DE69713109T2 - Verbindungen mit wachstumshormon freisetzenden eigenschaften - Google Patents

Verbindungen mit wachstumshormon freisetzenden eigenschaften

Info

Publication number
DE69713109T2
DE69713109T2 DE69713109T DE69713109T DE69713109T2 DE 69713109 T2 DE69713109 T2 DE 69713109T2 DE 69713109 T DE69713109 T DE 69713109T DE 69713109 T DE69713109 T DE 69713109T DE 69713109 T2 DE69713109 T2 DE 69713109T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
ethyl
methyl
naphthyl
mmol
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE69713109T
Other languages
English (en)
Other versions
DE69713109D1 (de
Inventor
Michael Ankersen
Kruse Hansen
Bernd Peschke
Henning Thoegersen
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Helsinn Therapeutics US Inc
Original Assignee
Novo Nordisk AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk AS filed Critical Novo Nordisk AS
Publication of DE69713109D1 publication Critical patent/DE69713109D1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE69713109T2 publication Critical patent/DE69713109T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/06—Compounds containing any of the groups, e.g. semicarbazides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/08—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/21—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/06—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with the ring nitrogen atom acylated by carboxylic or carbonic acids, or with sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/06—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having one or two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/08—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having one or two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

  • Die Erfindung betrifft neue Verbindungen, pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese enthalten, und die Verwendung der Verbindungen für die Herstellung von Arzneimitteln.
    • HINTERGRUND DER ERFINDUNG
  • Wachstumshormon ist ein Hormon, das das Wachstum aller Gewebe, die in der Lage sind, zu wachsen, stimuliert. Zusätzlich ist bekannt, dass Wachstumshormon zahlreiche Wirkungen auf Stoffwechselprozesse ausübt, z. B. Stimulierung der Proteinsynthese und der Mobilisierung von freien Fettsäuren, und eine Umstellung beim Energiestoffwechsel vom Kohlenhydrat- zum Fettsäurestoffwechsel verursacht. Ein Mangel an Wachstumshormon kann zu verschiedenen schweren medizinischen Störungen, z. B. Zwergwuchs, führen.
  • Wachstumshormon wird aus der Hypophyse freigesetzt. Die Freisetzung steht entweder direkt oder indirekt unter enger Kontrolle zahlreicher Hormone und Neurotransmitter. Die Freisetzung von Wachstumshormon kann durch das Wachstumshormon-freisetzende Hormon ("growth hormone releasing hormone"; GHRH) stimuliert und durch Somatostatin gehemmt werden. In beiden Fällen werden die Hormone aus dem Hypothalamus freigesetzt, aber ihre Wirkung wird primär über spezifische Rezeptoren, die sich in der Hypophyse befinden, vermittelt. Es sind auch andere Verbindungen, die die Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse stimulieren, beschrieben worden. Beispielsweise setzen Arginin, L-3,4-Dihydroxyphenylalanin (L-Dopa), Glucagon, Vasopressin, PACAP ("pituitary adenylyl cyclase activating peptide"; Hypophysen- Adenylylcyclase aktivierendes Peptid), Agonisten muskarinischer Rezeptoren und ein synthetisches Hexapeptid, GHRP ("growth hormone releasing peptide"; Wachstumshormon-freisetzendes Peptid) endogenes Wachstumshormon entweder durch eine direkte Wirkung auf die Hypophyse oder durch Beeinflussung der Freisetzung von GHRH und/oder Somatostatin aus dem Hypothalamus frei.
  • Bei Störungen oder Leiden, bei denen erhöhte Spiegel an Wachstumshormon erwünscht sind, macht die Protein-Natur von Wachstumshormon alles außer einer parenteralen Verabreichung unmöglich. Darüber hinaus sind andere direkt wirkende natürliche Sekretagoge, z. B. GHRH und PACAP, längere Polypeptide, aus welchem Grunde eine orale Verabreichung von diesen nicht möglich ist.
  • Die Verwendung von bestimmten Verbindungen zum Erhöhen der Spiegel von Wachstumshormon bei Säugetieren ist bereits früher vorgeschlagen worden, z. B. in EP 18 072, EP 83 864, WO 89/07110, WO 89/01711, WO 89/10933, WO 88/9780, WO 83/02272, WO 91/18016, WO 92/01711, WO 93/04081, WO 95/17422, WO 95/17423, WO 95/14666, WO 96/15148 und WO 96/10040.
  • Die Zusammensetzung von Wachstumshormon freisetzenden Verbindungen ist für deren Wachstumshormonfreisetzungskraft wie auch deren biologische Verfügbarkeit von Bedeutung. Es ist dementsprechend ein Gegenstand der Erfindung, neue Verbindungen mit Wachstumshormon freisetzenden Eigenschaften bereitzustellen.
    • ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
  • Dementsprechend betrifft die Erfindung eine Verbindung der allgemeinen Formel VI Formel VI,
  • worin A²
  • oder R³³&supmin;NH-(CR³&sup4;R³&sup5;)p-(CH&sub2;)m-M-(CHR³&sup6;)o-(CH&sub2;)n- ist,
  • wobei R²&sup9;, R³&sup0;, R³¹, R³², R³³, R³&sup4;, R³&sup5; und R³&sup6; unabhängig voneinander Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl gegebenenfalls substituiert mit Halogen, Amino, Hydroxyl oder Aryl sind;
  • R³³ und R³&sup4;, R³³ und R³&sup5; oder R³&sup4; und R³&sup4; gegebenenfalls -(CH&sub2;)i-Z-(CH&sub2;)j-, worin i und j unabhängig voneinander 1 oder 2 sind und Z -O-, -S- oder eine Valenzbindung ist, bilden können;
  • n, m und q unabhängig voneinander 0, 1, 2 oder 3 sind;
  • o und p unabhängig voneinander 0 oder 1 sind;
  • M-CR³&sup7;=CR³&sup8;-, -O- oder -S- ist;
  • R³&sup7; und R³&sup8; unabhängig voneinander Wasserstoff oder gegebenenfalls mit Aryl substituiertes C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl sind;
  • D Wasserstoff, -O-(CH&sub2;)k-R5a,
  • ist, worin R&sup5;, R&sup6;, R&sup7;, R&sup8; und R&sup9; unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Aryl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy sind;
  • R5a Wasserstoff, gegebenenfalls mit Halogen oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl substituiertes Aryl oder gegebenenfalls mit Halogen oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl substituiertes C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist, k 0, 1, 2 oder 3 ist;
  • E Wasserstoff, -O-(CH&sub2;)r-R10a,
  • ist, worin R¹&sup0;, R¹¹, R¹², R¹³ und R¹&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Aryl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl-, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy, -CONR¹&sup5;R¹&sup6;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;SO&sub2;R¹&sup7;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;COR¹&sup6;, -(CH&sub2;)v-OR¹&sup7;, -(CH&sub2;)v-OCOR¹&sup6;, - CH(R¹&sup5;)R¹&sup6;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;-CS-NR¹&sup6;R¹&sup8;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;-CO-NR¹&sup6;R¹&sup8;,
  • worin
  • X¹ -N(R¹9)-, -O- oder -S- ist,
  • X² -C(R²&sup0;)= oder -N= ist,
  • X³ -C(R²¹)= oder -N= ist,
  • X&sup4; -C(R²²)= oder -N= ist,
  • G² Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist,
  • R¹ Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist,
  • R² Wasserstoff, -C(=O)-R&sup5;&sup4; oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist, worin R&sup5;&sup4; Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl ist;
  • R³ und R&sup4; zusammen genommen werden, wodurch sie =O bilden;
  • b 0, 1, 2 oder 3 ist;
  • oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
  • In einer bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI ist A²
  • R³³-NH-(CR³&sup4;R³&sup5;)p-(CH&sub2;)m-M-(CHR³&sup5;)o-(CH&sub2;)n-
  • worin R³³, R³&sup4;, R³&sup5; R³&sup6;, m, n, o und p wie oben definiert sind.
  • In einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI ist A²
  • worin M, m, n, o und q wie oben definiert sind.
  • In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI ist A²
  • worin R³³, R³&sup4;, R³&sup5;, m, n und p wie oben definiert sind.
  • Hinsichtlich der Gruppe D ist in einer bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI D
  • worin R&sup5;, R&sup6;, R&sup7;, R&sup8; und R&sup9; wie oben definiert sind.
  • In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI ist D
  • worin R&sup5; und R&sup6; wie oben definiert sind.
  • Betreffend die Gruppe E ist in einer bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI E
  • worin R¹&sup0; und R¹¹ wie oben definiert sind.
  • In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Verbindung der Formel VI ist E
  • worin R¹&sup0;, R¹¹, R¹², R¹³ und R¹&sup4; wie oben definiert sind.
  • In bevorzugten Ausführungsformen der Verbindung der Formel VI ist G² Wasserstoff oder Methyl.
  • In bevorzugten Ausführungsformen der Verbindung der Formel VI ist R¹ Wasserstoff oder Methyl.
  • In der Verbindung der Formel VI ist R² vorzugsweise Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder -C(=O)-CH&sub3;.
  • Darüber hinaus ist in der Verbindung der Formel VIb vorzugsweise 0 oder 1.
  • Die Verbindung der Formel VI umfasst jegliche optischen Isomere davon in Form von getrennten, reinen oder teilweise gereinigten optischen Isomeren oder racemische Mischungen davon.
  • Bevorzugte Verbindungen der Erfindung sind: (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid: (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-(2-(2-(methyl- sulfonylamino)phenyl)ethyl)amid: (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)amid: (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-Hydroxypropylamino)-5-methylhex-2-enoyl)-N- methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N-phenethylpropionamid: (2E)-5-Amino-5-methyl-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid (2E)-5-Methyl-5-(methylamino)-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3- phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)amid (2R)-2-(N-(3-(1-Aminoethyl)benzoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)- N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid (2E)-5-Methyl-N-methyl-5-(methylamino)-N-((1R)-1-(N-methyl-N- phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-propionamid (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2- naphthyl)-N-(2-(2-methylsulfonylaminophenyl)-ethyl)propionamid (2E)-5-Amino-N-((1R)-2-(biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-5-methyl-N-methylhex-2-enamid (2E)-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)- 2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methyl-5-methyl-5-(methylamino)hex-2-enamid 3-Aminomethyl-N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]benzamid (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naph-thyl)ethyl)amid (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-{N-[2-(2-(benzolsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylamid 2-Amino-N-(2-(2-(N-((2R)-2-(N-((2E)-5-amino-5-methylhex-2-enoyl)-N- methylamino)-3-(2-naphthyl)propionyl)-N-methylamino)ethyl)phenyl)acetamid (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-(2-(2-(3- hydroxypropoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-propionamid 3-Aminomethyl-N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]benzamid (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naph-thyl)ethyl)-N- methylamid
  • Es wird angenommen, dass Verbindungen der Formel VI aufgrund des Fehlens von natürlichen Peptidbindungen eine verbesserte Widerstandsfähigkeit gegenüber einem proteolytischen Abbau durch Enzyme aufweisen verglichen mit jener der Peptide, die in der früheren Literatur vorgeschlagen worden sind. Es wird erwartet, dass die erhöhte Widerstandsfähigkeit gegenüber einem proteolytischen Abbau kombiniert mit der geringeren Größe der Verbindungen der Erfindung verglichen mit bekannten Wachstumshormon freisetzenden Peptiden deren biologische Verfügbarkeit verglichen mit jener der in der früheren Literatur vorgeschlagenen Peptide verbessern wird.
  • In den obigen Strukturformeln und in den gesamten vorliegenden Unterlagen haben die folgenden Begriffe die angegebenen Bedeutungen:
  • Die oben angegebenen C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppen sollen jene Alkylgruppen der angegebenen Länge in einer entweder linearen oder verzweigten oder cyclischen Konfiguration umfassen. Beispiele von linearem Alkyl sind Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, Pentyl und Hexyl. Beispiele von verzweigtem Alkyl sind Isopropyl, sek.- Butyl, tert.-Butyl, Isopentyl und Isohexyl. Beispiele von cyclischem Alkyl sind C&sub3;&submin;&sub6;-Cycloalkyl, wie Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl.
  • Die oben angegebenen C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxygruppen sollen jene Alkoxygruppen der angegebenen Länge in einer entweder linearen oder verzweigten oder cyclischen Konfiguration umfassen. Beispiele von linearem Alkoxy sind Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Butoxy, Pentoxy und Hexoxy. Beispiele von verzweigtem Alkoxy sind Isopropoxy, sek.-Butoxy, tert.-Butoxy, Isopentoxy und Isohexoxy. Beispiele von cyclischem Alkoxy sind Cyclopropyloxy, Cyclobutyloxy, Cyclopentyloxy und Cyclohexyloxy.
  • In dem vorliegenden Kontext soll der Begriff "Aryl" aromatische Ringe, wie carbocyclische und heterocyclische aromatische Ringe, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Phenyl, Naphthyl, Pyridyl, 1-H-Tetrazol-5-yl, Thiazolyl, Imidazolyl, Indolyl, Pyrimidinyl, Thiadiazolyl, Pyrazolyl, Oxazolyl, Isoxazolyl, Oxadiazolyl, Thienyl, Chinolinyl, Pyrazinyl oder Isothiazolyl, gegebenenfalls substituiert durch ein oder mehrere C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy, Halogen, Amino oder Aryl, umfassen. Aryl ist vorzugsweise Phenyl, Thienyl, Imidazolyl, Oxadiazolyl, Pyridyl, Indolyl, Chinolinyl oder Naphthyl, gegebenenfalls substituiert mit Halogen, Amino, Hydroxy C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy.
  • Der Begriff "Halogen" soll Cl, F, Br und I umfassen.
  • Die Verbindungen der Erfindung können ein oder mehrere Asymmetriezentren aufweisen und es ist beabsichtigt, dass Stereoisomere in Form von getrennten, reinen oder teilweise gereinigten Stereoisomeren oder racemische Mischungen davon in dem Umfang der Erfindung mit enthalten sind.
  • Die Verbindungen der Erfindung können gegebenenfalls in Form von pharmazeutisch verträglichen Salzen vorliegen, wie den pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzen von Verbindungen der Formel VI, die jene umfassen, die hergestellt worden sind, indem man die Verbindung der Formel VI mit einer anorganischen oder organischen Säure, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Essigsäure, Phosphorsäure, Milchsäure, Maleinsäure, Phthalsäure, Citronensäure, Glutarsäure, Gluconsäure, Methansulfonsäure, Salicylsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Toluolsulfonsäure, Trifluoressigsäure, Sulfaminsäure oder Fumarsäure, umsetzt.
  • Die Verbindungen der Formel VI können in Form von pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzen oder, wo passend, als ein Alkalimetall- oder Erdalkalimetall- oder Niederalkylammoniumsalz verabreicht werden. Es wird angenommen, dass solche Salzformen etwa die gleiche Größenordnung an Aktivität wie die freien Basenformen zeigen.
  • In einem anderen Aspekt betrifft die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die als Wirkstoff eine Verbindung der allgemeinen Formel VI oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  • Pharmazeutische Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Erfindung enthalten, können durch herkömmliche Techniken, z. B. wie in Remington's Pharmaceutical Sciences, 198, beschrieben, hergestellt werden. Die Zusammensetzungen können in herkömmlichen Formen, beispielsweise Kapseln, Tabletten, Aerosolen, Lösungen, Suspensionen oder topischen Anwendungen, auftreten.
  • Der pharmazeutische Träger oder das pharmazeutische Verdünnungsmittel, die eingesetzt werden, kann ein herkömmlicher fester oder flüssiger Träger sein. Beispiele von festen Trägern sind Lactose, Terra alba, Saccharose, Cyclodextrin, Talkum, Gelatine, Agar, Pektin, Akaziengummi, Magnesiumstearat, Stearinsäure oder Niederalkylether von Cellulose. Beispiele von flüssigen Trägern sind Dicksaft, Erdnussöl, Olivenöl, Phospholipide, Fettsäuren, Fettsäureamine, Polyoxyethylen oder Wasser.
  • Der Träger oder das Verdünnungsmittel können in ähnlicher Weise ein jegliches Material für eine länger andauernde Freisetzung, das in diesem Fachgebiet bekannt ist, wie Glycerylmonostearat oder Glyceryldistearat, allein oder mit einem Wachs gemischt, umfassen.
  • Wenn ein fester Träger für eine orale Verabreichung verwendet wird, kann die Zubereitung tablettiert, in Pulver- oder Pelletform in eine Hartgelatinekapsel eingebracht werden oder sie kann in Form einer Pastille oder eines Trochiskus vorliegen. Die Menge von festem Träger wird stark variieren, wird aber üblicherweise im Bereich von etwa 25 mg bis etwa 1 g liegen. Wenn ein flüssiger Träger verwendet wird, kann die Zubereitung in Form eines Sirups, einer Emulsion, Weichgelatinekapsel oder sterilen injizierbaren Flüssigkeit, wie einer wässrigen oder nicht-wässrigen flüssigen Suspension oder Lösung, vorliegen.
  • Eine typische Tablette, die durch herkömmliche Tablettiertechniken hergestellt werden kann, kann enthalten:
    • Kern:
  • Wirkstoff (als freie Verbindung oder Salz davon) 100 mg
  • Kolloides Siliciumdioxid (Aerosil) 1,5 mg
  • Cellulose, mikrokrist. (Avicel) 70 mg
  • Modifizierter Cellulosegummi (Ac-Di-Sol) 7,5 mg
  • Magnesiumstearat
    • Überzug:
  • HPMC, ungef. 9 mg
  • *Mywacett 9-40 T, ungef. 0,9 mg
  • * Acyliertes Monoglycerid, das als Weichmacher für den Filmüberzug verwendet wird.
  • Für eine nasale Verabreichung kann die Zubereitung eine Verbindung der Formel VI gelöst oder suspendiert in einem flüssigen Träger, insbesondere einem wässrigen Träger, für eine Anwendung als Aerosol enthalten. Der Träger kann Zusatzstoffe, wie Solubilisierungsmittel, z. B. Propylenglycol, grenzflächenaktive Mittel, Absorptionsverstärker, wie Lecithin (Phosphatidylcholin) oder Cyclodextrin, oder Konservierungsmittel, wie Parabene, enthalten.
  • Im allgemeinen werden die Verbindungen der Erfindung in Einheitsdosisform, umfassend 50-200 mg Wirkstoff zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger pro Einheitsdosis, abgegeben.
  • Die Dosierung der erfindungsgemäßen Verbindungen beträgt geeigneterweise 0,1- 500 mg/Tag, z. B. 5 bis 50 mg, wie beispielsweise etwa 10 mg pro Dosis, wenn sie an Patienten, z. B. Menschen, als Arzneimittel verabreicht werden.
  • Es ist gezeigt worden, dass Verbindungen der allgemeinen Formel VI die Fähigkeit aufweisen, endogenes Wachstumshormon in vivo freizusetzen. Die Verbindungen können dementsprechend bei der Behandlung von Leiden, die erhöhte Wachstumshormon-Plasmaspiegel erfordern, wie bei Menschen mit Wachstumshormonmangel oder bei älteren Patienten oder landwirtschaftlichen Nutztieren, verwendet werden.
  • So betrifft die Erfindung in einem besonderen Aspekt eine pharmazeutische Zusammensetzung zum Stimulieren der Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse, wobei die Zusammensetzung als einen Wirkstoff eine Verbindung der allgemeinen Formel VI oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  • In einem noch weiteren Aspekt betrifft die Erfindung die Verwendung einer Verbindung der allgemeinen Formel VI oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung eines Arzneimittels, insbesondere eines Arzneimittels zum Stimulieren der Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse.
  • Fachleuten auf diesem Gebiet ist es wohlbekannt, dass die gegenwärtigen und potentiellen Verwendungen von Wachstumshormon bei Menschen sehr unterschiedlich und zahlreich sind. So können Verbindungen der Formel I für Zwecke einer Stimulierung der Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse verabreicht werden und würden dann ähnliche Wirkungen oder Verwendungen wie Wachstumshormon selbst haben. Die Verwendungen von Wachstumshormon können, wie folgt, zusammengefasst werden: Stimulierung einer Wachstumshormonfreisetzung bei älteren Menschen; Prävention von katabolischen Nebenwirkungen von Glucocorticoiden, Prävention und Behandlung von Osteoporose, Behandlung von NIDDM, Stimulierung des Immunsystems, Beschleunigung der Wundheilung, Beschleunigung der Knochenbruchreparatur, Behandlung von Wachstumsverzögerungen, Behandlung von Nierenversagen oder -insuffizienz, die aus einer Wachstumsverzögerung resultieren, Behandlung von physiologischem Kleinwuchs, einschließlich Kindern mit Wachstumshormonmangel, und Kleinwuchs, der mit chronischen Erkrankungen verbunden ist, Behandlung von Obesität und einer mit Obesität verbundenen Wachstumsverzögerung, Behandlung von Anorexie, Behandeln einer Wachstumsverzögerung, die mit dem Prader- Willi-Syndrom und Turner'-Syndrom verbunden ist; Beschleunigen der Genesung und Verringerung des Krankenhausaufenthalts von Verbrennungspatienten; Behandlung von intrauteriner Wachstumsverzögerung, Skelettdysplasie, Hypercortisolismus und Cushing'-Syndrom; Induktion einer pulsierenden Wachstumshormonfreisetzung; Ersetzen von Wachstumshormon bei unter Stress stehenden Patienten, Behandlung von Osteochondrodysplasien, Noonan'-Syndrom, Schizophrenie, Depressionen, Alzheimer'-Krankheit, verzögerter Wundheilung und psychosozialer Deprivation, Behandlung von Lungendysfunktion und Abhängigkeit von Beatmungsgeräten, Abschwächung der Proteinkatabolismusreaktionen nach einem größeren chirurgischen Eingriff, Verringern von Kachexie und Proteinverlust aufgrund von chronischen Erkrankungen, wie Krebs oder AIDS; Behandlung von Hyperinsulinämie, einschließlich Nesidioblastose, ergänzende Behandlung zur Ovulationsinduktion; zur Stimulierung der Thymusentwicklung und zur Verhinderung der mit dem Alter zusammenhängenden Abnahme der Thymusfunktion, Behandlung von Patienten mit Immunsuppression, Verbesserung der Muskelfestigkeit bzw. -stärke, Mobilität, Beibehaltung der Hautdicke, Stoffwechselhomöostase, Nierenhomöostase bei gebrechlichen älteren Menschen, Stimulierung von Osteoblasten, Knochenumbau und Knorpelwachstum, Stimulierung des Immunsystems bei Begleit- oder Haustieren und Behandlung von Alterungserkrankungen bei Begleit- oder Haustieren, Wachstumsförderer bei landwirtschaftlichen Nutztieren und Stimulierung des Wollwachstums bei Schafen.
  • Für die obigen Indikationen wird die Dosierung abhängig von der eingesetzten Verbindung der Formel VI, von der Verabreichungsweise und von der gewünschten Therapie variieren. Jedoch werden im allgemeinen Dosierungsmengen zwischen 0,0001 und 100 mg/kg Körpergewicht täglich an Patienten und Tiere verabreicht, um eine wirksame Freisetzung von endogenem Wachstumshormon zu erzielen. Üblicherweise umfassen für eine orale, nasale, pulmonale oder transdermale Verabreichung geeignete Dosierungsformen 0,0001 mg bis 100 mg, vorzugsweise 0,001 mg bis 50 mg der Verbindungen der Formel VI, die mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel gemischt sind.
  • Gegebenenfalls kann die pharmazeutische Zusammensetzung der Erfindung eine Verbindung der Formel VI kombiniert mit einer oder mehreren Verbindungen, die eine unterschiedliche Aktivität zeigen, z. B. einem Antibiotikum oder andersartigen pharmakologisch wirksamem Material, umfassen.
  • Die Verabreichungsroute kann eine jegliche Route sein, die den Wirkstoff wirksam zu dem korrekten oder gewünschten Wirkort transportiert, wie oral, nasal, pulmonal, transdermal oder parenteral, wobei die orale Route bevorzugt ist.
  • Abgesehen von der pharmazeutischen Verwendung der Verbindungen der Formel VI können sie nützliche in vitro einsetzbare Hilfsmittel zum Untersuchen der Regulation der Wachstumshormonfreisetzung sein.
  • Verbindungen der Formel VI können auch nützliche in vivo einsetzbare Hilfsmittel sein, um das Wachstumshormonfreisetzungsvermögen der Hypophyse auszuwerten. Beispielsweise können Serumproben, die vor und nach der Verabreichung dieser Verbindungen an Menschen abgenommen worden sind, auf Wachstumshormon untersucht werden. Ein Vergleich des Wachstumshormons in jeder Serumprobe würde direkt die Fähigkeit der Hypophyse dieser Patienten, Wachstumshormon freizusetzen, bestimmen.
  • Verbindungen der Formel VI können an kommerziell wichtige Tiere, wie Kühe, Schafe, Schweine, Ziegen u. s. w. verabreicht werden, um deren Wachstumsrate und -ausmaß zu erhöhen und um die Milchproduktion zu erhöhen.
  • Eine weitere Verwendung von Wachstumshormon-sekretatogen Verbindungen der Formel VI besteht in Kombination mit anderen sekretagogen Verbindungen, wie GHRP (2 oder 6), GHRH und dessen Analogen, Wachstumshormon und dessen Analogen oder Somatomedinen, einschließlich IGF-1 und IGF-2.
    • Pharmakologische Verfahren
  • Verbindungen der Formel VI können in vitro hinsichtlich ihrer Wirksamkeit und Wirkkraft, Wachstumshormon in Rattenhypophysen-Primärkulturen freizusetzen, ausgewertet werden.
  • Die Isolierung von Ratten-Hypophysenzellen ist eine Modifizierung von O. Sartor et al., Endocrinology 116, 1985, S. 952-957. Männliche Sprague-Dawley- Albinoratten (250 +/- 25 g) wurden von Mrallegaard, Lille Skensved, Dänemark, erworben. Die Ratten wurden in Gruppenkäfigen (vier Tiere/Käfig) gehalten und in Räume mit einem 12 h Licht-Zyklus gesetzt. Die Raumtemperatur variierte von 19-24ºC und die Feuchtigkeit von 30-60ºC.
  • Die Ratten wurden dekapitiert und die Hypophysen wurden präpariert. Die Neuralzwischenlappen wurden entfernt und das restliche Gewebe wurde unverzüglich in eiskalten Isolierungspuffer (Gey's-Medium (Gibco 041-04030), ergänzt mit 0,25% D-Glucose, 2% nicht-essentiellen Aminosäuren (Gibco 043-01140) und 1% Rinderserumalbumin (BSA) (Sigma A-4503)) gelegt. Das Gewebe wurde in kleine Stücke geschnitten und in Isolierungspuffer, der mit 3,8 mg/ml Trypsin (Worthington #3707 TRL-3) und 330 mg/ml DNase (Sigma D-4527) ergänzt worden war, transferiert. Diese Mischung wurde bei 70 Umdrehungen/min 35 min bei 37ºC in einer 95/5%-Atmosphäre von O&sub2;/CO&sub2; inkubiert. Das Gewebe wurde dann dreimal in dem obigen Puffer gewaschen. Unter Verwendung einer Standard-Pasteurpipette wurde das Gewebe dann in Einzelzellen angesaugt. Nach der Dispergierung wurden die Zellen durch einen Nylon-Filter (160 mm) filtriert, um unverdautes Gewebe zu entfernen. Die Zellsuspension wurde 3-mal mit mit Trypsininhibitor (0,75 mg/ml, Worthington #2829) ergänztem Isolierungspuffer gewaschen und schließlich in Kulturmedium, DMEM (Gibco 041-01965), ergänzt mit 25 mM HEPES (Sigma H-3375), 4 mM Glutamin (Gibco 043-05030H), 0,075% Natriumbicarbonat (Sigma S-8875), 0,1% nicht-essentiellen Aminosäuren, 2,5% Vitalem Kälberserum (FCS, Gibco 011-06290), 3% Pferde-Serum (Gibco 034- 06050), 10% frischem Rattenserum, 1 nM T&sub3; (Sigma T-2752) und 40 mg/l Dexamethason (Sigma D-4902), pH 7,3, zu einer Dichte von 2 · 10&sup5; Zellen/ml resuspendiert. Die Zellen wurden in Mikrotiterplatten (Nung, Dänemark) ausgesät, 200 ml/Vertiefung, und 3 Tage bei 37ºC und 8% CO&sub2; kultiviert.
    • Untersuchung von Verbindungen
  • Nach der Kultivierung wurden die Zellen zweimal mit Stimulierungspuffer (Hanks Balanced Salt Solution (Gibco 041-04020), ergänzt mit 1% BSA (Sigma A-4503), 0,25% D-Glucose (Sigma G-5250) und 25 mM HEPES (Sigma H-3375) pH 7,3) gewaschen und 1 h bei 37ºC vorinkubiert. Der Puffer wurde gegen 90 ml Stimulierungspuffer (37ºC) ausgetauscht. Zehn ml Testverbindungslösung wurden zugesetzt und die Platten wurden 15 min bei 37ºC und 5% CO&sub2; inkubiert. Das Medium wurde dekantiert und auf den Wachstumshormon- oder GH-Gehalt in einem rGH-SPA-Testsystem analysiert.
  • Alle Verbindungen wurden in Dosen, die von 10 pM bis 100 mM reichten, getestet. Eine Dosis-Wirkungs-Kurve wurde unter Verwendung der Hill-Gleichung (Fig P, Biosoft) konstruiert. Die Wirksamkeit (maximales freigesetztes GH, Emax) wurde in % des Emax von GHRP-6 ausgedrückt. Die Wirkkraft (EC&sub5;&sub0;) wurde als die Konzentration, die eine halbmaximale Stimulierung der GH-Freisetzung induzierte, bestimmt.
  • Verbindungen der Formel VI können hinsichtlich ihrer metabolischen Stabilität ausgewertet werden.
  • Verbindungen wurden in einer Konzentration von 1 mg/ml in Wasser gelöst. 25 ml dieser Lösung werden zu 175 ml der jeweiligen Enzymlösung (was zu einem Enzym : Substrat-Verhältnis (Gew./Gew.) von etwa 1 : 5 führt) hinzugesetzt. Die Lösung wird bei 37ºC über Nacht stehengelassen. 10 ml der verschiedenen Abbaulösungen werden gegen eine entsprechende Null-Probe unter Verwendung von Flussinjektions-Elektrospray-Massenspektrometrie (ESMS) mit einem auf ausgewählte Ionen gerichteten Überwachen des Molekülions analysiert. Wenn das Signal um mehr als 20% verglichen mit der Null-Probe abgenommen hat, wird der Rest der Lösung durch HPLC und Massenspektrometrie analysiert, um das Ausmaß und die Stelle(n) des Abbaus genau zu identifizieren.
  • In die Stabilitätstests wurden mehrere Standardpeptide (ACTH 4-10, Angiotensin 1-14 und Glucagon) aufgenommen, um die Fähigkeit der verschiedenen Lösungen, Peptide abzubauen, zu verifizieren.
  • Standardpeptide (Angiotensin 1-14, ACTH 4-10 und Glucagon) wurden von Sigma, MO, USA erworben).
  • Enzyme (Trypsin, Chymotrypsin, Elastase, Aminopeptidase M und Carboxypeptidase Y und B) wurden allesamt von Boehringer Mannheim GmbH (Mannheim, Deutschland) erworben.
  • Pankreas-Enzym-Mischung: Trypsin, Chymotrypsin und Elastase in 100 mM Ammoniumbicarbonat, pH 8,0 (alle Konzentrationen 0,025 mg/ml).
  • Carboxypeptidase-Mischung: Carboxypeptidase Y und B in 50 mM Ammoniumacetat, pH 4,5 (alle Konzentrationen 0,025 mg/ml).
  • Aminopeptidase M-Lösung: Aminopeptidase M (0,025 mg/ml) in 100 mM Ammoniumbicarbonat, pH 8,0.
  • Die massenspektrometrische Analyse wurde unter Verwendung von zwei unterschiedlichen Massenspektrometern ausgeführt, einem mit einer Elektrospray- Ionenquelle ausgestatteten Sciex-API III-Dreifach-Quadrupol-LC-MS-Instrument (Sciex Instruments, Thornhill, Ontario) und einem Flugzeit-"Plasma Desorption 20"-Instrument von Bio-Ion (Bio-Ion Nordic AB, Uppsala, Schweden).
  • Eine Quantifizierung der Verbindungen (vor und nach dem Abbau) erfolgte an dem API-III-Instrument unter Verwendung von Einzelionenüberwachung des fraglichen Molekülions bei Flussinjektion der zu analysierenden Probe. Der Flüssigkeitsfluss (MeOH : Wasser 1 : 1) von 100 ml/min wurde durch eine ABI 140B- HPLC-Einheit (Perkin-Elmer Applied Biosystems Divisions, Foster City, CA) kontrolliert. Die Instrumentenparameter wurden auf Standardbetriebsbedingungen eingestellt und es wurde eine SIM-Überwachung unter Verwendung des Molekülions höchster Intensität (in den meisten Fällen entsprach dies dem doppelt geladenen Molekülion) ausgeführt.
  • Eine Identifizierung von Abbauprodukten umfasste darüber hinaus die Verwendung von Plasmadesorptions-Massenspektrometrie (PDMS) mit einem Auftragen der Probe auf mit Nitrocellulose beschichtete Ziele und Standardinstrumenteneinstellungen. Die Genauigkeit der dadurch ermittelten Massen ist im allgemeinen besser als 0,1%.
  • Auftrennung und Isolierung von Abbauprodukten erfolgten unter Verwendung einer 4,6 · 105 mm-HY-TACH-C-18-Umkehrphase-HPLC-Säule (Hewlett- Packard Company, Palo Alto, CA) mit einem Standard-Acetonitril : TFA- Auftrennungsgradienten. Das verwendete HPLC-System war HP1090M (Hewlett- Packard Company, Palo Alto, CA).
  • +: stabil (weniger als 20% Abnahme des SIM-Signals nach 24 h in der Abbaulösung)
  • -: instabil (mehr als 20% Abnahme des SIM-Signals nach 24 h in der Abbaulösung)
    • BEISPIELE
  • Das Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel VI und diese enthaltenden Zubereitungen wird in den folgenden Beispielen, die jedoch nicht als beschränkend verstanden werden sollen, weiter veranschaulicht.
  • Die Strukturen der Verbindungen werden entweder durch Elementaranalyse (MA), Kernmagnetresonanz (NMR) oder Massenspektrometrie (MS) bestätigt. NMR-Verschiebungen (d) sind in Teilen pro Million (ppm) angegeben und es werden nur ausgewählte Peaks angegeben. Schmp. ist Schmelzpunkt und ist in 0ºC angegeben. Säulenchromatographie wurde unter Verwendung der von W. C. Still et al., J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925, beschriebenen Technik an Merck Kieselgel 60 (Art. 9385) ausgeführt. Als Ausgangsmaterialien verwendete Verbindungen sind entweder bekannte Verbindungen oder Verbindungen, die durch an sich bekannte Verfahren leicht hergestellt werden können.
    • Abkürzungen:
  • DSC: Dünnschichtchromatographie
  • DMSO: Dimethylsulfoxid
  • min: Minuten
  • h: Stunden
    • HPLC-Analyse: Methode A1.
  • Die RP-Analyse wurde unter Verwendung von UV-Detektionen bei 214, 254, 276 und 301 nm an einer 4,6 mm · 250 mm-218TP54-5m-C-18-Siliciumdioxid-Säule (The Separations Group, Hesperia), die mit 1 ml/min bei 42ºC eluiert wurde, ausgeführt. Die Säule wurde mit 5% Acetonitril in einem Puffer, bestehend aus 0,1 M Ammoniumsulfat, der mit 4 M Schwefelsäure auf pH 2,5 eingestellt worden war, äquilibriert. Nach dem Einspritzen wurde die Probe durch einen Gradienten von 5% bis 60% Acetonitril in demselben Puffer während 50 min eluiert. Beispiel 1 (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-tert.-Butoxycarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (1,40 g, 4,3 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (5 ml) und Dichlormethan (5 ml) gelöst. Hydroxy-7-azabenzotriazol (0,59 g, 4,3 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3- Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (0,99 g, 5,2 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. N-Methyl-N-phenethylamin (0,86 ml, 6,0 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Wasser (300 ml) und Ethylacetat (150 ml) verdünnt. Es wurde 10%-ige Natriumhydrogensulfat- Lösung (80 ml) zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (4 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (90 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,89 g N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2-naphthyl) ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,01, 1,09, 1,25 und 1,30 (alle s, insgesamt 9H); 2,60-3,85 (m, 12H); 4,75, 5,03, 5,31 und 5,37 (alle dd, insgesamt 1H); 7,00-7,85 (m, 12 H). (2R)-2-(Methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid
  • N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (1,84 g, 4,12 mmol) wurde in Dichlormethan (6 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (6 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 10 min gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum bei 20ºC entfernt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (100 ml) gelöst und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Diese letztgenannte Prozedur wurde zweimal wiederholt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (70 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 350 mg (2R)-2-(Methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,72 (br, 1H); 2,12, 2,30, 2,44 und 2,87 (alle s, insgesamt 6 H); 2,58, 2,76, 2,91, 2,98, 3,09, 3,25, 3,50, 3,61 und 3,73 (alle m, insgesamt 7H); 6,90-7,85 (m, 12H). (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-3-ensäure (303 mg, 1,04 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (2 ml) und Dichlormethan (2 ml) gelöst. Hydroxy-7-azabenzotriazol (170 mg, 1,25 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (299 mg, 1,56 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 10 min gerührt. (2R)-2-(Methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid (360 mg, 1,04 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst und der Reaktionsmischung zugesetzt. Ethyldiisopropylamin (0,18 ml, 1,04 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Die Lösung wurde mit Wasser (200 ml) und Ethylacetat (150 ml) verdünnt. 10%-ige wässrige Natriumhydrogensulfatlösung (50 ml) wurde zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt und die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (4 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (110 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 546 mg (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)- 1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,14, 1,17, 1,23 und 1,26 (alle s, zusammen 6H); 1,38 und 1,41 (beide s, zusammen 9H); 2,40-3,10, 3,30-3,60 und 3,92 (alle m, zusammen 8H); 2,78, 2,89 und 3,03 (alle s, zusammen 6H); 4,28 und 4,40 (beide br, zusammen 1H); 5,78 und 5,85 (beide dd, zusammen 1H); 6,15 und 6,23 (beide d, zusammen 1H); 6,70 und 6,80 (beide m, zusammen 1H); 7,00-7,85 (m, 12H).
  • (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester (528 mg, 0,85 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Es wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei Raumtemperatur 10 min gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum bei 20ºC entfernt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (50 ml) gelöst und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Diese letztgenannte Prozedur wurde zweimal wiederholt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 320 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung als freie Base erhalten wurden. 100 mg davon wurden in Ethylacetat (3 ml) gelöst. 3 M Chlorwasserstoff in Ethylacetat (0,7 ml) wurden zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde durch zwei HPLC-Chromatographien an einer 25 mm · 250 mm-10 m-C18-Siliciumdioxid-Säule bei 40ºC mit einem Gradienten von 30 bis 43% Acetonitril in einem 0,1 M Ammoniumsulfatpuffer, der mit 4 M Schwefelsäure auf pH 2,5 eingestellt worden war, gereinigt. Die Peptid enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt, mit 3 Volumen Wasser verdünnt und auf eine Sep-Pak®-C18-Kartusche (Waters part. # 51910), die mit 0,1% Trifluoressigsäure äquilibriert worden war, aufgetragen. Das Peptid wurde von der Sep-Pak®-Kartusche mit 70% Acetonitril in einer 0,1%-igen Trifluoressigsäurelösung in Wasser eluiert. Das Produkt wurde lyophilisiert, wodurch 10 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung als Trifluoracetat erhalten wurden.
  • HPLC (Al): Rt 34,27 min.
  • NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte, freie Base): d, 1,04, 1,05, 1,11 und 1,12 (alle s, zusammen 6H); 5,78 und 5,87 (beide dd, zusammen 1H); 6,14 und 6,23 (beide d, zusammen 1H); 6,78 und 6,87 (beide dt, zusammen 1H).
  • MS: 472,1 [M + H]&spplus; Beispiel 2 (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-Hydroxypropylamino)-5-methylhex-2-enoyl)-N- methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N-phenethylpropionamid (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-(tert.-Butoxydimethylsilyloxy)propylamino)-5- methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N- phenethylpropionamid
  • (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid (179 mg, 0,38 mmol) wurde in Methanol (10 ml) gelöst. Eisessig (0,30 ml, 5,30 mmol) und Molekularsiebe (3 Å, 5,0 g) wurden nacheinander zugesetzt. (2R)-2-(tert.- Butyldimethylsilyloxy)propanal (500 mg, 2,66 mmol) wurde in Methanol (3 ml) gelöst und der Reaktionsmischung zugesetzt. Natriumcyanborhydrid (95 mg, 1,51 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 3 h bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde ein weiterer Anteil Natriumcyanborhydrid (95 mg, 1,51 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Molekularsiebe wurden durch einen Celite-Bausch, der mit Methanol (30 ml) gewaschen wurde, abfiltriert. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Wasser/1 N Natriumhydroxidlösung (50 ml/50 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit Diethylether (3 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan/Triethylamin (10 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 160 mg (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-(tert.-Butoxydimethylsilyloxy)-propylamino)-5- methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N-phenethylpropionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d = 5,80 und 5,86 (t und dd, zusammen 1 H); 6,14 und 6,23 (beide d, zusammen 1H); 6,85 (m, 1H).
  • (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-(tert.-Butoxydimethylsilyloxy)-propylamino)-5- methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N- phenethylpropionamid (135 mg, 0,21 mmol) wurde in THF (2 ml) gelöst. Eine 1,1 M Lösung von tert.-Butylammoniumfluorid (0,42 ml, 0,46 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 1 h gerührt. Die Lösung wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt. Sie wurde mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Die Lösemittel wurden im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde an Siliciumdioxid (20 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 24 mg des Rohprodukts erhalten wurden. Der Rückstand wurde durch HPLC-Chromatographie an einer 25 mm · 250 mm-10m-C18- Siliciumdioxid-Säule bei 40ºC mit einem Gradient von 30,0 bis 43,5% Acetonitril in einem 0,1 M Ammoniumsulfatpuffer, der mit 4 M Schwefelsäure auf pH 2,5 eingestellt worden war, gereinigt. Die Peptid enthaltenden Fraktionen wurden gesammelt, mit 3 Volumen Wasser verdünnt und auf eine Sep-Pak®-C18- Kartusche (Waters part. # 51910), die mit 0,1% Trifluoressigsäure äquilibriert worden war, aufgetragen. Das Peptid wurde von der Sep-Pak®-Kartusche mit 70% Acetonitril in einer 0,1%-igen Trifluoressigsäurelösung in Wasser eluiert. Das Produkt wurde lyophilisiert, wodurch 10,7 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung als Trifluoracetat erhalten wurden.
  • HPLC: Rt 35,13 (A1)
  • Rt 37,08 (B1)
  • MS: 530,8 ±0,5 (M + 1) Beispiel 3 (2E)-5-Amino-5-methyl-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid 3-Hydroxy-1,1-dimethylpropylcarbaminsäure-tert.-butylester:
  • Bei 0ºC wurde Ethylchlorformiat (1,10¹/&sub2;, 11,5 mmol) tropfenweise zu einer Lösung von 3-tert.-Butoxycarbonylamino-3-methylbutansäure (2,50 g, 11,5 mmol) und Triethylamin (1,92 ml, 13,8 mmol) in Tetrahydrofuran (10 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 40 min gerührt. Das gebildete Präzipitat wurde abfiltriert und mit Tetrahydrofuran (20 ml) gewaschen. Die Flüssigkeit wurde unverzüglich auf 0ºC abgekühlt. Es wurde eine 2 M Lösung von Lithiumborhydrid in Tetrahydrofuran (14,4 ml, 28,8 mmol) tropfenweise zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 2 h gerührt, dann über einen Zeitraum von 4 h auf Raumtemperatur erwärmt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde vorsichtig Methanol (5 ml) zugesetzt. Es wurde 1 N Salzsäure (100 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde mit Ethylacetat (2 · 100 ml, 3 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde einer Chromatographie an Siliciumdioxid (110 g) mit Ethylacetat/Heptan 1 : 2 unterzogen, wodurch 1,84 g 3-Hydroxy-1,1- dimethylpropylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):_d 1,33 (s, 6H); 1,44 (s, 9H); 1,88 (t, 2H); 1,94 (br, 1H); 3,75 (q, 2H); 4,98 (br, 1H). 3-(tert.-Butoxycarbonylamino)-3-methylbutanal:
  • Dimethylsulfoxid (1,22 ml, 17,2 mmol) wurde einer Lösung von Oxalylchlorid (1,1 ml, 12,9 mmol) bei -78ºC in Dichlormethan (15 ml) zugesetzt. Die Mischung wurde bei -78ºC 15 min gerührt. Eine Lösung von 3-Hydroxy-1,1- dimethylpropylcarbaminsäure-tert.-butylester (1,75 g, 8,6 mmol) in Dichlormethan (10 ml) wurde über einen Zeitraum von 15 min tropfenweise zugesetzt. Die Lösung wurde bei -78ºc weitere 15 min gerührt. Triethylamin (6,0 ml, 43 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei -78ºC 5 min gerührt und dann auf Raumtemperatur erwärmt. Die Lösung wurde mit Dichlormethan (100 ml) verdünnt und mit 1 N Salzsäure (100 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Säulenchromatographie an Siliciumdioxid (140 g) mit Ethylacetat/Heptan (1 : 3) gereinigt, wodurch 1,10 g 3-(tert.- Butoxycarbonylamino)-3-methylbutanal erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,39 (s, 6H); 1,45 (s, 9H); 2,85 (d, 2H); 4,73 (br. 1H 9,80 (t, 1H). Ethyl-(2E)-5-(tert.-butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-enoat
  • Triethylphoshonoacetat (1,96 ml, 9,8 mmol) wurde in Tetrahydrofuran (30 ml) gelöst. Kalium-tert.-butoxid (1,10 g, 9,8 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 40 min bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde eine Lösung von 3-(tert.- Butoxycarbonylamino)-3-methylbutanal (1,10 g, 5,5 mmol) in Tetrahydrofuran (6 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei Raumtemperatur 75 min gerührt. Sie wurde mit Ethylacetat (100 ml) und 1 N Salzsäure (100 ml) verdünnt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (60 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Säulenchromatographie an Siliciumdioxid (90 g) mit Ethylacetat/Heptan (1 : 4) gereinigt, wodurch 1,27 g Ethyl-(2E)-5-(tert.-butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-enoat erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):_d 1,30 (s, 6H); 1,30 (t, 3H); 1,46 (s, 9H); 2,62 (d, 2H); 4,27 (q, 2H); 4,42 (br, 1H); 5,88 (d, 1H); 6,94 (td, 1H). (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure
  • Ethyl-(2E)-5-(tert.-butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-enoat (1,233 g, 4,54 mmol) wurde in Dioxan (20 ml) gelöst. Lithiumhydroxid (0,120 g, 5,00 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Wasser (10 ml) wurde zugesetzt, bis eine klare Lösung erreicht wurde. Die Lösung wurde 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde mit Wasser (70 ml) verdünnt und mit tert.-Butylmethylether (2 · 100 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit 1 N Natriumhydrogensulfat- Lösung (pH = 1) angesäuert und mit tert.-Butylmethylether (3 · 70 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 1,05 g (2E)-5-(tert.- Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure erhalten wurde. Das Rohprodukt wurde für weitere Synthesen verwendet.
  • ¹H-NMR (DMSO d&sub6;):_d 1,15 (s, 6H); 1,35 (s, 9H); 2,53 (d, 2H); 5,75 (d, 1H); 6,57 (br, 1H); 6,75 (td, 1H); 12,1 (s, 1H). N-(2-(2-Thienyl)ethyl)formamid:
  • 2-(2-Thienyl)ethylamin (15,0 g, 118 mmol) wurde in Ameisensäure (120 ml) gelöst, während mit einem Wasserbad gekühlt wurde. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Essigsäureanhydrid (45 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 3 h gerührt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt und Wasser (45 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Mischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (300 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit Wasser (2 · 150 ml) und gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (200 ml) gewaschen. Sie wurde über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (180 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 14,30 g N-(2-(2- Thienyl)ethyl)formamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):_d 3,07 (t, 2H); 3,59 (q, 2H); 5,90 (br, 1H); 6,85 (d 1H); 6,95 (dd, 1H); 7,17 (d, 1H); 8,12 (s, 1H). N-Methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)amin:
  • Bei 7ºC wurde eine Lösung von N-(2-(2-Thienyl)ethyl)formamid (9,98 g, 63,8 mmol) in Tetrahydrofuran (200 ml) einer Suspension von Natriumborhydrid (2,89 g, 76,5 mmol) in Tetrahydrofuran (200 ml) zugesetzt. Die Mischung wurde 10 min gerührt. Eine Lösung von Iod (8,09 g, 31,9 mmol) in Tetrahydrofuran (200 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 7ºC und 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Sie wurde 16 h unter Rückfluss erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf 7ºC abgekühlt. Methanol (500 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in 20%-iger wässriger Natriumhydroxidlösung (500 ml) und tert.- Butylmethylether (200 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Pha
  • se wurde mit tert.-Butylmethylether (2 · 200 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (220 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 2,82 g N- Methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)amin erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):_d 2,05 (s, 1H); 2,46 (s, 3H); 2,90 (t, 2H); 3,04 (t, 2H); 6,84 (d, 1H); 6,94 (dd, 1H); 7,15 (d, 1H). N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester:
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (4,52 g, 13,7 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (6 ml) und Dichlormethan (6 ml) gelöst. 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (1,86 g, 13,7 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (2,63 g, 13,7 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 15 min gerührt. Eine Lösung von N-Methyl-N- (2-(2-thienyl)ethyl)amin in Dichlormethan (6 ml) wurde zugesetzt. Ethyldiisopropylamin (2,37 ml, 13,7 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (200 ml) verdünnt. Die Mischung wurde mit 1 N Salzsäure (150 ml) und gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (150 ml) gewaschen. Sie wurde über
  • Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (100 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 5,57 g N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte):_d 4,84, 5,05 und 5,86 (dd, dd und m, zusammen 1H); 6,60-7,90 (m, 10H). (2R)-N-Methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)-N-(2-(2-thienyl)- ethyl)propionamid:
  • N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (5,17 g, 11,4 mmol) wurde in Dichlormethan (12 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (12 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum bei 20ºC entfernt. Der Rückstand wurde mit Dichlormethan (3 · 60 ml) codestilliert. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges (100 : 10 : 1) Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,91 g (2R)-N-Methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)-N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):_d 2,18, 2,32, 2,46 und 2,89 (alle s, zusammen 6H); 2,50- 3,60 (m, zusammen 6H); 3,65 und 3,75 (beide dd, zusammen 1H); 6,58 und 6,69 (beide d, zusammen 1H); 6,87, 7,10, 7,35, 7,45, 7,76 (alle m, zusammen 8H); 7,62 und 7,65 (beide s, zusammen 1H). (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester:
  • (2E)-5-tert.-Butoxycarbonylamino-5-methylhex-2-ensäure (380 mg, 1,56 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (2 ml) und Dichlormethan (2 ml) gelöst. 1- Hydroxy-7-azabenzotriazol (299 mg, 1,56 mmol) wurde als ein Feststoff zugegeben. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (380 mg, 1,56 mmol) wurde zugegeben. Die Lösung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-Methyl-2- (methylamino)-3-(2-naphthyl)-N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid (500 mg, 1,42 mmol) in Dichlormethan (2 ml) wurde zugegeben. Es wurde Ethyldiisopropylamin (0,25 ml, 1,42 mmol) zugegeben. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (70 ml) verdünnt und mit 1 N Salzsäure (100 ml) gewaschen. Die organische Phase wurde mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (150 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 697 mg (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte):_d 1,14, 1,17, 1,21 und 1,24 (alle s, zusammen 6H); 1,39 und 1,41 (beide s, zusammen 9H); 2,82, 2,91, 3,03 und 3,06 (alle s, zusammen 6H); 5,84 und 5,88 (beide dd, zusammen 1H); 6,15 und 6,26 (beide d, zusammen 1H).
  • (3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester (640 mg, 1,11 mmol) wurde in Dichlormethan (3 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (3 ml) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum ohne Erwärmen entfernt. Der Rückstand wurde mit Dichlormethan (3 · 50 ml codestilliert. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 416 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • HPLC: Rt = 33,48 min (A1)
  • Bt = 35,13 min (B1)
  • MS: 478,2, [M + H]&spplus;
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte):_d 1,04, 1,05, 1,11 und 1,11 (alle s, zusammen 6H); 2,80, 2,90, 3,04 und 3,07 (alle s, zusammen 6H); 5,83 und 5,88 (beide dd, zusammen 1H); 6,14 und 6,25 (beide d, zusammen 1H).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung in 0,5 M Essigsäure gelöst und lyophilisiert. Beispiel 4 (2E)-5-Methyl-5-(methylamino)-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid (2E)-5-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-5-methylhex-2-ensäure
  • (2E)-5-(tert.-Butyloxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (5,00 g; 20,6 mmol) wurde in Tetrahydrofuran (70 ml) gelöst. Methyliodid (10,3 ml; 164 mmol) wurde zugesetzt und die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Natriumhydrid (60% in Öl) (2,07 g; 61,6 mmol) wurde in Anteilen zugesetzt und die Lösung wurde bei Raumtemperatur 4 Tage gerührt. Ethylacetat (70 ml) und Wasser (60 ml) wurden tropfenweise zugesetzt und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde in Wasser (40 ml) und Ether (40 ml) gelöst. Die organische Phase wurde mit einer gesättigten wässrigen Natriumhydrogencarbonat-Lösung (30 ml) gewaschen. Die wässrigen Phasen wurden gemischt und 5% wässrige Citronensäure wurde bis zu pH 3 zugesetzt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (4 · 50 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde mit Wasser (2 · 40 ml), einer wässrigen Lösung von Natriumthiosulfat (5%; 40 ml), Wasser (40 ml) gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (45 ml) gelöst und mit einer wässrigen Natriumhydrogensulfat-Lösung (10%; 3 · 30 ml) gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und im Vakuum aufkonzentriert, wodurch 4,00 g (2E)-5-(N-tert.- Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-5-methylhex-2-ensäure erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,38 (s, 6H), 1,45 (s, 9H); 2,80 (d, 2H); 2,85 (s, 3H); 5,88 (d, 1H); 7,01 (q, 1H). N-Methyl-N-((3E)-1,1-dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-5-methylhex-2-ensäure (146 mg, 0,57 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) und N,N-Dimethylformamid (2 ml) gelöst. 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (72 mg, 0,57 mmol) wurde als ein Feststoff zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3- Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (109 mg, 0,57 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Es wurde eine Lösung von (2R)-N-Methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)-N-(2-(2- thienyl)ethyl)propionamid (200 mg, 0,57 mmol) in Dichlormethan (2 ml) zugesetzt. Es wurde Ethyldiisopropylamin (0,1 ml, 0,57 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt. während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit 1 N Salzsäure gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (40 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 270 mg N-Methyl-N-((3E)-1,1-dimethyl-4-(N-methyl-N- ((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3-enyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,67, 2,76, 2,82, 2,90, 3,03 und 3,05 (alle s, zusammen 9H); 5,85 (m, 1H); 6,10 und 6,22 (beide d, zusammen 1H).
  • N-Methyl-N-((3E)-1,1-dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester (221 mg, 0,37 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 20 min gerührt. Es wurde gesättigte Natriumhydrogencarbonat-Lösung (10 ml) zugesetzt. Die Mischung wurde mit festem Kaliumcarbonat auf pH = 9 eingestellt. Die Mischung wurde mit Wasser 820 ml) verdünnt. Sie wurde mit tert.-Butylmethylether (3 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (30 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 125 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,00 und 1,08 (beide s, zusammen 6H); 2,23 und 2,30 (beide s, zusammen 3H); 2,80, 2,89, 3,04 und 3,07 (alle s, zusammen 6H); 5,85 (m, 1H); 6,13 und 6,25 (beide d, zusammen 1H).
  • HPLC: 33,27 min (A1)
  • 35,28 min (B1).
  • MS: 492,0 [M + H].
  • Für die biologische Untersuchung wurde sie durch Lyophilisation ausgehend von 0,5 N Essigsäure (25 ml) in das Acetat umgewandelt. Beispiel 5 (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3- phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)amid N-(3-Phenylpropyl)formamid
  • 3-Phenylpropylamin (10 ml, 70,0 mmol) wurde bei 0ºC tropfenweise zu Ameisensäure (80 ml) hinzugesetzt. Essigsäureanhydrid (30 ml) wurde der Reaktionsmischung tropfenweise zugesetzt. Nach der Zugabe wurde die Reaktionsmischung auf Raumtemperatur erwärmt. Sie wurde 2,5 h gerührt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt. Wasser (30 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur erwärmt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (300 ml) gelöst. Die organische Phase wurde mit gesättigter Natriumchloridlösung (2 · 150 ml) und mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung (200 ml) gewaschen. Sie wurde über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 5,82 g N-(3- Phenylpropyl)formamid erhalten wurden, die ohne weitere Reinigung verwendet wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,85 (m, 2H); 2,65 (t, 2H); 3,21 und 3,30 (beide q, zusammen 2H); 5,85 (breit, 1H); 7,10-7,50 (m, 5H); 8,12 (s, 1H). N-Methyl-N-(3-phenylpropyl)amin
  • N-(3-Phenylpropyl)formamid (5,70 g, 34,9 mmol) wurde in Tetrahydrofuran (50 ml) gelöst und tropfenweise zu einer Suspension von Natriumborhydrid (1,58 g, 41,91 mmol) in Tetrahydrofuran (100 ml), die auf 7ºC gekühlt war, zugesetzt. Eine Lösung von Iod (4,42 g, 17,46 mmol) in Tetrahydrofuran wurde tropfenweise zugesetzt, während die Temperatur bei 7ºC gehalten wurde. Nachdem die Zugabe abgeschlossen war, wurde die Reaktionsmischung 16 h unter Rückfluss erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf 7ºC abgekühlt und Methanol (250 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in 20%-iger wässriger Natriumhydroxidlösung (250 ml) und tert.-Butylmethylether (100 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit tert.-Butylmethylether (2 · 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (400 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%- iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 2,76 g N-Methyl-N-(3-phenylpropyl)amin erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,85 (m, 2H); 2,43 (s, 1H); 2,50 (s, 3H); 2,65 (m, 4H); 7,10-7,40 (m, 5H). N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (2,21 g, 6,70 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (3 ml) und Dichlormethan (6 ml) gelöst. 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (0,91 g, 6,70 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (1,28 g, 6,70 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Es wurde eine Lösung von N- Methyl-N-(3-phenylpropyl)amin (1,0 g, 6,7 mmol) in Dichlormethan (3 ml) zugesetzt. Ethyldiisopropylamin (1,2 ml, 6,7 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich langsam auf Raumtemperatur erwärmte. Die Lösung wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt. Sie wurde mit 1 N Salzsäure (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (400 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 3) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,43 g N-Methyl- N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)- carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,25 (breit, 9H); 1,79 (m, 2H); 2,88 (breit, 3H); 5,05 und 5,45 (beide m, zusammen 1H). (2R)-N-Methyl-2-methylamino-3-(2-naphthyl)-N-(3-phenylpropyl)propionamid
  • N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (1,43 g, 3,10 mmol) wurde in Dichlormethan (5 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (5 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 90 min gerührt. Es wurden Dichlormethan (35 ml) und gesättigte Natriumhydrogencarbonat-Lösung zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde bis pH 7 zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 0,91 g rohes (2R)- N-Methyl-2-methylamino-3-(2-naphthyl)-N-(3-phenylpropyl)propionamid erhalten wurde, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 0,91-1,35 (m, 2H); 2,35, 2,42, 2,43 und 2,84 (alle s, zusammen 6H); 3,64 und 3,92 (beide dd, zusammen 1H).
  • MS: 361,2 [M + 1]&spplus;. ((3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3- phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (405 mg, 1,66 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (4 ml) und Dichlormethan (4 ml) gelöst. 1- Hydroxy-7-azabenzotriazol (227 mg, 1,66 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (319 mg, 1,66 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 40 min gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-Methyl-2-methylamino-3-(2-naphthyl)- N-(3-phenylpropyl)propionamid (600 mg, 1,66 mmol) in Dichlormethan (4 ml) wurde zugesetzt. Es wurde Ethyldiisopropylamin (0,29 m., 1,66 mmol) zugesetzt.
  • Die Lösung wurde 2 Tage gerührt, während sie sich langsam auf Raumtemperatur erwärmte. Die Reaktionsmischung wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt und mit 1 N Salzsäure (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (180 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 706 mg ((3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N- methyl-N-(3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,21, 1,24, 1,25 und 1,26 (alle s, zusammen 6H); 1,41 (s, 9H); 2,83, 2,83, 3,10 und 3,12 (alle s, zusammen 6H); 5,88 und 5,97 (beide dd, zusammen 1H); 6,25 (m, 1H); 6,80 (m, 1H).
  • ((3E)-1,1-Dimethyl-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)but-3-enyl)carbaminsäuretert.-butylester wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 55 min gerührt. Es wurde Dichlormethan (13 ml) zugesetzt. Es wurde eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (16 ml) zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde bis pH 7 zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 436 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,10 und 1,11 (beide s, zusammen 6H); 2,85, 3,13, 3,15 und 3,50 (alle s, zusammen 6H); 5,89 und 5,97 (beide dd, zusammen 1H); 6,23 und 6,24 (beide d, zusammen 1H).
  • MS: 486,4; [M + 1]&spplus;.
  • HPLC: 36,62 min (A1)
  • 38,93 min (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation ausgehend von 0,5 M wässriger Essigsäure (50 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 6 (2R)-2-(N-(3-(1-Aminoethyl)benzoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)- N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid 3-(1-(N-tert.-Butoxycarbonyl)aminoethyl)benzoesäure
  • Ammoniumacetat (10,6 g, 138 mmol) wurde ausgehend von trockenem Ethanol (100 ml) eingedampft und in trockenem Methanol (100 ml) über Molekularsieben (3 Å, 3 g) erneut gelöst. Es wurde 3-Acetylbenzonitril (2,0 g, 13,8 mmol) zugesetzt. Nach 30 min bei Raumtemperatur wurde Natriumcyanborhydrid (0,87 g, 138 mmol) zugesetzt und die Reaktionsmischung wurde 18 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum aufkonzentriert und erneut in Wasser (100 ml) gelöst. Konzentrierte Salzsäure wurde bis pH 2 zugesetzt und die wässrige Lösung wurde mit Ethylacetat (2 · 100 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit festem Kaliumhydroxid auf pH 11 eingestellt und mit Dichlormethan (2 · 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und im Vakuum aufkonzentriert. Eine konzentrierte Lösung von Chlorwasserstoff in Ethylacetat (100 ml) wurde zugesetzt und die Lösung wurde im Vakuum aufkonzentriert. Der Rückstand wurde in Ethanol (25 ml) gelöst und es wurde Schwefelsäure (9 N, 25 ml) zugesetzt. Nach 16 h bei Raumtemperatur und 2 h bei Rückflusstemperatur wurde das Ethanol durch Eindampfen im Vakuum entfernt und die restliche wässrige Mischung wurde unter Verwendung von festem Kaliumhydroxid auf pH > 8 eingestellt. Di-tert.-butyldicarbonat (2,0 g), gelöst in Tetrahydrofuran (100 ml) wurde bei 0ºC zugesetzt. Nach 18 h bei Raumtemperatur wurde die Reaktionsmischung im Vakuum aufkonzentriert und erneut in Wasser (100 ml) gelöst. Feste Citronensäure wurde bis pH 5 zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde mit Dichlormethan (2 · 100 ml) extrahiert und die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und im Vakuum aufkonzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselgel (3 · 40 cm) unter Verwendung von Ethanol und Dichlormethan (1 : 9) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,1 g 3-(1-N-tert.-Butoxycarbonyl)aminoethyl)benzoesäure erhalten wurde. (1-(3-(N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbamoyl)phenyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • 3-(1-(tert.-Butyloxycarbonylamino)ethyl)benzoesäure (217 mg, 0,82 mmol) wurde in Dichlormethan (5 ml) und N,N-Dimethylformamid (3 ml) gelöst. Es wurde 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (111 mg, 0,82 mmol) zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (157 mg, 0,82 mmol) zugesetzt. Eine Lösung von (2R)-N-Methyl-2- (methylamino)-3-(2-naphthyl)-N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid (288 mg, 0,82 mmol) in Dichlormethan (3 rnl) wurde zugesetzt. Es wurde Ethyldiisopropylamin (0,14 ml, 0,82 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (80 ml) verdünnt und mit 10%-iger Natriumhydrogensulfatlösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 40 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (110 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 479 mg (1-(3-(N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)phenyl)- ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Peaks): d 1,43 (br, 9H); 5,91 und 6,02 (beide dd, zusammen 1H).
  • MS: 600,0 [M + H]&spplus;.
  • 1-(3-(N-Methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbamoyl)phenyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (479 mg, 0,80 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst und auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (2 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC 35 min gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (8 ml) verdünnt. Gesättigte Natriumhydrogencarbonat-Lösung (10 ml) wurde vorsichtig zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde bis pH 7 zugesetzt. Wasser wurde zugesetzt, bis eine klare Lösung erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt und die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (70 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 293 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Peaks): d 1,15 und 1,27 (beide d, zusammen 3H); 2,87 (s, 3H); 3,00 und 3,03 (beide s, zusammen 3H); 5,90 und 6,00 (beide dd, zusammen 1H).
  • MS: 500,0 [M + H]&spplus;.
  • HPLC: 34,30 (A1)
  • 36,85 (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation ausgehend von 0,5 N Essigsäure (50 ml) in ihr Acetatsalz umgewandelt. Beispiel 7 (2E)-5-Methyl-N-methyl-5-(methylamino)-N-((1R)-1-(N-methyl-N- phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-enamid N-Methyl-N-((3E)-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure-tert.- butylester
  • (2E)-5-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-5-methylhex-2-ensäure (122 mg, 0,48 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (2 ml) und Dichlormethan (2 ml) gelöst. Es wurde 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (65 mg, 0,48 mmol) zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (92 mg, 0,48 mmol) wurde zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-2- (Methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid (165 mg, 0,48 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,083 ml, 0,48 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 10 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 204 mg N-Methyl-N-((3E)-4- (N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)carbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 0,90 und 0,92 (beide s, zusammen 6H); 5,80 und 5,86 (t und dd, zusammen 1H); 6,12 und 6,21 (beide d, zusammen 1H); 6,80 (m, 1H); 7,00-7,85 (m, 12H).
  • N-Methyl-N-((3E)-4-(N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-phenethylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)carbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure-tert.- butylester (182 mg, 0,31 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC 20 min gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (SO ml) verdünnt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (10 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 15 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt.
  • Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (45 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak 100 : 10 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 80 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,00 und 1,06 (beide s, zusammen 6H); 2,25 und 2,31 (beide s, zusammen 3H); 2,76, 2,87 und 3,05 (alle s, zusammen 6 H); 5,77 und 5,85 (t und dd, zusammen 1H); 6,14 und 6,23 (beide d, zusammen 1 H); 6,78 (m, 1H); 7,00-7,90 (m, 12H).
  • HPLC 34,30 min (A1)
  • 36,28 min (B1)
  • MS: 486,0 ([M + 1]&spplus;)
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (50 ml) in ihr Acetatsalz umgewandelt. Beispiel 8 (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)propionamid 2-(2-Hydroxyphenyl)-N-methylacetamid
  • (2-Hydroxyphenyl)essigsäure (9,89 g, 63,7 mmol) und 1-Hydroxybenzotriazolhydrat (8,61 g, 63,7 mmol) wurden in N,N-Dimethylformamid (50 ml) und Dichlormethan (200 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N- (3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (8,67 g, 63,7 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 0ºC gerührt. Eine 8,0 M Lösung von Methylamin (39 ml, 318 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich langsam auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (600 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat (2 · 300 ml) gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung (300 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das rohe Produkt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (180 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 4,90 g 2-(2-Hydroxyphenyl)-N-methylacetamid erhalten wurden.
  • Schmp.: 105-106ºC (Ethylacetat/Heptan).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,82 (d, 3H); 3,56 (s, 2H); 6,20 (br, 1H); 6,83 (m, 1H); 7,00 (m, 2H); 7,18 (m, 1H); 9,85 (s, 1H). Ethyl-2-(2-((N-methylcarbamoyl)methyl)phenoxy)acetat
  • Kaliumcarbonat (2,81 g, 20,34 mmol) wurde zu einer Lösung von 2-(2- Hydroxyphenyl)-N-methylacetamid (3,36 g, 20,34 mmol) in Aceton (150 ml) zugesetzt. Ethylbromacetat (2,13 ml, 19,32 mmol) und Kaliumiodid (166 mg, 1,02 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 6 h unter Rückfluss erwärmt. Sie wurde 16 h bei Raumtemperatur stehengelassen. Der Feststoff wurde abfiltriert. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Dichlormethan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 5,00 g Ethyl-2-(2-((N-methylcarbamoyl)methyl)phenoxy)acetat erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,33 (t, 3H); 2,74 (d, 3H); 3,61 (s, 2H); 4,30 (q, 2H); 4,70 (s, 2H); 6,68 (br, 1H); 6,76 (d, 1H); 6,98 (t, 1H); 7,24 (t, 1H); 7,32 (d, 1H). 2-(2-(2-(Methylamino)ethyl)phenoxy)ethanol
  • Bei 0ºC wurde eine Lösung von Ethyl-2-(2-((N-methylcarbamoyl)- methyl)phenoxy)acetat (5,00 g, 19,9 mmol) in Tetrahydrofuran (75 ml) tropfenweise zu einer Suspension von Natriumborhydrid (2,26 g, 59,7 mmol) in Tetrahydrofuran (75 ml) zugesetzt. Eine Lösung von Iod (5,05 g, 19,9 mmol) in Tetrahydrofuran (150 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur erwärmt und 16 h unter Rückfluss erwärmt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt. Methanol (150 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der feste Rückstand wurde in 20%-iger wässriger Natriumhydroxid-Lösung/tert.-Butylmethylether (150 ml/150 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit tert.-Butylmethylether (3 · 150 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/10%-iges wässriges Ammoniak (zuerst: 100 : 10 : 1, dann 70 : 30 : 3) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,124 g 2-(2-(2- (Methylamino)ethyl)phenoxy)ethanol erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,40 (s, 3H); 2,82 (m, 2H); 2,92 (m, 2H); 3,05 (br, 2H); 3,94 (m, 2H); 4,10 (m, 2H); 6,87 (d, 1H); 6,92 (t, 1H); 7,17 (m, 2H). N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • Bei 0ºC wurde N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (558 mg, 2,91 mmol) zu einer Lösung von (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N- methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (959 g, 2,91 mmol) und 1-Hydroxy-7- azabenzotriazol (396 mg, 2,91 mmol) in N,N-Dimethylformamid (5 ml) und Dichlormethan (5 ml) gegeben. Die Lösung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von 2-(2-(2-(Methylamino)ethyl)phenoxy)ethanol (608 mg, 2,91 mmol) in Dichlormethan (5 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,50 ml, 2,91 mmol) wurden nacheinander zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (150 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Natriumhydrogensulfat-Lösung (70 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat- Lösung (150 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (110 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,02 g N-((1R)-1-(N-(2-(2- (2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurde.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,00, 1,22 und 1,29 (alle s, zusammen 9 H); 4,88, 5,02, 5,20 und 5,39 (t, m, q und t, zusammen 2H).
  • MS: 507,2 ([M + H]&spplus;). (2R)-N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)propionamid
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (4 ml) zu einer Lösung von N-((1R)-1-(N-(2-(2- (2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester (986 mg, 1,95 mmol) in Dichlormethan (4 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 3 h gerührt. Dichlormethan (50 ml) wurde zugesetzt. Eine gesättigte Lösung von Natriumhydrogencarbonat (30 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Wasser wurde zugesetzt, bis eine klare Lösung erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Dichlormethan/ Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 730 mg (2R)-N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)- phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,25 und 2,30 (beide s, zusammen 3H); 2,50 und 2,89 (beide s, zusammen 3H). (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • Bei 0ºC wurde N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (125 mg, 0,65 mmol) zu einer Lösung von (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5- methylhex-2-ensäure (158 mg, 0,65 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (88 mg, 0,65 mmol) in N,N-Dimethylformamid (3 ml) und Dichlormethan (3 ml) zugesetzt. Die Lösung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-(2- (2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)propionamid (265 mg, 0,65 mmol) in Dichlormethan (3 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,11 ml, 0,65 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (200 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (zuerst: 2 : 1 (500 ml), dann: 3 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 378 mg (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,32 und 1,40 (beide s, zusammen 9H); 2,91 und 2,97 (beide s, zusammen 3H); 3,02 und 3,05 (beide s, zusammen 3H);
  • 4,80 und 4,90 (beide t, zusammen 1H); 5,69 und 5,87 (beide dd, zusammen 1H); 6,05 und 6,22 (beide d, zusammen 1H).
  • (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester (347 mg, 0,55 mmol) wurde in Dichlormethan (3 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (3 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 0ºC gerührt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (6 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugegeben, bis pH 7 erreicht wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (15 g) unter Verwendung von Dichlormethan/ Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (zuerst: 100 : 10 : 1, dann 50 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 218 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,04 und 1,12 (beide s, zusammen 6H); 2,93, 2,99, 3,02 und 3,07 (alle s, zusammen 6H); 5,68 und 5,87 (beide dd, zusammen 1H); 6,05 und 6,25 (beide d, zusammen 1H).
  • MS: 532,2 ([M + H]&spplus;).
  • HPLC: 32,75 min (A1).
  • 33,82 min (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (50 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 9 (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2- naphthyl)-N-(2-(2-methylsulfonylaminophenyl)ethyl)propionamid N-Methyl-2-(2-nitrophenyl)acetamid
  • (2-Nitrophenyl)essigsäure (10,0 g, 55,21 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (15 ml) und Dichlormethan (50 ml) gelöst. 1-Hydroxybenzotriazolhydrat (7,46 g, 55,21 mmol) wurde zugegeben. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3- Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (10,58 g, 55,21 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei 0ºC 15 min gerührt. Eine 8,0 M Lösung von Methylamin in Ethanol (10,3 ml, 82,81 mmol) und Ethyldiisopropylamin (9,55 ml, 55,21 mmol) wurden nacheinander zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (180 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 40 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung (200 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (200 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 8,01 g N-Methyl-2-(2- nitrophenyl)acetamid erhalten wurden.
  • Schmp.: 147ºC (Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,80 (d, 3H); 3,82 (s, 2H), 5,85 (br, 1H); 7,40-7,65 (m, 3 H); 8,04 (d, 1H).
  • MS: 388,8 ([2M + H]&spplus;), 195,2 ([M + H]&spplus;).
  • C&sub9;H&sub1;&sub0;N&sub2;O&sub3; (194,2) berechn.: C 55,62H 5,19 N 14,43 gefunden: C 55,86 H 5,30 N 14,39 N-Methyl-N-(2-(2-nitrophenyl)ethyl)amin
  • Bei 0ºC wurde eine Lösung von N-Methyl-2-(2-nitrophenyl)acetamid (7,00 g, 36,05 mmol) in Tetrahydrofuran (410 ml) tropfenweise zu einer Suspension von Natriumborhydrid (1,63 g, 43,25 mmol) in Tetrahydrofuran (110 ml) zugesetzt. Eine Lösung von Iod (4,57 g, 18,02 mmol) in Tetrahydrofuran (150 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h unter Rückfluss erwärmt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt. Methanol (310 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in 20%-iger wässriger Natriumhydroxid-Lösung (300 ml) und tert.-Butylmethylether (200 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit tert.- Butylmethylether (2 · 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (160 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,28 g N-Methyl-N- (2-(2-nitrophenyl)ethyl)amin erhalten wurde.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) d 2,49 (s, 3H); 2,50 (br, 1H); 2,93 (t, 2H); 3,12 (t, 2H); 7,39 (m, 2H); 7,55 (m, 1H); 7,91 (d, 1H).
  • MS: 181,2 ([M + H]&spplus;). N-Methyl-N-(2-(2-nitrophenyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • Zu einer Lösung von N-Methyl-N-(2-(2-nitrophenyl)ethyl)amin (529 mg, 2,9 mmol) in einer 1 N wässrigen Natriumhydroxid-Lösung (2,9 ml, 2,9 mmol) und Tetrahydrofuran (3,0 ml) wurde eine Lösung von Di-tert.-butyldicarbonat (769 mg, 3,5 mmol) tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Sie wurde mit Wasser (50 ml) und Ethylacetat (50 ml) verdünnt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (3 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (50 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 924 mg N-Methyl-N-(2-(2-nitrophenyl)ethyl)carbaminsäuretert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) d 1,35 und 1,44 (beide br, zusammen 9H); 2,85 (br, 3H); 3,10 (br, 2H); 3,56 (m, 2H); 7,20-7,50 (br, 2H); 7,55 (t, 1H); 7,97 (br, 1H). N-(2-(2-Aminophenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • N-Methyl-N-(2-(2-nitrophenyl)ethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (924 mg, 3,3 mmol) wurde in Ethanol (60 ml) gelöst. 10% Palladium auf Kohlenstoff (200 mg) wurde zugesetzt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur bei 1 Atmosphäre 16 h hydriert. Der Katalysator wurde durch einen Celite-Bausch abfiltriert. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 723 mg N-(2-(2- Aminophenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,47 (s, 9H); 2,75 (t, 2H); 2,90 (s, 3H); 3,35 (br, 2H); 3,71 (br, 1H); 4,23 (br, 1H); 6,68 (m, 2H); 7,00 (d, 1H); 7,05 (t, 1H).
  • MS: 151,2 ([M + H]&spplus;). N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester
  • Eine Lösung von N-(2-(2-Aminophenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester (723 mg, 2,9 mmol) und Triethylamin (0,48 ml, 3,5 mmol) in Dichlormethan (10 ml) wurde auf -78ºC abgekühlt. Eine Lösung von Methansulfonylchlorid (0,22 ml, 2,9 mmol) in Dichlormethan (2 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (150 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (3 · 80 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat- Lösung (150 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 870 mg N-(2-(2- (Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) d 1,50 (s, 9H); 2,87 (m, 2H); 2,91 (s, 3H); 3,02 (s, 3H); 3,30 (br, 2H); 7,05-7,30 (m, 3H); 7,57 (br, 1H); 8,65 (br, 1H). N-(2-(2-(Methylamino)ethyl)phenyl)methansulfonamid
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (6 ml) einer Lösung von N-(2-(2- (Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (870 mg, 2,6 mmol) in Dichlormethan (6 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 50 min gerührt. Dichlormethan (24 ml) wurde zugesetzt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (34 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 308 mg N-(2-(2(Methylamino)ethyl)phenyl)methansulfonamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) d 2,51 (s, 3H); 2,84 (m, 2H); 2,94 (m, 2H); 3,00 (s, 3H); 5,70-6,70 (br, 1H); 7,03 (m, 1H); 7,12 (d, 1H); 7,22 (t, 1H); 7,53 (d, 1H). N-((1R)-1-(N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (444 mg, 1,35 mmol) und danach 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (184 mg, 1,35 mmol) wurden in N,N-Dimethylformamid (5 ml) und Dichlormethan (7 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (259 mg, 1,35 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von N-(2-(2- (Methylamino)ethyl)phenyl)methansulfonamid (308 mg, 1,35 mmol) wurde zugesetzt. Ethyldiisopropylamin (0,23 ml, 1,35 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (70 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (150 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 245 mg N-((1R)-1-(N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte) d 1,15, 1,20 und 1,35 (alle s, zusammen 9 H); 4,83, 5,06 und 5,42 (alle t, zusammen 1H); 8,07, 8,70 und 8,89 (alle br, zusammen 1H).
  • MS: 540,0 ([M + H]&spplus;). (2R)-N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3- (2-naphthyl)propionamid
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (1,5 ml) einer Lösung von N-((1R)-1-(N-(2-(2- (Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)- N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (245 mg, 0,45 mmol) in Dichlormethan (1,5 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 1,75 h bei 0ºC gerührt. Dichlormethan (5 ml) und eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (6 ml) wurden nacheinander zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (30 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 155 mg (2R)-N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3- (2-naphthyl)propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte) d 2,35 und 2,51 (beide s, zusammen 3H); 2,59 und 2,79 (beide s, zusammen 3H); 2,94 und 3,07 (beide s, zusammen 3H); 3,80 und 3,95 (dd und t, zusammen 1H). ((3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • Eine Lösung von (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (86 mg, 0,35 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (48 mg, 0,35 mmol) in N,N- Dimethylformamid (1,5 ml) und Dichlormethan (1,8 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (68 mg, 0,35 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N- methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)propionamid (155 mg, 0,35 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,06 ml, 0,35 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat- Lösung (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (40 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 174 mg ((3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2- (Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)- N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte) d 5,58 und 5,88 (t und dd, zusammen 1H); 6,16 und 6,28 (beide d, zusammen 1H); 6,87 (m, 1H).
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zu einer Lösung von ((3E)-4-(N-((1R)-1- (N-(2-(2-(Methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl-)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäuretert.-butylester (168 mg, 0,25 mmol) in Dichlormethan (2 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC 40 min gerührt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (6 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Wasser wurde zugesetzt, bis eine klare Lösung erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (15 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 82 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte) d 1,08 und 1,15 (beide s, zusammen 1H); 2,93 und 2,95 (beide s, zusammen 3H); 2,99 und 3,05 (beide s, zusammen 3H); 3,12 und 3,13 (beide s, zusammen 3H); 5,57 und 5,88 (t und dd, zusammen 1H); 6,18 und 6,30 (beide d, zusammen 1H).
  • MS: 565,0 ([M + H]&spplus;).
  • HPLC 32,08 min (A1)
  • 32,53 min (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 10 (2E)-5-Amino-N-((1R)-2-(biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-5-methyl-N-methylhex-2-enamid (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-2-(N-(tert.-butoxycarbonyl)-N-methylamino)propionsäure
  • (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-2-(tert.-butoxycarbonylamino)propionsäure (5,0 g, 14,7 mmol) wurde in Tetrahydrofuran (50 ml) gelöst. Iodmethan (7,3 ml, 117,3 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Eine 60%-ige Dispersion von Natriumhydrid in Mineralöl (2,0 g, 44,0 mmol) wurde portionsweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 8 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Tetrahydrofuran (100 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde auf 0ºC abgekühlt. Methanol (50 ml) und danach Wasser (20 ml) wurden tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in tert.-Butylmethylether (30 ml) und einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (50 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit 5%-iger wässriger Citronensäure auf pH 3 angesäuert. Sie wurde mit Ethylacetat (2 · 100 ml) extrahiert. Diese Extrakte wurden mit einer 5%-igen wässrigen Natriumthiosulfat-Lösung (2 · 100 ml) und mit Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen. Sie wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 3,96 g rohe (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-2-(N- (tert.-butoxycarbonyl)-N-methylamino)propionsäure erhalten wurden, die für die weiteren Schritte ohne Reinigung verwendet wurden.
  • ¹H-NMR (DMSO d&sup6;): d 1,24 und 1,29 (beide s, zusammen 9H); 2,64 und 2,66 (beide s, zusammen 3H); 2,95-3,40 (m, 2H); 4,67 und 4,85 (beide dd, zusammen 1H); 7,20-7,70 (m, 9H); 12,83 (br, 1H).
  • HPLC: 44,98 min (A1). N-((1R)-2-(Biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)- N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-2-(N-(tert.-butoxycarbonyl)-N-methylamino)propionsäure (753 mg, 2,12 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (289 mg, 2,12 mmol) wurden in N,N-Dimethylformamid (6 ml) und Dichlormethan (6 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (406 mg, 2,12 mmol) zugesetzt. Die Lösung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von N-Methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)amin (300 mg, 2,12 mmol) in Dichlormethan (6 ml) wurde zugesetzt. Ethyldiisopropylamin (0,37 ml, 2,12 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (300 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Natriumhydrogencarbonat-Lösung (60 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,03 g N-((1R)-2- (Biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurde.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,13, 1,21, 1,30, 1,36 (alle s, zusammen 9H); 4,79, 4,97 und 5,31 (dd, dd und m, zusammen 1H); 6,70-7,60 (m, 12H). (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-N-methyl-2-(methylamino)-N-(2-(2- thienyl)ethyl)propionamid
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (4 ml) einer Lösung von N-((1R)-2-(Biphenyl- 4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester (910 mg, 1,90 mmol) in Dichlormethan (4 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 3 h bei 0ºC gerührt. Eine gesättigte Lösung von Natriumhydrogencarbonat (8 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Wasser wurde zugesetzt, bis eine klare Lösung erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%- iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 674 mg (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-N-methyl-2-(methylamino)-N-(2-(2-thienylethyl)- propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,20 und 2,30 (beide s, zusammen 6H); 2,59 und 2,90 (beide s, zusammen 3H); 6,69, 6,78, 6,90, 7,12 und 7,20-7,60 (alle m, zusammen 12H). (3E)-4-(N-((1R)-2-(Biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)- ethyl)carbamoyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • Eine Lösung von (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (202 mg, 0,83 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (113 mg, 0,83 mmol) in N,N-Dimethylformamid (3 ml) und Dichlormethan (3 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (159 mg, 0,83 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 10 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-3-(Biphenyl-4-yl)-N-methyl-2-(methylamino)-N-(2- (2-thienyl)ethyl)propionamid (314 mg, 0,83 mmol) in Dichlormethan (3 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,14 ml, 0,83 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Natriumhydrogensulfat-Lösung (100 ml) gewaschen. Die wässrige Lösung wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten Natriumhydrogencarbonat-Lösung (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1 (500 ml), dann 2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 374 mg (3E)-4-(N-((1R)-2-(Biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,25 und 1,26 (beide s, zusammen 6H); 1,39 und 1,40 (beide s, zusammen 9H); 2,85, 2,89, 3,01 und 3,02 (alle s, zusammen 6H); 5,78 (m, 1H); 6,20 und 6,26 (beide d, zusammen 1H); 6,67-6,90, 7,10 und 7,20-7,60 (alle m, zusammen 14H).
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (3 ml) zu einer Lösung von (3E)-4-(N-((1R)-2- (Biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2-thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester in Dichlormethan (3 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 0ºC gerührt. Dichlormethan (30 ml) wurde zugesetzt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (10 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde bis pH 7 zugesetzt. Wasser (30 ml) wurde zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 15 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (50 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 152 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,09 und 1,22 (beide s, zusammen 6H); 2,21 und 2,27 (beide d, zusammen 2H); 2,85, 2,90, 3,07 und 3,08 (alle s, zusammen 6H); 5,78 (m, 1H); 6,20 und 6,26 (beide d, zusammen 1H); 6,65-6,95, 7,09 und 7,20-7,60 (alle m, zusammen 13H).
  • MS: 504,0 ([M + H]&spplus;).
  • HPLC 37,87 min (A1).
  • 38,52 min (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz umgewandelt. Beispiel 11 (2E)-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)- 2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methyl-5-methyl-5-(methylamino)hex-2-enamid N-((3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-5-methylhex-2-ensäure (133 mg, 0,52 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (2 ml) und Dichlormethan (2 ml) gelöst. 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (71 mg, 0,52 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (100 mg, 0,52 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 10 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-(2-(2-(2- Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)propionamid (262 mg, 0,52 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,09 ml, 0,52 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (30 ml) verdünnt und mit 10%-iger Natriumhydrogensulfat-Lösung (20 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung (30 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (100 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 261 mg N-((3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,25, 1,26, 1,32, 1,33, 1,36 und 1,43 (alle s, zusammen 15H); 2,61, 2,75, 2,90, 2,91, 3,02 und 3,04 (alle s, zusammen 9 H); 4,85 und 5,02 (beide t, zusammen 1H); 5,69 und 5,88 (beide dd, zusammen 1 H); 6,02 und 6,22 (beide d, zusammen 1H); 6,60-7,85 (m, 12).
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (2 ml) zu einer Lösung von N-((3E)-4-(N- ((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester (236 mg, 0,37 mmol) in Dichlormethan (2 ml) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 40 min bei 0ºC gerührt. Eine gesättigte Lösung von Natriumhydrogencarbonat (5 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugegeben, bis pH 7 erhalten wurde. Wasser (30 ml) und Dichlormethan (30 ml) wurden zugesetzt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 118 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,02 und 1,10 (beide s, zusammen 6H); 2,27 und 2,32 (beide s, zusammen 3H); 2,91, 2,98, 3,02 und 3,06 (alle s, zusammen 6H); 5,65 und 5,86 (beide dd, zusammen 1H); 6,10 und 6,25 (beide d, zusammen 1H); 6,55-7,90 (m, 12H).
  • MS: 546,0 ([M + H]&spplus;).
  • HPLC: 33,47 min (A1).
  • 34,25 min (B1).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 12 3-Aminomethyl-N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]benzamid [(1R)-1-(N-{2-[2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl]carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(tert.-Butoxycarbonylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (654 mg, 2,07 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (4 ml) und Dichlormethan (4 ml) gelöst. 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (282 mg, 2,07 mmol) wurde zugegeben. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (397 mg, 2,07 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von 2-(2-(2- (Methylamino)ethyl)phenoxy)ethanol (434 mg, 2,07 mmol) in Dichlormethan (4 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,36 ml, 2,07 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (70 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 539 mg [(1R)-1-(N-{2-[2-(2- Hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl]carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,39 und 1,41 (beide s, zusammen 9H); 2,60 und 2,94 (beide s, zusammen 3H); 5,45 und 5,50 (beide s, zusammen 1H). (2R)-2-Amino-N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methyl-3-(2- naphthyl)propionamid
  • Eine Lösung von [(1R)-1-(N-{2-[2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]carbaminsäure-tert.-butylester (519 mg, 1,85 mmol) in Dichlormethan (3 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (3 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC 40 min gerührt. Es wurde Dichlormethan (20 ml) zugesetzt. Eine gesättigte Lösung von Natriumhydrogencarbonat (10 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak gereinigt, wodurch 377 mg (2R)-2-Amino-N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methyl-3-(2- naphthyl)propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,73 und 2,85 (beide s, zusammen 3H); 3,50 (t, 1H); 7,60 und 7,65 (beide s, zusammen 1H). ((3-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethylcarbamoyl)phenyl)methyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • 3-(tert.-Butoxycarbonylaminomethyl)benzoesäure (113 mg, 0,45 mmol) und 7- Aza-1-hydroxybenzotriazol (61 mg, 0,45 mmol) wurden in N,N- Dimethylformamid (1 ml) und Dichlormethan (1 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (86 mg, 0,45 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-2-Amino-N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methyl-3-(2-naphthyl)propionamid (175 mg, 0,45 mmol) und Ethyldiisopropylamin (0,08 ml, 0,45 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 15 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (40 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 3 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 211 mg ((3-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethylcarbamoyl)phenyl)methyl)-carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,45 (s, 9H); 2,68 und 2,95 (beide s, zusammen 3H); 4,88 und 4,95 (beide br, zusammen 1H); 5,46 (m, 1H).
  • Eine Lösung von ((3-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethylcarbamoyl)phenyl)methyl)carbaminsäuretert.-butylester (193 mg, 0,31 mmol) in Dichlormethan (2 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (2 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (10 ml) verdünnt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (10 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (15 g) unter Verwendung von Dichlormethan/ Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 130 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,75 und 3,04 (beide s, zusammen 3H); 3,86 und 3,90 (beide s, zusammen 2H); 5,51 (m, 1H).
  • HPLC: 32,63 min (A1);
  • 39,5 min (B1).
  • MS: 525,8 ([M + H]&spplus;).
  • Für die biologische Untersuchung wurde in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 13 (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)amid {(3E)-4-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)- 2-(2-naphthyl)ethylcarbamoyl]-1,1-dimethylbut-3-enyl}carbaminsäure-tert.- butylester
  • (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (95 mg, 0,39 mmol) wurde in Dichlormethan (1 ml) und N,N-Dimethylformamid (1 ml) gelöst. 1- Hydroxy-7-azabenzotriazol (55 mg, 0,39 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (75 mg, 0,39 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-2-Amino-N-{2-[2-(2- hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methyl-3-(2-naphthyl)propionamid (155 mg, 0,39 mmol) in Dichlormethan (1 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,07 ml, 0,39 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (30 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (30 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat-Lösung (30 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (12 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 147 mg {(3E)-4-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethylcarbamoyl]-1,1-dimethylbut-3-enyl}carbaminsäure- tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,42 (s, 9H); 2,58 und 2,92 (beide s, zusammen 3H); 5,31 und 5,37 (beide q, zusammen 1H); 5,80 und 5,87 (beide d, zusammen 1H).
  • {(3E)-4-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)- 2-(2-naphthyl)ethylcarbamoyl]-1,1-dimethylbut-3-enyl}carbaminsäure-tert.- butylester (129 mg, 0,21 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (2 ml) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (10 ml) verdünnt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (10 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (25 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 71 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,13 und 1,14 (beide s, zusammen 6H); 2,24 ("t", 2H); 2,62 und 2,92 (beide s. zusammen 3H); 5,32 und 5,39 (beide q, zusammen 1H); 5,86 und 5,91 (beide d. zusammen 1H).
  • HPLC 31,92 min (A1).
  • 36,57 min (B1).
  • MS: 518,0 ((M + H]&spplus;).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 14 (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-{N-[2-(2-(benzolsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylamid N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester
  • N-(2-(2-Aminophenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (555 mg, 2,22 mmol) und Triethylamin (0,40 ml, 2,66 mmol) wurden in Dichlormethan (12 ml) gelöst und auf -78ºC abgekühlt. Eine Lösung von Benzolsulfonylchlorid (0,28 ml, 2,22 mmol) in Dichlormethan (3 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (40 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (20 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 15 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung (30 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (30 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 3 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 557 mg N-[2-(2-Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;), ausgewählte Werte): d 1,55 (br, 9 H); 2,82 (br, 3H); 8,80 (br, 1H). N-[2-(2-Methylamino)ethyl)phenyl]benzolsulfonamid
  • N-[2-(2-Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester (547 mg, 1,4 mmol) wurde in Dichlormethan (5 ml) gelöst. 3,1 N Chlorwasserstoff in Ethylacetat (3 ml, 9,3 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde bei Raumtemperatur 1 h gerührt. Es wurde ein weiterer Anteil 3,1 N Chlorwasserstoff in Ethylacetat (5 ml, 15,3 mmol) zugesetzt. Die Lösung wurde weitere 3,5 h gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (7 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak 50 : 10 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 521 mg N-[2-(2-Methylamino)ethyl)phenyl]benzolsulfonamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,42 (m, 2H), 2,50 (s, 3H); 2,82 (m, 2 H). N-((1R)-1-{N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2- (2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (517 mg, 1,57 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (214 mg, 1,57 mmol) wurden in Dichlormethan (6 ml) und N,N-Dimethylformamid (6 ml) gelöst. Die Mischung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (301 mg, 1,57 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von N-[2-(2- (Methylamino)ethyl)phenyl]benzolsulfonamid (457 mg, 1,57 mmol) in Dichlormethan (6 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,27 ml, 1,57 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Natriumhydrogensulfat-Lösung (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (25 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 785 mg N-((1R)-1-{N-[2-(2- Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 4,80, 5,05 und 5,43 (dd, t und t, zusammen 1H). (2R)-N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methyl-2-(methylamino)-3- (2-naphthyl)propionamid
  • Bei 0ºC wurde Trifluoressigsäure (4 ml) zu einer Lösung von N-((1R)-1-{N-[2- (2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2- naphthyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (647 mg, 1,08 mmol) in Dichlormethan (4 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 2,5 h bei 0ºC gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (15 ml) verdünnt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (15 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten worden war. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (2 · 15 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (20 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak 200 : 10 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 434 mg (2R)-N-[2-(2- (Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,37, 2,43, 2,52 und 2,75 (alle s, zusammen 6H); 3,72 und 3,89 (dd und t, zusammen 1H). {(3E)-4-[N-((1R)-1-{N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N- methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl]-1,1-dimethylbut-3- enyl}carbaminsäure-tert.-butylester
  • Bei 0ºC wurde N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (138 mg, 0,72 mmol) einer Lösung von (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-Smethylhex-2-ensäure (175 mg, 0,72 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (98 mg, 0,72 mmol) in Dichlormethan (3 ml) und N,N-Dimethylformamid (3 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methyl-2-(methylamino)-3- (2-naphthyl)propionamid (363 mg, 0,72 mmol) in Dichlormethan (3 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,13 ml) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 3d gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (60 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat (60 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (60 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (50 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 363 mg {(3E)-4-[N-((1R)-1-{N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)- phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl]- 1,1-dimethylbut-3-enyl}carbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,25 und 1,40 (beide m, zusammen 15 H); 2,85 und 2,86 (beide s, zusammen 3H); 3,12 und 3,18 (beide s, zusammen 3 H); 5,62 und 5,87 (t und dd, zusammen 1H); 6,20 und 6,31 (beide d, zusammen 1 H).
  • Eine Lösung von {(3E)-4-[N-((1R)-1-{N-[2-(2-(Phenylsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl]-1,1- dimethylbut-3-enyl}carbaminsäure-tert.-butylester (330 mg, 0,45 mmol) in Dichlormethan (3 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (3 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 40 min bei 0ºC gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (20 ml) verdünnt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (6 ml) wurde zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erreicht wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (20 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak 100 : 10 : 1 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 252 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,09 und 1,12 (beide s, zusammen 6H); 2,84 und 2,86 (beide s, zusammen 3H); 3,15 und 3,20 (beide s, zusammen 3H); 5,65 und 5,87 (t und dd, zusammen 1H); 6,22 und 6,32 (beide d, zusammen 1H).
  • HPLC 37,87 min (A1).
  • 40,23 min (B1).
  • MS: 627,2 ([M + H]&spplus;).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 15 2-Amino-N-(2-(2-(N-((2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N- methylamino)-3-(2-naphthyl)propionyl)-N-methylamino)ethyl)phenyl)acetamid ({2-[2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)ethyl]phenylcarbamoyl}methyl)carbaminsäure-((9-fluorenyl)methyl)ester
  • 2-(((9-Fluorenyl)methoxycarbonyl)amino)essigsäure (2,49 g, 2,79 mmol) wurde in Dichlormethan (40 ml) suspendiert. Die Suspension wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (802 mg, 4,19 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von N-(2-(2-Aminophenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester (698 mg, 2,79 mmol) in Dichlormethan (15 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Dichlormethan (100 ml) verdünnt und mit Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen. Die wässrige Lösung wurde mit Dichlormethan (2 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,412 g ({2-[2-(N- (tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)ethyl]phenylcarbamoyl}methyl)carbaminsäure-((9-fluorenyl)methyl)ester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,50 (br, 9H); 2,80 (m, 2H); 2,98 (br, 3 H); 3,22 (m, 2H); 4,25 (m, 3H); 4,40 (m, 2H); 6,32 (br, 1H); 9,20 (br, 1H). {[2-(2-(Methylamino)ethyl)phenylcarbamoyl]methyl}carbaminsäure-9H- ((fluoren-9-yl)methyl)ester
  • ({2-[2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)ethyl]phenylcarbamoyl}methyl)carbaminsäure-((9-fluorenyl)methyl)ester (1,342 g, 2,53 mmol) wurde in 3,0 M Chlorwasserstoff in Ethylacetat (10 ml) gelöst. Die Reaktionsmischung wurde 2 h bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde Diethylether (40 ml) zugesetzt. Das Präzipitat wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wodurch 857 mg rohes {[2-(2-(Methylamino)ethyl)phenylcarbamoyl]methyl}carbaminsäure-9H-((fluoren-9-yl)methyl)ester als Hydrochlorid erhalten wurden, das für den nächsten Schritt ohne Reinigung verwendet wurde.
  • ¹H-NMR (DMSO-d&sub6;, ausgewählte Werte): d 2,99 (br, 4H); 9,05 (br, 2H); 9,68 (br, 1H). N-{(1R)-1-[N-(2-{2-[2-((Fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)amino)- acetylamino]phenyl}ethyl)-N-methylcarbamoyl]-2-(2-naphthyl)-ethyl}-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)3-(2-naphthyl)-propionsäure (590 mg, 1,79 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (243 mg, 1,79 mmol) wurden in Dichlormethan (12 ml) und N,N-Dimethylformamid (6 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (343 mg, 1,79 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 25 min bei 0ºC gerührt. Das Hydrochlorid von {(2-(2- (Methylamino)ethyl)phenylcarbamoyl]methyl}carbaminsäure-9H-((fluoren-9- yl)methyl)ester (834 mg, 1,79 mmol) und Ethyldiisopropylamin (0,62 ml, 3,58 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (30 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat-Lösung (30 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (3 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (30 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (60 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 1,293 g N-{(1R)-1- [N-(2-{2-[2-((Fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)amino)acetylamino]phenyl} ethyl)-N- methylcarbamoyl]-2-(2-naphthyl)ethyl}-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurde.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d (1,25 und 1,30, beide br, zusammen 9 H); 2,85, 3,03 und 3,04 (alle s, zusammen 6H); 5,08 und 5,45 (beide t, zusammen 1H); 9,31 und 9,45 (beide s, zusammen 1H). [(2-{2-[N-Methyl-N-((2R)-2-methylamino-3-(2-naphthyl)propionyl)- amino]ethyl}phenylcarbamoyl)methyl]carbaminsäure-(fluoren-9-yl)methylester
  • N-{(1R)-1-[N-(2-{2-[2-((Fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)amino)- acetylamino]phenyl}ethyl)-N-methylcarbamoyl]-2-(2-naphthyl)-ethyl}-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester (1,18 g, 1,59 mmol) wurde in 3,0 M Chlorwasserstoff in Ethylacetat (8 ml) gelöst. Die Reaktionsmischung wurde 2,25 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde mit Diethylether (3 · 20 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet, wodurch 1,198 g rohes [(2-{2-[N-Methyl-N-((2R)-2-methylamino-3-(2- naphthyl)propionyl)amino]ethyl}-phenylcarbamoyl)methyl]carbaminsäure- (fluoren-9-yl)methylester als Hydrochlorid erhalten wurde, das für den nächsten Schritt ohne Reinigung verwendet wurde.
  • ¹H-NMR (DMSO-d&sub6;, ausgewählte Werte): d 4,41 und 4,67 (beide m, zusammen 1 H). (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-((((9-Fluorenyl)methoxycarbonyl)- amino)acetylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (200 mg, 0,82 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (112 mg, 0,82 mmol) wurden in Dichlormethan (4 ml) und N,N-Dimethylformamid (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (157 mg, 0,82 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Das Hydrochlorid von rohem [(2-{2-[N-Methyl-N-((2R)-2-methylamino-3- (2-naphthyl)propionyl)amino]ethyl}-phenylcarbamoyl)methyl]carbaminsäure- (fluoren-9-yl)methylester (553 mg, 0,82 mmol) und Ethyldiisopropylamin (0,28 ml, 1,64 mmol) wurden nacheinander zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (50 ml) verdünnt und mit 10%-iger wässriger Natriumhydrogensulfat- Lösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (50 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (40 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 265 mg (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-((((9H-9-Fluorenyl)methoxycarbonyl)amino)acetylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2- naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäure-tert.- butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 5,51 und 5,94 (t und dd, zusammen 1 H); 6,13 und 6,25 (beide d, zusammen 1H); 6,25 (br, 1H); 6,75 und 6,83 (beide m, zusammen 1H). (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Aminoacetylamino)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • Bei Raumtemperatur wurde Tris(2-aminoethyl)amin (2,99 ml, 19,8 mmol) einer Lösung von (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-((((9-Fluorenyl)methoxycarbonyl)amino)acetylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäuretert.-butylester (346 mg, 0,40 mmol) in Dichlormethan (2,8 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 1,2 h bei Raumtemperatur gerührt. Sie wurde mit Dichlormethan (40 ml) verdünnt und mit Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Natriumdihydrogenphosphat- Dikaliumhydrogenphosphat-Puffer (pH 6,4, 3 · 30 ml) und anschließend mit Kochsalzlösung (20 ml) gewaschen. Sie wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (40 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 185 mg (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- Aminoacetylamino)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3-enylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,14, 1,15, 1,23 und 1,24 (alle s, zusammen 6H); 1,39 und 1,40 (beide s, zusammen 9H); 2,90, 2,94, 3,02 und 3,10 (alle s, zusammen 6H); 5,64 und 5,90 (t und dd, zusammen 1H); 6,12 und 6,26 (beide d, zusammen 1H); 6,63 und 6,82 (beide m, zusammen 1H); 9,42 und 9,53 (beide br, zusammen 1H).
  • (3E)-4-(N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Aminoacetylamino)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-1,1-dimethylbut-3- enylcarbaminsäure-tert.-butylester (175 mg, 0,27 mmol) wurde in Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (2 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 25 min bei 0ºC gerührt. Dichlormethan (20 ml) und Ethanol (20 ml) wurden nacheinander zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum ohne Erwärmen entfernt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (40 ml) gelöst und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Die letzte Prozedur wurde wiederholt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (15 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak /(zuerst: 100 : 10 : 1, dann 100 : 20 : 2) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 128 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,03 und 1,12 (beide s, zusammen 6H); 2,92, 2,94, 3,01 und 3,12 (alle s, zusammen 6H); 5,62 und 5,90 (t und dd, zusammen 1H); 6,10 und 6,25 (beide d, zusammen 1H); 6,70 und 6,89 (beide m, zusammen 1H); 9,48 und 9,52 beide br, zusammen 1H).
  • HPLC: 7,15 min (H8).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt.
    • HPLC-Methode H8:
  • Die RP-Analyse wurde unter Verwendung von UV-Detektionen bei 214, 254, 276 und 301 nm an einer 4,6 mm · 150 mm-218TP54-C-18-Siliciumdioxid-Säule, die mit 1 ml/min bei 42ºC eluiert wurde, ausgeführt. Die Säule wurde mit S% Acetonitril, 85% Wasser und 10% einer Lösung von 0,5% Trifluoressigsäure in Wasser äquilibriert und durch einen linearen Gradienten von 5% Acetonitril, 85% Wasser und 10% einer 0,5%-igen Trifluoressigsäure-Lösung bis 90% Acetonitril und 10% einer 0,5%-igen Trifluoressigsäure-Lösung über 15 min eluiert. Beispiel 16 (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-(2-(2-(3- hydroxypropoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)propionamid 2-(2-Benzyloxyphenyl)-N-methylacetamid
  • 2-(2-Benzyloxyphenyl)essigsäure (15,0 g, 62 mmol) wurde in Dichlormethan (270 ml) und N,N-Dimethylformamid (70 ml) gelöst. 1-Hydroxybenzotriazol (8,37 g, 62 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3- Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (11,89 g, 62 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min gerührt. Eine 8,0 M Lösung von Methylamin in Ethanol (38,8 ml, 310 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (500 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat-Lösung (500 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 300 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (400 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Die zurückbleibenden Kristalle wurden mit einer Mischung von Ethylacetat/Heptan 1 : 4 (100 ml) gewaschen. Sie wurden im Vakuum getrocknet. Sie wurden in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (2 · 500 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 10,24 g 2-(2-Benzyloxyphenyl)-N-methylacetamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): d 2,57 und 2,58 (beide s, zusammen 3H); 3,44 (s, 2H); 5,60 und 5,61 (beide s, zusammen 2H); 6,89 (t, 1H); 7,03 (d, 1H); 7,19 (m, 2H); 7,30 (m, 1H); 7,38 (m, 2H); 7,45 (m, 2H); 7,69 (br, 1H). N-(2-(2-Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylamin
  • Bei 0ºC wurde eine Lösung von 2-(2-Benzyloxyphenyl)-N-methylacetamid (9,39 g, 36,8 mmol) in Tetrahydrofuran (150 ml) tropfenweise einer Suspension von Natriumborhydrid (1,67 g, 44,12 mmol) in Tetrahydrofuran (100 ml) zugesetzt. Nachdem die Zugabe abgeschlossen war, wurde eine Lösung von Iod (4,67 g, 18,39 mmol) in Tetrahydrofuran (200 ml) tropfenweise zugesetzt. Die Lösung wurde 16 h unter Rückfluss erwärmt. Sie wurde auf 0ºC abgekühlt. Methanol (200 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in einer wässrigen 20%-igen Natriumhydroxid- Lösung (200 ml) und tert.-Butylmethylether (200 ml) gelöst. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit tert.-Butylmethylether (3 · 75 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (400 g) unter Verwendung von Dichlormethan/ Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak als Elutionsmittel (100 : 10 : 1) gereinigt, wodurch 4,38 g N-(2-(2-Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylamin erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 2,40 (s, 3H); 2,70 (br, 1H); 2,87 (m, 4H); 5,07 (s, 2H); 6,89 (m, 2H); 7,18 (m, 2H); 7,35 (m, 5H). N-(2-(2-Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • Eine Lösung von Di-tert.-butyldicarbonat (3,80 g, 17,4 mmol) in Tetrahydrofuran (8,7 ml) wurde tropfenweise zu einer Lösung von N-(2-(2- Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylamin (3,82 g, 15,8 mmol) in Tetrahydrofuran (8,7 ml) und einer 1 N wässrigen Natriumhydroxid-Lösung (17,4 ml, 17,4 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Sie wurde mit Ethylacetat (200 ml) und Wasser (200 ml) verdünnt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (200 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (400 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (225 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan 1 : 4 als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 4,73 g N-(2-(2- Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,32 und 1,42 (beide br, zusammen 9H); 2,74 und 2,86 (beide br, zusammen 5H); 3,43 (t, 2H); 5,08 (s, 2H); 6,89 (m, 2H); 7,17 (br, 2H); 7,40 (m, 5H). N-(2-(2-Hydroxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • N-(2-(2-Benzyloxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (4,66 g, 13,65 mmol) wurde in Ethanol (35,6 ml) gelöst und wurde bei Raumtemperatur in Gegenwart von 10% Palladium auf Aktivkohle 16 h hydriert. Die Reaktionsmischung wurde durch einen Celite-Bausch filtriert. Die Celite wurde mit Ethylacetat (50 ml) gewaschen. Die flüssigen Phasen wurden gesammelt. Die Lösemittel wurden im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash- Chromatographie an Siliciumdioxid (300 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 2,84 g N-(2-(2- Hydroxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,45 (s, 9H); 2,86 (t, 2H), 2,90 (s, 3H); 3,34 (br, 2H); 6,81 (t, 1H); 6,87 (br, 1H), 7,03 (d, 1H), 7,12 (t, 1H). {2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • N-(2-(2-Hydroxyphenyl)ethyl)-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (702 mg, 2,79 mmol) wurde in N,N-Dimethylformamid (6 ml) gelöst. Kaliumcarbonat (1,93 g, 13,97 mmol) und Caesiumchlorid (24 mg, 0,14 mmol) wurden zugesetzt. 3-Brom-1-propanol (0,28 ml, 3,07 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 80ºC 16 h gerührt. Sie wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Ethylacetat (75 ml) und Wasser (75 ml) verdünnt. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat-Lösung (70 ml) und einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (70 ml) gewaschen. Sie wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (80 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 606 mg {2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbaminsäure-tert.- butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,39 (br, 9H); 2,06 (m, 2H); 2,82 (br, 5H); 3,45 (br, 2H); 3,90 (br, 2H); 4,14 (t, 2H); 6,85 (m, 2H); 7,09 (br, 1H); 7,17 (t, 1H). 3-[2-(2-Methylaminoethyl)phenoxy]propan-1-ol
  • {2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (0,587 g, 1,90 mmol) wurde in Dichlormethan (5 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. Es wurde Trifluoressigsäure (5 ml) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 0ºC gerührt. Es wurde Dichlormethan (50 ml) zugesetzt. Eine gesättigte wässrige Natriumhydrogencarbonat-Lösung (50 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erreicht wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Lösung wurde mit Dichlormethan (3 · 70 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit einer 20%- igen wässrigen Natriumhydroxidlösung bis zu pH 14 basisch gemacht. Sie wurde mit tert.-Butylmethylether (3 · 100 ml) extrahiert. Die tert.-Butylmethylether- Extrakte wurden vereinigt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 227 mg rohes 3-[2-(2-Methylaminoethyl)phenoxy]propan-1-ol erhalten wurden. Das Rohprodukt wurde in dem nächsten Schritt ohne weitere Reinigung verwendet.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,19 (s, 1H); 2,03 (m, 2H); 2,25 (br, 1H); 2,39 (s, 3H); 2,83 (m, 4H); 3,87 (m, 2H); 4,10 (m, 2H); 5,90 (m, 2H); 7,15 (m, 2H). N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl]-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester
  • (2R)-2-(N-(tert.-Butoxycarbonyl)-N-methylamino)-3-(2-naphthyl)propionsäure (357 mg, 1,08 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (148 mg, 1,08 mmol) wurden in N,N-Dimethylformamid (2 ml) und Dichlormethan (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'- ethylcarbodiimid-hydrochlorid (208 mg, 1,08 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von 3-[2-(2- Methylaminoethyl)phenoxy]propan-1-ol (227 mg, 1,08 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,2 ml, 1,08 mmol) wurden zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (100 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat (100 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat (100 ml) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (30 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (2 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 383 mg N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)- phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]-N- methylcarbaminsäure-tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 0,98, 1,05, 1,18 und 1,26 (alle s, zusammen 9H); 4,28, 4,98, 5,18 und 5,32 (m, m, dd und t, zusammen 1H). (2R)-N-(2-(2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2- naphthyl)propionamid
  • Eine Lösung von N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-naphthyl)ethyl]-N-methylcarbaminsäure-tert.-butylester (383 mg, 0,74 mmol) in Dichlormethan (4 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (4 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 105 min bei 0ºC gerührt. Dichlormethan (40 ml) wurde zugesetzt. Eine gesättigte wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (40 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 60 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (30 g) unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 216 mg (2R)-N-(2-(2-(3-Hydroxypropoxy)- phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)-propionamid erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 2,00 (m, 2H); 2,12 und 2,19 (beide s, zusammen 3H); 2,47 und 2,91 (beide s, zusammen 3H). ((3E)-4-N-{[1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-1,1-dimethylbut-3- enyl)carbaminsäure-tert.-butylester
  • (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (125 mg, 0,514 mmol) und 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol (70 mg. 0,514 mmol) wurden in Dichlormethan (2 ml) und N,N-Dimethylformamid (2 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt. N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimidhydrochlorid (99 mg, 0,514 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 20 min bei 0ºC gerührt. Eine Lösung von (2R)-N-(2-(2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-2-(methylamino)-3-(2-naphthyl)propionamid (216 mg, 0,514 mmol) in Dichlormethan (2 ml) und Ethyldiisopropylamin (0,09 ml, 0,514 mmol) wurden zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 16 h gerührt, während sie sich auf Raumtemperatur erwärmte. Sie wurde mit Ethylacetat (70 ml) verdünnt und mit einer 10%-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogensulfat-Lösung (70 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 40 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid (15 g) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (3 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 270 mg ((3E)- 4-N-{[1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2- (2-naphthyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure- tert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 1,05, 1,11, 1,34 und 1,41 (alle s, zusammen 15H); 2,82, 2,90 und 3,02 (alle s, zusammen 6H); 5,46 und 5,83 (dd und t, zusammen 1H); 5,95 und 6,20 (beide d, zusammen 1H); 6,45 (m, 1H).
  • Eine Lösung von ((3E)-4-N-{[1R)-1-(N-{2-[2-(3-Hydroxypropoxy)- phenyl]ethyl}-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}- 1,1-dimethylbut-3-enyl)carbaminsäure-tert.-butylester (176 mg, 0,27 mmol) in Dichlormethan (2 ml) wurde auf 0ºC abgekühlt. Trifluoressigsäure (2 ml) wurde zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC 35 min gerührt. Dichlormethan (20 ml) wurde zugesetzt. Eine gesättigte Lösung von Natriumhydrogencarbonat (30 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Festes Natriumhydrogencarbonat wurde zugesetzt, bis pH 7 erhalten wurde. Die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Dichlormethan (3 · 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Siliciumdioxid unter Verwendung von Dichlormethan/Methanol/25%-iges wässriges Ammoniak (100 : 10 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, wodurch 64 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, ausgewählte Werte): d 0,98, 0,99, 1,10 und 1,11 (alle s, zusammen 6H); 2,82, 2,85, 2,91 und 3,03 (alle s, zusammen 6H); 5,47 und 5,84 (beide dd, zusammen 1H); 5,95 und 6,19 (beide d, zusammen 1H); 6,55 (m, 1 H).
  • HPLC: 32,57 min (A1)
  • 34,50 min (B1).
  • MS: 546,0 ([M + H]&spplus;).
  • Für die biologische Untersuchung wurde die in der Überschrift angegebene Verbindung durch Lyophilisation mit 0,5 M Essigsäure (40 ml) in ihr Acetatsalz überführt. Beispiel 17 (3R)-4-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-3-((2-naphthyl)methyl)-1- phenethylpiperazin-2-on (2R)-2-((2-(tert.-Butoxycarbonylamino)ethyl)amino)-3-(2-naphthyl)propionsäuremethylester
  • (2R)-2-Amino-3-(2-naphthyl)propionsäure (5,0 g, 23 mmol) wurde Methanol (150 ml) zugesetzt und Thionylchlorid (2,0 ml; 23 mmol) wurde tropfenweise zugesetzt und die Mischung wurde über Nacht gerührt und dann 2,5 h unter Rückfluss gekocht. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde in einer Mischung von Methanol (95 ml) und Essigsäure (5 ml) gelöst. (2- Oxoethyl)carbaminsäure-tert.-butylester (3,4 g, 23 mmol, hergestellt wie in Dueholm et al. Org. Prep. Proced. Int. (1993), 457), Natriumcyanborhydrid (1,9 g, 31 mmol) und Molekularsiebe (50 g, Fluka, 3Å) wurden zugesetzt und die Mischung wurde über Nacht stehengelassen. Die Mischung wurde filtriert und das Filtrat wurde Wasser (200 ml) hinzugesetzt und mit Methylenchlorid (3 · 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde einer Chromatographie an Siliciumdioxid (3 · 30 cm) unterzogen, wodurch 3,55 g (2R)-2-((2-(tert.-Butoxycarbonylamino)ethyl)amino)-3-(2-naphthyl)propionsäuremethylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;): d 1,39 (s, 9H); 2,56 (m, 1H); 2,75 (m, 1H); 3,09 (m, 3H); 3,59 (m, 1H); 3,65 (s, 3H); 7,28-7,81 (7 arom. H). (3R)-2-((2-Naphthyl)methyl)piperazin-2-on
  • (2R)-2-((2-(tert.-Butoxycarbonylamino)ethyl)amino)-3-(2-naphthyl)propionsäuremethylester (3,4 g, 9,1 mmol) wurde 1 h in einer Mischung aus TFA (5 ml) und Methylenchlorid (5 ml) gerührt. Die flüchtigen Substanzen wurden im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde in einer Mischung von Wasser (40 ml) und Methanol (100 ml) gelöst. Natriumhydrogencarbonat (2,3 g) wurde zugesetzt und die Mischung wurde über Nacht gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde in Wasser (40 ml) gelöst und mit Ethylacetat (10 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 1,96 g (3R)- 3-((2-Naphthyl)methyl)piperazin-2-on erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; ausgewählte Peaks für Hauptrotamer): d 2,95 (m, 1H); 3,05 (m, 2H); 3,24 (m, 1H); 3,39 (m, 1H); 3,59 (dd, 1H); 3,72 (dd, 1H). (2R)-2-(2-Naphthyl)methyl-3-oxo-4-phenethylpiperazin-1-carbonsäure-tert.- butylester
  • (3R)-3-((2-Naphthyl)methyl)piperazin-2-on (1,9 g; 7,9 mmol) und Di-tert.- butyldicarbonat (2,1 g; 9,5 mmol) wurden in einer Mischung von THF (20 ml) und wässrigem Natriumhydroxid (1 M, 8 ml) suspendiert und über Nacht gerührt. Das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt und Wasser (30 ml) wurde zugesetzt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 · 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in einer Mischung von DMSO (15 ml) und Kaliumhydroxid (1,3 g) gelöst. (2-Bromethyl)benzol (2,2 g, 11 mmol) wurde zugesetzt und die Mischung wurde 1 h gerührt. Wasser (30 ml) und Methylenchlorid (60 ml) wurden zugesetzt. Die organische Phase wurde mit Wasser (5 · 10 ml) gewaschen und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde einer Chromatographie an Siliciumdioxid (3 · 40 cm) unter Verwendung von Ethylacetat/Heptan (1 : 2) als Elutionsmittel unterzogen, wodurch 1,25 g (2R)-2-(2-Naphthyl)methyl-3-oxo-4-phenethylpiperazin-1-carbonsäuretert.-butylester erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; ausgewählte Peaks für Hauptrotamer): d 1,15 (s, 9H); 2,76 (t, 2 H); 3,39 (t, 3H);
  • (2R)-2-(2-Naphthyl)methyl-3-oxo-4-phenethylpiperazin-1-carbonsäure-tert.- butylester (1,2 g, 2,7 mmol) wurde in einer Mischung von TFA (5 ml) und Methylenchlorid (5 ml) gelöst und 15 min gerührt. Methylenchlorid (30 ml) und wässriges Natriumhydrogencarbonat (gesättigt) wurden bis pH 8 zugesetzt. Die Mischung wurde mit Methylenchlorid (3 · 10 ml) extrahiert und die vereinigten wässrigen Phasen wurden getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Ein Teil des Rückstands (400 mg, 1,2 mmol) wurde einer Mischung von (2E)-5-(tert.-Butoxycarbonylamino)-5-methylhex-2-ensäure (282 mg; 1,2 mmol); HOAt (158 mg; 1,2 mmol), EDAC (245 mg; 1,3 mmol) und DIEA (150 mg; 1,2 mmol) zugesetzt und über Nacht gerührt. Es wurde Methylenchlorid (50 ml) zugesetzt und die Mischung wurde mit wässrigem Natriumhydrogensulfat (10%, 50 ml); wässrigem Natriumhydrogencarbonat (gesättigt; 50 ml) und Wasser (50 ml) gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde einer Chromatographie an Siliciumdioxid (2 · 20 cm) unterzogen und der Rückstand wurde in einer Mischung von TFA (2 ml) und Methylenchlorid (2 ml) gelöst und 5 min gerührt. Methylenchlorid und eine wässrige Lösung von Natriumhydrogencarbonat (ges.) wurde bis zu pH 8 zugesetzt. Die Mischung wurde mit Methylenchlorid (2 · 10 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösemittel wurde im Vakuum entfernt, wodurch 310 mg der in der Überschrift angegebenen Verbindung erhalten wurden.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; ausgewählte Peaks für Hauptrotamer): d 0,99 (s, 6H); 4,51 (dd, 1H); 5,61 (d, 1H); 6,56 (m, 1H).
  • HPLC: (Methode A1): Rt = 32,47 min
  • PDMS: m/z 470,5 (M + H)&spplus;.

Claims (22)

  1. Verbindung der allgemeinen Formel VI
    Formel VI,
    worin A²
    oder R³³-NH-(CR³&sup4;R³&sup5;)p-(CH&sub2;)m-M-(CHR³&sup6;)o-(CH&sub2;)n- ist,
    wobei R²&sup9;, R³&sup0;, R³¹, R³², R³³, R³&sup4;, R³&sup5; und R³&sup6; unabhängig voneinander Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl gegebenenfalls substituiert mit Halogen, Amino, Hydroxyl oder Aryl sind;
    R³³ und R³&sup4;, R³³ und R³&sup5; oder R³&sup4; und R³&sup5; gegebenenfalls -(CH&sub2;)i-Z-(CH&sub2;)j-, worin i und j unabhängig voneinander 1 oder 2 sind und Z -O-, -S- oder eine Valenzbindung ist, bilden können;
    n, m und q unabhängig voneinander 0, 1, 2 oder 3 sind;
    o und p unabhängig voneinander 0 oder 1 sind;
    M-CR³&sup7;=CR³&sup8;-, -O- oder -S- ist;
    R³&sup7; und R³&sup8; unabhängig voneinander Wasserstoff oder gegebenenfalls mit Aryl substituiertes C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl sind;
    D Wasserstoff, -O-(CH&sub2;)k-R5a,
    ist, worin R&sup5;, R&sup6;, R&sup7;, R&sup8; und R&sup9; unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Aryl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy sind;
    R5a Wasserstoff, gegebenenfalls mit Halogen oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl substituiertes Aryl oder gegebenenfalls mit Halogen oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl substituiertes C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist,
    k 0, 1, 2 oder 3 ist; E Wasserstoff, -O-(CH&sub2;)-R10a,
    ist, worin R¹&sup0;, R¹¹, R¹², R¹³ und R¹&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Aryl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl-, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkoxy, -CONR¹&sup5;R¹&sup6;,
    -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;SO&sub2;R¹&sup7;, -(CH&sub2;)vNR¹&sup5;COR¹&sup6;, -(CH&sub2;)v-OR¹&sup7;, -(CH&sub2;)v-OCOR¹&sup6;, - CH(R¹&sup5;)R¹&sup6;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;-CS-NR¹&sup6;R¹&sup8;, -(CH&sub2;)v-NR¹&sup5;-CO-NR¹&sup6;R¹&sup8;,
    worin
    X¹ -N(R¹&sup9;)-, -O- oder -S- ist,
    X² -C(R²&sup0;)= oder -N= ist,
    X³ -C(R²¹)= oder -N= ist,
    X&sup4; -C(R²²)= oder N= ist,
    G² Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist,
    R¹ Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist,
    R² Wasserstoff, -C(=O)-R&sup5;&sup4; oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist, worin R&sup5;&sup4; Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl ist;
    R³ und R&sup4; zusammen genommen werden, wodurch sie =O bilden;
    b 0, 1, 2 oder 3 ist;
    oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
  2. 2. Verbindung nach Anspruch 1, worin A²
    R³³-NH-(CR³&sup4;R³&sup5;)p-(CH&sub2;)m-M-(CHR³&sup6;)o-(CH&sub2;)n- ist.
  3. 3. Verbindungen nach Anspruch 1, worin A²
    ist.
  4. 4. Verbindung nach Anspruch 1, worin A²
    ist.
  5. 5. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4, worin D
    ist.
  6. 6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4, worin D
    ist.
  7. 7. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-6, worin E
    ist.
  8. 8. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-6, worin E
    ist.
  9. 9. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-8, worin G² Wasserstoff oder Methyl ist.
  10. 10. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-9, worin R¹ Wasserstoff oder Methyl ist.
  11. 11. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-10, worin R² Wasserstoff, - C(=O)-CH&sub3; oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist.
  12. 12. Verbindung nach einem der Ansprüche 1-11, worin b 0 oder 1 ist.
  13. 13. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-phenethylamid oder dem Trifluoracetatsalz,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylami-no)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-(2-(2-(methylsulfonylamino)phenyl)ethyl)amid,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylami-no)-3-(2- naphthyl)propionsäure-N-methyl-N-(2-(2-thienyl)-ethyl)amid,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-((2R)-2-Hydroxypropylamino)-5-methylhex-2-enoyl)- N-methylamino)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-N-phenethylpropionamid oder dem Trifluoracetatsalz,
    (2E)-5-Amino-5-methyl-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-en-amid,
    (2E)-5-Methyl-5-(methylamino)-N-methyl-N-((1R)-1-(N-me-thyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)-ethyl)hex-2-enamid,
    (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N- (3-phenylpropyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethy1)-amid,
    (2R)-2-(N-(3-(1-Aminoethyl)benzoyl)-N-methylamino)-N-methyl-3-(2- naphthyl)-N-(2-(2-thienyl)ethyl)propionamid,
    (2E)-5-Methyl-N-methyl-5-(methylamino)-N-((1R)-1-(N-me-thyl-N- phenethylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)hex-2-en-amid,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N-(2- (2-(2-hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)-propionamid,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylamino)-N- methyl-3-(2-naphthyl)-N-(2-(2-methylsulfonylaminophenyl)ethyl)- propionamid,
    (2E)-5-Amino-N-((1R)-2-(biphenyl-4-yl)-1-(N-methyl-N-(2-(2- thienyl)ethyl)carbamoyl)ethyl)-5-methyl-N-methylhex-2-enamid,
    (2E)-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2-Hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)-N-methyl-5-methyl-5- (methylamino)hex-2-enamid,
    3-Aminomethyl-N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthy1)ethyl]benzamid,
    (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)- N-methylamid,
    (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-{N-[2-(2-(benzolsulfonylamino)phenyl)ethyl]-N-methylcarbamoyl}-2-(2- naphthyl)ethyl)-N-methylamid,
    2-Amino-N-(2-(2-(N-((2R)-2-(N-((2E)-5-amino-5-methylhex-2-enoyl)-N- methylamino)-3-(2-naphthyl)propionyl)-N-methylamino)ethyl)phenyl)acetamid,
    (2R)-2-(N-((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)-N-methylami-no)-N-(2- (2-(3-hydroxypropoxy)phenyl)ethyl)-N-methyl-3-(2-naphthyl)- propionamid,
    3-Aminomethyl-N-[(1R)-1-(N-{2-[2-(2-hydroxyethoxy)phenyl]-ethyl}-N- methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl]benzamid und
    (2E)-5-Amino-5-methylhex-2-ensäure-N-((1R)-1-(N-(2-(2-(2- hydroxyethoxy)phenyl)ethyl)-N-methylcarbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)amid; oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, wie das Acetatsalz.
  14. 14. Pharmazeutische Zusammensetzung, die als einen Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  15. 15. Zusammensetzung nach Anspruch 14 in Einheitsdosierungsform, umfassend 10 bis 200 mg der Verbindung nach einem der Ansprüche 1-12 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon.
  16. 16. Pharmazeutische Zusammensetzung zum Stimulieren der Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse, wobei die Zusammensetzung als einen Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  17. 17. Pharmazeutische Zusammensetzung für eine Verabreichung an Tiere, um deren Wachstumsgeschwindigkeit und -ausmaß zu erhöhen, um deren Milch- und Wollproduktion zu erhöhen oder für die Behandlung von Krankheiten, wobei die Zusammensetzung als einen Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel umfasst.
  18. 18. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 14-17 für eine orale, nasale, transdermale, pulmonare oder parenterale Verabreichung.
  19. 19. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung eines Arzneimittels.
  20. 20. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung eines Arzneimittels zum Stimulieren der Freisetzung von Wachstumshormon aus der Hypophyse.
  21. 21. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung eines Arzneimittels für eine Verabreichung an Tiere, um deren Wachstumsgeschwindigkeit und -ausmaß zu erhöhen, um deren Milch- und Wollproduktion zu erhöhen, oder für die Behandlung von Krankheiten.
  22. 22. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-13 oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung einer Stimulierung einer Wachstumshormonfreisetzung bei älteren Menschen; Prävention von katabolischen Nebenwirkungen von Glucocorticoiden, Prävention und Behandlung von Osteoporose, Stimulierung des Immunsystems, Beschleunigung der Wundheilung, Beschleunigung der Knochenbruchreparatur, Behandlung von Wachstumsverzögerungen, Behandlung von Nierenversagen oder -insuffizienz, die aus einer Wachstumsverzögerung resultieren, Behandlung von physiologischem Kleinwuchs, einschließlich Kindern mit Wachstumshormonmangel, und Kleinwuchs, der mit chronischen Erkrankungen verbunden ist, Behandlung von Obesität und einer mit Obesität verbundenen Wachstumsverzögerung, Behandlung von Anorexie, Behandlung von NIDDM, Behandeln einer Wachstumsverzögerung, die mit dem Prader- Willi-Syndrom und Turner'-Syndrom verbunden ist; Beschleunigen der Genesung und Verringerung des Krankenhausaufenthalts von Verbrennungspatienten; Behandlung von intrauteriner Wachstumsverzögerung, Skelettdysplasie, Hypercortisolismus und Cushing'-Syndrom; Induktion einer pulsierenden Wachstumshormonfreisetzung; Ersetzen von Wachstumshormon bei unter Stress stehenden Patienten, Behandlung von Osteochondrodysplasien, Noonan'-Syndrom, Schizophrenie, Depressionen, Alzheimer'-Krankheit, verzögerter Wundheilung und psychosozialer Deprivation, Behandlung von Lungendysfunktion und Abhängigkeit von Beatmungsgeräten, Abschwächung der Proteinkatabolismusreaktionen nach einem größeren chirurgischen Eingriff, Verringern von Kachexie und Proteinverlust aufgrund von chronischen Erkrankungen, wie Krebs oder AIDS; Behandlung von Hyperinsulinämie, einschließlich Nesidioblastose, ergänzende Behandlung zur Ovulationsinduktion; zur Stimulierung der Thymusentwicklung und zur Verhinderung der mit dem Alter zusammenhängenden Abnahme der Thymusfunktion, Behandlung von Patienten mit Immunsuppression, Verbesserung der Muskelfestigkeit bzw. -stärke, Mobilität, Beibehaltung der Hautdicke, Stoffwechselhomöostase, Nierenhomöostase bei gebrechlichen älteren Menschen, Stimulierung von Osteoblasten, Knochenumbau und Knorpelwachstum, Stimulierung des Immunsystems bei Begleit- oder Haustieren und Behandlung von Alterungserkrankungen bei Begleit- oder Haustieren, Wachstumsförderer bei landwirtschaftlichen Nutztieren und Stimulierung des Wollwachstums bei Schafen.
DE69713109T 1996-07-22 1997-07-17 Verbindungen mit wachstumshormon freisetzenden eigenschaften Expired - Lifetime DE69713109T2 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK80396 1996-07-22
PCT/DK1997/000314 WO1998003473A1 (en) 1996-07-22 1997-07-17 Compounds with growth hormone releasing properties

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE69713109D1 DE69713109D1 (de) 2002-07-11
DE69713109T2 true DE69713109T2 (de) 2003-01-02

Family

ID=8097747

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE69734215T Expired - Lifetime DE69734215T2 (de) 1996-07-22 1997-07-17 Verbindungen mit Wachstumshormon-freisetzenden Eigenschaften
DE69713109T Expired - Lifetime DE69713109T2 (de) 1996-07-22 1997-07-17 Verbindungen mit wachstumshormon freisetzenden eigenschaften

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE69734215T Expired - Lifetime DE69734215T2 (de) 1996-07-22 1997-07-17 Verbindungen mit Wachstumshormon-freisetzenden Eigenschaften

Country Status (8)

Country Link
US (3) US5922770A (de)
EP (2) EP0923539B1 (de)
JP (1) JP4425992B2 (de)
AT (2) ATE218537T1 (de)
AU (1) AU3434697A (de)
DE (2) DE69734215T2 (de)
WO (1) WO1998003473A1 (de)
ZA (1) ZA976371B (de)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6127341A (en) * 1997-06-20 2000-10-03 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
AU7906998A (en) * 1997-06-20 1999-01-04 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
SI1077941T1 (sl) * 1998-05-11 2010-01-29 Novo Nordisk As Spojine, ki imajo lastnost sproščanja rastnega hormona
TW450954B (en) * 1998-05-14 2001-08-21 Pharmacia & Amp Upjohn Company Phenylsulfonamide-phenylethylamines useful as dopamine receptors
CA2334315C (en) * 1998-06-30 2011-07-26 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6919315B1 (en) 1998-06-30 2005-07-19 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6358951B1 (en) 1998-08-21 2002-03-19 Pfizer Inc. Growth hormone secretagogues
EP1930021A3 (de) 1999-02-18 2008-06-18 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Neue Amidderivate als Wachstumshormonssekretagoge
UA73530C2 (uk) * 1999-11-10 2005-08-15 Ново Нордіск А/С Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту
US6992081B2 (en) 2000-03-23 2006-01-31 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
AU2001252958A1 (en) 2000-03-23 2001-10-03 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods to treat alzheimer's disease
US6613801B2 (en) * 2000-05-30 2003-09-02 Transtech Pharma, Inc. Method for the synthesis of compounds of formula I and their uses thereof
DE60140285D1 (de) 2000-05-31 2009-12-10 Pfizer Prod Inc Verwendung von Wachstumshormonsekretagoga zur Förderung der Beweglichkeit des Verdauungstrakts
EP1666452A2 (de) 2000-06-30 2006-06-07 Elan Pharmaceuticals, Inc. Verbindungen zur Behandlung der Alzheimerischen Krankheit
US20030096864A1 (en) * 2000-06-30 2003-05-22 Fang Lawrence Y. Compounds to treat alzheimer's disease
ATE302751T1 (de) 2000-06-30 2005-09-15 Elan Pharm Inc Verbindungen zur behandlung der alzheimerischen krankheit
US6846813B2 (en) * 2000-06-30 2005-01-25 Pharmacia & Upjohn Company Compounds to treat alzheimer's disease
PE20020276A1 (es) 2000-06-30 2002-04-06 Elan Pharm Inc COMPUESTOS DE AMINA SUSTITUIDA COMO INHIBIDORES DE ß-SECRETASA PARA EL TRATAMIENTO DE ALZHEIMER
ATE327986T1 (de) * 2001-02-16 2006-06-15 Allelix Neuroscience Inc Thiophen substituierte amin derivate als glyt-1 inhibitoren
AU2002245591B2 (en) * 2001-03-05 2007-05-17 Transtech Pharma, Inc. Carboxamide derivatives as therapeutic agents
CA2440037C (en) * 2001-03-05 2010-02-16 Transtech Pharma, Inc. Benzimidazole derivatives for modulating the rage receptor
US6982264B2 (en) * 2001-06-27 2006-01-03 Elan Pharmaceuticals, Inc. Substituted alcohols useful in treatment of Alzheimer's disease
US20070213407A1 (en) * 2001-06-29 2007-09-13 Elan Pharmaceuticals And Pharmacia & Upjohn Company Llc Compounds to treat Alzheimer's disease
AU2003202495B2 (en) * 2002-01-11 2006-07-20 Sankyo Company, Limited Amino alcohol derivative or phosphonic acid derivative and medicinal composition containing these
US7230133B2 (en) 2003-05-01 2007-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Malonamides and malonamide derivatives as modulators of chemokine receptor activity
MXPA05012350A (es) * 2003-05-20 2006-05-25 Transtech Pharma Inc Antagonistas rage como agentes para la amiloidosis inversa y enfermedades asociadas con la misma.
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
WO2005027913A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and a growth hormone secretagogue
NZ549162A (en) 2004-02-24 2009-12-24 Sankyo Co Amino-pyrrol alcohol compounds
EP1735055A1 (de) * 2004-03-30 2006-12-27 Sapphire Therapeutics, Inc. Verfahren zur verringerung von c-reaktivem protein mit wachstumshormon-sekretagoga
CN1976921B (zh) * 2004-06-29 2013-08-21 蓝宝石治疗公司 (3r)-1-(2-甲基丙氨酰-d-色氨酰)-3-(苯甲基)-3-哌啶羧酸1,2,2-三甲基酰肼的晶形
JP2008509930A (ja) * 2004-08-12 2008-04-03 サファイア セラピューティクス インコーポレイテッド 成長ホルモン分泌促進物質を利用して胃腸系の運動性を刺激する方法
CN101248184B (zh) 2005-08-25 2013-01-16 宇部兴产株式会社 光学活性（S或R）-α-氨基酸及光学活性（S或R）-α-氨基酸酯的制造方法
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
JP5649825B2 (ja) 2007-01-31 2015-01-07 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド 安定化させたｐ５３ペプチドおよびその使用法
EP2644618B1 (de) 2007-02-09 2016-08-17 Ocera Therapeutics, Inc. Intermediaten für die Synthese von Makrozyklische Ghrelin-Rezeptormodulatoren
JP2010518158A (ja) * 2007-02-13 2010-05-27 ヘルシン セラピューティクス（ユー．エス．），インコーポレイティド 成長ホルモン分泌促進物質を用いた細胞増殖性障害の治療方法
KR20160061439A (ko) 2007-03-28 2016-05-31 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 스티칭된 폴리펩티드
TWI429436B (zh) * 2007-04-10 2014-03-11 Helsinn Therapeutics Us Inc 使用生長激素促泌素治療或預防嘔吐之方法
UA105657C2 (uk) * 2009-02-27 2014-06-10 Хелсінн Терапьютікс (Ю.Ес.), Інк. Поліпшені способи лікування мігрені на основі анамореліну
EP2470510B1 (de) 2009-09-30 2014-05-14 TransTech Pharma, LLC Substituierte imidazol-derivate für die behandlung von alzheimers krankheit.
KR102104762B1 (ko) 2010-08-13 2020-04-24 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 펩티도미메틱 거대고리
KR20140100937A (ko) 2011-10-18 2014-08-18 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 펩티도미메틱 거대고리
CN104144695A (zh) 2012-02-15 2014-11-12 爱勒让治疗公司 ***交联的和硫醚交联的拟肽大环化合物
CN107216380A (zh) 2012-02-15 2017-09-29 爱勒让治疗公司 拟肽大环化合物
US9717710B2 (en) 2012-10-05 2017-08-01 Vtv Therapeutics Llc Treatment of mild and moderate Alzheimer's disease
KR20150082307A (ko) 2012-11-01 2015-07-15 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 이치환 아미노산 및 이의 제조 및 사용 방법
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
BR112017005598A2 (pt) 2014-09-24 2017-12-12 Aileron Therapeutics Inc macrociclos peptidomiméticos e usos dos mesmos
EP3294318A4 (de) 2015-03-20 2019-04-03 Aileron Therapeutics, Inc. Peptidomimetische makrozyklen und verwendungen davon
US20170121385A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
WO2017139317A1 (en) 2016-02-09 2017-08-17 Lumeova, Inc Ultra-wideband, wireless optical high speed communication devices and systems
WO2019190823A1 (en) 2018-03-28 2019-10-03 Vtv Therapeutics Llc Pharmaceutically acceptable salts of [3-(4- {2-butyl-1-[4-(4-chlorophenoxy)-phenyl]-1h-imidazol-4-yl} -phenoxy)-propyl]-diethyl-amine
WO2019190822A1 (en) 2018-03-28 2019-10-03 Vtv Therapeutics Llc Crystalline forms of [3-(4- {2-butyl-1-[4-(4-chloro-phenoxy)-phenyl]-1h-imidazol-4-yl} -phenoxy)-propyl]-diethyl-amine
WO2020076668A1 (en) 2018-10-10 2020-04-16 Vtv Therapeutics Llc Metabolites of [3-(4-{2-butyl-l-[4-(4-chloro-phenoxy)-phenyl]-lh-imidazol-4-yl } -phen ox y)-prop yl] -diethyl-amine

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2179597A1 (en) * 1993-12-23 1995-06-29 Nils Langeland Johansen Compounds with growth hormone releasing properties
MY113488A (en) * 1995-01-27 2002-03-30 Novo Nordisk As Compounds with growth hormone releasing properties
DE69637855D1 (de) * 1995-12-22 2009-04-16 Novo Nordisk As Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften

Also Published As

Publication number Publication date
AU3434697A (en) 1998-02-10
ATE304528T1 (de) 2005-09-15
WO1998003473A1 (en) 1998-01-29
EP1184370B1 (de) 2005-09-14
US6127354A (en) 2000-10-03
ATE218537T1 (de) 2002-06-15
JP2000515517A (ja) 2000-11-21
DE69713109D1 (de) 2002-07-11
EP0923539A1 (de) 1999-06-23
EP1184370A3 (de) 2002-03-27
DE69734215T2 (de) 2006-06-29
ZA976371B (en) 1998-01-22
EP1184370A2 (de) 2002-03-06
DE69734215D1 (de) 2005-10-20
EP0923539B1 (de) 2002-06-05
US6274584B1 (en) 2001-08-14
US5922770A (en) 1999-07-13
JP4425992B2 (ja) 2010-03-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69713109T2 (de) Verbindungen mit wachstumshormon freisetzenden eigenschaften
DE69633003T2 (de) Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften
JP4130519B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
ES2331102T3 (es) Compuestos con propiedades de liberacion de la hormona del crecimiento.
DE60015173T2 (de) Verbindung mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften
DE69718469T2 (de) Verbindungen mit wachtumshormon freisetzenden eigenschaften
JP4116097B2 (ja) 成長ホルモン放出特性をもつ化合物
EP1117642B1 (de) Substituierte 1,3-diaryl-2-pyridin-2-yl-3-(pyridin-2-ylamino)-propanolderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO1996024580A1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
DE69921611T2 (de) Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften
WO1996024587A1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
RU2298547C2 (ru) Соединения и фармацевтическая композиция, обладающие свойствами высвобождения гормона роста, способ стимуляции выделения гормона роста из гипофиза млекопитающего
DE69908756T2 (de) Matrix-metalloproteinase-inhibitoren
US6566337B1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
DE69919195T2 (de) Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzender eigenschaft
JP3007613B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
MXPA00006692A (en) Compounds with growthhormone releasing properties

Legal Events

Date Code Title Description
8364 No opposition during term of opposition
8327 Change in the person/name/address of the patent owner

Owner name: SAPPHIRE THERAPEUTICS, INC., BRIDGEWATER, N.J., US