DE19602786A1 - Reversible or irreversible immobilisation of microorganisms suspended in aqueous solution - Google Patents
Reversible or irreversible immobilisation of microorganisms suspended in aqueous solutionInfo
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft mit Mikroelektroden versehene Oberflächen, mit deren Hilfe in unmittelbarer Nähe dieser Oberfläche schwimmende Mikroorganismen vollständig, partiell, zeitweise oder dauerhaft bewegungsunfähig gemacht oder über die angelegten elektrischen Hochfrequenzsignale abgetötet werden.The invention relates to surfaces provided with microelectrodes, with the aid of which in microorganisms completely floating in the immediate vicinity of this surface, partially, temporarily or permanently disabled or via the applied high-frequency electrical signals are killed.
Zahlreiche Meßverfahren in wäßrigen Lösungen weisen Probleme bezüglich der Langzeitstabilität auf, wenn die Meßfühler, Meßflächen oder optischen Hilfseinrichtungen von Mikroorganismen wie Bakterien, Diatomeen und anderen Kleinalgen, sowie Larvenstadien von Makroorganismen wie Seepocken, Muscheln, Großalgen etc. besiedelt werden. Im marinen Bereich ist dieser Prozeß besonders ausgeprägt. Die Anheftzeiten einiger dieser Oberflächen besiedelnden Organismen liegen im Sekundenbereich und darunter. Ist erst einmal die Anheftung erfolgt, kann der Bewuchs nur schwer verhindert werden. Das gilt auch für stark angeströmte Oberflächen, wie Schiffskörper.Numerous measurement methods in aqueous solutions have problems with the Long-term stability when the sensors, measuring surfaces or optical Auxiliary devices of microorganisms such as bacteria, diatoms and others Small algae, as well as larval stages of macroorganisms such as barnacles, mussels, Large algae etc. are colonized. This process is special in the marine sector pronounced. The attachment times of some of these surface-colonizing organisms are in the seconds range and below. Once attachment is complete, you can fouling is difficult to prevent. This also applies to those with strong currents Surfaces, like hulls.
Dem Stand der Technik entsprechen im wesentlichen zwei Grundprinzipien, mit denen ein Bewuchs von Oberflächen verhindert werden soll: i. Der Überzug mit einer die Haftung der Organismen vermindernden oder toxisch wirkenden Schicht und 2. die aktive Säuberung der Oberfläche über Flüssigkeitsströmungen, mechanische Wischelemente oder auch Aufheizung der Oberfläche.The state of the art essentially corresponds to two basic principles, with which should prevent the growth of surfaces: i. The coating with a layer that reduces the liability of the organisms or has a toxic effect and 2. the active cleaning of the surface via liquid flows, mechanical wiping elements or heating of the surface.
Weit verbreitet sind auf die genannten Organismen toxisch wirkende Anstriche, wie sie bei Schiffen verwendet werden. Ihr Nachteil, auch bei Benutzung auf kleineren Flächen, wie Sensorelementen, ist die Gefahr der Kontamination der Meßlösung. Die aktive Säuberung wird vor allem bei optischen Sicht- und Meßfeldern angewendet, erfordert jedoch erheblichen Energie- und Wartungsaufwand. Gegenwärtig gibt es noch kein langzeitstabiles Konzept, das alle Organismen von einer Oberflächenbesiedlung abzuhalten vermag.Coatings which have a toxic effect on the organisms mentioned, such as they are used on ships. Your disadvantage, even when used on smaller ones Areas such as sensor elements are at risk of contamination of the measurement solution. The active cleaning is especially with optical fields of view and measurement applied, but requires considerable energy and maintenance. There is currently no long-term stable concept that all organisms of surface settlement.
Einige Organismen erweisen sich als besonders problematisch. Im marinen Bereich sind es Larven verschiedener Spezies wie beispielsweise die von Seepocken. Für bestimmte Anwendungsbereiche wären somit auch das Abhalten und die Behinderung einzelner Organismenarten eine spürbare Verbesserung.Some organisms are particularly problematic. In the marine area they are larvae of various species, such as those of barnacles. For certain areas of application would also be holding and Disability of individual organism species is a noticeable improvement.
Gegenüber dem Stand der Technik liegt der vorliegenden Erfindung die Aufgabe zugrunde, aktiv bewegliche Mikroorganismen und Einzeller mit Hilfe hochfrequenter starker elektrischer Felder in ihrer Beweglichkeit einzuschränken oder diese vollständig zu verhindern. Das soll jedoch nur dann erfolgen, wenn sich die Organismen in unmittelbarer Nähe der Oberfläche befinden. Darüber hinaus muß die Bewegungsbeeinträchtigung steuerbar reversibel oder irreversibel sein. Durch die Bewegungsminderung oder -verhinderung ist ein Anhaften der Organismen an der Oberfläche unterdrückbar bzw. sie können mit geringerem Aufwand davon abgehalten werden. Diese Aufgabe wird mit der technischen Verfahrenslehre und Vorrichtung gemäß Anspruch 1 erreicht. Die Einsatzgebiete der Vorrichtung und der Verfahren sind in den Ansprüchen 15 bis 19 angegeben.The object of the present invention is compared to the prior art based, actively mobile microorganisms and unicellular organisms with the help of high-frequency strong electric fields to restrict their mobility or this completely prevent. However, this should only be done if the Organisms are located in the immediate vicinity of the surface. In addition, must the movement impairment can be controllably reversible or irreversible. By The reduction or prevention of movement is an attachment of the organisms to the surface can be suppressed or you can do it with less effort be held. This task is accomplished with technical process engineering and Device according to claim 1 achieved. The areas of application of the device and the Methods are given in claims 15 to 19.
Die Verwendung extrem miniaturisierter Elektrodensysteme (typische Abmessungen und Elektrodenabstände in um- oder sub-Mikrometerbereich) erlaubt die Applikation lokal sehr starker elektrischer Felder (bis zu einigen zehn oder hundert MV/m), vor allem in unmittelbarer Nähe der mit Mikroelektroden bedeckten Oberfläche (Wirksamkeit in etwa bis auf eine Entfernung des 3- bis 10-fachen der Elektrodenabstände). Die Anwendung hoher Frequenzen (< 1 kHz), typischerweise im kHz- oder MHz-Bereich induziert in den Zellen des Organismus derart starke elektrische Polarisationen, daß eine vorübergehende oder permanente Bewegungslosigkeit oder sogar das Abtöten erreicht wird.The use of extremely miniaturized electrode systems (typical dimensions and electrode spacing in the um or sub-micrometer range) allows the application locally very strong electric fields (up to a few tens or hundreds of MV / m) especially in the immediate vicinity of the surface covered with microelectrodes (Effectiveness approximately up to a distance of 3 to 10 times the Electrode distances). The use of high frequencies (<1 kHz), typically in the kHz or MHz range induces such strong in the cells of the organism electrical polarizations that are temporary or permanent Immobility or even killing is achieved.
Die abhängigen Ansprüche konkretisieren und erweitern die abstrakten - vom Anspruch 1 in seinen tragenden Merkmalen umrissenen - Gedanken der elektrisch steuerbaren Immobilisierung und Anhaftunterdrückung von Mikroorganismen und Einzellern.The dependent claims substantiate and expand the abstract - from Claim 1 outlined in its basic features - thoughts of electric controllable immobilization and adhesion suppression of microorganisms and Unicellular.
Da die Geschwindigkeit der Annäherung von einigen Organismen an die Oberfläche in wäßrigen Medien relativ gering ist, kann unter diesen Bedingungen die Feldapplikation auch in periodischer Folge oder mit sehr kurzen Burstsignalen erfolgen. Auf diese Weise kann mit sehr verringertem energetischen Aufwand ein dem Dauerfeld vergleichbarer Effekt erreicht, bzw. größere Flächen betrieben werden.Because the speed of the approach of some organisms to the surface is relatively low in aqueous media, the under these conditions Field application also in a periodic sequence or with very short burst signals respectively. In this way, a very reduced energy expenditure effect comparable to the permanent field achieved, or operated larger areas will.
Je kleiner (in mindestens zwei Dimensionen, z. B. Breite und Höhe) die Einzelelektroden ausgeführt werden, um so höhere Spannungen lassen sich anlegen und um so wirksamer wird die o.g. Anwendung. Mit kleiner werdendem Elektrodenabstand nimmt jedoch gleichermaßen die Fernwirkung von der Oberfläche gesehen auf die Mikroorganismen ab, so daß ein Kompromiß für den jeweiligen Organismengrößenbereich gefunden werden muß.The smaller (in at least two dimensions, e.g. width and height) the Single electrodes are executed, the higher voltages can be create and the more effective the above Application. With getting smaller However, the distance between the electrodes also takes away the long-distance effect of the Surface seen on the microorganisms, so that a compromise for the respective organism size range must be found.
Die periodische Feldapplikation (z. B. mit einem Pausen-Ausschaltverhältnis von 1 : 1, 2 : 1 oder mehr) und in noch stärkerem Maße der Impuls- oder Burstbetrieb gestatten die Anwendung wesentlich höherer Elektrodenanregungsspannungen als der Dauerbetrieb.The periodic field application (e.g. with a pause switch-off ratio of 1: 1, 2: 1 or more) and, to an even greater extent, pulse or burst operation allow the use of much higher electrode excitation voltages than the continuous operation.
Die Wirkung auf die Organismen kann durch die Applikation rotierender oder sich bewegender Felder durch Anlegen phasenverschobener Signale modifiziert werden. Neben der Bewegungseinschränkung erhalten die Organismen dann noch ein Drehmoment oder eine sie parallel zur Oberfläche verschiebende Kraft, die die Anhaftwahrscheinlichkeit noch weiter vermindert und die betrachtete Oberfläche freihält.The effect on the organisms can be rotating or by application moving fields can be modified by applying phase-shifted signals. In addition to restricting movement, the organisms also get one Torque or a force that moves it parallel to the surface, which the The likelihood of adherence is further reduced and the surface under consideration keeps clear.
Die Ausführung der Mikroelektroden kann mit den Methoden der Halbleitertechnologie bis in einen Bereich von wenigen 10 nm (E-Strahl- Lithographe) oder den um-Bereich (Photolithographie) getrieben werden. Zweckmäßig und sinnvoll sind Mehrebenenprozessierungen, um isolierende Abdeckungen herstellen zu können. Diese können partiell oder vollständig sein. Ebenfalls möglich sind eine 3-dimensionale Anordnung in Hybridform oder das Auskleiden von Hohlräumen und Rohrsystemen, mit diesbezüglichen Anwendungen. Für größere Flächen (dm² oder m²) sind Drucktechniken und ähnliche Verfahren zur Herstellung der Mikroelektrodenoberfläche anwendbar.The execution of the microelectrodes can be done with the methods of Semiconductor technology down to a few 10 nm (e-beam Lithographhe) or the um-range (photolithography) are driven. Multi-level processing is useful and useful in order to isolate To be able to produce covers. These can be partial or complete. A 3-dimensional arrangement in hybrid form or that is also possible Lining cavities and pipe systems, with related applications. For larger areas (dm² or m²), printing techniques and similar processes are available Production of the microelectrode surface applicable.
Im einfachsten Fall genügen 2 Zuleitungen (Wechselstrombetrieb) zum elektrischen Betrieb der Mikroelektroden. Für wandernde oder rotierende Felder lassen sich jeweils Gruppen von Elektroden zusammenfassen, die mit jeweils einem phasenverschobenen Signal betrieben werden. Entsprechend der Gruppenzahl ist die Phasenverschiebung zu wählen (z. B. je 3 Elektroden 120°, je 4 Elektroden 90°) oder auch andere Werte.In the simplest case, 2 supply lines (AC operation) are sufficient for the electrical Operation of the microelectrodes. For moving or rotating fields summarize groups of electrodes, each with one phase-shifted signal are operated. According to the number of groups select the phase shift (e.g. 3 electrodes each 120 °, 4 electrodes 90 ° each) or other values.
Mittels der Anwendung der Mikroelektroden lassen sich auf den Oberflächen Muster ausbilden (z. B. Ringe, Straßen, Kreuzungen etc.), die dem jeweiligen Zweck, d. h. speziellen Organismen, angepaßt werden. Die Bereiche zwischen den Elektroden lassen die Integration von Sensorelementen zu oder können transparent gehalten werden (z. B. optische Fenster). By using the microelectrodes, patterns can be created on the surfaces train (e.g. rings, roads, intersections, etc.) that are appropriate for the respective purpose, i.e. H. special organisms. The areas between the electrodes allow the integration of sensor elements or can be kept transparent (e.g. optical windows).
Die geometrische Anordnung der Elektroden erlaubt es weiterhin zu bestimmen, ob die Mikroorganismen vollständig oder nur partiell bewegungsbeeinflußt werden. Oft wird die einseitige Lähmung (z. B. bei bi- oder multipedalen Organismen) genügen, um ein Anhaften zu verhindern, da eine gerichtete Schwingungsbewegung und Steuerung nicht mehr möglich ist. Das kann erreicht werden, indem einzelne Elektroden lokal enger beabstandet werden als an anderen Stellen der Oberflächen.The geometrical arrangement of the electrodes also makes it possible to determine whether the microorganisms are completely or only partially influenced by movement. Often will the one-sided paralysis (e.g. in bi- or multipetal organisms) suffice, to prevent sticking, as a directional vibration movement and Control is no longer possible. That can be achieved by individual Electrodes are spaced closer together locally than at other locations on the surfaces.
Bevorzugte Ausführungsbeispiele der Erfindung werden nachfolgend unter Bezugnahme auf die beiliegenden Figuren näher erläutert.Preferred embodiments of the invention are described below Reference to the accompanying figures explained in more detail.
Fig. 1 veranschaulicht einen Ausschnitt aus einer mikrostrukturierten Oberfläche (Substrat (12)), auf dem Mikroelektroden (11a bis 11l) planar aufgebracht wurden. Jeweils zwischen den benachbarten Elektroden wird ein Wechselfeld der beschriebenen Art (kHz bis MHz) angelegt. Ein in der darüber befindlichen Lösung schwimmender Mikroorganismus (hier Cypris-Larve (14)), der aus der Richtung (15) kommt, würde in dem gezeichneten Bereich bewegungsunfähig werden und von dem Oberflächenbereich (13) weggedrängt bzw. könnte diesen nicht erreichen. Auch eine einseitige Behinderung hätte denselben Effekt, da ein Kreisschwimmen entstünde, so daß ein Anhaften im Bereich (13) nicht möglich wird. Die Elektroden (11a bis 11l) können entweder in alternierender Folge mit 180°-phasenverscho benen Signalen (Wechselspannungsbetrieb) oder 3mal 120° - 4mal 90° usw. phasenverschobenen Signalen angesteuert werden. Je nach der im oberflächennahen Bereich der Lösung entwickelten Feldstärken wird die Bewegungsbeeinträchtigung des Mikroorganismus (14) kurzfristig, langfristig oder irreversibel sein. Falls Impulssignale periodisch angelegt werden, kann der Organismus auch zerstört werden. Fig. 1 illustrates a section of a microstructured surface (substrate ( 12 )) on which microelectrodes ( 11 a to 11 l) have been applied planar. An alternating field of the type described (kHz to MHz) is applied between the adjacent electrodes. A microorganism floating in the solution above (here Cypris larva ( 14 )), which comes from the direction ( 15 ), would become immobile in the area shown and pushed away from the surface area ( 13 ) or could not reach it. A one-sided disability would also have the same effect, since a circular swimming would occur, so that it does not stick to area ( 13 ). The electrodes ( 11 a to 11 l) can be controlled either in alternating sequence with 180 ° phase-shifted signals (AC operation) or 3 times 120 ° - 4 times 90 ° etc. phase-shifted signals. Depending on the field strengths developed near the surface of the solution, the movement impairment of the microorganism ( 14 ) will be short-term, long-term or irreversible. If pulse signals are applied periodically, the organism can also be destroyed.
Fig. 2 zeigt das Muster einer Oberflächen (22), mit der in bestimmten Arealen ein An haften der Mikroorganismen (24) unterbunden werden soll. Die Elektroden (22a bis 22i) sind zu Gruppen zusammengefaßt. Auf diese Weise lassen sich wandernde Hochfrequenzfelder als auch Wechselfelder applizieren. Auch hier werden die Mikroorganismen (24) beim unmittelbaren Überschwimmen der Oberfläche bewegungsbeeinflußt. Für kleinere Organismen eignen sich auch engere Elektrodenanordnungen. Typische Abstände und Breiten liegen zwischen 50 nm und 100 µm. Die Anregungsspannungen variieren dann zwischen mV und einigen 10 V. Fig. 2 shows the pattern of a surface ( 22 ) with which adherence to the microorganisms ( 24 ) is to be prevented in certain areas. The electrodes ( 22 a to 22 i) are combined in groups. In this way, wandering radio frequency fields as well as alternating fields can be applied. Here, too, the microorganisms ( 24 ) are influenced by movement when the surface swims directly over them. Tighter electrode arrangements are also suitable for smaller organisms. Typical distances and widths are between 50 nm and 100 µm. The excitation voltages then vary between mV and a few 10 V.
Im Impulsbetrieb und dem periodischen An- und Abschalten des Feldes sind Werte von bis zu 100 V und mehr möglich.Values are in pulse mode and the periodic switching on and off of the field of up to 100 V and more possible.
Claims (19)
Priority Applications (1)
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DE1996102786 DE19602786A1 (en) | 1996-01-26 | 1996-01-26 | Reversible or irreversible immobilisation of microorganisms suspended in aqueous solution |
Applications Claiming Priority (1)
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Publications (1)
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DE1996102786 Withdrawn DE19602786A1 (en) | 1996-01-26 | 1996-01-26 | Reversible or irreversible immobilisation of microorganisms suspended in aqueous solution |
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DE (1) | DE19602786A1 (en) |
Cited By (3)
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1996
- 1996-01-26 DE DE1996102786 patent/DE19602786A1/en not_active Withdrawn
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