DE2636789A1

DE2636789A1 - Lanolin ohne allergie erzeugende wirkung, derivate davon und verfahren zu ihrer herstellung

Info

Publication number: DE2636789A1
Application number: DE19762636789
Authority: DE
Inventors: Tsuruo Mikata; Kikuhiko Okamoto; Fumio Saito; Satoshi Takano; Makoto Yamanaka
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1975-10-09
Filing date: 1976-08-16
Publication date: 1977-04-14
Also published as: JPS5247009A; DE2636789C3; JPS565799B2; NZ181712A; DE2636789B2; AU1691076A; US4167518A; GB1504821A

Description

Lanolin ohne Allergie erzeugende Wirkung, Derivate davon und Verfahren zu ihrer Herstellung

Die vorliegende Erfindung betrifft Lanolin ohne Allergie erzeugende Wirkung, Derivate davon sowie ein Verfahren zu ihrer Herstellung.

Lanolin ist ein höherer Fettsäureester mit einem höheren Alkohol oder einem Sterin. Die hauptsächliche Fettsäurekomponente enthält n-, iso- und anteiso-Isomere einer Alkansäure, α- und ω-Hydroxysäure und bildet daher insgesamt neun verschiedene Formen. Andererseits umfaßt die alkoholische Kom-

X/R

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ponente sechs verschiedene Formen, welche die n-, iso- und ariteiso-Isomeren eines Monoalkohols und α,β-Diols und r. 2hreren Arten von Sterinen sind.

Lanolin wird als eine Kombination der obigen Alkohole und · Säuren, oder als ein polymerisiertes Produkt davon angesehen, jedoch enthält es noch mehrere Substanzen in der Größenordnung von mehreren Prozenten, deren Strukturen noch unbekannt sind. So ist Lanolin durch die Tatsache gekennzeichnet, daß es keine Hauptkomponenten besitzt, jedoch kann man annähernd sagen, daß etwa 30 % der Sterine in dem Lanolin der Hauptkomponente entsprechen.

Bisher wurde Lanolin in großem Umfang als Salbengrundlage und als Basis für kosmetische Cremes und Lotionen verwendet, jedoch wurde relativ oft eine durch Lanolin induzierte Allergie beobachtet, die in einer Häufigkeit im Bereich von 1 bis 18 % bei Personen auftrat, die damit in Berührung gekommen waren.

Wereide berichtete, daß eine durch Lanolin induzierte Allergie mit gleicher oder größerer Häufigkeit als bei Allergenen wie Nickel, Chrom, p-Phenylendiamin und dergleichen beobachtet wurde, jedoch mit einer geringeren Häufigkeit als bei Formaldehyd.

— ■? _

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Als erster legt Marcus im Jahre 1922 einige Ergebnisse bezüglich einer durch Lanolin induzierten Allergie vor, die er unter Anwendung einer Lanolinalkohol-Kombinationscreme als Testverbindung erhalten hatte, jedoch sind dieser Arbeit keine Angaben zu entnehmen, was in der untersuchten Verbindung tatsächlich als Allergen wirkte.

Später führte im Jahre 1936 Sezary zahlreiche Experimente mit Lanolin durch, jedoch konnte er wegen der äußerst komplizierten chemischen Struktur keine der Lanolinkomponenten, ermitteln, die fähig sind, als Allergen zu wirken, und er gab lediglich ganz allgemein Lanolin als Allergen an.

Im Jahre 19^0 stellte Panburg als erster fest, daß Lanolinalkohol ein Allergen ist. In den nächsten 30 Jahren wurden von zahlreichen Forschern eine große Anzahl von Untersuchungen mit Lanolin, Lanolinalkohol und Lanolinderivaten durchgeführt. Ungeachtet dieser fortgesetzten Bemühungen blieb eine als Allergen wirkende Substanz bis heute unbekannt. Dies ist vor allem auf die Schwierigkeit bei der Beurteilung der Allergie-Untersuchungen und die komplizierte chemische Zusammensetzung von Lanolin zurückzuführen.

In Kenntnis dieses Standes der Technik wurden nun umfangreiche Untersuchungen durchgeführt, um ein Allergen aus Lano-

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lin zu eliminieren, und als Ergebnis gefunden, daß irgendwelche Substanzen mit charakteristischen R~-Werten Allergie induzieren und daher durch Entfernung der obigen Substanzen Lanolin ohne Allergie erzeugende Wirkung und Derivate davon erhalten werden können, obwohl nicht geklärt werden konnte, welche Verbindungen tatsächlich als Allergen wirken.

Die vorliegende Erfindung beruht auf diesen Befunden.

Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung kann gelöst werden, indem man Substanzen mit charakteristischen R~-Werten von niedriger als 0,38 (Entwickler: Chloroform) oder niedriger als 0,14 (Entwickler: Benzol) in der Dünnsehicht-Chromatographie unter Verwendung von FLORISIL (Handelsmarke der Plorisin Co., Ltd., USA) als Adsorbens in einer Dicke von 0,25 mm aus Lanolin und Derivaten davon eliminiert.

Lanolin und Derivate davon, aus welchen ein Allergen durch nachstehend mehr im einzelnen beschriebene Säulenchromatographie eliminiert werden kann, schließen beispielsweise Lanolin, Lanolinwachs, flüssiges Lanolin, hydriertes Lanolin, acetylierten Lanolinalkohol, Lanolinfettsäureester und dergleichen, ein.

Um gemäß der vorliegenden Erfindung ^c-xn Allergen aus Lanolin

mm CZ mm

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und dessen Derivaten zu entfernen, werden Lanolin und dessen Derivate unter Verwendung einer mit Adsorbentien, wie beispielsweise Fullererde, aktivierter Magnesia, aktivierter Kohle, Tonerde, Kieselsäure, Magnesiumsilicat und dergleichen gefüllten Säule chromatographiert, mit nicht-polaren Lösungsmitteln eluiert und die auf diese Weise durch Elution mit den nicht-polaren Lösungsmitteln erhaltenen Eluate gesammelt.

Magnesiumsilicat (beispielsweise PLORISIL) kann bevorzugt als Adsorbens verwendet werden und die nicht-polaren Lösungsmittel können aus solchen organischen Lösungsmitteln, wie η-Hexan, Benzol, Toluol, Petroläther, Cyclohexan, Kohlenstofftetrachlorid. Chloroform und dergleichen, ausgewählt sein. Diese Lösungsmittel können allein oder kombiniert verwendet werden.

Zur Erleichterung der Destillation nach der Elution, und vor allem wegen des Geruchs und der Toxizität, können Benzol und Petroläther bevorzugt verwendet werden.

Das so erhaltene, keine Allergie erzeugende Lanolin kann weiter nach irgendwelchen bekannten Verfahren in die verschiedenen, keine Allergie erzeugenden Lanolinderivate überführt werden.

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ORIGINAL INSPECTED

Demzufolge umfaßt das keine Allergie erzeugende Lanolin
und dessen Derivate, welche gemäß der vorliegenden Erfindung erhalten werden, Lanolin und seine Derivate, die keinerlei Substanzen mit charakteristischen R«-Werten enthalten, und alle Lanolinderivate ohne Allergie erzeugende Wirkung, die sich von dem obigen, keine Allergiewirkung hervorrufenden Lanolin ableiten, wie beispielsweise hydriertes Lanolin, acetyliertes Lanolin, äthoxyliertes Lanolin, Lanolinalkohol, acetylierter Lanolinalkohol, Ä'thoxylanolinalkohol, äthoxylierter und acetylierter Lanolinalkohol, äthoxyliertes hydriertes Lanolin, äthoxyliertes und propoxyliertes hydriertes Lanolin, Lanolinfettsäure, Lanolinfettsäureester, Lanolinfettsäurepolyäthylenglykolester, Lanolinfettsäurealkanolamid, Lanolinfettsäureseife und dergleichen.

Im Hinblick auf die oben geschilderten Schwierigkeiten
schafft die vorliegende Erfindung Lanolin und Derivate davon ohne Allergie erzeugende Wirkung durch Eliminieren eines
Allergens aus Lanolin und seinen Derivaten.

Die vorliegende Erfindung wird durch die nachfolgenden Beispiele näher erläutert.

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4.

Beispiel 1

Allergie-Untersuchungen mit Lanolin und dessen Derivaten: Es wurden 13 Patienten mit Lanolin-Allergie untersucht; Allergie-Lappen-Untersuchungen

Proben Positive Zahlen

Lanolinwachs 2

Flüssiges Lanolin 2

Hydriertes Lanolin 18

Acetyliertes Lanolin 1

Lanolinfettsäure 2

Lanolinalkohol ,, 17

Acetylierter Lanolinalkohol .,,.,.. 3

Äthoxylierter-acetylierter Lanolinalkohol ,. 0

Um irgendwelche Komponenten, die ein Allergen enthalten, aufzuklären, wurden Allergie-Untersuchungen mit Lanolin und seinen Derivaten durchgeführt. Es wurde gefunden, daß hydriertes Lanolin und Lanolinalkohol eine erhebliche Häufigkeit des Auftretens der positiven Zahl induzieren, und andererseits Lanolinwachs und flüssiges Lanolin ein geringes Auftreten zeigen.

- 8 -7 0 9 8 15/1028 _; :

Die Acetylierung von Lanolin neigt zu einer Abnahme der positiven Zahl, und diese Tendenz ist besonders signifikant bezüglich eines Lanolinalkohols. Der Lanolinalkohol zeigt eine hohe Häufigkeit des Auftretens der positiven Patienten, jedoch senkt eine Äthoxylierung desselben die positive Zahl auf Null. Eine Lanolinfettsäure ist, wie in anderen Berichten gezeigt wird, als mit dem Lanolinalkohol verunreinigt anzusehen.

Im Hinblick auf die vorstehenden Ergebnisse wurde angenommen, daß ein Allergen in Alkoholkomponenten enthalten ist. Weiterhin wurden die nachfolgenden Versuche mit hydriertem Lanolin als Untersuchungssubstanz durchgeführt.

Beispiel 2 Abtrennung von hydriertem Lanolin und Allergie-Untersuchungen

Abtrennung durch: Dünnschicht-Chromatographie Adsorbens: PLORISIL mit einer Dicke von 0,25 nun Entwickler: Chloroform

Probe: Hydriertes Lanolin

Fleck-Nr. R„-Wert Allergie-Untersuchungen

0,90 Negativ

- 9 7098 15/1028

Z63&789

FIeck-Nr.	R_f-Wert
2	0,65
3	0,51
4	0,38
5	0,10
6	0,04
7	0

Aller gie-Unte. Buchungen

Negativ Negativ Positiv Positiv Positiv Positiv

Die Flecken mit den R^-Werten von niedriger als 0,38 unter den obigen Bedingungen zeigten alle positive Allergie-Reaktionen. Dies bedeutet, daß in den Flecken ein Allergen enthalten war.

Beispiel 3

Abtrennung von Lanolin und Allergie-Untersuchungen: Abtrennung durch: Dünnschicht-Chromatographie Adsorbens: FLORISIL mit einer Dicke von 0,25 Entwickler: Chloroform
Probe: Lanolin

- 10

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Pleck-Nr. R_f-Wert Allergie-Untersuchungen

1 0,79 Negativ

2 0,57 Negativ

3 . 0,51 Negativ

4 0,38 Positiv

5 - 0,10 Positiv

6 0,04 Positiv

7 0 Positiv

Die Flecken mit FL,-Wert en von niedriger als 0,38 unter den obigen Bedingungen zeigten alle positive Allergie-Reaktionen. Dies zeigte eindeutig, daß ein Allergen in den Flecken enthalten war. Diese Ergebnisse sind denen in Beispiel 2 sehr ähnlich, in welchem hydriertes Lanolin verwendet worden war.

Beispiel 4

R^-Werte des Allergen-enthaltenden Teils von hydrierten Lanolin:

Abtrennung durch: Dünnschicht-Chromatographie

Adsorbens: FLORISIL mit einer Dicke von 0,25 mm Entwickler: (1) Benzol

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Entwickler: Probe:

(2) Chloroform

Allergen-enthaltender Teil des hydrierten Lanolins

Entwickelndes Lösungsmittel

R_f-Wert

Benzol Chloroform

0,14 0,04 0,02 0 0,38 0,10 0,04 0

Ein Allergen-enthaltender Teil von hydriertem Lanolin hatte eine ziemlich starke Polarität und.zeigte daher derartig niedrige R^-Werte wie oben.

Beispiel 5

Eliminierung eines Allergen-enthaltenden Teils aus hydriertem Lanolin (1):
Abtrennung durch: Säulenchromatographie

Adsorbens:

Säule:

Eluiermittel:

Probe:

PLORISIL

25 mm 0, 250 mm

(1) Benzol

(2) Chloroform/Äther (8/2)

(3) Methanol

1,5 g Hydriertes Lanolin

- 12

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Fraktion

Eluiermittel

Untersuchungen

II
III
IV

Benzol 100 ml Benzol 100 ml Benzol 100 ml

Negativ
Negativ
Negativ

Chloroform/Äther (8/2) Positiv

300 ml
Methanol 300 ml Positiv

Ausbeute

8 -SS 4 %

65 % 19 %

Wie aus den vorstehenden Ergebnissen entnommen werden kann, zeigen die mit Benzol erhaltenen Eluate eine negative Allergie-Reaktion und die Ausbeute an hydriertem Lanolin ohne Allergie erzeugende Wirkung betrug insgesamt etwa 80 %.

Beispiel 6

Eliminierung eines Allergen-enthaltenden Teils aus hydriertem Lanolin (2):

Abtrennung durch: Destillation unter vermindertem Druck Probe: 50 g Hydriertes Lanolin

- 13 -

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Destillationsbedingungen

Allergie- . , . Auftreten des Teils Unters. . ^AusDeu1;e mit R.-Wert 0,32

- 164° C/3mm Hg destillierter Teil

Rückstand

Negativ

Positiv

20,6 %

7 9,3

Nein

Ja

Wie aus den vorstehenden Ergebnissen entnommen werden kann, ermöglicht die Destillation unter vermindertem Druck ebenfalls die Abtrennung eines Allergen-enthaltenden Teils. Jedoch war die Ausbeute erheblich niedriger, wobei diese durch Verbesserung der Destillationsbedingungen gesteigert werden kann.

Beispiel 7 Abtrennung von hydriertem Lanolin und Adsorbentien:

Abtrennung durch: Säulenchromatographie

Säule: 25 mm 0 , 250 mm

Adsorbentien: FLORISIL, Kieselgel, Tonerde

Eluiermittel: n-Hexan

Probe: 1,5 g Hydriertes Lanolin

(Vergleich der durch Allergie-Reaktion erzielten Ausbeuten

wurde positiv.)

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Adsorbentien Ausbeuten

PLORISIL 80 %

Kieselgel 55 %

Tonerde 45 %

Wie aus den vorstehenden Ergebnissen entnommen werden kann, nahm die Ausbeute in der Reihe FLORISIL₅ Kieselgel und Tonerde ab, und FLORISIL lieferte eine besonders hohe Ausbeute.

Beispiel 8

Abtrennung von hydriertem Lanolin und Eluiermitteln: Abtrennung durch: Säulenchromatographie Säule: 25 mm 0, 250 mm

Adsorbens: FLORISIL
Eluiermittel: η-Hexan, Benzol, Kohlenstofftetraehlorid,

Petroläther

Probe: I₅5 g Hydriertes Lanolin

(Die durch Allergie-Reaktion erzielten Ausbeuten wurden positiv.)

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Eluiermittel Ausbeuten

η-Hexan 80 %

Benzol 77 %

Kohlenstofftetrachlorid 70 %

Petroläther 65 %

Wie aus den obigen Ergebnissen entnommen werden kann_a zeigten die Eluiermittel η-Hexan und Benzol relativ hohe Ausbeuten.

Beispiel 9

Abtrennung und Reinigung von Lanolin und Derivaten davon: Abtrennung durch: Säulenchromatographie Säule: 25 mm 0, 250 mm

Adsorbens: PLORISIL
Eluiermittel: Benzol
Proben: (1) Lanolin

(2) Hydriertes Lanolin

(3) Lanolinalkohol

(4) Acetyliertes Lanolin

(5) Acetylierter Lanolinalkohol

(Ausbeuten erzielt durch die Substanzen mit einem R_f-Wert von 0,38 in Beispiel 2 herauseluiert.)

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• /Ar .

Proben	Ausbeuten	Allergie- Untersuchungen
Lanolin	90 %	Negativ
Hydriertes Lanolin	83 %	Negativ
Lanolinalkohol	80 %	Negativ
Acetyliertes Lanolin	95 %	Negativ
Aeetylierter Lanolin alkohol	92 %	Negativ

Wie aus den vorstehenden Ergebnissen entnommen werden kann, erwiesen sich Lanolin und Derivate da-von₃ die den Teil mit dem R^-Wert von 0,38 in der Dünnschicht-Chromatographie (FLORISIL: Entwickler: Chloroform) nicht enthielten, als Lanolin und Lanolinderivate, die keine Allergie erzeugende Wirkung aufwiesen.

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Claims

Patentansprüche

ΠΛ Lanolin oder Derivate davon ohne Allergie erzeugende Wirkung, die keine Substanz mit charakteristischen R_f-Werten von weniger als 0,38 (Entwickler: Chloroform) oder weniger als 0,14 (entwickelndes Lösungsmittel: Benzol) in der Dünnschicht-Chromatographie unter Verwendung von Magnesiumsilicat mit einer Dicke von 0,25 mm als Adsorbens enthalten.
2. Verfahren zur Herstellung von Lanolin oder dessen Derivaten, die keine Allergie erzeugende Wirkung aufweisen, dadurch gekennzeichnet, daß man Lanolin oder seine Derivate einer Säulenchromatographie an Magnesiumsilicat unterwirft, mit einem nicht-polaren Lösungsmittel eluiert und die durch Elution mit dem nicht-polaren Lösungsmittel erhaltenen Eluate sammelt.
3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet , daß die Lanolinderivate aus der Gruppe bestehend aus hydriertem Lanolin, acetyliertem Lanolin, Lanolinfettsäure, Lanolinalkohol, acetyliertem Lanolinalkohol und äthoxyliertem-acetylierten Lanolinalkohol ausgewählt sind.
4. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch g e -

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kennzeichnet , daß das nicht-polare Lösungsmittel aus der Gruppe bestehend aus Chloroform, Benzol ₃ n-Hexan, Kohlenstofftetrachlorid und Petroläther ausgewählt ist.

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