EA002468B1 - A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production - Google Patents
A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production Download PDFInfo
- Publication number
- EA002468B1 EA002468B1 EA200100373A EA200100373A EA002468B1 EA 002468 B1 EA002468 B1 EA 002468B1 EA 200100373 A EA200100373 A EA 200100373A EA 200100373 A EA200100373 A EA 200100373A EA 002468 B1 EA002468 B1 EA 002468B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- lycopene
- strains
- strain
- vsb
- pair
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и касается производства витаминов и антиоксидантов, в частности производства ликопина.The invention relates to the field of biotechnology and relates to the production of vitamins and antioxidants, in particular the production of lycopene.
Ликопин - красный пигмент плодов томата, относится к классу природных соединений, а именно каротиноидам. Его широко применяют при изготовлении пищевых продуктов в качестве пищевого красителя. Особенно велико его значение при производстве колбас и ветчинных изделий, где он может заменить нитрит натрия.Lycopene is a red pigment of tomato fruits, belongs to the class of natural compounds, namely carotenoids. It is widely used in the manufacture of food as a food coloring. Its value is especially great in the production of sausages and ham products, where it can replace sodium nitrite.
В последние годы было показано, что ликопин обладает более выраженной способностью устранять вредное воздействие синглетного кислорода по сравнению с β-каротином и другими каротиноидами [1]. Активность подавлять рост раковых клеток у ликопина также выше по сравнению с β-каротином [2]. Кроме того, установлено положительное влияние ликопина при комплексном лечении больных сахарным диабетом [3].In recent years, it has been shown that lycopene has a more pronounced ability to eliminate the harmful effects of singlet oxygen compared with β-carotene and other carotenoids [1]. Activity to inhibit the growth of cancer cells in lycopene is also higher compared with β-carotene [2]. In addition, the positive effect of lycopene in the complex treatment of patients with diabetes mellitus has been established [3].
Известен способ получения ликопина из кожицы томатов путем экстракции хлористым метиленом в присутствии адсорбента [4]. Однако выход ликопина при этом незначительный, т.к. содержание ликопина в томатах невелико. Указанное делает этот способ экономически нецелесообразным. Помимо этого сезонность получения сырья для реализации данного способа можно также отнести к недостаткам. К более перспективным методам получения ликопина относятся биотехнологические способы получения ликопина, основанные на выращивании микроорганизмов-продуцентов пигмента и выделении его из биомассы органическими растворителями.A method of obtaining lycopene from the skin of tomatoes by extraction with methylene chloride in the presence of an adsorbent [4]. However, the yield of lycopene is insignificant, since the content of lycopene in tomatoes is small. This makes this method economically inexpedient. In addition, the seasonality of obtaining raw materials for the implementation of this method can also be attributed to the disadvantages. The more promising methods for obtaining lycopene include biotechnological methods for producing lycopene, based on growing microorganisms producing pigment and isolating it from biomass with organic solvents.
Способность синтезировать ликопин обнаружена у различных видов микроорганизмов бактерий, грибов, актиномицетов. Известен штамм 81гср1ошусс5 сйтойотусеБсик, который на минеральной среде накапливает 20-50 мг/кг ликопина [5]. Описан штамм бактерий МусоЬас1егшт гиЬгит, который на среде с мелассой и кукурузным экстрактом накапливает до 7,05 мг/г суммарных каротиноидов. При этом в пигментном комплексе бактерий помимо ликопина обнаружены α-, β- и γ-каротин, ауроксантин, лютеин, криптоксантин, виолоксантин, зеаксантин, антераксантин, рубиксантин, лепротеин, неоксантин [6].The ability to synthesize lycopene is found in various types of microorganisms of bacteria, fungi, actinomycetes. A known strain of 81crc1oscuss5 sytoyotusse Bsik, which accumulates 20-50 mg / kg of lycopene on the mineral medium [5]. The bacterial strain Musobilus rumen is described, which on a medium with molasses and corn extract accumulates up to 7.05 mg / g of total carotenoids. At the same time, in addition to lycopene, α-, β-, and γ-carotene, auroxanthin, lutein, cryptoxanthin, violoxanthin, zeaxanthin, anteraxanthin, rubiksanthin, leprotein, neoxanthin were found in the pigment complex of bacteria [6].
Наиболее активными продуцентами ликопина являются грибы Р11усотусс5 Ь1акс51сапи5 и В1акеДеа 1г1зрога. У гриба Рйусотусек ЫакеДеапш в зависимости от особенностей штамма и условий культивирования уровень накапливания ликопина колеблется в интервале 192-600 мкг/г АСВ [7].The most active producers of lycopene are the fungi P11usotuss5 L1ax51Sapi5 and BaccaDea Hirrosov. Depending on strain characteristics and cultivation conditions, the level of accumulation of lycopene varies in the range of 192–600 μg / g DIA [7].
Известны способы получения ликопина из биомассы гриба В1аке§1еа 1г15рога [8, 9]. В соответствии с описанными способами выход кристаллического ликопина составляет 31-56% от количества его в биомассе. Наиболее близким к заявленному изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения ликопина, описанный в патенте РФ № 2102416 [10]. Согласно данному изобретению выращивают штаммы гриба В1аке§1еа (порога А-732-3(+) и А-731-3(-) или 8А(+) и 8А(-) на кукурузно-соевой среде с добавлением в качестве стимуляторов ликопинообразования соединений класса аминометилпиридинов или табачной крошки. Выращивание (+) и (-) штаммов ведут в течение 48 ч, полученный посевной материал используют в соотношении 1:9 для последующей ферментации. Получение целевого продукта осуществляют экстракцией подсолнечным маслом, кристаллизацией с использованием этанола и толуола и последующей колоночной хроматографией в системе н-гексанацетон 50:1.There are known methods for producing lycopene from the biomass of the fungus Blake§lea I1515rog [8, 9]. In accordance with the described methods, the yield of crystalline lycopene is 31-56% of its quantity in biomass. The closest to the claimed invention to the technical essence and the achieved result is a method for producing lycopene, described in the patent of the Russian Federation No. 2102416 [10]. According to the present invention, the strains of the fungus Blake§lea (threshold A-732-3 (+) and A-731-3 (-) or 8A (+) and 8A (-)) are grown on corn soybean medium with the addition of the following compounds as stimulants of lycopene formation Aminomethylpyridine class or tobacco chips. Growing (+) and (-) strains is carried out for 48 h, the obtained seed is used in a ratio of 1: 9 for subsequent fermentation. Obtaining the desired product is carried out by extraction with sunflower oil, crystallization using ethanol and toluene and subsequent column chromatograph iey in the system n-geksanatseton 50: 1.
В соответствии с описанным способом выход ликопина составляет 0,7 г/л среды. Соотношение ликопина и β-каротина составляет 11:1 или 92 и 8% соответственно. К сожалению, в патенте не указан уровень накопления биомассы гриба в единице объема питательной среды, что не позволяет оценить ликопинсинтезирующую активность культуры-продуцента. Кроме того, для накопления ликопина культурой гриба В1аке§1еа (порога указанными штаммами в среду добавляют стимуляторы: аминометилпиридин или табачную крошку. При этом табачная крошка является более слабым стимулятором в сравнении с аминометилпиридином, так при ее добавлении в среду культивирования уровень накопления ликопина грибом В1аке§1еа (порога составляет 0,4 г/л, что в 1,7 раза ниже по сравнению с аминометилпиридином. Добавление в среду культивирования производных пиридина, несмотря на их низкие концентрации (0,010,005%), нежелательно.In accordance with the described method, the yield of lycopene is 0.7 g / l of medium. The ratio of lycopene and β-carotene is 11: 1 or 92 and 8%, respectively. Unfortunately, the patent does not indicate the level of accumulation of the biomass of the fungus per unit volume of the nutrient medium, which does not allow one to estimate the lycopene-synthesizing activity of the producer-culture. In addition, for the accumulation of lycopene by the culture of the fungus Blake§lea (the threshold for these strains is added to the environment by stimulants: aminomethylpyridine or tobacco chips. At the same time, tobacco chips are a weaker stimulant compared to aminomethylpyridine, so when it is added to the culture medium, the level of accumulation of lycopene by the mushroom B1 §1еа (threshold is 0.4 g / l, which is 1.7 times lower than aminomethylpyridine. The addition of pyridine derivatives to the cultivation medium, despite their low concentrations (0.010.005%), is undesirable.
Задачей данного изобретения является получение новой пары штаммов гетероталличного гриба ВЬАКЕБЬЕА ТЯКРОЯА ВСБ-129(-) и ВСБ-130(+), продуцирующей ликопин, и разработка более эффективного способа получения ликопина при использовании указанной пары штаммов.The objective of this invention is to obtain a new pair of strains heterotallichnogo fungus VIAKEBEAA TYAKROYAA BCE-129 (-) and BAB-130 (+), producing lycopene, and the development of a more effective way to obtain lycopene using the specified pair of strains.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что в результате многоступенчатой селекции и отбора получена пара штаммов гетероталличного гриба В1аке§1еа 1г1крога ВСБ-129(-) и ВСБ-130(+), которая при совместном глубинном культивировании на минеральной среде с глюкозой через 36 ч культивирования накапливает до 35 мг ликопина в расчете на 1 г абсолютно сухого веса (АСВ) биомассы (или до 0,8 г/л культуральной среды); на кукурузносоевой среде через 48 ч от начала культивирования - до 30 мг ликопина в расчете на 1 г абсолютно сухого веса (АСВ) биомассы (или до 1,5 г/л культуральной среды). При этом в среду культивирования не вносят дополнительно сти3 муляторы ликопинообразования. Содержание ликопина составляет 92-96% от суммы каротиноидов. Ликопинсодержащую биомассу отделяют от культуральной жидкости. Экстракцию проводят смесью органических растворителей гексан-этанол. Кристаллизацию ликопина проводят в этиловом спирте. Выход кристаллического ликопина составляет 50-55% от содержания его в биомассе.The essence of the invention lies in the fact that as a result of multi-stage selection and selection, a pair of strains of the heterotallic fungus Blake§lea 1g1kroga BWA-129 (-) and BWA-130 (+) was obtained, which, when co-cultivated in depth on a mineral medium with glucose, after 36 h cultivating accumulates up to 35 mg of lycopene per 1 g of absolutely dry weight (DIA) of biomass (or up to 0.8 g / l of culture medium); on the corn soybean medium after 48 hours from the start of cultivation - up to 30 mg of lycopene per 1 g of absolutely dry weight (DIA) of biomass (or up to 1.5 g / l of culture medium). In addition, lycopene stimulators are not added to the cultivation medium. Lycopene content is 92-96% of the amount of carotenoids. Lycopene-containing biomass is separated from the culture fluid. The extraction is carried out with a mixture of organic solvents hexane-ethanol. Crystallization of lycopene is carried out in ethanol. The yield of crystalline lycopene is 50-55% of its content in biomass.
Пара штаммов гриба В1аке§1еа 1г1зрога ВСБ-129(-) и ВСБ-130(+) получена из (+) и (-) форм коллекционного штамма В1аке§1еа 1г15рога в результате многоступенчатой селекции с применением ультрафиолетовых лучей и Ν-метилЫ-нитро-Ы-нитрозогуанидина и бензилпенициллина в качестве мутагенных факторов и рассевом на чашки Петри с питательной средой сусло-агар (7° Баллинга). Через 18-24 ч выращивания изолированные колонии отсевали в пробирки на скошенный сусло-агар. Отбор колонии производили после 8-10-дневного выращивания их в пробирках при 26°С по признаку наибольшего пигментообразования с последующим определением продуктивности выделенных вариантов. Штаммы ВСБ-129 и ВСБ-130 имеют следующие характеристики.A pair of strains of the fungus B1Ake§lea 1g1xrg BWA-129 (-) and BWA-130 (+) obtained from (+) and (-) forms of the collection strain B1Ake§1e1r15roh as a result of multi-stage selection using UV rays and и-methyl-nitro -Y-nitrosoguanidine and benzylpenicillin as mutagenic factors and sieving on Petri dishes with a wort agar nutrient medium (7 ° Balling). After 18-24 h of cultivation, the isolated colonies were screened in tubes on beveled wort agar. Colonies were selected after 8–10 days of cultivation in test tubes at 26 ° C on the basis of the greatest pigmentation with subsequent determination of the productivity of the isolated variants. The strains of BWA-129 and BWA-130 have the following characteristics.
Сусло-агар. Штамм ВСБ-130(+). Рост штамма интенсивный. Воздушный мицелий развит равномерно, пушистый, бежевого цвета. Субстратный мицелий палевого цвета. Спорообразование активное.Wort agar. The strain BAB-130 (+). The growth of the strain is intense. Aerial mycelium is developed uniformly, fluffy, beige color. Substrate mycelium of fawn color. Sporulation is active.
Штамм ВСБ-129(-). Рост менее активный по сравнению со штаммом ВСБ-130. Воздушный мицелий развит слабо. Спорообразование скудное. Субстратный мицелий штамма яркооранжевого цвета.The strain BAB-129 (-). Growth is less active compared to the strain BAB-130. Aerial mycelium is underdeveloped. Sporulation scanty. Substrate mycelium strain bright orange color.
При совместном росте на среде сусло-агар в месте соприкосновения (+) и (-) форм не образуется характерной полосы черных зигоспор. После соприкосновения с (+) формой вся поверхность мицелия (-) формы окрашивается в бордово-красный цвет.With the joint growth on the wort agar medium at the point of contact (+) and (-) forms, no characteristic band of black zygospores is formed. After contact with the (+) form, the entire surface of the mycelium (-) of the form is colored maroon-red.
Выход ликопина при совместном глубинном культивировании штаммов ВСБ-129 и ВСБ120 на минеральной среде с глюкозой через 36 ч культивирования накапливает до 35 мг ликопина в расчете на 1 г абсолютно сухого веса (АСВ) биомассы (или до 0,8 г/л культуральной среды); на кукурузно-соевой среде через 48 ч от начала культивирования - до 30 мг ликопина в расчете на 1 г абсолютно сухого веса (АСВ) биомассы (или до 1,5 г/л культуральной среды).The yield of lycopene during the joint cultivation of strains of BWA-129 and BWA120 on mineral medium with glucose after 36 hours of cultivation accumulates up to 35 mg of lycopene per 1 g of absolutely dry weight (DIA) of biomass (or up to 0.8 g / l of culture medium) ; on corn-soy medium after 48 hours from the start of cultivation - up to 30 mg of lycopene per 1 g of absolutely dry weight (DIA) of biomass (or up to 1.5 g / l of culture medium).
Пример 1.Example 1
Штаммы гриба В1акеЧеа 1г15рога ВСБ-129 и ВСБ-130 выращивают на косяках сусло-агар в течение 12 суток. Штамм ВСБ-1 29 засевают в качалочные колбы на предварительно гидролизованную кукурузно-соевую среду следующего состава:The strains of the fungus VakekeChe 1g15roga BWA-129 and BWA-130 are grown on the jambs wort agar for 12 days. The strain BWA-1 29 seeded in katalochnye flasks on pre-hydrolyzed corn-soy environment of the following composition:
соевая мука - 4,5%;soy flour - 4.5%;
кукурузная мука - 2,3%;corn flour - 2.3%;
КН2РО4 - 0,05%;KN 2 PO 4 - 0.05%;
тиаминхлорид - 2х10-4%.thiamine chloride - 2x10 -4 %.
Гидролиз муки осуществляют следующим образом: кукурузную и соевую муку разводят водопроводной водой, добавляют 2,8 мл концентрированной серной кислоты и стерилизуют при 1 атм 1,5 ч. После стерилизации устанавливают рН 6,5-6,3 и добавляют КН2РО4. Выращивание (-) штамма ведут при 26-27°С на качалке при 200 об/мин в течение 48 ч. Выросшую культуру штамма ВСБ-129 используют как засевной материал для засева колб с кукурузно-соевой средой вышеописанного состава. Кукурузносоевую среду для основной ферментации гидролизу не подвергают. Засеянные культурой ВСБ-129 колбы выращивают на качалке 32 ч при 26-27°С при 200 об/мин. Через 32 ч от начала культивирования в колбы с выросшей культурой ВСБ-129 вносят антиоксидант и предварительно выращенный на кукурузно-соевой среде (+) штамм ВСБ-130. Количество внесенного (+) штамма составляет 1,5% от объема среды. Совместное выращивание штаммов ведут 48 ч при вышеописанных условиях. Через 48 ч концентрация биомассы составляет 50 г/л, содержание ликопина в биомассе - 30 мг/г АСВ биомассы, общий выход ликопина - 1,5 г/л культуральной среды. Содержание ликопина и β-каротина составляет 92 и 8% соответственно.The hydrolysis of flour is as follows: corn and soy flour is diluted with tap water, 2.8 ml of concentrated sulfuric acid are added and sterilized at 1 atm for 1.5 hours. After sterilization, the pH is adjusted to 6.5-6.3 and KH 2 PO 4 is added. Growing (-) strain is carried out at 26-27 ° C on a rocking chair at 200 rpm for 48 hours. The grown culture of the BWA strain 129 is used as seeding material for seeding flasks with corn soybean medium of the composition described above. Maize environment for the main fermentation is not subjected to hydrolysis. The flasks seeded with VSB-129 are grown on a rocking chair for 32 hours at 26-27 ° C at 200 rpm. After 32 hours from the beginning of cultivation, antioxidant and pre-grown on the corn soybean medium (+) strain BWA-130 are introduced into flasks with grown culture of BWA-129. The number of introduced (+) strain is 1.5% of the volume of the medium. Joint cultivation of strains are 48 h under the above conditions. After 48 h, the biomass concentration is 50 g / l, the biomass content in the biomass is 30 mg / g DIA biomass, the total lycopene yield is 1.5 g / l of culture medium. Lycopene and β-carotene are 92 and 8%, respectively.
Пример 2.Example 2
Способ получения ликопина осуществляют так же, как описано в Примере 1, но кукурузно-соевую среду для основной ферментации подвергают гидролизу. На гидролизованной среде (-) штамм ВСБ-1 29 выращивают в течение 24 ч, затем в выросшую культуру (-) штамма добавляют суспензию (+) штамма ВСБ-130 в количестве 1,0% от объема среды и антиоксидант. Совместное выращивание (+) и (-) штаммов ведут 40 ч при вышеописанных условиях. Через 40 ч содержание ликопина в биомассе составляет 28 мг/г АСВ биомассы, общий выход ликопина - 1,4 г/л культуральной среды. Содержание ликопина и β-каротина составляет 94 и 6% соответственно.The method for producing lycopene is carried out in the same manner as described in Example 1, but the corn-soy medium for the main fermentation is subjected to hydrolysis. On the hydrolyzed medium (-) strain BWA-1, 29 is grown for 24 hours, then suspension (B) of the BWA-130 strain in the amount of 1.0% of the medium volume and antioxidant are added to the grown culture of the (-) strain. Joint cultivation of (+) and (-) strains are 40 h under the above conditions. After 40 h the content of lycopene in biomass is 28 mg / g DIA biomass, the total yield of lycopene is 1.4 g / l of culture medium. Lycopene and β-carotene are 94 and 6%, respectively.
Пример 3.Example 3
Способ получения ликопина осуществляют так же, как описано в Примере 1, но после выращивания на кукурузно-соевой среде штамм ВСБ-1 29 засевают в минеральную среду с глюкозой. Состав среды:The method of producing lycopene is carried out in the same manner as described in Example 1, but after growing on corn-soy medium, the BWA-1 strain 29 is seeded into the mineral medium with glucose. The composition of the medium:
глюкоза-15 г/л;glucose-15 g / l;
(ΝΗ4)28Ο4 - 5,8 г/л; ЫаН2РО4 - 5,2 г/л;(ΝΗ 4 ) 2 8Ο 4 - 5.8 g / l; NaH 2 PO 4 - 5.2 g / l;
К2НРО4 - 5,0 г/л;K 2 NRA 4 - 5.0 g / l;
МАСС - 0,34 г/л;MASS - 0.34 g / l;
пептон -10 г/л;peptone -10 g / l;
тиаминхлорид - 2х10-4%.thiamine chloride - 2x10 -4 %.
На минеральной среде (-) штамм ВСБ-129 выращивают 20 ч при 26-27°С на качалке приOn the mineral medium (-) the strain BWA-129 is grown for 20 h at 26-27 ° С on a rocking chair with
200 об/мин. Затем в среду культивирования добавляют антиоксидант, 3% глюкозы и предвари5 тельно выращенный на кукурузно-соевой среде (+) штамм ВСБ-130. Количество внесенного (+) штамма составляет 1% от объема среды. Совместное выращивание (-) и (+) штаммов ведут при вышеописанных условиях в течение 36 ч. Через 36 ч от начала совместного выращивания штаммов накопление биомассы составляет 23 г/л, содержание ликопина в биомассе - 35 мг/г АСВ биомассы, общий выход ликопина - 0,8 мг/л культуральной среды. Содержание ликопина и β-каротина составляет 96 и 4% соответственно.200 rpm Then, an antioxidant, 3% glucose, and a BAB-130 strain preliminarily grown on corn soybean medium (+) are added to the culture medium. The amount of the introduced (+) strain is 1% of the volume of the medium. Joint cultivation of (-) and (+) strains is carried out under the above conditions for 36 hours. 36 hours after the start of joint cultivation of strains, biomass accumulation is 23 g / l, lycopene content in biomass is 35 mg / g biomass DIA, total lycopene yield - 0.8 mg / l of culture medium. Lycopene and β-carotene are 96 and 4%, respectively.
Пример 4.Example 4
Способ получения ликопина осуществляют так же, как описано в Примере 3, но (-) штамм ВСБ-129 выращивают на минеральной среде с 2% глюкозы в качестве источника углерода и энергии в течение 28 ч при температуре 26°С в колбах с отбойниками для создания оптимального режима аэрации. Через 28 ч выращивания (-) штамма в колбы с выросшей культурой (-) штамма добавляют 1,5% глюкозы, 1,0% суспензии (+) штамма ВСБ-130 и антиоксидант. Совместное выращивание (+) и (-) штаммов ведут в течение 40 ч при вышеописанных условиях. Содержание ликопина в биомассе составляет 33 мг/г АСВ биомассы, общий выход ликопина в расчете на единицу объема питательной среды - 940 мг/л. Содержание ликопина и β-каротина составляет 96 и 4% соответственно.The method of producing lycopene is carried out as described in Example 3, but the (-) BAB-129 strain is grown on a mineral medium with 2% glucose as a carbon source and energy for 28 hours at a temperature of 26 ° C in flasks with bump stops to create optimal aeration mode. After 28 hours of growing the (-) strain, 1.5% glucose, 1.0% suspension of the (+) strain BWA-130 and antioxidant are added to the flasks with the grown culture of the (-) strain. Co-cultivation of (+) and (-) strains is carried out for 40 hours under the conditions described above. The content of lycopene in biomass is 33 mg / g DIA biomass, the total yield of lycopene per unit volume of the nutrient medium is 940 mg / l. Lycopene and β-carotene are 96 and 4%, respectively.
Пример 5.Example 5
В колбу загружают ликопинсодержащую биомассу и смесь растворителей гексан-этанол в соотношении 4:1. Соотношение биомассы и растворителя 1:5. Экстракцию проводят в 3 ступени при 1=60°С в течение 30 мин на каждую ступень. Далее шрот отфильтровывают и насыщенный экстракт направляют на кристаллизацию в этиловом спирте при (=5°С в течениеThe flask is charged with lycopene-containing biomass and a mixture of solvents hexane-ethanol in a 4: 1 ratio. The ratio of biomass and solvent is 1: 5. Extraction is carried out in 3 steps at 1 = 60 ° C for 30 minutes at each step. Next, the meal is filtered and the saturated extract is directed to crystallization in ethyl alcohol at (= 5 ° C for
ч. Выход ликопина составляет около 55% от содержания его в биомассе. Доля основного вещества - 92%.h. The output of lycopene is about 55% of its content in biomass. The proportion of the main substance - 92%.
Список литературыBibliography
1. Масю Ρ.Ό., Эсуа^щауат Т.Р.А., Ка1§ег 8., 81е§ Н. || Вюсйет. 8ос. Тгап8асИоп8.-1990ν.18. И6.-р. 1055-1056.1. Masyu Ρ.Ό., Esoa ^ schauat, T.P.A., Ka1gseg 8., 81e§ N. || Vusyet. 8os Tgap8asIop8.-1990ν.18. I.6.r. 1055-1056.
2. Заявка на патент ЕР 0600544.2. Application for patent EP 0600544.
3. А тепсап 1оигпа1 о£ ЕрИетю1оду 1999; 149:168-176.3. And a tepap trademark about £ 1999; 149: 168-176.
4. Патент РФ № 2039775.4. RF patent number 2039775.
5. Патент 1Т № 343773.5. Patent 1T number 343773.
6. АС СССР № 1071636.6. The USSR AS No. 1071636.
7. В.Е Ме1Иа. Е.Сег6а-О1те6о || Арр1. М1стоЫо1. Вю!есйпо1.-1995.-№ 42-р.836-838.7. V.E. Me1Ia. E.Seg6a-O1te6o || Arr1 M1stoYo1. Vu! Eipo1.-1995.-№ 42-p. 836-838.
8. Патент РФ 2112747.8. RF patent 2112747.
9. Патент РФ № 2126806.9. RF patent № 2126806.
10. Патент РФ № 2102416.10. RF patent № 2102416.
Claims (2)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EA200100373A EA002468B1 (en) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EA200100373A EA002468B1 (en) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200100373A1 EA200100373A1 (en) | 2002-04-25 |
EA002468B1 true EA002468B1 (en) | 2002-04-25 |
Family
ID=8161578
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200100373A EA002468B1 (en) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
EA (1) | EA002468B1 (en) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3097146A (en) * | 1961-06-30 | 1963-07-09 | Miles Lab | Process for lycopene production |
GB1008469A (en) * | 1961-06-30 | 1965-10-27 | Miles Lab | Improvements in or relating to lycopene |
US3369974A (en) * | 1964-05-14 | 1968-02-20 | Rhone Poulenc Sa | Production of lycopene |
RU2115678C1 (en) * | 1997-11-13 | 1998-07-20 | Открытое акционерное общество "Московский комитет по науке и технологиям" | Method of lycopin preparing |
-
2001
- 2001-03-30 EA EA200100373A patent/EA002468B1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3097146A (en) * | 1961-06-30 | 1963-07-09 | Miles Lab | Process for lycopene production |
GB1008469A (en) * | 1961-06-30 | 1965-10-27 | Miles Lab | Improvements in or relating to lycopene |
US3369974A (en) * | 1964-05-14 | 1968-02-20 | Rhone Poulenc Sa | Production of lycopene |
RU2115678C1 (en) * | 1997-11-13 | 1998-07-20 | Открытое акционерное общество "Московский комитет по науке и технологиям" | Method of lycopin preparing |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA200100373A1 (en) | 2002-04-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1808483B1 (en) | Process for obtaining lutein from algae | |
JPWO2005085465A1 (en) | Method for producing astaxanthin-containing lipid | |
US20040077036A1 (en) | Process to produce astaxanthin from haematococcus biomass | |
JP3163127B2 (en) | Method for producing astaxanthin | |
EP1676925B1 (en) | Process for producing zeaxanthin and beta-cryptoxanthin | |
RU2211862C2 (en) | (-)-strain of heterothallic phycomycetus blakeslea trispora producing lycopin in pair with different (+)-strains of blakeslea trispora and method for micribiological synthesis of lycopin | |
US20050124032A1 (en) | Method of production of astaxanthin by fermenting selected strains of <I>xanthophyllomyces dendrorhous | |
JP2003502052A (en) | How to make lycopene | |
JP2001061466A (en) | Production of astaxanthin | |
JP4557244B2 (en) | Method for producing zeaxanthin | |
KR101797083B1 (en) | Novel Escherichia coli Ajou_CEM45W strain | |
JP2012139164A (en) | Method for producing carotenoid by using microorganism | |
KR100431359B1 (en) | Mutant of Phaffia rhodozyma producing astaxanthin and fermentation method thereof | |
EA002468B1 (en) | A pair of strains of heterothallic fungus "blakeslea trispora" vsb-129 (-) and vsb-130 (+), producing lycopene and process for lycopene production | |
RU2102416C1 (en) | Method of lycopine producing | |
KR20230085376A (en) | Flavobacterium sp. strain ic2-16 producing carotenoids, and uses thereof | |
NO334735B1 (en) | Process for the preparation of carotenoids | |
JPH05168465A (en) | Mutant strain of phaffia rhodozyma and production of carotenoids by its cultivation | |
SU908092A1 (en) | Method of obtaining riboflavin | |
JP2003304895A (en) | Method for fermentation production of lycopene | |
RU2115678C1 (en) | Method of lycopin preparing | |
KR100706175B1 (en) | New bacterium Flavococcus chejuensis producing zeaxanthin and production method of zeaxanthin using thereof | |
RU2053301C1 (en) | Pair strains of heterothallic fungus blakeslea trispora f - 674(+) and f-551 (-) producing beta-carotene | |
WO2004057012A1 (en) | BLAKESLEA TRISPORA TKST (+) AND (-) HIGH-YIELD STRAIN-PRODUCER OF ß-CAROTENE | |
JPH05219983A (en) | Method of producting zeaxanthin |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |