EA043376B1 - ANTIBODY B7-H4 COMPOSITIONS - Google Patents
ANTIBODY B7-H4 COMPOSITIONS Download PDFInfo
- Publication number
- EA043376B1 EA043376B1 EA202091747 EA043376B1 EA 043376 B1 EA043376 B1 EA 043376B1 EA 202091747 EA202091747 EA 202091747 EA 043376 B1 EA043376 B1 EA 043376B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- ser
- leu
- val
- binding fragment
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 176
- 102100038929 V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1 Human genes 0.000 title description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 281
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 278
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 271
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 271
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 271
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 195
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 67
- 101000955999 Homo sapiens V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1 Proteins 0.000 claims description 64
- 102000055298 human VTCN1 Human genes 0.000 claims description 55
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 44
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 38
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 38
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 38
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 38
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 claims description 16
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 claims description 16
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 76
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 76
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 73
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 70
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 70
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 64
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 62
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 59
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 59
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 58
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 57
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 57
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 55
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 54
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 54
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 54
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 54
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 description 42
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 40
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 36
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 33
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 29
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 29
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000013456 study Methods 0.000 description 27
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 26
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 26
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 24
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 23
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 22
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 21
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 21
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 21
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 20
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 20
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 18
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 18
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 16
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 13
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 13
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 12
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 11
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 11
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 10
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 9
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 8
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 8
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 8
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 8
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 7
- -1 antibody Proteins 0.000 description 7
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 7
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 7
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 6
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 6
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 6
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 6
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 6
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 5
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 5
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 5
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 5
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 206010044412 transitional cell carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 5
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- UKKNTTCNGZLJEX-WHFBIAKZSA-N Gln-Ser Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UKKNTTCNGZLJEX-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- WXHHTBVYQOSYSL-FXQIFTODSA-N Met-Ala-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WXHHTBVYQOSYSL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N Thr-Tyr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CYCGARJWIQWPQM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 4
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N Val-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 4
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001516 effect on protein Effects 0.000 description 4
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 108010078274 isoleucylvaline Proteins 0.000 description 4
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 108010016686 methionyl-alanyl-serine Proteins 0.000 description 4
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 4
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 4
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 4
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 4
- ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N Ala-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 3
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 3
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 3
- 102100021266 Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Human genes 0.000 description 3
- UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- AMGQTNHANMRPOE-LKXGYXEUSA-N Asn-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AMGQTNHANMRPOE-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 3
- LTDGPJKGJDIBQD-LAEOZQHASA-N Asn-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LTDGPJKGJDIBQD-LAEOZQHASA-N 0.000 description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- PEZINYWZBQNTIX-NAKRPEOUSA-N Cys-Met-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)N PEZINYWZBQNTIX-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 3
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 3
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 3
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 3
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N Glu-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- MZZSCEANQDPJER-ONGXEEELSA-N Gly-Ala-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MZZSCEANQDPJER-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- WEIYKCOEVBUJQC-JYJNAYRXSA-N His-Glu-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N WEIYKCOEVBUJQC-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 description 3
- RWIKBYVJQAJYDP-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN RWIKBYVJQAJYDP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- QYZYJFXHXYUZMZ-UGYAYLCHSA-N Ile-Asn-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N QYZYJFXHXYUZMZ-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 3
- TWPSALMCEHCIOY-YTFOTSKYSA-N Ile-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N TWPSALMCEHCIOY-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 3
- UDBPXJNOEWDBDF-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N UDBPXJNOEWDBDF-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 3
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- FIYMBBHGYNQFOP-IUCAKERBSA-N Leu-Gly-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N FIYMBBHGYNQFOP-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N Lys-Glu-Gly Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)NCC([O-])=O GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- KJJROSNFBRWPHS-JYJNAYRXSA-N Phe-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KJJROSNFBRWPHS-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- HVKMTOIAYDOJPL-NRPADANISA-N Ser-Gln-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HVKMTOIAYDOJPL-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- HBTCFCHYALPXME-HTFCKZLJSA-N Ser-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HBTCFCHYALPXME-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 3
- OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N Ser-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N 0.000 description 3
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- RRVUOLRWIZXBRQ-IHPCNDPISA-N Trp-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N RRVUOLRWIZXBRQ-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SINRIKQYQJRGDQ-MEYUZBJRSA-N Tyr-Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SINRIKQYQJRGDQ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- USXYVSTVPHELAF-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Met Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O USXYVSTVPHELAF-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 3
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 3
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 3
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 3
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- JFOWDKWFHZIMTR-RUCXOUQFSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;(2s)-2,5-diamino-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JFOWDKWFHZIMTR-RUCXOUQFSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N Ala-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N Ala-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 2
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- GDVDRMUYICMNFJ-CIUDSAMLSA-N Arg-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GDVDRMUYICMNFJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N Arg-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N Asn-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N 0.000 description 2
- JQBCANGGAVVERB-CFMVVWHZSA-N Asn-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N JQBCANGGAVVERB-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- HDHZCEDPLTVHFZ-GUBZILKMSA-N Asn-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HDHZCEDPLTVHFZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- YXVAESUIQFDBHN-SRVKXCTJSA-N Asn-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YXVAESUIQFDBHN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N Asp-Thr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- NJLLRXWFPQQPHV-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJLLRXWFPQQPHV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 2
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 208000006402 Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- VSXBYIJUAXPAAL-WDSKDSINSA-N Gln-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O VSXBYIJUAXPAAL-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N Gln-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LGIKBBLQVSWUGK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N Glu-Ile-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 2
- IDEODOAVGCMUQV-GUBZILKMSA-N Glu-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IDEODOAVGCMUQV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N Glu-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGYHAAXZWPEBDQ-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 2
- JPXNYFOHTHSREU-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CN JPXNYFOHTHSREU-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- BGVYNAQWHSTTSP-BYULHYEWSA-N Gly-Asn-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BGVYNAQWHSTTSP-BYULHYEWSA-N 0.000 description 2
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 2
- UESJMAMHDLEHGM-NHCYSSNCSA-N Gly-Ile-Leu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UESJMAMHDLEHGM-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N Gly-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 2
- HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N Gly-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N 0.000 description 2
- FOKISINOENBSDM-WLTAIBSBSA-N Gly-Thr-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O FOKISINOENBSDM-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- ODPKZZLRDNXTJZ-WHOFXGATSA-N Ile-Gly-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N ODPKZZLRDNXTJZ-WHOFXGATSA-N 0.000 description 2
- HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 2
- VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N Lys-Asn-Gln Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N YKIRNDPUWONXQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- QUYCUALODHJQLK-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QUYCUALODHJQLK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- CZQZSMJXFGGBHM-KKUMJFAQSA-N Phe-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O CZQZSMJXFGGBHM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- CKJACGQPCPMWIT-UFYCRDLUSA-N Phe-Pro-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CKJACGQPCPMWIT-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 2
- NUZHSNLQJDYSRW-BZSNNMDCSA-N Pro-Arg-Trp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O NUZHSNLQJDYSRW-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- GDXZRWYXJSGWIV-GMOBBJLQSA-N Pro-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 GDXZRWYXJSGWIV-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 2
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- CXGLFEOYCJFKPR-RCWTZXSCSA-N Pro-Thr-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O CXGLFEOYCJFKPR-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N Pro-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 102220492414 Ribulose-phosphate 3-epimerase_H35A_mutation Human genes 0.000 description 2
- LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N Ser-Asn Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N Ser-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 2
- MPPHJZYXDVDGOF-BWBBJGPYSA-N Ser-Cys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CO MPPHJZYXDVDGOF-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 2
- KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N Ser-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 2
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N Ser-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- ZSLFCBHEINFXRS-LPEHRKFASA-N Ser-Met-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N ZSLFCBHEINFXRS-LPEHRKFASA-N 0.000 description 2
- WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N Ser-Pro Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N 0.000 description 2
- ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N Ser-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- OSFZCEQJLWCIBG-BZSNNMDCSA-N Ser-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OSFZCEQJLWCIBG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N Ser-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(O)=O HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- LMMDEZPNUTZJAY-GCJQMDKQSA-N Thr-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LMMDEZPNUTZJAY-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 2
- VEWZSFGRQDUAJM-YJRXYDGGSA-N Thr-Cys-Tyr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N)O VEWZSFGRQDUAJM-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N Thr-His Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N 0.000 description 2
- NZRUWPIYECBYRK-HTUGSXCWSA-N Thr-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O NZRUWPIYECBYRK-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 2
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- JHORGUYURUBVOM-KKUMJFAQSA-N Tyr-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JHORGUYURUBVOM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N Tyr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N Val-Phe-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GVRKWABULJAONN-VQVTYTSYSA-N Val-Thr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GVRKWABULJAONN-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N Val-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- JAIZPWVHPQRYOU-ZJDVBMNYSA-N Val-Thr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O JAIZPWVHPQRYOU-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 2
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- STTYIMSDIYISRG-UHFFFAOYSA-N Valyl-Serine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(O)=O STTYIMSDIYISRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- 108010078114 alanyl-tryptophyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N anthranilic acid Chemical compound NC1=CC=CC=C1C(O)=O RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 2
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 201000004228 ovarian endometrial cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 2
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 2
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 239000012905 visible particle Substances 0.000 description 2
- AUXMWYRZQPIXCC-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-amino-4-methylpentanoic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O AUXMWYRZQPIXCC-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-[hydroxy(methyl)phosphoryl]butanoic acid;azane Chemical compound [NH4+].CP(O)(=O)CCC(N)C([O-])=O ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- NXSFUECZFORGOG-CIUDSAMLSA-N Ala-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NXSFUECZFORGOG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SHYYAQLDNVHPFT-DLOVCJGASA-N Ala-Asn-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SHYYAQLDNVHPFT-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- JQDFGZKKXBEANU-IMJSIDKUSA-N Ala-Cys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O JQDFGZKKXBEANU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N Ala-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N Ala-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- SUMYEVXWCAYLLJ-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SUMYEVXWCAYLLJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N Ala-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N Ala-Leu-Thr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- SUHLZMHFRALVSY-YUMQZZPRSA-N Ala-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)NCC(O)=O SUHLZMHFRALVSY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- DCVYRWFAMZFSDA-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DCVYRWFAMZFSDA-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N Ala-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N Ala-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)N IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- ZVWXMTTZJKBJCI-BHDSKKPTSA-N Ala-Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 ZVWXMTTZJKBJCI-BHDSKKPTSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N Arg-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N Arg-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LFAUVOXPCGJKTB-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LFAUVOXPCGJKTB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)O)C(O)=O XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- LOVIQNMIPQVIGT-BVSLBCMMSA-N Arg-Trp-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 LOVIQNMIPQVIGT-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N Asn-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QPTAGIPWARILES-AVGNSLFASA-N Asn-Gln-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QPTAGIPWARILES-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N Asn-Gln-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- GMUOCGCDOYYWPD-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GMUOCGCDOYYWPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N Asn-Ser-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N Asn-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N Asn-Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- JZLFYAAGGYMRIK-BYULHYEWSA-N Asn-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O JZLFYAAGGYMRIK-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- JNCRAQVYJZGIOW-QSFUFRPTSA-N Asn-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JNCRAQVYJZGIOW-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- VGRHZPNRCLAHQA-IMJSIDKUSA-N Asp-Asn Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O VGRHZPNRCLAHQA-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- VHQOCWWKXIOAQI-WDSKDSINSA-N Asp-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O VHQOCWWKXIOAQI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- LTXGDRFJRZSZAV-CIUDSAMLSA-N Asp-Glu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N LTXGDRFJRZSZAV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N Asp-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N Asp-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N Asp-Pro-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AHWRSSLYSGLBGD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SXLCDCZHNCLFGZ-BPUTZDHNSA-N Asp-Pro-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O SXLCDCZHNCLFGZ-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N Asp-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- KNDCWFXCFKSEBM-AVGNSLFASA-N Asp-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KNDCWFXCFKSEBM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005738 B7 Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010045634 B7 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101100228200 Caenorhabditis elegans gly-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N Cys-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RGTVXXNMOGHRAY-WDSKDSINSA-N Cys-Arg Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RGTVXXNMOGHRAY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N Cys-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N Cys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VTBGVPWSWJBERH-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VTBGVPWSWJBERH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N Cys-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMEYEQDCCBHTEF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N Cys-Pro-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N Cys-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NDNZRWUDUMTITL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LPBUBIHAVKXUOT-FXQIFTODSA-N Cys-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N LPBUBIHAVKXUOT-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000006471 Fucosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108010019236 Fucosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- WLODHVXYKYHLJD-ACZMJKKPSA-N Gln-Asp-Ser Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N WLODHVXYKYHLJD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N Gln-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GLEGHWQNGPMKHO-DCAQKATOSA-N Gln-His-Glu Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N GLEGHWQNGPMKHO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Lys Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- XZLLTYBONVKGLO-SDDRHHMPSA-N Gln-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O XZLLTYBONVKGLO-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZEEPYMXTJWIMSN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SWDSRANUCKNBLA-AVGNSLFASA-N Gln-Phe-Asp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SWDSRANUCKNBLA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- XUMFMAVDHQDATI-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Arg Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XUMFMAVDHQDATI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Pro Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RWQCWSGOOOEGPB-FXQIFTODSA-N Gln-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RWQCWSGOOOEGPB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OTQSTOXRUBVWAP-NRPADANISA-N Gln-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OTQSTOXRUBVWAP-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- ZQFAGNFSIZZYBA-AAEUAGOBSA-N Gln-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZQFAGNFSIZZYBA-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- BETSEXMYBWCDAE-SZMVWBNQSA-N Gln-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N BETSEXMYBWCDAE-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- SDSMVVSHLAAOJL-UKJIMTQDSA-N Gln-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SDSMVVSHLAAOJL-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IRDASPPCLZIERZ-XHNCKOQMSA-N Glu-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N IRDASPPCLZIERZ-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N Glu-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HUFCEIHAFNVSNR-IHRRRGAJSA-N Glu-Gln-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HUFCEIHAFNVSNR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CUXJIASLBRJOFV-LAEOZQHASA-N Glu-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CUXJIASLBRJOFV-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N Glu-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- UDEPRBFQTWGLCW-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O UDEPRBFQTWGLCW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N Glu-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O AAJHGGDRKHYSDH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BFEZQZKEPRKKHV-SRVKXCTJSA-N Glu-Pro-Lys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O BFEZQZKEPRKKHV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N Glu-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N Glu-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Asn Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N Glu-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- ZYRXTRTUCAVNBQ-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZYRXTRTUCAVNBQ-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N Gly-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- PNMUAGGSDZXTHX-BYPYZUCNSA-N Gly-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O PNMUAGGSDZXTHX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- CQZDZKRHFWJXDF-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CN CQZDZKRHFWJXDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- BPQYBFAXRGMGGY-LAEOZQHASA-N Gly-Gln-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)CN BPQYBFAXRGMGGY-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N Gly-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)CN)C(=O)O PABFFPWEJMEVEC-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N Gly-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)CN ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N Gly-Pro-Ser Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAOUOFNNJJLVNS-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ser-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DBUNZBWUWCIELX-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N Gly-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)CN FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N His-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N WMKXFMUJRCEGRP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N His-Gln-Asp Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N FYVHHKMHFPMBBG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HVCRQRQPIIRNLY-IUCAKERBSA-N His-Gln-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N HVCRQRQPIIRNLY-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ZYDYEPDFFVCUBI-SRVKXCTJSA-N His-Glu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N ZYDYEPDFFVCUBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N His-Thr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 1
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N Ile-Ala-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N MKWSZEHGHSLNPF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- ASCFJMSGKUIRDU-ZPFDUUQYSA-N Ile-Arg-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ASCFJMSGKUIRDU-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- QTUSJASXLGLJSR-OSUNSFLBSA-N Ile-Arg-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N QTUSJASXLGLJSR-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- YPQDTQJBOFOTJQ-SXTJYALSSA-N Ile-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N YPQDTQJBOFOTJQ-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N Ile-Asn-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- SLQVFYWBGNNOTK-BYULHYEWSA-N Ile-Gly-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SLQVFYWBGNNOTK-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N Ile-His-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N 0.000 description 1
- DMSVBUWGDLYNLC-IAVJCBSLSA-N Ile-Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 DMSVBUWGDLYNLC-IAVJCBSLSA-N 0.000 description 1
- PFPUFNLHBXKPHY-HTFCKZLJSA-N Ile-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PFPUFNLHBXKPHY-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 1
- AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N Ile-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- IOVUXUSIGXCREV-DKIMLUQUSA-N Ile-Leu-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IOVUXUSIGXCREV-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- YSGBJIQXTIVBHZ-AJNGGQMLSA-N Ile-Lys-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YSGBJIQXTIVBHZ-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- KLJKJVXDHVUMMZ-KKPKCPPISA-N Ile-Phe-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N KLJKJVXDHVUMMZ-KKPKCPPISA-N 0.000 description 1
- TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N VGSPNSSCMOHRRR-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N L-lysyl-L-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N L-prolylglycine Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N Leu-Ala-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N Leu-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N 0.000 description 1
- OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LOLUPZNNADDTAA-AVGNSLFASA-N Leu-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LOLUPZNNADDTAA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N Leu-Gly-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- SEMUSFOBZGKBGW-YTFOTSKYSA-N Leu-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O SEMUSFOBZGKBGW-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- NRFGTHFONZYFNY-MGHWNKPDSA-N Leu-Ile-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NRFGTHFONZYFNY-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N Leu-Met-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AUNMOHYWTAPQLA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- DDVHDMSBLRAKNV-IHRRRGAJSA-N Leu-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DDVHDMSBLRAKNV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N Leu-Phe-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N UHNQRAFSEBGZFZ-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N Leu-Ser-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ICYRCNICGBJLGM-HJGDQZAQSA-N Leu-Thr-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O ICYRCNICGBJLGM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- DAYQSYGBCUKVKT-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O DAYQSYGBCUKVKT-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KCXUCYYZNZFGLL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MWVUEPNEPWMFBD-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN MWVUEPNEPWMFBD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DZQYZKPINJLLEN-KKUMJFAQSA-N Lys-Cys-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O DZQYZKPINJLLEN-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QZONCCHVHCOBSK-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QZONCCHVHCOBSK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N Lys-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CN=CN1 FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- QQPSCXKFDSORFT-IHRRRGAJSA-N Lys-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QQPSCXKFDSORFT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ODTZHNZPINULEU-KKUMJFAQSA-N Lys-Phe-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ODTZHNZPINULEU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N Lys-Pro Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N Lys-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- IEVXCWPVBYCJRZ-IXOXFDKPSA-N Lys-Thr-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IEVXCWPVBYCJRZ-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- YKBSXQFZWFXFIB-VOAKCMCISA-N Lys-Thr-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YKBSXQFZWFXFIB-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- 101000956000 Mus musculus V-set domain containing T-cell activation inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 101100068676 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gln-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N Phe-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- MQVFHOPCKNTHGT-MELADBBJSA-N Phe-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)O MQVFHOPCKNTHGT-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- CSDMCMITJLKBAH-SOUVJXGZSA-N Phe-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)O CSDMCMITJLKBAH-SOUVJXGZSA-N 0.000 description 1
- NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N Phe-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- DVOCGBNHAUHKHJ-DKIMLUQUSA-N Phe-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DVOCGBNHAUHKHJ-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- BYAIIACBWBOJCU-URLPEUOOSA-N Phe-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O BYAIIACBWBOJCU-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N Phe-Pro-Glu Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UNBFGVQVQGXXCK-KKUMJFAQSA-N Phe-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UNBFGVQVQGXXCK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- GNRMAQSIROFNMI-IXOXFDKPSA-N Phe-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GNRMAQSIROFNMI-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- WDOCBGZHAQQIBL-IHPCNDPISA-N Phe-Trp-Ser Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 WDOCBGZHAQQIBL-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N Pro-Arg-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N Pro-Arg-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N Pro-Asn-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OZAPWFHRPINHND-GUBZILKMSA-N Pro-Cys-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OZAPWFHRPINHND-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WVOXLKUUVCCCSU-ZPFDUUQYSA-N Pro-Glu-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WVOXLKUUVCCCSU-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N Pro-Phe Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]1NCCC1)C1=CC=CC=C1 IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DMNANGOFEUVBRV-GJZGRUSLSA-N Pro-Trp-Gly Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 DMNANGOFEUVBRV-GJZGRUSLSA-N 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010038111 Recurrent cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010070308 Refractory cancer Diseases 0.000 description 1
- BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N Ser-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IDQFQFVEWMWRQQ-DLOVCJGASA-N Ser-Ala-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O IDQFQFVEWMWRQQ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N Ser-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OYEDZGNMSBZCIM-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N Ser-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- KNCJWSPMTFFJII-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KNCJWSPMTFFJII-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- SNNSYBWPPVAXQW-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O SNNSYBWPPVAXQW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N Ser-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IXUGADGDCQDLSA-FXQIFTODSA-N Ser-Gln-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IXUGADGDCQDLSA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N Ser-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OJPHFSOMBZKQKQ-GUBZILKMSA-N Ser-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO OJPHFSOMBZKQKQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YQQKYAZABFEYAF-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQQKYAZABFEYAF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N Ser-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BPMRXBZYPGYPJN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- HMRAQFJFTOLDKW-GUBZILKMSA-N Ser-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HMRAQFJFTOLDKW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N Ser-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CO ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XQAPEISNMXNKGE-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Cys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O XQAPEISNMXNKGE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N Ser-Pro-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- WLJPJRGQRNCIQS-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WLJPJRGQRNCIQS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N Ser-Thr-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N Ser-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- CAGTXGDOIFXLPC-KZVJFYERSA-N Thr-Arg-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CCCN=C(N)N CAGTXGDOIFXLPC-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- KWQBJOUOSNJDRR-XAVMHZPKSA-N Thr-Cys-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O KWQBJOUOSNJDRR-XAVMHZPKSA-N 0.000 description 1
- BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N Thr-Gln Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N Thr-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- OQCXTUQTKQFDCX-HTUGSXCWSA-N Thr-Glu-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O OQCXTUQTKQFDCX-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- ONNSECRQFSTMCC-XKBZYTNZSA-N Thr-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ONNSECRQFSTMCC-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N Thr-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N Thr-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(O)=O DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N Thr-Phe-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N)O JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N 0.000 description 1
- FWTFAZKJORVTIR-VZFHVOOUSA-N Thr-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FWTFAZKJORVTIR-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- QJIODPFLAASXJC-JHYOHUSXSA-N Thr-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O QJIODPFLAASXJC-JHYOHUSXSA-N 0.000 description 1
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 1
- RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N Thr-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- CKHWEVXPLJBEOZ-VQVTYTSYSA-N Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O CKHWEVXPLJBEOZ-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- NMCBVGFGWSIGSB-NUTKFTJISA-N Trp-Ala-Leu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N NMCBVGFGWSIGSB-NUTKFTJISA-N 0.000 description 1
- DQDXHYIEITXNJY-BPUTZDHNSA-N Trp-Gln-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N DQDXHYIEITXNJY-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- YRXXUYPYPHRJPB-RXVVDRJESA-N Trp-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)N YRXXUYPYPHRJPB-RXVVDRJESA-N 0.000 description 1
- GQHAIUPYZPTADF-FDARSICLSA-N Trp-Ile-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 GQHAIUPYZPTADF-FDARSICLSA-N 0.000 description 1
- KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N Trp-Ile-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N 0.000 description 1
- XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N Trp-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N XGFGVFMXDXALEV-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- UMIACFRBELJMGT-GQGQLFGLSA-N Trp-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N UMIACFRBELJMGT-GQGQLFGLSA-N 0.000 description 1
- TYYLDKGBCJGJGW-WMZOPIPTSA-N Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N Trp-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N 0.000 description 1
- 108091005906 Type I transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N Tyr-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QYSBJAUCUKHSLU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N Tyr-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- WJKJJGXZRHDNTN-UWVGGRQHSA-N Tyr-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 WJKJJGXZRHDNTN-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N Tyr-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- ZQOOYCZQENFIMC-STQMWFEESA-N Tyr-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZQOOYCZQENFIMC-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N Tyr-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- AUZADXNWQMBZOO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Pro-Arg Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AUZADXNWQMBZOO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- PYJKETPLFITNKS-IHRRRGAJSA-N Tyr-Pro-Asn Chemical compound N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PYJKETPLFITNKS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ZSXJENBJGRHKIG-UWVGGRQHSA-N Tyr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 ZSXJENBJGRHKIG-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- GZWPQZDVTBZVEP-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GZWPQZDVTBZVEP-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N Tyr-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SQUMHUZLJDUROQ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N Val-Ala-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- DBOXBUDEAJVKRE-LSJOCFKGSA-N Val-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N DBOXBUDEAJVKRE-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- CGGVNFJRZJUVAE-BYULHYEWSA-N Val-Asp-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N CGGVNFJRZJUVAE-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N Val-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- WPSXZFTVLIAPCN-WDSKDSINSA-N Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O WPSXZFTVLIAPCN-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N Val-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VCAWFLIWYNMHQP-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- NXRAUQGGHPCJIB-RCOVLWMOSA-N Val-Gly-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NXRAUQGGHPCJIB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- OACSGBOREVRSME-NHCYSSNCSA-N Val-His-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OACSGBOREVRSME-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N Val-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- FMQGYTMERWBMSI-HJWJTTGWSA-N Val-Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](C(C)C)N FMQGYTMERWBMSI-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KSFXWENSJABBFI-ZKWXMUAHSA-N Val-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KSFXWENSJABBFI-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N Val-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- UVHFONIHVHLDDQ-IFFSRLJSSA-N Val-Thr-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O UVHFONIHVHLDDQ-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 1
- IRAUYEAFPFPVND-UVBJJODRSA-N Val-Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 IRAUYEAFPFPVND-UVBJJODRSA-N 0.000 description 1
- QPJSIBAOZBVELU-BPNCWPANSA-N Val-Tyr-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N QPJSIBAOZBVELU-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N Val-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012615 aggregate Substances 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 102000012086 alpha-L-Fucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010061314 alpha-L-Fucosidase Proteins 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 238000010420 art technique Methods 0.000 description 1
- 150000001508 asparagines Chemical class 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 150000001510 aspartic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229920005557 bromobutyl Polymers 0.000 description 1
- 238000000738 capillary electrophoresis-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001818 capillary gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012707 chemical precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 201000010255 female reproductive organ cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 238000013457 freeze/thaw-study Methods 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 101150089730 gly-10 gene Proteins 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N glyclproline Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 208000027706 hormone receptor-positive breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 108010023260 immunoglobulin Fv Proteins 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 238000012004 kinetic exclusion assay Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000013627 low molecular weight specie Substances 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000002742 methionines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012900 molecular simulation Methods 0.000 description 1
- JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5s,6r)-2-[[(2r,3r,4s,5s,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-6-[(2r,3s,4r,5r)-5-acetamido-1,2,4-trihydroxy-6-oxohexan-3-yl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-4-h Chemical group O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]([C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)C)[C@H](O)CO)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)O1 JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004305 normal phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000002367 polarised neutron reflectometry Methods 0.000 description 1
- 229920002859 polyalkenylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 1
- 108010071097 threonyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 1
- 108010079202 tyrosyl-alanyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108010052774 valyl-lysyl-glycyl-phenylalanyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
Description
1. Область техники1. Technical field
В настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции, содержащие антитела к B7H4, и способы применения таких составов.Provided herein are pharmaceutical compositions containing anti-B7H4 antibodies and methods of using such compositions.
2. Уровень техники2. State of the art
B7-H4 (также известный как B7x, B7-S1 и VTCN1) представляет собой иммунорегулирующую молекулу, которая разделяет гомологию с другими членами семейства B7, включая PD-L1. Это трансмембранный белок типа I, состоящий из эктодоменов как IgV, так и IgC. В то время как экспрессия B7-H4 в здоровых тканях относительно ограничена на уровне белка, B7-H4 экспрессируется в нескольких солидных опухолях, таких как гинекологические карциномы молочной железы, яичника и эндометрия. Экспрессия B7-H4 в опухолях имеет тенденцию к корреляции с неблагоприятным прогнозом. Рецептор B7H4 неизвестен, но считается, что он экспрессируется на поверхности T-клеток. Считается, что B7-H4 непосредственно ингибирует активность T-клеток.B7-H4 (also known as B7x, B7-S1 and VTCN1) is an immunoregulatory molecule that shares homology with other members of the B7 family, including PD-L1. It is a type I transmembrane protein consisting of both IgV and IgC ectodomains. While B7-H4 expression in healthy tissues is relatively limited at the protein level, B7-H4 is expressed in several solid tumors, such as gynecologic carcinomas of the breast, ovary, and endometrium. B7-H4 expression in tumors tends to correlate with poor prognosis. The B7H4 receptor is unknown but is thought to be expressed on the surface of T cells. B7-H4 is thought to directly inhibit T cell activity.
Учитывая экспрессию и функцию B7-H4, антител, которые специфически связываются с B7-H4, разрабатываются для терапии, включающей модуляцию B7-H4, например, для лечения рака. Соответственно, существует необходимость в фармацевтических композициях, содержащих антитела к B7-H4 и их антигенсвязывающие фрагменты, для введения в таких способах лечения.Given the expression and function of B7-H4, antibodies that specifically bind to B7-H4 are being developed for therapies involving modulation of B7-H4, such as the treatment of cancer. Accordingly, there is a need for pharmaceutical compositions containing anti-B7-H4 antibodies and antigen-binding fragments thereof for administration in such treatments.
3. Сущность изобретения3. Essence of the invention
В настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции, содержащие антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека.Provided herein are pharmaceutical compositions containing an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция состоящая из (i) антитела или его антигенсвязывающего фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, (ii) буфер, выбранный из группы, состоящей из ацетатного или цитратного буфера, и (iii) сахар, при этом pH композиции составляет от около 4,5 до около 6 или от 4,5 до 6.In certain aspects, a pharmaceutical composition consisting of (i) an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, (ii) a buffer selected from the group consisting of an acetate or citrate buffer, and (iii) a sugar, wherein the pH composition is from about 4.5 to about 6 or from 4.5 to 6.
В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит CDR 20502.In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof comprises CDR 20502.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит (i) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека и содержит CDR 20502, (ii) буфер и (iii) pH композиции составляет от около 4,5 до около 6 или от 4,5 до 6.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains (i) an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4 and contains CDR 20502, (ii) a buffer, and (iii) the pH of the composition is from about 4.5 to about 6 or from 4 ,5 to 6.
В определенных аспектах CDR 20502 представляют собой CDR, определенные по Кабату, CDR, определенные по Чотиа, или CDR, определенные по AbM. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат последовательности области, определяющей комплементарность (CDR) 1, вариабельной области тяжелой цепи (VH), CDR2 VH, CDR3 VH и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 5-10 соответственно.In certain aspects, CDRs 20502 are Kabat CDRs, Chotia CDRs, or AbM CDRs. In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof comprises complementarity determining region (CDR) 1, heavy chain variable region (VH), CDR2 VH, CDR3 VH, and variable light chain (VL) CDR1, CDR2 and CDR3 sequences SEQ ID NO: 5 -10 accordingly.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит не более чем 45% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит не более чем 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит от около 35% до около 45% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит от 35% до 45% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 20% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains no more than 45% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains no more than 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains from about 35% to about 45% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains from 35% to 45% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 20% of the major variants of the antibody or antigen-binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит не более чем 20% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит от около 9% до около 18% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит от 9% до 18% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 45% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains no more than 20% major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains from about 9% to about 18% major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains from 9% to 18% major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 45% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязы- 1 043376 вающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит не более чем 60% кислых и основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 55% кислых и основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 45% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах композиция содержит не более чем 20% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains no more than 60% acidic and basic variants of the antibody or antigen-binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C . In certain aspects, the composition contains no more than 55% acidic and basic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 45% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the composition contains no more than 20% of the major variants of the antibody or antigen-binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от около 30% до около 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от 30% до 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от около 35% до около 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от 35% до 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от около 10% до около 17% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from about 30% to about 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from 30% to 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from about 35% to about 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from 35% to 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from about 10% to about 17% major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от 10% до 17% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от около 11% до около 16% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C. В определенных аспектах фармацевтическая композиция содержит от 11% до 16% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from 10% to 17% of the major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from about 11% to about 16% major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C. In certain aspects, the pharmaceutical composition contains from 11% to 16% of the major variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах композиция содержит не более чем 55% кислых и основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев хранения при 5°C.In certain aspects, the composition contains no more than 55% acidic and basic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months of storage at 5°C.
В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит CDR 20502. В определенных аспектах CDR 20502 представляют собой CDR, определенные по Кабату, CDR, определенные по Чотиа, или CDR, определенные по AbM. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат последовательности области, определяющей комплементарность (CDR) 1, вариабельной области тяжелой цепи (VH), CDR2 VH, CDR3 VH и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 5-10 соответственно.In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof comprises CDR 20502. In certain aspects, CDR 20502 is a Kabat CDR, a Chotia CDR, or an AbM CDR. In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof comprises complementarity determining region (CDR) 1, heavy chain variable region (VH), CDR2 VH, CDR3 VH, and variable light chain (VL) CDR1, CDR2 and CDR3 sequences SEQ ID NO: 5 -10 accordingly.
В определенных аспектах pH композиции составляет от около 4,5 до около 6 или от 4,5 до 6.In certain aspects, the pH of the composition is from about 4.5 to about 6, or from 4.5 to 6.
В определенных аспектах композиция содержит буфер. В определенных аспектах буфер представляет собой ацетатный или цитратный буфер.In certain aspects, the composition contains a buffer. In certain aspects, the buffer is an acetate or citrate buffer.
В определенных аспектах композиция дополнительно содержит сахар. В определенных аспектах сахар выбран из группы, состоящей из сахарозы, сорбита и трегалозы.In certain aspects, the composition further contains sugar. In certain aspects, the sugar is selected from the group consisting of sucrose, sorbitol, and trehalose.
В определенных аспектах концентрация буфера составляет от около 15 мМ до около 25 мМ. В определенных аспектах концентрация буфера составляет от 15 до 25 мМ. В определенных аспектах концентрация буфера составляет от около 18 мМ до около 22 мМ. В определенных аспектах концентрация буфера составляет от 18 мМ до 22 мМ. В определенных аспектах концентрация буфера составляет около 20 мМ. В определенных аспектах концентрация буфера составляет 20 мМ.In certain aspects, the buffer concentration is from about 15 mM to about 25 mM. In certain aspects, the buffer concentration is from 15 to 25 mM. In certain aspects, the buffer concentration is from about 18 mM to about 22 mM. In certain aspects, the buffer concentration is from 18 mM to 22 mM. In certain aspects, the buffer concentration is about 20 mM. In certain aspects, the buffer concentration is 20 mM.
В определенных аспектах концентрация сахара составляет от около 225 мМ до около 300 мМ. В определенных аспектах концентрация сахара составляет от 225 мМ до 300 мМ. В определенных аспектах концентрация сахара составляет от около 250 мМ до около 290 мМ. В определенных аспектах концентрация сахара составляет от 250 мМ до 290 мМ. В определенных аспектах концентрация сахара составляет около 270 мМ. В определенных аспектах концентрация сахара составляет 270 мМ.In certain aspects, the sugar concentration is from about 225 mM to about 300 mM. In certain aspects, the sugar concentration is from 225 mM to 300 mM. In certain aspects, the sugar concentration is from about 250 mM to about 290 mM. In certain aspects, the sugar concentration is from 250 mM to 290 mM. In certain aspects, the sugar concentration is about 270 mM. In certain aspects, the sugar concentration is 270 mM.
В определенных аспектах концентрация сахара в от около 10 до около 15 раз превышает концентрацию буфера. В определенных аспектах концентрация сахара в от 10 до 15 раз превышает концентрацию буфера. В определенных аспектах концентрация сахара в около 13,5 раз превышает концентрацию буфера. В определенных аспектах концентрация сахара в 13,5 раз превышает концентрацию буфера.In certain aspects, the sugar concentration is about 10 to about 15 times the buffer concentration. In certain aspects, the sugar concentration is 10 to 15 times the buffer concentration. In certain aspects, the sugar concentration is about 13.5 times the buffer concentration. In certain aspects, the sugar concentration is 13.5 times the buffer concentration.
В определенных аспектах композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В определенных аспектах поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат. В определенных аспектах полисорбат представляет собой полисорбат 20. В определенных аспектах концентрация полисорбата составляет от около 0,025% до около 0,075% масса/объем (мас./об.). В определенных аспектах композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В определенных аспектах поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат. В определенных аспектах полисорбат представляет собой полисорбат 20. В определенных аспектах концентрация полисорбата составляет от 0,025% до 0,075% масса/объем (мас./об.). В определенных аспектах концентрация полисорбата составляет от около 0,035% до около 0,065% масса/объем (мас./об.). В определенных аспектах концентрация полисорбата составляет от 0,035% до 0,065% масса/объем (мас./об.). В определенных аспектах концентра- 2 043376 ция полисорбата составляет около 0,005% масса/объем (мас./об.). В определенных аспектах концентрация полисорбата составляет 0,005% масса/объем (мас./об.).In certain aspects, the composition further contains a surfactant. In certain aspects, the surfactant is a polysorbate. In certain aspects, the polysorbate is polysorbate 20. In certain aspects, the concentration of polysorbate is from about 0.025% to about 0.075% weight/volume (w/v). In certain aspects, the composition further contains a surfactant. In certain aspects, the surfactant is a polysorbate. In certain aspects, the polysorbate is polysorbate 20. In certain aspects, the concentration of polysorbate is from 0.025% to 0.075% weight/volume (w/v). In certain aspects, the concentration of polysorbate is from about 0.035% to about 0.065% weight/volume (w/v). In certain aspects, the polysorbate concentration is from 0.035% to 0.065% weight/volume (w/v). In certain aspects, the polysorbate concentration is about 0.005% weight/volume (w/v). In certain aspects, the polysorbate concentration is 0.005% weight/volume (w/v).
В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет от около 5 мг/мл до около 30 мг/мл. В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет от 5 мг/мл до 30 мг/мл. В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет от около 10 до около 25 мг/мл. В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет от 10 до 25 мг/мл. В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет около 20 мг/мл. В определенных аспектах концентрация антитела или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислые и основные варианты) составляет 20 мг/мл.In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is from about 5 mg/ml to about 30 mg/ml. In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is from 5 mg/ml to 30 mg/ml. In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is from about 10 to about 25 mg/ml. In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is from 10 to 25 mg/ml. In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is about 20 mg/ml. In certain aspects, the concentration of the antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) is 20 mg/ml.
В определенных аспектах pH композиции составляет от около 5,0 до около 6.0. В определенных аспектах pH композиции составляет от 5,0 до 6,0. В определенных аспектах pH композиции составляет около 5. В определенных аспектах pH композиции составляет 5. В определенных аспектах pH композиции составляет около 5,5. В определенных аспектах pH композиции составляет 5,5.In certain aspects, the pH of the composition is from about 5.0 to about 6.0. In certain aspects, the pH of the composition is from 5.0 to 6.0. In certain aspects, the pH of the composition is about 5. In certain aspects, the pH of the composition is 5. In certain aspects, the pH of the composition is about 5.5. In certain aspects, the pH of the composition is 5.5.
В определенных аспектах композиция представляет собой жидкость. В определенных аспектах композиция предназначена для парентерального введения. В определенных аспектах композиция предназначена для внутривенного введения. В определенных аспектах буфер представляет собой ацетатный буфер, а вспомогательное вещество представляет собой сахарозу. В определенных аспектах композиция содержит около 20 мМ ацетата, около 270 мМ сахарозы, около 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и около 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,0. В определенных аспектах композиция содержит концентрацию сахарозы, которая около в 13,5 раза превышает концентрацию ацетата, около 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и около 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,0. В определенных аспектах композиция содержит 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы, 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,0. В определенных аспектах композиция содержит концентрацию сахарозы, которая в 13,5 раза превышает концентрацию ацетата, 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,0.In certain aspects, the composition is a liquid. In certain aspects, the composition is intended for parenteral administration. In certain aspects, the composition is intended for intravenous administration. In certain aspects, the buffer is an acetate buffer and the excipient is sucrose. In certain aspects, the composition contains about 20 mM acetate, about 270 mM sucrose, about 20 mg/ml antibody or antigen binding fragment thereof, and about 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.0. In certain aspects, the composition contains a concentration of sucrose that is about 13.5 times the concentration of acetate, about 20 mg/ml of antibody or antigen binding fragment thereof, and about 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.0. In certain aspects, the composition contains 20 mM acetate, 270 mM sucrose, 20 mg/ml antibody or antigen binding fragment thereof, and 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being 5.0. In certain aspects, the composition contains a concentration of sucrose that is 13.5 times the concentration of acetate, 20 mg/ml of antibody or antigen binding fragment thereof, and 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being 5.0.
В определенных аспектах буфер представляет собой цитратный буфер, а вспомогательное вещество представляет собой сахарозу. В определенных аспектах композиция содержит около 20 мМ цитрата, около 270 мМ сахарозы, около 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и около 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,5. В определенных аспектах композиция содержит концентрацию сахарозы, которая в около 13,5 раза превышает концентрацию цитрата, около 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и около 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,5. В определенных аспектах композиция содержит 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы, 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,5. В определенных аспектах композиция содержит концентрацию сахарозы, которая в 13,5 раза превышает концентрацию цитрата, 20 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и 0,05% полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,5.In certain aspects, the buffer is a citrate buffer and the excipient is sucrose. In certain aspects, the composition contains about 20 mM citrate, about 270 mM sucrose, about 20 mg/ml antibody or antigen binding fragment thereof, and about 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.5. In certain aspects, the composition contains a concentration of sucrose that is about 13.5 times the concentration of citrate, about 20 mg/ml of antibody or antigen binding fragment thereof, and about 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.5. In certain aspects, the composition contains 20 mM citrate, 270 mM sucrose, 20 mg/ml antibody or antigen binding fragment thereof, and 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being 5.5. In certain aspects, the composition contains a concentration of sucrose that is 13.5 times the concentration of citrate, 20 mg/ml of antibody or antigen binding fragment thereof, and 0.05% polysorbate 20, the pH of the composition being 5.5.
В определенных аспектах антитело содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, и/или VL, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 21, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 22.In certain aspects, the antibody comprises a VH comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 11 and/or a VL comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 12. In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof comprises a heavy chain comprising an amino acid the sequence presented in SEQ ID NO: 21, and/or a light chain containing the amino acid sequence presented in SEQ ID NO: 22.
В определенных аспектах по меньшей мере 95% антител или их антигенсвязывающих фрагментов в композиции являются афукозилированными. В определенных аспектах фукозилирование в композиции является необнаруживаемым.In certain aspects, at least 95% of the antibodies or antigen-binding fragments thereof in the composition are afucosylated. In certain aspects, fucosylation in the composition is undetectable.
В определенных аспектах композиция содержит полноразмерное антитело.In certain aspects, the composition contains a full-length antibody.
В определенных аспектах композиция содержит антигенсвязывающий фрагмент. В определенных аспектах антигенсвязывающий фрагмент содержит Fab, Fab', F(ab')2, одноцепочечный Fv (scFv), дисульфидносвязанный Fv, V-NAR домен, IgNar, интратело, IgGACH2, миниантитело, F(ab')3, тетратело, триатело, диатело, однодоменное антитело, DVD-Ig, Fcab, mAb2, (scFv)2 или scFv-Fc.In certain aspects, the composition contains an antigen binding moiety. In certain aspects, the antigen binding fragment comprises a Fab, Fab', F(ab') 2 , single chain Fv (scFv), disulfide-linked Fv, V-NAR domain, IgNar, intrabody, IgGACH2, minibody, F(ab') 3 , tetrabody, tribody , diabody, single domain antibody, DVD-Ig, Fcab, mAb 2 , (scFv) 2 or scFv-Fc.
В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с B7-H4 яванского макака. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с B7-H4 крысы. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с B7-H4 мыши.In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof specifically binds to cynomolgus B7-H4. In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof specifically binds to rat B7-H4. In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof specifically binds to mouse B7-H4.
В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с IgV доменом B7-H4 человека.In certain aspects, the antibody or antigen binding fragment thereof specifically binds to the human IgV B7-H4 domain.
В определенных аспектах pI антитела или его антигенсвязывающего фрагмента составляет околоIn certain aspects, the pI of an antibody or antigen binding fragment thereof is about
- 3 043376- 3 043376
8,2. В определенных аспектах pI антитела или его антигенсвязывающего фрагмента составляет 8,2.8.2. In certain aspects, the pI of the antibody or antigen binding fragment thereof is 8.2.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция состоит из (i) антитела, содержащего тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 21, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 22, (ii) около 20 мМ ацетата, (iii) около 270 мМ сахарозы и (iv) около 0,05% масса/объем полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,0. В определенных аспектах фармацевтическая композиция состоит из (i) антитела, содержащего тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 21, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 22, (ii) 20 мМ ацетата, (iii) 270 мМ сахарозы и (iv) 0,05% масса/объем полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,0.In certain aspects, the pharmaceutical composition consists of (i) an antibody comprising a heavy chain comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 and/or a light chain containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, (ii) about 20 mM acetate, (iii) about 270 mM sucrose, and (iv) about 0.05% w/v polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.0. In certain aspects, the pharmaceutical composition consists of (i) an antibody comprising a heavy chain comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 and/or a light chain containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, (ii) 20 mM acetate, (iii) 270 mM sucrose and (iv) 0.05% w/v polysorbate 20, the pH of the composition being 5.0.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция состоит из (i) антитела, содержащего тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 21, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 22, (ii) около 20 мМ цитрата, (iii) около 270 мМ сахарозы и (iv) около 0,05% масса/объем полисорбата 20, причем pH композиции составляет около 5,5. В определенных аспектах фармацевтическая композиция состоит из (i) антитела, содержащего тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 21, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 22, (ii) 20 мМ цитрата, (iii) 270 мМ сахарозы и (iv) 0,05% масса/объем полисорбата 20, причем pH композиции составляет 5,5.In certain aspects, the pharmaceutical composition consists of (i) an antibody comprising a heavy chain comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 and/or a light chain containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, (ii) about 20 mM citrate, (iii) about 270 mM sucrose, and (iv) about 0.05% w/v polysorbate 20, the pH of the composition being about 5.5. In certain aspects, the pharmaceutical composition consists of (i) an antibody comprising a heavy chain comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 and/or a light chain containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, (ii) 20 mM citrate, (iii) 270 mM sucrose and (iv) 0.05% w/v polysorbate 20, the pH of the composition being 5.5.
В определенных аспектах шприц или флакон содержит фармацевтическую композицию, представленную в настоящем документе.In certain aspects, the syringe or vial contains a pharmaceutical composition provided herein.
В определенных аспектах способ лечения рака, экспрессирующего B7-H4 у субъекта, включает введение субъекту фармацевтической композиции, представленной в настоящем документе. В определенных аспектах рак представляет собой солидную опухоль. В определенных аспектах рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, протоковой карциномы, рака эндометрия, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака поджелудочной железы, рака щитовидной железы, рака почки и рака мочевого пузыря. В определенных аспектах рак молочной железы представляет собой трижды негативный рак молочной железы или положительный на рецептор гормона рак молочной железы. В определенных аспектах немелкоклеточный рак легких представляет собой плоскоклеточную карциному.In certain aspects, a method of treating cancer expressing B7-H4 in a subject includes administering to the subject a pharmaceutical composition provided herein. In certain aspects, cancer is a solid tumor. In certain aspects, the cancer is selected from the group consisting of breast cancer, ductal carcinoma, endometrial cancer, ovarian cancer, non-small cell lung cancer, pancreatic cancer, thyroid cancer, kidney cancer, and bladder cancer. In certain aspects, breast cancer is triple negative breast cancer or hormone receptor positive breast cancer. In certain aspects, non-small cell lung cancer is squamous cell carcinoma.
В определенных аспектах субъект представляет собой человека.In certain aspects the subject is a person.
В определенных аспектах фармацевтическая композиция вводится парентерально. В определенных аспектах фармацевтическая композиция вводится внутривенно.In certain aspects, the pharmaceutical composition is administered parenterally. In certain aspects, the pharmaceutical composition is administered intravenously.
4. Краткое описание графических материалов4. Brief description of graphic materials
На фиг. 1 представлена температура развертывания (Tm1) B7-H4 антитела 20502 (афукозилированное) при различных условиях pH, измеренных с помощью системы UNit. (См. пример 3.)In fig. 1 shows the unfolding temperature (Tm1) of B7-H4 antibody 20502 (afucosylated) under various pH conditions measured using the UNit system. (See example 3.)
На фиг. 2 представлено влияние pH буфера на образование агрегатов антитела к B7-H4 20502 (афукозилированное) при 40°C, как определено с помощью эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии (эксклюзионная ВЭЖХ). Состав для каждого значения pH приведен в табл. 13. Процент высокомолекулярных частиц (BMM) составлял около 0 при T0 для всех протестированных значений pH. (См. пример 3.)In fig. 2 shows the effect of buffer pH on the formation of anti-B7-H4 antibody 20502 (afucosylated) aggregates at 40°C as determined by size exclusion high performance liquid chromatography (SEC HPLC). The composition for each pH value is given in table. 13. The percentage of high molecular weight particles (BMM) was around 0 at T0 for all pH values tested. (See example 3.)
На фиг. 3 представлено влияние pH буфера на образование фрагмента при 40°C, как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ. Состав для каждого значения pH приведен в табл. 13. Процент низкомолекулярных частиц (HMM) составлял около 0 при T0 для всех протестированных pH. (См. пример 3.)In fig. 3 shows the effect of buffer pH on fragment formation at 40°C as determined by size exclusion HPLC. The composition for each pH value is given in table. 13. The percentage of low molecular weight species (HMM) was around 0 at T0 for all pH tested. (See example 3.)
На фиг. 4 представлено влияние pH буфера на образование агрегатов (как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C в составах, содержащих 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы и 0,05% полисорбата 20 (PS20). (См. пример 4.)In fig. Figure 4 shows the effect of buffer pH on aggregate formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C in formulations containing 20 mM citrate, 270 mM sucrose, and 0.05% polysorbate 20 (PS20). (See example 4.)
На фиг. 5 представлено влияние pH буфера на образование фрагмента (как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C в составах, содержащих 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20. Процент HMM составлял около 0 при T0 для всех протестированных pH. (См. пример 4.)In fig. Figure 5 shows the effect of buffer pH on fragment formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C in formulations containing 20 mM citrate, 270 mM sucrose and 0.05% PS20. The percentage of HMM was around 0 at T0 for all pH tested. (See example 4.)
На фиг. 6 представлено влияние pH буфера на кислотные варианты (как определено с помощью изоэлектрического фокусирования под визуализационным контролем (iCE)) при 40°C. (См. пример 4.)In fig. Figure 6 shows the effect of buffer pH on acidic variants (as determined by image-guided isoelectric focusing (iCE)) at 40°C. (See example 4.)
На фиг. 7 представлено влияние типов буферов на образование агрегатов (как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C. (См. пример 5.)In fig. Figure 7 shows the effect of buffer types on aggregate formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C. (See example 5.)
На фиг. 8 представлено влияние типов буферов на образование фрагментов (как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C. (См. пример 5.)In fig. Figure 8 shows the effect of buffer types on fragment formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C. (See example 5.)
На фиг. 9 представлено влияние типов буферов на образование кислых вариантов (как определено с помощью iCE) при 40°C. (См. пример 5.)In fig. Figure 9 shows the effect of buffer types on the formation of acidic variants (as determined by iCE) at 40°C. (See example 5.)
На фиг. 10 представлено влияние типов буферов на образование основных вариантов (как определено с помощью iCE) при 40°C. (См. пример 5.)In fig. Figure 10 shows the effect of buffer types on the formation of major variants (as determined by iCE) at 40°C. (See example 5.)
На фиг. 11 представлено влияние вспомогательных веществ на образование агрегатов (как определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C. (См. пример 6.)In fig. 11 shows the effect of excipients on aggregate formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C. (See example 6.)
На фиг. 12 представлено влияние вспомогательных веществ на образование фрагментов (как опре- 4 043376 делено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) при 40°C. (См. пример 6.)In fig. 12 shows the effect of excipients on fragment formation (as determined by size exclusion HPLC) at 40°C. (See example 6.)
На фиг. 13 представлено влияние вспомогательных веществ на кислотные варианты (как определено с помощью iCE) при 40°C. (См. пример 6.)In fig. Figure 13 shows the effect of excipients on acid variants (as determined by iCE) at 40°C. (See example 6.)
На фиг. 14 представлено влияние вспомогательных веществ на основные варианты (как определено с помощью iCE) при 40°C. (См. пример 6.)In fig. Figure 14 shows the effect of excipients on the main variants (as determined by iCE) at 40°C. (See example 6.)
На фиг. 15 представлен профиль дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) 20502 (афукозилированное) в выбранном составе. (См. пример 6.)In fig. Figure 15 shows the differential scanning calorimetry (DSC) profile of 20502 (afucosylated) in the selected formulation. (See example 6.)
5. Подробное описание сущности изобретения5. Detailed description of the invention
В настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции, содержащие антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с B7-H4 человека. Фармацевтические композиции могут быть стабильными, например, в условиях длительного хранения, при повторяющихся циклах замораживания-оттаивания (например, по меньшей мере 5 циклов) и/или при перемешивания. Как указано в настоящем документе, фармацевтическая композиция, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, может иметь pH от около 4,5 до около 6, антитело к B7H4 или его антигенсвязывающий фрагмент (например, в концентрации от около 5 до около 25 мг/мл), буфер (включая, но не ограничиваясь этим, ацетат или цитрат), вспомогательное вещество (включая, но не ограничиваясь этим, сахарозу, трегалозу и сорбит) и/или поверхностно-активное вещество (включая, но не ограничиваясь этим, полисорбат, например, полисорбат 20 (PS20)).Provided herein are pharmaceutical compositions containing an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4. Pharmaceutical compositions may be stable, for example, under long-term storage conditions, repeated freeze-thaw cycles (eg, at least 5 cycles) and/or stirring. As described herein, a pharmaceutical composition comprising an anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment thereof may have a pH of about 4.5 to about 6, the anti-B7H4 antibody or antigen-binding fragment thereof (e.g., at a concentration of about 5 to about 25 mg/ml), buffer (including but not limited to acetate or citrate), excipient (including but not limited to sucrose, trehalose and sorbitol) and/or surfactant (including but not limited to polysorbate, e.g. polysorbate 20 (PS20)).
В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предлагается жидкая водная фармацевтическая композиция, содержащая 20 мг/мл антитела к B7-H4 (например, афукозилированное антитело 20502) в 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20 с pH 5,0. В другом варианте осуществления в настоящем документе предлагается жидкая водная фармацевтическая композиция, содержащая 20 мг/мл антитела к B7-H4 (например, афукозилированное антитело 20502) в 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20 с pH 5,5.In a specific embodiment, provided herein is a liquid aqueous pharmaceutical composition containing 20 mg/ml anti-B7-H4 antibody (eg, afucosylated antibody 20502) in 20 mM acetate, 270 mM sucrose, and 0.05% PS20 pH 5.0. In another embodiment, provided herein is a liquid aqueous pharmaceutical composition containing 20 mg/ml anti-B7-H4 antibody (eg, afucosylated antibody 20502) in 20 mM citrate, 270 mM sucrose, and 0.05% PS20 pH 5.5.
Фармацевтические композиции, представленные в настоящем документе, могут быть полезны для лечения состояний, таких как рак.The pharmaceutical compositions provided herein may be useful for treating conditions such as cancer.
1. Терминология.1. Terminology.
Термин B7-H4, в контексте настоящего документа, относится к полипептидам B7-H4 млекопитающих, включая, но не ограничиваясь этим, нативные полипептиды B7-H4 и изоформы полипептидов B7-H4. B7-H4 охватывает полноразмерные непроцессированные полипептиды B7-H4, а также формы полипептидов B7-H4, которые возникают в результате процессинга внутри клетки. Полинуклеотид B7H4, нуклеотид B7-H4 или нуклеиновая кислота B7-H4 относится к полинуклеотиду, кодирующему B7-H4.The term B7-H4, as used herein, refers to mammalian B7-H4 polypeptides, including, but not limited to, native B7-H4 polypeptides and isoforms of B7-H4 polypeptides. B7-H4 covers full-length, full-length B7-H4 polypeptides, as well as forms of B7-H4 polypeptides that arise from intracellular processing. B7H4 polynucleotide, B7-H4 nucleotide or B7-H4 nucleic acid refers to a polynucleotide encoding B7-H4.
Термин антитело означает молекулу иммуноглобулина, которая распознает и специфически связывается с мишенью, такой как белок, полипептид, пептид, углевод, полинуклеотид, липид или комбинации вышеуказанного по меньшей мере через один сайт распознавания антигена в вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Термин антитело, в контексте настоящего документа, охватывает интактные поликлональные антитела, интактные моноклональные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, антитела человека, слитые белки, содержащие антитело, и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, при условии, что антитела проявляют желаемую биологическую активность. Антитело может относиться к любому из пяти основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, или их подклассов (изотипов) (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) на основании идентичности их константных доменов тяжелой цепи, называемых альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю соответственно. Различные классы иммуноглобулинов имеют отличные и хорошо известные структуры субъединиц, и трехмерные конфигурации. Антитела могут быть голыми или конъюгированы с другими молекулами, такими как токсины, радиоизотопы и т.д.The term antibody means an immunoglobulin molecule that recognizes and specifically binds to a target, such as a protein, polypeptide, peptide, carbohydrate, polynucleotide, lipid, or combinations thereof, through at least one antigen recognition site in the variable region of the immunoglobulin molecule. The term antibody, as used herein, includes intact polyclonal antibodies, intact monoclonal antibodies, chimeric antibodies, humanized antibodies, human antibodies, antibody-containing fusion proteins, and any other modified immunoglobulin molecule, provided that the antibodies exhibit the desired biological activity. An antibody may belong to any of the five major immunoglobulin classes: IgA, IgD, IgE, IgG, and IgM, or subclasses (isotypes) thereof (e.g., IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, and IgA2) based on the identity of their heavy chain constant domains , called alpha, delta, epsilon, gamma and mu respectively. The different classes of immunoglobulins have distinct and well-known subunit structures and three-dimensional configurations. Antibodies can be naked or conjugated to other molecules such as toxins, radioisotopes, etc.
Термин фрагмент антитела относится к части интактного антитела. Антигенсвязывающий фрагмент, антигенсвязывающий домен или антигенсвязывающая область относится к части интактного антитела, которая связывается с антигеном. Антигенсвязывающий фрагмент может содержать антигенный участок распознавания интактного антитела (например, определяющие комплементарность области (CDR), достаточные для специфического связывания антигена). Примеры антигенсвязывающих фрагментов антител включают, но не ограничиваются ими, фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv, линейные антитела и одноцепочечные антитела. Антигенсвязывающий фрагмент антитела может быть получен из любых видов животных, таких как грызуны (например, мышь, крыса или хомяк) и человека, или может быть получен искусственно.The term antibody fragment refers to a portion of an intact antibody. An antigen-binding fragment, antigen-binding domain, or antigen-binding region refers to the portion of an intact antibody that binds an antigen. The antigen binding fragment may comprise an antigen recognition site for an intact antibody (eg, complementarity determining regions (CDRs) sufficient for specific antigen binding). Examples of antigen binding antibody fragments include, but are not limited to, Fab, Fab', F(ab') 2 and Fv fragments, linear antibodies and single chain antibodies. The antigen-binding antibody fragment can be obtained from any animal species, such as rodents (eg, mouse, rat or hamster) and humans, or can be produced artificially.
Термины антитело к B7-H4 и антитело, которое связывается с B7-H4 относятся к антителу, которое способно специфически связываться с B7-H4 с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано как диагностический и/или терапевтический агент для нацеливания на B7-H4. Термины специфически связывающий, иммуноспецифически связывающий, иммуноспецифически распознающий и специфически распознающий, в контексте настоящего документа, являются аналогичными терминами в контексте антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Эти термины указывают, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с эпитопом через его антигенсвязывающийThe terms anti-B7-H4 antibody and antibody that binds to B7-H4 refer to an antibody that is capable of specifically binding to B7-H4 with sufficient affinity such that the antibody can be used as a diagnostic and/or therapeutic agent to target B7-H4 . The terms specific binding, immunospecific binding, immunospecific recognizing and specific recognizing, as used herein, are analogous terms in the context of antibodies or antigen binding fragments thereof. These terms indicate that the antibody or antigen-binding fragment binds to an epitope through its antigen-binding
- 5 043376 домен и что связывание влечет за собой некоторую комплементарность между антигенсвязывающим доменом и эпитопом. Соответственно, антитело, которое специфически связывается с B7-H4 человека (SEQ ID NO: 1), может также связываться с B7-H4 из других видов (например, B7-H4 яванского макака, мыши и/или крысы) и/или B7-H4 белком, продуцируемые из других аллелей человека, но степень связывания с несвязанным белком, не относящимся к B7-H4 (например, другими членами семейства белков B7, такими как PD-L1), составляет менее чем около 10% связывания антитела с B7-H4, как измерено, например, радиоиммуноанализом (RIA). В конкретном варианте осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для применения в составе, представленном в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека, яванского макака, мыши и крысы.- 5 043376 domain and that binding entails some complementarity between the antigen binding domain and the epitope. Accordingly, an antibody that specifically binds to human B7-H4 (SEQ ID NO: 1) may also bind to B7-H4 from other species (eg, cynomolgus, mouse, and/or rat B7-H4) and/or B7- H4 protein produced from other human alleles, but the extent of binding to unbound non-B7-H4 protein (e.g., other members of the B7 protein family such as PD-L1) is less than about 10% of antibody binding to B7-H4 , as measured, for example, by radioimmunoassay (RIA). In a specific embodiment, an antibody or antigen binding fragment thereof for use in a formulation provided herein specifically binds to human, cynomolgus, mouse and rat B7-H4.
Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к популяции гомогенного антитела или антигенсвязывающего фрагмента, вовлеченного в высокоспецифичное распознавание и связывание одной антигенной детерминанты или эпитопа. Это отличается от поликлональных антител, которые обычно включают разные антитела, направленные против разных антигенных детерминант. Термин моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент охватывает как интактные, так и полноразмерные моноклональные антитела, а также фрагменты антител (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv), одноцепочечные (scFv) мутанты, слитые белки, содержащие часть антитела, и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, содержащую участок распознавания. Кроме того, моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к таким антителам и их антигенсвязывающим фрагментам, полученным любым числом способов, включая, но не ограничиваясь ими, гибридомы, фаговый отбор, рекомбинантная экспрессия и трансгенные животные.A monoclonal antibody or antigen-binding fragment thereof refers to a population of homogeneous antibody or antigen-binding fragment involved in highly specific recognition and binding of a single antigenic determinant or epitope. This is in contrast to polyclonal antibodies, which typically include different antibodies directed against different antigenic determinants. The term monoclonal antibody or antigen-binding fragment thereof covers both intact and full-length monoclonal antibodies, as well as antibody fragments (such as Fab, Fab', F(ab') 2 , Fv), single chain (scFv) mutants, fusion proteins containing part antibodies, and any other modified immunoglobulin molecule containing a recognition site. In addition, a monoclonal antibody or antigen-binding fragment thereof refers to such antibodies and antigen-binding fragments thereof produced by any number of methods, including, but not limited to, hybridomas, phage selection, recombinant expression and transgenic animals.
Термины вариабельная область или вариабельный домен, в контексте настоящего документа, используются взаимозаменяемо и являются общими в данной области техники. Вариабельная область обычно относится к части антитела, обычно к части легкой или тяжелой цепи, обычно к аминоконцу от 110 до 120 аминокислот или от 110 до 125 аминокислот в зрелой тяжелой цепи и от около 90 до 115 аминокислот в зрелой легкой цепи, которые различаются по последовательности среди антител и используются в связывании и специфичности конкретного антитела к его конкретному антигену. Изменчивость в последовательности сконцентрирована в тех областях, которые называются областями, определяющими комплементарность (CDR), в то время как более высоко консервативные области в вариабельном домене называются каркасными областями (FR). Не желая быть связанными каким-либо конкретным механизмом или теорией, полагают, что CDR легкой и тяжелой цепей несут основную ответственность за взаимодействие и специфичность антитела с антигеном. В определенных вариантах осуществления вариабельная область представляет собой вариабельную область человека. В некоторых вариантах осуществления вариабельная область включает CDR грызунов или мыши, и каркасные области человека (FR). В конкретных вариантах осуществления вариабельная область представляет собой вариабельную область приматов (например, приматов, не являющихся человеком). В некоторых вариантах осуществления вариабельная область включает CDR грызунов или мыши, и каркасные области приматов (FR).The terms variable region or variable domain, as used herein, are used interchangeably and are common in the art. A variable region typically refers to a portion of an antibody, typically a portion of the light or heavy chain, typically the amino terminus 110 to 120 amino acids or 110 to 125 amino acids in the mature heavy chain and about 90 to 115 amino acids in the mature light chain, which vary in sequence among antibodies and are used in the binding and specificity of a particular antibody to its particular antigen. Variation in the sequence is concentrated in those regions called complementarity determining regions (CDRs), while the more highly conserved regions in the variable domain are called framework regions (FRs). Without wishing to be bound by any particular mechanism or theory, it is believed that the light and heavy chain CDRs are primarily responsible for antibody-antigen interaction and specificity. In certain embodiments, the variable region is a human variable region. In some embodiments, the variable region includes rodent or mouse CDRs and human framework regions (FRs). In specific embodiments, the variable region is a primate (eg, non-human primate) variable region. In some embodiments, the variable region includes rodent or mouse CDRs and primate framework regions (FRs).
Термины VL и домен VL используются взаимозаменяемо для обозначения вариабельной области легкой цепи антитела.The terms VL and VL domain are used interchangeably to refer to the variable region of the light chain of an antibody.
Термины VH и домен VH используются взаимозаменяемо для обозначения вариабельной области тяжелой цепи антитела.The terms VH and VH domain are used interchangeably to refer to the variable region of the heavy chain of an antibody.
Термин нумерация по Кабат и подобные термины известны в данной области техники и относятся к системе нумерации аминокислотных остатков в вариабельных областях тяжелой и легкой цепи антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента. В определенных аспектах CDR могут быть определены в соответствии с системой нумерации по Кабат (см., например, Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 and Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NTH Publication No. 91-3242). Используя систему нумерации по Кабат, CDR в молекуле тяжелой цепи антитела обычно присутствуют в положениях аминокислот от 31 до 35, которые необязательно могут включать одну или две дополнительные аминокислоты, следующие за 35 (упоминается в схеме нумерации по Кабат как 35A и 35B) (CDR1), положения аминокислот от 50 до 65 (CDR2) и положения аминокислот от 95 до 102 (CDR3). Используя систему нумерации по Кабат, CDR в молекуле легкой цепи антитела обычно присутствуют в положениях аминокислот 24-34 (CDR1), положениях аминокислот 50-56 (CDR2) и положениях аминокислот 89-97 (CDR3). В конкретном варианте осуществления CDR антител, описанных в настоящем документе, были определены в соответствии со схемой нумерации по Кабат.The term Kabat numbering and similar terms are known in the art and refer to a system for numbering amino acid residues in the heavy and light chain variable regions of an antibody, or antigen binding fragment thereof. In certain aspects, CDRs may be defined in accordance with the Kabat numbering system (see, for example, Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 and Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NTH Publication No. 91-3242). Using the Kabat numbering system, CDRs in an antibody heavy chain molecule are typically present at amino acid positions 31 to 35, which may optionally include one or two additional amino acids following 35 (referred to in the Kabat numbering scheme as 35A and 35B) (CDR1) , amino acid positions 50 to 65 (CDR2) and amino acid positions 95 to 102 (CDR3). Using the Kabat numbering system, CDRs in an antibody light chain molecule are typically present at amino acid positions 24-34 (CDR1), amino acid positions 50-56 (CDR2), and amino acid positions 89-97 (CDR3). In a specific embodiment, the CDRs of the antibodies described herein have been identified according to the Kabat numbering scheme.
Система нумерации Чотиа ссылается вместо этого на расположение структурных петель (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Конец петли CDR-H1 по Чотиа при нумерации согласно системе нумерации по Кабату варьируется между H32 и H34 в зависимости от длины петли (это связано с тем, что в схеме нумерации по Кабат в H35A и H35B размещаются вставки; если ни 35A, ни 35B не присутствуют, петля заканчивается на 32; если присутствует только 35A, петля заканчивается на 33; если присутствуют оба 35A и 35B, петля заканчивается на 34). Гипервариабельные области AbM представляют собой компромисс между CDR по Кабат и структурными петлями по Чотиа, и используются программным обеспечением Oxford Molecular для моделирования антител AbM.Chothia's numbering system refers instead to the location of structural loops (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). The end of the CDR-H1 Chotia loop when numbered according to the Kabat numbering system varies between H32 and H34 depending on the length of the loop (this is because the Kabat numbering scheme places inserts in H35A and H35B; if neither 35A nor 35B are present, the loop ends on 32; if only 35A is present, the loop ends on 33; if both 35A and 35B are present, the loop ends on 34). AbM hypervariable regions represent a compromise between Kabat's CDRs and Chotia's structural loops, and are used by Oxford Molecular software to model AbM antibodies.
- 6 043376- 6 043376
Термин константная область и константный домен, в контексте настоящего документа, являются взаимозаменяемыми и имеют общие значения в данной области техники. Константная область представляет собой часть антитела, например, карбоксильную концевую часть легкой и/или тяжелой цепи, которая не участвует непосредственно в связывании антитела с антигеном, но которая может проявлять различные эффекторные функции, такие как взаимодействие с Fc-рецептором. Константная область молекулы иммуноглобулина обычно имеет более консервативную аминокислотную последовательность относительно вариабельного домена иммуноглобулина. В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит константную область или ее часть, достаточную для антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (ADCC).The terms constant region and constant domain, as used herein, are used interchangeably and have common meanings in the art. A constant region is a portion of an antibody, such as the carboxyl-terminal portion of the light and/or heavy chain, that is not directly involved in the binding of the antibody to an antigen, but which may exhibit various effector functions, such as interaction with the Fc receptor. The constant region of an immunoglobulin molecule usually has a more conserved amino acid sequence relative to the variable domain of the immunoglobulin. In certain aspects, the antibody or antigen-binding fragment thereof comprises a constant region or portion thereof sufficient to cause antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC).
Термин тяжелая цепь, в контексте настоящего документа, при использовании в отношении антитела может относиться к любому отдельному типу, например, альфа (α), дельта (δ), эпсилон (ε), гамма (γ) и мю (μ), на основе аминокислотной последовательности константного домена, которая приводит к классам антител IgA, IgD, IgE, IgG и IgM соответственно, включая подклассы IgG, например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Аминокислотные последовательности тяжелой цепи хорошо известны в данной области техники. В конкретных вариантах осуществления тяжелая цепь представляет собой тяжелую цепь человека.The term heavy chain, as used herein, when used in relation to an antibody, can refer to any single type, for example, alpha (α), delta (δ), epsilon (ε), gamma (γ) and mu (μ), based on constant domain amino acid sequence that gives rise to the antibody classes IgA, IgD, IgE, IgG, and IgM, respectively, including IgG subclasses such as IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4. Heavy chain amino acid sequences are well known in the art. In specific embodiments, the heavy chain is a human heavy chain.
Термин легкая цепь, в контексте настоящего документа, при использовании в отношении антитела может относиться к любому другому типу, например, каппа (к) или лямбда (λ) на основе аминокислотной последовательности константных доменов. Аминокислотные последовательности легкой цепи хорошо известны в данной области техники. В конкретных вариантах осуществления легкая цепь представляет собой легкую цепь человека.The term light chain, as used herein, when used in relation to an antibody, can refer to any other type, for example, kappa (k) or lambda (λ) based on the amino acid sequence of the constant domains. Light chain amino acid sequences are well known in the art. In specific embodiments, the light chain is a human light chain.
Термин химерные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты относятся к антителам или их антигенсвязывающим фрагментам, причем аминокислотная последовательность происходит от двух или более видов. Как правило, вариабельная область как легкой, так и тяжелой цепей соответствует вариабельной области антител или их антигенсвязывающих фрагментов, полученных от одного вида млекопитающих (например, мыши, крысы, кролика и т. д.) с желаемой специфичностью, аффинностью и способностью, в то время как константные области гомологичны последовательностям антител или их антигенсвязывающих фрагментов, полученных от другого (обычно человека), чтобы избежать вызывания иммунного ответа у этого вида.The term chimeric antibodies or antigen-binding fragments thereof refers to antibodies or antigen-binding fragments thereof where the amino acid sequence is derived from two or more species. Typically, the variable region of both the light and heavy chains corresponds to the variable region of antibodies or antigen-binding fragments thereof obtained from a single mammalian species (e.g., mouse, rat, rabbit, etc.) with the desired specificity, affinity, and potency, while while the constant regions are homologous to sequences of antibodies or antigen-binding fragments thereof obtained from another (usually a human) to avoid eliciting an immune response in that species.
Термин гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к формам нечеловеческих (например, мышиных) антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые представляют собой специфические цепи иммуноглобулинов, химерные иммуноглобулины или их фрагменты, которые содержат минимальное количество нечеловеческой последовательности (например, мыши). Как правило, гуманизированные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты представляют собой иммуноглобулины человека, в которых остатки из комплементарной определяющей области (CDR) заменены остатками из CDR нечеловеческого вида (например, мыши, крысы, кролика, хомяка), которые имеют желаемую специфичность, аффинность и способность (привитые CDR) (Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)). В некоторых случаях определенные остатки каркасной области Fv (FR) иммуноглобулина человека заменяются соответствующими остатками в антителе или фрагменте вида, не принадлежащему к человеку, который обладает желаемой специфичностью, аффинностью и способностью. Гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть дополнительно модифицированы путем замены дополнительных остатков либо в каркасной области Fv, и/или в остатках CDR нечеловеческого происхождения для уточнения и оптимизации специфичности антитела, его антигенсвязывающего фрагмента, аффинности и/или способности. В общем, гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент будет содержать вариабельные домены, содержащие все или по существу все области CDR, которые соответствуют иммуноглобулину, не относящемуся к человеку, тогда как все или по суThe term humanized antibody or antigen-binding fragment thereof refers to forms of non-human (eg, murine) antibodies or antigen-binding fragments that are specific immunoglobulin chains, chimeric immunoglobulins, or fragments thereof that contain a minimal amount of non-human (eg, murine) sequence. Typically, humanized antibodies or antigen-binding fragments thereof are human immunoglobulins in which residues from the complementary determining region (CDR) are replaced by residues from the CDR of a non-human species (eg, mouse, rat, rabbit, hamster) that have the desired specificity, affinity, and potency. (grafted CDRs) (Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)) . In some cases, certain residues of the human immunoglobulin Fv framework region (FR) are replaced by corresponding residues in an antibody or fragment of a non-human species that has the desired specificity, affinity and potency. The humanized antibody or antigen binding fragment thereof may be further modified by substitution of additional residues in either the Fv framework region and/or non-human CDR residues to refine and optimize the antibody, antigen binding fragment specificity, affinity and/or potency. In general, a humanized antibody or antigen binding fragment thereof will contain variable domains containing all or substantially all of the CDR regions that correspond to a non-human immunoglobulin, while all or substantially all
- 7 043376 ществу все области FR являются таковыми из консенсусной последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент также могут содержать по меньшей мере часть константной области или домена иммуноглобулина (Fc), обычно иммуноглобулина человека. Примеры способов, используемые для получения гуманизированных антител, описаны в патенте США № 5225539; Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994), и Roguska et al., Protein Eng. 9(10):895-904 (1996). В некоторых вариантах осуществления гуманизированное антитело представляет собой антитело с измененной поверхностью.- 7 043376 in society, all FR regions are those of the human immunoglobulin consensus sequence. The humanized antibody or antigen binding fragment thereof may also comprise at least a portion of an immunoglobulin constant region or domain (Fc), typically human immunoglobulin. Examples of methods used to obtain humanized antibodies are described in US Pat. No. 5,225,539; Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994), and Roguska et al., Protein Eng. 9(10):895-904 (1996). In some embodiments, the humanized antibody is a surface-edited antibody.
Термин антитело человека или его антигенсвязывающий фрагмент означает антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий аминокислотную последовательность, полученную из генного локуса иммуноглобулина человека, где такое антитело или антигенсвязывающий фрагмент получают с использованием любого способа, известного в данной области техники. Данное определение антитела человека или его антигенсвязывающего фрагмента включает интактные или полноразмерные антитела и их фрагменты.The term human antibody or antigen-binding fragment thereof means an antibody or antigen-binding fragment thereof having an amino acid sequence derived from the human immunoglobulin gene locus, wherein such antibody or antigen-binding fragment is produced using any method known in the art. This definition of a human antibody or antigen-binding fragment thereof includes intact or full-length antibodies and fragments thereof.
Афукозилированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, или антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, лишенные фукозы, относится к антителу изотипа IgG1 или IgG3, или его антигенсвязывающему фрагменту, в котором отсутствует гликозилирование константной области фукозы. Гликозилирование IgG1 или IgG3 человека происходит по Asn297 в виде гликозилирования олигосахаридным диантеннарным комплексом фукозы, оканчивающимся после 2 остатков Gal. В некоторых вариантах осуществления афукозилированное антитело лишено фукозы по Asn297. Эти структуры обозначены как остатки гликана G0, Gl (a 1,6 или 1,3) или G2 в зависимости от количества концевых остатков Gal. См., например, Raju, T. S., BioProcess Int. 1: 44-53 (2003). Гликозилирование типа CHO антитела Fc описано, например, в Routier, F. FL, Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997).An afucosylated antibody or antigen-binding fragment thereof, or an antibody or antigen-binding fragment thereof lacking fucose, refers to an antibody of the IgG1 or IgG3 isotype, or an antigen-binding fragment thereof, that lacks glycosylation of the fucose constant region. Glycosylation of human IgG1 or IgG3 occurs at Asn297 in the form of glycosylation with an oligosaccharide diantennary fucose complex ending after 2 Gal residues. In some embodiments, the afucosylated antibody lacks fucose at Asn297. These structures are designated as G0, Gl (a 1.6 or 1.3) or G2 glycan residues depending on the number of terminal Gal residues. See, for example, Raju, T. S., BioProcess Int. 1:44-53 (2003). Glycosylation of the CHO antibody Fc type is described, for example, in Routier, F. FL, Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997).
Способы измерения количества фукозы включают любые способы, известные в данной области техники. Для целей настоящего изобретения фукозу обнаруживают способом, описанным в Примере 1 WO 2015/017600, который полностью включен в настоящее описание посредством ссылки. Вкратце, анализ гликанов осуществляют путем высвобождения гликанов из антитела (например, путем ферментативного высвобождения), маркировки гликанов антраниловой кислотой (2-AA), а затем очистки меченых гликанов. Для разделения гликанов и измерения относительного количества каждого гликана в антителе используют ВЭЖХ с нормальной фазой с флуоресцентным детектированием. Гликаны могут быть положительно идентифицированы с отсутствием или включением фукозы с помощью масс-спектрометрии. В некоторых вариантах осуществления фукоза является необнаруживаемой в композиции, содержащей множество афукозилированных антител или их антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых вариантах осуществления афукозилированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент обладает повышенной активностью ADCC, что может быть измерено с помощью анализа, приведенного в Примере 12 в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления афукозилированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент обладает повышенной аффинностью к Fc-гамма RIIIA. В некоторых вариантах осуществления афукозилированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент обладает повышенной аффинностью к Fc-гамма RIIIA(V158). В некоторых вариантах осуществления афукозилированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент обладает повышенной аффинностью к Fcгамма RIIIA(F158). Сродство к Fc-гамма RIIIA или его аллелям можно измерить с помощью анализа, приведенного в Примере 10 в настоящем документе.Methods for measuring the amount of fucose include any methods known in the art. For the purposes of the present invention, fucose is detected by the method described in Example 1 of WO 2015/017600, which is incorporated herein by reference in its entirety. Briefly, glycan analysis is performed by releasing the glycans from the antibody (eg, by enzymatic release), labeling the glycans with anthranilic acid (2-AA), and then purifying the labeled glycans. Normal phase HPLC with fluorescence detection is used to separate the glycans and measure the relative amount of each glycan in the antibody. Glycans can be positively identified with the absence or inclusion of fucose using mass spectrometry. In some embodiments, fucose is undetectable in a composition containing a plurality of afucosylated antibodies or antigen binding fragments thereof. In some embodiments, the afucosylated antibody or antigen binding fragment thereof has increased ADCC activity, which can be measured using the assay set forth in Example 12 herein. In some embodiments, the afucosylated antibody or antigen binding fragment thereof has increased affinity for Fc-gamma RIIIA. In some embodiments, the afucosylated antibody or antigen binding fragment thereof has increased affinity for Fc-gamma RIIIA(V158). In some embodiments, the afucosylated antibody or antigen binding fragment thereof has increased affinity for Fcgamma RIIIA(F158). Affinity for Fc-gamma RIIIA or its alleles can be measured using the assay described in Example 10 herein.
Аффинность связывания обычно относится к силе общей суммы нековалентных взаимодействий между одним сайтом связывания молекулы (например, антителом или его антигенсвязывающим фрагментом) и его партнером связывания (например, антигеном). Если не указано иное, в контексте настоящего документа, аффинность связывания относится к внутренней аффинности связывания, которая отражает взаимодействие 1:1 между членами пары связывания (например, антителом или его антигенсвязывающим фрагментом и антигеном). Сродство молекулы X к ее партнеру Y обычно может быть представлено константой диссоциации (KD). Сродство может быть измерено и/или выражено несколькими способами, известными в данной области техники, включая, но не ограничиваясь этим, константу равновесной диссоциации (KD) и константу равновесной ассоциации (KA). KD вычисляется из отношения koff/kon, тогда как KA вычисляется из отношения kon/koff. kon относится к константе скорости ассоциации, например, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с антигеном, а koff относится к диссоциации, например, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с антигеном, kon and koff могут быть определены способами, известными специалисту в данной области техники, такими как BIAcore® или KinExA.Binding affinity generally refers to the strength of the total sum of non-covalent interactions between one binding site of a molecule (eg, an antibody or an antigen-binding fragment thereof) and its binding partner (eg, an antigen). Unless otherwise specified, as used herein, binding affinity refers to an intrinsic binding affinity that reflects a 1:1 interaction between members of a binding pair (eg, an antibody or antigen-binding fragment thereof and an antigen). The affinity of a molecule X for its partner Y can usually be represented by the dissociation constant (KD). Affinity can be measured and/or expressed in several ways known in the art, including, but not limited to, the equilibrium dissociation constant (KD) and the equilibrium association constant (KA). KD is calculated from the ratio k off /k on , while KA is calculated from the ratio k on /k off . k on refers to the rate constant of association of, for example, an antibody or an antigen-binding fragment thereof with an antigen, and ko ff refers to the dissociation of, for example, an antibody or an antigen-binding fragment thereof with an antigen, k on and k off can be determined by methods known to one skilled in the art techniques such as BIAcore® or KinExA.
Термин эпитоп, в контексте настоящего документа, является термином в данной области техники и относится к локализованной области антигена, с которой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент могут специфически связываться. Эпитоп может представлять собой, например, смежные аминокислоты полипептида (линейный или непрерывный эпитоп) или эпитоп, например, может объединяться из двух или более несмежных областей полипептида или полипептидов (конформационных, нелинейных, прерывистых или несмежных эпитопов). В некоторых вариантах осуществления эпитоп, с которым специфически связывается антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, может быть определен, наприThe term epitope, as used herein, is a term in the art and refers to a localized region of an antigen to which an antibody or antigen-binding fragment thereof can specifically bind. An epitope may be, for example, contiguous amino acids of a polypeptide (linear or continuous epitope) or an epitope, for example, may be combined from two or more non-contiguous regions of a polypeptide or polypeptides (conformational, non-linear, discontinuous or non-contiguous epitopes). In some embodiments, the epitope to which an antibody or antigen-binding fragment thereof specifically binds can be determined, e.g.
- 8 043376 мер, с помощью ЯМР-спектроскопии, исследований рентгеновской дифракционной кристаллографии, анализов ИФА, обмена водород/дейтерий в сочетании с масс-спектрометрией (например, жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией с электрораспылением), анализов на основе олигопептидного сканирования и/или мутагенезного картирования (например, картирование сайт-направленного мутагенеза). Для рентгеновской кристаллографии, кристаллизация может быть выполнена с использованием любого из известных в данной области техники способов (например, Giege R et al., (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350; McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274; McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303). Кристаллы антитело/его антигенсвязывающий фрагмент: антиген могут быть изучены с использованием хорошо известных способов дифракции рентгеновских лучей и могут быть уточнены с использованием компьютерного программного обеспечения, такого как X-PLOR (Yale University, 1992, распространяется Molecular Simulations, Inc.; см., например, Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; U.S. 2004/0014194), и BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, ed Carter CW; Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 13161323). Исследования мутагенезного картирования могут быть выполнены с использованием любого способа, известного специалисту в данной области техники. См., например, Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 и Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085 для описания способов мутагенеза, включая способы аланин-сканирующего мутагенеза.- 8 043376 measures, by NMR spectroscopy, X-ray diffraction crystallography studies, ELISA assays, hydrogen/deuterium exchange coupled with mass spectrometry (e.g. liquid chromatography with electrospray mass spectrometry), oligopeptide scanning assays and/or mutagenesis mapping (eg, site-directed mutagenesis mapping). For X-ray crystallography, crystallization can be performed using any of the methods known in the art (for example, Giege R et al., (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350; McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274; McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303). Crystals of the antibody/antigen binding fragment: antigen can be studied using well known X-ray diffraction techniques and can be refined using computer software such as X-PLOR (Yale University, 1992, distributed by Molecular Simulations, Inc.; see, for example, Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; U.S. 2004/0014194), and BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, ed Carter CW; Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 13161323). Mutagenesis mapping studies can be performed using any method known to one skilled in the art. See, for example, Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 and Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085 for descriptions of mutagenesis methods, including alanine scanning mutagenesis methods.
Полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция, которые выделены, представляет собой полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетку или композицию, которая находится в форме, не встречающейся в природе. Выделенные полипептиды, антитела, полинуклеотиды, векторы, клетка или композиции включают те, которые были очищены до такой степени, что они больше не присутствуют в той форме, в которой они находятся в природе. В некоторых вариантах осуществления выделенные антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция являются по существу чистой. Термин по существу чистый, в контексте настоящего документа, относится к материалу, который имеет чистоту по меньшей мере 50% (т.е., не содержит загрязнений), чистоту по меньшей мере 90%, чистоту по меньшей мере 95%, чистоту по меньшей мере 98% или чистоту по меньшей мере 99%.The polypeptide, antibody, polynucleotide, vector, cell or composition that is isolated is a polypeptide, antibody, polynucleotide, vector, cell or composition that is in a form not found in nature. Isolated polypeptides, antibodies, polynucleotides, vectors, cells or compositions include those that have been purified to such an extent that they are no longer present in the form in which they occur naturally. In some embodiments, the isolated antibody, polynucleotide, vector, cell, or composition is substantially pure. The term substantially pure, as used herein, refers to a material that is at least 50% pure (i.e., free of contaminants), at least 90% pure, at least 95% pure, at least at least 98% or at least 99% purity.
Термины полипептид, пептид и белок используются в настоящем документе взаимозаменяемо для обозначения полимеров аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и он может быть разделен не аминокислотами. Кроме того, указанные термины включают аминокислотный полимер, который был модифицирован природным путем или путем вмешательства; например, образованием дисульфидных связей, гликозилированием, липидацией, ацетилированием, фосфорилированием или любыми другими манипуляциями, или модификациями, такие как конъюгация с меченым компонентом. В определение также включены, например, полипептиды, содержащие один или более аналогов аминокислоты (включая, например, неприродные аминокислоты и т.д.), а также другие модификации, известные в данной области техники. Понятно, что поскольку полипептиды по настоящему изобретению основаны на антителах, в некоторых вариантах осуществления полипептиды могут встречаться в виде отдельных цепей или связанных цепей.The terms polypeptide, peptide and protein are used interchangeably herein to refer to polymers of amino acids of any length. The polymer may be linear or branched, it may contain modified amino acids, and it may be separated by non-amino acids. In addition, these terms include an amino acid polymer that has been modified naturally or by intervention; for example, by the formation of disulfide bonds, glycosylation, lipidation, acetylation, phosphorylation or any other manipulation or modification such as conjugation with a labeled moiety. Also included in the definition are, for example, polypeptides containing one or more amino acid analogues (including, for example, unnatural amino acids, etc.), as well as other modifications known in the art. It is understood that since the polypeptides of the present invention are antibody based, in some embodiments the polypeptides may occur as single chains or linked chains.
Термин клетка-хозяин, в контексте настоящего документа, может быть любым типом клеток, например, первичной клеткой, клеткой в культуре, или клеткой из клеточной линии. В конкретных вариантах осуществления термин клетка-хозяин относится к клетке, трансфицированной молекулой нуклеиновой кислоты, и потомству или потенциальному потомству такой клетки. Потомство такой клетки может не быть идентичным родительской клетке, трансфицированной молекулой нуклеиновой кислоты, например, из-за мутаций или влияния окружающей среды, которые могут произойти в последующих поколениях или интеграции молекулы нуклеиновой кислоты в геном клетки-хозяина.The term host cell, as used herein, can be any type of cell, for example, a primary cell, a cell in culture, or a cell from a cell line. In specific embodiments, the term host cell refers to a cell transfected with a nucleic acid molecule and the progeny or potential progeny of such cell. The progeny of such a cell may not be identical to the parent cell transfected with the nucleic acid molecule, for example, due to mutations or environmental influences that may occur in subsequent generations or integration of the nucleic acid molecule into the genome of the host cell.
Термин фармацевтический состав или фармацевтическая композиция относится к препарату, который находится в такой форме, которая позволяет биологической активности активного ингредиента быть эффективной, и который не содержит дополнительных компонентов, которые являются неприемлемо токсичными для субъекта, которому будет вводится состав. Состав может быть стерильным.The term pharmaceutical formulation or pharmaceutical composition refers to a preparation that is in a form that allows the biological activity of the active ingredient to be effective and that does not contain additional components that are unacceptably toxic to the subject to whom the formulation will be administered. The composition may be sterile.
Термин лекарственное средство относится к готовой лекарственной форме, например, к жидкому составу, содержащему действующее вещество, как правило, но не обязательно, в сочетании с одним или более другими ингредиентами.The term drug refers to a finished dosage form, such as a liquid formulation, containing an active substance, usually, but not necessarily, in combination with one or more other ingredients.
Термин действующее вещество относится к активному ингредиенту, например антителу к B7-H4 или его антигенсвязывающему фрагменту (например, афукозилированному антителу 20502), который предназначен для обеспечения фармакологической или биологической активности или другого прямого эффекта в диагностике, излечении, смягчении, лечении или профилактики заболевания, но не включает промежуточные соединения, используемые при синтезе такого ингредиента.The term active ingredient refers to an active ingredient, such as an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502), which is intended to provide pharmacological or biological activity or other direct effect in the diagnosis, cure, mitigation, treatment, or prevention of a disease. but does not include intermediates used in the synthesis of such ingredient.
Термин буфер, в контексте настоящего документа, относится к компоненту в растворе, который позволяет раствору противостоять изменениям pH b. Буферы включают, например, ацетатный, цитратный, сукцинатный и гистидиновый буферы.The term buffer, as used herein, refers to a component in a solution that allows the solution to withstand changes in pH b. Buffers include, for example, acetate, citrate, succinate and histidine buffers.
Стабильный состав представляет собой состав, в котором активный ингредиент (например, антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент) по существу сохраняет свою физическую стойA stable formulation is one in which the active ingredient (e.g., anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment thereof) substantially retains its physical properties
- 9 043376 кость и/или химическую стабильность, и/или биологическую активность при хранении. Стабильность может быть измерена при выбранных условиях (например, при температуре) в течение выбранного периода времени. Составы, представленные в настоящем документе, могут быть стабильными при комнатной температуре (около 25°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев и/или стабильными при около 2-8°C в течение по меньшей мере 1 года. Составы, представленные в настоящем документе, также могут быть стабильными после замораживания (например, до -70°C) и оттаивания состава, далее называемых цикл замораживания/оттаивания. Составы, представленные в настоящем документе, также могут быть стабильными после перемешивания.- 9 043376 bone and/or chemical stability and/or biological activity during storage. Stability can be measured under selected conditions (eg temperature) over a selected period of time. The compositions provided herein may be stable at room temperature (about 25°C) for at least 6 months and/or stable at about 2-8°C for at least 1 year. The compositions provided herein may also be stable after freezing (eg, to -70°C) and thawing the composition, hereinafter referred to as a freeze/thaw cycle. The compositions presented herein may also be stable after mixing.
Термины вводить, вводимый, введение и тому подобное, используемые в настоящем документе, относятся к способам, которые могут использоваться для обеспечения доставки лекарственного средства, например, антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента в желаемый участок биологического действия (например, внутривенное введение). Способ введения, которые можно применять с агентами и способами, описанными в настоящем документе, можно найти, например, в Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, current edition, Pergamon; и Remington's, Pharmaceutical Sciences, current edition, Mack Publishing Co., Easton, Pa.The terms administer, administered, administration, and the like as used herein refer to methods that can be used to ensure delivery of a drug, such as an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof, to the desired site of biological action (e.g., intravenous administration) . Methods of administration that can be used with the agents and methods described herein can be found, for example, in Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, current edition, Pergamon; and Remington's, Pharmaceutical Sciences, current edition, Mack Publishing Co., Easton, Pa.
В контексте настоящего документа термины субъект и пациент употребляются взаимозаменяемо. Субъектом может быть животное. В некоторых вариантах осуществления субъект представляет собой млекопитающее, такое как отличное от человека животное (например, корова, свинья, лошадь, кошка, собака, крыса, мышь, обезьяна или другой примат, и т.д.). В некоторых вариантах осуществления субъект представляет собой яванского макака. В некоторых вариантах осуществления изобретения субъект представляет собой человека.In the context of this document, the terms subject and patient are used interchangeably. The subject may be an animal. In some embodiments, the subject is a mammal, such as a non-human animal (eg, a cow, pig, horse, cat, dog, rat, mouse, monkey or other primate, etc.). In some embodiments, the subject is a cynomolgus monkey. In some embodiments, the subject is a human.
Термин терапевтически эффективное количество относится к количеству лекарственного средства, например, антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента, эффективного для лечения заболевания или расстройства у субъекта. В случае рака терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшить количество раковых клеток; уменьшить размер или нагрузку опухоли; ингибировать до некоторой степени инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать до некоторой степени метастазирование опухоли; ингибировать до некоторой степени рост опухоли; облегчить до некоторой степени один или более симптомов, связанных с раком; и/или приводят к благоприятному ответу, такому как увеличение выживаемости без прогрессирования заболевания (PFS), выживаемости без заболевания (DFS), общей выживаемости (OS), полного ответа (CR), частичного ответа (PR) или в некоторых случаях стабильное заболевание (SD), уменьшение прогрессирующего заболевания (PD), уменьшение времени до прогрессирования (TTP) или любая их комбинация. В той степени, в которой лекарственное средство может предотвращать рост и/или убивать существующие раковые клетки, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим.The term "therapeutically effective amount" refers to the amount of a drug, such as an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof, effective to treat a disease or disorder in a subject. In the case of cancer, a therapeutically effective amount of a drug can reduce the number of cancer cells; reduce tumor size or burden; inhibit to some extent the infiltration of cancer cells into peripheral organs; inhibit tumor metastasis to some extent; inhibit tumor growth to some extent; relieve to some extent one or more symptoms associated with cancer; and/or result in a favorable response, such as increased progression-free survival (PFS), disease-free survival (DFS), overall survival (OS), complete response (CR), partial response (PR), or in some cases stable disease ( SD), reduction in progressive disease (PD), reduction in time to progression (TTP), or any combination thereof. To the extent that a drug can prevent the growth and/or kill existing cancer cells, it may be cytostatic and/or cytotoxic.
Такие термины, как лечение, лечащий, лечить, облегчающий и облегчение относятся к терапевтическим мерам, которые лечат, замедляют, уменьшают симптомы и/или останавливают прогрессирование патологического состояния или расстройства. Таким образом, те, кто нуждается в лечении, включают тех, кто уже имеет диагноз или подозрение на заболевание. В определенных вариантах осуществления субъект успешно лечится от рака в соответствии со способами по настоящему изобретению, если пациент демонстрирует одно или более из следующего: уменьшение количества или полное отсутствие раковых клеток; уменьшение размера опухоли; ингибирование или отсутствие проникновения раковых клеток в периферические органы, включая, например, распространение рака в мягкие ткани и кости; торможение или отсутствие метастазирования опухоли; торможение или отсутствие роста опухоли; облегчение одного или более симптомов, связанных с конкретным раком; снижение заболеваемости и смертности; улучшение качества жизни; уменьшение онкогенности, онкогенной частоты или онкогенной способности опухоли; уменьшение количества или частоты раковых стволовых клеток в опухоли; дифференцировка онкогенных клеток в неопухолевое состояние; увеличение выживаемости без прогрессирования (PFS), выживаемость без заболевания (DFS), общая выживаемость (OS), полный ответ (CR), частичный ответ (PR), стабильное заболевание (SD), уменьшение прогрессирующего заболевания (PD), уменьшенное время до прогрессирования (TTP) или любая их комбинация.Terms such as cure, cure, treat, alleviate and alleviate refer to therapeutic measures that treat, slow, reduce symptoms and/or stop the progression of a pathological condition or disorder. Thus, those who need treatment include those who are already diagnosed or suspected of having the disease. In certain embodiments, a subject is successfully treated for cancer in accordance with the methods of the present invention if the patient demonstrates one or more of the following: a decrease in the number or complete absence of cancer cells; reduction in tumor size; inhibiting or preventing the penetration of cancer cells into peripheral organs, including, for example, the spread of cancer into soft tissue and bone; inhibition or absence of tumor metastasis; inhibition or absence of tumor growth; relief of one or more symptoms associated with a specific cancer; reduction in morbidity and mortality; improving quality of life; reducing tumorigenicity, oncogenic frequency or oncogenic capacity of a tumor; reducing the number or frequency of cancer stem cells in the tumor; differentiation of oncogenic cells into a non-tumor state; increased progression-free survival (PFS), disease-free survival (DFS), overall survival (OS), complete response (CR), partial response (PR), stable disease (SD), decreased progressive disease (PD), decreased time to progression (TTP) or any combination thereof.
Термины рак и раковый относятся или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примеры рака включают, но не ограничиваются ими, гинекологические виды рака (например, рак молочной железы (включая трижды негативный рак молочной железы, протоковая карцинома, рак яичников и рак эндометрия), немелкоклеточный рак легких, рак поджелудочной железы, рак щитовидной железы, рак почки (например, почечно-клеточная карцинома) и рак мочевого пузыря (например, карцинома уротелиальной клетки). Рак может быть раком, который экспрессирует B7-H4 или раком, экспрессирующим B7-H4. Такие термины относятся к раку, содержащему клетки, которые экспрессируют B7-H4. Рак может быть первичной опухолью или может быть запущенным или метастатическим раком.The terms cancer and cancerous refer to or describe a physiological condition in mammals in which a population of cells is characterized by unregulated cell growth. Examples of cancer include, but are not limited to, gynecologic cancers (eg, breast cancer (including triple negative breast cancer, ductal carcinoma, ovarian cancer, and endometrial cancer), non-small cell lung cancer, pancreatic cancer, thyroid cancer, kidney cancer (eg, renal cell carcinoma) and bladder cancer (eg, urothelial cell carcinoma).The cancer may be a cancer that expresses B7-H4 or a cancer that expresses B7-H4. Such terms refer to cancers that contain cells that express B7 -H4 The cancer may be a primary tumor or may be an advanced or metastatic cancer.
Рефрактерный рак представляет собой рак, который прогрессирует, даже если противоопухолевое лечение, такое как химиотерапия, применяют к больному раком.Refractory cancer is cancer that progresses even if anticancer treatment such as chemotherapy is administered to the cancer patient.
Рецидивирующий рак представляет собой рак, который повторно развивается, или на начальномRecurrent cancer is cancer that develops again, or at an initial
- 10 043376 участке или в отдаленном месте, после ответа на начальную терапию.- 10 043376 site or in a remote location, after response to initial therapy.
Пациент с рецидивом представляет собой пациента, который имеет признаки или симптомы рака после ремиссии. Необязательно пациент имеет рецидив после адъювантной или неоадъювантной терапии.A relapsed patient is a patient who has signs or symptoms of cancer after remission. The patient does not necessarily relapse after adjuvant or neoadjuvant therapy.
В контексте настоящего документа в настоящем раскрытии и формуле изобретения, формы единственного числа включают формы и множественного числа, если контекст явно не предписывает иное.As used herein in the present disclosure and claims, the singular forms include the plural forms unless the context clearly dictates otherwise.
Следует понимать, что в тех случаях, когда варианты осуществления описаны в настоящем документе с формулировкой содержащий, в противном случае аналогичные варианты осуществления, описанные в терминах состоящий из и/или состоящий в основном из, также предлагаются. В настоящем раскрытии содержит, содержащий, включающий и имеющий и тому подобное может иметь значение, приписанное им в патентном праве США, и может означать включает, включающий и тому подобное; состоящий по существу из или состоящий по существу аналогичным образом имеет значение, указанное в патентном праве США, и термин является открытым, что допускает присутствие большего, чем то, что указано, если основные или новые характеристики того, что говорится не изменяются при наличии более того, что указано, но исключают варианты осуществления предшествующего уровня техники.It should be understood that where embodiments are described herein with the language containing, otherwise similar embodiments described with the terms consisting of and/or consisting essentially of are also provided. In the present disclosure, contains, containing, including and having and the like may have the meaning ascribed to them in US patent law and may mean includes, including and the like; consisting essentially of or consisting essentially in a like manner has the meaning given to it under US patent law, and the term is open-ended, allowing for more to be present than what is stated as long as the essential or novel characteristics of what is said are not changed by the presence of more , as stated, but excluding prior art embodiments.
Если специально не указано или не очевидно из контекста, используемый в настоящем документе термин или понимается как включающий. Термин и/или, используемый в такой фразе, как A и/или B, предназначен для обозначения A и B, A или B, A и B. Аналогично, термин и/или, используемый в такой фразе, как A, B и/или C, предназначен для охвата каждого из следующих вариантов осуществления: A, B и C; A, B или C; A или C; A или B; B или C; A и C; A и B; B и C; A (один); B (один); и C (один).Unless specifically stated or obvious from the context, the term or is understood to be inclusive as used herein. The term and/or used in a phrase such as A and/or B is intended to mean A and B, A or B, A and B. Likewise, the term and/or used in a phrase such as A, B and/ or C is intended to cover each of the following embodiments: A, B and C; A, B or C; A or C; A or B; B or C; A and C; A and B; B and C; A (one); B (one); and C (one).
Термины около и приблизительно, в контексте настоящего документа, когда используются для изменения числового значения или числового диапазона, указывают, что отклонения от 5% до 10% выше и от 5% до 10% ниже значения или диапазона остаются в пределах предполагаемого значение приведенного значения или диапазона.The terms about and about, as used herein, when used to change a numerical value or numerical range, indicate that deviations of 5% to 10% above and 5% to 10% below the value or range remain within the intended value of the given value or range.
Любые композиции или способы, представленные в настоящем документе, могут быть объединены с одной или более любыми другими композициями и способами, представленными в настоящем документе.Any of the compositions or methods provided herein may be combined with one or more of any other compositions or methods provided herein.
5.2 Фармацевтические композиции, содержащие антитела к B7-H4.5.2 Pharmaceutical compositions containing antibodies to B7-H4.
В настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции (например, водные фармацевтические композиции), содержащие антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент (например, как описано в разделе 5.3 ниже).Provided herein are pharmaceutical compositions (eg, aqueous pharmaceutical compositions) containing an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof (eg, as described in section 5.3 below).
В определенных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, является устойчивой к множественным циклам замораживания-оттаивания. Цикл замораживания-оттаивания может включать замораживание фармацевтической композиции (например, при температуре около -70°C), а затем оттаивание фармацевтической композиции (например, при комнатной температуре). Фармацевтическая композиция может быть стабильной в течение по меньшей мере пяти циклов замораживания-оттаивания. Циклы замораживания-оттаивания (например, по меньшей мере пять циклов замораживания-оттаивания) могут не приводить к изменению внешнего вида, растворимым агрегатам или невидимым невооруженным глазом твердым частицам.In certain embodiments, the pharmaceutical composition provided herein is stable against multiple freeze-thaw cycles. The freeze-thaw cycle may involve freezing the pharmaceutical composition (eg, at about -70°C) and then thawing the pharmaceutical composition (eg, at room temperature). The pharmaceutical composition may be stable for at least five freeze-thaw cycles. Freeze-thaw cycles (eg, at least five freeze-thaw cycles) may not result in changes in appearance, soluble aggregates, or particulate matter invisible to the naked eye.
В определенных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, является стабильной при перемешивании. Перемешивание может включать встряхивание (например, при 300 оборотах в минуту на орбитальном шейкере) в течение около трех дней при комнатной температуре. Перемешивание может не привести к изменению внешнего вида, растворимым агрегатам, вариантам, отличающимся зарядами или невидимым невооруженным глазом твердым частицам.In certain embodiments, the pharmaceutical composition provided herein is stable when stirred. Mixing may involve shaking (eg at 300 rpm on an orbital shaker) for about three days at room temperature. Stirring may not result in changes in appearance, soluble aggregates, variants differing in charge, or solids invisible to the naked eye.
В определенных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, является стабильной в условиях длительного хранения. Условия длительного хранения могут включать хранение при температуре около 5°C (например, от около 2°C до около 8°C) в течение около 6 месяцев или около 1 года. Условия длительного хранения могут включать хранение при температуре около 25°C в течение около 6 месяцев или около 1 года. Условия длительного хранения могут включать хранение при температуре около 40°C в течение около 3 месяцев, около 6 месяцев или около 1 года.In certain embodiments, the pharmaceutical composition provided herein is stable under long-term storage conditions. Long-term storage conditions may include storage at a temperature of about 5°C (eg, about 2°C to about 8°C) for about 6 months or about 1 year. Long-term storage conditions may include storage at about 25°C for about 6 months or about 1 year. Long-term storage conditions may include storage at about 40°C for about 3 months, about 6 months, or about 1 year.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, является устойчивой к множественным (например, по меньшей мере пяти) циклам замораживания-оттаивания, стабильной при перемешивании и/или стабильной в условиях длительного хранения.In some embodiments, the pharmaceutical composition provided herein is stable under multiple (eg, at least five) freeze-thaw cycles, stable under stirring, and/or stable under long-term storage conditions.
В определенных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, является стабильной при хранении при температуре около -70°C и при хранении при температуре от около 2°C до около 8°C в течение около 1 года.In certain embodiments, the pharmaceutical composition provided herein is stable when stored at about -70°C and when stored at about 2°C to about 8°C for about 1 year.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может содержать антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основные варианты) в составе составляет от около 5 мг/мл до около 30 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основ- 11 043376 ные варианты) в фармацевтической композиции составляет от около 10 мг/мл до около 25 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основные варианты) в фармацевтической композиции составляет около мг/мл.In some embodiments, the pharmaceutical composition may comprise an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof. In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof (including acid and base variants thereof) in the composition is from about 5 mg/ml to about 30 mg/ml. In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof (including acidic and base variants thereof) in the pharmaceutical composition is from about 10 mg/ml to about 25 mg/ml. In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof (including acid and base variants thereof) in the pharmaceutical composition is about mg/mL.
В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основные варианты) в композиции составляет от 5 мг/мл до 30 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основные варианты) в фармацевтической композиции составляет от 10 мг/мл до 25 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента (включая его кислотные и основные варианты) в фармацевтической композиции составляет 20 мг/мл.In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment thereof (including acid and base variants thereof) in the composition is from 5 mg/mL to 30 mg/mL. In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof (including acid and base variants thereof) in the pharmaceutical composition is from 10 mg/mL to 25 mg/mL. In some embodiments, the concentration of the anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment thereof (including acidic and basic variants thereof) in the pharmaceutical composition is 20 mg/ml.
Как предусмотрено в настоящем документе, фармацевтическая композиция может содержать буфер. В определенных вариантах осуществления буфер представляет собой ацетатный буфер. В определенных вариантах осуществления буфер представляет собой цитратный буфер. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет от около 15 до около 25 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет от около 18 до около 22 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет около 20 мМ.As provided herein, the pharmaceutical composition may contain a buffer. In certain embodiments, the buffer is an acetate buffer. In certain embodiments, the buffer is a citrate buffer. In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is from about 15 to about 25 mM. In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is from about 18 to about 22 mM. In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is about 20 mM.
В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет от 15 до 25 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет от 18 до 22 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера (например, ацетатного или цитратного) составляет 20 мМ.In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is between 15 and 25 mM. In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is between 18 and 22 mM. In some embodiments, the buffer concentration (eg, acetate or citrate) is 20 mM.
Как предусмотрено в настоящем документе, фармацевтическая композиция может содержать вспомогательное вещество, например сахар, такое как сахароза, сорбит или трегалоза. В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет от около 225 мМ до около 300 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет от около 250 мМ до около 290 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет около 270 мМ.As provided herein, the pharmaceutical composition may contain an excipient, for example a sugar such as sucrose, sorbitol or trehalose. In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is from about 225 mM to about 300 mM. In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is from about 250 mM to about 290 mM. In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is about 270 mM.
В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет 225 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет от 250 мМ до 290 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества (например, сахарозы) составляет 270 мМ.In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is 225 mM. In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is between 250 mM and 290 mM. In some embodiments, the concentration of the excipient (eg, sucrose) is 270 mM.
Как предусмотрено в настоящем документе, фармацевтическая композиция может содержать буфер (например, ацетатный или цитратный) и вспомогательное вещество, такое как сахар (например, сахароза). В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества, такого как сахар (например, сахароза), от около в 10 до около в 15 раз превышает концентрацию буфера (например, ацетатного или цитратного). В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества, такого как сахар (например, сахароза), около в 13,5 раз превышает концентрацию буфера (например, ацетатного или цитратного).As provided herein, the pharmaceutical composition may contain a buffer (eg, acetate or citrate) and an excipient such as a sugar (eg, sucrose). In some embodiments, the concentration of the excipient, such as a sugar (eg, sucrose), is about 10 to about 15 times the concentration of the buffer (eg, acetate or citrate). In some embodiments, the concentration of the excipient, such as a sugar (eg, sucrose), is about 13.5 times the concentration of the buffer (eg, acetate or citrate).
В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества, такого как сахар (например, сахароза), в от 10 до 15 раз превышает концентрацию буфера (например, ацетатного или цитратного). В некоторых вариантах осуществления концентрация вспомогательного вещества, такого как сахар (например, сахароза) в 13,5 раз превышает концентрацию буфера (например, ацетатного или цитратного).In some embodiments, the concentration of the excipient, such as a sugar (eg, sucrose), is 10 to 15 times the concentration of the buffer (eg, acetate or citrate). In some embodiments, the concentration of the excipient, such as a sugar (eg, sucrose) is 13.5 times the concentration of the buffer (eg, acetate or citrate).
Как предусмотрено в настоящем документе, фармацевтическая композиция может содержать поверхностно-активное вещество, например, полисорбат. Полисорбат может представлять собой, например, полисорбат 20 (PS20). В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностноактивного вещества (например, PS20) составляет около 0,025-0,075% массы по объему (мас./об.). В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностно-активного вещества (например, PS20) составляет от около 0,035 до около 0,065% мас./об. В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностно-активного вещества (например, PS20) составляет около 0,05% мас./об.As provided herein, the pharmaceutical composition may contain a surfactant, for example, polysorbate. The polysorbate may be, for example, polysorbate 20 (PS20). In some embodiments, the concentration of surfactant (eg, PS20) is about 0.025-0.075% weight by volume (w/v). In some embodiments, the concentration of surfactant (eg, PS20) is from about 0.035 to about 0.065% w/v. In some embodiments, the concentration of surfactant (eg, PS20) is about 0.05% w/v.
В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностно-активного вещества (например, PS20) составляет 0,025-0,075% массы по объему (мас./об.). В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностно-активного вещества (например, PS20) составляет от 0,035 до 0,065% мас./об. В некоторых вариантах осуществления концентрация поверхностно-активного вещества (например, PS20) составляет 0,05% мас./об.In some embodiments, the concentration of surfactant (eg, PS20) is 0.025-0.075% weight by volume (w/v). In some embodiments, the concentration of surfactant (eg, PS20) is from 0.035 to 0.065% w/v. In some embodiments, the surfactant concentration (eg, PS20) is 0.05% w/v.
Как предусмотрено в настоящем документе, в некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от около 4,5 до около 6. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет от около 5 до около 6. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет около 5. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет около 5,5. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет около 6.As provided herein, in some embodiments, the pharmaceutical composition has a pH of from about 4.5 to about 6. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is from about 5 to about 6. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is about 5. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is about 5.5. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is about 6.
В настоящем документе, в некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композицияHerein, in some embodiments, the pharmaceutical composition
- 12 043376 имеет pH от 4,5 до 6. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет от 5 до 6. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет 5. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет 5,5. В некоторых вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет 6.- 12 043376 has a pH of 4.5 to 6. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is from 5 to 6. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is 5. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is 5.5. In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is 6.
Как предусмотрено в настоящем документе, фармацевтическая композиция может представлять собой жидкость. Фармацевтическая композиция (например, жидкая фармацевтическая композиция) может быть для парентерального введения, например, для внутривенного введения.As provided herein, the pharmaceutical composition may be a liquid. The pharmaceutical composition (eg, liquid pharmaceutical composition) may be for parenteral administration, for example, intravenous administration.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 5 мг/мл до около 30 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в, от около 15 мМ до около 25 мМ ацетата, от около 225 мМ до около 300 мМ сахарозы и от около 0,025% до около 0,075% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от около 4,5 до около 6 например, около 5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from about 5 mg/ml to about 30 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in, from about 15 mM to about 25 mM acetate, from about 225 mM to about 300 mM sucrose and from about 0.025% to about 0.075% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from about 4.5 to about 6, such as about 5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от 5 мг/мл до 30 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в, от 15 мМ до 25 мМ ацетата, от 225 мМ до 300 мМ сахарозы и от 0,025% до 0,075% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от 4,5 до 6, например, 5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from 5 mg/ml to 30 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502), from 15 mM to 25 mM acetate, from 225 mM to 300 mM sucrose, and 0.025% to 0.075% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH between 4.5 and 6, such as 5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 10 мг/мл до около 25 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в, от около 18 мМ до около 22 мМ ацетата, от около 250 мМ до около 290 мМ сахарозы и от около 0,035% до около 0,065% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от около 4,5 до около 6, например, около 5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from about 10 mg/ml to about 25 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in, from about 18 mM to about 22 mM acetate, from about 250 mM to about 290 mM sucrose and about 0.035% to about 0.065% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from about 4.5 to about 6, such as about 5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от 10 мг/мл до 25 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в от 18 мМ до 22 мМ ацетата, от 250 мМ до 290 мМ сахарозы и от 0,035% до 0,065% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от 4,5 до 6, например, 5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from 10 mg/ml to 25 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in 18 mM to 22 mM acetate, 250 mM to 290 mM sucrose, and 0.035% to 0.065% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH between 4.5 and 6, such as 5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит 20 мг/мл антитела к B7H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH 5,0. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains 20 mg/ml of an anti-B7H4 antibody or fragment thereof (eg, afucosylated antibody 20502) in 20 mM acetate, 270 mM sucrose, and 0.05% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of 5.0. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 5 мг/мл до около 30 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в от около 15 мМ до около 25 мМ цитрата, от около 225 мМ до около 300 мМ сахарозы и от около 0,025% до около 0,075% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от около 4,5 до около 6, например, около 5,5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from about 5 mg/ml to about 30 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in from about 15 mM to about 25 mM citrate, from about 225 mM to about 300 mM sucrose and about 0.025% to about 0.075% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from about 4.5 to about 6, such as about 5.5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от 5 мг/мл до 30 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в от 15 мМ до 25 мМ цитрата, от 225 мМ до 300 мМ сахарозы и от 0,025% до 0,075% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от 4,5 до 6, например, около 5,5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from 5 mg/ml to 30 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in 15 mM to 25 mM citrate, 225 mM to 300 mM sucrose, and 0.025% to 0.075% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from 4.5 to 6, such as about 5.5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 10 мг/мл до около 25 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в от около 18 мМ до около 22 мМ цитрата, от около 250 мМ до около 290 мМ сахарозы и от около 0,035% до около 0,065% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от около 4,5 до около 6, например, около 5,5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from about 10 mg/ml to about 25 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in from about 18 mM to about 22 mM citrate, from about 250 mM to about 290 mM sucrose and about 0.035% to about 0.065% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from about 4.5 to about 6, such as about 5.5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит от 10 мг/мл до 25 мг/мл антитела к B7-H4 или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в от 18 мМ до 22 мМ цитрата, от 250 мМ до 290 мМ сахарозы и от 0,035% до 0,065% PS20. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет pH от 4,5 до 6, например, около 5,5. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.In one embodiment, the pharmaceutical composition contains from 10 mg/ml to 25 mg/ml of an anti-B7-H4 antibody or fragment thereof (e.g., afucosylated antibody 20502) in 18 mM to 22 mM citrate, 250 mM to 290 mM sucrose, and 0.035% to 0.065% PS20. In one embodiment, the pharmaceutical composition has a pH of from 4.5 to 6, such as about 5.5. In one embodiment, the pharmaceutical composition is a liquid.
В одном варианте осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит 20 мг/мл антитела или его фрагмента (например, афукозилированного антитела 20502) в 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20. В одном варианте осуществления жидкая фармацевтическая композиция имеет pH 5,5.In one embodiment, the liquid pharmaceutical composition contains 20 mg/ml of an antibody or fragment thereof (eg, afucosylated antibody 20502) in 20 mM citrate, 270 mM sucrose and 0.05% PS20. In one embodiment, the liquid pharmaceutical composition has a pH of 5.5.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека (например, афукозилированное антитело 20502), причем композиция содержит не более 40% кислых вариантов антитела или его антиген-связывающих фрагментов, и/или не более 20% основных вариантов антитела или егоIn some embodiments, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4 (e.g., afucosylated antibody 20502), wherein the composition contains no more than 40% acidic variants of the antibody or antigen-binding fragments thereof, and/or more than 20% of the main variants of the antibody or its
- 13 043376 антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев при хранении при 5°C.- 13 043376 antigen-binding fragment after 6 months when stored at 5°C.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека (например, афукозилированное антитело 20502), причем композиция содержит от около 30% до около 45%, от около 30% до около 40 % или от около 35% до около 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и/или от около 11% до около 16%, от около 10% до около 17% или от около 9% до около 18% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев при хранении при 5°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека (например, афукозилированное антитело 20502), причем композиция содержит от 30% до 45%, от 30% до 40 % или от 35% до 40% кислых вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, и/или от 11% до 16%, от 10% до 17% или от 9% до 18% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев при хранении при 5°C.In some embodiments, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4 (e.g., afucosylated antibody 20502), wherein the composition contains from about 30% to about 45%, from about 30% to about 40%, or from about 35% to about 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof, and/or from about 11% to about 16%, from about 10% to about 17%, or from about 9% to about 18% basic variants of the antibody or thereof antigen-binding fragment after 6 months when stored at 5°C. In some embodiments, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4 (e.g., afucosylated antibody 20502), wherein the composition contains from 30% to 45%, from 30% to 40%, or from 35% to 40% acidic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof, and/or 11% to 16%, 10% to 17% or 9% to 18% basic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months when stored at 5°C.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, причем композиция содержит не более 60% или 55% кислых и основных вариантов антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев при хранении при 5°C В некоторых вариантах осуществления композиция также содержит не более 40% кислых вариантов и/или не более 20% основных вариантов антитела или его антигенсвязывающего фрагмента через 6 месяцев при хранении при 5°C. В некоторых вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или их антигенсвязывающие фрагменты, и фармацевтически приемлемый носитель. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 80% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 85% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 90% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 95% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 96% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 97% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 98% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты, например, причем по меньшей мере 99% антител в композиции являются афукозилированными. В конкретных вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит афукозилированные антитела к B7H4 или антигенсвязывающие фрагменты, причем фукоза является необнаруживаемой в композиции.In some embodiments, the pharmaceutical composition contains an antibody or antigen binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4, wherein the composition contains no more than 60% or 55% acidic and basic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months when stored at 5°C C In some embodiments, the composition also contains no more than 40% acidic variants and/or no more than 20% basic variants of the antibody or antigen binding fragment thereof after 6 months when stored at 5°C. In some embodiments, pharmaceutical compositions are provided, wherein the pharmaceutical composition comprises afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen-binding fragments thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 80% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 85% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 90% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 95% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 96% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 97% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 98% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragments, for example, wherein at least 99% of the antibodies in the composition are afucosylated. In specific embodiments, pharmaceutical compositions are provided wherein the pharmaceutical composition contains afucosylated anti-B7H4 antibodies or antigen-binding fragments, wherein fucose is undetectable in the composition.
В некоторых вариантах осуществления предлагаются фармацевтические композиции, в которых фармацевтическая композиция содержит (i) изолированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с B7-H4 человека, включающим (a) последовательности области определяющей комплементарность (CDR) 1 вариабельной области тяжелой цепи (VH), CDR2 VH, CDR3 VH и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 5-10 соответственно, (b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, или (c) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22 и (ii) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.In some embodiments, pharmaceutical compositions are provided, wherein the pharmaceutical composition comprises (i) an isolated antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to human B7-H4 comprising (a) heavy chain variable region (VH) complementarity determining region (CDR) 1 sequences ), CDR2 VH, CDR3 VH and CDR1, CDR2 and CDR3 of the light chain variable region (VL) SEQ ID NO: 5-10, respectively, (b) a heavy chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11 and the light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or (c) a heavy chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 21 and a light chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 22 and (ii) a pharmaceutically acceptable excipient.
В настоящем документе также предлагается фармацевтическая композиция, в которой фармацевтическая композиция содержит (i) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 человека и содержат последовательности области определяющей комплементарность (CDR) 1 вариабельной области тяжелой цепи (VH), CDR2 VH, CDR3 VH и CDR1, CDR2 иAlso provided herein is a pharmaceutical composition, wherein the pharmaceutical composition contains (i) antibodies or antigen-binding fragments thereof that specifically bind to human B7-H4 and contain complementarity determining region (CDR) 1 sequences of the heavy chain variable region (VH), CDR2 VH , CDR3 VH and CDR1, CDR2 and
- 14 043376- 14 043376
CDR3 вариабельной области легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 5-10 соответственно и (ii) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, причем по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% антител или их антигенсвязывающих фрагментов в композиции являются афукозилированными. В одном варианте осуществления (i) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, или (ii) антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22.CDR3 of the light chain variable region (VL) SEQ ID NO: 5-10, respectively, and (ii) a pharmaceutically acceptable excipient, wherein at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, or at least 99% of the antibodies or antigen-binding fragments thereof in the composition are afucosylated. In one embodiment, (i) the antibody or antigen binding fragment thereof comprises a heavy chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11 and a light chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or (ii) the antibody comprises a heavy chain , containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 21, and a light chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 22.
5.3 Антитела к B7-H4.5.3 Antibodies to B7-H4.
В настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции, содержащие антитела (например, моноклональные антитела, такие как химерные, гуманизированные антитела или антитела человека) и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7H4 человека). Типовые антитела B7-H4 и их антигенсвязывающие фрагменты, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, известны в данной области техники. Аминокислотные последовательности для B7-H4 человека, яванского макака, мыши и крысы известны в данной области техники и также представлены в настоящем документе, как представлено SEQ ID NO: 1-4 соответственно.Provided herein are pharmaceutical compositions containing antibodies (eg, monoclonal antibodies such as chimeric, humanized or human antibodies) and antigen binding fragments thereof that specifically bind to B7-H4 (eg, human B7H4). Exemplary B7-H4 antibodies and antigen binding fragments thereof that can be used in the pharmaceutical compositions provided herein are known in the art. The amino acid sequences for human, cynomolgus, mouse and rat B7-H4 are known in the art and are also presented herein as shown by SEQ ID NO: 1-4, respectively.
В7-Н4 человека:B7-H4 person:
MASLGQILFWSIISIIIILAGAIALIIGFGISGRHSITVTTVASAGNIGEDGILSCTFEPDIKLSDMASLGQILFWSIISIIIILAGAIALIIGFGISGRHSITVTTVASAGNIGEDGILSCTFEPDIKLSD
IVIQWLKEGVLGLVHEFKEGKDELSEQDEMFRGRTAVFADQVIVGNASLRLKNVQLTDIVIQWLKEGVLGLVHEFKEGKDELSEQDEMFRGRTAVFADQVIVGNASLRLKNVQLTD
AGTYKC YIITSKGKGNANLEYKTGAF SMPEVNVD YNAS SETLRCEAPRWFPQPT VVWA SQVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVT ESEIKRRSHLQLLNSKASLCVSSFFAISWALLPLSPYLMLK (SEQ ID NO:1)AGTYKC YIITSKGKGNANLEYKTGAF SMPEVNVD YNAS SETLRCEAPRWFPQPT VVWA SQVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVT ESEIKRRSHLQLLNSKASLCVSSFFAISWALLPLSPYLMLK (SEQ ID NO:1)
В7-Н4 яванского макака:B7-H4 cynomolgus macaque:
MASLGQILFWSIISIIFILAGAIALIIGFGISGRHSITVTTVASAGNIGEDGILSCTFEPDIKLSMASLGQILFWSIIISIIFILAGAIALIIGFGISGRHSITVTTVASAGNIGEDGILSCTFEPDIKLS
DIVIQWLKEGVIGLVHEFKEGKDELSEQDEMFRGRTAVFADQVIVGNASLRLKNVQLTDDIVIQWLKEGVIGLVHEFKEGKDELSEQDEMFRGRTAVFADQVIVGNASLRLKNVQLTD
AGTYKC YIITSKGKGNANLEYKTGAF SMPEVNVD YNAS SETLRCEAPRWFPQPT VVWA SQVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVT ESEIKRRSHLQLLNSKASLCVSSFLAISWALLPLAPYLMLK (SEQ ID NO:2) B7-H4 мыши:AGTYKC YIITSKGKGNANLEYKTGAF SMPEVNVD YNAS SETLRCEAPRWFPQPT VVWA SQVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVT ESEIKRRSHLQLLNSKASLCVSSFLAISWALLPLAPYLMLK (SEQ ID NO:2) B7-H4 mice:
MASLGQIIFWSIINIIIILAGAIALIIGFGISGKHFITVTTFTSAGNIGEDGTLSCTFEPDIKLNG IVIQWLKEGIKGLVHEFKEGKDDLSQQHEMFRGRTAVFADQVVVGNASLRLKNVQLTD AGTYTCYIRTSKGKGNANLEYKTGAFSMPEINVDYNASSESLRCEAPRWFPQPTVAWAS QVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVTD SEVKRRSQLQLLNSGPSPCVFSSAFVAGWALLSLSCCLMLR (SEQ ID NO:3)MASLGQIIFWSIINIIIILAGAIALIIGFGISGKHFITVTTFTSAGNIGEDGTLSCTFEPDIKLNG IVIQWLKEGIKGLVHEFKEGKDDLSQQHEMFRGRTAVFADQVVVGNASLRLKNVQLTD AGTYTCYIRTSKGKGNANLEYKTGAFSMPEINVDYNASSESLRCEAPRWFPQPTVAWAS QVDQGANFSEVS NTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKVTD SEVKRRSQLQLLNSGPSPCVFSSAFVAGWALLSLSCCLMLR (SEQ ID NO:3)
B7-H4 крысы:B7-H4 rats:
MASLGQIIFWSIINVIIILAGAIVLIIGFGISGKHFITVTTFTSAGNIGEDGTLSCTFEPDIKLN GIVIQWLKEGIKGLVHEFKEGKDDLSQQHEMFRGRTAVFADQVVVGNASLRLKNVQLT DAGTYTCYIHTSKGKGNANLEYKTGAFSMPEINVDYNASSESLRCEAPRWFPQPTVAW ASQVDQGANFSEVSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKV TDSEVKRRSQLELLNSGPSPCVSSVSAAGWALLSLSCCLMLR (SEQ ID NO:4)MASLGQIIFWSIINVIIILAGAIVLIIGFGISGKHFITVTTFTSAGNIGEDGTLSCTFEPDIKLN GIVIQWLKEGIKGLVHEFKEGKDDLSQQHEMFRGRTAVFADQVVVGNASLRLKNVQLT DAGTYTCYIHTSKGKGNANLEYKTGAFSMPEINVDYNASSESLRCEAPRWFPQPTVAW ASQVDQGANFSE VSNTSFELNSENVTMKVVSVLYNVTINNTYSCMIENDIAKATGDIKV TDSEVKRRSQLELLNSGPSPCVSSVSAAGWALLSLSCCLMLR (SEQ ID NO:4)
В определенных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7H4 человека. В определенных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и яванского макака. В определенных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека, мыши и крысы. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека, яванского макака, мыши и крысы.In certain embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7H4. In certain embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human and cynomolgus B7-H4. In certain embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human, mouse and rat B7-H4. In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human, cynomolgus, mouse, and rat B7-H4.
B7-H4 содержит эктодомен IgC (аминокислоты 153-241 SEQ ID NO: 1) и эктодомен IgV (аминокислоты 35-146 SEQ ID NO: 1). В определенных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфи- 15 043376 чески связывается с доменом IgV B7-H4 человека. Соответственно в настоящем документе представлены фармацевтические композиции, содержащие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с полипептидом, состоящим из аминокислот 35-146 SEQ ID NO: 1.B7-H4 contains an IgC ectodomain (amino acids 153-241 SEQ ID NO: 1) and an IgV ectodomain (amino acids 35-146 SEQ ID NO: 1). In certain embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to the human IgV B7-H4 domain. Accordingly, provided herein are pharmaceutical compositions containing antibodies and antigen-binding fragments thereof that specifically bind to a polypeptide consisting of amino acids 35-146 of SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит шесть CDR антитела 20502, перечисленные в табл. 1 и 2.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and contains the six CDRs of antibody 20502 listed in Table. 1 and 2.
Таблица 1Table 1
Аминокислотная последовательность CDR VH 1_____________Amino acid sequence CDR VH 1 _____________
'CDR VH в табл. 1 определяются по Кабат'CDR VH in table. 1 determined by Kabat
Таблица 2table 2
Аминокислотная последовательность CDR2 VL_____________Amino acid sequence CDR 2 VL_____________
2' CDR VL в табл. 2 определяются по Кабат2' CDR VL in table. 2 determined by Kabat
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит VH антитела 20502, указанную в табл. 3.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and comprises the antibody VH 20502 set forth in Table. 3.
Таблица 3Table 3
Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH)Amino acid sequence of the variable heavy chain (VH) region
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит VL 20502, указанную в табл. 4.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and comprises VL 20502 as set forth in Table. 4.
Таблица 4Table 4
Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL)Amino acid sequence of the variable light chain (VL) region
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит VH и VL антитела 20502, указанные в табл. 3 и 4.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and comprises the VH and VL antibodies 20502 listed in Table 1. 3 and 4.
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит каркасные области VH антитела 20502, указанные в табл. 5.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and comprises the VH framework regions of antibody 20502 set forth in Table. 5.
Таблица 5Table 5
Аминокислотная последовательность FR3 VHAmino acid sequence of FR 3 VH
3· Каркасные области VH, описанные в табл. 5, определяются на основе границ системы нумерации Кабат для CDR. Соответственно, CDR VH определяются по Кабат, а каркасные области представляют собой аминокислотные остатки, окружающие CDR в вариабельной области в формате FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4 3 · VH framework areas described in Table. 5 are determined based on the boundaries of the Kabat numbering system for the CDR. Accordingly, VH CDRs are defined by Kabat, and the framework regions are the amino acid residues surrounding the CDRs in the variable region in the format FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 and FR4
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фарма- 16 043376 цевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит каркасные области VL антитела 20502, указанные в табл. 6.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and comprises the antibody 20502 VL framework regions set forth in Table. 6.
Таблица 6Table 6
Аминокислотная последовательность FR4 VLAmino acid sequence of FR 4 VL
4. Каркасные области VL, описанные в табл. 6, определяются на основе границ системы нумерации по Кабат для CDR. Соответственно, CDR VL определяются по Кабат, а каркасные области представляют собой аминокислотные остатки, окружающие CDR в вариабельной области в формате FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4 4. VL frame regions described in Table. 6 are determined based on the boundaries of the Kabat numbering system for the CDR. Accordingly, VL CDRs are defined by Kabat, and the framework regions are the amino acid residues surrounding the CDRs in the variable region in the format FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 and FR4
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит четыре каркасных области VH и четыре каркасных области VL антитела 20502, перечисленные в табл. 5 и 6.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and contains the four VH framework regions and four VL framework regions of antibody 20502 listed in Table 1. 5 and 6.
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит последовательность тяжелой цепи антитела 20502, приведенную в табл. 7.In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and contains the heavy chain sequence of antibody 20502 set forth in Table. 7.
Таблица 7Table 7
Аминокислотные последовательности полноразмерной тяжелой цепиAmino acid sequences of the full-length heavy chain
В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит последовательность легкой цепи антитела 20502, приведенную в табл. 8.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and contains the light chain sequence of antibody 20502 set forth in Table. 8.
Таблица 8Table 8
Аминокислотные последовательности полноразмерной легкой цепиAmino acid sequences of the full-length light chain
В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, специфически связывается с B7-H4 человека и содержит последовательность тяжелой цепи и последовательность легкой цепи антитела 20502, перечисленные в табл. 7 и 8.In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment in the pharmaceutical compositions provided herein specifically binds to human B7-H4 and contains the heavy chain sequence and the light chain sequence of antibody 20502 listed in Table. 7 and 8.
В определенных аспектах антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, описывается только его VL-доменом или только его VH-доменом или только его 3 CDR VL или только его 3 CDR VH. См., например, Rader C et al., (1998) PNAS 95: 8910-8915, которая включена в настоящее описание посредством ссылки во всей ее полноте, описывая гуманизацию мышиного антитела к о^3 путем идентификации дополняющей легкойIn certain aspects, an antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein is described by its VL domain only or its VH domain only or its 3 VL CDRs only or its 3 VH CDRs only. See, for example, Rader C et al., (1998) PNAS 95: 8910-8915, which is incorporated herein by reference in its entirety, describing the humanization of a murine anti-OQ3 antibody by identifying a complementary lung
- 17 043376 цепи или тяжелой цепи, соответственно, от легкой цепи человека или библиотеки тяжелой цепи, приводящей к вариантам гуманизированного антитела, имеющим сродство настолько же или более высокое, чем сродство исходного антитела. См. также Clackson T et al., (1991) Nature 352: 624-628, которая включена в настоящее описание посредством ссылки во всей ее полноте, описывая способы получения антител, которые специфически связываются со специфическим антигеном с использованием специфического VL домена (или домена VH), и скрининг библиотеки на дополняющий VH домен (или VL домен). Скрининг привел к 14 новым партнерам для конкретного домена VH и 13 новым партнерам для конкретного домена VL, которые связывались сильнее, как определено с помощью ИФА. См. также Kim SJ & Hong HJ, (2007) J Microbiol 45: 572-577, которая включена в настоящее описание посредством ссылки во всей ее полноте, описывая способы получения антител, которые специфически связывают специфический антиген, с использованием специфического домена VH и скрининга библиотеки (например, библиотеки VL человек) на дополняющие VL домены; выбранные VL домены в свою очередь, могут быть использованы для направленного отбора дополняющих комплементарных (например, человека) VH доменов.- 17 043376 chain or heavy chain, respectively, from a human light chain or a heavy chain library resulting in humanized antibody variants having an affinity equal to or greater than that of the parent antibody. See also Clackson T et al., (1991) Nature 352: 624-628, which is incorporated herein by reference in its entirety, describing methods for producing antibodies that specifically bind to a specific antigen using a specific VL domain (or domain VH), and screening the library for a complementary VH domain (or VL domain). The screen resulted in 14 new VH domain-specific partners and 13 new VL domain-specific partners that bound stronger, as determined by ELISA. See also Kim SJ & Hong HJ, (2007) J Microbiol 45: 572-577, which is incorporated herein by reference in its entirety, describing methods for producing antibodies that specifically bind a specific antigen using a specific VH domain and screening libraries (for example, VL human libraries) for complementary VL domains; the selected VL domains, in turn, can be used for targeted selection of complementary complementary (for example, human) VH domains.
В некоторых аспектах CDR антитела или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть определены в соответствии со схемой нумерации по Чотиа, которая относится к местоположению иммуноглобулина структурных петель (см., например, Chothia C & Lesk AM, (1987), J Mol Biol 196: 901-917; AlLazikani B et al., (1997) J Mol Biol 273: 927-948; Chothia C et al., (1992) J Mol Biol 227: 799-817; Tramontano A et al., (1990) J Mol Biol 215(1): 175-82 и патент США № 7709226). Как правило, при использовании системы нумерации по Кабату петля по Чотиа CDR-H1 представлена аминокислотами тяжелой цепи 2632, 33 или 34, петля по Чотиа CDR-H2 представлена аминокислотами тяжелой цепи 52-56, и петля по Чотиа CDR-H3 представлена аминокислотами тяжелой цепи 95-102, в то время как петля по Чотиа CDRL1 представлена аминокислотами легкой цепи 24-34, петля по Чотиа CDR-L2 представлена аминокислотами легкой цепи 50-56 и петля по Чотиа CDR-L3 представлена аминокислотами легкой цепи 89-97. Конец петли CDR-H1 по Чотиа при нумерации согласно системе нумерации по Кабату варьируется между H32 и H34 в зависимости от длины петли (это связано с тем, что в схеме нумерации по Кабату в H35A и H35B размещаются вставки; если ни 35A, ни 35B не присутствуют, петля заканчивается на 32; если присутствует только 35A, петля заканчивается на 33; если присутствуют оба 35A и 35B, петля заканчивается на 34).In some aspects, an antibody CDR or an antigen binding fragment thereof may be defined according to the Chothia numbering scheme, which refers to the location of immunoglobulin structural loops (see, e.g., Chothia C & Lesk AM, (1987), J Mol Biol 196: 901- 917; AlLazikani B et al., (1997) J Mol Biol 273: 927-948; Chothia C et al., (1992) J Mol Biol 227: 799-817; Tramontano A et al., (1990) J Mol Biol 215(1): 175-82 and US Patent No. 7709226). Typically, when using the Kabat numbering system, the Chotia loop CDR-H1 is represented by heavy chain amino acids 2632, 33, or 34, the Chotia loop CDR-H2 is represented by heavy chain amino acids 52-56, and the Chotia loop CDR-H3 is represented by heavy chain amino acids 95-102, while the Chotia loop CDRL1 is light chain amino acids 24-34, the Chotia loop CDR-L2 is light chain amino acids 50-56 and the Chotia loop CDR-L3 is light chain amino acids 89-97. The end of the Chotia CDR-H1 loop when numbered according to the Kabat numbering system varies between H32 and H34 depending on the length of the loop (this is because the Kabat numbering scheme places inserts in H35A and H35B; if neither 35A nor 35B are present, the loop ends on 32; if only 35A is present, the loop ends on 33; if both 35A and 35B are present, the loop ends on 34).
В некоторых аспектах в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) и содержат CDR VH и VL по Чотиа из антитела 20502, перечисленные в табл. 3 и 4. В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) и содержат один или более CDR, в которых CDR по Чотиа и по Кабат имеют одинаковую аминокислотную последовательность. В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) и состоят из комбинаций CDR по Кабату, и CDR по Чотиа.In some aspects, provided herein are pharmaceutical compositions comprising antibodies and antigen binding fragments that specifically bind to B7-H4 (eg, human B7-H4) and comprising the VH and Chotia VL CDRs of antibody 20502 listed in Table 1. 3 and 4. In some embodiments, provided herein are pharmaceutical compositions comprising antibodies and antigen binding fragments that specifically bind to B7-H4 (e.g., human B7-H4) and contain one or more CDRs, wherein the Chotia CDR and the Kabats have the same amino acid sequence. In some embodiments, provided herein are pharmaceutical compositions comprising antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to B7-H4 (eg, human B7-H4) and consist of combinations of Kabat CDRs and Chotia CDRs.
В некоторых аспектах CDR антитела или его антигенсвязывающего фрагмента могут быть определены в соответствии с системой нумерации IMGT, как описано в Lefranc M-P, (1999) The Immunologist 7: 132-136 и Lefranc M-P et al., (1999) Nucleic Acids Res 27: 209-212. Согласно системе нумерации IMGT VH-CDR1 находится в положениях 26-35, VH-CDR2 находится в положениях 51- 57, VH-CDR3 находится в положениях 93-102, VL-CDR1 находится в положениях 27-32, VL-CDR2 находится в положениях 5052, и VL-CDR3 находится в положениях 89-97. В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) и содержат CDR VH и VL IMGT из антитела 20502, перечисленные в табл. 3 и 4, например, как описано в Lefranc M-P (1999) выше и Lefranc M-P et al., (1999) выше).In some aspects, the CDR of an antibody or antigen-binding fragment thereof may be defined in accordance with the IMGT numbering system as described in Lefranc M-P, (1999) The Immunologist 7: 132-136 and Lefranc M-P et al., (1999) Nucleic Acids Res 27: 209-212. According to the IMGT numbering system, VH-CDR1 is in positions 26-35, VH-CDR2 is in positions 51-57, VH-CDR3 is in positions 93-102, VL-CDR1 is in positions 27-32, VL-CDR2 is in positions 5052, and VL-CDR3 is in positions 89-97. In a specific embodiment, provided herein are pharmaceutical compositions comprising antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to B7-H4 (eg, human B7-H4) and containing the VH and VL IMGT CDRs from antibody 20502 listed in Table 1. 3 and 4, for example as described in Lefranc M-P (1999) supra and Lefranc M-P et al., (1999) supra).
В определенных аспектах CDR антитела или его антигенсвязывающего фрагмента могут быть определены в соответствии с MacCallum RM et al., (1996) J Mol Biol 262: 732-745. См. также, например, Martin A. Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains, в Antibody Engineering, Kontermann и Dubel, eds., Chapter 31, pp. 422-439, Springer-Verlag, Berlin (2001). В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела или антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7H4 человека) и содержат CDR VH и VL, из антитела 20502, перечисленные в табл. 3 и 4, как определено методом из MacCallum RM et al.In certain aspects, the CDR of an antibody or an antigen binding fragment thereof may be determined in accordance with MacCallum RM et al., (1996) J Mol Biol 262: 732-745. See also, for example, Martin A. Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains, in Antibody Engineering, Kontermann and Dubel, eds., Chapter 31, pp. 422-439, Springer-Verlag, Berlin (2001). In a specific embodiment, provided herein are pharmaceutical compositions containing antibodies or antigen-binding fragments that specifically bind to B7-H4 (eg, human B7H4) and contain the VH and VL CDRs from antibody 20502 listed in Table. 3 and 4, as determined by the method from MacCallum RM et al.
В определенных аспектах CDR антитела или его антигенсвязывающего фрагмента могут быть определены в соответствии со схемой нумерации AbM, которая относится к гипервариабельным областям AbM, и которая представляют собой компромисс между CDR по Кабат и структурными петлями Чотиа, и используется в программном обеспечении для моделирования антител AbM Oxford Molecular (Oxford Molecular Group, Inc.). В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела или антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) и содержат CDR VH и VL из антитела 20502,In certain aspects, the CDRs of an antibody or an antigen binding fragment thereof may be defined according to an AbM numbering scheme that refers to the hypervariable regions of the AbM, and which represents a compromise between the Kabat CDRs and the Chotia structural loops, and is used in the AbM Oxford antibody modeling software Molecular (Oxford Molecular Group, Inc.). In a specific embodiment, provided herein are pharmaceutical compositions comprising antibodies or antigen-binding fragments that specifically bind to B7-H4 (e.g., human B7-H4) and containing the VH and VL CDRs from antibody 20502.
- 18 043376 перечисленные в табл. 3 и 4, как определено схемой нумерации AbM.- 18 043376 listed in table. 3 and 4, as defined by the AbM numbering scheme.
В конкретных аспектах в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие антитела, которые содержат тяжелую цепь и легкую цепь.In specific aspects, provided herein are pharmaceutical compositions containing antibodies that comprise a heavy chain and a light chain.
Что касается легкой цепи, в конкретном варианте осуществления легкая цепь антитела, описанного в настоящем документе, представляет собой легкую цепь каппа. Константная область легкой цепи каппа человека может содержать следующую аминокислотную последовательность:With respect to the light chain, in a particular embodiment, the light chain of the antibody described herein is a kappa light chain. The human kappa light chain constant region may contain the following amino acid sequence:
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQ DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:23).RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQ DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:23).
Константная область легкой цепи каппа человека может кодироваться следующей нуклеотидной последовательностью: CGGACCGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAA TCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAA GTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCAC AGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCA AAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGThe human kappa light chain constant region can be encoded by the following nucleotide sequence: CGGACCGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAA TCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAA GTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCAC AGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGC CTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCA AAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTG
AGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT (SEQ IDNO 24).AGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT (SEQ IDNO 24).
В конкретном варианте осуществления изобретения антитела, которое иммуноспецифически связывается с полипептидом B7-H4 (например, B7-H4 человека) фармацевтическая композиция, описанная в настоящем документе, включает легкую цепь, причем аминокислотная последовательность домена VL содержит множество последовательностей указанных в табл. 4, и при этом константная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность константной области легкой цепи каппа человека.In a specific embodiment of the invention of an antibody that immunospecifically binds to a B7-H4 polypeptide (e.g., human B7-H4), the pharmaceutical composition described herein includes a light chain, wherein the amino acid sequence of the VL domain contains a plurality of the sequences set forth in Table. 4, wherein the light chain constant region comprises the amino acid sequence of a human kappa light chain constant region.
В конкретном варианте осуществления изобретения антитела, которое иммуноспецифически связывается с B7-H4 (например, B7-H4 человека) фармацевтическая композиция, описанная в настоящем документе, включает тяжелую цепь, причем аминокислотная последовательность домена VH содержит множество аминокислотных последовательностей указанных в табл. 3, и при этом константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи гамма.In a specific embodiment of the invention of an antibody that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4), the pharmaceutical composition described herein includes a heavy chain, wherein the amino acid sequence of the VH domain contains a plurality of the amino acid sequences specified in table. 3, wherein the heavy chain constant region comprises the amino acid sequence of a gamma heavy chain constant region.
Константная область тяжелой цепи IgG 1 человека может содержать следующую аминокислотную последовательность:The human IgG 1 heavy chain constant region may contain the following amino acid sequence:
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQY NSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSR DELTKNQ VSLTCLVKGF YP SDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLD SDGSFFLYSKLT VDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:25).ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQY NSTYRVVSVLTV LHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSR DELTKNQ VSLTCLVKGF YP SDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLD SDGSFFLYSKLT VDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:25).
Константная область тяжелой цепи IgG 1 человека может кодироваться следующей нуклеотидной последовательностью: GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCT GGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCT ACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTT GGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGG ACAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCA GCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGAC ACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAC GAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGC CAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGGGTGGTCAGCGTC CTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTC CAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGC CCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAAC CAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAG TGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGA CTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAIgG heavy chain constant region1 human can be encoded by the following nucleotide sequence: GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCT GGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCT ACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCT CCAGCAGCTT GGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGG ACAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCA GCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGAC ACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAC GAAGACC CTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGC CAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGGGTGGTCAGCGTC CTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTC CAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGC CCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCC CCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAAC CAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAG TGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGA CTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCA
- 19 043376- 19 043376
GCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACAC
GCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA. (SEQ ID NO:26)GCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA. (SEQ ID NO:26)
В конкретном варианте осуществления антитело, которое иммуноспецифически связывается с B7H4 (например, B7-H4 человека) в фармацевтической композиции, описанной в настоящем документе, включает домен VH и домен VL, содержащий аминокислотную последовательность любого VH и VL доменов, описанных в настоящем документе, и при этом константные области содержат аминокислотные последовательности константных областей молекулы иммуноглобулина IgG (например, IgG человека). В другом конкретном варианте осуществления антитело, которое иммуноспецифически связывается с B7H4 (например, B7-H4 человека), для использования в фармацевтической композиции, описанной в настоящем документе, включает домен VH и домен VL, содержащий аминокислотную последовательность любого VH и VL доменов, описанных в настоящем документе, и при этом константные области содержат аминокислотные последовательности константных областей молекулы иммуноглобулина IgG1 (например, IgG1 человека).In a specific embodiment, an antibody that immunospecifically binds to B7H4 (e.g., human B7-H4) in a pharmaceutical composition described herein includes a VH domain and a VL domain comprising the amino acid sequence of any VH and VL domains described herein, and wherein the constant regions contain the amino acid sequences of the constant regions of the IgG immunoglobulin molecule (for example, human IgG). In another specific embodiment, an antibody that immunospecifically binds to B7H4 (e.g., human B7-H4) for use in a pharmaceutical composition described herein comprises a VH domain and a VL domain comprising the amino acid sequence of any of the VH and VL domains described in herein, and wherein the constant regions comprise the amino acid sequences of the constant regions of an IgG1 immunoglobulin molecule (eg, human IgG1).
Антитела с пониженным содержанием фукоз, как сообщалось, обладают повышенной аффинностью к рецепторам Fc, таким как, например, FcyRIIIA. Соответственно, в определенных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтической композиции, описанной в настоящем документе, имеет пониженное содержание фукозы или не содержит фукозы (то есть является афукозилированным). Такие антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть получены с использованием методик, известных специалисту в данной области техники. Например, они могут быть экспрессированы в клетках с дефицитом или отсутствием способности к фукозилированию. В конкретном примере клеточные линии с нокаутом обоих аллелей гена а1,6-фукозилтрансферазы (FUT8) могут быть использованы для получения антител или их антигенсвязывающих фрагментов с пониженным содержанием фукозы. Potelligent ® система (Lonza) является примером такой системы, которая может быть использована для получения антител и антигенсвязывающих их фрагментов с пониженным содержанием фукозы. Альтернативно, антитело или антигенсвязывающие фрагменты с пониженным содержанием фукозы или не содержащие фукозу, могут быть получены, например (i) культивирование клетки в условиях, которые предотвращают или уменьшают фукозилирование; (ii) посттрансляционным удалением фукозы (например, с помощью фермента фукозидазы); (iii) посттрансляционным добавление желаемых углеводов, например, пострекомбинантной экспрессией негликозилированного гликопротеина; или (iv) очисткой гликопротеина для отбора антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые не являются фукозилированными. См., например, Longmore GD & Schachter H (1982) Carbohydr Res 100: 365-92 и Imai-Nishiya H et al., (2007) BMC Biotechnol. 7: 84 для способов получения антител не содержащих фукозу или с пониженным содержанием фукозы.Antibodies with reduced fucose content have been reported to have increased affinity for Fc receptors such as, for example, FcyRIIIA. Accordingly, in certain embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical composition described herein has reduced fucose content or does not contain fucose (ie, is afucosylated). Such antibodies or antigen-binding fragments thereof can be prepared using techniques known to one skilled in the art. For example, they may be expressed in cells that are deficient or absent in the ability to fucosylate. In a specific example, cell lines with knockout of both alleles of the α1,6-fucosyltransferase (FUT8) gene can be used to produce antibodies or antigen-binding fragments thereof with reduced fucose content. The Potelligent ® system (Lonza) is an example of such a system that can be used to produce antibodies and antigen-binding fragments with reduced fucose content. Alternatively, antibody or antigen-binding fragments with reduced fucose content or without fucose can be prepared, for example, by (i) culturing the cell under conditions that prevent or reduce fucosylation; (ii) post-translational removal of fucose (eg using the enzyme fucosidase); (iii) post-translational addition of the desired carbohydrates, for example, post-recombinant expression of a non-glycosylated glycoprotein; or (iv) purifying the glycoprotein to select antibodies or antigen-binding fragments thereof that are not fucosylated. See, for example, Longmore GD & Schachter H (1982) Carbohydr Res 100: 365-92 and Imai-Nishiya H et al., (2007) BMC Biotechnol. 7: 84 for methods for producing antibodies containing no fucose or with a reduced fucose content.
В некоторых вариантах осуществления афукозилированное B7-H4 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент обладает повышенной ADCC активностью in vitro по сравнению с фукозилированными B7-H4 антителами или их антигенсвязывающими фрагментами, имеющими одинаковую аминокислотную последовательность. В некоторых вариантах осуществления афукозилированные антитела B7-H4 или их антигенсвязывающие фрагменты вызывают специфический лизис, который на по меньшей мере 10, по меньшей мере 15, по меньшей мере 20, по меньшей мере 25, по меньшей мере 30, по меньшей мере 35, по меньшей мере 40, по по меньшей мере 45, по меньшей мере 50, по меньшей мере 60, по меньшей мере 65, по меньшей мере 70 или по меньшей мере 75 процентов больше, чем специфический лизис вызванный фукозилированными антителами B7-H4.In some embodiments, a fucosylated B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof has increased ADCC activity in vitro compared to fucosylated B7-H4 antibodies or antigen binding fragments thereof having the same amino acid sequence. In some embodiments, afucosylated B7-H4 antibodies or antigen-binding fragments thereof cause a specific lysis that is at least 10, at least 15, at least 20, at least 25, at least 30, at least 35, by at least 40, at least 45, at least 50, at least 60, at least 65, at least 70, or at least 75 percent greater than the specific lysis caused by fucosylated B7-H4 antibodies.
В некоторых вариантах осуществления B7-H4 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент имеет усиленное сродство к Fc гамма RIIIA по сравнению с фукозилированными антителами B7-H4 или их антигенсвязывающими фрагментами, имеющими одинаковую аминокислотную последовательность. В некоторых вариантах осуществления афукозилированные антитела B7-H4 или их антигенсвязывающие фрагменты связываются с Fc гамма RIIIA по меньшей мере в 2 раза, по меньшей мере в 3 раза, по меньшей мере в 4 раза, по меньшей мере в 5 раз, по меньшей мере в 7 раз, по меньшей мере в 10 раз, по меньшей мере в 12 раз, по меньшей мере в 15 раз, по меньшей мере в 17 раз или по меньшей мере в 20 раз с большим сродством, чем фукозилированные антитела B7-H4 или их антигенсвязывающие фрагменты. В некоторых вариантах осуществления аффинность к Fc гамма RIIIA определяют с использованием поверхностного плазмонного резонанса. В некоторых вариантах осуществления Fc гамма RIIIA выбран из Fc гамма RIIIA (V158) и Fc гамма RIIIA (F158). В некоторых вариантах осуществления Fc гамма RIIIA представляет собой Fc гамма RIIIA (V158).In some embodiments, the B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof has enhanced affinity for Fc gamma RIIIA compared to fucosylated B7-H4 antibodies or antigen binding fragments thereof having the same amino acid sequence. In some embodiments, afucosylated B7-H4 antibodies or antigen binding fragments thereof bind to Fc gamma RIIIA at least 2-fold, at least 3-fold, at least 4-fold, at least 5-fold, at least 7-fold, at least 10-fold, at least 12-fold, at least 15-fold, at least 17-fold, or at least 20-fold with greater affinity than fucosylated B7-H4 antibodies or antigen-binding antibodies thereof fragments. In some embodiments, the affinity for Fc gamma RIIIA is determined using surface plasmon resonance. In some embodiments, Fc gamma RIIIA is selected from Fc gamma RIIIA (V158) and Fc gamma RIIIA (F158). In some embodiments, Fc gamma RIIIA is Fc gamma RIIIA (V158).
В некоторых вариантах осуществления присутствие фукозы может быть определено способом, включающим высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), капиллярный электрофорез или масс-спектрометрию MALDI-TOF.In some embodiments, the presence of fucose can be determined by a method including high performance liquid chromatography (HPLC), capillary electrophoresis, or MALDI-TOF mass spectrometry.
В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (i) содержат последовательности CDR 20502, последовательности VH и VL 20502 или последовательности тяжелой и легкой цепей 20502 и (ii) являются афукозилированными.In specific embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof (i) comprises CDR 20502 sequences, VH and VL sequences 20502, or heavy and light chain sequences 20502 and (ii) is afucosylated.
В конкретных вариантах осуществления композиция содержит антитела или их антигенсвязываю- 20 043376 щие фрагменты, которые (i) содержат последовательности CDR 20502, последовательности VH и VLIn specific embodiments, the composition contains antibodies or antigen-binding fragments thereof that (i) contain CDR 20502 sequences, VH and VL sequences
20502 или последовательности тяжелой и легкой цепей 20502 и (ii) являются афукозилированными, например, в которых по меньшей мере 95% антител в композиции являются афукозилированными или при этом фукозилирование является не обнаруживаемым в композиции.20502 or the heavy and light chain sequences of 20502 and (ii) are afucosylated, for example, wherein at least 95% of the antibodies in the composition are afucosylated or wherein fucosylation is not detectable in the composition.
Инженерные гликоформы могут быть полезны для различных целей, включая, но не ограничиваясь, усиление или уменьшение эффекторной функции. Способы получения сконструированных гликоформ в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, описанные в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, те, которые описаны, например, в Umana P et al., (1999) Nat Biotechnol 17: 176-180; Davies J et al., (2001) Biotechnol Bioeng 74: 288-294; Shields RL et al., (2002) J Biol Chem 277: 26733-26740; Shinkawa T et al., (2003) J Biol Chem 278: 3466-3473; Niwa R et al., (2004) Clin Cancer Res 1: 6248-6255; Presta LG et al., (2002) Biochem Soc Trans 30: 487-490; Kanda Y et al., (2007) Glycobiology 17: 104-118; патентах США № 6602684; 6946292; и 7214775; патентных публикациях США № US 2007/0248600; 2007/0178551; 2008/0060092; и 2006/0253928; международных патентных публикациях № WO 00/61739; WO 01/292246; WO 02/311140; и WO 02/30954; технологии Potelligent™ (Biowa, Inc. Принстон, Нью Джерси); и технологии конструирования гликозилирования GlycoMAb® (Glycart biotechnology AG, Цюрих, Швейцария). См. также, например, Ferrara C et al., (2006) Biotechnol Bioeng 93: 851-861; международные патентные публикации № WO 07/039818; WO 12/130831; WO 99/054342; WO 03/011878; и WO 04/065540.Engineered glycoforms may be useful for a variety of purposes, including, but not limited to, enhancing or reducing effector function. Methods for producing engineered glycoforms in an antibody or antigen binding fragment thereof described herein include, but are not limited to, those described, for example, in Umana P et al., (1999) Nat Biotechnol 17: 176-180; Davies J et al., (2001) Biotechnol Bioeng 74: 288-294; Shields RL et al., (2002) J Biol Chem 277: 26733-26740; Shinkawa T et al., (2003) J Biol Chem 278: 3466-3473; Niwa R et al., (2004) Clin Cancer Res 1: 6248-6255; Presta LG et al., (2002) Biochem Soc Trans 30: 487-490; Kanda Y et al., (2007) Glycobiology 17: 104-118; US patents No. 6602684; 6946292; and 7214775; US Patent Publications No. US 2007/0248600; 2007/0178551; 2008/0060092; and 2006/0253928; international patent publications No. WO 00/61739; WO 01/292246; WO 02/311140; and WO 02/30954; Potelligent™ technologies (Biowa, Inc. Princeton, NJ); and GlycoMAb® glycosylation engineering technologies (Glycart biotechnology AG, Zurich, Switzerland). See also, for example, Ferrara C et al., (2006) Biotechnol Bioeng 93: 851-861; international patent publications No. WO 07/039818; WO 12/130831; WO 99/054342; WO 03/011878; and WO 04/065540.
В определенных вариантах осуществления любые из мутаций или модификаций константной области, описанных в настоящем документе, могут быть введены в одну или обе константные области тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанного в настоящем документе, имеющего две константные области тяжелой цепи.In certain embodiments, any of the constant region mutations or modifications described herein may be introduced into one or both heavy chain constant regions of an antibody or antigen binding fragment thereof described herein having two heavy chain constant regions.
В другом конкретном варианте осуществления изобретения, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанный в настоящем документе, который иммуноспецифически связывается с B7-H4 (например, B7-H4 человека), содержит тяжелую и легкую цепь, причем (i) тяжелая цепь содержит домен VH, содержащий аминокислотные последовательности CDR1 VH, CDR2 VL и CDR3 VL антитела 20502, перечисленные в табл. 1; (ii) легкая цепь содержит домен VL, содержащий аминокислотные последовательности CDR1 VL, CDR2 VH и CDR3 VH антитела 20502, перечисленные в табл. 2; (iii) тяжелая цепь дополнительно содержит константный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность константного домена тяжелой цепи IgG 1 человека; и (iv) легкая цепь дополнительно содержит константный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность константного домена легкой цепи каппа человека.In another specific embodiment of the invention, an antibody or antigen binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) comprises a heavy and a light chain, wherein (i) the heavy chain comprises a VH domain, containing the amino acid sequences CDR1 VH, CDR2 VL and CDR3 VL of antibody 20502, listed in table. 1; (ii) the light chain contains a VL domain containing the amino acid sequences CDR1 VL, CDR2 VH and CDR3 VH of antibody 20502 listed in table. 2; (iii) the heavy chain further comprises a heavy chain constant domain comprising the amino acid sequence of a human IgG 1 heavy chain constant domain; and (iv) the light chain further comprises a light chain constant domain comprising the amino acid sequence of a human kappa light chain constant domain.
В другом конкретном варианте осуществления изобретения, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанный в настоящем документе, который иммуноспецифически связывается с B7-H4 (например, B7-H4 человека), содержит тяжелую и легкую цепь, причем (i) тяжелая цепь содержит домен VH, содержащий аминокислотную последовательность домена VH антитела 20502, перечисленную в табл. 3; (ii) легкая цепь содержит домен VL, содержащий аминокислотную последовательность домена VL антитела 20502, перечисленную в табл. 4; (iii) и тяжелая цепь дополнительно содержит константный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность константного домена тяжелой цепи IgG 1 человека; и (iv) легкая цепь дополнительно содержит константный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность константного домена легкой цепи каппа человека.In another specific embodiment of the invention, an antibody or antigen binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) comprises a heavy and a light chain, wherein (i) the heavy chain comprises a VH domain, containing the amino acid sequence of the VH domain of antibody 20502, listed in table. 3; (ii) the light chain contains a VL domain containing the amino acid sequence of the VL domain of antibody 20502 listed in table. 4; (iii) and the heavy chain further comprises a heavy chain constant domain comprising the amino acid sequence of a human IgG 1 heavy chain constant domain; and (iv) the light chain further comprises a light chain constant domain comprising the amino acid sequence of a human kappa light chain constant domain.
В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), проявляют активность по отношению к блокаде активности контрольной точки T-клеток. В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), увеличивают выработку интерферона гамма (IFNy) в T-клетках. В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), усиливают пролиферацию T-клеток. В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), усиливают пролиферацию CD4+ T-клеток. В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), усиливают пролиферацию CD8+ T-клеток.In specific embodiments, an antibody or antigen binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) exhibits T cell checkpoint activity blockade activity. In specific embodiments, an antibody or antigen binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) increases the production of interferon gamma (IFNy) in T cells. In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) enhances T cell proliferation. In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) enhances the proliferation of CD4+ T cells. In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) enhances the proliferation of CD8+ T cells.
В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC). В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) на клеточных линиях с по меньшей мере 300000 молекул B7-H4 на поверхности клетки (например, клетки SK-BR-3). ВIn specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (eg, human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC). In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) on cell lines with at least 300,000 B7-H4 molecules on the cell surface (for example, SK-BR-3 cells). IN
- 21 043376 конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) на клеточных линиях с по меньшей мере 100000 молекул B7-H4 на поверхности клетки (например, клетки HCC1569). В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) на клеточных линиях с по меньшей мере 50000 молекул B7-H4 на поверхности клетки (например, клетки ZR-75-1). В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) на клеточных линиях с по меньшей мере 30000 молекул B7-H4 на поверхности клетки (например, клетки MDA-MB468). В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в настоящем документе, которые иммуноспецифически связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека), демонстрируют антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) на клеточных линиях с по меньшей мере 15000 молекул B7-H4 на поверхности клетки (например, клетки HCC1964).- 21 043376 specific embodiments, an antibody or antigen binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) on cell lines with at least 100,000 B7 molecules -H4 on the cell surface (eg HCC1569 cells). In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) on cell lines with at least 50,000 B7-H4 molecules on the cell surface (for example, ZR-75-1 cells). In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) on cell lines with at least 30,000 B7-H4 molecules on the cell surface (for example, MDA-MB468 cells). In specific embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) exhibits antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) on cell lines with at least 15,000 B7-H4 molecules on the cell surface (eg HCC1964 cells).
В конкретном аспекте антигенсвязывающий фрагмент, как описано в настоящем документе, который иммуноспецифически связывается с B7-H4 (например, B7-H4 человека), выбран из группы, состоящей из Fab, Fab', F(ab')2, и ScFv, причем Fab, Fab', F(ab')2 или ScFv содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи последовательности антитела к B7H4 или его антигенсвязывающего фрагмента, как описано в настоящем документе. Fab, Fab', F(ab')2 или scFv могут быть получены любым способом, известным специалистам в данной области техники. В некоторых вариантах осуществления Fab, Fab', F(ab')2 или ScFv дополнительно содержат фрагмент, который увеличивает период полураспада антитела in vivo. Фрагмент также называют фрагмент, увеличивающий период полураспада. Могут быть использованы любые фрагменты, известные специалистам в данной области техники для увеличения периода полураспада Fab, Fab', F(ab')2 или ScFv in vivo. Например, фрагмент, увеличивающий период полураспада, может включать Fc область, полимер, альбумин или альбумин-связывающий белок или соединение. Полимер может включать природный или синтетический, необязательно замещенный полиалкилен с прямой или разветвленной цепью, полиалкенилен, полиоксилалкилен, полисахарид, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, поливиниловый спирт, метоксиполиэтиленгликоль, лактозу, амилозу, декстран, гликоген или их производное. Заместители могут включать одну или более гидрокси, метил или метоксигруппы. В некоторых вариантах осуществления Fab, Fab', F(ab')2 или ScFv могут быть изменены путем добавления одной или более С-концевых аминокислот для прикрепления фрагмента, увеличивающего период полураспада. В некоторых вариантах осуществления изобретения фрагмент, увеличивающий период полураспада, представляет собой полиэтиленгликоль или сывороточный альбумин человека. В некоторых вариантах осуществления Fab, Fab', F(ab')2 или ScFv слит с Fc областью.In a specific aspect, an antigen binding fragment as described herein that immunospecifically binds to B7-H4 (e.g., human B7-H4) is selected from the group consisting of Fab, Fab', F(ab')2, and ScFv, wherein Fab, Fab', F(ab') 2 or ScFv contains the heavy chain variable region and light chain variable region sequence of an anti-B7H4 antibody or an antigen binding fragment thereof, as described herein. Fab, Fab', F(ab')2 or scFv can be prepared by any method known to those skilled in the art. In some embodiments, the Fab, Fab', F(ab')2, or ScFv further comprises a moiety that increases the half-life of the antibody in vivo. The fragment is also called the half-life extending fragment. Any fragments known to those skilled in the art to increase the half-life of Fab, Fab', F(ab') 2 or ScFv in vivo can be used. For example, the half-life increasing moiety may include an Fc region, a polymer, albumin, or an albumin-binding protein or compound. The polymer may include natural or synthetic, optionally substituted straight or branched chain polyalkylene, polyalkenylene, polyoxyalkylene, polysaccharide, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyvinyl alcohol, methoxy polyethylene glycol, lactose, amylose, dextran, glycogen, or a derivative thereof. Substituents may include one or more hydroxy, methyl or methoxy groups. In some embodiments, the Fab, Fab', F(ab')2, or ScFv may be modified by adding one or more C-terminal amino acids to attach a moiety that increases the half-life. In some embodiments, the half-life extending moiety is polyethylene glycol or human serum albumin. In some embodiments, Fab, Fab', F(ab') 2 or ScFv is fused to the Fc region.
5.4 Производство антител и полинуклеотидов.5.4 Production of antibodies and polynucleotides.
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифично связываются с B7-H4 (например, B7-H4 человека) могут быть получены любым способом, известным в данной области техники для синтеза антител и антигенсвязывающих их фрагментов, например, химическим синтезом или методами рекомбинантной экспрессии. Способы, описанные в настоящем документе используют, если не указано иное, обычные методы молекулярной биологии, микробиологии, генетического анализа, рекомбинантной ДНК, органической химии, биохимии, ПНР, синтеза олигонуклеотидов и их модификации, гибридизации нуклеиновых кислот, и методы смежных областей в пределах области техники. Эти методики описаны, например, в ссылках, цитируемых в настоящем документе, и полностью объяснены в литературе. См., например, Sambrook J et al., (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel FM et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren B et al., (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press.Antibodies and antigen-binding fragments thereof that immunospecifically bind to B7-H4 (eg, human B7-H4) can be produced by any method known in the art for the synthesis of antibodies and antigen-binding fragments thereof, for example, chemical synthesis or recombinant expression methods. The methods described herein use, unless otherwise indicated, conventional methods of molecular biology, microbiology, genetic analysis, recombinant DNA, organic chemistry, biochemistry, PNR, oligonucleotide synthesis and modification, nucleic acid hybridization, and related fields within the field technology. These techniques are described, for example, in the references cited herein and are fully explained in the literature. See, for example, Sambrook J et al., (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel F. M. et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren B et al., (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press.
В определенных аспектах в настоящем документе предлагаются фармацевтические композиции, содержащие антитело к B7-H4 или антигенсвязывающий фрагмент, причем антитела или фрагменты продуцируются рекомбинантной экспрессией полинуклеотида, содержащего нуклеотидную последовательность, в соответствующей клетке-хозяине.In certain aspects, provided herein are pharmaceutical compositions comprising an anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment, wherein the antibodies or fragments are produced by recombinant expression of a polynucleotide comprising the nucleotide sequence in an appropriate host cell.
В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 9 (то есть SEQ ID NO: 27). В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержитIn certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a heavy chain variable region encoded by a polynucleotide comprising the nucleotide sequence set forth in Table. 9 (ie SEQ ID NO: 27). In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises
- 22 043376 вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 9 (то есть SEQ ID NO: 27), и нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область тяжелой цепи гамма (γ) человека. В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 9 (то есть SEQ ID NO: 27), и константный домен тяжелой цепи, кодируемый полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 26.- 22 043376 heavy chain variable region encoded by a polynucleotide containing the nucleotide sequence presented in table. 9 (ie, SEQ ID NO: 27), and a nucleotide sequence encoding the human gamma (γ) heavy chain constant region. In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a heavy chain variable region encoded by a polynucleotide comprising the nucleotide sequence set forth in Table. 9 (i.e., SEQ ID NO: 27), and a heavy chain constant domain encoded by a polynucleotide containing the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 26.
Таблица 9Table 9
Полинуклеотидные последовательности, кодирующие вариабельную область тяжелой цепиPolynucleotide sequences encoding the heavy chain variable region
В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область легкой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 10 (то есть SEQ ID NO: 28). В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область легкой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 10 (то есть SEQ ID NO: 28), и нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область легкой цепи лямбда человека. В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область легкой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, представленную в табл. 10 (то есть SEQ ID NO: 28), и константный домен легкой цепи, кодируемый полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 24.In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a light chain variable region encoded by a polynucleotide comprising the nucleotide sequence set forth in Table. 10 (ie SEQ ID NO: 28). In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a light chain variable region encoded by a polynucleotide comprising the nucleotide sequence set forth in Table. 10 (ie, SEQ ID NO: 28), and a nucleotide sequence encoding the human lambda light chain constant region. In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a light chain variable region encoded by a polynucleotide comprising the nucleotide sequence set forth in Table. 10 (i.e., SEQ ID NO: 28), and a light chain constant domain encoded by a polynucleotide containing the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 24.
Таблица 10Table 10
Полинуклеотидные последовательности, кодирующие вариабельную область легкой цепиPolynucleotide sequences encoding the light chain variable region
В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область тяжелой цепи, представленную в табл. 9 (т.е. SEQ ID NO: 27) и вариабельную легкую цепь, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную легкую цепь, представленную в табл. 10 (то есть, SEQ ID NO: 28).In certain aspects, the anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises a heavy chain variable region encoded by a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding the heavy chain variable region set forth in Table. 9 (ie SEQ ID NO: 27) and a variable light chain encoded by a polynucleotide containing the nucleotide sequence encoding the variable light chain presented in table. 10 (ie, SEQ ID NO: 28).
В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, включает (i) тяжелую цепь, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную областьIn certain aspects, an anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises (i) a heavy chain encoded by a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding a variable region
- 23 043376 тяжелой цепи, представленную в табл. 9 (т.е. SEQ ID NO: 27) и нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область тяжелой цепи гамма (γ) человека, и (ii) легкую цепь, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную легкую цепь, представленную в табл. 10 (т.е. SEQ ID NO: 28) и нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область легкой цепи лямбда человека.- 23 043376 heavy chain, presented in table. 9 (i.e. SEQ ID NO: 27) and a nucleotide sequence encoding a human gamma (γ) heavy chain constant region, and (ii) a light chain encoded by a polynucleotide containing a nucleotide sequence encoding a variable light chain presented in table. 10 (ie, SEQ ID NO: 28) and a nucleotide sequence encoding the human lambda light chain constant region.
В определенных аспектах антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, включает (i) тяжелую цепь, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область тяжелой цепи, представленную в табл. 9 (т.е. SEQ ID NO: 27) и нуклеотидную последовательность, кодирующую константный домен тяжелой цепи SEQ ID NO:26, и (ii) легкую цепь, кодируемую полинуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную легкую цепь, представленную в табл. 10 (т.е. SEQ ID NO: 28) и нуклеотидную последовательность, кодирующую константный домен легкой цепи SEQ ID NO:24.In certain aspects, an anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein comprises (i) a heavy chain encoded by a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding a heavy chain variable region set forth in Table. 9 (ie, SEQ ID NO: 27) and a nucleotide sequence encoding a heavy chain constant domain of SEQ ID NO: 26, and (ii) a light chain encoded by a polynucleotide containing a nucleotide sequence encoding a variable light chain shown in Table. 10 (ie, SEQ ID NO: 28) and the nucleotide sequence encoding the light chain constant domain of SEQ ID NO: 24.
В некоторых аспектах, антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе кодируются полинуклеотидами, кодирующими антитела к B7-H4 или их антигенсвязывающие фрагменты или домены, которые оптимизированы, например путем оптимизации кодонов/РНК, замены гетерологичными сигнальными последовательностями и удаления элементов нестабильности мРНК. Способы для генерирования оптимизированных нуклеиновых кислот, кодирующих антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент или домен (например, тяжелую цепь, легкую цепь, домен VH, или домен VL) для рекомбинантной экспрессии путем внесения изменений в кодоны (например, изменение кодона, кодирующего ту же аминокислоту из-за вырожденности генетического кода) и/или устранение ингибирующие области в мРНК может быть осуществлено путем адаптации способов оптимизации описанных, например, патентах США № 5965726; 6174666; 6291664; 6414132; и 6 794498, соответственно.In some aspects, anti-B7-H4 antibodies or antigen-binding fragments in the pharmaceutical compositions provided herein are encoded by polynucleotides encoding anti-B7-H4 antibodies or antigen-binding fragments or domains thereof that are optimized, for example, by codon optimization/RNA substitution with heterologous signal sequences and removal of mRNA instability elements. Methods for generating optimized nucleic acids encoding an anti-B7-H4 antibody or an antigen binding fragment or domain (e.g., heavy chain, light chain, VH domain, or VL domain) for recombinant expression by making changes to the codons (e.g., changing the codon encoding the same amino acid due to the degeneracy of the genetic code) and/or elimination of inhibitory regions in the mRNA can be accomplished by adapting optimization methods described, for example, in US patent No. 5965726; 6174666; 6291664; 6414132; and 6 794498, respectively.
Полинуклеотиды могут быть, например, в форме РНК или в форме ДНК. ДНК включает кДНК, геномную ДНК и синтетическую ДНК. ДНК может являться двухцепочечной или одноцепочечной. Будучи одноцепочечной, ДНК может являться кодирующей цепью или некодирующей (антисмысловой) цепью. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой кДНК или ДНК, в которой отсутствует один или более интронов. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой не встречающийся в природе полинуклеотид. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид продуцируется рекомбинантно. В определенных вариантах осуществления полинуклеотиды являются изолированными. В определенных вариантах осуществления полинуклеотиды являются по существу чистыми. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид очищают от природных компонентов.The polynucleotides may be, for example, in the form of RNA or in the form of DNA. DNA includes cDNA, genomic DNA and synthetic DNA. DNA can be double-stranded or single-stranded. Being single-stranded, DNA can be a coding strand or a non-coding (antisense) strand. In some embodiments, the polynucleotide is cDNA or DNA lacking one or more introns. In certain embodiments, the polynucleotide is a non-naturally occurring polynucleotide. In certain embodiments, the polynucleotide is produced recombinantly. In certain embodiments, the polynucleotides are isolated. In certain embodiments, the polynucleotides are substantially pure. In certain embodiments, the polynucleotide is purified from natural components.
В некоторых аспектах, векторы (например, векторы экспрессии) содержат нуклеотидные последовательности, кодирующие антитела к B7-H4 и их антигенсвязывающие фрагменты или домен, для рекомбинантной экспрессии в клетках-хозяевах, предпочтительно в клетках млекопитающих. В некоторых аспектах, клетки, например, клетки-хозяева, включают в себя такие векторы для рекомбинантной экспрессии антитела к B7-H4 или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в настоящем документе (например, человеческие или гуманизированные антитела или антигенсвязывающие фрагменты). Таким образом, способ получения антитела или его антигенсвязывающих фрагментов для применения в фармацевтической композиции, описанной в настоящем документе, может включать экспрессию такого антитела или его антигенсвязывающего фрагмента в клетке-хозяине.In some aspects, vectors (eg, expression vectors) contain nucleotide sequences encoding anti-B7-H4 antibodies and antigen binding fragments or domain thereof for recombinant expression in host cells, preferably mammalian cells. In some aspects, cells, such as host cells, include such vectors for recombinant expression of an anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof as described herein (eg, human or humanized antibodies or antigen binding fragments). Thus, a method of producing an antibody or antigen binding fragments thereof for use in a pharmaceutical composition described herein may involve expressing such antibody or antigen binding fragment thereof in a host cell.
Вектор экспрессии может быть перенесен в клетку (например, клетку-хозяин) с помощью обычных методик и полученные клетки могут быть затем культивированы с помощью обычных методов для получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в настоящем документе (например, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащих шесть CDR, VH, VL, VH и VL, тяжелую цепь, легкую цепь, или тяжелую и легкую цепь 20502) или их домена (например, VH, VL, VH и VL, тяжелую и легкую цепь 20502).The expression vector can be transferred into a cell (e.g., a host cell) using conventional techniques, and the resulting cells can then be cultured using conventional techniques to produce an antibody or antigen binding fragment thereof described herein (e.g., an antibody or antigen binding fragment thereof, containing six CDRs, VH, VL, VH and VL, heavy chain, light chain, or heavy and light chain 20502) or domains thereof (eg, VH, VL, VH and VL, heavy and light chain 20502).
В некоторых вариантах осуществления, антитела к B7-H4 или антигенсвязывающий фрагмент (например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, включающий CDR из 20502) в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе производятся в клетках Potelligent® CHOK1SV.In some embodiments, the anti-B7-H4 antibodies or antigen binding fragment (eg, an antibody or antigen binding fragment thereof comprising the CDR of 20502) in the pharmaceutical compositions provided herein are produced in Potelligent® CHOK1SV cells.
В некоторых вариантах осуществления, антитела к B7-H4 или антигенсвязывающие фрагменты (например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, включающий CDR из 20502) в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе производятся в клетке-хозяине, в которой не хватает функционирующего гена альфа-1,6-фукозилтрансферазы (FUT8). В некоторых вариантах осуществления клетка-хозяин представляет собой клетку CHO.In some embodiments, anti-B7-H4 antibodies or antigen-binding fragments (e.g., an antibody or antigen-binding fragment thereof comprising the CDR of 20502) in the pharmaceutical compositions provided herein are produced in a host cell that lacks a functioning alpha-1 gene ,6-fucosyltransferase (FUT8). In some embodiments, the host cell is a CHO cell.
В конкретных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в фармацевтических композициях, представленных в настоящем документе, выделяют или очищают. Обычно изолированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой такое, котороеIn specific embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof in the pharmaceutical compositions provided herein is isolated or purified. Typically, an isolated antibody or antigen-binding fragment thereof is one that
- 24 043376 по существу не содержит других антител или их антигенсвязывающих фрагментов с антигенной специфичностью, отличной от выделенного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Например, в конкретном варианте осуществления состав антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанный в настоящем документе, по существу не содержит клеточного материала и/или химических предшественников.- 24 043376 is substantially free of other antibodies or antigen binding fragments thereof with an antigenic specificity different from the isolated antibody or antigen binding fragment thereof. For example, in a particular embodiment, the antibody composition or antigen binding fragment thereof described herein is substantially free of cellular material and/or chemical precursors.
5.5 Терапевтические применения и способы.5.5 Therapeutic uses and methods.
В одном аспекте в настоящем документе предлагаются способы модуляции одной или более иммунных функций у субъекта, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, представленной в настоящем документе, содержащей антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент.In one aspect, provided herein are methods of modulating one or more immune functions in a subject, comprising administering to a subject in need thereof a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof.
В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, вводится пациенту (например, пациенту-человеку) для усиления пролиферации T-клеток, CD4+ T-клеток или CD8+ T-клеток у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, вводится пациенту (например, пациенту-человеку) для увеличения выработки интерферона-гамма (IFNy) у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, вводится пациенту (например, пациенту-человеку) для блокирования ингибирующей активности B7-H4 в отношении T-клеток у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, вводится пациенту (например, пациенту-человеку) для удаления экспрессирующих B7-H4 раковых клеток у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, содержащая антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, вводится для достижения двух или более из указанных выше эффектов.In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof is administered to a patient (e.g., a human patient) to enhance the proliferation of T cells, CD4+ T cells, or CD8+ T cells in the patient . In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof is administered to a patient (eg, a human patient) to increase interferon-gamma (IFNy) production in the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof is administered to a patient (eg, a human patient) to block the inhibitory activity of B7-H4 on T cells in the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof is administered to a patient (eg, a human patient) to remove B7-H4 expressing cancer cells from the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein comprising an anti-B7-H4 antibody or an antigen-binding fragment thereof is administered to achieve two or more of the above effects.
В определенном варианте осуществления в настоящем документе предлагаются способы лечения рака, например рака, экспрессирующего B7-H4, включающие введение фармацевтической композиции, содержащей антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, предложенные в настоящем документе, пациенту (например, пациенту-человеку), нуждающемуся в этом. В определенном варианте осуществления в настоящем документе предлагаются способы лечения солидной опухоли, например солидной опухоли, экспрессирующей B7-H4, включающие введение фармацевтической композиции, содержащей антитело к B7-H4 или его антигенсвязывающий фрагмент, предложенные в настоящем документе, пациенту (например, пациенту-человеку), нуждающемуся в этом.In a certain embodiment, provided herein are methods of treating a cancer, such as a cancer expressing B7-H4, comprising administering a pharmaceutical composition comprising an anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof provided herein to a patient (e.g., a human patient), who needs it. In a certain embodiment, provided herein are methods of treating a solid tumor, such as a solid tumor expressing B7-H4, comprising administering a pharmaceutical composition comprising an anti-B7-H4 antibody or antigen binding fragment thereof provided herein to a patient (e.g., a human patient ), who needs it.
В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из: рака молочной железы (например, рак молочной железы, тройной негативный рак молочной железы, положительный на рецептор гормона (HR) рак молочной железы или рак протоков), рака эндометрия, рака яичника, рака уротелия, немелкоклеточного рака легкого (например, плоскоклеточный рак), рака поджелудочной железы, рака щитовидной железы, рака почки (например, почечно-клеточный рак) и рака мочевого пузыря (например, уротелиальноклеточный рак). В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции для лечения прогрессирующего рака молочной железы (в том числе тройного негативного рака молочной железы и положительного на рецептор гормона (HR) рака молочной железы), рака яичников, рака эндометрия, или уротериального рака. В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции для лечения рака молочной железы. В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции для лечения рака яичников. В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции для лечения рака эндометрия. В определенном варианте осуществления настоящего изобретения предложены фармацевтическими композициями для лечения уротериального рака.In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of cancer selected from the group consisting of: breast cancer (e.g., breast cancer, triple negative breast cancer, hormone receptor (HR) positive breast cancer, or ductal cancer) , endometrial cancer, ovarian cancer, urothelial cancer, non-small cell lung cancer (eg, squamous cell carcinoma), pancreatic cancer, thyroid cancer, kidney cancer (eg, renal cell carcinoma), and bladder cancer (eg, urothelial cell carcinoma). In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of advanced breast cancer (including triple negative breast cancer and hormone receptor (HR) positive breast cancer), ovarian cancer, endometrial cancer, or urothelial cancer. In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of breast cancer. In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of ovarian cancer. In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of endometrial cancer. In a certain embodiment, the present invention provides pharmaceutical compositions for the treatment of urothelial cancer.
В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой рак, экспрессирующий B7-H4.In some embodiments, the cancer is a cancer expressing B7-H4.
В другом варианте осуществления фармацевтическую композицию, предложенную в настоящем описании, вводят пациенту (например, пациенту-человеку) с диагнозом рак, чтобы усилить пролиферацию T-клеток, CD4+ T-клеток, или CD8+ T-клеток у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическую композицию, представленную в настоящем документе, вводят пациенту (например, пациенту-человеку), с диагнозом рак, для увеличения выработки интерферона-гамма (IFNy) у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическую композицию, представленную в настоящем документе, вводят пациенту (например, пациенту-человеку), с диагнозом рак, чтобы блокировать ингибирующую активность B7-H4 в отношении T-клеток у пациента. В другом варианте осуществления фармацевтическую композицию, представленную в настоящем документе, вводят пациенту (например, пациенту-человеку), с диагнозом рак, чтобы истощить экспрессирующие B7-H4 раковые клетки у пациента.In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein is administered to a patient (eg, a human patient) diagnosed with cancer to enhance the proliferation of T cells, CD4+ T cells, or CD8+ T cells in the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein is administered to a patient (eg, a human patient) diagnosed with cancer to increase interferon-gamma (IFNy) production in the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein is administered to a patient (eg, a human patient) diagnosed with cancer to block the T cell inhibitory activity of B7-H4 in the patient. In another embodiment, a pharmaceutical composition provided herein is administered to a patient (eg, a human patient) diagnosed with cancer to deplete B7-H4 expressing cancer cells in the patient.
Фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, могут быть доставлены паци- 25 043376 енту с помощью внутривенного введения. Обычно пациент является человеком, но могут поддаваться лечению млекопитающие, не являющиеся человеком, включая трансгенные млекопитающие.The pharmaceutical compositions described herein can be delivered to a patient via intravenous administration. Typically the patient is human, but non-human mammals, including transgenic mammals, may be treatable.
6. Примеры6. Examples
Примеры в этом разделе (то есть в разделе 6) предлагаются в качестве иллюстрации, а не в качестве ограничения.The examples in this section (i.e., Section 6) are offered as illustrations and not as limitations.
Пример 1. Способы, использованные в исследованиях составов.Example 1: Methods used in formulation studies.
I. Производство антител.I. Antibody production.
Антитела 20502 были получены в клеточной линии CHO, в которой отсутствует ген FUT8 (α1,6фукозилтрансфераза), поэтому антитела 20502, используемые во всех Примерах 2-9, являются афукозилированными. У них отсутствует концевая фукоза при ASN297 в Fc-части антитела.Antibodies 20502 were produced in the CHO cell line, which lacks the FUT8 (α1,6 fucosyltransferase) gene, so the 20502 antibodies used in all Examples 2-9 are afucosylated. They lack the terminal fucose at ASN297 in the Fc portion of the antibody.
II. Общая процедура составления.II. General compilation procedure.
Образцы моноклонального антитела (mAb) получали в различных составах путем диализа лекарственного вещества, не содержащего полисорбата (афукозилированное 20502), с использованием диализных мембранных устройств с отсечением по молекулярной массе в 20 кДа (MWCO). После диализа концентрацию моноклональных антител измеряли с помощью УФ-спектроскопии с использованием коэффициента экстинкции 1,47 смДг/л]’1. Концентрации белка в образцах, с замененным буфером, доводили до желаемых значений с помощью буфера для диализа, и 10% PS20 маточного раствора добавляли в каждый состав до конечной концентрации 0,05% (мас./об.) PS20. Составы стерильно фильтровали с использованием фильтровальных блоков 0,22 мкм и помещали в соответствующие системы контейнеров/укупорочных средств в вытяжном шкафу с ламинарным потоком. Образцы помещали в различные условия хранения в соответствии с дизайном исследования, и их стабильность анализировали с использованием различных способов в определенные моменты времени.Monoclonal antibody (mAb) samples were prepared in various formulations by dialyzing polysorbate-free drug substance (afucosylated 20502) using dialysis membrane devices with a molecular weight cutoff of 20 kDa (MWCO). After dialysis, the concentration of monoclonal antibodies was measured by UV spectroscopy using an extinction coefficient of 1.47 cmDg/L]' 1 . Protein concentrations of the buffer-exchanged samples were adjusted to the desired values using dialysis buffer, and 10% PS20 stock solution was added to each formulation to a final concentration of 0.05% (w/v) PS20. The formulations were sterile filtered using 0.22 μm filter blocks and placed in appropriate container/closure systems in a laminar flow hood. Samples were placed under different storage conditions according to the study design, and their stability was analyzed using different methods at specific time points.
III. Аналитические способы.III. Analytical methods.
Визуальный осмотр (AD-Gen-002/00): Визуальная оценка проводилась как на черном, так и на белом фоне при флуоресцентном освещении. Образцы были исследованы на цвет, прозрачность и наличие видимых частиц.Visual Inspection (AD-Gen-002/00): Visual evaluation was performed on both black and white backgrounds under fluorescent lighting. The samples were examined for color, transparency and the presence of visible particles.
Концентрация белка (TM-150-001/00): Концентрацию белка определяли с помощью УФ-поглощения при длине волны 280 нм с использованием теоретических коэффициентов поглощения 1,47 см’1[г/л]’1. Образцы разбавляли до линейного диапазона поглощения с помощью фосфатно-солевого буфера Дульбекко (DPBS) и измеряли относительно DPBS в виде холостого раствора. Поглощение измеряли с использованием УФ-видимого спектрофотометра Agilent Сагу 8454 (Agilent Technologies, Калифорния).Protein Concentration (TM-150-001/00): Protein concentration was determined by UV absorbance at 280 nm using theoretical absorbance coefficients of 1.47 cm' 1 [g/L]' 1 . Samples were diluted to linear absorbance range with Dulbecco's phosphate-buffered saline (DPBS) and measured against DPBS blank. Absorbance was measured using an Agilent Cargo 8454 UV-visible spectrophotometer (Agilent Technologies, California).
pH (AD-GEN-001/00): pH буфера определяли с помощью калиброванного устройства Beckman Coulter pHi560 (Beckman Coulter, Inc., Калифорния).pH (AD-GEN-001/00): The pH of the buffer was determined using a calibrated Beckman Coulter pHi560 device (Beckman Coulter, Inc., California).
Осмоляльность (TM-GEN-004/00): Осмоляльность буфера измеряли по давлению пара с использованием системы Wescor VAPRO (Wescor, Inc., Юта).Osmolality (TM-GEN-004/00): Buffer osmolality was measured by vapor pressure using a Wescor VAPRO system (Wescor, Inc., Utah).
Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК).Differential scanning calorimetry (DSC).
Измерения ДСК проводились на платформе MicroCal VP-Capillary DSC (GE Healthcare, Великобритания). Образцы mAb разводили в различных буферах составов до концентрации 1 мг/мл. В качестве эталона использовали буфер соответствующего состава. Образцы сканировали при температуре от 15 до 110°C со скоростью 1°С/мин. Данные сначала были нормализованы по концентрации белка, затем скорректированы по исходному уровню и значения для буфера были вычтены с помощью программного обеспечения Origin 7.0 (OriginLab, Массачусетс). Переходы плавления были проанализированы с помощью инициируемой курсором функции подгонки пика DSC с использованием модели развертывания без двух состояний в исходном программном обеспечении.DSC measurements were performed on a MicroCal VP-Capillary DSC platform (GE Healthcare, UK). mAb samples were diluted in various formulation buffers to a concentration of 1 mg/mL. A buffer of the appropriate composition was used as a standard. Samples were scanned at temperatures from 15 to 110°C at a rate of 1°C/min. Data were first normalized to protein concentration, then baseline corrected and buffer subtracted using Origin 7.0 software (OriginLab, MA). Melting transitions were analyzed using a cursor-triggered DSC peak fitting function using a two-state free unfolding model in the original software.
Температура развертывания™ по системе UNIT: Температура развертывания (Tm) белка обеспечивает измерение физической стабильности молекулы. Температура развертывания определяется как температура, при которой в равновесии существуют равные количества нативного и денатурированного белка. Система UNIT от Unchained Labs (Калифорния) использует собственные флуоресцентные спектроскопические изменения для определения температуры, при которой происходит тепловое развертывание белка. Образцы в концентрации 1 мг/мл сканировали при температуре от 20 до 90°C со скоростью 1°С/мин. Tm определяли с использованием программного обеспечения Uncle от Unchained Labs (Калифорния).UNIT Unfolding Temperature™: The Unfolding Temperature (Tm) of a protein provides a measure of the physical stability of a molecule. The unfolding temperature is defined as the temperature at which equal amounts of native and denatured protein exist in equilibrium. The UNIT system from Unchained Labs (California) uses proprietary fluorescence spectroscopic changes to determine the temperature at which thermal unfolding of a protein occurs. Samples at a concentration of 1 mg/mL were scanned at temperatures from 20 to 90°C at a rate of 1°C/min. Tm was determined using Uncle software from Unchained Labs (California).
Изоэлектрическое фокусирование под визуализационным контролем (iCE) (TM-150-003/02): Варианты заряда были проанализированы с помощью изоэлектрического фокусирования под визуализационным контролем (iCE) на приборе Protein Simple iCE3 с автоматическим пробоотборником 720 NV (ProteinSimple, Калифорния). Данные анализировали с использованием программного обеспечения iCE CFR, и относительные количества главных, кислых и основных пиков определяли путем интегрирования площади пиков, наблюдаемых в профиле, и использовали для расчета процентного содержания кислых и основных вариантов.Image-guided isoelectric focusing (iCE) (TM-150-003/02): Charge variants were analyzed using image-guided isoelectric focusing (iCE) on a Protein Simple iCE3 instrument with a 720 NV autosampler (ProteinSimple, California). Data were analyzed using iCE CFR software and the relative amounts of major, acidic and basic peaks were determined by integrating the areas of the peaks observed in the profile and used to calculate the percentage of acidic and basic variants.
Эксклюзионная хроматография (SEC), (TM-150-004/00): Образцы были проанализированы на Agilent 1100 Series ВЭЖХ, снабженном детектором с диодной матрицей, и оптическую плотность измерялиSize Exclusion Chromatography (SEC), (TM-150-004/00): Samples were analyzed on an Agilent 1100 Series HPLC equipped with a diode array detector and absorbance was measured
- 26 043376 при 280 нм. Образцы разбавляли до 1 мг/мл в подвижной фазе (100 мМ фосфата натрия, 400 мМ хлорида натрия, pH 6,8) и 50 мкл вкалывали в предварительно уравновешенную колонку Sepax Zenix SEC-300 7,8x200 мм (Sepax Technologies, Inc., Делавэр). Разделительные SEC и защитные колонки использовались при 25°C. Скорость потока 1,0 мл/мин использовалась при длительности анализа 12 мин. Пики агрегатов, мономеров и фрагментов определяли количественно с использованием программного обеспечения для анализа данных.- 26 043376 at 280 nm. Samples were diluted to 1 mg/mL in the mobile phase (100 mM sodium phosphate, 400 mM sodium chloride, pH 6.8) and 50 μL injected into a pre-equilibrated Sepax Zenix SEC-300 7.8 x 200 mm column (Sepax Technologies, Inc., Delaware). SEC separation and guard columns were used at 25°C. A flow rate of 1.0 mL/min was used for an assay duration of 12 min. Aggregate, monomer, and fragment peaks were quantified using data analysis software.
Капиллярный электрофорез с гелем и додецилсульфатом натрия (CE-SDS) (TM-150-002/00): CESDS использовали для определения чистоты антитела B7-H4 20502 при восстановительных и не восстановительных условиях. Образцы анализировали на системе Beckman Coulter PA800 plus (Beckman Coulter, Калифорния) с использованием капилляра с внутренним диаметром 50 мкМ без покрытия. Поглощение наблюдали при 220 нм. Чистоту 20502 в восстановительных условиях определяли путем измерения площади пиков тяжелых и легких цепей и сравнения с общей площадью всех обнаруженных пиков. Чистоту 20502 в не восстановительных условиях определяли путем измерения площади главного пика интактного белка и сравнения с общей площадью всех обнаруженных пиков.Capillary gel electrophoresis with sodium dodecyl sulfate (CE-SDS) (TM-150-002/00): CESDS was used to determine the purity of antibody B7-H4 20502 under reducing and non-reducing conditions. Samples were analyzed on a Beckman Coulter PA800 plus system (Beckman Coulter, CA) using an uncoated 50 μM ID capillary. Absorbance was observed at 220 nm. The purity of 20502 under reducing conditions was determined by measuring the peak area of the heavy and light chains and comparing with the total area of all detected peaks. The purity of 20502 under non-reducing conditions was determined by measuring the area of the main peak of the intact protein and comparing it with the total area of all detected peaks.
Частицы не видимые невооруженным глазом по HIAC (AD-GEN-006).Particles not visible to the naked eye according to HIAC (AD-GEN-006).
Счетчик частиц HIAC 9703+ (Hach, Колорадо), оборудованный детектором HRDL-150 и шприцем на 1 мл. Перед использованием система была промыта не содержащей частиц водой Milli-Q (Millipore, Массачусетс) для создания чистой базовой линии. Четыре последовательных аликвоты по 0,4 мл были взяты из образцов, и количество частиц из трех последних аликвот было усреднено и зарегистрировано.HIAC 9703+ particle counter (Hach, CO) equipped with an HRDL-150 detector and a 1-mL syringe. Before use, the system was rinsed with particle-free Milli-Q water (Millipore, MA) to create a clean baseline. Four consecutive 0.4 mL aliquots were taken from the samples, and the particle counts from the last three aliquots were averaged and recorded.
Пример 2. Биохимический анализ аминокислотных остатков антитела 20502.Example 2. Biochemical analysis of amino acid residues of antibody 20502.
Антитело к B7-H4 20502 представляет собой моноклональное антитело. Основанный на знаниях подход к составлению составов использовался для определения подходящих композиций, которые обеспечивают максимальную стабильность белка. Для этого учитывались как внутренние свойства молекулы, так и свойства компонентов состава, которые могут влиять на стабильность белка.Anti-B7-H4 antibody 20502 is a monoclonal antibody. A knowledge-based formulation approach was used to identify suitable formulations that maximize protein stability. To do this, both the internal properties of the molecule and the properties of the composition components, which can affect the stability of the protein, were taken into account.
Аминокислотные последовательности полноразмерной тяжелой цепи и легкой цепи антитела 20502 показаны в табл. 11.The amino acid sequences of the full-length heavy chain and light chain of antibody 20502 are shown in table. eleven.
Таблица 11Table 11
Первичные аминокислотные последовательности полноразмерной тяжелой цепи и легкой цепи антитела 20502Primary amino acid sequences of the full-length heavy chain and light chain of antibody 20502
Анализ первичной последовательности 20502 показал, что некоторые аминокислотные остатки потенциально могут подвергаться биохимическим модификациям. К ним относятся дезамидирование при аспарагине, изомеризация при аспарагиновой кислоте и окисление при метионине, цистеине, гистидине, триптофане, фенилаланине и тирозине. Аспарагины, аспарагиновые кислоты и метионины, поддающиеся деамидированию, изомеризации и окислению, соответственно, указаны жирным и серым квадратами в последовательностях в табл. 11. Потенциальные сайты биохимической деградации в 20502 отмечены в табл. 12. Эти потенциальные сайты деградации находятся вне областей CDR.Analysis of the primary sequence of 20502 showed that some amino acid residues could potentially be subject to biochemical modifications. These include deamidation with asparagine, isomerization with aspartic acid, and oxidation with methionine, cysteine, histidine, tryptophan, phenylalanine, and tyrosine. Asparagines, aspartic acids and methionines, which are amenable to deamidation, isomerization and oxidation, respectively, are indicated by bold and gray squares in the sequences in the table. 11. Potential sites of biochemical degradation in 20502 are noted in Table. 12. These potential degradation sites are outside the CDR regions.
- 27 043376- 27 043376
Таблица 12Table 12
Потенциальные аминокислотные остатки в 20502 _______для путей химической деградации___________________Potential amino acid residues in 20502 _______for chemical degradation pathways___________________
Чтобы разработать жидкий состав, который мог бы обеспечить хорошую стабильность для 20502, были оценены различные условия, такие как pH, типы буферов и вспомогательные вещества. Стабильность белка контролировали на основе биофизических и биохимических свойств 20502 в каждом примере. Детали исследований и их результаты описаны в настоящем документе.To develop a liquid formulation that could provide good stability for 20502, various conditions such as pH, types of buffers, and excipients were evaluated. Protein stability was monitored based on the biophysical and biochemical properties of 20502 in each example. Details of the studies and their results are described in this document.
Пример 3. Начальное скрининг pH.Example 3: Initial pH Screening.
pH состава влияет на стабильность белка. pH состава может влиять на пути биохимического разложения, такие как дезамидирование, изомеризация и окисление, а также на биофизическое разложения, такое как агрегация и фрагментация, вследствие взаимодействия между белками и окружающей их средой.The pH of the formulation affects protein stability. The pH of the formulation can influence biochemical degradation pathways such as deamidation, isomerization and oxidation, as well as biophysical degradation such as aggregation and fragmentation, due to interactions between proteins and their environment.
Скрининг pH был проведен для определения диапазона pH, который обеспечивает максимальную стабильность для 20502, и для понимания механизмов деградации белка в этих условиях. Детали состава, определяемые в исследовании, приведены в табл. 13.A pH screen was performed to determine the pH range that provides maximum stability for 20502 and to understand the mechanisms of protein degradation under these conditions. Details of the composition determined in the study are given in Table. 13.
Таблица 13Table 13
Составы, оцененные по влиянию pH на стабильность белка________Formulations Evaluated for Effect of pH on Protein Stability________
Чтобы определить термостабильность белка при различных pH, температуру развертывания измеряли по изменению во внутренней флуоресценции при другой температуре с использованием прибора UNit. Сдвиг длины волны флуоресцентного излучения триптофана (среднее барицентрическое значение, BCM) указывает на то, что при нагревании образцов происходит событие развертывания. Фиг. 1 показывает измеренную температуру развертывания (Tm1) 20502 при различных условиях pH. Результаты показывают, что Tm1 зависит от pH. При более высоком pH (например, pH >7) наблюдалась температура развертывания в 74°C. При pH 5 и 6 температуры развертывания составляли 66°C и 70°C соответственно. При pH 4 температура развертывания составляла 55°C. Кроме того, температура начала, по-видимому, составляла ~ 50°C с использованием pH 4, но температура начала составляла 62°C или выше с использованием pH 5-8. Эти результаты демонстрируют, что составы с pH >5 будут обеспечивать лучшую термическую стабильность, чем составы с pH 4.To determine the thermal stability of the protein at different pH, the unfolding temperature was measured by the change in intrinsic fluorescence at different temperatures using a UNit instrument. The wavelength shift of tryptophan fluorescence emission (barycentric mean, BCM) indicates that an unfolding event occurs when the samples are heated. Fig. 1 shows the measured deployment temperature (Tm1) of 20502 under different pH conditions. The results indicate that Tm1 is pH dependent. At higher pH (eg pH >7) an unfolding temperature of 74°C was observed. At pH 5 and 6, the deployment temperatures were 66°C and 70°C, respectively. At pH 4, the deployment temperature was 55°C. Additionally, the onset temperature appeared to be ~50°C using pH 4, but the onset temperature was 62°C or higher using pH 5-8. These results demonstrate that formulations with pH >5 will provide better thermal stability than formulations with pH 4.
Стабильность 20502 при различных значениях pH также оценивали в условиях стресса при 40°C в течение до четырех недель. Все образцы оставались прозрачными и бесцветными без каких-либо частиц, наблюдаемых на протяжении всего исследования. Изменения в агрегатах и фрагментах определяли с помощью эксклюзионной ВЭЖХ. В нулевой момент времени (T0) в исследуемых составах не было обна- 28 043376 ружено видимых агрегатов для 20502 при концентрации 1 мг/мл. Через четыре недели при 40°C количество растворимых агрегатов заметно увеличилось в составах с pH 4, 7 и 8; только небольшое увеличение количества агрегатов наблюдалось в композициях с pH 5 или 6 (фиг. 2). Аналогичное влияние pH наблюдалось на образование фрагментов (фиг. 3). Результаты этого исследования показали, что 20502 наиболее стабильно при pH 5-6, как показано измерением эксклюзионной ВЭЖХ указанных свойств.The stability of 20502 at various pH values was also assessed under stress conditions at 40°C for up to four weeks. All samples remained clear and colorless with no particles observed throughout the study. Changes in aggregates and fragments were determined using size exclusion HPLC. At time zero (T0), no visible aggregates were detected for 20502 at a concentration of 1 mg/ml in the studied compositions. After four weeks at 40°C, the number of soluble aggregates increased markedly in the pH 4, 7, and 8 formulations; only a small increase in the number of aggregates was observed in compositions with pH 5 or 6 (Fig. 2). A similar effect of pH was observed on fragment formation (Figure 3). The results of this study showed that 20502 is most stable at pH 5-6, as shown by size exclusion HPLC measurements of the indicated properties.
Пример 4. Детальный скрининг pH.Example 4 Detailed pH screening.
Результаты предварительного скринингового исследования pH показали, что антитело 20502 наиболее стабильно при pH 5-6. Было проведено детальное исследование pH для определения pH, которое обеспечивает максимальную стабильность в диапазоне от 4,5 до 6,5. Детали составов приведены в табл. 14. Это исследование было проведено с использованием цитратного буфера, чтобы минимизировать возможное влияние типов буферов на стабильность mAb. Стабильность антитела 20502 при 10 мг/мл исследовали на основе внешнего вида, агрегации, фрагментации (с помощью эксклюзионной ВЭЖХ) и вариантов заряда (iCE) в условиях стресса (40°C) в течение до трех недель.Results from a preliminary pH screening study indicated that antibody 20502 was most stable at pH 5-6. A detailed pH study was carried out to determine the pH that provides maximum stability in the range of 4.5 to 6.5. Details of the compositions are given in table. 14 This study was conducted using citrate buffer to minimize the possible influence of buffer types on mAb stability. The stability of antibody 20502 at 10 mg/mL was examined based on appearance, aggregation, fragmentation (by size exclusion HPLC) and charge variations (iCE) under stress conditions (40°C) for up to three weeks.
Таблица 14Table 14
Составы, оцененные на детальное влияние pH на стабильность белкаFormulations Evaluated for Detailed Effect of pH on Protein Stability
Все образцы оставались прозрачными и бесцветными без каких-либо частиц, наблюдаемых на протяжении всего исследования. Результаты эксклюзионной ВЭЖХ показали, что низкий уровень агрегатов наблюдался для 20502 при концентрации 10 мг/мл в начале исследования (T0). Термический стресс в течение трех недель при 40°C приводил к зависящему от pH увеличению агрегации в порядке 4,5<5,0<5,5<6,0<6,5, в то время как фрагментация показала противоположную тенденцию (фиг. 4 и 5).All samples remained clear and colorless with no particles observed throughout the study. Size exclusion HPLC results indicated that low levels of aggregates were observed for 20502 at 10 mg/mL at baseline (T0). Thermal stress for three weeks at 40°C resulted in a pH-dependent increase in aggregation in the order of 4.5 < 5.0 < 5.5 < 6.0 < 6.5, while fragmentation showed the opposite trend (Fig. 4 and 5).
Данные iCE показали, что количество кислых вариантов увеличилось через 3 недели при 40°C. Увеличение количество кислых вариантов зависело от pH, причем порядок возрастания pH составлял 6,5/6,0/5,5<5,0<4,5 (фиг. 6).iCE data showed that the number of acidic variants increased after 3 weeks at 40°C. The increase in the number of acidic variants depended on pH, with the increasing order of pH being 6.5/6.0/5.5<5.0<4.5 (Fig. 6).
Тот факт, что более высокие pH были связаны с повышенной агрегацией, а более низкие pH были связаны с повышенной фрагментацией, усложняло определение желаемого фармацевтического состава. В совокупности результаты исследования показывают, что составы с pH 5-6 обеспечивают наилучший общий профиль стабильности для 20502.The fact that higher pH was associated with increased aggregation and lower pH was associated with increased fragmentation made it difficult to determine the desired pharmaceutical formulation. Taken together, the study results indicate that pH 5-6 formulations provide the best overall stability profile for 20502.
Пример 5. Скрининг буферов.Example 5: Screening buffers.
Как и pH, типы буферов в различной степени влияют на стабильность белка. Ускоренную стабильность 20502 при 10 мг/мл оценивали в ацетатном, цитратном, сукцинатном и гистидиновом буферах от pH 5,0 до 6,5 с шагом 0,5 единицы на основе их pKa с целью определения буфера, который обеспечит максимальную стабильность при pH 5,0 - 6,5. Подробные составы представлены в табл. 15. Эти буферы были исследованы на их влияние на стабильность белка на основе внешнего вида, агрегации, фрагментации и заряда.Like pH, buffer types affect protein stability to varying degrees. Accelerated stability of 20502 at 10 mg/mL was assessed in acetate, citrate, succinate and histidine buffers from pH 5.0 to 6.5 in 0.5 unit increments based on their pKa to determine the buffer that would provide maximum stability at pH 5. 0 - 6.5. Detailed compositions are presented in table. 15 These buffers have been studied for their effect on protein stability based on appearance, aggregation, fragmentation, and charge.
Таблица 15Table 15
Виды буферов для составов, оцененные на их влияние на стабильность белкаTypes of Formulation Buffers Evaluated for Their Effect on Protein Stability
Все образцы оставались прозрачными и бесцветными без каких-либо частиц, наблюдаемых на протяжении всего исследования. Результаты эксклюзионной ВЭЖХ, показанные на фиг. 16 показывают увеличение количества агрегатов в зависимости от буфера (pH) в этом исследовании. Агрегаты образовывались с более высокими скоростями при более высоком pH по сравнению со скоростью при более низким pH; в порядке гистидин (pH 6,5)> сукцинат (pH 6)> цитрат (pH 5,5)> ацетат (pH 5). С другой стороны, в ацетатном (pH 5) и цитратном (pH 5,5) буферах было обнаружено слегка меньшее количество фрагментов по сравнению с таковым в гистидиновых (pH 6,5) и сукцинатных (pH 6) буферах, хотя общие уровниAll samples remained clear and colorless with no particles observed throughout the study. The size exclusion HPLC results shown in FIG. 16 show the increase in the number of aggregates as a function of buffer (pH) in this study. Aggregates formed at higher rates at higher pH compared to the rate at lower pH; the order is histidine (pH 6.5) > succinate (pH 6) > citrate (pH 5.5) > acetate (pH 5). On the other hand, slightly fewer fragments were detected in acetate (pH 5) and citrate (pH 5.5) buffers compared to those in histidine (pH 6.5) and succinate (pH 6) buffers, although overall levels
- 29 043376 фрагментов были низкими (0,5% - 0,7%) в течение 3 недель при 40°C (фиг. 8).- 29,043,376 fragments were low (0.5% - 0.7%) for 3 weeks at 40°C (Fig. 8).
Результаты iCE показали, что буферы оказали некоторое влияние на профиль заряда 20502, как показано на фиг. 9 и фиг. 10. Но общая разница между ними составляла чуть более 10% в кислых вариантах и около 2% в основных вариантах при хранении при 40°C в течение трех недель.The iCE results showed that the buffers had some effect on the charge profile of the 20502, as shown in FIG. 9 and fig. 10. But the overall difference between them was just over 10% in the sour varieties and about 2% in the basic varieties when stored at 40°C for three weeks.
Антитело 20502 было испытано в двух других стандартных составах, содержащих гистидин, но ни один из них не привел к композиции с желаемой стабильностью. На основании этих результатов был сделан вывод о том, что 20502 наиболее стабильно в ацетатном буфере при pH 5 среди всех протестированных условий составов. Нитратный буфер при pH 5,5 также обеспечивает относительно стабильный буфер для 20502.Antibody 20502 was tested in two other standard formulations containing histidine, but neither resulted in a formulation with the desired stability. Based on these results, it was concluded that 20502 was most stable in acetate buffer at pH 5 among all formulation conditions tested. Nitrate buffer at pH 5.5 also provides a relatively stable buffer for 20502.
Пример 6. Скрининг вспомогательных веществ.Example 6: Screening of excipients.
Вспомогательные вещества, такие как наполнители, могут влиять на стабильность продукта. Чтобы оценить влияние вспомогательных веществ на стабильность антитела 20502, антитело в концентрации 20 мг/мл готовили в виде ацетатного и цитратного составов, содержащих хлорид натрия (NaCl), трегалозу, сорбит или сахарозу в изотонических концентрациях. Цитратные составы были составлены при pH 5,5, а ацетатные составы были составлены при pH 5,0. Два дополнительных ацетатных состава с сахарозой также готовили при pH 4,5 и 5,5. Подробные составы представлены в табл. 16. Вспомогательные вещества были исследованы на их влияние на стабильность белка на основе внешнего вида, агрегации, фрагментации и вариантов заряда при условиях хранения 40°C, 25°C и 5°C.Excipients such as fillers may affect product stability. To evaluate the effect of excipients on the stability of antibody 20502, the antibody at a concentration of 20 mg/ml was prepared as acetate and citrate formulations containing sodium chloride (NaCl), trehalose, sorbitol, or sucrose at isotonic concentrations. Citrate formulations were formulated at pH 5.5, and acetate formulations were formulated at pH 5.0. Two additional acetate formulations with sucrose were also prepared at pH 4.5 and 5.5. Detailed compositions are presented in table. 16. Excipients were examined for their effect on protein stability based on appearance, aggregation, fragmentation, and charge variations under storage conditions of 40°C, 25°C, and 5°C.
Таблица 16Table 16
Вспомогательные вещества для составов, оцененные на их влияние на стабильность белкаFormulation excipients evaluated for their effect on protein stability
Все образцы оставались прозрачными и бесцветными без каких-либо частиц, наблюдаемых в течение 4-недельного периода исследования. Результаты эксклюзионной ВЭЖХ, показанные на фиг. 11 показывают, что агрегаты 20502 образуются с более высокими скоростями в цитратных составах по сравнению с ацетатными составами. Скорость агрегации была самой высокой в составах с NaCl, и это было справедливо как для цитрата, так и для ацетата. Составы с сорбитом, трегалозой и сахарозой показали сходные изменения в агрегации как в цитратном, так и в ацетатном буферах. Что касается фрагментов, все составы были аналогичными, за исключением состава, содержащего ацетат и NaCl, который показал немного большее количество фрагментов (фиг. 12). Таким образом, хотя NaCl широко используется в фармацевтических композициях, он приводил к увеличению агрегации и фрагментации 20502. Количество фрагментов, наблюдаемых в этом исследовании, было выше, чем в предыдущих исследованиях. Это может быть связано с более высокой концентрацией белка (20 мг/мл), использованной в этом исследовании.All samples remained clear and colorless with no particles observed during the 4-week study period. The size exclusion HPLC results shown in FIG. 11 show that 20502 aggregates form at higher rates in citrate formulations compared to acetate formulations. The rate of aggregation was highest in the NaCl formulations, and this was true for both citrate and acetate. Formulations with sorbitol, trehalose and sucrose showed similar changes in aggregation in both citrate and acetate buffers. In terms of fragments, all formulations were similar, with the exception of the acetate-NaCl formulation, which showed slightly more fragments (Figure 12). Thus, although NaCl is widely used in pharmaceutical compositions, it resulted in increased aggregation and fragmentation 20502. The number of fragments observed in this study was higher than in previous studies. This may be due to the higher protein concentration (20 mg/mL) used in this study.
Вспомогательные вещества составов оказывали меньшее влияние на профиль заряда 20502 при хранении. Как показано на фиг. 13, разница в количестве кислых вариантов среди всех составов составляла менее чем 10%. Подобным образом, разница в количестве основных вариантов в пределах каждого типа буфера во всех составах составляла менее чем 2% (фиг. 14).The excipients of the formulations had less effect on the charge profile of 20502 during storage. As shown in FIG. 13, the difference in the number of sour variants among all formulations was less than 10%. Likewise, the difference in the number of major variants within each buffer type across all formulations was less than 2% (Figure 14).
На основании результатов исследования вспомогательных веществ, выбрали сахарозу вместо NaCl из-за наблюдаемого уровня агрегатов. Сахароза показала схожий профиль агрегации и заряда, как и сорбит, и трегалоза. Тем не менее, сахароза является более надежной с точки зрения поставок сырья с лучшим качеством и опытом регулирования.Based on the results of the excipient study, sucrose was chosen over NaCl due to the observed level of aggregates. Sucrose showed a similar aggregation and charge profile as sorbitol and trehalose. However, sucrose is more reliable in terms of raw material supply with better quality and regulatory experience.
В совокупности результаты исследований pH, видов буферов и скрининга вспомогательных веществ показывают, что антитело 20502 было наиболее стабильным в составе, содержащем 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20 при pH 5,0. Состав, содержащий 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы, 0,05% PS20 при pH 5,5, также обеспечивал хорошую стабильность.Taken together, the results of pH studies, buffer types, and excipient screening indicate that antibody 20502 was most stable in a formulation containing 20 mM acetate, 270 mM sucrose, and 0.05% PS20 at pH 5.0. A formulation containing 20 mM citrate, 270 mM sucrose, 0.05% PS20 at pH 5.5 also provided good stability.
Профиль дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) антитела 20502 в составе, содержащем 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы, 0,05% PS20 при pH 5,0, показан на фиг. 15. Наблюдалось два пика: Tm1 = 69°C и Tm2 = 84°C.The differential scanning calorimetry (DSC) profile of antibody 20502 in a formulation containing 20 mM acetate, 270 mM sucrose, 0.05% PS20 at pH 5.0 is shown in FIG. 15. Two peaks were observed: Tm1 = 69°C and Tm2 = 84°C.
Пример 7. Устойчивость к замораживанию-оттаиванию 20502.Example 7. Freeze-thaw resistance of 20502.
Исследование замораживания/оттаивания проводили путем замораживания лекарственного вещества 20502, составленного в виде 20 мг/мл белка, в 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы, 0,05% PS20 при pHA freeze/thaw study was performed by freezing drug substance 20502 formulated as 20 mg/mL protein in 20 mM acetate, 270 mM sucrose, 0.05% PS20 at pH
- 30 043376- 30 043376
5,0 в количестве 500 мл при -70°C и оттаивания при температуре окружающей среды в течение 5 циклов.5.0 in an amount of 500 ml at -70°C and thawing at ambient temperature for 5 cycles.
Никаких видимых изменений внешнего вида, растворимых агрегатов или твердых частиц не было обнаружено (табл. 17).No visible changes in appearance, soluble aggregates or particulate matter were detected (Table 17).
Таблица 17Table 17
Стабильность состава 20502 после замораживания-оттаиванияStability of composition 20502 after freezing-thawing
Пример 8. Стабильность при перемешивании 20502.Example 8: Stability under stirring 20502.
На 20502 создавалось перемешивающее напряжение путем заполнения лекарственного вещества 20502 в стеклянные флаконы объемом 3 см3, размещения флакон с образцами горизонтально на орбитальном шейкере и встряхивания образцов при 300 об/мин в течение 72 часов при комнатной температуре. 20502 составляли в виде 20 мг/мл белка в 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы, 0,05% PS20 при pH 5,0. В образцах состава 20502 не было обнаружено видимых изменений внешнего вида, растворимых агрегатов, профилей вариантов заряда или невидимых невооруженным глазом твердых частиц (табл. 18). Все исследования проводились при комнатной температуре 20±5°C. Все образцы были прозрачны и бесцветны, и без видимых частиц.Stirring voltage was generated at 20502 by filling drug substance 20502 into 3 cc glass vials, placing the sample vial horizontally on an orbital shaker, and shaking the samples at 300 rpm for 72 hours at room temperature. 20502 was formulated as 20 mg/ml protein in 20 mM acetate, 270 mM sucrose, 0.05% PS20 at pH 5.0. Samples of formulation 20502 showed no visible changes in appearance, soluble aggregates, charge variant profiles, or particulate matter invisible to the naked eye (Table 18). All studies were carried out at room temperature 20±5°C. All samples were clear and colorless, and without visible particles.
Таблица 18Table 18
Стабильность состава 20502 после перемешивания в течение 72 чStability of composition 20502 after stirring for 72 hours
Пример 9. Подтверждение исследований по стабильности.Example 9: Confirmation of stability studies.
Исследование стабильности было выполнено для оценки стабильности 20502 в двух составах (i) состава, содержащего 20 мг/мл белка в 20 мМ ацетата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20 при pH 5,0, и (ii) состава, содержащего 20 мг/мл белка в 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы и 0,05% PS20 при pH 5,5. 1,5 мл приготовленных растворов помещали в стеклянные флаконы объемом 3 см3 типа 1 с 13 мм горлышками, закрывали серыми бромбутиловыми пробками West 4023/50 для сыворотки толщиной 13 мм и герметизировали алюминиевыми уплотнениями. Совместимость системы контейнера/укупорки с антителом 20502 оценивали, помещая флаконы в перевернутые положения. Условия хранения при 5°C, 25°C и 40°C были использованы для этого исследования стабильности. Данные о стабильности за шесть месяцев, показанные в табл. с 19 по 21 для ацетатного состава и в табл. с 22 по 24 для цитратного состава.A stability study was performed to evaluate the stability of 20502 in two formulations (i) a formulation containing 20 mg/mL protein in 20 mM acetate, 270 mM sucrose and 0.05% PS20 at pH 5.0, and (ii) a formulation containing 20 mg/ml protein in 20 mM citrate, 270 mM sucrose and 0.05% PS20 at pH 5.5. 1.5 ml of the prepared solutions were placed in 3 cm 3 type 1 glass vials with 13 mm necks, closed with gray West 4023/50 bromobutyl serum stoppers, 13 mm thick, and sealed with aluminum seals. Compatibility of the container/closure system with antibody 20502 was assessed by placing the vials in inverted positions. Storage conditions of 5°C, 25°C and 40°C were used for this stability study. The six-month stability data shown in Table. from 19 to 21 for the acetate composition and in table. from 22 to 24 for citrate composition.
- 31 043376- 31 043376
Таблица 19Table 19
Стабильность лекарственного продукта 20502 в ацетатном составе при 5°CStability of drug product 20502 in acetate formulation at 5°C
Сокращения: NP = не планировали; NT = не проверяли; T0 = время ноль.Abbreviations: NP = not planned; NT = not tested; T0 = time zero.
Таблица 20 _______Стабильность лекарственного продукта 20502 в ацетатном составе при 25°C_______Table 20 _______Stability of drug product 20502 in acetate formulation at 25°C_______
- 32 043376- 32 043376
Таблица 21Table 21
Стабильность лекарственного продукта 20502 в ацетатном составе при 40°С_______Stability of drug product 20502 in acetate composition at 40°C_______
-33 043376-33 043376
Таблица 22Table 22
Стабильность лекарственного продукта 20502 в цитратном составе при 5°CStability of drug product 20502 in citrate formulation at 5°C
Таблица 23Table 23
Стабильность лекарственного продукта 20502 в цитратном составе при 25°C______Stability of drug product 20502 in citrate formulation at 25°C______
- 34 043376- 34 043376
Таблица 24Table 24
Стабильность лекарственного продукта 20502 в цитратном составе при 40°CStability of drug product 20502 in citrate formulation at 40°C
Данные о стабильности лекарственного средства 20502 в условиях длительного хранения при 2-8°C собирали в реальном времени в ацетатных и нитратных составах в течение 6 месяцев. Все данные о стабильности соответствовали критериям приемлемости (табл. 19 и табл. 22). Никакой четкой тенденции изменений стабильности не наблюдалось ни в одном из протестированных признаков. Результаты показывают, что лекарственное средство 20502 является стабильным в обоих составах в условиях длительного хранения при 2-8°C в течение по меньшей мере 6 месяцев.Stability data for drug 20502 under long-term storage conditions at 2-8°C were collected in real time in acetate and nitrate formulations over a period of 6 months. All stability data met the acceptance criteria (Table 19 and Table 22). No clear trend in stability changes was observed in any of the traits tested. The results show that drug 20502 is stable in both formulations under long-term storage conditions at 2-8°C for at least 6 months.
Данные о стабильности при ускоренных условиях 25°C собирали в ацетатных и цитратных составах в течение 6 месяцев. В целом, хранение в ускоренных условиях в течение 6 месяцев привело к увеличению количества кислотных пиков и уменьшению главного пика, что определено с помощью iCE; небольшому увеличение количества агрегатов и фрагментов, что определено с помощью эксклюзионной ВЭЖХ; незначительному снижению чистоты, определяемое по восстановленному и не восстановленному CE-SDS; и небольшому снижению активности, что определено анализом ADCC в клетках. Никаких изменений в других свойствах продукта не наблюдалось. Все данные о стабильности были в пределах приемлемых критериев.Stability data under accelerated conditions of 25°C were collected in acetate and citrate formulations for 6 months. Overall, storage under accelerated conditions for 6 months resulted in an increase in the number of acid peaks and a decrease in the main peak as determined by iCE; a slight increase in the number of aggregates and fragments, as determined by size exclusion HPLC; slight decrease in purity, determined by reduced and unreduced CE-SDS; and a slight decrease in activity as determined by ADCC assay in cells. No changes were observed in other product properties. All stability data were within acceptable criteria.
Данные об устойчивости при стрессовых условиях при 40°C собирали в течение 3 месяцев. Некоторые изменения были более заметны в данных, собранных с течением времени. Тенденции были аналогичны тем, которые были показаны в условиях ускоренного хранения (25°C). Наблюдали количества увеличение кислых пиков и уменьшение главного пика и количества основных пиков по iCE. Увеличение количества агрегатов и фрагментов с уменьшением количества мономера наблюдали с помощью SEВЭЖХ. Кроме того,в этих условиях снижалась чистота, что продемонстрировано в результате анализа с восстановленным и не восстановленным CE-SDS. Также наблюдалось снижение активности в анализе ADCC в клетках. Эти результаты согласуются с ожидаемыми изменениями для белковых лекарственных средств, которые хранят в указанных условиях.Stability data under stress conditions at 40°C were collected over a period of 3 months. Some changes were more noticeable in data collected over time. The trends were similar to those shown under accelerated storage conditions (25°C). An increase in acidic peaks and a decrease in the main peak and the number of basic peaks according to iCE were observed. An increase in the number of aggregates and fragments with a decrease in the amount of monomer was observed using SEHPLC. In addition, purity was reduced under these conditions, as demonstrated by analysis with reduced and non-reduced CE-SDS. A decrease in activity in the ADCC assay in cells was also observed. These results are consistent with the expected changes for protein drugs stored under these conditions.
Вышеуказанные исследования были проведены для определения составов, которые обеспечивают максимальную стабильность для 20502. К ним относятся скрининг pH, выбор видов буферов и исследования выбора вспомогательных веществ. 20502 было наиболее стабильным в диапазоне pH 5-6 в ацетатном или цитратном буфере. 20502 также было стабильным, когда в качестве вспомогательного вещества использовалась сахароза. Был выбран состав, содержащий 20 мг/мл белка в 20 мМ ацетата, 270 мМ саха- 35 043376 розы и 0,05% PS20 при pH 5,0. Также была выбран резервный состав в виде 20 мг/мл белка в 20 мМ цитрата, 270 мМ сахарозы, 0,05% PS20, pH 5,5.The above studies were conducted to determine formulations that provide maximum stability for 20502. These included pH screening, selection of buffer types, and excipient selection studies. 20502 was most stable in the pH range of 5-6 in acetate or citrate buffer. 20502 was also stable when sucrose was used as an excipient. A formulation was chosen containing 20 mg/ml protein in 20 mM acetate, 270 mM sucrose and 0.05% PS20 at pH 5.0. A reserve composition was also chosen in the form of 20 mg/ml protein in 20 mM citrate, 270 mM sucrose, 0.05% PS20, pH 5.5.
Антитело 20502 также стабильно в ацетатном составе в условиях замораживания-оттаивания и перемешивания. Ожидается, что 20502 в ацетатном составе будет стабильным как в качестве лекарственного средства при хранении при -70°C, так и в качестве лекарственного средства при хранении при 2-8°C в течение по меньшей мере 12 месяцев.Antibody 20502 is also stable in the acetate formulation under freeze-thaw and stirring conditions. 20502 in the acetate formulation is expected to be stable both as a drug when stored at -70°C and as a drug when stored at 2-8°C for at least 12 months.
Изобретение не должно быть ограничено в объеме конкретными вариантами осуществления, описанными в настоящем документе. Действительно, различные модификации представленного в настоящем документе описания, в дополнение к описанным, будут очевидны специалистам в данной области техники из вышеуказанного описания и сопроводительных фигур. Подразумевается, что такие модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.The invention should not be limited in scope to the specific embodiments described herein. Indeed, various modifications to the description presented herein, in addition to those described, will be apparent to those skilled in the art from the foregoing description and accompanying figures. Such modifications are intended to be within the scope of the appended claims.
Все ссылки (например, публикации или патенты или патентные заявки), цитированные в настоящем документе, включены в настоящий документ посредством ссылки во всей их полноте и для всех целей в той же степени, как если бы каждая отдельная ссылка (например, публикация или патент или заявка на патент) была конкретно и индивидуально включена посредством ссылки во всей своей полноте для всех целей. Другие варианты осуществления находятся в пределах следующей формулы изобретения.All references (e.g., publications or patents or patent applications) cited herein are incorporated herein by reference in their entirety and for all purposes to the same extent as if each individual reference (e.g., publication or patent or patent application) has been specifically and individually incorporated by reference in its entirety for all purposes. Other embodiments are within the scope of the following claims.
Перечень последовательностей.List of sequences.
< 110> ФАЙВ ПРАЙМ ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК.< 110> FIVE PRIME THERAPEUTICS, INC.
< 120> СОСТАВЫ АНТИТЕЛА B7-H4 < 130> 3986.013PC01/EKS/CLD/M-S <150> US 62/633 537 <151> 21.02.2018 <160>28 <170> PatentIn версия 3.5 <210>1 <211>282 <212> Белок <213> Искусственная последовательность <220><120> ANTIBODY COMPOSITIONS B7-H4 <130> 3986.013PC01/EKS/CLD/M-S <150> US 62/633 537 <151> 02/21/2018 <160>28 <170> PatentIn version 3.5 <210>1 <211> 282 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> человеческий B7-H4 <400> 1<223> human B7-H4 <400> 1
Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Leu 1 5Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Leu 1 5
Phe Trp Ser Ile Ile Ser Ile IlePhe Trp Ser Ile Ile Ser Ile Ile
1515
Ile Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala 20Ile Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala 20
Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser 25 30Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser 25 30
Gly Arg His Ser Ile Thr Val ThrGly Arg His Ser Ile Thr Val Thr
4040
Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn Ile 45Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn Ile 45
Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser CysGly Glu Asp Gly Ile Leu Ser Cys
5555
Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys Leu 60Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys Leu 60
Ser Asp Ile Val Ile Gln Trp Leu 65 70Ser Asp Ile Val Ile Gln Trp Leu 65 70
Lys Glu Gly Val Leu Gly Leu ValLys Glu Gly Val Leu Gly Leu Val
8080
- 36 043376- 36 043376
GluGlu
GluGlu
PhePhe
LysLys
Glu 85Glu 85
GlyGly
LysLys
AspAsp
GluGlu
Leu 90Leu 90
SerSer
GluGlu
GlnGln
AspAsp
PhePhe
ArgArg
GlyGly
Arg 100Arg 100
ThrThr
AlaAla
ValVal
PhePhe
AlaAla
105105
AspAsp
GlnGln
ValVal
IleIle
ValVal
110110
GlyGly
AlaAla
SerSer
LeuLeu
115115
ArgArg
LeuLeu
LysLys
AsnAsn
ValVal
120120
GlnGln
LeuLeu
ThrThr
AspAsp
AlaAla
125125
GlyGly
ThrThr
LysLys
CysCys
130130
TyrTyr
IleIle
IleIle
ThrThr
SerSer
135135
LysLys
GlyGly
LysLys
GlyGly
AsnAsn
140140
AlaAla
AsnAsn
LeuLeu
Tyr 145Tyr 145
LysLys
ThrThr
GlyGly
AlaAla
PhePhe
150150
SerSer
MetMet
ProPro
GluGlu
ValVal
155155
AsnAsn
ValVal
AspAsp
TyrTyr
AlaAla
SerSer
SerSer
GluGlu
ThrThr
165165
LeuLeu
ArgArg
CysCys
GluGlu
AlaAla
170170
ProPro
ArgArg
TrpTrp
PhePhe
ProPro
175175
ProPro
ThrThr
ValVal
ValVal
180180
TrpTrp
AlaAla
SerSer
GlnGln
ValVal
185185
AspAsp
GlnGln
GlyGly
AlaAla
AsnAsn
190190
PhePhe
GluGlu
ValVal
SerSer
195195
AsnAsn
ThrThr
SerSer
PhePhe
GluGlu
200200
LeuLeu
AsnAsn
SerSer
GluGlu
AsnAsn
205205
ValVal
ThrThr
LysLys
ValVal
210210
ValVal
SerSer
ValVal
LeuLeu
TyrTyr
215215
AsnAsn
ValVal
ThrThr
IleIle
AsnAsn
220220
AsnAsn
ThrThr
TyrTyr
CysCys
225225
MetMet
IleIle
GluGlu
AsnAsn
Asp 230Asp 230
IleIle
AlaAla
LysLys
AlaAla
ThrThr
235235
GlyGly
AspAsp
IleIle
LysLys
ThrThr
GluGlu
SerSer
GluGlu
IleIle
245245
LysLys
ArgArg
ArgArg
SerSer
HisHis
250250
LeuLeu
GlnGln
LeuLeu
LeuLeu
AsnAsn
255255
LysLys
AlaAla
SerSer
LeuLeu
260260
CysCys
ValVal
SerSer
SerSer
PhePhe
265265
PhePhe
AlaAla
IleIle
SerSer
Trp 270Trp 270
AlaAla
MetMet
AsnAsn
TyrTyr
GluGlu
Asn 160Asn 160
GlnGln
SerSer
MetMet
SerSer
Val 240Val 240
SerSer
LeuLeu
LeuLeu
ProPro
LeuLeu
275275
SerSer
ProPro
TyrTyr
LeuLeu
MetMet
280280
LeuLeu
Lys <210>Lys <210>
<211><211>
<212><212>
<213><213>
282282
БелокProtein
Искусственная последовательность <220>Artificial sequence <220>
<223><223>
B7-H4 яванского макакаB7-H4 cynomolgus macaque
- 37 043376 <400> 2- 37 043376 <400> 2
Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Leu Phe 1 5Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Leu Phe 1 5
Phe Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala Leu 20 25Phe Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala Leu 20 25
Gly Arg His Ser Ile Thr Val Thr ThrGly Arg His Ser Ile Thr Val Thr Thr
4040
Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser Cys Thr 50 55Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser Cys Thr 50 55
Ser Asp Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys 65 70Ser Asp Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys 65 70
His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Glu 85His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Glu 85
Phe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe AlaPhe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe Ala
100 105100 105
Ala Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val GlnAla Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val Gln
115 120115 120
Lys Cys Tyr Ile Ile Thr Ser Lys GlyLys Cys Tyr Ile Ile Thr Ser Lys Gly
130 135130 135
Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro 145 150Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro 145 150
Ala Ser Ser Glu Thr Leu Arg Cys GluAla Ser Ser Glu Thr Leu Arg Cys Glu
165165
Pro Thr Val Val Trp Ala Ser Gln ValPro Thr Val Val Trp Ala Ser Gln Val
180 185180 185
Glu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu LeuGlu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu Leu
195 200195 200
Lys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn ValLys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn Val
210 215210 215
Ser Ile Ile Ser Ile IleSer Ile Ile Ser Ile Ile
Ile Gly Phe Gly Ile Ser 30Ile Gly Phe Gly Ile Ser 30
Ala Ser Ala Gly Asn Ile 45Ala Ser Ala Gly Asn Ile 45
Glu Pro Asp Ile Lys Leu 60Glu Pro Asp Ile Lys Leu 60
Gly Val Ile Gly Leu Val 75 80Gly Val Ile Gly Leu Val 75 80
Ser Glu Gln Asp Glu Met 95Ser Glu Gln Asp Glu Met 95
Gln Val Ile Val Gly AsnGln Val Ile Val Gly Asn
110110
Thr Asp Ala Gly Thr TyrThr Asp Ala Gly Thr Tyr
125125
Gly Asn Ala Asn Leu Glu 140Gly Asn Ala Asn Leu Glu 140
Val Asn Val Asp Tyr AsnVal Asn Val Asp Tyr Asn
155 160155 160
Pro Arg Trp Phe Pro GlnPro Arg Trp Phe Pro Gln
175175
Gln Gly Ala Asn Phe SerGln Gly Ala Asn Phe Ser
190190
Ser Glu Asn Val Thr MetSer Glu Asn Val Thr Met
205205
Ile Asn Asn Thr Tyr SerIle Asn Asn Thr Tyr Ser
220220
Cys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala LysCys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala Lys
Thr Gly Asp Ile Lys ValThr Gly Asp Ile Lys Val
- 38 043376- 38 043376
225225
230230
235235
Thr Glu Ser GluThr Glu Ser Glu
Ile Lys Arg Arg Ser His Leu Gln Leu Leu AsnIle Lys Arg Arg Ser His Leu Gln Leu Leu Asn
245 250 255245 250 255
Lys Ala Ser LeuLys Ala Ser Leu
260260
Cys Val Ser Ser Phe Leu Ala Ile Ser Trp AlaCys Val Ser Ser Phe Leu Ala Ile Ser Trp Ala
265 270265 270
240240
SerSer
LeuLeu
Leu Pro Leu AlaLeu Pro Leu Ala
275275
Pro Tyr Leu Met Leu LysPro Tyr Leu Met Leu Lys
280 <210> 3 <211> 283 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>280 <210> 3 <211> 283 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> B7-H4 мыши < 400> 3<223>B7-H4 mouse <400>3
Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Ile Phe Trp Ser Ile Ile Asn Ile 1 5 10 15Met Ala Ser Leu Gly Gln Ile Ile Phe Trp Ser Ile Ile Asn Ile 1 5 10 15
Ile Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala Leu Ile Ile Gly Phe Gly IleIle Ile Leu Ala Gly Ala Ile Ala Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile
25 3025 30
Gly Lys His Phe Ile Thr Val Thr Thr Phe Thr Ser Ala Gly Asn 35 40 45Gly Lys His Phe Ile Thr Val Thr Thr Phe Thr Ser Ala Gly Asn 35 40 45
Gly Glu Asp Gly Thr Leu Ser Cys Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys 50 55 60Gly Glu Asp Gly Thr Leu Ser Cys Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys 50 55 60
Asn Gly Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys Glu Gly Ile Lys Gly Leu 65 70 75Asn Gly Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys Glu Gly Ile Lys Gly Leu 65 70 75
His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Asp Leu Ser Gln Gln His Glu 85 90 95His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Asp Leu Ser Gln Gln His Glu 85 90 95
Phe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe Ala Asp Gln Val Val Val GlyPhe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe Ala Asp Gln Val Val Val Gly
100 105 110100 105 110
Ala Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val Gln Leu Thr Asp Ala Gly ThrAla Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val Gln Leu Thr Asp Ala Gly Thr
115 120 125115 120 125
Thr Cys Tyr Ile Arg Thr Ser Lys Gly Lys Gly Asn Ala Asn LeuThr Cys Tyr Ile Arg Thr Ser Lys Gly Lys Gly Asn Ala Asn Leu
130 135 140130 135 140
IleIle
SerSer
IleIle
LeuLeu
Val 80Val 80
MetMet
AsnAsn
TyrTyr
GluGlu
- 39 043376- 39 043376
Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser MetTyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met
145 150145 150
Pro Glu Ile Asn Val Asp Tyr AsnPro Glu Ile Asn Val Asp Tyr Asn
155 160155 160
Ala Ser Ser Glu Ser Leu Arg CysAla Ser Ser Glu Ser Leu Arg Cys
165165
Glu Ala Pro Arg Trp Phe Pro GlnGlu Ala Pro Arg Trp Phe Pro Gln
170 175170 175
ProPro
Thr Val Ala Trp Ala 180Thr Val Ala Trp Ala 180
Ser Gln Val Asp Gln Gly Ala Asn Phe SerSer Gln Val Asp Gln Gly Ala Asn Phe Ser
185 190185 190
Glu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu Leu AsnGlu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu Leu Asn
195 200195 200
Ser Glu Asn Val Thr MetSer Glu Asn Val Thr Met
205205
Lys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn Val ThrLys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn Val Thr
210 215210 215
Ile Asn Asn Thr Tyr SerIle Asn Asn Thr Tyr Ser
220220
Cys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala Lys AlaCys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala Lys Ala
225 230225 230
Thr Gly Asp Ile Lys ValThr Gly Asp Ile Lys Val
235 240235 240
Thr AspThr Asp
Gly ProGly Pro
Ser Glu Val Lys Arg Arg Ser Gln Leu Gln Leu Leu Asn SerSer Glu Val Lys Arg Arg Ser Gln Leu Gln Leu Leu Asn Ser
245 250 255245 250 255
Ser Pro Cys Val Phe Ser Ser Ala Phe Val Ala Gly Trp AlaSer Pro Cys Val Phe Ser Ser Ala Phe Val Ala Gly Trp Ala
260 265 270260 265 270
Leu Leu Ser Leu Ser Cys Cys Leu Met Leu ArgLeu Leu Ser Leu Ser Cys Cys Leu Met Leu Arg
275 280 <210> 4 <211> 282 <212> Белок <213> Искусственная последовательность <220>275 280 <210> 4 <211> 282 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> B7-H4 крысы <400> 4<223> B7-H4 rats <400> 4
Met Ala Ser Leu 1Met Ala Ser Leu 1
Gly Gln Ile Ile Phe Trp 5 10Gly Gln Ile Ile Phe Trp 5 10
Ser Ile Ile Asn Val IleSer Ile Ile Asn Val Ile
Ile Ile Leu AlaIle Ile Leu Ala
Gly Ala Ile Val Leu IleGly Ala Ile Val Leu Ile
Ile Gly Phe Gly Ile Ser 30Ile Gly Phe Gly Ile Ser 30
Gly Lys His PheGly Lys His Phe
Ile Thr Val Thr Thr PheIle Thr Val Thr Thr Phe
Thr Ser Ala Gly Asn Ile 45Thr Ser Ala Gly Asn Ile 45
Gly Glu Asp Gly Thr Leu Ser CysGly Glu Asp Gly Thr Leu Ser Cys
Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys LeuThr Phe Glu Pro Asp Ile Lys Leu
- 40 043376- 40 043376
Gly Ile Lys Gly Leu ValGly Ile Lys Gly Leu Val
8080
5555
Asn Gly Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys 65 70Asn Gly Ile Val Ile Gln Trp Leu Lys 65 70
His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Asp 85His Glu Phe Lys Glu Gly Lys Asp Asp 85
Phe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe AlaPhe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe Ala
100 105100 105
Ala Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val GlnAla Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val Gln
115 120115 120
Thr Cys Tyr Ile His Thr Ser Lys GlyThr Cys Tyr Ile His Thr Ser Lys Gly
130 135130 135
Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro 145 150Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro 145 150
Ala Ser Ser Glu Ser Leu Arg Cys GluAla Ser Ser Glu Ser Leu Arg Cys Glu
165165
Pro Thr Val Ala Trp Ala Ser Gln ValPro Thr Val Ala Trp Ala Ser Gln Val
180 185180 185
Glu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu LeuGlu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu Leu
195 200195 200
Lys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn ValLys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn Val
210 215210 215
Cys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala LysCys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala Lys
225 230225 230
Thr Asp Ser Glu Val Lys Arg Arg SerThr Asp Ser Glu Val Lys Arg Arg Ser
245245
Gly Pro Ser Pro Cys Val Ser Ser ValGly Pro Ser Pro Cys Val Ser Ser Val
260 265260 265
Leu Ser Leu Ser Cys Cys Leu Met LeuLeu Ser Leu Ser Cys Cys Leu Met Leu
275 280275 280
Ser Gln Gln His Glu MetSer Gln Gln His Glu Met
Gln Val Val Val Gly AsnGln Val Val Val Gly Asn
110110
Thr Asp Ala Gly Thr TyrThr Asp Ala Gly Thr Tyr
125125
Gly Asn Ala Asn Leu Glu 140Gly Asn Ala Asn Leu Glu 140
Ile Asn Val Asp Tyr AsnIle Asn Val Asp Tyr Asn
155 160155 160
Pro Arg Trp Phe Pro GlnPro Arg Trp Phe Pro Gln
175175
Gln Gly Ala Asn Phe SerGln Gly Ala Asn Phe Ser
190190
Ser Glu Asn Val Thr MetSer Glu Asn Val Thr Met
205205
Ile Asn Asn Thr Tyr SerIle Asn Asn Thr Tyr Ser
220220
Thr Gly Asp Ile Lys ValThr Gly Asp Ile Lys Val
235 240235 240
Leu Glu Leu Leu Asn SerLeu Glu Leu Leu Asn Ser
255255
Ala Ala Gly Trp Ala LeuAla Ala Gly Trp Ala Leu
270 <210> 5270 <210> 5
- 41 043376 < 211> 11 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>- 41 043376 <211> 11 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> VH CDR1 < 400>5<223>VH CDR1 <400>5
Gly Ser Ile Lys Ser Gly Ser Tyr Tyr Trp GlyGly Ser Ile Lys Ser Gly Ser Tyr Tyr Trp Gly
510 < 210>6 < 211>16 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>510 <210>6 <211>16 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> VH CDR2 < 400>6<223>VH CDR2 <400>6
Asn Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr TyrAsn Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr
510510
Asn Pro Ser Leu Arg Ser < 210>7 < 211>12 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Pro Ser Leu Arg Ser < 210>7 < 211>12 < 212> Protein < 213> Artificial sequence <220>
< 223> VH CDR3 < 400>7<223>VH CDR3 <400>7
Ala Arg Glu Gly Ser Tyr Pro Asn Gln Phe Asp ProAla Arg Glu Gly Ser Tyr Pro Asn Gln Phe Asp Pro
510 <210>8 <211>11 <212> Белок <213> Искусственная последовательность <220>510 <210>8 <211>11 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> VL CDR1 <400>8<223> VL CDR1 <400>8
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu AlaArg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala
510 <210>9 <211>7 <212> Белок <213> Искусственная последовательность510 <210>9 <211>7 <212> Protein <213> Artificial sequence
- 42 043376 <220>- 42 043376 <220>
<223> VL CDR2 <400>9<223> VL CDR2 <400>9
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 15 <210>10 < 211>9 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 15 <210>10 <211>9 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> VL CDR3 <400>10<223> VL CDR3 <400>10
Gln Gln Tyr His Ser Phe Pro Phe Thr <210>11 <211>120 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Gln Gln Tyr His Ser Phe Pro Phe Thr <210>11 <211>120 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223><223>
Вариабельный домен тяжелой цепи (VH) <400>11Heavy chain variable domain (VH) <400>11
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 1015Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 1015
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Lys Ser Gly 20 2530Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Lys Ser Gly 20 2530
Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 4045Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 4045
Trp Ile Gly Asn Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 5560Trp Ile Gly Asn Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 5560
Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 7580Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 7580
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 9095Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 9095
Cys Ala Arg Glu Gly Ser Tyr Pro Asn Gln Phe Asp Pro Trp Gly GlnCys Ala Arg Glu Gly Ser Tyr Pro Asn Gln Phe Asp Pro Trp Gly Gln
100 105110100 105110
- 43 043376- 43 043376
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerGly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115115
120 < 210> 12 < 211> 107 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 12 <211> 107 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> Вариабельный домен легкой цепи (VL) < 400> 12<223>Variable domain light chain (VL) <400>12
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro 1 5Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro 1 5
Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro GlyAla Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1515
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg 20Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg 20
Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser AsnAla Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
30thirty
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys ProLeu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
4040
Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 45Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala ThrTyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr
5555
Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 60Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr 65 70Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr 65 70
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln SerLeu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
8080
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 85Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 85
Gln Gln Tyr His Ser Phe Pro PheGln Gln Tyr His Ser Phe Pro Phe
9595
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys ValThr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val
100100
Glu Ile Lys 105 < 210> 13 < 211> 26 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность < 220>Glu Ile Lys 105 <210> 13 <211> 26 <212> Protein <213> Artificial Sequence <220>
< 223> VH FR1 < 400>13< 223> VH FR1 < 400>13
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser GluGln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
5 10155 1015
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser GlyThr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly
20252025
- 44 043376 <210> 14 < 211> 14 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>- 44 043376 <210> 14 <211> 14 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> VH FR2 < 400>14<223>VH FR2 <400>14
Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile GlyTrp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly
510 <210>15 <211>30 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>510 <210>15 <211>30 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> VH FR3 <400>15<223> VH FR3 <400>15
Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu LysArg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys
5 10155 1015
Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 20 2530 < 210>16 < 211>11 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 20 2530 < 210>16 < 211>11 < 212> Protein < 213> Artificial sequence <220>
< 223> VH FR4 < 400>16<223>VH FR4 <400>16
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerTrp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
510 < 210>17 < 211>23 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>510 <210>17 <211>23 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> VL FR1 < 400> 17<223>VL FR1 <400>17
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15
- 45 043376- 45 043376
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20 <210> 18 <211> 15 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20 <210> 18 <211> 15 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> VL FR2 <400>18<223> VL FR2 <400>18
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile TyrTrp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
5 1015 <210>19 <211>32 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>5 1015 <210>19 <211>32 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
<223> VL FR3 <400> 19<223> VL FR3 <400> 19
Gly Ile Pro AlaGly Ile Pro Ala
Arg Phe Ser Gly 5Arg Phe Ser Gly 5
Ser Gly Ser GlySer Gly Ser Gly
Thr Glu Phe ThrThr Glu Phe Thr
Leu Thr IleLeu Thr Ile
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 20 2530 < 210>20 < 211>10 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 20 2530 < 210>20 < 211>10 < 212> Protein < 213> Artificial sequence <220>
< 223> VL FR4 < 400>20< 223> VL FR4 < 400>20
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 1 510 < 210>21 < 211>450 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 1,510 < 210>21 < 211>450 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> Полноразмерная аминокислотная последовательность тяжелой < 400> 21 цепи<223>Full-length amino acid sequence of heavy <400>21 chains
- 46 043376- 46 043376
Gln 1Gln 1
ThrThr
SerSer
T rpT rp
Leu 65Leu 65
SerSer
CysCys
GlyGly
PhePhe
Leu 145Leu 145
TrpTrp
LeuLeu
SerSer
ProPro
Lys 225Lys 225
LeuLeu
LeuLeu
TyrTyr
GlnGln
SerSer
Tyr 35Tyr 35
LeuLeu
Leu 20Leu 20
TrpTrp
Gln 5Gln 5
ThrThr
GlyGly
Ile Gly Asn Ile 50Ile Gly Asn Ile 50
Arg Ser Arg ValArg Ser Arg Val
Leu Lys Leu Ser 85Leu Lys Leu Ser 85
Ala Arg Glu GlyAla Arg Glu Gly
100100
ThrThr
Pro 130Pro 130
GlyGly
AsnAsn
GluGlu
CysCys
TrpTrp
SerSer
ThrThr
IleIle
GlyGly
ProPro
Gly 10Gly 10
LeuLeu
ValVal
LysLys
ProPro
Ser 15Ser 15
ValVal
Arg 40Arg 40
Ser 25Ser 25
GlyGly
GlyGly
SerSer
IleIle
Lys 30Lys 30
SerSer
GlnGln
ProPro
ProPro
GlyGly
Lys 45Lys 45
GlyGly
LeuLeu
Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn ProTyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro
6060
Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln 70 75Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln 70 75
Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val TyrSer Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr
9595
Ser Tyr Pro Asn Gln Phe Asp Pro Trp GlySer Tyr Pro Asn Gln Phe Asp Pro Trp Gly
105 110105 110
Leu Val Thr Val Ser 115Leu Val Thr Val Ser 115
Leu Ala Pro Ser SerLeu Ala Pro Ser Ser
135135
Cys Leu Val Lys AspCys Leu Val Lys Asp
150150
Ser Gly Ala Leu Thr 165Ser Gly Ala Leu Thr 165
Gln SerGln Ser
Ser SerSer Ser
195195
Ser AsnSer Asn
210210
Thr HisThr His
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro SerSer Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
120 125120 125
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr AlaLys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
140140
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr ValTyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
155155
Ser Gly Val His Thr Phe Pro AlaSer Gly Val His Thr Phe Pro Ala
170 175170 175
Ser Gly Leu Tyr 180Ser Gly Leu Tyr 180
Leu Gly Thr GlnLeu Gly Thr Gln
Thr Lys Val Asp 215Thr Lys Val Asp 215
Thr Cys Pro Pro 230Thr Cys Pro Pro 230
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr ValSer Leu Ser Ser Val Val Thr Val
185 190185 190
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn HisThr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
200 205200 205
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser CysLys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
220220
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu GlyCys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
235235
GluGlu
GlyGly
GluGlu
SerSer
Phe 80Phe 80
TyrTyr
GlnGln
ValVal
AlaAla
Ser 160Ser 160
ValVal
ProPro
LysLys
AspAsp
Gly 240Gly 240
- 47 043376- 47 043376
ProPro
SerSer
ValVal
PhePhe
LeuLeu
245245
PhePhe
ProPro
ProPro
LysLys
ProPro
250250
LysLys
AspAsp
ThrThr
LeuLeu
MetMet
255255
SerSer
ArgArg
ThrThr
ProPro
260260
GluGlu
ValVal
ThrThr
CysCys
ValVal
265265
ValVal
ValVal
AspAsp
ValVal
SerSer
270270
HisHis
AspAsp
ProPro
GluGlu
275275
ValVal
LysLys
PhePhe
AsnAsn
Trp 280Trp 280
TyrTyr
ValVal
AspAsp
GlyGly
ValVal
285285
GluGlu
ValVal
AsnAsn
AlaAla
290290
LysLys
ThrThr
LysLys
ProPro
Arg 295Arg 295
GluGlu
GluGlu
GlnGln
TyrTyr
AsnAsn
300300
SerSer
ThrThr
TyrTyr
ValVal
305305
ValVal
SerSer
ValVal
LeuLeu
ThrThr
310310
ValVal
LeuLeu
HisHis
GlnGln
Asp 315Asp 315
TrpTrp
LeuLeu
AsnAsn
GlyGly
GluGlu
TyrTyr
LysLys
CysCys
Lys 325Lys 325
ValVal
SerSer
AsnAsn
LysLys
AlaAla
330330
LeuLeu
ProPro
AlaAla
ProPro
IleIle
335335
LysLys
ThrThr
IleIle
SerSer
340340
LysLys
AlaAla
LysLys
GlyGly
GlnGln
345345
ProPro
ArgArg
GluGlu
ProPro
GlnGln
350350
ValVal
ThrThr
LeuLeu
ProPro
355355
ProPro
SerSer
ArgArg
AspAsp
GluGlu
360360
LeuLeu
ThrThr
LysLys
AsnAsn
GlnGln
365365
ValVal
SerSer
ThrThr
CysCys
370370
LeuLeu
ValVal
LysLys
GlyGly
PhePhe
375375
TyrTyr
ProPro
SerSer
AspAsp
IleIle
380380
AlaAla
ValVal
GluGlu
GluGlu
385385
SerSer
AsnAsn
GlyGly
GlnGln
ProPro
390390
GluGlu
AsnAsn
AsnAsn
TyrTyr
Lys 395Lys 395
ThrThr
ThrThr
ProPro
ProPro
LeuLeu
AspAsp
SerSer
AspAsp
Gly 405Gly 405
SerSer
PhePhe
PhePhe
LeuLeu
Tyr 410Tyr 410
SerSer
LysLys
LeuLeu
ThrThr
ValVal
415415
LysLys
SerSer
ArgArg
Trp 420Trp 420
GlnGln
GlnGln
GlyGly
AsnAsn
ValVal
425425
PhePhe
SerSer
CysCys
SerSer
ValVal
430430
MetMet
GluGlu
AlaAla
LeuLeu
435435
HisHis
AsnAsn
HisHis
TyrTyr
ThrThr
440440
GlnGln
LysLys
SerSer
LeuLeu
SerSer
445445
LeuLeu
SerSer
IleIle
GluGlu
HisHis
ArgArg
Lys 320Lys 320
GluGlu
TyrTyr
LeuLeu
TrpTrp
Val 400Val 400
AspAsp
HisHis
ProPro
GlyGly
LysLys
450 <210>450 <210>
<211><211>
<212><212>
214214
БелокProtein
- 48 043376 <213> Искусственная последовательность <220>- 48 043376 <213> Artificial sequence <220>
<223> Полноразмерная аминокислотная последовательность <400> 22<223> Full-length amino acid sequence <400> 22
Glu Ile 1Glu Ile 1
Val MetVal Met
Thr Gln 5Thr Gln 5
Ser ProSer Pro
Ala ThrAla Thr
Leu SerLeu Ser
Val SerVal Ser
Glu ArgGlu Arg
Ala ThrAla Thr
Leu SerLeu Ser
Cys ArgCysArg
Ala Ser 25Ala Ser 25
Gln SerGln Ser
Val SerVal Ser
Leu AlaLeu Ala
Trp Tyr 35Trp Tyr 35
Gln GlnGln Gln
Lys Pro 40Lys Pro 40
Gly GlnGly Gln
Ala ProAla Pro
Arg Leu 45Arg Leu 45
Tyr Gly 50Tyr Gly 50
Ala SerAla Ser
Thr ArgThr Arg
Ala Thr 55Ala Thr 55
Gly IleGly Ile
Pro AlaPro Ala
Arg Phe легкой цепиArg Phe light chain
Pro Gly 15Pro Gly 15
Ser AsnSer Asn
Leu IleLeu Ile
Ser GlySer Gly
Ser Gly 65Ser Gly 65
Ser GlySer Gly
Thr GluThr Glu
Phe ThrPhe Thr
Leu ThrLeu Thr
Ile Ser 75Ile Ser 75
Ser LeuSer Leu
Gln SerGln Ser
Glu AspGlu Asp
Phe AlaPhe Ala
Val Tyr 85Val Tyr 85
Tyr CysTyr Cys
Gln GlnGln Gln
Tyr HisTyr His
Ser PheSer Phe
Pro Phe 95Pro Phe 95
Thr PheThr Phe
Gly GlyGly Gly
100100
Gly ThrGly Thr
Lys ValLys Val
Glu Ile 105Glu Ile 105
Lys ArgLys Arg
Thr ValThr Val
110110
Ala AlaAla Ala
Pro SerPro Ser
Val Phe 115Val Phe 115
Ile PheIle Phe
Pro ProPro Pro
120120
Ser AspSer Asp
Glu GlnGlu Gln
Leu Lys 125Leu Lys 125
Ser GlySer Gly
Thr AlaThr Ala
130130
Ser ValSer Val
Val CysVal Cys
Leu Leu 135Leu Leu 135
Asn AsnAsn Asn
Phe TyrPhe Tyr
140140
Pro ArgPro Arg
Glu AlaGlu Ala
Lys Val 145Lys Val 145
Gln TrpGln Trp
Lys ValLys Val
150150
Asp AsnAsp Asn
Ala LeuAla Leu
Gln Ser 155Gln Ser 155
Gly AsnGly Asn
Ser GlnSer Gln
160160
Glu SerGlu Ser
Val ThrVal Thr
Glu Gln 165Glu Gln 165
Asp SerAsp Ser
Lys AspLys Asp
170170
Ser ThrSer Thr
Tyr SerTyr Ser
Leu Ser 175Leu Ser 175
Ser ThrSer Thr
Leu ThrLeu Thr
180180
Leu SerLeu Ser
Lys AlaLys Ala
Asp Tyr 185Asp Tyr 185
Glu LysGlu Lys
His LysHis Lys
190190
Val TyrVal Tyr
Ala CysAla Cys
Glu Val 195Glu Val 195
Thr HisThr His
Gln GlyGln Gly
200200
Leu SerLeu Ser
Ser ProSer Pro
Val Thr 205Val Thr 205
Lys SerLys Ser
Phe AsnPhe Asn
Arg GlyArg Gly
Glu CysGlu Cys
- 49 043376- 49 043376
210 <210> 23 < 211> 107 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 23 <211> 107 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> константная область легкой цепи каппа человека <400>23<223> human kappa light chain constant region <400>23
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser 1 5Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser 1 5
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala 20Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala 20
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val 35Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val 35
Ser Gly Asn Ser Gln Glu SerSer Gly Asn Ser Gln Glu Ser
5555
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr 65 70Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr 65 70
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys 85Lys His Lys Val Tyr Ala Cys 85
Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp GluVal Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
10151015
Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn PheSer Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
25302530
Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 4045Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 4045
Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 60Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 60
Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 7580Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 7580
Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser SerGlu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
90959095
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn 100Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn 100
Arg Gly Glu Cys 105 <210>24 <211>321 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>Arg Gly Glu Cys 105 <210>24 <211>321 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>
< 223> нуклеотидная последовательность константной области легкой цепи каппа человека < 400> 24 cggaccgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60 ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120 tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180< 223 > human kappa light chain constant region nucleotide sequence < 400 > 24 cggaccgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60 ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120 tggaa ggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180
- 50 043376 agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240 aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300 agcttcaaca ggggagagtg t- 50 043376 agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240 aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300 agcttcaaca ggggagagtg t
321 <210> 25 <211> 330 < 212> Белок < 213> Искусственная последовательность <220>321 <210> 25 <211> 330 <212> Protein <213> Artificial sequence <220>
< 223> константная область тяжелой цепи IgG1 человека < 400> 25<223>human IgG1 heavy chain constant region <400>25
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 85Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 85
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp LysLys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
9595
Lys Val Glu Pro LysLys Val Glu Pro Lys
100100
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 105Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 105
Cys Pro Pro CysCys Pro Pro Cys
110110
Pro Ala Pro Glu LeuPro Ala Pro Glu Leu
115115
Leu Gly Gly Pro Ser Val PheLeu Gly Gly Pro Ser Val Phe
120120
Leu Phe Pro Pro 125Leu Phe Pro Pro 125
Lys Pro Lys Asp Thr 130Lys Pro Lys Asp Thr 130
Leu Met Ile Ser Arg Thr ProLeu Met Ile Ser Arg Thr Pro
135 140135 140
Glu Val Thr CysGlu Val Thr Cys
Val Val Val Asp Val 145Val Val Val Asp Val 145
Ser His Glu Asp Pro Glu ValSer His Glu Asp Pro Glu Val
150 155150 155
Lys Phe Asn TrpLys Phe Asn Trp
160160
- 51 043376- 51 043376
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn AlaTyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
165 170165 170
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val ValGlu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
180 185180 185
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu TyrHis Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
195 200195 200
Lys Thr Lys Pro Arg Glu 175Lys Thr Lys Pro Arg Glu 175
Ser Val Leu Thr Val Leu 190Ser Val Leu Thr Val Leu 190
Lys Cys Lys Val Ser Asn 205Lys Cys Lys Val Ser Asn 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro IleLys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
210 215210 215
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys GlyGlu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
220220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln ValGln Pro Arg Glu Pro Gln Val
225 230225 230
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp GluTyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
235 240235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val SerLeu Thr Lys Asn Gln Val Ser
245245
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe TyrLeu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
250 255250 255
Pro Ser AspPro Ser Asp
Ile Ala Val Glu Trp 260Ile Ala Val Glu Trp 260
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu AsnGlu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
265 270265 270
Asn Tyr LysAsn Tyr Lys
275275
Thr Thr Pro Pro ValThr Thr Pro Pro Val
280280
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe PheLeu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
285285
Leu Tyr Ser 290Leu Tyr Ser 290
Lys Leu Thr Val AspLys Leu Thr Val Asp
295295
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly AsnLys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
300300
Val Phe Ser 305Val Phe Ser 305
Cys Ser Val Met HisCys Ser Val Met His
310310
Glu Ala Leu His Asn His Tyr ThrGlu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
315 320315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysGln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330 <210> 26 <211> 990 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>325 330 <210> 26 <211> 990 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>
< 223> нуклеотидная последовательность константной области тяжелой цепи IgG1 человека < 400> 26 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120<223> nucleotide sequence of the human IgG1 heavy chain constant region <400> 26 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
- 52 043376 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540 agcacgtacc gggtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720 ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa- 52 043376 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tgg acaagaa agttgagccc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540 agcacgtacc gggtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcc cccatc ccgggatgag 720 ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780 gccgtggagt ggggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa
990 <210> 27 <211> 360 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>990 <210> 27 <211> 360 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>
<223> полинуклеотидная последовательность кодирующая вариабельную область тяжелой цепи 20502 <400> 27 cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60<223> polynucleotide sequence encoding the heavy chain variable region 20502 <400> 27 cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
--
Claims (4)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/633,537 | 2018-02-21 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA043376B1 true EA043376B1 (en) | 2023-05-22 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR20200123170A (en) | B7-H4 antibody formulation | |
DK2620450T3 (en) | Antibody Compositions against CTLA-4 | |
KR102084806B1 (en) | ANTIBODIES TO INTEGRIN αvβ6 AND USE OF SAME TO TREAT CANCER | |
ES2686618T3 (en) | And anti-CD33 antibodies and use them to treat cancer | |
KR20190059958A (en) | Anti-LAG-3 antibodies and compositions | |
CN111094352A (en) | B7-H4 antibodies and methods of use thereof | |
AU2016340989A1 (en) | Anti-IL-2 antibodies and compositions and uses thereof | |
KR101453462B1 (en) | Antibodies Capable of Binding Specifically to HER2 | |
TW201008579A (en) | Anti-Fn14 antibodies and uses thereof | |
CN115348970B (en) | Antibodies that bind SIGLEC15 and uses thereof | |
KR102478986B1 (en) | Anti-Ck8 antibodies for use in the treatment of cancers | |
CN111315213A (en) | Anti-transthyretin antibodies | |
KR20200123169A (en) | B7-H4 antibody dosing regimen | |
KR102558418B1 (en) | Antibodies that bind to PD-1 and uses thereof | |
CN113166242A (en) | Combination therapy for cancer | |
CN106795223B (en) | Antibodies to Fc gamma receptors IIB and Fc epsilon receptors | |
KR20220160555A (en) | Antibodies that bind to CD40 and uses thereof | |
KR20160131082A (en) | Anti-laminin4 antibodies specific for lg1-3 | |
KR20230152062A (en) | Pharmaceutical composition containing anti-TSLP antibody | |
EA043376B1 (en) | ANTIBODY B7-H4 COMPOSITIONS | |
AU2014240252B2 (en) | Anti-CTLA-4 Antibody Compositions | |
AU2012200203B2 (en) | Anti-CTLA-4 Antibody Compositions |