EA043991B1 - 2,4-DIAMINOQUINAZOLINE DERIVATIVES AND OPTIONS FOR THEIR APPLICATION IN MEDICINE - Google Patents
2,4-DIAMINOQUINAZOLINE DERIVATIVES AND OPTIONS FOR THEIR APPLICATION IN MEDICINE Download PDFInfo
- Publication number
- EA043991B1 EA043991B1 EA202092052 EA043991B1 EA 043991 B1 EA043991 B1 EA 043991B1 EA 202092052 EA202092052 EA 202092052 EA 043991 B1 EA043991 B1 EA 043991B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- amino
- methyl
- compound
- fluorine
- mmol
- Prior art date
Links
- XELRMPRLCPFTBH-UHFFFAOYSA-N quinazoline-2,4-diamine Chemical class C1=CC=CC2=NC(N)=NC(N)=C21 XELRMPRLCPFTBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 133
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 46
- 239000011737 fluorine Chemical group 0.000 claims description 46
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical group FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 35
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 28
- 239000000460 chlorine Chemical group 0.000 claims description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 23
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 19
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical group [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 15
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims description 12
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 12
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 11
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 9
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 9
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 claims description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 9
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 8
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- -1 methoxy, cyclopropyl Chemical group 0.000 claims description 7
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 claims description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 4
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 3
- 125000001715 oxadiazolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 claims description 2
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 claims description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 2
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 claims description 2
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 claims description 2
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 claims description 2
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 claims description 2
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 claims description 2
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 claims description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 claims description 2
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 claims description 2
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 claims description 2
- 206010019692 hepatic necrosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 claims description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018191 liver inflammation Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000149 liver necrosis Toxicity 0.000 claims description 2
- GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-chloro-2-[(1-ethyl-6-methoxy-2-oxo-4,5-dihydro-3h-1-benzazepin-7-yl)amino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound CCN1C(=O)CCCC2=C(OC)C(NC=3N=C(C(=CN=3)Cl)N[C@H]3[C@H]([C@@]4([H])C[C@@]3(C=C4)[H])C(N)=O)=CC=C21 GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N 0.000 claims 1
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 claims 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 claims 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 63
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 47
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 42
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 27
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 25
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 description 23
- 239000000047 product Substances 0.000 description 22
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 22
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 22
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 21
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 16
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 16
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 16
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 15
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 14
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 11
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 11
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 9
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- DPEOTCPCYHSVTC-ZCFIWIBFSA-N (2r)-2-aminohexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@@H](N)CO DPEOTCPCYHSVTC-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 8
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- AUGOWPBMMBVYGB-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-chloro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound ClC1=CC=CC2=NC(N)=NC(O)=C21 AUGOWPBMMBVYGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 6
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 6
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 6
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 6
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- MGOAQHCQEHUMJU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-fluoro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1F MGOAQHCQEHUMJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- WABUXSHYCDPHKN-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-bromo-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1Br WABUXSHYCDPHKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VNMGBMVQEWAOSB-UHFFFAOYSA-N 2-amino-8-fluoro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC(F)=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1 VNMGBMVQEWAOSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DBPBOXADXAQLHU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-8-methoxy-1h-quinazolin-4-one Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1C(OC)=CC=C2 DBPBOXADXAQLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NLLZAHIPYDRNRQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-8-methylquinazolin-4(3h)-one Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1C(C)=CC=C2 NLLZAHIPYDRNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- WQNBVVYBHLFPEI-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-bromoquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)Br WQNBVVYBHLFPEI-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- LVEYOSJUKRVCCF-UHFFFAOYSA-N 1,3-bis(diphenylphosphino)propane Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)CCCP(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 LVEYOSJUKRVCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWUAMROXVQLJKA-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-chlorobenzoic acid Chemical compound NC1=C(Cl)C=CC=C1C(O)=O LWUAMROXVQLJKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PIBUJWGLYKALMO-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5,7-difluoro-3H-quinazolin-4-one Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC(=C2C(=N1)O)F)F PIBUJWGLYKALMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOJQKNWGRVCAOC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-(trifluoromethyl)-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1C(F)(F)F NOJQKNWGRVCAOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HPKALMHHISYAFQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-methyl-1h-quinazolin-4-one Chemical compound NC1=NC(O)=C2C(C)=CC=CC2=N1 HPKALMHHISYAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LSGSMUWWRYHTFQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-6,7-difluoro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound FC1=C(F)C=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1 LSGSMUWWRYHTFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YKRJERFQSDIWPH-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-(trifluoromethyl)-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC(C(F)(F)F)=CC2=NC(N)=NC(O)=C21 YKRJERFQSDIWPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IRBJUDZHLBICJG-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-fluoro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=C(F)C=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1 IRBJUDZHLBICJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MVWSAUGKNXPFDM-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-methyl-1h-quinazolin-4-one Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C=2C1=CC(C)=CC=2 MVWSAUGKNXPFDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AXVDXEZLKWPCJX-UHFFFAOYSA-N 2-amino-8-chloro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC(Cl)=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1 AXVDXEZLKWPCJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SXOPCLUOUFQBJV-UHFFFAOYSA-N 3-methoxyanthranilic acid Chemical compound COC1=CC=CC(C(O)=O)=C1N SXOPCLUOUFQBJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JTEGQNOMFQHVDC-RQJHMYQMSA-N 4-amino-1-[(2s,5r)-2-(hydroxymethyl)-1,3-oxathiolan-5-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)SC1 JTEGQNOMFQHVDC-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 2
- BKZKSEVOJGEMSX-UHFFFAOYSA-N 5-(trifluoromethyl)quinazoline-2,4-diamine Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC2=NC(N)=NC(N)=C21 BKZKSEVOJGEMSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGIFEBQNCUUREX-UHFFFAOYSA-N NC1=NC2=C(C=CC(=C2C(=N1)O)F)C Chemical compound NC1=NC2=C(C=CC(=C2C(=N1)O)F)C NGIFEBQNCUUREX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UOIYCPLZJOQONI-SNVBAGLBSA-N NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)Br Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)Br UOIYCPLZJOQONI-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 2
- ZLLNBYQDWUTSOR-LLVKDONJSA-N NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(=O)OC Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(=O)OC ZLLNBYQDWUTSOR-LLVKDONJSA-N 0.000 description 2
- OACQXDQHOLWDGV-SECBINFHSA-N NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(F)(F)F Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(F)(F)F OACQXDQHOLWDGV-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- 229940124614 TLR 8 agonist Drugs 0.000 description 2
- 108010060752 Toll-Like Receptor 8 Proteins 0.000 description 2
- 102000008208 Toll-Like Receptor 8 Human genes 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N adefovir depivoxil Chemical compound N1=CN=C2N(CCOCP(=O)(OCOC(=O)C(C)(C)C)OCOC(=O)C(C)(C)C)C=NC2=C1N WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003205 adefovir dipivoxil Drugs 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical compound CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229960001627 lamivudine Drugs 0.000 description 2
- JTEGQNOMFQHVDC-NKWVEPMBSA-N lamivudine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1O[C@@H](CO)SC1 JTEGQNOMFQHVDC-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N quinazoline Chemical compound N1=CN=CC2=CC=CC=C21 JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 2
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 2
- HHVIBTZHLRERCL-UHFFFAOYSA-N sulfonyldimethane Chemical compound CS(C)(=O)=O HHVIBTZHLRERCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 2
- 229960004693 tenofovir disoproxil fumarate Drugs 0.000 description 2
- VCMJCVGFSROFHV-WZGZYPNHSA-N tenofovir disoproxil fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.N1=CN=C2N(C[C@@H](C)OCP(=O)(OCOC(=O)OC(C)C)OCOC(=O)OC(C)C)C=NC2=C1N VCMJCVGFSROFHV-WZGZYPNHSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 2
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 2
- MGCANECGDJQHKI-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-5,7-difluoroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)F)F MGCANECGDJQHKI-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- SCXAVBQNBJCEDF-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-chloroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)Cl SCXAVBQNBJCEDF-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- CWSNGQSQZXZLGI-GFCCVEGCSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-cyclopropylquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C1CC1 CWSNGQSQZXZLGI-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- JTXSFTGPRPJKIC-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-fluoro-8-methylquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=C(C=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)F)C JTXSFTGPRPJKIC-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- AHZVDRAWWFCGNT-MRVPVSSYSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]-4-methylsulfanylbutan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCSC)F AHZVDRAWWFCGNT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- CXRJKWCLGDTPHW-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)F CXRJKWCLGDTPHW-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- QPLUJQCUBXPNAG-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-methoxyquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2cccc(OC)c12 QPLUJQCUBXPNAG-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- ITQJBLXQWCHZJM-LLVKDONJSA-N (2R)-2-[(2-amino-5-methylquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C ITQJBLXQWCHZJM-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- FOKXFEZLOFSIHF-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[(2-amino-7-fluoroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2cc(F)ccc12 FOKXFEZLOFSIHF-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- AEXLYDJZJFKVKJ-LLVKDONJSA-N (2R)-2-[(2-amino-7-methylquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2cc(C)ccc12 AEXLYDJZJFKVKJ-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- NDLVNKQHFBQSLC-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-chloroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2c(Cl)cccc12 NDLVNKQHFBQSLC-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- QZRPEXFGYUUDKI-SECBINFHSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-fluoroquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2c(F)cccc12 QZRPEXFGYUUDKI-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- RPTAUDUGXGCOMQ-MRVPVSSYSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-fluoroquinazolin-4-yl)amino]pentan-1-ol Chemical compound CCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2c(F)cccc12 RPTAUDUGXGCOMQ-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- GQRQCHJLQSOGOQ-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-methoxyquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2c(OC)cccc12 GQRQCHJLQSOGOQ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- QLCSUGCOLZFNHY-LLVKDONJSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=C(C=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C QLCSUGCOLZFNHY-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- VTEVDRYBBVGGDR-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[(2-amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino]pentan-1-ol Chemical compound CCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2c(C)cccc12 VTEVDRYBBVGGDR-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- BFCQFSACTYWUQK-LLVKDONJSA-N (2R)-2-[[2-amino-7-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)quinazolin-4-yl]amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C=1OC=NN=1 BFCQFSACTYWUQK-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- UNAFDFFGGWHLBM-SNVBAGLBSA-N (2R)-2-[[2-amino-7-(trifluoromethyl)quinazolin-4-yl]amino]hexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(F)(F)F UNAFDFFGGWHLBM-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- MDCKGHRGUMXERP-KWQFWETISA-N (2R,3S)-2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]-3-methylpentan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)N[C@@H](CO)[C@H](CC)C)F MDCKGHRGUMXERP-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- ULAXUFGARZZKTK-RXMQYKEDSA-N (2r)-2-aminopentan-1-ol Chemical compound CCC[C@@H](N)CO ULAXUFGARZZKTK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- VTQHAQXFSHDMHT-NTSWFWBYSA-N (2s,3s)-2-amino-3-methylpentan-1-ol Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)CO VTQHAQXFSHDMHT-NTSWFWBYSA-N 0.000 description 1
- KZPYGQFFRCFCPP-UHFFFAOYSA-N 1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene Chemical compound [Fe+2].C1=CC=C[C-]1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=C[C-]1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KZPYGQFFRCFCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BUTTVUBNXIIXRH-UHFFFAOYSA-N 1-(cyclopropylmethyl)pyrazole-4-carbaldehyde Chemical compound C1=C(C=O)C=NN1CC1CC1 BUTTVUBNXIIXRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNAJXPYVTFYEST-UHFFFAOYSA-N 2-Amino-3-methylbenzoate Chemical compound CC1=CC=CC(C(O)=O)=C1N WNAJXPYVTFYEST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRQIZNYHILWVGF-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]-2,4-dimethylpentan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)NC(CO)(CC(C)C)C)F FRQIZNYHILWVGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUQZEVWGEJMXAK-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]-2-methylhexan-1-ol Chemical compound C1=CC(F)=C2C(NC(C)(CO)CCCC)=NC(N)=NC2=C1 MUQZEVWGEJMXAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFJDDNWXPQCDKL-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]-3-methylhexan-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)NC(CO)C(CCC)C)F QFJDDNWXPQCDKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQHFDMQDFVDYJU-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]hex-5-en-1-ol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)NC(CO)CCC=C)F PQHFDMQDFVDYJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNQBSPUKOJQYEO-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino]hexane-1,3-diol Chemical compound NC1=NC2=CC=CC(=C2C(=N1)NC(CO)C(CCC)O)F SNQBSPUKOJQYEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PRCKBMHGMGFYHG-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3,4-difluorobenzoic acid Chemical compound NC1=C(F)C(F)=CC=C1C(O)=O PRCKBMHGMGFYHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGUGLENOIPGKIE-GFCCVEGCSA-N 2-amino-4-[[(2R)-1-hydroxyhexan-2-yl]amino]-N,N-dimethylquinazoline-7-carboxamide Chemical compound CCCC[C@H](CO)Nc1nc(N)nc2cc(ccc12)C(=O)N(C)C XGUGLENOIPGKIE-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- BMDRHMNKNNKLEK-SNVBAGLBSA-N 2-amino-4-[[(2R)-1-hydroxyhexan-2-yl]amino]-N-methylquinazoline-5-carboxamide Chemical compound NC1=NC=2C=CC=C(C=2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(=O)NC BMDRHMNKNNKLEK-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- VLTSAXIKBMDRMC-SNVBAGLBSA-N 2-amino-4-[[(2R)-1-hydroxyhexan-2-yl]amino]quinazoline-7-carbohydrazide Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C(=O)NN VLTSAXIKBMDRMC-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- OBZQWCDPIWZCMP-LLVKDONJSA-N 2-amino-4-[[(2R)-1-hydroxyhexan-2-yl]amino]quinazoline-7-carbonitrile Chemical compound NC1=NC2=CC(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)C#N OBZQWCDPIWZCMP-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- LGPVTNAJFDUWLF-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-fluorobenzoic acid Chemical compound NC1=CC(F)=CC=C1C(O)=O LGPVTNAJFDUWLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RPGKFFKUTVJVPY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=CC=C(C(O)=O)C(N)=C1 RPGKFFKUTVJVPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMPJVINIIUUACP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-methoxy-1h-quinazolin-4-one Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1C=CC=C2OC KMPJVINIIUUACP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBLYLHBKDJTOCY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-6-fluoro-1h-quinazolin-4-one Chemical compound FC1=CC=C2NC(N)=NC(=O)C2=C1 BBLYLHBKDJTOCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSFZKWMVWPDGZ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-6-fluorobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=CC(F)=C1C(O)=O RWSFZKWMVWPDGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYZDIWNRWSNVPT-UHFFFAOYSA-N 2-amino-6-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=CC(N)=C1C(O)=O DYZDIWNRWSNVPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQAPDEGXTWATLX-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7,8-difluoro-3H-quinazolin-4-one Chemical compound NC1=NC2=C(C(=CC=C2C(N1)=O)F)F GQAPDEGXTWATLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEZJZZPBSKSEOQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-bromo-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC(Br)=CC2=NC(N)=NC(O)=C21 ZEZJZZPBSKSEOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UILRGJPWNZWSOY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-N,N-dimethyl-4-oxo-3H-quinazoline-5-carboxamide Chemical compound NC1=NC=2C=CC=C(C=2C(=N1)O)C(=O)N(C)C UILRGJPWNZWSOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRZXDDRGJGGILF-UHFFFAOYSA-N 2-amino-N-methyl-4-oxo-3H-quinazoline-5-carboxamide Chemical compound NC1=NC=2C=CC=C(C=2C(=N1)O)C(=O)NC QRZXDDRGJGGILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGQYJDHTHFAPRN-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-6-(trifluoromethyl)benzonitrile Chemical compound FC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1C#N OGQYJDHTHFAPRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SDTFBAXSPXZDKC-UHFFFAOYSA-N 2-imino-1,2,3,4-tetrahydroquinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NC(N)=NC2=C1 SDTFBAXSPXZDKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGMOBVGABMBZSB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)C(Cl)=O DGMOBVGABMBZSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLBVOAVBGATKEZ-UHFFFAOYSA-N 2-oxo-1h-quinazoline-7-carboxylic acid Chemical compound C1=NC(=O)NC2=CC(C(=O)O)=CC=C21 YLBVOAVBGATKEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEGMIZDTCLGYHP-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-4-N-(1-methoxyhexan-2-yl)quinazoline-2,4-diamine Chemical compound FC1=C2C(=NC(=NC2=CC=C1)N)NC(COC)CCCC LEGMIZDTCLGYHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N Chemical compound C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- BSTYVGKLXDDTKY-UHFFFAOYSA-N CN1C(=NC2=C(C(=CC=C2C1=O)F)F)N Chemical compound CN1C(=NC2=C(C(=CC=C2C1=O)F)F)N BSTYVGKLXDDTKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100352919 Caenorhabditis elegans ppm-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101000763579 Homo sapiens Toll-like receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000763537 Homo sapiens Toll-like receptor 10 Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006444 Leucine-Rich Repeat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100481579 Mus musculus Tlr11 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100481580 Mus musculus Tlr12 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100481581 Mus musculus Tlr13 gene Proteins 0.000 description 1
- QLBKJMNCPXHNQL-MRVPVSSYSA-N NC1=NC2=C(C(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)F)F Chemical compound NC1=NC2=C(C(=CC=C2C(=N1)N[C@@H](CO)CCCC)F)F QLBKJMNCPXHNQL-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 101150003085 Pdcl gene Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940124613 TLR 7/8 agonist Drugs 0.000 description 1
- 241001441723 Takifugu Species 0.000 description 1
- 108010060825 Toll-Like Receptor 7 Proteins 0.000 description 1
- 102000008236 Toll-Like Receptor 7 Human genes 0.000 description 1
- 102100027010 Toll-like receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100027009 Toll-like receptor 10 Human genes 0.000 description 1
- TXYGOKZTZACLAE-CQSZACIVSA-N [(2R)-2-[(2-amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino]hexyl] 2-methylpropanoate Chemical compound C(C(C)C)(=O)OC[C@@H](CCCC)NC1=NC(=NC2=C(C=CC=C12)C)N TXYGOKZTZACLAE-CQSZACIVSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000798 anti-retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- STIAPHVBRDNOAJ-UHFFFAOYSA-N carbamimidoylazanium;carbonate Chemical compound NC(N)=N.NC(N)=N.OC(O)=O STIAPHVBRDNOAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- WLVKDFJTYKELLQ-UHFFFAOYSA-N cyclopropylboronic acid Chemical compound OB(O)C1CC1 WLVKDFJTYKELLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- DIBHLCJAJIKHGB-UHFFFAOYSA-N dec-5-ene Chemical compound [CH2]CCCC=CCCCC DIBHLCJAJIKHGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N ethanol etoh Chemical compound CCO.CCO OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- OJCSPXHYDFONPU-UHFFFAOYSA-N etoac etoac Chemical compound CCOC(C)=O.CCOC(C)=O OJCSPXHYDFONPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 102000045715 human TLR7 Human genes 0.000 description 1
- 102000045720 human TLR8 Human genes 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 210000004901 leucine-rich repeat Anatomy 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- ISLOQGNBENYQQF-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-3-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(F)=C1N ISLOQGNBENYQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YJEZEMGLLFLMDF-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-3-methoxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(OC)=C1N YJEZEMGLLFLMDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCONXOIGKRDGKS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-4-oxo-1h-quinazoline-7-carboxylate Chemical compound N1=C(N)NC(=O)C=2C1=CC(C(=O)OC)=CC=2 WCONXOIGKRDGKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PUDDYSBKCDKATP-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-5-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(F)=CC=C1N PUDDYSBKCDKATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- DAZSWUUAFHBCGE-KRWDZBQOSA-N n-[(2s)-3-methyl-1-oxo-1-pyrrolidin-1-ylbutan-2-yl]-3-phenylpropanamide Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCCC1)C(=O)CCC1=CC=CC=C1 DAZSWUUAFHBCGE-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- AYDRXUGEVYPGIK-UHFFFAOYSA-N quinazoline-7-carbohydrazide Chemical compound C1=NC=NC2=CC(C(=O)NN)=CC=C21 AYDRXUGEVYPGIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003246 quinazolines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000003571 reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000036185 rubor Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003797 solvolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N sulfolane Chemical compound O=S1(=O)CCCC1 HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940044616 toll-like receptor 7 agonist Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates
В настоящем изобретении описаны производные хиназолина, способы их получения, фармацевтические композиции и варианты их применения в медицине, более конкретно в области терапии. Средства, описанные в настоящем изобретении, являются подходящими для модулирования толл-подобных рецепторов (TLR), более конкретно TLR8, более конкретно для агонистического воздействия на них. Средства, описанные в настоящем изобретении, в первую очередь применимы в лечении или предупреждении заболеваний или состояний, таких как вирусные инфекции, иммунные или воспалительные нарушения.The present invention describes quinazoline derivatives, methods for their preparation, pharmaceutical compositions and their uses in medicine, more particularly in the field of therapy. The agents described in the present invention are suitable for modulating toll-like receptors (TLRs), more specifically TLR8, more specifically for their agonistic effects. The agents described in the present invention are primarily useful in the treatment or prevention of diseases or conditions, such as viral infections, immune or inflammatory disorders.
Уровень техникиState of the art
Толл-подобные рецепторы представляют собой основные трансмембранные белки, характеризующиеся внеклеточным доменом, богатым лейцином, и цитоплазматическим расширением, которое содержит консервативную область. Врожденная иммунная система может распознавать патогенассоциированные молекулярные паттерны посредством данных TLR, экспрессируемых на клеточной поверхности определенных типов иммунных клеток. При распознавании чужеродных патогенов активируется выработка цитокинов и повышается экспрессия костимулирующих молекул на фагоцитах. Это приводит к модулированию поведения Т-клеток.Toll-like receptors are major transmembrane proteins characterized by an extracellular leucine-rich domain and a cytoplasmic extension that contains a conserved region. The innate immune system can recognize pathogen-associated molecular patterns through TLRs expressed on the cell surface of certain types of immune cells. Upon recognition of foreign pathogens, the production of cytokines is activated and the expression of costimulatory molecules on phagocytes increases. This results in modulation of T cell behavior.
Установлено, что большинство видов млекопитающих имеют от десяти до пятнадцати типов толлподобных рецепторов. В общей сложности у человека и мышей было идентифицировано тринадцать TLR (называемых просто TLR1 - TLR13), и эквивалентные формы многих из них были обнаружены у других видов млекопитающих. Тем не менее, эквиваленты определенного TLR, обнаруженного у человека, присутствуют не у всех млекопитающих. Например, ген, кодирующий белок, аналогичный TLR10 у людей, присутствует у мышей, но, по-видимому, когда-то в прошлом был поврежден ретровирусом. С другой стороны, у мыши экспрессируются TLR11, 12 и 13, но ни один из них не представлен у человека. У других млекопитающих могут экспрессироваться TLR, которые не обнаружены у человека. Другие виды, не являющиеся млекопитающими, могут иметь TLR, отличные от таковых у млекопитающих; доказательством этому служит TLR14, обнаруженный у рыбы фугу рода Takifugu. Это может осложнить процедуру использования экспериментальных животных в качестве моделей врожденного иммунитета человека.It has been established that most mammalian species have from ten to fifteen types of toll-like receptors. A total of thirteen TLRs (simply called TLR1 - TLR13) have been identified in humans and mice, and equivalent forms of many of them have been found in other mammalian species. However, the equivalents of a particular TLR found in humans are not present in all mammals. For example, a gene encoding a protein similar to TLR10 in humans is present in mice but appears to have been damaged by a retrovirus at some time in the past. On the other hand, TLR11, 12, and 13 are expressed in mouse, but none of them are present in humans. Other mammals may express TLRs that are not found in humans. Other non-mammalian species may have TLRs different from those of mammals; evidence for this is TLR14, found in puffer fish of the genus Takifugu. This may complicate the use of experimental animals as models of human innate immunity.
В ходе лечения определенных болезней может быть целесообразным индуцировать выработку IL12 или IFNy, среди других цитокинов, посредством агонистического воздействия на рецепторы TLR 7/8 (Schurich et al. PLoS Pathology 2013, 9, e1003208 и Jo, J et al. PLoS Pathology 2014, 10, e1004210).During the treatment of certain diseases, it may be useful to induce the production of IL12 or IFNy, among other cytokines, through agonistic effects on TLR 7/8 receptors (Schurich et al. PLoS Pathology 2013, 9, e1003208 and Jo, J et al. PLoS Pathology 2014, 10, e1004210).
Для обзоров толл-подобных рецепторов см. следующие статьи в журналах. Hoffmann, J. A., Nature, 426, р33-38, 2003; Akira, S., Takeda, K., and Kaisho, Т., Annual Rev. Immunology, 21, p335-376, 2003; Ulevitch, R. J., Nature Reviews: Immunology, 4, p512-520, 2004. O'Neil et al. Nature Reviews Immunology 13, 453-460, 2013.For reviews of toll-like receptors, see the following journal articles. Hoffmann, J. A., Nature, 426, p33-38, 2003; Akira, S., Takeda, K., and Kaisho, T., Annual Rev. Immunology, 21, p335-376, 2003; Ulevitch, R. J., Nature Reviews: Immunology, 4, p512-520, 2004. O'Neil et al. Nature Reviews Immunology 13, 453-460, 2013.
Соединения, проявляющие активность в отношении толл-подобных рецепторов, были ранее описаны в таких документах как WO2006117670, WO98/01448, WO9928321, WO 2009067081, WO2012136834, WO2012156498, WO2014076221 и WO2016141092.Compounds exhibiting activity at toll-like receptors have been previously described in WO2006117670, WO98/01448, WO9928321, WO2009067081, WO2012136834, WO2012156498, WO2014076221 and WO2016141 092.
Существует острая необходимость в новых модуляторах толл-подобных рецепторов, обладающих предпочтительной селективностью и улучшенным профилем безопасности по сравнению с соединениями из предшествующего уровня техники.There is an urgent need for new toll-like receptor modulators that have superior selectivity and an improved safety profile compared to prior art compounds.
Краткое описаниеShort description
В настоящем изобретении представлено соединение формулы (I)The present invention provides a compound of formula (I)
или его фармацевтически приемлемая соль, гдеor a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein
R1 представляет собой С4-8алкил, замещенный гидроксилом, углерод в R1, связанный с амином в положении 4 хиназолина, находится в ^-конфигурации,R1 is a C4-8 alkyl substituted with hydroxyl, the carbon in R1 bonded to the amine at position 4 of quinazoline is in the ^ configuration,
R2 представляет собой водород, дейтерий, фтор, хлор, метил, метокси, циклопропил или -C(=O)NHCH3, при этом каждый из метила, метокси и циклопропила необязательно замещен одним или несколькими заместителями (более конкретно одним заместителем), независимо выбранными из фтора и нитрила,R 2 is hydrogen, deuterium, fluorine, chlorine, methyl, methoxy, cyclopropyl or -C(=O)NHCH 3 , wherein each of methyl, methoxy and cyclopropyl is optionally substituted with one or more substituents (more specifically one substituent), independently selected from fluorine and nitrile,
R3 представляет собой водород или дейтерий,R 3 represents hydrogen or deuterium,
R4 представляет собой водород, дейтерий, фтор, метил, -С(=О)ОСН3, -C(=O)N(CH3)2, нитрил, циклопропил, оксадиазолил, при этом каждый из метила и циклопропила необязательно замещен одним или несколькими заместителями (более конкретно 1 или 2 заместителями, более конкретно 1 заместителем), независимо выбранными из фтора, гидроксила и метила, иR4 is hydrogen, deuterium, fluorine, methyl, -C(=O)OCH 3 , -C(=O)N(CH 3 ) 2 , nitrile, cyclopropyl, oxadiazolyl, wherein each of methyl and cyclopropyl is optionally substituted with one or several substituents (more particularly 1 or 2 substituents, more particularly 1 substituent) independently selected from fluorine, hydroxyl and methyl, and
- 1 043991- 1 043991
R5 представляет собой водород, дейтерий, фтор, хлор, метил или метокси, при условии, что по меньшей мере один из R2, R3, R4 и R5 не представляет собой водород.R 5 is hydrogen, deuterium, fluorine, chlorine, methyl or methoxy, provided that at least one of R 2 , R 3 , R 4 and R 5 is not hydrogen.
Продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно демонстрировать улучшенный агонизм (или селективность) в отношении TLR8 по сравнению с TLR7.The products provided in the present invention may advantageously demonstrate improved agonism (or selectivity) for TLR8 compared to TLR7.
В настоящем изобретении также представлены средства, которые содержат или состоят из соединения, представленного в настоящем изобретении, такие как фармацевтическая композиция, иммунологические композиции и наборы.The present invention also provides agents that contain or consist of a compound of the present invention, such as pharmaceutical compositions, immunological compositions and kits.
Продукты и средства, представленные в настоящем изобретении, могут быть применимы в активации или стимуляции TLR8.The products and agents provided in the present invention may be useful in activating or stimulating TLR8.
Продукты и средства, представленные в настоящем изобретении, могут быть применимы в активации или стимуляции иммунного ответа, опосредованного Th1, и/или продуцирования цитокинов, таких как IL12.The products and agents provided in the present invention may be useful in activating or stimulating a Th1-mediated immune response and/or the production of cytokines such as IL12.
Продукты и средства, представленные в настоящем изобретении, в первую очередь применимы в лечении или предупреждении вирусной инфекции или заболевания, вызванного вирусом, более конкретно инфекции, вызванной HBV (вирус гепатита В), или заболевания, вызванного HBV, а также при других показаниях, более конкретно в лечении или предупреждении злокачественной опухоли, рака или аллергии.The products and agents provided in the present invention are primarily useful in the treatment or prevention of viral infection or disease caused by a virus, more particularly HBV infection (hepatitis B virus) or disease caused by HBV, as well as other indications, more specifically in the treatment or prevention of malignancy, cancer or allergies.
Подробное описаниеDetailed description
В настоящем изобретении описывается объект изобретения, описанный ниже, объект, проиллюстрированный ниже, а также объект изобретения, определенный в пунктах формулы изобретения, которые включены в данный документ посредством ссылки.The present invention describes the subject matter described below, the subject matter illustrated below, and the subject matter of the invention as defined in the claims, which are incorporated herein by reference.
В настоящем изобретении представлено соединение формулы (I)The present invention provides a compound of formula (I)
или его фармацевтически приемлемая соль, гдеor a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein
R1 представляет собой С4-8алкил, замещенный гидроксилом, углерод в R1, связанный с амином в положении 4 хиназолина, находится в ^-конфигурации,R1 is a C4-8 alkyl substituted with hydroxyl, the carbon in R1 bonded to the amine at position 4 of quinazoline is in the ^ configuration,
R2 представляет собой водород, дейтерий, фтор, хлор, метил, метокси, циклопропил или -C(=O)NHCH3, при этом каждый из метила, метокси и циклопропила необязательно замещен одним или несколькими заместителями (более конкретно одним заместителем), независимо выбранными из фтора или нитрила,R2 is hydrogen, deuterium, fluorine, chlorine, methyl, methoxy, cyclopropyl or -C(=O)NHCH 3 , wherein each of methyl, methoxy and cyclopropyl is optionally substituted with one or more substituents (more specifically one substituent) independently selected from fluorine or nitrile,
R3 представляет собой водород или дейтерий,R 3 represents hydrogen or deuterium,
R4 представляет собой водород, дейтерий, фтор, метил, -С(=О)ОСН3, -C(=O)N(CH3)2, нитрил, циклопропил, оксадиазолил, при этом каждый из метила и циклопропила необязательно замещен одним или несколькими заместителями (более конкретно 1 или 2 заместителями, более конкретно 1 заместителем), независимо выбранными из фтора, гидроксила или метила, иR4 is hydrogen, deuterium, fluorine, methyl, -C(=O)OCH 3 , -C(=O)N(CH 3 )2, nitrile, cyclopropyl, oxadiazolyl, wherein each of methyl and cyclopropyl is optionally substituted with one or several substituents (more particularly 1 or 2 substituents, more particularly 1 substituent) independently selected from fluorine, hydroxyl or methyl, and
R5 представляет собой водород, дейтерий, фтор, хлор, метил или метокси, при условии, что по меньшей мере один из R2, R3, R4 и R5 не представляет собой водород (т. е. все из R2, R3, R4 и R5 не могут представлять собой Н одновременно).R5 is hydrogen, deuterium, fluorine, chlorine, methyl or methoxy, provided that at least one of R2 , R3 , R4 and R5 is not hydrogen (i.e. all of R2 , R3 , R 4 and R 5 cannot be H at the same time).
R4 может находиться в (R)- или ^-конфигурации.R4 can be in (R)- or ^-configuration.
Продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно демонстрировать улучшенный агонизм (или селективность) в отношении TLR8 по сравнению с TLR7.The products provided in the present invention may advantageously demonstrate improved agonism (or selectivity) for TLR8 compared to TLR7.
Агонисты TLR 7/8 также представляют интерес как адъюванты вакцины благодаря их способности индуцировать ответ, опосредованный Th1. Агонисты TLR8 представляют особый интерес в отношении воздействия на индуцирование выработки IL12, а также других цитокинов.TLR 7/8 agonists are also of interest as vaccine adjuvants due to their ability to induce a Th1-mediated response. TLR8 agonists are of particular interest in their effects on inducing the production of IL12 as well as other cytokines.
В целом для соединений формулы (I) может быть преимущественным то, если они имеют низкий уровень метаболической стабильности или иным образом подвергаются быстрому выведению, что, таким образом, ограничивает концентрацию в большом круге кровообращения и иммунную сверхстимуляцию, которые могут привести к нежелательным эффектам.In general, it may be advantageous for compounds of formula (I) if they have a low level of metabolic stability or are otherwise subject to rapid clearance, thereby limiting concentrations in the systemic circulation and immune overstimulation, which may lead to undesirable effects.
Если не указано иное или если из контекста следует иное, все термины имеют их обычное значение в соответствующей(соответствующих) области(областях).Unless otherwise indicated or unless the context otherwise requires, all terms have their ordinary meaning in their respective field(s).
Термин алкил относится к насыщенному алифатическому углеводороду с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащему определенное количество атомов углерода.The term alkyl refers to a straight-chain or branched-chain saturated aliphatic hydrocarbon containing a specified number of carbon atoms.
Термин алкокси относится к алкильной группе (цепи из атомов углерода и водорода), связанной одинарной связью с кислородом, такой как, например, метоксигруппа или этоксигруппа.The term alkoxy refers to an alkyl group (a chain of carbon and hydrogen atoms) linked by a single bond to an oxygen, such as a methoxy group or an ethoxy group.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают их соли присоединения кислоты и основные соли. Подходящие соли присоединения кислоты образуются из кислот, которые образуют нетоксичные соли. Подходящие основные соли образуются из оснований, которые образуют нетоксичные соли.Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula (I) include their acid addition salts and basic salts. Suitable acid addition salts are formed from acids that form non-toxic salts. Suitable basic salts are formed from bases that form non-toxic salts.
- 2 043991- 2 043991
Соединения, представленные в настоящем изобретении, могут также существовать в несольватированной и сольватированной формах. Термин сольват применяется в данном документе для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение, представленное в настоящем изобретении, и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола.The compounds provided in the present invention may also exist in unsolvated and solvated forms. The term solvate is used herein to describe a molecular complex containing a compound of the present invention and one or more molecules of a pharmaceutically acceptable solvent, such as ethanol.
Термин полиморф относится к способности соединения, представленного в настоящем изобретении, существовать в более чем одной форме или кристаллической структуре.The term polymorph refers to the ability of a compound of the present invention to exist in more than one form or crystal structure.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R1 характеризуется формулой (II)In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I), wherein R1 is characterized by formula (II)
ДЭН ν η = 0, 1 или 2, более конкретно 1 формула (II) или формулой (III)DEN ν η = 0, 1 or 2, more specifically 1 formula (II) or formula (III)
ОНHE
II
V η = 0,1 или 2, более конкретно 1 формула (III) и где R2, R3, R4 и R5 определены выше.V η = 0.1 or 2, more specifically 1 formula (III) and where R2, R3 , R4 and R5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R2 представляет собой трифтометил.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R 2 is triflutomethyl.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R2 представляет собой фтор, хлор или метил, и при этом метил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из фтора и нитрила, и где R1, R3, R4 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R 2 is fluorine, chlorine or methyl, and wherein methyl is optionally substituted with one or more substituents independently selected from fluorine and nitrile, and wherein R 1 , R 3 , R 4 and R5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R2 представляет собой фтор, хлор или метил, и при этом метил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из фтора и нитрила, и где R1 характеризуется формулой (II) или (III), более конкретно формулой (II), и где R3, R4 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R 2 is fluorine, chlorine or methyl, and wherein methyl is optionally substituted with one or more substituents independently selected from fluorine and nitrile, and wherein R 1 is characterized by formula (II ) or (III), more specifically formula (II), and where R 3 , R 4 and R 5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R2 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, и где R1, R3, R4 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R2 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, and wherein R1, R3 , R4 and R5 are as defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R2 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, где R1 характеризуется формулой (II) или (III), более конкретно формулой (II), и где R3, R4 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I), wherein R 2 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, wherein R 1 is characterized by formula (II) or (III), more particularly by formula (II), and wherein R 3 , R 4 and R 5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R5 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, и где R1, R2, R3 и R4 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R5 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, and wherein R1, R2, R3 and R4 are as defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R5 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, где R1 характеризуется формулой (II) или (III), более конкретно формулой (II), и где R2, R3 и R4 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I), wherein R 5 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, wherein R 1 is characterized by formula (II) or (III), more particularly by formula (II), and wherein R 2 , R 3 and R 4 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R4 представляет собой фтор или метил, более конкретно фтор, и при этом метил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из фтора, гидроксила или метила, и где R1, R2, R3 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R4 is fluorine or methyl, more particularly fluorine, and wherein methyl is optionally substituted with one or more substituents independently selected from fluorine, hydroxyl or methyl, and wherein R1, R2, R3 and R5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R4 представляет собой фтор или метил, более конкретно фтор, и при этом метил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из фтора, гидроксила или метила, и где характеризуется формулой (II) или (III), более конкретно формулой (II), и где R2, R3 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R 4 is fluorine or methyl, more particularly fluorine, and wherein methyl is optionally substituted with one or more substituents independently selected from fluorine, hydroxyl or methyl, and wherein characterized by the formula (II) or (III), more specifically formula (II), and where R 2 , R 3 and R 5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R4 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, и где R1, R2, R3 и R5 определены выше.In embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R4 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, and wherein R1, R2, R3 and R5 are as defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), где R4 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, где R1 характеризуется формулой (II) илиIn embodiments, the present invention provides compounds of formula (I) wherein R4 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, wherein R1 is formula (II) or
- 3 043991 (III), более конкретно формулой (II), и где R2, R3 и R5 определены выше.- 3 043991 (III), more specifically formula (II), and where R2, R 3 and R5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения формулы (I), гдеIn embodiments, the present invention provides compounds of formula (I), wherein
R2 представляет собой фтор, хлор, метил, более конкретно фтор, где R4 представляет собой фтор или хлор, более конкретно фтор, где R1 характеризуется формулой (II) или (III), более конкретно формулой (II), и где R3 и R5 определены выше.R2 is fluorine, chlorine, methyl, more particularly fluorine, where R4 is fluorine or chlorine, more particularly fluorine, wherein R1 is characterized by formula (II) or (III), more particularly by formula (II), and where R 3 and R 5 are defined above.
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения с номерами от 1 до 34 (соединения 1-34), как описано в табл. 5 ниже.In embodiments, the present invention provides compounds numbered 1 to 34 (compounds 1-34), as described in Table. 5 below.
Таблица 5Table 5
- 4 043991- 4 043991
- 5 043991- 5 043991
- 6 043991- 6 043991
- 7 043991- 7 043991
- 8 043991- 8 043991
- 9 043991- 9 043991
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9,In embodiments, the present invention provides compounds 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9,
11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 и 26 (как описано, например, в табл. 5).11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 and 26 (as described, for example, in Table 5).
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9,In embodiments, the present invention provides compounds 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9,
11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 20, 21, 23, 24 и 26 (как описано, например, в табл. 5).11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 20, 21, 23, 24 and 26 (as described, for example, in Table 5).
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения 2, 13, 14, 15, 16, 21 и 23 (как описано, например, в табл. 5).In embodiments, the present invention provides compounds 2, 13, 14, 15, 16, 21 and 23 (as described, for example, in Table 5).
В вариантах осуществления в настоящем изобретении представлены соединения 2, 13, 15, 21 и 23 (как описано, например, в табл. 5).In embodiments, the present invention provides compounds 2, 13, 15, 21 and 23 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 2 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides Compound 2 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 13 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides compound 13 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 15 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides compound 15 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 16 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides compound 16 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 21 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides compound 21 (as described, for example, in Table 5).
В одном варианте осуществления в настоящем изобретении представлено соединение 23 (как описано, например, в табл. 5).In one embodiment, the present invention provides compound 23 (as described, for example, in Table 5).
Соединения, представленные в настоящем изобретении, и их фармацевтически приемлемые соль, сольват или полиморф характеризуются активностью как фармацевтические препараты, в частности как модуляторы активности TLR7 и/или TLR8, более конкретно активности TLR8.The compounds of the present invention and their pharmaceutically acceptable salt, solvate or polymorph are characterized by activity as pharmaceuticals, in particular as modulators of TLR7 and/or TLR8 activity, more particularly TLR8 activity.
Термин модулятор включает как ингибитор, так и активатор, где ингибитор относится к соединениям, которые приводят к снижению или инактивации активности рецептора, и где активатор относится к соединениям, которые приводят к увеличению или инициации активности рецептора.The term modulator includes both an inhibitor and an activator, wherein an inhibitor refers to compounds that result in a decrease or inactivation of receptor activity, and where an activator refers to compounds that result in an increase or initiation of receptor activity.
Более конкретно соединения, представленные в настоящем изобретении, и их фармацевтически приемлемые соль, сольват или полиморф могут характеризоваться активностью как агонисты в отношении активности TLR7 и/или TLR8, более конкретно активности TLR8.More specifically, the compounds provided herein and their pharmaceutically acceptable salt, solvate or polymorph may be characterized by agonist activity on TLR7 and/or TLR8 activity, more particularly TLR8 activity.
Продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно демонстрировать улучшенный агонизм (или селективность) в отношении TLR8 по сравнению с TLR7. В качестве альтернативы или в порядке дополнения продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно демонстрировать улучшенный агонизм в отношении TLR8 по сравнению с соединениями, описанными в WO 2012156498.The products provided in the present invention may advantageously demonstrate improved agonism (or selectivity) for TLR8 compared to TLR7. Alternatively or in addition, the products provided in the present invention may advantageously demonstrate improved TLR8 agonism compared to the compounds described in WO 2012156498.
Средства для определения активности TLR7 и/или активности TLR8, более конкретно активности TLR8, известны специалисту в данной области техники. Средства для определения активности TLR7 и/или активности TLR8, более конкретно активности TLR8, могут содержать клетки, которые были генетически сконструированы для экспрессии TLR7 или TLR8, такие как клетки клеточной линии HEK293 с репортерной системой NF-kB-(Iuc).Tools for determining TLR7 activity and/or TLR8 activity, more particularly TLR8 activity, are known to one skilled in the art. Tools for detecting TLR7 activity and/or TLR8 activity, more particularly TLR8 activity, may comprise cells that have been genetically engineered to express TLR7 or TLR8, such as the HEK293 cell line with the NF-kB-(Iuc) reporter system.
Активность TLR7 или TLR8 может быть выражена как наиболее низкое значение эффективной концентрации (LEC), т. е. концентрации, которая индуцирует эффект, по меньшей мере в два раза превышающий стандартное отклонение в рамках анализа.TLR7 or TLR8 activity can be expressed as the lowest effective concentration (LEC), i.e., the concentration that induces an effect of at least twice the standard deviation of the assay.
Продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно стимулировать или активировать продуцирование (или секрецию) цитокинов, более конкретно продуцирование IL12 (у млекопитающего).The products of the present invention may advantageously stimulate or activate the production (or secretion) of cytokines, more particularly the production of IL12 (in a mammal).
В настоящем изобретении представлена фармацевтическая композиция, или иммунологическая композиция, или вакцина, содержащая соединение, представленное в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемые соль, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, разбавителями или носителями.The present invention provides a pharmaceutical composition or immunological composition or vaccine containing a compound of the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, together with one or more pharmaceutically acceptable excipients, diluents or carriers.
Соединение, представленное в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемые соль, или фармацевтическая композиция, представленная в настоящем изобретении, могут использоваться как лекарственный препарат.The compound provided in the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition provided in the present invention can be used as a drug.
Соединение, представленное в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемые соль, или фармацевтическая композиция, представленная в настоящем изобретении, могут использоваться как адъювант вакцины или как иммуномодулятор, в первую очередь для активации или стимуляции ответа, опосредованного Th1, и/или для стимуляции или активации продуцирования одного или нескольких цитокинов, более конкретно IL12.The compound provided in the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition provided in the present invention, can be used as a vaccine adjuvant or as an immunomodulator, primarily to activate or stimulate a Th1-mediated response and/or to stimulate or activate producing one or more cytokines, more specifically IL12.
Соединение, представленное в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемые соль, или фармацевтическая композиция, представленная в настоящем изобретении, могут применяться в лечении или предупреждении заболевания или нарушения, при которых имеет место модулирование TLR7 и/или TLR8, более конкретно TLR8.The compound provided in the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition provided in the present invention, can be used in the treatment or prevention of a disease or disorder in which modulation of TLR7 and/or TLR8, more particularly TLR8, occurs.
Такие заболевания или состояния могут в первую очередь охватывать вирусную инфекцию, заболе- 10 043991 вания, вызванные вирусом, (вызванные вирусом или не вызванные вирусом) рак и аллергию, более конкретно вирусную инфекцию, (вызванные вирусом или не вызванные вирусом) заболевания, вызванные вирусом, и рак, более конкретно вирусную инфекцию и заболевания, вызванные вирусом.Such diseases or conditions may primarily include viral infection, diseases caused by a virus, (whether caused by a virus or not caused by a virus) cancer and allergies, more specifically viral infection, (whether caused by a virus or not caused by a virus) diseases caused by a virus , and cancer, more specifically viral infection and diseases caused by a virus.
Такие заболевания или состояния могут в первую очередь охватывать вирусную инфекцию, более конкретно хроническую вирусную инфекцию, а также (вызванные вирусом или не вызванные вирусом) опухоли, более конкретно злокачественные опухоли или рак.Such diseases or conditions may primarily include viral infection, more particularly chronic viral infection, as well as (viral or non-viral) tumors, more particularly malignant tumors or cancer.
Такие заболевания или состояния более конкретно охватывают вирусную инфекцию, более конкретно инфекцию, вызванную HBV, более конкретно хроническую инфекцию, вызванную HBV.Such diseases or conditions more specifically include viral infection, more particularly HBV infection, more particularly chronic HBV infection.
Такие заболевания или состояния более конкретно охватывают заболевания (или нарушения), вызванные вирусом, более конкретно заболевания (или нарушения), вызванные HBV.Such diseases or conditions more specifically include diseases (or disorders) caused by a virus, more particularly diseases (or disorders) caused by HBV.
Такие заболевания или состояния более конкретно охватывают одно или несколько заболеваний (или нарушений), выбранных среди фиброза печени, воспаления печени, некроза печени, цирроза, заболевания печени и гепатоцеллюлярной карциномы.Such diseases or conditions more specifically include one or more diseases (or disorders) selected from liver fibrosis, liver inflammation, liver necrosis, cirrhosis, liver disease and hepatocellular carcinoma.
Такие заболевания или состояния более конкретно охватывают (вызванные вирусом или не вызванные вирусом) опухоли, более конкретно злокачественные опухоли или рак.Such diseases or conditions more specifically include (viral or non-viral) tumors, more particularly malignant tumors or cancer.
Такие заболевания или состояния более конкретно охватывают аллергию.Such diseases or conditions more specifically cover allergies.
Термин млекопитающее охватывает млекопитающих, отличных от человека, а также людей. Млекопитающие, отличные от человека, в первую очередь включают млекопитающих, представляющих собой овец, крупный рогатый скот, свиней, собак, кошек, грызунов и мышей, а также приматов, отличных от человека. Термин человек(люди) более конкретно охватывает человека(людей), который(которые) инфицирован(инфицированы) HBV, более конкретно который(которые) имеет(имеют) хроническую инфекцию, вызванную HBV.The term mammal includes non-human mammals as well as humans. Non-human mammals primarily include mammals consisting of sheep, cattle, pigs, dogs, cats, rodents and mice, as well as non-human primates. The term person(s) more specifically covers person(s) who are infected with HBV, more specifically who(s) have chronic HBV infection.
Термин лечение не ограничен значением радикального лечения, а включает любое лечение, которое специалист среднего уровня квалификации в данной области или квалифицированный врач будут рассматривать как терапию или как часть терапии. Таким образом, термин лечение может подразумевать лечение для облегчения состояния, виды паллиативного лечения, лечение, связанное с ремиссией.The term treatment is not limited to the meaning of radical treatment, but includes any treatment that a person of ordinary skill in the art or a qualified physician would consider as therapy or as part of therapy. Thus, the term treatment can imply treatment for alleviation of the condition, types of palliative treatment, treatment associated with remission.
Продукты, представленные в настоящем изобретении, могут преимущественно показывать улучшенный клиренс (из большого круга кровообращения млекопитающего), в первую очередь по сравнению с агонистами TLR7 и/или TLR8 из предшествующего уровня техники.The products provided by the present invention may advantageously exhibit improved clearance (from the mammalian systemic circulation), primarily compared to prior art TLR7 and/or TLR8 agonists.
Соединения, представленные в настоящем изобретении, можно вводить в виде кристаллических или аморфных продуктов. Их можно получать, например, в виде твердых прессованных масс, порошков или пленок посредством таких способов, как осаждение, кристаллизация, сублимационное высушивание, высушивание распылением или высушивание выпариванием. Их можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими соединениями, представленными в настоящем изобретении, или в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами. Как правило, их будут вводить в виде состава в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами.The compounds provided in the present invention can be administered as crystalline or amorphous products. They can be obtained, for example, in the form of solid compacts, powders or films by methods such as precipitation, crystallization, freeze-drying, spray-drying or evaporation-drying. They can be administered alone or in combination with one or more other compounds provided in the present invention, or in combination with one or more other drugs. Typically, they will be administered as a formulation in combination with one or more pharmaceutically acceptable excipients.
Термин вспомогательное вещество применяют в данном документе для описания любого ингредиента, отличного от соединения(соединений), представленного(представленных) в настоящем изобретении. Выбор вспомогательного вещества в большей степени зависит от таких факторов, как способ введения, влияние вспомогательного вещества на растворимость и стабильность и природа лекарственной формы.The term excipient is used herein to describe any ingredient other than the compound(s) provided in the present invention. The choice of excipient depends largely on factors such as the route of administration, the effect of the excipient on solubility and stability, and the nature of the dosage form.
Соединения, представленные в настоящем изобретении, или любая их подгруппа могут быть составлены в различные фармацевтические формы для целей введения. В качестве соответствующих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно применяемые для системно вводимых лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций, представленных в настоящем изобретении, эффективное количество соединения, необязательно в форме соли, в качестве активного ингредиента объединяют в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требуемой для введения. Данные фармацевтические композиции предпочтительно представлены в виде стандартной лекарственной формы, подходящей, например, для перорального, ректального или чрескожного введения. Например, при получении композиций в виде лекарственной формы для перорального введения можно применять любую из общепринятых фармацевтических сред, а именно, например, воду, гликоли, масла, спирты и т. п. в случае жидких препаратов для перорального введения, таких как суспензии, сиропы, настойки, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазывающие средства, связывающие средства, разрыхлители и т. п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Благодаря простоте введения таблеток и капсул они представляют собой наиболее преимущественные стандартные лекарственные формы для перорального введения, в случае которых, несомненно, используют твердые фармацевтические носители. Также включены препараты в твердой форме, которые можно преобразовать в жидкие формы непосредственно перед применением. В композиции, подходящей для чрескожного введения, носитель необязательно содержит средство, повышающее проницаемость, и/или подходящее смачивающее средство, необязательно в комбинации с подходящими добавками лю- 11 043991 бой природы в минимальных пропорциях, при этом добавки не оказывают никакого существенного вредного воздействия на кожу. Указанные добавки могут облегчать введение через кожу и/или могут быть полезными для получения требуемых композиций. Данные композиции можно вводить различными путями, например, посредством трансдермального пластыря, путем точечного нанесения, в виде мази. Соединения, представленные в настоящем изобретении, можно также вводить посредством ингаляции или инсуффляции с помощью способов и составов, применяемых в данной области техники для введения таким путем. Таким образом, соединения, представленные в настоящем изобретении, в основном можно вводить в легкие в форме раствора, суспензии или сухого порошка.The compounds provided in the present invention, or any subgroup thereof, can be formulated into various pharmaceutical forms for administration purposes. All compositions commonly used for systemically administered drugs may be mentioned as suitable compositions. To prepare the pharmaceutical compositions of the present invention, an effective amount of the compound, optionally in salt form, as the active ingredient is combined in a uniform mixture with a pharmaceutically acceptable carrier, which carrier may take a wide variety of forms depending on the form of preparation required for administration. These pharmaceutical compositions are preferably presented in unit dosage form, suitable, for example, for oral, rectal or transdermal administration. For example, when preparing the compositions in the form of a dosage form for oral administration, any of the conventional pharmaceutical vehicles can be used, namely, for example, water, glycols, oils, alcohols, etc. in the case of liquid preparations for oral administration, such as suspensions, syrups , tinctures, emulsions and solutions; or solid carriers such as starches, sugars, kaolin, diluents, lubricants, binders, disintegrants, etc., in the case of powders, pills, capsules and tablets. Due to the ease of administration of tablets and capsules, they represent the most advantageous unit dosage forms for oral administration, in which case solid pharmaceutical carriers are of course used. Also included are drugs in solid form that can be converted to liquid forms immediately before use. In a composition suitable for transdermal administration, the carrier optionally contains a permeation agent and/or a suitable wetting agent, optionally in combination with suitable additives of any nature in minimal proportions, the additives not having any significant deleterious effect on the skin. . These additives may facilitate transdermal administration and/or may be useful in obtaining the desired compositions. These compositions can be administered in various ways, for example, through a transdermal patch, by spot application, or as an ointment. The compounds presented in the present invention can also be administered by inhalation or insufflation using methods and compositions used in the art for administration by such route. Thus, the compounds presented in the present invention can generally be administered to the lungs in the form of a solution, suspension or dry powder.
Особенно предпочтительным является составление вышеуказанных фармацевтических композиций в виде единичной лекарственной формы для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, используемая в данном документе, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно заданное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (в том числе делимые или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, пластинки, суппозитории, растворы или суспензии для инъекций и т. п., а также их отдельные множества.It is particularly preferred to formulate the above pharmaceutical compositions in unit dosage form for ease of administration and uniformity of dosage. Unit dosage form as used herein refers to physically discrete units suitable as unitary dosages, each unit containing a predetermined amount of active ingredient calculated to produce the desired therapeutic effect, in combination with the required pharmaceutical carrier. Examples of such unit dosage forms are tablets (including divisible or coated tablets), capsules, pills, powder packets, wafers, suppositories, injectable solutions or suspensions, etc., as well as individual pluralities thereof.
Специалисты среднего уровня квалификации в области лечения инфекционных заболеваний смогут определить эффективное количество для введения индивидууму, нуждающемуся в этом. В целом предполагается, что эффективное суточное количество будет составлять от 0,01 мг/кг до 200 мг/кг массы тела. Может оказаться целесообразным вводить требуемую дозу в виде двух, трех, четырех или более частей дозы через соответствующие интервалы в течение суток. Указанные части дозы могут быть составлены в виде единичных лекарственных форм, например, содержащих от 0,1 до 1000 мг и, в частности, от 1 до 200 мг активного ингредиента на единичную лекарственную форму. Также может быть целесообразным вводить требуемую дозу менее часто, например, раз или дважды в неделю, или, в редких случаях, помесячно.Those of ordinary skill in the art of treating infectious diseases will be able to determine an effective amount to administer to an individual in need thereof. In general, effective daily amounts are expected to range from 0.01 mg/kg to 200 mg/kg body weight. It may be advisable to administer the required dose in two, three, four or more portions at appropriate intervals throughout the day. Said dosage units may be formulated as unit dosage forms, for example containing from 0.1 to 1000 mg and in particular from 1 to 200 mg of active ingredient per unit dosage form. It may also be advisable to administer the required dose less frequently, such as once or twice a week, or, in rare cases, monthly.
Эффективное количество может представлять собой количество, которого достаточно для стимуляции или активации (инициации активности) рецептора TLR8 или рецепторов TLR8 и TLR7.An effective amount may be an amount that is sufficient to stimulate or activate (initiate activity) the TLR8 receptor or the TLR8 and TLR7 receptors.
Эффективное количество может представлять собой количество, которого достаточно для стимуляции или активации продуцирования (или секреции) цитокинов, более конкретно IL12.An effective amount may be an amount that is sufficient to stimulate or activate the production (or secretion) of cytokines, more particularly IL12.
Точная дозировка и частота введения зависят от применяемого соединения, конкретного состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста, веса и общего физического состояния конкретного пациента, а также другого медикаментозного лечения, которое может получать индивидуум, что хорошо известно специалистам в данной области техники. Кроме того, очевидно, что эффективное количество можно уменьшать или увеличивать в зависимости от реакции субъекта, подвергаемого лечению, и/или в зависимости от оценки лечащего врача, назначающего соединения, представленные в настоящем изобретении. Следовательно, вышеупомянутые диапазоны эффективного количества являются только рекомендациями и не предназначены для ограничения в какой-либо степени объема или применения настоящего изобретения.The exact dosage and frequency of administration will depend on the compound used, the specific condition being treated, the severity of the condition being treated, the age, weight and general physical condition of the particular patient, as well as other drug treatments that the individual may be receiving, as is well known to those skilled in the art. technology. In addition, it is obvious that the effective amount can be reduced or increased depending on the response of the subject being treated and/or depending on the assessment of the attending physician prescribing the compounds presented in the present invention. Therefore, the above effective amount ranges are guidelines only and are not intended to limit in any way the scope or application of the present invention.
В настоящем изобретении также представлен продукт или набор, содержащий первое соединение и второе соединение в виде объединенного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в предупреждении или лечении инфекции, вызванной HBV, или заболевания, вызванного HBV, у млекопитающего, нуждающегося в этом, где указанное первое соединение отличается от указанного второго соединения.The present invention also provides a product or kit containing a first compound and a second compound in a combined formulation for simultaneous, separate or sequential use in the prevention or treatment of HBV infection or disease in a mammal in need thereof, wherein specified the first connection is different from said second connection.
Указанное первое соединение является соединением, представленным в настоящем изобретении или входящим в состав фармацевтической композиции, представленной в настоящем изобретении, а указанное второе соединение является ингибитором HBV.Said first compound is a compound provided in the present invention or included in a pharmaceutical composition provided in the present invention, and said second compound is an HBV inhibitor.
Указанное второе соединение может, например, представлять собой ингибитор HBV, который выбран из:Said second compound may, for example, be an HBV inhibitor which is selected from:
цитокинов, характеризующихся ингибирующей активностью в отношении репликации HBV, таких как интерферон, более конкретно интерферон-альфа, замещенных сульфонамидов, характеризующихся ингибирующей активностью в отношении сборки капсидов HBV и/или характеризующихся ингибирующей активностью в отношении HBsAg, таких как соединения, описанные в WO 2014033170, WO 2014184350, или другие комбинации (например, WO 2017181141), или карбоновые кислоты, как описано в WO 2017140750, аналогов антиретровирусных нуклеозидов, более конкретно ингибиторов обратной транскриптазы или ингибиторов полимеразы, таких как ламивудин (или 3ТС, регистрационный номер согласно CAS 134678-17-4), адефовир дипивоксил, тенофовира дизопроксила фумарат, противовирусной вакцины или иммунологических композиций, более конкретно вакцины против HBV или иммунологических композиций, и их комбинаций.cytokines having inhibitory activity against HBV replication, such as interferon, more particularly interferon-alpha, substituted sulfonamides having inhibitory activity against HBV capsid assembly and/or having inhibitory activity against HBsAg, such as the compounds described in WO 2014033170, WO 2014184350, or other combinations (eg WO 2017181141), or carboxylic acids as described in WO 2017140750, antiretroviral nucleoside analogues, more particularly reverse transcriptase inhibitors or polymerase inhibitors such as lamivudine (or 3TC, registration number according to CAS 134678-17 -4), adefovir dipivoxil, tenofovir disoproxil fumarate, antiviral vaccine or immunological compositions, more particularly HBV vaccine or immunological compositions, and combinations thereof.
Более конкретно, указанное второе соединение может представлять собой, например, ингибиторMore specifically, said second compound may be, for example, an inhibitor
- 12 043991- 12 043991
HBV, который выбран из:HBV, which is selected from:
замещенных сульфонамидов, характеризующихся ингибирующей активностью в отношении сборки капсидов HBV и/или характеризующихся ингибирующей активностью в отношении HBsAg, таких как соединения, описанные в WO 2014033170, WO 2014184350, или другие комбинации (например, WOsubstituted sulfonamides having inhibitory activity against HBV capsid assembly and/or having inhibitory activity against HBsAg, such as the compounds described in WO 2014033170, WO 2014184350, or other combinations (eg WO
2017181141), или карбоновые кислоты, как описано в WO 2017140750, ламивудина (или 3ТС, регистрационный номер согласно CAS 134678-17-4), адефовира дипивоксила, тенофовира дизопроксила фумарата, противовирусных вакцин и противовирусных иммунологических композиций, более конкретно вакцин против HBV и иммунологических композиций против HBV, и их комбинаций.2017181141), or carboxylic acids as described in WO 2017140750, lamivudine (or 3TC, registration number according to CAS 134678-17-4), adefovir dipivoxil, tenofovir disoproxil fumarate, antiviral vaccines and antiviral immunological compositions, more particularly vaccines against HBV and immunological compositions against HBV, and combinations thereof.
В настоящем изобретении также предусмотрены фармацевтически приемлемые пролекарства на основе соединений, представленных в настоящем изобретении, и их применение в терапии, более конкретно в лечении или предупреждении инфекции, вызванной HBV, более конкретно хронической инфекции, вызванной HBV.The present invention also provides pharmaceutically acceptable prodrugs of the compounds provided herein and their use in therapy, more particularly in the treatment or prevention of HBV infection, more particularly chronic HBV infection.
Под термином пролекарство подразумевается, как правило, предшественник обозначенного соединения, который после введения субъекту превращается в соединение in vivo посредством химического или физиологического процесса, такого как сольволиз или ферментативное расщепление, или в физиологических условиях (например, пролекарство при нахождении в условиях физиологического рН превращается в соединение, представленное в настоящем изобретении). Фармацевтически приемлемое пролекарство более конкретно может представлять собой пролекарство, которое является нетоксичным, биологически переносимым и иным образом биологически подходящим для введения субъекту.The term prodrug generally means a precursor of the designated compound that, upon administration to a subject, is converted to the compound in vivo by a chemical or physiological process such as solvolysis or enzymatic degradation, or under physiological conditions (e.g., the prodrug, when exposed to physiological pH conditions, is converted to compound provided in the present invention). More specifically, a pharmaceutically acceptable prodrug may be a prodrug that is non-toxic, biologically tolerable, and otherwise biologically suitable for administration to a subject.
В настоящем изобретении также предусмотрены фармацевтически приемлемые метаболиты соединений, представленных в настоящем изобретении, и их применение в терапии, более конкретно в лечении или предупреждении заболевания или нарушения, при которых имеет место модулирование TLR7 и/или TLR8, более конкретно TLR8, более конкретно инфекции, вызванной HBV, более конкретно хронической инфекции, вызванной HBV, или в лечении рака.The present invention also provides pharmaceutically acceptable metabolites of the compounds provided herein and their use in therapy, more particularly in the treatment or prevention of a disease or disorder in which modulation of TLR7 and/or TLR8, more particularly TLR8, more particularly infection, occurs. caused by HBV, more particularly chronic infection caused by HBV, or in the treatment of cancer.
Фармацевтически активный метаболит, как правило, означает фармакологически активный продукт метаболизма соединения, представленного в настоящем изобретении, или его соли в организме. Пролекарства на основе соединения и активные метаболиты соединения могут быть определены с применением стандартных методик, известных или доступных в уровне техники.A pharmaceutically active metabolite generally means a pharmacologically active product of metabolism of a compound of the present invention or a salt thereof in the body. Prodrugs of a compound and active metabolites of a compound can be determined using standard techniques known or available in the art.
Термин содержащий, который является синонимичным с включающий или содержащим в себе, является неограничивающим и не исключает дополнительные, не упомянутые элемент(элементы), ингредиент(ингредиенты) или стадию(стадии) способа, при этом термин состоящий из является ограничивающим термином, который исключает любые дополнительные элемент, стадию или ингредиент, которые не упомянуты в явной форме.The term containing, which is synonymous with including or containing, is non-limiting and does not exclude additional, unmentioned element(s), ingredient(s) or process step(s), and the term consisting of is a limiting term that excludes any an additional element, step or ingredient that is not explicitly mentioned.
Термин по сути состоящий из является частично неограничивающим, который не исключает дополнительные, не упомянутые элемент(элементы), стадию(стадии) или ингредиент(ингредиенты), при условии, что такие дополнительные элемент(элементы), стадия(стадии) или ингредиент(ингредиенты) не оказывают существенного влияния на основные и новые свойства, представленные в настоящем изобретении.The term essentially consisting of is a partially non-limiting term that does not exclude additional, not mentioned element(s), step(s) or ingredient(s), provided that such additional element(s), step(s) or ingredient(s) ) do not significantly affect the basic and novel properties presented in the present invention.
Следовательно, термин содержащий (или содержат(содержит)) включает термин состоящий из (состоят(состоит) из), а также термин по сути состоящий из (по сути состоят(состоит) из). Соответственно, термин содержащий (или содержат(содержит)) в настоящем изобретении более конкретно подразумевает охватывание термина состоящий из (состоят(состоит) из) и термина по сути состоящий из (по сути состоят(состоит) из).Therefore, the term containing (or contain) includes the term consisting of (consisting of), as well as the term essentially consisting of (essentially consisting of). Accordingly, the term comprising (or comprises) in the present invention is more specifically meant to cover the term consisting of (consist of) and the term essentially consisting of (essentially consisting of).
С целью помочь читателю описание было разделено на различные параграфы или разделы. Такие разделения не должны рассматриваться как разобщение сути параграфа или раздела от сути другого параграфа или раздела. Наоборот, описание охватывает все комбинации различных разделов, параграфов и предложений, которые могут быть рассмотрены специалистом в данной области техники.To assist the reader, the description has been divided into various paragraphs or sections. Such divisions should not be construed as dividing the essence of a paragraph or section from the essence of another paragraph or section. Rather, the description covers all combinations of various sections, paragraphs and sentences that may be considered by one skilled in the art.
Каждое из соответствующих раскрытий всех источников, упомянутых в данном документе, конкретно включено посредством ссылки. Следующие примеры предложены только для иллюстрации, а не для ограничения.Each of the relevant disclosures of all sources referenced herein is specifically incorporated by reference. The following examples are offered for illustrative purposes only and not for limitation.
- 13 043991- 13 043991
ПримерыExamples
Таблица 1Table 1
Получение соединений.Receiving connections.
2-Амино-5-бромхиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-6,7-дифторхиназолин-4-ола. Rt: 1,16, масса/заряд=240/242 [М+Н], способ: G.2-Amino-5-bromoquinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-6,7-difluoroquinazolin-4-ol. Rt: 1.16, mass/charge=240/242 [M+H], method: G.
(R)-2-((2-Амино-5-бромхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол. Раствор 2-амино-5-бромхиназолин-4ола (2,4 г, 8,68 ммоль), D-норлейцинола (2,75 г, 23,43 ммоль), DBU (3,9 мл, 26,0 ммоль) и ВОР (4,61 г, 10,42 ммоль) в безводном DMF (40 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч и концентрировали с получением указанного в заголовке продукта. Rt: 2,16, масса/заряд=339/341 [М+Н], способ: D.(R)-2-((2-Amino-5-bromoquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol. A solution of 2-amino-5-bromoquinazolin-4ol (2.4 g, 8.68 mmol), D-norleucinol (2.75 g, 23.43 mmol), DBU (3.9 ml, 26.0 mmol) and BOP (4.61 g, 10.42 mmol) in anhydrous DMF (40 ml) was stirred at RT. for 2 hours and concentrated to give the title product. Rt: 2.16, mass/charge=339/341 [M+H], method: D.
(R)-2-((2-Амино-5-циклопропилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (1). Смесь смеси (R)-2-((2амино-5-бромхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ола (200 мг, 0,59 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (151 мг, 1,77 ммоль) и фосфата калия (375 мг, 1,77 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (0,1 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли PdCl2(dppf) (38 мг, 0,06 ммоль) и смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч. Твердые вещества удаляли посредством фильтрации и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество разделяли с помощью простого эфира и воды, органический слой высушивали (MgSO4), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворитель из фильтрата концентрировали in vacuo. Смесь очищали посредством колоночной хроматографии на диоксиде кремния с применением градиента от CH2Cl2 до [CH2Cl2: СН3ОН: NH3 (9:1:0,1)].(R)-2-((2-Amino-5-cyclopropylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (1). A mixture of (R)-2-((2amino-5-bromoquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (200 mg, 0.59 mmol), cyclopropylboronic acid (151 mg, 1.77 mmol) and phosphate potassium (375 mg, 1.77 mmol) in dioxane (10 ml) and water (0.1 ml) was purged with nitrogen for 10 min. PdCl 2 (dppf) (38 mg, 0.06 mmol) was added and the mixture was stirred at 100°C for 18 hours. Solids were removed by filtration and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The crude material was separated with ether and water, the organic layer was dried (MgSO 4 ), the solids were removed by filtration and the solvent from the filtrate was concentrated in vacuo. The mixture was purified by silica column chromatography using a gradient from CH 2 Cl 2 to [CH 2 Cl 2 : CH3OH: NH 3 (9:1:0.1)].
Общая процедура А. Раствор 2-аминохиназолин-4-ола (2,4 г, 8,68 ммоль), D-норлейцинола (2 экв.), DBU (3 экв.) и ВОР (1,3 экв.) в безводном DMF перемешивали при к.т. в течение 2 ч и концентрировали с получением указанного в заголовке продукта.General Procedure A. A solution of 2-aminoquinazolin-4-ol (2.4 g, 8.68 mmol), D-norleucinol (2 eq.), DBU (3 eq.), and BOP (1.3 eq.) in anhydrous DMF was stirred at room temperature. for 2 hours and concentrated to give the title product.
2-Амино-5-фторхиназолин-4-ол. В автоклав объемом 500 мл помещали 2-амино-6-фторбензойную кислоту (25 г, 161,16 ммоль), EtOH (350 мл), цианамид (10,16 г, 241,74 ммоль) и концентрированную HCl (8 мл). Смесь перемешивали при 80°С в течение 16 ч, затем охлаждали до к.т. и твердое вещество выделяли посредством фильтрации, промывали с помощью этанола и высушивали под вакуумом. Rt: 0,93, масса/заряд=180 [М+Н], Способ: Н. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 6,98 (m, 1H), 7,13 (d, J=8,3 Гц, 1 H), 7,51 (br. s., 2H), 7,64 (m, 1H), 12,30 (br. s, 1H) (R)-2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (2). Раствор 2-амино-5-фторхиназолин-4ола (1,07 г, 6 ммоль), DBU (1,8 мл, 12 ммоль) в безводном DMF (30 мл) перемешивали при к.т. в атмосфере азота. Добавляли порциями ВОР (3,2 г, 7,2 ммоль) и перемешивали в течение 15 минут. Добавляли D-норлейцинол (1,41 г, 12 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 2 дней. Смесь выливали в ледяную воду и перемешивали в течение 1 ч. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc, объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором. Органическую фазу высушивали над MgSO4, твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворитель из фильтрата удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством препаративной HPLC (XBridge Prep C18 OBD-10 мкм, 50x150 мм, подвижная фаза: 0,25% водн. NH4HCO3, CH3CN) с получением 0,81 г указанного в заголовке соединения.2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-ol. 2-Amino-6-fluorobenzoic acid (25 g, 161.16 mmol), EtOH (350 mL), cyanamide (10.16 g, 241.74 mmol) and concentrated HCl (8 mL) were placed in a 500 mL autoclave. The mixture was stirred at 80°C for 16 hours, then cooled to room temperature. and the solid was isolated by filtration, washed with ethanol and dried under vacuum. Rt: 0.93, mass/charge=180 [M+H], Method: H. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 6.98 (m, 1H), 7.13 (d, J =8.3 Hz, 1H), 7.51 (br. s., 2H), 7.64 (m, 1H), 12.30 (br. s., 1H) (R)-2-((2 -Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (2). A solution of 2-amino-5-fluoroquinazolin-4ol (1.07 g, 6 mmol), DBU (1.8 mL, 12 mmol) in anhydrous DMF (30 mL) was stirred at room temperature. in a nitrogen atmosphere. BOP (3.2 g, 7.2 mmol) was added portionwise and stirred for 15 minutes. D-norleucinol (1.41 g, 12 mmol) was added and stirring was continued for 2 days. The mixture was poured into ice water and stirred for 1 hour. The aqueous layer was extracted with EtOAc, and the combined organic layers were washed with water and brine. The organic phase was dried over MgSO 4 , solids were removed by filtration and the solvent in the filtrate was removed under reduced pressure. The crude material was purified by preparative HPLC (XBridge Prep C18 OBD-10 µm, 50x150 mm, mobile phase: 0.25% aq NH4HCO3, CH3CN) to obtain 0.81 g of the title compound.
5-(Трифторметил)хиназолин-2,4-диамин. В герметично закрытой пробирке смесь 2-фтор-6(трифторметил)бензонитрила (4,5 г, 23,8 ммоль) и карбоната гуанидина (8,57 г, 47,6 ммоль) в DMA (54 мл) перемешивали при 130°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли с помощью EtOAc и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток смешивали с холодной водой и твердое вещество выделяли посредством фильтрации с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества (5,2 г) и применяли на следующей стадии без дополнительной очистки.5-(Trifluoromethyl)quinazoline-2,4-diamine. In a hermetically sealed test tube, a mixture of 2-fluoro-6(trifluoromethyl)benzonitrile (4.5 g, 23.8 mmol) and guanidine carbonate (8.57 g, 47.6 mmol) in DMA (54 ml) was stirred at 130°C for 3 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature, diluted with EtOAc and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was mixed with cold water and the solid was isolated by filtration to give the title compound as a beige solid (5.2 g) and used in the next step without further purification.
2-Амино-5-(трифторметил)хиназолин-4-ол. В колбе Шленка суспензию 5-(трифторметил)хиназолин-2,4диамина (5,2 г, 0,02 моль) в NaOH (1M, водн., 329 мл) перемешивали при 100°С в течение 5 ч. рН регулировали до значения 2-3 посредством добавления HCl (1 н., водн.). Смесь концентрировали in vacuo. Добавляли воду и твердое вещество выделяли посредством фильтрации с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества (4,25 г). Rt: 1,79 мин, масса/заряд= 169 [М+Н], способ I.2-Amino-5-(trifluoromethyl)quinazolin-4-ol. In a Schlenk flask, a suspension of 5-(trifluoromethyl)quinazoline-2,4diamine (5.2 g, 0.02 mol) in NaOH (1M, aq, 329 ml) was stirred at 100°C for 5 hours. The pH was adjusted to 2-3 by adding HCl (1N, aq). The mixture was concentrated in vacuo. Water was added and the solid was isolated by filtration to give the title product as a white solid (4.25 g). Rt: 1.79 min, mass/charge= 169 [M+H], method I.
(R)-2-((2-Амино-5-(трифторметил)хиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (3).(R)-2-((2-Amino-5-(trifluoromethyl)quinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (3).
Раствор 2-амино-5-(трифторметил)хиназолин-4-ола (1,5 г, 6,55 ммоль), D-норлейцинола (2,30 г, 19,6A solution of 2-amino-5-(trifluoromethyl)quinazolin-4-ol (1.5 g, 6.55 mmol), D-norleucinol (2.30 g, 19.6
- 14 043991 ммоль), DBU (2,94 мл, 19,6 ммоль) и бензотриазол-1-илокситриспирролидинфосфония гексафторфосфата (РуВОР) (4,43 г, 8,51 ммоль) в безводном DMF (30 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч и концентрировали с получением указанного в заголовке продукта.- 14043991 mmol), DBU (2.94 ml, 19.6 mmol) and benzotriazol-1-yloxytrispyrrolidinephosphonium hexafluorophosphate (PyBOP) (4.43 g, 8.51 mmol) in anhydrous DMF (30 ml) were stirred at room temperature. T. for 2 hours and concentrated to give the title product.
(R)-2-((2-Амино-5-(трифторметил)хиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ола фумарат. Фумаровую кислоту (346 мг, 2,99 ммоль) добавляли к раствору (R)-2-((2-амино-5-(трифторметил)хиназолин-4ил)амино)гексан-1-ола (0,98 г, 2,99 ммоль) в СН3ОН (14,3 мл). Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 20 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении, затем высушивали in vacuo с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка (1,3 г).(R)-2-((2-Amino-5-(trifluoromethyl)quinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol fumarate. Fumaric acid (346 mg, 2.99 mmol) was added to a solution of (R)-2-((2-amino-5-(trifluoromethyl)quinazolin-4yl)amino)hexan-1-ol (0.98 g, 2. 99 mmol) in CH3OH (14.3 ml). The resulting solution was stirred at room temperature. for 20 hours. The solvent was removed under reduced pressure, then dried in vacuo to obtain the title compound as a white powder (1.3 g).
(R)-2-((2-Амино-7-бромхиназолин-4-ил)амино)гексан-1 -ол. Раствор 2-амино-7-бромхиназолин4(3H)-она (3,00 г, 12,5 ммоль), D-норлейцинола (3,66 г, 31,2 ммоль), (DBU) (4,67 мл, 31,2 ммоль) и РуВОР (8,45 г, 16,2 ммоль) в безводном (55 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч и концентрировали с получением указанного в заголовке продукта. Rt: 1,32 мин, масса/заряд=339/341 [М+Н], способ J3.(R)-2-((2-Amino-7-bromoquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol. Solution of 2-amino-7-bromoquinazolin4(3H)-one (3.00 g, 12.5 mmol), D-norleucinol (3.66 g, 31.2 mmol), (DBU) (4.67 ml, 31 .2 mmol) and RuBOR (8.45 g, 16.2 mmol) in anhydrous (55 ml) were stirred at room temperature. for 2 hours and concentrated to give the title product. Rt: 1.32 min, mass/charge=339/341 [M+H], method J3.
(R)-2-Амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7-карбонитрил (4). В герметично закрытой пробирке раствор (R)-2-((2-амино-7-бромхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ола (1,43 г, 4,22 ммоль), Zn(CN)2 (594 мг, 5,06 ммоль) и Pd(PPh3)4 (487 мг, 0,422 ммоль; 0,1 экв.) в диоксане (31 мл) дегазировали путем барботирования N2 и перемешивали при 100°С в течение 16 ч. Добавляли дополнительное количество Zn(CN)2 (297 мг; 2,53 ммоль) и Pd(PPh3)4 (487 мг, 0,422 ммоль), смесь дегазировали с использованием азота и перемешивали при 110°С в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и воды. Органический слой высушивали над MgSO4, твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворитель удаляли при пониженном давлении, затем очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением градиента подвижной фазы CH2Cl2/CH3OH (от 100/0 до 80/20) с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-оранжевого твердого вещества (840 мг).(R)-2-Amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)quinazolin-7-carbonitrile (4). In a hermetically sealed test tube, a solution of (R)-2-((2-amino-7-bromoquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (1.43 g, 4.22 mmol), Zn(CN) 2 ( 594 mg, 5.06 mmol) and Pd(PPh 3 ) 4 (487 mg, 0.422 mmol; 0.1 eq.) in dioxane (31 ml) were degassed by bubbling N2 and stirred at 100°C for 16 hours. Add additional Zn(CN) 2 (297 mg, 2.53 mmol) and Pd(PPh 3 ) 4 (487 mg, 0.422 mmol), the mixture was degassed using nitrogen and stirred at 110°C for 4 hours. The reaction mixture was diluted with EtOAc and water. The organic layer was dried over MgSO 4 , solids were removed by filtration and the solvent was removed under reduced pressure, then purified by silica gel column chromatography using a mobile phase gradient of CH 2 Cl 2 /CH 3 OH (100/0 to 80/20) with obtaining the title compound as a pale orange solid (840 mg).
(R)-2-Амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7-карбогидразид. К раствору метил-Щ)-2амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7-карбоксилата (1,50 г, 4,71 ммоль) в EtOAc (30 мл) добавляли гидразин (3,00 мл, 96,4 ммоль). Раствор нагревали при 80°С в течение 18 ч, затем охлаждали до к.т. Неочищенное вещество выпаривали in vacuo с получением 1,55 г указанного в заголовке соединения в виде бледно-оранжевого твердого вещества, которое применяли без дополнительной очистки на следующей стадии.(R)-2-Amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)quinazoline-7-carbohydrazide. Hydrazine (3, 00 ml, 96.4 mmol). The solution was heated at 80°C for 18 hours, then cooled to room temperature. The crude material was evaporated in vacuo to obtain 1.55 g of the title compound as a pale orange solid, which was used without further purification in the next step.
(R)-2-((2-Амино-7-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)хиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (5). В реакторе Шленка раствор Щ)-2-амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7-карбогидразида (1,30 г, 3,88 ммоль), триэтилортоформиата (22,8 мл, 137 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (57 мг, 0,33 ммоль) перемешивали при 90°С в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли с помощью EtOAc и промывали с помощью NaHCO3 (насыщ., водн.), воды и солевого раствора. Органический слой высушивали над MgSO4, твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворитель из фильтрата удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством хроматографии с обращенной фазой (YMC-actus Triart-C18, 10 мкм, 30x150 мм, градиент от 85% водн. NH4HCO3 0,2%, 15% ACN до 45% водн. NH4HCO3 0,2%, 55% ACN) с получением указанного в заголовке продукта (25 мг).(R)-2-((2-Amino-7-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)quinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (5). In a Schlenk reactor, a solution of A)-2-amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)quinazoline-7-carbohydrazide (1.30 g, 3.88 mmol), triethyl orthoformate (22.8 ml, 137 mmol) and p-toluenesulfonic acid (57 mg, 0.33 mmol) were stirred at 90°C for 17 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was diluted with EtOAc and washed with NaHCO 3 (sat., aq.), water and brine. The organic layer was dried over MgSO 4 , solids were removed by filtration, and the solvent in the filtrate was removed under reduced pressure. The crude material was purified by reverse phase chromatography (YMC-actus Triart-C18, 10 µm, 30x150 mm, gradient from 85% aq NH4HCO3 0.2%, 15% ACN to 45% aq NH4HCO3 0.2%, 55% ACN) to obtain the title product (25 mg).
2-Амино-8-метилхиназолин-4-ол. В круглодонную колбу объемом 250 мл, оснащенную якорем магнитной мешалки, помещали 2-амино-3-метилбензойную кислоту (10 г, 66,15 ммоль), EtOAc (250 мл), цианамид (4,17 г, 99,2 ммоль) и концентрированную HCl (3 мл). Смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 6 ч. С интервалами в 1 ч добавляли с помощью пипетки концентрированную HCl (0,5 мл). Реакционную смесь охлаждали до к.т. и твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали с помощью EtOAc и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (4,8 г). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 2,41 (s, 3Н), 7,15 (t, J=7,5 Гц, 1H), 7,43 (br. s., 2H), 7,55 (d, J=7,0 Гц, 1H), 7,80 (d, J=7,8 Гц, 1H), 11,17-12,49 (m, 1H). Rt: 0,50 мин, масса/заряд=176 [М+Н], способ В.2-Amino-8-methylquinazolin-4-ol. In a 250 mL round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, 2-amino-3-methylbenzoic acid (10 g, 66.15 mmol), EtOAc (250 mL), cyanamide (4.17 g, 99.2 mmol) and concentrated HCl (3 ml). The mixture was stirred at reflux for 6 hours. Concentrated HCl (0.5 ml) was added by pipetting at 1 hour intervals. The reaction mixture was cooled to room temperature. and the solids were isolated by filtration, washed with EtOAc and dried under vacuum to give the title compound as an off-white solid (4.8 g). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 2.41 (s, 3H), 7.15 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.43 (br. s., 2H), 7.55 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.80 (d, J=7.8 Hz, 1H), 11.17-12.49 (m, 1H). Rt: 0.50 min, mass/charge=176 [M+H], method B.
(R)-2-((2-Амино-8-метилхиназолин-4-ил)амино)пентан-1-ол (6). В стеклянный сосуд объемом 50 мл помещали 2-амино-8-метилхиназолин-4-ол (500 мг, 2,71 ммоль), безводный DMF (10 мл), DBU (1,22 мл, 8,13 ммоль) и D-норвалинол (1,40 г, 13,6 ммоль).(R)-2-((2-Amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino)pentan-1-ol (6). 2-Amino-8-methylquinazolin-4-ol (500 mg, 2.71 mmol), anhydrous DMF (10 mL), DBU (1.22 mL, 8.13 mmol) and D- were placed in a 50 mL glass vial. norvalinol (1.40 g, 13.6 mmol).
К данному раствору добавляли ВОР (1,44 г, 3,3 ммоль). Сосуд герметично закрывали и встряхивали в течение 15 ч при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли NaOH (1 М, водн., 10 мл) и промывали с помощью EtOAc (5x20 мл). Органические слои объединяли, высушивали (MgSO4), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворители удаляли из фильтрата при пониженном давлении. К смеси добавляли EtOAc, продукт осаждался, и его выделяли в виде белого твердого вещества (309 мг).BOP (1.44 g, 3.3 mmol) was added to this solution. The vessel was hermetically sealed and shaken for 15 hours at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure. NaOH (1 M, aq, 10 ml) was added and washed with EtOAc (5x20 ml). The organic layers were combined, dried (MgSO 4 ), solids were removed by filtration and solvents were removed from the filtrate under reduced pressure. EtOAc was added to the mixture, the product precipitated and was isolated as a white solid (309 mg).
(R)-2-((2-Амино-8-метилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (7). В сосуд объемом 50 мл помещали 2-амино-8-метилхиназолин-4-ол (500 мг, 2,24 ммоль), безводный DMF (10 мл), DBU (1,01 мл, 6,7 ммоль) и (R)-(-)-2-амино-1-гексанол (1,32 г, 11,2 ммоль). К данному раствору добавляли ВОР (1,19 г, 2,7 ммоль). Сосуд герметично закрывали и реакционную смесь встряхивали в течение 15 ч при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли NaOH (1M, водн., 10 мл) и промывали с помощью EtOAc(R)-2-((2-Amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (7). A 50 mL vessel was filled with 2-amino-8-methylquinazolin-4-ol (500 mg, 2.24 mmol), anhydrous DMF (10 mL), DBU (1.01 mL, 6.7 mmol), and (R) -(-)-2-amino-1-hexanol (1.32 g, 11.2 mmol). BOP (1.19 g, 2.7 mmol) was added to this solution. The vessel was sealed and the reaction mixture was shaken for 15 hours at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure. Add NaOH (1M, aq, 10 ml) and wash with EtOAc
- 15 043991 (5x20 мл). Органические слои объединяли, высушивали (MgSO4), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворители удаляли из фильтрата при пониженном давлении. К смеси добавляли- 15 043991 (5x20 ml). The organic layers were combined, dried (MgSO 4 ), solids were removed by filtration and solvents were removed from the filtrate under reduced pressure. Added to the mixture
EtOAc, и указанное в заголовке соединение осаждалось в виде белого твердого вещества (161 мг).EtOAc, and the title compound precipitated as a white solid (161 mg).
2-Амино-8-хлорхиназолин-4-ол. В круглодонную колбу объемом 1 л, оснащенную якорем магнитной мешалки, помещали 2-амино-3-хлорбензойную кислоту (25 г, 146 ммоль), EtOAc (400 мл), цианамид (9,2 г, 219 ммоль) и конц. HCl (5 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником при перемешивании. С интервалами в 1 ч добавляли конц. HCl (1 мл). Через 6,5 ч источник тепла удаляли и реакционную смесь охлаждали до к.т. Твердые вещества выделяли посредством фильтрации и промывали с помощью EtOAc и простого эфира с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (3,38 г). Rt: 3,37 мин, масса/заряд= 196 [М+Н], способ J2.2-Amino-8-chloroquinazolin-4-ol. In a 1 L round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, 2-amino-3-chlorobenzoic acid (25 g, 146 mmol), EtOAc (400 ml), cyanamide (9.2 g, 219 mmol) and conc. HCl (5 ml). The mixture was refluxed with stirring. Conc. was added at 1 hour intervals. HCl (1 ml). After 6.5 hours, the heat source was removed and the reaction mixture was cooled to room temperature. Solids were isolated by filtration and washed with EtOAc and ether to give the title compound as a white solid (3.38 g). Rt: 3.37 min, mass/charge= 196 [M+H], method J2.
(R)-2-((2-Амино-8-хлорхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (8). В сосуд объемом 50 мл помещали 2амино-8-хлорхиназолин-4-ол (390 мг, 2,0 ммоль), безводный DMF (10 мл), DBU (0,89 мл, 6,0 ммоль) и Dнорлейцинол (1,17 г, 10,0 ммоль). К данному раствору добавляли ВОР (1,06 г, 2,4 ммоль). Сосуд герметично закрывали и реакционную смесь перемешивали в течение 15 ч при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли NaOH (1M, водн., 10 мл) и промывали с помощью EtOAc (5x20 мл). Органические слои объединяли, высушивали (сульфат магния), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворители удаляли из фильтрата при пониженном давлении. К смеси добавляли EtOAc, примеси растворялись, и продукт выпадал в осадок. Надосадочную жидкость удаляли и способ дважды повторяли. Оставшийся растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (64 мг).(R)-2-((2-Amino-8-chloroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (8). A 50 mL vessel was filled with 2amino-8-chloroquinazolin-4-ol (390 mg, 2.0 mmol), anhydrous DMF (10 mL), DBU (0.89 mL, 6.0 mmol), and Dnorleucinol (1.17 g, 10.0 mmol). BOP (1.06 g, 2.4 mmol) was added to this solution. The vessel was sealed and the reaction mixture was stirred for 15 hours at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure. NaOH (1M, aq, 10 ml) was added and washed with EtOAc (5x20 ml). The organic layers were combined, dried (magnesium sulfate), solids were removed by filtration and solvents were removed from the filtrate under reduced pressure. EtOAc was added to the mixture, the impurities dissolved, and the product precipitated. The supernatant was removed and the method was repeated twice. The remaining solvent was removed under reduced pressure to obtain the title compound as a white solid (64 mg).
2-Амино-8-фторхиназолин-4-ол. Сложный метиловый эфир 2-амино-3-фторбензойной кислоты (15 г, 88,68 ммоль) растворяли в EtOAc (100 мл) в пробирке объемом 250 мл, предназначенной для работы под давлением, затем добавляли цианамид (5,59 г, 133 ммоль) и HCl (37% в Н2О) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при 80°С. При охлаждении образовывался осадок, и его выделяли посредством фильтрации, промывали с помощью EtOAc и высушивали in vacuo с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка. Rt: 0,44 мин, масса/заряд=180 [М+Н], способ В.2-Amino-8-fluoroquinazolin-4-ol. 2-Amino-3-fluorobenzoic acid methyl ester (15 g, 88.68 mmol) was dissolved in EtOAc (100 mL) in a 250 mL pressure test tube, then cyanamide (5.59 g, 133 mmol) was added ) and HCl (37% in H 2 O) and the reaction mixture was stirred for 18 hours at 80°C. Upon cooling, a precipitate formed and was isolated by filtration, washed with EtOAc and dried in vacuo to give the title compound as a white powder. Rt: 0.44 min, mass/charge=180 [M+H], method B.
(R)-2-((2-Амино-8-фторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (9). В сосуд объемом 50 мл помещали 2амино-8-фторхиназолин-4-ол (400 мг, 1,9 ммоль), безводный DMF (10 мл), DBU (0,83 мл, 5,6 ммоль) и Dнорлейцинол (1,09 г, 9,3 ммоль). К данному раствору добавляли ВОР (0,98 г, 2,2 ммоль). Сосуд герметично закрывали и реакционную смесь встряхивали в течение 15 ч при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли NaOH (1 М, водн., 10 мл) и промывали с помощью EtOAc (5x20 мл). Органические слои объединяли, высушивали (сульфат магния), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворители удаляли из фильтрата при пониженном давлении. К смеси добавляли EtOAc, и продукт осаждался с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (224 мг).(R)-2-((2-Amino-8-fluoroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (9). A 50 ml vessel was filled with 2amino-8-fluoroquinazolin-4-ol (400 mg, 1.9 mmol), anhydrous DMF (10 ml), DBU (0.83 ml, 5.6 mmol) and Dnorleucinol (1.09 g, 9.3 mmol). BOP (0.98 g, 2.2 mmol) was added to this solution. The vessel was sealed and the reaction mixture was shaken for 15 hours at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure. NaOH (1 M, aq, 10 ml) was added and washed with EtOAc (5x20 ml). The organic layers were combined, dried (magnesium sulfate), solids were removed by filtration and solvents were removed from the filtrate under reduced pressure. EtOAc was added to the mixture and the product precipitated to give the title compound as a white solid (224 mg).
(R)-2-((2-Амино-8-фторхиназолин-4-ил)амино)пентан-1-ол (10). В сосуд объемом 50 мл помещали 2-амино-8-фторхиназолин-4-ол (400 мг, 1,9 ммоль), безводный DMF (10 мл), DBU (0,83 мл, 5,6 ммоль) и D-норвалинол (766 мг, 7,4 ммоль). К данному раствору добавляли ВОР (0,98 г, 2,2 ммоль). Сосуд герметично закрывали и реакционную смесь встряхивали в течение 15 ч при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли NaOH (1 М, водн., 10 мл) и промывали с помощью EtOAc (5x20 мл). Органические слои объединяли, высушивали (сульфат магния), твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворители удаляли из фильтрата при пониженном давлении. К смеси добавляли EtOAc, примеси растворялись, и указанный в заголовке продукт осаждался в виде белого твердого вещества (161 мг).(R)-2-((2-Amino-8-fluoroquinazolin-4-yl)amino)pentan-1-ol (10). 2-Amino-8-fluoroquinazolin-4-ol (400 mg, 1.9 mmol), anhydrous DMF (10 mL), DBU (0.83 mL, 5.6 mmol) and D-norvalinol were placed in a 50 mL vessel. (766 mg, 7.4 mmol). BOP (0.98 g, 2.2 mmol) was added to this solution. The vessel was sealed and the reaction mixture was shaken for 15 hours at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure. NaOH (1 M, aq, 10 ml) was added and washed with EtOAc (5x20 ml). The organic layers were combined, dried (magnesium sulfate), solids were removed by filtration and solvents were removed from the filtrate under reduced pressure. EtOAc was added to the mixture, the impurities were dissolved, and the title product precipitated as a white solid (161 mg).
(R)-2-((2-Амино-8-метилхиназолин-4-ил)амино)гексилизобутират (11). (R)-2-((2-Amuho-8метилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (2,1 г, 7,65 ммоль) растворяли в DCM (40 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли DBU (2,3 мл, 15,3 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. По каплям добавляли изобутирилхлорид (1,6 мл, 15,3 ммоль) в DCM (10 мл) и смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Смесь разбавляли с помощью CH2Cl2 и промывали водой. Органический слой высушивали над MgSO4, твердые вещества удаляли посредством фильтрации и растворитель удаляли из фильтрата при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством заполненной диоксидом кремния колонки с применением CH2Cl2/CH3OH, от 100/0 до 95/5, в качестве градиента. Наилучшие фракции выпаривали и затем высушивали in vacuo с получением указанного в заголовке соединения.(R)-2-((2-Amino-8-methylquinazolin-4-yl)amino)hexyl isobutyrate (11). (R)-2-((2-Amuho-8methylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (2.1 g, 7.65 mmol) was dissolved in DCM (40 ml) and cooled to 0°C. DBU (2.3 mL, 15.3 mmol) was added and the mixture was stirred for 30 minutes. Isobutyryl chloride (1.6 mL, 15.3 mmol) in DCM (10 mL) was added dropwise and the mixture was stirred at room temperature. for 18 hours. The mixture was diluted with CH 2 Cl 2 and washed with water. The organic layer was dried over MgSO 4 , solids were removed by filtration, and the solvent was removed from the filtrate under reduced pressure. The crude material was purified through a silica packed column using CH 2 Cl 2 /CH 3 OH, 100/0 to 95/5, as a gradient. The best fractions were evaporated and then dried in vacuo to give the title compound.
2-Амино-5-метоксихиназолин-4-ол. В круглодонную колбу объемом 1 л, оснащенную якорем магнитной мешалки, помещали 2-амино-6-метоксибензойную кислоту (50 г, 299 ммоль), EtOAc (400 мл), цианамид (18,9 г, 448,7 ммоль) и конц. HCl (5 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником при перемешивании и добавляли конц. HCl (1 мл) с интервалами в 1 ч в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., указанное в заголовке соединение осаждалось, и его выделяли в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 3,82 (s, 3H), 5,40 (br. s., 1H), 6,77 (m, 1H), 6,84 (m, 1H), 7,23 (br. s., 2H), 7,55 (m, 1H). Rt: 0,89 мин, масса/заряд=192 [М+Н], способ G.2-Amino-5-methoxyquinazolin-4-ol. In a 1 L round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, 2-amino-6-methoxybenzoic acid (50 g, 299 mmol), EtOAc (400 ml), cyanamide (18.9 g, 448.7 mmol) and conc. HCl (5 ml). The mixture was refluxed with stirring and conc. HCl (1 ml) at 1 hour intervals for 6 hours. The reaction mixture was cooled to RT, the title compound precipitated and was isolated as a white solid. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.82 (s, 3H), 5.40 (br. s., 1H), 6.77 (m, 1H), 6.84 (m, 1H ), 7.23 (br. s., 2H), 7.55 (m, 1H). Rt: 0.89 min, mass/charge=192 [M+H], method G.
(R)-2-((2-Амино-5-метоксихиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (12). Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-5-метоксихиназолин- 16 043991(R)-2-((2-Amino-5-methoxyquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (12). The title compound was synthesized according to General Procedure A using 2-amino-5-methoxyquinazoline-16 043991
4-ола в качестве исходного гетероцикла.4-ol as the starting heterocycle.
2-Амино-7-фторхиназолин-4-ол. В круглодонную колбу объемом 250 мл, оснащенную якорем магнитной мешалки, помещали 2-амино-4-фторбензойную кислоту (10 г, 64,46 ммоль), EtOAc (200 мл), цианамид (4,06 г, 96,7 ммоль) и конц. HCl (3 мл). Смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 6 ч. С интервалами в 1 ч добавляли конц. HCl (0,5 мл). Реакционную смесь охлаждали до к.т. и твердые вещества выделяли посредством фильтрации, промывали с помощью EtOAc и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (2,8 г). Rt: 0,49 мин, масса/заряд= 180 [М+Н], способ В. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 7,01-7,16 (m, 2Н), 7,56 (br. s., 2H), 7,99 (m, 1H), 10,38-13,48 (m, 1H).2-Amino-7-fluoroquinazolin-4-ol. In a 250 mL round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, 2-amino-4-fluorobenzoic acid (10 g, 64.46 mmol), EtOAc (200 mL), cyanamide (4.06 g, 96.7 mmol) and conc. HCl (3 ml). The mixture was stirred at reflux for 6 hours. Conc. was added at intervals of 1 hour. HCl (0.5 ml). The reaction mixture was cooled to room temperature. and the solids were isolated by filtration, washed with EtOAc and dried under vacuum to give the title compound as an off-white solid (2.8 g). Rt: 0.49 min, mass/charge = 180 [M+H], method B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 7.01-7.16 (m, 2H), 7.56 (br. s., 2H), 7.99 (m, 1H), 10.38-13.48 (m, 1H).
(R)-2-((2-Амино-7-фторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (13). Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-7-фторхиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-7-fluoroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (13). The title compound was synthesized according to General Procedure A using 2-amino-7-fluoroquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
2-Амино-7-метилхиназолин-4-ол. В круглодонную колбу объемом 250 мл, оснащенную якорем магнитной мешалки, помещали 2-амино-4-метилбензойную кислоту (10 г, 64,17 ммоль), EtOAc (200 мл), цианамид (4,05 г, 96,3 ммоль) и конц. HCl (3 мл). Смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 6 ч. С интервалами в 1 ч добавляли конц. HCl (0,5 мл). Реакционную смесь охлаждали до к.т. и твердые вещества выделяли с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества, Rt: 0,50 мин, масса/заряд=176 [М+Н], способ В. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSOd6) δ ppm 2,43 (s, 3 Н), 7,22 (d, J=1,0 Гц, 1Н), 7,24 (s, 1Н), 7,89 (d, J=8,0 Гц, 1H), 8,29 (br. s., 2H), 12,65 (br. s, 1H) (R)-2-((2-Амино-7-метилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (14). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-7-метилхиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.2-Amino-7-methylquinazolin-4-ol. In a 250 mL round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, 2-amino-4-methylbenzoic acid (10 g, 64.17 mmol), EtOAc (200 mL), cyanamide (4.05 g, 96.3 mmol) and conc. HCl (3 ml). The mixture was stirred at reflux for 6 hours. Conc. was added at intervals of 1 hour. HCl (0.5 ml). The reaction mixture was cooled to room temperature. and the solids were isolated to give the title compound as an off-white solid, Rt: 0.50 min, wt/charge=176 [M+H], Method B. 1H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ ppm 2 .43 (s, 3H), 7.22 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.89 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.29 (br. s., 2H), 12.65 (br. s., 1H) (R)-2-((2-Amino-7-methylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol ( 14). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-7-methylquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
2-Амино-6-фторхиназолин-4-ол. Метил-2-амино-5-фторбензоат (25 г, 147,8 ммоль) растворяли в EtOAc (150 мл) в пробирке объемом 250 мл, предназначенной для работы под давлением, затем добавляли цианамид (9,32 г, 221,7 ммоль) и конц. HCl (27 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 80°С. Реакционную смесь охлаждали до к.т. и указанное в заголовке соединение выделяли в виде белого осадка.2-Amino-6-fluoroquinazolin-4-ol. Methyl 2-amino-5-fluorobenzoate (25 g, 147.8 mmol) was dissolved in EtOAc (150 mL) in a 250 mL pressure test tube, then cyanamide (9.32 g, 221.7 mmol) was added ) and conc. HCl (27 ml) and the reaction mixture was stirred overnight at 80°C. The reaction mixture was cooled to room temperature. and the title compound was isolated as a white solid.
2-Амино-5-хлорхиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-6,7-дифторхиназолин-4-ола.2-Amino-5-chloroquinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-6,7-difluoroquinazolin-4-ol.
Rt: 3,19 мин, масса/заряд=196 [М+Н], способ J2. (R)-2-((2-Амино-5-хлорхиназолин-4ил)амино)гексан-1-ол (15). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.Rt: 3.19 min, mass/charge=196 [M+H], method J2. (R)-2-((2-Amino-5-chloroquinazolin-4yl)amino)hexan-1-ol (15). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
2-Амино-5-метилхиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола. Rt: 0,17, масса/заряд = [М+Н] 176,1, Способ: K.2-Amino-5-methylquinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol. Rt: 0.17, mass/charge = [M+H] 176.1, Method: K.
(R)-2-((2-Амино-5-метилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (16). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-5-метилхиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-5-methylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (16). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-5-methylquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
Сложный метиловый эфир 2-амино-3-метоксибензойной кислоты. Смесь 2-амино-3метоксибензойной кислоты (6,22 г, 37,21 ммоль) и карбоната цезия (18,18 г, 55,81 ммоль) в DMF (100 мл) перемешивали при к.т. в течение 40 мин. Добавляли CH3I (2,31 мл, 37,21 ммоль) в DMF (15 мл) и смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым эфиром. Водную фазу повторно экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, разделяли, высушивали над MgSO4, твердые вещества удаляли посредством фильтрации и фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (5,75 г, 31,73 ммоль). LC-MS ES+ масса/заряд= 182,1; Rt: 0,68 мин, способ K.Methyl ester of 2-amino-3-methoxybenzoic acid. A mixture of 2-amino-3methoxybenzoic acid (6.22 g, 37.21 mmol) and cesium carbonate (18.18 g, 55.81 mmol) in DMF (100 ml) was stirred at room temperature. within 40 min. CH3I (2.31 mL, 37.21 mmol) in DMF (15 mL) was added and the mixture was stirred at RT. during the night. The mixture was diluted with water and extracted with diethyl ether. The aqueous phase was re-extracted with diethyl ether. The combined organic extracts were washed with brine, separated, dried over MgSO 4 , solids were removed by filtration and the filtrate was concentrated to give the title compound (5.75 g, 31.73 mmol). LC-MS ES+ mass/charge= 182.1; Rt: 0.68 min, method K.
2-Амино-8-метоксихиназолин-4-ол. Смесь сложного метилового эфира 2-амино-3-метоксибензойной кислоты (5,70 г, 41,46 ммоль), цианамида (1,984 г, 47,19 ммоль), 37% HCl (1 мл) в EtOAc нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. С интервалами в 1 ч добавляли 37% HCl (0,1 мл). Реакционную смесь охлаждали до к.т. и твердое вещество фильтровали и промывали с помощью EtOAc с получением 2-амино-8-метоксихиназолин-4-ола (2,70 г, 11,86 ммоль). LC-MS ES+масса/заряд= 192,1; Rt: 0,15 мин, способ K.2-Amino-8-methoxyquinazolin-4-ol. A mixture of 2-amino-3-methoxybenzoic acid methyl ester (5.70 g, 41.46 mmol), cyanamide (1.984 g, 47.19 mmol), 37% HCl (1 ml) in EtOAc was refluxed for 6 hours. 37% HCl (0.1 ml) was added at 1 hour intervals. The reaction mixture was cooled to room temperature. and the solid was filtered and washed with EtOAc to give 2-amino-8-methoxyquinazolin-4-ol (2.70 g, 11.86 mmol). LC-MS ES + mass/charge = 192.1; Rt: 0.15 min, method K.
(R)-2-((2-Амино-8-метоксихиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (17). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-8-метоксихиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-8-methoxyquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (17). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-8-methoxyquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
Метил-2-амино-4-гидроксихиназолин-7-карбоксилат. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола. Rt: 1,02 мин, масса/заряд=220 [М+Н], способ Н.Methyl 2-amino-4-hydroxyquinazoline-7-carboxylate. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol. Rt: 1.02 min, mass/charge=220 [M+H], method H.
Метил-(R)-2-амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7-карбоксилат (18). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением метил-2-амино-4Methyl (R)-2-amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)quinazoline-7-carboxylate (18). The title compound was prepared according to General Procedure A using methyl-2-amino-4
- 17 043991 гидроксихиназолин-7-карбоксилата в качестве исходного гетероцикла.- 17 043991 hydroxyquinazoline-7-carboxylate as the starting heterocycle.
2-Амино-7,8-дифторхиназолин-4(3Н)-он. В герметично закрытую пробирку последовательно добавляли диметилсульфон (13,9 г, 147 ммоль), а затем сульфолан (1,15 мл, 12,0 ммоль), 2-амино-3,4дифторбензойную кислоту (5 г, 28,9 ммоль) и гидрохлорид хлорформамидина (6,64 г, 57,8 ммоль) и смесь перемешивали при 165°С в течение 2 ч. Полученное твердое вещество добавляли к воде и подвергали воздействию ультразвука. рН регулировали до значения 7-8 путем добавления NH3 (водн.). Осадок собирали посредством фильтрации с получением указанного в заголовке соединения (5,54 г) в виде бежевого твердого вещества. Rt: 1,72 мин, масса/заряд=198 [М+Н], способ J.2-Amino-7,8-difluoroquinazolin-4(3H)-one. Dimethylsulfone (13.9 g, 147 mmol), followed by sulfolane (1.15 ml, 12.0 mmol), 2-amino-3,4difluorobenzoic acid (5 g, 28.9 mmol) and chloroformamidine hydrochloride (6.64 g, 57.8 mmol) and the mixture was stirred at 165°C for 2 hours. The resulting solid was added to water and sonicated. The pH was adjusted to 7-8 by adding NH3(aq). The precipitate was collected by filtration to give the title compound (5.54 g) as a beige solid. Rt: 1.72 min, mass/charge=198 [M+H], method J.
(R)-2-((2-Амино-7,8-дифторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (19). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением метил-2-амино-7,8дифторхиназолин-4(3Н)-она в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-7,8-difluoroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (19). The title compound was prepared according to General Procedure A using methyl 2-amino-7,8difluoroquinazolin-4(3H)-one as the starting heterocycle.
(R)-2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)-4-(метилтио)бутан-1-ол (20). Раствор 2-амино-5фторхиназолин-4-ола (1 г, 3,964 ммоль), DBU (1,183 мл, 7,93 ммоль) в безводном DMF (20 мл) перемешивали при к.т. в атмосфере азота. Добавляли порциями ВОР (1,93 г, 4,36 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 15 мин. Добавляли D-норлейцинол (929 мг, 7,93 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 18 ч при к.т. Раствор очищали посредством препаративной HPLC (неподвижная фаза: RP XBridge Prep С18 ODB-5 мкм, 30x250 мм, подвижная фаза: 0,25% водн. NH4HCO3, CH3CN, CH3OH). (Rt: 0,66 мин, масса/заряд=297 [М+Н], Способ: В) (2R,3S)-2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)-3-метилпентан-1-ол (21). Раствор 2-амино-5фторхиназолин-4-ола (200 мг, 1,12 ммоль), DBU (0,333 мл, 2,23 ммоль) в безводном DMF (10 мл) перемешивали при к.т. в атмосфере азота. Добавляли порциями ВОР (543 мг, 1,23 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 15 мин. Добавляли L-изолейцинол (162 мг, 1,34 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 18 ч при к.т. Раствор очищали посредством препаративной HPLC (неподвижная фаза: RP XBridge Prep С18 ODB-5 мкм, 30x250 мм, подвижная фаза: 0,25% водн. NH4HCO3, CH3CN). Необходимые фракции собирали и выпаривали до сухого состояния с получением указанного в заголовке соединения в виде масла. (Rt: 0,79 мин, масса/заряд=279 [М+Н], Способ: В).(R)-2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)-4-(methylthio)butan-1-ol (20). A solution of 2-amino-5fluoroquinazolin-4-ol (1 g, 3.964 mmol), DBU (1.183 mL, 7.93 mmol) in anhydrous DMF (20 mL) was stirred at RT. in a nitrogen atmosphere. BOP (1.93 g, 4.36 mmol) was added portionwise and stirring was continued for 15 minutes. D-norleucinol (929 mg, 7.93 mmol) was added and stirring was continued for 18 hours at room temperature. The solution was purified by preparative HPLC (stationary phase: RP XBridge Prep C18 ODB-5 µm, 30x250 mm, mobile phase: 0.25% aq. NH 4 HCO 3 , CH3CN, CH3OH). (Rt: 0.66 min, mass/charge=297 [M+H], Method: B) (2R,3S)-2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)-3- methylpentan-1-ol (21). A solution of 2-amino-5fluoroquinazolin-4-ol (200 mg, 1.12 mmol), DBU (0.333 ml, 2.23 mmol) in anhydrous DMF (10 ml) was stirred at room temperature. in a nitrogen atmosphere. BOP (543 mg, 1.23 mmol) was added portionwise and stirring was continued for 15 minutes. L-isoleucinol (162 mg, 1.34 mmol) was added and stirring was continued for 18 hours at room temperature. The solution was purified by preparative HPLC (stationary phase: RP XBridge Prep C18 ODB-5 µm, 30x250 mm, mobile phase: 0.25% aq. NH 4 HCO 3 , CH3CN). The required fractions were collected and evaporated to dryness to obtain the title compound as an oil. (Rt: 0.79 min, mass/charge=279 [M+H], Method: B).
2-Амино-4-гидрокси-N-метилхиназолин-5-карбоксамид. Автоклав из нержавеющей стали объемом 75 мл продували азотом и в него загружали 2-амино-5-бромхиназолин-4-ол (0,5 г, 2,08 ммоль), Pd(OAc)2 (4 мг, 0,02 ммоль), 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (17 мг, 0,042 ммоль), KOAc (408 мг, 4,17 ммоль), метиламин (2M в THF, 10 мл), THF (25 мл) и диизопропилэтиламин (2 мл). Автоклав герметично закрывали, повышали давление до 50 бар СО и нагревали до 100°С в течение 16 ч. Растворитель удаляли и остаток растворяли в смеси CH3OH/NH3 (7 н.), затем очищали посредством препаративной HPLC (неподвижная фаза: RP SunFire Prep C18 OBD-10 мкм, 30x150 мм, подвижная фаза: 0,25% водн. NH4HCO3, CH3OH). Rt: 0,78 мин, масса/заряд=219 [М+Н], способ А.2-Amino-4-hydroxy-N-methylquinazoline-5-carboxamide. A 75 ml stainless steel autoclave was purged with nitrogen and charged with 2-amino-5-bromoquinazolin-4-ol (0.5 g, 2.08 mmol), Pd(OAc) 2 (4 mg, 0.02 mmol) , 1,3-bis(diphenylphosphino)propane (17 mg, 0.042 mmol), KOAc (408 mg, 4.17 mmol), methylamine (2M in THF, 10 ml), THF (25 ml) and diisopropylethylamine (2 ml) . The autoclave was sealed, pressurized to 50 bar CO and heated to 100°C for 16 hours. The solvent was removed and the residue was dissolved in CH3OH/NH3 (7N), then purified by preparative HPLC (stationary phase: RP SunFire Prep C18 OBD-10 µm, 30x150 mm, mobile phase: 0.25% aq. NH4HCO3, CH3OH). Rt: 0.78 min, mass/charge=219 [M+H], method A.
(R)-2-Амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)-N-метилхиназолин-5-карбоксамид (22). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением метил-2-амино-4гидрокси-N-метилхиназолин-5-карбоксамида в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-Amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)-N-methylquinazoline-5-carboxamide (22). The title compound was prepared according to General Procedure A using methyl 2-amino-4hydroxy-N-methylquinazoline-5-carboxamide as the starting heterocycle.
2-Амино-5,7-дифторхиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола. Rt: 1,01, масса/заряд=198 [М+Н], способ: В.2-Amino-5,7-difluoroquinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol. Rt: 1.01, mass/charge=198 [M+N], method: B.
(R)-2-((2-Амино-5,7-дифторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (23). Раствор 2-амино-5,7дифторхиназолин-4-ола (200 мг, 1,01 ммоль), DBU (0,303 мл, 2,03 ммоль) в безводном DMF (10 мл) перемешивали при к.т. в атмосфере азота. Добавляли порциями ВОР (494 мг, 1,12 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 15 мин. Добавляли D-норлейцинол (162 мг, 1,38 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 18 ч. Смесь выливали в 1 мл воды, при этом перемешивание продолжали в течение 1 ч. Растворитель выпаривали и остаток поглощали в 30 мл СН3ОН, перемешивали и нейтрализовали с помощью конц. HCl. Раствор очищали посредством препаративной HPLC (неподвижная фаза: RP XBridge Prep C18 ODB-5 мкм, 30x250 мм, подвижная фаза: 0,25% водн. NH4HCO3, СН3ОН).(R)-2-((2-Amino-5,7-difluoroquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (23). A solution of 2-amino-5,7difluoroquinazolin-4-ol (200 mg, 1.01 mmol), DBU (0.303 ml, 2.03 mmol) in anhydrous DMF (10 ml) was stirred at room temperature. in a nitrogen atmosphere. BOP (494 mg, 1.12 mmol) was added portionwise and stirring was continued for 15 minutes. D-norleucinol (162 mg, 1.38 mmol) was added and stirring was continued for 18 hours. The mixture was poured into 1 ml of water, while stirring was continued for 1 hour. The solvent was evaporated and the residue was taken up in 30 ml of CH 3 OH, stirred and neutralized with conc. HCl. The solution was purified by preparative HPLC (stationary phase: RP XBridge Prep C18 ODB-5 µm, 30x250 mm, mobile phase: 0.25% aq. NH4HCO3, CH3OH).
2-Амино-7-(трифторметил)хиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола. Rt: 1,29, масса/заряд=230 [М+Н], способ: А.2-Amino-7-(trifluoromethyl)quinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol. Rt: 1.29, mass/charge=230 [M+N], method: A.
(R)-2-((2-Амино-7-(трифторметил)хиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (24). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-7(трифторметил)хиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-7-(trifluoromethyl)quinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (24). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-7(trifluoromethyl)quinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
(R)-2-Амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)-N, N-диметилхиназолин-7-карбоксамид (32). В герметично закрытой пробирке смесь метил-(R)-2-амино-4-((1-гидроксигексан-2-ил)амино)хиназолин-7карбоксилата (1,50 г, 4,71 ммоль), диметиламина (2M в THF, 7 мл) и триазабицикло[4.4.0]дец-5-ена (TBD) (268 мг, 1,89 ммоль) в THF (81 мл) перемешивали при 50°С в течение 24 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали посредством хроматографии с обращенной фазой (С18 с зернами правильной формы, 25 мкм, 120 г YMC ODS-25), градиент подвижной фазы: от 70% водн. NH4HCO3 (0,2%), 30% CH3CN до 50% водн. NH4HCO3 (0,2%), 50% MeCN) с получением ука- 18 043991 занного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (940 мг).(R)-2-Amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)-N,N-dimethylquinazoline-7-carboxamide (32). In a hermetically sealed test tube, a mixture of methyl (R)-2-amino-4-((1-hydroxyhexan-2-yl)amino)quinazoline-7carboxylate (1.50 g, 4.71 mmol), dimethylamine (2M in THF, 7 ml) and triazabicyclo[4.4.0]dec-5-ene (TBD) (268 mg, 1.89 mmol) in THF (81 ml) were stirred at 50°C for 24 hours. The solvent was removed under reduced pressure. The crude material was purified by reverse phase chromatography (C18 regular beads, 25 µm, 120 g YMC ODS-25), mobile phase gradient: 70% aq. NH 4 HCO 3 (0.2%), 30% CH 3 CN to 50% aq. NH 4 HCO 3 (0.2%), 50% MeCN) to give the title compound as a pale yellow solid (940 mg).
2-Амино-5-фтор-8-метилхиназолин-4-ол. Указанное в заголовке соединение получали в ходе процедуры, аналогичной той, что описана для 2-амино-5-хлорхиназолин-4-ола. Rt: 1,09, масса/заряд=1942-Amino-5-fluoro-8-methylquinazolin-4-ol. The title compound was prepared by a procedure similar to that described for 2-amino-5-chloroquinazolin-4-ol. Rt: 1.09, mass/charge=194
[М+Н], способ: А.[M+N], method: A.
(R)-2-((2-Амино-5-фтор-8-метилхиназолин-4-ил)амино)гексан-1-ол (26). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А с применением 2-амино-5-фтор-8метилхиназолин-4-ола в качестве исходного гетероцикла.(R)-2-((2-Amino-5-fluoro-8-methylquinazolin-4-yl)amino)hexan-1-ol (26). The title compound was prepared according to General Procedure A using 2-amino-5-fluoro-8methylquinazolin-4-ol as the starting heterocycle.
2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)-2-метилгексан-1-ол. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 0,85 (t, J=6,9 Гц, 3Н) 1,05-1,33 (m, 4Н) 1,41 (s, 3Н) 1,81-2,02 (m, 2Н) 3,47 (d, J=10,6 Гц, 1Н) 3,66 (d, J=10,6 Гц, 1Н) 5,10 (br s, 1Н) 6,23 (s, 2Н) 6,64-6,83 (m, 2 Н) 7,00 (dd, J=8,5, 1,0 Гц, 1Н) 7,36-7,51 (m, 1H). Rt: 0,92 мин, масса/заряд =293 [М+Н], способ: В2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)-2-methylhexan-1-ol. The title compound was prepared according to General Procedure A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.85 (t, J=6.9 Hz, 3H) 1.05-1.33 (m, 4H) 1.41 (s, 3H) 1.81-2.02 (m, 2H) 3.47 (d, J=10.6 Hz, 1H) 3.66 (d, J=10.6 Hz, 1Н) 5.10 (br s, 1Н) 6.23 (s, 2Н) 6.64-6.83 (m, 2 Н) 7.00 (dd, J=8.5, 1.0 Hz, 1Н ) 7.36-7.51 (m, 1H). Rt: 0.92 min, mass/charge =293 [M+H], method: B
2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)-2,4-диметилпентан-1-ол. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 0,88 (dd, J=6,6, 4,0 Гц, 6 Н) 1,44 (s, 3Н) 1,69-1,86 (m, 3Н) 1,87-1,92 (m, 2Н) 3,49 (d, J=10,6 Гц, 1Н) 3,73 (d, J=10,6 Гц, 1Н) 6,25 (s, 2Н) 6,67 (d, J=18,7 Гц, 1Н) 6,71-6,86 (m, 2Н) 7,01 (dd, J=8,5, 1,0 Гц, 1Н) 7,33-7,52 (m, 1H).2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)-2,4-dimethylpentan-1-ol. The title compound was prepared according to General Procedure A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.88 (dd, J=6.6, 4.0 Hz, 6 H) 1.44 (s , 3H) 1.69-1.86 (m, 3H) 1.87-1.92 (m, 2H) 3.49 (d, J=10.6 Hz, 1H) 3.73 (d, J= 10.6 Hz, 1H) 6.25 (s, 2H) 6.67 (d, J=18.7 Hz, 1H) 6.71-6.86 (m, 2H) 7.01 (dd, J= 8.5, 1.0 Hz, 1H) 7.33-7.52 (m, 1H).
2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)гексан-1,3-диол. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой A. Rt: 1,29 мин, масса/заряд=295 [М+Н], способ: Н2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)hexane-1,3-diol. The title compound was prepared according to General Procedure A. Rt: 1.29 min, wt/charge=295 [M+H], method: H
2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)-3-метилгексан-1-ол. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSC-d6) δ ppm 0,82-0,89 (m, 3Н) 0,89-0,98 (m, 3Н) 1,06-1,50 (m, 4Н) 1,73-2,03 (m, 1H) 3,44-3,75 (m, 2Н) 4,17-4,43 (m, 1Н) 4,74-4,95 (m, 1Н) 6,23 (s, 2Н) 6,54-6,74 (m, 1H) 6,75-6,85 (m, 1Н) 7,03 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1Н) 7,32-7,59 (m, 1H). Rt: 0,87 мин, масса/заряд=293 [М+Н], способ: В2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)-3-methylhexan-1-ol. The title compound was prepared according to General Procedure A. 1H NMR (400 MHz, DMSC-d 6 ) δ ppm 0.82-0.89 (m, 3H) 0.89-0.98 (m, 3H) 1 .06-1.50 (m, 4H) 1.73-2.03 (m, 1H) 3.44-3.75 (m, 2H) 4.17-4.43 (m, 1H) 4.74 -4.95 (m, 1H) 6.23 (s, 2H) 6.54-6.74 (m, 1H) 6.75-6.85 (m, 1H) 7.03 (dd, J=8 ,4, 0.9 Hz, 1H) 7.32-7.59 (m, 1H). Rt: 0.87 min, mass/charge=293 [M+H], method: B
5-Фтор-N4-(1-метоксигексан-2-ил)хиназолин-2,4-диамин. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 0,83-0,95 (m, 3Н) 1,231,39 (m, 4Н) 1,54-1,69 (m, 2Н) 3,29 (s, 3Н) 3,36-3,56 (m, 2Н) 4,47-4,57 (m, 1Н) 6,26 (s, 2Н) 6,65 (dd, J=15,4, 8,4 Гц, 1H) 6,73-6,81 (m, 1Н) 7,02 (dd, J=8,5, 1,0 Гц, 1H) 7,44 (td, J=8,2, 6,7 Гц, 1H). Rt: 1,02 мин, масса/заряд=293 [М+Н], способ: В.5-Fluoro-N 4 -(1-methoxyhexan-2-yl)quinazolin-2,4-diamine. The title compound was prepared according to General Procedure A. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6 ) δ ppm 0.83-0.95 (m, 3H) 1.231.39 (m, 4H) 1.54-1 .69 (m, 2H) 3.29 (s, 3H) 3.36-3.56 (m, 2H) 4.47-4.57 (m, 1H) 6.26 (s, 2H) 6.65 (dd, J=15.4, 8.4 Hz, 1H) 6.73-6.81 (m, 1H) 7.02 (dd, J=8.5, 1.0 Hz, 1H) 7.44 (td, J=8.2, 6.7 Hz, 1H). Rt: 1.02 min, mass/charge=293 [M+H], method: B.
2-((2-Амино-5-фторхиназолин-4-ил)амино)гекс-5-ен-1-ол. Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с общей процедурой А. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,60-1,83 (m, 2Н) 2,022,20 (m, 2Н) 3,51-3,61 (m, 2Н) 4,26-4,44 (m, 1Н) 4,92-4,97 (m, 1Н) 4,99-5,06 (m, 1Н) 5,77-6,00 (m, 1Н) 6,28 (s, 2Н) 6,68-6,87 (m, 2Н) 7,03 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1H) 7,35-7,54 (m, 1Н). Rt: 1,49 мин, масса/заряд=277 [М+Н], способ: А.2-((2-Amino-5-fluoroquinazolin-4-yl)amino)hex-5-en-1-ol. The title compound was prepared according to General Procedure A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 1.60-1.83 (m, 2H) 2.022.20 (m, 2H) 3.51-3 .61 (m, 2H) 4.26-4.44 (m, 1H) 4.92-4.97 (m, 1H) 4.99-5.06 (m, 1H) 5.77-6.00 (m, 1H) 6.28 (s, 2H) 6.68-6.87 (m, 2H) 7.03 (dd, J=8.4, 0.9 Hz, 1H) 7.35-7, 54 (m, 1H). Rt: 1.49 min, mass/charge=277 [M+H], method: A.
Таблица 2table 2
Соединения формулы (I)Compounds of formula (I)
- 19 043991- 19 043991
- 20 043991- 20 043991
- 21 043991- 21 043991
- 22 043991- 22 043991
- 23 043991- 23 043991
Аналитические способы.Analytical methods.
Таблица 3Table 3
Характеристики соединений определяли с помощью LC-MS с применением следующих способовCompounds were characterized by LC-MS using the following methods
- 24 043991- 24 043991
- 25 043991- 25 043991
LCMS, способ K. Анализы проводили на колонке Phenomenex Kinetex 00B-4475-AN С18 (50 мм х 2,1 мм I.D.; 1,7 мкм) при 60°С со скоростью потока 1,5 мл/мин. Градиентное элюирование проводили от 90% (вода+0,1% НСООН)/10% CH3CN до 10% (вода+0,1% НСООН)/90% CH3CN за 1,50 минуты; полученную композицию выдерживали в течение 0,40 мин.; затем применяли конечный состав подвижной фазы: от 10% (вода+0,1% НСООН)/90% CH3CN до 90% (вода+0,1% НСООН)/10% CH3CN за 0,10 минуты. Объем вводимой пробы составлял 2 мкл с применением автодозатора-инжектора Agilent или 5 мкл с применением инжектора Gerstel MPS. Диапазон обнаружения для MS и DAD-детектор были установлены на 100-800 масса/заряд и 190-400 нм соответственно.LCMS, method K. Analyzes were performed on a Phenomenex Kinetex 00B-4475-AN C18 column (50 mm x 2.1 mm I.D.; 1.7 μm) at 60°C with a flow rate of 1.5 ml/min. Gradient elution was carried out from 90% (water + 0.1% HCOOH)/10% CH3CN to 10% (water + 0.1% HCOOH)/90% CH3CN in 1.50 minutes; the resulting composition was kept for 0.40 minutes; then the final composition of the mobile phase was applied: from 10% (water + 0.1% HCOOH)/90% CH3CN to 90% (water + 0.1% HCOOH)/10% CH3CN in 0.10 minutes. The injected sample volume was 2 μL using an Agilent autosampler injector or 5 μL using a Gerstel MPS injector. The detection range for the MS and DAD detector were set to 100–800 wt/charge and 190–400 nm, respectively.
Точка плавления. Значения точки плавления определяли в соответствии со следующими способами. A. Mettler Toledo MP50.Melting point. Melting point values were determined according to the following methods. A. Mettler Toledo MP50.
B. DSC: от 30 до 300°С при 10°С/мин. 50 мл N2.B. DSC: 30 to 300°C at 10°C/min. 50 ml N 2 .
C. DSC: от 25°С до 350°С/10°С мин./40 мкл Al.C. DSC: 25°C to 350°C/10°C min./40 µl Al.
Описание биологических анализов.Description of biological assays.
Оц енка активности в отношении TLR7 и TLR8.Assessment of activity against TLR7 and TLR8.
Способность соединений активировать TLR7 и/или TLR8 человека оценивали в клеточном анализе с репортерным геном с использованием клеток HEK293, временно трансфицированных вектором экспрессии TLR7 или TLR8 и репортерной конструкцией NFkB-Iuc. В одном случае конструкция экспрессии TLR экспрессирует соответствующую последовательность дикого типа или мутантную последовательность, содержащую делецию во втором богатом лейцином повторе TLR. Ранее было показано, что такие мутантные TLR белки являются более чувствительными к активации агонистом (US 7498409, выданный Schering Corporation, содержание которого включено в данный документ посредством ссылки).The ability of the compounds to activate human TLR7 and/or TLR8 was assessed in a cellular reporter gene assay using HEK293 cells transiently transfected with a TLR7 or TLR8 expression vector and an NFkB-Iuc reporter construct. In one case, the TLR expression construct expresses the corresponding wild-type sequence or a mutant sequence containing a deletion in the second leucine-rich repeat of the TLR. Such mutant TLR proteins have previously been shown to be more sensitive to agonist activation (US 7,498,409 issued to Schering Corporation, the contents of which are incorporated herein by reference).
Клетки HEK293 выращивали в среде для культивирования (DMEM, дополненная 10% FCS и 2 мМ глутамина). Для трансфекции клеток в 10-см чашках клетки отделяли с помощью трипсина-EDTA, трансфицировали смесью плазмиды CMV-TLR7 или TLR8 (750 нг), плазмиды NFB-люцифераза (375 нг) и трансфекционного реагента и инкубировали 24 ч при 37°С в увлажненной 5% СО2 атмосфере. Трансфицированные клетки затем отделяли с помощью трипсина-EDTA, промывали в PBS и ресуспендировали в среде до плотности 1,67х10 клеток/мл. Тридцать микролитров клеток затем распределяли в каждую лунку в 384-луночных планшетах, где уже содержалось 10 мкл соединения в 4% DMSO. После 6 ч инкубации при 37°С, 5% СО2, определяли активность люциферазы путем добавления 15 мкл субстрата STEADY LITE PLUS (PERKIN ELMER) в каждую лунку и проводили считывание показаний на устройстве для визуализации микропланшетов VIEWLUX ULTRAHTS (PERKIN ELMER). Кривые зависимости доза-ответ были построены на основе измерений, выполненных в четырех повторностях. Для каждого соединения определяли значения наиболее низких эффективных концентраций (LEC), определяемых как концентрация, которая вызывает эффект, по меньшей мере в два раза превышающий стандартное отклонение анализа.HEK293 cells were grown in culture medium (DMEM supplemented with 10% FCS and 2 mM glutamine). To transfect cells in 10 cm dishes, cells were detached using trypsin-EDTA, transfected with a mixture of CMV-TLR7 or TLR8 plasmid (750 ng), NFB-luciferase plasmid (375 ng) and transfection reagent and incubated for 24 h at 37°C in humidified 5% CO 2 atmosphere. Transfected cells were then detached using trypsin-EDTA, washed in PBS, and resuspended in medium to a density of 1.67 × 10 cells/ml. Thirty microliters of cells were then dispensed into each well of 384-well plates, which already contained 10 µl of compound in 4% DMSO. After 6 hours of incubation at 37°C, 5% CO 2 , luciferase activity was determined by adding 15 μl of STEADY LITE PLUS substrate (PERKIN ELMER) to each well and reading on a VIEWLUX ULTRAHTS microplate imager (PERKIN ELMER). Dose-response curves were constructed from measurements performed in quadruplicate. For each compound, lowest effective concentration (LEC) values were determined, defined as the concentration that produces an effect at least twice the standard deviation of the assay.
Токсичность соединения определяли параллельно в 384-луночных планшетах с использованием аналогичной серии разведений соединения на клетках, трансфицированных только конструкцией CMVTLR7 (1,67х105 клеток/мл), из расчета 30 мкл на лунку. Жизнеспособность клеток измеряли после 6 ч инкубации при 37°С, 5% СО2, посредством добавления 15 мкл ATP lite (PERKIN ELMER) на лунку и считывания показаний на устройстве для визуализации микропланшетов ViewLux ultraHTS (PERKIN ELMER). Данные указывали как CC50.Compound toxicity was determined in parallel in 384-well plates using a similar dilution series of compound in cells transfected with the CMVTLR7 construct alone (1.67 x 10 5 cells/ml) at 30 μl per well. Cell viability was measured after 6 hours of incubation at 37°C, 5% CO 2 by adding 15 μl of ATP lite (PERKIN ELMER) per well and reading on a ViewLux ultraHTS microplate imager (PERKIN ELMER). The data was reported as CC 50 .
--
Claims (21)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP18159583.6 | 2018-03-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA043991B1 true EA043991B1 (en) | 2023-07-13 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11597704B2 (en) | 2,4-diaminoquinazoline derivatives and medical uses thereof | |
| JP7171444B2 (en) | Dihydropyranopyrimidines for treating viral infections | |
| AU2018274911B2 (en) | Pyrrolo[3,2-c]Pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections and other diseases | |
| JP6293765B2 (en) | Pyrrolo [3,2-D] pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections and other diseases | |
| JP6283320B2 (en) | Piperidino-pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections | |
| IL228317A (en) | Pyrimidine derivatives and pharmaceutical compositions comprising them | |
| JP6718451B2 (en) | Pyrrolopyrimidine for use in influenza virus infection | |
| IL228906A (en) | Quinazoline derivatives for the treatment of viral infections and further diseases | |
| EA043991B1 (en) | 2,4-DIAMINOQUINAZOLINE DERIVATIVES AND OPTIONS FOR THEIR APPLICATION IN MEDICINE | |
| TW202415645A (en) | 2,4-diaminoquinazoline derivatives and medical uses thereof | |
| EA038646B1 (en) | Pyrimidine prodrugs for the treatment of viral infections and further diseases | |
| NZ754320B2 (en) | Pyrrolo[3,2-d]pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections and other diseases |