-
Viele
Arten von Faden- bzw. Rundwürmern (Nematoda), Kratzern
(Acanthocephala) und parasitischen Krebsen (Crustacea) treten als
Krankheitserreger von Fischen sowohl im Süß- als
auch im Meerwasser auf. Bei Süßwasserfischen sind
Nematoda z. B. der Gattungen Camallanus, Capillaria und Oxyuris
sowie Infektionen mit Acanthocephala weit verbreitet. Bei Süßwasserfischen
parasitierende Crustacea sind verschiedene Arten von Copepoda aus
den Gattungen Lernea, Ergasilus und Neoergasilus. Bei Meerwasserfischen
stellen Copepoda aus den Gattungen Lepeophtheirus und Caligus vor
allem in Zuchten von Lachsen ein großes Problem dar. Fische
können mit Bandwürmern (Cestoda; z. B. Bothriocephalus
acheilognathi) infiziert werden, wenn sie bestimmte Copepoda fressen,
in denen sich Larven der Bandwürmer entwickeln. Zu den
Crustacea gehörende Branchiura, z. B. Arten der Gattung
Argulus, sind häufig auftretende Ektoparasiten von Fischen
in Teichen und Aquarien. An Fischen im Süß- und
Meerwasser parasitieren auch verschiedene Arten der ebenfalls zu
den Crustacea gehörenden Asseln (Isopoda).
-
Ein
Befall mit den genannten Erregern bedeutet zumeist ein großes
wirtschaftliches Risiko in der Produktion von Speisefischen sowie
auch für die oft kostspieligen Investitionen von Züchtern,
Händlern und privaten Haltern von Zierfischen (Mehlhorn
H, Düwel D, Raether W 1993: Diagnose und Therapie der Parasitosen der
Haus-, Nutz- und Heimtiere. 2. Auflage, G. Fischer, Stuttgart; Mehlhorn
B, Mehlhorn H, Schmahl G 1993: Gesunde Zierfische, Springer Verlag,
Heidelberg; Woo PTK 1995: Fish diseases and disorders, Vol. 1, Protozoan
and metazoan infections, CAB International, Wallingford, UK; Brown
E 1980: Fish farming handbook, AVI Publishing Company, Westport,
USA; Schäperclaus W 1979: Fischkrankheiten, Bände
1 und 2, Akademie-Verlag, Berlin).
-
Viele
Arten von Nematoda parasitieren in Säugetieren einschließlich
des Menschen, während Acanthocephala und Crustacea bei
diesen Wirten keine große Rolle spielen. Dementsprechend
werden neue Wirkstoffe gegen Nematoda, nicht aber gegen die anderen
Parasiten entwickelt. Gegen Crustacea bei Fischen werden zumeist
Insektizide verwendet, für die auch eine Wirkung auf Crustacea
gefunden werden konnte. Zur Behandlung gegen Nematoda bei Säugetieren
sind bekannt: Levamisol, Piperazin, Oxamyl, Oxantel, Pyrantel, Diethylcarbamazin,
die Benzimidazole: Thiabendazol, Mebendazol, Fenbendazol, Flubendazol,
Albendazol, macrocyklische Laktone: Avermectine (Abamectin = Avermectin
B1), Ivermectin, Moxidectin, Doramectin, Eprinomectin und Selamectin
und Milbemycin.
-
Zur
Behandlung von Fischen gegen Nematoda ist Levamisol bekannt. Zur
Behandlung von Fischen gegen Acanthocephala ist Loperamid bekannt.
Zur Behandlung von Fischen gegen Crustacea sind bekannt: Wasserstoffperoxid,
Formalin, die Organophoshate Trichlorfon, Dichlorphos und Azamethiphos,
die Pyrethroide Cypermethrin und Deltamethrin, die Benzoylharnstoffderivate
Diflubenzuron, Teflubenzuron und Lufenuron sowie das macrocyclische
Lakton Emamectin Benzoat.
-
Eprinomectin
(4''-deoxy-4''-epi-N-Acetylamino-Avermectin Bla/Blb) wurde zur Behandlung
gegen Nematoden von Weidetieren eingeführt (
US Patente 4,427,663 und
5,602,107 ;
Shoop WL, Egerton
JR, Eary CH, Haines HW, Michael BF, Mrozik H, Eskola P, Fisher MH,
Slayton L, Ostlind DA, Skelly BJ, Fulton RK, Barth D, Costa SD,
Gregory LM, Cambell WC, Seward RL, Tuner MJ 1996: Eprinomectin,
a novel avermectin for use as a topical endectocide for cattle.
Int J Parasitol 26: 1237–1242). Eprinomectin wurde
bisher jedoch nicht zur Behandlung von Parasiten von Fischen beschrieben
oder seine Verwendung hierfür nahegelegt.
-
Emamectin
(4''-deoxy-4''-epi-N-Methylamino-Avermectin Bla/Blb) wurde zur Bekämpfung
von schädlichen Insekten und Milben an Pflanzen entwickelt
(
US Patente 4,874,749 und
5,288,710 ; European Patent
Application
736,252 ;
Fisher
MH 1993: Recent progress in avermectin research. ACS Symp Ser 524:
169–182). Emamectin wurde erstmals zur oralen
Behandlung von Fischen gegen Parasiten in den Patenten
EP 1168 931 B1 und
WO 2000/060952 offenbart.
Die Patente lehren ausschließlich die orale Applikation
des Wirkstoffs, wobei eine Vormischung des Wirkstoffs dem Futter
für die Fische zugesetzt wird. Emamectin wird zur Bekämpfung
von Lachsläusen (Lepeophtheirus salmonis und Caligus elongatus)
am Alantischen Lachs (Salmo salar) eingesetzt. Es wird unter dem
Produktnamen SLICE für die Anwendung bei Salmoniden vertrieben
(Schering Plough Technical Report. Potential impacts of emamectin
benzoate formulated as Slice for salmonids; Schering-Plough Animal
Health: Technical Report Vol. 1 Guidance Notes for the use of SLICE
in Aquaculture;
http://www.spaquaculture.com/assets/FINALgdnce.pdf).
-
Auch
in wissenschaftlichen Publikationen wird ausschließlich
die orale Anwendung von Emamectin im Futter für Fische
beschrieben (Stone J, Sutherland IH, Sommerville CS, Richards
RH, Varma KJ 1999: the efficacy of emamectin benzoate as an oral
treatment of sea lice, Lepeophtheirus salmonis infestations in Atlantic salmon
Salmo salar L. J Fish Dis 4: 261–270; Roy
WJ, Sutherland IH, Rodger HDM, Varma KJ 2000: Tolerance of Atlantic
salmon, Salmo salar L., and rainbow trout Oncorhynchus mykiss (Walbaum),
to emamectin benzoate, a new orally administered treatment for sea
lice. Aquaculture 184: 19–29; Ramstad
A, Colquhoun DJ, Nordmo R, Sutherland IH, Simmons R 2002: Field
trials in Norway with Slice (0,2% emamectin benzoate) for the oral
treatment of sea lice infestation in farmed Atlantic salmon Salmo
salar. Dis Aquat Organ 50: 29–33; Armstrong
R, MacPhee D, Katz T, Endris R 2000: A field evaluation of emamectin
benzoate for the control of sea lice on Atlantic salmon. Can Vet
J 41: 607–612; Kim-Kang H, Bova A, Crough
LS, Wislocki PG, Robinson RA, Wu J 2004: Tissue distribution, metabolism,
and residue depletion study in Atlantic salmon following oral administration
of [3H]-emamectin benzoate. J Agric Food Chem 52: 2108–2118; Farer
LJ, Haynes JM 2005: Comparison of two procedures for the determination
of emamectin benzoate in medicated fish feed. Journal of the Association
of Official Analytical Chemists 88: 468–471; Gustafson
L, Ellis S, Robinson T, Marenghi F, Endris R 2006: Efficacy of emamectin
benzoate against sea lice infestations of Atlantic salmon, Salmo
salar L.: evaluation in the absence of an untreated contemporary
control. J Fish Dis 29: 621–627). Auch die Wirkung einer
oralen Gabe von Emamectin gegen Argulus bei Regenbogenforellen wurde
beschrieben (Hakalahti T, Lankinen ET, Valtonen ET 2004:
Efficacy of emamectin benzoate in control of Argulus coregoni (Crustacea: Branchiura)
an rainbow trout Oncorhynchus mykiss. Dis of Aquat Organ 60: 197–204).
-
Nach
Stand der Technik ist nicht bekannt, dass Eprinomectin eine Wirkung
auf parasitische Crustacea hat. Es ist auch nicht bekannt, dass
Eprinomectin eine Wirkung auf Acanthocephala hat. Es ist im weiteren nicht
bekannt, dass mit Eprinomectin Nematoden in Fischen abgetötet
werden können. Nach Stand der Technik ist auch nicht bekannt,
dass Emamectin eine Wirkung auf Nematoden in Fischen hat.
-
Nachteile
der nach Stand der Technik zur Verfügung stehenden Mittel
gegen Parasiten von Fischen liegen hauptsächlich, aber
nicht nur, in folgenden Bereichen: die Wirkstoffe gegen die Parasiten
sind a) zu toxisch für Fische b) haben eine nur unbefriedigende
Wirkung gegen die Parasiten der Fische bzw. erreichen nicht alle
Stadien der Parasiten und/oder c) sind nicht wasserlöslich
und/oder werden nur im Futter bei Fischen appliziert, obwohl erkrankte
Fische oft nicht mehr fressen.
-
Die
Anwendung von Mitteln gegen parasitische Crustacea von Fischen im
Wasser der Fische als medizinisches Bad ist bekannt für
die Organophosphate Dichlorphos, Trichlorfon und Azamethiphos. Diese
Substanzen sind jedoch sowohl für Fische als auch für
den Mensch hochgradig toxisch (Horsberg TE, Hoy T, Nafstad
I 1989: Organophosphate poisoning of Atlantic salmon in connection
with treatment against salmon lice. Acta Vet Scand 30: 385–390).
Ihre Anwendung bei Speisefischen ist inzwischen durch behördliche
Auflagen verboten. Eine nur unbefriedigende Wirkung gegen parasitische
Krebse haben die oft verwendeten Substanzen Wasserstoffperoxid,
Kaliumpermanganat und Formalin. Diese Substanzen werden zwar im
Wasser angewendet, jedoch schädigen sie auch die Fische,
insbesondere deren Kiemen.
-
Eine
Therapie mit einem Hemmstoff für Arthropoden, z. B. Diflubenzuron,
hat den Nachteil, dass nur die Entwicklungsstadien der Parasiten
während der Häutung abgetötet werden,
während adulte Parasiten kaum geschädigt werden.
-
Für
die Therapie von Fischen gegen parasitische Nematoden stand der
Wirkstoff Levamisol zur Verfügung. Levamisol hat jedoch
eine nur unbefriedigende Wirkung auf Nematoden in Fischen, weil
täglich erneute Gaben des Wirkstoffs über mehrere
Tage erforderlich sind. Dennoch werden zumeist nicht alle Würmer
abgetötet. Ein Nachteil besteht auch darin, dass Levamisol
verschreibungspflichtig ist, und es damit für Züchter und
privaten Haltern von Fischen nicht frei verfügbar ist.
Ein gravierender Nachteil der Präparate mit Levamisol besteht
im weiteren darin, dass sie nur oral im Futter an die Fische verabreicht
und nicht zur Therapie im Wasser angewendet werden können.
Die Präparate verursachen nämlich eine starke
Vermehrung von Bakterien und nachfolgend eine Sauerstoffzehrung,
so dass die ständige Gefahr besteht, dass die behandelten
Fische an Sauerstoffmangel sterben.
-
Daher
ist eine Vielzahl von Substanzen für Fische unverträglich
oder führt zum Verenden der Fische. Die Substanzen sind
entweder wasserunlöslich und können nur mit geeigneten
Lösungsvermittlern, Detergentien oder Emulgatoren im Wasser
verteilt werden. Diese können aber ihrerseits, insbesondere
an den empfindlichen Kiemen der Fische, Schäden verursachen.
Viele wasserlösliche Stoffe werden dagegen nicht durch
die Körperoberfläche der Fische in das Gewebe
resorbiert. Daher können viele bekannte Wirkstoffe gegen
Nematoden die im Gewebe der Fische vorhandenen Parasiten nicht erreichen.
-
Es
ist daher besonders schwierig, Wirkstoffe zu finden, die im Wasser
angewendet werden können und dabei die Fische nicht schädigen,
sondern selektiv die Parasiten abtöten.
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Es
ist bekannt, dass Avermectine und mehrere andere macrocyclische
Laktone vergleichsweise toxisch für Fische sind. Die LD50
(bei der die Hälfte der Versuchstiere sterben) von Abamectin
bei Anwendung im Wasser ist für die Regenbogenforelle mit
3,2 μg/L sehr gering und beträgt auch für
den Sonnenbarsch nur 9,6 μg/L (
Wislocki P, Gross
L, Dybas R 1989: Environmental aspects of abamectin. In: Cambell
WC, ed, Ivermectin and abamectin, Springer, New York, p.p. 182–200).
Avermectine können neurotoxisch sein und müssen daher
korrekt dosiert werden. Ein besonderes Problem bei der Anwendung
im Wasser für Fische besteht aber darin, dass Wirkstoffe
aus dem Wasser in das Gewebe der Fische aufgenommen werden und sich
dort anreichern können. Dies gilt auch für macrocyclische
Laktone (
Chukwudebe AC, Andrew N, Dropttar K, Swigert J, Wilocki
PG 1996: Bioaccumulation potential of 4''-epi-(methylamino)-4''-deoxyavermectin
B1a benzoate (emamectin benzoate) in bluegill sunfish. Journal of
Agricultural and Food Chemistry 44: 2894–2899).
In der Folge kann es zu einer hohen Konzentration im Gewebe kommen,
aufgrund der die Fische regelrecht ergiftet werden. Eine korrekte
Dosierung durch eine Anwendung im Wasser, bei der nur die Parasiten
geschädigt werden, ist daher bei vielen Wirkstoffen praktisch
nicht möglich.
-
Es
verwundert daher nicht, dass die Eignung der speziellen Avermectin-Derivate
zur Behandlung von Fischen im medizinischen Bad bisher nicht erkannt
worden ist, obwohl die Wirkstoffe seit vielen Jahren in ihrer Wirkung
gegen Nematoden von Säugetieren bzw. Krebstiere von Fischen
bekannt sind.
-
Bei
oraler Applikation über das Futter ist jedoch eine korrekte
Dosierung des Wirkstoffs bei vielen erkrankten Fischen gar nicht
möglich:
- 1. Akute oder chronische
Infektionen mit Parasiten belasten die Fische in unterschiedlichem
Maße so stark, dass die Tiere nur eine verminderte Menge
an Futter aufnehmen oder sogar – zumindest zeitweise – die Aufnahme
von Futter ganz einstellen. In vielen Fällen ist es daher
nicht möglich, dass die Fische überhaupt den Wirkstoff
mit dem Futter aufnehmen oder dass sie eine korrekte Dosis des Wirkstoffs
erhalten.
- 2. Für orale Applikationen wird eine Vormischung des
Medikaments auf die Futtermittel aufgebracht. Nach geltendem Arzneimittelrecht
dürfen Vormischungen mit Medikamenten nur von Tierärzten
verschrieben und angewendet werden. Bei Medikamenten, die jedoch
als nicht verschreibungspflichtige Präparate von Laien angewendet
werden sollen, steht diese Applikationsform daher nicht zur Verfügung.
- 3. Auch bei prophylaktischer Anwendung oder bei schwach infizierten,
wenig belasteten Fischen ist die korrekte Dosierung insbesondere
bei privaten Fischhaltern schwierig, da die Futteraufnahme sehr
unterschiedlich sein kann und z. B. abhängig von der Fischart,
Wassertemperatur und der Tages- und Jahreszeit variiert.
- 4. In vielen Fällen werden die von Fischen oral verabreichten
Wirkstoffe nur zu einem geringen Anteil im Darmtrakt resorbiert,
während die überwiegende Menge ungenutzt in den
Fäzes ausgeschieden wird. Dies trifft auch für
macrocyclische Laktone zu (Davies IM, Rodger GK 2000: A
review of the use of ivermectin as a treatment for sea lice, Lepeophtheirus
salmonis and Caligus elongatus, infestation in farmed Atlantic salmon,
Salmo salar. Aquaculture Research 31: 869–883).
-
Die
Injektion eines Wirkstoffs (Benzoylharnstoff-Derivate) in jeden
einzelnen Fisch zur Behandlung gegen Seeläuse von Lachsen
ist in
US Patent 6,538,031 offenbart.
Diese Applikationsform weist gleich mehrere der Nachteile der Anwendung
im Futter und ist zudem mit Stress für die Tiere, sowie
mit einem höheren Arbeitsaufwand verbunden.
-
Eine
weitere Schwierigkeit besteht darin, dass viele Wirkstoffe – so
auch Emamectin und Eprinomectin – nur eine geringe Wasserlöslichkeit
besitzen. Daher ist die Herstellung Wasser enthaltender Präparate
bzw. die Applikation dieser Wirkstoffe durch einfaches Auflösen
im Wasser der Fische nicht möglich.
-
Im
Bemühen, eine besser wirksame und dabei einfacher anwendbare
Medikation gegen parasitische Nematoda, Acanthocephala und Crustacea
von Fischen zu finden, wurde nun überraschenderweise gefunden, dass
die erfindungsgemäße Verwendung von Emamectin
und/oder dem strukturell sehr ähnlichen Eprinomectin die
genannten Nachteile der gegenwärtigen Therapiemaßnahmen
nicht haben.
-
Nach
unseren Untersuchungen können Emamectin und Eprinomectin
in fischverträglichen Lösungsvermittlern im Wasser
zur Anwendung bei Fischen gebracht werden. Hierzu eignen sich organische
Lösungsmittel, z. B. ein- und mehrwertige Alkohole.
-
Es
wurde überraschend gefunden, dass Emamectin und Eprinomectin
bei Verwendung im Wasser die Parasiten der Fische sehr wirksam abtöten
können, dabei jedoch in der therapeutisch erforderlichen
Dosis und selbst bei mehrfacher Überdosierung die Fische
nicht schädigen. Wahrscheinlich ist die Derivatisierung
von Emamectin und Eprinomectin an C4'' des Ausgangsstoffs Avermectin
für die geringe Toxizität für die Fische bei
guter therapeutischer Wirksamkeit ausschlaggebend. Das nicht in
dieser Weise derivatisierte, sonst aber identische Avermectin erwies
sich dagegen für die Fische so toxisch, dass keine Befreiung
der Fische von Parasiten erreicht werden konnte, ohne dass viele
der behandelten Fische starben.
-
Nach
den eigenen Versuchen eignen sich aus dem zuvor beschriebenen Grund
auch andere macrocyclische Laktone, z. B. Moxidectin und Doramectin,
nicht zur Verwendung gegen Parasiten im Wasser der Fische.
-
In
den eigenen Untersuchungen konnte nun erstmals festgestellt werden,
dass Eprinomectin bei erkrankten Fischen Nematoda, Crustacea und
Acanthocephala abtötet. Dies gelingt bei Verwendung des
Wirkstoffs im Wasser als auch bei oraler. Gabe mit dem Futter. Eine
erfindungsgemäße Verwendung von Eprinomectin im
Wasser der Fische hat jedoch die beschriebenen Vorteile.
-
Ein
besonderer Vorteil der erfindungsgemäßen Verwendung
von Emamectin und Eprinomectin besteht darin, dass Parasiten völlig
verschiedener systematischer Zugehörigkeit, d. h. Nematoda,
Acanthocephala und Crustacea, abgetötet werden können.
Viele Halter von Fischen haben nicht das Fachwissen zu erkennen,
an welchem Erreger die Fische erkrankt sind. Es ist daher wichtig,
dass ein Medikament eine möglichst breite Wirkung auf verschiedene
Krankheitserreger hat. Präparate mit Breitbandwirkung werden
von der Mehrheit der Kunden bevorzugt, und daher haben diese Medikamente
deutliche Vorteile in der Vermarktung.
-
Ein
besonderer Vorteil der erfindungsgemäßen Verwendung
im Wasser besteht darin, dass die Behandlung innerhalb sehr kurzer
Zeit und auch bei nur einmaliger Anwendung die gewünschte
Heilung der Fische erzielt. Bei einmaliger Anwendung sind die Parasiten
in nur 1 bis 2 Tagen vollständig eliminiert. Im Unterschied
hierzu erfordert die orale Therapie über das Futter nach
EP 1 168 931 B1 täglich
erneute Anwendungen für einen Zeitraum von 3 bis 14 Tagen.
-
Ein
besonderer Vorteil der Erfindung besteht darin, dass bei der Bekämpfung
von parasitischen Krebsen nicht nur die Erreger auf den Fischen,
sondern auch die frei im Wasser lebenden Stadien abgetötet
werden. Bei parasitischen Copepoden, z. B. Ergasilus und Lernea,
parasitieren nämlich die Weibchen vom Gewebe der Fische,
während die Männchen und Larvenstadien frei im
Wasser leben. Auch bei der Bekämpfung von Argulus ist es
erforderlich, nicht nur die an den Fischen festgesaugten Karpfenläuse
abzutöten, sondern auch die bis zu mehrere Tage frei im
Wasser umher schwimmenden Individuen zu eliminieren. Im Wasser schwimmende
Argulus können z. B. Viren, wie den Erreger der Frühjahrsvirämie
des Karpfens, auf andere Fische übertragen, wenn sie sich
wieder an einem Fisch festsaugen. Die Behandlung des gesamten Wassers
ist deshalb wichtig, insbesondere im Fischhandel, weil Fische unterschiedlicher
Herkunft in den Hälterungsbecken zusammengesetzt werden
und dadurch Infektionen von den Karpfenläusen leicht weitergeben
können.
-
Bei
der Therapie gegen Nematoden besteht ein ganz besonderer Vorteil
der Anwendung im medizinischen Bade darin, dass nicht nur die in
den Fischen vorhandene Nematoden abgetötet werden, sondern
auch Larven dieser Würmer, die sich in Kleinkrebsen im
Wasser entwickeln. Die infizierten Kleinkrebse werden nämlich – ebenso
wie die in ihnen enthaltenen Wurmlarven – abgetötet.
Im Unterschied hierzu werden die Wurmlarven bei oraler Therapie
der Fische nicht erreicht. Nach oraler Therapie können
die infektiösen Larven weiterhin von den Fischen aufgenommen
werden, und die Durchseuchung des Fischbestandes kann weiterhin
bestehen bleiben.
-
Copepoden
im freien Wasser können auch Überträger
von Larven bestimmter Bandwürmer sein, z. B. von Bothriocephalus
acheilognathi. Die erfindungsgemäße Verwendung
von Emamectin oder Eprinomectin ermöglicht es, Infektionen
von Fischen mit diesen Würmern wirksam zu bekämpfen.
-
Zur
erfindungsgemäßen Verwendung von Emamectin und/oder
Eprinomectin im Wasser der Fische ist im allgemeinen eine Konzentration
von 0,005 bis 0,8 mg/L erforderlich, vorzugsweise sind 0,02 mg/L
bis 0,25 mg/L anzuwenden. Hierbei können Emamectin und
Eprinomectin jeweils alleine oder beide Wirkstoffe in Kombination
angewendet werden. Bei kurzzeitiger Behandlung, bei der die Fische
nur bis zu etwa 4 Stunden dem Therapeutikum im Wasser ausgesetzt
werden, wobei die Behandlung zumeist in einem speziellen Becken
ausgeführt wird, können jedoch auch höhere
Dosen bis zu 1 g Wirkstoff pro Liter Wasser verwendet werden. Es sind
Eprinomectin und Emamectin sowie deren Salze, z. B. als Benzoat.
Da die Wasserlöslichkeit von Emamectin und Eprinomectin
sehr gering ist, müssen Präparate zur Anwendung
im Wasser von Fischen als wasserlösliche oder als im Wasser
verteilbare Formulierungen hergestellt werden.
-
Geeignete
pharmazeutische Zusammensetzungen für die Verwendung von
Emamectin oder Eprinomectin im Wasser der Fische liegen vorzugsweise
als Lösung, Suspension, Emulsion, Gel, Paste oder Spray vor.
Geeignete feste Zubereitungsformen sind beispielsweise Pulver, Granulate,
Tabletten oder Präparate mit verzögerter Wirkstoff-Freigabe,
z. B. Mikrokapseln.
-
Herstellung von Wirkstoff-Präparaten
für die erfindungsgemäße Verwendung:
-
Beispiel 1:
-
Emamectin
Benzoat wird gelöst in 96%-igem Ethanol und anschließend
im Dunkeln bei Raumtemperatur aufbewahrt.
-
Beispiel 2:
-
Eprinomectin
wird gelöst in 96%-igem Ethanol und anschließend
im Dunkeln bei Raumtemperatur aufbewahrt.
-
Beispiel 3:
-
Avermectin
B1 wird gelöst in 96%-igem Ethanol und anschließend
im Dunkeln bei Raumtemperatur aufbewahrt.
-
Beispiel 4:
-
Emamectin
Benzoat wird gelöst in Methylethylketon und anschließend
im Dunkeln bei Raumtemperatur aufbewahrt.
-
Beispiel 5:
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Emamectin
Benzoat wird gemischt mit 9 Gewichtsanteilen Bentonit und anschließend
trocken und bei Raumtemperatur aufbewahrt.
-
Diese
Beispiele sind in keiner Weise als einschränkend aufzufassen,
da sich für die erfindungsgemäße Verwendung
eine Vielzahl verschiedener Formulierungen eignet. Zur Verwendung
werden die Präparate in der geeigneten Dosierung dem Süßwasser
oder Meerwasser zugesetzt, in dem sich die zu behandelnden Fische befinden.
-
Anwendungsbeispiele:
-
Beispiel 1: Behandlung mit Emamectin Benzoat
gegen Camallanus cotti (Nematoda):
-
Die
Tests wurden in 60-Liter-Becken an etwa 4–5 cm langen Skalaren
(Pterophyllum scalare) durchgeführt, die aus einer Zucht
stammten, deren Fischbestand eine starke Durchseuchung mit Camallanus
cotti aufwies. Das Präparat von Emamectin Benzoat (Formulierung
1) wurde erfindungsgemäß dem Wasser der Fische
zugesetzt. Zur Auswertung wurden die Fische zu den angegebenen Zeiten
seziert und auf adulte Würmer im Darmtrakt untersucht.
| Behandlung | Anzahl Fische | Anzahl lebender
Camallanus im Darm der Fische |
| | | nach
24 Std. | nach
48 Std. |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 8 | n.
d. (nicht durchgeführt) | 5/2/4/4/2/6/1/4 |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser | 8 | 0/0/2/0/1/0/0/0 | n.
d. |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser | 8 | n.
d. | 0/0/0/0/0/0/0/0 |
| 0,075
mg Emamectin pro L Wasser | 8 | n.
d. | 0/0/0/0/0/0/0/0 |
| 0,05
mg Emamectin pro L Wasser | 8 | n.
d. | 0/2/4/0/0/3/2/0 |
- (n. d. = nicht durchgeführt)
-
Bei
Behandlung mit 0,1 mg Emamectin Benzoat pro L Wasser waren demnach
die meisten Würmer bereits nach 24 Stunden gestorben. Nach
48 Stunden der Behandlung waren keine lebenden Würmer mehr anzutreffen.
Es wurde zudem festgestellt, dass bei Würmern, die tot
im Darmlumen der für 48 Stunden behandelten Fische gefunden
wurden, die inneren Organe bereits weitgehend zerfallen waren. Auch
juvenile Würmer, die in sehr unterschiedlicher Zahl zu
finden waren, wurden durch die Behandlung abgetötet.
-
Beispiel 2: Behandlung mit Emamectin Benzoat
gegen Capillaria spec. (Nematoda):
-
Die
Tests wurden in 120-Liter-Becken an etwa 8–11 cm langen
Diskus (Symphysodon discus) aus einer kommerziellen Zucht durchgeführt,
deren Fischbestand einen Befall mit einer Art der Gattung Capillaria aufwies.
Das Präparat von Emamectin Benzoat (Formulierung 1) wurde
erfindungsgemäß dem Wasser der Fische zugesetzt.
Zur Auswertung wurden die Fische nach den angegebenen Zeiten seziert
und auf Würmer im Darmtrakt untersucht.
| Behandlung | Anzahl Fische | Anzahl lebender
Capillaria im Darm der Fische |
| | | nach
24 Std. | nach
48 Std. |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 7 | n.
d. | 2/5/3/3/2/1/3 |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser | 7 | 1/0/0/0/0/0/0 | n.
d. |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser | 7 | n.
d. | 0/0/0/0/0/0/0 |
| 0,05
mg Emamectin pro L Wasser | 7 | n.
d. | 0/0/0/0/0/0/0 |
- (n. d. = nicht durchgeführt)
-
Bei
einer Verwendung von 0,1 mg/L oder 0,05 mg/L Emamectin Benzoat werden
alle Capillaria in der Darmwand der Fische innerhalb von 48 Stunden
abgetötet.
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Beispiel 3: Behandlung mit Eprinomectin
gegen Camallanus cotti (Nematoda):
-
Die
Tests wurden in 60-Liter-Becken an ausgewachsenen, mit Camallanus
cotti infizierten Schwerträgern (Xiphiphorus helleri) durchgeführt.
Ein Präparat von Eprinomectin (Formulierung 2) wurde erfindungsgemäß dem
Wasser der Fische zugesetzt. Zur Auswertung wurden die Fische nach
den angegebenen Zeiten seziert und auf adulte Würmer im
Darmtrakt untersucht.
| Behandlung | Anzahl Fische | Anzahl lebender
Camallanus im Darm der Fische |
| | | nach
24 Std. | nach
48 Std. |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 8 | n.
d. | 1/7/4/1/8/2/1/5 |
| 0,1
mg Eprinomectin pro L Wasser | 7 | 0/0/0/0/0/0/0 | n.
d. |
| 0,05
mg Eprinomectin pro L Wasser | 8 | n.
d. | 0/0/0/0/0/0/0/0 |
-
Beispiel 4 (zum Vergleich): Behandlung
mit Avermectin B1a gegen Camallanus cotti (Nematoda):
-
Die
Tests wurden wie in Beispiel 3 an Schwerträgern (Xiphiphorus
helleri) durchgeführt. Das Präparat von Avermectin
(Formulierung 4) wurde dem Wasser der Fische zugesetzt. Gestorbene
Fische sind in der Tabelle mit einem (-) notiert.
| Behandlung | Anzahl Fische | Anzahl lebende
Camallanus im Darm der Fische |
| | | nach
24 Std. | nach
48 Std. |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 5 | n.
d. | 2/2/1/1/5 |
| 0,1
mg Avermectin pro L Wasser | 5 | 1/2/-/0/4 | n.
d. |
| 0,05
mg Avermectin pro L Wasser | 6 | n.
d. | -/2/-/-/4/- |
-
Avermectin
wirkte nicht effektiv gegen die Nematoden. Dieser Wirkstoff ist
dennoch zu toxisch für die Fische, denn bereits während
der Behandlung starben einige der mit Avermectin behandelten Fische.
-
Beispiel 5: Behandlung mit Eprinomectin
gegen Pomphorhynchus laevis (Acanthocephala):
-
Die
Tests wurden in 800-Liter-Rundbecken an 15–19 cm langen
Regenbogenforellen (Oncorhynchus mykiss) aus der Teichwirtschaft
durchgeführt, die mit Pomphorhnychus laevis infiziert waren.
Ein Präparat von Eprinomectin (Formulierung 2) wurde erfindungsgemäß dem
Wasser der Fische zugesetzt. Zur Auswertung wurden die Fische nach
den angegebenen Zeiten seziert und auf Würmer im Darmtrakt
untersucht.
| Behandlung | Anzahl
Fische | Anzahl
lebende Würmer im Darm der Fische |
| | | nach
etwa 72 Stunden |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 12 | 12/5/16/21/2/24/7/9/15/16/7/4 |
| 0,1
mg Eprinomectin pro L Wasser | 12 | 0/0/0/0/0/0/0/0/0/0/0/0 |
| 0,05
mg Eprinomectin pro L Wasser | 12 | 0/2/0/0/0/0/3/0/0/0/0/0 |
-
Die
Kratzer können somit wirksam mit dem Mittel Eprinomectin
eliminiert werden.
-
Beispiel 6: Behandlung mit Emamectin bzw.
Eprinomectin gegen Argulus spec. (Crustacea):
-
Die
Tests wurden in 1-Liter-Bechergläsern an adulten Argulus
spec. durchgeführt, die von infizierten Goldfischen (Carassius
auratus) abgesammelt worden waren. Ein Präparat von Emamectin
Benzoat (Formulierung 1) wurde erfindungsgemäß dem
Wasser zugesetzt. Zur Auswertung wurden die Karpfenläuse
nach den angegebenen Zeiten beobachtet.
| Behandlung | Anzahl
Karpfenläuse | Anzahl vitaler
Karpfenläuse nach Behandlung |
| | | nach
6 Std. | nach
18 Std. |
| Kontrolle
(ohne Wirkstoff) | 12 | 12 | 12 |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser für | 12 | 0 | 0 |
| 0,05
mg Emamectin pro L Wasser für | 12 | 0 | 0 |
| 0,025
mg Emamectin pro L Wasser | 12 | 4
(geschädigt) | 0 |
| 0,1
mg Eprinomectin pro L Wasser für | 12 | 0 | 0 |
| 0,05
mg Eprinomectin pro L Wasser für | 12 | 1
(geschädigt) | 0 |
| 0,025
mg Eprinomectin pro L Wasser | 12 | 1
(geschädigt) | 0 |
-
Beispiel 7: Behandlung mit Emamectin Benzoat
gegen Argulus spec. (Crustacea):
-
Die
Tests wurden in 120-Liter-Becken an 7–9 cm langen Koi (Farbvariante
von Cyprinus carpio) mit Argulus spec. durchgeführt. Ein
Präparat von Emamectin Benzoat (Formulierung 1) wurde erfindungsgemäß dem
Wasser zugesetzt. Zur Auswertung wurden die Karpfenläuse
nach den angegebenen Zeiten beobachtet.
| Behandlung | gesamte
Anzahl Koi/Karpfenläuse | Zahl lebender
Karpfenläuse nach Behandlung |
| | | für
3 Std. | für
6 Std. |
| Kontrolle
(ohne Behandlung) | 5/12 | 12 | 0 |
| 0,1
mg Emamectin pro L Wasser | 5/15 | 8
(geschädigt) | 0 |
| 0,05
mg Emamectin pro L Wasser | 5/11 | 12
(geschädigt) | 0 |
-
Die
Karpfenläuse sterben also bereits am ersten Tag der Behandlung
mit Emamectin im Wasser ab.
-
Beispiel 8: Behandlung mit Emamectin gegen
Lernea (Crustacea, Copepoda)
-
Graskarpfen
(Ctenopharyngodon idellus) aus dem Zoofachhandel mit einer Infektion
von Lernea, sowie Guppies (Lebistes reticulatus), die während
des Sommers in einem etwa 200-Liter-Becken in einem privaten Garten
gehalten wurden und eine Infektion mit Lernea bekommen hatten, wurden
mit Emamectin Benzoat (Formulierung 1) im Wasser behandelt.
- a) Behandlung von 6 Graskarpfen mit 0,1 mg/L
Emamectin im Wasser:
Beobachtung während der Behandlung:
Bei den behandelten Fischen starben die parasitischen Krebse in etwa
1 bis 3 Tagen, dies wurde durch das zerfallene Gewebe im Inneren
der Parasiten deutlich. Die Reste der Krebse blieben zunächst
noch an den Fischen verankert, lösten sich aber innerhalb
von 8 bis 15 Tagen vom Fisch ab.
- b) Behandlung von 10 Guppies mit 0,05 mg/L Emamectin im Wasser:
Beobachtung
während der Behandlung: Die parasitischen Krebse starben
in etwa 3 bis 5 Tagen, dies wurde durch das zerfallende Gewebe im
Inneren der Parasiten deutlich. Die Reste der Krebse blieben zunächst noch
an den Fischen verankert, lösten sich dann aber innerhalb
der nächsten Tage vom Fisch ab.
-
Beispiel 9: Behandlung mit Emamectin bzw.
Eprinomectin gegen Copepoden, Gattung Cyclops (Crustacea), die Bandwürmer übertragen:
-
Aus
der Filteranlage einer kommerziellen Zuchtanlage für Diskusfische
(Symphysodon discus) mit hoher Infestation der Fische mit dem Bandwurm
Bothriocephalus acheilognathi wurden mit einem Netz aus feiner Gaze
freilebende Cyclops gesammelt. Die Cyclops wurden zur Behandlung
in 0,5-Liter-Bechergläser überführt und
wie in der Tabelle angegeben durch Zusatz der Wirkstoffe im Wasser
behandelt. Zur Auswertung wurden die Cyclops nach den angegebenen
Zeiten mit Hilfe einer Stereolupe untersucht.
| Behandlung | gesamte
Anzahl Cyclops | Anzahl lebender
Cyclops nach Behandlung |
| | | für
3 Std. | für
6 Std. |
| Kontrolle
(ohne Behandlung) | 23 | 23 | 23 |
| 0,025
mg Emamectin pro L Wasser | 27 | 27
(stark geschädigt) | 0 |
| 0,025
mg Eprinomectin pro L Wasser | 24 | 24
(stark geschädigt) | 0 |
-
Anschließend
wurde die Zucht-Anlage für Diskus mit insgesamt 12.000
Liter Wasservolumen mit 0,025 mg/L Eprinomectin (Formulierung 2)
in Kombination mit 5 mg/L Praziquantel (Handelspräparat
Tremazol) im Wasser behandelt. Am nächsten Tag wurden keine
lebenden Cyclops mehr festgestellt. Die Bandwürmer waren
gestorben und wurden von den Fischen ausgeschieden. Die Fische zeigten
keine Beeinträchtigung in ihrer Vitalität durch
die Behandlungen.
-
Beispiele
von Fischen, die erfindungsgemäß behandelt werden
können, umfassen, sind aber nicht beschränkt auf:
Cyprinidae, z. B. Karpfen, Koi, Goldfisch und Aland, Lebendgebärende,
z. B. Schwertträger und Guppy, Salmler, z. B. Roter Neon
und Kardinalfisch, Welse, z. B. Vertreter der Loricariidae und Panzerwelse, Barschartige,
z. B. die Cichlidae Diskusfisch und Segelflosser, Zander, Tilapia,
Riffbarsche, Doktorfische, Zackenbarsche und Wolfsbarsch, Lachsartige,
z. B. Lachs und Regenbogenforelle sowie Aal, Störe und
Plattfische.
-
Diese
Anwendungsbeispiele sind in keiner Weise als einschränkend
aufzufassen, da gegen viele verschiedene Arten von Parasiten bei
vielen Arten von Fischen mit der erfindungsgemäßen
Verwendung von Emamectin bzw. Eprinomectin im Wasser behandelt werden
kann.
-
ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
-
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-
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