EA022755B1

EA022755B1 - Способы длительной терапии с применением аминопиридинов

Info

Publication number: EA022755B1
Application number: EA201171043A
Authority: EA
Inventors: Эндрю Р. Блайт; Рон Коэн
Original assignee: Акорда Терапьютикс, Инк.
Priority date: 2009-02-11
Filing date: 2010-02-11
Publication date: 2016-02-29
Also published as: AR075413A1; CN102046174A; EA201171043A1; KR20170034452A; AU2016219650A1; TW201032809A; US20150313886A1; MX2011008485A; SG10201609184PA; NI201100155A; PE20120791A1; UY32445A; WO2010093838A1; CA2751581A1; BRPI1000030A2; CL2011001927A1; UY32444A; JP2012517449A; CO6440534A2; IL214500A0

Abstract

В настоящем изобретении раскрыты способы, связанные с применением аминопиридинов, таких как 4-аминопиридин, для применения терапевтически эффективным способом у пациентов с демиелинизирующим заболеванием, таким как рассеянный склероз.

Description

Варианты осуществления настоящего изобретения относятся к способам применения 4аминопиридина для лечения рассеянного склероза и его симптомов. Такие варианты осуществления включают следующее.

Способ поддержания улучшенной походки в течение по меньшей мере одного года у пациента с рассеянным склерозом, включающий введение указанному пациенту композиции с замедленным высвобождением, содержащей 10 мг 4-аминопиридина, два раза в день в течение указанного периода времени. В одном из вариантов осуществления период времени в способе поддержания улучшенной походки составляет по меньшей мере 18 месяцев. Еще в одном варианте осуществления период времени составляет по меньшей мере 2 года. В одном из вариантов осущесления указанных способов улучшенная походка подразумевает повышенную скорость ходьбы.

Описание фигур

Следующие фигуры являются частью настоящего описания и включены с целью более подробной демонстрации некоторых аспектов настоящего описания. Изобретение может быть лучше понято при обращении к одной из представленных фигур в сочетании с подробным описанием некоторых вариантов осуществления, представленных в настоящей заявке.

Для более полного понимания сущности и преимуществ настоящего изобретения следует обратиться к следующему подробному описанию в сочетании с сопровождающими фигурами, в которых фиг. 1 является гистограммой, на которой показано число посещений с целью проведения терапии, при которох пациенты демонстрировали повышение скорости ходьбы на отрезке протяженностью 25 футов на время по сравнению со всеми пятью посещениями без проведения терапии;

фиг. 2 - график средних скоростей ходьбы (фут/с) на день исследования (наблюдаемые случаи, ΙΤΤпопуляция (популяция, получавшая назначенную терапию));

фиг. 3 - гистограмма процентного изменения средней скорости ходьбы в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 4 - гистограмма процента зарегистрированных респондеров (субъектов со средним изменением скорости ходьбы в течение 12-недельного периода при неизменяемой дозе, составляющим по меньшей мере 20%) в терапевтической группе (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 5 - график ΕΕΜΜΤ на день исследования (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 6 - гистограмма изменений ΕΕΜΜΤ в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 7 - гистограмма процента ро81-йое респондеров в терапевтической группе (ΙΤΤ-популяция) согласно анализу респондеров настоящего изобретения;

фиг. 8 - гистограмма процентного отношения респондеров среди субъектов плацебо к пулам субъектов, получавших 4-аминопиридин (ΙΤΤ-популяция), согласно анализу респондеров настоящего изобретения;

фиг. 9 - гистограмма валидации переменной роЧ-Нос респондеров с использованием субъективных шкал (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 10 - график процентного изменения скорости ходьбы при каждом двойном слепом посещении в группах анализа респондеров (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 11 - график изменения ΕΕΜΜΤ при каждом двойном слепом посещении в группах анализа респондеров (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 12 - график изменения общего балла по шкале Ашворта при каждом двойном слепом посещении в группах анализа респондеров (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 13 - информация касательно 4-аминопиридина;

фиг. 14 - схема и дизайн исследования, посещения в исследовании показаны числами в кружках;

фиг. 15 - схема распределения пациентов в рандомизированном испытании ΟΟΝδΟΚΤ;

фиг. 16 - А) процент ответов при ходьбе на время у пациентов, получавших плацебо и 4аминопиридин (Р-8К); В) процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении после рандомизации по группам в анализе респондеров (ΙΤΤ-популяция), получавшие 4-аминопиридин респондеры в ходьбе на время показали устойчивое улучшение в ходе терапии, которое подвергалось полной реверсии при последующем контрольном посещении через две недели (Р-И). Р-8К = фампридин-δΚ (4-аминопиридин-8К); Τν = ходьба на время;

фиг. 17 - первичная переменная эффективности: процент респондеров в ходьбе на время в исследованиях Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204 и при их объединении (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция). При- 1 022755 мечание 1) респондер в ходьбе на время был определен как пациент с более высокой скоростью ходьбы по меньшей мере в трех посещениях в ходе периода двойной слепой терапии (из всего четырех возможных) по сравнению с максимальной скоростью для любых из четырех посещений перед терапией и посещения через две недели после терапии. Примечание 2) для каждого исследования р-значение при терапии было получено из модели логистической регрессии, скорректированной по центру. Исследование было включено в качестве фактора в объединенной модели;

фиг. 18 - клиническая значимость первичной переменной эффективности; среднее изменение относительно базового уровня в шкале Μδνδ-12 в исследованиях М8-Р202, М8-Р203, М8-Р204 и при их объединении (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция). Примечание 1) один ΙΤΤ нереспондер в ходьбе на время не имел двойных слепых оценок по Μδνδ-12 в М8-Р202. Примечание 2) отрицательное изменение по шкале Μδνδ-12 (нетрудоспособность) является показателем улучшения у пациента. Примечание 3) Μδνδ-12 преобразовывает сумму 12 отдельных вопросов по нетрудоспособности (от 1 = совсем нет до 5 = в наивысшей степени) в шкалу 0-100;

фиг. 19 - процентное улучшение средних значений Μδνδ-12 для исследований Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204 и при их объединении (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция); сокращения: ΡΝΚ = 4аминопиридин-δΚ нереспондеры в ходьбе на время; РК = 4-аминопиридин-§К респондеры в ходьбе на время. Описательная статистика: процентное улучшение средних значений было вычислено для каждой группы путем деления среднего значения изменения относительно базового уровня в группе на среднее значение базового уровня в группе, выраженных в процентах. Изменение относительно базового уровня было основано на двойном слепом среднем. *: р-значение в отношении 4-аминопиридин-§К нереспондеров в ходьбе на время основано на среднем изменении относительно базового уровня в Μδνδ-12. Примечание: один ΙΤΤ плацебо пациент не имел двойных слепых оценок по Μδνδ-12 в Μ8-Ρ202;

фиг. 20 - процент пациентов с возрастающим средним процентным увеличением относительно базового уровня скорости ходьбы за период двойной слепой терапии в исследованиях Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204 и их объединении в терапевтической группе (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция);

фиг. 21 - изменение относительно базового уровня (фут/с) скорости ходьбы в конечной точке двойного слепого исследования Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204 (наблюдаемые случаи, ΙΤΤ-популяция). Сокращения: ΡΝΚ = 4-аминопиридин-§К нереспондеры в ходьбе на время; РК = 4-аминопиридин-§К респондеры в ходьбе на время. *: р-значение в отношении группы 4-аминопиридин-§К респондеров в ходьбе на время. Примечание: в анализе конечной точкой двойного слепого исследования Μ8-Ρ204 являлось посещение 6 (день 56). Двойное слепое посещение 7 (день 63) использовалось, прежде всего, для получения данных по эффективности и концентрации плазмы препарата в конце нормального 12-часового интервала между приемом доз. По сути, данное посещение (посещение 7) не являлось частью первичного критерия эффективности;

фиг. 22 - процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при контрольном наблюдении в объединенных исследованиях Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204 (наблюдаемые случаи, ΙΤΤпопуляция). Сокращения для данной фигуры: РNΚ = 4-аминопиридин-§К, 10 мг два раза в день нереспондеры в ходьбе на время; РК = 4-аминопиридин-§К 10 мг, два раза в день респондеры в ходьбе на время, *: р-значение в отношении группы 4-аминопиридин-§К респондеров в ходьбе на время (примечание: в контрольном наблюдении 1 для РNΚ в сравнении с плацебо р=0,017). Примечание 1) только Μ8-Ρ203 включало второе контрольное посещение. Примечание 2 (наблюдаемые случаи)) для каждого контрольного посещения численность терапевтической выборки, представленная в подписях на фигуре, представляет собой количество ΙΤΤ-пациентов с оценкой указанной переменной;

фиг. 23 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня для принявших участие в расширенных исследованиях респондеров в ходьбе на время и нереспондеров в ходьбе на время в исследованиях Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ203ΕΧΤ;

фиг. 24 - профили РК в стационарном состоянии в день 8 для индивидуальных пациентов с рассеянным склерозом при стандартной дозе 10 мг; РК = фармакокинетика;

фиг. 25 - Μ8-Ρ204: эффективность в конце цикла дозирования; ИВ = двойная слепая терапия; * доверительные интервалы не показаны для ясности;

фиг. 26 - Μ8-Ρ204: зависимость концентрации фампридина (4-аминопиридина) в плазме от времени, прошедшего после введения предыдущей дозы;

фиг. 27 - Μ8-Ρ204: процентное изменение скорости ходьбы в сравнении с концентрацией фампридина (4-аминопиридина) в плазме;

фиг. 28 - процентное изменение скорости ходьбы с концентрацией фампридина (4-аминопиридина) в плазме: Μ8-Ρ204; 8ΕΜ: стандартная ошибка среднего;

фиг. 29 - РК фампридин-§К (4-аминопиридин-§К) популяции у пациентов с рассеянным склерозом; РК = фармакокинетика; Μ8-Ρ202 (10 мг два раза в день), Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204; среднее значение ±95%ный доверительный интервал;

фиг. 30 - объединенные: оценка эффективности в конце цикла дозирования; Μ8-Ρ202 (10 мг два раза в день), Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204; РNΚ = фампридин-§К нереспондеры в ходьбе на время; РК = фампридин8К респондеры в ходьбе на время;

- 2 022755 фиг. 31 - изменение скорости ходьбы во времени: М8-Р203 и М8-Р203 ЕХТ (фампридин-δΚ респондеры в ходьбе на время и фампридин-δΚ нереспондеры в ходьбе на время); ΡΝΚ = фампридин-δΚ нереспондеры в ходьбе на время; ΡΚ = фампридин-δΚ респондеры в ходьбе на время;

фиг. 32 - изменение скорости ходьбы во времени: М8-Р204 и М8-Р204 ЕХТ (фампридин-δΚ респондеры в ходьбе на время и фампридин-δΚ нереспондеры в ходьбе на время); ΌΒ = двойной слепой; ΡΝΚ = фампридин-δΚ нереспондеры в ходьбе на время; ΡΚ = фампридин-δΚ респондеры в ходьбе на время;

фиг. 33 - кумулятивное удержание пациентов при расширенном исследовании в группе респондеров в ходьбе на время, в расширенном исследовании Мδ-Ρ202ΕXΤ; примечание: ΝΚ указывает, что срединное значение не было достигнуто. Случай указывает на приостановку или завершение терапии;

фиг. 34 - кумулятивное удержание пациентов при расширенном исследовании в группе респондеров в ходьбе на время, в расширенном исследовании Мδ-Ρ203ΕXΤ; ΝΚ указывает, что срединное значение не было достигнуто. Случай указывает на приостановку или завершение терапии;

фиг. 35 - кумулятивное удержание пациентов при расширенном исследовании в группе респондеров в ходьбе на время, в расширенном исследовании Мδ-Ρ204ΕXΤ; ΝΚ указывает, что срединное значение не было достигнуто. Случай указывает на приостановку или завершение терапии;

фиг. 36 - среднее процентное изменение относительно базового уровня скорости ходьбы в группах респондеров в ходьбе на время в расширенных исследованиях Мδ-Ρ2 02/Мδ-Ρ2 02ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ202, посещения 3, 5, 6 и 10 были посещениями только в целях безопасности; оценок эффективности не производили; в исследовании Мδ-Ρ202ЕXТ запланированными посещениями были посещение 4 = 14 недель; посещение 6 = 26 недель; посещение 8 = 38 недель; посещение 10 = 50 недель; посещение 12 = 62 недели; посещение 14 = 74 недели;

фиг. 37 - среднее процентное изменение относительно базового уровня скорости ходьбы при каждом посещении в зависимости от состояния респондеров в исходном/расширенном исследовании, для пациентов, рандомизированных к фампридину (4-аминопиридину), в исследованиях Мδ-Ρ202/МδР202ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ202, посещения 3, 5, 6, и 10 были посещениями только в целях безопасности; оценок эффективности не производили; в исследовании Мδ-Ρ202ЕXТ запланированными посещениями были посещение 4 = 14 недель; посещение 6 = 26 недель; посещение 8 = 38 недель; посещение 10 = 50 недель; посещение 12 = 62 недели; посещение 14 = 74 недели;

фиг. 38 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношении получавших плацебо в исходном исследовании Мδ-Ρ202 и респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании Р202ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ202 посещения 3, 5, 6 и 10 были посещениями только в целях безопасности; оценок эффективности не производили; в исследовании Мδ-Ρ202ЕXТ запланированными посещениями были посещение 4 = 14 недель; посещение 6 = 26 недель; посещение 8 = 38 недель; посещение 10 = 50 недель; посещение 12 = 62 недели; посещение 14 = 74 недели;

фиг. 39 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в группах респондеров в ходьбе на время в исследованиях Мδ-Ρ203/Мδ-Ρ203ЕXТ; в исследовании Мδ-Ρ20 3ЕХТ запланированными посещениями были посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недели; посещение 5 = 78 недель; посещение 6 = 104 недели;

фиг. 40 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении в зависимости от состояния респондеров в исходном/расширенном исследовании для пациентов, рандомизированных к фампридину (4-аминопиридину), в исследованиях Мδ-Ρ203/МδР203ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ203ЕXТ запланированными посещениями были посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недели; посещение 5 = 78 недель; посещение 6 = 104 недели;

фиг. 41 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношениями получавших плацебо в исходном исследовании Мδ-Ρ203 и респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании Р203ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ203ЕXТ запланированными посещениями были посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недели; посещение 5 = 78 недель; посещение 6 = 104 недели;

фиг. 42 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в группах респондеров в ходьбе на время в исследованиях Мδ-Ρ204/Мδ-Ρ204ЕXТ; в исследовании Мδ-Ρ2 0 4ЕХТ запланированными посещениями были посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недель;

фиг. 43 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении в зависимости от состояния респондеров в исходном/расширенном исследовании для пациентов, рандомизированных к фампридину, в исследованиях Мδ-Ρ204/Мδ-Ρ204ЕXТ; в исследовании Мδ-Ρ204ЕXТ запланированными посещениями были посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недели;

фиг. 44 - среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношении получавших плацебо в исходном исследовании Мδ-Ρ204 и респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании Р204ЕХТ; в исследовании Мδ-Ρ204ЕXТ запланированными посещениями были

- 3 022755 посещение 1 = 2 недели; посещение 2 = 14 недель; посещение 3 = 26 недель; посещение 4 = 52 недели; фиг. 45 - пример результата по шкале Μδ^δ-12 при введении 4-аминопиридина в соответствии с настоящим изобретением;

фиг. 46 - соответствие скорости ходьбы и класса способности к самостоятельному передвижению; фиг. 47 - сохранение улучшения ходьбы в ходе исследования М8-Р203;

фиг. 48 - предварительная статистика исследований в пациенто-годах в трех расширенных исследованиях (М8-Р203ЕХТ, М8-Р204ЕХТ, М8-Р205ЕХТ). На данной диаграмме показан ход расширенных исследований и количество пациенто-лет при дозе 10 мг два раза в день с прекращением в ноябре 2008 г. Общая экспозиция в течение данных исследований при дозе 10 мг два раза в день составила более 1200 пациенто-лет на ноябрь 2008 г.;

фиг. 49 - вычисленные концентрации в плазме для типового пациента с нормальной почечной функцией, определенной по СгС1 (клиренс креатинина) выше 80 мл/мин; указанный типовой пациент был мужского пола и, как следует понимать, несколько более крупным, чем типичный пациент с рассеянным склерозом.

Подробное описание

Перед описанием настоящих композиций и способов следует упомянуть, что необходимо понимать, что настоящее изобретение не ограничивается конкретными описанными способами, композициями или методами, поскольку они могут изменяться. Следует также понимать, что терминология, используемая в описании, служит исключительно в целях описания конкретных вариантов или вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, которое ограничивается только прилагаемой формулой. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящей заявке, имеют такие же значения, в которых их обычно понимают средние специалисты в данной области техники. Хотя любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в настоящей заявке, могут применяться при осуществлении или проверке вариантов осуществления настоящего изобретения, далее описываются предпочтительные способы, устройства и материалы. Все публикации, заявки на патенты и патенты, указанные в настоящей заявке, полностью включены путем ссылки. Ничто в настоящей заявке не следует рассматривать как допущение того, что изобретение не правомочно противопоставлять такое описание в силу приоритета изобретения. В описании, фигурах и таблицах в настоящей заявке используется множество терминов. В целях обеспечения полного и последовательного понимания настоящего описания и формулы приводятся следующие определения.

Оптические изомеры - диастереомеры - геометрические изомеры - таутомеры: соединения, описанные в настоящей заявке, могут содержать асимметричный центр и могут, таким образом, существовать в виде энантиомеров. Если соединения согласно изобретению обладают двумя или более асимметричными центрами, они могут дополнительно существовать в виде диастереомеров. Настоящее изобретение включает все возможные стереоизомеры как. по существу, чистые разделенные энантиомеры, их рацемические смеси, а также смеси диастереомеров. Формулы показаны без точно определенной стереохимии в определенных положениях. Настоящее изобретение включает все стереоизомеры таких формул и их фармацевтически приемлемые соли. Диастереоизомерные пары энантиомеров могут быть разделены, например, с помощью фракционной кристаллизации из подходящего растворителя, при этом пара энантиомеров, полученных таким образом, может быть разделена на индивидуальные стереоизомеры стандартными способами, например при помощи оптически активной кислоты или основания в качестве разделяющего агента или на хиральной ВЭЖХ колонке. Кроме того, любой энантиомер или диастереомер соединения общей формулы может быть получен с помощью стереоспецифического синтеза с использованием оптически чистых исходных веществ или реагентов с известной конфигурацией.

Используемый в настоящей заявке термин приблизительно означает плюс или минус 15, 14, 13, 12, 11, 10% или меньше 10% от значения, с которым он используется. Приблизительно является включительным. Таким образом, в одном примере, когда приблизительно означает 10%, приблизительно 50% означает диапазон 45-55% включительно.

Введение при использовании в сочетании с лекарственным средством означает введение лекарственного средства непосредственно в или на целевую ткань или введение лекарственного средства пациенту, в результате чего лекарственное средство положительно влияет, или воздействует, или оказывает воздействие на ткань, на которую оно направлено. Таким образом, используемый в настоящей заявке термин введение при использовании в сочетании с соединением может включать, помимо прочего, доставку соединения в или на целевую ткань; доставку соединения системно пациенту, например внутривенную инъекцию (например, парентеральную) или пероральное введение (например, энтеральное), или местное (например, трансдермальное, чрескожное, посредством пластыря, суппозитория), или ингаляционное (например, трансмукозальное) введение, при котором лекарственное средство достигает целевой ткани. Введение композиции может быть выполнено различными способами, описанными в настоящей заявке. Кроме того, введение относится к действию предоставления или доставки композиции или соединения пациенту, выполняемому пациентом непосредственно или выполняемому лицом, осуществляющим уход за пациентом, например медицинским работником; включая акт приема пищи или применения пациентом или что-либо подобное, при котором композиция или соединение могут проявлять свои

- 4 022755 эффекты.

Термин животное, используемый в настоящей заявке, включает, помимо прочего, людей, а также позвоночных помимо человека, таких как дикие, домашние и сельскохозяйственные животные.

Термин улучшение определяет изменение параметра в требуемом направлении. Используемое в настоящей заявке улучшение также включает стабилизацию параметра, который в ином случае мог бы ухудшиться или измениться в нежелательном направлении.

Термин ингибирование включает введение соединения настоящего изобретения с целью предотвращения развития симптомов, облегчения симптомов или устранения заболевания, патологического состояния или нарушения.

Местное введение означает прямое введение несистемным путем на участок повреждения, нарушения или ощущаемой боли или вблизи него.

Под фармацевтически приемлемым подразумевается, что носитель, разбавитель или наполнитель должны быть совместимы с другими компонентами лекарственной формы и не вызывать нежелательных эффектов у ее реципиента.

Термин пролекарство относится к соединениям, которые подвергаются быстрому превращению ίη νίνο с образованием исходных соединений вышеуказанной формулы, например, при гидролизе в крови. Подробное описание приведено в Т. Ηίβΐιαίιί апб V. 81с11а. Рго-бгидв ав Νονοί Иекуегу 8ув1ств. νοί. 14, А.С.8. 8утровшт 8епев, а также в ВюгсуегаЫе Сатегв ίη Эгид Иев1дп, еб. Еб\\агб В. Коске, Лтепсап Ркагтасеикса1 ЛввоааОоп апб Регдатоп Ргевв, 1987, которые включены в настоящую заявку путем ссылки.

Термины пациент и субъект означают животных, включая млекопитающих, а также в одном варианте осуществления людей. Примеры пациентов или субъектов включают людей, коров, собак, кошек, коз, овец и свиней.

Использумый в настоящей заявке термин Респондер в целом является статистическим термином и не предназначен для выражения существования или отсутствия применимости или обеспечения результата изобретения. Таким образом, индивид может демонстрировать полезный ответ на способ изобретения, но в то же время не удовлетворять специфическому набору статистических критериев в качестве Респондера.

Термин соли относится к относительно нетоксичным солям присоединения неорганических и органических кислот соединений настоящего изобретения. Указанные соли могут быть получены ш вки в ходе окончательного выделения и очистки соединений или путем отдельного взаимодействия очищенного соединения в форме свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой и последующего выделения образующейся в результате соли. Репрезентативные соли включают гидробромид, гидрохлорид, сульфат, гидросульфат, нитрат, ацетат, оксалат, валерат, олеат, пальмитат, стеарат, лаурат, борат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат, мезилат, глюкогептаноат, лактобионат и лаурилсульфат и т.п. Они могут включать катионы щелочных и щелочно-земельных металлов, таких как катионы натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п., а также нетоксичный аммоний, тетраметиламмоний, тетраметиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, этиламин и т.п. (см., например, 8.М. Вагде е! а1., Ркагтасеи1юа1 8а11в, 1. Ркагт. 8ск, 1977, 66:1-19, включенный в настоящую заявку путем ссылки).

Используемый в настоящей заявке термин стационарное состояние обозначает систему, которая имеет одно или более свойств, которые остаются неизменными с течением времени, или стационарное состояние обозначает систему, которая имеет одно или более свойств, которые изменяются в пределах ограниченного диапазона с течением времени. Как правило, стационарное состояние является более распространенной ситуацией, чем динамическое равновесие. Если система находится в стационарном состоянии, то недавно наблюдаемые характеристики системы будут, как правило, сохраняться в будущем. Во многих системах стационарное состояние не достигается, пока некоторое время не проходит после задействования или инициации системы. Указанную начальную ситуацию часто называют переходным состоянием, периодом титрования, начальным периодом или периодом разогрева.

Используемый в настоящей заявке термин замедленное высвобождение, относящийся к композициям аминопиридина, включает высвобождение аминопиридина из дозированной лекарственной формы с замедленной скоростью, в результате чего терапевтически эффективный уровень в крови сохраняется в течение по меньшей мере приблизительно 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 ч, или более чем 18 ч, или более чем 24 ч, или более чем 30 ч. Предпочтительно количество аминопиридина в дозированных лекарственных формах для перорального применения согласно вариантам осуществления настоящего изобретения обеспечивает терапевтически эффективную концентрацию в плазме или ЦНС при введении фармацевтической композиции три раза в день, два раза в день или один раз в день. Термины замедленное высвобождение и длительное высвобождение в целом являются синонимичными, если из контекста прямо не следует иное.

Используемый в настоящей заявке термин лекарственное средство означает средство, применяемое для лечения, борьбы, уменьшения интенсивности, облегчения, предотвращения или улучшения нежелательное состояния или заболевания пациента. Частично варианты осуществления настоящего изобретения направлены на лечение рассеянного склероза и/или любого его симптома. Частично варианты

- 5 022755 осуществления настоящего изобретения направлены на способ достижения терапевтического результата при рассеянном склерозе и/или любом его симптоме.

Терапевтически эффективное количество является количеством, достаточным для достижения лечебного или терапевтического результата.

В одном из вариантов осуществления терапевтически эффективное количество соединения настоящего изобретения является таким количеством, которое при введении, необязательно в составе физиологически переносимой вспомогательной композиции, является достаточным для достижения эффективной системной концентрации или местной концентрации в ткани.

Используемое в настоящей заявке лечение включает любое из следующего: результат, который уменьшает интенсивность, облегчает, уменьшает или предотвращает симптомы, связанные с заболеванием или недомоганием, способ нормализации функций организма при заболевании или нарушениях, приводящих к ухудшению некоторых физических функций, или улучшения одного или нескольких клинически измеряемых параметров заболевания. В одном из вариантов осуществления терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое способно обеспечить терапию. Предпочтительно улучшение симптомов, связанных с рассеянным склерозом, включает скорость ходьбы, тонус мышц нижних конечностей, силу мышц нижних конечностей и/или мышечную спастичность. В рамках настоящей заявки терапевтически эффективное количество может также быть количеством, достаточным для уменьшения боли или мышечной спастичности, связанной с неврологическим нарушением, которое подвергается лечению.

Кроме того, термины лечить, получающий лечение, лечение и тому подобное, используемые в настоящей заявке, относятся и к терапевтическому воздействию, и к профилактическим или предупредительным мерам, цель которых состоит в предотвращении или замедлении (уменьшении) нежелательного физиологического состояния, нарушения или заболевания или в получении выгодного или желаемого результата. Результатом может быть, например, медицинская, физиологическая, клиническая, физическая терапия, профессиональная терапия, производимая медицинским работником или пациентом; или параметр, известный в уровне техники как качество жизни или активность повседневной жизни. В рамках настоящего изобретения выгодные или желаемые клинические результаты включают, помимо прочего, облегчение симптомов; уменьшение степени тяжести состояния, нарушения или заболевания; стабилизацию (т.е. не ухудшение) состояния, нарушения или заболевания; задержку развития или замедление прогрессии состояния, нарушения или заболевания; улучшение интенсивности или облегчение состояния, нарушения или заболевания и ремиссию (частичную или полную), выявляемую или невыявляемую; или улучшение состояния, нарушения или заболевания. В одном варианте осуществления лечение включает индукцию клинически существенного ответа без превышения уровней побочных эффектов. В одном варианте осуществления лечение также включает увеличение продолжительности жизни по сравнению с ожидаемой продолжительностью жизни без получения лечения. В одном варианте осуществления лечение относится к введению лекарственного средства или предоставлению медицинских процедур пациенту в целях либо профилактики (предотвращения) для лечения недомогания или болезни у пораженного пациента, либо улучшения клинического состояния пациента, включая уменьшение продолжительности заболевания или тяжести заболевания, либо субъективного улучшения качества жизни пациента или увеличения продолжительности жизни пациента. Следует понимать, что один или несколько вариантов осуществления лечения, лекарственного средства или терапевтически эффективный могут существовать совместно.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированных, так и в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п. В большинстве случаев сольватированные формы в рамках настоящего изобретения приравниваются к несольватированным формам.

В сущности, термин ткань относится к любому скоплению клеток с аналогичной специализацией, которые объединены при выполнении специфической функции.

Другие термины и/или сокращения приведены ниже

- 6 022755

Сокращение или специализированный термин	Объяснение
ΑΩΜΕ	Поглощение, распределение, выделение	метаболизм и
А_е	Количество выделенного	лекарственного
	средства
ΑΡϋ₃₀, ΑΡϋ^η, АРРог,	Потенциальная продолжительность действия
	30%, 50%, 90%
Аис	Площадь под кривой	динамической
	концентрации
АиС(о-г.), Аис ) или	Площадь под кривой зависимости концентрации
Аис₍₀-_1п£1	в плазме от времени,	до последнего
	измеримого уровня, и экстраполируемая до
	бесконечности
Аис (0-12), Аис (0-24)	Площадь под кривой зависимости концентрации
	в плазме от времени, 0-12 часов, 0-24 часа
Д.р. в день	Два раза в день
¹⁴с	Радиоактивный углерод 14
СС1	Клиническая оценка общего состояния
СНО	Яичник китайского хомячка
С1	Доверительный интервал
СЬ/Е	Кажущийся общий клиренс после введения
С1к	Почечный клиренс
см	Сантиметр
Стах	Максимальная измеренная	концентрация в
	плазме
Стах®®	Максимальная измеренная	концентрация в

	плазме в стационарном состоянии
с_т1Г,	Минимальная измеренная концентрация в плазме
с_т1Г,_ее	Минимальная измеренная концентрация в плазме в стационарном состоянии
ЦНС	Центральная нервная система
СР	Контролируемое высвобождение
СгС1	Клиренс креатинина
СитА_е	Выделенное кумулятивное количество лекарственного средства
СУР, СУР 450	Изофермент цитохром р450
Далфампридин	Фампридин
ΌΑΡ	диаминопиридин
РЕК, Р-ЕК	Далфампридин длительного высвобождения, см. также ЕЗР
ЭКГ	Электрокардиограмма
ЕР55	Расширенная шкала оценки статуса инвалидности
ээг	Электроэнцефалограмма
Е	Женщина
Фампридин	Далфампридин
ЕОВ	Серия функциональных тестов
ЕЗР, Е-ЗР	Фампридин-ЗК, Фампридин длительного высвобождения, 4-аминопиридин замедленного высвобождения (например, Ампира (ΑΜΡΥΚΑ™), Асогс1а ТПегареибтсз, НаибПогпе, ΝΥ); также см. О-ЕР
г, кг, мг, мкг, нг	Грамм, килограмм, миллиграмм, микрограмм, нанограмм
САВА	Гамма-аминомасляная кислота
СЬР	Надлежащая лабораторная практика
ч	Час
НРРЕ	Полиэтилен низкого давления
ПЕРС	Ген специфических калиевых каналов сердца человека

- 7 022755

ВЭЖХ	Высокоэффективная жидкостная	хроматография
1С₅₀	50%-ая ингибирующая концентрация
1кг	Калиевый ионный канал, активность которого измеряют в анализе НЕКС
ΙΝϋ	Заявка на регистрацию нового средства	лекарственного
ΙΚ	Быстрое высвобождение
в/в (ίν)	Внутривенный
К⁺	Калий
К_е1	Константа выведения
Л, мл	Литр, миллилитр
ЖХМС, жх/мс/мс	Жидкостная хроматография спектрометрия	/ масс-
1ГО₅г,	Средняя летальная доза
ЬЕММТ	Мануальное обследование конечностей	мышц нижних
Ьп	Натуральный логарифм
ьоо	Предел измерения
м	Мужчина
МеаЬКА	Медицинский словарь регулятивной деятельности	терминологии
мин	Минута
мМ, мкМ	Миллимолярный, микромолярный
МВТ	Среднее время пребывания
РС	Рассеянный склероз
Μ3Ν3-12	Шкала оценки ходьбы при рассеянном
	склерозе, включающая 12 пунктов
МТЬ	Максимальная переносимая доза
ΝΑ	Не применим
Νϋ	Не обнаружен
ΝϋΑ	Заявка на регистрацию нового средства	лекарственного
ΝΕ	Не поддающийся оценке
ΝΕ	Национальный формуляр
ΝΟΑΕΙι	Уровень отсутствия заметных	нежелательных

	эффектов
ΝΟΕΣ	Уровень отсутствия заметных эффектов
норм	Нормализованный
ΝΖ	Новая Зеландия
Рарр	Кажущийся коэффициент проницаемости
р.О.	Пероральный
ч.а. <_ча)	Один раз в день
ЗАЕ	Серьезное нежелательное явление
ЗС1	Повреждение спинного мозга
ЗЬ	Стандартное отклонение
сек	Секунда
ЗЕМ	Стандартная ошибка среднего
ЗС1	Самооценка общего состояния субъекта
ЗРЕ	Несодержащий специфических патогенов
зк	Замедленное высвобождение
33	Стационарное состояние
	Кажущийся конечный элиминационный период полувыведения
Т25ЕИ	Ходьба на время на дистанции 25 футов
сл.а. (иа)	Три раза ежедневно
тк	Токсикокинетика
ТСХ	Тонкослойная хроматография
Ттах	Период достижения максимальной измеряемой концентрации в плазме
ТИК	Респондер в ходьбе на время
изр	Фармакопея США
υτι	Инфекция мочевыводящих путей
уа	Объем распределения
У.Ъгг·	Объем распределения в стационарном состоянии
ИЗ	Скорость ходьбы
4АР	4-аминопиридин
3,4 БАР	3,4-диаминопиридин

- 8 022755

Рассеянный склероз известен как аутоиммунное заболевание и характеризуется наличием очагов демиелинизации (очагов разрушения миелина) в ЦНС. Указанная характерная демиелинизация и сопутствующий воспалительный ответ приводят к нарушению передачи нервных импульсов или блокировке проводимости нервных волокон бляшками. Очаги склероза могут возникать в различных областях ЦНС, однако наиболее уязвимыми областями представляются определенные участки, такие как зрительный нерв, ствол мозга, спинной мозг и перивентрикулярная область. Нарушенная проводимость потенциала действия, вероятно, вносит основной вклад в развитие наиболее распространенных симптомов (например, паралич, нарушения зрения, мышечная слабость, нистагм, сенсорные нарушения и нарушения речи).

Исследования 4-аминопиридина (далфампридин, фампридин) проводили, используя внутривенное (в/в) введение и лекарственные формы в виде капсул с быстрым высвобождением (ΙΚ) для перорального введения в дополнение к лекарственным формам с контролируемым высвобождением или замедленным высвобождением. Введение ΙΚ капсул приводило к быстрым и коротковременным пикам 4аминопиридина в плазме. Первые фармакокинетические исследования проводили с использованием лекарственных форм с быстрым высвобождением (ΙΚ) для перорального введения, которые состояли из порошка 4-аминопиридина в капсуле на основе желатина или раствора для перорального введения. Введение приводило к быстрому изменению уровней 4-аминопиридина в плазме, что переносилось плохо. Затем разработали матричную таблетку с замедленным высвобождением (например, фампридин-δΚ; ампира (ΑΜΡΥΚΑ™), Аеотба ТЬетареиНск, НаМЬотпе, ΝΥ). Матричная таблетка с замедленным высвобождением демонстрировала повышенную стабильность и соответствующий фармакокинетический профиль при введении два раза в день. Композиции 4-аминопиридина с замедленным высвобождением описаны, например, в патенте США 5370879, патенте США 5540938; υδδΝ 11/101828; υδδΝ 11/102559. Например, подходящие лекарственные формы, способы изготовления, фармакокинетические свойства композиций аминопиридина с замедленным высвобождением и способы лечения различных неврологических нарушений дополнительно описаны в одновременно рассматриваемой заявке на патент США 11/010828, озаглавленной 8и81атеб Ке1еаке Атшорупбше СотрокШоп, поданной 13 декабря 2004 г.; и одновременно рассматриваемой заявке на патент США 11/102559, озаглавленной МеИобк о£ икшд 8и81ашеб Ке1еаке Атторупбше СотрокПюпк, поданной 8 апреля 2005 г.; содержание которых полностью включено в настоящую заявку путем ссылки.

Исследования на пациентах с рассеянным склерозом (РС), включавшие фазы 1, 2 и 3 клинических испытаний, показали, что лекарственное соединение 4-аминопиридин улучшает различные неврологические функции, нарушенные при указанном заболевании, при этом особое внимание сосредоточили на эффектах препарата по улучшению способности к передвижению и повышению силы ног.

В уровне техники сохраняется потребность в способах уменьшения интенсивности эффектов РС или симптомов РС.

Соединение 4-аминопиридин представляет собой блокатор калиевых (К+) каналов, одобренный Управлением по контролю продуктов питания и лекарственных средств США для лечения пациентов с РС. Как показано на фиг. 13, далфампридин является официальным наименованием в США (υδΑΝ) химического соединения 4-аминопиридина (4АР), который имеет молекулярную формулу С₅И₆М и молекулярную массу 94,1; первоначальным названием υδΑΝ данного соединения был фампридин. Термины далфампридин, фампридин и 4-аминопиридин используются по всему тексту настоящего описания для обозначения активного вещества лекарственного средства. 4-Аминопиридин получали в виде матричной таблетки с замедленным высвобождением (δΚ) или длительным высвобождением (ЕК) при различных дозировках, например от 5 до 4 0 мг, где предпочтительными в данном случае являются 5-, 7,5-, 10-, 12,5-, 15-, 17,5 и 20 мг; предпочтительным в данном случае является включение 10 мг 4аминопиридина-δΚ, что предпочтительно при введении два раза в день, другие режимы дозирования включены в объем изобретения, соответственно другие количества активного компонента в лекарственных формах с замедленным высвобождением также включены в объем изобретения.

В одном из вариантов осуществления в каждую таблетку обычно включены следующие наполнители: гидроксипропилметилцеллюлоза, υδΡ; микрокристаллическая целлюлоза, υδΡ; коллоидный диоксид кремния, ΝΡ; стеарат магния, υδΡ и опадрай белый. В некоторых вариантах осуществления 10 мг 4аминопиридина может присутствовать в фармацевтических композициях, таких как таблетки.

Фармакологически блокирующие свойства 4-аминопиридина в отношении К+ каналов и его эффекты в отношении передачи потенциала действия в препаратах демиелинизированных нервных волокон были широко описаны. При низких концентрациях, которые согласуются с клиническим опытом, в диапазоне 0,2-2 мкМ (18-180 нг/мл), 4-аминопиридин способен блокировать некоторые потенциалозависимые К+ каналы в нейронах. Именно эта особенность, вероятно, объясняет способность указанного лекарственного средства восстанавливать передачу потенциалов действия в демиелинизированных нервных волокнах. В более высоких (миллимолярных) концентрациях 4-аминопиридин действует на другие типы К+ каналов как в нервных тканях, так и в других. Блокада реполяризационных К+ токов может усиливать синаптическую передачу по всей нервной системе, увеличивая продолжительность пресинаптического потенциала действия. Диапазон неврологических эффектов, согласуемых с увеличенной возбудимостью пресинаптических нервных окончаний, происходит при клинически соответстсвующих дозах 4- 9 022755 аминопиридина.

Эффекты в отношении блокады аксональной проводимости. К+ каналы, блокируемые 4аминопиридином при низких концентрациях, частично ответственны за реполяризацию нейронных потенциалов действия. Они, вероятно, включают каналы, обнаруженные под миелиновыми оболочками в миелинизированных нервных волокнах взрослых млекопитающих. Указанные каналы расположены, прежде всего, в паранодальной и интернодальной мембране аксона, где они не активируются в значительной степени при передаче потенциала действия, поскольку миелиновые оболочки действуют как электрический экран. Поэтому потенциал действия нормальных зрелых миелинизированных аксонов демонстрирует низкую чувствительность или отсутствие чувствительности к 4-аминопиридину при концентрациях ниже 100 мкМ (9,4 мкг/мл). Концентрации выше 1 мМ (94,1 мкг/мл) склонны вызывать постепенную деполяризацию потенциала покоя аксона, возможно, при взаимодействии с каналами утечки.

Когда аксон демиелинизирован, интернодальная мембрана и ее ионные каналы подвергаются более высоким кратковременным электрическим токам во время потенциала действия. Утечка ионного тока через К+ канал, при описанных условиях, может вносить свой вклад в явление блокады передачи потенциала действия. 4-Аминопиридин может увеличивать продолжительность потенциалов действия нерва, блокируя указанные открытые каналы и ингибируя реполяризацию. Это согласуется со способностью указанного лекарственного средства снимать блокаду проводимости и повышать защищенность проводимости в некоторых аксонах с критической демиелинизацией, включая аксоны в поврежденном в течение длительного периода и частично ремиелинизированном спинном мозге млекопитающих. Дополнительное исследование показало, что данный эффект 4-аминопиридина в поврежденном в течение длительного периода спинном мозге морских свинок возникал при пороговой концентрации 0,2-1 мкМ (19,194,1 нг/мл), хотя в данной ткани он наиболее эффективен при концентрации приблизительно 10 мкМ (941 нг/мл).

Повторная импульсная активность, спонтанная или в ответ на единичные стимулы, наблюдается в некоторых демиелинизированных аксонах, подвергнутых действию 4-аминопиридина при более высоких уровнях [0,1-1 мМ (9,4-94,1 мкг/мл)] ίη νίίτο. Подобный эффект при более низких концентрациях в чуствительных нейронах или нервных окончаниях может объяснять парестезию и боль в области внутривенной инфузии, о которых сообщали, как о побочных эффектах при клиническом воздействии 4аминопиридина на пациентов. Впрочем, нет никаких опубликованных данных, указывающих, что повторная спонтанная активность наблюдается в таких нервных волокнах при более низких, клинически соответствующих концентрациях в диапазоне 0,25-1 мкМ (23,5-94,1 нг/мл).

Необходимо понимать, что блокада К+ токов усиливает синаптическую передачу по всему головному и спинному мозгу. Целый ряд нейрологических эффектов наблюдается при повышении концентраций 4-аминопиридина в центральной нервной системе (ЦНС), вплоть до возникновения судорог. Различные ίη νίίτο эксперименты на срезах мозга показали эпилептиформные разряды в миндалине и гиппокампе крыс при нанесении на ткань растворов, содержащих 5-500 мкМ (0,47-47 мкг/мл) 4-аминопиридина. Судорожную активность у животных наблюдали после больших доз 4-аминопиридина, при этом судорожная активность является частью токсикологического профиля лекарственного средства. Синхронная разрывная активность в спинном мозге децеребрированных кошек регистрировали после введения очень больших доз 4-аминопиридина (5-20 мг/кг), которые предположительно дают уровни в плазме в области нескольких сотен нг/мл. Впервые в настоящей заявке указанные неврологические эффекты раскрыты в качестве аспекта в лечении нейрокогнитивного нарушения (и сопутствующих психоневрологических проблем) и устранены с помощью способов по изобретению.

Абсорбция. 4-Аминопиридин быстро абсорбируется после перорального приема внутрь. В исследовании ίη 511и. 4-аминопиридин быстрее абсорбировался из тонкой кишки, чем из желудка. Полупериод абсорбции составил 108,8 мин и 40,2 мин для желудка и тонкой кишки соответственно. В исследовании ίη νίίτο с васкулярно перфузированными сегментами кишечника крысы, коэффициент регионарной кажущейся проницаемости (р_аррх 10^-6 см/с) 4-аминопиридина был высоким в верхнем отделе тонкой кишки (22,7 см/с) и уменьшался дистально в направлении толстой кишки (2,9 см/с) по сравнению с плохо проникающим маркером (атенолол; 1,9 см/с в верхнем отделе тонкой кишки и 0 см/с в толстой кишке).

После перорального введения (незамедленное высвобождение) 4-аминопиридина у животных пиковые концентрации в плазме наблюдаются в течение 1 ч после дозирования. На основе сравнений областей под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (АИС(_0-„)) после в/в и перорального введения 4-аминопиридина (2 мг/кг), биодоступность 4-аминопиридина, как сообщали, составляла приблизительно 66,5% у самцов крыс и 55% у самок крыс (М 2001-03). После перорального введения пиковые концентрации в плазме у самок были на 38% ниже, чем у самцов, хотя (АИС(_0-„)) и масса тела были аналогичны; значения АИС у самцов и самок после в/в введения не отличались.

Исследования проводили на крысах и собаках, используя ¹⁴С-меченый 4-аминопиридин (1 мг/кг), который давали через зонд в виде разовой пероральной дозы в растворе. У обоих видов ¹⁴С 4аминопиридин быстро абсорбировался. Пиковые уровни в плазме были достигнуты в пределах 0,5-1 ч у обоих видов. Пиковые уровни в плазме (С_тах) и степень абсорбции, как отражено АИС, у собаки были

- 10 022755 приблизительно в четыре раза выше, чем у крысы, после введения равных доз, на основании мг/кг. В данных исследованиях в обоих видах не было никаких очевидных половых различий. Указанные результаты приведены в табл. 1.

Таблица 1

Итоговые данные по абсорбции для крыс и собак после разового перорального введения 1 мг/кг ¹⁴С-4-аминопиридина

Параметр	Крысы	Собаки
Самцы (71=3¹)	Самки (Ы=3¹)	Самцы (N=3)	Самки (N=3)
Стах (мкг/г)	0,189+0,0202	0,168+0,0157	0,574+0,1230	0,635+0,1028
Ттах (Ч)	1,0	0,5	1, 0+0	0,8+0,3
АиС (мкг -ч/мл)	0,498+0,0176	0,506+0,0633	2,03+0,406	1,92+0,150
и (ч)	1,1+0,04	1,4+0,17	2,1+0,14	1,3+0,04

¹ В момент времени

При пероральном введении 4-аминопиридин полностью абсорбируется из желудочно-кишечного тракта. Абсолютная биодоступность ΙΚ таблеток двух составов, как сообщали, составила 95%.

Относительная биодоступность таблеток 4-аминопиридина-ЗК (по сравнению с водным раствором для перорального введения) составила 95%. Абсорбция проходит быстро, кроме введения в модифицированной матрице. При введении одной таблетки 4-аминопиридин-ЗК с дозой 10 мг здоровым добровольцам натощак средние пиковые концентрации, варьирующие в различных исследованиях от 17,3 до 21,6 нг/мл, наблюдали через 3-4 ч после введения (Т_тах). Для сравнения С_тах, достигнутая при такой же дозе 10 мг раствора 4-аминопиридина для перорального введения, составила 42,7 нг/мл, наблюдалась через приблизительно 1,1 ч после введения дозы. Воздействие возрастало пропорционально с дозой, и максимальные концентрации в стационарном состоянии приблизительно на 29-37% выше, чем для разовых доз.

В табл. 2 показана пропорциональность дозы 25 и 10 мг разовых доз и относительная биоэквивалентность твердой дозированной пероральной лекарственной формы и перорального раствора.

Таблица 2

Итоговые результаты исследования биодоступности/биоэквивалентности, проведенного на здоровых взрослых добровольцах (N=26 с данными)

Параметр	Доза	10 мг νί. раствор	(вводимая доза) 10 мг νί. 25 мг
Доза Фампридина 5К в таблетке	Буферный раствор (0,83 мг/мл)	Отношение геометрия. Средних*	90% С1	Отношение геометрия. Средних*	90% С1
10 мг	25 мг
	2,91	3,77	3.73	43,6	41.07-46,35	104,3	98.07- 110,88
1п-АиС(о	5.21	6.09	5.35	86.7	80.60-93,26	102,1	94.96- 109,99
1п-Аис₍о. ιηί)	5,37	6.17	5.42	94.7	88,23- 101.55	110,9	103.20- 119,25

Пропорциональность дозы воздействия после разовых доз 4-аминопиридина-ЗК представлена в табл. 3. Фармакокинетическое расположение после нескольких доз 4-аминопиридина-ЗК показано в табл. 4.

- 11 022755

Таблица 3

Нормализованные по дозе значения фармакокинетических параметров (среднее ± §ЕМ) после разового перорального приема таблеток 4-аминопиридина-8К пациентами с рассеянным склерозом

Параметр	Доза (мг)
5 (п=24)	10 (п=24)	15 (п=24)	20 (п=23)
Слнх-норм* (нг/мл)	13,1±0, 6	12,6±0,7	12,3+0,7	12,3±0,8
Ттах (ч)	3,9±0,2	3,9 + 0,3	3,6+0,3	3,6±0,3
АиС-норм* (нг -ч/мл)	122,1±9,4	122,1±9,4	131,5±7,4	127,8±б, 9
и (ч)	5,8±0,5	5,6+0,4	5,5+0,4	5,1±0,3
С1/Е (мл/мин)	619,8±36,2	641,4±39,1	632,4+39,0	653,9±37,1

* Значение нормализовано по дозе 5 мг.

Таблица 4

Значения фармакокинетических параметров (среднее и 95% С1) после нескольких пероральных доз таблеток 4-аминопиридина-8К (40 мг/день, 20 мг два раза в день) у 20 пациентов с рассеянным склерозом

День	Параметр
Сн, (нг/мл)	Т_мх (часы)	АЦС(о_12) (нг -ч/мл)	Ϊ.1,	(часы)	С1/Г (мл/мин)
День 1	48, 6 (42,0, 55,3)	3,8 (3,2, 4,3)	ΝΕ		ΝΕ	ΝΕ
День 7/8	66,7 (57, 5, 76,0)	3,3 (2,8, 3,9)	531 (452, 610)		ΝΕ	700 (557, 844)
День 14/15	62,6	3,3	499		5,8	703
	(5 5, 7, 6 9,4)	(2,6, 3,9)	(446, 552)	(5,	0, 6,6)	(621, 789)

ΝΕ = Не оценивали

Распределение. Объем распределения в стационарном состоянии (У*₈) у крыс, как сообщали, приблизительно соответствовал полному объему тела (без коррекции по бионакоплению). После введения разовой р.о. (пероральной) дозы 4-аминопиридина (2 мг/кг) самцам и самкам крыс У,ь был на 13% ниже у самок, чем у самцов (1094,4 мл у самцов против 947,5 мл у самок); впрочем, различие не было статистически значимым. Кроме того, при коррекции с учетом различий по массе тела между самцами и самками не было различия (2%).

В исследовании с разовой дозой крысам вводили ¹⁴С-меченый 4-аминопиридин (1 мг/кг) р.о. Трех животных в каждый момент времени, 1, 3, 8 и 24 ч после введения дозы, умертвляли. Забирали кровь и вырезали ткани для определения радиоактивности. Через час после введения дозы в момент, приблизительно соответствующий пиковой концентрации в плазме, радиоактивность регистрировали во всех взятых тканях. Количества соответствовали малым процентам от дозы; впрочем, в целом насчитали только 58,3% дозы. Наиболее высокие концентрации присутствовали в печени (2,6%), почке (1,6%) и крови (0,7%); 51% радиоактивности обнаружили в теле (прежде всего в желудочно-кишечном тракте и скелетно-мышечной системе). Период полувыведения из тканей варьировал от 1,1 до 2,0 ч. Чере 3 ч после введения дозы количество радиоактивности, обнаруженной во всех тканях, было незначительным (за исключением тела, которое содержало 15,4% радиоактивной дозы).

Ιη νίίτο исследование проводили с целью оценки связывания с белками плазмы в плазме крысы и собаки. Использовали концентрации 4-аминопиридина 5, 50 или 500 нг/мл. 4-Аминопиридин в значительной степени был свободен от белков и во всех трех протестированных концентрациях содержал большую фракцию свободного лекарственного средства. После 4-часового диализа средний процент свободного лекарственного средства варьировал от 73 до 94% в плазме крысы и от 88 до 97% в плазме собаки.

Целевые исследования, описывающие распределение 4-аминопиридина через гематоэнцефалический барьер, плаценту или в молоко, не были идентифицированы. Однако у крысы ¹⁴С-меченый 4аминопиридин был обнаружен в головном мозге и мозжечке при отношениях ткани к крови 3,07 и 1,48 соответственно, указывая на то, что 4-аминопиридин проникал через гематоэнцефалический барьер после введения пероральной дозы. 4-Аминопиридин выводился из мозга с аналогичной скоростью, как и из крови. В частности, периоды полувыведения 4-аминопиридина из тканей мозга (мозжечок и головной мозг) и крови аналогичны (1,24, 1,63 и 1,21 ч соответственно).

4-Аминопиридин в значительной степени свободен от белков плазмы (97-99%). При введении разо- 12 022755 вой внутривенной дозы 20 мг средний Уй составляет 2,6 л/кг, что значительно превышает общий объем воды в теле, аналогично значениям, вычисленным у здоровых добровольцев и пациентов с 8С1, которые получали таблетки 4-аминопиридина-8К. Динамический профиль концентрации в плазме состоит из двух или трех компартментов с быстрой начальной фазой распределения. Измеримые уровни присутствуют в слюне.

Токсикология. В исследованиях токсичности при введении разовой дозы и повторных доз режим дозирования сильно влиял на уровень смертности и частоту проявления клинических симптомов у всех исследуемых видов (с возможным исключением мыши). Как правило, более высокие уровни смертности и большая частота проявления неблагоприятных клинических симптомов были отмечены при введении 4-аминопиридина в разовой высокой дозе по сравнению с тем, когда ту же полную дозу давали в виде двух, трех или четырех равно разделенных субдоз. Токсические реакции на перорально вводимый 4аминопиридин быстро развивались и чаще всего наблюдались в пределах первых 2 ч после введения дозы.

Клинические симптомы, наблюдаемые после введения высоких разовых доз или повторных более низких доз, были аналогичными у всех исследуемых видов и включали тремор, судороги, атаксию, затрудненное дыхание, расширенные зрачки, прострацию, нарушение звукообразования, учащенное дыхание, избыточное слюнотечение, нарушения походки, а также гипер- и гиповозбудимость. Перечисленные клинические симптомы не были неожиданными и соответствуют фармакологии 4-аминопиридин при превышении дозы.

В контролируемых клинических исследованиях, включающих применение 4-аминопиридина, наиболее частые неблагоприятные явления в организме происходили в нервной системе, в организме в целом и в пищеварительной системе. Головокружение, бессоница, парестезия, боль, головная боль и астения являются наиболее распространенными неблагоприятными явлениями в нервной системе, а о тошноте наиболее часто сообщают в категории пищеварительной системы.

Обзор клинической эффективности

Лекарственная форма 4-аминопиридин-§К предназначена для лечения пациентов с рассеянным склерозом с целью улучшения ходьбы. Ухудшение ходьбы является заметным проявлением рассеянного склероза; до 85% пациентов идентифицируют ее как свою первичную жалобу, при этом неспособность самостоятельно передвигаться оценивалась и пациентами, страдающими рассеянным склерозом, и невропатологами, как фактор, оказывающий наибольшее отрицательное влияние на качество жизни пациентов. 4-Аминопиридин-§К представляет новый класс средств для терапии рассеянного склероза, отличающийся от симптоматических или иммуномодулирующих способов терапии, в которых соединение устраняет блокаду проводимости нервов на фоне демиелинизации, которая является характерным симптомом патофизиологии рассеянного склероза. Хотя некоторые из доступных в настоящее время лекарственных средств для лечения рассеянного склероза назначаются с целью замедления прогрессии инвалидизации в течение длительных периодов, на настоящий момент доступных лекарственных средств, позволяющих улучшить функцию демиелинизированной нервной системы или сопутствующих способностей, например способности ходить по сравнению с текущим исходным уровнем, не существует.

Данные в подтверждение настоящего изобретения включают обширную программу клинических исследований при рассеянном склерозе, проводимую с применением доз 4-аминопиридина (например, 4аминопиридина-8К) до 40 мг два раза в день. Следовательно, имеются вполне достаточные клинические данные относительно применимости, эффективности и безопасности 4-аминопиридина в случае его применения на пациентах с рассеянным склерозом.

Рассеянный склероз является сложным и многофакторным заболеванием, затрагивающим центральную нервную систему (ЦНС), с переменными и непредсказуемыми периодами внезапного или продолжительного ухудшения и временного улучшения, и может проявляться в целом ряде признаков и симптомов с течением времени. Непосредственной причиной функциональных нарушений при рассеянном склерозе является блокада проводимости аксонов на фоне очагов демиелинизации, которые в свою очередь опосредованы аутоиммунным процессом неопределенной этиологии. По мере прогрессии заболевания сами аксоны могут постепенно разрушаться, что приводит к вторичной потере нейронов в ЦНС. При нарастающем повреждении и неполном восстановлении пациенты с рассеянным склерозом обычно испытывают затруднения в ряде областей, включающих в дополнение к ходьбе когнитивные способности, тонкую координацию движений рук, силу, энергию, зрение, вегетативные функции и настроение, что оказывает серьезное влияние на их повседневную активность и качество жизни. Среди перечисленных функций ограничения в способности передвигаться рассматриваются как представляющие особую важность.

Ходьба является очень сложной физической активностью, требующей интеграции многих неврологических функций и работоспособности их соответствующих путей ЦНС. Указанные функции включают, среди прочих, двигательную силу, координацию, равновесие, соматическую чувствительность, проприоцепцию и зрение, одна из которых или все могут затрагиваться у индивидуального пациента с рассеянным склерозом. Поэтому тесты на способность ходить играют ключевую роль в клинической оценке РС как сами по себе, так и в оценке тяжести и прогрессии заболевания в целом.

Тесты ходьбы, которые прежде всего позволяют измерять выносливость, такие как шестиминутная

- 13 022755 ходьба, как было показано, полезны при таких патологиях, как сердечная недостаточность с застойными явлениями и болезнь легких. Тем не менее, имеется растущее подтверждение того, что измерение скорости ходьбы является более надежным подходом для оценки состояния при РС. Полная дистанция, которую может пройти пациент с рассеянным склерозом, может значительно изменяться изо дня в день, тогда как средняя скорость ходьбы, по-видимому, является более постоянной. Кроме того, на более длинных дистанциях компенсаторные механизмы, функционирующие на более коротких отрезках, могут выключаться, что увеличивает вариабельность.

В тесте с ходьбой на время на дистанцию 25 футов (Т25Р^) пациента просят пройти данный, относительно короткий отрезок как можно быстрее. Было показано, что указанный тест является чувствительным и воспроизводимым, требуя при этом относительно небольшой подготовки и демонстрируя малый практический эффект. Изменение на 20% или больше считается клинически значимым. Т25Р^ используется как один из трех тестов, включенных в шкалу комплексной функциональной оценки при рассеянном склерозе (МБРС), которая также включает тест с 9 отверстиями и стержнями (для оценки функций верхней части тела) и слуховой тест на сложение в заданном темпе (РАБАТ).

1.1. Схема клинических программ.

Первичная программа клинических исследований для 4-аминопиридина и рассеянного склероза включала два исследования эффективности (МБ-Р203 и МБ-Р204), одно исследование с контролем плацебо для определения оптимальной дозы (МБ-Р202), одно исследование с контролем плацебо для определения оптимальной дозы на ранней стадии (МБ-Р201) и три длительных, открытых, расширенных исследования (МБ-Р202ЕХТ, МБ-Р203ЕХТ и МБ-Р204ЕХТ). Данные исследования, рассматриваемые отдельно или вместе, подтверждают применимость и эффективность 4-аминопиридина-БК.

Каждое из двух исследований фазы 3 (МБ-Р203 и МБ-Р204) представляло собой рандомизированное, двойное слепое исследование в параллельных группах, в котором с плацебо сравнивали 10 мг 4аминопиридина-БК два раза в день. Первичной переменной эффективности был ответ в ходьбе на время, определенный как последовательное повышение скорости ходьбы на основании Т25Р\У (анализ респондеров Т25Р\У). где по меньшей мере в трех из четырех эффективных посещениях с терапией была показана более высокая скорость ходьбы, чем наибольшая скорость ходьбы, достигнутая в пяти посещениях без терапии (т.е. четыре посещения перед терапией и одно посещение после терапии, через две недели после отмены лекарственного средства). Шкалу оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов, а также самооценку общего состояния субъекта и клиническую оценку общего состояния использовали для проверки клинической значимости критерия ответа при ходьбе на время. Вторичные переменные эффективности включали скорость ходьбы, балл при мануальном обследовании мышц нижних конечностей (ЬЕММТ) и балл по шкале спастичности Ашворта, причем последние два показателя усредняли для восьми и шести групп оценки мышц нижних конечностей соответственно. Продолжительность двойной слепой терапии, на которой была основана эффективность, составила 14 недель в первом исследовании и 8 недель во втором исследовании. Двухнедельный односторонне слепой подготовительный период с плацебо предшествовал двойному слепому периоду.

Исследование фазы 2 с подбором оптимальной дозы (МБ-Р202) было двойным слепым, рандомизированным, с контролем плацебо исследованием в параллельных группах, с уровнями дозы 4аминопиридина-БК 10, 15 или 20 мг два раза в день. Пациентов титровали до их рандомизированной дозы более чем две недели; и фаза терапии с фиксированной дозой имела продолжительность 12 недель. Перспективно определенная первичная переменная эффективности была процентным изменением средней скорости ходьбы относительно базового уровня в тесте Т25РХУ за последние три посещения при назначенной неизменяемой дозе. Другие вторичные переменные эффективности являлись другими оценками МБРС (тест с 9 отверстиями и стержнями и РАБАТ 3), комбинированный балл МБРС, ЬЕММТ, Шкала оценки ходьбы при рассеянном склерозе с 12 пунктами (МБ^Б-12), шкала оценки качества жизни при рассеянном склерозе (МБрЫ), балл по шкале мышечной спастичности Ашворта, клиническая оценка общего состояния (СС1) и самооценка общего состояния субъекта (БС1).

Исследование фазы 2 с определением оптимальной дозы (МБ-Р201) было двойным слепым, рандомизированным, с контролем плацебо исследованием 4-аминопиридина-БК в дозах, возрастающих еженедельно с приращением на 5 мг два раза в день, начиная с 10 мг два раза в день до 40 мг два раза в день, и плацебо. Продолжительность двойной слепой терапии составила семь недель. Было несколько пробных критериев эффективности: краткая шкала оценки слабости (ΒΡΙ), шкала комплексной функциональной оценки при рассеянном склерозе (МБРС, которая включает Т25Р^, тест с 9 отверстиями и стержнями, а также слуховой тест на сложение в заданном темпе или РАБАТ 3), шкала оценки качества жизни при рассеянном склерозе (МБОБТ которая включает измененную шкалу оценки слабости), мануальное обследование мышц нижних конечностей (ЬЕММТ), балл по шкале Ашворта, клиническую оценку изменения общего состояния (ССГ) и самооценку общего состояния субъекта (БС1).

Три длительных исследования (МБ-Р202ЕХТ, МБ-Р203ЕХТ, МБ-Р204ЕХТ) являются непрерывными многоцентровыми, открытыми расширенными исследованиями длительной терапии с применением 4аминопиридина-БК на пациентах с клинически подтвержденным рассеянным склерозом, которые участвовали или в двух исследованиях фазы 3, или в более ранних исследованиях фазы 2. Оценками эффек- 14 022755 тивности являются ходьба на время на дистанции 25 футов, СО1 и 801 при каждом посещении, а также ΕΌ88, оцениваемая каждые два года.

1.2. Определения переменных эффективности.

Первичные переменные.

Первичные критерии трех испытаний фазы 2 приведены ниже.

В исследовании М8-Р203 первичная переменная эффективности являлась состоянием респондера, основанным на последовательном повышении скорости ходьбы в ходьбе на время на дистанции 25 футов. Респондер в ходьбе на время был определен как пациент по меньшей мере с тремя из четырех скоростей ходьбы при терапии, более высоких, чем самая высокая скорость ходьбы, достигнутая в пяти посещениях без терапии (т.е. четыре посещения перед терапией и одно посещение через две недели после терапии). Трехстадийный ступенчатый анализ, основанный на данной переменной, использовали для установления положительного результата в первичной конечной точке и установления его клинической значимости в отношении общей способности ходить. Первый этап должен был показать значительно большую пропорцию респондеров в ходьбе на время в группе 4-аминопиридина-8К по сравнению с группой плацебо. Второй этап должен был регистрировать существенное улучшение балла М8ХУ8-12 для респондеров в ходьбе на время по сравнению с нереспондерами в ходьбе на время. Третий этап должен был подтвердить сохранение эффекта с помощью проверки, будет ли все еще регистрироваться у тех пациентов, которые отвечали на 4-аминопиридин-8К в тесте Τ25Ρ\ν, существенное повышение скорости ходьбы по сравнению с пациентами, получавшими плацебо в последнем, наблюдаемом двойном слепом посещении (т.е. изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в двойной слепой конечной точке). На фиг. 47 показаны улучшения скорости ходьбы, найденные в исследовании М8-Р203: на фиг. 47, на двух графиках показано среднее изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в каждом из четырех посещений за 3 месяца двойной слепой терапии. На графике слева показано изменение скорости у пациентов, получавших 4-аминопиридин, по сравнению с плацебо, с демонстрацией существенного повышения скорости ходьбы в группе, получавшей фампридин, в конце периода терапии. На графике справа показано процентное увеличение скорости ходьбы у получавших фампридин респондеров в ходьбе на время (золотистый цвет) и у получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время (синий цвет). Группа респондеров в ходьбе на время показала приблизительно 25%-ное улучшение за весь период терапии; нереспондеры в ходьбе на время показали улучшение, аналогичное улучшению в группе плацебо, приблизительно 7%. Признаков потери эффективности в течение, например, 12 недель, 13 недель, 14 недель, 3 месяцев терапии в данном исследовании не наблюдалось. Исследование М8-Р203 показало, что повышение скорости ходьбы, отмеченное у подвергавшихся терапии респондеров в ходьбе на время, сохранялось, например, в течение 12 недель, 13 недель, 14 недель, 3 месяцев терапии. Данные настоящего расширенного исследования показали, что более длительные периоды, чем периоды в данном исследовании, могут быть эффективными, например, в качестве долговременной и продолжительной терапии.

В исследовании М8-Р204, первичной переменной эффективности также являлся статус респондера, основанный на последовательном повышении скорости ходьбы в тесте Τ25Ρν. Респондера в ходьбе на время определяли как пациента с более высокой скоростью ходьбы по меньшей мере в трех из первых четырех двойных слепых посещений по сравнению с максимальной скоростью ходьбы в любом из посещений перед терапией и в посещении после терапии.

В исследовании М8-Р202 первичной переменной эффективности также являлось процентное изменение средней скорости ходьбы относительно базового уровня, измеренное при помощи Τ25Ρν. В следующих разделах приведены детали относительно различных оценок.

Ходьба на время на дистанции 25 футов: тест Τ25Ρν является стандартным неврологическим тестом, который используют для оценки степени тяжести рассеянного склероза в отношении функции ходьбы, которая также отражает более широкую группу неврологических функций, включающих силу, координацию, равновесие и зрение. Было показано, что данный тест является чувствительным и воспроизводимым, требует относительно небольшой подготовки и показывает небольшой практический эффект. Более широкую клиническую значимость изменений в тесте Τ25Ρν проверяли в ряде исследований. В двух недавних сообщениях была показана четкая корреляция между изменениями в данном тесте и выявлением у пациента нарушений неврологических функций, вызванных РС, при оценке с помощью шкалы неврологического дефицита и инвалидности Гая (0ΝΏ8).

В ходе теста пациента просят идти так быстро, как только он или она может идти без риска, от одного конца до другого конца четко отмеченной, не содержащей препятствий дистанции длиной 25 футов. При тесте в ходьбе на время на дистанции 25 футов по возможности стараются использовать ту же комнату, ту же обозначенную область и температуру воздуха при каждом посещении. При необходимости пациент может использовать соответствующее предварительно подобранное вспомогательное устройство, такое как трость или ходунки, однако вспомогательные устройства и обувь должны оставаться теми же во всех посещениях в течение данного теста. Возможность присутствия внешних отвлекающих раздражителей необходимо по возможности сохранять на минимальном уровне. Носки обуви пациентов должны стоять на стартовой линии (обозначенной полосой на полу), и отсчет времени должен начаться

- 15 022755 при пересечении полосы какой-либо частью ноги пациента. Отсчет времени должен закончиться, когда какая-либо часть ноги пациента пересечет финишную линии (обозначенной полосой на полу). Время должно быть зарегистрировано в секундах и округлено до десятых секунды при использовании цифрового секундомера, предусмотренного для исследования. Задачу нужно немедленно выполнить снова (между испытаниями максимально допускается пятиминутный период отдыха), при этом пациент проходит в обратном направлении то же расстояние. Во всех испытаниях, рассматриваемых в настоящей заявке, тест проводил и регистрировал результаты эксперт, который не был осведомлен относительно общих аспектов клинического прогресса пациентов в исследовании, включая субъективные оценки благоприятного действия терапии, которые регистрировались отдельным клиническим врачом. При каждом посещении эксперт вычислял среднее значение для двух выполнений задачи. Каждого пациента инструктировали, чтобы он/она сохранял свою нормальную активность без подготовки или тренировки для улучшения оценки при выполнении теста между посещениями.

Вторичные переменные.

М8№8-12.

Шкала оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов представляет собой оценочную шкалу, состоящую из нескольких пунктов, специально разработанную для применения существующих психометрических методов при самоотчете пациента, сосредоточенном на аспектах неспособности к передвижению при РС. Шкала позволяет регистрировать самооценку способности передвижения пациента, затрагиваемой при рассеянном склерозе, в течение двух предшествующих недель.

Опросник МЗ\УЗ-12 включает следующие вопросы.

На сколько за 2 последних недели Ваш РС: ограничивал вашу способность ходить? ограничивал вашу способность бегать?

ограничивал вашу способность подниматься вверх и вниз по лестнице? затруднял пребывание в положении стоя при выполнении каких-либо дел? ограничивал ваше равновесие в положении стоя или при ходьбе? ограничивал, насколько долго вы можете идти?

увеличивал усилие, которое вам необходимо прикладывать для того, чтобы идти? заставлял вас использовать опору при передвижении в помещении? заставлял вас использовать опору при передвижении на открытом воздухе? замедлял вашу ходьбу?

влиял на плавность вашей ходьбы?

заставлял вас концентрироваться на вашей ходьбе?

Возможными ответами на каждый вопрос являются: 1 = совсем нет, 2 = немного, 3 = умеренно, 4 = довольно сильно и 5 = очень. Возможный суммарный балл изменяется в пределах от 12 до 60 и преобразуется при анализе данных в шкалу от 0 (отсутствует/нет инвалидности) до -100 (максимальная инвалидность).

Шкалу оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов (М§^§-12) выбрали для первичного подтверждения клинической значимости объективных функциональных изменений в тесте Τ25Ρ\ν. в частности для проверки критерия ответа в ходьбе на время, используемого в базовых исследованиях. Μδνδ-12 показывает превосходные характеристики измерения, полностью сфокусированные на функциональной области ходьбы, но при этом охватывающие полный спектр аспектов ходьбы в повседневной деятельности, включая нахождение в положении стоя, равновесие, подъем по лестнице, передвижение дома и вне дома, а также потребность в помощи. Данная шкала была проверена в группах больных рассеянным склерозом и других, и также является очевидно валидной в качестве критерия при оценке информации, полученной от пациента при опросе.

Мануальное обследование мышц нижних конечностей (ЬЕММТ).

Измененный мануальный мышечный тест совета по медицинским исследованиям Великобритании (ВМКС) используется для оценки силы мышц билатерально в четырех группах мышц: сгибающих мышц бедра, сгибающих мышц колена, разгибающих мышц колена и сгибающих мышц голеностопного сустава. Данный тест выполняется экспертом. Обследование начинается с того, что пациент принимает удобное положение лежа на спине. Силу каждой группы мышц оценивают следующим образом:

5,0 = нормальная сила мышц,

4.5 = свободное движение, преодолевающее существенное сопротивление, прикладываемое экспертом, но не нормальное,

4,0 = свободное движение, преодолевающее умеренное сопротивление, прикладываемое экспертом,

3.5 = свободное движение, преодолевающее слабое сопротивление, прикладываемое экспертом,

3,0 = свободное движение, преодолевающее силу тяжести, но не сопротивление,

2,0 = свободное движение присутствует, но не способно преодолевать силу тяжести,

1,0 = видимое или прощупываемое сокращение мышцы, но без движения конечности,

0,0 = отсутствие какого-либо свободного сокращения.

- 16 022755

Клиническая оценка общего состояния (ССГ).

Клинический врач, ведущий наблюдение, использовал 7-бальную шкалу для оценки изменений неврологического состояния пациента после терапии по сравнению с состоянием пациента до терапии (без сравнения с предыдущей неделей). Оценка основана на оценке клиническим врачом общего неврологического состояния и общего состояния здоровья пациента, связанного с его или ее участием в исследовании (в особенности признаки и симптомы, связанные с РС). Возможные ответы являются следующими: 1 = очень большое улучшение, 2 = большое улучшение, 3 = некоторое улучшение, 4 = без изменений, 5 = некоторое ухудшение, 6 = большое ухудшение и 7 = очень большое ухудшение. Клинический врач, выполняющий СОЦ не должен выполнять тест с ходьбой на время на дистанции 25 футов, ΕΕΜΜΤ или тест по Ашворту. Впрочем, клинический врач может иметь доступ к результатам указанных тестов и ко всем другим клиническим наблюдениям, оценивая прогресс пациента относительно исходного состояния.

Самооценка общего состояния субъекта (8ΟΙ).

При 8ΟΙ, основанной на 7-бальной шкале с градациями от ужасно до восхитительно, пациента просят оценить свое впечатление от воздействия лечения в исследовании на его/ее физическое самочувствие в течение предыдущей недели. Возможные ответы являются следующими: 1 = ужасно, 2 = недоволен, 3 = большей частью неудовлетворен, 4 = неопределенно/смешанное ощущение, 5 = большей частью удовлетворен, 6 = доволен и 7 = восхищен. Уделяется внимание, чтобы данный тест не проводил эксперт, проводящий оценку пациента, который отвечает за проведение объективных функциональных тестов.

Оценка по шкале Ашворта.

Мышечную спастичность эксперт оценивает при использовании шкалы Ашворта. Оценка по шкале Ашворта должна быть получена перед оценкой ΕΕΜΜΤ и включает шесть групп мышц нижних конечностей: сгибающие мышцы колена, разгибающие мышцы колена и приводящие мышцы бедра на правой и левой стороне тела. Балл по Ашворту ставят по шкале от 0 до 4, с 0 = нет усиления тонуса до 4 = конечность ригидна при сгибании или разгибании.

Все эксперты, проводящие тестирование по Ашворту, обучены проводить данный тест и используют те же процедуры каждый раз при проведении тестирования. По возможности, один и тот же эксперт проводит все тесты пациента по Ашворту в течение всего периода исследования. Если обычный эксперт пациента недоступен при каком-нибудь посещении, резервный эксперт обучается проводить тест таким же способом, и при этом до исследования проводят проверку корреляции оценок.

Другие вторичные переменные.

Дополнительные показатели являлись следующими: ΜδΟΜ (комплексная оценка показателей качества жизни, состоящая из 10 отдельных шкал); Μ8ΡΟ который включает тест Τ25Ρν, тест с 9 отверстиями и стержнями (количественная оценка функции и координации верхних конечностей) и слуховой тест на сложение в заданном темпе (показатель когнитивной функции, который оценивает обработку слуховой информации и вычисление); а также модифицированная шкала усталости ΜΡΙ8 (показатель усталости).

В табл. 15 ниже приведен обзор первичных и вторичных переменных эффективности в двух исследованиях Μ8-Ρ201 и Μ8-Ρ202 и в исследованиях Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204.

- 17 022755

Таблица 15

Эффективность и показатели здоровья, используемые в исследованиях эффективности с контролем плацебо

	Исследование
Показатели	М5-Г203	М5-Г204	М5-Г201	М5-202
Первичная переменная
Ответ при ходьбе на время (по меньшей мере, в 3 посещениях с терапией в тесте Т25РИ показаны более высокие скорости, чем наибольшая скорость без терапии)	X	X		X (за прошедшее время)
Вторичные переменные
Скорость в тесте Т25РИ при каждом посещении	X	X	X	X
Тестирование мышц нижних конечное тей (ЬЕММТ)	X	X	X	X
Оценка мышечной спастичности (оценка по Ашворту)	X	X		X
Шкала оценки ходьбы при РС из 12 пунктов (М5И5-12)	X	X		X
Клиническая оценка изменения общего состояния (СО1)	X	X	X	X
Самооценка общего состояния субъекта (δΘΙ)	X	X	X	X

Ответ >20% сред, повышение скорости ходьбы		X
Комплексная функциональная оценка РС	X	X
Краткая шкала оценки усталости (ВП)	X
Модифицированная шкала усталости (МГ15)	X
Шкала оценки качества жизни М3 (МЗОЫ)		X

1.3. Статистические методы.

В М8-Р203 и М8-Р204 первичной переменной эффективности являлось состояние респондера в ходьбе на время, основанное на постоянном повышении скорости ходьбы в тесте Τ25Ρ\ν. Дополнительно М8-Р203 требовало, чтобы постоянное повышение скорости ходьбы сохранялось в течение периода терапии и чтобы постоянное повышение скорости ходьбы подтверждалось как показатель клинической значимости. При выполнении двух указанных дополнительных требований в М8-Р203 (подтверждение клинической значимости и сохранение эффекта), они не учитывались как требования в М8-Р204.

В параграфах ниже приведены ключевые элементы исследований М8-Р204 и М8-Р203.

1.3.1. Первичная переменная эффективности.

Респондер в ходьбе на время был определен как пациент с более высокой скоростью ходьбы в тесте Τ25ΡV по меньшей мере в трех из четырех (эффективных) посещений в течение периода двойной слепой терапии по сравнению с максимальной скоростью ходьбы, достигнутой в любом из четырех посещений перед терапией и в посещении после терапии, через две недели после прекращения терапии. Первичную переменную эффективности анализировали путем сравнения дозы 4-аминопиридина-8К 10 мг два раза в день, одобренной РОЛ клинической дозы, с плацебо относительно пропорции пациентов с постоянными улучшениями в скорости ходьбы (респондеры в ходьбе на время).

Критерий Кохрана-Мантела-Хенсела, контролируемый по центру, использовали для сравнения 4аминопиридина с плацебо по скоростям респондеров в ходьбе на время в отчетах исходных клинических исследований.

1.3.2. Вторичные переменные эффективности.

Цели анализа вторичных переменных эффективности являлись следующими.

Охарактеризовать величину ответа в ходьбе на время, сравнивая изменения скорости ходьбы при

- 18 022755 терапии между группами анализа респондеров в ходьбе на время (плацебо, получавшие 4-аминопиридин нереспондеры в ходьбе на время и получавшие 4-аминопиридин респондеры в ходьбе на время).

Подтвердить клиническую значимость критерия ответа в ходьбе на время путем сравнения субъективных показателей благоприятного эффекта (М8^8-12, δΟΙ, СС1) между нереспондерами в ходьбе на время и респондерами в ходьбе на время, независимо от терапии.

Исследовать потенциальные отношения между ответом в ходьбе на время и изменениями двух других неврологических показателей, ЬЕММТ и балла по шкале Ашворта, путем сравнения указанных изменений между группами анализа респондеров в ходьбе на время (плацебо, получавшие 4-аминопиридин нереспондеры в ходьбе на время и получавшие 4-аминопиридин респондеры в ходьбе на время).

Одна из причин анализа вторичных переменных в методе респондеров в ходьбе на время в сравнении с традиционным подходом сравнений терапии состояла в том, чтобы те пациенты, у которых, вероятно, был достигнут благоприятный эффект, могли быть охарактеризованы с большей точностью и полнотой, в особенности в отношении клинической значимости наблюдаемых изменений. Кроме того, данный метод позволял выполнить оценку отношений между ответом в ходьбе на время и изменениями двух других неврологических показателей, ЬЕММТ и балла по шкале Ашворта.

Важно отметить, что первичную переменную эффективности (ответ в ходьбе на время) анализировали на основании полного 1ТТ сравнения всех пациентов, получавших 10 мг 4-аминопиридина-δΚ два раза в день, со всеми пациентами, получавшими плацебо.

Цель анализа вторичных переменных состояла в том, чтобы охарактеризовать ответ на терапию более подробно, а также исследовать потенциальный вклад изменений силы ног и мышечной спастичности в улучшение, наблюдаемое в способности передвигаться. В каждом статистическом плане исследований Мδ-Ρ203 и Мδ-Ρ204 было прямо указано при использовании пошагового метода тестирования, что результаты вторичных переменных не будут учитываться для значимости, если пропорция респондеров в ходьбе на время в группе, получавшей 10 мг 4-аминопиридин-δΚ два раза в день, не будет значительно больше, чем в группе плацебо. Также требовалось, чтобы любые предыдущие протестированные вторичные переменные были значимыми, чтобы продолжать тестирование. Таким образом, весь спектр исследований, в которых использовался данный пошаговый метод тестирования, сохранял суммарный уровень значимости <0,05.

Рассматривали следующие объективные и субъективные переменные.

Объективные переменные.

Изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в последнем, зарегистрированном двойном слепом (эффективном) посещении (т.е. двойная слепая конечная точка).

Процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в каждом двойном слепом (эффективном) посещении и усредненное за двойной слепой (эффективный) период.

Изменение ЬЕММТ относительно базового уровня в каждом двойном слепом (эффективном) посещении и усредненное за двойной слепой (эффективный) период.

Изменение среднего балла по шкале Ашворта относительно базового уровня в каждом двойном слепом (эффективном) посещении и усредненное за весь двойной слепой (эффективный) период.

Субъективные переменные.

Среднее изменение балла Мδ\Vδ-12 относительно базового уровня в течение двойного слепого (эффективного) периода.

Средний балл δΟΙ в течение двойного слепого (эффективного) периода.

Балл СО1, зарегистрированный в конце двойного слепого (эффективного) периода.

В оригинальном клиническом исследовании сравнения группы отчетов проанализировали с помощью дисперсионного анализа с главными эффектами по группе и центру. Для объединенного анализа исследование добавляли в качестве главного эффекта.

1.3.3. Апостериорные переменные эффективности.

Ряд апостериорных исследований с использованием традиционного определения ответа, основанного на пороговом изменении, проводили с целью получения дополнительного свидетельства надежности первичных исследований с использованием критерия респондеров в ходьбе на время. Для указанных исследований пациент определялся как % респондер при различных порогах ответа (при среднем увеличении скорости ходьбы в течение периода терапии по меньшей мере 10%, 20% и т.п. до 60% относительно базового уровня). Точный критерий Фишера использовали для сравнения 4-аминопиридина с плацебо для каждого исследования и для объединенного анализа.

1.4. Полные результаты по эффективности и дозировке.

Данные, полученные во всех индивидуальных клинических исследованиях эффективности, выполненных с 4-аминопиридином^К и объединенные данные из исследований Мδ-Ρ202, Мδ-Ρ203 и МδР204 последовательно и без исключения поддерживали применимость и возможность получения эффективности 4-аминопиридина, например, в качестве терапевтического средства для лечения пациентов с рассеянным склерозом с целью улучшения ходьбы.

Клинически значимое повышение скорости ходьбы наблюдали в обоих исследованиях фазы 3 ^δР203, Мδ-Ρ204) в большей пропорции пациентов при активной терапии по сравнению с плацебо, при

- 19 022755 этом данное различие имело высокую статистическую значимость. Полученные результаты подтверждались более ранними наблюдениями в исследованиях фазы 2. Это является важным и клинически значимым благоприятным эффектом, подтверждаемым по улучшению самооценок повседневной деятельности, связанной с функциональной способностью передвигаться (Μδ^δ-12), а также по улучшению оценок общего состояния субъекта, сделанных самим субъектом и клиническим врачом. Дальнейшее подтверждение было обеспечено группой фармакокинетического/фармакодинамического исследования РК/РЭ. которое демонстрировало отношения между уровнями 4-аминопиридина в плазме и вероятностью ответа в ходьбе на время.

В частности, было показано, что эффективность не зависит от классификации заболевания, тяжести нарушения или любой другой тестируемой переменной. Улучшение ограничивалось не только тестом ходьбы на время, но наблюдалось также и по другим шкалам, измеряющим силу ног и мышечную спастичность, даже у пациентов, не квалифицированных как респондеры в ходьбе на время в первичной конечной точке.

Фармакокинетические/фармакодинамические данные и данные клинических исследований подтвердили, что дозировка 10 мг Ъл.й является предпочтительной на данный момент дозой и частотой дозирования для 4-аминопиридина-8К.

Как впервые изложено в настоящей заявке, было продемонстрировано, что эффективность не была временным улучшением, а сохранялась в течение периода терапии в двойных слепых исследованиях с контролем плацебо. Ранее в некоторых вариантах осуществления введения 4-аминопиридина, при использовании препарата применяли титрование. В ходе титрования некоторый побочный эффект, как установили, уменьшался со временем. Как известно специалистам в данной области, побочный эффект является всего лишь эффектом лекарственного средства, который произвольно определяется как не очень желательный. При титровании действительно уменьшаются некоторые побочные эффекты. Таким образом, до настоящего изобретения существовал вопрос относительно длительного сохранения желательного эффекта(эффектов) терапии с применением 4-аминопиридина. На данный вопрос окончательный ответ был дан благодаря настоящим данным, и ответ являлся утвердительным: установлено, что 4аминопиридин вызывает длительный терапевтический эффект.

Данные долгосрочных, открытых расширенных исследований, в которых принимали участие 756 пациентов с рассеянным склерозом, из которых более чем 330 пациентов проходили лечение в течение 2 лет или дольше (например, указанные люди проходили лечение до 4,4 лет на 31 июля 2008 г.; по меньшей мере 5 лет на февраль 2009 г. и по меньшей мере 6 лет на февраль 2010 г.), обеспечивают дополнительное подтверждение длительно сохраняющихся благоприятных эффектов. Таким образом, было обнаружено, что применимость и эффективность способов согласно изобретению сохранялась в течение многих периодов продолжительностью по меньшей мере или более 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недель; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. Функциональное улучшение, наблюдаемое в ходе терапии с применением 10 мг 4-аминопиридинадва раза в день в двойных слепых исследованиях, утрачивалось после отмены терапии, причем это происходило без признаков синдрома отмены или возобновления симптомов.

2. Обобщенные результаты индивидуальных исследований

В данном разделе представлен подробный обзор результатов всех исследований эффективности, проводимых на пациентах с рассеянным склерозом с применением 4-аминопиридина-8К. В табл. 16 ниже приведен структурный обзор исследований и краткое описание результатов каждого исследования. Здесь приводится оценка объединенных данных исследований эффективности Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204. Ввиду исключительно описательной природы анализа данных расширенных исследований, они были скомбинированы для всех трех расширенных исследований в конце данного раздела.

- 20 022755

Таблица 16

Общая схема исследований 4-аминопиридина-8К М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204 (М8ХУ8-12 = шкала оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов; 801 = самооценка общего состояния субъекта;

С01 = клиническая оценка общего состояния;

ЬЕММТ = мануальное обследование мышц нижних конечностей)

			Продолжительность исследования (недели)	Результаты исследований
№ исследования	Кол-во	Доза,	Двойной	Общая	Первичные	Вторичные
название	пациентов	режим,	слепой	продолж-ть
протокола, схема		путь	период	исследований
МЗ-Е202:	211 включено	ЕАМ-ЗК	15 недель	20 недель	Проспективные	Проспективные вторичные
Двойное слепое,	206	Табл.;			первичные	резуль та ты:
с контролем	рандомизиров	10, 15,			результаты:	критерий ответа основан
плацебо, 20-	ано	2 0 мг ;			процентное изменение	на среднем повышении
недельное,	<47,	два раза			средней скорости	>20% скорости ходьбы в
исследование в	плацебо;	в день;			ходьбы относительно	течение двойного
параллельных	52, 10 мг	Перор.			базового уровня,	слепого периода
группах для	два раза в				измеренное с помощью	терапии; среднем
оценки	день				теста с ходьбой на	улучшении балла в
безопасности,	50, 15 мг				время на дистанции	Мануальном обследовании
привыкания и	два раза в				25 футов	мышц нижних конечностей
активности при	день				Апостериорный анализ	(ДЕММТ) и тесте с 9
пероральном	57, 20 мг				респондеров:	отверстиями и
приеме внутрь 4-	два раза в				Сохранение повышения	стержнями; баллах в

аминопиридина-	день 4-	скорости ходьбы	Слуховом тесте на
3Ρ. у больных	аминопиридин	(Ответ в ходьбе на	сложение в заданном
рассеянным	-5К)	время). Респондер	темпе (оба из Шкалы
склерозом		был определен как	комплексной
		пациент, который	функциональной оценки
Схема:		имел более высокую	РС - МЗЕС);
Двойное слепое,		скорость ходьбы по	комбинированный балл
рандомизированно		меньшей мере в трех	МЗЕС; тест мышечной
е, с контролем		из четырех посещений	спастичности (балл по
плацебо,		в течение двойного	шкале Ашворта);
исследование со		слепого периода по	Клиническая оценка
сравнением доз		сравнению с	изменения общего
		максимальной	состояния (С01);
		скоростью во всех	Самооценка общего
		пяти из двойных	состояния субъекта
		слепых посещений без	(301); Шкала оценки
		терапии.	ходьбы при РС из 12
			пунктов (МЗИЗ-12);
			Шкала оценки качества
			жизни при рассеянном
			склерозе (МЗ£>Ы) .

- 21 022755

Μ3-Ρ203:	304 включено	РАМ-ЗР	14 недель	21 неделя	Проспективный	Проспективный пошаговый
Двойное слепое,	301	Табл. ,·			первичный результат,	анализ вторичных
С контролем	рандомизиров	10 мг;			как определено в	резулвтатов:
плацебо, 21-	ано	два раза			5 РА:	•Изменение относительно
недельное	(72,	в день;			Ответ в ходьбе на	базового уровня в
исследование в	плацебо;	Внутрь			время основан на	ЬЕММТ, усредненное за
параллельных	229, 10 мг	перорален			Тесте с ходьбой на	двойной слепой период
группах для	два раза в				время на дистанции	терапии и сравненное
оценки	день 4-				25 футов. Респондер	отдельно для
безопасности и	аминопиридин				был определен как	Респондеров в ходьбе на
эффективности	а-5К)				пациент, который	время и Нереспондеров в
перорального					имел более высокую	ходьбе на время
введения 4-					скорость ходьбы по	•Изменение относительно
аминопиридина-ЗР					меньшей мере в трех	базового уровня
(10 мг два раза					из четырех посещений	среднего балла по шкале
в день) у					во время двойного	Ашворта за двойной
субъектов с					слепого периода по	слепой период терапии и
рассеянным					сравнению с	сравненное отдельно для
склерозом					максимал ь ной	Респондеров в ходьбе на
Схема;					скоростью в первых	время и Нереспондеров в
Двойное слепое,					пяти двойных слепых	ходьбе на время.
рандомизированно					посещениях без
е исследование,					терапии.
с контролем					Допол нитель ные
плацебо					требования 5РА:
					Сохранение эффекта,

определенного как значительно большее повышение скорости ходьбы при последней двойной слепой оценке у получавших 4-аминопиридин-ЗР Респондеров в ходьбе на время по сравнению с получавшими плацебо пациентами. Проверка критерия Ответа в ходьбе на время - статистически значимое больше улучшение балла М5ИЗ-12 у Респондеров в ходьбе на время по сравнению с Нереспондерами в ходьбе на время.

- 22 022755

М5-Г204:	240 включено	ГАМ-5К	9 недель	14 недель	Проспективный	Проспективный вторичный
Двойное слепое,	239	Табл.;			первичный результат	результат: Среднее
с контролем	рандомизиров	10 мг ;			как определено в	изменение относительно
плацебо,	ано	два раза			5 РА:	базового уровня в ЪЕММТ
исследование в	(119,	в день;			Ответ в ходьбе на	в течение
параллельных	плацебо;	Внутрь			время, основанный на	восьминедельного
группах для	120, 10 мг	пероральн			Тесте с ходьбой на	двойного слепого
оценки	два раза в				время на дистанции	периода терапии.
безопасности и	день 4-				25 футов. Респонденр	сравнивающее
эффективности	аминопиридин				был определен как	Респондеров в ходьбе на
перорального	-5К)				пациент, который	время и Нереспондеров в
введения 4-					имел более высокую	ходьбе на время
аминопиридина-$К.					скорость ходьбы по	отдельно и
(10 мг два раза					меньшей мере в трех	последовательно с
в день) у					из первых четырех	получавшими плацебо
пациентов с					посещений во время	пациентами.
рассеянным					двойного слепого	Фармакокинетические
склерозом					периода по сравнению	данные нужно было
Схема:					с максимальной	собрать в
Двойное слепое,					скоростью во всех	дополнительное пятое
рандомизированно					пяти двойных слепых	двойное слепое
е исследование с					посещениях без	посещение с терапией
контролем					терапии.	(Посещение 7) , которое
плацебо						не было частью анализа

						общей эффективности.
						Дополнительные оценки,
						включающие М5ДОЗ-12,
						£С1, СС1 и балл по
						шкале Ашворта, были
						собраны в рамках
						объединенного анализа с
						другими исследованиями
						и не являлись
						формальными вторичными
						результатами.

2.1. М8-Р201.

Тридцать шесть пациентов рандомизировали и тридцать один пациент (86%; 20/25 4аминопиридин-§К, 11/11 плацебо) были включены в исследование. Изменение балла ЬЕММТ относительно базового уровня было значимым между группами терапии за недели исследования согласно оценке с помощью дисперсионного анализа (ΑΝΟνΑ) с повторными измерениями (р=0,01). Изменение времени, требуемого для выполнения теста Т25Е\У. относительно базового уровня не было значимо различным между группами терапии за недели исследования или в конце исследования согласно запланированному анализу. На основе ретроспективного анализа эффекта выходящих за пределы значений в течение времени ходьбы обратная величина времени ходьбы (скорость ходьбы) идентифицировали как подходящее преобразование, чтобы улучшить нормальность данных. Результирующий апостериорный анализ в отношении изменений скорости ходьбы относительно базового уровня показал значимость (р=0,03) с предпочтением группы, получавшей 4-аминопиридин, в течение недель исследования согласно оценке с помощью дисперсионного анализа с повторными измерениями. Повышение скорости ходьбы, наблюдаемое в данном исследовании, оказалось максимальным при уровне дозы 20 мг два раза в день и сохранялось, но не увеличивалось при дальнейшем увеличении дозы.

2.2. М8-Р202.

В общей сложности 206 пациентов с рассеянным склерозом были рандомизированы и 195 включены в группу терапии (50/52 с дозой 10 мг 4-аминопиридин-8К Η.ί.ά. 49/50 с дозой 15 мг два раза в день, 51/57 с дозой 20 мг два раза в день и 45/47 с плацебо). Перспективно определенная первичная переменная эффективности являлась процентным изменением средней скорости ходьбы относительно базового уровня в тесте Т25Е\У в последних трех посещениях с назначенной дозой (посещения 7-9, посттитрование, период с неизменяемой дозой). Вторичная переменная эффективности являлась ответом, определенным как 20%-ное или большее повышение скорости ходьбы в течение 12-недельного двойного слепого периода терапии с неизменяемой дозой (т.е. измерения при посещениях 7-9). Другие вторичные переменные эффективности являлись другими оценками М8РС (тест с 9 отверстиями и стержнями и ΡΑ8ΑΤ 3)/комбинированным баллом М8РС, ЬЕММТ, М§^§-12, М§фЕ1, баллом по шкале мышечной спастич- 23 022755 ности Ашворта, СС1 и §С1.

Среднее процентное повышение скорости ходьбы для каждой из групп, получавших 4аминопиридин-§К, в числовой форме превышало соответствующий показатель, наблюдаемый в группе плацебо: 1,2% (плацебо), 7,5% (10 мг два раза в день), 9,7% (15 мг два раза в день) и 6,9% (20 мг два раза в день) соответственно. Кроме того, процент пациентов, которые удовлетворяли заданному критерию ответа (среднее изменение скорости ходьбы относительно базового уровня составляет по меньшей мере 20%), также был выше в группах, получавших 4-аминопиридин-§К, чем в группах плацебо: 12,8% (плацебо), 23,5% (10 мг два раза в день), 26,0% (15 мг два раза в день) и 15,8% (20 мг два раза в день). Статистическая значимость была получена для вторичного критерия эффективности, силы мышц нижних конечностей, оцененной с помощью мануального обследования мышц нижних конечностей или ЬЕММТ. Все три группы, получавшие разные дозы 4-аминопиридина-§К, показали большее среднее увеличение силы мышц нижних конечностей относительно базового уровня по сравнению с группой плацебо, причем различия были статистически значимы для групп, получавших дозы 4-аминопиридина-§К 15 мг и 10 мг в сравнении с плацебо (р<0,05). Никаких значимых различий между группами по каким-либо другим вторичным переменным эффективности, перспективно определенным для данного исследования, не выявили.

Новый критерий ответа был определен апостериорно и был основан на сохраняющихся более высоких скоростях ходьбы при приеме лекарственного средства, чем без приема лекарственного средства. Данный критерий был удовлетворен у 36,7% пациентов в комбинированной группе, получавшей 4аминопиридин-§К, в сравнении с 8,5% пациентов в группе плацебо; различие, которое являлось статистически значимым (р<0,001). Среднее повышение скорости ходьбы для респондеров 4-аминопиридина§К в течение двойного слепого периода составляло 27,1% по сравнению с 2,6% для группы плацебо (р<0,001). Указанные проценты респондеров и среднее повышение скорости ходьбы также были статистически значимыми при индивидуальном сравнении каждой группы, получавшей дозы лекарственного средства, с группой плацебо.

2.3. М8-Р203.

В данном исследовании 301 пациент с рассеянным склерозом был рандомизирован и 283 включены в группу терапии (212/229 с дозой 10 мг 4-аминопиридина-§К два раза в день, 71/72 с плацебо). Первичной переменной эффективности являлся ответ при ходьбе на время, определенный как последовательное повышение скорости ходьбы, основанное на тесте Т25Р\У (анализ респондеров Т25Р\У). в котором по меньшей мере в трех из четырех посещений с терапией скорости ходьбы превышали самую высокую скорость ходьбы, достигнутую в пяти посещениях без терапии (т.е. в четырех посещениях до терапии и в одном посещении через две недели после терапии). Вторичные переменные эффективности включали скорость ходьбы, балл ЬЕММТ и балл по шкале мышечной спастичности Ашворта, причем последние два показателя усредняли для восьми и шести групп тестирования мышц нижних конечностей соответственно. Анализ указанных вторичных показателей был перспективно определен последовательным способом для защиты статистической мощности сравнений. М§\У§-12 (первично), а также §01 и СО1 (вторично) являлись показателями, используемыми для подтверждения клинической значимости первичного критерия ответа конечного результата.

Значимо больший процент пациентов, принимавших 4-аминопиридин-§К, демонстрировал сохраняющееся повышение скорости ходьбы, первичный результат исследования, по сравнению с пациентами, принимавшими плацебо (34,8% в сравнении с 8,3%), согласно измерению в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов (р<0,001). Кроме того, эффект сохранялся в течение 14-недельного периода терапии (р<0,001), при этом наблюдалось статистически значимое улучшение ходьбы по шкале оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов (М§^§-12) для респондеров в сравнении с нереспондерами (р<0,001). Также регистрировали статистически значимые улучшения ходьбы в §01 и С01 для респондеров в сравнении с нереспондерами (р<0,001 для каждого). Таким образом, были достигнуты все три компонента предварительно установленной первичной конечной точки. Среднее повышение скорости ходьбы в течение периода терапии по сравнению с базовым уровнем составляло 25,2% для респондеров 4аминопиридина-§К в сравнении с 4,7% для группы плацебо (р<0,001). Кроме того, статистически значимые увеличения балла ЬЕММТ были отмечены в обеих группах респондеров в ходьбе на время 4аминопиридина-§К (р<0,001) и нереспондеров в ходьбе на время 4-аминопиридина-§К (р=0,046) по сравнению с плацебо. Что касется балла по шкале Ашворта, уменьшение мышечной спастичности также наблюдали у респондеров 4-аминопиридина-§К при ходьбе на время и у нереспондеров 4аминопиридина-§К при ходьбе на время по сравнению с плацебо.

2.4. М§-Р204.

В общей сложности 239 пациентов с рассеянным склерозом были рандомизированы, и 227 включены в данное исследование (113/120 с дозой 10 мг 4-аминопиридина-§К два раза в день и 114/119 с плацебо). Первичной переменной эффективности являлось сохранение повышенной скорости ходьбы на основании теста Т25Р\У (анализ респондеров Т25Р^), в котором по меньшей мере в трех из первых четырех посещений с терапией скорости ходьбы превышали самую высокую скорость ходьбы, достигнутую в пяти посещениях без терапии. Вторичной переменной эффективности являлось среднее изменение балла

- 24 022755

ЬЕММТ относительно базового уровня в течение двойного слепого периода, сравнивающее получавших 4-аминопиридин респондеров и нереспондеров в ходьбе на время отдельно с группой, получавшей плацебо. Другие показатели, М§^§-12, §01, С01 и балл по шкале Ашворта, были включены только в целях объединенного анализа и сравнения с результатами других двух испытаний.

Первичный критерий эффективности для данного исследования был достигнут: процент пациентов, которые удовлетворяли критерию респондеров в ходьбе на время, составлял 42,9% в группе, получавшей 4-аминопиридин-§К, по сравнению с 9,3% в группе, получавшей плацебо (р<0,001). Среднее повышение скорости ходьбы для респондеров 4-аминопиридина-8К в течение двойного слепого периода составило 25% по сравнению с 6% для нереспондеров 4-аминопиридина-8К и 8% для группы плацебо (апостериорное статистическое сравнение между респондерами 4-аминопиридина-8К и группой плацебо была значимым, р<0,001). Вторичный критерий эффективности большего увеличения силы ног у респондеров 4аминопиридина-δΚ в ходьбе на время по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, также был удовлетворен (р=0,028). Впрочем, изменение силы ног у нереспондеров 4-аминопиридин-§К в ходьбе на время не было статистически значимо различным как в сравнении с пациентами, получавшими плацебо, так и с респондерами 4-аминопиридина-8К в ходьбе на время. Респондеры 4-аминопиридин-§К в ходьбе на время показали в числовой форме большее среднее улучшение, чем группа плацебо, среднего изменения балла по шкале Ашворта, показателя мышечной спастичности, относительно базового уровня. Респондеры в ходьбе на время (независимо от терапии) также показали большее улучшение, чем нереспондеры в ходьбе на время (независимо от терапии) для трех итоговых субъективных результатов в данном исследовании: среднее изменение относительно базового уровня в М§^§-12, средний балл §С1 за двойной слепой период и С01 в конце двойного слепого периода. В апостериорных статистических сравнениях для всех указаных переменных средние улучшения у респондеров 4-аминопиридина-8К были значительно выше, чем в группе плацебо.

2.5. М8-Р202ЕХТ.

На дату подачи заявки М8-Р202ЕХТ является продолжающимся, долгосрочным, многоцентровым, открытым расширенным исследованием длительной терапии с применением 4-аминопиридина-8К у пациентов с клинически подтвержденным рассеянным склерозом, которые ранее участвовали в исследовании 4-аминопиридина. На 31 июля 2008 г. было отобрано 198 пациентов, 177 включено в исследование и приблизительно 98 продолжали участие в исследовании на основании клинических контрольных отчетов. Приблизительно 160 пациентов участвовали в исследовании более 6 месяцев, еще 145 - более 1 года и 90 - более 4 лет на 31 июля 2008 г. В комбинированном отчете М§-Р-ЕХТ использовали данные всех продолжающихся расширенных исследований с клинической датой окончания 31 июля 2008 г. с целью оценки эффективности 4-аминопиридина-8К в длительной открытой терапии. Результаты представлены в настоящей заявке.

2.6. М8-Р203ЕХТ.

На дату подачи заявки М8-Р203ЕХТ является продолжающимся долгосрочным, многоцентровым, открытым, расширеннным исследованием длительной терапии с применением 4-аминопиридина-8К у пациентов с клинически подтвержденным рассеянным склерозом, которые участвовали в исследовании М8-Р203. На 31 июля 2008 г. было отобрано 272 пациентов, 269 включено в исследование и приблизительно 196 продолжали участие в исследовании на основании клинических контрольных отчетов. Приблизительно 247 пациентов участвовали в исследовании более 6 месяцев, еще 227 - более 1 года и 203 более 2 лет на 31 июля 2008 г. В комбинированном отчете М8-Р-ЕХТ использовали данные всех продолжающихся расширенных исследований с клинической датой окончания 31 июля 2008 г. с целью оценки эффективности 4-аминопиридина-8К в длительной открытой терапии. Результаты представлены в настоящей заявке.

2.7. М8-Р204ЕХТ.

На дату подачи заявки М8-Р204ЕХТ является продолжающимся долгосрочным, многоцентровым, открытым, расширенным исследованием длительной терапии с применением 4-аминопиридина-8К у пациентов с клинически подтвержденным рассеянным склерозом, которые участвовали в исследовании М8-Р204. На 31 июля 2008 г. было отобрано 219 пациентов, 214 включено в исследование и приблизительно 190 продолжали участие в исследовании на основании клинических контрольных отчетов. В общей сложности 139 пациентов участвовали в исследовании более 6 месяцев на 31 июля 2008 г. В комбинированном отчете М8-Р-ЕХТ использовали данные всех продолжающихся расширенных исследований с клинической датой окончания 31 июля 2008 г. с целью оценки эффективности 4-аминопиридина-8К в длительной открытой терапии. Результаты представлены в настоящей заявке.

3. Сравнение и анализ результатов всех исследований

В данном разделе сначала приводится обзор характеристик популяции пациентов, исследуемых с применением 4-аминопиридина-8К После этого приведено подробное обсуждение первичного критерия эффективности, вторичных критериев эффективности и эффектов возможных искажающих факторов.

3.1. Популяция, вошедшая в исследование.

Исследования М8-Р202, М8-Р203, М8-Р204 включали пациентов с рассеянным склерозом всех основных течений заболевания, распределенных следующим образом: 51,5% пациентов имели тип диагно- 25 022755 за вторично-прогрессирующий, за которым следовал возвратно-ремиттирующий (29,6%), первичнопрогрессирующий (16,0%) и возвратно-прогрессирующий (3,0%). Средняя продолжительность болезни составляла 13,33 года (диапазон: 0,1-45,6 года), тогда как средний балл по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΕΌ33) при скрининге составил 5,75 (диапазон: 1,5-7,0).

В общей сложности в данной популяции было 639 пациентов (238 плацебо и 401 10 мг 4аминопиридин-ЗК два раза в день), из которых 67,4% являлись женщинами и 32,6% - мужчинами. Большинство пациентов было европейцами (92,5%), затем афроамериканцами (4,5%), латиноамериканцами (1,6%), классифицированными как Прочие (0,8%), а также азиатами/уроженцами тихоокеанских островов (0,6%). Средний возраст, вес и рост пациентов были следующими: 51,5 лет (диапазон: 24-73 года), 75,85 кг (диапазон: 37,3-153,8 кг) и 168,67 см (диапазон: 129,5-200,7 см) соответственно.

Анализ ковариаций со следующими факторами показал, что они не влияли на общие результаты: в группе плацебо было больше мужчин, чем в группе 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день (39,5% и 28,4% соответственно). Из-за большего процента мужчин группа плацебо включала, в среднем, более высоких пациентов (169,97 см против 167,90 см) и более тяжелых пациентов (77,65 кг против 74,78 кг). Также был некоторый дисбаланс по типу диагноза, который, главным образом, был обусловлен большим процентом пациентов с первичным прогрессивным РС в группе плацебо (19,7% против 13,7%) и соответственно меньшим процентом пациентов с вторичным прогрессивным РС (47,5% против 53,9%). Группы терапии были сопоставимы по остальным исходным демографическим переменным и переменным характеристики болезни.

Общее число прекращений и их причины в исследованиях МЗ-Р202, МЗ-Р203 и МЗ-Р204 и в совокупности данных исследований приведены в табл. 17. В общей сложности 34 пациента (5,3%) прекращали участие в трех исследованиях [8 (3,4%) в группе плацебо и 26 (6,5%) в группе 10 мг 4аминопиридина-ЗК два раза в день]. Средняя совокупная продолжительность всех трех исследований составила 85,49 дней (диапазон: 14-120 дней); группы терапии были сопоставимы. Необходимо отметить, что исследования МЗ-Р202 и МЗ-Р203 имели большую продолжительность, чем МЗ-Р204. Пациенты были подвергнуты воздействию в течение большего времени (диапазон: 14-120 дней) в двух указанных исследованиях по сравнению с МЗ-Р204 (диапазон: 15-72 дней).

Общий процент выпадающих пациентов в данных исследованиях был низким (всего 5,3%) и не влиял на результат терапии каким-либо существенным образом. Пациенты, которые выбыли до завершения, по меньшей мере, третьего посещения с терапией в любом из настоящих исследований, были подсчитаны как Нереспондеры по умолчанию, поскольку было бы невозможно удовлетворить критерий ответа при ходьбе на время без измерений в тесте Т25Б\У по меньшей мере в трех посещениях в течение терапии.

- 26 022755

Таблица 17

Сводка по распределению пациентов в исследованиях Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203, Μ8-Ρ204 и в совокупности (вся рандомизированная популяция; проценты вычисляли на основании количества рандомизированных пациентов)

Статус	Плацебо (N=238)	4-аминопиридин- 2Р. 10 мг два раза в день (N=401)	Общее количество (N=639)
МЗ-Г202
Рандомизированные пациенты	47	52	99
Популяция ΙΤΤ	47 (100,0%)	51 (98,1%)	98 (99,0%)
Участвовали в полном исследовании	45 (95,7%)	50 (96,2%)	95 (96,0%)
Прекратили исследование досрочно:	2 (4,3%)	2 (3,8%)	4 (4,0%)
Неблагоприятный случай	1 (2,1%)	0 (0%)	1 (1,0%)
Несоблюдение протокола	0 (0%)	0 (0%)	0 (0%)
Субъект отказался	0 (0%)	1 (1,9%)	1 (1,0%)
Субъект выбыл из наблюдения	1 (2,1%)	1 (1,9%)	2 (2,0%)
Μ3-Ε203
Рандомизированные пациенты	72	229	301
Популяция ΙΤΤ	72 (100,0%)	224 (97,8%)	296 (98,3%)
Участвовали в полном исследовании	71 (98,6%)	212 (92,6%)	283 (94,0%)
Прекратили исследование досрочно:	1 (1,4%)	17 (7,4%)	18 (6,0%)
Неблагоприятный случай	0 (0%)	11 (4,8%)	11 (3,7%)
Несоблюдение протокола	0 (0%)	0 (0%)	0 (0%)
Субъект отказался	0 (0%)	4 (1,7%)	4 (1,3%)
Субъект выбыл из наблюдения	1 (1,4%)	0 (0%)	1 (0,3%)
Другое	0 (0%)	2 (0,9%)	2 (0,7%)

М5-Г204
Рандомизированные пациенты	119	120	239
Популяция ΙΤΤ	118	(99,2%)	119	(99,2%)	237	(99,2%)
Участвовали в полном	114	(95,8%)	113	(94,2%)	227	(95,0%)
исследовании
Прекратили исследование	5	(4,2%)	7	(5,8%)	12	(5,0%)
досрочно:
Неблагоприятный случай	4	(3, 4%)	4	(3,3%)	8	(3,3%)
Несоблюдение протокола	1	(0,8%)	2	(1,7%)	3	(1,3%)
Субъект отказался	0	(0%)	0	<0%>	0	(0%)
Субъект выбыл из	0	(0%)	0	(0%)	0	(0%)
наблюдения
Другое	0	(0%)	1	(0,8%)	1	(0,4%)
Объединенные данные
Рандомизированные		238		401		639
пациенты
Популяция ΙΤΤ	237	(99,6%)	394	(98,3%)	631	(98,7%)
Участвовали в полном	230	(96,6%)	375	(93,5%)	605	(94,7%)
исследовании
Прекратили исследование	8	(3,4%)	26	(6,5%)	34	(5,3%)
досрочно:
Неблагоприятный случай	5	(2,1%)	15	(3,7%)	20	(3,1%)
Несоблюдение протокола	1	(0,4%)	2	(0,5%)	3	(0,5%)
Субъект отказался	0	(0%)	5	(1,2%)	5	(0,8%)
Субъект выбыл из	2	(0,8%)	1	(0,2%)	3	(0,5%)
наблюдения
Другое	0	(0%)	3	(0,7%)	3	(0,5%)

- 27 022755

3.2. Сравнение результатов эффективности всех исследований.

Из первичных и вторичных переменных, описанных в настоящей заявке, ключевые результаты представлены ниже.

Первичный результат эффективности.

Эффективность была убедительно продемонстрирована в исследованиях Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 и дополнительно подтверждалась эквивалентным, но ретроспективным анализом предыдущего исследования Μδ-Ρ202. Во всех трех исследованиях у значительно большего процента пациентов, принимавших 10 мг 4-аминопиридина^К два раза в день, наблюдалось стойкое повышение скорости ходьбы по сравнению с пациентами, принимавшими плацебо: (Μδ-Ρ204: 42,9% против 9,3%, Μδ-Ρ203: 34,8% против 8,3%, ΜδР202: 35,3% против 8,5% (р<0,001 для Μδ-Ρ203 и для Μδ-Ρ204 и р=0,001 для Μδ-Ρ202). При объединии всех исследований уровень ответа при ходьбе на время составил 37,3% в группе 10 мг 4-аминопиридинаδΚ два раза в день и 8,9% в группе плацебо (р<0,001). Результаты приведены на фиг. 17.

При валидации результатов Μδ-Ρ202 и Μδ-Ρ203 сравнивали респондеров в ходьбе на время с нереспондерами в ходьбе на время в популяции 1ТТ, которая состояла из четырех групп терапии: плацебо, 4-аминопиридин^К 10 мг два раза в день, 4-аминопиридин^К 15 мг два раза в день и 4-аминопиридинδΚ 20 мг два раза в день. Результаты представлены ниже.

Респондеры в ходьбе на время демонстрировали статистически значимое уменьшение инвалидности при самооценке по сравнению с нереспондерами в ходьбе на время, как показано изменением балла Μδνδ-12 (Μδ-Ρ203: р<0,001; Μδ-Ρ202: р=0,020). Это продемонстрировало, что объективно измеренное повышение скорости ходьбы, преобразованное в субъективный клинический ответ, имеющий значение для пациентов с учетом воздействия рассеянного склероза на функциональную способность к передвижению. Более детальный анализ ответов на индивидуальные вопросы в Μδνδ-12 показал средний положительный ответ (уменьшенный балл инвалидности) на все 12 вопросов среди пациентов в группе респондеров в ходьбе на время по сравнению с группой нереспондеров в ходьбе на время. Это было верно для каждого из исследований по отдельности, а также для объединенного анализа. Полученные результаты показали улучшение ряда функций в повседневной деятельности, которые зависят от функциональной подвижности. Кроме того, две вторичных субъективных переменных, шкалы самооценки общего состояния субъекта (δΟΙ) и клинической оценки общего состояния (СОЦ, были включены как дополнительная основа для валидации критерия респондера в ходьбе на время. В обоих исследованиях результаты из δΟΙ показали значительно более высокие (то есть улучшенные) средние баллы у респондеров в ходьбе на время, чем у нереспондеров (Μδ-Ρ203: р<0,001; Μδ-Ρ202: р=0,004), подтверждая вывод, что стойкое повышение скорости ходьбы было клинически значимым для пациентов с рассеянным склерозом. Кроме того, респондеры в ходьбе на время были оценены значительно лучше, чем нереспондеры по шкале клинической оценки общего состояния (СО^ клиническими исследователями в Μδ-Ρ203 (р<0,001), при этом в Μδ-Ρ202 респондеры показали тенденцию к большему улучшению, чем нереспондеры (р=0,056).

Дополнительные анализы выполняли на переменных валидации для настоящих исследований. Ключевые результаты, объединенные из всех трех исследований, приведены для пациентов ΙΤΤ, рандомизированных в группу плацебо или группу 10 мг 4-аминопиридина^К два раза в день. Указанные результаты оставались согласующимися с первыми двумя исследованиями и также подтверждали заключения отчета метаанализа (Μδ-Ρ2 02_203МЕТА приведен выше).

Первично:

a) во всех трех исследованиях респондеры в ходьбе на время демонстрировали статистически значимое уменьшение инвалидности при самооценке по сравнению с нереспондерами, как показано изменениями балла Μδνδ-12 (объединенное р-значение <0,001; см. фиг. 18, а касательно процентного улучшения см. фиг. 19). Важно отметить, что в объединенном анализе и получавшие 4-аминопиридин^К нереспондеры в ходьбе на время, и получавшие плацебо пациенты не показали изменения относительно базового уровня в Μδνδ-12;

b) респондеры в ходьбе на время показали сниженые баллы инвалидности по сравнению с нереспондерами в ходьбе на время во всех 12 вопросах, во всех трех исследованиях, причем значительно более низкие в 11 из указанных 12 вопросов в объединенном анализе, как в табл. 15. Один вопрос, который не был значимо отличен между указанными группами, был вопросом 2, связанным со способностью бегать.

Вторично:

a) во всех трех исследованиях респондеры в ходьбе на время в сравнении с нереспондерами в ходьбе на время показали значительно лучшие средние баллы δΟΙ (р=0,013 для Μδ-Ρ202, р<0,001 для ΜδР203 и Μδ-Ρ204 и всех трех объединенных исследований);

b) в обоих исследованиях под δΡΑ респондеры в ходьбе на время были оценены значительно лучше (р<0,001), чем нереспондеры в ходьбе на время по шкале ΟΟΙ и в Μδ-Ρ202, респондеры в ходьбе на время показали тенденцию к большему улучшению (р=0,100) по шкале СОЕ чем нереспондеры (объединенное р-значение <0,001).

Апостериорный анализ с использованием традиционного определения респондеров выполняли для

- 28 022755 обеспечения дополнительного свидетельства надежности анализов, как описано ранее, с результатами первичного критерия респондера в ходьбе на время. Пациент был определен как традиционный респондер в ходьбе на время при различных порогах ответа (при средних увеличениях скорости ходьбы по меньшей мере 10%, 20% и т.п., до 60%). Результаты приведены как объединенные из исследований МЗР202, МЗ-Р203 и МЗ-Р204 для пациентов ΙΤΤ, рандомизированных в группы 10 мг два раза в день или плацебо на фиг. 20.

С учетом данных, показанных на фиг. 20, по увеличению скорости ходьбы, также был вычислен процент пациентов в двух группах терапии, показывающих уменьшения скорости ходьбы относительно базового уровня. Результаты показали, что было значительно меньше получавших 4-аминопиридин-ЗК пациентов с каким-либо уменьшением скорости ходьбы относительно базового уровня и что не было никакого признака противоположного ответа на лечение, то есть не было никакого свидетельства наличия подгруппы пациентов, получавших 4-аминопиридин, которые показывали снижение способности ходьбы по сравнению с пациентами, получавшими плацебо.

Доза 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день значительно превосходила плацебо по среднему увеличению скорости ходьбы по меньшей мере на 10, 20, 30 и 40% (р<0,001 для каждого). Плацебо не было более эффективным, чем 4-аминопиридин-ЗК ни в каком смысле. Результат среднего увеличения скорости ходьбы по меньшей мере на 20% наиболее близко соответствует критерию респондера в ходьбе на время. Используя традиционный подход 124 пациента (31,5%), получавших 10 мг 4-аминопиридинаЗК два раза в день, демонстрировали среднее увеличение скорости ходьбы по меньшей мере 20% в сравнении с 31 пациентом (13,1%) в группе плацебо (т.е. результат с коррекцией плацебо 18,4%: 31,5-13,1%).

Во всех трех исследованиях получавшие 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день респондеры в ходьбе на время имели значительно большее среднее увеличение баллов ЬЕММТ, чем группа плацебо. Объединенные результаты указывают, что среднее улучшение в ЬЕММТ для получавших 10 мг 4аминопиридина-ЗК два раза в день респондеры в ходьбе на время в течение двойного слепого периода составляло 0,16 единиц по сравнению с 0,03 единиц для группы плацебо (р<0,001). В группе нереспондеров в ходьбе на время, получавшей 4-аминопиридин-ЗК, также значительно повысилась сила ног по сравнению с группой плацебо (р=0,006, р-значение не показано на фигуре), указывая на то, что улучшения скорости ходьбы и силы ног, отмечаемые с 4-аминопиридином-ЗК, являются в некоторой степени независимыми и могут вносить свой вклад в повышение скорости ходьбы у некоторых пациентов.

Вторичный результат эффективности.

Следующие данные были получены для среднего процентного изменения скорости ходьбы. Во всех трех исследованиях получавшие 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день Респондеры в ходьбе на время имели значительно большее среднее увеличение скорости ходьбы, чем группа плацебо; в рамках каждого исследования. Результаты всех исследований близко соответствовали друг другу; был достигнут высокий уровень статистической значимости. Объединенные результаты указывают, что среднее повышение скорости ходьбы у получавших 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день респондеров в ходьбе на время в течение двойного слепого периода терапии составило 25,30% по сравнению с 5,76% для группы плацебо (р<0,001) и 6,29% для получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время (р<0,001). Известно, что указанные изменения скорости ходьбы у респондеров в ходьбе на время по сравнению с плацебо были высоко статистически значимыми во всех трех исследованиях по отдельности, а также при объедининии, и что нереспондеры в ходьбе на время не показали никакого отличия от группы плацебо, что является показателем верного распределения на указанные две группы ответа в ходьбе на время.

Следующие данные были получены для среднего изменения балла ЬЕММТ. Во всех трех исследованиях получавшие 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день респондеры в ходьбе на время имели значительно большее среднее увеличение балла ЬЕММТ, чем группа плацебо. Объединенные результаты указывают, что среднее улучшение в ЬЕММТ у получавших 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день респондеров в ходьбе на время в течение двойного слепого периода составляло 0,16 единиц по сравнению с 0,03 единиц для группы плацебо (р<0,001), относительно базового уровня средний балл 4,00 по 0-5 шкале (т.е. обеспечивая максимальное возможное среднее улучшение 1,0). Так как балл усреднен для более чем 8 групп мышц, данное изменение среднего балла может быть вызвано множеством различных комбинаций изменений в индивидуальных группах мышц (например, изменение оценки на два уровня для одной мышцы у 50% пациентов в группе или изменение одной оценки для двух мышц у 50% пациентов в группе оба дали бы 0,125 изменение общего среднего балла для группы). Среднее улучшение в ЬЕММТ у получавших 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день респондеров в ходьбе на время также было значительно большим (р=0,009), чем у получавших 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день нереспондеров в ходьбе на время (среднее улучшение 0,09 единиц). В группе получавших 4аминопиридин-ЗК нереспондеров в ходьбе на время сила ног была также значительно повышена по сравнению с группой плацебо (р=0,006, р-значение не показано на фигуре), указывая на то, что повышения скорости ходьбы и силы ног, отмечаемые при приеме 4-аминопиридина-ЗК, являются в некоторой степени независимыми и могут вносить свой вклад в повышение скорости ходьбы у некоторых пациентов. Данная независимость повышения силы ног и увеличения скорости ходьбы подтверждается при

- 29 022755 проверке данных отдельных пациентов в исследованиях, в которых индивиды могут демонстрировать улучшение ходьбы или повышение силы ног по отдельности или демонстрировать улучшение обоих показателей (данные не показаны).

Следующие данные были получены для среднего изменения балла по шкале Ашворта. В М8-Р204 статистическая значимость была достигнута при сравнении группы получавших 4-аминопиридин-§К респондеров в ходьбе на время с группой плацебо (р=0,018). В М8-Р202 и М8-Р203 статистической значимости при сравнении с группой плацебо не было достигнуто, хотя имелись числовые тенденции в пользу получавшей 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день группы респондеров в ходьбе на время. В двух из трех исследований улучшение у получавших лекарственное средство нереспондеров в ходьбе на время было в числовой форме более сильным, чем улучшение у получавших лекарственное средство респондеров в ходьбе на время, что указывает на то, что влияние на мышечную спастичность было независимо и мало, вероятно, вносило значительный вклад в наблюдаемое повышение скорости ходьбы у респондеров в ходьбе на время. Объединенные результаты указывают, что среднее снижение балла по шкале Ашворта у получавших 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день респондеров в ходьбе на время в течение двойного слепого периода составило 0,15 единиц по сравнению с 0,07 единиц для группы плацебо (р=0,003) от исходного балла 0,91 по 0-4 шкале (т.е. обеспечивая максимальное возможное среднее улучшение 0,91). Так как бал усреднен более чем для 6 групп мышц, данное изменение среднего балла может быть вызвано множеством различных комбинаций изменений в индивидуальных группах мышц (например, изменение оценки на два уровня для одной мышцы у 50% пациентов в группе или изменение одной оценки для двух мышц у 50% пациентов в группе оба дали бы 0,167 изменения общего среднего балла для группы). В группе получавших 4-аминопиридин-§К нереспондеров в ходьбе на время (среднее сокращение 0,16 единиц) мышечная спастичность также была значительно уменьшена по сравнению с группой плацебо (р=0,009), что указывает на то, что улучшения в скорости ходьбы и мышечной спастичности, отмечаемые при приеме 4-аминопиридина-8К, являются в некоторой степени независимыми. Это также указывало на то, что прием 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день может оказывать благоприятный эффект у пациентов, которые не ощущают стойкого повышения скорости ходьбы при терапии.

Свидетельство улучшений в других областях симптоматологии рассеянного склероза согласуется с предполагаемым механизмом действия в том смысле, что очаги рассеянного склероза могут возникать в различных частях центральной нервной системы, которые связаны с различными аспектами инвалидности. Таким образом, независимые эффекты, влияющие на мышечную спастичность, силу мышц и способность ходить, не являются неожиданными и могут вносить свой вклад в общее впечатление пациента от благоприятного действия. Исследования были разработаны с целью направления на изменения способности передвигаться, при этом в исследования специально набирали пациентов с исходными нарушениями в соответствующей области.

3.3. Сравнение результатов субпопуляций.

Для оценки соответствия процентных уровней ответов в ходьбе на время в рамках выбранных субпопуляций проводили большое количество анализов в подгруппах. Они включали пол, расу, возраст, индекс массы тела, тип диагноза рассеянного склероза, продолжительность болезни, балл ΕΌδδ, исходный уровень скорости ходьбы, исходный балл ЬЕММТ, исходный балл по шкале Ашворта, исходный балл М§^§-12, исходный балл 8ΟΙ, уровень почечной недостаточности, использование иммуномодуляторов. Не было выявлено никаких признаков, что какой-либо протестированный фактор влиял на ответ при терапии. В частности важно отметить, что отсутствовал какой-либо признак зависимости ответа на исходный уровень скорости ходьбы.

Одновременное применение иммуномодуляторов.

Относительно одновременного применения иммуномодулирующих средств при влиянии использования иммуномодуляторов на терапию наблюдали р-значение <0,10, что указывает на то, что уровни респондеров в ходьбе на время при плацебо в сравнении с дозой 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день отличались у пациентов, применяющих иммуномодулирующие средства и не применяющих их. Проценты респондеров в ходьбе на время для пациентов, получавших плацебо, составили 6,1% и 14,9% для пациентов, применяющих иммуномодулирующие средства, и пациентов, не применяющих их, соответственно. Проценты респондеров в ходьбе на время для респондеров, получавших 10 мг 4-аминопиридинаЪлД составили 36,0% и 39,8% для пациентов, применяющих иммуномодулирующие средства, и пациентов, не применяющих их, соответственно. Основным фактором, повлиявшим на различие между данными подгруппами, таким образом, кажется то, что у получавших плацебо пациентов, не использующих иммуномодуляторы, наблюдали почти в два раза более высокую вероятность стойкого повышения скорости ходьбы, чем у получавших плацебо пациентов, которые использовали иммуномодуляторы (т.е. 14,9% против 6,1%). Это наблюдение, вероятно, связано с наблюдаемым различием в частоте ответов при приеме плацебо между возвратно-ремиттирующим и прогрессирующим типами течения заболевания. Поскольку иммуномодуляторы прежде всего одобрены для применения в популяции с возвратноремиттирующим типом и использовались с большей частотой в данной субпопуляции (приблизительно 90% против 58% для не возвратно-ремиттирующих групп), более низкая частота ответа на плацебо у пациентов с возвратно-ремиттирующим типом, по-видимому, прежде всего ответственна за очевидную

- 30 022755 связь с применением иммуномодулирующих средств. У пациентов не с возвратно-ремиттирующей формой рассеянного склероза в данных исследованиях процент ответа в ходьбе на время при приеме плацебо составлял 13,4% против 10,4% для пациентов, применявших иммуномодулирующие средства, и пациентов, не применявших их, соответственно.

4. Анализ клинической информации, относящейся к вариантам осуществления дозировки

Отношение между уровнем дозы и эффективностью.

В исследованиях М8-Р201 и М8-Р202 тестировали различные уровни доз 4-аминопиридина-8К. Исследование М8-Р201 не выявило какого-либо дополнительного снижения скорости ходьбы при дозах более 20 мг два раза в день. В исследовании М8-Р202 тестировали дозы 10, 15 и 20 мг два раза в день. Небольшие различия между каждым уровнем дозы 4-аминопиридин-8К отмечали в среднем процентном повышении скорости ходьбы (7,5% при 10 мг два раза в день, 9,7% при 15 мг два раза в день и 6,9% при 20 мг два раза в день), а также в проценте пациентов, которые удовлетворяли заданному критерию ответа среднего изменения скорости ходьбы относительно базового уровня по меньшей мере на 20% (23,5% при 10 мг два раза в день, 26,0% при 15 мг два раза в день и 15,8% при 20 мг два раза в день), неожиданно указанные различия не приобрели достаточной значимости, чтобы поддержать выбор более высоких уровней дозы, в особенности потому, что наблюдался четкий дозозависимый рост частоты и тяжести ассоциированных нежелательных побочных эффектов. Таким образом, доза 10 мг два раза в день была выбрана в качестве дозы в исследованиях М8-Р204 и М8-Р203.

Отношение эффективности и времени, прошедшего после введения последней дозы.

При анализе двойных слепых средних процентных изменений скорости ходьбы относительно базового уровня по отношению к времени, прошедшему от введения последней дозы, обнаружили лишь малое снижение среднего увеличения скорости ходьбы у респондеров в ходьбе на время в течение последнего часа 12-часового интервала между введением доз, по сравнению с увеличением, отмеченным при формальной оценке эффективности, на основании двойного слепого среднего процентного изменения (среднее повышение 24%, интервал между дозами 9-10 ч - 25%, интервал между дозами 10-11 ч -24% и интервал между дозами 11-12 ч - 20%). Вместе с доступными фармакокинетическими данными это подтверждает режим дозирования два раза в день в сочетании с применением лекарственной формы 4аминопиридина с замедленным высвобождением (см., например, АМРУКА™, Асотба ΤΙιοπιροιιΙίοδ, На\\11югпе, ΝΥ).

Отношение между эффективностью и концентрацией 4-аминопиридина в плазме.

Терапия с применением 4-аминопиридина-8К привела к существенному увеличению вероятности ответа в ходьбе на время. Исследование М8-Р202, которое включало дозы 10, 15 и 20 мг Ъл.б 4аминопиридина-8К, с контролем плацебо в параллельных группах, показало, что все три дозы вызывали ответ в ходьбе на время с частотой 35,3, 36,0 и 36,8% соответственно. Теоретическое моделирование, основанное на анализе РК/ΡΌ популяции, показало, что вероятность того, что пациент станет респондером в ходьбе на время, могла быть описана логистической регрессионной моделью. Модель в свою очередь позволила предположить, что типичные концентрации в плазме, создаваемые указанными дозами (10, 15, 20 мг два раза в день), могли бы давать на 25,5, 35,3 и 42,6% больше респондеров в ходьбе на время, чем плацебо соответственно. Неожиданно ожидаемые параметры данной теоретической модели не были подтверждены клиническими данными эффективности в исследовании М8-Р202; это, как теперь стало известно, было опосредовано комбинацией низкой переносимости и недостаточной дополнительной эффективности при дозах выше 10 мг два раза в день.

Впрочем, и модель РК/ΡΌ популяции, и доступные данные клинических исследований показали, что доза 10 мг два раза в день 4-аминопиридин-8К соответствовала оптимальному режиму дозирования для сохранения благоприятных эффектов. Исследование М8-Р204 включало заключительное посещение с терапией (посещение 7), специально для оценки сохранения эффекта к концу 12-часового цикла дозирования. Данные из указанного исследования и из интегрированного анализа данных РК/РЭ в исследованиях показали, что концентрация в плазме, ниже которой эффективность начинает значительно снижаться, находится в диапазоне 15-20 нг/мл, причем это средний диапазон концентрации в конце 12часового цикла дозирования при дозе 10 мг два раза в день. Данные, полученные при посещении 7 в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов, показали снижение повышения скорости ходьбы относительно базового уровня приблизительно с 25% в течение периода терапии в целом, до приблизительно 20% в 12-часовом периоде после введения доз.

5. Сохранение эффективности и эффекты отсутствия привыкания

5.1. Сохранение эффекта в контролируемых клинических исследованиях.

Протокол М8-Р203 направлен непосредственно на проблему сохранения эффекта в течение длительных периодов лечения. Сохранение эффекта оценивали посредством тестирования, регистрировалось ли у субъектов, которые все еще отвечали на 4-аминопиридин, существенное повышение скорости ходьбы по сравнению с субъектами плацебо при последнем наблюдаемом двойном слепом посещении (т.е. изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в двойной слепой конечной точке). Результаты в группе респондеров в ходьбе на время представлены на фиг. 21 для исследований М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204 и обобщают сохранение эффекта у пациентов ΙΤΤ в группах плацебо и 10 мг 4- 31 022755 аминопиридин-δΚ два раза в день.

Представленные данные продемонстрировали, что эффект после приема 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день сохранялся в течение периода лечения. У подвергнутых терапии респондеров в ходьбе на время сохранялась приблизительно в 4-5 раз более высокое улучшение в среднем по сравнению с нереспондерами в ходьбе на время и пациентами, получавшими плацебо. Указанные изменения имели высокую значимость (р<0,001 в сравнении с плацебо для исследований Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 и р=0,001 в сравнении с плацебо для Μδ-Ρ202).

Не было выявлено каких-либо различий между подвергнутыми терапии нереспондерами в ходьбе на время и группой плацебо. Эффект терапии быстро исчезал после прекращения терапии, что является еще одним признаком как эффективности 4-аминопиридина, так и отсутствия привыкания к эффекту.

5.2. Ответ на прекращение терапии.

Из трех исследований (Μδ-Ρ203, Μδ-Ρ202, Μδ-Ρ204), Μδ-Ρ203 имело наиболее продолжительный период наблюдения после завершения фазы двойной слепой терапии с последующими контрольными посещениями через две и четыре недели после прекращения терапии. Другие исследования имели одно контрольное посещение через две недели после завершения фазы двойной слепой терапии. Среднее повышение скорости ходьбы у респондеров 4-аминопиридина-8К в ходьбе на время при последнем двойном слепом посещении составило приблизительно 25% по сравнению со значительно меньшим повышением, приблизительно 5% у нереспондеров 4-аминопиридина-8К в ходьбе на время и в группе плацебо. В двух указанных контрольных посещениях средние значения в группе сходились обратно к исходным значениям (см. фиг. 22). Не было выявлено каких-либо существенных различий между респондерами 4аминопиридина-δΚ в ходьбе на время и группой плацебо в любом из последующих контрольных посещений; также не наблюдали никаких признаков эффекта отмены, переноса или возобновления симптомов. Наблюдали небольшое, но существенное уменьшение скорости ходьбы у нереспондеров 4аминопиридина-δΚ в ходьбе на время по сравнению с группой, получавшей плацебо, при первом контрольном посещении через две недели (р=0,017), однако при втором контрольном посещении через 4 недели никаких различий с группой плацебо не было (р=0,475).

5.3. Подтверждение длительной эффективности в долгосрочном расширеннном открытом исследовании.

В общей сложности 756 пациентов участвовали в трех долгосрочных расширеннных открытых исследованиях (Μδ-Ρ202ΕΧΤ, Μδ-Ρ203ΕΧΤ и Μδ-Ρ204ΕΧΤ), из которых 546 пациентов завершили участие в исследовании через 6 месяцев, а 372 завершили участие в исследовании более чем через 1 год по данным клинических контрольных отчетов на 31 июля 2008 г. В наиболее продолжительном открытом исследовании, Μδ-Ρ202ΕΧΤ, из 177 принимавших участие пациентов приблизительно 98 (55%) продолжили свое участие в исследовании, большинство из них завершили участие в исследовании более чем через 4 года открытого лечения.

В комбинированном отчете Μδ-Ρ-ΕΧΤ использовали промежуточные данные из трех продолжающихся расширенных исследований (Μδ-Ρ202ΕΧΤ, Μδ-Ρ203ΕΧΤ и Μδ-Ρ204ΕΧΤ) с промежуточной клинической датой окончания исследования 31 июля 2008 г. для изучения долговременной эффективности 4-аминопиридина^К. Цели, методология и ключевые результаты представлены ниже.

Цели Μδ-Ρ-ΕΧΤ: цель Μδ-Ρ-ΕΧΤ состояла в проведении анализа доступных данных по эффективности из продолжающегося открытого расширенного исследования безопасности 4-аминопиридина^К у пациентов с диагнозом рассеянного склероза с промежуточной клинической датой окончания исследования 31 июля 2008 г.

Методология Μδ-Ρ-ΕΧΤ: основная цель данного отчета заключалась в проверке доступных данных по скорости ходьбы, а также оценки общего состояния субъекта и клинического врача для подтверждения сохранения ответа на терапии в течение продолжающейся расширенной фазы исследования без плацебо.

Анализ эффективности был основан на всех субъектах, подвергнутых по меньшей мере одному измерению эффективности в исследованиях Μδ-Ρ202ΕΧΤ, Μδ-Ρ203ΕΧΤ или Μδ-Ρ204ΕΧΤ, а также участвовавших в исходном двойном слепом исследовании. С этой целью эквивалентный критерий ответа в ходьбе на время использовали в качестве данных расширенного исследования, в котором респондер расширенного исследования в ходьбе на время был определен как пациент, демонстрирующий скорости ходьбы в большинстве посещений с терапией в расширенном исследовании, более высокие по сравнению с наибольшей скоростью ходьбы без терапии, зарегистрированной до открытой терапии (т.е. скорости, измеренные во всех посещениях без терапии после контрольного посещения в исходном двойном слепом исследовании до контрольного посещения в расширенном исследовании). Были представлены данные пары исследований (исходного и расширенного).

Для охарактеризована эффективности 4-аминопиридина^К при лечении пациентов с РС проводили следующие исследования.

1. Частота расширенного ответа в ходьбе на время в каждом из расширенных исследований.

2. Средние процентные изменения скорости ходьбы относительно двойного слепого базового уровня были представлены в графической форме группами анализа респондеров для посещений в исходном и

- 32 022755 расширенном исследованиях.

3. Для подтверждения клинической значимости критерия расширенного ответа в ходьбе на время средние баллы по шкале самооценки общего состояния субъекта (801) и средние баллы по шкале клинической оценки общего состояния (С01) в течение каждого расширенного исследования сравнивали у расширенных респондеров и нереспондеров в ходьбе на время.

4. Кроме того, проценты расширенных ответов в ходьбе на время в течение последующих лет после терапии были приведены в таблицах частоты.

5. Изменения баллов по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΕΌδδ) сравнивали в группах расширенных респондеров в ходьбе на время, по возможности (оценивали только каждые 2 года).

6. В анализе использовали уровень значимости 0,05. Коррекцию для многократных тестов не использовали.

Наблюдения и данные после продолжительного/длительного/долговременного введения 4аминопиридина.

В исследовании М8-Р202ЕХТ в общей сложности 21 (15,7%) пациента классифицировали как расширенные респондеры в ходьбе на время. В общей сложности 11 (25,6%) получавших 4-аминопиридин расширенных респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (М8-Р202) продолжили участие в исследованиях в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; кроме того, 6 (9,5%) получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время из исходного исследования стали расширенными респондерами в ходьбе на время и 4 (14,3%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были отнесены к расширенным респондерам в ходьбе на время. Процент получавших 4-аминопиридин двойных слепых респондеров, которые продолжили участие в исследовании в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время в год 1, 2 и 3 расширенного исследования, составил 25,6, 23,1 и 22,2% соответственно. Для двойных слепых нереспондеров в ходьбе на время указанные значения составили 11,1, 5,2 и 6,1% соответственно, а для получавших плацебо пациентов - 17,9, 4,6 и 5,3% соответственно.

В исследовании М8-Р203ЕХТ в общей сложности 66 (24,9%) пациентов классифицировали как расширенных респондеров в ходьбе на время. Из них 29 (41,4%) получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (М8-Р203) продолжили участие в исследовании в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; кроме того, 25 (19,7%) получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время из исходного исследования стали расширенными респондерами в ходьбе на время, а 12 (17,7%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были отнесены к расширенным респондерам в ходьбе на время. Частота ответа в год 1 и год 2 у получавших 4аминопиридин двойных слепых респондеров составила 42,9 и 36,1% соответственно; у получавших 4аминопиридин двойных слепых нереспондеров - 19,7 и 17,5% соответственно; и 16,2 и 20,8%, соответственно, у пациентов, получавших плацебо.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня у расширенных респондеров в ходьбе на время и расширенных нереспондеров в ходьбе на время показано для всех пациентов в М8-Р203ЕХТ на фиг. 23, ниже, в течение исходного исследования и первых двух лет расширенного исследования. Средняя скорость ходьбы в течение первого года расширенного исследования в группе расширенных респондеров в ходьбе на время при каждом посещении в расширенном исследовании была немного более чем на 30% выше, чем базовая скорость ходьбы в двойном слепом исследовании. Расширенные нереспондеры в ходьбе на время показали небольшое изменение средней скорости ходьбы относительно базового уровня в течение года, за исключением небольшого увеличения по прошествии первых двух недель приема лекарственного средства (посещение 1), и небольшого уменьшения в среднем за один год (посещение 4). Некоторое снижение среднего повышения скорости ходьбы было отмечено для респондеров в ходьбе на время в течение второго года расширенного исследования, при этом улучшение по сравнению с исходным базовым уровнем составило лишь немногим более 20% при посещении 6. Также к концу второго года у нереспондеров в ходьбе на время скорость ходьбы уменьшилась приблизительно на 8% по сравнению с исходным базовым уровнем двойного слепого исследования, что соответствовало или было основано на прогрессирующей форме основного заболевания.

В исследовании М8-Р204ЕХТ в общей сложности 105 (49,3%) пациентов были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время. Из них 35 (71,4%) получавших 4-амино пиридин респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (М8-Р204) продолжили участие в исследовании в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; кроме того, 18 (30,0%) получавших 4аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время из исходного исследования стали расширенными респондерами в ходьбе на время, а 52 (50,0%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были отнесены к расширенным респондерам в ходьбе на время. Улучшения у пациентов, оцениваемых в исследовании, наблюдали в течение периодов терапии продолжительностью по меньшей мере или превышающей 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев; или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет.

В момент промежуточного прекращения сбора данных (31 июля 2008 г.) данные от большинства пациентов в исследовании М8-Р204ЕХТ ограничивали первыми тремя посещениями с терапией в тече- 33 022755 ние первых шести месяцев.

В ходе расширенных исследований были сделаны следующие наблюдения.

1. Ответ на терапию в подгруппе респондеров в ходьбе на время, наблюдаемый в двойных слепых исследованиях, был повторен в расширенных исследованиях, как у пациентов, ранее получавших 4аминопиридин, так и у пациентов, которые получали плацебо в двойном слепом исследовании и, таким образом, в расширенном исследовании первоначально получали 4-аминопиридин.

2. Среднее повышение скорости ходьбы у указанных расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с исходным базовым уровнем в двойном слепом исследовании находилось в диапазоне 30%.

3. Пациенты, охарактеризованные как расширенные респондеры в ходьбе на время, имели приблизительно в два раза больше шансов являться респондерами в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, чем нереспондерами в ходьбе на время.

4. Расширенные респондеры в ходьбе на время также показали значительно более высокие средние баллы самооценки общего состояния субъекта и клинической оценки общего состояния, чем расширенные нереспондеры в ходьбе на время.

Таким образом, стойкое повышение скорости ходьбы отмечали у значительного процента пациентов в долгосрочных расширенных исследованиях МЗ-Р202ЕХТ, МЗ-Р203ЕХТ и МЗ-Р204ЕХТ, используя первичную конечную точку, ответ в ходьбе на время (который использовали в двойных слепых, контролируемых исходных исследованиях МЗ-Р202, МЗ-Р203 и МЗ-Р204). Данное улучшение у расширенных респондеров в ходьбе на время было стабильным в течение по меньшей мере первых двух лет лечения. Улучшение(я) у пациентов, рассматриваемых в данных исследованиях, наблюдалось/наблюдались в течение периодов терапии продолжительностью по меньшей мере или превышающей 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет.

В качестве группы те пациенты, которых идентифицировали как расширенных респондеров в ходьбе на время, показали стойкое среднее повышение скорости ходьбы, превышающее базовый уровень исходного двойного слепого исследования приблизительно на 30% по меньшей мере в течение всего первого года лечения без плацебо. Расширенные респондеры в ходьбе на время также показали значительно более высокие средние баллы самооценки общего состояния субъекта и клинической оценки общего состояния, чем расширенные нереспондеры в ходьбе на время.

В целом, улучшение(я) у пациентов, рассматриваемых в данных исследованиях, наблюдалось/наблюдались в течение периодов терапии продолжительностью по меньшей мере или превышающей 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. Представленные данные дополнительно подтверждают клиническую значимость улучшений, наблюдаемых в двойных слепых исследованиях и расширенных исследованиях, а также достоверность критерия, использумого для идентификации данного амбулаторного ответа на лечение.

Лекарственные формы и введение.

Наиболее предпочтительно приготавливать парентеральные композиции в виде единичных лекарственных форм для легкости введения и однородности дозировки. Единичная лекарственная форма, применяемая в настоящей заявке, относится к физически дискретным единицам, которые подходят в качестве стандартных единиц дозы субъектам, проходящим лечение; каждая единица содержит заданное количество терапевтического соединения, рассчитанное таким образом, чтобы производить желаемый терапевтический эффект, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Требования к единичным лекарственным формам изобретения продиктованы и непосредственно зависят от (а) уникальных свойств терапевтического соединения и специфического терапевтического эффекта, который требуется достичь, и (Ь) ограничений, известных из уровня техники, при составлении такого терапевтического соединении для лечения выбранного состояния у пациента. Единичные лекарственные формы могут представлять собой таблетки или блистерные упаковки. В некоторых протоколах введения пациент может применять больше одной единичной лекарственной формы одновременно, например принимать две таблетки, содержащиеся в отдельных блистерах блистерной упаковки.

Активные соединения вводят в терапевтически эффективной дозировке, достаточной для лечения состояния, связанного с состоянием у пациента. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество уменьшает количество симптомов у пациента по меньшей мере на приблизительно 10%, более предпочтительно, на 20%, более предпочтительно по меньшей мере на приблизительно 40%, еще более предпочтительно по меньшей мере на приблизительно 60% и наиболее предпочтительно по меньшей мере на приблизительно 80% по сравнению с не проходившими лечение субъектами. Например, эффективность соединения может быть оценена в модельной системе на животных, которая может прогнозировать эффективность лечения заболевания у людей, такой как модельные системы, описанные в настоящей заявке.

Фактическая величина дозы соединения настоящего описания или композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению, вводимых субъекту, может определяться физическими и физиологи- 34 022755 ческими факторами, такими как возраст, пол, масса тела, тяжесть состояния, тип заболевания, подвергаемого лечению, предыдущие или параллельные терапевтические вмешательства, болезнь неясного происхождения у субъекта, а также зависеть от пути введения. Перечисленные факторы с легкостью могут быть определены квалифицированным специалистом. Практикующий медицинский работник, ответственный за введение, обычно определяет концентрацию активного компонента (компонентов) в композиции и подбирает дозу (дозы) для каждого отдельного субъекта. Дозировка может быть подобрана отдельным практикующим медицинским работником в случае какого-либо осложнения или изменения состояния у пациента.

Комбинированная терапия.

Композиции и способы настоящего изобретения могут применяться во множестве терапевтических или профилактических областей. Для повышения эффективности лечения с применением композиций настоящего изобретения, например аминопиридинов, или усиления защитного действия другой терапии (дополнительной терапии) может быть желательно объединить данные композиции и способы с другими средствами и способами, эффективными при лечении, уменьшении интенсивности проявления или предотвращения заболеваний и патологических состояний, например когнитивных дисфункций или нарушений, амбулаторных дефицитов и т.п.

Могут применяться различные комбинации, например аминопиридин или его производное или аналог являются А, а дополнительной терапией (например, ингибиторами холинэстеразы, такими как донепезил, ривастигмин и галантамин, и иммуномодуляторами, такими как интерферон и т.п.) является В, при этом неограничивающие циклы комбинаций включают

А/В/А В/А/В В/В/А А/А/В А/В/В В/А/А А/В/В/В В/А/В/В В/В/В/А В/В/А/В А/А/В/В А/В/А/В А/В/В/А В/В/А/А в/а/в/а в/а/а/в а/а/а/в

В/А/А/А Α/В/А/А Α/Α/Β/Α

Введение композиции настоящего изобретения субъекту производят согласно стандартным протоколам введения, описанным в настоящей заявке, и при введении специфической дополнительной терапии также руководствуются стандартными протоколами, учитывая токсичность, если таковая присутствует, лечения. Ожидается, что циклы лечения могут быть повторены при необходимости. Также предполагается, что различные стандартные терапии могут применяться в комбинации с описанными терапиями.

Наборы.

Наборы составляют примерный вариант осуществления изобретения. Набор может включать внешнюю упаковку или контейнер, выполненные с возможностью размещения в них одного или нескольких внутренних упаковок/контейнеров, принадлежностей и/или инструкций. Принадлежность в соответствии с изобретением может включать предмет(ы) для введения лекарственного средства, такие как пластырь, ингаляционное устройство, емкость для жидкости, шприц или игла. Композиция изобретения может содержаться в упаковке изобретения. Упаковка изобретения может содержать достаточное количество композиции изобретения, которая может применяться в виде множества доз или может находиться в виде единичных или разовых лекарственных форм. Наборы изобретения обычно включают инструкции по введению в соответствии с настоящим изобретением. Любой способ введения, описанный или поддерживаемый в настоящей заявке, может составлять некоторую часть инструкций. В одном варианте осуществления инструкции указывают, что композицию изобретения нужно принимать два раза в день. В одном варианте осуществления инструкции указывают, что композицию изобретения нужно принимать один раз в день. Инструкции могут быть прикреплены на любом контейнере/упаковке изобретения. В одном варианте осуществления инструкции указывают, что композицию изобретения нужно принимать, например, чтобы достичь терапевтического диапазона в соответствии с настоящим изобретением. Инструкции могут быть прикреплены на любом контейнере/упаковке изобретения или могут быть отдельным листом, находящимся в контейнере или упаковке изобретения. В альтернативном варианте инструкции могут быть напечатаны, отштампованы на поверхности или сформированы в виде элемента упаковки изобретения. В альтернативном варианте инструкции могут быть напечатаны на материале, который помещен в упаковку или контейнер набора изобретения. В одном варианте осуществления набор представляет собой внешнюю упаковку, такую как коробка, внутрь которой помещен контейнер, такой как флакон; инструкции имеются на и/или в наружной упаковке и/или флаконе. Набор также может включать инструкции по применению компонентов набора, а также по применению любого другого реактива, не включенного в набор. Предполагается, что такие реактивы являются вариантами осуществления наборов изобретения. Такие наборы, впрочем, не ограничиваются конкретными предметами, идентифицированными выше, и могут включать любой реактив, используемый непосредственно или опосредованно в требуемом лечении.

Альтернативные варианты осуществления.

Варианты осуществления настоящего изобретения включают способы эффективного лечения рассеянного склероза у пациента в течение продолжительного, или расширенного, или длительного, или долговременного периода; также они упоминаются как длительное лечение или способ длительного

- 35 022755 лечения; также они упоминаются как продолжительное лечение или способ продолжительного лечения. Другой вариант осуществления настоящего изобретения направлен на способы сохранения ослабления симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту после предыдущего достижения ослабления симптома рассеянного склероза у указанного пациента в течение непрерывного, или продолжающегося, или предшествующего введения 4-аминопиридина. Любой из таких способов включает введение терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту в течение расширенного, длительного, продолжительного или увеличенного периода (используемые в настоящей заявке расширенный, продолжительный, длительный, увеличенный и тому подобное являются синонимами, если из контекста прямо не следует иное). В некоторых вариантах осуществления расширенный, продолжительный, длительный или увеличенный период имеет продолжительность по меньшей мере или превышающую 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. В некоторых вариантах осуществления расширенный, продолжительный, длительный или увеличенный период продолжается в течение всей жизни пациента. Указанные способы могут также включать введение 4-аминопиридина при или до терапевтического уровня (например, С_тт88 или средней С_тш8) или диапазона (например, диапазона С_тт88 или референсного диапазона средних значений С_ттж) в соответствии с настоящим изобретением.

В другом варианте осуществления изобретение включает способ определения терапевтической дозы аминопиридина, предпочтительно 4-аминопиридина, где определяемым количеством является количество, которое обеспечивает достижение С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл или среднее С_т||к, в диапазоне 20 нг/мл у пациента. В другом варианте осуществления изобретение включает определение терапевтической дозы аминопиридина, предпочтительно 4-аминопиридина, где определяемым количеством является количество, которое обеспечивает достижение С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл или среднее С_тт88 в диапазоне 20 нг/мл у референсной популяции. В некоторых вариантах осуществления С_|1|||к, в диапазоне 20 нг/мл обеспечивает достижение С_тш88 приблизительно 20 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления С_тш88приблизительно 20 нг/мл включает низкое предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления среднее значение С_т1ГВ8 приблизительно 20 нг/мл включает среднее нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и среднее верхнее предельное значение 20, 21. 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. Другой вариант осуществления является способом, в котором определяемое количество 4-аминопиридина обеспечивает достижение среднего значения С_ттж, равного по меньшей мере или превышающего: 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл. Определяемое количество может быть предназначено для одного пациента или для популяции пациентов. В другом варианте осуществления имеется способ введения пациенту количества, полученного в способе определения терапевтической дозы аминопиридина по изобретению.

В одном варианте осуществления некоторое количество лекарственного средства дается отдельному пациенту (например, количество дозы), где указанное количество дозы соответствует дозе, которая при введении в стандартной или референсной популяции обеспечивает достижение среднего значения С_тш8, равного по меньшей мере или превышающего 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл.

В некоторых вариантах осуществления эффективная терапия рассеянного склероза повышает или улучшает способность к передвижению. В некоторых вариантах осуществления эффективная терапия рассеянного склероза повышает или увеличивает скорость ходьбы. В некоторых вариантах осуществления эффективная терапия рассеянного склероза уменьшает проявление или облегчает симптом рассеянного склероза, выбранный из одного или более следующих показателей: самооценка общего состояния пациента, клиническая оценка общего состояния, тонус мышц нижних конечностей, сила мышц нижних конечностей, балл по шкале Ашворта и мышечная спастичность. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить два раза в день. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить один раз в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективным количеством 4-аминопиридина является 10 мг в композиции с замедленным высвобождением, которую вводят два раза в день. Указанные способы также могут включать введение 4-аминопиридина при терапевтическом уровне или до терапевтического уровня (такого как С_тш88) или диапазона (такого как диапазон С_тш88) в соответствии с настоящим изобретением.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения направлен на способы сохранения улучшенной способности к ходьбе или способности к передвижению у пациента с рассеянным склерозом, включающие введение терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту в течение длительного периода времени. В некоторых вариантах осуществления расширенный, продолжительный, длительный или увеличенный период равен по меньшей мере или превышает: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. В некоторых вариантах осуществления расширенный, продолжительный, длительный или увеличенный период продолжается в течение всей жизни пациента. В некоторых вариантах осуществления улучшенная способность к передвижению является увеличенной или повы- 36 022755 шенной скоростью ходьбы. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективным количеством 4-аминопиридина является 10 мг в композиции с замедленным высвобождением, которую вводят два раза в день. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить два раза в день. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить один раз в день. Указанные способы также могут включать введение 4аминопиридина при терапевтическом уровне или до терапевтического уровня (такого как С_тш88) или диапазона (такого как диапазон С_тш88) в соответствии с настоящим изобретением.

Другие варианты осуществления настоящего изобретения направлены на способы достижения длительного или относительно длительного (например, по сравнению с контрольным или стандартным количеством или значением известно, что у пациентов с таким заболеванием, как рассеянный склероз, часто наблюдается нарастающее ухудшение состояния, чтобы увеличение или относительное увеличение можно было надлежащим образом оценивать относительно снижения функции, соответствующего характерному развитию патологии рассеянного склероза) повышения скорости ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, включающие продолжительное введение терапевтически эффективного количества 4аминопиридина указанному пациенту в течение длительного периода времени. В некоторых вариантах осуществления длительное улучшение происходит в течение длительного периода, например равного по меньшей мере или превышающего: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. В некоторых вариантах осуществления длительный период продолжается в течение всей жизни пациента. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективным количеством 4-аминопиридина является 10 мг в композиции с замедленным высвобождением. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить два раза в день. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить один раз в день. Указанные способы также могут включать введение 4-аминопиридина при терапевтическом уровне или до терапевтического уровня (такого как С_|1|||к,) или диапазона (такого как диапазон С_тш88) в соответствии с настоящим изобретением.

В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина является стабильным, или постоянным, или единообразным, или неизменяющимся, или неколеблющимся, или неизменным режимом дозирования, который включает терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина, которое вводят по единообразной схеме (например, количество миллиграммов или конретное количество миллиграммов в определенное время дня, например, более высокая доза может быть введена утром, а более низкая доза - вечером или наоборот) и в единообразном режиме (например, два раза в день), где не происходит изменений количества дозы или режима в течение стабильного, или постоянного, или единообразного, или неизменяющегося, или неколеблющегося, или неизменного режима дозирования. Использумые в настоящей заявке термины стабильный, или постоянный, или единообразный, или неизменяющийся, или неколеблющийся, или неизменный являются синонимами, если из контекста прямо не следует иное. Необходимо понимать, что, например, случайное несоблюдение или отклонение пациента от в ином случае стабильного, постоянного, единообразного, неизменяющегося, неколеблющегося или неизменного курса терапии находится в рамках определения такой терапии. В некоторых вариантах осуществления в течение полного стабильного режима дозирования не происходит титрования (увеличения или уменьшения) дозы (например, количества миллиграммов) 4аминопиридина. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективным количеством 4аминопиридина является 10 мг в композиции с замедленным высвобождением. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить два раза в день. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить один раз в день. Указанные способы могут также включать введение 4-аминопиридина при терапевтическом уровне или до терапевтического уровня (такого как С_тт88) или диапазона (такого как диапазон С_тш88) в соответствии с настоящим изобретением.

Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения проявления симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается минимальная концентрация в стационарном состоянии (С_т1ГВ8) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл. Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения проявления симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается средняя минимальная концентрация в стационарном состоянии (средняя С_тт88) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается средняя С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл достигает С_|1|||к, приблизительно 20 нг/мл. В других вариантах осуществления достигается С_тш88 приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления С_т1ГВ8 в диапазоне 20 нг/мл включает нижное предельное значение 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариан- 37 022755 тах осуществления получают С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_тш88, равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В других вариантах осуществления получают среднюю С_т||к, приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления средняя С_т||к, в диапазоне 20 нг/мл включает среднее нижнее предельное значение 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и среднее верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_ттж в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т1ГВ8 в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_тш88, равную по меньшей мере или превышающую: 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл.

Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается минимальная концентрация в стационарном состоянии (С_т1ГВ8) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается С_т1ГВ8 в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не является 10 мг два раза в день. Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается средняя минимальная концентрация в стационарном состоянии (средняя С_тш8) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается средняя Ст^₈ в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не является 10 мг два раза в день. В некоторых вариантах осуществления С_ттж в диапазоне 20 нг/мл достигает С_ттжприблизительно 20 нг/мл. В других вариантах осуществления получают С_т1ГВ8 приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления С_тш88 в диапазоне 20 нг/мл включает нижнее предельное значение 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||К:, в диапазоне по меньшей мере от 12 до нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||К:, в диапазоне по меньшей мере от 13 до нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||К:, в диапазоне по меньшей мере от 15 до нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В других вариантах осуществления получают среднюю С_ттж приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления средняя С_т1ГВ8 в диапазоне 20 нг/мл включает среднее нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и среднее верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_тш8 в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т1ГВ8 в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т||к,, равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В указанных выше некоторых вариантах осуществления количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не являются 10 мг два раза в день.

Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается минимальная концентрация в стационарном состоянии (С_т1ГВ8) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается Ст™₈ в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не являются 17,5 мг два раза в день. Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается средняя минимальная концентрация в стационарном состоянии (средняя С_тш8) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается средняя С_т||К:, в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4-аминопиридина, который вводят указанному пациенту, не являются 17,5 мг два раза в день. В некоторых вариантах осуществления С_ттж в диапазоне 20 нг/мл достигает С_т1п85 приблизительно 20 нг/мл. В других вариантах осуществления получают С_т||к, приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления С_т||К:, в диапазоне 20 нг/мл включает нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||К:, в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||К:,, равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В других вариантах осуществления получают среднюю С_тш88 приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления

- 38 022755 средняя С_т||к, в диапазоне 20 нг/мл включает среднее нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и среднее верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_тш8 в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В указанных выше некоторых вариантах осуществления количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимые указанному пациенту, не являются 17,5 мг два раза в день.

Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается минимальная концентрация в стационарном состоянии (С_т|м,,) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4-аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не являются 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17 или 17,5 мг два раза в день. Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы лечения или уменьшения интенсивности симптома рассеянного склероза у пациента, включающие введение количества или диапазона 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается средняя минимальная концентрация в стационарном состоянии (средняя С_т||к,) в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл или достигается средняя в диапазоне 20 нг/мл, где количество или диапазон 4аминопиридина, вводимого указанному пациенту, не является 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17 или 17,5 мг два раза в день. В некоторых вариантах осуществления С_т11К5 в диапазоне 20 нг/мл достигает С_т||к, приблизительно 20 нг/мл. В других вариантах осуществления получают приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления С_т||к, в диапазоне 20 нг/мл включает нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т|м,, в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т||к, в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают С_т|м,,, равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В других вариантах осуществления получают среднюю С_т||к, приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления средняя С,™, в диапазоне 20 нг/мл включает среднее нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и среднее верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т11К5 в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С,^, в диапазоне по меньшей мере от 15 до 25 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления получают среднюю С_т11К8, равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл. В указанных выше некоторых вариантах осуществления количество или диапазон 4-аминопиридина, которые вводят указанному пациенту, не являются 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5,

13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17 или 17,5 мг два раза в день.

В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина вводят один раз в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина вводят два раза в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина вводят три раза в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина составляет 10 мг в композиции с замедленным высвобождением или композиции с пролонгированным действием.

В некоторых вариантах осуществления лечение является улучшением симптома рассеянного склероза, таким как увеличение или улучшение способности к передвижению. В некоторых вариантах осуществления лечение является улучшением симптома рассеянного склероза, таким как увеличение или повышение скорости ходьбы. В некоторых вариантах осуществления лечение является улучшением симптома рассеянного склероза, таким как улучшение параметра симптома рассеянного склероза, выбранного из самооценки общего состояния пациента, клинической оценки общего состояния, тонусом мышц нижних конечностей, силы мышц нижних конечностей, балла по шкале Ашворта или мышечной спастичности. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4аминопиридина вводят с получением С_тт88 или средней С_т11К8 (или ее соответствующего диапазона) в течение длительного периода, который равен по меньшей мере или превышает: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. В некоторых вариантах осуществления длительный период продолжается в течение всей жизни пациента.

Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ лечения рассеянного склероза или его симптомов, включающий введение терапевтически эффективного количества 4- 39 022755 аминопиридина указанному пациенту, в результате чего достигается средняя концентрация в плазме от приблизительно 13 до приблизительно 15 нг/мл, при этом средняя максимальная концентрация в плазме не превышает приблизительно 15 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина, вводимое указанному пациенту, не является 10 мг два раза в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина, вводимое указанному пациенту, не является 17,5 мг два раза в день. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина, вводимое указанному пациенту, не является 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17 или 17,5 мг два раза в день.

В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно (или превышать) 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно (или превышать) 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 20%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 25%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно (или превышать) 30, 31, 32, 33, 34. 35, 36, 37, 38, 39 или 40%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 40%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 45%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно (или превышать) 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 или 50%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 50%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 55%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 60%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 65%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 70%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 75%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 80% определенных вариантов осуществления, повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 85%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 90%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять по меньшей мере приблизительно 95%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлят по меньшей мере приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может быть больше чем приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может быть больше чем приблизительно 150%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может быть больше чем приблизительно 200%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может быть больше чем приблизительно 250%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может быть больше чем приблизительно 300%. В некоторых вариантах осуществления повышение скорости ходьбы может составлять от 4-10%, 4-20%, 5-20%, 6-20%, 7-20%, 8-20%, 9-20%, 10-20%, 10-30%, 10-60%, 20-30%, 20-40%, 20-50%, 20-60%, 20-100%, 30-100%, 50-100%, 30-150%, 50-150%, 100-150%, 100-200%, 50-250%, 100-250% или 100-300%.

Варианты осуществления настоящего изобретения также направлены на способы монотонного увеличения скорости ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, включающие введение терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту в течение длительного периода времени. В некоторых вариантах осуществления продолжительность длительного периода составляет по меньшей мере 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 недели; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 месяцев или 1, 2, 3, 4, 5, 6 или более 5 лет. В некоторых вариантах осуществления длительный период продолжается в течение всей жизни пациента. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективным количеством 4-аминопиридина является 10 мг в композиции с замедленным высвобождением. В некоторых вариантах осуществления композицию с замедленным высвобождением можно вводить два раза в день. Используемое в настоящей заявке монотонное увеличение скорости ходьбы является постоянным увеличением без какого-либо уменьшения скорости ходьбы относительно базового уровня (т.е. до терапии с применением 4-аминопиридина).

На фиг. 45 представлены результаты Μδνδ-12, которые получены согласно способам настоящего изобретения. На данной фигуре без фампридина указывает значения до терапии; с фампридином указывает результаты изобретения.

На фиг. 46 представлены корреляции скорости ходьбы и амбулаторного класса. Например, исследования на пациентах после инсульта показали, что их можно разделить на три широких класса по способности передвигаться на основании важных скоростей перехода, например пациенты со скоростями ходьбы ниже 1,31 футов/с могут передвигаться только в домашних условиях. Пациенты со скоростями ходь- 40 022755 бы между 1,31 и 2,62 футов/с способны ходить вне дома, но имеют только ограниченный доступ к общественным объектам вследствие ограничений максимального расстояния, которое они могут пройти, и потребности в посторонней помощи. Пациенты, которые ходят быстрее чем 2,62 футов/с, классифицируются как лица с полным доступом к общественным объектам и к большей части сфер повседневной деятельности. Данные классификации отмечены здесь горизонтальными линиями на соответствующей скорости, в футах в секунду. Линия сверху обозначает нижний предел диапазона скорости ходьбы для непораженной, здоровой популяции. В соответствии с настоящим изобретением субъект с таким заболеванием, как рассеянный склероз, способен ходить быстрее. Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением в отношении фиг. 46 каждый в состоянии перейти в категорию способности передвижения, показанную выше на фигуре. Например, лицо, ранее имевшее группу премещения на дому, может затем перейти в группу ограниченного премещения вне дома при помощи способов изобретения.

На фиг. 48 представлена предварительная статистика исследований в пациенто-годах в трех расширенных исследованиях (МЗ-Р203ЕХТ, МЗ-Р204ЕХТ, МЗ-Р205ЕХТ). На данной диаграмме показан ход расширенных исследований и количество пациенто-лет при дозе 10 мг два раза в день с прекращением в ноябре 2008 г. Общая экспозиция в течение данных исследований при дозе 10 мг два раза в день составила более 1200 пациенто-лет на ноябрь 2008 г. Представленные данные обеспечивают примерные результаты, подтвержденные в соответствии с изобретением; способы изобретения полезны и эффективны и могут осуществляться в течение периодов времени и параметров пациенто-лет, представленных на данной фигуре.

На фиг. 49 представлены вычисленные концентрации в плазме в стационарном состоянии для типового пациента с нормальной почечной функцией, определенной по СгС1 или выше 80 мл/мин; указанный типовой пациент был мужского пола и, как следует понимать, несколько более крупным, чем типичный пациент с рассеянным склерозом. Таким образом, в соответствии с данной фигурой способы изобретения полезны и эффективны и могут быть осуществлены, включая значения С_т;_П88 11 нг/мл или выше. Кроме того, в соответствии с данной фигурой способы изобретения полезны и эффективны и могут быть осуществлены, включая значения С_ттж 7, 7,23, 11,14, 14, 14,91 нг/мл (или выше).

Средний исходный балл пациентов в настоящем исследовании составлял приблизительно 70. Таким образом, способы изобретения полезны и эффективны и могут быть осуществлены с достижением улучшения балла ΜЗVЗ-12 у рассматриваемого пациента. Таким образом, способы изобретения полезны и эффективны, и могут быть осуществлены с достижением улучшения балла ΜЗVЗ-12 в популяции рассматриваемых пациентов. В одном варианте осуществления популяция перемещается с исходного балла ΜЗVЗ-12 (например, 70) до улучшенного балла (например, 69).

В дополнение к ΜЗVЗ-12 в уровне техники известны различные параметры, известные как качество жизни или повседневная деятельность. Они включают, например, Влияние ухудшения ходьбы на повседневную жизнь:

перемещение между комнатами в собственном доме, переход в ванную, душ, забота о детях, благополучный переход улицы, наличие постоянной работы, посещение магазина с целью покупки продуктов, приготовление пищи, подъем по лестнице, физическая нагрузка, участие в общественной деятельности.

Способы по изобретению позволяют субъекту выполнять любое из вышеуказанного, если ранее они не были способны выполнять такую деятельность. Способы по изобретению позволяют субъекту выполнять любое из вышеуказанного лучше, если ранее они были ограничены в своей способности выполнять такую деятельность.

Способы по изобретению позволяют сохранять улучшения симптома, параметра, характеристики, значения, показателя или проявления рассеянного склероза у пациента, где такой симптом, параметр, характеристика, значение, показатель или проявление ранее подвергались эффективному воздействию 4аминопиридина при введении терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту (после предварительного достижения улучшения такого симптома, параметра, характеристики, значения, показателя или проявления). В одном варианте осуществления параметром, который сохраняется, является способность к передвижению. Предыдущий период эффективности может составлять 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 недель; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или 13 месяцев; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более 10 лет.

Способы изобретения также включают сохранение улучшенной способности к передвижению у пациента с рассеянным склерозом, включающее введение терапевтически эффективного количества 4аминопиридина указанному пациенту в течение длительного периода времени. Данное сохранение мо- 41 022755 жет быть относительно постоянным, что заключается в практически единообразном процентном улучшении по сравнению с референсной или стандартной популяцией, или данное сохранение может быть относительно различным, что заключается в колебании величины процентного улучшения по сравнению с референсной или стандартной популяцией; когда сохранение относительно различно, оно может включать периоды, когда состояние рассматриваемого пациента может ухудшаться по сравнению с референсной или стандартной популяцией.

Способы изобретения также включают достижение долговременного повышения скорости ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, включающее продолжение введения терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту в течение длительного периода времени. Данное долговременное улучшение может относительно усиливаться, что заключается в продолжении роста величины процентного улучшения по сравнению с референсной или стандартной популяцией, или данное улучшение может быть относительно различно, что заключается в колебании процентного улучшения по сравнению с референсной или стандартной популяцией, что заключается в проявлении тенденции достижения лучших показателей, чем в референсной группе; когда улучшение относительно различно, оно может включать периоды, когда состояние рассматриваемого пациента может ухудшаться по сравнению с референсной или стандартной популяцией.

Возражения, отрицательные признаки, исключения

Кроме того, варианты осуществления способов по изобретению могут в частности исключать варианты осуществления, которые включают введение приблизительно 10 мг лекарственной формы 4аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день. Варианты осуществления способов по изобретению могут, в частности, исключать варианты осуществления, которые включают введение приблизительно 17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день. Варианты осуществления способов по изобретению могут, в частности, исключать варианты осуществления, которые включают введение два раза в день, два раза в день количества лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением в диапазоне приблизительно 10-17,5 мг (для ясности, это дает суммарную ежедневную дозу 10-35 мг 4-аминопиридина). Варианты осуществления способов по изобретению могут в частности исключать варианты осуществления, которые включают введение суммарного ежедневного количества приблизительно 20 мг два раза в день лекарственной формы аминопиридина замедленного высвобождения. Варианты осуществления способов по изобретению могут в частности исключать варианты осуществления, которые включают введение суммарного ежедневного количества приблизительно 35 мг два раза в день лекарственной формы аминопиридина замедленного высвобождения. Варианты осуществления способов в соответствии с изобретением могут, в частности, исключать варианты осуществления, которые включают введение суммарного ежедневного количества два раза в день лекарственной формы аминопиридина замедленного высвобождения в любом количестве в диапазоне от приблизительно 20 до приблизительно 35 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением.

Таким образом, в каждом из вариантов осуществления в следующих параграфах (до следующего заголовка), другие варианты осуществления могут включать отрицательное ограничение или возражение, или условие, которое исключает варианты осуществления, которые включают введение приблизительно 10 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; варианты осуществления, которые включают введение приблизительно 17,5 мг лекарственной формы 4аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; варианты осуществления, которые включают введение любого количества в диапазоне от приблизительно 10 мг до приблизительно 17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не вводят суммарное ежедневное количество, приблизительно 20 мг, два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением; или не вводят суммарное ежедневное количество, приблизительно 35 мг, два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением; или не вводят суммарное ежедневное количество два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением в любом количестве в диапазоне приблизительно 20-35 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением. Варианты осуществления, включающие способ лечения рассеянного склероза у пациента, включают введение указанному пациенту некоторого количества 4-аминопиридина, где указанное количество является таким количеством, которое дает С_т||к, в диапазоне 20 нг/мл, у а) пациента или Ь) в стандартной популяции. В другом варианте осуществления способ, в котором указанное терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина дает С_тш88 в диапазоне 12-20 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления С_тш8 в диапазоне 20 нг/мл достигает С_тш8приблизительно 20 нг/мл. В другом варианте осуществления способ, в котором указанное терапевтически эффективное количество 4-аминопиридина дает С_тш88 приблизительно 20 нг/мл; в некоторых вариантах осуществления С_тш88 приблизительно 20 нг/мл включает нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл. В другом варианте осуществления способ лечения рассеянного склероза у пациента включает введение некоторого количества 4-аминопиридина указанному пациенту, в результате чего достигается С_т11К8, равная по меньшей мере или превышающая: 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или

- 42 022755 нг/мл. В другом варианте осуществления способ лечения рассеянного склероза у пациента включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина, в результате чего достигается С_тш88 в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл. В другом варианте осуществления способ лечения рассеянного склероза у пациента включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина, в результате чего достигается С_т||К:, в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В другом варианте осуществления способ, в котором указанное количество 4-аминопиридина вводят один раз в день, два раза в день или три раза в день. В другом варианте осуществления способ, в котором указанное количество 4-аминопиридина достигает средней С_тш8, равной по меньшей мере или превышающей 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 нг/мл. В одном варианте осуществления отдельному пациенту дают некоторое количество лекарственного средства (например, количество дозы), где количество дозы соответствует дозе, при введении которой в стандартной популяции или референсной популяции достигается средняя С_тт88, равная по меньшей мере или превышающая 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл; уровни в плазме (например, С_т1пжС_тах55, С_ау88) в референсной популяции могут быть указаны, как стандартные значения.

Таким образом, вариант осуществления настоящего изобретения включает способ лечения рассеянного склероза у пациента, включающий введение указанному пациенту некоторого количества 4аминопиридина, в результате чего достигается С_тш88, равная по меньшей мере или превышающая 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28 нг/мл; при условии, что вводимое количество 4-аминопиридина не соответствует введению 10 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не соответствует введению 17,5 мг лекарственной формы 4аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не соответствует введению 10-17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не соответствует введению суммарного ежедневного количества приблизительно 20 мг два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением; или не соответствует введению суммарного ежедневного количества приблизительно 35 мг два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением; или не соответствует введению суммарного ежедневного количества два раза в день лекарственной формы аминопиридина с замедленным высвобождением в любом количестве в диапазоне приблизительно 20-35 мг.

В некоторых вариантах осуществления лекарственная форма с замедленным высвобождением, которая может быть исключена, является 4-аминопиридином-Ж, или АМРУКА™ (Асотйа ТЬетареийск, На^Шотпе, ΝΥ), или композиция 4-аминопиридина с замедленным высвобождением, описанная или заявленная в патенте США 5370879, патенте США 5540938; ΉδδΝ 11/101828 или ΉδδΝ 11/102559.

Таким образом, вариант осуществления настоящего изобретения включает способ лечения рассеянного склероза у пациента, включающий введение указанному пациенту некоторого количества 4аминопиридина, которое является таким количеством, которое дает С’_т||к, (или среднюю С_ттж), равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28 нг/мл у пациента; при условии, что вводимое количество 4-аминопиридина не соответствует введению 10 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или введению 17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или введению 10-17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день.

Таким образом, вариант осуществления настоящего изобретения включает способ лечения рассеянного склероза у пациента, включающий введение указанному пациенту некоторого количества 4аминопиридина, которое является таким количеством, которое дает С’_т||к, (или среднюю С_ттж), равную по меньшей мере или превышающую 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28 нг/мл у стандартной популяции; при условии, что вводимое количество 4-аминопиридина не соответствует введению 10 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или введению 17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или введению 10-17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день.

Таким образом, вариант осуществления настоящего изобретения включает способ лечения рассеянного склероза у пациента, включающий введение указанному пациенту некоторого количества 4аминопиридина, которое является таким количеством, которое дает С’_т|п,_:, (или среднюю С_ттж) в некотором диапазоне, где диапазон имеет нижнее предельное значение от 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 нг/мл и верхнее предельное значение 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл; при условии, что вводимое количество 4-аминопиридина не соответствует введению 10 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не соответствует введению 17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день; или не соответствует введению 10-17,5 мг лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением два раза в день.

Пример 1.

Настоящий пример представляет вариант осуществления способа лечения субъектов с применением лекарственной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением и анализ респондеров настоя- 43 022755 щего изобретения. Это было двойное слепое с контролем плацебо исследование 20-недельной терапии фазы 2 в параллельных группах у 206 субъектов с диагнозом рассеянного склероза. Данное исследование разработали с целью исследования безопасности и эффективности трех уровней дозы 4-аминопиридина8К, 10 мг два раза в день, 15 мг два раза в день и 20 мг два раза в день, у субъектов с клинически подтвержденным рассеянным склерозом. Основным критерием эффективности являлось увеличение относительно базового уровня скорости ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов. Дополнительные показатели эффективности включали мануальное обследование мышц нижних конечностей в четырех группах мышц нижних конечностей (сгибающие мышцы бедра, сгибающие мышцы колена, разгибающие мышцы колена и сгибающих мышц голеностопного сустава); тест с 9 отверстиями и стержнями и слуховой тест на сложение в заданном темпе ^Α8ΑΤ 3); балл по шкале мышечной спастичности Ашворта; балл частоты/тяжести спазмов; а также клиническую оценку общего состояния (С01) и самооценку общего состояния субъекта (80Ι), шкалу оценки качества жизни при рассеянном склерозе (М80Ы) и шкалу оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов (М8V8-12).

При первом посещении (посещении 0) субъекты должны были войти в двухнедельный односторонне слепой, плацебо подготовительный период для определения базовых уровней функции. При посещении 2 субъекты должны были быть рандомизированы в одну из четырех групп терапии (плацебо или 10, 15, 20 мг 4-аминопиридина-8К) и начать двухнедельное двойное слепое повышение дозы в группах терапии активным лекарственным средством (В, С и Ό). Группа А в ходе исследования должна была получать плацебо. Субъекты в группе 10 мг (группа В) исследования получали дозу 10 мг приблизительно каждые 12 ч в течение обеих недель фазы повышения. Субъекты в группах доз 15 мг (группа С) и 20 мг (группа Ό) получали дозу 10 мг приблизительно каждые 12 ч в течение первой недели фазы повышения с изменением до 15 мг два раза в день во второй неделе. Субъектов должны были проинструктировать придерживаться схемы приема дозы каждые 12 часов. Каждому субъекту рекомендовали принимать препарат приблизительно в одно и то же время ежедневно в течение исследования; впрочем, различные субъекты имели разные схемы лечения (например, 7:00 и 19:00 или 9:00 и 21:00). Через две недели субъекты должны были возвратиться в клинику, при посещении 3, для начала периода терапии с постоянной дозой. Первую дозу двойной слепой фазы терапии с конечной целевой дозой (плацебо два раза в день для группы А, 10 мг два раза в день для группы В, 15 мг два раза в день для группы С и 20 мг два раза в день для группы Ό) принимали вечером, после посещения 4 исследования. Субъектов нужно было оценивать пять раз в течение 12-недельного периода терапии. После 12-недельной фазы терапии было намечено однонедельное изменение в сторону понижения дозы, начиная с посещения 9. В течение данного периода понижения группа В должна была получать неизмененную дозу - 10 мг два раза в день, а группа С должна была получать пониженную дозу - 10 мг два раза в день, тогда как в группе Ό уровень дозы должен был изменяться в течение недели (15 мг Ъл.б в течение первых трех дней, а затем 10 мг два раза в день в течение четырех последних дней). В конце периода понижения при посещении 10 субъекты должны были войти в двухнедельный период вымывания, в котором они не получали исследуемый препарат. Последнее посещение (посещение 11) было запланировано через две недели после последнего дня приема дозы (конец периода понижения дозы). Пробы плазмы забирали при каждом посещении исследовательского центра, за исключением посещения 0 исследования.

Основым показателем эффективности являлось повышение средней скорости ходьбы по сравнению с исходным периодом (подготовительный период плацебо), при использовании ходьбы на время на дистанции 25 футов из шкалы комплексной функциональной оценки при рассеянном склерозе (М8РС). Данный показатель является количественной мерой функции нижних конечностей. Субъекты были проинструктированы использовать любые вспомогательные средства для ходьбы, которые они обычно используют, и идти так быстро, насколько они могут, от одного конца до другого конца четко отмеченной дистанции протяженностью 25 футов. Другие показатели эффективности включали тест ЙЕММУ позволяющий оценивать силу мышц билатерально в четырех группах мышц: сгибающих мышц бедра, сгибающих мышц колена, разгибающих мышц колена и сгибающих мышц голеностопного сустава. Тест проводили при контрольном посещении и при посещении 1, 2, 4, 7, 8, 9 и 11 исследования. Силу каждой группы мышц оценивали по модифицированной шкале ВМКС: 5 = нормальная сила мышц; 4,5 = свободное движение, преодолевающее существенное сопротивление, прикладываемое экспертом, но не нормальное; 4,0 = свободное движение, преодолевающее умеренное сопротивление, прикладываемое экспертом; 3,5 = свободное движение, преодолевающее слабое сопротивление, прикладываемое экспертом; 3,0 = свободное движение, преодолевающее силу тяжести, но не сопротивление; 2,0 = свободное движение присутствует, но не способно преодолевать силу тяжести; 1,0 = видимое или прощупываемое сокращение мышцы, но без движения конечности; 0,0 = отсутствие какого-либо свободного сокращения. Мышечную спастичность у каждого субъекта оценивали с помощью шкалы мышечной спастичности Ашворта. Тест на мышечную спастичность по Ашворту проводили и регистрировали результаты при контрольном посещении и при посещении 1, 2, 4, 7, 8, 9 и 11 исследования.

Установленный протоколом анализ респондеров.

Для дополнения основного анализа также проводили категорийный анализ респондеров. Результативный ответ для каждого субъекта определяли как повышение скорости ходьбы (процентное измене- 44 022755 ние относительно базового уровня) по меньшей мере на 20%. Субъекты, выбывшие до периода с неизменяемой дозой, считались нереспондерами. Процентные соотношения установленных протоколом респондеров сравнивали между группами терапии с использованием критерия Кохрана-Мантела-Хенсела, контролируемого по центру.

Апостериорный анализ в данном исследовании показал, что относительно высокоселективный критерий для вероятного респондера терапии будет соответствовать субъекту с более высокой скоростью ходьбы по меньшей мере в трех посещениях в течение двойного слепого периода терапии по сравнению с максимальным значением в серии из пяти посещений без терапии (четыре посещения до терапии и одно после прекращения терапии). Четыре посещения перед началом двойной слепой терапии предоставили исходный уровень для измерения стойкости ответа в течение четырех двойных слепых посещений с терапией. Включение последующего контрольного посещения в качестве дополнительного компонента сравнения было необходимо, прежде всего, при исключении тех субъектов, которые могли быть ложноположительными, то есть не показывали ожидаемой потери улучшения после прекращения приема лекарственного средства. Различия в процентном соотношении при терапии указанных апостериорных респондеров анализировали, используя критерий Кохрана-Мантела-Хенсела (СМН), контролируемый по центру.

Для подтверждения клинической значимости переменной апостериорных респондеров (апостериорных) респондеров сравнивали с (апостериорными) нереспондерами по субъективным переменным: (ί) изменение относительно базового уровня в МЗХУЗ-12 за двойной слепой период; (ίί) 3ΟΙ за двойной слепой период и (ίίί) изменение относительно базового уровня в СС1 за двойной слепой период с целью определения, могли ли субъекты со стойким повышением скорости ходьбы в течение двойного слепого периода чувствовать улучшение по сравнению с теми субъектами, которые не имели стойкого повышения скорости ходьбы. В отношении субъективных переменных различия между классификацией статуса респондера (респондер или нереспондер) сравнивали, используя модель ΑΝΟνΑ с эффектами по статусу респондера и центру.

Результаты.

В общей сложности 206 субъектов рандомизировали в исследовании: 47 отнесли к группе плацебо, 52 - к 10 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день (10 мг два раза в день), 50 - к 15 мг 4-аминопиридинаЗК (15 мг два раза в день) и 57 - к 20 мг 4-аминопиридина-ЗК два раза в день (20 мг два раза в день). Распределение субъектов представлено в табл. 5 ниже.

Таблица 5

Сводка по распределению субъектов* (вся рандомизированная популяция)

	Группа терапии:	N (%)
Плацебо	10 мг д.в день	15 в	МГ д. день	20 мг д. в день	Всего
Ра ндомизир об а н ные субъекты	47	52		50	57	206
Принимали по меньшей мере одну дозу (включены в анализ безопасности)	47 (100%)	52 (100%)	50	(100%)	57 (100%)	206(100%)
Популяция ΙΤΤ	47(100%)	51(98,1%)	50 (100%)	57 (100%)	205(100%)
Выбывшие субъекты	2(4,3%)	2(3,8%)	1	2,0%)	6(10,5%)	11(5,3%)

*Примечание: проценты взяты по количеству рандомизированных субъектов.

Все 206 рандомизированных субъектов принимали по меньшей мере одну дозу в исследовании препарата и были включены в популяцию оценки безопасности. Один субъект (группа 10 мг два раза в день) был исключен из популяции 1ТТ (выбыл из наблюдения через 8 дней подготовительного периода плацебо). В общей сложности 11 субъектов досрочно прекратили исследование.

Популяция на 63,6% состояла из женщин и на 36,4% из мужчин. Большинство субъектов были европейцами (92,2%), затем следовали афроамериканцы (4,9%), латиноамериканцы (1,5%), классифицированные как другие (1,0%), а также азиаты/жители островов Тихого океана (0,5%). Средний возраст, вес и рост субъектов составлял 49,8 лет (диапазон: 28-69 лет), 74,44 кг (диапазон: 41,4-145,5 кг) и 168,84 см (диапазон: 137,2-200,7 см) соответственно.

Большинство субъектов (52,4%) имело вторично-прогрессирующий тип диагноза и приблизительно поровну - возвратно-ремиттирующий (22,8%) и первично-прогрессирующий (24,8%). Средняя продолжительность болезни составляла 12,00 лет (диапазон: 0,1-37,5 лет), тогда как средний балл по расширен- 45 022755 ной шкале оценки статуса инвалидности (ΕΌδδ) при скрининге составил 5,77 единиц (диапазон: 2,5-6,5 единиц). Группы терапии были сопоставимы по всем исходным демографическим переменным и переменным характера болезни.

Результаты для ключевых переменных эффективности при исходном уровне для популяции 1ТТ также приведены в табл. 6 ниже.

Таблица 6

Сводка по переменным эффективности при исходном уровне (1ТТ популяция)

Параметр	Группа терапии: Среднее (£Э)
плацебо N=47	10 МГ Д. Б день N=51	15 МГ Д. Б день N=50	20 мг д. в день N=57	р- значение терапии
Скорость ходьбы (фут/сек)	1,87(0,902)	1, 94 (0,8741	1,99(0,877)	2,04 10,811)	0,752
ЬЕММТ	4,05(0,690)	3,98 (0,6611	4,00 (0,737)	3,9810,634)	0,964
501	4,38 (0,795)	4, 32 (0,999)*	4,56(1,110)	4, 25 (0,969)	0,413
М5И5-12	75,71(16,5661	76,31 (16,186)	74, 60 (17,671)	76,83118,124)	0,923

* один субъект не имел базового значения.

В отношении 205 субъектов в популяции 1ТТ средние значения исходной скорости ходьбы, ЬЕЕМТ, 8ΟΙ и М§^§-12 составляли приблизительно 2 фут/с, 4 единицы, 4,5 единицы и 76 единиц соответственно. Группы терапии были сопоставимы по данным переменным, а также по всем остальным переменным эффективности при базовом уровне.

Описательная статистика для средней скорости ходьбы (фут/с) по дням исследования на основе теста с ходьбой на время на дистанции 25 футов представлена в табл. 7 и на фиг. 2. Ходьба на время на дистанции 25 футов показала тенденцию к увеличению скорости в течение периода с постоянной дозой во всех трех группах дозы, хотя среднее улучшение уменьшалось в течение периода терапии.

Таблица 7

Средние скорости ходьбы (фут/с) по дням исследования (наблюдаемые случаи, 1ТТ популяция)

Общая статистика по времени
	День исследования
Терапия		базовый	титрование	1 пост.	2 пост.	3 пост.	последующее наблюдение
плацебо	Среднее	1,87	1,89	1,90	1,89	1, 89	1,86
	(8ϋ)	(0, 902)	(0,876)	(0, 908)	(0,891)	(0,914)	(0, 933)
	N	47	47	46	46	45	45
10 мг	Среднее	1,94	2,20	2,09	2,12	2, 00	1,88
Д. В	(50)	(0,874)	(0, 979)	(0,955)	(1,043)	(1,016)	(0, 952)
день	N	51	51	51	51	50	47
15 мг	Среднее	1,99	2,25	2,16	2,14	2, 18	1,83
д. в	(5ϋ)	(0,877)	(0,995)	(0,986)	(0,957)	(0,932)	(0, 952)
день	N	50	49	49	48	48	47
2 0 мг	Среднее	2,04	2,26	2,22	2,19	2,04	1,83
д. в	(5ϋ)	(0,811)	(0,936)	(0,893)	(0,936)	(0,996)	(0,822)
день	N	57	55	52	51	49	55

#: размеры выборки терапии, представленные в легенде фигуры, представляют число 1ТТ субъектов. Размеры выборки в отдельные моменты времени могут быть меньше, чем в 1ТТ популяции, из-за выбывших или пропустивших оценку.

В течение двойной слепой терапии все группы, получавшие 4-аминопиридин-§К, показали среднюю скорость ходьбы между 2,00 и 2,26 фут/с, тогда как среднее значение в группе плацебо постоянно составляло приблизительно 1,90 фут/с. Следует отметить, что при третьем посещении с постоянной дозой средние значения в группах 10 мг два раза в день и 20 мг два раза в день выпали из ожидания согласно условию, что благоприятный эффект терапии является постоянным с течением времени. Это могло быть обусловлено, или нет, простым случаем; дальнейшие исследования должны предоставить дополнительное свидетельство любого случая. После прекращения двойной слепой терапии все группы терапии

- 46 022755 сходились до приблизительно одинакового среднего значения при последующем наблюдении.

Результаты для первичной переменной эффективности (процентное изменение средней скорости ходьбы в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой относительно базового уровня на основет ходьбы на 25 футов) представлены на фиг. 3. Ходьба на время на дистанции 25 футов показала тенденцию к увеличению скорости в течение периода с неизменяемой дозой для всех трех групп дозы, хотя среднее улучшение уменьшалось с течением периода обработки, как показано на фиг. 3. Средние процентные изменения средней скорости ходьбы в течение 12-недельного периода с постоянной дозой (на основе скорректированного среднего геометрического изменения преобразованных в логарифм скоростей ходьбы) составляли 2,5, 5,5, 8,4 и 5,8% для групп плацебо, 10, 15 и 20 мг два раза в день соответственно. Между группами, получавшими 4-аминопиридин-8К, и группой плацебо не было никаких статистических различий.

Результаты установленного протоколом анализа респондеров (субъекты со средним изменением скорости ходьбы в течение 12-недельной двойной слепой терапии с постоянной дозой по меньшей мере 20%) приведены на фиг. 4. Процент субъектов со средним изменением скорости ходьбы в течение 12недельного периода с неизменяемой дозой по меньшей мере 20% (установленные респондеры) составлял 12,8, 23,5, 26,5 и 16,1% для групп плацебо, 10, 15 и 20 мг два раза в день соответственно. Между любой из групп, получавших 4-аминопиридин-8К, и группой плацебо не было никаких статистически значимых различий.

Описательная статистика по средним значениям в мануальном обследовании мышц нижних конечносте (ЬЕММТ) по дням исследования представлена в табл. 8 и на фиг. 5.

Таблица 8

Средние значения в ЬЕММТ по дням исследования

Общая статистика по времени
	День исследования
Терапия		базовый	титрование	1 пост.	2 пост.	3 пост.	последующее наблюдение
плацебо	Среднее	4,05	4,00	4,02	4,03	4,00	4,02
	(3ϋ)	(0, 690)	(0,705)	(0,687)	(0,696)	(0,679)	(0,738)
	N	47	46	46	46	45	45
10 мг	Среднее	3, 98	4,09	4,06	4,09	4,07	3,89
два	(3ϋ)	(0,661)	(0,641)	(0,650)	(0,685)	(0,642)	(0,631)
раза в день	N	51	50	51	51	50	49
15 мг	Среднее	4,00	4,16	4,11	4,09	4, 17	4,08
два	(50)	(0,737)	(0, 653)	(0,645)	(0,659)	(0, 618)	(0,674)
раза в день	N	50	49	49	49	49	46
2 0 мг	Среднее	3,98	4,08	4,03	3, 98	4, 07	3, 92
два	(50)	(0,634)	(0, 639)	(0, 659)	(0,714)	(0, 649)	(0,650)
раза в день	N	57	54	52	52	48	55

#: размеры выборки терапии, представленные в отдельных моментах времени, могут быть меньше, чем у 1ТТ популяции, из-за выбывших или пропустивших оценку.

В течение двойной слепой терапии все группы, получавшие 4-аминопиридин-8К, показали численный тип с более высокими средними баллами ЬЕММТ, чем плацебо (кроме группы 20 мг два раза в день при втором посещении с постоянной дозой). После прекращения двойной слепой терапии за исключением группы 15 мг два раза в день, средние значения во всех группах были ниже, чем в базовом уровне.

Результаты среднего изменения балла ЬЕММТ в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой относительно базового уровня представлены на фиг. 6. Средние изменения в общем ЬЕММТ в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой составили -0,05 единиц, 0,10 единиц, 0,13 единиц и 0,05 единиц для групп плацебо, 10 мг два раза в день, 15 мг два раза в день и 20 мг два раза в день соответственно. Улучшения в ЬЕММТ были значительно больше в группах 10 мг два раза в день и 15 мг два раза в день, чем в группе плацебо; между группой 20 мг два раза в день и группой плацебо не было никаких значимых различий.

В группе терапии не было обнаружено никаких статистически значимых различий, на основе какой- 47 022755 либо из других вторичных переменных эффективности, как показано в табл. 9.

Таблица 9

Изменения во вторичных переменных эффективности относительно базового уровня в течение 12-недельного периода с неизменяемой дозой

	Группа терапии
Параметр	плацебо N=47	10 мг два раза в день N-51	15 мг два раза в день N-50	20 мг два раза в день N-57
Балл Ашворта N Среднее <5Ό> р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	46 -0, 11(0,377)	51 -0,04(0,449) 0,802	49 -0, 06 (0,345) 0, 826	53 0, 02 (0,466) 0,275
СС1 N Среднее (5Ό) р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	45 0, 0(0,66)	50 -0,2(0,72) 0,772	49 -0,1 (0,85) 0, 997	52 0,0 (0,78) 0,996
ЗС1 N Среднее (3Ό) р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	46 -0,2 (0, 96)	50 0,0(1,27) 0,704	49 -0, 1(1,11) 0, 953	53 -0,1(0,86) 0,968
РА5АТ КГ Среднее (3Ό) р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	46 2,17(4,016)	51 2,13(3,394) >0,999	49 0,90 13,274) 0, 306	53 0,65(4,590) 0,218
МЗГС N Среднее (£□) р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	46 0, 08 (0,205)	51 0, 10(0,310) 0, 977	49 0, 90 (0, 224) >0,999	52 0,06 (0, 194) 0,968
ΜΞϊί5-12 N Среднее (ΞΌ) р-значение (каждая доза в сравнении с плацебо)	46 -3,56(14,543)	51 -5,53 116,154) 0,718	49 -7,32(16,295) 0,445	52 -5, 76 (15,296) 0, 617

Примечание: размеры выборки терапии, представленные в шапке таблицы, обозначают количество 1ТТ субъектов. Размеры выборки для индивидуальных переменных могут быть меньше из-за выбывших или пропустивших оценку.

Примечание: для каждой переменной р-значения (в сравнении с плацебо) скорректированы по критерию Даннета.

Хотя предварительные исследования основного критерия эффективности предоставили недостаточное подтверждение благоприятных эффектов терапии для какой-либо из доз 4-аминопиридина-8К, последующий анализ показал существование подгруппы субъектов, которые отвечали на лекарственное средство с клинической значимостью. Скорости ходьбы, показанные данными субъектами в течение приема лекарственного средства, постоянно превышали наиболее высокие измеренные скорости ходьбы,

- 48 022755 когда субъекты не принимали активное лекарственное средство.

Процентные соотношения апостериорных респондеров, основанные на согласованности повышенных скоростей ходьбы, были значительно выше во всех трех группах активных доз (35, 36 и 39%) по сравнению с плацебо (9%; р<0,006 для каждой группы дозы, с коррекцией множественных сравнений), как показано на фиг. 7.

С учетом частоты ответа при каждой из исследованных трех доз проводили более детальные исследования, сравнивая объединенные группы, получавшие 4-аминопиридин^К, с группой, получавшей плацебо. На фиг. 8 показан процент апостериорных респондеров для плацебо и объединенной группы 4аминопиридина-δΚ. Число субъектов, удовлетворявших критерий апостериорных респондеров в объединенной группе, получавшей 4-аминопиридин^К, составило 58 (36,7%) по сравнению с 4 (8,5%) в группе, получавшей плацебо, при этом данное различие являлось статистически значимым (р<0,001).

Для подтверждения клинической значимости переменной апостериорных респондеров указанные 62 респондера (58 4-аминопиридина и 4 плацебо) сравнивали с 143 нереспондерами (100 4аминопиридина и 4 3 плацебо) по субъективным переменным, чтобы определить, могли ли субъекты с постоянно улучшенными скоростями ходьбы в течение двойного слепого периода ощущать благоприятный эффект по сравнению с теми субъектами, которые не имели постоянно улучшенных скоростей ходьбы. Результаты, представленные на фиг. 9, указывают, что сохранение скорости ходьбы имело клиническую значимость для субъектов в данном исследовании, так как респондеры имели (за двойной слепой период) значительно лучшие изменения относительно базового уровня в Μδνδ-12 и значительно лучшие показатели субъективных оценок общего состояния. Кроме того, клинические врачи оценивали респондеров несколько лучше, чем нереспондеров, в течение двойного слепого периода. Таким образом, респондеры показывали клинически значимые улучшения симптомов рассеянного склероза, и терапия с применением 4-аминопиридина существенно повышала вероятность подобного ответа.

Для устанавления исходной сравнимости в группах анализа респондеров проводили исследования по исходным демографическим переменным, ключевым неврологическим характеристикам и соответствующим переменным эффективности при базовом уровне. В целом, группы анализа респондеров были сопоставимы по всем демографическим переменным и переменным базовых характеристик.

Демонстрируя клиническую значимость стойко повышенных скоростей ходьбы в течение двойного слепого периода в качестве критерия частоты ответа, становится интересен вопрос величины благоприятного эффекта. Нереспондеры 4-аминопиридина, не дававшие какой-либо существенной информации по эффективности, предоставляли информацию по безопасности относительно тех людей, которые проходили терапию 4-аминопиридином, но не показали какого-либо очевидного благоприятного клинического эффекта. По этой причине проводили анализ респондеров в указанных группах.

Относительно величины благоприятного эффекта на фиг. 10 и в табл. 10 ниже предствлены процентные изменения скорости ходьбы при каждом двойном слепом посещении по группам анализа респондеров. Среднее улучшение для 4-аминопиридин респондеров в течение двойного слепого периода в течение 14 недель терапии варьировало от 24,6 до 29,0% по сравнению с 1,7-3,7% для группы плацебо; оно было очень значимым (р<0,001) при каждом посещении. Улучшение было стабильным (±3%) в течение 14 недель терапии и было связано с улучшением двух оценок общего состояния (самооценка общего состояния субъекта и шкала ходьбы при рассеянном склерозе-12). Четыре респондера плацебо показали 19%-ное повышение скорости ходьбы, однако в данной группе было слишком мало субъектов для значимого статистического сравнения. Статус ответа не был значительно связан с исходной демографией, включая тип или тяжесть РС. Нежелательные события и меры безопасности согласовывались с предыдущим опытом применения данного лекарственного средства.

Таблица 10

Сводка процентных изменений скорости ходьбы при каждом двойном слепом посещении по группам в анализе респондеров

Общая статистика по времени
		День исследования
Терапия		титрование	1 пост.	2 пост.	3 пост.
Плацебо	Среднее	1,7	2, 6	1,8	3,7
	(ЗЕМ)	(2,21)	(3,23)	(3,11)	(3,38)
	Ν#	47	46	46	45
Нереспондеры	Среднее	8,3	3, 5	-0,2	-6, 5
Фампридина	(ЗЕМ)	(2,05)	(1,90)	(1,76)	(2,49)
	N	97	94	93	89
Респондеры	Среднее	27,4	24, 6	29,0	27,3
Фампридина	(ЗЕМ)	(2,43)	(2,44)	(4,31)	(3,52)

- 49 022755

	N	58	58	57	58
ГК в срав. с	р-значение''	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001
плацебо
РЕ Е срав, с ΓΝΕ	р-значение^Л	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001
ΓΝΕ в срав. с РВО	р-значение^Л	0, 080	0,884	0, 497	0,022

Сокращения: РК=респондеры фампридина, РNΚ=нереспондеры фампридина, #: размеры выборки терапии, представленные в отдельные моменты времени могут быть меньше, чем в ΙΤΤ-популяции из-за выбывших или пропустивших оценку, #: размеры выборки терапии, представленные в легенде фигуры, представляют количество ΙΤΤ субъектов. Размеры выборки в отдельные моменты времени могут быть меньше из-за выбывших или пропустивших оценку.

^Л:р-значения из ΐ-критериев средних наименьших квадратов с применением средней квадратической ошибки в модели ΑΝΟνΑ с эффектами по группам анализа респондеров и центру.

На фиг. 11 и в табл. 11 приведены изменения в ΕΕΜΜΤ при каждом двойном слепом посещении по группам в анализе респондеров. Среднее улучшение для респондеров 4-аминопиридина в течение двойного слепого периода варьировали от 0,09 до 0,18 единиц по сравнению с -0,04 единицами при каждом посещении в группе плацебо; оно было значимым при каждом посещении кроме второго посещения с постоянной дозы (р=0,106). Это предполагает, что хотя клинически значимый ответ может быть связан приблизительно с 37% субъектов, получавших 4-аминопиридин-8К, дополнительные субъекты могут иметь функциональные улучшения по другим переменным помимо скорости ходьбы.

Таблица 11

Сводка процентных изменений в ΕΕΜΜΤ при каждом двойном слепом посещении по группам в анализе респондеров

Общая статистика по времени
	День исследования
Терапия	титрование	1 пост.	2 пост.	3 пост.

Плацебо	Среднее (5ЕМ) Ν#	-0,04 (0, 035) 46	-0, 04 (0,042) 46	-0,04 (0, 039) 46	-0, 04 (0,042) 45
Нереспондеры	Среднее	0,12	0,10	0,09	0,10
Фампридина	(ЗЕМ) ы	(0, 028) 95	(0,033) 94	(0, 036) 94	(0,038) 89
Респондеры	Среднее	0,18	0,09	0,09	0,17
Фампридина	(ЗЕМ) ы	(0,029) 58	(0,032) 58	(0, 043) 58	(0, 045) 58
ГЕ в срав, с плацебо	р-значение^Л	<0,001	0,023	о, 106	0,004
ГК в срав. с ΓΝΚ	р-значение^'	0, 178	0,627	0,739	0,311
ГЫК в срав. с РВО	р-значение'	<0,001	0,003	0,038	0,032

Сокращения: РК=респондеры фампридина, РNΚ=нереспондеры фампридина, #: размеры выборки терапии, представленные в отдельные моменты, времени могут быть меньше, чем в ΙΤΤ-популяции, из-за выбывших или пропустивших оценку. Размеры выборки терапии, представленные в легенде фигуры, представляют количество ΙΤΤ субъектов. Размеры выборки в отдельные моменты времени могут быть меньше из-за выбывших или пропустивших оценку.

Л: р-значения из ΐ-критериев средних наименьших квадратов с применением средней квадратической ошибки в модели ΑΝΟνΑ с эффектами по группам анализа респондеров и центру.

На фиг. 12 и в табл. 12 ниже приведены изменения общего балла по шкале Ашворта при каждом двойном слепом посещении по группам в анализе респондеров. Среднее снижение относительно базового уровня (являющееся показателем улучшения) для респондеров 4-аминопиридина в течение двойного слепого периода варьировало от -0,18 до -0,11 единиц по сравнению с -0,11 - 0,06 для группы плацебо.

- 50 022755

Респондеры 4-аминопиридина в числовом выражении превосходили плацебо, однако имелось недостаточное подтверждение обнаружения значимых различий. Хотя данные результаты дают мало релевантной информации относительно эффективности, также приведены результаты для нереспондеров 4аминопиридина.

Таблица 12

Изменения общего балла по шкале Ашворта при каждом двойном слепом посещении по группам в анализе респондеров Общая статистика по времени

День исследования

Терапия		титрование	1 пост.	2 пост.	3 пост.
Плацебо	Среднее (ЗЕМ) Ν#	-0, 06 (0,069) 46	-0, 11 (0,073) 46	-0,06 (0,070) 46	-0, 13 (0, 073) 45
Нереспондеры	Среднее	-0,16	-0, 08	-0,07	0,00
Фампридина	(ЗЕМ) N	(0,044) 95	(0,053) 94	(0,054) 94	(0, 056) 89
Респондеры	Среднее	-0, 14	-0,18	-0,11	-0, 18
Фампридина	(ЗЕМ) N	(0,058) 58	(0,066) 58	(0, 060) 58	(0, 055) 58
ГК в срав. с плацебо	р-значение^А	0,343	0,374	0, 717	0, 680
ГН В срав, С ЕЫЕ	р-значение^А	0, 675	0,210	0, 911	0,064
ΕΉΚ в срав. с РВО	р-значение^Л	0,151	0,823	0, 772	0,189

Сокращения: РК=респондеры фампридина, РЫК=нереспондеры фампридина, #: размеры выборки терапии, представленные в отдельные моменты времени, могут быть меньше, чем в 1ТТ-популяции, из-за выбывших или пропустивших оценку, ^Л: р-значения из ΐ-критериев средних наименьших квадратов с применением средней квадратической ошибки в модели ΛΝ0νΛ с эффектами по группам анализа респондеров и центру.

Нежелательные явления, о которых обычно сообщали до терапии, являлись случайными повреждениями, описанными у 12 субъектов (5,8%), тошнотой, о которой сообщили 9 субъектов (4,4%), а также астенией, диареей и парестезией, о которых сообщило по 8 субъектов (3,9%). Шесть субъектов (2,9%) также сообщили о головной боли, беспокойстве, головокружении, диарее и периферическом отеке. Перечисленные нежелательные явления являются признаком патологических состояний, затрагивающих людей с РС.

Данные из этого примера не подтверждают ряд казуистических сообщений и ожиданий из доклинической фармакологии, что дозы выше чем приблизительно 10 мг два раза в день и даже приблизительно 15 мг два раза в день должны ассоциироваться с большей эффективностью. Данные, представленные ниже в табл. 13, подтверждают это, основываясь на новой методике анализа респондеров.

- 51 022755

Таблица 13

Сравнение доз 10 мг и 15 мг у респондеров

	10 мг (N=51)	15 мг (N=50)
Респондеры Ν(%)	18(35,3)	18(36,0)
Средний % СРВ скорости ходьбы:	27, 6%(18,39)	29, 6%(22,43)
среднее (Ξϋ)
% изменение скорости ходьбы по	26%-32%	27%-31%
посещениям: минимум - максимум
Средний балл 561	4,8(1,09)	4,7(1,09)
Среднее изменение в М5И5-12*	-11,1(21,9)	-7,8(19,6)

* Касательно среднего изменения в ΜЗVЗ-12 отрицательный балл служит показателем субъективного улучшения.

Анализ респондеров, основанный на стойкости улучшения, обеспечивает чувствительный значимый подход к измерению влияния на ходьбу на время на дистанции 25 футов и может применяться в качестве основного критерия для будущих испытаний. Представленные данные указывают на то, что для чувствительных субъектов (приблизительно 37%) терапия 4-аминопиридином в предложенных дозах 1020 мг производит существенное и постоянное улучшение ходьбы.

Эффективность.

Обе дозы, 10 мг два раза в день и 15 мг два раза в день, вызывали ответы на препарат. Кроме того, наибольшее различие говорило в пользу группы 10 мг два раза в день (см., например, результаты ΜЗVЗ12).

Безопасность.

Что касается безопасности, существует три фактора: Было очевидное снижение скорости ходьбы ниже базового уровня при последнем посещении во время приема лекарственного средства у нереспондеров 4-аминопиридина в группах 10 мг два раза в день и 20 мг два раза в день, но не в группе 15 мг два раза в день. Это может быть значимым, а может и не быть, но это не четко зависит от дозы. Был очевидный эффект отмены, при этом скорость ходьбы снизилась ниже базового уровня у субъектов, получавших 4-аминопиридин в последующем контрольном посещении через две недели; это произошло в группах 15 и 20 мг, но не в группе 10 мг два раза в день. Тяжелые НЯ были более частыми в группах 20 мг и 15 мг два раза в день, с 10% и 12% частотой в сравнении с 0% в группе 10 мг два раза в день и 4% в группе плацебо. Из всех доступных данных и основываясь на теперь изученном механизме действия риск проявления нежелательных побочных эффектов, в особенности судорог, по-видимому, связан с дозой. На основании полученных данных можно предположить, что доза 10 мг два раза в день является предпочтительной вследствие ее благоприятного соотношения риска и пользы по сравнению с дозами 15 и 20 мг.

Пример 2. Фаза 3 испытания пероральной формы 4-аминопиридина с замедленным высвобождением при рассеянном склерозе.

В настоящее время доступные средства для лечения рассеянного склероза (МЗ) считаются иммуномодулирующими. Фампридин (4-аминопиридин) представляет собой терапевтическое средство нового класса, которое направленно воздействует на нервную систему, а не иммунную систему, изменяя функцию аксонов, демиелинизированных в результате заболевания. Предыдущее испытание фазы 3 (МЗ-203) показало, что лечение с применением таблетки 4-аминопиридина с замедленным высвобождением при дозе 10 мг два раза в день улучшало способность к передвижению у людей с рассеянным склерозом (РС) и что оно обеспечивало клинически значимый терапевтический эффект.

Ряд клинических исследований показал, что лечение 4-аминопиридином связано с улучшениями различных неврологических функций, нарушенных при РС, однако большинство указанных более ранних исследований не позволяло выполнить объективную оценку безопасности и эффективности. Позднее серия из четырех клинических испытаний, включающая два исследования фазы 3, из которых данное испытание является вторым, была сосредоточена непосредственно на способности к ходьбе, измеряемой с помощью теста с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25РV) в качестве основного критерия. В указанных исследованиях использовали пероральную таблетированную форму с замедленным высвобождением 4-аминопиридин-ЗК, созданную для поддерживания терапевтических концентраций в плазме при приеме два раза в день.

Предыдущее исследование фазы 3 (МЗ 203) показало существенное улучшение способности к передвижению у пациентов с рассеянным склерозом, принимавших пероральную форму 4-аминопиридина с замедленным высвобождением 10 мг два раза в день. Текущее исследование подтверждало эффектив- 52 022755 ность, а также дополнительно определяло безопасность и фармакодинамику.

Данное исследование в настоящем примере было двойным слепым испытанием, проводимым в 39 центрах на пациентах с подтвержденным рассеянным склерозом любого течения. Участников исследования рандомизировали в группы 9-недельной терапии 4-аминопиридином (10 мг два раза в день; п=120) или плацебо (п=119). Ответ определяли как стойкое улучшение в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов, при этом процент респондеров в ходьбе на время (ГОУК) в каждой группе терапии являлся первичным результатом. Последнее посещение с терапией обеспечивало данные через 8-12 ч после приема дозы для оценки сохранения эффекта. Один пациент из каждой группы был исключен из ΙΤΤ-популяции (популяции, в которой пациентам назначали терапию).

Пропорция ГОУК была выше в группе 4-аминопиридина (51/119 или 42,9%) по сравнению с группой плацебо (11/118 или 9-3%, р<0,0001).

Среднее повышение скорости ходьбы у получавших 4-аминопиридин ГОУК в течение 8-недельного периода оценки эффективности составило 24,7% относительно базового уровня (95% 0=21,0-28,4%); среднее улучшение при последнем посещении с терапией составило 25,7%, указывая на сохранение эффекта в течение периода между приемом доз.

Другие данные эффективности в значительной степени согласовывались с предыдущим исследованием. Не было получено никаких новых данных по безопасности.

Данное исследование показало, что 4-аминопиридин-§К производил клинически значимое улучшение способности к ходьбе у людей с РС, причем эффект сохранялся в интервале между приемом доз, а также в течение периода поддерживающей терапии.

Методы.

Пациенты. Удовлетворяющие критериям пациенты имели возраст 18-70 лет, клинически подтвержденный диагноз рассеянного склероза и были способны выполнить два испытания, состоящих из теста с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25Ρν) за среднее время от 8 до 45 с при скрининге. Пациентов исключали из иследования, если они ранее проходили терапию 4-аминопиридином, если у них начиналось обострение рассеянного склероза в пределах 60 дней до скрининга, если в анамнезе они имели случаи судорог или свидетельство эпилептиформной активности при анализе электроэнцефалограммы или какое-либо состояние, которое препятствовало проведению исследования или интерпретации результатов.

Дизайн исследования. Это было рандомизированное, двойное слепое плацебо-контролируемое испытание, как показано на фиг. 14. Пациентов подвергали скринингу без получения исследуемого лекарственного препарата, и подходящие пациенты возвращались через одну неделю (посещение 0, см. фиг. 14). Затем пациенты входили в двухнедельный односторонне слепой подготовительный период плацебо; посещение 1 проходило в конце первой недели подготовительного периода плацебо, а посещение 2 - в конце второй недели. Пациентов проинструктировали принимать одну неидентифицируемую таблетку (поставляемые в необходимых количествах при каждом посещении клиники) каждые 12 ч в течение фазы терапии.

При посещении 2 пациентов рандомизировали поровну в одну из двух групп терапии, 4аминопиридин с замедленным высвобождением (4-аминопиридин-§К, 10 мг два раза в день) или плацебо, используя заданный машинно-генерируемый рандомизационный список, блокированный и статифицированный по месту проведения терапии и предварительно пронумерованным наборам терапии. Независимые статистические, упаковывающие и распределяющие работники с временными контрактами использовались для сохранения режима неосведомленности для всего остального персонала.

После рандомизации пациенты возвращались каждые две недели для оценки при посещениях 3-6. Затем пациентов проинструктировали возвратиться через одну неделю в посещении 7 и установить время для приема последней дозы исследуемого лекарственного препарата, чтобы при посещении клиники можно было выполнить оценки в интервале между 10 и 12 ч после приема указанной последней дозы. После посещения 7 пациенты начали двухнедельный период без терапии, по истечении которого возвращались для последующих контрольных оценок в посещении 8.

Набор субъектов для данного исследования проводили в тридцати девяти центрах в Соединенных Штатах и Канаде. Испытание проводили в соответствии с Хельсинкской декларацией и ее последующими поправками, надлежащей клинической практикой и применяемыми нормативными требованиями. Протокол исследования был одобрен компетентным экспертным советом или комиссией по этическим нормам, и все участники дали письменное согласие на основе полной информации.

Конечные показатели. Первичный показатель эффективности, ответ на терапию, был основан на изменении скорости ходьбы (в футах в секунду), измеряемом в тесте Τ25Ρν, проводимом согласно инструкциям по комплексной функциональной шкале при рассеянном склерозе. Пациентам разрешали использовать вспомогательное устройство при условии, что его постоянно использовали при посещениях. Тест проводили дважды при каждом посещении, давая не более 5 мин на отдых между тестами, при этом для анализа использовали среднее значение (тест повторяли с одночасовыми интервалами при получении трех наборов измерений при посещении 7).

Единственным проспективно определяемым вторичным конечным показателем являлось мануаль- 53 022755 ное обследование мышц нижних конечностей (ЬЕММТ), проводимое при каждом посещении и сравниваемое между получавшими 4-аминопиридин группами респондеров в ходьбе на время, нереспондеров в ходьбе на время и группой, получавшей плацебо, с целью оценки взаимной зависимости между изменением силы ног и скорости ходьбы. В ЬЕММТ измеряли силу четырех групп мышц билатерально (сгибающие мышцы бедра, сгибающие мышцы и разгибающие мышцы колена, а также сгибающие мышцы голеностопного сустава), с использованием модифицированной шкалы Совета по медицинским исследованиям Великобритании.

Также регистрировали дополнительные параметры. Они включали балл по шкале мышечной спастичности Ашворта, шкалу оценки ходьбы при рассеянном склерозе из 12 пунктов ^δ^νδ^), оценочную шкалу, которая позволяет регистрировать перспективные оценки пациентов относительно их неспособности к передвижению, самооценку общего состояния субъекта (801) и клиническую оценку общего состояния (С01).

Оценку по шкале Ашворта производили при всех посещениях, усредненных для трех групп мышц билатерально: приводящих мышц бедра, разгибающих и сгибающих мышц колена. Оценку по шкале Μ8V8-12 производили при всех посещениях за исключением посещения 1. 801 оценивали при посещениях 1-6, при этом пациентов просили оценить собственное впечатление от воздействия лечения при исследовании в течение предыдущей недели на их физическое состояние, используя шкалу из 7 пунктов (от 1 = ужасно до 7 = восхитительно). С01 оценивали однократно при посещении 6, при этом регистрировали впечатление наблюдающего клинического врача по поводу неврологического состояния пациента по 7-балльной шкале (от 1 = намного лучше до 7 = намного хуже) относительно контрольного посещения. Краткие анкеты субъекта и клинического врача заполнялись при заключительном последующем контрольном посещении для определения впечатления пациента и клинического врача по поводу того, получил ли пациент активное лекарственное средство, а также оснований для указанных впечатлений.

Отдельный эксперт в каждом центре, неосведомленный по поводу общих клинических оценок и оценок безопасности пациента, а также результатов С01 и 801, проводил регистрацию всех функциональных конечных параметров, при этом анализы и оценки по возможности проводились одним и тем же лицом при каждом посещении.

Концентрацию 4-аминопиридина в плазме, в индивидуальных пробах, полученных при каждом посещении клиники, определяли с помощью утвержденного метода жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии в центральной лаборатории.

Безопасность оценивали путем мониторинга нежелательных явлений, показателей жизненно важных функций, клинических лабораторных тестов и регистрации ЭКГ.

Статистический анализ. Программное обеспечение для статистического анализа (например, 8А8) использовали для анализа данных, при этом статистическую значимость показывали р-значения <0,05. Все тесты были двухсторонними. Первичный анализ эффективности был основан на всех рандомизированных пациентах, имевших по меньшей мере одну оценку эффективности Τ25ΡV в течение двойного слепого периода терапии (проспективно определенная популяция с назначенной терапией (1ТТ)).

Первичной переменной эффективности являлся статус респондера, основанный на сохранении повышения скорости ходьбы. Респондер в ходьбе на время был определен как пациент с более высокой скоростью ходьбы по меньшей мере в трех из первых четырех посещений в течение двойного слепого периода терапии по сравнению с максимальной скоростью при любом из пяти посещений без приема лекарственного средства (четыре до двойной слепой терапии, одно через две недели после прекращения терапии: то есть скрининг и посещения 0, 1, 2 и 8). Различия в процентных соотношениях респондеров в ходьбе на время между группами, получавшими 4-аминопиридин, и группой плацебо были проанализированы с использовнием критерия Кохрана-Мантела-Хенсела, контролируемом по центру. Оценки, сделанные при пятом двойном слепом посещении (посещение 7), были разработаны для анализа потенциальных изменений концентрации в плазме и эффективности лекарственного средства к исходу 12часового интервала между приемом доз.

Что касается вторичной переменной эффективности (среднее изменение балла ЬЕММТ относительно базового уровня) для сохранения общего уровня значимости, меньшего или равного 0,05, перспективно определенную, пошаговую процедуру планировалось осуществить в том случае, если для первичной переменной эффективности имелась значимость. Сначала предстояло сравнить изменение балла ЬЕММТ относительно базового уровня в течение 8-недельного двойного слепого периода оценки эффективности у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время и у пациентов в группе плацебо. Если между двумя указанными группами было статистически значимое различие, то тогда можно было бы сравнивать изменение балла ЬЕММТ у получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время и в группе плацебо. Указанные сравнения проводили с использованием модели ΑΝΟνΑ, с эффектами по группам в анализе респондеров и центру. Исходный балл для каждого пациента являлся средним значением всех баллов до рандомизации (от скрининга до посещения 2).

Дополнительные апостериорные анализы проводили с целью сравнения наблюдений в данном исследовании с наблюдениями в предыдущем испытании фазы 3, которое включило множество дополнительных перспективных анализов. Были включены следующие тесты. Среднее изменение балла Μ8V8- 54 022755 относительно базового уровня в течение двойного слепого периода терапии анализировали относительно статуса респондера (респондеры в ходьбе на время в сравнении с нереспондерами). Аналогичные анализы проводили в отношении 801 и С01. Изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в течение двойного слепого периода терапии анализировали для трех групп анализа респондеров (плацебо, нереспондеры 4-аминопиридина в ходьбе на время и респондеры 4-аминопиридина в ходьбе на время) с ΐ-критериями средних наименьших квадратов при использовании среднеквадратичной ошибки посредством модели ΑΝΟνΑ с эффектами по группам анализа респондеров и центру.

На основании результатов предыдущих исследований, размер выборки 92 пациентов, получавших 10 мг 4-аминопиридина-8К Ъл.б, и 92 пациентов, получавших плацебо, обеспечивал приблизительно 90% мощность при общем уровне значимости 0,05, выявляя различие между частотой ответов на лекарственное средство 30% и частотой ответов на плацебо 10%. Чтобы гарантировать, что исследование завершат по меньшей мере 184 пациента, приблизительно 100 пациентов планировалось рандомизировать в каждую группу.

Результаты. Исследование в данном примере показало, что улучшение способности к ходьбе сохранялось в течение всего 12-часового интервала между приемом доз. В общей сложности 240 пациентов были включены в испытание. На фиг. 15 показано распределение пациентов и причины досрочного прекращения. Один пациент прекратил участие перед рандомизацией. Все 239 рандомизированных пациентов принимали по меньшей мере одну дозу исследуемого лекарственного средства и были включены в популяцию оценки безопасности. Два пациента не проходили оценок эффективности и были исключены из популяции с назначенной терапией, которая включала 237 пациентов (118 плацебо, 119 4аминопиридин). Двести двадцать семь (227; 114 плацебо/113 4-аминопиридин) пациентов прошли полный курс исследования. Группы терапии были сопоставимы по исходным демографическим переменным, переменным характеристик болезни и переменным эффективности (табл. 14). Только одного пациента в каждой группе терапии сочли несоблюдающим режим исследования лекарственного средства.

Количество пациентов, которые удовлетворяли критерию респондера, то есть количество респондеров в ходьбе на время, составило 51 из 119 (42,9%) в группе терапии 4-аминопиридином и 11 из 118 (9,3%) в группе, получавшей плацебо (р<0,0001; отношение шансов Мантела-Хенсела [ОК] 8,14; 95% С1=3,73, 17,74).

Среднее изменение скорости ходьбы относительно базового уровня у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время в течение периода анализа эффективности (посещения 3-6) составило 24,7% (95% С1=21,0%, 28,4%) или 0,51 футов/с (95% С1=0,43, 0,59) в сравнении с изменением в группе плацебо 7,7% (95% С1=4,4%, 11,0%) или 0,17 футов/с (95% С1=0,10, 0,23). Получавшие 4-аминопиридин нереспондеры в ходьбе на время не показали различий среднего ответа от группы, получавшей плацебо, среднее изменение в течение терапии составило 6,0% (95% С1=2,2%, 9,7%) или 0,12 футов/с (95% С1=0,05, 0,19). Увеличение скорости ходьбы у получавших 4-аминопиридин респондеров сохранялось в течение всего периода двойной слепой терапии и полностью исчезало при прекращении терапии (фиг. 16).

Улучшение скорости ходьбы относительно базового уровня у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время при первой оценке в посещение 7 (полученной при заборе плазмы для измерения концентрации 4-аминопиридина) составило 25,7% (95% С1=19,8%, 31,7%). Среднее повышение скорости ходьбы у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время при посещении 7 анализировали для оценки временных интервалов чере 9-10 ч, 10-11 ч и 11-12 ч после приема дозы и, как установили, составило 25,5%, 25,3% и 20,1% соответственно.

Средние изменения баллов М8ХУ8-12 относительно базового уровня в течение двойного слепого периода терапии составляли -6,04 (95% С1=-9,57, -2,52) у респондеров в ходьбе на время по сравнению с 0,85 (С1 -0,72, 2,43) у нереспондеров в ходьбе на время независимо от назначения терапии, показывая снижение неспособности к ходьбе при самооценке у респондеров в ходьбе на время. Все 12 пунктов теста показали среднее уменьшение балла инвалидности в группе респондеров в ходьбе на время по сравнению с группой нереспондеров, что свидетельствует об улучшении в целом ряде сфер повседневной активности, связанных с ходьбой. Пациенты, идентифицированные как респондеры в ходьбе на время, также имели более положительные баллы 801 по сравнению с нереспондерами (средний балл 4,76 против 4,21, срединный балл 4,63 против 4,00), а также получили более высокие баллы С01, чем нереспондеры (средний балл 3,38 против 3,75, срединный балл 3,5 против 4,0).

Среднее улучшение балла ЬЕММТ для респондеров фампридина-8К в ходьбе на время в течение двойного слепого периода составило 0,145 единиц по сравнению с 0,042 единицами для группы плацебо; это являлось статистически значимым различием (р=0,028). ЬЕММТ для получавшей фампридин-8К группы нереспондеров в ходьбе на время (среднее улучшение 0,048 единиц) не был значимо отличен ни от группы респондеров фампридина-8К в ходьбе на время, ни от группы плацебо.

Дополнительный анализ эффективности. В дополнение к запланированному анализу частоты ответа, получавшая 4-аминопиридин группа в целом была сопоставима с группой, получавшей плацебо.

На основании данного прямого сравнения групп терапии, группа, получавшая 4-аминопиридин (в целом), статистически значительно превосходила группу плацебо по среднему процентному изменению скорости ходьбы относительно базового уровня (р=0,007), среднему изменению балла по шкале Ашворта

- 55 022755 относительно базового уровня (р=0,015), среднему изменению балла по шкале МЗХУЗ-12 относительно базового уровня (р=0,021) и СС1 в конце двойного слепого периода (р=0,002). Среднее изменение балла ЗС1 говорило в пользу группы, получавшей 4-аминопиридин.

Ослепление исследования. В краткой анкете субъекта 45% получавших 4-аминопиридин пациентов и 45% получавших плацебо пациентов правильно оценили их назначение терапии. Ответы в краткой анкете клинического врача показали, что клинические врачи в конце исследования правильно идентифицировали назначение лекарственного средства у 38% получавших 4-аминопиридин пациентов и 35% получавших плацебо пациентов, что указывает на отсутствие какого-либо существенного демаскирования пациентов или ведущих исследование клинических врачей вследствие проявления побочных эффектов.

Исходные характеристики получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время. Группы анализа респондеров (получавшие 4-аминопиридин респондеры, получавшие 4-аминопиридин нереспондеры и пациенты, получавшие плацебо) представлялись сопоставимыми при базовых уровнях (табл. 14) по всем переменным эффективности и демографическим переменным, исходным симптомам рассеянного склероза (включая чувствительность к повышенной температуре и поражение мозжечка), а также другим клиническим характеристикам, таким как балл ЕЭЗЗ. форма течения заболевания и предыдущее лечение. Большинство пациентов находились на постоянной терапии иммуномодуляторами, и это не отличалось между группами терапии или группами респондеров. Было небольшое различие в распределении по половому признаку между группами, получавшими 4-аминопиридин и плацебо, но не было никакой связи между полом и ответом при первичной конечной точке, причем данный дисбаланс не влиял на результат эффективности.

Концентрации 4-аминопиридина в плазме. Средние концентрации 4-аминопиридина в плазме в группе, получавшей 4-аминопиридин, находились в пределах 28,5-30,2 нг/мл в каждом из первых четырех двойных слепых посещений со стандартными отклонениями 11,2-13,3 нг/мл и полным диапазоном 087,3 нг/мл. Время проведения забора плазмы по отношению к времени приема предыдущей дозы исследуемого лекарственного препарата свободно колебалось в зависимости от графика посещений клиники при указанных четырех посещениях. Средняя концентрация в плазме при посещении 7, в пробах, забранных во время первой из трех оценок эффективности, составила 21,2±9,7 с диапазоном 0-56,4 нг/мл. Время проведения забора плазмы при данном посещении, как было намечено, началось в интервале 8-10 ч после приема дозы с целью сбора данных по эффективности в течение последующих 2 ч, начиная с конца периода между приемом доз.

На фиг. 24 приведены данные группы индивидуальных пациентов с рассеянным склерозом в формальном фармакокинетическом исследовании. Исследование, представленное на фиг. 24, было привязано не к эффективности, а скорее к фармакокинетике. Как можно видеть, концентрации 4-аминопиридина в плазме снижались по мере приближения пациентов к 12-часовой точке (как можно было бы ожидать в случае лекарственной формы, вводимой два раза в день).

Отдельно идентифицировали С_тш88 настоящего изобретения, причем указанная С_тш88 наслоена по данным на фиг. 24. Представленная информация указывает, что предпочтительный вариант осуществления изобретения, включающий 10 мг 4-аминопиридина-ЗК, индуцирует минимальные уровни концентрации, которые превышают терапевтический порог.

В исследовании МЗ-Р204 пациентов тестировали в ходьбе на время на дистанции 25 футов в течение последних 3 ч цикла дозирования, при этом пациентов тестировали три раза с часовым интервалом между оценками, чтобы собрать данные по ходьбе в течение этого конца периода между приемом доз. Данные из этого исследования представлены на фиг. 25. На фиг. 25 показано процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня до терапии в четырех периодах времени. Слева на фигуре первые точки данных представляют среднее значение (среднее±95%-ные доверительные интервалы) за четыре предыдущих посещения эффективности (посещения 3-6). Три указанных временных интервала справа на фиг. 25 представляют изменения относительно базового уровня в течение последних 3 ч 12часового периода дозирования и нанесены изменения скорости, измеренной в пределах показанных столбиков времени. На фигуре показано процентное увеличение скорости ходьбы относительно базового уровня у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время (РК на фигуре) в красном цвете, получавших 4-аминопиридин нереспондеров в ходьбе на время (ΕΝΡ на фигуре) в синем цвете и пациентов плацебо в черном цвете.

Было обнаружено, что 25%-ное повышение скорости ходьбы у респондеров в ходьбе на время, отмеченное при посещениях 3-6, сохранялось до последнего часа периода между приемом доз, причем в данной точке уменьшение среднего изменения относительно базового уровня составляло 20%, таким образом, имелось свидетельство уменьшения эффективности в период от 11 до 12 ч по меньшей мере в подгруппе указанных респондеров, как можно было бы ожидать в случае режима приема дозы два раза в день. Аналогичные графики показаны для объединенных данных из исследований МЗ-Р203 и МЗ-Р204 на фиг. 30. При приеме дозы два раза в день С_тш88 приблизительно соответствует моменту, когда пациент принимает следующую дозу.

Как показано на фиг. 26, пробы плазмы забирали для оценки концентраций 4-аминопиридина во

- 56 022755 всех посещениях в исследовании Μδ-Ρ204. После этого исследовали отношения между концентрацией в плазме и временем, прошедшим после приема дозы, которые отражают фармакокинетику 4аминопиридина в течение режима дозирования.

Для определения порога терапевтической эффективности концентрации 4-аминопиридина (как показано на фиг. 26) наносили на график против изменения скорости ходьбы, измеренной в том же посещении, в котором была получена каждая проба плазмы; данные этого анализа представлены на фиг. 27. На фиг. 27 измерения концентрации в плазме находятся на горизонтальной оси, организованной приращениями концентрации в плазме на 2 нг/мл, а % изменения скорости ходьбы относительно базового уровня нанесены по вертикальной оси. Представленные данные также нанесены на фиг. 28, организованной приращениями на 5 нг/мл.

Как можно четко видеть на фиг. 27, при понижении концентрации ниже 15 нг/мл наблюдается снижение повышенной скорости ходьбы, и, в особенности, при понижении концентрации ниже 13 нг/мл наблюдается заметное снижение повышенной скорости ходьбы. Наоборот наблюдается улучшение ходьбы выше 13 нг/мл, при этом улучшение ходьбы достигает относительного плато выше приблизительно 15 нг/мл.

Представленные данные также коррелируют с небольшим снижением эффективности в послений час интервала между дозами (фиг. 25), в момент приближения пациента к своей С_тшкк в режиме приема дозы два раза в день. Таким образом, в связи с предпочтительной в настоящий момент лекарственной формой с замедленным высвобождением доза 10 мг идеальна для сохранения эффективности в режиме приема дозы два раза в день у большинства пациентов. Из приведенной информации видно, что какоелибо четкое усиление благоприятного эффекта в отношении скорости ходьбы при более высоких концентрациях в плазме отсутствует. Нужно понимать, что другие лекарственные формы и режимы дозирования также включены в объем настоящего изобретения. В варианте осуществления настоящее изобретение включает достижение нового желаемого терапевтического уровня или нового желаемого терапевтического диапазона.

Таким образом, предпочтительные способы в соответствии с настоящим изобретением (например, способы лечения рассеянного склероза, или способ улучшения ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, или способ получения терапевтически эффективного уровня 4-аминопиридина у пациента с рассеянным склерозом) включают введение 4-аминопиридина указанному пациенту таким образом, что достигается С_тшкк в диапазоне по меньшей мере от 12 до 20 нг/мл.

В альтернативе способ в соответствии с изобретением (например, способ лечения рассеянного склероза, или способ улучшения ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, или способ получения терапевтически эффективного уровня 4-аминопиридина у пациента с рассеянным склерозом) включает введение 4-аминопиридина указанному пациенту, при котором достигается С_тшкк, равная по меньшей мере или превышающая 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25 нг/мл; в варианте осуществления С_тшкк находится в диапазоне 20 нг/мл; в варианте осуществления указанный диапазон находится между 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 или 19 и 20 нг/мл; в варианте осуществления С_т1пкк находится в диапазоне 15-25 нг/мл; в варианте осуществления С_тшкк находится в диапазоне 17-23 нг/мл; в варианте осуществления С_т1пкк находится в диапазоне 18-22 нг/мл; в варианте осуществления С_т1пкк находится в диапазоне 19-21 нг/мл; в варианте осуществления С_т1пкк находится в диапазоне, в котором нижнее значение выбрано из группы 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 нг/мл, а верхнее значение выбрано из группы 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 или 27 нг/мл, при этом следует понимать, что это означает, что предусматривается любая конкретная комбинация, например, без ограничения, диапазон 16-23 нг/мл, 12-24 нг/мл, 13-27 нг/мл и т.п.

В варианте осуществления есть способ в соответствии с изобретением (например, способ лечения рассеянного склероза, или способ улучшения ходьбы у пациента с рассеянным склерозом, или способ получения терапевтически эффективного уровня 4-аминопиридина у пациента с рассеянным склерозом), включающий введение терапевтически эффективного количества 4-аминопиридина указанному пациенту, при котором достигается С_т1пкк в диапазоне по меньшей мере от 12 до 15 нг/мл; в варианте осуществления достигается С_тшкк в диапазоне по меньшей мере от 13 до 15 нг/мл. В объем настоящего изобретения включено, что значение приблизительно в отношении любого из значений, приведенных в настоящей заявке, включено в объем изобретения; следует понимать, что без ограничения значение приблизительно, в частности, нг/мл, включает плюс или минус 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 или 0,1 нг/мл.

Обсуждение.

Нарушение ходьбы является основной особенностью инвалидности, вызываемой рассеянным склерозом, и главным фактором при оценке прогрессии заболевания. Основной целью данного исследования являлась оценка эффективности и безопасности 4-аминопиридина с замедленным высвобождением при лечении нарушения ходьбы при рассеянном склерозе и подтверждение результатов более раннего исследования.

Первичный результат эффективности был основан на скорости ходьбы, измеренной в Τ25ΡV при использовании анализа частоты ответа, который позволял оценить сохранение улучшения в течение терапии. Более раннее исследование показало, что стойкое повышение скорости ходьбы обеспечивало бо- 57 022755 лее чувствительный критерий, чем произвольный порог для средней величины изменения скорости. В целом, результаты клинических испытаний 4-аминопиридина при рассеянном склерозе показали, что хотя подгруппа пациентов может отвечать на препарат с проявлением четких положительных клинических эффектов в отношении любого конкретного функционального показателя, например силы ног или мышечной спастичности, они не обязательно перекрывались с реакциями тех пациентов, у которых наблюдали ответ в отношении ходьбы.

Селективность ответа может быть связана с предложенным на настоящий момент механизмом действия, улучшение проводимости демиелинизированных путей вследствие блокады потенциалозависимых калиевых каналов. Можно ожидать, что только некоторая часть пациентов будет иметь аксоны, подходящие к специфической функции, аксоны, чувствительные к действию лекарственного препарата в тот или иной момент.

Пациенты, испытывающие повышение скорости ходьбы при большинстве посещений во время приема исследуемого лекарственного препарата по сравнению с наиболее высокой скоростью ходьбы в течение периода без терапии, были определены как респондеры в ходьбе на время. Процент пациентов в 1ТТ-популяции, которые удовлетворяли указанному критерию, составил 42,9% в группе, получавшей 4аминопиридин, по сравнению с 9,3% в группе, получавшей плацебо, при этом данное различие не только характеризовалось высокой значимостью, но и согласовывалось с результатами двух предыдущих испытаний.

Величина улучшения, измеряемого по среднему изменению скорости ходьбы в течение двойного слепого эффективного периода (посещения 3-6), составляла 24,7% у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время по сравнению с 7,7% в группе плацебо. Среднее повышение скорости ходьбы при каждом двойном слепом посещении (посещения 3-7) было выше в группе получавших 4аминопиридин респондеров в ходьбе на время, чем в группе плацебо, при этом было показано стойкое сохранение эффекта в течение восьми недель оценки эффективности и терапии. Величина и сохранение изменения также были аналогичны наблюдаемым в двух предыдущих исследованиях в течение более длительных периодов терапии.

Показатели М§\У§-12, §01 и С01 были включены в целях интегрированного анализа в исследованиях, наблюдаемые изменения данных показателей были аналогичны по направлению и величине изменениям, отмеченным в двух предыдущих испытаниях. В частности, наблюдали четкие улучшения всех трех показателей у респондеров в ходьбе на время в сравнении с нереспондерами в ходьбе на время, согласуемые с валидацией клинического значения критерия ответа в ходьбе на время, которую проводили ранее.

В данном или в предыдущих исследованиях не было никакого признака какого-либо различия между получавшими 4-аминопиридин респондерами в ходьбе на время и нереспондерами по исходным демографическим параметрам, симптоматологии рассеянного склероза или любым другим показателям, регистрируемым в рамках исследования.

Не ограничиваясь какой-либо теорией и на основе предложенного механизма действия, восприимчивость отдельных пациентов по отношению к эффектам терапии может быть связана с конкретными характеристиками распределения и миелинизации очагов в их центральной нервной системе.

Впрочем, критерий ответа респондер или нереспондер является статистическим инструментом, а не биологическим анализом ответа на лекарственный препарат, и тот факт, что данный статистический критерий дает полную или не дает ни какую классификацию ответа, вовсе не означает, что он отражает все или не отражает ни одного биологического явления.

Например, у пациентов с лежащим в основе негативным путем прогресии тяжести заболевания статистический алгоритм не позволил бы идентифицировать ответ пациента на терапию со снижением степени функционального ухудшения. В равной степени могут быть пациенты с положительными тенденциями в основном состоянии болезни, что могло бы привести к тому, что такие пациенты удовлетворяли бы критерию ответа даже в группе, получающей плацебо.

Другая цель исследования состояла в том, чтобы определить, сохранялась ли эффективность в течение 12-часового периода между приемом доз. Это было решено требованием при последнем двойном слепом посещении (посещение 7) проведения трех оценок скорости ходьбы (с одночасовым интервалом) между 8 и 12 часами после приема последней дозы исследуемого лекарственного средства. Это показало, что повышение скорости ходьбы у получавших 4-аминопиридин респондеров в ходьбе на время значительно не уменьшалось к концу периода между приемом доз по сравнению с оценками, сделанными в течение нормального курса исследования.

Хотя средняя концентрация 4-аминопиридина в плазме уменьшалась приблизительно на 25% во время первой оценки при посещении 7, какого-либо снижения среднего увеличения скорости ходьбы относительно базового уровня не было (25,7% по сравнению со средним значением 24,7% в посещениях 3-6). Уменьшения концентраций 4-аминопиридина в центральной нервной системе могут быть задержены по отношению к снижению уровней в плазме, с учетом задержки, наблюдаемой ранее в отношении пиковых концентраций в спинно-мозговой жидкости по сравнению с плазмой.

Повышение скорости ходьбы относительно базового уровня показало снижение показателей во

- 58 022755 временном окне 11-12 ч после введения дозы (в среднем до 20,1%); однако данное изменение, возможно, также являлось результатом повторной оценки в указанном посещении и элементом усталости, в особенности при третьей оценке.

Значительно более высокий процент получавших 4-аминопиридин пациентов показали положительный ответ со стойким улучшением скорости ходьбы, причем это сохранялось в течение 12-часового периода между приемами доз. Данное исследование подтверждало результаты предыдущего испытания, показывая, что терапия 4-аминопиридином производит клинически значимое улучшение способности к передвижению в подгруппе людей с РС. Два указанных исследования показали, что 4-аминопиридин является ценным и новым классом средств для терапии РС. Предполагаемый механизм действия 4аминопиридина состоит в том, что он модулирует нервную функцию путем повышения проводимости, предпочтительно такие функциональные возможности могут дополнять иммуномодулирующую терапию.

Таблица 14

Исходные демографические параметры и характеристики заболевания

Популяция оценки	Плацебо		4-аминопиридин
безопасности#	N=119	Всего N=120	Респондеры N=51	Нереспондеры N=69

Возраст, лет, среднее±5Л (Диапазон)	51,7 + 9, 8 (24-70)	51,8+9,6 (25-73)	53,7+10,1 (25-73)	50,4 + 8, 9 (28-70)
Пол, N (%)
Мужчины	45 137,8)	32 (26,7)	13 (25,5)	19 127,5)
Женщины	74 162,2)	88 (73,3)	38 (74,5)	50 172,5)
Раса, N (%)
Белые	105 (88,2)	113 (94,2)	47 (92, 2)	66 (95, 7)
Афроамериканцы	9 (7,6)	3 (2,5)	1 (2,0)	2 (2,9)
Ла тино американцы	2 (1,7)	2 (1,7)	1 (2,0)	1 И,4)
Представители коренного населения США	1 10,8)	0	0	0
Индейцы/уроженцы Аляски Местные жители
Прочие	2 (1,7)	2 (1,7)	2 (3,9)	0
Форма течения РС, N (%)
Возвратно-ремиттирующий	40 (33,6)	43 (35,8)	16 (31,4)	27 (39,1)
Первично-прогрессирующий	21 (17,6)	10 (8,3)	5 (9,8)	5 (7,2)
Вторично-прогрессирующий	56 (47,1)	62 (51,7)	28 (54, 9)	34 (49,3)
Возвратно-прогрессирующий	2 (1,7)	5 (4,2)	2 (3,9)	3 (4,3)
Иммуномодулирующая терапия *	83 (69,7)	83 (69,2)	33 (64,7)	50 (72,5)
Продолжительность заболевания, лет, среднее+50 (Диапазон)	13,1+8,7 (0,1-34,1)	14,4+9,5 (0, 5-45, 6)	16,1+10,8 (0, 6-45,6)	13,2+8,3 (0, 5-35,2)
Балл Εϋ53, среднее+ЗО (Диапазон)	5,6+1,2 (1,5-7, 0)	5,8±1,0 (2, 5-6,5)	5,9+0,9 (3, 0-6, 5)	5,8 + 1,0 (2,5-6, 5)

Пример 3.

4-Аминопиридин с замедленным высвобождением улучшал скорость ходьбы при широком диапазоне исходных дефицитов: объединенные данные трех плацебо-конторолируемых исследований на пациентах с рассеянным склерозом.

В данном примере исследовали величину повышения скорости в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Т25Р^) относительно базового уровня у пациентов с рассеянным склерозом (РС), по- 59 022755 лучавших 10 мг 4-аминопиридина^К два раза в день или плацебо, в трех исследованиях.

Дизайн/методы. Все пациенты из Μδ-Ρ202, Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 были включены в объединенный анализ. Пациенты с клинически подтвержденным диагнозом рассеянного склероза были рандомизированы в группы 10 мг 4-аминопиридин^К два раза в день или плацебо в течение 14 недель. Первичную переменную эффективности определяли как более высокая скорость ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25Ρν) по меньшей мере в 3 из 4 двойных слепых эффективных посещений по сравнению с максимальной скоростью ходьбы в любом из 5 посещений без терапии и определяли проспективно для Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 и ретроспективно в Μδ-Ρ202. Средняя скорость ходьбы (νδ) в четырех базовых посещениях и четырех посещения с терапией сравнивали по терапии и статусу ΤνΚ.

Результаты. Объединенная популяция включала 631 пациента с рассеянным склерозом (237 плацебо и 394 10 мг два раза в день 4-аминопиридина^К). Процент респондеров в группе плацебо составил 8,9% (п=21) по сравнению с 37,3% (п=147) в группе 4-аминопиридина^К. Базовая νδ изменялась в пределах 0,3-4,8 футов/с. Процент респондеров и процентные изменения νδ у ΤνΚ в популяции 4аминопиридина-δΚ были аналогичны в указанном диапазоне. Среднее повышение νδ у 4аминопиридина-δΚ ΤνΚδ составило 25,3% (диапазон 3,9%-110,4%).

Указанные обнаруженные улучшения включали два результата. Во-первых, они обеспечили более высокий процент ΤνΚδ, чем пациенты плацебо, переместившись с νδ, связанной с перемещением только дома (<1,3 футов/с), до ограниченного перемещения вне дома. Кроме того, указанные улучшения обеспечили более высокий процент ΤνΚδ, чем пациенты плацебо, переместившись с νδ, связанной с ограниченным перемещением вне дома (1,3-2,6 футов/с) до свободного перемещения вне дома (>2,6 футов/с).

Не было никаких значительных различий в сигналах безопасности между ΤνΚ и нереспондерами.

Повышения νδ у пациентов с рассеянным склерозом, получавших 4-аминопиридина^К, являются независимыми от базовой νδ; указанные улучшения являются клинически значимыми.

Пример 4.

Ответ на терапию 4-аминопиридином с замедленным высвобождением у пациентов с рассеянным склерозом не зависит от исходных показателей пациента и сопутствующей иммуномодулирующей терапии.

В данном примере исследовали эффективность фампридина-δΚ (4-аминопиридина^К) у пациентов с рассеянным склерозом (РС) в отношении характеристик заболевания и сопутствующей терапии в объединенном анализе трех рандомизированных контролируемых испытаний.

Дизайн/методы. Анализы подгрупп проводили для оценки сохранения эффекта 4-аминопиридинаδΚ в отношении статуса респондера в ходьбе на время (ΤνΚ) в пуле из 631 пациентов с рассеянным склерозом из испытаний Μδ-Ρ202, Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 4-аминопиридина^К (10 мг два раза в день в сравнении с плацебо).

Все пациенты из Μδ-Ρ202, Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 были включены в объединенный анализ. Пациенты с клинически подтвержденным диагнозом рассеянного склероза были рандомизированы в группы 10 мг два раза в день 4-аминопиридина^К или плацебо в течение 14 недель. Первичная переменная эффективность была определена как более высокая скорость ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25Ρν) по меньшей мере в 3 из 4 двойных слепых эффективных посещений по сравнению с максимальной скоростью ходьбы в любом из 5 посещений без терапии и была определена проспективно для Μδ-Ρ203 и Μδ-Ρ204 и ретроспективно в Μδ-Ρ202.

Результаты. Исходная популяция исследования включала 631 пациента с рассеянным склерозом, 67,5% женщин, 32,5% мужчин, со средним возрастом 51,5 лет (диапазон 24-73 года). Различие в процентном соотношении ΤνΚ между подгруппами, получавшими 4-аминопиридин^К и плацебо, не зависело от демографических параметров (пол, возраст, индекс массы тела (ΒΜΙ)), формы течения болезни (возвратно-ремиттирующий, вторично-прогрессирующий, первично-прогрессирующий, возвратнопрогрессирующий), исходного индекса ΕΌδδ (диапазон 1,5-7,0) или продолжительности болезни (диапазон 0,1-45,6 лет).

Процент 4-аминопиридина^К ΤνΚδ также не был связан с терапией стандартными иммуномодулирующими средствами, включая интерфероны (36,8%), глатирамера ацетат (37,1%) или натализумаб (27,3%) по сравнению с 39,8% у лиц, не использующих иммуномодуляторы. Не было никаких существенных различий в сигналах безопасности между подгруппами иммуномодуляторов, при сравнении с или без сопутствующей иммуномодулирующей терапии. Таким образом, не было никаких проблем с безопасностью при совместном введении 4-аминопиридина^К и иммуномодуляторов.

Терапия 4-аминопиридином^К была эффективна, как показано статусом ΤνΚ, при этом эффективность не изменялась в зависимости от характеристик рассеянного склероза, пола, возраста, ΒΜΙ или сопутствующей терапии иммуномодулирующими средствами.

Пример 5. Характеристики повышения скорости ходьбы, наблюдаемого в трех плацебоконтролируемых исследованиях 10 мг два раза в день 4-аминопиридина с замедленным высвобождением у пациентов с рассеянным склерозом.

Данный пример дополнительно характеризовал первичную конечную точку статуса респондеров в

- 60 022755 ходьбе на время (ΤνΚ) у пациентов с рассеянным склерозом (РС) в трех двойных слепых, плацебоконтролируемых исследованиях фампридина-δΚ (4-аминопиридина-8К) при дозе 10 мг два раза в день.

Дизайн/методы. Все пациенты из Μ8-Ρ202, Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204 были включены в объединенный анализ. Пациенты с клинически подтвержденным диагнозом рассеянного склероза были рандомизированы в группы 10 мг два раза в день 4-аминопиридина-8К или плацебо в течение 14 недель. Первичная переменная эффективность была определена как более высокая скорость ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25Ρν) по меньшей мере в 3 из 4 двойных слепых эффективных посещений по сравнению с максимальной скоростью ходьбы в любом из 5 посещений без терапии и была определена проспективно для Μ8-Ρ203 и Μ8-Ρ204 и ретроспективно в Μ8-Ρ202.

Результаты. Популяция исследования включала 631 пациента с рассеянным склерозом. Процент ΤνΚ в трех исследованиях составил 37,3% в группе 4-аминопиридина-8К по сравнению с 8,9% в плацебо (р<0,001 объединенные и для Μ8-Ρ203/204 отдельно; р<0,01 для Μ8-Ρ202). 4-Аминопиридин-8К ΤνΚδ показали среднее улучшение 25,3% (диапазон 3,9-110,4%). В группе Τν нереспондеров, получавших 4-аминопиридин-8К, наблюдали изменения относительно базового уровня, аналогичные группе плацебо (6,29 и 5,76% соответственно), что указывает на то, что критерий ΤνΚ эффективно отделял эффекты терапии от посторонних изменений.

Альтернативный анализ респондеров проводили, используя заданные пороги процентных улучшений. Указанные анализы следующим образом также показали значительно большее количество пациентов, принимавших 4-аминопиридин-8К, по сравнению с плацебо, имевших среднее увеличение скорости ходьбы относительно базового уровня, составляющее по меньшей мере 10, 20, 30 или 40% (р-значения <0,05), хотя простые пороговые критерии были менее специфичными в отношении эффектов терапии, чем ΤνΚ.

Было показано, что ΤνΚ эффективен при отделении респондеров от нереспондеров. Кроме того, было показано, что ΤνΚ эффективен при отделении эффектов терапии от изменений, связанных с болезнью.

Кроме того, в отношении терапии 10 мг два раза в день 4-аминопиридина-8К, указанная терапия вызывала среднее улучшение скорости ходьбы 25% относительно базового уровня.

Пример 6. Промежуточный анализ открытых расширенных исследований 4-аминопиридина с замедленным высвобождением на пациентах с рассеянным склерозом.

Данный пример обеспечивает промежуточную оценку эффективности и безопасности 4аминопиридина с замедленным высвобождением (фампридина-δΚ, Р-δΚ) у пациентов с рассеянным склерозом (РС), участвующих в продолжающихся расширенных открытых исследованиях.

Два двойных слепых исследования фазы 3 (Μ8-Ρ203/Μ8-Ρ204) 4-аминопиридина-8К на пациентах с рассеянным склерозом продемонстрировали повышение скорости ходьбы (νδ) при использовании ходьбы на время на дистанции 25 футов. Указанные улучшения сохранялись в открытых расширенных исследованиях (Μ8-Ρ203ΕΧΤ/Μ8-Ρ204ΕΧΤ).

Дизайн/методы. В Μ8-Ρ203ΕΧΤ/Μ8-Ρ204ΕΧΤ пациенты постоянно получали 10 мг два раза в день и подвергались оценке в клинике через 2, 14, 26 недель после начала открытой терапии, а затем через каждые 6 месяцев. Пациенты, получавшие 4-аминопиридин-8К в двойных слепых исследованиях, были классифицированы на основании того, действительно ли они являлись двойным слепым респондером в ходьбе на время (ΌΒΤνΚ); ΌΒΤνΚ был определен как пациент, показавший более высокую νδ по меньшей мере в 3 из 4 двойных слепых эффективных посещений по сравнению с максимальной νδ в любом из 5 посещений без терапии.

Результаты. Из указанных 212 пациентов, получавших 4-аминопиридин-δΚ в Μδ-Ρ203, 197 участвовали в расширенном исследовании и проходили по меньшей мере одно измерение νδ; из 113 пациентов, получавших 4-аминопиридин-δΚ в Μδ-Ρ204, 109 пациентов участвовали в Μδ-Ρ204ΕΧΤ и проходили по меньшей мере одно измерение νδ.

В Μδ-Ρ203ΕΧΤ улучшение νδ, наблюдаемое в двойном слепом исследовании, пропадало после прекращения приема 4-аминопиридина-δΚ, но восстанавливалось при первом эффективном посещении в расширенном исследовании. Через 2,5 года участия в Μδ-Ρ203 среднее изменение относительно базового уровня у ΌΒΤνΚδ оставалось выше исходного базового уровня, тогда как у поп-ΌΒΤνΚδ уменьшился ниже исходного базового уровня.

Аналогичный анализ, проводимый для Μδ-Ρ204/Μδ-Ρ204ΕΧΤ, показал подобные результаты на момент прекращения регистрации данных через 1,2 года участия в Μδ-Ρ204.

Не было выявлено никаких существенных различий в переносимости между ΌΒΤνΚδ и попΌΒΤνΚδ в каком-либо из расширенных исследований и не было идентифицировано никаких новых сигналов безопасности.

Подгруппа пациентов с рассеянным склерозом, получавших 4-аминопиридин-δΚ, показали повышение скорости ходьбы, которое сохранялось на уровне выше базового до 2,5 лет в течение открытой терапии. Никаких новых сигналов безопасности не появилось.

Пример 7.

4-Аминопиридин улучшал ходьбу у пациентов с рассеянным склерозом согласно объединенным данным из трех клинических испытаний.

- 61 022755

Данный пример оценивает фампридин-8К (таблетки 4-аминопиридина с замедленным высвобождением, Ό-ЕК, ΑМΡΥКΑ™) на предмет вызываемого им улучшения ходьбы у пациентов с рассеянным склерозом (РС), определяемого по скорости ходьбы (\νδ) при использовании данных из объединенного анализа трех рандомизированных, плацебо-контролируемых, мультицентровых испытаний (М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204) с увеличением, таким образом, статистической мощности.

Методы. Данные пациентов, которые получали терапевтическую дозу 4-аминопиридина-8К 10 мг два раза в день, из трех рандомизированных контролируемых испытаний (М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204) объединяли (п=394) и сравнивали с плацебо (п=237). Сравнительные анализы были основаны на процентном изменении \У8 относительно базового уровня при использовании ходьбы на время на дистанции 25 футов. При выполнении указанных вычислений базовое значение было определено как среднее значение в четырех посещениях до терапии, а терапевтическое значение было определено как среднее значение в двойных слепых посещениях. Процентное изменение в объединенных популяциях при каждом двойном слепом посещении оценивали по временному интервалу, чтобы вычислить различия в графиках исследования (дни 1-21, 22-49, 50-77 и 78 - конец двойной слепой фазы). Процентные изменения были проанализированы с помощью дисперсионного анализа с эффектами по группам терапии, исследованию и участку в рамках исследования.

Результаты. Демографические и клинические характеристики были аналогичны для групп терапии и плацебо. Полное процентное изменение значительно улучшилось на 13,4% (95% С1 11,6-15,1%) в группе 4-аминопиридина-8К по сравнению с плацебо 5,8% (95% С1 3,6-8,0%) (р<0,001) относительно исходных значений, которые были аналогичны в группах 4-аминопиридина-8К и плацебо (среднее (8Ό) 2,05 (0,76) футов/с для 4-аминопиридина-8К; 2,09 (0,74) футов/с для плацебо). Указанные результаты согласовывались с отдельными исследованиями.

Значительно больший процент пациентов в группе 4-аминопиридина-8К имел улучшения \У8 относительно их индивидуального базового уровня, которые превышали 10% (54,1% 4-аминопиридин-8К; 32,5% плацебо, р<0,001), 20% (31,5% 4-аминопиридин-8К; 13,1% плацебо, р<0,001), 30% (15,5% 4аминопиридин-8К; 3,8% плацебо, р<0,001) и 40% (6,6% 4-аминопиридин-8К; 2,5% плацебо, р<0,027).

В течение каждого двойного слепого временного интервала процентное улучшение было значительно больше в группе 4-аминопиридина-8К по сравнению с плацебо (р<0,05), что указывает на сохранение эффекта терапии.

Выводы. Объединенные результаты демонстрируют повышение относительно базового уровня у пациентов с РС. Объединенные результаты также подтверждают данные отдельных испытаний в демонстрации эффективности 4-аминопиридина-8К при повышении \У8 относительно базового уровня у пациентов с РС.

Пример 8. Промежуточный анализ показателей эффективности из открытых расширенных исследований 4-аминопиридина-8К на пациентах с рассеянным склерозом с неспособностью к передвижению.

1. Вводная информация к примеру 8.

Было три законченных рандомизированных, плацебо-контролируемых клинических испытаний (М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204), в которых оценивали безопасность и эффективность 4-аминопиридина8К у субъектов с рассеянным склерозом (РС) за периоды терапии продолжительностью до трех месяцев.

Для оценки долговременной безопасности и переносимости 4-аминопиридина-8К проводили натоящие открытые расширенные исследования (М8-Р202ЕХТ, М8-Р203ЕХТ и М8-Р204ЕХТ); данные исследования проводили на прошедших отбор пациентах, участвовавших в трех двойных слепых исходных исследованиях. Указанные данные представляют временной анализ ограниченных эффективных данных, полученных в указанных открытых расширенных исследованиях во время прекращения сбора клинического данных 30 ноября 2008 г. Это включает данные из указанных исследований вместе с релевантными данными тех же пациентов в соответствующих исходных исследованиях М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204.

Эти данные концентрируются на исследованиях М8-Р204ЕХТ и М8-Р203ЕХТ; данные М8Р202ЕХТ считаются вспомогательными; все три расширенных исследования обобщены.

Методология. Центром данных в этом отчете являлась проверка данных, например, в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов, самооценки общего состояния субъекта (801) и клинической оценки общего состояния (С01) на предмет сохранения ответа на терапию 4-аминопиридином-8К в течение продолжающейся, открытой расширенной фазы трех исследований.

Количество пациентов (запланированное и проанализированное). В М8-Р202ЕХТ скринингу подвергали 188 пациентов, и 177 пациентов было включено в исследование; 134 пациента проанализировали в данном промежуточном отчете. В М8-Р203ЕХТ скринингу подвергали 272 пациента, и 269 пациентов было включено в исследование; 265 пациентов проанализировали в данном промежуточном отчете. В М8-Р204ЕХТ скринингу подвергали 219 пациентов, и 214 пациента было включено в исследование; 213 пациентов проанализировали в данном промежуточном отчете.

Диагноз и основные критерии для включения. Популяция исследования состояла из пациентов, включенных в исследования М8-Р202ЕХТ, М8-Р203ЕХТ или М8-Р204ЕХТ, которые ранее участвовали в соответствующих двойных слепых исходных исследованиях М8-Р202, М8-Р203 или М8-Р204. Пациенты, которые проходили по меньшей мере одно эффективное измерение скорости ходьбы после определения базово- 62 022755 го уровня в одном из трех расширенных исследований, были включены в анализ эффективности.

Тестируемый продукт, доза и способ введения, номер партии. 4-Аминопиридин-8К давали в виде овальных белых матричных таблеток с замедленным высвобождением. Неактивные компоненты являлись следующими: гидроксипропилметилцеллюлоза И8Р, микрокристаллическая целлюлоза И8Р, коллоидный диоксид кремния ΝΡ, стеарат магния И8Р и опадрай белый (пленочное покрытие таблетки).

Продолжительность терапии. В исследовании М8-Р202 было четыре группы дозирования: плацебо, 10, 15 и 20 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день. После двухнедельного односторонне слепого подготовительного периода плацебо пациентов рандомизировали в одну из четырех групп терапии и подвергали двухнедельной фазе повышения дозы, с последующей 12-недельной двойной слепой терапией с рандомизированной дозой, однонедельный период понижения дозы и две недели последующего наблюдения без терапии.

В исследовании М8-Ρ202ΕXΤ, в которое пациентов начали набирать через несколько месяцев после завершения исходного исследования, пациенты при посещении должны были проходить скрининг перед распределением открытого 4-аминопиридина-8К. Исследование начинали с оценки возможности повышения дозы вверх до максимума 20 мг два раза в день с последующими посещениями для титрования с недельными интервалами. Ряд поправок протокола привели к уменьшению максимальной дозы до 15, а затем до 10 мг два раза в день, при этом также были изменены запланированные интервалы посещений, однако в текущем измененном протоколе и доза (10 мг два раза в день), и интервал между посещениями (26 недель) привели в соответствие с М8-Р203ЕХУ

Схема исследования М8-Р203 состояла из двухнедельной односторонне слепой подготовительной фазы плацебо, сопровождаемой 14-недельной двойной слепой фазой терапии при постоянной дозе 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день или плацебо и четыре недели наблюдения без терапии.

В исследовании М8-Ρ203ΕXΤ, которое позволяло включать пациентов непосредственно из исходного исследования М8-Р203, открытый 4-аминопиридин-8К, 10 мг два раза в день, распределяли при посещении 0 (отдельное контрольное посещение требовалось только тогда, когда контрольное посещение нельзя было объединить с конечным посещением исследования М8-Р203); посещение 1 было намечено через две недели после посещения 0, посещение 2 через 12 недель после посещения 1, посещение 3 через 12 недель после посещения 2. Запланированный интервал между последующими посещениями составлял 26 недель. Таким образом, при посещении 4 пациент должен был проходить терапию 4аминопиридином-8К в течение приблизительно одного года.

Исследование М8-Р204 состояло из двухнедельного односторонне слепого подготовительного периода плацебо, сопровождаемого девятинедельной двойной слепой терапией при неизменной дозе 10 мг 4-аминопиридина-8К два раза в день, и двухнедельного наблюдения без терапии.

В исследовании М8-Ρ204ΕXΤ, которое позволяло включать пациентов непосредственно из исходного исследования М8-Р204, открытый 4-аминопиридин-8К, 10 мг два раза в день, распределяли при посещении 0 (отдельное контрольное посещение требовалось только тогда, когда контрольное посещение нельзя было объединить с конечным посещением исследования М8-Р204); посещение 1 было намечено через две недели после контрольного посещения (или посещения 0), посещение 2 через 12 недель после посещения 1, посещение 3 через 12 недель после посещения 2. Запланированный интервал между последующими посещениями составлял 2 6 недель. Таким образом, при посещении 4 пациент должен был проходить терапию 4-аминопиридином-8К в течение приблизительно одного года.

Контрольная терапия, доза и способ введения, номер партии. В исследованиях М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204 плацебо предоставляли в виде таблеток, идентичных по внешнему виду активному лекарственному препарату в исследованиях.

Критерии для оценки/эффективности.

В этом примере рассматривались данные эффективности, полученные в трех продолжающихся, открытых расширенных исследованиях (М8-Ρ202ΕXΤ, М8-Ρ203ΕXΤ, М8-Ρ204ΕXΤ). Первичным центром являлась ходьба на время на дистанции 25 футов, оцениваемая способом, согласующимся с ее оценкой в исходних двойных слепых исследованиях. Это включало определение ответа на терапию с использованием критерия, эквивалентного критерию ответа в ходьбе на время, используемому в исходных исследованиях. Расширенный респондер в ходьбе на время был определен как пациент, который достигал более высокой скорости ходьбы в большинстве посещений с приемом лекарственного препарата в течение первого года активной терапии расширенного исследования, по сравнению с максимальной скоростью ходьбы, предварительно измеренной у пациента в течение любого посещения без приема лекарственного препарата либо в исходном исследовании, либо в расширенном исследовании. Клиническую значимость данного критерия оценивали по величине самооценки общего состояния субъекта и клинической оценки общего состояния, регистрируемых в ходе расширенных исследований.

Статистические методы. Оценка эффективности включала всех пациентов, которые проходили по меньшей мере одно эффективное измерение в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов, зарегистрированное в расширенных исследованиях М8-Ρ202ΕXΤ, М8-Ρ203ΕXΤ или М8-Ρ204ΕXΤ, а также участвовали в исходных двойных слепых исследованиях М8-Р202, М8-Р203 или М8-Р204. Данные и результаты были представлены по парам исследований (исходное и расширенное исследования).

- 63 022755

Эффективность оценок состояла из следующего.

(1) Частота расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенных исследованиях и соотношение с респондерами в ходьбе на время в исходних исследованиях были приведены для каждого из расширенных исследований.

(2) Средние процентные изменения скорости ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов относительно периода посещения были представлены в графической форме по группам респондеров и статусу ответа как в исходных, так и в расширенных исследованиях.

(3) Средние процентные изменения скорости ходьбы в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов относительно периода посещения были представлены статусом ответа в расширенном исследовании для пациентов, рандомизированных в группу плацебо-терапии в исходном исследовании.

(4) В качестве одного из методов оценки клинической значимости наблюдаемого процентного соотношения расширенных ответов в ходьбе на время, средние баллы по шкале самооценки общего состояния субъекта и по шкале клинической оценки общего состояния сравнивали между группами расширенных респондеров и нереспондеров в ходьбе на время для каждого расширенного исследования.

(5) Изменения баллов по расширенной шкале оценки статуса инвалидности относительно базового уровня сравнивали между расширенными респондерами и нереспондерами в ходьбе на время, при возможности (ЕЭББ оценивали каждые два года в исследованиях МБ-Р203ЕХТ и МБ-Р204ЕХТ).

(6) Двусторонний уровень значимости 0,05 использовали в тех оценках, при которых проводилось формальное статистическое тестирование. Никаких коррекций или поправок в многократные тесты не вносили.

Например, на фиг. 31 приведены данные ходьбы на время на дистанции 25 футов пациентов, включенных в испытания МБ-Р203ЕХТ и МБ-Р203. Они включают данные только тех пациентов, которые завершили двойное слепое исследование МБ-Р203 и перешли в расширенное открытое исследование МБР203ЕХТ. Среднее изменение скорости ходьбы относительно базового уровня показано на вертикальной оси в отношении базового измерения из двойного слепого исследования. Получавшие 4-аминопиридин респондеры в ходьбе на время (РК) показаны в сравнении с получавшими 4-аминопиридин нереспондерами в ходьбе на время из двойного слепого исследования. Это показывает существенное увеличение скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования для респондеров в ходьбе на время и потерю указанного увеличения в течение периода без терапии между двумя исследованиями. Улучшение в значительной степени восстанавливалось при начале повторного проведения терапии в открытом исследовании (МБ-Р203ЕХТ). И респондеры, и нереспондеры показывали постепенное снижение скорости ходьбы в течение двух последующих лет, как можно было бы ожидать в случае прогрессирующей формы болезни, однако снижение между двумя указанными группами было аналогичным. По прошествии двух лет средняя скорость ходьбы у респондеров в ходьбе на время все еще сохранялась на более высоком уровне по сравнению с исходным уровнем.

На фиг. 32 представлены данные из исследований МБ-Р204 и МБ-Р204ЕХТ, которые эквивалентны данным более ранних исследований, показанных, например, на фиг. 31, но охватывали более короткой период времени, продолжающийся до 68 недель от измерения исходных показателей в двойном слепом исследовании. Выводы в данных исследованиях являются такими же: Респондеры в ходьбе на время продолжают демонстрировать благоприятный эффект в отношении скорости ходьбы в течение всей продолжительности исследования (на момент прекращения сбора данных).

2. Цели исследования

Цель данного промежуточного анализа состояла в том, чтобы проанализировать показатели эффективности в трех расширенных открытых исследованиях (МБ-Р202, МБ-Р203 и МБ-Р204) 4аминопиридина-БК в терапии пациентов с диагнозом рассеянного склероза, для определения, согласуются ли эти данные с выводами, полученными в предыдущих двойных слепых исследованиях.

Указанные исследования показали, что терапия 4-аминопиридином-БК приводила к улучшению способности к ходьбе у существенной части пациентов (респондеры в ходьбе на время) по сравнению с плацебо; показанные результаты сохраняются в течение длительного времени и являются клинически значимыми.

3. План исследования

3.1. Информация и дизайн исследования.

МБ-Р202 являлось двойным слепым, плацебо-контролируемым, 20-недельным исследованием фазы 2 в параллельных группах, проводившимся в 24 центрах в США и Канаде. Исследование было разработано с целью сравнения доз 10, 15 и 20 мг два раза в день с плацебо и для подтверждения воздействия на скорость ходьбы и силу ног, наблюдаемые в предыдущем исследовании фазы 2 (МБ-Р201). После начального однонедельного периода после скрининга и затем двухнедельной односторонне слепой подготовительной фазы плацебо, пациенты переходили в двухнедельный период повышения дозы, сопровождаемый 12 неделями при неизменной дозе плацебо, 10, 15 или 20 мг 4-аминопиридина-БК два раза в день, с последующим однонедельным периодом понижения дозы и двухнедельным периодом без терапии. В общей сложности 206 пациентов были рандомизированы в одну из четырех групп терапии (47 получали плацебо, 52 получали 10 мг два раза в день, 50 получали 15 мг два раза в день и 57 получали 20

- 64 022755 мг два раза в день). В общей сложности 195 пациентов (94,7%) завершили исследование.

МЗ-Р202ЕХТ является долгосрочным, многоцентровым, расширенным открытым исследованием длительной терапии 4-аминопиридином-ЗК у пациентов с РС. В данном исследовании оценивали безопасность, переносимость и активность при долговременном приеме 4-аминопиридина-ЗК у пациентов с рассеянным склерозом, которые ранее участвовали в МЗ-Р202, МЗ-Р203 и МЗ-Р204. По данным контрольных отчетов, на 30 ноября 2008 г. в общей сложности 93 пациента (52,5%) продолжали свое участие в исследовании. Указанный отчет включал пациентов, участвующих в МЗ-Р202ЕХТ, которые также участвовали в МЗ-Р202.

МЗ-Р203 являлось двойным слепым, плацебо-контролируемым, 21-недельным исследованием фазы 3 в параллельных группах, разработанным с целью исследования безопасности и эффективности 4аминопиридина-ЗК в дозе 10 мг два раза в день. Период терапии состоял из однонедельного постскрининга и двухнедельного односторонне слепого подготовительного периода плацебо, сопровождаемого 14-недельной двойной слепой терапией при неизменной дозе 4-аминопиридина-ЗК 10 мг два раза в день и четырехнедельным периодом последующего наблюдения без терапии. В общей сложности 301 пациент из 33 центров в США и Канаде был рандомизирован в отношении 3:1 в одну из двух групп терапии (229 получали 10 мг два раза в день и 72 получали плацебо). Из 301 рандомизированного пациента один пациент не получал препарата и четыре пациента были исключены из 1ТТ-популяции, поскольку не проходили оценок после определения базовых значений. В общей сложности 283 из рандомизированных пациентов (94%) завершили исследование.

МЗ-Р203ЕХТ является долгосрочным, многоцентровым, расширенным открытым исследованием длительной терапии 4-аминопиридином-ЗК при дозе 10 мг два раза в день у пациентов с РС. В данном исследовании оценивали безопасность, переносимость и активность 4-аминопиридина-ЗК при долговременном приеме у пациентов с рассеянным склерозом, которые ранее участвовали в МЗ-Р203. В общей сложности 272 пациента проходили скрининг, и 269 пациентов были включены в исследование. По данным контрольных сообщений на 30 ноября 2008 г. в общей сложности 187 пациентов (69,7%) продолжали участие в исследовании.

МЗ-Р204 являлось двойным слепым, плацебо-контролируемым, 14-недельным исследованием фазы 3 в параллельных группах, разработанным с целью исследования безопасности и эффективности 4аминопиридина-ЗК в дозе 10 мг два раза в день. Период терапии состоял из однонедельного постскрининга и двухнедельного односторонне слепого подготовительного периода плацебо, сопровождаемого девятинедельной двойной слепой терапией 4-аминопиридином-ЗК при неизменной дозе 10 мг Β.ί.ά, и двухнедельным периодом последующего наблюдения без терапии. В общей сложности 239 пациентов из 39 центров в США и Канаде были рандомизированы в отношении 1:1 в одну из двух групп терапии, 10 мг два раза в день 4-аминопиридина-ЗК (п=120) или плацебо (п=119). Сравнения групп терапии по эффективности были основаны на первых восьми неделях двойной слепой терапии; конец активного интервала дозирования оценивали в последней неделе двойной слепой терапии. В общей сложности 227 пациентов (95%) завершили исследование.

МЗ-Р204ЕХТ является долгосрочным, многоцентровым, расширенным открытым исследованием длительной терапии 4-аминопиридином-ЗК у пациентов с клинически подтвержденным диагнозом рассеянного склероза. Данное исследование было разработано для того, чтобы позволить пациентам, которые завершили исследование МЗ-Р204, продолжить терапии 4-аминопиридином-ЗК при дозе 10 мг два раза в день. Пациенты соответствовали критериям отбора независимо от того, получали ли они активный препарат или плацебо в ходе своего участия в исследовании МЗ-Р204, если они завершили участие. В общей сложности 219 пациентов прошли скрининг, и 214 пациентов были включены в исследование. По данным продолжающегося мониторинга на 30 ноября 2008 г. в общей сложности 184 пациента (86,0%) продолжали участие в исследовании.

3.2. Оценки эффективности.

Тест с ходьбой на время на дистанции 25 футов (Τ25РV) является количественной мерой функции ходьбы, которая широко применяется специалистами по рассеянному склерозу для оценки общего воздействия заболевания и ее прогрессии на физическую недееспособность пациента. При каждом посещении, в котором приводили измерение Τ25РV, было необходимо проводить две оценки, время, требуемое для выполнения каждой оценки, регистрировали в секундах и округляли до ближайшей десятой доли секунды, используя секундомер, предусмотренный в данном исследовании. При индивидуальной оценке скорость ходьбы (в футах в секунду) получали путем деления 25 футов или фактической дистанции ходьбы в футах на время (в секундах), требуемое для прохождения дистанции. Для каждого пациента скорость ходьбы в конкретном посещении исследования вычисляли как среднее значение скоростей ходьбы в двух оценках. Если какая-либо оценка отсутствовала, то скорость ходьбы присутствующей оценки использовали в качестве возможного среднего значения. Если оценку не проводили или же по какой-либо причине отсутствовали данные по ходьбе на время, скорость ходьбы считали отсутствующей для данного посещения.

Исходная скорость ходьбы была определена как среднее значение всех доступных измерений скорости ходьбы до приема двойного слепого лекарственного средства в двойных слепых исходных иссле- 65 022755 дованиях. Изменение относительно базового уровня при любом запланированном посещении в исходных исследованиях было получено путем вычитания исходной скорости ходьбы из скорости ходьбы, полученной после определения исходной скорости ходьбы. Процентное изменение относительно базового уровня вычисляли путем деления изменения относительно базового уровня на исходную скорость ходьбы и умножения на 100. Таким образом, положительное значение указывает на улучшение функции ходьбы.

В рандомизированных двойных слепых исследованиях М8-Р203 и М8-Р204 респондер в ходьбе на время был перспективно определен как пациент с более высокой скоростью ходьбы в тесте Т25Р\У по меньшей мере в трех из четырех посещений в течение двойного слепого периода терапии по сравнению с максимальной скоростью ходьбы в любом из четырех посещений до терапии и первом посещении после терапии (т.е. пять измерений без приема лекарственного препарата); всех остальных пациентов классифицировали как нереспондеров в ходьбе на время. Первичная конечная точка исследования являлась процентным соотношением респондеров в ходьбе на время в группах терапии (4-аминопиридин-§К и плацебо). Данный анализ ответа в ходьбе на время был предложен в ходе ретроспективного анализа данных исследования М8-Р202.

В расширенных исследованиях расширенный респондер в ходьбе на время был определен как пациент, который достигал более высокой скорости ходьбы в тесте Т25Р\У при большинстве посещений во время приема лекарственного препарата в течение первого года исследования (посещения 1-4 для М§Р203ЕХТ и М8-Р204ЕХТ), по сравнению с максимальной скоростью ходьбы, ранее измеренной у пациента в течение любого посещения без приема лекарственного препарата, либо в исходном исследовании, либо в расширенном исследовании.

3.3. Графики исследования.

График посещений в исследованиях М§-Р202/М§-Р203/М§-Р204 и М§-Р202ЕХТ/М§-Р203ЕХТ/М§Р204ЕХТ, по которому проводили измерение времени ходьбы на дистанции 25 футов, показан в табл. 18 и 19 соответственно.

Таблица 18

Запланированные посещения в двойных слепых исследованиях М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204

Двойной слепой день	МЗ-Г202	Μ3-Γ203	МЗ-Е’204
-21	Контрольное	Контрольное	Контрольное
	посещение	посещение	посещение
-14	Посещение 0	Посещение 0	Посещение 0
-7	Посещение 1	Посещение 1	Посещение 1

0	Посещение 2	Посещение 2	Посещение 2
14	Посещение	Посещение 3	Посещение 3
28			Посещение 4
42	Посещение 7^Ь	Посещение 4	Посещение 5
56			Посещение 6
63			Посещение 7
70	Посещение 8	Посещение 5
98	Посещение 9	Посещение б
Наблюдение (+14)	Посещение 11	Посещение 7	Посещение 8
Наблюдение (+28)		Посещение 8

Примечание: двойной слепой день относился ко дню первой двойной слепой терапии. Двойные слепые посещения выделены серым, ^а посещения 3 и 10 в М8-Р202 являлись лишь посещениями оценки безопасности, ^ь Посещения 5 и 6 в М8-Р202 являлись телефонными опросами оценки безопасности.

- 66 022755

Таблица 19

Запланированные посещения измерения Τ25Ρν в расширенных исследованиях

Посещение клиники	Актуальнее время в открытых исследованиях
ΜΞ-Γ202ΕΧΤ	Μ3-Ε203ΕΧΤ	МЗ-Г204ЕХТ
Скрининг	Скрининг	Скрининг	Скрининг
1		2 недели	2 недели
2		14 недель	14 недель
3		26 недель	26 недель
4	14 недель	52 недели	52 недели
5		78 недель	78 недель
6	26 недель	104 недели	104 недели
7	Графики пациентов	130 недель	130 недель
	десинхронизированы	И посещения	И посещения
		через каждые 26	через каждые 2 6
		недель	недель

Примечание: в исследовании Μ8-Ρ202ΕΧΤ была начальная фаза (посещения 1-3) восходящего титрования дозы до максимума 20 мг два раза в день, в течение которой не проводили сбора данных по скорости ходьбы. При последующих изменениях протокола максимальную дозу ограничили сначала до 15 мг два раза в день, а затем до 10 мг два раза в день и график продолжающихся посещений пересмотрели с первоначального плана посещений через каждые 12 недель, начиная с посещения 6, к графику с посещениями каждые 26 недель. Это означает, что графики индивидуальных посещений пациентов были десинхронизированы на основании первоначального набора участников, и поэтому несколько сложно сравнивать данные из исследования Μ8-Ρ202ΕΧΤ с данными из исследований Μ8-Ρ203ΕΧΤ и Μ8-Ρ204ΕΧΤ, в которых доза (10 мг два раза в день) и графики посещения оставались постоянными; с другой стороны, линейная фармакокинетика 4-аминопиридина облегчает сравнение.

3.4. Статистический и аналитический планы.

Анализ эффективности был основан на всех пациентах, которые участвовали в одном из трех двойных слепых исследований и проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в соответствующем расширенном исследовании. Результаты представлены по парам исследований (т.е. исходное исследование и расширенное исследование).

Проводили следующие исследования.

1. Частота расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенных исследованиях и соотношение с респондерами в ходьбе на время в исходних исследованиях были приведены в каждом из расширенных исследований.

2. Средние процентные изменения скорости ходьбы при ходьбе на время на дистанции 25 футов относительно периода посещения были представлены в графической форме по группам анализа респондеров как в исходных, так и в расширенных исследованиях.

3. Средние процентные изменения скорости ходьбы при ходьбе на время на дистанции 25 футов относительно периода посещения были дополнительно представлены различным статусом ответа в исходном и в расширенном исследованиях (т.е. двойной слепой нереспондер - расширенный нереспондер, двойной слепой нереспондер - расширенный респондер, двойной слепой респондер - расширенный нереспондер и двойной слепой респондер - расширенный респондер), а также отношениями получавшего плацебо в исходном исследовании и расширенного респондера в расширенном исследовании (т.е. плацебо относительно расширенного нереспондера и плацебо относительно расширенного ответа).

4. Клиническую значимость критерия расширенного ответа в ходьбе на время оценивали посредством сравнения средних баллов по шкале самооценки общего состояния субъекта (801) и по шкале клинической оценки общего состояния (С0^ между группами расширенных респондеров в ходьбе на время и расширенных нереспондеров в ходьбе на время для каждого расширенного исследования.

(5) Изменения баллов по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΕΌδδ) относительно базового уровня сравнивали между расширенными респондерами и нереспондерами в ходьбе на время, при возможности. Баллы ΕΌδδ оценивали каждые два года в расширенном исследовании, и поэтому они еще не были доступны для последнего на данный момент исследования, Μ8-Ρ204ΕΧΤ.

4. Пациенты исследования

4.1. Распределение пациентов.

Распределение пациентов в трех группах исследований представлено в табл. 20 ниже. Популяция исследования на момент промежуточных данных состояла из а) включенных в расширенные исследования пациентов, которые ранее были включены в двойные слепые исходные исследования, и Ь) пациентов, которые также проходили по меньшей мере одно эффективное измерение скорости после определе- 67 022755 ния базового уровня в одном из трех расширенных исследований.

Таблица 20

Распределение пациентов в исследованиях М8-Р202/М8-Р202ЕХТ, М8-Р203/М8-Р203ЕХТ и М8-Р204/М8-Р204ЕХТ

Статус	М8-Е202/202ЕХТ	Μ3-Ε203/203ΕΧΤ	МЗ-Е204/204ЕХТ
Двойная слепая Фаза (Исходное исследование)
По д вергнутые с кринингу	265	401	362
Рандомизированные	206	301	239

Назначенные на терапию	205	296	237
Завершившие исследование	195	283	227
Расширенная фаза
Включены в расширенное исследование	141*	269	214
Прошедшие по меньшей мере одно эффективное измерение Т2 5ГИ при открытой терапии	134*	265	213
Пациенты, продолжавшие участие на 30 ноября 2008 г.	75*	187	184

Примечание: * указанные числа не включают 36 пациентов из других исследований кроме М8-Р202, которые были включены в М8-Р202ЕХТ, 18 из которых продолжали участие на 30 ноября 2008 г.

4.2. Терпеливое задержание.

На следующих кривых Каплана-Мейера показано удержание пациентов с течением времени в трех расширенных исследованиях при сравнении расширенного респондера в ходьбе на время с расширенным нереспондером в ходьбе на время.

В исследовании М8-Р202ЕХТ был более высокий процент прекративших участие из расширенных респондеров в ходьбе на время в течение периода между шестью месяцами и одним годом, как показано на фиг. 33. Множество указанных пациентов прекратило участие в исследовании в те моменты, когда максимальная доза в исследовании была уменьшена, сначала с 20 мг два раза в день до 15 мг два раза в день, а затем до 10 два раза в день. Наиболее часто указанные пациенты выходили из исследования, а не продолжали участие при уменьшенной дозе, чувствуя, что более низкая доза приводила бы к уменьшению терапевтического эффекта. Однако после фиксации дозы на уровне 10 мг два раза в день удержание пациентов в группе расширенных респондеров в ходьбе на время оставалась неизменным (приблизительно при 70%), тогда как процент выходивших из исследования нереспондеров в ходьбе на время постоянно возрастал. Приблизительно через 36 месяцев процент прекративших участие в исследовании нереспондеров в ходьбе на время превысил аналогичный показатель, наблюдаемый у респондеров в ходьбе на время. Нужно отметить, что различие в гладкости профилей кривых выживаемости обусловлено различием знаменателей двух групп ответа.

В исследовании М8-Р203ЕХТ невысокий общий процент прекративших исследование наблюдали для расширенных респондеров в ходьбе на время приблизительно через три месяца (фиг. 34), который затем оставался почти неизменным в течение всего исследования. Напротив, строго возрастающий процент прекративших исследование нереспондеров отмечали с начала исследования. В конце интервала воздействия процент прекративших исследование расширенных нереспондеров в ходьбе на время был почти в два раза выше, чем у респондеров.

В исследовании М8-Р204ЕХТ, как показано на фиг. 35, удержание, по-видимому, следовало рядом с предыдущими исследованиями, в особенности в течение первых 6 месяцев воздействия.

Оценка эффективности

5.1. Количества пациентов.

Анализ эффективности в М8-Р202/М8-Р202ЕХТ был основан на 134 пациентах, которые участвовали и в исходном исследовании, и в расширеннном исследовании и проходили по меньшей мере одно эффективное измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в М8-Р202ЕХТ.

В М8-Р203/М8-Р203ЕХТ анализ эффективности был основан на 265 пациентах, которые участвовали и в исходном, и в расширеннном исследовании и проходили по меньшей мере одно эффективное измерение скорости ходьбы после определения базового уровня М8-Р203ЕХТ.

В М8-Р204/М8-Р204ЕХТ анализ эффективности был основан на 213 пациентах, которые участвовали и в исходном, и в расширеннном исследовании и которые также проходили по меньшей мере одно

- 68 022755 эффективное измерение скорости ходьбы после определения базового уровня Мδ-Ρ204ЕXТ.

5.2. Демографические и другие исходные параметры.

Для 134 пациентов в исследовании Мδ-Ρ202ЕXТ, включенном в данный пример, 86 (64,2%) были женщинами и 48 были мужчинами (35,8%). Большинство пациентов было европейцами - 129 (96,3%), затем афроамериканцами - 2 (1,5%), латиноамериканцами - 2 (1,5%), а также классифицированными как прочие - 1 (0,7%). Средний возраст, средний вес и средний рост пациентов составляли 50,0 лет (диапазон 28-67 лет), 75,29 кг (диапазон 41,4-145,5 кг) и 168,96 см (диапазон 144,8-200,7 см) соответственно. Немного меньше половины пациентов - 63 (47,0%), имело вторично-прогрессирующую форму течения рассеянного склероза, а остальные пациенты почти поровну разделялись между возвратно-ремиттирующей 37 (27,6%) и первично-прогрессирующей - 34 (25,4%) формой РС. Средняя продолжительность болезни составляла 11,38 года (диапазон: 0,1-34,5 года), тогда как средний балл по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (Έϋδδ) при скрининге составлял 5,72 (диапазон: 3,0-6,5). Средняя базовая скорость ходьбы составляла 2,010 футов/с (диапазон: 0,35-6,25). Группы терапии и плацебо из исходного исследования были сопоставимы по всем исходным демографическим переменным и переменным характеристик болезни.

Из указанных 265 пациентов, рассматриваемых в Мδ-Ρ203ЕXТ, 180 пациентов было женщинами (67,9%) и 85 (32,1%) - мужчинами. Большинство пациентов было европейцами - 248 (93,5%), затем афроамериканцами - 11 (4,2%), азиатами/жителями островов Тихого океана - 4 (1,5%) и латиноамериканцами - 2 (0,8%). Средний возраст, средний вес и средний рост пациентов составляли 52,1 года (диапазон: 26-71 год), 75,38 кг (диапазон: 39,1-145,8 кг) и 168,58 см (диапазон: 137,2-198,1 см) соответственно. Немного больше половины пациентов 139 (52,5%) имело вторично-прогрессирующую форму течения рассеянного склероза, а остальные пациенты были распределены между возвратно-ремиттирующей - 76 (28,7%), первично-прогрессирующей - 39 (14,7%) и возвратно-прогрессирующей - 11 (4,2%) формой. Средняя продолжительность болезни состаляла 13,58 лет (диапазон: 0,4-41,7 года), тогда как средний балл по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΡΌδδ) при скрининге составлял 5,76 (диапазон: 2,5-7,0). Средняя базовая скорость ходьбы составляла 2,129 футов/с (диапазон: 0,49-3,55). Группы терапии и плацебо в исходном двойном слепом исследовании были сопоставимы по всем исходным демографическим переменных и переменным характеристик болезни.

Что касается Мδ-Ρ204ЕXТ, 213 пациентов, включенных в данный отчет, состояли из 143 женщин (67,1%) и 70 мужчин (32,9%). Большинство пациентов было европейцами - 199 (93,4%), затем афроамериканцами - 7 (3,3%), латиноамериканцами - 6 (2,8%) и представителями другой этнической группы - 1 (0,5%). Средний возраст, средний вес и средний рост пациентов составляли 51,8 лет (диапазон: 24-70 лет), 77,35 кг (диапазон: 41,1-151,3 кг) и 168,43 см (диапазон: 139,7-198,1 см) соответственно.

Приблизительно половина пациентов - 108 (50,7%) имела вторично-прогрессирующую форму течения рассеянного склероза, а остальные пациенты были определены как имеющие возвратноремиттирующую - 73 (34,3%), первично-прогрессирующую - 25 (11,7%) или возвратнопрогрессирующую - 7 (3,3%) форму РС. Средняя продолжительность болезни составляла 14,25 года (диапазон: 0,1-45,6 года), тогда как средний балл по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (Έϋδδ) при скрининге составлял 5,69 (диапазон: 1,5-7,0). Средняя базовая скорость ходьбы составляла 2,179 футов/с (диапазон: 0,51-3,41). Группа терапии и плацебо в исходном двойном слепом исследовании были сопоставимы по всем демографическим переменным и переменным характеристик болезни.

5.3. Результаты эффективности.

5.4. Анализ респондеров - Мδ-Ρ202ЕXТ.

5.4.1.1. Частота ответа.

В Мδ-Ρ202ЕXТ в общей сложности 23 пациента (17,2%) были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время; 11 (25,6%) получавших 4-аминопиридин-δΚ респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (Мδ-Ρ202) продолжали участвовать в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время, 7 (11,1%) получавших 4-аминопиридин-δΚ нереспондеров в ходьбе на время и 5 (17,9%) пациентов, получавших плацебо, из исходного исследования также были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время (табл. 21).

- 69 022755

Таблица 21

Частота расширенных респондеров в ходьбе на время в Μδ-Ρ202ЕXΤ и ее отношение к респондерам в ходьбе на время в Μδ-Ρ202

Двойное слепое исследование (М5-Р202)	Расширенное исследование (М5-Е202ЕХТ)
	N	Расширенный Респондер в ходьбе на время	Ра сшир енный Нереспондер в ходьбе на время
4-аминопиридин-8К
Респондер в ходьбе на время	43	11 (25,6%)	32 (74,4%)
Нереспондер в ходьбе на время	63	7(11,1%)	56(88,9%)
Плацебо	28	5(17,9%)	23 (82,1%)
Всего	134	23(17,2%)	111 (82,8%)

Примечание: были включены только те пациенты, которые участвовали и в двойном слепом и в расширенном исследовании.

5.4.1.2. Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в группах расширенных респондеров в ходьбе на время в исследованиях Μδ-Ρ202/Μδ-Ρ202ЕXΤ показано на фиг. 36, в течение периода исходного исследования и первых двух лет расширенного исследования. Данные на фиг. 36 показывают, что расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, отражали тенденцию к большему повышению скорости ходьбы со временем в течение всего интервала дозирования. Напротив, расширенные нереспондеры в ходьбе на время как группа показали слабую тенденцию к уменьшению скорости ходьбы в течение расширенной фазы.

Скорость ходьбы расширенных респондеров в ходьбе на время при первых трех посещениях (посещения 2, 4 и 6) в среднем более чем на 40% превышала базовую скорость ходьбы из двойного слепого исследования и немного уменьшалась до приблизительно 32-35% при посещениях 10 и 12, увеличиваясь до 38% при посещении 14.

Напротив, среднее процентное изменение скорости у расширенных нереспондеров в ходьбе на время показало приблизительное 10% уменьшение относительно базового уровня при первых трех посещениях и 20% уменьшение при следующих трех посещениях. Очевидное увеличение скорости ходьбы у нереспондеров с месяца 2 до месяца 4 в исходном исследовании не поддается легкой интерпретации, хотя по сравнению с респондерами, которые показывают монотонно возрастающую скорость ходьбы, скорость ходьбы нереспондеров показывает монотонное снижение после месяца 4.

Для дальнейшего объяснения изменения скорости ходьбы в зависимости от статуса ответа при терапии 4-аминопиридином^К между исходным и расширенным исследованиями, средние процентные изменения скорости ходьбы относительно базового уровня в обоих исследованиях были отражены статусом респондера, как показано на фиг. 37. Имеется четыре различных типа ответа на терапию в исходном и расширенном исследованиях: 1) двойной слепой нереспондер - расширенный респондер; 2) двойной слепой респондер - расширенный нереспондер; 3) двойной слепой нереспондер - расширенный нереспондер и 4) двойной слепой респондер - расширенный респондер.

Нереспондеры в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, которые также были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали умеренную тенденцию к увеличению скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования. Указанная тенденция сохранялась в расширенном исследовании, приводя в среднем более чем к 30% повышению скорости ходьбы в течение периода расширенной терапии.

Напротив, респондеры в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, которые не классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали приблизительно 20% увеличение скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования, но показали приблизительно 10% уменьшение относительно базового уровня в течение периода расширенной терапии.

Для наблюдения длительного эффекта на пациентов, которые получали плацебо в исходном исследовании, а затем получали 4-аминопиридин^К в расширенном исследовании, среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня по отношению к получавшим плацебо в исходном исследовании и расширенным респондерам в ходьбе на время в расширенном исследовании, показано на фиг. 38.

Расширенные респондеры в ходьбе на время, получавшие плацебо в двойном слепом исследовании,

- 70 022755 как группа, показали сильную тенденцию к увеличению скорости ходьбы в хеде двойного слепого исследования. Указанная тенденция сохранялась в расширенном исследовании, приводя к среднему повышению скорости ходьбы более чем 30% по сравнению с исходной базовой скоростью ходьбы, хотя в скорости ходьбы в течение двойного слепого и расширенного исследования присутствовало значительное колебание, учитывая малое количество пациентов. Расширенные нереспондеры в ходьбе на время в расширенном исследовании, получавшие плацебо в двойном слепом исследовании, как группа, показали небольшое уменьшение относительно базового уровня в течение двойного слепого исследования, которое сохранялось в течение расширенного исследования, что, как правило, согласуется с общей картиной у пациентов, рандомизированных в группу 4-аминопиридина в двойном слепом исследовании.

5.4.1.3. ЗС1 и СС1 анализ.

Для дальнейшей оценки клинической значимости критерия расширенного ответа в ходьбе на время средние баллы по шкале самооценки общего состояния субъекта (ЗСГ) (табл. 24) и по шкале клинической оценки общего состояния (ССТ) (табл. 27) сравнивали между расширенными респондерами в ходьбе на время и расширенными нереспондерами в ходьбе на время. Двухсторонние р-значения были получены из модели дисперсионного анализа (ΑΝΟνΑ) с группой расширенных респондеров в ходьбе на время и центром в качестве главных эффектов.

Таблица 24

Средний балл ЗСТ по группам анализа расширенных респондеров (МЗ-Р202ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=111)	(N=23)	сравнении с Нереспондером
η	111	23	<0,001
Среднее (ЗЭ)	4,66 (0,744)	4,86 (0,855)
Срединное значение	4, 60	4, 81
Пределы (Μίη, Мах)	(2, 83, 6, 67)	(3,50, 6,31)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΑΝΟνΑ, контролируемой по центру, ³ касательно ЗС1 более высокий балл указывает на большее удовлетворение ощущаемыми эффектами от лечения в исследовании.

Таблица 27

Средний балл ССТ по группам анализа расширенных респондеров (МЗ-Р202ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=111)	(N=23)	сравнении с Нереспондером
η	111	23	<0,001
Среднее (ЗЭ)	3,69 (0,528)	3, 44 (0, 688)
Срединное значение	3,79	3, 50
Пределы (Μίη, Мах)	(2,13, 5,33)	(1,93, 4,53)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΑΝΟνΑ, контролируемой по центру, ³ касательно СС1 более низкий балл указывает на более существенное улучшение неврологического состояния пациента.

В МЗ-Р202ЕХТ средний балл ЗС1 в течение расширенного периода составлял 4,86 единицы для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 4,66 единицами для расширеннных нереспондеров в ходьбе на время, где более высокое значение служит показателем положительной оценки пациента. Средний балл ССТ в течение расширенного периода расширенного 3,44 единицы для расширен- 71 022755 ных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 3,69 единицами для расширенных нереспондеров в ходьбе на время, где меньшее значение служит показателем положительной клинической оценки. Результаты показали, что между двумя группами респондеров присутствовало статистически значимое различие (р<0,001 для каждой), говорившее в пользу расширенных респондеров в ходьбе на время как для 801, так и для С01. Кроме того, данные по среднему процентному изменению скорости ходьбы указывают, что расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали более чем 30% повышение скорости ходьбы по сравнению с расширенными нереспондерами в ходьбе на время. Данные наблюдения согласуются с опубликованными ранее исследованиями, в которых было показано, что 20% изменение в тесте с ходьбой на время на дистанции 25 футов является клинически значимым и что такое наблюдаемое изменение параллельно присутствует в сообщаемых пациентом и сообщаемых клиническим врачом результатах, связанных с положительным клиническим эффектом терапии.

5.4.1.4. Изменение балла по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΈΩ88) относительно базового уровня.

В М8-Р202ЕХТ среднее изменение балла ЕЭ88 относительно базового уровня в течение периода открытой терапии составляло -0,23 для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 0,45 для расширенных нереспондеров в ходьбе на время (табл. 30), где отрицательное значение служит показателем улучшения статуса инвалидности. Результаты показали, что между двумя указанными группами респондеров имелось статистически значимое различие (р<0,018), говорившее в пользу расширенных респондеров в ходьбе на время. Кроме того, отрицательное изменение балла ЕЭ88 для расширенных респондеров в ходьбе на время также указывало на улучшение относительно оценок базового уровня в исходном двойном слепом исследовании.

Таблица 30

Среднее изменение ЕЭ88 относительно базового уровня по группам анализа расширенных респондеров (М8-Р202ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(П-111,	(N=23)	сравнении с Нереспондером
п	101	20	<0,018
Среднее (3ϋ)	0,45 (0,992)	-0,23(1,059)
Срединное значение	0,00	0, 00
Пределы (Μίη, Мах)	(-4,00, 3,50)	(-2,50, 2,00)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² использовали базовый уровень из двойного слепого исследования. Балл ЕЭ88 оценивали каждые два года, ³ р-значение было получено из критерия Фридмена, контролируемого по центру, ⁴ касательно ЕЭ88 более низкий балл указывает на меньшую степень инвалидности.

5.4.2. Анализ респондеров - М8-Р203ЕХТ.

5.4.2.1. Проценты ответов.

В М8-Р203ЕХТ в общей сложности 66 пациентов (24,9%) были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время; 30 (42,9%) получавших 4-аминопиридин-8К респондеров в ходьбе на время из исходного исследования продолжили участие в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время, 25 (19,7%) получавших 4-аминопиридин-8К нереспондеров в ходьбе на время и 11 (16,2%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования также были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время (табл. 22).

- 72 022755

Таблица 22

Частота расширенных респондеров в ходьбе на время в М§-Р203ЕХТ и ее отношение к респондерам в ходьбе на время в М§-Р203

Двойное слепое исследование (М5-Р203)	Расширенное исследование (М5-Р203ЕХТ)
	N	Расширенный Респондер в ходьбе на время	Расширенный Нереспондер в ходьбе на время
4-аминопиридин-5Е
Респондер в ходьбе на время	70	30 (42,9%)	40 (57,1%)
Нереспондер в ходьбе на время	127	25 (19,7%)	102 (80, 3%)
Плацебо	68	11 (16,2%)	57 (83,8%)
Всего	265	66 (24,9%)	199 (75,1%)

Примечание: были включены только те пациенты, которые участвовали и в двойном слепом, и в расширенном исследовании.

5.4.2.2. Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в группах расширенных респондеров в ходьбе на время в исследованиях М§-Р203/М§-Р203ЕХТ показано на фиг. 39, в течение периода исходного исследования и первых двух лет расширенного исследования.

Наблюдение показывает, что в течение первого года расширенного исследования средняя скорость ходьбы расширеных респондеров в ходьбе на время при каждом посещении в расширенном исследовании была немногим более чем на 30% выше, чем базовая скорость ходьбы из двойного слепого исследования, и немного уменьшалась приблизительно до 23% при следующих двух посещениях (посещения 5 и 6). Напротив, расширеннные нереспондеры в ходьбе на время имели небольшое уменьшение скорости ходьбы относительно базового уровня в конце первого и второго года, но показали небольшое увеличение после первой двухнедельной терапии при посещении 1. Кроме того, данные на фиг. 39 также демонстрируют, что расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, испытывали тенденцию к повышению скорости ходьбы со временем в части двойного слепого исследования без терапии, что накладывалось на общее связанное с терапией увеличение скорости ходьбы в течение двойного слепого периода.

Средние процентные изменения скорости ходьбы относительно базового уровня в ходе обоих исследований представлены статусом респондера на фиг. 40. Как описано в настоящей заявке, имеется четыре различных типа ответа на терапию.

Нереспондеры в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, которые также были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали тенденцию к увеличению скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования. Указанная тенденция возрастала в расширенном исследовании, приводя в среднем более чем к 30% повышению скорости ходьбы по сравнению с исходным базовым уровнем, с достижением приблизительно 40% при посещении 3.

Напротив, респондеры в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, которые не были отнесены к расширенным респондерам в ходьбе на время, как группа, показали приблизительно 20% увеличение скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования, но показали общую тенденцию к уменьшению скорости ходьбы за два года периода расширенной терапии.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в течение расширенного исследования для пациентов, получавших плацебо в исходном исследовании, показано на фиг. 41; фигура показывает, что расширенные респондеры в ходьбе на время из получавших плацебо пациентов показали аналогичную тенденцию к улучшению в последующих контрольных посещенииях в ходе двойного слепого исследования по сравнению с расширенными нереспондерами в ходьбе на время. Это также показывает, что расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали тенденции к улучшению в течение периода терапии по сравнению с расширенными нереспондерами в ходьбе на время, но данное улучшение было намного меньше по сравнению с ответом в последующей открытой терапии в данной группе. Общее улучшение в расширенном исследовании было аналогично улучшению, наблюдаемому у расширенных респондеров в ходьбе на время на фиг. 39. Расширенные нереспондеры в ходьбе на время из пациентов, первоначально получавших плацебо, показали малое изменение скорости ходьбы относительно базового уровня за исключением небольшого увеличения после первых двух недель терапии (посещение 1).

- 73 022755

5.4.2.3. δΟΙ и СС1 анализ.

Средний балл по шкале самооценки общего состояния субъекта (δΟΙ) (табл. 25) и по шкале клинической оценки общего состояния (СОР (табл. 28) сравнивали между расширенными респондерами и нереспондерами в ходьбе на время. Как описано в 8.4.1.3, р-значения были получены из модели дисперсионного анализа (ΑΝΟνΑ) с группой расширенных респондеров в ходьбе на время и центром в качестве главных эффектов.

Таблица 25

Средний балл δΟΙ по группам анализа расширенных респондеров (Мδ-Ρ203ΕXТ)

	р-значение
Статистические данные	Нереспондер (N=199)	Респондер (N=66)	Респондер в сравнении с Нереспондером
η	199	66	<0,001
Среднее (5ϋ)	4,74 (0,875)	5,28 (0,901)
Срединное значение	4,67	5, 31
Пределы (Μίη, Мах)	(2,00, 6,71)	(3,00, 7,00)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΑΝΟνΑ, контролируемой по центру, ³ касательно δΟΙ, более высокий балл указывает на большее удовлетворение ощущаемыми эффектами от лечения в исследовании.

Таблица 28

Средний балл СОТ по группам анализа расширенных респондеров (Мδ-Ρ203ΕXТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=199)	(N=66)	сравнении с Нереспондером
η	199	66	<0,001
Среднее (3ϋ)	3,68 (0,636)	3,24 (0,727)
Срединное значение	3, 83	3, 29
Пределы (Μίη, Мах)	(1,86, 5,17)	(1,17, 5,00)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΑΝΟνΑ, контролируемой по центру, ³ касательно СΟI более низкий балл указывает на более существенное улучшение неврологического состояния пациента.

В Мδ-Ρ203ΕXТ средний балл δΟΙ в течение расширенного периода составлял 5,28 единиц для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 4,74 единиц для расширенных нереспондеров в ходьбе на время, а средний балл СΟI в течение расширенного периода составлял 3,24 единиц для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 3,68 единиц для расширенных нереспондеров в ходьбе на время. Результаты показали, что между двумя указанными группами респондеров присутствовало статистически значимое различие (р<0,001 для каждой), говорившее в пользу расширенных респондеров в ходьбе на время как для δΟΙ, так и для СΟI. Данное наблюдение аналогично отмеченному в исследовании Мδ-Ρ202ΕXТ и подтверждает клиническую значимость критерия расширенного ответа.

5.4.2.4. Изменение балла по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (Έϋδδ) относительно базового уровня.

В Мδ-Ρ203ΕXТ среднее изменение балла Ε^δδ относительно базового уровня в течение периода открытой терапии составляло -0,06 для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 0,35 для расширенных нереспондеров в ходьбе на время (табл. 31). Результаты показали, что между двумя указанными группами респондеров имелось статистически значимое различие (р<0,001), говорившее в пользу расширенных респондеров в ходьбе на время.

- 74 022755

Таблица 31

Среднее изменение ЕЭ§§ относительно базового уровня по группам анализа расширенных респондеров (М8-Р203ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=195)	(N=70)	сравнении с Нереспондером
η	128	60	<0,018
Среднее (ЗЬ)	0,35 (0,780)	-0,06 (0,844)
Срединное значение	0,00	0, 00
Пределы (Μίη, Мах)	(-2,50, 3,50)	(-3,50, 2,50)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² использовали базовый уровень из двойного слепого исследования. Балл ЕЭ§§ оценивали каждые два года, ³ р-значение было получено из критерия Фридмена, контролируемого по центру, ⁴ касательно ЕЭ§§ более низкий балл указывает на меньшую степень инвалидности.

5.4.3. Анализ респондеров - М8-Р204ЕХТ.

5.4.3.1. Проценты ответов.

В М8-Р204ЕХТ в общей сложности 99 (46,5%) пациентов были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время. Из них 34 (69,4%) получавших 4-аминопиридин-8К респондеров в ходьбе на время из исходного исследования продолжили свое участие в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; 15 (25,0%) получавших 4-аминопиридин-8К нереспондеров в ходьбе на время и 50 (48,1%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время (табл. 23).

На момент времени прекращения сбора промежуточных данных (30 ноября 2008 г.) было доступно несколько точек данных за пределами одного года воздействия. По сравнению с результатами одногодичного воздействия, представленными для М8-Р203ЕХТ, в табл. 26 показано общее увеличение ответа среди плацебо респондеров из исходного исследования М8-Р204. Как респондеры исходного исследования 4-аминопиридина-8К, так и нереспондеры показали более высокие проценты ответа в М8-Р204ЕХТ, чем наблюдаемые в первом году М8-Р203ЕХТ.

Таблица 23

Частота расширенных респондеров в ходьбе на время в М8-Р204ЕХТ и ее отношение к респондерам в ходьбе на время в М8-Р204

Двойное слепое исследование (М5-Р204)	Расширенное исследование (М5-Е204ЕХТ)
	N	Расширенный Респондер в ходьбе на время	Расширенный Нереспондер в ходьбе на время
4-аминопиридин-5Н
Респондер в ходьбе на время	49	34 (69,4%)	15 (30,6%)
Нереспондер в ходьбе на время	60	15 (25,0%)	45 (75,0%)
Плацебо	104	50 (48,1%)	54 (51,9%)
Всего	213	99 (46,5%)	114 (53,5%)

5.4.3.2. Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня по группам расширенного ответа для исходного и расширенного исследований показано на фиг. 42. Аналогично результатам М8-Р203ЕХТ среднее увеличение скорости ходьбы для группы расширенных респондеров в ходьбе

- 75 022755 на время было немногим более чем на 30% выше базовой скорости ходьбы из двойного слепого исследования. Расширенные нереспондеры в ходьбе на время показали малое изменение скорости ходьбы относительно базового уровня, за исключением небольшого увеличения после первых двух недель терапии (посещение 1).

Как видно в исследованиях МБ-Р202/МБ-Р202ЕХТ и МБ-Р203/МБ-Р203ЕХТ, расширенные респондеры в ходьбе на время, как группа, показали большее повышение скорости ходьбы в течение двойного слепого исследования по сравнению с расширенными нереспондерами в ходьбе на время. Также у расширенных респондеров в ходьбе на время, как группы, наблюдалась тенденция к улучшению со временем в течение части двойного слепого исследования без терапии, накладывалось на общее связанное с терапией увеличение скорости ходьбы в течение двойного слепого периода (т.е. некоторое улучшение сохранялось в контрольном посещении через две недели после прекращения терапии). Расширенные нереспондеры в ходьбе на время, как группа, показали небольшое уменьшение средней скорости ходьбы относительно базового уровня в последующем контрольном посещении.

Средние процентные изменения скорости ходьбы относительно базового уровня в обоих исследованиях представлены статусом респондера в исходном и расширенном исследовании на фиг. 42. Как описано в исследованиях МБ-Р202/МБ-Р202ЕХТ и МБ-Р203/МБ-Р203ЕХТ, изменения скорости ходьбы являлись более заметными, когда группы расширенных респондеров в ходьбе на время разделялись подобным образом.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в зависимости от статуса ответа в расширенном исследовании у пациентов, получавших плацебо в исходном исследовании, показано на фиг. 43. Наблюдение показывает, что расширенные респондеры в ходьбе на время из получавших плацебо пациентов в двойном слепом исследовании показывали аналогичную тенденцию улучшения скорости ходьбы по сравнению с расширенными нереспондерами в ходьбе на время. Общее улучшение в расширенном исследовании совпадало с подобным профилем ответов в МБ-Р203/МБР203ЕХТ.

5.4.3.3. Б01 и С01 анализ.

Средние баллы по шкале самооценки общего состояния субъекта (БС1) (табл. 26) и по шкале клинической оценки общего состояния (ССГ) (табл. 29) сравнивали между расширенными респондерами и нереспондерами в ходьбе на время. р-Значения были получены из модели дисперсионного анализа (ΛN0VА) с группой расширенных респондеров в ходьбе на время и центром в качестве главных эффектов.

Таблица 26

Средний балл БСГ по группам анализа расширенных респондеров (МБ-Р204ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=114)	(N=99)	сравнении с Нереспондером
η	114	99	<0,001
Среднее (3Ό)	4,56 (1,090)	4,98 (1,000)
Срединное значение	4,33	5, 00
Пределы (Μίη, Мах)	(1,00, 7,00)	(2,75, 7,00)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΛN0VА, контролируемой по центру, ³ касательно БСГ более высокий балл указывает на большее удовлетворение ощущаемыми эффектами от лечения в исследовании.

- 76 022755

Таблица 29

Средний балл С01 по группам анализа расширенных респондеров (М8-Р204ЕХТ)

	р-значение
Статистические	Нереспондер	Респондер	Респондер в
данные	(N=114)	(N=99)	сравнении с Нереспондером
η	114	99	<0,001
Среднее (ЗЭ)	3, 60 (0, 626)	3,14 (0,682)
Срединное значение	3, 67	3, 00
Пределы (Μίη, Мах)	(1,50, 5,00)	(1,25, 4,33)

¹ выборка анализа включала тех пациентов в исходном исследовании и расширенном исследовании, которые проходили по меньшей мере одно измерение скорости ходьбы после определения базового уровня в расширенном исследовании, ² р-значение было получено из модели ΑΝΟνΑ, контролируемой по центру, ³ касательно С01 более низкий балл указывает на более существенное улучшение неврологического состояния пациента.

В М8-Р204ЕХТ, средний балл 801 в течение расширенного периода составил 4,98 единиц для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 4,56 единиц для расширенных нереспондеров в ходьбе на время, а средний балл С01 в течение расширенного периода составил 3,14 единиц для расширенных респондеров в ходьбе на время по сравнению с 3,60 единицами для расширенных нереспондеров в ходьбе на время. Результаты показали, что между указанными двумя группами респондеров имелось статистически значимое различие (р<0,001 для каждой), говорившее в пользу расширенных респондеров в ходьбе на время как для 801, так и для С01. Данное наблюдение было аналогично отмеченному в М8-Р202ЕХТ и М8-Р203ЕХТ.

5.4.3.4. Изменение балла по расширенной шкале оценки статуса инвалидности (ΈΩ88) относительно базового уровня.

Измерения ЕЭ88 после определения базового уровня для исследования М8-Р204ЕХТ проводили два года в открытом исследовании.

6. Обсуждение и общие выводы

Относительно промежуточных данных, рассматриваемых в данном примере, ряд оценок эффективности проводили на данных из трех продолжающихся открытых исследований (М8-Р202ЕХТ, М8Р203ЕХТ и М8-Р204ЕХТ) и соответствующих двойных слепых исследований (М8-Р202, М8-Р203 и М8Р204). Анализ сосредоточен на результатах, полученных с фиксированной дозой 4-аминопиридина-8К 10 мг два раза в день

Результаты.

Были получены следующие результаты.

1) Существенная доля респондеров в ходьбе на время, наблюдаемых в двойных слепых исследованиях, оставалась респондерами в расширенных исследованиях.

2) Средняя скорость ходьбы у расширенных респондеров в ходьбе на время была выше более чем на 30% (что свидетельствовало об улучшении) по сравнению с исходным наблюдаемым базовым уровнем в двойных слепых исследованиях.

3) Пациенты, классифицированные как расширенные респондеры в ходьбе на время в расширенных исследованиях, приблизительно в два раза чаще могли являться респондерами в ходьбе на время в двойном слепом исследовании по сравнению с нереспондерами в ходьбе на время в двойном слепом исследовании.

4) Длительная терапия 4-аминопиридином-8К в расширенных исследованиях привела к ряду пациентов, которые не могли быть классифицированны как респондеры в ходьбе на время в двойных слепых исследованиях, но при этом все же становились расширенными респондерами в ходьбе на время.

5) Между группами расширенных респондеров в ходьбе на время присутствовало статистически значимое различие (р<0,001 для каждой), указывающее на преимущество расширенных респондеров в ходьбе на время как для 801, так и для С01.

Стойкое повышение скорости ходьбы наблюдали у существенной доли пациентов в трех долгосрочных расширенных исследованиях,

М8-Р202ЕХТ, М8-Р203ЕХТ и М8-Р204ЕХТ, используя аналогичный подход к первичной конечной точке, ответу в ходьбе на время, используемому в двойных слепых, плацебо-контролируемых исходных исследованиях М8-Р202, М8-Р203 и М8-Р204.

Пациенты, которые были идентифицировны как расширенные респондеры в ходьбе на время, пока- 77 022755 зали среднее улучшение скорости ходьбы выше начального базового уровня в двойных слепых исследованиях приблизительно на 30% по меньшей мере за весь первый год открытой терапии, показывая, что продолжающаяся длительная терапия 4-аминопиридином-ЗК приводит к еще более очевидной эффективности в отношении увеличения амбулаторной функции. Расширенные респондеры в ходьбе на время также показали значительно лучший средний балл по шкале самооценки общего состояния субъекта, клинической оценки общего состояния и среднее изменение балла ЕЭЗЗ относительно базового уровня, чем расширенные нереспондеры в ходьбе на время.

Результаты по эффективности

В исследовании МЗ-Р202ЕХТ в общей сложности 23 пациента (17,2%) были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время. В общей сложности 11 (25,6%) получавших 4аминопиридин-ЗК респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (МЗ-Р202) продолжали участие в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; 7 (11,1%) получавших 4аминопиридин-ЗК нереспондеров в ходьбе на время из исходного исследования стали расширенными респондерами в ходьбе на время и 5 (17,9%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время.

В МЗ-Р203ЕХТ в общей сложности 66 пациентов (24,9%) были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время. Из них 30 (42,9%) получавших 4-аминопиридин-ЗК респондеров в ходьбе на время из исходного исследования (МЗ-Р203ЕХТ) продолжали участие в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время, 25 (19,7%) получавших 4-аминопиридин-ЗК нереспондеров в ходьбе на время и 11 (16,2%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время.

В МЗ-Р204ЕХТ в общей сложности 99 пациентов (46,5%) были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время. Из них 34 (69,4%) получавших 4-аминопиридин-ЗК респондеров в ходьбе на время из исходного исследования продолжали участвовать в качестве расширенных респондеров в ходьбе на время; 15 (25,0%) получавших 4-аминопиридин-ЗК нереспондеров в ходьбе на время; и 50 (48,1%) получавших плацебо пациентов из исходного исследования были классифицированы как расширенные респондеры в ходьбе на время.

Среднее процентное изменение скорости ходьбы по группам расширенных респондеров в ходьбе на время было графически отображено по посещениям в парах исследований МЗ-Р202/202ЕХТ, МЗР203/203ЕХТ и МЗ-Р204/204ЕХТ. Среднее процентное изменение скорости ходьбы было также отображено статусом ответа в подгруппах двойной слепой группы респондеров в ходьбе на время и группы расширенных респондеров в ходьбе на время (т.е. двойной слепой нереспондер - расширенный нереспондер; двойной слепой нереспондер - расширенный респондер; двойной слепой респондер - расширенный нереспондер и двойной слепой респондер - расширенный респондер), и соотношением получавших плацебо в исходном исследовании и расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании соответственно.

Стойкое повышение скорости ходьбы наблюдали в значительной доле пациентов в трех долгосрочных расширенных исследованиях, МЗ-Р202ЕХТ, МЗ-Р203ЕХТ и МЗ-Р204ЕХТ, используя аналогичный подход к первичной конечной точке, ответу в ходьбе на время, из двойных слепых, плацебоконтролируемых исходных исследований, МЗ-Р202, МЗ-Р203 и МЗ-Р204.

Пациента определяли как расширенный респондер в ходьбе на время, если пациент достигал более высокой скорости ходьбы в тесте Т25РХУ в большинстве посещений с терапией лекарственным средством в течение первого года открытого расширенного исследования по сравнению с максимальной скоростью ходьбы, ранее измеренной для указанного пациента в течение любого посещения без приема лекарственного средства (не двойная слепая терапия), либо в исходном исследовании, либо в расширенном исследовании. Процент пациентов, включенных и подвергаемых терапии в расширенных исследованиях, которых классифицировали как расширенных респондеров в ходьбе на время, составил 17,2, 24,9 и 46,5% для МЗ-Р202ЕХТ, МЗ-Р203ЕХТ и МЗ-Р204ЕХТ соответственно. Проценты расширенного ответа в ходьбе на время в МЗ-Р203ЕХТ и МЗ-Р204ЕХТ лишь немного отличаются от процентов ответа в ходьбе на время, наблюдаемых в группах терапии 4-аминопиридином-ЗК в двух исходных исследованиях (34,8 и 42,9% соответственно).

Данные ответы примечательны с учетом того, что повышение скорости ходьбы относительно базового уровня у респондеров наблюдали в течение всех многолетних периодов открытых исследований, несмотря на прогрессирующую природу заболевания, отражаемую в прогрессии амбулаторной недееспособности среди нереспондеров за годы наблюдения.

Отдельные пациенты, идентифицированные как расширенные респондеры в ходьбе на время, приблизительно в два раза чаще являлись респондерами в ходьбе на время в двойном слепом исследовании, чем нереспондерами в ходьбе на время.

Данные из настоящих расширенных исследований указывают, что существуют специфические пути функционального ухудшения, стабильности или улучшения для отдельных пациентов в то или иное время, при этом указанные пути могут отражать лежащий в основе процесс воспалительного заболевания.

Как группа, пациенты, идентифицированные как расширенные респондеры в ходьбе на время, пока- 78 022755 зали постоянное среднее улучшение скорости ходьбы выше первоначального базового уровня двойного слепого исследования приблизительно на 30% за весь первый год открытой терапии, причем указанное улучшение не понижалось ниже 20% даже в течение второго года. Кроме того, расширенные респондеры в ходьбе на время также показали значительно лучший средний балл самооценки общего состояния субъекта и клинической оценки общего состояния, чем расширенные нереспондеры в ходьбе на время. Это дополнительно подтверждает клиническую значимость улучшений, наблюдаемых в двойных слепых исследованиях и расширенных исследованиях, а также значимость критерия, применяемого для идентификации указанного амбулаторного ответа на терапию.

С промежуточными данными, дополненными на дату прекращения, 31 августа 2009 г., следующая информация была получена по мере продолжения воздействия:

Тип исследования Воздействие (дни)	Фампридин-5Е 10 мг Ь. ϊ . ά	Фампридин-ЗЕ 15 мг Ь.1.6	Фампридин-5Е 20 мг Ь.ϊ.ά

Пациенты РС
МЗ-Г202 ЕХТ
N	177	175	7
Среднее (ЗБ)	1071,1 (673,187)	221,50 (90,493)	48,00 (31,021)
Срединное значение	1408,0	259,00	42, 00
Пределы (Μίη, Мак)	2,00, 1924,00	2,00, 353,00	15,00, 84,00

М5-Г203 ЕХТ
N	269
Среднее (3ϋ)	964,83 (424,812)
Срединное значение	1175,5
Пределы (Μίη, Мах)	8,50, 1357, 50

МЗ-Г204 ЕХТ
N	214
Среднее (ЗБ)	542,51 (179, 572)
Срединное значение	590,00
Пределы (Μίη, Мах)	7,50, 739,50

Таким образом, в соответствии с указанными днями воздействия, составившими до 1924 дней (т.е. более чем 5 лет и трех месяцев), пациенты показывали повышение скорости ходьбы. Таким образом, терапевтический результат при рассеянном склерозе (например, повышение скорости ходьбы) показан в каждом последующем моменте времени и в момент, больший, чем каждый из следующих моментов времени 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 или 24 недели; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 36, 42, 48, 54, 60 и 63 месяца; 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6 и 6,5 лет.

Нужно также отметить, что используемые в оригинальном тексте настоящего описания и прилагаемой формулы формы единственного числа включают множественную ссылку, если из контекста явно не следует иное. Таким образом, например, ссылка на нейрон является ссылкой на один или более нейронов, а также их эквиваленты, известные квалифицированным специалистам, и тому подобное.

Хотя настоящее изобретение было описано довольно подробно в отношении некоторых предпочтительных вариантов осуществления, возможны другие варианты. Таким образом, сущность и объем прилагаемой формулы не должны ограничиваться описанием и предпочтительными вариантами, содержащимися в настоящем описании.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ поддержания улучшенной походки в течение по меньшей мере одного года у пациента с рассеянным склерозом, включающий введение указанному пациенту композиции с замедленным высвобождением, содержащей 10 мг 4-аминопиридина, два раза в день в течение указанного периода времени.
2. Способ по п.1, где период времени составляет по меньшей мере 18 месяцев.
3. Способ по п.1 или 2, где период времени составляет по меньшей мере 2 года.
4. Способ по пп.1, 2 и 3, где улучшенная походка подразумевает повышенную скорость ходьбы.

- 79 022755

Количество терапевтических посещений с более высокой скоростью ходьбы

Фиг. 1

Средние показатели терапии в динамике по времени

Плацебо (N=47) -А- 10мг ВЮ (N=51)

15 мг ВЮ (N=50) 20 мг ВЮ (N=57)

Фиг. 2

Скорректированные средние геометрические значения при терапии

Примечание: размеры терапевтической выборки основаны на количестве ΙΤΤ-субъектов с доступными данными

Примечание: р-значения (в сравнении с плацебо), приведенные над столбиками средних зачений при терапии, скорректированы по критерию Даннета

Фиг. 3

- 80 022755

Процентные соотношения при терапии

Примечание: размеры терапевтической выборки основаны на количестве ΙΤΤ-субъектов с доступными данными

Фиг. 4

Фиг. 5

Примечание: размеры терапевтической выборки основаны на количестве ΙΤΤ-субъектов с доступными данными Примечание: р-значения (в сравнении с плацебо), приведенные над столбиками средних зачений при терапии, скорректированы по критерию Даннета

Фиг. 6

- 81 022755

Процентные соотношения в группе терапии

Примечание: терапевтическое р-значение из критерия Кохрана-Мантела-Хенсела, с контролем по центру

Фиг. 8

Изменение М8МЗ-12 относительно базового уровня за двойной слепой период* Средние значения по статусу респондеров и стандартные планки погрешности

8С1 за двойной слепой период

Средние значения по статусу респондеров и

Изменение СО1 за двойной слепой период Средние значения по статусу респондеров • Двойные слепые измерения только в первом и последнем посещениях с постоянной дозой • Примечание: для изменений относительно базового уровня, отрицательный балл является показателем положительного клинического эффекта.

• Примечание: некоторые нереспонденры не имели данных после определения выборки для нереспондеров (относительно указанной переменной) могут быть меньше, чем реальное количество нереспондеров.

• Примечание: р-значения при сравнении респондеров и нереспондеров получены из ΑΝΟ\/Α моделей с эффектами в отношении статуса респондера и центра.

Фиг. 9

- 82 022755

Фиг. 11

Фиг. 12

- 83 022755

Химическое название: 4-аминопиридин _υ5ΑΝ: фампридин или далфампридин

Регистрационный номер САЗ: 504-24-5

Химическая структура:

ΝΗ2

Молекулярная формула: 051^2

Относительная молукулярная масса: 94,1 Внешний вид: белое твердое вещество

Растворимость: растворимость в воде 4 50 мг/мл

Температура плавления: 157-162°С

Фиг. 13

Фиг. 14

Фиг. 15

- 84 022755

Фиг. 16А

Фиг. 16В

Фиг. 17

- 85 022755

Фиг. 19

Фиг. 20

- 86 022755 ф

о о у

¥ § § 5о ё ¥ ¥

о. Ф О η о
5 -0-3 ф ф ф Σ I I сС ф Ф I О. ф О Ζ

2 -0.3

М5-Р202

0.6

0.3 о

81 ®

8 ΐ ° % -0.3

0.53 Р=0.001* Р<0.001* В! -ой ШППШ Плацебо (N=47) ΡΝΚ(Ν=33) ΡΚ(Ν=18)

Группа респондеров в ходьбе на время

М5-Р203

0.6

0.3 о

0.52 Р< 0.001* Р< 0.001* . 0.17 у////л 11ШН1Н1 Плацебо (N=72) ΡΝΚ (N=146) РК (N=78)

Группа респондеров в ходьбе на время

М5-Р204

0.6

0.3 о

0.56 Р< 0.001* Р< 0.001* ι II шип . Плацебо (N=118) ΡΝΚ (N=68) РК (N=51)

Г руппа респондеров в ходьбе на время

Фиг. 21

Фиг. 22

- 87 022755

РК профили в стационарном состоянии у отдельных пациентов с РС, день 8, доза нормализована до 10 мг ΒΙΌ

Фиг. 25

М§-Р204: эффективность в конце цикла дозирования

- 88 022755

Μδ-Ρ204: концентрация фампридина в плазме в зависимости от времени после предыдущей дозы

Μδ-Ρ204: процентное изменение скорости ходьбы в сравнении с концентрацией фампридина в плазме

Процентное изменение скорости ходьбы в зависимости от концентрации фампридина в плазме: Μδ-Ρ204

- 89 022755

РК популяции фампридина-8К у пациентов с РС

Фиг. 30

Объединенные данные: оценка эффективности в конце цикла дозирования М8-Р202 (10 мг ΒΙΌ), М8-Р203, М8-Р204

Изменение скорости ходьбы в динамике по времени в М8-Р203 и М8-Р203ЕХР (респондеры и нереспондеры фампридина-8К в ходьбе на время)

- 90 022755

Изменение скорости ходьбы в динамике по времени в М8-Р204 и М8-Р204ЕХТ (респондеры и нереспондеры фампридина-8К в ходьбе на время)

Фиг. 33

Кумулятивное удержание пациента в расширенном исследовании в группе расширенных респондеров в ходьбе на время в исследовании М8-Р202 ЕХТ

Продолжительность воздействия в месяцах

-Расширенный респондер в ходьбе на время

-— Расширенный нереспондер в ходьбе на время _{п Л Л} Продолжительность воздействия на момент прекращения регистрации данных ^{ц ц} от одного или более пациентов

Фиг. 34

Кумулятивное удержание пациента в расширенном исследовании в группе расширенных респондеров в ходьбе на время в исследовании М8-Р203 ЕХТ

- 91 022755

Фиг. 35

Кумулятивное удержание пациента в расширенном исследовании в группе расширенных респондеров в ходьбе на время в исследовании Μδ-Ρ204 ЕХТ —о— Расширенный нереспондер (расширенное исследование:]^] 11 ;Ν4=Ι 11;Ν6=107;Ν8=101;Ν10=98;Ν12=92;Ν14=88) —н—Расширенный респондер (расширенное исследование: Νδ=23;Ν4=23;Ν6=22;Ν8=19;Ν10=18;Ν12=18;Ν14=ί8)

Фиг. 36

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня по группам расширенных респондеров в ходьбе на время в исследованиях Μδ-Ρ202/Μδ-Ρ202ΕΧΤ

- 92 022755 —о— ов нересп - расш нересп (расширенное исследование: Ν$=56;Ν4=56;Ν6=54;Ν8=53;Ν10=52;Ν12=44;Ν14=45) ···+··* ов нересп - расш респ (расширенное исследование: Νδ=7;Ν4=7;Ν6=7;Ν8=5:Ν10=5;Ν12=5;Ν 14=5)

- м-ϋΒ респ - расш нересп (расширенное исследование: Ν5=32;Ν4=32;Ν6=30;Ν8=28;Ν1(}=28·,Ν 12=28;Ν14=25) —о-ϋΒ респ - расш респ (расширенное исследование: Νβ«11;Ν4=11;Ν6=11 ;Ν8=Ι 1 ;Ν 10=11;Ν12=ίΐ;Ν14=11)

Фиг. 37

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении; по статусу репондера в исходном/расширенном исследовании, для пациентов, рандомизированных в группу фампридина, в исследованиях Μδ-Ρ202/Μδ-Ρ202ЕXΤ —о—Плацебо расш нереспондер (расширенное исследование: Ν8=23;Ν4=23;Ν6=23;Ν8=20;Ν10=19;Ν12=20;Ν14=18) -+·· Плацебо расш респондер (расширенное исследование: Ν&=5;Ν4=5;Ν6=4;Ν8=3;Ν10=2:Ν12=2;Ν14=2)

Фиг. 38

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношении получавших плацебо в исходном исследовании Μδ-Ρ202 и расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании Μδ-Ρ202ЕXΤ

- 93 022755 л

\о

X)

X ь

о

о.

§ о

0) н

X

0)

X

Ί)

О а>

х £Х

О —о—Расширенный нереспондер (расширенное исследование: Ν&=198;Ν1=198:Ν2=190;Ν3=178;Ν4=161;Ν5=151;Ν6=140) ••-(-•Расширенный респондер (расширенное исследование: Ν8=66;Ν1=66;Ν2=59;Ν3=58;Ν4=58;Ν5=58;Ν6=55)

Фиг. 39

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня по группам расширенных респондеров в ходьбе на время в исследованиях М§-Р203/М§-Р203ЕХТ —о— ϋΒ нересп - расш нересп (расширенное исследование: Νδ= 101 ;ΝΙ=ΐ02;Ν2=95;Ν3=88;Ν4=79;Ν5=76;Ν6=72) —н - ϋΒ нересп - расш респ (расширенное исследование: Νδ=25;Ν1=25;Ν2=21 ;Ν3=2Ο;Ν4=21 ;Ν5=21 ;Ν6=2Ο)

ЭВ респ - расш нересп (расширенное исследование: Νδ=4Ο;Ν1=39;Ν2=39;Ν3=38;Ν4=35;Ν5=34;Ν6=3Ο)

...о- ЭВ респ - расш респ (расширенное исследование: Νδ=30;Ν1=30;Ν2=28;Ν3=28;Ν4=27;Ν5=27;Ν6=25)

Фиг. 40

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении, по статусу респондера в исходном/расширенном исследовании, для пациентов, рандомизированных в группу фампридина, в исследованиях М§-Р203/М§-Р203ЕХТ

- 94 022755 —о—Плацебо расш нереспондер (расширенное исследование: Ν$=57;Ν 1=57',Ν2=56;Ν3=52;Ν4=47;Ν5=41 ;Ν6=3£) —н—Плацебо расш респондер (расширенное исследование: Νδ= 11 ;Ν 1-11 ;Ν2=10;Ν3=10;Ν4=10;Ν5=10;Ν6-10)

Фиг. 41

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношении получавших плацебо в исходном исследовании Μδ-Ρ203 и расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании Μδ-Ρ203ΕΧΤ

-о—Расширенный нереспондер (расширенное исследование: Νδ=114;Ν1=114;Ν2=106;Ν3=101;Ν4=53 ч—Расширенный респондер (расширенное исследование: Νδ=99;Ν1=99;Ν2=91;Ν3=91;Ν4=4ό)

Фиг. 42

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня по группам расширенных респондеров в ходьбе на время в исследованиях Μδ-Ρ204/Μδ-Ρ204ΕΧΤ

- 95 022755 —о- ОБ нересп - расш нересп (расширенное исследование: Ν8=45;Ν1=45;Ν2=42;Ν3=39;Ν4=21)

-Ч— ОВ нересп - расш респ (расширенное исследование: Ν«=15;Ν1=15,Ν2=12;Ν3=ί2;Ν4=4)

- ϋΒ респ - расш нересп (расширенное исследование: №ι=15;Ν1=15;Ν2=13;Ν3=]3;Ν4=7)

-о- ϋΒ респ - расш респ (расширенное исследование: Ν$=34;Ν1=34;Ν2=32;Ν3=33;Ν4=19)

Фиг. 43

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня при каждом посещении, по статусу респондера в исходном/расширенном исследовании, для пациентов, рандомизированных в группу фампридина, в исследованиях М8-Р204/М8-Р204ΕXΤ

Посещение М5-Р204 Посещение МЗ-Р204ЕХТ

-о— Плацебо расш нереспондер (расширенное исследование; Νχ=54:Ν I =54:Ν2=51 :Ν3=49;Ν4=25)

...ц— Плацебо расш респондер (расширенное исследование: Ν$=50;ΝI =50;Ν2=47;Ν3=46;Ν4=23)

Фиг. 44

Среднее процентное изменение скорости ходьбы относительно базового уровня в отношении получавших плацебо в исходном исследовании М8-Р204 и расширенных респондеров в ходьбе на время в расширенном исследовании М8-Р204ЕХУ

- 96 022755

КАЧЕСТВЕННЫЙ ЭФФЕКТ

Среднее изменение респондера у среднего участника

ответ Пункты МЗИ5-12 без фампридина с фампридином 1. способность ходить существенно умеренно 2. способность бегать очень очень 3. способность подниматься по лестнице существенно умеренно 4. затрудненное стояние умеренно умеренно 5. ограниченное равновесие в положении существенно умеренно

стоя или при ходьбе

6. ограниченная дистанция передвижения существенно существенно 7. повышенные усилия при ходьбе существенно умеренно 8. использование вспомогательных существенно умеренно приспособлений при ходьбе дома 9. использование вспомогательных существенно существенно приспособлений при ходьбе вне дома 10. замедление вашей ходьбы существенно умеренно 11. влияние на плавность вашей ходьбы существенно существенно 12. сосредоточенность на ходьбе существенно существенно изменение в 6 пунктах (порядок 1,5,7, ,8,3,10)

Фиг. 45

Фиг. 46

- 97 022755

Статистика открытых расширенных исследований М5-Р202ЕХТ, Μ3-Γ203ΕΧΤ, М8-Р204ЕХТ при дозе 10 мг

М8-Р202 ЕХТ 1 453 пациенто-лет ί N=177 М5-Р203 ЕХТ N=93 1 1 1 1 576 пациенто-лет ! N=269 М5-Р204 ЕХТ N=187 1 1 1 1 187пациенто-лет 1 А------------------- N=214 N=184 1 -1—-►

Февраль 2003

Ноябрь 2008

Общая экспозиция: 1216 пациенто-лет

Фиг. 48

Моделирование РК стационарного состояния: 10 мг ВЮ в сравнении с 30 мг ВЮ Нормальная функция почек (СгС1>80 мл/мин)

Срединное значение при терапии [90% С1] Цпах (нг/мл) ^-ιηίη (нг/мл)

10 мг ВЮ 24.66 [19.62,29.891 11.14 [7.23,14.91] 20 мг ВЮ 49.33 22.28 [39.24,59.771 [14.45,29.82] 30 мг ВЮ 73.99 [58.86,89.66] 33.42 [21.68,44.73]

Стах =максимальная концентрация в плазме; Стю = минимальная концентрация в плазме. Нормальная функция почек: (СгС1>80 мл/мин); сниженная функция почек: 50-80 мл/мин

Фиг. 49