EA044759B1 - Лечение и профилактика амилоидоза - Google Patents
Лечение и профилактика амилоидоза Download PDFInfo
- Publication number
- EA044759B1 EA044759B1 EA202092264 EA044759B1 EA 044759 B1 EA044759 B1 EA 044759B1 EA 202092264 EA202092264 EA 202092264 EA 044759 B1 EA044759 B1 EA 044759B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- amino acid
- acid sequence
- approximately
- Prior art date
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 47
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 title description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 38
- 208000005531 Immunoglobulin Light-chain Amyloidosis Diseases 0.000 claims description 25
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 24
- 208000023761 AL amyloidosis Diseases 0.000 claims description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 16
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 15
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 15
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 15
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims description 15
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 claims description 13
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 claims description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 13
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 7
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims description 6
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 6
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- FOWNDZJYGGTHRO-DKWTVANSSA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2-aminobutanedioic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O FOWNDZJYGGTHRO-DKWTVANSSA-N 0.000 claims 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 claims 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 claims 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 34
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 26
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 19
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 14
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 13
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 12
- 102400000269 Amyloid protein A Human genes 0.000 description 11
- 101710144835 Amyloid protein A Proteins 0.000 description 11
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- 102000001049 Amyloid Human genes 0.000 description 9
- 108010094108 Amyloid Proteins 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 4
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102400001263 NT-proBNP Human genes 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 3
- 238000000370 laser capture micro-dissection Methods 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 108010008064 pro-brain natriuretic peptide (1-76) Proteins 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 3
- HNYSIKXAASZNEM-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 HNYSIKXAASZNEM-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 2
- 206010061666 Autonomic neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 2
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 2
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 2
- 206010025391 Macroglossia Diseases 0.000 description 2
- 206010038748 Restrictive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000007622 bioinformatic analysis Methods 0.000 description 2
- 208000003295 carpal tunnel syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000012829 chemotherapy agent Substances 0.000 description 2
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 2
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 2
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 231100000226 haematotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 2
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Chemical group 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002023 Amyloidoses Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010004146 Basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005024 Castleman disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 208000020406 Creutzfeldt Jacob disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003407 Creutzfeldt-Jakob Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000010859 Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010016207 Familial Mediterranean fever Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 208000030289 Lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000010190 Monoclonal Gammopathy of Undetermined Significance Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010031256 Osteomyelitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000014675 Prion-associated disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 1
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 208000027207 Whipple disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N amlintide Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)CSSC1)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N 0.000 description 1
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 description 1
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 201000009267 bronchiectasis Diseases 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- -1 for example Substances 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000000322 laser mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000009512 pharmaceutical packaging Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000007371 visceral function Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к техническим областям иммунологии и медицины.
Предшествующий уровень техники
Амилоидоз - это общий термин, который описывает ряд заболеваний, характеризующихся наличием патологических форм амилоидных белков, часто содержащих внеклеточное отложение белковых фибрилл, которые образуют многочисленные амилоидные отложения или амилоидные бляшки, которые могут возникать на локальных участках или систематически. Эти отложения или бляшки состоят в основном из природных растворимых белков или пептидов, собранных в обширные нерастворимые отложения диаметром 10-100 мкм в различных участках тканей. Отложения обычно состоят из латеральных агрегатов фибрилл приблизительно 10-15 нм в диаметре. Амилоидные фибриллы при окрашивании красителем Конго Красный дают характерное двойное лучепреломление яблочно-зеленого цвета в поляризованном свете. Обычно фибриллярный состав этих отложений является отличительной характеристикой различных форм амилоидного заболевания.
Пептиды или белки, образующие отложения бляшек, часто происходят из более крупного белкапредшественника. Более конкретно, патогенез амилоидных агрегатов, таких как отложения фибрилл, обычно включает протеолитическое расщепление аномального белка-предшественника на фрагменты, которые объединяются в антипараллельные β-складчатые листы. Фибриллярный состав этих отложений является отличительной характеристикой различных форм амилоидного заболевания. Например, внутримозговые и цереброваскулярные отложения, состоящие в основном из фибрилл бета-амилоидного пептида (β-AP), характерны для болезни Альцгеймера (как семейных, так и спорадических форм), островковый амилоидный протеиновый пептид (IAPP; амилин) является отличительной характеристикой фибрилл в амилоидных отложениях островковых клеток поджелудочной железы, вызванных диабетом типа II, а в2-микроглобулин является основным компонентом амилоидных отложений, которые образуются вследствие длительного лечения гемодиализом. Прион-ассоциированные заболевания, такие как болезнь Крейтцфельда-Якоба, также были признаны амилоидными заболеваниями.
В общем первичные амилоидозы отличаются наличием белковых фибрилл амилоидного типа легкой цепи (AL-типа), названных так из-за гомологии N-терминальной области AL фибрилл с вариабельным фрагментом легкой цепи иммуноглобулина (каппа или лямбда). Различные формы заболевания были разделены на классы в основном на основании того, связан ли амилоидоз с основным систематическим заболеванием. Таким образом, некоторые расстройства считают первичными амилоидозами, при которых нет доказательств наличия ранее существовавшего или сопутствующего заболевания. Отложение амилоида AL обычно связано с практически любой дискразией линии B-лимфоцитов от злокачественного образования плазматических клеток (множественная миелома) до доброкачественной моноклональной гаммапатии. Иногда наличие амилоидных отложений может являться первичным показателем основного заболевания.
Фибриллы амилоидных отложений AL состоят из легких цепей моноклонального иммуноглобулина или их фрагментов. Более конкретно, фрагменты происходят из N-терминальной области легкой цепи (каппа или лямбда) и содержат весь или часть ее вариабельного (VL) домена. Отложения обычно возникают в мезенхимальных тканях, вызывая периферическую и автономную нейропатию, туннельный запястный синдром, макроглоссию, рестриктивную кардиомиопатию, артропатию крупных суставов, иммунные дискразии, миеломы, а также скрытые дискразии. Однако следует отметить, что может быть поражена практически любая ткань, особенно внутренние органы, такие как сердце.
При вторичном или реактивном (тип AA) амилоидозе, отличающемся наличием отложений фибрилл амилоидного протеина A (AA), существует основное или связанное с ним состояние хронического воспалительного или инфекционного заболевания. К таким заболеваниям относятся, но без ограничения, воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, анкилозирующий спондилит, псориаз, псориатическая артропатия, синдром Рейтера, болезнь Стилла у взрослых, синдром Бехчета и болезнь Крона. Отложения AA также образуются в результате хронических микробных инфекций, таких как проказа, туберкулез, бронхоэктаз, пролежни, хронический пиелонефрит, остеомиелит и болезнь Уиппла. Некоторые злокачественные новообразования также могут приводить к отложению амилоидных фибрилл AA. К ним относятся такие состояния, как лимфома Ходжкина, карцинома почек, карцинома кишечника, легких и мочеполовых путей, базальноклеточная карцинома и волосатоклеточный лейкоз. Амилоидная болезнь AA также может быть результатом наследственных воспалительных заболеваний, таких как семейная средиземноморская лихорадка. Кроме того, амилоидная болезнь AA может быть результатом лимфопролиферативных нарушений, таких как болезнь Кастлемана.
Фибриллы AA состоят из пептидных фрагментов, которые различаются по размеру, но обычно составляют приблизительно 8000 дальтон (пептид AA или белок), образованных за счет протеолитического расщепления сывороточного амилоидного белка A (SSA), циркулирующего аполипопротеина, который присутствует в частицах HDL и который синтезируется в гепатоциты в ответ на такие цитокины, как интерлейкин (IL)-1 и IL-6, а также фактор некроза опухолей α. Протеолитическое расщепление приводит к патологическому отложению N-терминальных двух третей белка SAA из ~76 остатков. У людей концен- 1 044759 трация SAA в плазме обычно составляет ~0,1 мг/мл, но может увеличиваться более чем в 1000 раз в ответ на воспалительный стимул. В рамках этого процесса молекула SAA подвергается протеолизу, а продукт N-терминального расщепления системно откладывается в виде фибрилл AA в жизненно важных органах, таких как печень, селезенка, почки и надпочечники. Отложения также распространены в сердце и желудочно-кишечном тракте.
Амилоидозы как AL, так и AA являются серьезными системными заболеваниями со значительным процентом смертности. Хотя ожидаемая продолжительность жизни пациентов с диагнозом амилоидоз увеличилась за последние два года, текущие методы лечения сосредоточены на сокращении наличия белков, которые образуют амилоидные фибриллы. Соответственно существует большая неудовлетворенная потребность в видах терапии, которые воздействуют исключительно на растворимые токсичные агрегаты и отложенные амилоидные фибриллы, тем самым сохраняя и улучшая функцию жизненно важных органов.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к лечению амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). В некоторых аспектах настоящего изобретения лечение амилоидоза AL предусматривает назначение пациенту эффективной дозы антитела. В некоторых аспектах настоящего изобретения антитело представляет собой химерное антитело. В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой гуманизированное антитело. В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, такой как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.
В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой химерный или гуманизированный вариант антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), например NEOD001. Некоторые формы антитела 2A4 содержат вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Например, антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Некоторые формы антитела 2A4 содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых аспектах легкая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или SEQ ID NO: 16. В некоторых аспектах тяжелая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18.
Настоящее раскрытие также относится к применению антитела, такого как антитела, описанные выше, для лечения пациента, страдающего амилоидозом AL. Настоящее раскрытие также относится к применению антитела, такого как антитела, описанные выше, при производстве лекарственного средства для лечения пациента, страдающего амилоидозом AL. Настоящее раскрытие также относится к антителу, такому как антитела, описанные выше, для применения при лечении пациента, страдающего амилоидозом AL.
В некоторых аспектах изобретения антитело составляют в виде и/или вводят/подлежит введению в виде фармацевтического состава, который не только содержит антитело, но также содержит гистидиновый буфер, трегалозу, полисорбат 20 и может быть составлен в определенном диапазоне pH. В некоторых аспектах изобретения фармацевтический состав вводят/подлежит введению пациенту внутривенно или подкожно через определенные интервалы времени и в определенных дозах. Такие временные интервалы и дозы могут быть заранее определены и/или могут быть скорректированы на основании измеримых улучшений почечной функции. В качестве примера антитело можно внутривенно или подкожно вводить/подлежит введению пациенту в количестве от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца. В качестве дополнительного примера, антитело можно внутривенно вводить/подлежит введению пациенту в количестве приблизительно 24 мг/кг каждые 28 дней.
В некоторых аспектах изобретения одно или несколько средств можно вводить, одновременно вводят/подлежат введению или будут позже введены/можно вводить позже пациенту. Иллюстративные средства также можно вводить/подлежат введению как часть схемы лечения.
Способы лечения и соответствующие способы применения в соответствии с изложенными здесь принципами могут замедлять, останавливать или способствовать положительной динамике хронических заболеваний одной или нескольких функций внутренних органов, связанных с амилоидозом AL, и тем самым улучшать качество жизни пациента и/или увеличивать продолжительность жизни пациента.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показана способность NEOD001 и 2A4 связываться с пептидами X1EDX2 и X1GDX2. Планшеты для ELISA покрывали указанными пептидами, блокировали и анализировали с помощью NEOD001 или 2A4, как указано. После промывания применяли соответствующие вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена. Затем планшет промывали, обрабатывали о-фенилендиаменом и
- 2 044759 считывали оптическую плотность при 490 нм.
На фиг. 2 показана способность NEOD001 и 2A4 связываться как с растворимыми, так и с нерастворимыми амилоидными фибриллами, полученными у пациентов с амилоидозом AL. С помощью микродиссекции с лазерным захватом/масс-спектрометрии определили, что легкие амилоидные цепи пациентов содержали аминокислотные остатки -ED- и -GD- в позициях 81 и 82 соответственно (нумерация по Кабату).
Подробное описание изобретения
NEOD001 (SEQ ID NO: 13 и 14) представляет собой исследуемое моноклональное антитело, которое специфически нацелено на множество форм вызывающих заболевание агрегатов с неправильно свернутой легкой цепью при амилоидозе AL. Считается, что NEOD001 нейтрализует растворимые токсичные агрегаты и вызывает удаление нерастворимых отложений амилоидных фибрилл посредством фагоцитоза. NEOD001 имеет общие определяющие комплементарность области (CDR) с мышиным антителом 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662). Такие антитела специфически распознают криптический эпитоп в белках каппа и лямбда легкой цепи (LC), который особым образом открывается во время неправильного сворачивания и агрегации и, как было показано, связывается с белками, имеющими консенсусную последовательность X1EDX2, причем X1 и X2 представляют собой различные аминокислотные остатки, присутствующие в позициях 80 и 83, и остатки глутаминовой кислоты (E) и аспарагиновой кислоты (D) в позициях 81 и 82 (нумерация легких цепей иммуноглобулина по Кабату).
Однако из-за генетической изменчивости не у всех пациентов с амилоидозом AL продуцируются неправильно свернутые легкие цепи, имеющие криптический эпитоп, содержащий консенсусную последовательность X1EDX2. Соответственно до настоящего раскрытия рядовой специалист в данной области мог бы полагать, что лечение этих пациентов любым из вышеуказанных антител не будет эффективным, поскольку антитела не будут связываться с растворимыми или осажденными амилоидными белками у пациентов. Вопреки этому мнению неожиданно было обнаружено, что NEOD001 и 2A4 также связываются с белками легкой цепи с глициновым остатком в позиции 81 (нумерация по Кабату), т.е. с пептидами и белками, которые содержат последовательность X1GDX2.
Таким образом, в изобретении представлены способы лечения пациента, страдающего или имеющего риск развития амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). Не связывая себя теорией, авторы полагают, что эти неправильно свернутые белки легкой цепи содержат криптический эпитоп, содержащий консенсусную последовательность X1GDX2. Лечение таких пациентов предусматривает введение пациенту эффективной дозы антитела, тем самым замедляя, останавливая или способствуя положительной динамике нарушений одной или нескольких функций внутренних органов пациента. Рядовому специалисту в данной области будет понятно, что оценка функции внутренних органов до и после лечения может быть выполнена множеством способов, установленных в данной области.
Антитело может представлять собой химерное антитело. Другое иллюстративное антитело представляет собой гуманизированное антитело. Антитело может представлять собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, такой как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.
В некоторых способах изобретения антитело представляет собой моноклональное антитело, содержащее определяющие комплементарность области антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), например химерное антитело или гуманизированное антитело. В некоторых способах антитело представляет собой NEOD001. Некоторые формы антитела 2A4 содержат вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющие комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющие комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Например, антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Некоторые формы антитела 2A4 содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых аспектах легкая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или SEQ ID NO: 16. В некоторых аспектах тяжелая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18.
Некоторые способы согласно настоящему изобретению предусматривают применение определенных фармацевтических составов, например, фармацевтических составов, содержащих
a) антитело в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл;
b) гистидиновый буфер в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ;
c) трегалозу в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; и
d) полисорбат 20 в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по массе до приблизительно 0,05% по массе,
- 3 044759 причем состав отличается pH в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.
В некоторых составах
a) антитело присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл;
b) гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ;
c) трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ;
d) полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л, при этом pH составляет приблизительно 6,5.
Некоторые способы согласно настоящему изобретению предусматривают применение определенных дозировок и лечебной схемы. В некоторых способах дозировка составляет от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг, а антитело вводят внутривенно или подкожно с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца. В некоторых способах дозировка составляет приблизительно 24 мг/кг, а антитело вводят внутривенно каждые 28 дней.
Антитела.
Термин антитело включает в себя интактные антитела и их антигенсвязывающие фрагменты. Как правило, фрагменты конкурируют с интактным антителом, из которого они были получены, за конкретное связывание с мишенью, в том числе отдельными тяжелыми цепями, легкими цепями Fab, Fab', F(ab')2, F(ab)c, Dab, нанотелами и Fv. Фрагменты могут быть получены методами рекомбинантной ДНК или ферментативным или химическим разделением интактных иммуноглобулинов. Термин антитело также включает в себя биспецифическое антитело и/или гуманизированное антитело. Биспецифическое или бифункциональное антитело представляет собой искусственное гибридное антитело, имеющее две разные пары тяжелой/легкой цепи и два разных участка связывания.
Термин гуманизированный иммуноглобулин или гуманизированное антитело относится к иммуноглобулину или антителу, которое содержит по меньшей мере одну цепь гуманизированного иммуноглобулина или антитела (т.е. по меньшей мере одну гуманизированную легкую или тяжелую цепь). Термин цепь гуманизированного иммуноглобулина или цепь гуманизированного антитела (т.е. легкая цепь гуманизированного иммуноглобулина или тяжелая цепь гуманизированного иммуноглобулина) относится к цепи иммуноглобулина или антитела (т.е. легкой или тяжелой цепи соответственно), имеющей вариабельную область, которая содержит вариабельную каркасную область, по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела, и области, определяющие комплементарность (CDR) (например, по меньшей мере одну CDR, предпочтительно две CDR, более предпочтительно три CDR), по существу из не являющегося человеческим иммуноглобулина или антитела, и дополнительно содержит константные области (например, по меньшей мере одну константную область или ее часть в случае легкой цепи, и предпочтительно три константные области в случае тяжелой цепи). Термин гуманизированная вариабельная область (например, гуманизированная вариабельная область легкой цепи или гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи) относится к вариабельной области, которая содержит вариабельную каркасную область, по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела, и области, определяющие комплементарность (CDR), по существу из не являющегося человеческим иммуноглобулина или антитела.
Фраза по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела или по существу человеческий означает, что при выравнивании с аминокислотной последовательностью человеческого иммуноглобулина или антитела для целей сравнения область имеет по меньшей мере 80-90%, предпочтительно 90-95%, более предпочтительно 95-99% идентичность (т.е. идентичность локальной последовательности) с последовательностью человеческой каркасной или константной области, что позволяет, например, делать консервативные замены, замены консенсусной последовательности, замены зародышевой линии, обратные мутации и т.п. Применение консервативных замен, замен консенсусной последовательности, замен зародышевой линии, обратных мутаций и т.п. часто называют оптимизацией гуманизированного антитела или цепи. Фраза по существу из иммуноглобулина или антитела, не являющегося человеческим или по существу не являющийся человеческим означает наличие последовательности иммуноглобулина или антитела не менее 80-95%, предпочтительно 90-95%, более предпочтительно 96%, 97%, 98% или на 99% идентичного таковому для не человеческого организма, например, не являющего человеком млекопитающего.
Соответственно все области или остатки гуманизированного иммуноглобулина или антитела либо цепи гуманизированного иммуноглобулина или антитела за исключением, возможно, CDR по существу идентичны соответствующим областям или остаткам одной или нескольких нативных последовательностей иммуноглобулина человека. Термин соответствующая область или соответствующий остаток относится к области или остатку на второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности, который занимает такую же (т.е. эквивалентную) позицию, как и область или остаток на первой аминокислотной или нуклеотидной последовательности, когда первая и вторая последовательности оптимально выровнены для целей сравнения.
Предусмотрены различные антитела, подходящие для лечения амилоидоза AL в соответствии со способами и соответствующими вариантами применения, раскрытыми в данном документе. Например, подходит химерный вариант антитела 2A4. Подходит также гуманизированный вариант антитела 2A4.
- 4 044759
Один подходящий вариант антитела 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Другой подходящий вариант антитела 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 и 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Еще один подходящий вариант антитела 2A4 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. Также подходят и предусмотрены антигенсвязывающие фрагменты антитела 2A4, такие как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.
Фармацевтические составы.
В некоторых раскрытых в данном документе способах и соответствующих вариантах применения антитело можно вводить в виде фармацевтического состава. Например, иллюстративные фармацевтические составы в дополнение к антителам содержат гистидиновый буфер, трегалозу и полисорбат 20. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл; гистидиновый буфер присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ; трегалоза присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,05% по массе; и pH находится в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.
В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 75 мг/мл. Например, антитело может присутствовать в концентрации приблизительно 10 мг/мл или присутствовать в концентрации приблизительно 50 мг/мл. Антитело может присутствовать в стерильной жидкой дозированной лекарственной форме от приблизительно 50 мг/флакон до приблизительно 500 мг/флакон или более. Например, антитело может присутствовать в стерильной жидкой дозированной лекарственной форме приблизительно 100 мг/флакон.
Гистидиновый буфер может присутствовать в некоторых составах в концентрации приблизительно 25 мМ. В некоторых составах гистидиновый буфер содержит L-гистидин и моногидрат L-гистидина HCl. Например, в некоторых составах L-гистидин присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 16 мМ до приблизительно 22 мМ и моногидрат L-гистидина HCl присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 4 мМ до приблизительно 8 мМ.
В некоторых составах трегалоза присутствует в концентрации от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ, например приблизительно 230 мМ. В некоторых составах используется другой невосстанавливающий сахар, такой как сахароза, маннит или сорбит.
В некоторых составах полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по весу до приблизительно 0,05% по весу, например 0,005, 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045 или 0,05% по весу. В альтернативном варианте в некоторых составах полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне приблизительно от 0,05, 0,1, 0,15, 0,2, 0,25, 0,3, 0,35, 0,4, 0,45 или 0,5 г/л. Некоторые составы включают полисорбат 20 г/л в концентрации 0,2 г/л.
Некоторые составы отличаются pH в диапазоне приблизительно 6-7, например pH 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9 или 7,0. Некоторые составы имеют pH приблизительно 6,5. Некоторые составы отличаются тем, что осмоляльность составляет приблизительно 300 мОсм/кг. В некоторые составы также может быть включен объемообразующий агент.
Обычно составы являются стерильными, что достигается, например, путем стерильной фильтрации с использованием фильтра 0,2 или 0,22 мкм. Раскрытые в данном документе составы также обычно стабильны при замораживании и оттаивании.
Необязательно раскрытые в данном документе составы могут дополнительно содержать другие вспомогательные вещества, такие как сахариды, полиолы и аминокислоты (например, аргинин, лизин и метионин). В настоящем изобретении также представлены составы, по существу не содержащие поверхностно-активное вещество, неорганические соли, дополнительные сахара и/или другие вспомогательные вещества, т.е. приблизительно менее 0,0005%, менее 0,0003% или менее 0,0001% таких соединений.
Иллюстративный состав содержит антитело, которое присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл, гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ, трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ, полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л и pH приблизительно 6,5.
Раскрытые в данном документе составы могут быть представлены в дозированной лекарственной форме, подходящей для парентерального (например, внутривенного, внутримышечного, подкожного) введения. В зависимости от конкретных применений состав может быть альтернативно представлен в дозировке, подходящей для ректального, трансдермального, назального, вагинального, ингаляционного,
- 5 044759 глазного или другого введения. Фармацевтические составы обычно готовят в соответствии с обычной фармацевтической практикой. См., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed.) ed. A.R. Gennaro, 1995, Mack Publishing Company, Easton, Pa. and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, N.Y.
В некоторых способах фармацевтический состав можно вводить пациенту внутривенно или подкожно с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца с дозировкой антитела в диапазоне от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг. Например, фармацевтический состав можно вводить пациенту внутривенно каждые 28 дней с дозировкой антитела приблизительно 24 мг/кг.
В раскрытых в данном документе способах и соответствующих вариантах применения также могут быть использованы фармацевтические препараты, содержащие лиофилизированную форму антитела и инструкции по восстановлению и применению. Например, иллюстративный фармацевтический препарат может содержать (a) флакон, содержащий приблизительно от 100 до 500 мг антитела в форме порошка;
(b) инструкции по восстановлению антитела; и (c) инструкции по приготовлению восстановленного антитела для инъекции, так что лиофилизированное антитело восстанавливают водой для инъекций до экстрагируемого объема 10 мл.
Способы лечения.
Раскрытые в данном документе способы и соответствующие варианта применения предназначены для лечения пациентов, страдающих амилоидозом AL, связанным с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). Такие способы лечения предусматривают введение пациенту эффективной дозировки антитела.
Некоторые раскрытые в данном документе способы лечения предусматривают введение пациенту эффективной дозы химерного или гуманизированного варианта антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662). Антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. В некоторых способах антитело 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. В некоторых способах антитело 2A4 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
В рамках настоящего изобретения термины лечить и лечение относятся к облегчению или уменьшению интенсивности одного или нескольких симптомов или эффектов, связанных с амилоидозом AL, профилактике, ингибированию или задержке появления одного или нескольких симптомов или эффектов амилоидоза AL, уменьшению тяжести или частоты проявления одного или нескольких симптомов или эффектов амилоидоза AL и/или улучшению или изменению в сторону желаемых результатов, как описано в данном документе.
Желаемые результаты раскрытых в данном документе способов лечения варьируются в зависимости от профиля пациента, и специалист в данной области может легко их определить. Обычно желаемые результаты включают измеримые показатели, такие как уменьшение или клиренс патологических амилоидных фибрилл, снижение или ингибирование агрегации амилоида и/или отложения амилоидных фибрилл, и усиление иммунного ответа на патологические и/или агрегированные амилоидные фибриллы. Желаемые результаты также подразумевают уменьшение симптомов, характерных для амилоидного заболевания. Например, желаемые результаты лечения амилоидоза AL подразумевают уменьшение частоты возникновения или тяжести известных симптомов, таких как дисфункция органов, периферическая и автономная невропатия, туннельный запястный синдром, макроглоссия, рестриктивная кардиомиопатия, артропатия крупных суставов, иммунные дискразии, миеломы, а также скрытые дискразии. Желаемые результаты раскрытых терапий, как правило, представляют собой поддающиеся количественной оценке показатели в сравнении с контрольными или исходными измерениями. В рамках настоящего изобретения относительные понятия, такие как улучшать, увеличивать или уменьшать указывают значения, относящиеся к контрольному варианту, как например измерение у одного и того же пациента до начала лечения, описанного в данном документе, или измерение у контрольного пациента или группы. Контрольный пациент - это пациент, страдающий тем же амилоидным заболеванием, что и пациент, подлежащий лечению, приблизительно одного возраста с пациентом, подлежащим лечению (для гарантии, что стадии заболевания у пациента, получающего лечение, и контрольного пациента сопоставимы), но который не получал лечения с использованием раскрытых составов антител. В этом случае эффективность раскрытых составов антител оценивается по сдвигу или тенденции отклонения от измеримых показателей в контрольном варианте до лечения. В альтернативном варианте контрольным пациентом является здоровый пациент, приблизительно одного возраста с пациентом, подлежащим лечению. В этом случае эффективность раскрытых составов антител оценивается по сдвигу или тенденции в сторону от измери- 6 044759 мых показателей в здоровом контрольном варианте. Изменения или улучшения в ответ на терапию обычно являются статистически значимыми и описываются значением p, меньше или равным 0,1, меньше 0,05, меньше 0,01, меньше 0,005 или меньше 0,001, которые можно рассматривать как значимые.
Как у бессимптомных, так и у пациентов с симптомами лечение в соответствии с раскрытыми способами можно начинать в любое время до или после диагностики основного амилоидного заболевания AL. Лечение обычно предполагает прием нескольких доз в течение периода времени. Лечение можно контролировать путем проведения анализа на содержание антитела или применения SAP сцинтиграфии с радиоактивной меткой в динамике. Если реакция снижается, может быть показана повторная доза. Реакцию пациентов с амилоидозом AL на лечение можно контролировать путем оценки сердечных маркеров, таких как NT-proBNP и/или тропонин, креатин сыворотки и/или щелочная фосфатаза; путем проведения анализов на содержание свободной легкой цепи (SFLC), количественных анализов на содержание иммуноглобулина, биопсии, электрофореза сывороточных белков (SPEP), электрофореза белков мочи (UPEP), сыворотки, электрофореза иммунофиксации мочи (IFE) и/или методов визуализации органов. Иллюстративный полный ответ (CR) может быть определен из критериев ответа, в том числе отрицательной IFE сыворотки и мочи, нормального содержания и/или <5% плазматических клеток в костном мозге. Иллюстративный очень хороший частичный ответ (VGPR) можно определить по dFLC <40 мг/л. Иллюстративный частичный ответ (PR) можно определить по уменьшению dFLC на >50%. В почках ответ на лечение может быть определен, например, по снижению >50% (например, >0,5 г/24 ч) экскреции белка в суточной моче при отсутствии снижения eGFR на >25% или повышения сывороточного креатина на >0,5 мг/дл. В печени ответ на лечение может быть определен, например, по уменьшению на >50% первоначально повышенного уровня щелочной фосфатазы или уменьшению на >2 см размера печени при КТ или МРТ. В сердце ответ на лечение может быть определен, например, по снижению NT-proBNP на >30% и >300 нг/л у пациентов с исходным уровнем NT-proBNP >650 нг/л. В почках ответ на лечение может быть определен, например, по уменьшению протеинурии >30% или снижению протеинурии до <0,5 г/24 ч при отсутствии прогрессирования почечной недостаточности. Пациенты с невропатией обычно отличаются увеличением NIS-LL на <2 пункта от исходного уровня. Улучшение при невропатии (например, улучшение функции нервной системы) определяют по уменьшению NIS-LL в сравнении с исходным уровнем.
Для облегчения или уменьшения интенсивности одного или нескольких симптомов или эффектов, связанных с амилоидозом, можно проводить их лечение независимо друг от друга. Термин независимо означает, что антитело или состав антитела можно вводить в дозировке, достаточной для лечения одного или нескольких симптомов или эффектов (например, периферической невропатии), без лечения всех симптомов или эффектов или конкретных симптомов или эффектов (например, функции сердца, функции почек).
Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение при помощи одного или нескольких химиотерапевтических средств. Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение при помощи одного или нескольких антител. Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение с помощью комбинированной терапии.
Некоторым пациентам была сделана аутогенная трансплантация. Некоторые пациенты могли получать комбинированные методы лечения. Некоторые пациенты могут быть выбраны для лечения в соответствии со способами, раскрытыми в настоящем документе, только в том случае, если они ранее получали лечение с помощью альтернативной терапии.
Однако некоторым пациентам может быть противопоказано лечение одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, антителами, аутогенной трансплантацией, комбинированной терапией или их комбинацией. Например, лечащий врач может предполагать, что конкретное лечение или режим введения дозы лекарственного средства, требуемые для достижения желаемого эффекта, окажут больше вредных эффектов на функцию почек пациента, чем любая ожидаемая польза.
Схемы лечения.
Лечение в соответствии со способами, раскрытыми в данном документе, обычно предусматривает введение пациенту нескольких доз антитела в течение некоторого периода времени. Антитела можно вводить пациенту, например, внутривенно в виде фармацевтического состава в диапазоне доз от приблизительно 10 мг до приблизительно 5000 мг, например приблизительно 10 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 2000 мг или приблизительно 2500 мг. Антитела также можно вводить внутривенно в диапазоне доз от приблизительно 0,1 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг или от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг в зависимости от массы тела пациента. Например, дозировки могут составлять приблизительно 0,5 мг/кг веса тела, приблизительно 1,0 мг/кг, приблизительно 1,5 мг/кг, приблизительно 2,0 мг/кг, приблизительно 4,0 мг/кг, приблизительно 5,0 мг/кг, приблизительно 8,0 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 16 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 24 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг или приблизительно 30 мг/кг веса тела. Эскалация для отдельного пациента может происходить по усмотрению лечащего врача при отсутствии какого-либо клинически значимого явления, которое, по
- 7 044759 обоснованному предположению лечащего врача, может повлечь за собой чрезмерную угрозу безопасности пациента, например негематологическая токсичность >3 степени, тошнота, рвота или диарея >3 степени, неконтролируемые максимальной противорвотной/противодиарейной терапией, нейтропения 4 степени, продолжающаяся >7 дней при отсутствии поддержки фактора роста, нейтропения 3 или 4 степени любой продолжительности, сопровождающаяся лихорадкой >38,5°С и/или системная инфекция, или другая гематологическая токсичность степени >4.
Антитела обычно вводят пациенту в несколько приемов. Иллюстративная схема лечения предусматривает введение один раз в две недели, один раз в месяц или один раз каждые 3-6 месяцев. Например, пациенты могут получать антитело (например, в виде внутривенного состава) один раз каждые четыре недели в виде цикла, например каждые двадцать восемь дней. Частоту дозирования можно регулировать в зависимости от фармакокинетического профиля антитела у пациента. Например, время полужизни антитела может служить основанием для двухнедельной частоты дозирования. В некоторых способах два или более антитела с разными специфичностями связывания можно вводить одновременно, и в этом случае доза каждого вводимого антитела попадает в указанные диапазоны. Интервалы между разовыми дозами могут составлять неделю, месяц или год. Интервалы также могут быть нерегулярными в зависимости от уровней антител в крови и других клинических признаков. В некоторых способах дозировку корректируют для достижения концентрации антител в плазме приблизительно 1-1000 мкг/мл или приблизительно 25-300 мкг/мл. В альтернативных вариантах антитела можно вводить в виде состава с замедленным высвобождением, и в этом случае требуется менее частое введение. Антитела можно вводить пациенту в течение по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев или в течение более длительного периода времени для достижения желаемого результата.
Дозировка и частота варьируются в зависимости от времени полужизни антитела у пациента. В общем человеческие антитела показывают самое длительное время полужизни, затем гуманизированные антитела, химерные антитела и не являющиеся человеческими антитела. Дозировка и частота введения могут варьироваться в зависимости от того, является ли лечение профилактическим или терапевтическим. В профилактических целях относительно небольшую дозу вводят через относительно нечастые интервалы в течение длительного периода времени. Некоторые пациенты продолжают получать лечение всю оставшуюся жизнь. В терапевтических целях иногда требуется относительно высокая доза с относительно короткими интервалами до тех пор, пока прогрессирование заболевания не уменьшится или не прекратится, пока не будет достигнут частичный или полный ответ, и/или пока у пациента не наступит облегчение или уменьшение интенсивности симптомов заболевания. После этого патенту может быть назначен профилактический режим.
Продолжительность схемы лечения зависит от заболевания, которое подлежит лечению, возраста и состояния пациента, стадии и типа заболевания у пациента, реакции пациента на лечение и т.д. Лечащий врач может внимательно наблюдать за эффектами терапии и проводить любые корректировки по мере необходимости. Когда средства используют в комбинации, два или более терапевтических средства вводят одновременно или последовательно в любом порядке, т.е. антитело, раскрытое в данном документе, вводят до введения второго терапевтического средства, одновременно со вторым терапевтическим средством или после введения второго терапевтического средства. Например, комбинированная терапия может быть выполнена путем введения первого терапевтического средства перед (например, за 1, 5, 15, 30, 45 мин, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 ч, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 или 12 недель до), одновременно с или после (например, 1, 5, 15, 30, 45 мин, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 ч, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 или 12 недель после) введения второго терапевтического средства.
Дозировку, частоту и способ введения каждого компонента комбинированной терапии можно контролировать независимо. Например, одно терапевтическое средство можно вводить перорально три раза в день, в то время как второе терапевтическое средство можно вводить внутримышечно один раз в день. Комбинированная терапия может проводиться циклами включения и выключения, которые включают периоды отдыха. Соединения можно также смешивать или иным образом составлять вместе, так чтобы одно введение обеспечивало доставку обоих терапевтических средств. В этом случае каждое терапевтическое средство обычно присутствует в количестве 1-95% по весу от общего веса композиции. В альтернативном варианте терапевтические средства могут быть составлены отдельно и в индивидуально дозированных количествах. Комбинации терапевтических средств для лечения могут быть предоставлены в составе фармацевтической упаковки.
Предпочтительно, чтобы комбинированная терапия вызывала синергетический терапевтический эффект, т.е. эффект, превышающий сумму индивидуальных эффектов или терапевтических результатов, таких как описанные выше. Например, синергетический терапевтический эффект может быть эффектом по меньшей мере приблизительно в два раза большим, чем сумма терапевтических эффектов, вызываемых отдельными средствами данной комбинации, или по меньшей мере приблизительно в пять раз больше, или по меньшей мере приблизительно в десять раз больше, или по меньшей мере приблизительно в двадцать раз больше, или по меньшей мере приблизительно в пятьдесят раз больше, или по меньшей мере приблизительно в сто раз больше. Синергетический терапевтический эффект также может наблю
- 8 044759 даться как увеличение терапевтического эффекта по меньшей мере на 10% по сравнению с суммой терапевтических эффектов, вызываемых отдельными средствами данной комбинации, или по меньшей мере на 20%, или по меньшей мере на 30%, или по меньшей мере на 40%, или по меньшей мере на 50%, или по меньшей мере на 60%, или по меньшей мере на 70%, или по меньшей мере на 80%, или по меньшей мере на 90%, или по меньшей мере на 100%, или более. Синергетический эффект также является эффектом, который позволяет снизить дозировку терапевтических средств, когда они используются в комбинации.
Примеры
Следующие примеры были предусмотрены для иллюстрации аспектов раскрытых здесь способов. Некоторые аспекты следующих примеров описаны применительно к методике и процедурам, которые получены или рассмотрены соавторами настоящего изобретения для практического использования, раскрытого в данном документе. В свете настоящего раскрытия и общего уровня квалификации в данной области специалистам в данной области должно быть понятно, что следующие примеры предназначены только для иллюстрации и многочисленные изменения, модификации и перемены могут быть использованы не выходя за рамки объема раскрытия.
Пример 1. Биоинформационный анализ AL-ассоциированных последовательностей легких цепей.
Наличие различных аминокислот в позициях 81 и 82 во всем репертуаре генов зародышевых линий VK и VL человека определили путем применения системы нумерации Кабата к последовательностям легких цепей из базы данных ImMunoGeneTics (IMGT) и выравнивания аминокислотных последовательностей с помощью инструмента MegAlign программного обеспечения LaserGene DNA.
Частота генных подтипов и аллелей, преобладающих у пациентов с амилоидозом AL, была определена с помощью биоинформационного анализа опубликованных в AL базе последовательностей легких цепей (Бостонский университет) и целого ряда публикаций. Для идентификации генного подтипа и аллеля была использована система нумерации Кабата и программный инструмент IMGT/DomainGapAlign.
Преобладающая аминокислотная последовательность в позициях 81 и 82, идентифицированная с помощью этого биоинформационного анализа, была -ED-, которая была идентифицирована в 77,89% проанализированных легких цепей. -GD- была второй по частоте последовательностью, хотя и гораздо менее распространенной, чем -ED-, и была идентифицирована в 11,58% проанализированных легких цепей. Также были идентифицированы -MD-, - DD- и -EA-.
Пример 2. Иммунологическая реактивность NEOD001 и 2A4 относительно пептидов X1EDX2 и X1GDX2.
Планшеты для ELISA покрывали пептидами, имеющими аминокислотную последовательность HEDT (SEQ ID NO: 19), AEDS (SEQ ID NO: 20) или HGDT (SEQ ID NO: 21), блокировали и анализировали с помощью NEOD001 (антитело с легкой цепью, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелой цепью, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14) или 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), как указано. После промывания применяли соответствующие вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена. Затем планшет промывали и обрабатывали о-фенилендиаменом и считывали оптическую плотность при 490 нм.
Как представлено на фиг. 1, оба NEOD001 и 2A4 связывают все три пептида. Таким образом, эти антитела связывают обе аминокислотные последовательности X1EDX2 и X1GDX2, присутствующие в легких цепях иммуноглобулина.
Пример 3. Определение подтипов легких цепей в образцах ткани амилоидоза AL, связанных при помощи NEOD001 и 2A4.
Свежезамороженных образцов от пациентов с AL были обработаны до растворимых и нерастворимых образцов, а связывание 2A4 оценивали с помощью электрохемилюминесцентного (ECL) иммуноанализа. Результаты показаны на фиг. 2. Впоследствии на образцах была проведена массспектрометрия с лазерным захватом и микродиссекцией (LCM-MS). Образцы окрашивали Конго красным для локализации амилоидных отложений, и отложения иссекали микродиссекцией с лазерным захватом. Изолированные отложения распарафинировали и растворяли перед анализом и секвенированием с помощью
LCM-MS. Остатки эпитопа определяли непосредственно с помощью LCM-MS. Результаты представлены в таблице.
- 9 044759
| LCM-MS и анализ последовательности образцов ткани амилоидоза AL Идентификатор образца | Ген легкой цепи | Остаток эпитопа |
| AL-1 | Не определено | Не определено |
| AL-2 | LV1-44 | -ED- |
| AL-3 | Не определено | Не определено |
| AL-4 | KV4-1 | -ED- |
| AL-5 | LV6-57 | -ED- |
| AL-6 | LV6-57 | -ED- |
| AL-7 | LV2-18 | -ED- |
| AL-8 | LV3-21 | -GD- |
| AL-9 | Не определено | Не определено |
| AL-10 | LV2-14 | -ED- |
Примечательно, что пациент AL-8, у которого было определено наличие -GD- в эпитопе легкой цепи, имел значительно больший сигнал в растворимом экстракте образца почек по сравнению с образцами пациентов, у которых было определено наличие -ED- в эпитопе.
Раскрытие каждого патента, патентной заявки и публикации, цитируемых в данном документе, настоящим полностью включено в данный документ посредством ссылки.
Хотя это изобретение было раскрыто со ссылкой на конкретные варианты осуществления, очевидно, что другие варианты осуществления и варианты этого изобретения могут быть разработаны другими специалистами в данной области без отклонения от истинной сущности и объема изобретения. Прилагаемая формула изобретения содержит все такие варианты осуществления и эквивалентные варианты.
Claims (33)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ лечения пациента, страдающего амилоидозом AL, связанным с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность глицин-аспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату), включающий введение эффективной дозы химерного или гуманизированного антитела, способного специфически связывать неправильно свернутые белки легкой цепи иммуноглобулина, имеющие аминокислотную последовательность глицинаспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату), содержащего вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 4, 5 и 6.
- 2. Способ по п.1, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12.
- 3. Способ по п.1, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12.
- 4. Способ по п.1, в котором антитело содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
- 5. Способ по п.1, в котором антитело представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, выбранный из группы, состоящей из Fab-, Fab'-, F(ab')2-, F(ab)c- или Fv-фрагмента.
- 6. Способ по п.1, в котором эффективную дозировку антитела вводят в виде фармацевтического состава, содержащегоa) антитело в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл;b) гистидиновый буфер в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ;c) трегалозу в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; иd) полисорбат 20 в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по массе до приблизительно 0,05% по массе, при этом фармацевтический состав отличается pH в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.
- 7. Способ по п.6, в которомa) антитело присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл;b) гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ;c) трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ;d) полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л, при этом pH составляет приблизительно 6,5.
- 8. Способ по п.1, в котором эффективная дозировка составляет от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг, а антитело вводят внутривенно или подкожно с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца.- 17 044759
- 9. Способ по п.1, в котором эффективная дозировка составляет 24 мг/кг, а антитело вводят внутривенно каждые 28 дней.
- 10. Способ по п.8, в котором продолжительность лечения - это период времени, необходимый для достижения эффекта от лечения.
- 11. Способ по п.9, в котором продолжительность лечения - это период времени, необходимый для достижения эффекта от лечения.
- 12. Применение химерного или гуманизированного варианта антитела, способного специфически связывать неправильно свернутые белки легкой цепи иммуноглобулина, имеющие аминокислотную последовательность глицин-аспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату), содержащего вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 4, 5 и 6, для лечения амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность глицин-аспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату).
- 13. Применение по п.12, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12.
- 14. Применение по п.12, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12.
- 15. Применение по п.12, в котором антитело содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
- 16. Применение по п.12, в котором антитело представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, выбранный из группы, состоящей из Fab-, Fab'-, F(ab')2-, F(ab)c- или Fv-фрагмента.
- 17. Применение по п.12, в котором эффективную дозировку антитела вводят в виде фармацевтического состава, содержащегоa) антитело в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл;b) гистидиновый буфер в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ;c) трегалозу в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; иd) полисорбат 20 в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по массе до приблизительно 0,05% по массе, при этом фармацевтический состав отличается pH в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.
- 18. Применение по п.17, в которомa) антитело присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл;b) гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ;c) трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ;d) полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л, при этом pH составляет приблизительно 6,5.
- 19. Применение по п.12, в котором антитело можно вводить пациенту внутривенно или подкожно в количестве от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца.
- 20. Применение по п.12, в котором антитело можно вводить пациенту внутривенно в количестве приблизительно 24 мг/кг каждые 28 дней.
- 21. Применение по п.19, в котором антитело можно вводить в течение периода времени, необходимого для достижения эффекта от лечения.
- 22. Применение по п.20, в котором антитело можно вводить в течение периода времени, необходимого для достижения эффекта от лечения.
- 23. Применение химерного или гуманизированного варианта антитела, способного специфически связывать неправильно свернутые белки легкой цепи иммуноглобулина, имеющие аминокислотную последовательность глицин-аспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату), содержащего вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую, три определяющих комплементарность области, представленные SEQ ID NO: 4, 5 и 6, в производстве лекарственного средства для лечения амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность глицин-аспартат GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату).
- 24. Применение по п.23, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12.- 18 044759
- 25. Применение по п.23, в котором антитело содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12.
- 26. Применение по п.23, в котором антитело содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
- 27. Применение по п.23, в котором антитело представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, выбранный из группы, состоящей из Fab-, Fab'-, F(ab')2-, F(ab)c- или Fv-фрагмента.
- 28. Применение по п.23, в котором эффективную дозировку антитела вводят в виде фармацевтического состава, содержащегоa) антитело в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл;b) гистидиновый буфер в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ;c) трегалозу в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; иd) полисорбат 20 в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по массе до приблизительно 0,05% по массе, при этом фармацевтический состав отличается pH в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.
- 29. Применение по п.28, в которомa) антитело присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл;b) гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ;c) трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ;d) полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л, при этом pH составляет приблизительно 6,5.
- 30. Применение по п.23, в котором антитело можно вводить пациенту внутривенно или подкожно в количестве от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца.
- 31. Применение по п.23, в котором антитело можно вводить пациенту внутривенно в количестве приблизительно 24 мг/кг каждые 28 дней.
- 32. Применение по п.30, в котором антитело можно вводить в течение периода времени, необходимого для достижения эффекта от лечения.
- 33. Применение по п.31, в котором антитело можно вводить в течение периода времени, необходимого для достижения эффекта от лечения.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/647,341 | 2018-03-23 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044759B1 true EA044759B1 (ru) | 2023-09-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7858087B2 (en) | Enhancing the efficacy of immunotherapies by supplementing with complement | |
| US9884020B2 (en) | Antibody formulations and methods for treating AL amyloidosis | |
| US20210079078A1 (en) | Compositions for Treating Amyloidosis | |
| KR20160044030A (ko) | 종양 치료용 항-ｂ7-ｈ1 항체 | |
| WO2020178638A1 (en) | Methods of treating al amyloidosis | |
| JP2022116305A (ja) | 抗体含有製剤 | |
| KR20210143752A (ko) | 항체-생산 세포 및 기타 면역 세포 상의 cd38 세포 막 분자 및 면역글로불린 경쇄에 대한 단일클론 항체들의 조합을 이용한 al 아밀로이드증의 치료 | |
| EA044759B1 (ru) | Лечение и профилактика амилоидоза | |
| US20210017278A1 (en) | Treatment and Prophylaxis of Amyloidosis | |
| JP2023502103A (ja) | インターロイキン－１７（ｉｌ－１７）アンタゴニストを用いてループス腎炎を治療する方法 | |
| WO2023134787A2 (zh) | 抗pd-1抗体和抗vegf抗体组合在治疗肝细胞癌中的用途 | |
| KR20230136643A (ko) | Al 아밀로이드증 치료 방법 | |
| EP4021457A1 (en) | Method for the treatment of chronic fatigue syndrome using an inhibitory or cytotoxic agent against plasma cells | |
| TW202421653A (zh) | 用TACI-Fc融合蛋白治療膜性腎病的方法 | |
| KR20230142834A (ko) | 항-cd38 항체 및 이의 용도 | |
| WO2023185720A1 (zh) | 包含抗ctla4和抗pd1的混合抗体的药物组合物及其治疗用途 |