EA024138B1 - Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита - Google Patents
Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита Download PDFInfo
- Publication number
- EA024138B1 EA024138B1 EA201400038A EA201400038A EA024138B1 EA 024138 B1 EA024138 B1 EA 024138B1 EA 201400038 A EA201400038 A EA 201400038A EA 201400038 A EA201400038 A EA 201400038A EA 024138 B1 EA024138 B1 EA 024138B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- experimental
- treatment
- cells
- bone marrow
- experimental animal
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии, и предназначено для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита для усовершенствования общепринятых, разработки новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей. Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение 3 суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult, полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в вену ушной раковины экспериментального животного.
Description
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии и предназначено для лечения экспериментальной хронического орхоэпидидимита для усовершенствования общепринятых и разработка новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей.
Острое воспаление яичка и придатка (орхоэпидидимит) является одним из наиболее частых урологических заболеваний. Более 27% мужчин на протяжении жизни переносят эпидидимоорхит. Статистические данные о частоте заболевания свидетельствуют об актуальности его изучения с различных точек зрения: патогенетической, диагностической, лечебной, профилактической.
Переход острого орхоэпидидимита в хронический чреват многими последствиям, среди которых наиболее серьёзны нарушение проходимости придатка яичка, развитие склеротического и дистрофического процессов в яичке, что приводит к нарушению репродуктивной функции этих органов на стороне поражения.
Тактика лечения острого и хронического орхоэпидидимита у пациентов строго дифференцирована, в некоторых случаях при остром орхоэпидидимите выполняют эпидидимотомию, ведущую к декомпрессии органа и уменьшению остроты воспаления, а также проведение консервативного лечения путем антибиотикотерапии и физиотерапии (Чиненный В.Л. Острый эпидидимит в урологической практике автореферат на соиск. ученой степени канд. мед наук. -1991. -Москва, с. 10-15).
В доступных патентно-информационных источниках информации прототипа способу проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита не найдено.
Задача изобретения - разработка способа проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита, позволяющего эффективно и доступно провести лечение.
Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см3, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Мс5спси11. полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных внутривенно в вену уха.
Способ осуществляют следующим образом.
В качестве объекта эксперимента используют беспородных кроликов, самцов, весом 3-4 кг, которым ранее осуществляют модель экспериментального хронического орхоэпидидимита путем введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры.
Введение осуществляют в паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл, в качестве бактериальной культуры используют смешанные культуры стафиллокок+стрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у экспериментального животного (кролик) определяют на 30 сутки, при проведении патоморфологических и ультразвуковых исследований экспериментальных животных.
На 30 сутки от начала введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры и при постановки диагноза экспериментального хронического орхоэпидидимита на основе патоморфологических и ультразвуковых исследований подопытным животным проводят антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг.
Затем выполняют забор костного мозга из крыла подвздошной кости в объеме 5 см3 с гепаринизированным раствором Хенкса. После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендируют в питательной среде МекеисиЬ, специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК).
Клетки высевают в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки от стекла снимают диспергирующим раствором, отмывают раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендируют в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн клеток/см3. Взвесь клеток в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных внутривенно в вену уха.
Пример выполнения способа.
Использовано животное - кролик самец, весом 3,5 кг. В паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл, в качестве бактериальной культуры были введены смешанные культуры стафиллокок+стрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у данного экспериментального животного определили на 30 сутки, при проведении ультразвуковых исследований.
После этого животному провели антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг. Затем выполнили забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см3, отделили и отмыли клетки костного мозга После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендировали в питательной среде МекеисиИ, специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Клетки высеяли в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки сняли со стекла диспергирующим раствором, отмыли раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендировали в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн.клеток/см3. Взвесь клеток в объеме 1 мл ввели в организм эксперименталь- 1 024138 ных животных внутривенно в вену уха.
Результаты гистоморфологического исследования после трансплантации мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в ушную вену лабораторных животных.
В материале ткань (паренхима) яичка с нормальной фиброзной стромой без признаков настоящего или прошлого воспаления или его организации. Сперматогенез выражен отлично во всех извитых канальцах - фиг. 1.
В материале исследования ткань яичка, нормального гистологического строения. Строма яичка нежноволокнистая, хорошо васкуляризирована, без признаков воспаления или его организации. Во всех канальцах хорошо выражен сперматогенез (слегка запустевшие канальцы единичны: около 5%) - фиг. 2.
В исследуемом материале ткань яичка нормального гистологического строения. Строма нежноволокнистая, без признаков воспаления или его организации. Сперматогенез в извитых канальцах выражен хорошо: признаки запустения выражены очень слабо (около 10%) - фиг. 3.
В исследуемом материале нормальная ткань яичка. Признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме не обнаружено. Сперматогенез выражен хорошо («полупустых канальцев около 5%) - фиг. 4.
В материале ткань яичка без признаков бывшего или настоящего воспаления в строме и паренхиме яичка, а также в прилежащих тканях. Сперматогенез отличный - фиг. 5.
В исследуемом материале ткань яичка нормального гистологического строения, без признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме. Сперматогенез отличный: полупустых канальцев менее 5% - фиг. 6.
Результаты гистоморфологии после трансплантации мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток внутривенно в вену уха показывают, что при этом наблюдается положительный эффект, выражающийся в следующем:
нормализация фиброзной стромы; удовлетворительная/хорошая васкуляризация стромы; уменьшение запустевших канальцев.
Таким образом, статистически доказано, что трансплантация мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток внутривенно в вену уха приводят к уменьшению и исчезновению признаков воспаления и, главным образом, улучшает сперматогенез.
Экспериментальным путем установлены нормальные показатели размеров яичек, показателей скорости кровотока, индекса резистентности и пульсационного индекса у лабораторных кроликов после проведенного лечения.
Разработанный способ выделения и введения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток внутривенно в вену уха лабораторных животных с целью изучения и внедрения новых методов лечения инфертильности и может быть использования для экспериментального лечения этих заболеваний.
Claims (1)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см3, отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Мс5спен11. полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в вену ушной раковины экспериментального животного.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KZ20131379 | 2013-10-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201400038A1 EA201400038A1 (ru) | 2015-06-30 |
| EA024138B1 true EA024138B1 (ru) | 2016-08-31 |
Family
ID=53488016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201400038A EA024138B1 (ru) | 2013-10-17 | 2013-12-12 | Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA024138B1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2475241C1 (ru) * | 2011-10-25 | 2013-02-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей" Министерства здравоохранения и социального развития РФ | Способ лечения острых орхоэпидидимитов и их осложнений |
| US20130053336A1 (en) * | 2010-01-13 | 2013-02-28 | Universite Paris Diderot Paris 7 | Treatment of chlamydiaceae infections by means of beta-lactams |
| EP2611906A1 (en) * | 2010-08-31 | 2013-07-10 | Cook General Biotechnology LLC | Systemic, allogenic stem cell therapies for treatment of diseases in animals |
-
2013
- 2013-12-12 EA EA201400038A patent/EA024138B1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20130053336A1 (en) * | 2010-01-13 | 2013-02-28 | Universite Paris Diderot Paris 7 | Treatment of chlamydiaceae infections by means of beta-lactams |
| EP2611906A1 (en) * | 2010-08-31 | 2013-07-10 | Cook General Biotechnology LLC | Systemic, allogenic stem cell therapies for treatment of diseases in animals |
| RU2475241C1 (ru) * | 2011-10-25 | 2013-02-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей" Министерства здравоохранения и социального развития РФ | Способ лечения острых орхоэпидидимитов и их осложнений |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| РАЗИНА С.Е. Острый эпидидимит. Альманах клинической медицины. 2007, No. 15, cc. 88-91[онлайн], [найдено 13.07.2014]. Найдено из Интернет: * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201400038A1 (ru) | 2015-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nishimori et al. | Synthetic retinoid Am80 ameliorates chronic graft-versus-host disease by down-regulating Th1 and Th17 | |
| JP2022022472A (ja) | 分娩後の哺乳動物の胎盤、その使用およびそれに由来する胎盤幹細胞 | |
| US20120201791A1 (en) | Methods of treating diseases or conditions using mesenchymal stem cells | |
| RU2323252C1 (ru) | Способ культивирования мезенхимальных стволовых клеток человека ex vivo | |
| US10668111B2 (en) | Use of umbilical mesenchymal stem cells for treating pulmonary fibrosis | |
| US20170360907A1 (en) | Compositions and methods for preventing and treating graft versus host disease | |
| Futrega et al. | Direct bone marrow HSC transplantation enhances local engraftment at the expense of systemic engraftment in NSG mice | |
| CN105420191A (zh) | 一种富含造血干细胞的临床用脐血单核细胞的制备方法 | |
| CN104902909A (zh) | 用于降低头痛的频率和/或严重性的组合物及方法 | |
| CN106470676A (zh) | 用于非细胞毒性干细胞移植的方法和组合物 | |
| Shaw et al. | Prenatal transplantation of human amniotic fluid stem cell could improve clinical outcome of type III spinal muscular atrophy in mice | |
| CN104818242A (zh) | 原代肝细胞的分离制备方法 | |
| McConico et al. | In utero cell transfer between porcine littermates | |
| Tracy et al. | Isolation of oligodendrocyte-like cells from human umbilical cord blood | |
| WO2006117237A2 (en) | Regeneration system, its production and use | |
| EA024138B1 (ru) | Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита | |
| EA025096B1 (ru) | Способ проведения клеточной терапии для лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита | |
| Siniscalco et al. | Cellular therapy for autism spectrum disorder: a step forward to the optimal treatments | |
| Dayem et al. | New therapeutic approach with extracellular vesicles from stem cells for interstitial cystitis/bladder pain syndrome | |
| KR20220073662A (ko) | 트롬빈 처리 줄기세포에서 유래된 엑소좀을 포함하는 감염성 질환 치료용 조성물 | |
| KR20200127039A (ko) | 다능성 간세포에 의한 주산기 뇌장애의 개선 및 치료 | |
| Bērziņš et al. | Characterisation and Safety of Canine Adipose-Derived Stem Cells | |
| EA024288B1 (ru) | Способ немедикаментозного лечения экспериментального хронического орхоэпидидимита | |
| Hanna et al. | Hedgehog signalling in CD4+ T helper cell polarisation | |
| Chen et al. | Pretreatment with licochalcone a enhances therapeutic activity of rat bone marrow mesenchymal stem cells in animal models of colitis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU |