DE964863C - Process for the preparation of hydrogenated formylpteroic acids - Google Patents

Description

Verfahren zur Herstellung hydrierter Formylpteroinsäuren In der Patentschrift gia 892 ist ein Verfahren zur Herstellung von tetrahydrierter Formylpteroinsäure und ihrer Derivate beschrieben., bei dem eine formylierte Verbindung der allgemeinen Formel (Y bedeutet einen Hydroxyl-, Amino, oder Alkylaminorest und R einen Hydroxyl- oder Aminor säurerest, vorzugsweise einen Glutaminsäurerest oder den Rest eines Glutam,insäurepeptn.ds, oder auch Reste einer anderen Aminosäure, wie Asparaginsäu,re" Glycin, Alanin oder Serin) oder ein Salz derselben mit 2 Mol-Wa,sserstoff hydriert wird.Process for the preparation of hydrogenated formylpteroic acids In the patent specification gia 892 a process for the preparation of tetrahydrated formylpteroic acid and its derivatives is described, in which a formylated compound of the general formula (Y denotes a hydroxyl, amino or alkylamino residue and R denotes a hydroxyl or amino acid residue, preferably a glutamic acid residue or the residue of a glutam, insäurepeptn.ds, or residues of another amino acid, such as aspartic acid, glycine, alanine or serine ) or a salt thereof is hydrogenated with 2 mol hydrogen.

Die entstehenden Verbindungen regen das Wachstum von, Leuconos.toc. citrovorum an und besitzen etwa die gleiche biologische. Wirksamkeit wie die natürlich, vorkommenden Stoffe mit Citrovorumakt.ivität.The resulting compounds stimulate the growth of, Leuconos.toc. citrovorum and have about the same biological. Effectiveness as natural, Occurring substances with Citrovorumakt.ativen.

Gemäß dem Patent 941 848 erhält man aus Z`etrahyd.ro-N12-formylpteroainsäure bzw. ihren Aminosäureami-den Verbindungen mit noch gräßerer Citrovorumaktivität, wenn man sie mit einem alkalischen Mittel in wäßrngem Medium bei einem pH-Wert zwischen 7 und 14, vorzugsweise zwischen 10 und 13, behandelt, wobei ein dem angewandten alkalischem. Mittel entsprechendes Salz der Tetrahydro@N7-formylpte@roinsäu.re oder ein Amino,s.äu,rearnid von dieser gebildet wird.According to patent 941 848, z'etrahyd.ro-N12-formylpteroic acid or its amino acid amide compounds with even greater citrovorum activity are obtained if they are mixed with an alkaline agent in an aqueous medium at a pH between 7 and 14, preferably between 10 and 13, treated with an alkaline applied to the one. Means corresponding salt of the Tetrahydro @ N7-formylpte @ roinsäu.re or an amino, see also, rearnid is formed by this.

Es wurde nun gefunden, daß nicht nur aus der N12-Fo@rxnylptero@insäure und. ihren Amino,säureamiden, sondern auch aus der N7, N12-Diformylpteroinsäu.re und, ihren Derivaten durch Behandlung mit alkalischen Stoffen. gemäß dem in der deutschen Patentschrift 941 848 beschriebenen Verfahren Verhindungen mit erhöhter Citrovorumaktivität erhalten werden.It has now been found that not only from the N12-Fo @ rxnylptero @ insäure and. their amino, acid amides, but also from the N7, N12-Diformylpteroinsäu.re and, their derivatives by treatment with alkaline substances. according to the German Patent 941 848 described method preventions with increased Citrovorum activity can be obtained.

Gemäß dem Patent gio 892 kann die Formylierung von Pte-roinsäure oder ihre:rAmsno,säureamide und die nachfolgen-de- Reduktion in 9o- bis iooo/oiger Ameisensäure ausgeführt werden:. Durch eingehendere Untersuchungen. wurde: nun, festgestellt, d'aß bei Verwendung von etwa 9o- bis 98o/o.iger Ameisensäure die Tet;rahydro-N12-foirmylpteroinsäure oder ihre Aminosäureamide, gebildet werden, während bei Verwendung von 98- bis io0o/oiger Ameisensäure und. Zugabe von etwas Essigsäureanhydrid, zwecks Erhaltung dieser Konzentration der Ameisensäure, Tetrahydroderivate der N7, N12-Dif'armylpteroainsäure oder ihrer Aminosäureamidie gewonnen werden.According to patent gio 892 , the formylation of pte-roic acid or its: rAmsno, säureamide and the subsequent de-reduction in 90 to 100% formic acid can be carried out. Through more in-depth research. it has now been established that when using about 90 to 98% formic acid, tet; rahydro-N12-foirmylpteroic acid or its amino acid amides are formed, while when using 98 to 100% formic acid and. Addition of a little acetic anhydride, in order to maintain this concentration of formic acid, tetrahydro derivatives of N7, N12-dif'armylpteroic acid or their amino acid amidies can be obtained.

Das erfindungsgemäße Verfahren besteht also darin, da.ß man Ptero@ins.äure oder ihre Aminosäureamide in 98- bis iooo/oiger Ameisensäure fo@rmyliert, die formylierteVerbin.dung mit, a Mol Wasserstoff unter Bildung ihres Tetrahydraderivats in Gegenwart eines Hydrierungskatalysators bei einer Temperatur zwischen, -2o und iso° hydriert, etwas Essigsäureanhydrid hinzufügt und das so erhaltene Tetrahydroderivat der N7, N12-Di.fo.rrnylpte;roinsäure mit einem alkalischen. Mittel in wäßrigem Medium bei enmem p11-Wert zwischen17 und 14, vorzugsweise zwischen io und 13, und vorzugsweise bei Temperaturen zwischen 8o und ioo° behandelt und aus dem entstehenden Salz der Tefirahydro-N7-formylpteroinsäure oder deren Aminosäureamiden gewünschtenfadls die Säuren in. Freiheit setzt.The process according to the invention thus consists in that one ptero@ins.äure or their amino acid amides are fo @ rmylated in 98 to 100% formic acid, the formylated compound with, a mole of hydrogen to form its tetrahydrate derivative in the presence of a Hydrogenation catalyst at a temperature between -2o and iso ° hydrogenated, something Acetic anhydride is added and the tetrahydro derivative of N7, N12-Di.fo.rrnylpte; roinsäure obtained in this way with an alkaline. Medium in aqueous medium with an enormous p11 value between 17 and 14, preferably between 10 and 13, and preferably at temperatures between 80 and 100 ° treated and from the resulting salt of tefirahydro-N7-formylpteroic acid or their amino acid amides, if desired, to set the acids free.

Es ist nicht völlig geklärt, warum durch diel erfindungsgemäße Behandlung von Tetrahydroderivaten der N7, N12-Diformylpteroinsäure oder deren Aminosäureamiden die Citrovorumaktivität gesteigert wird. Es ist jedoch, zu vermuten, däß dabei eine einfache Hydrolyse der N12-Formylgruppe erfolgt.It is not entirely clear why by the treatment according to the invention of tetrahydro derivatives of N7, N12-diformylpteroic acid or their amino acid amides the Citrovorum activity is increased. It is, however, to be suspected that there is one simple hydrolysis of the N12 formyl group occurs.

Als alkalische Mittel sind beispielsweise Alkalihyäroxyde, -carbonate, -bicarbonate und -phosphate sowie Erda,lkatihydroxyde und quaternäre Amsnoa. säurebasen verwendbar. Die Umsetzung erfolgt in wäßrigem Medium, jedoch können, auch Mischungen, vom. Wasser mit anderen, mit Wasser mischbarem. Lösungsmitteln, z. B. mit Alkohol, verwendet werden- Bei Stehen bei Zimmertemperatur verläuft die Reaktion langsiam. Durch Erwärmen. auf eine Temperatur von 8o bis ioo° kann erreicht werden:, daß sie in kürzerer Zeit, beispielsweise in 30 Minuten bis zu 2 oder 3 Stundien, erfolgt.Alkali agents are, for example, alkali hydroxides, carbonates, bicarbonates and phosphates, as well as earths, alkali hydroxides and quaternary amsnoas. acid bases can be used. The reaction takes place in an aqueous medium, but can, including mixtures, of. Water with others, miscible with water. Solvents, e.g. B. with alcohol, the reaction is slow on standing at room temperature. By heating. to a temperature of 80 to 100 ° can be achieved: that it takes place in a shorter time, for example in 30 minutes to 2 or 3 hours.

Die Reinigung der erfindungsgemäß hergestellten Tetrahyd-roformylpteroilnsäure und ihrer Derivate kann., wie in der deutschen Patentschrift 94s 848 beschrieben., durch Ausfällen der Calciumsalze der als Nebenprodukte anwesendem: Pterine, die schwerer wasserlöslich sind als die Calciumsalze der gewünschten Produkte-, aus dem rohen Reaktionsgemisch und Abtrennung dieser Calciumsalze erfolgen. Das erfindungsgemäße Produkt mit erhöhter Citrovorumaktivität, vermutlich Te@trahyd:ro@-N7-formylpteroinsäure oder deren, Aminasäureamide, kann. dann. durch Zusatz eines Überschusses an Calciumionen in. Form seines Calciumsa,lzes isoliert werden, das die für therapeutische Zwecke bequemste Form des. Produkts darstellt. Das gewünschte Material kann dann durch Chromatographie weiter gereinigt werden.The purification of the tetrahydroformylpterolic acid prepared according to the invention and their derivatives, as described in German Patent 94s 848., by precipitation of the calcium salts of those present as by-products: pterines, which are less soluble in water than the calcium salts of the desired products the crude reaction mixture and separation of these calcium salts take place. The inventive Product with increased Citrovorum activity, probably Te @ trahyd: ro @ -N7-formylpteroic acid or their, aminic acid amides, can. then. by adding an excess of calcium ions in the form of its calcium salt, which is used for therapeutic purposes most convenient form of the product. The desired material can then go through Chromatography can be further purified.

Die Ca-Sadze sind auch wegen. ihrer Neutralität, Beständigkeit gegen Hitze und Kohlendioxyd der Luft und wegen ihres Mangels an Hygroskopizität unter feuchten. Bedingungen besonders geeignet. Sie eignen sich daher zum Aufbewahren. der, aktiven Verbindungen, und zur Herstellung therapeutischer Präparate für orale, parenterale oder für andersartige Anwendungen in der Human- und Tiermedizin. Beispiel Eine Mischung aus 5 Teilen gereinigter Pteroylglutamirisäure, 0,3 Teilen:Platino@xyd und: i 5o Vodumteilem 98- bis iooo/oiger Ameisensäure wird unter einem Wasserstoffdruck von etwa 2,24 kg/cm2 hydriert. Dann setzt man 15 Volumteile Essigsäureanhydrid. zu und läßt die Mischung über Nacht stehen. Nach dem Abffiltrieren des Katalysators wird das Filtrat zu isoo Vodumteilen Äther zugegeben, der ausgefallene feste Stoff abfiltriert, gut mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Der trockene, feste Stoff hat eine geringe Aktivität' für Leucondstoc citrovorum. Seine Mikroanalyse zeigt dasVorhand.ensein zweier Formylgruppen.The Ca-Sadze are also because of. their neutrality, resistance to heat and carbon dioxide in the air and their lack of hygroscopicity under humid conditions. Conditions particularly suitable. They are therefore suitable for storage. der, active compounds, and for the production of therapeutic preparations for oral, parenteral or other uses in human and veterinary medicine. EXAMPLE A mixture of 5 parts of purified pteroylglutamiric acid, 0.3 part: Platino @ xyd and: 150 parts of 98 to 100% formic acid is hydrogenated under a hydrogen pressure of about 2.24 kg / cm2. Then 15 parts by volume of acetic anhydride are used. and let the mixture stand overnight. After the catalyst has been filtered off, the filtrate is added to isoo parts of ether, the precipitated solid is filtered off, washed well with ether and dried under reduced pressure. The dry, solid substance has little activity for Leucondstoc citrovorum. Its microanalysis shows the presence of two formyl groups.

2 Teile der oben hergestellten 7, i2-Diforrnyltetrahyda-optkeroylglutaminsäure werden in , aooo Volumteilen o., i n-Na:triumhydroxyd i Stunde lang auf 9o bis ioo° erhitzt. Nach. dem Abkühlen wird die Lösung mit Essigsäure auf ein PH von. 7 bis 7,5 eingestellt. Diese Lösung enthält nun, 8,75 VOlümteile an Citrovorumfaktor, wie der Versuch mit Leuconostoc citrovorum zeigt, und entspricht einer 3o- bis 4o°/oigen Ausbeute an aktiver Substanz.2 parts of the 7,12-diformyltetrahyda-optkeroylglutamic acid prepared above are in, aooo parts by volume o., i n-Na: triumhydroxyd for 1 hour at 9o to 100 ° heated. To. the solution is cooled with acetic acid to a pH of. 7 to 7.5 set. This solution now contains 8.75 parts of the Citrovorum factor, as the experiment with Leuconostoc citrovorum shows, and corresponds to a thirty to forty per cent Active substance yield.

Zur Reinigung wird eine Lösung des, rohen Reaktionsprodukts mit Alkali. auf einen pH-Wert von über etwa 8 eingestellt, um die Tetrahyd:ro@N7-fo,rmylpt-roylglutaminsäure sowie die übrigen, in dem Reaktionsgemisch enthaltenen Pterine in Lösung zu bringen. Dann wird die Lösung mit einer wasserlöslichen, Calciumverbindung versetzt, um die Cadciumsalze zu bilden,. Viele der unerwünschten Pterine fallen in Form ihrer Calciumsalze aus und können abfiltriert werden. Durch diese selektive Ausfällung der unerwünschten. Pterine in Form ihrer Calciumsalze wird, es möglich, die meisten. Verunreinigungen ohne merklichen. Verlust an aktivem Produkt zu. entfernen. Das erwünschte Produkt kann ch.romatographisch weiter gereinigt werden.A solution of the crude reaction product with alkali is used for purification. adjusted to a pH of above about 8 to reduce the tetrahyd: ro @ N7-fo, rmylpt-roylglutamic acid as well as the other pterins contained in the reaction mixture in solution. A water-soluble calcium compound is then added to the solution in order to To form cadcium salts. Many of the undesirable pterins fall in the form of their calcium salts and can be filtered off. Through this selective precipitation the undesirable. Pterine in the form of its calcium salts becomes, most of it possible. Impurities without noticeable. Loss of active product. remove. That desired product can be purified further by chromatography.

Claims (3)

PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zur Herstellung hydrierter Fonnylp.teroinsäuren, dadurch. gekennzeichnet, daß man Pteroinsäure oder ihre Aminasäuream.ide in. 98- bis, ioo°/aigerAmeisensäure formyliert, die formylierte Verbindung mit 2 MO-1 Wasserstoff in. Gegenwart eines Hydrierungska,ta,lysa@to@rs bei einer Temperatur zwischen -2o und. i5o° hydriert, etwas. Ess.igsäureanhydrid hinzufügt und das erhaltene Tetrahyd.roderivat der N7, 1@T12-Diformylpteroinsäure mit einem alkalischen Mittel in. wäßrigem Medium bei einem p1, zwischen 7 und 1q., vorzugsweise zwischen io und 13, und vorzugsweise bei Temperaturen zwischen 8o und ioo' behandelt und aus dem entstehenden Salz der Tetrahydro-1\T7-formylpteroinsäure oder deren Aminosäureamiden, @gewünschtenfalls .die Säuren in Freiheit setzt. PATENT CLAIMS: i. Process for the preparation of hydrogenated Fonnylp.teroinsäuren, thereby. characterized in that pteroic acid or its aminic acid amide is formylated in 98 to 100% formic acid, the formylated compound is formylated with 2 MO-1 hydrogen in the presence of a hydrogenation ca, ta, lysa @ to @ rs at a temperature between -2o and. i5o ° hydrogenated, something. Acetic anhydride is added and the resulting tetrahydro derivative of N7,1 @ T12-diformylpteroic acid with an alkaline agent in an aqueous medium at a p1, between 7 and 1q., Preferably between 10 and 13, and preferably at temperatures between 8o and 100 'treated and from the resulting salt of tetrahydro-1 \ T7-formylpteroic acid or its amino acid amides, @ if desired, sets the acids free. 2. Verfahren nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, dafi die Tetrahydroformylpteroinsäure bzw. ihre Aminosäureamide in Form ihrer Calciumsalze ausgefällt und gereinigt werden. 2. The method according to claim i, characterized in that dafi tetrahydroformylpteroic acid or its amino acid amides in the form of their calcium salts precipitated and cleaned. 3. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch, gekennzeichnet, daß vor Ausfällung der Calciumsalze der Tetrahydro@ fo,rmylpteroiinsäure; bzw. ihrer Amino,säureamide zwecks Reinigung des Rohprodukts die schwererläslichen Ca,lciumsalze der als Verunreinigungen anwesenden Pterine ausgefällt und, abgetrennt werden.3. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that prior to precipitation of the calcium salts of tetrahydro @ fo, rmylpteroiinsäure; or their amino acid amides, for the purpose of purifying the crude product, the difficult ones Calcium salts of the pterins present as impurities are precipitated and separated off will.