DE2934110C2 - - Google Patents
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Description
Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung
und ein Verfahren zur Bestimmung des Hämatokrits
in einer Blutprobe.
Bekanntlich kann man Blut unter Verwendung von Gelmaterialien
analysieren. Aus der US-PS 39 90 849 ist ein Verfahren
zur Auftrennung der festen und flüssigen Phase des Blutes
unter Verwendung eines Gelmaterials bekannt. Nach einer
derartigen Auftrennung werden dann Analysen von zu bestimmenden
Bestandteilen innerhalb der flüssigen Phase des Plasmas
innerhalb des Gelmaterials durchgeführt.
In DE-OS 29 27 345 wurde bereits
ein Verfahren vorgeschlagen, das es ermöglicht, durch
gesteuerte Diffusion genaue Anteile von Plasma und von
zu bestimmenden Substanzen oder anderen Reagenzien inner
halb des Gelmaterials zu erhalten. Derartige genaue Anteile
werden erhalten, ohne daß man die zu untersuchende Probe
messen müßte.
Sämtliche derartige Verfahren haben das Ziel gemeinsam,
Bestimmungen rasch, einfach und kostengünstig durchzuführen.
Es besteht jedoch eine Schwierigkeit beim Diffundieren genauer
Anteile von Blutplasma aus den Gesamtblutproben in das
Gelmaterial, wenn man die bereits beschriebenen Verfahren
anwendet. Das Eindiffundierenlassen von löslichen Bestand
teilen des Plasmas aus Gesamtblutproben in ein Gel oder
ein anderes poröses Material geht von der Annahme aus, daß
die Geschwindigkeit der Eindiffundierung von löslichen Be
standteilen des Plasma für jede Blutprobe gleich ist, so
daß für sämtliche Blutproben innerhalb eines derartigen
Mediums ein konstanter Anteil erhalten wird. Dies ist je
doch nicht immer der Fall. Der Hämatokrit der Blutprobe
beeinflußt die Diffusionsgeschwindigkeit von löslichen
Bestandteilen des Plasmas, die in ein Gelmaterial eindif
fundieren. Wenn man die Diffusionszeit genau steuert, erhält
man daher keineswegs für sämtliche Proben einen konstanten
Plasmaanteil innerhalb des Gels. Jedoch ist ein derartiger
genauer aliquoter Plasmaanteil innerhalb des Gelmaterials
erforderlich, im quantitative Analysen der innerhalb der
Blutprobe vorliegenden zu analysierenden Bestandteile durch
führen zu können.
Aufgabe der Erfindung ist die Schaffung eines verbesserten
Verfahrens und einer verbesserten Vorrichtung zur Hämatokrit
bestimmung, wobei das Blut vor der Durchführung der Bestim
mung nicht mehr in seine Bestandteile aufgetrennt zu werden
braucht, ferner Diffusionsmethoden und insbesondere Gel
diffusionstechniken anwendbar sind, durch die Einwirkungen des
Hämatokrits auf die Erzielung genauer Analysenergebnisse von
Blutproben korrigiert werden können und ein Hämatokritkor
rekturfaktor für Gesamtblutanalysen unter Anwendung von
Diffusionsmethoden zur Erzielung von bestimmten Anteilen des
Blutplasmas innerhalb poröser Medien erhalten werden kann.
Gegenstand der Erfindung ist eine Vorrichtung zur Bestimmung
des Hämatokrits in einer Blutprobe, gekennzeichnet durch ein
poröses Material mit einer vorherbestimmten Oberfläche, auf
die eine bestimmte Menge des zu analysierenden Blutes auf
bringbar ist, und eine gegenüber der Blutprobe inerte Sub
stanz, die innerhalb des Materials in vorherbestimmter Kon
zentration vorhanden und über die vorherbestimmte Oberfläche
aus dem Material herausdiffundierbar ist, wenn das Blut auf
die vorherbestimmte Oberfläche aufgebracht wird. Die Inert
substanz ist sowohl gegenüber dem im Plasma Gelösten als
auch gegenüber den Blutzellen inert.
Gegenstand der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur
Bestimmung des Hämatokrits in einer Blutprobe, das dadurch
gekennzeichnet ist, daß man
- a) eine Oberfläche eines porösen Materials, das eine Inert substanz enthält, mit einer Blutprobe in Berührung bringt, wobei die Inertsubstanz gegenüber der Blutprobe inert ist;
- b) mindestens einen Teil des im Plasma der Blutprobe Gelösten über die Oberfläche in das Material eindiffundieren läßt;
- c) mindestens einen Teil der inerten Substanz aus dem Mate rial über die Oberfläche, die mit dem Blut in Berührung steht, hinausdiffundieren läßt und
- d) die Konzentration der inerten Substanz, die aus dem Material herausdiffundiert ist, als Maß für den Hämatokrit der Blutprobe bestimmt.
Auf diese Weise ist ein Mittel zur Bestimmung des Hämato
krits in Blutproben durch Diffusionsverfahren sowie zur
Bestimmung der Wirkung des Hämatokrits auf Blutanalysen
geschaffen. Außerdem ist auf diese Weise eine Korrektur
für die Hämatokriteinwirkungen geschaffen, die bei
der Verwendung von Verfahren zur Durchführung von Bestim
mungen unter Verwendung von Diffusionsvorrichtungen auf
treten.
Weiter kann so eine zu bestimmende Substanz unmittelbar
aus dem Plasma einer Blutprobe bestimmt werden, die in
ein Gel oder ein anderes poröses Material eindiffundieren
gelassen wurde, indem man zwei Farbumschläge innerhalb
des porösen Materials beobachtet:
- 1. den Farbumschlag, der einer Diffusion von Farbstoff aus dem Material nach außen als Funktion des Hämatokrits der Blutprobe zuzuschreiben ist, und
- 2. den Farbumschlag, der der Umsetzung eines zu bestim menden Bestandteils im Plasma der Probe mit einem in dem porösen Material vorhandenen Reagenz zuzuschreiben ist.
Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren und der erfindungsgemäßen
Vorrichtung zum Bestimmen des Hämatokrits ist eine
vorherige Trennung der Proben in den zellularen und den
Plasmabestandteil nicht erforderlich.
Man kann ein Gel oder ein anderes poröses Material dazu
verwenden, um einen genauen Anteil des Plasmas aus einer
Gesamtblutprobe durch Diffusionsverfahren zu erhalten.
Die Blutprobe wird auf einer bestimmten Oberfläche des
Materials aufgebracht, und man läßt das Plasma in das
Material über eine bestimmte Zeit hinweg hineindiffundieren.
Wenn die Blutprobe lediglich aus Plasma bestünde, würde ein
konstanter Anteil des Plasmas nach der bestimmten Zeit inner
halb des Materials erhalten werden, wie in der oben erwähnten
Offenlegungsschrift beschrieben.
Wegen der Anwesenheit der Erythrozyten in der Blutprobe
wird jedoch die Diffusion des Plasmas etwas behindert. Da
einige der Erythrozyten einen Teil der bestimmten Oberfläche
des Materials bedecken, wird die Oberfläche dadurch verringert,
so daß der mittlere Diffusionsweg für gelöste Moleküle
bis zum Erreichen der Geloberfläche erhöht und die
Geschwindigkeit der im Plasma gelösten Bestandteile verringert
werden. Der Einfluß auf die Diffusionsgeschwindigkeit
der Plasmabestandteile verschiedener Blutproben variiert,
weil die Fraktion, die die Blutzellen enthält, ebenfalls
zwischen verschiedenen Proben variiert. Wegen der Verän
derungen des Hämatokrits in diesen Proben kann daher ein
konstanter Anteil des Plasmas nicht erhalten werden.
In Weiterbildung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird auch
ein Korrekturfaktor für die Hämatokritver
änderungen ermittelt, mit dessen Hilfe
man den in ein Gelmedium eindiffundierten Plasmaanteil
genau bestimmen kann. Dieser Korrekturfaktor kann auf ver
schiedene Weise erhalten werden:
- a) Zunächst kann der Hämatokrit in einem getrennten Gel be stimmt und danach der Korrekturfaktor für Analysen, die in anderen Gelmaterialien durchgeführt werden, unter Verwendung unterschiedlicher Anteile der Blutprobe berechnet werden, oder
- b) die Umsetzung eines in dem Plasma des Blutes vorhandenen
zu bestimmenden Anteils mit einem in dem Gelmaterial vor
handenen Reagenz kann unmittelbar durch Messung zweier Farb
umschläge bestimmt werden:
- 1. des Farbumschlages, der durch die Umsetzung von zu be stimmendem Bestandteil und Reagenz hervorgerufen wird, und
- 2. des Farbumschlages, der durch den Verlust des Materials an Farbstoff als Funktion des Hämatokrits in der Blutprobe hervorgerufen wird, wie weiter unten näher beschrieben wird.
Bei dem Verfahren a) wird die Hämatokrit-Wirkung dadurch be
stimmt, daß man in ein getrenntes poröses Material, das
keine anderen Reagenzien enthält, einen inerten Indikator
einbringt. Dieser inerte Indikator kann ein gefärbtes Molekül,
wie beispielsweise Vitamin B₁₂ (Cyano-Cobalamin) sein, das
mit der Blutprobe nicht wesentlich reagiert. Bekanntlich
diffundieren Substanzen innerhalb des porösen Materials
in dem Maße nach außen, wie das Plasma aus der Blutprobe in
das Material hineindiffundiert. Die Blutzellen blockieren
die Diffusion des sich nach außen bewegenden inerten Farb
stoffs in gleicher Weise, wie die löslichen Bestandteile
des Plasmas daran gehindert werden, in das Material ein
zudringen. Versuche haben gezeigt, daß die Diffusion des
Farbstoffs aus dem Gel oder dem anderen porösen Material
proportional der Geschwindigkeit ist, mit der die gelösten
Bestandteile des Plasmas in das Gel eindiffundieren.
Außerdem hat sich gezeigt, daß die Diffusion des Farbstoffs
umgekehrt proportional zum Hämatokrit der Blutprobe ist.
Auf der Grundlage dieser Versuche kann mit Hilfe des Farb
stoffverlustes des Materials ein Korrekturfaktor bestimmt
werden. Dieser Korrekturfaktor ermöglicht die Berechnung
der Konzentration eines beliebigen teilchenförmigen zu
bestimmenden Stoffes, der in dem Plasma anwesend ist.
Außerdem hat es sich erwiesen, daß die Bestimmug des
Hämatokrits unter Anwendung von Diffusionsverfahren vergleich
bar der Hämatokritbestimmung auf der Grundlage von üblichen
Zentrifugierverfahren ist.
Es ist äußerst wichtig, daß der Farbstoff, der in dem Gel
oder dem anderen porösen Material enthalten ist, nicht mit
irgendeinem Teil der Blutprobe reagiert, d. h. weder mit
den gelösten Stoffen des Plasmas noch mit den Blutzellen.
Dies ist deswegen wichtig, weil jede Umsetzung, Verklumpung
oder Koagulation innerhalb der Blutprobe die Diffusionsge
schwindigkeit und damit den Korrekturfaktor beeinflussen kann.
Bei dem Verfahren b) werden optische Messungen gleichzeitig
zur Bestimmung des Umsetzungsproduktes einer zu bestimmenden
Substanz innerhalb des Materials und des Farbstoffverlustes
des Materials durchgeführt. Dies erfordert, daß der Farbum
schlag, der auf den Verlust des Materials an Farbstoff zu
rückgeht, in keiner Weise den Farbumschlag, der zufolge der
Umsetzung des zu bestimmenden Bestandteils hervorgerufen
wird, stört.
Bei diesem Verfahren wird eine unmittelbare Bestimmung des
zu bestimmenden Bestandteils ermöglicht, indem beide Farb
umschläge in demselben Material gemessen werden. Die Färbung
durch den Farbstoff und die Färbung durch die Umsetzung
dürfen über ihre entsprechende Farbumschlaggeschwindigkeit
hinaus einander nicht stören.
Die Erfindung wird im folgenden anhand von Zeichnung er
läutert, worin
Fig. 1 eine perspektivische Ansicht einer Ausführungsform
der erfindungsgemäßen Vorrichtung;
Fig. 2 einen Querschnitt der Vorrichtung gemäß Fig. 1
längs der Linie 2-2, wobei ein Tropfen einer Blut
probe an seinem Platz angeordnet ist;
Fig. 3 eine perspektivische Ansicht einer weiteren Ausfüh
rungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung mit
einer biegsamen Abdeckung über einem Teil der zu
füllenden Aushöhlung;
Fig. 4 eine perspektivische Darstellung ähnlich Fig. 3,
wobei ein durchsichtiges Band die gesamte Aushöh
lung abschließt, die mit einem eine Inertsubstanz
enthaltenden porösen Material gefüllt ist;
Fig. 5 eine perspektivische Darstellung ähnliche Fig. 3 und
4, wobei das durchsichtige Band gerade entfernt
wird;
Fig. 6 eine perspektivische Darstellung einer weiteren
Ausführungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung;
Fig. 7 eine perspektivische Darstellung einer weiteren
Ausführungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung
mit einer Eintauchstab-Anordnung;
Fig. 8 eine schematische Darstellung einer weiteren Aus
führungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung
mit einem automatisierten System;
Fig. 9 eine schematische Darstellung einer weiteren Aus
führungsform der erfindungsgemäßen Vorrichtung mit
einem automatisierten System;
Fig. 10 eine perspektivische Darstellung eines Beispiels
für eine Anordnung mit einem kontinuierlichen
Band für die automatisierten Systeme gemäß Fig. 8 und 9;
Fig. 11 ein Diagramm zur Diffusion von Vitamin B₁₂ aus
Agarose in Blut hinein als Funktion des Hämatokrits
(HCT);
Fig. 12 ein Diagramm über die Diffusion von Vitamin B₁₂
aus Agarose, die proportional der Quadratwurzel gemäß
den Diffusionsgesetzen erfolgt;
Fig. 13 ein Diagramm zur Korrelation zwischen den Bestim
mungen des Hämatokrits durch Diffusion und durch
übliche Zentrifugierverfahren und
Fig. 14 ein Diagramm über die Auswirkung des Hämatokrits
auf eine Albuminbestimmung darstellen.
Gemäß Fig. 1 und 2 besitzt ein flacher, rechteckig geformter
Träger 11 eine Vertiefung 12, die mit einem Gel oder
einem anderen porösen Material 13, wie beispielsweise
Agarose gefüllt ist, die eine Inertsubstanz, wie beispiels
weise Vitamin B₁₂ enthält. Der Träger 11 kann aus Kunststoff
oder Glas bestehen. Abmessungen sind nicht von besonderer
Bedeutung, jedoch besitzt die Vertiefung 12 im allgemeinen
eine Tiefe von 0,1 bis 2 mm und einen Durchmesser von 5 bis
20 mm. Die Ausführungsform gemäß Fig. 1 und 2 besitzt eine
Vertiefung 12 von 1 mm Tiefe und 8 mm Durchmesser. Die Aus
nehmung ist im allgemeinen in der Mitte des Trägers 11 an
einer Stelle angeordnet, an der das Gel den Lichtstrahl eines
geeigneten Photometers oder Spektrophotometers schneidet.
Das Gel füllt die Vertiefung 12 vorzugsweise bis zu ihrer
Oberfläche, wodurch eine gute Berührung mit der Blutprobe
hergestellt wird. Wenn beispielsweise ein Tropfen einer
Blutprobe 14 aufgebracht wird, muß dieser Tropfen den Rand
des Trägers um die Vertiefung herum überdecken. Das Erfor
dernis, daß die Vertiefung zur Gänze mit dem Gel auszufüllen
ist, ist nocht wichtiger, wenn das Aufbringen der Probe durch
einen weiteren Träger erfolgt. Beispielsweise kann eine Blut
probe in einem Kapillargewebe eingeschlossen werden. Ein derar
tiges Gewebe wird dann mit der Oberfläche des Gels in Be
rührung gebracht. Der Plasmaanteil der Probe diffundiert un
mittelbar aus dem mit der Blutprobe beladenen Gewebe in das
Gel. Nach einer vorgewählten Zeitdauer kann das Gewebe von
der Oberfläche des Gels entfernt werden. Das Plasma, das
in einen Teil des Gels eindringt, diffundiert gleich
zeitig und in demselben Maße in das Gel, wie die Inertsub
stanz aus dem Gel in die Blutprobe diffundiert. Am Ende der vor
gewählten Zeitdauer ist die Inertsubstanz aus dem Gel um
eine bestimmte Menge ausdiffundiert, die umgekehrt proportio
nal zum Hämatokrit der Blutprobe ist.
Dies geht aus den Fig. 11 bzw. 12 hervor. Fig. 12 zeigt, daß
die Diffusion der Inertsubstanz (in diesem Falle von Vitamin B₁₂
oder Cyanocobalamin) aus dem aus Agarose bestehenden Gel
medium in die Blutprobe dem Einstein′schen Gesetz der Braun′
schen Molekularbewegung folgt (Introduction to Colloid Chemi
stry, K.J. Mysels, Interscience (1959) N.N.). Die Diffusion,
die durch die Abnahme der Absorption gemessen wird, ist eine
lineare Funktion der Quadratwurzel der Zeit.
Fig. 11 erläutert, daß die Diffusion der Inertsubstanz (Vita
min B₁₂) aus dem Gelmaterial nach außen eine lineare Funktion
des Hämatokrits der Blutprobe ist.
Gemäß den Fig. 3,4 und 5 besitzt ein Träger 15 eine
U-förmige Ausnehmung 16 auf einer seiner Oberflächen.
Das breite Ende der Ausnehmung 16 ist am Ende des Trägers
offen. Die Anordnung gem. dieser Ausführungsform bietet
sich für eine Massenherstellung an. Diese wird dadurch
bewerkstelligt, daß man die hauptsächliche offene Oberfläche
einer Anzahl von gleichen Trägern mit druckempfindlichen
Klebbändern 17 verschließt, wobei jedoch der Endabschnitt
der Ausnehmung offen bleibt, so daß das Gel 13 in die Aus
nehmung eingebracht werden kann. Das Gel wird dann härten
gelassen. Danach wird der restliche, lose Abschnitt des
Klebebandes 17 um das Ende des Trägers herumgeschlagen,
um den restlichen Teil der Ausnehmung 16 zu verschließen.
Bei dieser Ausführungsform kann die Vorrichtung als Ein
tauchstab benutzt werden, der eine bestimmte Zeitlang
die Probe eingetaucht wird. Das Band 17 wird vor der Ver
wendung entfernt. Der Eintauchstab wird dann eine bestimmte
Zeit lang die ausreicht, um gelöste Bestandteile des Plasmas
der Blutprobe in das poröse Material eindiffundieren und
gleichzeitig damit Inertsubstanz aus dem Material in die
Blutprobe hinausdiffundieren zu lassen, in die flüssige
Blutprobe eingetaucht.
Fig. 6 zeigt eine Anordnung, wie sie ähnlich der in den
Fig. 3, 4 und 5 dargestellten Anordnung ist. Es werden
eine Reihe Ausnehmungen 20 a, 20 b und 20 c angeordnet, so daß
eine Anzahl Versuche oder Bestimmungen auf einem einzigen
Träger 19 zusätzlich zur Bestimmung der Hämatokrit-Wirkung
auf die Blutprobe vorgenommen werden kann. Die Blutprobe
wird über alle drei Ausnehmungen 20 a, 20 b und 20 c in über
lappender Form aufgebracht. Die Ausnehmung 20 a kann ein Gel
mit einem Inertfarbstoff zur Hämatokritbestimmung enthalten,
während die Ausnehmungen 20 b und 20 c Gele mit Reagenzien zur
Umsetzung mit bestimmten Bestandteilen des Plasmas enthalten
können.
Bisher wurden Ausführungsformen beschrieben, die aus einem
Substrat mit einer Vertiefung oder mindestens einer Art Ein
senkung bestanden. Es kann jedoch nach der erfindungsgemäßen
Lehre ein Eintauchstab von Vorteil sein, der aus einer be
sonders hergestellten Bandrolle aufgebaut ist. In diesem Zu
sammenhang wird auf die Fig. 7 verwiesen. Zur Herstellung dieser
Vorrichtung wird einem langgestreckten, durchsichtigen
Band auf mindestens einer seiner Oberflächen eine Beschichtung
mit einem Gel gegeben. Das Gel wird darauf härten gelassen,
obwohl zur besseren Handhabung ein gewisser Grad an Bieg
samkeit erwünscht sein kann. Das Gel ist ein solches, wie es
vorher beschrieben wurde, d h. es enthält die Inertsubstanz
zur Verwendung bei der Bestimmung des Hämatokrits in der
Blutprobe.
Das erhaltene Band wird in geeignete Verbundkörperlängen 50
geschnitten, wie in der auseinandergezogenen Darstellung der
Fig. 7 gezeigt ist. Das Gel 51 zeigt nach oben, während sich
darunter das Bandsubstrat 52 befindet. Das Substrat 52 be
sitzt an seiner Unterseite eine Klebebeschichtung. Das
Ganze wird auf einem ziemlich starren Kunststoffträger 53
befestigt, der verhältnismäßig länger als die Länge 50 ist.
Der überstehende Teil kann aus einem Handgriff 54 bestehen,
mit dessen Hilfe man den Eintauchstab in eine flüssige Blut
probe eintauchen kann, wie oben beschrieben.
Weiter kann das Band gemäß Fig. 7 in einer Form verwendet werden,
in der es nicht in Einzelteile geschnitten, sondern als
Ganzes in einer Vorrichtung zum automatischen Bestimmen
des Hämatokrits verwendet wird. Diese Ausführungsform ist in
Fig. 10 dargestellt, wo ein Band 60 mit einer Reihe von
Gruppen von Gelen gezeigt ist, die die Form von kleinen Strei
fen oder Chips 76 aufweisen. Jede Gruppe der Chips umfaßt
ein Chip 76 a, das einen inerten Farbstoff für die Hämatokrit
bestimmung aufweist, und zwei weitere Chips 76 b und 76 c, die
Reagenzien für zwei weitere Bestimmungen von in dem Blutplasma
zu bestimmenden Substanzen enthalten. Das Band 60 wird in der
Vorrichtung zum automatischen Bestimmen des Hämatokrits,
die in Fig. 6 dargestellt ist, verwendet. Betrachtet man
diese Figur von rechts nach links, so erkannt man, daß ein
Gelband 60 von einer Beschickungsrolle 61 abgewickelt wird
und horizontal längs eines mit Pfeilen angedeuteten Weges
wandert. Das Band 60 passiert dabei eine Probenauftrag
station 62, bei der Blutproben aufgetropft werden. An der
Probenauftragstation 62 ist angrenzend an das Band 60 eine
Vibrier-Schüttel-Vorrichtung 71 angeordnet, um die Probe
zu mischen und eine Sedimentierung von Erythrozyten in der
Blutprobe zu verhindern, während die gelösten Bestandteile
des Plasmas in die Gele eindiffundieren. Die Bestimmung der
Hämatokritwirkung kann nicht genau erfolgen, wenn diese
Sedimentierung der Erythrozyten während der Diffusion des
gelösten Anteils des Plasmas in die Gele zugelassen wird.
Der Weg und die Wanderungsgeschwindigkeit des Bandes sind
derart ausgewählt, daß in dem Gel eine hinreichende Diffu
sion stattfindet. Bei der Station 63 wird die verbliebene
Blutprobe kurz durch bekannte Maßnahmen abgespült. Bei der
nächsten Station 64 wird das Band inkubiert, um eine weitere
Diffusion für die Gele 76 b und 76 c zu ermöglichen, so daß
ihre Reagenzien mit den zu bestimmenden Bestandteilen im
Plasma reagieren können, wie in der oben erwähnten
deutschen Patentanmeldung beschrieben. Danach wird das
Band 60 einer Ablesestation 65 zugeführt, wo die Flächen,
auf denen Reaktionen stattgefunden haben,
in herkömmlicher Weise optisch ausgewertet werden. Das
Band kann danach durch eine Aufnahmerolle 66 aufgewickelt
werden. Das Ablesegerät 65 besteht aus zwei Abschnitten
65 a und 65 b, wobei vom Abschnitt 65 a der Farbumschlag
in dem Hämatokritgel 76 a optisch gemessen wird. In dem
Abschnitt 65 b werden die Farbumschläge in den Gelen 76 b
und 76 c optisch gemessen, um die anwesenden zu bestimmenden
Substanzen zu bestimmen. Die optische Messung von
Abschnitt 65 a wird einem Informationsspeicher oder anderem
Gerät 74 zugeführt, um einen Korrekturfaktor für den
Hämatokrit zu erhalten. Der Korrekturfaktor wird dem
Abschnitt 65 b erneut eingegeben, um einen korrigierten
Wert für die in den Gelen 76 b und 76 c bestimmten
Substanzen zu erhalten. Die korrigierten Werte für die zu
bestimmenden Substanzen werden anschließend mit einem
Aufzeichnungsgerät 75 oder einem anderen geeigneten Gerät
aufgezeichnet. Das Gel 76 a kann bereits nach der ersten
Diffusionszeit auf seinen Farbumschlag hin, der durch
die Hinausdiffusion des Farbstoffes aus dem Gelmaterial
herbeigeführt wird, ausgewertet werden, jedoch für Auto
matisierungszwecke kann es gemeinsam mit den Gelen 76 b
und 76 c an der Auswertungsstation 65 abgelesen werden.
Bei der genannten Ausführungsform kann das Substrat des
Bandes aus einem von mehreren bekannten transparenten
Kunststoffmaterialien bestehen, wie beispielsweise aus
Polyethylenterphthalat (Mylar), Polyethylen, Polypropylen,
Methylmethacrylat (Lucite) usw.
Eine weitere Vorrichtung zur automatischen Bestimmung des
Hämatokrits ist schematisch in
Fig. 9 dargestellt. Wiederum ist ein Gelband 60 auf einer
Rolle 61 aufgewickelt. Bei dieser Ausführungsform wird
der Probentropfen nicht unmittelbar auf das Gelband 60
aufgebracht, sondern es wird eine zweite Beschickungs
walze 67 verwendet, die ein für wäßrige Flüssigkeiten
durchlässiges Gewebe 68 trägt. Das Gewebe 68 kann aus
Cellulose, Celluloseacetat, Polyamid (Nylon) oder anderen
netzbaren und für lösliche Substanzen durchlässigen
Materialien bestehen. Das Gewebe 68 wird von Rolle 67
abgezogen und wandert längs eines Weges, der eine Proben
auftragstation 69 quert. Die Probenauftragstation 69 be
liefert das Gewebe 68 mit einem Probentropfen. Der Proben
tropfen dringt durch das Gewebe 68 zufolge von Diffusion
oder Kapillarwirkung hindurch, so daß die Probe das Gel
band 60 durch die Unterseite des Gewebes 68 hindurch be
netzen kann, wenn es mit dem Gelband bei der Stelle 70
in Berührung tritt. Es wird eine hinreichende Zeit benötigt,
um die Diffusion der im Plasma gelösten Anteile der
Probe aus dem Band 68 in das Gelband 60 zu bewirken. Nach
dem sich das Gewebe 68 und das Band 60 getrennt haben,
wird das Gewebe 68 von einer Aufnahmerolle 72 aufgenommen.
An dem Band 60 kann an der Stelle 70 ein Vibrations-Schüttel
gerät 71 angeordnet sein, um die Sedimentierung von
Erythrozyten und damit den oben erwähnten Hämatokriteffekt
zu verhindern. Nach der Diffusion des im Plasma Gelösten
in das Gel setzt das Band 60 seine Wanderung, wie durch
die Pfeile dargestellt, bis zu einem Inkubator 64 fort,
wie er bereits im Zusammenhang mit Fig. 8 beschrieben
worden ist. Danach wird das Band zu der Meßstation 65 zur
Analyse geführt. Die Ableseeinrichtung 65 besteht aus
zwei Abschnitten 65 a und 65 b, wovon der Abschnitt 65 a den
Farbumschlag in dem Hämatokritgel 76 a optisch mißt,
während der Abschnitt 65 b die Farbumschläge in den Gelen
76 b und 76 c zur Bestimmung der vorhandenen zu bestimmenden
Substanzen optisch mißt. Die von dem Abschnitt 65 a
durchgeführte optische Messung wird einem Informations
speicher oder anderem Gerät 74 zugeführt, um einen Häma
tokrit-Korrekturfaktor zu erhalten. Der Korrekturfaktor
wird erneut in das Ablesegerät 65 b eingespeist, um einen
korrigierten Wert für die zu bestimmenden Substanzen in
den Gelen 76 b und 76 c zu erhalten. Die berichtigten Werte
für die zu bestimmenden Substanzen werden anschließend
durch ein Aufzeichnungsgerät 75 oder ein anderes geeignetes
Ausgangsgerät aufgezeichnet. Schließlich wird das Band 60
auf die Rolle 66 aufgewickelt.
Die Vorrichtung gemäß der Erfindung eignet sich, wie man
sieht, zur Durchführung verschiedener klinisch chemischer
Bestimmungen mit Gesamtblutproben. Das Band 60 gemäß
Fig. 10 kann aus Polyethylenterphthalat (Mylar), Poly
styrol oder anderem transparentem Material bestehen.
Die oben erwähnten Chips 76 gemäß Fig. 10 sind auf dem
Band 16 im Abstand voneinander aufgeklebt. Die erste Reihe
von Chips 76 a wird dazu verwendet, um den Hämatokriteffekt
auf die Blutprobe zu ermitteln, so daß die Bestimmungen
der Substanzen in den ersten Gelen 76 b und 76 c korrigiert
werden können. Die zweite Reihe von Chips 76 b kann bei
spielsweise sämtlich für eine Albuminbestimmung verwendet
werden. Die dritte Reihe von Chips 76 c kann beispielsweise
in ihrer Gesamtheit für eine Glucosebestimmung verwendet
werden. Weitere Chips 76 d, 76 e usw. (nicht dargestellt)
können auf dem Band 60 ebenfalls vorgesehen werden, um
noch weitere Bestimmungen, wie die von Lactatdehydroge
nase usw., durchzuführen.
Die Meßstation 65 ist derart eingerichtet, daß sie die
Umsetzungsergebnisse, die in den entsprechenden Chips
erhalten werden, hinsichtlich jeder einzelnen Blutprobe
in korrelierter Weise analysiert.
Bei dem beschriebenen System ist eine Reihe einzelner
Chips 76 dargestellt. Die Chips können aber auch konti
nuierlich ausgebildet sein, so daß parallel verlaufende,
längliche Streifen verwendet werden können, d. h. einer
für jede der ausgewählten Bestimmungen.
Linearität in einem chemischen Bestimmungssystem ist
ein wichtiges Kriterium für eine zuverlässige Durchführ
barkeit. Linearität impliziert eine Reaktionskinetik
erster Ordnung, so daß die Konzentration der Testsub
stanzen leicht bestimmt werden kann. Bekanntlich ist es
zur Erzielung von Linearität erforderlich, in dem Mate
rial überschüssiges Reagenz vorliegen zu haben. Dies wird
in dem beschriebenen Gelsystem dadurch erreicht, daß man
die Bestimmung in einem zweistufigen Verfahren durchführt.
Gewisse zu bestimmende Substanzen können auch durch
Messung der Reaktionsgeschwindigkeit von Enzymen, die in
dem Gel enthalten sind, bestimmt werden.
Der Betrieb der genannten Systeme zur Bestimmung von zu
bestimmenden Substanzen wird im folgenden näher beschrieben.
Zwischen der bestimmenden Oberfläche des Gels und der
Probe wird für eine kurze Zeitdauer, d. h. eine solche von
der Größenordnung von 10 bis 60 s, eine Berührung herge
stellt. Danach wird die Probe entfernt. Dadurch wird eine
Diffusion der zu bestimmenden Bestandteile der Probe in
die Oberflächenregion des Gels ermöglicht. Selbstver
ständlich können die Bedingungen im einzelnen leicht be
stimmt werden, bei denen die Endringtiefe der Moleküle
der zu bestimmenden Substanz im Verhältnis zur Geldicke
klein ist. Dieses Verfahren schafft ein Reservoir von zu
bestimmender Substanz in der Nähe der äußeren Oberfläche
des Gels.
Um die höchste Effektivität zu erzielen muß eine Weiter
diffusion der zu bestimmenden Substanz in das Gel nach
der Entfernung der Flüssigkeitsprobe von der Gelober
fläche stattfinden. Dies erlaubt die Verteilung der ge
lösten Bestandteile des Plasmas der Probe durch das Gel
hindurch. Die anschließende Diffusion ist einer Vermi
schung einer bekannten Verdünnung der Probensubstanz in
der vergleichbaren Lösungschemie äquivalent. Die löslichen
Bestandteile des Plasmas der Probe werden nunmehr
mit gleicher Konzentration an allen Punkten durch das
Gel hindurch verteilt, wobei die Konzentration niedriger
ist als in der zu untersuchenden ursprünglichen Probe.
Durch diese Anordnung eines zweistufigen Diffusionsver
fahrens werden die üblichen bekannten Verfahren mit ali
quoten Teilen und Verdünnungsverfahren ersetzt. Dieses
Verfahren eignet sich auch zur Gewinnung eines bestimmten
Teiles sowie zur Verdünnung von störenden Bestandteilen
in der Probe, wodurch ihr Einfluß auf die Analyse ver
ringert wird. Wegen der Verdünnung der Probe sind weiter
niedrigere Reagenzienkonzentrationen erforderlich, um
vollständig mit der Probe umgesetzt zu werden. Derartige
günstige Bedingungen sind für das Auftreten von Reaktions
kinetiken erster Ordnung sowie für Eichkurven, die linear
mit der Konzentration der zu bestimmenden Substanz sind,
von Vorteil. Jedoch ist die Zeitabhängigkeit der Umsetzung,
wie oben erwähnt, nicht linear, weil die Diffusionsstrecke
eine Funktion der Quadratwurzel der Zeit ist. Somit er
zeugen Irrtümer, die beim Messen der Zeit, während der
das Gel einer Flüssigkeitsprobe ausgesetzt ist, auftreten,
geringere analytische Fehler, die lediglich der Quadrat
wurzel der Zeit proportional sind.
Im vorliegenden Falle wird der Ausdruck Gel für ein Mate
rial verwendet, in dem eine polymere Substanz eine Matrix
mit einer gegebenen dreidimensionalen Form bildet. Obwohl
der Mechanismus eines derartigen Verhaltens nur teilweise
aufgeklärt ist, enthalten derartige Materialien verhältnis
mäßig große Mengen an Lösungsmittel, das einen integrie
renden Bestandteil des Gelmaterials bildet. Die Auswahl
einer Matrix ist selbstverständlich variabel und hängt
von dem beabsichtigten Verwendungszweck ab. Geeignete
Matrixmaterialien für wäßrige Gelmaterialien sind bei
spielsweise hydrophile Materialien, wie natürlich vorkom
mende Substanzen, wie Gelatine, Gelatinederivate, hydro
phile Cellulosederivate, Polysaccharide, wie Dextran,
Gummiarabikum, Agarose und dgl., sowie synthetische Sub
stanzen, wie wasserlösliche Polyvinylverbindungen, wie
Poly(Vinylalkohol) und Poly(Vinylpyrrolidon), Acrylamid
polymerisate usw. An die erfindungsgemäßen Zwecke ist jede
Analysenmethode anpaßbar. Zwar sind die Vorrichtung und
das Verfahren gemäß der Erfindung zur routinemäßig durch
geführten Blutchemie, wie der Bestimmung von Glucose,
Blutharnstoff, Stickstoff, Harnsäure, Albumin, Kreatinin,
Bilirubin, Phosphat, Gesamtprotein, Amylase, Calcium usw.,
besonders geeignet, doch können zahlreiche andere analy
tische Bestimmungen, die periodisch durchgeführt werden,
automatisch mit ihnen vorgenommen werden.
Die Vorrichtungen zum automatischen Bestimmen des Häma
tokrits gemäß Fig. 8 und 9 sind oben in bezug auf ein
Verfahren erörtert worden, bei dem der Hämatokrit unab
hängig von den Blutchemie-Bestimmungen bestimmt worden
ist, doch ist es auch möglich, daß mit derartigen Vor
richtungen der Hämatokrit und die anderen zu bestimmenden
Substanzen unter Verwendung desselben Gelmediums bestimmt
werden können. Bei einer derartigen Vorrichtung enthalten
sämtliche Chips 76 eine inerten Farbstoff zusammen mit
den für die bestimmte zu bestimmende Substanz erforderlichen
Reagenzien. Nach der Eindiffundierung der im Plasma
gelösten Bestandteile aus der Blutprobe in die Gele und
der nachfolgenden Inkubation bei der Station 64 mißt die
Ablesestation 65 zwei Farbumschläge. Dieses Farbumschläge
können mit Hilfe üblicher fotometrischer Mittel abgelesen
werden. Der erste der beiden Farbumschläge bezieht sich
auf den Austritt der Inertsubstanz aus den Gelen als
Funktion der Größe des Hämatokrits in den Blutproben, wie
oben im Zusammenhang mit Fig. 11 erläutert wurde. Die
Messung dieser Größe kann innerhalb oder außerhalb des
Gelmaterials durchgeführt werden, da der Austritt der
Inertsubstanz aus dem Material in dem Gel selbst oder in
dem Blut, das auf dem Gel vorhanden ist, beobachtet werden
kann. Der zweite der beiden Farbumschläge bezieht sich
auf die chemische Umsetzung in dem Gel zwischen der zu
bestimmenden Substanz und ihrem spezifischem Reagenz.
Der zweite Farbumschlag der Reaktion mit dem zu bestim
menden Bestandteil ergibt die Menge an zu bestimmendem
Bestandteil im Blutplasma ohne Hämatokritkorrekturwert.
Die Ablesestation 65 würde den Hämatokrit aus dem ersten
Farbumschlag bestimmen und den erhaltenen Wert automa
tisch über die Informationsspeichereinrichtung 74 für die
Konzentration von zu bestimmender Substanz aus dem zweiten
Farbumschlag korrigieren.
Bei einem derartigen Verfahren würde es erforderlich sein,
daß der Farbbereich für die Farbstoffauswanderung mit der
Farbänderung, die durch die Reaktion zwischen Reagenz
und zu bestimmendem Bestandteil nicht stört. Außerdem ist
es erforderlich, daß der Inertfarbstoff nicht mit dem Reagenz
reagiert, was entweder die Farbablesung oder die
Diffusionswirkungen beeinflußt.
Im folgenden wird die Art der Hämatokritkorrektur er
örtert.
In Fig. 14 ist eine typische Bestimmung (im vorliegenden
Falle von Albumin) für Blutproben mit unterschiedlichem
Hämatokrit durchgeführt worden. Die Kurve a zeigt den
wahren (korrigierten) Albumingehalt in den Blutproben,
während die Kurve b die Wirkung des ansteigenden Häma
tokrits auf die Absorption bei 630 nm erläutert. Wie
ersichtlich, sinkt die Absorption für die Albuminbestim
mung in dem Maße, wie der Hämatokrit in den Blutproben
ansteigt. Wie oben angeführt, nimmt man an, daß die Blut
zellen die Geloberfläche blockieren und die Diffusion
der im Plasma gelösten Bestandteile der Blutprobe in das
Gel behindern. Demzufolge werden weniger lösliche Bestand
teile des Plasmas und damit weniger Albumin innerhalb des
Gels nach einer bestimmten Zeit vorhanden sein. Daher ist
die Umsetzung zwischen dem zu bestimmenden Albumin und
dem Reagenz zufolge des Hämatokriteffektes schwächer.
Diese schwächere Umsetzung resultiert in der beobachteten
Abnahme der Absorption.
Aus Daten, die für jede zu bestimmende Substanz gesam
melt werden, können die Wirkungen des ansteigenden Häma
tokrits in den Blutproben bestimmt werden. Dadurch werden
Korrekturfaktoren erhalten, die zu Berichtigung der
optischen Ablesungen dienen, damit diese die wahren Werte
für die vorhandene Menge an zu bestimmender Substanz
wiedergeben, wie für die Albuminbestimmung in Fig. 14
dargestellt.
Fig. 13 zeigt ein Diagramm, das die Hämatokritbestim
mungen für verschiedene Blutproben korreliert, die einer
seits nach dem Diffusionsverfahren gemäß der Erfindung
und andererseits für diese Proben nach üblichen Zentri
fugierverfahren durchgeführt wurden. Wie sich aus der
Kurve ergibt, sind die Hämatokritwerte, die nach dem
Diffusionsverfahren gemäß der Erfindung bestimmt worden sind,
denen äquivalent, die von üblichen Zentrifugierverfahren
her stammen.
Die Erfindung wird im folgenden an Hand von Beispielen
näher erläutert.
In einem 25-ml-Erlenmeyerkolben wurden 0,1 g Agarose und
9,00 ml mit Phosphat gepufferter Salzlösung 5 min in einem
kochenden Wasserbad gehalten, um die Agarose zu lösen.
Danach ließ man auf 50°C abkühlen und fügte 1,0 ml 1%ige
Vitamin B₁₂-Lösung in mit Phosphat gepufferter Salzlösung
hinzu. Die Gelstäbe wurden anschließend durch Einbringen
von zwei bis drei Tropfen dieser warmen Lösung in die Ver
tiefungen und Abdecken der Vertiefungen mit einer Kunst
stoffabdeckung hergestellt. Wenn die Gele nicht unmittel
bar danach verwendet werden, können sie bei Raumtemperatur
in einem feuchten Behälter aufbewart werden. Die rote
Farbe der Gele erwies sich als sehr stabil bei mehrmonatiger
Aufbewahrung bei Raumtemperatur oder im Kühlschrank.
Die mit Phosphat gepufferte Salzlösung enthielt die folgenden
Bestandteile je Liter: 80 ml 0,1 m Dinatriumhydrogen
phosphat, 20 ml 0,1 m Kaliumdihydrogenphosphat, 8,5 g
Kochsalz und 0,2 g Natriumacid. Der pH-Wert betrug 7,3.
Die anfängliche Absorption bei 540 nm wird für jeden Gel
stab abgelesen, wobei als Bezugswert eine Blindprobe mit
Agarosegel dient. Die Gelstäbe werden anschließend in
1,5 ml Gesamtblut von bekanntem nach der Zentrifugier
methode bestimmten Hämatokrit eingetaucht. Die Eintauch
dauer beträgt typischerweise 10 min. Die Gelstäbe werden
danach aus dem Blut herausgenommen und rasch frei von
Blut gespült, indem man sie in zwei Bechergläser mit
sauberer, mit Phosphat gepufferter Salzlösung eintaucht.
Danach wurde die Absorption bei 540 nm erneut bestimmt.
Schließlich wurde die Änderung der Absorption 540 nm
Δ A=anfängliche Absorption minus Endabsorption be
stimmt. Die experimentellen Ergebnisse wurden mit Δ A
bei 540 nm als Ordinate gegen den Zentrifugierhämatokrit
als Abszisse aufgetragen. In Fig. 11 sind die Ergebnisse
für 49 Gesamtblutproben dargestellt. Jeder Zentrifugier
hämatokrit bestand aus dem Mittelwert einer Doppelbe
stimmung, die nach der 7-min-Micromethode erfolgt war.
In einem 25-ml-Erlenmeyerkolben wurden 150 g Agarose mit
7,0 mg Succinatpuffer vom pH 4,4 versetzt. Die Agarose
wurde durch Eintauchen des Kolbens während etwa 5 min
in kochendes Wasser gelöst. Danach wurden 3,0 ml einer
1,5 millimolaren Bromcresol Grün-Lösung zugesetzt und
das Ganze vermischt und nicht weiter erhitzt. Daraus
wurden Gelstäbe hergestellt, wie für die B₁₂/Agarose-
Gele beschrieben.
Der Succinatpuffer wurde wie folgt hergestellt: In 800 ml
destilliertem Wasser wurden 8,85 g (75 mM) Bernsteinsäure
gelöst und das Ganze durch Zusatz von Natriumhydroxid-
Plätzchen auf einen pH-Wert von 4,2 gebracht. Danach wurden
5,0 ml einer 30%igen oberflächenaktiven Lösung (Brÿ-35)
und 5,36 g Natriumchlorid zugesetzt und das Ganze auf 1 l
aufgefüllt.
Die anfängliche Absorption jedes Geleintauchstabes wurde
bei 630 nm abgelesen. Danach wurde ein Tropfen Blut, Plasma
oder Serum genau 30 s lang auf der Oberfläche des Gels ge
halten und danach rasch in zwei Waschvorgängen mit sauberem
Succinatpuffer abgewaschen. Die Endabsorption wurde
nach 20 min bei 630 nm abgelesen. Ein Diagramm, in dem
die Absorptionsänderung Δ A bei 630 nm gegen den Hämato
krit bei fester Plasmaalbuminkonzentration aufgetragen
ist, ist in Fig. 14 dargestellt, die den Hämatokriteffekt
erläutert.
Im vorliegenden Falle bezieht sich im allgemeinen der
Ausdruck "Inerstsubstanz" auf ein Material, das in einem
Lösungsmittel löslich ist und sich gegenüber der Zelle
oder der Teilchenfraktion und auch gegenüber den im
Lösungsmittel gelösten Substanzen inert verhält. Ins
besondere darf sich die Inertsubstanz nicht an gelöste
Moleküle, Zellen oder teilchenförmiges Material binden
oder mit diesen reagieren. Sie darf weder passiv noch
aktiv in der Innere von Zellen oder Teilchen eindringen.
Dieser Innenraum bleibt daher ein ausgenommenes Volumen.
Außderdem muß dieses Material einen im Hinblick auf die
mittlere Porengröße des Gelmaterials genügend niedrigen
effektiven molekularen Durchmesser aufweisen, so daß es in
diese Materialien und über die Lösungsmittel/Gel-Grenze
diffundierbar ist.
Die Verwendung verschiedener inerter Farbstoffe wurde für
die Hämatokritbestimmung vorgeschlagen. Einer dieser
Farbstoffe ist Vitamin B₁₂ (Cyanocobalamin), das eine
gute Wahl darstellt, weil es leicht in reiner Form er
hältlich ist und sich sehr wenig an Plasmaproteine bindet.
Menschliches Plasma enthält ungefähr 100 ng/ml an Vita
min B₁₂ bindbare Proteine, die Transcobalamine genannt
werden (Literatur: Allen, R.H. und Majerus, P.W.: Journal
of Bioligical Chemistry 23 (10); 7695, (1972). Außerdem
besitzt Vitamin B₁₂ einen Spektralbereich, der sich leicht
mit fotometrischen Methoden beobachten läßt. Inerte Farb
stoffe, die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren zur Be
stimmung des Hämatokrits einsetzbar sind, müssen insbe
sondere die folgenden Erfordernisse erfüllen:
- (a) Sie müssen wasserlöslich sein;
- (b) sie müssen eine geringstmögliche elektrische Ladung aufweisen, und
- (c) sie müssen, wenn optisch gemessen wird, eine große molare Absorptionsfähigkeit im sichtbaren Bereich, vor zugsweise bei einer Wellenlänge besitzen, die unterschieden werden kann.
Vitamin B₁₂ erfüllt die obigen Anforderungen. Es ist ein
großes Molekül (Molekulargewicht 1355), das lediglich
eine negative Ladung im Nukleotid besitzt. Die dreifache
positive Ladung am Kobaltatom ist durch die Bindung des
Kobaltatoms an sechs Leganden stark delokalisiert. Die
Abwesenheit hochgeladener Gruppen ist erforderlich, so
daß das Molekül nicht an Albumin und andere Proteine ge
bunden wird. Die Tatsache, daß es ein großes Molekül ist,
ist außerdem von Vorteil, weil dadurch Bindungen zufolge
sterischer Hinderung unterbleiben. Unter elektrischer
Neutralität ist ein geringstmögliches Vorhandensein
ionischer Gruppen zu verstehen, wie beispielsweise
CO₂-; NH₃+; NR₂H+; NRH₂+; SO₃-; usw., die herkömmlicher
weise dazu verwendet werden, um bei polyaromatischen
Farbstoffen Wasserlöslichkeit herzustellen.
Die Löslichkeit des Vitamin B₁₂-Moleküls wird durch Poly
hydroxylierung mit eine Anzahl von Hydroxylgruppen und
Etherbrücken erzielt. Die Amidogruppen
sind
ebenfalls polar. Die Löslichkeit des Moleküls wird jedoch hauptsächlich von dem Nucleotid abgeleitet.
ebenfalls polar. Die Löslichkeit des Moleküls wird jedoch hauptsächlich von dem Nucleotid abgeleitet.
Claims (42)
1. Vorrichtung zum Bestimmen des Hämatokrits in
einer Blutprobe, gekennzeichnet durch
ein poröses Material (13, 51, 76) mit einer vorher
bestimmten Oberfläche, auf die eine bestimmte Menge des
zu analysierenden Blutes aufbringbar ist, und eine gegen
über der Blutprobe inerte Substanz, die innerhalb des
Materials in vorherbestimmter Konzentration vorhanden
und über die vorherbestimmte Oberfläche aus dem Material
herausdiffundierbar ist, wenn das Blut auf die vorher
bestimmte Oberfläche aufgebracht wird.
2. Vorrichtung gemäß Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Material ein Gel ist.
3. Vorrichtung gemäß Anspruch 2,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Gel ein Hydrocolloid ist.
4. Vorrichtung gemäß Anspruch 2,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Gel durchsichtig ist.
5. Vorrichtung gemäß Anspruch 2,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Gel aus Gelatine, einem Gelatinederivat, einem
hydrophilen Cellulosederivat, einem Polysaccharid, Gummi
arabikum, Agarose, einer wasserlöslichen Polyvinylverbin
dung oder einem Acrylamidpolymerisat besteht.
6. Vorrichtung gemäß Anspruch 1,
dadurch gekennzeichent,
daß die inerte Substanz eine gefärbte Indikatorsubstanz
ist, die optisch nachweisbar ist.
7. Vorrichtung gemäß Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Inertsubstanz polyhydroxyliert ist.
8. Vorrichtung gemäß Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Inertsubstanz ein Glycosid ist.
9. Vorrichtung gemäß Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Inertsubstanz Vitamin B₁₂ (Cyanocobalamin) ist.
10. Vorrichtung gemäß Anspruch 1 zur zusätzlichen
Bestimmung einer Substanz in der Blutprobe,
dadurch gekennzeichnet,
daß das poröse Material außerdem ein Reagenz zur Umsetzung
mit dieser Substanz enthält.
11. Verfahren zum Bestimmen des Hämatokrits in
einer Blutprobe,
dadurch gekennzeichnet,
daß man
- (a) eine Oberfläche eines porösen Materials, das eine Inertsubstanz enthält, mit einer Blutprobe in Be rührung bringt, wobei die Inertsubstanz gegenüber der Blutprobe inert ist;
- (b) mindestens einen Teil des im Plasma der Blut probe Gelösten über die Oberfläche in das Material ein diffundieren läßt;
- (c) mindesten einen Teil der inerten Substanz aus dem Material über die Oberfläche, die mit dem Blut in Berührung steht, herausdiffundiern läßt und
- (d) die Konzentration der inerten Substanz, die aus dem Material herausdiffundiert ist, als Maß für den Hämatokrit der Blutprobe bestimmt.
12. Vorrichtung gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man außerdem
- (e) eine Anzahl poröser Materialien auf einem ge meinsamen Träger vorsieht;
- (f) jedes der porösen Materialien mit je einer Blut probe in Berührung bringt und
- (g) die Konzentration an der inerten Substanz, die aus jeden der porösen Materialien herausdiffundiert ist, als Maß für den Hämatokrit der entsprechenden Blutprobe, mit der es in Berührung stand, bestimmt.
13. Vorrichtung gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man die Diffundierschritte (b) und (c) auf
eine bestimmte Zeitdauer beschränkt.
14. Verfahren gemäß Anspruch 12 zur zusätzlichen
Bestimmung einer Substanz in der Blutprobe,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Material ein Reagenz zur Umsetzung mit dieser
Substanz in den gelösten Anteil des Plasmas enthält
und daß man außerdem
- (e) die Umsetzung des Reagenzes mit der zu bestim menden Substanz mißt.
15. Verfahren gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man außerdem
- (e) die Menge an Inertsubstanz mißt, die in dem Material nach der Diffusion als Maß für den Hämatokrit der Blutprobe verbleibt.
16. Verfahren gemäß Anspruch 14,
dadurch gekennzeichnet,
daß man außerdem
- (f) den Meßschritt (e) durch einen Faktor korrigiert, der von dem Hämatokrit der Blutprobe abhängt.
17. Verfahren gemäß Anspruch 14,
dadurch gekennzeichnet,
daß man die Diffusion der Inertsubstanz eine erste Färbung
und die Umsetzung des Reagenzes mit der zu bestimmenden
Substanz eine zweite Färbung erzeugen läßt, die ein Maß
für den Hämatokrit der Blutprobe bzw. die Menge an zu be
stimmender Substanz in der Blutprobe darstellen, und daß
man weiter
- (f) den Hämatokrit und die Konzentration des zu be stimmenden Bestandteils der Blutprobe aus der ersten und zweiten Färbung bestimmt.
18. Verfahren gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man außerdem
- (e) die Oberfläche des Materials zur Entfernung von auf dieser Oberfläche nach Durchführung des Diffusions schrittes (b) verbleibener Anteile der Blutprobe wäscht.
19. Verfahren gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man einen Diffundierschritt (b) anwendet, bei dem man
- (f) die Blutprobe auf einen Träger aufbringt und
- (g) den Träger mit dem Material in Berührung bringt, um die Diffusion der gelösten Bestandteile des Plasmas der Blutprobe in das Material zu bewirken.
20. Verfahren gemäß Anspruch 19,
dadurch gekennzeichnet,
daß man als Träger ein poröses Material verwendet und daß
man im Aufbringschritt (f) das poröse Material mit der
Blutprobe imprägniert.
21. Verfahren gemäß Anspruch 11, wobei man ein transpa
rentes Material und eine farbige Inertsubstanz verwendet,
dadurch gekennzeichnet,
daß man weiter
- (d) den Hämatokrit der Blutprobe dadurch bestimmt, daß man die Farbtiefe der Inertsubstanz in dem Material bestimmt.
22. Verfahren gemäß Anspruch 11, wobei man ein Material
mit einem Gehalt an einem Enzym zur Umsetzung mit einem
zu bestimmenden Stoff aus der Blutprobe verwendet,
dadurch gekennzeichnet,
daß man weiter
- (d) die Umsetzungsgeschwindigkeit des Enzyms be stimmt.
23. Verfahren gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man im Kontaktierungsschritt (a) die Blutprobe derart
aufbringt, daß sie eine vorherbestimmte Oberfläche des
Materials überlappt.
24. Verfahren gemäß Anspruch 23,
dadurch gekennzeichnet,
daß man die vorherbestimmte Oberfläche in ebener Form
vorsieht.
25. Verfahren gemäß Anspruch 11,
dadurch gekennzeichnet,
daß man in der Kontaktierungsstufe (a) die Blutprobe auf
der Oberfläche des Materials schüttelt.
26. Vorrichtung gemäß einem der Ansprüche 1, 3 bis 5
und 7 bis 9, enthaltend
eine Gelmasse (13, 51, 76) mit einer vorherbestimmten
Oberfläche, die der Blutprobe ausgesetzt ist und durch die
bei dem Kontakt mit der Blutprobe während einer bestimmten
Zeitdauer ein Teil der im Plasma gelösten Bestandteile aus
der Blutprobe in die Gelmasse diffundierbar ist;
eine in der Gelmasse enthaltene inerte Substanz und
einen Träger (11, 15, 19, 53, 60) zur Unterstützung
der Gelmasse und Begrenzung der vorherbestimmten Ober
fläche.
27. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß der Träger ein starres Substrat (53) umfaßt, das die
Gelmasse (51) an einem Ende und an dem anderen Ende einen
Handgriff (54) trägt sowie einen Klebeteil (52) zur Befe
stigung der Gelmasse an dem einen Ende des Substrates (53)
aufweist, und daß ein Ende des Substrates (53) als Eintauch
stab in die Blutprobe eintauchbar ist.
28. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß der Träger (11, 15, 19) eine längliche Substratober
fläche umfaßt, an deren einem Ende eine Vertiefung (12,
16, 20) zur Aufnahme der Gelmasse (13) vorgesehen ist.
29. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Gelmasse (13, 51, 76) außerdem ein Reagenz zur
Umsetzung mit einer zu bestimmenden Substanz der Blutprobe
enthält.
30. Vorrichtung gemäß Anspruch 29,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Substrat ein langgestrecktes, biegsames Gewebe
(60) ist und die Gelmasse (76) mindestens einen Streifen
umfaßt, der von dem Gewebe gehaltert ist und eine gegebene
Menge eines Reagenzes enthält, mit dem der zu analysierende
Bestandteil umsetzbar ist.
31. Vorrichtung gemäß Anspruch 29,
dadurch gekennzeichnet,
daß das Substrat ein langgestrecktes, biegsames Gewebe
(60) ist und die Gelmasse (76) mindestens zwei getrennte
Streifen (76 a, 76 b) umfaßt, die von dem Gewebe gehaltert
sind und die gegebene Mengen unterschiedlicher Reagenzien
enthalten, mit denen verschiedene zu bestimmende Bestand
teile umsetzbar sind.
32. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß sie weiter einen Träger (68) und Mittel zum Bewegen
von Teilen des Trägers in überlappende Berührung mit der
Gelmasse (76) enthält, wobei der Träger die Blutprobe
haltert und mindestens einen Teil der im Plasma gelösten
Bestandteile der Blutprobe von dem Träger in die Gelmasse
diffundierbar ist.
33. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß der Träger (11, 15, 19, 53, 60) aus Polyethylenter
phthalat, Polyethylen, Polypropylen oder Methylmethacrylat
besteht.
34. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß der Träger (11, 15, 19, 53, 60) aus durchsichtigem
Material besteht.
35. Vorrichtung gemäß Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Inertsubstanz in demselben Maße aus der Gelmasse
(13, 51, 76) diffuniert, wie die im Plasma gelösten Be
standteile in der Gelmasse eindiffundieren.
36. Vorrichtung zum automatischen Bestimmen des Häma
tokrits von aufeinanderfolgenden Blutproben gemäß
Anspruch 1,
gekennzeichnet durch
ein kontinuierliches Substrat (60), das eine Anzahl
poröser Materialien (76) trägt, wobei mindestens
ausgewählte Vertreter dieser Materialien (76) eine
bezüglich der Blutproben inerte Substanz enthalten, die
eine bekannte Konzentration aufweist und aus den
Materialien hinausdiffundierbar ist, ferner eine Proben
aufbringstation (62, 69) zum selektiven Aufbringen von
Blutproben auf die Materialien während einer bestimmten
Zeitdauer sowie eine Meßstation (65) zur Bestimmung
der Menge der Inertsubstanz, die aus den Materialien
hinausdiffundiert ist, als Maß für den Hämatokrit der
entsprechenden Blutprobe.
37. Vorrichtung gemäß Anspruch 36,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Probenaufgabestation (62, 69) Mittel zum Aufbringen
der Blutprobe in Tropfenform auf die porösen Materialien
(76) umfaßt.
38. Vorrichtung gemäß Anspruch 36,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Probenaufbringstation (69) Mittel zur Aufbringung
der Blutproben in Form aufeinanderfolgender Tropfen auf
ein bewegbares Gewebe (68) sowie Mittel zur Vorwärtsbewe
gung des Gewebes (68) und zum Inberührungbringen des Gewebes
mit den ausgewählten porösen Materialien (76), die auf
dem kontinuierlichen Substrat (60) gehaltert sind, enthält.
39. Vorrichtung gemäß Anspruch 36, worin ein
Teil der im Plasma gelösten Substanzen der Blutprobe während
einer bestimmten Zeit in die porösen Materialien (76) diffun
diert wird, dadurch gekennzeichnet,
daß es weiter Mittel (63) zur Entfernung nichtdiffundierter
Anteile der Probe von den porösen Materialien nach dieser
Zeitdauer enthält.
40. Vorrichtung gemäß Anspruch 36,
dadurch gekennzeichnet,
daß jedes der porösen Materialien (76) eine Anzahl von
Gelkörpern (76 a, b, c) enthält, die eine gegebene Menge
an Reagenz zur Umsetzung mit unterschiedlichen zu bestim
menden Substanzen in der Probe enthalten, und daß die
Meßstation (65) Mittel zum Messen der Umsetzung in jedem
der reagenzhaltigen Gelkörper in korrelierter Weise ent
hält.
41. Vorrichtung gemäß Anspruch 36,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Menge an Reagenz in jedem Gelkörper (76 a, b, c)
im Überschuß über die Menge an den unterschiedlichen zu
bestimmenden Substanzen, die in den Gelkörper während der
bestimmten Zeitdauer eindiffundieren, vorhanden ist.
42. Vorrichtung gemäß Anspruch 36,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Probenaufbringstation (62, 69) außerdem eine
Schütteleinrichtung (71) zum Schütteln der Blutproben
aufweist.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/936,436 US4250257A (en) | 1978-08-24 | 1978-08-24 | Whole blood analyses in porous media |
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Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2934110A1 DE2934110A1 (de) | 1980-03-06 |
DE2934110C2 true DE2934110C2 (de) | 1988-03-03 |
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JPS5697872A (en) * | 1980-01-07 | 1981-08-06 | Fuji Photo Film Co Ltd | Measuring material for concentration of hemoglobin in blood |
US4478944A (en) * | 1982-11-24 | 1984-10-23 | Eastman Kodak Company | Analytical element containing a barrier zone and process employing same |
US4678757A (en) * | 1985-04-11 | 1987-07-07 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Device and method for whole blood separation and analysis |
WO1987001581A1 (en) * | 1985-09-13 | 1987-03-26 | Chattan Nominees Pty. Ltd. | Collection of human body discharge |
US4772561A (en) * | 1985-12-23 | 1988-09-20 | Miles Inc. | Test device and method of determining concentration of a sample component |
US4745279A (en) * | 1986-01-02 | 1988-05-17 | American Hospital Supply Corporation | Hematocrit measuring apparatus |
US4962021A (en) * | 1986-06-20 | 1990-10-09 | Personal Diagnostics, Inc. | Analyte determination using gel including a reagent system reacts with analyte to change transmissive property of gel detectable by light beam transmitted through gel by total internal reflectance |
US4935346A (en) | 1986-08-13 | 1990-06-19 | Lifescan, Inc. | Minimum procedure system for the determination of analytes |
DK142388A (da) * | 1987-03-17 | 1988-09-18 | Diagnostic Systems Inc | Fremgangsmaade og apparat til detektering af analyter i fluidumproever, navnlig glucose i legemesvaesker |
DE3718140A1 (de) * | 1987-05-29 | 1988-12-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Heterogener immunoassay |
DE3851998T2 (de) * | 1987-08-25 | 1995-03-09 | Fuji Photo Film Co Ltd | Geräte für biochemische Analyse. |
US4833088A (en) * | 1987-09-25 | 1989-05-23 | Miles Inc. | Reagent strip handling mechanism |
US5200148A (en) * | 1988-01-11 | 1993-04-06 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Chemical assay tape |
US5054327A (en) * | 1988-01-19 | 1991-10-08 | Gregory Gould | Apparatus for auditing means used for measuring an aliquot from a bulk material for measurement of one or more characteristics of said bulk material |
US5040423A (en) * | 1988-01-19 | 1991-08-20 | Gregory Gould | Method and apparatus for auditing means used for measuring an aliquot from a bulk material for measurement of one or more characteristics of said bulk material |
JP2501460B2 (ja) * | 1988-03-23 | 1996-05-29 | オリンパス光学工業株式会社 | ヘマトクリット値の測定方法 |
CA1337682C (en) * | 1988-04-28 | 1995-12-05 | Roger Phillips | Whole blood glucose test strip |
US4994238A (en) * | 1988-06-09 | 1991-02-19 | Daffern George M | Constant volume chemical analysis test device |
US5652148A (en) * | 1993-04-20 | 1997-07-29 | Actimed Laboratories, Inc. | Method and apparatus for red blood cell separation |
US5660798A (en) * | 1993-04-20 | 1997-08-26 | Actimed Laboratories, Inc. | Apparatus for red blood cell separation |
US5766552A (en) * | 1993-04-20 | 1998-06-16 | Actimed Laboratories, Inc. | Apparatus for red blood cell separation |
DK0764046T3 (da) | 1994-06-16 | 2000-12-18 | Dade Behring Marburg Gmbh | Fremgangsmåde og apparat til blanding af væsker |
US5833924A (en) * | 1995-12-22 | 1998-11-10 | Universal Healthwatch, Inc. | Sampling-assay device and interface system |
US5833923A (en) * | 1995-12-22 | 1998-11-10 | Universal Healthwatch, Inc. | Sampling-assay interface system |
US5989747A (en) * | 1996-07-10 | 1999-11-23 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Cell electrode with thick tip portions |
US5846487A (en) * | 1996-11-26 | 1998-12-08 | Bennett, Ii; Edward R. | Specimen cartridge |
DE19753847A1 (de) | 1997-12-04 | 1999-06-10 | Roche Diagnostics Gmbh | Analytisches Testelement mit Kapillarkanal |
DE19753850A1 (de) | 1997-12-04 | 1999-06-10 | Roche Diagnostics Gmbh | Probennahmevorrichtung |
US6287870B1 (en) * | 1999-08-20 | 2001-09-11 | Robert A. Levine | Method and assembly for separating formed constituents from a liquid constituent in a complex biologic fluid sample |
US6458326B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-01 | Home Diagnostics, Inc. | Protective test strip platform |
US6562625B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-05-13 | Home Diagnostics, Inc. | Distinguishing test types through spectral analysis |
US6525330B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-02-25 | Home Diagnostics, Inc. | Method of strip insertion detection |
US6541266B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-04-01 | Home Diagnostics, Inc. | Method for determining concentration of an analyte in a test strip |
CA2484097A1 (en) * | 2002-04-17 | 2003-10-30 | Biosafe Medical Technologies, Inc. | Method and device for measurement of hematocrit |
US20060281187A1 (en) * | 2005-06-13 | 2006-12-14 | Rosedale Medical, Inc. | Analyte detection devices and methods with hematocrit/volume correction and feedback control |
US8529751B2 (en) * | 2006-03-31 | 2013-09-10 | Lifescan, Inc. | Systems and methods for discriminating control solution from a physiological sample |
US20090007947A1 (en) * | 2006-12-22 | 2009-01-08 | Angela Spangenberg | Portable weather shielding canopy |
WO2008097598A2 (en) * | 2007-02-06 | 2008-08-14 | Kensey Kenneth R | Blood volume analyzer |
US8778168B2 (en) | 2007-09-28 | 2014-07-15 | Lifescan, Inc. | Systems and methods of discriminating control solution from a physiological sample |
US8603768B2 (en) | 2008-01-17 | 2013-12-10 | Lifescan, Inc. | System and method for measuring an analyte in a sample |
JP5642066B2 (ja) | 2008-06-06 | 2014-12-17 | インテュイティ メディカル インコーポレイテッド | 体液の試料内に含まれている検体の存在または濃度を決定する検定を行う方法および装置 |
CA2726071C (en) | 2008-06-06 | 2024-01-02 | Intuity Medical, Inc. | Blood glucose monitoring device |
US8551320B2 (en) | 2008-06-09 | 2013-10-08 | Lifescan, Inc. | System and method for measuring an analyte in a sample |
US20120107949A1 (en) * | 2009-02-26 | 2012-05-03 | Jeffrey Haas | Test swipe for portable explosive or drug detection system |
DE102009029194A1 (de) | 2009-09-04 | 2011-04-07 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc., Neenah | Abtrennung gefärbter Stoffe aus wasserhaltigen Flüssigkeiten |
US8919605B2 (en) | 2009-11-30 | 2014-12-30 | Intuity Medical, Inc. | Calibration material delivery devices and methods |
WO2011162823A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Intuity Medical, Inc. | Analyte monitoring methods and systems |
EP2607492A1 (de) | 2011-12-22 | 2013-06-26 | Roche Diagniostics GmbH | Verfahren zur Bestimmung einer Analytkonzentration |
US9220646B2 (en) | 2012-03-30 | 2015-12-29 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Absorbent articles with improved stain decolorization |
CA2912283A1 (en) | 2013-06-21 | 2014-12-21 | Intuity Medical, Inc. | Analyte monitoring system with audible feedback |
US9237975B2 (en) | 2013-09-27 | 2016-01-19 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Absorbent article with side barriers and decolorizing agents |
CN105816184B (zh) * | 2015-01-06 | 2018-11-27 | 陈建诚 | 血糖量测方法及其装置 |
CN207636617U (zh) * | 2016-02-17 | 2018-07-20 | 贝克顿·迪金森公司 | 自动化预分析样品处理模块和容器穿梭器运送组件 |
KR102478639B1 (ko) * | 2016-02-23 | 2022-12-19 | 노을 주식회사 | 표지 물질을 저장하는 패치, 이를 이용하는 조직 진단 방법 및 장치 |
KR20170099739A (ko) | 2016-02-23 | 2017-09-01 | 노을 주식회사 | 접촉식 염색 보조 패치, 그 제조 방법 및 이를 이용하는 염색 방법 |
WO2017146505A1 (ko) * | 2016-02-23 | 2017-08-31 | 노을 주식회사 | 물질 표지 패치, 이를 이용하는 조직 진단 방법 및 장치 |
WO2017146506A1 (ko) * | 2016-02-23 | 2017-08-31 | 노을 주식회사 | 혈액 염색 패치, 이를 이용하는 혈액 검사 방법 및 장치 |
US10371610B2 (en) | 2016-02-23 | 2019-08-06 | Noul Co., Ltd. | Contact-type patch, staining method using the same, and manufacturing method thereof |
JP7063886B2 (ja) * | 2016-09-15 | 2022-05-09 | エフ.ホフマン-ラ ロシュ アーゲー | マルチプレックスリアルタイムpcrを実施する方法 |
JP7015521B2 (ja) * | 2017-11-09 | 2022-02-03 | 国立大学法人弘前大学 | 全血アルブミン分析装置および全血アルブミン分析方法 |
WO2019212235A1 (ko) * | 2018-05-03 | 2019-11-07 | 노을 주식회사 | 검체의 검사 방법 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3146163A (en) * | 1962-01-23 | 1964-08-25 | John H Brewer | Apparatus for separating certain components from blood |
US3368872A (en) * | 1964-08-31 | 1968-02-13 | Scientific Industries | Automatic chemical analyzer |
NL126573C (de) * | 1965-08-02 | |||
US3526480A (en) * | 1966-12-15 | 1970-09-01 | Xerox Corp | Automated chemical analyzer |
US3981776A (en) * | 1967-02-16 | 1976-09-21 | Rolf Saxholm | Magnetically responsive, biologically active substance and associated methods and apparatus |
US3552928A (en) * | 1967-07-19 | 1971-01-05 | Miles Lab | Whole blood separation means and test system using same |
US3607093A (en) * | 1968-02-15 | 1971-09-21 | Schering Corp | Devices for testing biological liquids |
US3585004A (en) * | 1969-03-21 | 1971-06-15 | Miles Lab | Test composition and device for detecting couplable compounds |
NO124603B (de) * | 1969-05-03 | 1972-05-08 | Rolf Saxholm | |
US3674438A (en) * | 1970-05-20 | 1972-07-04 | James T Shen | Ouchterlony technique apparatus |
DE2152099C3 (de) * | 1971-10-19 | 1975-03-13 | Wolfgang Dipl.-Phys. Dr.Rer.Nat. 2000 Norderstedt Ludwig-Clarius | Teststreifen und Verfahren zur Analyse chemischer Lösungen |
US3798004A (en) * | 1972-04-18 | 1974-03-19 | Ames Yissum Ltd | Test device |
US3814670A (en) * | 1972-04-26 | 1974-06-04 | Miles Lab | Test article for use in microbiology |
DE2332760C3 (de) * | 1972-06-30 | 1982-03-04 | Eastman Kodak Co., 14650 Rochester, N.Y. | Material für die quantitative spektrophotometrische Analyse einer Flüssigkeit |
US3975162A (en) * | 1974-03-13 | 1976-08-17 | Marine Colloids, Inc. | Applying reagent to medium and device therefor |
DE2416047A1 (de) * | 1974-04-03 | 1975-10-09 | Ludwig Clarius Wolfgang Dipl P | Transparenter teststreifen inkonstanter dicke oder dichte und verfahren zur analyse chemischer loesungen |
US3901657A (en) * | 1974-04-29 | 1975-08-26 | Sun Scient Inc | Device for testing solutions and body fluids |
US3990849A (en) * | 1975-02-07 | 1976-11-09 | Technicon Instruments Corporation | Separation of cells from liquid components of blood |
-
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