DE2202701A1 - METHOD FOR PRODUCING LEMON ACID BY FERMENTATION - Google Patents
METHOD FOR PRODUCING LEMON ACID BY FERMENTATIONInfo
- Publication number
- DE2202701A1 DE2202701A1 DE19722202701 DE2202701A DE2202701A1 DE 2202701 A1 DE2202701 A1 DE 2202701A1 DE 19722202701 DE19722202701 DE 19722202701 DE 2202701 A DE2202701 A DE 2202701A DE 2202701 A1 DE2202701 A1 DE 2202701A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- fermentation
- paraffins
- citric acid
- culture medium
- culture liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/44—Polycarboxylic acids
- C12P7/48—Tricarboxylic acids, e.g. citric acid
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
DU Ä. POSCHENRIEDERYOU Ä. POSCHENRIEDER
► DR. E. BOETTNER
DIPL-ING. H..J. MÜLLER► DR. E. BOETTNER
DIPL-ING. H..J. MÜLLER
Patentanwälte 2 £ U £ /UlPatent Attorneys £ 2 U £ / ul
Λ 8 MÜNCHEN 80 Lucile - Grahn - Straße 38 Telefon 475155Λ 8 MUNICH 80 Lucile - Grahn - Street 38 Telephone 475155
No. 6-4, Otemachi Mitsui Sugar Co., Ltd., Tokyo. Japan,2 chome, Chiyoda-ku,No. 6-4, Otemachi Mitsui Sugar Co., Ltd., Tokyo . Japan, 2 chome, chiyoda-ku,
Hiroshi Iizuka, Tokyo, Japan, 14, No. 5, 4-chome, Nishiochiai, Shin.juku-ku Hiroshi Iizuka, Tokyo , Japan, 14, No. 5, 4-chome, Nishiochiai, Shin.juku-ku
Verfahren zur Herstellung von Zitronensäure durch GärungProcess for the production of citric acid by fermentation
(zusatz zu Patent . ... Patentanmeldung(in addition to patent. ... patent application
P 18 12 71C.1-41).P 18 12 71C.1-41).
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur biotechnischen Herstellung von Zitronensäure durch Gärung, und insbesondere betrifft sie ein Verfahren zur Herstellung von Zitronensäure durch Gärung unter Verwendung von Kohlenwasserstoffen als Kohlenstoffquelle.The present invention relates to a method for the biotechnological production of citric acid by Fermentation, and in particular it relates to a process for the production of citric acid by fermentation under Use of hydrocarbons as a carbon source.
Bei einem bekannten Gärungsverfahren zur Herstellung von Zitronensäure, das in der Technik praktisch ausgeübt wird, werden Schimmelpilze verwendet, und als Kohlenstoffquelle für das bei der Gärung verwendete Kulturmedium wird ein Saccharid, insbesondere Melasse, benutzt. Darüber hinaus wird die Gärung für gewöhnlich vermittels einer Oberflächenkultur durchgeführt, doch gewinnt die Submerskultur seit kurzem eine immer größere praktische Bedeutung. In a known fermentation process for the production of citric acid, which is practiced in the art, Molds are used, and as a carbon source a saccharide, in particular molasses, is used for the culture medium used in fermentation. Furthermore If fermentation is usually carried out using a surface culture, the submerged culture wins recently of increasing practical importance.
Die Submerskultur von Schimmelpilzen bietet jedooh wegen der Eigenschaften eines Stammes, der zur GattungThe submerged culture of mold, however, offers because of that the characteristics of a tribe belonging to the genus
309807/ 1 U9309807/1 U9
Asperglllus niger gehört, der einen typischen, normalerweise bei der Gärung verwendeten Schimmelpilz darstellt, verschiedene Schwierigkeiten. So erfordert die submerse Züchtung beispielsweise einen hohen technischen Aufwand zur Regulierung des Gärprozesses. Asperglllus niger , which is a typical mold normally used in fermentation, has raised various difficulties. For example, submerged breeding requires a high level of technical effort to regulate the fermentation process.
Die eigene ältere offengelegte Patentanmeldung P 18 12 7^0.1 betrifft ein biotechnisches Herstellungsverfahren für Zitronensäure oder ihren Salzen durch Mikroorganismen in zuckerhaltigen Nährsubstraten, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man den unter ATCC 20 177 niedergelegten Mikrostamm der Gattung Candida oleophila unter aeroben Bedingungen in einer Kulturflüssigkeit, welche assimilierbare Kohlenhydrate und übliche Neutralisierungsmittel, wie Calciumcarbonat, in Verbindung mit anderen anorganischen und organischen Bestandteilen enthält, züchtet, und das in großer Menge angesammelte Zitrat aus der Kulturflüssigkeit gewinnt.The own, earlier published patent application P 18 12 7 ^ 0.1 relates to a biotechnological production process for citric acid or its salts by microorganisms in sugar-containing nutrient substrates, which is characterized in that the microstrain of the genus Candida oleophila laid down under ATCC 20 177 is under aerobic conditions in a culture liquid which contains assimilable carbohydrates and common neutralizing agents such as calcium carbonate in combination with other inorganic and organic components, and extracts the citrate accumulated in large quantities from the culture liquid.
Dieses Verfahren bietet besondere Vorteile bezüglich der Ausbeute, einer kürzeren Kulturdauer, eines geringeren Belüftungsaufwandes und der Möglichkeit, kontinuierlich zu arbeiten.This method offers particular advantages in terms of yield, a shorter culture time, a lower one Ventilation effort and the ability to work continuously.
Es wurde überraschenderweise gefunden, daß dieser zur Gattung Candida oleophila gehörige Stamm, der aus einem Petroleumkraftstoff-Tank isoliert wurde, nicht nur Kohlenwasserstoffe assimiliert, sondern bei Züchtung in einem flüssigen, Kohlenwasserstoffe enthaltenden Kulturmedium Zitronensäure in großer Menge zu bilden vermag, die sioh in dem Kulturmedium ansammelt und aus der Gärmaische gewonnen werden kann.It has surprisingly been found that this strain belonging to the genus Candida oleophila , which was isolated from a petroleum fuel tank, not only assimilates hydrocarbons, but is also able to form large quantities of citric acid when grown in a liquid culture medium containing hydrocarbons, which sioh in the Culture medium accumulates and can be obtained from the fermentation mash.
Das erfindungegemäße Verfahren aur bioteohnischen Herstellung von Zitronensäure oder ihren Salzen durch ZüchtenThe process according to the invention involves the biological production of citric acid or its salts by cultivation
309807/1U9 - 3 -309807 / 1U9 - 3 -
von Candida oleophila ATCC 20 177 unter aeroben Bedingungen in einer Kulturflüssigkeit, welche eine assimilierbare Kohlenstoffquelle und übliche Neutralisierungsmittel, wie Calciumcarbonat, in Verbindung mit anderen anorganischen und organischen Bestandteilen enthält, und Gewinnen des gebildetenof Candida oleophila ATCC 20 177 under aerobic conditions in a culture liquid, which contains an assimilable carbon source and common neutralizing agents, such as calcium carbonate, in conjunction with other inorganic and organic components, and recovering the formed
Zitrats aus der Kulturflüssigkeit nach Patent Citrate from the culture liquid according to patent
(Patentanmeldung P 18 12 710.1-41), ist dadurch gekennzeichnet, daß man eine Kulturflüssigkeit verwendet, die als Kohlenstoffquelle η-Paraffine oder überwiegend η-Paraffine enthaltende Kohlenwasserstoffe enthält.(Patent application P 18 12 710.1-41), is characterized by that one uses a culture liquid which η-paraffins or as a carbon source contains predominantly η-paraffins containing hydrocarbons.
Die für die Taxonomie der erfindungsgemäß verwendeten Art Candida oleophila charakteristischen Eigenschaften sind die folgenden:The properties characteristic of the taxonomy of the species Candida oleophila used according to the invention are as follows:
- 4 - 'i (ι Ί Η 0 7 / 1 1 A 9- 4 - 'i (ι Ί Η 0 7/1 1 A 9
(1) Wachstum in Malzextrakt (1) Growth in malt extract
Naoh dreitägigem Wachstum bei 25°C sind ovale oder länglich-ovale Zellen entstanden, deren Größe (2,5 bis 5,0 Ai) χ (3,0 bis 15,0/u) beträgt. Auf der Oberfläche des Kulturmediums hat sich ein schwerflüssiger ausgedehnter Ring bzw. eine entsprechende Haut gebildet. Dieser Ring bzw. diese Haut ist glatt oder runzlig und hellbräunlich-cremefarben. Es werden keine Ascosporen, sondern es wird ein Pseudomycel gebildet.After three days of growth at 25 ° C, oval or oblong-oval cells were formed, the size of which is (2.5 to 5.0 Ai) χ (3.0 to 15.0 / u). On the surface of the culture medium, a heavy, extended ring or a corresponding skin has formed. This ring or this skin is smooth or wrinkled and light brownish-cream in color. No ascospores are formed, but a pseudomycelium is formed.
(2) Aufstrelohkultur auf Malz-Agar (2) Aufstreloh culture on malt agar
Nach dreitägigem Wachstum bei 25°C ist die Aufstreichkultur glatt und hellbräunlich-cremefarben. Die Form der Zellenist die gleiche wie im Falle des Malzextraktes. Es werden keine Ascosporen, sondern es wird ein Pseudomycel gebildet.After three days of growth at 25 ° C, the spread culture is smooth and light brownish-cream in color. Form the cells are the same as in the case of the malt extract. There will be no ascospores, but rather it will be one Pseudomycelium formed.
(3) Plattenkultur (3) plate culture
Das Pseudomycel entwickelt sich gut auf Kartoffel-Agar. The pseudomycelium develops well on potato agar.
(4) Physiologische Eigenschaften (4) Physiological properties
i) optimale Wachstumsbedingungens pH 5,2; Temperatur 30°C; aerobe Bedingungen; ii) Assimilierung von Kaliumnitratt keine; iii) Koagulierung von Milcht keine; iv) osmophlle Eigenschaft (in 1Obigem NaCl-Medium) keine;i) optimal growth conditions p H 5.2; Temperature 30 ° C; aerobic conditions; ii) assimilation of potassium nitrate none; iii) milk coagulation none; iv) osmophile property (in 1Obigem NaCl medium) none;
v) Verflüssigung von Oelatine: keine; vi) Vitaminbedarf: keiner;
vii) Bildung von Karotinfarbstoffeni keine.v) Liquefaction of oilatins: none; vi) vitamin requirement: none;
vii) Formation of carotene pigmentsi none.
(5) Assimilierbare Stickstoffquelle Pepton, Ammoniumsulfat und Harnstoff(5) Assimilable nitrogen source peptone, ammonium sulfate and urea
309807/ 1 1 49309807/1 1 49
(6) Assimilierbare (6) Assimilables KohlenstoffguelleCarbon source Olukose +Olucose +
Galactose + Saccharose + Maltose Lactose StärkeGalactose + Sucrose + Maltose Lactose strength
(7) Äthanol als einzige (7) Ethanol as the only one KohlenstoffguelleCarbon source Outes WachstumOutes growth
(8) Kerosin als einzige (8) Kerosene as the only one KohlenstoffquelleCarbon source Gutes WachstumGood growth
(9) Gärungen von (9) Fermentations of Glukose, Galactose, Saccharose, MaltoseGlucose, galactose, sucrose, maltose und Lactoseand lactose
KeineNo
(10) Arbutin-Spaltung Keine(10) Arbutin cleavage None
(11) Vorkommen (11) Occurrence
Dieser Mikroorganismus kommt in Petroleumkraftstoff-Tanks u.dgl. vor. This microorganism is found in petroleum fuel tanks and the like.
Die vorstehend angeführten taxonomen Eigenschaften stehen im Gegensatz zu dem, was in dem Buch von Lodder und Kreger- van RiJ "The Yeast" (1952) beschrieben ist. Obwohl der vor liegend verwendete Mikroorganismus in die Gattung Candida eingeordnet wurde, ist nichts in der entsprechenden Beschreibung der Species erwähnt, mit welcher der vorliegende Mikro organismus gleichgesetzt werden kann. Er scheint mit der bekannten Species Candida rugosa eng verwandt zu sein, un terscheidet sich jedoch deutlich von dieser durch die Fähig keit zur Assimilierung von Saccharose und durch die Bildung des schwerflüssigen Ringes bzw. der Haut im Falle der Züch tung im Malzextrakt. Demgemäß wird der Mikroorganismus, der The taxonomic properties listed above are in contrast to what is described in the book by Lodder and Kreger- van RiJ "The Yeast" (1952). Although the present microorganism used has been classified in the genus Candida , nothing is mentioned in the corresponding description of the species with which the present microorganism can be equated. It appears to be closely related to the well-known species Candida rugosa , but differs significantly from it in its ability to assimilate sucrose and the formation of the thick ring or the skin in the case of cultivation in the malt extract. Accordingly , the microorganism that
309807/ 1 1 49309807/1 1 49
bei der vorliegenden Erfindung zur Anwendung gelangt, als neue Species angesehen, die zur Gattung Candida gehört und dem die Erfinder den Namen "Candida oleophila" gegeben haben.used in the present invention is considered to be a new species belonging to the genus Candida , which the inventors named " Candida oleophila ".
Eine Kultur des lebenden Organismus ist bei der American Type Culture Collection unter der ATCC-Nr. 20177 hinterlegt worden.A living organism culture is registered with the American Type Culture Collection under ATCC No. 20177 deposited been.
Gemäß der Lehre der vorliegenden Erfindung kann jeder beliebige Stamm, der zur Species Candida oleophila gehört, für das erfindungsgemäße Verfahren verwendet werden. Es kann jeder Organismus für die vorliegende Erfindung Anwendung finden, der als Mutante oder Variante von Candida oleophila anerkannt werden kann und der die oben angeführten hauptsächlichen mykologischen Eigenschaften aufweist.According to the teaching of the present invention, any strain belonging to the species Candida oleophila can be used for the method according to the invention. Any organism which can be recognized as a mutant or variant of Candida oleophila and which has the main mycological properties listed above can be used for the present invention.
Als Kohlenwasserstoffe, die für das erfindungsgemäße Kulturmedium verwendet werden, kann man auf übliche Paraffine zurüokgreifen, doch werden vorzugsweise n-Paraffine benutzt. Als solche η-Paraffine können 9 bis 35 Kohlenstoffatome aufweisende η-Paraffine verwendet werden, doch benutzt man solche η-Paraffine, die 9 bis 20 Kohlenstoffatome aufweisen, so wird Zitronensäure in besonders hoher Ausbeute erzeugt. Die vorstehend angeführten n-Paraffine können für sich allein oder im Gemisch untereinander angewendet werden.As hydrocarbons that are used for the culture medium according to the invention are used, one can resort to common paraffins, but n-paraffins are preferred used. Such η-paraffins can have 9 to 35 carbon atoms having η-paraffins can be used, but such η-paraffins are used which have 9 to 20 carbon atoms have, citric acid is produced in a particularly high yield. The above-mentioned n-paraffins can be used on their own or in a mixture with one another.
Zu den Stickstoffquellen, die beim erfindungsgemäßen Kulturmedium verwendet werden, gehören beispielsweise Ammoniak, Harnstoff, anorganische oder organische Ammoniumsalze, wie Ammoniumchlorid, Ammoniumsulfat oder Ammoniumacetat, Pepton,The nitrogen sources that are used in the culture medium according to the invention include, for example, ammonia, Urea, inorganic or organic ammonium salts such as ammonium chloride, ammonium sulfate or ammonium acetate, peptone,
309807/1 U9309807/1 U9
Fleischextrakt* Hefeextrakt, Maiseinweichwasser, Fischmehl, ein aufgeschlossenes Produkt desselben, Sojabohnenkuchen oder ein aufgeschlossenes Produkt desselben u.dgl. mehr. Diese Stickstoffquellen können für sich allein oder in Kombination miteinander verwendet werden.Meat extract * yeast extract, maize steeping water, fish meal, a digested product thereof, soybean cake or a digested product thereof, and the like. more. These nitrogen sources can be used alone or in combination with each other.
Erforderlichenfalls kann ein anorganisches Material, wie ein Phosphat, ein Magnesiumsalz oder ein Mangansalz, und ein Vitamin, wie Thiamin oder Nicotinsäure, dem Kulturmedium einverleibt werden.If necessary, an inorganic material such as a phosphate, a magnesium salt or a manganese salt, and a vitamin such as thiamine or nicotinic acid can be incorporated into the culture medium.
Um zu verhindern, daß das pH des Kulturmediums schwankt, ist es empfehlenswert, vorher Calciumcarbonat oder Natriumcarbonat dem Kulturmedium zuzusetzen, um während der Züchtung gebildete und angesammelte Zitronensäure zu neutralisieren, doch kann das vorerwähnte Salz oder Calciumhydroxyd oder Natriumhydroxyd dem Kulturmedium während der Züchtung als Neutralisiermittel zugegeber» werden.In order to prevent the p H varies the culture medium, it is recommended that before calcium carbonate or sodium carbonate to add to the culture medium to neutralize formed during the cultivation, and the accumulated citric acid, but the aforementioned salt or calcium hydroxide or sodium hydroxide may be the culture medium during the culturing as Neutralizing agents are added ».
Das erfindungsgemäß verwendete Kulturmedium wird für gewöhnlich in der Weise hergestellt, daß man eine wäßrige Lösung der oben angeführten Nährstoffe sterilisiert und danach den Kohlenwasserstoff oder die Kohlenwasserstoffe zugibt, doch kann in dem Fall, in dem eine Sterilisierung des Kohlenwasserstoffes erforderlich ist, der Kohlenwasserstoff vorher einer solchen Sterilisierung durch Erhitzen oder einer Sterilisierung durch Filtration unterworfen werden. Die Konzentration des Kohlenwasserstoffes im Kulturmedium liegt vorzugsweise zwischen 5 und 20 Volumenprozent pro Einheitevolumen des Kulturmediums. Der Kohlenwasserstoff bzw. die Kohlenwasserstoffe werden für gewöhnlich sämtlich dem Kulturmedium zu Beginn zugesetzt, doch könnenThe culture medium used in the invention is usually prepared in such a way that an aqueous Solution of the above nutrients sterilized and then the hydrocarbon or hydrocarbons admits, but in the case where sterilization of the hydrocarbon is required, the hydrocarbon previously subjected to such sterilization by heating or sterilization by filtration. The concentration of the hydrocarbon in the culture medium is preferably between 5 and 20 percent by volume per unit volume of the culture medium. The hydrocarbon or hydrocarbons are usually all added to the culture medium at the beginning, but can
309807/ 1 1 49309807/1 1 49
sie dem Kulturmedium während der Züchtung auch stufenweise oder kontinuierlich zugesetzt werden.they are also added gradually or continuously to the culture medium during cultivation.
Danach wird im Normalfall eine wäßrige Anschlämmung von Calciumcarbonat durch Erhitzen sterilisiert und dem Kulturmedium als Neutralisationsmittel zugesetzt.Thereafter, an aqueous suspension of calcium carbonate is normally sterilized by heating and the culture medium added as a neutralizing agent.
Als ZUchtungsmethode wird erfindungsgemäß eine aerobe Züchtung angewendet. Es ist vorteilhaft, von einer submersen Züchtungsmethode unter Durchwirbeln vermittels Einblasen von Luft mit nachfolgendem lebhaftem Rühren zwecks guter Dispergierung der Kohlenwasserstoffe in dem Kulturmedium Gebrauch zu machen. Die Luftmenge, die zu diesem Zweok in das Kulturmedium eingeblasen wird, beträgt das 1/2- bis 2-fache des Volumens des Kulturmediums pro Minute, und der Druck in dem Gärtank kann Kormaldruck oder ein erhöhter Druck sein.According to the invention, an aerobic breeding method is used as the breeding method Breeding applied. It is advantageous to use a submerged swirling method Blowing in air followed by vigorous stirring for the purpose of good dispersion of the hydrocarbons in to make use of the culture medium. The amount of air that is blown into the culture medium for this purpose, is 1/2 to 2 times the volume of the culture medium per minute, and the pressure in the fermentation tank can Normal pressure or an increased pressure.
Die Züchtung wird für gewöhnlich bei Temperaturen von etwa 20 bis 35°C, bei einem pH von 2 bis 8, vorzugsweise 4 bis 8, und für eine Dauer von etwa 3 bis 7 Tagen durchgeführt. Culturing is usually carried out at temperatures of about 20 to 35 ° C, at a p H of 2 to 8, preferably 4 to 8, and carried out for a period of about 3 to 7 days.
Ist die Züchtung beendet, so liegt die gebildete Zitronensäure in der Oärflüssigkeit dank dem Calciumcarbonat, das dem Kulturmedium zugesetzt worden ist, für gewöhnlich in Form von Calclumcitrat vor. Das Salz der Zitronensäure wird von der GärflUssigkeit dadurch abgetrennt, daß man das in dieser Flüssigkeit suspendierte Calciumcitrat gemeinschaftlich mit der restlichen Hefe abfiltriert, die Feststoffe nach dem Waschen mit einer bestimmten Menge Schwefelsäure versetzt, um die Zitronensäure freizumachen und in Lösung zu bringen,und danach die ungelösten festenWhen the cultivation is finished, the citric acid formed is in the oar fluid thanks to the calcium carbonate, which has been added to the culture medium, usually in the form of calcium citrate. The salt of citric acid is separated from the fermentation liquid by jointly using the calcium citrate suspended in this liquid with the remaining yeast filtered off the solids after washing with a certain amount Sulfuric acid is added to free the citric acid and bring it into solution, and then the undissolved solids
309807/ 1 1309807/1 1
Substanzen, die aus Calciumsulfat und Hefe bestehen, durch Abfiltrieren entfernt. Das Filtrat wird zwecks Entfärbung erforderlichenfalls mit Aktivkohle oder Ionenaustauschharzen behandelt und danach konzentriert, wodurch die Zitronensäure ausgefällt und gesammelt wird. Man kann auch von einer anderen Methode zur Gewinnung der Zitronensäure Gebrauch machen, bei welcher die Zitronensäure in der Weise isoliert wird, daß man zur Gärflüssigkeit direkt Schwefelsäure zusetzt, die Hefe und das Calciumsulfat durch Filtrieren entfernt und das Filtrat - erforderlichenfalls nach entsprechender Reinigung konzentriert, um die Zitronensäure zum Kristallisieren zu bringen.Substances consisting of calcium sulphate and yeast are removed by filtering off. The filtrate is used to decolorize if necessary treated with activated carbon or ion exchange resins and then concentrated, whereby the citric acid is precipitated and collected. One can also use another method of extraction make use of citric acid, in which the citric acid is isolated in such a way that it becomes fermentation liquor sulfuric acid is added directly, the yeast and calcium sulfate are removed by filtration and the filtrate - If necessary, after appropriate cleaning, concentrated to allow the citric acid to crystallize bring to.
Die mit der vorliegenden Erfindung verbundenen Vorteile lassen sich wie folgt zusammenfassen:The advantages associated with the present invention can be summarized as follows:
(1) Im Vergleich zu dem üblichen Pail der Verwendung von Sacchariden als Rohmaterial ist es beim erfindungsgemäßen Verfahren nicht erforderlich, ein Perrocyanid, Methanol u. dgl. zum Kulturmedium zuzugeben, und darüber hinaus sind Vorbehandlungsoperationen, wie das Entsalzen und das Reinigen des Saccharids als Rohmaterial unnötig und zudem wird die Zitronensäure in höherer Ausbeute erhalten.(1) Compared to the usual pail of using Saccharides as raw material, it is not necessary in the process according to the invention to use a perrocyanide, To add methanol and the like to the culture medium, and in addition, pretreatment operations such as the desalting and purification of the saccharide as a raw material become unnecessary, and besides, the citric acid becomes obtained in higher yield.
(2) Das Säurebildungsvermögen des erfindungsgemäß verwendeten und zur Gattung Candida oleophila gehörigen Stammes ist in hohem Maße beständig, und die Mikroorganismen sind recht einfach zu handhaben. (2) The acid-forming ability of the strain used according to the invention and belonging to the genus Candida oleophila is to a high degree stable, and the microorganisms are quite easy to handle.
(3) Da beim erfindungsgemäßen Verfahren eine Hefe, wie Candida oleophila und als Kohlenstoffquelle Kohlenwasserstoffe benutzt werden, sind bei der Gärung geringere Befürchtungen hinsichtlich einer Verunreinigung durch Bakterien oder Hefen zu hegen, selbst wenn die(3) Since the method of the present invention uses a yeast such as Candida oleophila and hydrocarbons as a carbon source, there is less fear of bacterial or yeast contamination during fermentation, even if the
309807/1149309807/1149
Gärapparate, das Kulturmedium und die Luft einmal nicht so sorgfältig sterilisiert worden sind. Ferner ist im. Vergleich zu den zum Stand der Technik gehörigen Verfahren, die Melasse u.dgl. als Rohmaterialien verwenden, die Bildung von Schaum während der Züchtung beim erfindungsgemäßen Verfahren geringer, wodurch der erfindungsgemäße Prozeß besonders wirtschaftlich gestaltet werden kann, und zwar sowohl im Hinblick auf dessen praktische Durchführung als auch auf die Einsparung an Antischaummitteln. Außerdem ist das erfindungsgemäße Verfahren wirtschaftlicher in bezug auf die betriebstechnische Durchführung der Fermentation im Vergleich zu der von bekannten Verfahren.Not for the fermentation apparatus, the culture medium and the air have been sterilized so carefully. Furthermore, in the. Compared to the state-of-the-art processes, use molasses and the like as raw materials to prevent the formation of foam during cultivation inventive method less, whereby the inventive Process can be made particularly economical, both in terms of practical implementation as well as saving on antifoam agents. In addition, this is according to the invention Process more economical with regard to the operational implementation of the fermentation compared to that of known processes.
(4) Da die Fermentationsdauer beim erfindungsgemäßen Verfahren weitgehend, d.h. zum Beispiel auf etwa 74 Stunden, herabgesetzt werden kann, ist ea möglich, das Verhältnis im Durchsatz zur Anlagegröße außerordentlich günstig zu gestalten. Ferner kann das erfindungsgemäße Verfahren des Fermentationsprozesses sowohl absatzweise als auch in einem kontinuierlichen System durchgeführt werden.(4) Since the fermentation time in the process according to the invention largely, i.e. for example to about 74 hours, can be reduced, ea is possible, the ratio of throughput to plant size is extraordinary cheap to design. Furthermore, the method according to the invention of the fermentation process can be carried out batchwise as well as in a continuous system.
(5) Das erfindungsgemäße Verfahren gestattet somit die Gewinnung von Zitronensäure in wirtschaftlicher Weise unter Verwendung eines Kohlenwasserstoffes als Kohlenstoffquelle mittels einer Submerskultur.(5) The process according to the invention thus allows citric acid to be obtained in an economical manner Use of a hydrocarbon as a carbon source by means of a submerged culture.
(6) Beim erfindungsgemäßen Verfahren wird ein Kohlenwasserstoff, insbesondere ein η-Paraffin, in einer hohen Konzentration, die 5 bis 20 # beträgt, in einem Kulturmedium fermentiert. Auch der Kohlenwasserstoff bzw. das η-Paraffin kann dem Kulturmedium diskontinuierlich oder(6) In the process according to the invention, a hydrocarbon, in particular an η-paraffin, is used in a high concentration, which is 5 to 20 #, fermented in a culture medium. Also the hydrocarbon or that η-paraffin can be discontinuous or in the culture medium
30980 7/1U930980 7 / 1U9
kontinuierlich während der Gärung zugesetzt werden. (7) Gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren wird die Zi tronensäure (als Anhydrid) in der erstaunlich hohen Ausbeute von 150 Gewichtsprozent (W/W), bezogen auf den Kohlenwasserstoff, insbesondere das n-Paraffin, erhalten. be added continuously during fermentation. (7) According to the process according to the invention, citric acid (as anhydride) is obtained in an astonishingly high yield of 150 percent by weight (W / W), based on the hydrocarbon, in particular the n-paraffin .
Das Verfahren der vorliegenden Erfindung soll nun durch die vorliegenden Beispiele eingehender erläutert werden. The process of the present invention will now be explained in more detail by the present examples.
Nach Einfüllen von 100 ml eines Kulturmediums, das 1 i<> Glukose, 0,5 $> Pepton, 0,3 % Hefeextrakt und 0,3 $> Malzextrakt (die Prozentwerte sind jeweils als Gewicht pro Volumen berechnet) enthält, in einen 500 ml-Sakaguchi-Kol- ben und Sterilisieren des Kulturmediums durch Aufkochen (boiling), wurde das Inokulum hergestellt durch Inkubation eines zu Candida oleophila ATCC 20177 gehörigen Stammes im Kulturmedium und Züchtung vermittels 24 Stun den langem Schütteln des Kulturmediums bei 280C. Von dem nach dieser Prozedur erhaltenen Inokulum wurden 400 ml zur Beimpfung des Gärmediums verwendet. After adding 100 ml of a culture medium containing 1 l <> glucose, $ 0.5> peptone, 0.3% yeast extract and $ 0.3> malt extract (the percentages are each calculated as weight per volume) into a 500 ml Sakaguchi piston ben and sterilization of the culture medium by boiling (boiling) was the inoculum prepared by incubating a Candida oleophila ATCC 20177 corresponding strain in the culture medium and culturing means 24 stun the long shaking the culture medium at 28 0 C. From the Inoculum obtained after this procedure, 400 ml was used to inoculate the fermentation medium.
In etwa 9 Liter Wasser wurden 120 g Glukose, 60 g Pepton, 36 g Hefeextrakt und 36 g Malzextrakt gelöst und die so hergestellte Lösung wurde durch 15 Minuten langes Kochen bei 1200C in einem Fermenter von 30 1 sterilisiert und danach auf 280C abgekühlt. Dann wurden 1,2 Liter eines Gemisches von η-Paraffinen mit 11 bis 15 Kohlenstoff atomen, das vorher durch Filtrieren sterilisiert worden war, und 600 g CaCO5, die durch Erhitzen sterilisiert worden waren, zu der Lösung in dem Fermenter zugegeben und ferner sterilisiertes Wasser zum 120 g of glucose, 60 g of peptone, 36 g of yeast extract and 36 g of malt extract were dissolved in about 9 liters of water and the solution thus produced was sterilized by boiling for 15 minutes at 120 ° C. in a 30 liter fermenter and then to 28 ° C. cooled down. Then, 1.2 liters of a mixture of η-paraffins having 11 to 15 carbon atoms which had been previously sterilized by filtration and 600 g of CaCO 5 which had been sterilized by heating were added to the solution in the fermenter and further sterilized Water to
309807/ 1 1309807/1 1
Qemisch zugesetzt« um das Volumen des Gemisches auf 11,6 Liter einzustellen, und danach folgte ein gründliches Durchrühren.Qemisch added «to the volume of the mixture 11.6 liters, and this was followed by thorough stirring.
Das auf diese Weise erhaltene Kulturmedium wurde mit dem wie oben angegeben hergestellten Inokulum beimpft. In dem so hergestellten Gärmedium betrug die Anfangskonzentration der n-Paraffine 10 Volumenprozent und das Anfangs-p„ 5#5·The culture medium thus obtained was inoculated with the inoculum prepared as described above. By doing fermentation medium prepared in this way, the initial concentration of n-paraffins was 10 percent by volume and the initial p "5 # 5 ·
Unmittelbar nach der Beimpfung wurde die Gärung in Gang gebracht und hierzu eine Belüftungsgeschwindigkeit von 12 Liter Luft/Minute, eine Rührgeschwindigkeit von 500 Umdrehungen/Minute und eine Temperatur von 28°C eingehalten. Unter diesen Bedingungen war die Gärung nach 96 Stunden abgeschlossen.Immediately after the inoculation, fermentation was started with an aeration speed of 12 liters of air / minute, a stirring speed of 500 revolutions / minute and a temperature of 28 ° C is maintained. Under these conditions, fermentation took place after 96 hours closed.
Nach Beendigung der Gärung betrug die Menge der Zitronensäure, die sich gebildet hatte, 1320 g, und die Mikroorganismen-Population belief sich auf 8,5 x 10 Zellen/ml. Der Mengenwert entsprach einer Zitronensäureausbeute von 152 Gewichtsprozent.After fermentation was complete, the amount of citric acid that had formed was 1320 g and the microorganism population was 8.5 x 10 cells / ml. The quantitative value corresponded to a citric acid yield of 152 percent by weight.
Aus der so entstandenen Gärbrühe wurden CaIciumzitrat, die Mikroorganismen und überschüssiges Calciumcarbonat durch Filtrieren abgetrennt und gesammelt, und nach dem Wasohen des abfiltrierten Gemisches wurde dieses Oemisch mit Schwefelsäure versetzt, um die Zitronensäure in Freiheit zu setzen. Nach dem Entfernen der Mikroorganismen und des Calciumsulfate durch Filtrieren wurde das verbleibende Filtrat konzentriert und in einem Kristallisierapparat zur Kristallisation gebracht, um so Zitronensäurekristalle zu gewinnen.The resulting fermentation broth was converted into calcium citrate, the microorganisms and excess calcium carbonate separated by filtration and collected, and after washing the filtered mixture, this mixture became mixed with sulfuric acid to set the citric acid free. After removing the microorganisms and the calcium sulfate by filtration, the remaining filtrate was concentrated and placed in a crystallizer brought to crystallization in order to obtain citric acid crystals.
309807/ 1 1309807/1 1
In etwa 9 Liter Wasser wurden 24 g NH2^Cl, 2,4 g g^ 2,4 g MgSO^·7 H2O, 3,0 g MnSO^·η H2O und 120 g Maiseinweichwasser gelöst, die Lösung wurde durch 15 Minuten langes Kochen bei 1200C in einem 30 Liter-Schüttel-Fermenter sterilisiert und danach auf 280C abgekühlt. Zu der so hergestellten Lösung wurden 1,2 Liter eines Gemisches von η-Paraffinen mit 11 bis 15 Kohlenstoffatomen, das vorher durch Erhitzen sterilisiert worden war, und 600 g gepulvertes Calciumcarbonat, das gleichfalls durch Erhitzen sterilisiert worden war, zugesetzt. Danach wurde das Volumen des Gemisches durch Zugabe von sterilisiertem Wasser auf 11,6 Liter eingestellt, und dann folgte ein gründliches Durchrühren. Das so hergestellte Kulturmedium wurde mit 400 ml des Inokulums, das nach der Arbeitsweise des Beispiels 1 hergestellt worden war, beimpft. In dem so entstandenen Gärmedium betrug die Anfangskonzentration an n-Paraffinen 10 Volumen-^ und das ρ« 5*5·In about 9 liters of water, 24 g of NH 2 ^ Cl, 2.4 g ^ 2.4 g of MgSO ^ 7H 2 O, 3.0 g of MnSO ^ · η H 2 O and 120 g of corn steeping water were dissolved, the solution became sterilized by boiling for 15 minutes at 120 ° C. in a 30 liter shaking fermenter and then cooled to 28 ° C. To the solution thus prepared were added 1.2 liters of a mixture of η-paraffins having 11 to 15 carbon atoms, which had been previously sterilized by heating, and 600 g of powdered calcium carbonate, which had also been sterilized by heating. Thereafter, the volume of the mixture was adjusted to 11.6 liters by adding sterilized water, followed by thorough stirring. The culture medium produced in this way was inoculated with 400 ml of the inoculum which had been produced according to the procedure of Example 1. In the fermentation medium thus created, the initial concentration of n-paraffins was 10 volume- ^ and the ρ «5 * 5 ·
Unmittelbar nach der Beimpfung wurde die Gärung in Gang gebracht und hierzu eine Belüftungsgeschwindigkeit von 12 Liter Luft pro Minute und eine Rührgeschwindigkeit von 500 Umdrehungen pro Minute eingestellt und eine Temperatur von 280C eingehalten. Unter diesen Bedingungen war die Gärung nach 96 Stunden abgeschlossen.Immediately after the inoculation, fermentation was started and for this purpose a ventilation speed of 12 liters of air per minute and a stirring speed of 500 revolutions per minute were set and a temperature of 28 ° C. was maintained. Under these conditions, fermentation was completed after 96 hours.
Nach Beendigung der Gärung betrug die Menge der gebildeten Zitronensäure I23O g, was einer Zitronensäureausbeute von 141 Gewichtsprozent entspricht.After completion of fermentation, the amount of citric acid formed was 123O g, which corresponds to a citric acid yield of 141 percent by weight.
Durch Zugabe von Schwefelsäure zu der so erhaltenen Gärbrühe wurde die Zitronensäure in Freiheit gesetzt, und die Mikroorganismen und das Calciumsulfat wurden hieraus durch Filtrieren entfernt. Das Filtrat wurde konzentriertThe citric acid was set free by adding sulfuric acid to the fermentation broth thus obtained, and the microorganisms and calcium sulfate were removed therefrom by filtration. The filtrate was concentrated
309807/11309807/11
und in einem Kristallisierapparat zur Kristallisation gebracht, um Kristalle der Zitronensäure zu gewinnen.and crystallized in a crystallizer to obtain crystals of citric acid.
In etwa 9 Liter Wasser wurden 24 g NH^Cl, 2,4 g KH2PO1^, 2,4 g MgSOjj· 7 H2O, 3*0 g MnSO1^* η HgO und 120 g MaiseinweichflUssigkeit gelöst, die Lösung wurde in einen 30 Liter fassenden flae Fermenter gefüllt, und danach erfolgte das 15 Minuten lang durchgeführte Sterilisieren durch Koohen bei 1200C, wonach auf 28°C abgekühlt wurde.In about 9 liters of water, 24 g of NH ^ Cl, 2.4 g of KH 2 PO 1 ^, 2.4 g of MgSO / 7H 2 O, 3 * 0 g of MnSO 1 ^ * η HgO and 120 g of corn steeping liquid were dissolved solution was charged into a 30 liter fermenter FLAE, and thereafter for 15 minutes conducted sterilization was carried out by Koohen at 120 0 C, followed by cooling to 28 ° C.
Zu der so hergestellten Lösung wurden 480 ml eines Gemisches von n-Paraffinen mit 11 bis 15 Kohlenstoffatomen, das vorher durch Erhitzen sterilisiert worden war, und 600 g gepulvertes Caloiumcarbonat, das gleichfalls durch Erhitzen sterilisiert worden war,, zugegeben. Hiernach wurde das Volumen des Oemisches durch Zugabe von sterilisiertem Wasser auf 11,6 Liter eingestellt, und dann setzte das Rühren ein. Das so hergestellte Kulturmedium wurde mit 400 ml eines Inokulums, das aus Candida oleophlla ATCC 20177 in der gleichen Weise, wie es in Beispiel 1 angegeben 1st, gewonnen worden war, beimpft, und hierdurch wurde die Anfangskonzentration an η-Paraffinen auf 4,0 Volumen-^ und das Anfangs-Pj, des Kulturmediums auf 5*5 eingestellt.To the solution thus prepared, 480 ml of a mixture of n-paraffins having 11 to 15 carbon atoms, which had previously been sterilized by heating, and 600 g of powdered potassium carbonate, which had also been sterilized by heating, were added. The volume of the mixture was then adjusted to 11.6 liters by adding sterilized water and stirring was then started. The culture medium thus prepared was inoculated with 400 ml of an inoculum obtained from Candida oleophlla ATCC 20177 in the same manner as stated in Example 1, and thereby the initial concentration of η-paraffins became 4.0 volume - ^ and the initial Pj, of the culture medium set to 5 * 5.
Unmittelbar nach der Beimpfung wurde die Gärung in Oang gesetzt und zu diesem Zweck eine Belüftungsgeschwindigkeit von 12 Liter Luft/Minute, eine Rührgeschwindigkeit von 500 Umdrehungen/Minute und eine Temperatur von 28°C eingehalten. Nachdem die Oärung in Gang gebracht wordenImmediately after the inoculation, the fermentation was set in Oang and for this purpose an aeration rate of 12 liters of air / minute, a stirring speed of 500 revolutions / minute and a temperature of 28 ° C adhered to. After the fermentation has started
309807/11309807/11
war, wurden 2 Volumen-^ η-Paraffine periodisch in drei Stufen zugegeben, und die Gärung war nach 74 Stunden beendet. was, 2 volume ^ η-paraffins were periodically in three Stages were added and fermentation was over in 74 hours.
Die Zitronensäure, die sich nach Beendigung der Gärung gebildet hatte, betrug mengenmäßig 1350 g, was einer Zitronensäureausbeute von 155 Gewichtsprozent entsprach.The amount of citric acid that had formed after fermentation was complete was 1350 g, which corresponds to a citric acid yield of 155 percent by weight.
Aus der Gärbrühe wurden Kristalle der Zitronensäure in der gleichen Weise, wie es Jn Beispiel 1 beschrieben ist, gewonnen .The fermentation broth turned into crystals of citric acid in the in the same manner as described in Example 1 was obtained.
Drei Fermenter von einem Fassungsvermögen von Je ^O Liter wurden miteinander in Serie verbunden, und dann wurde in dem ersten Fermenter die Gärung von Candida oleophila ATCC 20177 nach der gleichen Arbeitsmethode, die in Beispiel 2 angegeben ist, in Oang gebracht. Danach wurde ein sterilisiertes Kulturmedium, das 0,2 % (Qewicht/Volumen) NH4Cl, 0,02 % (Gewicht/Volumen) KH2PO4, 0,02 % (Gewicht/Volumen) MgSO4*7 H3O, 0,025 % (Gewicht/Volumen) MnSOj,·η HpO, 1,0 % (Gewicht/Volumen) Maiseinweichwasser, 10 Volumen-^ n-Paraffine und 5,0 % (Gewicht/Volumen) CaCO, enthielt, kontinuierlich in den ersten Fermenter in einer Dosierung von 12 Liter/24 Stunden gegeben, und zwar 24 Stunden nach Ingangsetzen der Gärung, und danach wurde die Gärbrühe kontinuierlich in den zweiten Fermenter und dann nacheinander in den dritten Fermenter befördert. Nachdem der erste, zweite und dritte Fermenter in den stationären Zustand gebracht worden waren, wurde die Gärbrühe aus dem dritten Fermenter kontinuierlich mit einer GeschwindigkeitThree fermenters with a capacity of ^ O liters each were connected to one another in series, and then the fermentation of Candida oleophila ATCC 20177 was carried out in the first fermenter according to the same working method given in Example 2. Thereafter, a sterilized culture medium containing 0.2 % (weight / volume) NH 4 Cl, 0.02 % (weight / volume) KH 2 PO 4 , 0.02 % (weight / volume) MgSO 4 * 7 H 3 O , 0.025 % (weight / volume) MnSOj, · η HpO, 1.0 % (weight / volume) corn steep water, 10 volume ^ n-paraffins and 5.0 % (weight / volume) CaCO, continuously in the first Fermenter given a dosage of 12 liters / 24 hours, namely 24 hours after the start of fermentation, and then the fermentation broth was continuously conveyed to the second fermenter and then successively to the third fermenter. After the first, second and third fermenters were brought to the stationary state, the fermentation broth from the third fermenter became continuous at one rate
3 0 9 H 0 7 / 1 U 93 0 9 H 0 7/1 U 9
von 12 Liter/24 Stunden abgezogen, und es wurde die gebildete Zitronensäure bestimmt.subtracted from 12 liters / 24 hours, and the citric acid formed was determined.
Wenn die Gärung 20 Tage lang fortgesetzt wurde, so wurden keine ungewöhnlichen Umstände in bezug auf die Fermentation und die Zitronensäureausbeute beobachtet. Außerdem wurde, nachdem das System den stationären Zustand erreicht hatte, Zitronensäure in einer Menge von 107 g/Liter erzeugt. Dieser Wert entspricht einer Zitronensäureausbeute von 148 Gewichtsprozent, bezogen auf die zugesetzten n-Paraffine.When fermentation was continued for 20 days, no unusual circumstances regarding fermentation and citric acid yield were observed. In addition, after the system reached the steady state, citric acid was added in an amount of 107 g / liter generated. This value corresponds to a citric acid yield of 148 percent by weight, based on the added n-paraffins.
Aus der so erhaltenen Gärbrühe wurden Zitronensäurekristalle nach der in Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise gewonnen.Citric acid crystals were obtained from the fermentation broth obtained in this way according to the procedure described in Example 1.
- Patentansprüche -- patent claims -
- 17 -- 17 -
309807/1 U9309807/1 U9
Claims (6)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP46054640A JPS4826981A (en) | 1971-07-23 | 1971-07-23 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2202701A1 true DE2202701A1 (en) | 1973-02-15 |
| DE2202701B2 DE2202701B2 (en) | 1978-02-23 |
| DE2202701C3 DE2202701C3 (en) | 1978-10-26 |
Family
ID=12976358
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2202701A Expired DE2202701C3 (en) | 1971-07-23 | 1972-01-20 | Process for the biotechnological production of citric acid |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS4826981A (en) |
| AT (1) | AT319875B (en) |
| AU (1) | AU458847B2 (en) |
| BE (1) | BE786617A (en) |
| BR (1) | BR7204885D0 (en) |
| DE (1) | DE2202701C3 (en) |
| ES (1) | ES405090A1 (en) |
| FR (1) | FR2147131B2 (en) |
| GB (1) | GB1354192A (en) |
| IE (1) | IE36581B1 (en) |
| IL (1) | IL39950A (en) |
| IT (1) | IT966665B (en) |
| NL (1) | NL7210136A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2323106A1 (en) * | 1972-05-19 | 1973-12-06 | Pfizer | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF CITRIC ACID FROM HYDROCARBONS |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1002816B (en) * | 1973-09-14 | 1976-05-20 | Coulter Information Systems | TRANSPARENT PHOTOCELL |
-
1971
- 1971-07-23 JP JP46054640A patent/JPS4826981A/ja active Pending
-
1972
- 1972-01-20 DE DE2202701A patent/DE2202701C3/en not_active Expired
- 1972-07-18 AU AU44669/72A patent/AU458847B2/en not_active Expired
- 1972-07-19 IL IL39950A patent/IL39950A/en unknown
- 1972-07-21 GB GB3429972A patent/GB1354192A/en not_active Expired
- 1972-07-21 IT IT27249/72A patent/IT966665B/en active
- 1972-07-21 NL NL7210136A patent/NL7210136A/xx unknown
- 1972-07-21 IE IE1022/72A patent/IE36581B1/en unknown
- 1972-07-21 BR BR4885/72A patent/BR7204885D0/en unknown
- 1972-07-22 ES ES405090A patent/ES405090A1/en not_active Expired
- 1972-07-24 AT AT633672A patent/AT319875B/en active
- 1972-07-24 BE BE786617A patent/BE786617A/en not_active IP Right Cessation
- 1972-07-24 FR FR7226541A patent/FR2147131B2/fr not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2323106A1 (en) * | 1972-05-19 | 1973-12-06 | Pfizer | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF CITRIC ACID FROM HYDROCARBONS |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES405090A1 (en) | 1975-07-16 |
| NL7210136A (en) | 1973-01-25 |
| IT966665B (en) | 1974-02-20 |
| BR7204885D0 (en) | 1973-06-14 |
| FR2147131B2 (en) | 1978-03-03 |
| IL39950A0 (en) | 1972-09-28 |
| AT319875B (en) | 1975-01-10 |
| DE2202701C3 (en) | 1978-10-26 |
| AU4466972A (en) | 1974-01-24 |
| JPS4826981A (en) | 1973-04-09 |
| DE2202701B2 (en) | 1978-02-23 |
| FR2147131A2 (en) | 1973-03-09 |
| IE36581B1 (en) | 1976-12-08 |
| BE786617A (en) | 1972-11-16 |
| IE36581L (en) | 1973-01-23 |
| IL39950A (en) | 1975-05-22 |
| GB1354192A (en) | 1974-06-05 |
| AU458847B2 (en) | 1975-03-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0144017B1 (en) | Process for the biotechnological preparation of poly-d(-)-3-hydroxybutyric acid | |
| DE3343576A1 (en) | METHOD FOR THE BIOTECHNOLOGICAL PRODUCTION OF POLY-D (-) - 3-HYDROXYBUTTERIC ACID | |
| DE1812710C3 (en) | Process for the biotechnical production of citric acid and its salts by microorganisms | |
| DE1792004A1 (en) | Process for the production of citric acid by fermentation | |
| DE1642708B2 (en) | Process for the production of trehalose by fermentation | |
| DE2202701A1 (en) | METHOD FOR PRODUCING LEMON ACID BY FERMENTATION | |
| DE2938377C2 (en) | Process for the preparation of coenzyme Q 1 0 | |
| AT392799B (en) | METHOD FOR THE FERMENTATIVE PRODUCTION OF CITRIC ACID FROM CARBOHYDRATES | |
| DE2157847C3 (en) | Process for the production of citric acid | |
| DE2901485A1 (en) | POLYSACCHARIDES OF XANTHOMONAS WHICH CAN BE USED FOR THE PREPARATION OF AQUATIC GELS WITH IMPROVED FILTRABILITY | |
| DE2413961C2 (en) | Biotechnical production of citric acid | |
| DE3545246A1 (en) | METHOD FOR PRODUCING EXOCELLULAR BIOPOLYMERS WITH THICKENING EFFECT FOR AQUEOUS MEDIA | |
| DE2038693C3 (en) | Method of growing yeast | |
| DE2810279C2 (en) | Process for the production of highly viscous polysaccharides and compositions containing them | |
| DE69432240T2 (en) | Process for the production of bacterial cells containing poly-3-hydroxy butyric acid | |
| DE2317841A1 (en) | PROCESS FOR THE CONVERSION OF STRAIGHT CHAIN HYDROCARBONS CONTAINED IN HYDROCARBON MIXTURES INTO PROTEIN MATERIALS OR. TO YOUR REMOVAL FROM THE MIXTURES | |
| DE1642701A1 (en) | Process for the production of sugars by fermentation | |
| DE2849393C2 (en) | Process for the biotechnological production of 2,5-diketogluconic acid | |
| DE3877685T2 (en) | METHOD FOR PRODUCING D (-) - TARTARIC ACID. | |
| AT379613B (en) | METHOD FOR THE BIOTECHNOLOGICAL PRODUCTION OF POLY-D - (-) - 3-HYDROXYBUTTERIC ACID | |
| DE2344006A1 (en) | PROCESS FOR THE BIOTECHNICAL TREATMENT OF WASTEWATER CONTAINING EPSILON-CAPROLACTAM | |
| DE1901621A1 (en) | Process for the production of yeast cells containing 1-tryptophan | |
| DD153131A5 (en) | PROCESS FOR PREPARING 2,5-DIKETOGLUCONE ACID | |
| DE2357345A1 (en) | PROCESS FOR THE BIOTECHNICAL PRODUCTION OF YEAST AND THEIR USE | |
| DE936287C (en) | Process for obtaining vitamins of the B group |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |