DE1695329C - Process for the production of 5-purine nucleotides by fermentation of microorganisms in the presence of antibiotics or surface-active substances. Elimination aas: 1570022 - Google Patents

Description

^{1 21 2}

Verfahren zurv Herstellung von 5'-Purinnucleotiden Im Rahmen der Erfindung werden Antibiotics, wieProcess for the preparation of 5'-purine nucleotides In the context of the invention, antibiotics such as

aus Purinbasen ;durch Fermentierung von Mikro- Penicillin, Mitomycin, Streptomycin, Cycloserin, Ba-from purine bases; by fermentation of micro-penicillin, mitomycin, streptomycin, cycloserine,

organismen sind aus den französischen Patentschriften citracin, Tetracyclin, Hydroxytetracyclin, Chlortetra-organisms are from the French patents citracin, tetracycline, hydroxytetracycline, chlorotetra-

849 519 und I 301 052 bekannt. Jedoch ergeben die cyclin, Carzinophilin (Antibioticum aus Strep. Saha-849 519 and I 301 052 known. However, the cyclin, carzinophilin (antibiotic from Strep. Saha-

bekannten Verfahren nur geringe Ausbeuten an dem 5 chiroi-KuIturen), Kanamycin oder Neomycin benutzt,known processes only low yields of the 5 chiroi-KuIturen), Kanamycin or Neomycin used,

gewünschten 5'-Purinnucleotid. Besonders wirksam sind Mitomycin, Penicillin,Strepto-desired 5'-purine nucleotide. Mitomycin, penicillin, strepto-

Demgegenüber befaßt sich die Erfindung mit einem mycin und Cycloserin.In contrast, the invention is concerned with a mycin and cycloserine.

Fermentationsverfahren zur Herstellung von 5'-Purin- Im allgemeinen wird das Antibioticum bei Beginn nucleotiden, wie 5'-lnosinsäure, 5'-Xanthylsäure, der logarithmischen Wachstumspenode der Mikro-5'-Guanylsäure und 5'-Adenylsäure in wirtschaftlich io Organismen, wenn deren Zunahme üblicherweise ausgünstiger Weise im Industriemaßstab aus Purinbasen. nehmend stark ist, zugefügt. Jedoch wird eine weitereFermentation Process for Making 5'-Purine Generally, the antibiotic is used at the beginning nucleotides, such as 5'-inosinic acid, 5'-xanthylic acid, the logarithmic growth penode of micro-5'-guanylic acid and 5'-adenylic acid in economically acceptable organisms, when their increase is usually more favorable Way on an industrial scale from purine bases. taking is strong inflicted. However, there will be another

Geeignete Basen sind z. B. Hypoxanthien, Guanin Zunahme an gewünschtem Produkt dann erzielt, und Adenin. Die Basen können als solche oder als wenn das Antibioticum kurz nach der obengenannten Nucleoside oder in Naturprodukten, die Basen bzw. Periode bei normalem Wachstum der Bakterien zuge-Nucleoside enthalten, vorliegen. Die erfindungsgemäß 15 fügt wird, und es erfolgt dann eine ausgezeichnete Anverwendeten Mikroorganismen sind Brevibacterium reicherung.Suitable bases are e.g. B. hypoxanthias, guanine increase in desired product then achieved and adenine. The bases can be used as such or as if the antibiotic shortly after the above Nucleosides or in natural products, the bases or period in normal growth of the bacteria added nucleosides included. The invention 15 adds, and there is then an excellent applied Microorganisms are brevibacterium enrichment.

ammoniagenes ATCC 6871 und 6872 und Micro- Gemäß der Erfindung können die vorstehenden mitammoniagenes ATCC 6871 and 6872 and Micro- According to the invention, the above can be used with

coccus sodonensis ATCC 15 932. Antibiotica erzielbaren Ergebnisse, d.h. die Unter-coccus sodonensis ATCC 15 932. Antibiotics achievable results, i.e. the under-

Die Erfindung befaßt sich mit einer Verbesserung drückung des übermäßigen Bakterienwachstums zu-The invention is concerned with improving the suppression of excessive bacterial growth.

der bei der fermentativen Herstellung von 5'-Purin- 20 gunsten der Bildung von 5'-Purinnucleotid, statt durchthat in the fermentative production of 5'-purine 20 in favor of the formation of 5'-purine nucleotide, instead of by

nucleotiden mit Brevibacterium ammoniagenes oder Zugabe von Antibiotica auch durch die Verwendungnucleotides with Brevibacterium ammoniagenes or addition of antibiotics also through the use

Micrococcus sodonensis auftretenden Verminderung von oberflächenaktiven Substanzen im Fermentations-Micrococcus sodonensis occurring reduction of surface-active substances in the fermentation

dcr Ausbeute des angestrebten Produktes infolge über- medium erreicht werden.The yield of the desired product can be achieved as a result of excess medium.

mäßiger Zunahme von Mikroorganismen wegen der Die Bildung der gewünschten Produkte wird fernerThere is also a moderate increase in microorganisms due to the formation of the desired products

Anwesenheit zu großer Mengen wachstumsfördernder »5 dadurch erhöht, daß oberflächenaktive Mittel nichtPresence of too large amounts of growth-promoting »5 is increased by the fact that surfactants are not

Substanzen. Diese Erscheinung ist um so leichter zu nur im Falle übermäßigen Bakterienwachstums zuge-Substances. This phenomenon is all the easier to admit only in the case of excessive bacterial growth.

beobachten, wenn Nährstoffe mit großem Gehalt an fügt werden, sondern auch, ähnlich wie bei der Be-observe when nutrients are added with high content of, but also, similar to when loading

wachstumsfördernder Substanz, z. B. einige Arten handlung mit Antibiotica, wenn 5'-Purinnucleotidgrowth-promoting substance, e.g. B. some types of dealing with antibiotics when 5'-purine nucleotide

Maisquellwasser, Reiskleie oder Fischextrakte ver- ausgezeichnet entwickelt wird,Corn steeple, rice bran or fish extracts are excellently developed,

wendet werden. 30 Als oberflächenaktive Mittel können solche mitbe turned. 30 As surface-active agents, those with

Ebenso wie die übermäßige Zugabe von Amino- kationischen, anionischen, amphoteren oder nicht säurequellen verursacht die Zufügung kleiner Mengen ionischen Eigenschaften verwendet werden. Kationenvon Substanzen, wie Mangansalz oder Eisensalz, in aktive Substanzen sind am wirkungsvollsten, dann einer über einem bestimmten Wert liegenden Konzen- folgen nichtionische Substanzen, und etwas weniger tration zum Kulturmedium, welches Pantothensäure 35 wirkungsvoll sind anionenaktive Stoffe. Beispiele für und Thiamin enthält, ungewöhnliches Bakterienwachs- kationenaktive Stoffe sind Polyoxyäthylenalkylamin, turn und damit geringe Bildung von 5'-Purinnucleotid. Cetylpyridinchlorid, Cetyltrimethylammoniumbromid Aus wirtschaftlichen Gründen werden als Quelle für und Alkyldimethylbenzylammoniumchlorid. Beispiele AminosäurenzweckmäßigerweisebilligeNaturprodukte für nichtionische oberflächenaktive Stoffe sind Gebenutzt. Einige dieser Naturprodukte enthalten jedoch 40 mische aus 40% Polyoxyäthylen und 60% PoIyauch erhebliche Mengen Eisen- oder Mangansalz. propylen oder aus 10% Polyoxyäthylen und 90%Just like the excessive addition of amino-cationic, anionic, amphoteric or not Acid sources cause the addition of small amounts of ionic properties. Cations of Substances, like manganese salt or iron salt, are most effective then in active substances a concentration above a certain value is followed by non-ionic substances, and a little less tration to the culture medium, which pantothenic acid 35 are effective anion-active substances. examples for and contains thiamine, unusual bacterial wax- cation-active substances are polyoxyethylene alkylamine, turn and thus low formation of 5'-purine nucleotide. Cetyl pyridine chloride, cetyl trimethyl ammonium bromide For economic reasons, as a source for and alkyldimethylbenzylammonium chloride. Examples Amino acid appropriately inexpensive natural products for nonionic surfactants are used. However, some of these natural products contain 40 mixtures of 40% polyoxyethylene and 60% polyacrylic significant amounts of iron or manganese salt. propylene or from 10% polyoxyethylene and 90%

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung Polypropylen.The inventive method for producing polypropylene.

von 5'-Purinnucleotiden durch Fermentation von Im allgemeinen empfiehlt es sich, die oberflächen-of 5'-purine nucleotides by fermentation of In general, it is recommended that the surface

Mikroorganismen in einem wäßrigen Nährmedium, aktiven Mittel relativ spät in der Periode des logärith-Microorganisms in an aqueous nutrient medium, active agents relatively late in the period of logarithmic

das neben üblichen Mengen an Kohlenstofflieferanten, 45 mischen Wachstums der Mikroorganismen — imthat in addition to the usual amounts of carbon suppliers, 45 mix growth of microorganisms - im

Stickstoffquellen, anorganischen Salzen und Vitamin H Falle übermäßig starker Zunahme — zuzufügen,Nitrogen sources, inorganic salts and vitamin H in case of excessive increase - to add,

auch größere Mengen wachstumsfördernder Substan- Wenn z. B. das maximale Wachstum 30 mg/ml,also larger amounts of growth-promoting substances. B. the maximum growth 30 mg / ml,

zen sowie Eisen- und Mangansalze enthalten kann, bezogen auf getrocknete Bakterienzellen, ausmacht,zen as well as iron and manganese salts, based on dried bacterial cells, makes up

in Gegenwart einer dem 5'-PurinnucIeotid entsprechen- so ist es zweckmäßig, die Substanz bei zwei Drittelin the presence of one of the 5'-purine nucleotide, it is advisable to reduce the substance to two-thirds

den Purinbase als Vorläufer ist dadurch gekennzeich- 50 dieser Größe, d. h. bei etwa 20 mg/ml, zuzugeben,the purine base as a precursor is characterized by this size, i. H. at about 20 mg / ml, to add

net, daß man als Mikroorganismen Brevibacterium Die Zunahme des zu gewinnenden Produkts wirdnet that one becomes Brevibacterium as microorganisms The increase in the product to be obtained

ammoniagenes ATCC 6871 und 6872 oder Micro- weiter erhöht, wenn man die oberflächenaktivenammoniagenes ATCC 6871 and 6872 or micro- further increased if one uses the surface-active

coccus sodonensis ATCC 15 932 verwendet und dem Substanzen zu einem späteren als dem obengenanntencoccus sodonensis ATCC 15 932 and the substances at a later date than the above

Fermentationsmedium ein Antibioticum oder eine Zeitpunkt zufügt, also kurz danach,Fermentation medium adds an antibiotic or a point in time, i.e. shortly afterwards,

oberflächenaktive Substanz in der Periode des loga- 55 Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung anSurface-active substance in the period of the loga 55 The following examples illustrate the invention

rithmischen Wachstums oder Mikroorganismen oder Hand bevorzugter Ausführungsformen. Falls nichlrithmic growth or microorganisms or hand of preferred embodiments. If not

kurz danach zugibt. anders angegeben, beziehen sich die Prozentangabenshortly thereafter admits. otherwise stated, the percentages relate

Erfindungsgemäß wird somit die unerwünschte Ent- in den folgenden Beispielen auf das Gewicht prcAccording to the invention, the undesired Ent- in the following examples is thus based on the weight prc

wicklung von Mikroorganismen ohne ausreichende Volumen Fermentationsmedium.development of microorganisms without sufficient volume of fermentation medium.

Erzeugung der 5'-Purinnucleotide verhindert, indem 60Production of the 5'-purine nucleotides prevented by 60

die Fermentation in einem Fermentationsmedium mit Beispiel 1the fermentation in a fermentation medium with example 1

zugefügten Antibiotica oder oberflächenaktiven Mit- Als Impfbaktcrium wird Brevibacterium ammonia-added antibiotics or surface-active co- As a vaccine, Brevibacterium ammonia is used

teln ausgeführt wird, wodurch die Erzeugung von genes (ATCC 6872) 24 Stunden in einem Kultur-is carried out, whereby the generation of genes (ATCC 6872) 24 hours in a culture

5'-Purinnucleotid erhöht wird. Die Anwesenheit von medium aus 2% Glucose, 1,5% Pepton, 0,2% Harn5'-purine nucleotide is increased. The presence of medium of 2% glucose, 1.5% peptone, 0.2% urine

Antibiotica ist für eine Maximalerzeugung von 5'-Pu- 6₅ stoff, 0,Γ'/₀ K₂HPO₄, 0,03% MgSO₄ · 7 H₂O, 0,3"/,Antibiotics are for a maximum production of 5'-Pu- 6 ₅ substance, 0. Γ '/ ₀ K ₂ HPO ₄ , 0.03% MgSO ₄ · 7 H ₂ O, 0.3 "/,

rinnucleotid auch dann zweckmäßig, selbst wenn keine NaCl, 0,01% FeSO₁ · 7 H₂O und 30 y/l Vitamin HRinnucleotide is also useful, even if no NaCl, 0.01% FeSO ₁ · 7 H ₂ O and 30 μ / l vitamin H

Bedingungen vorliegen, die ein übermäßiges Wachs- (Restprozente — Wasser), pH = 7,3, kultiviert. DamConditions exist that an excessive wax (residual percent - water), pH = 7.3, cultivated. Dam

turn von Mikroorganismen begünstigen. werden 10 Volumprozent dieser Impfkultur auf eirfavor the turn of microorganisms. 10 percent by volume of this inoculation culture are placed on eir

Fermentationsmedium übertragen. Beide Medien sind zuvor sterilisiert worden. Die Kultivierung wird bei 30⁰C unter Schütteln in einem Fermentationsmedium durchgeführt, das die folgende Zusammensetzung aufweißt: 10 "/„ Glucose, 1% K₈HPO₄, 1,3% KH₂PO₄, 1,1 % MgSO₄ · 7 H₂O, 0,01 °/₀ CaCl₂ · 2 H₈O, 30 y/1 Vitamin H, 5 y/ml Calciumpantothenat, 3 y/ml Thiaminhydrochlorid, 0,5% .Maisquellwasser, 3 mg/ml Hypoxanthin (Restprozente = Wasser). Der pH-Wert wird vor der Sterilisierung mit 5 n-NaOH auf 8,0 eingestellt. Nach der Sterilisierung wird zuvor sterilisierter Harnstoff in das Kulturmedium bis zu einem Gehalt von 0,6% gegeben. Die nachstehend angeführten Mengen Mitomycin C wurden in einzelnen Dosen nach einer bestimmten Kulturdauer zugegeben. Tabelle I gibt die nach 96stündiger Kultivierung in der Fermentationsflüssigkeit angesammelten Mengen 5'-Natriuininosinat an.Transfer fermentation medium. Both media have been sterilized beforehand. The cultivation is carried out at 30 ⁰ C with shaking in a fermentation medium which aufweißt the following composition: 10 "/" of glucose, 1% K ₈ HPO _4, 1.3% KH ₂ PO _4, 1.1% MgSO ₄ · 7 H ₂ O, 0.01% / ₀ CaCl ₂ · 2 H ₈ O, 30 y / 1 vitamin H, 5 y / ml calcium pantothenate, 3 y / ml thiamine hydrochloride, 0.5% corn steep water, 3 mg / ml hypoxanthine ( Remaining percent = water). Before sterilization, the pH is adjusted to 8.0 with 5N NaOH. After sterilization, previously sterilized urea is added to the culture medium up to a content of 0.6%. The amounts of mitomycin listed below C. were added in individual doses after a certain culture period.Table I shows the amounts of 5'-sodium ininosinate that have accumulated in the fermentation liquid after cultivation for 96 hours.

Tabelle 1Table 1 MitomMitome
ZugabeEncore
zeittime
(Std.)(Hours.) ycin Cycin C
ZugabeEncore
mengenamounts
(V/ml)(V / ml) EntstandeneArisen
Mengen anAmounts of
5'-Natriuminosinat*)5'-sodium inosinate *)
(mg/ml)(mg / ml) Mengenamounts
getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells
(mg/ml)(mg / ml) 88th 15
3015th
30th 1,3
2,51.3
2.5 12,912.9
11,011.0 1212th 2020th
4040 8,82
11,038.82
11.03 15,115.1
14,814.8 1616 20
4020th
40 3,92
4,033.92
4.03 18,018.0
17,617.6 2020th 30
4030th
40 1,22
1,111.22
1.11 21,321.3
20,720.7 Keine ZugabeNo encore Spurensense 32,832.8

Penicillin G-NatriumPenicillin G Sodium ZugabeEncore ZugabeEncore inengenarrow zeittime (r/ml)(r / ml) (Std.)(Hours.) 55 88th 1010 55 1212th 1010 5050 1010 1818th 5050 Keine ZugabeNo encore

EntstandeneArisen

Mengen anAmounts of

5'-Natriuminosinat*)5'-sodium inosinate *)

(mg/ml)(mg / ml)

2,3
4,12.3
4.1

4,0
6,34.0
6.3

10,210.2

9,0
7,99.0
7.9

Spurensense

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

13,3
13,013.3
13.0

15,9
15,915.9
15.9

14,214.2

19,1
18,319.1
18.3

38,2 tation und in verschiedenen Konzentrationen Cycloserin zugefügt. Die übrigen Kulturbedingungen bleiben dieselben wie im Beispiel 1. Nach 96 ständiger Kultur hat sich 5'-Natriuminosinat gebildet wie in Tabelle III angegeben.38.2 tion and cycloserine in various concentrations added. The other culture conditions remain the same as in Example 1. After 96 continuous culture 5'-sodium inosinate formed as indicated in Table III.

Tabelle IIITable III

*) Bestimmt als S'-Inosinsäuredinatriumsalz · 7¹/» H_aO.
Beispiel 2 *) Determined as S'-inosinic acid disodium salt · 7 ¹ / »H _a O.
Example 2

Der Vorgang entspricht dem im Beispiel 1 angegebenen, außer, daß an Stelle von Mitomycin C hier zu verschiedenen Zeiten Penicillin G-Natrium zugefügt wurde. Die entstandenen Mengen an 5'-Natriuminosinat nach 120stündiger Kultivierung sind in Tabelle Il angegeben.The procedure corresponds to that given in Example 1, except that instead of Mitomycin C here too Penicillin G sodium was added at various times. The resulting amounts of 5'-sodium inosinate after 120 hours of cultivation are given in Table II.

Tabelle IlTable Il

*) Bestimmt als 5'-Inosinsauredinatriumsalz · 7¹/» H_aO.
Beispiel 3 *) Determined as disodium 5'-inosinate · 7 ¹ / »H _a O.
Example 3

Es wird das gleiche Impfbakterium sowie das gleiche Fermentationsmedium wie im Beispiel 1 verwendet, jedoch statt Maisquellwasser 0,0005% MnSO₄ ■ 4 H₁₁O zugegeben. Ferner wird an Stelle von Mitomycin (Beispiel 1) zu verschiedenen Zeiten während der FermenThe same inoculating bacterium and the same fermentation medium as in Example 1 are used, but 0.0005% MnSO ₄ · 4 H ₁₁ O is added instead of corn steep liquor. Furthermore, instead of mitomycin (Example 1) at different times during the Fermen

CycloserinCycloserine ZugabeEncore ZugabeEncore mengecrowd zeittime (y/ml)(y / ml) (Std.)(Hours.) 400400 77th 800800 16001600 800800 1010 16001600 20002000 800800 1313th 16001600 20002000 Keine ZugabeNo encore

EntstandeneArisen

Mengen an'Quantities of '

5'-Natriuminosinat*)5'-sodium inosinate *)

(mg/ml)(mg / ml)

5,35.3

•7,2• 7.2

9,09.0

3,13.1

10,210.2

9,99.9

6,4 9,2 6,86.4 9.2 6.8

Spurensense

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

13,8 12,0 12,213.8 12.0 12.2

•14,2 14,0 13,6• 14.2 14.0 13.6

18,2 17,3 17,518.2 17.3 17.5

39,139.1

*) Bestimmt als S'-Inosinsäuredinatriumsalz - 7¹/* H₁O.*) Determined as S'-inosinic acid disodium salt - 7 ¹ / * H ₁ O.

Beispiel 4Example 4

Es werden das gleiche Impfbakterium wie im Beispiel 1 und das Fermentationsmedium wie im Beispiel 3, jedoch ohne Hypoxanthin verwendet. Nach 48stündiger Kultivierung wird Guanin mit 3,0 mg/ml zugefügt. Dihydrostreptomycinsulfat wird als Antibioticum in unterschiedlichen Konzentrationen und zu verschiedenen Zeiten zugegeben. Die übrigen Kulturbedingungen entsprechen denen des Beispiels 1.The same vaccine bacterium as in example 1 and the fermentation medium as in example are used 3, but used without hypoxanthine. After 48 hours of cultivation, guanine at 3.0 mg / ml added. Dihydrostreptomycin sulfate is used as an antibiotic in different concentrations and admitted at different times. The other culture conditions correspond to those of Example 1.

Tabelle IV zeigt die Bildung von 5'-Natriumguanylat nach 96stündiger Kultur.Table IV shows the formation of 5'-sodium guanylate after 96 hours of culture.

Tabelle IV .Table IV.

Dihydrostrepto-Dihydrostrepto- sulfatsulfate
ZugabeEncore
mengecrowd EntstandeneArisen MenffcnMenffcn mycinmycin
ZugabeEncore
zeittime (WmI)(WmI) Mengen anAmounts of
5'-Natrium-5'-sodium
guanylat*)guanylate *) getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells (Std.)(Hours.) 55 (mg/ml)(mg / ml) (mg/ml)(mg / ml) 88th 1010 1,31.3 15,215.2 5050 2,62.6 14,914.9 55 2,72.7 14,114.1 1414th 1010 2,32.3 19,219.2 5050 4,44.4 18,118.1 55 5,15.1 18,818.8 2020th 1010 1,21.2 22,522.5 5050 1,21.2 23,023.0 Keine ZugabeNo encore 2,02.0 21,621.6 Spurensense 38,938.9

·) Bestimmt als S'-Guanylsäuredinatriumsalz.·) Determined as S'-guanyl disodium salt.

Beispiel 5Example 5

Das gleiche Impfbakterium wie im Beispiel I und das Fermentationsmedium wie im Beispiel 4 werden verwendet. Nach 48stündiger Kultivierung werden 2,5 mg/ml Adenin zugegeben. Tetracyclin wird als Antibioticum in unterschiedlichen Konzentrationen zu verschiedenen Zeiten zugefügt. Die übrigen Kulturbedingungen entsprechen denen des Beispiels 1. Nach 96 Stunden sind die in Tabelle V aufgeführten Mengen 5'-Adenylsäure nachzuweisen.The same inoculum as in Example I and the fermentation medium as in Example 4 are used used. After 48 hours of cultivation, 2.5 mg / ml adenine are added. Tetracycline is called Antibiotic added in different concentrations at different times. The remaining culture conditions correspond to those of Example 1. After 96 hours, the amounts listed in Table V are To detect 5'-adenylic acid.

Tabelle VTable V

Tetracylin-Zusatz Zugabe- Zugabezeit menge (Std.) I (WmI)Tetracycline additive Addition time amount (Std.) I (WmI)

1
21
2

1
2
51
2
5

1
2
51
2
5

Keine ZugabeNo encore

EntstandeneArisen

Mengen anAmounts of

5'-Adenylsäure5'-adenylic acid

(mg/ml)(mg / ml)

1,1 2,31.1 2.3

2,1 4,1 1.92.1 4.1 1.9

.0,8 3,8 2,70.8 3.8 2.7

Spurensense

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

17,1 16,817.1 16.8

18,1 15,3 14,218.1 15.3 14.2

13,1 12,9 13,013.1 12.9 13.0

40,2 Bei spi el 640.2 At game 6

Es werden das gleiche Impfbakterium und das gleiche Fermentationsmedium wie im Beispiel 1 verwendet, jedoch Maisquellwasser durch 0,3% eines enzymatischen Gaseinhydrolysats ersetzt und die Hypoxanthinzugabe auf 4 mg/ml erhöht. Während der Kulturdauer werden bestimmte Konzentrationen vonThe same vaccine bacterium and the same fermentation medium as in Example 1 are used, however, corn steep water is replaced by 0.3% of an enzymatic gas hydrolyzate and the addition of hypoxanthine increased to 4 mg / ml. During the culture period, certain concentrations of

ίο Penicillin G-Kalium, Mitomycin C und Dihydrostreptoiriycinsulfat zu bestimmten Zeiten zugegeben. Im übrigen sind die Kulturbedingungen wie im Beispieil. TabelleVI gibt die nach 120stündiger Kultivierung im Fermentationsmedium gefundenen Mengen 5'-Natriuminosinat wieder.ίο Penicillin G Potassium, Mitomycin C and Dihydrostreptoiriycin Sulphate admitted at certain times. Otherwise, the culture conditions are as in the example. Table VI gives those after 120 hours of culture amounts of 5'-sodium inosinate found in the fermentation medium.

Tabelle VITable VI

Antibioticum ArtAntibiotic Art

ZugabeEncore ZugabeEncore zeittime mengecrowd (Std.)(Hours.) (WmI)(WmI) 2424 1010 2828 2020th 3030th 5050 KeineNone ZugabeEncore

EntstandeneArisen Mengenamounts Mengen anAmounts of getrockneterdried 5'-Natriuminosinat*)5'-sodium inosinate *) BakterienzellenBacterial cells (mg/ml)(mg / ml) (mg/ml)(mg / ml) 15,115.1 15,715.7 16,016.0 16,316.3 13,813.8 17,017.0 9,99.9 19,819.8

Penicillin-G-Kalium Penicillin G Potassium

Mitomycin C ...χ . ί Mitomycin C ... χ. ί Dihydrostreptomycihsulfat Dihydrostreptomycihsulfate

*) Bestimmt als S'-lnosinsäuredinacriumsalz ■ 7 Vt H₁O.*) Determined as S'-inosinic acid dinacrium salt ■ 7 Vt H ₁ O.

Beispiel 7Example 7

KanamycinKanamycin

Zugabezeit (Std.)Addition time (Hours.)

Zugabemenge
WI Added amount
WI

10
20
5010
20th
50

10 20 5010 20th 50

Mengenamounts

getrockneter'dried '

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

12,0 11,5 10,112.0 11.5 10.1

14,5 13,1 13,314.5 13.1 13.3

Entstandene MengenAmounts created

an 5'-Natrium-of 5'-sodium

guanylat*)guanylate *)

(mg/ml)(mg / ml)

0,9 2,9 1,30.9 2.9 1.3

2,0 3,92.0 3.9

5,25.2

Keine Zugabe 28,3 SpurenNo addition 28.3 tracks

*) Bestimmt als S'-Guanylsäuredinatriumsalz.*) Determined as S'-guanyl disodium salt.

Beispiel 8Example 8

Impfbakterium: Micrococcus sodonensis (ATCC 15932); Kulturmedium: 2% Glucose, 0,5%> Hefeextrakt, 1,5% Pepton und 0,25% NaCl (Restprozente = Wasser), pH = 7,3; Fermentationsmedium: 10% Glucose, 0,6% K₂HPO₄, 0,6% MgSO₄ · 7H₂O,Vaccine bacterium: Micrococcus sodonensis (ATCC 15932); Culture medium: 2% glucose, 0.5% yeast extract, 1.5% peptone and 0.25% NaCl (residual percentage = water), pH = 7.3; Fermentation medium: 10% glucose, 0.6% K ₂ HPO ₄ , 0.6% MgSO ₄ · 7H ₂ O,

65 0,01»/, 65 0.01 »/,

Impfbakterium: Brevibacterium ammoniagenes (ATCC 6871), Fermentationsmedium nach Beispiel Nach 50stündiger Kulturdauer werden 3,0 mg/ml Guanin zugegeben. Kanamycinsulfat wird in unterschiedlicher Konzentration nach 10 bzw. 15 Stunden zugesetzt. Die übrigen Kulturbedinguugen entsprechen denen des Beispiels 1. Tabelle VII gibt die nach 96 Stunden gewonnenen Mengen an 5'-Natriumguanylat wieder.Vaccine bacterium: Brevibacterium ammoniagenes (ATCC 6871), fermentation medium according to the example After a culture time of 50 hours, 3.0 mg / ml guanine are added. Kanamycin sulfate is used in different ways Concentration added after 10 or 15 hours. The other culture conditions correspond those of Example 1. Table VII gives the amounts of 5'-sodium guanylate obtained after 96 hours again.

Tabelle VIITable VII

ο CaCl₂ · 2 H₂O, 5 y/ml Calciumpantothenat, 1 y/mlThiamin, 30 y/Vitamin H, 0,1% FeSO₄ · 7 H₂O, 1% Caseinaminosäuren, 0,6% Harnstoff und 2,5 mg/ ml Hypoxanthin (Restprozente = Wasser); pH-Wert = 8,0 vor der Sterilisation. Die übrigen Kulturbedingungen entsprechen denen des Beispiels 1. Nach lOstündiger Kultivierung wird Penicillin G-Kalium in unterschiedlichen Konzentrationen zugegeben. Die nach 96stündiger Kultur gefundenen Mengen an 5'-Natriuminosinat sind in Tabelle V3II wiedergegeben. ο CaCl ₂ · 2 H ₂ O, 5 y / ml calcium pantothenate, 1 y / ml thiamine, 30 y / vitamin H, 0.1% FeSO ₄ 7 H ₂ O, 1% casein amino acids, 0.6% urea and 2, 5 mg / ml hypoxanthine (residual percentage = water); pH = 8.0 before sterilization. The other culture conditions correspond to those of Example 1. After 10 hours of cultivation, penicillin G-potassium is added in different concentrations. The amounts of 5'-sodium inosinate found after 96 hours of culture are shown in Table V3II.

Tabelle VIIJTable VIIJ

Penicillin G-KaliumPenicillin G Potassium
ZugabemengeAdded amount
(WmI)(WmI) Mengenamounts
getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells
(mg/ml)(mg / ml) EntstandeneArisen
Mengen anAmounts of
5'-Natriuminosinat*]5'-sodium inosinate *]
(mg/ml)(mg / ml) 5
10
20
50
Keine Zugabe5
10
20th
50
No encore 19,3
18,2
14,3
14,1
30,819.3
18.2
14.3
14.1
30.8 4,1
5,8
7,2
7,0
Spuren4.1
5.8
7.2
7.0
sense

*) Bestimmt als S'-Inosinsäuredinatriumsalz · 7Vi H₂O.*) Determined as S'-inosinic acid disodium salt · 7Vi H ₂ O.

Beispiel 9Example 9

Impfbakterium: Brevibacterium
(ATCC 6872); Kulturmedium: 2%Vaccine bacterium: Brevibacterium
(ATCC 6872); Culture medium: 2%

ammoniagenes Glucose, 2%ammoniacal glucose, 2%

Pepton, 0,1% Harnstoff, 0,1% K₂HPO₄, 0,03% MgSO₄-7 H₂O, 0,3% NaCl, 0,01% FeSO-7 H₂O und 30y/ml Vitamin H (Restprozente = Wasser); Kulturdauer 24 Stunden; pH-Wert = 7,3. 10 Volumprozent dieses Impfmediums werden in ein Fermenta-Peptone, 0.1% urea, 0.1% K ₂ HPO ₄ , 0.03% MgSO ₄ -7 H ₂ O, 0.3% NaCl, 0.01% FeSO-7 H ₂ O and 30 µg / ml vitamin H (remainder percent = water); Culture time 24 hours; pH = 7.3. 10 percent by volume of this inoculation medium is poured into a fermentation

tionsmedium gegeben. Beide Kulturmedien sind zuvor sterilisiert. Das Fermentationsmedium besitzt die unten angegebene Zusammensetzung. Die aerobe Kultivierung wird bei 30⁰C unter Schütteln durchgeführt.tion medium given. Both culture media are sterilized beforehand. The fermentation medium has the composition given below. The aerobic cultivation is ^{carried out at 30 °} C. with shaking.

Zusammensetzung des Fermentationsmediums: 10% Glucose, 1% K₂HPO₄, l°/₀ KH₂PO₁, 1% MgSO₄-7 H₂O, 0,1 % CaCl₂ · 2 H₂O, 30 y/ml Vitamin H, 5 y/ml Calciumpantothenat, 3 y/ml Thiaminhydrochlorid, 4 mg/ml Hypoxanthin (Restprorente = Wasser). Der pH-Wert wird vor der Sterilisation mit 5 n-NaOH auf 8,0 eingestellt. Nach'der Sterilisation werden zu dem Fermentationsmedium 0,6% sterilisierter Harnstoff gegeben. Composition of the fermentation medium: 10% glucose, 1% K ₂ HPO _4, l ° / ₀ KH ₂ PO _1, 1% MgSO ₄ -7 H ₂ O, 0.1% CaCl ₂ · 2 H ₂ O, 30 y / ml Vitamin H, 5 y / ml calcium pantothenate, 3 y / ml thiamine hydrochloride, 4 mg / ml hypoxanthine (residual percentage = water). The pH is adjusted to 8.0 with 5N NaOH before sterilization. After sterilization, 0.6% of sterilized urea is added to the fermentation medium.

Nach 20, 24 und 48 Stunden Kulturdauer wird Polyoxyäthylenalkylamin in unterschiedlichen Kon zentrationen zugegeben. Die nach 120stündiger Kultivierung gewonnenen Mengen 5'-Natriuminosinat sind in Tabelle IX wiedergegeben. After 20, 24 and 48 hours of culture, polyoxyethylene alkylamine is added in different concentrations . The amounts of 5'-sodium inosinate obtained after culturing for 120 hours are shown in Table IX.

Tabelle IXTable IX Beispiel 11Example 11

Es werden das gleiche Impfbakterium wie im Beispiel 1 und das Fermentationsmedium nach Beispiel 1 verwendet, das jedoch an Stelle von Maisquellwasser 0,0005 °/o MnSO₄-4 H₂O enthielt. Cctyl- trimethylammoniumbromid wird als oberflächenaktives Mittel verwendet. Die übrigen Kulturbedingungen stimmen mit denen im Beispiel 1 überein.. Nach 96stündiger Kultivierung waren die in Tabelle Xl angegebenen Mengen 5'-Natriuminosinat entstanden. The same vaccine bacterium as in Example 1 and the fermentation medium according to Example 1 are used, which, however, contained 0.0005 _{% MnSO 4} -4 H ₂ O instead of corn steep liquor. Cctyl trimethylammonium bromide is used as a surfactant. The other culture conditions are the same as in Example 1. After 96 hours of cultivation, the amounts of 5'-sodium inosinate given in Table Xl were obtained.

PolyoxyPolyoxy
alkylalkyl
ZugabeEncore
zeittime
(StQ.)(StQ.) ithylen-ethylene-
iminimin
ZugabeEncore
mengenamounts
(y/tnl)(y / tnl) Mengenamounts
getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells
(mg/ml)(mg / ml) EntstandeneArisen
Mengen anAmounts of
5'-Natriuminosinat *)5'-sodium inosinate *)
(mg/ml)(mg / ml) 2020th 500500
750750
10001000 24,324.3
21,221.2
19,919.9 7,67.6
9,09.0
6,36.3 2424 750750
10001000
13001300 22,022.0
20,120.1
21,021.0 10,110.1
15,915.9
13,613.6 2828 750750
10001000
13001300 23,223.2
22,022.0
21,721.7 9,89.8
12,212.2
12,012.0 Keine ZugabeNo encore 30,830.8 Spurensense

Cetyl-trirCetyl trir
ammoniuammoniu
ZugabeEncore
zeittime
(Std.)(Hours.) tiethyl-tiethyl
mbromidmbromid
ZugabeEncore
mengecrowd
O/ml)O / ml) Tabelle XITable XI EntstandeneArisen
Mengen anAmounts of
S'-Natriuminosinat*]S'-sodium inosinate *]
(mg/ml).(mg / ml). 1515th 2020th 500500
750750
10001000 Mengenamounts
getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells
(mg/ml)(mg / ml) 3,63.6
5,25.2
6,56.5 2020th 2424 750750
10001000
12501250 24,024.0
20,220.2
16,516.5 10,610.6
14,914.9
15,115.1 «5«5 2828 750750
10001000
12501250 21,321.3
21,8 ,21.8,
19,219.2 8,28.2
9,19.1
8,78.7 Keine ZugabeNo encore 22,322.3
22,522.5
21,521.5 Spurensense 3030th 34,834.8

3535

·) Bestimmt als S'-Inosinsäuredinatriumsalz · I¹I, H,O.·) Determined as S'-inosinic acid disodium salt · I ¹ I, H, O.

Beispiel 10Example 10

Es werden die gleichen Maßnahmen wie im Beispiel 1 angewendet; an Stelle von Polyoxyäthylenaikylamin wird zu verschiedenen Zeiten in unter-i schiedlichen Konzentrationen Cetylpyridinchlorid zugefügt, Mengen an 5'-Natriuminosinat, die nach 120-stündiger Kultivierung nachzuweisen sind, sind in Tabelle X wiedergegeben.The same measures are used as in Example 1; instead of Polyoxyäthylenaikylamin is at different times in under-i Cetylpyridine chloride added to different concentrations, amounts of 5'-sodium inosinate that can be detected after 120 hours of cultivation are in Table X reproduced.

Tabelle XTable X

*) Bestimmt als S'-Inosinsäurcdinatriumsalz · 7¹/« H₁O.*) Determined as S'-inosinic acid disodium salt · 7 ¹ / «H ₁ O.

Beispiel 12Example 12

Es werden, das gleiche Impfbakterium und Fermentationsmedium wie im Beispiel 1, jedoch ohne Hypoxanthin verwendet. Nach 50stündiger Kultivierung werden 2,5 mg/ml Guanin zugegeben. Als oberflächenaktives Mittel wird Alkyldimethylbenzylammoniumchlorid verwendet. Die übrigen Kulturbedingungen entsprechen denen des Beispiels 1. Nach 96stündiger 'Kultur finden sich die in Tabelle XII angegebenen Mengen an 5'-NatriumguanyIat.The same inoculum and fermentation medium as in Example 1, but without hypoxanthine, are used. After 50 hours of cultivation 2.5 mg / ml guanine are added. Alkyldimethylbenzylammonium chloride is used as the surfactant. The remaining culture conditions correspond to those of Example 1. After 96 hours' culture, those given in Table XII are found Amounts of 5'-sodium guanyiate.

Tabelle XlITable XlI

AlkyldimethylbenzylaramoniumcMoridAlkyldimethylbenzylaramonium moride

Zugabezeit (SId.)Addition time (SId.)

CetylpyridinchloridCetyl pyridine chloride

Zugabezeit (Std.)Addition time (Hours.)

250 500 750250 500 750

500 750500 750

Keine ZugabeNo encore

Zugabemengen (y/ml)Added quantities (y / ml)

250 500 750250 500 750

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

25,0 22,3 19,125.0 22.3 19.1

25,9 23,2 20,425.9 23.2 20.4

24,8 23,224.8 23.2

32,932.9

Entstandene Mengen an 5'-Natriuminosinat*) (mg/ml)Arisen Amounts of 5'-sodium inosinate *) (mg / ml) 2222nd

3,5 4,9 4,13.5 4.9 4.1

8,1 12,9 10,28.1 12.9 10.2

6,3 7,16.3 7.1

Spurensense 2626th

3030th

6o6o Zugabemengen (V/ml)Added quantities (V / ml)

500
1000500
1000

500
1000
1250500
1000
1250

500
1000
1250500
1000
1250

Keine ZugabeNo encore

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

19,5 17,119.5 17.1

20,3 19,3 20,120.3 19.3 20.1

21,5 21,3 22,721.5 21.3 22.7

36,836.8

Entstandene Mengen anAmounts of

5'-Natrium-5'-sodium

guanylat*)guanylate *)

(mg/ml)(mg / ml)

1,1 2,01.1 2.0

1,9 5,9 4,71.9 5.9 4.7

2,3 4,0 3,12.3 4.0 3.1

Spurensense

*) Bestimmt als S'-Inosinsäurcdinatriumsalz · 7'/t H,O.*) Determined as S'-inosinic acid disodium salt · 7 '/ t H, O.

·> Bestimmt als S'-Guanylsäuredinatriamsalz.·> Determined as S'-guanyl dinatriam salt.

Beispiel 13Example 13

Es werden das gleiche Impfbakterium und Fcrnicntationsmedium wie im Beispiel 1 verwendet, jedochThe same vaccine bacterium and infection medium as in Example 1 are used, however

209632/285209632/285

an Stelle von Maisquellwasser 0,4% Pepton eingesetzt. In bestimmten Konzentrationen werden zu bestimmten Zeiten Polyoxyäthylenalkylamin, Cetylpyridinchlorid lind Alkyldimethylbenzylammoniumchlorid0.4% peptone was used in place of corn steep liquor. In certain concentrations, polyoxyethylene alkylamine, cetylpyridine chloride and alkyldimethylbenzylammonium chloride are used at certain times

zugegeben. Die übrigen Kulturbedingungen stimmen mit denen aus Beispiel 11 überein. Nach l20stündiger Kultivierung sind die in Tabelle XIII angegebenen Mengen 5'-Natriuminosinat nachzuweisen.admitted. The other culture conditions are the same as in Example 11. After 120 hours In cultivation, the amounts of 5'-sodium inosinate given in Table XIII are to be detected.

Tabelle XIIITable XIII

Oberflächenaktive Substanz ArtSurface active substance Art

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

EntstandeneArisen

Mengen anAmounts of

5'-Natriuminosinat*)5'-sodium inosinate *)

(mg/ml)(mg / ml)

Polyoxyäthylenalkylamin Polyoxyethylene alkylamine Cetylpyridinchlorid Cetyl pyridine chloride Alkyldimethylbenzylammoniumchlorid Alkyl dimethyl benzyl ammonium chloride

*) Bestimmt als 5'-lnosinsäuredinatriumsalz · 7'/i H₈O.*) Determined as 5'-inosinic acid disodium salt · 7 '/ i H ₈ O.

38 36 3838 36 38

400
200
400400
200
400

Keine ZugabeNo encore

18,6 18,9 19.0 22,918.6 18.9 19.0 22.9

15,815.8

15,015.0

14,714.7

8,98.9

Beispiel 14Example 14

Impfbakterium: Brevibacterium ammoniagenes (ATCC 6871), Fermentationsmedium nach Beispiel 11, jedoch mit nur 2 mg/ml Hypoxanthin. Im übrigen gleiche Kulturbedingungen wie im Beispiel 11. Als oberflächenaktive Substanz wird ein Gemisch aus 40% Polyoxyäthylen und 60% Polypropylen verwendet. Nach 120 Stunden sind die in Tabelle XIV angegebenen Mengen 5'-Natriuminosinat entstanden.Vaccine bacterium: Brevibacterium ammoniagenes (ATCC 6871), fermentation medium according to Example 11, but with only 2 mg / ml hypoxanthine. Otherwise the same culture conditions as in Example 11. As As a surfactant, a mixture of 40% polyoxyethylene and 60% polypropylene is used. After 120 hours, the values in Table XIV indicated amounts of 5'-sodium inosinate were formed.

Tabelle XIVTable XIV Tabelle XVTable XV

Ein Gemisch ausA mixture of ZugabeEncore Mengenamounts EntstandeneArisen 40% Polyoxyäthvlen40% polyoxyethylene mengenamounts
(ylrnW(ylrnW getrockneterdried
BakterienzellenBacterial cells Mengen anAmounts of
5'-Natriüminosinat·'»5'-sodium minosinate · '» undand
60% Polypropylen60% polypropylene 500500 ZugabeEncore 10001000 (mg/ml)(mg / ml) (mg/ml)(mg / ml) zeittime
(StcU(StcU 10001000 25,425.4 1,31.3 1616 15001500 23,223.2 ' 2,2'2.2 10001000 23,923.9 7,57.5 2020th 15001500 21,021.0 6,16.1 Keine ZugabeNo encore 24,324.3 4,04.0 2424 22,022.0 2,62.6 37,237.2 Spurensense

3333

PolyoxyäthylenPolyoxyethylene Mengenamounts Entstandene MengenAmounts created alkylaminalkylamine getrockneterdried an 5'-Natrium-of 5'-sodium ZugabemengenAdded quantities BakterienzellenBacterial cells adenylat·)adenylate) (WmI)(WmI) (mg/ml)(mg / ml) (mg/ml)(mg / ml) 500500 24,924.9 1,081.08 750750 22,122.1 3,933.93 10001000 20,420.4 4,084.08 12501250 18,218.2 2,992.99 Keine ZugabeNo encore 29,329.3 Spurensense

*) Bestimmt als S'-Adenylsäuredinatriumsalz.*) Determined as S'-adenylic acid disodium salt.

*) Bestimmt als S'-Inosinsäuredinatriumsalz ■ 7'/i H₁O.*) Determined as S'-inosinic acid disodium salt ■ 7 '/ i H ₁ O.

Beispiel 15Example 15

Impfbakterium: Micrococcus sodonensis (ATCC 15932); Kulturmedium: 2% Glucose, 0,5% Hefeextrakt, 1,5% Pepton und 0,25% NaCl (Restprozente = Wasser); pH = 7,3. Das Fermentationsmedium: 10% Glucose, 0,6% K₂HPO₄, 0,6% KHgPO₄, 0,6% MgSO₄ · 7H₈O, 0,01% CaCl · 2 H₂O, 5 y/mi Calciumpantothenat, 1 y/ml Thiamin, 30 y/ml Vitamin H, 0,1 % FeSO₄ · 7 H₂O, 1 % Casein-Aminosäuren und 0,6% Harnstoff (Restprozente = Wasser); pH-Wert = 8,0 vor der Sterilisation. Nach 48stündiger Kultivierung werden 20 mg/ml Adenin und nach 30 stündiger Kultivierung noch Polyoxyäthylenalkylamin in verschiedenen Konzentrationen zugegeben. Die übrigen Kulturbedingungen entsprechen denen von Beispiel 11. Nach 96stündiger Kultivierung konnten die ra Tabelle XV angegebenen Mengen 5'-Netriumadenylat gewonnen werden.Vaccine bacterium: Micrococcus sodonensis (ATCC 15932); Culture medium: 2% glucose, 0.5% yeast extract, 1.5% peptone and 0.25% NaCl (residual percentage = water); pH = 7.3. The fermentation medium: 10% glucose, 0.6% K ₂ HPO ₄ , 0.6% KHgPO ₄ , 0.6% MgSO ₄ · 7H ₈ O, 0.01% CaCl · 2 H ₂ O, 5 y / ml calcium pantothenate , 1 y / ml thiamine, 30 y / ml vitamin H, 0.1% FeSO ₄ · 7 H ₂ O, 1% casein amino acids and 0.6% urea (remaining percentage = water); pH = 8.0 before sterilization. After 48 hours of cultivation, 20 mg / ml of adenine and, after 30 hours of cultivation, polyoxyethylene alkylamine in various concentrations are added. The other culture conditions correspond to those of Example 11. After 96 hours of cultivation, the amounts of 5'-netrium adenylate given in Table XV could be obtained.

Beispiel 16Example 16

Es wurden das gleiche Impfbakterium und Kulturmedium wie im Beispiel 15 verwendet; an Stelle von Adenin werden in das Medium nach 48 Stunden jedochThe same vaccine bacterium and culture medium as in Example 15 were used; instead of Adenine will be in the medium after 48 hours, however 2,0 mg/ml Guanin gegeben. Ferner wird Cetylpyridinchlorid nach 30stündiger Kultivierung in unterschiedlichen Konzentrationen hinzugefügt. Die sonstigen Kulturbedingungen entsprechen denen des Beispiels 11. Die nach 96stündiger Kultivierung gewonnenen Men2.0 mg / ml guanine given. Furthermore, cetylpyridine chloride is added in various concentrations after culturing for 30 hours. The others Culture conditions correspond to those of Example 11. The men obtained after 96 hours of cultivation gen an 5'-Natriumguanylat ergeben sich aus Ta belle XVI.genes of 5'-sodium guanylate result from Ta belle XVI.

Tabelle XVITable XVI

Cetylpyridinchlorid ZugabemengenCetyl pyridine chloride Added quantities

(y/ml)(y / ml)

5555

250250

500500

750750

10001000

Keine ZugabeNo encore

Mengenamounts

getrockneterdried

BakterienzellenBacterial cells

(mg/ml)(mg / ml)

22,8 22,0 20,1 19,6 28,722.8 22.0 20.1 19.6 28.7

Entstandene MengenAmounts created

. an 5'-Natrium-. of 5'-sodium

guanylat*)guanylate *)

(mg/ml)(mg / ml)

2,1 4,3 4,7 1,8 Spuren2.1 4.3 4.7 1.8 sense

*) Bestimmt als 5'-Guanylsäun:dinatriumsalz.*) Determined as 5'-guanyl acid: disodium salt.

Claims (1)

Patentanspruch:Claim: Verfahren zur Herstellung von 5'-Purianucleotiden durch Fermentation von Mikroorganismen in einem wäßrigen Nährmedium, das heben üblichen Mengen an Kohlenstofflieferaiiien, Stickstoffquellen, anorganischen Salzen und Vitamin H auchProcess for the production of 5'-purianucleotides by fermentation of microorganisms in an aqueous nutrient medium that has the usual amounts of carbon supplies, nitrogen sources, inorganic salts and vitamin H too größere Mengen wachstumsfördernder Substanzen sowie Eisen- und Mangansalze enthalten kann, in Gegenwart einer dem 5'-Purinnucleotid entsprechenden Purinbase als Vorläufer, dadurch gekennzeichnet, daß man als Mikroorganismen Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6871 und 6872 oder Micrococcus sodonensis ATCC 15 932 verwendet und dem Fermentationsmediuir ein Antibioticum oder eine oberflächenaktive Sub· stanz in der Periode des logarithmischen Wachstums der Mikroorganismen oder kurz danacr zugibt.may contain larger amounts of growth-promoting substances as well as iron and manganese salts, in Presence of a purine base corresponding to the 5'-purine nucleotide as a precursor, thereby characterized in that the microorganisms Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6871 and 6872 or Micrococcus sodonensis ATCC 15 932 and the fermentation medium an antibiotic or a surface-active substance in the period of logarithmic growth the microorganisms or briefly danacr admits.