DE60014345T2 - MACROCYCLIC PEPTIDES AS HEPATITIS C VIRUS NS3 PROTEASE INHIBITORS - Google Patents

Description

Gebiet der ErfindungTerritory of invention

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, Zusammensetzungen, die Herstellung derartiger Verbindungen und Verfahren zur Behandlung von Hepatitis C-Virus (HCV)-Infektionen. Insbesondere stellt die vorliegende Erfindung neuartige Peptidanaloge, pharmazeutische Zusammensetzungen, die derartige Analoge enthalten, und Verfahren zur Verwendung dieser Analogen bei der Behandlung von HCV-Infektionen bereit.The The present invention relates to compounds, compositions, the preparation of such compounds and methods of treatment of hepatitis C virus (HCV) infections. In particular, the present invention provides novel peptide analogues, pharmaceutical compositions containing contain such analogs, and methods of using these Analogs ready in the treatment of HCV infections.

Hintergrund der ErfindungBackground of the invention

Hepatitis C-Virus (HCV) ist weltweit der wichtigste ätiologische Auslöser von durch Transfusion und durch allgemeine Umstände erworbene Nicht-A-Nicht-B-Hepatitis. Es wird angenommen, dass weltweit mehr als 170 Millionen Personen von dem Virus infiziert sind. Bei einem hohen prozentualen Anteil von Virusträgern entsteht eine chronische Infektion, wobei es in zahlreichen Fällen zu einer chronischen Leberkrankheit kommt, der sogenannten chronischen Hepatitis C. Bei dieser Gruppe besteht wiederum die starke Gefahr von ernsthaften Leberkrankheiten, wie Leberzirrhose, hepatozellulärem Karzinom und zum Tod führenden terminalen Stadien von Lebererkrankungen.hepatitis C virus (HCV) is the world's most important etiological trigger of Transfusion and generalized non-A non-B hepatitis. It will Assumed that more than 170 million people worldwide of the Virus are infected. At a high percentage of virus carriers arises a chronic infection, in many cases too a chronic liver disease, the so-called chronic Hepatitis C. This group again has a high risk of serious liver diseases, such as liver cirrhosis, hepatocellular carcinoma and leading to death terminal stages of liver disease.

Der Mechanismus, gemäß dem HCV seinen vitalen Fortbestand gewährleistet und eine hohe Rate an chronischen Lebererkrankungen hervorruft, ist noch nicht vollständig aufgeklärt. Es ist nicht bekannt, wie HCV mit dem Wirtsimmunsystem in Wechselwirkung tritt und diesem ausweicht. Ferner müssen die Rollen der zellulären und humoralen Immunreaktionen beim Schutz gegen HCV-Infektionen und -Krankheiten noch aufgeklärt werden. Es wurde berichtet, dass Immunoglobuline eine Prophylaxe bei transfusionsbedingter viraler Hepatitis bewirken, jedoch empfiehlt das Center for Disease Control gegenwärtig zu diesem Zweck nicht die Behandlung mit Immunoglobulinen. Das Fehlen einer wirksamen schützenden Immunreaktion behindert die Entwicklung eines Impfstoffes oder angemessener Prophylaxemaßnahmen nach der Belastung, so dass in naher Zukunft die ganze Hoffnung fest auf antivirale Eingriffe gesetzt wird.Of the Mechanism, according to the HCV ensures its vital survival and causes a high rate of chronic liver disease, is not complete yet elucidated. It is not known how HCV interacts with the host immune system and escapes. Furthermore, the roles of the cellular and humoral immune responses in protection against HCV infections and Diseases still enlightened become. It has been reported that immunoglobulins are a prophylactic effect in transfusion-induced viral hepatitis, however, recommends the Center for Disease Control currently not for this purpose treatment with immunoglobulins. The absence of an effective protected Immune response hinders the development of a vaccine or more appropriate prophylactic measures after the load, so in the near future all hope firmly on antiviral intervention is set.

Es wurden verschiedene klinische Studien mit dem Ziel durchgeführt, pharmazeutische Mittel zu identifizieren, die in wirksamer Weise zur Behandlung von HCV-Infektionen bei von chronischer Hepatitis C betroffenen Patienten befähigt sind. Bei diesen Untersuchungen verwendete man Interferon-alpha, allein und in Kombination mit anderen antiviralen Mitteln. Derartige Untersuchungen haben ergeben, dass eine erhebliche Anzahl der Teilnehmer auf diese Therapien nicht reagiert und dass von den Teilnehmern, die eine günstige Reaktion zeigen, ein großer Anteil nach Beendigung der Behandlung einen Rückfall erleidet.It Various clinical studies have been conducted with the aim of pharmaceutical To identify agents that are effective for treatment of HCV infections in chronic hepatitis C affected Patient empowered are. Interferon-alpha was used in these studies, alone and in combination with other antiviral agents. such Research has shown that a significant number of participants unresponsive to these therapies and that by the participants, the one cheap Reaction show a big one Share on termination of treatment suffers a relapse.

Bis vor einigen Jahren stellte die Behandlung mit Interferon (IFN) die einzige verfügbare Therapie mit nachgewiesenem Nutzen dar, die in der Klinik für Patienten mit chronischer Hepatitis C anerkannt war. Jedoch ist die anhaltende Reaktionsrate gering und ferner führt die Behandlung mit Interferon auch zu schweren Nebenwirkungen (d. h. Retinopathie, Thyroiditis, akute Pankreatitis, Depressionen), die die Lebensqualität der behandelten Patienten verringern. Interferon in Kombination mit Ribavirin wurde ursprünglich für Patienten, die auf IFN allein nicht reagieren, zugelassen. Es wurde nunmehr für unbefangene Patienten zugelassen und stellt derzeit den "goldenen Standard" bei der HCV-Therapie dar. Jedoch werden mit dieser Kombinationstherapie die durch IFN verursachten Nebenwirkungen nicht gelindert.To a few years ago, treatment with interferon (IFN) presented the only available Therapy with proven benefits in the clinic for patients with chronic hepatitis C was recognized. However, the persistent Reaction rate low and further leads to the treatment with interferon severe side effects (i.e., retinopathy, thyroiditis, acute pancreatitis, depression) that affects the quality of life of the treated Reduce patients. Interferon in combination with ribavirin was originally for patients, which do not respond to IFN alone, admitted. It became now for the unbiased Patients admitted and currently represents the "golden standard" in HCV therapy. However with this combination therapy the side effects caused by IFN not relieved.

Somit besteht ein Bedürfnis zur Entwicklung wirksamer antiviraler Mittel zur Behandlung von HCV-Infektionen, mit denen die Einschränkungen vorhandener pharmazeutischer Therapien überwunden werden können.Consequently there is a need for the development of effective antiviral agents for the treatment of HCV infections with which the limitations of existing pharmaceutical Therapies overcome can be.

HCV ist ein umhülltes Plusstrang-RNA-Virus der Familie Flaviviridae. Das einzelsträngige HCV-RNA-Genom weist eine Länge von etwa 9 500 Nucleotiden auf und besitzt einen einzigen offenen Leseraster (ORF), der für ein einziges großes Polyprotein mit etwa 3 000 Aminosäuren kodiert. In infizierten Zellen wird dieses Polyprotein an mehreren Stellen durch zelluläre und virale Proteasen gespalten, wodurch strukturelle und nicht-strukturelle (NS) Proteine entstehen. Im Fall von HCV wird die Erzeugung von reifen, nicht-strukturellen Proteinen (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NSSA und NS5B) durch zwei virale Proteasen erreicht. Die erste Protease, die noch schlecht charakterisiert ist, spaltet an der NS2-NS3-Verbindungsstelle. Die zweite Protease ist eine Serin-protease, die innerhalb der N-terminalen Region von NS3 enthalten ist (und daher als NS3-Protease bezeichnet wird) und vermittelt sämtliche anschließenden Spaltungen stromabwärts von NS3, sowohl in cis, an der NS3-NS4A-Spaltungsstelle, als auch in trans, für die restlichen NS4A-NS4B-, NS4B-NS5A- und NS5A-NS5B-Stellen. Das NS4A-Protein scheint mehrere Funktionen auszuüben, nämlich die Wirkung als Kofaktor für die NS3-Protease und möglicherweise die Unterstützung der Membranlokalisierung von NS3 und anderen viralen Replicase-Komponenten. Die Komplexbildung des NS3-Proteins mit NS4A scheint für die Prozessierungsereignisse notwendig, die die proteolytische Wirksamkeit an sämtlichen Stellen verstärken. Das NS3-Protein besitzt auch Nucleosid-triphosphatase- und RNA-Helicase-Aktivitäten. NS5B ist eine RNAabhängige RNA-Polymerase, die an der Replikation von HCV beteiligt ist.HCV is a coated Plusstrang RNA virus of the family Flaviviridae. The single-stranded HCV RNA genome is about 9,500 nucleotides in length and has a single open reading frame (ORF) encoding a single large polyprotein of about 3,000 amino acids. In infected cells, this polyprotein is cleaved at multiple sites by cellular and viral proteases, resulting in structural and non-structural (NS) proteins. In the case of HCV, production of mature non-structural proteins (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NSSA and NS5B) is achieved by two viral proteases. The first protease, poorly characterized, cleaves at the NS2 NS3 junction. The second protease is a serine protease contained within the N-terminal region of NS3 (and therefore referred to as NS3 protease) and mediates all subsequent cleavage downstream of NS3, both in cis, at the NS3 NS4A cleavage site , as well as in trans, for the remaining NS4A NS4B, NS4B NS5A and NS5A NS5B sites. The NS4A protein appears to perform several functions, namely the effect as a cofactor for the NS3 protease and possibly the support of membrane localization of NS3 and other viral replicase components. NS4A complex formation of the NS3 protein appears to be necessary for the processing events that enhance proteolytic activity at all sites. The NS3 protein also has nucleoside triphosphatase and RNA helicase activities. NS5B is an RNA-dependent RNA polymerase involved in the replication of HCV.

Die Patentanmeldung WO-97/06804 beschreibt das (–)-Enantiomere des Nucleosidanalogen Cytosin-1,3-oxathiolan (auch bekannt als 3TC) mit Aktivität gegen HCV. Diese Verbindung wird zwar in früheren klinischen Untersuchungen gegen HIV und HBV als sicher bezeichnet, ihre klinische Aktivität gegen HCV ist jedoch nicht erwiesen und ihr Wirkungsmechanismus gegen das Virus bedarf noch der Aufklärung.The patent application WO-97/06804 describes the (-) - enantiomer of the nucleoside analogue cytosine-1,3-oxathiolane (also known as 3TC) with activity against HCV. Although this compound is considered safe in previous clinical trials against HIV and HBV, its clinical activity against HCV has not been established and its mechanism of action against the virus remains to be elucidated.

Eine allgemeine Strategie zur Entwicklung von antiviralen Mitteln besteht in der Inaktivierung von viral kodierten Enzymen, die für die Replikation des Virus erforderlich sind.A general strategy for the development of antivirals in the inactivation of virally-encoded enzymes responsible for replication of the virus are required.

Diesbezüglich haben intensive Bemühungen zum Auffinden von Verbindungen, die die NS3-Protease oder die RNA-Helicase von HCV hemmen, zu folgenden Arbeiten geführt:Have in this regard intensive efforts for finding compounds containing the NS3 protease or the RNA helicase of HCV, led to the following work:

US-Patent 5 633 388 beschreibt heterocyclisch substituierte Carboxamide und Analoge mit Wirksamkeit gegen HCV. Diese Verbindungen sind gegen die Helicase-Aktivität des NS3-Proteins des Virus gerichtet, wobei aber bisher nicht über klinische Tests berichtet wird.US Patent 5 633 388 describes heterocyclic substituted carboxamides and analogues having activity against HCV. These compounds are directed against the helicase activity of the NS3 protein of the virus, but so far no clinical tests are reported.

Chu et al. (Tet. Lett., (1996), S. 7229–7232), berichten über ein Phenanthrenchinon, das in vitro gegen die HCV-NS3-Protease wirksam ist. Bezüglich dieser Verbindung gibt es keine Berichte über weitere Entwicklungen.Chu et al. (Tet Lett., (1996), pp. 7229-7232) report a Phenanthrene quinone, which acts in vitro against the HCV NS3 protease is. In terms of There are no reports of further developments in this connection.

Bei der Ninth International Conference on Antiviral Research, Urabandai, Fukyshima, Japan (1996) (Antiviral Research, Bd. 30 (1) (1996), A23 (Abstract 19)) wurde eine Arbeit vorgelegt, die über Thiazolidin-Derivate mit Hemmwirkung gegen die HCV-Protease berichtet.at the Ninth International Conference on Antiviral Research, Urabandai, Fukyshima, Japan (1996) (Antiviral Research, Vol. 30 (1) (1996), A23 (Abstract 19)) has been presented a thesis on thiazolidine derivatives with inhibitory activity against the HCV protease.

Es gibt mehrere Untersuchungen über Verbindungen mit Hemmwirkung gegen andere Serin-proteasen, wie humane Leukozyten-elastase. Über eine Familie dieser Verbindungen wird in WO-95/33764 berichtet (Hoechst Marion Roussel, 1995). Bei den in dieser Anmeldung beschriebenen Peptiden handelt es sich um Morpholinylcarbonyl-benzoyl-Peptidanaloge, die sich strukturell von den erfindungsgemäßen Peptiden unterscheiden.There are several studies of compounds having inhibitory activity against other serine proteases, such as human leukocyte elastase. About a family of these compounds is in WO 95/33764 reported (Hoechst Marion Roussel, 1995). The peptides described in this application are morpholinylcarbonyl-benzoyl-peptide analogues structurally different from the peptides of the invention.

WO-98/17679 der Fa. Vertex Pharmaceuticals Inc. beschreibt Inhibitoren von Serin-protease, insbesondere von Hepatitis C-Virus-NS3-Protease. WO-98/17679 Vertex Pharmaceuticals Inc. describes inhibitors of serine protease, in particular hepatitis C virus NS3 protease.

Hoffman LaRoche ( WO-98/22496 ; US-5 866 684 ; und US-6 018 020 ) berichtet ebenfalls über Hexapeptide, bei denen es sich um Proteinase-Inhibitoren handelt, die sich als antivirale Mittel zur Behandlung von HCV-Infektionen eignen.Hoffman LaRoche ( WO-98/22496 ; U.S. 5,866,684 ; and U.S. 6,018,020 ) also reports hexapeptides, which are proteinase inhibitors useful as antiviral agents for the treatment of HCV infections.

Steinkühler et. al. und Ingallinella et. al. beschrieben eine NS4A-4B-Produkthemmung (Biochemistry, Bd. 37 (1998), S. 8899–8905 und 8906-8914).Steinkühler et. al. and Ingallinella et. al. described NS4A-4B product inhibition (Biochemistry, Vol. 37 (1998), pp. 8899-8905 and 8906-8914).

WO-97/43310 der Fa. Schering Corporation beschreibt Peptidsequenzen mit 20 und 21 Aminosäuren, die gegen die HCV-NS3-Protease wirksam sind. WO 97/43310 Schering Corporation describes peptide sequences of 20 and 21 amino acids which are active against the HCV NS3 protease.

WO-98/46597 der Emory University beschreibt Peptide und Peptidomimetika, die in vitro gegen Serin-proteasen wirksam sind. WO-98/46597 Emory University describes peptides and peptidomimetics that are active against serine proteases in vitro.

WO-98/46630 der Fa. Peptide Therapeutics Limited beschreibt Depsipeptid-Substrate, die die HCV-NS3-Protease hemmen. WO-98/46630 Peptide Therapeutics Limited describes depsipeptide substrates that inhibit the HCV NS3 protease.

Schließlich beschreibt US-5 869 253 enzymatische RNA-Moleküle, die die HCV-NS3-Protease hemmen.Finally describes U.S. 5,869,253 enzymatic RNA molecules that inhibit the HCV NS3 protease.

Keine der vorstehend erwähnten früheren Patentanmeldungen beschreibt cyclische Peptide mit Aktivität und Selektivität gegen die Hepatitis C-Virus NS3-Protease oder legt derartige Peptide nahe.None the aforementioned earlier Patent applications describe cyclic peptides with activity and selectivity against the hepatitis C virus NS3 protease or suggests such peptides.

WO-99/07733 , WO-99/07734 , WO-00/09543 und WO-00/09558 beschreiben Hexa- bis Tetrapeptide und Tripeptidanaloge, die die NS3-Protease hemmen. Jedoch legen diese Druckschriften weder die erfindungsgemäßen makrocyclischen Analogen nahe, noch führen sie zu deren Konzeption. WO-99/07733 . WO-99/07734 . WO-00/09543 and WO-00/09558 describe hexa- to tetrapeptides and tripeptide analogues that inhibit the NS3 protease. However, these references neither suggest the macrocyclic analogs of the invention nor lead to their conception.

WO-99/38888 , Veröffentlichungstag 5. August 1999, des Istituto de Richerche di Biologia Moleculare (IRBM) beschreibt kleine Peptide als Inhibitoren der HCV-NS3-Protease. In dieser Druckschrift findet sich keinerlei Hinweis auf die cyclische Natur der erfindungsgemäßen Peptide. Ferner wurde diese PCT-Anmeldung nach dem Prioritätstag der vorliegenden Anmeldung veröffentlicht. WO-99/38888 , Published on 5 August 1999, by the Instituto Richerche di Biologia Moleculare (IRBM), describes small peptides as inhibitors of the HCV NS3 protease. There is no reference in this document to the cyclic nature of the peptides according to the invention. Further, this PCT application was published after the priority date of the present application.

WO-99/64442 des IRBM, die ebenfalls nach dem Prioritätsdatum der vorliegenden Anmeldung veröffentlicht ist, beschreibt Oligopeptide mit Ketosäuren an P1. WO-99/64442 of IRBM, also published after the priority date of the present application, describes oligopeptides with keto acids at P1.

WO-99/50230 der Fa. Vertex Pharmaceuticals (veröffentlicht am 7. Oktober 1999) wurde ebenfalls nach dem Prioritätsdatum der vorliegenden Anmeldung veröffentlicht. Trotzdem findet sich in dieser Druckschrift nicht der entfernteste Hinweis auf eines der erfindungsgemäßen cyclischen Peptide. WO-99/50230 Vertex Pharmaceuticals (published October 7, 1999) was also published after the priority date of the present application. Nevertheless, this publication does not contain the farthest indication of any of the cyclic peptides according to the invention.

WO-00/09543 der Fa. Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. (veröffentlicht am 24. Februar 2000) ist ebenfalls nach dem Prioritätsdatum der vorliegenden Anmeldung veröffentlicht. Auch diese Druckschrift legt nicht im entferntesten irgendwelche cyclischen Peptide der vorliegenden Erfindung nahe. WO-00/09543 from Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. (published February 24, 2000) is also published after the priority date of the present application. Also, this reference does not remotely suggest any cyclic peptides of the present invention.

Ein Vorteil der vorliegenden Erfindung besteht darin, dass makrocyclische Peptide bereitgestellt werden, die eine Hemmwirkung gegen NS3-Protease des Hepatitis C-Virus aufweisen.One Advantage of the present invention is that macrocyclic Peptides are provided which have an inhibitory effect against NS3 protease of the hepatitis C virus.

Ein weiterer Vorteil eines Aspekts der vorliegenden Erfindung besteht in der Tatsache, dass diese Peptide spezifisch die NS3-Protease hemmen und keine signifikante Hemmwirkung gegen andere Serin-proteasen ausüben, z. B. gegen humane Leukozyten-elastase (HLE), Schweinepankreas-elastase (PPE) oder Rinderpankreas-chymotrypsin, oder gegen Cystein-proteasen, wie Humanlebercathepsin B (Cat B).One another advantage of one aspect of the present invention in the fact that these peptides are specifically the NS3 protease inhibit and no significant inhibitory activity against other serine proteases exercise, z. Against human leukocyte elastase (HLE), porcine pancreatic elastase (PPE) or bovine pancreatic chymotrypsin, or against cysteine proteases, like human liver cathepsin B (Cat B).

Ein weiterer Vorteil der vorliegenden Erfindung besteht darin, dass kleine Peptide von geringem Molekulargewicht bereitgestellt werden, die dazu befähigt sind, in die Zellmembranen einzudringen und die NS3-Protease-Aktivität in Zellkultur zu hemmen.One Another advantage of the present invention is that small peptides of low molecular weight are provided who are capable enter the cell membranes and NS3 protease activity in cell culture to inhibit.

Ein weiterer Vorteil der erfindungsgemäßen Verbindungen besteht in der Tatsache, dass sie in beiden Hauptgenotypen, die in klinischen Isolaten auftreten (1a & 1b) aktiv sind, was stark darauf hinweist, dass diese Verbindungen gegen alle derzeit bekannten Genotypen von HCV aktiv sind.One Another advantage of the compounds of the invention consists in the fact that they are present in both major genotypes in clinical Isolates occur (1a & 1b) are active, which strongly indicates that these compounds are against all currently known genotypes of HCV are active.

Zusammenfassende Darstellung der ErfindungSummary presentation the invention

Unter den Umfang der Erfindung fallen Verbindungen der Formel (I)

worin W CH oder N ist,
R²¹ N, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Nalogenalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, Hydroxy oder N(R²³)₂ ist,
worin R²³ jeweils unabhängig H, C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist;
R²² H, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Halogenalkyl, C_1–6-Thioalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, C_2–7-Alkoxyalkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C₆ oder C₁₀-Aryl oder Het ist, worin Het ein 5-, 6- oder 7-gliedriger gesättigter oder ungesättigter Heterocyclus ist, der 1 bis 4 Heteroatome ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel enthält;
wobei Cycloalkyl, Aryl oder Het mit R²⁴ substituiert sind,
worin R²⁴ H, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, NO₂, N(R²⁵)₂, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-NH-R²⁵ ist, worin jedes R²⁵ unabhängig N, C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist;
oder R²⁴ NH-C(O)-OR²⁶ ist, worin R²⁶ C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist;
R³ Hydroxy, NH₂ oder eine Gruppe der Formel -NH-R³¹ ist, worin R³¹ C₆- oder C₁₀-Aryl , Heteroaryl, -C(O)-R³², -C(O)-OR³² oder -C(O)-NHR³² ist,
worin R³² C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist,
D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 5 bis 10 Atomen ist, die gegebenenfalls 1 bis 3 Heteroatome enthält, die unabhängig ausgewählt sind aus O, S oder N-R⁴¹, worin
R⁴¹ H, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl oder -C(O)-R⁴² ist, worin R⁴² C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl oder C₆- oder C₁₀-Aryl ist;
R⁴ H oder von 1 bis 3 Substituenten an irgendeinem Kohlenstoffatom der Kette D ist, wobei der Substituent unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: C_1–6-Alkyl, C_1–6-Halogenalkyl, C_1–6-Alkoxy, Hydroxy, Halogen, Amino, Oxo, Thio oder C_1–6-Thioalkyl,
und
A ein Amid der Formel -C(O)-NH-R⁵ ist, worin R⁵ ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: C_1–8-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C₆- oder C₁₀-Aryl oder C_7–16-Aralkyl;
oder A eine Carbonsäure ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbarer Ester davon.The scope of the invention includes compounds of the formula (I)

where W is CH or N,
R ^{21 is} N, halo, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _3-6 cycloalkoxy, hydroxy or N (R ²³ ) ₂ .
wherein each R ²³ is independently H, C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl;
R ^{22 is} H, halogen, C _1-6 -alkyl, C _3-6 -cycloalkyl, C _1-6 -haloalkyl, C _1-6 -thioalkyl, C _1-6 -alkoxy, C _3-6 -cycloalkoxy, C _2-7 alkoxyalkyl, C _3-6 cycloalkyl, C ₆ or C ₁₀ aryl or Het, wherein Het is a 5-, 6- or 7-membered saturated or unsaturated heterocycle containing from 1 to 4 heteroatoms selected from Containing nitrogen, oxygen and sulfur;
wherein cycloalkyl, aryl or Het are substituted with R ²⁴ ,
wherein R ^{24 is} H, halogen, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _3-6 cycloalkoxy, NO ₂ , N (R ²⁵ ) ₂ , NH-C (O ) -R ²⁵ or NH-C (O) -NH-R ²⁵ wherein each R ^{25 is} independently N, C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl;
or R ^{24 is} NH-C (O) -OR ²⁶ , wherein R ^{26 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl;
R ^{3 is} hydroxy, NH ₂ or a group of the formula -NH-R ³¹ , wherein R ^{31 is} C ₆ - or C ₁₀ -aryl, heteroaryl, -C (O) -R ³² , -C (O) -OR ³² or -C (O) -NHR is ³² ,
wherein R ^{32 is} C _1-6 -alkyl or C _3-6 -cycloalkyl,
D is a saturated or unsaturated alkylene chain of 5 to 10 atoms, optionally containing 1 to 3 heteroatoms independently selected from O, S or NR ⁴¹ , wherein
R ^{41 is} H, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl or -C (O) -R ⁴² , wherein R ^{42 is} C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl or C ₆ - or C _{10 is} aryl;
R ^{4 is} H or from 1 to 3 substituents on any carbon atom of chain D, wherein the substituent is independently selected from the group consisting of: C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, Hydroxy, halogen, amino, oxo, thio or C _1-6 thioalkyl,
and
A is an amide of the formula -C (O) -NH-R ⁵ , wherein R ^{5 is} selected from the group consisting of: C _1-8 alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C ₆ - or C ₁₀ aryl or C _7-16 aralkyl;
or A is a carboxylic acid, or a pharmaceutically acceptable salt or a pharmaceutically acceptable ester thereof.

Unter den Umfang der Erfindung fällt ferner eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine bezüglich Hepatitis C antiviral wirksame Menge einer Verbindung der Formel I oder ein therapeutisch annehmbares Salz oder einen therapeutisch annehmbaren Ester davon in Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Trägermedium oder Hilfsmittel umfasst.Under the scope of the invention falls a pharmaceutical composition containing a hepatitis C antivirally effective amount of a compound of formula I or a therapeutically acceptable salt or a therapeutically acceptable Esters thereof in admixture with a pharmaceutically acceptable carrier medium or aids.

Ein wichtiger Aspekt der Erfindung beinhaltet die Verwendung der Verbindung der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Replikation von Hepatitis C-Virus.One important aspect of the invention involves the use of the compound of the formula I according to the above versions for the manufacture of a medicament for inhibiting replication of hepatitis C virus.

Ein weiterer wichtiger Aspekt beinhaltet die Verwendung der Verbindung der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Therapie oder Prophylaxe einer Hepatitis C-Virusinfektion.One Another important aspect involves the use of the compound of the formula I according to the above versions for the manufacture of a medicament for therapy or prophylaxis a hepatitis C virus infection.

Gemäß einer Ausführungsform enthalten die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen ein zusätzliches immunomodulatorisches Mittel. Zu Beispielen für zusätzliche immunomodulatorische Mittel gehören (ohne Beschränkung hierauf) α-, β- und δ-Interferone.According to one embodiment contain the pharmaceutical according to the invention Compositions an additional immunomodulatory agent. Examples of additional immunomodulatory agents belong (without restriction on this) α-, β- and δ-interferons.

Gemäß einer alternativen Ausführungsform können die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen zusätzlich ein antivirales Mittel enthalten. Zu Beispielen für antivirale Mittel gehören Ribavirin und Amantadin.According to one alternative embodiment can the pharmaceutical according to the invention Compositions in addition contain an antiviral agent. Examples of antiviral Include funds Ribavirin and amantadine.

Gemäß einer weiteren alternativen Ausführungsform können die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen zusätzlich andere Inhibitoren von HCV-Protease enthalten.According to one further alternative embodiment can the pharmaceutical according to the invention Compositions in addition contain other inhibitors of HCV protease.

Gemäß einer weiteren alternativen Ausführungsform können die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen zusätzlich einen Inhibitor von anderen Zielen im HCV-Lebenszyklus enthalten, wie Helicase, Polymerase, Metalloprotease oder IRES.According to one further alternative embodiment can the pharmaceutical according to the invention Compositions in addition contain an inhibitor of other targets in the HCV life cycle, such as Helicase, polymerase, metalloprotease or IRES.

Ausführliche Beschreibung bevorzugter AusführungsformenFull Description of preferred embodiments

Definitionendefinitions

Sofern nichts anderes angegeben ist, haben die nachstehend angegebenen Definitionen die folgenden Bedeutungen.Provided unless otherwise stated, have the following Definitions the following meanings.

Sofern die Symbole (R) oder (S) zur Bezeichnung der absoluten Konfiguration eines Substituenten, z. B. R⁴ der Verbindung der Formel I, verwendet werden, erfolgt die Bezeichnung im Zusammenhang mit der gesamten Verbindung und nicht im Zusammenhang mit dem Substituenten allein.If the symbols (R) or (S) denote the absolute configuration of a substituent, e.g. B. R ^{4 of} the compound of formula I are used, the name is in connection with the ge whole compound and not related to the substituent alone.

Die hier verwendeten Bezeichnungen "P1, P2 und P" beziehen sich auf die Position der Aminosäurereste, ausgehend vom C-terminalen Ende der Peptidanalogen in Richtung zum N-Terminus (d. h. P1 bezieht sich auf die Position 1 vom C-Terminus aus, P2 auf die zweite Position vom C-Terminus aus und dergl.) (vergl. A. Berger & I. Schechter, Transactions of the Royal Society London Series B257 (1970), S. 249–264).The here used designations "P1, P2 and P "relate on the position of the amino acid residues, starting from the C-terminal end of the peptide analogues towards the N-terminus (i.e., P1 refers to position 1 of the C-terminus from, P2 to the second position from the C-terminus and the like) (see A. Berger & I. Schechter, Transactions of the Royal Society London Series B257 (1970), p. 249-264).

Der hier verwendete Ausdruck "1-Aminocyclopropylcarbonsäure" (ACCA) bezieht sich auf eine Verbindung der folgenden Formel

The term "1-aminocyclopropylcarboxylic acid" (ACCA) as used herein refers to a compound of the following formula

Der hier verwendete Ausdruck "Vinyl-ACCA" bezieht sich auf eine Verbindung der Formel

The term "vinyl-ACCA" as used herein refers to a compound of the formula

Der hier verwendete Ausdruck "Homoallyl-ACCA" bezieht sich auf eine

The term "homoallylic ACCA" as used herein refers to a

Der hier verwendete Ausdruck "Halogen" bezieht sich auf einen Halogensubstituenten, der unter Brom, Chlor, Fluor oder Iod ausgewählt ist.Of the As used herein, "halogen" refers to a halo substituent selected from bromine, chlorine, fluorine or iodine selected is.

Der hier verwendete Ausdruck "C_1–6-Halogenalkyl", der allein oder in Kombination mit einem anderen Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf acyclische, geradkettige oder verzweigte Alkylsubstituenten mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei ein oder mehr Wasserstoffatome durch ein Halogenatom, das unter Brom, Chlor, Fluor oder Iod ausgewählt ist, substituiert sind.As used herein, the term "C _1-6 haloalkyl" used alone or in combination with another substituent refers to acyclic, straight or branched chain alkyl substituents of 1 to 6 carbon atoms wherein one or more hydrogen atoms are represented by a halogen atom, the is selected from bromine, chlorine, fluorine or iodine.

Der hier verwendete Ausdruck "C_1–6-Thioalkyl", der allein oder in Kombination mit einem anderen Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf acyclische, geradkettige oder verzweigte Alkylsubstituenten, die eine Thiolgruppe enthalten, z. B. Thiopropyl.As used herein, the term "C _1-6 thioalkyl", used alone or in combination with another substituent, refers to acyclic, straight or branched chain alkyl substituents containing a thiol group, e.g. For example, thiopropyl.

Die hier verwendeten Ausdrücke "C_1–6-Alkyl" oder "(nieder)-Alkyl", die allein oder in Kombination mit einem anderen Substituenten verwendet werden, beziehen sich auf acyclische, geradkettige oder verzweigte Alkylsubstituenten mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispiele hierfür sind Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, Hexyl, 1-Methylethyl, 1-Methylpropyl, 2-Methylpropyl und 1,1-Dimethylethyl.The terms "C _1-6 alkyl" or "(lower) alkyl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refer to acyclic, straight or branched chain alkyl substituents of 1 to 6 carbon atoms. Examples of these are methyl, ethyl, propyl, butyl, hexyl, 1-methylethyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl and 1,1-dimethylethyl.

Der hier verwendete Ausdruck "C_3–6-Cycloalkyl", der allein oder in Kombination mit einem anderen Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf einen Cycloalkylsubstituenten, der 3 bis 6 Kohlenstoffatome enthält. Der Ausdruck umfasst Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl.The term "C _3-6 cycloalkyl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to a cycloalkyl substituent containing from 3 to 6 carbon atoms. The term includes cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl.

Der Ausdruck "ungesättigtes Cycloalkyl" umfasst beispielsweise den Substituenten Cyclohexenyl der Formel

The term "unsaturated cycloalkyl" includes, for example, the substituent cyclohexenyl of the formula

Der hier verwendete Ausdruck "gesättigtes oder ungesättigtes Alkylen" bezieht sich auf einen zweiwertigen Alkylsubstituenten, der sich von einem gesättigten oder ungesättigten, geradkettigen oder verzweigten, aliphatischen Kohlenwasserstoff durch Entfernung von jeweils einem Wasserstoffatom von jedem Ende ableitet. Zu Beispielen hierfür gehören -CH₂CH₂C(CH₃)₂CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH=CHCH₂CH₂-oder -CH₂C-CCH₂CH₂-. Diese Alkylkette kann gegebenenfalls ein Heteroatom, wie Sauerstoff, enthalten (z. B. CH₃-CH₂-O-CH₂-).The term "saturated or unsaturated alkylene" as used herein refers to a divalent alkyl substituent which is derived from a saturated or unsaturated, straight chain or branched chain aliphatic hydrocarbon by removal of one hydrogen atom from each end. Examples include -CH ₂ CH ₂ C (CH ₃ ) ₂ CH ₂ CH ₂ -, -CH ₂ CH ₂ CH = CHCH ₂ CH ₂ -or -CH ₂ C-CCH ₂ CH ₂ -. This alkyl chain may optionally contain a heteroatom such as oxygen (eg, CH ₃ -CH ₂ -O-CH ₂ -).

Der hier verwendete Ausdruck "C_1–6-Alkoxy", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf den Substituenten -O-C_1–6-Alkyl, wobei der Alkylrest wie vorstehend definiert bis zu 6 Kohlenstoffatome enthält. Alkoxy umfasst Methoxy, Ethoxy, Propoxy, 1-Methylethoxy, Butoxy und 1,1-Dimethylethoxy. Der letztgenannte Substituent ist allgemein als tert.-Butoxy bekannt.The term "C _1-6 -alkoxy" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to the substituent -OC _1-6 -alkyl wherein the alkyl radical as defined above contains up to 6 carbon atoms , Alkoxy includes methoxy, ethoxy, propoxy, 1-methylethoxy, butoxy and 1,1-dimethylethoxy. The latter substituent is commonly known as tert-butoxy.

Der hier verwendete Ausdruck "C_3–6-Cycloalkyl", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf den Substituenten -O-C_3–6-Cycloalkyl, der 3 bis 6 Kohlenstoffatome enthält.The term "C _3-6 cycloalkyl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to the substituent -OC _3-6 cycloalkyl containing from 3 to 6 carbon atoms.

Der hier verwendete Ausdruck "C_1–6-Alkoxyalkyl" bezieht sich auf den Substituenten C_1–6-Alkyl-O-C_1–6-alkyl, wobei Alkyl gemäß der vorstehenden Definition bis zu 6 Kohlenstoffatome enthält. Beispielsweise bedeutet Methoxymethyl -CH₂-O-CH₃.The term "C _1-6 alkoxyalkyl" as used herein refers to the substituent C _1-6 alkyl-OC _1-6 alkyl wherein alkyl as defined above contains up to 6 carbon atoms. For example, methoxymethyl-CH ₂ -O-CH ₃ .

Der hier verwendete Ausdruck "C_2–7-Acyl", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf eine C_1–6-Alkylgruppe, die über eine Carbonylgruppe gebunden ist, z. B. -C(O)-C_1–6-Alkyl.The term "C _2-7 acyl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to a C _1-6 alkyl group bonded through a carbonyl group, e.g. B. -C (O) -C _1-6 alkyl.

Der hier verwendete Ausdruck "C₆- oder C₁₀-Aryl", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf ein aromatisches monocyclisches System mit einem Gehalt an 6 Kohlenstoffatomen oder auf ein aromatisches bicyclisches System mit einem Gehalt an 10 Kohlenstoffatomen. Beispielsweise umfasst Aryl ein Phenyl- oder ein Naphthyl-Ringsystem.The term "C ₆ or C ₁₀ aryl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to an aromatic monocyclic system containing 6 carbon atoms or to an aromatic bicyclic system containing at 10 carbon atoms. For example, aryl includes a phenyl or a naphthyl ring system.

Der hier verwendete Ausdruck "C_7–16-Aralkyl", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf einen Arylrest gemäß der vorstehenden Definition, der über eine Alkylgruppe gebunden ist, wobei Alkyl gemäß der vorstehenden Definition 1 bis 6 Kohlenstoffatome enthält. Aralkyl umfasst beispielsweise Benzyl und Butylphenyl.The term "C _7-16 aralkyl" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to an aryl radical as defined above which is attached via an alkyl group, wherein alkyl as defined above contains up to 6 carbon atoms. Aralkyl includes, for example, benzyl and butylphenyl.

Der hier verwendete Ausdruck "Het", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf einen einwertigen Substituenten, der von einem 5-, 6- oder 7-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten (einschließlich aromatischen) Heterocyclus, der 1 bis 4 unter Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel ausgewählte Heteroatome enthält, durch Entfernen eines Wasserstoffatoms abgeleitet ist. Zu Beispielen für geeignete Heterocyclen gehören: Tetrahydrofuran, Thiophen, Diazepin, Isoxazol, Piperidin, Dioxan, Morpholin, Pyrimidin oder

As used herein, the term "het", used alone or in combination with another substituent, refers to a monovalent substituent derived from a 5-, 6- or 7-membered, saturated or unsaturated (including aromatic) heterocycle, which contains from 1 to 4 heteroatoms selected from nitrogen, oxygen and sulfur, by removal of a hydrogen atom. Examples of suitable heterocycles include: tetrahydrofuran, thiophene, diazepine, isoxazole, piperidine, dioxane, morpholine, pyrimidine or

Der Ausdruck "Het" umfasst ferner einen Heterocyclus gemäß der vorstehenden Definition, der mit einem oder mehreren Ringen, bei denen es sich um einen Heterocyclus oder einen beliebigen anderen Ring handeln kann, fusioniert ist. Ein derartiges Beispiel ist Thiazolo[4,5-b)pyridin.Of the The term "Het" further includes a Heterocycle according to the above Definition that involves one or more rings that are themselves to be a heterocycle or any other ring can, is fused. One such example is thiazolo [4,5-b] pyridine.

Der hier verwendete Ausdruck "Heteroaryl" fällt zwar allgemein unter den Ausdruck "Het", bedeutet aber präzise einen ungesättigten Heterocyclus, bei dem die Doppelbindungen ein aromatisches System bilden. Zu geeigneten Beispielen für heteroaromatische Systeme gehören: Chinolin, Indol, Pyridin,

Although the term "heteroaryl" as used herein generally falls under the term "het", it means precisely an unsaturated heterocycle in which the double bonds form an aromatic system. Suitable examples of heteroaromatic systems include: quinoline, indole, pyridine,

Der hier verwendete Ausdruck "pharmazeutisch annehmbarer Ester", der entweder allein oder in Kombination mit einem weiteren Substituenten verwendet wird, bezieht sich auf Ester der Verbindung der Formel I, bei denen beliebige Carboxylfunktionen des Moleküls, vorzugsweise jedoch der Carboxyterminus, durch eine Alkoxycarbonylfunktion ersetzt sind:

worin der Rest R des Esters unter Alkyl, (z. B. Methyl, Ethyl, n-Propyl, tert.-Butyl, n-Butyl); Alkoxyalkyl (z. B. Methoxymethyl); Alkoxyacyl (z. B. Acetoxymethyl); Aralkyl (z. B. Benzyl); Aryloxyalkyl (z. B. Phenoxymethyl); Aryl (z. B. Phenyl), die gegebenenfalls durch Halogen, C_1–4-Alkyl oder C_1–4-Alkoxy substituiert sind, ausgewählt ist. Weitere geeignete Arzneistoffvorstufen-Ester finden sich in Design of prodrugs, Bundgaard, H. Ed. Elsevier (1985) (auf diese Literaturstelle wird durch Verweis Bezug genommen). Derartige pharmazeutisch annehmbare Ester werden üblicherweise dann, wenn sie einem Säugetier injiziert werden, in vivo hydrolysiert und in die Säureform der Verbindung der Formel I umgewandelt.The term "pharmaceutically acceptable ester" as used herein, used alone or in combination with another substituent, refers to esters of the compound of formula I wherein any carboxyl functions of the molecule, but preferably the carboxy terminus, are replaced by an alkoxycarbonyl function :

wherein R of the ester is alkyl, (e.g., methyl, ethyl, n -propyl, t -butyl, n -butyl); Alkoxyalkyl (eg, methoxymethyl); Alkoxyacyl (e.g., acetoxymethyl); Aralkyl (eg benzyl); Aryloxyalkyl (eg, phenoxymethyl); Aryl (e.g., phenyl) optionally substituted with halo, C _1-4 alkyl or C _1-4 alkoxy. Other suitable prodrugs are found in Design of prodrugs, Bundgaard, H. Ed. Elsevier (1985) (this reference is incorporated by reference). Such pharmaceutically acceptable esters are usually hydrolyzed in vivo when injected into a mammal and converted to the acid form of the compound of formula I.

Was die vorstehend beschriebenen Ester betrifft, so enthalten etwaige vorhandene Alkylreste vorzugsweise 1 bis 16 Kohlenstoffatome und insbesondere 1 bis 6 Kohlenstoffatome. Etwaige vorhandene Arylreste in derartigen Estern umfassen vorteilhafterweise eine Phenylgruppe.What As regards the esters described above, they contain any existing alkyl radicals preferably 1 to 16 carbon atoms and in particular 1 to 6 carbon atoms. Any existing aryl radicals in such esters advantageously comprise a phenyl group.

Insbesondere kann es sich bei den Estern um einen C_1–16-Alkylester, einen unsubstituierten Benzylester oder um einen Benzylester, der mit mindestens einem Halogenatom, einer C_1–6-Alkylgruppe, einer C_1–6-Alkoxygruppe, einer Nitrogruppe oder einer Trifluormethylgruppe substituiert ist, handeln.In particular, the esters may be a C _1-16 alkyl ester, an unsubstituted benzyl ester or a benzyl ester containing at least one halogen atom, a C _1-6 alkyl group, a C _1-6 alkoxy group, a nitro group, or a Trifluoromethyl group is substituted act.

Der hier verwendete Ausdruck "pharmazeutisch annehmbares Salz" umfasst Salze, die sich von pharmazeutisch verträglichen Basen ableiten. Zu Beispielen für geeignete Basen gehören Cholin, Ethanolamin und Ethylendiamin. Na⁺-, K⁺- und Ca⁺⁺-Salze fallen ebenfalls unter den Umfang der Erfindung (vergl. auch Pharmaceutical salts, S. M. Birge et. al., J. Pharm. Sci., Bd. 66 (1977), S. 1–19; diese Druckschrift wird durch Verweis zum Gegenstand der Beschreibung gemacht).The term "pharmaceutically acceptable salt" as used herein includes salts derived from pharmaceutically acceptable bases. Examples of suitable bases include choline, ethanolamine and ethylenediamine. Na ⁺ , K ⁺ and Ca ⁺⁺ salts also fall within the scope of the invention (see also Pharmaceutical salts, SM Birge et al., J. Pharm. Sci., Vol. 66 (1977), p. 1-19, which is incorporated herein by reference).

Bevorzugte Ausführungsformenpreferred embodiments

Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung umfassen Verbindungen der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen, wobei das 1-Kohlenstoffzentrum die R-Konfiguration aufweist und D syn zum Amid gebunden ist oder syn zu A gebunden ist, wie durch die Strukturen (i) und (ii) dargestellt ist:

Preferred embodiments of the present invention include compounds of formula I as above, wherein the 1-carbon center has the R-configuration and D syn is attached to the amide or is linked syn to A, as represented by structures (i) and (ii) is shown:

Insbesondere ist der Linker D syn zu A gebunden, wie durch die Struktur (ii) dargestellt ist.Especially the linker D syn is bound to A as represented by structure (ii) is shown.

Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung umfassen Verbindungen der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen, wobei im Rest der Formel

W vorzugsweise N bedeutet.Preferred embodiments of the present invention include compounds of the formula I as described above, wherein in the rest of the formula

W is preferably N.

Vorzugsweise hat R²¹ die Bedeutung N, C_1–6-Alkyl, C_1–6-Alkoxy, Hydroxy, Chlor oder N(R²³)₂, wobei R²³ vorzugsweise H oder C_1–6-Alkyl bedeutet. Insbesondere bedeutet R²¹ H oder C_1–6-Alkoxy. Besonders bevorzugt ist für R²¹ die Bedeutung Methoxy.Preferably, R ^{21 is} N, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy, hydroxy, chloro or N (R ²³ ) ₂ , wherein R ^{23 is} preferably H or C _1-6 alkyl. In particular, R ^{21 is} H or C _1-6 alkoxy. Particularly preferred for R ^{21 is} methoxy.

Vorzugsweise bedeutet R²² H, C_1–6-Thioalkyl, C_1–6-Alkoxy, Phenyl oder Het, das aus der folgenden Gruppe ausgewählt ist:

Preferably R ^{22 is} H, C _1-6 thioalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl or Het selected from the following group:

Vorzugsweise hat R²⁴ die Bedeutung H, C_1–6-Alkyl, NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-NH-R²⁵ oder NH-C(O)-OR²⁶.Preferably, R ^{24 is} H, C _1-6 alkyl, NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -NH-R ²⁵ or NH-C (O) -OR ²⁶ .

Insbesondere hat R²² die Bedeutung C_1–4-Alkoxy, Phenyl oder Het, das aus folgender Gruppe ausgewählt ist:

In particular, R ^{22 has} the meaning C _1-4 -alkoxy, phenyl or Het, which is selected from the following group:

Insbesondere hat R²⁴ die Bedeutung H, C_1–6-Alkyl, NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-OR²⁶.In particular, R ^{24 has} the meaning H, C _1-6 -alkyl, NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -OR ²⁶ .

Besonders bevorzugt ist für R²² die Bedeutung Ethoxy oder Het, das aus folgender Gruppe ausgewählt ist:

Particularly preferred for R ^{22 is} ethoxy or Het, which is selected from the following group:

Besonders bevorzugt für R^24a sind die Bedeutungen NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-OR²⁶. Ganz besonders bevorzugt für R^24b sind die Bedeutungen H oder C_1–6-Alkyl.Particularly preferred for R ^24a are the meanings NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -OR ²⁶ . Very particularly preferably for R ^24b , the meanings are H or C _1-6 -alkyl.

Vorzugsweise bedeutet jeder Rest R²⁵ unabhängig voneinander H, C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl. Insbesondere bedeutet R²⁵ C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl. Besonders bevorzugt für R²⁵ ist die Bedeutung C_1–6-Alkyl.Preferably, each R ²⁵ independently of one another is H, C _1-6 -alkyl or C _3-6 -cycloalkyl. In particular, R ^{25 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl. Particularly preferred for R ²⁵ is the meaning C _1-6 alkyl.

Vorzugsweise bedeutet R²⁶ C_1–6-Alkyl.Preferably, R ^{26 is} C _1-6 alkyl.

R3R3

Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung umfassen Verbindungen der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen, wobei der Rest R3 vorzugsweise ein Amid der Formel NH-C(O)-R³², einen Harnstoff der Formel NH-C(O)-NH-R³² oder ein Carbamat der Formel NH-C(O)-OR³² bedeutet. Insbesondere bedeutet R³ ein Carbamat oder einen Harnstoff. Ganz besonders bevorzugt ist für R³ die Bedeutung Carbamat.Preferred embodiments of the present invention include compounds of the formula I as described above, wherein the radical R3 is preferably an amide of the formula NH-C (O) -R ³² , a urea of the formula NH-C (O) -NH-R ³² or a carbamate of the formula NH-C (O) -OR ³² . In particular, R ^{3 is} a carbamate or a urea. Very particularly preferred for R ^{3 is} carbamate.

Vorzugsweise bedeutet R³² C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl. Insbesondere bedeutet R+ C_1–6-Alkyl oder C_4–6-Cycloalkyl. Ganz besonders bevorzugt für R³² sind die Bedeutungen tert.-Butyl, Cyclobutyl oder Cyclopentyl.Preferably, R ^{32 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl. In particular, R + denotes C _1-6 -alkyl or C _4-6 -cycloalkyl. With very particular preference for R ³² , the meanings are tert-butyl, cyclobutyl or cyclopentyl.

DD

Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung umfassen Verbindungen der Formel I, wobei der Linker D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 6 bis 8 Atomen aufweist. Insbesondere handelt es sich beim Linker D um eine Kette mit 7 Atomen.preferred embodiments of the present invention include compounds of the formula I wherein the linker D is a saturated one or unsaturated Alkyl chain having 6 to 8 atoms. In particular, it is the linker D is a chain of 7 atoms.

Vorzugsweise enthält die Kette D ein oder zwei Heteroatome, die unter O, S, NH, N-C_1–6-Alkyl oder N-C_2–7-Acyl ausgewählt sind. Insbesondere enthält die Kette D gegebenenfalls ein Heteroatom, das unter NH oder N-C_2–7-Acyl ausgewählt ist, wobei es sich ganz besonders um N(Ac) handelt, wobei das Heteroatom als Atom 10 der Kette angeordnet ist. Ganz besonders bevorzugt ist es, dass die ein Stickstoffatom enthaltende Kette gesättigt ist.Preferably, the chain D contains one or two heteroatoms selected from O, S, NH, NC _1-6 alkyl or NC _2-7 acyl. In particular, chain D optionally contains a heteroatom selected from NH or NC _2-7 acyl, more particularly N (Ac), with the heteroatom being located as atom 10 of the chain. Most preferably, the nitrogen atom-containing chain is saturated.

Alternativ enthält D ein Heteroatom, das unter O oder S ausgewählt ist. Wenn D eine Länge von 7 Atomen aufweist, befindet sich das O oder S-Atom vorzugsweise in Position 9 der Kette. Vorzugsweise ist diese Kette mit R⁴ substituiert, wobei R⁴ die Bedeutung N oder C_1–6-Alkyl hat. Insbesondere bedeutet R⁴ H oder Methyl. Ganz besonders bevorzugt sind für R⁴ die Bedeutungen H oder 8-(S)-Me. Ganz besonders bevorzugt ist es, dass D gesättigt ist. Alternativ enthält D eine Doppelbindung an der Position 11, 12. Vorzugsweise weist diese Doppelbindung die trans-Konfiguration auf.Alternatively, D contains a heteroatom selected from O or S. When D has a length of 7 atoms, the O or S atom is preferably in position 9 of the chain. Preferably, this chain is substituted with R ⁴ , wherein R ^{4 is} N or C _1-6 alkyl. In particular, R ^{4 is} H or methyl. Most preferably, for R ^4, the meanings are H or 8- (S) -Me. Most preferably, D is saturated. Alternatively, D contains a double bond at position 11, 12. Preferably, this double bond has the trans configuration.

Alternativ bedeutet D eine vollständig aus Kohlenstoffatomen bestehende, gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette. In diesem Fall ist D vorzugsweise gesättigt und weist eine Länge von 7 Atomen auf. Insbesondere ist D mit R⁴ substituiert, wobei R⁴ die Bedeutung H, Oxo, Thio, Hydroxy, Thioalkyl, Alkoxy oder Alkyl hat. Insbesondere bedeutet R⁴ H oder C_1–6-Alkyl. Ganz besonders bevorzugt sind für R⁴ die Bedeutungen H oder Methyl. Besonders bevorzugt ist es, dass R⁴ H oder 10-(S)-Me bedeutet.Alternatively, D represents a fully carbonated, saturated or unsaturated alkylene chain. In this case, D is preferably saturated and has a length of 7 atoms. In particular, D is substituted with R ⁴ , wherein R ^{4 is} H, oxo, thio, hydroxy, thioalkyl, alkoxy or alkyl. In particular, R ^{4 is} H or C _1-6 alkyl. With very particular preference for R ^4, the meanings are H or methyl. It is particularly preferred that R ^{4 is} H or 10- (S) -Me.

Alternativ bedeutet D eine vollständig aus Kohlenstoffatomen bestehende Alkylenkette, die vorzugsweise eine Doppelbindung enthält und eine Länge von 7 Atomen aufweist. Insbesondere befindet sich diese Doppelbindung an der Position 13, 14 der Kette. Insbesondere weist diese Doppelbindung die cis-Konfiguration auf. Vorzugsweise ist diese Kette D mit R⁴ substituiert, wobei R⁴ die Bedeutungen H, Oxo, Hydroxy, Alkoxy oder Alkyl hat. Insbesondere hat R⁴ die Bedeutungen H oder C_1–6-Alkyl. Ganz besonders bevorzugt sind für R⁴ die Bedeutungen H oder Methyl. Am meisten bevorzugt sind für R⁴ die Bedeutungen H oder 10-(S)-Me.Alternatively, D represents an alkylene chain consisting entirely of carbon atoms, which preferably contains one double bond and has a length of 7 atoms. In particular, this double bond is located at position 13, 14 of the chain. In particular, this double bond has the cis configuration. Preferably, this chain D is substituted with R ⁴ , wherein R ^{4 has} the meanings H, oxo, hydroxy, alkoxy or alkyl. In particular, R ^{4 has} the meanings H or C _1-6 alkyl. With very particular preference for R ^4, the meanings are H or methyl. Most preferred for R ⁴ are H or 10- (S) -Me.

AA

Zu bevorzugten Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung gehören Verbindungen der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen, wobei es sich bei A um eine Carbonsäure handelt.To preferred embodiments of the present invention Compounds of the formula I according to the above designs, where A is a carboxylic acid.

Spezielle AusführungsformenSpecial embodiments

Zu bevorzugten Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung gehören Verbindungen der Formel I gemäß den vorstehenden Ausführungen, wobei folgende Bedeutungen vorliegen:
R² bedeutet einen Chinolinsubstituenten (d. h. W hat die Bedeutung N);
R³ bedeutet eine Gruppe der Formel -NH-C(O)-NHR³² oder -NH-C(O)-OR³²,
wobei R³² C_1–4-Alkyl oder C_4–6-Cycloalkyl bedeutet;
D bedeutet eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 6 bis 8 Kohlenstoffatomen, die mit R¹ in syn-Konfiguration zu A verknüpft ist und gegebenenfalls ein oder zwei Heteroatome enthält, die unabhängig voneinander sind und unter O, S oder N-R⁴¹ ausgewählt sind, wobei R⁴¹ die Bedeutung C_2–7-Acyl hat;
R⁴ bedeutet H oder 1 bis 3 Substituenten, die unabhängig voneinander unter Hydroxy oder C_1–6-Alkyl ausgewählt sind; und
A bedeutet eine Carbonsäure oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder einen pharmazeutisch annehmbaren Ester davon.Preferred embodiments of the present invention include compounds of the formula I as described above, where the following meanings are present:
R ^{2 represents} a quinoline substituent (ie, W has the meaning N);
R ^{3 represents} a group of the formula -NH-C (O) -NHR ³² or -NH-C (O) -OR ³² ,
wherein R ^{32 is} C _1-4 alkyl or C _4-6 cycloalkyl;
D represents a saturated or unsaturated alkylene chain of 6 to 8 carbon atoms which is linked to R ¹ in syn configuration to A and optionally contains one or two heteroatoms independently of one another which are selected from O, S or NR ⁴¹ , wherein R ^{41 is} C _2-7 acyl;
R ^{4 represents} H or 1 to 3 substituents independently selected from hydroxy or C _1-6 alkyl; and
A represents a carboxylic acid or a pharmaceutically acceptable salt or a pharmaceutically acceptable ester thereof.

Besonders bevorzugt sind Verbindungen der Formel I, worin R¹ die vorstehend definierten Bedeutungen hat; R²¹ H oder Methoxy bedeutet;
R²² C_1–6-Alkoxy oder Het bedeutet, das aus folgender Gruppe ausgewählt ist

wobei R^24a H, C_1–6-Alkyl, NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-NH-R²⁵ bedeutet,
wobei R²⁵ H, C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl bedeutet;
oder R^24a NH-C(O)-OR²⁶ bedeutet, wobei R²⁶ C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl bedeutet;
und R^24b H oder C_1–6-Alkyl bedeutet;
R³ einen Harnstoff der Formel NH-C(O)-NHR³² oder ein Carbamat der Formel NH-C(O)-OR³² bedeutet, wobei R³² C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl bedeutet;
D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 7 Kohlenstoffatomen bedeutet, die gegebenenfalls eine Doppelbindung in der Position 11, 12 oder 13, 14 enthält;
wobei die Kette D gegebenenfalls ein Heteroatom enthält, das unabhängig unter O, S, NH, N(Me) oder N(Ac) ausgewählt ist; und
R⁴ H oder C_1–6-Alkyl bedeutet.Particular preference is given to compounds of the formula I in which R ^{1 has} the meanings defined above; R ^{21 is} H or methoxy;
R ^{22 is} C _1-6 -alkoxy or Het selected from the following group

where R ^{24a is} H, C _1-6 -alkyl, NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -NH-R ²⁵ ,
wherein R ^{25 is} H, C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl;
or R ^{24a is} NH-C (O) -OR ²⁶ , wherein R ^{26 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl;
and R ^{24b is} H or C _1-6 alkyl;
R ^{3 is} a urea of the formula NH-C (O) -NHR ³² or a carbamate of the formula NH-C (O) -OR ³² , where R ^{32 is} C _1-6 -alkyl or C _3-6 -cycloalkyl;
D represents a saturated or unsaturated alkylene chain of 7 carbon atoms optionally containing a double bond in position 11, 12 or 13, 14;
wherein chain D optionally contains a heteroatom independently selected from O, S, NH, N (Me) or N (Ac); and
R ^{4 is} H or C _1-6 alkyl.

Ganz besonders bevorzugt werden Verbindungen der Formel I, wobei R²¹ Methoxy bedeutet und R²² Ethoxy oder einen Rest der folgenden Formel bedeutet

wobei R^24a einen Rest der Formeln NH-(C_1–4-Alkyl), NH-C(O)-(C_1–4-Alkyl}; oder NH-C(O)-O-(C_1–4-Alkyl) bedeutet; und
D gesättigt ist oder eine cis-Doppelbindung in der Position 13, 14 enthält.Very particular preference is given to compounds of the formula I in which R ^{21 is} methoxy and R ^{22 is} ethoxy or a radical of the following formula

wherein R ^{24a is} a radical of the formulas NH- (C _1-4 -alkyl), NH-C (O) - (C _1-4 -alkyl), or NH-C (O) -O- (C _1-4 -alkyl); Alkyl); and
D is saturated or contains a cis double bond in position 13, 14.

Schließlich fallen unter den Umfang der Erfindung sämtliche Verbindungen der Formel I, die in den Tabellen 1 bis 9 aufgeführt sind.Finally fall all of the scope of the invention Compounds of the formula I which are listed in Tables 1 to 9.

Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können oral, parenteral oder über ein implantiertes Reservoir verabreicht werden. Eine orale Verabreichung oder eine Verabreichung durch Injektion werden bevorzugt. Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können beliebige herkömmliche nicht-toxische, pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe, Hilfsmittel oder Vehikel enthalten. In einigen Fällen kann der pH-Wert der Zubereitung mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren, Basen oder Puffern eingestellt werden, um die Stabilität der zubereiteten Verbindung oder ihrer Abgabeform zu erhöhen. Der hier verwendete Ausdruck "parenteral" umfasst eine subkutane, intrakutane, intravenöse, intramuskuläre, intraartikuläre, intrasynoviale, intrasternale, intrathekale und intraläsionale Injektion oder Infusion.The pharmaceutical according to the invention Compositions can oral, parenteral or above implanted reservoir. Oral administration or administration by injection is preferred. The pharmaceutical according to the invention Compositions can any conventional non-toxic, pharmaceutically acceptable carriers, adjuvants or Contain vehicle. In some cases the pH of the preparation may be pharmaceutically acceptable acids, Bases or buffers are adjusted to the stability of the prepared Compound or to increase their delivery form. The term "parenteral" as used herein includes a subcutaneous, intracutaneous, intravenous, intramuscular, intraarticular, intrasynovial, intrasternal, intrathecal and intralesional Injection or infusion.

Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in Form eines sterilen, injizierbaren Präparats vorliegen, z. B. als eine sterile injizierbare wässrige oder ölartige Suspension. Diese Suspension kann nach bekannten Techniken unter Verwendung geeigneter Dispergier- oder Netzmittel (z. B. Tween 80) und Suspendiermittel zubereitet werden.The pharmaceutical compositions may take the form of a sterile, be present in injectable preparation, z. B. as a sterile injectable aqueous or oleaginous Suspension. This suspension can be prepared by known techniques Use of suitable dispersing or wetting agents (eg Tween 80) and suspending agents.

Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können auf oralem Wege in beliebigen, oral annehmbaren Dosierungsformen verabreicht werden, wozu (ohne Beschränkung hierauf) Kapseln, Tabletten und wässrige Suspensionen und Lösungen gehören. Im Fall von Tabletten für die orale Anwendung umfassen herkömmlicherweise verwendete Trägerstoffe Lactose und Maisstärke. Typischerweise werden auch Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, zugesetzt. Für die orale Verabreichung in Kapselform gehören zu geeigneten Verbindungsmitteln Lactose und getrocknete Maisstärke. Bei Verabreichung von wässrigen Suspensionen auf oralem Wege wird der Wirkstoff mit Emulgier- und Suspendiermitteln vereinigt. Gegebenenfalls können bestimmte Süßungsmittel und/oder Aromastoffe und/oder farbgebende Mittel zugesetzt werden.The pharmaceutical compositions of the present invention can be administered orally in any of the orally acceptable dosage forms, including but not limited to capsules, Tablets and aqueous suspensions and solutions include. In the case of tablets for oral use, conventionally used excipients include lactose and corn starch. Typically, lubricants such as magnesium stearate are also added. For oral administration in capsule form, suitable laxatives include lactose and dried cornstarch. When aqueous suspensions are administered orally, the active ingredient is combined with emulsifying and suspending agents. Optionally, certain sweetening and / or flavoring and / or coloring agents may be added.

Weitere geeignete Vehikel oder Trägerstoffe für die vorerwähnten Zubereitungen und Zusammensetzungen finden sich in üblichen pharmazeutischen Handbüchern, z. B. in "Remington's Pharmaceutical Science", 19. Auflg., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995.Further suitable vehicles or carriers for the aforementioned Preparations and compositions are found in conventional pharmaceutical manuals, z. In "Remington's Pharmaceutical Science ", 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995.

Dosierungen von etwa 0,01 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht pro Tag und vorzugsweise von etwa 0,5 bis etwa 75 mg/kg Körpergewicht pro Tag der hier beschriebenen Protease-Inhibitor-Verbindungen eignen sich bei einer Monotherapie zur Prophylaxe und Therapie von HCV-vermittelten Krankheiten. Typischerweise werden die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen etwa 1- bis etwa 5-mal täglich oder alternativ in Form einer kontinuierlichen Infusion verabreicht. Eine derartige Verabreichung kann als eine chronische oder akute Therapie eingesetzt werden. Die Menge des Wirkstoffes, die mit den Trägermaterialien vereinigt werden kann, um eine einzelne Dosierungsform herzustellen, hängt von dem zu behandelnden Wirt und dem speziellen Verabreichungsweg ab. Ein typisches Präparat enthält etwa 5 bis etwa 95% Wirkstoff (Gew./Gew.). Vorzugsweise enthalten derartige Präparate etwa 20 bis etwa 80% Wirkstoff.dosages from about 0.01 to about 100 mg / kg of body weight per day, and preferably from about 0.5 to about 75 mg / kg of body weight per day of the protease inhibitor compounds described herein are suitable in a monotherapy for the prophylaxis and therapy of HCV-mediated Diseases. Typically, the pharmaceutical of the invention Compositions about 1 to about 5 times daily or alternatively in the form administered a continuous infusion. Such administration can be used as a chronic or acute therapy. The amount of the active ingredient that is combined with the carrier materials can to produce a single dosage form depends on the host to be treated and the particular route of administration. A typical preparation contains from about 5 to about 95% active ingredient (w / w). Preferably included such preparations about 20 to about 80% active ingredient.

Wie es für den Fachmann ersichtlich ist, können im Vergleich zu den vorerwähnten Dosen niedrigere oder höhere Dosen erforderlich sein. Spezielle Dosierungs- und Behandlungsschemata für jeden speziellen Patienten hängen von einer Reihe von Faktoren ab, wozu die Aktivität der spezifischen verwendeten Verbindung, das Alter, das Körpergewicht, der allgemeine Gesundheitszustand, das Geschlecht, die Nahrung, der Zeitpunkt der Verabreichung, die Ausscheidungsgeschwindigkeit, die Arzneistoffkombination, die Schwere und der Verlauf der Infektion, die Anfälligkeit des Patienten für die Infektion und die Beurteilung des behandelnden Arztes gehören. Im allgemeinen wird die Behandlung mit geringen Dosen, die erheblich unter der optimalen Dosis des Peptids liegen, eingeleitet. Anschließend wird die Dosierung in kleinen Schritten erhöht, bis unter den gegebenen Umständen die optimale Wirkung erzielt wird. Im allgemeinen wird die Verbindung insbesondere in einem Konzentrationsbereich verabreicht, der allgemein eine antivirale Wirksamkeit ergibt, ohne dass irgendwelche schädlichen oder nachteiligen Nebenwirkungen hervorgerufen werden.As it for the skilled person can see compared to the aforementioned Cans lower or higher Doses may be required. Special dosage and treatment schemes for each hanging on special patients depends on a number of factors, including the activity of the specific used compound, age, body weight, general Health status, sex, food, time of Administration, the rate of excretion, the drug combination, the severity and the course of the infection, the susceptibility of the patient for the infection and the judgment of the attending physician belong. in the Generally, treatment with low doses will be significant below the optimal dose of the peptide. Subsequently, will the dosage increases in small increments until given below circumstances the optimal effect is achieved. In general, the connection will be especially administered in a concentration range generally gives an antiviral effect without any harmful or adverse side effects.

Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen eine Kombination einer Verbindung der Formel I und einen oder mehrere zusätzliche therapeutische oder prophylaktische Mittel enthalten, so sollen die Verbindung und das zusätzliche Mittel in Dosierungsmengen von etwa 10 bis 100% und vorzugsweise von etwa 10 bis 80% der Dosierung, die normalerweise bei einer Monotherapie verabreicht wird, vorliegen.If the compounds of the invention a combination of a compound of formula I and one or more additional contain therapeutic or prophylactic agents, so should the connection and the extra Agent in dosage amounts of about 10 to 100% and preferably from about 10 to 80% of the dosage normally given by monotherapy is administered.

Wenn diese Verbindungen oder ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger zubereitet werden, so kann die erhaltene Zusammensetzung in vivo an Säugetiere, z. B. an den Menschen, verabreicht werden, um HCV-NS3-Protease zu hemmen oder um eine HCV-Virusinfektion zu behandeln oder zu verhindern. Eine derartige Behandlung kann auch unter Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit Mitteln erreicht werden, zu denen (ohne Beschränkung hierauf) folgende Mittel gehören: immunomodulatorische Mittel, wie α-, β-, oder γ-Interferone; andere antivirale Mittel, wie Ribavirin und Amantadin; andere Inhibitoren von HCV-NS3-Protease; Inhibitoren von anderen Zielen im HCV-Lebenszyklus, wie Helicase, Polymerase, Metalloprotease oder eine interne Ribosomen-Zugangsstelle (internal ribosome entry site = IRES); oder Kombinationen davon. Die zusätzlichen Mittel können mit den erfindungsgemäßen Verbindungen unter Schaffung einer einzelnen Dosierungsform kombiniert werden. Alternativ können diese zusätzlichen Mittel getrennt einem Säugetier als Bestandteil einer Mehrfachdosierungsform verabreicht werden.If these compounds or their pharmaceutically acceptable salts together can be prepared with a pharmaceutically acceptable carrier, so may the composition obtained in vivo to mammals, e.g. To humans, be administered to inhibit HCV NS3 protease or to a HCV virus infection treat or prevent. Such a treatment can also using the compounds of the invention in combination be achieved by means of which (without limitation) following means include: immunomodulatory agents, such as α-, β-, or γ-interferons; other antiviral agents, such as ribavirin and amantadine; other inhibitors of HCV NS3 protease; Inhibitors of other targets in the HCV life cycle, such as helicase, Polymerase, metalloprotease or an internal ribosome access site (internal ribosome entry site = IRES); or combinations thereof. The additional Means can with the compounds of the invention be combined to create a single dosage form. Alternatively you can these extra Agent isolated to a mammal as part of a multiple dosage form.

Gemäß einer weiteren Ausführungsform der Erfindung werden Verfahren zur Hemmung der HVC-NS3-Protease-Aktivität in Säugetieren bereitgestellt, indem man eine Verbindung der Formel I verabreicht, wobei die Substituenten die vorstehend angegebenen Bedeutungen haben.According to one another embodiment The invention provides methods for inhibiting HVC NS3 protease activity in mammals provided by administering a compound of formula I, where the substituents have the meanings given above.

Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform eignen sich diese Verfahren zur Verringerung der HCV-NS3-Protease-Aktivität in einem Säugetier. Wenn die pharmazeutische Zusammensetzung nur eine erfindungsgemäße Verbindung als Wirkstoff enthält, können derartige Verfahren zusätzlich die Stufe der Verabreichung eines unter folgenden Mitteln ausgewählten Mittels an das Säugetier umfassen: ein immunomodulatorisches Mittel, ein antivirales Mittel, ein HCV-Protease-Inhibitor oder ein Inhibitor von anderen Zielen im HCV-Lebenszyklus, wie Helicase, Polymerase oder Metalloprotease. Ein derartiges zusätzliches Mittel kann dem Säugetier vor, gleichzeitig mit oder nach der Verabreichung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung verabreicht werden.In a preferred embodiment, these methods are useful for reducing HCV NS3 protease activity in a mammal. When the pharmaceutical composition contains only a compound of the present invention as an active ingredient, such methods may additionally comprise the step of administering to the mammal an agent selected from: an immunomodulatory agent, an antiviral agent, an HCV protease inhibitor or an inhibitor of others Goals in the HCV life cycle, such as helicase, polymerase or metalloprotease. Such additional agent may be administered to the mammal prior to, simultaneously with or after the administration of the composition of the invention.

In einer alternativen bevorzugten Ausführungsform eignen sich diese Verfahren zur Hemmung der viralen Replikation in einem Säugetier. Derartige Verfahren eignen sich zur Therapie oder Prophylaxe von HCV-Erkrankungen. Wenn die pharmazeutische Zusammensetzung nur eine erfindungsgemäße Verbindung als Wirkstoff enthält, können derartige Verfahren zusätzlich die Stufe der Verabreichung eines unter folgenden Mitteln ausgewählten Mittels an das Säugetier umfassen: ein immunomodulatorisches Mittel, ein antivirales Mittel, ein HCV-Protease-Inhibitor oder ein Inhibitor von anderen Zielen im HCV-Lebenszyklus. Ein derartiges zusätzliches Mittel kann dem Säugetier vor, gleichzeitig mit oder nach der Verabreichung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung verabreicht werden.In an alternative preferred embodiment, these are suitable A method of inhibiting viral replication in a mammal. Such methods are suitable for the therapy or prophylaxis of HCV diseases. If the pharmaceutical composition only a compound of the invention as Contains active substance, can Such methods in addition the step of administering an agent selected from the following means to the mammal include: an immunomodulatory agent, an antiviral agent, an HCV protease inhibitor or an inhibitor of other targets in the HCV life cycle. Such an additional agent may be given to the mammal before, simultaneously with or after the administration of the composition according to the invention be administered.

Die vorstehend dargelegten Verbindungen können auch als Laboratoriumsreagenzien verwendet werden. Die Anmelderin stellt erstmals Verbindungen mit einem niedrigen Molekulargewicht bereit, die eine hohe Aktivität und Spezifität gegen die HCV-NS3-Protease besitzen. Einige der vorliegenden Verbindungen können als Instrumente bei der Bereitstellung von Forschungswerkzeugen zur Konzeption von Tests auf virale Replikation, für die Validierung von tierischen Testsystemen und für strukturelle biologische Untersuchungen zur weiteren Aufklärung der HCV-Krankheitsmechanismen verwendet werden.The The compounds set forth above can also be used as laboratory reagents be used. The applicant for the first time makes connections a low molecular weight ready, which has high activity and specificity against possess the HCV NS3 protease. Some of the present compounds can as Instruments in the provision of research tools for Conception of tests on viral replication, for the validation of animal Test systems and for Structural biological investigations to further elucidate the HCV disease mechanisms are used.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch zur Behandlung oder Verhinderung von viralen Verunreinigungen von Materialien und somit zur Verringerung der Gefahr von viralen Infektionen von Laboratoriumspersonal oder medizinischem Personal oder von Patienten, die in Kontakt mit derartigen Materialien kommen (z. B. Blut, Gewebe, chirurgische Instrumente und Kleidungsstücke, Laboratoriumsinstrumente oder -kleidungsstücke sowie Blutsammel- oder -transfusionsvorrichtungen und -materialien), verwendet werden.The Compounds of the invention can also for the treatment or prevention of viral contaminants of materials and thus reduce the risk of viral Infections of laboratory personnel or medical personnel or of patients who come in contact with such materials (eg, blood, tissues, surgical instruments and garments, laboratory instruments or garments and blood collection or transfusion devices and materials), be used.

Methodikmethodology

Mehrere Wege zur Durchführung der Synthese von acyclischen Zwischenprodukten der Verbindungen der Formel I sind in WO-00/09543 und WO-00/09558 beschrieben.Several ways to carry out the synthesis of acyclic intermediates of the compounds of formula I are in WO-00/09543 and WO-00/09558 described.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden nach dem allgemeinen Verfahren, das in den Schemata I, II und III dargestellt ist, synthetisiert (wobei PG eine geeignete Schutzgruppe bedeutet). (In sämtlichen nachstehend dargestellten Schemata hat D' die gleiche Bedeutung wie D, ist jedoch um 2 bis 5 Atome kürzer).The Compounds of the invention according to the general procedure described in Schemes I, II and III is synthesized (wherein PG is a suitable Protecting group means). (In all below Schemes has D 'the same meaning as D, but is shorter by 2 to 5 atoms).

Wenn die Erfindung Verbindungen der Formel I betrifft, bei denen A ein Nsubstituiertes Amid bedeutet, wird Vinyl-ACCA oder Homoallyl -ACCA vor der Kupplung an P2 an ein geeignetes Amin gekuppelt. Eine derartige Kupplung ist dem Fachmann geläufig. Wie es für den Fachmann ersichtlich ist, ist ein derartiges Amid (A) nicht geschützt, sondern trägt etwaige einschlägige Substituenten R⁵ gemäß der vorstehenden Definition. Die Ringschlussreaktion (Makrocyclisierung) wird entweder durch Olefin-Metathese (Schema I) durchgeführt oder, wenn der Linker ein Stickstoffatom enthält, durch reduktive Aminierung (Schema II) oder durch Bildung einer Peptidbindung (Schema III).When the invention relates to compounds of formula I in which A is a N-substituted amide, vinyl-ACCA or homoallyl-ACCA is coupled to a suitable amine prior to coupling to P2. Such a coupling is familiar to the person skilled in the art. As will be apparent to those skilled in the art, such amide (A) is not protected but carries any relevant substituents R ^{5 as} defined above. The ring-closure reaction (macrocyclization) is performed either by olefin metathesis (Scheme I) or, if the linker contains a nitrogen atom, by reductive amination (Scheme II) or by formation of a peptide bond (Scheme III).

Einzelheiten über diese Verfahren sind nachstehend aufgeführt. A. Makrocyclisierung über eine Olefin-Metathese Schema I

Details of these procedures are listed below. A. Macrocyclization Via Olefin Metathesis Scheme I

Die Erfindung betrifft ferner Zwischenprodukte der Formeln (A), (D), (E) und

wobei X die Bedeutung PG oder R² hat;
jedes PG unabhängig voneinander eine Schutzgruppe bedeutet;
R² eine Gruppe der Formel

bedeutet, wobei R²¹, R²² und W die in Anspruch 1 definierte Bedeutung haben;
A' eine geschützte Carbonsäure bedeutet;

worin X, A' und PG die für die Formeln (A) und (B) definierten Bedeutungen haben;
n 0 oder 2 bedeutet;
D' die gleiche Bedeutung wie D hat, jedoch 2 bis 5 Atome kürzer ist; und
D die gleiche Bedeutung wie in der Formel (I) hat;

worin R² die vorstehend für die Formeln (A) und (B) definierten Bedeutungen hat, R³ und D die für die Formel (I) definierten Bedeutungen haben und
A' eine geschützte Carbonsäure bedeutet.The invention further relates to intermediates of the formulas (A), (D), (E) and

wherein X is PG or R ² ;
each PG independently represents a protecting group;
R ^{2 is} a group of the formula

wherein R ²¹ , R ²² and W have the meaning defined in claim 1;
A 'is a protected carboxylic acid;

wherein X, A 'and PG have the meanings defined for the formulas (A) and (B);
n is 0 or 2;
D 'has the same meaning as D, but is 2 to 5 atoms shorter; and
D has the same meaning as in the formula (I);

wherein R ^{2 has} the meanings defined above for the formulas (A) and (B), R ³ and D have the meanings defined for the formula (I), and
A 'is a protected carboxylic acid.

Schema IScheme I

Es gibt zur Durchführung der Kupplungssequenz mehrere Wege, die für den Fachmann leicht ersichtlich sind. Ausgehend von 4-(S)-Hydroxyprolin kann der Substituent an der 4-Hydroxygruppe über eine Mitsunobu-Reaktion (beschrieben von Mitsunobu, Synthesis, Januar 1981, S. 1–28; Rano et. al., Tet. Lett., Bd.36 (1994), S. 3779–3792; Krchnak et. al., Tet. Lett., Bd. 36 (1995), S. 6193–6196) vor oder nach der Makrocyclisierung eingebaut werden. Alternativ kann der Aufbau mit dem erforderlichen 4-(R)-hydroxysubstituierten Prolin gemäß dem allgemeinen Verfahren von WO-00/09543 und WO-00/09558 (vergl. die nachstehenden Ausführungen bezüglich spezieller Beispiele für diese Fragmente) vorgenommen werden.There are several ways to carry out the coupling sequence which will be readily apparent to one skilled in the art. Starting from 4- (S) -hydroxyproline, the substituent on the 4-hydroxy group can be resolved via a Mitsunobu reaction (described by Mitsunobu, Synthesis, January 1981, pp. 1-28, Rano et al., Tet. Lett., Vol 36: 3779-3792 (1994), Krchnak et al., Tet. Lett., Vol. 36 (1995), pp. 6193-6196) may be incorporated before or after macrocyclization. Alternatively, the constitution with the required 4- (R) -hydroxy-substituted proline according to the general method of WO-00/09543 and WO-00/09558 (See below for specific examples of these fragments).

Stufen A, B, CSteps A, B, C

Kurz zusammengefasst, die Reste P1, P2 und P3 können gemäß bekannten Peptid-Kupplungstechniken verknüpft werden; vergl. die allgemeine Beschreibung in WO-00/09543 und WO-00/09558 .Briefly, residues P1, P2 and P3 can be linked according to known peptide coupling techniques; See the general description in WO-00/09543 and WO-00/09558 ,

Stufe DStage D

Die Bildung des Makrocyclus kann über eine Olefin-Metathese unter Verwendung eines Katalysators auf Ru-Basis durchgeführt werden, beispielsweise mit einem Katalysator gemäß S. J. Miller, H. E. Blackwell, R. N. Grubbs, J. Am. Chem. Soc., Bd. 118 (1996), S. 9606–9614 (a); J. S. Kingsbury, J. P. A. Harrity, P. J. Bonitatebus, A. H. Hoveyda, J. Am. Chem. Soc., Bd. 121 (1999), S. 791–799 (b); und J. Huang, E. D. Stevens, S. P. Nolan, J. L. Petersen, J. Am. Chem. Soc., Bd. 121 (1999), S. 2674–2678 (c). Es ist ersichtlich, dass für diese Reaktion Katalysatoren verwendet werden können, die andere Übergangsmetalle enthalten, z. B. Mo.The Formation of the macrocycle can be over an olefin metathesis using a Ru-based catalyst carried out with, for example, a catalyst according to S.J. Miller, H.E. Blackwell, R. N. Grubbs, J. Am. Chem. Soc., Vol. 118 (1996), pp. 9606-9614 (a); Kingsley Kings, J.P.A. Harrity, P.J. Bonitatebus, A.H. Hoveyda, J.S. J. Am. Chem. Soc., Vol. 121 (1999), pp. 791-799 (b); and J. Huang, E. D. Stevens, S.P. Nolan, J.L. Petersen, J. Am. Chem. Soc., Vol. 121 (1999), pp. 2674-2678 (C). It can be seen that for this Reaction catalysts can be used, the other transition metals included, for. B. Mo.

Stufe ELevel E

Gegebenenfalls wird die Doppelbindung durch übliche Hydrierungsverfahren, die aus dem Stand der Technik bekannt sind, reduziert. Wenn es sich bei A' um eine geschützte Carbonsäure handelt, wird diese ebenfalls in geeigneter Weise von Schutzgruppen befreit.Possibly is the double bond by usual Hydrogenation processes known in the art reduced. If it is A 'um a protected carboxylic acid this is also suitably protected by protective groups freed.

B. Makrocyclisierung über eine reduktive Aminierung (für Linker mit einem Gehalt an N)B. macrocyclization over a reductive amination (for Linker containing N)

Wenn der Linker ein Stickstoffatom enthält, wird die Makrocyclisierung durch reduktive Aminierung gemäß Schema II durchgeführt, wodurch man Inhibitoren der allgemeinen Struktur II erhält. Schema 11

When the linker contains a nitrogen atom, the macrocyclization is carried out by reductive amination according to Scheme II to give inhibitors of general structure II. Scheme 11

Stufe ALevel A

Eine Hydroborierung der Doppelbindung gemäß dem Verfahren von Brown (H. C. Brown und B. C. Subba Rao, J. Am. Chem. Soc., Bd. 81 (1959), S. 6434–6437) unter anschließender Oxidation des erhaltenen Alkohols (beispielsweise über Dess-Martin-Periodinan, J. Am. Chem. Soc., Bd. 113 (1991), S. 7277–7287) liefert den entsprechenden Aldehyd.A Hydroboration of the double bond according to the method of Brown (H. C. Brown and B.C. Subba Rao, J. Am. Chem. Soc., Vol. 81 (1959), P. 6434-6437) under subsequent Oxidation of the resulting alcohol (for example via Dess-Martin periodinan, J. Am. Chem. Soc., 113: 7277-7287 (1991)) provides the corresponding Aldehyde.

Stufe BLevel B

Eine Hydrierung in Gegenwart von Säure führt zur Entfernung der Aminoschutzgruppe, wonach eine Makrocyclisierung über eine reduktive Aminierung erfolgt. Die bei dieser Synthese verwendete P3-Einheit lässt sich leicht aus verschiedenen Aminosäuren, wie Lysin, Ornithin, Glutamin (gemäß einer Hofmann-Reaktion, Ber., Bd. 14 (1881), S. 2725) und andere, erhalten. Diese Synthesemodifikationen stellen aus dem Stand der Technik bekannte Verfahren dar.A Hydrogenation in the presence of acid leads to Removal of the amino protecting group, followed by macrocyclization over a reductive amination occurs. The used in this synthesis P3 unit can be easy from different amino acids, such as lysine, ornithine, glutamine (according to a Hofmann reaction, Ber., Vol. 14 (1881), p. 2725) and others. These synthesis modifications represent methods known from the prior art.

Stufe CStage C

Gegebenenfalls wird das sekundäre Amin im Linker D (gebildet nach der Stufe D) mit Alkylhalogeniden alkyliert oder mit Alkyl- oder Arylsäurechloriden acetyliert, wobei man sich bekannter Verfahren bedient, wodurch man Inhibitoren der allgemeinen Strukturformel II erhält. Wenn A' eine geschützte Carbonsäure bedeutet, wird sie ebenfalls in entsprechender Weise von Schutzgruppen befreit. Possibly becomes the secondary one Amine in the linker D (formed after step D) with alkyl halides alkylated or acetylated with alkyl or Arylsäurechloriden, wherein one uses known methods, which inhibitors of general structural formula II. When A 'is a protected carboxylic acid, it will likewise be released from protective groups in a corresponding manner.

Die Erfindung betrifft ferner Zwischenprodukte der Formeln (J), (K) und (L):

wobei R² der Definition für die Formeln (A) und (B) entspricht und R³ die für die Formel (I) definierten Bedeutungen hat;
m einen Wert von 1 bis 5 hat;
n einen Wert von 1 bis 5 hat;
A' eine geschützte Carbonsäure bedeutet;
und Cbz Benzyloxycarbonyl bedeutet.The invention further relates to intermediates of formulas (J), (K) and (L):

wherein R ² corresponds to the definition for the formulas (A) and (B) and R ^{3 has} the meanings defined for the formula (I);
m has a value of 1 to 5;
n has a value of 1 to 5;
A 'is a protected carboxylic acid;
and Cbz is benzyloxycarbonyl.

C. Makrocyclisierung über eine LactambildungC. macrocyclization over one lactam

Alternativ lassen sich diese makrocyclischen Verbindungen der allgemeinen Strukturformeln I und II auch auf anderen Wegen synthetisieren. Beispielsweise können P1 und P3 zunächst mit dem Linker D verbunden und anschließend an P2 gekuppelt werden, wobei es sich bei der Makrocyclisierungsreaktion um eine Lactambildung gemäß zwei möglichen Wegen handelt, wie der Fachmann erkennt und in Schema III dargestellt ist. Schema III

Alternatively, these macrocyclic compounds of the general structural formulas I and II can also be synthesized in other ways. For example, P1 and P3 may be first linked to linker D and then coupled to P2, where the macrocyclization reaction is a lactam formation according to two possible routes, as those skilled in the art will recognize and illustrated in Scheme III. Scheme III

Synthese von P1Synthesis of P1

Die Synthese von Inhibitoren der allgemeinen Strukturformeln I und II erfordert die gleichen P1-Fragmente:

• a) Vinyl-ACCA, dessen Synthese und Auftrennung in WO-00/09543 und WO-00/09558 beschrieben ist, oder
• b) Homoallyl-ACCA (Beispiel 1, Verbindung 1f).

The synthesis of inhibitors of general structural formulas I and II requires the same P1 fragments:

• a) Vinyl-ACCA, whose synthesis and separation in WO-00/09543 and WO-00/09558 is described, or
• b) Homoallyl-ACCA (Example 1, Compound 1f).

Synthese von P2Synthesis of P2

Einige der für die Synthese der Verbindungen der Formel I verwendeten P2-Fragmente sind in WO-00/09543 und WO-00/09558 beschrieben.Some of the P2 fragments used for the synthesis of the compounds of the formula I are in WO-00/09543 and WO-00/09558 described.

Weitere P2-Fragmente werden folgendermaßen synthetisiert: a. Synthese von 2-"Het"-4-Hydroxy-7-methoxychinolin-Derivaten (i) Weg, ausgehend von der entsprechenden "Het"-Carbonsäure IVb Schema IV

Other P2 fragments are synthesized as follows: a. Synthesis of 2- "Het" -4-Hydroxy-7-Methoxyquinoline Derivatives (i) Route starting from the corresponding "Het" carboxylic acid IVb Scheme IV

Die Synthese wird gemäß einem modifizierten Verfahren von Li et. al., J. Med. Chem., Bd. 34 (1994), S. 3400–3407, durchgeführt. Das Zwischenprodukt IVa, in dem R21 = OMe (Beispiel 7, Verbindung 7b), wird gemäß Brown et. al., J. Med. Chem., Bd. 32 (1989), S. 807–826, hergestellt.The Synthesis is according to a modified methods of Li et. al., J. Med. Chem., Vol. 34 (1994), p. 3400-3407, carried out. The intermediate IVa in which R21 = OMe (Example 7, compound 7b), according to Brown et. al., J. Med. Chem., 32: 807-826 (1989).

Stufe ALevel A

Das Zwischenprodukt IVa wird mit heterocyclischen Carbonsäuren IVb unter basischen Bedingungen mit POCl₃ zur Aktivierung der Carboxylatgruppe gekuppelt. Verschiedene Carbonsäuren der allgemeinen Strukturformel IVb werden zur Herstellung von Inhibitoren verwendet. Diese sind entweder handelsüblich, werden gemäß den Schemata V, VI und VII synthetisiert oder werden individuell unter Verwendung von in den speziellen Beispielen beschriebenen Verfahren synthetisiert.Intermediate IVa is coupled with heterocyclic carboxylic acids IVb under basic conditions with POCl ₃ to activate the carboxylate group. Various carboxylic acids of general structural formula IVb are used to prepare inhibitors. These are either commercially available, synthesized according to Schemes V, VI and VII, or individually synthesized using methods described in the Specific Examples.

Stufe BLevel B

Ein Ringschluss und eine anschließende Dehydratisierung wird unter basischen Bedingungen erreicht, wodurch man Chinoline der allgemeinen Strukturformel IVd erhält.One Ring closure and a subsequent Dehydration is achieved under basic conditions, whereby to obtain quinolines of the general structural formula IVd.

(i.a). Synthese von "Het"-Carbonsäuren der allgemeinen Formel IVb(I.a). Synthesis of "Het" carboxylic acids of general formula IVb

Synthese von 2-(subst.)-Amino-4-carboxyaminothiazol-Derivaten (Vc)Synthesis of 2- (substituted) amino-4-carboxyaminothiazole derivatives (Vc)

Man bedient sich des modifizierten Verfahrens von Berdikhina et al., Chem. Heterocycl. Compd. (Engl. Transl.), Bd. 4 (1991), S. 427–433.you uses the modified method of Berdikhina et al. Chem. Heterocycl. Compd. (Engl. Transl.), Vol. 4 (1991), pp. 427-433.

Schema V

Scheme V

Verschiedene 2-Alkylaminothiazolyl-4-carbonsäuren, Verbindungen der allgemeinen Strukturformel Vc, werden unter Anwendung des allgemeinen Syntheseverfahrens gemäß Schema V unter Verwendung von Thioharnstoffen (Va) mit verschiedenen Alkylsubstituenten (R²⁵ = Alkylgruppe) und 3-Brombrenztraubensäure hergestellt. Dieser Typ einer Kondensationsreaktion ist aus dem Stand der Technik bekannt. Alternativ werden P2-Fragmente, die die 2-Aminosubst.-thiazol-Derivate enthalten, aus dem entsprechenden 2-Carboxylderivat gemäß der Darstellung in Schema VI nach dem Verfahren von P. C. Unangst, D. T. Connor, J. Heterocyc. Chem., Bd. 29 (5) (1992), S. 1097–1100, synthetisiert. Schema VI

Various 2-alkylaminothiazolyl-4-carboxylic acids, compounds of general structural formula Vc, are prepared using the general synthetic procedure of Scheme V using thioureas (Va) having various alkyl substituents (R ²⁵ = alkyl group) and 3-bromopreneic acid. This type of condensation reaction is known in the art. Alternatively, P2 fragments containing the 2-amino-substituted thiazole derivatives are prepared from the corresponding 2-carboxyl derivative as shown in Scheme VI by the method of PC Unangst, DT Connor, J. Heterocyc. Chem., Vol. 29 (5) (1992), pp. 1097-1100. Scheme VI

Beispiele für dieses Verfahren sind in WO-00/09543 und WO-00/09558 beschrieben.Examples of this method are in WO-00/09543 and WO-00/09558 described.

Synthese von 2-Carboxy-4-subst.-aminothiazol-Derivaten VIId Verschiedene 4-Alkylthiazolyl-2-carbonsäuren, Verbindungen der allgemeinen Strukturformel VIId, werden unter Verwendung des allgemeinen Syntheseverfahrens gemäß der Darstellung in Schema VII hergestellt.synthesis of 2-carboxy-4-subst.-aminothiazole derivatives VIId Various 4-alkylthiazolyl-2-carboxylic acids, Compounds of general structural formula VIId are used of the general synthesis method as shown in Scheme VII produced.

Schema VII

Scheme VII

Es wird das von Janusz et. al., J. Med. Chem., Bd. 41 (1998), S. 3515–3529, beschriebene Verfahren unter folgenden Modifikationen eingehalten: Ethylthiooxamat (VIIa) wird mit verschiedenen β-Bromketonen der allgemeinen Strukturformel VIIb (R²⁴ = Alkylgruppe) unter Bildung von Thiazolylcarbonsäuren der allgemeinen Strukturformel VIId umgesetzt. Dieser Typ einer Kondensationsreaktion ist aus dem Stand der Technik bekannt.It will be that of Janusz et. al., J. Med. Chem., 41 (1998), pp. 3515-3529, with the following modifications: Ethyl thiooxamate (VIIa) is reacted with various β-bromo ketones of the general structural formula VIIb (R ²⁴ = alkyl group) reacted to form Thiazolylcarbonsäuren the general structural formula VIId. This type of condensation reaction is known in the art.

Synthese von 2-Carboxy-(subst.)-imidazol-Derivaten (VIIIb)Synthesis of 2-carboxy (substituted) imidazole derivatives (VIIIb)

Verschiedene Alkylimidazolyl-2-carbonsäuren, Verbindungen der allgemeinen Strukturformel VIIIb, werden gemäß dem allgemeinen Syntheseverfahren, das in Schema VIII dargestellt ist, hergestellt.Various Alkylimidazolyl-2-carboxylic acids, Compounds of general structural formula VIIIb are prepared according to the general Synthesis method shown in Scheme VIII.

Schema VIII

Scheme VIII

Es wurde das von Baird et. al., J. Amer. Chem. Soc., Bd. 118 (1996), S. 6141–6146, beschriebene Verfahren herangezogen. Ein Alkylimidazol wird mit einer starken Base (z. B. nBuLi) deprotoniert und anschließend mit CO₂ unter Bildung der Carbonsäure VIIIb umgesetzt. Dieser Typ einer Kondensationsreaktion ist aus dem Stand der Technik bekannt.It was that of Baird et. al., J. Amer. Chem. Soc., 118: 6141-6146 (1996). An alkylimidazole is deprotonated with a strong base (eg, nBuLi) and then reacted with CO _{2 to} produce the carboxylic acid VIIIb. This type of condensation reaction is known in the art.

b. Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(imidazolyl- oder pyrazolyl)chinolinenb. Synthesis of 4-hydroxy-7-methoxy-2- (imidazolyl) or pyrazolyl) quinolines

4-Hydroxy-7-R21-chinoline mit einem Imidazolyl- oder Pyrazolylrest an C2 werden im allgemeinen unter Anwendung des in Schema IX dargestellten Verfahrens hergestellt. Schema IX

4-Hydroxy-7-R21-quinolines having an imidazolyl or pyrazolyl radical on C2 are generally prepared using the procedure outlined in Scheme IX. Scheme IX

Die Synthese des Schlüsselzwischenprodukts (worin R²¹ = OMe) 4-Benzyloxy-2-chlor-7-methoxychinolin IXa, ist ausführlich in Beispiel 6 beschrieben (Verbindung 6e).The synthesis of the key intermediate (wherein R ²¹ = OMe) 4-benzyloxy-2-chloro-7-methoxyquinoline IXa is described in detail in Example 6 (Compound 6e).

Stufe ALevel A

Bei hohen Temperaturen können verschiedene Imidazole, alkylsubstituierte Imidazole, Pyrazole oder alkylsubstituierte Pyrazole verwendet werden, um den 2-Chlorrest der Verbindung IXa unter Bildung von Verbindungen der allgemeinen Strukturformel IXb zu ersetzen. at high temperatures can various imidazoles, alkyl-substituted imidazoles, pyrazoles or alkyl-substituted Pyrazoles are used to form the 2-chloro radical of compound IXa to give compounds of general structural formula IXb to replace.

Stufe BLevel B

Nach Entfernung der Benzylschutzgruppe vom 4-Hydroxyrest des Chinolins durch übliche Hydrierungsverfahren werden Chinolin-Derivate der allgemeinen Strukturformel IXc erhalten.To Removal of the benzyl protecting group from the 4-hydroxy moiety of quinoline by usual Hydrogenation processes become quinoline derivatives of the general structural formula IXc received.

Synthese von P3Synthesis of P3

Verschiedene P3-Fragmente werden synthetisiert, die die entsprechende D-Linker-Erweiterung für die Makrocyclisierung durch Olefin-Metathese enthalten. Im allgemeinen werden P3-Einheiten mit einem Gehalt an einem terminalen Olefin für die Metathese gemäß den nachstehenden allgemeinen Schemata (Schemata X, XI und XII) synthetisiert.Various P3 fragments are synthesized that have the corresponding D-linker extension for the macrocyclization by olefin metathesis. In general, P3 units become containing a terminal olefin for metathesis according to the following general schemes (Schemes X, XI and XII).

Synthese von Linkern der Klasse ASynthesis of linkers of Class A

Diese allgemeine Synthese wird zur Herstellung von Linkern herangezogen, die durchgehend auf Kohlenstoff basieren (kein Heteroatom) (Schema X).These general synthesis is used for the preparation of linkers, which are based on carbon throughout (no heteroatom) (Scheme X).

Schema X

Scheme X

Die Synthese wird gemäß dem Verfahren von Evans et. al., J. Am. Chem. Soc., Bd. 112 (1990), S. 4011–4030, durchgeführt.The Synthesis is according to the method from Evans et. al., J. Am. Chem. Soc., 112: 4011-4030 (1990).

Die Ausgangscarbonsäuren (Xa) sind handelsüblich oder werden nach aus der Literatur bekannten Verfahren, die dem Fachmann geläufig sind, hergestellt.The Starting carboxylic acids (Xa) are commercially available or are known from the literature known methods, the Specialist familiar are manufactured.

Stufe ALevel A

Die Carbonsäure Xa wird mit Pivaloylchlorid aktiviert und anschließend mit dem Anion des chiralen unterstützenden 4(S)-4-(Phenylmethyl)-2-oxazolidinon gemäß Evans nach einem bekannten Verfahren umgesetzt (Übersichtsartikel: D. J. Ager et. al., Aldrichimica Acta, Bd. 30 (1997), S. 3–11, und die dort zitierten Literaturstellen), wodurch man Verbindungen der allgemeinen Strukturformel Xb erhält. The carboxylic acid Xa is activated with pivaloyl chloride and then with supporting the anion of the chiral 4 (S) -4- (phenylmethyl) -2-oxazolidinone according to Evans reacted according to a known method (review article: D. J. Ager et. al., Aldrichimica Acta, Vol. 30 (1997), pp. 3-11, and those cited therein References) to give compounds of the general structural formula Xb receives.

Stufe BLevel B

Eine stereoselektive α-Azidierung mit Trizylazid eines chiralen Imidenolats, wie sie beispielsweise aus Verbindungen der allgemeinen Strukturformel Xb in Gegenwart einer Base, wie KHMDS, entstehen, ist ebenfalls aus dem Stand der Technik bekannt (Übersichtsartikel: D. J. Ager et. al., Aldrichimica Acta, Bd. 30 (1997), S. 3–11, und die darin zitierten Literaturstellen). A stereoselective α-azidation with trizylazide of a chiral imidolate, as for example from compounds of the general structural formula Xb in the presence A base, such as KHMDS arise, is also from the state of Technology known (review article: D.J. Ager et. al., Aldrichimica Acta, Vol. 30 (1997), pp. 3-11, and the references cited therein).

Stufe CStage C

Eine Reduktion des α-Azids unter Katalyse mit SnCl₂ und ein anschließender Schutz des gebildeten Amins in Form eines tert.-Butylcarbamats ergibt Zwischenprodukte der allgemeinen Strukturformel Xc. Diese Reaktionen sind ebenfalls aus dem Stand der Technik bekannt.Reduction of the α-azide under catalysis with SnCl ₂ and subsequent protection of the resulting amine in the form of a tert-butyl carbamate gives intermediates of the general structural formula Xc. These reactions are also known in the art.

Stufe DStage D

Schließlich wird das chirale Hilfsprodukt unter basischen Bedingungen, z. B. mit einem Gemisch aus H₂O₂ mit LiOH, hydrolysiert, wodurch man die Linker vom Aminosäuretyp der allgemeinen Strukturformel Xe erhält.Finally, the chiral auxiliary product under basic conditions, eg. B. with a mixture of H ₂ O ₂ with LiOH, hydrolyzed, whereby one obtains the linker of the amino acid type of the general structural formula Xe.

Alternativ werden P3-Reste der gleichen allgemeinen Strukturformel Xe gemäß dem Verfahren von M. J. Burk et. al., J. Am. Chem. Soc., Bd. 120 (1998), S. 657–663 gemäß der Darstellung in Schema XI hergestellt. Diese Verbindungen variierten bezüglich der Anzahl der Methyleneinheiten (-CH₂-) entlang des Linkers (m = 1 bis 5) und der Substitution von Alkylgruppen bei R₄, enthielten aber kein Heteroatom.Alternatively, P3 radicals of the same general structural formula Xe are prepared according to the method of MJ Burk et. al., J. Am. Chem. Soc., Vol. 120 (1998), pp. 657-663, as shown in Scheme XI. These compounds varied with respect to the number of methylene units (-CH ₂ -) along the linker (m = 1 to 5) and the substitution of alkyl groups at R ₄ , but did not contain a heteroatom.

Schema XI

Scheme XI

Stufe ALevel A

Die Monosäure-Verbindung XIb wird aus handelsüblichem Diethyl-2-acetamidomalonat durch eine übliche Esterhydrolyse unter basischen Bedingungen hergestellt. The Mono acid compound XIb is made of commercial Diethyl 2-acetamidomalonate by a usual Ester hydrolysis prepared under basic conditions.

Stufe BLevel B

Eine Kondensation vom Knoevenagel-Typ zwischen einem Aldehyd der allgemeinen Strukturformel XIc und der Verbindung XIb in Gegenwart einer Base, wie Pyridin, sowie Essigsäureanhydrid führt zur Bildung eines Enamid-Zwischenprodukts XId mit der Z-stereochemischen Konfiguration um die neu gebildete Doppelbindung gemäß der Darstellung.A Knoevenagel-type condensation between an aldehyde of the general Structural formula XIc and the compound XIb in the presence of a base, such as pyridine, as well as acetic anhydride leads to Formation of an Enamide Intermediate XId with the Z-stereochemical configuration around the newly formed Double bond as shown.

Stufe CStage C

Eine regioselektive und enantioselektive katalytische Hydrierung des Enamid-Zwischenprodukts XId zum Aminosäure-Zwischenprodukt XIe wird unter Anwendung des Burk-Verfahrens erreicht. A regioselective and enantioselective catalytic hydrogenation of the Enamide intermediate XId to amino acid intermediate XIe is achieved using the Burk method.

Stufe DStage D

Das Stickstoffatom des Acetamidoderivats XIe wird anschließend 2-fach durch Addition eines tert.-Butylcarbamat-Substituenten mit einer Schutzgruppe versehen, bevor die Acetatgruppe sowie der Ethylester unter üblichen basischen Bedingungen hydrolysiert werden, wodurch man P3-Reste der allgemeinen Strukturformel XIf erhält. Synthese von Linkern der Klasse B Allgemeine Struktur von Linkern der Klasse B

The nitrogen atom of the acetamido derivative XIe is then capped twice by addition of a tert-butylcarbamate substituent before the acetate group and the ethyl ester are hydrolyzed under conventional basic conditions to give P3 radicals of the general structural formula XIf. Synthesis of Class B Linkers General structure of class B linkers

Diese allgemeine Synthese wird zur Herstellung von Linkern mit einem Gehalt an Sauerstoff oder Schwefel herangezogen. Schema XII

R = H oder CH₃
R² = H oder CH₃, jedoch bedeuten nicht beide R¹=R²=CH₃ This general synthesis is used to prepare linkers containing oxygen or sulfur. Scheme XII

R = H or CH ₃
R ² = H or CH ₃ , but not both R ¹ = R ² = CH ₃

Stufe ALevel A

In geeigneter Weise geschützte Aminosäuren, wie Boc-(L)-Serinmethylester, Boc-(L)-Threoninmethylester oder Boc-(L)-Allothreoninmethylester, werden mit Allyliodid in Gegenwart von Ag₂O unter Bildung des Methylesters XIIb alkyliert.Suitably protected amino acids, such as Boc- (L) -serine methyl ester, Boc- (L) -tetraonine methyl ester or Boc- (L) -alothreonine methyl ester, are alkylated with allyl iodide in the presence of Ag ₂ O to form the methyl ester XIIb.

Stufe BLevel B

Die Hydrolyse des Methylesters unter üblichen basischen Bedingungen führt zu den Linkern vom Ethertyp der allgemeinen Strukturformel XIIc (X=O).The Hydrolysis of the methyl ester under usual basic conditions leads to the ether-type linkers of general structural formula XIIc (X = O).

Stufe CStage C

Das Schwefelanaloge wird aus der gleichen Ausgangsaminosäure XIIa (wie vorstehend in entsprechender Weise geschützt) hergestellt und seine Hydroxylgruppe wird in eine leicht austretende Gruppe (z. B. Tosylat-Zwischenprodukt XIId) unter Anwendung eines aus dem Stand der Technik üblichen Verfahrens umgewandelt.The Sulfur analogue is made from the same starting amino acid XIIa (as appropriately protected above) and its Hydroxyl group becomes a readily leaving group (eg, tosylate intermediate XIId) converted using a conventional from the prior art method.

Stufe DStage D

Der Tosylrest wird anschließend durch das Anion von Thioacetat ersetzt, was zur Bildung des Thioester-Zwischenprodukts XIIe unter Inversion des chiralen Zentrums am β-Kohlenstoffatom führt.Of the Tosylrest is subsequently replaced by the anion of thioacetate, resulting in the formation of the thioester intermediate XIIe leads to inversion of the chiral center at the β-carbon atom.

Stufe ELevel E

Eine Hydrolyse des Thioesterrestes unter milden basischen Bedingungen führt zum freien Thiol XIIf.A Hydrolysis of the thioester residue under mild basic conditions leads to free thiol XIIf.

Stufe FLevel F

Eine Alkylierung des Thiolrestes wird leicht unter basischen Bedingungen mit Allyliodid erreicht. A Alkylation of the thiol residue is readily under basic conditions achieved with allyl iodide.

Stufe GLevel G

Schließlich wird das Sulfidanaloge XIIc (X=S) nach Hydrolyse des Methylesters unter Anwendung üblicher Verfahren erhalten.Finally will the sulfide analogue XIIc (X = S) after hydrolysis of the methyl ester under Application usual Obtained procedure.

Synthese des R3-FragmentsSynthesis of the R3 fragment

Beispiele für die Synthese von Fragmenten, in denen R³ die Bedeutung NH-R³¹ hat, sind in WO-00/09543 beschrieben.Examples of the synthesis of fragments in which R ^{3 has} the meaning NH-R ³¹ are in WO-00/09543 described.

BeispieleExamples

Nachstehend wird die vorliegende Erfindung ausführlich anhand der folgenden, nicht-beschränkenden Beispiele beschrieben. Weitere spezielle Wege zur Synthese oder Auftrennung finden sich in WO-00/09543 und WO-00/09558 .Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of the following nonlimiting examples. Further special ways of synthesis or separation can be found in WO-00/09543 and WO-00/09558 ,

Temperaturen sind in Grad Celsius angegeben. Prozentangaben für Lösungen beziehen sich auf das Gewicht in Bezug zum Volumen und Lösungsverhältnisse beziehen sich auf Volumen pro Volumen, sofern nichts anderes angegeben ist. Kernmagnetische Resonanzspektren (NMR-Spektren) wurden mit einem Bruker 400 MHz-Spektrometer aufgezeichnet. Die chemischen Verschiebungen (δ) werden in Teile pro Million angegeben und beziehen sich auf das interne deuterierte Lösungsmittel, sofern nichts anderes angegeben ist. Die NMR-Spektren sämtlicher Endprodukte (Inhibitoren) wurden in DMSO-d₆ in Form von TFA-Salzen aufgezeichnet, sofern nichts anderes angegeben ist. Eine Flash-Säulenchromatographie wurde an Kieselgel (SiO₂) gemäß der Still-Flash-Chromatographietechnik durchgeführt (W. C. Still et. al., J. Org. Chem., Bd. 43 (1978), S. 2923).Temperatures are given in degrees Celsius. Percentages for solutions refer to weight by volume and solution ratios are by volume per volume, unless otherwise specified. Nuclear magnetic resonance spectra (NMR spectra) were recorded on a Bruker 400 MHz spectrometer. Chemical shifts (δ) are reported in parts per million and refer to the internal deuterated solvent unless otherwise specified. The NMR spectra of all final products (inhibitors) were recorded in DMSO-d ₆ in the form of TFA salts, unless otherwise specified. Flash column chromatography was performed on silica gel (SiO ₂ ) according to the Still-Flash chromatography technique (WC Still et al., J. Org. Chem., 43: 2923 (1978)).

In den Beispielen werden folgende Abkürzungen verwendet: Bn: Benzyl; Boc: tert.-Butyloxycarbonyl [Me₃COC(O)]; BSA: Rinderserumalbumin; Cbz: Benzyloxycarbonyl; CHAPS: 3-[(3-Cholamidopropyl)-dimethylammonio]-1-propansulfonat; DBU: 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en; CH₂Cl₂ = DCM: Methylenchlorid; DEAD: Diethylazodicarboxylat; DIAD: Diisopropylazodicarboxylat; DIPEA: Diisopropylethylamin; DMAP: Dimethylaminopyridin; DCC: 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid; DME: 1,2-Dimethyoxyethan; DMF: Dimethylformamid; DMSO: Dimethylsulfoxid; DTT: Dithiothreit oder Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol; DPPA: Diphenylphosphorylazid; EDTA: Ethylendiamintetraessigsäure; Et: Ethyl; EtOH: Ethanol; EtOAc: Ethylacetat; Et₂O: Diethylether; ESMS: Elektrospray-Massenspektrometrie; HATU: O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorphosphat; HPLC: Hochleistungs-Flüssigchromatographie; MS: Massenspektrometrie; MALDI-TOF: matrixgestützte Laser-Disorptionsionisationszeit des Flights; FAB: Fast Atom Bombardment; LAN: Lithiumaluminiumhydrid; Me: Methyl; McOH: Methanol; MES: (2-[N-Morpholino]-ethansulfonsäure); NaHMDS: Natrium-bis-(trimethylsilyl)-amid; NMM: N-Methylmorpholin; NMMO: N-Methylmorpholinoxid; NMP: N-Methylpyrrolidin; Pr: Propyl; Succ: 3-Carboxypropanoyl; PNA: 4-Nitrophenylamin oder p-Nitroanilid; TBAF: Tetra-n butylammoniumfluorid; TBME: tert.-Butylmethylether; tBuOK: Kalium-tert.-butoxid; TBTU: 2-(1H-Benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborat; TCEP: Tris-(2-carboxyethyl)-phosphin-hydrochlorid; TFA: Trifluoressigsäure; THF: Tetrahydrofuran; TIS: Triisopropylsilan; TLC: Dünnschichtchromatographie; TMSE: Trimethylsilylethyl; Tris/HCl: Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan-hydrochlorid. P1-Reste Beispiel 1 Synthese von tert.-Butyl-(1 R,2R)/(1 S,2S)-1-amino-2-homoallylcyclopropylcarboxylat (1f)

The following abbreviations are used in the examples: Bn: benzyl; Boc: tert-butyloxycarbonyl [Me ₃ COC (O)]; BSA: bovine serum albumin; Cbz: benzyloxycarbonyl; CHAPS: 3 - [(3-cholamidopropyl) -dimethylammonio] -1-propanesulfonate; DBU: 1,8-diazabicyclo [5.4.0] undec-7-ene; CH ₂ Cl ₂ = DCM: methylene chloride; DEAD: diethyl azodicarboxylate; DIAD: diisopropyl azodicarboxylate; DIPEA: diisopropylethylamine; DMAP: dimethylaminopyridine; DCC: 1,3-dicyclohexylcarbodiimide; DME: 1,2-dimethyoxyethane; DMF: dimethylformamide; DMSO: dimethyl sulfoxide; DTT: dithiothreitol or threo-1,4-dimercapto-2,3-butanediol; DPPA: diphenyl phosphoryl azide; EDTA: ethylenediaminetetraacetic acid; Et: ethyl; EtOH: ethanol; EtOAc: ethyl acetate; Et ₂ O: diethyl ether; ESMS: electrospray mass spectrometry; HATU: O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate; HPLC: high performance liquid chromatography; MS: mass spectrometry; MALDI-TOF: matrix-assisted laser dission ionization time of the flight; FAB: Fast Atom Bombardment; LAN: lithium aluminum hydride; Me: methyl; MeOH: methanol; MES: (2- [N-morpholino] -ethanesulfonic acid); NaHMDS: sodium bis (trimethylsilyl) amide; NMM: N-methylmorpholine; NMMO: N-methylmorpholine oxide; NMP: N-methylpyrrolidine; Pr: propyl; Succ: 3-carboxypropanoyl; PNA: 4-nitrophenylamine or p-nitroanilide; TBAF: tetra-n-butylammonium fluoride; TBME: tert-butyl methyl ether; tBuOK: potassium t-butoxide; TBTU: 2- (1H-Benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate; TCEP: tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride; TFA: trifluoroacetic acid; THF: tetrahydrofuran; TIS: triisopropylsilane; TLC: thin layer chromatography; TMSE: trimethylsilylethyl; Tris / HCl: tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrochloride. P1 residues Example 1 Synthesis of tert-butyl (1R, 2R) / (1S, 2S) -1-amino-2-homoallylcyclopropylcarboxylate (1f)

AA

Eine Suspension von Benzyltriethylammoniumchlorid (5,08 g, 22,3 mmol) in 50%igem wässrigen NaOH (50 ml) wurde nacheinander mit 1,2-Dibrom-5-hexen (1b, 8,10 g, 33,46 mmol) und Di-tert.-butylmalonat (1a, 4,82 g, 22,30 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur heftig gerührt, sodann mit H₂O verdünnt und mit CH₂Cl₂ (3 × 50 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde mit H₂O (2 × 50 ml), Kochsalzlösung/H₂O (2/1, 2 × 50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Der rohe Rückstand wurde durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von 3 bis 5% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die Verbindung 1c in einer Ausbeute von 38% (2,48 g).A suspension of benzyltriethylammonium chloride (5.08 g, 22.3 mmol) in 50% aqueous NaOH (50 mL) was added sequentially with 1,2-dibromo-5-hexene (1b, 8.10 g, 33.46 mmol). and di-tert-butylmalonate (1a, 4.82 g, 22.30 mmol). The mixture was stirred vigorously for 16 hours at room temperature, then diluted with H ₂ O and extracted with CH ₂ Cl ₂ (3 x 50 mL). The organic phase was washed with H ₂ O (2 x 50 mL), brine / H ₂ O (2/1, 2 x 50 mL), dried over MgSO ₄ and evaporated. The crude residue was purified by flash column chromatography on silica gel using 3 to 5% EtOAc in hexane as eluent. Compound 1c was obtained in 38% yield (2.48 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,19 (bd, J = 7,9 Hz, 2H), 1,25–1,33 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,48 (s, 9H), 1,47–1,60 (m, 1H), 1,75–1,82 (m, 1H), 2,14–2,22 (m, 2H), 4,93–5,50 (m, 2H), 4,96 (dm, J = 10,2 Hz, 1H), 5,18 (dm, J = 17,2 Hz, 1H).
ES(+)MS m/z 297 (M+H)⁺. ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.19 (bd, J = 7.9 Hz, 2H), 1.25 to 1.33 (m, 1H), 1.46 (s, 9H) , 1.48 (s, 9H), 1.47-1.60 (m, 1H), 1.75-1.82 (m, 1H), 2.14-2.22 (m, 2H), 4 , 93-5.50 (m, 2H), 4.96 (dm, J = 10.2 Hz, 1H), 5.18 (dm, J = 17.2 Hz, 1H).
ES (+) MS m / z 297 (M + H) ⁺ .

BB

Eine Suspension von Kalium-tert.-butoxid (5,75 g, 51,25 mmol) in wasserfreiem Diethylether (150 ml) wurde bei 0°C mit H2O (203 μl, 11,27 mmol) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 10 Minuten bei 0°C gerührt. Sodann wurde eine Etherlösung der Verbindung 1c (2,48 g in 10 ml Diethylether, 10,25 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Gemisch mit eiskaltem H₂O verdünnt und mit Diethylether (3 × 200 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit eiskalter 10%iger wässriger Citronensäure auf den pH-Wert 3,5–4 angesäuert und mit EtOAc reextrahiert (3 × 200 ml). Die EtOAc-Phase wurde mit H₂O (2 × 100 ml) und Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Man erhielt die Verbindung 1d in einer Ausbeute von 85%, bezogen auf die Menge des gewonnenen Ausgangsmaterials.A suspension of potassium t-butoxide (5.75 g, 51.25 mmol) in anhydrous diethyl ether (150 mL) at 0 ° C was added H2O (203 μL, 11.27 mmol). The reaction mixture was stirred at 0 ° C for 10 minutes. Then, an ether solution of Compound 1c (2.48 g in 10 mL diethyl ether, 10.25 mmol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 5 hours. The mixture was diluted with ice-cold H ₂ O and extracted with diethyl ether (3 × 200 ml). The aqueous phase was acidified to pH 3.5-4 with ice-cold 10% aqueous citric acid and reextracted with EtOAc (3 x 200 mL). The EtOAc layer was washed with H ₂ O (2 x 100 mL) and brine (100 mL), dried over MgSO ₄ and evaporated. Compound 1d was obtained in 85% yield based on the amount of starting material recovered.

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,51 (s, 9H), 1,64–1,68 (m, 1H), 1,68–1,75 (m, 1H), 1,77–1,88 (m, 1H), 1,96–2,01 (m, 1H), 2,03–2,22 (m, 3H), 5,01 (dm, J = 6,4 Hz, 1H), 5,03 (dm, J = 14,9 Hz, 1H), 5,72–5,83 (m, 1H).
ES(+)MS: m/z 241 (M+H)⁺. ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.51 (s, 9H), 1.64-1.68 (m, 1H), 1.68-1.75 (m, 1H), 1, 77-1.88 (m, 1H), 1.96-2.01 (m, 1H), 2.03-2.22 (m, 3H), 5.01 (dm, J = 6.4 Hz, 1H), 5.03 (dm, J = 14.9 Hz, 1H), 5.72-5.83 (m, 1H).
ES (+) MS: m / z 241 (M + H) ⁺ .

CC

Eine Lösung der Säure 1d in wasserfreiem Benzol (1,14 g in 25 ml Benzol, 4,74 mmol) wurde mit Et₃N (800 μl, 5,68 mmol) versetzt. Anschließend wurde Diphenylphosphorylazid (1,13 ml, 5,21 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde 3,5 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Sodann wurde Trimethylsilylethanol (1,36 ml, 9,48 mmol) zugegeben. Der Rührvorgang wurde unter Rückfluss 4 Stunden fortgesetzt. Anschließend wurde das Gemisch auf Raumtemperatur abgekühlt, auf die Hälfte seines ursprünglichen Volumens eingedampft, mit Diethylether (30 ml) verdünnt, mit 5%iger wässriger NaHCO3-Lösung (2 × 30 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Das verbleibende Öl wurde an Kieselgel unter Verwendung von 10% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die reine Verbindung 1 e in einer Ausbeute von 88% (1,49 g).To a solution of the acid 1d in anhydrous benzene (1.14 g in 25 mL of benzene, 4.74 mmol) was added Et ₃ N (800 μL, 5.68 mmol). Subsequently, diphenylphosphoryl azide (1.13 ml, 5.21 mmol) was added. The mixture was refluxed for 3.5 hours. Then trimethylsilylethanol (1.36 ml, 9.48 mmol) was added. Stirring was continued under reflux for 4 hours. The mixture was then cooled to room temperature, evaporated to half of its original volume, diluted with diethyl ether (30 ml), washed with 5% aqueous NaHCO 3 solution (2 × 30 ml) and brine (50 ml), dried over MgSO ₄ and evaporated. The residual oil was purified on silica gel using 10% EtOAc in hexane as eluent. The pure compound 1 e was obtained in a yield of 88% (1.49 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 0,03 (s, 9H), 0,91–0,99 (m, 2H), 1,18–1,29 (m, 2H), 1,45 (bs, 11H), 1,56–1,72 (m, 2H), 2,02–2,18 (m, 2H), 4,12 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 4,93 (dm, J = 10,2 Hz, 1H), 4,98 (dm, J = 17,2 Hz, 1H), 5,07 (bs, 1H), 5,71–5,83 (m, 1H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 0.03 (s, 9H), 0.91-0.99 (m, 2H), 1.18 to 1.29 (m, 2H), 1, 45 (bs, 11H), 1.56-1.72 (m, 2H), 2.02-2.18 (m, 2H), 4.12 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4 , 93 (dm, J = 10.2 Hz, 1H), 4.98 (dm, J = 17.2 Hz, 1H), 5.07 (bs, 1H), 5.71-5.83 (m, 1H).

DD

Eine Lösung des Cyclopropyl-Derivats 1e (1,19 g, 3,35 mmol in 30 ml TNF) wurde mit tert.-Bu₄NF (6,7 ml, 1 M in THF, 6,7 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und sodann 15 Minuten unter Rückfluss erwärmt. Das Lösungsmittel wurde sorgfältig unter geringem Druck abgedampft (wegen der starken Flüchtigkeit des freien Amins 1f ist die Abdampfung des Lösungsmittels vorsichtig vorzunehmen). Der rohe Rückstand wurde wieder in EtOAc (100 ml) in Lösung gebracht und mit H₂O (2 × 50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und erneut einer sorgfältigen Abdampfung des Lösungsmittels unterzogen. Das rohe Produkt 1f (ein Gemisch von zwei Enantiomeren 1f und 1f') wurde für die Kupplung mit P2-Prolinderivaten ohne weitere Reinigung verwendet. Die Isolierung des P1 P2-Fragments mit der angestrebten stereochemischen Beschaffenheit an P1 wurde in dieser Stufe unter Anwendung von Flash-Chromatographie leicht erreicht (Beispiel 21, Fragment 21 b). P2-Reste Beispiel 2 Synthese von Boc-4(R)-[(7-Methoxy-4-chinolinyl)-oxy]-prolin (2c)

To a solution of the cyclopropyl derivative 1e (1.19 g, 3.35 mmol in 30 ml of TNF) was added tert-Bu ₄ NF (6.7 ml, 1 M in THF, 6.7 mmol). The mixture was stirred at room temperature for 16 hours and then refluxed for 15 minutes. The solvent was carefully evaporated under low pressure (due to the high volatility of the free amine 1f, the evaporation of the solvent has to be carried out carefully). The crude residue was redissolved in EtOAc (100 mL) and washed with H ₂ O (2 x 50 mL) and brine (50 mL), dried over MgSO ₄ and again subjected to a thorough evaporation of the solvent. The crude product 1f (a mixture of two enantiomers 1f and 1f ') was used for coupling with P2-proline derivatives without further purification. The isolation of the P1 P2 fragment with the desired stereochemical nature at P1 was easily achieved in this step using flash chromatography (Example 21, fragment 21b). P2 residues Example 2 Synthesis of Boc-4 (R) - [(7-methoxy-4-quinolinyl) -oxy] -proline (2c)

4-Hydroxy-7-methoxychinolin (2b) wurde gemäß dem Verfahren von M. W. Chun, K. K. Olmstead, Y. S. Choi, C. O. Lee, C.-K. Lee, J. N. Kim, Lee, J. Bioorg. Med. Chem. Lett., Bd. 7 (1997), S. 789, hergestellt. Eine Lösung der Verbindung 2b (1,88 g, 10,73 mmol) und von DEAD (3,4 ml, 21,46 mmol) in wasserfreiem THF wurde bei 0°C unter N₂ zu einer gerührten Lösung von geschütztem cis-Hydroxyprolin 2a (2,63 g, 10,73 mmol) und Triphenylphosphin (5,63 g, 21,46 mmol) in wasserfreiem THF (160 ml) gegeben. Man ließ das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen und rührte es 14 Stunden. Sodann wurde das THF abgedampft. Das reine Produkt 2c wurde nach Flash-Chromatographie unter Verwendung von 5% McOH in EtOAc als Elutionsmittel in einer Ausbeute von 35% (1,5 g) isoliert.4-Hydroxy-7-methoxyquinoline (2b) was prepared according to the method of MW Chun, KK Olmstead, YS Choi, CO Lee, C.-K. Lee, JN Kim, Lee, J. Bioorg. Med. Chem. Lett., Vol. 7 (1997), p. 789. A solution of compound 2b (1.88 g, 10.73 mmol) and DEAD (3.4 mL, 21.46 mmol) in anhydrous THF was added at 0 ° C under N ₂ to a stirred solution of protected cis -hydroxyproline 2a (2.63 g, 10.73 mmol) and triphenylphosphine (5.63 g, 21.46 mmol) in anhydrous THF (160 mL). The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 14 hours. Then the THF was evaporated. The pure product 2c was purified by flash chromatography using 5% MeOH in EtOAc isolated as eluent in a yield of 35% (1.5 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,44 (s, 9H), 1,65 (bs, 1H), 2,34–2,43 (m, 1H), 2,63–2,76 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,75–3,85 & 3,89–3,99 (2m, 1H, 2 Rotamere), 3,95 (s, 3H), 4,51 & 4,60 (2t, J = 8 Hz, 1H, 2 Rotamere), 5,15 (bs, 1H), 6,53–6,59 (m, 1H), 7,12–7,18 (dd, J = 8,9 & 2,2 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,03 (bd, J = 9,2 Hz, 1H), 8,65 (bd, J = 5,1 Hz, 1H). Beispiel 3 Synthese von 2-Ethoxy-4-hydroxy-7-methoxychinolin (3c)

¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.44 (s, 9H), 1.65 (bs, 1H), 2.34 to 2.43 (m, 1H), 2.63 to 2, 76 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.75-3.85 & 3.89-3.99 (2m, 1H, 2 rotamers), 3.95 (s, 3H), 4 , 51 & 4.60 (2t, J = 8Hz, 1H, 2 rotamers), 5.15 (bs, 1H), 6.53-6.59 (m, 1H), 7.12-7.18 ( dd, J = 8.9 & 2.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.03 (bd, J = 9.2 Hz, 1H), 8, 65 (bd, J = 5.1 Hz, 1H). Example 3 Synthesis of 2-ethoxy-4-hydroxy-7-methoxyquinoline (3c)

Die Synthese von Methyl-p-methoxyanthranylat 3a wurde gemäß Katz et. al., J. Org. Chem., Bd. 18 (1953), S. 1380–1400, durchgeführt.The Synthesis of methyl p-methoxyanthranylate 3a was carried out according to Katz et. al., J. Org. Chem., Vol. 18 (1953), pp. 1380-1400.

Die allgemeine Synthese des Chinolinderivats 3c stellt eine Modifikation des Verfahrens von Baccar et. al., Indian Journal of Chemistry, Sat. B (1995), S. 330–332, dar.The General Synthesis of Quinoline Derivative 3c provides a modification the method of Baccar et. al., Indian Journal of Chemistry, Sat. B (1995), pp. 330-332, represents.

AA

Methyl-p-methoxyanthranylat 3a (3,069 g, 16,96 mmol) wurde in Triethylorthoacetat (4,7 ml, 25,4 mmol) gelöst. Sodann wurde eine Lösung von wasserfreiem HCl (4 N/Dioxan, 50 μl, 0,6 mmol) zugegeben. Das erhaltene Gemisch wurde 19 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Sodann wurden die flüchtigen Bestandteile unter Vakuum abgedampft. Man erhielt das Produkt 3b (4,92 g, bernsteinfarbenes Öl, quantitative Ausbeute, das direkt in der nächsten Stufe eingesetzt wurde.Methyl-p-methoxyanthranylat 3a (3.069 g, 16.96 mmol) in triethyl orthoacetate (4.7 mL, 25.4 mmol). solved. Then it became a solution of anhydrous HCl (4 N / dioxane, 50 μl, 0.6 mmol). The The resulting mixture was heated at reflux for 19 hours. Then the fleeting Components evaporated under vacuum. The product 3b was obtained (4.92 g, amber oil, quantitative yield, which was used directly in the next step.

BB

Eine Lösung des Substrats 3b (vermutlich 16,96 mmol) in THF (34 ml) wurde bei –78°C unter Stickstoff mit LiHMDS (1 MTTHF, 22 ml, 1,3 Äq.) versetzt. Kurz nach der Zugabe wurde das Kältebad entfernt und man ließ das Gemisch 1 Stunde bei Umgebungstemperatur stehen. Anschließend wurde eine weitere Portion von LiHMDS (16 ml) zugegeben. Das erhaltene Gemisch wurde gerührt, bis dünnschichtchromatographisch (100% EtOAc, Imidat R_f = 0,7, Produkt R_f = 0,2) das vollständige Verschwinden des Ausgangsmaterials festgestellt wurde. HCl (4 N/Dioxan, 10 ml) wurde sodann zugegeben. Das Gemisch wurde unter Vakuum eingeengt. Die erhaltene Paste wurde mit einem Gemisch aus EtOAc (10 ml) und wässrigem NaH₂PO₄ (1 M, 10 ml) verrieben und mit Ultraschall behandelt. Der gebildete reichliche Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Man erhielt das angestrebte Produkt 3c als beigefarbenen Feststoff (3,117 g, Ausbeute 84% für die beiden Stufen, Reinheit bei HPLC > 99%).To a solution of substrate 3b (presumably 16.96 mmol) in THF (34 mL) was added LiHMDS (1M MTTHF, 22 mL, 1.3 eq) at -78 ° C under nitrogen. Shortly after the addition, the cold bath was removed and the mixture was allowed to stand at ambient temperature for 1 hour. Then another portion of LiHMDS (16 ml) was added. The resulting mixture was stirred until complete disappearance of the starting material was determined by TLC (100% EtOAc, Imidate R _f = 0.7, product R _f = 0.2). HCl (4N / dioxane, 10 ml) was then added. The mixture was concentrated in vacuo. The resulting paste was triturated with a mixture of EtOAc (10 mL) and aqueous NaH ₂ PO ₄ (1 M, 10 mL) and sonicated. The resulting copious precipitate was filtered off, washed with water and dried. The desired product 3c was obtained as a beige solid (3.117 g, yield 84% for the two steps, purity in HPLC> 99%).

¹H-NMR, (400 MHz, DMSO-d) δ (ppm): 7,88 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,98 (br, s, 1 H), 6,89 (br, d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,94 (br, s, 1H), 4,30 (br, s, 2H), 3,84 (s, 3H), 1,34 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Beispiel 4 Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)chinolin (4d)

¹ H-NMR, (400 MHz, DMSO-d) δ (ppm): 7.88 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.98 (br, s, 1H), 6.89 ( br, d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.94 (br, s, 1H), 4.30 (br, s, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.34 (t , J = 7.0 Hz, 3H). Example 4 Synthesis of 4-hydroxy-7-methoxy-2- (3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl) quinoline (4d)

AA

Eine Lösung von 2-Carbomethoxy-4-hydroxy-7-methoxychinolin 4a (die Herstellung erfolgte gemäß WO-00/09543 und WO-00/09558 ) (1 g, 4,29 mmol) in DMF (10 ml) wurde unter Stickstoff mit NaH (60% in Mineralöl, 190 mg, 4,98 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt und anschließend tropfenweise mit MEM-Chlorid (455 μl, 4,98 mmol) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde weitere 19,5 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch mit EtOAc (100 ml) verdünnt, mit H₂O (50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Man erhielt das rohe Reaktionsisolationsprodukt (1,37 g). Dieses Produkt wurde durch Flash-Säulenchromatographie gereinigt. Man erhielt das Produkt 4b (1,04 g, Ausbeute 75%) in Form eines farblosen Öls.A solution of 2-carbomethoxy-4-hydroxy-7-methoxyquinoline 4a (the preparation was carried out according to WO-00/09543 and WO-00/09558 ) (1 g, 4.29 mmol) in DMF (10 mL) was added under nitrogen with NaH (60% in mineral oil, 190 mg, 4.98 mmol). The mixture was stirred for 1 hour at ambient temperature and then treated dropwise with MEM chloride (455 μl, 4.98 mmol). The resulting mixture was stirred at ambient temperature for an additional 19.5 hours. The reaction mixture was diluted with EtOAc (100 mL), washed with H ₂ O (50 mL) and brine (50 mL), dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The crude reaction isolation product (1.37 g) was obtained. This product was purified by flash column chromatography. The product 4b (1.04 g, yield 75%) was obtained in the form of a colorless oil.

BB

Ein Gemisch von frisch aktiviertem 4 A-Molekularsieb (500 mg) und Acetamidoxim (248 mg, 3,35 mmol) wurde mit THF (3 ml) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 15 Minuten bei Umgebungstemperatur unter Stickstoff gerührt und sodann portionsweise mit NaH (60% in Mineralöl, 124 mg, 3,24 mmol) versetzt. Die erhaltene Suspension wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt und sodann mit dem Ester 4b (500 mg, 1,56 mmol) in Lösung in THF (5 ml) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 1 Stunde unter Rückfluss erwärmt, sodann über Celite filtriert, mit EtOAc (3 Portionen von 20 ml) gespült und unter Vakuum eingeengt. Das erhaltene rohe Gemisch wurde durch Flash-Säulenchromatographie (100% EtOAc) gereinigt. Man erhielt das Produkt 4c (352 mg, Ausbeute 65%) in Form eines weißen Feststoffes. One Mixture of freshly activated 4 A molecular sieve (500 mg) and acetamidoxime (248mg, 3.35mmol) was added THF (3mL). The obtained Mixture was left at ambient temperature under nitrogen for 15 minutes touched and then portionwise with NaH (60% in mineral oil, 124 mg, 3.24 mmol). The suspension obtained was stirred for 1 hour at ambient temperature and then the ester 4b (500 mg, 1.56 mmol) in solution in THF (5 ml) was added. The resulting mixture was heated at reflux for 1 hour, then over Celite filtered, rinsed with EtOAc (3 portions of 20 ml) and placed under Vacuum concentrated. The resulting crude mixture was purified by flash column chromatography (100% EtOAc). The product was obtained 4c (352 mg, yield 65%) in the form of a white Solid.

CC

Der MEM-Ether 4c (170 mg, 0,493 mmol) in THF (4 ml) wurde mit wässrigem NCl (1 N, 1 ml) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt und sodann mit wässrigem NaH₂PO₄ (1 M, 50 ml) verdünnt. Der gebildete Feststoff wurde abfiltriert, mit EtOAc verrieben, filtriert und getrocknet. Man erhielt das angestrebte Produkt (4d) (90 mg, Ausbeute 71%) in Form eines weißen Feststoffes.
MS (ES+) 258 (M + 1), (ES–) 256 (M–1).The MEM ether 4c (170 mg, 0.493 mmol) in THF (4 mL) was added with aqueous NCl (1 N, 1 mL). The resulting mixture was stirred for 1 hour at ambient temperature and then diluted with aqueous NaH ₂ PO ₄ (1M, 50 ml). The resulting solid was filtered off, triturated with EtOAc, filtered and dried. The desired product (4d) (90 mg, 71% yield) was obtained in the form of a white solid.
MS (ES +) 258 (M + 1), (ES-) 256 (M-1).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d) δ (ppm): 8,03 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,85 (br, s, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,64 (s, 3H). Beispiel 5 Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)chinolin (5e)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d) δ (ppm): 8.03 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7 , 06 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.85 (br, s, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.64 (s, 3H). Example 5 Synthesis of 4-hydroxy-7-methoxy-2- (5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl) quinoline (5e)

AA

Das Substrat 4b (465 mg, 1,45 mmol) in Ethanol (5 ml) wurde mit wasserfreiem Hydrazin (57 μl, 1,8 mmol) versetzt. Die erhaltene Lösung wurde 4 Stunden unter Rückfluss erwärmt und sodann unter Vakuum eingeengt. Man erhielt das rohe Produkt 5a (704 mg, quantitative Rohausbeute) in Form eines gelben Feststoffes, der direkt in der nächsten Stufe eingesetzt wurde. The Substrate 4b (465 mg, 1.45 mmol) in ethanol (5 mL) was washed with anhydrous Hydrazine (57 μl, 1.8 mmol). The resulting solution was allowed to stand for 4 hours backflow heated and then concentrated in vacuo. The crude product was obtained 5a (704 mg, quantitative crude yield) in the form of a yellow solid, the directly in the next Stage was used.

BB

Die Verbindung 5a (vermutlich 1,45 mmol) wurde in Triethylorthoacetat (5 ml) unter Stickstoff auf 100–110°C erwärmt. Das erhaltene Gemisch wurde sodann mit EtOAc (100 ml) verdünnt, mit wässrigem gesättigtem NaHCO₃ (50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet, unter Vakuum eingeengt und durch Flash-Säulenchromatographie (100% EtOAc) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 5b (359 mg, Ausbeute 61% für die beiden Stufen) in Form eines gelben Öls.
MS (ES+) 392 (m +1), (ES–) 390 (m–1).Compound 5a (presumably 1.45 mmol) was heated to 100-110 ° C in triethyl orthoacetate (5 mL) under nitrogen. The resulting mixture was then diluted with EtOAc (100 mL), washed with aqueous saturated NaHCO ₃ (50 mL) and brine (50 mL), dried over MgSO ₄ , concentrated in vacuo and purified by flash column chromatography (100% EtOAc). Compound 5b (359 mg, 61% yield for the two steps) was obtained as a yellow oil.
MS (ES +) 392 (m + 1), (ES-) 390 (m-1).

CC

Die Verbindung 5b (333 mg, 0,852 mmol) wurde unter Hochvakuum 8,5 Stunden auf 140°C erwärmt und sodann durch Flash-Säulenchromatographie (100% EtOAc) gereinigt. Man erhielt ein Gemisch aus 5b (116 mg, 35%, R_f 0,5) und der Verbindung 5c (138 mg, korrigierte Ausbeute 72%, R_f 0,3). Eine Lösung der Verbindung 5c (138 mg, 0,4 mmol) in THF (4 ml) wurde mit wässriger HCl (1 N, 1 ml) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde bis zur vollständigen Umsetzung gerührt (30 min). THF wurde unter Vakuum abgedampft. Wässriges NaH₂PO₄ (1 M, 2 ml) wurde zugegeben. Die erhaltene Suspension wurde mit Ultraschall behandelt und filtriert. Der Feststoff wurde unter Hochvakuum getrocknet. Man erhielt das angestrebte Produkt 5d, (75 mg, Ausbeute 73%) in Form eines beigefarbenen Feststoffes.
MS (ES+) 258 (m+1), (ES-) 256 (m-1).Compound 5b (333 mg, 0.852 mmol) was heated at 140 ° C under high vacuum for 8.5 hours and then purified by flash column chromatography (100% EtOAc). A mixture of 5b (116 mg, 35%, R _f 0.5) and compound 5c (138 mg, corrected yield 72%, R _f 0.3) was obtained. To a solution of Compound 5c (138 mg, 0.4 mmol) in THF (4 mL) was added aqueous HCl (1 N, 1 mL). The resulting mixture was stirred until complete reaction (30 minutes). THF was evaporated under vacuum. Aqueous NaH ₂ PO ₄ (1M, 2 mL) was added. The resulting suspension was sonicated and filtered. The solid was dried under high vacuum. The desired product 5d, (75 mg, yield 73%) was obtained in the form of a beige solid.
MS (ES +) 258 (m + 1), (ES-) 256 (m-1).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,03 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,06 (br, d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,85 (br, s, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,64 (s, 3H). Beispiel 6 Synthese von 4-Benzyloxy-2-chlor-7-methoxychinolin (6e)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8.03 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.06 ( br, d, J = 8.6Hz, 1H), 6.85 (br, s, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.64 (s, 3H). Example 6 Synthesis of 4-benzyloxy-2-chloro-7-methoxyquinoline (6e)

AA

Handelsübliches meta-Anisidin (25 g, 0,20 mol) in Dioxan (80 ml) wurde auf 0°C gekühlt und mit wasserfreiem HCl (4 N/Dioxan, 75 ml, 0,30 mol) versetzt. Sodann wurde Et₂O (500 ml) zugegeben und der Rührvorgang wurde 1 Stunde fortgesetzt. Der beigefarbene Feststoff wurde abfiltriert und unter Vakuum getrocknet. Man erhielt das Salz 6a (31,88 g, Ausbeute 98%).Commercially available meta-anisidine (25 g, 0.20 mol) in dioxane (80 mL) was cooled to 0 ° C and anhydrous HCl (4 N / dioxane, 75 mL, 0.30 mol) was added. Then Et ₂ O (500 ml) was added and stirring was continued for 1 hour. The beige solid was filtered off and dried under vacuum. The salt was obtained 6a (31.88 g, yield 98%).

BB

Dieses Salz wurde mit Ethylcyanoacetat (21,3 ml, 0,20 mol) versetzt. Das Gemisch wurde in einem Kolben, der mit einem Destillationskopf und einem Auffangkolben ausgerüstet war, auf 280–300°C erwärmt. Gebildetes Ethanol wurde zur Überwachung der Reaktionsentwicklung gesammelt. Nach Sammeln von 9 ml Ethanol (theoretische Menge 11,7 ml) wurde der Erwärmungsvorgang abgebrochen und das Reaktionsgemisch wurde auf Raumtemperatur gekühlt, mit Wasser (200 ml) EtOAc (200 ml) verdünnt, gerührt und mit wässrigem NaH₂PO₄ (300 ml) versetzt. Nach weiterem 1-ständigem Rühren wurde das Produkt abfiltriert und getrocknet. Man erhielt die Verbindung 6b (19,06 g, Reinheit 84,5%, Ausbeute ~50%) in Form eines gelben Feststoffes, der direkt bei der nächsten Umsetzung eingesetzt wurde.Ethyl acetate (21.3 ml, 0.20 mol) was added to this salt. The mixture was heated to 280-300 ° C in a flask equipped with a distillation head and a receiver flask. Formed ethanol was collected to monitor reaction evolution. After collecting 9 ml of ethanol (theoretical amount 11.7 ml), the heating procedure was stopped and the reaction mixture was cooled to room temperature, diluted with water (200 ml) EtOAc (200 ml), stirred and washed with aqueous NaH ₂ PO ₄ (300 ml ). After stirring for a further 1 hour, the product was filtered off and dried. Compound 6b (19.06 g, purity 84.5%, yield ~ 50%) was obtained as a yellow solid which was used directly in the next reaction.

CC

Die Verbindung 6b (11,0 g, 57,8 mmol) in DMF (100 ml) wurde bei 0°C zu NaH (60% in Mineralöl, 2,78 g, 115,6 mmol) gegeben. Sodann wurde das Eisbad entfernt und das Gemisch wurde 1 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt, anschließend mit Benzylbromid (7,6 ml, 63,6 mmol) versetzt und weitere 16 Stunden gerührt. Anschließend wurde die Lösung mit EtOAc (220 ml) – Hexan (220 ml) verdünnt. Der gebildete Feststoff wurde abfiltriert, mit wässrigem gesättigtem NaHCO₃ (110 ml) verrieben, mit Wasser und Hexan-EtOAc (Verhältnis 1 : 1, 100 ml) gewaschen und unter Hochvakuum getrocknet. Auf diese Weise erhielt man das Produkt 6c (5,6 g, Reinheit 91%, Ausbeute 35%) in Form eines gelben Feststoffes.Compound 6b (11.0 g, 57.8 mmol) in DMF (100 mL) was added at 0 ° C to NaH (60% in mineral oil, 2.78 g, 115.6 mmol). The ice bath was then removed and the mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour then benzyl bromide (7.6 ml, 63.6 mmol) was added and stirring continued for 16 hours. The solution was then diluted with EtOAc (220 mL) -hexane (220 mL). The resulting solid was filtered, triturated with aqueous saturated NaHCO ₃ (110 mL), washed with water and hexane-EtOAc (1: 1, 100 mL) and dried under high vacuum. In this way the product 6c (5.6 g, purity 91%, yield 35%) was obtained in the form of a yellow solid.

Die Verbindung 6c (2,67 g, 9,52 mmol) in Essigsäure (21 ml) wurde mit Isoamylnitrit (3,8 ml, 28,6 mmol) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde sodann bei Umgebungstemperatur gerührt und durch HPLC überwacht. Nach 2 Stunden wurde weiteres Isoamylnitrit (1,3 ml, 9,52 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde 90 Stunden gerührt (HPLC: 81% Produkt, 3% Substrat). Die erhaltene Suspension wurde mit Wasser (100 ml) versetzt und sodann filtriert. Der gewonnene braune Feststoff wurde unter Hochvakuum getrocknet. Man erhielt das Produkt 6d (2,35 g, Reinheit 92%, Ausbeute 72%).The Compound 6c (2.67 g, 9.52 mmol) in acetic acid (21 mL) was treated with isoamyl nitrite (3.8 ml, 28.6 mmol). The resulting mixture was then stirred at ambient temperature and monitored by HPLC. After 2 hours, additional isoamyl nitrite (1.3 mL, 9.52 mmol) was added. added. The mixture was stirred for 90 hours (HPLC: 81% product, 3% Substrate). The resulting suspension was added with water (100 ml) and then filtered. The recovered brown solid was under Dried under high vacuum. The product was obtained 6d (2.35 g, purity 92%, yield 72%).

DD

Die Verbindung 6d (1,5 g, 4,39 mmol) wurde mit Phosphoroxychlorid (13 ml, 141 mmol) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 1 Stunde unter Rückfluss erwärmt, sodann mit EtOAc (150 ml) verdünnt und bei 0°C langsam mit wässrigem NaOH (1 N, 150 ml) auf den pH-Wert 9 gebracht. Die beiden Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Man erhielt einen braunen Feststoff, der durch Flash-Säulenchromatographie (15% EtOAc/Hexan) gereinigt wurde. Man erhielt das Produkt 6e (819 mg, Reinheit > 99%, Ausbeute 62%) in Form eines gelben Feststoffes.Compound 6d (1.5 g, 4.39 mmol) was added with phosphorus oxychloride (13 mL, 141 mmol). The resulting mixture was heated at reflux for 1 hour, then diluted with EtOAc (150 mL) and brought to pH 9 slowly at 0 ° C with aqueous NaOH (1 N, 150 mL). The two phases were separated. The organic phase was dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. One got a brown one Solid which was purified by flash column chromatography (15% EtOAc / hexane). The product 6e (819 mg, purity> 99%, yield 62%) was obtained in the form of a yellow solid.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8,07 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,50–7,40 (m, 5H), 7,29 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 9,2, 2,5 Hz, 1H), 6,73 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 3,92 (s, 3H). ¹ H-NMR (400 MHz, CDCl _3): δ 8.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.50-7.40 (m, 5H), 7.29 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 9.2, 2.5 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.92 ( s, 3H).

Beispiel 7Example 7

Synthese von 4-Hydroxy-2-(1-imidazolyl)-7-methoxychinolin (7b); 4-Hydroxy-2-(4-methyl-1-imidazolyl)-7-methoxychinolin (7d); 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(1-pyrazolyl)-chinolin (7f); und 4-Hydroxy-2-(3-methyl-1-pyrazolyl)-7-methoxychinolin (7h).synthesis of 4-hydroxy-2- (1-imidazolyl) -7-methoxyquinoline (7b); 4-hydroxy-2- (4-methyl-1-imidazolyl) -7-methoxyquinoline (7d); 4-Hydroxy-7-methoxy-2- (1-pyrazolyl) quinoline (7f); and 4-hydroxy-2- (3-methyl-1-pyrazolyl) -7-methoxyquinoline (7h).

AA

Die Verbindung 6e (423 mg, 1,41 mmol) und Imidazol (400 mg, 5,88 mmol) wurden 20 Stunden auf 110°C erwärmt. Sodann wurde das Gemisch mit EtOAc verdünnt, mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhielt die Verbindung 7a (422 mg, Reinheit 96%, Ausbeute 90%) in Form eines gelben Feststoffes. Die Verbindung 7a (319 mg, 0,963 mmol) wurde zusammen mit Pd (5%/C, 64 mg) in einem Gemisch aus Ethanol (5 ml) und THF (5 ml) gespült und unter 1 atm Wasserstoff gesetzt. Nach 7,5-ständigem Rühren bei Umgebungstemperatur wurde das Reaktionsgemisch abfiltriert, mit einem Chloroform/Methanol-Gemisch gespült und eingeengt. Man erhielt die Verbindung 7b (130 mg, Reinheit 97,7%, Ausbeute 56%) in Form eines gelben Feststoffes.
MS (ES+) 242 (m + 1), (ES–) 240 (m–1).Compound 6e (423 mg, 1.41 mmol) and imidazole (400 mg, 5.88 mmol) were heated to 110 ° C for 20 hours. The mixture was diluted with EtOAc, washed with water and brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. Compound 7a (422 mg, purity 96%, yield 90%) was obtained in the form of a yellow solid. Compound 7a (319 mg, 0.963 mmol) was rinsed together with Pd (5% / C, 64 mg) in a mixture of ethanol (5 mL) and THF (5 mL) and placed under 1 atm of hydrogen. After stirring for 7.5 hours at ambient temperature, the reaction mixture was filtered off, rinsed with a chloroform / methanol mixture and concentrated. Compound 7b (130 mg, purity 97.7%, yield 56%) was obtained in the form of a yellow solid.
MS (ES +) 242 (m + 1), (ES-) 240 (m-1).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,51 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,23 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,12 (dd, J = 9,2, 2,2 Hz, 1H), 6,92 (br, s, 1H), 3,91 (s, 3H). ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8.51 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7, 23 (d, J = 1.9Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.12 (dd, J = 9.2, 2.2Hz, 1H), 6.92 (br, s , 1H), 3.91 (s, 3H).

BB

Die Verbindung 6e (251 mg, 0,837 mmol) und 4-Methylimidazol (344 mg, 4,19 mmol) wurden 20 Stunden auf 110°C erwärmt. Anschließend wurde das Gemisch mit EtOAc verdünnt, mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO4 getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhielt ein Rohprodukt, das ein 10 : 1-Gemisch des 4-Methyl- bzw. 5-Methylimidazolyl-Isomeren enthielt. Das vermutlich das Hauptprodukt darstellende, angestrebte Isomere 11 c, ein weißer Feststoff (166 mg, Reinheit 99%, Ausbeute 57%), wurde aus einer zweiten, polareren Fraktion (76 mg, Ausbeute 23%), das ein Gemisch der 4- und 5-Methylimidazolyl-Isomeren enthielt, durch Flash-Säulenchromatographie (100% EtOAc) abgetrennt. Die Verbindung 7c (163 mg, 0,472 mmol) wurde zusammen mit Pd (5%/C, 33 mg) in einem Gemisch aus Ethanol (2,4 ml) und THF (5 ml) gespült und unter 1 atm Wasserstoff gesetzt. Nach 18-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde das Reaktionsgemisch filtriert, mit einem Chloroform/Methanol-Gemisch gespült und eingeengt. Man erhielt die Verbindung 7d (118 mg, Reinheit 99%, Ausbeute 98%) in Form eines weißen Feststoffes. The Compound 6e (251 mg, 0.837 mmol) and 4-methylimidazole (344 mg, 4.19 mmol) were heated to 110 ° C for 20 hours. Subsequently was the mixture is diluted with EtOAc, with water and saline washed over MgSO4 dried and concentrated under reduced pressure. One received one A crude product containing a 10: 1 mixture of the 4-methyl or 5-methylimidazolyl isomers contained. Probably the main product performing, aimed Isomers 11 c, a white one Solid (166 mg, purity 99%, yield 57%), was from a second, more polar fraction (76 mg, yield 23%) containing a mixture the 4- and 5-methylimidazolyl isomers contained by flash column chromatography (100% EtOAc) separated. Compound 7c (163 mg, 0.472 mmol) was combined with Pd (5% / C, 33 mg) in a mixture of ethanol (2.4 ml) and THF (5 ml) and put under 1 atm of hydrogen. After stirring at room temperature for 18 hours the reaction mixture is filtered, with a chloroform / methanol mixture rinsed and concentrated. Compound 7d (118 mg, purity 99%, Yield 98%) in the form of a white Solid.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,42 (br, s, 1H), 8,01 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,64 (br, s, 1H), 7,21 (br, s, 1H), 7,10 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,89 (br, s, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,20 (s, 3H). ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8.42 (br, s, 1H), 8.01 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.64 (br, s, 1H ), 7.21 (br, s, 1H), 7.10 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.89 (br, s, 1H), 3.90 (s, 3H), 2 , 20 (s, 3H).

CC

Die Verbindung 6e (184 mg, 0,614 mmol) und Pyrazol (209 mg, 3,07 mmol) wurden 17 Stunden auf 110°C erwärmt. Anschließend wurde das Gemisch mit EtOAc verdünnt, mit wässrigem NaOH (1 N) und Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhielt ein Rohprodukt, das durch Flash-Säulenchromatographie (2 : 1 Hexan-EtOAc) gereinigt wurde. Man erhielt die Verbindung 7e (103 mg, Ausbeute 50%) in Form eines blassgelben Feststoffes. Die Verbindung 7e (103 mg, 0,311 mmol) wurde zusammen mit Pd (5%/C, 20 mg) in einem Gemisch aus Ethanol (2 ml) und THF (2 ml) gespült und unter 1 atm Wasserstoff gesetzt. Nach 5,5-stündigem Rühren bei Umgebungstemperatur wurde das Reaktionsgemisch filtriert, mit einem Chloroform/Methanol-Gemisch gespült und eingeengt. Man erhielt die Verbindung 7f (77 mg, Reinheit 99%, Ausbeute 99%) in Form eines gelben Feststoffes.
MS (ES+) 242 (m + 1), (ES–) 240 (m–1).Compound 6e (184 mg, 0.614 mmol) and pyrazole (209 mg, 3.07 mmol) were heated to 110 ° C for 17 hours. The mixture was then diluted with EtOAc, washed with aqueous NaOH (1N) and brine, dried over MgSO ₄ and concentrated under reduced pressure. A crude product was obtained which was purified by flash column chromatography (2: 1 hexane-EtOAc). Compound 7e (103 mg, yield 50%) was obtained in the form of a pale yellow solid. Compound 7e (103 mg, 0.311 mmol) was rinsed together with Pd (5% / C, 20 mg) in a mixture of ethanol (2 mL) and THF (2 mL) and placed under 1 atm of hydrogen. After stirring at ambient temperature for 5.5 hours, the reaction mixture was filtered, rinsed with a chloroform / methanol mixture and concentrated. Compound 7f (77 mg, purity 99%, yield 99%) was obtained in the form of a yellow solid.
MS (ES +) 242 (m + 1), (ES-) 240 (m-1).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,72 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,00 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,83 (br, s, 1H), 7,43 (br, s, 1H), 7,24 (br, s, 1H), 7,10 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,59 (br, s, 1H), 3,90 (s, 3H). ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.83 (br, s, 1H), 7.43 (br, s, 1H), 7.24 (br, s, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz , 1H), 6.59 (br, s, 1H), 3.90 (s, 3H).

DD

Die Verbindung 6e (217 mg, 0,724 mmol) und 4-Methylpyrazol (594 mg, 7,24 mmol) wurden 23 Stunden auf 110°C erwärmt. Das Gemisch erwies sich als 1 : 1-Gemisch von debenzylierter Verbindung 7h und benzyliertem Produkt 7g. Es wurde sodann mit EtOAc (2–3 ml) verdünnt und filtriert. Man erhielt das reine debenzylierte Produkt 7h (111 mg, Reinheit 95%, Ausbeute 54%) in Form eines weißen Feststoffes. The Compound 6e (217 mg, 0.724 mmol) and 4-methylpyrazole (594 mg, 7.24 mmol) were heated to 110 ° C for 23 hours. The mixture proved as a 1: 1 mixture of debenzylated compound 7h and benzylated Product 7g. It was then diluted with EtOAc (2-3 mL) and filtered. One received the pure debenzylated product 7h (111 mg, purity 95%, yield 54%) in the form of a white Solid.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,58 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,25 (br, s, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,04 (br, d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,38 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,30 (s, 3H). ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8.58 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.25 ( br, s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.04 (br, d, J = 9.2Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 3.89 (s, 3H ), 2.30 (s, 3H).

Beispiel 8Example 8

Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-[4-(2-isopropylaminothiazolyl)]chinolin (8f)Synthesis of 4-hydroxy-7-methoxy-2- [4- (2-isopropylaminothiazolyl)] quinoline (8f)

Anmerkung: [Eine Reihe von 2-Alkylaminothiazolyl-Substituenten wurden gemäß dem gleichen Syntheseschema hergestellt, wobei die Verbindung 8b durch andere Alkylthioharnstoffe ersetzt wurde.]

Note: [A series of 2-alkylaminothiazolyl substituents were prepared according to the same synthetic scheme, replacing compound 8b with other alkylthioureas.]

AA

Das Verfahren zur Umwandlung von m-Anisidin in 8a war identisch mit den Literaturangaben von F. J. Brown et. al., J. Med. Chem., Bd. 32 (1989), S. 807–826. Jedoch wurde das Reinigungsverfahren modifiziert, um eine chromatographische Reinigung zu vermeiden. Die EtOAc-Phase, die das gewünschte Produkt enthielt, wurde mit einem Gemisch aus MgSO₄, Aktivkohle und 5% (Gew./Gew., bezogen auf die erwartete Masse) Kieselgel behandelt. Nach Filtration über Celite wurde das Produkt mit Ether verrieben. Die Verbindung 8a wurde in Form eines blassbraunen Feststoffes in einer Reinheit von > 99% (bestätigt durch HPLC) erhalten.The process for the conversion of m-anisidine into 8a was identical to the literature data of FJ Brown et. al., J. Med. Chem., Vol. 32 (1989), pp. 807-826. However, the purification process has been modified to avoid chromatographic purification. The EtOAc phase containing the desired product was treated with a mixture of MgSO ₄ , activated charcoal and 5% (w / w, based on expected mass) of silica gel. After filtration through Celite, the product was triturated with ether. Compound 8a was obtained as a pale brown solid in> 99% purity (confirmed by HPLC).

BB

Eine Suspension von Isopropylthioharnstoff (8b, 3,55 g, 30 mmol) und 3-Brombrenztraubensäure (8c, 5 g, 1 Äq.) in Dioxan (300 ml, 0,1 M) wurde auf 80°C erwärmt. Beim Erreichen von 80°C wurde die Lösung klar, wobei bald danach das Produkt in Form eines weißen Feststoffes ausfiel. Nach 2-ständigem Erwärmen wurde die Lösung auf Raumtemperatur abgekühlt. Der weiße Niederschlag wurde abfiltriert. Man erhielt die Verbindung 8d in hoher Reinheit (Reinheit > 98%, bestätigt durch NMR) und einer Ausbeute von 94% (7,51 g). A Suspension of isopropylthiourea (8b, 3.55 g, 30 mmol) and 3-bromopyruvic acid (8c, 5g, 1 eq.) in dioxane (300 mL, 0.1 M) was heated to 80 ° C. When reaching 80 ° C was the solution clear, soon after the product in the form of a white solid failed. After 2 hours Heat became the solution cooled to room temperature. The White Precipitate was filtered off. The compound 8d was obtained in high purity (purity> 98%, approved by NMR) and a yield of 94% (7.51 g).

CC

Ein Gemisch aus der Carbonsäure 8d (4,85 g, 18,2 mmol) und dem Anilinderivat 8a (3 g, 1 Äq.) in Pyridin (150 ml, 0,12 M) wurde auf –30°C abgekühlt (beim Abkühlen entstand aus der klaren Lösung partiell eine Suspension). Sodann wurde langsam innerhalb von 5 Minuten Phosphoroxychlorid (3,56 ml, 2,1 Äq.) zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei –30°C gerührt. Nach Entfernen des Bades ließ man das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen. Nach 1,5 Stunden wurde das Reaktionsgemisch auf Eis gegossen. Der pH-Wert wurde mit wässrigem 3 N NaOH auf 11 eingestellt. Das Reaktionsgemisch wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum eingeengt. Der beigefarbene Feststoff wurde sodann durch Flash-Chromatographie (45% EtOAc in Hexan) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 8e in Form eines blassgelben Feststoffes in einer Ausbeute von 73% (6,07 g).A mixture of the carboxylic acid 8d (4.85 g, 18.2 mmol) and the aniline derivative 8a (3 g, 1 eq.) In pyridine (150 mL, 0.12 M) was cooled to -30 ° C (on cooling a suspension partially formed from the clear solution). Phosphorus oxychloride (3.56 ml, 2.1 eq.) Was added slowly over 5 minutes. The reaction mixture was stirred at -30 ° C for 1 hour. After removing the bath, it was left Warm the reaction mixture to room temperature. After 1.5 hours, the reaction mixture was poured onto ice. The pH was adjusted to 11 with aqueous 3N NaOH. The reaction mixture was extracted with CH ₂ Cl ₂ , dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The beige solid was then purified by flash chromatography (45% EtOAc in hexane). Compound 8e was obtained as a pale yellow solid in a yield of 73% (6.07 g).

DD

Eine Lösung von tBuOK (2,42 g, 21,6 mmol) in wasserfreiem tBuOH (40 ml, 0,14 M, destilliert über Mg-Metall) wurde unter Rückfluss erwärmt. Die Verbindung 8e (1,8 g, 5,4 mmol) wurde portionsweise innerhalb von 5 Minuten zugegeben. Die gebildete dunkelrote Lösung wurde weitere 20 Minuten unter Rückfluss gerührt (die Vollständigkeit der Reaktion wurde durch HPLC überwacht). Das Gemisch wurde sodann auf Raumtemperatur abgekühlt und mit HCl (4 N in Dioxan, 1,5 Äq.) versetzt. Anschließend wurde das Gemisch unter Vakuum eingeengt, um zu gewährleisten, dass das gesamte HCl und Dioxan entfernt worden waren. Das Produkt wurde 2-mal in CH₂Cl₂ erneut in Lösung gebracht und unter Vakuum getrocknet. Man erhielt schließlich das HCl-Salz der Verbindung 8f in Form eines beigefarbenen Feststoffes (1,62 g, Reinheit 93% gemäß HPLC. Das Produkt wurde sodann in Phosphatpuffer (1 N NaH₂PO₄, pH-Wert = ~4,5) gegossen und mit Ultraschall behandelt. Der beigefarbene Feststoff wurde abfiltriert und unter Vakuum getrocknet. Man erhielt die Verbindung 8f (1,38 g, Ausbeute 81%) in Form eines beigefarbenen Feststoffes (Reinheit 91% gemäß HPLC).A solution of tBuOK (2.42 g, 21.6 mmol) in anhydrous tBuOH (40 mL, 0.14 M, distilled over Mg metal) was heated to reflux. Compound 8e (1.8 g, 5.4 mmol) was added portionwise over 5 minutes. The resulting dark red solution was stirred at reflux for a further 20 minutes (completeness of the reaction was monitored by HPLC). The mixture was then cooled to room temperature and treated with HCl (4N in dioxane, 1.5 eq.). The mixture was then concentrated under vacuum to ensure that all HCl and dioxane had been removed. The product was redissolved twice in CH ₂ Cl ₂ and dried under vacuum. Finally, the HCl salt of compound 8f was obtained as a beige solid (1.62 g, purity 93% according to HPLC.) The product was then suspended in phosphate buffer (1N NaH ₂ PO ₄ , pH = ~ 4.5). The beige solid was filtered off and dried under vacuum to give compound 8f (1.38 g, 81% yield) as a beige solid (purity 91% by HPLC).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,27 (s, 1H), 8,12 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 7,97 (br,s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,24 (dd, 1H, J = 9,2, 2,2 Hz), 3,97 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 1,24 (d, 2H, J = 6,4 Hz). ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.27 (s, 1H), 8.12 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 7.97 (br, s, 1H), 7, 94 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.24 (dd, 1H, J = 9.2, 2.2Hz), 3.97 (m, 1H), 3.94 (s , 3H), 1.24 (d, 2H, J = 6.4 Hz).

Beispiel 9Example 9

Herstellung von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-[2-(4-isopropylthiazolyl)]-chinolin (9f)Preparation of 4-hydroxy-7-methoxy-2- [2- (4-isopropylthiazolyl)] quinoline (9f)

Anmerkung: Eine Vielzahl von 2-(4-Alkyl)-thiazolyl-Substituenten wurde gemäß dem gleichen Syntheseschema hergestellt, wobei die Verbindung 9b durch andere α-Bromketone ersetzt wurde.Annotation: A variety of 2- (4-alkyl) thiazolyl substituents were prepared according to the same Synthesis scheme prepared, wherein the compound 9b replaced by other α-bromoketones has been.

AA

Eine Lösung von 3-Methylbutan-2-on (8 g, 93 mmol) in McOH (100 ml) wurde bei –30°C tropfenweise innerhalb von 45 Minuten mit Br₂ (4,79 ml, 93 mmol, 1 Äq.) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 90 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Nach Zugabe von Pentan wurde die Lösung mit 5%igem wässrigem NaHCO₃ gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum eingeengt. Das erhaltene rohe gelbe Öl, Verbindung 9b, wurde ohne weitere Reinigung eingesetzt. Eine Lösung von Ethylthiooxamat (9a, 1,8 g, 13,5 mmol) und von Bromketon-Derivat 9b (13,5 mmol) wurde 15 Stunden bei 70°C gerührt. Sodann wurde das Gemisch unter Vakuum eingeengt und anschließend durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von 15% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die Verbindung 9c (740 mg, Ausbeute 28%).A solution of 3-methylbutan-2-one (8 g, 93 mmol) in MeOH (100 mL) was added dropwise at -30 ° C over 45 minutes with Br ₂ (4.79 mL, 93 mmol, 1 eq). added. The resulting mixture was stirred at room temperature for 90 minutes. After adding pentane, the solution was washed with 5% aqueous NaHCO ₃ to wash. The organic phase was dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The resulting crude yellow oil, compound 9b, was used without further purification. A solution of ethyl thiooxamate (9a, 1.8 g, 13.5 mmol) and bromoketone derivative 9b (13.5 mmol) was stirred at 70 ° C for 15 hours. The mixture was concentrated in vacuo and then purified by flash column chromatography using 15% EtOAc in hexane as eluent. Compound 9c (740 mg, 28% yield) was obtained.

B B

Eine Lösung der Verbindung 9c (700 mg, 3,5 mmol) in THF/MeOH/H₂O (Verhältnis 3 : 1 : 1, 13 ml) wurde mit LiOH·H₂O (148 mg, 3,5 mmol, 1 Äq.) 5 Stunden bei Raumtemperatur behandelt. Sodann wurde der pH-Wert mit 0,1 N HCl auf 6 eingestellt. Das Gemisch wurde unter Vakuum zur Trockne eingeengt. Man erhielt die Säure 13d, die ohne weitere Reinigung direkt in der nächsten Stufe eingesetzt wurde.A solution of compound 9c (700 mg, 3.5 mmol) in THF / MeOH / H ₂ O (ratio 3: 1: 1, 13 ml) was treated with LiOH.H ₂ O (148 mg, 3.5 mmol, 1 Eq.) Treated at room temperature for 5 hours. The pH was then adjusted to 6 with 0.1N HCl. The mixture was concentrated to dryness under vacuum. The acid 13d was obtained which was used directly in the next step without further purification.

CC

Eine Lösung von 4-Methoxy-2-amino-acetophenon (Zwischenprodukt 8a, 570 mg, 3,45 mmol) und des Carbonsäurederivats 9d (590 mg, 3,45 mmol, 1 Äq.) in Pyridin (30 ml) wurde auf –20°C gekühlt. Sodann wurde POCl₃ (0,35 ml, 3,79 mmol, 1,1 Äq.) innerhalb von 5 Minuten zugetropft. Die erhaltene Lösung wurde 2 Stunden bei –10°C gerührt. Sodann wurde die Umsetzung durch Zugabe von H₂O gestoppt. Das Gemisch wurde unter Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in eine gesättigte wässrige Lösung von NaHCO₃ gegossen und mit EtOAc extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von 25% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die Verbindung 9e in Form eines weißen Feststoffes (740 mg, Ausbeute 67%).A solution of 4-methoxy-2-amino-acetophenone (interm. 8a, 570 mg, 3.45 mmol) and the carboxylic acid derivative 9d (590 mg, 3.45 mmol, 1 eq.) In pyridine (30 ml) was added. Cooled to 20 ° C. Then, POCl ₃ (0.35 ml, 3.79 mmol, 1.1 eq.) Was added dropwise over 5 minutes. The resulting solution was stirred at -10 ° C for 2 hours. Then, the reaction was stopped by adding H ₂ O. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was poured into a saturated aqueous solution of NaHCO ₃ and extracted with EtOAc. The organic phase was dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. The crude product was purified by flash column chromatography using 25% EtOAc in hexane as eluent. Compound 9e was obtained as a white solid (740 mg, 67% yield).

DD

tBuOK (518 mg, 2,1 Äq.) wurde zu einer Suspension der Verbindung 9e (700 mg, 2,2 mmol) in wasserfreiem tBuOH (11 ml) gegeben. Das erhaltene Gemisch wurde 7,5 Stunden auf 75°C erwärmt. Sodann wurde die Lösung auf Raumtemperatur abgekühlt und durch Zugabe von HCl angesäuert (4N HCl in Dioxan, 2,5 ml). Anschließend wurde das Gemisch unter Vakuum eingeengt. Der erhaltene Rückstand wurde in eine Lösung von 1 N NaH₂PO₄ gegossen und filtriert. Das feste Material wurde sodann mit einer geringen Menge an EtOAc verrieben, filtriert und unter Vakuum getrocknet. Man erhielt die Verbindung 9f in Form eines blass-beigefarbenen Feststoffes (270 mg, Ausbeute 41%).tBuOK (518 mg, 2.1 eq.) was added to a suspension of compound 9e (700 mg, 2.2 mmol) in anhydrous tBuOH (11 mL). The resulting mixture was heated to 75 ° C for 7.5 hours. The solution was cooled to room temperature and acidified by the addition of HCl (4N HCl in dioxane, 2.5 ml). Subsequently, the mixture was concentrated under vacuum. The resulting residue was poured into a solution of 1N NaH ₂ PO ₄ and filtered. The solid material was then triturated with a small amount of EtOAc, filtered and dried under vacuum. Compound 9f was obtained as a pale beige solid (270 mg, 41% yield).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,00 (br, s, 1H), 7,60 (br, s, 1H), 7,51 (br, s, 1H), 7,43 (br, s, 1H), 7,29 (br, s, 1H), 7,14 (br, s, 1H), 6,95 (br, a, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,15 (m, 1H), 1,33 (d, J=5,4 Hz, 6H). Beispiel 10 Synthese von 4-Hydroxy-2-(1-methyl-2-imidazolyl)-7-methoxychinolin (10d)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.00 (br, s, 1H), 7.60 (br, s, 1H), 7.51 (br, s, 1H), 7.43 (br, s, 1H), 7.29 (br, s, 1H), 7.14 (br, s, 1H), 6.95 (br, a, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.15 (m, 1H), 1.33 (d, J = 5.4 Hz, 6H). Example 10 Synthesis of 4-hydroxy-2- (1-methyl-2-imidazolyl) -7-methoxyquinoline (10d)

AA

Eine Lösung von N-Methylimidazol 10a (5 g, 61 mmol) in 100 ml THF wurde auf –78°C gekühlt. n-BuLi (24,4 ml einer 2,5 M/Et₂O-Lösung, 1 Äq.) wurde innerhalb von 15 Minuten zugetropft. Das erhaltene Gemisch wurde 90 Minuten bei –78°C gerührt und sodann portionsweise auf überschüssiges festes CO₂ gegossen. Das heterogene Gemisch wurde 2 Stunden gerührt, wobei man es auf Raumtemperatur kommen ließ. 1 N HCl wurde bis zum Erreichen eines pH-Werts von 5 zugesetzt. Die wässrige Phase wurde abgetrennt und lyophilisiert. Der auf diese Weise erhaltene Rückstand wurde mit EtOAc extrahiert (zur Entfernung von Salzen), getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhielt 6,2 g (Ausbeute 80%) des weißen Feststoffes 10b.A solution of N-methylimidazole 10a (5 g, 61 mmol) in 100 mL of THF was cooled to -78 ° C. n-BuLi (24.4 mL of a 2.5 M / Et ₂ O solution, 1 eq.) was added dropwise over 15 minutes. The resulting mixture was stirred at -78 ° C for 90 minutes and then poured in portions onto excess solid CO ₂ . The heterogeneous mixture was stirred for 2 hours, allowing to come to room temperature. 1N HCl was added until pH 5 was reached. The aqueous phase was separated and lyophilized. The residue thus obtained was extracted with EtOAc (to remove salts), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. This gave 6.2 g (yield 80%) of the white solid 10b.

BB

Eine Lösung von 4-Methoxy-2-amino-acetophenon 8a (394 mg, 2,39 mmol) und des Carbonsäurederivats 10b (301 mg, 1 Äq.) in Pyridin (10 ml) wurde auf –20°C gekühlt. Sodann wurde tropfenweise POCl₃ (244 μl, 1,1 Äq.) innerhalb von 5 Minuten zugegeben. Die erhaltene Lösung wurde 2,5 Stunden bei –10°C gerührt. Anschließend wurde Wasser zugesetzt. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde in eine gesättigte NaHC_O3-Lösung gegossen und mit EtOAc extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet (MgSO₄), filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Das Produkt wurde durch Chromatographie unter Verwendung von Kieselgel (25% EtOAc/Hex) gereinigt. Man erhielt 530 mg (Ausbeute 81%) des blassgelben Feststoffes 10c.A solution of 4-methoxy-2-amino-acetophenone 8a (394 mg, 2.39 mmol) and the carboxylic acid derivative 10b (301 mg, 1 eq.) In pyridine (10 mL) was cooled to -20 ° C. Then, POCl ₃ (244 μl, 1.1 eq.) Was added dropwise over 5 minutes. The resulting solution was stirred at -10 ° C for 2.5 hours. Subsequently, water was added. The mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was poured into a saturated NaHCO _O3 solution and extracted with EtOAc. The organic phase was dried (MgSO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The product was purified by chromatography using silica gel (25% EtOAc / Hex). 530 mg (81% yield) of the pale yellow solid 10c were obtained.

CC

tBuOK (431 mg, 2,1 Äq.) wurde zu einer Suspension des Substrats 10c (500 mg, 1,8 mmol) in 8 ml tBuOH gegeben. Das erhaltene Gemisch wurde sodann 7 Stunden auf 75°C erwärmt. Man ließ die Lösung über Nacht auf Raumtemperatur kommen. Sodann wurden 2,5 ml NCl (4 N/Dioxan) zugegeben. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der erhaltene Rückstand wurde mit EtOAc verdünnt. 1 N NaOH wurde bis zum Erreichen eines pH-Werts von 7 zugegeben. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄), filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhielt 145 mg 10d (Ausbeute 31%) in Form eines blass-beigefarbenen Feststoffes.tBuOK (431 mg, 2.1 eq.) was added to a suspension of substrate 10c (500 mg, 1.8 mmol) in 8 mL tBuOH. The resulting mixture was then heated at 75 ° C for 7 hours. The solution was allowed to come to room temperature overnight. Then 2.5 ml of NCl (4 N / dioxane) was added. The mixture was concentrated under reduced pressure. The resulting residue was diluted with EtOAc. 1 N NaOH was added until a pH of 7 was reached. The organic phase was separated, dried (MgSO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. 145 mg of 10d (31% yield) were obtained in the form of a pale beige solid.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,99 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,84 (s, 3H). Beispiel 11 Synthese von 4-Hydroxy-2-(1-pyrrolyl)-7-methoxychinolin (11b)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7.99 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7, 18 (s, 1H), 6.92 (d, J = 8.9Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.84 (s, 3H). Example 11 Synthesis of 4-hydroxy-2- (1-pyrrolyl) -7-methoxyquinoline (11b)

AA

Eine Lösung des Substrats 11a (erhalten aus der Verbindung 6c nach Hydrogenolyse der Benzylgruppe mit 5% Pd/C in Ethanol-THF) (1 g, 5,25 mmol) und von 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran (0,68 ml, 1 Äq.) in Eisessig wurde 4,5 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Nach Erreichen von Raumtemperatur wurde das Gemisch unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mit Methanol verdünnt und mit 1 N NaOH (wässrig) bis zum Erreichen eines pH-Werts von 7 versetzt. Das Produkt wurde chromatographisch unter Verwendung von Kieselgel (3% McOH/CH₂Cl₂, Voradsorption des Rückstands an Kieselgel) gereinigt. Man erhielt 140 mg (Ausbeute 13%) der Verbindung 11 b in Form eines weißen Feststoffes.A solution of substrate 11a (obtained from compound 6c after hydrogenolysis of the benzyl group with 5% Pd / C in ethanol-THF) (1 g, 5.25 mmol) and 2,5-dimethoxytetrahydrofuran (0.68 mL, 1 eq .) in glacial acetic acid was refluxed for 4.5 hours. After reaching room temperature, the mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was diluted with methanol and treated with 1N NaOH (aqueous) until pH = 7 was reached. The product was purified by chromatography using silica gel (3% MeOH / CH ₂ Cl ₂ , pre-adsorption of the residue on silica gel). This gave 140 mg (yield 13%) of compound 11 b in the form of a white solid.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,98 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,05 (br, d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,88 (br, s, 1H), 6,32 (s, 2H), 3,90 (s, 3H). Beispiel 12 Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(6-methyl-2-pyridyl)-chinolin (12d)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7.98 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.64 (s, 2H), 7.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.05 (br, d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.88 (br, s, 1H), 6.32 (s, 2H), 3.90 (s, 3H ). Example 12 Synthesis of 4-hydroxy-7-methoxy-2- (6-methyl-2-pyridyl) -quinoline (12d)

AA

6-Methylpicolinsäure 12a (411 mg, 3,0 mmol) und SOCl₂ (0,520 ml, 7,2 mmol, 2,4 Äq.) wurden 2 Stunden in Benzol (5 ml) unter Rückfluss erwärmt. Das Lösungsmittel und überschüssiges SOCl₂ wurden aus dem Reaktionsgemisch unter Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde mit Pentan verrieben. Das gebildete feste Material wurde abfiltriert. Das Filtrat wurde eingeengt. Man erhielt das Säurechlorid 12b (500 mg, 2,6 mmol).6-Methylpicolinic acid 12a (411 mg, 3.0 mmol) and SOCl ₂ (0.520 mL, 7.2 mmol, 2.4 eq.) Were refluxed in benzene (5 mL) for 2 h. The solvent and excess SOCl ₂ were removed from the reaction mixture under vacuum. The residue was triturated with pentane. The formed solid material was filtered off. The filtrate was concentrated. The acid chloride 12b (500 mg, 2.6 mmol) was obtained.

BB

Eine Lösung des rohen Säurechlorids 12b in CN₂Cl₂ (5 ml) wurde bei 0°C mit einer Lösung des Anilins 8a (344 mg, 2,08 mmol), DIPEA (1,45 ml, 8,35 mmol) und DMAP (61 mg, 0,5 mmol) in CH₂Cl₂ (10 ml) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die flüchtigen Bestandteile wurden unter Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in EtOAc gelöst. Die Lösung wurde mit 5% NaHCO₃ (2×), H₂O und Kochsalzlösung gewaschen. Sodann wurde die organische Phase über MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Das Gemisch wurde durch Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt das Amid 12c (490 mg, 82%).A solution of crude acid chloride 12b in CN ₂ Cl ₂ (5 mL) was treated at 0 ° C with a solution of aniline 8a (344 mg, 2.08 mmol), DIPEA (1.45 mL, 8.35 mmol) and DMAP (61 mg, 0.5 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (10 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The volatiles were removed under vacuum. The residue was dissolved in EtOAc. The solution was washed with 5% NaHCO ₃ (2X), H ₂ O and saline. The organic phase was dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The mixture was purified by column chromatography using EtOAc / hexane (1: 2) as eluent. The amide 12c (490 mg, 82%) was obtained.

CC

Eine Suspension des Amids 12c (490 mg, 1,71 mmol) in t-BuOH (10 ml) wurde mit tBuOK (410 mg, 3,43 mmol) versetzt. Sodann wurde das Gemisch 6 Stunden bei 75°C und anschließend 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Gemisch in Phosphatpuffer (175 ml, pH-Wert 7) gegossen und 30 Minuten gerührt. Der Feststoff wurde 2-mal mit Ethylacetat verrieben. Die organische Phase wurde mit Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Der erhaltene Feststoff wurde mit EtOAc verrieben. Man erhielt das Chinolinderivat 12d (263 mg, 58%).To a suspension of amide 12c (490 mg, 1.71 mmol) in t-BuOH (10 mL) was added tBuOK (410 mg, 3.43 mmol). Then, the mixture was stirred at 75 ° C for 6 hours and then at room temperature for 16 hours. The mixture was poured into phosphate buffer (175 ml, pH 7) and stirred for 30 minutes. The solid was triturated twice with ethyl acetate. The organic phase was washed with brine, dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The resulting solid was triturated with EtOAc. The quinoline derivative 12d (263 mg, 58%) was obtained.

¹H-NMR: (CDCl₃, 400 MHz): δ 2,68 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 6,85–6,88 (2d, J= 8,68 & 9,5 Hz, 2H), 6,94 (dd, J = 8,9 & 2,2 Hz, 1H), 7,27 (dd, J= 6,7 & 1,9 Hz, 1H), 7,73–7,79 (m, 2H), 8,28 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 10,3 (br s, 1H). ¹ H-NMR: _(CDCl3, 400 MHz): δ 2.68 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 6.85-6.88 (2d, J = 8.68 & 9, 5Hz, 2H), 6.94 (dd, J = 8.9 & 2.2Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 6.7 & 1.9Hz, 1H), 7.73- 7.79 (m, 2H), 8.28 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 10.3 (br s, 1H).

Beispiel 13 Herstellung von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(5-methoxy-2-pyridyl)-chinolin (13d)

Example 13 Preparation of 4-hydroxy-7-methoxy-2- (5-methoxy-2-pyridyl) -quinoline (13d)

AA

Eine Lösung der Verbindung 13a (623 mg, 3,73 mmol) in McOH wurde mit NaOH (2 M, 4,70 ml) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde die Lösung mit HCl (6 N, 2,2 ml) angesäuert und eingeengt. Man erhielt die Verbindung 13b, die ohne Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt wurde. A solution Compound 13a (623 mg, 3.73 mmol) in MeOH was treated with NaOH (2 M, 4.70 ml). The reaction mixture was allowed to stand at room temperature for 2 hours touched. Then the solution became acidified with HCl (6N, 2.2 ml) and concentrated. Compound 13b was obtained without purification in the next Stage was used.

BB

Eine Lösung der rohen Verbindung 13b (3,73 mmol) in Pyridin (25 ml) wurde mit dem Anilin 8a (500 mg, 3,03 mmol) versetzt. Sodann wurde die Lösung auf –25°C abgekühlt, wonach POCl₃ (0,35 ml, 3,73 mmol) zugegeben wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei –10°C und sodann 2 Stunden bei 0°C gerührt. Anschließend wurde das Gemisch in H₂O gegossen und mit EtOAc (2–3×) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit 5% NaHCO₃ und Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Das rohe Material wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1 : 2) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt das Amid 13c (617 mg, 55%).To a solution of crude compound 13b (3.73 mmol) in pyridine (25 ml) was added aniline 8a (500 mg, 3.03 mmol). The solution was cooled to -25 ° C, after which POCl ₃ (0.35 mL, 3.73 mmol) was added. The reaction mixture was stirred at -10 ° C for 1 hour and then at 0 ° C for 2 hours. The mixture was poured into H ₂ O and extracted with EtOAc (2-3x). The combined organic phases were washed with 5% NaHCO ₃ and brine, dried over MgSO ₄ and concentrated in vacuo. The crude material was purified by flash column chromatography using EtOAc / hexane (1: 2) as eluent. The amide 13c (617 mg, 55%) was obtained.

CC

Eine Suspension des Amids 13c (617 mg, 2,05 mmol) in wasserfreiem t-BuOH (10 ml) wurde mit tBuOK (490 mg, 4,11 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 6 Stunden bei 75°C und sodann 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch in Phosphatpuffer (175 ml, pH-Wert = 7) gegossen und 30 Minuten gerührt. Das gebildete feste Material wurde abfiltriert und mit EtOAc verrieben. Man erhielt das Chinolinderivat 13d (250 mg, 43%). A Suspension of amide 13c (617 mg, 2.05 mmol) in anhydrous t-BuOH (10 ml) was added tBuOK (490 mg, 4.11 mmol). The mixture was 6 hours at 75 ° C and then stirred at room temperature for 16 hours. Then the reaction mixture became poured into phosphate buffer (175 ml, pH = 7) and 30 minutes touched. The resulting solid material was filtered off and triturated with EtOAc. The quinoline derivative 13d (250 mg, 43%) was obtained.

¹H-NMR: (DMSO, 400 MHz): δ 3,86 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 6,72 (bs, 1H), 6,91 (dd, J = 8,9 & 1,9 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,9 & 2,9 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 1,9 Hz, 1H), Beispiel 14 Synthese von 4-Hydroxy-7-methoxy-2-(oxazol-5-yl)-chinolin (14c)

¹ H-NMR: (DMSO, 400 MHz): δ 3.86 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 6.72 (bs, 1H), 6.91 (dd, J = 8, 9 & 1.9Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.9Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.9 & 2.9Hz, 1H), 7.97 ( d, J = 8.9Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.6Hz, 1H), 8.48 (d, J = 1.9Hz, 1H), Example 14 Synthesis of 4- Hydroxy-7-methoxy-2- (oxazol-5-yl) -quinoline (14c)

AA

Das geschützte Chinolinderivat 4b von Beispiel 4 (3,8 g, 11,8 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (60 ml) gelöst und auf –78°C abgekühlt, wonach Diisobutylaluminiumhydrid (7,9 ml, 1 Äq., 1,5 M in Toluol) sehr langsam innerhalb von 15 Minuten zugegeben wurde. Nach 80-minütigem Rühren wurde eine weitere Menge an DIBAL (5,5 ml, 0,7 Äq., 1,5 M in Toluol) zugegeben. Nach 2-ständigem Rühren bei –78°C wurde die Umsetzung vorsichtig mit Methanol (4 ml) bei –78°C gestoppt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch in eine wässrige Lösung von Rochelle-Salz (1 N K-Na-Tartrat) gegossen. Die dicke Paste wurde 2 Stunden mit CH₂Cl₂ (300 ml) bis zur Erzielung einer klaren Beschaffenheit gerührt. Die Phasen wurden abgetrennt. Die organische Phase wurde getrocknet (MgSO₄), filtriert und eingeengt. Der erhaltene weiße Feststoff ergab nach Flash-Chromatographie (SiO₂, 230–400 mesh) mit 50% EtOAc/Hexan den Aldehyd 14a in Form eines weißen Feststoffes (2,5 g, 73%).The protected quinoline derivative 4b of Example 4 (3.8 g, 11.8 mmol) was dissolved in CH ₂ Cl ₂ (60 mL) and cooled to -78 ° C, after which diisobutylaluminum hydride (7.9 mL, 1 eq., 1 , 5M in toluene) was added very slowly over 15 minutes. After stirring for 80 minutes, an additional amount of DIBAL (5.5 mL, 0.7 eq, 1.5 M in toluene) was added. After stirring at -78 ° C for 2 h, the reaction was quenched cautiously with methanol (4 mL) at -78 ° C. The reaction mixture was poured into an aqueous solution of Rochelle salt (1 N K-Na tartrate). The thick paste was stirred for 2 hours with CH ₂ Cl ₂ (300 ml) until it became clear. The phases were separated. The organic phase was dried (MgSO ₄ ), filtered and concentrated. The white solid obtained gave after flash chromatography (SiO ₂ , 230-400 mesh) with 50% EtOAc / hexane the aldehyde 14a as a white solid (2.5 g, 73%).

BB

Eine gerührte Suspension von K₂CO₃ (48 mg, 0,34 mmol) in McOH (7 ml) wurde mit Toluolsulfonylmethylisocyanid (66 mg, 0,34 mmol) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde auf 45°C erwärmt und mit dem Aldehyd 14a (0,10 g, 0,34 mmol) versetzt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch 16 Stunden auf 80°C erwärmt und anschließend unter Vakuum zur Trockne eingeengt. Die Reinigung wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂, 230–400 mesh) durchgeführt. Man erhielt das angestrebte Oxazol 14b (0,089 g, 80%).
MS: 331,0 (M + H)⁺.To a stirred suspension of K ₂ CO ₃ (48 mg, 0.34 mmol) in MeOH (7 mL) was added toluenesulfonylmethyl isocyanide (66 mg, 0.34 mmol). The reaction mixture was warmed to 45 ° C and the aldehyde 14a (0.10 g, 0.34 mmol) was added. The reaction mixture was then heated to 80 ° C for 16 hours and then concentrated to dryness under vacuum. Purification was performed by flash chromatography (SiO ₂ , 230-400 mesh). The desired oxazole 14b (0.089 g, 80%) was obtained.
MS: 331.0 (M + H) ⁺ .

CC

Das MEM-geschützte Hydroxychinolin 14b wurde in THF (3 ml) gelöst und mit wässrigem HCl (1 N, 1 ml) versetzt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, wonach es unter Vakuum zur Trockne eingeengt wurde. Der Rückstand wurde mit Phosphatpuffer (3 ml, 1 N Lösung, pH-Wert 4,5) behandelt und gerührt. Sodann wurde das Produkt abfiltriert, mit destilliertem Wasser gewaschen und über Nacht unter Hochvakuum (60°C, 16 Stunden) getrocknet. Das angestrebte Hydroxychinolin 14c wurde in Form eines gelbbraunen Feststoffes erhalten (0,065 g, 100%).
MS: 242,9 (M + H)⁺.The MEM-protected hydroxyquinoline 14b was dissolved in THF (3 ml) and treated with aqueous HCl (1 N, 1 ml). The reaction mixture was stirred for 30 minutes at room temperature, after which it was concentrated to dryness under vacuum. The residue was treated with phosphate buffer (3 ml, 1N solution, pH 4.5) and stirred. The product was filtered off, washed with distilled water and dried overnight under high vacuum (60 ° C, 16 hours). The desired hydroxyquinoline 14c was in Form of a tan solid (0.065 g, 100%).
MS: 242.9 (M + H) ⁺ .

¹H-NMR (DMSO-d₆): δ 8,65 (s, 1H), 8,02 (bs, 1H), 7,97 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,93 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,42 (bs, 1H), 3,87 (s, 3H).
ES (+) MS: m/z 242,9 (M + H)⁺. Peptid-Linkerreste (P3) Beispiel 15 Synthese von (2S)-N-Boc-Amino-non-8-ensäure (15 g)

¹ H-NMR (DMSO-d ₆ ): δ 8.65 (s, 1H), 8.02 (bs, 1H), 7.97 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.19 ( s, 1H), 6.93 (d, J = 7.9Hz, 1H), 6.42 (bs, 1H), 3.87 (s, 3H).
ES (+) MS: m / z 242.9 (M + H) ⁺ . Peptide Linker Residues (P3) Example 15 Synthesis of (2S) -N-Boc-amino-non-8-enoic Acid (15 g)

AA

Eine Lösung des handelsüblichen Diethyl-2-acetamidomalonats 15a (100 g, 0,46 mol) in Dioxan (500 ml) wurde tropfenweise innerhalb von 30 bis 45 Minuten mit wässrigem Natriumhydroxid (1 M, 1 Äq., 460 ml) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde 16,5 Stunden gerührt. Sodann wurde das Dioxan unter Vakuum abgedampft. Die wässrige Lösung wurde mit 3 Portionen von jeweils 300 ml Ethylacetat extrahiert und mit konzentrierter HCl auf den pH-Wert 1 angesäuert. Man ließ diese Lösung in einem Eis/Wasser-Bad kristallisieren. Nach Auftreten von einigen Kristallen wurde das Gemisch einer Ultraschallbehandlung unterzogen, wobei reichlicher Niederschlag auftrat. Nach Filtrieren und Trocknen unter Vakuum erhielt man die Verbindung 15b (62,52 g, Ausbeute 72%) in Form eines weißen Feststoffes. A solution of the commercial Diethyl 2-acetamidomalonate 15a (100 g, 0.46 mol) in dioxane (500 ml) was added dropwise in 30 to 45 minutes with aqueous Sodium hydroxide (1 M, 1 eq., 460 ml). The resulting mixture was stirred for 16.5 hours. thereupon the dioxane was evaporated under vacuum. The aqueous solution was taken with 3 servings each of 300 ml of ethyl acetate and concentrated HCl acidified to pH 1. One left these solution to crystallize in an ice / water bath. After the appearance of some Crystals, the mixture was subjected to an ultrasonic treatment, with abundant precipitation occurred. After filtering and drying under vacuum the compound 15b was obtained (62.52 g, yield 72%). in the form of a white one Solid.

BB

Eine mit einem Magnetrührer gerührte Emulsion von handelsüblichem 7-Octen-1,2-diol 15c (25 g, 0,173 mol) in H₂O (100 ml) wurde in einem 1 Liter fassenden Rundkolben innerhalb von 20 Minuten mit einer wässrigen Lösung von Natriumperiodat (40,7 g, 0,190 mol, 1,1 Äq., in 475 ml H₂O) versetzt (leicht exotherme Reaktion). Das erhaltene Gemisch wurde 1 weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt (die Beendigung der Umsetzung wurde durch TLC bestätigt). Anschließend wurde das Gemisch in einem Scheidetrichter dekantiert. Die wässrige Phase wurde von der organischen Phase abgetrennt. Die wässrige Lösung wurde mit NaCl gesättigt, dekantiert und ein weiteres Mal von der organischen Fraktion abgetrennt. Die beiden organischen Fraktionen wurden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und durch einen Wattebausch (in einer Pasteur-Pipette) filtriert. Man erhielt die Verbindung 15d (15,135 g, farbloses Öl, Ausbeute 78%). Die wässrige Lösung wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt (ohne Erwärmen, Heptanal Kp. 153°C). Man erhielt eine weitere Menge der Verbindung 15d (1,957 g, farbloses Öl, Ausbeute 10%). Gesamtausbeute 88%.An emulsion of commercial 7-octene-1,2-diol 15c (25 g, 0.173 mol) in H ₂ O (100 mL) stirred with a magnetic stirrer was placed in a 1 liter round bottom flask over 20 minutes with an aqueous solution of sodium periodate (40.7 g, 0.190 mol, 1.1 eq., In 475 ml H ₂ O) added (slightly exothermic reaction). The resulting mixture was stirred for 1 more hour at room temperature (completion of the reaction was confirmed by TLC). The mixture was then decanted in a separatory funnel. The aqueous phase was separated from the organic phase. The aqueous solution was saturated with NaCl, decanted and separated once more from the organic fraction. The two organic fractions were combined, dried over sodium sulfate and filtered through a cotton ball (in a Pasteur pipette). The compound 15d (15.135 g, colorless oil, yield 78%) was obtained. The aqueous solution was extracted with CH ₂ Cl ₂ , dried over anhydrous MgSO ₄ and concentrated in vacuo (without heating, heptanal bp 153 ° C). An additional amount of compound 15d (1.957 g, colorless oil, yield 10%) was obtained. Total yield 88%.

CC

Festes Ethyl-2-acetamidomalonat 15b (7,57 g, 40 mmol) wurde innerhalb von 1 Minute mit 6-Heptenal 15d (4,48 g, 40 mmol) in Lösung in Pyridin (32 ml, 10 Äq.) versetzt. Die erhaltene Lösung wurde in einem Bad von 10°C gekühlt und innerhalb von 4 Minuten mit Essigsäureanhydrid (12 ml, 3,2 Äq.) versetzt. Die erhaltene orangefarbene Lösung wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und sodann mit einer weiteren Portion Ethyl-2-acetamidomalonat 15b (2,27 g) versetzt. Das erhaltene Gemisch wurde weitere 11 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde Eis (60 ml) zugegeben. Die Lösung wurde 1,5 Stunden gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit 250 ml Wasser verdünnt und mit 2 Portionen Ether extrahiert. Die Etherlösung wurde mit 1 N HCl und gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, eingeengt und durch Flash-Chromatographie (EtOAc 40%/Hexan) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 15e (4,8 g, Ausbeute 50%) in Form eines blassgelben Öls.Solid ethyl 2-acetamidomalonate 15b (7.57 g, 40 mmol) was added within 1 minute with 6-heptenal 15d (4.48 g, 40 mmol) in solution in pyridine (32 mL, 10 eq). The resulting solution was cooled in a 10 ° C bath and treated with acetic anhydride (12 mL, 3.2 eq) over 4 minutes. The obtained orange solution was stirred for 3 hours at room temperature and then treated with another portion of ethyl 2-acetamidomalonate 15b (2.27 g). The resulting mixture was stirred at room temperature for an additional 11 hours. Then, ice (60 ml) was added. The solution was stirred for 1.5 hours. The mixture was then diluted with 250 ml of water and extracted with 2 portions of ether. The ether solution was washed with 1N HCl and saturated NaHCO ₃ solution, dried over Na ₂ SO ₄ , concentrated and purified by flash chromatography (EtOAc 40% / hexane). Compound 15e (4.8 g, yield 50%) was obtained in the form of a pale yellow oil.

DD

Eine entgaste (30-minütiges Einleiten von Argon) Lösung von Z-Ethyl-2-acetamido-2,8-nonadienoat 15e (8,38 g, 35 mmol) in trockenem Ethanol (70 ml) wurde mit (S,S)-Et-DUPHOS Rh(COD)OTf (51 mg, S/C = 496) versetzt. Das Gemisch wurde unter einem Wasserstoffdruck von 30 psi gesetzt (nach 4 Vakuum-H₂-Zyklen) und 2 Stunden auf einem Parr-Schüttler gerührt. Das erhaltene Gemisch wurde zur Trockne eingedampft. Man erhielt die rohe Verbindung 15f, die ohne weitere Reinigung in der folgenden Stufe eingesetzt wurde.A degassed (bubbling argon) solution of Z-ethyl-2-acetamido-2,8-nonadienoate 15e (8.38 g, 35 mmol) in dry ethanol (70 ml) was treated with (S, S) - Et-DUPHOS Rh (COD) OTf (51 mg, S / C = 496). The mixture was placed under a hydrogen pressure of 30 psi (after 4 vacuum H ₂ cycles) and stirred for 2 hours on a Parr shaker. The resulting mixture was evaporated to dryness. The crude compound 15f was obtained, which was used without further purification in the following step.

Ee

Eine Lösung von rohem (S)-Ethyl-2-acetamido-8-nonenoat 15f (7,3 g, 30,3 mmol) in THF (100 ml) wurde mit Boc₂O (13,2 g, 2 Äq.) und DMAP (740 mg, 0,2 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 2,5 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Anschließend wurde der Großteil des THF-Lösungsmittels abgedampft. Das rohe Gemisch wurde mit CH₂Cl₂ verdünnt und zur Entfernung von DMAP mit 1 N HCl gewaschen. Die organische Phase wurde mit gesättigter wässriger NaHCO₃ extrahiert, über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde sodann mit THF (50 ml) und Wasser (30 ml) verdünnt, mit LiOH·H₂O (2,54 g, 2 Äq.) versetzt und das erhaltene Gemisch wurde 25 Stunden bei Raumtemperatur gerührt (die Beendigung der Hydrolyse wurde durch TLC bestätigt).A solution of crude (S) -ethyl-2-acetamido-8-nonenoate 15f (7.3 g, 30.3 mmol) in THF (100 mL) was added with Boc ₂ O (13.2 g, 2 eq.). and DMAP (740 mg, 0.2 eq.). The reaction mixture was refluxed for 2.5 hours. Subsequently, most of the THF solvent was evaporated. The crude mixture was diluted with CH ₂ Cl ₂ and washed with 1N HCl to remove DMAP. The organic phase was extracted with saturated aqueous NaHCO ₃ , dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ and concentrated in vacuo. The crude product was then diluted with THF (50 ml) and water (30 ml), LiOH.H ₂ O (2.54 g, 2 eq.) Added and the resulting mixture stirred at room temperature for 25 hours (completion of hydrolysis was confirmed by TLC).

Das Reaktionsgemisch wurde zur Entfernung des Großteils des THF-Lösungsmittels unter Vakuum eingeengt und mit CH₂Cl₂ verdünnt. Die erhaltene Lösung wurde mit 1 N HCl gewaschen, über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Um geringfügige Verunreinigungen und überschüssiges Boc₂O zu entfernen, wurde das Rohprodukt durch Flash-Chromatographie (unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 100% Hexan zu 100% EtOAc als Elutionsmittel) gereinigt. Man erhielt die Titelverbindung 15g in hoher Reinheit in Form eines blassgelben Öls (5,82 g, Ausbeute 71%).The reaction mixture was concentrated under vacuum to remove most of the THF solvent and diluted with CH ₂ Cl ₂ . The resulting solution was washed with 1N HCl, dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ and concentrated in vacuo. To remove minor impurities and excess Boc ₂ O, the crude product was purified by flash chromatography (using a solvent gradient of 100% hexane to 100% EtOAc as eluent). The title compound 15g was obtained in high purity as a pale yellow oil (5.82 g, 71% yield).

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 7,01 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,79 (tdd, Jt = 6,7 Hz, Jd = 17,0, 10,2 Hz, 1H), 5,00 (md, Jd = 17,0 Hz, 1H), 4,93 (md, Jd = 10,2 Hz, 1H), 3,83 (m, 1H), 2,00 (q, J = 6,9 Hz, 2H), 1,65–1,5 (m, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,35–1,21 (m, 6H). Beispiel 15a Alternative Synthese von (2S)-N-Boc-Amino-non-8-ensäure (15g)

¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 7.01 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.79 (tdd, Jt = 6.7 Hz, Jd = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 5.00 (md, Jd = 17.0 Hz, 1H), 4.93 (md, Jd = 10.2 Hz, 1H), 3.83 (m, 1H), 2.00 (q, J = 6.9Hz, 2H), 1.65-1.5 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.35-1.21 (m, 6H). Example 15a Alternative Synthesis of (2S) -N-Boc-amino-non-8-enoic Acid (15g)

AA

Eine gerührte Suspension von fein geschnittenen Mg-Streifen (0,55 g, 22,5 mmol) in trockenem THF (30 ml) mit einem Gehalt an Dibromethan (0,1 ml) wurde tropfenweise innerhalb von 15 Minuten mit 8-Brom-1-octen (15 h, 2,52 ml, 15 mmol) versetzt (die Reaktion verläuft leicht exotherm). Nach 30 Minuten wurde das Gemisch 1 Stunde auf 38°C erwärmt und sodann auf –78°C abgekühlt, wonach es mit einer Kanüle auf eine überschüssige Menge an festem CO₂ gegeben wurde. Das Gemisch wurde mit Diethylether (100 ml) verdünnt. Die Lösung wurde mit Kochsalzlösung (2 × 50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Man erhielt ein rohes Öl, das durch Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung von 15% EtOAc in Hexanen als Elutionsmittel gereinigt wurde. Man erhielt die Verbindung 15i in einer Ausbeute von 62% (1,44 g).A stirred suspension of finely cut Mg strips (0.55 g, 22.5 mmol) in dry THF (30 mL) containing dibromoethane (0.1 mL) was added dropwise over 15 minutes with 8-bromo-1 octane (15 h, 2.52 ml, 15 mmol) (the reaction is slightly exothermic). After 30 minutes, the mixture was heated to 38 ° C for 1 hour and then cooled to -78 ° C, after which it was cannulated for an excess amount of solid CO ₂ . The mixture was diluted with diethyl ether (100 ml). The solution was washed with brine (2 x 50 ml), dried over MgSO ₄ and evaporated. A crude oil was obtained which was purified by chromatography on silica gel using 15% EtOAc in hexanes as eluent. Compound 15i was obtained in 62% yield (1.44 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,31–1,42 (m, 6H), 1,60–1,69 (m, 2H), 2,02–2,09 (m, 2H), 2,35 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 4,99 (dm, J = 10,0 Hz, 1H), 5,04 (dm, J = 17,0 Hz, 1H), 5,75–5,86 (m, 1H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.31 to 1.42 (m, 6H), 1.60-1.69 (m, 2H), 2.02-2.09 (m, 2H) , 2.35 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4.99 (dm, J = 10.0 Hz, 1H), 5.04 (dm, J = 17.0 Hz, 1H), 5 , 75-5.86 (m, 1H).

BB

Eine heftig gerührte Lösung der Carbonsäure 15i (1,36 g, 8,7 mmol) in wasserfreiem THF (70 ml) wurde bei –78°C mit frisch destilliertem Et₃N (1,6 ml, 11,3 mmol) und Pivaloylchlorid (1,18 ml, 9,58 mmol) mit einer Spritze unter wasserfreien Bedingungen versetzt. Sodann wurde das Gemisch 15 Minuten bei –78°C und anschließend 45 Minuten bei 0°C gerührt. Anschließend wurde das Gemisch erneut auf –78°C abgekühlt und mit einer Kanüle in eine wasserfreie Lösung von 4(S)-4-(Phenylmethyl)-2-oxazolidinon-lithiumsalz in THF bei –78°C übertragen. Das Lithiumsalz des Oxazolidinon-Reagenz war vorher durch langsame Zugabe von n-BuLi (2,00 M in Hexanen, 7,85 ml, 15,7 mmol) einer THF-Lösung (20 ml) des Oxazolidinons (2,78 g, 15,7 mmol) in THF bei –78°C hergestellt worden. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Minuten bei –78°C und anschließend 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Schließlich wurde das Gemisch mit einer wässrigen Lösung von Natriumbisulfat (100 ml einer 1 M Lösung) versetzt. Das THF wurde auf 3/4 des ursprünglichen Volumens eingedampft. Der Rückstand wurde mit EtOAc (2 × 150 ml) extrahiert. Die vermischten organischen Phasen wurden mit 5% NaHCO₃ (3 × 50 ml) und Kochsalzlösung (2 × 50 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Das erhaltene rohe Öl wurde an Kieselgel unter Verwendung von 15% EtOAc in Hexanen chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 15j in einer Ausbeute von 68% (1,88 g).A vigorously stirred solution of the carboxylic acid 15i (1.36 g, 8.7 mmol) in anhydrous THF (70 mL) was added at -78 ° C with freshly distilled Et ₃ N (1.6 mL, 11.3 mmol) and pivaloyl chloride (1.18 ml, 9.58 mmol) with a syringe under anhydrous conditions. The mixture was then stirred at -78 ° C for 15 minutes and then at 0 ° C for 45 minutes. The mixture was then recooled to -78 ° C and cannulated in an anhydrous solution of 4 (S) -4- (phenylmethyl) -2-oxazolidinone lithium salt in THF at -78 ° C. The lithium salt of the oxazolidinone reagent was previously prepared by the slow addition of n-BuLi (2.00 M in hexanes, 7.85 mL, 15.7 mmol) of a THF solution (20 mL) of the oxazolidinone (2.78 g, 15 , 7 mmol) in THF at -78 ° C. The reaction mixture was stirred at -78 ° C for 15 minutes and then 1.5 Stirred hours at room temperature. Finally, to the mixture was added an aqueous solution of sodium bisulfate (100 ml of a 1 M solution). The THF was evaporated to 3/4 of the original volume. The residue was extracted with EtOAc (2 × 150 ml). The mixed organic phases were washed with 5% NaHCO ₃ (3 x 50 mL) and brine (2 x 50 mL), dried over MgSO ₄ and evaporated. The resulting crude oil was chromatographed on silica gel using 15% EtOAc in hexanes. Compound 15j was obtained in 68% yield (1.88 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,35–1,47 (m, 6H), 1,67–1,74 (m, 2H), 2,02–2,09 (m, 2H), 2,65 (dd, J = 13,4 & 9,9 Hz, 1H), 2,84–3,02 (m, 2H), 3,31 (dd, J = 13,4 & 3,2 Hz, 1H), 4,13–4,22 (m, 2H), 4,62–4,71 (m, 1H), 4,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 5,00 (dd, J = 17,2 & 1,6 Hz, 1H), 5,75–5,84 (m, 1H), 7,18–7,38 (m, 5H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.35 to 1.47 (m, 6H), 1.67-1.74 (m, 2H), 2.02-2.09 (m, 2H) , 2.65 (dd, J = 13.4 & 9.9 Hz, 1H), 2.84-3.02 (m, 2H), 3.31 (dd, J = 13.4 & 3.2 Hz , 1H), 4.13-4.22 (m, 2H), 4.62-4.71 (m, 1H), 4.93 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.00 ( dd, J = 17.2 & 1.6 Hz, 1H), 5.75-5.84 (m, 1H), 7.18-7.38 (m, 5H).

CC

Eine gerührte Lösung von KHMDS (0,8 M THF, 22 ml, 17,5 mmol) in trockenem THF (50 ml) wurde bei –78°C mittels einer Kanüle mit einer Lösung des Säurederivats 15j (3,25 g, 10,30 mmol) in trockenem THF (40 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 45 Minuten bei –78°C gerührt. Sodann wurde das Gemisch mit einer Lösung von Trizylazid (3,67 g, 11,85 mmol) in trockenem THF (40 ml) bei –78°C versetzt. Das Gemisch wurde 3 Minuten bei –78°C gerührt und sodann mit Essigsäure (5 ml) versetzt. Anschließend wurde das Gemisch 1 Stunde und 45 Minuten bei Raumtemperatur und schließlich 15 Minuten bei 40°C gerührt. Nach Abdampfen des Großteils des THF wurde der Rückstand in EtOAc (100 ml) aufgenommen. Die organische Lösung wurde mit H₂O (50 ml), 5% NaHCO₃ (3 × 50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft. Das erhaltene Öl wurde an Kieselgel unter Verwendung von Hexan/CH₂Cl₂ (1/1) als Elutionsmittel chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 15k (2,47 g, Ausbeute 67%).A stirred solution of KHMDS (0.8 M THF, 22 mL, 17.5 mmol) in dry THF (50 mL) was cannulated at -78 ° C with a solution of the acid derivative 15j (3.25 g, 10%). 30 mmol) in dry THF (40 ml). The mixture was stirred at -78 ° C for 45 minutes. The mixture was added to a solution of trizyl azide (3.67 g, 11.85 mmol) in dry THF (40 mL) at -78 ° C. The mixture was stirred at -78 ° C for 3 minutes, then acetic acid (5 ml) was added. Subsequently, the mixture was stirred for 1 hour and 45 minutes at room temperature and finally at 40 ° C for 15 minutes. After evaporation of most of the THF, the residue was taken up in EtOAc (100 mL). The organic solution was washed with H ₂ O (50 ml), 5% NaHCO ₃ (3 × 50 ml) and brine (50 ml), dried (MgSO ₄ ) and evaporated. The resulting oil was chromatographed on silica gel using hexane / CH ₂ Cl ₂ (1/1) as eluent. The compound was 15k (2.47g, 67% yield).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,32–1,45 (m, 6H), 1,45–1,6 (m, 1H), 1,75–1,88 (2, 2H, Rotamere), 2,01–2,11 (m, 2H), 2,82–2,87 (m, 1H), 3,33 (dd, J = 13,4 & 3,2 Hz, 1H), 4,10–4,28 (m, 2H), 4,62–4,72 (m, 1H), 4,90–5,05 (m, 3H), 5,73–5,88 (m, 1H), 7,17–7,38 (m, 5H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.32 to 1.45 (m, 6H), 1.45-1.6 (m, 1H), 1.75-1.88 (2, 2H, Rotamers), 2.01-2.11 (m, 2H), 2.82-2.87 (m, 1H), 3.33 (dd, J = 13.4 & 3.2 Hz, 1H), 4 , 10-4.28 (m, 2H), 4.62-4.72 (m, 1H), 4.90-5.05 (m, 3H), 5.73-5.88 (m, 1H) , 7.17-7.38 (m, 5H).

DD

Eine gerührte Lösung von wasserfreiem SnCl₂ (2,61 g, 13,8 mmol) in wasserfreiem McOH (80 ml) wurde mittels einer Kanüle mit einer Lösung des Azids 15k (2,45 g, 6,9 mmol) in wasserfreiem McOH (20 ml) von 0°C versetzt. Das Gemisch wurde 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Abdampfen des McOH wurde das erhaltene schaumartige Material in Dioxan/H₂O (100 μl/20 μl) aufgenommen und mit Boc₂O (3,0 g, 13,8 mmol) und NaHCO₃ (2,89 g, 34,5 mmol) behandelt (der pH-Wert wurde gegebenenfalls mit NaHCO₃ auf 8 oder mehr eingestellt). Das Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde ein Teil des Dioxans abgedampft (~50%) und der Rückstand wurde 2-mal mit EtOAc extrahiert. Die organische Lösung wurde mit Kochsalzlösung (2 × 50 ml) gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde an Kieselgel unter Verwendung von 20–25% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 15l (1,75 g, Ausbeute 60%).A stirred solution of anhydrous SnCl ₂ (2.61 g, 13.8 mmol) in anhydrous MeOH (80 mL) was cannulated with a solution of the 15 K-azide (2.45 g, 6.9 mmol) in anhydrous MeOH ( 20 ml) of 0 ° C. The mixture was stirred for 4 hours at room temperature. After evaporation of the MeOH, the resulting foam-like material was taken up in dioxane / H ₂ O (100 μl / 20 μl) and washed with Boc ₂ O (3.0 g, 13.8 mmol) and NaHCO ₃ (2.89 g, 34% ₎ . 5 mmol) (the pH was optionally adjusted to 8 or more with NaHCO ₃ ). The mixture was stirred at room temperature for 16 hours. Then a portion of the dioxane was evaporated (~50%) and the residue was extracted twice with EtOAc. The organic solution was washed with brine (2 x 50 ml), dried and evaporated. The resulting residue was chromatographed on silica gel using 20-25% EtOAc in hexane as eluent. The compound was obtained 15 L (1.75 g, yield 60%).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,27–1,53 (m, 6H), 1,46 (s, 9H), 1,80 (m, 1H), 2,00–2,08 (m, 1H), 2,80 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 3,34 (d, 14,3 Hz, 1H), 4,17–4,23 (m, 2H), 4,60–4,66 (m, 1H), 4,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 5,05 (dd, J = 17,2 & 1,9 Hz, 1H), 5,13 (bs, 1H), 5,38–5;43 (m, 1H), 5,74–5,84 (m, 1H), 7,22–7,36 (m, 5H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.27 to 1.53 (m, 6H), 1.46 (s, 9H), 1.80 (m, 1H), 2.00-2.08 (m, 1H), 2.80 (t, J = 12.1Hz, 1H), 3.34 (d, 14.3Hz, 1H), 4.17-4.23 (m, 2H), 4 , 60-4.66 (m, 1H), 4.93 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 17.2 & 1.9 Hz, 1H), 5, 13 (bs, 1H), 5.38-5, 43 (m, 1H), 5.74-5.84 (m, 1H), 7.22-7.36 (m, 5H).

Ee

Eine gerührte Lösung des N-Boc-Derivats 15l (1,74 g, 4,04 mmol) in THF/H₂O (75 ml/15 ml) wurde bei 90°C mit H₂O₂ (30% Vol./Gew., 2,05 ml, 16,2 mmol) und LiOH·N₂O (0,34 g, 8,1 mmol) versetzt. Die Lösung wurde 1 Stunde bei 0°C gerührt. Sodann wurde die Umsetzung mit Na₂SO₃ (2,24 g in H₂O, 15 ml, 17,8 mmol) gestoppt. Der pH-Wert wurde mit 10%iger wässriger Citronensäure auf 4–5 eingestellt. Das Gemisch wurde mit EtOAc verdünnt. Die wässrige Fraktion wurde ein weiteres Mal mit EtOAc extrahiert. Die organische Lösung wurde 2-mal mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde an Kieselgel unter Verwendung von 20% Hexan in EtOAc als Elutionsmittel chromatographiert. Man erhielt die freie Carbonsäure 15g (0,76 g, Ausbeute 70%).A stirred solution of N-Boc derivative 15I (1.74 g, 4.04 mmol) in THF / H ₂ O (75 mL / 15 mL) was treated at 90 ° C with H ₂ O ₂ (30% v / v). Wt., 2.05 ml, 16.2 mmol) and LiOH.N ₂ O (0.34 g, 8.1 mmol). The solution was stirred at 0 ° C for 1 hour. The reaction was then quenched with Na ₂ SO ₃ (2.24 g in H ₂ O, 15 mL, 17.8 mmol). The pH was adjusted to 4-5 with 10% aqueous citric acid. The mixture was diluted with EtOAc. The aqueous fraction was extracted once more with EtOAc. The organic solution was washed twice with brine, dried and evaporated. The residue was chromatographed on silica gel using 20% hexane in EtOAc as eluent. The free carboxylic acid was 15 g (0.76 g, yield 70%).

Diese Verbindung war in jeglicher Hinsicht mit dem in Beispiel 15 erhaltenen Produkt identisch. Beispiel 16 Synthese von (2S)-N-Boc-Amino-5-oxo-non-8-ensäure-methytester (16d)

This compound was identical in all respects to the product obtained in Example 15. Example 16 Synthesis of (2S) -N-Boc-amino-5-oxo-non-8-enoic acid methyl ester (16d)

Diese Synthese beruht auf der Methode von T. Tsuda et. al., J. Am. Chem. Soc., Bd. 102 (1980), S. 6381–6384.These Synthesis is based on the method of T. Tsuda et. al., J. Am. Chem. Soc., 102 (1980), pp. 6381-6384.

AA

Eine gründlich gerührte Lösung des Monoallylesters von Malonsäure (1,50 g, 10,4 mmol) in trockenem THF (20 ml) wurde unter N₂ bei –78°C tropfenweise innerhalb von 5 Minuten mit n-Bu₂Mg (0,9 M/Hexan, 5,8 ml, 5,2 mmol) versetzt. Die schwere Suspension wurde sodann 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und zur Trockne eingedampft (Vakuumentlastung unter N₂). Das feste Mg-Salz 16b wurde 1 Stunde unter Vakuum getrocknet.A thoroughly stirred solution of the monoallyl ester of malonic acid (1.50 g, 10.4 mmol) in dry THF (20 mL) was added dropwise under N ₂ at -78 ° C over 5 minutes with n-Bu ₂ Mg (0.9 M / hexane, 5.8 mL, 5.2 mmol). The heavy suspension was then stirred for 1 hour at room temperature and evaporated to dryness (vacuum release under N ₂ ). The solid Mg salt 16b was dried under vacuum for 1 hour.

Das Glutaminsäurederivat 16a wurde zunächst mit 1,1'-Carbonylidiimidazol (1,65 g, 10,21 mmol) in wasserfreiem THF vermischt. Das Gemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, um den freien Säurerest zu aktivieren. Anschließend wurde das aktivierte Glutaminsäurederivat mittels einer Kanüle zu einer Lösung des Mg-Salzes 16b gegeben. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde es mit EtOAc verdünnt. Die organische Lösung wurde mit 0,5 N eiskalter HCl und mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde an Kieselgel unter Verwendung von 35–40% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 16c (1,85 g, Ausbeute 53%).The glutamic acid 16a was first with 1,1'-carbonylidiimidazole (1.65 g, 10.21 mmol) in anhydrous THF. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour to give the free acid residue to activate. Subsequently became the activated glutamic acid derivative by means of a cannula to a solution of the Mg salt 16b. The resulting reaction mixture was Stirred for 16 hours at room temperature. Then it was with EtOAc diluted. The organic solution was washed with 0.5 N ice-cold HCl and with brine, dried and evaporated. The residue obtained was on silica gel using 35-40% EtOAc in hexane as eluent Chromatograph. Compound 16c (1.85 g, yield 53%).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,44 (s, 9H), 1,85–1,95 (m, 1H), 2,12–2,22 (m, 1H), 2,58–2,74 (m, 2H), 3,48 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,24–4,34 (m, 1H), 4,52 (dm, J = 5,7 Hz, 2H), 5,09 (m, 1H), 5,25 (dm, J = 10,2 Hz, 1H), 5,34 (dm, J = 17,2 Hz, 1H), 5,91 (m, 1H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.44 (s, 9H), 1.85-1.95 (m, 1H), 2.12-2.22 (m, 1H), 2.58 -2.74 (m, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.24-4.34 (m, 1H), 4.52 (dm, J = 5 , 7Hz, 2H), 5.09 (m, 1H), 5.25 (dm, J = 10.2Hz, 1H), 5.34 (dm, J = 17.2Hz, 1H), 5, 91 (m, 1H).

BB

Eine gerührte Lösung von Tetrakis-(triphenylphosphin)-Pd(0) (0,116 g, 5 Mol-%, 0,1 mmol) in trockenem DMF (7 ml) wurde (mit einer Spritze und unter einer N₂-Atmosphäre) mit dem Diester 16c (0,687 g, 2 mmol) in trockenem DMF (3 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 3,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das DMF wurde unter vermindertem Druck abgedampft. Der Rückstand wurde mit EtOAc (20 ml) verdünnt. Die EtOAc-Lösung wurde mit 0,5 N eiskalter HCl (5 ml) und Kochsalzlösung (10 ml), gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde an Kieselgel unter Verwendung von 15–20% EtOAc in Hexan als Elutionsmittel chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 16d (0,253 g, Ausbeute 42%).A stirred solution of tetrakis (triphenylphosphine) -Pd (0) (0.116 g, 5 mol%, 0.1 mmol) in dry DMF (7 mL) was added (with a syringe and under an N ₂ atmosphere) to the Diester 16c (0.687 g, 2 mmol) in dry DMF (3 mL). The mixture was stirred at room temperature for 3.5 hours. The DMF was evaporated under reduced pressure. The residue was diluted with EtOAc (20 ml). The EtOAc solution was washed with 0.5 N ice-cold HCl (5 mL) and brine (10 mL), dried, and evaporated. The residue was chromatographed on silica gel using 15-20% EtOAc in hexane as eluent. Compound 16d (0.253 g, yield 42%) was obtained.

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,44 (s, 9H), 1,84–1,94 (m, 1H), 2,08–2,22 (m, 1H), 2,33 (dd, J = 14,0 & 7,3 Hz, 2H), 2,45–2,55 (m, 4H), 3,74 (s, 3H), 4,28 (bm, 1H), 4,98 (dm, J = 10,2 Hz, 1H), 5,03 (dm, J = 17,2 Hz, 1H), 5,00–5,10 (m, 1H), 5,74–5,85 (m, 1H). Beispiel 17 Synthese von (2S,5R)-N-Boc-2-Amino-5-methyl-non-8-ensäure (17f)

¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.44 (s, 9H), 1.84-1.94 (m, 1H), 2.08-2.22 (m, 1H), 2.33 (dd, J = 14.0 & 7.3 Hz, 2H), 2.45-2.55 (m, 4H), 3.74 (s, 3H), 4.28 (bm, 1H), 4, 98 (dm, J = 10.2 Hz, 1H), 5.03 (dm, J = 17.2 Hz, 1H), 5.00-5.10 (m, 1H), 5.74-5.85 (m, 1H). Example 17 Synthesis of (2S, 5R) -N-Boc-2-amino-5-methyl-non-8-enoic Acid (17f)

A, B, C, DA, B, C, D

Handelsübliches (R)-(+)-Citronellal 17a wurde zunächst den gleichen Synthesestufen, die in Beispiel 15 für die Umwandlung des Aldehyds 15d in das Aminosäure-Zwischenprodukt 15f beschrieben wurden, in das Aminosäurederivat 17b umgewandelt. commercial (R) - (+) - Citronellal 17a was initially subjected to the same synthesis steps, those in Example 15 for the conversion of aldehyde 15d into amino acid intermediate 15f is described into the amino acid derivative 17b converted.

Ee

Die Verbindung 17b (0,675 g, 5,6 mmol) wurde in einem Gemisch aus tBuOH/Aceton/H₂O (1 : 1 : 1, 18 ml) gelöst und in ein Eisbad (0°C) gestellt. NMMO (0,789 g, 6,74 mmol, 1,2 Äq.) und OsO₄ (2,5% Gew./Gew. in tBuOH, 0,7 ml, 0,067 mmol, 0,012 Äq.) wurden nacheinander zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der Großteil des Acetons wurde unter Vakuum abgedampft. Sodann wurde das Gemisch mit EtOAc extrahiert. Die organische Phase wurde mit H₂O und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft. Das Diol 17c wurde nach Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von 1% EtOH in EtOAc als Elutionsmittel in einer Ausbeute von 77% (0,575 g) erhalten.Compound 17b (0.675 g, 5.6 mmol) was dissolved in a mixture of tBuOH / acetone / H ₂ O (1: 1: 1, 18 mL) and placed in an ice bath (0 ° C). NMMO (0.789 g, 6.74 mmol, 1.2 eq.) And OsO ₄ (2.5% w / w in tBuOH, 0.7 mL, 0.067 mmol, 0.012 eq.) Were added sequentially. The reaction mixture was stirred for 4 hours at room temperature. Most of the acetone was evaporated off under vacuum. The mixture was extracted with EtOAc. The organic phase was washed with H ₂ O and brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness. Diol 17c was obtained after flash column chromatography using 1% EtOH in EtOAc as eluent in 77% yield (0.575 g).

FF

Eine Lösung des Diols 17c (0,575 g, 1,73 mmol) in THF/H₂O (1 : 1, 20 ml) wurde bei 0°C mit NaIO₄ (0,48 g, 2,25 mmol, 1,3 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 3,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde der Großteil des THF-Lösungsmittels durch Abdampfen unter Vakuum entfernt. Das verbleibende Gemisch wurde mit EtOAc (2 × 100 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit 5%iger wässriger Citronensäurelösung (2 × 20 ml), 5%iger wässriger NaHCO₃-Lösung (20 ml) und Kochsalzlösung (2 × 50 ml) gewaschen und die EtOAc-Lösung wurde über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Das Aldehyd-Zwischenprodukt 17d (0,47 g Rohprodukt) wurde ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.A solution of diol 17c (0.575 g, 1.73 mmol) in THF / H ₂ O (1: 1, 20 mL) was added at 0 ° C with NaIO ₄ (0.48 g, 2.25 mmol, 1.3 Äq.). The reaction mixture was stirred at room temperature for 3.5 hours. Subsequently, most of the THF solvent was removed by evaporation under vacuum. The remaining mixture was extracted with EtOAc (2 x 100 ml). The combined organic phases were washed with 5% aqueous citric acid solution (2 × 20 ml), 5% aqueous NaHCO ₃ solution (20 ml) and brine (2 × 50 ml) and the EtOAc solution was dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness under vacuum. Aldehyde intermediate 17d (0.47 g crude product) was used in the next step without further purification.

GG

Eine Lösung von Ph₃PCH₃Br (925 mg, 2,6 mmol) in wasserfreiem Toluol (15 ml) wurde mit KHMDS (0,5 M in Toluol, 5,2 ml, 2,6 mmol) versetzt. Die gebildete gelbe Suspension wurde 30 Minuten unter N₂ bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde die Suspension zunächst auf 0°C abgekühlt und sodann mit einer Spritze mit der Lösung des Aldehyds 17d (0,47 g 1,73 mmol (gelöst in 15 ml wasserfreiem THF) versetzt. Sodann ließ man das Gemisch auf Raumtemperatur erwärmen. Nach 1-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde der Großteil des THF durch Abdampfen unter Vakuum entfernt. Das Gemisch wurde mit EtOAc (100 ml) versetzt. Die organische Phase wurde mit H₂O (30 ml), 5%iger wässriger NaNCO₃-Lösung (30 ml) und Kochsalzlösung (30 ml) gewaschen. Die EtOAc-Lösung wurde sodann über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Die reine Verbindung 17e wurde nach Reinigung durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von Hexan : EtOAc (3 : 2) als Elutionsmittel isoliert. Die Ausbeute betrug 63% (0,29 g) für die beiden letzten Stufen.To a solution of Ph ₃ PCH ₃ Br (925 mg, 2.6 mmol) in anhydrous toluene (15 mL) was added KHMDS (0.5 M in toluene, 5.2 mL, 2.6 mmol). The resulting yellow suspension was stirred at room temperature for 30 minutes under N ₂ . The suspension was then cooled first to 0 ° C. and then treated with a syringe with the solution of the aldehyde 17d (0.47 g, 1.73 mmol (dissolved in 15 ml of anhydrous THF), and the mixture was allowed to warm to room temperature Stirred for 1 hour at room temperature, most of the THF was removed by evaporation under vacuum, EtOAc (100 mL) was added, and the organic phase was washed with H ₂ O (30 mL), 5% aqueous NaNCO ₃ ( The EtOAc solution was then dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness under vacuum The pure compound 17e was purified after purification by flash column chromatography on silica gel using hexane: EtOAc (3 The yield was 63% (0.29 g) for the last two stages.

Die Hydrolyse des Ethylesters und der gleichzeitige Austausch der N-Acetylschutzgruppe anstelle von Boc im Zwischenprodukt 17e zur Bildung der Verbindung 17f wurden nach dem gleichen Verfahren, wie es für die Umwandlung der Verbindung 15f zu 15g angegeben wurde, durchgeführt (17f, 310 mg, quantitativ).The hydrolysis of the ethyl ester and the simultaneous replacement of the N-acetyl protecting group in place of Boc in the intermediate 17e to give the compound 17f were carried out according to the same procedure as for conversion of Compound 15f to 15g was performed (17f, 310 mg, quantitative).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 0,88 (d, J=6,4 Hz, 3H), 1,18–1,28 (m, 2H), 1,35–1,48 (m, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,64–1,74 (m, 1H), 1,81–1,89 (m, 1H), 1,94–2,12 (m, 2H), 4,28 (bd, J=3,2 Hz, 1H), 4,93 (dm, J=11,1 Hz, 1H), 5,00 (dm, J=16,8 Hz, 1H), 5,74–5,84 (m, 1H). Beispiel 18 Synthese von N-Boc-O-Allyl-(L)-threonin (18d)

¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 0.88 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.18-1.28 (m, 2H), 1.35 to 1.48 ( m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.64-1.74 (m, 1H), 1.81-1.89 (m, 1H), 1.94-2.12 (m, 2H), 4.28 (bd, J = 3.2Hz, 1H), 4.93 (dm, J = 11.1Hz, 1H), 5.00 (dm, J = 16.8Hz, 1H) , 5.74-5.84 (m, 1H). Example 18 Synthesis of N-Boc-O-Allyl- (L) -threonine (18d)

AA

Boc-(L)-threonin 18a (500 mg, 2,28 mmol) wurde bei 0°C partiell in CH₂Cl₂/MeOH (8 ml bzw. 0,5 ml) gelöst. Eine Lösung von Diazomethan in Diethylether wurde langsam zugegeben, bis die gelbe Farbe bestehen blieb, was auf das Vorliegen von überschüssigem Diazomethan hindeutete. Nach Abdampfen der Lösungsmittel wurde der rohe Methylester 18b in Form eines trüben weißen Öls (0,534 g) erhalten.Boc- (L) -threonine 18a (500 mg, 2.28 mmol) was partially dissolved at 0 ° C in CH ₂ Cl ₂ / MeOH (8 mL and 0.5 mL, respectively). A solution of diazomethane in diethyl ether was added slowly until the yellow color persisted, indicating the presence of excess diazomethane. After evaporation of the solvents, the crude methyl ester 18b was obtained as a cloudy white oil (0.534 g).

BB

Das Zwischenprodukt 18b (311 mg, 1,33 mmol) wurde sodann in wasserfreiem Diethylether (8 ml) gelöst, mit Ag₂O (341 mg, 1,47 mmol) und frisch aktivierten 4 Å-Molekularsieben (1 g) versetzt. Schließlich wurde Allyliodid (134 μl, 1,47 mmol) in den Reaktionskolben gegeben und das Gemisch wurde unter Rückfluss gerührt. Nach 20 Stunden und 30 Stunden wurden weitere 2 Portionen Allyliodid (jeweils 45 μl, 0,50 mmol) zugegeben. Der Rührvorgang wurde insgesamt 36 Stunden fortgesetzt. Anschließend wurde das Gemisch durch Celite filtriert und durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1 : 4) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt 73 mg (Ausbeute 27%) der Verbindung 18c in Form eines klaren Öls.Intermediate 18b (311 mg, 1.33 mmol) was then dissolved in anhydrous diethyl ether (8 mL), added with Ag ₂ O (341 mg, 1.47 mmol) and freshly activated 4 Å molecular sieves (1 g). Finally, allyl iodide (134 μl, 1.47 mmol) was added to the reaction flask and the mixture was stirred at reflux. After 20 hours and 30 hours, another 2 allyl iodide portions (45 μl, 0.50 mmol each) were added. Stirring was continued for a total of 36 hours. Subsequently, the mixture was filtered through celite and purified by flash column chromatography on silica gel using EtOAc / hexane (1: 4) as eluent. This gave 73 mg (yield 27%) of compound 18c in the form of a clear oil.

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,21 (d, J=6,0 Hz, 3H), 1,45 (s, 9H), 3,75 (s, 3H), 3,82–3,87 (m, 1H), 3,99–4,07 (m, 2H), 4,29 (dd, J=9,5 & 2,5 Hz, 1H), 5,14 (dm, J=10,5 Hz, 1H), 5,21 (dm, J=17,2 Hz, 1H), 5,75–5,84 (m, 1H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.21 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H), 3.75 (s, 3H), 3.82 -3.87 (m, 1H), 3.99-4.07 (m, 2H), 4.29 (dd, J = 9.5 & 2.5 Hz, 1H), 5.14 (dm, J = 10.5 Hz, 1H), 5.21 (dm, J = 17.2 Hz, 1H), 5.75-5.84 (m, 1H).

CC

Die Esterverbindung 18c (99 mg, 0,362 mmol) wurde in einem Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (2 : 1 : 1, 4 ml) gelöst und mit LiOH·H2O (61 mg, 1,45 mmol) versetzt. Die Lösung wurde 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und sodann mit 1H HCl auf einen pH-Wert von ~3 angesäuert, wonach die Lösungsmittel unter Vakuum entfernt wurden. Das erhaltene Öl, die Verbindung 18d, wurde direkt für die Synthese von makrocyclischen Inhibitoren verwendet. Beispiel 19 Synthese von (2S,3S)-N-Boc-2-Amino-3-(mercaptoallyl)-butansäure (19e)

The ester compound 18c (99 mg, 0.362 mmol) was dissolved in a mixture of THF / MeOH / H ₂ O (2: 1: 1, 4 mL) and LiOH.H ₂ O (61 mg, 1.45 mmol) was added. The solution was stirred for 2 hours at room temperature and then acidified to pH ~3 with 1H HCl, after which the solvents were removed under vacuum. The resulting oil, compound 18d, was used directly for the synthesis of macrocyclic inhibitors. Example 19 Synthesis of (2S, 3S) -N-Boc-2-amino-3- (mercaptoallyl) -butanoic acid (19e)

AA

Die Verbindung 19a (9,1 mmol) wurde in Pyridin (5 ml) gelöst. Die Lösung wurde in einem Eisbad auf 0°C gekühlt und in kleinen Portionen mit Tosylchlorid (2,3 g, 11,8 mmol, 1,3 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach wurde das Reaktionsgemisch mit Diethylether (300 ml) und H₂O (100 ml) ausgeschüttelt. Die Etherphase wurde ferner mit 0,2 N HCl (6 × 100 ml) und Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum zur Trockne eingeengt. Nach Reinigung des Rohmaterials durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von Hexan/EtOAc (Gradient von 8 : 2 bis 7 : 3) als Elutionsmittel erhielt man das Tosylderivat 19b in einer Ausbeute von 85% (3,05 g).Compound 19a (9.1 mmol) was dissolved in pyridine (5 ml). The solution was cooled to 0 ° C in an ice bath and tossed in small portions with tosyl chloride (2.3 g, 11.8 mmol, 1.3 eq.). The reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hours. Thereafter, the reaction mixture was partitioned between diethyl ether (300 ml) and H ₂ O (100 ml). The ether phase was further washed with 0.2N HCl (6 x 100 mL) and brine (100 mL), dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and concentrated to dryness in vacuo. Purification of the crude material by flash column chromatography using hexane / EtOAc (gradient from 8: 2 to 7: 3) as eluent gave the tosyl derivative 19b in 85% yield (3.05 g).

BB

Eine Lösung des Zwischenprodukts 19b (775 mg, 2 mmol) in wasserfreiem DMF (2,5 ml) wurde mit Kaliumthioacetat (365 mg, 3,2 mmol, 1,6 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der Großteil des DMF wurde unter Vakuum abgedampft. Das restliche Gemisch wurde mit EtOAc und H₂O ausgeschüttelt. Die wässrige Phase wurde mit EtOAc rückextrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft. Nach Reinigung des Rohmaterials durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von Hexan/EtOAc (Verhältnis 4 : 1) als Elutionsmittel erhielt man die Verbindung 19c in einer Ausbeute von 80% (465 mg).To a solution of Intermediate 19b (775 mg, 2 mmol) in anhydrous DMF (2.5 mL) was added potassium thioacetate (365 mg, 3.2 mmol, 1.6 eq). The reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hours. Most of the DMF was evaporated under vacuum. The remaining mixture was shaken out with EtOAc and H ₂ O. The aqueous phase was back-extracted with EtOAc. The combined organic phases were washed with brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness. Purification of the crude material by flash column chromatography using hexane / EtOAc (4: 1 ratio) as eluent gave compound 19c in 80% yield (465 mg).

CC

Eine Lösung des Thioesters 19c (465 mg) in H₂O/EtOH (Verhältnis 3 : 5, 8 ml) wurde mit einer wässrigen Lösung von 0,2 M NaOH (2,4 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde Allyliodid (0,292 ml, 3,2 mmol, 2 Äq.) zugegeben. Der Rührvorgang wurde weitere 30 Minuten bei Raumtemperatur fortgesetzt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch auf die Hälfte seines ursprünglichen Volumens eingeengt und anschließend mit EtOAc extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit wässriger 0,5 N HCl auf den pH-Wert ~3 angesäuert und mit EtOAc rückextrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Das rohe Reaktionsgemisch enthielt mindestens vier Produkte. Sämtliche Produkte wurden durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von Hexan/EtOAc (Gradient von 9 : 1 bis 3 : 1) isoliert. Die Struktur der am wenigsten polaren Verbindung (TLC R_f = 0,68 in Hex/EtOAc 4 : 1) entsprach dem angestrebten Produkt 19d (83 mg, Ausbeute 18%).To a solution of the thioester 19c (465 mg) in H ₂ O / EtOH (ratio 3: 5, 8 ml) was added an aqueous solution of 0.2 M NaOH (2.4 ml). The mixture was stirred for 1.5 hours at room temperature. Allyl iodide (0.292 mL, 3.2 mmol, 2 eq.) Was added. The stirring was continued for another 30 minutes at room temperature. The reaction mixture was then concentrated to half its original volume and then extracted with EtOAc. The aqueous phase was acidified to pH ~ 3 with aqueous 0.5 N HCl and back extracted with EtOAc. The combined organic phases were washed with brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness in vacuo. The crude reaction mixture contained at least four products. All products were isolated by flash column chromatography on silica gel using hexane / EtOAc (gradient from 9: 1 to 3: 1). The structure of the least polar compound (TLC R _f = 0.68 in hex / EtOAc 4: 1) corresponded to the desired product 19d (83 mg, yield 18%).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,24 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 3,13–3,19 (m, 2H), 3,24–3,29 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,50 (dd, J=8,6 & 3,8 Hz, 1H), 5,12 (d, J=12,4 Hz, 1H), 5,15 (dd, J=18,4 & 1,3 Hz, 1H), 5,22 (bd, J=7,6 Hz, 1H), 5,75–5,85 (m, 1H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.24 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H), 3.13 to 3.19 (m, 2H) , 3.24-3.29 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.50 (dd, J = 8.6 & 3.8Hz, 1H), 5.12 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 18.4 & 1.3 Hz, 1H), 5.22 (bd, J = 7.6 Hz, 1H), 5.75-5 , 85 (m, 1H).

DD

Eine Lösung des Methylesters 19d (83 mg, 0,287 mmol) in McOH/H₂O (3 : 1,4 ml) wurde mit wässrigem NaOH (0,2 N, 1,3 ml, 0,26 mmol) 24 Stunden bei Raumtemperatur und 1 Stunde bei 40°C vermischt. Das Reaktionsgemisch wurde mit kalter wässriger HCl (0,5 N HCl, 0°C, pH-Wert 4–5) angesäuert. Das McOH wurde unter Vakuum entfernt und das restliche wässrige Gemisch mit EtOAc extrahiert. Die organische Lösung wurde über MgSO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft. Man erhielt die Verbindung 19e. Die Verbindung 19e wurde ohne weitere Reinigung für die endgültige Synthese von Inhibitoren verwendet. Beispiel 20 Synthese von (S)-N-Boc-2-Amino-3-methyl-3-(1-mercapto-4-butenyl)-butansäure (20e)

A solution of methyl ester 19d (83 mg, 0.287 mmol) in MeOH / H ₂ O (3: 1.4 mL) was treated with aqueous NaOH (0.2 N, 1.3 mL, 0.26 mmol) for 24 h at room temperature and mixed at 40 ° C for 1 hour. The reaction mixture was acidified with cold aqueous HCl (0.5 N HCl, 0 ° C, pH 4-5). The MeOH was removed in vacuo and the residual aqueous mixture extracted with EtOAc. The organic solution was dried over MgSO ₄ and evaporated to dryness. The compound 19e was obtained. Compound 19e was used without further purification for the final synthesis of inhibitors. Example 20 Synthesis of (S) -N-Boc-2-amino-3-methyl-3- (1-mercapto-4-butenyl) -butanoic acid (20e)

AA

L-Penicillamin 20a (448 mg, 3 mmol) wurde in DMF/DMSO (Verhältnis 5 : 1,6 ml) gelöst und mit 4-Brompenten (0,46 ml, 4,5 mmol, 1,5 Äq.) und CsOH·H₂O (1,0 g, 6 ml, 2 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur gerührt. Nach 24 Stunden wurde Boc₂O (820 mg, 3,75 mmol, 1,25 Äq.) zum Gemisch gegeben und der Rührvorgang wurde weitere 12 Stunden fortgesetzt. Sodann wurde das DMF unter Vakuum entfernt. Das verbleibende Gemisch wurde mit kalter wässriger 0,5 N HCl unter Einstellung des pH-Werts auf ~4–5 verdünnt und sodann mit EtOAc (2 × 50 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde mit Kochsalzlösung (2×) gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Man erhielt die rohe Carbonsäure 20b.L-Penicillamine 20a (448 mg, 3 mmol) was dissolved in DMF / DMSO (ratio 5: 1.6 mL) and extracted with 4-bromopentene (0.46 mL, 4.5 mmol, 1.5 eq.) And CsOH · H ₂ O (1.0 g, 6 ml, 2 eq.) Is added. The reaction mixture was stirred at room temperature. After 24 hours, Boc ₂ O (820 mg, 3.75 mmol, 1.25 eq.) Was added to the mixture and stirring was continued for an additional 12 hours. Then the DMF was removed under vacuum. The residual mixture was diluted to ~4-5 with cold aqueous 0.5 N HCl to adjust the pH and then extracted with EtOAc (2 x 50 mL). The organic phase was washed with brine (2x), dried over anhydrous magnesium sulfate and evaporated to dryness. The crude carboxylic acid 20b was obtained.

BB

Die Reinigung von 20b erwies sich als schwierig, so dass das Rohprodukt zunächst mit Diazomethan unter Bildung des entsprechenden Methylesters 20c behandelt wurde. Anschließend wurde eine Reinigung durch Flash- Säulenchromatographie unter Verwendung von Hexan/EtOAc (9 : 1) als Elutionsmittel durchgeführt. Man erhielt 190 mg (Ausbeute 20%) des reinen Methylesters 20c. The Purification of 20b proved difficult, leaving the crude product first with diazomethane to give the corresponding methyl ester 20c was treated. Subsequently was purified by flash column chromatography using hexane / EtOAc (9: 1) as eluent. you received 190 mg (yield 20%) of pure methyl ester 20c.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1,35 (s, 3H), 1,37 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,59–1,67 (m, 2H), 2,11–2,17 (m, 2H), 2,51–2,60 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,29 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 4,98 (dm, J=10,5 Hz, 1H), 5,03 (dm, J=19 Hz, 1H), 5,35 (bd, J=7 Hz, 1H), 5,72–5,83 (m, 1H). ¹ H-NMR (400 MHz, CDCl _3): δ 1.35 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.59-1.67 (m, 2H), 2.11-2.17 (m, 2H), 2.51-2.60 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.29 (d, J = 8.6 Hz , 1H), 4.98 (dm, J = 10.5 Hz, 1H), 5.03 (dm, J = 19 Hz, 1H), 5.35 (bd, J = 7 Hz, 1H), 5, 72-5.83 (m, 1H).

CC

Der Ester wurde anschließend in THF/MeOH/H₂O (2 : 2 : 1,5 ml) gelöst und mit LiOH·H₂O (50 mg, 2,0 mmol, 2 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Stunden bei 40°C gerührt, um den Ester 20c zurück zur Säure 20b zu hydrolysieren. Das Reaktionsgemisch wurde mit 0,5 N HCl auf den pH-Wert 4–5 angesäuert, das THF und das McOH wurden zur Trockne abgedampft. Die verbleibende wässrige Lösung wurde mit EtOAc extrahiert. Die EtOAc-Phase wurde über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft. Man erhielt die Verbindung 20b, die ohne weitere Reinigung bei der anschließenden Synthese von makrocyclischen Inhibitoren verwendet wurde.The ester was then dissolved in THF / MeOH / H ₂ O (2: 2: 1.5 mL) and LiOH.H ₂ O (50 mg, 2.0 mmol, 2 eq.) Added. The reaction mixture was stirred at 40 ° C for 4 hours to hydrolyze the ester 20c back to the acid 20b. The reaction mixture was acidified to pH 4-5 with 0.5 N HCl, the THF and MeOH evaporated to dryness. The remaining aqueous solution was extracted with EtOAc. The EtOAc layer was dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness. Compound 20b was obtained, which was used without further purification in the subsequent synthesis of macrocyclic inhibitors.

Acyclische Dipeptid- und Tripeptid-ZwischenprodukteAcyclic dipeptide and Tripeptide intermediates

Das allgemeine Verfahren zur Durchführung der Kupplungsreaktionen in Lösung sowie spezielle Beispiele hierfür sind in WO-00/09543 und WO-00/09558 beschrieben.The general procedure for carrying out the coupling reactions in solution as well as specific examples thereof are given in WO-00/09543 and WO-00/09558 described.

Diese Verfahren wurden zur Synthese der Zwischenprodukt-Dipeptide 26c, 30a und Tripeptide 23a, 24a, 31a, 32a und 33a herangezogen. Beispiel 21 Synthese des acyclischen Tripeptids 21e

These procedures were used to synthesize intermediate dipeptides 26c, 30a and tripeptides 23a, 24a, 31a, 32a and 33a. Example 21 Synthesis of the acyclic tripeptide 21e

AA

Eine Lösung des Prolinderivats 21a (hergestellt aus handelsüblichem Boc-4(R)-Hydroxyprolin und 4-Chlorchinolin gemäß WO-00/05543 und WO-00/09558 ) (1,32 g, 3,68 mmol) und des rohen Homoallyl-ACCA 1f (~3,35 mmol) in CH₂Cl₂ (10 ml) wurde nacheinander mit NMM (1,21 ml, 10,05 mmol) und HATU (1,53 g, 4,02 mmol) versetzt. Die Suspension wurde 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde das Lösungsmittel abgedampft. Das rohe Reaktionsgemisch wurde erneut in EtOAc (30 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit 5%iger wässriger NaHCO₃-Lösung (2 × 10 ml) und Kochsalzlösung (10 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung von 8% Diethylether in EtOAc als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt das gewünschte Diastereomere der Verbindung 21 b in einer Ausbeute von 20% (die absolute stereochemische Beschaffenheit wurde nicht bestimmt).A solution of the proline derivative 21a (prepared from commercial Boc-4 (R) -hydroxyproline and 4-chloroquinoline according to WO-00/05543 and WO-00/09558 ) (1.32 g, 3.68 mmol) and the crude homoallyl-ACCA 1f (~3.35 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (10 mL) was washed successively with NMM (1.21 mL, 10.05 mmol). and HATU (1.53 g, 4.02 mmol). The suspension was stirred at room temperature for 18 hours. Then the solvent was evaporated. The crude reaction mixture was redissolved in EtOAc (30 mL). The solution was washed with 5% aqueous NaHCO ₃ solution (2 x 10 mL) and brine (10 mL), dried over MgSO ₄ and evaporated. The crude product was purified by chromatography on silica gel using 8% diethyl ether in EtOAc as eluent. The desired diastereomer of compound 21b was obtained in a yield of 20% (the absolute stereochemistry was not determined).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 0,93 & 1,01 (t, J = 8,3 Hz, 1H, Rotamere im Verhältnis 3 : 7), 1,14–1,35 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,50–1,82 (m, 4H), 2,08–2,24 (m, 2H), 2,32 (bs, 0,7H), 2,63 (bs, 0,75H), 2,93 (bs, 0,75H), 3,16 (m, 0,25H), 3,77 (bs, 1,5H), 3,88 (bs, 0,5H), 4,4–4,55 (m, 1H), 4,98 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 5,03 (dd, J = 17,2 & 1,6 Hz, 1H), 5,24 (bs, 1H), 5,75–5,88 (m, 1H), 6,57 & 6,78 (2bs, 1H, 2 Rotamere), 7,42–7,58 (m, 3H), 7,63–7,73 (m, 2H), 8,04 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,74 (d, J = 5,1 Hz, 1H). ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz): δ 0.93 & 1.01 (t, J = 8.3 Hz, 1H, rotamers in the ratio 3: 7), 1.14-1.35 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.50-1.82 (m, 4H), 2.08-2.24 (m, 2H), 2.32 (bs, 0.7H), 2.63 (bs, 0.75H), 2.93 (bs, 0.75H), 3.16 (m, 0.25H), 3.77 (bs, 1.5H ), 3.88 (bs, 0.5H), 4.4-4.55 (m, 1H), 4.98 (d, J = 10.2Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 17.2 & 1.6 Hz, 1H), 5.24 (bs, 1H), 5.75-5.88 (m, 1H), 6.57 & 6.78 (2bs, 1H, 2 rotamers), 7.42-7.58 (m, 3H), 7.63-7.73 (m, 2H), 8.04 (d, J = 8.3Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 5.1 Hz, 1H).

B B

Eine Lösung des Dipeptids 21 b (137 mg, 0,248 mmol) in trockenem CH₂Cl₂ wurde mit einer Lösung von HCl in Dioxan (4 M, 4 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Lösungsmittel abgedampft und der Rückstand unter Hochvakuum getrocknet. Man erhielt die freie Aminosäure. Das Gemisch wurde in Diethylether/MeOH (3 μl/2 μl) gelöst und mit einem geringfügigen Überschuss an Diazomethan in Lösung in Diethylether behandelt. Nach 30 Minuten wurde das überschüssige Diazomethan durch Zugabe von HCl (4 M in Dioxan) zerstört. Das Gemisch wurde zur Trockne eingedampft. Man erhielt das HCl-Salz der Verbindung 21 c, die ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt wurde.To a solution of dipeptide 21b (137 mg, 0.248 mmol) in dry CH ₂ Cl ₂ was added a solution of HCl in dioxane (4 M, 4 mL). The mixture was stirred for 1.5 hours at room temperature. The solvent was evaporated and the residue was dried under high vacuum. The free amino acid was obtained. The mixture was dissolved in diethyl ether / MeOH (3 μl / 2 μl) and treated with a slight excess of diazomethane in solution in diethyl ether. After 30 minutes, the excess diazomethane was destroyed by the addition of HCl (4 M in dioxane). The mixture was evaporated to dryness. The HCl salt of compound 21c was obtained, which was used without further purification in the next step.

CC

Eine gerührte Suspension des rohen Dipeptids 21 c (0,23 g, 0,48 mmol) in CH₂Cl₂ (25 ml) wurde nacheinander mit (2S)-N-Boc-Amino-hept-6-ensäure 21d (0,151 g, 0,62 mmol), NMM (210 μl, 1,91 mmol) und HATU (0,236 g, 0,62 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt (der pH-Wert wurde, sofern erforderlich, nach 1 Stunde mit NNM auf ~8 eingestellt). Das CH₂Cl₂ wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in EtOAc (50 ml) aufgenommen. Die organische Lösung wurde mit einer 5%igen NaHCO₃-Lösung (2 × 20 ml) und Kochsalzlösung (2 × 20 ml) gewaschen, getrocknet und eingedampft. Die erhaltene rohe Verbindung wurde an Kieselgel (50 ml, 2% EtOH/EtOAc) chromatographiert. Man erhielt die Verbindung 21e (0,139 g, Ausbeute 46%).A stirred suspension of crude dipeptide 21c (0.23g, 0.48mmol) in CH ₂ Cl ₂ (25mL) was added sequentially with (2S) -N-Boc-amino-hept-6-enoic acid 21d (0.151g , 0.62 mmol), NMM (210 μl, 1.91 mmol) and HATU (0.236 g, 0.62 mmol). The mixture was stirred at room temperature for 16 hours (the pH was adjusted to ~8 after 1 hour with NNM, if necessary). The CH ₂ Cl ₂ was evaporated. The residue was taken up in EtOAc (50 ml). The organic solution was washed with a 5% NaHCO ₃ solution (2 x 20 mL) and brine (2 x 20 mL), dried and evaporated. The resulting crude compound was chromatographed on silica gel (50 mL, 2% EtOH / EtOAc). The compound 21e (0.139 g, yield 46%) was obtained.

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz, Rotamere im Verhältnis 6 : 1) chemische Verschiebungen des Hauptrotameren: δ 1,21–1,27 (m, 1H), 1,36 (s, 9H), 1,45–1,81 (4m, 7H), 2,20–2,22 (m, 4H), 2,28–2,37 (m, 1H), 2,90–2,99 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,94–3,98 (m, 1H), 4,29 (bd, J = 9,9 Hz, 1H), 4,46–4,50 (m, 1H), 4,81 (dd, J = 8,3 & 5,4 Hz, 1H), 4,92–5,06 (m, 4H), 5,16 (d, J = 8,3 Hz 1H), 5,37 (m, 1H), 5,70–5,84 (m, 2H), 6,82 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,47–7,55 (m, 2H), 7,71 (dt, J = 7,0 & 1,3 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,78 (d, J = 5,1 Hz, 1H). ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 400 MHz, rotamers in the ratio 6: 1) chemical shifts of the main rotamer: δ 1.21-1.27 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.45- 1.81 (4m, 7H), 2.20-2.22 (m, 4H), 2.28-2.37 (m, 1H), 2.90-2.99 (m, 1H), 3, 66 (s, 3H), 3.94-3.98 (m, 1H), 4.29 (bd, J = 9.9Hz, 1H), 4.46-4.50 (m, 1H), 4 , 81 (dd, J = 8.3 & 5.4 Hz, 1H), 4.92-5.06 (m, 4H), 5.16 (d, J = 8.3 Hz 1H), 5.37 (m, 1H), 5.70-5.84 (m, 2H), 6.82 (d, J = 5.1Hz, 1H), 7.47-7.55 (m, 2H), 7, 71 (dt, J = 7.0 & 1.3 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 5.1 Hz, 1H).

Makrocyclische PeptideMacrocyclic peptides

Beispiel 22Example 22

Allgemeines Verfahren zur Makrocyclisierung über Olefin-MetatheseGeneral procedure for macrocyclization over Olefin metathesis

In sämtlichen Fällen wurde das Tripeptidien in CH₂Cl₂ in einer Konzentration von 0,01 M gelöst. Die Lösung wurde durch Einleiten von Argon (~1 Stunde für ein Volumen von 500 ml) desoxygeniert. Eine Lösung des Katalysators (5–30 Mol-%, gelöst in einer geringen Menge an entgastem CH₂Cl₂) wurde zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde unter Rückfluss erwärmt, bis das gesamte Ausgangsmaterial in das oder die Produkte umgewandelt war, wie sich durch TLC und HPLC ergab. Die rohen Reaktionsgemische wurden anschließend bis nahezu zur Trockne eingeengt und durch eine kurze Kieselgelschicht filtriert, wobei zunächst mit CH₂Cl₂ zur Entfernung des Großteils des Katalysators und anschließend mit EtOAc zur Entfernung sämtlicher makrocyclischer Produkte eluiert wurde (meist als einzelnes Diastereomeres). Die Rohprodukte jeder Umsetzung wurden durch chirale HPLC an einer CHIRALCEL OJ-R-Säule (Produkt der Fa. Chiral Technologies Inc, 0,46 ⌀ × 15 cm) analysiert, wozu ein isokratisches Lösungsmittelgemisch aus 70% H₂O + 0,06% TFA – 30% CH₃CN + 0,06% TFA verwendet wurde (205 nm). Die hauptsächlichen makrocyclischen Produkte wurden vollständig charakterisiert durch ¹H-, COSY-, TOCSY- und ROESY-NMR-Daten, um ihre Struktur und stereochemische Beschaffenheit zu bestätigen. Beispiel 23 Synthese des makrocyclischen Zwischenprodukts (23b)

In all cases, the tripeptide was dissolved in CH ₂ Cl ₂ at a concentration of 0.01M. The solution was deoxygenated by bubbling argon (~ 1 hour for a volume of 500 ml). A solution of the catalyst (5-30 mole% dissolved in a small amount of degassed CH ₂ Cl ₂ ) was added. The reaction mixture was refluxed until all of the starting material was converted to the product (s) as determined by TLC and HPLC. The crude reaction mixtures were then concentrated to near-dry and filtered through a short layer of silica gel eluting first with CH ₂ Cl ₂ to remove most of the catalyst and then with EtOAc to remove all macrocyclic products (usually as a single diastereomer). The crude products of each reaction were analyzed by chiral HPLC on a CHIRALCEL OJ-R column (product of Chiral Technologies Inc, 0.46 x 15 cm), to which an isocratic solvent mixture of 70% H ₂ O + 0.06% was added. TFA - 30% CH ₃ CN + 0.06% TFA was used (205 nm). The major macrocyclic products were fully characterized by ¹ H, COZY, TOCSY and ROESY NMR data to confirm their structure and stereochemistry. Example 23 Synthesis of Macrocyclic Intermediate (23b)

Eine Lösung des Diens 23a (4,0 g, 7,88 mmol) in trockenem CH₂Cl₂ (800 ml, Aldrich, wasserfrei) wurde durch 2-stündiges Einleiten von Ar desoxygeniert. Anschließend wurde Hoveyda-Katalysator (262 mg, 0,434 mmol, 5,5 Mol-%) als Feststoff zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde unter einem Ar-Ballon unter Rückfluss erwärmt. Nach 28 Stunden wurde die rot-orangefarbene Lösung zu einem amorphen Feststoff eingedampft und sodann durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt. Beim anfänglichen Lösungsmittelsystem handelte es sich um 10% EtOAc in CH₂Cl₂. Nach Elution des Katalysators von der Säule wurde das Lösungsmittel in reines EtOAc abgeändert. Die Elution des Katalysators von der Säule ist aufgrund der Färbung ersichtlich. Das makrocyclische Produkt 23b wurde in Form eines farblosen Schaums isoliert, der in CH₂Cl₂/Hexan (~1 : 2) erneut in Lösung gebracht wurde. Durch Eindampfen des Lösungsmittels erhielt man ein weißes Pulver (3,362 g, Ausbeute 89%).A solution of diene 23a (4.0 g, 7.88 mmol) in dry CH ₂ Cl ₂ (800 mL, Aldrich, anhydrous) was deoxygenated by introducing Ar for 2 h. Then, Hoveyda catalyst (262 mg, 0.434 mmol, 5.5 mol%) was added as a solid. The reaction mixture was heated to reflux under an Ar balloon. After 28 hours, the red-orange solution was evaporated to an amorphous solid and then purified by flash column chromatography on silica gel. At the initial solution means system was 10% EtOAc in CH ₂ Cl ₂ . After elution of the catalyst from the column, the solvent was changed to pure EtOAc. The elution of the catalyst from the column is evident from the coloration. Macrocyclic product 23b was isolated as a colorless foam which was redissolved in CH ₂ Cl ₂ / hexane (~ 1: 2). Evaporation of the solvent gave a white powder (3.362 g, yield 89%).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,20–1,50 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,53 (dd, J = 9,5 & 5,4, 1H), 1,61–1,70 (m, 1H), 1,76–1,90 (m, 2H), 2,05–2,26 (m, 4H), 2,45 (d, J = 14,3, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,71 (d, J = 11,1, 1H), 3,90 (dd, J = 11,1 & 4,3, 1H), 4,43–4,53 (m, 2H), 4,76 (d, J = 8,6, 1H), 4,86 (bd, J = 9,8, 1H), 5,20–5,23 (m, 2H), 5,57 (dt, J = 7,0 & 9,8, 1H), 7,32 (bs, 1H). Beispiel 24 Synthese des makrocyclischen Zwischenprodukts (24b)

¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.20-1.50 (m, 6H), 1.43 (s, 9H), 1.53 dd (, J = 9.5 & 5.4 , 1H), 1.61-1.70 (m, 1H), 1.76-1.90 (m, 2H), 2.05-2.26 (m, 4H), 2.45 (d, J = 14.3, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.71 (d, J = 11.1, 1H), 3.90 (dd, J = 11.1 & 4.3, 1H) , 4.43-4.53 (m, 2H), 4.76 (d, J = 8.6, 1H), 4.86 (bd, J = 9.8, 1H), 5.20-5, 23 (m, 2H), 5.57 (dt, J = 7.0 & 9.8, 1H), 7.32 (bs, 1H). Example 24 Synthesis of Macrocyclic Intermediate (24b)

Eine Lösung des Diens 24a (2,76 g, 3,82 mmol) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (600 ml, wasserfrei) wurde durch 1,5-stündiges Einleiten von Ar desoxygeniert. Eine Lösung des Hoveyda-Katalysators (117 mg, 0,19 mmol, 0,05 Äq.) in wasserfreiem und entgastem CH₂Cl₂ (8 ml) wurde über eine Kanüle zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde unter einem Ar-Ballon unter Rückfluss gerührt. Nach 20 Stunden war die Umsetzung zu etwa 50% beendet. Zu diesem Zeitpunkt wurde eine zweite Portion Katalysator (117 mg) zugegeben und der Rührvorgang wurde weitere 16 Stunden fortgesetzt. Sodann wurde die Lösung auf 100 ml eingeengt und oben auf eine Schicht Kieselgel (6 × 10 cm) aufgesetzt. Der Katalysator wurde zuerst durch Elution mit CN₂Cl₂ gewonnen. Die Verbindung 24b wurde mit 3% McOH in EtOAc aus der Kieselgelschicht ausgewaschen und durch Flash- Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan (2 : 1) gereinigt. Man erhielt in einer Ausbeute von 70% einen leicht olivfarbenen weißen Feststoff (1,85 g, Reinheit 94% gemäß HPLC).A solution of diene 24a (2.76 g, 3.82 mmol) in anhydrous CH ₂ Cl ₂ (600 mL, anhydrous) was deoxygenated by introducing Ar for 1.5 h. A solution of the Hoveyda catalyst (117 mg, 0.19 mmol, 0.05 eq.) In anhydrous and degassed CH ₂ Cl ₂ (8 mL) was added via cannula. The reaction mixture was stirred under an Ar balloon under reflux. After 20 hours, the reaction was about 50% complete. At this time, a second portion of catalyst (117 mg) was added and stirring was continued for a further 16 hours. The solution was then concentrated to 100 ml and placed on top of a layer of silica gel (6 × 10 cm). The catalyst was first recovered by elution with CN ₂ Cl ₂ . Compound 24b was washed out of the silica gel layer with 3% MeOH in EtOAc and purified by flash column chromatography using EtOAc / hexane (2: 1). A slightly olive white solid (1.85 g, purity 94% by HPLC) was obtained in 70% yield.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8,69 (s, 1H), 8,13 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,50–7,44 (m, 2H), 7,17 (dd, J = 9,2, 2,2 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 5,60–5,56 (m, 1H), 5,52 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 11 Hz, 1N), 4,44 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,05–3,98 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,89–3,82 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,64–2,53 (m, 1H), 2,46 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 2,40–2,31 (m, 1H), 2,21 (dd, J = 8,9 Hz, 1H), 1,78–1,65 (m, 2H), 1,55 (dd, J = 4,8 Hz, 1H), 1,485 (dd, J = 4,8 Hz, 1H), 1,41–1,30 (m, 7H), 1,16 (s, 9H), MS; ES+: 795,4 (M + H)⁺. Beispiel 25 Synthese der Verbindungen 202 und 203 (Tabelle 2)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.69 (s, 1H), 8.13 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.50-7.44 (m, 2H ), 7.17 (dd, J = 9.2, 2.2 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.60-5.56 (m, 1H) , 5.52 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 5.25 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 4.59 (d, J = 11Hz, 1N), 4.44 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 4.05-3.98 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.89-3, 82 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.64-2.53 (m, 1H), 2.46 (d, J = 7.3Hz, 1H), 2.40-2 , 31 (m, 1H), 2.21 (dd, J = 8.9 Hz, 1H), 1.78-1.65 (m, 2H), 1.55 (dd, J = 4.8 Hz, 1H), 1.485 (dd, J = 4.8Hz, 1H), 1.41-1.30 (m, 7H), 1.16 (s, 9H), MS; ES +: 795.4 (M + H) ⁺ . Example 25 Synthesis of Compounds 202 and 203 (Table 2)

AA

Die Dienverbindung 21e (0,130 g, 0,205 mmol) wurde unter Verwendung katalytischer Mengen an Bis-(tricyclohexylphosphin)-benzylidenruthenium IV-dichlorid (Grubb-Katalysator, vergl. oben) (52 mg, 0,064 mmol) in CH₂Cl₂ (60 ml) unter 2-stündigem Sieden unter Rückfluss cyclisiert. Nach Chromatographie an Kieselgel (50 ml, 3% EtOH/EtOAc) erhielt man die Verbindung 25a (60,1 mg, Ausbeute 48%).The diene compound 21e (0.130 g, 0.205 mmol) was prepared using catalytic amounts of bis (tricyclohexylphosphine) benzylidene ruthenium IV dichloride (Grubb catalyst, supra) (52 mg, 0.064 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (60 mL ) is cycled under reflux for 2 hours. Chromatography on silica gel (50 ml, 3% EtOH / EtOAc) gave compound 25a (60.1 mg, 48% yield).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,22–1,30 (m, 2H), 1,35 (s, 9H), 1,44–2,35 (m, 13H), 3,07–3,14 & 3,16–3,24 (2m, 1H, Rotamere im Verhältnis 1 : 3), 3,69 (s, 3H), 3,96–4,04 (m, 1H0, 4,42–4,50 (m, 1H), 4,95–5,04 (m, 1H), 5,05–5,15 (m, 1H), 5,20–5,30 (m, 1H), 5,55–5,65 (m, 1H), 6,75–6,79 (2d, J = 5,4 Hz, 1H, Rotamere im ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.22-1.30 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.44 to 2.35 (m, 13H), 3.07 -3.14 & 3.16-3.24 (2m, 1H, rotamers in the ratio 1: 3), 3.69 (s, 3H), 3.96-4.04 (m, 1H0, 4.42- 4.50 (m, 1H), 4.95-5.04 (m, 1H), 5.05-5.15 (m, 1H), 5.20-5.30 (m, 1H), 5, 55-5.65 (m, 1H), 6.75-6.79 (2d, J = 5.4 Hz, 1H, rotamers im

Verhältnis 1 : 3), 7,36 (s, 1H), 7,46–7,50 (m, 1H), 8,03 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,13 & 8,17 (2d, J = 8,0 Hz, 1H, Rotamere im Verhältnis 1 : 3), 8,77 (d, J = 5,1 Hz, 1H).Ratio 1 : 3), 7.36 (s, 1H), 7.46-7.50 (m, 1H), 8.03 (d, J = 8.3Hz, 1H), 8.13 & 8.17 (2d, J = 8.0Hz, 1H, rotamers in relation to 1: 3), 8.77 (d, J = 5.1 Hz, 1H).

BB

Der Esterrest der makrocyclischen Verbindung 25a (0,0156 g, 0,026 mmol) wurde mit LiOH·H₂O (8,7 mg, 0,206 mmol) in THF/MeOH/H₂O (4 ml/2 ml/2 ml) hydrolysiert. Das Rohprodukt wurde durch Umkehrphasen-C18-HPLC an einer Whatman-Säule (Partisil 10,0 DS3; 50/2,4 cm) unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 5% wässrigem CH₃CN zu 100% CH₃CN gereinigt. Man erhielt die reine Verbindung 202 in Form eines amorphen weißen Feststoffes (11,8 mg).The ester residue of macrocyclic Compound 25a (0.0156 g, 0.026 mmol) was hydrolyzed with LiOH.H ₂ O (8.7 mg, 0.206 mmol) in THF / MeOH / H ₂ O (4 mL / 2 mL / 2 mL) , The crude product was purified by reverse phase C18 HPLC on a Whatman column (Partisil 10.0 DS3, 50 / 2.4 cm) using a solvent gradient of 5% aqueous CH ₃ CN to 100% CH ₃ CN. The pure compound 202 was obtained in the form of an amorphous white solid (11.8 mg).

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,12 (s, 9H), 1,20–1,24 (m, 2H), 1,32–1,40 (m, 3H), 1,58–1,62 (m, 2H), 1,68–1,78 (m, 3H), 1,95–2,02 (m, 1H), 2,08–2,18 (m, 2H), 2,42–2,59 (m, 2H), 3,97–4,00 (bd, J = 9,8 Hz, 2H), 4,47 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 5,22–5,29 (m, 1H), 5,46–5,54 (m, 1H), 5,66 (s, 1H), 7,12 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 7,3 Hz, 1H), 7,98 (dd, J = 7,0 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,35 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 9,08 (d, J = 5 Hz, 1H). ¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.12 (s, 9H), 1.20-1.24 (m, 2H), 1.32-1.40 (m, 3H), 1.58 -1.62 (m, 2H), 1.68-1.78 (m, 3H), 1.95-2.02 (m, 1H), 2.08-2.18 (m, 2H), 2 , 42-2.59 (m, 2H), 3.97-4.00 (bd, J = 9.8 Hz, 2H), 4.47 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4, 58 (d, J = 11.8Hz, 1H), 5.22-5.29 (m, 1H), 5.46-5.54 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 7 , 12 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 7.3 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 7.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.35 (d, J = 8.3 Hz , 1H), 9.08 (d, J = 5 Hz, 1H).

CC

Die makrocyclische Verbindung 25a (20 mg, 0,033 mmol) wurde in trockenem CH₂Cl₂ (1 ml) 1 Stunde in Gegenwart von 4 M HCl/Dioxan (5 ml) gerührt. Das Gemisch wurde eingedampft und sorgfältig getrocknet. Der Rückstand wurde in CH₂Cl₂/DMF (3 ml/1 ml) in Lösung gebracht und mit NMM (14,5 μl, 0,132 mmol) und Essigsäureanhydrid (7,0 μl, 0,073 mmol) behandelt und 14 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Gemisch eingedampft und unter Hochvakuum getrocknet. Der Rückstand wurde in einem Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (4 ml/2 ml/2 ml) gelöst und über Nacht mit LiOH·2H₂O (11 mg, 0,264 mmol) gerührt. Der nach Ansäuern auf den pH-Wert 3 mit 1H eiskalter HCl isolierte Rückstand wurde durch Umkehrphasen-C18-HPLC unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 0–40% wässrigem CH₃CN (0,06% TFA) gereinigt. Es wurde die reine Verbindung 203 in Form eines amorphen weißen Feststoffes (12 mg) isoliert.Macrocyclic Compound 25a (20 mg, 0.033 mmol) was stirred in dry CH ₂ Cl ₂ (1 mL) for 1 h in the presence of 4 M HCl / dioxane (5 mL). The mixture was evaporated and dried thoroughly. The residue was dissolved in CH ₂ Cl ₂ / DMF (3 ml / 1 ml) and treated with NMM (14.5 μl, 0.132 mmol) and acetic anhydride (7.0 μl, 0.073 mmol) and stirred at room temperature for 14 hours , The mixture was then evaporated and dried under high vacuum. The residue was dissolved in a mixture of THF / MeOH / H ₂ O (4 mL / 2 mL / 2 mL) and stirred overnight with LiOH · 2H ₂ O (11 mg, 0.264 mmol). The residue, which was acidified to pH 3 with 1H ice cold HCl, was purified by reverse phase C18 HPLC using a solvent gradient of 0-40% aqueous CH ₃ CN (0.06% TFA). The pure compound 203 was isolated as an amorphous white solid (12 mg).

¹H-NMR (50 mM Na₂PO₄-Puffer, pH-Wert = 6,0, 600 MHz): δ 1,22–1,27 (m, 2H), 1,38–1,43 (m, 2H), 1,58–1,64 (m, 2H), 1,67–1,76 (m, 2H), 1,77–1,84 (m, 1H), 1,92–1,99 (m, 1H), 2,22–2,08 (m, 1H), 2,12–2,27 (m, 1H), 2,22–2,27 (m, 1H), 2,60–2,67 (m, 1H, Pro-β'), 2,83–2,89 (m, 1H, Pro-β), 4,32 (dd, J = 12,1 & 3,5 Hz, 1H, Pro-δ'), 4,41 (dd, J = 12,1 & 7,3 Hz, 1H), 4,56 (bd, J = 8,0 Hz, 1H, Pro-δ), 4,62 (dd, J = 8,9 Hz, 1H, Pro-α), 5,40–5,46 (m, 1H), 5,55–5,61 (m, 1H), 5,73 (bs, 1H, Pro-γ), 7,41 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,64 (bs, 1H, Acca-NH), 7,80 (dd, J = 7,9 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 7 Hz, 1H, AcNH), 8,36 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,90 (d, J = 6,0 Hz, 1H). Beispiel 26 Synthese der Verbindung 508 (Tabelle 5)

¹ H-NMR (50 mM Na ₂ PO ₄ buffer, pH = 6.0, 600 MHz): δ 1.22-1.27 (m, 2H), 1.38-1.43 (m, 2H), 1.68-1.64 (m, 2H), 1.67-1.76 (m, 2H), 1.77-1.84 (m, 1H), 1.92-1.99 ( m, 1H), 2.22-2.08 (m, 1H), 2.12-2.27 (m, 1H), 2.22-2.27 (m, 1H), 2.60-2, 67 (m, 1H, Pro-β '), 2.83-2.89 (m, 1H, Pro-β), 4.32 (dd, J = 12.1 & 3.5 Hz, 1H, Pro δ '), 4.41 (dd, J = 12.1 & 7.3 Hz, 1H), 4.56 (bd, J = 8.0 Hz, 1H, Pro-δ), 4.62 (dd, J = 8.9 Hz, 1H, Pro-α), 5.40-5.46 (m, 1H), 5.55-5.61 (m, 1H), 5.73 (bs, 1H, Pro γ), 7.41 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.64 (bs, 1H, Acca-NH), 7.80 (dd, J = 7.9 Hz, 1H), 8, 03 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 7 Hz, 1H, AcNH), 8.36 ( d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.90 (d, J = 6.0 Hz, 1H). Example 26 Synthesis of Compound 508 (Table 5)

A A

Eine Lösung von Boc-geschütztem L-Glutamin 26a (4,93 g, 20 mmol) und Iodbenzoldiacetat (7,73 g, 24 mmol, 1,2 Äq.) in EtOAc/CH₃CN/H₂O (2 : 2 : 1, 60 ml) wurde 1 Stunde bei 16°C und 3 Stunden bei 20°C gerührt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch mit H₂O (20 ml) verdünnt. Die Lösungsmittel EtOAc und CH₃CN wurden unter Vakuum entfernt. Das verbleibende wässrige Gemisch wurde mit Diethylether (3 × 50 ml) und EtOAc (50 ml) extrahiert, um den Großteil der Verunreinigungen zu entfernen. Die wässrige Phase (die das Amin-Zwischenprodukt enthält) wurde sodann zur Trockne eingeengt. Das restliche Material wurde in 10% Na₂CO₃ (30 ml) in Lösung gebracht, in einem Eisbad auf 0°C abgekühlt und langsam (~10 Minuten) mit einer Lösung von Chlorameisensäurebenzylester (3,3 ml, 20,4 mmol, 1,02 Äq.) in Dioxan (40 ml) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei 0°C und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Gemisch mit H₂O (50 ml) verdünnt, mit kaltem (~5°C) Diethylether (3 × 50 ml) extrahiert, mit 4 M HCl auf den pH-Wert 3–4 angesäuert und mit EtOAc (3 × 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Das rohe Material wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan/AcOH (7 : 2,9 : 0,1) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 26b in einer Gesamtausbeute von 43% (3,04 g).A solution of Boc-protected L-glutamine 26a (4.93 g, 20 mmol) and iodobenzene diacetate (7.73 g, 24 mmol, 1.2 eq.) In EtOAc / CH ₃ CN / H ₂ O (2: 2 : 1.60 ml) was stirred at 16 ° C for 1 hour and at 20 ° C for 3 hours. The reaction mixture was diluted with H ₂ O (20 ml). The solvents EtOAc and CH ₃ CN were removed in vacuo. The remaining aqueous mixture was extracted with diethyl ether (3 x 50 mL) and EtOAc (50 mL) to remove most of the impurities. The aqueous phase (containing the amine intermediate) was then concentrated to dryness. The residual material was solubilized in 10% Na ₂ CO ₃ (30 mL), cooled to 0 ° C in an ice-bath and slowly (~10 minutes) with a solution of benzylchloroformate (3.3 mL, 20.4 mmol, 1.02 eq.) In dioxane (40 ml). The Re reaction mixture was stirred for 1 hour at 0 ° C and 2 hours at room temperature. The mixture was diluted with H ₂ O (50 mL), extracted with cold (~ 5 ° C) diethyl ether (3 x 50 mL), acidified to pH 3-4 with 4 M HCl and extracted with EtOAc (3 x 50 ml). The combined organic phases were dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness in vacuo. The crude material was purified by flash column chromatography using EtOAc / hexane / AcOH (7: 2, 9: 0.1). Compound 26b was obtained in 43% overall yield (3.04 g).

BB

Das Dipeptid-Zwischenprodukt 26c (250 mg, 0,41 mmol), die Verbindung 26b (171 mg, 0,49 mmol, 1,2 Äq.) und HATU (185 mg, 0,49 mmol, 1,2 Äq.) wurden in CH₂Cl₂ (6 ml) gelöst und mit DIPEA (0,29 ml, 1,62 mmol, 4 Äq.) versetzt. Sodann wurde das Reaktionsgemisch 14 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde das CH₂Cl₂ unter Vakuum abgedampft und das rohe Material wurde in EtOAc in Lösung gebracht. Die EtOAc-Lösung wurde mit wässriger 5%iger NaHCO₃-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und zur Trockne eingedampft. Die Verbindung 26d wurde nach Reinigung des rohen Materials durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Nexan (4 : 1) als Elutionsmittel in einer Ausbeute von 98% erhalten (338 mg).The dipeptide intermediate 26c (250 mg, 0.41 mmol), compound 26b (171 mg, 0.49 mmol, 1.2 eq.) And HATU (185 mg, 0.49 mmol, 1.2 eq.). were dissolved in CH ₂ Cl ₂ (6 mL) and added with DIPEA (0.29 mL, 1.62 mmol, 4 eq.). The reaction mixture was stirred at room temperature for 14 hours. Subsequently, the CH ₂ Cl ₂ was evaporated under vacuum and the crude material was dissolved in EtOAc. The EtOAc solution was washed with aqueous 5% NaHCO ₃ solution and brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness. Compound 26d was obtained after purification of the crude material by flash column chromatography using EtOAc / nexane (4: 1) as eluent in 98% yield (338 mg).

CC

Eine Lösung der Verbindung 26d (335 mg, 0,394 mmol) in THF (5 ml) wurde auf 0°C abgekühlt und mit einer Lösung von BH₃ in Dimethylsulfid (0,12 ml einer 10 M Lösung, 1,2 mmol, 3 Äq.) versetzt. Man ließ das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen und rührte es 1 Stunde. Anschließend wurde es erneut auf 0°C abgekühlt, wonach eine wässrige Lösung von NaOH (0,8 ml einer 2,5 M Lösung, 1,97 mmol, 5 Äq.) langsam innerhalb von 15 Minuten zugegeben wurde. Hieran schloss sich die langsame Zugabe (~15 Minuten) einer wässrigen Lösung von H₂O₂ (0,8 ml einer 8,8 M Lösung, 6,9 mmol, 17,5 Äq.) an. Man ließ das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen und rührte es 1 Stunde. Sodann wurde das Reaktionsgemisch auf den pH-Wert ~4 angesäuert, um überschüssiges BH₃ zu beseitigen. Sodann wurde zur Einstellung eines pH-Werts von ~9–10 eine wässrige NaHCO₃-Lösung zugegeben. Das THF wurde unter Vakuum entfernt und das rohe Material wurde mit H₂O und EtOAc ausgeschüttelt. Die wässrige Phase wurde erneut mit EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Das rohe Material wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan/NH₄OH (8 : 2 : 0,5) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die reine Verbindung 26e in einer Ausbeute von 57% (192 mg).A solution of compound 26d (335 mg, 0.394 mmol) in THF (5 mL) was cooled to 0 ° C and washed with a solution of BH ₃ in dimethyl sulfide (0.12 mL of a 10 M solution, 1.2 mmol, 3 eq .). The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 1 hour. It was then cooled again to 0 ° C, after which an aqueous solution of NaOH (0.8 ml of a 2.5 M solution, 1.97 mmol, 5 eq.) Was added slowly over 15 minutes. This was followed by the slow addition (~ 15 minutes) of an aqueous solution of H ₂ O ₂ (0.8 mL of 8.8 M solution, 6.9 mmol, 17.5 eq.). The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 1 hour. Then the reaction mixture was acidified to pH ~ 4, to eliminate excess BH. ₃ Then ₃ solution was added to adjust a pH of ~ 9-10 an aqueous NaHCO. The THF was removed under vacuum and the crude material was shaken out with H ₂ O and EtOAc. The aqueous phase was extracted again with EtOAc. The combined organic phases were washed with brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated to dryness in vacuo. The crude material was purified by flash column chromatography using EtOAc / hexane / NH ₄ OH (8: 2: 0.5) as eluent. The pure compound 26e was obtained in a yield of 57% (192 mg).

DD

Eine Lösung der Verbindung 26e in CH₂Cl₂ (8 ml) wurde mit Dess-Martin-Periodinat (195 mg, 97%, 0,33 mmol, 1,5 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde die Umsetzung durch Zugabe von wässrigem Na₂S₂O₃ (3 ml einer 5%igen Lösung) gestoppt. Anschließend wurde eine wässrige NaHCO₃-Lösung (5 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Schließlich wurde das rohe Reaktionsgemisch mit EtOAc extrahiert. Die organische Phase wurde mit wässriger 5%iger NaHCO₃-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und unter Vakuum eingedampft. Man erhielt 188 mg des Aldehyds 28f, der ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt wurde.To a solution of compound 26e in CH ₂ Cl ₂ (8 mL) was added Dess-Martin periodinate (195 mg, 97%, 0.33 mmol, 1.5 eq.). The reaction mixture was stirred for 1.5 hours at room temperature. The reaction was stopped by adding aqueous Na ₂ S ₂ O ₃ (3 ml of a 5% solution). Then, an aqueous NaHCO ₃ solution (5 ml) was added. The mixture was stirred for 15 minutes at room temperature. Finally, the crude reaction mixture was extracted with EtOAc. The organic phase was washed with aqueous 5% NaHCO ₃ solution and brine, dried over anhydrous MgSO ₄ and evaporated in vacuo. This gave 188 mg of the aldehyde 28f, which was used without further purification in the next stage.

Ee

Eine Lösung der Verbindung 26f (188 mg, 0,22 mmol) von CH₃CO₂H (38 μl) und Pd(OH)₂ (25 mg) in Ethanol (5 ml) wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur unter H₂ bei atmosphärischem Druck gerührt. Anschließend wurde weiteres H₂-Gas, Pd(OH)₂ (180 mg) und CH₃CO₂H (154 μl) in den Kolben gegeben. Der Rührvorgang wurde weitere 24 Stunden fortgesetzt. Sodann wurde das Gemisch filtriert. Das Lösungsmittel wurde zur Trockne eingedampft. Das rohe makrocyclische Produkt wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung von CHCl₃/MeOH/AcOH (10 : 2 : 1) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 26g in einer Ausbeute von ~30% (48 mg).A solution of Compound 26f (188 mg, 0.22 mmol) of CH ₃ CO ₂ H (38 μL) and Pd (OH) ₂ (25 mg) in ethanol (5 mL) was stirred at room temperature under H ₂ for 16 h at atmospheric Pressure stirred. Subsequently, additional H ₂ gas, Pd (OH) ₂ (180 mg) and CH ₃ CO ₂ H (154 μl) were added to the flask. Stirring was continued for another 24 hours. The mixture was filtered. The solvent was evaporated to dryness. The crude macrocyclic product was purified by flash column chromatography using CHCl ₃ / MeOH / AcOH (10: 2: 1). Compound 26g was obtained in ~ 30% yield (48 mg).

FF

Ein Gemisch aus der Verbindung 26g (22 mg, 0,031 mmol), DIPEA (27 μl, 0,155 mmol, 5 Äq.) und Essigsäureanhydrid (8,7 μl, 0,093 mmol, 3 Äq.) in CH₂Cl₂ (5 ml) wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde das CH₂Cl₂ unter Vakuum entfernt. Ein Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (2 : 2 : 1, 5 ml) und LiOH·2H₂O (13 mg, 0,31 mmol, 10 Äq.) wurde zugegeben. Man ließ die Hydrolysereaktion 68 Stunden bei Raumtemperatur und 2 Stunden bei 50°C ablaufen. Sodann wurde das Reaktionsgemisch angesäuert (pH-Wert = ~4) und durch Umkehrphasen-HPLC gereinigt. Man erhielt das Endprodukt 508 (~6 mg, Ausbeute ~26% für die letzten 2 Stufen).A mixture of compound 26g (22 mg, 0.031 mmol), DIPEA (27 μL, 0.155 mmol, 5 eq.) And acetic anhydride (8.7 μL, 0.093 mmol, 3 eq.) In CH ₂ Cl ₂ (5 mL). was stirred for 16 hours at room temperature. Subsequently, the CH ₂ Cl ₂ was removed under vacuum. A mixture of THF / MeOH / H ₂ O (2: 2: 1, 5 mL) and LiOH • 2H ₂ O (13 mg, 0.31 mmol, 10 eq.) Was added. The hydrolysis reaction was allowed to proceed at room temperature for 68 hours and at 50 ° C for 2 hours. The reaction mixture was acidified (pH = ~ 4) and purified by reverse phase HPLC. The final product was 508 (~ 6 mg, yield ~ 26% for the last 2 steps).

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz) von 508 (Gemisch von Rotameren bestätigt durch COSY-, TOCSY- und ROESY-NMR-Daten): δ 1,18 (s, 9H), 1,09–1,85 (überlappendes m, 11H), 1,95 (s, 3H), 2,30 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 3,18–4,14 (überlappendes m, 6H), 3,96 (s, 3H), 4,44 (m, 1H), 4,62 & 4,69 (2d, J =11,8 Hz, 1H, Rotamere), 5,82 (bs, 1H), 7,20 (m, 2H), 7,53 (bs, 1H), 7,67 (bs, 4H), 8,19 (bs, 3H), 8,61 (s, 1H). Beispiel 27 Synthese des gesättigten makrocyclischen Zwischenprodukts (27a)

¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz) of 508 (mixture of rotamers confirmed by COZY, TOCSY and ROESY NMR data): δ 1.18 (s, 9H), 1.09-1.85 (overlapping m, 11H), 1.95 (s, 3H), 2.30 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 3.18-4.14 (overlapping m, 6H), 3.96 ( s, 3H), 4.44 (m, 1H), 4.62 & 4.69 (2d, J = 11.8Hz, 1H, rotamer), 5.82 (bs, 1H), 7.20 (m , 2H), 7.53 (bs, 1H), 7.67 (bs, 4H), 8.19 (bs, 3H), 8.61 (s, 1H). Example 27 Synthesis of Saturated Macrocyclic Intermediate (27a)

AA

Das ungesättigte makrocyclische Zwischenprodukt 23b (3,50 g, 7,30 mmol) wurde in EtOAc (30 ml) gelöst. 700 mg (20% Gew./Gew.) 5% Rh-auf-Aluminiumoxid wurden zugegeben. Das Gemisch wurde 1,5 Stunden unter H₂-Gas bei atmosphärischem Druck und bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend bestätigte die HPLC-Analyse die vollständige Umwandlung des Ausgangsmaterials in zwei Produkte, nämlich das angestrebte Produkt 27a und ein untergeordnetes Produkt (8% der Gesamtmasse), das später als Verbindung 27b identifiziert wurde und sich durch Öffnung des Cyclopropanrings gebildet hatte. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert und eingeengt. Man erhielt einen hellgrünen Feststoff (3,47 g). Dieser Feststoff wurde 2-mal mit EtOH eingedampft, um das EtOAc zu entfernen (die Anwesenheit von EtOAc stört die nächste Stufe). Die Abtrennung der Verbindung 27a von der Verbindung 27b durch Chromatographie erwies sich als sehr schwierig, so dass ein alternatives Verfahren auf der Grundlage der relativen Hydrolysegeschwindigkeiten der entsprechenden Methylesterreste konzipiert wurde.The unsaturated macrocyclic intermediate 23b (3.50 g, 7.30 mmol) was dissolved in EtOAc (30 mL). 700 mg (20% w / w) of 5% Rh on alumina was added. The mixture was stirred for 1.5 hours under H ₂ gas at atmospheric pressure and at room temperature. Subsequently, HPLC analysis confirmed the complete conversion of the starting material into two products, the targeted product 27a and a minor product (8% of the total mass), which was later identified as compound 27b and formed by opening the cyclopropane ring. The reaction mixture was filtered and concentrated. A light green solid (3.47 g) was obtained. This solid was coevaporated twice with EtOH to remove the EtOAc (the presence of EtOAc interferes with the next step). The separation of compound 27a from compound 27b by chromatography proved to be very difficult so that an alternative process was designed based on the relative rates of hydrolysis of the corresponding methyl ester residues.

BB

Das rohe Gemisch der Verbindungen 27a und 27b (3,47 g) wurde in THF : MeOH (1 : 1, 20 ml) gelöst und eine wässrige Lösung von LiOH·H₂O (24 mg in 5 ml H₂O, 8% Äq.) wurde zugegeben. Sodann wurde das Reaktionsgemisch 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt (die vollständige Hydrolyse des Nebenprodukts 27b in die entsprechende Säure 27c wurde durch HPLC bestätigt). Das Reaktionsgemisch wurde unter Vakuum eingeengt, um den Großteil des THF und McOH zu entfernen, und mit H₂O (100 ml) und EtOAc (300 ml) ausgeschüttelt. Die organische Phase wurde mit 0,5 N NaOH (3 × 100 ml), Kochsalzlösung (100 ml), 10%iger wässriger Citronensäure (2 × 100 ml) und Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und zur Trockne eingeengt. Das angestrebte Produkt 27a wurde in hoher Reinheit (> 90% gemäß HPLC) als hellgrüner Schaum und in einer Gesamtausbeute von 93% (3,28 g) für die beiden Stufen erhalten.The crude mixture of compounds 27a and 27b (3.47 g) was dissolved in THF: MeOH (1: 1, 20 ml) and an aqueous solution of LiOH.H ₂ O (24 mg in 5 ml H ₂ O, 8%). Eq.) Was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for 16 hours (complete hydrolysis of by-product 27b to the corresponding acid 27c was confirmed by HPLC). The reaction mixture was concentrated in vacuo to remove most of the THF and MeOH, and shaken with H ₂ O (100 mL) and EtOAc (300 mL). The organic phase was washed with 0.5 N NaOH (3 × 100 mL), brine (100 mL), 10% aqueous citric acid (2 × 100 mL) and brine (100 mL), dried over anhydrous MgSO ₄ dried, filtered and concentrated to dryness. The desired product 27a was obtained in high purity (> 90% by HPLC) as a light green foam and in an overall yield of 93% (3.28 g) for the two stages.

¹H-NMR: (400 MHz, CDCl₃): δ 1,1–1,38 (m, 13H), 1,42 (s, 9H), 1,51–1,57 (m, 1H), 1,63–1,67 (dd, J = 8,0 & 5,1 Hz, 1H), 1,81–1,87 (m, 1H), 1,92–1,99 (m, 1H), 2,02–2,08 (m, 1H), 2,62 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,4 (d, J= 8,3, 1H), 3,65 (s, 3H), 4,01 (dd, J = 10,8 & 4,1 Hz, 1H), 4,42–4,48 (m, 1H), 4,51–4,55 (m, 1H), 4,87 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,97 (br s, 1H). Beispiel 28 Synthese der Verbindung #741 (Tabelle 7)

¹ H-NMR: (400 MHz, CDCl ₃ ): δ 1.1-1.38 (m, 13H), 1.42 (s, 9H), 1.51-1.57 (m, 1H), 1 , 63-1.67 (dd, J = 8.0 & 5.1 Hz, 1H), 1.81-1.87 (m, 1H), 1.92-1.99 (m, 1H), 2 , 02-2.08 (m, 1H), 2.62 (d, J = 14Hz, 1H), 3.4 (d, J = 8.3, 1H), 3.65 (s, 3H), 4.01 (dd, J = 10.8 & 4.1 Hz, 1H), 4.42-4.48 (m, 1H), 4.51-4.55 (m, 1H), 4.87 ( d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.97 (br s, 1H). Example 28 Synthesis of Compound # 741 (Table 7)

Das Chinolinderivat 8f wurde über eine Mitsunobu-Reaktion an der vorher gebildeten makrocyclischen Verbindung 23b angebracht. Das Chinolinderivat 8f (30 mg, 0,095 mmol) wurde in THF gelöst. Anschließend wurden die makrocyclische Verbindung 23b (45,6 mg, 1 Äq.) und PPh₃ (49,8 mg, 2 Äq.) zugegeben. Das erhaltene Gemisch wurde auf 0°C gekühlt. Anschließend wurde DIAD (37,4 μl, 2 Äq.) zugetropft. Die Lösung wurde 1 Stunde bei 0°C und sodann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Hierauf wurde das Gemisch mit EtOAc (15 ml) verdünnt und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (15 ml) und anschließend mit Kochsalzlösung gewaschen. Die Lösung wurde mit MgSO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum eingeengt. Man erhielt 202 mg eines gelben Öls. Das Produkt wurde durch Flash-Chromatographie an Kieselgel (100% EtOAc) gereinigt. Das Produkt enthielt nach der Reinigung noch DIAD-Nebenprodukte. Das erhaltene Produkt enthielt 55% (Gew./Gew.) des angestrebten Produkts, so dass die Ausbeute 62% betrug.The quinoline derivative 8f was attached to the previously formed macrocyclic compound 23b via a Mitsunobu reaction. The quinoline derivative 8f (30 mg, 0.095 mmol) was dissolved in THF. Subsequently, the macrocyclic compound 23b (45.6 mg, 1 eq.) And PPh ₃ (49.8 mg, 2 eq.) Were added. The resulting mixture was cooled to 0 ° C. Then DIAD (37.4 μl, 2 eq.) Was added dropwise. The solution was stirred at 0 ° C for 1 hour and then at room temperature overnight. The mixture was then diluted with EtOAc (15 mL) and washed with saturated NaHCO ₃ solution (15 mL) followed by brine. The solution was dried with MgSO ₄ , filtered and concentrated in vacuo. 202 mg of a yellow oil were obtained. The product was purified by flash chromatography on silica gel (100% EtOAc). The product still contained DIAD by-products after purification. The obtained product contained 55% (w / w) of the intended product, so that the yield was 62%.

Das Ester-Zwischenprodukt (46 mg, 0,06 mmol) wurde in einem Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (Verhältnis 2 : 1 : 1,2 ml) gelöst. LiOH·H₂O (20 mg, 0,48 mmol) wurde zugegeben und die Lösung würde bei Raumtemperatur gerührt. Nach 16 Stunden ergab eine Analyse des Reaktionsgemisches durch HPLC, dass die Hydrolyse vollständig war. Die organischen Lösungsmittel wurden unter Vakuum entfernt. Das verbleibende rohe Material wurde in DMSO gelöst und durch Umkehrphasen-C18-HPLC gereinigt. Man erhielt den reinen Inhibitor 741.The ester intermediate (46 mg, 0.06 mmol) was dissolved in a mixture of THF / MeOH / H ₂ O (2: 1: 1.2 mL ratio). LiOH · H ₂ O (20 mg, 0.48 mmol) was added and the solution was stirred at room temperature. After 16 hours, analysis of the reaction mixture by HPLC revealed that the hydrolysis was complete. The organic solvents were removed under vacuum. The remaining crude material was dissolved in DMSO and purified by reverse phase C18 HPLC. The pure inhibitor 741 was obtained.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8,67 (s, 1H), 8,29–8,14 (m, 2H), 8,08–7,97 (m, 1H), 7,91–7,78 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,31–7,20 (m, 1H), 7,10 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 5,82–5,71 (m, 1H), 5,58–5,47 (m, 1H), 5,32–5,23 (m, 1H), 4,74–4,64 (m, 1H), 4,55–4,47 (m, 1H), 4,23–4,06 (m, 1H), 4,04–3,94 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,92–3,85 (m, 1H), 2,70–2,55 (m, 2H), 2,53–2,36 (m, 2H), 2,20–2,09 (m, 1H), 1,80–1,62 (m, 2H), 1,56–1,43 (m, 2H), 1,42–1,29 (m, 6H), 1,27 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,25 (d, J = 2,9 Hz, 3H), 1,12 (s, 9H).
MS: 763,1 (M + 1), 761,1 (M – 1). Beispiel 29 Synthese der Verbindung 205 (Tabelle 2)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ (ppm): 8.67 (s, 1H), 8.29-8.14 (m, 2H), 8.08-7.97 (m, 1H), 7.91-7.78 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.31-7.20 (m, 1H), 7.10 (d, J = 5.7 Hz , 1H), 5.82-5.71 (m, 1H), 5.58-5.47 (m, 1H), 5.32-5.23 (m, 1H), 4.74-4.64 (m, 1H), 4.55-4.47 (m, 1H), 4.23-4.06 (m, 1H), 4.04-3.94 (m, 1H), 3.97 (s , 3H), 3.92-3.85 (m, 1H), 2.70-2.55 (m, 2H), 2.53-2.36 (m, 2H), 2.20-2.09 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 2H), 1.56-1.43 (m, 2H), 1.42-1.29 (m, 6H), 1.27 (i.e. , J = 3.2 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 2.9 Hz, 3H), 1.12 (s, 9H).
MS: 763.1 (M + 1), 761.1 (M-1). Example 29 Synthesis of Compound 205 (Table 2)

Eine Lösung der makrocyclischen Verbindung 25a (21 mg, 0,035 mmol) in tert.-Butanol/H₂O) (1,5 ml/1,5 ml) wurde bei 0°C mit einer Lösung von OsO₄ in tert.-Butanol (0,36 ml einer 35%igen (Gew./Vol.) Lösung, 0,035 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde das Gemisch mit EtOAc (20 ml) verdünnt und die organische Lösung wurde mit 5%iger NaHCO₃-Lösung (2 × 10 ml) und Kochsalzlösung (2 × 10 ml) gewaschen, getrocknet und zur Trockne eingedampft. Die rohe Verbindung wurde in THF/MeOH/H₂O (3 ml/1,5 ml/1,5 ml) aufgenommen und 16 Stunden in Gegenwart von LiOH·H₂O (13 mg, 0,28 mmol) gerührt. Das Gemisch wurde mit 0,5 N eiskalter HCl auf den pH-Wert 4 angesäuert, eingedampft und durch Umkehrphasen-C18-HPLC unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von H₂O (0,06% TFA) bis zu 40%igem wässrigem CH₃CN (0,06% TFA) gereinigt. Das syn-Diol 205 wurde in hoher Reinheit in Form eines amorphen weißen Feststoffes isoliert.A solution of the macrocyclic compound 25a (21 mg, 0.035 mmol) in t-butanol / H ₂ O) (1.5 mL / 1.5 mL) was treated at 0 ° C with a solution of OsO ₄ in t-butanol (0.36 ml of a 35% (w / v) solution, 0.035 mmol). The mixture was stirred for 1 hour at room temperature. The mixture was diluted with EtOAc (20 mL) and the organic solution was washed with 5% NaHCO ₃ (2 × 10 mL) and brine (2 × 10 mL), dried and evaporated to dryness. The crude compound was taken up in THF / MeOH / H ₂ O (3 mL / 1.5 mL / 1.5 mL) and stirred for 16 hours in the presence of LiOH · H ₂ O (13 mg, 0.28 mmol). The mixture was acidified to pH 4 with 0.5 N ice cold HCl, evaporated and purified by reverse phase C18 HPLC using a solvent gradient of H ₂ O (0.06% TFA) to 40% aqueous CH ₃ CN (0.06% TFA). The syn-diol 205 was isolated in high purity in the form of an amorphous white solid.

Verbindung #205: ¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,01 (s, 9H), 1,06–1,30 (m, 9H), 1,48–1,68 (m, 3H), 1,78–1,88 (m, 1H), ≈2,2-2,5 (2m, 2H), 3,78–3,82 (m, 1H), 3,86–3,90 (m, 1H), 4,39 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 5,60 (bs, 1H, Pro-γ), 7,03 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,40 (bs, 1H), 7,58–7,62 (m, 1H), 7,87–7,91 (m, 1H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,99 (bs, 1H),
EMS (negativer Ionisationsmodus): m/z 625 (M – H)^–. Beispiel 30 Synthese der Verbindungen 214 und 218 (Tabelle 2)

Compound # 205: ¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.01 (s, 9H), 1.06-1.30 (m, 9H), 1.48-1.68 (m, 3H) , 1.78-1.88 (m, 1H), ≈2.2-2.5 (2m, 2H), 3.78-3.82 (m, 1H), 3.86-3.90 (m , 1H), 4.39 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 5.60 (bs, 1H, Pro-γ), 7 , 03 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.40 (bs, 1H), 7.58-7.62 (m, 1H), 7.87-7.91 (m, 1H), 8.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.99 (bs, 1H),
EMS (negative ionization mode): m / z 625 (M - H) ^- . Example 30 Synthesis of Compounds 214 and 218 (Table 2)

AA

Eine Lösung des Ketononenoatesters 16d (0,180 g, 0,6 mmol) in McOH/H₂O (5 ml/2 ml) wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur in Gegenwart von LiOH·H₂O (50 mg, 1,2 mmol) gerührt. Die Lösung wurde mit 0,5 N eiskalter HCl auf den pH-Wert 6 angesäuert und ein Großteil des McOH wurde abgedampft. Sodann wurde der Rückstand in EtOAc (30 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit 0,5 N eiskalter HCl (10 ml) und Kochsalzlösung (10 ml) gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der rohe Rückstand wurde in CH₂Cl₂ (10 ml) in Lösung gebracht und mit dem P1–P2-Fragment 30a (0,337 g, 0,6 mmol) in Gegenwart von HATU (233 mg, 0,612 mmol) und DIPEA (420 μl, 2,4 mmol) bei Raumtemperatur innerhalb von 16 Stunden umgesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde der Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1/1) als Elutionsmittel unterzogen. Man erhielt die reine Verbindung 30b (0,370 g, Ausbeute 83%, Reinheit > 95% gemäß HPLC).A solution of the Ketononenoatesters 16d (0.180 g, 0.6 mmol) in MeOH / H ₂ O (5 ml / 2 ml) was stirred for 1 hour at room temperature in the presence of LiOH · H ₂ O (50 mg, 1.2 mmol) , The solution was acidified to pH 6 with 0.5 N ice-cold HCl and most of the MeOH was evaporated. The residue was dissolved in EtOAc (30 ml). The solution was washed with 0.5 N ice cold HCl (10 mL) and brine (10 mL), dried and evaporated. The crude residue was dissolved in CH ₂ Cl ₂ (10 mL) and treated with the P1-P2 fragment 30a (0.337 g, 0.6 mmol) in the presence of HATU (233 mg, 0.612 mmol) and DIPEA (420 μL) , 2.4 mmol) at room temperature within 16 hours. The reaction mixture was subjected to chromatography on silica gel using EtOAc / hexane (1/1) as eluent. The pure compound 30b (0.370 g, yield 83%, purity> 95% according to HPLC) was obtained.

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,41 (s, 9H), 1,45–1,54 (m, 1H), 1,58–1,62 (m, 1H), 1,73–1,77 (m, 1H), 1,86–1,91 (m, 1H), 2,16 (dd, J = 17,8 & 8,6 Hz, 1H), 2,26–2,43 (2m, 2H), 2,46–2,58 (m, 2H), 2,64–2,81 (m, 1H), 2,85–2,92 & 2,95–3,03 (2m, 1H, Rotamere im Verhältnis 1 : 3), 3,67 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,10–4,18 (m, 1H), 4,20–4,30 (m, 1H), 4,40–4,55 (m, 1H), 4,80–4,88 (m, 1H), 4,92–5,10 (m, 2H), 5,14 (dd, J = 10,2 & 1,6 Hz, 1H), 5,24–5,38 (m, 4H), 5,42–5,54 (m, 1H), 5,68–5,86 (m, 2H), 7,04–7,14 (m, 2H, 7,42–7,64 (m, 5H), 7,92–8,12 (m, 3H). ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz) δ 1.41 (s, 9H), 1.45-1.54 (m, 1H), 1.58-1.62 (m, 1H), 1.73 -1.77 (m, 1H), 1.86-1.91 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 17.8 & 8.6 Hz, 1H), 2.26-2.43 (2m, 2H), 2.46-2.58 (m, 2H), 2.64-2.81 (m, 1H), 2.85-2.92 & 2.95-3.03 (2m, 1H, rotamers in the ratio 1: 3), 3.67 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.10-4.18 (m, 1H), 4.20-4.30 (m , 1H), 4.40-4.55 (m, 1H), 4.80-4.88 (m, 1H), 4.92-5.10 (m, 2H), 5.14 (dd, J = 10.2 & 1.6 Hz, 1H), 5.24-5.38 (m, 4H), 5.42-5.54 (m, 1H), 5.68-5.86 (m, 2H), 7.04-7.14 (m, 2H , 7.42-7.64 (m, 5H), 7.92-8.12 (m, 3H).

BB

Das Dien 30b (0,370 g, 0,49 mmol) wurde in Gegenwart des Bis-(tricyclohexylphosphin)-benzyliden-ruthenium IV-dichlorid-Katalysators (0,125 mg, 0,15 mmol) in CH₂Cl₂ (über CaH₂ destilliert und 30 Minuten mit Argon entgast) 2 Stunden unter Rückfluss cyclisiert. Die Verbindung wurde nach Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von EtOAc/Hexan (3/1) in Form eines Gemisches von Stereoisomeren (30c und 30d, Verhältnis 1 : 1) in einer Ausbeute von 35% (0,124 g) erhalten.The diene 30b (0.370 g, 0.49 mmol) was distilled in the presence of bis (tricyclohexylphosphine) benzylidene ruthenium IV dichloride catalyst (0.125 mg, 0.15 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (over CaH ₂ and Degassed with argon for 30 minutes) cyclized under reflux for 2 hours. The compound was obtained after flash column chromatography on silica gel using EtOAc / hexane (3/1) as a mixture of stereoisomers (30c and 30d, ratio 1: 1) in a yield of 35% (0.124 g).

¹H-NMR des Gemisches 30c & 30d (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,44 (s, 4H) & 1,37 (s, 4H), 1,60 (m, 2H), 1,83 (m, 0,5H), 2,01 (m, 1H), 2,09 (m, 1N), 2,42 (m, 5H), 2,73 (m, 2H), 3,26 (m, 0,5H), 3,69 (s, 1,5H), 3,76 (s, 1,5H), 3,96 (s, 3H), 4,10 (m, 1H), 4,24 (m, 0,5H), 4,10 (m, 0,5H), 4,58 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,89 (m, 0,5H), 4,97 (m, 0,5H), 5,30 (m, 0,5H), 5,44 (m, 2H), 5,64 (m, 1H), 7,1–7,0 (m, 3H), 7,47 (m, 4H), 8,08–7,98 (m, 3H). ¹ H-NMR of the mixture 30c & 30d (CDCl ₃ , 400 MHz) δ 1.44 (s, 4H) & 1.37 (s, 4H), 1.60 (m, 2H), 1.83 (m, 0.5H), 2.01 (m, 1H), 2.09 (m, 1N), 2.42 (m, 5H), 2.73 (m, 2H), 3.26 (m, 0.5H ), 3.69 (s, 1.5H), 3.76 (s, 1.5H), 3.96 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.24 (m, 0, 5H), 4.10 (m, 0.5H), 4.58 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.89 (m, 0.5H), 4.97 (m, 0 , 5H), 5.30 (m, 0.5H), 5.44 (m, 2H), 5.64 (m, 1H), 7.1-7.0 (m, 3H), 7.47 ( m, 4H), 8.08-7.98 (m, 3H).

C, DC, D

Die Hydrolyse der Methylester 30c und 30d (24 mg, 0,033 mmol) wurde in THF/MeOH/H₂O (1 ml/0,5 ml/0,5 ml) mit LiO·H₂O (11 mg, 0,246 mmol) 16 Stunden bei Raumtemperatur durchgeführt. Anschließend wurde das Reaktionsgemisch auf den pH-Wert 4–5 angesäuert und an einer Umkehrphasen-C18-HPLC-Säule unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von H₂O (0,06% TFA) bis 50% wässrigem CH₃CN (0,06% TFA) chromatographiert. Die angestrebten Verbindungen 214 und 218 wurden aus dem Gemisch der beiden Verbindungen in hoher Reinheit (94% rein gemäß HPLC) in einer Ausbeute von 15% (3 mg) isoliert.Hydrolysis of methyl esters 30c and 30d (24 mg, 0.033 mmol) was performed in THF / MeOH / H ₂ O (1 mL / 0.5 mL / 0.5 mL) with LiO • H ₂ O (11 mg, 0.246 mmol). 16 hours at room temperature. The reaction mixture was then acidified to pH 4-5 and purified on a reverse phase C18 HPLC column using a solvent gradient of H ₂ O (0.06% TFA) to 50% aqueous CH ₃ CN (0.06%). TFA). The desired compounds 214 and 218 were isolated from the mixture of the two compounds in high purity (94% pure by HPLC) in a yield of 15% (3 mg).

Verbindung 214: ¹H-NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1,15 (s, 9H), 1,48–1,54 (m, 2H), 1,65–1,74 (m, 1H), 1,77–1,85 (m, 1H), 2,12–2,25 (m, 4H), 2,27–2,34 (m, 1H), 2,61–2,68 (m, 1H), 2,87 (bt, J = 11,5 Hz, 1H), 3,92 (dd, J = 9,2 & 1,5 Hz, 1H, Pro-δ), 3,97 (s, 3H, -OCH₃), 4,14–4,20 (m, 1H), 4,52 (t, J = 7,8 Hz, 1H, Pro-α), 4,66 (d, J = 11,8 Hz, 1H, Pro-δ), 5,45 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 5,51–5,58 (m, 1H), 5,82 (bs, 1H, Pro-γ), 7,09 (d, J = 6,0 Hz, 1H, BocNH), 7,26 (bs, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,67 (bs, 3H), 8,16 (d, J = 2 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,83 (s, 1H, ACCA-NH).Compound 214: ¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.15 (s, 9H), 1.48-1.54 (m, 2H), 1.65-1.74 (m, 1H), 1 , 77-1.85 (m, 1H), 2.12-2.25 (m, 4H), 2.27-2.34 (m, 1H), 2.61-2.68 (m, 1H) , 2.87 (bt, J = 11.5 Hz, 1H), 3.92 (dd, J = 9.2 & 1.5 Hz, 1H, Pro-δ), 3.97 (s, 3H, - OCH ₃ ), 4.14-4.20 (m, 1H), 4.52 (t, J = 7.8 Hz, 1H, Pro-α), 4.66 (d, J = 11.8 Hz, 1H, Pro-δ), 5.45 (t, J = 9.9Hz, 1H), 5.51-5.58 (m, 1H), 5.82 (bs, 1H, Pro-γ), 7 , 09 (d, J = 6.0 Hz, 1H, BocNH), 7.26 (bs, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.67 (bs, 3H), 8.16 (d, J = 2Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.83 (s, 1H, ACCA-NH).

Verbindung 218: ¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,06–1,10 (m, 1H), 1,18 (s, 9H), 1,52–1,55 (m, 1H), 1,62–1,80 (m, 1H), 2,10–2,68 (überlappend, 9H), 3,90 (bd, J = 8,3 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H, OCH₃), 4,20–4,27 (m, 1H), 4,58–4,63 (m, 1H, Pro-δ), 4,66 (dd, J = 8,3 Hz, 1H, Pro-α) 4,88 (dd, J = 10,2 Hz, 1H), 5,18–5,26 (m, 1H), 5,73–5,79 (m, 1H, Pro-γ), 7,01 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,23 (bs, 1H), 7,50 (bs, 1H), 7,66 (bs, 3H), 8,20 (bs, 2H), 8,53 (s, 1H). Beispiel 31 Synthese der Verbindung 209 (Tabelle 2)

Compound 218: ¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.06-1.10 (m, 1H), 1.18 (s, 9H), 1.52-1.55 (m, 1H), 1.62-1.80 (m, 1H), 2.10-2.68 (overlapping, 9H), 3.90 (bd, J = 8.3Hz, 1H), 3.96 (s, 3H, OCH ₃ ), 4.20-4.27 (m, 1H), 4.58-4.63 (m, 1H, Pro-δ), 4.66 (dd, J = 8.3 Hz, 1H, Pro -α) 4.88 (dd, J = 10.2 Hz, 1H), 5.18-5.26 (m, 1H), 5.73-5.79 (m, 1H, Pro-γ), 7 , 01 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.23 (bs, 1H), 7.50 (bs, 1H), 7.66 (bs, 3H), 8.20 (bs, 2H) , 8.53 (s, 1H). Example 31 Synthesis of Compound 209 (Table 2)

AA

Das Dien 31a (249 mg, 0,330 mmol) wurde in 30 ml wasserfreiem CH₂Cl₂ gelöst und die Lösung wurde 15 Minuten mit Argon entgast. Der Katalysator Bis-(tricyclohexylphosphin)-benzyliden-ruthenium IV-dichlorid (82 mg, 0,100 mmol) wurde in 3 ml wasserfreiem und entgastem CN₂Cl₂ gelöst und zu der Dienlösung gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden unter N₂ unter Rückfluss erwärmt. Sodann wurde die Lösung eingeengt und durch Flash-Säulenchromatographie gereinigt. Man erhielt die Verbindung 31 b in Form eines braunen Feststoffes in einer Ausbeute von 71% (171 mg).The diene 31a (249 mg, 0.330 mmol) was dissolved in 30 mL of anhydrous CH ₂ Cl ₂ and the solution was degassed with argon for 15 minutes. The catalyst bis (tricyclohexylphosphine) benzylidene ruthenium IV dichloride (82 mg, 0.100 mmol) was dissolved in 3 mL anhydrous and degassed CN ₂ Cl ₂ and added to the diene solution. The reaction mixture was refluxed under N _{2 for} 2 hours. The solution was concentrated and purified by flash column chromatography. Compound 31b was obtained as a brown solid in 71% yield (171 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 1,22–1,44 (m, 10H), 1,42 (s, 9H), 1,66–1,74 (m, 1H), 1,87–1,97 (m, 2H), 2,13–2,28 (m, 3H), 2,32–2,39 (m, 1H), 3,08–3,16 (m, 1H), 3,41 (s, 3H), 4,07–4,22 (m, 3H), 4,28–4,34 (m, 1H), 4,58–4,64 (m, 1H), 4,95–4,99 (m, 1H), 5,22–5,29 (m, 2H), 5,38–5,43 (m, 1H), 5,48–5,56 (m, 1H), 7,00–7,12 (m, 3H), 7,43–7,55 (m, 4H), 7,97–8,11 (m, 3H).
ES(+)MS: m/z 727,4 (M + H)⁺. ¹ H-NMR _(CDCl3, 400 MHz): δ 1.22 to 1.44 (m, 10H), 1.42 (s, 9H), 1.66 to 1.74 (m, 1H), 1, 87-1.97 (m, 2H), 2.13-2.28 (m, 3H), 2.32-2.39 (m, 1H), 3.08-3.16 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 4.07-4.22 (m, 3H), 4.28-4.34 (m, 1H), 4.58-4.64 (m, 1H), 4, 95-4,99 (m, 1H), 5,22-5,29 (m, 2H), 5,38-5,43 (m, 1H), 5,48-5,56 (m, 1H), 7.00-7.12 (m, 3H), 7.43-7.55 (m, 4H), 7.97-8.11 (m, 3H).
ES (+) MS: m / z 727.4 (M + H) ⁺ .

BB

Die Verbindung 31 b (0,117 mmol) wurde in einer Lösung von HCl (1 ml, 4H in Dioxan) 30 Minuten gerührt und sodann zur Trockne eingeengt. Der Feststoff wurde in CH₂Cl₂ (2 ml) aufgenommen und nacheinander mit Et₃N (82 μl, 0,585 mmol) und tert.-Butylisocyanat (35 mg, 0,351 mmol) versetzt. Nach 20-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde das Gemisch zur Trockne eingeengt. Die rohe Verbindung 31c wurde ohne weitere Reinigung in der endgültigen Hydrolysestufe eingesetzt.Compound 31b (0.117 mmol) was stirred in a solution of HCl (1 mL, 4H in dioxane) for 30 minutes and then concentrated to dryness. The solid was taken up in CH ₂ Cl ₂ (2 mL) and Et ₃ N (82 μL, 0.585 mmol) and tert-butyl isocyanate (35 mg, 0.351 mmol) added sequentially. After stirring at room temperature for 20 hours, the mixture was concentrated to dryness. The crude compound 31c was used without further purification in the final hydrolysis step.

DD

Die Verbindung 31c (85 mg, 0,117 mmol) wurde in THF/MeOH/H₂O (2 ml/1 ml/1 ml) gelöst und mit LiON·H₂O (39 mg, 0,936 mmol) versetzt. Die Lösung wurde 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde Essigsäure (1 ml) zugegeben. Die Lösung wurde zur Entfernung von McON und THF eingeengt.Compound 31c (85 mg, 0.117 mmol) was dissolved in THF / MeOH / H ₂ O (2 mL / 1 mL / 1 mL) and LiON · H ₂ O (39 mg, 0.936 mmol) added. The solution was stirred at room temperature for 20 hours. Then, acetic acid (1 ml) was added. The solution was concentrated to remove McON and THF.

Die reine Verbindung 209 wurde nach Reinigung des Rohprodukts durch Umkehrphasen-C18-HPLC isoliert (25 mg, Ausbeute ~31%).The pure compound 209 was purified after purification of the crude product by reverse phase C18 HPLC isolated (25 mg, yield ~ 31%).

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,04 (s, 9H), 1,15–1,24 (m, 2H), 1,30-1,40 (m, 5H), 1,44–1,51 (m, 2H), 1,54–1,68 (m, 1H), 1,75–1,88 (m, 1H), 2,18 (dd, J = 17,2 & 8,5 Hz, 1H), 2,32–2,45 (m, 1H, Pro-β), 2,54–2,62 (m, 1H), 2,65–2,68 (m, 1H, Pro-β), 3,91 (dd, J = 11,1 & 3,5 Hz, 1H, Pro-δ), 3,96 (s, 3H, -OCH₃), 4,17–4,23 (m, 1H), 4,47 (dd, J = 8,6, 1H, Pro-α), 4,67 (bd, J = 7,9 Hz, 1H, Pro-6), 5,30 (dd, J = 9,5 Hz, 1H), 5,52 (bdd, J = 19 & 8,3, 1H), 5,68 (s, 1H), 5,78 (bs, 1H, Pro-γ), 5,94 (bs, 1H), 7,21 (bs, 1H), 7,51 (bs, 1H), 7,66 (bs, 4H), 8,19 (s, 2H), 8,40 (d, J = 7 Hz, 1H), 8,61 (s, 1H, ACCA-NH).
ES(+)MS: m/z 698,3 (M + H)+. Beispiel 32 Synthese der Verbindungen #404 und #407 (Tabelle 4)

¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.04 (s, 9H), 1.15-1.24 (m, 2H), 1.30-1.40 (m, 5H), 1.44 -1.51 (m, 2H), 1.54-1.68 (m, 1H), 1.75-1.88 (m, 1H), 2.18 (dd, J = 17.2 & 8, 5 Hz, 1H), 2.32-2.45 (m, 1H, Pro-β), 2.54-2.62 (m, 1H), 2.65-2.68 (m, 1H, Pro. β), 3.91 (dd, J = 11.1 & 3.5 Hz, 1H, Pro-δ), 3.96 (s, 3H, -OCH ₃ ), 4.17-4.23 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 8.6, 1H, Pro-α), 4.67 (bd, J = 7.9Hz, 1H, Pro-6), 5.30 (dd, J = 9.5Hz, 1H), 5.52 (bdd, J = 19 & 8.3, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.78 (bs, 1H, Pro-γ), 5.94 (bs, 1H), 7.21 (bs, 1H), 7.51 (bs, 1H), 7.66 (bs, 4H), 8.19 (s, 2H), 8.40 (d, J = 7Hz, 1H), 8.61 (s, 1H, ACCA-NH).
ES (+) MS: m / z 698.3 (M + H) +. Example 32 Synthesis of Compounds # 404 and # 407 (Table 4)

AA

Das Dien 32a (84 mg, 0,11 mmol) wurde in wasserfreiem CH₂Cl₂ (11 ml) gelöst. Die Lösung wurde innerhalb von 15 Minuten unter einem Argonstrom entgast. Der Bis-(tricyclohexylphosphin)-benzyliden-ruthenium IV-dichlorid-Katalysator (19 mg, 0,023 mmol) wurde zunächst in 1 ml entgastem CH₂Cl₂ gelöst und sodann über eine Kanüle in den Reaktionskolben übertragen. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Sodann wurde das Lösungsmittel unter Vakuum entfernt und das Reaktionsgemisch wurde durch Säulenchromatographie an Kieselgel unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die makrocyclische Verbindung 32b in Form eines gelben Öls (33 mg, Ausbeute 41%).The diene 32a (84 mg, 0.11 mmol) was dissolved in anhydrous CH ₂ Cl ₂ (11 mL). The solution was degassed within 15 minutes under an argon stream. The bis (tricyclohexylphosphine) benzylidene ruthenium IV dichloride catalyst (19 mg, 0.023 mmol) was first dissolved in 1 ml of degassed CH ₂ Cl ₂ and then transferred via cannula to the reaction flask. The reaction mixture was refluxed for 2 hours. The solvent was then removed under vacuum and the reaction mixture was purified by column chromatography on silica gel using EtOAc / hexane (1: 1) as eluent. Macrocyclic compound 32b was obtained as a yellow oil (33 mg, 41% yield).

BB

Das Ester-Zwischenprodukt 32b (33 mg, 0,045 mmol) wurde in einem Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (Verhältnis 2 : 1 : 1, 2 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit LiOH·H₂O (8 mg, 0,18 mmol) versetzt und bei Raumtemperatur gerührt. Nach 16 Stunden ergab die Analyse des Reaktionsgemisches durch HPLC, dass die Hydrolyse unvollständig war. Daher wurde eine weitere Menge an LiOH·H₂O (4 mg, 0,09 mmol) zugegeben und die Lösung wurde insgesamt 36 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Schließlich wurde die Lösung mit einer geringen Menge an Essigsäure angesäuert. Nach Entfernen der organischen Lösungsmittel unter Vakuum wurde das verbleibende Rohmaterial durch Umkehrphasen-C18-HPLC gereinigt. Man erhielt den reinen Inhibitor 404.Ester intermediate 32b (33 mg, 0.045 mmol) was dissolved in a mixture of THF / MeOH / H ₂ O (2: 1: 1, 2 mL). The solution was added with LiOH.H ₂ O (8 mg, 0.18 mmol) and stirred at room temperature. After 16 hours, analysis of the reaction mixture by HPLC revealed that the hydrolysis was incomplete. Therefore, an additional amount of LiOH.H ₂ O (4 mg, 0.09 mmol) was added and the solution was stirred for a total of 36 hours at room temperature. Finally, the solution was acidified with a small amount of acetic acid. After removal of the organic solvents under vacuum The remaining crude material was purified by reverse phase C18 HPLC. The pure inhibitor 404 was obtained.

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,21 (d, J = 6,0 Hz, 3H, Me), 1,36 (s, 9H, Boc), 1,1–1,4 (3m, 3H), 1,66 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 2,10 (m, 2H), 2,57 (m, 2H), 3,90 (m, 4H), 4,47 (bd, J=12,7 Hz, 1H), 4,58 (bd, J=7,3, 1H), 4,66 (dd, J=8,0 Hz, 1H), 5,57 (m, 1H), 5,66 (m, 1H), 5,83 (bs, 1H), 6,18 (bd, J=6,9 Hz, 1H), 7,25 (bd, J=7,3 Hz, 1 H), 7,56 (bs, 1H), 7,70 (m, 4H), 8,22 (bd, J=2,9 Hz, 2H), 8,29 (bs, J=9,2 Hz, 1H). ¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.21 (d, J = 6.0 Hz, 3H, Me), 1.36 (s, 9H, Boc), 1.1-1.4 (3m , 3H), 1.66 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 2.10 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 3.90 (m, 4H), 4 , 47 (bd, J = 12.7 Hz, 1H), 4.58 (bd, J = 7.3, 1H), 4.66 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 5.57 ( m, 1H), 5.66 (m, 1H), 5.83 (bs, 1H), 6.18 (bd, J = 6.9Hz, 1H), 7.25 (bd, J = 7.3 Hz, 1H), 7.56 (bs, 1H), 7.70 (m, 4H), 8.22 (bd, J = 2.9Hz, 2H), 8.29 (bs, J = 9, 2 Hz, 1H).

CC

Der Inhibitor 404 (15 mg, 0,021 mmol) wurde in Ethanol (2 ml) gelöst und mit Pd 10%/C (2 mg) versetzt. Das Gemisch wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur unter Wasserstoff gerührt. Nach Filtration wurde das Gemisch durch Umkehrphasen-C18-HPLC gereinigt. Man erhielt den Inhibitor 407 in Form eines weißen Feststoffes (10 mg, 66 %).Of the Inhibitor 404 (15 mg, 0.021 mmol) was dissolved in ethanol (2 ml) and washed with Pd 10% / C (2 mg). The mixture was allowed to stand at room temperature for 16 hours stirred under hydrogen. After filtration, the mixture was purified by reverse phase C18 HPLC. The inhibitor 407 was obtained as a white solid (10 mg, 66 %).

¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1,04 (m, 1H), 1,17 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,35 (s, 9H), 1,25-1,75 (m, 12H), 2,32–2,45 (m, 1H), 3,40–3,50 (m, 2H), 3,74–3,83 (m, 1H), 3,85–3,93 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 4,27–4,36 (dd, J = 21,1 & 8,6 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 7,95 & 7,95 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,82 (br s, 1H), 7,27–7,33 (m, 1H), 7,53–7,57 (bs, 1H), 7,60–7,74 (m, 4H), 8,13–8,27 (m, 3H), 8,30–8,35 (br s, 1H). Beispiel 33 Synthese der Verbindung #824 (Tabelle 8)

¹ H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 1.04 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.25- 1.75 (m, 12H), 2.32-2.45 (m, 1H), 3.40-3.50 (m, 2H), 3.74-3.83 (m, 1H), 3, 85-3.93 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.27-4.36 (dd, J = 21.1 & 8.6 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 7.95 & 7.95 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.82 (brs, 1H), 7.27-7.33 (m, 1H), 7.53-7.57 (bs, 1H), 7.60-7.74 (m, 4H), 8.13-8.27 (m, 3H), 8.30-8.35 ( br s, 1H). Example 33 Synthesis of Compound # 824 (Table 8)

AA

Die Verbindung 33a (0,55 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (100 ml) gelöst. Die Lösung wurde vorsichtig entgast, wonach eine Probe des Hoveyda-Katalysators (17 mg, 0,028 mmol, 0,05 Äq.) zugegeben wurde. Anschließend wurde die Lösung 5 Stunden unter Rückfluss gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt und durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von CH2Cl₂/EtOAc (Verhältnis von 3 : 2 bis 2 : 3) gereinigt. Man erhielt die Verbindung 33b in einer Ausbeute von 72% (194 mg).Compound 33a (0.55 mmol) was dissolved in CH ₂ Cl ₂ (100 ml). The solution was gently degassed, after which a sample of the Hoveyda catalyst (17 mg, 0.028 mmol, 0.05 eq.) Was added. Subsequently, the solution was stirred for 5 hours under reflux. The reaction mixture was concentrated and purified by flash column chromatography using a solvent gradient of CH ₂ Cl ₂ / EtOAc (Ratio of 3: 2 to 2: 3). Compound 33b was obtained in 72% yield (194 mg).

BB

Eine Lösung der Verbindung 33b (70 mg, 0,142 mmol), 2-Ethoxy-4-hydroxy-7-methoxychinolin 3c (63 mg, 0,284 mmol, 2 Äq.) und Ph₃P (186 mg, 0,71 mmol, 5 Äq.) in wasserfreiem THF (15 ml) wurde bei 0°C langsam innerhalb von 20 Minuten mit DIAD (140 μl, 0,71 mmol, 5 Äq.) versetzt. Man ließ das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen und rührte es 2,5 Stunden bei Raumtemperatur. Anschließend wurde das THF unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Säulenchromatographie unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von Hexan/EtOAc (Verhältnis von 7 : 3 bis 1 : 1) gereinigt. Die reine Verbindung 33c wurde in einer Ausbeute von 73% (72 mg) isoliert.A solution of compound 33b (70 mg, 0.142 mmol), 2-ethoxy-4-hydroxy-7-methoxyquinoline 3c (63 mg, 0.284 mmol, 2 eq.) And Ph ₃ P (186 mg, 0.71 mmol, 5 Eq.) In anhydrous THF (15 ml) was added slowly at 0 ° C over 20 minutes with DIAD (140 μl, 0.71 mmol, 5 eq.). The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred at room temperature for 2.5 hours. Subsequently, the THF was removed under vacuum. The crude product was purified by flash column chromatography using a solvent gradient of hexane / EtOAc (ratio of 7: 3 to 1: 1). The pure compound 33c was isolated in a yield of 73% (72 mg).

CC

Die Verbindung 33c (72 mg, 0,104 mmol) wurde mit CH₂Cl₂ (5 ml) und 4M HCl in Dioxan (5 ml) vermischt. Das Gemisch wurde 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die Boc-Schutzgruppe abzuspalten. Man erhielt das HCl-Salz des Zwischenprodukts 33d. Das rohe Reaktionsgemisch wurde unter Vakuum zur Trockne eingedampft und unter Vakuum getrocknet, um zu gewährleisten, dass das gesamte HCl entfernt war. Das Produkt wurde ohne Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.Compound 33c (72 mg, 0.104 mmol) was mixed with CH ₂ Cl ₂ (5 mL) and 4M HCl in dioxane (5 mL). The mixture was stirred for 1.5 hours at room temperature to cleave off the Boc protecting group. The HCl salt of intermediate 33d was obtained. The crude reaction mixture was evaporated to dryness under vacuum and dried under vacuum to ensure that all of the HCl was removed. The product was used without purification in the next step.

DD

Eine Lösung von Cyclopentanol (29 μl, 0,32 mmol) in THF (10 ml) wurde tropfenweise mit einer Lösung von Phosgen in Toluol (1,93 M, 274 μl, 0,528 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um das Chlorameisensäurecyclopentylester-Reagenz zu bilden. Anschließend wurde etwa die Hälfte des Lösungsmittels durch Abdampfen unter Vakuum entfernt. Die verbleibende hellgelbe Lösung wurde durch Zugabe von CH₂Cl₂ (5 ml) verdünnt und erneut auf die Hälfte ihres ursprünglichen Volumens eingeengt, um zu gewährleisten, dass das gesamte überschüssige Phosgen entfernt war. Die vorstehende Lösung des Chlorameisensäurecyclopentylester-Reagenz wurde ferner mit THF (10 ml) verdünnt, auf 0°C abgekühlt und bei 0°C zu der festen Verbindung 33d (0,104 mmol) gegeben. Sodann wurde das Reaktionsgemisch mit Et₃N (75 μl, 0,534 mmol, 5,2 Äq.) versetzt und weitere 1,5 Stunden bei 0°C gerührt. Die Lösungsmittel wurden unter Vakuum entfernt. Das rohe Material wurde durch Fiash-Säulenchromatographie unter Verwendung von EtOAc/Hexan (1 : 1) als Elutionsmittel gereinigt. Man erhielt die Verbindung 33e in fast quantitativer Ausbeute (75 mg).To a solution of cyclopentanol (29 μl, 0.32 mmol) in THF (10 ml) was added dropwise a solution of phosgene in toluene (1.93 M, 274 μl, 0.528 mmol). The mixture was stirred for 2 hours at room temperature to form the cyclopentyl chloroformate reagent. Then about half of the solvent was removed by evaporation under vacuum. The remaining light yellow solution was diluted by the addition of CH ₂ Cl ₂ (5 mL) and reconcentrated to half its original volume to ensure that all excess phosgene was removed. The above solution of the cyclopentyl chloroformate reagent was further diluted with THF (10 ml), cooled to 0 ° C and added at 0 ° C to solid compound 33d (0.104 mmol). The reaction mixture was then treated with Et ₃ N (75 μl, 0.534 mmol, 5.2 eq.) And stirred at 0 ° C. for a further 1.5 hours. The solvents were removed under vacuum. The crude material was purified by flash column chromatography using EtOAc / hexane (1: 1) as eluent. Compound 33e was obtained in almost quantitative yield (75 mg).

Ee

Die Hydrolyse des Methylesters wurde durch Umsetzung der Verbindung 33e (75 mg, 0,11 mmol) mit LiOH·H₂O (35 mg, 0,84 mmol, 8 Äq.) in einem Lösungsmittelgemisch aus THF/MeOH/H₂O (Verhältnis 2 : 2 : 1, 7,5 ml) für 2,5 Stunden bei 50°C erreicht. Nach Beendigung der Hydrolyse wurde das Gemisch auf den pH-Wert 4,5 angesäuert und die Lösungsmittel wurden unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch präparative Umkehrphasen-C18-HPLC unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von H₂O bis 58%igem wässrigem CH₃CN (mit 0,06 % TFA) gereinigt. Man erhielt den Inhibitor #824 in Form eines weißen amorphen Feststoffes (45 mg, Ausbeute 65%).Hydrolysis of the methyl ester was carried out by reacting Compound 33e (75 mg, 0.11 mmol) with LiOH.H ₂ O (35 mg, 0.84 mmol, 8 eq.) In a mixed solvent of THF / MeOH / H ₂ O ( Ratio 2: 2: 1, 7.5 ml) for 2.5 hours at 50 ° C. After completion of the hydrolysis, the mixture was acidified to pH 4.5 and the solvents were evaporated to dryness under vacuum. The crude product was purified by preparative reverse phase C18 HPLC using a solvent gradient of H ₂ O to 58% aqueous CH ₃ CN (with 0.06% TFA). Inhibitor # 824 was obtained as a white amorphous solid (45 mg, 65% yield).

¹H-NMR des Na⁺-Salzes von #824 (DMSO, 400 MHz): δ 0,88 (d, J=6,7 Hz, 3H), 0,95–1,70 (überlappende Resonanzen, 17H), 1,37 (t, J=7 Hz, 3H), 2,00–2,10 (m, 1H), 2,10–2,33 (m, 3H), 2,38–2,44 (m, 1H), 3,80–3,85 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,02–4,08 (m, 1H), 4,42 (q, J=7 Hz, 2H), 4,35–4,44 (m, 1H), 4,50 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,63 (bs, 1H), 5,28 (dd, J=9,5 Hz, 1H), 5,38 (bs, 1H), 5,42–5,49 (m, 1H), 6,37 (s, 1H), 6,87 (dd, J-8,9 & 2,2 Hz, 1H), 7,07 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,90 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,57 (s, 1H). Beispiel 34 Synthese der Verbindung #812 (Tabelle 8)

¹ H NMR of the Na ⁺ salt of # 824 (DMSO, 400 MHz): δ 0.88 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.95-1.70 (overlapping resonances, 17H), 1.37 (t, J = 7Hz, 3H), 2.00-2.10 (m, 1H), 2.10-2.33 (m, 3H), 2.38-2.44 (m, 1H), 3.80-3.85 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 4.02-4.08 (m, 1H), 4.42 (q, J = 7Hz, 2H 4.35-4.44 (m, 1H), 4.50 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.63 (bs, 1H), 5.28 (dd, J = 9, 5Hz, 1H), 5.38 (bs, 1H), 5.42-5.49 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 6.87 (dd, J-8.9 & 2 , 2 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H). Example 34 Synthesis of Compound # 812 (Table 8)

AA

Eine Lösung des makrocyclischen Zwischenprodukts 23b (13,05 g, 27,2 mmol, 1,0 Äq.) von Ph₃P (14,28 g, 54,4 mmol, 2,0 Äq.) und von 2-Carboxymethoxy-4-hydroxy-7-methoxychinolin ( WO-00/09543 und WO-00/09558 ) (6,67 g, 28,6 mmol, 1,05 Äq.) in THF (450 ml) wurde innerhalb von 15 Minuten bei 0°C tropfenweise mit DIAD (10,75 ml, 54,6 mmol, 2,0 Äq.) versetzt. Sodann wurde das Eisbad entfernt und das Reaktionsgemisch wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach beendeter Umsetzung des Ausgangsmaterials zu Produkten wurde das Lösungsmittel unter Vakuum abgedampft. Das verbleibende Gemisch wurde mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (2×) und Kochsalzlösung (1×) gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und zur Trockne eingedampft. Die reine Verbindung 34a wurde nach Flash-Säulenchromatographie erhalten. Die Säule wurde zunächst mit Hexan/EtOAc (50 : 50) und anschließend mit CHCl₃/EtOAc (95 : 5) zur Entfernung von Ph₃PO und DIAD-Nebenprodukten eluiert. Die Elution der Verunreinigungen wurde durch TLC überwacht. Schließlich wurde das angestrebte Produkt 34a von der Säule mit CHCl₃/EtOAc (70 : 30) eluiert. Üblicherweise musste die Chromatographiestufe 2- bis 3-mal wiederholt werden, bevor die Verbindung 34a in hoher Reinheit in Form eines weißen Feststoffes in einer Gesamtausbeute von 68% (12,8 g, 99,5% rein gemäß HPLC) isoliert werden konnte.A solution of the macrocyclic intermediate 23b (13.05 g, 27.2 mmol, 1.0 eq.) Of Ph ₃ P (14.28 g, 54.4 mmol, 2.0 eq.) And 2-carboxymethoxy 4-hydroxy-7-methoxyquinoline ( WO-00/09543 and WO-00/09558 ) (6.67 g, 28.6 mmol, 1.05 eq.) In THF (450 mL) was added dropwise over 15 min at 0 ° C with DIAD (10.75 mL, 54.6 mmol, 2.0 Äq.). Then, the ice bath was removed and the reaction mixture was stirred at room temperature for 3 hours. Upon completion of reaction of the starting material into products, the solvent was evaporated in vacuo. The remaining mixture was diluted with EtOAc and washed with saturated NaHCO ₃ solution (2x) and brine (1x). The organic phase was dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and evaporated to dryness. The pure compound 34a was obtained after flash column chromatography. The column was eluted first with hexane / EtOAc (50:50) followed by CHCl ₃ / EtOAc (95: 5) to remove Ph ₃ PO and DIAD by-products. The elution of the impurities was monitored by TLC. Finally, the desired product 34a was eluted from the column with CHCl ₃ / EtOAc (70:30). Typically, the chromatography step had to be repeated 2 to 3 times before Compound 34a could be isolated in high purity as a white solid in an overall yield of 68% (12.8 g, 99.5% pure by HPLC).

BB

Eine Lösung des Boc-geschützten Zwischenprodukts 34a (1,567g) in CH₂Cl₂ (15 ml) wurde mit 4 N HCl in Dioxan (12 ml) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. (Für den Fall, dass nach Ablauf der Hälfte der Reaktionsdauer ein dickes Gel entstand, wurden weitere 10 ml CH₂Cl₂ zugesetzt.) Nach Beendigung der Schutzgruppenentfernung wurden die Lösungsmittel zur Trockne abgedampft. Man erhielt einen gelben Feststoff und ein pastenartiges Material. Das Gemisch wurde in etwa 5% McOH in CH₂Cl₂ in Lösung gebracht und erneut unter Vakuum zur Trockne eingedampft. Man erhielt die Verbindung 34b in Form eines gelben Feststoffes, der ohne Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt wurde.To a solution of Boc-protected intermediate 34a (1.567 g) in CH ₂ Cl ₂ (15 ml) was added 4N HCl in dioxane (12 ml). The reaction mixture was stirred for 1 hour at room temperature. (In the event that a thick gel formed after half the reaction time, an additional 10 mL of CH ₂ Cl _{2 was} added.) After deprotection was complete, the solvents were evaporated to dryness. A yellow solid and a paste-like material were obtained. The mixture was dissolved in about 5% MeOH in CH ₂ Cl ₂ and again evaporated to dryness under vacuum. Compound 34b was obtained as a yellow solid which was used without purification in the next step.

CC

Eine Lösung von Cyclopentanol (614 μl, 6,76 mmol) in THF (15 ml) wurde tropfenweise mit einer Lösung von Phosgen in Toluol (1,93 M, 5,96 ml, 11,502 mmol) versetzt. Das Gemisch wurde 2 Stunden bei Raumtemperatur unter Bildung des Chlorameisensäurecyclopentyl-Reagenz (z) gerührt. Anschließend wurde etwa die Hälfte des Lösungsmittels durch Abdampfen unter Vakuum entfernt. Die verbleibende hellgelbe Lösung wurde durch Zugabe von CH₂Cl₂ (5 ml) verdünnt und auf die Hälfte ihre ursprünglichen Volumens eingeengt, um zu gewährleisten, dass das gesamte überschüssige Phosgen entfernt wurde. Die vorstehende Lösung des Chlorameisensäurecyclopentylester-Reagenz wurde ferner mit THF (15 ml) verdünnt und zum Amin-2HCl-Salz 34b gegeben. Das Gemisch wurde in einem Eisbad auf 0°C gekühlt. Der pH-Wert wurde durch Zugabe von Et₃N (tropfenweise) auf ~8,5–9 eingestellt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei 0°C gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit EtOAc verdünnt und mit Wasser (1×), gesättigter NaHCO₃-Lösung (2×), H₂O (2×) und Kochsalzlösung (1×) gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem MgSO₄, getrocknet, filtriert und unter Vakuum unter Bildung eines gelb-bernsteinfarbenen Schaums eingedampft. Die Verbindung 34c wurde nach Reinigung durch Flash-Säulenchromatographie (unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 30% Hexan bis 20 % Hexan in EtOAc als Elutionsmittel) in Form eines weißen Schaums in einer Ausbeute von 80% (1,27 g) und in einer Reinheit von > 93% erhalten.To a solution of cyclopentanol (614 μl, 6.76 mmol) in THF (15 ml) was added dropwise a solution of phosgene in toluene (1.93 M, 5.96 ml, 11.502 mmol). The mixture was stirred for 2 hours at room temperature to give the chloroformic acid cyclopentyl reagent (z). Then about half of the solvent was removed by evaporation under vacuum. The remaining light yellow solution was diluted by the addition of CH ₂ Cl ₂ (5 mL) and concentrated to half of its original volume to ensure that all excess phosgene was removed. The above solution of the cyclopentyl chloroformate reagent was further diluted with THF (15 ml) and added to the amine 2HCl salt 34b. The mixture was cooled to 0 ° C in an ice bath. The pH was adjusted by addition of Et ₃ N (added dropwise) to ~ 8.5-9. The reaction mixture was stirred at 0 ° C for 1 hour. The mixture was then diluted with EtOAc and washed with water (1X), saturated NaHCO ₃ (2X), H ₂ O (2X) and brine (1X). The organic phase was dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered, and evaporated under vacuum to give a yellow amber foam. Compound 34c, after purification by flash column chromatography (using a solvent gradient of 30% hexane to 20% hexane in EtOAc as eluant), was isolated as a white foam in 80% yield (1.27 g) and in a purity of > 93% received.

DD

Der Dimethylester 34c (1,17 g) wurde in einem Gemisch aus THF/MeOH/H₂O (20 ml, Verhältnis 2 : 1 : 1) gelöst. Eine wässrige Lösung von NaOH (1,8 ml, 1 N, 1 Äq.) wurde zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und anschließend zur Trockne eingedampft. Man erhielt das Natriumsalz 34d in Form eines weißen Feststoffes (1,66 mmol). Die Verbindung 34d wurde ohne Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.The dimethyl ester 34c (1.17 g) was dissolved in a mixture of THF / MeOH / H ₂ O (20 mL, 2: 1: 1 ratio). An aqueous solution of NaOH (1.8 ml, 1 N, 1 eq.) Was added. The reaction mixture was stirred for 1 hour at room temperature and then evaporated to dryness. The sodium salt 34d was obtained as a white solid (1.66 mmol). Compound 34d was used without purification in the next step.

Ee

Das rohe Natriumsalz 34d (1,66 mmol) wurde in THF (17 ml) gelöst und mit Et₃N versetzt. Das Gemisch wurde in einem Eisbad auf 0°C gekühlt. Chlorameisensäureisobutylester (322 μl, 2,5 mmol) wurde tropfenweise zugegeben und das Gemisch wurde 75 Minuten bei 0°C gerührt. Anschließend wurde Diazomethan (15 ml) zugegeben. Der Rührvorgang wurde 30 Minuten bei 0°C und sodann 1 weitere Stunde bei Raumtemperatur fortgesetzt. Der Großteil des Lösungsmittels wurde unter Vakuum zur Trockne abgedampft. Das verbleibende Gemisch wurde mit EtOAc verdünnt, mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (2 ×), H₂O (2×) und Kochsalzlösung (1×) gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und zur Trockne eingedampft. Man erhielt die Verbindung 34e in Form eines hellgelben Schaums (1,2 g, 1,66 mmol). Das Diazoketon-Zwischenprodukt 34e wurde ohne Reinigung in der nächsten Stufe verwendet.The crude sodium salt 34d (1.66 mmol) was dissolved in THF (17 ml) and added with Et ₃ N. The mixture was cooled to 0 ° C in an ice bath. Isobutyl chloroformate (322 μl, 2.5 mmol) was added dropwise and the mixture was stirred at 0 ° C for 75 minutes. Then diazomethane (15 ml) was added. The stirring was continued for 30 minutes at 0 ° C and then for 1 more hour at room temperature. Most of the solvent was evaporated to dryness under vacuum. The Ver The mixture was diluted with EtOAc, washed with saturated NaHCO ₃ (2x), H ₂ O (2x) and brine (1x _), dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and evaporated to dryness. Compound 34e was obtained as a light yellow foam (1.2 g, 1.66 mmol). The diazoketone intermediate 34e was used without purification in the next step.

FF

Das Diazoketon 34e (1,2 g, 1,66 mmol) wurde in Lösung in THF (17 ml) in einem Eisbad auf 0°C gekühlt. Eine Lösung von wässrigem HBr (48%, 1,24 ml) wurde zugetropft und das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei 0°C gerührt. Sodann wurde das Gemisch mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (2×), H₂O (2×) und Kochsalzlösung (1×) gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und zur Trockne eingedampft.The diazo ketone 34e (1.2 g, 1.66 mmol) was cooled to 0 ° C in solution in THF (17 mL) in an ice bath. A solution of aqueous HBr (48%, 1.24 ml) was added dropwise and the reaction mixture was stirred at 0 ° C for 1 hour. The mixture was diluted with EtOAc and washed with saturated NaHCO ₃ solution (2X), H ₂ O (2X ₎ and brine (1X). The organic phase was dried over anhydrous MgSO ₄ , filtered and evaporated to dryness.

Man erhielt das β-Bromketon-Zwischenprodukt 34f in Form eines hellgelben Schaums (1,657 mmol).you received the β-bromoketone intermediate 34f in the form of a light yellow foam (1.657 mmol).

GG

Eine Lösung des Bromketons 34f (600 mg, 0,779 mmol) in Isopropanol (5 ml) wurde mit Thioharnstoff (118 mg, 1,55 mmol) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde in ein auf 75°C vorgeheiztes Ölbad gestellt und darin 1 Stunde gerührt. Sodann wurde das Isopropanol unter Vakuum entfernt. Das Produkt wurde in EtOAc (100 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und eingedampft. Man erhielt das Rohprodukt 34g (522 mg) in Form eines rotbraunen Feststoffes. Dieses Material wurde ohne weitere Reinigung in der letzten Stufe eingesetzt.A solution of the bromoketone 34f (600 mg, 0.799 mmol) in isopropanol (5 mL) was added with thiourea (118 mg, 1.55 mmol). The reaction mixture was placed in an oil bath preheated to 75 ° C and stirred therein for 1 hour. Then the isopropanol was removed under vacuum. The product was dissolved in EtOAc (100 ml). The solution was washed with saturated NaHCO ₃ solution and brine. The organic phase was dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ , filtered and evaporated. The crude product 34g (522 mg) was obtained in the form of a red-brown solid. This material was used in the last step without further purification.

HH

Der rohe Methylester 34g (122 mg, 0,163 mmol) wurde in einer Lösung von THF/MeOH/H₂O (Verhältnis 2 : 1 : 1,4 ml) gelöst und unter Verwendung von LiOH·H₂O (89 mg, 2,14 mmol) verseift. Die Hydrolysereaktion wurde 12 bis 15 Stunden bei Raumtemperatur durchgeführt. Anschließend wurden die Lösungsmittel unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Umkehrphasen-C18-HPLC unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 10% CH₃CN in H₂O bis 100% CH₃CN gereinigt. Man erhielt den HCV-Proteaseinhibitor #812 in Form eines gelben Feststoffes (24 mg, 20 % Gesamtausbeute für die Umwandlung des Zwischenprodukts 34f in den Inhibitor #812).The crude methyl ester 34g (122 mg, 0.163 mmol) was dissolved in a solution of THF / MeOH / H ₂ O (2: 1: 1.4 mL) and purified using LiOH · H ₂ O (89 mg, 2, 14 mmol) saponified. The hydrolysis reaction was carried out at room temperature for 12 to 15 hours. Then the solvents were removed under vacuum. The crude product was purified by reverse phase C 18 HPLC using a solvent gradient of 10% CH ₃ CN in H ₂ O to 100% CH ₃ CN. The HCV protease inhibitor # 812 was obtained as a yellow solid (24 mg, 20% overall yield for the conversion of intermediate 34f to inhibitor # 812).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8,63 (s, 1H), 8,26–8,15 (m, 2H), 7,79 (bs, 1H), 7,72 (bs, 1H), 7,50 (bs, 2H), 7,33–7,25 (m, 2H), 5,77 (bs, 1H), 5,52 (dd, J = 8,3 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,64 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 8,3 Hz, 1H), 4,39–4,31 (m, 1H), 4,08–3,99 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,87 (d, J = 9,5 Hz, 2H), 2,65–2,53 (m, 2H), 2,46–2,36 (m, 2H), 2,20–2,12 (dd, J = 8,6 Hz, 1H), 1,80–1,64 (m, 2H), 1,63–1,06 (m, 14H).
MS; es⁺: 733,2 (M + H)⁺, es^–: 731,2 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.63 (s, 1H), 8.26-8.15 (m, 2H), 7.79 (bs, 1H), 7.72 (bs , 1H), 7.50 (bs, 2H), 7.33-7.25 (m, 2H), 5.77 (bs, 1H), 5.52 (dd, J = 8.3 Hz, 1H) , 5.27 (dd, J = 9.2 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 8.3 Hz, 1H), 4 , 39-4.31 (m, 1H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.87 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 2.65-2.53 (m, 2H), 2.46-2.36 (m, 2H), 2.20-2.12 (dd, J = 8.6 Hz, 1H), 1.80- 1.64 (m, 2H), 1.63-1.06 (m, 14H).
MS; it ⁺ : 733.2 (M + H) ⁺ , it ^- : 731.2 (M - H) ^- .

Beispiel 34AExample 34A

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 34, jedoch durch Umsetzung von Bromketon 34f mit handelsüblichem N-Methylthioharnstoff erhielt man die Verbindung # 811 (Tabelle 8)

Using the same procedure as in Example 34 but reacting bromoketone 34f with commercial N-methylthiourea gave compound # 811 (Table 8).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,63 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,12–7,93 (m, 1H) , 7,88–7,69 (m , 2H), 7,32–7,24 (m, 2H), 5,82–5,75 (m, 1H), 5,52 (ddd, J= 8,1 Hz, 1H), 5,28 (dd, J= 9,9 Hz, 1H), 4,67–4,61 (m, 1H), 4,51 (dd , J= 8,8 Hz, 1H), 4,44–4,37 (m, 1H), 4,08–4,00 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,89 (m, 1H), 3,04 (d, J= 4,1 Hz, 3H), 2,65–2,37 (m, 3H), 2,16 (m, 1H), 1,77–1,65 (m, 2H), 1,63–1,11 (m, 17H).
MS; es⁺: 747,2 (M + H)⁺, es^–: 745,3 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.63 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8, 12-7, 93 ( m, 1H), 7.88-7.69 (m, 2H), 7.32-7.24 (m, 2H), 5.82-5.75 (m, 1H), 5.52 (ddd, J = 8.1 Hz, 1H), 5, 28 (dd, J = 9.9Hz, 1H), 4.67-4.61 (m, 1H), 4.51 (dd, J = 8.8Hz, 1H), 4.44-4.37 (m, 1H), 4.08-4.00 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.04 (d, J = 4.1 Hz, 3H), 2.65-2.37 (m, 3H), 2.16 (m, 1H), 1.77-1.65 (m, 2H), 1.63-1.11 (m, 17H) ,
MS; it ⁺ : 747,2 (M + H) ⁺ , it ^- : 745,3 (M - H) ^- .

Beispiel 34BExample 34B

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 34, jedoch unter Umsetzung des Bromketons 34f mit handelsüblichem N-Ethylthioharnstoff erhielt man die Verbindung #810 Tabelle 8).Under Using the same method as in Example 34, but under Reaction of bromoketone 34f with commercial N-ethylthiourea Compound # 810 Table 8) was obtained.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,63 (s, 1H), 8,27 (bs, 1H), 8,20 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 8,13–8,07 (m, 1H), 7,86 (bs, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,33–7,25 (m, 2H), 5,81 (bs, 1H), 5,54 (dd, J= 8,8 Hz, 1H), 5,28 (dd, J= 9,7 Hz, 1H), 4,65 (d, J= 12,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J= 8,8 Hz, 1H), 4,38 (bs, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,92–3,87 (m, 1H), 3,54–3,46 (m, 2H), 2,68–2,65 (m, 2H), 2,47–2,38 (m, 1H), 2,15 (dd, J= 8,6 Hz, 1H), 1,78–1,65 (m, 2H), 1,60–1,12 (m, 17H), 1,25 (t, J= 7,3 Hz, 3H).
MS; es⁺: 783,2 (M + Na)⁺, es^–: 761,2 (M + H)⁺. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.63 (s, 1H), 8.27 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8 , 13-8.07 (m, 1H), 7.86 (bs, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.33-7.25 (m, 2H), 5.81 (bs, 1H ), 5.54 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 9.7 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.51 (dd, J = 8.8Hz, 1H), 4.38 (bs, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.54-3.46 (m, 2H), 2.68-2.65 (m, 2H), 2.47-2.38 (m, 1H), 2.15 (d , J = 8.6 Hz, 1H), 1.78-1.65 (m, 2H), 1.60-1.12 (m, 17H), 1.25 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
MS; it ⁺ : 783.2 (M + Na) ⁺ , it ^- : 761.2 (M + H) ⁺ .

Beispiel 34CExample 34C

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 34, jedoch unter Umsetzung des Bromketons 34f mit handelsüblichem N-Isopropylthioharnstoff erhielt man die Verbindung # 822.Under Using the same method as in Example 34, but under Reaction of bromoketone 34f with commercial N-isopropylthiourea the compound # 822 was obtained.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8,63 (s, 1H), 8,33–8,23 (bs, 1H), 8,21 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,86 (bs, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,35–7,23 (m, 2H), 5,81 (bs, 1H), 5,52 (dd, J = 8,5 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 7,6 Hz, 1H), 4,37 (bs, 1H), 4,15 (bs, 1H), 4,07–3,98 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,88 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 2,60–2,53 (m, 2H), 2,47–2,37 (m, 2H), 2,19–2,10 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 1,80–1,64 (m, 2H), 1,63–1,29 (m, 13H), 1,27 and 1,25 (2 × d, J = 6,5 Hz, 6H), 1,23–1,09 (m, 2H).
MS; es⁺: 775,0 (M + H)⁺, es^–: 772,9 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.63 (s, 1H), 8.33-8.23 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 9.2 Hz, 1H ), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.86 (bs, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.35-7.23 (m, 2H), 5 , 81 (bs, 1H), 5.52 (dd, J = 8.5 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 9.2 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11, 8Hz, 1H), 4.51 (dd, J = 7.6Hz, 1H), 4.37 (bs, 1H), 4.15 (bs, 1H), 4.07-3.98 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.88 (d, J = 8.9Hz, 1H), 2.60-2.53 (m, 2H), 2.47-2.37 (m , 2H), 2.19-2.10 (dd, J = 9.2 Hz, 1H), 1.80-1.64 (m, 2H), 1.63-1.29 (m, 13H), 1.27 and 1.25 (2 × d, J = 6.5 Hz, 6H), 1.23-1.09 (m, 2H).
MS; it ⁺ : 775.0 (M + H) ⁺ , it ^- : 772.9 (M - H) ^- .

Beispiel 34DExample 34D

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 34, jedoch unter Umsetzung des Bromketons 34f mit handelsüblichem N-Acetylthioharnstoff erhielt man die Verbindung # 809.Under Using the same method as in Example 34, but under Reaction of bromoketone 34f with commercial N-acetylthiourea the compound # 809 was obtained.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,62 (s, 1H), 8,30 (bs, 1H), 8,17 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 7,62 (bs , 1H) , 7,52 (bs , 1H), 7,28 (d, J= 6,4 Hz, 1H), 7,21 (bs, 1H), 5,63 (bs, 1H), 5,54 (dd, J= 8,1 Hz, 1H), 5,28 (dd, J= 9,5 Hz, 1H), 4,62 (d, J= 12,1 Hz, 1H), 4,56–4,46 (m , 2H), 4,11–4,04 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,93–3,88 (m, 1H), 2,62–2,54 (m, 1H), 2,45–2,36 (m, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,21–2,13 (m, 1H), 1,79–1,69 (m, 2H), 1,65–1,30 (m, 16H), 26-1,12 (m, 2H).
MS; es+: 775,3 (M + H)+, es^–: 773,3 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.62 (s, 1H), 8.30 (bs, 1H), 8.17 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7 , 62 (bs, 1H), 7.52 (bs, 1H), 7.28 (d, J = 6.4Hz, 1H), 7.21 (bs, 1H), 5.63 (bs, 1H) , 5.54 (dd, J = 8.1 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 9.5 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4 , 56-4.46 (m, 2H), 4.11-4.04 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93-3.88 (m, 1H), 2.62 -2.54 (m, 1H), 2.45-2.36 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.21-2.13 (m, 1H), 1.79-1 , 69 (m, 2H), 1.65-1.30 (m, 16H), 26-1.12 (m, 2H).
MS; es +: 775,3 (M + H) +, es ^- : 773,3 (M - H) ^- .

Beispiel 34EExample 34E

Eine gerührte Lösung des 2-Amino-4-thiazolyl-Zwischenprodukts 34g (0,24 g, 0,32 mmol) in CH₂Cl₂ (5 ml) wurde bei Raumtemperatur mit DIPEA (0,55 ml, 3,18 mmol, 10 Äq.) und Chlorameisensäuremethylester (0,13 ml, 1,6 mmol, 5 Äq.) versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 6,5 Stunden gerührt und anschließend unter Vakuum eingeengt. Das rohe isolierte Material wurde sodann gemäß Beispiel 34 zu der angestrebten Carbonsäure hydrolysiert. Man erhielt die Verbindung #818.

A stirred solution of the 2-amino-4-thiazolyl intermediate 34g (0.24 g, 0.32 mmol) in CH ₂ Cl ₂ (5 mL) was treated at room temperature with DIPEA (0.55 mL, 3.18 mmol, 10 eq.) And methyl chloroformate (0.13 ml, 1.6 mmol, 5 eq.). The reaction mixture was stirred for 6.5 hours and then concentrated under vacuum. The crude isolated material was then hydrolyzed according to Example 34 to the desired carboxylic acid. The compound # 818 was obtained.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,61 (s, 1H), 8,21–8,07 (m, 2H), 7,61–7,38 (m, 2H), 7,26 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,19–7,10 (m, 1H), 5,60–5,47 (m, 2H), 5,27 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 4,63–4,53 (m, 1H), 4,47 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,13–4,04 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,92–3,87 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 2,42–2,30 (m, 2H), 2,17 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 1,81–1,68 (m, 2H), 1,63–1,29 (m, 16H), 1,23–1,10 (m, 2H).
MS; es⁺: 791,1 (M + H)⁺, es^–: 789,1 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.61 (s, 1H), 8.21-8.07 (m, 2H), 7.61-7.38 (m, 2H), 7.26 (d, J = 6.4Hz, 1H), 7.19-7.10 (m, 1H), 5.60-5.47 (m, 2H), 5.27 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 4.63-4.53 (m, 1H), 4.47 (d, J = 7.9Hz, 1H), 4.13-4.04 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.92-3.87 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.42-2.30 (m, 2H), 2.17 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 1.81-1.68 (m, 2H), 1.63-1.29 (m, 16H), 1.23-1.10 (m, 2H).
MS; it ⁺ : 791,1 (M + H) ⁺ , it ^- : 789,1 (M - H) ^- .

Beispiel 34FExample 34F

Es wurden die im vorstehenden Beispiel 34E beschriebenen Bedingungen eingehalten, wobei aber Chlorameisensäureisobutylester verwendet wurde. Man erhielt das analog substituierte Carbamat-Zwischenprodukt. Das rohe isolierte Material wurde sodann zu der angestrebten Verbindung #$19 hydrolysiert.It were the conditions described in Example 34E above complied with but using isobutyl chloroformate has been. The analogously substituted carbamate intermediate was obtained. The crude isolated material then became the desired compound # $ 19 hydrolyzed.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,62 (s, 1H), 8,47–8,27 (bs, 1H), 8,18 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,69–7,60 (m, 1H), 7,60–7,51 (m, 1H), 7,28 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,28–7,19 (m, 1H), 5,70–5,60 (m, 1H), 5,52 (dd, J = 8,3 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 9,8 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,53–4,44 (m, 2H), 4,10–3,99 (m, 1H), 4,04 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,94–3,87 (m, 1H), 2,65–2,53 (m, 1H), 2,46–2,34 (m, 1H), 2,16 (dd, J = 8,1 Hz, 1H), 2,03–1,91 (m, 1H), 1,79–1,09 (m, 20H), 0,95 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
MS; es⁺: 833,2 (M + H)⁺, es^-: 831,2 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.62 (s, 1H), 8.47-8.27 (bs, 1H), 8.18 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.69-7.60 (m, 1H), 7.60-7.51 (m, 1H), 7.28 (d, J = 6.7Hz, 1H), 7.28-7 , 19 (m, 1H), 5.70-5.60 (m, 1H), 5.52 (dd, J = 8.3 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 9.8 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.8Hz, 1H), 4.53-4.44 (m, 2H), 4.10-3.99 (m, 1H), 4.04 (i.e. , J = 6.7 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.94-3.87 (m, 1H), 2.65-2.53 (m, 1H), 2.46- 2.34 (m, 1H), 2.16 (dd, J = 8.1 Hz, 1H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.79-1.09 (m, 20H) , 0.95 (d, J = 6.7 Hz, 6H).
MS; it ⁺ : 833.2 (M + H) ⁺ , it ^- : 831.2 (M - H) ^- .

Beispiel 35Example 35

Synthese der Verbindung #90$Synthesis of the compound # 90 $

Ausgehend vom Derivat 27a und unter Anwendung der in Beispiel 34 beschriebenen chemischen Reaktionen wurde die nachstehend angegebene gesättigte makrocyclische Verbindung #908 (Tabelle 9) erhalten.outgoing of derivative 27a and using the method described in Example 34 chemical reactions were the saturated macrocyclic compounds given below Compound # 908 (Table 9).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,47 (s, 1H), 8,16 (d, J = 10 Hz, 1H), 8,15–8,07 (m, 1H), 7,82–7,63 (m, 2H), 7,53–7,43 (m, 2H), 7,33–7,22 (m, 1H), 7,13 (d, J = 7 Hz, 1H), 5,77–5,65 (m, 1H), 4,62–4,52 (m, 2H), 4,50–4,4 (m, 1H), 4,20–4,10 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,89–3,83 (m, 1H), 2,59–2,53 (m, 1H), 2,48–2,40 (m, 1H), 1,79–1,0 (m, 25H);).
MS; es⁺: 735,2 (M + H)⁺, es^–: 733,2 (M – N)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.47 (s, 1H), 8.16 (d, J = 10 Hz, 1H), 8.15-8.07 (m, 1H) , 7.82-7.63 (m, 2H), 7.53-7.43 (m, 2H), 7.33-7.22 (m, 1H), 7.13 (d, J = 7 Hz , 1H), 5.77-5.65 (m, 1H), 4.62-4.52 (m, 2H), 4.50-4.4 (m, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89-3.83 (m, 1H), 2.59-2.53 (m, 1H), 2.48-2.40 (m , 1H), 1.79-1.0 (m, 25H);).
MS; it ⁺ : 735,2 (M + H) ⁺ , it ^- : 733,2 (M - N) ^- .

Beispiel 35AExample 35A

Synthese der Verbindung #909Synthesis of the compound # 909

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 35, jedoch unter Verwendung von handelsüblichem N-Acetyλthioharnstoff erhielt man die Verbindung

Using the same procedure as in Example 35, but using commercially available N-acetylthiourea, the compound was obtained

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,53–8,41 (m, 2H), 8,20 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 7,68 (bs , 1H) , 7,68 (bs , 1H), 7,27 (dd, J= 9,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J= 6,4 Hz, 1H), 5,67 (bs, 1H), 4,65–4,50 (m, 3H), 4,44–4,37 (m, 1H), 4,21–4,13 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,99–3,86 (m, 1H), 2,62–2,39 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,78–1,67 (m, 3H), 1,67–1,01 (m, 22H).
MS; es⁺: 798,0 (M + Na)⁺, es^–: 777,0 (M + H)⁺. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.53-8.41 (m, 2H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.68 (bs, 1H), 7.68 (bs , 1H), 7.27 (dd, J = 9.2Hz, 1H), 7.15 (d, J = 6.4Hz, 1H), 5.67 (bs, 1H), 4.65-4 , 50 (m, 3H), 4.44-4.37 (m, 1H), 4.21-4.13 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.99-3.86 (m, 1H), 2.62-2.39 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.78-1.67 (m, 3H), 1.67-1.01 (m , 22H).
MS; it ⁺ : 798.0 (M + Na) ⁺ , it ^- : 777.0 (M + H) ⁺ .

Beispiel 35BExample 35B

Synthese der Verbindung #910Synthesis of the compound # 910

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 35, jedoch unter Verwendung von handelsüblichem N-Ethylthioharnstoff erhielt man die Verbindung # 910 (Tabelle 9).Under Using the same method as in Example 35, but under Use of commercial N-ethylthiourea gave compound # 910 (Table 9).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,47 (s, 1H), 8,29 (bs, 1H), 8,20 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,09 (bs, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,32 (dd, J = 9,2 Hz, 1H), 7,14 (dd, J = 6,7 Hz, 1H), 5,78 (bs, 1H), 4,58 (dd, J = 8,1 Hz, 2H), 4,43 (bs, 1H), 4,18–4,12 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,87 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,55–3,46 (m, 2H), 2,63–2,53 (m, 1H), 2,47–2,41 (m, 1H), 1,78–1,00 (m, 25H), 1,25 (t, J = 7,3 Hz, 3H), ). MS; es⁺: 763,1 (M + H)⁺, es^–: 761,1 (M – H)^–. ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.47 (s, 1H), 8.29 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8 , 09 (bs, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.32 (dd, J = 9.2 Hz, 1H), 7.14 (dd, J = 6.7Hz, 1H), 5.78 (bs, 1H), 4.58 (dd, J = 8.1Hz, 2H), 4.43 (bs, 1H), 4.18-4.12 ( m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (d, J = 8.9Hz, 1H), 3.55-3.46 (m, 2H), 2.63-2.53 (m, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 1.78-1.00 (m, 25H), 1.25 (t, J = 7.3Hz, 3H),). MS; it ⁺ : 763.1 (M + H) ⁺ , it ^- : 761.1 (M - H) ^- .

Beispiel 35CExample 35C

Synthese der Verbindung #911Synthesis of the compound # 911

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens wie in Beispiel 35, jedoch unter Verwendung von handelsüblichem N-Isopropylthioharnstoff erhielt man die Verbindung # 911 (Tabelle 9).Under Using the same method as in Example 35, but under Use of commercial N-Isopropylthiourea gave compound # 911 (Table 9).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,47 (s, 1H), 8,29–8,19 (m, 1H), 8,19 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,09–8,0 (m, 1H), 7,83 (bs, 1H), 7,74 (bs, 1H), 7,31 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 5,76 (bs, 1H), 4,64–4,53 (m, 2H), 4,44 (bs, 1H), 4,22–4,09 (m, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,87 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 2,63–2,58 (m, 1H), 2,46–2,41 (m, 1H), 1,79–1,10 (m, 24H), 1,27 and 1,26 (2 × d, J = 6,5 Hz, 6H).
MS; es⁺: 777,0 (M + H)⁺, es^–: 775,0 (M – H)^–. Beispiel 36 Synthese der Verbindung #716

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.47 (s, 1H), 8.29-8.19 (m, 1H), 8.19 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.09-8.0 (m, 1H), 7.83 (bs, 1H), 7.74 (bs, 1H), 7.31 (d, J = 8Hz, 1H), 7, 14 (d, J = 6.4Hz, 1H), 5.76 (bs, 1H), 4.64-4.53 (m, 2H), 4.44 (bs, 1H), 4.22-4 , 09 (m, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.63-2.58 (m, 1H), 2.46- 2.41 (m, 1H), 1.79-1.10 (m, 24H), 1.27 and 1.26 (2 x d, J = 6.5 Hz, 6H).
MS; it ⁺ : 777.0 (M + H) ⁺ , it ^- : 775.0 (M - H) ^- . Example 36 Synthesis of Compound # 716

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,62 (s, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,64–7,54 (m, 2H), 7,47 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,16 (dd, J=9,2, 2,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J=6,0 Hz, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,52 (q, J=9,9 Hz, 1H), 5,26 (t, J=8,9 Hz, 1H),4,62 (d, J=11,45, 1H), 4,45 (dd, J=9,2, 8,27 Hz, 1H),4,02 (m, 1H) 3,93 (s, 3H), 3,7 (dd, J=7,6, 1,0 Hz, 1H), 2,66 (s, 3H), 2,55–2,65 (m, 1H), 2,35–2,45 (m, 1H), 2,17 (q, J=8,6 Hz, 1H), 1,65–1,75 (m, 2H), 1,5–1,35 (m, 7H), 1,15 (s, 9H).
MS : 705, (M + 1), 703 (M – 1) Beispiel 37 Synthese der Verbindung #717

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.62 (s, 1H), 8.13 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.64-7, 54 (m, 2H), 7.47 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.16 (dd, J = 9.2, 2.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 5.52 (q, J = 9.9 Hz, 1H), 5.26 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 11.45, 1H), 4.45 (dd, J = 9.2, 8.27 Hz, 1H), 4.02 (m, 1H) 3.93 (s, 3H ), 3.7 (dd, J = 7.6, 1.0 Hz, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.55-2.65 (m, 1H), 2.35-2, 45 (m, 1H), 2.17 (q, J = 8.6 Hz, 1H), 1.65-1.75 (m, 2H), 1.5-1.35 (m, 7H), 1 , 15 (s, 9H).
MS: 705, (M + 1), 703 (M-1) Example 37 Synthesis of Compound # 717

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,62 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,19 (dd, J=9,2, 2,2 Hz, 1H), 7,02 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,64 (s, 1H), 5,52 (q, J=9,9 Hz, 1H), 5,26 (t, J=9,2 Hz, 1H), 4,63 (d, J=11,44, 1H), 4,45 (t, J=9,2 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,9–3,8 (m, 1H),2,7-2,55 (m, 1H), 2,4–2,3 (m, 1H), 2,18 (q, J=8,9 Hz, 1H), 1,75–1,65 (m, 2H), 1,5–1,2 (m, 7H), 1,14 (s, 9H).
MS : 705, (M + 1), 703 (M – 1). Beispiel 38 Synthese der Verbindung #718

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.62 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.19 (dd, J = 9.2, 2.2Hz, 1H), 7.02 (d, J = 5.4Hz, 1H), 5, 64 (s, 1H), 5.52 (q, J = 9.9 Hz, 1H), 5.26 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.44 , 1H), 4.45 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.9-3.8 (m, 1H), 2.7-2.55 ( m, 1H), 2.4-2.3 (m, 1H), 2.18 (q, J = 8.9Hz, 1H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.5 -1,2 (m, 7H), 1,14 (s, 9H).
MS: 705, (M + 1), 703 (M-1). Example 38 Synthesis of Compound # 718

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 9,55 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,13 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,32 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,10–7,07 (m, 2H), 5,64–5,54 (m, 1H), 5,59–5,48 (m, 1H), 5,33–5,23 (m, 1H), 4,73–4,61 (m, 1H), 4,45 (dd, J = 7,5, 9,1 Hz, 1H), 4,09–4,00 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,93–3,83 (m, 1H), 2,67–2,55 (m, 2H), 2,53–2,43 (m, 1H), 2,42–2,31 (m, 1H), 2,23–2,12 (m, 1H), 1,81–1,66 (m, 2H), 1,52–1,42 (m, 2H), 1,42–1,25 (m, 6H), 1,21 (s, 9H).
MS: 689,3 (M + 1), 687,3 (M – 1) Beispiel 39 Synthese der Verbindung #722

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 9.55 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.13 ( d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.32 (d, J = 2.6Hz, 1H), 7.10-7.07 (m, 2H), 5.64-5.54 (m, 1H), 5.59-5.48 (m, 1H), 5.33-5.23 (m, 1H), 4.73-4.61 (m, 1H ), 4.45 (dd, J = 7.5, 9.1 Hz, 1H), 4.09-4.00 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.93-3, 83 (m, 1H), 2.67-2.55 (m, 2H), 2.53-2.43 (m, 1H), 2.42-2.31 (m, 1H), 2.23- 2.12 (m, 1H), 1.81-1.66 (m, 2H), 1.52-1.42 (m, 2H), 1.42-1.25 (m, 6H), 1, 21 (s, 9H).
MS: 689.3 (M + 1), 687.3 (M-1) Example 39 Synthesis of Compound # 722

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 9,70 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,14 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,30 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,14–7,06 (m, 2H), 5,60–5,54 (m, 1H), 5,58–5,48 (m, 1H), 5,31–5,23 (m, 1H), 4,71–4,62 (m, 1H), 4,49–4,40 (m, 1H), 4,08–3,99 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,92–3,84 (m, 1H), 2,69–2,54 (m, 2H), 2,53–2,46 (m, 1H), 2,42–2,31 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,22–2,13 (m, 1H), 1,81–1,64 (m, 2H), 1,54–1,42 (m, 2H), 1,42–1,27 (m, 6H), 1,22 (s, 9H).
MS: 703,3 (M + 1), 701,3 (M – 1) Beispiel 40 Synthese der Verbindung #733

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 9.70 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.14 ( d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.14-7.06 (m, 2H), 5.60-5.54 (m, 1H), 5.58-5.48 (m, 1H), 5.31-5.23 (m, 1H), 4.71-4.62 (m, 1H 4.49-4.40 (m, 1H), 4.08-3.99 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.92-3.84 (m, 1H), 2.69-2.54 (m, 2H), 2.53-2.46 (m, 1H), 2.42-2.31 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2, 22-2.13 (m, 1H), 1.81-1.64 (m, 2H), 1.54-1.42 (m, 2H), 1.42-1.27 (m, 6H), 1.22 (s, 9H).
MS: 703.3 (M + 1), 701.3 (M-1) Example 40 Synthesis of Compound # 733

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,75 (m, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,06 ( , J=9,2 Hz, 1H), 7,88–7,87 (m, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,28 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,05–7,00 (m, 2H), 6,64–6,63 (m, 1H), 5,62–5,58 (m, 1H), 5,55–5,49 (m, 1H), 5,28–5,24 (m, 1H), 4,64–4,61 (m, 1H), 4,48–4,44 (m, 1H), 4,07–4,03 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,92–3,85 (m, 1H), 2,67–2,54 (m, 2H),2,53–2,45 (m, 1H), 2,41–2,34 (m, 1H), 2,20–2,14 (m, 1H), 1,75–1,69 (m, 2H), 1,50–1,43 (m, 2H), 1,41–1,32 (m, 6H), 1,17 (s, 9H).
MS : 689,3 (M + 1), 687,2 (M – 1). Beispiel 41 Synthese der Verbindung # 703

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.75 (m, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.06 (, J = 9.2 Hz, 1H 7.88-7.87 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.28 (d, J = 2.6Hz, 1H), 7.05-7.00 (m, 2H), 6.64-6.63 (m, 1H), 5.62-5.58 (m, 1H), 5.55-5.49 (m, 1H), 5.28-5.24 ( m, 1H), 4.64-4.61 (m, 1H), 4.48-4.44 (m, 1H), 4.07-4.03 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.92-3.85 (m, 1H), 2.67-2.54 (m, 2H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.41-2.34 ( m, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H), 1.75-1.69 (m, 2H), 1.50-1.43 (m, 2H), 1.41-1, 32 (m, 6H), 1.17 (s, 9H).
MS: 689.3 (M + 1), 687.2 (M-1). Example 41 Synthesis of Compound # 703

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ 8,50 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,11–8,00 (m, 1H), 7,88–7,77 (m, 1H), 7,73 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 6 Hz, 1H), 5,89–5,68 (m, 1H), 4,62 (d, J = 11 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 8,3 Hz, 1H), 4,16–4,07 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,88 (bd, J = 9,5 Hz, 1H), 3,53–3,43 (m, 2H), 2,63–2,51 (m, 1H), 2,46–2,36 (m, 1H), 1,81–1,62 (m, 2H), 1,60–1,01 (m, 15H), 1,24 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 1,17 (s, 9H).
MS; es⁺: 751,1(M + H)⁺, es^–: 749,1- (M – H)-. Beispiel 42 Synthese der Verbindung #734

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ 8.50 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.11-8.00 ( m, 1H), 7.88-7.77 (m, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.25 (d, J = 8.6Hz, 1H), 6.93 (d, J = 6Hz, 1H), 5.89-5.68 (m, 1H), 4.62 (d, J = 11Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 8.3Hz, 1H) , 4.16-4.07 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.88 (bd, J = 9.5Hz, 1H), 3.53-3.43 (m, 2H ), 2.63-2.51 (m, 1H), 2.46-2.36 (m, 1H), 1.81-1.62 (m, 2H), 1.60-1.01 (m , 15H), 1.24 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 1.17 (s, 9H).
MS; it ⁺ : 751,1 (M + H) ⁺ , it ^- : 749,1- (M - H) -. Example 42 Synthesis of Compound # 734

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,62 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,24 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,05–6,98 (m, 2H), 5,57–5,54 (m, 1H), 5,55–5,48 (m, 1H), 5,28–5,24 (m, 1H), 4,63–4,59 (m, 1H), 4,47–4,43 (m, 1H), 4,13–3,99 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,92–3,83 (m, 1H), 2,67–2,55 (m, 2H), 2,53–2,46 (m, 1H), 2,43–2,31 (m, 1H), 2,22–2,15 (m, 1H), 2,15 (3H), 1,75–1,70 (m, 2H), 1,51–1,42 (m, 2H), 1,41–1,28 (m, 6H), 1,17 (s, 9H).
MS : 703,2 (M + 1), 701, 3 (M – 1) Beispiel 43 Synthese der Verbindung #738

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.62 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.24 (d, J = 2.6Hz, 1H), 7.05-6.98 (m, 2H), 5.57-5.54 (m, 1H), 5.55-5.48 (m, 1H), 5.28-5.24 (m, 1H), 4.63-4.59 (m, 1H 4,47-4,43 (m, 1H), 4,13-3,99 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,92-3,83 (m, 1H), 2.67-2.55 (m, 2H), 2.53-2.46 (m, 1H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2.22-2.15 (m, 1H , 2.15 (3H), 1.75-1.70 (m, 2H), 1.51-1.42 (m, 2H), 1.41-1.28 (m, 6H), 1, 17 (s, 9H).
MS: 703.2 (M + 1), 701, 3 (M-1) Example 43 Synthesis of Compound # 738

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,64 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,04 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,24 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 2,2, 9,2 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,62–5,57 (m, 1H), 5,56–5,47 (m, 1H), 5,31–5,22 (m, 1H), 4,65–4,56 (m, 1H), 4,45 (dd, J = 7,6, 8,9 Hz, 1H), 4,07–4,00 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,88–3,84 (m, 1H), 2,68–2,56 (m, 2H), 2,54–2,43 (m, 1H), 2,42–2,31 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,24–2,14 (m, 1H), 1,80–1,64 (m, 2H), 1,52–1,43 (m, 2H), 1,43–1,27 (m, 6H), 1,18 (s, 9H).
MS: 703,2 (M + 1), 701,2 (M – 1) Beispiel 44 Synthese der Verbindung #725

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.64 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.04 (d, J = 9.2Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.24 (d, J = 2.5Hz, 1H), 7.04 (d, J = 6.0Hz, 1H) , 6.99 (dd, J = 2.2, 9.2 Hz, 1H), 6.43 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.62-5.57 (m, 1H), 5.56-5.47 (m, 1H), 5.31-5.22 (m, 1H), 4.65-4.56 (m, 1H), 4.45 (dd, J = 7.6 , 8.9Hz, 1H), 4.07-4.00 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88-3.84 (m, 1H), 2.68-2, 56 (m, 2H), 2.54-2.43 (m, 1H), 2.42-2.31 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24-2.14 ( m, 1H), 1.80-1.64 (m, 2H), 1.52-1.43 (m, 2H), 1.43-1.27 (m, 6H), 1.18 (s, 9H).
MS: 703.2 (M + 1), 701.2 (M-1) Example 44 Synthesis of Compound # 725

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,62 (s, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,35 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,09–7,03 (m, 2H), 5,65–5,61 (m, 1H), 5,55–5,49 (m, 1H), 5,28–5,24 (m, 1H), 4,62–4,57 (m, 1H), 4,49–4,45 (m, 1H), 4,08–4,01 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,92–3,86 (m, 1H), 3,20–3,14 (m, 1H), 2,65–2,56 (s, 1H), 2,53–2,47 (m, 1H) 2,42–2,35 (m, 1H), 2,22–2,15 (m, 1H), 1,79–1,68 (m, 2H), 1,50–1,43 (m, 2H), 1,41–1,28 (m, 12H), 1,18 (s, 9H).
MS : 748,2 (M + 1), 746,2 (M – 1) Beispiel 45 Synthese der Verbindung #726

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.62 (s, 1H), 8.10 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.35 (d, J = 2.2Hz, 1H), 7.09-7.03 (m, 2H), 5.65-5.61 (m , 1H), 5.55-5.49 (m, 1H), 5.28-5.24 (m, 1H), 4.62-4.57 (m, 1H), 4.49-4.45 (m, 1H), 4.08-4.01 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.92-3.86 (m, 1H), 3.20-3.14 (m , 1H), 2.65-2.56 (s, 1H), 2.53-2.47 (m, 1H) 2.42-2.35 (m, 1H), 2.22-2.15 ( m, 1H), 1.79-1.68 (m, 2H), 1.50-1.43 (m, 2H), 1.41-1.28 (m, 12H), 1.18 (s, 9H).
MS: 748.2 (M + 1), 746.2 (M-1) Example 45 Synthesis of Compound # 726

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,64 (s, 1H), 8,10 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,83–7,76 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 7,44–7,42 (m, 1H), 7,18–7,01 (m, 2H), 5,56–5,49 (m, 2H), 5,29–5,24 (m, 1H), 4,66–4,63 (m, 1H), 4,47–4,42 (m, 1H), 4,28 (s, 3H), 4,06–4,02 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,93–3,86 (m, 1H), 2,66–2,55 (m, 2H), 2,42–2,31 (m, 2H), 2,22–2,14 (m, 1H), 1,79–1,65 (m, 2H), 1,52–1,27 (m, 7H), 1,22 (s, 9H).
MS : 703,2 (M + 1), 701,3 (M – 1) Beispiel 46 Synthese der Verbindung #906

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.64 (s, 1H), 8.10 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.83-7, 76 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.44-7.42 (m, 1H), 7.18-7.01 (m, 2H), 5.56-5.49 ( m, 2H), 5.29-5.24 (m, 1H), 4.66-4.63 (m, 1H), 4.47-4.42 (m, 1H), 4.28 (s, 3H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.93-3.86 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 2H) , 2.42-2.31 (m, 2H), 2.22-2.14 (m, 1H), 1.79-1.65 (m, 2H), 1.52-1.27 (m, 7H), 1.22 (s, 9H).
MS: 703.2 (M + 1), 701.3 (M-1) Example 46 Synthesis of Compound # 906

¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,46 (s, 1H), 8,06 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,14–7,05 (m, 2H), 5,63–5,58 (m, 1H), 4,66–4,61 (m, 1H), 4,54–4,44 (m, 2H), 4,23–4,18 (m, 1H) 3,93 (s, 3H), 3,92–3,88 (m, 1H), 3,21–3,14 (m, 1H), 2,44–2,33 (m, 1H), 1,35 (d, J=7 Hz, 6H), 1,73–1,01 (m, 26H).
MS : 762,0 (M + 1), 759,9 (M – 1) Beispiel 47 Synthese der Verbindung #907

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.46 (s, 1H), 8.06 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.14-7.05 (m, 2H), 5.63-5.58 (m, 1H), 4.66 4.61 (m, 1H), 4.54-4.44 (m, 2H), 4.23-4.18 (m, 1H) 3.93 (s, 3H), 3.92-3, 88 (m, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 2.44-2.33 (m, 1H), 1.35 (d, J = 7Hz, 6H), 1.73 -1.01 (m, 26H).
MS: 762.0 (M + 1), 759.9 (M-1) Example 47 Synthesis of Compound # 907

¹H-NMR 400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm): 8,46 (s, 1H), 7,98 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,91–7,89 (m, 2H), 7,23–7,21 (m, 2H), 7,07–7,00 (m, 2H), 6,35–6,32 (m, 2H), 564–5,58 ¹ H-NMR 400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ (ppm): 8.46 (s, 1H), 7.98 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.91-7.89 (m, 2H), 7.23-7.21 (m, 2H), 7.07-7.00 (m, 2H), 6.35-6.32 (m, 2H), 564-5.58

(m, 1H), 4,65–4,61 (m, 1H), 4,53–4,47 (m, 2H), 4,24–4,19 (m, 1H) 3,90 (s, 3H), 3,86–3,84 (m, 1H), 2,40–2,33 (m, 1H), 1,73–1,01 (m, 26H).
MS : 702,0 (M + 1), 699,9 (M – 1)(m, 1H), 4.65-4.61 (m, 1H), 4.53-4.47 (m, 2H), 4.24-4.19 (m, 1H) 3.90 (s, 3H), 3.86-3.84 (m, 1H), 2.40-2.33 (m, 1H), 1.73-1.01 (m, 26H).
MS: 702.0 (M + 1), 699.9 (M - 1)

Beispiel 48Example 48

Fluorogener Test auf das heterodimere NS3-NS4A-Protein von voller LängeFluorogenic test on the full length heterodimeric NS3 NS4A protein

Die NS2-NS5B-3'-Nichtcodierungsregion wurde durch RT-PCR in den pCR^®3-Vektor (Invitrogen) unter Verwendung von RNA, die aus dem Serum einer mit HCV-Genotyp 1 b infizierten Person (bereitgestellt von Dr. Bernard Willems, Hôpital St-Luc, Montreal, Quebec, Kanada) extrahiert worden war, kloniert. Die NS3-NS4A-Region (NS3-NS4AFL) wurde sodann durch PCR in den pFastBac^R HTa-Baculovirus-Expressionsvektor (Gibco/BRL) subkloniert. Die Vektorsequenz umfasst eine Region, die für eine N-terminale Sequenz mit 28 Resten, die eine Hexahistidin-Markierung enthält, kodiert. Das Bac-to-Bac^®-Baculovirus-Expressionssystem (Gibco/BRL) wurde zur Herstellung des rekombinanten Baculovirus verwendet. His-NS3-NS4AFL wurde durch Infektion von 106 Sf21-Zellen/ml mit dem rekombinanten Baculovirus in einer Infektionsmultiplizität von 0,1–0,2 bei 27°C exprimiert. Eine authentische Autoproteolyse erfolgte während der Expression unter Bildung eines nicht-kovalenten und stabilen NS3-NS4A-Proteinkomplexes (nachstehend als volle Länge "FL" bezeichnet). Die infizierte Kultur wurde 48 bis 64 Stunden später durch Zentrifugation bei 4°C geerntet. Das Zellpellet wurde in 50 mM NaPO₄, pH-Wert 7,5, 40 Glycerin (Gew./Vol.) und 2 mM β-Mercaptoethanol in Gegenwart eines Cocktails von Protease-Inhibitoren homogenisiert. His-NS3-NS4AFL wurde sodann aus dem Zelllysat mit 1,5% NP-40, 0,5 % Triton X-100, 0,5 M NaCl und eine DNase-Behandlung extrahiert. Nach Ultrazentrifugation wurde der lösliche Extrakt 4-fach verdünnt und an eine Pharmacia Hi-Trap-Ni-Chelatbildungssäule gebunden. Das His-NS3-NS4AFL wurde in einer Form mit einer Reinheit von > 90% (festgestellt durch SDS-PAGE) unter Verwendung eines 50 bis 400 mM Imidazolgradienten eluiert. Das His-NS3-NS4AFL wurde bei –80°C in 50 mM Natriumphosphat, pH-Wert 7,5, 10% (Gew./Vol.) Glycerin, 0,5 M NaCl, 0,25 M Imidazol, 0,1% NP-40 gelagert. Unmittelbar vor der Verwendung wurde es auf Eis aufgetaut und verdünnt.The NS2-NS5B-3 'non coding region was obtained by RT-PCR into the pCR ^® 3 vector (Invitrogen) using RNA extracted from the serum of an HCV genotype 1 b infected individual (provided by Dr. Bernard Willems, Hôpital St-Luc, Montreal, Quebec, Canada) was cloned. The NS3 NS4A region (NS3-NS4AFL) was then subcloned by PCR into the pFastBac ^R HTa baculovirus expression vector (Gibco / BRL). The vector sequence comprises a region encoding a 28 residue N-terminal sequence containing a hexahistidine tag. The Bac-to-Bac ^® baculovirus expression system (Gibco / BRL) was used to produce the recombinant baculovirus. His-NS3-NS4AFL was expressed by infection of 106 Sf21 cells / ml with the recombinant baculovirus at a multiplicity of infection of 0.1-0.2 at 27 ° C. Authentic auto-proteolysis occurred during expression to produce a non-covalent and stable NS3-NS4A protein complex (hereinafter referred to as full-length "FL"). The infected culture was harvested 48 to 64 hours later by centrifugation at 4 ° C. The cell pellet was homogenized in 50 mM NaPO ₄ , pH 7.5, 40 glycerol (w / v) and 2 mM β-mercaptoethanol in the presence of a cocktail of protease inhibitors. His-NS3-NS4AFL was then extracted from the cell lysate 1.5% NP-40, 0.5% Triton X-100, 0.5 M NaCl and a DNase treatment. After ultracentrifugation, the soluble extract was diluted 4-fold and bound to a Pharmacia Hi-Trap Ni chelating column. The His-NS3-NS4AFL was eluted in a> 90% pure form (as determined by SDS-PAGE) using a 50 to 400 mM imidazole gradient. The His-NS3 NS4AFL was incubated at -80 ° C in 50 mM sodium phosphate, pH 7.5, 10% (w / v) glycerol, 0.5 M NaCl, 0.25 M imidazole, 0.1 % NP-40 stored. Immediately before use, it was thawed and diluted on ice.

Die Protease-Aktivität von His-NS3-NS4AFL wurde in 50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8,0, 0,25 M Natriumcitrat, 0,01 % (Gew./Vol.) n-Dodecyl-β-D-maltosid und 1 mM TCEP bestimmt. 5 μM des intern gequenchten Substrats Anthranilyl-DDIVPAbu[C(O)-O]-AMY(3-NO₂)TW-OH in Gegenwart von verschiedenen Inhibitorkonzentrationen wurden mit 1,5 nM His-NS3-NS4AFL 45 Minuten bei 23°C inkubiert. Die endgültige DMSO-Konzentration überstieg 5,25 % nicht. Die Umsetzung wurde durch Zugabe von 1 M MES, pH-Wert 5,8, beendet. Die Fluoreszenz des N-terminalen Produkts wurde mit einem Perkin-Elmer LS-50B- Fluorimeter, der mit einem Lesegerät für Platten mit 96 Vertiefungen ausgerüstet war, überwacht (Anregungswellenlänge 325 nm; Emissionswellenlänge 423 nm).The protease activity of His-NS3-NS4AFL was assayed in 50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.25 M sodium citrate, 0.01% (w / v) n-dodecyl-β-D- maltoside and 1 mM TCEP. 5 μM of internally quenched substrate anthranilyl-DDIVPAbu [C (O) -O] -AMY (3-NO ₂ ) TW-OH in the presence of various inhibitor concentrations were incubated with 1.5 nM His-NS3-NS4AFL for 45 minutes at 23 ° C incubated. The final DMSO concentration did not exceed 5.25%. The reaction was terminated by addition of 1 M MES, pH 5.8. The fluorescence of the N-terminal product was monitored with a Perkin-Elmer LS-50B fluorimeter equipped with a 96-well plate reader (excitation wavelength 325 nm, emission wavelength 423 nm).

Die prozentuale Hemmung wurde gemäß der folgenden Gleichung berechnet: 100 – [(Fluo_inh-Fluo_Leerwert)/(Fluo_Kontrolle-fluo_Leerwert) × 100].Percent inhibition was calculated according to the following equation: 100 - [(fluo _inh -fluo _blank ) / (fluo _control - _blank ) x 100].

Eine nicht-lineare Kurvenanpassung nach dem Hill-Modell wurde auf die Hemmungs-Konzentrations-Daten angewandt. Die 50% effektive Konzentration (IC₅₀) wurde unter Verwendung von SAS-Software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc, Cary, N.C.) berechnet.A non-linear curve fit according to the Hill model was applied to the inhibition concentration data. The 50% effective concentration (IC ₅₀ ) was calculated using SAS software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc, Cary, NC).

Beispiel 49Example 49

Radiometrischer Test auf rekombinante HCV-NS3-ProteaseRadiometric test on recombinant HCV NS3 protease

Das für den radiometrischen Test auf HCV-NS3-Protease verwendete Substrat, nämlich DDIVPC-SMSYTW, wird durch das Enzym zwischen dem Cystein- und dem Serinrest gespalten. Die Sequenz DDIVPC-SMSYTW entspricht der natürlichen Spaltungsstelle von NS5A/NS5B, bei der der Cysteinrest in P2 durch Prolin ersetzt ist. Das Peptidsubstrat DDIVPC-SMSYTW und der Tracer Biotin-DDIVPC-SMS[¹²⁵l- Y]TW wurden mit der rekombinanten NS3-Protease in Abwesenheit oder in Gegenwart von Inhibitoren inkubiert. Die Abtrennung des Substrats von den Produkten wurde durch Zugabe von mit Avidin beschichteten Agaroseperlen zum Testgemisch und anschließende Filtration durchgeführt. Die Menge an SMS[¹²⁵l- Y]TW-Produkt im Filtrat (mit oder ohne Inhibitor), die festgestellt wurde, ermöglichte die Berechnung des prozentualen Anteils der Substratumwandlung und des prozentualen Hemmgrads.The substrate used for the radiometric assay for HCV NS3 protease, DDIVPC-SMSYTW, is cleaved by the enzyme between the cysteine and serine residues. The sequence DDIVPC-SMSYTW corresponds to the natural cleavage site of NS5A / NS5B in which the cysteine residue in P2 is replaced by proline. The peptide substrate DDIVPC-SMSYTW and the tracer biotin-DDIVPC-SMS [ ¹²⁵ I-Y] TW were incubated with the recombinant NS3 protease in the absence or in the presence of inhibitors. The separation of the substrate from the products was carried out by adding avidin-coated agarose beads to the test mixture followed by filtration. The amount of SMS [ ¹²⁵ I-Y] TW product in the filtrate (with or without inhibitor) detected allowed the calculation of the percentage of substrate conversion and% inhibition.

A. ReagenzienA. Reagents

Tris- und Tris-HCl (Ultrarein) wurden von der Fa. Life Technologies bezogen. Glycerin (Ultrarein), MES und BSA wurden von der Fa. Sigma^R bezogen. TCEP wurde von der Fa. Pierce, DMSO von der Fa. Aldrich^R und NaOH von der Fa. Anachemia^R bezogen.Tris- and Tris-HCl (ultra-pure) were purchased from the company Life Technologies. Glycerol (ultrapure), MES and BSA were purchased from Sigma ^R. TCEP was purchased from Pierce, DMSO from Aldrich ^R, and NaOH from Anachemia ^R.

Testpuffer: 50 mM Tris-HCl, pH-Wert 7,5, 30% (Gew./Vol.) Glycerin, 2% (Gew./Vol.) CHAPS, 1 mg/ml BSA, 1 mM TCEP (TCEP wurde unmittelbar vor der Verwendung aus einer 1 M Vorratslösung in Wasser zugegeben).Assay buffer: 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 30% (w / v) glycerol, 2% (w / v) CHAPS, 1 mg / ml BSA, 1 mM TCEP (TCEP was used immediately before use from a 1 M stock solution added in water).

Substrat: DDIVPC-SMSYTW, Endkonzentration 25 μM (aus einer 2 mM Vorratslösung in DMSO, die zur Vermeidung von Oxidation bei –20°C aufbewahrt wurde).substrate: DDIVPC-SMSYTW, final concentration 25 μM (from a 2 mM stock solution in DMSO stored at -20 ° C to avoid oxidation).

Tracer: Reduziertes, monojodiertes Substrat (Biotip-DDIVPC-SMS[¹²⁵l-Y]TW) (≈1 nM Endkonzentration).Tracer: Reduced, monoiodinated substrate (Biotip DDIVPC-SMS [ ¹²⁵ IY] TW) (≈1 nM final concentration).

HCV-NS3 Protease Typ 1 b, Endkonzentration 25 nM (aus einer Vorratslösung in 50 mM Natriumphosphat, pH-Wert 7,5, 10% Glycerin, 300 mM NaCl, 5 mM DTT, 0,01% NP-40).HCV NS3 Protease Type 1 b, final concentration 25 nM (from a stock solution in 50 mM sodium phosphate, pH 7.5, 10% glycerol, 300 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.01% NP-40).

B. VerfahrenB. Method

Der Test wurde an einer Polypropylenplatte mit 96 Vertiefungen durchgeführt. Die einzelnen Vertiefungen enthielten folgende Bestandteile:
20 μl Substrat/Tracer im Testpuffer;
10 μl ± Inhibitor in 20% DMSO/Testpuffer;
10 μl NS3-Protease 1 b.The test was performed on a 96-well polypropylene plate. The individual wells contained the following components:
20 μl of substrate / tracer in the assay buffer;
10 μl ± inhibitor in 20% DMSO / assay buffer;
10 μl of NS3 protease 1 b.

Leerwert (kein Inhibitor und kein Enzym) und Kontrolle (kein Inhibitor) wurden ebenfalls auf der gleichen Testplatte zubereitet.blank (no inhibitor and no enzyme) and control (no inhibitor) also prepared on the same test plate.

Die enzymatische Reaktion wurde durch Zugabe der Enzymlösung eingeleitet und das Testgemisch wurde 60 Minuten bei 23°C unter mäßigem Bewegen inkubiert. 20 μl 0,025 N NaOH wurden zum Stoppen der enzymatischen Reaktion zugesetzt.The enzymatic reaction was initiated by addition of the enzyme solution and the test mixture was incubated at 23 ° C for 60 minutes with gentle agitation. 20 μl 0.025 N NaOH was added to stop the enzymatic reaction.

20 μl mit Avidin beschichtete Agaroseperlen (bezogen von der Fa. Pierce^R) wurden in einer Millipore^R-MADP-N65-Filtrationsplatte zugegeben. Das gestoppte Testgemisch wurde auf die Filtrationsplatte übertragen und unter mäßigem Bewegen bei 23°C 60 Minuten inkubiert.20 μl of avidin-coated agarose beads (supplied by Pierce ^R ) were added in a Millipore ^R MADP-N65 filtration plate. The stopped test mixture was transferred to the filtration plate and incubated with gentle agitation at 23 ° C for 60 minutes.

Die Platten wurden unter Verwendung einer Millipore^R-MuItiScreen-Vacuum-Manifold-Filtrationsvorrichtung filtriert. 40 μl des Filtrats wurden auf eine undurchsichtige Platte mit 96 Vertiefungen mit einem Gehalt an 60 μl Szintillationsflüssigkeit pro Vertiefung übertragen.The plates were filtered using a Millipore ^R MilliScreen Vacuum-Manifold filtration device. 40 μl of the filtrate was transferred to a 96-well opaque plate containing 60 μl of scintillation fluid per well.

Die Filtrate wurden mit einem Packard^R-TopCount-Gerät unter Anwendung eines ¹²⁵l-Flüssigverfahrens 1 Minute ausgezählt.Filtrates were counted 1 minute using a Packard ^R TopCount device using a ¹²⁵ L liquid method.

Die prozentuale Hemmung wurde gemäß der folgenden Gleichung berechnet: 100-[(Zählereignisseinh-ZählereignisseLeerwert)/ (ZählereignisseKontrolle ZählereignisseLeerwert)×100] Percent inhibition was calculated according to the following equation: 100 - [(count event count events blank value) / (count events control counts blank ) × 100]

Eine nicht-lineare Kurvenanpassung mit dem Hill-Modell wurde auf die Hemmungs-Konzentrations-Daten angewandt. Die 50% effektive Konzentration (IC₅₀) wurde unter Verwendung der SAS-Software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc., Can, N.C.) berechnet.A nonlinear curve fit with the Hill model was applied to the inhibition concentration data. The 50% effective concentration (IC ₅₀ ) was calculated using the SAS software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc., Can, NC).

Beispiel 50Example 50

Spezifitätstestsspecificity tests

Die Spezifität der Verbindungen wurden gegen eine Vielzahl von Serinproteasen bestimmt: humane Leukozyten-elastase, Schweinepankreas-elastase und Rinderpankreas-α-chymotrypsin, und eine Cystein-Protease: humanes Lebercathepsin B. In sämtlichen Fällen wurde ein Verfahren mit einer Platte mit 96 Vertiefungen unter Verwendung eines chromogenen Substrats, das für jedes Enzym spezifisch war; herangezogen. Die einzelnen Tests umfassten eine 1-stündige Vorinkubation von Enzym-Inhibitor bei Raumtemperatur unter anschließender Zugabe von Substrat und anschließender Hydrolyse zu einer ≈30%igen Umwandlung, gemessen an einem UV-Thermomax^R-Mikroplattenlesegerät oder einem Fluoreszenz- Perkin-ElmerR-LS50B-Plattenlesegeräts. Die Substrat-Konzentrationen wurden im Vergleich zum K_M-Wert möglichst gering gehalten, um eine Substratkonkurrenz zu verringern. Die Konzentrationen der Verbindungen variierten von 300 bis 0,06 μM, je nach ihrer Wirkungsstärke.The specificity of the compounds was determined against a variety of serine proteases: human leukocyte elastase, porcine pancreatic elastase and bovine pancreatic α-chymotrypsin, and a cysteine protease: human liver cathepsin B. In all cases, a 96-well plate method was used Using a chromogenic substrate specific for each enzyme; used. Each test included a preincubation of enzyme inhibitor for 1 h at room temperature followed by addition of substrate and subsequent hydrolysis to a ≈30% conversion as measured on a UV Thermomax ^R microplate reader or a fluorescence Perkin-ElmerR-LS50B. plate reader. Substrate concentrations were minimized compared to the K _M value to reduce substrate competition. The concentrations of the compounds varied from 300 to 0.06 μM, depending on their potency.

Für die einzelnen Tests wurden die folgenden Endkonzentrationen herangezogen:
50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 0,5 M Na₂SO₄, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 3% DMSO, 0,01% Tween-20 für:
[100 μM Succ-AAPF-pNA und 250 pM α-Chymotrypsin), [133 μM Succ-AAApNA und 8 nM Schweine-elastase], [133 μM Succ-AAV-pNA und 8 nM Leukozytenelastase]; oder
[100 mM NaHPO₄, pH-Wert 6, 1 mM EDTA, 3% DMSO, 1 mM TCEP, 0,01% Tween-20, 4 μM Z-FR-AMC (7-Amino-4-methylcumarin) und 0,5 nM Cathepsin B (das Vorratsenzym wurde in Puffer mit einem Gehalt an 20 mM TCEP vor der Verwendung aktiviert)].The following final concentrations were used for the individual tests:
50 mM Tris-HCl, pH 8, 0.5 M Na ₂ SO ₄ , 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 3% DMSO, 0.01% Tween-20 for:
[100 μM succ-AAPF-pNA and 250 μM α-chymotrypsin], [133 μM Succ-AAApNA and 8 nM porcine elastase], [133 μM Succ-AAV-pNA and 8 nM leukocyte elastase]; or
[100 mM NaHPO ₄ , pH 6, 1 mM EDTA, 3% DMSO, 1 mM TCEP, 0.01% Tween-20, 4 μM Z-FR-AMC (7-amino-4-methylcoumarin) and 0, 5 nM cathepsin B (the stock enzyme was activated in buffer containing 20 mM TCEP before use)].

Nachstehend ist ein repräsentatives Beispiel für Schweinepankreas-elastase zusammengefasst:below is a representative example for Pig pancreatic elastase summarized:

In einer Polystyrolplatte mit 96 flachbödigen Vertiefungen (Cellwells, Corning) wurden unter Verwendung eines Biomek-Flüssigkeitshandhabungsgeräts (Beckman) folgende Bestandteile vorgelegt:
40 μl Testpuffer (50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 1 M Na₂SO₄, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA); 20 μl Enzymlösung (50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 40 nM Schweinepankreas-elastase); und
20 μl Inhibitorlösung (50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 1,5 mM-0,3 μM Inhibitor, 15 % (Vol./Vol.) DMSO).In a 96 flat bottomed polystyrene plate (Cellwells, Corning), the following ingredients were prepared using a Biomek liquid handling instrument (Beckman):
40 μl assay buffer (50 mM Tris-HCl, pH 8, 1 M Na ₂ SO ₄ , 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA); 20 μl of enzyme solution (50 mM Tris-HCl, pH 8, 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.02% Tween-20, 40 nM porcine pancreatic elastase); and
20 μl of inhibitor solution (50 mM Tris-HCl, pH 8, 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.02% Tween-20, 1.5 mM-0.3 μM inhibitor, 15% (v / v)). Vol.) DMSO).

Nach einer 60-minütigen Vorinkubation bei Raumtemperatur wurden 20 μl Substratlösung (50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 0,5 M Na₂SO₄, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 665 μM Succ-AAA-pNA) in jede Vertiefung gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde ferner 60 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert, wonach die Absorption am UV-Thermomax^R-Plattenlesegerät abgelesen wurde. Reihen von Vertiefungen wurden für Kontrollen (ohne Inhibitor) und für Leerwerte (ohne Inhibitor und ohne Enzym) vorgesehen.After a 60 min preincubation at room temperature, 20 μl of substrate solution (50 mM Tris-HCl, pH 8, 0.5 M Na ₂ SO ₄ , 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 665 μM Succ-AAA-pNA ) into each well. The reaction mixture was further incubated for 60 minutes at room temperature, after which the absorbance was read on the UV Thermomax ^R plate reader. Rows of wells were provided for controls (no inhibitor) and blank (no inhibitor and no enzyme).

Zweifach Reihenverdünnungen der Inhibitorlösung wurden auf einer getrennten Platte mit dem Flüssigkeitshandhabungsgerät unter Verwendung von 50 mM Tris-HCl, pH-Wert 8, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 0,02% Tween-20, 15% (Vol./Vol.) DMSO, vorgenommen. Sämtliche übrigen Spezifitätstests wurden auf ähnliche Weise durchgeführt.dual Serial dilutions the inhibitor solution were placed on a separate plate with the liquid handling device Use of 50 mM Tris-HCl, pH 8, 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.02% Tween-20, 15% (v / v) DMSO, made. All other specificity tests were on similar Manner performed.

Die prozentuale Hemmung wurde unter Anwendung, der folgenden Formel berechnet: [1-((UVinh-UVLeerwert)/(UVKontrolle-UVLeerwert))] × 100 Percent inhibition was calculated using the following formula: [1 - ((UV inh -UV blank ) / (UV control -UV blank )) × 100

Eine nicht-lineare Kurvenanpassung mit dem Hill-Modell wurde auf die Hemmungs-Konzentrations-Daten angewandt. Die 50 % effektive Konzentration (IC₅₀) wurde unter Verwendung der SAS-Software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc., Cary, N.C.) berechnet.A nonlinear curve fit with the Hill model was applied to the inhibition concentration data. The 50% effective concentration (IC ₅₀ ) was calculated using SAS software (Statistical Software System, SAS Institute, Inc., Cary, NC).

Beispiel 51Example 51

Test auf NS3-Protease auf ZellbasisTest for NS3 protease on a cell basis

Dieser Test wurde mit Huh-7-Zellen durchgeführt, einer humanen Zelllinie, die sich von einem Hepatom ableitete und mit 2 DNA-Konstrukten transfiziert war: Ein Konstrukt (mit der Bezeichnung NS3), das einen Teil des HCV-Nichtstruktur-Polyproteins in Fusion mit dem tTA-Protein über eine NS5A-NS5B-Spaltungsstelle in der folgenden Reihenfolge exprimierte: NS3-NS4A-NS4B-NS5A(NS5B)tTA, wobei (NSSB) die ersten 6 Aminosäuren von NSSB wiedergibt. Dieses Polyprotein wird unter der Kontrolle des CMV-Promotors exprimiert. Das andere Konstrukt (mit der Bezeichnung SEAP), das das Reporterprotein exprimiert, sezernierte alkalische Phosphatase (SEAP) unter der Regulation des tTA-reaktiven Promotors.This Test was performed on Huh-7 cells, a human cell line, which was derived from a hepatoma and transfected with 2 DNA constructs was a construct (called NS3) that was part of the HCV non-structural polyprotein in fusion with the tTA protein via an NS5A NS5B cleavage site in expressed in the following order: NS3-NS4A-NS4B-NS5A (NS5B) tTA, where (NSSB) is the first 6 amino acids from NSSB. This polyprotein is under control of the CMV promoter. The other construct (named SEAP) expressing the reporter protein secreted alkaline phosphatase (SEAP) under the regulation of the tTA-reactive promoter.

Das erste Konstrukt führt zur Expression eines Polyproteins, aus dem die verschiedenen reifen Proteine durch Spaltung durch die NS3-Protease freigesetzt werden. Es wird angenommen, dass die reifen viralen Proteine einen Komplex an der Membran des endoplasmatischen Retikulums bilden. tTA ist ein Fusionsprotein, beschrieben von Gossen und Bujard (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Bd. 89 (1992), S. 5547–5551), das eine DNA-Bindungsdomäne und einen transkriptionalen Aktivator enthält. Die Freisetzung des tTA-Proteins erfordert eine NS3-abhängige Spaltung an der NS5A-NS5B-Spaltungsstelle zwischen NS5A und dem Protein selbst. Diese letztgenannte Spaltung ermöglicht es dem tTA zum Nucleus zu wandern und das SEAP-Gen zu transaktivieren. Daher führt eine Verringerung der proteolytischen NS3-Aktivität zu einer Begrenzung von tTA auf das Zytoplasma und zu einer gleichzeitigen Verringerung der SEAP-Aktivität.The first construct leads for the expression of a polyprotein from which the various mature Proteins are released by cleavage by the NS3 protease. It is believed that the mature viral proteins form a complex at the membrane of the endoplasmic reticulum. tTA is a fusion protein described by Gossen and Bujard (Proc Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 89 (1992), pp. 5547-5551), which has a DNA-binding domain and a DNA binding domain contains transcriptional activator. Release of the tTA protein requires NS3-dependent cleavage at the NS5A NS5B cleavage site between NS5A and the protein itself. This last split allows to migrate the tTA to the nucleus and to transactivate the SEAP gene. Therefore leads a decrease in proteolytic NS3 activity to one Limitation of tTA to the cytoplasm and to a simultaneous Reduction of SEAP activity.

Zur Kontrolle von zellulären Aktivitäten, die sich von der Hemmung von NS3-Protease unterscheiden und die auf die Verbindung zurückzuführen sind, wurde eine parallele Cotransfektion mit einem Konstrukt, das tTA allein exprimiert, und dem gleichen Reporterkonstrukt so durchgeführt, dass die SEAP-Aktivität von der NS3-Protease unabhängig ist.to Control of cellular Activities, different from the inhibition of NS3 protease and that are due to the connection, became a parallel Cotransfection with a construct expressing tTA alone, and the same reporter construct so that the SEAP activity is independent of the NS3 protease.

Testverfahrentest method

Huh-7-Zellen, die in CHO-SFMII (Life Technologies) + 10% FCS (fötales Kälberserum) gezüchtet worden waren, wurden mit den beiden DNA-Konstrukten in folgenden Verhältnissen cotransfiziert:
7 μg NS3 + 500 ng SEAP + 800 μl FuGENE (Boehringer Mannheim) pro 4 × 106 Huh-7-Zellen. Nach 5 Stunden bei 37°C wurden die Zellen gewaschen, trypsiniert und auf Platten mit 96 Vertiefungen, die verschiedene Konzentrationen der zu testenden Verbindungen enthielten, ausgestrichen (80 000 Zellen/Vertiefung). Nach einer 24-stündigen Inkubationsdauer wurde die SEAP-Aktivität im Medium mit dem Phospha-Light Kit (Tropix) gemessen.Huh 7 cells cultured in CHO-SFMII (Life Technologies) + 10% FCS (fetal calf serum) were cotransfected with the two DNA constructs in the following ratios:
7 μg NS3 + 500 ng SEAP + 800 μl FuGENE (Boehringer Mannheim) per 4 × 106 Huh-7 cells. After 5 hours at 37 ° C, the cells were washed, trypsinized and plated on 96-well plates containing various concentrations of the compounds to be tested (80,000 cells / well). After a 24-hour incubation period, the SEAP activity in the medium was measured with the Phospha-Light kit (Tropix).

Die Analyse der prozentualen Hemmung der SEAP-Aktivität in Bezug auf die Konzentration der Verbindung wurde mit der SAS-Software zur Ermittlung des EC₅₀-Werts durchgeführt.The analysis of the percentage inhibition of SEAP activity with respect to the concentration of Ver binding was performed with the SAS software to determine the EC ₅₀ value.

Tabellen bezüglich der VerbindungenTables concerning the links

In den folgenden Tabellen sind repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen aufgeführt.In The following tables are representative compounds of the invention listed.

Sämtliche in den Tabellen 1 bis 9 aufgeführten Verbindungen erwiesen sich bei dem in Beispiel 48 erläuterten enzymatischen Test als aktiv. Eine mit einem Stern (*) versehene Zahl gibt die enzymatische Aktivität an, die mit dem in Beispiel 49 aufgeführten radiometrischen Test bei IC₅₀-Werten unter 50 μm erhalten wurden. Bei diesen enzymatischen Tests wurde die folgende Abstufung verwendet: A ≥ 1 μM; 1 μM > B > 0,1 μM; und C ≤0,1 μM.All of the compounds listed in Tables 1 to 9 were found to be active in the enzymatic assay illustrated in Example 48. An asterisked (*) number indicates the enzymatic activity obtained with the radiometric assay listed in Example 49, with IC ₅₀ values below 50 μm. For these enzymatic assays, the following grading was used: A ≥ 1 μM; 1 μM>B> 0.1 μM; and C ≤ 0.1 μM.

Verschiedene Verbindungen wurden in den in Beispiel 50 beschriebenen Spezifitätstests getestet. Es wurde festgestellt, dass sie für die NS3-Protease spezifisch sind. Im allgemeinen wurden bei den verschiedenen Spezifitätstests folgende Ergebnisse erzielt: HLE > 300 μM; PPE > 300 μM; α-Chym. > 300 μM; Cat. B > 300 μM, was darauf hinweist, dass diese Verbindungen gegenüber der HCV-NS3-Protease hochspezifisch sind. Es ist nicht zu erwarten, dass sie zu ernsthaften Nebenwirkungen führen. Ferner wurden darunter bestimmte Verbindungen in dem in Beispiel 51 beschriebenen Test auf Zellbasis getestet. Es wurde festgestellt, dass sie aktiv sind, wobei der EC₅₀-Wert unter 10 μM liegt, was stark darauf hinweist, dass diese Verbindungen die Zellmembran durchqueren können. Insbesondere die Verbindungen der Tabellen 7, 8 und 9 wurden im Zelltest getestet. Die Ergebnisse sind in der letzten Spalte aufgeführt. Bei diesem Zelltest wurde die folgende Codierung herangezogen: A > 1 μM; B ≤ 1 μM.Various compounds were tested in the specificity tests described in Example 50. They were found to be specific for the NS3 protease. In general, the following results were obtained in the various specificity tests: HLE> 300 μM; PPE> 300 μM; α-Chym. > 300 μM; Cat. B> 300 μM, indicating that these compounds are highly specific to the HCV NS3 protease. It is not expected to cause serious side effects. Further below, certain compounds were tested in the cell-based assay described in Example 51. They were found to be active, with the EC ₅₀ value below 10 μM, strongly suggesting that these compounds can cross the cell membrane. In particular, the compounds of Tables 7, 8 and 9 were tested in the cell test. The results are listed in the last column. The following coding was used in this cell test: A> 1 μM; B ≤ 1 μM.

Innerhalb der nachstehenden Tabellen wurden die folgenden Abkürzungen verwendet:
MS: Elektrospray-Massenspektroskopiedaten; m/z MH⁺, ausgenommen bei Bezeichnung mit einem Stern * = m/z MH^–; Ac: Acetyl; Bn: Benzyl; Boc: tert.-Butyloxycarbonyl; Ph: Phenyl; Pr: Propyl. Tabelle 1

Tabelle 2

Tabelle 3

Tabelle 4

Tabelle 5

Tabelle 6

Tabelle 7

Tabelle 8

Tabelle 9

Within the tables below, the following abbreviations have been used:
MS: electrospray mass spectrometry data; m / z MH ⁺ , except for designation with an asterisk * = m / z MH ^- ; Ac: acetyl; Bn: benzyl; Boc: tert-butyloxycarbonyl; Ph: phenyl; Pr: Propyl. Table 1

Table 2

Table 3

Table 4

Table 5

Table 6

Table 7

Table 8

Table 9

Claims (81)

Verbindung der Formel (I)

worin W CH oder N ist, R²¹ H, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Halogenalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, Hydroxy oder N(R²³)₂ ist, worin R²³ jeweils unabhängig H, C_1–6-Alkyl oder C₃_₆-Cycloalkyl ist; R²² H, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Halogenalkyl, C_1–6-Thioalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, C_2–7-Alkoxyalkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C₆- oder ₁₀-Aryl oder Het ist, worin Het ein 5-, 6- oder 7-gliedriger gesättigter oder ungesättigter Neterocyclus ist, der 1 bis 4 Neteroatome ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel enthält; wobei das Cycloalkyl, Aryl oder Het mit R²⁴ substituiert sind, worin R²⁴ H, Halogen, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C_1–6-Alkoxy, C_3–6-Cycloalkoxy, NO₂, N(R²⁵)₂, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-NH-R²⁵ ist, worin jedes R²⁵ unabhängig: H, C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist; oder R²⁴ NH-C(O)-OR²⁶ ist, worin R²⁶ C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist; R³ Hydroxy, NH₂ oder eine Gruppe der Formel -NH-R³¹ ist, worin R³¹ C₆ oder ₁₀-Aryl , Heteroaryl, -C(O)-R³², -C(O)-NHR³² oder -C(O)-OR³² ist, worin R³² C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist, D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 5 bis 10 Atomen ist, die gegebenenfalls 1 bis 3 Heteroatome enthält, die unabhängig ausgewählt sind aus: O, S oder N-R⁴¹, worin R⁴¹ H, C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl oder -C(O)-R⁴² ist, worin R⁴² C_1–6-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl oder C₆ oder ₁₀-Aryl ist; R⁴ H oder von 1 bis 3 Substituenten an irgendeinem Kohlenstoffatom der Kette D ist, wobei der Substituent unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: C_1–6-Alkyl, C_1–6-Halogenalkyl, C_1–6-Alkoxy, Hydroxy, Halogen, Amino, Oxo, Thio oder C1–6-Thioalkyl, und A ein Amid der Formel -C(O)-NH-R⁵ ist, worin R⁵ ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus: C_1–8-Alkyl, C_3–6-Cycloalkyl, C₆ oder ₁₀-Aryl oder C_7–16-Ar-alkyl; oder A eine Carbonsäure ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbarer Ester davon.Compound of the formula (I)

wherein W is CH or N, R ^{21 is} H, halo, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _3-6 cycloalkoxy, hydroxy or N (R ²³⁾ _2, wherein R ²³ is each independently H, C _1-6 alkyl or C ₃ _ ₆ cycloalkyl; R ^{22 is} H, halogen, C _1-6 -alkyl, C _3-6 -cycloalkyl, C _1-6 -haloalkyl, C _1-6 -thioalkyl, C _1-6 -alkoxy, C _3-6 -cycloalkoxy, C ₂ Is _-7- alkoxyalkyl, C _3-6 -cycloalkyl, C ₆ - or ₁₀ -aryl or Het, wherein Het is a 5-, 6- or 7-membered saturated or unsaturated heterocycle containing 1 to 4 heteroatoms selected from nitrogen, Contains oxygen and sulfur; wherein the cycloalkyl, aryl or het is substituted with R ²⁴ , wherein R ^{24 is} H, halo, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _3-6 cycloalkoxy, NO ₂ , N (R ²⁵ ) ₂ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -NH-R ²⁵ , wherein each R ^{25 is} independently H, C _1-6 alkyl or C _3-6 Cycloalkyl; or R ^{24 is} NH-C (O) -OR ²⁶ , wherein R ^{26 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl; R ^{3 is} hydroxy, NH ₂ or a group of the formula -NH-R ³¹ , wherein R ^{31 is} C ₆ or ₁₀ -aryl, heteroaryl, -C (O) -R ³² , -C (O) -NHR ³² or -C (O) -OR ³² , wherein R ^{32 is} C _1-6 alkyl or C _3-6 cycloalkyl, D is a saturated or unsaturated alkylene chain of 5 to 10 atoms, optionally containing 1 to 3 hetero independently selected from O, S or NR ⁴¹ , wherein R ^{41 is} H, C _1-6 alkyl, C _3-6 cycloalkyl or -C (O) -R ⁴² , wherein R ^{42 is} C _{1 -6-} alkyl, C _3-6 -cycloalkyl or C ₆ or ₁₀ -aryl; R ^{4 is} H or from 1 to 3 substituents on any carbon atom of chain D, wherein the substituent is independently selected from the group consisting of: C _1-6 alkyl, C _1-6 haloalkyl, C _1-6 alkoxy, Hydroxy, halogen, amino, oxo, thio or C1-6-thioalkyl, and A is an amide of the formula -C (O) -NH-R ⁵ , wherein R ^{5 is} selected from the group consisting of: C _1-8 - Alkyl, C _3-6 cycloalkyl, C ₆ or ₁₀ aryl or C _7-16 aralkyl; or A is a carboxylic acid, or a pharmaceutically acceptable salt or a pharmaceutically acceptable ester thereof. Verbindung der Formel I nach Anspruch 1, worin das 1-Kohlenstoffzentrum die (R)-Konfiguration aufweist und D syn zum Amid gebunden ist oder syn zu A gebunden ist, wie durch die Strukturen (i) und (ii) dargestellt:

A compound of the formula I as claimed in claim 1, wherein the 1-carbon center has the (R) -configuration and D syn is attached to the amide or is linked syn to A as represented by the structures (i) and (ii):

Verbindung der Formel I nach Anspruch 1 oder 2, worin D syn zu A gebunden ist, wie durch Formel (ii) dargestellt.A compound of the formula I as claimed in claim 1 or 2, in which D syn is bound to A as represented by formula (ii). Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 3, worin W N ist; R²³ H, C_1–6-Alkyl, C_1–6-Alkoxy, Hydroxy, Chlor oder N(R²³)₂ ist, worin R²³ H oder C_1–6-Alkyl ist; R²² H, C_1–6-Thioalkyl, C_1–6-Alkoxy, Phenyl oder Het ist, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

worin R²⁴ H, C_1–6-Alkyl, NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵, NH-C(O)-NH-R²⁵, worin jedes R²⁵ unabhängig H, C_1–6-Alkyl oder C₃_₆-Cycloalkyl ist; oder NH-C(O)-OR²⁶, worin R²⁶ C_1–6-Alkyl ist, ist.A compound of formula I according to any one of claims 1 to 3 wherein W is N; R ^{23 is} H, C _1-6 alkyl, C _1-6 alkoxy, hydroxy, chloro or N (R ²³ ) ₂ , wherein R ^{23 is} H or C _1-6 alkyl; R ^{22 is} H, C _1-6 thioalkyl, C _1-6 alkoxy, phenyl or het selected from the group consisting of:

wherein R ^{24 is} H, C _1-6 alkyl, NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ , NH-C (O) -NH-R ²⁵ , wherein each R ^{25 is} independently H, C _1-6 alkyl or C ₃ _ ₆ cycloalkyl; or NH-C (O) -OR ²⁶ , wherein R ^{26 is} C _1-6 alkyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 4, worin R²¹ H oder C1–6-Alkoxy ist.A compound of formula I according to claim 4 wherein R ^{21 is} H or C 1-6 alkoxy. Verbindung der Formel I nach Anspruch 4, worin R²² C_1–4-Alkoxy, Phenyl oder Het ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

worin R²⁴ H, C1–6-Alkyl, NH-R²⁵ oder NH-C(O)-R²⁵; worin R²⁵ jeweils C_1–6-Alkyl oder C3_₆-Cycloalkyl ist, oder NH-C(O)-OR²⁶, worin R²⁶ wie in Anspruch 4 definiert ist, ist.A compound of the formula I according to claim 4, wherein R ^{22 is} C _1-4 alkoxy, phenyl or het selected from the group consisting of:

wherein R ^{24 is} H, C 1-6 alkyl, NH-R ²⁵ or NH-C (O) -R ²⁵ ; wherein R ²⁵ are each C _1-6 alkyl or C3_ ₆ cycloalkyl, or NH-C (O) -OR, where R ²⁶ is as defined in claim ²⁶ is 4. Verbindung der Formel nach Anspruch 6, worin R²¹ Methoxy ist.A compound of the formula according to claim 6, wherein R ^{21 is} methoxy. Verbindung der Formel nach Anspruch 7, worin R²² Ethoxy oder Het ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

worin R^24a NH-R²⁵ oder NH-C(O)-R²⁵ ist, worin R²⁵ C_1–6-Alkyl ist; oder R^24a NH-C(O)-OR²⁶ ist, worin R²⁶ C_1–6-Alkyl ist, und R^24b H oder C_1–6-Alkyl ist, ist.A compound of the formula of claim 7, wherein R ^{22 is} ethoxy or Het is selected from the group consisting of:

wherein R ^{24a is} NH-R ²⁵ or NH-C (O) -R ²⁵ wherein R ^{25 is} C _1-6 alkyl; or R ^{24a is} NH-C (O) -OR ²⁶ wherein R ^{26 is} C _1-6 alkyl and R ^{24b is} H or C _1-6 alkyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 1, worin R³ ein Amid der Formel NH-C(O)R³² oder ein Harnstoff der Formel NH-C(O)-NH-R³² oder ein Carbamat der Formel NH-C(O)-OR³² ist, worin R³² C₁_₆-Alkyl oder C₃_₆-Cycloalkyl ist.A compound of the formula I as claimed in claim 1, in which R ^{3 is} an amide of the formula NH-C (O) R ³² or a urea of the formula NH-C (O) -NH-R ³² or a carbamate of the formula NH-C (O) -OR ^32, wherein R ₁ _ ₆ alkyl or C ³² C ₃ _ ₆ cycloalkyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 9, worin R³ ein Harnstoff oder ein Carbamat ist, worin R³² C_1–6-Alkyl oder C₄_₆-Cycloalkyl ist.Compound of the formula I according to claim 9, wherein R ³ is a urea or a carbamate, wherein R ³² is C _1-6 alkyl or C ₄ _ ₆ cycloalkyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 10, worin R³ ein Carbamat ist und R³² tert.-Butyl, Cyclobutyl oder Cyclopentyl ist.A compound of the formula I according to claim 10, wherein R ^{3 is} a carbamate and R ^{32 is} tert-butyl, cyclobutyl or cyclopentyl. Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 11, worin D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 6 bis 8 Atomen ist, die gegebenenfalls 1 oder 2 Heteroatome enthält, die unabhängig ausgewählt sind aus: O, S oder N-R⁴¹, worin R⁴¹ H, C_1–6-Alkyl oder C_2–7-Acyl ist.A compound of the formula I according to any one of claims 1 to 11, wherein D is a saturated or unsaturated alkylene chain of 6 to 8 atoms optionally containing 1 or 2 heteroatoms independently selected from: O, S or NR ⁴¹ , wherein R ⁴¹ H is C _1-6 alkyl or C _2-7 acyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 12, worin D gegebenenfalls ein Heteroatom enthält, das ausgewählt ist aus NH und N-C_2–7-Acyl.A compound of formula I according to claim 12 wherein D optionally contains a heteroatom selected from NH and NC _2-7 acyl. Verbindung nach Anspruch 13, worin das Heteroatom ausgewählt ist aus NH und N(Ac).A compound according to claim 13, wherein the heteroatom selected is from NH and N (Ac). Verbindung nach Anspruch 13, worin die Kette D 7 Atome enthält.A compound according to claim 13, wherein the chain D 7 Contains atoms. Verbindung nach Anspruch 15, worin das Heteroatom an Position 10 der Kette D ist.A compound according to claim 15, wherein the heteroatom at position 10 of the chain D is. Verbindung nach Anspruch 13, worin die Kette D gesättigt ist.A compound according to claim 13, wherein the chain D is saturated. Verbindung der Formel I nach Anspruch 12, worin D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 6 bis 8 Atomen ist, die gegebenenfalls ein Heteroatom enthält, das ausgewählt ist aus O oder S.A compound of the formula I according to claim 12, wherein D a saturated or unsaturated Alkyl chain with 6 to 8 atoms, which is optionally a heteroatom contains that selected is from O or S. Verbindung nach Anspruch 18, worin die Kette D 7 Atome enthält.A compound according to claim 18, wherein the chain is D 7 Contains atoms. Verbindung nach Anspruch 19, worin das Heteroatom an Position 9 der Kette D ist.A compound according to claim 19, wherein the heteroatom at position 9 of the chain D. Verbindung nach Anspruch 20, worin die Kette D an Position 8 mit R⁴ substituiert ist, worin R⁴ H oder C_1–6-Alkyl ist.The compound of claim 20, wherein the chain D at position 8 is substituted with R ⁴ wherein R ^{4 is} H or C _1-6 alkyl. Verbindung nach Anspruch 21, worin R⁴ H oder Methyl ist.A compound according to claim 21, wherein R ^{4 is} H or methyl. Verbindung nach Anspruch 22, worin R⁴ H oder 8-(S)-Me ist.A compound according to claim 22 wherein R ^{4 is} H or 8- (S) -Me. Verbindung nach Anspruch 23, worin die Kette D gesättigt ist.A compound according to claim 23, wherein the chain D is saturated. Verbindung nach Anspruch 19, worin die Kette D an Position 11,12 eine Doppelbindung enthält.A compound according to claim 19, wherein the chain D is Position 11,12 contains a double bond. Verbindung nach Anspruch 25, worin die Doppelbindung trans ist.A compound according to claim 25, wherein the double bond trans is. Verbindung der Formel I nach Anspruch 12, worin D eine gesättigte oder ungesättigte Ganzkohlenstoff-Alkylenkette mit 6 bis 8 Atomen ist.A compound of the formula I according to claim 12, wherein D a saturated or unsaturated Wholly carbon alkylene chain having 6 to 8 atoms. Verbindung der Formel I nach Anspruch 27, worin D eine Kette mit 7 Atomen ist.A compound of the formula I according to claim 27, wherein D is a chain of 7 atoms. Verbindung der Formel I nach Anspruch 28, worin D gesättigt ist.A compound of the formula I according to claim 28, wherein D saturated is. Verbindung nach Anspruch 29, worin die Kette D mit R⁴ substituiert ist, worin R⁴ H, Oxo, Hydroxy, Alkoxy oder Alkyl ist.A compound according to claim 29, wherein the chain D is substituted with R ⁴ , wherein R ^{4 is} H, oxo, hydroxy, alkoxy or alkyl. Verbindung nach Anspruch 30, worin R⁴ H oder C_1–6-Alkyl ist.A compound according to claim 30, wherein R ^{4 is} H or C _1-6 alkyl. Verbindung nach Anspruch 31, worin R⁴ H oder Methyl ist.A compound according to claim 31, wherein R ^{4 is} H or methyl. Verbindung nach Anspruch 32, worin R⁴ H oder 10-(S)-Me ist.A compound according to claim 32 wherein R ^{4 is} H or 10- (S) -Me. Verbindung der Formel I nach Anspruch 28, worin D eine Doppelbindung enthält.A compound of the formula I according to claim 28, wherein D contains a double bond. Verbindung der Formel I nach Anspruch 34, worin die Doppelbindung an Position 13,14 der Kette D ist.A compound of the formula I according to claim 34, wherein is the double bond at position 13,14 of the chain D. Verbindung der Formel I nach Anspruch 35, worin die Doppelbindung cis ist.A compound of the formula I according to claim 35, wherein the double bond is cis. Verbindung nach Anspruch 36, worin die Kette D mit R⁴ substituiert ist, worin R⁴ H, Oxo, Hydroxy, C_1–6-Alkoxy oder C_1–6-Alkyl ist.A compound according to claim 36, wherein the chain D is substituted with R ⁴ , wherein R ^{4 is} H, oxo, hydroxy, C _1-6 -alkoxy or C _1-6 -alkyl. Verbindung nach Anspruch 37, worin R⁴ H oder C_1–6-Alkyl ist.A compound according to claim 37, wherein R ^{4 is} H or C _1-6 alkyl. Verbindung nach Anspruch 38, worin R⁴ H oder Methyl ist.A compound according to claim 38, wherein R ^{4 is} H or methyl. Verbindung nach Anspruch 39, worin R⁴ H oder 10-(S)-Me ist.A compound according to claim 39 wherein R ^{4 is} H or 10- (S) -Me. Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 40, worin A eine Carbonsäure ist.A compound of formula I according to any one of claims 1 to 40, wherein A is a carboxylic acid is. Verbindung nach Anspruch 1, worin W N ist; R³ eine Gruppe der Formel -NH-C(O)-NHR³² oder -NH-C(O)-OR³² ist, worin R³² C1–4-Alkyl oder C₄_₆-Cycloalkyl ist; D eine gesättigte oder ungesättigte Alkylenkette mit 6 bis 8 Atomen ist, die syn zu A an die Cyclopropylgruppe der Verbindung der Formel I gebunden ist, gegebenenfalls enthaltend 1 oder 2 Heteroatome, die unabhängig ausgewählt sind aus: O, S oder N-R⁴¹, worin R⁴¹ H oder C_2–7-Acyl ist; R⁴ H oder von 1 bis 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus Hydroxy oder C_1–6-Alkyl ist und A eine Carbonsäure ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbarer Ester davon.A compound according to claim 1, wherein W is N; R ³ is a group of the formula -NH-C (O) -NHR ³² or -NH-C (O) -OR ³² wherein R ³² is C 1-4 alkyl or C ₄ _ ₆ cycloalkyl; D is a saturated or unsaturated alkylene chain of 6 to 8 atoms which is syn to A bonded to the cyclopropyl group of the compound of formula I, optionally containing 1 or 2 heteroatoms independently selected from: O, S or NR ⁴¹ , wherein R ^{41 is} H or C _2-7 acyl; R ^{4 is} H or from 1 to 3 substituents independently selected from hydroxy or C _1-6 alkyl and A is a carboxylic acid, or a pharmaceutically acceptable salt or ester thereof. Verbindung der Formel I nach Anspruch 42, worin R²¹ H oder Methoxy ist; R²² C_1–6-Alkoxy oder Het ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

worin R^24a H, C_1–6-Alkyl, NH-R²⁵, NH-C(O)-R²⁵ oder NH-C(O)-NH-R²⁵ ist, worin R²⁵ H, C_1–6-Alkyl oder C₃_₆-Cycloalkyl ist; oder R^24a NH-C(O)-OR²⁶ ist, worin R²⁶ C₁_₆-Alkyl oder C₃_₆-Cycloalkyl ist; und R^24b H oder C_1–6-Alkyl ist, ist; R³ Harnstoff der Formel N-C(O)-NHR³² oder ein Carbamat der Formel N-C(O)-OR³², worin R³² C_1–6-Alkyl oder C_3–6-Cycloalkyl ist, ist; D eine Alkylenkette mit 7 Atomen ist, die gegebenenfalls eine Doppelbindung an Position 11,12 oder 13,14 enthält; wobei die Kette D gegebenenfalls ein Heteroatom enthält, das unabhängig ausgewählt ist aus: O, S, NH, N(Me) oder N(Ac), und R⁴ Hoder C_1–6-Alkyl ist.A compound of formula I according to claim 42 wherein R ^{21 is} H or methoxy; R ^{22 is} C _1-6 -alkoxy or Het is selected from the group consisting of:

wherein R ^{24a is} H, C _1-6 alkyl, NH-R ²⁵ , NH-C (O) -R ²⁵ or NH-C (O) -NH-R ²⁵ , wherein R ^{25 is} H, C _1-6 - alkyl or C ₃ _ ₆ cycloalkyl; or R ^24a is NH-C (O) -OR ²⁶ wherein R ²⁶ is C ₁ _ ₆ alkyl or C ₃ _ ₆ cycloalkyl; and R ^{24b is} H or C _1-6 alkyl; R ^{3 is} urea of the formula NC (O) -NHR ³² or a carbamate of the formula NC (O) -OR ³² , wherein R ^{32 is} C _1-6 -alkyl or C _3-6 -cycloalkyl; D is an alkylene chain of 7 atoms optionally containing a double bond at position 11, 12 or 13, 14; wherein the chain D optionally contains a heteroatom independently selected from: O, S, NH, N (Me) or N (Ac), and R ⁴ is H or C _1-6 alkyl. Verbindung der Formel I nach Anspruch 43, worin R²¹ Methoxy ist und R²² Ethoxy oder

worin R^24a NH-(C_1–4-Alkyl); NH-C(O)-(Cis-Alkyl); NH-C(O)-O-(C_1–4-Alkyl) oder NH-C(O)-NH-(C_1–4-Alkyl) ist, ist; D eine C7-Ganzkohlenstoffkette ist, die gesättigt ist oder eine cis-Doppelbindung in Position 13, 14 enthält.A compound of the formula I according to claim 43, wherein R ^{21 is} methoxy and R ^{22 is} ethoxy or

wherein R ^{24a is} NH- (C _1-4 alkyl); NH-C (O) - (Cis-alkyl); NH-C (O) -O- (C _1-4 alkyl) or NH-C (O) -NH- (C _1-4 alkyl); D is a C7 full carbon chain that is saturated or contains a cis double bond in position 13, 14. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

umfassend ein einzelnes Stereoisomer am 1-Kohlenstoffzentrum, wobei die Doppelbindung und die Stereochemie von D und R²² wie folgt definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

comprising a single stereoisomer at the 1-carbon center, wherein the double bond and the stereochemistry of D and R ²² are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

umfassend ein einzelnes Stereoisomer am 1-Kohlenstoffzentrum, wobei R³, R⁴, die Doppelbindungsposition und die Stereochemie von D, R²¹ und R²² wie folgt definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

comprising a single stereoisomer at the 1-carbon center, wherein R ³ , R ⁴ , the double bond position and the stereochemistry of D, R ²¹ and R ²² are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

umfassend ein einzelnes Stereoisomer am 1-Kohlenstoffzentrum, wobei R³, D, die Stereochemie von D, R²¹ und R²² wie folgt definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

comprising a single stereoisomer at the 1-carbon center, wherein R ³ , D, the stereochemistry of D, R ²¹ and R ²² are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, R⁴, X₉ und die 11,12-Doppelbindung folgendermaßen definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, R ⁴ , X ₉ and the 11,12-double bond are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, X₁₀, X₁₁ und X₁₂ folgendermaßen definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, X ₁₀ , X ₁₁ and X ₁₂ are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, R²¹ und R²² folgendermaßen definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, R ²¹ and R ²² are defined as follows:

Verbindung der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, R⁴, X₉, X₁₀, X₁₁, die 13,14-Doppelbindung und R²² folgendermaßen definiert sind:

Compound of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, R ⁴ , X ₉ , X ₁₀ , X ₁₁ , the 13,14-double bond and R ²² are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, die 13,14-Doppelbindung cis ist, R³² R⁴ und R²² folgendermaßen definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, the 13,14-double bond is cis, R ³² R ⁴ and R ²² are defined as follows:

Verbindung nach Anspruch 1 der Formel:

worin D syn zur Carbonsäure -COOH ist, R³², R⁴ und R²² folgendermaßen definiert sind:

A compound according to claim 1 of the formula:

wherein D syn is the carboxylic acid -COOH, R ³² , R ⁴ and R ²² are defined as follows:

Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 als Arzneimittel.A compound of formula I according to any one of claims 1 to 53 as a medicine. Verwendung einer Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 als Research-Tool zum Entwerfen von viralen Replikations-Assays.Use of a compound of formula I according to any one the claims 1 to 53 as a research tool for designing viral replication assays. Verwendung der Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Inhibierung der Replikation des Hepatitis C-Virus.Use of the compound of formula I according to any one the claims 1 to 53 for the manufacture of a medicament for inhibiting the Replication of the hepatitis C virus. Verwendung der Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Verhinderung einer Hepatitis C-Virusinfektion.Use of the compound of formula I according to any one the claims 1 to 53 for the manufacture of a medicament for the treatment or Prevention of hepatitis C virus infection. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine bezüglich Hepatitis C antiviral wirksame Menge einer Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 oder eines therapeutisch annehmbaren Salzes oder eines therapeutisch annehmbaren Esters davon in Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Trägermedium oder Hilfsmittel.A pharmaceutical composition comprising a in terms of Hepatitis C antivirally effective amount of a compound of the formula I according to any of the claims 1 to 53 or a therapeutically acceptable salt or a therapeutically acceptable ester thereof in admixture with a pharmaceutical acceptable carrier medium or aids. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 58, ferner umfassend einen zusätzlichen Immunmodulator.A pharmaceutical composition according to claim 58, further comprising an additional Immunomodulator. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 59, worin der zusätzliche Immunmodulator ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus α-, β- und δ-Interferonen.Pharmaceutical composition according to claim 59, wherein the additional Immunomodulator selected is from the group consisting of α, β and δ interferons. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 58, ferner umfassend ein antivirales Mittel.A pharmaceutical composition according to claim 58, further comprising an antiviral agent. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 61, worin das antivirale Mittel ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Ribavirin und Amantadin.A pharmaceutical composition according to claim 61, wherein the antiviral agent is selected from the group consisting from ribavirin and amantadine. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 58, ferner umfassend einen anderen Inhibitor von HCV-Protease.The pharmaceutical composition of claim 58, further comprising another inhibitor of HCV protease. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 58, ferner umfassend einen Inhibitor von anderen Targets im HCV-Lebenszyklus.A pharmaceutical composition according to claim 58, further comprising an inhibitor of other targets in the HCV life cycle. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 64, worin der Inhibitor von anderen Targets im HCV-Lebenszyklus ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Helicase, Polymerase und Metalloprotease.A pharmaceutical composition according to claim 64, wherein the inhibitor is selected from other targets in the HCV life cycle from the group consisting of helicase, polymerase and metalloprotease. Verwendung einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach irgendeinem der Ansprüche 58 bis 65 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Verhinderung einer Hepatitis C-Virusinfektion in einem Säuger.Use of a pharmaceutical composition according to any of the claims 58 to 65 for the manufacture of a medicament for the treatment or Prevention of hepatitis C virus infection in a mammal. Verbindung mit der folgenden Formel (A):

worin X PG oder R² ist; jedes PG unabhängig eine Schutzgruppe ist; R² eine Gruppe der Formel

ist, worin R²¹, R²² und W wie in Anspruch 1 definiert sind; A' eine geschützte Carbonsäure ist; und n 2 ist.Compound of the following formula (A):

wherein X is PG or R ² ; each PG is independently a protecting group; R ^{2 is} a group of the formula

wherein R ²¹ , R ²² and W are as defined in claim 1; A 'is a protected carboxylic acid; and n is 2. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (A) nach Anspruch 67, wobei das Verfahren umfasst das Umsetzen einer Verbindung der Formel (B) mit einer Verbindung der Formel (C):

worin PG, X, A' und n wie in Anspruch 67 definiert sind.A process for the preparation of a compound of formula (A) according to claim 67, which process comprises reacting a compound of formula (B) with a compound of formula (C):

wherein PG, X, A 'and n are as defined in claim 67. Verbindung mit der folgenden Formel (D):

worin X PG or R² ist; PG eine Schutzgruppe ist; R² wie in Anspruch 67 definiert ist; A' eine geschützte Carbonsäure ist; und n 2 ist.Compound with the following formula (D):

wherein X is PG or R ² ; PG is a protecting group; R ^{2 is} as defined in claim 67; A 'is a protected carboxylic acid; and n is 2. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (D) nach Anspruch 69, wobei das Verfahren umfasst das Abspalten der Schutzgruppe PG am Pyrrolidinring in der Verbindung der Formel (A):

worin X PG oder R² ist; jedes PG unabhängig eine Schutzgruppe ist; R², A' und n wie in Anspruch 69 definiert sind.A process for the preparation of a compound of formula (D) according to claim 69, which process comprises cleaving the protecting group PG on the pyrrolidine ring in the compound of formula (A):

wherein X is PG or R ² ; each PG is independently a protecting group; R ² , A 'and n are as defined in claim 69. Verbindung mit der folgenden Formel (E):

worin X PG or R² ist; PG eine Schutzgruppe ist; R² wie in Anspruch 67 definiert ist; A' eine geschützte Carbonsäure ist; R³ wie in Anspruch 1 definiert ist; n 0 oder 2 ist; D' wie für D definiert ist, aber 2 bis 5 Atome kürzer ist; und D wie in Anspruch 1 definiert ist.Compound of the following formula (E):

wherein X is PG or R ² ; PG is a protecting group; R ^{2 is} as defined in claim 67; A 'is a protected carboxylic acid; R ^{3 is defined} as in claim 1; n is 0 or 2; D 'is as defined for D, but 2 to 5 atoms shorter; and D as defined in claim 1. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (E) nach Anspruch 71, wobei das Verfahren umfasst das Umsetzen einer Verbindung der Formel (D) mit einer Verbindung der Formel (F):

worin X, A', n, R³ und D' wie in Anspruch 71 definiert sind.A process for the preparation of a compound of formula (E) according to claim 71, which process comprises reacting a compound of formula (D) with a compound of formula (F):

wherein X, A ', n, R ³ and D' are as defined in claim 71. Verbindung mit der folgenden Formel (G):

worin R² wie in Anspruch 67 definiert ist, R³ und D wie in Anspruch 1 definiert sind; und A' eine geschützte Carbonsäure ist.Compound of the following formula (G):

wherein R ^{2 is} as defined in claim 67, R ³ and D are as defined in claim 1; and A 'is a protected carboxylic acid. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (G'), die der Verbindung der Formel (G) entspricht, nach Anspruch 73, wobei D eine ungesättigte Gruppe wie in Anspruch 1 definiert ist, wobei das Verfahren umfasst das Bewirken eines Ringschlusses der Verbindung der Formel (E) durch Umsetzen der Verbindung der Formel (E) in Anwesenheit eines Katalysators auf Übergangsmetallbasis, um eine Verbindung der Formel (G') zu erhalten:

worin R² wie in Anspruch 67 definiert ist, R³, n und A' wie in Anspruch 1 definiert sind.A process for the preparation of a compound of formula (G ') corresponding to the compound of formula (G) according to claim 73, wherein D is an unsaturated group as defined in claim 1, which process comprises effecting a ring closure of the compound of formula (E) by reacting the compound of the formula (E) in the presence of a transition metal-based catalyst to obtain a compound of the formula (G '):

wherein R ^{2 is} as defined in claim 67, R ³ , n and A 'are as defined in claim 1. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (G) nach Anspruch 73, worin D eine gesättigte Gruppe wie in Anspruch 1 definiert darstellt, wobei das Verfahren die Hydrierung der Verbindung der Formel (G') nach Anspruch 74 umfasst.Process for the preparation of a compound of the formula (G) according to claim 73, wherein D is a saturated group as claimed in claim 1, the process being the hydrogenation of the compound of the formula (G ') according to claim 74. Verbindung mit der folgenden Formel (J):

worin R² wie in Anspruch 67 definiert ist und R³ wie in Anspruch 1 definiert ist; m 1 bis 5 ist; n 1 bis 5 ist; A' eine geschützte Carbonsäure ist; und Cbz Benzyloxycarbonyl ist.Compound with the following formula (J):

wherein R ^{2 is} as defined in claim 67 and R ^{3 is} as defined in claim 1; m is 1 to 5; n is 1 to 5; A 'is a protected carboxylic acid; and Cbz is benzyloxycarbonyl. Verbindung der folgenden Formel (K):

worin R² wie in Anspruch 67 definiert ist und R³ wie in Anspruch 1 definiert ist; m 1 bis 5 ist; n 1 bis 5 ist; A' eine geschützte Carbonsäure ist; und Cbz Benzyloxycarbonyl ist.Compound of the following formula (K):

wherein R ^{2 is} as defined in claim 67 and R ^{3 is} as defined in claim 1; m is 1 to 5; n is 1 to 5; A 'is a protected carboxylic acid; and Cbz is benzyloxycarbonyl. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (K) nach Anspruch 77, wobei das Verfahren das Unterwerfen einer Verbindung der Formel (J) einer Hydroborierung und dann einer Oxidation umfasst:

worin R², R³, m, n A' und Cbz wie in Anspruch 76 definiert sind.A process for the preparation of a compound of formula (K) according to claim 77, which process comprises subjecting a compound of formula (J) to hydroboration and then to oxidation:

wherein R ² , R ³ , m, n A 'and Cbz are as defined in claim 76. Verbindung mit der folgenden Formel (L):

worin R² wie in Anspruch 67 definiert ist und R³ wie in Anspruch 1 definiert ist; m 1 bis 5 ist; n 1 bis 5 ist; und A' eine geschützte Carbonsäure ist.Compound with the following formula (L):

wherein R ^{2 is} as defined in claim 67 and R ^{3 is} as defined in claim 1; m is 1 to 5; n is 1 to 5; and A 'is a protected carboxylic acid. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (L) nach Anspruch 79, wobei das Verfahren die Hydrierung der Verbindung der Formel (K) in Anwesenheit einer Säure umfasst:

worin R² und R³, m, n und A' wie in Anspruch 79 definiert sind; und Cbz Benzyloxycarbonyl ist.A process for the preparation of a compound of formula (L) according to claim 79, which process comprises hydrogenating the compound of formula (K) in the presence of an acid:

wherein R ² and R ³ , m, n and A 'are as defined in claim 79; and Cbz is benzyloxycarbonyl. Verwendung einer Verbindung der Formel I nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 53 zur Behandlung oder Verhinderung der viralen Kontamination von Materialien.Use of a compound of formula I according to any one the claims 1 to 53 for the treatment or prevention of viral contamination of materials.