EA040849B1 - Кислородсодержащее арилфосфорное соединение в качестве ингибитора киназы egfr - Google Patents

Description

Данная заявка испрашивает приоритет по следующим заявкам:

CN201710592778.X, дата подачи заявки 19.07.2017;

CN201711277584.7, дата подачи заявки 06.12.2017;

CN201810130633.2, дата подачи заявки 08.02.2018; и

CN201810355614.X, дата подачи заявки 19.04.2018.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящая заявка относится к кислородсодержащему арилфосфорному соединению в качестве ингибитора киназы EGFR, и в ней конкретно раскрыты соединение, представленное формулой (I), и его фармацевтически приемлемая соль.

Предпосылки изобретения

Рак легкого является одной из наиболее распространенных злокачественных опухолей. Ежегодно во всем мире возникает приблизительно 1,6 млн новых случаев заболевания раком легкого, и ежегодно рак легкого приводит к 1,4 млн летальных исходов. Среди них немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) составляет приблизительно 80-85% всех видов рака легкого (10-й форум по раку легкого).

TKI (ингибитор тирозинкиназы) EGFR (рецептора эпидермального фактора роста) в качестве низкомолекулярного ингибитора конкурентно связывается с EGFR посредством эндогенных лигандов и подавляет активацию тирозинкиназы, что приводит к блокированию сигнального пути с участием EGFR и в конечном итоге к получению серии таких биологических эффектов, как подавление пролиферации и метастазирования опухолевых клеток и стимуляция апоптоза опухолевых клеток, и это представляет собой одну из основных мишеней лечения рака легкого.

Осимертиниб (AZD9291) представляет собой нацеливающееся на EGFR-TKI лекарственное средство третьего поколения. Поскольку он обладает более высокой чувствительностью в отношении лекарственной устойчивости, обусловленной мутацией Т790М, у пациентов также развивается лекарственная устойчивость (Clin Cancer Res; 21 (17), 2015). В 2015 г. был впервые описан анализ лекарственной устойчивости у 15 пациентов с AZD9291 в Nature Medicine, 21, 560-562, 2015, где третья полученная мутация, т. е. мутация C797S EGFR, была одним из основных механизмов, которые приводят к лекарственной устойчивости к осимертинибу, на долю которого приходится приблизительно 40%. В то же время об лекарственной устойчивости к AZD9291 также сообщалось на нескольких конференциях, и на одной из них, 2015 WCLC, Oxnard GR сообщил об анализе лекарственной устойчивости у 67 пациентов, у которых частота C797S составляла приблизительно 22%; на 2017 ASCO, Piotrowska также сообщалось о 23 случаях, и случаи C797S также составляли приблизительно 22%; и на 2017 ASCO, Zhou Caicun et al., сообщали об анализе механизмов лекарственной устойчивости у 99 пациентов, у которых встречаемость C797S составляла приблизительно 22%. Следовательно, большое значение для исследования имеет преодоление устойчивости в отношении AZD9291, связанной с мутацией C797S, и предоставление пациентам более безопасного и более эффективного ингибитора EGFR C797S/T790M четвертого поколения.

В 2016 в Nature, 534, 129-132, 2016 сообщалось о соединении EAI045, способном преодолевать лекарственную устойчивость к осимертинибу, связанную с C797S. EAI045 принадлежит к аллостерическому ингибитору, который проявляет лучший эффект подавления опухоли в фармакодинамической модели мыши in vivo с мутациями L858R/T790M/C797S в комбинации с таким моноклональным антителом к EGFR, таким как цетуксимаб; но данное соединение не было введено в стадию клинических исследований. В 2017, Nature Communications, 8:14768, 2017 сообщалось, что бригатиниб (АР26113) в комбинации с моноклональным антителом к EGFR (таким как цетуксимаб) может преодолевать лекарственную устойчивость к таргетному лекарственному средству третьего поколения, осимертинибу, которая обусловлена мутацией C797S. Было показано, что как комбинация бригатиниба с панитумумабом, так и цетуксимаб демонстрируют хорошую противоопухолевую эффективность согласно результатам, полученным в фармакодинамической модели мыши РС9 (EGFR-C797S/T790M/del19).

В WO 2012051587A1 раскрыт сравнительный пример 1, но не предоставлены какие-либо данные об его влиянии.

- 1 040849

Краткое описание изобретения

В настоящем изобретении предусмотрены соединение, представленное формулой (I), или его фар мацевтически приемлемая соль

где кольцо А выбрано из фенила, тиенила, пиридила, пиразинила, пиразолила, циклопентанонила, циклопентенила, тиазолила, изотиазолила и пирролила, где указанные фенил, тиенил, пиридил, пиразинил, пиразолил, циклопентанонил, циклопентенил, тиазолил, изотиазолил и пирролил необязательно замещены R6,

R₁ выбран из H, галогена, C_1-6алкила и C_1-6гетероαлкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где C_1-6алкил и C_1-6гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

R2 выбран из H, галогена, CN, ОН, NO2, NH2, C_3-12циклоалкила и 3-12-членного гетероциклоалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные NH2, C_3-12пиклоалкил и 3-12-членный гетероциклоалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

R₃ выбран из H, галогена, C_3-6циклоαлкилокси, -O(CH₂)_nNRaR_b, C_1-6алкила и C_3-6циклоалкила, где указанные C_1-6алкил и C_3-6циклоалкил необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

n выбран из 0, 1, 2, 3 или 4;

каждый из Ra и R_b независимо выбран из H, C_1-5алкила и C_1-5гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О-, -S-и -S(=O)₂-, и при этом указанные С_1-5алкил и C_1-5гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О-, -S- и -S(=O)₂-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

или в качестве альтернативы Ra и R_b связаны вместе с образованием 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из -C(=O)N(R)-, N, -О- и -S-;

R₄ представляет собой Н;

I, CN, СНз, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СНз)2СН, при этом указанные СН3, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СН3)2СН, ⁰ и I необязательно замещены 1, 2 или 3 R

R5 выбран из H, F, Cl, Br,

группами;

или в качестве альтернативы R₄ и R₅ связаны вместе с образованием 5-6-членного кольца, содержащего 1, 2 или 3 атома, независимо выбранных из N, S или О, где 5-6-членное кольцо необязательно замещено 1, 2 или 3 R-группами;

каждый из R6 независимо выбран из H, галогена, CN, ОН, NH2, C_1-6алкилα, =O, =S или C_1-6гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-;

каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из H или C_1-6алкилα;

- 2 040849

R выбран из галогена, CN, ОН, NH2, C_1-6алкила, C_3-6циклоалкила, C_1-6гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, 3-6-членного гетероциклоалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, фенила и 5-6-членного гетероарила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, C_1-6гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, 3-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, фенил и 5-6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R'-группами;

R' выбран из H, F, Cl, Br, I, CN, ОН, NH2, CH3, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СНэ^СН, СН3О, CF3, CHF2 и CH2F.

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R выбран из F, Cl, Br, I, ,Ν ^{1 1}

CN, ОН, NH2, CH₃, СН₃СН2, СН3СН2СН2, (СН₃)2СН, СН₃О, (CH₃)2N,

⁴CF_3? OH,

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R1 выбран из H, галогена, C_1-3алкила и C_1-3гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные C_1-3алкил и C_1-3гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R1 выбран из H, F, Cl, Br, I, СН₃, СН₃СН₂, СН₃СН₂СН₂, (СН₃)₂СН, СН₃О, СН₃СН₂О, СН₃СН₂СН₂О, (СН₃)₂СНО, где указанные СН₃, СН₃СН₂, СН₃СН₂СН₂, (СН₃)₂СН, СН₃О, СН₃СН₂О, СН₃СН₂СН₂О, (СН₃)₂СНО необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R2 выбран из H, галогена,

CN, ОН, NH2, NO2, -NHR, -N(R)2,

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R2 выбран из H, F, Cl, Br,

CN, OH, NH2, NO2, ж

*CF₃, oh, , -NHCH2CH3, -NHCH₃,

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки структурная единица выбрана из

Ν

-N(CH3)2 и ι

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R₆ выбран из H, F, Cl, Br, CN, ОН, NH2, СН₃, СН₃СН₂, СН₃СН₂СН₂, (СН₃)₂СН, СН₃О, =S и =O.

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки каждый из вышеуказанных Ra и R_b независимо выбран из H, СН₃, СН₃СН₂

-S(=O)₂CH₃ необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.

и -S(=O)2CH3, где указанные СН3, СН3СН2,

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R₃ выбран из H, F, Cl, Br,

CH3, СН3СН2, (СН₃)₂СН, ч

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанный R₅ выбран из Н, Cl, Br,

CN, CH3, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СН3)2СН,

- 3 040849 .R₅

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки структурная единица '' ^N '' выбрана из

заявки каждый из вышеуказанных R₇ и R₈ незаВ некоторых вариантах осуществления настоящей висимо выбран из H или CH3.

В некоторых вариантах осуществления настоящей мацевтически приемлемая соль выбраны из заявки вышеуказанное соединение или его фар-

где R1, R2, R3, R4, R₅, R6, R₇ и R₈ определены выше.

В некоторых вариантах осуществления настоящей заявки вышеуказанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль выбраны из

- 4 040849 где R1, R₃, R4, R5, R7, R₈, R и R' определены выше.

В настоящей заявке также предусмотрены следующие соединения или их фармацевтически прием-

- 5 040849

- 6 040849

- 7 040849

- 8 040849

В настоящем изобретении также предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество вышеуказанного соединения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

В настоящем изобретении также предусмотрено применение вышеуказанного соединения или его фармацевтически приемлемой соли или вышеуказанной фармацевтической композиции для получения лекарственного препарата для лечения рака.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения рак представляет собой рак легкого.

В настоящем изобретении получены еще другие варианты осуществления из любой комбинации

- 9 040849 вышеуказанных переменных.

Технический эффект

Соединения по настоящему изобретению демонстрируют превосходную антипролиферативную активность в отношении клетки EGFR Ba/F₃ с тремя мутациями (A19del/T790M/C797S) и активность фосфорилирования в модели клетки EGFR Ba/F₃ с тремя мутациями (A19del/T790M/C797S).

Соединения по настоящему изобретению проявляют неожиданную подавляющую активность по сравнению со сравнительным примером 1.

Определения и представления

Если не указано иное, следующие термины и выражения, используемые в данном документе, имеют следующие значения. Конкретный термин или выражение не следует считать неопределенным или неясным в случае отсутствия конкретного определения, а следует понимать в соответствии с его общепринятым значением. Предполагается, что при упоминании в данном документе торгового названия, оно означает соответствующий товар или его активный ингредиент. Термин фармацевтически приемлемый, применяемый в данном документе, относится к тем соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые, в пределах объема тщательной медицинской оценки, являются подходящими для применения в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соизмеримых с приемлемым соотношением польза/риск.

Термин фармацевтически приемлемая соль относится к соли соединения по настоящей заявке, которую получают из соединения, содержащего конкретный заместитель, обнаруженный в настоящей заявке, и относительно нетоксичной кислоты или основания. Если соединение по настоящей заявке содержит относительно кислотную функциональную группу, его соль присоединения основания можно получить посредством приведения в контакт нейтральной формы такого соединения с достаточным количеством основания в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Если соединение по настоящей заявке содержит относительно основную функциональную группу, его соль присоединения кислоты можно получить посредством приведения в контакт нейтральной формы такого соединения с достаточным количеством кислоты в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты включают соли неорганических кислот, соли органических кислот, соли аммония и соли органических кислот, таких как глюкуроновая кислота. Некоторые конкретные соединения по настоящей заявке содержат основные и кислотные функциональные группы, которые можно превратить как в соль присоединения основания, так и в соль присоединения кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли в соответствии с настоящей заявкой можно синтезировать из исходного соединения, содержащего кислотный фрагмент или основный фрагмент, с помощью традиционных химических способов. В целом, такую соль получают с помощью осуществления реакции соединения в форме свободной кислоты или основания со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде, или в органическом растворителе, или в их смеси. В общем, предпочтительной является безводная среда, такая как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил.

В дополнение к форме соли соединение, представленное в данном документе, также существует в форме пролекарства. Пролекарство соединения, описанного в данном документе, представляет собой соединение, которое легко подвергается химическому изменению при физиологических условиях и превращается в соединение по настоящей заявке. Кроме того, пролекарство можно превратить в соединения по настоящей заявке путем химического или биохимического способа в среде in vivo.

Некоторые соединения по настоящей заявке могут находиться в несольватированной или сольватированной форме, в том числе в форме гидрата. В целом, сольватированная форма является эквивалентной несольватированной форме, и обе из них охватываются объемом настоящей заявки.

Соединения в соответствии с настоящей заявкой могут существовать в конкретных геометрических или стереоизомерных формах. Все такие соединения, предусмотренные в настоящем изобретении, включают цис- и транс-изомеры, пары (-)- и (+)-энантиомеров, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереоизомеры, (D)-изомеры, Щ)-изомеры и их рацемические смеси, и другие их смеси, такие как обогащенные энантиомерами или диастереомерами смеси, все из которых находятся в пределах объема настоящей заявки. Другие асимметричные атомы углерода могут присутствовать в составе заместителей, таких как алкил. Все такие изомеры и их смеси включены в объем настоящей заявки.

Если не указано иное, термин энантиомер или оптический изомер относится к стереоизомерам, которые являются зеркальным отражением друг друга.

Если не указано иное, термин цис-транс-изомер или геометрический изомер обусловлен неспособностью двойной связи или одинарной связи атомов углерода в кольце свободно вращаться.

Если не указано иное, термин диастереомер относится к стереоизомерам, в которых молекулы имеют два или более хиральных центров и не являются зеркальным отражением друг друга.

Если не указано иное, (D) или (+) означает вращение вправо, (L) или (-) означает вращение

- 10 040849 влево, (DL) или (±) означает рацемизацию.

Если не указано иное, абсолютная конфигурация стереогенного центра представлена сплошной клиновидной связью () и пунктирной клиновидной связью ( )> а относительная конфигурация стереогенного центра представлена прямой сплошной связью () и прямой пунктирной связью )

Волнистая линия (^) представляет собой сплошную клиновидную связь (^) или пунктирную клиновидную связь ('' ) или представляет собой прямую сплошную связь (^) и прямую пунктирную связь (' У

В частности, могут быть представлены соединения в соответствии с настоящей заявкой. Если не указано иное, термины таутомер или таутомерная форма относятся к тому факту, что различные функциональные изомеры находятся в динамическом равновесии при комнатной температуре и могут быть быстро превращены друг в друга. Если таутомеры возможны (например, в растворе), можно достичь химического равновесия таутомеров. Например, протонные таутомеры (также известные как прототипные таутомеры) предусматривают взаимные превращения путем переноса протона, такие как изомеризация кето-енола и изомеризация имин-енамина. Валентный таутомер включает взаимное преобразование некоторых связывающих электронов. Конкретным примером таутомеризации кето-енола является взаимное превращение между двумя таутомерами пентан-2,4-диона и 4-гидроксипент-3-ен-2-она.

Если не указано иное, термин обогащенный одним изомером, обогащенный изомером, обогащенный одним энантиомером или обогащенный энантиомером относится к тому, что содержание одного из изомеров или энантиомеров составляет менее 100%, и содержание изомера или энантиомера составляет 60% или больше, или 70% или больше, или 80% или больше, или 90% или больше, или 95% или больше, или 96% или больше, или 97% или больше, или 98% или больше, или 99% или больше, или 99,5% или больше, или 99,6% или больше, или 99,7% или больше, или 99,8% или больше, или 99,9% или больше.

Если не указано иное, термин избыток изомера или избыток энантиомера относится к разнице между относительными процентными долями двух изомеров или энантиомеров. Например, если содержание одного из изомеров или энантиомеров составляет 90%, а другого 10%, то избыток изомера или энантиомера (значение ее) составляет 80%.

Оптически активные (R)- и (S)-изомеры, а также D- и L-изомеры могут быть получены с помощью хирального синтеза, или хиральных реагентов, или других традиционных методик. Если необходим энантиомер определенного соединения по настоящей заявке, он может быть получен посредством асимметричного синтеза, или посредством дериватизации с помощью хирального вспомогательного средства, где полученную в результате диастереомерную смесь разделяют и вспомогательную группу отщепляют с получением чистых необходимых энантиомеров. В качестве альтернативы, если молекула содержит основную функциональную группу (такую как аминогруппа) или кислотную функциональную группу (такую как карбоксильная), она образует диастереомерную соль с подходящими оптически активными кислотой или основанием, а затем проводят разделение диастереомеров посредством традиционного способа, хорошо известного из уровня техники, с последующим извлечением с получением чистого энантиомера. Кроме того, разделение энантиомеров и диастереомеров в целом выполняют путем применения хроматографии, в которой используется хиральная неподвижная фаза, и необязательно в комбинации со способом химической дериватизации (например, образование карбаматов из аминов). Соединения в соответствии с настоящей заявкой могут содержать не встречающиеся в природе пропорции атомных изотопов одного или более атомов, которые образуют соединение. Например, соединение может быть меченным с помощью радиоактивного изотопа, такого как тритий (³Н), йод-125 (¹²⁵I) или С-14 (¹⁴С). Любые изменения изотопного состава соединения в соответствии с настоящей заявкой, являются они радиоактивными или нет, включены в объем настоящей заявки.

Термин фармацевтически приемлемый носитель относится к любому составу или среденосителю, способным доставлять эффективное количество активного вещества по настоящей заявке без негативного воздействия на биологическую активность активного вещества и не имеющим токсичных побочных эффектов в отношении хозяина или пациента. Иллюстративные носители включают воду, масла, овощи и минералы, основания для крема, основания для лосьона, основания для мази и т. д. Такие основания включают суспензии, реагенты, придающие клейкость, средства, увеличивающие трансдермальное проникновение, и т.д. Их составы хорошо известны специалистам в косметической области или области, связанной с лекарственными средствами для местного применения.

Термин вспомогательное вещество в целом означает носитель, разбавитель и/или среду, необходимые для составления эффективной фармацевтической композиции.

Термин эффективное количество или терапевтически эффективное количество по отношению к лекарственным средствам или фармакологически активным средствам означает достаточное количество лекарственного средства или средства, которое не является токсичным, но может обеспечивать необходимый эффект. В случае лекарственной формы для перорального применения в соответствии с настоящей заявкой эффективное количество одного активного вещества в композиции означает количество,

- 11 040849 требуемое для достижения необходимого эффекта, если его применяют в комбинации с другим активным веществом в композиции. Определение эффективного количества будет различаться для каждого индивидуума в зависимости от возраста и общего состояния субъекта, а также конкретного активного вещества. Подходящее эффективное количество в каждом случае может быть определено специалистом в данной области техники путем проведения обычного эксперимента.

Термины активный ингредиент, терапевтическое средство, активное вещество или активное средство означают химическое соединение, которое может обеспечивать эффективное лечение целевого нарушения, заболевания или состояния.

Необязательный или необязательно означает, что далее описанное событие или ситуация могут, но не обязательно, происходить, и описание включает случаи, при которых событие или ситуация происходят, и случаи, при которых событие или ситуация не происходят.

Термин замещенный означает, что любые один или более атомов водорода при конкретном атоме замещены заместителем (который может включать тяжелый водород и варианты водорода), при условии, что валентное состояние конкретного атома является нормальным, и замещенное соединение является стабильным. Если заместитель представляет собой кислород (т.е. =O), это означает, что замещены два атома водорода. Замещение кислорода не происходит в ароматической группе. Термин необязательно замещенный означает, что он может быть или не быть замещенным, если не указано иное; тип и количество заместителей могут быть произвольными до тех пор, пока это достижимо химически.

Если любая переменная (например, R) встречается более одного раза в композиции или структуре соединения, ее определение в каждом случае является независимым. Таким образом, например, если группа замещена 0-2 R, то данная группа необязательно может быть замещена не более чем двумя R, и R в каждом случае имеет независимый параметр. Кроме того, комбинация заместителей и/или их вариантов допускается, только если такая комбинация приводит к образованию стабильных соединений.

Если число связывающих групп равняется 0, как, например, -(CRR)₀-, это означает, что связывающая группа представляет собой одинарную связь.

Когда одна из переменных выбрана из одинарной связи, это означает, что две группы, связанные одинарной связью, соединены непосредственно. Например, когда L в A-L-Z представляет собой одинарную связь, структура A-L-Z на самом деле представляет собой A-Z.

Если заместитель свободный, это означает, что заместителя не существует. Например, если X является свободным в A-X, структура на самом деле представляет собой A. Если заместитель может быть связан с более чем одним атомом на кольце, заместитель может быть связан с любым атомом на кольце.

Например, структурная единица или означает, что заместитель R может нахо диться в любом положении на циклогексиле или циклогексадиене. Если для указанных заместителей не определено, какой атом присоединен к замещенной группе, такой заместитель может быть связан посредством любого из его атомов, например, пиридил в качестве заместителя может быть связан с замещенной группой посредством любого одного из атомов углерода на пиридиновом кольце. Если счетная связывающая группа не определяет направление для связывания, при этом направление для связывания является произвольным. Например, связывающая группа L в является -M-W-, тогда -M( A В

W- может связать кольцо A и кольцо B с образованием в направлении, аналогичном ( А )— W-M-i в ) порядку прочтения слева направо, и обеспечить образование ⁴в направлении, противо положном порядку прочтения слева направо. Комбинации связывающих групп, заместителей и/или их вариантов допускаются, только если такие комбинации приводят к образованию стабильных соединений.

Если не указано иное, термин гетеро относится к гетероатому или гетероатомной группе (т.е. атомной группе, содержащей гетероатом), включающим атом, отличный от углерода (С) и водорода (H), и атомной группе, содержащей такие гетероатомы, включая, например, кислород (O), азот (N), серу (S), кремний (Si), германий (Ge), алюминий (Al), бор (В), -О-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)₂- и -C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)₂N(H)- или -S(=O)N(H)-, каждый из которых необязательно замещен.

Если не указано иное, кольцо относится к замещенным или незамещенным циклоалкилу, гетероциклоалкилу, циклоалкенилу, гетероциклоалкенилу, циклоалкинилу, гетероциклоалкинилу, арилу или гетероарилу. Так называемое кольцо включает одиночное кольцо, бициклическое кольцо, спиральное кольцо, сочлененное кольцо или мостиковое кольцо. Число атомов на кольце обычно определяется как число членов кольца. Например, 5-7-членное кольцо означает, что на кольце расположены 5-7 атомов. Если не указано иное, кольцо необязательно содержит 1-3 гетероатома. Таким образом, 5-7-членное кольцо включает, например, фенил, пиридин и пиперидинил; с другой стороны, термин 5-7-членное

- 12 040849 гетероциклоалкильное кольцо включает пиридил и пиперидинил, но за исключением фенила. Термин кольцо также включает кольцевую систему, содержащую по меньшей мере одно кольцо, где каждое кольцо независимо соответствует вышеуказанному определению.

Если не указано иное, термин гетероцикл или гетероциклил относится к стабильному моноциклическому, бициклическому или трициклическому кольцу, содержащему гетероатом или гетероатомную группу, которая может быть насыщенной, частично ненасыщенной или ненасыщенной (ароматическиой) и может содержать атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома кольца, независимо выбранных из N, О и S, где любой из вышеуказанных гетероциклов может быть сочленен с бензольным кольцом с образованием бициклического кольца. Гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окисленными (т. е. NO и S(O)p, p равняется 1 или 2). Атом азота может быть замещенным или незамещенным (т. е. N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, уже определенный в данном документе). Гетероцикл может быть присоединен к боковым группам любого гетероатома или атома углерода с образованием стабильной структуры. Если полученное соединение является стабильным, гетероциклы, описанные в данном документе, могут подвергаться замещению в положении углерода или азота. Атом азота на гетероцикле необязательно кватернизирован. В предпочтительном варианте осуществления,когда общее число атомов S и O в гетероцикле составляет более 1, при этом гетероатомы не являются смежными друг с другом. В другом предпочтительном варианте осуществления общее число атомов S и O гетероцикла составляет не более 1. Термин ароматическая гетероциклическая группа или гетероарил, применяемый в данном документе, относится к стабильному 5-, 6- или 7-членному моноциклическому или бициклическому или 7-, 8-, 9- или 10-членному бициклическому гетероциклическому ароматическому кольцу, которое содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома кольца, независимо выбранных из N, О и S. Атом азота может быть замещенным или незамещенным (т. е. N или NR, где R представляет собой H или другие заместители, уже определенные в данном документе). Гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окисленными (т. е. NO и S(O)_p, p равняется 1 или 2). Стоит отметить, что общее число атомов S и О ароматического гетероцикла составляет не более 1. Мостиковое кольцо также включено в определение гетероцикла. Мостиковое кольцо формируется, когда один или несколько атомов (т.е. С, O, N или S) связывают два несмежных атома углерода или азота. Предпочтительно мостиковое кольцо включает без ограничения один атом углерода, два атома углерода, один атом азота, два атома азота и одну углерод-азотную группу. Стоит отметить, что мостик всегда превращает моноциклическое кольцо в трициклическое кольцо. В мостиковом кольце заместитель на кольце может также присутствовать на мостике. Примеры гетероциклических соединений включают без ограничения акридинил, азоцинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензотиолфуранил, бензотиолфенил, бензоксазолил, бензоксазолинил, бензотиазолил, бензотриазолил, бензотетразолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолинил, карбазолил, 4aH-карбазолил, карбазолинил, хроманил, бензопиран, циннолинил декагидрохинолинил, 2H,6H1,5,2-дитиазинил, дигидрофуро[2,3-b]тетрагидрофуранил, фурил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, Ш-индазолил, индолнил, индолинил, индолизинил, индолил, ЗН-индолил, изобензофуранил, изоиндолил, изоиндолинил, изохинолинил, изотиазолил, изоксазолил, метилендиоксифенил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, гидроксииндолил, пиримидинил, фенантридинил, фенантролинил, феназинил, фенотиазинил, бензоксантинил, фенолоксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, пиперидинонил, 4-пиперидинонил, пиперонил, птеридинил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, пиридооксазолил, пиридоимидазолил, пиридотиазолил, пиридинил, пирролидинил, пирролинил, 2Н-пирролил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, 4Н-хинолизинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетразолил, 6Н-1,2,5-типдиазинил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, тиантренил, тиазолил, изотиазолилтиофенил, тиенооксазолил, тиенотиазолил, тиеноимидазолил, тиенил, триазинил, 1Н-1,2,3-триазолил, 2H-1,2,3триазолил, 1Н-1,2,4-триазолил, 4Н-1,2,4-триазолил и ксантенил. Также включены соединения с сочлененным кольцом и спирокольцом.

Если не указано иное, термин гидрокарбил или его гипонимы (например, алкил, алкенил, алкинил, арил и т.д.), самостоятельно или как часть другого заместителя, относится к углеводородному радикалу с прямой, разветвленной цепью или циклическому углеводородному радикалу или их комбинации, он может быть полностью насыщенным (например, алкил), моно- или полиненасыщенным (например, алкенил, алкинил и арил), может быть моно- или полизамещенным, а может быть одновалентным (например, метил), двухвалентным (например, метилен) или поливалентным (например, метенил), может включать двухвалентную или поливалентную группу, содержать указанное число атомов углерода (например, С1-С12 представляет 1-12 атомов углерода, C1-₁₂ выбраны из C1, C₂, С₃, С₄, C₅, С₆, С₇, C₈, C₉, Сю, Сц и С₁₂; C₃_₁₂ выбраны из С₃, С₄, C₅, С₆, С₇, C₈, C₉, Сю, Сц и С₁₂). Гидрокарбил включает без ограничения алифатический гидрокарбил и ароматический гидрокарбил, алифатический гидрокарбил включает линейный и циклический гидрокарбил, конкретно включает без ограничения алкил, алкенил и алкинил, а ароматический гидрокарбил включает без ограничения 6-12-членный ароматический гидрокарбил, такой как фенил, нафтил и т.п. В некоторых вариантах осуществления, термин гидрокарбил означает прямую

- 13 040849 или разветвленную группу или их комбинацию, которая может быть полностью насыщенной, моно- или полиненасыщенной и может включать двухвалентный или поливалентный радикал. Примеры насыщенного радикала гидрокарбила включают без ограничения метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, третбутил, изобутил, втор-бутил, изобутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил и гомолог или изомер н-пентила, н-гексила, н-гептила, н-октила и т.п. Ненасыщенная гидрокарбильная группа содержит одну или более двойных или тройных связей, и ее примеры включают без ограничения винил, 2пропенил, бутенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 3-(1,4-пентадиенил), этинил, 1-й 3-пропинил, 3-бутинил и более высшие гомологи и изомеры.

Если не указано иное, термин гетерогидрокарбил или его гипонимы (такие как гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил и т.д.), самостоятельно или в комбинации с другим термином, обозначает стабильный прямой, разветвленный или циклический углеводородный радикал или его любую комбинацию, которые содержат указанное число атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом.

Если не указано иное, термин гетероалкил, самостоятельно или в комбинации с другим термином, обозначает стабильный углеводородный радикал с прямой цепью, разветвленный радикал или его комбинацию, содержащие указанное число атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом. В конкретном варианте осуществления гетероатом выбран из B, O, N и S, где атомы азота и серы необязательно окислены, а гетероатом азота необязательно кватернизирован. Гетероатом или гетероатомная группа могут быть расположены в любом внутреннем положении гетерогидрокарбила, включая положение, где гидрокарбил присоединен к остальной части молекулы. Но термины алкокси, алкиламино и алкилтио (или тиоалкокси) относятся к общепринятому выражению, которое обозначает алкил, который присоединен к остальной части молекулы посредством атома кислорода, амино или атома серы соответственно. Примеры гетероалкила включают без ограничения -ОСН₃, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3, -ОСН(СНз)2, -N(CH₃)2, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2.CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -S(O)2-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -СН=СН-О-СНз, -CH2-CH=N-OCH3 и -CH=CHN(CH₃)-CH₃. He более двух гетероатомов могут быть непрерывными, например, -CH₂-NH-OCH₃.

Если не указано иное, термин циклогидрокарбил, гетероциклогидрокарбил или его гипонимы (такие как арил, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, циклоалкинил, гетероциклоалкинил и т. д.), самостоятельно или в комбинации с другими терминами, представляет собой циклизированный гидрокарбил или гетерогидрокарбил соответственно. Кроме того, в случае гетерогидрокарбила или гетероциклогидрокарбила (например, гетероалкила или гетероциклоалкила) гетероатом может занимать положение, где гетероциклическое кольцо присоединено к остальной части молекулы. Примеры циклогидрокарбила включают без ограничения циклопентил, циклогексил, 1циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил и т.п. Неограничивающие примеры гетероциклических групп включают 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридил), 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 4морфолинил, 3-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиофен-2-ил, тетрагидротиофен-3-ил, 1-пиперазинил и 2-пиперазинил.

Если не указано иное, термин алкил относится к прямой или разветвленной насыщенной углеводородной группе, которая может быть моно- (например, -CH2F) или полизамещенной (например, -CF₃) и может быть одновалентной (например, метил), двухвалентной (например, метилен) или поливалентной (например, метенил). Примеры алкила включают метил (Me), этил (Et), пропил (такой как, н-пропил и изопропил), бутил (такой как н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил), пентил (такой как н-пентил, изопентил, неопентил) и т.п.

Если не указано иное, алкенил относится к алкильной группе, содержащей одну или более углерод-углеродных двойных связей в любом положении цепи, которая может быть монозамещенной или полизамещенной и может быть одновалентной, двухвалентной или поливалентной. Примеры алкенила включают винил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил, бутадиенил, пентадиенил, гексадиенил и т. п. Термин алкенилокси относится к алкенильной группе, каждая из которых присоединена к остальной части молекулы посредством атома кислорода, примеры включают без ограничения СН₂=СН₂-О-, СН3СН=СН-О-.

Если не указано иное, алкинил относится к алкильной группе, содержащей одну или более углерод-углеродных тройных связей в любом положении цепи, которая может быть монозамещенной или полизамещенной и может быть одновалентной, двухвалентной или поливалентной. Примеры алкинила включают этинил, пропинил, бутинил, пентинил и т.п.

Если не указано иное, циклоалкил включает любой стабильный циклический или полициклический гидрокарбил, и при этом любой атом углерода является насыщенным, который может быть монозамещенным или полизамещенным и может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным. Примеры такого циклоалкила включают без ограничения циклопропил, норборнанил, [2.2.2]бициклооктан, [4.4.0]бициклодеканил и т.п. Однако термин циклоалкилокси относится к циклоалкильной группе, каждая из которых присоединена к остальной части молекулы посредством атома ки- 14 040849

- Ζ / ΠΤ°'' , □ L>° U слорода, примеры включают без ограничения ’ ’ ’

Если не указано иное, циклоалкенил включает любой стабильный циклический или полициклический гидрокарбил, содержащий одну или более ненасыщенных углерод-углеродных двойных связей в любом положении кольца, который может быть монозамещенным или полизамещенным и быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным. Примеры такого циклоалкенила включают без ограничения циклопентенил, циклогексенил и т.п.

Если не указано иное, циклоалкинил включает любой стабильный циклический или полициклический гидрокарбил, содержащий одну или более углерод-углеродных тройных связей в любом положении кольца, который может быть монозамещенным или полизамещенным и может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным.

Если не указано иное, термин галоген или галогено, самостоятельно или как часть другого заместителя, относится к атому фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, предполагается, что термин галогеналкил включает как моногалогеналкил, так и полигалогеналкил. Например, предполагается, что термин галоген(С1-С₄)алкил включает без ограничения трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и т.п. Если не указано иное, примеры галогеналкила включают без ограничения трифторметил, трихлорметил, пентафторэтил и пентахлорэтил.

Алкокси представляет собой любой алкил, определенный выше, содержащий указанное число атомов углерода, присоединенных посредством кислородного мостика. Если не указано иное, C₁.₆алкокси включает C1, C2, С₃, С₄, C5 и С₆алкокси. Примеры алкокси включают без ограничения метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентилокси и S-пентилокси.

Если не указано иное, термин арил относится к полиненасыщенному ароматическому заместителю, который может быть моно- или полизамещенным, может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным, может представлять собой одиночное кольцо или множество колец (например, 1-3 кольца; где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим), которые сочленены вместе или ковалентно связаны.

Если не указано иное, термин гетероарил относится к арилу (или кольцу), содержащему от одного до четырех гетероатомов. В иллюстративном примере гетероатом выбран из В, N, О и S, где атомы азота и серы необязательно окислены, и атом азота необязательно кватернизирован. Гетероарил может быть присоединен к остальной части молекулы посредством гетероатома. Неограничивающие примеры арила или гетероарила включают фенил, нафтил, бифенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиразинил, оксазолил, фенил-оксазолил, изоксазолил, тиазолил, фурил, тиенил, пиридил, пиримидинил, бензотиазолил, пуринил, бензимидазолил, индолил, изохинолил, хиноксалинил, хинолинил, 1-нафтил, 2-нафтил, 4бифенил, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2оксазолил, 4-оксазолил, 2-фенил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4пиридил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензимидазолил, 5-индолил, 1изохинолинил, 5-изохинолинил, 2-хиноксалинил, 5-хиноксалинил, 3-хинолил и 6-хинолинил. Заместитель любой из вышеуказанных арильной или гетероарильной кольцевых систем выбран из приемлемых заместителей, описанных ниже.

Если не указано иное, в комбинации с другими терминами (такими как арилокси, арилтио, аралкил) арил включает арильное и гетероарильное кольца, определенные выше. Таким образом, предполагается, что термин аралкил включает группы (например, бензил, фенэтил, пиридилметил и т.д.), где арил присоединен к алкилу, включая алкил, где атом углерода (например, метилен) был заменен на атом, такой как кислород, например, феноксиметил, 2-пиридилоксиметил, 3-(1-нафтилокси)пропил и т.п.

Термин уходящая группа относится к функциональной группе или атому, которые могут быть заменены другой функциональной группой или атомом посредством реакции замещения (например, реакции аффинного замещения). Например, иллюстративные уходящие группы включают трифлат; хлор, бром и йод; сульфонат, такой как мезилат, тозилат, п-бромбензолсульфонат, п-толуолсульфонат и т. п.; ацилокси, такой как ацетокси, трифторацетокси и т. п.

Термин защитная группа включает без ограничения защитную группу для аминогруппы, защитную группу для гидроксигруппы или защитную группу для тиольной группы. Термин защитная группа для аминогруппы относится к защитной группе, подходящей для предотвращения побочных реакций в положении азота в аминогруппе. Иллюстративные защитные группы для аминогруппы включают без ограничения формил; ацил, такой как алканоил (например, ацетил, трихлорацетил или трифторацетил); алкоксикарбонил, такой как трет-бутоксикарбонил (Boc); арилметоксикарбонил, такой как бензилоксикарбонил (Cbz) и 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc); арилметил, такой как бензил (Bn), тритил (Tr), 1,1-ди(4'-метоксифенил)метил; силил, такой как триметилсилил (TMS) и третбутилдиметилсилил (TBS) и т. д. Термин защитная группа для гидроксигруппы относится к защитной группе, подходящей для предотвращения побочных реакций гидроксильных групп. Иллюстративные

- 15 040849 защитные группы для гидроксигрупп включают без ограничения алкил, такой как метил, этил и третбутил; ацил, такой как алканоил (например, ацетил); арилметил, такой как бензил (Bn), п-метоксибензил (РМВ), 9-флуоренилметил (Fm) и дифенилметил (бензгидрил, DPM); силил, такой как триметилсилил (TMS), трет-бутилдиметилсилил (TBS) и т. д.

Соединения в соответствии с настоящей заявкой можно получать с помощью разнообразных способов синтеза, хорошо известных специалистам в данной области техники, в том числе с помощью следующих приведенных в качестве примера вариантов осуществления, вариантов осуществления, образованных посредством их объединения с другими химическими способами синтеза, и эквивалентных альтернатив, известных специалисту в данной области техники. Предпочтительные варианты осуществления включают без ограничения примеры настоящего изобретения.

Растворители, применяемые в настоящей заявке, являются коммерчески доступными. В настоящей заявке используются следующие сокращения:

водн. обозначает водный;

экв. обозначает эквивалент;

CDI обозначает карбонилдиимидазол;

DCM обозначает дихлорметан;

РЕ обозначает петролейный эфир;

DMF обозначает N,N-диметилформамид;

DMSO обозначает диметилсульфоксид;

EtOAc обозначает этилацетат;

EtOH обозначает этанол;

MeOH обозначает метанол;

ВОС обозначает трет-бутилкарбонил, который представляет собой защитную группу для аминогруппы;

НОАс обозначает уксусную кислоту;

Na(ОАс)₃ВН обозначает ацетат борогидрида натрия;

THF обозначает тетрагидрофуран;

Boc2O обозначает ди-трет-бутилдикарбонат;

TFA обозначает трифторуксусную кислоту;

Cu(асас)₂ обозначает ацетилацетонат меди;

DIEA обозначает диизопропилэтиламин;

Xantphos обозначает 9,9-диметил-4,5-бисдифенилфосфеноксантен;

Pd(OAc)2 обозначает ацетат палладия;

Pd(dppf)Cl₂ обозначает [1,1 '-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладийдихлорид;

K₃PO₄ обозначает фосфат калия;

K₂CO₃ обозначает карбонат калия;

NaHCO₃ представляет собой гидрокарбонат натрия;

Na₂CO₃ обозначает карбонат натрия;

HCl обозначает хлорид водорода;

Pd/C обозначает палладий на угле;

ICl обозначает хлористый йод;

NaH обозначает гидрид натрия;

DMAP обозначает 4-диметиламинопиридин;

DIPEA/DIEA обозначает N,N-диизопропилэтиламин;

DPPF обозначает 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен;

DCE обозначает 1,2-дихлорэтан;

DME обозначает диметоксиэтан.

Соединения называли вручную или с помощью программного обеспечения ChemDraw®, а для коммерчески доступных соединений применяли их названия из каталога поставщиков.

Подробное описание

Заявка подробно описана ниже с помощью следующих примеров, но не означает каких-либо неблагоприятных ограничений заявки. Настоящая заявка была определена в данном документе, где раскрыты конкретные варианты осуществления настоящей заявки. Различные вариации и модификации будут внесены в варианты осуществления настоящей заявки без отступления от сущности и объема настоящей заявки, которые будут очевидны для специалиста в данной области техники.

Пример 1. Соединение 1А

В защитной атмосфере газообразного азота 5-бромбензотиофен (10 г, 46,93 ммоль), K₃PO₄ (9,96 г, 46,93 ммоль) и Cu(асас)₂ (644 мг, 1,16 ммоль, 0,05 экв.) растворяли в растворе DMF в жидком аммиаке (2 М, 50 мл). Обеспечивали протекание реакции в реакционном растворе в реакторе высокого давления при

- 16 040849

100°С в течение 12 ч. Реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 1А.

ΊI ЯМР (400 МГц, CDC13) δ=7,65 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,39 (d, J=5,3 Гц, 1H), 7,16 (d, J=5,3 Гц, 1H), 7,11 (s, 1H), 6,79 (dd, J=1,8, 8,5 Гц, 1H), 3,67 (br s, 2H).

Соединение 1B:

Соединение 1А (3,8 г, 25,47 ммоль) и NaHCO₃ (4,28 г, 50,93 ммоль) растворяли в 50 мл DCM, а затем добавляли по каплям хлористый йод (4,96 г, 30,56 ммоль, 1,56 мл) и обеспечивали протекание реакции в реакционном растворе при 20°С в течение 1 ч. После завершения реакции в реакционный раствор добавляли 100 мл DCM и промывали соответственно водой и насыщенным солевым раствором. Органические фазы объединяли, высушивали и концентрировали с получением соединения 1В.

Соединение 1С:

Соединение 1B (0,6 г, 2,18 ммоль), диметилфосфиноксид (364,76 мг, 3,27 ммоль), Xantphos (126,19 мг, 218,10 мкмоль), Pd(OAc)₂ (48,96 мг, 218,10 мкмоль) и K₃PO₄ (694,41 мг, 3,27 ммоль) растворяли в 10 мл DMF и 2 мл Н₂О и проводили реакцию при 120°С в защитной атмосфере газообразного азота в течение 24 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 1С.

Соединение 1D:

Соединение 1С (0,3 г, 1,33 ммоль) растворяли в 5 мл EtOH и к полученному добавляли 2,4,5трихлорпиримидин (488,59 мг, 2,66 ммоль, 303,47 мкл) и DIEA (688,54 мг, 5,33 ммоль, 927,95 мкл). Реакционный раствор нагревали с обратным холодильником в защитной атмосфере газообразного азота в течение 24 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 1D.

Соединение 1E:

Соединения 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9-диазаспиро[5.5]ундекана растворяли в 30 мл DMF, а затем добавляли K₂CO₃ (5,04 г, 36,48 ммоль). Реакцию проводили при 60°С в защитной атмосфере газообразного азота в течение 8 ч. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 1E.

Л ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,05 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 3,96 (s, 3Н), 3,19-3,11 (m, 4H), 2,42 (m, 4H), 2,31 (s, 3Н), 1,71-1,67 (m, 4H), 1,65-1,61 (m, 4H).

Соединение 1F:

Соединение 1E (3,1 г, 8,76 ммоль) растворяли в 30 мл EtOH и добавляли порошок железа (2,94 г,

- 17 040849

52,57 ммоль) и водный раствор хлорида аммония (4,69 г хлорида аммония, растворенного в 10 мл воды).

Реакцию проводили при 90°С в течение 2 ч в защитной атмосфере газообразного азота. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения

1F.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ=6,71 (s, 1H), 6,66 (s, 1H), 4,73 (br s, 2H), 3,77 (s, 3Н), 3,25 (m, 2H), 3,06 (m, 2H), 2,81 (m, 4H), 2,74 (s, 3Н), 1,89 (m, 2H), 1,74 (m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,49 (m, 2H).

Соединение 1:

Соединение 1D (100 мг, 268,67 мкмоль) и соединение 1F (87,01 мг, 268,67 мкмоль) растворяли в 4 мл трет-бутанола и добавляли метилсульфоновую кислоту (103,28 мг, 1,07 ммоль, 76,50 мкл). Реакцию проводили при 90°С в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали, доводили до значения pH, составляющего приблизительно 9, с помощью насыщенного NaHCO₃ и экстрагировали три раза с помощью DCM. Органические фазы собирали, высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 1 (40,16 мг, 63,98 мкмоль).

1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ=8,54 (br s, 1H), 8,17 (d, J=9,0 Гц, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,02 (d, J=5,6 Гц, 1H), 7,91 -7,80 (m, 3Н), 6,74 (s, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,30-3,16 (m, 4H), 2,96-2,88 (m, 4H), 2,84 (s, 3Н), 1,99 (s, 3Н)), 1,95 (s, 3Н), 1,83 (br s, 3H), 1,73 (br s, 4H).

Пример 2. Соединение 2А

Кроме раздельной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-2-метил-4-нитробензола и 2-метил-2,7диазаспиро[3.5]нонана, соединение 2А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Соединение 2В:

Кроме замены соединения 1E соединением 2А, соединение 2В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=6,57 (s, 1H), 6,53 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,86-3,82 (m, 1H), 3,91-3,79 (m, 1H), 3,37 (s, 4H), 2,78-2,69 (m, 4H), 2,58-2,49 (m, 3Н), 2,19 (d, J=15,8 Гц, 3Н), 1,97-1,89 (m, 4H).

Соединение 2:

Кроме замены соединения 1F соединением 2В, соединение 2 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

- 18 040849

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,54 (br s, 1H), 8,17 (d, J=9,0 Гц, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,02 (d, J=5,6 Гц,

1H), 7,91-7,80 (m, 3Н), 6,74 (s, 1H), 3,88 (s, 3Н), 3,30-3,16 (m, 4H), 2,96-2,88 (m, 4H), 2,84 (s, 3Н), 1,99 (s,

3Н), 1,95 (s, 3Н), 1,83 (brs, 3Н), 1,73 (br s, 4H).

Пример 3. Соединение 3А

Соединения трет-бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (20 г, 100,38 ммоль) и 1-метилпиперазина (12,06 г, 120,45 ммоль, 13,36 мл) растворяли в 200 мл этанола и добавляли АсОН (6,03 г, 100,38 ммоль, 5,74 мл) и NaBH(OAc)₃ (42,55 г, 200,76 ммоль). Реакцию проводили при 20°С в течение 12 ч. После завершения реакции реакцию гасили с помощью добавления метанола (10 мл) и воды (10 мл), а затем экстрагировали с помощью этилацетата (500 мл). Органическую фазу собирали, высушивали и концентрировали с получением соединения 3А.

Соединение 3В:

Соединение 3А (16 г, 56,46 ммоль) растворяли в HCl/MeOH (50 мл, 4 М) и обеспечивали протекание реакции при 0°С в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали с получением соединения 3В.

Соединение 3С:

Кроме раздельной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 4-фтор-2-метокси-1-нитробензола и 1-метил-4-(4-пиперидинил)пиперазина, соединение 3С получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,02-7,88 (m, 1H), 6,40 (dd, J=2,5, 9,5 Гц, 1H), 6,29 (d, J=2,5 Гц, 1H), 3,99-3,84 (m, 5H), 3,26-2,86 (m, 4H), 2,65-2,41 (m, 8Н), 2,29 (s, 3Н), 2,00-1,92 (m, 2Н), 1,59 (dq, J=4,0, 12,0 Гц, 2Н).

Соединение 3D:

Кроме замены соединения 1E соединением 3С, соединение 3D получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=6,56 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,45 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,34 (dd, J=2,4, 8,6 Гц, 1H), 3,76 (s, 3Н), 3,45 (br d, J=12,2 Гц, 3Н), 2,75-2,47 (m, 7H), 2,46-2,36 (m, 3Н), 2,31-2,20 (m, 5H), 1,85 (br d, J=12,5 Гц, 2H), 1,64 (dq, J=3,8, 12,0 Гц, 2Н).

- 19 040849

Соединение 3:

Кроме замены соединения 1F соединением 3D, соединение 3 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,14 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,04-7,87 (m, 4H), 7,36 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 6,59 (d, J=2,2 Гц, 1H), 5,98 (br d, J=8,1 Гц, 1H), 3,83 (s, 3Н), 3,64-3,57 (m, 3Н), 2,96-2,56 (m, 10Н), 2,47 (s, 4H), 2,02 (br d, J=12,5 Гц, 2H), 1,95 (s, 3Н), 1,91 (s, 3Н), 1,71-1,60 (m, 2H).

Пример 4. Соединение 4А

В защитной атмосфере газообразного азота нафталин-2-амин (4 г, 27,94 ммоль) растворяли в перемешанном растворе 120 мл DCM и 40 мл MeOH и добавляли бензилтриметиламмония дихлорйодид (9,72 г, 27,94 ммоль). Обеспечивали протекание реакции в реакционном растворе при 20°С в течение 0,5 ч. После завершения реакции реакционный раствор промывали раствором бикарбоната натрия и органическую фазу собирали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 4А.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=8,00 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,66 (dd, J=8,3, 17,6 Гц, 2Н), 7,54 (ddd, J=1,2, 7,2, 8,4 Гц, 1H), 7,37-7,29 (m, 1H), 6,99 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,47 (br s, 2H).

Соединение 4В:

Кроме замены соединения 1В соединением 4А, соединение 4В получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=7,66 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 7,51-7,45 (m, 1H), 7,45-7,37 (m, 1H), 7,25-7,17 (m, 1H), 6,76 (dd, J=3,6, 8,8 Гц, 1H), 6,51 (br s, 2Н), 2,05 (s, 3Н), 2,01 (s, 2Н);

LC-MS (ESI): масса/заряд: 220,1 [M+1].

Соединение 4С:

Кроме замены соединения 1С соединением 4В, соединение 4С получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=13,05 (s, 1H), 8,62 (dd, J=4,0, 9,2 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,89 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,56 (dd, J=7,2, 7,2 Гц, 1H), 7,48 (dd, J=7,2, 7,2 Гц, 1H),

2,18 (s, 3Н), 2,14 (s, 3H). Соединение 4:

Кроме замены соединения 1D соединением 4С, соединение 4 получали в соответствии со способом получения соединения 1. 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ=8,45 (s, 1H), 8,24-8,17 (m, 2H), 8,11 (s, 1H), 8,06 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,91 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,63 (ddd, J=1,2, 7,2, 7,2 Гц, 1H), 7,53 (dd, J=7,2, 7,2 Гц,

- 20 040849

1H), 6,75 (s, 1H), 3,89 (s, 3Н), 3,32-3,12 (m, 4H), 2,98-2,90 (m, 4H), 2,88 (s, 3Н), 2,14 (s, 3Н), 2,10 (s, 3Н),

2,05-1,49 (m, 8Н); LC-MS (ESI): масса/заряд: 653,0 [M+1].

Пример 5. Соединение 5

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 4С и 2В, соединение 5 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,56 (br s, 1H), 8,30-8,21 (m, 2H), 8,06 (s, 1H), 8,02 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,96 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,67-7,61 (m, 1H), 7,61-7,53 (m, 2H), 6,62 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6,11 (d, J=8,8 Гц, 1H), 3,87 (s, 4H), 3,84 (s, 3Н), 3,09-2,97 (m, 4H), 2,88 (s , 3Н), 2,10 (s, 3Н), 2,07 (s, 3Н), 2,04-1,94 (m, 4H);

LCMS (ESI): масса/заряд: 591,1 [M+1].

Пример 6. Соединение 6

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 4С и 3D, соединение 6 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,54 (br s, 1H), 8,30-8,22 (m, 2H), 8,06 (s, 1H), 8,02 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,97 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,67-7,62 (m, 1H), 7,60-7,49 (m, 2H), 6,63 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,13 (d, J=8,0 Гц, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,63 (d, J=12,4 Гц, 2Н), 2,79 (br s, 6H), 2,71-2,61 (m, 3Н), 2,61-2,38 (m, 5Н), 2,11 (s, 3Н), 2,07 (s, 3Н), 2,02 (br d, J=12,8 Гц, 2Н), 1,72-1,61 (m, 2H);

LCMS (ESI): масса/заряд: 634,1 [M+1].

Пример 7. Соединение 7А

Растворяли 7-нитрохинолин (7 г, 40,19 ммоль) в 120 мл метанола и добавляли Pd/C (10%, 1 г) в атмосфере азота. После продувки водородом 3 раза реакционный раствор перемешивали при 20°С в атмосфере водорода в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения 7А.

1H ЯМР (400 МГц, CDCla) δ=8,75 (dd, J=1,8, 4,3 Гц, 1Н), 7,98 (dd, J=0,8, 8,0 Гц, 1Н), 7,61 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,22 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,13 (dd, J=4,4, 8,2 Гц, 1H), 6,98 (dd, J=2,3, 8,5 Гц, 1H), 3,98 (br s, 2H).

Соединение 7В

I

Соединение 7А (2,5 г, 17,34 ммоль) растворяли в 75 мл АсОН и ICl (3,10 г, 19,07 ммоль, 973,85 мкл) растворяли в 25 мл уксусной кислоты, которую добавляли по каплям к реакционному раствору. Реакционный раствор перемешивали при 20°С в течение 1 ч. После завершения реакции реакционный раствор подвергали ротационному выпариванию с удалением уксусной кислоты и остаток экстрагировали с помощью этилацетата и разбавляли, а затем промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу собирали, высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 7В.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,88 (dd, J=1,5, 4,3 Гц, 1Н), 7,95 (dd, J=1,5, 8,0 Гц, 1Н), 7,58 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=4,3, 8,0 Гц, 1H), 7,04 (d, J=8,5 Гц, 1H), 5,10-4,63 (m, 2H).

- 21 040849

Соединение 7С

Кроме замены соединения 1В соединением 7В, соединение 7С получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,63 (dd, J=1,8, 4,3 Гц, 1H), 7,88 (td, J=1,5, 7,9 Гц, 1H), 7,61 (d, J=9,0 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=4,4, 8,1 Гц, 1H), 6,80 (dd, J=3,9, 8,8 Гц, 1H), 6,73-6,23 (m, 1H), 2,07 (s, 3Н), 2,03 (s, 3Н).

Соединение 7D

Кроме замены соединения 1С соединением 7С, соединение 7D получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5=13,31 (s, 1H), 8,93 (dd, J=3,9, 9,2 Гц, 1H), 8,82 (dd, J=1,8, 4,3 Гц, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,3 Гц, 1H), 8,01 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=4,3, 8,3 Гц, 1H), 2,19 (s, 3Н), 2,15 (s, 3Н).

Соединение 7

Кроме замены соединения 3D соединением 7D, соединение 7 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5=8,92-8,79 (m, 2H), 8,50 (br s, 1H), 8,23 (br d, J=8,3 Гц, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,90 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,69 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=4,3, 8,2 Гц, 1H), 6,69 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,53 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,74 (br d, J=12,2 Гц, 2Н), 2,99-2,65 (m, 10Н), 2,62-2,56 (m, 1H), 2,55 (s, 3Н), 2,16 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,04 (br d, J=12,5 Гц, 2H), 1,76-1,65 (m, 2H).

Пример 8. Соединение 8А

Растворяли 4-нитробензол-1,2-диамин (10 г, 65,30 ммоль) в 100 мл этанола и добавляли глиоксаль (4,55 г, 78,36 ммоль, 4,10 мл) с перемешиванием при 80°С в течение 15 ч. После завершения реакции смесь фильтровали и осадок на фильтре высушивали с получением соединения 10А.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) 5=9,18 (s, 2H), 8,93 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,58 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 8,36 (d, J=9,2 Гц, 1Н); LC-MS (ESI): масса/заряд: 176,1 [M+1].

Соединение 8В

Кроме замены соединения 1E соединением 8А, соединение 8В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

lH ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5=8,60 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,45 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,73 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 6,92 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,08 (s, 2H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 146,2 [M+1].

Соединение 8С

Кроме замены соединения 7А соединением 8В, соединение 8С получали в соответствии со способом получения соединения 7В.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) 5=8,76 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,56 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,80 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,45 (d, J=9,2 Гц, 1H), 6,38 (br s, 2H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 271,9 [M+1].

- 22 040849

Соединение 8D

Кроме замены соединения 1B соединением 8С, соединение 8D получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=8,61 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,49 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,82 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,22 (d, J=9,2 Гц, 1H), 6,38 (br s, 2H), 1,89 (s, 3Н), 1,85 (s, 3Н). LC-MS (ESI): масса/заряд: 222,1 [M+1].

Соединение 8Е

Кроме замены соединения 1С соединением 8D, соединение 8Е получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=13,20 (s, 1H), 9,12 (dd, J=4,0, 9,6 Гц, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8.21 (d, J=9,6 Гц, 1H), 2,08 (s, 3Н), 2,05 (s, 3Н); LC-MS (ESI): масса/заряд: 367,9 [M+1].

Соединение 8

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 8Е и 2В, соединение 8 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=12,90 (s, 1H), 9,09-8,96 (m, 1H), 8,87 (dd, J=2,0, 7,6 Гц, 2Н), 8,31-8,24 (m, 2H), 8,20 (s, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,10 (s, 4H), 2,77 (t, J=5,2 Гц, 4H), 2,33 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,84 (t, J=5,2 Гц, 4Н); LC-MS (ESI): масса/заряд: 607,1 [M+1].

Пример 9. Соединение 9

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 4С и 2В, соединение 9 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,57 (s, 1H), 8,27 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,24-8,19 (m, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,00 (d, J=9,1 Гц, 1H), 7,93 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,68-7,53 (m, 3Н), 6,65 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,58-3,50 (m, 4H), 2,792,71 (m, 4H), 2,66 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 1,98-1,90 (m, 4Н), 1,79 (s, 3H).

Пример 10. Соединение 10

Кроме замены соединения 1D соединением 7D, соединение 10 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

- 23 040849

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,83 (dd, J=1,7, 4,4 Гц, 1H), 8,71 (dd, J=3,7, 9,0 Гц, 1H), 8,49 (br s, 1H),

8,20 (br d, J=8,1 Гц, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,00 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=4,3, 8,2 Гц, 1H), 6,78 (s,

1H), 3,89 (s, 3Н), 3,24 (br s, 4H), 3,04-2,92 (m, 4H), 2,86 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,93-1,59 (m, 8H).

Пример 11. Соединение 11А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 1-метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина, соединение 11А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Л ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=6,79 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,24-2,76 (m, 8H), 2,72 (br s, 1H), 2,71-2,65 (m, 2Н), 2,02 (br d, J=10,8 Гц, 2H), 1,89-1,71 (m, 2H).

Соединение 11В

Кроме замены соединения 1E соединением 11А, соединение 11В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCls) δ=8,04 (s, 1H), 6,56 (s, 1H), 4,02-3,91 (m, 3Н), 3,65 (br d, J=12,1 Гц, 2Н), 2,81-2,73 (m, 2Н), 2,66 (br s, 4Н), 2,56-2,37 (m, 5Н), 2,31 (s, 3Н), 1,98 (br d, J=12,2 Гц, 2Н), 1,84-1,71 (m, 2H).

Соединение 11

Кроме раздельной замены соединений 1D и 1F соединениями 4С и 11В, соединение 11 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

Л ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,23 (br d, J=8,7 Гц, 2Н), 8,16-8,10 (m, 1H), 8,02 (br d, J=8,1 Гц, 1H), 7,76-7,55 (m, 3Н), 6,85 (s, 1H), 4,01 (br s, 2H), 3,92 (s, 5H), 3,73 (br s, 3H), 3,69-3,56 (m, 2H), 3,50 (br d, J=10,1 Гц, 2H), 3,08 (s, 3H), 2,86 (br t, J=11,5 Гц, 2Н), 2,36 (br d, J=11,5 Гц, 2H), 2,17 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11-2,02 (m, 2H).

Пример 12. Соединение 12

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 2В и 7D, соединение 12 получа

- 24 040849 ли в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,84 (br d, J=2,7 Гц, 1H), 8,79 (br dd, J=3,7, 9,0 Гц, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,22 (br d, J=8,1 Гц, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,90 (br d, J=9,0 Гц, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,44 (dd, J=4,3, 8,2 Гц, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,01 (br s, 4H), 3,84 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,82 (br s, 4H), 2,16 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 2,03 (br s, 4H).

Пример 13. Соединение 13А

Растворяли 6-нитро-1H-индазол (25 г, 153,25 ммоль) в 200 мл DMF, NaH (6,74 г, 168,57 ммоль, чистота 60%) добавляли по частям при 0°С, а затем MeI (23,93 г, 168,57 ммоль, 10,49 мл) добавляли по частям при 0°С. Реакцию проводили при 25°С в течение 1 ч. После завершения реакции реакционный раствор выливали в 500 мл воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Органическую фазу собирали и последовательно промывали с помощью 20 мл воды и 20 мл насыщенного солевого раствора. Органическую фазу собирали, высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 13А.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=8,71 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,29 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,03-7,97 (m, 1H), 7,967,92 (m, 1H), 4,19 (s, 3Н).

Соединение 13В:

Кроме замены соединения 1E соединением 13А, соединение 13В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=7,68 (s, 1H), 7,36 (d, J=8,6 Гц, 1H), 6,50 (dd, J=2,0, 8,6 Гц, 1H), 6,45 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 3,81 (s, 3H).

Соединение 13С:

Кроме замены соединения 7А соединением 13В, соединение 13С получали в соответствии со способом получения соединения 7В.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=7,76 (s, 1H), 7,40 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 6,61 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4,38 (s, 3Н).

Соединение 13D:

Кроме замены соединения 1В соединением 13С, соединение 13D получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=7,81 (d, J=1,7 Гц, 1H), 7,50 (dd, J=1,1, 8,7 Гц, 1H), 6,55 (dd, J=3,2, 8,8 Гц, 1H), 6,50 (s, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 1,93 (s, 3Н), 1,89 (s, 3Н).

Соединение 13Е:

Кроме замены соединения 1С соединением 13D, соединение 13Е получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=10,38 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,00 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 4,41 (s, 3Н), 1,88 (s, 3Н), 1,84 (s, 3Н).

- 25 040849

Соединение 13

Кроме замены соединения 1D соединением 13Е и замены соединения 1F соединением 2В, соединение 13 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=9,56 (br s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,19 (d, J=1,5 Гц, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,96 (dd, J=1,1, 8,4 Гц, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,18 (dd, J=2,9, 8,6 Гц, 1H), 6,53 (s, 1H), 4,37 (s, 3Н), 3,72 (s, 3Н), 3,21 (s, 4H), 2,57 (br s, 4H), 2,39 (s, 3Н), 1,79 (s, 3Н), 1,76 (s, 7H).

Пример 14 Соединение 14А

Растворяли 2,3-дигидро-1H-инден-1-он (10 г, 75,67 ммоль, 9,09 мл) в 100 мл концентрированной серной кислоте и к полученному добавляли KNO₃ (8,03 г, 79,45 ммоль) при 0°С. Реакцию проводили при 0-5°С в течение 1,5 ч. После завершения реакции реакционный раствор выливали в 300 мл воды. После фильтрации осадок на фильтре растворяли в EtOAc, высушивали, а затем концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 14А.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=8,60 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,48 (dd, J=2,3, 8,5 Гц, 1H), 7,69 (d, J=8,3 Гц, 1H), 3,34 -3,27 (m, 2H), 2,90-2,83 (m, 2H).

Соединение 14В

Кроме замены соединения 1E соединением 14А, соединение 14В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=7,29-7,25 (m, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,98 (br d, J=8,3 Гц, 1H), 3,81 (br s, 2H), 3,09-3,00 (m, 2H), 2,74-2,66 (m, 2H); LCMS (ESI) масса/заряд: 147,9 [M+1].

Соединение 14С

Кроме замены соединения 7А соединением 14В, соединение 14С получали в соответствии со способом получения соединения 7В.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ=7,26 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,09 (d, J=8,1 Гц, 1H), 5,49 (s, 2H), 2,86-2,81 (m, 2H), 2,65-2,60 (m, 2H); LCMS (ESI) масса/заряд: 273,9 [M+1].

Соединение 14D

Кроме замены соединения 1В соединением 14С, соединение 14D получали в соответствии со способом получения соединения 1С. LCMS (ESI) масса/заряд: 223,9 [M+1].

Соединение 14Е

Кроме замены соединения 1С соединением 14D, соединение 14Е получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ=13,09 (s, 1H), 8,84 (dd, J=3,5, 8,8 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,3 Гц, 1H), 3,21-3,16 (m, 2H), 2,80-2,75 (m, 2H), 2,08 (s, 3Н), 2,04 (s, 3Н);

- 26 040849

LC-MS (ESI) масса/заряд: 369,9 [M+1]. Соединение 14

Кроме замены соединения 1D соединением 14Е, соединение 14 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=12,60 (s, 1H), 8,61 (br d, J=6,6 Гц, 1H), 8,30 (br s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,63 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 6,87 (s, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,08-3,01 (m, 2H), 2,93 (m, 4H), 2,74-2,67 (m, 2H), 2,60 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,60 (m, 8H); LCMS (ESI) масса/заряд: 657,0 [M+1].

Пример 15. Соединение 15A

Добавляли DMAP (376 мг, 3,08 ммоль) к раствору 5-нитро-1H-индола (10 г, 61,6 ммоль) и Boc₂O (14,1 г, 64,7 ммоль, 14,9 мл) в тетрагидрофуране (100 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали и суспендировали с помощью петролейного эфира с получением соединения 15А.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 8,52 (d, J=1,88 Гц, 1H), 8,17-8,35 (m, 2Н), 7,76 (d, J=3,76 Гц, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,74 (d, J=3,64 Гц, 1H), 1,72 (s, 9Н), 1,59 (s, 7Н).

Соединение 15В

Кроме замены соединения 15А соединением 7-нитрохинолина, соединение 15В получали в соответствии со способом получения соединения 7А.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,58 (s, 13Н), 3,41 (s, 1H), 3,52 (br s, 2H), 6,32 (d, J=3,67 Гц, 1H), 6,64 (dd, J=8,68, 2,20 Гц, 1H), 6,77 (d, J=2,20 Гц, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,36-7,51 (m, 1H), 7,74-7,93 (m, 1H).

Соединение 15С

Кроме замены соединения 15В соединением 1А, соединение 15С получали в соответствии со способом получения соединения 1B.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,58 (s, 9Н), 6,34 (d, J=3,67 Гц, 1H), 6,69 (d, J=8,68 Гц, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,43-7,56 (m, 1H), 7,83 (br d, J=8,44 Гц, 1H).

Соединение 15D

Кроме замены соединения 1В соединением 15С, соединение 15D получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

1Н ЯМР (400 МГц, m) δ ppm 1,57 (s, 9Н), 2,88 (s, 3Н), 3,01 (s, 3Н), 6,47-6,56 (m, 1H), 6,59 (d, J=3,91 Гц, 1H), 6,75 (dd, J=9,05, 4,16 Гц, 4Н).

- 27 040849

Кроме замены соединения 1С соединением 15D, соединение 15Е получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

Соединение 15F

Соединение 15Е

Соединение 15Е (1,5 г, 3,29 ммоль) растворяли в 20 мл DCM и к полученному добавляли TFA (3,76 г, 32,9 ммоль, 2,44 мл). Реакцию проводили при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершения реакции органическую фазу концентрировали и очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 15F.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 11,88 (s, 1H), 8,45 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,65 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 2,07 (s, 3Н), 2,03 (s, 3Н).

Соединение 15G

Гидрид натрия (59,9 мг, 1,49 ммоль, чистота 60%) и метилиодид (211 мг, 1,49 ммоль, 92,9 мкл) добавляли к раствору соединения 15F (0,53 г, 1,49 ммоль) в DMF (10 мл) и раствор охлаждали до температуры 0°С и обеспечивали протекание реакции в течение 1 ч. После завершения реакции ее гасили с помощью добавления воды, экстрагировали с помощью этилацетата и органическую фазу промывали насыщенным раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия, концентрировали и очищали с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с получением соединения 15G.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 8,52-8,49 (m, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,61-7,59 (m, 1H), 7,20 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 3,87 (s, 3Н), 2,03 (s, 3Н), 1,99 (s, 3Н).

Соединение 15

Кроме замены соединения 1D соединением 15G и замены соединения 1F соединением 2В, соединение 15 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 11,31 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,41 (dd, J=9,16, 3,76 Гц, 1H), 7,51 (d, J=9,29 Гц, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,34 (d, J=3,01 Гц, 1H), 3,86 (m, 8Н), 3,72 (s, 3Н), 2,76 (m, 7Н), 2,11 (s, 3Н), 2,03-1,98 (m, 9Н).

Пример 16. Соединение 16А

Кроме замены соединения 1А соединением 2,3-дигидро-1H-инден-5-амина, соединение 16А получали в соответствии со способом получения соединения 1B.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,26 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,01 (d, J=8,0 Гц, 1H), 2,96-2,96 (m, 4H), 2,76-2,73 (m, 2H).

- 28 040849

Соединение 16В

Кроме замены соединения 1B соединением 16А, соединение 16В получали в соответствии со способом получения соединения 1С. Кроме замены соединения 1В соединением 16А, соединение 16В получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

‘H-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=7,11 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,47 (d, J=8,0 Гц, 1H), 2,84-2,76 (m, 4Н), 2,082,06 (m, 2Н), 1,84 (s, 3Н), 1,81 (s, 3Н).

Соединение 16С

Кроме замены соединения 1С соединением 16В, соединение 16С получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=12,18 (s, 1H), 8,41 (dd, J=3,9, 8,4 Гц, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,47 (d, J=7,8 Гц, 1H), 2,93 (t, J=7,4 Гц, 4Н), 2,15 (q, J=7,3 Гц, 2Н), 1,93 (s, 3Н), 1.89 (s, 3Н).

Соединение 16

Кроме замены соединения 1D соединением 16С и замены соединения 1F соединением 2В, соединение 16 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=11,50 (s, 1H), 8,33 (br s, 1H), 8,09 (br dd, J=3,2, 8,1 Гц, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,26 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,68 (s, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,45 (br s, 3H), 2,97 (br t, J=7,1 Гц, 2H), 2,80 (br t, J=7,3 Гц, 2H), 2,73 (br s, 4H), 2,56-2,52 (m, 4H), 2,07 (s, 3H), 2,05-1,97 (m, 2H), 1,87 (br s, 4H), 1,80 (s, 3H), 1,76 (s, 3H).

Пример 17. Соединение 17A

Кроме замены соединения 2,4,5-трихлорпиримидина соединением

2,4-дихлор-5-метоксипиримидина и замены соединения 1С соединением 4В, соединение 17 получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 12,78 (s, 1H), 8,65-9,42 (m, 1H), 8,02 (d, J=9,29 Гц, 1H), 7,68 (d, J=8,56 Гц, 1H), 7,49-7,57 (m, 1H), 7,40-7,46 (m, 1H), 7,31-7,39 (m, 1H), 7,36 (s, 1H), 2,50 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 2,06 (s, 3Н).

Соединение 17В

Соединение 17А (0,94 г, 2,60 ммоль) растворяли в 25 мл DCE и добавляли BBr₃ (6,51 г, 25,9 ммоль, 2,50 мл). После продувки газообразным азотом 3-5 раз, смесь перемешивали при комнатной температуре, составляющей приблизительно 25°С, в течение 2 ч и перемешивали при 80°С в течение 1 ч. Реакционный раствор охлаждали до 0°С и доводили pH до 7-8 с помощью добавления насыщенного раствора NaHCO₃. После фильтрации фильтрат экстрагировали DCM и органическую фазу высушивали и концентрировали с получением соединения 17В.

Ή ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 2,05 (s, 3Н), 2,08 (s, 3Н), 6,54 (s, 1H), 7,47-7,53 (m, 1H), 7,60 (ddd, J=8,50, 6,91, 1,47 Гц, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,92-8,04 (m, 2Н), 8,13 (d, J=9,54 Гц, 1H), 8,64 (dd, J=9,41, 3,55 Гц, 1H), 12,73 (br s, 1H). LCMS (ESI): масса/заряд: 348,0 [M+1].

- 29 040849

Соединение 17С

Соединение 17В (0,2 г, 575 мкмоль) и Ν,Ν-диметилкарбамоилхлорид (92,7 мг, 862 мкмоль, 79,3 мкл) растворяли в 4 мл DMF, добавляли K₂CO₃ (158 мг, 1,15 ммоль) и перемешивали при 25°С в течение 2 ч. После завершения реакции реакционный раствор разбавляли EtOAc и промывали дважды с помощью насыщенного солевого раствора и органическую фазу высушивали и концентрировали с получением соединения 17С.

1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ ppm 2,13 (d, J=13,05 Гц, 6H), 3,07 (s, 3Н), 3,28 (s, 3Н), 7,46 (t, J=7,03 Гц, 1H), 7,51-7,57 (m, 1H), 7,69 (d, J=8,78 Гц, 1H), 7,88 (d, J=8,03 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,29 Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,80 (dd, J=9,16, 3,89 Гц, 1H), 12,87 (s, 1H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 419,0 [M+1].

Соединение 17

Кроме замены соединения 1D соединением 7С и замены соединения 1F соединением 2В, соединение 17 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

‘Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,85 (br s, 4Н), 2,03 (s, 3Н), 2,07 (br d, J=10,03 Гц, 6 Н), 2,40 (s, 3Н), 2,75 (br s, 4Н), 2,92 (s, 3Н), 3,12-3,18 (m, 4Н), 3,22 (s, 4Н), 3,80 (s, 3Н), 6,71 (s, 1H), 7,43-7,51 (m, 1H), 7,52-7,66 (m, 2Н), 7,80 (s, 1H), 7,86-8,03 (m, 4Н), 8,33 (s, 1H), 8,71 (br d, J=5,87 Гц, 1H), 12,52 (s, 1H). LCMS (ESI): масса/заряд: 658,1 [M+1].

Пример 18. Соединение 18А

Соединения 4-метокси-3-нитрофенола (1,25 г, 7,39 ммоль) и 2-бром-1,1-диметоксиэтана (1,60 г, 8,13 ммоль) растворяли в DMF (15 мл) и добавляли K₂CO₃ (1,12 г, 8,13 ммоль) и смесь перемешивали при 100°С в течение 4 ч. Реакцию гасили с помощью добавления 10 мл воды и экстрагировали три раза с помощью 100 мл этилацетата. Органические фазы объединяли, промывали дважды с помощью насыщенно го солевого раствора, высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта.

‘Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,28-1,25 (m, 6Н), 3,78-3,65 (m, 4Н), 3,92 (s, 3Н), 4,02-4,00 (m, 2Н), 4,85 (m, 1H), 7,28-7,15 (m, 1H), 7,03 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,46 (s, 1H).

Соединение 18В

Соединение 18А (1,95 г, 6,88 ммоль) растворяли в THF (30 мл) и добавляли раствор хлористоводородной кислоты (0,5 М, 223,80 мл) с последующим перемешиванием при 70°С в течение 12 ч. Реакцию гасили с помощью добавления 10 мл воды и экстрагировали три раза с помощью 100 мл этилацетата. Органические фазы объединяли, промывали дважды с помощью насыщенного солевого раствора, высушивали и концентрировали с получением соединения 18В.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm: 3,95 (s, 3Н), 4,65 (s, 2Н), 7,09 (m, 1H), 7,25 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,46 (s, 1H), 9,86 (s, 1Н).

- 30 040849

Соединение 18С

При 25°С соединение 18В (200 мг, 947 мкмоль) растворяли в 10 мл перемешанного раствора DCE с последующим последовательным добавлением пиразин-2-илметиламина (206 мг, 1,89 ммоль), уксусной кислоты (113 мг, 1,89 ммоль, 108 мкл) и ацетата борогидрида натрия (602 мг, 2,84 ммоль) и перемешиванием при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции насыщенный водный раствор NaHCO₃ добавляли к реакционному раствору с доведением pH до приблизительно 9 и экстрагировали три раза с помощью DCM. Органическую фазу высушивали над безводным Na₂SO₄, концентрировали и очищали с помощью тонкослойной хроматографии с получением соединения 18С.

¹И-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 8,64 (s, 1H), 8,38-8,40 (m, 3Н), 7,24-7,42 (m, 1H), 6,93-7,21 (m, 2Н), 4,03-4,30 (m, 4Н), 3,91 (s, 3Н), 3,01-3,18 (m, 2Н).

Соединение 18D

Кроме замены соединения 1E соединением 18С, соединение 18D получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ ppm 8,67 (s, 1H), 8,54-8,57 (m, 1H), 8,49 (d, J=2,38 Гц, 1H), 6,70 (d, J=8,78 Гц, 1H), 6,37 (d, J=2,89 Гц, 1H), 6,27 (dd, J=8,78, 2,89 Гц, 1H), 4,03-4,10 (m, 4Н), 3,82 (s, 3Н), 3,06 (t, J=5,21 Гц, 2Н).

Соединение 18

Кроме замены соединения 1F соединением 18D и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 18 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm 2,05-2,19 (m, 7Н), 2,79 (br s, 2H), 3,61-3,75 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 4,04 (s, 2H), 6,54 (dd, J=8,80, 2,81 Гц, 1H), 6,88 (d, J=8,93 Гц, 1H), 7,48-7,54 (m, 1H), 7,60 (br t, J=7,70 Гц, 1H), 7,82 (d, J=2,69 Гц, 1H), 7,93 (br d, J=7,95 Гц, 1H), 8,03 (d, J=9,05 Гц, 1H), 8,11-8,22 (m, 2H), 8,31 (dd, J=9,05, 3,91 Гц, 1H), 8,44-8,67 (m, 4H).

Пример 19. Соединение 19A

Кроме замены соединения пиразин-2-илметиламина соединением пиридин-3-илметиламина, соединение 19А получали в соответствии со способом получения соединения 18А.

- 31 040849

Соединение 19В

Кроме замены соединения 1E соединением 19А, соединение 19В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 19

Кроме замены соединения 1F соединением 19В и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 19 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,60-8,42 (m, 3Н), 8,29 (dd, J=3,9, 9,0 Гц, 1H), 8,21 (d, J=8,2 Гц, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,0 Гц, 1H), 7,94 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,85-7,79 (m, 2Н), 7,62 (ddd, J=1,5, 6,9, 8,5 Гц, 1H), 7,53 (t, J=7,5 Гц, 1H), 7,48-7,43 (m, 1H), 6,89 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,54 (dd, J=3,2, 8,8 Гц, 1H), 3,89-3,84 (m, 5 Н), 3,74-3,55 (m, 2Н), 2,67 (br t, J=5,0 Гц, 2Н), 2,19-2,06 (m, 7Н).

Пример 20. Соединение 20А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-2-метил-4-нитробензола и трет-бутил 2,7диазаспиро[3.5]онан-2-карбоксилата, соединение 20А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm: 1,48 (s, 9Н), 1,90-1,98 (m, 4Н), 2,26 (s, 3Н), 2,91-2,95 (m, 4Н), 3,73 (s, 4Н), 3,96 (s, 3Н), 6,54 (s, 1H), 7,82-7,86 (m, 1H).

Соединение 20В

Соединение 20А (2,14 г, 5,47 ммоль) растворяли в DCM (15 мл), к нему добавляли TFA (6,23 г, 54,67 ммоль, 4,05 мл) и смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 20В.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 2,05-2,09 (m, 4Н), 2,28 (s, 3Н), 2,98-3,02 (m, 4Н), 3,33 (s, 4Н), 3,94 (s, 3Н), 6,74 (s, 1H), 7,78 (s, 1H).

- 32 040849

Соединение 20С

Соединение 20В и соединение 2-хлорацетальдегида растворяли в 5 мл DCM и добавляли уксусную кислоту (43,19 мкл) и ацетат борогидрида натрия (218,2 мг, 1,03 ммоль). Реакцию проводили при 20°С в течение 2 ч. Реакцию гасили водой и экстрагировали с помощью этилацетата с получением органической фазы. Органическую фазу промывали один раз насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью пластинки для препаративной тонкослойной хроматографии с получением соединения 20С.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 7,77 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 3,93-3,95 (m, 3Н), 3,60-3,64 (m, 2Н), 3,41 (s, 4Н), 3,04 (t, J=6,15 Гц, 2H), 2,95-2,99 (m, 4Н), 2,26 (s, 3Н), 2,03 (s, 2Н), 1,97-2,00 (m, 4Н).

Соединение 20D

Соединение 20С растворяли в 5 мл EtOH и добавляли раствор диметиламина в этаноле (2 М, 10,8 мл). Смесь нагревали до 90°С и обеспечивали протекание реакции в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали с получением соединения 20D.

Соединение 20Е

Кроме замены соединения 1E соединением 20D, соединение 20Е получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm 1,94-1,97 (m, 3Н), 2,16 (s, 3Н), 2,41-2,46 (m, 6Н), 2,58-2,66 (m, 3Н), 2,67-2,79 (m, 4Н), 3,01 (t, J=6,53 Гц, 2Н), 3,50-3,56 (m, 4Н), 3,82 (s, 3Н), 6,62 (d, J=2,76 Гц, 2Н).

- 33 040849

Соединение 20

Кроме замены соединения 1F соединением 20Е и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 20 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm = 12,48 (br s, 1H), 8,38 (br d, J=5,9 Гц, 1H), 8,28 (br s, 2Н), 8,14 (s, 1H), 8,05 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 7,98-7,94 (m, 2Н), 7,91 (br d, J=10,0 Гц, 2H), 7,59 (br t, J=7,3 Гц, 1H), 7,527,47 (m, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,70 (s, 1H), 3,77-3,75 (m, 3H), 3,38 (s, 4H), 2,88 (br t, J=6,0 Гц, 2H), 2,72 (br s, 4H), 2,48-2,44 (m, 2H), 2,28 (s, 6H), 2,06 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,86 (br s, 4H).

Пример 21. Соединение 21A

Кроме замены соединения 20В соединением 1E, соединение 21А получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 21В

Кроме замены соединения 1F соединением 21А и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 21В получали согласно способу получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=12,46 (s, 1H), 8,64 (dd, J=3,5, 9,3 Гц, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,95 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,87 (br d, J=7,8 Гц, 1H), 7,74 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,56 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,50-7,44 (m, 1H), 7,41 (s, 1H), 3,87 (s, 3Н), 3,71 (s, 3Н), 2,77 (br s, 4H), 2,51 (br s, 4H), 2,19 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,01 (br s, 4H).

Соединение 21

Соединения 21В (0,1 г, 169 мкмоль) и 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфоната (392 мг, 1,69 ммоль) растворяли в 5 мл DMF, добавляли DIPEA (87,4 мг, 676 мкмоль) и нагревали до 40°С с перемешиванием в течение 2 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали, гасили с помощью добавления насыщенного солевого раствора и экстрагировали с помощью EtOAc, а органическую фазу высушивали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 21.

- 34 040849

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,79 (s, 3Н), 1,87-1,97 (m, 4Н), 2,10 (s, 3Н), 2,13 (s, 2Н), 2,66-2,85 (m, 4Н), 3,20 (q, J=9,78 Гц, 2Н), 3,84 (s, 3Н), 4,65 (br s, 5 Н), 4,78-4,85 (m, 2Н), 6,66 (s, 1H), 7,54-7,67 (m,

3Н), 7,94 (d, J=8,29 Гц, 1H), 8,01 (d, J=8,95 Гц, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,22 (dd, J=9,17, 4,03 Гц, 1H), 8,27 (d,

J=8,80 Гц, 1H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 673,0 [M+1]. Пример 22. Соединение 22А

Соединение 2,4-дихлор-7-тозил-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина и соединение 4В растворяли в 25 мл изобутанола, затем добавляли метилсульфоновую кислоту (842,54 мг, 8,77 ммоль, 624,10 мкл) и обеспечивали протекание реакции при 110°С в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали и неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 22А.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ=8,83 (br d, J=5,6 Гц, 1H), 8,20 (br d, J=9,0 Гц, 1H), 8,08 (br d, J=8,1 Гц, 1H), 8,03-7,95 (m, 3H), 7,77 (br d, J=3,7 Гц, 1H), 7,62 (br t, J=7,5 Гц, 1H), 7,55-7,47 (m, 3H), 6,82 (br d, J=2,9 Гц, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,11 (brd, J=13,2 Гц, 6H).

Соединение 22В

Соединения 22А (100 мг, 190,49 мкмоль) и 2В растворяли в перемешанном растворе 2 мл толуола и 0,4 мл трет-бутанола с последующим последовательным добавлением Pd₂(dba)₃ (17,4 мг, 19,1 мкмоль), XPhos (18,2 мг, 38,1 мкмоль) и K₂CO₃ (52,6 мг, 380 мкмоль) и перемешивали при 100°С в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду и экстрагировали три раза с помощью DCM. Органическую фазу высушивали над безводным Na₂SO₄, концентрировали и очищали с помощью тонкослойной хроматографии с получением соединения 22В.

Соединение 22

Соединение 22В растворяли в перемешанном растворе 2 мл i-PrOH и 1 мл THF и NaOH (13,0 мг, 327 мкмоль) растворяли в 2 мл воды, добавляли к перемешанному раствору, а затем обеспечивали протекание реакции при 100°С в течение 8 ч. После завершения реакции реакцию гасили с помощью добавления воды и экстрагировали с помощью EtOAc и органическую фазу концентрировали. Неочищенный продукт отделяли с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с получением соединения 22.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,86 (dd, J=4,1, 9,2 Гц, 1H), 8,16 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,01 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,91 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,73 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,62 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,52-7,46 (m, 1H), 7,25 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6,94 (d, J=3,5 Гц, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,55 (d, J=3,5 Гц, 1H), 3,89 (s, 3Н), 3,67 (s, 4Н), 2,84-2,78 (m, 4Н), 2,73 (s, 3Н), 2,18 (s, 3Н), 2,15 (s, 3Н), 2,05 (s, 3Н), 2,01-1,96 (m, 4Н).

Пример 23. Соединение 23А

- 35 040849

Соединение 5-бром-2,4-дихлор-пиримидина (1,04 г, 4,56 ммоль) и соединение 4В (0,5 г, 2,28 ммоль, экв.) растворяли в этаноле (10 мл) и добавляли DIEA (1,18 г, 9,12 ммоль, 1,59 мл). Реакционную смесь нагревали до приблизительно 90°С с перемешиванием в течение 12 ч. Затем реакционный раствор концентрировали, гасили водой и экстрагировали три раза с помощью EtOAc и органическую фазу концентрировали с получением соединения 23А.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 8,48 (dd, J=9,16, 3,89 Гц, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,05 (d, J=9,29 Гц, 1H), 7,91 (d, J=8,03 Гц, 1H), 7.73 (d, J=8.53 Гц, 1H), 7,54-7,61 (m, 1H), 7,47-7,53 (m, 1H), 2,16 (s, 3Н), 2,19 (s, 3Н).

Соединение 23

Кроме замены соединения 1D соединением 23А и замены соединения 1F соединением 2В, соединение 23 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm 1,83 (br s, 4H), 1,94 (s , 3H), 2.03 (d, J=13,20 Гц, 5H), 2,00-2,06 (m, 1H), 2,44 (br s, 3H), 2,70 (br s, 4H), 3,28 (br s, 4H), 3,77 (s, 3H), 6,68 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,47-7,53 (m, 1H), 7,54-7,62 (m, 1H), 7,87-7,97 (m, 3H), 8,06 (d, J=8,80 Гц, 1H), 8,18-8,24 (m, 2H), 8,37 (br s, 1H).

Пример 24. Соединение 24А

Соединение 23 (0,1 г, 153 мкмоль) и трибутил(1-этоксивинил)станнан (111 мг, 307 мкмоль) растворяли в 3 мл толуола и последовательно добавляли Pd(PPh₃)₂Cl₂ (10,8 мг, 15,4 мкмоль), CuBr (6,63 мг, 46,2 мкмоль, 1,41 мкл) и PPh₃ (12,1 мг, 46,2 мкмоль) по частям. Смесь перемешивали при 110°С в защитной атмосфере газообразного азота в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор гасили с помощью добавления раствора KF и экстрагировали три раза с помощью EtOAc. Органическую фазу высушивали над безводным Na₂SO₄, концентрировали и очищали с помощью тонкослойной хроматографии с получением соединения 24А.

Соединение 24

Соединение 24А растворяли в HCl/диоксане (4 М, 65,94 мкл) и обеспечивали протекание реакции при комнатной температуре в течение получаса. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли насыщенный раствор NaHCO₃ и доводили pH до приблизительно 9. Смесь экстрагировали три раза с помощью EtOAc и последовательно промывали с помощью воды и насыщенного солевого раствора.

Органическую фазу концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 24.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ=11,17 (s, 1H), 9,36-9,28 (m, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,28 (br d, J=13,3 Гц, 2Н), 8,06 (br d, J=9,0 Гц, 1H), 7,96 (br s, 1H), 7,57 (br dd, J=3,3, 6,3 Гц, 3H), 7,25 (br s, 1H), 6,55 (br s, 1H),

- 36 040849

3,74 (s, 3H), 3,31 (br s, 3H), 2,55 (m, 4H), 2,53-2,52 (m, 6H), 2,47 (br s, 4H), 1,81 (brs, 4H), 1,79-1,75 (m, 6H).

Пример 25. Соединение 25

Соединение 24 (0,1 г, 153 мкмоль) и циклопропилбороновую кислоту (52,9 мг, 615 мкмоль) растворяли в перемешанном растворе 5 мл толуола и 0,5 мл воды и последовательно добавляли Pd(OAc)₂ (3,46 мг, 15,4 мкмоль), K₃PO₄ (81,7 мг, 384 мкмоль) и P(Cy)₃ (8,63 мг, 30,8 мкмоль, 9,98 мкл). Реакционный раствор нагревали до 110°С и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и концентрировали, а неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 25.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm 0,55-0,66 (m, 2Н), 0,85-0,96 (m, 2Н), 1,71-1,78 (m, 1H), 1,83 (br s, 4H), 1,96-2,01 (m, 3 H), 2,03 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,45 (br s, 3H), 2,70 (br s, 5H), 3,30 (br d, J=7,09 Гц, 4H), 3,79 (s, 3H), 6,67 (s, 1H), 7,44-7,53 (m, 2H), 7,57 (br t, J=7,58 Гц, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,91 (br d, J=8,07 Гц, 1H), 7,96 (d, J=9,17 Гц, 1H), 8,03 (d, J=8,56 Гц, 1H), 8,37 (br s, 1H), 8,56 (dd, J=9,17, 3,55 Гц, 1H), 12,25 (s, 1H). LCMS (ESI): масса/заряд: 611,2 [M+1].

Пример 26. Соединение 26

Соединение 24 (0,1 г, 153 мкмоль) растворяли в 5 мл DMF и последовательно добавляли цинковую пыль (5,03 мг, 76,9 мкмоль), Pd₂(dba)₃ (28,2 мг, 30,7 мкмоль), DPPF (17,1 мг, 30,8 мкмоль) и Zn(CN)₂ (36,1мг, 307 мкмоль, 19,5 мкл). Реакционный раствор нагревали до 120°С и дополнительно перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и концентрировали, а неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 26.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm 1,83 (br s, 4H), 2,04 (br d, J=13,20 Гц, 8Н), 1,91-2,12 (m, 1H), 2,40 (br s, 3H), 2,73 (br s, 4H), 3,21 (br s, 4H), 3,76 (s, 3H), 6,70 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,48-7,54 (m, 1H), 7,54-7,61 (m, 1H), 7,88 (br s, 2H), 8,10 (br d, J=8,31 Гц, 1H), 8,33 (br s, 2H), 8,46 (s, 1H), 8,78 (br s, 1H). LCMS (ESI): масса/заряд: 596,2 [M+1].

Пример 27. Соединение 27А

Соединение 24 (0,1 г, 153 мкмоль) растворяли в 5 мл EtOH и последовательно добавляли Pd(dppf)Cl₂ (11,3 мг, 15,40 мкмоль) и Et₃N (46,7 мг, 461 мкмоль, 64,2 мкл). Обеспечивали протекание реакции в реакционном растворе при 80°С в течение 24 ч в атмосфере монооксида углерода (50 фунтов/кв.дюйм). После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и концентрировали, а неочищенный продукт очищали с помощью препаративной TLC с получением соединения 27А.

- 37 040849

Соединение 27В

Соединение 27А (60 мг, 93,3 мкмоль) растворяли в 2 мл EtOH и к полученному добавляли N₂H₄-H₂O (95,4 мг, 1,87 ммоль, 92,6 мкл). Реакционный раствор нагревали до 100°С и дополнительно перемешивали в течение 6 ч. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и концентрировали и получали соединение 27В без дополнительной очистки.

Соединение 27

Соединение 27В (30 мг, 47,7 мкмоль) и НОАс (210 мг, 3,50 ммоль) растворяли в 2 мл триэтилортоацетата. Реакционный раствор нагревали до 120°С и дополнительно перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции реакционный раствор фильтровали и концентрировали, а неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC с получением соединения 27.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=9,17 (br d, J=6,5 Гц, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,55 (br s, 1H), 8,16 (br d, J=8,5 Гц, 1H), 8,02 (br d, J=7,3 Гц, 1H), 7,69-7,60 (m, 3Н), 7,42 (br s, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,64 (br s, 4Н), 3,83 (br s, 3H), 2,85 (br s, 3H), 2,66 (br s, 6H), 1,97 (br d, J=13,1 Гц, 6H), 1,92 (br s, 4H), 1,30 (br s, 4H).

Пример 28. Соединение 28А

Кроме замены соединения пиразин-2-илметиламина соединением пиперазин-2-она, соединение 28А получали в соответствии со способом получения соединения 18А.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 7,44 (d, J=2,89 Гц, 1H), 7,23-7,34 (m, 1H), 7,16 (dd, J=9,16, 3,01 Гц, 1H), 4,13 (t, J=5,21 Гц, 2Н), 3,95 (s, 3Н), 3,37-3,49 (m, 2Н), 3,33 (s, 2Н), 2,92 (t, J=5,27 Гц, 2Н), 2,84 (br t, J=5,27 Гц, 2H).

Соединение 28В:

Кроме замены соединения 1E соединением 28А, соединение 28В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 2,85 (dt, J=15,50, 5,36 Гц, 4Н) 3,31 (s, 2Н) 3,35-3,51 (m, 2Н) 3,82 (s, 3Н) 3,89-4,17 (m, 2Н), 6,36 (d, J=2,89 Гц, 1H), 6,70 (d, J=8,66 Гц, 1H), 7,29 (s, 1H).

- 38 040849

Соединение 28

Кроме замены соединения 1F соединением 28В и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 28 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm 2,18 (s, 3Н), 2,21 (s, 3Н), 3,45 (br s, 2H), 3,53-3,73 (m, 4H), 3,82 (br s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,97-4,24 (m, 2H), 6,99 (br d, J=8,44 Гц, 1H), 7,11 (d, J=8,98 Гц, 1H), 7,31 (br s, 1H), 7,65-7,78 (m, 2H), 8,08 (br d, J=8,19 Гц, 2H), 8,15-8,33 (m, 3H).

Пример 29. Соединение 29А

Кроме замены соединения пиразин-2-илметиламина соединением метансульфонамида, соединение 29А получали в соответствии со способом получения соединения 18А.

Соединение 29В

Кроме замены соединения 1E соединением 29А, соединение 29В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 29

Кроме замены соединения 1F соединением 29В и замены соединения 1D соединением 4С соединение 29 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 2,18 (s, 3Н), 2,21 (s, 3Н), 3,45 (br s, 2H), 3,53-3,73 (m, 4H), 3,82 (br s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,97-4,24 (m, 2H), 6,99 (br d, J=8,44 Гц, 1H), 7,11 (d, J=8,98 Гц, 1H), 7,31 (br s, 1H), 7,65-7,78 (m, 2H), 8,08 (br d, J=8,19 Гц, 2H), 8,15-8,33 (m, 3H).

Пример 30. Соединение 30A

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9- 39 040849 диазаспиро[5.5]ундекана соединением 20В и соединением 2-хлорэтанола, соединение 30А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Соединение 30В

Кроме замены соединения 1E соединением 30А, соединение 30В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 30

Кроме замены соединения 1F соединением 30В и замены соединения 1D соединением 4С, соединение 30 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,78 (s, 3Н), 1,95-2,06 (m, 4Н), 2,09 (s, 3Н), 2,13 (s, 3Н), 2,71-2,83 (m, 4Н), 3,24-3,31 (m, 1H), 3,71-3,81 (m, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,88-3,96 (m, 4Н), 4,58-4,86 (m, 7Н), 6,67 (s, 1H), 7,53-7,59 (m, 1H), 7,61-7,68 (m, 2Н), 7,94 (d, J=8,07 Гц, 1H), 8,02 (d, J=9,17 Гц, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,21 (dd, J=9,05, 3,91 Гц, 1H), 8,30 (br d, J=8,93 Гц, 1H), 8,55 (s, 1H).

Пример 31. Соединение 31А

Соединение 20В (200 мг, 686 мкмоль) и ацетон (199 мг, 3,43 ммоль, 252,34 мкл) растворяли в 4 мл метанола, добавляли уксусную кислоту (82,4 мг, 1,37 ммоль, 78,52 мкл) и перемешивали при 25°С в течение 1 ч. Реакционный раствор охлаждали, добавляли NaBH₃CN (86,2 мг, 1,37 ммоль) и перемешивали при 0°С в течение 1 ч. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали, добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали три раза с помощью DCM. Органическую фазу высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали с получением соединения 31А.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,15 (d, J=6,27 Гц, 6H), 1,99-2,03 (m, 5 Н), 2,25 (s, 4Н), 2,91-2,97 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 3Н), 3,44 (s, 3Н), 3,96 (s, 3Н), 6,55-6,56 (m, 1H), 7,83 (s, 1H). LCMS (ESI): масса/заряд: 334,1 [M+1].

- 40 040849

Соединение 31В

Кроме замены соединения 1E соединением 31А, соединение 31В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,33 (d, J=6,60 Гц, 5Н), 1,82 (br d, J=7,34 Гц, 4H), 2,07 (s, 3Н), 2,25 (br s, 1H), 2,72 (br s, 4H), 3,28-3,53 (m, 4H), 3,74 (s, 3H), 4,00-4,14 (m, 2H), 6,42 (s, 1H), 7,96 (s, 1H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 304,1 [M+1]

Соединение 31

Кроме замены соединения 1F соединением 32В, соединение 31 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ ppm 1,23 (d, J=6,60 Гц, 6H) 1,66 (s, 2Н) 1,70 (s, 1H) 1,93 (s, 3Н) 1,96 (s, 7Н) 2,75 (br s, 4H) 4,58 (s, 8Н) 6,64 (s, 1H) 7,48 (s, 1H) 7,87 (d, J=5,38 Гц, 2H) 8,07-8,17 (m, 3Н) 8,55 (s, 1H). LC-MS (ESI): масса/заряд: 639,1 [M+1].

Пример 32. Соединение 32А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-бром-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 2-метил-2,7диазаспиро[3.5]нонана, соединение 32А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDClj) δ ppm 2,44 (s, 3Н), 3,15-3,22 (m, 4Н), 3,19 (s, 8Н), 3,98 (s, 3Н), 6,57 (s, 1H), 8,23 (s, 1H).

Соединение 32В

Кроме замены соединения 23 соединением 32А и замены соединения трибутил(1этоксивинил)станнана соединением трибутил(винил)станнана, соединение 32В получали в соответствии со способом получения соединения 24А.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 1,27 (s, 2Н), 1,80-2,01 (m, 4Н), 2,39 (s, 3Н), 2,91 (s, 2Н), 2,96-3,03 (m, 4Н), 3,51 (s, 1H), 3,93-4,04 (m, 3Н), 5,27-5,35 (m, 1H), 5,71 (d, J=17,69 Гц, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,72 (dd, J=17,63, 10,98 Гц, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,12 (s, 1H).

- 41 040849

Соединение 32С

Кроме замены соединения 49А соединением 32В, соединение 32С получали в соответствии со способом получения соединения 49В.

Соединение 32

Кроме замены соединения 1F соединением 32С и замены соединения 1D соединением 23А, соединение 32 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 0,58-0,55 (m, 3Н) 1,93-2,07 (m, 4Н) 2,11-2,05 (s, 9Н) 2,74-2,71 (m, 4Н) 2,76 (s, 3H), 3,86 (d, J=2,89 Гц, 8Н), 7,19 (d, J=3,14 Гц, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,51 (d, J=9,29 Гц, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,41 (dd, J=9,16, 3,76 Гц, 1H), 8,59 (s, 1H), 11,31 (s, 1H).

Пример 33. Соединение 33

Кроме замены соединения 1D соединением 23А и замены соединения 1F соединением 31В, соединение 33 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,22 (d, J=6,36 Гц, 6H) 1,70 (s, 3Н) 1,89-2,02 (m, 4Н) 2,10 (d, J=13,45 Гц, 6 Н) 2,76 (br s, 4Н) 3,85 (s, 3Н) 4,64 (s, 4Н) 6,65 (s, 1H) 7,55-7,60 (m, 2Н) 7,61-7,69 (m, 1H) 7,96 (d, J=8,31 Гц, 1H) 8,02-8,10 (m, 2Н) 8,19 (s, 1H) 8,38 (d, J=8,80 Гц, 1H) 8,56 (s, 1H). LCMS (ESI) масса/заряд: 677,0 [M+1].

Пример 34. Соединение 34А

Кроме замены соединения 2,4,5-трихлорпиримидина соединением 5-бром-2,4-дихлорпиримидина, соединение 34А получали в соответствии со способом получения соединения 8Е.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 2,17 (s, 3Н), 2,21 (s, 3Н), 8,28 (d, J=9,54 Гц, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,87 (d, J=2,01 Гц, 1H), 8,90 (d, J=2,01 Гц, 1H), 9,04 (dd, J=9,41, 4,14 Гц, 1H).

- 42 040849

Соединение 34В.

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 2-фтор-4-метокси-5-нитротолуола и 3В, соединение 34В получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3-d) δ=7,74 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 3,86 (s, 3Н), 3,27 (br d, J=12,2 Гц, 2H), 2,712,52 (m, 10 Н), 2,44 (br s, 1H), 2,37-2,29 (m, 1H), 2,68-2,27 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,92 (br d, J=12,2 Гц, 2H), 1,73-1,59 (m, 2H).

Соединение 34С

Кроме замены соединения 1E соединением 34В, соединение 34С получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃-d) δ=6,57 (d, J=5,0 Гц, 2Н), 3,87-3,80 (m, 3Н), 3,08 (br d, J=12,0 Гц, 2H), 2,84-2,41 (m, 11Н), 2,38-2,27 (m, 5 Н), 2,21-2,13 (m, 3Н), 1,97-1,87 (m, 2Н), 1,76-1,61 (m, 2Н).

Соединение 34

Кроме замены соединения 1F соединением 34С и замены соединения 1D соединением 34А, соединение 34 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,64-1,82 (m, 2Н), 2,09 (s, 3Н), 2,14 (s, 3Н), 2,18 (s, 3Н), 2,43 (s, 3Н), 2,50 (br t, J=11,43 Гц, 2H), 2,72 (br t, J=11,13 Гц, 6H), 2,82 (br s, 3H), 3,15-3,25 (m, 2H), 3,37 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 6,76 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,99 (d, J=9,41 Гц, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,55 (br s, 1H), 8,83 (dd, J=17,12, 1,83 Гц, 2H), 8,97 (dd, J=9,48, 4,10 Гц, 1Н).

Пример 35. Соединение 35

Кроме замены соединения 1F соединением 3D и замены соединения 1D соединением 16С, соединение 35 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

- 43 040849

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,71 (br dd, J=12,05, 3,26 Гц, 2H), 1,82 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,982,12 (m, 3H), 2,17 (quin, J=7,34 Гц, 2H), 2,61 (s, 3H), 2,72 (br t, J=11,54 Гц, 3 Н), 2,94-2,98 (m, 10Н), 3,15 (br t, J=7,15 Гц, 3H), 3,68 (br d, J=12,55 Гц, 2H), 3,86 (s, 3H), 6,34 (dd, J=8,91, 2,13 Гц, 1H), 6,65 (d, J=2,26 Гц,

1H), 7,43 (d, J=8,03 Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,78 Гц, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,52 (br s, 1H).

Пример 36. Соединение 36

Кроме замены соединения 1F соединением 2В и замены соединения 1D соединением 34 А, соединение 36 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 2,00-2,05 (m, 4Н), 2,08 (s, 3Н), 2,14 (s, 3Н), 2,17 (s, 3Н), 2,85 (s, 7Н), 2,80-2,84 (m, 2Н), 3,85 (d, J=4,65 Гц, 5H), 3,80-3,88 (m, 1H), 3,85-3,87 (m, 1H), 6,73 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,98 (d, J=9,54 Гц, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,83 (dd, J=18,95, 1,71 Гц, 2H), 8,95 (dd, J=9,48, 4,10 Гц, 1H).

Пример 37. Соединение 37

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 20С, соединение 37 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ ppm 1,99-2,03 (m, 4Н), 2,06 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,16 (s, 3Н), 2,54 (s, 6 Н), 2,77-2,80 (m, 2Н), 2,82 (br d, J=6,53 Гц, 4H), 3,17 (t, J=6,02 Гц, 2H), 3,71 (s, 4H), 3,84 (s, 4H), 6,70 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,95 (br d, J=9,54 Гц, 1H), 8,19 (d, J=1,51 Гц, 1H), 8,54 (br s, 1H), 8,79 (d, J=1,26 Гц, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,92 (br dd, J=9,16, 3,39 Гц, 1H).

Пример 38. Соединение 38A

Кроме замены соединения 2,4,5-трихлорпиримидина соединением 5-бром-2,4-дихлорпиримидина и замены соединения 1С соединением 16В, соединение 38А получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,89 (s, 2Н), 1,89-1,89 (m, 1H), 1,92 (s, 3Н), 2,12-2,20 (m, 2Н), 2,95 (t, J=7,34 Гц, 2H), 3,08-3,16 (m, 2Н), 7,49 (d, J=8,07 Гц, 1H), 7,96 (d, J=3,91 Гц, 1H), 8,37 (s, 1H).

Соединение 38

- 44 040849

Кроме замены соединения 1F соединением 3D и замены соединения 1D соединением 38 А, соединение 38 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ ppm 1,66-1,76 (m, 2Н), 1,82 (d, J=13,30 Гц, 6 Н), 2,04 (br d, J=11,80 Гц, 2H), 2,17 (quin, J=7,40 Гц, 2H), 2,63 (s, 4Н), 2,70 (br t, J=11,80 Гц, 2H), 2,97 (br t, J=7,28 Гц, 12 H), 3,17 (br t, J=7,28 Гц, 2H), 3,67 (br d, J=12,30 Гц, 2H), 3,85 (s, 3H), 6,29 (dd, J=8,78, 2,01 Гц, 1H), 6,63 (d, J=2,26 Гц, 1H), 7,44 (d, J=8,28 Гц, 1H), 7,57 (d, J=8,78 Гц, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,52 (br s, 1H).

Пример 39. Соединение 39

Кроме замены соединения 10Е соединением 4С, соединение 39 получали в соответствии со способом получения соединения 20.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=9,11 (dd, J=9,54, 4,27 Гц, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,98 (d, J=9,54 Гц, 1H), 7,63 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,55 (s, 4Н), 3,03 (t, J=6,53 Гц, 2Н), 2,82-2,88 (m, 4Н), 2,65 (t, J=6,65 Гц, 2Н), 2,46 (s, 6 Н), 2,17 (s, 3Н), 2,12-2,15 (m, 1H), 2,13 (d, J=3,51 Гц, 5 Н), 1,98-2,03 (m, 4Н).

Пример 40. Соединение 40

Кроме замены соединения 1F соединением 32В и замены соединения 1D соединением 34А, соединение 40 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 0,86 (br t, J=7,34 Гц, 3H), 1,22-1,28 (m, 2H), 2,03 (s, 4H), 2,14 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,51 (q, J=7,46 Гц, 2H), 2,85 (br s, 4H), 2,89 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,90 (s, 4H), 6,79 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 8,00 (d, J=9,54 Гц, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,56 (br s, 1H), 8,82 (d, J=1,83 Гц, 1H), 8,87 (d, J=1,83 Гц, 1H).

Пример 41. Соединение 41A

Кроме замены соединения 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола соединением 1-бром-2-фтор-4метокси-5-нитробензола и замены соединения 3-метил-3,9-диазаспиро[5.5]ундекана соединением 1метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина, соединение 41А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

‘H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,72-1,83 (m, 2Н), 1,98 (br d, J=12,10 Гц, 4H), 2,29 (s, 3Н), 2,64 (br d, J=4,28 Гц, 5H), 2,70-2,79 (m, 4Н), 3,61 (br d, J=12,23 Гц, 2H), 3,94 (s, 3H), 6,54-6,60 (m, 1H), 8,18-8,21 (m, 1H).

- 45 040849

Соединение 41В

Кроме замены соединения 23 соединением 41А и замены соединения трибутил(1этоксивинил)станнана соединением трибутил(винил)станнана, соединение 41В получали в соответствии со способом получения соединения 24А.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 1,26-1,42 (m, 1H), 1,27-1,41 (m, 1H), 1,66 (s, 3Н), 1,68-1,78 (m, 2Н), 1,99 (br d, J=11,86 Гц, 2H), 2,31 (s, 2Н), 2,39 (ddt, J=11,20, 7,57, 3,58, 3,58 Гц, 2H), 2,50 (br s, 2H), 2,66 (br s, 2H), 2,71-2,79 (m, 2H), 3,48 (br d, J=12,59 Гц, 2H), 3,96 (s, 3H), 5,26-5,32 (m, 1H), 5,69 (d, J=17,61 Гц, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,71 (dd, J=17,67, 10,94 Гц, 1H), 8,10 (s, 1H).

Соединение 41С

Кроме замены соединения 1E соединением 41В, соединение 41С получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 41

Кроме замены соединения 1F соединением 41С и замены соединения 1D соединением 34А, соединение 41 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,90 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,87 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,82 (br s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,05 (br d, J=9,7 Гц, 1H), 7,48 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 3,87 (s, 3Н), 3,38 (br s, 6H), 3,33 (d, J=1,7 Гц, 2Н), 3,26 (br s, 4H), 3,12-3,02 (m, 1H), 2,95 (br t, J=11,7 Гц, 2H), 2,88 (s, 3H), 2,56 (q, J=7,5 Гц, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,99-1,85 (m, 2H), 0,96 (br t, J=7,2 Гц, 3H).

Пример 42. Соединение 42А

Кроме замены соединения 1А соединением бензо[d]тиазол-5-амина, соединение 42А получали в соответствии со способом получения соединения 1B.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm 4,37 (br s, 2H), 6,91 (d, J=8,56 Гц, 1H), 7,62-7,75 (m, 1H), 9,00 (s, 1H).

Соединение 42В

Кроме замены соединения 1В соединением 42А, соединение 42В получали в соответствии со спо

- 46 040849 собом получения соединения 1С.

Соединение 42С

Кроме замены соединения 1С соединением 42В, соединение 42С получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 2,02 (s, 3Н), 2,05 (s, 3Н), 8,43 (d, J=9,16 Гц, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,67 (dd, J=9,16, 3,26 Гц, 1H), 9,53-9,60 (m, 1H), 12,82 (s, 1H).

Соединение 42

Кроме замены соединения 1D соединением 42С и замены соединения 1F соединением 3D, соединение 42 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 1,61-1,73 (m, 2Н), 2,00-2,06 (m, 1H), 2,04 (br d, J=14,43 Гц, 1H), 2,08 (s, 2H), 2,07-2,09 (m, 1H), 2,12 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,34-2,44 (m, 2H), 2,54 (br s, 4H), 2,67-2,77 (m, 4H), 3,73 (br d, J=12,47 Гц, 2H), 3,85 (s, 3H), 6,53 (dd, J=8,68, 2,32 Гц, 1H), 6,68 (d, J=2,32 Гц, 1H), 7,66 (d, J=8,68 Гц, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,08 (d, J=9,17 Гц, 1H), 8,77 (dd, J=9,17, 3,55 Гц, 1H), 9,30 (s, 1H).

Пример 43. Соединение 43

Кроме замены соединения 1D соединением 7D и замены соединения 1F соединением 3D, соединение 43 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ ppm 1,67-1,79 (m, 2Н), 2,06 (br d, J=12,10 Гц, 2H), 2,14 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,63 (s, 3H), 2,77 (br t, J=11,37 Гц, 2H), 2,95 (br s, 6H), 3,76 (br d, J=12,35 Гц, 2H), 3,86 (s, 3H), 4,60 (br s, 2H), 6,55 (dd, J=8,68, 2,45 Гц, 1H), 6,70 (d, J=2,32 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=8,13, 4,34 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,68 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,29 Гц, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,25 (br d, J=8,07 Гц, 1H), 8,45 (br s, 1H), 8,84 (dd, J=4,28, 1,59 Гц, 1H), 8,88 (dd, J=9,11, 3,73 Гц, 1H).

Пример 44. Соединение 44А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-2-метил-4-нитробензола и N,N-диметилпиперидин-4-амина, соединение 44А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=7,83 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 3,94 (s, 3Н), 3,34 (br d, J=12,5 Гц, 2Н), 2,72 (dt, J=2,0, 11,9 Гц, 2Н), 2,35 (s, 6 Н), 2,32-2,27 (m, 1H), 2,25 (s, 3Н), 1,97 (br d, J=12,5 Гц, 2H), 1,70 (dq, J=3,8, 12,0 Гц, 2H).

- 47 040849

Соединение 44В

Кроме замены соединения 1E соединением 44А, соединение 44В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=6,58 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 3,82 (s, 3Н), 3,56 (br s, 2Н), 3,08 (brd, J=12,0 Гц, 2H), 2,61 (dt, J=1,6, 11,6 Гц, 2H), 2,34 (s, 6Н), 2,30-2,20 (m, 1H), 2,18 (s, 3Н), 1,93-1,85 (m, 2Н), 1,731,64 (m, 2Н).

Соединение 44

Кроме замены соединения 1F соединением 44В и замены соединения 1D соединением 34А, соединение 44 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,93 (dd, J=4,3, 9,5 Гц, 1H), 8,83 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,79 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,95 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,60 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,16 (br d, J=11,8 Гц, 2H), 2,69 (br t, J=11,0 Гц, 2H), 2,53-2,47 (m, 1H), 2,45 (s, 6H), 2,16 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,04-1,99 (m, 2H), 1,71 (dq, J=3,8, 11,9 Гц, 2H).

Пример 45. Соединение 45А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-2-метил-4-нитробензола и 1-метилпиперазина, соединение 45А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Соединение 45В

Кроме замены соединения 1E соединением 45А, соединение 45В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 45

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 45В, соединение 45 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,97 (dd, J=4,3, 9,4 Гц, 1H), 8,86 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,82 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,55 (br s, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,01 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,78 (s, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,30-3,12 (m, 2H), 3,09-2,96 (m, 4H), 2,82 (br s, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H).

- 48 040849

Пример 46. Соединение 46А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-4-нитро-2-винилбензола и N,N-диметилпиперидин-4-амина 23А, соединение 46А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,12 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,84-6,63 (m, 1H), 6,53 (s, 1H), 5,71 (dd, J=1,0, 17,6 Гц, 1Н), 5,30 (dd, J=1,0, 11,0 Гц, 1H), 4,00-3,96 (m, 3H), 3,51 (s, 5H), 3,00 (br d, J=6,6 Гц, 1H), 2,82-2,72 (m, 2H), 2,55 (s, 1H), 2,39 (s, 6H), 2,00 (br d, J=12,5 Гц, 2H), 1,79-1,67 (m, 2H).

Соединение 46В

Кроме замены соединения 1E соединением 46А, соединение 46В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

Соединение 46

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 46В, соеди нение 46 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,84 (s, 2Н), 8,80 (br s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,96 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,69 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,22-3,08 (m, 3Н), 2,87-2,78 (m, 8Н), 2,50 (q, J=7,3 Гц, 2H), 2,16 (s, 4Н), 2,12 (s, 4Н), 2,09-1,82 (m, 2Н), 0,85 (br t, J=7,3 Гц, 3H).

Пример 47. Соединение 47А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-фтор-5-метокси-2-метил-4-нитробензола и N1,N1,N2триметилэтан-1,2-диамина, соединение 47А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,80 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 3,93 (s, 3Н), 3,23-3,16 (m, 2Н), 2,87 (s, 3Н), 2,53-2,47 (m, 2Н), 2,24 (s, 9Н).

- 49 040849

Соединение 47В

Кроме замены соединения 1E соединением 47А, соединение 47В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD₃OD-d₄) δ=6,70 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 5,00-4,78 (m, 1H), 4,91 (s, 3Н), 3,81 (s, 3Н), 3,02-2,95 (m, 2Н), 2,60 (s, 3Н), 2,46-2,40 (m, 2Н), 2,24 (s, 5Н), 2,26-2,22 (m, 1H), 2,15 (s, 3Н).

Соединение 47:

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 47В, соединение 47 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,98 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,85 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,80 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,53 (br s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 3,88 (s, 3Н), 3,26 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 3,08-2,99 (m, 2H), 2,69 (s, 9H), 2,17 (s, 3H), 2,12 (d, J=7,6 Гц, 6H).

Пример 48. Соединение 48А

Соединение 34А (100 мг, 242 мкмоль), 2,4,6-триметил-1,3,5,2,4,6-триоксатрициклогексана растворяли в воде и 1,4-диоксане, а затем добавляли Pd(dppf)Cl₂ (8,87 мг, 12,1 мкмоль) и K₂CO₃ (66,9 мг, 484 мкмоль). Реакционный раствор нагревали до температуры 110°С и перемешивали в течение 1 ч в атмосфере азота. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали, добавляли этилацетат, промывали три раза с помощью насыщенного солевого раствора, высушивали над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и очищали с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с получением соединения 48А.

Соединение 48

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 34С, соединение 48 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 9,03 (br s, 1H), 8,95 (s, 2H), 8,18 (d, J=9,41 Гц, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 3,98-4,00 (m, 1H), 3,99 (s, 2H), 3,97 (s, 1H), 3,82 (br d, J=10,51 Гц, 5H), 3,70 (br d, J=10,27 Гц, 3H), 3,27-3,37 (m, 5H), 3,09 (s, 3H), 2,48-2,65 (m, 4H), 2,36 (d, J=12,59 Гц, 6H), 2,20 (d, J=14,55 Гц, 7H).

- 50 040849

Пример 49. Соединение 49А

Соединение 34 (150 мг, 215 мкмоль, 1 экв.) и 2-изопропенил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2 диоксаборолан (72,5 мг, 431 мкмоль) добавляли к смешанному растворителю из диметилового эфира этиленгликоля и воды, затем добавляли Pd(PPh₃)₄ (24,9 мг, 21,60 мкмоль) и Na₂CO₃ (45,7 мг, 431 мкмоль) и перемешивали при 90°С в течение 6 ч в защитной атмосфере газообразного азота. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли DCM и промывали три раза водой. Органическую фазу высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт отделяли с помощью препаративной тонкослойной хроматографии с получением соединения 49А.

Соединение 49В

Соединение 49А (90 мг, 113,71 мкмоль) растворяли в MeOH (10 мл) и добавляли влажный палладий на угле (20 мг, 113,71 мкмоль, чистота 10%, содержание воды 50%). Реакционную систему продували с помощью водородного баллона и перемешивали при 20-30°С в течение 18 ч при атмосферном давлении. После завершения реакции реакционную систему фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения 49В.

Соединение 49

MnO₂ (39,4 мг, 453 мкмоль, 10 экв.) добавляли к раствору соединения 49В (30 мг, 45,33 мкмоль, 1 экв.) в толуоле и смесь перемешивали при 30°С в течение 12 ч. После завершения реакции смесь разбавляли путем добавления DCM и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт отделяли с помощью тонкослойной хроматографии с получением соединения 49.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=9,14 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,83 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,77 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,99 (d, J=9,8 Гц, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 3,87 (s, 3Н), 3,19 (br d, J=13,2 Гц, 2Н), 2,84-2,48 (m, 10Н), 2,47-2,38 (m, 1H), 2,35 (s, 3Н), 2,17 (s, 3Н), 2,14 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 2,03 (br d, J=12,0 Гц, 2Н), 1,79-1,66 (m, 2Н), l,34(d, J=6,8 Гц, 6H).

- 51 040849

Пример 50.

Соединение 50

Соединение 34 (0,1 г, 143 мкмоль, 1 экв.) и циклопропилбороновую кислоту (49,4 мг, 575,87 мкмоль, 4 экв.) добавляли к смешанному растворителю из толуола и воды и добавляли Pd(OAc)₂ (3,23 мг, 14,4 мкмоль, 0,1 экв.), трициклогексилфосфин (8,07 мг, 28,7 мкмоль, 0,2 экв.) и K₂CO₃ (76,4 мг, 359,9 мкмоль, 2,5 экв.). Смесь перемешивали при 90°С в течение 6 ч в защитной атмосфере газообразного азота. После завершения реакции реакционную систему разбавляли путем добавления DCM и промывали один раз с помощью воды, а органическую фазу высушивали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт отделяли с помощью кислотной препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением соединения 50.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=9,19 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,82 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,75 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,52 (br s, 1H), 7,96 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,18 (br d, J=11,7 Гц, 2Н), 3,02 (br s, 8Н), 2,71 (br t, J=11,7 Гц, 3H), 2,67 (s, 3H), 2,18-2,09 (m, 9H), 2,04 (br d, J=11,0 Гц, 2H), 1,83-1,71 (m, 3H), 1,08-1,01 (m, 2H), 0,66-0,60 (m, 2H).

Пример 51. Соединение 51A

Кроме замены соединения 2,4,5-трихлорпиримидина соединением 5-бром-2,4-дихлорпиримидина и замены соединения 1С соединением 42В, соединение 51А получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

Соединение 51

Кроме замены соединения 1D соединением 51А и замены соединения 1F соединением 34С, соединение 51 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 9,31 (s, 1H), 8,55 (dd, J=9,17, 3,42 Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,07 (d, J=9,17 Гц, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,31 (dt, J=3,21, 1,64 Гц, 2H), 2,63-2,98 (m, 10Н), 2,522,59 (m, 1H), 2,48 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 2,04 (s, 3Н), 2,01 (br s, 2H), 1,64-1,76 (m, 2H).

Пример 52. Соединение 52А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-бром-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и N,N-диметилпиперидин-4-амина, соединение 52А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Соединение 52В

- 52 040849

Соединение 52А (0,1 г, 279 мкмоль, 1 экв.), 2-изопропенил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (234 мг, 1,40 ммоль, 5 экв) растворяли в смешанном растворителе DME и Н₂О и добавляли Pd(PPh₃)₄ (32,2 мг, 27,9 мкмоль, 0,1 экв) и Na₂CO₃ (59,1мг, 558 мкмоль, 2 экв.). Реакционную систему продували 3 раза с помощью газообразного азота и перемешивали при 110°С в течение 12 ч в атмосфере азота. Реакционный раствор разбавляли DCM, промывали три раза водой и разделяли. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом натрия и затем фильтровали. Фильтрат выпаривали до сухого состояния с получением соединения 52В.

Соединение 52С

Кроме замены соединения 49А соединением 52В соединение 52С получали в соответствии со способом получения соединения 49В.

Соединение 52

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 52С, соединение 52 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 0,96 (d, J=6,85 Гц, 6H), 1,74-1,86 (m, 2Н), 2,10 (br d, J=12,47 Гц, 2H), 2,14 (s, 3H) 2,17 (s, 3H), 2,64 (s, 6H), 2,85 (br t, J=11,19 Гц, 3Н), 3,13 (br d, J=11,86 Гц, 3H), 3,85 (s, 3H), 6,86 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,96 (d, J=9,29 Гц, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,80 (d, J=1,83 Гц, 1H), 8,85 (d, J=1,83 Гц, 1H).

Пример 53. Соединение 53А

Кроме замены соединения 2-изопропенил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана соединением циклопропилбороновой кислоты соединение 53А получали в соответствии со способом получения соединения 52В.

Соединение 53В

Кроме замены соединения 1E соединением 53А, соединение 53В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

- 53 040849

Соединение 53

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 53В, соединение 53 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ ppm 0,28 (br d, J=3,91 Гц, 2H), 0,59 (br d, J=7,83 Гц, 2H), 1,81-1,97 (m, 2H), 2,16 (d, J=14,43 Гц, 9H), 2,78 (s, 6 Н), 2,80-2,88 (m, 2Н), 3,05 (br t, J=11,86 Гц, 1H), 3,47 (br d, J=12,23 Гц, 2H), 3,86 (s, 3H), 6,77 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,95 (d, J=9,54 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,80 (d, J=1,83 Гц, 1H), 8,86 (d, J=1,83 Гц, 1H).

Пример 54. Соединение 54А

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 1-метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина, соединение 54А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

¹H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=6,79 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,24-2,76 (m, 8Н), 2,72 (br s, 1H), 2,71-2,65 (m, 2Н), 2,02 (br d, J=10,8 Гц, 2H), 1,89-1,71 (m, 2H).

Соединение 54В

Кроме замены соединения 1E соединением 54А соединение 54В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,04 (s, 1H), 6,56 (s, 1H), 4,02-3,91 (m, 3Н), 3,65 (br d, J=12,1 Гц, 2Н), 2,81-2,73 (m, 2Н), 2,66 (br s, 4Н), 2,56-2,37 (m, 5 Н), 2,31 (s, 3Н), 1,98 (br d, J=12,2 Гц, 2H), 1,84-1,71 (m,

2H).

Соединение 54

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 11В соединение 54 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,88 (dd, J=4,2, 9,4 Гц, 1H), 8,85 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,81 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,15 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,97 (s, 1H), 6,78 (s, 1H), 3,90 (s, 3Н), 3,39 (br d, J=11,1 Гц, 2Н), 2,95-2,56 (m, 10 Н), 2,48 (br t, J=11,6 Гц, 1H), 2,41 (s, 3Н), 2,15 (d, J=14,4 Гц, 6H), 2,01 (br d, J=11,6 Гц, 2H),

- 54 040849

1,82-1,67 (m, 2H).

Пример 55. Соединение 55А

Кроме замены соединения 52А соединением 1-бром-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола соединение 55А получали в соответствии со способом получения соединения 52В.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,95 (d, J=7,9 Гц, 1H), 6,78 (d, J=12,3 Гц, 1H), 5,36-5,26 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 2,14 (s, 3H).

Соединение 55В

Кроме соответственной замены соединений 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 55А и 1-метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина соединение 55В получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

Соединение 55С

Кроме замены соединения 49А соединением 55В соединение 55С получали в соответствии со способом получения соединения 49В.

Соединение 55

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 55С соединение 55 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,83 (d, J=1,8 Гц, 2Н), 8,79 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,94 (br d, J=9,8 Гц, 1H), 7,53 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 3,83 (s, 3Н), 3,45-3,37 (m, 2Н), 3,08 (br d, J=10,9 Гц, 2H), 2,91-2,47 (m, 1H), 2,79 (br t, J=11,1 Гц, 8Н), 2,41 (br s, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,14 (d, J=14,4 Гц, 6H), 2,03 (br d, J=11,0 Гц, 2H), 1,77-1,64 (m, 2H), 1,30 (s, 2H), 0,95 (br d, J=6,8 Гц, 6H).

Пример 56. Соединение 56А

Кроме замены соединения 52А соединением 1-бром-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола соединение 56А получали в соответствии со способом получения соединения 53А.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,57 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6,76 (d, J=11,4 Гц, 1H), 3,94 (s, 3Н), 2,08-1,92 (m, 1H), 1,09-0,94 (m, 2Н), 0,81-0,65 (m, 2Н).

- 55 040849

Соединение 56В

Кроме соответственной замены соединения 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола и 3-метил-3,9диазаспиро[5.5]ундекана соединениями 56А и 1-метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина, соединение 56В получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (s, 1H), 6,57-6,48 (m, 1H), 3,94 (s, 3Н), 3,63 (br d, J=12,0 Гц, 2H), 2,83-2,45 (m, 11Н), 2,43-2,36 (m, 1H), 2,31 (s, 3Н), 2,06-1,93 (m, 4Н), 1,79-1,67 (m, 2Н), 1,34-1,21 (m, 1H), 1,07-0,94 (m, 2Н), 0,78-0,69 (m, 2Н).

Соединение 56С

Кроме замены соединения 1E соединением 56В соединение 56С получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=6,62-6,51 (m, 1H), 6,13 (s, 1H), 3,84-3,80 (m, 3Н), 3,33-3,21 (m, 2Н), 2,81-2,40 (m, 12 Н), 2,32 (s, 3Н), 1,93 (brd, J=11,5 Гц, 2Н), 1,78-1,68 (m, 2Н), 1,31-1,17 (m, 1H), 0,92-0,84 (m, 2Н), 0,67-0,53 (m, 2Н).

Соединение 56

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 56С соединение 56 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,85-8,79 (m, 2Н), 8,77 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,98-7,86 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 3,82 (s, 3Н), 3,38 (br d, J=11,7 Гц, 2H), 2,87-2,49 (m, 10 Н), 2,42 (br t, J=11,6 Гц, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,13 (d, J=14,4 Гц, 6H), 2,02 (br d, J=10,9 Гц, 2H), 1,79-1,64 (m, 2H), 1,42-1,07 (m, 2H), 0,89-0,86 (m, 2H), 0,56 (br d, J=7,8 Гц, 2H), 0,25 (br d, J=3,8 Гц, 2H).

Пример 57. Соединение 57А

Кроме замены соединения 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола соединением 1-фтор-5метокси-2-метил-4-нитробензола соединение 57А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=7,75 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 3,87 (s, 3Н), 2,93-2,85 (m, 4Н), 2,33 (br s, 4Н), 2,23 (s, 3Н), 2,16 (s, 3Н), 1,61-1,53 (m, 8H).

- 56 040849

Соединение 57В

Кроме замены соединения 1E соединением 57А соединение 57В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=6,62 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,61-3,50 (m, 2Н), 2,82-2,75 (m, 4Н), 2,41 (br s, 4Н), 2,32 (s, 3Н), 2,19 (s, 3Н), 1,65-1,60 (m, 8Н).

Соединение 57

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 57В соединение 57 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,89 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,81 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,77 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,91 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,58 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 3,83 (s, 3Н), 3,16 (br s, 4Н), 2,89-2,82 (m, 4Н), 2,81 (s, 3Н), 2,12 (d, J=14,2 Гц, 6H), 2,04 (s, 3Н), 1,84 (br s, 4H), 1,73 (br s, 4H).

Пример 58. Соединение 58А

Кроме замены соединения 1-хлор-2-фтор-4-метокси-5-нитробензола соединением 1-фтор-5метокси-4-нитро-2-винилбензола соединение 58А получали в соответствии со способом получения соединения 1E.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ=8,03 (s, 1H), 6,64 (dd, J=11,0, 17,9 Гц, 1Н), 6,45 (s, 1H), 5,61 (dd, J=1,1, 17,7 Гц, 1H), 5,19 (dd, J=1,1, 10,9 Гц, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,02-2,93 (m, 4H), 2,36-2,28 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 1,56 (td , J=5,5, 15,1 Гц, 8H).

Соединение 58В

Кроме замены соединения 49А соединением 58А соединение 58В получали в соответствии со способом получения соединения 49В.

- 57 040849

Соединение 58

Кроме замены соединения 1D соединением 34А и замены соединения 1F соединением 58В соединение 58 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,88-8,82 (m, 2Н), 8,80 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,96 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,64 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 3,85 (s, 3Н), 3,13 (br s, 4Н), 2,92-2,83 (m, 4Н), 2,79 (s, 3Н), 2,49 (q, J=7,6 Гц, 2H), 2,14 (d, J=14,4 Гц, 6H), 1,85 (br s, 4H), 1,74 (br s, 4H), 0,84 (br t, J=7,5 Гц, 3H).

Пример 59. Соединение 59

-ф -Г

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 8Е и 3D соединение 59 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

¹Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=9,08 (d, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,79 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,75 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,92 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,57 (d, J=8,7 Гц, 1H), 6,63 (d, J=2,3 Гц, 1H), 6,46 (d, J=2,3, 8,7 Гц, 1H), 3,82 (s, 3Н), 3,74-3,66 (m, 6Н), 3,70 (d, J=12,2 Гц, 2Н), 2,69 (t, J=11,6 Гц, 3Н), 2,55 (s, 1H), 2,52 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 2,00 (d, J=12,2 Гц, 2Н), 1,67 (q, J=3,7, 12,0 Гц, 2Н).

Пример 60. Соединение 60

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 34А и 3D соединение 60 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ=8,98 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,82 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,78 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,98 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,59 (d, J=8,7 Гц, 1H), 6,67 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,50 (dd, J=2,4, 8,7 Гц, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,73 (br d, J=12,7 Гц, 2Н), 2,97-2,61 (m, 10 Н), 2,60-2,52 (m, 1H), 2,49 (s, 3Н), 2,14 (s, 3Н), 2,11 (s, 3Н), 2,03 (br d , J=12,3 Гц, 2H), 1,78-1,63 (m, 2Н).

- 58 040849

Пример 61. Соединение 61

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F соединениями 8Е и 34С соединение 61 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400М Гц, CD3OD) δ=9,05 (dd, J=4,2, 9,5 Гц, 1H), 8,80 (d, J=1,7 Гц, 1H), 8,75 (d, J=1,8 Гц, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,92 (d, J=9,5 Гц, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 3,81 (s, 3Н), 3,14 (br d, J=11,7 Гц, 2Н), 3,01-2,54 (m, 11 Н), 2,52 (s, 3Н), 2,13 (s, 2Н), 2,16-2,12 (m, 1H), 2,10 (s, 3Н), 2,08 (s, 3Н), 2,00 (br d, J=11,7 Гц, 2Н), 1,79-1,65 (m, 2Н).

Пример 62. Соединение 62

Кроме замены соединения 1D соединением 8Е соединение 62 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ=12,92 (s, 1H), 9,08-8,94 (m, 1H), 8,87 (dd, J=2,0, 9,2 Гц, 2Н), 8,35 (s, 1H), 8,29-8,21 (m, 2Н), 8,04 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 3,84 (s, 3Н), 3,00-2,92 (m, 4Н), 2,562,53 (m, 4Н), 2,32 (s, 3Н), 2,06 (s, 3Н), 2,02 (s, 3Н), 1,65-1,54 (m, 8Н); LC-MS (ESI): масса/заряд: 655,0 [M+1].

Сравнительный пример 1. Сравнительное соединение 1А

Растворяли 4-нитробензол-1,2-диамин (10 г, 65,30 ммоль) в НСООН (9,03 г, 187,92 ммоль, 7,40 мл) и добавляли раствор хлористоводородной кислоты (5 М, 100,00 мл). Смесь перемешивали при 110°С в течение 15 ч. После завершения реакции реакционный раствор доводили до нейтральности с помощью 2 М раствора гидроксида натрия и осаждали большое количество твердых веществ. После фильтрации осадок на фильтре высушивали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт перекристаллизовывали из воды с получением сравнительного соединения 1А.

1H ЯМР (400 МГц, CD₃OD-d₆) δ=8,55 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,22-8,19 (m, 1H), 7,74 (d, J=8,8 Гц, 1H).

Сравнительное соединение 1В

Кроме замены соединения 1E сравнительным соединением 1А, сравнительное соединение 1В получали в соответствии со способом получения соединения 1F.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD-d6) δ=7,93 (s, 1H), 7,37 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,78-6,75 (m, 1H).

Сравнительное соединение 1С rA

Η₂νΎ^^ν

I

Сравнительное соединение 1В (7,8 г, 58,58 ммоль) растворяли в 100 мл АсОН, добавляли йод (14,87

- 59 040849 г, 58,58 ммоль) и ацетат натрия (9,61 г, 117,16 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч. После завершения реакции уксусную кислоту удаляли с помощью концентрирования при пониженном давлении и реакционную смесь доводили до pH приблизительно 9 с помощью 1 М раствора гидроксида натрия. Смесь экстрагировали с помощью дихлорметана и последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а органическую фазу собирали и высушивали. После концентрирования получали неочищенный продукт. Неочищенный продукт подвергали колоночной хроматографии с получением сравнительного соединения 1С.

1Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD-d₆) δ=8,00 (s, 1H), 7,34 (m, J=8,8 Гц, 1H), 6,84 (d, J=8,8 Гц, 1H).

Сравнительное соединение 1D

Кроме замены соединения 1В сравнительным соединением 1С и замены соединения 1F соединением 31В, сравнительное соединение 1D получали в соответствии со способом получения соединения 1С.

1Н ЯМР (400 МГц, CD₃OD-d₆) δ=7,88 (s, 1H), 7,44 (d, J=5,2 Гц, 1H), 6,61-6,58 (m, 1H), 2,03 (s, 1H), 1,99 (s, 1H).

Сравнительное соединение 1E

ЯйЛ

H

II О

Кроме замены соединения 1С сравнительным соединением 1D сравнительное соединение 1E получали в соответствии со способом получения соединения 1D.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ=12,84 (s, 1H), 12,33 (s, 1H), 8,43-8,36 (m, 3Н), 7,82 (d, J=9,6 Гц, 1Н), 2,03 (s, 3H), 1,99 (s, 3H).

Сравнительное соединение 1

Кроме соответственной замены соединений 1D и 1F сравнительным соединением 1E и соединением 3D сравнительное соединение 1 получали в соответствии со способом получения соединения 1.

1H ЯМР (400 МГц, CD3OD-d6) δ=8,50 (s, 1H), 8,36-8,08 (m, 2Н), 8,00 (s, 1H), 7,82-7,68 (m, 1H), 7,59 (br s, 1H), 6,63 (d, J=1,8 Гц, 1H), 6,24 (br s, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,66 (br d, J=11,9 Гц, 2H), 3,13-2,78 (m, 8Н), 2,76-2,56 (m, 6H), 2,01 (br d, J=14,1 Гц, 8Н), 1,80-1,59 (m, 2H).

Экспериментальный пример 1. Эксперимент в отношении ферментативной активности (1) Процедура проведения эксперимента

1. Получение соединения

1) Помещали 10 мкл соединений, подлежащих испытанию, и эталонные соединения, разбавленные до 10 мМ, в планшет Echo LDV и разбавляли их в соответствии с профилем соединения с помощью Echo.

2. Стадии реакции

1) Получали 1хбуфер для ферментативной реакции: 1хферментный буфер, 5 мМ MgCl₂, 1 мМ DTT (дитиотреитол), вода.

2) Перемешанный раствор 10 нМ фермента (конечная концентрация 5 нМ) и 2 мкМ субстрата (конечная концентрация 1 мкМ) и раствор, содержащий только субстрат, получали с разбавленным буфером для ферментативной реакции.

3) Добавляли 5 мкл субстрата в A1-H1, J24-P24 (номер положения лунки) и добавляли 5 мкл смеси фермента и субстрата в оставшиеся лунки.

4) Проводили центрифугирование при 1000 об/мин при 23°С в течение 30 с.

5) Проводили инкубирование при 23°С в течение 15 мин.

6) Добавляли 5 мкл 40 мкМ ATP (EGFR (Δ19del/T790M/C797S), конечная концентрация АТР 20 мкМ, полученного с 1 храствором ферментного буфера.

- 60 040849

7) Центрифугирование проводили при 1000 об/мин. при 23°С в течение 30 с.

8) Проводили инкубирование при 23°С в течение 60 мин.

9) Добавляли 10 мкл 250 нМ антитела ТК-криптата (конечная концентрация 125 нМ) и 1xD2 (конечная концентрация с кратностью 1/2), полученных с помощью буфера для обнаружения.

10) Проводили центрифугирование при 1000 об/мин при 23°С в течение 30 с.

11) Проводили инкубирование при 23°С в течение 60 мин.

12) Данные считывали с помощью Envision и рассчитывали соотношение с получением IC₅₀ соединения для подавления ферментативной активности.

Результаты экспериментов: IC₅₀ соединений по настоящей заявке для подавления ферментативной активности EGFR (A19del/T790M/C797S) показаны в табл. 1.

Вывод: из табл. 1 видно, что предпочтительные соединения по настоящей заявке оказывают сильные подавляющие эффекты в отношении ферментативной активности EGFR (A19del/T790M/C797S).

Экспериментальный пример 2. Эксперимент в отношении ферментативной активности (2)

1. Градиентное разбавление соединения: брали 40 мкл раствора тестового соединения (которое было разбавлено до 0,1 мМ) и эталонного соединения (при 0,1 и 0,03 мМ) соответственно и добавляли в 384-луночный планшет Echo PP. Разбавление и перенос соединений выполняли с помощью Echo от Labcyte Inc. с трехкратным градиентом концентрации, 11 точек дозы всего и 100 нл соединений на лунку. Максимальная концентрация тестовых соединений в киназных реакционных растворах составляла 1000 нМ. Максимальная концентрация эталонного соединения (кризотиниб и АР26113) в киназном реакционном растворе составляла 1000 нМ. Максимальная концентрация эталонного соединения (AZD9291) в киназном реакционном растворе составляла 300 нМ.

2. Ферментативная реакция (1) В 384-луночном тестовом планшете, за исключением лунок А1-Н1 и I24-P24 добавляли в каждую лунку 5 мкл перемешанного раствора 2xEGFR WT и пептида ТК (0,1 нМ EGFR WT, 2 мкМ ТК) или 5 мкл перемешанного раствора 2xEGFR C797S Т790М L858R и пептида TK (0.4 nM EGFR C797S/T790M/L858R, 2 мкМ ТК); добавляли 5 мкл киназного реакционного буферного раствора в лунки А1-Н1 и I24-P24 в качестве контроля 100% подавления. Планшет центрифугировали при скорости 1000 об/мин в течение 60 с. Тестовый планшет инкубировали при 23°С в течение 15 мин.

(2) В тестовый планшет добавляли 5 мкл 2храствора ATP (EGFR WT: ATP при 50 мкМ; EGFR (C797S/T790M/L858R): ATP при 20 мкМ) в каждую лунку и центрифугировали при скорости 1000 об/мин в течение 60 с.

(3) Тестовый планшет накрывали герметизирующей пленкой и инкубировали при 23°С в течение 90 мин.

(4) В тестовые планшеты добавляли 2храствор для обнаружения (4 нМ антитела ТК и 125 нМ XL665), 10 мкл на лунку, и центрифугировали при скорости 1000 об/мин в течение 60 с, и накрывали герметизирующей пленкой, полученное инкубировали при 23°С в течение 60 мин.

(5) Планшеты считывали на многоканальном детекторе Envision.

Анализ данных. Анализ данных проводили по формуле 205 с применением программного обеспечения XLfit с получением IC₅₀ соединений.

Результаты экспериментов. IC₅₀ соединений по настоящей заявке для подавления ферментативной активности EGFR (WT) и EGFR (C797S/T790M/L858R) показаны в табл. 1.

Вывод. Из табл. 1 видно, что соединения по настоящей заявке характеризуются лучшей селективностью в отношении ферментативной активности EGFR (WT) и лучшим подавлением ферментативной активности EGFR (C797S/T790M/L858R).

- 61 040849

Соединения примеров	EGFR (WT) 1С50(нМ)	EGFR (A19del/T790M/C797S) 1С50(нМ)	EGFR (L858R/T790M/C797S) 1С50(нМ)
1	-	2,64	-
2	-	0,613	-
5	-	1,63	-
6	-	2,54	-
8	-	0,792	-
9	-	0,485	-
13	-	5,79	-
16	-	0,491	-
17	-	856	-
18	-	25,3	-
19	-	12,9	-
20	-	<0,0508	-
21	-	30,6	-
23	-	0,0517	-
25	-	1,79	-
26	-	0,679	-
28	-	185	-
29	-	67,6	-
34	7,92	0,218	0,16
41	5,12	0,212	0,26
44	11	0,281	0,21

Таблица 1

Экспериментальный пример 3. Эксперимент по антипролиферативному эффекту в отношении клеток (1)

Экспериментальный способ

1) Культивирование и пересевание клеток (1) Среда А431: 88% DMEM + 10% фетальной бычьей сыворотки + 1% L-глутамина + 1% двойного антитела (2) Клетки А431 выделяли и пересевали каждые 3-4 дня, при этом количество клеток для 3дневного пересева составляло 5е6 клеток на колбу для культивирования Т75, и количество клеток для 4дневного пересева составляло 3е6 клеток на колбу для культивирования Т75.

2) День 1. Получение планшета с клетками (1) Фосфатный буфер, трипсин и кулыуральную среду помещали на водяную баню при 37°С для предварительного нагрева.

(2) Исходную среду удаляли из колбы для культивирования клеток и промывали один раз с помощью 6 мл PBS.

(3) Переливали пипеткой 5 мл фосфатного буфера в колбу для культивирования для промывания клеток (пересев 17), а затем жидкость отбрасывали.

(4) В колбу для культивирования клеток добавляли 3,5 мл трипсина и при осторожном встряхивании удаляли трипсин после полного контакта с клетками, а затем колбу для культивирования помещали в инкубатор, содержащий 5% СО2, при 37°С в течение приблизительно 1 мин;

(5) Клетки ресуспендировали в 10 мл среды для культивирования клеток и отбирали приблизительно 0,6 мл клеточной суспензии для подсчета (ViCell XR);

(6) Клеточную суспензию разбавляли средой до плотности клеток, составляющей 5е4 клеток на мл, которая требовалась для посева (концентрация клеток: 2500 клеток на лунку);

(7) 100 мкл фосфатного буферного раствора добавляли в каждую лунку по краю клеточного планшета, при этом 50 мкл клеточной суспензии добавляли в другие лунки, и планшет инкубировали в течение ночи в инкубаторе, содержащем 5% СО₂, при 37°С.

3) День 2. Добавление дозы (1) 9 мкл соединения (концентрация: 1 мМ) добавляли в неглубокий луночный планшет для Echo.

(2) Неглубокий луночный планшет центрифугировали при 1000 об/мин в течение 10 с и планшет с клетками извлекали из инкубатора.

(3) В соответствии со схемой микропланшета соединения разбавляли при трехкратном градиенте концентрации с помощью Echo, каждое соединение разбавляли до 10 градиентов концентрации и 250 нл разбавленных соединений соответственно добавляли в клеточный планшет, а затем клеточный планшет возвращали в инкубатор и дополнительно инкубировали в течение 3 дней.

4) День 5. Добавление CTG и считывание планшета (1) После инкубации в течение 72 ч 25 мкл CellTiter Glo добавляли в каждую лунку клеточного планшета с последующим встряхиванием планшета в течение 10 мин в темноте.

(2) Планшет считывали на Envision.

Анализ данных: С помощью компьютерной аппроксимации соответствующую концентрацию соединения при уровне подавления 50% регистрировали как IC₅₀ соединения для подавления клеточной активности.

Результаты экспериментов:

- 62 040849

IC5₀ соединений по настоящей заявке для подавления активности клеток А431 показаны в табл. 2.

Вывод:

Из табл. 2 видно, что соединения по настоящей заявке характеризуются хорошей селективностью в отношении клеток А431.

Экспериментальный пример 4. Эксперимент по антипролиферативному эффекту на клетках (2) Экспериментальный способ

Для суспензии клеток Ba/F₃ (EGFR A19del/T790M/C797S)

Соединения, подлежащие тестированию, разбавляли при трехкратном градиенте концентрации с помощью Echo и получали 10 значений концентраций дозы от 10 мкМ до 0,508 нМ. Соединения переносили в 384-луночный планшет с 125 нл соединения на лунку. Плотность клеток регулировали и высевали 2000 клеток Ba/F₃ (EGFR A19del/T790M/C797S) в каждую лунку в объеме 50 мкл, инкубировали в инкубаторе с СО₂ при 37°С в течение 3 дней. Через 3 дня добавляли 25 мл реагента для обнаружения.

Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин, а затем считывали с помощью Envision.

Анализ данных:

Показания преобразовывали в степень ингибирования (%) с помощью следующей формулы: (Max-Sample)/(Max-Min)x 100%((максимальная концентрация-показание образца)/(максимальная концентрация-минимальная концентрация^ 100%)

Данные IC₅₀ получали с помощью аппроксимации параметрической кривой (модель 205 в Activity Base, IDBS).

Результаты экспериментов:

Значения IC₅₀ соединений по настоящей заявке для подавления активности клеток Ba/F₃ (EGFR A19del/T790M/C797S) показаны в табл. 2.

Вывод:

Из табл. 2 видно, что предпочтительные соединения по настоящей заявке оказывают сильный подавляющий эффект на клетки Ba/F₃ с тремя мутациями (EGFR A19del/T790M/C797S). Сравнительный пример 1 почти не оказывает подавляющего эффекта на клетки Ba/F₃ с тремя мутациями (EGFR A19del/T790M/C797S).

Экспериментальный пример 5. Эксперимент в отношении подавления фосфорилирования клеток Экспериментальный способ

Тестовые соединения и эталонные соединения разбавляли с помощью 100% DMSO до 10 мМ или 1 мМ, а затем проводили градиентное разбавление с помощью Echo по 150 нл на лунку, с трехкратным градиентом концентрации и кривой доза-ответ с десятью точками дозы. Конечная концентрация соединений составляла 100 мкМ или 10 мкМ. Клетки суспензии центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 мин, суспендировали в сбалансированном солевом растворе Хэнкса и добавляли в 384-луночный планшет, содержащий соединения при 10 мкл/120000/лунка (плотность клеток 1,2х10⁷), с последующим центрифугированием при 1200 об/мин в течение 30 с и инкубировали при 37°С в течение 30 мин. Добавляли 5 мкл EGF (который разбавили 0,1% сбалансированным солевым раствором Хэнкса в BSA) в каждую лунку, в которой конечная концентрация EGF составляла 1 мкМ. Планшет центрифугировали при 1200 об/мин в течение 30 с и инкубировали при 37°С в течение 20 мин. Добавляли 5 мкл 4х буфера для лизиса, содержащего блокирующий раствор, к каждой лунке, а затем планшет центрифугировали при 1200 об/мин в течение 30 с и инкубировали при 37°С в течение 30 мин. Добавляли 5 мкл смесь 0,25xEu и D2 в каждую лунку и планшет центрифугировали при 1200 об/мин в течение 30 с, накрывали герметизирующей светозащитной пленкой и инкубировали при комнатной температуре (22-26°С) в течение 4-24ч. Сигналы флуоресценции считывали при 665 нм/620 нм с помощью ридера для микропланшетов.

Результаты экспериментов.

Значения IC50 соединений по настоящей заявке для подавления активности фосфорилирования клеток pEGFR Ba/F₃ (EGFR A19del/T790M/C797S) показаны в табл. 2.

Вывод:

Поскольку самопроизвольное фосфорилирование EGFR, а именно димеризация, может активировать его киназный путь, расположенный внутри клетки, а множество опухолей имеют высокую или аномальную экспрессию EGFR, это играет очень важную роль в развитии злокачественных опухолей. Подавление активности клеток pEGFR Ba/F₃ (A19del/T790M/C797S) может демонстрировать наиболее наглядный подавляющий эффект соединения в отношении фосфорилирования в модели тройной мутантной клетки Ba/F₃ (A19del/T790M/C797S) с тем, чтобы специфически провести скрининг соединений in vitro. Из табл. 2 видно, что соединения по настоящей заявке характеризуются превосходным подавляющим эффектом в отношении активности фосфорилирования клеток Ba/F₃ (A19del/T790M/C797S), при этом сравнительный пример 1 почти не оказывает подавляющего эффекта на фосфорилирование клеток Ba/F3 (A19del/T790M/C797S).

- 63 040849

Таблица 2

Тестовые соединения	Антипролифератив ный эффект в отношении клеток А431 EGFRWT	Антипролиферативный эффект в отношении клеток Ba/F3(A19del/T790M/C7	Эффект в отношении фосфорилирования клеток EGFR Ba/F3(A19del/T790M/C7
	1С50(нМ)	97S) 1С50(нМ)	97S) 1С50 (нМ)
2	811	178	68
3	3239	638	187
4	3751	556	278
5	890	313	96
6	997	361	187
7	-	-	533
8	-	275	133
9	282	149	149
10	-	6026	-
11	-	180	-
12	1256	239	203
13	>10000	3620	1725
14	-	351	-
15	-	583	-
16	-	211	-
17	-	4753	-
18	-	1646	-
19	-	1220	-
20	-	214	-
21	-	1959	-
22	-	249	-
23	-	103	34
24	-	4085	-
25	-	642	-
26	-	764	-
27	-	2713	-
28	-	2657	-
29	-	1594	-
30	-	290	-
31	-	242	-
32	-	79	57
33	-	162	-
34	154	22	19
35		533
36	168	45	25
37	357	56	94
38	-	371	-
39	-	187	195
40	561	31	24
41	245	9	25
42	-	442	-
43	-	496	-
44	-	-	9
45	-	87	27
48	-	152	-
51	-	36	-
54	-	39	-
57	-	26,8	-
58	-	18,6	-
59	534	54,3	534
60	271	47,6	271
61	58	32,2	58
Сравнительн ый пример 1	-	>5000	1014,0

Экспериментальный пример 6. Исследование в отношении эффективности in vivo (1)

Экспериментальный способ

Эксперимент по эффективности in vivo проводили на голых мышах BALB/c с ксенотрансплантатами (CDX), полученными из подкожно имплантированных Ba/F₃ (A19del/T790M/C797S). Голых мышей BALB/c, самок, возрастом 6-8 недель с массой тела 18-20 г, содержали в среде, соответствующей SPF, и каждую клетку по отдельности вентилировали (5 мышей на клетку). Все клетки, подстилку и воду стерилизовали перед применением. Все животные имели свободный доступ к стандартному сертифицированному коммерческому и лабораторному корму. Всего 48 мышей, приобретенных у компании Beijing

-64040849

Weitonglihua, использовали для исследования. Каждой мыши имплантировали клетки в правый бок для роста опухоли. Эксперимент начинали, когда средний объем опухоли достигал примерно 80-120 мм³. Тестовые соединения вводили перорально ежедневно, при этом соединение биргатиниба (15 мг/кг), соединение 34 (5, 15, 45 мг/кг соответственно) и соединение 41 (5, 15, 45 мг/кг соответственно) вводили в течение 13 последовательных дней. Данные показаны в табл. 3. Объем опухоли измеряли дважды в неделю с помощью двумерного штангенциркуля, измеряли в мм³ и рассчитывали по следующей формуле: V=0,5axb², где a и b представляют собой соответственно диаметр по длинной оси и диаметр по короткой оси опухоли. Противоопухолевую эффективность определяли с помощью деления среднего увеличения объема опухоли у животных, обработанных соединением, на среднее увеличение объема опухоли у необработанных животных. Применяли TGI (значение подавления опухоли) для оценки эффекта подавления роста опухоли тестируемого лекарственного средства in vivo, где TGI группы соединения биргатиниба (15 мг/кг) составляло 8,6%, TGI группы соединения 34 (45 мг/кг, введенных по отдельности) составляло 101%, и TGI группы соединения 41 (45 мг/кг, введенных по отдельности) составляло 109%.

На 14 день после введения группам для эксперимента по эффективности у мышей собирали плазму крови путем подчелюстного сбора крови перед последним введением и через 2 ч после последнего введения и образцы плазмы крови собирали у мышей через 1, 4, 8 и 24 ч после введения. Приблизительно 100 мкл крови собирали каждый раз, помещали в пробирку с антикоагулянтами и центрифугировали при 8000 об/мин в течение 7 мин для сбора плазмы крови, которую хранили при -80°С. Ткани легкого и опухоли мышей собирали через 2 ч после введения и хранили при -80°С, при этом опухоли разделяли на две части (где масса опухоли для анализа PD не превышала 100 мг) для обнаружения и анализа данных.

Результаты экспериментов см. табл. 3 и 4.

Таблица 3

Тестовые соединения	Доза	Объем опухоли (мм3)
День 0	День 2	День 5	День 8	День 10	День 12	День 13
Холостой контроль	Нет данных	85	143	315	582	765	929	1048
Биргатиниб	15 мг/кг/день	84	124	292	477	646	880	965
Соединение 34	5 мг/кг/день	84	108	212	395	505	748	881
15 мг/кг/день	84	76	107	126	176	292	326
45 мг/кг/день	84	56	32	35	42	73	68
Соединение 41	5 мг/кг/день	84	103	203	348	485	707	814
15 мг/кг/день	84	68	69	82	115	146	211
45 мг/кг/день	84	47	24	7	4	0	0

Таблица 4

’ ' ----Тестовые соединения Тестовые показатели ——	Бригатиниб	Соединение 34	Соединение 41
Доза (мг/кг/день)	15,0	15,0	15,0
Т1/2 (Ч.)	5,57	10,0	20,5
AUCo-последний (нМ.Ч.)	32808	57037	121718
Плазма крови (нМ), 2 ч.	5177	3553	6990
Опухоль (нмоль/кг), 2 ч.	5807	16667	18567
Легкое (нмоль/кг), 2 ч.	10217	32533	29567

Вывод.

Соединения по настоящей заявке демонстрируют сильный противоопухолевый эффект в модели лекарственной устойчивости на голых мышах BALB/c с ксенотрансплантатами (CDX), полученными при подкожной имплантации Ba/F₃ (Δ19del/T790M/C797S). Период полувыведения и степень воздействия в плазме крови и тканях для соединений по настоящей заявке были в значительной степени улучшены, что указывало на то, что соединения по настоящей заявке характеризуются хорошим фармакокинетическим эффектом у мышей.

Экспериментальный пример 7. Фармакодинамическое исследование in vivo (2)

Экспериментальный способ

1. Культура клеток: клетки рака легкого РС-9 культивировали в виде монослоя in vitro, условия культивирования: RPMI-1640 (среда для культивирования клеток) плюс 10% фетальной бычьей сыворотки, 100 ед./мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина культивировали в инкубаторе с 5% СО₂ при 37°С. Клетки обычно расщепляли с помощью трипсина-EDTA дважды в неделю для пересева. Когда насыщенность клеток составляла 80-90%, а количество достигало требований, клетки собирали и подсчитывали. Плотность составляла 5x106 клеток.

2. Инокуляция клеток. Инокулировали 0,2 мл (содержащего 5x106 клеток) клеточной суспензии РС9 (PBS: матригель =1:1) подкожно в правый бок каждой мыши, всего 64 мыши. На 7 день после инокуля-

- 65 040849 ции, когда средний измеренный объем опухоли достигал 169 мм³, животных произвольным образом иерархически группировали на основе объема опухоли и веса животного и начинали введение каждой группе. PBS представлял собой фосфатный буферный раствор, и матригель представлял собой матрицу.

3. Введение, доза. Дни 0-9: 50 мг/кг; дни 10-21: 25 мг/кг; пероральное введение; частота введения:

один раз в день х3 недели.

Измерение опухоли и экспериментальные показатели

Диаметр опухоли измеряли два раза в неделю с помощью штангенциркуля. Формула для расчета объема опухоли являлась следующей: V=0,5axb², где а и b представляют собой диаметр по длинной оси и диаметр по короткой оси опухоли соответственно.

Противоопухолевый эффект соединения оценивали с помощью TGI (%).

Относительный объем опухоли (RTV) рассчитывали в соответствии с результатами измерения опухоли. Формула для расчета являлась следующей RTV=V_t/V₀, где V₀ представлял собой объем опухоли, измеренный во время введения группе (т.е. в DO), и V_t представлял собой объем опухоли соответствующей мыши, измеренный в определенное время. Данные собирали в один и тот же день для TRTV и CRTV.

TGI (%) отражал степень подавления роста опухоли.

TGI (%)=[(1-(средний объем опухоли в конце введения в группе обработки - средний объем опухоли в начале введения в группе обработки))/(средний объем опухоли в конце обработки в контрольной группе с введением растворителя-средний объем опухоли в начале обработки в контрольной группе с введением растворителя)] х 100%

После завершения экспериментов измеряли массу опухоли и рассчитывали TGI (%).

Результаты экспериментов: см. табл. 5. TGI соединения 34 на 23 день составлял 100%.

__________________________________________________________ Таблица 5

Тестовые соединения	Доза	Объем опухоли (мм3)
День 0	День 2	День 6	День 9	День 13	День 16	День 20	День 23
Холостой контроль	/	186	257	285	326	482	527	637	921
Соединение 34	50 мг/кг (дни 0-9) 25 мг/кг (дни 10-21)	185	198	92	75	40	45	76	111
Соединение 41	50 мг/кг (дни 0-9) 25 мг/кг (дни 10-21)	184	198	54	44	36	30	37	42

Вывод.

В модели подкожно трансплантированной опухоли РС-9 (Δ19del) у мыши соединения по настоящей заявке оказывают значительный подавляющий эффект в отношении роста опухоли и эффект сокращения опухоли, что указывает на хорошие противоопухолевые эффекты.

Claims (19)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль

   где кольцо A выбрано из фенила, тиенила, пиридила, пиразинила, пиразолила, циклопентанонила, циклопентенила, тиазолила, изотиазолила и пирролила, где указанные фенил, тиенил, пиридил, пиразинил, пиразолил, циклопентанонил, циклопентенил, тиазолил, изотиазолил и пирролил необязательно замещены R6;

   R1 выбран из H, галогена, C_1-6алкила и C_1-6гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где C_1-6алкил и C_1-6гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

   R₂ выбран из H, галогена, CN, ОН, NO₂, NH₂, C_3-12циклоалкила и 3-12-членного гетероциклоалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные NH2, C_3-12циклоалкил и 3-12-членный гетероциклоалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

   R₃ выбран из H, галогена, C_3-6циклоалкилокси, -O(CH₂)nNR_aR_b, C_1-6алкила и C_3-6циклоалкила, где указанные C_1-6алкил и C_3-6циклоалкил необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

   - 66 040849 n выбран из 0, 1, 2, 3 или 4;

   каждый из Ra и R_b независимо выбран из H, C_1-5алкила и C_1-5гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О-, -S и -S(=O)₂-, и при этом указанные C_1-5алкил и

   C_1-5гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О-, -S- и -S(=O)₂-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

   или в качестве альтернативы R_a и R_b связаны вместе с образованием 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома или гетероатомные группы, независимо выбранные из -C(=O)N(R)-, N, -О- и -S-;

   R₄ представляет собой Н;

   Br, I, CN, CH3, СН3СН2, CH3CH2CH2, (СН3)2СН,

   R₅ выбран из H, F, Cl,

   '0' н O^N.

   ' ’ при этом указанные CH₃, CH₃CH₂, СН₃СН₂СН₂, (СНз)₂СН, '

   ΝΗ ¹ необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами;

   или в качестве альтернативы R4 и R₅ связаны вместе с образованием 5-6-членного кольца, содержащего 1, 2 или 3 атома, независимо выбранных из N, S или О, где 5-6-членное кольцо необязательно замещено 1, 2 или 3 R-группами;

   каждый из R₆ независимо выбран из H, галогена, CN, ОН, NH₂, C_1-6алкила, =O, =S или C_1-6гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-;

   каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из H или C_1-6алкила;

   R выбран из галогена, CN, ОН, NH₂, C_1-6алкила, C_3-6циклоалкила, C_1-6гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, 3-6-членного гетероциклоалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, фенила и 5-6-членного гетероарила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, C_1-6гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, 3-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -Ои -S-, фенил и 5-6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R’-группами;

   R’ выбран из H, F, Cl, Br, I, CN, ОН, NH2, CH3, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СНз^СН, CH3O, CF3, CHF2 и CH2F.
2. 2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R выбран из F, Cl, Br, I, CN,

   OH, NH₂, CH₃, CH₃CH₂, CH₃CH₂CH₂, (СН_з)₂СН, CH₃O, (CH₃)₂N,
3. 3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где R1 выбран из H, галогена, С_1-3алкила и С_1-3гетероалкила, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, где указанные С_1-3алкил и С_1-3гетероалкил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранные из N, -О- и -S-, необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.
4. 4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.3, где R1 выбран из H, F, Cl, Br, I, CH₃, CH₃CH₂, CH₃CH₂CH₂, (СН_з)₂СН, CH₃O, CH₃CH₂O, CH₃CH₂CH₂O и (СН_з)₂СНО, где указанные CH₃, CH₃CH₂, CH₃CH₂CH₂, (СН_з)₂СН, CH₃O, CH₃CH₂O, CH₃CH₂CH₂O и (СН_з)₂СНО необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.
5. 5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R₂ выбран из H, галогена, CN,

   1 , ;

   ОН, NH2, NO2, -NHR, -N(R)2,
6. 6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.5, где R₂ выбран из H, F, Cl, Br, CN, .Ν.

   ОН, NH2, NO2, , -NHCH2CH3, -NHCH3, -N(CH3)2 и I
7. 7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где R₆ выбран из H, F, Cl, Br, CN, ОН, NH2, CH3, СН3СН2, СН3СН2СН2, (СНз)2СН, СН3О, =S и =O.
8. 8. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где структурная единица

   - 67 040849 выбрана из /
9. 9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где каждый из Ra и R_b независимо выбран из H, CH3, CH3CH2,

   -S(=O)₂CH₃ необязательно замещены 1, 2 или 3 R-группами.

   и -S(=O)2CH3, где указанные CH3, CH3CH2,

   и
10. 10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где R₃ выбран из Н, F, Cl,

    Br, CH₃, CH₃CH₂, (СН₃)₂СН, '0 '0
11. 11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R5 выбран из H, Cl, Br, CN,

    CH3, CH3CH2, CH3CH2CH2, (СН3)2СН,
12. 12. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где структурная единица ^4 оА 9 Л Г N .

    .Br

    - выбрана из
13. 13. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где каждый из R₇ и R₈ независимо выбран из H или CH₃.
14. 14. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-13, которое выбрано из

    где

    R1 определен в любом из пп.1 или 3-4,

    R₂ определен в любом из пп.1 или 5-6,

    R₃ определен в п.1 или 10,

    R4 и R₅ определены в п.1 или 11,

    R₆ определен в п.1 или 7,

    R₇ и R₈ определены в п.1 или 13.
15. 15. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.14, которое выбрано из

    - 68 040849

    где R1, R3, R4, R5, R₇, R8, R и R' определены в п.14.
16. 16. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, которое выбрано из

    - 69 040849

    - 70 040849

    - 71 040849
17. 17. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-16 и фармацевтически приемлемый носитель.

    - 72 040849
18. 18. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-16 или фармацевтической композиции по п.17 для получения лекарственного препарата для лечения рака.
19. 19. Применение по п.18, где рак представляет собой рак легкого.