the study site for study drug administration (Day 14 until disease progression). ) and end-of-therapy (EOT) assessments performed within 7 days of the last ARGX-110 treatment. Additional follow-up assessments were scheduled 30 and 60 days (±7 days) after the EOT date. The 60-day follow-up visit was also the end-of-study (EOS) visit.
Пациенты мужского и женского пола, не моложе 18 лет, с недавно диагностированным гистологически подтвержденным (биопсия костного мозга) AML или миелодиспластическим синдромом высокого риска (MDS) с числом бластов >20%, которым не подходила стандартная интенсивная химиотерапия, были приемлемыми для включения в исследование. Пациенты должны были иметь ожидаемую продолжительность жизни 3 или более месяцев, а статус эффективности Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) 0-2 при скрининге. Пациенты получали нагрузочную дозу ARGX-110 в день-14 с последующим введением ARGX-110 в комбинации со стандартными дозами AZA. Дозы ARGX-110 вводили внутривенно каждые 2 недели (нагрузочная доза в день-14 и дополнительные дозы в дни 3 и 17) в комбинации со стандартными дозами AZA для определения токсичности, ограничивающей дозу (см. фиг. 4). Первый пациент каждой когорты находился под наблюдением до 7 дня, после чего привлекали второго пациента. Поскольку в течение этого периода не произошло значительных нежелательных явлений, в исследование были включены другие пациенты из каждой когорты. Уровень дозы ARGX-110 в первой группе в фазе I составлял 1 мг/кг массы тела.Male and female patients, at least 18 years of age, with newly diagnosed histologically confirmed (bone marrow biopsy) AML or high-risk myelodysplastic syndrome (MDS) with a blast count >20% and who were not eligible for standard intensive chemotherapy were eligible for inclusion in the study. . Patients were required to have a life expectancy of 3 months or more and an Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status of 0–2 at screening. Patients received a loading dose of ARGX-110 on day-14 followed by ARGX-110 in combination with standard doses of AZA. Doses of ARGX-110 were administered intravenously every 2 weeks (loading dose on day-14 and additional doses on days 3 and 17) in combination with standard doses of AZA to determine dose-limiting toxicity (see Fig. 4). The first patient in each cohort was followed until day 7, after which the second patient was recruited. Because no significant adverse events occurred during this period, additional patients from each cohort were included in the study. The dose level of ARGX-110 in the first group in phase I was 1 mg/kg body weight.
Все участники исследования получали однократную нагрузочную дозу ARGX-110 в день-14 при том же уровне дозы, что и двухнедельная доза. Пациенты на первой стадии исследования получили один из следующих методов лечения: когорта 1: 1 мг/кг массы тела IV в дни 3 и 17 28-дневного цикла; когорта 2: 3 мг/кг массы тела IV в дни 3 и 17 28-дневного цикла; когорта 3:10 мг/кг массы тела IV в дни 3 и 17 28дневного цикла; когорта 4: масса тела 20 мг/кг IV в дни 3 и 17 28-дневного циклаAll study participants received a single loading dose of ARGX-110 on day-14 at the same dose level as the biweekly dose. Patients in the first phase of the study received one of the following treatments: Cohort 1: 1 mg/kg body weight IV on days 3 and 17 of a 28-day cycle; Cohort 2: 3 mg/kg body weight IV on days 3 and 17 of a 28-day cycle; cohort 3: 10 mg/kg body weight IV on days 3 and 17 of a 28-day cycle; cohort 4: body weight 20 mg/kg IV on days 3 and 17 of a 28-day cycle
Инфузию начинали со скоростью 10 мл/ч. Затем скорость была увеличена в соответствии с переносимостью препарата пациентом.The infusion was started at a rate of 10 ml/h. The rate was then increased according to patient tolerance.
Клинический ответ на лечение был классифицирован в соответствии с табл. 3.Clinical response to treatment was classified according to Table. 3.
- 20 044996- 20 044996
* Все критерии должны быть выполнены; оценка костного мозга должна основываться на подсчете 200 ядросодержащих клеток в аспирате со спикулами; если неоднозначно, рассмотрите повторное исследование через 5-7 дней; оценка проточной цитометрии может помочь различить между персистирующим лейкозом и регенерирующимся нормальным костным мозгом; биопсия костного мозга должна выполняться в случаях сухой пункции или при отсутствии спикул; минимальная продолжительность ответа не требуется.* All criteria must be met; bone marrow assessment should be based on a count of 200 nucleated cells in a spicule aspirate; if equivocal, consider re-testing in 5-7 days; Flow cytometry assessment can help differentiate between persistent leukemia and regenerating normal bone marrow; Bone marrow biopsy should be performed in cases of dry puncture or in the absence of spicules; There is no minimum response duration required.
Концентрации ARGX-110 в сыворотке крови анализировали с использованием проверенного мето- 21 044996 да иммуноферментного анализа (ИФА). Оценивали следующие фармакокинетические параметры:Serum concentrations of ARGX-110 were analyzed using a validated enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. The following pharmacokinetic parameters were assessed:
Cmax: максимальная наблюдаемая концентрация; Сост: остаточная концентрации; Cmax : maximum observed concentration; Cres : residual concentration;
AUC^: площадь под кривой концентрация-время в сыворотке от нуля до бесконечности;AUC^: area under the serum concentration-time curve from zero to infinity;
AUCtau: площадь под кривой сывороточная концентрация-время в течение интервала дозирования;AUC tau : area under the serum concentration-time curve during the dosing interval;
Vd: кажущийся объем распределения;V d : apparent volume of distribution;
CL: общий системный клиренс препарата после внутривенного введения; t1/2: период полужизни.CL: total systemic clearance of the drug after intravenous administration; t1/2: half-life.
У всех пациентов исследования были взяты образцы венозной крови для оценки антител против лекарственных средств (ADA). Иммуногенность ARGX-110 оценивали в образцах сыворотки, используя метод ИФА, который может обнаружить любой класс ADA. Реактивные образцы были проанализированы в подтверждающем анализе для проверки специфичности.Venous blood samples were collected from all study patients for anti-drug antibody (ADA) assessment. The immunogenicity of ARGX-110 was assessed in serum samples using an ELISA method that can detect any class of ADA. Reactive samples were analyzed in a confirmatory assay to verify specificity.
Оценка биомаркеров может быть выполнена на аспиратах костного мозга и/или цельной крови, собранной в моменты времени, как указано на фиг. 5. Фармакодинамику исследовали путем измерения ряда биомаркеров, включая следующие:Biomarker assessment can be performed on bone marrow aspirates and/or whole blood collected at time points as indicated in FIG. 5. Pharmacodynamics were studied by measuring a number of biomarkers, including the following:
Молекулярная генетика: характеристика метилирования промоторов CD70 и CD11а, выявление повторяющихся геномных аберраций AML, а также анализ геномной ДНК воздействия лечения на заболевание и патологию-мишень.Molecular genetics: characterize CD70 and CD11a promoter methylation, identify recurrent genomic aberrations in AML, and genomic DNA analysis of treatment effects on disease and target pathology.
Экспрессия генов: характеристика уровней мРНК CD70, маркеры болезни и лекарственного эффекта.Gene expression: characterization of CD70 mRNA levels, markers of disease and drug effect.
Проточная цитометрия (FACS): дополнительная характеристика CD70 (например, лечение до ARGX-110, пострецидив) и экспрессии CD27, а также влияние лекарственного средства (например, бласты, NK и Т-клетки) и анализ минимального остаточного заболевания (MRD).Flow cytometry (FACS): additional characterization of CD70 (eg, pre-ARGX-110 treatment, post-relapse) and CD27 expression, as well as drug effects (eg, blasts, NK and T cells) and minimal residual disease (MRD) analysis.
Количественное определение сывороточного белка: дополнительная характеристика sCD27, маркеры болезни и лекарственного эффекта (например, IL-8). Если связанные с инфузией реакции являются более серьезными, чем в более ранних испытаниях ARGX-110, то может быть выполнен анализ воспалительных цитокинов.Serum protein quantification: additional characterization of sCD27, markers of disease and drug effect (eg IL-8). If infusion-related reactions are more severe than in earlier ARGX-110 trials, then inflammatory cytokine testing may be performed.
Определение стволовости проводили на мононуклеарных клетках, очищенных из крови или костного мозга. В зависимости от количества собранных клеток анализ данных включал окрашивание Numb (для определения соотношения асимметричного/симметричного деления), исследования на клетках и in vivo (оценка потенциала стволовых клеток, например, с помощью анализа CFU колонии с метилцеллюлозой или исследований выживания мышей NSG, которым инъецировали мононуклеарные клетки пациента) или анализ экспрессии генов.Stemness determination was carried out on mononuclear cells purified from blood or bone marrow. Depending on the number of cells collected, data analysis included Numb staining (to determine the ratio of asymmetric/symmetric division), in-cell and in vivo studies (assessing stem cell potential, e.g. using methylcellulose colony CFU assay or survival studies of NSG mice injected patient's mononuclear cells) or gene expression analysis.
Оценки минимального остаточного заболевания (MRD) были выполнены на аспиратах костного мозга и/или цельной крови, собранной в моменты времени, как указано на фиг. 5. Проточная цитометрия была использована в качестве основного метода анализа MRD. Подходящие маркеры проточной цитометрии для оценки MRD и определения подтипа AML включают CD16, CD13, CD34, CD117, CD11b, CD10, HLA-DR, CD45, CD35, CD64, IREM-2, CD36, CD105, CD14, CD33, CD71, CD36, CD105, CD33, CD71, cTdT, CD56, CD7, CD19, сМРО, сЛактоферрин, сЛизоцим. В качестве части исследования использовалась дополнительная панель, посвященная экспрессии CD70, CD27, а также маркерам, указывающим на потенциал стволовых клеток или миелоидную дифференцировку: CD27, CD70, CD34, CD117, CD11b, HLA-DR, CD45, CD38 и CD123. Когда это возможно, результаты проточной цитометрии сравнивали с другими молекулярными подходами, такими как тест полимеразной цепной реакции (ПЦР).Minimal residual disease (MRD) assessments were performed on bone marrow aspirates and/or whole blood collected at time points as indicated in FIG. 5. Flow cytometry was used as the primary method for MRD analysis. Suitable flow cytometry markers for assessing MRD and determining AML subtype include CD16, CD13, CD34, CD117, CD11b, CD10, HLA-DR, CD45, CD35, CD64, IREM-2, CD36, CD105, CD14, CD33, CD71, CD36, CD105, CD33, CD71, cTdT, CD56, CD7, CD19, cMPO, cLactoferrin, cLysozyme. As part of the study, an additional panel was used on the expression of CD70, CD27, as well as markers indicating stem cell potential or myeloid differentiation: CD27, CD70, CD34, CD117, CD11b, HLA-DR, CD45, CD38 and CD123. Whenever possible, flow cytometry results were compared with other molecular approaches such as polymerase chain reaction (PCR) testing.
Аспираты костного мозга или цельная кровь могут быть использованы для иммунофенотипирования (выполненного с помощью проточной цитометрии или массовой цитометрии), которое включает анализ NK-клеток и Т-клеток, а также других потенциальных субпопуляций иммунных клеток.Bone marrow aspirates or whole blood can be used for immunophenotyping (performed by flow cytometry or mass cytometry), which includes analysis of NK cells and T cells, as well as other potential immune cell subsets.
Результатыresults
Общие клинические результатыGeneral clinical results
Примечательно, что более 90% пациентов, привлеченных к участию в исследовании, ответили на терапию антителом против CD70 (10/11 пациентов, которых лечили в течение времени, достаточного для оценки ответа).Notably, more than 90% of patients enrolled in the study responded to anti-CD70 antibody therapy (10/11 patients treated long enough to assess response).
Табл. 4 показывает лучший ответ тех пациентов, у которых было достаточно времени, чтобы оценить ответ. В каждой из групп 1 мг/кг, 3 мг/кг и 10 мг/кг 2 из 3 пациентов в каждой когорте показали полную ремиссию. В когорте 1 третий пациент достиг полной ремиссии с неполным гематологическим выздоровлением.Table 4 shows the best response of those patients who had sufficient time to evaluate the response. In each of the 1 mg/kg, 3 mg/kg, and 10 mg/kg groups, 2 of 3 patients in each cohort showed complete remission. In cohort 1, the third patient achieved complete remission with incomplete hematological recovery.
Уровень ответа, превышающий 90%, резко контрастирует с показателем ответа приблизительно 25%, наблюдаемым для aza индивидуально (Dombret et al. Blood 2015 (Blood. 2015; 126 (3): 291-299, включено в настоящее описание в качестве ссылки).The response rate exceeding 90% is in sharp contrast to the approximately 25% response rate observed for aza individually (Dombret et al. Blood 2015 (Blood. 2015; 126 (3): 291-299, incorporated herein by reference).
- 22 044996- 22 044996
Таблица 4Table 4
Примечательно, что состояние без морфологического лейкоза (MLFS) было достигнуто после монотерапии одним ARGX-110. У 71-летнего пациента в когорте 2 с 20% бластов костного мозга при включении в исследование и у 74-летнего пациента в группе 3 с >50% бластов костного мозга при включении в исследование достигнут MLFS, характеризующийся отсутствием бластов к моменту времени C1D1 - т.е. после нагрузочной дозы с ARGX-110 и до первой дозы aza.Notably, a morphological leukemia free state (MLFS) was achieved after monotherapy with ARGX-110 alone. A 71-year-old patient in cohort 2 with 20% marrow blasts at study entry and a 74-year-old patient in cohort 3 with >50% marrow blasts at study entry achieved MLFS, characterized by the absence of blasts at time point C1D1 - t .e. after the loading dose with ARGX-110 and before the first dose of aza.
Это ясно демонстрирует, что терапия антителами против CD70 сама по себе может быть эффективным лечением AML.This clearly demonstrates that anti-CD70 antibody therapy alone can be an effective treatment for AML.
Кроме того, полная ремиссия также была вызвана комбинированной терапией ARGX-110/aza. Шесть пациентов в каждой из когорт 1-4 достигли полной ремиссии после комбинированной терапии, а еще два пациента достигли CRi после комбинированной терапии.In addition, complete remission was also induced by ARGX-110/aza combination therapy. Six patients in each of cohorts 1–4 achieved complete remission after combination therapy, and an additional two patients achieved CRi after combination therapy.
Еще более важным является тот факт, что комбинированное лечение позволило одному пациенту перейти к пересадке костного мозга. Это важно потому, что многие пациенты с AML, особенно пожилые пациенты, обычно не могут перенести трансплантацию из-за агрессивного характера традиционных методов лечения, необходимых для соответствия критериям трансплантации. Тот факт, что комбинированное лечение было достаточно эффективным, чтобы позволить 75-летнему пациенту с AML прогрессировать до трансплантации, показывает преимущества комбинированной терапии по сравнению с традиционным лечением.Even more important is the fact that the combination treatment allowed one patient to progress to a bone marrow transplant. This is important because many patients with AML, especially older patients, are typically unable to undergo transplantation due to the aggressive nature of traditional treatments required to meet transplant criteria. The fact that combination therapy was effective enough to allow a 75-year-old patient with AML to progress to transplantation shows the benefits of combination therapy over conventional treatment.
Моно- и комбинированная терапия уменьшают количество бластов в костном мозге и периферической крови.Mono- and combination therapy reduces the number of blasts in the bone marrow and peripheral blood.
Для каждого пациента количество бластов в костном мозге и периферической крови оценивалось в различные моменты времени, как показано на фиг. 5.For each patient, the number of blasts in the bone marrow and peripheral blood was assessed at various time points, as shown in Fig. 5.
Для оценки бластов костного мозга были проанализированы аспираты костного мозга, взятые в различные моменты времени. Метилцеллюлозные анализы колоний с использованием FACSотсортированных моноцитов (мононуклеарные клетки (CD45dim) были селективно отсортированы путем исключения дублетов, мертвых клеток и лимфоцитов с использованием аннексина V и антитела к CD 19 и CD4/CD8) использовались для оценки количества LSC в костном мозге. Кроме того, процентное содержание бластов в костном мозге также оценивалось с помощью морфологии клеток и анализа проточной цитометрией.To assess bone marrow blasts, bone marrow aspirates collected at various time points were analyzed. Methylcellulose colony assays using FACS-sorted monocytes (mononuclear cells (CD45 dim ) were selectively sorted by excluding doublets, dead cells and lymphocytes using Annexin V and anti-CD 19 and CD4/CD8 antibodies) were used to assess the number of LSCs in the bone marrow. In addition, the percentage of bone marrow blasts was also assessed using cell morphology and flow cytometry analysis.
Результаты бластов костного мозга для каждого пациента показаны в сопоставлении на фиг. 6. Эти данные показывают, что для большинства пациентов процент бластов в костном мозге был по меньшей мере частично или полностью снижен на C1D1, то есть после монотерапии ARGX-110.The bone marrow blast results for each patient are shown side-by-side in FIG. 6. These data show that for the majority of patients, the percentage of bone marrow blasts was at least partially or completely reduced on C1D1, that is, after ARGX-110 monotherapy.
Кроме того, после начала aza-терапии (с C1D1) процент бластов костного мозга еще более уменьшался и поддерживался на низком уровне в течение оставшейся части лечения. Это имеет место независимо от того, используются ли цитоморфологические или проточные анализы бластов.In addition, after initiation of aza therapy (with C1D1), the percentage of bone marrow blasts decreased further and was maintained at a low level for the remainder of treatment. This is the case regardless of whether cytomorphological or flow blast assays are used.
Особенно примечательно, что количество бластов костного мозга, измеренное в соответствии с критериями минимального остаточного заболевания (MRD), значительно снижается как при монотерапии ARGX-110, так и при комбинированной терапии ARGX-110 и aza, учитывая клиническую важность оценки MRD. Два пациента (один в когорте 1 и один в когорте 2) достигли статуса MRD.It is particularly noteworthy that the number of bone marrow blasts, measured according to minimal residual disease (MRD) criteria, was significantly reduced with both ARGX-110 monotherapy and combination therapy with ARGX-110 and aza, given the clinical importance of MRD assessment. Two patients (one in cohort 1 and one in cohort 2) achieved MRD status.
Аналогичные результаты также наблюдаются при оценке процента бластов периферической крови (фиг. 7). Изменения в данных периферической крови пациента более восприимчивы к внешним факторам, что приводит к большему разбросу данных. Тем не менее, результаты периферической крови (РВ)Similar results are also observed when assessing the percentage of peripheral blood blasts (Fig. 7). Changes in a patient's peripheral blood data are more susceptible to external factors, resulting in greater data variability. However, peripheral blood (PB) results
-23044996 соответствуют изменениям, наблюдаемым в костном мозге после моно- и комбинированной терапии (фиг. 7).-23044996 correspond to the changes observed in the bone marrow after mono- and combination therapy (Fig. 7).
На фиг. 7 показано, что подобно данным для костного мозга процентная доля бластных клеток в целом снижается после монотерапии ARGX-110 (то есть при уровне C1D1 по сравнению с более ранними точками данных), а затем дополнительно снижается при комбинированной терапии (начиная с уровня C1D1 и далее). Опять же, этот эффект наблюдается независимо от того, используются ли цитоморфологические анализы бластов или на основе проточной цитометрии, и это очевидно при использовании критериев оценки MRD.In fig. Figure 7 shows that, similar to the bone marrow data, the percentage of blast cells overall decreases after ARGX-110 monotherapy (i.e., at C1D1 compared to earlier data points) and then decreases further with combination therapy (from C1D1 onwards). ). Again, this effect is observed regardless of whether blast cytomorphology or flow cytometry-based assays are used, and is evident when using MRD scoring criteria.
Таким образом, монотерапия антителами против CD70 и комбинация анти-CD70 плюс НМА, такие как aza, способны снизить процент бластов в костном мозге и периферической крови и, в случае комбинированной терапии, поддерживать этот сниженный процент в течение ряда временных точек.Thus, anti-CD70 monotherapy and a combination of anti-CD70 plus HMAs such as aza are able to reduce the percentage of blasts in the bone marrow and peripheral blood and, in the case of combination therapy, maintain this reduced percentage over a range of time points.
Моно- и комбинированная терапия усиливают миелоидную дифференцировку LSCMono- and combination therapy enhances myeloid differentiation of LSCs
Постоянство лейкозных стволовых клеток (LSC) при AML представляет собой значительное препятствие для успешного лечения пациентов с AML. LSC ответственны за рецидив заболевания при AML, и их количество поддерживается посредством процесса симметричного деления клеток, то есть каждая LSC делится симметрично с образованием двух дочерних LSC. Такое симметричное разделение является движущим фактором агрессивности AML и рецидивов у пациентов.Leukemia stem cell (LSC) persistence in AML poses a significant barrier to successful treatment of patients with AML. LSCs are responsible for disease relapse in AML and their numbers are maintained through a process of symmetrical cell division, that is, each LSC divides symmetrically to form two daughter LSCs. This symmetrical separation is a driving factor in the aggressiveness of AML and patient relapse.
При альтернативном предопределении клеточной судьбы LSC должна подвергнуться миелоидной дифференцировке. В этом процессе LSC подвергается асимметричному делению, генерируя миелоиднодифференцированную дочернюю клетку вместе с дочерней стволовой клеткой.Under alternative cell fate determination, LSCs would undergo myeloid differentiation. In this process, the LSC undergoes asymmetric division, generating a myeloid-differentiated daughter cell along with a daughter stem cell.
Такое асимметричное деление значительно уменьшает пул LSC у пациента, и увеличенное асимметричное деление указывает на улучшение реакции пациента.This asymmetric division significantly reduces the patient's LSC pool, and increased asymmetric division indicates improved patient response.
Уровень асимметричного деления в популяции LSC можно определить путем измерения уровня детерминанты клеточной судьбы, такой как белок Numb (Riether et al. J Exp Med. 2017 Feb; 214(2): 359-380, включено в настоящее описание в качестве ссылки). Повышенная экспрессия Numb указывает на увеличение асимметричного деления и, следовательно, увеличение миелоидной дифференцировки и уменьшение популяций LSC.The level of asymmetric division in a population of LSCs can be determined by measuring the level of a cell fate determinant such as Numb protein (Riether et al. J Exp Med. 2017 Feb; 214(2): 359-380, incorporated herein by reference). Increased expression of Numb indicates increased asymmetric division and hence increased myeloid differentiation and decreased LSC populations.
На фиг. 8 показано, что экспрессия Numb увеличивается после монотерапии ARGX-110 (C1D1), а затем дополнительно увеличивается при комбинированной терапии ARGX-110/aza, что указывает на то, что обе терапии увеличивают асимметричное деление и, таким образом, миелоидную дифференцировку LSC.In fig. Figure 8 shows that Numb expression is increased following ARGX-110 (C1D1) monotherapy and then further increased by ARGX-110/aza combination therapy, indicating that both therapies increase asymmetric division and thus myeloid differentiation of LSCs.
Эти данные указывают на то, что не только монотерапия антителом против CD70 и комбинированная aza-терапия снижает количество бластов у пациентов путем модуляции пути CD70-CD27 (тем самым способствуя Т-клеточной чувствительности), но и то, что антитело против CD70 также способствует дифференцировке LSC. Эта дифференцировка уменьшает популяцию стволовых клеток и, таким образом, способствует снижению количества бластов, наблюдаемых у пациентов, участвовавших в исследовании.These data indicate that not only does anti-CD70 monotherapy and aza combination therapy reduce blast counts in patients by modulating the CD70-CD27 pathway (thereby promoting T cell sensitivity), but that anti-CD70 also promotes differentiation L.S.C. This differentiation reduces the stem cell population and thus contributes to the reduced number of blasts observed in the patients in the study.
Монотерапия и комбинированная терапия уменьшают образование колоний ех vivoMonotherapy and combination therapy reduce colony formation ex vivo
Для дальнейшего изучения влияния моно- и комбинированной терапии на популяции LSC у пациентов были проведены анализы колоний на метилцеллюлозе с использованием FACS-отсортированных моноцитов ex vivo. Мононуклеарные клетки (CD45dim) были выборочно отсортированы путем исключения дублетов, мертвых клеток и лимфоцитов с использованием аннексина V и антитела к CD19 и CD4/CD8 и последовательного высевания на метилцеллюлозу в течение 14 дней.To further examine the effects of mono- and combination therapy on LSC populations in patients, methylcellulose colony assays were performed using FACS-sorted ex vivo monocytes. Mononuclear cells (CD45 dim ) were selectively sorted by excluding doublets, dead cells and lymphocytes using Annexin V and anti-CD19 and CD4/CD8 antibodies and serially plated on methylcellulose for 14 days.
На фиг. 9А-Е представлены репрезентативные данные для формирования колонии на лунку (и, следовательно, количество LSC) до лечения (SCR) и после монотерапии ARGX-110 (момент времени 0, соответствующий C1D1)In fig. 9A-E show representative data for colony formation per well (and therefore LSC count) before treatment (SCR) and after ARGX-110 monotherapy (time point 0, corresponding to C1D1)
На фиг. 9F представлены репрезентативные данные для формирования колонии на лунку (и, следовательно, количество LSC) до лечения, после монотерапии ARGX-110 (то есть при C1D1) и после комбинированной терапии (C4D1). Эти данные соответствуют примерно 24-кратному снижению частоты встречаемости LSC по сравнению с базовыми уровнями.In fig. 9F shows representative data for colony formation per well (and therefore LSC count) before treatment, after ARGX-110 monotherapy (ie, C1D1), and after combination therapy (C4D1). These data correspond to an approximately 24-fold reduction in the incidence of LSC compared with baseline levels.
Кроме того, терапия не только уменьшает количество LSC, но также уменьшается количество клеток в колонии, что указывает на то, что пролиферативный потенциал LSC также уменьшается после терапии (данные не показаны).In addition, therapy not only decreases the number of LSCs, but also the number of cells per colony decreases, indicating that the proliferative potential of LSCs also decreases after therapy (data not shown).
Опять же, эти данные демонстрируют, что уровень циркулирующих LSC снижаются после монотерапии ARGX-110, а затем снижается еще больше после комбинации ARGX-110 и aza. Кроме того, пролиферативный потенциал этих LSC также снижается при терапии.Again, these data demonstrate that circulating LSC levels are reduced following ARGX-110 monotherapy and then further reduced following the combination of ARGX-110 and aza. In addition, the proliferative potential of these LSCs is also reduced by therapy.
Монотерапия и комбинированная терапия снижают уровень растворимого CD27Monotherapy and combination therapy reduce soluble CD27 levels
Растворимый CD27 (sCD27) может служить биомаркером для степени взаимодействия CD70/CD27. Считается, что опосредованная CD70/CD27 передача сигналов способствует аберрантному делению клеток, а высокий уровень sCD27 в сыворотке коррелирует с плохим прогнозом у пациентов с AML. Кроме того, sCD27, как полагают, коррелирует с процентом бластных клеток в костном мозге, а также служит маркером стволовости бластов пациента, с повышенным уровнем sCD27, указывающим на повышенныйSoluble CD27 (sCD27) may serve as a biomarker for the extent of CD70/CD27 interaction. CD70/CD27-mediated signaling is thought to promote aberrant cell division, and high serum levels of sCD27 correlate with poor prognosis in AML patients. In addition, sCD27 is believed to correlate with the percentage of blast cells in the bone marrow and also serves as a marker of the stemness of a patient's blasts, with increased levels of sCD27 indicating increased
- 24 044996 уровень стволовости (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380).- 24 044996 stemness level (Riether et al. J. Exp. Med. 2017 Feb;214(2):359-380).
Для оценки влияния монотерапии антителом против CD70 и комбинированной терапии на взаимодействие CD27/CD70, а также для дальнейшего изучения влияния на процент бластов и стволовость был также измерен уровень растворимого CD27 у пациентов.To evaluate the effect of anti-CD70 monotherapy and combination therapy on CD27/CD70 interaction, and to further examine the effect on blast percentage and stemness, soluble CD27 levels in patients were also measured.
На фиг. 10 показаны типичные уровни sCD27 для пациента во время цикла лечения. Монотерапия ARGX-110 (C1D1) снижает уровни sCD27 по сравнению с уровнем до лечения (Загрузка), и это снижение продолжает усиливаться во время комбинированной терапии, так что оно достигает уровней, характерных для здорового пациента.In fig. 10 shows typical sCD27 levels for a patient during a treatment cycle. ARGX-110 (C1D1) monotherapy reduces sCD27 levels compared to pre-treatment levels (Load), and this reduction continues to increase during combination therapy so that it reaches healthy patient levels.
Эти данные демонстрируют, что как моно-, так и комбинированная терапия ингибируют взаимодействие CD27/CD70 и снижают процент бластов и стволовость в соответствии с результатами других анализов.These data demonstrate that both mono- and combination therapies inhibit the CD27/CD70 interaction and reduce blast percentage and stemness, consistent with the results of other assays.
Кроме того, на фиг. 10 показано, что уровни sCD27 повышаются после завершения терапии (EOT). Это, вероятно, обусловлено увеличением взаимодействия CD27/CD70 после удаления антитела против CD70 и указывает на то, что sCD27 можно использовать в качестве эффективного маркера рекрутирования лекарственного средства против CD70 у пациента.In addition, in FIG. 10 shows that sCD27 levels increase after end of therapy (EOT). This is likely due to an increase in CD27/CD70 interaction after removal of anti-CD70 antibody and indicates that sCD27 can be used as an effective marker of anti-CD70 drug recruitment to the patient.
ARGX-110 терапия не повышает токсичностьARGX-110 therapy does not increase toxicity
Существенным фактором в пригодности терапевтического режима является связанная с ним токсичность для пациента. Преимущественно антитело против CD70, ARGX-110, не приводило к какомулибо наблюдаемому увеличению токсичности ни в качестве монотерапии, ни при использовании в комбинации с aza.A significant factor in the suitability of a therapeutic regimen is the associated toxicity to the patient. The predominant anti-CD70 antibody, ARGX-110, did not result in any observed increase in toxicity either as monotherapy or when used in combination with aza.
Для каждой из когорт 1 мг/кг, 3 мг/кг и 10 мг/кг неблагоприятные события и гематологическая токсичность не отличались от таковых, отражающих обычный профиль безопасности азацитидина. Это особенно удивительно и выгодно, поскольку добавление комбинированного терапевтического агента часто приводит к увеличению токсичности. Однако с комбинацией ARGX-110/aza не наблюдалось увеличения токсичности и вызывалось значительное увеличение эффективности.For each of the 1 mg/kg, 3 mg/kg, and 10 mg/kg cohorts, adverse events and hematologic toxicities were not different from those reflecting the usual safety profile of azacitidine. This is especially surprising and beneficial since the addition of a combination therapeutic agent often results in increased toxicity. However, with the ARGX-110/aza combination, no increase in toxicity was observed and a significant increase in efficacy was caused.
Таблица 5Table 5
Фармакокинетические (PK) данныеPharmacokinetic (PK) data
Концентрацию ARGX-110 в сыворотке анализировали с использованием утвержденного метода иммуноферментного анализа (ИФА). На фиг. 11 представлены индивидуальные графики PK пациента для когорты 10 мг/кг. График PK представляет данные для цикла 1 ARGX-110 (предварительная доза D14 до предварительной дозы 1 цикла D1).Serum concentrations of ARGX-110 were analyzed using a validated enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. In fig. Figure 11 shows individual patient PK graphs for the 10 mg/kg cohort. The PK plot represents data for cycle 1 of ARGX-110 (D14 predose to cycle 1 predose D1).
В целом, фармакокинетика ARGX-110 показала пропорциональность дозы Cmax и AUC в исследованном диапазоне доз и период полужизни приблизительно 9,2 дня при 10 мг/кг.Overall, the pharmacokinetics of ARGX-110 showed dose proportional Cmax and AUC over the dose range studied and a half-life of approximately 9.2 days at 10 mg/kg.
Концентрацию ARGX-110 в аспиратах костного мозга измеряли в ограниченных образцах и сравнивали с соответствующими образцами плазмы. Концентрация ARGX-110 в аспиратах костного мозга была сопоставима с уровнями в плазме для пациентов 1001005 и 1001007 в дозовой когорте 3 мг/кг и 10 мг/кг, соответственно.ARGX-110 concentrations in bone marrow aspirates were measured in limited samples and compared with matched plasma samples. ARGX-110 concentrations in bone marrow aspirates were comparable to plasma levels for patients 1001005 and 1001007 in the 3 mg/kg and 10 mg/kg dose cohorts, respectively.
- 25 044996- 25 044996
Таблица 6Table 6
Характеристики пациентов и исследование частных случаевPatient characteristics and case studies
В табл. 7 представлены сводные данные о вновь диагностированных пациентах с AML, набранных в каждую когорту.In table Figure 7 presents summary data on newly diagnosed AML patients recruited into each cohort.
Таблица 7Table 7
Ниже приведены примеры отдельных пациентов, привлеченных к участию в испытании.Below are examples of individual patients recruited to participate in the trial.
Пациент 1001001 - 80-летняя женщина с AML, связанным с терапией, через 5 лет после адъювантной химиотерапии при раке молочной железы с бластными показателями 90% в костном мозге (ВМ) и 80% в периферической крови (РВ) (39,5 г/л), FAB подтип: миеломоноцитарный М4 и классификация ВОЗ 2016 года: временная подгруппа: AML с мутированным RUNX1. Пациент лечился в соответствии с протоколом в группе терапии 1 мг/кг.Patient 1001001 is an 80-year-old woman with treatment-related AML 5 years after adjuvant chemotherapy for breast cancer with blast counts of 90% in the bone marrow (BM) and 80% in the peripheral blood (PB) (39.5 g/ l), FAB subtype: myelomonocytic M4 and WHO classification 2016: temporary subgroup: AML with mutated RUNX1. The patient was treated according to protocol in the 1 mg/kg therapy group.
Аспират костного мозга, взятый в 1-й день, сравнивали с аспиратом костного мозга, взятым до введения нагрузки ARGX-110. Метилцеллюлозные анализы колоний с использованием FACSотсортированных моноцитов (мононуклеарные клетки (CD45dim) были выборочно отсортированы путем исключения дублетов, мертвых клеток и лимфоцитов с использованием аннексина V и антитела к CD19 и CD4/CD8) использовались для оценки количества LSC в костном мозге.Bone marrow aspirate collected on day 1 was compared with bone marrow aspirate taken before ARGX-110 loading. Methylcellulose colony assays using FACS-sorted monocytes (mononuclear cells (CD45 dim ) were selectively sorted by excluding doublets, dead cells and lymphocytes using Annexin V and antibodies to CD19 and CD4/CD8) were used to assess the number of LSCs in the bone marrow.
Результаты показали, что однократная доза ARGX-110 снижала количество LSC в костном мозге в 140000 раз (расчет частоты стволовых клеток с помощью ELDA: анализ предельного разведения (http://bioinf.wehi.edu.au; Ни & Smyth (2009) ELDA: Journal of Immunological Methods 347, 70-78.).Results showed that a single dose of ARGX-110 reduced the number of LSCs in the bone marrow by 140,000-fold (calculation of stem cell frequency using ELDA: limiting dilution analysis (http://bioinf.wehi.edu.au; Ni & Smyth (2009) ELDA : Journal of Immunological Methods 347, 70-78.).
Кроме того, клеточный морфологический и проточный цитометрический анализ популяций бластных клеток продемонстрировал снижение количества бластов костного мозга и периферической крови после однократного введения (нагрузочная доза) ARGX-110. После продолжения лечения в комбинации с AZA в соответствии с графиком на фиг. 5, бласты ВМ снизились до 2,8% (согласно проточной цитометрии) к C3D1 (то есть после 2 циклов лечения). Таким образом, оценка клинического ответа пациента в этот момент времени соответствовала полной ремиссии с неполным выздоровлением (CRi). Минимальное остаточное заболевание (MRD) было определено как 0,2%. Статус CRi по аспирату костного мозга и по оценке MRD поддерживался, по крайней мере, до C5D1. В периферической крови бласты выводились после первого полного цикла лечения (C2D1). К C3D1 MRD для периферической крови составлял 0,3%, а к C4D1 процент бластов периферической крови составлял 0,8% бластов по проточной цитометрии и 0% по морфологии клеток. К C4D17 количество бластных клеток в периферической крови было достаточно низким, чтобы классифицировать его как MRD-отрицательное.In addition, cellular morphological and flow cytometric analysis of blast cell populations demonstrated a decrease in the number of bone marrow and peripheral blood blasts after a single administration (loading dose) of ARGX-110. After continuing treatment in combination with AZA according to the schedule in FIG. 5, VM blasts decreased to 2.8% (by flow cytometry) to C3D1 (ie, after 2 cycles of treatment). Thus, the assessment of the patient's clinical response at this time point was consistent with complete remission with incomplete recovery (CRi). Minimal residual disease (MRD) was determined to be 0.2%. CRi status by bone marrow aspirate and MRD assessment was maintained at least until C5D1. In peripheral blood, blasts were cleared after the first full cycle of treatment (C2D1). By C3D1, the peripheral blood MRD was 0.3%, and by C4D1, the percentage of peripheral blood blasts was 0.8% blasts by flow cytometry and 0% by cell morphology. By C4D17, the blast cell count in the peripheral blood was low enough to classify him as MRD negative.
Пациент 1001002 - это 75-летний мужчина с AML с изменениями, связанными с миелодисплазией (классификация ВОЗ; М1/М2 AML в соответствии с классификацией FAB). Пациент продемонстрировал 40% бластов костного мозга до лечения. Пациент лечился в соответствии с протоколом в группе терапииPatient 1001002 is a 75-year-old man with AML with changes associated with myelodysplasia (WHO classification; M1/M2 AML according to FAB classification). The patient demonstrated 40% bone marrow blasts before treatment. The patient was treated according to the protocol in the therapy group
--
Claims (36)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB1709677.7 | 2017-06-16 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044996B1 true EA044996B1 (en) | 2023-10-23 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018285731B2 (en) | Use of anti CD70 antibody ARGX-110 to treat acute myeloid leukaemia | |
| CN109153724B (en) | Method of treating skin cancer by administering PD-1 inhibitor | |
| US11712468B2 (en) | CD70 combination therapy | |
| WO2021053667A2 (en) | Combination cancer therapy and cytokine control therapy for cancer treatment | |
| WO2019189780A1 (en) | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of cancer | |
| CA3013333A1 (en) | Antibodies having specificity for btla and uses thereof | |
| JP2022535062A (en) | Cancer treatment with GM-CSF antagonists | |
| AU2020350221A1 (en) | Combination cancer therapy and cytokine control therapy for cancer treatment | |
| US20210292408A1 (en) | Antibodies targeting tumor associated macrophages and uses thereof | |
| EA044996B1 (en) | USE OF ANTI-CD70 ANTIBODY, ARGX-110 FOR THE TREATMENT OF ACUTE MYELOID LEUKEMIA | |
| WO2018005775A1 (en) | Cd47 blockade enhances therapeutic activity of antibodies to low density cancer epitopes | |
| US20220119523A1 (en) | Treatment of cutaneous t cell lymphoma with targeting of cd47 pathway | |
| US20220049015A1 (en) | Compositions and methods for the treatment and/or prevention of her2+ cancers | |
| WO2022007947A1 (en) | Combination of anti-cd47 antibody or antigen binding fragment thereof and dna methyltransferase inhibitor and use thereof | |
| WO2023051674A1 (en) | Anti-cd47 antibody for combined treatment of blood tumor | |
| US20240182590A1 (en) | Method of treatment of patients having reduced sensitivity to a bcl-2 inhibitor | |
| JP2023539493A (en) | Methods of treating patients with decreased sensitivity to BCL-2 inhibitors | |
| EP4320153A1 (en) | Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma | |
| TW202345900A (en) | Pharmaceutical composition of anti-tim-3 antibody and hypomethylating agent | |
| CN115956088A (en) | Anti-tumor combination therapy comprising an anti-CD 19 antibody and a polypeptide that blocks a SIRPa-CD 47 innate immune checkpoint | |
| JP2023501211A (en) | Sequential anti-CD19 treatment | |
| EP1645284A1 (en) | Use of ligands of the antigen CDw52 for the treatment of diseases that are related to degenerated macrophages | |
| TW201713346A (en) | Methods and antibodies for modulation of immunoresponse |