EA040294B1

EA040294B1 - Fluoropiperidine Compounds as Pure 5-HT6 Receptor Antagonists

Info

Publication number: EA040294B1
Application number: EA202090397
Authority: EA
Inventors: Рамакришна Нироджи; Анил Карбхари Схинде; Абдул Рашид Мохаммед; Раджеш Кумар Бадандже; Кумар Боджджа; Винод Кумар Гоял; Сантош Кумар Пандей; Джагадиш Бабу Тхенту; Венкатесварлу Джасти
Original assignee: Сувен Лайф Сайенсиз Лимитед
Priority date: 2017-08-07
Filing date: 2018-08-06
Publication date: 2022-05-18

Description

Область техники, к которой относится изобретениеThe field of technology to which the invention belongs

Настоящее изобретение относится к фторпиперидиновым соединениям, их стереоизомерам, изотопным формам или их фармацевтически приемлемым солям в качестве антагонистов рецептора 5гидрокситриптамина 6 (5-HT6R). В частности, настоящее изобретение раскрывает способы получения, фармацевтическую композицию, комбинации и применение фторпиперидиновых соединений, их стереоизомеров, изотопных форм или их фармацевтически приемлемых солей.The present invention relates to fluoropiperidine compounds, their stereoisomers, isotopic forms or their pharmaceutically acceptable salts as 5-hydroxytryptamine 6 receptor (5-HT6R) antagonists. In particular, the present invention discloses methods of preparation, pharmaceutical composition, combinations and use of fluoropiperidine compounds, their stereoisomers, isotopic forms or their pharmaceutically acceptable salts.

Уровень техники изобретенияState of the art invention

Нарушение нейротрансмиттера, 5-гидрокситриптамина (5-НТ) или серотонина, было связано с различными расстройствами центральной нервной системы, такими как беспокойство, депрессия, нейродегенеративные нарушения, когнитивные расстройства или нарушения моторной координации. Серотонин локализуется в центральной и периферической нервных системах (ЦНС и ПНС) и, как известно, играет жизненно важную роль во многих биологических процессах. Его активация или дерегуляция связана с такими состояниями, как когнитивные расстройства, психические расстройства, отсутствие моторной координации, расстройства пищевого поведения, сексуальные расстройства, расстройства нейроэндокринной регуляции и некоторые другие. Подтипы рецептора 5-НТ включают 5-НТ1, 5-НТ2, 5-НТ₃, 5-НТ4, 5-НТ5, 5-НТ₆, 5-НТ₇ и изоформы, такие как 5-НТ2А, 5-НТ_2В, 5-HT2C, 5-НТ4А, 5-НТ_4В, 5-HT4D и 5-НТ4Е.Disruption of the neurotransmitter, 5-hydroxytryptamine (5-HT) or serotonin, has been associated with various central nervous system disorders such as anxiety, depression, neurodegenerative disorders, cognitive disorders, or motor coordination disorders. Serotonin is localized in the central and peripheral nervous systems (CNS and PNS) and is known to play a vital role in many biological processes. Its activation or deregulation is associated with such conditions as cognitive disorders, mental disorders, lack of motor coordination, eating disorders, sexual disorders, disorders of neuroendocrine regulation, and some others. 5-HT receptor subtypes include 5-HT1, 5-HT2, 5- _HT3 , 5-HT4, 5-HT5, 5- _HT6 , 5- _HT7 and isoforms such as 5-HT2A, 5- _HT2B , 5-HT2C, 5-HT4A, 5- _HT4B , 5-HT4D and 5-HT4E.

Подтип рецептора 5-гидрокситриптамина 6 (5-HT6R) был впервые идентифицирован в 1993 г. и является членом семейства GPCR. 5-HT6R почти исключительно экспрессируется в мозге, в частности в гиппокампе и лобной коре, которые связаны с познавательной способностью (Molecular Pharmacology, 1993, 43, 320-327). Активация 5-HT6R обычно подавляет холинергическую функцию (British Journal of Pharmacology, 1999, 126, 1537-1542), тогда как блокада рецептора улучшает когнитивные функции.The 5-hydroxytryptamine 6 receptor subtype (5-HT6R) was first identified in 1993 and is a member of the GPCR family. 5-HT6R is almost exclusively expressed in the brain, particularly in the hippocampus and frontal cortex, which are associated with cognition (Molecular Pharmacology, 1993, 43, 320-327). Activation of 5-HT6R generally suppresses cholinergic function (British Journal of Pharmacology, 1999, 126, 1537-1542), while blockade of the receptor improves cognitive function.

Недавние исследования показали, что антагонизм этого рецептора несколькими исследуемыми соединениями улучшает обучение и память на животных моделях (CNS & Neurological Disorders - Drug Targets, 2004, 3, 59-79). Следовательно, антагонизм рецептора 5-НТ₆ может потенциально обеспечить эффективное лечение различных когнитивных расстройств.Recent studies have shown that antagonism of this receptor by several investigated compounds improves learning and memory in animal models (CNS & Neurological Disorders - Drug Targets, 2004, 3, 59-79). Therefore, 5-HT ₆ receptor antagonism could potentially provide an effective treatment for various cognitive disorders.

Патент US 7378415 раскрыл соединения бензоксазина и хиноксалина, как показано ниже, обладающие сродством к рецептору 5-НТ6 и 5-НТ2А, для лечения определенных нарушений ЦНСUS Patent 7378415 discloses benzoxazine and quinoxaline compounds as shown below having 5-HT6 and 5-HT2A receptor affinity for the treatment of certain CNS disorders

Клинические кандидаты, идалопирдин (Lu AE58054) и церлапирдин (SAM-531), которые являются антагонистами 5-HT6R и также показали сродство к рецепторам 5-HT2A, исключены из клинических испытаний.Clinical candidates, idalopirdin (Lu AE58054) and cerlapirdin (SAM-531), which are 5-HT6R antagonists and have also shown 5-HT2A receptor affinity, are excluded from clinical trials.

Следовательно, цель настоящего изобретения состоит в том, чтобы предоставить соединения, обладающие сильной аффинностью к рецептору 5-НТ6 с минимальной или нулевой аффинностью по отношению к рецептору 5-HT2A, а также предоставить соединения, имеющие хороший профиль безопасности. Настоящее изобретение относится к фторпиперидиновым соединениям, которые являются высокоселективными по отношению к рецептору 5-НТ₆ с минимальной или нулевой аффинностью по отношению к рецептору 5-HT2A. Специалист в данной области не подумал бы, что введение определенной группы (фтора) в конкретное положение фторпиперидиновых производных приведет к улучшению селективности в отношении рецептора 5-HT2A и будет иметь лучший профиль безопасности. Эти наблюдения были крайне удивительными и неожиданными.Therefore, it is an object of the present invention to provide compounds having strong affinity for the 5-HT6 receptor with minimal or no affinity for the 5-HT2A receptor, and also to provide compounds having a good safety profile. The present invention relates to fluoropiperidine compounds that are highly selective for the 5-HT ₆ receptor with minimal or no affinity for the 5-HT2A receptor. One skilled in the art would not have thought that introducing a specific group (fluorine) at a specific position in fluoropiperidine derivatives would result in improved selectivity for the 5-HT2A receptor and would have a better safety profile. These observations were extremely surprising and unexpected.

Сущность изобретенияThe essence of the invention

В первом аспекте настоящее изобретение относится к фторпиперидиновому соединению формулы (I)In a first aspect, the present invention relates to a fluoropiperidine compound of formula (I)

- 1 040294 в которой- 1 040294 in which

R¹ представляет собой фенил или пиридил; где фенил необязательно замещен галогеном;R ¹ is phenyl or pyridyl; where phenyl is optionally substituted with halogen;

R² представляет собой водород;R ² is hydrogen;

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁴ представляет собой водород или (C₁.₆)-алкил;R ⁴ is hydrogen or (C ₁ . ₆ )-alkyl;

R⁵ представляет собой водород или галоген(C₁_₆)-алкил; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.R ⁵ is hydrogen or halo(C ₁ _ ₆ )-alkyl; or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способам получения соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention relates to methods for preparing a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые эксципиенты или носители.In yet another aspect, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of at least one compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, and pharmaceutically acceptable excipients or carriers.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли, ингибитора ацетилхолинэстеразы и антагониста рецептора NMDA для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I) or a pharmaceutical salt thereof, an acetylcholinesterase inhibitor and an NMDA receptor antagonist for use in the treatment of cognitive disorders.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли и ингибитора ацетилхолинэстеразы для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I), or a pharmaceutical salt thereof, and an acetylcholinesterase inhibitor for use in the treatment of cognitive disorders.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли и антагониста рецептора NMDA для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I), or a pharmaceutical salt thereof, and an NMDA receptor antagonist for use in the treatment of cognitive disorders.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве антагониста 5-НТ₆рецептора.In yet another aspect, the present invention relates to a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, for use as a 5-HT ₆ receptor antagonist.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in the treatment of cognitive disorders.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения когнитивных расстройств, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention relates to a method of treating cognitive disorders comprising administering to a patient in need thereof a therapeutically effective amount of a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств.In another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, for the manufacture of a medicament for the treatment of cognitive disorders.

Краткое описание чертежейBrief description of the drawings

На фиг. 1 показано влияние комбинации примера 1 и донепезила на внеклеточные уровни ацетилхолина в вентральном гиппокампе самцов крыс линии Вистар.In FIG. 1 shows the effect of the combination of Example 1 and donepezil on extracellular levels of acetylcholine in the ventral hippocampus of male Wistar rats.

На фиг. 2 показано влияние комбинации примера 1, донепезила и мемантина на внеклеточные уровни ацетилхолина в вентральном гиппокампе самцов крыс линии Вистар.In FIG. 2 shows the effect of the combination of Example 1, donepezil and memantine on extracellular levels of acetylcholine in the ventral hippocampus of male Wistar rats.

Подробное описание изобретенияDetailed description of the invention

Если не указано иное, следующие термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют значения, указанные ниже.Unless otherwise indicated, the following terms used in the description and claims have the meanings given below.

В контексте настоящего описания термин (C₁.₆)-алкил относится к алифатическому углеводороду с разветвленной или прямой цепью, содержащему от 1 до 6 атомов углерода. Примеры (C₁.₆)-алкила включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил и гексил.In the context of the present description, the term (C ₁ . ₆ )-alkyl refers to a branched or straight chain aliphatic hydrocarbon containing from 1 to 6 carbon atoms. Examples of (C ₁ . ₆ )-alkyl include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, t-butyl, pentyl and hexyl.

В контексте настоящего описания термин галоген или галогено относится к фтору, хлору, брому или иоду. Предпочтительно галоген представляет собой фтор, хлор или бром. Более предпочтительно галоген представляет собой фтор.In the context of the present description, the term halogen or halo refers to fluorine, chlorine, bromine or iodine. Preferably the halogen is fluorine, chlorine or bromine. More preferably, the halogen is fluorine.

В контексте настоящего описания термин галоген(C₁.₆)-алкил относится к (C₁.₆)-алкилу, как определено выше, в котором один или несколько атомов водорода у одного и того же атома углерода или разных атомов углерода замещены одинаковыми или разными галогенами. Примеры галоген(C₁_₆)-алкила включают фторметил, хлорметил, фторэтил, дифторметил, дихлорметил, трифторметил, дифторэтил, хлорфторэтил и т.п.As used herein, the term halo(C ₁ _.6 )-alkyl refers to (C ₁ _.6 )-alkyl as defined above in which one or more hydrogen atoms on the same carbon atom or different carbon atoms are replaced by the same or different halogens. Examples of halo(C ₁ _ ₆ )-alkyl include fluoromethyl, chloromethyl, fluoroethyl, difluoromethyl, dichloromethyl, trifluoromethyl, difluoroethyl, chlorofluoroethyl, and the like.

Фраза терапевтически эффективное количество определяется как количество соединения по настоящему изобретению, которое (i) лечит конкретное заболевание, состояние или расстройство, (ii) устраняет один или несколько симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, (iii) облегчает симптомы конкретного заболевания, состояния или расстройства, (iv) задерживает появление одного или нескольких симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанных в настоящем документе.The phrase therapeutically effective amount is defined as the amount of a compound of the present invention that (i) treats a particular disease, condition, or disorder, (ii) relieves one or more symptoms of a particular disease, condition, or disorder, (iii) alleviates the symptoms of a particular disease, condition, or disorder , (iv) delays the onset of one or more of the symptoms of a particular disease, condition, or disorder described herein.

В контексте настоящего описания термин стереоизомеры относится к изомерам соединения формулы (I), которые отличаются расположением их атомов в пространстве. Раскрытые в настоящем документе соединения могут существовать в виде единственного стереоизомера, рацемата и/или смеси энантиомеров и/или диастереомеров. Предполагается, что все такие единственные стереоизомеры, рацематыIn the context of the present description, the term stereoisomers refers to isomers of a compound of formula (I) that differ in the arrangement of their atoms in space. The compounds disclosed herein may exist as a single stereoisomer, racemate and/or mixture of enantiomers and/or diastereomers. It is assumed that all such single stereoisomers, racemates

- 2 040294 и их смеси входят в объем настоящего изобретения.- 2 040294 and mixtures thereof are included in the scope of the present invention.

В контексте настоящего описания термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям активного соединения, т.е. соединения формулы (I), и их получают реакцией с соответствующей кислотой или производным кислоты в зависимости от конкретных заместителей, находящихся в соединениях, описанных в настоящем документе.In the context of the present description, the term pharmaceutically acceptable salt refers to salts of the active compound, i. compounds of formula (I), and they are obtained by reaction with the appropriate acid or acid derivative, depending on the specific substituents found in the compounds described herein.

В контексте настоящего описания термин когнитивное расстройство относится к группе расстройств психического здоровья, которые главным образом влияют на обучение, память, восприятие, решение проблем и включают амнезию, деменцию и делирий. Когнитивные расстройства могут быть идиопатическими или возникать вследствие заболевания, расстройства, болезненного состояния или токсичности. Предпочтительно когнитивное расстройство, упомянутое в настоящем документе, представляет собой деменцию. Примеры деменции включают, но не ограничиваются ими, деменцию при болезни Альцгеймера, деменцию при болезни Паркинсона, деменцию при болезни Хантингтона, деменцию, связанную с синдромом Дауна, деменцию, связанную с синдромом Туретта, деменцию, связанную с постменопаузой, лобно-височную деменцию, деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию, деменцию при ВИЧ, деменцию при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующую деменцию, вызванную употреблением психоактивных веществ, деменцию при болезни Пика, деменцию при шизофрении, деменцию при соматических заболеваниях и старческую деменцию.As used herein, the term cognitive disorder refers to a group of mental health disorders that primarily affect learning, memory, perception, problem solving, and include amnesia, dementia, and delirium. Cognitive disorders may be idiopathic or result from a disease, disorder, disease state, or toxicity. Preferably, the cognitive disorder referred to herein is dementia. Examples of dementia include, but are not limited to, Alzheimer's disease dementia, Parkinson's disease dementia, Huntington's disease dementia, Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, postmenopausal dementia, frontotemporal dementia, dementia Lewy bodies, vascular dementia, HIV dementia, Creutzfeldt-Jakob disease dementia, persistent substance use dementia, Pick's disease dementia, schizophrenia dementia, somatic dementia, and senile dementia.

Варианты осуществления.Embodiments.

Настоящее изобретение охватывает все соединения, описанные соединением формулы (I), без каких-либо ограничений, однако предпочтительные аспекты и элементы изобретения обсуждаются в настоящем документе в форме следующих вариантов осуществления.The present invention covers all compounds described by the compound of formula (I) without any limitation, however, preferred aspects and elements of the invention are discussed herein in the form of the following embodiments.

Во втором аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) в которойIn a second aspect, the present invention relates to a compound of formula (I) in which

R² представляет собой водород;R ² is hydrogen;

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁴ представляет собой водород или (C_1-6)-αлкил;R ⁴ is hydrogen or (C _1-6 )-αkyl;

R⁵ представляет собой водород или гaлоген(C_1-6)-aлкил; или к его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.R ⁵ is hydrogen or halo(C _1-6 )-alkyl; or to its stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (Ia), полученному из соединения формулы (I) (1а) в которойIn another aspect, the present invention relates to a compound of formula (Ia) obtained from a compound of formula (I) (1a) in which

R¹ представляет собой фенил или пиридил; где фенил необязательно замещен галогеном; R² представляет собой водород;R ¹ is phenyl or pyridyl; where phenyl is optionally substituted with halogen; R ² is hydrogen;

- 3 040294- 3 040294

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁴ представляет собой водород или (С_1-6)-алкил;R ⁴ is hydrogen or (C _1-6 )-alkyl;

R⁵ представляет собой водород или галоген(C_1-6)-алкил; или к его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.R ⁵ is hydrogen or halo(C _1-6 )-alkyl; or to its stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (Ib), полученному из соединения формулы (I) в которойIn another aspect, the present invention relates to a compound of formula (Ib) obtained from a compound of formula (I) in which

R² представляет собой водород;R ² is hydrogen;

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁴ представляет собой водород или (C_1-6)-алкил;R ⁴ is hydrogen or (C _1-6 )-alkyl;

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в которой: R¹ представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном; или к его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention provides a compound of formula (I) wherein: R ¹ is phenyl optionally substituted with halogen; or to its stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в которой R¹ представляет собой фенил, или к его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention provides a compound of formula (I) wherein R ¹ is phenyl, or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) (I) в которойIn another aspect, the present invention relates to a compound of formula (I) (I) in which

R¹ представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном;R ¹ is phenyl optionally substituted with halogen;

R² представляет водород;R ² represents hydrogen;

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁵ представляет собой водород;R ⁵ is hydrogen;

или к его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.or to its stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt.

В другом варианте осуществления соединение по изобретению выбрано из группы, состоящей изIn another embodiment, the compound of the invention is selected from the group consisting of

- 4 040294- 4 040294

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина;7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[ 1,4]oxazine;

4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-Фенил сульфонил-4-(3 -фтор-3 -метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine;

6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина;6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

иAnd

7-Фенил сульфонил-4- [3 -фтор-1 -(2-фторэтил)пиперид ин-4-ил] -3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperide in-4-yl]-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine;

или их стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом варианте осуществления предпочтительное соединение по изобретению выбрано из группы, состоящей из:In another embodiment, a preferred compound of the invention is selected from the group consisting of:

Раг/ел/ического-7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;Par/el/ic-7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine;

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine

- 5 040294 (Пик I);- 5 040294 (Peak I);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик II);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak II);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик III);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak III);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик IV);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak IV);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик I);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak I);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик II);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak II);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик III);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak III);

7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик IV);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak IV);

Рацемического-Ί-(3-Фторфенил сульфонил)-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро· 2Н-бензо[ 1,4] оксазина;Racemic-Ί-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro 2H-benzo[ 1,4]oxazine;

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик I);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak I);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик II);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak II);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик III);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak III);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик IV);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak IV);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик I);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak I);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик II);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak II);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик III);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak III);

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Пик IV);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Peak IV);

Раг/е.ш/ческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро2Н-бензо[ 1,4] оксазина;Par/w.w/c-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro2H-benzo[1,4]oxazine;

Раг/елшческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро2Н-бензо[ 1,4]оксазина гидрохлорида;Par/else-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

Раг/елшческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро2Н-бензо[ 1,4] оксазина;Par/else-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro2H-benzo[1,4]oxazine;

Раг/елшческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро- 6 040294Par/else-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-6 040294

2Н-бензо[ 1,4]оксазина гидрохлорида;2H-benzo[ 1,4]oxazine hydrochloride;

Рацемического-7-Фенилсульфонил-4-(3 -фтор-3 -метилпиперидин-4-ил)-3,4дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина;Racemic-7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-Фенил сульфонил-4-(3 -фтор-3 -метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Первый элюируемый изомер);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (First eluting isomer);

7-Фенил сульфонил-4-(3 -фтор-3 -метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Второй элюируемый изомер);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Second eluting isomer);

Раг/елшческого-6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[ 1,4]оксазина;Par/else-6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine;

Раг/елшческого-6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида;Par/else-6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride;

6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик I);6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak I);

6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик II);6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak II);

6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик III);6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak III);

6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Пик IV);6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (Peak IV);

7-Фенил сульфонил-4- [3 -фтор-1 -(2-фторэтил)пиперид ин-4-ил] -3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик III);7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperide in-4-yl]-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak III);

7-Фенил сульфонил-4- [3 -фтор-1 -(2-фторэтил)пиперид ин-4-ил] -3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина (Пик IV);7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperide in-4-yl]-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine (Peak IV);

В другом варианте осуществления предпочтительное соединение по изобретении выбрано из группы, состоящей из:In another embodiment, the preferred compound of the invention is selected from the group consisting of:

- 7 040294- 7 040294

7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксозина гидрохлорида (Пик IV);7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxosine hydrochloride (Peak IV);

Рш/елшческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро2Н-бензо[ 1,4]оксазина гидрохлорида;Rsh/else-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

Рш/елшческого-4-(3-Фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-Дигидро2Н-бензо[ 1,4]оксазина гидрохлорида;Rsh/else-4-(3-Fluoro-piperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

7-Фенилсульфонил-4-(3 -фтор-3-метилпипер идин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Первый элюируемый изомер);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (First eluting isomer);

7-Фенилсульфонил-4-(3 -фтор-3-метилпипер идин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида (Второй элюируемый изомер);7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride (Second eluting isomer);

Рш/елшческого-6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлорида;Rsh/else-6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride;

7-Фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]окслзина (Пик III); и7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxlzine (Peak III); And

7-Фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксозина (Пик IV);7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxosine (Peak IV);

Экспериментальные процедуры.experimental procedures.

Схема 1 изображает общий способ получения соединений формулы (1), где R¹, R², R³, R⁴ и R⁵ имеют значения, определенные в первом аспекте.Scheme 1 depicts a general method for obtaining compounds of formula (1), where R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ have the meanings defined in the first aspect.

Схема 1Scheme 1

Вос ВосVos Vos

Соединение формулы (I), Соединение формулы (I], в которой R® представляет собой Н в которой R⁵ представляет собой (С 1.д)-алкил, галоген^.^-алкил, (^сНз1о-з-(^сз.б)-ЦиклоалкилCompound of formula (I) Compound of formula (I) wherein R® is H wherein R ⁵ is (C 1.e)-alkyl, ^halo ^{^} . .b)-Cycloalkyl

Стадия 1. Получение соединения формулы (2).Step 1: Preparation of a compound of formula (2).

Соединение формулы (1) подвергают взаимодействию с соединением R1SH (где R¹ является таким, как определено в первом аспекте) в присутствии основания, выбранного из карбоната аммония, карбоната цезия, карбоната калия и карбоната натрия, в растворителе, выбранном из диметилсульфоксида (ДМСО), дихлорметана (ДХМ), тетрагидрофурана (ТГФ), ацетонитрила (ACN) и диметилформамида (ДМФА), при температуре в диапазоне 25-30°С в течение от 2 до 4 ч с получением соединения формулы (2).The compound of formula (1) is reacted with a compound R1SH (where R ¹ is as defined in the first aspect) in the presence of a base selected from ammonium carbonate, cesium carbonate, potassium carbonate and sodium carbonate, in a solvent selected from dimethyl sulfoxide (DMSO) , dichloromethane (DCM), tetrahydrofuran (THF), acetonitrile (ACN) and dimethylformamide (DMF), at a temperature in the range of 25-30°C for 2 to 4 hours to obtain a compound of formula (2).

Стадия 2. Получение соединения формулы (3).Step 2: Preparation of a compound of formula (3).

Соединение формулы (2), полученное на стадии 1, подвергают взаимодействию с окислителем, та- 8 040294 ким как метахлорпероксибензойная кислота (м-СРВА) или оксон, в растворителе, выбранном из ДХМ, хлороформа (CHCl₃), толуола, при температуре в диапазоне 25-30°С в течение от 22 до 26 ч с получением соединения формулы (3).The compound of formula (2) obtained in step 1 is reacted with an oxidizing agent such as metachloroperoxybenzoic acid (m-CPBA) or oxone in a solvent selected from DCM, chloroform (CHCl ₃ ), toluene at a temperature of range of 25-30°C for 22 to 26 hours to obtain a compound of formula (3).

Стадия 3. Получение соединения формулы (4).Step 3: Preparation of the compound of formula (4).

Нитрогруппу в соединении формулы (3), полученную на стадии 2, восстанавливают с помощью Fe/NH₄Cl, цинка/уксусной кислоты или NaBH₄/NiCl в присутствии смеси растворителей, таких как ТГФ:этанол:вода, в условиях от комнатной температуры до нагревания с обратным холодильником в течение от 2 до 6 ч с получением соединения формулы (4).The nitro group in the compound of formula (3) obtained in step 2 is reduced with Fe/NH ₄ Cl, zinc/acetic acid or NaBH ₄ /NiCl in the presence of a mixture of solvents such as THF:ethanol:water under conditions from room temperature to heating under reflux for 2 to 6 hours to obtain the compound of formula (4).

Стадия 4. Получение соединения формулы (6).Step 4: Preparation of the compound of formula (6).

Соединение формулы (4), полученное на стадии 3, подвергают взаимодействию с соединением формулы (5)The compound of formula (4) obtained in step 3 is reacted with a compound of formula (5)

в условиях восстановительного аминирования с использованием восстановителей, таких как триацетоксиборгидрид натрия, цианоборогидрид натрия, боргидрид натрия, в растворителях, выбранных из ДХМ, дихлорэтана (ЭДХ), CHCl₃, метанола, уксусной кислоты и толуола, при температуре в диапазоне 25-30°С в течение от 22 до 26 ч с получением соединения формулы (6).under reductive amination conditions using reducing agents such as sodium triacetoxyborohydride, sodium cyanoborohydride, sodium borohydride, in solvents selected from DCM, dichloroethane (EDC), CHCl ₃ , methanol, acetic acid and toluene, at a temperature in the range of 25-30°C for 22 to 26 hours to give a compound of formula (6).

Стадия 5. Получение соединения формулы (7).Step 5: Preparation of the compound of formula (7).

Соединение формулы (6), полученное на стадии 4, подвергают взаимодействию с соединением формулы (А)The compound of formula (6) obtained in step 4 is reacted with a compound of formula (A)

в присутствии иодирующих агентов, таких как иодид натрия и иодид тетрабутиламмония, и основания, такого как карбонат калия, карбонат натрия, карбонат цезия, в растворителе, выбранном из ДХМ, ТГФ, ACN и ДМФА, в условиях от комнатной температуры до нагревания с обратным холодильником в течение от 4 до 8 ч с получением соединения формулы (7).in the presence of iodinating agents such as sodium iodide and tetrabutylammonium iodide and a base such as potassium carbonate, sodium carbonate, cesium carbonate, in a solvent selected from DCM, THF, ACN and DMF, from room temperature to reflux for 4 to 8 hours to give a compound of formula (7).

Стадия 6. Получение соединения формулы (8).Step 6: Preparation of a compound of formula (8).

Соединение формулы (7), полученное на стадии 5, циклизуют, используя иодид натрия или иодид тетрабутиламмония и карбонат калия, карбонат цезия, гидрид натрия или трет-бутоксид натрия в растворителе, выбранном из ТГФ, ACN и ДМФА, при температуре в диапазоне 25-30°С в течение от 2 до 6 ч с получением соединения формулы (8).The compound of formula (7) obtained in step 5 is cyclized using sodium iodide or tetrabutylammonium iodide and potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydride or sodium t-butoxide in a solvent selected from THF, ACN and DMF at a temperature in the range of 25- 30°C for 2 to 6 hours to obtain a compound of formula (8).

Стадия 7. Получение соединения формулы (I) (в которой R⁵ представляет собой водород).Step 7: Preparation of a compound of formula (I) (wherein R ⁵ is hydrogen).

Соединение формулы (8), полученное на стадии 6, подвергают удалению третбутилоксикарбонильной группы с использованием растворителей, таких как метанол, этанол, изопропанол, этилацетат, 1,4-диоксан, и кислоты, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, трифторуксусная кислота, в условиях от комнатной температуры до нагревания с обратным холодильником в течение от 2 до 6 ч с получением соединения формулы (I) (в которой R⁵ представляет собой водород).The compound of formula (8) obtained in step 6 is subjected to removal of the tert-butyloxycarbonyl group using solvents such as methanol, ethanol, isopropanol, ethyl acetate, 1,4-dioxane, and an acid such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, trifluoroacetic acid, in conditions from room temperature to heating under reflux for 2 to 6 hours to obtain the compounds of formula (I) (in which R ⁵ represents hydrogen).

Стадия 8. Получение соединения формулы (I) (в которой R⁵ представляет собой (C₁.₆)-алкuл, галоген(C₁.₆)-алкил или -(СН₂)₀.₃-(C₃.₆)-циклоалкил).Step 8. Preparation of a compound of formula (I) (wherein R ⁵ is (C ₁ _.6 )-alkyl, halo(C ₁ _.6 )-alkyl, or -(CH ₂ ) _0.3 -(C ₃ _.6 ₎ -cycloalkyl).

Соединение формулы (I), полученное на стадии 7, необязательно алкилируют с использованием смеси формальдегид/муравьиная кислота, альдегидов, кетонов, алкилгалогенидов или циклоалкилгалогенидов с получением соединения формулы (I) (в котором R⁵ представляет собой (C₁.₆)-алкил, галоген(C₁.₆)-алкил или -(СН₂)₀-₃-(C₃-₆)-циклоалкил).The compound of formula (I) obtained in step 7 is optionally alkylated using a mixture of formaldehyde/formic acid, aldehydes, ketones, alkyl halides or cycloalkyl halides to give a compound of formula (I) (in which R ⁵ is (C ₁ . ₆ )-alkyl , halo(C ₁ . ₆ )-alkyl or -(CH ₂ ) ₀ - ₃ -(C ₃ - ₆ )-cycloalkyl).

Разделение энантиомеров.Separation of enantiomers.

Диастереоизомеры соединения формулы (8), соединения формулы (I) разделяют, используя хроматографическое разделение на хиральной колонке с получением чистых энантиомерных форм.The diastereoisomers of the compound of formula (8), the compound of formula (I) are separated using chiral column chromatography to give the pure enantiomeric forms.

Получение фармацевтически приемлемой соли соединения формулы (I).Preparation of a pharmaceutically acceptable salt of a compound of formula (I).

Соединение формулы (I) необязательно может быть превращено в его фармацевтически приемлемую соль путем взаимодействия с подходящей кислотой или производным кислоты. Подходящие фармацевтически приемлемые соли будут очевидны для специалистов в данной области техники. Соли образуются с неорганическими кислотами, например хлористоводородной, бромистоводородной, серной, перхлорной и фосфорной кислотой, или органическими кислотами, например щавелевой, янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, яблочной, винной, бензойной, толуиловой, толуолсульфоно- 9 040294 вой, бензолсульфоновой кислотой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой.The compound of formula (I) may optionally be converted into a pharmaceutically acceptable salt thereof by reaction with an appropriate acid or acid derivative. Suitable pharmaceutically acceptable salts will be apparent to those skilled in the art. Salts are formed with inorganic acids, such as hydrochloric, hydrobromic, sulfuric, perchloric and phosphoric acids, or organic acids, such as oxalic, succinic, maleic, acetic, fumaric, citric, malic, tartaric, benzoic, toluic, toluenesulfonic acid, benzenesulfonic acid acid, methanesulfonic or naphthalenesulfonic acid.

Схема 2 изображает способ получения соединения формулы (3 а).Scheme 2 depicts a process for preparing a compound of formula (3a).

Схема 2 rA+s/⁰¹⁴ r¹so₂ci, aici₃ (А ----~ r< ЛА no₂ 140 °с +_zs; no₂ (1а) (За)Scheme 2 rA+s/ ⁰¹⁴ r ¹ so ₂ ci, aici ₃ (А ----~ r< LA no ₂ 140 °С + _z s; no ₂ (1а) (За)

Соединение формулы (1а) подвергают взаимодействию с R1SO₂Cl в присутствии хлорида алюминия при температуре в диапазоне 130-150°С в течение от 8 до 16 ч с получением соединения формулы (3а). Соединение формулы (3 а) также может быть превращено в соединение формулы (I), следуя способу на схеме 1, начиная со стадии 3.The compound of formula (1a) is reacted with R1SO ₂ Cl in the presence of aluminum chloride at a temperature in the range of 130-150°C for 8 to 16 hours to obtain a compound of formula (3a). The compound of formula (3a) can also be converted to a compound of formula (I) by following the method of scheme 1 starting from step 3.

Получение стереоизомеров соединения формулы (I).Preparation of stereoisomers of the compound of formula (I).

Стереоизомеры соединений формулы (I) могут быть получены одним или несколькими обычными способами, представленными ниже.Stereoisomers of compounds of formula (I) can be obtained by one or more of the usual methods below.

a) Один или несколько реагентов могут быть использованы в их оптически активной форме.a) One or more reagents may be used in their optically active form.

b) В процессе восстановления может быть использован оптически чистый катализатор или хиральные лиганды вместе с металлическим катализатором. Металлический катализатор может представлять собой родий, рутений, индий и т.п. Хиральные лиганды могут предпочтительно представлять собой хиральные фосфины.b) An optically pure catalyst or chiral ligands may be used in the reduction process along with a metal catalyst. The metal catalyst may be rhodium, ruthenium, indium, and the like. Chiral ligands may preferably be chiral phosphines.

c) Смесь стереоизомеров может быть разделена обычными способами, такими как образование диастереомерных солей с хиральными кислотами, или хиральными аминами, или хиральными аминоспиртами, или хиральными аминокислотами. Полученная смесь диастереомеров затем может быть разделена такими способами, как фракционная кристаллизация, хроматография и т.п., после чего следует дополнительная стадия выделения оптически активного продукта из разделенного вещества/соли.c) A mixture of stereoisomers may be resolved by conventional means such as the formation of diastereomeric salts with chiral acids or chiral amines or chiral amino alcohols or chiral amino acids. The resulting mixture of diastereomers can then be separated by methods such as fractional crystallization, chromatography, and the like, followed by an additional step of isolating the optically active product from the separated substance/salt.

d) Смесь стереоизомеров может быть разделена обычными способами, такими как микробное разделение, разделение диастереомерных солей, образованных хиральными кислотами или хиральными основаниями. Хиральные кислоты, которые могут быть использованы, могут представлять собой винную кислоту, миндальную кислоту, молочную кислоту, камфорсульфоновую кислоту, хиральные аминокислоты и т.п. Хиральные основания, которые могут быть использованы, могут представлять собой алкалоиды хинного дерева, бруцин или основную аминокислоту, такую как лизин, аргинин и т.п.d) A mixture of stereoisomers can be separated by conventional methods such as microbial separation, separation of diastereomeric salts formed from chiral acids or chiral bases. Chiral acids that can be used can be tartaric acid, mandelic acid, lactic acid, camphorsulfonic acid, chiral amino acids, and the like. Chiral bases that may be used may be cinchona alkaloids, brucine, or a basic amino acid such as lysine, arginine, and the like.

В другом варианте осуществления подходящая фармацевтически приемлемая соль включает, но не ограничивается ими, гидрохлорид, гидробромид, оксалат, фумарат, тартрат, малеат и сукцинат.In another embodiment, a suitable pharmaceutically acceptable salt includes, but is not limited to, hydrochloride, hydrobromide, oxalate, fumarate, tartrate, maleate, and succinate.

В другом аспекте настоящего изобретения соединения формулы (I) являются антагонистами рецептора 5-гидрокситриптамина 6 (5-HT₆R).In another aspect of the present invention, the compounds of formula (I) are 5-hydroxytryptamine 6 (5-HT ₆ R) receptor antagonists.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения когнитивных расстройств, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединений формулы (I) или их стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention relates to a method of treating cognitive disorders comprising administering to a patient in need thereof a therapeutically effective amount of the compounds of formula (I) or a stereoisomer or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения когнитивных расстройств, включая деменцию при болезни Альцгеймера, деменцию при болезни Паркинсона, деменцию при болезни Хантингтона, деменцию, связанную с синдромом Дауна, деменцию, связанную с синдромом Туретта, деменцию, связанную с постменопаузой, лобно-височную деменцию, деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию, деменцию при ВИЧ, деменцию при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующую деменцию, вызванную употреблением психоактивных веществ, деменцию при болезни Пика, деменцию при шизофрении, деменцию при соматических заболеваниях и старческую деменцию, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединений формулы (I) или их стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.In another aspect, the present invention relates to a method of treating cognitive disorders, including Alzheimer's disease dementia, Parkinson's disease dementia, Huntington's disease dementia, Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, postmenopausal dementia, frontal temporal dementia, Lewy body dementia, vascular dementia, HIV dementia, Creutzfeldt-Jakob disease dementia, persistent substance use dementia, Pick's disease dementia, schizophrenia dementia, systemic dementia, and senile dementia, comprising administration to a patient in need thereof, a therapeutically effective amount of the compounds of formula (I) or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении заболевания или расстройства, выбранного из когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in the treatment of a disease or disorder selected from cognitive disorders.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств.In yet another aspect, the present invention relates to the use of a compound of formula (I), or a stereoisomer or pharmaceutically acceptable salt thereof, in the manufacture of a medicament for the treatment of cognitive disorders.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли, ингибитора ацетилхолинэстеразы и антагониста рецептора NMDA для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another embodiment, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I) or a pharmaceutical salt thereof, an acetylcholinesterase inhibitor and an NMDA receptor antagonist for use in the treatment of cognitive disorders.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли и ингибитора ацетилхолинэстеразы для применения в лече- 10 040294 нии когнитивных расстройств.In yet another embodiment, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I), or a pharmaceutical salt thereof, and an acetylcholinesterase inhibitor for use in the treatment of cognitive disorders.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или его фармацевтической соли и антагониста рецептора NMDA для применения в лечении когнитивных расстройств.In yet another embodiment, the present invention relates to a combination of a compound of formula (I), or a pharmaceutical salt thereof, and an NMDA receptor antagonist for use in the treatment of cognitive disorders.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации, в которой ингибитор ацетилхолинэстеразы выбран из галантамина, ривастигмина, донепезила и такрина или их фармацевтически приемлемой соли.In another embodiment, the present invention provides a combination wherein the acetylcholinesterase inhibitor is selected from galantamine, rivastigmine, donepezil and tacrine, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации, в которой ингибитор ацетилхолинэстеразы в комбинации представляет собой донепезила гидрохлорид.In another embodiment, the present invention provides a combination wherein the acetylcholinesterase inhibitor in combination is donepezil hydrochloride.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации, в которой антагонист рецептора NMDA в комбинации представляет собой мемантин или его фармацевтически приемлемую соль. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации, в которой антагонист рецептора NMDA в комбинации представляет собой мемантина гидрохлорид.In another embodiment, the present invention provides a combination wherein the NMDA receptor antagonist in combination is memantine or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In another embodiment, the present invention provides a combination wherein the NMDA receptor antagonist in combination is memantine hydrochloride.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции соединения формулы (I). Чтобы использовать соединение формулы (I) или его стереоизомеры и его фармацевтически приемлемые соли в терапии, их обычно включают в состав фармацевтической композиции в соответствии со стандартной фармацевтической практикой.In yet another aspect, the present invention relates to a pharmaceutical composition of a compound of formula (I). In order to use a compound of formula (I) or its stereoisomers and its pharmaceutically acceptable salts in therapy, they are usually formulated into a pharmaceutical composition in accordance with standard pharmaceutical practice.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть составлены общепринятым способом с использованием одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов. Фармацевтически приемлемые эксципиенты представляют собой разбавители, разрыхлители, связующие вещества, смазывающие вещества, глиданты, полимеры, покрывающие вещества, растворители, сорастворители, консерванты, смачивающие агенты, загустители, противовспенивающие агенты, подсластители, ароматизаторы, антиоксиданты, красители, солюбилизаторы, пластификаторы, диспергирующие агенты и т.п. Эксципиенты выбраны из микрокристаллической целлюлозы, маннита, лактозы, прежелатинизированного крахмала, натрия крахмала гликолята, кукурузного крахмала или его производных, повидона, кросповидона, стеарата кальция, глицерилмоностеарата, глицерилпальмитостеарата, талька, коллоидного диоксида кремния, стеарата магния, лаурилсульфата натрия, стеарилфумарата натрия, стеарата цинка, стеариновой кислоты или гидрогенизированного растительного масла, гуммиарабика, магнезии, глюкозы, жиров, восков, натуральных или отвержденных масел, воды, физиологического раствора хлорида натрия или спиртов, например этанола, пропанола или глицерина, растворов сахара, таких как растворы глюкозы или растворы маннита, и т.п., или смесей различных эксципиентов.The pharmaceutical compositions of the present invention may be formulated in conventional manner using one or more pharmaceutically acceptable excipients. Pharmaceutically acceptable excipients are diluents, disintegrants, binders, lubricants, glidants, polymers, coating agents, solvents, cosolvents, preservatives, wetting agents, thickeners, defoamers, sweeteners, flavoring agents, antioxidants, coloring agents, solubilizers, plasticizers, dispersing agents. and so on. Excipients selected from microcrystalline cellulose, mannitol, lactose, pregelatinized starch, sodium starch glycolate, corn starch or derivatives thereof, povidone, crospovidone, calcium stearate, glyceryl monostearate, glyceryl palmitostearate, talc, colloidal silicon dioxide, magnesium stearate, sodium lauryl sulfate, sodium stearyl fumarate, stearate zinc, stearic acid or hydrogenated vegetable oil, gum arabic, magnesia, glucose, fats, waxes, natural or hardened oils, water, saline sodium chloride or alcohols such as ethanol, propanol or glycerin, sugar solutions such as glucose solutions or mannitol solutions , etc., or mixtures of various excipients.

В еще одном аспекте активные соединения изобретения могут быть включены в состав драже, таблеток, таблеток с покрытием, капсул, порошка, гранул, пеллет, пластырей, имплантатов, пленок, жидкостей, полутвердых веществ, гелей, аэрозолей, эмульсий, эликсиров и т.п. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники.In yet another aspect, the active compounds of the invention may be formulated into dragees, tablets, coated tablets, capsules, powder, granules, pellets, patches, implants, films, liquids, semi-solids, gels, aerosols, emulsions, elixirs, and the like. . Such pharmaceutical compositions and methods for their preparation are well known in the art.

В еще одном аспекте фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит от 1 до 90%, от 5 до 75% и от 10 до 60 мас.% соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемой соли. Количество активного соединения или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтической композиции(ях) может составлять от около 1 до около 500 мг, или от около 5 до около 400 мг, или от около 5 до около 250 мг, или от около 7 до около 150 мг, или в любом диапазоне, попадающем в более широкий диапазон от 1 до 500 мг.In another aspect, the pharmaceutical composition of the present invention contains from 1 to 90%, from 5 to 75% and from 10 to 60% by weight of the compounds of the present invention or their pharmaceutically acceptable salt. The amount of active compound or pharmaceutically acceptable salt thereof in the pharmaceutical composition(s) may be from about 1 to about 500 mg, or from about 5 to about 400 mg, or from about 5 to about 250 mg, or from about 7 to about 150 mg. , or any range falling within the broader range of 1 to 500 mg.

Доза активных соединений может варьироваться в зависимости от таких факторов, как возраст и вес пациента, природа и тяжесть заболевания, подлежащего лечению, и таких других факторов. Поэтому любая ссылка, касающаяся фармакологически эффективного количества соединений общей формулы (I), их стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей, относится к вышеупомянутым факторам.The dose of active compounds may vary depending on such factors as the age and weight of the patient, the nature and severity of the disease being treated, and such other factors. Therefore, any reference regarding a pharmacologically effective amount of the compounds of general formula (I), their stereoisomers and pharmaceutically acceptable salts, refers to the above factors.

Аббревиатуры.Abbreviations.

В настоящем документе используются следующие аббревиатуры:The following abbreviations are used in this document:

5-НТ - 5-гидрокситриптамин,5-HT - 5-hydroxytryptamine,

5-НТ6 - 5-гидрокситриптамин 6,5-HT6 - 5-hydroxytryptamine 6,

5-HT_2A - 5-гидрокситриптамин 2 А,5-HT _2A - 5-hydroxytryptamine 2 A,

ACN - ацетонитрил,ACN - acetonitrile,

AlCl₃ - хлорид алюминия,AlCl ₃ - aluminum chloride,

AUC - площадь под кривой,AUC - area under the curve,

С_макс - максимальная концентрация,C _max - maximum concentration,

СМЖ - спинно-мозговая жидкость,CSF - cerebrospinal fluid

CHCl₃ - хлороформ,CHCl ₃ - chloroform,

CDCl₃ - дейтерированный хлороформ,CDCl ₃ - deuterated chloroform,

Cs₂CO₃ - карбонат цезия,Cs ₂ CO ₃ - cesium carbonate,

CD3OD - дейтерированный метанол,CD3OD - deuterated methanol,

ДХМ - дихлорметан,DXM - dichloromethane,

ДЭА - диэтиламин,DEA - diethylamine,

ДМФА - Ν,Ν-диметилформамид,DMF - Ν, Ν-dimethylformamide,

- 11 040294- 11 040294

ДМСО - диметилсульфоксид,DMSO - dimethyl sulfoxide,

ЭДХ - этилен дихлорид,EDC - ethylene dichloride,

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота,EDTA - ethylenediaminetetraacetic acid,

Fe - железо, г - грамм, Н2О - вода, HCl -хлористоводородная кислота, ИПС - изопропиловый спирт, Кс_в - константа связывания, К_и - константа ингибирования, ЖХ-МС/МС - жидкостная хроматография-масс-спектрометрия/масс-спектрометрия, МеОН - метанол,Fe - iron, g - gram, H2O - water, HCl - hydrochloric acid, IPA - isopropyl alcohol, Kc _in - binding constant, K _i - inhibition constant, LC-MS / MS - liquid chromatography-mass spectrometry / mass spectrometry , MeOH - methanol,

NaBH₄ - боргидрид натрия,NaBH ₄ - sodium borohydride,

NaI - иодид натрия,NaI - sodium iodide,

NaIO₄ - периодат натрия,NaIO ₄ - sodium periodate,

NaHCO3 - бикарбонат натрия,NaHCO3 - sodium bicarbonate,

NiCl - хлорид никеля,NiCl - nickel chloride,

Na₂SO₄ - сульфат натрия,Na ₂ SO ₄ - sodium sulfate,

NaBH(OAc)3 - триацетоксиборгидрид натрия,NaBH(OAc)3 - sodium triacetoxyborohydride,

NH3 - аммиак,NH3 - ammonia,

NMDA - N-метил-D-аспартат, п.о. - перорально, Т_уд - время удерживания, ПВ - путь введения, ТГФ - тетрагидрофуран, м-СРВА - метахлорпербензойная кислота, NaBH(OAc)3 - триацетоксиборгидрид натрия, ч - час,NMDA - N-methyl-D-aspartate, p.o. - oral, T _beats - retention time, PT - route of administration, THF - tetrahydrofuran, m-CPBA - metachloroperbenzoic acid, NaBH (OAc) 3 - sodium triacetoxyborohydride, h - hour,

в.в. - внутривенно,c.c. - intravenously,

NOAEL - уровень, при котором отсутствуют видимые неблагоприятные воздействия, нг - нанограмм, мг - миллиграмм,NOAEL - level at which there are no visible adverse effects, ng - nanogram, mg - milligram,

п.к. - подкожно,PC. - subcutaneously,

Т_1/2 - период полураспада.T _1/2 - half-life.

ПримерыExamples

Соединения по настоящему изобретению получали в соответствии со следующими экспериментальными процедурами, используя соответствующие вещества и условия. Следующие примеры приведены только для иллюстрации, но не для ограничения объема настоящего изобретения.Compounds of the present invention were obtained in accordance with the following experimental procedures, using appropriate substances and conditions. The following examples are given only to illustrate and not to limit the scope of the present invention.

Промежуточное соединение 1. 2-Нитро-5-(фенилсульфанил)фенол (т ттIntermediate 1. 2-Nitro-5-(phenylsulfanyl)phenol (t tt

Cs₂CO₃ (78 г, 0,24 моль) добавляли порциями к перемешиваемому раствору 5-фтор-2-нитрофенола (31,4 г, 0,2 моль) и тиофенола (24,2 г, 0,22 моль) в ДМФА (600 мл) при 25-35°С. Полученную массу перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, выливали в холодную воду (1000 мл), в процессе чего осаждались твердые вещества. Эти твердые вещества отфильтровывали и растворяли в CHCl3 (1000 мл). Органический слой промывали рассолом (250 мл), сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией, используя этилацетат:н-гексан (30:70), с получением 2-нитро-5-(фенилсульфанил)фенола.Cs ₂ CO ₃ (78 g, 0.24 mol) was added in portions to a stirred solution of 5-fluoro-2-nitrophenol (31.4 g, 0.2 mol) and thiophenol (24.2 g, 0.22 mol) in DMF (600 ml) at 25-35°C. The resulting mass was stirred for 1 hour at room temperature, poured into cold water (1000 ml), during which solids precipitated. These solids were filtered off and dissolved in CHCl3 (1000 ml). The organic layer was washed with brine (250 ml), dried over anhydrous Na2SO4, filtered and concentrated on a rotary evaporator to give a crude mass which was purified by column chromatography using ethyl acetate:n-hexane (30:70) to give 2-nitro-5- (phenylsulfanyl)phenol.

Выход: 47,2 г (95%);Yield: 47.2 g (95%);

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 6,67-6,68 (м, 2Н), 7,47-7,52 (м, 3Н), 7,55-7,58 (м, 2Н), 7,93-7,95 (д, J=9,52 Гц, 1H), 10,7 (с, 1H); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 6.67-6.68 (m, 2H), 7.47-7.52 (m, 3H), 7.55-7.58 (m, 2H), 7.93-7.95 (d, J=9.52 Hz, 1H), 10.7 (s, 1H);

Масса (m/z): 247,9 (М+Н)+.Weight (m/z): 247.9 (M+H)+.

Промежуточное соединение 2. 5-(Фенилсульфонил)-2-нитрофенолIntermediate 2. 5-(Phenylsulfonyl)-2-nitrophenol

ОН (JITOH (JIT

-+ no₂ м-СРВА (82,4 г, 0,47 моль) добавляли порциями к перемешиваемому раствору 2-нитро-5(фенилсульфанил)фенола (47 г, 0,19 моль) в ДХМ (1000 мл) при комнатной температуре (экзотермический процесс, умеренное кипение растворителя). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в-+ no ₂ m-CPBA (82.4 g, 0.47 mol) was added in portions to a stirred solution of 2-nitro-5(phenylsulfanyl)phenol (47 g, 0.19 mol) in DCM (1000 ml) at room temperature (exothermic process, moderate boiling of the solvent). The reaction mixture was further stirred in

- 12 040294 течение 18 ч при комнатной температуре и выливали в воду (500 мл). Органический слой отделяли, промывали 10% водным раствором NaHCO₃ (250 мл х 2), рассолом (250 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением 5-фенилсульфонил-2нитрофенола.- 12 040294 for 18 hours at room temperature and poured into water (500 ml). The organic layer was separated, washed with 10% aqueous NaHCO ₃ solution (250 ml x 2), brine (250 ml), dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to obtain 5-phenylsulfonyl-2nitrophenol.

Выход: 52,2 г (~100%);Yield: 52.2 g (~100%);

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 7,49-7,52 (дд, J=1,52, 8,76 Гц, 1H), 7,55-7,58 (м, 2Н), 7,63-7,67 (м, 1H), 7,76-7,76 (д, J=1,36 Гц, 1H), 7,96-7,98 (д, J=7,48 Гц, 2Н), 8,22-8,24 (д, J=8,84 Гц, 1H), 10,58 (с, 1H); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 7.49-7.52 (dd, J=1.52, 8.76 Hz, 1H), 7.55-7.58 (m , 2H), 7.63-7.67 (m, 1H), 7.76-7.76 (d, J=1.36 Hz, 1H), 7.96-7.98 (d, J=7 .48 Hz, 2H), 8.22-8.24 (d, J=8.84 Hz, 1H), 10.58 (s, 1H);

Масса (m/z): 278,2 (М-Н)⁺.Weight (m/z): 278.2 (M-H) ⁺ .

Промежуточное соединение 3. 2-Амино-5-(фенилсульфонил)фенол Ч'РIntermediate 3. 2-Amino-5-(phenylsulfonyl)phenol N'P

I J I ТI J I T

Суспензию 5-(фенилсульфонил)-2-нитрофенола (52 г, 0,18 моль), Fe (41 г, 0,74 моль) и NH4Cl (49,8 г, 0,93 моль) в Н₂О, этаноле (D.S) и ТГФ (1000 мл:250 мл:250 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ~4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали до получения остаточной массы. К вышеуказанной смеси добавляли воду (500 мл) и подщелачивали с помощьюSuspension of 5-(phenylsulfonyl)-2-nitrophenol (52 g, 0.18 mol), Fe (41 g, 0.74 mol) and NH4Cl (49.8 g, 0.93 mol) in H ₂ O, ethanol ( DS) and THF (1000 ml:250 ml:250 ml) were heated under reflux for ~4 h. The reaction mixture was cooled to room temperature and concentrated to obtain a residual mass. Water (500 ml) was added to the above mixture and made basic with

NaHCO₃ (pH ~9), продукт экстрагировали с помощью CHCl₃ (500 мл х 3). Органические экстракты объединяли, промывали рассолом (250 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением 2-амино-5-(фенилсульфонил)фенола.NaHCO ₃ (pH ~9), the product was extracted with CHCl ₃ (500 ml x 3). The organic extracts were combined, washed with brine (250 ml), dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give 2-amino-5-(phenylsulfonyl)phenol.

Выход: 41,7 г (~90%);Yield: 41.7 g (~90%);

¹Н-ЯМР (CD3OD, 400 МГц) δ м.д.: 6,71-6,71 (м, 1H), 7,13-7,22 (м, 2Н), 7,51-7,53 (м, 3Н), 7,83-7,85 (м, 2Н); ¹ H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ ppm: 6.71-6.71 (m, 1H), 7.13-7.22 (m, 2H), 7.51-7.53 ( m, 3H), 7.83-7.85 (m, 2H);

Масса (m/z): 250,1 (М+Н)⁺.Mass (m/z): 250.1 (M+H) ⁺ .

Промежуточное соединение 4. трет-Бутил 4-(4-фенилсульфонил-2-гидроксифениламино)-3фторпиперидин-1 -карбоксилатIntermediate 4. tert-Butyl 4-(4-phenylsulfonyl-2-hydroxyphenylamino)-3fluoropiperidine-1-carboxylate

Суспензию 2-амино-5-(фенилсульфонил)фенола (40 г, 0,16 моль), трет-бутил 3-фтор-4оксопиперидин-1-карбоксилата (41,8 г, 0,19 моль) в ЭДХ (1000 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч с получением прозрачного раствора. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и NaBH(OAc)₃ (102 г, 0,48 моль) добавляли к вышеуказанному раствору тремя равными частями, каждую с интервалом времени 1 ч. Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре и снова нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (500 мл) и подщелачивали водн. раствором NH₃ (pH ~9). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (500 мл х 3). Органические экстракты объединяли, промывали рассолом (250 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией, используя этилацетат:н-гексан (30:70), с получением трет-бутил 4-(4-фенилсульфонил-2гидроксифениламино)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата в виде диастереомерной смеси.Suspension of 2-amino-5-(phenylsulfonyl)phenol (40 g, 0.16 mol), tert-butyl 3-fluoro-4-oxopiperidine-1-carboxylate (41.8 g, 0.19 mol) in EDC (1000 ml) heated under reflux for 4 h to obtain a clear solution. The reaction mixture was cooled to room temperature and NaBH(OAc) ₃ (102 g, 0.48 mol) was added to the above solution in three equal parts, each with a time interval of 1 h. The reaction mixture was stirred for 18 h at room temperature and heated again with reflux for 1 h. The reaction mixture was cooled to room temperature, water (500 ml) was added and basified with aq. NH ₃ solution (pH ~ 9). The organic layer was separated and the aqueous layer was extracted with ethyl acetate (500 ml x 3). The organic extracts were combined, washed with brine (250 ml), dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to obtain a crude mass, which was purified by column chromatography using ethyl acetate:n-hexane (30:70) to obtain tert -butyl 4-(4-phenylsulfonyl-2hydroxyphenylamino)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate as a diastereomeric mixture.

Выход: 60,3 г (~83%); ВЭЖХ (55,5% и 40,8%); диастереомерная пара; масса (m/z): 449,4 (М-Н)⁺.Yield: 60.3 g (~83%); HPLC (55.5% and 40.8%); diastereomeric pair; mass (m/z): 449.4 (M-N) ⁺ .

Промежуточное соединение 5. трет-Бутил 4-[4-фенилсульфонил-2-(2-хлорэтокси)фениламино]-3фторпиперидин-1 -карбоксилатIntermediate 5. tert-Butyl 4-[4-phenylsulfonyl-2-(2-chloroethoxy)phenylamino]-3fluoropiperidine-1-carboxylate

Карбонат калия (73,5 г, 0,53 моль) добавляли к перемешиваемой смеси трет-бутил 4-(4фенилсульфонил-2-гидроксифениламино)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (60 г, 0,13 моль), 1-бром-2хлорэтана и NaI (2 г, 0,013 моль) в ацетонитриле (1000 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 ч, охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (1000 мл) и экст- 13 040294 рагировали этилацетатом (1000 мл х 2). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией. Первый элюируемый диастереомер (вместе с некоторым количеством второго элюируемого изомера) получали в смеси этилацетат:CHClз (3:97), а второй элюируемый диастереомер (вместе с некоторым количеством первого элюируемого изомера) получали в смеси этилацетат:CHCl₃ (5:95, а затем этилацетат градиентно увеличивали).Potassium carbonate (73.5 g, 0.53 mol) was added to a stirred mixture of tert-butyl 4-(4phenylsulfonyl-2-hydroxyphenylamino)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate (60 g, 0.13 mol), 1-bromo -2chloroethane and NaI (2 g, 0.013 mol) in acetonitrile (1000 ml). The reaction mixture was heated at reflux for 5 hours, cooled to room temperature, poured into water (1000 ml) and extracted with ethyl acetate (1000 ml x 2). The organic extracts were combined, dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give a crude mass which was purified by column chromatography. The first eluting diastereomer (together with some of the second eluting isomer) was obtained in ethyl acetate:CHCl3 (3:97), and the second eluting diastereomer (together with some of the first eluting isomer) was obtained in ethyl acetate:CHCl ₃ (5:95, a then ethyl acetate was increased in a gradient).

Первый элюируемый изомер.First eluting isomer.

Выход: 12,74 г (~18,6%); ВЭЖХ 85,5%;Yield: 12.74 g (~18.6%); HPLC 85.5%;

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,49 (с, 9Н), 1,53-1,59 (м, 1H), 2,13-2,16 (м, 1H), 3,12-3,25 (м, 2Н), 3,62-3,65 (м, 1H), 3,85-3,88 (м, 2Н), 4,11-4,15 (м, 1H), 4,31-4,34 (м, 3Н), 4,45-4,46 (м, 1H), 4,92-4,94 (д, J=7,38 Гц, 1H), 6,74-6,76 (д, J=8,58 Гц, 1H), 7,24-7,25 (м, 1H), 7,46-7,54 (м, 4Н), 7,89-7,91 (д, J=7,26 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.49 (s, 9H), 1.53-1.59 (m, 1H), 2.13-2.16 (m, 1H ), 3.12-3.25 (m, 2H), 3.62-3.65 (m, 1H), 3.85-3.88 (m, 2H), 4.11-4.15 (m , 1H), 4.31-4.34 (m, 3H), 4.45-4.46 (m, 1H), 4.92-4.94 (d, J=7.38 Hz, 1H), 6.74-6.76 (d, J=8.58 Hz, 1H), 7.24-7.25 (m, 1H), 7.46-7.54 (m, 4H), 7.89- 7.91 (d, J=7.26 Hz, 2H);

Масса (m/z): 513,6, 515,5 (М+Н)+.Weight (m/z): 513.6, 515.5 (M+H)+.

Второй элюируемый изомер.Second eluting isomer.

Выход: 24,69 г (~36%); ВЭЖХ 91,5%;Yield: 24.69 g (~36%); HPLC 91.5%;

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,49 (с, 9Н), 1,79-1,87 (м, 2Н), 2,86-3,12 (м, 2Н), 3,55-3,62 (м, 1H), 3,84-3,87 (м, 2Н), 4,12-4,17 (м, 1H), 4,30-4,33 (м, 2Н), 4,41-4,53 (м, 1H), 4,69-4,92 (м, 1H), 5,13-5,15 (д, J=9,12 Гц, 1H), 6,59-6,61 (д, J=8,46 Гц, 1H), 7,27-7,29 (м, 1H), 7,47-7,56 (м, 4Н), 7,90-7,91 (д, J=7,1 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.49 (s, 9H), 1.79-1.87 (m, 2H), 2.86-3.12 (m, 2H ), 3.55-3.62 (m, 1H), 3.84-3.87 (m, 2H), 4.12-4.17 (m, 1H), 4.30-4.33 (m , 2H), 4.41-4.53 (m, 1H), 4.69-4.92 (m, 1H), 5.13-5.15 (d, J=9.12 Hz, 1H), 6.59-6.61 (d, J=8.46 Hz, 1H), 7.27-7.29 (m, 1H), 7.47-7.56 (m, 4H), 7.90- 7.91 (d, J=7.1 Hz, 2H);

Масса (m/z): 513,4, 515,2 (М+Н)+.Mass (m/z): 513.4, 515.2 (M+H)+.

Промежуточное соединение 6. трет-Бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3-дигидробензо[1,4]оксазин-4ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилатIntermediate 6 tert-Butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3-dihydrobenzo[1,4]oxazin-4yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate

ВосVos

Гидрид натрия (2,6 г, 0,064 моль, 60% дисперсия в минеральном масле) порциями добавляли к перемешиваемой смеси трет-бутил 4-[4-фенилсульфонил-2-(2-хлорэтокси)фениламино]-3-фторпиперидин1-карбоксилата (второй элюируемый изомер, 22 г, 0,04 моль) и NaI (0,32 г, 0,002 моль) в ДМФА (220 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 18 ч. Затем реакционную смесь выливали в воду (500 мл) и экстрагировали с помощью CHCl₃ (300 мл х 3). Органические экстракты объединяли, промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением трет-бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3-дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3фторпиперидин-1-карбоксилата в виде не совсем белого твердого вещества. Эти твердые вещества растирали с н-гексаном (100 мл х 3) и продукт сушили в вакууме на роторном испарителе.Sodium hydride (2.6 g, 0.064 mol, 60% dispersion in mineral oil) was added portionwise to a stirred mixture of tert-butyl 4-[4-phenylsulfonyl-2-(2-chloroethoxy)phenylamino]-3-fluoropiperidine 1-carboxylate (second eluting isomer, 22 g, 0.04 mol) and NaI (0.32 g, 0.002 mol) in DMF (220 ml) at room temperature and stirred for 18 h. The reaction mixture was then poured into water (500 ml) and extracted with CHCl ₃ (300 ml x 3). The organic extracts were combined, washed with brine (50 ml), dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give tert-butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3-dihydrobenzo[1,4]oxazine-4 -yl)-3fluoropiperidine-1-carboxylate as an off-white solid. These solids were triturated with n-hexane (100 ml x 3) and the product was dried under vacuum on a rotary evaporator.

Выход: 18,3 г (~89%); ВЭЖХ (90,1%);Yield: 18.3 g (~89%); HPLC (90.1%);

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,47 (с, 9Н), 1,64-1,65 (м, 1H), 2,21-2,31 (м, 1H), 2,82-3,05 (м, 2Н), 3,37-3,47 (м, 1H), 3,54-3,57 (м, 1H), 3,78-3,89 (м, 1H), 4,12-4,18 (м, 2Н), 4,42-4,59 (м, 2Н), 4,78-4,90 (м, 1H), 6,58-6,60 (д, J=8,74 Гц, 1H), 7,31-7,31 (д, J=1,94 Гц, 1H), 7,41-7,51 (м, 4Н), 7,89-7,90 (д, J=7,21 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.47 (s, 9H), 1.64-1.65 (m, 1H), 2.21-2.31 (m, 1H ), 2.82-3.05 (m, 2H), 3.37-3.47 (m, 1H), 3.54-3.57 (m, 1H), 3.78-3.89 (m , 1H), 4.12-4.18 (m, 2H), 4.42-4.59 (m, 2H), 4.78-4.90 (m, 1H), 6.58-6.60 (d, J=8.74 Hz, 1H), 7.31-7.31 (d, J=1.94 Hz, 1H), 7.41-7.51 (m, 4H), 7.89- 7.90 (d, J=7.21 Hz, 2H);

Масса (m/z): 477,2 (М+Н)+.Weight (m/z): 477.2 (M+H)+.

Промежуточное соединение 7. Хиральное разделение трет-бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата.Intermediate 7 Chiral resolution of tert-butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate.

Промежуточное соединение 6 (имеющее 10% минорной фракции и 90% основной фракции по данным ВЭЖХ) разделяли хиральной колоночной хроматографией на промежуточное соединение 7 в виде четырех отдельных пиков, используя метод, приведенный ниже.Intermediate 6 (having 10% minor fraction and 90% major fraction by HPLC) was separated by chiral column chromatography into intermediate 7 as four distinct peaks using the method below.

Метод. Колонка: CHIRALPAK IC, подвижная фаза: ДХМ:этилацетат (75:25), скорость потока: 1 мл/мин, температура: 25°С, длина волны: 320 нМ.Method. Column: CHIRALPAK IC, mobile phase: DCM:ethyl acetate (75:25), flow rate: 1 ml/min, temperature: 25° C., wavelength: 320 nM.

Промежуточное соединение 7 (пик I): хиральная ВЭЖХ 99,9%, (Т_уд: 8,6 мин);Intermediate 7 (peak I): chiral HPLC 99.9% ( _Tsp : 8.6 min);

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,47 (с, 9Н), 1,61-1,68 (м, 2Н), 1,82-1,86 (м, 1H), 2,78-2,84 (м, 2Н), 3,34-3,44 (м, 2Н), 3,88-3,91 (м, 1H), 4,16-4,22 (м, 3Н), 4,57-4,62 (м, 1H), 6,77-6,79 (д, J=8,76 Гц, 1H), 7,317,31 (д, J=1,72 Гц, 1H), 7,42-7,52 (м, 4Н), 7,88-7,90 (д, J=7,48 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.47 (s, 9H), 1.61-1.68 (m, 2H), 1.82-1.86 (m, 1H ), 2.78-2.84 (m, 2H), 3.34-3.44 (m, 2H), 3.88-3.91 (m, 1H), 4.16-4.22 (m , 3H), 4.57-4.62 (m, 1H), 6.77-6.79 (d, J=8.76 Hz, 1H), 7.317.31 (d, J=1.72 Hz, 1H), 7.42-7.52 (m, 4H), 7.88-7.90 (d, J=7.48 Hz, 2H);

Масса (m/z): 477,3 (М+Н)+.Weight (m/z): 477.3 (M+H)+.

Промежуточное соединение 7 (пик II): хиральная ВЭЖХ 99,8%, (Т_уд: 10,7 мин);Intermediate 7 (peak II): chiral HPLC 99.8% ( _Tsp : 10.7 min);

¹Н-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ м.д.: 1,47 (с, 9Н), 1,61-1,68 (м, 2Н), 1,82-1,86 (м, 1H), 2,78-2,84 (м, 2Н), 3,34-3,44 (м, 2Н), 3,88-3,91 (м, 1H), 4,16-4,22 (м, 3Н), 4,57-4,62 (м, 1H), 6,77-6,79 (д, J=8,76 Гц, 1H), 7,317,31 (д, J=1,72 Гц, 1H), 7,42-7,52 (м, 4Н), 7,88-7,90 (д, J=7,48 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ ppm: 1.47 (s, 9H), 1.61-1.68 (m, 2H), 1.82-1.86 (m, 1H) , 2.78-2.84 (m, 2H), 3.34-3.44 (m, 2H), 3.88-3.91 (m, 1H), 4.16-4.22 (m, 3H), 4.57-4.62 (m, 1H), 6.77-6.79 (d, J=8.76 Hz, 1H), 7.317.31 (d, J=1.72 Hz, 1H ), 7.42-7.52 (m, 4H), 7.88-7.90 (d, J=7.48 Hz, 2H);

Масса (m/z): 477,5 (М+Н)+.Weight (m/z): 477.5 (M+H)+.

- 14 040294- 14 040294

Промежуточное соединение 7 (пик III): хиральная ВЭЖХ 99,9%, (Т_уд: 12,2 мин);Intermediate 7 (peak III): chiral HPLC 99.9% ( _Tsp : 12.2 min);

+-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,47 (с, 9Н), 1,62-1,64 (м, 1H), 2,24-2,28 (м, 1H), 2,84-3,01 (м, 2Н), 3,42-3,47 (м, 1H), 3,54-3,58 (м, 1H), 3,76-3,87 (м, 1H), 4,14-4,19 (м, 2Н), 4,43-4,50 (м, 2Н), 4,78-4,91 (м, 1H), 6,58-6,60 (д, J=8,74 Гц, 1H), 7,31-7,32 (д, J=1,70 Гц, 1H), 7,41-7,53 (м, 4Н), 7,89-7,91 (д, J=7,31 Гц, 2Н);+-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.47 (s, 9H), 1.62-1.64 (m, 1H), 2.24-2.28 (m, 1H) , 2.84-3.01 (m, 2H), 3.42-3.47 (m, 1H), 3.54-3.58 (m, 1H), 3.76-3.87 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 4.43-4.50 (m, 2H), 4.78-4.91 (m, 1H), 6.58-6.60 ( d, J=8.74 Hz, 1H), 7.31-7.32 (d, J=1.70 Hz, 1H), 7.41-7.53 (m, 4H), 7.89-7 .91 (d, J=7.31 Hz, 2H);

Масса (m/z): 477,1 (М+Н)+.Weight (m/z): 477.1 (M+H)+.

Промежуточное соединение 7 (пик IV): хиральная ВЭЖХ 99,7%, (Т_уд: 17,8 мин);Intermediate 7 (peak IV): chiral HPLC 99.7% ( _Tsp : 17.8 min);

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,47 (с, 9Н), 1,62-1,64 (м, 1H), 2,24-2,28 (м, 1H), 2,84-3,01 (м, 2Н), 3,42-3,47 (м, 1H), 3,54-3,58 (м, 1H), 3,76-3,87 (м, 1H), 4,14-4,19 (м, 2Н), 4,43-4,50 (м, 2Н), 4,78-4,91 (м, 1H), 6,58-6,60 (д, J=8,74 Гц, 1H), 7,31-7,32 (д, J=1,70 Гц, 1H), 7,41-7,53 (м, 4Н), 7,89 7,91 (д, J=7,31 Гц, 2Н); ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.47 (s, 9H), 1.62-1.64 (m, 1H), 2.24-2.28 (m, 1H ), 2.84-3.01 (m, 2H), 3.42-3.47 (m, 1H), 3.54-3.58 (m, 1H), 3.76-3.87 (m , 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 4.43-4.50 (m, 2H), 4.78-4.91 (m, 1H), 6.58-6.60 (d, J=8.74 Hz, 1H), 7.31-7.32 (d, J=1.70 Hz, 1H), 7.41-7.53 (m, 4H), 7.89 7 .91 (d, J=7.31 Hz, 2H);

Масса (m/z): 477,1 (М+Н)⁺.Mass (m/z): 477.1 (M+H) ⁺ .

Пример 1. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (пик III)Example 1 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak III)

Ч,РH, R

Метанольный HCl (раствор 16% мас./об., 1,3 мл, 0,005 моль) добавляли к перемешиваемой суспензии трет-бутил (4-(7-фенилсульфонил-2,3-дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1карбоксилата (промежуточное соединение 7 (пик III), 0,5 г, 0,001 моль) в метаноле (10 мл), полученную в результате смесь нагревали с обратным холодильником в течение ~4 ч с получением прозрачного раствора. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме на роторном испарителе с получением кристаллического твердого вещества.Methanolic HCl (16% w/v solution, 1.3 ml, 0.005 mol) was added to a stirred suspension of tert-butyl (4-(7-phenylsulfonyl-2,3-dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl )-3-fluoropiperidine-1-carboxylate (intermediate 7 (peak III), 0.5 g, 0.001 mol) in methanol (10 mL), the resulting mixture was refluxed for ~4 h to give a clear solution. the mixture was cooled to room temperature and concentrated in vacuo on a rotary evaporator to give a crystalline solid.

Выход: 0,41 г (95%);Yield: 0.41 g (95%);

¹Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ м.д.: 1,81-1,84 (м, 1H), 2,24-2,32 (м, 1H), 3,10-3,16 (м, 1H), 3,36-3,41 (м, 2Н), 3,46-3,53 (м, 3Н), 4,09-4,18 (м, 2Н), 4,32-4,38 (м, 1H), 5,05-5,17 (д, J=47,8 Гц, 1H), 7,04-7,06 (д, J=8,89 Гц, 1H), 7,17-7,18 (д, J=2,05 Гц, 1H), 7,33-7,36 (м, 1H), 7,55-7,65 (м, 3Н), 7,88-7,89 (д, J=7,4 Гц, 2Н), 8,73 (уш.с, 1H), 9,52 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 1.81-1.84 (m, 1H), 2.24-2.32 (m, 1H), 3.10-3, 16 (m, 1H), 3.36-3.41 (m, 2H), 3.46-3.53 (m, 3H), 4.09-4.18 (m, 2H), 4.32- 4.38 (m, 1H), 5.05-5.17 (d, J=47.8 Hz, 1H), 7.04-7.06 (d, J=8.89 Hz, 1H), 7 .17-7.18 (d, J=2.05 Hz, 1H), 7.33-7.36 (m, 1H), 7.55-7.65 (m, 3H), 7.88-7 .89 (d, J=7.4 Hz, 2H), 8.73 (br.s, 1H), 9.52 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 377,0 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 99,93.Mass (m/z): 377.0 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 99.93.

Пример 2. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (пик I).Example 2 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak I).

Указанное в заголовке соединение получали из трет-бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (промежуточное соединение 7 (пик I)), следуя экспериментальной процедуре из примера 1.The title compound was prepared from tert-butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate (intermediate 7 (peak I)) following experimental procedure from example 1.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,87-1,90 (м, 1H), 1,97-2,09 (м, 1H), 3,04-3,10 (м, 2Н), 3,37-3,39 (м, 3Н), 3,63-3,66 (м, 1H), 4,14-4,18 (м, 2Н), 4,46-4,48 (м, 1H), 5,00-5,15 (м, 1H), 7,07-7,11 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,15-7,16 (д, J=1,69 Гц, 1H), 7,34-7,36 (дд, J=1,27, 8,7 Гц, 1H), 7,55-7,65 (м, 3Н), 7,87-7,89 (д, J=7,38 Гц, 2Н), 8,56 (уш.с, 1H), 9,38 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.87-1.90 (m, 1H), 1.97-2.09 (m, 1H), 3.04-3 .10 (m, 2H), 3.37-3.39 (m, 3H), 3.63-3.66 (m, 1H), 4.14-4.18 (m, 2H), 4.46 -4.48 (m, 1H), 5.00-5.15 (m, 1H), 7.07-7.11 (d, J=8.84 Hz, 1H), 7.15-7.16 (d, J=1.69 Hz, 1H), 7.34-7.36 (dd, J=1.27, 8.7 Hz, 1H), 7.55-7.65 (m, 3H), 7.87-7.89 (d, J=7.38 Hz, 2H), 8.56 (br.s, 1H), 9.38 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 377,2 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 99,96.Weight (m/z): 377.2 (M+H)+; HPLC (% purity): 99.96.

Пример 3. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (пик II).Example 3 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak II).

Указанное в заголовке соединение получали из трет-бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (промежуточное соединение 7 (пик II)), следуя экспериментальной процедуре из примера 1.The title compound was prepared from tert-butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate (intermediate 7 (peak II)) following experimental procedure from example 1.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,89-1,90 (м, 1H), 1,99-2,02 (м, 1H), 3,07-3,16 (м, 2Н), 3,39-3,40 (м, 3Н), 3,64-3,66 (м, 1H), 4,13-4,19 (м, 2Н), 4,46-4,48 (м, 1H), 5,13-5,15 (м, 1H), 7,09-7,11 (д, J=8,91 Гц, 1H), 7,15-7,16 (д, J=2,61 Гц, 1H), 7,34-7,36 (дд, J=1,76, 8,75 Гц, 1H), 7,55-7,65 (м, 3Н), 7,87-7,89 (д, J=7,4 Гц, 2Н), 8,53 (уш.с, 1H), 9,34 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.89-1.90 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 3.07-3 .16 (m, 2H), 3.39-3.40 (m, 3H), 3.64-3.66 (m, 1H), 4.13-4.19 (m, 2H), 4.46 -4.48 (m, 1H), 5.13-5.15 (m, 1H), 7.09-7.11 (d, J=8.91 Hz, 1H), 7.15-7.16 (d, J=2.61 Hz, 1H), 7.34-7.36 (dd, J=1.76, 8.75 Hz, 1H), 7.55-7.65 (m, 3H), 7.87-7.89 (d, J=7.4 Hz, 2H), 8.53 (br.s, 1H), 9.34 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 377,2 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 94,00.Weight (m/z): 377.2 (M+H)+; HPLC (% purity): 94.00.

Пример 4. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (пик IV).Example 4 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak IV).

Указанное в заголовке соединение получали из трет-бутил 4-(7-фенилсульфонил-2,3дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (промежуточное соединение 7 (пик IV)), следуя экспериментальной процедуре из примера 1.The title compound was prepared from tert-butyl 4-(7-phenylsulfonyl-2,3dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate (intermediate 7 (peak IV)) following the experimental procedure from example 1.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ м.д.: 1,81-1,84 (м, 1H), 2,27-2,34 (м, 1H), 3,12-3,15 (м, 1H), 3,37-3,52 (м, 5Н), 4,10-4,16 (м, 2Н), 4,31-4,37 (м, 1H), 5,05-5,17 (д, J=47,8 Гц, 1H), 7,05-7,07 (д, J=8,86 Гц, 1H), 7,17- ¹ H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 1.81-1.84 (m, 1H), 2.27-2.34 (m, 1H), 3.12-3, 15 (m, 1H), 3.37-3.52 (m, 5H), 4.10-4.16 (m, 2H), 4.31-4.37 (m, 1H), 5.05- 5.17 (d, J=47.8 Hz, 1H), 7.05-7.07 (d, J=8.86 Hz, 1H), 7.17-

- 15 040294- 15 040294

7,17 (д, J=1,99 Гц, 1H), 7,33-7,35 (дд, J=1,87, 8,66 Гц, 1H), 7,56-7,63 (м, 3Н), 7,87-7,89 (д, J=7,38 Гц, 2Н),7.17 (d, J=1.99 Hz, 1H), 7.33-7.35 (dd, J=1.87, 8.66 Hz, 1H), 7.56-7.63 (m, 3H), 7.87-7.89 (d, J=7.38 Hz, 2H),

8,68 (уш.с, 1H), 9,66 (уш.с, 1Н);8.68 (br.s, 1H), 9.66 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 377,2 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 99,63.Weight (m/z): 377.2 (M+H)+; HPLC (% purity): 99.63.

Примеры с 5 по 8. Соединения из примеров с 5 по 8 получали, следуя экспериментальным процедурам, описанным в примерах с 1 по 4, с некоторыми некритическими вариациями с использованием соответствующих промежуточных соединений.Examples 5 to 8 Compounds of Examples 5 to 8 were prepared following the experimental procedures described in Examples 1 to 4 with some minor variations using the appropriate intermediates.

Пример 5. 7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорид (пик I)Example 5 7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak I)

¹Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ м.д.: 1,90-2,01 (м, 2Н), 3,05-3,15 (м, 3Н), 3,34-3,39 (м, 2Н), 3,64-3,67 (м, 1H), 4,12-4,19 (м, 2Н), 4,45-4,49 (м, 1H), 4,94-5,13 (м, 1H), 7,08-7,10 (д, J=8,90 Гц, 1H), 7,20-7,21 (д, J=2,09 Гц, 1H), 7,37-7,40 (дд, J=2,04, 8,75 Гц, 1H), 7,49-7,51 (м, 1H), 7,61-7,65 (м, 1H), 7,71-7,75 (м, 2Н), 9,09 (уш.с, 1H), 9,29 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 1.90-2.01 (m, 2H), 3.05-3.15 (m, 3H), 3.34-3, 39 (m, 2H), 3.64-3.67 (m, 1H), 4.12-4.19 (m, 2H), 4.45-4.49 (m, 1H), 4.94- 5.13 (m, 1H), 7.08-7.10 (d, J=8.90 Hz, 1H), 7.20-7.21 (d, J=2.09 Hz, 1H), 7 .37-7.40 (dd, J=2.04, 8.75 Hz, 1H), 7.49-7.51 (m, 1H), 7.61-7.65 (m, 1H), 7 .71-7.75 (m, 2H), 9.09 (br.s, 1H), 9.29 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 395,2 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 99,8.Mass (m/z): 395.2 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 99.8.

Пример 6. 7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (пик II).Example 6 7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak II).

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,90-2,01 (м, 2Н), 3,06-3,15 (м, 3Н), 3,35-3,39 (м, 2Н), 3,64-3,67 (м, 1H), 4,12-4,19 (м, 2Н), 4,45-4,50 (м, 1H), 4,94-5,10 (м, 1H), 7,08-7,10 (д, J=9,8 Гц, 1H), 7,20-7,21 (д, J=2,02 Гц, 1H), 7,37-7,40 (дд, J=2,02, 8,74 Гц, 1H), 7,46-7,51 (м, 1H), 7,59-7,64 (м, 1H), 7,71-7,75 (м, 2Н), 9,09 (уш.с, 1H), 9,29 (уш.с, 1Н);1H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.90-2.01 (m, 2H), 3.06-3.15 (m, 3H), 3.35-3, 39 (m, 2H), 3.64-3.67 (m, 1H), 4.12-4.19 (m, 2H), 4.45-4.50 (m, 1H), 4.94- 5.10 (m, 1H), 7.08-7.10 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.20-7.21 (d, J=2.02 Hz, 1H), 7 .37-7.40 (dd, J=2.02, 8.74 Hz, 1H), 7.46-7.51 (m, 1H), 7.59-7.64 (m, 1H), 7 .71-7.75 (m, 2H), 9.09 (br.s, 1H), 9.29 (br.s, 1H);

Пример 7. 7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорид (пик III).Example 7 7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak III).

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,81-1,84 (м, 1H), 2,17-2,31 (м, 1H), 3,12-3,15 (м, 1H), 3,31-3,36 (м, 2Н), 3,46-3,57 (м, 3Н), 4,11-4,17 (м, 2Н), 4,29-4,40 (м, 1H), 5,50-5,17 (д, J=47,68 Гц, 1H), 7,02-7,04 (д, J=8,87 Гц, 1H), 7,22-7,22 (д, J=1,69 Гц, 1H), 7,37-7,39 (дд, J=1,52, 8,68 Гц, 1H), 7,47-7,51 (м, 1H), 7,60-7,65 (м, 1H), 7,72-7,76 (м, 2Н), 8,45-8,68 (уш.с, 1H), 9,36 (уш.с, 1Н);1H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.81-1.84 (m, 1H), 2.17-2.31 (m, 1H), 3.12-3, 15 (m, 1H), 3.31-3.36 (m, 2H), 3.46-3.57 (m, 3H), 4.11-4.17 (m, 2H), 4.29- 4.40 (m, 1H), 5.50-5.17 (d, J=47.68 Hz, 1H), 7.02-7.04 (d, J=8.87 Hz, 1H), 7 .22-7.22 (d, J=1.69 Hz, 1H), 7.37-7.39 (dd, J=1.52, 8.68 Hz, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.60-7.65 (m, 1H), 7.72-7.76 (m, 2H), 8.45-8.68 (br. s, 1H), 9.36 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 395,2 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 99,39.Mass (m/z): 395.2 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 99.39.

Пример 8. 7-(3-Фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорид (пик IV).Example 8 7-(3-Fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak IV).

1Н-ЯМР (ДМСО-Й6, 400 МГц) δ м.д.: 1,81-1,84(м, 1H), 2,25-2,31 (м, 1H), 3,11-3,13 (м, 1H), 3,32-3,36 (м, 2Н), 3,46-3,57 (м, 3Н), 4,13-4,14 (м, 2Н), 4,28-4,40 (м, 1H), 5,05-5,17 (д, J=47,71 Гц, 1H), 7,01-7,03 (д, J=8,74 Гц, 1H), 7,22-7,22 (д, J=1,65 Гц, 1H), 7,37-7,39 (м, 1H), 7,47-7,51 (м, 1H), 7,59-7,65 (м, 1H), 7,72-7,76 (м, 2Н), 8,66 (уш.с, 1H), 9,24 (уш.с, 1Н);1H-NMR (DMSO-H6, 400 MHz) δ ppm: 1.81-1.84(m, 1H), 2.25-2.31(m, 1H), 3.11-3.13 (m, 1H), 3.32-3.36 (m, 2H), 3.46-3.57 (m, 3H), 4.13-4.14 (m, 2H), 4.28-4 .40 (m, 1H), 5.05-5.17 (d, J=47.71 Hz, 1H), 7.01-7.03 (d, J=8.74 Hz, 1H), 7, 22-7.22 (d, J=1.65 Hz, 1H), 7.37-7.39 (m, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.59-7, 65 (m, 1H), 7.72-7.76 (m, 2H), 8.66 (br.s, 1H), 9.24 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 395,2 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 98,78.Mass (m/z): 395.2 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 98.78.

Пример 9. Рацемический-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлоридExample 9 Racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride

Стадия: 2. Нитро-5-(пиридин-2-сульфонил)фенолStage: 2. Nitro-5-(pyridine-2-sulfonyl)phenol

NaIO₄ (29 г, 0,13 моль) добавляли к перемешиваемой смеси 2-нитро-5-(пиридин-2илсульфанил)фенола (6,8 г, 0,027 моль) в смеси ИПС:Н₂О (100 мл:200 мл) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, экстрагировали с использованием ДХМ (150 мл х 3). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией, используя этилацетат:н-гексан (30:70), сNaIO ₄ (29 g, 0.13 mol) was added to a stirred mixture of 2-nitro-5-(pyridin-2ylsulfanyl)phenol (6.8 g, 0.027 mol) in IPA:H ₂ O (100 ml:200 ml) and the reaction mixture was heated under reflux for 24 h. Then the reaction mixture was cooled to room temperature, extracted with DCM (150 ml x 3). The organic extracts were combined, dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give a crude mass which was purified by column chromatography using ethyl acetate:n-hexane (30:70), with

- 16 040294 получением 2-нитро-5-(пиридин-2-сульфонил)фенола.- 16 040294 obtaining 2-nitro-5-(pyridine-2-sulfonyl)phenol.

Выход: 6,2 г (81%);Yield: 6.2 g (81%);

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 7,45-7,48 (м, 1H), 7,69-7,75 (м, 2Н), 8,02-8,04 (д, J=8,56 Гц, 1H), ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 7.45-7.48 (m, 1H), 7.69-7.75 (m, 2H), 8.02-8 .04 (d, J=8.56 Hz, 1H),

8,16-8,28 (м, 2Н), 8,72-8,73 (д, J=4,2 Гц, 1H), 11,96 (уш.с, 1H);8.16-8.28 (m, 2H), 8.72-8.73 (d, J=4.2 Hz, 1H), 11.96 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 279,2 (М-Н)⁺.Weight (m/z): 279.2 (M-H) ⁺ .

Рацемический-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]окса зина гидрохлорид.Racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя экспериментальным процедурам, описанным в промежуточных соединениях с 4 по 6, с некоторыми некритическими вариациями с использованием 2-нитро-5-(пиридин-2-сульфонил)фенола (полученного на вышеуказанной стадии) и соответствующих промежуточных соединений.The title compound was synthesized following the experimental procedures described in Intermediates 4 to 6, with some minor variations, using 2-nitro-5-(pyridine-2-sulfonyl)phenol (prepared in the above step) and appropriate intermediates.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,82-1,85 (м, 1H), 2,24-2,32 (м, 1H), 3,11-3,15 (м, 2Н), 3,47-3,53 (м, 4Н), 4,09-4,18 (м, 2Н), 4,30-4,39 (м, 1H), 5,06-5,18 (д, J=47,81 Гц, 1H), 7,04-7,07 (д, J=8,86 Гц, 1H), 7,17-7,17 (д, J=2 Гц, 1H), 7,33-7,36 (дд, J=1,84, 8,68 Гц, 1H), 7,61-7,64 (м, 1H), 8,06-8,11 (м, 2Н), 8,66-8,70 (м, 2Н), 9,49 (уш.с, 1H);1H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.82-1.85 (m, 1H), 2.24-2.32 (m, 1H), 3.11-3, 15 (m, 2H), 3.47-3.53 (m, 4H), 4.09-4.18 (m, 2H), 4.30-4.39 (m, 1H), 5.06- 5.18 (d, J=47.81 Hz, 1H), 7.04-7.07 (d, J=8.86 Hz, 1H), 7.17-7.17 (d, J=2 Hz , 1H), 7.33-7.36 (dd, J=1.84, 8.68 Hz, 1H), 7.61-7.64 (m, 1H), 8.06-8.11 (m , 2H), 8.66-8.70 (m, 2H), 9.49 (br. s, 1H);

Масса (m/z): 378,2 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 97,54.Mass (m/z): 378.2 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 97.54.

Пример 10. Рацемический-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]оксазина гидрохлоридExample 10 Racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-2Hbenzo[1,4]oxazine hydrochloride

Стадия-1. 2-Нитро-5-(пиридин-4-сульфонил)фенолStage-1. 2-Nitro-5-(pyridine-4-sulfonyl)phenol

Указанное в заголовке соединение синтезировали из 2-нитро-5-(пиридин-4-илсульфанил)фенола, следуя процедуре, описанной на стадии 1 примера 9.The title compound was synthesized from 2-nitro-5-(pyridin-4-ylsulfanyl)phenol following the procedure described in Step 1 of Example 9.

Выход: 1,4 г (95%);Yield: 1.4 g (95%);

¹Н-ЯМР (ДМСО-d4, 400 МГц) δ м.д.: 7,53-7,55 (д, J=8,04 Гц, 1H), 7,66-7,67 (м, 1H), 7,91-7,93 (м, 2Н), 8,05-8,07 (д, J=8,16 Гц, 1H), 8,90-8,92 (м, 2Н), 12,03 (уш.с, 1H); ¹ H-NMR (DMSO-d4, 400 MHz) δ ppm: 7.53-7.55 (d, J=8.04 Hz, 1H), 7.66-7.67 (m, 1H) , 7.91-7.93 (m, 2H), 8.05-8.07 (d, J=8.16 Hz, 1H), 8.90-8.92 (m, 2H), 12.03 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 279,2 (М-Н)⁺.Weight (m/z): 279.2 (M-H) ⁺ .

Рацемический-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]окса зина гидрохлорид.Racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя экспериментальным процедурам, описанным в промежуточных соединениях 4-6, с некоторыми некритическими вариациями с использованием 2нитро-5-(пиридин-4-сульфонил)фенола (полученного на вышеуказанной стадии) и соответствующих промежуточных соединений.The title compound was synthesized following the experimental procedures described in Intermediates 4-6 with some minor variations using 2nitro-5-(pyridine-4-sulfonyl)phenol (prepared in the above step) and appropriate intermediates.

Масса (m/z): 378,4 (М+Н)⁺.Mass (m/z): 378.4 (M+H) ⁺ .

Пример 11. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фтор-3-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (первый элюируемый изомер)Example 11 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (first eluting isomer)

Этот пример получали, следуя экспериментальным процедурам, описанным в промежуточном соединении 6, с некоторыми некритическими вариациями с использованием соответствующих промежуточных соединений.This example was prepared following the experimental procedures described in Intermediate 6 with some minor variations using the appropriate intermediates.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ м.д.: 1,46-1,52 (д, J=24,5 Гц, 3Н), 2,02-2,05 (м, 2Н), 3,07-3,08 (м, 1H), 3,29-3,31 (м, 2Н), 3,39-3,47 (м, 3Н), 4,12-4,18 (м, 2Н), 4,39-4,45 (м, 1H), 7,07-7,09 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,13 (д, J=1,81 Гц, 1H), 7,30-7,33 (дд, J=1,5, 8,7 Гц, 1H), 7,54-7,63 (м, 3Н), 7,85-7,87 (д, J=7,49 Гц, 2Н), 8,97 (уш.с, 1H), 9,63 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 1.46-1.52 (d, J=24.5 Hz, 3H), 2.02-2.05 (m, 2H) , 3.07-3.08 (m, 1H), 3.29-3.31 (m, 2H), 3.39-3.47 (m, 3H), 4.12-4.18 (m, 2H), 4.39-4.45 (m, 1H), 7.07-7.09 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.13 (d, J=1.81 Hz, 1H ), 7.30-7.33 (dd, J=1.5, 8.7 Hz, 1H), 7.54-7.63 (m, 3H), 7.85-7.87 (d, J =7.49 Hz, 2H), 8.97 (br.s, 1H), 9.63 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 391,3 (М+Н)⁺; ВЭЖХ (% чистоты): 99,79.Mass (m/z): 391.3 (M+H) ⁺ ; HPLC (% purity): 99.79.

- 17 040294- 17 040294

Пример 12. 7-Фенилсульфонил-4-(3-фтор-3-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорид (второй элюируемый изомер)Example 12 7-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (second eluting isomer)

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 1,26-1,32 (д, J=22,3 Гц, 3Н), 1,76-1,79 (м, 1H), 2,17-2,26 (м, 1H), 3,05-3,10 (м, 1H), 3,32-3,49 (м, 5Н), 4,08-4,20 (м, 2Н), 4,29-4,39 (м, 1H), 7,12-7,15 (, 2Н), 7,31-7,33 (дд, J=1,53, 8,67 Гц, 1H), 7,54-7,64 (м, 3Н), 7,87-7,89 (д, J=7,44 Гц, 2Н), 8,66 (уш.с, 1H), 9,53 (уш.с, 1Н); ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 1.26-1.32 (d, J=22.3 Hz, 3H), 1.76-1.79 (m, 1H ), 2.17-2.26 (m, 1H), 3.05-3.10 (m, 1H), 3.32-3.49 (m, 5H), 4.08-4.20 (m , 2H), 4.29-4.39 (m, 1H), 7.12-7.15 (, 2H), 7.31-7.33 (dd, J=1.53, 8.67 Hz, 1H), 7.54-7.64 (m, 3H), 7.87-7.89 (d, J=7.44 Hz, 2H), 8.66 (br.s, 1H), 9.53 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 391,3 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 99,07.Weight (m/z): 391.3 (M+H)+; HPLC (% purity): 99.07.

Пример 13. Рацемический-6-фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4] оксазина гидрохлоридExample 13 Racemic 6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride

Стадия 1. 4-Фенилсульфонил-2-нитрофенолStage 1. 4-Phenylsulfonyl-2-nitrophenol

AlCl₃ (7,2 г, 0,53 моль) добавляли к 2-нитрофенолу (5 г, 0,035 моль) при комнатной температуре при механическом перемешивании, выдерживали в течение ~15 мин с последующим добавлением бензолсульфонилхлорида (7,6 г, 0,043 моль). Реакционную смесь нагревали до 140°С и выдерживали в течение 3 ч с получением густого темного вещества. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли к холодной воде (250 мл), экстрагировали этилацетатом (100 мл х 3). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией, используя этилацетат:нгексан (20:80), с получением 4-фенилсульфонил-2-нитрофенола.AlCl ₃ (7.2 g, 0.53 mol) was added to 2-nitrophenol (5 g, 0.035 mol) at room temperature with mechanical stirring, kept for ~15 min, followed by the addition of benzenesulfonyl chloride (7.6 g, 0.043 mol ). The reaction mixture was heated to 140° C. and held for 3 hours to give a thick dark substance. The reaction mixture was cooled to room temperature, added to cold water (250 ml), extracted with ethyl acetate (100 ml x 3). The organic extracts were combined, dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give a crude mass which was purified by column chromatography using ethyl acetate:nhexane (20:80) to give 4-phenylsulfonyl-2-nitrophenol.

Выход: 4,3 г (43%);Yield: 4.3 g (43%);

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 7,28-7,30 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,59-7,63 (м, 2Н), 7,67-7,71 (м, 1H), 7,95-7,97 (д, J=8,81 Гц, 2Н), 8,02-8,04 (дд, J=2,18, 8,95 Гц, 1H), 8,40-8,41 (д, J=2,14 Гц, 1H). ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 7.28-7.30 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.59-7.63 (m, 2H ), 7.67-7.71 (m, 1H), 7.95-7.97 (d, J=8.81 Hz, 2H), 8.02-8.04 (dd, J=2.18 , 8.95 Hz, 1H), 8.40-8.41 (d, J=2.14 Hz, 1H).

Стадия 2. 2-Амино-4-фенилсульфонилфенолStage 2. 2-Amino-4-phenylsulfonylphenol

Указанное в заголовке соединение синтезировали из 4-фенилсульфонил-2-нитрофенола в соответствии с процедурой, описанной в промежуточном соединении 3.The title compound was synthesized from 4-phenylsulfonyl-2-nitrophenol according to the procedure described in Intermediate 3.

Выход: 3,4 г (89%);Yield: 3.4 g (89%);

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ м.д.: 5,03 (уш.с, 2Н), 6,74-6,76 (д, J=8,2 Гц, 1H), 6,98-7,00 (дд, J=2,12, 8,16 Гц, 1H), 7,07-7,08 (д, J=2,08 Гц, 1H), 7,54-7,63 (м, 3Н), 7,79-7,81 (д, J=7,2 Гц, 2Н), 10,2 (уш.с, 1H); ¹ H-NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm: 5.03 (br. s, 2H), 6.74-6.76 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.98-7.00 (dd, J=2.12, 8.16 Hz, 1H), 7.07-7.08 (d, J=2.08 Hz, 1H), 7.54-7, 63 (m, 3H), 7.79-7.81 (d, J=7.2 Hz, 2H), 10.2 (br. s, 1H);

Масса (m/z): 248,4 (М-Н)⁺.Weight (m/z): 248.4 (M-H) ⁺ .

Стадия 3. трет-Бутил 4-(5-фенилсульфонил-2-гидроксифениламино)-3-фторпиперидин-1карбоксилатStage 3. tert-Butyl 4-(5-phenylsulfonyl-2-hydroxyphenylamino)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate

Указанное в заголовке соединение синтезировали из 2-амино-4-фенилсульфонилфенола в соответствии с процедурой, описанной в промежуточном соединении 4. Это соединение выделяли в виде диастереомерной смеси.The title compound was synthesized from 2-amino-4-phenylsulfonylphenol according to the procedure described in Intermediate 4. This compound was isolated as a diastereomeric mixture.

- 18 040294- 18 040294

Выход: 2,4 г (85%); Масса (m/z): 449,1 (М-Н)⁺.Yield: 2.4 g (85%); Weight (m/z): 449.1 (M-H) ⁺ .

Стадия 4. трет-Бутил 4-[5-фенилсульфонил-2-(2-хлорэтокси)фениламино]-3-фторпиперидин-1карбоксилатStage 4. tert-Butyl 4-[5-phenylsulfonyl-2-(2-chloroethoxy)phenylamino]-3-fluoropiperidine-1-carboxylate

Указанное в заголовке соединение синтезировали из трет-бутил 4-(5-фенилсульфонил-2гидроксифениламино)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата, следуя процедуре, описанной в промежуточном соединении 5. Это соединение выделяли в виде диастереомерной смеси.The title compound was synthesized from tert-butyl 4-(5-phenylsulfonyl-2hydroxyphenylamino)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate following the procedure described in Intermediate 5. This compound was isolated as a diastereomeric mixture.

Выход: 1,87 г (68%); ВЭЖХ (40,3%, 53,7%); Масса (m/z): 513,2 (М+Н)⁺.Yield: 1.87 g (68%); HPLC (40.3%, 53.7%); Mass (m/z): 513.2 (M+H) ⁺ .

Стадия 5. трет-Бутил 4-(6-фенилсульфонил-3,4-дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин1-карбоксилатStep 5. tert-Butyl 4-(6-phenylsulfonyl-3,4-dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine 1-carboxylate

Указанное в заголовке соединение синтезировали из трет-бутил 4-[5-фенилсульфонил-2-(2хлорэтокси)фениламино]-3-фторпиперидин-1-карбоксилата, следуя процедуре, описанной в промежуточном соединении 6. Это соединение выделяли в виде диастереомерной смеси.The title compound was synthesized from t-butyl 4-[5-phenylsulfonyl-2-(2chloroethoxy)phenylamino]-3-fluoropiperidine-1-carboxylate following the procedure described in Intermediate 6. This compound was isolated as a diastereomeric mixture.

Выход: 0,39 г (23%); ВЭЖХ (40,3%, 53,7%); Масса (m/z): 477,2 (М+Н)+.Yield: 0.39 g (23%); HPLC (40.3%, 53.7%); Weight (m/z): 477.2 (M+H)+.

Стадия 6. Рацемический-6-фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[ 1,4] оксазина гидрохлоридStep 6 Racemic 6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride

Указанное в заголовке соединение получали из трет-бутил 4-(6-фенилсульфонил-3,4дигидробензо[1,4]оксазин-4-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата, следуя процедуре, описанной в примере 1. Это соединение выделяли в виде диастереомерной смеси.The title compound was prepared from tert-butyl 4-(6-phenylsulfonyl-3,4dihydrobenzo[1,4]oxazin-4-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylate following the procedure described in Example 1. This compound was isolated as a diastereomeric mixture.

Выход: 0,62 г (87%); ВЭЖХ (47,08%, 47,30%); масса (m/z): 377,2 (М+Н)⁺.Yield: 0.62 g (87%); HPLC (47.08%, 47.30%); mass (m/z): 377.2 (M+H) ⁺ .

Примеры с 14 по 17.Examples 14 to 17.

Примеры с 14 по 17 получали хиральным разделением гидрохлорида 6-фенилсульфонил-4-(3фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (пример 13) в форме свободного основания с использованием метода, приведенного ниже.Examples 14 to 17 were prepared by chiral resolution of 6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Example 13) in free base form using the method below.

Метод: колонка: 250x4,6 мм, 5 мкм, CHIRALPAK IC; подвижная фаза: 0,1% диэтиламина в метаноле; скорость потока: 1 мл/мин; температура: 25°С; длина волны: 243 нМ.Method: column: 250x4.6 mm, 5 µm, CHIRALPAK IC; mobile phase: 0.1% diethylamine in methanol; flow rate: 1 ml/min; temperature: 25°C; wavelength: 243 nm.

Пример 14. 6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин (пик I).Example 14 6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak I)

Хиральная ВЭЖХ 93,5%, (Т_уд: 5,2 мин), масса (m/z): 377,1 (М+Н)⁺.Chiral HPLC 93.5%, ( _Tsp : 5.2 min), mass (m/z): 377.1 (M+H) ⁺ .

Пример 15. 6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин (пик II).Example 15 6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak II).

Хиральная ВЭЖХ 98,1%, (Т_уд: 5,9 мин), масса (m/z): 377,5 (М+Н)⁺.Chiral HPLC 98.1%, ( _Tsp : 5.9 min), mass (m/z): 377.5 (M+H) ⁺ .

Пример 16. 6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин (пик III).Example 16 6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak III).

Хиральная ВЭЖХ 96,50%, (Т_уд: 8,1 мин), масса (m/z): 377,1 (М+Н)⁺.Chiral HPLC 96.50%, ( _Tsp : 8.1 min), mass (m/z): 377.1 (M+H) ⁺ .

Пример 17. 6-Фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин (пик IV).Example 17 6-Phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak IV)

Хиральная ВЭЖХ 98,1%, (Т_уд: 15,1 мин), масса (m/z): 377,0 (М+Н)⁺.Chiral HPLC 98.1%, ( _Tsp : 15.1 min), mass (m/z): 377.0 (M+H) ⁺ .

Пример 18. 7-Фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо [1,4]оксазин (пик III).Example 18 7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak III).

- 19 040294- 19 040294

Cs₂CO3 (0,097 г, 0,0003 моль) добавляли к перемешиваемому раствору гидрохлорида 7фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (0,04 г, 0,00009 моль, пример 1) и 1-бром-2-фторэтана (0,037 г, 0,0003 моль) в ацетонитриле (5 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 8 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (15 мл х 3). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе с получением сырой массы, которую очищали колоночной хроматографией, используя этилацетат: метанол (2:98), с получением ука занного в заголовке соединения.Cs ₂ CO3 (0.097 g, 0.0003 mol) was added to a stirred solution of 7phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1.4]oxazine hydrochloride (0.04 g, 0.00009 mol, example 1) and 1-bromo-2-fluoroethane (0.037 g, 0.0003 mol) in acetonitrile (5 ml) and heated under reflux for 8 hours. Then the reaction mixture was cooled to room temperature , poured into water (5 ml) and extracted with ethyl acetate (15 ml x 3). The organic extracts were combined, dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated on a rotary evaporator to give a crude mass which was purified by column chromatography using ethyl acetate:methanol (2:98) to give the title compound.

Выход: 0,028 г (70%), ¹Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ м.д.: 1,26-1,32 (д, J=22,3 Гц, 3Н), 1,76-1,79 (м, 1H), 2,17-2,26 (м, 1H), 3,05-3,10 (м, 1H), 3,32-3,49 (м, 5Н), 4,08-4,20 (м, 2Н), 4,29-4,39 (м, 1H), 7,12-7,15 (м, 2Н), 7,31-7,33 (дд, J=1,53, 8,67 Гц, 1H), 7,54-7,64 (м, 3Н), 7,87-7,89 (д, J=7,44 Гц, 2Н), 8,66 (уш.с, 1H), 9,53 (уш.с, 1Н);Yield: 0.028 g (70%), ¹ H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 1.26-1.32 (d, J=22.3 Hz, 3H), 1.76 -1.79(m, 1H), 2.17-2.26(m, 1H), 3.05-3.10(m, 1H), 3.32-3.49(m, 5H), 4 .08-4.20 (m, 2H), 4.29-4.39 (m, 1H), 7.12-7.15 (m, 2H), 7.31-7.33 (dd, J= 1.53, 8.67 Hz, 1H), 7.54-7.64 (m, 3H), 7.87-7.89 (d, J=7.44 Hz, 2H), 8.66 (br .s, 1H), 9.53 (br.s, 1H);

Масса (m/z): 423,1 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 99,07.Weight (m/z): 423.1 (M+H)+; HPLC (% purity): 99.07.

Пример 19. 7-Фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо [1,4]оксазин (пик IV)Example 19 7-Phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak IV)

Указанное в заголовке соединение синтезировали из гидрохлорида 7-фенилсульфонил-4-(3фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (пример 4), следуя процедуре, описанной в примере 18.The title compound was synthesized from 7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (Example 4) following the procedure described in Example 18.

Выход: 0,031 г (75%);Yield: 0.031 g (75%);

Ή-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ м.д.: 1,62-1,68 (м, 1H), 2,40-2,44 (м, 2Н), 2,78-2,86 (м, 2Н), 3,16-3,18 (м, 1H), 3,30-3,33 (м, 1H), 3,45-3,48 (м, 2Н), 3,59-3,63 (м, 1H), 3,64-3,69 (м, 1H), 4,14-4,17 (м, 2Н), 4,53-4,57 (м, 1H), 4,65-4,69 (м, 1H), 4,82-4,94 (д, J=49,35 Гц, 1H), 6,56-6,58 (д, J=8,72 Гц, 1H), 7,29-7,30 (м, 1H), 7,11-7,52 (м, 4Н), 7,89-7,91 (д, J=7,27 Гц, 2Н);Ή-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz) δ ppm: 1.62-1.68 (m, 1H), 2.40-2.44 (m, 2H), 2.78-2.86 ( m, 2H), 3.16-3.18 (m, 1H), 3.30-3.33 (m, 1H), 3.45-3.48 (m, 2H), 3.59-3, 63 (m, 1H), 3.64-3.69 (m, 1H), 4.14-4.17 (m, 2H), 4.53-4.57 (m, 1H), 4.65- 4.69 (m, 1H), 4.82-4.94 (d, J=49.35 Hz, 1H), 6.56-6.58 (d, J=8.72 Hz, 1H), 7 .29-7.30 (m, 1H), 7.11-7.52 (m, 4H), 7.89-7.91 (d, J=7.27 Hz, 2H);

Масса (m/z): 423,4 (М+Н)+; ВЭЖХ (% чистоты): 98,71.Weight (m/z): 423.4 (M+H)+; HPLC (% purity): 98.71.

Пример 20. Определение K_cβ для рецептора 5-НТ6.Example 20 Determination of K _cβ for the 5-HT6 receptor.

Для анализа на основе клеток использовали стабильную клеточную линию СНО, экспрессирующую рекомбинантный человеческий рецептор 5-НТ6 и репортерную систему pCRE-Luc. Анализ предлагает нерадиоактивный подход для определения связывания соединения с GPCR. В этом специфическом анализе измеряется уровень внутриклеточного циклического АМФ, который модулируется активацией или ингибированием рецептора. Рекомбинантные клетки содержат репортерный ген люциферазы под контролем элемента ответа цАМФ. Вышеуказанные клетки высевали в белые 96-луночные планшеты с прозрачным дном при плотности 5х10⁴ клеток/лунка, используя среду Hams F12, содержащую 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС), и инкубировали в течение ночи при 37°С и 5% CO2 с последующим сывороточным голоданием в течение 18-20 ч. Увеличивающиеся концентрации испытуемых соединений добавляли вместе с 10 мкМ серотонина в Opti-MEM к клеткам. Инкубацию продолжали при 37°С в CO2инкубаторе в течение 4 ч. Через 4 ч клетки лизировали, используя буфер для лизиса, и в каждую лунку добавляли буфер для анализа люциферазы и число импульсов в секунду регистрировали, используя люминесцентный счетчик. Из полученного числа импульсов в секунду (имп/с) рассчитывали процент связывания для каждой лунки, принимая 10 мкМ 5-НТ в качестве 100%-го связывания и носитель в качестве 0%-го связывания. Значения связывания в процентах наносили на график в зависимости от концентраций соединений, и данные анализировали с использованием нелинейной итерационной компьютерной программы для проведения кривых по точкам программного обеспечения Graph pad Prism 4. Значения K^ рассчитывали, используя концентрацию агониста, использованного в анализе.For cell-based analysis, a stable CHO cell line expressing the recombinant human 5-HT6 receptor and the pCRE-Luc reporter system was used. The assay offers a non-radioactive approach to determine compound binding to GPCR. This specific assay measures intracellular cyclic AMP, which is modulated by receptor activation or inhibition. The recombinant cells contain a luciferase reporter gene under the control of the cAMP response element. The above cells were seeded in white 96-well clear bottom plates at a density of 5x10 ⁴ cells/well using Hams F12 medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) and incubated overnight at 37°C and 5% CO2 followed by serum starvation for 18-20 hours. Increasing concentrations of test compounds were added along with 10 μM serotonin in Opti-MEM to the cells. Incubation was continued at 37° C. in a CO2 incubator for 4 hours. After 4 hours, cells were lysed using lysis buffer and luciferase assay buffer was added to each well and the number of pulses per second was recorded using a fluorescent counter. From the counts per second (pps) obtained, the percent binding for each well was calculated, taking 10 μM 5-HT as 100% binding and vehicle as 0% binding. Percent binding values were plotted against compound concentrations and the data was analyzed using a non-linear iterative curve-by-point software program Graph pad Prism 4. K^ values were calculated using the concentration of agonist used in the assay.

- 20 040294- 20 040294

Ссылки.Links.

Br. J. Pharmacol. 2006, 148, 1133-1143.Br. J Pharmacol. 2006, 148, 1133-1143.

Mol. Brain Res. 2001, 90, 110-117.Mol. Brain Res. 2001, 90, 110-117.

Определение связывания 5-HT_2A.Determination of binding 5-HT _2A .

Мембранный препарат из рекомбинантной клеточной линии 5-HT_2A человека (кат. № ES-313M400UA) и радиолиганд гидрохлорид кетансерина [этилен-³Н]-(Я-41468) (кат. № NET791250UC) приобретали у Perkin Elmer. Все другие реагенты, использованные при приготовлении буфера, приобретали у Sigma. Конечная концентрация лиганда составляла 1,75 нМ; неспецифическая детерминанта представляла собой 1-NP [10 мкМ] и мембранный белок 5-HT_2A (5 мкг/лунка). 1-NP использовали в качестве положительного контроля. Реакции проводили в 67 мМ Трис с рН 7,6, содержащем 0,5 мМ буфера ЭДТА, в течение 60 мин при 25°С. Реакцию останавливали быстрой фильтрацией, после чего шесть раз промывали связывающей смесью, используя 96-луночный планшет для сбора (Millipore кат. № MSFBNXB50), предварительно покрытый 0,33% полиэтиленимином. Планшет высушивали и связанную радиоактивность, собранную на фильтрах, определяли сцинтилляционными измерениями с использованием MicroBeta TriLux. Связывание с радиолигандом в присутствии немеченого соединения выражали в процентах от общего связывания и наносили на график в зависимости от логарифмической концентрации соединения. Значения K _и определяли с использованием нелинейной итерационной компьютерной программы для проведения кривых по точкам программного обеспечения Graph pad Prism 4.A membrane preparation from the recombinant human 5-HT _2A cell line (p/n ES-313M400UA) and radioligand ketanserin hydrochloride [ethylene- ³ H]-(R-41468) (p/n NET791250UC) were purchased from Perkin Elmer. All other reagents used in the preparation of the buffer were purchased from Sigma. The final ligand concentration was 1.75 nM; the non-specific determinant was 1-NP [10 μM] and membrane protein 5-HT _2A (5 μg/well). 1-NP was used as a positive control. Reactions were carried out in 67 mM Tris pH 7.6 containing 0.5 mM EDTA buffer for 60 min at 25°C. The reaction was stopped by rapid filtration followed by washing six times with binding mixture using a 96-well collection plate (Millipore cat. no. MSFBNXB50) pre-coated with 0.33% polyethyleneimine. The plate was dried and the associated radioactivity collected on the filters was determined by scintillation measurements using MicroBeta TriLux. Radioligand binding in the presence of an unlabeled compound was expressed as a percentage of total binding and plotted against the log concentration of the compound. The values of K _and were determined using a non-linear iterative curve-by-point computer program Graph pad Prism 4 software.

Ссылка.Link.

J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993, 265, 1272-1279.J Pharmacol. Exp. Ther. 1993, 265, 1272-1279.

Таблица 1 Данные in-vitroTable 1 In vitro data

№ Примера Example No. 5-НТ₆ Кс_В (нМ)5-HT ₆ Ks _B (nM) 5-НТ_2АК_и(нМ)5-HT _2A K _i (nM) 1 1 0,04 0.04 130,4 130.4 2 2 0,4 0.4 261,6 261.6 3 3 0,09 0.09 112,6 112.6 4 4 0,4 0.4 3934 3934 7 7 <0,1 <0.1 19,73 19.73 8 8 18,96 18.96 803,6 803.6 15 15 1,25 1.25 1660 1660 17 17 1,79 1.79 907 907 Сравнительный пример Comparative Example 0,1 0.1 9,02 9.02

Вывод.Conclusion.

Приведенные выше данные ясно показывают, что соединения по настоящему изобретению демонстрируют высокую селективность по отношению к рецептору 5-НТ_2А по сравнению со сравнительным примером из US 7378415.The above data clearly show that the compounds of the present invention show high selectivity for the 5-HT _2A receptor compared to the comparative example from US 7378415.

Сравнительный пример. 7-Фенилсульфонил-4-(пиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин.Comparative example. 7-Phenylsulfonyl-4-(piperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine.

Сравнительный пример синтезирован в соответствии с процедурой из US 7378415.Comparative example synthesized according to the procedure of US 7378415.

Пример 21. Фармакокинетическое исследование на грызунах.Example 21 Pharmacokinetic study in rodents.

Самцов крыс линии Вистар (260±50 г) использовали в качестве экспериментальных животных. Животных содержали по отдельности в клетке из полипропилена. За два дня до исследования самцов крыс линии Вистар анестезировали изофлураном для хирургического размещения катетера в яремной вене. Крыс случайным образом разделяли для перорального (3 мг/кг) и внутривенного (1 мг/кг) введения доз (n=3/группа), и они воздерживались от приема пищи в течение ночи перед пероральным введением (п.о). Однако крысам, распределенным для внутривенного введения доз, пищу и воду давали сколько угодно.Male Wistar rats (260±50 g) were used as experimental animals. The animals were kept individually in a polypropylene cage. Two days prior to the study, male Wistar rats were anesthetized with isoflurane for surgical placement of a catheter in the jugular vein. Rats were randomly divided for oral (3 mg/kg) and intravenous (1 mg/kg) doses (n=3/group) and fasted overnight prior to oral administration (po). However, rats distributed for intravenous dosing were given food and water ad libitum.

В заранее определенный момент времени кровь собирали через яремную вену и компенсировали эквивалентным объемом физиологического раствора. Собранную кровь переносили в подписанную пробирку Эппендорфа, содержащую 10 мкл гепарина в качестве антикоагулянта. Обычно образцы крови собирали в следующие моменты времени: 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после введения дозы. Кровь центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 мин. Плазму отделяли и хранили замороженной при -80°С до анализа. Концентрации испытуемых соединений количественно определяли в плазме с помощью специфицированного метода ЖХ-МС/МС с использованием подходящей методики экстракции. Испытуемые соединения определяли количественно в диапазоне калибровки около 1-1000 нг/мл в плазме. Исследуемые образцы анализировали с использованием калибровочных образцов в партии и образцов контроля качества, распределенных по партии.At a predetermined time point, blood was collected via the jugular vein and compensated with an equivalent volume of saline. The collected blood was transferred to a signed Eppendorf tube containing 10 µl of heparin as an anticoagulant. Typically, blood samples were collected at the following time points: 0.08, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, and 24 hours post-dose. Blood was centrifuged at 4000 rpm for 10 min. Plasma was separated and stored frozen at -80°C until analysis. Test compound concentrations were quantified in plasma using the specified LC-MS/MS method using an appropriate extraction technique. Test compounds were quantified over a calibration range of about 1-1000 ng/mL in plasma. Test samples were analyzed using calibration samples in the lot and quality control samples distributed throughout the lot.

Фармакокинетические параметры С_макс, AUC_t, T_1/2, клиренс и биодоступность (F) рассчитывали посредством некомпартментной модели с использованием стандартной некомпартментной модели, используя программного пакета версии Phoenix WinNonlin 6.2 или 6.4.Pharmacokinetic parameters C _max , AUC _t , T _1/2 , clearance and bioavailability (F) were calculated by a non-compartmental model using a standard non-compartmental model using the Phoenix WinNonlin 6.2 or 6.4 software package.

- 21 040294- 21 040294

Таблица 2table 2

Фармакокинетический профильPharmacokinetic profile

№ Примера No. example ПВ PV с '-'max (нг/мл) With '-'max (ng/ml) AUC₀._t(нг-ч/мл)AUC ₀ . _t (ng-h/ml) Т1/2 (ч) Т1/2 (h) Клиренс (мл/мин/кг) Clearance (ml/min/kg) F (%) F(%) 1 1 перорально (зондовое питание) orally (probe feeding) 84±14 84±14 1004±15 1004±15 5,6±0,9 5.6±0.9 - - 81±1 81±1 внутривенно intravenously - - 412 ±37 412±37 4,5±0,1 4.5±0.1 40±3 40±3 (болюс) (bolus)

Пример 22. Исследование проникновения в мозг грызуна.Example 22 Rodent Brain Penetration Study.

Самцов крыс линии Вистар (260±40 г) использовали в качестве экспериментальных животных. Трех животных размещали в каждой клетке. Животным давали сколько угодно воду и еду на протяжении всего эксперимента и поддерживали 12-часовой цикл свет/темнота.Male Wistar rats (260±40 g) were used as experimental animals. Three animals were housed in each cage. Animals were given ad libitum water and food throughout the experiment and were maintained on a 12 hour light/dark cycle.

Проникновение в мозг определяли дискретным способом у крыс. За день до введения дозы самцам крыс линии Вистар давали акклиматизироваться и случайным образом распределяли по группам в соответствии с их весом. В каждый момент времени (0,50, 1 и 2 ч) использовали n=3 животных.Brain penetration was determined discretely in rats. The day before dosing, male Wistar rats were allowed to acclimate and were randomly assigned to groups according to their weight. At each time point (0.50, 1 and 2 h) n=3 animals were used.

Из испытуемых соединений подходящим образом предварительно получали лекарственную форму и вводили перорально в дозе (в пересчете на свободное основание) 3 мг/кг. Образцы крови собирали с помощью сердечной пункции путем использования изофлурановой анестезии. Животных умерщвляли для сбора тканей головного мозга. Плазму отделяли и образцы мозга гомогенизировали и хранили замороженными при -20°С до анализа. Концентрации испытуемых соединений в плазме и мозге определяли методом ЖЧ-МС/МС.The test compounds were suitably pre-formulated and administered orally at a dose (as free base) of 3 mg/kg. Blood samples were collected by cardiac puncture using isoflurane anesthesia. Animals were sacrificed to collect brain tissue. Plasma was separated and brain samples were homogenized and stored frozen at -20°C until analysis. Plasma and brain concentrations of test compounds were determined by LC-MS/MS.

Испытуемые соединения количественно определяли в плазме и гомогенате мозга с помощью специфицированного метода ЖХ-МС/МС, используя подходящую методику экстракции. Испытуемые соединения определяли количественно в диапазоне калибровки 1-1000 нг/мл в плазме и гомогенате мозга. Исследуемые образцы анализировали с использованием калибровочных образцов в партии и образцов контроля качества, распределенных по партии. Рассчитывали соотношения содержания в головном мозге-плазме (С_м/С_п).Test compounds were quantified in plasma and brain homogenate by a specified LC-MS/MS method using an appropriate extraction technique. Test compounds were quantified over a calibration range of 1-1000 ng/mL in plasma and brain homogenate. Test samples were analyzed using calibration samples in the lot and quality control samples distributed throughout the lot. The brain-plasma content ratios (C _m /C _p ) were calculated.

Таблица 3Table 3

Данные о проникновении в головной мозг и кровьData on penetration into the brain and blood

№ Примера Example No. Проникновение в мозг крысы при однократном введении (С_м/С_п) в дозе 3 мг/кг, п.о.Penetration into the rat brain with a single injection (C _m /C _p ) at a dose of 3 mg/kg, p.o. 1 1 0,78±0,20 0.78±0.20

Пример 23. Модель задачи распознавания объектов.Example 23. Model of the problem of object recognition.

Свойства соединений по настоящему изобретению, улучшающие когнитивную способность, оценивали с использованием животной модели когнитивной способности, т.е. задачи распознавания объектов.The cognition-enhancing properties of the compounds of the present invention were evaluated using an animal model of cognition, ie. object recognition tasks.

Самцов крыс линии Вистар (~230-280 г) использовали в качестве экспериментальных животных. Четырех животных размещали в каждой клетке. Животных содержали на 20% пищевой депривации в течение одного дня до эксперимента и давали воду сколько угодно на протяжении всего эксперимента, поддерживали 12-часовой цикл свет/темнота. Крыс приучали к индивидуальным аренам в течение 20 ч в отсутствие каких-либо объектов.Male Wistar rats (~230-280 g) were used as experimental animals. Four animals were housed in each cage. Animals were kept on 20% food deprivation for one day prior to the experiment and given water ad libitum throughout the experiment, maintained on a 12 hour light/dark cycle. Rats were accustomed to individual arenas for 20 h in the absence of any objects.

Одна группа из 12 крыс получала носитель (1 мл/кг) перорально, а другая группа животных получала соединение формулы (I) перорально за 30 мин до испытания на узнавание знакомого объекта (Т1) и выбор (Т2).One group of 12 rats received vehicle (1 ml/kg) orally and another group of animals received compound of formula (I) orally 30 minutes prior to the familiar object recognition (T1) and choice (T2) test.

Эксперимент проводили на открытом поле размером 50x50x50 см, выполненном из акрилового полимера. Во время фазы ознакомления (Т1) крыс помещали по отдельности на открытое поле на 3 мин, на котором два одинаковых объекта (пластиковые бутылки высотой 12,5 см x диаметром 5,5 см), покрытые только желтой маскировочной лентой (a1 и а2), располагались в двух смежных углах (10 см от стен). После 24-часового испытания (Т1) тех же крыс помещали на ту же арену, на которую их помещали в испытании Т1. Во время фазы выбора (Т2) крысам позволяли изучить открытое поле в течение 3 мин в присутствии одного знакомого объекта (а3) и одного нового объекта (b) (стеклянная бутылка янтарного цвета высотой 12 см и диаметром 5 см). Во время испытаний Т1 и Т2 изучения каждого объекта (определяемые как обнюхивание, облизывание, жевание или движение вибриссы при направлении носа в сторону объекта на расстоянии менее чем 1 см), регистрировали отдельно с помощью секундомера.The experiment was carried out in an open field 50x50x50 cm in size, made of acrylic polymer. During the familiarization phase (T1), the rats were placed individually in an open field for 3 min, in which two identical objects (12.5 cm high x 5.5 cm diameter plastic bottles) covered only with yellow masking tape (a1 and a2) located in two adjacent corners (10 cm from the walls). After the 24 hour trial (T1), the same rats were placed in the same arena that they were placed in the T1 trial. During the selection phase (T2), rats were allowed to explore the open field for 3 min in the presence of one familiar object (a3) and one new object (b) (an amber colored glass bottle 12 cm high and 5 cm in diameter). During the T1 and T2 tests, the examination of each object (defined as sniffing, licking, chewing, or vibrissa movement while pointing the nose towards the object at a distance of less than 1 cm) was recorded separately using a stopwatch.

Т1 представляет собой общее время, потраченное на изучение знакомых объектов (a1+a2).T1 represents the total time spent studying familiar objects (a1+a2).

Т2 представляет собой общее время, потраченное на изучение знакомого объекта и нового объекта (а3+Ь).T2 is the total time spent learning a familiar object and a new object (a3+b).

- 22 040294- 22 040294

Ссылка.Link.

Behavioural Brain Research, 1988, 31, 47-59.Behavioral Brain Research, 1988, 31, 47-59.

Таблица 4Table 4

Данные задачи распознавания объектовObject recognition task data

№ Примера Example No. Доза мг/кг, п.о. Dose mg/kg, p.o. Среднее время на изучение±стандартная ошибка среднего (сек) Mean time to study±standard error of the mean (sec) Вывод Conclusion Знакомый объект familiar object Новый объект New object 1 1 ОД OD 7,03±1Д 7.03±1D 12Д6±0,72 12D6±0.72 Активно Actively

Пример 24. Неклиническая токсикология.Example 24 Non-Clinical Toxicology

Безопасность примера 1 настоящего изобретения и сравнительного примера из US 7378415 оценивали в исследовании токсичности многократного применения на крысах.The safety of example 1 of the present invention and the comparative example of US 7378415 was evaluated in a repeated dose toxicity study in rats.

Самок крыс использовали в качестве экспериментальных животных для оценки профиля токсичности примера 1 настоящего изобретения и сравнительного примера из US 7378415.Female rats were used as experimental animals to evaluate the toxicity profile of example 1 of the present invention and the comparative example from US 7378415.

Во время исследования самкам крыс вводили дозу в течение минимум 4 дней. Оценку токсичности проводили по смертности, клиническим наблюдениям, изменению массы тела, потреблению корма, клинической и анатомической патологии. Системные воздействия также оценивали для обоих соединений. Все количественные переменные сравнивают с контрольной группой с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим применением апостериорного критерия Даннетта на программном обеспечении GraphPad Prism, версия 4, 2003.During the study, female rats were dosed for a minimum of 4 days. Toxicity was assessed by mortality, clinical observations, body weight change, feed intake, clinical and anatomical pathology. Systemic effects were also evaluated for both compounds. All quantitative variables are compared to a control group using one-way ANOVA followed by Dunnett's post hoc test on GraphPad Prism software version 4, 2003.

Таблица 5Table 5

Данные о токсичности для крысRat toxicity data

№ п/п No. p / p Соединение Compound Макси мально перено симая доза Maximum tolerated dose Данные исследования Research data Токсичность при многократном (4/7-дней) введении дозы (NOAEL, мг/кг) Repeated (4/7-day) Dose Toxicity (NOAEL, mg/kg) С_МаксS _Max AUC AUC 1 1 Пример 1 Example 1 >300 мг/кг >300 mg/kg Отсуствие смеретльных случаев до самой высокой испытанной дозы 300 мг/кг No deaths up to the highest tested dose of 300 mg/kg Токсичность при 4-дневном повторном введении NOAEL 300 мг/кг Toxicity after 4-day repeated administration of NOAEL 300 mg/kg 2420 нг/мл 2420 ng/ml 38100 нгч/мл 38100 ngch/ml 2 2 Сравнительн ый пример из US7378415 Comparative example from US7378415 30 мг/кг 30 mg/kg Смертность при >100 мг/кг на 2й день введения дозы Mortality at >100 mg/kg on day 2 of dosing Токсичность при 7-дневном повторном введении NOAEL 30 мг/кг Toxicity after 7-day repeated administration of NOAEL 30 mg/kg 280 нг/мл 280 ng/ml 4050 нгч/мл 4050 ngch/ml

Результаты.Results.

Среди доклинически испытанных соединений пример 1 неожиданно продемонстрировал превосходный профиль безопасности по сравнению со сравнительным примером из US 7378415. В исследовании, где вводили дозу примера 1, не наблюдалось смертельных случаев при дозах до 300 мг/кг и содержании вещества в плазме, достигающего вплоть до 38100 нгч/мл (AUC). Напротив, в исследовании, где оценивали сравнительный пример из US 7378415, смертельные случаи наблюдались при дозах >100 мг/кг на второй день введения дозы и отмечалось, что концентрации в плазме составляли всего 4050 нй/мл (AUC).Among preclinically tested compounds, Example 1 unexpectedly showed an excellent safety profile compared to the comparative example from US 7378415. In a study dosed with Example 1, no deaths were observed at doses up to 300 mg/kg and plasma levels reaching up to 38100 hh/ml (AUC). In contrast, in a study evaluating the comparative example of US 7378415, deaths were observed at doses >100 mg/kg on the second day of dosing and plasma concentrations were noted to be as low as 4050 nU/mL (AUC).

Пример 25. Оценка модуляции ацетилхолина в вентральном гиппокампе самцов крыс линии Вистар.Example 25 Evaluation of acetylcholine modulation in the ventral hippocampus of male Wistar rats.

Экспериментальная процедура.experimental procedure.

Четырем группам самцов крыс линии Вистар (масса тела 240-300 г) стереотаксикально имплантировали направляющую канюлю для микродиализа в вентральном гиппокампе (АР: -5,2 мм, ML: + 5,0 мм, DV: -3,8 мм) под изофлурановой анестезией. Координаты брали в соответствии с атласом мозга крысы (Paxinos и Watson 2004) с контрольными точками, взятыми от брегмы и вертикально от черепа. Крысам давали возможность самостоятельно восстановиться в течение четырех-пяти дней в круглодонной камереFour groups of male Wistar rats (body weight 240-300 g) were stereotactically implanted with a microdialysis guide cannula in the ventral hippocampus (AP: -5.2 mm, ML: +5.0 mm, DV: -3.8 mm) under isoflurane anesthesia. The coordinates were taken according to the rat brain atlas (Paxinos and Watson 2004) with reference points taken from the bregma and vertically from the skull. The rats were allowed to self-repair for four to five days in a round-bottomed chamber.

--

Claims

из оргстекла со свободным доступом к корму и воде.made of plexiglass with free access to food and water.

После хирургического восстановления в течение 4-5 дней самцов крыс линии Вистар подключали к двухканальному жидкостному вертлюгу с двойной кварцевой футеровкой (Instech, Великобритания) на уравновешивающем плече рычага, обеспечивающему животным неограниченные движения. За 16 ч до начала исследования предварительно уравновешенный зонд для микродиализа (диализная мембрана 4 мм) вводили в вентральный гиппокамп через направляющую канюлю. В день исследования через зонд осуществляли перфузию искусственной спинно-мозговой жидкости (иСМЖ; NaCl 147 мМ, KCl 3 мМ, MgCl₂ 1 мМ, CaCl₂2Н₂О 1,3 мМ, NaH₂PO₄ 2H2O 0,2 мМ и Na₂HPO₄ 7Н2О 1 мМ, рН 7,2) при скорости потока 1,5 мкл/мин, и выдерживали период стабилизации 2 ч. Пять базовых образцов отбирали с 20минутными интервалами до лечения примером 1 (10 мг/кг, п.о.) или носителем.After surgical recovery for 4–5 days, male Wistar rats were connected to a two-channel liquid swivel with a double quartz lining (Instech, UK) on the balancing arm of the lever, which provided the animals with unrestricted movements. Sixteen hours prior to the start of the study, a pre-equilibrated microdialysis probe (4 mm dialysis membrane) was inserted into the ventral hippocampus via a guide cannula. On the day of the study, artificial cerebrospinal fluid (CSF; NaCl 147 mM, KCl 3 mM, MgCl ₂ 1 mM, CaCl ₂ 2H ₂ O 1.3 mM, NaH ₂ PO ₄ 2H2O 0.2 mM and Na ₂ HPO ₄ 7H2O 1 mM, pH 7.2) at a flow rate of 1.5 μl/min, and maintained a stabilization period of 2 hours. Five baseline samples were taken at 20-minute intervals prior to treatment with example 1 (10 mg/kg, p. or carrier.

Для двух групп самцов крыс линии Вистар вводили донепезил (1 мг/кг, п.к) через 30 мин после введения примера 1, а для другой группы крыс комбинацию донепезила (1 мг/кг, п.к) + мемантина (1 мг/кг, п.к) вводили через 30 мин после введения примера 1. Образцы диализата собирали в течение дополнительного 4-часового периода времени после лечения примером 1. Диализаты хранили при -50°С до анализа.For two groups of male Wistar rats, donepezil (1 mg/kg, sc) was administered 30 minutes after the administration of example 1, and for another group of rats, a combination of donepezil (1 mg/kg, sc) + memantine (1 mg/kg) kg, sc) was administered 30 minutes after the administration of Example 1. Dialysate samples were collected over an additional 4 hour period after treatment with Example 1. Dialysates were stored at -50°C until analysis.

Количественное определение ацетилхолина.Quantitative determination of acetylcholine.

Ацетилхолин в диализате количественно определяли методом ЖХ-МС/МС в диапазоне калибровки 0,099 нмоль/л-70,171 нмоль/л.Acetylcholine in dialysate was quantified by LC-MS/MS over a calibration range of 0.099 nmol/L-70.171 nmol/L.

Статистический анализ.Statistical analysis.

Все данные микродиализа для ацетилхолина представляли в виде процентного изменения от средних исходных концентраций в диализате, при этом 100% определяли как среднее из пяти значений до введения дозы. Процентное изменение уровней ацетилхолина сравнивали с применением донепезила в монотерапии и комбинации донепезила или мемантина с использованием двухфакторного дисперсионного анализа (время и лечение) с последующим применением апостериорного критерия Бонферрони. Рассчитывали значения площади под кривой (AUC) для процентного изменения уровней ацетилхолина, и статистическую значимость между средним значением AUC сравнивали с лечением донепезилом в монотерапии или комбинацией донепезила и мемантина, используя однофакторный дисперсионный анализ с последующим применением критерия Даннетта. Статистическую значимость рассматривали при значении р менее 0,05. Неправильное размещение зонда считалось критерием отклонения данных от животного.All microdialysis data for acetylcholine were presented as percentage change from mean baseline dialysate concentrations, with 100% defined as the mean of five pre-dose values. Percent change in acetylcholine levels was compared with donepezil alone and donepezil or memantine combination using a two-way analysis of variance (time and treatment) followed by Bonferroni's post hoc test. Area under the curve (AUC) values were calculated for percent change in acetylcholine levels, and statistical significance between mean AUC values was compared with treatment with donepezil alone or with the combination of donepezil and memantine using one-way analysis of variance followed by Dunnett's test. Statistical significance was considered at a p value of less than 0.05. Incorrect placement of the probe was considered a criterion for rejecting data from the animal.

Ссылка. Paxinos G. and Watson С. (2004) Rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, New York.Link. Paxinos G. and Watson C. (2004) Rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, New York.

Результаты.Results.

(I) Лечение донепезилом (1 мг/кг, п.к.) приводило к повышению уровней ацетилхолина в гиппокампе и достигало максимума в 888±85% от исходных уровней. Пример 1 (10 мг/кг, п.о) в сочетании с донепезилом (1 мг/кг, п.к.) приводил к значительному увеличению уровней ацетилхолина, а пиковые уровни достигали до 1445±247% от уровней до введения дозы (фиг. 1а).(I) Treatment with donepezil (1 mg/kg, s.c.) resulted in an increase in acetylcholine levels in the hippocampus and peaked at 888±85% of baseline levels. Example 1 (10 mg/kg, po) in combination with donepezil (1 mg/kg, s.c.) resulted in a significant increase in acetylcholine levels, with peak levels reaching up to 1445±247% of pre-dose levels (Fig. .1a).

Средние значения площади под кривой (AUC), рассчитанные после лечения комбинацией примера 1 (10 мг/кг, п.о) и донепезила, были значительно выше по сравнению с лечением донепезилом в монотерапии (1 мг/кг, п.к.) (фиг. 1b).Mean area under the curve (AUC) values calculated after treatment with the combination of Example 1 (10 mg/kg, po) and donepezil were significantly higher compared to treatment with donepezil alone (1 mg/kg, s.c.) ( Fig. 1b).

(II) Лечение комбинацией донепезила (1 мг/кг, п.к.) и мемантина (1 мг/кг, п.к) приводило к повышению уровней ацетилхолина в гиппокампе до максимума в 1170±270% от исходных уровней. Пример 1 (10 мг/кг, п.о) в комбинации с донепезилом (1 мг/кг, п.к.) и мемантином (1 мг/кг, п.к.) приводил к значительному повышению уровней ацетилхолина, а пиковые уровни достигали до 2822±415% от уровней до введения дозы (фиг. 2а).(II) Treatment with a combination of donepezil (1 mg/kg, sc) and memantine (1 mg/kg, sc) resulted in an increase in hippocampal acetylcholine levels to a maximum of 1170±270% of baseline levels. Example 1 (10 mg/kg, po) in combination with donepezil (1 mg/kg, s.c.) and memantine (1 mg/kg, s.c.) resulted in a significant increase in acetylcholine levels, and peak levels reached up to 2822±415% of pre-dose levels (FIG. 2a).

Средние значения площади под кривой (AUC), рассчитанные после лечения примером 1 (10 мг/кг, п.о), донепезилом (1 мг/кг, п.к.) и мемантином (1 мг/кг, п.к.), были значительно выше по сравнению с лечением комбинацией донепезила (1 мг/кг, п.к.) и мемантина (1 мг/кг, п.к.) (фиг. 2b).Mean area under the curve (AUC) values calculated after treatment with Example 1 (10 mg/kg, po), donepezil (1 mg/kg, s.c.) and memantine (1 mg/kg, s.c.) were significantly higher compared with treatment with the combination of donepezil (1 mg/kg, sc) and memantine (1 mg/kg, sc) (Fig. 2b).

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM

1. Фторпиперидиновое соединение формулы (I)1. Fluoropiperidine compound of formula (I)

- 24 040294- 24 040294

(I) в которой(I) in which

R¹ представляет собой фенил или пиридил; где фенил не замещен или замещен галогеном;R ¹ is phenyl or pyridyl; where phenyl is unsubstituted or substituted by halogen;

R² представляет собой водород;R ² is hydrogen;

R³ представляет собой водород;R ³ is hydrogen;

R⁵ представляет собой водород или галоген(C_1-6)-алкил;R ⁵ is hydrogen or halo(C _1-6 )-alkyl;

или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль.or a stereoisomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt.

2. Соединение формулы (I) по п.1, причем соединение выбрано из2. The compound of formula (I) according to claim 1, wherein the compound is selected from

7-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина;7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-(3 -фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина;7-(3-fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина;4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина;4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-фенилсульфонил-4-(3-фтор-3-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина;7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

7-фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина;7-phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine;

3. Соединение формулы (I) по п.1 или 2, в котором соединение выбрано из группы, состоящей из3. The compound of formula (I) according to claim 1 or 2, wherein the compound is selected from the group consisting of

7-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик II);7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak II);

7-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик IV);7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak IV);

7-(3 -фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик I);7-(3-fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak I);

7-(3 -фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик II);7-(3-fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak II);

7-(3 -фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик III);7-(3-fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak III);

7-(3 -фторфенилсульфонил)-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина гидрохлорида (пик IV);7-(3-fluorophenylsulfonyl)-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (peak IV);

рацемического-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-2-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]ок сазина гидрохлорида;racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-2-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

рацемического-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-7-(пиридин-4-сульфонил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида;racemic 4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-7-(pyridine-4-sulfonyl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

7-фенилсульфонил-4-(3-фтор-3-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (первый элюируемый изомер);7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (first eluting isomer);

7-фенилсульфонил-4-(3-фтор-3-метилпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида (второй элюируемый изомер);7-phenylsulfonyl-4-(3-fluoro-3-methylpiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride (second eluting isomer);

рацемического-6-фенилсульфонил-4-(3-фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина гидрохлорида;racemic-6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine hydrochloride;

6-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина (пик I);6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak I);

6-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина (пик II);6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak II);

6-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина (пик III);6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak III);

6-фенилсульфонил-4-(3 -фторпиперидин-4-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина (пик IV);6-phenylsulfonyl-4-(3-fluoropiperidin-4-yl)-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak IV);

7-фенилсульфонил-4-[3-фтор-1 -(2-фторэтил)пиперидин-4-ил] -3,4-дигидро-2Н-бензо [ 1,4]оксазина7-phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine

- 25 040294 (пик III) и- 25 040294 (peak III) and

7-фенилсульфонил-4-[3-фтор-1-(2-фторэтил)пиперидин-4-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (пик IV).7-phenylsulfonyl-4-[3-fluoro-1-(2-fluoroethyl)piperidin-4-yl]-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazine (peak IV).

4. Фармацевтическая композиция для лечения когнитивного расстройства, опосредованного рецептором 5-гидрокситриптамина 6, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемые эксципиенты.4. Pharmaceutical composition for the treatment of cognitive impairment mediated by the 5-hydroxytryptamine 6 receptor, containing a compound of formula (I) according to any one of claims 1 to 3 or a pharmaceutically acceptable salt thereof and pharmaceutically acceptable excipients.

5. Фармацевтическая композиция по п.4, где указанное когнитивное расстройство выбрано из группы, состоящей из деменции при болезни Альцгеймера, деменции при болезни Паркинсона, деменции при болезни Хантингтона, деменции, связанной с синдромом Дауна, деменции, связанной с синдромом Туретта, деменции, связанной с постменопаузой, лобно-височной деменции, деменции с тельцами Леви, сосудистой деменции, деменции при ВИЧ, деменции при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующей деменции, вызванной употреблением психоактивных веществ, деменции при болезни Пика, деменция при шизофрении, деменции при соматических заболеваниях и старческой деменции.5. The pharmaceutical composition according to claim 4, wherein said cognitive disorder is selected from the group consisting of Alzheimer's disease dementia, Parkinson's disease dementia, Huntington's disease dementia, Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, dementia, associated with postmenopause, frontotemporal dementia, dementia with Lewy bodies, vascular dementia, dementia in HIV, dementia in Creutzfeldt-Jakob disease, persistent dementia due to substance use, dementia in Pick's disease, dementia in schizophrenia, dementia in medical diseases and senile dementia.

6. Способ лечения когнитивных расстройств, опосредованных рецептором 5-гидрокситриптамина 6, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3.6. A method for treating cognitive disorders mediated by the 5-hydroxytryptamine 6 receptor, comprising administering to a patient in need thereof a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1-3.

7. Способ лечения когнитивных расстройств по п.6, в котором когнитивные расстройства выбраны из группы, состоящей из деменции при болезни Альцгеймера, деменции при болезни Паркинсона, деменции при болезни Хантингтона, деменции, связанной с синдромом Дауна, деменции, связанной с синдромом Туретта, деменции, связанной с постменопаузой, лобно-височной деменции, деменции с тельцами Леви, сосудистой деменции, деменции при ВИЧ, деменции при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующей деменции, вызванной употреблением психоактивных веществ, деменции при болезни Пика, деменции при шизофрении, деменции при соматических заболеваниях и старческой деменции.7. The method of treating cognitive disorders according to claim 6, wherein the cognitive disorders are selected from the group consisting of Alzheimer's disease dementia, Parkinson's disease dementia, Huntington's disease dementia, Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, dementia associated with postmenopause, frontotemporal dementia, dementia with Lewy bodies, vascular dementia, dementia in HIV, dementia in Creutzfeldt-Jakob disease, persistent dementia due to substance use, dementia in Pick's disease, dementia in schizophrenia, dementia in somatic diseases and senile dementia.

8. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 в лечении когнитивных расстройств, выбранных из группы, состоящей из деменции при болезни Альцгеймера, деменции при болезни Паркинсона, деменции при болезни Хантингтона, деменции, связанной с синдромом Дауна, деменции, связанной с синдромом Туретта, деменции, связанной с постменопаузой, лобно-височной деменции, деменции с тельцами Леви, сосудистой деменции, деменции при ВИЧ, деменции при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующей деменции, вызванной употреблением психоактивных веществ, деменции при болезни Пика, деменции при шизофрении, деменции при соматических заболеваниях и старческой деменции.8. The use of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 3 in the treatment of cognitive disorders selected from the group consisting of dementia in Alzheimer's disease, dementia in Parkinson's disease, dementia in Huntington's disease, dementia associated with Down's syndrome, dementia associated with Tourette's syndrome, dementia associated with postmenopause, frontotemporal dementia, dementia with Lewy bodies, vascular dementia, dementia in HIV, dementia in Creutzfeldt-Jakob disease, persistent dementia due to the use of psychoactive substances, dementia in Pick's disease, dementia in schizophrenia, dementia in somatic diseases and senile dementia.

9. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 в изготовлении лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств, выбранных из группы, состоящей из деменции при болезни Альцгеймера, деменции при болезни Паркинсона, деменции при болезни Хантингтона, деменции, связанной с синдромом Дауна, деменции, связанной с синдромом Туретта, деменции, связанной с постменопаузой, лобно-височной деменции, деменции с тельцами Леви, сосудистой деменции, деменции при ВИЧ, деменции при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующей деменции, вызванной употреблением психоактивных веществ, деменции при болезни Пика, деменции при шизофрении, деменции при соматических заболеваниях и старческой деменции.9. The use of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 3 in the manufacture of a medicament for the treatment of cognitive disorders selected from the group consisting of dementia in Alzheimer's disease, dementia in Parkinson's disease, dementia in Huntington's disease , Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, postmenopausal dementia, frontotemporal dementia, Lewy body dementia, vascular dementia, HIV dementia, Creutzfeldt-Jakob disease dementia, persistent use-induced dementia psychoactive substances, dementia in Pick's disease, dementia in schizophrenia, dementia in somatic diseases and senile dementia.

10. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для антагонизма рецептора 5-гидрокситриптамина 6.10. Use of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 3 for 5-hydroxytryptamine 6 receptor antagonism.

11. Комбинация, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп. 1-3 и ингибитор ацетилхолинэстеразы для лечения когнитивных расстройств; в которой ингибитор ацетилхолинэстеразы выбран из галантамина, ривастигмина, донепезила, такрина или их фармацевтически приемлемой соли.11. A combination containing a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of paragraphs. 1-3 and an acetylcholinesterase inhibitor for the treatment of cognitive disorders; wherein the acetylcholinesterase inhibitor is selected from galantamine, rivastigmine, donepezil, tacrine, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

12. Комбинация, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-3, ингибитор ацетилхолинэстеразы и антагонист рецептора NMDA для лечения когнитивных расстройств; в которой ингибитор ацетилхолинэстеразы выбран из галантамина, ривастигмина, донепезила, такрина или их фармацевтически приемлемой соли; и антагонист рецептора NMDA выбран из мемантина или его фармацевтически приемлемой соли.12. A combination containing a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 3, an acetylcholinesterase inhibitor and an NMDA receptor antagonist for the treatment of cognitive disorders; wherein the acetylcholinesterase inhibitor is selected from galantamine, rivastigmine, donepezil, tacrine, or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and the NMDA receptor antagonist is selected from memantine or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

13. Комбинация по п.11 или 12, где когнитивное расстройство выбрано из группы, состоящей из деменции при болезни Альцгеймера, деменции при болезни Паркинсона, деменции при болезни Хантингтона, деменции, связанной с синдромом Дауна, деменции, связанной с синдромом Туретта, деменции, связанной с постменопаузой, лобно-височной деменции, деменции с тельцами Леви, сосудистой деменции, деменции при ВИЧ, деменции при болезни Крейтцфельдта-Якоба, персистирующей деменции, вызванной употреблением психоактивных веществ, деменции при болезни Пика, деменции при шизофрении, деменции при соматических заболеваниях и старческой деменции.13. The combination according to claim 11 or 12, wherein the cognitive impairment is selected from the group consisting of Alzheimer's disease dementia, Parkinson's disease dementia, Huntington's disease dementia, Down's syndrome-associated dementia, Tourette's syndrome-associated dementia, dementia, associated with postmenopause, frontotemporal dementia, dementia with Lewy bodies, vascular dementia, dementia in HIV, dementia in Creutzfeldt-Jakob disease, persistent dementia due to substance use, dementia in Pick's disease, dementia in schizophrenia, dementia in medical diseases and senile dementia.

--