EA041082B1 - CRYSTALLINE FORMS OF THE LYSILOXIDASE-LIKE PROTEIN 2 INHIBITOR AND METHODS OF OBTAINING - Google Patents

CRYSTALLINE FORMS OF THE LYSILOXIDASE-LIKE PROTEIN 2 INHIBITOR AND METHODS OF OBTAINING Download PDF

Info

Publication number
EA041082B1
EA041082B1 EA201990621 EA041082B1 EA 041082 B1 EA041082 B1 EA 041082B1 EA 201990621 EA201990621 EA 201990621 EA 041082 B1 EA041082 B1 EA 041082B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
theta
acid
crystalline
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
EA201990621
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Дэвид Лонерган
Кевин Росс Холм
Мартин У. Роуботтом
Original Assignee
Фармакеа, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Фармакеа, Инк. filed Critical Фармакеа, Инк.
Publication of EA041082B1 publication Critical patent/EA041082B1/en

Links

Description

Ссылка на родственные заявкиLink to related applications

Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на выдачу патента США №62/384596 под названием Кристаллические формы ингибитора лизилоксидазаподобного белка 2 и способы получения, поданной 07 сентября 2016 г., которая включена в настоящий документ ссылкой во всей своей полноте.The present application claims priority under U.S. Provisional Application No. 62/384,596 titled Lysyl Oxidase Like Protein Inhibitor Crystal Forms 2 and Methods of Preparation, filed September 07, 2016, which is incorporated herein by reference in its entirety.

Область техники, к которой относится настоящее изобретениеThe field of technology to which the present invention relates

В настоящем документе описаны кристаллические формы ингибитора лизилоксидаза-подобного белка 2 (LOXL2) (3-(4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-илокси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанона, его фармацевтически приемлемые соли, его сольваты, а также его фармацевтические композиции и способы его применения при лечении или профилактике заболеваний или состояний, связанных с активностью LOXL2.This document describes the crystal forms of the lysyl oxidase-like protein 2 (LOXL2) inhibitor (3-(4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yloxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4hydroxypyrrolidine -1-yl)methanone, its pharmaceutically acceptable salts, its solvates, as well as its pharmaceutical compositions and methods of its use in the treatment or prevention of diseases or conditions associated with the activity of LOXL2.

Предшествующий уровень техники настоящего изобретенияBackground of the Invention

Лизилоксидаза-подобный белок-2 (LOXL2) представляет собой аминоксидазный фермент, который катализирует сшивание белков внеклеточного матрикса. LOXL2 также вовлечен во внутриклеточные процессы, такие как опосредование эпителиально-мезенхимального перехода клеток. Сигналинг LOXL2 вовлечен, например, в фиброзные заболевания и рак.Lysyl oxidase-like protein-2 (LOXL2) is an amine oxidase enzyme that catalyzes the cross-linking of extracellular matrix proteins. LOXL2 is also involved in intracellular processes such as mediating the epithelial-mesenchymal cell transition. LOXL2 signaling is involved, for example, in fibrotic diseases and cancer.

Краткое раскрытие настоящего изобретенияBrief summary of the present invention

В одном аспекте в настоящем документе описана фармацевтически приемлемая соль (R,R)-транс(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1ил)метанона, причем фармацевтически приемлемая соль представляет собой мезилатную соль, гидрохлоридную соль, сульфатную соль, малеатную соль, фосфатную соль, L-тартратную соль, фумаратную соль, сукцинатную соль или ацетатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой мезилатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлоридную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой сульфатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой малеатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой фосфатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой Lтартратную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой фумаратную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой сукцинатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой ацетатную соль.In one aspect, the present document describes a pharmaceutically acceptable salt of (R,R)-trans(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4- hydroxypyrrolidin-1yl)methanone, wherein the pharmaceutically acceptable salt is the mesylate salt, hydrochloride salt, sulfate salt, maleate salt, phosphate salt, L-tartrate salt, fumarate salt, succinate salt, or acetate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the mesylate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the hydrochloride salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the sulfate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the maleate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a phosphate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the L tartrate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a fumarate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a succinate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is an acetate salt.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой мезилатную соль и имеет структуру соединения 2:In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the mesylate salt and has the compound 2 structure:

FF

Соединение 2.Connection 2.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является аморфным.In some embodiments, Compound 2 is amorphous.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,6° 2-тета, 16,9° 2-тета, 19,4° 2-тета, 20,1° 2-тета, 20,3° 2-тета, 20,6° 2-тета, 23,1° 2-тета, 23,6° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.6° 2-theta, 16.9° 2-theta, 19.4° 2-theta, 20.1° 2-theta, 20.3° 2 -theta, 20.6° 2-theta, 23.1° 2-theta, 23.6° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 1;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 1;

(c) термограмма ДСК с эндотермами при приблизительно 231°С и приблизительно 236°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 2;(c) DSC thermogram with endotherms at approximately 231°C and approximately 236°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 2;

(e) обратимое поглощение воды (~2,1% мас./мас.) от 0 до 90% ОВ (относительной влажности);(e) reversible water uptake (~2.1% w/w) from 0 to 90% RH (relative humidity);

(f) неизменная РПД после анализа ГСП (гравиметрической сорбции паров).(f) unchanged RPD after GSP (gravimetric vapor sorption) analysis.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 13,6° 2-тета, 16,9° 2-тета, 19,4° 2-тета, 20,1° 2-тета, 20,3° 2-тета, 20,6° 2-тета, 23,1° 2-тета, 23,6° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 1. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермами при приблизительно 231°С и приблизительно 236°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристал- 1 041082 лическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 2.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.6° 2-theta, 16.9° 2-theta, 19.4° 2-theta, 20.1° 2- theta, 20.3° 2-theta, 20.6° 2-theta, 23.1° 2-theta, 23.6° 2-theta. In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 1. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with endotherms at about 231°C and about 236°C. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 2.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,6°(a) X-ray powder diffraction pattern (XRD) with characteristic peaks at 2.6°

2-тета, 3,2° 2-тета, 6,3° 2-тета, 9,4° 2-тета, 15,7° 2-тета, 22,1° 2-тета;2-theta, 3.2° 2-theta, 6.3° 2-theta, 9.4° 2-theta, 15.7° 2-theta, 22.1° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 3;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 3;

(c) термограмма ДСК с тремя эндотермами при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С;или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 4;(c) a DSC thermogram with three endotherms at approximately 121.7°C, 231.1°C, and 236.1°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 4;

(e) является безводным;(e) is anhydrous;

(f) превращение в соединение 2, форму 1, при нагревании свыше 150°С;(f) transformation into compound 2, form 1, when heated above 150°C;

(g) превращение в соединение 2, форму 1, после анализа ГСП и через 7 дней при 40°С/75% ОВ;(g) conversion to Compound 2 Form 1 after GSP analysis and after 7 days at 40° C./75% RH;

(h) превращение в соединение 2, форму 1, через 7 дней при 25°С/97% ОВ.(h) conversion to Compound 2 Form 1 after 7 days at 25°C/97% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 2,6° 2-тета, 3,2° 2-тета, 6,3° 2-тета, 9,4° 2-тета, 15,7° 2-тета, 22,1° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 3. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с тремя эндотермами при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 4. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и безводным.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.6° 2-theta, 3.2° 2-theta, 6.3° 2-theta, 9.4° 2- theta, 15.7° 2-theta, 22.1° 2-theta. In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 3. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with three endotherms at approximately 121.7°C, 231.1°C, and 236.1°C. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 4. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and anhydrous.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,9° 2-тета, 3,2° 2-тета, 3,3° 2-тета, 15,8° 2-тета, 16,9° 2-тета, 20,2° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.9° 2-theta, 3.2° 2-theta, 3.3° 2-theta, 15.8° 2-theta, 16.9° 2 -theta, 20.2° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 5;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 5;

(c) термограмма ДСК с двумя эндотермами при приблизительно 132,2°С и 238,8°С;(c) DSC thermogram with two endotherms at approximately 132.2°C and 238.8°C;

(d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 6;(d) DSC thermogram essentially the same as shown in FIG. 6;

(e) сольватируется с диметилсульфоксидом (DMSO);(e) solvated with dimethyl sulfoxide (DMSO);

(f) превращение в соединение 2, форму 1, при нагревании свыше 130°С;(f) transformation into compound 2, form 1, when heated above 130°C;

(g) превращение в соединение 2, форму 1, после анализа ГСП и через 7 дней при 40°С/75% ОВ;(g) conversion to Compound 2 Form 1 after GSP analysis and after 7 days at 40° C./75% RH;

(h) превращение в соединение 2, форму 1, через 7 дней при 40°С и 75% ОВ.(h) conversion to compound 2, form 1 after 7 days at 40° C. and 75% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 2,9° 2-тета, 3,2° 2-тета, 3,3° 2-тета, 15,8° 2-тета, 16,9° 2-тета, 20,2° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 5. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с двумя эндотермами при приблизительно 132,2°С и 238,8°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 6. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и сольватируется с диметилсульфоксидом (DMSO).In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.9° 2-theta, 3.2° 2-theta, 3.3° 2-theta, 15.8° 2- theta, 16.9° 2-theta, 20.2° 2-theta. In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 5. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with two endotherms at approximately 132.2°C and 238.8°C. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 6. In some embodiments, compound 2 is crystalline and solvates with dimethyl sulfoxide (DMSO).

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,9° 2-тета, 16,6° 2-тета, 18,8° 2-тета, 19,1° 2-тета, 19,7° 2-тета, 19,9° 2-тета, 20° 2-тета, 21,2° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,7° 2-тета, 23,4° 2-тета, 23,8° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.9° 2-theta, 16.6° 2-theta, 18.8° 2-theta, 19.1° 2-theta, 19.7° 2 -theta, 19.9° 2-theta, 20° 2-theta, 21.2° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.7° 2-theta, 23.4° 2-theta, 23 .8° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 7;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 7;

(с) термограмма ДСК с эндотермой при приблизительно 233°С; или d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 8.(c) DSC thermogram with endotherm at approximately 233°C; or d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 8.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 13,9° 2-тета, 16,6° 2-тета, 18,8° 2-тета, 19,1° 2-тета, 19,7° 2-тета, 19,9° 2-тета, 20° 2-тета, 21,2° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,7° 2-тета, 23,4° 2-тета, 23,8° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 7. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермой при приблизительно 233°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 8.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.9° 2-theta, 16.6° 2-theta, 18.8° 2-theta, 19.1° 2- theta, 19.7° 2-theta, 19.9° 2-theta, 20° 2-theta, 21.2° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.7° 2-theta, 23, 4° 2-theta, 23.8° 2-theta. In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 7. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with an endotherm at approximately 233°C. In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 8.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлоридную соль и имеет структуру соединения 1In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the hydrochloride salt and has the structure of Compound 1

- 2 041082- 2 041082

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является аморфным. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является аморфным и растворяется при 40°С/75% ОВ.In some embodiments, Compound 1 is amorphous. In some embodiments, Compound 1 is amorphous and dissolves at 40°C/75% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 1 is crystalline. In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 5,5° 2-тета, 7,5° 2-тета, 18,5° 2-тета, 19,4° 2-тета, 21,8° 2-тета, 23,5° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 5.5° 2-theta, 7.5° 2-theta, 18.5° 2-theta, 19.4° 2-theta, 21.8° 2 -theta, 23.5° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 9;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 9;

(c) термограмма ДСК с эндотермой при приблизительно 153°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 10.(c) DSC thermogram with endotherm at approximately 153°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 10.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 5,5° 2-тета, 7,5° 2-тета, 18,5° 2-тета, 19,4° 2-тета, 21,8° 2-тета, 23,5° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 9. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермой при приблизительно 153°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 10. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и гигроскопическим твердым веществом.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 5.5° 2-theta, 7.5° 2-theta, 18.5° 2-theta, 19.4° 2- theta, 21.8° 2-theta, 23.5° 2-theta. In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 9. In some embodiments, compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram with an endotherm at approximately 153°C. In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 10. In some embodiments, Compound 1 is a crystalline and hygroscopic solid.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 6,6° 2-тета, 13,2° 2-тета, 19,7° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,5° 2-тета, 23,7° 2-тета, 24,5° 2-тета, 26,4° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 6.6° 2-theta, 13.2° 2-theta, 19.7° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.5° 2 -theta, 23.7° 2-theta, 24.5° 2-theta, 26.4° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 11;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. eleven;

(c) термограмма ДСК с эндотермами при приблизительно 43°С и приблизительно 119°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 12.(c) DSC thermogram with endotherms at approximately 43°C and approximately 119°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 12.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 6,6° 2-тета, 13,2° 2-тета, 19,7° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,5° 2-тета, 23,7° 2-тета, 24,5° 2-тета, 26,4° 2-тета. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 11. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермами при приблизительно 43°С и приблизительно 119°С. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 12.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 6.6° 2-theta, 13.2° 2-theta, 19.7° 2-theta, 22.3° 2- theta, 22.5° 2-theta, 23.7° 2-theta, 24.5° 2-theta, 26.4° 2-theta. In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 11. In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram with endotherms at about 43°C and about 119°C. In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 12.

В одном аспекте в настоящем документе описана фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемую соль любого одного из вышеуказанных вариантов осуществления и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для введения млекопитающему путем внутривенного введения, подкожного введения, перорального введения, ингаляции, назального введения, накожного введения или введения в глаз. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для введения млекопитающему путем перорального введения. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция составлена для введения млекопитающему путем перорального введения в виде таблетки, пилюли, капсулы, суспензии или раствора. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в виде твердой формы фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в виде таблетки, пилюли или капсулы. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит от приблизительно 1 мг до приблизительно 2000 мг (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в виде таблетки и содержит приблизительно 50 мг или приблизительно 250 мг (R,R)-транс-(3-((4-(амииометил)-6-(трифторметил)πиридин-2ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона на таблетку.In one aspect, this document describes a pharmaceutical composition containing a pharmaceutically acceptable salt of any one of the above embodiments and at least one pharmaceutically acceptable excipient. In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated for administration to a mammal by intravenous administration, subcutaneous administration, oral administration, inhalation, nasal administration, dermal administration, or administration to the eye. In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated for administration to a mammal by oral administration. In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated for oral administration to a mammal as a tablet, pill, capsule, suspension, or solution. In some embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition is in the form of a solid form of the pharmaceutical composition. In some embodiments, the pharmaceutical composition is in the form of a tablet, pill, or capsule. In some embodiments, the pharmaceutical composition contains from about 1 mg to about 2000 mg of (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3 -fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone. In some embodiments, the pharmaceutical composition is in the form of a tablet and contains about 50 mg or about 250 mg of (R,R)-trans-(3-((4-(amiomethyl)-6-(trifluoromethyl)πyridin-2yl)oxy)phenyl )(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone per tablet.

В другом аспекте в настоящем документе описан способ синтеза (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанона (соединения I), включающий стадию восстановления нитрильного соединения А-7 со следующей структурой:In another aspect, this document describes a method for the synthesis of (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine -1 -yl) methanone (compound I), including the stage of reduction of the nitrile compound A-7 with the following structure:

- 3 041082- 3 041082

ОНHE

Соединение А-7, при подходящих условиях для восстановления нитрила с получением ЩД)-транс-(3-((4(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения I):Compound A-7, under suitable conditions to reduce the nitrile to give SD)-trans-(3-((4(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4- hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I):

онHe

Соединение I.Compound I

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия восстановления нитрила включают условия каталитического гидрирования.In some embodiments, suitable nitrile recovery conditions include catalytic hydrogenation conditions.

В некоторых вариантах осуществления условия каталитического гидрирования включают: палладиевый катализатор, платиновый катализатор, железный катализатор, кобальтовый катализатор, никелевый катализатор, рутениевый катализатор, родиевый катализатор, иридиевый катализатор или осмиевый катализатор и газообразный водород. В некоторых вариантах осуществления условия каталитического гидрирования включают: палладиевый катализатор или платиновый катализатор, который нанесен на активированный уголь, Al2O3, TiO2, ZrO2 или SiO2; и газообразный водород. В некоторых вариантах осуществления условия каталитического гидрирования включают: уксусную кислоту; гидроксид палладия на угле и газообразный водород.In some embodiments, catalytic hydrogenation conditions include: palladium catalyst, platinum catalyst, iron catalyst, cobalt catalyst, nickel catalyst, ruthenium catalyst, rhodium catalyst, iridium catalyst, or osmium catalyst, and hydrogen gas. In some embodiments, catalytic hydrogenation conditions include: a palladium or platinum catalyst that is supported on activated carbon, Al 2 O 3 , TiO 2 , ZrO 2 , or SiO 2 ; and gaseous hydrogen. In some embodiments, the catalytic hydrogenation conditions include: acetic acid; palladium hydroxide on carbon and hydrogen gas.

В некоторых вариантах осуществления нитрильное соединение А-7In some embodiments, the nitrile compound A-7

онHe

Соединение А-7, получают путем сочетания бензойной кислоты-соединения А-6Compound A-7, obtained by combining benzoic acid-compound A-6

F3 F3

онHe

Соединение А-6, с (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-олом при подходящих условиях сочетания.Compound A-6, with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol under suitable coupling conditions.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания включают превращение бензойной кислоты А-6 в соответствующий ацилхлорид и сочетание соответствующего ацилхлорида бензойной кислоты-соединения А-6 с (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-олом.In some embodiments, suitable coupling conditions include converting benzoic acid A-6 to the corresponding acyl chloride and coupling the corresponding benzoic acid compound A-6 acyl chloride with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol.

В некоторых вариантах осуществления превращение бензойной кислоты А-6 в соответствующий ацилгалогенид включает обработку бензойной кислоты С тионилхлоридом (SOCl2), оксалилхлоридом ((COCl)2), трихлоридом фосфора (PCl3), оксихлоридом фосфора (POCl3) или пентахлоридом фосфора (PCl5).In some embodiments, converting benzoic acid A-6 to the corresponding acyl halide comprises treating benzoic acid C with thionyl chloride (SOCl 2 ), oxalyl chloride ((COCl) 2 ), phosphorus trichloride (PCl 3 ), phosphorus oxychloride (POCl 3 ), or phosphorus pentachloride (PCl5 ).

В некоторых вариантах осуществления сочетание соответствующего ацилхлорида бензойной кислоты А-6 с (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-олом включает ненуклеофильное основание - третичный амин. В некоторых вариантах осуществления ненуклеофильный третичный амин представляет собой триэтиламин, трибутиламин, N,N-диизопропилэтиламин, 8-диазабициклоундец-7-ен, 1,2,2,6,6-пентаметилпиперидин, Nметилморфолин или пиридин.In some embodiments, the combination of the corresponding A-6 benzoic acid acyl chloride with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol comprises a non-nucleophilic tertiary amine base. In some embodiments, the non-nucleophilic tertiary amine is triethylamine, tributylamine, N,N-diisopropylethylamine, 8-diazabicycloundec-7-ene, 1,2,2,6,6-pentamethylpiperidine, Nmethylmorpholine, or pyridine.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания включают: использование дициклогексилкарбодиимида (DCC), диизопропилкарбодиимида (DIC), N-(3-диметилαминопропил)-N'In some embodiments, suitable coupling conditions include: use of dicyclohexylcarbodiimide (DCC), diisopropylcarbodiimide (DIC), N-(3-dimethylαminopropyl)-N'

- 4 041082 этилкарбодиимида-HCl (EDC HCl), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфония (ВОР), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфония (PyBOP), гексафторфосфата бромтрипирролидинофосфония (PyBrOP), гексафторфосфата 7-аза-бензотриазол-1илокситрипирролидинофосфония (РуАОР), гексафторфосфата этилциано(гидроксиимино)ацетато-О2)три-(1-пирролидинил)-фосфония (PyOxim), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензо[d]триазин-4(3Н)-она (DEPBT), тетрафторбората/гексафторфосфата 2-(1 H-бензотриазол-1 -ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (TBTU (BF4-)), гексафторфосфата 2-(6-хлор-1Н-бензотрuазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (HCTU), N-оксида гексафторфосфата N-[(5-хлор-1Н-бензотрuазол-1-ил)-диметиламиноморфолино]-уронuя (HDMC), гексафторфосфата 2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (HATU), гексафторфосфата 1-[1-(циано-2-этокси-2-оксоэтилиденаминоокси)-диметиламиноморфолино]-урония (COMU), тетрафторбората 2-(1-оксипиридин-2-ил)-1,1,3,3-тетраметилизотиоурония (ТОТТ), гексафторфосфата тетраметилфторформамидиния (TFFH), N-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолина (EEDQ), ангидрида 2-пропанфосфоновой кислоты (T3P), солей 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4метилморфолиния (DMTMM), бис-трихлорметилкарбоната (ВТС) или 1,1'-карбонилдиимидазола (CDI). В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания также включают одну или несколько добавок, выбранных из группы, состоящей из 1-гидроксибензотриазола (HOBt), 1гидроксибензотриазол-6-сульфонамидометила·HCl (HOBt-6-сульфонамидометила·HCl), гидрокси-3,4дигидро-4-оксо-1,2,3-бензотриазина (HOOBt), N-гидроксисукцинимида (HOSu), 1-гидрокси-7-аза-1Нбензотриазола (HOAt), этил-2-циано-2-(гидроксимино)ацетата и 4-(N,N-диметиламино)пиридина (DMAP).- 4 041082 ethylcarbodiimide-HCl (EDC HCl), benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP), benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP), bromtriazolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBrOP), 7-aza-benzotriazole-hexafluorophosphate 1yloxytripyrrolidinophosphonium (PyAOP), ethylcyano(hydroxyimino)aceto-O 2 )tri-(1-pyrrolidinyl)-phosphonium hexafluorophosphate (PyOxim), 3-(diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzo[d]triazine-4(3H) -one (DEPBT), 2-(1 H-benzotriazol-1 -yl)-N,N,N',N'-tetramethylaminium tetrafluoroborate/hexafluorophosphate (TBTU (BF4 - )), 2-(6-chloro-1H) hexafluorophosphate -benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethylaminium (HCTU), N-[(5-chloro-1H-benzotriazol-1-yl)-dimethylaminomorpholino]-uronium hexafluorophosphate N-oxide (HDMC ), 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethylaminium hexafluorophosphate (HATU), 1-[1-(cyano-2-ethoxy-2-oxoethylideneaminooxy )-dimethylaminomorpholino]-uronium (COMU), 2-(1-oxypyridin-2-yl)-1,1,3,3-tetramethium tetrafluoroborate lysothiouronium (TOTT), tetramethylfluoroformamidinium hexafluorophosphate (TFFH), N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline (EEDQ), 2-propanephosphonic acid anhydride (T3P), salts of 4-(4,6-dimethoxy-1,3 ,5-triazin-2-yl)-4methylmorpholinium (DMTMM), bis-trichloromethyl carbonate (BTC) or 1,1'-carbonyldiimidazole (CDI). In some embodiments, suitable coupling conditions also include one or more additives selected from the group consisting of 1-hydroxybenzotriazole (HOBt), 1hydroxybenzotriazole-6-sulfonamidomethyl HCl (HOBt-6-sulfonamidomethyl HCl), hydroxy-3,4dihydro- 4-oxo-1,2,3-benzotriazine (HOOBt), N-hydroxysuccinimide (HOSu), 1-hydroxy-7-aza-1Hbenzotriazole (HOAt), ethyl 2-cyano-2-(hydroxyimino)acetate and 4- (N,N-dimethylamino)pyridine (DMAP).

В некоторых вариантах осуществления бензойную кислоту А-6In some embodiments, benzoic acid A-6

Соединение А-6, получают сочетанием 2-хлор-6-(трифторметил)изоникотинонитрилаCompound A-6, obtained by a combination of 2-chloro-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile

F3CF 3 C

CN с 3-гидроксибензойной кислотойCN with 3-hydroxybenzoic acid

при подходящих условиях реакции.under suitable reaction conditions.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают условия реакции нуклеофильного замещения на ароматическом ядре (SNAr). В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают органическое или неорганическое основание в подходящем растворителе. В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают неорганическое основание, выбранное из группы, состоящей из гидроксида лития, гидроксида натрия, гидроксида калия, бикарбоната натрия, бикарбоната калия, бикарбоната цезия, карбоната натрия, карбоната калия, карбоната цезия, ацетата натрия, ацетата калия, фосфата натрия и фосфата калия; и подходящий растворитель, выбранный из группы, состоящей из диметилформамида, диметилацетамида, тетрагидрофурана, тетрафторпирана и диоксана.In some embodiments, suitable reaction conditions include aromatic nucleophilic substitution (SNAr) reaction conditions. In some embodiments, suitable reaction conditions include an organic or inorganic base in a suitable solvent. In some embodiments, suitable reaction conditions include an inorganic base selected from the group consisting of lithium hydroxide, sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium bicarbonate, potassium bicarbonate, cesium bicarbonate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium acetate, potassium acetate, sodium phosphate and potassium phosphate; and a suitable solvent selected from the group consisting of dimethylformamide, dimethylacetamide, tetrahydrofuran, tetrafluoropyran and dioxane.

В других вариантах осуществления в настоящем документе описан способ синтеза метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(амииометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения 2), включающий стадии обработки соединения СIn other embodiments, described herein is a process for the synthesis of (R,R)-trans-(3-((4-(amiiomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro -4hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound 2), including the steps of treating compound C

NHBoc у-онNHBoc y-he

Соединение С, метансульфоновой кислотой в подходящем растворителе с получением соединения 2Compound C with methanesulfonic acid in a suitable solvent to give compound 2

- 5 041082- 5 041082

FF

Соединение 2Compound 2

В некоторых вариантах осуществления подходящий растворитель представляет собой дихлорметан.In some embodiments, a suitable solvent is dichloromethane.

В некоторых вариантах осуществления соединение СIn some embodiments, connection C

Соединение С, получают путем сочетания бензойной кислоты-соединения АCompound C, obtained by coupling benzoic acid-compound A

Соединение А, с гидрохлоридом (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола при подходящих условиях сочетания.Compound A, with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride under suitable coupling conditions.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания включают превращение бензойной кислоты-соединения А в соответствующий ацилхлорид и сочетание соответствующего ацилхлорида бензойной кислоты соединения А с гидрохлоридом (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола.In some embodiments, suitable coupling conditions include converting the benzoic acid Compound A to the corresponding acyl chloride and coupling the corresponding benzoic acid acyl chloride Compound A with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride.

В некоторых вариантах осуществления превращение бензойной кислоты-соединения А в соответствующий ацилгалогенид включает обработку бензойной кислоты-соединения А тионилхлоридом (SOCl2), оксалилхлоридом ((COCl)2), трихлоридом фосфора (PCl3), оксихлоридом фосфора (POCl3) или пентахлоридом фосфора (PCl3).In some embodiments, converting benzoic acid Compound A to the corresponding acyl halide comprises treating benzoic acid Compound A with thionyl chloride (SOCl 2 ), oxalyl chloride ((COCl) 2 ), phosphorus trichloride (PCl 3 ), phosphorus oxychloride (POCl 3 ), or phosphorus pentachloride (PCl 3 ).

В некоторых вариантах осуществления сочетание соответствующего ацилхлорида бензойной кислоты-соединения А с гидрохлоридом (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола включает ненуклеофильное основание - третичный амин. В некоторых вариантах осуществления ненуклеофильный третичный амин представляет собой триэтиламин, трибутиламин, N,N-диизопропилэтиламин, 8-диазабициклоундец-7-ен, 1,2,2,6,6-пентаметилпиперидин, N-метилморфолин или пиридин.In some embodiments, the combination of the corresponding benzoic acid acyl chloride Compound A with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride comprises a non-nucleophilic tertiary amine base. In some embodiments, the non-nucleophilic tertiary amine is triethylamine, tributylamine, N,N-diisopropylethylamine, 8-diazabicycloundec-7-ene, 1,2,2,6,6-pentamethylpiperidine, N-methylmorpholine, or pyridine.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания включают использование дициклогексилкарбодиимида (DCC), диизопропилкарбодиимида (DIC), N-(3-диметиламинопропил)-N'этилкарбодиимида-HCl (EDC HCl), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфония (ВОР), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокси-трипирролидинофосфония (PyBOP), гексафторфосфата бромтрипирролидинофосфония (PyBrOP), гексафторфосфата 7-аза-бензотриазол-1илокситрипирролидинофосфония (РуАОР), гексафторфосфата этилциано(гидроксиимино)ацетато-О2)три-(1-пирролидинил)-фосфония (PyOxim), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензо[d]триазин-4(3Н)-она (DEPBT), тетрафторбората/гексафторфосфата 2-(1 H-бензотриазол-1 -ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (TBTU (BF4-)), гексафторфосфата 2-(6-хлор-1Н-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (HCTU), N-оксида гексафторфосфата N-[(5-хлор-1Н-бензотриазол-1-ил)-диметиламиноморфолино]-урония (HDMC), гексафторфосфата 2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N''-тетраметиламиния (HATU), гексафторфосфата 1-[1 -(циано-2-этокси-2-оксоэтилиденаминоокси)-диметиламиноморфолино] -урония (COMU), тетрафторбората 2-(1-оксипиридин-2-ил)-1,1,3,3-тетраметилизотиоурония (ТОТТ), гексафторфосфата тетраметилфторформамидиния (TFFH), N-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолина (EEDQ), ангидрида 2-пропанфосфоновой кислоты (T3P), солей 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4метилморфолиния (DMTMM), бис-трихлорметилкарбоната (ВТС) или 1,1'-карбонилдиимидазола (CDI). В некоторых вариантах осуществления подходящие условия сочетания также включают: одну или несколько добавок, выбранных из группы, состоящей из 1-гидроксибензотриазола (HOBt), 1гидроксибензотриазол-6-сульфонамидометила·HCl (HOBt-6-сульфонамидометила·HCl), гидрокси-3,4дигидро-4-оксо-1,2,3-бензотриазина (HOOBt), N-гидроксисукцинимида (HOSu), 1-гидрокси-7-аза-1Нбензотриазола (HOAt), этил-2-циано-2-(гидроксимино)ацетата и 4-(N,N-диметиламино)пиридина (DMAP).In some embodiments, suitable coupling conditions include the use of dicyclohexylcarbodiimide (DCC), diisopropylcarbodiimide (DIC), N-(3-dimethylaminopropyl)-N'ethylcarbodiimide-HCl (EDC HCl), benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate ( BOP), benzotriazol-1-yloxy-tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP), bromtripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBrOP), 7-aza-benzotriazol-1yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyAOP), ethylcyano(hydroxyimino)acetate-O2)tri-(1-pyrrolidinyl)-hexafluorophosphate phosphonium (PyOxim), 3-(diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzo[d]triazin-4(3H)-one (DEPBT), 2-(1 H-benzotriazol-1 -yl)-N tetrafluoroborate/hexafluorophosphate ,N,N',N'-tetramethylaminium (TBTU (BF4 - )), 2-(6-chloro-1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethylaminium hexafluorophosphate (HCTU), N-[(5-chloro-1H-benzotriazol-1-yl)-dimethylaminomorpholino]-uronium hexafluorophosphate N-oxide (HDMC), 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-yl)-N,N hexafluorophosphate, N',N''-tetramethylamine ionium (HATU), 1-[1 -(cyano-2-ethoxy-2-oxoethylideneaminooxy)-dimethylaminomorpholino]-uronium hexafluorophosphate (COMU), 2-(1-hydroxypyridin-2-yl)-1,1,3 tetrafluoroborate, 3-tetramethylisothiouronium (TOTT), tetramethylfluoroformamidinium hexafluorophosphate (TFFH), N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline (EEDQ), 2-propanephosphonic acid anhydride (T3P), 4-(4,6-dimethoxy-1) salts ,3,5-triazin-2-yl)-4methylmorpholinium (DMTMM), bis-trichloromethyl carbonate (BTC) or 1,1'-carbonyldiimidazole (CDI). In some embodiments, suitable coupling conditions also include: one or more additives selected from the group consisting of 1-hydroxybenzotriazole (HOBt), 1hydroxybenzotriazole-6-sulfonamidomethyl HCl (HOBt-6-sulfonamidomethyl HCl), hydroxy-3,4dihydro -4-oxo-1,2,3-benzotriazine (HOOBt), N-hydroxysuccinimide (HOSu), 1-hydroxy-7-aza-1Hbenzotriazole (HOAt), ethyl 2-cyano-2-(hydroxyimino)acetate and 4 -(N,N-dimethylamino)pyridine (DMAP).

- 6 041082- 6 041082

В еще одном аспекте в настоящем документе описан способ синтеза метансульфонатной соли (R,R)транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1ил)метанона (соединения 2), включающий стадии обработки (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения I) при помощи 0,92 экв. метансульфоновой кислоты в ацетонитриле, а затем выделения соединения 2 фильтрацией и сушкой под вакуумом. В некоторых вариантах осуществления стадия обработки соединения I метансульфоновой кислотой в ацетонитриле также включает перемешивание раствора при температуре окружающей среды с последующим кипячением раствора.In yet another aspect, the present document describes a process for the synthesis of the methanesulfonate salt of (R,R)trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro- 4-hydroxypyrrolidin-1yl)methanone (compound 2), including the steps of processing (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3 -fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I) with 0.92 eq. methanesulfonic acid in acetonitrile, followed by isolation of compound 2 by filtration and drying under vacuum. In some embodiments, the step of treating compound I with methanesulfonic acid in acetonitrile also includes stirring the solution at ambient temperature, followed by boiling the solution.

В другом аспекте в настоящем документе описан способ синтеза гидрохлорида (3R,4R)-4фторпирролидин-3-ола, включающийIn another aspect, this document describes a method for the synthesis of (3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride, comprising

a) подвергание рацемического (транс-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанона ферментативному биокатализу с получением ((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанона; иa) subjecting racemic (trans-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone to enzymatic biocatalysis to give ((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone ; And

b) расщепление амидной связи ((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанона с получением гидрохлорида (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола.b) cleavage of the amide bond of ((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone to give (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride.

В некоторых вариантах осуществления ферментативный биокатализ включает использование подходящей липазы. В некоторых вариантах осуществления подходящая липаза способна участвовать в катализируемой липазой переэтерификации вторичных спиртов. В некоторых вариантах осуществления подходящая липаза представляет собой липазу грибкового происхождения или бактериальную липазу. В некоторых вариантах осуществления липазу грибкового происхождения получают из Candida rugose (CRL), Candida antarctica A (CAL-A), Candida antarctica В (CAL-B), Thermomyces lanuginosus (TL IL) или Rhizomucor miehei (RL IM). В некоторых вариантах осуществления бактериальную липазу получают из Pseudomonas fluorescens (AK, PFL), Burkholderia cepacia (PS), Chromobacterium viscosum (CVL). В некоторых вариантах осуществления подходящая липаза представляет собой Novozyme 435, Novocor AD L и Lipozyme CALB L. В некоторых вариантах осуществления катализируемую липазой переэтерификацию проводят в присутствии донора ацила. В некоторых вариантах осуществления донор ацила представляет собой необратимый донор ацила. В некоторых вариантах осуществления донор ацила представляет собой сложный эфир енолов или ангидрид. В некоторых вариантах осуществления сложный эфир енолов представляет собой сложный виниловый эфир, сложный изопрениловый эфир или сложный этоксивиниловый эфир. В некоторых вариантах осуществления сложный эфир енолов представляет собой сложный виниловый эфир, который выбирают из группы, состоящей из винилацетата, винилпивалата, винил-4пентеноата, винилкротоната, винилметакрилата, винилбензоата, винилциннамата, винил-N-Bocглицината и винилфенил(тио)ацетата. В некоторых вариантах осуществления ферментативный биокатализ проводят в органическом растворителе. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, метанол, этанол, ацетон, метилацетат, этилацетат, бутанол, диэтиловый эфир, ТВМЕ, DIPE, толуол, циклогексан, гексан или гептан. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой ацетон, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, трет-амиловый спирт, DIPE или толуол.In some embodiments, the implementation of the enzymatic biocatalysis includes the use of a suitable lipase. In some embodiments, a suitable lipase is capable of participating in the lipase-catalyzed interesterification of secondary alcohols. In some embodiments, a suitable lipase is a fungal-derived lipase or a bacterial lipase. In some embodiments, the fungal-derived lipase is derived from Candida rugose (CRL), Candida antarctica A (CAL-A), Candida antarctica B (CAL-B), Thermomyces lanuginosus (TL IL), or Rhizomucor miehei (RL IM). In some embodiments, the bacterial lipase is derived from Pseudomonas fluorescens (AK, PFL), Burkholderia cepacia (PS), Chromobacterium viscosum (CVL). In some embodiments, a suitable lipase is Novozyme 435, Novocor AD L, and Lipozyme CALB L. In some embodiments, the lipase-catalyzed interesterification is carried out in the presence of an acyl donor. In some embodiments, the acyl donor is an irreversible acyl donor. In some embodiments, the acyl donor is an enol ester or an anhydride. In some embodiments, the enol ester is a vinyl ester, an isoprenyl ester, or an ethoxy vinyl ester. In some embodiments, the enol ester is a vinyl ester selected from the group consisting of vinyl acetate, vinyl pivalate, vinyl 4-pentenoate, vinyl crotonate, vinyl methacrylate, vinyl benzoate, vinyl cinnamate, vinyl N-Boc glycinate, and vinyl phenyl (thio) acetate. In some embodiments, the enzymatic biocatalysis is carried out in an organic solvent. In some embodiments, the organic solvent is dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylformamide, methanol, ethanol, acetone, methyl acetate, ethyl acetate, butanol, diethyl ether, TBME, DIPE, toluene, cyclohexane, hexane, or heptane. In some embodiments, the organic solvent is acetone, tetrahydrofuran, diethyl ether, t-amyl alcohol, DIPE, or toluene.

В некоторых вариантах осуществления стадия b) включает обработку ((3R,4R)-3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанона кислотой в подходящем растворителе. В некоторых вариантах осуществления кислота представляет собой соляную кислоту. В некоторых вариантах осуществления подходящий растворитель представляет собой органический растворитель. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой эфирный растворитель. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, тетрагидропиран, диметоксиэтан или диэтиловый эфир.In some embodiments, step b) comprises treating ((3R,4R)-3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone with an acid in a suitable solvent. In some embodiments, the acid is hydrochloric acid. In some embodiments, a suitable solvent is an organic solvent. In some embodiments, the organic solvent is an ether solvent. In some embodiments, the organic solvent is 1,4-dioxane, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, dimethoxyethane, or diethyl ether.

В любом из вышеуказанных аспектов представлены дополнительные варианты осуществления, в которых эффективное количество соединения, описанного в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемой соли (а) системно вводится млекопитающему; и/или (b) перорально вводится млекопитающему; и/или (с) внутривенно вводится млекопитающему; и/или (d) вводится ингаляцией; и/или (е) вводится назальным введением; и/или (f) вводится инъекцией млекопитающему; и/или (g) вводится местно млекопитающему; и/или (h) вводится введением в глаз; и/или (i) вводится ректально млекопитающему; и/или (j) вводится несистемно или локально млекопитающему.In any of the above aspects, further embodiments are provided wherein an effective amount of a compound described herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, (a) is systemically administered to a mammal; and/or (b) orally administered to a mammal; and/or (c) intravenously administered to a mammal; and/or (d) administered by inhalation; and/or (e) administered by nasal administration; and/or (f) is injected into a mammal; and/or (g) administered topically to a mammal; and/or (h) administered by administration to the eye; and/or (i) is administered rectally to a mammal; and/or (j) is administered non-systemically or locally to the mammal.

В любом из вышеуказанных аспектов представлены дополнительные варианты осуществления, включающие однократные введения эффективного количества соединения, включая дополнительные варианты осуществления, в которых соединение вводят раз в день млекопитающему или соединение вводят млекопитающему множество раз в течение одного дня. В некоторых вариантах осуществления соединение вводят в режиме непрерывного дозирования. В некоторых вариантах осуществления соединение вводят в режиме непрерывного ежедневного дозирования.In any of the above aspects, further embodiments are provided comprising single administrations of an effective amount of a compound, including further embodiments wherein the compound is administered once per day to a mammal, or the compound is administered to a mammal multiple times in one day. In some embodiments, the compound is administered in a continuous dosing regimen. In some embodiments, the compound is administered on a continuous daily dosing schedule.

В любом из вышеуказанных аспектов, включающих лечение заболевания или состояния, представлены дополнительные варианты осуществления, включающие введение по меньшей мере одного дополнительного средства помимо введения соединения формулы (I), описанного в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемой соли. В различных вариантах осуществления каждое средство вводят в любом порядке, включая одновременно.In any of the above aspects involving the treatment of a disease or condition, further embodiments are provided comprising administering at least one additional agent in addition to administering a compound of formula (I) described herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In various embodiments, each agent is administered in any order, including simultaneously.

- 7 041082- 7 041082

В любом из вариантов осуществления, раскрытых в настоящем документе, млекопитающее представляет собой человека.In any of the embodiments disclosed herein, the mammal is a human.

В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, вводят человеку.In some embodiments, the compounds provided herein are administered to a human.

В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, вводят перорально.In some embodiments, the compounds provided herein are administered orally.

Обеспечиваются готовые изделия, которые содержат упаковочный материал, соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль в упаковочном материале и этикетку, которая указывает, что соединение, или композицию, или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемое пролекарство или фармацевтически приемлемый сольват используют для ингибирования активности LOXL2 или для лечения, профилактики или улучшения одного или нескольких симптомов заболевания или состояния, которое будет извлекать пользу из ингибирования или снижения активности LOXL2.Finished articles are provided that contain a packaging material, a compound described herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the packaging material, and a label that indicates that the compound or composition, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a pharmaceutically active metabolite, a pharmaceutically acceptable prodrug, or the pharmaceutically acceptable solvate is used to inhibit LOXL2 activity or to treat, prevent, or ameliorate one or more symptoms of a disease or condition that would benefit from inhibiting or reducing LOXL2 activity.

Другие задачи, признаки и преимущества соединений, способов и композиций, описанных в настоящем документе, станут очевидными из следующего подробного описания. Следует понимать, однако, что подробное описание и конкретные примеры, хотя указывают конкретные варианты осуществления, даны только в качестве иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации сущности и объема настоящего раскрытия станут очевидными специалистам в данной области из этого подробного описания.Other objects, features, and advantages of the compounds, methods, and compositions described herein will become apparent from the following detailed description. It should be understood, however, that the detailed description and specific examples, while indicating specific embodiments, are given by way of illustration only, as various changes and modifications to the spirit and scope of the present disclosure will become apparent to those skilled in the art from this detailed description.

Краткое описание фигурBrief description of the figures

На фиг. 1 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) для формы 1 соединения 2.In FIG. 1 shows an X-ray powder diffraction (XRD) pattern for form 1 of compound 2.

На фиг. 2 показана типичная термограмма ДСК для формы 1 соединения 2.In FIG. 2 shows a typical DSC thermogram for form 1 of compound 2.

На фиг. 3 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 2 соединения 2.In FIG. 3 shows the X-ray powder diffraction pattern for form 2 of compound 2.

На фиг. 4 показана типичная термограмма ДСК для формы 2 соединения 2.In FIG. 4 shows a typical DSC thermogram for form 2 of compound 2.

На фиг. 5 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 3 соединения 2.In FIG. 5 shows the X-ray powder diffraction pattern for form 3 of compound 2.

На фиг. 6 показана типичная термограмма ДСК для формы 3 соединения 2.In FIG. 6 shows a typical DSC thermogram for form 3 of compound 2.

На фиг. 7 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 4 соединения 2.In FIG. 7 shows the X-ray powder diffraction pattern for form 4 of compound 2.

На фиг. 8 показана типичная термограмма ДСК для формы 4 соединения 2.In FIG. 8 shows a typical DSC thermogram for form 4 of compound 2.

На фиг. 9 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 1 соединения 1.In FIG. 9 shows the X-ray powder diffraction pattern for Form 1 of Compound 1.

На фиг. 10 показана типичная термограмма ДСК для формы 1 соединения 1.In FIG. 10 shows a typical DSC thermogram for form 1 of compound 1.

На фиг. 11 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 2 соединения 1.In FIG. 11 shows the X-ray powder diffraction pattern for form 2 of compound 1.

На фиг. 12 показана типичная термограмма ДСК для формы 2 соединения 1.In FIG. 12 shows a typical DSC thermogram for form 2 of compound 1.

Подробное раскрытие настоящего изобретенияDetailed disclosure of the present invention

Лизилоксидаза-подобный белок-2 (LOXL2) является членом семейства лизилоксидаз (LOX), который содержит зависимые от Cu2+ и лизинтирозилхинона (LTQ) аминоксидазы. Семейство содержит пять генов: fax (LOX), loxl1 (лизилоксидаза-подобный белок-1, LOXL1), loxl2 (LOXL2), loxl3 (лизилоксидазаподобный белок-3, LOXL3) и loxl4 (лизилоксидаза-подобный белок-4, LOXL4). Семейство LOX известно как катализирующее окислительное дезаминирование s-аминогруппы лизинов и гидроксилизинов в коллагене и эластине с активацией сшивания этих молекул. Сшивание коллагена и эластина важно для сохранения прочности при растяжении внеклеточного матрикса.Lysyl oxidase-like protein-2 (LOXL2) is a member of the lysyl oxidase (LOX) family, which contains Cu 2+ and lysine tyrosylquinone (LTQ) dependent amine oxidases. The family contains five genes: fax (LOX), loxl1 (lysyl oxidase-like protein-1, LOXL1), loxl2 (LOXL2), loxl3 (lysyl oxidase-like protein-3, LOXL3), and loxl4 (lysyl oxidase-like protein-4, LOXL4). The LOX family is known to catalyze the oxidative deamination of the s-amino group of lysines and hydroxylysines in collagen and elastin, with activation of crosslinking of these molecules. Cross-linking of collagen and elastin is important for maintaining the tensile strength of the extracellular matrix.

Развитие патологической стромы играет важную роль при заболевании. Патологическая строма состоит из активированных стромальных клеток, коллагеновой матрицы, факторов роста и ангиогенных структур. При патологических состояниях, таких как фиброгенез, фибробласты накапливаются и активируются, что приводит к созданию микросреды, которая способствует увеличению синтеза и осаждению белков внеклеточного матрикса, приводя к развитию фиброза.The development of an abnormal stroma plays an important role in the disease. The pathological stroma consists of activated stromal cells, a collagen matrix, growth factors, and angiogenic structures. Under pathological conditions such as fibrogenesis, fibroblasts accumulate and become activated, resulting in the creation of a microenvironment that promotes increased synthesis and precipitation of extracellular matrix proteins, leading to the development of fibrosis.

Связанная с заболеванием активация фибробластов при фиброзном заболевании и раке приводит к реструктурированию внеклеточного матрикса, что в конечном итоге приводит к избыточному осаждению белков внеклеточного матрикса, включая коллаген I и III, повышенному сшиванию свежеосадившегося коллагена и повышенной жесткости тканей. Кроме того, активированные фибробласты экспрессируют множество проангиогенных, проваскулогенных и пропролиферативных факторов роста и цитокинов, таких как трансформирующий фактор роста бета (TGF-β), фактор роста соединительной ткани (CTGF), стромальный фактор роста 1 (SDF-1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), при этом играя важные роли в сигналинге паракринных факторов при развитии заболевания. Прерывание развития этой патогенной стромы путем ингибирования активации и накопления фибробластов и/или их сигнальных путей представляет новую стратегию терапии при фиброзном заболевании.Disease-associated activation of fibroblasts in fibrotic disease and cancer leads to restructuring of the extracellular matrix, which ultimately leads to excessive precipitation of extracellular matrix proteins, including collagen I and III, increased cross-linking of freshly deposited collagen, and increased tissue stiffness. In addition, activated fibroblasts express a variety of pro-angiogenic, pro-vascular, and pro-proliferative growth factors and cytokines, such as transforming growth factor beta (TGF-β), connective tissue growth factor (CTGF), stromal growth factor 1 (SDF-1), and endothelial growth factor. vessels (VEGF), while playing an important role in the signaling of paracrine factors during the development of the disease. Interrupting the development of this pathogenic stroma by inhibiting the activation and accumulation of fibroblasts and/or their signaling pathways represents a new therapeutic strategy for fibrotic disease.

Несмотря на аналогичную каталитическую активность, каждый фермент лизиоксидаза, как сообщалось, имеет уникальную экспрессию и функциональные активности. LOXL2 играет центральную роль при развитии патогенной стромы при фиброзных заболеваниях путем активации и накопления фибробластов на патогенном сайте.Despite similar catalytic activity, each lysoxidase enzyme has been reported to have unique expression and functional activities. LOXL2 plays a central role in the development of pathogenic stroma in fibrotic diseases by activating and accumulating fibroblasts at the pathogenic site.

LOXL2, как было показано, имеет внутриклеточные функции, помимо его роли в реструктурировании внеклеточного матрикса. LOXL2 положительно регулирует трансдуктор эпителиальномезенхимального перехода (ЕМТ), Snail1, путем промотирования стабильности и функциональной активности Snail1. LOXL2 положительно способствует активации сигнального пути киназы фокальной ад- 8 041082 гезии (FAK) и участвует в организации комплексов фокальной адгезии. Сайленсинг гена LOXL2 приводит к повторному появлению полярности эпителиальных клеток и снижает миграционную и инвазивную способности клеточных линий молочной железы. Модуляция адгезии клеток и полярности клеток, как отмечалось, опосредована внутриклеточным LOXL2. LOXL2 транскрипционно подавляет Е-кадгерин, а также гены плотного контакта и полярности клеток путем зависящего от Snail1 и независящего от Snail1 механизмов. LOXL2 был ранее описан как связанный с хроматином и, как сообщалось, вовлечен в триметилдеаминирование гистона H3, функцию, которая зависит от каталитического домена LOXL2.LOXL2 has been shown to have intracellular functions in addition to its role in extracellular matrix restructuring. LOXL2 positively regulates the epithelial-mesenchymal transition (EMT) transducer, Snail1, by promoting the stability and functional activity of Snail1. LOXL2 positively promotes the activation of the focal adhesion kinase (FAK) signaling pathway and is involved in the organization of focal adhesion complexes. Silencing of the LOXL2 gene leads to the reappearance of epithelial cell polarity and reduces the migratory and invasive capacity of breast cell lines. Modulation of cell adhesion and cell polarity has been noted to be mediated by intracellular LOXL2. LOXL2 transcriptionally represses E-cadherin, as well as tight contact and cell polarity genes, through Snail1-dependent and Snail1-independent mechanisms. LOXL2 has previously been described as being associated with chromatin and has been reported to be involved in trimethyldeamination of histone H3, a function that is dependent on the catalytic domain of LOXL2.

LOXL2 вовлечен в фиброзные процессы. Фиброзные процессы включают избыточное осаждение компонентов внеклеточного матрикса, таких как коллаген, что изменяет физические, биохимические и биомеханические свойства матрикса, что приводит к нарушению работы органов и отказу органов. Фиброз тканей также связан с развитием рака путем непосредственной активации клеточных преобразований и метастазирования. Опухоли обычно более плотные, чем нормальная ткань, и жесткость опухоли влияет на метастазирование опухоли.LOXL2 is involved in fibrotic processes. Fibrotic processes involve excessive deposition of extracellular matrix components such as collagen, which alters the physical, biochemical, and biomechanical properties of the matrix, leading to organ failure and organ failure. Tissue fibrosis is also associated with the development of cancer through the direct activation of cellular transformations and metastasis. Tumors are usually denser than normal tissue, and tumor stiffness affects tumor metastasis.

Избыточная ферментативная активность LOXL2 была вовлечена в повышение плотности опухолей. Увеличение уровней LOXL2 также связано с фиброзными повреждениями печени пациентов, страдающих от болезни Вильсона, первичного биллиарного цирроза и NASH. Кроме того, введение специфичного к LOXL2 моноклонального антитела, АВ0023, было эффективным при облегчении симптомов заболевания в модели фиброза. АВ0023, как было показано, ингибирует продукцию факторов роста и сшитой коллагеновой матрицы и сигналинга TGF-бета.Excessive LOXL2 enzymatic activity has been implicated in increasing tumor density. Increased levels of LOXL2 are also associated with fibrotic liver lesions in patients suffering from Wilson's disease, primary biliary cirrhosis, and NASH. In addition, administration of a LOXL2-specific monoclonal antibody, AB0023, was effective in alleviating disease symptoms in a fibrosis model. AB0023 has been shown to inhibit the production of growth factors and cross-linked collagen matrix and TGF-beta signaling.

LOXL2 промотирует сшивание коллагена I типа и является основным регулятором фиброгенеза различных этиологии и в различных органах. Уровни циркуляции LOXL2 соотносятся с стадией фиброза. LOXL2 является мишенью основного пути при фиброзном заболевании. Mehal et al., Expressway to the core of fibrosis, Nat Med. 2011. 17: 552-553.LOXL2 promotes cross-linking of type I collagen and is a major regulator of fibrogenesis of various etiologies and in various organs. Circulating levels of LOXL2 correlate with the stage of fibrosis. LOXL2 is the target of a major pathway in fibrotic disease. Mehal et al., Expressway to the core of fibrosis, Nat Med. 2011. 17: 552-553.

В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе раскрыто применение соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата при лечении или профилактике фиброза у млекопитающего.In some embodiments, the present document discloses the use of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, in the treatment or prevention of fibrosis in a mammal.

Фиброз при использовании в настоящем документе относится к накоплению составляющих внеклеточного матрикса, которое возникает после травмы, воспаления, восстановления тканей, иммунологических реакций, клеточной гиперплазии и неоплазии.Fibrosis, as used herein, refers to the accumulation of extracellular matrix constituents that occurs following trauma, inflammation, tissue repair, immunological responses, cellular hyperplasia, and neoplasia.

В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ снижения фиброза в ткани, включающий контакт фиброзной клетки или ткани с соединением, раскрытым в настоящем документе, в количестве, достаточном для снижения или ингибирования фиброза. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброзное состояние.In some embodiments, disclosed herein is a method for reducing fibrosis in a tissue, comprising contacting a fibrous cell or tissue with a compound disclosed herein in an amount sufficient to reduce or inhibit fibrosis. In some embodiments, fibrosis includes a fibrotic state.

В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз легких, фиброз печени, фиброз почек, фиброз сердца, перитонеальный фиброз, фиброз глаза, миелофиброз или фиброз кожи. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз легких. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз печени. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз почек. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз сердца. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает перитонеальный фиброз. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз глаза. В некоторых вариантах осуществления фиброз включает фиброз кожи.In some embodiments, fibrosis includes pulmonary fibrosis, liver fibrosis, renal fibrosis, cardiac fibrosis, peritoneal fibrosis, ocular fibrosis, myelofibrosis, or skin fibrosis. In some embodiments, fibrosis includes pulmonary fibrosis. In some embodiments, fibrosis includes fibrosis of the liver. In some embodiments, the implementation of fibrosis includes fibrosis of the kidneys. In some embodiments, fibrosis includes fibrosis of the heart. In some embodiments, fibrosis includes peritoneal fibrosis. In some embodiments, fibrosis includes fibrosis of the eye. In some embodiments, fibrosis includes fibrosis of the skin.

Повышенная экспрессия LOXL2 связана с неблагоприятным прогнозом у пациентов с опухолями толстой кишки, пищевода, плоскоклеточной карциномой ротовой полости, плоскоклеточной карциномой гортани и плоскоклеточными карциномами головы и шеи. LOXL2, как предполагалось, участвует в развитии рака молочной железы, толстой кишки, желудка, головы и шеи, легких и меланомы.Increased expression of LOXL2 is associated with a poor prognosis in patients with tumors of the colon, esophagus, oral cavity squamous cell carcinoma, larynx squamous cell carcinoma, and head and neck squamous cell carcinomas. LOXL2 has been suggested to be involved in the development of breast, colon, stomach, head and neck, lung, and melanoma cancers.

В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе раскрыты способы лечения рака при помощи соединения, раскрытого в настоящем документе.In some embodiments, provided herein are methods for treating cancer with a compound disclosed herein.

Термин рак при использовании в настоящем документе относится к аномальному росту клеток, которые стремятся размножаться неконтролируемым образом, и в некоторых случаях к метастазированию (распространению). Типы рака включают, помимо прочего, солидные опухоли (такие как опухоли мочевого пузыря, кишечника, мозга, молочной железы, эндометрия, сердца, почки, легкого, печени, матки, лимфатической ткани (лимфома), яичника, поджелудочной железы или другого эндокринного органа (щитовидной железы), простаты, кожи (меланома или рак базальных клеток) или гематологические опухоли (такие как лейкемии и лимфомы) на любой стадии заболевания с метастазами или без них.The term cancer as used herein refers to the abnormal growth of cells that tend to multiply in an uncontrolled manner, and in some cases to metastasize (spread). Cancer types include, but are not limited to, solid tumors (such as those of the bladder, intestines, brain, breast, endometrium, heart, kidney, lung, liver, uterus, lymphatic tissue (lymphoma), ovary, pancreas, or other endocrine organ ( thyroid), prostate, skin (melanoma or basal cell carcinoma), or hematologic tumors (such as leukemias and lymphomas) at any stage of the disease with or without metastases.

В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе раскрыт способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного идиопатического артрита, остеоартроза, псориатического артрита или анкилозирующего спондилита у млекопитающего, включающий введение соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) млекопитающему, нуждающемуся в этом.In some embodiments, disclosed herein is a method for treating rheumatoid arthritis, juvenile idiopathic arthritis, osteoarthritis, psoriatic arthritis, or ankylosing spondylitis in a mammal, comprising administering a compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., compound 1 or compound 2) to a mammal in need thereof. .

(R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанон (соединение I)(R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I)

Соединение I, или (R,R)-mранс-(3-((4-(аминометил)-6-(mрифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон, или (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)-пиридин-2- 9 041082 ил)окси)фенил)(ЗК,4К)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон, или любое другое подобное название относится к соединению со следующей структурой:Compound I, or (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(m-fluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone , or (3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)-pyridin-2-9 041082 yl)oxy)phenyl)(ZK,4K)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone , or any other similar name refers to a compound with the following structure:

В некоторых вариантах осуществления соединение I по существу не содержит (8,8)-изомер (т.е. соединение I по существу не содержит (8,8)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанон, или (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(38,48)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон, или любое другое подобное название).In some embodiments, compound I is substantially free of the (8,8)-isomer (i.e., compound I is substantially free of (8,8)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-( trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone, or (3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy) phenyl)(38,48)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone, or any other similar name).

По существу не содержит в отношении энантиомера означает, что упоминаемый энантиомер не присутствует, или присутствует менее 5%, менее 4%, менее 3%, менее 2% или менее 1% упоминаемого энантиомера.Essentially free with respect to an enantiomer means that said enantiomer is not present, or less than 5%, less than 4%, less than 3%, less than 2%, or less than 1% of said enantiomer is present.

Пром. соединение-1, или (8,8)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанон, или (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(38,48)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон, или любое другое подобное название относится к соединению со следующей структурой:Prom. compound-1, or (8,8)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl) methanone, or (3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(38.48)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone, or any other similar name refers to a compound with the following structure:

В некоторых вариантах осуществления рацемический транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон используют вместо соединения I. Рацемическое соединение I (рац. соединение-1) изображено следующим образом:In some embodiments, racemic trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone is used in place of compound I. Racemic compound I (racial compound-1) is depicted as follows:

смесь- 1:1mixture - 1:1

Соединение I является сильным ингибитором LOXL2 на основе механизма. Соединение I представляет собой селективный, псевдо-необратимый, низкомолекулярный ингибитор LOXL2 с высоким сродством. В некоторых вариантах осуществления аминометилпиридиновый фрагмент соединения I взаимодействует с активным сайтом фермента с получением зависящего от времени, псевдо-необратимого ингибирующего комплекса. Исследования профилей предполагают, что два энантиомера соединения I (т.е. (R,R) и (S,S)) являются подобными друг другу и рацемическому соединению I в отношении фармакологического и фармакокинетического профиля. Соединение I было более сильным, чем (8,8)-изомер в in vitro анализах. В некоторых вариантах осуществления соединение I было менее чем в 2 раза более сильным, чем (8,8)-изомер в in vitro анализах.Compound I is a potent inhibitor of LOXL2 based mechanism. Compound I is a selective, pseudo-irreversible, low molecular weight, high affinity inhibitor of LOXL2. In some embodiments, the aminomethylpyridine moiety of Compound I interacts with the active site of the enzyme to generate a time-dependent, pseudo-irreversible inhibitory complex. Profile studies suggest that the two enantiomers of compound I (ie (R,R) and (S,S)) are similar to each other and to racemic compound I in terms of pharmacological and pharmacokinetic profile. Compound I was more potent than the (8,8) isomer in in vitro assays. In some embodiments, compound I was less than 2 times more potent than the (8,8) isomer in in vitro assays.

В некоторых вариантах осуществления соединение I специфически ингибирует и/или связывается с LOXL2. В некоторых вариантах осуществления соединение I специфически ингибирует и/или связывается с LOXL2 и по существу не ингибирует и/или не связывается с любой другой лизилоксидазой. Другие лизилоксидазы включают LOX, LOXL1, LOXL3 и LOXL4. В некоторых вариантах осуществления соединение I является специфическим к LOXL2. В некоторых вариантах осуществления соединение I ингибирует активность LOXL2 и по существу не ингибирует активность LOX. В некоторых вариантах осуществления соединение I ингибирует активность LOXL2 и по существу не ингибирует активность другого лизилоксидаза-подобного белка.In some embodiments, Compound I specifically inhibits and/or binds to LOXL2. In some embodiments, Compound I specifically inhibits and/or binds to LOXL2 and does not substantially inhibit and/or bind to any other lysyl oxidase. Other lysyl oxidases include LOX, LOXL1, LOXL3 and LOXL4. In some embodiments, Compound I is specific for LOXL2. In some embodiments, Compound I inhibits LOXL2 activity and does not substantially inhibit LOX activity. In some embodiments, compound I inhibits the activity of LOXL2 and does not substantially inhibit the activity of another lysyl oxidase-like protein.

- 10041082- 10041082

При использовании в настоящем документе селективный ингибитор LOXL2 относится к низкомолекулярному ингибитору LOXL2, который по существу не ингибирует и/или не связывается с любой другой лизилоксидазой. Другие лизилоксидазы включают LOX, LOXL1, LOXL3 и LOXL4. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор LOXL2 по существу не ингибирует и/или не связывается с LOX или LOXL3. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор LOXL2 является по меньшей мере в 2 раза, по меньшей мере в 3 раза, по меньшей мере в 4 раза, по меньшей мере в 5 раз, по меньшей мере в 10 раз, по меньшей мере в 20 раз, по меньшей мере в 30 раз, по меньшей мере в 40 раз, по меньшей мере в 50 раз, по меньшей мере в 60 раз, по меньшей мере в 70 раз, по меньшей мере в 80 раз, по меньшей мере в 90 раз, по меньшей мере в 100 раз, по меньшей мере в 120 раз, по меньшей мере в 140 раз, по меньшей мере в 160 раз, по меньшей мере в 180 раз, по меньшей мере в 200 раз, по меньшей мере в 250 раз, по меньшей мере в 300 раз, по меньшей мере в 350 раз, по меньшей мере в 400 раз, по меньшей мере в 450 раз, по меньшей мере в 500 раз, по меньшей мере в 550 раз, по меньшей мере в 600 раз, по меньшей мере в 650 раз, по меньшей мере в 700 раз, по меньшей мере в 800 раз, по меньшей мере в 900 раз или по меньшей мере в 1000 раз более селективным к LOXL2, чем к LOX. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор LOXL2 является по меньшей мере в 400 раз более селективным к LOXL2, чем к LOX. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор LOXL2 является по меньшей мере в 2 раза, по меньшей мере в 3 раза, по меньшей мере в 4 раза, по меньшей мере в 5 раз, по меньшей мере в 10 раз, по меньшей мере в 20 раз, по меньшей мере в 30 раз, по меньшей мере в 40 раз, по меньшей мере в 50 раз, по меньшей мере в 60 раз, по меньшей мере в 70 раз, по меньшей мере в 80 раз, по меньшей мере в 90 раз, по меньшей мере в 100 раз, по меньшей мере в 120 раз, по меньшей мере в 140 раз, по меньшей мере в 160 раз, по меньшей мере в 180 раз, по меньшей мере в 200 раз, по меньшей мере в 250 раз, по меньшей мере в 300 раз, по меньшей мере в 350 раз, по меньшей мере в 400 раз, по меньшей мере в 450 раз, по меньшей мере в 500 раз, по меньшей мере в 550 раз, по меньшей мере в 600 раз, по меньшей мере в 650 раз, по меньшей мере в 700 раз, по меньшей мере в 800 раз, по меньшей мере в 900 раз или по меньшей мере в 1000 раз более селективным к LOXL2, чем к LOXL3. В некоторых вариантах осуществления селективный ингибитор LOXL2 является по меньшей мере в 5 раз более селективным к LOXL2, чем к LOXL3.As used herein, a selective LOXL2 inhibitor refers to a small molecule inhibitor of LOXL2 that does not substantially inhibit and/or bind to any other lysyl oxidase. Other lysyl oxidases include LOX, LOXL1, LOXL3 and LOXL4. In some embodiments, the selective LOXL2 inhibitor does not substantially inhibit and/or bind to LOX or LOXL3. In some embodiments, the selective LOXL2 inhibitor is at least 2-fold, at least 3-fold, at least 4-fold, at least 5-fold, at least 10-fold, at least 20-fold, at least 30 times, at least 40 times, at least 50 times, at least 60 times, at least 70 times, at least 80 times, at least 90 times, at least 100 times, at least 120 times, at least 140 times, at least 160 times, at least 180 times, at least 200 times, at least 250 times, at least at least 300 times, at least 350 times, at least 400 times, at least 450 times, at least 500 times, at least 550 times, at least 600 times, at least 650 times, at least 700 times, at least 800 times, at least 900 times, or at least 1000 times more selective for LOXL2 than for LOX. In some embodiments, a selective LOXL2 inhibitor is at least 400 times more selective for LOXL2 than for LOX. In some embodiments, the selective LOXL2 inhibitor is at least 2-fold, at least 3-fold, at least 4-fold, at least 5-fold, at least 10-fold, at least 20-fold, at least 30 times, at least 40 times, at least 50 times, at least 60 times, at least 70 times, at least 80 times, at least 90 times, at least 100 times, at least 120 times, at least 140 times, at least 160 times, at least 180 times, at least 200 times, at least 250 times, at least at least 300 times, at least 350 times, at least 400 times, at least 450 times, at least 500 times, at least 550 times, at least 600 times, at least 650 times, at least 700 times, at least 800 times, at least 900 times, or at least 1000 times more selective for LOXL2 than for LOXL3. In some embodiments, a selective LOXL2 inhibitor is at least 5 times more selective for LOXL2 than for LOXL3.

В любом из вариантов осуществления, раскрытых в настоящем документе (включая способы, применения, составы, комбинированную терапию и пр.), соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват заменяют:In any of the embodiments disclosed herein (including methods, uses, formulations, combination therapy, etc.), Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is substituted for:

а) соединением I или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом более низкой хиральной чистоты;a) compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof of lower chiral purity;

b) (S,S)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метаноном или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом любой оптической чистоты; или с) рацемическим транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метаноном или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом.b) (S,S)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone or its pharmaceutically acceptable salt or solvate of any optical purity; or c) racemic trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or solvate.

Термин фармацевтически приемлемая соль в отношении соединения I относится к соли соединения I, которая не вызывает значительного раздражения у млекопитающего, которому ее вводят, и по существу значительно не отменяет биологическую активность и свойства соединения. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use. International Union of Pure and Applied Chemistry, Wiley-VCH 2002. S.M. Berge, L.D. Bighley, D.C. Monkhouse, J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zurich:WileyVCH/VHCA, 2002. Фармацевтические соли обычно являются более растворимыми и быстрее растворяются в желудочном и кишечном соках, чем неионные частицы, и поэтому являются пригодными в твердых лекарственных формах. Кроме того, поскольку их растворимость часто зависит от pH, возможно селективное растворение в одной или другой части желудочно-кишечного тракта, и этой способностью можно управлять как одним аспектом отсроченного и замедленного высвобождения. Также, поскольку солеобразующая молекула может находиться в равновесии с нейтральной формой, можно регулировать прохождение через биологические мембраны.The term pharmaceutically acceptable salt with respect to Compound I refers to a salt of Compound I that does not cause significant irritation to the mammal to which it is administered and does not substantially alter the biological activity and properties of the compound. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use. International Union of Pure and Applied Chemistry, Wiley-VCH 2002. S.M. Berge, L.D. Bighley, D.C. Monkhouse, J. Pharm. sci. 1977, 66, 1-19. P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zurich: WileyVCH/VHCA, 2002. Pharmaceutical salts are generally more soluble and dissolve faster in gastric and intestinal juices than non-ionic particles and therefore are suitable in solid dosage forms. In addition, since their solubility is often dependent on pH, selective dissolution in one or another part of the gastrointestinal tract is possible, and this ability can be controlled as one aspect of delayed and sustained release. Also, since the salt-forming molecule can be in equilibrium with the neutral form, passage through biological membranes can be controlled.

Следует понимать, что ссылка на фармацевтически приемлемую соль включает формы с добавленным растворителем (сольваты). Сольваты содержат или стехиометрические, или нестехиометрические количества растворителя и образуются в процессе образования или выделения продукта с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол, метил-трет-бутиловый эфир, изопропанол, ацетонитрил, гептан и подобные. В одном аспекте сольваты образуются при помощи, помимо прочего, растворителя(ей) 3 класса. Категории растворителей определены, например, в документе Международного совета по гармонизации технических требований к регистрации лекарственных препаратов для медицинского применения (ICH), Примеси: Руководство по остаточным растворителям, Q3C(R3) (ноябрь 2005 г.). Гидраты образуются, когда растворителем является вода, или алкоголяты образуются, когда растворителем является спирт. В одном варианте осуществления сольваты соединения I или его фармацевтически приемлемые соли удобно получаются или образуются в процессах получения соединения I или его фармацевтически приемлемых солей. Кроме того, соединение I или его фармацевтически прием- 11 041082 лемые соли существуют в несольватированном виде. В некоторых вариантах осуществления соединениеIt should be understood that reference to a pharmaceutically acceptable salt includes solvent-added forms (solvates). Solvates contain either stoichiometric or non-stoichiometric amounts of solvent and are formed during product formation or isolation with pharmaceutically acceptable solvents such as water, ethanol, methyl t-butyl ether, isopropanol, acetonitrile, heptane, and the like. In one aspect, solvates are formed using, among other things, class 3 solvent(s). Categories of solvents are defined, for example, in the International Council for the Harmonization of Technical Requirements for Registration of Medicinal Products for Human Use (ICH), Impurities: Guidelines for Residual Solvents, Q3C(R3) (November 2005). Hydrates are formed when the solvent is water, or alcoholates are formed when the solvent is alcohol. In one embodiment, compound I solvates or pharmaceutically acceptable salts thereof are conveniently prepared or formed in processes for preparing compound I or pharmaceutically acceptable salts thereof. In addition, Compound I or its pharmaceutically acceptable salts exist in a non-solvated form. In some embodiments, the connection

I или его фармацевтически приемлемая соль является гидратированной.I or its pharmaceutically acceptable salt is hydrated.

Широкое разнообразие фармацевтически приемлемых солей образуется из соединения I и включает со ли, образованные, когда соединение I (т.е. форму свободного основания) обрабатывают неорганической кислотой; неорганические кислоты включают, помимо прочего, соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, азотную кислоту и метафосфорную кислоту;A wide variety of pharmaceutically acceptable salts are formed from compound I and include those formed when compound I (i.e. the free base form) is treated with an inorganic acid; inorganic acids include, but are not limited to, hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, and metaphosphoric acid;

соли, образованные, когда соединение I (т.е. форму свободного основания) обрабатывают органической кислотой.salts formed when compound I (ie the free base form) is treated with an organic acid.

Органические кислоты включают, помимо прочего, 1-гидрокси-2-нафтойную кислоту; 2,2дихлоруксусную кислоту; 2-гидроксиэтансульфоновую кислоту; 2-оксоглутаровую кислоту; 4ацетамидобензойную кислоту; 4-аминосалициловую кислоту; уксусную кислоту; адипиновую кислоту; аскорбиновую кислоту (L); аспарагиновую кислоту (L); бензолсульфоновую кислоту; бензойную кислоту; камфарную кислоту (+); камфор-10-сульфоновую кислоту (+); каприновую кислоту (декановую кислоту); капроевую кислоту (гексановую кислоту); каприловую кислоту (октановую кислоту); карбоновую кислоту; коричную кислоту; лимонную кислоту; цикламовую кислоту; додецилсерную кислоту; этан-1,2-дисульфоновую кислоту; этансульфоновую кислоту; муравьиную кислоту; фумаровую кислоту; галактаровую кислоту; гентизиновую кислоту; глюкогептоновую кислоту (D); глюконовую кислоту (D); глюкуроновую кислоту (D); глутаминовую кислоту; глутаровую кислоту; глицерофосфорную кислоту; гликолевую кислоту; гиппуровую кислоту; изомасляную кислоту; молочную кислоту (DL); лактобионовую кислоту; лауриновую кислоту; малеиновую кислоту; яблочную кислоту (-L); малоновую кислоту; миндальную кислоту (DL); метансульфоновую кислоту; монометилфумарат, нафталин-1,5дисульфоновую кислоту; нафталин-2-сульфоновую кислоту; никотиновую кислоту; масляную кислоту; щавелевую кислоту; пальмитиновую кислоту; памовую кислоту; фосфорную кислоту; пропионовую кислоту; пироглутаминовую кислоту (-L); салициловую кислоту; себациновую кислоту; стеариновую кислоту; янтарную кислоту; серную кислоту; виннокаменную кислоту (+L); тиоциановую кислоту; толуолсульфоновую кислоту (пара) и ундеценовую кислоту.Organic acids include, among others, 1-hydroxy-2-naphthoic acid; 2,2 dichloroacetic acid; 2-hydroxyethanesulfonic acid; 2-oxoglutaric acid; 4acetamidobenzoic acid; 4-aminosalicylic acid; acetic acid; adipic acid; ascorbic acid (L); aspartic acid (L); benzenesulfonic acid; benzoic acid; camphoric acid (+); camphor-10-sulfonic acid (+); capric acid (decanoic acid); caproic acid (hexanoic acid); caprylic acid (octanoic acid); carboxylic acid; cinnamic acid; citric acid; cyclamic acid; dodecylsulfuric acid; ethane-1,2-disulfonic acid; ethanesulfonic acid; formic acid; fumaric acid; galactic acid; gentisic acid; glucoheptonic acid (D); gluconic acid (D); glucuronic acid (D); glutamic acid; glutaric acid; glycerophosphoric acid; glycolic acid; hippuric acid; isobutyric acid; lactic acid (DL); lactobionic acid; lauric acid; maleic acid; malic acid (-L); malonic acid; mandelic acid (DL); methanesulfonic acid; monomethyl fumarate, naphthalene-1,5disulfonic acid; naphthalene-2-sulfonic acid; nicotinic acid; butyric acid; oxalic acid; palmitic acid; pamoic acid; phosphoric acid; propionic acid; pyroglutamic acid (-L); salicylic acid; sebacic acid; stearic acid; succinic acid; sulfuric acid; tartaric acid (+L); thiocyanic acid; toluenesulfonic acid (para) and undecenoic acid.

Фармацевтически приемлемые соли соединения I включают гидрохлоридную соль, сульфатную соль, мезилатную соль, малеатную соль, фосфатную соль, L-тартратную соль, фумаратную соль, сукцинатную соль или ацетатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлоридную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой сульфатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой мезилатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой малеатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой фосфатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой L-тартратную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой фумаратную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой сукцинатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой ацетатную соль.Pharmaceutically acceptable salts of Compound I include the hydrochloride salt, sulfate salt, mesylate salt, maleate salt, phosphate salt, L-tartrate salt, fumarate salt, succinate salt or acetate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the hydrochloride salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the sulfate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the mesylate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the maleate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a phosphate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is the L-tartrate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a fumarate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is a succinate salt. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is an acetate salt.

В некоторых вариантах осуществления соединение I обрабатывают серной кислотой в растворителе с образованием соответствующей сульфатной соли. В некоторых вариантах осуществления соединение I обрабатывают фосфорной кислотой в растворителе с образованием соответствующей фосфатной соли. В некоторых вариантах осуществления соединение I обрабатывают L-виннокаменной кислотой в растворителе с образованием соответствующей L-тартратной соли. В некоторых вариантах осуществления соединение I обрабатывают лимонной кислотой в растворителе с образованием соответствующей цитратной соли. В некоторых вариантах осуществления растворитель представляет собой ацетонитрил или этанол.In some embodiments, Compound I is treated with sulfuric acid in a solvent to form the corresponding sulfate salt. In some embodiments, Compound I is treated with phosphoric acid in a solvent to form the corresponding phosphate salt. In some embodiments, compound I is treated with L-tartaric acid in a solvent to form the corresponding L-tartrate salt. In some embodiments, Compound I is treated with citric acid in a solvent to form the corresponding citrate salt. In some embodiments, the solvent is acetonitrile or ethanol.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль является аморфной. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль является кристаллической.In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is amorphous. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable salt is crystalline.

В некоторых вариантах осуществления соединение I, описанное в настоящем документе, получают в виде хлоридной соли, сульфатной соли, бромидной соли, мезилатной соли, малеатной соли, цитратной соли или фосфатной соли. В некоторых вариантах осуществления соединение I, описанное в настоящем документе, получают в виде гидрохлоридной соли. В некоторых вариантах осуществления соединение I, описанное в настоящем документе, получают в виде мезилатной соли.In some embodiments, Compound I described herein is obtained as the chloride salt, sulfate salt, bromide salt, mesylate salt, maleate salt, citrate salt, or phosphate salt. In some embodiments, Compound I described herein is obtained as the hydrochloride salt. In some embodiments, Compound I described herein is obtained as the mesylate salt.

При использовании в настоящем документе MsO является сокращением для метансульфонатного аниона, CH3S(O)2O-.As used herein, MsO is shorthand for the methanesulfonate anion, CH 3 S(O) 2 O - .

(R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанон, гидрохлоридная соль (соединение 1)(R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone, hydrochloride salt ( connection 1)

Соединение 1, или гидрохлоридная соль (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, или гидрохлоридная соль (3-((4(аминометил)-6-(трифторметил)-пиридин-2-ил)окси)фенил)(3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1ил)метанона, или любое другое подобное название относится к соединению со следующей структурой:Compound 1, or (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl) hydrochloride salt ) methanone, or hydrochloride salt of (3-((4(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)-pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1yl)methanone, or any other similar name refers to a compound with the following structure:

- 12 041082- 12 041082

(S ,S)-энантиомер соединения 1 (пром. соединение 1) имеет следующую структуру:The (S,S)-enantiomer of compound 1 (prom. compound 1) has the following structure:

Рацемическое соединение 1 (рац. соединение 1) изображено следующим образом:Racemic compound 1 (racial compound 1) is depicted as follows:

Аморфное соединение 1Amorphous compound 1

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является аморфным. В некоторых вариантах осуществления аморфная фаза соединения 1 имеет график РПД, показывающий отсутствие кристалличности.In some embodiments, Compound 1 is amorphous. In some embodiments, the implementation of the amorphous phase of compound 1 has an RPD plot showing the absence of crystallinity.

Аморфное соединение 1 растворяется при 40°С/75% ОВ.Amorphous compound 1 dissolves at 40°C/75% RH.

Форма 1 соединения 1Form 1 compound 1

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 представляет собой кристаллическое вещество формы 1. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 представляет собой кристаллическое вещество формы 1 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 1 is crystalline. In some embodiments, Compound 1 is a Form 1 crystalline substance. In some embodiments, Compound 1 is a Form 1 crystalline substance and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 5,5° 2-тета, 7,5° 2-тета, 18,5° 2-тета, 19,4° 2-тета, 21,8° 2-тета, 23,5° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 5.5° 2-theta, 7.5° 2-theta, 18.5° 2-theta, 19.4° 2-theta, 21.8° 2 -theta, 23.5° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 9;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 9;

(c) термограмма ДСК с эндотермой при приблизительно 153°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 10.(c) DSC thermogram with endotherm at approximately 153°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 10.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет по меньшей мере свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет по меньшей мере три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет свойства (а), (b), (с) и (d).In some embodiments, Compound 1 is Form 1 crystalline and has at least properties selected from the group consisting of (a), (b), (c) and (d). In some embodiments, Compound 1 is a Form 1 crystalline material and has at least three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), and (d). In some embodiments, Compound 1 is Form 1 crystalline and has properties (a), (b), (c), and (d).

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 5,5° 2-тета, 7,5° 2-тета, 18,5° 2-тета, 19,4° 2-тета, 21,8° 2-тета, 23,5° 2-тета.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 5.5° 2-theta, 7.5° 2-theta, 18.5° 2-theta, 19.4° 2- theta, 21.8° 2-theta, 23.5° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 9.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 9.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермой при приблизительно 153°С.In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram with an endotherm at approximately 153°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 10.In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 10.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 1 и получается из раствора тетрагидрофурана, этилацетата, ацетонитрила, диметоксиэтана или тетрагидрофурана/воды (95:5).In some embodiments, Compound 1 is Form 1 crystalline and is prepared from a solution of tetrahydrofuran, ethyl acetate, acetonitrile, dimethoxyethane, or tetrahydrofuran/water (95:5).

Форма 1 представляет собой гигроскопическое твердое вещество, которое превращается в форму 2 при хранении при 40°С/75% ОВ в течение одной недели.Form 1 is a hygroscopic solid that converts to Form 2 when stored at 40° C./75% RH for one week.

- 13 041082- 13 041082

Форма 2 соединения 1Form 2 compound 1

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 представляет собой кристаллическое вещество формы 2. В некоторых вариантах осуществления соединение 1 представляет собой кристаллическое вещество формы 2 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 1 is crystalline. In some embodiments, Compound 1 is a Form 2 crystalline. In some embodiments, Compound 1 is a Form 2 crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 6,6° 2-тета, 13,2° 2-тета, 19,7° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,5° 2-тета, 23,7° 2-тета, 24,5° 2-тета, 26,4° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 6.6° 2-theta, 13.2° 2-theta, 19.7° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.5° 2 -theta, 23.7° 2-theta, 24.5° 2-theta, 26.4° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 11;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. eleven;

(c) термограмма ДСК с эндотермами при приблизительно 43°С и приблизительно 119°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 12.(c) DSC thermogram with endotherms at approximately 43°C and approximately 119°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 12.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет свойства (а), (b), (с) и (d).In some embodiments, Compound 1 is a Form 2 crystalline material and has at least properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), and (d). In some embodiments, Compound 1 is a Form 2 crystalline material and has at least three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), and (d). In some embodiments, Compound 1 is Form 2 crystalline and has properties (a), (b), (c) and (d).

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 6,6° 2-тета, 13,2° 2-тета, 19,7° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,5° 2-тета, 23,7° 2-тета, 24,5° 2-тета, 26,4° 2-тета.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 6.6° 2-theta, 13.2° 2-theta, 19.7° 2-theta, 22.3° 2- theta, 22.5° 2-theta, 23.7° 2-theta, 24.5° 2-theta, 26.4° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 11.In some embodiments, compound 1 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. eleven.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермами при приблизительно 43°С и приблизительно 119°С.In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram with endotherms at about 43°C and about 119°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 12.In some embodiments, Compound 1 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 12.

Форма 2 является термически стабильной, но превращается с течением времени в воскообразное твердое вещество, не подходящее для обработки.Form 2 is thermally stable but turns over time to a waxy solid that is not suitable for processing.

Синтез соединения 1Synthesis of compound 1

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 получают при помощи пути синтеза, в кото ром используют хиральное разделение, следуя схеме ниже.In some embodiments, Compound 1 is prepared using a synthetic route that uses a chiral resolution following the scheme below.

Схема 1. Получение путем хирального разделения.Scheme 1. Obtaining by chiral separation.

Энантиомер. который Энантиомер, который элюируется первым элюируется вторымenantiomer. which enantiomer that elutes first elutes second

Удаление защитных групп ♦IDeprotection ♦I

F3C¥^ ,^NH2 нанаF 3 C ¥ ^ ,^ NH2 nana

О.Ο-,O.Ο-,

1· Ίϊ I __Ύ °'' 'N l /-ОН °1 Ίϊ I __Ύ °''' N l /-OH °

F Приь-l FF Pri-l F

Как показано на схеме выше, в некоторых вариантах осуществления 3-(4-((третбутоксикарбониламино)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-илокси)бензойную кислоту (соединение А) обрабатывают при соответствующих условиях сочетания рацемическим гидрохлоридом транс-4-фтор-3гидроксипирролидина с получением рацемического транс-трет-бутил-((2-(3-(3-фтор-4-гидроксипирролидин1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамата (соединения В).As shown in the scheme above, in some embodiments, 3-(4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yloxy)benzoic acid (compound A) is treated under appropriate coupling conditions with racemic trans-4- hydrochloride fluoro-3hydroxypyrrolidine to give racemic trans-tert-butyl-((2-(3-(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (Compound B ).

В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование EDC, DCC, ВОР, HATU или подобного. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование основания. В некоторых вариантах осуществления основание представляет собой органическое основание. В некоторых вариантах осуществления основание представляет собой затрудненное основание, такое как триметиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIEA или DIPEA), N-метилморфолин, пиридин или подобное. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование растворителя. Подходящие растворителиIn some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of EDC, DCC, BOP, HATU, or the like. In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of a base. In some embodiments, the base is an organic base. In some embodiments, the base is a hindered base such as trimethylamine (TEA), diisopropylethylamine (DIEA or DIPEA), N-methylmorpholine, pyridine, or the like. In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of a solvent. Suitable solvents

- 14 041082 включают дихлорметан, дихлорэтан, тетрагидрофуран, диметоксиэтан или подобное. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают HATU и DIEA в DCM/DMF при комнатной температуре. В некоторых вариантах осуществления рацемический транс-трет-бутил-((2-(3(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (соединение В) разделяют на отдельные энантиомеры при помощи соответствующих методов хиральной ВЭЖХ с получением mрет-бутил-(2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гиgроксипuрролидин-1-кαрбонил)фенокси)-6(трифторметил)пиридин-4-ил)метилкарбамата (соединения С). Треm-бутил-(2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метилкарбамат (соединение С) обрабатывают подходящей кислотой в подходящем растворителе с получением гидрохлоридной соли (R,R)транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1ил)метанона (соединения 1). В некоторых вариантах осуществления подходящая кислота представляет собой соляную кислоту (HCl), метансульфоновую кислоту, трифторуксусную кислоту, бензолсульфоновую кислоту или толуолсульфоновую кислоту. В некоторых вариантах осуществления подходящая кислота представляет собой соляную кислоту (HCl). В некоторых вариантах осуществления подходящий растворитель представляет собой диэтиловый эфир (Et2O).- 14 041082 include dichloromethane, dichloroethane, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or the like. In some embodiments, appropriate coupling conditions include HATU and DIEA in DCM/DMF at room temperature. In some embodiments, racemic trans-tert-butyl-((2-(3(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (Compound B ) separated into individual enantiomers using appropriate chiral HPLC methods to give tert-butyl-(2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6(trifluoromethyl)pyridine -4-yl)methylcarbamate (compound C). Trem-butyl-(2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methylcarbamate (compound C) is treated with an appropriate acid in suitable solvent to give (R,R)trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1yl) hydrochloride salt methanone (compound 1). In some embodiments, a suitable acid is hydrochloric acid (HCl), methanesulfonic acid, trifluoroacetic acid, benzenesulfonic acid, or toluenesulfonic acid. In some embodiments, a suitable acid is hydrochloric acid (HCl). In some embodiments, a suitable solvent is diethyl ether (Et2O).

В некоторых вариантах осуществления соединение 1 получают при помощи пути синтеза, который следует схеме ниже.In some embodiments, Compound 1 is prepared using a synthetic route that follows the scheme below.

Схема 2. Получение соединения 1 без хирального разделения.Scheme 2. Obtaining compound 1 without chiral separation.

Как показано на схеме выше, в некоторых вариантах осуществления 2-хлор-6(трифторметил)изоникотинонитрил (соединение А-1) подвергают соответствующим условиям реакции с получением метил-3-((4-циано-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоата (соединения А-2). В неко торых вариантах осуществления соответствующие условия реакции включают условия реакции нуклеофильного замещения на ароматическом ядре (SNAr). Нуклеофильное замещение на ароматическом ядре представляет собой реакцию замещения, в которой нуклеофил замещает соответствующую уходящую группу, такую как галогенид, на ароматическом кольце. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия реакции включают метил-3-гидроксибензоат с K2CO3 в THF/DMF.As shown in the scheme above, in some embodiments, 2-chloro-6(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (Compound A-1) is subjected to appropriate reaction conditions to give methyl-3-((4-cyano-6-(trifluoromethyl)pyridine-2- yl)oxy)benzoate (compound A-2). In some embodiments, appropriate reaction conditions include aromatic nucleophilic substitution (SNAr) reaction conditions. Nucleophilic substitution on an aromatic ring is a substitution reaction in which a nucleophile replaces an appropriate leaving group, such as a halide, on an aromatic ring. In some embodiments, appropriate reaction conditions include methyl 3-hydroxybenzoate with K 2 CO 3 in THF/DMF.

Способы образования ароматических эфиров включают описанные в настоящем документе или описанные в уровне техники, включая, помимо прочего, Ulman Ether synthesis, Chan-Lam coupling и Buchwald-Hartwig synthesis (D. Ma, Q. Cai, Org. Lett., 2003, 5, 3799-3802; C.G. Bates, et al., Org. Lett., 2002,4, 2803-2806; С. Н. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; С H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; D. M. T. Chan, et al., Tetrahedron Lett., 1998, 39, 2933-2936; Z. Liu, R. С Larock, J. Org. Chem., 2006, 71, 3198-3209; Y.-J. Chen, H.-H. Chen, Org. Lett., 2006, 8, 5609-5612; F. Li, Q. et al., Org. Lett., 2003, 5, 2169-2171; D. A. Evans, et al., Tetrahedron Letters, 1998, 39, 2937-2940; C.-E. Yeom, et al., Synlett, 2007, 146-150).Methods for the formation of aromatic esters include those described herein or described in the prior art, including, but not limited to, Ulman Ether synthesis, Chan-Lam coupling, and Buchwald-Hartwig synthesis (D. Ma, Q. Cai, Org. Lett., 2003, 5 , 3799-3802; C. G. Bates, et al., Org. Lett., 2002.4, 2803-2806; C. H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321- 4326; C H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; D. M. T. Chan, et al., Tetrahedron Lett., 1998, 39, 2933-2936; Z. Liu , R. C Larock, J. Org. Chem., 2006, 71, 3198-3209; Y.-J. Chen, H.-H. Chen, Org. Lett., 2006, 8, 5609-5612; F. Li, Q. et al., Org. Lett., 2003, 5, 2169-2171; D. A. Evans, et al., Tetrahedron Letters, 1998, 39, 2937-2940; C.-E. Yeom, et al., Synlett, 2007, 146-150).

В некоторых вариантах осуществления метил-3-((4-циано-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)бензоат (соединение А-2) обрабатывают при помощи CoCl2 и NaBH4 при подходящих условиях реакции с получением метил-3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоата (соединения А-3). В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают THF/MeOH при 0°С. В некоторых вариантах осуществления метил-3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2In some embodiments, methyl 3-((4-cyano-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)benzoate (compound A-2) is treated with CoCl 2 and NaBH 4 under suitable reaction conditions to give methyl-3- ((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compounds A-3). In some embodiments, suitable reaction conditions include THF/MeOH at 0°C. In some embodiments, methyl-3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridine-2

- 15 041082 ил)окси)бензоат (соединение А-3) превращается в метил-3-((4-(((трет-бутоксикарбонил)амино)метил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоат (соединение А-4) при помощи ди-трет-бутилдикарбоната. В некоторых вариантах осуществления метил-3-((4-(((трет-бутоксикарбонил)амино)метил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоат (соединение А-4) гидролизуют в соответствующую кислоту, 3-((4-(((трет-бутоксикарбонил)амино)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойную кислоту (соединение А-5), посредством обработки при помощи LiOH. В некоторых вариантах осуществления 3-((4(((трет-бутоксикарбонил)амино)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойную кислоту (соединение А-5) обрабатывают при помощи гидрохлорида (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола с получением третбутил-((2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4ил)метил)карбамата (соединения С) при подходящих условиях реакции. В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают HATU и DIPEA в DCM/DMF. В некоторых вариантах осуществления трет-бутил-((2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (соединение С) обрабатывают при соответствующих кислотных условиях реакции с получением гидрохлоридной соли (3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения 1). В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия реакции включают HCl/МТВЕ в DCM.- 15 041082 yl)oxy)benzoate (compound A-3) is converted to methyl 3-((4-(((tert-butoxycarbonyl)amino)methyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate ( compound A-4) with di-tert-butyl dicarbonate. In some embodiments, methyl 3-((4-(((tert-butoxycarbonyl)amino)methyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compound A-4) is hydrolyzed to the corresponding acid, 3- ((4-(((tert-butoxycarbonyl)amino)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-5), by treatment with LiOH. In some embodiments, 3-((4(((tert-butoxycarbonyl)amino)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-5) is treated with hydrochloride (3R,4R )-4-fluoropyrrolidin-3-ol to give tert-butyl-((2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4yl )methyl)carbamate (compound C) under suitable reaction conditions. In some embodiments, suitable reaction conditions include HATU and DIPEA in DCM/DMF. In some embodiments, tert-butyl-((2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (compound C) is treated under appropriate acidic reaction conditions to give the hydrochloride salt (3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro- 4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound 1). In some embodiments, appropriate reaction conditions include HCl/MTBE in DCM.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 имеют чистоту более 90%. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 имеют чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99%.In some embodiments, Compound 1 samples are greater than 90% pure. In some embodiments, Compound 1 samples are greater than 95% pure, greater than 96% pure, greater than 97% pure, greater than 98% pure, or greater than 99% pure.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 имеют хиральную чистоту более 90%. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 имеют хиральную чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99%.In some embodiments, samples of Compound 1 have a chiral purity greater than 90%. In some embodiments, samples of Compound 1 have a chiral purity greater than 95%, greater than 96%, greater than 97%, greater than 98%, or greater than 99%.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 включают обнаружимое количество (S,S)-энантиомера соединения 1.In some embodiments, Compound 1 samples include a detectable amount of the (S,S) enantiomer of Compound 1.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 содержат менее 5% (3R,4R)-4фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 1 содержат менее 5, 4, 3, 2 или 1% (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола.In some embodiments, Compound 1 samples contain less than 5% (3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol. In some embodiments, Compound 1 samples contain less than 5%, 4%, 3%, 2%, or 1% (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol.

(R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанон, метансульфонатная соль (соединение 2)(R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone, methanesulfonate salt ( connection 2)

Соединение 2, или метансульфонатная соль (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, или метансульфонатная соль (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)-пиридин-2-ил)окси)фенил) (3R,4R)-3 -фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанона, или любое другое подобное название (например, мезилатная соль соединения 2) относится к соединению со следующей структурой:Compound 2, or (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1) methanesulfonate salt -yl)methanone or (3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)-pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3R,4R)-3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl methanesulfonate salt ) methanone, or any other similar name (for example, the mesylate salt of compound 2) refers to a compound with the following structure:

Рацемическое соединение 2 (рац. соединение-2) изображено следующим образом:Racemic compound 2 (rac. compound-2) is shown as follows:

- 16 041082- 16 041082

смесь 1:1mix 1:1

Аморфное соединение 2Amorphous compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является аморфным. В некоторых вариантах осуществления аморфная фаза соединения 2 имеет график РПД, показывающий отсутствие кристалличности.In some embodiments, Compound 2 is amorphous. In some embodiments, the amorphous phase of Compound 2 has an RPD plot indicating no crystallinity.

Форма 1 соединения 2Form 1 compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 1. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 1 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,6° 2-тета, 16,9° 2-тета, 19,4° 2-тета, 20,1° 2-тета, 20,3° 2-тета, 20,6° 2-тета, 23,1° 2-тета, 23,6° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.6° 2-theta, 16.9° 2-theta, 19.4° 2-theta, 20.1° 2-theta, 20.3° 2 -theta, 20.6° 2-theta, 23.1° 2-theta, 23.6° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 1;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 1;

(c) термограмма ДСК с эндотермами при приблизительно 231°С и приблизительно 236°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 2;(c) DSC thermogram with endotherms at approximately 231°C and approximately 236°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 2;

(e) обратимое поглощение воды (~2,1% мас./мас.) от 0 до 90% ОВ;(e) reversible water uptake (~2.1% w/w) from 0 to 90% RH;

(f) неизменная РПД после анализа ГСП.(f) unchanged RAP after GSP analysis.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет по меньшей мере свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e) и (f). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e) и (f). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет четыре свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e) и (f). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет пять свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e) и (f). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и имеет свойства (а), (b), (с), (d), (e) и (f).In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline material and has at least properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), and (f). In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline material and has three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), and (f). In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline material and has four properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), and (f). In some embodiments, Compound 2 is a Form 1 crystalline material and has five properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), and (f). In some embodiments, Compound 2 is Form 1 crystalline and has properties (a), (b), (c), (d), (e) and (f).

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 13,6° 2-тета, 16,9° 2-тета, 19,4° 2-тета, 20,1° 2-тета, 20,3° 2-тета, 20,6° 2-тета, 23,1° 2-тета, 23,6° 2-тета.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.6° 2-theta, 16.9° 2-theta, 19.4° 2-theta, 20.1° 2- theta, 20.3° 2-theta, 20.6° 2-theta, 23.1° 2-theta, 23.6° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 1.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 1.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермами при приблизительно 231°С и приблизительно 236°С.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with endotherms at about 231°C and about 236°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 2.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 2.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет обратимое поглощение воды (~2,1% мас./мас.) от 0 до 90% ОВ.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a reversible water uptake (~2.1% w/w) of 0 to 90% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет неизменную РПД после анализа ГСП.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has an unchanged RPD after GSP analysis.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 1 и получается из раствора этанола или ацетонитрила.In some embodiments, Compound 2 is Form 1 crystalline and is obtained from an ethanol or acetonitrile solution.

Форма 2 соединения 2Form 2 connection 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 2. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 2 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,6° 2-тета, 3,2° 2-тета, 6,3° 2-тета, 9,4° 2-тета, 15,7° 2-тета, 22,1° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.6° 2-theta, 3.2° 2-theta, 6.3° 2-theta, 9.4° 2-theta, 15.7° 2 -theta, 22.1° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 3;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 3;

(c) термограмма ДСК с тремя эндотермами при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С;(c) DSC thermogram with three endotherms at approximately 121.7°C, 231.1°C and 236.1°C;

(d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 4;(d) DSC thermogram essentially the same as shown in FIG. 4;

(e) является безводным;(e) is anhydrous;

(f) превращение в соединение 2, форму 1, при нагревании свыше 150°С;(f) transformation into compound 2, form 1, when heated above 150°C;

- 17 041082 (g) превращение в соединение 2, форму 1, после анализа ГСП и через 7 дней при 40°С/75% ОВ;- 17 041082 (g) conversion to compound 2, form 1, after analysis of GSP and after 7 days at 40°C/75% RH;

(h) превращение в соединение 2, форму 1, через 7 дней при 25°С/97% ОВ.(h) conversion to Compound 2 Form 1 after 7 days at 25°C/97% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере два свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере четыре свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере пять свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере шесть свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет по меньшей мере семь свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и имеет свойства (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h).In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has at least two properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has at least four properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has at least five properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has at least six properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 2 crystalline substance and has at least seven properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is Form 2 crystalline and has properties (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), and (h).

Форма 2 превращается в форму 1 во влажных условиях.Form 2 converts to form 1 in wet conditions.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 2,6° 2-тета, 3,2° 2-тета, 6,3° 2-тета, 9,4° 2-тета, 15,7° 2-тета, 22,1° 2-тета.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.6° 2-theta, 3.2° 2-theta, 6.3° 2-theta, 9.4° 2- theta, 15.7° 2-theta, 22.1° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 3.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 3.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с тремя эндотермами при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with three endotherms at approximately 121.7°C, 231.1°C, and 236.1°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 4.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 4.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и безводным.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and anhydrous.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и получается из раствора этанола и н-гептана.In some embodiments, Compound 2 is Form 2 crystalline and is obtained from a solution of ethanol and n-heptane.

Форма 3 соединения 2Form 3 compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 3. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 3 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,9° 2-тета, 3,2° 2-тета, 3,3° 2-тета, 15,8° 2-тета, 16,9° 2-тета, 20,2° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.9° 2-theta, 3.2° 2-theta, 3.3° 2-theta, 15.8° 2-theta, 16.9° 2 -theta, 20.2° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 5;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 5;

(c) термограмма ДСК с двумя эндотермами при приблизительно 132,2°С и 238,8°С;(c) DSC thermogram with two endotherms at approximately 132.2°C and 238.8°C;

(d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 6;(d) DSC thermogram essentially the same as shown in FIG. 6;

(e) сольватируется с диметилсульфоксидом (DMSO);(e) solvated with dimethyl sulfoxide (DMSO);

(f) превращение в соединение 2, форму 1, при нагревании свыше 130°С;(f) transformation into compound 2, form 1, when heated above 130°C;

(g) превращение в соединение 2, форму 1, после анализа ГСП и через 7 дней при 40°С/75% ОВ;(g) conversion to Compound 2 Form 1 after GSP analysis and after 7 days at 40° C./75% RH;

(h) превращение в соединение 2, форму 1, через 7 дней при 40°С и 75% ОВ.(h) conversion to compound 2, form 1 after 7 days at 40° C. and 75% RH.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет по меньшей мере два свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет по меньшей мере четыре свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет по меньшей мере пять свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет по меньшей мере шесть свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет по меньшей мере семь свойств, выбранных из группы, состоящей из (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 3 и имеет свойства (а), (b), (с), (d), (e), (f), (g) и (h).In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline material and has at least two properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline substance and has three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline substance and has at least four properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline material and has at least five properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline material and has at least six properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is a Form 3 crystalline material and has at least seven properties selected from the group consisting of (a), (b), (c), (d), (e), (f), ( g) and (h). In some embodiments, Compound 2 is Form 3 crystalline and has properties (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), and (h).

Форма 3 представляет собой сольват DMSO. РПД изменялась на форму 1 при нагревании формы 3 до 130°С и при условиях хранения, что может показывать, что форма 3 является метастабильным сольватом, который превращается в форму 1.Form 3 is a DMSO solvate. RPD changed to Form 1 when Form 3 was heated to 130°C and under storage conditions, which may indicate that Form 3 is a metastable solvate that converts to Form 1.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 2,9° 2-тета, 3,2° 2-тета,In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.9° 2-theta, 3.2° 2-theta,

- 18 041082- 18 041082

3,3° 2-тета, 15,8° 2-тета, 16,9° 2-тета, 20,2° 2-тета.3.3° 2-theta, 15.8° 2-theta, 16.9° 2-theta, 20.2° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 5.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 5.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с двумя эндотермами при приблизительно 132,2°С и 238,8°С.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with two endotherms at approximately 132.2°C and 238.8°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 6.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 6.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и сольватируется с диметилсульфоксидом (DMSO).In some embodiments, Compound 2 is crystalline and solvates with dimethyl sulfoxide (DMSO).

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 2 и получается из раствора диметилсульфоксида (DMSO) и ацетонитрила (MeCN).In some embodiments, Compound 2 is Form 2 crystalline and is prepared from a solution of dimethyl sulfoxide (DMSO) and acetonitrile (MeCN).

Форма 4 соединения 2Form 4 connection 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 4. В некоторых вариантах осуществления соединение 2 представляет собой кристаллическое вещество формы 4 и имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:In some embodiments, Compound 2 is crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 4 crystalline. In some embodiments, Compound 2 is a Form 4 crystalline and has at least one of the following properties:

(a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,9° 2-тета, 16,6° 2-тета, 18,8° 2-тета, 19,1° 2-тета, 19,7° 2-тета, 19,9° 2-тета, 20° 2-тета, 21,2° 2-тета, 22,3° 2тета, 22,7° 2-тета, 23,4° 2-тета, 23,8° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.9° 2-theta, 16.6° 2-theta, 18.8° 2-theta, 19.1° 2-theta, 19.7° 2 -theta, 19.9° 2-theta, 20° 2-theta, 21.2° 2-theta, 22.3° 2theta, 22.7° 2-theta, 23.4° 2-theta, 23.8 ° 2-theta;

(b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 7;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 7;

(c) термограмма ДСК с эндотермой при приблизительно 233°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 9.(c) DSC thermogram with endotherm at approximately 233°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 9.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 4 и имеет по меньшей мере свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 4 и имеет три свойства, выбранные из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d). В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 4 и имеет свойства (а), (b), (с) и (d).In some embodiments, Compound 2 is Form 4 crystalline and has at least properties selected from the group consisting of (a), (b), (c) and (d). In some embodiments, Compound 2 is Form 4 crystalline and has three properties selected from the group consisting of (a), (b), (c) and (d). In some embodiments, Compound 2 is Form 4 crystalline and has properties (a), (b), (c) and (d).

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД) с характеристическими пиками при 13,9° 2-тета, 16,6° 2-тета, 18,8° 2-тета, 19,1° 2-тета, 19,7° 2-тета, 19,9° 2-тета, 20° 2-тета, 21,2° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,7° 2-тета, 23,4° 2-тета, 23,8° 2-тета.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.9° 2-theta, 16.6° 2-theta, 18.8° 2-theta, 19.1° 2- theta, 19.7° 2-theta, 19.9° 2-theta, 20° 2-theta, 21.2° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.7° 2-theta, 23, 4° 2-theta, 23.8° 2-theta.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (РПД), по существу такую же, как показано на фиг. 7.In some embodiments, compound 2 is crystalline and has an X-ray powder diffraction (XRD) pattern substantially the same as shown in FIG. 7.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК с эндотермой при приблизительно 233°С.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram with an endotherm at approximately 233°C.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим и имеет термограмму ДСК, по существу такую же, как показано на фиг. 8.In some embodiments, Compound 2 is crystalline and has a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 8.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 является кристаллическим веществом формы 4 и выделяется из суспензии соединения 2 в ацетонитриле.In some embodiments, Compound 2 is Form 4 crystalline and is isolated from a suspension of Compound 2 in acetonitrile.

Синтез соединения 2Synthesis of compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 получают при помощи пути синтеза, как показано на следующей схеме ниже.In some embodiments, Compound 2 is prepared using a synthetic route as shown in the following scheme below.

Схема 3. Получение соединения 2.Scheme 3. Preparation of compound 2.

уд-ud-

Как показано на схеме выше, 2-хлор-6-(трифторметил)изоникотинонитрил (соединение А-1) и 3- 19 041082 гидроксибензойная кислота реагируют при подходящих условиях реакции с получением 3-((4-циано-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойной кислоты (соединения А-6). В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают условия реакции нуклеофильного замещения на ароматическом ядре (SNAr). Нуклеофильное замещение на ароматическом ядре представляет собой реакцию замещения, в которой нуклеофил замещает соответствующую уходящую группу, такую как галогенид, на ароматическом кольце. В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают использование Cs2CO3 в DMF.As shown in the scheme above, 2-chloro-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (compound A-1) and 3-19 041082 hydroxybenzoic acid are reacted under suitable reaction conditions to give 3-((4-cyano-6(trifluoromethyl)pyridine- 2-yl)hydroxy)benzoic acid (compounds A-6). In some embodiments, suitable reaction conditions include aromatic nucleophilic substitution (SNAr) reaction conditions. Nucleophilic substitution on an aromatic ring is a substitution reaction in which a nucleophile replaces an appropriate leaving group, such as a halide, on an aromatic ring. In some embodiments, suitable reaction conditions include the use of Cs 2 CO 3 in DMF.

Способы образования ароматических эфиров включают описанные в настоящем документе или описанные в уровне техники, включая, помимо прочего, Ulman Ether synthesis, Chan-Lam coupling и Buchwald-Hartwig synthesis (D. Ma, Q. Cai, Org. Lett., 2003, 5, 3799-3802; С G. Bates, et al., Org. Lett., 2002, 4, 2803-2806; С. Н. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; C.H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; D. M. T. Chan, etal, Tetrahedron Lett., 1998, 39, 2933-2936; Z. Liu, R. С Larock, J. Org. Chem., 2006, 71, 3198-3209; Y.-J. Chen, H.-H. Chen, Org. Lett., 2006, 8, 5609-5612; F. Li, Q. et al., Org. Lett., 2003, 5, 2169-2171; D. A. Evans, et al., Tetrahedron Letters, 1998, 39, 2937-2940; C.-E. Yeom, et al., Synlett, 2007, 146-150).Methods for the formation of aromatic esters include those described herein or described in the prior art, including, but not limited to, Ulman Ether synthesis, Chan-Lam coupling, and Buchwald-Hartwig synthesis (D. Ma, Q. Cai, Org. Lett., 2003, 5 , 3799-3802, G. Bates, et al., Org. Lett., 2002, 4, 2803-2806, C. H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; C. H. Burgos, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2006, 45, 4321-4326; D. M. T. Chan, et al, Tetrahedron Lett., 1998, 39, 2933-2936; Z. Liu, R C Larock, J. Org. Chem., 2006, 71, 3198-3209; Y.-J. Chen, H.-H. Chen, Org. Lett., 2006, 8, 5609-5612; F. Li, Q. et al., Org. Lett., 2003, 5, 2169-2171; D. A. Evans, et al., Tetrahedron Letters, 1998, 39, 2937-2940; C.-E. Yeom, et al., Synlett, 2007, 146-150).

В некоторых вариантах осуществления 3-((4-циано-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойную кислоту (соединение А-6) обрабатывали при помощи гидрохлорида (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола при подходящих условиях сочетания с получением 2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)изоникотинонитрила (соединения А-7).In some embodiments, 3-((4-cyano-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-6) was treated with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride under suitable coupling conditions to give 2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (Compound A-7).

В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование EDC, DCC, ВОР, HATU или подобного. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование основания. В некоторых вариантах осуществления основание представляет собой органическое основание. В некоторых вариантах осуществления основание представляет собой затрудненное основание, такое как триметиламин, триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIEA), N-метилморфолин, пиридин или подобное. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование растворителя. Подходящие растворители включают дихлорметан, дихлорэтан, тетрагидрофуран, диметоксиэтан или подобное.In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of EDC, DCC, BOP, HATU, or the like. In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of a base. In some embodiments, the base is an organic base. In some embodiments, the base is a hindered base such as trimethylamine, triethylamine (TEA), diisopropylethylamine (DIEA), N-methylmorpholine, pyridine, or the like. In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of a solvent. Suitable solvents include dichloromethane, dichloroethane, tetrahydrofuran, dimethoxyethane or the like.

В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают использование дициклогексилкарбодиимида (DCC), диизопропилкарбодиимида (DIC), N-(3-диметиламинопропил)N'-этилкарбодиимидаHCl (EDC HCl), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфония (ВОР), гексафторфосфата бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфония (PyBOP), гексафторфосфата бромтрипирролидинофосфония (PyBrOP), гексафторфосфата 7-аза-бензотриазол-1илокситрипирролидинофосфония (РуАОР), гексафторфосфата этилциано(гидроксиимино)ацетато-О2)три-(1-пирролидинил)-фосфония (PyOxim), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензо[d]триазин-4(3Н)-она (DEPBT), тетрафторбората/гексафторфосфата 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (TBTU (BF4 -)), гексафторфосфата 2-(6-хлор-1Н-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (HCTU), N-оксида гексафторфосфата N-[(5-хлор-1Н-бензотриазол-1-ил)-диметиламиноморфолино]-урония (HDMC), гексафторфосфата 2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметиламиния (HATU), гексафторфосфата 1-[1-(циано-2-этокси-2-оксоэтилиденаминоокси)-диметиламиноморфолино]-урония (COMU), тетрафторбората 2-(1-оксипиридин-2-ил)-1,1,3,3-тетраметилизотиоурония (ТОТТ), гексафторфосфата тетраметилфторформамидиния (TFFH), N-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолина (EEDQ), ангидрида 2-пропанфосфоновой кислоты (T3P), солей 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4метилморфолиния (DMTMM), бис-трихлорметилкарбоната (ВТС) или 1,1'-карбонилдиимидазола (CDI).In some embodiments, appropriate coupling conditions include the use of dicyclohexylcarbodiimide (DCC), diisopropylcarbodiimide (DIC), N-(3-dimethylaminopropyl)N'-ethylcarbodiimide HCl (EDC HCl), benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP) , benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP), bromtripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBrOP), 7-aza-benzotriazol-1yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyAOP), ethyl cyano(hydroxyimino)acetate-O2)tri-(1-pyrrolidinyl)-phosphonium hexafluorophosphate (PyOxim) , 3-(diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzo[d]triazin-4(3H)-one (DEPBT), tetrafluoroborate/hexafluorophosphate 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethylaminium (TBTU (BF 4 - )) N-[(5-chloro-1H-benzotriazol-1-yl)-dimethylaminomorpholino]-uronium (HDMC), 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N hexafluorophosphate '-tetramethyls nium (HATU), 1-[1-(cyano-2-ethoxy-2-oxoethylideneaminooxy)-dimethylaminomorpholino]-uronium hexafluorophosphate (COMU), 2-(1-oxypyridin-2-yl)-1,1,3 tetrafluoroborate, 3-tetramethylisothiouronium (TOTT), tetramethylfluoroformamidinium hexafluorophosphate (TFFH), N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline (EEDQ), 2-propanephosphonic acid anhydride (T3P), 4-(4,6-dimethoxy-1) salts ,3,5-triazin-2-yl)-4methylmorpholinium (DMTMM), bis-trichloromethyl carbonate (BTC) or 1,1'-carbonyldiimidazole (CDI).

В некоторых вариантах осуществления реакции сочетания включают одну или несколько добавок, выбранных из группы, состоящей из 1-гидроксибензотриазола (HOBt), 1-гидроксибензотриазол-6сульфонамидометила-HCl (HOBt-6-сульфонамидометилаHCl), гидрокси-3,4-дигидро-4-оксо-1,2,3бензотриазина (HOOBt), N-гидроксисукцинимида (HOSu), 1-гидрокси-7-аза-1H-бензотриазола (HOAt), этил-2-циано-2-(гидроксимино)ацетата и 4-(N,N-диметиламино)пиридина (DMAP).In some embodiments, the coupling reactions include one or more additives selected from the group consisting of 1-hydroxybenzotriazole (HOBt), 1-hydroxybenzotriazole-6sulfonamidomethyl-HCl (HOBt-6-sulfonamidomethylHCl), hydroxy-3,4-dihydro-4- oxo-1,2,3benzotriazine (HOOBt), N-hydroxysuccinimide (HOSu), 1-hydroxy-7-aza-1H-benzotriazole (HOAt), ethyl 2-cyano-2-(hydroxyimino)acetate and 4-(N ,N-dimethylamino)pyridine (DMAP).

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают двухстадийный процесс, включающий сначала превращение кислоты в ацилгалогенид с последующим сочетанием с гидрохлоридом (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления подходящие реагенты для превращения кислоты в ацилгалогенид включают использование тионилхлорида (SOCl2), оксалилхлорида ((COCl)2), трихлорида фосфора (PCl3), оксихлорида фосфора (POCl3) и пентахлорида фосфора (PCl3). Эти реакции часто активируются добавлением каталитического количества диметилформамида (DMF).In some embodiments, suitable reaction conditions include a two step process comprising first converting the acid to an acyl halide followed by coupling with (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride. In some embodiments, suitable reagents for converting an acid to an acyl halide include the use of thionyl chloride (SOCl 2 ), oxalyl chloride ((COCl) 2 ), phosphorus trichloride (PCl 3 ), phosphorus oxychloride (POCl 3 ), and phosphorus pentachloride (PCl 3 ). These reactions are often activated by the addition of a catalytic amount of dimethylformamide (DMF).

Дополнительные подходящие реагенты для превращения кислоты в ацилгалогенид включают использование цианурхлорида (2,4,6-трихлор-1,3,5-триазина) в присутствии триметиламина, трифенилфосфина (ТРР) и источника хлорида (например, тетрахлорида углерода, трихлорацетонитрила) и тетраметил-а-хлоренамина.Additional suitable reagents for converting an acid to an acyl halide include the use of cyanuric chloride (2,4,6-trichloro-1,3,5-triazine) in the presence of trimethylamine, triphenylphosphine (TPP) and a chloride source (e.g. carbon tetrachloride, trichloroacetonitrile) and tetramethyl- a-chlorenamine.

Реакции сочетания с хлорангидридами обычно требуют использования дополнительного основания для улавливания образовавшейся HCl. Сочетания обычно проводят в инертных сухих растворителях, вCoupling reactions with acid chlorides usually require the use of an additional base to trap the resulting HCl. Couplings are usually carried out in inert dry solvents, in

- 20 041082 присутствии ненуклеофильного третичного амина (NEt3, iPr2NEt (также называемого основанием Хунига) или N-метилморфолина). В некоторых вариантах осуществления реакцию сочетания ускоряют каталитическим количеством пиридина или N,N-диметиламинопиридина (DMAP). В некоторых случаях в качестве растворителя используют пиридин. В некоторых вариантах осуществления использование металлического цинка может также ускорять сочетание при комнатной температуре.- 20 041082 the presence of a non-nucleophilic tertiary amine (NEt 3 , iPr 2 NEt (also called Hunig's base) or N-methylmorpholine). In some embodiments, the coupling reaction is accelerated with a catalytic amount of pyridine or N,N-dimethylaminopyridine (DMAP). In some cases, pyridine is used as a solvent. In some embodiments, the use of metallic zinc may also accelerate coupling at room temperature.

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия реакции включают предварительную обработку бензойной кислоты С оксалилхлоридом перед добавлением гидрохлорида (3R,4R)-4фторпирролидин-3-ола.In some embodiments, suitable reaction conditions include pretreatment of C benzoic acid with oxalyl chloride prior to addition of (3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride.

В некоторых вариантах осуществления 2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)изоникотинонитрил (соединение А-7) подвергают действию соответствующих условий восстановления с получением 3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения I). Подходящие условия восстановления нитрила для восстановления нитрила до амина известны (Nishimura, Shigeo (2001). Handbook of Heterogeneous Catalytic Hydrogenation for Organic Synthesis (1 st ed.). Wiley-Interscience. pp. 254-277; March, Jerry (1985), Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (3rd ed.), Wiley).In some embodiments, 2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (Compound A-7) is subjected to appropriate reduction conditions to give 3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I). Suitable nitrile reduction conditions for reducing nitrile to amine are known (Nishimura, Shigeo (2001). Handbook of Heterogeneous Catalytic Hydrogenation for Organic Synthesis (1st ed.). Wiley-Interscience. pp. 254-277; March, Jerry (1985), Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (3rd ed.), Wiley).

В некоторых вариантах осуществления подходящие условия восстановления нитрила включают каталитическое гидрирование нитрилов (Karsten et al. (2000). Amines, Aliphatic. Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry). В качестве катализаторов гидрирования нитрильной функциональной группы в соответствующий амин можно использовать катализаторы, которые содержат один или несколько элементов переходной группы Периодической таблицы, таких как, помимо прочего, железо, кобальт, никель, рутений, родий, палладий, платину, иридий или осмий. Катализаторы могут быть легированы промоторами, которые включают, например, хром, железо, кобальт, марганец, молибден, титан, олово, металлы щелочной группы, металлы щелочноземельной группы и/или фосфор.In some embodiments, suitable nitrile reduction conditions include catalytic hydrogenation of nitriles (Karsten et al. (2000). Amines, Aliphatic. Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry). As catalysts for the hydrogenation of the nitrile functional group to the corresponding amine, catalysts can be used that contain one or more elements of the transition group of the Periodic Table, such as, but not limited to, iron, cobalt, nickel, ruthenium, rhodium, palladium, platinum, iridium, or osmium. The catalysts may be doped with promoters which include, for example, chromium, iron, cobalt, manganese, molybdenum, titanium, tin, alkali metals, alkaline earth metals and/or phosphorus.

Также рассматривается скелетные катализаторы (также называемые катализатором ренеевского типа, т.е. катализатором Ренея), которые получают выщелачиванием (активацией) сплава металла, активного для гидрирования, и содержат дополнительный компонент (например, алюминий). Такие катализаторы включают никелевые катализаторы Ренея и кобальтовые катализаторы Ренея.Also contemplated are skeletal catalysts (also referred to as Raney-type catalyst, ie Raney catalyst) which are obtained by leaching (activating) a metal alloy active for hydrogenation and containing an additional component (eg aluminum). Such catalysts include Raney nickel catalysts and Raney cobalt catalysts.

В некоторых вариантах осуществления в качестве катализаторов используют палладиевые или платиновые катализаторы на носителе. В некоторых вариантах осуществления материалы носителей включают, помимо прочего, активированный уголь, Al2O3, TiO2, ZrO2 и SiO2.In some embodiments, supported palladium or platinum catalysts are used as catalysts. In some embodiments, carrier materials include, but are not limited to, activated carbon, Al 2 O 3 , TiO 2 , ZrO 2 , and SiO 2 .

В некоторых вариантах осуществления катализатор каталитического гидрирования включает использование никеля Ренея, палладиевой черни или диоксида платины. Рассматриваются другие катализаторы, такие как борид кобальта.In some embodiments, the catalytic hydrogenation catalyst comprises the use of Raney nickel, palladium black, or platinum dioxide. Other catalysts are contemplated, such as cobalt boride.

Другие важные факторы для гидрирования включают выбор растворителя, pH раствора, пространственные эффекты, температуру и давление водорода внутри емкости для гидрирования.Other important factors for hydrogenation include the choice of solvent, the pH of the solution, spatial effects, and the temperature and pressure of the hydrogen inside the hydrogenation vessel.

В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия гидрирования включают АсОН 5%, Pd(OH)2/C и H2.In some embodiments, appropriate hydrogenation conditions include AcOH 5%, Pd(OH) 2 /C, and H 2 .

В некоторых вариантах осуществления средства некаталитического восстановления для некаталитической конверсии нитрилов в амины включают алюмогидрид лития, боргидрид лития, диборан или элементарный натрий в спиртовых растворителях.In some embodiments, non-catalytic reduction agents for the non-catalytic conversion of nitriles to amines include lithium aluminum hydride, lithium borohydride, diborane, or elemental sodium in alcoholic solvents.

В некоторых вариантах осуществления 3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанон (соединение I) обрабатывают при соответствующих условиях реакции с получением метансульфонатной соли (3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения 2). В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия реакции включают разбавление соединения I в ACN, медленное добавление метансульфоновой кислоты (MSA) и регулирование концентрации MSA при помощи чистоты по ВЭЖХ. В некоторых вариантах осуществления реакционный раствор выдерживали в течение приблизительно 1 ч при приблизительно 20±5°С и нагревали до кипения (~82-85°С) в течение приблизительно 2 ч. В некоторых вариантах осуществления смеси позволяли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре и цикл нагревания повторяли еще 3 раза до соответствующей ДСК.In some embodiments, 3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I ) is treated under appropriate reaction conditions to give the methanesulfonate salt (3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine- 1-yl)methanone (compound 2). In some embodiments, appropriate reaction conditions include diluting Compound I in ACN, adding methanesulfonic acid (MSA) slowly, and adjusting the MSA concentration using HPLC purity. In some embodiments, the reaction solution was held for about 1 hour at about 20±5°C and heated to boiling (~82-85°C) for about 2 hours. In some embodiments, the mixture was allowed to stir overnight at room temperature and the heating cycle was repeated 3 more times until the corresponding DSC.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 получают при помощи пути синтеза, как показано на следующей схеме ниже.In some embodiments, Compound 2 is prepared using a synthetic route as shown in the following scheme below.

- 21 041082- 21 041082

Схема 4. Альтернативное получение соединения 2.Scheme 4. Alternative preparation of compound 2.

Как показано на схеме выше, в некоторых вариантах осуществления (3-(4-((трет-бутоксикарбонил)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-илокси)бензойная кислота) (соединение А) и гидрохлорид ((3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола ((R,R)-FP) реагируют при соответствующих условиях сочетания с получением трет-бутил-((2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамата (соединения С). Соответствующие условия сочетания обсуждались выше. В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия сочетания включают HATU, DIPEA и DCM/DMF.As shown in the scheme above, in some embodiments, (3-(4-((tert-butoxycarbonyl)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yloxy)benzoic acid) (compound A) and hydrochloride ((3R,4R )-4-fluoropyrrolidin-3-ol ((R,R)-FP) react under appropriate coupling conditions to give tert-butyl-((2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine -1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (Compound C) Appropriate coupling conditions have been discussed above In some embodiments, appropriate coupling conditions include HATU, DIPEA and DCM/DMF.

В некоторых вариантах осуществления соединение С обрабатывают метансульфоновой кислотой при соответствующих условиях реакции с получением метансульфонатной соли (3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения 2). В некоторых вариантах осуществления соответствующие условия реакции включают растворение соединения С в DCM, перенос раствора в реактор и разбавление при помощи DCM. В некоторых вариантах осуществления загружали метансульфоновую кислоту и реакцию нагревали до кипения и перемешивали в течение ночи до завершения. В некоторых вариантах осуществления полученную густую белую суспензию разбавляли при помощи DCM, охлаждали и отфильтровывали и промывали метилтрет-бутиловым эфиром (МТВЕ).In some embodiments, compound C is treated with methanesulfonic acid under appropriate reaction conditions to give the methanesulfonate salt (3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3 -fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound 2). In some embodiments, appropriate reaction conditions include dissolving Compound C in DCM, transferring the solution to a reactor, and diluting with DCM. In some embodiments, methanesulfonic acid was charged and the reaction was heated to reflux and stirred overnight to completion. In some embodiments, the resulting thick white slurry was diluted with DCM, cooled and filtered and washed with methyl tert-butyl ether (MTBE).

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имеют чистоту более 90%. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имеют чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99%.In some embodiments, Compound 2 samples are greater than 90% pure. In some embodiments, Compound 2 samples are greater than 95% pure, greater than 96% pure, greater than 97% pure, greater than 98% pure, or greater than 99% pure.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 включают обнаружимое количество по меньшей мере одного из следующих соединений:In some embodiments, Compound 2 samples include a detectable amount of at least one of the following compounds:

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имеют хиральную чистоту более 90%. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имеют хиральную чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99%.In some embodiments, samples of compound 2 have a chiral purity greater than 90%. In some embodiments, samples of Compound 2 have a chiral purity greater than 95%, greater than 96%, greater than 97%, greater than 98%, or greater than 99%.

- 22 041082- 22 041082

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 включают обнаружимое количество (S,S)-энантиомера соединения 2.In some embodiments, Compound 2 samples include a detectable amount of the (S,S) enantiomer of Compound 2.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 содержат менее 5% (3R,4R)-4фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 содержат менее 5,In some embodiments, Compound 2 samples contain less than 5% (3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol. In some embodiments, Compound 2 samples contain less than 5,

4, 3, 2 или 1% (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола.4, 3, 2 or 1% (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol.

Получение кристаллических формObtaining crystalline forms

В некоторых вариантах осуществления кристаллическую форму фармацевтически приемлемой соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин1-ил)метанона (например, гидрохлоридной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролид ин-1-ил)метанона или метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона) получают, как указано в примерах. Следует отметить, что растворители, температуры и другие условия реакции, представленные в настоящем документе, могут изменяться.In some embodiments, a crystalline form of the pharmaceutically acceptable salt of (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4- hydroxypyrrolidin1-yl)methanone (e.g., hydrochloride salt of (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4 -hydroxypyrrolide of in-1-yl)methanone or methanesulfonate salt of (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro -4-hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone) is prepared as described in the examples. It should be noted that solvents, temperatures, and other reaction conditions presented herein are subject to change.

Подходящие растворителиSuitable solvents

Терапевтические средства, которые можно вводить млекопитающим, таким как люди, необходимо получать, следуя нормативным рекомендациям. Такие регулируемые правительством рекомендации называются надлежащей производственной практикой (НПП). Рекомендации НПП указывают приемлемые уровни загрязняющих веществ для активных терапевтических средств, такие как, например, количество остаточного растворителя в готовом продукте. Предпочтительные растворители являются такими, которые подходят для использования в установках НПП и согласуются с целями промышленной безопасности. Категории растворителей определены, например, в документе Международного совета по гармонизации технических требований к регистрации лекарственных препаратов для медицинского применения (ICH), Примеси: Руководство по остаточным растворителям, Q3C(R3) (ноябрь 2005 г.).Therapeutic agents that can be administered to mammals, such as humans, must be prepared following regulatory guidelines. These government-managed recommendations are referred to as Good Manufacturing Practices (GMPs). GMP guidelines specify acceptable levels of contaminants for active therapeutic agents, such as, for example, the amount of residual solvent in the finished product. Preferred solvents are those that are suitable for use in RPE installations and are consistent with industrial safety objectives. Categories of solvents are defined, for example, in the International Council for the Harmonization of Technical Requirements for Registration of Medicinal Products for Human Use (ICH), Impurities: Guidelines for Residual Solvents, Q3C(R3) (November 2005).

Растворители группируют в три класса. Растворители 1 класса являются токсичными, и их следует избегать. Растворители 2 класса представляют собой растворители, использование которых следует ограничить при изготовлении терапевтического средства. Растворители 3 класса представляют собой растворители с низким токсичным потенциалом и более низким риском для здоровья человека. Данные для растворителей 3 класса показывают, что они являются менее токсичными при изучении непосредственных эффектов или краткосрочном исследовании и имеют отрицательные значения при исследованиях генотоксичности.Solvents are grouped into three classes. Class 1 solvents are toxic and should be avoided. Class 2 solvents are solvents whose use should be limited in the manufacture of a therapeutic agent. Class 3 solvents are solvents with a low toxic potential and a lower risk to human health. Data for Class 3 solvents show that they are less toxic in direct effect or short term studies and negative in genotoxicity studies.

Растворители 1 класса, которых следует избегать, включают бензол; тетрахлорид углерода; 1,2дихлорэтан; 1,1-дихлорэтен и 1,1,1-трихлорэтан.Class 1 solvents to be avoided include benzene; carbon tetrachloride; 1,2 dichloroethane; 1,1-dichloroethene and 1,1,1-trichloroethane.

Примеры растворителей 2 класса включают ацетонитрил, хлорбензол, хлороформ, циклогексан, 1,2дихлорэтен, дихлорметан, 1,2-диметоксиэтан, N,N-диметилαцетαмид, N,N-диметилформамид, 1,4диоксан, 2-этоксиэтанол, этиленгликоль, формамид, гексан, метанол, 2-метоксиэтанол, метилбутилкетон, метилциклогексан, N-метилпирролидин, нитрометан, пиридин, сульфолан, тетралин, толуол, 1,1,2трихлорэтен и ксилол.Examples of Class 2 solvents include acetonitrile, chlorobenzene, chloroform, cyclohexane, 1,2dichloroethene, dichloromethane, 1,2-dimethoxyethane, N,N-dimethylαcetαamide, N,N-dimethylformamide, 1,4dioxane, 2-ethoxyethanol, ethylene glycol, formamide, hexane , methanol, 2-methoxyethanol, methylbutylketone, methylcyclohexane, N-methylpyrrolidine, nitromethane, pyridine, sulfolane, tetralin, toluene, 1,1,2trichloroethene, and xylene.

Растворители 3 класса, которые характеризуются низкой токсичностью, включают уксусную кислоту, ацетон, анизол, 1-бутанол, 2-бутанол, бутилацетат, трет-бутилметиловый эфир (МТВЕ), кумол, диметилсульфоксид, этанол, этилацетат, этиловый эфир, этилформиат, муравьиную кислоту, гептан, изобутилацетат, изопропилацетат, метилацетат, 3-метил-1-бутанол, метилэтилкетон, метилизобутилкетон, 2метил-1-пропанол, пентан, 1-пентанол, 1-пропанол, 2-пропанол, пропилацетат и тетрагидрофуран.Class 3 solvents with low toxicity include acetic acid, acetone, anisole, 1-butanol, 2-butanol, butyl acetate, tert-butyl methyl ether (MTBE), cumene, dimethyl sulfoxide, ethanol, ethyl acetate, ethyl ether, ethyl formate, formic acid , heptane, isobutyl acetate, isopropyl acetate, methyl acetate, 3-methyl-1-butanol, methyl ethyl ketone, methyl isobutyl ketone, 2methyl-1-propanol, pentane, 1-pentanol, 1-propanol, 2-propanol, propyl acetate, and tetrahydrofuran.

Остаточные растворители в активных фармацевтических ингредиентах (АФИ) получаются при изготовлении АФИ. В некоторых случаях растворители не полностью удаляются техниками изготовления на практике. Соответствующий выбор растворителя для синтеза АФИ может повышать выход или определять характеристики, такие как кристаллическая форма, чистота и растворимость. Таким образом, растворитель является важным параметром в процессе синтеза.Residual solvents in active pharmaceutical ingredients (APIs) are obtained during the manufacture of APIs. In some cases, solvents are not completely removed by fabrication techniques in practice. Appropriate choice of solvent for API synthesis can enhance yield or determine characteristics such as crystal form, purity, and solubility. Thus, the solvent is an important parameter in the synthesis process.

В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соли соединения I, содержат органический растворитель(и). В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соли соединения I, содержат остаточное количество органического растворителя(ей). В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соли соединения I, содержат остаточное количество растворителя 2 класса. В некоторых вариантах осуществления растворитель 2 класса выбирают из ацетонитрила, хлорбензола, хлороформа, циклогексана, 1,2-дихлорэтена, дихлорметана, 1,2-диметоксиэтана, N,Nдиметилацетамида, N,N-диметилформамида, 1,4-диоксана, 2-этоксиэтанола, этиленгликоля, формамида, гексана, метанола, 2-метоксиэтанола, метилбутилкетона, метилциклогексана, N-метилпирролидина, нитрометана, пиридина, сульфолана, тетралина, толуола, 1,1,2-трихлорэтена и ксилола. В некоторых вариантах осуществления растворитель 2 класса представляет собой дихлорметан, ацетонитрил и N,Nдиметилформамид. В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соли соединения I, содержат остаточное количество растворителя 3 класса. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой растворитель 3 класса. В некоторых вариантах осуществления растворитель 3 класса выбирают из группы, состоящей из уксусной кислоты, ацетона, анизола, 1бутанола, 2-бутанола, бутилацетата, трет-бутилметилового эфира, кумола, диметилсульфоксида, этанола,In some embodiments, compositions containing salts of Compound I contain an organic solvent(s). In some embodiments, compositions containing salts of Compound I contain a residual amount of organic solvent(s). In some embodiments, compositions containing salts of Compound I contain a residual amount of Class 2 solvent. In some embodiments, the class 2 solvent is selected from acetonitrile, chlorobenzene, chloroform, cyclohexane, 1,2-dichloroethene, dichloromethane, 1,2-dimethoxyethane, N,N-dimethylacetamide, N,N-dimethylformamide, 1,4-dioxane, 2-ethoxyethanol , ethylene glycol, formamide, hexane, methanol, 2-methoxyethanol, methylbutylketone, methylcyclohexane, N-methylpyrrolidine, nitromethane, pyridine, sulfolane, tetralin, toluene, 1,1,2-trichloroethene and xylene. In some embodiments, the Class 2 solvent is dichloromethane, acetonitrile, and N,N-dimethylformamide. In some embodiments, compositions containing salts of Compound I contain a residual amount of Class 3 solvent. In some embodiments, the organic solvent is a class 3 solvent. In some embodiments, the Class 3 solvent is selected from the group consisting of acetic acid, acetone, anisole, 1-butanol, 2-butanol, butyl acetate, t-butyl methyl ether, cumene, dimethyl sulfoxide, ethanol,

- 23 041082 этилацетата, этилового эфира, этилформиата, муравьиной кислоты, гептана, изобутилацетата, изопропилацетата, метилацетата, 3-метил-1-бутанола, метилэтилкетона, метилизобутилкетона, 2-метил-1пропанола, пентана, 1-пентанола, 1-пропанола, 2-пропанола, пропилацетата и тетрагидрофурана. В некоторых вариантах осуществления растворитель 3 класса выбирают из этилацетата, трет-бутилметилового эфира, гептана и ацетона.- 23 041082 ethyl acetate, ethyl ether, ethyl formate, formic acid, heptane, isobutyl acetate, isopropyl acetate, methyl acetate, 3-methyl-1-butanol, methyl ethyl ketone, methyl isobutyl ketone, 2-methyl-1-propanol, pentane, 1-pentanol, 1-propanol, 2 -propanol, propyl acetate and tetrahydrofuran. In some embodiments, the Class 3 solvent is selected from ethyl acetate, t-butyl methyl ether, heptane, and acetone.

В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соль соединения I, содержат обнаружимое количество органического растворителя. В некоторых вариантах осуществления соль соединения I представляет собой гидрохлоридную соль (т.е. соединение 1). В некоторых вариантах осуществления соль соединения I представляет собой мезилатную соль (т.е. соединение 2). В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой растворитель 2 класса. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой растворитель 3 класса.In some embodiments, compositions containing a salt of Compound I contain a detectable amount of an organic solvent. In some embodiments, the salt of Compound I is the hydrochloride salt (ie, Compound 1). In some embodiments, the salt of Compound I is the mesylate salt (ie Compound 2). In some embodiments, the organic solvent is a class 2 solvent. In some embodiments, the organic solvent is a class 3 solvent.

(3 R,4R)-4-фторпирролидин-3-ол(3 R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol

В некоторых вариантах осуществления гидрохлорид (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола получают, как описано на схеме 5.In some embodiments, (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride is prepared as described in Scheme 5.

Схема 5. Получение (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола, гидрохлорида (соединения С6).Scheme 5. Preparation of (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol, hydrochloride (compound C6).

С2 СЗ (Тацаинеояй)C2 NW (Tacaineoyai)

Переэтерификация .липазыInteresterification of .lipase

С6 СЗ С5 C6 NW C5

В некоторых вариантах осуществления (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ол получают из рацемического (транс-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанона с использованием ферментативного биокатализа. В некоторых вариантах осуществления ферментативный биокатализ включает использование подходящей липазы. Липазы являются одним из наиболее часто используемых классов ферментов в биокатализе. Их использовали на различных субстратах, и они показали очень широкую специфичность к субстратам. Липазы катализируют гидролиз триацилглицеринов в диацилглицерин, моноацилглицерин, глицерин и свободные жирные кислоты. Реакция изменяет направление на противоположное при безводных условиях, и фермент способен синтезировать новые молекулы путем эстерификации, алкоголиза и переэтерификации. Все реакции можно проводить с высокой регио- и энантиоселективностью при умеренных условиях реакции.In some embodiments, (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol is prepared from racemic (trans-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone using enzymatic biocatalysis. In some embodiments, the implementation of the enzymatic biocatalysis includes the use of a suitable lipase. Lipases are one of the most commonly used classes of enzymes in biocatalysis. They have been used on a variety of substrates and have shown very broad substrate specificity. Lipases catalyze the hydrolysis of triacylglycerols to diacylglycerol, monoacylglycerol, glycerol, and free fatty acids. The reaction reverses under anhydrous conditions, and the enzyme is able to synthesize new molecules by esterification, alcoholysis, and transesterification. All reactions can be carried out with high regio- and enantioselectivity under moderate reaction conditions.

Применения липаз в синтезе использует их хемо-, регио- и стереоселективность. Липазы катализируют регио- и хемоселективные реакции полифункциональных соединений, которые включают техники введения защитных групп и снятия защитных групп.The use of lipases in synthesis exploits their chemo-, regio- and stereoselectivity. Lipases catalyze regio- and chemoselective reactions of polyfunctional compounds, which involve the techniques of introducing protective groups and deprotecting groups.

Стереоселективность катализируемых липазами переэтерификации используется для получения энантиочистых спиртов путем кинетического разделения соответствующих рацематов. Другие функциональные группы допускаются в структуре спиртов, хотя липазный катализ поддерживается для гидроксильной функциональной группы. Энантиоселективность, полученная со вторичными спиртами, часто сильно сравнивается с тем, что наблюдается с первичными или третичными спиртами. Липазный катализ для вторичных спиртов ориентирован на гидроксильную функциональную группу, непосредственно прикрепленную к центру асимметрии.The stereoselectivity of lipase-catalyzed interesterifications is used to obtain enantiopure alcohols by kinetic separation of the corresponding racemates. Other functional groups are allowed in the structure of alcohols, although lipase catalysis is supported for the hydroxyl functional group. The enantioselectivity obtained with secondary alcohols often compares strongly with that observed with primary or tertiary alcohols. Lipase catalysis for secondary alcohols focuses on the hydroxyl functional group directly attached to the center of asymmetry.

Кинетическое разделение вторичных спиртов и сложных эфиров выполняют в органических растворителях путем катализируемого липазами ацилирования и алкоголиза, соответственно. Это приводит к образованию одного энантиомера в виде спирта и другого энантиомера в виде сложного эфира. Максимальный теоретический выход для каждого энантиомера составляет 50%.The kinetic separation of secondary alcohols and esters is performed in organic solvents by lipase-catalyzed acylation and alcoholysis, respectively. This results in one enantiomer as an alcohol and the other enantiomer as an ester. The maximum theoretical yield for each enantiomer is 50%.

Катализируемое липазами разделение спиртов проводят в присутствии донора ацила. В некоторых вариантах осуществления катализируемое липазами разделение спиртов проводят в присутствии квазинеобратимых или необратимых доноров ацила. В некоторых вариантах осуществления катализируемое липазами разделение спиртов проводят в присутствии сложных эфиров енолов в качестве необратимых реагентов переэтерификации.The lipase-catalyzed separation of alcohols is carried out in the presence of an acyl donor. In some embodiments, the lipase-catalyzed separation of alcohols is carried out in the presence of quasi-irreversible or irreversible acyl donors. In some embodiments, the lipase-catalyzed separation of alcohols is carried out in the presence of enol esters as irreversible interesterification reagents.

- 24 041082- 24 041082

Квазинеобратимые или необратимые доноры ацила относятся к активированным донорам ацила, и они участвуют в повышении скоростей ферментативных реакций. Квази-необратимые доноры ацила включают, помимо прочего, 2,2,2-трифторэтильные сложные эфиры, цианометильные сложные эфиры и оксимные сложные эфиры. Необратимые доноры ацила включают, помимо прочего, ангидриды и сложные эфиры енолов. Сложные эфиры енолов включают, помимо прочего, сложные виниловые эфиры, сложные изопрениловые эфиры и сложные этоксивиниловые эфиры. Сложные виниловые эфиры включают, помимо прочего, винилацетат, винилпивалат, винил-4-пентеноат, винилкротонат, винилметакрилат, винилбензоат, винилциннамат, винил-N-Boc-глицинат и винилфенил(тио)ацетат.Quasi-irreversible or irreversible acyl donors are activated acyl donors, and they are involved in increasing the rates of enzymatic reactions. Quasi-irreversible acyl donors include, but are not limited to, 2,2,2-trifluoroethyl esters, cyanomethyl esters, and oxime esters. Irreversible acyl donors include, but are not limited to, anhydrides and enol esters. Enol esters include, but are not limited to, vinyl esters, isoprenyl esters, and ethoxy vinyl esters. Vinyl esters include, but are not limited to, vinyl acetate, vinyl pivalate, vinyl 4-pentenoate, vinyl crotonate, vinyl methacrylate, vinyl benzoate, vinyl cinnamate, vinyl N-Boc glycinate, and vinyl phenyl (thio) acetate.

Когда обратимые доноры ацила (алкиловые сложные эфиры и сложные тиоэфиры) используют для ацилирования, термодинамическое равновесие может быть сдвинуто в направлении образования продуктов при помощи избытка донора ацилов или путем удаления продукта, образовавшегося в реакционной смеси.When reversible acyl donors (alkyl esters and thioesters) are used for the acylation, the thermodynamic equilibrium can be shifted towards product formation by using an excess of acyl donor or by removing the product formed in the reaction mixture.

В некоторых вариантах осуществления ферментативную реакцию проводят в органическом растворителе. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой диметилсульфоксид, N,N-диметилформамид, метанол, этанол, ацетон, метилацетат, этилацетат, бутанол, диэтиловый эфир, ТВМЕ, DIPE, толуол, циклогексан, гексан или гептан. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой ацетон, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, третамиловый спирт, DIPE или толуол. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой ацетон.In some embodiments, the enzymatic reaction is carried out in an organic solvent. In some embodiments, the organic solvent is dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylformamide, methanol, ethanol, acetone, methyl acetate, ethyl acetate, butanol, diethyl ether, TBME, DIPE, toluene, cyclohexane, hexane, or heptane. In some embodiments, the organic solvent is acetone, tetrahydrofuran, diethyl ether, tertamyl alcohol, DIPE, or toluene. In some embodiments, the organic solvent is acetone.

Липазы, используемые в реакциях синтеза, обычно получают из микроорганизмов. Липазы грибкового происхождения включают Candida rugose (CRL), Candida antarctica A (CAL-A), Candida antarctica В (CAL-B), Thermomyces lanuginosus (TL IL), Rhizomucor miehei (RL IM). Бактериальные липазы включают Pseudomonas fluorescens (AK, PFL), Burkholderia cepacia (PS), Chromobacterium viscosum (CVL).Lipases used in synthesis reactions are usually obtained from microorganisms. Lipases of fungal origin include Candida rugose (CRL), Candida antarctica A (CAL-A), Candida antarctica B (CAL-B), Thermomyces lanuginosus (TL IL), Rhizomucor miehei (RL IM). Bacterial lipases include Pseudomonas fluorescens (AK, PFL), Burkholderia cepacia (PS), Chromobacterium viscosum (CVL).

Липазы включают липазу В Candida antarctica, липазы Burkholderia cepacia и липазы Thermomyces lanuginosus. Дрожжи Candida antarctica дают две различные липазы, A (CAL-A) и В (CAL-B). Обе липазы были очищены, охарактеризованы и доступны в иммобилизованных формах. CAL-B является белком с молекулярной массой 33 кДа и pI 6,0. Фермент стабилен в водной среде в диапазоне pH 3,5-9,5. Температура денатурации составляет 50-60°С. Наиболее часто используемый препарат CAL-B представляет Novozyme 435, который содержит фермент, иммобилизованный на макропористой акриловой полимерной смоле, на основе нераскрытого протокола. Дополнительные ферментативные препараты, содержащие CAL-B, включают, помимо прочего, IMMCALB-T1-1500, IMMCALB-T2-150, IMMCALB-T2-350, IMMCALB-T3-150, IMMCALBY-T1-1500, IMMCALBY-T2-150, IMMCALBY-T2-350, IMMCALBY-T3-150. Методы иммобилизации представляют или адсорбцию на сухих полипропиленовых шариках, или ковалентное прикрепление к сухим или влажным акриловым шарикам. Размер шариков может варьировать (150-300 мкм, 350-700 мкм, <1500 мкм).Lipases include Candida antarctica lipase B, Burkholderia cepacia lipases, and Thermomyces lanuginosus lipases. The yeast Candida antarctica produces two different lipases, A (CAL-A) and B (CAL-B). Both lipases have been purified, characterized and are available in immobilized forms. CAL-B is a protein with a molecular weight of 33 kDa and a pI of 6.0. The enzyme is stable in the aquatic environment in the pH range of 3.5-9.5. The temperature of denaturation is 50-60°C. The most commonly used CAL-B formulation is Novozyme 435, which contains an enzyme immobilized on a macroporous acrylic polymer resin based on an undisclosed protocol. Additional enzyme preparations containing CAL-B include, but are not limited to, IMMCALB-T1-1500, IMMCALB-T2-150, IMMCALB-T2-350, IMMCALB-T3-150, IMMCALBY-T1-1500, IMMCALBY-T2-150, IMMCALBY-T2-350, IMMCALBY-T3-150. Immobilization methods are either adsorption on dry polypropylene beads or covalent attachment to dry or wet acrylic beads. Bead size can vary (150-300 µm, 350-700 µm, <1500 µm).

Липаза Burkholderia cepacia (ранее называемая Pseudomonas cepacia) имеет бактериальное происхождение. Липаза Burkholderia cepacia представляет собой белок, состоящий из 320 аминокислот и имеющий молекулярную массу 33 кДа. Эта липаза доступна в свободной форме (лиапза SL и липаза АН), иммобилизованной путем адсорбции на диатомитовой земле (PS-D), или иммобилизованной при помощи сильных сил адсорбции на керамике Toyonite 200 (PS-C II).Burkholderia cepacia lipase (formerly called Pseudomonas cepacia) is of bacterial origin. Burkholderia cepacia lipase is a 320 amino acid protein with a molecular weight of 33 kDa. This lipase is available in free form (SL lipase and AH lipase), immobilized by adsorption on diatomaceous earth (PS-D), or immobilized by strong adsorption forces on Toyonite 200 ceramic (PS-C II).

Липаза Thermomyces lanuginosus (ранее называемая Humicola lanuginosa) имеет грибковое происхождение. Этот белок имеет молекулярную массу 30 кДа и 269 аминокислот. Оптимальный pH составляет 11-12, и термостабильность сохраняется до 55-60°С. Липаза Thermomyces lanuginosus является активным компонентом коммерческого препарата Lipolase®. Липазные препараты из Thermomyces Lanuginosus включают Lipozyme TL IM (липазу, иммобилизованную на диоксиде кремния), IMMTLL-T1-1500 (липазу, иммобилизованную адсорбцией на полипропилене) и IMMTLL-T2-150 (липазу, иммобилизованную ковалентно на полиакриловых шариках).Thermomyces lanuginosus lipase (formerly Humicola lanuginosa) is of fungal origin. This protein has a molecular weight of 30 kDa and 269 amino acids. The optimum pH is 11-12, and thermal stability is maintained up to 55-60°C. Thermomyces lanuginosus lipase is the active ingredient in the commercial formulation Lipolase®. Lipase preparations from Thermomyces Lanuginosus include Lipozyme TL IM (lipase immobilized on silica), IMMTLL-T1-1500 (lipase immobilized by adsorption on polypropylene) and IMMTLL-T2-150 (lipase immobilized covalently on polyacrylic beads).

Кроме того, одна липаза млекопитающих (свиная поджелудочная железа (PPL)), как было доказано, является пригодной.In addition, one mammalian lipase (porcine pancreas (PPL)) has been shown to be useful.

В некоторых вариантах осуществления липазные ферменты, рассматриваемые для использования в настоящем документе, включают иммобилизованные липазные ферменты. Иммобилизация липазных ферментов на твердом носителе приводит к ряду преимуществ для биокатализа. Преимущества иммобилизованных липазных ферментов включают лучшие показатели работы в неводных растворителях, эффективное извлечение и разделение продукта реакции, то, что могут быть повторно использованы для снижения себестоимости, минимизируют белковое загрязнение продукта, имеют повышенную стабильность к теплу, органическим растворителям или автолизу, более высокую продуктивность катализатора для снижения стоимости и удобны и безопасны в обработке.In some embodiments, the lipase enzymes contemplated for use herein include immobilized lipase enzymes. Immobilization of lipase enzymes on a solid support results in a number of advantages for biocatalysis. Advantages of immobilized lipase enzymes include better performance in non-aqueous solvents, efficient recovery and separation of the reaction product, being reusable for cost savings, minimizing protein contamination of the product, improved stability to heat, organic solvents or autolysis, higher catalyst productivity to reduce cost and convenient and safe to handle.

Иммобилизованные ферменты пригодны для энантиоселективного разделения сложных эфиров, ацилирования спиртов с получением сложных эфиров, умеренного гидролиза или ацилирования чувствительных субстратов, кинетического разделения путем переэтерификации рацемических спиртов, кинетического разделения гидролизом рацемических сложных эфиров.The immobilized enzymes are suitable for enantioselective resolution of esters, acylation of alcohols to give esters, moderate hydrolysis or acylation of sensitive substrates, kinetic resolution by transesterification of racemic alcohols, kinetic resolution by hydrolysis of racemic esters.

В органических растворителях липазы используют в сухих формах, полученных лиофилизацией иIn organic solvents, lipases are used in dry forms obtained by lyophilization and

- 25 041082 все в большей степени иммобилизацией. Преимущества использования иммобилизованных липаз являются такими, которые получены из гетерогенного катализа, такие как простота извлечения, пригодность к переработке для повторного использования и возможность разработки непрерывных процессов. Иммобилизацию используют для повышения стабильности в органических растворителях. Кроме того, активность, специфичность к субстрату и энантиоселективность могут улучшаться путем иммобилизации. Способы, доступные для иммобилизации, представляют адсорбцию на носителе и инкапсуляцию или ковалентное прикрепление к носителю. Сшивание фермента является конкретным случаем иммобилизации на основе образования ковалентных связей без использования носителя.- 25 041082 increasingly immobilized. The advantages of using immobilized lipases are those derived from heterogeneous catalysis, such as ease of recovery, recyclability, and the ability to develop continuous processes. Immobilization is used to improve stability in organic solvents. In addition, activity, substrate specificity and enantioselectivity can be improved by immobilization. The methods available for immobilization are adsorption to the carrier and encapsulation or covalent attachment to the carrier. Enzyme crosslinking is a specific case of immobilization based on the formation of covalent bonds without the use of a carrier.

В некоторых вариантах осуществления Novozyme® 435 используют в качестве липазного фермента для кинетического разделения путем переэтерификации рацемического спирта С2. Novozyme® 435 представляет собой липазу CALB, иммобилизованную на гидрофобном носителе (акриловой смоле). Дополнительные липазные ферменты, рассматриваемые для разделения рацемического спирта С2, включают Novocor® AD L (из Candida Antarctica A (CALA)) и Lipozyme® CALB L (из Candida Antarctica В (CALB)).In some embodiments, Novozyme® 435 is used as the lipase enzyme for kinetic separation by transesterification of the C2 racemic alcohol. Novozyme® 435 is a CALB lipase immobilized on a hydrophobic carrier (acrylic resin). Additional lipase enzymes considered for resolution of C2 racemic alcohol include Novocor® AD L (from Candida Antarctica A (CALA)) and Lipozyme® CALB L (from Candida Antarctica B (CALB)).

В некоторых вариантах осуществления рацемический спирт С2 обрабатывают винилацетатом и Novozyme® 435 в ацетоне с получением непрореагировавшего спирта С3 и сложного эфира С4. Спирт С3 и сложный эфир С4 разделяют. В некоторых вариантах осуществления спирт С3 и сложный эфир С4 разделяют колоночной хроматографией.In some embodiments, the C2 racemic alcohol is treated with vinyl acetate and Novozyme® 435 in acetone to provide unreacted C3 alcohol and C4 ester. Alcohol C3 and ester C4 are separated. In some embodiments, the C3 alcohol and C4 ester are separated by column chromatography.

В некоторых вариантах осуществления хиральную чистоту спирта С3 повышают путем воздействия на спирт С3 по второму кругу винилацетата и Novozyme® 435 в ацетоне. После того, когда считается, что реакция завершилась, спирт С3 очищают. В некоторых вариантах осуществления спирт С3 очищают колоночной хроматографией.In some embodiments, the chiral purity of the C3 alcohol is increased by exposing the C3 alcohol to a second round of vinyl acetate and Novozyme® 435 in acetone. After the reaction is considered complete, the C3 alcohol is purified. In some embodiments, the C3 alcohol is purified by column chromatography.

Амид соединения С3 затем гидролизуют с получением (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления соединение С3 обрабатывают кислотой в подходящем растворителе с получением (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления кислота представляет собой соляную кислоту. В некоторых вариантах осуществления подходящий растворитель представляет собой органический растворитель. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой эфирный растворитель. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, тетрагидропиран, диметоксиэтан или диэтиловый эфир. В некоторых вариантах осуществления органический растворитель представляет собой 1,4-диоксан.The amide of compound C3 is then hydrolyzed to give (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol. In some embodiments, Compound C3 is treated with an acid in a suitable solvent to provide (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol. In some embodiments, the acid is hydrochloric acid. In some embodiments, a suitable solvent is an organic solvent. In some embodiments, the organic solvent is an ether solvent. In some embodiments, the organic solvent is 1,4-dioxane, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, dimethoxyethane, or diethyl ether. In some embodiments, the organic solvent is 1,4-dioxane.

Некоторая терминологияSome terminology

Если не указано иное, следующие термины, используемые в данном описании, имеют определения, данные ниже. Использование термина включающий, а также других форм, таких как включать, включает и включавший, не является ограничивающим. Названия разделов, используемые в настоящем документе, представлены только с организационными целями и не должны толковаться как ограничивающие описанный объект.Unless otherwise indicated, the following terms used in this specification have the definitions given below. The use of the term including, as well as other forms such as include, includes, and included, is not limiting. The section titles used in this document are provided for organizational purposes only and should not be construed as limiting the subject matter described.

Термин приемлемый в отношении состава, композиции или ингредиента при использовании в настоящем документе означает не имеющий постоянного вредного влияния на общее состояние здоровья субъекта, которого лечат.The term "acceptable" in relation to a formulation, composition, or ingredient, as used herein, means having no permanent adverse effect on the general health of the subject being treated.

Термин модулировать при использовании в настоящем документе означает взаимодействовать с мишенью или непосредственно, или опосредованно, чтобы изменять активность мишени, включая, в качестве примера, для повышения активности мишени, для ингибирования активности мишени, для ограничения активности мишени или для продления активности мишени.The term modulate as used herein means to interact with a target, either directly or indirectly, to change the activity of the target, including, by way of example, to increase the activity of the target, to inhibit the activity of the target, to limit the activity of the target, or to prolong the activity of the target.

Термин модулятор при использовании в настоящем документе относится к молекуле, которая взаимодействует с мишенью или непосредственно, или опосредованно. Взаимодействия включают, помимо прочего, взаимодействия агониста, частичного агониста, обратного агониста, антагониста, биодеструктора или их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления модулятор представляет собой антагонист. В некоторых вариантах осуществления модулятор представляет собой биодеструктор.The term modulator, as used herein, refers to a molecule that interacts with a target, either directly or indirectly. Interactions include, but are not limited to, agonist, partial agonist, inverse agonist, antagonist, biodestructor, or combinations thereof. In some embodiments, the implementation of the modulator is an antagonist. In some embodiments, the implementation of the modulator is a biodestructor.

Термины вводить, введение, применение и подобные при использовании в настоящем документе относятся к способам, которые можно использовать для облегчения доставки соединений или композиций к желаемому сайту биологического действия. Эти способы включают, помимо прочего, пероральные пути, интрадуоденальные пути, парентеральную инъекцию (включая внутривенную, подкожную, внутрибрюшинную, внутримышечную, внутрисосудистую или инфузию), местное и ректальное введение. Специалисты в данной области знакомы с техниками введения, которые можно использовать с соединениями и способами, описанными в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления соединения и композиции, описанные в настоящем документе, вводят перорально.The terms administer, administer, use, and the like, as used herein, refer to methods that can be used to facilitate the delivery of compounds or compositions to the desired site of biological action. These methods include, but are not limited to, oral routes, intraduodenal routes, parenteral injection (including intravenous, subcutaneous, intraperitoneal, intramuscular, intravascular or infusion), topical and rectal administration. Those skilled in the art are familiar with administration techniques that can be used with the compounds and methods described herein. In some embodiments, the compounds and compositions described herein are administered orally.

Термины совместное введение или подобные при использовании в настоящем документе означают охватывающие введение выбранных терапевтических средств одному пациенту и предназначены включать режимы лечения, в которых средства вводят таким же или другим путем введения или в то же или в другое время.The terms co-administration or the like, as used herein, are meant to encompass the administration of selected therapeutic agents to a single patient and are intended to include treatment regimens in which the agents are administered by the same or different route of administration, or at the same or different times.

- 26 041082- 26 041082

Термины эффективное количество или терапевтически эффективное количество при использовании в настоящем документе относятся к достаточному количеству средства или соединения, которое вводят и которое будет облегчать в некоторой степени один или несколько симптомов заболевания или состояния, которое лечат. Результат включает снижение и/или облегчение признаков, симптомов или причин заболевания, или любое другое желаемое изменение биологической системы. Например, эффективное количество для терапевтических применений представляет количество композиции, содержащей соединение, раскрытое в настоящем документе, необходимое для обеспечения клинически значимого снижения симптомов заболевания. Соответствующее эффективное количество в любом конкретном случае необязательно определяют при помощи техник, таких как исследование с повышением дозы.The terms effective amount or therapeutically effective amount, as used herein, refer to a sufficient amount of an agent or compound that is administered that will alleviate to some extent one or more symptoms of the disease or condition being treated. The result includes the reduction and/or alleviation of the signs, symptoms or causes of the disease, or any other desired change in the biological system. For example, an effective amount for therapeutic applications is the amount of a composition containing a compound disclosed herein required to provide a clinically meaningful reduction in the symptoms of a disease. The appropriate effective amount in any particular case is optionally determined by techniques such as a dose escalation study.

Термины увеличивать или увеличение при использовании в настоящем документе означают повышение или продление или действия или длительности желаемого эффекта. Таким образом, в отношении увеличения эффекта терапевтических средств термин увеличение относится к способности повышать или продлевать или действие или длительность эффекта других терапевтических средств на систему. Увеличивающее эффективное количество при использовании в настоящем документе относится к количеству, требуемому для увеличения эффекта другого терапевтического средства в желаемой системе.The terms increase or increase as used herein means to increase or prolong either the effect or the duration of the desired effect. Thus, in relation to increasing the effect of therapeutic agents, the term increase refers to the ability to increase or prolong either the effect or duration of the effect of other therapeutic agents on the system. An enhancing effective amount, as used herein, refers to the amount required to increase the effect of another therapeutic agent in the desired system.

Термин фармацевтическая комбинация при использовании в настоящем документе означает продукт, который получают при смешивании или объединении более чем одного активного ингредиента и который содержит как фиксированные, так и нефиксированные комбинации активных ингредиентов. Термин фиксированная комбинация означает, что как активные ингредиенты, например, соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль, так и дополнительное средство вводят пациенту одновременно в виде одного вещества или дозы. Термин нефиксированная комбинация означает, что активные ингредиенты, например, соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное средство вводят пациенту в виде отдельных веществ или одновременно, или параллельно, или последовательно без особых временных ограничений, причем такое введение обеспечивает эффективные уровни двух соединений в теле пациента. Последнее также относится к коктейльной терапии, например, введению трех или более активных ингредиентов.The term pharmaceutical combination as used herein means a product that is obtained by mixing or combining more than one active ingredient and which contains both fixed and non-fixed combinations of active ingredients. The term fixed combination means that both the active ingredients, for example, a compound described herein or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and an additional agent are administered to a patient simultaneously as a single substance or dose. The term non-fixed combination means that the active ingredients, for example, the compound described herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and an additional agent are administered to the patient as separate substances or simultaneously, or in parallel, or sequentially without special time restrictions, and such administration provides effective levels of the two compounds in the patient's body. The latter also applies to cocktail therapy, for example, the administration of three or more active ingredients.

Термин набор и изделие используют как синонимы.The terms kit and product are used interchangeably.

Термин субъект или пациент охватывает млекопитающих. Примеры млекопитающих включают, помимо прочего, любой член класса млекопитающих: людей, приматов, не относящихся к людям, таких как шимпанзе, и другие виды приматов и обезьян; сельскохозяйственных животных, таких как крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы, свиньи; домашних животных, таких как кролики, собаки и кошки; лабораторных животных, включая грызунов, таких как крысы, мыши и морские свинки, и подобные. В одном аспекте млекопитающее представляет собой человека.The term subject or patient encompasses mammals. Examples of mammals include, but are not limited to, any member of the mammal class: humans, non-human primates such as chimpanzees, and other primate and monkey species; farm animals such as cattle, horses, sheep, goats, pigs; pets such as rabbits, dogs and cats; laboratory animals, including rodents such as rats, mice and guinea pigs, and the like. In one aspect, the mammal is a human.

Термины лечить, лечение или обработка при использовании в настоящем документе включают облегчение, ослабление или улучшение по меньшей мере одного симптома заболевания или состояния, предотвращение дополнительных симптомов, ингибирование заболевания или состояния, например, подавление развития заболевания или состояния, облегчение состояния при заболевании или состоянии, обеспечение регресса заболевания или состояния, облегчение состояния, вызванного заболеванием или состоянием, или прекращение симптомов заболевания или состояния или профилактически и/или терапевтически.The terms treat, treat, or treat as used herein include alleviating, alleviating, or improving at least one symptom of a disease or condition, preventing additional symptoms, inhibiting a disease or condition, e.g., inhibiting the progression of a disease or condition, alleviating a condition of a disease or condition, providing regression of the disease or condition, alleviation of the condition caused by the disease or condition, or cessation of the symptoms of the disease or condition, either prophylactically and/or therapeutically.

Фармацевтические композиции/составыPharmaceutical compositions/formulations

Фармацевтические композиции составляют обычным образом при помощи одного или нескольких физиологически приемлемых носителей, включая вспомогательные вещества и средства, которые облегчают переработку активных соединений в препараты, которые используют фармацевтически. Подходящие техники, носители и вспомогательные вещества включают такие, которые находятся, например, в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975; Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; и Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 1999), включенных в настоящий документ ссылкой во всей их полноте.Pharmaceutical compositions are formulated in the usual manner using one or more physiologically acceptable carriers, including excipients and agents which facilitate the processing of the active compounds into formulations for pharmaceutical use. Suitable techniques, carriers, and excipients include those found, for example, in Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975; Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 1999), incorporated herein by reference in their entirety.

В некоторых вариантах осуществления для перорального введения соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют путем объединения активного соединения с фармацевтически приемлемыми носителями или вспомогательными веществами. Такие носители облегчают составление соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) в виде таблеток, порошков, пилюль, драже, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, эликсиров, взвесей, суспензий и подобного, для перорального проглатывания пациентом, которого лечат. В некоторых вариантах осуществления для перорального введения соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют без объединения активного соединения с фармацевтически приемлемыми носителями или вспомогательными веществами и помещают непосредственно в капсулу для введения млекопитающему.In some embodiments for oral administration, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) is formulated by combining the active compound with pharmaceutically acceptable carriers or excipients. Such carriers facilitate the formulation of Compound I or its pharmaceutically acceptable salt (e.g. Compound 1 or Compound 2) in the form of tablets, powders, pills, dragees, capsules, liquids, gels, syrups, elixirs, slurries, suspensions and the like, for oral ingestion by a patient. who is being treated. In some embodiments for oral administration, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) is formulated without combining the active compound with pharmaceutically acceptable carriers or excipients and placed directly into a capsule for administration to a mammal.

Фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат соединение I или егоThe pharmaceutical compositions described herein contain Compound I or its

- 27 041082 фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2). В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат соединение 1. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат аморфное соединение 1. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат кристаллическое соединение 1. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат соединение 2. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат аморфное соединение 2. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат кристаллическое соединение 2.- 27 041082 pharmaceutically acceptable salt (eg compound 1 or compound 2). In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain compound 1. In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain amorphous compound 1. In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain crystalline compound 1. In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain compound 2. In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain amorphous compound 2. In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain crystalline compound 2.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат (а) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2); и одно или несколько из следующего:In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein comprise (a) Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2); and one or more of the following:

(b) связующие;(b) binders;

(с) дезинтегрирующие средства;(c) disintegrants;

(d) наполнители (разбавители);(d) fillers (diluents);

(е) смазывающие средства;(e) lubricants;

(f) способствующие скольжению средства (усилители текучести);(f) glidants (flow enhancers);

(g) добавки для прессования;(g) compression aids;

(h) красители;(h) dyes;

(i) подсластители;(i) sweeteners;

(j) консерванты;(j) preservatives;

(k) суспендирующие/диспергирующие средства;(k) suspending/dispersing agents;

(l) пленкообразующие средства/покрытия;(l) film-forming agents/coatings;

(m) ароматизаторы;(m) flavors;

(о) печатные краски;(n) printing inks;

(р) солюбилизаторы;(p) solubilizers;

(q) подщелачивающие средства;(q) alkalizing agents;

(r) буферные вещества;(r) buffer substances;

(s) антиоксиданты;(s) antioxidants;

(t) шипучие средства.(t) effervescent agents.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат (а) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) и (b) оболочку капсулы.In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein comprise (a) Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) and (b) a capsule shell.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, содержат одно или несколько из следующего в дополнение к соединению I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединению 1 или соединению 2):In some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein contain one or more of the following in addition to Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2):

(а) стеарат магния;(a) magnesium stearate;

(b) лактоза;(b) lactose;

(с) микрокристаллическая целлюлоза;(c) microcrystalline cellulose;

(d) силикатированная микрокристаллическая целлюлоза;(d) silicified microcrystalline cellulose;

(е) маннит;(e) mannitol;

(f) крахмал (кукурузный);(f) starch (corn);

(g) диоксид кремния;(g) silicon dioxide;

(h) диоксид титана;(h) titanium dioxide;

(i) стеариновая кислота;(i) stearic acid;

(j) крахмалгликолят натрия;(j) sodium starch glycolate;

(k) желатин;(k) gelatin;

(l) тальк;(l) talc;

(m) сахароза;(m) sucrose;

(n) аспартам;(n) aspartame;

(о) стеарат кальция;(o) calcium stearate;

(р) повидон;(p) povidone;

(q) желатинированный крахмал;(q) gelatinized starch;

(r) гидроксипропилметилцеллюлоза;(r) hydroxypropyl methylcellulose;

(s) продукты ОРА (покрытия и чернила);(s) OPA products (coatings and inks);

(t) кроскармелеза;(t) croscarmeliasis;

(u) гидроксипропилцеллюлоза;(u) hydroxypropyl cellulose;

(v) этилцеллюлоза;(v) ethyl cellulose;

(w) фосфат кальция (двухосновный);(w) calcium phosphate (dibasic);

(х) кросповидон;(x) crospovidone;

(y) шеллак (и глазурь);(y) shellac (and glaze);

- 28 041082 (z) карбонат натрия;- 28 041082 (z) sodium carbonate;

(аа) гипромеллоза.(aa) hypromellose.

В одном варианте осуществления фармацевтические препараты для перорального применения получают смешиванием одного или нескольких твердых вспомогательных веществ с одним или несколькими соединениями, описанными в настоящем документе, необязательно измельчением полученной смеси и обработкой смеси гранул после добавления подходящих вспомогательных веществ, при необходимости, с получением таблеток. Подходящие вспомогательные вещества, в частности представляют собой наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, маннит или сорбит; целлюлозные препараты, такие как, например, кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагакантовую камедь, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, силикатированную микрокристаллическую целлюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия; или другие, такие как, поливинилпирролидон (PVP или повидон) или фосфат кальция. При необходимости, добавляют дезинтегрирующие средства, такие как сшитая кроскармелеза натрия, поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.In one embodiment, pharmaceutical preparations for oral administration are prepared by mixing one or more solid excipients with one or more compounds described herein, optionally grinding the resulting mixture, and processing the mixture of granules after adding suitable excipients, if necessary, to obtain tablets. Suitable excipients are, in particular, fillers such as sugars, including lactose, sucrose, mannitol or sorbitol; cellulose preparations such as, for example, corn starch, wheat starch, rice starch, potato starch, gelatin, gum tragacanth, methylcellulose, microcrystalline cellulose, silicified microcrystalline cellulose, hydroxypropyl methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose; or others such as polyvinylpyrrolidone (PVP or povidone) or calcium phosphate. If necessary, disintegrating agents are added, such as cross-linked croscarmelose sodium, polyvinylpyrrolidone, agar, or alginic acid or a salt thereof, such as sodium alginate.

В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, составляют в любую подходящую лекарственную форму, включая, помимо прочего, водные пероральные дисперсии, твердые пероральные лекарственные формы, быстроплавкие составы, шипучие составы, лиофилизированные составы, таблетки, капсулы, пилюли, составы с контролируемым высвобождением, таблетки с энтеросолюбильным покрытием, вдыхаемые порошки, вдыхаемые дисперсии, внутривенные составы.In one embodiment, the pharmaceutical compositions described herein are formulated into any suitable dosage form, including, but not limited to, aqueous oral dispersions, solid oral dosage forms, fast melting formulations, effervescent formulations, lyophilized formulations, tablets, capsules, pills, formulations with controlled release, enteric-coated tablets, inhalable powders, inhalable dispersions, intravenous formulations.

В дополнительных вариантах осуществления фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе, могут обеспечиваться в виде прессованных таблеток, измельченных в порошок таблеток, быстрорастворимых таблеток, множества прессованных таблеток или таблеток с энтеросолюбильным покрытием, покрытых сахаром или покрытых пленкой таблеток.In additional embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein may be provided as compressed tablets, powdered tablets, instant tablets, multiple compressed tablets, or enteric-coated tablets, sugar-coated or film-coated tablets.

Фармацевтические лекарственные формы можно составлять различными способами и можно обеспечивать разные профили высвобождения лекарственного средства, включая немедленное высвобождение, замедленное высвобождение и отсроченное высвобождение. В некоторых случаях может быть желательным предотвращение высвобождения лекарственного средства после введения лекарственного средства, пока не пройдет некоторое количество времени (т.е. отсроченное по времени), обеспечение по существу непрерывного высвобождения в течение заранее определенного периода времени (т.е. замедленное высвобождение) или обеспечение высвобождения сразу после введения лекарственного средства (т.е. немедленное высвобождение).Pharmaceutical dosage forms can be formulated in a variety of ways and can provide different drug release profiles, including immediate release, sustained release, and delayed release. In some instances, it may be desirable to prevent drug release after drug administration until a certain amount of time has elapsed (i.e., time-delayed), to provide a substantially continuous release over a predetermined period of time (i.e., sustained release) or providing release immediately after administration of the drug (ie, immediate release).

В некоторых вариантах осуществления составы обеспечивают терапевтически эффективное количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2), облегчая введение, например, раз в неделю, дважды в неделю, трижды в неделю, четыре раза в неделю, пять раз в неделю, через день, раз в день, дважды в день (b.i.d.) или трижды в день (t.i.d.), при необходимости. В одном варианте осуществления состав обеспечивает терапевтически эффективное количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2), облегчая введение раз в день.In some embodiments, the formulations provide a therapeutically effective amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2), facilitating administration, e.g., once a week, twice a week, thrice a week, four times a week, five times a week, every other day, once a day, twice a day (b.i.d.), or thrice a day (t.i.d.), as needed. In one embodiment, the formulation provides a therapeutically effective amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2), facilitating once-daily administration.

В одном варианте осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют в форму немедленного высвобождения, которая обеспечивает введение раз в день. В общем, может быть желательно вводить количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2), которое эффективно для достижения уровней в плазме, соответствующих концентрациям, которые были обнаружены как эффективные in vivo, в течение периода времени, эффективного для обеспечения терапевтического эффекта.In one embodiment, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) is formulated into an immediate release form that allows for once daily administration. In general, it may be desirable to administer an amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2), that is effective to achieve plasma levels corresponding to concentrations found to be effective in vivo, over a period of time effective to provide a therapeutic effect.

В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) и одно или несколько вспомогательных веществ смешивают в сухом виде и прессуют в массу, такую как таблетка, с твердостью, достаточной для обеспечения фармацевтической композиции, которая по существу дезинтегрируется в течение менее чем приблизительно 10 мин, менее чем приблизительно 15 мин, менее чем приблизительно 20 мин, менее чем приблизительно 25 мин, менее чем приблизительно 30 мин, менее чем приблизительно 35 мин или менее чем приблизительно 40 мин, после перорального введения, при этом высвобождая состав соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) в желудочнокишечную жидкость.In some embodiments, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2) and one or more excipients are dry-blended and compressed into a mass, such as a tablet, of sufficient hardness to provide a pharmaceutical composition that is essentially disintegrates in less than about 10 minutes, less than about 15 minutes, less than about 20 minutes, less than about 25 minutes, less than about 30 minutes, less than about 35 minutes, or less than about 40 minutes, after oral administration, while releasing the formulation of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2) into the gastrointestinal fluid.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе, в лекарственной форме с немедленным высвобождением способны высвобождать не менее 75% терапевтически активного ингредиента или комбинации и/или удовлетворяют требованиям к дезинтеграции или растворению для таблеток с немедленным высвобождением конкретных терапевтических средств или комбинации, заключенной в ядре таблетки, как указано в USP XXII, 1990 (Фармакопея США). Фармацевтические композиции немедленного высвобождения включают капсулы, таблетки, пилюли, пероральные растворы, порошки, шарики, пелетты, частицы и подобное.In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein, in an immediate release dosage form, are capable of releasing at least 75% of the therapeutically active ingredient or combination and/or meet the disintegration or dissolution requirements for immediate release tablets of the particular therapeutic agents or combination concluded in the tablet core, as specified in USP XXII, 1990 (United States Pharmacopeia). Immediate release pharmaceutical compositions include capsules, tablets, pills, oral solutions, powders, boluses, pellets, particles, and the like.

Вспомогательные вещества, используемые в фармацевтических композициях, следует выбирать наExcipients used in pharmaceutical compositions should be selected on the basis

- 29 041082 основе совместимости с соединением I или его фармацевтически приемлемой солью (например, соединением 1 или соединением 2) и свойств профиля высвобождения желаемой лекарственной формы. Типичные вспомогательные вещества включают, например, связующие, суспендирующие средства, дезинтегрирующие средства, наполнители, поверхностно-активные вещества, солюбилизаторы, стабилизаторы, смазывающие средства, смачивающие средства, разбавители и подобное.- 29 041082 on the basis of compatibility with compound I or its pharmaceutically acceptable salt (eg compound 1 or compound 2) and properties of the release profile of the desired dosage form. Typical excipients include, for example, binders, suspending agents, disintegrating agents, fillers, surfactants, solubilizers, stabilizers, lubricants, wetting agents, diluents, and the like.

Связующие придают способность к сцеплению составам твердых пероральных лекарственных форм: для состава заполненной порошком капсулы они способствуют образованию пробки, которая заполняется в капсулы с мягкой или твердой оболочкой, а для составов таблеток они обеспечивают то, что таблетка остается нетронутой после прессования, и способствуют гарантированию равномерности смеси перед стадией прессования или заполнения.Binders impart cohesiveness to solid oral dosage form formulations: for a powder-filled capsule formulation, they aid in the formation of a plug that is filled into soft or hard shell capsules, and for tablet formulations, they ensure that the tablet remains intact after compression and helps to ensure uniformity. mixture before the pressing or filling stage.

В некоторых вариантах осуществления связующее(ие) выбирают из крахмалов, Сахаров, повидона, целлюлозы или модифицированной целлюлозы, такой как микрокристаллическая целлюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, лактозы или сахарных спиртов, таких как ксилит, сорбит или мальтит. В некоторых вариантах осуществления связующее представляет собой гидроксипропилметилцеллюлозу. В некоторых вариантах осуществления связующее представляет собой гипромеллозу (например, Methocel E5).In some embodiments, the binder(s) are selected from starches, sugars, povidone, cellulose, or modified cellulose such as microcrystalline cellulose, hydroxypropyl methylcellulose, lactose, or sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, or maltitol. In some embodiments, the binder is hydroxypropyl methylcellulose. In some embodiments, the binder is hypromellose (eg, Methocel E5).

В общем, связующее на уровне 20-70% используют в составах заполненных порошком желатиновых капсул. Уровни применения связующего в составах таблеток варьируют при прямом прессовании, влажной грануляции, вальцевании или применении других вспомогательных веществ, таких как наполнители, которые сами выступают в качестве умеренного связующего.In general, a binder level of 20-70% is used in powder-filled gelatin capsule formulations. Binder levels in tablet formulations vary with direct compression, wet granulation, rolling, or the use of other excipients such as excipients that themselves act as a moderate binder.

Диспергирующие средства и/или средства модулирования вязкости включают материалы, которые регулируют диффузию и однородность лекарственного средства в жидкой среде или способе грануляции или способе смешивания. В некоторых вариантах осуществления эти средства также облегчают эффективность нанесения покрытия или эродирование матрицы.Dispersing agents and/or viscosity modulating agents include materials that control the diffusion and uniformity of a drug in a liquid medium or granulation process or mixing process. In some embodiments, these tools also facilitate coating efficiency or matrix erosion.

Разбавители увеличивают объем композиции для облегчения прессования или создания достаточного объема для гомогенной смеси для заполнения в капсулы.Diluents increase the volume of the composition to facilitate compression or create sufficient volume for a homogeneous mixture to be filled into capsules.

Термин дезинтегрировать включает как растворение, так и диспергирование лекарственной формы при контакте с желудочно-кишечной жидкостью. Дезинтегрирующие средства или вызывающие дезинтеграцию средства облегчают разрушение или дезинтеграцию вещества. В некоторых вариантах осуществления один аспект, твердая пероральная лекарственная форма, включает до 15 % мас./мас., дезинтегрирующего средства. В некоторых вариантах осуществления дезинтегрирующее средство представляет собой кроскармелозу натрия. В другом аспекте дезинтегрирующее средство представляет собой крахмалгликолят натрия или кросповидон.The term disintegrate includes both dissolution and dispersion of the dosage form upon contact with the gastrointestinal fluid. Disintegrating agents or disintegrating agents facilitate the destruction or disintegration of the substance. In some embodiments, one aspect, the solid oral dosage form, comprises up to 15% w/w of a disintegrant. In some embodiments, the disintegrant is croscarmellose sodium. In another aspect, the disintegrant is sodium starch glycolate or crospovidone.

Наполнители включают соединения, такие как лактоза, карбонат кальция, фосфат кальция, двухосновный фосфат кальция, сульфат кальция, микрокристаллическая целлюлоза, порошок целлюлозы, декстроза, декстраты, декстран, крахмалы, желатинированный крахмал, сахароза, ксилит, лактит, маннит, сорбит, хлорид натрия, полиэтиленгликоль и подобное.Bulking agents include compounds such as lactose, calcium carbonate, calcium phosphate, dibasic calcium phosphate, calcium sulfate, microcrystalline cellulose, cellulose powder, dextrose, dextrates, dextran, starches, gelatinized starch, sucrose, xylitol, lactitol, mannitol, sorbitol, sodium chloride , polyethylene glycol and the like.

В одном аспекте наполнитель представляет собой лактозу (например, моногидрат). В другом аспекте наполнитель представляет собой маннит или фосфат дикальция. В другом аспекте наполнитель представляет собой маннит, микрокристаллическую целлюлозу, фосфат дикальция или сорбит.In one aspect, the filler is lactose (eg, monohydrate). In another aspect, the filler is mannitol or dicalcium phosphate. In another aspect, the filler is mannitol, microcrystalline cellulose, dicalcium phosphate, or sorbitol.

Желудочно-кишечная жидкость представляет собой жидкость секрета желудка субъекта или слюну субъекта после перорального введения композиции, описанной в настоящем документе, или ее эквивалент. Эквивалент секрета желудка включает, например, in vitro жидкость с аналогичным содержанием и/или pH, что и у секрета желудка, такую как 1% раствор додецилсульфата натрия или 0,1 н раствор HCl в воде. Кроме того, имитация кишечного сока (фармакопея США) представляет собой систему водного фосфатного буфера с pH 6,8.Gastrointestinal fluid is the subject's gastric secretion fluid or the subject's saliva after oral administration of the composition described herein, or its equivalent. A gastric secretion equivalent includes, for example, an in vitro fluid of similar content and/or pH to gastric secretions, such as 1% sodium dodecyl sulfate solution or 0.1 N HCl in water. In addition, simulated intestinal juice (USP) is an aqueous phosphate buffer system with a pH of 6.8.

Смазывающие средства и способствующие скольжению средства представляют собой соединения, которые предотвращают, снижают или ингибируют адгезию или трение материалов. В одном аспекте твердые пероральные лекарственные формы включают от приблизительно 0,25% мас./мас. до приблизительно 2,5% мас./мас. смазывающего средства. В другом аспекте твердые пероральные лекарственные формы включают от приблизительно 0,5% мас./мас. до приблизительно 1,5% мас./мас. смазывающего средства.Lubricants and glidants are compounds that prevent, reduce or inhibit the adhesion or friction of materials. In one aspect, solid oral dosage forms include from about 0.25% wt./wt. up to about 2.5% wt./wt. lubricant. In another aspect, solid oral dosage forms include from about 0.5% wt./wt. up to about 1.5% wt./wt. lubricant.

В некоторых вариантах осуществления твердые лекарственные формы, описанные в настоящем документе, находятся в виде таблетки (включая таблетку немедленного высвобождения, таблетку с пролонгированным действием, таблетку с замедленным высвобождением, таблетку с энтеросолюбильным покрытием, суспензионную таблетку, быстроплавкую таблетку, таблетку для разжевывания и дезинтеграции, таблетку быстрого распада, шипучую таблетку или каплет), пилюли, порошка (включая стерильно упакованный порошок, дозируемый порошок или шипучий порошок), капсулы (включая как мягкие, так и твердые капсулы, например, капсулы, полученные из животного желатина или растительной НРМС, или вскрываемые капсулы), твердой дисперсии, лекарственных формах с множеством частиц, пеллет или гранул.In some embodiments, the solid dosage forms described herein are in the form of a tablet (including an immediate release tablet, a sustained release tablet, a sustained release tablet, an enteric coated tablet, a suspension tablet, a fast melting tablet, a tablet for chewing and disintegrating, rapidly disintegrating tablet, effervescent tablet or caplet), pill, powder (including sterile packed powder, dosed powder or effervescent powder), capsule (including both soft and hard capsules, such as those made from animal gelatin or vegetable HPMC, or openable capsules), solid dispersion, multiparticulate dosage forms, pellets or granules.

В других вариантах осуществления фармацевтический состав находится в виде порошка. В еще одних вариантах осуществления фармацевтический состав находится в виде таблетки, включая, помимоIn other embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition is in the form of a powder. In still other embodiments, the pharmaceutical composition is in the form of a tablet, including, in addition to

- 30 041082 прочего, таблетку с немедленным высвобождением. Кроме того, фармацевтические составы, описанные в настоящем документе, вводят в виде одной дозы или множества доз. В некоторых вариантах осуществления фармацевтический состав вводят в двух, или трех, или четырех таблетках.- 30 041082 other, immediate release tablet. In addition, the pharmaceutical compositions described herein are administered as a single dose or multiple doses. In some embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition is administered in two, or three, or four tablets.

В некоторых вариантах осуществления твердые лекарственные формы, например, таблетки, шипучие таблетки и капсулы, получают смешиванием соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) с одним или несколькими фармацевтическими вспомогательными средствами с образованием объемной смеси. При ссылке на эти объемные смеси как однородные понимают, что частицы соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) диспергированы равномерно в композиции так, что композиция может быть легко подразделена на эффективные в равной мере стандартные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли или капсулы. В одном варианте осуществления стандартные лекарственные формы также включают пленочные покрытия, которые дезинтегрируются при пероральном проглатывании или при контакте с разбавителем. В одном варианте осуществления эти составы изготавливают обычными техниками.In some embodiments, solid dosage forms, e.g., tablets, effervescent tablets, and capsules, are prepared by mixing Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2) with one or more pharmaceutical auxiliaries to form a bulk mixture. When referring to these bulk mixtures as homogeneous, it is understood that the particles of Compound I or its pharmaceutically acceptable salt (e.g., Compound 1 or Compound 2) are dispersed uniformly in the composition so that the composition can be easily subdivided into equally effective unit dosage forms, such as tablets, pills or capsules. In one embodiment, unit dosage forms also include film coatings that disintegrate upon oral ingestion or upon contact with a diluent. In one embodiment, these compositions are made by conventional techniques.

Обычные техники включают, например, один или комбинацию способов: (1) сухого смешивания, (2) прямого прессования, (3) размола, (4) сухой или неводной грануляции, (5) влажной грануляции или (6) плавления. См., например, Lachman et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy (1986). Другие способы включают, например, сушку распылением, дражирование, гранулирование из расплава, гранулирование, сушку распылением в псевдоожиженном слое или нанесение покрытия (например, нанесение покрытия методом Вюрстера), тангенциальное покрытие, верхнее распыление, таблетирование, экструзию и подобное.Conventional techniques include, for example, one or a combination of (1) dry blending, (2) direct compression, (3) grinding, (4) dry or non-aqueous granulation, (5) wet granulation, or (6) melting. See, for example, Lachman et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy (1986). Other methods include, for example, spray drying, panning, melt granulation, granulation, fluidized bed spray drying or coating (eg, Wurster coating), tangential coating, top spraying, tableting, extrusion, and the like.

Прессованные таблетки представляют собой твердые лекарственные формы, полученные прессованием объемных смесей, описанных выше. В различных вариантах осуществления прессованные таблетки, которые разработаны для растворения во рту, будут содержать один или несколько ароматизаторов. В других вариантах осуществления прессованные таблетки будут содержать пленку, окружающую готовую прессованную таблетку. В некоторых вариантах осуществления пленочное покрытие способствует соблюдение пациентом режима и схемы лечения (например, покрытия Opadry® или сахарные покрытия). Пленочные покрытия, содержащие Opadry®, обычно составляют в диапазоне от приблизительно 1% до приблизительно 5% массы таблетки. В других вариантах осуществления прессованные таблетки содержат одно или несколько вспомогательных средств.Compressed tablets are solid dosage forms obtained by compressing the bulk mixtures described above. In various embodiments, compressed tablets that are designed to dissolve in the mouth will contain one or more flavors. In other embodiments, the compressed tablets will comprise a film surrounding the finished compressed tablet. In some embodiments, the film coating promotes patient compliance with the treatment regimen and regimen (eg, Opadry® coatings or sugar coatings). Film coatings containing Opadry® typically range from about 1% to about 5% by weight of the tablet. In other embodiments, the compressed tablets contain one or more adjuvants.

В настоящем документе обеспечиваются фармацевтические композиции в покрытых пленкой лекарственных формах, которые содержат комбинацию активного ингредиента или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства и одного или нескольких вспомогательных средств для таблетирования с получением ядра таблетки, используя обычные процессы таблетирования и затем нанесения покрытия на ядро. Ядра таблеток можно получать при помощи обычных методов грануляции, например, влажной или сухой грануляции, с необязательным дроблением гранул и с последующим прессованием и нанесением покрытия.Provided herein are pharmaceutical compositions in film-coated dosage forms that contain a combination of an active ingredient or a pharmaceutically acceptable salt, solvate or prodrug thereof and one or more tableting aids to form a tablet core using conventional tableting and then coating the core processes. Tablet cores can be obtained by conventional granulation techniques, such as wet or dry granulation, with optional crushing of the granules followed by compression and coating.

Также обеспечиваются фармацевтические композиции в покрытых пленкой лекарственных формах, которые содержат комбинацию активного ингредиента или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства и одного или нескольких вспомогательных веществ для регулирования высвобождения для использования в покрытой энтеросолюбильной оболочкой лекарственной форме. Фармацевтические композиции также содержат вспомогательные вещества, не регулирующие высвобождение.Also provided are pharmaceutical compositions in film-coated dosage forms that contain a combination of the active ingredient or a pharmaceutically acceptable salt, solvate or prodrug thereof and one or more release control excipients for use in an enteric-coated dosage form. Pharmaceutical compositions also contain excipients that do not control release.

Энтеросолюбильные покрытия представляют собой покрытия, которые выдерживают действие желудочной кислоты, но растворяются или дезинтегрируются в кишечнике.Enteric coatings are coatings that withstand the action of gastric acid but dissolve or disintegrate in the intestine.

В одном аспекте пероральная твердая лекарственная форма, раскрытая в настоящем документе, содержит энтеросолюбильное покрытие(я). Энтеросолюбильные покрытия включают одно или несколько из следующих: фталат ацетата целлюлозы; сополимеры метилакрилата и метакриловой кислоты; сукцинат ацетата целлюлозы; фталат гидроксипропилметилцеллюлозы; сукцинат ацетата гидроксипропилметилцеллюлозы (сукцинат ацетата гипромеллозы); фталат поливинилацетата (PVAP); сополимеры метилметакрилата и метакриловой кислоты; сополимеры метакриловой кислоты, ацетат целлюлозы (и его сукцинатные и фталатные варианты); сополимеры стирола и малеиновой кислоты; сополимер полиметакриловой кислоты/акриловой кислоты; фталат гидроксиэтилцеллюлозы; сукцинат ацетата гидроксипропилметилцеллюлозы; тетрагидрофталат ацетата целлюлозы; акриловая смола; шеллак.In one aspect, the oral solid dosage form disclosed herein contains enteric coating(s). Enteric coatings include one or more of the following: cellulose acetate phthalate; copolymers of methyl acrylate and methacrylic acid; cellulose acetate succinate; hydroxypropyl methylcellulose phthalate; hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate (hypromellose acetate succinate); polyvinyl acetate phthalate (PVAP); copolymers of methyl methacrylate and methacrylic acid; methacrylic acid copolymers, cellulose acetate (and its succinate and phthalate variants); copolymers of styrene and maleic acid; polymethacrylic acid/acrylic acid copolymer; hydroxyethylcellulose phthalate; hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate; cellulose acetate tetrahydrophthalate; acrylic resin; shellac.

Энтеросолюбильное покрытие представляет собой покрытие, которое нанесено на таблетку, пилюлю, капсулу, пеллету, шарик, гранулу, частицу и пр. так, что оно не растворяется до достижения тонкого кишечника.An enteric coating is a coating that is applied to a tablet, pill, capsule, pellet, bead, granule, particle, etc. so that it does not dissolve before reaching the small intestine.

Покрытые сахаром таблетки представляют собой прессованные таблетки, окруженные сахарным покрытием, что может быть предпочтительным для маскирования неприятных вкусов или запахов и защиты таблеток от окисления.Sugar-coated tablets are compressed tablets surrounded by a sugar coating, which may be advantageous to mask unpleasant tastes or odors and protect the tablets from oxidation.

Покрытые пленкой таблетки представляют собой прессованные таблетки, которые покрыты тонким слоем или пленкой растворимого в воде материала. Пленочные покрытия включают, помимо прочего,Film-coated tablets are compressed tablets that are coated with a thin layer or film of a water-soluble material. Film coatings include, but are not limited to,

- 31 041082 гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, полиэтиленгликоль 4000 и фталат ацетата целлюлозы. Пленочные покрытия придают такие же общие характеристики, что и сахарное покрытие. Множество прессованных таблеток представляют собой прессованные таблетки, полученные более чем одним циклом прессования, включая многослойные таблетки, и таблетки с покрытием, нанесенным прессованием или сухим способом. В некоторых вариантах осуществления на таблетки наносят растворимое в воде, независимое от pH пленочное покрытие, которое обеспечивает немедленное разложение для быстрого, активного высвобождения (например, продукты Opadry).- 31 041082 hydroxyethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, polyethylene glycol 4000 and cellulose acetate phthalate. Film coatings impart the same general characteristics as sugar coatings. A plurality of compressed tablets are compressed tablets made from more than one compression cycle, including multi-layered tablets and compression-coated or dry-coated tablets. In some embodiments, tablets are coated with a water-soluble, pH-independent film coating that provides immediate disintegration for fast, active release (eg, Opadry products).

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе, находятся в виде лекарственной формы с контролируемым высвобождением. При использовании в настоящем документе термин контролируемое высвобождение относится к лекарственной форме, в которой скорость или место высвобождения активного ингредиента(ов) отличается от таковых для лекарственной формы немедленного высвобождения при введении перорально. Лекарственные формы с контролируемым высвобождением включают отсроченное, длительное, пролонгированное, замедленное, пульсирующее, модифицированное, целенаправленное, запрограммированное высвобождение. Фармацевтические композиции в лекарственных формах с контролируемым высвобождением получают при помощи различных устройств и способов модифицированного высвобождения, включая, помимо прочего, матричные устройства контролируемого высвобождения, осмотические устройства контролируемого высвобождения, устройства контролируемого высвобождения множества частиц, ионообменные смолы, энтеросолюбильные покрытия, многослойные покрытия и их комбинации. Скорость высвобождения активного ингредиента(ов) можно также модифицировать путем изменения размеров частиц.In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein are in controlled release dosage form. As used herein, the term controlled release refers to a dosage form in which the rate or site of release of the active ingredient(s) differs from that of an immediate release dosage form when administered orally. Controlled release dosage forms include delayed, prolonged, sustained, sustained, pulsatile, modified, targeted, programmed release. Pharmaceutical compositions in controlled release dosage forms are prepared using a variety of modified release devices and methods, including, but not limited to, matrix controlled release devices, osmotic controlled release devices, controlled release devices for many particles, ion exchange resins, enteric coatings, multilayer coatings, and combinations thereof. . The release rate of the active ingredient(s) can also be modified by changing the particle size.

В отличие от композиций немедленного высвобождения, композиции с контролируемым высвобождением позволяют доставлять средство человеку в течение длительного периода времени согласно заранее определенному профилю. Такие скорости высвобождения могут обеспечивать терапевтически эффективные уровни средства в течение длительного периода времени и при этом обеспечивать более длительный период фармакологического ответа. Такие более длительные периоды ответа обеспечивают много характерных преимуществ, которые не достигаются с соответствующими препаратами немедленного высвобождения. В одном аспекте композиции с контролируемым высвобождением соединения I или его фармацевтически приемлемой соли обеспечивают терапевтически эффективные уровни соединения I в течение длительного периода времени и при этом обеспечивают более длительный период фармакологического ответа.Unlike immediate release formulations, controlled release formulations allow the agent to be delivered to a human over an extended period of time according to a predetermined profile. Such release rates can provide therapeutically effective levels of the agent over an extended period of time while still providing a longer period of pharmacological response. Such longer response times provide many inherent benefits that are not achievable with the corresponding immediate release formulations. In one aspect, controlled release compositions of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, provide therapeutically effective levels of Compound I over an extended period of time while providing a longer period of pharmacological response.

Отсроченное высвобождение при использовании в настоящем документе относится к такой доставке, что высвобождение может осуществляться в некотором обычно ожидаемом месте в кишечнике, которое более удалено от того, в котором бы осуществлялось, если бы не было изменений отсроченного высвобождения. В некоторых вариантах осуществления способ задержки высвобождения представляет собой покрытие. Любые покрытия следует наносить достаточной толщины, чтобы все покрытие не растворялось в желудочно-кишечных жидкостях при pH ниже приблизительно 5, но растворялось при pH приблизительно 5 и выше.Delayed release, as used herein, refers to delivery such that release can occur at some normally expected site in the intestine that is more distant from where it would be if there were no delayed release changes. In some embodiments, the delayed release method is a coating. Any coatings should be applied in sufficient thickness so that the entire coating does not dissolve in gastrointestinal fluids at a pH below about 5, but does dissolve at a pH of about 5 and above.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе, находятся в лекарственной форме с модифицированным высвобождением, которую изготавливают при помощи матричного устройства контролируемого высвобождения (см. Takada et al., Encyclopedia of Controlled Drug Delivery, Vol. 2, Mathiowitz ed., Wiley, 1999).In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein are in a modified release dosage form that is manufactured using a controlled release matrix device (see Takada et al., Encyclopedia of Controlled Drug Delivery, Vol. 2, Mathiowitz ed., Wiley, 1999).

В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе в лекарственной форме с модифицированным высвобождением, составляют при помощи эродируемого матричного устройства, которое является набухающими в воде, эродируемыми или растворимыми полимерами, включая синтетические полимеры и природные полимеры и производные, такие как полисахариды и белки.In one embodiment, pharmaceutical compositions provided herein in a modified release dosage form are formulated using an erodible matrix device that is water-swellable, erodible, or soluble polymers, including synthetic polymers and natural polymers and derivatives such as polysaccharides and proteins. .

В некоторых вариантах осуществления матричная система с контролируемым высвобождением содержит энтеросолюбильное покрытие, чтобы лекарственное средство не высвобождалось в желудке.In some embodiments, the controlled release matrix system contains an enteric coating so that the drug is not released in the stomach.

Фармацевтические композиции, обеспеченные в настоящем документе, могут обеспечиваться в стандартных лекарственных формах или лекарственных формах с множеством доз. Стандартные лекарственные формы при использовании в настоящем документе относятся к физически дискретным элементам, подходящим для введения субъекту-человеку и субъекту-животному и упакованным по отдельности, как известно в данной области. Каждая стандартная доза содержит заранее определенное количество активного ингредиента(ов), достаточное для получения желаемого терапевтического эффекта, вместе с необходимыми фармацевтическими носителями или вспомогательными веществами. Примеры стандартных лекарственных форм включают упакованные по отдельности таблетки и капсулы. Стандартные лекарственные формы можно вводить по частям или в кратных количествах. Лекарственная форма с множеством доз представляет множество идентичных стандартных лекарственных форм, упакованных в одном контейнере, чтобы вводить их в виде отдельных стандартных лекарственных форм. Примеры лекарственных форм с множеством доз включают бутылочки с таблетками или капсулами.The pharmaceutical compositions provided herein may be provided in unit dosage forms or multi-dose dosage forms. Unit dosage forms as used herein refer to physically discrete units suitable for administration to a human subject and an animal subject and individually packaged as is known in the art. Each unit dose contains a predetermined amount of the active ingredient(s) sufficient to produce the desired therapeutic effect, together with the necessary pharmaceutical carriers or excipients. Examples of unit dosage forms include individually packaged tablets and capsules. Standard dosage forms can be administered in parts or in multiples. A multi-dose dosage form is a plurality of identical unit dosage forms packaged in a single container to be administered as separate unit dosage forms. Examples of multi-dose dosage forms include tablet or capsule bottles.

В других вариантах осуществления порошок, содержащий составы соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2), описанные в настоящем докумен- 32 041082 те, составляют для включения одного или нескольких фармацевтических вспомогательных веществ и ароматизаторов. Дополнительные варианты осуществления также содержат суспендирующее средство и/или смачивающее средство. Эта объемная смесь равномерно подразделяется на упаковки стандартных доз или упаковки с множеством доз. Термин равномерно означает, что однородность объемной смеси по существу сохраняется в процессе упаковки.In other embodiments, the powder containing the formulations of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2) described herein is formulated to include one or more pharmaceutical excipients and flavors. Additional embodiments also contain a suspending agent and/or a wetting agent. This bulk mixture is evenly subdivided into unit dose packs or multi dose packs. The term uniformly means that the homogeneity of the bulk mixture is substantially maintained during the packaging process.

В еще одних вариантах осуществления получают шипучие порошки. Шипучие соли использовали для диспергирования лекарственных средств в воде для перорального введения. Шипучие соли представляют собой гранулы или крупные порошки, содержащие медицинское средство в сухой смеси, обычно состоящей из бикарбоната натрия, лимонной кислоты и/или виннокаменной кислоты.In still other embodiments, effervescent powders are produced. Effervescent salts have been used to disperse drugs in water for oral administration. Effervescent salts are granules or large powders containing a medicinal agent in a dry mixture, usually consisting of sodium bicarbonate, citric acid and/or tartaric acid.

В способе получения шипучих гранул, описанных в настоящем документе, используют три основных процесса: влажную грануляцию, сухую грануляцию и плавление. Метод плавления используют для получения большинства коммерческих шипучих порошков. Следует отметить, что хотя эти способы предназначены для получения гранул, составы шипучих солей, описанные в настоящем документе, в одном варианте осуществления также получают в виде таблеток согласно технологии получения таблеток.The process for producing effervescent granules described herein uses three main processes: wet granulation, dry granulation, and melting. The melting method is used to produce most commercial effervescent powders. It should be noted that although these methods are designed to produce granules, the effervescent salt formulations described herein are also, in one embodiment, prepared as tablets according to tablet technology.

В одном варианте осуществления фармацевтические препараты, которые используют перорально, включают твердые капсулы, полученные из желатина, а также мягкие, герметичные капсулы, полученные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. В одном варианте осуществления твердые капсулы содержат активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связующими, такими как крахмалы, и/или смазывающими веществами, такими как тальк или стеарат магния, и необязательно стабилизаторами. В одном варианте осуществления твердые капсулы содержат только активный ингредиент без дополнительных неактивных ингредиентов. В одном варианте осуществления в мягких капсулах активные соединения растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли. Кроме того, в одном варианте осуществления добавляют стабилизаторы. В других вариантах осуществления состав помещают во вскрываемую капсулу, причем капсула является проглатываемой целиком, или капсулу открывают и содержимое разбрызгивают на пищу перед едой.In one embodiment, oral pharmaceutical preparations include hard capsules made from gelatin as well as soft, sealed capsules made from gelatin and a plasticizer such as glycerol or sorbitol. In one embodiment, the hard capsules contain the active ingredients in admixture with an excipient such as lactose, binders such as starches and/or lubricants such as talc or magnesium stearate, and optional stabilizers. In one embodiment, the hard capsules contain only the active ingredient with no additional inactive ingredients. In one embodiment, in soft capsules, the active compounds are dissolved or suspended in suitable liquids such as fatty oils, liquid paraffin, or liquid polyethylene glycols. In addition, stabilizers are added in one embodiment. In other embodiments, the composition is placed in an openable capsule, the capsule being swallowed whole, or the capsule is opened and the contents sprinkled on food before eating.

Все составы для перорального введения должны быть в дозировках, подходящих для такого введения.All formulations for oral administration should be in dosages suitable for such administration.

В некоторых вариантах осуществления обеспечиваются фармацевтические составы, содержащие соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) и по меньшей мере одно диспергирующее средство или суспендирующее средство для перорального введения субъекту. В одном варианте осуществления состав представляет собой порошок и/или гранулы для суспендирования, и при смешивании с водой получается по существу однородная суспензия.In some embodiments, pharmaceutical formulations are provided comprising Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) and at least one dispersing agent or suspending agent for oral administration to a subject. In one embodiment, the composition is a powder and/or granules for suspension, and when mixed with water, a substantially homogeneous suspension is obtained.

Суспензия является по существу однородной, когда она является практически гомогенной, а именно, когда суспензия содержит приблизительно одинаковую концентрацию соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) в любой точке суспензии (фармакопея США глава 905).A suspension is substantially homogeneous when it is substantially homogeneous, that is, when the suspension contains approximately the same concentration of Compound I or its pharmaceutically acceptable salt (e.g., Compound 1 or Compound 2) at any point in the suspension (U.S. Pharmacopeia chapter 905).

Жидкие лекарственных форм состава для перорального введения представляют водные суспензии или неводные суспензии.Liquid dosage forms of the formulation for oral administration are aqueous suspensions or non-aqueous suspensions.

Жидкие лекарственные формы состава для перорального введения представляют водные суспензии, выбранные, помимо прочего, из фармацевтически приемлемых водных пероральных дисперсий, эмульсий, растворов и сиропов. См., например, Singh et al., Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, 2nd Ed., pp. 754-757 (2002). Помимо включения соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2), жидкие лекарственные формы содержат добавки, такие как: (а) дезинтегрирующие средства; (b) диспергирующие средства; (с) смачивающие средства; (d) консерванты; (е) повышающие вязкость средства; (f) подсластители; (g) ароматизаторы; (h) солюбилизаторы (повышающие биодоступность средства).Liquid dosage forms of the formulation for oral administration are aqueous suspensions selected from, among other things, pharmaceutically acceptable aqueous oral dispersions, emulsions, solutions and syrups. See, for example, Singh et al., Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, 2nd Ed., pp. 754-757 (2002). In addition to including Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2), liquid dosage forms contain additives such as: (a) disintegrants; (b) dispersants; (c) wetting agents; (d) preservatives; (e) viscosity-increasing agents; (f) sweeteners; (g) flavors; (h) solubilizers (bioavailability enhancing agents).

В одном варианте осуществления водные суспензии и дисперсии, описанные в настоящем документе, остаются в гомогенном состоянии, как определено выше в главе 905 фармакопеи США, в течение по меньшей мере 4 ч.In one embodiment, the aqueous suspensions and dispersions described herein remain in a homogeneous state, as defined above in USP 905, for at least 4 hours.

Жидкие композиции в качестве иллюстрации принимают вид жидкости, где средство (например, соединение I или его фармацевтически приемлемая соль (например, соединение 1 или соединение 2)) находится в растворе, в суспензии или и том, и другом. В одном варианте осуществления жидкая композиция является водной.Liquid compositions illustratively take the form of a liquid, wherein the agent (eg Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2)) is in solution, in suspension, or both. In one embodiment, the liquid composition is aqueous.

Жидкие композиции в качестве иллюстрации принимают вид жидкости, где средство (например, соединение I или его фармацевтически приемлемая соль (например, соединение 1 или соединение 2)) находится в растворе, в суспензии или и том, и другом. В одном варианте осуществления жидкая композиция является неводной.Liquid compositions illustratively take the form of a liquid, wherein the agent (eg Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2)) is in solution, in suspension, or both. In one embodiment, the liquid composition is non-aqueous.

В одном варианте осуществления водная суспензия также содержит один или несколько полимеров в качестве суспендирующих средств. Пригодные полимеры включают растворимые в воде полимеры, такие как целлюлозные полимеры, например, гидроксипропилметилцеллюлоза, и нерастворимые в воде полимеры, такие как сшитые содержащие карбоксил полимеры. В одном варианте осуществления пригодные композиции также содержат мукоадгезивный полимер, выбранный, например, из карбоксиме- 33 041082 тилцеллюлозы, карбомера (полимера акриловой кислоты), поли(метилметакрилата), полиакриламида, поликарбофила, сополимера акриловой кислоты/бутилакрилата, альгината натрия и декстрана.In one embodiment, the aqueous suspension also contains one or more polymers as suspending agents. Suitable polymers include water-soluble polymers such as cellulosic polymers, such as hydroxypropyl methylcellulose, and water-insoluble polymers, such as cross-linked carboxyl-containing polymers. In one embodiment, suitable compositions also contain a mucoadhesive polymer selected from, for example, carboxymethyl cellulose, carbomer (acrylic acid polymer), poly(methyl methacrylate), polyacrylamide, polycarbophil, acrylic acid/butyl acrylate copolymer, sodium alginate, and dextran.

В одном варианте осуществления фармацевтические композиции также содержат одно или несколько регулирующих pH средств или буферных средств, включая кислоты, такие как уксусная, борная, лимонная, молочная, фосфорная и соляная кислоты; основания, такие как гидроксид натрия, фосфат натрия, борат натрия, карбонат натрия, цитрат натрия, ацетат натрия, лактат натрия и трисгидроксиметиламинометан; и буферы, такие как цитрат/декстроза, карбонат натрия, бикарбонат натрия и хлорид аммония. Такие кислоты, основания и буферы включены в количестве, необходимом для поддержания pH композиции в соответствующем диапазоне.In one embodiment, the pharmaceutical compositions also contain one or more pH adjusting agents or buffering agents, including acids such as acetic, boric, citric, lactic, phosphoric, and hydrochloric acids; bases such as sodium hydroxide, sodium phosphate, sodium borate, sodium carbonate, sodium citrate, sodium acetate, sodium lactate and trishydroxymethylaminomethane; and buffers such as citrate/dextrose, sodium carbonate, sodium bicarbonate and ammonium chloride. Such acids, bases and buffers are included in an amount necessary to maintain the pH of the composition within the appropriate range.

В одном варианте осуществления жидкие фармацевтические композиции также содержат одну или несколько солей в количестве, необходимом для придания композиции осмоляльности в соответствующем диапазоне. Такие соли включают такие, которые имеют катионы натрия, калия или аммония и анионы хлорида, цитрата, аскорбата, бората, фосфата, бикарбоната, сульфата, тиосульфата или бисульфита; подходящие соли включают хлорид натрия, хлорид калия, тиосульфат натрия, бисульфит натрия и сульфат аммония.In one embodiment, liquid pharmaceutical compositions also contain one or more salts in an amount necessary to give the composition an osmolality in the appropriate range. Such salts include those having sodium, potassium or ammonium cations and chloride, citrate, ascorbate, borate, phosphate, bicarbonate, sulfate, thiosulfate or bisulfite anions; suitable salts include sodium chloride, potassium chloride, sodium thiosulfate, sodium bisulfite and ammonium sulfate.

В одном варианте осуществления фармацевтические композиции также содержат один или несколько консервантов для ингибирования микробной активности.In one embodiment, the pharmaceutical compositions also contain one or more preservatives to inhibit microbial activity.

Еще одни композиции включают одно или несколько поверхностно-активных веществ для повышения физической стабильности или для других целей. Подходящие неионные поверхностно-активные вещества включают глицериды полиоксиэтилена и жирных кислот и растительные масла, например, полиоксиэтилен (60) гидрогенизированное касторовое масло; и алкильные эфиры и алкилфенильные эфиры полиоксиэтилена, например, октоксинол 10, октоксинол 40.Still other compositions include one or more surfactants to improve physical stability or for other purposes. Suitable non-ionic surfactants include polyoxyethylene fatty acid glycerides and vegetable oils, for example polyoxyethylene (60) hydrogenated castor oil; and alkyl ethers and alkylphenyl ethers of polyoxyethylene, for example octoxynol 10, octoxynol 40.

Еще одни композиции включают один или несколько антиоксидантов для повышения химической стабильности, при необходимости. Подходящие антиоксиданты включают в качестве примера аскорбиновую кислоту, токоферол и метабисульфит натрия.Still other compositions include one or more antioxidants to improve chemical stability, if desired. Suitable antioxidants include, by way of example, ascorbic acid, tocopherol, and sodium metabisulphite.

В одном варианте осуществления водные композиции упаковывают в повторно не закрываемые контейнеры для однократной дозы. Альтернативно, используют повторно закрываемые контейнеры для множества доз, в случае чего композиции обычно содержат консервант.In one embodiment, the aqueous compositions are packaged in resealable single dose containers. Alternatively, resealable multi-dose containers are used, in which case the compositions typically contain a preservative.

В некоторых вариантах осуществления водные фармацевтические композиции не содержат консервант и используются в течение 24 ч после получения.In some embodiments, the aqueous pharmaceutical compositions do not contain a preservative and are used within 24 hours of receipt.

В некоторых вариантах осуществления водные фармацевтические композиции содержат один или несколько солюбилизаторов, которые способствуют повышению биодоступности активного фармацевтического ингредиента. В некоторых вариантах осуществления солюбилизатор выбирают из Labrasol, Lutrol (макрогелей, полоксамеров) и других, известных в данной области.In some embodiments, the aqueous pharmaceutical compositions contain one or more solubilizers that enhance the bioavailability of the active pharmaceutical ingredient. In some embodiments, the solubilizer is selected from Labrasol, Lutrol (macrogels, poloxamers), and others known in the art.

Пероральные фармацевтические растворы, описанные в настоящем документе, являются предпочтительными для введения младенцам (возрастом менее 2 лет), детям до 10 лет и любой группе пациентов, которые не могут проглатывать или принимать внутрь твердые пероральные лекарственные формы.The oral pharmaceutical solutions described herein are preferred for administration to infants (less than 2 years of age), children under 10 years of age, and any group of patients who cannot swallow or ingest solid oral dosage forms.

Для буквального или подъязычного введения в одном варианте осуществления композиции принимают вид таблеток, пастилок или гелей, составленных обычным образом (см., например, патенты США №№ 4229447; 4596795; 4755386 и 5739136).For literal or sublingual administration, in one embodiment, the compositions take the form of tablets, lozenges, or gels formulated in the usual manner (see, for example, US Pat.

В одном варианте осуществления ядра драже получают с подходящими покрытиями. Для этой цели используют концентрированные растворы сахара, которые необязательно содержат гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, карбопол-гель, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы глазури, и подходящие органические растворители или смеси растворителей. В одном варианте осуществления красители или пигменты добавляют в покрытия таблеток или драже для идентификации или определения характеристик различных комбинаций доз активных соединений.In one embodiment, dragee cores are prepared with suitable coatings. For this purpose, concentrated sugar solutions are used, which optionally contain gum arabic, talc, polyvinylpyrrolidone, carbopol gel, polyethylene glycol and/or titanium dioxide, glaze solutions, and suitable organic solvents or solvent mixtures. In one embodiment, dyes or pigments are added to tablet or dragee coatings to identify or characterize various combinations of active compound doses.

Следует понимать, что многие носители и вспомогательные вещества могут служить нескольким функциям, даже в одном и том же составе.It should be understood that many carriers and excipients can serve multiple functions, even in the same formulation.

В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют в виде фармацевтической композиции, которая подходит для ингаляции/назальной доставки. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в виде раствора, суспензии, эмульсии, коллоидной дисперсии, спрея, сухого порошка, аэрозоля или их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, которое обычно используется в назальных фармацевтических композициях/фармацевтических композициях для ингаляций. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию вводят при помощи атомизатора, инсуффлятора, небулайзера, испарителя или дозирующего ингалятора. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию вводят ингаляцией назально или перорально. В некоторых вариантах осуществления кристаллическое соединение 1 используют в фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления кристаллическое соединение 2 используют в фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления аморфное соединение 1 используют в фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления аморфное соединение 2 исполь- 34 041082 зуют в фармацевтической композиции.In some embodiments, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) is formulated into a pharmaceutical composition that is suitable for inhalation/nasal delivery. In some embodiments, the pharmaceutical composition is in the form of a solution, suspension, emulsion, colloidal dispersion, spray, dry powder, aerosol, or combinations thereof. In some embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition contains at least one pharmaceutically acceptable excipient, which is usually used in nasal pharmaceutical compositions/pharmaceutical compositions for inhalation. In some embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition is administered using an atomizer, insufflator, nebulizer, vaporizer or metered dose inhaler. In some embodiments, the implementation of the pharmaceutical composition is administered by inhalation, nasally or orally. In some embodiments, crystalline Compound 1 is used in a pharmaceutical composition. In some embodiments, crystalline Compound 2 is used in a pharmaceutical composition. In some embodiments, amorphous Compound 1 is used in a pharmaceutical composition. In some embodiments, amorphous compound 2 is used in a pharmaceutical composition.

Типичные назальные составы/составы для ингаляций описаны, например, в Ansel, Н. С. et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Sixth Ed. (1995); REMINGTON: THE SCIENCE ANDExemplary nasal/inhalation formulations are described in, for example, Ansel, H. C. et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Sixth Ed. (1995); REMINGTON: THE SCIENCE AND

PRACTICE OF PHARMACY, 21st edition, 2005.PRACTICE OF PHARMACY, 21st edition, 2005.

В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют в виде назального спрея, назального аэрозоля и подобного.In some embodiments, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) is formulated as a nasal spray, nasal aerosol, and the like.

Для введения ингаляцией соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) составляют для использования в виде аэрозоля, спрея или порошка.For administration by inhalation, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2) is formulated for use as an aerosol, spray or powder.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, подходящие для назального введения/введения ингаляцией, удобно доставляют в виде аэрозольного спрея из упаковок под давлением или небулайзера с использованием подходящего газа-вытеснителя. Капсулы и картриджи для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть составлены так, что они содержат порошкообразную смесь соединения, описанного в настоящем документе, и подходящей порошкообразной основы, такой как лактоза или крахмал.In some embodiments, pharmaceutical compositions suitable for nasal/inhalation administration are conveniently delivered as an aerosol spray from pressurized packs or a nebulizer using a suitable propellant. Capsules and cartridges for use in an inhaler or insufflator may be formulated to contain a powder mixture of a compound described herein and a suitable powder base such as lactose or starch.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в виде порошка для назальной доставки/доставки ингаляцией млекопитающему. В некоторых вариантах осуществления порошки содержат частицы соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) микро-и/или наноразмера, смешанные с большими частицами носителя, которые предотвращают агрегацию. Например, в одном варианте осуществления состав сухого порошка получают следующим образом: соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) измельчают на струйной мельнице. Лактозу измельчают на струйной мельнице, два ингредиента смешивают и готовую смесь упаковывают в стерильные инсуффляторы. В некоторых случаях составы порошка для ингаляций, описанные в настоящем документе, содержат кристаллические частицы соединения 1. В некоторых случаях составы порошка для ингаляций, описанные в настоящем документе, содержат кристаллические частицы соединения 2. В некоторых вариантах осуществления составы порошка для ингаляций, описанные в настоящем документе, содержат аморфные частицы соединения 1. В некоторых вариантах осуществления составы порошка для ингаляций, описанные в настоящем документе, содержат аморфные частицы соединения 2.In some embodiments, the pharmaceutical composition is in powder form for nasal/inhalation delivery to a mammal. In some embodiments, the powders contain micro- and/or nano-sized particles of compound I or a pharmaceutically acceptable salt (eg, compound 1 or compound 2) mixed with large carrier particles that prevent aggregation. For example, in one embodiment, a dry powder formulation is prepared as follows: Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2) is jet milled. The lactose is ground in a jet mill, the two ingredients are mixed and the finished mixture is packaged in sterile insufflators. In some instances, the inhalation powder formulations described herein contain crystalline particles of Compound 1. In some instances, the inhalation powder formulations described herein contain crystalline particles of Compound 2. In some embodiments, the inhalation powder formulations described herein document contain amorphous particles of Compound 1. In some embodiments, the inhalable powder formulations described herein contain amorphous particles of Compound 2.

ДозировкиDosages

В некоторых вариантах осуществления эффективное количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) составляет от приблизительно 1 мг до приблизительно 2,5 г на дозу, от 1 мг до приблизительно 2 г на дозу, от приблизительно 1 мг до приблизительно 1,5 г на дозу, от приблизительно 1 мг до приблизительно 1 г на дозу, от приблизительно 5 мг до приблизительно 600 мг на дозу или от приблизительно 50 мг до приблизительно 250 мг на дозу. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2) составляет от приблизительно 1 мг до приблизительно 5 г в день, от приблизительно 5 мг до приблизительно 2 г в день, от приблизительно 5 мг до приблизительно 1 г в день, от приблизительно 5 мг до приблизительно 0,6 г в день или от приблизительно 5 мг до приблизительно 0,5 г в день.In some embodiments, an effective amount of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2) is from about 1 mg to about 2.5 g per dose, from 1 mg to about 2 g per dose, from about 1 mg up to about 1.5 g per dose, from about 1 mg to about 1 g per dose, from about 5 mg to about 600 mg per dose, or from about 50 mg to about 250 mg per dose. In some embodiments, an effective amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof (e.g., Compound 1 or Compound 2), is about 1 mg to about 5 g per day, about 5 mg to about 2 g per day, about 5 mg to about 1 g per day, about 5 mg to about 0.6 g per day, or about 5 mg to about 0.5 g per day.

В некоторых вариантах осуществления эффективное количество соединения I составляет приблизительно 50 мг на дозу, приблизительно 100 мг на дозу, приблизительно 150 мг на дозу, приблизительно 200 мг на дозу, приблизительно 250 мг на дозу, приблизительно 300 мг на дозу, приблизительно 350 мг на дозу, приблизительно 400 мг на дозу, приблизительно 450 мг на дозу, приблизительно 500 мг на дозу, приблизительно 550 мг на дозу, приблизительно 600 мг на дозу, приблизительно 650 мг на дозу, приблизительно 700 мг на дозу, приблизительно 750 мг на дозу, приблизительно 800 мг на дозу, приблизительно 850 мг на дозу, приблизительно 900 мг на дозу, приблизительно 950 мг на дозу, приблизительно 1000 мг на дозу, приблизительно 1050 мг на дозу, приблизительно 1100 мг на дозу, приблизительно 1150 мг на дозу, приблизительно 1200 мг на дозу, приблизительно 1250 мг на дозу, приблизительно 1300 мг на дозу, приблизительно 1350 мг на дозу, приблизительно 1400 мг на дозу, приблизительно 1450 мг на дозу, приблизительно 1500 мг на дозу, приблизительно 1550 мг на дозу, приблизительно 1600 мг на дозу, приблизительно 1650 мг на дозу, приблизительно 1700 мг на дозу, приблизительно 1750 мг на дозу, приблизительно 1800 мг на дозу, приблизительно 1850 мг на дозу, приблизительно 1900 мг на дозу, приблизительно 1950 мг на дозу или приблизительно 2000 мг на дозу.In some embodiments, an effective amount of Compound I is about 50 mg per dose, about 100 mg per dose, about 150 mg per dose, about 200 mg per dose, about 250 mg per dose, about 300 mg per dose, about 350 mg per dose , approximately 400 mg per dose, approximately 450 mg per dose, approximately 500 mg per dose, approximately 550 mg per dose, approximately 600 mg per dose, approximately 650 mg per dose, approximately 700 mg per dose, approximately 750 mg per dose, approximately 800 mg per dose, approximately 850 mg per dose, approximately 900 mg per dose, approximately 950 mg per dose, approximately 1000 mg per dose, approximately 1050 mg per dose, approximately 1100 mg per dose, approximately 1150 mg per dose, approximately 1200 mg per dose, approximately 1250 mg per dose, approximately 1300 mg per dose, approximately 1350 mg per dose, approximately 1400 mg per dose, approximately 1450 mg per dose, approx. 1500 mg per dose, approximately 1550 mg per dose, approximately 1600 mg per dose, approximately 1650 mg per dose, approximately 1700 mg per dose, approximately 1750 mg per dose, approximately 1800 mg per dose, approximately 1850 mg per dose, approximately 1900 mg per dose, approximately 1950 mg per dose, or approximately 2000 mg per dose.

В некоторых вариантах осуществления пероральные фармацевтические растворы содержат от приблизительно 6 мг/мл до приблизительно 63 мг/мл соединения 2. В некоторых вариантах осуществления пероральные фармацевтические растворы содержат от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл соединения 2. В некоторых вариантах осуществления пероральные фармацевтические растворы содержат от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл соединения 1.In some embodiments, the oral pharmaceutical solutions contain from about 6 mg/mL to about 63 mg/mL of Compound 2. In some embodiments, the oral pharmaceutical solutions contain from about 1 mg/mL to about 100 mg/mL of Compound 2. In some embodiments, oral pharmaceutical solutions contain from about 1 mg/ml to about 100 mg/ml of Compound 1.

В одном аспекте таблетки содержат от приблизительно 5% мас./мас. до приблизительно 50% мас./мас. соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2). В некоторых вариантах осуществления таблетки немедленного высвобождения содержат от приблизитель- 35 041082 но 5% мас./мас. до приблизительно 40% мас./мас. соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2). В некоторых вариантах осуществления таблетки немедленного высвобождения содержат приблизительно 5% мас./мас., приблизительно 10% мас./мас., приблизительно 15% мас./мас., приблизительно 20% мас./мас., приблизительно 25% мас./мас., приблизительно 30% мас./мас., приблизительно 33% мас./мас., приблизительно 35% мас./мас., приблизительно 40% мас./мас. соединения I или его фармацевтически приемлемой соли (например, соединения 1 или соединения 2).In one aspect, the tablets contain from about 5% wt./wt. up to about 50% wt./wt. Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2). In some embodiments, the immediate release tablets contain from about 5% w/w. up to about 40% wt./wt. Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2). In some embodiments, the immediate release tablets contain about 5% w/w, about 10% w/w, about 15% w/w, about 20% w/w, about 25% w/w. wt., approximately 30% wt./wt., approximately 33% wt./wt., approximately 35% wt./wt., approximately 40% wt./wt. Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg Compound 1 or Compound 2).

В некоторых вариантах осуществления капсулы содержат соединение I или его фармацевтически приемлемую соль (например, соединение 1 или соединение 2) и только оболочку капсулы.In some embodiments, the capsules contain Compound I or a pharmaceutically acceptable salt thereof (eg, Compound 1 or Compound 2) and only the capsule shell.

Способы дозирования и режимы леченияDosing methods and treatment regimens

В одном варианте осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват используют в получении лекарственных средств для лечения заболеваний или состояний у млекопитающего, которые могут извлечь пользу из ингибирования или снижения активности LOXL2. Способы лечения любых заболеваний или состояний, описанные в настоящем документе, у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, включают введение фармацевтических композиций, которые содержат соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, активный метаболит, пролекарство, в терапевтически эффективных количествах указанному млекопитающему.In one embodiment, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is used in the manufacture of medicaments for the treatment of diseases or conditions in a mammal that may benefit from inhibition or reduction of LOXL2 activity. Methods for treating any diseases or conditions described herein in a mammal in need of such treatment include administering pharmaceutical compositions that contain a compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, an active metabolite, a prodrug, in therapeutically effective amounts to said mammal.

В некоторых вариантах осуществления композиции, содержащие соединение(я), описанное в настоящем документе, вводят для профилактических и/или терапевтических лечений. В некоторых терапевтических применениях композиции вводят пациенту, уже страдающему от заболевания или состояния, в количестве, достаточном для лечения или, по меньшей мере, частичной остановки по меньшей мере одного из симптомов заболевания или состояния. Количества, эффективные для этого применения, зависят от тяжести и течения заболевания или состояния, предыдущей терапии, состояния здоровья пациента, веса и реакции на лекарственные средства, и решения лечащего врача. Терапевтически эффективные количества необязательно определяют способами, включая, помимо прочего, исследования с повышением дозы и/или исследования с подбором дозы.In some embodiments, compositions containing the compound(s) described herein are administered for prophylactic and/or therapeutic treatments. In some therapeutic applications, the compositions are administered to a patient already suffering from a disease or condition in an amount sufficient to treat or at least partially stop at least one of the symptoms of the disease or condition. Amounts effective for this use will depend on the severity and course of the disease or condition, previous therapy, the health of the patient, weight and drug response, and the judgment of the attending physician. Therapeutically effective amounts are optionally determined by methods including, but not limited to, dose escalation studies and/or dose titration studies.

В профилактических применениях композиции, содержащие соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, вводят пациенту, подверженному или иным образом находящему в группе риска конкретного заболевания, расстройства или состояния. Такое количество определяют как профилактически эффективное количество или дозу. При таком применении точные количества также зависят от состояния здоровья пациента, веса и подобного. При использовании для пациентов эффективные количества для этого применения будут зависеть от тяжести и течения заболевания, расстройства или состояния, предыдущей терапии, состояния здоровья пациента, и реакции на лекарственные средства, и решения лечащего врача. В одном аспекте профилактические лечения включают введение млекопитающему, который ранее испытывал по меньшей мере один симптом заболевания, которое лечат, и на данный момент находится в состоянии ремиссии, фармацевтической композиции, содержащей соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, для предотвращения возврата симптомов заболевания или состояния.In prophylactic applications, compositions containing Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, are administered to a patient susceptible to or otherwise at risk for a particular disease, disorder, or condition. Such an amount is defined as a prophylactically effective amount or dose. In this application, the precise amounts also depend on the patient's health status, weight, and the like. When used in patients, effective amounts for this application will depend on the severity and course of the disease, disorder or condition, previous therapy, the patient's medical condition, and drug response, and the judgment of the attending physician. In one aspect, prophylactic treatments comprise administering to a mammal that has previously experienced at least one symptom of the disease being treated and is currently in remission, a pharmaceutical composition comprising Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, to prevent recurrence of symptoms of the disease. or states.

В некоторых вариантах осуществления, где состояние пациента не улучшается, по решению врача соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят постоянно, а именно, в течение длительного периода времени, включая в течение всей жизни пациента, для облегчения или иным образом регулирования или ограничения симптомов заболевания или состояния пациента.In some embodiments, where the patient's condition does not improve, at the discretion of the physician, Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is administered continuously, i.e., for an extended period of time, including throughout the life of the patient, to facilitate or otherwise regulate or limit symptoms of the disease or condition of the patient.

В некоторых вариантах осуществления, где состояние пациента не улучшается, доза лекарственного средства, которое вводят, временно снижается или временно приостанавливается в течение некоторого периода времени (т.е. отдых от лекарственных средств). В конкретных вариантах осуществления длительность отдыха от лекарственных средств составляет от 2 дней до 1 года, включая, например, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 7 дней, 10 дней, 12 дней, 15 дней, 20 дней, 28 дней или более чем 28 дней. Снижение дозы в течение отдыха от лекарственных средств составляет, например, на 10-100%, включая, например, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 и 100%.In some embodiments, where the patient's condition does not improve, the dose of drug that is administered is temporarily reduced or temporarily suspended for a period of time (ie, drug rest). In specific embodiments, the duration of drug rest is from 2 days to 1 year, including, for example, 2 days, 3 days, 4 days, 5 days, 6 days, 7 days, 10 days, 12 days, 15 days, 20 days , 28 days or more than 28 days. The dose reduction during drug rest is, for example, 10-100%, including, for example, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 and 100%.

Как только возникало улучшение состояния пациента, вводили поддерживающую дозу при необходимости. Затем в конкретных вариантах осуществления дозировку, или частоту введения, или и то и другое снижают в зависимости от симптомов до уровня, при котором сохраняется улучшение состояния при заболевании, расстройстве или состоянии. В некоторых вариантах осуществления, однако, пациент требует прерывистого лечения длительное время после любого рецидива симптомов.As soon as there was an improvement in the patient's condition, a maintenance dose was administered if necessary. Then, in specific embodiments, the dosage, or the frequency of administration, or both, is reduced depending on the symptoms to a level that maintains improvement in the disease, disorder, or condition. In some embodiments, however, the patient requires intermittent treatment long after any recurrence of symptoms.

В одном аспекте соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят каждый день людям, нуждающимся в терапии соединением I или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят раз в день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят дважды в день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят трижды в день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят через день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтическиIn one aspect, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered daily to humans in need of therapy with Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered once a day. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered twice a day. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered thrice daily. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered every other day. In some embodiments, Compound I or its pharmaceutical

- 36 041082 приемлемую соль или сольват вводят дважды в неделю.- 36 041082 an acceptable salt or solvate is administered twice a week.

В общем, дозы соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, используемые для лечения заболеваний или состояний, описанных в настоящем документе, у людей, обычно находятся в диапазоне от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 10 мг/кг массы тела на дозу. В одном варианте осуществления желаемая доза удобно представлена в виде однократной дозы или разделенных доз, вводимых одновременно (или в течение короткого периода времени) или с соответствующими интервалами, например, как две, три, четыре или более поддоз в день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемая соль или сольват удобно представлены в виде разделенных доз, которые вводят одновременно (или в течение короткого периода времени) раз в день. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемая соль или сольват удобно представлены в виде разделенных доз, которые вводят равными порциями дважды в день.In general, doses of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, used to treat the diseases or conditions described herein in humans typically range from about 0.1 mg to about 10 mg/kg body weight per dose. In one embodiment, the desired dose is conveniently presented as a single dose or divided doses administered simultaneously (or over a short period of time) or at appropriate intervals, such as two, three, four or more subdoses per day. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is conveniently presented as divided doses administered simultaneously (or for a short period of time) once a day. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is conveniently presented as divided doses administered in equal portions twice daily.

В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят перорально человеку в дозе от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 10 кг/кг веса тела на дозу. В некоторых вариантах осуществления соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят человеку согласно графику непрерывного ежедневного дозирования.In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is orally administered to a human at a dose of about 0.1 mg to about 10 kg/kg body weight per dose. In some embodiments, Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered to a human according to a continuous daily dosing schedule.

Термин график непрерывного дозирования относится к введению конкретного терапевтического средства с равными интервалами. В некоторых вариантах осуществления график непрерывного дозирования относится к введению конкретного терапевтического средства с равными интервалами без отдыха от конкретного терапевтического средства. В некоторых других вариантах осуществления график непрерывного дозирования относится к введению конкретного терапевтического средства циклами. В некоторых других вариантах осуществления график непрерывного дозирования относится к введению конкретного терапевтического средства циклами введения лекарственного средства с последующим отдыхом (например, периодом вымывания или другим таким периодом времени, когда лекарственное средство не вводят) от конкретного терапевтического средства. Например, в некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство вводят раз в день, дважды в день, трижды в день, раз в неделю, дважды в неделю, три раза в неделю, четыре раза в неделю, пять раз в неделю, шесть раз в неделю, семь раз в неделю, через день, каждый третий день, каждый четвертый день, ежедневно в течение недели с последующей неделей без введения терапевтического средства, ежедневно в течение двух недель с последующей одной или двумя неделями без введения терапевтического средства, ежедневно в течение трех недель с последующей одной, двумя или тремя неделями без введения терапевтического средства, ежедневно в течение четырех недель с последующей одной, двумя, тремя или четырьмя неделями без введения терапевтического средства, введение раз в неделю терапевтического средства с последующей неделей без введения терапевтического средства или введение дважды в неделю терапевтического средства с последующими двумя неделями без введения терапевтического средства. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет раз в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет дважды в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет три раза в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет более трех раз в день.The term continuous dosing schedule refers to the administration of a particular therapeutic agent at regular intervals. In some embodiments, a continuous dosing schedule refers to administering a particular therapeutic agent at regular intervals without resting from the particular therapeutic agent. In some other embodiments, a continuous dosing schedule refers to administering a particular therapeutic agent in cycles. In some other embodiments, a continuous dosing schedule refers to administering a particular therapeutic agent in cycles of drug administration followed by a rest period (eg, a washout period or other such time period when no drug is administered) from a particular therapeutic agent. For example, in some embodiments, the therapeutic agent is administered once a day, twice a day, three times a day, once a week, twice a week, three times a week, four times a week, five times a week, six times a week, seven once a week, every other day, every third day, every fourth day, daily for a week, followed by a week without the administration of a therapeutic agent, daily for two weeks, followed by one or two weeks without the administration of a therapeutic agent, daily for three weeks, followed by one, two, or three weeks without therapeutic agent, daily for four weeks followed by one, two, three, or four weeks without therapeutic agent, once weekly administration of therapeutic agent followed by weekly administration of therapeutic agent, or twice weekly administration of therapeutic agent means followed by two weeks without the introduction of a therapeutic agent. In some embodiments, the daily administration is once a day. In some embodiments, the daily administration is twice a day. In some embodiments, the daily administration is three times a day. In some embodiments, the daily administration is more than three times a day.

Термин график непрерывного ежедневного дозирования относится к введению конкретного терапевтического средства каждый день в приблизительно одно и то же время каждый день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет раз в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет дважды в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет три раза в день. В некоторых вариантах осуществления ежедневное введение представляет более трех раз в день.The term continuous daily dosing schedule refers to the administration of a particular therapeutic agent each day at approximately the same time each day. In some embodiments, the daily administration is once a day. In some embodiments, the daily administration is twice a day. In some embodiments, the daily administration is three times a day. In some embodiments, the daily administration is more than three times a day.

В некоторых вариантах осуществления количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата вводят раз в день. В некоторых других вариантах осуществления количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата вводят дважды в день. В некоторых других вариантах осуществления количество соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата вводят три раза в день.In some embodiments, an amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered once a day. In some other embodiments, an amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered twice daily. In some other embodiments, an amount of compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is administered three times a day.

В некоторых вариантах осуществления, где улучшение состояния при заболевании или состоянии у человека не наблюдается, суточную дозу соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата повышают. В некоторых вариантах осуществления график дозирования раз в день изменяют на график дозирования дважды в день. В некоторых вариантах осуществления график дозирования три раза в день используют для увеличения количества соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, которое вводят. В некоторых вариантах осуществления частоту введения ингаляцией увеличивают для обеспечения повторных высоких уровней Cmax на более регулярной основе. В некоторых вариантах осуществления частоту введения увеличивают для обеспечения поддержания или более регулярного воздействия соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата. В некоторых вариантах осуществления частоту введения увеличивают для обеспечения повторных высоких уровней Cmax на более регулярной основе и обеспечения поддержания или более регулярного воздействия соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.In some embodiments, where improvement in the disease or condition in the human is not observed, the daily dose of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is increased. In some embodiments, the once daily dosing schedule is changed to a twice daily dosing schedule. In some embodiments, a three times a day dosing schedule is used to increase the amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, that is administered. In some embodiments, the frequency of inhalation administration is increased to provide repeated high C max levels on a more regular basis. In some embodiments, the frequency of administration is increased to ensure maintenance or more regular exposure to Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof. In some embodiments, the frequency of administration is increased to provide repeated high levels of C max on a more regular basis and to ensure maintenance or more regular exposure to Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof.

В любом из вышеуказанных аспектов представлены дополнительные варианты осуществления, вIn any of the above aspects, additional embodiments are provided, in

- 37 041082 которых эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата (а) системно вводится млекопитающему; и/или (b) вводится перорально млекопитающему; и/или (с) внутривенно вводится млекопитающему, и/или (d) вводится инъекцией млекопитающему; и/или (е) вводится местно млекопитающему; и/или (f) вводится несистемно или локально млекопитающему.- 37 041082 which an effective amount of the compound or its pharmaceutically acceptable salt or solvate (a) is systemically administered to a mammal; and/or (b) is orally administered to a mammal; and/or (c) intravenously administered to a mammal, and/or (d) injected into a mammal; and/or (e) is administered topically to a mammal; and/or (f) is administered non-systemically or locally to the mammal.

В любом из вышеуказанных аспектов представлены дополнительные варианты осуществления, включающие однократные введения эффективного количества соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, включая дополнительные варианты осуществления, в которых (i) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят раз в день; или (ii) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят млекопитающему множество раз в течение одного дня.In any of the above aspects, further embodiments are provided comprising single administrations of an effective amount of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, including further embodiments wherein (i) Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is administered once a day; or (ii) Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered to the mammal multiple times in one day.

В любом из вышеуказанных аспектов представлены дополнительные варианты осуществления, включающие многократные введения эффективного количества соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, включая дополнительные варианты осуществления, в которых (i) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят непрерывно или с перерывами: в виде однократной дозы;In any of the above aspects, further embodiments are provided, comprising multiple administrations of an effective amount of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, including further embodiments, wherein (i) Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered continuously or intermittently: as a single dose;

(ii) время между многократными введениями составляет 6 ч;(ii) the time between multiple injections is 6 hours;

(iii) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят млекопитающему каждые 8 ч;(iii) compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is administered to the mammal every 8 hours;

(iv) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят млекопитающему каждые 12 ч;(iv) Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered to the mammal every 12 hours;

(v) соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят млекопитающему каждые 24 ч.(v) Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered to the mammal every 24 hours.

В дополнительных или альтернативных вариантах осуществления способ включает отдых от лекарственных средств, причем введение соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата временно прекращается, или вводимая доза соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата временно снижается; в конце отдыха от лекарственных средств дозирование соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата возобновляется. В одном варианте осуществления длительность отдыха от лекарственных средств варьирует от 2 дней до 1 года.In additional or alternative embodiments, the method includes resting from drugs, wherein the administration of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is temporarily stopped, or the dose of Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is temporarily reduced; at the end of drug rest, dosing of compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is resumed. In one embodiment, the duration of drug rest ranges from 2 days to 1 year.

В общем, дозы, используемые для лечения взрослого человека, обычно находятся в диапазоне 15000 мг в день. В некоторых вариантах осуществления дозы, используемые для лечения взрослого человека, составляют от приблизительно 1 мг до приблизительно 4000 мг в день, от приблизительно 150 мг до приблизительно 4000 мг в день или от приблизительно 150 мг до приблизительно 2000 мг в день. В некоторых вариантах осуществления 50, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350, 1400, 1450, 1500, 1550, 1600, 1650, 1700, 1750, 1800, 1850, 1900, 1950 или 2000 мг соединения I вводят взрослому человеку. В некоторых вариантах осуществления желаемая доза удобно представлена в виде однократной дозы или разделенных доз, вводимых одновременно или с соответствующими интервалами, например как две, три, четыре или более поддоз в день.In general, doses used to treat an adult are typically in the range of 15,000 mg per day. In some embodiments, dosages used to treat an adult human are from about 1 mg to about 4000 mg per day, from about 150 mg to about 4000 mg per day, or from about 150 mg to about 2000 mg per day. In some embodiments, 50, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350, 1400, 1450, 1500, 1550, 1600, 1650, 1700, 1750, 1800, 1850, 1900, 1950 or 2000 mg of Compound I is administered to an adult. In some embodiments, the desired dose is conveniently presented as a single dose or divided doses administered simultaneously or at appropriate intervals, such as two, three, four or more subdoses per day.

В некоторых вариантах осуществления ежедневная дозировка или количество активного вещества в лекарственной форме ниже или выше, чем диапазоны, указанные в настоящем документе, на основе ряда переменных в отношении конкретного режима лечения. В различных вариантах осуществления ежедневные и стандартные дозы изменяют в зависимости от ряда переменных, включая, помимо прочего, заболевание или состояние, которое необходимо лечить, режим введения, требования конкретного субъекта, тяжесть заболевания или состояния, которое лечат, идентификацию (например, вес) человека и конкретные дополнительные терапевтические средства, которые вводят (при необходимости), и решение лечащего врача.In some embodiments, the daily dosage or amount of the active substance in the dosage form is lower or higher than the ranges specified herein, based on a number of variables in relation to a particular treatment regimen. In various embodiments, daily and unit doses vary depending on a number of variables, including, but not limited to, the disease or condition being treated, the mode of administration, the requirements of the particular subject, the severity of the disease or condition being treated, the identification (e.g., weight) of the individual and the specific additional therapeutic agents that are administered (if necessary) and the judgment of the attending physician.

Токсичность и терапевтическая эффективность таких терапевтических режимов определяются стандартными фармацевтическими процедурами на клеточных культурах или экспериментальных животных, включая, помимо прочего, определение LD50 и ED50. Соотношение дозы между токсичным и терапевтическим эффектами представляет терапевтический индекс, и он выражается как отношение между LD50 и ED50. В некоторых вариантах осуществления данные, полученные от анализа клеточных линий и исследований на животных, используют при составлении терапевтически эффективного ежедневного диапазона доз и/или терапевтически эффективного количества для стандартной дозы для использования для млекопитающих, включая людей. В некоторых вариантах осуществления количество суточной дозы соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата лежит в диапазоне циркулирующих концентраций, которые включают ED50 с минимальной токсичностью. В некоторых вариантах осуществления диапазон суточных доз и/или величина стандартной дозы варьирует в этом диапазоне в зависимости от используемой лекарственной формы и применяемого пути введения.The toxicity and therapeutic efficacy of such therapeutic regimens are determined by standard pharmaceutical procedures in cell cultures or experimental animals, including, but not limited to, determination of LD 50 and ED 50 . The dose ratio between toxic and therapeutic effects represents the therapeutic index, and it is expressed as the ratio between LD 50 and ED 50 . In some embodiments, data obtained from cell line analysis and animal studies is used in formulating a therapeutically effective daily dosage range and/or a therapeutically effective amount per dosage unit for use in mammals, including humans. In some embodiments, the amount of daily dose of Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is in a range of circulating concentrations that include the ED50 with minimal toxicity. In some embodiments, the range of daily doses and/or the size of the unit dose varies within this range depending on the dosage form used and the route of administration used.

В некоторых вариантах осуществления NOAEL (уровень отсутствия проявляющихся нежелательных явлений) в течение 7 дней для крысы, которой вводили соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, составляет по меньшей мере приблизительно 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 или 1000 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления NOAEL в течение 7 дней для собаки, которойIn some embodiments, the NOAEL (No Appearing Adverse Event Level) for 7 days for a rat administered Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is at least about 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 or 1000 mg/kg. In some embodiments, NOAEL for 7 days for a dog that

- 38 041082 вводили соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, составляет по меньшей мере приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300 и до 500 мг/кг.Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof is administered at least about 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300 and up to 500 mg/kg.

Комбинированное лечениеCombined treatment

В некоторых случаях уместно вводить или составлять соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват в комбинации с одним или несколькими другими терапевтическими средствами.In some instances, it is appropriate to administer or formulate Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, in combination with one or more other therapeutic agents.

Наборы и изделияKits and products

В настоящем документе описаны наборы для лечения состояния, заболевания или расстройства, связанного с активностью LOXL2, содержащие введение указанному субъекту соединения I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.Disclosed herein are kits for the treatment of a condition, disease or disorder associated with LOXL2 activity comprising administering to said subject a Compound I or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof.

Для использования в терапевтических применениях, описанных в настоящем документе, в настоящем документе также описаны наборы и изделия. В некоторых вариантах осуществления такие наборы содержат носитель, упаковку или контейнер, который разделен на отсеки для приема одного или нескольких контейнеров, таких как пузырьки, пробирки и подобное, причем каждый из контейнеров содержит один из отдельных элементов, которые следует использовать в способе, описанном в настоящем документе. Подходящие контейнеры включают, например, бутылочки, пузырьки, шприцы и пробирки. Контейнеры могут быть получены из различных материалов, таких как стекло или пластмасса.For use in the therapeutic applications described herein, kits and articles of manufacture are also described herein. In some embodiments, such kits comprise a carrier, package, or container that is divided into compartments to receive one or more containers, such as vials, vials, and the like, each container containing one of the individual elements to be used in the method described in this document. Suitable containers include, for example, bottles, vials, syringes and test tubes. Containers can be made from various materials such as glass or plastic.

Изделия, обеспеченные в настоящем документе, содержат упаковочные материалы. Примеры фармацевтических упаковочных материалов включают, помимо прочего, блистерные упаковки, бутылочки, пробирки, ингаляторы, насосы, пакеты, пузырьки, контейнеры, шприцы, бутылки и любой упаковочный материал, подходящий для выбранного состава и предполагаемого способа введения и лечения. Большой ряд составов соединений и композиций, обеспеченных в настоящем документе, рассматривается как разнообразные лечения для любого расстройства, которые извлекают пользу из ингибирования LOXL2, или в которых LOXL2 является медиатором или способствует симптомам или причине.The products provided herein contain packaging materials. Examples of pharmaceutical packaging materials include, but are not limited to, blister packs, bottles, tubes, inhalers, pumps, pouches, vials, containers, syringes, bottles, and any packaging material suitable for the formulation chosen and the intended mode of administration and treatment. The large range of compound formulations and compositions provided herein are contemplated as a variety of treatments for any disorder that benefit from inhibition of LOXL2, or in which LOXL2 mediates or contributes to a symptom or cause.

Контейнер(ы) необязательно имеет стерильное впускное отверстие (например, контейнер является пакетом для внутривенного раствора или пузырьком с пробкой, проницаемой для иголки для подкожной инъекции). Такие наборы необязательно содержат соединение с идентифицирующим описанием, или этикеткой, или инструкциями, относящимися к его применению в способах, описанных в настоящем документе.The container(s) optionally has a sterile inlet (eg, the container is an intravenous solution bag or vial with a stopper permeable to a hypodermic needle). Such kits optionally contain a compound with an identifying description or label or instructions relating to its use in the methods described herein.

Набор будет обычно содержать один или несколько дополнительных контейнеров, каждый с одним или несколькими различными материалами (такими как реагенты, необязательно в концентрированном виде, и/или устройства), желательные с коммерческой и пользовательской точки зрения для использования с соединением, описанным в настоящем документе. Неограничивающие примеры таких материалов включают, помимо прочего, буферы, разбавители, фильтры, иголки, шприцы; этикетки на носитель, упаковку, контейнер, пузырек и/или пробирку, указывающие содержимое, и/или инструкции по применению и листки-вкладыши в упаковку с инструкциями по применению. Набор инструкций будет также обычно включен.The kit will typically contain one or more additional containers, each with one or more different materials (such as reagents, optionally in concentrated form, and/or devices) commercially and user-desired for use with the compound described herein. Non-limiting examples of such materials include, but are not limited to, buffers, diluents, filters, needles, syringes; labels on the carrier, packaging, container, vial and/or vial indicating contents and/or instructions for use and package inserts with instructions for use. An instruction set will also usually be included.

В некоторых вариантах осуществления этикетка находится на контейнере или связана с ним. Этикетка может быть на контейнере, когда буквы, цифры или другие символы, образующие этикетку, прикреплены, сформованы или вытравлены на самом контейнере; этикетка может быть связана с контейнером, когда она находится в коробке или на носителе, который также вмещает контейнер, например, в виде листка-вкладыша в упаковке. Этикетку можно использовать для указания, что содержимое следует использовать для конкретного терапевтического применения. Этикетка может также указывать руководство по применению содержимого, например, в способах, описанных в настоящем документе.In some embodiments, the label is on or associated with the container. A label may be on a container when the letters, numbers, or other symbols forming the label are affixed, molded, or etched onto the container itself; the label may be associated with the container when it is in the box or on a carrier that also accommodates the container, such as in the form of a package insert. The label may be used to indicate that the contents are to be used for a particular therapeutic application. The label may also indicate guidance on how to use the content, for example, in the methods described herein.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, содержащая соединение I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, находится в упаковке или дозирующем устройстве, которое может содержать одну или несколько стандартных лекарственных форм. Упаковка может, например, содержать металлическую или пластмассовую фольгу, такую как блистерная упаковка. К упаковке или дозирующему устройству могут прилагаться инструкции по введению. К упаковке или дозирующему устройству могут прилагаться примечания, связанные с контейнером в виде предусмотренного государственным органом регламента изготовления, применения или продажи фармацевтических препаратов, причем примечания отражают одобрение органом формы лекарственного средства для введения людям или животным. Такое примечание, например, может быть этикеткой, одобренной Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США для отпускаемых по рецепту лекарственных средств, или одобренный листок-вкладыш в продукт. Композиции, содержащие соединение, обеспеченное в настоящем документе, составленное с совместимым фармацевтическим носителем, можно также получать, помещать в соответствующий контейнер и маркировать для лечения указанного состояния.In some embodiments, a pharmaceutical composition containing Compound I, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is in a package or dispenser that may contain one or more unit dosage forms. The package may, for example, contain a metal or plastic foil, such as a blister pack. The package or dispenser may be accompanied by instructions for administration. The package or dispenser may be accompanied by notes associated with the container in the form of government regulations for the manufacture, use or sale of pharmaceuticals, the notes reflecting the authority's approval of the form of the medicinal product for administration to humans or animals. Such a note, for example, could be a US Food and Drug Administration-approved label for prescription drugs or an approved product package leaflet. Compositions containing a compound provided herein formulated with a compatible pharmaceutical carrier may also be prepared, placed in an appropriate container, and labeled for the treatment of the indicated condition.

Следует понимать, что при использовании в настоящем документе фармацевтические композиции, описанные как содержащие фармацевтически приемлемую соль, описанную в настоящем документе, например, жидкие растворы, охватывают фармацевтические композиции, содержащие ассоциированные и/или диссоциированные формы соли. Таким образом, например, фармацевтическая композиция, описанная в настоящем документе, содержащая водный раствор соединения 2, охватывает композицию, со- 39 041082 держащую множество метансульфонатных анионов и множество катионов (2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метанаминия.As used herein, pharmaceutical compositions described as containing a pharmaceutically acceptable salt as described herein, eg, liquid solutions, are to be understood to encompass pharmaceutical compositions containing associated and/or dissociated forms of the salt. Thus, for example, a pharmaceutical composition described herein containing an aqueous solution of compound 2 encompasses a composition containing a plurality of methanesulfonate anions and a plurality of cations (2-(3-((3R,4R)-3-fluoro- 4hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methanaminium.

ПримерыExamples

Следующие примеры представлены только с целью иллюстрации и не ограничивают объем формулы изобретения, представленной в настоящем документе.The following examples are presented for illustrative purposes only and do not limit the scope of the claims presented herein.

Пример 1. Получение соединения 1 путем хирального разделения соединения 1 и пром. соединение1 получали путем хирального разделения, как показано ниже.Example 1. Obtaining compound 1 by chiral separation of compound 1 and prom. Compound 1 was obtained by chiral resolution as shown below.

Стадия 1. Рацемический транс-трет-бутил-((2-(3-(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (В).Step 1. Racemic trans-tert-butyl-((2-(3-(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-carbonyl)phenoxy)6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (B).

Две отдельные равные реакционные партии получали следующим образом: в перемешанный раствор соединения А (750 мг, 1,82 ммоль) в смеси DCM/DMF (3:1, 11 мл) добавляли HATU (1,0 г, 2,63 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 20 мин. Добавляли рацемический гидрохлорид транс-4-фтор-3гидроксипирролидина (Synthonix; 304 мг, 2,14 ммоль) и DIEA (938 мг, 7,27 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 2,5 ч. В этот момент обе реакционные партии объединяли и DCM выпаривали под пониженным давлением. Оставшуюся реакционную смесь разделяли между водой (200 мл) и EtOAc (200 мл). Органический слой отделяли, сушили (Na2SO4), фильтровали, а затем концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный остаток очищали (силикагель; элюируя при помощи 10-100% EtOAc в гексанах) с получением соединения В (1,58 г, 87%) в виде белого твердого вещества.Two separate equal reaction batches were prepared as follows: HATU (1.0 g, 2.63 mmol) was added to a stirred solution of Compound A (750 mg, 1.82 mmol) in DCM/DMF (3:1, 11 mL) and the mixture was stirred at rt. within 20 min. Racemic trans-4-fluoro-3-hydroxypyrrolidine hydrochloride (Synthonix; 304 mg, 2.14 mmol) and DIEA (938 mg, 7.27 mmol) were added and the mixture was stirred at rt. for 2.5 hours. At this point, both reaction batches were combined and the DCM was evaporated under reduced pressure. The remaining reaction mixture was partitioned between water (200 ml) and EtOAc (200 ml). The organic layer was separated, dried (Na 2 SO 4 ), filtered and then concentrated under reduced pressure. The crude residue was purified (silica gel; eluting with 10-100% EtOAc in hexanes) to give Compound B (1.58 g, 87%) as a white solid.

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 7,60 (m, 1H), 7,47-7,56 (m, 2H), 7,36-7,44 (m, 2H), 7,31 (m, 1H), 7,14 (s, 1H), 5,56 (m, 1H), 4,93 (m, 1H), 4,10-4,30 (m, 3Н), 3,45-3,90 (m, 4H), 1,38 (s, 9H); масса согласно ЖХМС (жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией): 522,0 (M++Na). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.60 (m, 1H), 7.47-7.56 (m, 2H), 7.36-7.44 (m, 2H), 7 .31 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.56 (m, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.10-4.30 (m, 3H), 3, 45-3.90 (m, 4H), 1.38 (s, 9H); mass according to LCMS (liquid chromatography with mass spectrometry): 522.0 (M + +Na).

Стадия 2. (R,R)-транс-трет-Бутил-((2-(3-(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (С) и (S,S)-транс-трет-бутил-((2-(3-(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (D).Step 2. (R,R)-trans-tert-Butyl-((2-(3-(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-carbonyl)phenoxy)-6(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl) carbamate (C) and (S,S)-trans-tert-butyl-((2-(3-(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl )methyl)carbamate (D).

Как соединение С (102 мг), так и соединение D (88 мг) получали из соединения В (300 мг, 0,60 ммоль) посредством хирального разделения ВЭЖХ (колонка Chiral Pak ADH, 250x20 мм, 5 мкм, элюируя изократически при помощи 10% МеОН:изопропанола (1:1) и 90% гексанов (содержащих 0,1% DEA), расход 18 мл/мин), причем соединение С элюировалось первым, а соединение D элюировалось вторым.Both Compound C (102 mg) and Compound D (88 mg) were prepared from Compound B (300 mg, 0.60 mmol) by HPLC chiral separation (Chiral Pak ADH, 250x20 mm, 5 µm column, eluting isocratically with 10 % MeOH:isopropanol (1:1) and 90% hexanes (containing 0.1% DEA), flow rate 18 ml/min), with Compound C eluting first and Compound D eluting second.

Соединение С: 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): δ 7,59 (m, 1H), 7,47-7,56 (m, 2Н), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,31 (m, 1H), 7,16 (s, 1H), 5,56 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,25-4,30 (m, 2H), 4,17 (m, 1H), 3,45-3,90 (m, 4H), 1,39 (s, 9H); масса согласно ЖХМС: 500,0 (М++1). Анализ при помощи хиральной ВЭЖХ: Rt=11,84 мин (ко лонка Chiral Pak ADH, 250x4,6 мм, 5 мкм, элюируя изократически при помощи 10% МеОН:EtOH (1:1) и 90% гексанов (содержащих 0,1% DEA) в течение 25 мин; расход 1,0 мл/мин).Compound C: 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.59 (m, 1H), 7.47-7.56 (m, 2H), 7.35-7.45 (m, 2H) , 7.31(m, 1H), 7.16(s, 1H), 5.56(m, 1H), 4.94(m, 1H), 4.25-4.30(m, 2H), 4.17 (m, 1H), 3.45-3.90 (m, 4H), 1.39 (s, 9H); weight according to LCMS: 500.0 (M + +1). Chiral HPLC analysis: R t = 11.84 min (Chiral Pak ADH column, 250x4.6 mm, 5 µm, eluting isocratically with 10% MeOH:EtOH (1:1) and 90% hexanes (containing 0, 1% DEA) for 25 min; flow rate 1.0 ml/min).

Соединение D: 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSC-d6): δ 7,59 (m, 1H), 7,47-7,56 (m, 2Н), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,31 (m, 1H), 7,16 (s, 1H), 5,56 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,25-4,30 (m, 2H), 4,17 (m, 1H), 3,45-3,90 (m, 4H), 1,39 (s, 9H); масса согласно ЖХМС: 500,0 (М++1). Анализ при помощи хиральной ВЭЖХ: Rt=14,71 мин (колонка Chiral Pak ADH, 250x4,6 мм, 5 им. элюируя изократически при помощи 10% МеОН:EtOH (1:1) и 90% гексанов (содержащих 0,1% DEA) в течение 25 мин; расход 1,0 мл/мин).Compound D: 1 H-NMR (400 MHz, DMSC-d6): δ 7.59 (m, 1H), 7.47-7.56 (m, 2H), 7.35-7.45 (m, 2H ), 7.31(m, 1H), 7.16(s, 1H), 5.56(m, 1H), 4.95(m, 1H), 4.25-4.30(m, 2H) , 4.17 (m, 1H), 3.45-3.90 (m, 4H), 1.39 (s, 9H); weight according to LCMS: 500.0 (M + +1). Chiral HPLC analysis: Rt=14.71 min (Chiral Pak ADH column, 250x4.6 mm, 5 nm eluting isocratically with 10% MeOH:EtOH (1:1) and 90% hexanes (containing 0.1% DEA) for 25 min; flow rate 1.0 ml/min).

Стадия 3. Гидрохлоридная соль (S,S)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)(3 -фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанона (пром. соединение-1).Step 3: (S,S)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl) hydrochloride salt methanone (prom. connection-1).

Названное соединение (пром. соединение-1) (77 мг, 100%) получали растворением соединения D вThe title compound (prom. compound-1) (77 mg, 100%) was prepared by dissolving compound D in

- 40 041082- 40 041082

DCM (27 мл) при к.т. Добавляли 2 М HCl в Et2O (9,69 мл, 19,38 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Дополнительное количество 2 М HCl в Et2O (9 мл, 18,0 ммоль) добавляли и смесь перемешивали в течение еще 2 ч. Смесь концентрировали под пониженным давлением с получением названного соединения (88 мг, 0,176 ммоль).DCM (27 ml) at RT 2 M HCl in Et 2 O (9.69 ml, 19.38 mmol) was added and the mixture was stirred at RT. over 18 hours. Additional 2 M HCl in Et 2 O (9 ml, 18.0 mmol) was added and the mixture was stirred for another 2 hours. The mixture was concentrated under reduced pressure to obtain the title compound (88 mg, 0.176 mmol).

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 8,61 (br s, 3Н), 7,84 (s, 1H), 7,51-7,57 (m, 2H), 7,43 (m, 1H), 7,28-7,37 (m, 2H), 5,57 (br m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,12-4,30 (br m, 3Н), 3,30-3,92 (m, 4H); масса согласно ЖХМС: 400,0 (M++1). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.61 (br s, 3H), 7.84 (s, 1H), 7.51-7.57 (m, 2H), 7.43 (m, 1H), 7.28-7.37 (m, 2H), 5.57 (br m, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.12-4.30 (br m, 3H ), 3.30-3.92 (m, 4H); weight according to LCMS: 400.0 (M++1).

Стадия 4. Гидрохлоридная соль (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2ил)окси)фенил)(3 -фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанона (1).Step 4. (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl) hydrochloride salt methanone (1).

Названное соединение (соединение 1) (89 мг, 100%) получали растворением соединения D в DCM (27 мл) при к.т. Добавляли 2 М HCl в Et2O (9,69 мл, 19,38 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Дополнительное количество 2 М HCl в Et2O (9 мл, 18,0 ммоль) добавляли и смесь перемешивали в течение еще 2 ч. Смесь концентрировали под пониженным давлением с получением названного соединения (102 мг, 0,204 ммоль).The title compound (compound 1) (89 mg, 100%) was prepared by dissolving compound D in DCM (27 ml) at rt. 2 M HCl in Et 2 O (9.69 ml, 19.38 mmol) was added and the mixture was stirred at RT. over 18 hours. Additional 2 M HCl in Et2O (9 ml, 18.0 mmol) was added and the mixture was stirred for another 2 hours. The mixture was concentrated under reduced pressure to give the title compound (102 mg, 0.204 mmol).

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 8,61 (br s, 3Н), 7,84 (s, 1H), 7,51-7,57 (m, 2Н), 7,43 (m, 1H), 7,28-7,37 (m, 2H), 5,62 (br m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,12-4,30 (br m, 3Н), 3,30-3,92 (m, 4H); масса согласно ЖХМС: 400,0 (M++1). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.61 (br s, 3H), 7.84 (s, 1H), 7.51-7.57 (m, 2H), 7.43 (m, 1H), 7.28-7.37 (m, 2H), 5.62 (br m, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.12-4.30 (br m, 3H ), 3.30-3.92 (m, 4H); weight according to LCMS: 400.0 (M + +1).

Пример 2. Получение соединения 1 с энантиомерно чистым гидрохлоридом (R,R)-4-фтор-3 гидроксипирролидина.Example 2 Preparation of compound 1 with enantiomerically pure (R,R)-4-fluoro-3-hydroxypyrrolidine hydrochloride.

Соединение 1 синтезировали при помощи энантиомерно чистого гидрохлорида (R,R)-4-фтор-3гидроксипирролидина, как показано ниже. Используя такую же методологию, пром. соединение-1 получали из гидрохлорида (S,S)-4-фтор-3-гидроксипирролидина.Compound 1 was synthesized using enantiomerically pure (R,R)-4-fluoro-3hydroxypyrrolidine hydrochloride as shown below. Using the same methodology, prom. compound-1 was obtained from (S,S)-4-fluoro-3-hydroxypyrrolidine hydrochloride.

Стадия 1. Метил-3-((4-циано-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоат (соединение А-2).Step 1. Methyl 3-((4-cyano-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compound A-2).

В раствор 2-хлор-6-(трифторметил)изоникотинонитрила (соединения А-1) (4,0 г, 19,4 ммоль) и метил-3-гидроксибензоата (3,24 г, 21,3 ммоль) в смеси THF/DMF (4:1, 55 мл) добавляли K2CO3 (8,0 г, 58 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч. THF выпаривали под пониженным давлением и оставшуюся реакционную смесь разделяли между водой (200 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли и водный слой повторно экстрагировали при помощи EtOAc (1x100 мл). Объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали, а затем концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный остаток очищали (силикагель; элюируя при помощи 0-50% EtOAc в гексанах) с получением соединения А-2 в виде светло-желтого твердого вещества (5,63 г, 91%).To a solution of 2-chloro-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (Compound A-1) (4.0 g, 19.4 mmol) and methyl 3-hydroxybenzoate (3.24 g, 21.3 mmol) in THF/ DMF (4:1, 55 ml) K2CO3 (8.0 g, 58 mmol) was added. The reaction mixture was heated at 60° C. for 2 hours. THF was evaporated under reduced pressure and the remaining reaction mixture was partitioned between water (200 ml) and EtOAc (100 ml). The organic layer was separated and the aqueous layer was re-extracted with EtOAc (1x100 ml). The combined organic layers were dried (Na 2 SO 4 ), filtered and then concentrated under reduced pressure. The crude residue was purified (silica gel; eluting with 0-50% EtOAc in hexanes) to give compound A-2 as a light yellow solid (5.63 g, 91%).

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 8,21 (m, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,87 (m, 1H), 7,77 (m, 1H), 7,64 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 3,85 (s, 3Н); масса согласно ЖХМС: 323,0 (М++1). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.21 (m, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.77 (m, 1H) , 7.64 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 3.85 (s, 3H); weight according to LCMS: 323.0 (M + +1).

Стадия 2. Метил-3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоат (соединение А-3).Step 2 Methyl 3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compound A-3).

В перемешанный раствор метил-3-((4-циано-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоата (соединения А-2) (1,5 г, 4,65 ммоль) в THF/MeOH (1:1, 140 мл) при 0°С порциями добавляли CoCl2 (1,8 г, 13,98 ммоль), а затем NaBH4 (1,77 г, 46,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин. Смесь разбавляли при помощи EtOAc (100 мл) и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и полученный остаток разделяли между водой (200 мл) и EtOAc (200 мл). Водно-органический слой фильтровали через целит и органический слой отделяли, сушили (Na2SO4), фильтровали, а затем концентрировали под пониженным давлением с получением соединения А-3 в виде янтарного маслаTo a stirred solution of methyl 3-((4-cyano-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compound A-2) (1.5 g, 4.65 mmol) in THF/MeOH (1 :1, 140 ml) at 0°C portions were added CoCl 2 (1.8 g, 13.98 mmol) and then NaBH 4 (1.77 g, 46.5 mmol). The reaction mixture was stirred at 0°C for 20 min. The mixture was diluted with EtOAc (100 ml) and filtered through celite. The filtrate was concentrated and the resulting residue was partitioned between water (200 ml) and EtOAc (200 ml). The aqueous organic layer was filtered through celite and the organic layer was separated, dried (Na2SO4), filtered and then concentrated under reduced pressure to give Compound A-3 as an amber oil

- 41 041082 (1,38 г, 92%), которое не требовало дополнительной очистки.- 41 041082 (1.38 g, 92%), which did not require further purification.

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 7,83 (m, 1H), 7,67 (m, 1H), 7,65 (br m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,33 (br m, 1H), 3,80-3,83 (m, 5H); масса согласно ЖХМС: 327,0 (М++1).1H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.83 (m, 1H), 7.67 (m, 1H), 7.65 (br m, 1H), 7.60 (m, 1H) , 7.47 (m, 1H), 7.33 (br m, 1H), 3.80-3.83 (m, 5H); weight according to LCMS: 327.0 (M++1).

Стадия 3. Метил-3-((4-(((трет-бутоксикарбонил)амино)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензоат (соединение А-4).Step 3 Methyl 3-((4-(((tert-butoxycarbonyl)amino)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoate (compound A-4).

В перемешанный раствор сложного эфира соединения А-3 (1,38 г, 4,24 ммоль) в THF (25 мл) при 0°С добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (1,29 г, 5,94 ммоль) и DIEA (2,21 мл, 12,74 ммоль). Смесь нагревали до к.т. и перемешивали в течение еще 4 ч. Смесь концентрировали и остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли, сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали (силикагель; 0-60% EtOAc в гексанах) с получением соединения А-4 в виде янтарного масла (1,42 г, 78%).To a stirred solution of compound A-3 ester (1.38 g, 4.24 mmol) in THF (25 mL) at 0°C was added di-tert-butyl dicarbonate (1.29 g, 5.94 mmol) and DIEA ( 2.21 ml, 12.74 mmol). The mixture was heated to rt. and stirred for another 4 h. The mixture was concentrated and the residue was partitioned between EtOAc (50 ml) and water (50 ml). The organic layer was separated, dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated in vacuo. The residue was purified (silica gel; 0-60% EtOAc in hexanes) to give Compound A-4 as an amber oil (1.42 g, 78%).

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 7,85 (m, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,58-7,62 (m, 2H), 7,48-7,51 (m, 2H), 7,13 (br m, 1H), 4,20 (m, 2H), 3,84 (s, 3Н), 1,36 (s, 9H); масса согласно ЖХМС: 427,0 (М++1). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.85 (m, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.58-7.62 (m, 2H), 7.48- 7.51 (m, 2H), 7.13 (br m, 1H), 4.20 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.36 (s, 9H); weight according to LCMS: 427.0 (M + +1).

Стадия 4. 3-((4-(((трет-Бутоксикарбонил)амино)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойная кислота (соединение А-5).Step 4 3-((4-(((tert-Butoxycarbonyl)amino)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-5).

В перемешанный раствор сложного эфира соединения А-4 (1,42 г, 3,34 ммоль) в смеси THF/H2O (6:1, 21 мл) добавляли водный 4М LiOH (17 мл, 68 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, затем разбавляли водой (30 мл) и подкисляли до pH 3-4 при помощи водн. насыщ. лимонной кислоты. Смесь экстрагировали при помощи EtOAc (2x50 мл), и объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением соединения А-5 в виде не совсем белого твердого вещества (1,2 г, 87%).To a stirred solution of compound A-4 ester (1.42 g, 3.34 mmol) in THF/H2O (6:1, 21 mL) was added aqueous 4M LiOH (17 mL, 68 mmol). The mixture was stirred at rt. for 16 h, then diluted with water (30 ml) and acidified to pH 3-4 with aq. sat. citric acid. The mixture was extracted with EtOAc (2x50 ml) and the combined organic layers were dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated under reduced pressure to give Compound A-5 as an off-white solid (1.2 g, 87%) .

1Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 13,17 (br s, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,66 (br m, 1H), 7,53-7,62 (m, 2H), 7,44-7,51 (m, 2H), 7,12 (br m, 1H), 4,25 (m, 2H), 1,36 (s, 9H); масса согласно ЖхМС: 413,0 (M++1). 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 13.17 (br s, 1H), 7.83 (m, 1H), 7.66 (br m, 1H), 7.53-7.62 (m, 2H), 7.44-7.51 (m, 2H), 7.12 (br m, 1H), 4.25 (m, 2H), 1.36 (s, 9H); weight according to LCMS: 413.0 (M + +1).

Стадия 5. трет-Бутил-((2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метил)карбамат (соединение С).Step 5. tert-Butyl-((2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methyl)carbamate (compound C).

В раствор соединения А-5 (160 г, 0,388 моль, 1,0 экв.) в смеси DCM (2,40 л, 15 об.) и DMF (0,56 л, 3,5 об.) добавляли HATU (177 г, 0,466 моль, 1,2 экв.). Смесь перемешивали в течение 10 мин при температуре окружающей среды, а затем гидрохлорид (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола (71,5 г, 0,466 моль, 1,3 экв.) и DIPEA (0,226 л, 1,37 моль, 3,5 экв.) добавляли в вышеуказанный раствор. Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1,5 ч. После завершения реакции, что доказано анализом ВЭЖХ, DCM удаляли под пониженным давлением.HATU (177 g, 0.466 mol, 1.2 eq.). The mixture was stirred for 10 min at ambient temperature followed by (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride (71.5 g, 0.466 mol, 1.3 eq) and DIPEA (0.226 L, 1. 37 mol, 3.5 eq.) was added to the above solution. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 1.5 hours. After completion of the reaction, as evidenced by HPLC analysis, DCM was removed under reduced pressure.

Остаток разделяли между водой (1,0 л) и EtOAc (1,0 л). Объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный остаток очищали хроматографией (силикагель: элюируя при помощи 20-50% EtOAc в РЕ). Элюат концентрировали под пониженным давлением с получением бесцветного масла. Масло разбавляли при помощи EtOAc (3,0 л), а затем промывали при помощи 5% раствора NaHCO3. Органический слой концентрировали под пониженным давлением с получением соединения С (160 г) в виде белого твердого вещества.The residue was partitioned between water (1.0 L) and EtOAc (1.0 L). The combined organic layers were dried (Na 2 SO 4 ), filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The crude residue was purified by chromatography (silica gel: eluting with 20-50% EtOAc in PE). The eluate was concentrated under reduced pressure to give a colorless oil. The oil was diluted with EtOAc (3.0 L) and then washed with 5% NaHCO 3 solution. The organic layer was concentrated under reduced pressure to give Compound C (160 g) as a white solid.

Выход: 82%, чистота согласно ВЭЖХ: 95,1% площади.Yield: 82%, HPLC purity: 95.1% area.

Стадия 6. Гидрохлоридная соль (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединение 1).Step 6: (3-((4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl) hydrochloride salt methanone (compound 1).

В раствор соединения С (151 г, 0,3 моль, 1,0 экв.) в DCM (3,37 л, 22 об.) добавляли 6,6 н HCl в МТВЕ (695 мл, 6,9 моль, 23 экв.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. После завершения реакции, что доказано анализом ВЭЖХ, смесь концентрировали под пониженным давлением с получением желтого твердого вещества. Твердое вещество суспендировали в МТВЕ (400 мл) и фильтровали. Влажный осадок промывали при помощи МТВЕ и сушили с получением соединения 1 (110 г) в виде желтого твердого вещества.To a solution of compound C (151 g, 0.3 mol, 1.0 eq.) in DCM (3.37 L, 22 vol.) was added 6.6 N HCl in MTBE (695 ml, 6.9 mol, 23 eq. .). The reaction mixture was stirred at ambient temperature overnight. After completion of the reaction, as evidenced by HPLC analysis, the mixture was concentrated under reduced pressure to give a yellow solid. The solid was suspended in MTBE (400 ml) and filtered. The wet cake was washed with MTBE and dried to give Compound 1 (110 g) as a yellow solid.

Выход: 83%, чистота согласно ВЭЖХ 98,4% площади, э.и.(энантиомерный избыток): 100%. Колонка (DAICEL Chiralcel AD-H: 5 мкмх4,6х150 мм, 80% НЕХ/10% МеОН/10%EtOH с 0,1% DEA).Yield: 83%, HPLC purity 98.4% area, ee (enantiomeric excess): 100%. Column (DAICEL Chiralcel AD-H: 5 µm x 4.6 x 150 mm, 80% HEX/10% MeOH/10% EtOH with 0.1% DEA).

Пример 3. Получение соединения 2.Example 3 Preparation of Compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 получали при помощи энантиомерно чистого гидрохлорида R,R-4-фтор-3-гидроксипирролидина, как показано ниже.In some embodiments, compound 2 was prepared using enantiomerically pure R,R-4-fluoro-3-hydroxypyrrolidine hydrochloride as shown below.

- 42 041082- 42 041082

об. АсОНabout. ASON

Стадии 3Stage 3

5% Р<ОН)27С5% P<OH)27C

250 фунтов кв.250 lbs.

дюйм Н; frai.)inch H; frei.)

-01%-01%

Стадия 4 ~9»Stage 4 ~9"

0,92 яке. MSA об. АСУ arc0.92 yak. MSA vol. ACS arc

Стадия 1. 3-((4-Циано-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойная кислота (соединение А-6).Step 1 3-((4-Cyano-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-6).

г 2-Хлор-6-(трифторметил)изоникотинонитрила (соединения А-1) и Cs2CO3 (78 г, 0,242 моль, 2,5 экв.) суспендировали в 80 мл DMF в реакторе. Раствор 3-гидроксибензойной кислоты (13,4 г, 0,096 моль, 1,0 экв.) в 40 мл DMF медленно добавляли в реактор, поддерживая температуру ниже 30°С. Содержимое реактора нагревали до 30±5°С и выдерживали до завершения реакции (69 ч). Считали, что реакция завершалась с соединением А-1=1%. Реакционную смесь разбавляли при помощи 1 л очищенной технологической H2O и промывали при помощи 2x200 мл EtOAc. pH водного раствора составлял ~9, и его доводили до pH ~3-4 путем добавления 97 мл 3М НС1(водн.), в то же время поддерживая температуру 20±5°С. Водный слой экстрагировали при помощи 2x300 мл EtOAc и органические слои промывали при помощи 150 мл рассола, сушили (Na2SO4) и концентрировали досуха с получением соединения А-6. Внешний вид: желтовато-коричневое твердое вещество. Масса=29,98 гg of 2-Chloro-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (compound A-1) and Cs 2 CO 3 (78 g, 0.242 mol, 2.5 eq.) were suspended in 80 ml of DMF in a reactor. A solution of 3-hydroxybenzoic acid (13.4 g, 0.096 mol, 1.0 eq.) in 40 ml DMF was slowly added to the reactor while maintaining the temperature below 30°C. The contents of the reactor were heated to 30±5°C and kept until the reaction was completed (69 h). It was believed that the reaction was completed with compound A-1=1%. The reaction mixture was diluted with 1 L of purified process H2O and washed with 2x200 ml of EtOAc. The pH of the aqueous solution was ~9, and it was brought to pH ~3-4 by adding 97 ml of 3M HCl (aq.), while maintaining the temperature of 20±5°C. The aqueous layer was extracted with 2x300 ml EtOAc and the organic layers were washed with 150 ml brine, dried (Na 2 SO 4 ) and concentrated to dryness to give Compound A-6. Appearance: yellowish brown solid. Weight=29.98 g

Стадия 2. 2-(3-((3R,4R)-3-Фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)изоникотинонитрил (соединение А-7).Step 2 2-(3-((3R,4R)-3-Fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)isonicotinonitrile (compound A-7).

3-((4-Циано-6-трифторметил)пиридин-2-ил)окси)бензойную кислоту (соединение А-6) вводили в DCM со стадии 1 путем концентрирования до 100 мл на основе теоретического выхода соединения А-6. Поддерживая температуру 0±5°С, в реактор загружали оксалилхлорид (1,2 экв.), и ему позволяли медленно нагреваться до комнатной температуры в течение 1 часа. Через 2 часа конверсию считали завершенной. Гидрохлорид (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола объединяли с 150 мл DMF и 350 мл DCM. Поддерживая температуру 0±5°С, хлорангидрид А-6 добавляли в раствор гидрохлорида (3R,4R)-4фторпирролидин-3-ола с последующим медленным добавлением 3,5 экв. DIPEA.3-((4-Cyano-6-trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)benzoic acid (compound A-6) was introduced into DCM from step 1 by concentration to 100 ml based on the theoretical yield of compound A-6. While maintaining the temperature at 0±5° C., oxalyl chloride (1.2 eq.) was charged into the reactor and allowed to slowly warm to room temperature over 1 hour. After 2 hours, the conversion was considered complete. (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride was combined with 150 ml DMF and 350 ml DCM. Maintaining the temperature at 0±5°C, acid chloride A-6 was added to a solution of (3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride, followed by the slow addition of 3.5 eq. DIPEA.

Реакцию гасили при помощи 40 мл H2O и DCM отгоняли, что давало смесь DMF/H2O с соединением А-7, которую разбавляли 720 мл МТВЕ, затем промывали при помощи 3x600 мл H2O, 1x400 мл рассола, сушили (Na2SO4) и концентрировали до 100 мл. Концентрату позволяли кристаллизоваться в течение 20 ч, затем загружали 15 об. гептана, а затем выдерживали дополнительные 20 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией, затем промывали при помощи 2x50 мл гептана и сушили при 45°С до постоянной массы с получением соединения А-7. Внешний вид=белое твердое вещество; масса=16,5, теоретическая 18,94 г; ВЭЖХ=98%The reaction was quenched with 40 ml H2O and DCM was distilled off, which gave a mixture of DMF/H2O with compound A-7, which was diluted with 720 ml MTBE, then washed with 3x600 ml H2O, 1x400 ml brine, dried (Na 2 SO 4 ) and concentrated up to 100 ml. The concentrate was allowed to crystallize for 20 h, then loaded with 15 vol. heptane and then held for an additional 20 hours. The solid was collected by filtration, then washed with 2x50 ml of heptane and dried at 45° C. to constant weight to give compound A-7. Appearance=white solid; mass=16.5, theoretical 18.94 g; HPLC=98%

Стадия 3. 3-((4-(Аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4гидроксипирролидин-1-ил)метанон (соединение I).Step 3 3-((4-(Aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)((3R,4R)-3-fluoro-4hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I) .

Объединяли 16 г соединения А-7, 350 мл АсОН, 5% Pd(OH)2/C в дегазированном реакторе под давлением 250 фунтов/кв. дюйм H2 (газ) в течение 3 ч. Материал тонко фильтровали, промывали при помощи 700 мл H2O при 0±5°С и гасили при помощи 50% NaOH - использовали 16,9 об. - до pH~11. Экстрагировали при помощи 2x20 об. EtOAc, выдерживали в течение 2 ч, затем разделяли слои и нагревали до 25±5°С (соли находятся в растворе при температуре свыше 25°С) с получением соединения I. ВЭЖХ=91,1%, 7,026 мин; масса=16,44 г; выход=101% - количественный.16 g of compound A-7, 350 ml of AcOH, 5% Pd(OH) 2 /C were combined in a degassed reactor at 250 psig. inch H 2 (gas) for 3 h. - up to pH~11. Extracted with 2x20 vol. EtOAc, held for 2 hours, then the layers were separated and heated to 25±5°C (salts are in solution at over 25°C) to give compound I. HPLC=91.1%, 7.026 min; weight=16.44 g; yield=101% - quantitative.

Стадия 4. Метансульфонатная соль (3-((4-(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1 -ил)метанона (соединение 2).Step 4 Methanesulfonate salt methanone (compound 2).

8,0 г соединения I превращали в MS А соль (соединение 2) путем разбавления соединения I в 160 мл ACN, медленного добавления MSA и регулирования концентрации MSA при помощи чистоты по ВЭЖХ. Раствор выдерживали в течение приблизительно 1 ч при 20±5°С и нагревали до кипения (~82-85°С)8.0 g of compound I was converted to MS A salt (compound 2) by diluting compound I in 160 ml of ACN, slowly adding MSA and adjusting the concentration of MSA using HPLC purity. The solution was kept for approximately 1 hour at 20±5°C and heated to boiling (~82-85°C)

- 43 041082 в течение 2 ч. Смеси позволяли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре, и цикл нагревания повторяли еще 3 раза до соответствующей ДСК (общее время нагревания 10 ч) с получением соединения 2.- 43 041082 for 2 hours. The mixture was allowed to stir overnight at room temperature, and the heating cycle was repeated 3 more times until the appropriate DSC (total heating time 10 hours) to obtain compound 2.

ВЭЖХ= 99,5%; масса=7,36 г; э.и=99,7% (колонка DAICEL Chiralcel OD-H: 5 мкм х4,6х150 мм, 90% HEX/10% IPA с 0,1% DEA).HPLC=99.5%; weight=7.36 g; e.i=99.7% (DAICEL Chiralcel OD-H column: 5 µm x 4.6 x 150 mm, 90% HEX/10% IPA with 0.1% DEA).

Пример 4. Получение гидрохлорида (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола (С6).Example 4 Preparation of (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride (C6).

В некоторых вариантах осуществления соединение С6 получали, как показано ниже.In some embodiments, Compound C6 was prepared as shown below.

Винилацетат Novozyni 435 растворительVinyl acetate Novozyni 435 solvent

OAcOAC

8ζ8ζ

C2C2

Оидия 2Oidia 2

N βζNβζ

СЗNW

Ν (иииика) ΒζΝ (iiiika) Βζ

C4C4

И HCl б н НС1 БОДИ. ДяксаиЛЬОand HCl b n HC1 BODY. DyaksaILO

Винилацетат И«чиут435 CHaCN выход 903 оVinyl acetate And chiut435 CHaCN Yield 90 3 o

риri

C6C6

8ζ8ζ

СЗNW

Стадия 1. ((3R,4R)-3-Фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанон (соединение C3).Step 1: ((3R,4R)-3-Fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone (compound C3).

190,0 кг ацетона загружали в реактор, а затем 50 кг соединения С2. Реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 15 мин; 15,6 кг винилацетата и 2 кг Novozyme® 435 загружали в реактор. Реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 37 ч. Течение реакции контролировали при помощи хиральной ВЭЖХ до соединения С3 (э.и.%) >95,0%. Смесь отфильтровывали и осадок промывали при помощи 10 кг ацетона. Ацетон удаляли под пониженным давлением при 40-50°С в течение 11 ч с получением 10,5 кг неочищенного соединения С3. Его загружали в реактор, а затем 16,0 кг силикагеля и 14,0 кг DCM и суспензию перемешивали при 20-25°С в течение 15 мин; 3,60 кг силикагеля загружали в хроматографическую колонку, а затем 6,3 кг петролейного эфира; 0,90 кг Na2SO4, а затем дополнительные 6,3 кг петролейного эфира загружали в колонку в течение 30 мин; 60 л смеси DCM (70,2 кг) и EtOAc (5,34 кг) загружали в колонку, 2,9 кг соединения С3 получали после выпаривания (э.и.%=94,9, колонка DAICEL Chiralcel OD-H: 5 мкмх4,6х150 мм, 90% HEX/10% IPA с 0,1% DEA).190.0 kg of acetone were charged into the reactor followed by 50 kg of compound C2. The reaction mixture was stirred at 20-25°C for 15 min; 15.6 kg of vinyl acetate and 2 kg of Novozyme® 435 were loaded into the reactor. The reaction mixture was stirred at 20-25° C. for 37 hours. The progress of the reaction was monitored by chiral HPLC until compound C3 (e.i.%) >95.0%. The mixture was filtered and the precipitate was washed with 10 kg of acetone. The acetone was removed under reduced pressure at 40-50° C. for 11 hours to give 10.5 kg of crude compound C3. It was loaded into the reactor, and then 16.0 kg of silica gel and 14.0 kg of DCM and the suspension was stirred at 20-25°C for 15 min; 3.60 kg of silica gel were loaded into a chromatographic column, followed by 6.3 kg of petroleum ether; 0.90 kg of Na 2 SO 4 and then an additional 6.3 kg of petroleum ether were loaded into the column for 30 min; 60 L of a mixture of DCM (70.2 kg) and EtOAc (5.34 kg) was loaded onto the column, 2.9 kg of compound C3 was obtained after evaporation (e.i.% = 94.9, column DAICEL Chiralcel OD-H: 5 µmx4.6x150 mm, 90% HEX/10% IPA with 0.1% DEA).

Стадия 2. (3R,4R)-3-Фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)(фенил)метанон (соединение С3).Step 2: (3R,4R)-3-Fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-yl)(phenyl)methanone (compound C3).

кг ацетона загружали в реактор, а затем 2,9 кг соединения С3. Реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 15 мин; 6,0 кг винилацетата и 2,8 кг Novozyme® 435 загружали в реактор. Реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 54 ч. Течение реакции контролировали при помощи хиральной ВЭЖХ до соединения С3 (э.и.%) > 99,5%. Смесь отфильтровывали и осадок промывали при помощи 5,5 кг ацетона. Ацетон удаляли под пониженным давлением при 40-50°С в течение 6 ч с получением 2,5 кг неочищенного соединения С3. 2,5 кг соединения С3 загружали в реактор, а затем 3,8 кг силикагеля и 14,0 кг DCM и суспензию перемешивали при 20-25°С в течение 30 мин; 3,60 силикагеля загружали в хроматографическую колонку, а затем 5,3 кг петролейного эфира; 0,50 кг Na2SO4, а затем дополнительные 6,3 кг петролейного эфира загружали в колонку на 30 мин; 60 л смеси DCM (70,2 кг) и EtOAc (5,34 кг), а затем 50 л EtOAc загружали в колонку (повторяли 3 раза); 2,0 кг соединения С3 получали после выпаривания (э.и.%=99,1 колонка DAICEL Chiralcel OD-H: 5 мкмх4,6х150 мм, 90% НЕХ/10% IPA>A с 0,1% DEA).kg of acetone was loaded into the reactor, followed by 2.9 kg of compound C3. The reaction mixture was stirred at 20-25°C for 15 min; 6.0 kg of vinyl acetate and 2.8 kg of Novozyme® 435 were loaded into the reactor. The reaction mixture was stirred at 20-25° C. for 54 hours. The progress of the reaction was monitored by chiral HPLC until compound C3 (e.i.%) > 99.5%. The mixture was filtered and the precipitate was washed with 5.5 kg of acetone. The acetone was removed under reduced pressure at 40-50° C. for 6 hours to give 2.5 kg of crude compound C3. 2.5 kg of compound C3 was charged into the reactor, followed by 3.8 kg of silica gel and 14.0 kg of DCM, and the suspension was stirred at 20-25° C. for 30 minutes; 3.60 silica gel was loaded into a chromatographic column, followed by 5.3 kg of petroleum ether; 0.50 kg of Na 2 SO 4 and then an additional 6.3 kg of petroleum ether were loaded into the column for 30 min; 60 L of a mixture of DCM (70.2 kg) and EtOAc (5.34 kg) followed by 50 L of EtOAc were loaded onto the column (repeated 3 times); 2.0 kg of compound C3 was obtained after evaporation (e.i.%=99.1 DAICEL Chiralcel OD-H column: 5 μm x 4.6 x 150 mm, 90% HEX/10% IPA>A with 0.1% DEA).

Стадия 3. Гидрохлорид (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола (соединение С6).Step 3: (3R,4R)-4-fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride (compound C6).

12,0 кг 1,4-диоксана загружали в реактор, а затем 2,40 кг соединения С3. Реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 15 мин, и 12,0 кг концентрированной соляной кислоты загружали в реактор, и 1,4-диоксан выпаривали под пониженным давлением при 65-75°С в течение 5 ч; 15,0 кг DCM загружали в реактор и реакционную смесь перемешивали при 20-25°С в течение 15 мин с последующим выпариванием под пониженным давлением (повторяли 4 раза). Оставшуюся воду удаляли под пониженным давлением при 65-75°С в течение 5 ч; 20,0 кг метилбензола добавляли в резервуар для центрифугирования с обработкой паром и удаляли под пониженным давлением при 40-50°С в течение 6 ч с получением 1,54 кг соединения С6 (э.и.%=99,1, колонка DAICEL Chiralcel OD-H: 5 мкмх4,6х150 мм, 90% НЕХ/10% IPA>A с 0,1% DEA).12.0 kg of 1,4-dioxane were charged into the reactor followed by 2.40 kg of compound C3. The reaction mixture was stirred at 20-25°C for 15 minutes, and 12.0 kg of concentrated hydrochloric acid was charged into the reactor, and 1,4-dioxane was evaporated under reduced pressure at 65-75°C for 5 hours; 15.0 kg of DCM was loaded into the reactor and the reaction mixture was stirred at 20-25° C. for 15 min, followed by evaporation under reduced pressure (repeated 4 times). The remaining water was removed under reduced pressure at 65-75°C for 5 hours; 20.0 kg of methylbenzene was added to a steam centrifuge tank and removed under reduced pressure at 40-50° C. for 6 hours to give 1.54 kg of compound C6 (e.i.%=99.1, DAICEL Chiralcel column OD-H: 5 µm x 4.6 x 150 mm, 90% HEX/10% IPA>A with 0.1% DEA).

- 44 041082- 44 041082

Пример 5. Определение абсолютной конфигурации гидрохлорида (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола (соединения С6).Example 5 Determination of the Absolute Configuration of (3R,4R)-4-Fluoropyrrolidin-3-ol Hydrochloride (Compound C6).

В некоторых вариантах осуществления абсолютную конфигурацию гидрохлорида (R,R)-4фторпирролидин-3-ола (соединения С6) определяли при помощи рентгеноструктурного анализа С7.In some embodiments, the absolute configuration of (R,R)-4fluoropyrrolidin-3-ol hydrochloride (C6 compound) was determined using C7 X-ray diffraction analysis.

Стадия 1. Рацемический транс-3-фтор-4-гидроксипирролидин (рац.-С6 СО).Step 1. Racemic trans-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine (rac-C6 CO).

В раствор NaOH (2,83 г, 70,6 ммоль) в EtOH (100 мл) добавляли рацемический гидрохлорид транс3-фтор-4-гидроксипирролидина (рац.-С6) (10 г, 70,6 ммоль). Затем вышеуказанный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и фильтрат концентрировали с получением свободного основания (рац.-С6 СО) в виде коричневой жидкости (7,0 г).To a solution of NaOH (2.83 g, 70.6 mmol) in EtOH (100 ml) was added racemic trans3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine hydrochloride (rac-C6) (10 g, 70.6 mmol). The above solution was then stirred at room temperature for 1 hour. The precipitate was filtered off and the filtrate was concentrated to give the free base (rac-C6 CO) as a brown liquid (7.0 g).

Стадия 2. (3R,4R)-3-Фтор-4-гидроксипирролидин-1-ия (2S,3S)-2,3-бис(бешоилокси)-3-карбоксипропаноатная соль С7.Step 2. (3R,4R)-3-Fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-ium (2S,3S)-2,3-bis(beshoyloxy)-3-carboxypropanoate salt C7.

(3R,4R)-3-Фтор-4-гидроксипирролидин-1-ия (2S,3S)-2,3-бис(бензоилокси)-3-карбоксипропаноатная соль получалась путем обработки рацемического транс-3-фтор-4-гидроксипирролидина (рац.-С6 СО) (2S,3S)-2,3-бис(бензоилокси)-3-карбоксипропановой кислотой и повторной кристаллизации из метанола с получением по существу чистого энантиомера, соответствующего С6 согласно хиральной ВЭЖХ (94,4% э.и.; колонка DAICEL Chiralcel AD-H: 5 мкмх4,6х150 мм, 90% НЕХ/10% IPA>A с 0,1% DEA). Рентгеноструктурный анализ подтвердил (R,R)-конфигурацию.(3R,4R)-3-Fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1-ium (2S,3S)-2,3-bis(benzoyloxy)-3-carboxypropanoate salt was obtained by treating racemic trans-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine ( rac-C6 CO) (2S,3S)-2,3-bis(benzoyloxy)-3-carboxypropanoic acid and recrystallized from methanol to give the substantially pure enantiomer corresponding to C6 according to chiral HPLC (94.4% ee .; DAICEL Chiralcel AD-H column: 5 µm x 4.6 x 150 mm, 90% HEX/10% IPA>A with 0.1% DEA). X-ray diffraction analysis confirmed the (R,R)-configuration.

Пример 6. Альтернативный процесс синтеза соединения 2.Example 6 Alternative Synthesis of Compound 2

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 получали, как показано ниже.In some embodiments, Compound 2 was prepared as shown below.

Объединяли 3-(4-((трет-бутоксикарбонил)метил)-6-(трифторметил)пиридин-2-илокси)бензойную кислоту (1,0 экв.) (соединение А), гидрохлорид (3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ола ((R,R)-FP) (1,4 экв.), HATU (1,2 экв.) и дихлорметан (DCM) (32 кг). При медленном перемешивании добавляли 5,2 кг N,Nдиметилформамида (DMF) и 3,5 экв. N,N-диизопропилэтиламина (DIPEA). Реакцию нагревали до кипения, пока она не завершится. DCM затем удаляли под вакуумом. Соединение С в DMF разбавляли при помощи EtOAc и промывали водой и рассолом. Неочищенное соединение С концентрировали досуха и очищали через набивку из силикагеля, используя градиент с конечным отношением растворителей при элюировании 7:3 EtOAc/гептан. Все фракции соединения С концентрировали и промывали раствором бикарбоната натрия, водой, рассолом и сушили при помощи Na2SO4. Концентрирование органических веществ давало соединение С с чистотой 98% согласно высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и выход 98,5%.Combined 3-(4-((tert-butoxycarbonyl)methyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yloxy)benzoic acid (1.0 eq.) (compound A), hydrochloride (3R,4R)-4-fluoropyrrolidine -3-ol ((R,R)-FP) (1.4 eq.), HATU (1.2 eq.) and dichloromethane (DCM) (32 kg). With slow stirring, 5.2 kg of N,N-dimethylformamide (DMF) and 3.5 eq. N,N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction was heated to boiling until it was complete. DCM was then removed under vacuum. Compound C in DMF was diluted with EtOAc and washed with water and brine. The crude compound C was concentrated to dryness and purified through a pad of silica gel using a final solvent ratio gradient eluting with 7:3 EtOAc/heptane. All fractions of compound C were concentrated and washed with sodium bicarbonate solution, water, brine and dried with Na 2 SO 4 . Concentration of the organics gave Compound C of 98% purity by high performance liquid chromatography (HPLC) and a yield of 98.5%.

трет-Бутил-(2-(3-((3R,4R)-3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-карбонил)фенокси)-6-(трифторметил)пиридин-4-ил)метилкарбамат (соединение С) растворяли в DCM, переносили в реактор и промывали при помощи DCM. Метансульфоновую кислоту (0,93 экв.) загружали, и реакцию нагревали до кипения иtert-Butyl-(2-(3-((3R,4R)-3-fluoro-4-hydroxypyrrolidine-1-carbonyl)phenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl)methylcarbamate (compound C) was dissolved in DCM was transferred to the reactor and washed with DCM. Methansulfonic acid (0.93 eq.) was charged and the reaction heated to reflux and

- 45 041082 перемешивали в течение ночи до завершения. В этот момент густую белую суспензию разбавляли при помощи DCM, охлаждали и отфильтровывали и промывали метил-трет-бутиловым эфиром (МТВЕ). Органические вещества концентрировали с получением соединения 2 с чистотой 98,5% по ВЭЖХ и выходом 91%.- 45 041082 stirred overnight until complete. At this point the thick white suspension was diluted with DCM, cooled and filtered and washed with methyl tert-butyl ether (MTBE). The organics were concentrated to give Compound 2 with a purity of 98.5% by HPLC and a yield of 91%.

Соединение 2 растирали в ацетонитриле и нагревали в течение приблизительно 4 ч, а затем охлаждали до 20°С. Образец твердого вещества удаляли и сушили для тестирования на остаточный DCM и ацетонитрил (ACN). Растирание повторяли, пока остаточные количества DCM и ACN не станут ниже пределов 1200 частей на миллион (ppm) и 820 частей на миллион, соответственно. Чистоту соединения 2 контролировали при помощи ВЭЖХ для регулирования образования примесей. Процесс давал соединение 2 с чистотой 99,3% по ВЭЖХ и извлечением 91%.Compound 2 was triturated in acetonitrile and heated for approximately 4 h and then cooled to 20°C. A solid sample was removed and dried to test for residual DCM and acetonitrile (ACN). Rubbing was repeated until the residual amounts of DCM and ACN were below the limits of 1200 parts per million (ppm) and 820 ppm, respectively. The purity of compound 2 was monitored by HPLC to control the formation of impurities. The process gave compound 2 with a purity of 99.3% by HPLC and a recovery of 91%.

Пример 7. Определение химической чистоты.Example 7 Determination of chemical purity.

Метод обращенно-фазовой ВЭЖХ разрабатывали для измерения чистоты и связанных соединений.The reverse phase HPLC method was developed to measure purity and bound compounds.

______Таблица 1. Параметры метода ВЭЖХ для определения химической чистоты____________Table 1. HPLC Method Parameters for Determination of Chemical Purity______

Колонка Column Колонка Agilent Eclipse XDB-Cs, 5 мкм (4,6 мм х 150 мм) Agilent Eclipse XDB-Cs, 5 µm column (4.6 mm x 150 mm) Подвижная фаза А Mobile phase A 0,1% TFA в воде: от 90% до 0% 0.1% TFA in water: 90% to 0% Подвижная фаза В Mobile phase B 0,1% TFA в ацетонитриле: от 10% до 100% 0.1% TFA in acetonitrile: 10% to 100% Детектирование Detection УФ: λ=275 нм UV: λ=275 nm Температура колонки Column temperature 25 °C 25°C Объем впрыска Injection volume 5,0 мкл 5.0 µl Расход Consumption 1,0 мл/мин. 1.0 ml/min. Время исследования Research time 20 минут 20 minutes

Образцы соединения 2, как обнаружили, имеют чистоту более 90%. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2, как обнаружили, имеют чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99%.Compound 2 samples were found to be over 90% pure. In some embodiments, samples of Compound 2 are found to be greater than 95% pure, greater than 96% pure, greater than 97% pure, greater than 98% pure, or greater than 99% pure.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 включают обнаружимое количество по меньшей мере одного из следующих соединений:In some embodiments, Compound 2 samples include a detectable amount of at least one of the following compounds:

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 не содержали обнаружимое количество соединений, указанных выше.In some embodiments, Compound 2 samples did not contain a detectable amount of the compounds listed above.

Пример 8. Определение хиральной чистоты.Example 8 Determination of Chiral Purity.

Хиральную ВЭЖХ использовали для измерения хиральной чистоты. Использовали следующие условия.Chiral HPLC was used to measure chiral purity. The following conditions were used.

- 46 041082- 46 041082

Таблица 2. Параметры метода ВЭЖХ для определения хиральной чистотыTable 2. HPLC method parameters for determining chiral purity

Колонка Column Колонка ChiralPak IC-3, 3 мкм (4,6 мм х 250 мм) Column ChiralPak IC-3, 3 µm (4.6 mm x 250 mm) Подвижная фаза mobile phase 0,05% ESA в гексане/ЕЮН (75:25 об./об.). 0.05% ESA in hexane/EUN (75:25 v/v). Детектирование Detection УФ: λ= 220 нм UV: λ= 220 nm Температура колонки Column temperature 15°С 15°C Объем впрыска Injection volume 10 мкл 10 µl Расход Consumption 1,0 мл/мин. 1.0 ml/min. Время исследования Study time 45 минут 45 minutes

Хиральную чистоту (% площади) определяли по ответу-площади пика для каждого энантиомера.Chiral purity (area %) was determined from the peak area response for each enantiomer.

Образцы соединения 2 имели хиральную чистоту более 90% энантиомерного избытка (э.и.). В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имели хиральную чистоту более 95%, более 96%, более 97%, более 98% или более 99% э.и. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 имели хиральную чистоту 100% э.и.Compound 2 samples had a chiral purity greater than 90% enantiomeric excess (e.i.). In some embodiments, samples of Compound 2 have a chiral purity greater than 95%, greater than 96%, greater than 97%, greater than 98%, or greater than 99% ee. In some embodiments, Compound 2 samples were 100% ee chiral purity.

В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 содержат обнаружимое количество (8,8)-энантиомера соединения 2. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 не содержали обнаружимое количество (8,8)-энантиомера соединения 2.In some embodiments, Compound 2 samples contain a detectable amount of the (8,8)-enantiomer of Compound 2. In some embodiments, Compound 2 samples do not contain a detectable amount of the (8,8)-Enantiomer of Compound 2.

Пример 9. Определение остаточного (R,R)-FP.Example 9 Determination of residual (R,R)-FP.

Метод обратно-фазовой ВЭЖХ разрабатывали для измерения остаточного (R,R)-FP [(3R,4R)-4фторпирролидин-3 -ола].A reverse phase HPLC method was developed to measure residual (R,R)-FP [(3R,4R)-4fluoropyrrolidin-3-ol].

Таблица 3. Параметры метода ВЭЖХ для определения остаточного (R,R)-FPTable 3. HPLC Method Parameters for Determination of Residual (R,R)-FP

Колонка Column Колонка Agilent Eclipse Plus С18 (4,6 мм х 100 мм, 3,5 мкм) Agilent Eclipse Plus C18 column (4.6 mm x 100 mm, 3.5 µm) Подвижная фаза А Mobile phase A 0,05% TFA в воде: 0.05% TFA in water: от 55% до 0% from 55% to 0% Подвижная фаза В Mobile phase B 0,05%TFA в ACN: 0.05%TFA in ACN: от 45% до 100% from 45% to 100% Детектирование Detection λ=235 λ=235 Температура колонки Column temperature 20°С 20°C Объем впрыска Injection volume 1,0 мкл 1.0 µl Расход Consumption 1,0 мл/мин. 1.0 ml/min. Время исследования Study time 15 минут 15 minutes

Образцы соединения 2 содержали менее 5% (ЗК,4К)-4-фторпирролидин-3-ола. В некоторых вариантах осуществления образцы соединения 2 содержали менее 5, 4, 3, 2 или 1% (ЗК,4К)-4-фторпирролидин3-ола.Compound 2 samples contained less than 5% (3K,4K)-4-fluoropyrrolidin-3-ol. In some embodiments, Compound 2 samples contained less than 5%, 4%, 3%, 2%, or 1% (3K,4K)-4-fluoropyrrolidin3-ol.

Пример 10. Остаточные растворители.Example 10 Residual Solvents

Остаточные растворители определяли газовой хроматографией, используя капиллярную колонку G43 по фармакопее США с пламенно-ионизационным детектором (ПИД). Раствор образца готовили в NMP с 10 мг/мл.Residual solvents were determined by gas chromatography using a USP G43 capillary column with a flame ionization detector (FID). The sample solution was prepared in NMP with 10 mg/ml.

Возможные остаточные растворители включают метанол, ацетон, изопропанол, ацетонитрил, дихлорметан, трет-бутилметиловый эфир, гексан, этитлацетат, тетрагидрофуран, циклогексан, гептан, диоксан, изобутилметилкетон, толуол и диметилформамид.Possible residual solvents include methanol, acetone, isopropanol, acetonitrile, dichloromethane, t-butyl methyl ether, hexane, ethyl acetate, tetrahydrofuran, cyclohexane, heptane, dioxane, isobutyl methyl ketone, toluene, and dimethylformamide.

В некоторых вариантах осуществления соединение 2 содержало обнаружимое количество по меньшей мере одного из следующего: дихлорметан, этитлацетат, гептан, трет-бутилметиловый эфир, ацетон, диметилформамид и ацетонитрил.In some embodiments, compound 2 contained a detectable amount of at least one of the following: dichloromethane, ethyl acetate, heptane, t-butyl methyl ether, acetone, dimethylformamide, and acetonitrile.

Пример 11. Проверка полиморфа соединения 1.Example 11. Checking the polymorph of connection 1.

Предварительная оценка растворимости.Preliminary evaluation of solubility.

Аморфное соединение 1 (30 мг) обрабатывали увеличивающимися объемами растворителя, пока соединение полностью не растворится, или пока не используют максимальный объем 100. После каждого добавления растворителя систему осторожно встряхивали в течение 10 мин при 50°С, а затем ей позволяли отстояться при комнатной температуре в течение 5 мин перед добавлением новой аликвоты растворителя. После завершения оценки, любые полученные суспензии выдерживали, и прозрачные растворы охлаждали при 5 °C. В табл. 4 показаны результаты этих исследований.Amorphous compound 1 (30 mg) was treated with increasing volumes of solvent until the compound was completely dissolved, or until a maximum volume of 100 was used. After each addition of solvent, the system was gently shaken for 10 min at 50°C, and then it was allowed to stand at room temperature for 5 min before adding a new aliquot of solvent. Upon completion of the evaluation, any resulting suspensions were held and the clear solutions were cooled at 5°C. In table. 4 shows the results of these studies.

-47041082-47041082

Таблица 4. Оценка растворимостиTable 4. Solubility evaluation

Растворитель Solvent 5 об. 5 vol. 10 об. 10 vol. 20 об. 20 vol. 50 об. 50 vol. 70 об. 70 rpm 100 об. 100 rpm Растворимость мг/мл Solubility mg/ml РПД RPD К.Т. K.T. 50°С 50°C к.т. k.t. 50°С 50°C к.т. k.t. 50°С 50°C К.Т. K.T. 50°С 50°C к.т. k.t. 50°С 50°C к.т. k.t. 50°С 50°С Толуол Toluene X X X X X X X X X X X X X X X X V V V V V V V V < 10 < 10 н/о But Дихлорметан dichloromethane X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 н/о But Тетрагидрофуран (THF) Tetrahydrofuran (THF) X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 Форма 1 Form 1 2-пропанол 2-propanol V V V V >200 >200 н/о But Этанол ethanol V V V V >200 >200 н/о But Этилацетат ethyl acetate X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 Форма 1 Form 1 Нитрометан Nitromethane X X V V V V V V V V X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 н/о But Ацетонитрил Acetonitrile X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 Форма 1 Form 1 Диметоксиэтан Dimethoxyethane X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X < 10 < 10 Форма 1 Form 1 ТНР:вода 95:5 THP: water 95:5 V V X X V V 200 - 100 200 - 100 Форма 1 Form 1

Выдерживание.Aging.

Суспензии, полученные после оценки растворимости, встряхивали в камере для выдерживания при 25-50°С (8-часовые циклы). Через 3 дня твердые вещества отфильтровывали и сушили на воздухе. Полученные твердые вещества первоначально анализировали при помощи РПД, как показано в табл. 5.Suspensions obtained after solubility evaluation were shaken in a holding chamber at 25-50° C. (8 hour cycles). After 3 days, the solids were filtered off and air dried. The resulting solids were initially analyzed using the RPD, as shown in table. 5.

Таблица 5. Результаты проверки полиморфизма при выдерживании (циклы 25-50°С)Table 5. Exposure Polymorphism Test Results (25-50°C Cycles)

Процедура Procedure Растворитель Solvent Объем (мкл) Volume (µl) Конечная температура (°C) Final temperature (°C) Выделение Selection РПД RPD Отстаивание settling Толуол Toluene 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration 2 пика - форма 1 2 spades - form 1 Отстаивание settling Дихлорметан dichloromethane 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1 Отстаивание settling Тетрагидрофуран Tetrahydrofuran 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1 Отстаивание settling Этилацетат ethyl acetate 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1 Отстаивание settling Нитрометан Nitromethane 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1 Отстаивание settling Ацетонитрил Acetonitrile 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1 Отстаивание settling Диметоксиэтан Dimethoxyethane 3000 3000 25 25 Фильтрация Filtration Форма 1 Form 1

Охлаждение.Cooling.

Растворы, полученные после оценки растворимости, помещали в холодильник (5°С) на 3 дня. Твердые вещества сушили на воздухе и остатки анализировали при помощи РПД, что показано в табл. 7.Solutions obtained after evaluating the solubility were placed in a refrigerator (5°C) for 3 days. The solids were air dried and residues were analyzed by RPD as shown in Table 1. 7.

Таблица 6. Результаты проверки полиморфизма после охлаждения при 5°СTable 6. Polymorphism test results after cooling at 5°C

Процедура Procedure Растворитель Solvent Объем (мкл) Volume (µl) Конечная температура (°C) Final temperature (°C) Выделение Selection рпд rpd Охлаждение Cooling 2-пропанол 2-propanol 150 150 5 5 Сушка при к.т. Drying at room temperature Форма 1 Form 1 Охлаждение Cooling Этанол ethanol 150 150 5 5 Сушка при к.т. Drying at room temperature Форма 1 Form 1 Охлаждение Cooling Тетрагидро фуран: вода 95:5 Tetrahydro furan: water 95:5 300 300 5 5 Сушка при к.т. Drying at room temperature Форма 1 Form 1

Выпаривание.Evaporation.

Супернатантам от выдерживания позволяли медленно испаряться при условиях окружающей среды. Твердые вещества не извлекали.The aging supernatants were allowed to slowly evaporate under ambient conditions. No solids were recovered.

Обсуждение результатов.The discussion of the results.

При оценке растворимости некоторые образцы показывали очевидное визуальное изменение после добавления растворителя (см. табл. 4). Твердые вещества не растворялись, но имели другую текстуру. Таким образом, небольшое количество твердого вещества брали и анализировали при помощи РПД перед продолжением оценки растворимости. Все дифрактограммы показали кристаллическую структуру, названную формой 1 соединения 1. Значение растворимости в таких условиях не соотносилось с абсолютным значением в мг/мл, а скорее с объемом, при котором происходила кристаллизация. После анализа РПД твердые вещества хранили при 40°С и 75% ОВ, растворяя через 24 ч.When evaluating the solubility, some samples showed an obvious visual change after the addition of the solvent (see table. 4). The solids did not dissolve but had a different texture. Thus, a small amount of solid was taken and analyzed by RPD before proceeding with the solubility evaluation. All diffractograms showed a crystal structure, called form 1 of compound 1. The value of solubility under these conditions did not correlate with the absolute value in mg/ml, but rather with the volume at which crystallization occurred. After RPD analysis, the solids were stored at 40°C and 75% RH, dissolving after 24 hours.

Дополнительные попытки кристаллизации проводили путем нескольких подходов, включая циклы нагревания/охлаждения, охлаждения и медленного испарения. Форму 1 соединения 1 получали при выдерживании при 5°С. Твердые вещества не извлекали после испарения супернатантов, таким образом показывая, что полученная форма 1 соединения 1 является нерастворимой в этих растворителях.Additional attempts at crystallization were carried out by several approaches, including cycles of heating/cooling, cooling and slow evaporation. Form 1 of compound 1 was obtained by keeping at 5°C. No solids were recovered after evaporation of the supernatants, thus indicating that the resulting form 1 of Compound 1 is insoluble in these solvents.

Все полученные при попытках кристаллизации твердые вещества хранили при 40°С и 75% ОВ. Через 12 дней они превращались в стеклоподобное твердое вещество, окруженное некоторым количеством капель. Они оставались кристаллическими согласно РПД, но показывали новую структуру, форму 2 соединения 1.All solids obtained from crystallization attempts were stored at 40° C. and 75% RH. After 12 days they turned into a glassy solid surrounded by a few droplets. They remained crystalline according to the RPD, but showed a new structure, form 2 of compound 1.

Форму 2 соединения 1 оставляли при условиях хранения на 1 неделю. Она оставалась неизменной.Form 2 of Compound 1 was left under storage conditions for 1 week. She remained unchanged.

-48 041082-48 041082

Определение характеристик новых кристаллических форм.Determination of the characteristics of new crystalline forms.

Две новые кристаллические структуры, форма 1 и форма 2 соединения 1, определяли при проверке полиморфов. Результаты определения характеристик этих двух форм в дополнение к аморфной форме подытожены в табл. 7.Two new crystal structures, form 1 and form 2 of compound 1, were determined by testing polymorphs. The characterization results for these two forms, in addition to the amorphous form, are summarized in Table 1. 7.

Таблица 7. Определение характеристик полиморфов соединения 1Table 7. Compound 1 polymorph characterization

Аморфная amorphous Форма 1 Form 1 Форма 2 Form 2 Солевая форма Salt form НС1 соль HC1 salt НС1 соль HC1 salt НС1 соль HC1 salt РПД RPD Аморфные следы amorphous traces Форма 1 Form 1 Форма 2 Form 2 Ή-ЯМР Ή-NMR Согласуется со структурой Consistent with the structure Согласуется со структурой Consistent with the structure Согласуется со структурой Consistent with the structure ДСК DSC Не наблюдали событий перекристаллизации No recrystallization events were observed Эндотерма (153, ГС, 51,3 Дж/г) Endotherm (153, GS, 51.3 J/g) Эндотерма (43, ГС, 17,9 Дж/г); эндотерма (118,9°С, 32,2 Дж/г) Endotherm (43, GS, 17.9 J/g); endotherm (118.9°C, 32.2 J/g) 7 дней хранения при 40°С / 75% ОВ 7 days storage at 40°C / 75% RH Стекловидный материал vitreous material Воскообразное/стекловидное твердое вещество + растворение небольших частиц - форма 2 Waxy/glassy solid + dissolution of small particles - form 2 Воскообразное/стекловидное твердое вещество + растворение небольших частиц - форма 2 Waxy/glassy solid + dissolution of small particles - form 2 IC IC 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1

1Н-ЯМР не показал никакого соответствующего количества растворителя или разложения любого исследуемого кристаллического твердого вещества. Этот результат подтверждается графиком ДСК, наблюдаемым для формы 1 соединения 1, где не наблюдали значительных событий перед относительно высокой температурой плавления (153,1°С), показывая, что форма 1 соединения 1 вероятнее всего представляет собой безводную форму. 1 H-NMR showed no corresponding amount of solvent or decomposition of any of the crystalline solids tested. This result is supported by the DSC plot observed for Form 1 of Compound 1 where no significant events were observed before the relatively high melting point (153.1° C.), indicating that Form 1 of Compound 1 is most likely the anhydrous form.

В случае формы 2 соединения 1 широкое событие при 43°С наблюдали перед эндотермой при 118,9°С, что представляет плавление твердого вещества. Это показывает, что форма 2 соединения 1, вероятнее всего, представляет собой гидратную форму.In the case of Form 2 of Compound 1, a broad event at 43° C. was observed before the endotherm at 118.9° C., representing the melting of the solid. This indicates that form 2 of compound 1 is most likely the hydrate form.

На основе этих результатов форма 1 соединения 1 представляет собой гигроскопическую форму, которая перегруппировывается для включения воды, изменяя свою структуру на форму 2 соединения 1. Как только вода высвобождается, данные ДСК показывают другую температуру плавления для формы 1 соединения 1, которая ниже, показывая, что она не возвращается в форму 1 соединения 1. Новая безводная форма, вероятно, может образовываться путем процесса дегидратации формы 2 соединения 1.Based on these results, Form 1 of Compound 1 is a hygroscopic form that rearranges to include water, changing its structure to Form 2 of Compound 1. Once the water is released, the DSC data shows a different melting point for Form 1 of Compound 1, which is lower, showing, that it does not revert to Form 1 of Compound 1. A new anhydrous form could probably be formed by the process of dehydration of Form 2 of Compound 1.

Кроме того, для быстрой оценки растворимости в воде формы 1 соединения 1 проводили краткую оценку растворимости. Смесь образцов формы 1 взвешивали в емкостях и аликвоты воды добавляли при 25°С, как показано в табл. 8. Форма 1 показывает растворимость по меньшей мере 1000 мг/мл.In addition, a brief solubility evaluation was performed to rapidly assess the water solubility of Compound 1 Form 1. A mixture of samples of form 1 was weighed into containers and aliquots of water were added at 25°C, as shown in table. 8. Form 1 shows a solubility of at least 1000 mg/ml.

Таблица 8. Растворимость в воде формы 1 соединения 1Table 8. Water Solubility Form 1 of Compound 1

Образец (мг) Sample (mg) Вода (мкл) Water (µl) Результат Result 30 thirty 150 мкл (2,5 об.) 150 µl (2.5 vol.) Растворилось Dissolved 10 10 10 мкл (1 об.) 10 µl (1 vol.) Растворилось Dissolved

Пример 12. Проверка соли соединения I.Example 12 Salt Test of Compound I

Коммерческие химические вещества и растворители закупали у Aldrich или Fluka. Исходные растворы кислоты, используемые при проверке, готовили, как показано в табл. 9.Commercial chemicals and solvents were purchased from Aldrich or Fluka. The initial acid solutions used in the test were prepared as shown in table. 9.

Таблица 9. Исходные растворы, используемые при проверке солиTable 9. Stock solutions used in salt testing

Противоион Counterion Концентрация Concentration Растворитель Solvent Серная кислота - SO4 Sulfuric acid - SO4 1,0 м 1.0 m THF THF Метансульфоновая кислота - MSA Methansulfonic acid - MSA 1,0 м 1.0 m THF THF Малеиновая кислота - МЕА Maleic acid - MEA 1,0 м 1.0 m THF THF Фосфорная кислота - РНОА Phosphoric acid - PHOA 1,0 м 1.0 m THF THF L-виннокаменная кислота - TAR L-tartaric acid - TAR 1,0 м 1.0 m THF THF Фумаровая кислота - FUA Fumaric acid - FUA 0,5 М 0.5 M MeOHTHF 1:1 MeOHTHF 1:1 Янтарная кислота - SUCA Succinic acid - SUCA 1,0 м 1.0 m Метанол methanol Уксусная кислота - АсОН Acetic acid - AcOH 1,0 м 1.0 m THF THF

Предварительная оценка растворимости свободного основания.Preliminary assessment of the solubility of the free base.

Соединение I (10 мг) обрабатывали увеличивающимися объемами растворителя, пока материал полностью не растворится, или пока не используют максимальный объем 50. После каждого добавления растворителя систему встряхивали при 50°С в течение 10 мин, а затем ей позволяли отстояться при комнатной температуре в течение 5 мин перед добавлением новой аликвоты растворителя.Compound I (10 mg) was treated with increasing volumes of solvent until the material was completely dissolved, or until a maximum volume of 50 was used. After each addition of solvent, the system was shaken at 50°C for 10 min, and then it was allowed to stand at room temperature for 5 min before adding a new solvent aliquot.

После завершения оценки системы нагревали до 50°С и обрабатывали при помощи 1,1 экв. HCl (1М в THF, 27,5 мкл). Растворы/суспензии оставляли при 50°С на 1 час, а затем охлаждали до 5°С при 0,1°С/мин и перемешивали при этой температуре в течение ночи. Извлеченным растворам позволяли испариться досуха при условиях окружающей среды.After evaluation was complete, the systems were heated to 50° C. and treated with 1.1 eq. HCl (1M in THF, 27.5 µl). Solutions/suspensions were left at 50°C for 1 hour, and then cooled to 5°C at 0.1°C/min and stirred at this temperature overnight. The recovered solutions were allowed to evaporate to dryness under ambient conditions.

- 49 041082- 49 041082

В табл. 10 показаны исходные результаты оценки растворимости.In table. 10 shows the initial results of the solubility evaluation.

Таблица 10. Оценка растворимости соединения ITable 10 Solubility evaluation of compound I

Растворитель Solvent Растворимость Solubility После выпаривания растворов After evaporation of the solutions Толуол Toluene > 20 мг/мл > 20 mg/ml Смола Resin Дихлорметан dichloromethane >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin Тетрагидрофуран Tetrahydrofuran >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin 2-пропанол 2-propanol >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin Этанол ethanol >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin Этилацетат ethyl acetate >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin Г ексан Geksan >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin Ацетонитрил Acetonitrile >100 мг/мл >100 mg/ml Смола Resin

Не извлекали кристаллический материал ни в каких исходных экспериментах. Дополнительные техники/подходы проводили для извлечения кристаллических твердых веществ и описаны далее.No crystalline material was recovered in any of the original experiments. Additional techniques/approaches were performed to recover crystalline solids and are described below.

Обработка ультразвуком.Ultrasonic treatment.

Смолы помещали в ультразвуковую ванну. Не отмечали изменений через 1 ч. 100 мкл каждого растворителя добавляли, и их помещали в ультразвуковую ванну еще на дополнительный час для обеспечения осаждения. Они оставались смолами.The resins were placed in an ultrasonic bath. No change was noted after 1 hour. 100 μl of each solvent was added and placed in an ultrasonic bath for an additional hour to ensure precipitation. They remained resin.

Выдерживание.Aging.

Извлеченные смолы после обработки ультразвуком (все еще с 100 мкл растворителя) выдерживали в течение 12 ч (циклы 25-50°С). Растворы извлекали.The recovered resins after sonication (still with 100 μl of solvent) were aged for 12 h (cycles 25-50°C). The solutions were removed.

Охлаждение.Cooling.

После выдерживания растворы помещали в холодильник (-20°С) на ночь. Осаждение не происходило, однако, смолу извлекали.After keeping the solutions were placed in a refrigerator (-20°C) overnight. Precipitation did not occur, however, the resin was recovered.

Сушка под вакуумом.Drying under vacuum.

Растворам и смолам, полученным при -20°С, позволяли высохнуть при комнатной температуре, и их помещали в печь (25°С/вакуум) на выходные. Два твердых вещества извлекали из EtOH и ACN, соответственно. Эти твердые вещества были аморфными, и сдвиги пиков наблюдали относительно свободного основания, наблюдаемого в 1Н-ЯМР, что предполагало, что происходило образование соли. На основании этих результатов этанол и ацетонитрил выбирали для проверки соли.Solutions and resins prepared at -20° C. were allowed to dry at room temperature and placed in an oven (25° C./vacuum) over the weekend. Two solids were recovered from EtOH and ACN, respectively. These solids were amorphous and peak shifts were observed relative to the free base observed in 1 H-NMR, suggesting that salt formation was occurring. Based on these results, ethanol and acetonitrile were selected for salt testing.

Общая процедура (EtOH).General procedure (EtOH).

Соединение I (15 мг) растворяли в EtOH при 50°С. Растворы обрабатывали выбранными противоионами и перемешивали в течение 1 часа при 50°С. Растворы затем охлаждали до 5°С при 0,1°С/мин и перемешивали при этой температуре в течение выходных. Суспензии позволили высохнуть при комнатной температуре. Растворы выпаривали при условиях окружающей среды и извлеченные масла помещали в печь (к.т./вакуум). Все твердые вещества анализировали при помощи РПД. В табл. 12 показаны результаты проверки соли.Compound I (15 mg) was dissolved in EtOH at 50°C. The solutions were treated with selected counterions and stirred for 1 hour at 50°C. The solutions were then cooled to 5°C at 0.1°C/min and stirred at this temperature over the weekend. The suspension was allowed to dry at room temperature. The solutions were evaporated at ambient conditions and the extracted oils were placed in an oven (rt/vacuum). All solids were analyzed by RPD. In table. 12 shows the results of the salt test.

Таблица 11. Результаты проверки соли (EtOH)Table 11. Salt test results (EtOH)

Растворитель Solvent Противоион Counterion После добавления кислоты After adding acid При 5°С At 5°C После сушки в печи (25°С/вакуум) - РПД After oven drying (25°C/vacuum) - RPD Этанол ethanol Серная кислота - SO4 Sulfuric acid - SO4 Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD Этанол ethanol Метансульфоновая кислота - MSA Methansulfonic acid - MSA Раствор Solution Суспензия Suspension н/о - кристаллическая структура (форма 1, соединение 2) n / o - crystal structure (form 1, compound 2) Этанол ethanol Малеиновая кислота МЕА Maleic acid MEA Раствор Solution Раствор Solution Твердое вещество аморфное1 Solid amorphous 1 Этанол ethanol Фосфорная кислота РНОА Phosphoric acid PHOA Раствор Solution Раствор Solution Твердое вещество аморфное Solid amorphous Этанол ethanol L-виннокаменная кислота - TAR L-tartaric acid - TAR Раствор Solution Раствор Solution Твердое вещество аморфное Solid amorphous Этанол ethanol Фумаровая кислота FUA Fumaric acid FUA Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD Этанол ethanol Янтарная кислота SUCA Succinic Acid SUCA Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD Этанол ethanol Уксусная кислота АсОН Acetic acid AcOH Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD

1Твердое вещество извлекали через 1 неделю под вакуумом. Общая процедура (ацетонитрил).1 The solid was recovered after 1 week under vacuum. General procedure (acetonitrile).

Соединение I (15 мг) растворяли в ацетонитриле при 50°С. Растворы обрабатывали выбранными противоионами. Растворы перемешивали в течение 1 ч при 50°С, охлаждали до 5°С при 0,1°С/мин и перемешивали при этой температуре в течение ночи. Суспензии позволили высохнуть при комнатной температуре. Смолы помещали в камеру для выдерживания (циклы 25-50°С, цикл 8 ч) на 24 ч с последую- 50 041082 щей сушкой в печи (к.т./вакуум). Растворы выпаривали при условиях окружающей среды и извлеченные масла помещали в печь (к.т./вакуум). Все твердые вещества анализировали при помощи РПД. В табл. 12 показаны результаты проверки соли.Compound I (15 mg) was dissolved in acetonitrile at 50°C. Solutions were treated with selected counterions. The solutions were stirred for 1 h at 50°C, cooled to 5°C at 0.1°C/min and stirred at this temperature overnight. The suspension was allowed to dry at room temperature. The resins were placed in a holding chamber (cycles 25-50°C, cycle 8 hours) for 24 hours followed by oven drying (RT/vacuum). The solutions were evaporated at ambient conditions and the extracted oils were placed in an oven (rt/vacuum). All solids were analyzed by RPD. In table. 12 shows the results of the salt test.

Таблица 12. Результаты проверки соли (ацетонитрил)Table 12. Salt test results (acetonitrile)

Растворитель Solvent Противоион Counterion После добавления кислоты After adding acid При 5°С At 5°C После сушки в печи (25°С/вакуум) - РПД After oven drying (25°C/vacuum) - RPD Ацетонитрил Acetonitrile Серная кислота - SO4 Sulfuric acid - SO4 Раствор Solution Раствор Solution Твердое вещество аморфное Solid amorphous Ацетонитрил Acetonitrile Метансульфоновая кислота - MSA Methansulfonic acid - MSA Суспензия Suspension Суспензия Suspension н/о - кристаллическая структура (форма 1, соединение 2) n / o - crystal structure (form 1, compound 2) Ацетонитрил Acetonitrile Малеиновая кислота -МЕА Maleic acid -MEA Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD Ацетонитрил Acetonitrile Фосфорная кислота -РНОА Phosphoric acid -RNOA Суспензия Suspension Смола Resin Твердое вещество аморфное Solid amorphous Ацетонитрил Ацетонитрил Acetonitrile Acetonitrile L-виннокаменная кислота - TAR Фумаровая кислота -FUA L-tartaric acid - TAR Fumaric acid - FUA Суспензия Раствор Suspension Solution Смола Раствор Resin Solution Твердое вещество аморфное Масло - без РПД Solid amorphous Oil - without RPD Ацетонитрил Acetonitrile Янтарная кислота SUCA Succinic Acid SUCA Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD Ацетонитрил Acetonitrile Уксусная кислота АсОН Acetic acid AcOH Раствор Solution Раствор Solution Масло - без РПД Oil - without RPD

Пример 13. Получение формы 1 соединения 2.Example 13 Preparation of Form 1 of Compound 2

Соединение I (500 мг) растворяли в ацетонитриле (3623 мкл). 1,1 экв. метансульфоновой кислоты медленно добавляли (1380 мкл) при помощи перистальтического насоса (Vt=5 мл, 10 об.). Получали очень густую суспензию, поэтому дополнительные 5 мл растворителя добавляли для облегчения перемешивания. Суспензию оставляли перемешиваться при 25°С на 1 час и цикл устанавливали на 24 ч:Compound I (500 mg) was dissolved in acetonitrile (3623 μl). 1.1 eq. methanesulfonic acid was slowly added (1380 μl) using a peristaltic pump (V t =5 ml, 10 vol.). A very thick suspension was obtained, so an additional 5 ml of solvent was added to facilitate mixing. The suspension was allowed to stir at 25°C for 1 hour and the cycle was set to 24 hours:

повышение до 5°С при 0,2°С/мин, 2 ч при 5°С, повышение до 25°С при 0,2°С/мин, 2 ч при 25°С.increase to 5°C at 0.2°C/min, 2 hours at 5°C, increase to 25°C at 0.2°C/min, 2 hours at 25°C.

При 25°С извлекали белую суспензию. Ее отфильтровывали (0,45 мкм) и оставляли сушиться на воздухе на выходные. 471,6 мг формы 1 соединения 2 (76% выход) получали и подтверждали при помощи анализа РПД.At 25° C. a white suspension was recovered. It was filtered (0.45 µm) and allowed to air dry over the weekend. 471.6 mg Compound 2 Form 1 (76% yield) was obtained and confirmed by RPD analysis.

В другом варианте осуществления форму 1 соединения 2 получали растворением 1,0 г соединения 2 в 10 об. ACN, кипятя в течение 24 ч. Раствор охлаждали, отфильтровывали и сушили под вакуумом с получением названного соединения.In another embodiment, form 1 of compound 2 was prepared by dissolving 1.0 g of compound 2 in 10 vol. ACN at reflux for 24 hours. The solution was cooled, filtered and dried under vacuum to give the title compound.

Свойства кристаллической формы 1 соединения 2 показаны в табл. 13.Properties of crystalline form 1 of compound 2 are shown in table. 13.

Таблица 13. Подробные характеристики для формы 1 соединения 2Table 13. Detailed characteristics for Compound 2 Form 1

Солевая форма Salt form Мезилат (1 экв.) Mesylate (1 eq.) Внешний вид Appearance Белое-светло-желтое твердое вещество White to light yellow solid Термогравиметрический анализ (ТГА) Thermogravimetric analysis (TGA) Потери 0,7% масс./масс. (от 78°С до 243°С), разложение свыше 250°С Loss of 0.7% wt./mass. (from 78°С to 243°С), decomposition over 250°С Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) Differential Scanning Calorimetry (DSC) Эндотерма при ~ 231,05°С (82,7 Дж/г) плечо Endotherm at ~ 231.05°С (82.7 J/g) shoulder наблюдали небольшое observed a small Удельное вращение: Specific rotation: 14 ± 2° (с=0,02 г/мл, метанол) при λ=589,2 14 ± 2° (c=0.02 g/ml, methanol) at λ=589.2 Растворимость в воде Solubility in water pH pH Растворимость Solubility pH 2 pH 2 >107 мг/мл (Легкорастворимый) >107 mg/ml (Easily soluble) pH 7,4 pH 7.4 >107 мг/мл (Легкорастворимый) >107 mg/ml (Easily soluble) pH 10 pH 10 >85 мг/мл (Растворимый) >85 mg/ml (Soluble)

- 51 041082- 51 041082

Растворимость в органических веществах Solubility in organic matter Растворители Качественная растворимость Solvents Quality solubility вода, диметилсульфоксид > 200 мг/мл (Легкорастворимый) water, dimethyl sulfoxide > 200 mg/ml (Easily soluble) метанол ~ 100 мг/мл тетрагидрофуран/вода (90:10) (Легкорастворимый) methanol ~ 100 mg/ml tetrahydrofuran/water (90:10) (Easily soluble) Этанол/вода (90:10) - 50 мг/мл изопропанол/вода (90:10) (Растворимый) Ethanol / water (90:10) - 50 mg / ml isopropanol/water (90:10) (Soluble) EtOH ~ 15 мг/мл (Умеренно растворимый EtOH ~ 15 mg/ml (Moderately soluble ) ) изопропилацетат, изо пропанол, <10 мг/мл метилэтилкетон, ацетон, (Слаборастворимый) этанол, метил-трет-бутиловый эфир, 1,4-диоксан, толуол, тетрагидрофуран, дихлорметан, ацетонитрил isopropyl acetate, isopropanol, <10 mg/ml methyl ethyl ketone, acetone, (Slightly soluble) ethanol, methyl tert-butyl ether, 1,4-dioxane, toluene, tetrahydrofuran, dichloromethane, acetonitrile Г игроскопичность (гравиметрическая сорбция паров [ГСП]) Igroscopicity (gravimetric vapor sorption [GSP]) Обратимое поглощение воды (-2,1% масс./масс.) от 0 до 90% ОВ Рентгеновская порошковая дифрактометрия (РПД): Неизменно Reversible water uptake (-2.1% w/w) 0 to 90% RH X-ray powder diffractometry (XRD): Unchanged Кристалличность Crystallinity Кр исталличе ский Russian Полиморфы Polymorphs Форма 1, которая стабильна в течение 7 дней при 40°С/75% ОВ и 25°С/97% ОВ Form 1 which is stable for 7 days at 40°C/75% RH and 25°C/97% RH

Пример 14. Исследования кристаллизации соединения 2.Example 14 Crystallization Studies of Compound 2

Соединение 2 (20 мг) взвешивали в пузырьках и добавляли растворители (100 мкл, 5 об.), добиваясь получения суспензий. Суспензии помещали в камеру для выдерживания (циклы 25-50°С) на 24 ч и извлеченные твердые вещества анализировали при помощи РПД. В табл. 14 подытожены исследования кристаллизации.Compound 2 (20 mg) was weighed into vials and solvents (100 μl, 5 vol) were added to obtain suspensions. The suspensions were placed in a holding chamber (cycles 25-50°C) for 24 hours and the recovered solids were analyzed by RPD. In table. 14 summarizes the crystallization studies.

Таблица 14. Исследования кристаллизацииTable 14. Crystallization studies

Соль (мг) Salt (mg) Растворитель Solvent Объем (мкл) Volume (µl) РПД RPD 20 20 Толуол Toluene 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Дихлорметан dichloromethane 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Тетрагидрофуран Tetrahydrofuran 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 2-пропанол 2-propanol 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Этанол ethanol 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Этилацетат ethyl acetate 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Нитрометан Nitromethane 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Ацетонитрил Acetonitrile 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 1,2-диметоксиэтан 1,2-dimethoxyethane 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2 20 20 Тетрагидрофуран: вода 95:5 Tetrahydrofuran: water 95:5 100 100 Форма 1, соединение 2 Form 1, connection 2

Пример 15. Проверка других возможных солей из соединения I.Example 15. Checking other possible salts from compound I.

Процедура образования других солей.The procedure for the formation of other salts.

Соединение I (100/50 мг) растворяли в ацетонитриле/этаноле (10 об.). Медленно добавляли 1,1 экв. противоионов и суспензии оставляли перемешиваться при 25°С на 1 час. Цикл устанавливали на 24 ч:Compound I (100/50 mg) was dissolved in acetonitrile/ethanol (10 vol.). 1.1 eq. counterions and suspension was left to mix at 25°C for 1 hour. The cycle was set to 24 h:

повышение до 5°С при 0,2°С/мин, 2 ч при 5°С, повышение до 25°С при 0,2°С/мин, 2 ч при 25°С.increase to 5°C at 0.2°C/min, 2 hours at 5°C, increase to 25°C at 0.2°C/min, 2 hours at 25°C.

При 25 °C извлекали смесь растворов, смол и белого твердого вещества, которая превращалась в смолы при сушке при комнатной температуре. Смолы помещали в печь (25°С/вакуум) и желтые твердые вещества извлекали и анализировали при помощи РПД. В табл. 15 показаны процедуры получения этих солей.At 25 °C, a mixture of solutions, resins and a white solid was recovered, which turned into resins when dried at room temperature. The resins were placed in an oven (25° C./vacuum) and the yellow solids were recovered and analyzed by RPD. In table. 15 shows procedures for preparing these salts.

-52041082-52041082

Таблица 15. Процедура получения других солейTable 15. Procedure for obtaining other salts

Масса (мг) Mass (mg) Растворитель Solvent Объем (мкл) Volume (µl) Противоион Counterion Эквиваленты Equivalents Объем (мкл) Volume (µl) Наблюдения после добавления противоиона Observations After Adding a Counterion 100 100 Ацетонитрил Acetonitrile 1000 1000 Серная кислота - SO4 Sulfuric acid - SO4 1,1 1.1 275 275 Суспензия превратилась в смолу после 175 мкл Suspension turned to resin after 175 µl 100 100 Ацетонитрил Acetonitrile 1000 1000 Фосфорная кислота РНОА Phosphoric acid PHOA 1,1 1.1 275 275 Оставалась в виде суспензии Remained in suspension 100 100 Ацетонитрил Acetonitrile 1000 1000 Lвиннокаменная кислота - TAR Tartaric acid - TAR 1,1 1.1 275 275 Суспензия превратилась в смолу после 200 мкл Suspension turned to resin after 200 µl 50 50 Ацетонитрил Acetonitrile 500 500 Лимонная кислота - СА Citric Acid - SA 1,1 1.1 138 138 Суспензия превратилась в смолу после 125 мкл Suspension turned to resin after 125 µl 50 50 Этанол ethanol 500 500 Лимонная кислота - СА Citric Acid - SA 1,1 1.1 138 138 Оставалась в виде раствора Remained in solution

Процедура исследований кристаллизации для других солей.Procedure for crystallization studies for other salts.

Аморфные соли растирали, взвешивали в пузырьках и добавляли растворители (5 об.). Суспензии помещали в камеру для выдерживания (циклы 25-50°С) на 24 ч. Растворы оставляли испаряться, и извлеченные твердые вещества анализировали при помощи РПД. В табл. 16 показаны результаты получения этих солей.Amorphous salts were triturated, weighed in vials, and solvents (5 vol.) were added. The suspensions were placed in a holding chamber (cycles 25-50° C.) for 24 hours. The solutions were allowed to evaporate and the recovered solids were analyzed by RPD. In table. 16 shows the results of these salts.

Таблица 16. Результаты для других солейTable 16. Results for other salts

Противоион Counterion Наблюдения после цикла выдерживания Observations after the holding cycle Наблюдения после сушки при К.Т. Observations after drying at K.T. Выход после сушки в печи Yield after oven drying Серная кислота - SO4 Sulfuric acid - SO4 Раствор Solution Смолы resins 53% 53% Фосфорная кислота РНОА Phosphoric acid PHOA Смола Resin Смолы resins 77% 77% L-виннокаменная кислота - TAR L-tartaric acid - TAR Белое твердое вещество white solid Смолы resins 70% 70% Лимонная кислота СА Citric acid SA Смола Resin Смолы resins 62% 62% Лимонная кислота СА Citric acid SA Раствор Solution Смолы resins 54% 54%

'Указание гигроскопичности для этой соли'Indication of hygroscopicity for this salt

После добавления противоиона образовывалась только одна белая густая суспензия (фосфатная соль), однако, она превращалась в смолу после выдерживания. Тартратная соль кристаллизовалась после цикла выдерживания, но она становилась смолой при сушке, что показывает ее способность поглощать воду. Остальные соли были или растворами, или смолами.After adding the counterion, only one white thick slurry (phosphate salt) was formed, however, it turned into a resin after aging. The tartrate salt crystallized after the aging cycle, but it became a gum when dried, indicating its ability to absorb water. The remaining salts were either solutions or resins.

Серную кислоту использовали для получения сульфатной соли соединения I. Исследования кристаллизации сульфатной соли соединения I проводили со следующими растворителями: толуол, дихлорметан, тетрагидрофуран, 2-пропанол, этанол, этилацетат, нитрометан, ацетонитрил, 1,2-диметоксиэтан и тетрагидрофуран/вода (95:5). Получали масла.Sulfuric acid was used to prepare the sulfate salt of compound I. Crystallization studies of the sulfate salt of compound I were carried out with the following solvents: toluene, dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-propanol, ethanol, ethyl acetate, nitromethane, acetonitrile, 1,2-dimethoxyethane and tetrahydrofuran/water (95 :5). Got oils.

Фосфорную кислоту использовали для получения фосфатной соли соединения I. Исследования кристаллизации фосфатной соли соединения I проводили со следующими растворителями: толуол, дихлорметан, тетрагидрофуран, 2-пропанол, этанол, этилацетат, нитрометан, ацетонитрил, 1,2-диметоксиэтан и тетрагидрофуран/вода (95:5). Аморфное соединение получали с толуолом и дихлорметаном; и масла получали с другими растворителями.Phosphoric acid was used to prepare the phosphate salt of compound I. Crystallization studies of the phosphate salt of compound I were carried out with the following solvents: toluene, dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-propanol, ethanol, ethyl acetate, nitromethane, acetonitrile, 1,2-dimethoxyethane and tetrahydrofuran/water (95 :5). An amorphous compound was obtained with toluene and dichloromethane; and oils were prepared with other solvents.

L-виннокаменную кислоту использовали для получения тартратной соли соединения I. Исследования кристаллизации тартратной соли соединения I проводили со следующими растворителями: толуол, дихлорметан, тетрагидрофуран, 2-пропанол, этанол, этилацетат, нитрометан, ацетонитрил, 1,2диметоксиэтан и тетрагидрофуран/вода (95:5). Масла получали из этанола и тетрагидрофурана:воды (95:5), тогда как аморфное соединение получали из других растворителей.L-tartaric acid was used to prepare the tartrate salt of compound I. Crystallization studies of the tartrate salt of compound I were carried out with the following solvents: toluene, dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-propanol, ethanol, ethyl acetate, nitromethane, acetonitrile, 1,2dimethoxyethane and tetrahydrofuran/water (95 :5). Oils were obtained from ethanol and tetrahydrofuran:water (95:5), while the amorphous compound was obtained from other solvents.

Лимонную кислоту использовали для получения цитратной соли соединения I из ацетонитрила. Исследования кристаллизации цитратной соли соединения I проводили со следующими растворителями: толуол, дихлорметан, тетрагидрофуран, 2-пропанол, этанол, этилацетат, нитрометан, ацетонитрил, 1,2диметоксиэтан и тетрагидрофуран/вода (95:5). Аморфное соединение получали из толуола и дихлорметана, тогда как масла получали из других растворителей.Citric acid was used to prepare the citrate salt of compound I from acetonitrile. Crystallization studies of the citrate salt of compound I were carried out with the following solvents: toluene, dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-propanol, ethanol, ethyl acetate, nitromethane, acetonitrile, 1,2dimethoxyethane and tetrahydrofuran/water (95:5). An amorphous compound was obtained from toluene and dichloromethane, while oils were obtained from other solvents.

Лимонную кислоту использовали для получения цитратной соли соединения I из этанола. Исследования кристаллизации цитратной соли соединения I проводили со следующими растворителями: толуол, дихлорметан, тетрагидрофуран, 2-пропанол, этанол, этилацетат, нитрометан, ацетонитрил, 1,2диметоксиэтан и тетрагидрофуран/вода (95:5). Получали масла.Citric acid was used to prepare the citrate salt of compound I from ethanol. Crystallization studies of the citrate salt of compound I were carried out with the following solvents: toluene, dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-propanol, ethanol, ethyl acetate, nitromethane, acetonitrile, 1,2dimethoxyethane and tetrahydrofuran/water (95:5). Got oils.

- 53 041082- 53 041082

Пример 16. Получение формы 2 соединения 2.Example 16 Preparation of Form 2 of Compound 2

Кристаллическую форму 2 соединения 2 получали растворением соединения 2 (700 мг) в EtOH (49 мл) при 50°С. Раствор перемешивали при 50°С и через 15 мин перемешивание прекращали. Н-гептан добавляли (70 мл) и систему помещали в ванну сухого льда/ацетона на 2 ч. Твердое вещество отфильтровывали, сушили на воздухе и определяли характеристики.Crystal form 2 of compound 2 was obtained by dissolving compound 2 (700 mg) in EtOH (49 ml) at 50°C. The solution was stirred at 50° C. and after 15 minutes the stirring was stopped. n-heptane (70 ml) was added and the system was placed in a dry ice/acetone bath for 2 hours. The solid was filtered off, air dried and characterized.

Пример 17. Получение формы 3 соединения 2.Example 17 Preparation of Form 3 of Compound 2

Кристаллическую форму 3 соединения 2 получали растворением соединения 2 в DMSO при 50°С. Раствор перемешивали при 50°С и через 15 мин перемешивание прекращали. MeCN добавляли и систему охлаждали до к.т., или 5°С, или температуры сухого льда/ацетона.Crystal form 3 of compound 2 was obtained by dissolving compound 2 in DMSO at 50°C. The solution was stirred at 50° C. and after 15 minutes the stirring was stopped. MeCN was added and the system was cooled to rt, or 5° C., or dry ice/acetone temperature.

Пример 18. Получение формы 4 соединения 2.Example 18 Preparation of Form 4 of Compound 2

Кристаллическую форму 4 соединения 2 получали обработкой 8,0 г (R,R)-транс-(3-((4(аминометил)-6-(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона (соединения I) в 160 мл ACN при помощи 0,92 экв. метансульфоновой кислоты. Раствору позволяли отстояться в течение 1 ч при 20±5°С, а затем нагревали до кипения (~82-85°С) в течение 2 ч, позволяли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре, повторяли цикл нагревания еще 3 раза до соответствующей ДСК, общее время выдерживания при кипении 10 ч. Кристаллическое соединение выделяли фильтрацией и сушили под вакуумом.Crystal form 4 of compound 2 was obtained by treating 8.0 g of (R,R)-trans-(3-((4(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4 -hydroxypyrrolidin-1-yl)methanone (compound I) in 160 ml of ACN with 0.92 eq. methanesulfonic acid. The solution was allowed to stand for 1 h at 20±5°C and then heated to boiling (~82-85°C) for 2 h, allowed to stir overnight at room temperature, repeated the heating cycle 3 more times until the appropriate DSC , total reflux time 10 hours. The crystalline compound was isolated by filtration and dried under vacuum.

Пример 19. Превращение смеси формы 1 и 4 соединения 2 в форму 1 соединения 2.Example 19 Conversion of a Mixture of Forms 1 and 4 of Compound 2 to Form 1 of Compound 2

Соединение 2 (смесь форм 1 и 4) обрабатывали охлажденным IPA: водой (95:5; 1 мл) и нагревали от -8 до 70°С со скоростью 0,5°С/мин. Образцы затем охлаждали от 70 назад до -8°С с той же скоростью. Температуру прозрачности при нагревании (при 100% пропускании) и температуру помутнения при повторном охлаждении (<100% пропускания) записывали при помощи прибора Crystal 16, и данные показаны в табл. 17. Анализ РПД проводили на всех твердых веществах, полученных после охлаждения. Анализ РПД выделенных твердых веществ после охлаждения показал, что форма 1 является единственной выделенной формой.Compound 2 (mixture of Forms 1 and 4) was treated with chilled IPA:water (95:5; 1 ml) and heated from -8 to 70°C at a rate of 0.5°C/min. The samples were then cooled from 70 back to -8°C at the same rate. The clear temperature on heating (at 100% transmission) and the cloud point on recooling (<100% transmission) were recorded using a Crystal 16 instrument and the data are shown in Table 1. 17. RPD analysis was performed on all solids obtained after cooling. RPD analysis of isolated solids after cooling showed Form 1 to be the only isolated form.

Таблица 17. Итоги кривых растворимости и метастабильного пределаTable 17. Results of solubility and metastable limit curves

Масса образца (мг) Sample weight (mg) Температура прозрачности (°C) Clear temperature (°C) Температура помутнения (°C) Cloud point (°C) 5 5 6,9 6.9 н/о But 10 10 20,3 20.3 н/о But 20 20 37,2 37.2 н/о But 30 thirty 48,5 48.5 -7,8 -7.8 40 40 55,8 55.8 -1,8 -1.8 60 60 64 64 14,5 14.5 70 70 68,6 68.6 24,7 24.7 100 100 н/о But н/о But

Пример 20. Исследования стабильности.Example 20 Stability Studies

Исследования стабильности проводили согласно условиям, показанным в табл. 18. Соединения анализировали на внешний вид, чистоту, связанные вещества, хиральную чистоту, влажность, ДСК и РПД.Stability studies were performed according to the conditions shown in table. 18. Compounds were analyzed for appearance, purity, bound substances, chiral purity, moisture content, DSC and RPD.

Таблица 18. Исследования стабильностиTable 18. Stability studies

Исследование Study Условия хранения Storage conditions 3 месяца ускоренно 3 months accelerated 40°С/75% ОВ 40°C/75% RH Принудительное разложение Forced decomposition Кислота (2н НС1) Основание (0,ЗЗнХаОН) Пероксид (10% Н2О2) Раствор, тепло (50°С, 24 ч.) Раствор, свет (365 нм, 24 часа) Твердое вещество, тепло (100°С, 24 часа) Твердое вещество, свет (365 нм, 24 часа) Acid (2n HC1) Base (0,ZZnKhaON) Peroxide (10% H2O2) Solution, heat (50°C, 24 hours) Solution, light (365 nm, 24 hours) Solid, heat (100°C, 24 hours) Solid, light (365 nm, 24 hours) Стабильность в течение 1 года по ICH Stability for 1 year according to ICH 25°С/60% 40°С/75% 25°C/60% 40°C/75% Стабильность в течение 2 лет по ICH Stability for 2 years according to ICH 25°С/60% 40°С/75% 25°C/60% 40°C/75%

ICH=Международный совет по гармонизацииICH=International Council for Harmonization

ОВ=относительная влажностьRH=relative humidity

Соединение 1.Connection 1.

Соединение 1 не показало значительного изменения чистоты или поглощения влаги в течение 3 месяцев при ускоренных условий (40°С/75% ОВ).Compound 1 showed no significant change in purity or moisture uptake over 3 months under accelerated conditions (40°C/75% RH).

Соединение 2.Connection 2.

Для соединения 2 данные для 1 месяца при длительных и ускоренных условиях исследования в течение 1 года по ICH и исследования в течение 2 лет по ICH находились в пределах для всех протестиро- 54 041082 ванных свойств, без заметных химических или физических изменений.For Compound 2, data for 1 month long and accelerated conditions of the 1 year ICH study and the 2 year ICH study were within limits for all properties tested, with no noticeable chemical or physical changes.

Пример 21. Исследования принудительного разложения.Example 21 Forced decomposition studies.

Исследование принудительного разложения соединения 2 проводили при помощи условий для оценки химической чистоты при помощи ВЭЖХ примера 7.The study of forced decomposition of compound 2 was carried out using the conditions for evaluating the chemical purity using HPLC of example 7.

Состояние твердого вещества.The state of the solid.

Соединение 2 было стабильным в виде твердого вещества, которое подвергали действию тепла (100°С, 24 ч) и света (макс. 365 нм, 24 ч).Compound 2 was stable as a solid which was exposed to heat (100° C., 24 h) and light (max 365 nm, 24 h).

Состояние раствора.The state of the solution.

Соединение 2 было стабильным при нагревании в растворе (50°С в течение 24 ч). Никаких значительных изменений не отмечали в связанных веществах или чистоте.Compound 2 was stable when heated in solution (50° C. for 24 h). No significant changes were noted in bound substances or purity.

Пример 22. Рентгеновская порошковая дифрактометрия (РПД) Bruker AXS C2 GADDS.Example 22 Bruker AXS C2 GADDS X-Ray Powder Diffractometry (XRD)

Рентгеновские порошковые дифрактограммы получали на дифрактометре Bruker AXS C2 GADDS при помощи излучения Cu Ka (40 кВ, 40 мА), автоматической стадии XYZ, лазерного видеомикроскопа для автоматического позиционирования образца и 2-мерного площадного индикатора Hi Star. Рентгеновская оптика состоит из одного многослойного зеркала Гебеля, соединенного с точечным коллиматором 0,3 мм. Проводили еженедельную проверку работы при помощи сертифицированного стандарта Corundum NIST 1976 (плоская пластина).X-ray powder diffraction patterns were obtained on a Bruker AXS C2 GADDS diffractometer using Cu Ka radiation (40 kV, 40 mA), an automatic XYZ stage, a laser video microscope for automatic sample positioning, and a 2-dimensional Hi Star area indicator. X-ray optics consists of a single multilayer Goebel mirror connected to a 0.3 mm point collimator. Performance was checked weekly using NIST 1976 certified Corundum (flat plate).

Расходимость пучка, т.е. эффективный размер рентгеновского пучка на образце, составлял приблизительно 4 мм. Режим непрерывного сканирования 9-9 использовали с расстоянием образец-детектор 20 см, что давало эффективный диапазон 29 3,2-29,7°. Обычно на образец будут воздействовать рентгеновским пучком в течение 120 с. Программное обеспечение, используемое для сбора данных, представляло собой GADDS для ХР/2000 4.1.43, и данные анализировали и представляли при помощи Diffrac Plus EVA v15.0.0.0.Beam divergence, i.e. the effective size of the x-ray beam on the sample was approximately 4 mm. Continuous scan mode 9-9 was used with a sample-detector distance of 20 cm, giving an effective range of 29 3.2-29.7°. Typically, the sample will be exposed to the X-ray beam for 120 seconds. The software used for data collection was GADDS for XP/2000 4.1.43 and the data was analyzed and presented using Diffrac Plus EVA v15.0.0.0.

Образцы, работающие в условиях окружающей среды, готовили в виде образцов тонких пластин, используя порошок в том виде, в котором получали, без измельчения. Приблизительно 1-2 мг образца слегка прессовали на предметном стекле с получением плоской поверхности.Samples operating at ambient conditions were prepared as thin wafer samples using the powder as received without grinding. Approximately 1-2 mg of the sample was lightly pressed onto a glass slide to form a flat surface.

Bruker AXS D8 Advance.Bruker AXS D8 Advanced.

Рентгеновские порошковые дифрактограммы получали на дифрактометре Bruker D8 при помощи излучения Cu Ka (40 кВ, 40 мА), гониометра 9-29 и расхождения V4 и приемных щелей, монохроматора Ge и детектора Lynxeye. Прибор проверяли на работу при помощи сертифицированного стандарта Corundum (NIST 1976). Программное обеспечение, используемое для сбора данных, представляло собой Diffrac Plus XRD Commander v2.6.1, и данные анализировали и представляли при помощи Diffrac Plus EVA V15.0.0.0.X-ray powder diffraction patterns were obtained on a Bruker D8 diffractometer using Cu Ka radiation (40 kV, 40 mA), a 9-29 goniometer and V4 divergence and receiving slits, a Ge monochromator, and a Lynxeye detector. The instrument was tested for operation using a certified Corundum standard (NIST 1976). The software used for data collection was Diffrac Plus XRD Commander v2.6.1 and data was analyzed and presented using Diffrac Plus EVA V15.0.0.0.

Образцы использовали в условиях окружающей среды в виде образцов тонких пластин, используя порошок в том виде, как получали. Образец осторожно упаковывали в полость, вырезанную в отполированной, с нулевым фоном (510) кремниевой пластине. Образец вращали в его собственной плоскости при анализе. Подробные полученные данные представляют собой следующее.The samples were used at ambient conditions as thin plate samples using the powder as received. The sample was carefully packed into a cavity cut into a polished zero background (510) silicon wafer. The sample was rotated in its own plane during analysis. The detailed data obtained are as follows.

Угловой диапазон: 2-42° 2θ.Angular range: 2-42° 2θ.

Размер шага: 0,05° 2θ.Step size: 0.05° 2θ.

Время сбора: 0,5 с/шаг.Collection time: 0.5 s/step.

Форма 1 соединения 1.Form 1 of Compound 1.

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 1 показана на фиг. 9. ХарактеристическиеThe X-ray powder diffraction pattern for Form 1 is shown in FIG. 9. Characteristic

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 2 показана на фиг. 11. Характеристические пики содержат пики, указанные в следующей таблице.The X-ray powder diffraction pattern for Form 2 is shown in FIG. 11. The characteristic peaks contain the peaks listed in the following table.

- 55 041082- 55 041082

Угол 2-тета ° Angle 2-theta ° Интенсивность % Intensity % 6,6 6.6 34,9 34.9 13,2 13.2 37,1 37.1 19,7 19.7 100 100 22,3 22.3 45,5 45.5 22,5 22.5 53,4 53.4 23,7 23.7 40,2 40.2 24,5 24.5 45 45 26,4 26.4 49,3 49.3

На фиг. 11 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 2 после хранения при 40°С и 75% ОВ в течение 7 дней.In FIG. 11 shows the X-ray powder diffraction pattern for Form 2 after storage at 40°C and 75% RH for 7 days.

Форма 1 соединения 2.Form 1 of compound 2.

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 1 показана на фиг. 1. Характеристические пики содержат пики, указанные в следующей таблице.The X-ray powder diffraction pattern for Form 1 is shown in FIG. 1. The characteristic peaks contain the peaks listed in the following table.

Угол (2-тета °) Angle (2-theta°) Интенсивность (%) Intensity (%) 13,6 13.6 37,1 37.1 14,0 14.0 22,6 22.6 15,4 15.4 26,6 26.6 16,9 16.9 90,3 90.3 17,3 17.3 24,3 24.3 18,3 18.3 30,7 30.7 19,4 19.4 75,7 75.7 20,1 20.1 52,2 52.2 20,3 20.3 60,1 60.1 20,6 20.6 40,4 40.4 21,3 21.3 29 29 22,6 22.6 27 27 23,1 23.1 100 100 23,6 23.6 36,6 36.6 27,9 27.9 30,2 30.2

Форма 2 соединения 2.Form 2 compound 2.

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 2 показана на фиг. 3. Характеристические пики содержат пики, указанные в следующей таблице.________________The X-ray powder diffraction pattern for Form 2 is shown in FIG. 3. The characteristic peaks contain the peaks listed in the following table.________________

Угол (2-тета °) Angle (2-theta°) Интенсивность (%) Intensity (%) 2,6 2.6 38,5 38.5 3,2 3.2 100 100 6,3 6.3 12,9 12.9 9,4 9.4 13,2 13.2 15,7 15.7 96,3 96.3 22,1 22.1 14,6 14.6

Форма 3 соединения 2.Form 3 compound 2.

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 3 показана на фиг. 5. Характеристические пики содержат пики, указанные в следующей таблице.The X-ray powder diffraction pattern for Form 3 is shown in FIG. 5. The characteristic peaks contain the peaks listed in the following table.

Угол (2-тета °) Angle (2-theta°) Интенсивность (%) Intensity (%) 2,9 2.9 63,1 63.1 3,2 3.2 67,5 67.5 з,з h, h 59,9 59.9 3,8 3.8 20,5 20.5 9,5 9.5 И,9 I,9 13,5 13.5 26,2 26.2 15,8 15.8 100 100 16,9 16.9 91,1 91.1 19,0 19.0 10,4 10.4 19,5 19.5 13,9 13.9 20,2 20.2 59,8 59.8 22,2 22.2 21,9 21.9

Форма 4 соединения 2.Form 4 compound 2.

Рентгеновская порошковая дифрактограмма для формы 4 показана на фиг. 7. Характеристические пики содержат пики, указанные в следующей таблице.The X-ray powder diffraction pattern for Form 4 is shown in FIG. 7. The characteristic peaks contain the peaks listed in the following table.

- 56 041082- 56 041082

Угол 2-тета ° Angle 2-theta ° Интенсивность % Intensity % 11,3 11.3 27,9 27.9 13,3 13.3 30,4 30.4 13,9 13.9 45,6 45.6 16,6 16.6 98,1 98.1 18,8 18.8 100 100 19,1 19.1 44,4 44.4 19,7 19.7 56,5 56.5 19,9 19.9 70,7 70.7 20 20 43,7 43.7 21,2 21.2 83,7 83.7 22,3 22.3 60 60 22,7 22.7 59,4 59.4 23,4 23.4 74,5 74.5 23,8 23.8 81,9 81.9

Пример 23. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) и термогравиметрический анализ (ТГА).Example 23 Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Thermogravimetric Analysis (TGA)

Данные ДСК получали на ТА Instalments Q2000, оборудованном 50-позиционным автодозатором. Калибровку для теплоемкости проводили при помощи сапфира, а калибровку для энергии и температуры проводили при помощи сертифицированного индия. Обычно 0,5-3 мг каждого образца в алюминиевой чашке с точечными отверстиями нагревали при 10°С/мин от 25°С до 300°С. Поддерживали продувку сухим азотом при 50 мл/мин через образец.DSC data were acquired on a TA Installations Q2000 equipped with a 50 position autosampler. Calibration for heat capacity was performed with sapphire, and calibration for energy and temperature was performed with certified indium. Typically, 0.5-3 mg of each sample in an aluminum cup with pinholes was heated at 10°C/min from 25°C to 300°C. Dry nitrogen purge at 50 ml/min was maintained through the sample.

Программное обеспечение для контроля прибора представляло Advantage for Q Series v2.8.0.394 и Thermal Advantage v5.5.3, и данные анализировали при помощи Universal Analysis v4.5A.Instrument control software was Advantage for Q Series v2.8.0.394 and Thermal Advantage v5.5.3 and data was analyzed using Universal Analysis v4.5A.

Данные ТГА получали на ТА Instruments Q500 TGA, оборудованном 16-позиционным автодозатором. Прибор калибровали по температуре при помощи сертифицированного алюмеля и никеля. Обычно 5-10 мг каждого образца загружали в предварительно взвешенную алюминиевую чашку для ДСК и нагревали при 10°С/мин от температуры окружающей среды до 350°С. Поддерживали продувку азотом при 60 мл/мин через образец.TGA data were obtained on a TA Instruments Q500 TGA equipped with a 16 position autosampler. The instrument was temperature calibrated using certified alumel and nickel. Typically, 5-10 mg of each sample was loaded into a pre-weighed aluminum DSC pan and heated at 10°C/min from ambient temperature to 350°C. Nitrogen purge at 60 ml/min was maintained through the sample.

Программное обеспечение для контроля прибора представляло Advantage for Q Series v2.5.0.256 и Thermal Advantage v5.5.3, и данные анализировали при помощи Universal Analysis v4.5A.The instrument control software was Advantage for Q Series v2.5.0.256 and Thermal Advantage v5.5.3 and data was analyzed using Universal Analysis v4.5A.

Аморфное соединение 1.Amorphous compound 1.

Наблюдали эндотерму с температурой приблизительно 66,8°С. Наблюдали широкую эндотерму, начиная с приблизительно 200°С. ТГА показал потерю массы прибл. 2% от 25°С до 130°С из-за наблюдаемого разложения, начиная с приблизительно 280°С. Это событие соответствует эндотерме при 70°С, наблюдаемой в ДСК. Никакие значительные количества растворителя (менее 0,02 экв. диэтилового эфира) не были видны при помощи 1Н-ЯМР, таким образом показывая, что соединение 1, вероятнее всего, содержит прибл. 0,5 молекулы воды на основе потери массы по ТГА.An endotherm was observed with a temperature of approximately 66.8°C. A broad endotherm was observed starting at approximately 200°C. TGA showed a weight loss of approx. 2% from 25°C to 130°C due to the observed decomposition, starting from approximately 280°C. This event corresponds to the endotherm at 70°C observed in DSC. No significant amounts of solvent (less than 0.02 equiv. diethyl ether) were visible using 1 H-NMR, thus showing that compound 1 most likely contains approx. 0.5 water molecules based on TGA mass loss.

Форма 1 соединения 1.Form 1 of Compound 1.

Наблюдали эндотерму с температурой приблизительно 153,1°С, причем никаких значительных событий не наблюдали перед относительно высокой температурой плавления. Из этого следует, что форма 1, вероятнее всего, представляет безводную форму. Типичная термограмма для формы 1 показана на фиг. 10.An endotherm was observed with a temperature of approximately 153.1°C, with no significant events observed before the relatively high melting point. It follows that Form 1 is most likely the anhydrous form. A typical thermogram for form 1 is shown in Fig. 10.

Форма 2 соединения 1.Form 2 compound 1.

Наблюдали широкое событие при 43,1°С перед эндотермой при 118,9°С, что представляет плавление твердого вещества. Это показывает, что форма 2 соединения 1, вероятнее всего, представляет собой гидратную форму. Типичная термограмма для формы 2 показана на фиг. 12.A broad event was observed at 43.1° C. before an endotherm at 118.9° C., which represents the melting of the solid. This indicates that form 2 of compound 1 is most likely the hydrate form. A typical thermogram for Form 2 is shown in Fig. 12.

Форма 1 соединения 2.Form 1 of compound 2.

Наблюдали эндотерму при приблизительно 230,5°С с небольшим плечом. Типичная термограмма для формы 1 показана на фиг. 2. Анализ ТГА показал потерю 0,7% мас./мас. от 78°С до приблизительно 243°С из-за разложения, наблюдаемого при температуре свыше 250°С.An endotherm was observed at approximately 230.5° C. with a small shoulder. A typical thermogram for form 1 is shown in Fig. 2. TGA analysis showed a loss of 0.7% w/w. from 78°C to approximately 243°C due to decomposition observed at temperatures above 250°C.

Форма 1 представляет собой безводную мезилатную соль.Form 1 is an anhydrous mesylate salt.

Форма 2 соединения 2Form 2 connection 2

Три эндотермы были при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С. Типичная термограмма для формы 4 показана на фиг. 4.The three endotherms were at approximately 121.7°C, 231.1°C and 236.1°C. A typical thermogram for Form 4 is shown in FIG. 4.

Форма 2, вероятнее всего, представляет собой безводную мезилатную соль.Form 2 is most likely the anhydrous mesylate salt.

При термическом анализе она показывает три эндотермических пика: первый пик соответствует форме 1 с последующим плавлением, которое дает два пика. Вторая эндотерма рассматривается как расплав формы 2. Правило для теплоты плавления указывает на энантиотропную систему между формой 1 и формой 2.When analyzed thermally, it shows three endothermic peaks: the first peak corresponds to form 1, followed by melting, which gives two peaks. The second endotherm is treated as a Form 2 melt. The rule for heat of fusion indicates an enantiotropic system between Form 1 and Form 2.

Форма 2 может превращаться в форму 1, когда ее нагревают свыше 150°С.Form 2 can be converted to form 1 when it is heated above 150°C.

- 57 041082 1Н-ЯМР показал прибл. 0,1 экв. этанола, что приблизительно соответствует потере массы, наблюдаемой при ТГА. Первое событие может быть десольватацией этанола.- 57 041082 1 H-NMR showed approx. 0.1 eq. ethanol, which approximately corresponds to the weight loss observed with TGA. The first event may be ethanol desolvation.

Форма 3 соединения 2.Form 3 compound 2.

Две эндотермы наблюдали при приблизительно 132,2°С и 238,8°С. Типичная термограмма для формы 3 показана на фиг. 6.Two endotherms were observed at approximately 132.2°C and 238.8°C. A typical thermogram for Form 3 is shown in FIG. 6.

Форма 3, как предполагается, представляет собой сольват DMSO. Изменение на РПД в форму 1 наблюдали при нагревании формы 3 до 130°С и при условиях хранения, что может показывать, что форма 3 является метастабильным сольватом, который превращается в форму 1.Form 3 is believed to be the DMSO solvate. The change in RPD to form 1 was observed when form 3 was heated to 130°C and under storage conditions, which may indicate that form 3 is a metastable solvate that converts to form 1.

Форма 4 соединения 2.Form 4 compound 2.

Эндотерму наблюдали при приблизительно 232,8°С с небольшим плечом. Типичная термограмма для формы 4 показана на фиг. 8.The endotherm was observed at approximately 232.8°C with a short shoulder. A typical thermogram for Form 4 is shown in FIG. 8.

Форма 4 представляет собой безводную мезилатную соль.Form 4 is the anhydrous mesylate salt.

Пример 24. Гравиметрическая сорбция паров (ГСП).Example 24 Gravimetric Vapor Sorption (GSP)

Изотермы гравиметрической сорбции паров (ГСП) получали при помощи анализатора сорбции влаги DVS Intrinsic от SMS, регулируемого программным обеспечением DVS Intrinsic Control V1.0.1.2 (или V1.0.1.3), в диапазоне от 0 до 90% относительной влажности (ОВ).Gravimetric vapor sorption (GSP) isotherms were obtained using a DVS Intrinsic moisture sorption analyzer from SMS, controlled by DVS Intrinsic Control V1.0.1.2 (or V1.0.1.3) software, in the range from 0 to 90% relative humidity (RH) .

Форма 1 соединения 2.Form 1 of compound 2.

Тестирование формы 1 соединения 2 показало обратимое поглощение воды (~2,1% мас./мас.) от 0 до 90% ОВ. РПД была неизменной после анализа ГСП.Compound 2 Form 1 testing showed reversible water uptake (~2.1% w/w) from 0 to 90% RH. RAP was unchanged after GSP analysis.

Форма 2 соединения 2.Form 2 compound 2.

Форма 2 подвергалась фазовому превращению в форму 1 (хотя и не полностью идентичную) после анализа ГСП и через 7 дней при 40°С/75% ОВ. Изменение также происходило через 7 дней при 25°С/97% ОВ.Form 2 was phase-transformed to Form 1 (though not completely identical) after GSP analysis and after 7 days at 40°C/75% RH. The change also occurred after 7 days at 25°C/97% RH.

Пример А-1. Состав капсулы соединения 1.Example A-1. Compound 1 capsule composition.

Соединение 1 непосредственно добавляли в капсулу размера 9 (Torpac, Inc., Нью-Джерси).Compound 1 was directly added to a size 9 capsule (Torpac, Inc., NJ).

Пример А-2. Состав таблетки соединения 2.Example A-2. Compound 2 tablet composition.

Два различных состава таблеток изготавливали с концентрациями 50 мг и 250 мг (на основе количества соединения I). Таблетки изготавливали при помощи стандартных техник таблетирования.Two different tablet formulations were made at concentrations of 50 mg and 250 mg (based on the amount of Compound I). Tablets were made using standard tabletting techniques.

Таблица 19. Состав АTable 19 Composition A

Доза 250 мг (соединение I) Dose 250 mg (compound I) Масс. % Mass. % Масса на таблетку (мг) Weight per tablet (mg) Масса на партию 50 г (г) Weight per batch 50 g (g) Соединение 2 Compound 2 35,27% 35.27% 317,42 317.42 17,634 17.634 Prosolv HD90 Prosolv HD90 55,73% 55.73% 501,58 501.58 27,866 27.866 Ac-Di-Sol Ac-Di-Sol 5,00% 5.00% 45,00 45.00 2,500 2,500 НРС Klucel EXF HPC Klucel EXF 3,00% 3.00% 27,00 27.00 1,500 1,500 Aerosil 200 Aerosil 200 0,50% 0.50% 4,50 4.50 0,250 0.250 Стеарат магния magnesium stearate 0,50% 0.50% 4,50 4.50 0,250 0.250 Всего Total 100,00% 100.00% 900,00 900.00 50,000 50,000

Таблица 20. Состав ВTable 20 Composition B

Доза 250 мг (соединение I) Dose 250 mg (Compound I) Масс. % Mass. % Масса на таблетку (мг) Weight per tablet (mg) Масса на партию 50 г (г) Weight per batch 50 g (g) Соединение 2 Compound 2 35,27% 35.27% 317,42 317.42 17,634 17.634 A vice 1 РН 102 Vice 1 RN 102 14,06% 14.06% 126,52 126.52 7,029 7.029 Parteck М200 (маннит) Parteck M200 (mannitol) 42,17% 42.17% 379,56 379.56 21,087 21.087 Explotab Explotab 5,00% 5.00% 45,00 45.00 2,500 2,500 PVP VA 64 PVP VA 64 3,00% 3.00% 27,00 27.00 1,500 1,500 PRUV PRUV 0,50% 0.50% 4,50 4.50 0,250 0.250 Всего Total 100,00% 100.00% 900,00 900.00 50,000 50,000

Два различных состава таблеток изготавливали с концентрациями 50 мг и 250 мг (на основе количества соединения I). Таблетки изготавливали согласно стандартным техникам таблетирования и хранили при 20-25°С. Таблетки составляли в виде прямой смеси и прессовали в 900 мг таблетки капсульной формы.Two different tablet formulations were made at concentrations of 50 mg and 250 mg (based on the amount of Compound I). Tablets were made according to standard tabletting techniques and stored at 20-25°C. The tablets were formulated as a straight mix and compressed into 900 mg capsule form tablets.

- 58 041082- 58 041082

Таблица 21. Композиция таблеток соединения 2, 50 мг (соединение I)Table 21 Compound 2 50 mg Tablet Composition (Compound I)

Компонент Component Количество на таблетку - (масс. %) Amount per tablet - (wt.%) Соединение 2 Compound 2 62,46 мг (6,94%) 62.46 mg (6.94%) Силикатированная микрокристаллическая целлюлоза Silicified microcrystalline cellulose 756,5 мг (84,1%) 756.5 mg (84.1%) Кроскармеллоза натрия Croscarmellose sodium 45,00 мг (5,0%) 45.00 mg (5.0%) Г идроксипропилцеллюлоза Hydroxypropylcellulose 27,00 мг (3,0%) 27.00 mg (3.0%) Коллоидный диоксид кремния colloidal silicon dioxide 4,50 мг (0,5%) 4.50 mg (0.5%) Стеарат магния magnesium stearate 4,50 мг (0,5%) 4.50 mg (0.5%) Всего Total 900 мг 900 mg

Таблица 22. Композиция таблеток соединения 2, 250 мг (соединение I)Table 22 Tablet Composition of Compound 2, 250 mg (Compound I)

Компонент Component Количество на таблетку - (масс. %) Amount per tablet - (wt.%) Соединение 2 Compound 2 312,3 мг (34,7%) 312.3 mg (34.7%) Prosolv HD90 Prosolv HD90 506,7 мг (56,3%) 506.7 mg (56.3%) Ac-Di-Sol® Ac-Di-Sol® 45,00 мг (5,0%) 45.00 mg (5.0%) НРС Klucel EXF HPC Klucel EXF 27,00 мг (3,0%) 27.00 mg (3.0%) Aerosil 200 Aerosil 200 4,50 мг (0,5%) 4.50 mg (0.5%) Стеарат магния magnesium stearate 4,50 мг (0,5%) 4.50 mg (0.5%) Всего Total 900 мг 900 mg

Вкратце, партии таблеток соединения 2 изготавливали при следующих условиях: добавление вспомогательных веществ (за исключением смазывающего средства) и соединения 2 в V-образный смеситель. Порядок добавления: половина наполнителя, супер-дезинтегрант, сухая смесь, способствующее скольжению вещество, соединение 2 и, наконец, остальной наполнитель. Перемешивание в течение 10 мин. Затем совместный размол через 813 мкм круглое плоское сито при 50% мощности или 2000-3000 оборотах в минуту (об/мин). Возвращение совместно размолотой смеси в V-образный смеситель и смешивание в течение дополнительных 10 мин. Просеивание стеарата магния. Добавление просеянного стеарата магния в смесь и перемешивание в V-образном смесителе в течение 2 мин. Прессование таблеток при помощи оборудования для получения таблетки капсульной формы с плоской поверхностью размером 0,400 дюймовх0,750 дюймов и массой таблетки 900 мг. Упаковка таблеток в бутылочки из ПЭНД (полиэтилена высокой плотности) и герметизация при помощи CRC.Briefly, compound 2 tablet batches were made under the following conditions: addition of excipients (excluding lubricant) and compound 2 in a V-blender. Order of addition: half filler, super disintegrant, dry mix, glidant, compound 2, and finally the rest of the filler. Stirring for 10 min. Then co-grinding through a 813 µm round flat sieve at 50% power or 2000-3000 revolutions per minute (rpm). Return the co-milled mixture to the V-blender and mix for an additional 10 minutes. Screening of magnesium stearate. Add the sieved magnesium stearate to the mixture and mix in a V-blender for 2 minutes. Compressing tablets using equipment to produce a 0.400 inch x 0.750 inch flat surface capsule shaped tablet weighing 900 mg. Packaging of tablets in HDPE (high density polyethylene) bottles and sealing with CRC.

Однородную смесь получали после смешивания и размола смеси за исключением стеарата магния. После получения смеси изготавливали таблетки с собственной массой (900 мг) и твердостью (твердость по Кнупу 18; в диапазоне 15-21). Измеряли хрупкость, и она составляла <1,0%. Таблетки произвольно взвешивали, проверяя на предельный допуск ± 5%. Каждую таблетку визуально осматривали на дефекты, такие как наслоение, растрескивание или деформацию, и отбраковывали при любом замеченном дефекте.A homogeneous mixture was obtained after mixing and grinding the mixture with the exception of magnesium stearate. After the mixture was obtained, tablets were made with their own weight (900 mg) and hardness (Knoop hardness 18; in the range of 15-21). Friability was measured and was <1.0%. The tablets were randomly weighed, checking for a tolerance limit of ± 5%. Each tablet was visually inspected for defects such as layering, cracking or distortion and discarded if any defect was noted.

Таблетки включали белые - не совсем белые таблетки капсульной формы.The tablets included white to off-white capsule-shaped tablets.

Пример В-1. Получение концентрированной кондиционированной среды (ККС).Example B-1. Obtaining a concentrated conditioned medium (CCM).

Стабильные клеточные линии LOXL2/CHO человека и LOX/HEK человека культивировали при условиях нормального роста в 15 см культуральных планшетах для тканей, пока клетки не станут на ~80% конфлюэнтными. Клетки затем промывали при помощи PBS перед добавлением 25-30 мл бессывороточной среды (смесь без фенолового красного DMEM/F12 с содержащим глютамакс пенициллином/стрептомицином, 10-100 мкМ CuCl2±0,1% BSA). Клетки инкубировали при 37°С, 5% CO2 в бессывороточной среде в течение 40-48 ч перед удалением кондиционированной среды и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 5 мин при 4°С для гранулирования клеток/остатков. Среду концентрировали в 1020 раз при помощи колонок 10-30 MWCO centriprep согласно инструкциям изготовителя (EMD Millipore, Биллерика, Массачусетс) перед отбором аликвот и хранением при -80°С.The stable human LOXL2/CHO and human LOX/HEK cell lines were cultured under normal growth conditions in 15 cm tissue culture plates until the cells were ~80% confluent. Cells were then washed with PBS before adding 25-30 ml of serum-free medium (phenol red free DMEM/F12 mix with glutamax-containing penicillin/streptomycin, 10-100 μM CuCl 2 ±0.1% BSA). Cells were incubated at 37° C., 5% CO 2 in serum-free medium for 40-48 h before removal of the conditioned medium and centrifuged at 2000 rpm for 5 min at 4° C. to pellet the cells/residue. The medium was concentrated 1020 times using 10-30 MWCO centriprep columns according to the manufacturer's instructions (EMD Millipore, Billerica, MA) before aliquoting and storing at -80°C.

Пример В-2. Анализ ККС LOXL2 человека.Example B-2. Human LOXL2 CCM analysis.

Активность аминоксидазы LOXL2 оценивали путем измерения флюоресценции Amplex Red, используя концентрированную в 10-20 раз кондиционированную среду (не содержащую BSA) из клеток СНО, стабильно экспрессирующих LOXL2 человека. Для анализа активности аминоксидазы 10 мкл концентрированной кондиционированной среды инкубировали с 2 мкл тестового соединения в DMSO и 73 мкл буфера для анализа (50 мМ боратного буфера, pH8) в течение 2 ч при 37°С. Через 2 ч инкубации добавляли 5 мкл 10 мМ 1,5-диаминопентана (DAP), разбавленного в буфере для анализа, и 10 мкл смеси Amplex Red (8,5 мкл буфера для анализа + 0,5 мкл 10 мМ Amplex Red + 1 мкл 500 ед/мл пероксидазы хрена) и планшет перемешивали и сразу же помещали на FlexStation для измерения флуоресценции. Флуоресценцию считывали в кинетитческом режиме каждые 2 мин в течение 0,5-1 ч при возбужде-LOXL2 amine oxidase activity was assessed by measuring Amplex Red fluorescence using 10-20 times concentrated conditioned medium (free of BSA) from CHO cells stably expressing human LOXL2. To assay amine oxidase activity, 10 µl of concentrated conditioned medium was incubated with 2 µl of test compound in DMSO and 73 µl of assay buffer (50 mM borate buffer, pH8) for 2 h at 37°C. After 2 h incubation, 5 µl of 10 mM 1,5-diaminopentane (DAP) diluted in assay buffer and 10 µl of Amplex Red mixture (8.5 µl of assay buffer + 0.5 µl of 10 mM Amplex Red + 1 µl 500 U/ml horseradish peroxidase) and the plate was mixed and immediately placed on the FlexStation to measure fluorescence. Fluorescence was read in the kinetic mode every 2 min for 0.5–1 h under excitation.

Claims (10)

нии=544 и излучении=590. Активность аминоксидазы рассчитывали из наклона линейной части кривой.nii=544 and radiation=590. Amine oxidase activity was calculated from the slope of the linear part of the curve. Лунки, содержащие среду (DMSO), представляли максимальную активность и устанавливали как 0% ингибирования, а лунки, содержащие 100 мкМ PAPN (3-аминопропионитрила), представляли отсутствие активности и устанавливали как 100% ингибирование.Wells containing medium (DMSO) represented maximum activity and were set as 0% inhibition, and wells containing 100 μM PAPN (3-aminopropionitrile) represented no activity and were set as 100% inhibition. Таблица 23Table 23 Соединение 1С50 Connection 1C 50 Рац.-1 АRats.-1 A Пром.-1 АProm.-1 A 1 А1 A 2 А2 A А составляет <300 нМ.A is <300 nM. Примеры и варианты осуществления, описанные в настоящем документе, представлены только с целью иллюстрации, и различные модификации или изменения, предлагаемые специалистам в данной области, должны быть включены в сущность и сферу данного изобретения, а также в объем приложенной формулы изобретения.The examples and embodiments described herein are presented for the purpose of illustration only, and various modifications or changes suggested by those skilled in the art should be included within the spirit and scope of this invention, as well as within the scope of the appended claims. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM 1. Кристаллическая форма метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, имеющей следующую структуру соединения 2:1. Crystalline form of methanesulfonate salt (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1- yl) methanone having the following structure of compound 2: FF Соединение 2 причем кристаллическая форма соединения 2 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:Compound 2 wherein the crystalline form of compound 2 has at least one of the following properties: (a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,6° 2-тета, 16,9° 2-тета, 19,4° 2-тета, 20,1° 2-тета, 20,3° 2-тета, 20,6° 2-тета, 23,1° 2-тета и 23,6° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.6° 2-theta, 16.9° 2-theta, 19.4° 2-theta, 20.1° 2-theta, 20.3° 2 -theta, 20.6° 2-theta, 23.1° 2-theta and 23.6° 2-theta; (b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 1;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 1; (c) термограмма ДСК с эндотермами при приблизительно 231°С и приблизительно 236°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 2;(c) DSC thermogram with endotherms at approximately 231°C and approximately 236°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 2; (e) обратимое поглощение воды приблизительно 2% мас./мас., от 0 до 90% относительной влажности; или (f) неизменная РПД после анализа ГСП.(e) reversible water uptake of approximately 2% w/w, 0 to 90% relative humidity; or (f) unchanged RPD after GSP analysis. 2. Кристаллическая форма метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, имеющей следующую структуру соединения 2:2. The crystalline form of the methanesulfonate salt (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1- yl) methanone having the following structure of compound 2: FF Соединение 2 причем кристаллическая форма соединения 2 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:Compound 2 wherein the crystalline form of compound 2 has at least one of the following properties: (a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,6° 2-тета, 3,2° 2-тета, 6,3° 2-тета, 9,4° 2-тета, 15,7° 2-тета и 22,1° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 2.6° 2-theta, 3.2° 2-theta, 6.3° 2-theta, 9.4° 2-theta, 15.7° 2 -theta and 22.1° 2-theta; (b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 3;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 3; (c) термограмма ДСК с тремя эндотермами при приблизительно 121,7°С, 231,1°С и 236,1°С;(c) DSC thermogram with three endotherms at approximately 121.7°C, 231.1°C and 236.1°C; (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 4; или (e) является безводной.(d) DSC thermogram essentially the same as shown in FIG. 4; or (e) is anhydrous. 3. Кристаллическая форма метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, имеющей следующую структуру соединения 2:3. Crystalline form of the methanesulfonate salt (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1- yl) methanone having the following structure of compound 2: - 60 041082- 60 041082 FF Соединение 2 причем кристаллическая форма соединения 2 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:Compound 2 wherein the crystalline form of compound 2 has at least one of the following properties: (а) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 2,9° 2-тета, 3,2° 2-тета, 3,3° 2-тета, 15,8° 2-тета, 16,9° 2-тета и 20,2° 2-тета;(a) X-ray powder diffractogram (XRD) with characteristic peaks at 2.9° 2-theta, 3.2° 2-theta, 3.3° 2-theta, 15.8° 2-theta, 16.9° 2 -theta and 20.2° 2-theta; (b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 5;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 5; (c) термограмма ДСК с двумя эндотермами при приблизительно 132,2°С и 238,8°С;(c) DSC thermogram with two endotherms at approximately 132.2°C and 238.8°C; (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 6; или (e) сольватируется с диметилсульфоксидом (DMSO).(d) DSC thermogram essentially the same as shown in FIG. 6; or (e) solvated with dimethyl sulfoxide (DMSO). 4. Кристаллическая форма метансульфонатной соли (R,R)-транс-(3-((4-(аминометил)-6(трифторметил)пиридин-2-ил)окси)фенил)(3-фтор-4-гидроксипирролидин-1-ил)метанона, имеющей следующую структуру соединения 2:4. Crystalline form of methanesulfonate salt (R,R)-trans-(3-((4-(aminomethyl)-6(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)oxy)phenyl)(3-fluoro-4-hydroxypyrrolidin-1- yl) methanone having the following structure of compound 2: FF Соединение 2 причем кристаллическая форма соединения 2 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:Compound 2 wherein the crystalline form of compound 2 has at least one of the following properties: (a) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД) с характеристическими пиками при 13,9° 2-тета, 16,6° 2-тета, 18,8° 2-тета, 19,1° 2-тета, 19,7° 2-тета, 19,9° 2-тета, 20° 2-тета, 21,2° 2-тета, 22,3° 2-тета, 22,7° 2-тета, 23,4° 2-тета и 23,8° 2-тета;(a) X-ray powder diffraction (XRD) pattern with characteristic peaks at 13.9° 2-theta, 16.6° 2-theta, 18.8° 2-theta, 19.1° 2-theta, 19.7° 2 -theta, 19.9° 2-theta, 20° 2-theta, 21.2° 2-theta, 22.3° 2-theta, 22.7° 2-theta, 23.4° 2-theta and 23 .8° 2-theta; (b) рентгеновская порошковая дифрактограмма (РПД), по существу такая же, как показано на фиг. 7;(b) an X-ray powder diffraction (XRD) pattern essentially the same as shown in FIG. 7; (c) термограмма ДСК с эндотермой при приблизительно 233°С; или (d) термограмма ДСК, по существу такая же, как показано на фиг. 8.(c) DSC thermogram with endotherm at approximately 233°C; or (d) a DSC thermogram substantially the same as shown in FIG. 8. 5. Фармацевтическая композиция, содержащая кристаллическую форму соединения 2 по любому из пп.1-4 и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное средство.5. A pharmaceutical composition containing a crystalline form of compound 2 according to any one of claims 1 to 4 and at least one pharmaceutically acceptable adjuvant. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, причем фармацевтическая композиция составлена для введения млекопитающему путем внутривенного введения, подкожного введения, перорального введения, ингаляции, назального введения, накожного введения или введения в глаз.6. The pharmaceutical composition according to claim 5, wherein the pharmaceutical composition is formulated for administration to a mammal by intravenous administration, subcutaneous administration, oral administration, inhalation, nasal administration, dermal administration, or administration to the eye. 7. Фармацевтическая композиция по п.5, причем фармацевтическая композиция находится в виде твердой формы фармацевтической композиции.7. Pharmaceutical composition according to claim 5, wherein the pharmaceutical composition is in the form of a solid form of a pharmaceutical composition. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, причем фармацевтическая композиция находится в виде таблетки, пилюли или капсулы.8. Pharmaceutical composition according to claim 7, wherein the pharmaceutical composition is in the form of a tablet, pill or capsule. 9. Фармацевтическая композиция по любому из пп.5-7, причем фармацевтическая композиция содержит от приблизительно 1 мг до приблизительно 2000 мг кристаллической формы соединения 2.9. A pharmaceutical composition according to any one of claims 5 to 7, wherein the pharmaceutical composition contains from about 1 mg to about 2000 mg of the crystalline form of compound 2. 10. Фармацевтическая композиция по п.9, причем фармацевтическая композиция находится в виде таблетки и содержит приблизительно 50 мг или приблизительно 250 мг кристаллической формы соединения 2 на таблетку.10. The pharmaceutical composition of claim 9, wherein the pharmaceutical composition is in the form of a tablet and contains about 50 mg or about 250 mg of compound 2 crystalline form per tablet. --
EA201990621 2016-09-07 2017-09-06 CRYSTALLINE FORMS OF THE LYSILOXIDASE-LIKE PROTEIN 2 INHIBITOR AND METHODS OF OBTAINING EA041082B1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US62/384,596 2016-09-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA041082B1 true EA041082B1 (en) 2022-09-09

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11459309B2 (en) Crystalline forms of a lysyl oxidase-like 2 inhibitor and methods of making
US11992531B2 (en) C3-carbon linked glutarimide degronimers for target protein degradation
US20230279023A1 (en) N/O-Linked Degrons and Degronimers for Protein Degradation
ES2846951T3 (en) Compositions comprising a lysine-specific demethylase-1 inhibitor, having a pyrimidine ring, and their use in the treatment of cancer
JP7042548B2 (en) Crystal form of MAGL inhibitor
US9662312B2 (en) Method for treating glomerulosclerosis
TW200528109A (en) Method of treatment of atherosclerosis
ES2682043T3 (en) Ibrutinib Deuterated
TW201443066A (en) Trifluoromethyl-substituted fused pyrimidines and their use
CN109651208B (en) N-aryl sulfonamide compound, pharmaceutical composition and application thereof
US20220002306A1 (en) Crystal form of upadacitinib and preparation method and use thereof
CN116249695A (en) Crystalline PPAR-delta agonists
SG182398A1 (en) Dp2 antagonist and uses thereof
US20160002250A1 (en) Polymorphs and salts of a compound
EA041082B1 (en) CRYSTALLINE FORMS OF THE LYSILOXIDASE-LIKE PROTEIN 2 INHIBITOR AND METHODS OF OBTAINING
ZA200203857B (en) Solid preparation.
JP2001517653A (en) Specific immunophilin ligands as anti-asthmatic, anti-allergic, anti-rheumatic, immunosuppressive, anti-psoriatic, and neuroprotective drugs
US20080200680A1 (en) Polymorph Transformation of Zolpidem in Tablet Matrix
CN107001327B (en) Crystal and pharmaceutical composition and application thereof
WO2024040241A1 (en) Pharmaceutical formulations, processes for preparation, and methods of use
WO2001040182A2 (en) Solid pharmaceutical preparation
US20080146602A1 (en) Thienopyridine Derivatives, Production Method and Use Thereof