DE19957371A1

DE19957371A1 - Mitomycin C-Lösung

Info

Publication number: DE19957371A1
Application number: DE1999157371
Authority: DE
Inventors: Hans-Peter Schroeer; Wilfried Mohr; Ferdinand Bach
Original assignee: Medac Gesellschaft fuer Klinische Spezialpraeparate mbH
Current assignee: Medac Gesellschaft fuer Klinische Spezialpraeparate mbH
Priority date: 1999-11-29
Filing date: 1999-11-29
Publication date: 2001-06-13
Also published as: WO2001039741A2; AU2669901A; WO2001039741A3

Abstract

Die Erfindung betrifft eine stabile wäßrige Lösung des Zytostatikums mit Mitomycin C sowie ein Mitomycin C enthaltendes Arzneimittel.

Description

Die Erfindung betrifft eine stabile wäßrige Lösung des Zyto statikums Mitomycin C und insbesondere ein Mitomycin C-enthalten des Arzneimittel.

Das 1958 isolierte Mitomycin C (Antibiot. Chemother. 8 (1958) 228) ist ein aus Streptomyces caespeitosus isoliertes Antibioti kum, das ausgezeichnete Antitumor-Wirkung besitzt und ins besondere bei der Behandlung von Blasentumoren eingesetzt wird.

Nachteilig im Hinblick auf die klinische Anwendung von Mitomy cin C ist die geringe Stabilität von Mitomycin-Infusionslösungen und die damit einhergehende begrenzte Lagerfähigkeit. Aus diesem Grund wird üblicherweise Mitomycin-Trockensubstanz vertrieben, aus der unmittelbar vor Anwendung eine Lösung zubereitet wird. Die Haltbarkeit der Lösung ist in der Regel auf einen Tag, bei anderen therapeutischen Erfordernissen (z. B. Dauerinfusion) auf höchstens 5 Tage begrenzt und aufgrund des Abbaus von Mitomycin C mit einem Wirkverlust in dieser Zeit von bis zu 10% verbunden.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, eine hinreichend stabile, vorzugsweise langzeitstabile Mitomycin-Lösung zur Verfügung zu stellen, die Mitomycin C in ausreichender Konzen tration und geeigneter Zusammensetzung für die klinische Anwendung enthält. Insbesondere soll ein Arzneimittel in Form einer Instillationslösung bereitgestellt werden, das sich zur Behandlung von Harnblasen-Tumoren eignet.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe durch eine auf einen pH-Wert im Bereich von 6,0 bis 9,0 eingestellte gepufferte wäßrige Mitomycin C-Lösung gelöst, die 0,1 bis 0,45 mg/ml Mitomycin C enthält und bei der das Verhältnis von Mitomycin C-Konzentration zur Ionenstärke der Puffersubstanzen etwa 0,005 bis 0,2 beträgt, d. h. die Ionenstärke im Bereich von etwa 7,5 bis 60 mmol/l liegt.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde überraschenderweise festgestellt, daß die Lagerfähigkeit wäßriger Mitomycin C- Lösungen bei im wesentlichen unveränderter Wirkstoff-Konzen tration, d. h. im wesentlichen unveränderter Aktivität, erhalten bleibt, wenn man zur Herstellung der Lösung einen Puffer niedriger Ionenstärke, vorzugsweise im Bereich von 7,5 bis 60 mmol/l zubereitet. Die zur therapeutischen Anwendung ge eigneten Mitomycin C-Konzentrationen liegen üblicherweise im Bereich von etwa 0,1 bis 0,45 mg/ml Mitomycin C, entsprechend etwa 0,30 bis 1,35 mmol/l. Obwohl für viele Anwendungen auch höhere Wirkstoff-Konzentrationen in Frage kommen können, weisen Mitomycin C-Lösungen mit mehr als 0,45 mg/ml Mitomycin C den Nachteil auf, daß langfristige Lagerung der Lösungen im Kühl schrank zur Auskristallisation des Wirkstoffs führt. Eine Mitomycin C-Konzentration von weniger als 0,1 mg/ml dürfte ebenfalls von untergeordneter praktischer Bedeutung sein, da, zum Beispiel bei der Instillation der Harnblase zur Behandlung von Blasentumoren, dem Patienten große Flüssigkeitsmengen instilliert bzw. infundiert werden mußten, um eine entsprechende Wirkstoff menge zu applizieren.

Es hat sich erfindungsgemäß gezeigt, daß Mitomycin C-Lösungen, die 0,1 bis 0,45 mg/ml Wirkstoff enthalten und bei denen das Verhältnis von Mitomycin C-Konzentration zur Ionenstärke der Puffersubstanzen im Bereich von etwa 0,005 bis 0,2 liegt, bei Aufbewahrung im Kühlschrank (etwa 5°C) eine sehr hohe Lager stabilität aufweisen und der Wirkstoffverlust (Aktivitätsverlust) nach einjähriger Lagerung bei weniger als 10% liegt. Bei Ver wendung von Puffern mit sehr geringer Ionenstärke, vorzugsweise ≧ 30 mmol/l bzw. ≧ 15 mmol/l, kann der Aktivitätsverlust sogar auf unter 5% nach einjähriger Lagerung gesenkt werden.

Die Mitomycin C-Lösungen werden auf einen Bereich von 6 bis 9, vorzugsweise 7 bis 8, eingestellt. Besonders bevorzugt sind Lösungen mit pH-Wert 7,75.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung hat sich die Verwendung eines Phosphat-Puffers als besonders vorteilhaft erwiesen, bei dem Dinatriumphosphat (Na₂HPO₄.12 H₂O) und Natriumdihydrogenphos phat (NaH₂PO₄.2 H₂O) im molaren Verhältnis von etwa 6 : 1 verwendet werden. Gemäß einer Ausführungsform der Erfindung werden zur Herstellung dieses Phosphat-Puffers 6,7 g/l (ent sprechend etwa 18,72 mmol/l) Dinatriumhydrogenphosphat und 528 mg/l (entsprechend etwa 3,38 mmol/l) Natriumdihydrogenphosphat verwendet, wobei dieser Puffer eine Ionenstärke von etwa 60 mmol/l aufweist.

Gemäß einer besonderen Ausführungsform der Erfindung wird ein Phosphat-Puffer mit einer Ionenstärke von etwa 30 eingesetzt, der durch Verwendung von 3,350 g/l Dinatriumhydrogenphosphat und 264 mg/ml Natriumdihydrogenphosphat erhalten wird. Es hat sich ferner gezeigt, eine nochmalige Halbierung der Phosphat-Konzentrationen (d. h. 1,675 g/l Dinatriumhydrogenphosphat und 132 mg/ml Natrium dihydrogenphosphat; Ionenstärke etwa 15 mmol/l) zu einer weiteren Erhöhung der Lagerstabilität der Mitomycin C-Lösungen führt.

Gemäß einer besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden Mitomycin C-Lösungen unter Verwendung der obengenannten Phosphat-Puffer zur Verfügung gestellt, die 0,4 mg/ml (ent sprechend etwa 1,2 mmol/l) Mitomycin C enthalten.

Die Erfindung betrifft somit ferner ein Mitomycin C-enthaltendes Arzneimittel, das eine oben beschriebene Lösung umfaßt, die in einer zur Infusion oder Instillation geeigneten Form vorliegt und zusätzliche pharmazeutisch verträgliche Hilfsstoffe, wie z. B. Natriumchlorid oder Mannit, enthält. Vorzugsweise handelt es sich bei dem Arzneimittel um ein pharmazeutisches Präparat zur Behandlung von Harnblasen-Tumoren, wobei das Arzneimittel in einer zur Instillation in die Harnblase geeigneten Form vorliegt. Die vorliegende Erfindung wird nachfolgend anhand von Beispielen beschrieben.

Beispiele Beispiel 1 Herstellung von Mitomycin-Lösungen

Zur Herstellung von Mitomycin-Lösungen wurde Mitomycin in Phosphat-Puffer gelöst, steril filtriert und für analytische Untersuchungen z. B. in 5 ml-Probenröhrchen gefüllt, die im Kühl schrank aufbewahrt wurden.

Folgende Mitomycin-Lösungen wurden hergestellt:

Mitomycin Lösungen 0,4 mg/ml

Aseptische Abfüllung nach Sterilfiltration:
Lagerung bei 4 bis 8°C
Mitomycin-Lösungen; SOLL-Konzentrationen:

1. 0,4 mg/ml Mitomycin in PPIII Puffer
pH: 7,61 60 mOsmol/kg
2. 0,4 mg/ml Mitomycin in PPIII Puffer + 7,5 g NaCl/l Puffer
pH: 7,42 294 mOsmol/kg
3. 0,4 mg/ml Mitomycin in PPIV Puffer
pH: 7,62 29 mOsmol/kg
4. 0,4 mg/ml Mitomycin in PPIV Puffer + 8,3 g NaCl/l Puffer
pH: 7,41 290 mOsmol/kg

Lösungsmittelrezeptur "Phosphatpuffer III" (PPIII)

3,350 g Na₂

HPO₄

.12 H₂

O
0,264 g NaH₂

PO₄

.2 H₂

O
ad 500,00 ml mit Wasser für Injektionszwecke (WFI)
pH = 7,62

Lösungsmittelrezeptur "Phosphatpuffer IV" (PPIV)

PPIV Puffer = 1 Teil PPIII + 1 Teil WFI
pH = 7,70

Phosphatsalze; IST-Einwaagen

Na₂

HPO₄

.12 H₂

O: 13,42 g
NaH₂

PO₄

.2 H₂

O: 1,06 g
ad 2000,00 ml mit Wasser für Injektionszwecke

Mitomycin IST-Einwaacren

Lösung 1: 202,13 mg in 500,00 ml PPIII Puffer
Lösung 2: 205,55 mg in 500,00 ml PPIII Puffer + 7,5 g NaCl/l Puffer
Lösung 3: 206,11 mg in 500,00 ml PPIV Puffer
Lösung 4: 197,90 mg in 500,00 ml PPIV Puffer + 8,3 g NaCl/l Puffer

Eingesetzte Chemikalien

Mitomycin rein Charge 961201
Wasser für Injektionszwecke, 1000 ml, Braun, Charge 8023A44A, Verfall 12.2002
Na₂

HPO₄

.12 H₂

O, Merck Art. 6579, Charge 961025-NP
NaH₂

PO₄

.2 H₂

O, Merck Art. 6345, Charge A146/2

Eingesetzte Hilfsmittel

Werkbank Klasse II, medac Hamburg
Mikrozid Liquid Desinfektionslösung, Schülke & Mayr, Charge PJ2251, Verfall 07. 2000
Sterile Einmalfilter, 0,20 µm, Sartorius Minisert, Charge 16534/970209, Verfall 04. 2000
Sterile Einmalspritze 30 ml, Henke-Sass, Wolf, Charge 94234, Verfall 30. 06. 1999
Sterile Probenröhrchen, Greiner, Charge 8945
Einmalhandschuhe Unigloves

Beispiel 2 Bestimmung der Mitomycin-Stabilität

Die Bestimmung des Mitomycin C-Gehaltes der hergestellten Lösungen erfolgte mittels High Performance Liquid Chromatography (HPLC) unter folgenden Bedingungen:

1) Analytisches System

HPLC-Pumpentyp: Knauer HPLC-Pumpe Typ 364.00
Integrator Typ/Auswertesystem: Jasco/Borwin
Detektor: Knauer-HPLC-Spektralphotometer mit Digitalanzeige Nr. A0293/V7026
verwendete Wellenlänge: 365 nm
Injektortyp: Rheodyne mit Signalkontakt
Injektor-Schleifen-Volumen: 20 µl
stationäre Phase: Molnar, EnCa Pharm 100 RP 18 (5 µm) 250 × 4,6 mm
mobile Phase: 0,05 M Na₂

HPO₄

-Lösung (pH 6,0) + ACN 85 : 15
Flußrate: 1,0 ml/min bei 30°C Säulenofen temperatur

Validierung der HPhC-Gehaltsbestimmung von Mitomycin 2) Präzision der Methode

Anhand von 10 Einzelinjektionen, ermittelt mit der normal zu analysierenden Lösungskonzentration, wurde die relative Standard abweichung (RSD < 2,0%) der zu analysierenden Signalfläche aus den Originalmeßdaten ermittelt.

Zusammenfassung

Die verwendete Methode erfüllt die Forderung nach präzisen Meßergebnissen.

Die HPLC-Messungen erfolgten etwa wöchentlich über einen Zeitraum von mehr als 1 Jahr. Für die Lösung von Mitomycin C in Phosphat- Puffer des Beispiels 1 wurden die in Fig. 1 gezeigten Werte erhalten. Es zeigt sich eindeutig, daß bei Verwendung des Phosphat-Puffers mit einer Ionenstärke von etwa 30 mmol/l eine sehr hohe Lagerstabilität erzielt wird, wobei der Aktivitätsver lust nach Lagerung über einen Zeitraum von mehr als 1 Jahr unter 5% liegt.

Claims

1. Mitomycin C-Lösung, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine auf einen pH-Wert im Bereich von 6,0 bis 9,0 eingestellte gepufferte wäßrige Lösung ist, die 0,1 bis 0,45 mg/ml Mitomycin C enthält und bei der das Verhältnis von Mitomycin C-Konzentration zur Ionenstärke der Puffersubstanzen im Bereich von etwa 0,005 bis 0,2 liegt.

2. Lösung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der pH- Wert im Bereich von 7 bis 8 liegt.

3. Lösung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß der pH-Wert 7, 75 beträgt.

4. Lösung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß sie 0,4 mg/ml (entsprechend etwa 1,2 mmol/l) Mitomy cin C, 6,7 g/l Na₂HPO₄.12 H₂O (entsprechend etwa 18,72 mmol/l) und 528 mg/ml (entsprechend etwa 3,38 mmol/l) NaH₂PO₄.2 H₂O enthält.

5. Lösung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß sie 0, 4 mg/l (entsprechend etwa 1,2 mmol/l) Mitomycin C, 3,350 g/l (entsprechend etwa 9,36 mmol/l) Na₂HPO₄.12 H₂O und 264 mg/ml (entsprechend etwa 1,69 mmol/l) NaH₂PO₄.2 H₂O enthält.

6. Lösung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß sie 0,4 mg/l (entsprechend etwa 1,2 mmol/l) Mitomycin C, 1,675 g/l (entsprechend etwa 4,68 mmol/l) Na₂HPO₄.12 H₂O und 132 mg/ml (entsprechend etwa 0,85 mmol/l) NaH₂PO₄.2 H₂O ent hält.

7. Mitomycin C-enthaltendes Arzneimittel, dadurch gekennzeich net, daß es eine Lösung nach den Ansprüchen 1 bis 6 umfaßt, die in einer zur Infusion oder Instillation geeigneten Form vorliegt.

8. Arzneimittel nach Anspruch 7 zur Therapie von Harnblasen- Tumoren, dadurch gekennzeichnet, daß es in einer für die In stillation in die Harnblase geeigneten Form vorliegt.