DE2839224C2 - - Google Patents

Description

Die Erfindung bezieht sich auf 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]- chinolin-4-carbonsäure(α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amid und dessen wasserlösliche Salze. Die genannte Verbindung besitzt eine antiblastische Wirkung.

Es ist eine große Anzahl von chemischen Verbindungen, die eine antiblastische Wirksamkeit besitzen, darunter auch 5-Nitrofuranderivate, bekannt.

Die ersten Mitteilungen über die geschwulsthemmende Wirksamkeit der Verbindungen der Nitrofuranreihe sind mit Furazilin (Furazin) [Green M. N., Friedgood Ch. E. - "Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.)", 1948, v. 69, p. 603-604; W. A. Wasiljewa, L. M. Tutkewitsch - "Tsw. AN Latw. SSR" (Nachrichten der AdW der Lettischen SSR), 1950, Bd. 37, S. 57-64; L. M. Tutkewitsch - im Buch "Furazilin und die Erfahrung der Anwendung", Riga, 1953, S. 175-180; Prior I. T., Ferguson I. H. - "Cancer (Philad)", 1950, v. 3, p. 1062-1072; Friedgood Ch., Green M. N. - "Cancer Res.", 1950, v. 10, p. 613-615] und Nitrofurfurylidenpropandinitryl verbunden [Petrakis N. L., Bierman H. R., Shimkin M. B. - "Cancer Res.", 1952, v. 12, p. 573; Gal E. M., Creenberg D. M. - "J. Am. Chem. Soc.", 1951, v. 73, p. 502-503]. Später wurde Furazilin zur Behandlung der testikulären Geschwulste, hauptsächlich des Seminoms und dessen Metastasen verwendet [Friedgood Ch. E., Danza A. L., Boccabella A. - "Cancer Res.", 1952, v. 12, p. 262-263; Wildermuth O. - "Radiology", 1955, v. 65, p. 599-603; Ishiyama K. G., Adachi J. - "Cancer Chemother. Abstr.", 1964, v. 5, p. 439-440; Karol H. I. - J. Urol. (Baltimore)", 1960, v. 84, p. 120-122; Hayllar B. L., O'/Neal A. H., Dotterer I. A. - "J. Urol. (Baltimore)", 1960, v. 84, p. 565-568).

Bei der Untersuchung der geschwulsthemmenden Eigenschaften der Nitrofuranderivate wurde festgestellt, daß 5-Nitrofuran das Wachstum des Jensen-Sarkoms und des Walker-Karzinosarkoms um 39 bis 51% hemmt.

5-Nitrofurfural, dessen Vinyloga und Acetale besitzen ungefähr die gleiche Wirksamkeit und eine höhere akute Toxizität. Der antiblastische Effekt wird durch die Kondensationsprodukte der Aldehyde der Nitrofuranreihe mit (β-Hydrazinoethyl)-pyridin, 3-Hydrazino-4-amino-1,2,4-triazol (S. A. Giller, R. Ju. Kalnberga, A. A. Sidermane u. a. - im Buch "Wege zur Synthese und Forschung nach Zytostatika", Heft 2, Moskau 1967, S. 75 bis 81; S. A. Giller u. a. - im Buch "Furazolidin", Riga, 1962, S. 5-18; A. Sh. Dauwarte, A. A. Sidermane, I. M. Krawtschenko u. a. - im Buch "Unterlagen der 1. Allunionskonferenz zur Chemotherapie bösartiger Geschwulste", Riga, 1968, S. 216-217; A. Sh. Dauwarte u. a. - im Buch "Geschwulsthemmende Verbindungen der 5-Nitrofuranreihe", Riga, 1972, S. 17-30) und 5-Aminobenzimidazolderivaten hervorgerufen [Fuska I., Fuskova A., Jurasek A. "Neoplasma (Bratisl.)", 1973, v. 20, p. 171- 179].

Von 1964 an wurde die Synthese und Untersuchung biologischer Eigenschaften der Nitrofurylpolienylheterocyclen, d. h. der Verbindungen vom neuen Strukturtyp durchgeführt, deren positiver Effekt durch die Vereinigung von Nitrofuran und Heterocyclus in einem Molekül durchs System der -CH=CH-Bindungen bedingt wird (SU-PS 2 42 174, 2 55 942 und 3 33 835). Die wirksamsten Verbindungen aus dieser Klasse sind Nitrofurylvinylpyrimidine (Katae H., Iwana H., Takase Y. et al. - "Arzneimittel-Forschung", 1967, Bd. 17, S. 1030-1034; I. M. Krawtschenko, A. A. Sidermane u. a. - im Buch "Unterlagen der 1. Allunionskonferenz zur Chemotherapie bösartiger Geschwulste", Riga, 1968, S. 234-235) und Chinoline (A. A. Sidermane u. a. - "Farmakologÿa i toksikologÿa" (Pharmokologie und Toxikologie), 1970, Nr. 6, S. 711-715; Miura K., Ikeda M., Oohashi T. et al. - "J. pharm. Soc. Jap.", 1964, v. 84, p. 341-345; Ujiie T. - "Chem. pharm. Bull.", 1966, v. 14, p. 461-466; Miura K. et al. - "J. pharm. Soc. Jap.", 1964, v. 84, p. 537-543; Miura K., Okada I. - "Chem. pharm. Bull.", 1965, v. 13, p. 525-528).

Das bekannte 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4- carbonsäureamid, das durch Kondensation des 2-Methyl-chinolin- 4-carbonsäureamids mit 5-Nitrofurfurol erhalten wird, besitzt ein ziemlich enges zytostatisches Wirkungsspektrum [K. Miura, M. Ikeda, T. Oohashi, Y. Igarashi, J. Pharm. Soc. Japan, 1964, 84 (6), p. 537-543; K. Miura, Iokada Chem. Pharm. Bull., 1965, 13 (5), p. 525-528]. Nach diesseitigen Angaben wurde bei der peroralen Gabe des 2-[2′- (5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäureamids keine geschwulsthemmende Wirkung am Jensen-Sarkom, Pliss-Lymphosarkom und Walker-Karzinosarkom nachgewiesen. Außerdem bildet die gegebene Verbindung mit Säuren keine wasserlöslichen Salze. Zweifellos ist der letzte Umstand ein wichtiger Faktor bei der Entwicklung antiblastischer Chemotherapeutika.

In bezug auf den biochemischen Mechanismus der zytostatischen Wirkung von nicht alkylierenden 5-Nitrofuranen, darunter auch von Nitrofurylvinylchinolinen, wurde festgestellt, daß die gegebenen Verbindungen die mit dem Phosphorylieren verbundene Atmung hemmen, und einige Nitrofurylvinylchinoline die Dehydrogenasenaktivität der Asziteszellen des Ehrlich-Karzinoms und die Biosynthese von DNS, RNS und Proteinen inhibieren.

Alle oben beschriebenen 5-Nitrofuranderivate haben bis jetzt wegen der Toxizität, einer niedrigen Selektivität der antiblastischen Wirkung und der schlechten Löslichkeit keine praktische Anwendung in der Medizin gefunden.

Diese Nitrofuranderivate besitzen auch antimikrobielle Wirksamkeit.

Bekannt sind 2-(5′-Nitrofurfurylidenmethyl)chinolin und seine 5-Chlor-8-hydorxy-5,8-dichlor-8-acetoxy-6-nitroderivate, die gegenüber grampositiven Bakterien und Pilzen antimikrobielle Wirkung zeigen. So z. B. werden für die Unterdrückung des Wachstums von Staphylococcus aureus Chinoline in minimalen Konzentrationen (0,2 µg/ml) verwendet, was nur 1/50 der Menge ausmacht, die für Furazolidon und Nitrofurantion und nur 1/250 der Menge ausmacht, die für Nitrofural erforderlich ist (DE-PS 17 95 487, 1974).

Bekannt sind 2-(5′-Nitrofurfurylidenmethyl)-6-aminochinolin und seine Substitutionsderivate, die bei gram-positiven und -negativen Bakterien wirksam sind (DE-PS 20 09 222, 1979).

4-[(5′-Nitrofuryl-2′)vinyl-(2-amino)-acetamino]chinoline zeigen eine erheblich höhere antibakterielle Wirkung als das zu Vergleichszwecken herangezogene 3-(5′-Nitrofurfurylidenamino)- oxazolidon-2. So beträgt die bakteriostatische Konzentration im Hinblick auf Staphylococcus aureus und Streptococcus haemolyticus 0,024 µg/ml bzw. 0,012 µg/ml (für Oxazolidon-2 - 1,56 µg/ml bzw. 50 µg/ml) (DE-PS 16 20 054, 1972).

Mikrofurylsubstituierte 4-Amino- und 4,6-Diaminochinoline zeigen analoge hohe antibakterielle Wirkung. Als Vergleichspräparat wurde neben dem genannten Oxazolidon-2 auch Tetracyclin verwendet (DE-PS 14 70 047, 1971).

Die Aufgabe der Erfindung bestand in der Erweiterung des Assortiments von Chemotherapeutika, die bösartige Geschwulste selektiv beeinflussen und eine weniger ausgeprägte Toxizität besitzen.

Diese Aufgabe wird wie aus den nachstehenden Ansprüchen ersichtlich gelöst.

Es wurde diesseits festgestellt, daß die erfindungsgemäße Verbindung der Formel I eine deutlich ausgeprägte antiblastische Wirksamkeit aufweist und dabei eine Kontaktwirkung auf die Geschwulstzelle selektiv besitzt.

Die Verbindung der Formel I wurde durch die Umsetzungen gemäß Anspruch 2 erhalten.

Die Umsetzung zwischen dem Säurechlorid mit dem Amin kann dabei in stöchiometrischen Mengen oder unter Überschuß des Amins im wässerigem Medium verlaufen. Wenn die Umsetzung im stöchiometrischen Verhältnis durchgeführt wird, empfiehlt es sich, diese in Gegenwart von Triethylamin durchzuführen. Die Salze der erfindungsgemäßen Verbindung können bei ihrer Umsetzung mit Säuren, beispielsweise mit o-Phosphor-, Chlorwasserstoff- oder Bromwasserstoffsäure erhalten werden.

Die Umsetzung verläuft nach folgendem Schema:

worin R die Gruppe -CH(CH₃)(CH₂)₃N(C₂H₅)₂, und K die Säure bedeuten.

Die erhaltene Substanz stellt ein grünlich-gelbes amorphes Pulver dar; die freie Base ist in Wasser schwer und in Chloroform gut löslich; deren Salze sind gut wasserlöslich.

Die Ausgangsverbindung ist eine bekannte und zugängliche Substanz.

Die erfindungsgemäße Verbindung der Formel I und deren Salze besitzen eine ausgeprägte antiblastische Wirkung in bezug auf Ehrlich-Asziteskarzinom, Sarkom 37, lymphatische Leukämie L 5178 und eine antimetastatische Wirksamkeit in bezug auf Lewis-Lungenkarzinom. Ein gewisser geschwulsthemmender Effekt wurde in bezug auf Sarkome 180, AK, Mammaadenokarzinom AC 755, Adenokarzinom des Dickdarms Akatol-1, Melanom B 16 und Hämozytoblastose La nachgewiesen. Die erfindungsgemäße Verbindung steht, was ihre zytostatische Wirksamkeit, beispielsweise in bezug auf Ehrlich-Asziteskarzinom betrifft, den gut bekannten Zytostatika, wie Thioguanin, Zyklozytidin und Zyklophosphan nicht nach oder übersteigt sogar deren Wirksamkeit (die Verlängerung der Überlebensdauer von Mäusen beträgt 100, 138 bzw. 0%).

Außerdem unterscheidet sich die erfindungsgemäße Verbindung sowohl der Struktur als auch dem Mechanismus der zytostatischen Wirkung nach von den bekannten Präparaten.

Bei der Untersuchung der geschwulsthemmenden Wirksamkeit der Verbindungen hat sich folgendes herausgestellt:

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diäthylaminobutyl)amid verlängert die Überlebensdauer von Mäusen mit Ehrlich-Asziteskarzinom um 70 bis 130% bei dreimaliger Einführung in Dosen von 10 und 17 mg/kg; um 30 bis 140% mit lymphatischer Leukämie L 5178 in einer Dosis von 6 bis 28 mg/kg; bis 25% mit Melanom B 16 in einer Dosis von 17 mg/kg und bis 20% mit Sarkom 180 und AK.

Bei der Untersuchung der Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindung auf Metastasen erwies es sich, daß die Verlängerung der Überlebensdauer der Mäuse mit Lewis-Lungenkarzinom um 30% in Tagesdosen von 6 und 10 mg/kg nachgewiesen wird.

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diäthylaminobutyl)amiddiphosphat verlängert die Überlebensdauer der Mäuse mit Ehrlich-Asziteskarzinom bei der intraperitonealen Einführung von 3- bis 5mal in Tagesdosen von 10 bis 28 mg/kg um 140 bis 180%, und mit lymphatischer Leukämie L 5178 bis 130%.

Die Verlängerung der Überlebensdauer wurde bei Mäusen mit Adenokarzinom 755 und Sarkom 180 bis 20% in Tagesdosen von 10 und 17 mg/kg nachgewiesen.

Adenokarzinom des Dickdarms Akatol-1 ist gegen die erfindungsgemäßen Verbindungen empfindlich.

Bei der Untersuchung der Wirkung auf Metastasen wurde festgestellt, daß die Verbindungen in einer Tagesdosis von 3,6 mg/kg die Überlebensdauer von Ratten mit Walker-Karzinom um 75% verlängern.

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diäthylaminobutyl)amidhydrochlorid verlängert die Überlebensdauer von Mäusen mit Ehrlich-Asziteskarzinom bei einer einmaligen intraperitonealen Einführung in einer Dosis von 5 mg/kg um 85% (die Präparateeinführung begann man 7 Tage nach der Geschwulstimplantation).

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diäthylaminobutyl)amidhydrobromid verlängert die Überlebensdauer von Mäusen mit Ehrlich-Asziteskarzinom bei einer einmaligen intraperitonealen Einführung in einer Dosis von 28 mg/kg um 85% (die Präparateinführung begann man 7 Tage nach der Geschwulstimplantation).

Besondere Aufmerksamkeit lenkt auf sich die Verbindung 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure-(α- methyl-δ-diäthylaminobutyl)amidtriphosphat mit einer Struktur, die der obengenannten Formel II entspricht, worin:

R -CH(CH₃)(CH₂)₃N(C₂H₅)₂, n = 1; K 3 H₃PO₄

bedeuten.

Diese Verbindung wurde in Form von wäßrigen Lösungen eingesetzt. Das Präparat, das als Wirkstoff diese Substanz in wäßriger Lösung enthält, wird im folgenden Ginichin genannt.

Der wichtige Vorteil des Präparats Ginichin besteht in seiner selektiven Wirkung auf die Geschwulstzellen.

Nachstehend wird die ausführliche Beschreibung des Präparats Ginichin angeführt.

Im Ergebnis der Untersuchung der erfindungsgemäßen Zytostatika in der Reihe der Nitrofurylvinylchinoline wurde festgestellt, daß sich das neue Zytostatikum der Kontaktwirkung - Ginichin - für die Behandlung der Kranken mit karzinomatösen Exsudat in der Plura- und Bauchhöhle als nützlich erweisen kann.

Bekanntlich zwingt die intensive Exsudatansammlung in serösen Höhlen zu wiederholten Punktionen. Jedoch kann sich bei diesen Eingriffen bakterielle Infektion im Exsudat entwickeln. Im Zusammenhang damit sind von besonderem Interesse Zytostatika, die außer der geschwulsthemmenden Wirkung auch eine antibakterielle Wirkung besitzen. Ginichin vereinigt diese beiden Eigenschaften in sich.

Noch ein Vorteil von Ginichin besteht im Ausbleiben des inhibierenden Einflusses auf die Wundheilungsprozesse.

Die zytostatische Kontaktwirkung von Ginichin wurde im Versuch am Ehrlich-Asziteskarzinom nachgewiesen. Der Versuch wurde folgenderweise angestellt. Stammlosen weißen Mäusen wurden je 10⁶ Zellen von Ehrlich-Karzinom intraperitoneal eingeführt. Ginichin wurde 1, 5 und 9 Tage nach der Geschwulstimplantation in fünf verschiedenen Dosen (6, 10, 17, 28 und 45 mg/kg) intraperitoneal angewandt. Jede Präparatdosis wurde an 6 Mäusen geprüft. Die Kontrollgruppe bestand aus 18 Mäusen. Die Ginichinlösung wurde durch die Auflösung der Substanz ex tempore in destilliertem Wasser oder im Puffer bereitgestellt. Die Präparatwirkung ist in den Diagrammen 1, 2, 3 gezeigt.

Ginichin wurde in verschiedenen Konzentrationen von 0,1%- bis 0,35%iger Lösung geprüft. Dabei wurde festgestellt, daß sich der zytostatische Effekt von Ginichin im gegebenen Konzentrationsbereich nicht verändert.

Aus den im Diagramm 1 angeführten Angaben ist ersichtlich, daß das Ginichin hauptsächlich eine geschwulsthemmende Kontaktwirkung besitzt, weil bei der intraperitonealen Einführung die Überlebensdauer der Versuchstiere um 100%, bei der intravenösen aber nur um 15% verlängert wurde.

Es ist interessant hervorzuheben, daß sich der geschwulsthemmende Effekt von Ginichin sowohl bei der einmaligen intraperitonealen Einführung am 1. Tag nach der Geschwulstimplantation als auch bei einer fünfmaligen Einführung 1, 2, 3, 4, 7 Tage nach der Geschwulstimplantation nicht wesentlich verändert (Diagramm 2).

Ein bedeutender zytostatischer Effekt von Ginichin wird auch bei der aufgeschobenen intraperitonealen Einführung (7 Tage nach der Geschwulstimplantation) beobachtet (Diagramm 3). Bei der Ginichin-Einführung am 1. Tag nach der Implantation erhöht sich die Überlebensdauer der Versuchstiere um 90%, 3 Tage nach der Implantation - um 80%, 7 Tage - um 100%, 14 Tage - um 55%. Die geschwulsthemmende Wirkung von Ginichin bleibt also auch bei einer hohen Zahl der sich bildenden Geschwulstzellen ausreichend hoch.

Außer den Versuchen am Ehrlich-Asziteskarzinom wurde Ginichin noch an 12 implantierten Geschwulsten untersucht, 7 Geschwulste (Melanom B₁₆, Sarkom AK, Karzinom des Dickdarms Akatol-1, Sarkom 180, Adenokarzinom 755, Lewis- Lungenkarzinom und Sarkom 37) wurden subkutan zu 50 mg Geschwulstzellen pro Maus implantiert. Vier Geschwulste (lymphatische Leukämien L 5178, L 5178Y, L 1210 und P-388) wurden intraperitoneal zu 10⁶ Zellen pro Maus implantiert. Eine Geschwulst (Hämozytoblastose La) wurde intraperitoneal je 50 mg Zellsuspension der Milz und Leber der an Hämozytoblastose La kranken Mäuse implantiert. Ginichin wurde intraperitoneal 5mal während 7 Tagen: am 1., 2., 3., 4., 7. Tag oder am 3., 4., 5., 6., 7. Tag nach der Geschwulstimplantation eingeführt. Der Prozentsatz der Geschwulstwachstumshemmung wurde 14 Tage nach der letzten Ginichin-Einführung verfolgt; die Überlebensdauer der Versuchstiere wurde während 60 Tage verfolgt.

Es wurde festgestellt, daß Ginichin eine schwache zytostatische Wirkung auf Melanom B₁₆, Sarkom AK, Akatol-1, Sarkom 180, Adenokarzinom 755 und lymphatische Leukämie L 5178 ausübt (siehe Tabelle 1 und 2).

Die lymphatischen Leukämien L 5178Y, L 1210 und P-388, Hämozytoblastose La, Lewis-Lungenkarzinom und Sarkom 37 sind praktisch gegen Ginichin unempfindlich.

In einzelnen Versuchen wurde der Einfluß des bekannten Präparats Ftorafur auf den geschwulsthemmenden Effekt von Ginichin untersucht. Es wurde festgestellt, daß Ftorafur das Summieren und in einigen Fällen die Potenzierung des zytostatischen Effekts von Ginichin hervorruft. Die gegebenen Versuche wurden am Ehrlich-Asziteskarzinom durchgeführt. Die Einführung der Präparate erfolgte 1, 2, 3, 4 und 7 Tage nach der Geschwulstimplantation. Ginichin wurde intraperitoneal, Ftorafur - subkutan injiziert.

Anhand der erhaltenen Angaben kann man annehmen, daß bei Kranken, deren Geschwulste gegen die antiblastische Wirkung von Ftorafur empfindlich sind, die Einführung von Ginichin (in die Höhle) mit der intravenösen und peroralen Einführung von Ftorafur kombiniert werden kann. Die Angaben sind in Tabelle 3 dargestellt.

Die Angaben über die Untersuchung der Toxizität von Ginichin sind in Tabelle 4 angeführt.

Aus der Tabelle 4 ist ersichtlich, daß die Empfindlichkeit der Mäuse gegen Ginichin nicht von ihrem Geschlecht abhängt. Es ist interessant, daß sich die Toxizität von Ginichin bei der einmaligen intraperitonealen Einführung des Präparats den Mäusen 7 Tage nach der Implantation des Ehrlich-Asziteskarzinoms um das Dreifache vermindert. Bei der intravenösen Einführung steigt die Toxizität von Ginichin um das Fünffache im Vergleich zur intraperitonealen Einführung an. Bei der peroralen Einführung wird die Toxizität von Ginichin im Gegenteil um das 4- bis 5fache niedriger.

Die antimikrobielle Aktivität des Präparats wurde nach der Methode der zweifachen Reihenverdünnungen in einem flüssigen und einem festen Nährmedium im Vergleich mit dem bekannten Präparat Furagin untersucht. Einige Daten sind in Tabelle I und II zusammengefaßt.

Tabelle 3

Bakteriostatische Aktivität von Ginichin und Furagin (flüssiges Nährmedium)

Tabelle 4

Bakteriostatische Aktivität von Ginichin und Furagin gegenüber Stämmen, die gegenüber 3-6 Antibiotika resistent sind

Die Untersuchung der biologischen Zugänglichkeit von Ginichin wurde an weißen stammlosen männlichen Ratten von 150 bis 200 g Körpergewicht und weißen stammlosen männlichen Mäusen von 25 bis 30 g Körpergewicht durchgeführt. Der Versuch wurde 7 Tage nach der Implantation des Ehrlich-Asziteskarzinoms den Tieren begonnen.

Ginichin wurde intraperitoneal in einer Dosis von 100 mg/kg eingeführt, als Lösungsmittel wurde destilliertes Wasser verwendet. In bestimmten Zeitabständen (5, 15, 30 und 60 min) wurden die Tiere getötet. Zur Analyse wurde biologisches Material (Blut und Leber bei Ratten, Aszites bei Mäusen) genommen. Zur Abtrennung der Aszitesflüssigkeit und der Geschwulstzellen wurde der Aszites bei 2000 U/min während 10 min zentrifugiert. Der Niederschlag wurde mit einem Gemisch aus physiologischer Lösung und Heparin gewaschen und unter den gleichen Bedingungen nochmals zentrifugiert. Aus Asziteszellen und Leber wurden 20%ige Homogenate im destillierten Wasser bereitgestellt.

Ginichin wurde aus dem biologischen Material mit Chloroform extrahiert. In den Versuchen in vitro wurde festgestellt, daß die Extraktion mit Chloroform gestattet, eine 100%ige Präparatausbeute aus dem biologischen Material zu erhalten.

Der Extraktionsprozeß bestand aus folgenden Stufen: Zu 1 ml der zu untersuchenden Probe setzte man 0,1 ml Ethylalkohol hinzu, mischte mit 0,5 ml gesättigter Kaliumkarbonatlösung sorgfältig durch, trug 4 ml Chloroform ein. Die verschlossenen Glasröhren wurden am Schütteltisch während 1 Stunde intensiv geschüttelt. Nach dem Schütteln wurden die Proben bei 5000 U/min während 10 min zentrifugiert. Die Chloroformschicht wurde zur Analyse genommen. Bei der Arbeit vermied man die Tagesbeleuchtung.

Die Präparatkonzentration in biologischen Proben wurde mit Hilfe der spektrophotometrischen Methode bei 400 nm bestimmt, indem der molare Absorptionskoeffizient ausgenutzt wurde (ε · 10^-3 = 36,4).

Die Ergebnisse wurden in µg/ml Probe ausgedrückt. Die Minimalempfindlichkeit der Methode betrug 1,1 µg/ml.

Tabelle 5

Einfluß von Ftorafur auf den geschwulsthemmenden Effekt von Ginichin bei dessen Einführung 1, 2, 3, 4, 7 Tage nach der intraperitonealen Implantation des Ehrlich-Asziteskarzinoms

Tabelle 6

LD₅₀ von Ginichin

Die Untersuchung der Biozugänglichkeit von Ginichin bei der intraperitonealen Einführung zeigte, daß sich das Präparat schon nach 5 min im Blut nachweisen läßt, was von seinem schnellen Durchdringen durch die Gewebebarrieren zeugt. Der maximale Ginichinspiegel wird 30 min nach der Einführung beobachtet und beträgt 23 µg/ml. Nachher sinkt die Präparationskonzentration im Blutserum schnell und beträgt am Ende der Untersuchungsperiode (60 min) 3 µg/ml, was sich schon der Empfindlichkeitsgrenze der Methode nähert. Ein schnelles Verschwinden des Präparats aus dem Blut kann offensichtlich sowohl durch dessen Verteilung in Organen und Geweben, als auch durch die Klimination aus dem Organismus bedingt werden.

Es wurde festgestellt, daß sich Ginichin in der Leber in Konzentrationen ansammelt, die dessen Konzentration im Blut etwas übersteigen (die Maximalkonzentration, die 20 min nach der Einführung entsteht, beträgt 28 µg/ml).

Die Konzentration von Ginichin ist nach dessen intraperitonealen Einführung in Asziteszellen viel höher als in der Aszitesflüssigkeit. Die maximale Präparatkonzentration in den Zellen, die in den ersten Fristen nach der Probenentnahme beobachtet wird (5 min), ist um das 4fache höher als in der Aszitesflüssigkeit (40 bis 10 µg/ml), was von dessen Bindung mit Zellkomponenten zeugt. Am Ende der Beobachtungsfrist (60 min) ist die Ginichin- Konzentration in den Geschwulstzellen auch höher, als in der Aszitesflüssigkeit.

Die Angaben über die vorherrschende Kumulation von Ginichin in den Asziteszellen gestatten, es als Präparat der Kontaktwirkung zu empfehlen.

Bekanntlich ist die geschwulsthemmende Wirkung der meisten Zytostatika mit der Hemmung der Biosynthese von Makromolekülen verbunden. Im Zusammenhang damit kann die Inhibierungseffektivität der Biosynthese der Makromolekülen mit Chemotherapeutika in den Geschwulst- und Normalgeweben als Index ihrer Wirkungsselektivität dienen, was hauptsächlich ihre Tauglichkeit für die onkologische Praxis bestimmt.

Der Einfluß von Ginichin auf die Biosynthese der Makromolekülen in den Versuchen in vitro wurde mit den Zellsuspensionen des Ehrlich-Asziteskarzinoms untersucht. Die Versuche wurden an weißen stammlosen Mäusen von 18 bis 20 g Körpergewicht durchgeführt. Der Aszites wurde 7-8 Tage nach der Implantation genommen, mit abgekühltem Igl- Medium (pH = 7,4), das 0,1% Heparin enthält, verdünnt, und die Zellen wurden durchs Zentrifugieren bei 600 g gefällt. Die Zellen wurden zweimal mit demselben Medium gewaschen und daraus wurde die 10%ige Suspension in Igl-Medium bereitgestellt.

Der Einfluß von Ginichin auf die Biosynthese von DNS, RNS und Protein in den Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms wurde nach der Einführung von speziellen markierten Vorläufern in die säureunlösliche Zellfraktion eingeschätzt: von 2-¹⁴C-Thymidin, 2-¹⁴C-Uridin bzw. 2-¹⁴C-Leuzin.

Das Inkubationsmedium enthielt im Gesamtvolumen von 2 ml 100 mg Geschwulstzellen in Suspensionsform, Igl-Medium (pH = 7,4), Ginichin in der Konzentration von 1 · 10^-4 m und markierte Vorläufer der Nukleinsäuren und des Proteins, deren Radioaktivität 0,1 µCu entspricht. Die Kontrollproben enthielten statt der Präparatlösung entsprechendes Volumen destillierten Wassers.

Die Inkubation wurde in Gefäßchen der Warburg-Apparatur bei 37°C während 1 Stunde durchgeführt. Nach der Inkubation wurden die Geschwulstzellen durch die Zugabe einer kalten 10%igen Trichloressigsäure zum Inkubationsmedium (1 : 1) fixiert. Parallel wurde eine Kontrollprobe ohne Inkubation bereitgestellt, in welche vor der Zugabe der Zellsuspension 10%ige Trichloressigsäure in demselben Verhältnis eingegossen wurde.

Die gefällten Zellen wurden während 20 min bei 0°C mit 5%iger Trichloressigsäure extrahiert. Dann wurden die Proben durch Milliporenfilter (HUFS, Porendurchmesser 0,4 µm) filtriert. Der Niederschlag am Filter wurde 2mal jeweils mit 5 ml kalter 5%iger Trichloressigsäure und einmal mit 5 ml Toluol durchgewaschen. Die in der Luft getrockneten Filter wurden in Quarzküvetten übergetragen, die 10 ml Toluolszintillator enthielten. Die Radioaktivität wurde am Flüssigkeits-Szintillationszähler bestimmt. Die Ergebnisse wurden in Prozenten zur Kontrolle ausgedrückt.

Der Einfluß von Ginichin auf die biosynthetischen Prozesse in den in-vitro-Versuchen wurde an stammlosen weißen Mäusen von 25 bis 35 g Körpergewicht mit Ehrlich-Asziteskarzinom untesucht.

Die Mäuse wurden in 2 Gruppen geteilt. Den Tieren der 1. Gruppe wurde das Präparat einmalig intraperitoneal in verschiedenen Dosen, und der zweiten - der Kontrollgruppe - destilliertes Wasser eingeführt. Es wurden 3 Versuchsserien durchgeführt.

In der ersten Versuchsserie (16 Mäuse) wurde den Tieren das Präparat in einer Dosis von 100 mg/kg (suboptimale Dosis) eingeführt und die Tiere wurden nach 1 Stunde enthauptet, in der zweiten Versuchsserie (16 Mäuse) wurden die Tiere bei ähnlichen Bedingungen der Präparateeinführung nach 3 Stunden getötet. In der dritten Serie (35 Mäuse) wurde der Einfluß von Ginichin auf den plastischen Stoffwechsel in den Geschwulst- und Normalzellen während 24 Stunden nach der Einführung der 0,33%igen Präparatlösung in einer Dosis von 28 mg/kg (therapeutische Dosis) untersucht.

Die markierten Vorläufer der Nukleinsäuren und des Proteins wurden eine Stunde vor dem Töten der Tiere (50 µCu/100 g) intraperitoneal eingeführt. Zur Analyse wurde Aszitesflüssigkeit des Tiers sowie Leber, Milz, Dünndarmschleimhaut, Gehirn, Nieren und Lungen genommen. Aus den Geschwulstzellen wurde eine 10%ige Suspension und aus den Geweben ein 10%iges Homogenat in physiologischer Lösung bereitgestellt.

Die Geschwulstzellen und die Gewebshomogenate wurden zur Fällung der Nukleinsäuren mit 57%iger Überchlorsäure (10 : 1) bearbeitet. Die säurelösliche Fraktion wurde durch zweimaliges Durchwaschen des Niederschlags mit 5 ml 5%iger Überchlorsäure mit darauffolgendem Zentrifugieren bei 2000 g entfernt. Die Nukleinsäuren wurde nach der Methode von Schneider hydrolysiert. Die Radioaktivität der DNS- und RNS-Fraktionen wurde am Flüssigkeits-Szintillationszähler gemessen. Die Menge von DNS und RNS wurde spektrophotometrisch, die Menge von DNS - nach der Reaktion mit Diphenylamin, von RNS - mit Orcin bestimmt.

Zur Herstellung des Proteinhydrolysats wurden die Suspension der Geschwulstzellen und die Homogenate der Normalgewebe mit kalter 10%iger Trichloressigsäure (1 : 4) mit darauffolgendem Zentrifugieren bei 2000 g während 10 min bearbeitet. Der Niederschlag wurde zweimal jeweils mit 5 ml 10%iger Trichloressigsäure gewaschen. Die Lipide wurden durch die Bearbeitung des Niederschlags nacheinanderfolgend mit Ethanol, gesättigtem Natriumazetat, mit einem Ethanol-Ether-Gemisch (3 : 1) und Äther entfernt. Zur Herstellung des Proteinhydrolysats wurde der Niederschlag mit 4 ml 0,3 n-KOH übergossen und im Thermostat bei 37°C während 60 min stehengelassen. Die Radioaktivität wurde am Flüssigkeits-Szintillationszähler gemessen. Quantitativ wurde Protein spektrophotometrisch unter Ausnutzung der Mikrobiuretreaktion bestimmt.

Die Angaben der Versuche in vitro zur Untersuchung des Einflusses von Ginichin auf die Einführung der markierten Vorläufer von DNS, RNS und Protein in die säureunlösliche Fraktion der Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms sind in Tabelle 5 dargestellt.

Wie aus der Tabelle zu ersehen ist, wird die Inklusion der markierten Vorläufer von DNS, RNS und Protein in die säureunlösliche Fraktion der Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms unter Einwirkung von Ginichin in der Konzentration von 1 · 10^-4 Mol im Vergleich zur Kontrolle zerstört.

Tabelle 7

Ginichin-Einfluß auf die Inklusion von 2-¹⁴C-Thymidin, 2-¹⁴C-Uridin und 2-¹⁴C-Leuzin in die säureunlösliche Fraktion der Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms

Da Ginichin zur Kontaktanwendung in Form von 0,33%iger Lösung vorgesehen ist, war es notwendig, die Präparatwirkung auf die Geschwulstzellen bei der gegebenen Konzentration, die ungefähr 50mal höher als die Konzentration in biochemischen Versuchen in vitro ist (1 · 10^-14 Mol entspricht 0,007%), sowie bei einer Konzentration zu untersuchen, die dreimal niedriger als die erfindungsgemäße ist (0,1%). Die Untersuchungsergebnisse des Einflusses der 0,3%- und 0,1%igen Ginichin-Lösung auf die Inklusion von 2-¹⁴C-Thymidin in die säureunlösliche Fraktion (DNS) der Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms sind in Tabelle 6 angeführt.

Tabelle 8

Ginichin-Einfluß auf die Inklusion von 2-¹⁴C-Thymidin in die DNS der Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms

Aus den erhaltenen Angaben ist ersichtlich, daß bei der Kontakteinführung der 0,3%igen Ginichin-Lösung eine praktisch vollständige Hemmung der DNS-Biosynthese in den Geschwulstzellen beobachtet wird. Offensichtlich ist es nicht wünschenswert, diese Konzentration herabzusetzen, weil die DNS-Biosynthese in den Geschwulstzellen in Gegenwart der 0,1%igen Ginichin-Lösung noch 2,4% von der Kontrolle beträgt.

Nachdem der hemmende Einfluß von Ginichin auf die Biosynthese in vitro festgestellt wurde, schien interessant zu klären, wie die Präparatwirkung auf die Geschwulstzellen sowie auf die Normalgewebe in vivo ist. Zu diesem Zweck wurde die Biosynthese der Makromoleküle bei der kurzwelligen Ginichin-Wirkung (1 und 3 Stunden) in der suboptimalen Dosis (100 mg/kg) und bei der anhaltenden Wirkung des Präparats (24 Stunden) in der therapeutischen Dosis (28 mg/kg) untersucht.

Die Angaben der Untersuchung des Ginichin-Einflusses auf die Biosynthese von DNS und Protein in den Zellen des Ehrlich-Asziteskarzinoms, der Leber und Milz der geschwulsttragenden Mäuse eine Stunde und drei Stunden nach der Einführung sind in Tabelle 7 bzw. 8 dargestellt.

Diese Versuche zeigen, daß eine Stunde nach der Präparateinführung die Hemmung der DNS-Biosynthese in den Geschwulstzellen (57%) nachgewiesen wird, in den Normalgeweben gibt es eine gewisse Stimulierung der DNS- Biosynthese (in der Leber - um 6%, in der Milz - um 20%). Nach 3 Stunden steigt die Hemmung in den Geschwulstzellen an und erreicht 70%. In der Leber wird auch eine gewisse Hemmung (7%) beobachtet, und in der Milz beträgt das Stimulierungsprozent 16%.

Tabelle 9

Ginichin-Einfluß auf die Inklusion von 2-¹⁴C-Thymidin in die DNS der Geschwulstzellen, Leber und Milz der Mäuse mit Ehrlich-Asziteskarzinom 1 Stunde und 3 Stunden nach der intraperitonelaen Einführung des Präparats in einer Dosis von 100 mg/kg

Tabelle 10

Ginichin-Einfluß auf die Inklusion von 2-¹⁴C-Leuzin ins Protein der Geschwulstzellen, Leber und Milz der Mäuse mit Ehrlich-Asziteskarzinom 1 Stunde und 3 Stunden nach der intraperitonealen Einführung des Präparats in einer Dosis von 100 mg/kg

Es wurden folgende Angaben in bezug auf den Ginichin- Einfluß auf die Proteinbiosynthese unter den obengenannten Einführungsbedingungen erhalten. 1 Stunde nach der Präparateinführung ist die Proteinbiosynthese bedeutend (um 41%) gehemmt. In den Normalgeweben - in der Leber und Milz - wird keine Hemmung oder eine unbedeutende Hemmung nachgewiesen. Weitere Untersuchungen haben ergeben, daß nach 3 Stunden die Hemmung der Proteinbiosynthese in den Geschwulstzellen viel höher (86%) als in den Normalgeweben (in der Leber - 4%, in der Milz - 60%) ist.

Daraus kann man schließen, daß die höchste Hemmung der Biosynthese von Protein und DNS in den Geschwulstzellen beobachtet wird, was von der Selektivität der Präparatwirkung zeugt. Diese Tatsache sowie die schnelle Präparatwirkung (eine Stunde nach der Einführung) gestatten, es als antiblastische Mittel der Kontaktanwendung zu empfehlen.

Die Ergebnisses der Untersuchung des Ginichin- Einflusses auf die Biosynthese von DNS, RNS und Protein 24 Stunden nach der Einführung der therapeutischen Präparatdosis sind im Tabelle 9 angeführt.

Tabelle 11

Ginichin-Einfluß auf die Biosynthese von DNS, RNS und Protein in den Geschwulstzellen und Normalgeweben der Mäuse mit Ehrlich-Asziteskarzinom 24 Stunden nach der intraperitonealen Präparateinführung in einer Dosis von 28 mg/kg

Diese Angaben zeugen davon, daß 24 Stunden nach der Ginichin-Einführung, ebenso wie in den vorherigen Versuchen, in den Geschwulstzellen eine bedeutende Hemmung der Biosynthese der Makromoleküle nachgewiesen wird. Die Hemmung der Inklusion von 2-¹⁴C-Thymidin in die DNS beträgt 82%, von 2-¹⁴C-Uridin in die RNS - 42%, von 2-¹⁴C-Leuzin ins Protein - 46%. In allen untersuchten Normalgeweben (Dünndarmschleimhaut, Leber, Milz, Gehirn, Nieren, Lungen) wird die allgemeine Tendenz - die Stimulierung der biosynthetischen Prozesse, insbesondere der DNS-Biosynthese beobachtet.

Deshalb ist Ginichin ein hochwirksames Zytostatikum der Kontaktwirkung. Außer der geschwulsthemmenden Wirksamkeit besitzt es noch eine antibakterielle Wirksamkeit. Das Präparat ist sogar bei der einmaligen Einführung genügend effektiv.

Bei der intraperitonealen Einführung wird Ginichin hauptsächlich in Asziteszellen angesammelt.

In den Versuchen in vitro hemmt Ginichin die Inklusion der markierten Vorläufer in DNS, RNS und Protein. In den Versuchen in vivo übt es die gleiche Wirkung auf die biosynthetischen Prozesse in den Geschwulstzellen aus, dabei tritt in diesem Fall die Selektivität seiner hemmenden Wirkung auf die Biosynthese der Makromoleküle in den Geschwulstzellen zutage.

Beispiel 1 Hydrochlorid des 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin- 4-carbonsäurechlorids

Ein Gemisch aus 3,1 g (0,01 Mol) 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl- 2′′)-vinyl]chinolin-4-carbonsäure und 24 g (0,2 Mol) Thionylchlorid wird mit Rückflußkühler bei Siedetemperatur des Gemisches während einer Stunde erwärmt. Der Überschuß an Thionylchlorid wird im Vakuum beim Restdruck von 15 mm Hg destilliert, dann werden 10 bis 15 ml Benzol zugesetzt und das Abdestillieren wird zur Entfernung der Thionylchloridspuren wiederholt.

Die Ausbeute an Hydrochlorid des 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl- 2′′)-vinyl]chinolin-4-carbonsäurechlorid beträgt 3,43 g (94% der Theorie), Schmp. 165-167°C. Nach der Umkristallisation beträgt der Schmp. 167°C (Benzol).
Gefunden, in %:
C 52,61; H 2,56; Cl 19,24; N 7,51. C₁₆H₁₀N₂O₄Cl₂.
Berechnet, in %:
C 52,62; H 2,71; Cl 19,41; N 7,67.

Das Produkt ist genügend rein und erfordert keine zusätzliche Umkristallisation.

Beispiel 2 2-[2′(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amid

Zu einer Lösung von 4,74 g (0,03 Mol) Diethylamino-4- aminopentan in 50 ml Wasser werden unter energischem Rühren in kleinen Portionen 3,65 g (0,01 Mol) des nach Beispiel 1 erhaltenen Hydrochlorids von 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl- 2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäurechlorid hinzugesetzt. Das Reaktionsgemisch wird während 6 bis 7 Stunden gerührt und dann bei Zimmertemperatur für 8 bis 12 Stunden stehengelassen. Der Niederschlag wird abfiltriert, mit Wasser bis zur neutralen Reaktion gewaschen, bei einer Temperatur von 90 bis 100°C getrocknet und aus Dimethylformamid umkristallisiert. Die Ausbeute an 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′vinyl]chinolin- 4-carbonsäure-(α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amid beträgt 3,94 g (87,4%), Schmp. 210-211°C (unter Zersetzung).
Gefunden, in %:
C 66,42; H 6,58; N 12,69. C₂₅H₃₀N₄O₄.
Berechnet, in %:
C 66,65; H 6,71; N 12,47.

Beispiel 3

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amid wird aus 1,58 g (0,01 Mol) Diethylamino-4-aminopentan und 3,65 g (0,01 Mol) Hydrochlorid des 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4- carbonsäurechlorids in 50 ml Wasser in Gegenwart von 8 ml Triethylamin erhalten. Das Verfahren wird analog Beispiel 2 durchgeführt.

Die Ausbeute beträgt 3,79 g (84,2% der Theorie).

Beispiel 4 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amiddiphosphat

4,51 g (0,01 Mol) des nach den Beispielen 2 und 3 erhaltenen 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amids werden in 2,5 bis 3 l Aceton gelöst, es werden 1,5 g Aktivkohle hinzugesetzt und das Gemisch wird während 15 min gekocht. Die Lösung filtriert man ab, kühlt man ab und gibt 2,31 g 85%ige Orthophosphorsäure in 350 ml Aceton zu. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, mit Aceton gewaschen, bei einer Temperatur von 90 bis 100°C getrocknet und aus Alkohol umkristallisiert. Die Ausbeute an 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin- 4-carbonsäure-(α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amiddiphosphat beträgt 4,81 g (74,3% der Theorie), Schmp. 180-181°C.
Gefunden, in %:
C 46,21; H 5,45; N 8,43; P 9,97. C₂₅H₃₀N₄O₄ · 2 H₃PO₄.
Berechnet, in %:
C 46,44; H 5,61; N 8,67; P 9,58.

Beispiel 5 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amidtriphosphat

4,51 g (0,01 Mol) des nach den Beispielen 2 und 3 erhaltenen 2-[2′- (5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure-(α-methyl- δ-diethylaminobutyl)amids werden in 2300 ml Aceton gelöst, es wird 1 g Aktivkohle hinzugesetzt und das Gemisch wird während 10 bis 15 min gekocht. Nachher filtriert man die Lösung ab und gibt 3,46 g 85%ige Orthophosphorsäure in 350 ml Aceton zu. Wenn der Niederschlag nicht sofort gebildet wird, ist es notwendig, das Gemisch auf 50°C unter energischem Rühren während 1 bis 2 min zu erwärmen. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, mit Aceton gewaschen und bei einer Temperatur von 90 bis 100°C getrocknet. Die Ausbeute an 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4- carbonsäure-(α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amidtriphophat beträgt 7,15 g (96,1%), Schmp. 175-176°C.
Gefunden, in %:
C 40,46; H 5,30; N 7,49; P 12,49. C₂₅H₃₀N₄O₄ · 3H₃PO₄.
Berechnet, in %:
C 40,33; H 5,28; N 7,53; P 12,48.

Beispiel 6 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (a-methyl-δ-diethylaminobutyl)amidhydrochlorid

4,51 g (0,01 Mol) 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chlorid-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amid werden in 2300 ml Aceton gelöst; es wird 1 g Aktivkohle hinzugesetzt und das Gemisch wird während 10 bis 15 min gekocht. Die Lösung wird abfiltriert, abgekühlt und dazu werden 2 bis 3 ml Salzsäure (d 1,179) zugegeben. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, mit Aceton gewaschen und bei einer Temperatur von 80 bis 90°C getrocknet. Die Ausbeute an 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amidhydrochlorid beträgt 3,6 g (74,1%), Schmp. 183-187°C (unter Zersetzung).
Gefunden, in %:
C 61,56; H 6,62; N 11,38; Cl 7,05. C₂₅H₃₀N₄O₄ · HCl.
Berechnet, in %:
C 61,66; H 6,42; N 11,51; Cl 7,28.

Beispiel 7

2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin-4-carbonsäure- (α-methyl-δ-diethylaminobutyl)amiddihydrobromid wird nach dem Beispiel 6 aus 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]chinolin- 4-carbonsäure-(αmethyl-δ-diethylaminobutyl)amid und Bromwasserstoffsäure in einer Ausbeute von 76,3%, Schmp. 238-240°C (unter Zersetzung) erhalten.
Gefunden, in %:
C 48,98; H 5,21; N 9,36; Br 23,94. C₂₅H₃₀N₄O₄ · 2 HBr.
Berechet, in %:
C 49,11; H 5,28; N 9,11; Br 24,14.

Claims (3)

1. 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]-chinolin-4-carbonsäure(α- methyl-δ-diethylaminobutyl)amid der Formel I und dessen Salze.

2. Verfahren zur Herstellung der Verbindung der Formel I in Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise 2-[2′-(5′′-Nitrofuryl-2′′)vinyl]-chinolin- 4-carbonsäure mit Thionylchlorid umsetzt und darauffolgend das erhaltene Säurechlorid mit einem Amin der Formel (C₂H₅)₂N(CH₂)₃(CH₃)CH-NH₂im wässerigen Medium behandelt.

3. Antiblastisches Arzneimittel mit Kontaktwirkung, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff eine Verbindung nach Anspruch 1 und einen pharmazeutischen Träger enthält.