DE2723226A1 - Desodorierungsmittel und verfahren zu seiner herstellung - Google Patents

Description

Patentanwalt DipL-lng. GERO LANGE 495 Minden/Westf.

Seikenkai

95 Fushimido-cho Tondabayashi City

Osaka Prefecture, Japan.

Minden / Westf. 21. Mai 1977 Anwaltsakte: 540.204

Desodorierungsmittel und Verfahren zu seiner Herstellung und Lagerung ·

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[nachqereickt I

Die Erfindung betrifft ein Desodorierungsmittel im besonderen zur Desodorierung von Exkrementen sowie Verfahren zu deren Herstellung und Lagerung.

Es sind bereits viele Versuche gemacht worden, die Exkremente unter Verwendung von Mikroorganismen zu desodorieren, wobei einige der Mikroorganismen zeitweilig handelsüblich verfügbar waren, um die Desodorisierung durchzuführen. Es hat sich jedoch bald gezeigt, daß diese anschließend vom Markt verschwanden. Der Grund, warum man bereits nach kurzer Zeit von der kommerziellen Herstellung abgegangen ist, liegt a) an ihrer mangelnden Fähigkeit zur Desodorisierung, b) an den schwierigen Bedinungen für deren Kultivierung, c) an der Schwierigkeit eine lange Zeit ihre ursprünglich hohe Fähigkeit zu desodorieren aufrechtzuerhalten, d) der mangelnden Information bezüglich ihrer Nicht-Pathogenes sowie e) an dem Nachteil vom wirtschaftlichen Standpunkt aus betrachtet. Den Erfindern ist es gelungen, unter Verwendung nur einer Art von Stämmen bzw. einer kleinen Zahl von Stämmen die Exkremente zu desodorieren, wobei gleichzeitig eine Anzahl von Informationen bezüglich der Desodorierung selbst wie auch der Bakterien gewonnen worden ist, die die Fähigkeit zur Desodorierung besitzen, was bislang unbekannt war. Somit ist es den Erfindern gelungen, verschiedene Probleme zur Desodorierung von Exkrementen zu lösen, deren Lösung bislang noch offen-stand, womit natürlich die unter a) bis e) genanntem Schwierigkeiten behoben sind.

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Allgemein ausgedrückt, ist es richtig, daß eine grundsätzliche Theorie für die Desodorierung von schlecht riechenden Substanzen unter dem Gesichtspunkt ihrer Zusammensetzung und ihres chemischen Aufbaues aufgestellt ist. Darüber hinaus ist herauszustellen, daß die Zusammensetzung schlecht riechender Substanzen wie Exkrementen so kompliziert ist, verglichen mit dem Produkt einer einfachen chemischen Reaktion, daß man die Anzahl von Verbindungen, die in einem Exkrement enthalten sind, als nahezu unbegrenzt ansehen muß. Zunächst besteht die Nahrung oder das Futter als Ausgangsmaterial für das Exkrement aus vielen Arten von Materialien und zweitens handelt es sich hierbei um ein Endprodukt, das nach vielen und nahezu einer unbegrenzten Anzahl von biochemischen Reaktionen durch die im Darm vorhandenen Bakterien erhalten wird, die zur Erzeugung der übelriechenden Zusammensetzungen innerhalb des Exkrementes führen. Dementsprechend ist,auch wenn die übelriechenden Komponeneten in dem Exkrement als ein Stoffwechselprodukt angesehen werden, die Anzahl der Arten aller übelriechenden Zusammensetzungen sehr groß, wenn man die übelriechenden Zusammensetzungen,deren Volumen sehr gering ist, und derjenigen, die bereits mit nicht-riechenden Komponenten reagiert haben, zusammenzählt.

Da, wie erwähnt, das Exkrement ein Produkt derart komplizierter biochemischer Reaktionen ist, ist es nahezu unmöglich, eine allgeimein Theorie für die Desodorierung zu

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entwickeln. Darüber hinaus existieren in einem frischen Exkrement bis zu 10 Bakterien in einem g, wobei nahezu alle den Darm bakterien zuzurechnen sind, wodurch viele Arten von Reaktionsprodukten des Stoffwechsels fortlaufend produziert werden. Darüber hinaus befinden sich unter den Darmbakterien eine Anzahl von starken Bakterien wie die Dickdarmbakterien und die sporenbildenden Bakterien. Es ist dementsprechend schlechterdings unmöglich, hinreichende Desodorierungsversuche an allen übelriechenden, in dem Exkrement vorhandenen Zusammensetzungen durchzuführen, um ein wirkungsvolles Desodorierungsverfahren zu entwickeln. Darüber hinaus ist es auch unmöglich, ein Verfahren zu finden, um die übelriechenden Stoffwechselprodukte zu entfernen, welche eines nach dem anderen aufeinanderfolgend in dem vom menschlichen Körper abgestoßenen Exkrement erzeugt werden.

Aus diesem Grund haben die Erfinder ihr Bestreben zur Desodorierung der Exkremente auf die S-enthaltenden Verbindungen, die N-enthaltenden Verbindungen und die C-enthaltenden Verbindungen, die in dem Exkrement vorliegen, beschränkt. Es wurde jedoch unglücklicherweise herausgefunden, daß auch dann, wenn die Nachforschung sich lediglich auf die drei erwähnten Gruppen von Verbindungen bezieht, es nahezu unmöglich ist, hinreichende Untersuchungen einer jeden Zusammensetzung, die zu diesen Gruppen gehört, durchzuführen und hierbei zu ver-

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läßlichen Schlüssen zu kommen, da so viele Arten von Verbindungen zu jeweils einer Gruppe gehören. So wurde beispielsweise (a) die Entfernung des üblen Geruchs aufgrund des Vorliegens von S-enthaltenden Verbindungen unter Verwendung sogenannter Schwefelbakterien untersucht. Es trifft jedoch zu, daß vMe Bakterien existieren, die S-enthaltende Verbindungen angreifen, so daß sie kurz als Schwefelbakterien bezeichnet werden, wobei jedoch deren Verhalten und Aktivität bezüglich S-enthaltender Verbindungen sehr unterschiedlich ist, wobei unglücklicherweise in dem Exkrement sehr viele S-enthaltende Verbindungen vorliegen.

Nachdem bereits viele Experimente von den Erfindern durchgeführt worden sind, liegen die ersten Ergebnisse vor, obwohl sie natürlich erst am Beginn der Untersuchungen stehen und weit von ihrem Abschluß entfernt sind, da viele Probleme der Zwischenreaktion zwischen Schwefelbakterien und S-enthaltenden Verbindungen in dem Exkrement verbleiben. Darüber hinaus (b) wurde auch bestätigt, daß die Entfernung eines üblen Geruchs, der auf der Existenz von N-enthaltenden Verbindungen unter Verwendung von Stickstoffbakterien beruht, aufgrund vollständiger Studien, die durch hinreichende experimentelle Untersuchungen gestützt sind, niemals durchzuführen ist. Schließlich ist (c) die Bedingung auch die gleiche für die C-enthaitenden Verbindungen, da hier so viele Verbindungen existieren, deren Hauptbestandteil aus Kohlenstoff-

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atomen besteht, womit hinreichende Versuche niemals erwartet werden können, auch wenn sich die Versuche auf die Dekarboxylierung beschränken. Es wurde somit bestätigt, daß jeder verläßliche Schluß bezüglich der Desodorierung von Exkrementen niemals experimentell abgeleitet werden kann, auch wenn sich die experimentellen Versuche auf die oben genannten drei Gruppen von Verbindungen beschränken.

Nach der Erkennung dieser Schwierigkeiten der oben erwähnten Studien bezüglich der Desodorierung haben sich die Erfinder angestrengt, um zunächst eine oder zwei Verbindungen herauszufinden, die andere übelriechende Verbindungen, die der gleichen oben genannten Gruppe angehören, repräsentieren können. Zum Glück wurde herausgefunden, daß (a) Natriumsulfid die Gruppe von Verbindungen mit einem S-Atom im Molekül zu repräsentieren vermag. Dementsprechend ist, wenn irgendein Bakterium gefunden wird, das wirkungsvoll so auf das Natriumsulfid ainzuwirken vermag, daß dieses chemisch durch vollständigen Geruchslosigkeit assimiliert oder verändert werden kann (hiernach soll eine solche Wirkung kurz S-Wirkung genannt werden), ein großer Fortschritt in Richtung auf die Lösung des Desodorierungsproblems bezüglich übelriechender S-enthaltender Verbindungen getan, (b) Bezüglich der Gruppe von Verbindungen mit einem N-Atom im Molekül können Ammoniak, Indol oder Scatol als repräsentativ für diese Gruppe angesehen werden, und der nächste Schritt ist darin zu sehen, ein geeignetes Bakterium zu finden, das die Fähigkeit be-

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sitzt, derart repräsentative Zusammensetzungen zur Geruchlosigkeit zu verändern (N-Wirkung). (c) Schließlich kann jede niedere aliphatische Karboxylsäure als repräsentativ für die Gruppe von Verbindungen angesehen werden, die ein C-Atom in ihrem Molekül aufweist. Der nächste Schritt liegt natürlich darin, ein entsprechendes Bakterium zur Desodorierung zu finden (C-Wirkung). Durch großangelegte experimentelle Untersuchungen unter Verwendung von vielen Kombinationen verschiedener organischer Reaktionsmittel und Stämme wurde herausgefunden, daß. obwohl sehr viele S-enthaltende Verbindungen in dem Exkremente enthalten sind, wie SO-, CS2, CH,SH, ...., (CgH₅CH₂)SH, usw., zusammen mit H-S und Na-S .9H-O als typische in einem Exkrement vorhandene Beispiele, es zwecklos ist, das Verhalten von Bakterien auf diese Sulfidverbindungen eine nach der anderen zu untersuchen, wenn Natriumsulfid als repräsentativ für diese Schwefelverbindungen ausgewählt wird. Das gleiche gilt auch für die Stickstoffverbindung und die Kohlenstoffverbindungen, wie dies bereits erläutert wurde. Folgt man dem von den Erfindern aufgestellten Verfahren, so kann eine praktische Desodorierungsuntersuchung durchgeführt werden unter Verwendung von Bakterien eines einzelnen Stammes, wenn diese die Fähigkeit besitzen, (a) eine Schwefelwirkung (wie oben erläutert, kann diese Wirkung experimentell unter Verwendung von Na-S als repräsentativ bestätigt werden), (b) eine N-Wirkung (diese Wirkung kann unter Verwendung von NH₃, Indol oder Scatol als repräsentativ für N-Verbindungen untersucht werden) und (c) eine C-Wirkung

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(diese kann anhand von niederen aliphatischen Karboxylsäuren untersucht werden) gleichzeitig auszuüben. Oder man verwendet eine Anzahl von Bakterienstämmen, wenn diese Stämme auf verschiedenen Wegen diese Wirkungen auszuüben vermögen. Dementsprechend wird es durch diese Methode erleichtert, eine Desodorierungsverfahren aufzustellen. Außerdem haben die Erfinder herausgefunden, daß eine besondere Beziehung zwischen den Desodorierungsbakterien und den S-, N- und C-enthaltenden Verbindungen besteht, wie später noch erläutert werden wird. Dieses allgemeine Verfahren zur Desodorierung von Exkrementen wird als S.N.C.-Theorie bezeichnet. Es ist jedoch herauszustellen, daß die Desodorierung von Exkrementen keineswegs einfach ist, wenn Bakterien eines einzelnen Stammes verwendet werden, die die Fähigkeit haben, eine S-, N- und C-Wirkung gemeinsam zur Desodorierung auszuüben, oder Bakterien mehrerer Stämme, die über jeweils ein oder zwei unterschiedliche Wirkungen verfügen, zum Einsatz gelangen. Es war zusätzlich die Bestimmung anderer, notwendiger Bedingungen zur Desodorierung erforderlich, um zur vorliegenden Erfindung zu gelangen.

(I) Es soll zunächst ein Kommentar zu der Spezies von Bakterien gegeben werden, die gemäß der Erfindung eingesetzt werden. Die Erfinder haben beschlossen, autotrophe Bakterien auszuwählen, da diese autotrophen Bakterien die Fähigkeit besitzen, mit schlechten Nährbodenverhältnissen auszukommen und dies auf sich selbst zu übertragen. Das bedeutet,

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daß die Nährstoffanforderungen der Bakterien ziemlich niedrig sind.

(II) Es ist bereits, wie aus Veröffentlichungen zu entnehmen ist, bekannt, daß Thiobazillen, die zu den autotrophen Bakterien gehören, die Fähigkeit besitzen, einen üblen Geruch infolge der Anwesenheit von Mercaptan zu entfernen. Vom wirtschaftlichen Standpunkt ausgesehen, besitzen die Bazillen jedoch den entscheidenden Nachteil, daß ihre Vermehrung sehr gering ist. Sie haben dementsprechend auch praktisch für die Desodorierung von Exkrementen noch keine Anwendung gefunden. Im Laufe der Untersuchungen war es für die Erfinder erforderlich, einen von zwei Wegen einzuschlagen, d. h. diese Gruppe von Bakterien wegen der geringen Vermehrungsrate außer acht zu lassen und den anderen Weg einzuschlagen, um einen Stamm zu finden, der zu dieser Gruppe von Bakterien gehört, und eine annehmbare Vermehrungsrate besitzt. Hier stießen die Erfinder auf das Problem der Vermehrungsgeschwindigkeit von Bakterien. Es handelt sich hierbei um ein wichtiges Problem in Beziehung auf die Desodorierung von Exkrementen unter zwei Gesichtspunkten, daß es nämlich für die vorgegebenen Bakterien erstens möglich sein muß, ander verschiedene Bakterien in dem Existenzkampf innerhalb des Exkrementes zu überwinden und zweitens, eine Massenproduktion fabrikmäßig zu ermöglichen.

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(III) Auch wenn ein Bakterium unter normalen Bedingungen eine hohe Wachstumsrate besitzt, ist es zweifelhaft, ob eine so hohe Vermehrungsgeschwindigkeit innerhalb des Exkrementes realisiert werden kann, da dieses eine bestimmte Menge von Gallenflüssigkeit aufweist, die eine vermehrungsverhindernde Wirkung auf die Bakterien besitzt. Es ist bekannt, daß allgemein das Wachstum von in der Erde lebenden Bakterien durch die Anwosenheit von etwa 0,5 % eines Gallenpulvers rasch verhindert wird. Da die autotrophen Bakterien tu der Gruppe der in der Erde lebenden Bakterien gehören, sind sie dementsprechen gegenüber Gallenflüssigkeit sehr empfindlich.

Im Sinne der Erfindung war es dementsprechend erforderlich, einen Stamm zu finden, der keine Empfindlichkeit gegenüber Gallenflüssigkeit besitzt,oder einen Stamm derart zu akklimatisieren, daß er einer Gallenkonzentration von 1 % zu widerstehen vermag.

(IV) Eine erforderliche Eigenschaft der im Sinne der Erfindung zu verwendenden Bakterien liegt darin, daß sie die Fähigkeit haben sollten, sich schnell zu vermehren oder rasch zu wachsen, und das Wachstum anderer Bakterien für einen langen Zeitraum zu unterdrücken

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und zwar nicht nur unter aeroben Lebensbedingungen sondern auch in einem Zustand,in welchem der Sauerstoff teildruck ziemlich niedrig ist, wenn eine Durchlüftung des Mediums nicht durchgeführt wird, da der innere Teil der Exkremente infolge der hierin lebenden Bakterien als in einem hohen anaeroben Zustand befindlich anzusehen ist.

Darüber hinaus tritt in der natürlichen Umgebung oftmals eine Änderung des pH-Wertes ein,und dementsprechend sollten die im Sinne der Erfindung eingesetzten Bakterien die Fähigkeit haben, einer solchen pH-Wertänderung zu widerstehen.

(V) Da die Exkremente im allgemeinen eine Mischung von Kot und Urin sind, sollen die für diesen Zweck eingesetzten Bakterien auch eine hohe Aktivität in einem solchen Medium besitzen, wo die Salzkonzentration sehr hoch ist.

(VI) Die hier zu verwendenden Bakterien dürfen niemals Ursache einer Krankheit für Tiere und Pflanzen sein. Dies ist eine sehr ernstzunehmende Bedingung für die zum Zweck der Desodorierung eingesetzten Bakterien.

Als notwendige, unverzichtbare Bedingung sollen die zum Zweck der Desodorierung von Exkrementen eingesetzten

Bakterien all diese Eigenschaften besitzen.

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Hier taucht die Frage auf, ob es möglich ist, daß irgendein Bakterienstamm diese oben erwähnten Eigenschaften alle zusammen zur gleichen Zeit als notwendige Bedingung für eine desodorierende bakterielle Substanz besitzt. Es wurde als äußerst schwierig angesehen, einen Bakterienstamm aufzufinden, der die Fähigkeit besitzt, S-, N- und C-enthaltende Verbindungen in nicht-riechende Substanzen zur gleichen Zeit umzusetzen, wobei eine derartige Fähigkeit nur ein Faktor der notwendigen Bedingungen für das Desodorierungsmittel darstellt, welches, wie oben ausgeführt, viele andere Eigenschaften besitzen muß, um eine zufriedenstellende Rolle zu spielen. Es ist den Erfindern gelungen, verschiedene Bakterien mit den charakteristischen Eigenschaften aus einer großen Anzahl von Bakterien zu isolieren. Beispielsweise haben einige der isolierten Spezies die Fähigkeit, nur eine S-Wirkung oder eine N-Wirkung oder eine C-Wirkung auszuüben, während andere zwei dieser drei Wirkungen zeigten,und schließlich einige auch die Fähigkeit besaßen, alle drei Wirkungen miteinander gleichzeitig auszuüben. Dabei erfüllten die isolierten Stämme die oben aufgeführten Bedingungen (II) und (VI).Unter Verwendung dieser isolierten Stämme gelang es den Erfindern, die Richtigkeit der S.N.C.-Theorie zu bestätigen. In Tabelle 1 ist ein Beispiel derartiger Versuchsdaten aufgeführt. Bei einem Versuch wurden drei Spezies von Stämmen miteinander kombiniert, nämlich F.R.I. Nr. 2546, Nr. 2545 und Nr. 2544, von denen jeder nur in der Lage war, eine Wirkung stark auszuüben. Der verwendete

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Stamm F.R.I. Nr. 2823 war in der Lage, die S-, N- und C-Wirkung gleichzeitig auszuüben. Aus der Tabelle 1 ergibt sich deutlich, daß zur wirkungsvollen Desodorierung die Bedingung erfüllt sein muß, daß die Bakterien, unabhängig ob sie sich aus nur einem Stamm oder mehreren Stämmen zusammensetzen, die Fähigkeit besitzen müssen, die besagten drei Wirkungen gleichzeitig auszuüben.

Tabelle 1

Charakteristische Wirkung

F.R.I. Nr.

Verbleibender Geruchsqrad (Desodorierunqskraft)

nach einer Verweildauer bei 28° C von

	2546	24 h	48 h	72 h
S-Wirkung besond. stark	2545	2	1·	1
N-Wirkung	2544	3	3	3
C-Wirkung besond. stark	2546+2545	3	3	2·
S+N-Wirkungen besonders stark	2546+2544	I1	1·	O'
S+C-Wirkungen besonders stark	2545+2544	1'	1·	0f
N+C-Wirkungen besonders stark	2546+2545+2544	3	2«	2
zusamme!;rkUngen	2823	I1	Ι	0«
S+N+C-Wirkungen zusammen		Ο'

Bemerkungen:

1) Bei jedem Test wurden 10 Gew. % der Kulturbrühe dem Exkrement, bezogen auf dessen Gewicht, zugeführt.

2) F.R.I. Nr. bedeutet die Annahmenummer des Fermentation Research Institute (Agency of Industrial Science & Technology).

3) Die Desodorierungskraft wurde über den verbleibenden Geruchsgrad bestimmt, wobei die Zahlen die folgende Bedeutung besitzen:

0.... vollständig deodorisiert (am wirkungsvollsten )
0'... es war nicht sicher, ob der üble Geruch

vollständig verschwunden war,

1.... es war zunächst möglich, einen schwachen Geruch festzustellen, der jedoch sofort nicht mehr wahrnehmbar war, 1·... es war zunächst sicher möglich, einen

schwachen Geruch festzustellen, der jedoch bald danach nicht mehr wahrgenommen werden konnte,

2 ein schwacher Geruch, der jedoch sicher aufgenommen werden konnte,

2·.... der Rückstandsgeruch war wesentlich schwächer als der üble Geruch der Kontrollprobe

(die der Testprobe entspr-ach), 709848/1 173

3 der Rückstandsgeruch war schwächer

als der üble Geruch der Kontrollprobe,

3'·... ein wenig schwächer als der üble Geruch der Kontrollprobe,

4 nahezu gleich dem üblen Geruch der

Kontrollprobe (es ist jedoch herauszustellen, daß auch dann wenn der Geruchsgrad in beiden Proben gleich wäre, dies nicht bedeuten würde, daß die Mengen der Substanzen mit üblem Geruch in beiden Proben gleich sein würden).

Als nächstes sollen die biochemischen Eigenschaften und die biologischen Charakteristika vier typischer Bakterienstämme beschrieben werden. Es handelt sich dabei um einen Stamm, der die Fähigkeit hat, gleichzeitig zusammen die S-, N- und C-Wirkungen auszuüben (nämlich F.R.I. Nr 2823) und drei Stämme, von denen zwei eine Wirkung besonders stark ausüben, wie z. B. die S-Wirkung (F.R.I. Nr. 2546) oder die C-Wirkung (F.R.I. Nr. 2544), während die andere nur die N-Wirkung ausübt (F.R.I. Nr. 2545). Diese wurden besonders oft für die experimentellen Untersuchungen bei der Aufstellung der Deodorisierungstheorie durch die Erfinder verwendet.

Die Tabelle 2 zeigt die Ergebnisse von mikroskopischen Untersuchungen dieser vier Bakterienstämme und deren biochemisches Verhalten. Die Tabelle 3 zeigt deren Fähigkeit, verschiedene Sacharide zu zersetzen. Die Tabelle 4 zeigt das Nahrungsauf-

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nahmebedürfnis bei der Vermehrung und außerdem die Ergebnisse der Wachstumsbeschleunigung. Schließlich zeigt Tabelle 5 die Ergebnisse der Kultivierung dieser vier Bakterien, wenn verschiedene wirkende Komponenten, die in dem Exkrement enthalten sind, den verschiedenen Kulturmedien als Nährstoff beigegeben wurden. Wie sich aus Tabelle 5 ergibt, wird die Wachstumsgeschwindigkeit derjenigen Bakterien durch die Beigabe solcher Nährstoffe wie S-, N- und C-enthaltenden Substanzen zum Kulturmedium beschleunigt, wenn das Medium aus einem schlechten Nährboden besteht. Mit einem Ansteigen der Nährrstoffe in dem Grundmedium wird jedoch eine derartige Beigabe für die Beschleunigung der Wachstumsgeschwindigkeit wirkungslos. D. h., wenn ein Grundkulturmedium mittlerer Nährbodenqualität zur Kultivierung eingesetzt wurde, konnte man eine schwache Beschleunigung durch die Beigabe dieser Substanzen feststellen, während bei der Verwendung eines Grundkulturmediums von hoher Nährbodenqualität eine weiterhin schwächere Beschleunigung kaum wahrzunehmen war, so daß, obwohl die Wachstumsbeschleunigung unter Verwendung eines Nephelometers genau meßbar war, ließ sie sich mit dem bloßen Auge unmöglich erkennen.

Die beigefügten Zeichnungen zeigen typische Beispiele des Wachstums von Bakterien, die in drei Medien unterschiedlicher Nährbodenqualität ζ. B. gut, mittel und schlecht kultiviert wurden, wobei durch die Zugabe von Substanzen mit einem Gehalt von S-, N- und C in unterschiedlichen Konzentrationen

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eine weitere Beschleunigung eintrat, wenn die Vermehrung in eine logarithmische Phase eintritt. Dabei zeigt im einzelnen:

Fig. 1 einen Fall, bei welchem ein Kulturmedium hoher Nährbodenqualität verwendet wurde. Es ist keine Beschleunigung feststellbar, auch wenn die Substanzen die S, N und C enthalten, zur Anregung des Wachstums beigegeben wurden,

Fig. 2 einen Fall, in welchem ein Kulturmedium mittlerer Nährbodenqualität verwendet wurde. Eine schwache Neigung zur Beschleunigung des Wachstums der Bakterien kann sicher festgestellt werden, entsprechend der Konzentrationen der dem Medium beigegebenen Substanzen und

Fig. 3 einen Fall, beiweichem ein Kulturmedium niedriger Nährbodenqualität verwendet wurde. Eine beträchtliche Wachstumsbeschleunigung läßt sich deutlich feststellen, in Abhängigkeit von der Konzentration der dem Medium beigegebenen Substanzen.

Bei den oben angegebenen Beispielen waren die Konzentrationen der Substanzen wie folgt:

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(θ) es wurden keine Substanzen mit einem Gehalt an S, N und C beigegeben,

(T) Na_?S, NH₃ und Essigsäure wurden in einer

Menge von 0,1 g beigegeben,

(|) Na-S, NH₃ und Essigsäure wurden in der Menge

von 1 g beigegeben und

(T) Na-S, NH₃ und Essigsäure wurden in einer Menge

von 2 g beigegeben.

In den Fig. 1 bis 3 sind Beispiele solcher Ergebnisse aufgetragen, die man durch die Messung unter Verwendung eines Nephelometers bei den Versuchen erhielt, die sich mit der Wachstumsbeschleunigung befaßten. Dabei wurden S-, N- und C- enthaltende Substanzen in das Ausgangskulturmedium in verschiedenen Konzentrationen während der Wachstumsperiode beigegeben, wenn sich das Wachstum der Bakterien in der logarithmischen Phase befand, d. h. nach 21 Stunden von Beginn der Kultivierung in dem Grundmedium. Die Reaktion auf die Beigabe dieser Substanzen wurde genau durch die Messung der relativen Trübe über die verstrichene Zeit bestimmt. Dabei war im Fall(O)keine Beigabe erfolgt, bei(l)wurde Na-S · 9H-0, NH₃ und Essigsäure jeweils in der Menge von 0,1 g beigegeben, während im Faii(T)diese Substanzen in der Menge von 1 g und im Fall(T)die Substanzen in einer Menge von 2 g beigegeben wurden. Für die Beigabe wurde als Quelle für NH₃ eine 37 %-ige wässrige Lösung von Ammoniak eingesetzt, während als Essigsäure Eisessigsäure eingesetzt wurde. Nebenbei wurden in den Experimenten,die in den Fig. 1 bis 3 dargestellt sind,

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als Kulturmedien (S-W) als Medium geringer Nährbodenqualität, (S-W) +Ig Casarninosäure + 0,1 g Vitamin als Medium mittlerer Nährbodenqualität und 10 g Pepton +5g Fleischsaft +5g NaCl +Ig Glucose als Medium hoher Nährbodenqualität eingesetzt. Es ist jedoch herauszustellen, daß diese Zusammensetzungen der Kulturmedien lediglich ein Beispiel der von den Erfindern durchgeführten Versuche darstellt.

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Tab eile

r · R · Ii IiΓ	Mikroskopische Beobachtung und Ergebnisse der Kultivierung	Gram. Färbung Form Sporen Kapsel Bewegbarkeit	2546	2545	2544	2823
Bedingung für die Kultivierung	Stab +	kurzer Stab +	Stab +	Stab +
Form und Aussehen der Kolonie (beo- >achtet auf japani scher Gelatine)	fakultativ anaerob	fakultativ anaerob	fakultativ anaerob	fakultativ anaerob
großer kreis- förm. Typ hohe Erhebung naß -glatte Oberfläche opalartig naß Umfang undurch sichtig, viskos	mittl. kreis- förm. Typ niedrige Er hebung naß -glatte Oberfläche opalartig naß, Umfang halbtranspar. viskos	mittl. kreis- förm. Typ halbkugel- förm. Erhebung naß-glatte Oberfläche opalartig naß Umfang untrans parent, viskos	mittl. kreisförmig- Typ halbkugelförmige Er hebung, glatte Ober fläche, opalartig naß, Umfang halbtransparent viskos to -^ ro OJ Ki IxJ

O CD OO

	"*"" ■—>^_^^ F.R.I. Nr.	2546	2545	2544	2823
		-	-	-	-
	Erzeugung von NH^	-	-	-	-
	Erzeugung von H~S	-	-	-	-
	Erzeugung von Indol	-	-	-	-
C ΛΙ	Erzeugung von Katalase	—	_	_	_
rhaftc	Erzeugung von Farb stoffen			+
ens«	Zersetzung von Harnstoff	+	-	+	+
»mische Eig	Verwendung von Zitronen säure Verflüssigung von Gelatine V-P Reaktion
υ 0 ω	Reduktion von Nitrat

Bemerkung +

positiv,

,negativ

Tabelle

F.R.I. Nr,

2546

2545

2544

2823

Glukose Stärke Melizitose Maltose Raffinose Fluctose Melibiose Xylose Sorbitol Mannitol Inositol Arabinose Laktose Mannose Sacharose Salicin

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^ORIGINAL

Tabelle

-^*^^^ F.R.I. Nr. dem (S-W)-Kulturmedium beigegebene Substanz ""^"»-^«^^^	2546 2545 2544 2823
keine S-enthaltende Aminosäure cyclische Aminosäure Aminosäure mit Kettenstruktur Cystin Cystein Methionyl Casaminosaure Casaminosaure + Vitamin Casaminosaure + Extrakt von Hefe Extrakt von Hefe Vitamine	+ + ++ ++ ++ +++ ++ ++ +++ ++ ♦+ ++ + + ♦ + ++ ++ + + +++ ++ ++ +++ +++ ++ ++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ +♦

Tabelle

co -ο m

F.R.I. Nr.	2546	2545	2544	2543
dem Grundmedium beigegebe Substanz	^a b c d	abcd	abcd	abcd
keine	_ +4. + + + + + +	- + ++ +++	_ ++ ++ +++	_ ++ ++ +++
Essigsäure	+ ++ +++ +++	- + ++ +++
Buttersäure	+ ++ +++ +++	- + ++ +++
Propionsäure	+ ++ +++ +++	- + ++ +++
Na2S 9H2O	+ ++ +++ +++	- + ++ +++	- ++ ++ +++
Mercaptan	- ++ +++ +++	- + ++ +++	- ++ ++ +++
Ammoniak	- ++ +++ +++	+ ++ +++ +++	- ++ ++ +++
Scatol	- ++ +++ +++	+ ++ +++ +++
Extrakt von Exkrementen		++ ++ +++ +++	++ ++ .+++ +++

Bemerkungen: 1) Die Zusammensetzungen der Grundkulturmedien waren wie folgt:

a (S-W)-Glukose

b (S-W)

c 8 g Pepton +2g Glukose

d 10 g Pepton +5g Fleischsaft +5g NaCl +Ig Glukose

2) Das Gewicht einer jeden Substanz, die dem Grundmedium beigegeben wurde, lag bei 1 g/l des Grundmediums.

3) Die Ergebnisse, die in den Tabellen 4 und 5 dargestellt sind, erhielt man aufgrund von Beobachtungen durch das bloße Auge.

Als nächstes werden in Tabelle 6 die experimentellen Daten bezüglich der spezifischen Wachstumsrate ( ,u) von zwei Bakterienstämmen gezeigt, wobei verschiedene Arten von Grundkulturmedien verwendet wurden. Als ein erfindungsgemäßes Deodorisierungsbakterium wurde F.R.I. Nr. 2823 ausgewählt, welches repräsentativ für die erfindungsgemäßen Deodorisierungsbakterien ist, während als anderes Beispiel eines Bakteriums,das nicht der Erfindung zuzurechnen ist, ein Farbbazillus zum Vergleich mit dem ersteren eingesetzt wurde. Entsprechend den Werten für die spezifische Wachstumsrate .u wurde herausgefunden, daß der ,u-Wert mehr als 0,65 betragen sollte, um eine größere Fähigkeit zur Deodorisierung zu besitzen, wenn (S-W) als Grundkulturmedium eingesetzt wird.

Tabelle 6

Grundkulturmedium	-u-Wert	F.R.I. Mr. 2823	Dickdarmbazillus
(S-W) + Glukose + F (S-W) (S-W) + Aminosäure mit S (S-W) + F (S-W) + Aminosäure + Vitamin	0.53 0.76 0.82 0.82 0.85	0.37 0.41 0.41 0.46

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Wie bereits erwähnt, sollten die Deodorisierungsbakterien eine große Wachstumsrate besitzen, während es außerdem für die Deodorisierungsbakterien erforderlich ist, daß sie einen Widerstand gegenüber der Säurekomponente der Gallenflüssigkeit besitzen, die in dem Exkrement enthalten ist. Darüber hinaus sollten sie widerstandsfähig gegen verschiedene antibakterielle Mittel sein, wie beispielsweise Antibiotika und verschiedene in den Speisen enthaltene Würzmittel. Außerdem sollen die Deodorisierungsbakterien bevorzugt die Fähigkeit besitzen, chemischen Reagenzien zu widerstehen, die eine Deodorisierungsfähigkeit besitzen, um es möglich zu machen, die Deodorisierungsbakterien zusammen mit anderen chemischen Reaktionsmitteln einzusetzen.

In Tabelle 7 sind die Ergebnisse zusammengestellt, die den graduellen Unterschied der Deodorisierung aufzeigen, der auf dem Unterschied in der Empfindlichkeit gegenüber der Gallenflüssigkeit liegt.

Tabelle 7

Empfindlichkeit der Bakterien gegenüber Gallenflüssigkeit	Änderung des Geruchsrückstandsgrades über die Zeit (F.R.I. Nr. 2823)	48 h	72 h
	24 h	0· 3·λ/3	Ολ/01 3
nicht empfindlich empfindlich	O1^l 3'

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Als nächstes soll das Problem der Unterkultur näher beschrieben werden.

Bei dem Studium der Deodorisierung unter verwendung von Mikroorganismen zeigt sich ein Problem, das darin liegt, die Deodorisierungskraft der Bakterien für einen langen Zeitraum aufrechtzuerhalten. Bei den Bakterien mit einer großen Fähigkeit zur Desodorierung zeigte sich die unvermeidbare Neigung, daß die Deodorisierungsfähigkeit der Bakterien über die Zeit sehr schnell abnahm, obwohl sie unter besonderer Sorgfalt aufbewahrt wurden, wobei die besten bekannten Techniken eingesetzt wurden.

Darüber hinaus war die Wiedergewinnung der Deodorisierungsfähigkeit der Bakterien äußerst schwierig mittels herkömmlicher Verfahren wieder herzustellen, wenn die ursprüngliche Fähigkeit verloren gegangen war, indem man eine Kultivierung ine einem ungeeigneten Medium oder eine wiederholte Subkultur durchgeführt hatte. Dementsprechend wird es unmöglich, gute effektive Ergebnisse bei der Desodorierung zu erzielen, wenn man nicht bestimmte Kulturbedingungen aufstellt, die es ermöglichen, die Desodorierungskraft der Bakterien über einen langen Zeitraum konstant zu halten, ohne daß ein Abfall eintritt. Mit anderen Worten, kann auch ein Desodorierungsmittel, das aus Bakterien besteht und überragend ist, seine besseren Eigenschaften unter berschiedenen Gesichtspunkten als aus Mikroorganismen zusammengesetzt niemals unter Beweis stellen,

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da das Mittel wesentlich unstabiler sein kann, wenn man es mit einem chemischen Desodorierungsmittel vergleicht, welches normalerweise ziemlich stabil ist.

Bislang war die Situation der Desodorierungsmittel, die aus Mikroorganismen bestanden, so wie dies oben beschrieben ist. Dementsprechend war es dringend notwendig, Kulturmedienzusammensetzungen zu finden, die die Desodorierungskraft der guten Bakterien nicht verdirbt, und darüber hinaus Kulturmedien zu entwickeln, die nicht nur die Desodorierungskraft aufrechterhalten, sondern auch eine Vermehrung der Zielbakterien selbst gewährleisten.

Die Erfinder haben in umfangreichen Studien bezüglich dieses Problems den Schlüssel hierzu gefunden, der in der Zusammensetzung eines Kulturmediums für die Aufrechterhaltung der Deodorisierungskraft der Bakterien während der Kultur liegt. Es ist den Erfindern gelungen, derartige Kulturmedien zu entwickeln und darüber hinaus viele Deodorisierungsbakterien zu isolieren. Es werden hier die experimentellen Ergebnisse offenbart, die man erhält, indem man fünf Stämme, bei welchen es sich um typische Stämme handelt, die von den Erfindern isoliert worden sind, einsetzt. Es handelt sich hierbei um F.R.I. Nr. 2823, F.R.I. Nr. 3577, F.R.I. Nr. 3576, F.R.I. Nr. 3575 und F.R.I. Nr. 3578. Diese fünf Stämme besitzen eine starke Desodorierungsfähigkeit,und ein jeder kann S-, N- und C-Wirkungen zusammen, allein zur gleichen Zeit ausüben.

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Bei den experimentellen Untersuchungen hat sich gezeigt, daß ihre Aktivitäten nahezu gleich sind, wobei die Versuchsergebnisse auf den Durchschnittswerten der ermittelten Daten beruhen. Bei dem Versuch enthielten die eingesetzten Kulturmedien 1 % Gallpulver. Man erhielt die in der folgenden Tabelle 8 zusammengefaßten Daten unter einer solchen Versuchsbedingung, daß man jedes Kulturmedium dem Exkrement in einer Menge von IO Gew.-% beigab und die Deodorisierung 24 Stunden lang bei 28° C durchführte.

Zunächst sind in der Tabelle 8-a als Beispiel Versuchsergebnisse zusammengestellt, wobei die Desodorierungskraft von denjenigen Bakterien, die man durch eine Subkultur unter verwendung herkömmlicher Kulturmedien hoher bis niedriger Nährbodenqualität erhietl, angegeben ist. Wie sich deutlich aus der Tabelle 8-a ergibt, kann eine schnelle Aktivitätsabnahme der Bakterien nie verhindert werden, wenn die Subkultur unter Verwendung irgendwelcher herkömmlicher Kulturmedien durchgeführt wird.

709848/117

Tabelle

8-a

Kulturmedium für die Subkultur	Rückstandsgeruchsgrad	Generation	5.	7.
		3.	3'	4
	1.	3	3·	4
(A) Fleischsaft + Pepton + Vitam.	NJ	3	31	4
(B) Fleischsaft + Pepton	2'	3	3«	4
(C) Pepton + Vitamine	2·	3	31	3'-4
(D) Pepton	2-2·	3	3	3'
(E) Aminosäure + Vitamine	2-2·	2'	2	3·
(F) Aminosäure	2	1-1·	2·	3·
(G) (S-W) + Vitamine	1	2
(H) (S-W)	1·

Als nächstes ist in der Tabelle 8-b die Neigung der Aktivitätsabnahme dargestellt, wobei den Subkulturmedien, deren Zusammensetzungen jeweils (A), (B), (C) und (H) gemäß Tabelle 8-a waren, weiterhin 1 g/l der F-Komponente beigegeben war, worauf man diese Medien für die Subkultur verwendete. Hier steht F-Komponente allgemein für S-enthaltende Verbindungen + N-enthaltende Verbindungen + C-enthaltende Verbindungen, die alle eine Neigung zu üblem Geruch besitzen und in dem Exkrement enthalten sind. In den in Tabelle 8-b enthaltenen Versuchen wurde Na-S-9H₂O, NH₃ und Essigsäure als repräsentative Substanzen für die S-, N- und C-Verbindungen verwendet.

709848/117 3

- 3b -

Tabelle

8-b

KuI	turmedium	für die Subkultur Ruckstandsqeruchsqrad	Generation	5.	7.
			3.	3	3·
			21	3	3«
(A)	+ F		21	2'	3
(B)	+ F		2	2·	3
(C)	+ F		2	2'	2 Ά/3
(D)	+ F		2	2·	3
(E)	+ F		2	1·	1·
(F)	+ F			1·/*2	2
(G)	+ F		1·
(H)	+ F
1.
2
2
1·~2
l'~2
1·~2
lV-2
1
1

Wie sich deutlich aus den Tabellen 8-a und 8-b ergibt, finden sich gute Zusammensetzungen für die Kulturmedien im Bereich (G) und (H) oder (G) + F und (H) + F, wo die Aktivitätsabnahme ziemlich klein ist.

Als nächstes wurde in dem Bereich der Zusammensetzungen (G), (H), (G) + F und (H) + F, wo die Aktivitätsabnahme als klein beobachtet worden war, ein Experiment wiederholt, wobei man die große Komponente von der Zusammensetzung des (S-W)-Medium eliminierte. Die Ergebnisse sind in der nachfolgenden Tabelle zusammengestellt, wobei - Glukose bedeutet, daß die Glukosekomponente eliminiert worden ist.

709848/1173

KuI	turmedium	tür	1	•	3	Rückstandsqeruchsgrad	•	5.	7.
für	die Subkul		1		1	Generation		1·	1'
			1		Ι	4·		2
(G)	- Glukose		0·,	,1	Ο		0U.1	O'~l
(H)	- Glukose	+ F	0Λ	*1	Ι		1-1'	1·
(G)	- Glukose	+ F
(H)	- Glukose

Aus der obigen Tabelle ergibt sich, daß die wesentlichen Faktoren der Kulturmediumzusammensetzung zur Verhinderung der Abnahme der Desodorierungskraft von fünf Bakterienstämmen darin liegen, daß zunächst das Basismedium eine geringe Nährbodenqualität besitzen sollte,und darüber hinaus sollte eine F-Substanz und Vitamin als Zusatzkomponente in dem Kulturmedium vorhanden sein.

Als nächstes sind in den Tabellen 9-a und 9-b die Ergebnisse von zwei Serien von Experimenten zusammengefaßt, wobei die Aktivitäten der Bakterien untersucht wurden, die aufeinanderfolgend durch wiederholte Subkultur vermehrt worden waren unter Verwendung von Kulturmedien, deren Grundzusammensetzung (G) - Glukose oder (H) - Glukose war, der außerdem noch verschiedene Aminosäuren beigegeben waren.

709848/1 173

Tabelle

772322G

9-a

die dem Grundkulturmedium beigegebene Aminosäure bestand aus (G) - Glukose für die Subkultur

Rückstandsqeruch

Generation
4.

Cystin

Cystein

Methionin

Glycin

Glutaminsäure

Arginin

Asparagin

Asparaginsäure

Alanin

Phenylalanin

AminobutyIsäure

Leucin

Isoleucin

Prolin

Lysin

Cyrosin

Histidin

Triptophan

Threonin

Serin

1·

1·

2·

2¹

1·

1·

1·

2·

2·

2'

2'

2·

2·

2·

2·

Casaminosäure

2/N/2

7 0 9 8 4 8/1173

Tabelle

9-b

die dem Grundkulturmedium beigegebene Aminosäure bestand aus (H) Glukose für die Subkultur Rückstandsgeruch

Generation 4.

Cystin Cystein Methionin Glycin Glutaminsäure Arginin Asparagin Asparaginsäure Alanin Phenylalanin AminobutyIsäure Leucin Isoleucin Prolin Lysin Cyrosin Histidin Triptophan Threonin Serin 1-v/P

1·

1·
2<ν2·

2·

2·

2'

2·

1' 1W2

2ν2·
2f2'

2 2 2 2' 3 3 3

2· 3

2'/ν 3' 3· 3

2· 2· 2·

Casaminosäure

709848/117

In der nachfolgenden Tabelle lO-a und der Tabelle 10-b sind die Ergebnisse von zwei Serien von Experimenten zusammengefaßt, wobei die Aktivitäten der Bakterien untersucht wurden, die aufeinanderfolgend in wiederholten Subkulturen vermehrt worden waren,unter Verwendung von Kulturmedien, deren Grundbestandteil (G) - Glukose oder (H) Glukose war, während außerdem noch verschiedene Aminosäuren sowie die übelriechende Komponente F beigegeben war.

709848/1173

- 4O -

Tabelle

272322G

lO-a

die dem Grundkulturmedium beigegebene Substanz bestand aus (G)- Glukose für die Subkultür

Restqeruch

Generation

11.

übelriechende
Komponente
F

Cystin	O'/vl	1	0Ά/1
Cystein	OVl	OWl	O'/vl
Methionin	O'n/1	O'*/l
Glycin	O'/vl	1
Glutaminsäure	OVvI	1
Arginin	1	1·
Asparagin	1	1«
Asparaginsäure	1	1·
Alanin	OWl	1~1·
Phenylalanin	1	1·
AminobutyIsäure	OWl	1«
Leucin	1	IVv 2
Isoleucin	1	IV1/ 2
Prolin	1	1'
Lysin	OVl	1
Cyrosin	OWl	1«
Histidin	O'/vl	l'vl·
Triptophan	1	IVv 2
Threonin	1	IV 2
Serin	IVv 2
Casaminosäure

709848/ 1173

272322B

Tabelle

lO-b

die dem Grundkulturmedium beigegebene Substanz bestand aus (H) - Glukose für die Subkultur

Restqeruch

Generation

4.

11.

übelriechende

Komponente

Cystin	1	1'
Cystein	1	1'
Methionin	1	1«
Glycin	1	I1
Glutaminsäure	1	1·
Arginin	WL'	"If O
Asparagin	1'	2
Asparaginsäure	1·	2
Alanin	1 1·	2
Phenylalanin	T-*	2
AminobutyIsäure	A 1 ι	2
Leucin	1'	2
Isoleucin	1·	2
Prolin	1'	2
Lysin	1	1·
Cyrosin	1-1·	1·
Histidin	1	IVv/2
Triptophan	I1	2
Threonin	1·	2
Serin	1·	2

Casaminosäure

Λ/

1·

1--V2

709848/117 3

Wie sich klar aus den Tabellen 9 und 10 ergibt, sind die Aminosäuren, die wirkungsvoll die Desodorierungskraft der Bakterien nahezu konstant kontinuierlich über viele Generationen zu halten vermögen, Cystin, Cystein, Methionin, Glycin, Glutaminsäure, Aminobutylsäure, Lysin, Histidin, Alanin, Cyrosin usw., während andere Aminosäuren, die in diesen Beispielen verwendet worden sind, eine allmähliche Abnahme der Desodorierungskraft der Bakterien nicht verhindern können.

Weitere Experimente auf die Bakterien, die durch aufeinanderfolgende Subkultur kultiviert wurden, zeigen, daß eine weitere Beigabe von Stärke, Mineralmaterialien usw. einen bemerkenswerten Effekt auf die Erhaltung der Desodorierungskraf t besitzen. Außerdem war es vorteilhafter, eine Kombination von Stärke, Mineralien, Vitamin und Aminosäure beizugeben, was sich als wirkungsvoll herausgestellt hat, wie Cystin usw. zur Erhaltung der Desodorierungskraf t. Gleichzeitig war die Beigabe auch wirkungsvoll bei der Erhöhung der Wachstumsrate. Diese erwähnten Auswirkungen können klar den Tabellen 11 bis 13 entnommen werden.

709848/1173

Tabelle

11

die (G) - Glukose + F beigegebene Substanz	10.	Restqeruchsqrad	25.
Stärke Mineralien Stärke + Mineralien	OVvI	Generation 15. 20.	1 1/tl' OVvI
	OVvI 1 1 1 O '1/1 O U/ 1

T a b e 1 Ie

12

dem Grundkulturmedium beigegebene Substanz ·	Anzahl erien kultiv bei 28	der Bakt- (aerob) iert 72 Std. 6 C	Restgeruchs grad (15. Ge neration^
keine	5 x	1O9	2«
Stärke	7 x	109	1 -Λ/ c.
Mineralien	6 x	109	CNJ
Vitamine	7 x	109	1·
Stärke + Mineralien	12 χ	109	1-1·
Stärke + Vitamine	13 χ	109	1
Vlineralien + Vitamine	8 x	109	1/vl1
Stärke + Mineralien + Vitamine	15 χ	109	Ο',νΐ

Bemerkung: Das Grundkulturmedium war (S-W) - Glukose + F

709848/117 3

/ / L ό Ζ Zb Tabelle 13

die dem	Grundkul	turmedium	20.	Restgeruchsgrad	35
[(G) - gebene	Glukose + Substanz	f] beige-	Ο'α,Ι OVvI	Generation 25. 30.	1
Stärke Stärke Cystin	+ Mineral + Mineral	ien ien +	O VvI 1

Als nächstes wurde von den Erfindern auch das Problem der Lagerung der Bakterien studiert. Dabei wurden die Bakterien verschiedenen Bedingungen im trockenen, halbtrockenen und nassen Zustand ausgesetzt, um die Änderung ihrer Aktivität zu ermitteln. Hierbei kamen die Erfinder zu dem Schluß, daß es nahezu unmöglich ist, die Lagerung von Bakterien für eine beträchtliche Zeitperiode durchzuführen, ohne deren Aktivität zu vermindern. Die "Lagerung eines handelsüblichen Gutes" kann unter wirtschaftlichen Gesichtspunkten nur durchgeführt werden, wenn die Bakterien in einen trockenen Status überführt werden.

Die experimentellen Werte führten die Erfinder zu dem oben erwähnten Schluß, der der Reihe nach erläutert werden soll. Hierbei wird zunächst auf Tabelle 14 Bezug genommen. Die in der Tabelle 14 angegebenen Daten wurden unter Verwendung der Bakterien F.R.I. Nr. 2823 als Untersuchungsprobe verwendet, wobei jedoch auch bestätigt wurde, daß analoge Werte erhalten werden können, wenn andere Bakterien als Untersuchungsprobe ausgewählt werden, wobei sich leider keine

709848/1173

Ausnahme zeigte.

Tabelle 14

Stadium während	der der	Bakterien Lagerung	Überzugs material	möglicher Lager periode 28° C 8° C	Tage	20	Tage
trocken			-	7	Tage	15	Tage
halbtrocken		-	5	Tage	7	Tage
naß		-	3	Tage	5	Tage
zusamrner	Flüssigkeit	—	2λ/3
ι mit

In der Tabelle 14 bedeutet der trockene Status der Bakterien, daß die Bakterien einen Wassergehalt von 8 % enthalten, wobei das Trocknen der Bakterien auf eine herkömmliche Weise erfolgen kann. Der halbtrockene Status bedeutet, daß die Bakterien einen Wassergehalt von 15 % besitzen. Der nasse Status bedeutet, daß die Bakterien von dem Kulturmedium gesammelt werden und als nasser Kuchen bezeichnet werden. Schließlich bedeutet der Status Bakterien zusammen mit Flüssigkeit, das Kulturmedium selbst nach dem Ende der Kultivierung. Die mögliche Lagerdauer bedeutet die längste Lagerdauer, während welcher die Bakterien ohne Abnahme ihrer Desodorisierungskraft gelagert werden können.

Bei dem obigen Experiment zur Ermittlung einer geeigneten Bedingung für die Lagerung, die sich kommerziell anwenden

709848/117

läßt, gelang es nicht, die Abnahme der Desodorisierungskraft für eine annehmbare Zeit zu verhindern, obwohl zwei Faktoren, nämlich der Wassergehalt und die Temperatur in einem weiten Bereich geändert wurden. Um die ursprüngliche Desodorisierungskraft über einen langen Zeitraum aufrechtzuerhalten, sollten andere Faktoren aufgrund einer neuen Idee in die Lagerungsbedingungen eingeführt werden. Da es den Erfindern bekannt war, daß die S-, N- und C-enthaltenden Zusammensetzungen sehr wirkungsvoll für die Verhinderung der Abnahme der Desodorisierungskraft von Bakterien ist, und außerdem ein rasches Wachstum, wie erwähnt, in den aufeinanderfolgenden Subkulturen bewirken, könnte das Vorhandensein einer solchen Zusammensetzung um den Körper der Bakterien eine Hilfe zur Verhinderung ihrer Aktivitätsab— nahm« sein. Es wurden Überziehungsuntersuchungen durchgeführt, wobei der Wassergehalt der Bakterien gleichzeitig in unterschiedlichem Maße verändert wurde.

Die Tabelle 15 zeigt ein Beispiel einer solchen Untersuchung von Bakterien, wenn ihr Körper mit diesen Substanzen überzogen wird, die eine wichtige Rolle bei den aufeinanderfolgenden Subkulturen spielen.

709848/117 3

T a b e 1 le

15(a)

Zustand bei

der
Lagerung

trocken

mögliche Laqerdauer

Überzugsmaterial

28° C

8° C

S-, N- und C-enthaltende

Zusammensetzungen 25 Tage 120 Tage

Mineral 10 Tage 40 Tage

Vitamine 15 Tage 50 Tage

Stärke 20 Tage 100 Tage

Cystin 20 Tage 100 Tage

Glutaminsäure 20 Tage 100 Tage

flüssig

S-, N- und C-enthaltende

Zusammensetzungen 5 Tage

Mineral 4 Tage

Vitamine 4 Tage

Stärke 4 Tage

Cystin 4 Tage

Glutaminsäure 4 Tage

25 Tage 15 Tage 20 Tage 25 Tage 25 Tage 25 Tage

S-, N- und C-enthaltende

Zusammensetzungen 4 Tage 20 Tage

Mineral 3 Tage 12 Tage

Vitamine 3 Tage 12 Tage

Stärke 3 Tage 20 Tage

Cystin 3 Tage 20 Tage

Glutaminsäure 3 Tage 20 Tage

709848/117

7723226

In den Tabelle 15 (a) und 15 (b) bedeutet ein Überziehen des Körpers der Bakterien im flüssigen Stadium, daß jeweils das Überzugsmaterial dem Kulturmedium beigegeben und mit diesem stark vermischt wurde, worauf man die Mischung zur Lagerung stehen ließ. Die Länge der möglichen Lagerdauer unterschied sich beträchtlich mit den unterschiedlichen Konzentrationen des Überzugsmaterial und es gab eine optimale Konzentration für die Lagerdauer, wie sie in Tabelle 15 (b) aufgeführt ist. Die Werte für die mögliche Lagerdauer, die in Tabelle 15 (a) angegeben sind, wurden durch eine Untersuchung an den Bakterien F.R.I. Nr. 2823 ermittelt, die jeweils mit einem Überzugsmaterial optimaler Konzentration überzogen waren. Die Situation ist auch die gleiche für diejenigen Werte, die in den Tabellen 16 und 17 angegeben sind.

709848/1173

Tabelle

15(b)

Stamm (F.R.I. Nr)

Lagerzustand Überzugs- Konzentration mögliche
material (d) Lagerdauer

28° C

8° C

2823

flüssig

S-,N-,C- 1

enthaltende 5

Zusammensetz- 10

ungen 20

Cystin 1
5

10
20

Tage

Tage

Tage

Tage

Tage

Tage

Tage
Tage

10 Tg. 15 Tg₁ 20 Tg. 20 Tg.

10 Tg. 15 Tg. 20 Tg. 20 Tg.

2544

flüssig S-,N-,C- 1
enthaltende 5
Zusammensetz— 10
ungen 20

Cystin 1
5

10
20

Tage

Tage

Tage
Tage

Tage

Tage

Tage
Tage

10 Tg. 15 Tg. 20 Tg. 12 Tg.

10 Tg. 15 Tg. 20 Tg. 12 Tg.

2545

flüssig

S-,K-,C-enthaltende
Zusammensetzungen

1
5

10
20

Cystin 1
5

10
20

Tage

Tage
Tage
Tag

Tage

Tage
Tage
Tage

15 Tg.

20 Tg.

10 Tg.

7 Tg.

15 Tg.

20 Tg.

12 Tg.

7 Tg.

7 0 9 8 4 8/1173

272322b

Stamm Überzugs- Konzen- mögliche Lager-

(F.R.I. Nr.) Lagerzustand material tration dauer

2546 flüssig

	1	28	° C	8°	C
S-,N-,C-	5	4	Tage	20	Tage
enthalt.	10	3	Tage	15	Tage
Zusammens-	20	1	Tag	6	Tage
	1	1	Tage	5	Tage
	5	4	Tage	20	Tage
	10	4	Tage	15	Tage
Cystin	20	2	Tage	10	Tage
	1	Tag	5	Tage

Benrerkungen: 1) Die Konzentration d in der Tabelle wurde wie

folgt definiert:

Id bedeutet, daß der flüssige Zustand 0,1 % jeweils von Na₂S 9H₂O, Ammoniak und Essigsäure, bezogen auf das Gewicht,enthält.

2) Die Konzentration von Cystin d in der Tabelle wird ebenfalls wie folgt definiert: Id bedeutet, daß der flüssige Zustand 0,1 % Cystin,bezogen auf das Gewicht,enthält.

Die Tabelle 16 zeigt die Lagerergebnisse dieser Bakterien, wobei jede Bakterienprobe mit einem Material überzogen war, das eine nicht-vernachlässigbare Rolle bei der Beschleunigung der Abnahme der Desodorierungskraft der Bakterien in aufeinanderfolgenden Subkulturen spielte.

709848/117

Tabelle

16

Lagerzustand Überzugsmaterial

mögliche Lagerdauer (Tage)

28° C

8° C

trocken

Pepton Fleischsaft Triptophan Serin

5 7 6 7

15 20 20 20

naß

Pepton Fleischsaft Triptophan Serin

5 5 5 7

flüssig

Pepton Fleischsaft Triptophan Serin

5 4 5 5

Wie sich aus den obigen Tabellen ergibt, ist es sehr wirkungsvoll, den Körper der Bakterien mit einer Substanz zu überziehen, die dazu beiträgt, die ursprüngliche Desodorierungsfähigkeit in der Subkultur aufrechtzuerhalten. Das bedeutet,

709848/1173

daß man hieraus schließen kann, daß zwischen einer Substanz, die dazu beiträgt die ursprüngliche Desodorierungsfähigkeit der Bakterien in der Subkultur aufrechtzuerhalten und einem Überzugsmaterial für die Bakterien, das eine wichtige Rolle für die Erhaltung der Fähigkeit während der Lagerung eine enge Beziehung besteht. Durch diese Information bezüglich des Überzugsmaterials wurden weitere Untersuchungen durchgeführt, um bessere Überzugsmaterialien durch die Kombination derjenigen Überzugsmaterialien zu finden, die für sich allein gute Eigenschaften zeigten. Die Erfinder haben festgestellt, daß es sehr wirkungsvoll ist, wenn man die Körper der Bakterien mit diesen Materialien jeweils in einer entsprechenden Konzentration überzieht. Eine solche Kombination von Zusammensetzungen, die ein sehr gutes Kulturmedium darstellt, oder eine Kombination von S-,N- und C-haltigen Zusammensetzungen und/oder Stärke und/oder Vitamin und Mineral oder eine Kombination von Aminosäuren, die wirkungsvoll für die Erahltung der Desodorierungskraft sind, oder widerum eine Mischung derartiger Kombinationen erscheinen sehr geeignet« Die Tabelle 17 (a) zeigt drei Beispiele von Überzugsmaterialien.

709848/117

Tabelle

(a)

272322G

Lagerzustand Überzugsmaterial

mögliche Lagerdauer

28° C

8° C

A.

trocken B..

(S-W) - Glukose +F + Stärke + Mineral + Vitamine

Cystin + Cystein + Methionin

S-, N-, C-Zusammensetzungen + Stärke + Mineral

Tage

Tage

Tage

300 Tage 200 Tage

300 Tage

A
B
C

Tage
Tage
Tage

60 Tage 50 Tage 50 Tage

flüssig

B
C

Tage
Tage
Tage

60 Tage 50 Tage 50 Tage

Es soll hier noch ein weiteres Beispiel aufgezeigtverden. Die Werte, die in den Tabellen 14 bis 17 (a) für Lageruntersuchungen angegeben sind, wurden erhalten, indem man mit Stickstoffgas in der Dampfphase jede Probe abdichtet, wobei auch andere Gase wirkungsvoll eingesetzt werden können, Der Effekt von verschiedenen Gasen, wie beispielsweise CO-, 0_, Hpi Methangas und Luft auf die mögliche Lagerdauer ist in Tabelle 17 <b) zusammen mit Stickstoff dargestellt. Von

709848/1173

diesen Werten läßt sich entnehmen, daß C0~ und H„ sehr viel besser für die Lagerung geeignet sind und nahezu mit Stickstoffgas vergleichbar sind, während jedoch Luft und Methangas leicht schlechter und Sauerstoffgas am allerschlechtesten ist.

Tabelle

17 (b)

Lagerzustand

Überzugsmaterial Dichtungs- ^mÖgli5^^^ager""

gas a««*»»·

dauer

28° C

8° C

trocken

^N2

Methangas
Luft

60 Tg. 60 Tg. 15 Tg.

55 Tg. 40 Tg. 30 Tg.

300 Tg.

300 Tg.

50 Tg.

250 Tg. 200 Tg. 100 Tg.

trocken

CO

^N2
CO.

^H2

Methangas
Luft

40 Tg. 40 Tg. 12 Tg. 40 Tg.

30 Tg. 20 Tg.

200 Tg.

200 Tg.

40 Tg.

200 Tg.

150 Tg. 70 Tg.

trocken

CO
°2

Methangas
Luft

60 Tg. 60 Tg. 15 Tg. 55 Tg.

40 Tg. 30 Tg.

300 Tg,

300 Tg,

50 Tg.

250 Tg.

180 Tg. 100 Tg.

709848/117 3

Von den oben erwähnten Experimenten können die folgenden Schlüsse gezogen werden.

(a) Als Temperatur für die Erhaltung der Desodorierungsfähigkeit der Bakterien ist 8° C geeigneter als 28° C (die mögliche Lagerdauer bei 8° C ist etwa fünfmal solange wie diejenige bei 28° C).

(b) Als Stadium der Bakterien während der Lagerung ist sowohl der nasse Zustand als auch der Zustand mit gleichzeitig vorliegendem Kulturmedium (manchmal ist dieser Zustand kurz als flüssiger Zustand bezeichnet worden) nicht geeignet.

(c) Es gibt eine optimale Konzentration für das Überzugsmaterial, die charakteristisch für die Stammspezien ist.

(d) Wenn Bakterien in den trockenen Zustand überführt und mit einem entsprechenden Überzugsmaterial überzogen werden, ist es möglich, sie über eine lange Zeit zu lagern.

(e) Ein geeignetes Überzugsmaterial kann in Abhängigkeit von dem Anwendungszweck der Bakterien ausgewählt werden, z. B. kann in dem Fall, wenn Bakterien als

709848/1173

?72322G

Desodorierungsmittel durch orale Verabreichung eingesetzt werden, eine Kombination von Aminosäure, Vitamin, Mineral und Stärke für das Überzugsmaterial verwendet werden, womit der Einsatz von S-, N- und C-Zusammensetzungen vermieden wird.

(f) Es besteht eine enge Beziehung zwischen dem Überzugsmaterial und den Bestandteilen des Kulturmediums, das in einer wirkungsvollen Weise die ursprüngliche Desodorierungskraft aufrechterhält.

Außerdem liegt,um das aus Bakterien bestehende Desodorant in die Praxis umzusetzen, ein weiteres wesentliches Problem darin, daß lediglich ein Stamm oder eine möglichst geringe Zahl von Stämmen Verwendung finden soll. Es sind intensive Bemühungen durchgeführt worden, um Desodorierungsverfahren unter Verwendung von Bakterien vieler Stämme zu studieren. Es ist jedoch äußerst schwierig, in der Praxis die Desodorierungskraft der Bakterien vieler Stämme konstant zu halten und ein kommerzielles Produkt zu schaffen, das eine stabile und konstante Qualität besitzt. Darüber hinaus ist es nahezu unmöglich, die Ungefährlichkeit bezüglich der Verursachung von Krankheiten dieser Bakterien vieler Stämme sowohl getrennt als auch in Kombination zu beweisen. Außerdem ist schließlich noch anzuführen, daß die Verwendung eines derartigen Mittels mit so vielen Stämmen in der natürlichen Welt im Falle eines Zusammenbruches des natürlichen Biogleichgewichtes dazu führt, daß

709848/1173

??2322G

dieses durch das menschliche Wissen kaum wieder ausgeglichen werden kann.

Aus den oben zum Ausdruck gebrachten Gesichtspunkten wird deutlich, daß es erstrebenswert ist, Bakterien eines einzigen Stammes einzusetzen. Auch, wenn eine solche Spezies von Bakterien schwierig zu erhalten ist, muß es als notwendig erachtet werden, Bakterien zu verwenden, die aus einer möglichst kleinen Zahl von Stämmen, wie etwa zwei bis drei Stämmen, bestehen. Es ist den Erfindern glücklicherweise gelungen, verschiedene Stämme zu isolieren, die allein oder als Mischung von zwei bis drei Stämmen zur Desodorierung eingesetzt werden können. Dies hat natürlich eine große Bedeutung bei dem praktischen Einsatz der Bakterien für die Desodorierung. Darüber hinaus ist es den Erfindern gelungen, die Entwicklung von zwei Gegenständen durchzuführen, die für die praktische Verwendung der Bakterien erforderlich ist. Bei einem dieser Gegenstände handelt es sich um folgendes.

Nachdem es den Erfindern gelungen war, die Bakterien eines einzigen Stammes abzutrennen, wuchsen sie sehr schnell unter einer aeroben Bedingung oder unter einer fakultativ anaeroben Bedingung, wobei es jedoch nahezu unmöglich erschien, sie unter anaerober Bedingung zu züchten. Die Bedeutung des schnellen Wachsens unter anaeroben Bedingungen für die Bakterien, die für den vorliegenden Zweck eingesetzt werden sollen, wurde bereits im Rahmen dieser Erfindung erläutert. Über länger als

709848/1173

*- / ^3226

ein Jahr hinweg haben die Erfinder versucht, sie selektiv an die anaerobe Bedingung, die sehr oft bei der Desodorierung vorliegt, zu akklimatisieren, wobei sie schließlich erfolgreich waren und Bakterien eines einzelnen Stammes erhielten, der unter anaeroben Bedingungen rasch wächst und außerdem eine ausgezeichnete Desodorierungsfähigkeit besitzt. Der Vermehrungsgrad von Bakterien unmittelbar nach ihrer Isolierung in einen einzelnen Stamm und nach der Akklimatisierung an die aneroben Bedingungen innerhalb der anaeroben Kultivierung ist in Tabelle 18 dargestellt.

Tabelle 18

Kulturmedium

Zahl der Bakterien (F.R.I. Nr. 2823Ϊ/ cm nach einer anaeroben Kultur bei 28° C während 72 Stunden

Stamm unmittelbar akklimatisierter nach der Isolierung Stamm

S-W - Glukose +F Ix 1O⁸ 3 χ ΙΟ⁹

S-W 5 χ 10⁸ 5 χ 10⁹

S-W + Amino-säure + Vitamine 1 χ ΙΟ⁹ 10 χ ΙΟ⁹

Eine weiter wichtige Entwicklung der Erfinder ist die Akklumatisierung der Bakterien an eine bestimmte Temperatur innerhalb

709848/1173

2723228

eines weiten Temperaturbereiches. Diese Notwendigkeit kommt natürlich von der Tatsache her, daß die Desodorierungsbakterien in großem Umfang überall in der Welt und zwar von tropischen Zonen über subtropische Zonen,gemäßigte Zonen und kalte Zonen Verwendung finden sollen. Somit sollen die Bakterien eines einzigen Stammes bevorzugt eine große Wachstumsrate und gleichzeitig eine starke Desodorierungskraft auch bei hohen oder niedrigen Temperaturen besitzen. Wenn der Temperaturbereich durch drei typische Temperaturen wie +8° C, +28° C und +40° C repräsentiert wird, und die Bedingung des Sauerstoffteildruckes in drei Bereiche aufgeteilt wird, nämlich aerobe, fakultativ anaerobe und anaerobe Bedinung, ergeben sich neun unterschiedliche Bedingungen, die in der nachfolgenden Tabelle zusammengestellt sind.

+8° C +28° C +40° C

aerob ο ο ο

fakultativ anaerob ο ο ο

anaerob ο ο ο

Beginnend mit einem Stamm, der bei 28° C unter aeroben oder fakultativ anaeroben Bedingungen schnell wuchs, wurde eine selektive Akklimatisierung unter allen angegebenen neun Bedingungen wiederholt und über einen längeren Zeitraum durchgeführt, wobei schließlich den Erfindern eine Kultivierung gelang.

709848/1173

Der Vermehrungsgrad der akklimatisierten Bakterien und der Vermehrungsgrad des einzelnen ursprünglichen Stammes, den man durch Isolation erhielt, und als Ausgangsmaterial für die Akklimatisierung an die neun vorgegebenen Bedingungen in Bezug auf Temperatur und Sauerstoffteildruck verwendete, sind in der Tabelle 19 zusammengestellt.

Tabelle

19

Sauerstoffteildruck

Zahl der Bakterien/cm"

	Stamm gerade nach der Isolierunq	28° C	40° C	akklimatisierter Stamm	28° C	40° C
aerob	8° C	8xlO9		8° C	lOxlO9	8xlO9
fakultativ anaerob	IxIO8	5xlO9	-	2xlO9	q 8x10	6xlO9
anaerob	3xlO7	IxIO8	—	IxIO9	5xlO9	3xlO9
IxIO6	3xlO8

Bemerkungen: 1) Das Kulturmedium war (S-W) und jede Kultivierung

wurde 72 Stunden lang durchgeführt.

2) Der für die Akklimatisierung verwendete Stamm war der gleiche wie er in Tabelle 18 aufgeführt ist.

Im Laufe der Experimente wurde noch herausgefunden, daß die Anpassungsfähigkeit der Bakterien an die Kulturbedingungen sich

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von Stamm zu Stamm shr stark unterscheidet, d. h. es gibt Stämme, die sich leicht an bestimmte Kulturbedingungen anpassen lassen,und andererseits war die Anpassung an die aufgezwungene Bedingung sehr schwierig.

In Jedem Fall macht es das Anwachsen der Zahl von Spezies von Stämmen wie beispielsweise auf neun in dem obigen Versuch sehr kompliziert, die experimentelle Arbeit durchzuführen, da es erforderlich ist, die Desodorierungskraft der Bakterien des einzelnen Stammes jeweils auf einem hohen Niveau zu halten. Durch die Kultivierung verschiedener Bakterien eines einzelnen Stammes, der sich an die klimatischen Bedingungen wie Temperatur und auch Sauerstoffteildruck in dem Medium, in welchem die Bakterien wachsen sollen, anpassen kann, wird es jedoch möglich, die Desodorierung überall in der Welt durch eine entsprechende Auswahl der Desodorierungsbakterien, die durch die Erfinder entwickelt worden sind, durchzuführen. Ein Beispiel, das dieses bestätigt, ist in Tabelle 20 aufgeführt.

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Tabelle 20

Versuchsbedingung Restgeruchsgrad

(Exkrement) (Desodorierunqskraft)

ursprünglicher Stamm akklimatis,

die Bakterien	im	Frühling	3
wurden in einen
Behälter von Ex	im	Sommer	3'
krementen in ei
nem Bassin bei	im	Herbst	3
gegeben
	im	Winter	4
	8°	C	2'
	28°	C	1
	40°	C	4

Bemerkungen: 1) Der ursprünglich nicht-akklimatisierte Stamm

war der gleiche, der in Tabelle 18 erwähnt ist.

2) Die akklimatisierten Stämme wurden von denjenigen, die in der Tabelle 19 dargestellt sind, ausgewählt.

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Claims (11)

Patentansprüche

1. Desodorierungsmittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt einer lebenden bakteriellen Substanz als Hauptkomponente zur Desodorierung von Exkrementen, wobei die Bakterien aus einem oder einer geringen Zahl von Stämmen bestehen, bei welchen es sich im wesentlichen um autotrophe Bakterien handelt und im Fall einer Kultivierung unter schlechten Nährbodenbedingungen zusätzlich allein oder kombiniert eine S-, N- oder C-enthaltende Zusammensetzung und/oder eine S-enthaltende Aminosäure zum schnellen Wachstum oder der Wachstumsbeschleuni gung der Bakterien eingesetzt ist, und der Wert von .u (die spezifische Wachstumsrate) der Bakterien, wenn sie bei 28° C unter Verwendung von (S-W) als Kulturmedium kultiviert werden, um 0,25 größer ist als diejenige der Dickdarmbakterien,und schließlich die Bakterien eine starke Resistenz gegen Gallenflüssigkeit besitzen.

2.Desodorierungsmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Bakterien durch eine künstliche, selektive Akklimatisation ursprünglicher Bakterien des gleichen Stammes oder anderer Stämme mit den gleichen Eigenschaften gewonnen werden, die aerobe oder fakultativ anaerobe oder anaerobe Eigenschaften besitzen.

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ORIGINAL INSPECTED

3. Desodorierungsmittel nach den Ansprüchen 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die hierin enthaltenen Bakterien durch selektive Akklumatisation ursprünglicher Bakterien des gleichen Stammes oder verschiedener Stämme hergeleitet sind, und eine Wachstumsrate bei einer vorgegebenen Temperatur auch dann besitzen, wenn diese in einem niedrigen Bereich von etwa 8° C oder einem hohen Bereich von etwa 40° C liegt.

4. Desodorierungsmittel nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die verwendeten Bakterien eine starke Resistenz gegenüber verschiedenen antibakteriellen Mitteln einschließlich Würzmitteln besitzen.

5. Verfahren zur Herstellung eines Desodorierungsmittels nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man die zur Desodorierung von Exkrementen verwendete lebende bakterielle Substanz durch Anbau oder Vermehrung von Bakterien ableitet, bei welchen es sich im wesentlichen um autotrophe Bakterien handelt, wobei man bei der Kultivierung unter schlechten Nährbodenbedingungen zusätzlich alein oder kombiniert eine S-, N- oder C-enthaltende Zusammensetzung und/oder eine S-enthaltende Aminosäure zum schnelleren Wachstum oder zur Wachstums-

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beschleunigung der Bakterien als wesentliche Komponente des Kulturmediums einsetzt, wobei der Wert von ,u (die spezifische Wachstumsrate) der Bakterien, wenn sie bei 28° C unter Verwendung von (S-W) als Kulturmedium kultiviert werden, um 0,25 größer ist als diejenige der Dickdarmbakterien, wobei als zusätzliche Komponente zu dem Kulturmedium Aminosäuren anwesend sein können.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß als Aminosäuren Cystin, Cystein, Methionin, Glycin, Glutaminsäure, Alanin, Aminobutylsäure, Lysin, Cyrosin oder Histidin eingesetzt wird.

7. Verfahren nach den Ansprüchen 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß die S-, N- und C-enthaltenden Komponenten nur aus S-Verbindungen, N-Verbindungen und niederen aliphatischen Karboxylsäuren (C-Verbindungen) bestehen, die in den Exkrementen als übelriechende Substanzen enthalten sind.

8. Verfahren nach einem der Ansprüche 5 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß man die Bakterien durch aufeinanderfolgenden Aufbau oder Vermehrung der Bakterien unter zusätzlicher Anwesenheit von Stärke und/oder Vitaminen und/ oder Mineralien durchführt.

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9. Verfahren nach einem der Ansprüche 5 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß das Kulturmedium (S-W) die folgende Zusammensetzung besitzt:
KH₂PO₄ .... 1 g, MgS0₄· 7H₂O ... 0,7 g, NaCl .... 1 g, (NH₄J₂HPO .... 4 g, FeSO₄* 7H₂O ... 0,03 g und Glucose .... 5 g.

10. Verfahren zur Lagerung des Desodorierungsmittels nach den Ansprüchen 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Zusatz zum Kulturmedium die Zusätze gemäß den Ansprüchen 5 oder 8 allein oder in Kombination verwendet, wobei das Kulturmedium die Bakterien in einem trockenen, halb trockenen oder nassen Zustand umgibt.

11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Lagerung der lebenden bakteriellen Substanz in einem inerten Gas, CO₂ oder H₂ durchgeführt wird.

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