DK145424B - Fremgangsmaade til fremstilling af nitrogenholdige polysaccharider med antitumorigen virkning - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af nitrogenholdige polysaccharider med antitumorigen virkning Download PDFInfo
- Publication number
- DK145424B DK145424B DK151977AA DK151977A DK145424B DK 145424 B DK145424 B DK 145424B DK 151977A A DK151977A A DK 151977AA DK 151977 A DK151977 A DK 151977A DK 145424 B DK145424 B DK 145424B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- extraction
- solution
- liters
- water
- yield
- Prior art date
Links
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 20
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title description 17
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title description 17
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 title description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title description 8
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 57
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 55
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 45
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 241000222356 Coriolus Species 0.000 description 13
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- -1 nitrogen-containing polysaccharide Chemical class 0.000 description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 9
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 8
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 8
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 7
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 7
- 241000222355 Trametes versicolor Species 0.000 description 7
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 7
- 230000002622 anti-tumorigenesis Effects 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 5
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000222357 Trametes hirsuta Species 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=CC2=C1 KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 2
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 2
- FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N Anthron Natural products COc1cc2Cc3cc(C)cc(O)c3C(=O)c2c(O)c1C=CC(C)C FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000136126 Ctenitis biformis Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241001676647 Trametes pubescens Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000002830 Volutella consors Species 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 210000001099 axilla Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000385 dialysis solution Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000010200 folin Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
- A61K36/074—Ganoderma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(19) DANMARK ( \Ry (12) FREMLÆGGELSESSKRIFT od 145^248
direktoratet for PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET
(21) Ansøgning nr. 1 519/77 (51) -IntCL* C 12 P 19/26 . ^ (22) Indleveringsdag 5· apr, 1977 C ,08 B 37/00 .
(24) Løbedag 5. apr. 1977 (41) Aim. tilgængelig 8. jan. 1978 . f , (44) Fremlagt 15. nov. 1982 x : (86) International ansøgning nr. - (86) International indleveringsdag - r .
(85) Videreførelsesdag - (62) Sta mansøgning nr. -
(30) Prioritet 7. jul. 1976, 80665/76, JP
(71) Ansøger KUREHA KAGAKU KOGYO KABUSHIKI KAISHA, Tokyo, JP.
(72) Opfinder Saburo Ueno, JP: Chlkao Yoshikumi, JP: Furalo Hirose, JP: Yoshlo Ohmura, JP: Toshihlko WscLa, JP: tn. fl.
(74) Fuldmægtig Ingeniørfirmaet Lehmann & Ree.
..... ' ' ..... I ' ' ........... " 1 - (54) Fremgangsmåde til fremstilling af nitrogenholdige polysaccha= .. >· j rider med antltumorigen virkning..
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af et nitrogenholdigt polysaccharid med antitumorigen virkning ved ‘ ekstraktion af en svamp tilhørende slægten Coriolus, familien Poly-poraceae og klassen Basidiomycetes med et vandigt opløsningåniddel.
Det er velkendt, at et polysaccharid med antitumorigen virkning kan fremstilles ved at rense ekstrakten, der fås ved eks-traktion af en Basidiomycet med et vandigt opløsningsmiddel. En N sådan fremgangsmåde har imidlertid den alvorlige ulempe, at ekstrak- ^ tionseffektiviteten med hensyn til den aktive bestanddel er lav, 3" hvilket resulterer i et betydeligt tab af det værdifulde antitumori- gene stof, og følgelig har en sådan fremgangsmåde kun ringe praktisk £ anvendelighed, navnlig ud fra en betragtning over tilpasningsmuiig- □ :ib V '·. .£’··· ..................
' i ' 2 U 5424 heden til industriel fremstilling af antitumorigent stof fra svampen.
Det har nu vist sig, at der fra en svamp hørende til slægten Coriolus, familien Polyporaceae og klassen Basidiomycetes kan udvindes et nitrogenholdigt polysaccharid med antitumorigen virkning i betydeligt udbytte ved en fremgangsmåde, som er ejendommelig ved, at svampen først ekstraheres med vand eller en fortyndet vandig alkalisk opløsning og derefter yderligere ekstraheres trinvis med vandige alkaliske opløsninger af gradvis øget koncentration indenfor området under 2N ved en temperatur på 50-100°C.
"Svampen hørende til Coriolus-slægten", som benyttes som udgangsmateriale ved den foreliggende opfindelse, er en af de kendte arter som indbefatter f.eks. Coriolus versicolor (Fr.)
Quél., Coriolus hirsutus (Fr.) Quél., Coriolus consors (Berk.) Imaz., Coriolus conchifer (Schw.) Pat., Coriolus pubescens (Fr.) Quél., Coriolus pargamenus (Fr.) Pat. og Coriolus biformis (klotz.) Pat. (Se COLORED ILLUSTRATIONS OF FUNGI OF JAPAN af Rokuya Imazeki og Tsuguo Hongo, Bind I, 1974, og Bind II, 1975). Blandt disse svampe er Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM-P nr. 2414), Coriolus consors (Berk.) Imaz. (FERM-P nr. 988), Coriolus hirsutus (Fr.) Quél. (FERM-P nr. 2711) og Coriolus pargamenus (Fr.) Pat. (FERM-P nr. 2712) deponeret i Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology (Chiba-shi, Japan), som er et statsforetagende udpeget af generaldirektøren for de japanske patentmyndigheder. Betegnelsen "svamp hørende til Coriolus-slægten", som den anvendes heri, skal forstås som refererende til frugtlegemerne og/eller mycelierne af førnævnte svampearter. Særligt foretrukket som udgangsmateriale ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er mycelium tilvejebragt fra en kultur af Coriolus versicolor (Fr.) Quel.
Til ekstraktion af det Ønskede nitrogenholdige polysaccharid fra Basidiomyceterne (udgangsmateriale) ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen underkastes udgangsmaterialet flere ekstraktionsbehandlinger (fle'rtrinsekstraktion), d.v.s. at udgangsmaterialet først ekstraheres under anvendelse af vand eller et vandigt opløsningsmiddel indeholdende en lille mængde alkali (en fortyndet alkalisk opløsning) og derefter ekstraheres yderligere i flere trin under anvendelse af de vandige opløsninger med de jævnt stigende alkalikoncentrationer. I løbet af denne ekstraktionsproces er det muligt at gentage ekstraktionen under anvendelse af en ekstraktionsopløsning med samme koncentration. "Vandigt opløsningsmiddel indeholdende en lille mængde alkali" betyder en vandig opløsning, hvori pH-værdien af den vandige fase efter blanding med svampen er ca. 7 eller derunder. En sådan specificeret definition 3 145424 er baseret på, at når rent vand eller en natriumhydroxidopløsning med en koncentration på ca. 0,,01 N blandes med. svampen, forbliver pH-værdien af denne opløsning i området fra ca. 4 til 7 som følge : . af svampens iboende puffervirkning.
De vandige alkaliske opløsninger, der benyttes ved jævnt M stigende koncentrationer ifølge den foreliggende opfindelse, har som nævnt en maksimal koncentration på 2 N. Dette , skyldes, at nedbrydning af den aktive bestanddel kunne finde sted, hvis ekstraktionen gennemføres ved en koncentration, som er højere énd ovennævnte niveau. Det til ekstraktionen af Basidiomyceterne ifølge opfindelsen anvendte vandige opløsningsmiddel benyttes i en mængde på fra 5 til 200 gange vægten af udgangsmaterialet (tørvægtsbasis) i hvert ’ ekstraktionstrin, og ekstraktionen gennemføres sædvanligvis ved 50-100°C over fra 20 minutter til 5 timer. Det bør bemærkes, at en reaktionstemperatur på under 50°C resulterer i en dårlig ekstraktionseffektivitet, medens en ekstraktions temperatur på over 100°C/$u:nne forårsage nedbrydning af slutproduktet. Antallet af ekstraktionstrin er sædvanligvis fra 2 til ca. 10, fortrinsvis fra 3 til ca. 8. For at hindre nedbryd-::, ning af den aktive bestanddel foretrækkes det, at den samlede opvarm-π ningstid under ovennævnte temperaturbetingelser er mindre end 20 timer uanset antallet af ekstraktionstrin. For at opnå tilfredsstillende ekstraktionseffektivitet anbefales det også, at den totale opvarmningstid ikke er under 1 time. Den i forbindelse med opfindelsen benyttede alkaliske forbindelse kan være natriumhydroxid, kaliumhydroxid, calcium-hydroxid eller ammoniak, og brugen af natriumhydroxid er den alminde-f ligste.
Den ovenfor angivne flertrinsekstfaktionsfremgangsmåde/- der benytter sig af vandige alkaliske opløsninger med jævnt stigende koncentrationer, giver et højere udbytte af slutproduktet, end det ér muligt at opnå under anvendelse af de sædvanlige fremgangsmåderog er følgelig af stor betydning ud fra et industrielt produktivitetsmæssigt synspunkt. Således har denne flertrinsekstraktionsproces en overraskende effekt, idet den giver et overraskende højt udbytte sammenlignet med gentagen ekstraktion under anvendelse af rent vand alene eller vandige alkaliske opløsninger med samme koncentration.
Den mekanisme, som tilvejebringer denne høje ekstraktions-_ ikke effekt, kendes endnu/præcist, men det antages, at ekstraktionsprocessen ikke blot fremkalder eluering af de opløselige bestanddele fra Basidiomyceterne men også forårsager mild nedbrydning af Basidiomyceterne til opnåelse af dannelse af den opløselige aktive bestanddel. Med andre ord antages det, at udgangsmaterialet undergår nedbrydning, hver gang 4 usm den alkaliske koncentration af den alkaliske vandige opløsning, der benyttes ved ekstraktionen, forøges, hvilket muliggør effektiv frembringelse af det aktive stof.
Hvis ekstraktionen på den anden side gennemføres under anvendelse af en stærkt koncentreret, vandig alkalisk opløsning fra begyndelsen uden indledende vandekstraktion, bliver ekstraktudbyttet ganske vist forholdsvis højt i det første ekstraktionstrin, men udbyttet falder stærkt i andet og de efterfølgende ekstraktionstrin- Dette menes at skyldes følgende. Den fraktion, som normalt skulle ekstraheres med varmt vand eller en fortyndet, alkalisk vandig opløsning, undergår for voldsom nedbrydning under de kraftige betingelser, og det højmolekylære polysaccharid reduceres formentlig til et lavmolekylært stof med en molekylvægt på under 5.000.
Ekstrakten, der er fremkommet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen på den ovenfor beskrevne måde, neutraliseres på sædvanlig vis under anvendelse af en mineralsk syre, såsom fortyndet saltsyre, og underkastes derefter en rensningsproces. I dette tilfælde kan den eks-traktopløsning, som fås ved hvert ekstraktionstrin, underkastes rensning, eller også kan de opløsninger, som fås i de respektive ekstraktionstrin, forenes og derefter underkastes rensning.
Forskellige rensningsmetoder, såsom ultrafiltrering, omvendt osmose, gelfiltrering, udsaltning og udfældning under anvendelse af et organisk opløsningsmiddel, står til rådighed, og disse metoder kan benyttes enten alene eller i kombination til udvinding af et renset nitrogenholdigt polysaccharid med antitumorigen virkning.
Elementaranalysen af det således frembragte nitrogenholdige polysaccharid viste, at det primært er sammensat af carbon, hydrogen, nitrogen og oxygen. Nitrogenindholdet i produktet varierer med nitrogenindholdet i udgangsmaterialet, men det bemærkedes, at produktet havde et nitrogenindhold på normalt over 2 vægtprocent, i de fleste tilfælde 3-5 vægtprocent.
Forskellige farvereaktionsprøver på stoffet gav de resultater, som er vist i nedenstående tabel 1.
5 U5424
Tabel 1
Farvereaktion Farve Resultater ’ a-naphthol/svovlsyre- reaktion (Molisch-prØve) Purpur Saccharider bekræftet '
Indol/svovlsyre-reaktion (Disch-prøve) Brun Saccharider bekræftet
Anthron/svovlsyrereaktion Grønblå Saccharider bekræftet
Phenol/svovlsyre- reaktion Brun Saccharider bekræftet
Tryptophan/svovlsyre- reaktion Purpurbrun Saccharider bekræftet
Iiowry-Folin-prøve Blå Peptidbindinger bekræf tet
Ninhydrin-reaktiom efter saltsyrehydrolyse Grønblå a-aminosyrer bekræftet
Resultaterne af disse farveprøver bekræfter, at slutproduktet, der fås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er et nitrøgenW holdigt polysaccharid (indeholdende primært peptidbundet nitrogen).
Det bestemtes ved søjlechromatografi, at molekylvægten af stoffet, der fås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, ligger i området fra ca. 5.000 til 300.000, og at middelmolekylvægten målt ved en ultracentrifugeringsmetode ligger i området fra 10.000 til. 100.-0,00. Fraktionerne med lav molekylvægt (med en molekylvægt på under 5.000), som fjernes ved ovenstående rensningsbehandling, er næsten betydningsløse, hvad angår inhiberende virkning overfor alvorlige Sarcoma-1&0 tumorer i mus ved intra-peritoneal indgivelse, og de er ligeledes bitre, har en ubehagelig lugt og har bivirkninger.
Det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen tilvejebragte ni-trogenholdige polysaccharid frembringer en antitumorigen virkning i mus, ikke blot ved intraperitoneal indgivelse men også ved oral indgivelse. Med andre ord kan dette nitrogenholdige polysaccharid udgøre et særdeles godt antitumorigent middel til oral indgivelse, og denne virkning fer e usm rent faktisk blevet bekræftet i en lang række forsøg som angivet i nedenstående udførelseseksempler. Brugen af det nitrogenholdige polysac-charid er ikke begrænset til et sådant oralt antitumorigent middel. Det viser sig også effektivt med hensyn til immunitetsgenvinding i værtsorganismen. Nærmere bestemt er stoffet ikke blot virksomt til hindring af bivirkninger ved chemoterapi af cancer og stigende følsomhed ved radioterapi men også til at hindre forringelse af immunitet eller fysisk styrke af en patient efter en operation eller blodtransfusion og kontrollere eller hindre infektionssygsomme forårsaget af virus eller bakterier som resultat af forringelse i immunitet eller fysisk styrke. Det nitrogenholdige polysaccharid giver også en særdeles god virkning ved oral indgivelse med hensyn til forbedring af leverfunktion, forøgelse af appetiten, afhjælpning af tarmforstyrrelser og fremme af urinering. Det viser sig også virksomt til behandling af spedalskhed.
Den foreliggende opfindelse vil nu blive beskrevet i detaljer ved hjælp af nogle udførelseseksempler.
Eksempel 1 200 g tørt mycelium (fugtighedsindhold: 9,9%) af Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM-P nr. 2414), tilvejebragt fra en dyrket kultur, og 3 liter vand anbragtes i en 5-liters kolbe forsynet med omrører, og blandingen omrørtes i et kogende vandbad og blev holdt i denne tilstand med en indre temperatur på 95 + 2°C i 3 timer. Derefter blev blandingen afkølet og underkastet vakuumfiltrering under anvendelse af en Biichner-tragt for at fjerne svampen fra ekstraktopløsningen, og derefter vaskedes det tilbageværende mycelium med ca. 1 liter vand, son blandedes med ekstraktopløsningen. Den blandede opløsning var på ca. 3,5 liter. pH af ekstraktopløsningen var 5,8. Restmyceliet blandedes yderligere med 2 liter vand og vinderkastedes derefter en tilsvarende 2 timers ekstraktion og vask med 1 liter vand, hvorved der fremkom ca. 3 liter ekstraktopløsning. Den fremkomne svamperemanens blandedes igen med 2 liter 0,1 normal natriumhydroxidopløsning og ekstraheredes på lignende måde ved 95 + 2°C i 2 timer efterfulgt af afkøling, neutralisering med 2N saltsyre og vakuumfiltrering for at separere ekstraktopløsningen og svamperemanensen. Efter adskillelse vaskedes remanensen med ca. 500 ml vand/ som blandedes med ekstraktopløsningen, hvorved der fremkom 2,5 liter opløsning. Tilsvarende operationer blev gentaget under anvendelse af 2 liter af natriumhydroxidopløsninger på 0,2N, 0,3N og 0,4N og 0,5 liter vaskevand, hvorved der fra hver proces fremkom ca. 2,5 liter ekstraktopløsning.
7 145424
De seks tilberedninger af ekstraktopløsning (ialt 16,5 liter) sammenbragtes og koncentreredes ved hjælp af en vakuumkoncencrator (rotationsinddamper) ved 60°C til 700 ml og blev derefter anbragt i et cellulosedialyserør (Visking Tube fra Union Carbide Corp.) for at gen-, nemføre løbende dialyse ved 5°C i 72 timer, og det fremkomne dialysat koncentreredes yderligere og underkastedes frysetørring for at tilvejer-bringe 60 g leverbrunt pulver med et fugtighedsindhold på 7% (udbytte? 31,1%). Elementaranalyse af dette pulver gav 40,3% carbon, 6,2% hydrogen, 2,9% nitrogen og 50,6% oxygen. Molekylvægten af dette stof målt ved søjlechromatografi var fra ca. 10.000 til 250.000, og middelmolekylvægten målt ved en ultracentrlfugeringsmetode under anvendelse af vand som opløsningsmiddel var 94.000. (Det ovenfor angivne oxygenindhold er den værdi, som fås ved at subtrahere det samlede procentiske indhold af de øvrige grundstoffer fra 100).
Forskellige farvereaktionsprøver Udført på dette pulver efter opløsning i vand gav samme resultater som vist i Tabel 1, og det bekræftedes således, at dette pulveragtige stof var et nitrogenholdigt polysaccharid. Stoffets inhiberingsforhold overfor alvorlige Sarcoma-180 tumorer i mus var så højt som 90% ved intraperitoneal indgivelse og 70% ved oral indgivelse.
Den antitumorigene virkning af stoffet måltes ved en sædvanlig fremgangsmåde, som er kortfattet beskrevet i det følgende.
Sarcana-180 tumorceller transplanteredes ind i bughulen hos mus, og efter tilstrækkelig celleformering i 7 dage transplanteredes 10^ af cellerne ind under huden af axilla hos andre mus under dannelse af kraftige tumorer. Indgivelse af stoffet, der fås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, påbegyndtes fra den 24. time efter transplantation på én af to måder,, enten ved intraperitoneal eller oral indgivelse af en fysiologisk saltvandsopløsning indeholdende 1 mg af stoffet pr. ml opløsning. Ved den intraperitoneale indgivelse blev der indgivet en dosis på 10 mg/kg legemsvægt én gang hver anden dag i 20 på hinanden følgende dage, og for en mus med en legemsvægt på 20 g var den indgivne dosis således 0,2 mg stof (svarende til 0,2 ml injiceret opløsning) og døn samlede indgivne stofmængde i behandlingsperioden 2 mg (svarende til 2 ml injiceret opløsning)· - Ved oral indgivelse blev stoffet indgivet i en dosis på 1000 icq/kq legsnsvægt^ dagligt i 20 på hinanden følgende dage, og for en mus med en legemsvægt på 20 g var den indgivne dosis således 20 mg stof dagligt (svarende til 20 ml opløsning) og den samlede indgivne stofmængde i behandlingsperioden 400 mg (svarende til , 400 ml opløsning).
Resultaterne af tilsvarende ekstraktionsforsøg gennemført under anvendelse af udelukkende vand som opløsningsmiddel er vist i nedenstående Tabel 2. Ved disse forsøg gennemførtes alle ekstraktions-og vasketrin under anvendelse af vand i samme mængde som det ved oven-nævnte behandlinger anvendte opløsningsmiddel. I dette tilfælde under- 8 U5424 kastedes ekstraktopløsningen (blandet med vaskevand) vakuumkoncentration, dialyse, afkøling og tørring for at bestemme udbyttet i hvert ekstraktionstrin, og resultatet var som vist i tabellen. Som det fremgår af tabellen falder ekstraktionsudbyttet stærkt fra det andet og efterfølgende ekstraktionstrin, og det er næppe muligt at tilvejebringe det ønskede stof i højt udbytte ved gentagne ekstraktionstrin.
Tabel 2
Ekstraktionstrin Ekstrakt- Vaskeopløs- Udbytte af tørt nr. opløsning (1) ning (1) pulver (vægtprocent) 1 3 1 7,0 2 2 0,5 2,1 3 2 0,5 0,8 4 2 0,5 0,3 5 2 0,5 0,1 6 2 0,5 0,1
Ialt 13 3,5 10,4 Mængde mycelium anvendt som udgangsmateriale: 200 g Ekstraktionstemperatur: 95 + 2°C.
Eksempel 2
Under anvendelse af samme apparatur, som benyttedes i Eksempel 1, ekstraheredes 200 g tørt mycelium (fugtighedsindhold: 8,8%) af Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM-P nr. 2414) under successiv anvendelse af 2 liter af natriumhydroxidopløsninger på 0,05N, 0,1N, 0,2N og 0,4N. Ekstraktionstemperaturen var 90-95°C, og ekstraktionstiden var 2 timer i' hvert ekstraktionstrin, og efter hvert ekstraktionstrin afkøledes blandingen, neutraliseredes med 2N saltsyreopløsning og underkastedes derefter vakuumfiltrering for at adskille svamperemanensen og ekstraktopløsningen. Remanensen vaskedes med 500 ml vand efter hvert ekstraktionstrin, og vaskeopløsningen blandedes med den tilsvarende ekstraktopløsning .
9 US424
Ekstraktopløsningen i hvert ekstraktionstrin underkastedes vakuumkoncentration, dialyse, koncentration og frysetørring på samme måde som i Eksempel 1, hvorved der fremkom et leverbrunt pulver.
Resultaterne af prøverne på produkterne fra de respektive ekstraktionstrin er vist i nedenstående Tabel 3. —
Tabel 3
Udbytte af
Ekstraktionstrin Natriumhydroxid- pH på ekstrak- tørt pulver nr. koncentration tionstidspunktet (vægtprocent) 1 0,05N 9,0 10,1 2 0, IN 11,5 3,5 3 0,2N 12,5 6,8 4 0,4N 13,0 6,6
Det samlede.udbytte var 27%, og en elementaranalyse af hvert produkt gav følgende resultater: Carbon: 41,0%, hydrogen: 6,3%, nitrogen: 3,7%, oxygen: 49,0%.
Ved samme prøver, som gennemførtes i Eksempel 1, bekræftedes det, at ovennævnte pulver er et nitrogenholdlgt polysaccharid med en molekylvægt på fra 10.000 til 250.000 og en middelmolekylvægt på 100.000. Inhiberingsforholdet overfor alvorlig Sarcoma-180 tumor i mus var 93% for såvidt angår intraperitoneal indgivelse og 73% for såvidt angår oral indgivelse.
Til samænligning af ekstraktionsudbyttet gennemførtes samme forsøg som i Eksempel 1 under anvendelse af IN og 0,4N natriumhydroxidopløsninger, hvorved de i nedenstående Tabel 4 viste resultater fremkom. Som det bemærkes af tabellen faldt udbyttet, når ekstraktionsoperationen blev gentaget under anvendelse af ekstraktionsopløsningen med samme koncentration, og det viste sig at være vanskeligt at opnå et sådant højt udbytte, som fremkom ved flertrinsekstraktionen ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.
10 145424
Tabel 4
Ekstraktionstrin Udbytte (vægtprocent) Udbytte (vægtprocent) nr. af ønsket materiale ved af ønsket materiale ved
ekstraktion med IN NaOH ekstraktion med 0,4N NaOH
1 10,5 13,8 2 2,4 2,9 3 1,1 2,0 4 0,5 1,5
Ialt 14,5 20,2
Eksempel 3
Under anvendelse af samme apparat, som benyttes i Eksempel 1, ekstraheredes 200 g tørt mycelium (fugtighedsindhold: 9,9%) af Coriolus versicolor (Fr.) Quel. (FERM-P nr. 2414), først med 3 liter vand ved 95 - 2°C i 3 timer pg blev derefter, efter afkøling, underkastet vakuumfiltrering til adskillelse af restmyceliet og ekstrakt-opløsningen, og restmyceliet blev yderligere vasket med 1 liter vand og blev derefter blandet med ekstraktopløsningen, hvorved der fremkom ca. 3,5 liter ekstraktopløsning.
Derefter tilsattes restmyceliet 2 liter IN natriumhydroxidopløsning til ekstraktion ved 90-95°C i 0,5 timer og blev efterfulgt af afkøling, neutralisation med 2N saltsyre, vakuumfiltrering og vask iried 1 liter vand, hvorved 3 liter ekstraktopløsning adskiltes fra svamperesten.
Alle de fremkomne ekstraktopløsninger sammenbragtes og underkastedes vakuumkoncentration, dialyse, yderligere koncentration og frysetørring ved fremgangsmåden ifølge Eksempel 1, hvorved der fremkom 33 g leverbrunt pulver med et fugtighedsindhold på 7,0% (udbytte: 21,0%). Resultatet af en elementaranalyse på dette pulver viste, at det er sammensat af 41,7% carbon, 6,4% hydrogen, 3,9% nitrogen og 48,0% oxygen.
Det bekræftedes også af de samme prøver, som gennemførtes i Eksempel 1, at dette stof er et nitrogenholdigfcpolysaccharid med en molekylvægt på 10.000-300.000 og en middelmolekylvægt på 98.000.
11 1Λ5Λ2Λ
Inhiberingsforholdet for dette stof overfor alvorlige Sarcoma-180 tumorer i mus var så højt som 94% ved Intraperitoneal indgivelse og 68% ved oral indgivelse.
Eksempel 4
Under anvendelse af apparatet ifølge Eksempel 1 ekstrahere-des 200 g tørre frugtlegemer af Coriolus versicolor (Fr.) Quél. (FERM-P nr. 2414) med et fugtighedsindhold på 8,7%, først med 2,4 liter vand ved 95 + 2°C i 3 timer, og produktet underkastedes efter afkøling vakuumfiltrering for at skille remanensen fra ekstraktopløsningen, og rema-nensen vaskedes yderligere med 500 cm vand og blandedes med ekstraktopløsningen, hvorved der fremkom ca. 2,5 liter ekstraktopløsning.
Remanensen blandedes derefter med 2 liter 0,4N natriumhydroxidopløsning og ekstraheredes ved 90 + 2°C i 1 time efterfulgt af afkøling, neutralisation med 2N saltsyre, vakuumfiltrering og vask med 500 cm vand for at adskille 2,5 liter ekstraktopløsning og remanens.
En tilsvarende ekstraktionsoperation gennemførtes igen med 2 liter IN natriumhydroxidopløsning ved 80 + 2°C i 1 time, hvorved der fremkom 2,5 liter ekstraktopløsning.
Alle ekstraktopløsningeme sammenbragtes og underkastedes vakuumkoncentration, dialyse, koncentration og frysetørring på samme måde som i Eksempel 1, hvorved der fremkom 43,4 g af et leverbrunt pulver med et fugtighedsindhold på 7,5% (udbytte: 22%). Resultatet af en elementaranalyse af dette pulver viste 42,3% carbon, 6,5% hydrogen, 2,2% nitrogen og 49,0% oxygen. Det bekræftedes også af samme prøver som i Eksempel 1, at stoffet er et nitrogenholdigt polysaccharid med en molekylvægt på 10.000-300.000 og en middelmolekylvægt på 110.000.
Inhiberingsforholdet for dette stof overfor alvorlige Sarcoma-180 tumorer i mus var så højt som 961 ved intraperitoneal indgivelse og 75% ved oral indgivelse.
For at sammenligne ekstraktionsudbyttet gennemførtes en tilsvarende ekstraktionsproces under anvendelse af vand udelukkende som ekstraktionsopløsningsmiddel. Udbyttet af det ønskede stof var kun 7,6%.
12 U5424
Eksempel 5 200 g tørt mycelium (fugtighedsindhold: 9,9%) af hver af de arter af slægten Coriolus, der er anført i omstående tabel 5, og som var indvundet fra en artificiel kultur, blev sammen med 3 liter vand anbragt i en 4-liters kolbe, som var forsynet med en omrører. Blandingen blev omrørt i et kogende vandbad og blev holdt i denne til-stand ved en indre temperatur på 95 + 2 C i 3 timer. Blandingen blev derpå afkølet og underkastet sugefiltrering under anvendelse af en Buchner-tragt til adskillelse af svampen og ekstraktopløsningen, og det tilbageblivende mycelium blev vasket med ca. 1 liter vand, som blev blandet med ekstraktopløsningen. Den blandede opløsning udgjorde ca. 3,5 liter, og dens pH var 5,8. Det tilbageblevne mycelium blev yderligere blandet med 2 liter vand og derpå underkastet 2 timers tilsvarende ekstraktion og vask med 1 liter vand til opnåelse af ca. 3 liter ekstraktopløsning. Den resulterende svamperemanens blev blandet med 2 liter 0,1N natriumhydroxidopløsning og ekstraheret tilsvarende ved 95 + 2°C i 2 timer efterfulgt af afkøling, neutralisering med 2N saltsyre og sugefiltrering til adskillelse af ekstraktopløsning og svamperemanens. Efter adskillelsen blev remanensen vasket med ca. 500 ml vand, som blev blandet med ekstraktopløsningen til opnåelse af 2,5 liter opløsning. Tilsvarende operationer blev udført under anvendelse af 2 liter 0,2N, 0,3N og 0,4N natriumhydroxidopløsning og 0,5 liter vaskevand til opnåelse af ca. 2,5 liter ekstraktopløsning fra hver proces.
De således fremstillede seks ekstraktionsopløsninger (ialt 16,5 liter) blev sammenblandet og koncentreret med en vakuumkoncentra-tor (rotationsfordamper) ved 60°C til 700 ml og blev derpå anbragt i en cellulose-dialyseslange (Visking Tube fremstillet af Union Carbide Corp.) til frembringelse af strømningsdialyse ved 5°C i 72 timer, hvorefter hver af de opnåede dialysater blev yderligere koncentreret og underkastet frysetørring til opnåelse af respektive leverbrune pulvere.
Egenskaberne af pulverprodukterne fra de respektive myce-lia af arter af slægten Coriolus blev bestemt ved de samme procedurer som dem, der er beskrevet i eksempel 1, og de er anført i den efterfølgende tabel 5.
13 145424
Tabel 5
Egenskaber af produkter opnået fra forskellige arter af slægten Coriolus.
; £ £> r
Nr. og art Udbytte Grundstofsammen- Gennem- I.P
sætning f sn.
C(%) H (%) N{%) Mol* (%) 1. C. hirsutus (Fr.)
Quél 29,0 40,2 6,0 5,0 100.000 91 (FERM-P nr. 2711) 2. C. consors (Berk)
Imaz. 30,2 38,6 5,9 4,6 " 74 (FERM-P nr. 988) 3. C. conchifer (Schw)
Pat. 29,5 39,8 5,9 5,0 " 75 4. C. pubescence (Fr.)
Quél 30,8 39,0 5,5 3,9 " 85 5. C. pargamenus (Fr.)
Pat. 27,0 39,5 5,9 4,3 " 83 (FERM-P nr. 2712) 6. C. biformis (Klotz)
Pat. 29,3 42,0 6,4 5,5 " 80 *
Gennemsnitlig molekylvægt.
* *
Inhiberingsforhold overfor transplanterede sarcoma 180-celler i mus.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP8066576A JPS536413A (en) | 1976-07-07 | 1976-07-07 | Preparation of n-containing polysaccharides |
JP8066576 | 1976-07-07 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK151977A DK151977A (da) | 1978-01-08 |
DK145424B true DK145424B (da) | 1982-11-15 |
DK145424C DK145424C (da) | 1983-04-18 |
Family
ID=13724651
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK151977A DK145424C (da) | 1976-07-07 | 1977-04-05 | Fremgangsmaade til fremstilling af nitrogenholdige polysaccharider med antitumorigen virkning |
Country Status (28)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4229570A (da) |
JP (1) | JPS536413A (da) |
AR (1) | AR217256A1 (da) |
AT (1) | AT360146B (da) |
AU (1) | AU497397B2 (da) |
BE (1) | BE853178A (da) |
BG (1) | BG33008A3 (da) |
BR (1) | BR7704434A (da) |
CA (1) | CA1072033A (da) |
CH (1) | CH628245A5 (da) |
CS (1) | CS219325B2 (da) |
DD (1) | DD130662A5 (da) |
DE (1) | DE2713536C2 (da) |
DK (1) | DK145424C (da) |
ES (1) | ES457723A1 (da) |
FR (1) | FR2361909A1 (da) |
GB (1) | GB1570538A (da) |
HU (1) | HU176828B (da) |
IN (1) | IN144759B (da) |
IT (1) | IT1075830B (da) |
MX (1) | MX4255E (da) |
NL (1) | NL169197C (da) |
PH (1) | PH12619A (da) |
PL (1) | PL103468B1 (da) |
SE (1) | SE441893B (da) |
SU (1) | SU704431A3 (da) |
YU (1) | YU39796B (da) |
ZA (1) | ZA773441B (da) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4851395A (en) * | 1976-07-07 | 1989-07-25 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kausha | Nitrogen-containing polysaccharide |
JPS536412A (en) * | 1976-07-07 | 1978-01-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of n-containing polysaccharides |
JPS5315495A (en) * | 1976-07-22 | 1978-02-13 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of polysaccharides |
JPS5394012A (en) * | 1977-01-27 | 1978-08-17 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Novel polysaccharide and its preparation |
JPS5932480B2 (ja) * | 1981-02-10 | 1984-08-09 | 呉羽化学工業株式会社 | 新規な糖蛋白複合体 |
US4614733A (en) * | 1981-12-31 | 1986-09-30 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polysaccharides pharmaceutical compositions and the use thereof |
DE3448153C2 (da) * | 1983-08-11 | 1989-11-02 | Kureha Kagaku Kogyo K.K., Nihonbashi, Tokio/Tokyo, Jp | |
JPH0643336B2 (ja) * | 1988-06-30 | 1994-06-08 | 呉羽化学工業株式会社 | 血管増殖抑制剤 |
GB2304347A (en) * | 1995-08-11 | 1997-03-19 | Boeringer Ingelheim Vetmedica | Antigenic preparations |
US7048932B2 (en) * | 2002-05-22 | 2006-05-23 | The Chinese University Of Hong Kong | Preparation and standardization of immunomodulatory peptide-linked glucans with verifiable oral absorbability from coriolus versicolor |
JPWO2005095413A1 (ja) * | 2004-04-01 | 2008-02-21 | 株式会社クレハ | 抗腫瘍剤 |
US7829098B2 (en) * | 2005-11-08 | 2010-11-09 | Vita Green Health Products Co., Ltd | Herbal powder extracts and methods of preparing and using the same |
CN103298476A (zh) * | 2010-10-06 | 2013-09-11 | 培力有限公司 | 采绒革盖菌提取物及其制备方法和用途 |
CN104804107B (zh) * | 2015-04-24 | 2017-08-04 | 成都中医药大学 | 一种波棱瓜子多糖提取方法,该提取方法得到的波棱瓜子多糖提取物及用途 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3382229A (en) * | 1963-04-11 | 1968-05-07 | Exxon Production Research Co | Polysaccharide recovery process |
US3436311A (en) * | 1966-02-28 | 1969-04-01 | Pillsbury Co | Fungal polysaccharide composition and method for making same |
US3759896A (en) * | 1968-03-28 | 1973-09-18 | T Yamamoto | Process for manufacture of polysaccharides with antitumor action |
BE757248A (fr) * | 1969-10-15 | 1971-04-08 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Substance a propriete anticancereuse et procedes pour sa preparation |
US4051314A (en) * | 1970-10-14 | 1977-09-27 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polysaccharides and method for producing same |
US3933788A (en) * | 1971-11-11 | 1976-01-20 | Kelco Company | Polysaccharide and bacterial fermentation process for its preparation |
JPS57793B2 (da) * | 1972-09-16 | 1982-01-07 | ||
JPS5290614A (en) * | 1975-12-18 | 1977-07-30 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of anti-tumor substance |
PH14773A (en) * | 1976-01-01 | 1981-12-09 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Protein-bound polysaccharides |
JPS536412A (en) * | 1976-07-07 | 1978-01-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of n-containing polysaccharides |
-
1976
- 1976-07-07 JP JP8066576A patent/JPS536413A/ja active Granted
-
1977
- 1977-03-22 YU YU764/77A patent/YU39796B/xx unknown
- 1977-03-22 SE SE7703264A patent/SE441893B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-03-26 DE DE2713536A patent/DE2713536C2/de not_active Expired
- 1977-03-28 IN IN463/CAL/77A patent/IN144759B/en unknown
- 1977-03-29 NL NLAANVRAGE7703371,A patent/NL169197C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-03-29 GB GB13270/77A patent/GB1570538A/en not_active Expired
- 1977-03-29 CS CS772085A patent/CS219325B2/cs unknown
- 1977-03-30 AT AT219377A patent/AT360146B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-03-30 CA CA275,104A patent/CA1072033A/en not_active Expired
- 1977-04-01 BE BE176369A patent/BE853178A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-04-04 CH CH418077A patent/CH628245A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-04-05 FR FR7710262A patent/FR2361909A1/fr active Granted
- 1977-04-05 DK DK151977A patent/DK145424C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-04-08 SU SU772468116A patent/SU704431A3/ru active
- 1977-04-12 AU AU24166/77A patent/AU497397B2/en not_active Expired
- 1977-04-12 ES ES457723A patent/ES457723A1/es not_active Expired
- 1977-04-13 DD DD7700198377A patent/DD130662A5/xx unknown
- 1977-04-13 PL PL1977197371A patent/PL103468B1/pl unknown
- 1977-04-15 IT IT22508/77A patent/IT1075830B/it active
- 1977-04-19 US US05/788,991 patent/US4229570A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-05-20 PH PH19794A patent/PH12619A/en unknown
- 1977-06-01 MX MX775769U patent/MX4255E/es unknown
- 1977-06-07 ZA ZA00773441A patent/ZA773441B/xx unknown
- 1977-06-17 AR AR268092A patent/AR217256A1/es active
- 1977-07-06 BR BR7704434A patent/BR7704434A/pt unknown
- 1977-07-06 BG BG036818A patent/BG33008A3/xx unknown
- 1977-07-07 HU HU77KU517A patent/HU176828B/hu unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA1072034A (en) | Method of producing nitrogen-containing polysaccharides | |
EP0893449B1 (en) | Antitumor substance extracted from hen-of-the-woods | |
DK145424B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af nitrogenholdige polysaccharider med antitumorigen virkning | |
SU786855A3 (ru) | Способ получени полисахаридов, обладающих противоопухолевым действием | |
JP2011026525A (ja) | β−グルカンを主体とする多糖類の抽出方法 | |
DK144890B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af et nitrongenholdigt polysaccharid | |
EP0353861B1 (en) | Angiogenesis inhibitor | |
US4851395A (en) | Nitrogen-containing polysaccharide | |
JP2005068112A (ja) | マイタケ由来の抽出物およびグリコプロテイン並びにその製造方法 | |
JPH0372085B2 (da) | ||
JP3129751B2 (ja) | ブナシメジ子実体熱水抽出物 | |
KR810001499B1 (ko) | 질소를 함유하는 다당류의 제조방법 | |
CN115414398B (zh) | 板栗提取物及其制备方法以及其在降血糖产品中的应用 | |
JPS6338325B2 (da) | ||
JPH0248000B2 (da) | ||
KR820000841B1 (ko) | 질소를 함유한 다당류의 제조방법 | |
JPH07238030A (ja) | 血糖降下剤 | |
JPS6372629A (ja) | 霊芝から生理活性エキスを製造する方法 | |
KR910002519B1 (ko) | 항암성 다당류의 제조방법 | |
KR920000486B1 (ko) | 항종양성 다당류의 정제방법 | |
JPH054375B2 (da) | ||
JPH0748268A (ja) | アミラーゼ阻害物質の調製方法 | |
JPS60181026A (ja) | 血糖降下剤 | |
JPS6152806B2 (da) | ||
JPS61293923A (ja) | 抗腫瘍性を有する糖たん白複合体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PBP | Patent lapsed | ||
PUP | Patent expired |