DE102004025731A1 - Antibakterielle Amid-Makrozyklen III - Google Patents

Antibakterielle Amid-Makrozyklen III Download PDF

Info

Publication number
DE102004025731A1
DE102004025731A1 DE102004025731A DE102004025731A DE102004025731A1 DE 102004025731 A1 DE102004025731 A1 DE 102004025731A1 DE 102004025731 A DE102004025731 A DE 102004025731A DE 102004025731 A DE102004025731 A DE 102004025731A DE 102004025731 A1 DE102004025731 A1 DE 102004025731A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
hydrogen
methyl
amino
independently
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE102004025731A
Other languages
English (en)
Inventor
Rainer Dr. Endermann
Kerstin Dr. Ehlert
Siegfried Dr. Raddatz
Yolanda Dr. Cancho-Grande
Martin Dr. Michels
Christoph Dr. Freiberg
Joachim Dr. Schuhmacher
Stefan Dr. Weigand
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aicuris GmbH and Co KG
Original Assignee
Bayer Healthcare AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Healthcare AG filed Critical Bayer Healthcare AG
Priority to DE102004025731A priority Critical patent/DE102004025731A1/de
Priority to PCT/EP2005/005223 priority patent/WO2005118613A2/de
Publication of DE102004025731A1 publication Critical patent/DE102004025731A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft antibakterielle Amid-Makrozyklen und Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen.

Description

  • Die Erfindung betrifft antibakterielle Amid-Makrozyklen und Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen.
  • In WO 03/106480 und WO 04/012816 werden antibakteriell wirkende Makrozyklen vom Biphenomycin B Typ mit Amid- bzw. Estersubstituenten beschrieben.
  • In US 3,452,136 , Dissertation R. U. Meyer, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Dissertation V. Leitenberger, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Synthesis (1992), (10), 1025-30, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 (1992), (1), 123-30, J. Chem. Soc., Chem. Commun. (1991), (10), 744, Synthesis (1991), (5), 409-13, J. Chem. Soc., Chem. Commun. (1991), (5), 275-7, J. Antibiot. (1985), 38(11), 1462-8, J. Antibiot. (1985), 38(11), 1453-61, wird der Naturstoff Biphenomycin B als antibakteriell wirksam beschrieben. Teilschritte der Synthese von Biphenomycin B werden in Synlett (2003), 4, 522-526 beschrieben.
  • Chirality (1995), 7(4), 181-92, J. Antibiot. (1991), 44(6), 674-7, J. Am. Chem. Soc. (1989), 111(19), 7323-7, J. Am. Chem. Soc. (1989), 111(19), 7328-33, J. Org. Chem. (1987), 52(24), 5435-7, Anal. Biochem. (1987), 165(1), 108-13, J. Org. Chem. (1985), 50(8), 1341-2, J. Antibiot. (1993), 46(3), C-2, J. Antibiot. (1993), 46(1), 135-40, Synthesis (1992), (12), 1248-54, Appl. Environ. Microbiol. (1992), 58(12), 3879-82, J. Chem. Soc., Chem. Commun. (1992), (13), 951-3 beschreiben einen strukturell verwandten Naturstoff, Biphenomycin A, der am Makrozyklus eine weitere Substitution mit einer Hydroxygruppe aufweist.
  • Die Naturstoffe entsprechen hinsichtlich ihrer Eigenschaften nicht den Anforderungen, die an antibakterielle Arzneimittel gestellt werden. Auf dem Markt sind zwar strukturell andersartige antibakteriell wirkende Mittel vorhanden, es kann aber regelmäßig zu einer Resistenzentwicklung kommen. Neue Mittel für eine gute und wirksamere Therapie sind daher wünschenswert.
    •
  • Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, neue und alternative Verbindungen mit gleicher oder verbesserter antibakterieller Wirkung zur Behandlung von bakteriellen Erkrankungen bei Menschen und Tieren zur Verfügung zu stellen.
  • Überraschenderweise wurde gefunden, dass bestimmte Derivate dieser Naturstoffe, worin die Carboxylgruppe des Naturstoffs gegen eine Amidgruppe ausgetauscht wird, die eine basische Gruppe enthält, gegen Biphenomycin resistente S. aureus Stämme (RN4220BiR und T17) antibakteriell wirksam sind.
  • Weiterin zeigen die Derivate gegen S. aureus Wildtyp-Stämme und Biphenomycin resistente S. aureus Stämme eine verbesserte Spontanresistenz-Frequenz.
  • Gegenstand der Erfindung sind Verbindungen der Formel
    Figure 00020001
    bei denen
    R1 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00020002
    wobei
    R7 gleich Wasserstoff oder Hydroxy ist,
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    R2 gleich Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist,
    R3 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00030001
    ist,
    wobei
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R8 gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist,
    R9 gleich Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00030002
    ist,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R20 gleich Wasserstoff oder *-(CH2)f-NHR22 ist,
    worin
    R22 gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    f eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R21 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
    d eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist
    und
    e eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R10 gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist,
    oder
    R9 und R10 bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring;
    R11 und R15 unabhängig voneinander *-(CH2)Z1-OH, *-(CH2)Z2-NHR16, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl, Aminocarbonylmethyl, *-CONHR17 oder *-CH2CONHR18 sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    Z1 und Z2 unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind,
    R16 gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    R17 und R18 unabhängig voneinander eine Gruppe der Formel
    Figure 00050001
    sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R8a gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist,
    R9a gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist,
    R10a gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist,
    oder
    R9a und R10a bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring,
    R11a und R15a unabhängig voneinander *-(CH2)Z1a-OH, *-(CH2)Z2a-NHR16a, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    R16a gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    Z1a und Z2a unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind,
    R12a und R14a unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind,
    R13a gleich Amino oder Hydroxy ist,
    ka eine Zahl 0 oder 1 ist,
    la, wa, xa und ya unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    R12 und R14 unabhängig voneinander Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00060001
    sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R20a gleich Wasserstoff oder *-(CH2)fa-NHR22a ist,
    worin
    R22a gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    fa eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R21a gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
    da eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist
    und
    ea eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R13 gleich Amino oder Hydroxy ist,
    R19 eine Gruppe der Formel
    Figure 00070001
    ist,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R8b gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist,
    R9b gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist,
    R10b gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist,
    oder
    R9b und R10b bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring,
    R11b und R15b unabhängig voneinander *-(CH2)Z1b-OH, *-(CH2)Z2b-NHR16b, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    R16b gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    Z1b und Z2b unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind,
    R12b und R14b unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind,
    R13b gleich Amino oder Hydroxy ist,
    kb eine Zahl 0 oder 1 ist,
    lb, wb, xb und yb unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    k und t unabhängig voneinander eine Zahl 0 oder 1 sind,
    l, w, x und y unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    m, r, s und v unabhängig voneinander eine Zahl 1 oder 2 sind,
    n, o, p und q unabhängig voneinander eine Zahl 0, 1 oder 2 sind,
    u eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist,
    Figure 00080001
    oder y unabhängig voneinander bei l, w, x oder y gleich 3 eine Hydroxy Gruppe tragen kann,
    R4 gleich Wasserstoff, Halogen, Amino, Hydroxy, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C4)-Alkyl, (C1-C4)-Alkoxy oder (C1-C6)-Alkylamino ist,
    R5 gleich Wasserstoff, Halogen, Amino, Hydroxy, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C4)-Alkyl, (C1-C4)-Alkoxy oder (C1-C6)-Alkylamino ist,
    R6 gleich Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist,
    und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.
  • Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formel (Ia) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) und/oder (Ia) umfassten, nachfolgend als Ausführungsbeispiel(e) genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) und/oder (Ia) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in stereoisomeren Formen (Enantiomere, Diastereomere) existieren. Die Erfindung umfasst deshalb die Enantiomeren oder Diastereomeren und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren.
  • Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegenden Erfindung sämtliche tautomere Formen.
  • Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind aber auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind aber beispielsweise für die Isolierung oder Reinigung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.
  • Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Benzoesäure.
  • Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C-Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methylmorpholin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und N-Methylpiperidin.
  • Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfindungsgemäßen Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungsmittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt.
  • Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:
    Alkyl per se und "Alk" und "Alkyl" in Alkoxy und Alkylamino stehen für einen linearen oder verzweigten Alkylrest mit in der Regel 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 4, besonders bevorzugt 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, beispielhaft und vorzugsweise für Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, tert-Butyl, n-Pentyl und n-Hexyl.
    Alkoxy steht beispielhaft und vorzugsweise für Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, tert-Butoxy, n-Pentoxy und n-Hexoxy.
    Alkylamino steht für einen Alkylaminorest mit einem oder zwei (unabhängig voneinander gewählten) Alkylsubstituenten. (C1-C3)-Alkylamino steht beispielsweise für einen Monoalkylaminorest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder für einen Dialkylaminorest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen pro Alkylsubstituent. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methylamino, Ethylamino, n-Propylamino, Isopropylamino, tert-Butylamino, n-Pentylamino, n-Hexylamino, N,N-Dimethylamino, N,N-Diethylamino, N-Ethyl-N-methylamino, N-Methyl-N-n-propylamino, N-Isopropyl-N-n-propylamino, N-tert-Butyl-N-methylamino, N-Ethyl-N-n-pentylamino und N-n-Hexyl-N-methylamino.
    Halogen steht für Fluor, Chlor, Brom und Iod.
  • Ein Symbol * in der Formel einer Gruppe kennzeichnet die Anknüpfstelle der Gruppe. Der Endpunkt der Linie, neben der jeweils ein * steht, steht dabei nicht für ein Kohlenstoffatom beziehungsweise eine CH2-Gruppe sondern ist Bestandteil der Bindung zu dem Atom, an das die Gruppe gebunden ist.
  • In den Formeln der Gruppen, für die R1 stehen kann, steht der Endpunkt der Linie, neben der jeweils ein * steht, nicht für ein Kohlenstoffatom beziehungsweise eine CH2-Gruppe sondern ist Bestandteil der Bindung zu dem Kohlenstoffatom, an das R1 gebunden ist.
  • In den Formeln der Gruppen, für die R3 stehen kann, steht der Endpunkt der Linie, neben der jeweils ein * steht, nicht für ein Kohlenstoffatom beziehungsweise eine CH2-Gruppe sondern ist Bestandteil der Bindung zu dem Stickstoffatom, an das R3 gebunden ist. R3 ist also beispielsweise 2-Aminoethyl im Falle von k = 0, l = 1, R9 = H und R10 = H, 3-Amino-2-hydroxypropyl im Falle von k = 1, R8 = OH, l = 1, R9 = H und R10 = H, Piperidin-4-yl-methyl im Falle von q = 1 und r = 1 oder Piperidin-4-yl im Falle von q = 0 und r = 1.
  • Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen, welche der Formel
    Figure 00100001
    entsprechen, worin R1 bis R6 die gleiche Bedeutung wie in Formel (I) haben,
    und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.
  • Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
    R1 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00110001
    wobei
    R7 gleich Wasserstoff oder Hydroxy ist,
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    R2 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
    R3 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00110002
    ist,
    wobei
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R8 gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist,
    R9 gleich Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00120001
    ist,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R20 gleich Wasserstoff oder *-(CH2)f-NHR22 ist,
    worin
    R22 gleich Wasserstoff ist
    und
    f eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R21 gleich Wasserstoff ist,
    d eine Zahl 0 ist
    und
    e eine Zahl 1, 2 oder 3 ist,
    R10 gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist,
    R11 gleich *-(CH2)Z1-OH, *-(CH2)Z2-NHR16, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl, Aminocarbonyl-methyl, *-CONHR17 oder *-CH2CONHR18 ist,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    Z1 und Z2 unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind,
    R16 gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    R17 und R18 unabhängig voneinander eine Gruppe der Formel
    Figure 00130001
    sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist,
    R8a gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist,
    R9a gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist,
    R10a gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist,
    oder
    R9a und R10 a bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring,
    R11 a und R15a unabhängig voneinander *-(CH2)Z1a-OH, *-(CH2)Z2a-NHR16a, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl sind,
    worin
    * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist,
    R1 6a gleich Wasserstoff oder Methyl ist
    und
    Z1a und Z2a unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind,
    R12 a und R14a unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind,
    R13a gleich Amino oder Hydroxy ist,
    ka eine Zahl 0 oder 1 ist,
    la, wa, xa und ya unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    R12 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
    k gleich eine Zahl 0 oder 1 ist,
    l und w unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    Figure 00140001
    oder w unabhängig voneinander bei 1 oder w gleich 3 eine Hydroxy-Gruppe tragen kann,
    R4 gleich Hydroxy ist,
    R5 gleich Wasserstoff ist,
    R6 gleich Wasserstoff ist,
    und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.
  • Gegenstand der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) oder ihrer Salze, ihrer Solvate oder der Solvate ihrer Salze, wobei nach Verfahren
    • [A] Verbindungen der Formel
      Figure 00140002
      worin R1, R2, R4, R5 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben und boc gleich tert-Butoxycarbonyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von einem oder mehreren Dehydratisierungsreagenzien mit Verbindungen der Formel H2NR3 (III),worin R3 die oben angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure umgesetzt werden, oder
    • [B] Verbindungen der Formel
      Figure 00150001
      worin R1, R2, R4, R5 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben und Z gleich Benzyloxycarbonyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von einem oder mehreren Dehydratisierungsreagenzien mit Verbindungen der Formel H2NR3 (III),worin R3 die oben angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure oder durch Hydrogenolyse umgesetzt werden, oder
    • [C] Verbindungen der Formel
      Figure 00160001
      worin R1, R2, R4, R5 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben und Z gleich Benzyloxycarbonyl ist, und R23 gleich Benzyl, Methyl oder Ethyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von Kaliumcyanid mit Verbindungen der Formel H2NR3 (III),worin R3 die oben angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure oder durch Hydrogenolyse umgesetzt werden.
  • Die freie Base der Salze kann zum Beispiel durch Chromatographie an einer Reversed Phase Säule mit einem Acetonitril-Wasser-Gradienten unter Zusatz einer Base erhalten werden, insbesondere durch Verwendung einer RP18 Phenomenex Luna C18(2) Säule und Diethylamin als Base.
  • Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) oder ihrer Solvate nach Anspruch 1, bei dem Salze der Verbindungen oder Solvate der Salze der Verbindungen durch Chromatographie unter Zusatz einer Base in die Verbindungen oder ihre Solvate überführt werden.
  • Die Hydroxygruppe an R7 ist gegebenenfalls während der Umsetzung der Verbindungen der Formeln (IX) und (XI) mit einer tert-Butyldimethylsilyl-Gruppe geschützt und wird in einem der darauf folgenden Reaktionsschritte unter Desilylierungsbedingungen mit abgespalten.
  • Reaktive Funktionalitäten in den Resten R1 und R3 von Verbindungen der Formeln (II), (III), (IV) und (VI) werden bereits geschützt mit in die Synthese eingebracht, bevorzugt sind säurelabile Schutzgruppen (z.B. boc oder z). Nach erfolgter Umsetzung zu Verbindungen der Formel (I) können die Schutzgruppen durch Entschützungsreaktion abgespalten werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind Entschützungsreaktionen unter sauren Bedingungen oder durch Hydrogenolyse.
  • Reaktive Funktionalitäten in dem Rest R1 von Verbindungen der Formeln (VII), (VIII), (IX) und (XI) werden bereits geschützt mit in die Synthese eingebracht, bevorzugt sind säurelabile Schutzgruppen (z.B. boc oder z). Diese Schutzgruppen werden in einem der darauf folgenden Reaktionsschritte durch Entschützungsreaktion abgespalten. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind Entschützungsreaktionen unter sauren Bedingungen oder durch Hydrogenolyse.
  • Die Umsetzung der ersten Stufe der Verfahren [A] und [B] erfolgt im Allgemeinen in inerten Lösungsmitteln, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Als Dehydratisierungsreagenzien eignen sich hierbei beispielsweise Carbodiimide wie z.B. N,N'-Diethyl-, N,N'-Dipropyl-, N,N'-Diisopropyl-, N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC), N-Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-1,2-oxazolium-3-sulfat oder 2-tert-Butyl-5-methyl-isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Isobutylchloroformat, oder Bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphorylchlorid oder Benzotriazolyloxy-tri(dimethylamino)phosphoniumhexafluorophosphat, oder O-(Benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetra-methyluroniumhexafluorophosphat (HBTU), 2-(2-Oxo-1-(2H)-pyridyl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluoroborat (TPTU) oder O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumlhexafluorophosphat (HATU), oder 1-Hydroxybenztriazol (HOBt), oder Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)-phosphoniumhexafluoro-phosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen, oder Mischung aus diesen zusammen mit Basen.
  • Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder -hydrogencarbonat, oder organische Basen wie Trialkylamine z.B. Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.
  • Vorzugsweise wird die Kondensation mit HATU in Gegenwart einer Base, insbesondere Diisopropylethylamin, durchgeführt.
  • Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoff wie Benzol, oder Nitromethan, Dioxan, Dimethylformamid oder Acetonitril. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt ist Dimethylformamid.
  • Die Umsetzung der ersten Stufe des Verfahrens [C] erfolgt im Allgemeinen mit der Verbindung der Formel (III) als Lösungsmittel, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Die Umsetzung mit einer Säure in der zweiten Stufe der Verfahren [A], [B] und [C] erfolgt bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Als Säuren eignen sich hierbei Chlorwasserstoff in Dioxan, Bromwasserstoff in Essigsäure oder Trifluoressigsäure in Methylenchlorid.
  • Die Hydrogenolyse in der zweiten Stufe der Verfahren [B] und [C] erfolgt im Allgemeinen in einem Lösungsmittel in Gegenwart von Wasserstoff und Palladium auf Aktivkohle, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Lösungsmittel sind beispielsweise Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol oder iso-Propanol, in einem Gemisch mit Wasser und Eisessig, bevorzugt ist ein Gemisch aus Ethanol, Wasser und Eisessig.
  • Die Verbindungen der Formel (III) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.
  • Die Verbindungen der Formel (II) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00180001
    worin R1, R2, R4, R5 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben,
    mit Di-(tert-butyl)-dicarbonat in Gegenwart einer Base umgesetzt werden.
  • Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen in einem Lösungsmitteln, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Basen sind beispielsweise Alkalihydroxide wie Natrium- oder Kaliumhydroxid, oder Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder andere Basen wie DBU, Triethylamin oder Diisopropylethylamin, bevorzugt ist Natriumhydroxid oder Natriumcarbonat.
  • Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid oder 1,2-Dichlorethan, Alkohole wie Methanol, Ethanol oder iso-Propanol, oder Wasser.
  • Vorzugsweise wird die Umsetzung mit Natriumhydroxid in Wasser oder Natriumcarbonat in Methanol durchgeführt.
  • Die Verbindungen der Formel (V) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00190001
    worin R1, R2, R4, R5 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben, und
    R23 gleich Benzyl, Methyl oder Ethyl ist,
    mit einer Säure oder durch Hydrogenolyse, wie für die zweite Stufe des Verfahrens [B] beschrieben, gegebenenfalls durch anschließende Umsetzung mit einer Base zur Verseifung des Methyl- oder Ethylesters, umgesetzt werden.
  • Die Verseifung kann zum Beispiel erfolgen, wie bei der Umsetzung von Verbindungen der Formel (VI) zu Verbindungen der Formel (IV) beschrieben.
  • Die Verbindungen der Formel (IV) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem in Verbindungen der Formel (VI) der Benzyl-, Methyl- oder Ethylester verseift wird.
  • Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen in einem Lösungsmitteln, in Gegenwart einer Base, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Basen sind beispielsweise Alkalihydroxide wie Lithium-, Natrium- oder Kaliumhydroxid, bevorzugt ist Lithiumhydroxid.
  • Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Ether wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, oder Alkohole wie Methanol, Ethanol oder Isopropanol, oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösungsmittel oder Gemische der Lösungsmittel mit Wasser einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Tetrahydrofuran oder ein Gemisch aus Methanol und Wasser.
  • Die Verbindungen der Formel (VI) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00200001
    worin R1, R2, R4, R5, R6 und R23 die oben angegebene Bedeutung haben,
    in der ersten Stufe mit Säuren, wie für die zweite Stufe der Verfahren [A] und [B] beschrieben, und in der zweiten Stufe mit Basen umgesetzt werden.
  • In der zweiten Stufe erfolgt die Umsetzung mit Basen im Allgemeinen in einem Lösungsmitteln, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Basen sind beispielsweise Alkalihydroxide wie Natrium- oder Kaliumhydroxid, oder Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder andere Basen wie DBU, Triethylamin oder Diisopropylethylamin, bevorzugt ist Triethylamin.
  • Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Chloroform, Methylenchlorid oder 1,2-Dichlorethan, oder Tetrahydrofuran, oder Gemische der Lösungsmittel, bevorzugt ist Methylenchlorid oder Tetrahydrofuran.
  • Die Verbindungen der Formel (VII) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00210001
    worin R1, R2, R4, R5, R6 und R23 die oben angegebene Bedeutung haben,
    mit Pentafluorphenol in Gegenwart von Dehydratisierungsreagenzien, wie für die erste Stufe der Verfahren [A] und [B] beschrieben, umgesetzt werden.
  • Die Umsetzung erfolgt bevorzugt mit DMAP und EDC in Dichlormethan in einem Temperaturbereich von -40°C bis 40°C bei Normaldruck.
  • Die Verbindungen der Formel (VIII) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00210002
    worin R1, R2, R4, R5, R6 und R23 die oben angegebene Bedeutung haben,
    mit Fluorid, insbesondere mit Tetrabutylammoniumfluorid, umgesetzt werden.
  • Die Umsetzung erfolgt im Allgemeinen in einem Lösungsmitteln, bevorzugt in einem Temperaturbereich von -10°C bis 30°C bei Normaldruck.
  • Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, oder Kohlenwasserstoffe wie Benzol oder Toluol, oder Ether wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Bevorzugte Lösungsmittel sind Tetrahydrofuran und Dimethylformamid.
  • Die Verbindungen der Formel (IX) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
    Figure 00220001
    worin R2, R4, R5 und R23 die oben angegebene Bedeutung haben,
    mit Verbindungen der Formel
    Figure 00220002
    worin R1 und R6 die oben angegebene Bedeutung haben,
    in Gegenwart von Dehydratisierungsreagenzien, wie für die erste Stufe der Verfahren [A] und [B] beschrieben, umgesetzt werden.
  • Die Verbindungen der Formel (X) sind bekannt oder können analog den im Beispielteil beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
  • Die Verbindungen der Formel (XI) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.
  • Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch folgendes Syntheseschema verdeutlicht werden: Synthese von Biphenomycin A-Derivaten am Beispiel von (7R,8S,11S,14S)-14-Amino-N-(2-aminoethyl)-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxamid-Trihydrochlorid
    Figure 00230001
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches und pharmakokinetisches Wirkspektrum.
  • Sie eignen sich daher zur Verwendung als Arzneimittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten bei Menschen und Tieren.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können aufgrund ihrer pharmakologischen Eigenschaften allein oder in Kombination mit anderen Wirkstoffen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Infektionskrankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen, eingesetzt werden.
  • Beispielsweise können lokale und/oder systemische Erkrankungen behandelt und/oder verhindert werden, die durch die folgenden Erreger oder durch Mischungen der folgenden Erreger verursacht werden:
    Gram-positive Kokken, z.B. Staphylokokken (Staph. aureus, Staph. epidermidis) und Streptokokken (Strept. agalactiae, Strept. faecalis, Strept. pneumoniae, Strept. pyogenes); gram-negative Kokken (neisseria gonorrhoeae) sowie gram-negative Stäbchen wie Enterobakteriaceen, z.B. Escherichia coli, Hämophilus influenzae, Citrobacter (Citrob. freundii, Citrob. divernis), Salmonella und Shigella; ferner Klebsiellen (Klebs. pneumoniae, Klebs. oxytocy), Enterobacter (Ent. aerogenes, Ent. agglomerans), Hafnia, Serratia (Serr. marcescens), Proteus (Pr. mirabilis, Pr. rettgeri, Pr. vulgaris), Providencia, Yersinia, sowie die Gattung Acinetobacter. Darüber hinaus umfaßt das antibakterielle Spektrum die Gattung Pseudomonas (Ps. aeruginosa, Ps. maltophilia) sowie strikt anaerobe Bakterien wie z.B. Bacteroides fragilis, Vertreter der Gattung Peptococcus, Peptostreptococcus sowie die Gattung Clostridium; ferner Mykoplasmen (M. pneumoniae, M. hominis, M. urealyticum) sowie Mykobakterien, z.B. Mycobacterium tuberculosis.
  • Die obige Aufzählung von Erregern ist lediglich beispielhaft und keineswegs beschränkend aufzufassen. Als Krankheiten, die durch die genannten Erreger oder Mischinfektionen verursacht und durch die erfindungsgemäßen topisch anwendbaren Zubereitungen verhindert, gebessert oder geheilt werden können, seien beispielsweise genannt:
    Infektionskrankheiten beim Menschen wie z. B. septische Infektionen, Knochen- und Gelenkinfektionen, Hautinfektionen, postoperative Wundinfektionen, Abszesse, Phlegmone, Wundinfektionen, infizierte Verbrennungen, Brandwunden, Infektionen im Mundbereich, Infektionen nach Zahnoperationen, septische Arthritis, Mastitis, Tonsillitis, Genital-Infektionen und Augeninfektionen.
  • Außer beim Menschen können bakterielle Infektionen auch bei anderen Spezies behandelt werden. Beispielhaft seien genannt:
    Schwein: Coli-diarrhoe, Enterotoxamie, Sepsis, Dysenterie, Salmonellose, Metritis-Mastitis-Agalaktiae-Syndrom, Mastitis;
    Wiederkäuer (Rind, Schaf, Ziege): Diarrhoe, Sepsis, Bronchopneumonie, Salmonellose, Pasteurellose, Mykoplasmose, Genitalinfektionen;
    Pferd: Bronchopneumonien, Fohlenlähme, puerperale und postpuerperale Infektionen, Salmonellose;
    Hund und Katze: Bronchopneumonie, Diarrhoe, Dermatitis, Otitis, Harnwegsinfekte, Prostatitis;
    Geflügel (Huhn, Pute, Wachtel, Taube, Ziervögel und andere): Mycoplasmose, E. coli-Infektionen, chronische Luftwegserkrankungen, Salmonellose, Pasteurellose, Psittakose.
  • Ebenso können bakterielle Erkrankungen bei der Aufzucht und Haltung von Nutz- und Zierfischen behandelt werden, wobei sich das antibakterielle Spektrum über die vorher genannten Erreger hinaus auf weitere Erreger wie z.B. Pasteurella, Brucella, Campylobacter, Listeria, Erysipelothris, Corynebakterien, Borellia, Treponema, Nocardia, Rikettsie, Yersinia, erweitert.
  • Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist der Einsatz der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, vorzugsweise von bakteriellen Krankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen.
  • Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
  • Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
  • Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer antibakteriell wirksamen Menge der erfindungsgemäßen Verbindungen.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat bzw. Stent.
  • Für diese Applikationswege können die erfindungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.
  • Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende schnell und/oder modifiziert die erfindungsgemäßen Verbindungen abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nichtüberzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophylisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weichgelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen.
  • Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.
  • Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen, -lösungen, -sprays; lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augenpräparationen, Vaginalkapseln, wässrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme (wie beispielsweise Pflaster), Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Laktose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige Polyethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecylsulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispielsweise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.
  • Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.
  • Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 5 bis 250 mg/kg Körpergewicht je 24 h zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Menge etwa 5 bis 100 mg/kg Körpergewicht je 24 h.
  • Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
  • Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.
  • A. Beispiele
  • Verwendete Abkürzungen:
    • Aloc
    Allyloxycarbonyl
    aq.
    wässrig
    Äquiv.
    Äquivalent
    Bn
    Benzyl
    Boc
    tert-Butoxycarbonyl
    CDCl3
    Chloroform
    CH
    Cyclohexan
    d
    Dublett (im 1H-NMR)
    dd
    Dublett von Dublett
    DCM
    Dichlormethan
    DCC
    Dicyclohexylcarbodiimid
    DIC
    Diisopropylcarbodiimid
    DIPEA
    Diisopropylethylamin
    DMSO
    Dimethylsulfoxid
    DMAP
    4-N,N-Dimethylaminopyridin
    DMF
    Dimethylformamid
    d. Th.
    der Theorie
    EDC
    N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid × HCl
    EE
    Ethylacetat (Essigsäureethylester)
    ESI
    Elektrospray-Ionisation (bei MS)
    ges.
    gesättigt
    HATU
    O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorophosphat
    HBTU
    O-(Benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorophosphat
    HOBt
    1-Hydroxy-1H-benzotriazol × H2O
    h
    Stunde(n)
    HPLC
    Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie
    konz.
    konzentriert
    LC-MS
    Flüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektroskopie
    m
    Multiplett (im 1H-NMR)
    min
    Minuten
    MS
    Massenspektroskopie
    MeOH
    Methanol
    NMR
    Kernresonanzspektroskopie
    MTBE
    Methyl-tert-butylether
    Pd/C
    Palladium/Kohle
    proz.
    Prozent
    q
    Quartett (im 1H-NMR)
    Rf
    Retentionsindex (bei DC)
    RT
    Raumtemperatur
    Rt
    Retentionszeit (bei HPLC)
    s
    Singulett (im 1H-NMR)
    t
    Triplett (im 1H-NMR)
    TBS
    tert-Butyldimethylsilyl
    THF
    Tetrahydrofuran
    TMSE
    2-(Trimethylsilyl)-ethyl
    TPTU
    2-(2-Oxo-1(2H)-pyridyl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluoroborat
    Z
    Benzyloxycarbonyl
  • LC-MS- und HPLC-Methoden:
    • Methode 1 (HPLC): Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil RP-18, 60 mm × 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml Perchlorsäure/l Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 9 min 90%B, 9.2 min 2%B, 10 min 2%B; Fluss: 0.75 ml/min; Ofen: 30°C; UV-Detektion: 210 nm.
    • Methode 2 (GC-MS): Instrument: Micromass GCT, GC6890; Säule: Restek RTX-35MS, 30 m × 250 μm × 0.25 μm; konstanter Fluss mit Helium: 0.88 ml/min; Ofen: 60°C; Inlet: 250°C; Gradient: 60°C (0.30 min halten), 50°C/min → 120°C, 16°C/min → 250°C, 30°C/min → 300°C (1.7 min halten).
    • Methode 3 (HPLC): Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil RP-18, 60 mm × 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml Perchlorsäure/l Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2%B, 0.5 min 2%B, 4.5 min 90%B, 6.5 min 90%B, 6.7 min 2%B, 7.5 min 2%B; Fluss: 0.75 ml/min; Ofen: 30°C; UV-Detektion: 210 nm.
    • Methode 4 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A → 2.5 min 30%A → 3.0 min 5%A → 4.5 min 5%A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 50°C; UV-Detektion: 210 nm.
    • Methode 5 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; W DAD; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A → 2.5 min 30%A → 3.0 min 5%A → 4.5 min 5%A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min. 2 ml/min; Ofen: 50°C; UV-Detektion: 210 nm.
    • Methode 6 (LC-MS): Instrument: Micromass Quattro LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm × 4 mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A → 2.5 min 30%A → 3.0 min 5%A → 4.5 min 5%A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 50°C; UV-Detektion: 208-400 nm.
    • Methode 7 (LC-MS): Instrument: Micromass Platform LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Thermo HyPURITY Aquastar 3μ 50 mm × 2.1 mm; Eluent A: 1 l Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 l Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 100%A → 0.2 min 100%A → 2.9 min 30%A → 3.1 min 10%A → 5.5 min 10%A; Ofen: 50°C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
    • Methode 8 (HPLC mit chiraler Phase): Säule: Packungsmaterial Chiraler Kieselgelselektor KBD 5287 (250 mm × 4.6 mm) basierend auf dem Selektor Poly(N-methacryloyl-L-leucin-dicyclopropylmethylamid); Eluent: Methyl-tert-butylether; Temperatur: 24°C; Fluß: 1 ml/min.
    • Methode 9 (HPLC mit chiraler Phase): Säule: Packungsmaterial Chiraler Kieselgelselektor KBD 5326 (600 mm × 40 mm) basierend auf dem Selektor Poly(N-methacryloyl-L-leucin-dicyclopropylmethylamid); Eluent A: Methyl-tert-butylether, Eluent B: Tetrahydrofuran; Gradient: 0.0 min 100%A → 45 min 100%A → 55 min 100%B; Temperatur: 24°C; Fluß: 50 ml/min.
    • Methode 10 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2790; Säule: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50 mm × 2 mm, 3.0 μm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure/l, Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige Ameisensäure/l; Gradient: 0.0 min 70%B → 4.5 min 90%B; Ofen: 45°C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
    • Präparative RP-HPLC: Säule: YMC Gel ODS-AQ S-5/15 μM, 250 mm × 30 mm, Eluent A: Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0.00 min 5%B → 3.00 min 5%B → 35.0 min 95%B → 46.0 min 95%B; Temp.: Raumtemperatur; Fluss: 50 ml/min; UV-Detektion.
  • Chemische Synthese der Beispiele
  • Synthese der Ausgangsverbindungen:
  • Synthese von substituierten beta-Hydroxyphenylalaninderivaten am Beispiel von Methyl-(betaR)-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-L-phenylalaninat
    Figure 00310001
  • Synthese von geschützten Biphenyl-bisaminosäuren am Beispiel von Methyl-(2S,3R)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propan
    Figure 00310002
  • Ausgangsverbindungen
  • Beispiel 1A
  • Benzyl-2-(benzyloxy)-5-brombenzoat
    Figure 00320001
  • Zu einer Lösung von 40 g (0.184 mol) 5-Brom-2-hydroxybenzoesäure in 500 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden 62 ml (0.46 mol) Benzylbromid und 76 g (0.553 mol) Kaliumcarbonat gegeben. Nach 16 h Rühren bei 85°C wird die abgekühlte Mischung filtriert und das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wird in Essigsäureethylester aufgenommen und mehrmals mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet, das Lösungsmittel im Vakuum eingedampft und der Rückstand aus Petrolether umkristallisiert.
    Ausbeute: 58 g (79% d. Th.), Feststoff
    HPLC (Methode 1): Rt = 5.81 min.
    MS (DCI(NH3)): m/z = 414 (M+NH4)+.
    1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 5.2 (s, 2H), 5.3 (s, 2H), 7.23 (d, 1H), 7.25-7.45 (m, 10H) 7.70 (dd, 1H), 7.8 (d, 1H).
  • Beispiel 2A
  • 2-(Benzyloxy)-5-brombenzoesäure
    Figure 00320002
  • Darstellung siehe Collect. Czech. Chem. Commun., 1976, 41, 3384-3387. 30.6 g (77 mmol) Benzyl-2-(benzyloxy)-5-brombenzoat (Beispiel 1A) werden in 450 ml THF/Wasser (1:1) gelöst und mit 77 ml 1N Natriumhydroxid-Lösung versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 24 h bei 80°C gerührt. Im Vakuum wird auf ein Volumen von 100 ml eingeengt und mit Diethylether extrahiert. Die wässrige Phase wird abgetrennt, mit 1N Salzsäure auf pH 1 gestellt und mehrmals mit Essigsäureethylester extrahiert. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingeengt.
    Ausbeute: 21 g (89% d. Th.), Feststoff
    GC-MS (Methode 2): Rt = 12.90 min,
    MS (EI+): m/z = 306 (M)+.
    1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 5.21 (s, 2H), 7.17 (d, 1H), 7.31 (mc, 1H), 7.38 (mc, 2H), 7.47 (mc, 2H), 7.64 (dd, 1H), 7.73 (d, 1H), 13.05 (br. s, 1H).
  • Beispiel 3A
  • Methyl-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-oxophenylalaninat
    Figure 00330001
  • Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung 1 von 17.5 g (57 mmol) 2-(Benzyloxy)-5-brombenzoesäure (Beispiel 2A) in 80 ml absolutem Dichlormethan werden unter Argon 18.8 ml (0.143 mmol) 1-Chlor-N,N,2-trimethylpropenylamin zugegeben. Es wird 1 h bei 0°C gerührt. In einem zweiten Kolben werden unter Argon 26.6 g (0.114 mmol) Methyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-3-oxoserinat (Darstellung siehe Synthesis, 1992, 1248-1254) in 770 ml absolutem THF bei -70°C mit 143 ml (228 mmol) einer 1.6M Lösung von. n-Butyllithium in Hexan versetzt und für 20 min gerührt. Anschließend wird bei -70°C das in Lösung 1 erzeugte Säurechlorid langsam zugetropft. Nach beendeter Zugabe wird langsam auf RT erwärmt und weitere 24 h intensiv gerührt. Die Lösungsmittel werden im Vakuum eingedampft, der Rückstand wird in Essigsäureethylester aufgenommen und nacheinander mit eisgekühlter 0.5%iger Schwefelsäure und 1N Kaliumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen. Die organische Phase wird über Magensiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel wird im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird säulenchromatographisch an Kieselgel 60 gereinigt (Cyclohexan:Essigsäureethylester 20:1).
    Ausbeute: 19 g (70% d. Th.), Feststoff
    HPLC (Methode 3): Rt = 5.26 min.
    MS (DCI(NH3)): m/z = 495 (M+NH4)+.
    1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 3.54 (s, 3H), 5.25 (s, 2H), 5.68 (d, 1H), 7.2 (d, 1H), 7.3-7.5 (m, 5H), 7.65-7.78 (m, 3H).
  • Beispiel 4A
  • Methyl-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-hydroxyphenylalaninat
    Figure 00340001
  • Unter Argon werden 2.1 ml einer 1M Lösung (S)-2-Methyl-CBS-oxazaborolidin in 25 ml Tetrahydrofuran vorgelegt und mit 4.8 ml (27 mmol) Boran-N,N-diethylanilin-Komplex versetzt. Nach 30 min Rühren bei RT werden bei 0°C 10 g (20.9 mmol) Methyl-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-oxophenylalaninat (Beispiel 3A) gelöst in 25 ml THF zugetropft. Nach beendeter Zugabe wird die Lösung unter langsamem Erwärmen auf RT 16 h gerührt. Anschließend tropft man 15 ml Methanol langsam hinzu und engt im Vakuum ein. Der Rückstand wird chromatographisch an einer präparativen RP-HPLC gereinigt. Das Produkt liegt als threo/erythro Gemisch (1:5) vor. Der Enantiomerenüberschuss (ee) beträgt jeweils 55%, ermittelt durch analytische HPLC an chiraler Phase (Methode 8).
    Ausbeute: 5.1 g (51 % d. Th.).
    threo-Isomer:
    LC-MS (Methode 4): Rt = 2.59 min
    MS (ESI): m/z = 480 (M+H)+.
    1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.3 (s, 9H), 2.66 (br, s, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.77 (br. d, 1H), 5.14 (mc, 2H), 5.25 (br. s, 1H), 5.58 (br. s, 1H), 6.8 (d, 1H), 7.28-7.50 (m, 6H), 7.55 (d, 1H).
    erythro-Isomer:
    LC-MS (Methode 4): Rt = 2.57 min
    MS (ESI): m/z = 480 (M+H)+.
    1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.43 (s, 9H), 3.40 (s, 3H), 4.49 (br. d, 1H), 4.71 (br. m, 1H), 5.05 (mc, 2H), 5.34 (br. m, 1H), 5.40 (br. m, 1H), 6.77 (d, 1H), 7.28-7.45 (m, 6H), 7.47 (d, 1H).
  • Beispiel 5A
  • Methyl-(betaR)-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-hydroxy-L-phenylalaninat
    Figure 00350001
  • Die Verbindung aus Beispiel 4A wird als Isomerengemisch durch Chromatographie an einer chiralen stationären Phase (Methode 9) in die vier Diastereomere getrennt. Die Zielverbindung wird als dritte Fraktion eluiert.
    LC-MS (Methode 6): Rt = 2.75 min
    MS (ESI): m/z = 480 (M+H)+.
  • Beispiel 6A
  • Methyl-(betaR)-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]-oxy}-L-phenylalaninat
    Figure 00350002
  • Eine Lösung von 200 mg (0.416 mmol) Methyl-(betaR)-2-(benzyloxy)-5-Brom-N-(tert-butoxycarbonyl)-beta-hydroxy-L-phenylalaninat (Beispiel 5A) in 2.5 ml DMF wird bei 0°C mit 220 mg (0.832 mmol) Trifluormethansulfonsäure-tert-butyldimethylsilylester, 0.084 mg (0.832 mmol) Triethylamin und 1 mg (0.42 mmol) 4-Dimethylaminopyridin versetzt und nach Aufwärmen auf RT für 24 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wird mit Dichlormethan versetzt und nacheinander mit 1N Natriumhydrogencarbonatlösung und Wasser gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, eingeengt und im Vakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird chromatographisch gereinigt (RP-HPLC, Laufmittel Gradient aus Acetonitril/Wasser).
    Ausbeute: 140 mg (57% d. Th.)
    LC-MS (Methode 5): Rt = 3.51 min
    MS (ESI): m/z = 595 (M+H)+.
    1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = -0.15 (s, 3H), -0.7 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 1.29 (s, 9H), 3.72 (s, 3H), 4.7 (dd, 1H), 5.0-5.3 (m, 3H), 5.68 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 7.25-7.50 (m, 7H).
  • Beispiel 7A
  • 2-(Trimethylsilyl)ethyl-2-(benzyloxy)-N-[(benzyloxy)carbonyl]-5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat
    Figure 00360001
  • Zu einer Lösung aus 2.0 g (3.17 mmol) 2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure-(2-trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel 11A aus WO03/106480) in 30 ml DMSO werden 0.923 g (9.5 mmol) Kaliumacetat zugegeben. Die Mischung wird deoxygeniert, indem durch die kräftig gerührte Lösung 15 min lang Argon durchgeleitet wird. Dann werden 0.924 g (3.64 mmol) 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octamethyl-2,2'-bi-1,3,2-dioxaborolan und 0.116 g (0.160 mmol, 0.05 Äquivalente) Bis-(diphenylphosphino)ferrocenpalladium(II)chlorid zugegeben. Unter leichtem Argonstrom wird auf 80°C erhitzt und nach 6 h wieder abgekühlt. Die Mischung wird über Silicagel (Laufmittel: Dichlormethan) filtriert. Der Rückstand wird säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel: Cyclohexan:Ethylacetat 4:1) gereinigt.
    Ausbeute: 1.12 g (56% d. Th.)
    LC-MS (Methode 10): Rt = 3.02 min.
    MS (EI): m/z = 632 (M+H)+
    1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 0.92 (dd, 2H), 1.31 (s, 12H), 2.95-3.95 (m, 2H), 4.11 (mc, 2H), 4.55 (11 (mc, 1H), 4.99 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 5.53 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 7.15-7.47 (m, 10H), 7.58 (d, 1H), 7.67 (dd, 1H).
  • Beispiel 8A
  • Methyl-(2S,3R)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-3-{[tert-butyl-(dimethyl)silyl]oxy}propanoat
    Figure 00370001
  • Eine Lösung von 2.0 g (3.36 mmol) Methyl-(betaR)-2-(benzyloxy)-5-brom-N-(tert-butoxy-carbonyl)-beta-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-L-phenylalaninat (Beispiel 6A) und 2.92 g (3.70 mmol) 2-(Trimethylsilyl)ethyl-2-(benzyloxy)-N-[(benzyloxy)carbonyl]-5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat (Beispiel 7A) in 16 ml 1-Methyl-2-pynolidon wird inertisiert und mit Argon gesättigt (ca. 30 min Argon durchleiten). Anschließend gibt man 250 mg (0.34 mmol) Bis(diphenylphosphino)ferrocen-palladium(II)chlorid (PdCl2(dppf)), 2.19 g (6.73 mmol) Cäsiumcarbonat und 0.8 ml Wasser hinzu. Das Reaktionsgemisch wird mit Argon leicht überströmt und für 3 h bei 50°C gerührt. Die Mischung wird abgekühlt, in Essigsäureethylester aufgenommen und nacheinander mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung und Wasser gewaschen. Die organische Phase wird über Magensiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel wird im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird säulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Cyclohexan:Essigsäureethylester Gradient: 15:1 → 10:1) und anschließend in Methanol ausgerührt. Der entstandene Feststoff wird abfiltriert und im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 2.77 g (77% d. Th.).
    LC-MS (Methode 5): Rt = 3.75 min
    MS (EI): m/z = 1019 (M+H)+.
    1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = -0.11 (s, 3H), 0.00 (m, 12H), 0.8-0.95 (m, 11H), 1.17 (s, 9H), 3.0-3.3 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.0-4.25 (m, 2H), 4.52-4.65 (m, 1H), 4.77 (mc, 1H), 4.92-5.3 (m, 7H), 5.52-5.65 (m, 1H), 5.77 (d, 1H), 6.85-6.97 (m, 2H), 7.19-7.46 (m, 16H), 7.48-7.65 (m, 3H).
  • Beispiel 9A
  • Methyl-(2S,3R)-2-amino-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat Hydrochlorid
    Figure 00380001
  • Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 1.64 g (1.61 mmol) Methyl-(2S,3R)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-3-{[tert-butyl(dimethyl)si1yl]oxy}propanoat (Beispiel 8A) in 5 ml wasserfreiem Dioxan werden 30 ml einer 4M Chlorwasserstoff-Dioxan-Lösung über ca. 20 min hinzugegeben. Nach 3 h Rühren wird das Lösungsmittel im Vakuum eingedampft, das Rohprodukt im Hochvakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung für nachfolgende Synthesen eingesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 4): Rt = 3.24 min.
    MS (EI): m/z = 919 (M-HCl+H)+.
  • Beispiel 10A
  • Methyl-(2S,3R)-2-[((2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}pentanoyl)amino]-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyl-oxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat
    Figure 00390001
  • Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 1.54 g (1.61 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-amino-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat Hydrochlorid (Beispiel 9A) und 0.88 g (1.77 mmol) 5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-4(R)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentansäure (Beispiel 14A aus WO03/106480) in 25 ml wasserfreiem DMF werden 0.76 g (2.01 mmol) HATU und 0.58 g (4.5 mmol) N,N-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Nach 30 min Rühren bei 0°C werden zusätzliche 0.15 g (1.13 mmol) N,N-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 15 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird dann eingedampft und der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen. Die organische Phase wird nacheinander mit Wasser, 0.2N Salzsäure und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird säulenchromatographisch an Kieselgel mit Dichlormethan/Essigsäureethylester (Gradient 30/1 → 20/1 → 2/1) gereinigt.
    Ausbeute: 1.94 g (86% d. Th.)
    LC-MS (Methode 4): Rt = 3.98 min.
    MS (EI): m/z = 1397 (M+H)+.
  • Beispiel 11A
  • Methyl-(2S,3R)-2-({(2S)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-butanoyl}amino)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat
    Figure 00400001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 10A aus 0.352 g (0.37 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-amino-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat Hydrochlorid (Beispiel 9A) und 142 mg (0.41 mmol) (2S)-4-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-butancarbonsäure mit 154 mg (0.41 mmol) HATU und insgesamt 167 mg (1.29 mmol) Hünig-Base in 5 ml absolutem DMF.
    Ausbeute: 412 mg (72% d. Th.)
    LC-MS (Methode 4): Rt = 3.55 min.
    MS (EI): m/z = 1253 (M+H)+.
  • Beispiel 12A
  • Methyl-(2S,3R)-2-({(2S)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-pentanoyl}amino)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat
    Figure 00410001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 10A aus 0.98 g (1.02 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-amino-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat Hydrochlorid (Beispiel 9A) und 0.45 g (1.23 mmol) N5-[(Benzyloxy)carbonyl]-N2-(tert-butoxycarbonyl)-L-ornithin mit 0.486 g (1.28 mmol) HATU und insgesamt 0.463 g (3.58 mmol) Hünig-Base in 16 ml absolutem DMF.
    Ausbeute: 1.06 g (68% d. Th.)
    LC-MS (Methode 4): Rt = 3.56 min.
    MS (EI): m/z = 1267 (M+H)+.
  • Beispiel 13A
  • Methyl-(2S,3R)-2-({(2S)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-hexanoyl}amino)-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat
    Figure 00410002
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 10A aus 0.38g (0.40 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-amino-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat Hydrochlorid (Beispiel 9A) und 0.18 g (0.48 mmol) N6-[(Benzyloxy)carbonyl]-N2-(tert-butoxycarbonyl)-L-lysin mit 0.188 g (0.50 mmol) HATU und insgesamt 0.180 g (1.39 mmol) Hünig-Base in 5 ml absolutem DMF.
    Ausbeute: 0.63 g (78% d. Th.)
    LC-MS (Methode 4): Rt = 3.57 min.
    MS (EI): m/z = 1281 (M+H)+.
  • Beispiel 14A
  • (2S)-2-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-3-{4,4'-bis(benzyloxy)-3'-[(1R,2S)-2-({(2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-hydroxypentanoyl}amino)-1-hydroxy-3-methoxy-3-oxopropyl]biphenyl-3-yl}propionsäure
    Figure 00420001
  • Zu einer Lösung von 183 mg (0.13 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-[((2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]-amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}pentanoyl)amino]-3-(4,4'-bis(benzyloxy)-3'-{(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]-propyl}biphenyl-3-yl)-3-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}propanoat (Beispiel 10A) in 2.65 ml absolutem DMF werden bei RT tropfenweise 0.52 ml 1N Tetrabutylammoniumfluorid-Lösung in THF hinzugegeben. Nach 60 min bei RT wird auf 0°C abgekühlt und mit Eiswasser versetzt. Es wird sofort mit Essigsäureethylester und etwas 1N Salzsäure-Lösung versetzt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und 1 h im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 4): Rt = 2.82 min.
    MS (EI): m/z = 1069 (M+H)+.
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 14A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 15A bis 17A hergestellt.
  • Figure 00430001
  • Beispiel 18A
  • Methyl-(2S,3R)-2-({(2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-hydroxypentanoyl}amino)-3-{4,4'-bis(benzyloxy)-3'-[(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-(pentafluorphenoxy)propyl]biphenyl-3-yl}-3-hydroxypropanoat
    Figure 00440001
  • 141 mg (Rohprodukt, ca. 0.13 mmol) (2S)-2-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-3-{4,4'-bis-(benzyloxy)-3'-[(1R,2S)-2-({(2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)-amino]-4-hydroxypentanoyl}amino)-1-hydroxy-3-methoxy-3-oxopropyl]biphenyl-3-yl}-propionsäure (Beispiel 14A) werden in 5 ml Dichlormethan vorgelegt und mit 121 mg (0.66 mmol) Pentafluorphenol, gelöst in 1 ml Dichlormethan, versetzt. Man fügt 2 mg (0.01 mmol) DMAP hinzu und kühlt auf -25°C (Ethanol/Kohlendioxid-Bad). Bei -25°C werden 39 mg (0.172 mmol) EDC hinzugefügt. Die Mischung erwärmt sich über Nacht langsam auf RT. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum kurz getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 5): Rt = 3.34 min.
    MS (EI): m/z = 1235 (M+H)+.
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 18A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 19A bis 21A hergestellt.
  • Figure 00450001
  • Beispiel 22A
  • Methyl-(2S,3R)-2-[((2S,4R)-2-amino-5-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-4-hydroxypentanoyl)-amino]-3-{4,4'-bis(benzyloxy)-3'-[(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-(pentafluorphenoxy)propyl]biphenyl-3-yl}-3-hydroxypropanoat Hydrochlorid
    Figure 00460001
  • 0.163 g (Rohprodukt, ca. 0.132 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-({(2S,4R)-5-{[(benzyloxy)carbonyl]-amino}-2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-hydroxypentanoyl}amino)-3-{4,4'-bis(benzyloxy)-3'-[(2S)-2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-3-oxo-3-(pentafluorphenoxy)propyl]biphenyl-3-yl}-3-hydroxypropanoat (Beispiel 18A) werden bei 0°C in 4 ml einer 4M Chlorwasserstoff-Dioxan-Lösung gelöst. Nach 2.5 h bei 0°C wird die Reaktionslösung bei im Vakuum eingeengt, mehrmals mit Dichlormethan coevaporiert und im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 5): Rt = 2.71 min.
    MS (EI): m/z = 1135 (M-HCl+H)+.
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 22A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 23A bis 25A hergestellt.
  • Figure 00470001
  • Beispiel 26A
  • Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat
    Figure 00480001
  • 150 mg (Rohprodukt, ca. 0.13 mmol) Methyl-(2S,3R)-2-[((2S,4R)-2-amino-5-{[(benzyloxy)-carbonyl]amino}-4-hydroxypentanoyl)amino]-3-{4,4'-bis(benzyloxy)-3'-[(2S)-2-{[(benzyloxy)-carbonyl]amino}-3-oxo-3-(pentafluorphenoxy)propyl]biphenyl-3-yl}-3-hydroxypropanoat Hydrochlorid werden in 150 ml Dichlormethan gelöst und tropfenweise mit einer Lösung von 0.37 ml Triethylamin in 30 ml Dichlormethan versetzt. Es wird über Nacht bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird das Gemisch schonend im Vakuum einrotiert und der Rückstand in Acetonitril verrührt. Der Feststoff wird abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 73 mg (58% d. Th., über vier Stufen ausgehend von Beispiel 10A).
    LC-MS (Methode 5): Rt = 3.02 min.
    MS (EI): m/z = 951 (M+H)+.
    1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 1.42-1.61 (m, 1H), 1.7-1.95 (m, 1H), 2.92 (mc, 1H), 3.02-3.13 (m, 2H), 3.3 (m, 1H unter D2O), 3.68 (s, 3H), 4.45 (mc, 1H), 4.68 (mc, 1H), 4.83-5.25 (m, 9H), 5.77 (d, 1H), 5.86 (d, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.95-7.2 (m, 4H), 7.21-7.60 (m, 23H), 8.54 (d, 1H), 8.64 (d, 1H).
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 26A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 27A bis 29A hergestellt.
  • Figure 00490001
  • Beispiel 30A
  • (7R,8S,11S,14S)-5,17-Bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]-henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
    Figure 00500001
  • Eine Suspension aus 25 mg (0.026 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat (Beispiel 26A) in 10 ml Dioxan/Wasser (4:1) wird nach Zugabe von 0.53 ml (0.053 mmol) einer 0.1N wässrigen Lithiumhydroxid-Lösung für 3 h bei 10°C gerührt. Durch Zugabe von 0.1N Salzsäure wird auf pH 2 gestellt, der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 24 mg (98% d. Th.)
    LC-MS (Methode 6): Rt = 2.85 min.
    MS (EI): m/z = 937 (M+H)+.
  • Beispiel 31A
  • (7R,8S,11S,14S)-5,17-Bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-(3-{[(benzyloxy)-carbonyl]amino}propyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
    Figure 00510001
  • Eine Suspension aus 30 mg (0.032 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-(3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}propyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat (Beispiel 28A) in 25 ml Tetrahydrofuran/Wasser (4:1) wird nach Zugabe von 0.64 ml (0.054 mmol) einer 0.1N wässrigen Lithiumhydroxid-Lösung für 12 h bei RT gerührt. Durch Zugabe von 0.1N Salzsäure wird auf pH 2 gestellt, der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 25 mg (85% d. Th.)
    LC-MS (Methode 5): Rt = 2.95 min.
    MS (EI): m/z = 921 (M+H)+.
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 31A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 32A und 33A hergestellt.
  • Figure 00510002
  • Figure 00520001
  • Beispiel 34A
  • Benzyl-{(2R)-3-[(7R,8S,11S,14S)-8-{[(2-aminoethyl)amino]carbonyl}-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-11-yl]-2-hydroxypropyl}carbamat
    Figure 00520002
  • Eine Lösung aus 40 mg (0.042 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat (Beispiel 26A) in 1.5 ml 1,2-Diaminoethan wird nach Zugabe von 0.55 mg (0.008 mmol) Kaliumcyanid 16 h bei RT gerührt. Nach Zugabe von Wasser wird der ausgefallene Feststoff abfiltriert und im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 27 mg (65% d. Th.)
    LC-MS (Methode 5): Rt = 2.39 min.
    MS (EI): m/z = 979 (M+H)+.
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 34A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 35A bis 37A hergestellt.
  • Figure 00530001
  • Beispiel 38A
  • Benzyl-{2-[(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-8-[({2-[bis(2-aminoethyl)amino]ethyl}amino)carbonyl]-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]-henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-11-yl]ethyl}carbamat
    Figure 00540001
  • Die Herstellung erfolgt analog zu Beispiel 34A aus 15 mg (0.02 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-11-(2-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-ethyl)-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat (Beispiel 27A) in 0.5 ml N,N-Bis(2-aminoethyl)ethan-1,2-diamin und mit 0.11 mg (0.0016 mmol) Kaliumcyanid.
    Ausbeute: 14.4 mg (85% d. Th.)
    LC-MS (Methode 5): Rt = 1.99 min.
    MS (EI): m/z = 1035 (M+H)+.
  • Beispiel 39A
  • Methyl-(7R,8S,11S,14S)-14-amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Dihydrochlorid
    Figure 00540002
  • Es werden 30 mg (0.32 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)-carbonyl]amino}-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl)-7-hydroxy-10,13- dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat (Beispiel 26A) in ein Gemisch aus 10 ml Essigsäure/Wasser/Ethanol 4:1:1 gegeben. Dazu gibt man 10 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig) und hydriert anschließend 15 h bei Normaldruck. Das Reaktionsgemisch wird über vorgewaschenem Kieselgur filtriert und das Filtrat im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird mit 0.95 ml 0.1N wässriger Salzsäure versetzt und eingeengt. Man verrührt den Rückstand mit 10 ml Diethylether und dekantiert ab. Der zurückgebliebene Feststoff wird im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 18 mg (97% d. Th.).
    LC-MS (Methode 7): Rt = 2.29 min
    MS (EI): m/z = 503 (M-2HCl+H)+.
    1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.8-1.93 (m, 1H), 1.96-2.1 (m, 1H), 2.83-2.93 (m, 1H), 2.97-3.12 (m, 2H), 3.5 (mc, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.95-4.05 (m, 1H), 4.37-4.42 (m, 1H), 4.9 (mc, 1H), 4.94-4.49 (m, 1H), 5.78 (mc, 1H), 6.84-6.95 (m, 3H), 7.27-7.42 (m, 3H).
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 39A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 40A bis 46A hergestellt.
  • Figure 00550001
  • Figure 00560001
  • Figure 00570001
  • Beispiel 47A
  • (7R,8S,11S,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-11-{(2R)-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxypropyl}-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
    Figure 00570002
  • 50 mg (0.087 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-14-amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Dihydrochlorid (Beispiel 39A) werden in 0.43 ml (0.43 mmol) 1N Natronlauge gelöst und bei Raumtemperatur unter Rühren mit 56.9 mg (0.26 mmol) Di-tert-butyl-dicarbonat, gelöst in 0.5 ml Methanol, versetzt. Nach 2 h Rühren bei RT wird durch Zutropfen von 0.1N Salzsäure auf pH 3 gestellt. Man extrahiert dreimal mit Essigsäureethylester, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum bis zur Gewichtskonstanz ein.
    Ausbeute: 37 mg (62% d. Th.).
    LC-MS (Methode 6): Rt = 1.83 min.
    MS (EI): m/z = 703 (M+H)+.
  • Beispiel 48A
  • (7R,8S,11S,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-11-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]propyl}-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
    Figure 00580001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 47A aus 50 mg (0.088 mmol) Methyl-(7R,8S,11S,14S)-14-amino-11-(3-aminopropyl)-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]-henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Dihydrochlorid (Beispiel 41A) mit 58 mg (0.26 mmol) Di-tert-butyl-dicarbonat in 0.44 ml (0.44 mmol) 1N Natronlauge und 0.5 ml Methanol.
    Ausbeute: 46 mg (77% d. Th.).
    LC-MS (Methode 6): Rt = 1.93 min.
    MS (EI): m/z = 687 (M+H)+.
  • Beispiel 49A
  • tert-Butyl-[(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-(hydroxymethyl)butyl]carbamat
    Figure 00590001
  • Eine Lösung von 300 mg (0.90 mmol) N2,N5-Bis(tert-butoxycarbonyl)-L-ornithin in 10 ml Tetrahydrofuran wird bei -10°C mit 91 mg (0.90 mmol) 4-Methylmorpholin und 98 mg (0.90 mmol) Chlorameisensäureethylester versetzt und 30 min gerührt. Bei dieser Temperatur werden 1.81 ml (1.81 mmol) einer 1M Lösung von Lithiumaluminiumhydrid in Tetrahydrofuran langsam zugetropft. Es wird langsam auf RT erwärmt und für 12 h bei RT gerührt. Unter Eiskühlung gibt man vorsichtig 0.1 ml Wasser und 0.15 ml 4.5%ige Natriumhydroxid-Lösung hinzu und rührt weitere 3 h bei RT. Der Ansatz wird filtriert und das Filtrat wird im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Essigsäureethylester gelöst, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und erneut im Vakuum zur Trockne eingeengt. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 239 mg (83% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 319 (M+H)+; 341 (M+Na)+.
  • Beispiel 50A
  • (2S)-2,5-Bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl-methansulfonat
    Figure 00590002
  • Eine Lösung von 240 mg (0.75 mmol) tert-Butyl-[(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-(hydroxymethyl)butyl]carbamat (Beispiel 49A) in 20 ml Dichlormethan wird mit 103 mg (0.90 mmol) Methansulfonsäurechlorid und 0.21 ml (1.5 mmol) Triethylamin versetzt und für 16 h bei RT gerührt. Es wird mit Dichlormethan verdünnt und zweimal mit 0.1N Salzsäure gewaschen. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 218 mg (73% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 419 (M+Na)+.
  • Beispiel 51A
  • tert-Butyl-{(4S)-5-azido-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl}carbamat
    Figure 00600001
  • Eine Lösung von 218 mg (0.55 mmol) (2S)-2,5-Bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl-methansulfonat (Beispiel 50A) in 15 ml Dimethylformamid wird mit 36 mg (0.55 mmol) Natriumazid versetzt und 12 h bei 70°C gerührt. Ein Großteil des Lösungsmittel wird im Vakuum abdestilliert und der Rückstand wird mit Essigsäureethylester verdünnt. Es wird mehrmals mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 188 mg (99% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 344 (M+H)+.
  • Beispiel 52A
  • tert-Butyl-{(4S)-5-amino-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl}carbamat
    Figure 00600002
  • Eine Lösung von 188 mg (0.55 mmol) tert-Butyl-{(4S)-5-azido-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-pentyl}carbamat (Beispiel 51A) in Ethanol wird nach Zugabe von 20 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig) 12 h bei RT und Normaldruck hydriert. Es wird über Kieselgur filtriert und der Rückstand mit Ethanol gewaschen. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingeengt. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 102 mg (59% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 318 (M+H)+; 340 (M+Na)+.
  • Beispiel 53A
  • tert-Butyl-{(3S)-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-hydroxybutyl}carbamat
    Figure 00610001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 49A aus 300 mg (0.60 mmol) Dicyclohexylamino-(2S)-2,4-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]butanat in 10 ml Tetrahydrofuran mit 61 mg (0.60 mmol) 4-Methylmorpholin, 65 mg (0.60 mmol) Chlorameisensäureethylester und 1.2 ml (1.20 mmol) einer 1M Lösung von Lithiumaluminiumhydrid in Tetrahydrofuran. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 174 mg (95% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 305 (M+H)+.
  • Beispiel 54A
  • (2S)-2,4-Bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]butyl-methansulfonat
    Figure 00610002
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 50A aus 250 mg (0.81 mmol) tert-Butyl-{(3S)-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-hydroxybutyl}carbamat (Beispiel 53A) in 20 ml Dichlormethan mit 110 mg (0.97 mmol) Methansulfonsäurechlorid und 0.23 ml (1.6 mmol) Triethylamin. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 200 mg (64% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 383 (M+H)+; 400 (M+Na)+.
  • Beispiel 55A
  • tert-Butyl-{(3S)-4-azido-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]butyl}carbamat
    Figure 00620001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 51A aus 200 mg (0.52 mmol) (2S)-2,4-Bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]butyl-methansulfonat (Beispiel 54A) in 15 ml Dimethylformamid mit 34 mg (0.52 mmol) Natriumazid. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 171 mg (99% d. Th.)
  • Beispiel 56A
  • tert-Butyl-{(3S)-4-amino-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]butyl}carbamat
    Figure 00620002
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 52A aus 171 mg (0.52 mmol) tert-Butyl-{(3S)-4-azido-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]butyl}carbamat (Beispiel 55A) in 10 ml Ethanol unter Zusatz von 20 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig). Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 117 mg (75% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 304 (M+H)+; 326 (M+Na)+.
  • Beispiel 57A
  • Benzyl-{(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-[({2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]ethyl}amino)-carbonyl]butyl}carbamat
    Figure 00620003
  • Unter Argon werden 300 mg (0.82 mmol) N2-[(Benzyloxy)carbonyl]-N5-(tert-butoxycarbonyl)-L-ornithin und 171 mg (1.06 mmol) tert-Butyl-(2-aminoethyl)carbamat in 6 ml Dimethylformamid gelöst. Bei 0°C (Eisbad) werden dann 204 mg (1.06 mmol) EDC und 33 mg (0.25 mmol) HOBt zugegeben. Es wird langsam auf RT erwärmt und für 12 h bei RT gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand wird mit Essigsäureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird nacheinander mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat- und Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der verbleibende Feststoff wird im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 392 mg (94% d. Th.)
    LC-MS (Methode 5): Rt = 2.36 min.
    MS (EI): m/z = 509 (M+H)+
  • Beispiel 58A
  • Benzyl-{(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-[({3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxypropyl}amino)carbonyl]butyl}carbamat
    Figure 00630001
  • Die Herstellung erfolgt analog zu Beispiel 57A aus 300 mg (0.82 mmol) N2-[(Benzyloxy)carbonyl]-N5-(tert-butoxycarbonyl)-L-ornithin und 202 mg (1.06 mmol) tert-Butyl-(3-amino-2-hydroxypropyl)carbamat in 6 ml Dimethylformamid unter Zusatz von 204 mg (1.06 mmol) EDC und 33 mg (0.25 mmol) HOBt.
    Ausbeute: 412 mg (93% d. Th.)
    LC-MS (Methode 6): Rt = 2.23 min.
    MS (EI): m/z = 539 (M+H)+
  • Beispiel 59A
  • N5-(tert-Butoxycarbonyl)-N-{2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]ethyl}-L-ornithinamid
    Figure 00640001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 52A aus 390 mg (0.77 mmol) Benzyl-{(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-[({2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]ethyl}amino)carbonyl]butyl}-carbamat (Beispiel 57A) in 50 ml Ethanol unter Zusatz von 40 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig). Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 263 mg (91 % d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 375 (M+H)+; 397 (M+Na)+.
  • Beispiel 60A
  • N5-(tert-Butoxycarbonyl)-N-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxypropyl}-L-ornithinamid
    Figure 00640002
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 52A aus 412 mg (0.76 mmol) Benzyl-{(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-[({3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxypropyl}amino)-carbonyl]-butyl}carbamat (Beispiel 58A) in 50 ml Ethanol unter Zusatz von 41 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig). Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 306 mg (99% d. Th.)
    MS (ESI): m/z = 405 (M+H)+.
  • Beispiel 61A
  • tert-Butyl-[(7R,8S,11S,14S)-8-[({(2S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl}amino)-carbonyl]-11-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]propyl}-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-14-yl]carbamat
    Figure 00650001
  • Unter Argon werden 23 mg (0.034 mmol) (7R,8S,11S,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-11-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]propyl}-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo-[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 48A) und 11.9 mg (0.07 mmol) tert-Butyl-{(4S)-5-amino-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl}carbamat (Beispiel 52A) in 0.75 ml Dimethylformamid gelöst. Bei 0°C (Eisbad) werden dann 8.5 mg (0.051 mmol) EDC und 1.4 mg (0.01 mmol) HOBt zugegeben. Es wird langsam auf RT erwärmt und für 12 h bei RT gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand wird mit Wasser verrührt. Der verbleibende Feststoff wird abgesaugt und durch präparative RP-HPLC gereinigt (Reprosil ODS-A, Laufmittel Acetonitril/0.2% wässrige Trifluoressigsäure 5:95 → 95:5).
    Ausbeute: 15 mg (45% d. Th.)
    LC-MS (Methode 6): Rt = 2.48 min.
    MS (EI): m/z = 972 (M+H)+
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 61A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 62A bis 66A hergestellt.
  • Figure 00660001
  • Beispiel 67A
  • (3S)-3-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-6-[(tert-butoxycarbonyl)amino]hexanoylmethylcarbonat
    Figure 00670001
  • Unter Argon werden 2 g (5.26 mmol) (3S)-3-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-6-[(tert-butoxycarbonyl)amino]hexansäure und 0.56 g (5.73 mmol) Triethylamin in 30 ml THF gelöst und auf 0°C abgekühlt. Dazu gibt man 0.59 g (5.73 mmol) Methylchloroformiat und lässt 3 Stunden bei 0°C nachrühren. Die Reaktionsmischung wird über Kieselgur filtriert. Das Filtrat wird direkt umgesetzt.
  • Beispiel 68A
  • Benzyl-[(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-(2-hydroxyethyl)butyl]carbamat
    Figure 00670002
  • Das Filtrat von (3S)-3-{[(Benzyloxy)carbonyl]amino}-6-[(tert-butoxycarbonyl)amino]hexanoylmethylcarbonat (Beispiel 67A) wird zu einer Suspension von 0.49 g (13.14 mmol) Natriumborhydrid in 0.6 ml Wasser bei 0°C tropfenweise hinzugegeben. Die Mischung erwärmt sich langsam auf Raumtemperatur und wird über Nacht gerührt. Die Reaktionslösung wird in Vakuum eingeengt, und der Rückstand wird zur Aufarbeitung mit Essigsäureethylester und Wasser versetzt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 570 mg (30% d. Th.)
    LC-MS (Methode 6): Rt = 2.09 min.
    MS (EI): m/z = 367 (M+H)+.
  • Beispiel 69A
  • tert-Butyl-[(4S)-4-amino-6-hydroxyhexyl]carbamat
    Figure 00680001
  • Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 52A aus 620 mg (1.69 mmol) Benzyl-[(1S)-4-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-(2-hydroxyethyl)butyl]carbamat (Beispiel 68A) in 60 ml Ethanol unter Zusatz von 100 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig). Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: 370 mg (95% d. Th.)
    1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.2-1.6 (m, 6H), 1.4 (s, 9H), 2.6-3.0 (m, 1H), 3.0-3.2 (m, 2H), 3.7-3.9 (m, 2H), 4.6 (br.s, 1H).
  • Beispiel 70A
  • Benzyl-{3-[(2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}ethyl)-amino]propyl}carbamat
    Figure 00680002
  • 310 mg (1.07 mmol) Di-tert-butyl-(2-aminopropan-1,3-diyl)biscarbamat und 222 mg (1.07 mmol) Benzyl-(3-oxopropyl)carbamat werden in 15 ml Dichloromethan gelöst. 334 mg (1.5 mmol) Natriumtriacetoxyborhydrid werden hinzugegeben und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird eingedampft und der Rückstand mittels präparative HPLC gereinigt.
    Ausbeute: 168 mg (38% d. Th.)
    LC-MS (Methode 4): Rt = 1.76 min.
    MS (EI): m/z = 481 (M+H)+.
  • Beispiel 71A
  • Benzyl-{3-[(tert-butoxycarbonyl)(2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-{[(tert-butoxycarbonyl)-amino]methyl}ethyl)amino]propyl}carbamat
    Figure 00690001
  • Zu einer Lösung von 168 mg (0.35 mmol) Benzyl-{3-[(2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}ethyl)amino]propyl}carbamat (Beispiel 70A) in 2 ml Acetonitril werden 0.55 ml einer 10%igen Triethylamin-Lösung in Acetonitril und 154 mg (0.70 mmol) Di-tert-butyl-dicarbonat hinzugegeben. Die Reaktionsmischung wird 6 Stunden bei 60°C gerührt. Die Lösung wird eingeengt und das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 5): Rt = 2.87 min.
    MS (EI): m/z = 580 (M+H)+.
  • Beispiel 72A
  • Di-tert-butyl-{2-[(3-aminopropyl)(tert-butoxycarbonyl)amino]propan-1,3-diyl}biscarbamat
    Figure 00690002
  • Eine Lösung von 190 mg (0.327 mmol) Benzyl-{3-[(tert-butoxycarbonyl)(2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}ethyl)amino]propyl}carbamat (Beispiel 71A) in 50 ml Eisessig/Wasser/Ethanol 4/1/1 wird nach Zugabe von 20 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig) 12 h bei Raumtemperatur und Normaldruck hydriert. Es wird über Kieselgur filtriert und der Rückstand mit Ethanol gewaschen. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingeengt. Das Produkt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
    Ausbeute: quant.
    LC-MS (Methode 5): Rt = 1.71 min.
    MS (EI): m/z = 447 (M+H)+.
  • Ausführungsbeispiele
  • Beispiel 1
  • (7R,8S,11S,14S)-14-Amino-N-(2-aminoethyl)-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxamid Trihydrochlorid
    Figure 00700001
  • Es werden 30 mg (0.32 mmol) Benzyl-{(2R)-3-[(7R,8S,11S,14S)-8-{[(2-aminoethyl)amino]-carbonyl}-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-7-hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-11-yl]-2-hydroxypropyl}carbamat (Beispiel 34A) in ein Gemisch aus 10 ml Essigsäure/Wasser/Ethanol 4:1:1 gegeben. Dazu gibt man 10 mg Palladium auf Aktivkohle (10%ig) und hydriert anschließend 15 h bei RT und Normaldruck. Das Reaktionsgemisch wird über vorgewaschenem Kieselgur filtriert, mit Ethanol gewaschen und das Filtrat im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird mit 0.96 ml 0.1N wässriger Salzsäure versetzt und eingeengt. Man verrührt den Rückstand mit 10 ml Diethylether und dekantiert ab. Der zurückgebliebene Feststoff wird im Hochvakuum getrocknet.
    Ausbeute: 18 mg (97% d. Th.).
    LC-MS (Methode 7): Rt = 1.92 min
    MS (EI): m/z = 531 (M-3HCl+H)+.
    1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.83-1.93 (m, 1H), 1.94-2.08 (m, 1H), 2.88 (mc, 1H), 2.97-3.18 (m, 4H), 3.42-3.64 (m, 3H), 3.91 (mc, 1H), 439 (mc, 1H), 4.82 (mc, 1H), 5.0 (mc, 1H), 5.56 (mc, 1H), 6.85-6.97 (m, 3H), 7.27-7.46 (m, 3H).
  • Beispiel 2
  • (7R,8S,11S,14S)-14-Amino-N-(2-aminoethyl)-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxamid Tri(hydrotrifluoracetat)
    Figure 00710001
  • Das Trihydrochlorid (Beispiel 1) wird durch präparative HPLC (Reprosil ODS-A, Laufmittel Acetonitril/0.2% wässrige Trifluoressigsäure 5:95 → 95:5) in das Tri(hydrotrifluoracetat) überführt.
    Ausbeute: quant.
    1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.83-1.93 (m, 1H), 1.94-2.08 (m, 1H), 2.88 (mc, 1H), 2.97-3.18 (m, 4H), 3.42-3.64 (m, 3H), 3.91 (mc, 1H), 4.39 (mc, 1H), 4.82 (mc, 1H), 5.0 (mc, 1H), 5.56 (mc, 1H), 6.85-6.97 (m, 3H), 7.27-7.46 (m, 3H).
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 1 werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 3 bis 6 hergestellt und gegebenenfalls analog Beispiel 2 in das entsprechende Tri(hydrotrifluoracetat) überführt.
  • Figure 00710002
  • Figure 00720001
  • Beispiel 7
  • (7R,8S,11S,14S)-14-Amino-N-(2-aminoethyl)-11-(3-aminopropyl)-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxamid Tri(hydrotrifluoracetat)
    Figure 00730001
  • Das Trihydrochlorid (Beispiel 5) wird durch präparative HPLC (Reprosil ODS-A, Laufmittel Acetonitril/0.2% wässrige Trifluoressigsäure 5:95 → 95:5) in das Tri(hydrotrifluoracetat) überführt.
    Ausbeute: quant.
    1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.6-1.95 (m, 4H), 2.97-3.02 (m, 3H), 3.07-3.17 (m, 2H), 3.45-3.56 (m, 3H), 4.41 (mc, 1H), 4.78 (mc, 1H), 4.85 (mc, 1H), 5.5 (mc, 1H), 6.85-6.95 (m, 3H), 7.28-7.39 (m, 3H).
  • Beispiel 8
  • (7R,8S,11S,14S)-14-Amino-11-(3-aminopropyl)-N-[(2S)-2,5-diaminopentyl]-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxamid Tetrahydrochlorid
    Figure 00740001
  • In 1 ml einer eisgekühlten 4N Chlorwasserstoff-Dioxan-Lösung gibt man 5.5 mg (5.7 μmol) tert-Butyl-[(7R,8S,11S,14S)-8-[({(2S)-2,5-bis[(tert-butoxycarbonyl)amino]pentyl}amino)-carbonyl]-11-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]propyl}-5,7,17-trihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-1(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-14-yl]carbamat (Beispiel 61A) und rührt eine Stunde bei RT. Anschließend engt man im Vakuum zur Trockne ein und trocknet bis zur Gewichtskonstanz.
    Ausbeute: 4 mg (98% d. Th.)
    LC-MS (Methode 7): Rt = 0.25 min.
    MS (EI): m/z = 513 (M-4HCl+H)+
  • Analog zur Vorschrift des Beispiels 8 werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 9 bis 13 hergestellt.
  • Figure 00740002
  • Figure 00750001
  • B. Bewertung der physiologischen Wirksamkeit
  • Verwendete Abkürzungen:
    • AMP
    Adenosinmonophosphat
    ATP
    Adenosintriphosphat
    BHI Medium
    Brain heart infusion medium
    CoA
    Coenzym A
    DMSO
    Dimethylsulfoxid
    DTT
    Dithiothreitol
    EDTA
    Ethylendiamintetraessigsäure
    KCl
    Kaliumchlorid
    KH2PO4
    Kaliumdihydrogenphosphat
    MgSO4
    Magnesiumsulfat
    MHK
    Minimale Hemmkonzentration
    MTP
    Mikrotiterplatte
    NaCl
    Natriumchlorid
    Na2HPO4
    Dinatriurnhydrogenphosphat
    NH4Cl
    Ammoniumchlorid
    NTP
    Nukleotidtriphosphat
    PBS
    Phosphat Buffered Saline
    PCR
    Polymerase Chain Reaction
    PEG
    Polyethylenglykol
    PEP
    Phosphoenolpyruvat
    Tris
    Tris[hydroxymethyl)aminomethan
  • Die in vitro-Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden:
  • In vitro Transkription-Translation mit E. coli Extrakten
  • Zur Herstellung eines S30-Extraktes werden logarithmisch wachsende Escherichia coli MRE 600 (M. Müller; University Freiburg) geerntet, gewaschen und wie beschrieben für den in vitro Transkriptions-Translations-Test eingesetzt (Müller, M. and Blobel, G. Proc Natl Acad Sci USA (1984) 81, pp.7421-7425).
  • Dem Reaktionsmix des in vitro Transkriptions-Translations-Tests werden zusätzlich 1 μl cAMP (11.25 mg/ml) je 50 μl Reaktionsmix zugegeben. Der Testansatz beträgt 105 μl, wobei 5 μl der zu testenden Substanz in 5%igem DMSO vorgelegt werden. Als Transkriptionsmatrize werden 1 μg/100μl Ansatz des Plasmides pBESTLuc (Promega, Deutschland) verwendet. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 μl Luziferin-Lösung (20 mM Tricine, 2.67 mM MgSO4, 0.1 mM EDTA, 33.3 mM DTT pH 7.8, 270 μM CoA, 470 μM Luziferin, 530 μM ATP) zugegeben und die entstehende Biolumineszenz für 1 Minute in einem Luminometer gemessen. Als IC50 wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50%igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt.
  • In vitro Transkription-Translation mit S. aureus Extrakten
  • Konstruktion eines S. aureus Luziferase Reporterplasmids
  • Zur Konstruktion eines Reporterplasmids, welches in einem in vitro Transkriptions-Translations-Assay aus S. aureus verwendet werden kann, wird das Plasmid pBESTluc (Promega Corporation, USA) verwendet. Der in diesem Plasmid vor der Firefly Luziferase vorhandene E. coli tac Promoter wird gegen den capA1 Promoter mit entsprechender Shine-Dalgarno Sequence aus S. aureus ausgetauscht. Dazu werden die Primer CAPFor 5'-CGGCC-AAGCTTACTCGGATCCAGAGTTTGCAAAATATACAGGGGATTATATATAATGGAAAAC AAGAAAGGAAAATAGGAGGTTTATATGGAAGACGCCA-3' und CAPRev 5'-GTCATCGTCGGGAAGACCTG-3' verwendet. Der Primer CAPFor enthält den capA1 Promotor, die Ribosomenbindestelle und die 5'-Region des Luziferase Gens. Nach PCR unter Verwendung von pBESTluc als Template kann ein PCR-Produkt isoliert werden, welches das Firefly Luziferase Gen mit dem fusionierten capA1 Promotor enthält. Dieses wird nach einer Restriktion mit ClaI und HindIII in den ebenfalls mit ClaI und HindIII verdauten Vektor pBESTluc ligiert. Das entstandene Plasmid p1a kann in E. coli repliziert werden und als Template im S. aureus in vitro Transkriptions-Translations-Test verwendet werden.
  • Herstellung von S30 Extrakten aus S. aureus
  • Sechs Liter BHI Medium werden mit einer 250 ml Übernachtkultur eines S. aureus Stammes inokuliert und bei 37°C bis zu einer OD600nm von 2-4 wachsen gelassen. Die Zellen werden durch Zentrifugation geerntet und in 500 ml kaltem Puffer A (10 mM Tris-acetat, pH 8.0, 14 mM Magnesiumacetat, 1 mM DTT, 1M KCl) gewaschen. Nach erneutem Abzentrifugieren werden die Zellen in 250 ml kaltem Puffer A mit 50 mM KCl gewaschen und die erhaltenen Pellets bei -20°C für 60 min eingefroren. Die Pellets werden in 30 bis 60 min auf Eis aufgetaut und bis zu einem Gesamtvolumen von 99 ml in Puffer B (10 mM Tris-acetat, pH 8.0, 20 mM Magnesiumacetat, 1 mM DTT, 50 mM KCl) aufgenommen. Je 1.5 ml Lysostaphin (0.8 mg/ml) in Puffer B werden in 3 vorgekühlte Zentrifugenbecher vorgelegt und mit je 33 ml der Zellsuspension vermischt. Die Proben werden für 45 bis 60 min bei 37°C unter gelegentlichem Schütteln inkubiert, bevor 150 μl einer 0.5 M DTT Lösung zugesetzt werden. Die lysierten Zellen werden bei 30.000 × g 30 min bei 4°C abzentrifugiert. Das Zellpellet wird nach Aufnahme in Puffer B unter den gleichen Bedingungen nochmals zentrifugiert und die gesammelten Überstände werden vereinigt. Die Überstände werden nochmals unter gleichen Bedingungen zentrifugiert und zu den oberen 2/3 des Überstandes werden 0.25 Volumen Puffer C (670 mM Tris-acetat, pH 8.0, 20 mM Magnesiumacetat, 7 mM Na3-Phosphoenolpyruvat, 7 mM DTT, 5.5 mM ATP, 70 μM Aminosäuren (complete von Promega), 75 μg Pyruvatkinase (Sigma, Deutschland))/ml gegeben. Die Proben werden für 30 min bei 37°C inkubiert. Die Überstände werden über Nacht bei 4°C gegen 2 l Dialysepuffer (10 mM Tris-acetat, pH 8.0, 14 mM Magnesiumacetat, 1 mM DTT, 60 mM Kaliumacetat) mit einem Pufferwechsel in einem Dialyseschlauch mit 3500 Da Ausschluss dialysiert. Das Dialysat wird auf eine Proteinkonzentration von etwa 10 mg/ml konzentriert, indem der Dialyseschlauch mit kaltem PEG 8000 Pulver (Sigma, Deutschland) bei 4°C bedeckt wird. Die S30 Extrakte können aliquotiert bei -70°C gelagert werden.
  • Bestimmung der IC50 im S. aureus in vitro Transcriptions-Translations-Assay
  • Die Inhibition der Proteinbiosynthese der Verbindungen kann in einem in vitro Transkriptions-Translations-Assay gezeigt werden. Der Assay beruht auf der zellfreien Transkription und Translation von Firefly Luziferase unter Verwendung des Reporterplasmids p1a als Template und aus S. aureus gewonnenen zellfreien S30 Extrakten. Die Aktivität der entstandenen Luziferase kann durch Lumineszenzmessung nachgewiesen werden.
  • Die Menge an einzusetzenden S30 Extrakt bzw. Plasmid p1a muss für jede Präparation erneut ausgetestet werden, um eine optimale Konzentration im Test zu gewährleisten. 3 μl der zu testenden Substanz gelöst in 5% DMSO werden in eine MTP vorgelegt. Anschließend werden 10 μl einer geeignet konzentrierten Plasmid-Lösung p1a zugegeben. Anschließend werden 46 μl eines Gemisches aus 23 μl Premix (500 mM Kaliumacetat, 87.5 mM Tris-acetat, pH 8.0, 67.5 mM Ammoniumacetat, 5 mM DTT, 50 μg Folsäure/ml, 87.5 mg PEG 8000/ml, 5 mM ATP, 1.25 mM je NTP, 20 μM je Aminosäure, 50 mM PEP (Na3-Salz), 2.5 mM cAMP, 250 μg je E. coli tRNA/ml) und 23 μl einer geeigneten Menge S. aureus S30 Extrakt zugegeben und vermischt. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 μl Luziferin-Lösung (20 mM Tricine, 2.67 mM MgSO4, 0.1 mM EDTA, 33.3 mM DTT pH 7.8, 270 μM CoA, 470 μM Luziferin, 530 μM ATP) und die entstehende Biolumineszenz für 1 min in einem Luminometer gemessen. Als IC50 wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50%igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt.
  • Bestimmung der Minimalen Hemmkonzentration (MHK)
  • Die minimale Hemmkonzentration (MHK) ist die minimale Konzentration eines Antibiotikums, mit der ein Testkeim in seinem Wachstum über 18-24 h inhibiert wird. Die Hemmstoffkonzentration kann dabei nach mikrobiologischen Standardverfahren mit modifizieriem Medium im Rahmen eines Agardilutionstests bestimmt werden (siehe z.B. The National Committee for Clinical Laboratory Standards. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; approved standard-fifth edition. NCCLS document M7-A5 [ISBN 1-56238-394-9]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2000). Die Bakterienkeime werden auf 1.5%igen Agarplatten kultiviert, die 20% defibriniertes Pferdeblut enthalten. Die Testkeime, die über Nacht auf Columbia-Blutagarplatten (Becton-Dickinson) inkubiert werden, werden in PBS verdünnt, auf eine Keimzahl von ca. 5×105 Keime/ml eingestellt und auf Testplatten getropft (1-3 μl). Die Testsubstanzen enthalten unterschiedliche Verdünnungen der Testsubstanzen (Verdünnungsstufen 1:2). Die Kulturen werden bei 37°C für 18-24 Stunden in Gegenwart von 5% CO2 inkubiert.
  • Die jeweils niedrigste Substanzkonzentration, bei der kein sichtbares Bakterienwachstum mehr auftritt, wird als MHK definiert. Die MHK-Werte in μg/ml einiger erfindungsgemäßer Verbindungen gegenüber einer Reihe von Testkeimen sind in der nachstehenden Tabelle beispielhaft aufgeführt. Die Verbindungen zeigen eine abgestufte antibakterielle Wirkung gegen die meisten der Testkeime.
  • Tabelle A (mit Vergleichsbeispiel 43A (Biphenomycin A))
    Figure 00790001
  • Systemische Infektion mit S. aureus 133
  • Die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen kann in verschiedenen Tiermodellen gezeigt werden. Dazu werden die Tiere im allgemeinen mit einem geeigneten virulenten Keim infiziert und anschließend mit der zu testenden Verbindung, die in einer an das jeweilige Therapiemodell angepassten Formulierung vorliegt, behandelt. Speziell kann die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen in einem Sepsismodell an Mäusen nach Infektion mit S. aureus demonstriert werden.
  • Dazu werden S. aureus 133 Zellen über Nacht in BH-Bouillon (Oxoid, Deutschland) angezüchtet. Die Übernachkultur wurde 1:100 in frische BH-Bouillon verdünnt und für 3 Stunden hochgedreht. Die in der logarithmischen Wachstumsphase befindlichen Bakterien werden abzentrifugiert und zweimal mit gepufferter, physiologischer Kochsalz-Lösung gewaschen. Danach wird am Photometer (Dr. Lange LP 2W) eine Zellsuspension in Kochsalz-Lösung mit einer Extinktion von 50 Einheiten eingestellt. Nach einem Verdünnungsschritt (1:15) wird diese Suspension 1:1 mit einer 10%-igen Mucinsuspension gemischt. Von dieser Infektionslösung wird 0.2 ml/20 g Maus i.p. appliziert. Dies entspricht einer Zellzahl von etwa 1-2×106 Keimen/Maus. Die i.v.-Therapie erfolgt 30 Minuten nach der Infektion. Für den Infektionsversuch werden weibliche CFW1-Mäuse verwendet. Das Überleben der Tiere wird über 6 Tage protokolliert. Das Tiermodell ist so eingestellt, daß unbehandelte Tiere innerhalb von 24 h nach der Infektion versterben. Für die Beispielverbindung 2 konnte in diesem Modell eine therapeutische Wirkung von ED100 = 1.25 mg/kg demonstriert werden.
  • Bestimmung der Spontanresistenzfrequenzen gegen S. aureus
  • Die Spontanresistenzraten der erfindungsgemäßen Verbindungen werden wie folgt bestimmt: die Bakterienkeime werden auf Blutagarplatten oder Müller-Hinton-Agarplatten bei 37°C über Nacht kultiviert, in 2 ml PBS resuspendiert (ca. 2×109 Keime/ml). 100 μl dieser Zellsuspension bzw. 1:10 und 1:100 Verdünnungen werden auf vorgetrockneten Agarplatten (1.5% Agar, 20% defibriniertes Pferdeblut bzw. 1.5% Agar, 20% Rinderserum in 1/10 Müller-Hinton-Medium verdünnt mit PBS), welche die zu testende erfindungsgemäße Verbindung in einer Konzentration entsprechend 5×MHK bzw. 10×MHK enthalten, ausplattiert und 48 h bei 37°C bebrütet. Die entstehenden Kolonien (cfu) werden ausgezählt.
  • Isolierung der Binhenomycin-resistenten S. aureus Stämme RN4220BiR und T17
  • Der S. aureus Stamm RN4220BiR wird in vitro isoliert. Dazu werden jeweils 100 μl einer S. aureus RN4220 Zellsuspension (ca. 1.2×108 cfu/ml) auf einer antibiotikafreien Agarplatte (18.5 mM Na2HPO4, 5.7 mM KH2PO4, 9.3 mM NH4Cl, 2.8 mM MgSO4, 17.1 mM NaCl, 0.033 μg/ml Thiaminhydrochlorid, 1.2 μg/ml Nicotinsäure, 0.003 μg/ml Biotin, 1% Glucose, 25 μg/ml von jeder proteinogenen Aminosäure unter Zusatz von 0.4% BH-Bouillon und 1% Agarose) und einer Agarplatte, die 2 μg/ml Biphenomycin B (10×MHK) enthält, ausplattiert und über Nacht bei 37°C bebrütet. Während auf der antibiotikafreien Platte ca. 1×107 Zellen wachsen, wachsen auf der antibiotikahaltigen Platte ca. 100 Kolonien, entsprechend einer Resistenzfrequenz von 1×10–5. Einige der auf der antibiotikahaltigen Platte gewachsenen Kolonien werden auf MHK gegen Biphenomycin B getestet. Eine Kolonie mit einer MHK > 50 μM wird zur weiteren Verwendung ausgewählt und der Stamm mit RN4220BiR bezeichnet.
  • Der S. aureus Stamm T17 wird in vivo isoliert. CFW1-Mäuse werden mit 4×107 S. aureus 133-Zellen pro Maus intraperitoneal infiziert. 0.5 Std. nach der Infektion werden die Tiere mit 50 mg/kg Biphenomycin B intravenös behandelt. Den überlebenden Tieren werden am Tag 3 nach der Infektion die Nieren entnommen. Nach dem Homogenisieren der Organe werden die Homogenate, wie bei RN4220BiR beschrieben, auf antibiotikafreien und antibiotikahaltigen Agarplatten, ausplattiert und über Nacht bei 37°C bebrütet. Etwa die Hälfte der aus der Niere isolierten Kolonien zeigen ein Wachstum auf den antibiotikahaltigen Platten (2.2×106 Kolonien), was die Anreicherung von Biphenomycin B resistenten S. aureus Zellen in der Niere der behandelten Tiere belegt. Ca. 20 dieser Kolonien werden auf MHK gegen Biphenomycin B getestet und eine Kolonie mit einer MHK > 50 μM wird zur Weiterkultivierung ausgewählt und der Stamm mit T17 bezeichnet.
  • C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden:
  • Intravenös applizierbare Lösung:
  • Zusammensetzung:
  • 1 mg der Verbindung von Beispiel 1, 15 g Polyethylenglykol 400 und 250 g Wasser für Injektionszwecke.
  • Herstellung:
  • Die erfindungsgemäße Verbindung wird zusammen mit Polyethylenglykol 400 in dem Wasser unter Rühren gelöst. Die Lösung wird sterilfiltriert (Porendurchmesser 0.22 μm) und unter aseptischen Bedingungen in hitzesterilisierte Infusionsflaschen abgefüllt. Diese werden mit Infusionsstopfen und Bördelkappen verschlossen.

Claims (11)

  1. Verbindung der Formel
    Figure 00830001
    bei der R1 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00830002
    wobei R7 gleich Wasserstoff oder Hydroxy ist, * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, R2 gleich Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist, R3 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00840001
    ist, wobei * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R8 gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist, R9 gleich Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00840002
    ist, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R20 gleich Wasserstoff oder *-(CH2)f-NHR22 ist, worin R22 gleich Wasserstoff oder Methyl ist und f eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R21 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, d eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist und e eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R10 gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist, oder R9 und R10 bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring, R11 und R1 5 unabhängig voneinander *-(CH2)Z1-OH, *-(CH2)Z2-NHR16, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl, Aminocarbonyl-methyl, *-CONHR17 oder *-CH2CONHR1 8 sind, worin * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, Z1 und Z2 unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind, R16 gleich Wasserstoff oder Methyl ist und R17 und R18 unabhängig voneinander eine Gruppe der Formel
    Figure 00860001
    sind, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R8a gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist, R9a gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist, R10a gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist, oder R9a und R10a bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring, R11a und R1 5a unabhängig voneinander *-(CH2)Z1a-OH, *-(CH2)Z2a-NHR16a, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl-methyl oder Aminocarbonylmethyl sind, worin * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, R16a gleich Wasserstoff oder Methyl ist und Z1a und Z2a unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind, R12 a und R1 4a unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind, R13a gleich Amino oder Hydroxy ist, ka eine Zahl 0 oder 1 ist, la, wa, xa und ya unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind, R12 und R14 unabhängig voneinander Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00870001
    sind, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R20a gleich Wasserstoff oder *-(CH2)fa-NHR22a ist, worin R22a gleich Wasserstoff oder Methyl ist und fa eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R21a gleich Wasserstoff oder Methyl ist, da eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist und ea eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R13 gleich Amino oder Hydroxy ist, R19 eine Gruppe der Formel
    Figure 00880001
    ist, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R8b gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist, R9b gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist, R10b gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist, oder R9b und R10b bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring, R11b und R15 b unabhängig voneinander *-(CH2)Z1b-OH, *-(CH2)Z2b-NHR16b, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl sind, worin * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, R16b gleich Wasserstoff oder Methyl ist und Z1b und Z2b unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind, R1 2b und R14b unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind, R13b gleich Amino oder Hydroxy ist, kb eine Zahl 0 oder 1 ist, lb, wb, xb und yb unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind, k und t unabhängig voneinander eine Zahl 0 oder 1 sind, l, w, x und y unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind, m, r, s und v unabhängig voneinander eine Zahl 1 oder 2 sind, n, o, p und q unabhängig voneinander eine Zahl 0, 1 oder 2 sind, u eine Zahl 0, 1, 2 oder 3 ist,
    Figure 00890001
    oder y unabhängig voneinander bei l, w, x oder y gleich 3 eine Hydroxy-Gruppe tragen kann, R4 gleich Wasserstoff, Halogen, Amino, Hydroxy, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C4)-Alkyl, (C1-C4)-Alkoxy oder (C1-C6)-Alkylamino ist, R5 gleich Wasserstoff, Halogen, Amino, Hydroxy, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl, Nitro, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C1-C4)-Alkyl, (C1-C4)-Alkoxy oder (C1-C6)-Alkylamino ist, R6 gleich Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist, oder eines ihrer Salze, ihrer Solvate oder der Solvate ihrer Salze.
  2. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie der Formel
    Figure 00890002
    entsprechen, worin R1 bis R6 die gleiche Bedeutung wie in Formel (I) haben, oder eines ihrer Salze, ihrer Solvate oder der Solvate ihrer Salze.
  3. Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass R1 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00900001
    wobei R7 gleich Wasserstoff oder Hydroxy ist, * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, R2 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, R3 gleich eine Gruppe der Formel
    Figure 00900002
    ist, wobei * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R8 gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist, R9 gleich Wasserstoff, Methyl oder eine Gruppe der Formel
    Figure 00900003
    ist, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R20 gleich Wasserstoff oder *-(CH2)f-NHR22 ist, worin R22 gleich Wasserstoff ist und f eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R21 gleich Wasserstoff ist, d eine Zahl 0 ist und e eine Zahl 1, 2 oder 3 ist, R10 gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist, R11 gleich *-(CH2)Z1-OH, *-(CH2)Z2-NHR1 6, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonylmethyl, Aminocarbonyl-methyl, *-CONHR17 oder *-CH2CONHR18 ist, worin * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, Z1 und Z2 unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind, R1 6 gleich Wasserstoff oder Methyl ist und R17 und R18 unabhängig voneinander eine Gruppe der Formel
    Figure 00920001
    sind, worin * die Anknüpfstelle an das Stickstoffatom ist, R8a gleich Wasserstoff, Amino oder Hydroxy ist, R9a gleich Wasserstoff, Methyl oder Aminoethyl ist, R10a gleich Wasserstoff oder Aminoethyl ist, oder R9a und R10a bilden zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind einen Piperazin-Ring, R11a und R1 5a unabhängig voneinander *-(CH2)Z1a-OH, *-(CH2)Z2a-NHR1 6a, Hydroxycarbonyl, Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl-methyl oder Aminocarbonylmethyl sind, worin * die Anknüpfstelle an das Kohlenstoffatom ist, R1 6a gleich Wasserstoff oder Methyl ist und Z1a und Z2a unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2 oder 3 sind, R1 2a und R1 4a unabhängig voneinander Wasserstoff oder Methyl sind, R13a gleich Amino oder Hydroxy ist, ka eine Zahl 0 oder 1 ist, la, wa, xa und ya unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind, R12 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, k gleich eine Zahl 0 oder 1 ist, l und w unabhängig voneinander eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 sind,
    Figure 00930001
    oder w unabhängig voneinander bei l oder w gleich 3 eine Hydroxy-Gruppe tragen kann, R4 gleich Hydroxy ist, R5 gleich Wasserstoff ist, R6 gleich Wasserstoff ist.
  4. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder eines ihrer Salze, Solvate oder der Solvate ihrer Salze, dadurch gekennzeichnet, dass [A] eine Verbindung der Formel
    Figure 00930002
    worin R1, R2, R4, R5 und R6 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben und boc gleich tert-Butoxycarbonyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von einem oder mehreren Dehydratisierungsreagenzien mit einer Verbindung der Formel H2NR3 (III),worin R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure umgesetzt wird, oder [B] eine Verbindung der Formel
    Figure 00940001
    worin R1, R2, R4, R5 und R6 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben und Z gleich Benzyloxycarbonyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von einem oder mehreren Dehydratisierungsreagenzien mit einer Verbindung der Formel H2NR3 (III),worin R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure oder durch Hydrogenolyse umgesetzt wird, oder [C] eine Verbindung der Formel
    Figure 00950001
    worin R1, R2, R4, R5 und R6 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben und Z gleich Benzyloxycarbonyl ist, und R23 gleich Benzyl, Methyl oder Ethyl ist, in einem zweistufigen Verfahren zunächst in Gegenwart von Kaliumcyanid mit einer Verbindung der Formel H2NR3 (III),worin R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, und anschließend mit einer Säure oder durch Hydrogenolyse umgesetzt wird.
  5. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder eines ihrer Solvate, dadurch gekennzeichnet, dass ein Salz der Verbindung oder ein Solvat eines Salzes der Verbindung durch Chromatographie unter Zusatz einer Base in die Verbindung oder eines ihrer Solvate überführt wird.
  6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten.
  7. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten.
  8. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von bakteriellen Erkrankungen.
  9. Arzneimittel enthaltend mindestens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 in Kombination mit mindestens einem inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoff.
  10. Arzneimittel nach Anspruch 9 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von bakteriellen Infektionen.
  11. Verfahren zur Bekämpfung von bakteriellen Infektionen in Menschen und Tieren durch Verabreichung einer antibakteriell wirksamen Menge mindestens einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 oder eines Arzneimittels nach Anspruch 9.
DE102004025731A 2004-05-26 2004-05-26 Antibakterielle Amid-Makrozyklen III Withdrawn DE102004025731A1 (de)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102004025731A DE102004025731A1 (de) 2004-05-26 2004-05-26 Antibakterielle Amid-Makrozyklen III
PCT/EP2005/005223 WO2005118613A2 (de) 2004-05-26 2005-05-13 Antibakterielle amid-makrozyklen

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102004025731A DE102004025731A1 (de) 2004-05-26 2004-05-26 Antibakterielle Amid-Makrozyklen III

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE102004025731A1 true DE102004025731A1 (de) 2005-12-15

Family

ID=35262058

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE102004025731A Withdrawn DE102004025731A1 (de) 2004-05-26 2004-05-26 Antibakterielle Amid-Makrozyklen III

Country Status (2)

Country Link
DE (1) DE102004025731A1 (de)
WO (1) WO2005118613A2 (de)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10358824A1 (de) 2003-12-16 2005-07-21 Bayer Healthcare Ag Antibakterielle Makrozyklen mit substituiertem Biphenyl
DE102005032781A1 (de) * 2005-07-14 2007-01-18 Aicuris Gmbh & Co. Kg Antibakterielle Amid-Markozyklen VII
PL3368544T3 (pl) * 2015-10-27 2020-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Peptydowe związki makrocykliczne przeciwko Acinetobacter baumannii
CN107793330B (zh) * 2016-08-29 2020-03-17 鲁南制药集团股份有限公司 一种安塞曲匹手性中间体的合成方法
EP3388445A1 (de) * 2017-04-10 2018-10-17 F. Hoffmann-La Roche AG Peptidmakrocyclen und deren verwendung bei der behandlung von bakteriellen infektionen
EP3388444A1 (de) 2017-04-10 2018-10-17 F. Hoffmann-La Roche AG Antibakterielle peptidmakrozyklen und verwendung davon
US11505573B2 (en) 2018-03-28 2022-11-22 Hoffmann-La Roche Inc. Peptide macrocycles against Acinetobacter baumannii
US11819532B2 (en) 2018-04-23 2023-11-21 Hoffmann-La Roche Inc. Peptide macrocycles against Acinetobacter baumannii

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10226921A1 (de) * 2002-06-17 2003-12-24 Bayer Ag Antibakterielle Amid-Makrozyklen
DE10234422A1 (de) * 2002-07-29 2004-02-12 Bayer Ag Antibakterielle Ester-Makrozyklen

Also Published As

Publication number Publication date
WO2005118613A3 (de) 2006-01-12
WO2005118613A2 (de) 2005-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE102005014245A1 (de) Antibakterielle Amid-Makrozyklen V
EP1515983B1 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen
AU2015228898B2 (en) Polymyxin derivatives and their use in combination therapy together with different antibiotics
EP1809657A1 (de) Cyclische nonapeptidamide
WO2005118613A2 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen
EP1797110B1 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen iv
EP1866291B1 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen vi
EP1697400B1 (de) Antibakterielle makrozyklen mit substituiertem biphenyl
WO2005033129A1 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen
WO2004012816A1 (de) Antibakterielle ester-makrozyklen
DE102006003443A1 (de) Asparagin-10-substituierte Nonadepsipeptide
DE102004053407A1 (de) Acylierte Nonadepsipeptide II
DE102004051023A1 (de) Desoxo-Nonadepsipeptide
WO2005100380A1 (de) Antibakterielle amid-makrozyklen ii
DE102005032781A1 (de) Antibakterielle Amid-Markozyklen VII
WO2007059908A1 (de) Neue cyclische iminopeptid-derivate und ein verfahren zur herstellung von cyclischen iminopeptid-derivaten

Legal Events

Date Code Title Description
8127 New person/name/address of the applicant

Owner name: AICURIS GMBH & CO. KG, 42117 WUPPERTAL, DE

8139 Disposal/non-payment of the annual fee