DE1292883B - Polymeric release agent in the form of gel cores swollen in a solvent - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft ein polymeres, in Form von Gelkörnern, welche in einem Lösungsmittel gequollen sind, vorliegendes Trennmittel zur Trennung von in Lösung befindlichen Stoffen, deren Molekulargewichtsdifferenz mehr als 100 beträgt, auf der Basis der Gelfiltrationsmethode. The invention relates to a polymer, in the form of gel grains, which are swollen in a solvent, present release agent for the separation of substances in solution with a molecular weight difference of more than 100, based on the gel filtration method.

Es ist bekannt, Stoffe verschiedener Molekülgröße mittels einer Schicht aus natürlichen oder in Wasser gequollenen Stärkekörnern aus wäßrigen Lösungen zu trennen. Dieses Verfahren weist jedoch mehrere beträchtliche Nachteile auf, und zwar in erster Linie deshalb, weil Stärke bis zu einem gewissen Grade in Wasser löslich ist, weil sie unbeständig ist und weil sie demDurchfluß durch damit gefüllte Säulen einen großen Widerstand entgegensetzt. Daher sind die getrennten Präparate immer durch Stärke verunreinigt, und die Schicht aus Stärkekörnern degeneriert rasch und wird zu einer schmierigen Masse. It is known to use a layer of substances of different molecular sizes from natural or water-swollen starch granules from aqueous solutions separate. However, this method suffers from several significant disadvantages, and primarily because starch is in water to a certain extent is soluble because it is inconsistent and because it allows the flow through the filled with it Opposed a great resistance to pillars. Hence the separate preparations always contaminated with starch, and the starch granule layer rapidly degenerates and becomes a greasy mass.

Bekannt ist ferner die Trennung von Stoffen mittels Ionenaustauschern, wie z. B. Reaktionsprodukten aus Natriumcellulose, Epichlorhydrin und Triäthanolamin, wobei man sich das Adsorptionsvermögen der elektrisch geladenen Teilchen zunutze macht (vgl. Nature, London, Bd. 178, 1956, S. 767 bis 771; Acta Chim. The separation of substances by means of ion exchangers is also known, such as B. reaction products from sodium cellulose, epichlorohydrin and triethanolamine, using the adsorptive capacity of the electrically charged particles makes (cf. Nature, London, Vol. 178, 1956, pp. 767 to 771; Acta Chim.

Scand., Bd. 11, 1957, S. 512; Biochim. Biophys. Acta, Bd. 24, 1957, S. 448).Scand., Vol. 11, 1957, p. 512; Biochim. Biophys. Acta, Vol. 24, 1957, P. 448).

Weiterhin ist die auf einer Siebwirkung beruhende Trennung von Stoffen mittels Zeolithen bekannt (vgl. Furthermore, the separation of substances based on a sieve effect known by means of zeolites (cf.

Chemie für Labor und Betrieb, Bd. 6, 1955, S. 471 und 472).Chemie für Labor und Betrieb, Vol. 6, 1955, pp. 471 and 472).

Gegenstand vorliegender Erfindung ist nun ein polymeres, in Form von in einem Lösungsmittel gequollenen Gelkörnern vorliegendes Trennmittel zur Trennung von in Lösung befindlichen Stoffen, deren Molekulargewichtsdifferenz mehr als 100 beträgt, auf der Basis der Gelfiltrationsmethode, das dadurch gekennzeichnet ist, daß es aus einem Mischpolymerisat einer ungeladenen organischen, Hydroxylgruppen enthaltenden Verbindung mit einer bifunktionellen Verbindung der Formel X-R-Z, worin R eine C8- bis ClO-Alkylgruppe bedeutet und X und Z je ein Halogenatom oder eine Epoxygruppe darstellen, besteht, wobei das Mischpolymerisat in Wasser unlöslich, jedoch darin quellbar ist, sein Quellvermögen einem Wasserwiedergewinn von 1 bis 50 g/g. des trockenen Gelproduktes entspricht und der Gehalt an Hydroxylgruppen in den Gelkörnern mindestens 12 Gewichtsprozent beträgt. The present invention is now a polymer in form separating agent for separation from gel grains swollen in a solvent of substances in solution with a molecular weight difference of more than 100 is based on the gel filtration method, which is characterized by that it consists of a copolymer of an uncharged organic hydroxyl group containing compound with a bifunctional compound of the formula X-R-Z, wherein R denotes a C8- to ClO-alkyl group and X and Z each represent a halogen atom or a Represent epoxy group, consists, the copolymer being insoluble in water, however, is swellable therein, its swelling capacity has a water recovery of 1 to 50 g / g. of the dry gel product and the content of hydroxyl groups in the gel granules is at least 12 percent by weight.

Diese Gelkörner sind in dem Lösungsmittel unlöslich, können jedoch darin quellen; sie sind unelektrisch und verhalten sich gegenüber den zu trennenden Substanzen inert. Ein Gel, das diese Zusammensetzung und Struktur hat, ist äußerst beständig und haltbar und besitzt ein hohes Trennvermögen. Ferner ist es möglich, dieses Trennvermögen innerhalb weiter Grenzen zu variieren. These gel grains are insoluble in the solvent, but can swell in it; they are non-electric and behave towards those to be separated Substances inert. A gel that has this composition and structure is extreme stable and durable and has a high separating power. It is also possible to vary this separation ability within wide limits.

Gegenüber einem (anorganischen) Zeolith-Trennmittel liegt der Vorteil vorliegenden Trennmittels darin, daß mit ersterem nur Gemische sehr kleiner Molekulargewichte aufgetrennt werden können, während mit dem erfindungsgemäßen Trennmittel Substanzen hohen Molekulargewichts von niedermolekularen Anteilen abgetrennt werden können, wobei man sich in beiden Fällen die Siebwirkung der Trennmittel zunutze macht und eine Auftrennung nach der Molekülgröße erfolgt, jedoch bei Zeolithen keine Elutionstechnik zur Anwendung gelangen kann. Gegenüber einem Ionenaustauscher, der auf Adsorptionsbasis arbeitet und ebenfalls zur Trennung von hochmulekolaren Substanzen, wie z. B. Enzymen, verwendet werden kann, liegt der Vorteil vorliegenden Trennmittels darin begründet, daß mit ihm eine Trennung von Stoffen nach der Molekülgröße durchführbar ist, ungeachtet dessen, ob die zu trennenden Substanzen elektrisch neutral oder geladen sind. It has the advantage over an (inorganic) zeolite release agent present release agent is that with the former only mixtures of very small molecular weights Can be separated, while substances with the release agent according to the invention high molecular weight can be separated from low molecular weight fractions, whereby one makes use of the sieving effect of the separating agent in both cases and a separation takes place according to the molecular size, but no elution technique in the case of zeolites can be used. Compared to an ion exchanger based on adsorption is working and also for the separation of high molecular weight substances, such as. B. enzymes, can be used, the advantage of this release agent is based on regardless of the fact that it can be used to separate substances according to their molecular size whether the substances to be separated are electrically neutral or charged.

Zweckmäßig wird die Trennung mit dem erfindungsgemäßen Trennmittel so durchgeführt, daß man eine wäßrige Lösung der zu trennenden Stoffe mit unterschiedlichen Molekülgrößen oben auf eine Schicht aus gequollenen Gelkörnern der beschriebenen Art, die sich in einer in ein wäßriges Medium getauchten Säule befinden, aufbringt. Aus der Säule wird Flüssigkeit abgezogen, um die Lösung mit der Gelkörnerschicht in Berührung zu bringen. Hierbei verteilen sich die in der Lösung befindlichen Stoffe verschiedener Molekülgrößeninfolge ihrerje nachihrer Molekülgröße unterschiedlichen Fähigkeit, in die Gelkörner einzudringen, unterschiedlich zwischen den Gelkörnern und der umgebenden Lösung, worauf anschließend zwecks Verdrängung der Flüssigkeit aus der Schicht eine wäßrige Flüssigkeit (Eluierungsflüssigkeit) in die Schicht gebracht wird und die aufeinanderfolgenden Fraktionen der verdrängten, aus der Schicht herausfließenden Flüssigkeit (des Ausflusses) aufgefangen werden, wodurch man eine Fraktion erhält, die einen größeren Teil der Stoffe mit größerer Molekulargröße und danach eine Fraktion gewinnt, die einen größeren Teil des Stoffes mit kleinerer Molekülgröße enthält. The separation with the release agent according to the invention is expedient carried out so that an aqueous solution of the substances to be separated with different Molecular sizes on top of a layer of swollen gel grains of the type described Art, which are located in a column immersed in an aqueous medium, applies. Liquid is withdrawn from the column to make up the solution with the gel granule layer to bring in touch. The substances in the solution are distributed here different molecular sizes due to their different depending on their molecular size Ability to penetrate the gel grains, different between the gel grains and the surrounding solution, followed by the purpose of displacing the liquid from the layer an aqueous liquid (eluting liquid) into the layer is brought and the successive fractions of the displaced, from the layer Outflowing liquid (the discharge) can be caught, creating a Fraction receives which a larger part of the substances with larger molecular size and then a faction wins which takes a larger part of the material with smaller ones Contains molecular size.

Mit den Bezeichnungen wäßrige Lösung«, »wäßriges Medium« und »wäßrige Flüssigkeit « ist hierbei gemeint, daß das Wasser den Hauptbestandteil des Lösungsmittels ausmacht; es kann aber natürlich auch eine bestimmte Menge eines wasserlöslichen organischen Lösungsmittels, wie Alkohole und Ketone, z. B. niedere aliphatische Alkohole und Ketone, enthalten. Auch braucht das »wäßrige Medium« bzw. «die wäßrige Flüssigkeit « nicht nur aus dem wasserhaltigen Lösungsmittel zu bestehen, sondern sie kann auch eine bestimmte Menge gelöster Stoffe, z. B. Salze enthalten, um in der Flüssigkeit eine geeignete lonenkonzentration herzustellen und aufrechtzuerhalten, oder Puffersubstanzen, um einen geeigneten pH-Wert zu erzielen. Beispiele der erstgenannten Art von Substanzen sind Natriumchlorid und Ammoniumsulfat, und Beispiele der zweitgenannten Art sind wasserlösliche Acetate, Phosphate, Chlorate, Essigsäure, Chloressigsäuren, Salzsäure und Pyridin. With the designations aqueous solution "," aqueous medium "and" aqueous Liquid "is meant here that the water is the main component of the solvent matters; But of course there can also be a certain amount of a water-soluble one organic solvents such as alcohols and ketones, e.g. B. lower aliphatic Alcohols and ketones. The "aqueous medium" or "the aqueous medium" also needs Liquid «to consist not only of the water-containing solvent, but it can also contain a certain amount of solutes, e.g. B. contain salts to in to establish and maintain a suitable ion concentration in the liquid, or buffer substances to achieve a suitable pH. Examples of the former Kind of substances are sodium chloride and ammonium sulfate, and examples of the latter Type are water-soluble acetates, phosphates, chlorates, acetic acid, chloroacetic acids, Hydrochloric acid and pyridine.

Die Fähigkeit der beschriebenen Gelprodukte in einem wäßrigen Medium zu quellen, beruht auf der Gegenwart von Hydroxylgruppen und Ätherbrücken. The ability of the described gel products in an aqueous medium swelling relies on the presence of hydroxyl groups and ether bridges.

Diese Quellfähigkeit läßt sich durch die in Gramm angegebene Menge Wasser ausdrücken, die durch 1 g des trockenen Gels absorbiert wird, was als sogenannter «Wasserwiedergewinn« bekannt ist. Der Wasserwiedergewinn der erfindungsgemäß verwendeten Gelprodukte liegt bei etwa 1 bis 50 g/g des trockenen Gelproduktes, im allgemeinen etwa 1,0 bis 20 g/g des trockenen Gelproduktes. Gelprodukte der beschriebenen Art können durch Polymerisation unelektrischer, organischer Hydroxylgruppen enthaltender Stoffe mit bifunktionellen organischen Stoffen, die Halogenatome und/oder Epoxygruppen enthalten, hergestellt werden. Beispiele von für diese Umsetzung geeigneten, Hydroxylgruppen enthaltenden Stoffen sind: Polysaccharide, z. B. Dextran, Stärke, Dextrin, Cellulose, Polyglukose oder Hydroxylgruppen enthaltende Derivate dieser Stoffe, wie Äthyloxyäthylcellulose oder durch eine teilweise Depolymerisation derselben erhaltene Produkte sowie deren Fraktionen, ferner Polyvinylalkohol, Zuckeralkohole, z. B. Sorbit und Kohlehydrate, z. B. Rohrzucker.This swelling capacity can be expressed in terms of the amount given in grams Express water, which is absorbed by 1 g of dry gel, what is called the so-called "Water recovery" is known. The water recovery of those used according to the invention Gel products is about 1 to 50 g / g of the dry gel product, generally about 1.0 to 20 g / g of the dry gel product. Gel products of the type described can by polymerizing non-electrical, organic hydroxyl-containing groups Substances with bifunctional organic substances, the halogen atoms and / or epoxy groups included. Examples of hydroxyl groups suitable for this reaction containing substances are: Polysaccharides, z. B. dextran, starch, dextrin, cellulose, Containing polyglucose or hydroxyl groups Derivatives of these substances, like Äthyloxyäthylcellulose or by a partial depolymerization of the same products obtained and their fractions, furthermore polyvinyl alcohol, sugar alcohols, z. B. sorbitol and carbohydrates, e.g. B. cane sugar.

Beispiele von für diese Umsetzung geeigneten bifunktionellen Verbindungen sind: Epichlorhydrin, Dichlorhydrin, Diepoxybutan, Bisepoxypropyläther, Äthylenglykol-bis-epoxypropyläther und 1,4-Butandiol-bis-epoxypropyläther. Examples of bifunctional compounds suitable for this reaction are: epichlorohydrin, dichlorohydrin, diepoxybutane, bisepoxypropyl ether, ethylene glycol bis-epoxypropyl ether and 1,4-butanediol bis-epoxypropyl ether.

Die Mischpolymerisation dieser organischen, Hydroxylgruppen enthaltenden Stoffe und der bifunktionellen Substanzen geht leicht vor sich, wenn man die Komponenten in wäßriger Lösung in Gegenwart eines alkalisch reagierenden Stoffes als Katalysator umsetzt. The interpolymerization of these organic, hydroxyl-containing Substances and the bifunctional substances is easy going on when you look at the components in aqueous solution in the presence of an alkaline substance as a catalyst implements.

Beispielsweise erhält man ein äußerst brauchbares Gelprodukt dadurch, daß man Dextran mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 5000 bis 100 000 mit Epichlorhydrin zu einem ein dreidimensionales makroskopisches Netzwerk aufweisenden Mischpolymerisat umsetzt, das aus Ketten von hauptsächlich cc-1,6-glycosidisch gebundenen Glukoseresten besteht, die über Ätherbrücken der Formel -O-CH, CH(OH) CH,-O-miteinander verbunden sind. Dieses Gel hat einen Gehalt an Hydroxylgruppen von mindestens 15 °/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen Wasserwiedergewinn von etwa 1 bis 50 g/g des trockenen Gelproduktes. For example, an extremely useful gel product is obtained by that one dextran with an average molecular weight of 5000 to 100,000 with epichlorohydrin to form a three-dimensional macroscopic network Copolymer converts, which consists of chains of mainly cc-1,6-glycosidically bonded Glucose residues are made up of ether bridges of the formula -O-CH, CH (OH) CH, -O- with one another are connected. This gel has a hydroxyl group content of at least 15 % Of the weight of the dry gel and a water recovery of about 1 to 50 g / g of the dry gel product.

Ein weiteres Beispiel ist ein Gel, das durch Umsetzung von handelsüblichem weißem Dextrin mit Epichlorhydrin gewonnen wird. Dabei erhält man ein aus einem dreidimensionalen makroskopischen Netzwerk bestehendes Mischpolymerisat, das aus Ketten von hauptsächlich oc-1, 4-glycosidisch gebundenen Glukoseresten besteht, die über Ätherbrücken der Formel -O-CH, CH (OH) CH2-omiteinander verbunden sind. Dieses Gel weist einen Gehalt an Hydroxylgruppen von mindestens 150/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen verhältnismäßig niedrigen Wasserwiedergewinn von im wesentlichen 1 bis 20 g/g des trockenen Gelproduktes auf. Another example is a gel that is made by implementation of commercially available white dextrin is obtained with epichlorohydrin. You get one out of one three-dimensional macroscopic network existing copolymer, which consists of Consists of chains of mainly oc-1,4-glycosidically bound glucose residues, which are connected to each other via ether bridges of the formula -O-CH, CH (OH) CH2-om. This gel has a hydroxyl group content of at least 150% by weight of the dry gel and a relatively low water recovery of im essentially 1 to 20 g / g of the dry gel product.

Auf ähnliche Weise kann weiter ein Gelprodukt der gleichen Grundstruktur aus Kartoffelstärke und Epichlorhydrin hergestellt werden. Dieses Gel hat einen höheren Wasserwiedergewinn, d. h. 10 bis 50 g/g des trockenen Gelproduktes. Similarly, a gel product of the same basic structure can also be used made from potato starch and epichlorohydrin. This gel has one higher water recovery, d. H. 10 to 50 g / g of the dry gel product.

Weiterhin kann ein geeignetes Gelprodukt durch Umsetzung von Sorbit mit Epichlorhydrin hergestellt werden. Dabei erhält man ein Mischpolymerisat aus einem dreidimensionalen makroskopischen Netzwerk aus Sorbitresten, die über Ätherbrücken -O-CH, CH(OH) CH2-O-miteinander verbunden sind und einen Gehalt an Hydroxylgruppen von etwa 15°/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen Wasserwiedergewinn von etwa 1 bis 30 g/g aufweisen. Dieses Mischpolymerisat eignet sich besonders für Fälle, in denen das Gel mit einer Flüssigkeit von verhältnismäßig hoher Azidität, z. B. bei Verwendung von Salzsäure als Puffersubstanz, in Berührung kommt. Furthermore, a suitable gel product can be obtained by reacting sorbitol be made with epichlorohydrin. A copolymer is obtained from this a three-dimensional macroscopic network of sorbitol residues, which via ether bridges -O-CH, CH (OH) CH2-O- are linked together and contain hydroxyl groups of about 15% the weight of the dry gel and a water recovery of about 1 to 30 g / g. This copolymer is particularly suitable for cases in which the gel is treated with a liquid of relatively high acidity, e.g. B. when using hydrochloric acid as a buffer substance, comes into contact.

Die vorgenannten Gelprodukte, die zur Herstellung der Gelschicht verwendet werden, werden bis zu einer Teilchengröße von 0,1 bis 2,0 mm, z. B. von etwa 0,05 bis 0,5 mm, vorzugsweise so klein gemahlen, daß sie ein Sieb mit einer Maschenweite von 56 bis 6560 Maschen je Quadratzentimeter passieren. The aforementioned gel products that are used to produce the gel layer are used up to a particle size of 0.1 to 2.0 mm, e.g. B. from approximately 0.05 to 0.5 mm, preferably ground so small that it is a sieve with a Mesh size of 56 to 6560 meshes per square centimeter pass.

Die Trennfähigkeit der Gelkörper hängt einerseits von der Molekülgröße der zu trennenden Stoffe und andererseits von der Porengröße oder Maschenweite des dreidimensionalen Netzwerkes des Gelproduktes ab. Die in der wäßrigen Lösung befindlichen Stoffe, deren Molekülgrößen zu groß sind, um ein Eindringen in die Gelkörner zu gestatten, verbleiben in der Lösung und passieren die Schicht außerhalb der Gelkörner. The separability of the gel body depends on the one hand on the size of the molecule the substances to be separated and, on the other hand, the pore size or mesh size of the three-dimensional network of the gel product. Those in the aqueous solution Substances whose molecular sizes are too large to penetrate the gel grains allow to remain in the solution and pass the layer outside the gel grains.

Sie werden in der ersten Fraktion oder den ersten Fraktionen aufgefangen, während die Stoffe, deren Molekülgrößen klein genug sind, um ein Eindringen in die Gelkörner zu gestatten, zeitweilig von den Körnern aufgenommen werden, so daß eine Trennung von den größeren Molekülen möglich wird und sie in den nachfolgenden Fraktionen aufgefangen werden können.You will be caught in the first fraction or the first fractions, while the substances whose molecular sizes are small enough to penetrate the To allow gel grains to be temporarily taken up by the grains, so that a Separation of the larger molecules becomes possible and they move into subsequent fractions can be caught.

Die Gelkörnerschicht findet vorzugsweise als Säule Anwendung, wie die folgenden Beispiele zeigen. The gel granule layer is preferably used as a column, such as the following examples show.

Beispiel 1 Ein Rohr mit einem Durchmesser von 3,5 cm und einer Höhe von 50 cm wurde mit 100 g (Trockengewicht) von im Wasser gequollenen Gelkörnern (die in trockenem Zustand eine solche Teilchengröße aufweisen, daß sie ein Sieb mit einer Maschenweite zwischen 1650 und 1760 bis 6560 je Quadratzentimeter passieren. Wasserwiedergewinn: 2,6 g/g des trockenen Gels = WW 2,6) gefüllt. Die Gelkörner waren durch Umsetzung von Dextran mit einem durchschnittlichem Molekulargewicht (Mw) von 40 000 und Epichlorhydrin hergestellt. Das Rohr wurde teilweise mit Wasser gefüllt, bevor die Gelkörner eingebracht wurden, und zwar so, daß letztere mit Wasser bedeckt waren. Während des Einfüllens der Körner ließ man Wasser mit gleichmäßiger Geschwindigkeit aus dem Rohr ausfließen, bis der obere Wasserspieg:l in der gepackten Gelschicht praktisch verschwand. Das Gesamtvolumen der gepackten Gelschicht betrug 390 ccm und der Leerraum 130 ccm. Anschließend wurden 5 ccm einer wäßrigen Lösung, die 10 0/o eines für klinische Zwecke bestimmten Dextrans (Molekulargewicht = 75 000) und 10 0/o Glukose enthielt auf die Schicht gebracht, wonach diese mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 84 ccm je Stunde eluiert wurde. Der Ausfluß wurde mittels eines Fraktionensammlers in Fraktionen von etwa 7 ccm aufgefangen, die dann jede für sich analysiert wurden. Die ersten 130 ccm des Ausflusses, die dem Leerraum entsprachen, enthielten Wasser. Die zwischen 130 und 170 ccm liegende Menge des Ausflusses enthielt Dextran und die zwischen 240 und 330 ccm liegende Menge Glukose. Es wurde eine quantitative Ausbeute erzielt. Example 1 A pipe with a diameter of 3.5 cm and a height of 50 cm was mixed with 100 g (dry weight) of gel grains swollen in water (which, in the dry state, have such a particle size that they form a sieve with a mesh size between 1650 and 1760 to 6560 per square centimeter. Water recovery: 2.6 g / g of dry gel = WW 2.6) filled. The gel grains were by reacting dextran with an average molecular weight (Mw) of 40,000 and epichlorohydrin. The pipe was partially filled with water filled before the gel grains were introduced, in such a way that the latter with water were covered. During the filling of the grains, water was let out with more uniform Velocity flow out of the pipe until the upper water level: l in the packed Gel layer practically disappeared. The total volume of the packed gel layer was 390 cc and the empty space 130 cc. Then 5 ccm of an aqueous solution, the 10 0 / o of a dextran intended for clinical purposes (molecular weight = 75 000) and 10 0 / o contained glucose applied to the layer, after which this with water was eluted at a rate of 84 cc per hour. The discharge was collected by means of a fraction collector in fractions of about 7 ccm, which then each individually analyzed. The first 130 cc of the discharge leading to the empty space corresponded, contained water. The amount of des The discharge contained dextran and an amount of glucose between 240 and 330 cc. A quantitative yield was achieved.

Beispiel 2 Auf eine Säule, die der im Beispiel 1 verwendeten entsprach, wurden 15 ccm einer wäßrigen Lösung gebracht, die 0,18 g Hämoglobin und 4,5 g Ammoniumsulphat enthielt. Anschließend wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 66 ccm je Stunde eluiert. Example 2 On a column similar to that used in Example 1, 15 cc of an aqueous solution were added containing 0.18 g of hemoglobin and 4.5 g of ammonium sulphate contained. Then was with water at a speed of 66 ccm each Eluted hour.

Die zwischen 130 und 230 ccm liegende Menge des Ausflusses enthielt Hämoglobin und die zwischen 230 und 340 ccm liegende Menge Ammoniumsulphat. Es wurde eine quantitative Ausbeute erzielt.The amount of discharge contained between 130 and 230 cc Hemoglobin and the amount of ammonium sulphate between 230 and 340 ccm. It was achieved a quantitative yield.

Beispiel 3 Eine rohrförmige Säule mit einem Durchmesser von 7,2 cm und einer Höhe von 50 cm wurde wie im Beispiel 1 mit 300 g (Trockengewicht) von in Wasser gequollenen Gelkörnern (die in trockenem Zustand eine solche Teilchengröße aufweisen, daß sie ein Sieb mit einer Maschenweite von 400 bis zwischen 1600 und 1760 je Quadratzentimeter passieren. Wasserwiedergewinn: 4,9) gepackt. Die Körner waren durch Umsetzung von Dextran (Molekulargewicht = 40000) mit Epichlorhydrin hergestellt worden. Das Gesamtvolumen der aus der Gelsubstanz gebildeten Schicht betrug 2000 ccm, der Leerraum 650 ccm. Example 3 A tubular column 7.2 cm in diameter and a height of 50 cm was as in Example 1 with 300 g (dry weight) of gel grains swollen in water (which in the dry state have such a particle size have that they have a sieve with a mesh size of 400 to between 1600 and Pass 1760 per square centimeter. Water recovery: 4.9) packed. The grains were by reacting dextran (molecular weight = 40,000) with epichlorohydrin has been manufactured. The total volume of the layer formed from the gel substance was 2000 cc, the empty space was 650 cc.

Auf die Schicht wurden 100ccm einer 100/dien wäßrigen Lösung einer Dextranfraktion mit einem Molekulargewicht von 4000 gebracht, wonach mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 240ccm je Stunde eluiert wurde. Die ersten 650 ccm des Ausflusses, die dem Leerraum entsprachen, wurden weg gegossen, wonach mittels eines Fraktionensammlers 100 Fraktionen von je 17 ccm aufgefangen wurden. 100ccm of a 100 / diene aqueous solution of a Dextran fraction with a molecular weight of 4000 brought, after which with water was eluted at a rate of 240cc per hour. The first 650 cc of the discharge, which corresponded to the empty space, were poured away, after which by means of a fraction collector 100 fractions of 17 ccm each were collected.

Durch Umsetzung mit Anthron wurde die in jeder einzelnen Fraktion enthaltene Menge an Kohlehydrat bestimmt. Die Fraktionen 8 bis einschließlich 95 enthielten. Kohlehydrat. Das Molekulargewicht Mn (= durchschnittliche Molekulargewichtszahi < Mw) wurde für jede fünfte Fraktion bestimmt, in der der Gehalt an Substanzen genügend hoch. war. Hierfür wurden folgende Werte erhalten: 5000, 4600, 4300, 4300, 3100, 2900, 2200, 1700, 1600, 1300, 950, 610, -400 und 180.By reacting with anthrone it was found in each individual faction The amount of carbohydrate contained is determined. Fractions 8 to 95 inclusive contained. Carbohydrate. The molecular weight Mn (= number average molecular weight <Mw) was determined for every fifth fraction in which the content of substances high enough. was. The following values were obtained for this: 5000, 4600, 4300, 4300, 3100, 2900, 2200, 1700, 1600, 1300, 950, 610, -400 and 180.

Beispiel 4 Eine rohrförmige Säule mit einem Durchmesser von 2 cm und einer Höhe von 40 cm wurde wie im Beispiell mit 7 g (Treckengewicht) Gelkörnern (Wasserwiedergewinn 10,0) gepackt. Die Gelkörner ließ man zuvor in als Puffersubstanz verwendetem 0, 1molarem Natriumphosphat mit einem pH-Wert von 7 quellen. Example 4 A tubular column 2 cm in diameter and a height of 40 cm was as in the example with 7 g (total weight) gel grains (Water recovery 10.0) packed. The gel grains were previously left in as a buffer substance used 0.1 molar sodium phosphate with a pH of 7 swell.

Die Gelsubstanz wurde durch Umsetzung von Äthyloxyäthylcellulose und Äthylenglykol-bis-epoxypropyläther hergestellt. Das Gesamtvolumen der Gelschicht -betrug 105 ccm und das des Leerraumes 38 cm. Auf die Schicht wurden 5 ccm einer wäßrigen Lösung von 60 mg Hämoglobin und 1,5 g Ammoniumsulphat in einer Phosphatpuffersubstanz gebracht, wonach mit einer Phosphatpuffersubstanz (0,1 molar-pH-Wert = 7) eluiert wurde. In dem Eluat erschienen Hämoglobin in Phosphatpuffersubstanz zwischen 40 und 55 ccm und Ammoniumsulphat in Phosphatpuffersubstanz zwischen 55 und 105 ccm.The gel substance was made by reaction of Äthyloxyäthylcellulose and Ethylene glycol bis-epoxypropyl ether produced. The total volume of the gel layer -was 105 cc and that of the empty space was 38 cm. On top of the layer were 5 cc aqueous solution of 60 mg hemoglobin and 1.5 g ammonium sulphate in a phosphate buffer substance brought, after which with a phosphate buffer substance (0.1 molar pH = 7) eluted became. In the eluate, hemoglobin appeared in phosphate buffer substance between 40 and 55 cc and ammonium sulphate in phosphate buffer substance between 55 and 105 cc.

Beispiel 5 Eine Säule mit einem Durchmesser von 4 cm und einer Höhe von 26 cm wurde wie im Beispiel 1 mit 15g (Trockengewicht) von im Wasser gequollenen Gelkörnern (Wasserwiedergewinn 16,0), die durch Umsetzung von Polyvinylalkohol und Epichlorhydrin hergestellt worden waren, gefüllt. Das Gesamtvolumen der Gelkörnerschicht betrug 330 ccm und das des Leerraums 120 ccm. Um festzustellen, wie weit es möglich ist, Dextran zu fraktionieren, d. h. polydisperse Dextranstoffe zu trennen, wurde die Verteilung von vier Dextransubstanzen in vier getrennten Versuchen bestimmt. Example 5 A column 4 cm in diameter and height of 26 cm was as in Example 1 with 15g (dry weight) of swollen in water Gel grains (water recovery 16.0) obtained by reacting polyvinyl alcohol and Epichlorohydrin had been made filled. The total volume of the gel granule layer was 330 cc and that of the void was 120 cc. To see how far it is possible is to fractionate dextran, d. H. to separate polydisperse dextran substances the distribution of four dextran substances was determined in four separate experiments.

Bei jedem dieser Versuche wurden 5 ccm einer 100/0eigen Lösung der jeweiligen im Wasser gelösten Substanz auf die Säule gebracht und jedesmal mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 20 ccm je Stunde eluiert. Der Ausfluß aus der Säule wurde mittels eines Fraktionensammlers in Fraktionen aufgefangen. In den beiden ersten Versuchen, die mit einer Dextransubstanz mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 1 800 000 bzw. 300 000 durchgeführt wurden, erschien das Dextran in dem Ausfluß, nachdem die dem Leerraum entsprechende Menge Ausfluß abgezogen worden war. In each of these experiments 5 cc of a 100/0 solution of the each substance dissolved in the water is brought onto the column and each time with water eluted at a rate of 20 cc per hour. The outflow from the column was collected in fractions by means of a fraction collector. In both first attempts, those with a dextran substance with an average molecular weight of 1,800,000 and 300,000 respectively, the dextran appeared in the effluent, after the amount of effluent corresponding to the void has been withdrawn.

In dem dritten Versuch, der unter Verwendung einer Dextransubstanz mit einem Molekulargewicht von 40 000 erfolgte, war der Hauptteil des Dextrans in dem Ausfluß enthalten, der nach Abzug einer dem Leerraum entsprechenden Menge folgte, und ein kleinerer Teil erschien später. In dem vierten Versuch mit einer Dextransubstanz mit einem Molekulargewicht von 20 000 erschien ein kleinerer Teil des Dextrans in dem Ausfluß, der nach Abzug einer dem Leerraum entsprechenden Menge Ausfluß folgte. Die Hauptmenge des Dextrans kam später. Wie aus diesen Versuchen hervorgeht, ermöglicht das vorliegende Verfahren eine Fraktionierung derartiger Dextransubstanzen in mindestens zwei Gruppen, wobei eine ein Molekulargewicht von mehr als 20 000 bis 40 000 und die andere ein Molekulargewicht von weniger als 20000 bis 40 000 hat. In the third attempt, the one using a dextran substance at a molecular weight of 40,000, most of the dextran was in contain the discharge that followed after subtracting an amount corresponding to the empty space, and a smaller part appeared later. In the fourth attempt with a dextran substance with a molecular weight of 20,000, a minor part of the dextran appeared in the effluent that followed after subtracting an amount equal to the void. Most of the dextran came later. As can be seen from these experiments, made possible the present method a fractionation of such dextran substances in at least two groups, one having a molecular weight of more than 20,000 to 40,000 and the other has a molecular weight of less than 20,000 to 40,000.

Beispiel 6 Eine Säule mit einem Durchmesser von 4 cm wurde mit 32 g (Trockengewicht) Gelkörnern (die eine solche Teilchengröße besitzen, daß sie durch ein Sieb mit einer Maschenweite von zwischen 1600 und 1760 bis 6560 je Quadratzentimeter passieren. Wasserwiedergewinn 6) gepackt. Diese Gelkörner waren durch- Umsetzung von Stärke mit Glycerin-1,3-Dichlorhydrin hergestellt worden. Die Gesamtmenge der Gelschicht betrug 314 ccm. In die Säule wurden 5 ccm einer wäßrigen Lösung eingebracht, die 200 mg menschliches Serumalbumin und 200 mg Natriumchlorid enthielt Die Schicht wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 120 ccm je Stunde eluiert und Fraktionen von 5,5 ccm wurden aufgefangen. Das Albumin erschien in dem Eluat zwischen 95 und 140 ccm -und das Salz zwischen 270 und 330 ccm. Example 6 A column with a diameter of 4 cm was fitted with 32 g (dry weight) of gel grains (which have such a particle size that they can pass through a sieve with a mesh size of between 1600 and 1760 to 6560 per square centimeter happen. Water recovery 6) packed. These gel grains were through-implementation of starch with glycerol-1,3-dichlorohydrin. The total amount of Gel layer was 314 cc. 5 ccm of an aqueous solution were introduced into the column, which contained 200 mg human serum albumin and 200 mg sodium chloride The layer was eluted with water at a rate of 120 cc per hour and fractions 5.5 cc were collected. The albumin appeared in the eluate between 95 and 140 cc - and the salt between 270 and 330 cc.

Beispiel 7 Eine Säule mit einem Durchmesser von 3 cm wurde bis zu einer Höhe von 45 cm mit gequollenem pulverförmigem Gel (mit einer solchen Teilchengröße, daß dieses ein Sieb mit einer Maschenweite von 6560 bis 22 500 je Quadratzentimeter passierte. Wasserwiedergewinn: 4,9) gefüllt. Dieses Gel wurde zuvor durch Umsetzung von Dextran (Molekulargewicht = 40000) mit Epichlorhydrin hergestellt. Die Schicht aus der G elsubstanz wurde mit Phosphatpuffer (Ionenkonzentration = 0,03-pH-Wert = 7,03) gewaschen, bis ein Gleichgewicht erreicht wurde. Dann führte man 25 ccm frisches menschliches Serum und anschließend Phosphatpuffer in die Schicht ein. Der Ausfluß wurde in einem Fraktionssammler, in dem die Rohre alle 15 Minuten gewechselt wurden, so daß man eine Fließgeschwindigkeit von 28 ccm je Stunde erzielte, in Fraktionen von 7 ccm aufgefangen. In jeder Fraktion wurde Protein (nach F o 1 i n-L o w r y), Aminosäuren, Peptide und nukleotides Material ermittelt (die Peptide durch Ninhydrin und das nukleotide Material durch Ultraviolettabsorption). Das Protein erhielt man in den Fraktionen 5 bis 12, die Peptide und die Aminosäuren in den Fraktionen 20 bis 40 und das nukleotide Material in den Fraktionen 42 bis 60. Example 7 A column with a diameter of 3 cm was made up to a height of 45 cm with swollen powdery gel (with such a particle size, that this is a sieve with a mesh size of 6560 to 22,500 per square centimeter happened. Water recovery: 4.9) filled. This gel was previously made by implementation made of dextran (molecular weight = 40,000) with epichlorohydrin. The layer the gel substance was converted into phosphate buffer (ion concentration = 0.03 pH value = 7.03) washed until equilibrium was reached. Then one led 25 cc fresh human serum followed by phosphate buffer into the layer. The effluent was in a fraction collector where the tubes were changed every 15 minutes so that a flow rate of 28 ccm per hour was achieved, in fractions caught by 7 cc. In each fraction was protein (according to F o 1 i n-L o w r y), Amino acids, Peptides and nucleotide material determined (the peptides by ninhydrin and the nucleotide material by ultraviolet absorption). The protein were obtained in fractions 5 to 12, the peptides and amino acids in the fractions 20 to 40 and the nucleotide material in fractions 42 to 60.

Beispiel 8 Eine Schicht von einem Ausmaß von 3 22 cm wurde mit gequollenen Gelkörnern (Wasserwiedergewinn 4,5), die durch Umsetzung von Dextran mit Epichlorhydrin hergestellt worden waren, gepackt. Zwei Versuche wurden angestellt, um den Einfluß des Assoziationsgrades von Insulin auf dessen Adsorption in die Gelkörner und dessen Verdrängung und Eluierung aus den Körnern zu ermitteln: a) Die Schicht wurde in ein Gleichgewicht mit einer lmolaren Acetatpuffersubstanz (pH-Wert =3,95) gebracht. Dann wurde 1 com von 0, 51°/Oigem Insulin in einer solchen Puffersubstanz in die Schicht eingeführt und diese mit der Puffersubstanz eluiert. Das Insulin erschien in dem Ausfluß zwischen 55 und 65 ccm. b) Die Schicht wurde in ein Gleichgewicht mit 1 °/o Dichloressigsäure in Wasser gebracht. 1 ccm einer 0,420/0igen Insulinlösung wurde in die Schicht eingeführt und diese mit der Dichloressigsäurenlösung eluiert. In diesem Falle war das Insulin in dem Ausfluß zwischen 80 und 100 ccm enthalten. Example 8 A layer 3 22 cm in size was swollen with Gel grains (water recovery 4.5) obtained by reacting dextran with epichlorohydrin were made, packed. Two attempts were made to find the influence the degree of association of insulin on its adsorption into the gel grains and its To determine displacement and elution from the grains: a) The layer was in brought to equilibrium with an imolar acetate buffer substance (pH = 3.95). Then 1 com of 0.51% insulin in such a buffer substance was added to the Layer introduced and this eluted with the buffer substance. The insulin appeared in the outflow between 55 and 65 cc. b) The layer was in equilibrium brought into water with 1% dichloroacetic acid. 1 cc of a 0.420 / 0 insulin solution was introduced into the layer and eluted with the dichloroacetic acid solution. In this case, the insulin in the effluent was between 80 and 100 cc.

Beispiel 9 Eine Schicht mit einem Ausmaß von 4 37 cm wurde mit Gelkörnern einer solchen Teilchengröße, daß sie ein Sieb mit einer Maschenweite von zwischen 1600 und 1760 bis 6560 je Quadratzentimeter passieren (Wasserwiedergewinn: 4,2) gefüllt. Diese Gelkörner waren durch Umsetzung von Dextran (Molekulargewicht = 20000) und Epichlorhydrin hergestellt worden. Die Schicht wurde mit 0, 1molarem Phosphatpuffer (pH-Wert = 7,0) gewaschen. Dann wurden 5 ccm einer wäßrigen Lösung, die 0,11 01o der antibiotischen Substanz Polymyxin B enthielt, auf die Schicht gebracht, und anschließend wurden 0,1molaren Phosphatpuffer mit einer Geschwindigkeit von 101 ccm je Stunde eingeführt. Das Polymyxin war in dem Ausfluß zwischen 350 und 400 ccm enthalten. Example 9 A layer 4 37 cm in size was made with gel grains such a particle size that they have a sieve with a mesh size of between 1600 and 1760 to 6560 pass per square centimeter (water recovery: 4.2) filled. These gel grains were by reaction of dextran (molecular weight = 20,000) and epichlorohydrin. The layer was filled with 0.1 molar phosphate buffer (pH = 7.0) washed. Then 5 ccm of an aqueous solution containing 0.11 01o the antibiotic substance polymyxin B contained on the layer, and then 0.1 molar phosphate buffer was added at a rate of 101 ccm introduced per hour. The polymyxin in the effluent was between 350 and 400 ccm included.

In einem anderen Versuch wurden Sccm einer Lösung, die 0, 15 °/o Polymyxin und 101o Natriumdextransulphat (Molekulargewicht = 1 000000) auf die Schicht gebracht. Anschließend wurden 0, 1 °/o Phosphatpuffer mit einer Geschwindigkeit von 100 ccm je Stunde eingeführt. Der Polymyxin-Dextransulphat-Komplex verließ die Schicht zusammen mit dem Dextransulphat im Ausfluß zwischen 200 und 250 ccm. In another experiment, Sccm of a solution containing 0.15% Polymyxin and 101o sodium dextran sulphate (molecular weight = 1,000,000) on the layer brought. Then 0.1% phosphate buffer was added at one rate of 100 cc per hour introduced. The polymyxin-dextran sulphate complex left the Layer together with the dextran sulphate in the discharge between 200 and 250 ccm.

Beispiel 10 Eine Säule mit einem Durchmesser von 1,5 cm und einer Höhe von 22 cm wurde mit im Wasser gequollenen Gelkörnern (mit einer solchen Teilchengröße, daß sie ein Sieb mit einer Maschenweite von zwischen 1600 und 1760 bis 6560 je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 2,7) gepackt. Die Gelkörner waren zuvor durch Mischpolymerisation von Dextran (Molekulargewicht = 40000) mit bis-Epoxypropyläther hergestellt worden. Das Gesamtvolumen der Gelschicht betrug 36 ccm. In die Schicht wurde 1 ccm einer wäßrigen Lösung, die 10 mg menschliches Serumalbumin und 100 mg Natriumchlorid enthielt, eingeführt. Die Schicht wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 95 ccm je Stunde eluiert und Fraktionen von jeweils 3 ccm in einem Fraktionensammler aufgefangen. Das Albumin erschien in den Fraktionen 5 und 6 und das Salz in den Fraktionen 8 bis 10. Example 10 A column with a diameter of 1.5 cm and a Height of 22 cm was measured with gel grains swollen in water (with a particle size that they have a sieve with a mesh size of between 1600 and 1760 to 6560 per square centimeter happen; Water recovery: 2.7) packed. The gel grains were previously interpolymerized from Dextran (molecular weight = 40,000) with bis-epoxypropyl ether. The total volume of the gel layer was 36 ccm. One cc was poured into the layer aqueous solution containing 10 mg human serum albumin and 100 mg sodium chloride, introduced. The layer was filled with water at a rate of 95 cc each Eluted hour and fractions of 3 cc each collected in a fraction collector. The albumin appeared in fractions 5 and 6 and the salt in fractions 8 until 10.

Beispiel 11 Die Säule des Beispiels 10 wurde mit Gelkörnern (mit einer solchen Teilchengröße, daß sie durch ein Sieb mit einer Maschenweite von zwischen 1600 und 1760 bis 6560 je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 1,3) gefüllt, die durch Umsetzung von Dextrin mit Epichlorhydrin hergestellt worden waren. Das Gesamtvolumen der Schicht betrug 35 ccm. In die Säule wurde 1 ccm einer wäßrigen Lösung, die 10 mg menschliches Serumalbumin und 100 mg Natriumchlorid enthielt, eingeführt. Die Schicht wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 36 ccm je Stunde eluiert und Fraktionen von jeweils 3 ccm aufgefangen. Das Albumin erschien in den Fraktionen 4 bis 6 und das Salz in der Fraktion 8 bis 10. Example 11 The column of Example 10 was filled with gel grains (with such a particle size that it can pass through a sieve with a mesh size of between 1600 and 1760 to 6560 per square centimeter pass; Water recovery: 1.3) filled, which had been prepared by reacting dextrin with epichlorohydrin. The total volume of the layer was 35 ccm. In the column 1 cc of an aqueous Solution containing 10 mg human serum albumin and 100 mg sodium chloride, introduced. The layer was filled with water at a speed of 36 cc each Eluted hour and collected fractions of 3 cc each. The album appeared in fractions 4 to 6 and the salt in fraction 8 to 10.

Beispiel 12 Eine Säule mit einem Durchmesser von 1,5 cm und einer Höhe von 22 cm wurde mit Gelkörnern (mit einer solchen Teilchengröße, daß sie durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 108 bis zwischen 1600 und 1760 je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 2,2) gepackt, die durch Umsetzung von Stärke mit bis-Epoxypropyläther hergestellt worden waren. Example 12 A column with a diameter of 1.5 cm and a Height of 22 cm was filled with gel grains (with a particle size such that they can pass through a sieve with a mesh size of 108 to between 1600 and 1760 per square centimeter happen; Water recovery: 2.2) packed by reacting starch with bis-epoxypropyl ether had been made.

Das Gesamtvolumen der Schicht betrug 36 ccm, In die Schicht wurde 1 com einer wäßrigen Lösung, die 10 mg menschliches Serumalbumin und 100 mg Natriumchlorid enthielt, eingeführt. Die Schicht wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 120 ccm je Stunde eluiert und Fraktionen von jeweils 3 ccm aufgefangen. Das Albumin erschien in den Fraktionen 4 bis 6 und das Salz in den Fraktionen 8 bis 10.The total volume of the layer was 36 ccm 1 com of an aqueous solution containing 10 mg of human serum albumin and 100 mg of sodium chloride contained, introduced. The layer was washed with water at a rate of 120 cc per hour eluted and fractions of 3 cc each collected. The albumin appeared in fractions 4 to 6 and the salt in fractions 8 to 10.

Beispiel 13 Die Säule des Beispiels 12 wurde mit Gelkörnern (mit einer solchen Teilchengröße, daß sie durch ein Sieb mit einer Weite von 400 bis 11 500 Maschen je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 1,6) gefüllt, die durch Umsetzung von Dextran mit 1,2,3,4-Diepoxybutan hergestellt worden waren. Das Gesamtvolumen der Gelschicht betrug 35 ccm. In die Schicht wurde 1 com einer wäßrigen Lösung eingeführt, die 10 mg menschliches Serumalbumin und 100mg Natriumchlorid enthielt. Die Schicht wurde mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 7 ccm je Stunde eluiert und Fraktionen von jeweils 3,5 ccm aufgefangen. Das Albumin erschien in den Fraktionen 4 und 5 und das Salz in den Fraktionen 8 bis 10. Example 13 The column of Example 12 was filled with gel grains (with a particle size such that it passes through a sieve with a width of 400 to Pass 11,500 meshes per square centimeter; Water recovery: 1.6) filled, which had been prepared by reacting dextran with 1,2,3,4-diepoxybutane. The total volume of the gel layer was 35 ccm. In the layer was 1 com one aqueous solution introduced containing 10 mg of human serum albumin and 100mg of sodium chloride contained. The layer was washed with water at a rate of 7 cc per hour eluted and collected fractions of 3.5 cc each. The albumin appeared in fractions 4 and 5 and the salt in fractions 8-10.

Beispiel 14 Eine Säule mit einem Durchmesser von 3 cm wurde mit Gelkörnern (mit einer solchen Teilchengröße, das sie durch ein Sieb mit einer Weite von zwischen 1600 und 1760 bis 6560 Maschen je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 2,1) gepackt, die lurch Umsetzung von Dextran mit 1,4-Butandioldiepoxypropyläther hergestellt worden waren. Das Gesamtvolumen der Gelschicht betrug 247 ccm. Vor Versuchsbeginn wurde die Schicht mit einer 100/0eigen lösung von Äthanol in Wasser gewaschen. In die Schicht wurden 3 ccm einer Lösung von 30 mg Dextran (Molekulargewicht = 40 000) und 30 mg Glukose in 100/0im wäßrigem Äthanol eingeführt. Dann wurde sie mit 100/0eigen wäßrigem Äthanol mit einer Geschwindigkeit von 180 ccm je Stunde eluiert und der Ausfluß in Fraktionen von 5,5 ccm aufgefangen. Example 14 A column with a diameter of 3 cm was filled with gel grains (with such a particle size that it passes through a sieve with a width of between 1600 and pass 1760 to 6560 meshes per square centimeter; Water recovery: 2.1) packed by the reaction of dextran with 1,4-butanediol diepoxypropyl ether had been made. The total volume of the gel layer was 247 ccm. Before starting the experiment the layer was washed with a 100/0 solution of ethanol in water. In the layer was 3 ccm of a solution of 30 mg dextran (molecular weight = 40,000) and 30 mg of glucose in 100/0 in aqueous ethanol. Then she got 100/0 aqueous ethanol eluted at a rate of 180 ccm per hour and the The effluent was collected in fractions of 5.5 cc.

In dem Ausfluß erschien das Dextran zwischen 103 und 120 ccm und die Glukose zwischen 180 und 213 ccm.In the effluent the dextran appeared between 103 and 120 cc and the Glucose between 180 and 213 cc.

Beispiel 15 Eine Säule mit einem Durchmesser von 3,5 cm wurde mit Gelkörnern (mit einer solchen Teilchen größe, daß sie ein Sieb mit einer Weite von 400 bis zwischen 1600 und 1760 Maschen je Quadratzentimeter passieren; Wasserwiedergewinn: 9,0) gepackt, die durch Umsetzung von Sorbitol mit Epichlorhydrin hergestellt worden waren. Das Schichtvolumen betrug 219 ccm. In die Schicht wurden 5 ccm einer Lösung eingeführt, die 200 mg menschliches Serumalbumin und 100mg Natriumchlorid enthielt. Anschließend wurde die Schicht mit Wasser mit einer Geschwindigkeit von 100 ccm je Stunde eluiert. In dem Ausfluß erschien das Albumin zwischen 75 und 110 ccm und das Natriumchlorid zwischen 190 und 225 ccm. Example 15 A column with a diameter of 3.5 cm was made with Gel grains (with a particle size such that they fit a sieve with a width of Pass 400 to between 1600 and 1760 meshes per square centimeter; Water recovery: 9.0), which were produced by reacting sorbitol with epichlorohydrin was. The layer volume was 219 ccm. 5 cc of a solution was poured into the layer was introduced containing 200 mg of human serum albumin and 100 mg of sodium chloride. The layer was then washed with water at a rate of 100 cc eluted per hour. In the discharge the albumin appeared between 75 and 110 cc and the sodium chloride between 190 and 225 cc.

Claims (5)

Patentansprüche: 1. Polymeres, in Form von in einem Lösungsmittel gequollenen Gelkörnern vorliegendes Trennmittel zur Trennung von in Lösung befindlichen Stoffen, deren Molekulargewichtsdifferenz mehr als 100 beträgt, auf der Basis der Gelfiltrationsmethode, dadurch gekennzeichnet, chnet,daß es aus einem Mischpolymerisat einer ungeladenen organischen, Hydroxylgruppen enthaltenden Verbindung mit einer bifunktionellen Verbindung der Formel X-R-Z, worin R eine C3- bis Clo-Alkylgruppe bedeutet und X und Z je ein Halogenatom oder eine Epoxygruppe darstellen, besteht, wobei das Mischpolymerisat in Wasser unlöslich, jedoch darin quellbar ist, sein Quellvermögen einem Wasserwiedergewinn von 1 bis 50 g/g des trockenen Gelproduktes entspricht und der Gehalt an Hydroxylgruppen in den Gelkörnern mindestens 12 Gewichtsprozent beträgt. Claims: 1. Polymer, in the form of in a solvent swollen gel grains present separating agent for separating those in solution Substances whose molecular weight difference is more than 100, on the basis of Gel filtration method, characterized in that it consists of a copolymer an uncharged organic compound containing hydroxyl groups with a bifunctional compound of the formula X-R-Z, in which R is a C3- to Clo-alkyl group and X and Z each represent a halogen atom or an epoxy group, consists, the copolymer being insoluble in water but swellable therein Swelling capacity a water recovery of 1 to 50 g / g of the dry gel product corresponds to and the content of Hydroxyl groups in the gel grains at least 12 percent by weight amounts to. 2. Trennmittel nach Anspruch, dadurch gekennzeichnet, daß es aus einem Mischpolymerisat besteht, das aus Dextran mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 5000 bis etwa 100000 und Epichlorhydrin erhalten worden ist und das aus einem dreidimensionalen makroskopischen Netzwerk besteht, welches aus Ketten aus hauptsächlich os-1, 6-glycosidisch gebundenen Glukoseresten aufgebaut ist, die über Ätherbrücken der Formel -O-CH2 (OH) CH2-O-miteinander verbunden sind, wobei die Gelkörner einen Gehalt an Hydroxylgruppen von mindestens 15 0/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen Wasserwiedergewinn von etwa 1 bis 50g/g des trockenen Gelproduktes aufweisen. 2. Release agent according to claim, characterized in that it consists of a copolymer consisting of dextran with an average molecular weight from about 5,000 to about 100,000 and epichlorohydrin and that from a three-dimensional macroscopic network, which consists of chains mainly os-1, 6-glycosidically bound glucose residues is built up over Ether bridges of the formula -O-CH2 (OH) CH2-O- are connected to one another, whereby the Gel grains have a hydroxyl group content of at least 15 0 / o of the weight of the dry gel and a water recovery of about 1 to 50 g / g of the dry gel product exhibit. 3. Trennmittel nach Anspruch, dadurch gekennzeichnet, daß es aus einem Mischpolymerisat besteht, das durch Umsetzung von handelsüblichem weißen Dextrin mit Epichlorhydrin erhalten worden ist und das aus einem dreidimensionalen makroskopischen Netzwerk besteht, welches aus Ketten von hauptsächlich oc-1,4-glycosidisch gebundenen Glukoseresten aufgebaut ist, die über Ätherbrücken der Formel -O-CH, CH(OH) CH2-omiteinander verbunden sind, wobei die Gelkörner einen Gehalt an Hydroxylgruppen von mindestens 15 °/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen Wasserwiedergewinn von etwa 1 bis 20g/g des trockenen Gelproduktes aufweisen. 3. Release agent according to claim, characterized in that it consists of consists of a copolymer which is made by reacting commercially available white dextrin with epichlorohydrin and that from a three-dimensional macroscopic Network consists, which consists of chains of mainly oc-1,4-glycosidically bonded Glucose residues are built up, which via ether bridges of the formula -O-CH, CH (OH) CH2-omit each other are connected, the gel grains having a hydroxyl group content of at least 15% the weight of the dry gel and a water recovery of about 1 to 20g / g of the dry gel product. 4. Trennmittel nach Anspruch, dadurch gekennzeichnet, daß es aus einem Mischpolymerisat besteht, das aus Sorbit und Epichlorhydrin erhalten worden ist, das aus einem dreidimensionalen makroskopischen Netzwerk aus Sorbitresten, die über Ätherbrücken der Formel -O-CH2 CH(oH)-CH2-omiteinander verbunden sind, besteht, wobei die Gelkörner einen Gehalt an Hydroxylgruppen von etwa 15 0/o des Gewichtes des trockenen Gels und einen Wassergewinn von etwa 1 bis 30g/g des trockenen Gelproduktes aufweisen. 4. Release agent according to claim, characterized in that it consists of consists of a copolymer obtained from sorbitol and epichlorohydrin is composed of a three-dimensional macroscopic network of sorbitol residues, which are connected to each other via ether bridges of the formula -O-CH2 CH (oH) -CH2-om, consists, the gel grains having a hydroxyl group content of about 15 0 / o des Weight of the dry gel and a water gain of about 1 to 30g / g of the dry Have gel product. 5. Trennmittel nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Gelkörner in trockenem Zustand einen mittleren Durchmesser von 0,01 bis 2,0 mm besitzen. 5. Release agent according to claim 1 to 3, characterized in that the gel grains in the dry state have an average diameter of 0.01 to 2.0 mm own.