DE102004002885B4 - New medically useful pyrrolo alkaloids: Processes for their isolation, synthesis, medicines containing them and their use - Google Patents

Abstract

Verbindung der allgemeinen Formel 23:

worin R¹ bis R¹¹ unabhängig voneinander entweder Wasserstoff, ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈ Alkenyl, wobei das Alkyl beziehungsweise Alkenyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Aryl- oder Heteroarylrest, ein über ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C-C₁₈-Alkenyl gebundener Aryl- oder Heteroarylrest, eine Acylgruppe, ausgewählt aus Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, eine Sulfonylgruppe, ausgewählt aus -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder -SO₂C₆H₄CH₂Br, oder Fluor, Chlor, Brom, Jod, -CN, NO₂,
eine Alkoxygruppe -OR oder eine Thioethergruppe -SR oder eine Aminogruppe -NRR', deren Reste R und R' jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈-Alkenyl, wobei das Alkyl beziehungsweise Alkenyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Aryl- oder Heteroarylrest, ein über ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈-Alkenyl gebundener Aryl- oder Heteroarylrest, eine Acylgruppe, ausgewählt aus Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, oder eine Sulfonylgruppe, ausgewählt aus -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder -SO₂C₆H₄CH₂Br sein können, sind, wobei
im Falle...Compound of General Formula 23:

wherein R ¹ to R ¹¹ independently of one another are either hydrogen, a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁ -C ₁₈ alkenyl, where the alkyl or alkenyl may be straight, branched or cyclic, an aryl or heteroaryl radical, a via a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁₈ alkenyl-linked aryl or heteroaryl group, an acyl group selected from formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, maleyl, succinyl, benzoyl, a sulfonyl group selected from -SO ₃ H, -SO ₂ Me , -SO ₂ CF ₃ , -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₃ or -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₂ Br, or fluorine, chlorine, bromine, iodine, -CN, NO ₂ ,
an alkoxy group -OR or a thioether group -SR or an amino group -NRR ', whose radicals R and R' are each independently hydrogen, a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁ -C ₁₈ alkenyl, wherein the alkyl or alkenyl is straight , branched or cyclic, an aryl or heteroaryl radical, an aryl or heteroaryl radical bonded via a C ₁ -C ₁₈ -alkyl or C ₁ -C ₁₈ -alkenyl, an acyl group selected from formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, Maleyl, succinyl, benzoyl, or a sulfonyl group selected from -SO ₃ H, -SO ₂ Me, -SO ₂ CF ₃ , -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₃ or -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₂ Br , are, being
in the event of...

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue bioaktive Verbindungen aus der Klasse der Pyrrolalkaloide und Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen durch Isolierung aus natürlichen Quellen und durch chemische Synthese. Diese Erfindung betrifft weiterhin diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung bei der Behandlung von Krankheiten.The The present invention relates to novel bioactive compounds from the Class of pyrrole alkaloids and process for making them Compounds by isolation from natural sources and by chemical synthesis. This invention further relates to these compounds Medicines and their use in the treatment of diseases.

Hintergrund der Erfindungbackground the invention

Meeresschwämme sind eine reichhaltige Quelle an Pyrrolalkaloiden, einer Gruppe von Naturstoffen, die sich durch ihre strukturelle Vielfalt und interessante biologische Aktivitäten auszeichnet. Strukturelle Gemeinsamkeit der meisten Mitglieder dieser Verbindungsklasse ist die Pyrrol-2-Carbonsäuregruppe, welche durch ein kurzes aliphatisches Verbindungsstück mit einem Heterozyklus, oft einer Aminoimidazoleinheit, verbunden ist.Sea sponges are a rich source of pyrrole alkaloids, a group of natural products that through their structural diversity and interesting biological activities distinguished. Structural commonality of most members of this Compound class is the pyrrole-2-carboxylic acid group, which is characterized by a short aliphatic connector with a heterocycle, often an aminoimidazole unit.

Als erste Verbindung dieser Klasse wurde das dibromierte Oroidin (1) isoliert, zuerst aus dem Schwamm Agelas oroides und später auch aus verschiedenen anderen Schwämmen (S. Forenza, L. Minale, R. Riccio, E. Fattorusso, J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1971, 13, 1129–1130). Im Laufe der letzten dreißig Jahre wurden zahlreiche weitere Pyrrolalkaloide mit vielfältigen biologischen Aktivitäten isoliert, zumeist (aber nicht ausschließlich) aus Schwämmen der Familien Agelisidae, Hymeniacidonidae und Axinellidae. So wurde zum Beispiel Keramadin (2), ein neuartiger Antagonist serotonerger Rezeptoren, aus einer von Okinawa stammenden Agelas-Spezies isoliert (H. Nakamura, Y. Ohizumi, J. Kobayashi, M. Kasei, Tetrahedron Lett. 1984, 25, 2475–2478). Hymenidin (3), aus einem Hymeniacidon sp. (J. Kobayashi, Y. Ohizumi, H. Nakamura, Y. Hirata, Experientia 1986, 42, 1176–1177), und Clathrodin (4), aus dem karibischem Schwamm Agelas clathrodes (J. J. Morales, A. D. Rodriguez, J. Nat. Prod. 1991, 54, 629–631), sind die mono- bzw. unbromierten Analoga von Oroidin (1). Clathrodin wirkt, wie auch Oroidin, auf muscarinische Acetylcholinrezeptoren (mAChR) in Membranen aus Rattengehirn, während Hymenidin eine ausgeprägte antiserotonerge Wirkung besitzt. Eine antimikrobielle Wirkung von Oroidin ist ebenfalls bekannt. Die Tauroacidine A (5) und B (6), aus einer Hymeniacidon sp., sind Brompyrrolalkaloide mit einem Taurinrest am Aminoimidazolring (J. Kobayashi, K. Inaba, M. Tsuda, Tetrahedron 1997, 53, 16679–16682); sie wirken als Inhibitoren der EGF-Rezeptor-Kinase und der c-erb8-2-Kinase mit einem IC₅₀ von jeweils 20 μg/ml. Die verwandte Verbindung Taurodispacamid A (7) wurde aus dem mediterranen Schwamm Agelas oroides isoliert und zeigte eine gute antihistaminische Aktivität am isolierten Meerschweinchenileum (E. Fattorusso, O. Taglialatela-Scafati, Tetrahedron Lett. 2000, 41, 9917–9922). Eine ungewöhnliche N-Methylimidazoliniumgruppe enthalten Clathramide A (8) und B (9) (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, Tetrahedron 1996, 52, 13713–13720), aus dem karibischen Schwamm Agelas clafhrodes, die eine antifungische Wirkung gegen Aspergillus niger zeigen. Trotz ihrer Ähnlichkeit zu anderen, bioaktiven, Strukturen konnte bei diesen Verbindungen jedoch keine antihistaminische, antiserotonerge oder anticholinerge Wirksamkeit beobachtet werden. Bei den Dispacamiden A bis D (10–13) handelt es sich um Brompyrrolalkaloide mit einer Aminoimidazoloneinheit (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 3587–3590; F. Cafieri, R. Carnuccio, E. Fattorusso, O. Taglialatela-Scafati, T. Vallefuoco, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1997, 7, 2283–2288), sie wurden aus verschiedenen karibischen Agelas-Arten isoliert und weisen eine erstaunlich selektive antihistaminische Wirkung auf. Aus dem Schwamm Agelas nakamurai wurden Mukanadin B (14) (H. Uemoto, M. Tsuda, J. Kobayashi, J. Nat. Prod. 1999, 62, 1581–1583), mit einer Hydantion- an Stelle der Aminoimidazolongruppe, und die Slagenine A bis C (15–17) (M. Tsuda, H. Remoto, J. Kobayashi, Tetrahedron Lett. 1999, 40, 5709–5712), mit einem einzigartigem Tetrahydrofuro[2,3-d]imidazolidin-2-onring, isoliert. Die Manzacidine A bis D (18–21) (J. Kobayashi, F. Kanda, M. Ishibashi, H. Shigemori, J. Org. Chem. 1991, 56, 4574–4576; T. Jahn, G. M. König, A. D. Wright, Tetrahedron Lett. 1997, 38, 3883–3884), aus einer Hymeniacidon sp., und Agelongin (22), aus Agelas longissima (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, R. Carnuccio, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995, 5, 799–804), stellen insofern eine strukturelle Neuerung unter den Pyrrolalkaloiden dar, als dass sie an Stelle des üblichen Imidazolrings einen 3,4,5,6-Tetrahydropyrimidin- beziehungsweise einen Pyridinring und an Stelle der zentralen Amidbindung eine Esterbindung besitzen. Agelongin besitzt eine antiserotonerge Wirkung an Funduspreparationen von Rattenmagen.The first compound of this class to be isolated was the dibrominated oroidin (1), first from the sponge Agelas oroides and later also from various other sponges (S. Forenza, L. Minale, R. Riccio, E. Fattorusso, J. Chem. Soc. , Chem. Comm. 1971, 13, 1129-1130). Over the past thirty years, numerous other pyrrole alkaloids have been isolated with a variety of biological activities, mostly (but not exclusively) from sponges of the Agelisidae, Hymeniacidonidae and Axinellidae families. For example, Keramadin (2), a novel antagonist of serotonergic receptors, has been isolated from an Okinawa-derived Agelas species (H. Nakamura, Y. Ohizumi, J. Kobayashi, M. Kasei, Tetrahedron Lett. 1984, 25, 2475- 2478). Hymenidine (3), from a Hymeniacidon sp. (J. Kobayashi, Y. Ohizumi, H. Nakamura, Y. Hirata, Experientia 1986, 42, 1176-1177), and Clathrodin (4), from the Caribbean sponge Agelas clathrodes (JJ Morales, AD Rodriguez, J. Nat. Prod. 1991, 54, 629-631), are the mono- and / or unbrominated analogs of oroidin (1). Clathrodin, like Oroidin, acts on muscarinic acetylcholine receptors (mAChR) in rat brain membranes, while hymenidine has pronounced antiserotonergic activity. An antimicrobial effect of Oroidin is also known. The tauroacidines A (5) and B (6), from a Hymeniacidon sp., Are bromopyrrole alkaloids having a taurine residue on the aminoimidazole ring (J. Kobayashi, K. Inaba, M. Tsuda, Tetrahedron 1997, 53, 16679-16682); they act as inhibitors of EGF receptor kinase and c-erb8-2 kinase with an IC ₅₀ of 20 μg / ml each. The related compound taurodispacamide A (7) was isolated from the Mediterranean sponge Agelas oroides and showed good antihistaminic activity on the isolated guinea pig ileum (E. Fattorusso, O. Taglialatela scafati, Tetrahedron Lett. 2000, 41, 9917-9922). An unusual N-methylimidazolinium group contains clathramides A (8) and B (9) (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, Tetrahedron 1996, 52, 13713-13720), from the Caribbean sponge Agelas clafhrodes showing an antifungal activity against Aspergillus niger. However, despite their similarity to other bioactive structures, no antihistaminic, antiserotonergic or anticholinergic efficacy could be observed with these compounds. Dispacamides A to D (10-13) are bromopyrrole alkaloids having an aminoimidazolone moiety (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, Tetrahedron Lett., 1996, 37, 3587-3590; Cafieri, R. Carnuccio, E. Fattorusso, O. Taglialatela-Scafati, T. Vallefuoco, Bioorg. Med. Chem. Lett., 1997, 7, 2283-2288), have been isolated from various Caribbean Agelas species and have one amazingly selective antihistaminic effect on. Mukanadin B (14) (H. Uemoto, M. Tsuda, J. Kobayashi, J. Nat., Prod., 1999, 62, 1581-1583), having a hydantione in place of the aminoimidazolone group, and the fungi Agelas nakamurai were obtained from the sponge Agelas nakamurai Slides A to C (15-17) (Tsuda, H. Remoto, J. Kobayashi, Tetrahedron Lett. 1999, 40, 5709-5712) with a unique tetrahydrofuro [2,3-d] imidazolidin-2-one ring isolated. Manzacidines A to D (18-21) (J. Kobayashi, F. Kanda, M. Ishibashi, H. Shigemori, J. Org. Chem. 1991, 56, 4574-4576; T. Jahn, GM King, AD Wright , Tetrahedron Lett., 1997, 38, 3883-3884), from a Hymeniacidon sp., And Agelongin (22), from Agelas longissima (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, R. Carnuccio , Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995, 5, 799-804), represent a structural innovation among the pyrrolo alkaloids in that they replace a 3,4,5,6-tetrahydropyrimidine or a pyridine ring instead of the usual imidazole ring and have an ester linkage in place of the central amide bond. Agelongin has an antiserotonergic effect on fundus reparations of rat stomach.

Das Anwendungsspektrum für eine kommerzielle Nutzung der neuen bioaktiven Substanzen, die interessante biologische Aktivitäten besitzen, ist sehr breit. Intensiv wird dabei auch nach solchen Substanzen gesucht, die eine Behandlung von bisher kaum therapierbaren neurodegenerativen Erkrankungen, wie z. B. von Morbus Alzheimer, Morbus Parkinson oder Multipler Sklerose, ermöglichen.The Application spectrum for a commercial use of new bioactive substances that are interesting biological activities own, is very wide. Intensive is also after such Substances that sought treatment of previously barely treatable neurodegenerative diseases such. From Alzheimer's disease, Parkinson's disease or multiple sclerosis.

Intrazelluläres freies Calcium [Ca²⁺]_i ist ein sehr wichtiger Second-Messenger in der Stimulation vieler Zellen. Die Mobilisierung von Calcium spielt auch eine sehr große Rolle bei verschiedenen Krankheiten, wie z. B. neurodegenerativen Erkrankungen des ZNS, Ischämie, Alzheimer-Krankheit, psychopathologischen Krankheiten und bei Alterungsprozessen. Dabei ist sowohl bei diesen Erkrankungen als auch bei direkten Verletzungen des Gehirns eine Erhöhung der intrazellulären Ca²⁺-Konzentration festzustellen. Dieser erhöhte Einstrom von Ca²⁺ führt über eine Reihe von weiteren Mechanismen zur fortschreitenden Zellzerstörung.Intracellular free calcium [Ca ²⁺ ] _i is a very important second messenger in stimulating many cells. The mobilization of calcium also plays a very important role in various diseases such. As neurodegenerative diseases of the CNS, ischemia, Alzheimer's disease, psychopathological diseases and aging processes. It is both in these diseases as well as in direct injury of the brain to detect an increase in the intracellular Ca ²⁺ concentration. This increased influx of Ca ²⁺ leads to progressive cell destruction through a number of other mechanisms.

Es ist daher Aufgabe der vorliegenden Erfindung, eine neue bioaktive Substanz aus einem marinen Organismus und strukturell verwandte Verbindungen, Verfahren zu deren Herstellung und zu deren Verwendung zur Verfügung zu stellen.It is therefore an object of the present invention, a new bioactive Substance from a marine organism and structurally related Compounds, processes for their preparation and their use to disposal to deliver.

Die vorliegende Erfindung betrifft das neue, aus dem Schwamm Axinella damicornis isolierte, Alkaloid Daminin (24) sowie Alkaloide der allgemeinen Struktur 23.

Agelongin (22) ist der bisher einzige Vertreter der allgemeinen Struktur 23, dabei ist R² = Br und R¹ sowie R³ bis R¹¹ sind H.The present invention relates to the new alkaloid daminin (24) isolated from the sponge Axinella damicornis and to alkaloids of general structure 23.

Agelongin (22) is the only representative of general structure 23 so far, where R ² = Br and R ¹ and R ³ to R ¹¹ are H.

Neue Substanzen wie das hier beschriebene Alkaloid Daminin (24), die die intrazellu läre Ca²⁺-Konzentration ([Ca²⁺]_i) senken (z. B. nach der Inkubation mit Neurotoxinen oder Neurotransmittern) und ausgeprägte neuroprotektive Eigenschaften besitzen, könnten in Zukunft bei der Behandlung von derartigen Erkrankungen eine große Rolle spielen.New substances such as the alkaloid daminin (24) described here, which lower the intracellular Ca ²⁺ concentration ([Ca ²⁺ ] _i ) (eg after incubation with neurotoxins or neurotransmitters) and possess pronounced neuroprotective properties, could play a major role in the treatment of such diseases in the future.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung sollen die neuen Pyrrolalkaloide auch von der allgemeinen Formel 23 abgeleitete Verbindung sein, worin R¹ bis R¹¹ sowie X unabhängig voneinander entweder H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z. B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, oder eine verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppe, -OH oder -SH, (im Falle von R¹, R³, R⁸, R¹⁰, und R¹¹ mit Auftreten zusätzlicher Tautomeren verbunden) ein Alkoxysubstituent, wie z. B. -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, eine über ein Schwefelatom gebundene Alkylgruppe, wie -SMe, -SEt, oder eine Sulfonylgruppe, wie z. B. -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆H₄CH₂Br, oder ein Stickstoffsubstituent, wie z. B. -NH₂, -NHR, -NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC oder -NO₂, oder Fluor, Chlor, Brom, Iod, -CN oder ein Heterosubstituent sind, wobei im Falle von R⁶ unterschiedlich von R⁷ oder R⁴ unterschiedlich von R⁵ oder bei sterisch anspruchsvollen (d.h. großen, raumfüllenden oder auch sperrigen) Arylresten, z.B. mit voluminösen ortho-Substituenten, R¹-R³ sowie R⁸-R¹¹ die Verbindung zentro- oder axialchiral sein kann, sowie alle auftretenden Stereoisomere und racemischen Gemische davon, zwei oder mehr Reste (z.B. ein Rest R¹ und ein Rest R² oder ein Rest R⁴ und ein Rest R⁶) können so untereinander in der Art verknüpft sein, dass dadurch ein iso- oder heteroaromatischer oder gesättigter Ring gebildet ist. So kann z.B. R¹ plus R² auch ein an zwei benachbarten Kohlenstoffeatomen des Pyrrolgerüsts kondensierter aromatischer oder gesättigter Ring sein. Außerdem besteht die Maßgabe, dass Formel 23 nicht die folgende Formel 22 bedeutet:In the context of the present invention, the novel pyrrole alkaloids are also compounds derived from the general formula 23 in which R ¹ to R ¹¹ and X independently of one another are either H, an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted C ₁ -C ₁₈ -alkyl, where the alkyl is straight , branched or cyclic, alkenyl, an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted aryl or heteroaryl radical, an unsubstituted, monosubstituted or polysubstituted benzyl group, an acyl group, such as. Formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, maleyl, succinyl, benzoyl, or a branched or heteroatom or aryl substituted acyl group, -OH or -SH (in the case of R ¹ , R ³ , R ⁸ , R ¹⁰ , and R ^{11 associated} with occurrence of additional tautomers) an alkoxy substituent, such as. B. -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, whose alkyl group is branched, unbranched or cyclic, an alkyl group bonded via a sulfur atom, such as -SMe, -SSE, or a sulfonyl group, such as. B. -SO ₃ H, -SO ₂ Me, -SO ₂ CF ₃ , -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₃ or SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₂ Br, or a nitrogen substituent, such as. For example, -NH ₂ , -NHR, -NRR '(with R, R' = alkyl, aryl, etc.), -NC or -NO ₂ , or fluorine, chlorine, bromine, iodine, -CN or a hetero substituent, wherein in the case of R ⁶ different from R ⁷ or R ⁴ different from R ⁵ or in sterically demanding (ie large, bulky or bulky) aryl radicals, for example with bulky ortho substituents, R ¹ -R ³ and R ⁸ -R ¹¹ the Compound may be centro- or axial chiral, as well as all occurring stereoisomers and racemic mixtures thereof, two or more radicals (eg, a radical R ¹ and a radical R ² or a radical R ⁴ and a radical R ⁶ ) can thus be linked together in the manner be that thereby an iso or heteroaromatic or saturated ring is formed. For example, R may be ¹ plus R ² be an on two adjacent carbon atoms of the Pyrrolgerüsts fused aromatic or saturated ring. In addition, it is understood that Formula 23 does not mean the following Formula 22:

Agelongin (22)

Agelongin (22)

Umfaßt sind außerdem Gemische verschiedener dieser Verbindungen, die zum Beispiel zu einem auf die jeweils zu therapierende Erkrankung und/oder den Patienten auf Basis von diagnostischen oder Daten über den Behandlungserfolg oder -verlauf abgestimmten "personalisierten" Medikament verarbeitet werden können. Unter einem Derivat wird auch eine Verbindung entsprechend der allgemeinen Formel 23 verstanden, die aus anderen (z. B. marinen) Organismen isoliert werden kann, als dem hier (beispielhaft) erwähnten.Included are Furthermore Mixtures of various of these compounds, for example one to the respective disease to be treated and / or the patient based on diagnostic or data on treatment success or -processed "personalized" drug processed can be. Under a derivative is also a compound corresponding to the general Formula 23 understood from other (eg marine) organisms can be isolated than the one mentioned here (by way of example).

Unter einem "Vorläufer" einer Substanz soll im Rahmen der vorliegenden Erfindung zum einen eine Substanz verstanden werden, die im Laufe ihrer Verabreichung zur Behandlung durch die Bedingungen im Körper (z. B. pH im Magen, oder ähnliches) so verändert wird, oder aber durch den Körper nach Aufnahme so metabolisiert wird, dass sich als wirksame Substanz die erfindungsgemäße Verbindung oder deren Derivate bilden.Under a "precursor" of a substance in the context of the present invention on the one hand understood a substance be administered in the course of their administration by the Conditions in the body (eg pH in the stomach, or similar) so changed is, or through the body After ingestion is so metabolized that as an effective substance the compound of the invention or their derivatives.

Daminin ist ein bisher unbekannter Naturstoff und die Pyrrolalkaloid-Derivate nach der allgemeinen Formel 23 sind davon abgeleitete Syntheseprodukte, die bisher unbekannt waren und deren Wirkung nicht beschrieben ist.Daminin is a previously unknown natural product and the Pyrrolalkaloid derivatives according to the general formula 23 are derived synthesis products, which were previously unknown and whose effect is not described.

Diese erfindungsgemäßen Verbindungen können mit den üblichen Lösungsmitteln, Hilfs- und Trägerstoffen zu Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- und Infusionszubereitungen verarbeitet werden, um therapeutisch zur peroralen, rektalen oder parenteralen Applikation Verwendung zu finden.These Compounds of the invention can with the usual solvents Auxiliaries and carriers to tablets, dragees, capsules, dripping solutions, suppositories, injections and infusion preparations are processed to be therapeutic for peroral, rectal or parenteral administration use to find.

Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Substanz Daminin (24), das dadurch gekennzeichnet ist, dass die Substanz aus einem marinen Organismus, bevorzugt dem Schwamm Axinella damicomis, gewonnen wird. Des Weiteren betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung des Naturstoffs Daminin (24) und von Pyrrolalkaloiden der allgemeinen Formel 23 durch chemische Synthese gemäß der Schemata 1 oder 2, wie in den Beispielen angegeben.The The present invention further relates to a process for the preparation the substance daminin (24), which is characterized in that the substance from a marine organism, preferably the sponge Axinella damicomis, won. Furthermore, the invention relates a process for the preparation of the natural product Daminin (24) and of Pyrrole alkaloids of general formula 23 by chemical synthesis according to the schemes 1 or 2 as indicated in the examples.

Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung mindestens einer der oben genannten Verbindungen zur Behandlung von Erkrankungen, wie z. B. neurodegenerativen Erkrankungen des ZNS, Ischämie, Alzheimer-Krankheit, psychopathologischen Krankheiten. Diese Verwendung kann zum Beispiel in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz erfolgen. Im Falle der Behandlung von neurodegenerativen Erkrankungen wird eine Behandlung in einem Konzentrationsbereich zwischen 0,5 und 3,0 μg/ml bevorzugt.One Another aspect of the present invention relates to the use at least one of the above compounds for treatment of diseases such. B. neurodegenerative diseases of the CNS, ischemia, Alzheimer's disease, psychopathological diseases. This use For example, it can be in the form of a depot substance or as a precursor with a suitable, pharmaceutically acceptable dilution solution or vehicle respectively. In case of treatment of neurodegenerative diseases is a treatment in a concentration range between 0.5 and 3.0 μg / ml prefers.

Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine erfindungsgemäße Verbindung, zusammen mit geeigneten Zusatz- oder Hilfsstoffen. Diese pharmazeutische Zusammensetzung kann dadurch gekennzeichnet sein, daß die Verbindung in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz vorliegt.One Another aspect of the present invention relates to a pharmaceutical A composition comprising a compound of the invention, together with suitable additives or auxiliaries. This pharmaceutical composition may be characterized in that the compound in the form of a Depot substance or as a precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable Dilution solution or vehicle is present.

Besonders bevorzugt werden pharmazeutische Zusammensetzung, in denen die erfindungsgemäße Verbindung in solch einer Menge vorliegt, daß ein Konzentrationsbereich zwischen 1,0 und 3,0 μg/ml bei der Behandlung in vivo vorliegt.Especially preferred are pharmaceutical compositions in which the compound of the invention is present in such an amount that a concentration range between 1.0 and 3.0 μg / ml present in the treatment in vivo.

Erfindungsgemäß kann die oben genannte pharmazeutische Zusammensetzung in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- oder Infusionszubereitungen zur peroralen, rektalen oder parenteralen Verwendung vorliegen. Solche Darreichungsformen und deren Herstellung sind dem Fachmann bekannt.According to the invention, the above-mentioned pharmaceutical composition in the form of tablet dragees, capsules, dripping solutions, suppositories, injection or infusion preparations for peroral, rectal or parenteral use. Such dosage forms and their preparation are known in the art.

Die Erfindung soll nun im Folgenden anhand von Beispielen unter Bezug auf die bei gefügten Figuren weiter verdeutlicht werden, ohne jedoch auf diese Beispiele beschränkt zu werden. Es zeigtThe Invention will now be described below by way of examples with reference on the at Figures will be further clarified, but without these examples limited to become. It shows

1: Reduktion des durch den Glutamatrezeptor-Agonisten L-Glutamat in Neuronen hervorgerufenen Anstiegs des intrazellulären Calcium-Spiegels durch das neue Pyrrolalkaloid Daminin (24). In der Kontrollserie wurden die Neuronen nur mit L-Glutamat behandelt [offene Kreise]. In den Testserien wurden die Neuronen mit steigenden Konzentrationen an Daminin (24) (0,5 μg/ml [gefüllte Dreiecke]; 1,0 μg/ml [offene Quadrate]; beziehungsweise 3,0 μg/ml [offene Rauten]) für 5 Minuten vorinkubiert. Anschließend wurde in die Ansätze L-Glutamat (10 Min.) hinzu gesetzt. Die Änderungskinetik wurde kontinuierlich gemessen. Der Mittelwert (n = 35) als auch die Standardabweichung (± SE) wurden ermittelt. 1 : Reduction in the intracellular calcium level of the glutamate receptor agonist L-glutamate in neurons by the new pyrrole alkaloid daminin (24). In the control series, the neurons were treated only with L-glutamate [open circles]. In the test series, the neurons were labeled with increasing concentrations of daminine (24) (0.5 μg / ml [filled triangles], 1.0 μg / ml [open squares], and 3.0 μg / ml [open diamonds]) for 5 minutes pre-incubated. Subsequently, L-glutamate (10 min.) Was added to the batches. The change kinetics were measured continuously. The mean (n = 35) as well as the standard deviation (± SE) were determined.

2: In dieser Versuchsreihe wurde NMDA als Agonist für den Glutamatrezeptor auf Neuronen eingesetzt. Auch dieser bewirkt eine starke Zunahme der Konzentration an intrazellulären Calcium-Ionen ([gefüllte Rauten]). Werden die Neuronen jedoch mit dem neuen Pyrrolalkaloid Daminin (24) (1 μg/ml) vorinkubiert (5 Min.), kommt es zu einer signifikanten Reduktion dieser Zunahme ([offene Quadrate]). Der Mittelwert (n = 30) als auch die Standardabweichung (± SE) wurden ermittelt. 2 : In this series of experiments, NMDA was used as an agonist for the glutamate receptor on neurons. This also causes a strong increase in the concentration of intracellular calcium ions ([filled diamonds]). However, when the neurons are preincubated (5 min / min) with the new pyrrole alkalin daminine (24) (1 μg / ml), there is a significant reduction in this increase ([open squares]). The mean (n = 30) as well as the standard deviation (± SE) were determined.

Beispiel 1: Gewinnung des neuen Pyrrolalkaloids Daminin (24) und von Agelongin (22) aus biologischen MaterialExample 1: Extraction of the new pyrrole alkaloid Daminin (24) and of Agelongin (22) biological material

Im November 2001 wurden in der Bucht von Calvi (Korsika) Exemplare des Schwammes Axinella damicomis gesammelt und bis zur weiteren Bearbeitung tiefgefroren. Zur Extraktion wurde der frisch aufgetaute Schwamm homogenisiert und bei Raumtemperatur zuerst mit Methanol und anschließend mit Chloroform behandelt. Die Extrakte wurden in vacuo aufkonzentriert und die wasserunlösliche Lipidfraktion mit n-Butanol behandelt. Der in n-Butanol lösliche Anteil wurde einer MPLC-Trennung auf einer "reversed-phase"-Säule unterzogen, wobei ein Eluentengradient von Wasser über Methanol nach Chloroform verwendet wurde. Zwei Alkaloidhaltige Fraktionen wurden mit Methanol/Wasser (3:7) (Fraktion A) bzw. Methanol/Wasser (2:8) (Fraktion B) eluiert. Die polarere Fraktion A wurde durch HPLC auf einer RP-18-Säule (Luna, 5 μm, 4,6 × 250 mm) aufgetrennt und über eine weitere HPLC auf einer C-18-Säule (AQUA, 5 μm, 4,6 × 250 mm) aufgereinigt, wodurch Verbindung 24 (4 mg) als Reinsubstanz erhalten wurde. Fraktion B wurde durch zwei aufeinanderfolgende HPLC-Trennungen auf RP-18-Säulen, mit Methanol/Wasser (1:1) als Eluent, aufgereinigt (Luna, 5 μm, 4,6 × 250 mm; Luna 3 μm, 4,6 × 250 mm), dadurch wurden 3 mg der reinen Verbindung 22 erhalten.in the November 2001 were in the Bay of Calvi (Corsica) copies of the sponge Axinella damicomis collected and until further Processing frozen. For extraction was the fresh thawed sponge homogenized and at room temperature first with methanol and then with Treated with chloroform. The extracts were concentrated in vacuo and the water-insoluble Lipid fraction treated with n-butanol. The n-butanol soluble fraction became an MPLC separation subjected to a "reversed-phase" column, where an eluent gradient of water over methanol to chloroform has been used. Two alkaloid-containing fractions were washed with methanol / water (3: 7) (fraction A) or methanol / water (2: 8) (fraction B) eluted. The more polar fraction A was analyzed by HPLC on an RP-18 column (Luna, 5 μm, 4.6 × 250 mm). separated and over another HPLC on a C-18 column (AQUA, 5 μm, 4.6 × 250 mm) to give compound 24 (4 mg) as a pure substance has been. Fraction B was characterized by two consecutive HPLC separations on RP-18 columns, with methanol / water (1: 1) as eluent, purified (Luna, 5 μm, 4.6 × 250 mm; Luna 3 μm, 4.6 × 250 mm), thereby obtaining 3 mg of the pure compound 22.

Der Vergleich der Spektraldaten von 22 mit Literaturwerten, zeigte, dass es sich um die aus Agelas longissima bekannte Verbindung Agelongin (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, R. Carnuccio, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995, 5, 799–804) handelte.Of the Comparison of the spectral data of 22 with literature values, showed that it is the compound Agelongin known from Agelas longissima (F. Cafieri, E. Fattorusso, A. Mangoni, O. Taglialatela-Scafati, R. Carnuccio, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995, 5, 799-804).

Die Summenformel C₁₃H₁₂N₂O₄ für Verbindung 24 wurde aus dem HRFAB-Massenspektrum (gemessen: m/z 261,0890; berechnet: m/z 261,0875) abgeleitet. Das Vorhandensein einer aromatischen Esterfunktion und einer Carboxylatgruppe wurde aus den IR-Absorptionen bei ν_max 1710 cm^–1 bzw. 1646 cm^–1 abgeleitet, erhärtet wurde dieser Befund durch die Signale im ¹³C-NMR-Spektrum bei δ161,6 und δ159,0. Darüberhinaus zeigte das ¹³C-NMR-Spektrum sieben sp²-Methinsignale und zwei nicht protonierte sp²-Kohlenstoffe, ein Hinweis auf aromatische Ringsysteme, sowie zwei sp³-Methylensignale. Im ¹H-NMR-Spektrum (in DMSO-d₆) waren zehn gut aufgelöste Signale zu sehen: sieben aromatische Protonensignale, ein mit D₂O austauschbares Proton sowie zwei miteinander koppelnde Methylensignale im mittleren ppm-Bereich (siehe Tabelle 1). Die Auswertung der NMR-Spektren, inklusive COSY, ROESY, HSQC und HMBC, zeigte eindeutig, dass die Struktur von 24 große Ähnlichkeiten zu Agelongin (22) aufweist. Aus den Spektraldaten ergeben sich zwei heterozyklische Teilstrukturen, ein Pyridinium-β-Carboxylat und ein Pyrrol-2-Carbonsäureester, die durch eine Ethylenbrücke verbunden sind. Somit ist Verbindung 24 das nicht-bromierte Analogon von Agelongin. Die NMR-Spektren erlaubten die vollständige und eindeutige Zuordnung aller ¹³C- und ¹H-Resonanzen; insbesondere die chemischen Verschiebungen der Pyrrolgruppe zeigten eine gute Übereinstimmung mit bekannten 2-substituierten Pyrrolen (J. Kobayashi, F. Kanda, M. Ishibashi, H. Shigemori, J. Org. Chem. 1991, 56, 4574–4576; Y. Cheng, N. Tan, R. Teng, Y. Lu, C. Wang, Q. Zheng, J. Nat. Prod. 2002, 65, 750–752).The empirical formula C ₁₃ H ₁₂ N ₂ O ₄ for compound 24 was derived from the HRFAB mass spectrum (measured: m / z 261.0890, calculated: m / z 261.0875). The presence of an aromatic ester function and a carboxylate group was deduced from the IR absorptions at ν _max 1710 cm ^-1 and 1646 cm ^-1 , respectively, confirmed by the signals in the ¹³ C NMR spectrum at δ161.6 and δ159, 0th In addition, the ¹³ C NMR spectrum showed seven sp ² methine signals and two unprotonated sp ² carbons, an indication of aromatic ring systems, as well as two sp ³ methylene signals. In the ¹ H NMR spectrum (in DMSO-d ₆ ), ten well-resolved signals were observed: seven aromatic proton signals, one D ₂ O-exchangeable proton, and two mid-ppm methyl signals coupling together (see Table 1). The evaluation of the NMR spectra, including COZY, ROESY, HSQC, and HMBC, clearly showed that the structure of 24 is very similar to agelongin (22). From the spectral data, there are two heterocyclic substructures, a pyridinium β-carboxylate and a pyrrole-2-carboxylic acid ester, which are linked by an ethylene bridge. Thus, compound 24 is the non-brominated analog of agelongin. The NMR spectra allowed the complete and unambiguous assignment of all ¹³ C and ¹ H resonances; in particular, the chemical shifts of the pyrrole group showed good agreement with known 2-substituted pyrroles (J. Kobayashi, F. Kanda, M. Ishibashi, H. Shigemori, J. Org. Chem., 1991, 56, 4574-4576, Y. Cheng N. Tan, R. Teng, Y. Lu, C. Wang, Q. Zheng, J. Nat., Prod., 2002, 65, 750-752).

Tabelle 1 NMR-Daten von Verbindung 24

24 (Daminin) Table 1 NMR data of compound 24

24 (Daminin)

Beispiel 2: Synthese neuer PyrrolalkaloideExample 2: Synthesis of new Pyrrole alkaloids

2.1 Allgemeiner Syntheseweg2.1 General Synthetic Pathway

Zur Synthese von 23, können zwei verschiedene Vorgehensweisen gewählt werden, die in Schema 1 und 2 dargestellt sind. Der erste Weg (siehe Schema 1) beginnt mit dem Pyrrolteil des Moleküls, der Pyrrol-2-Carbonsäure 25 (R¹-R³ = H), welche in das bekannte Säurechlorid 26 überführt (T. J. Donohoe, P. M. Guyo, J. Org. Chem. 1996, 61, 7664–7665) wird und anschließend mit einem Überschuss an Ethylenglykol (27, R⁴-R⁷ = H) zum Monoester 28 (R¹-R⁷ = H) umsetzt. Alternativ kann 28 (R¹-R⁷ = H) aus 25 (R¹-R³ = H) auch direkt erhalten werden, indem ein Überschuss an Ethylenglykol (27, R⁴-R⁷ = H) und DCC (Dicyclohexylcarbodiimid), oder ein anderes wasserentziehendes Mittel, eingesetzt wird.For the synthesis of 23, two different approaches can be chosen, which are shown in Schemes 1 and 2. The first route (see Scheme 1) starts with the pyrrole portion of the pyrrole-2-carboxylic acid 25 (R ¹ -R ³ = H) molecule which converts to the known acid chloride 26 (TJ Donohoe, PM Guyo, J. Org. Chem. 1996, 61, 7664-7665) and then with an excess of ethylene glycol (27, R ⁴ -R ⁷ = H) to the monoester 28 (R ¹ -R ⁷ = H). Alternatively, 28 (R ¹ -R ⁷ = H) may also be 25 (R ¹ -R ³ = H) can be obtained directly by using an excess of ethylene glycol (27, R ⁴ -R ⁷ = H) and DCC (dicyclohexylcarbodiimide), or another dehydrating agent.

Die weitere Umsetzung von 28 zum Bromid 29 (R¹-R⁷ = H) wird zum Beispiel durch den Einsatz von 1,2-Dibromtetrachlorethan in Kombination mit Triphenylphosphan erreicht (G. Bringmann, S. Schneider, Synthesis 1983, 139–141). Dieses Bromid 29 (R¹-R⁷ = H) kann nun, in Analogie zu anderen N-Alkylierungsreaktionen einfacher Pyridine (z. B. R. C. Elderfield, B. Fischer, J. M. Lagowski, J. Org. Chem. 1957, 22, 1376–1380), mit Nikotinsäure (30, R⁸-R¹¹ = H, X = OH) zum Zielmolekül 23 reagieren.The further conversion of 28 to the bromide 29 (R ¹ -R ⁷ = H) is achieved, for example, by the use of 1,2-dibrometetrachloroethane in combination with triphenylphosphine (G. Bringmann, S. Schneider, Synthesis 1983, 139-141). , This bromide 29 (R ¹ -R ⁷ = H) can now, in analogy to other N-alkylation reactions of simple pyridines (eg BRC Elderfield, B. Fischer, JM Lagowski, J. Org. Chem. 1957, 22, 1376-1380 ), react with nicotinic acid (30, R ⁸ -R ¹¹ = H, X = OH) to target molecule 23.

Mit Hilfe dieses Syntheseweges ist, durch Variation von X sowie der Reste am Pyrrolteil (R¹-R³), an der "Ethylenbrücke" (R⁴-R⁷) und am Nikotinsäureteil (R⁸-R¹¹), auch eine Vielzahl strukturell ähnlicher Verbindungen zugänglich.With the help of this synthetic route, a variety of structurally by variation of X and the radicals on the Pyrrolteil (R ¹ -R ³ ), on the "ethylene bridge" (R ⁴ -R ⁷ ) and nicotinic (R ⁸ -R ¹¹ ) accessible to similar compounds.

Der zweite Syntheseweg (siehe Schema 2) kann, unter bestimmten Umständen, sogar als Eintopfsynthese durchgeführt werden. Dazu wird Verbindung 30 (R⁸-R¹¹ = H, X = OH) durch N-Alkylierung mit dem Bromethanol 31 (R⁴-R⁷ = H) in das Pyridiniumsalz 33 (R⁴-R¹¹ = H, X = OH) überführt. Alternativ kann zur N-Alkylierung auch das entsprechende Epoxid 32 (R⁴-R⁷ = H) verwendet werden. Die Nukleophilie des Pyridins 30 kann durch den Einsatz als Carboxylatsalz (z. B. X = ONa oder OK) noch gesteigert werden. Die Veresterung des so erhaltenen Pyridiniumsalzes 33 mit dem Pyrrol-2-Carbonsäurechlorid 26 (R¹-R³ = H) ergibt das Zielmolekül 24 (R¹-R¹¹ = H, X = OH).The second synthetic route (see Scheme 2) can, under certain circumstances, even be carried out as a one-pot synthesis. Compound 30 (R ⁸ -R ¹¹ = H, X = OH) is prepared by N-alkylation with the bromoethanol 31 (R ⁴ -R ⁷ = H) in the pyridinium salt 33 (R ⁴ -R ¹¹ = H, X = OH ). Alternatively, for N-alkylation, the corresponding epoxide 32 (R ⁴ -R ⁷ = H) can also be used. The nucleophilicity of the pyridine 30 can be increased even further by use as a carboxylate salt (for example X = ONa or OK). The esterification of the pyridinium salt 33 thus obtained with the pyrrole-2-carboxylic acid chloride 26 (R ¹ -R ³ = H) gives the target molecule 24 (R ¹ -R ¹¹ = H, X = OH).

Auch dieser Syntheseweg kann durch Variation der Reste R¹-R¹¹ (siehe Patentansprüche) und von X (welches, z. B., auch O-Alkyl, O-Aryl, NH₂, NH-Alkyl, NH-Aryl, N-Alkyl₂, N-Aryl₂, N-Aryl-Alkyl, etc. sein kann) modifiziert werden.This synthetic route can also be achieved by varying the radicals R ¹ -R ¹¹ (see claims) and X (which, for example, also denotes O-alkyl, O-aryl, NH ₂ , NH-alkyl, NH-aryl, N- Alkyl ₂ , N-aryl- ₂ , N-aryl-alkyl, etc.) may be modified.

In ähnlicher Weise können die heterozyklischen Systeme, der Pyridin- und der Pyrrolring, durch andere Regioisomere (z. B. 3- an Stelle von 2-Pyrrolcarbonsäuren) oder auch durch andere mono-, bi- oder oligozyklische, hetero- oder isozyklische, gesättigte oder ungesättigte Ringsysteme ersetzt werden.In similar Way you can the heterocyclic systems, the pyridine and the pyrrole ring, by other regioisomers (eg 3- instead of 2-pyrrolecarboxylic acids) or by other mono-, bi- or oligo-cyclic, heterocyclic or isocyclic, saturated or unsaturated Ring systems are replaced.

2.2 Synthese von Daminin (24)2.2 Synthesis of Daminine (24)

Darstellung des 1-(2-Hydroxyethyl)-3-Methoxycarbonylpyridinium-Bromids (33a): Eine Lösung von Nikotinsäuremethylester (30a; 1 g) und 2-Bromethanol (31a; 5 ml) in Toluol (7 ml) wurde unter Rühren für 2,5 Stunden auf 120°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand dreimal mit je 15 ml Diethylether gewaschen. Umkristallisation aus 60 ml Acetonitril-Diethylether (1:2) ergab das 1-(2-Hydroxyethyl)-3-methoxycarbonyl-Pyridiniumbromid (33a) in Form weißer Kristalle (siehe Schema 3).presentation of the 1- (2-hydroxyethyl) -3-methoxycarbonylpyridinium bromide (33a): A solution of nicotinic acid methyl ester (30a, 1g) and 2-bromoethanol (31a, 5ml) in toluene (7ml) with stirring for 2.5 hours to 120 ° C heated. The solvent was removed in vacuo and the residue three times with 15 ml Washed diethyl ether. Recrystallization from 60 ml of acetonitrile-diethyl ether (1: 2) gave the 1- (2-hydroxyethyl) -3-methoxycarbonyl-pyridinium bromide (33a) in the form of white Crystals (see Scheme 3).

Darstellung von Daminin (24): Eine Suspension von Kaliumpyrrol-2-carboxylat (25a; 230 mg) in Oxalylchlorid (0,25 ml) und Dichlormethan (5 ml) wurde bei Raumtemperatur (RT) unter Stickstoff gerührt. Nach 4 Stunden wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, und der Rückstand wieder in 5 ml Dichlormethan gelöst. Zu dieser Lösung wurden 1-(2-Hydroxyethyl)-3-methoxycarbonyl-Pyridiniumbromid (33a, 262 mg, Schema 3), Pyridin (0,24 ml) und eine katalytische Menge Dimethylaminopyridin gegeben. Die Mischung wurde bei RT über Nacht gerührt. Anschließend wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand mit Diethylether gewaschen. Anschließend wurde der Rückstand in Pyridin (4 ml) gelöst und nach Zugabe von Lithiumjodid (900 mg) bei 100°C gerührt. Nach 3 Stunden wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Säulenchromatographie aufgereinigt (SiO₂, Ethylacetat/Methanol (2:8)). Der so erhaltene Feststoff wurde aus 12 ml Ethanol/Diethylether (2:1) umkristallisiert.Preparation of Daminine (24): A suspension of potassium pyrrole-2-carboxylate (25a, 230 mg) in oxalyl chloride (0.25 ml) and dichloromethane (5 ml) was stirred at room temperature (RT) under nitrogen. After 4 hours the solvent was removed in vacuo and the residue redissolved in 5 ml of dichloromethane. To this solution were added 1- (2-hydroxyethyl) -3-methoxycarbonyl-pyridinium bromide (33a, 262 mg, Scheme 3), pyridine (0.24 ml) and a catalytic amount of dimethylaminopyridine. The mixture was stirred at RT overnight. Then the solvent was removed in vacuo and the residue was washed with diethyl ether. The residue was then dissolved in pyridine (4 ml) and stirred at 100 ° C. after addition of lithium iodide (900 mg). After 3 hours, the solvent was removed in vacuo and the Residue purified by column chromatography (SiO ₂ , ethyl acetate / methanol (2: 8)). The resulting solid was recrystallized from 12 ml of ethanol / diethyl ether (2: 1).

Beispiel 3: Biologische Eigenschaften der Verbindungen Neuroprotektive AktivitätExample 3: Biological Properties of the compounds Neuroprotective activity

Materialien: Es wurden die gleichen Materialien wie früher beschrieben verwendet (S. Perovic, A. Wichels, C. Schütt, G. Gerdts, S. Pahler, R. Steffen, W.E.G. Müller, Environm. Toxicol. Phamtacol. 1998, 6, 125–133). Fura-2-acetoxymethylester (Fura-2-AM) wurde von Molecular Probes (Leiden, Niederlande), "Dulbecco's modified Eagle's Medium" mit 4,5 g/L Glucose (DMEM/HG) von Sigma-Aldrich (Taufkirchen, Deutschland) und die Antikörper "Mäuse-anti-Neurofilament" (68 kDa) und "Mäuse-Anti-Glial-Fibrillary-Acidic-Protein" (Anti-GFAP) von Roche Diagnostics (Mannheim, Deutschland) bezogen.Materials: The same materials were used as previously described (S. Perovic, A. Wichels, C. Schütt, G. Gerdts, S. Pahler, R. Steffen, W.E.G. Müller, Environm. Toxicol. Phamtacol. 1998, 6, 125-133). Fura-2-acetoxymethyl ester (Fura-2-AM) Molecular Probes (Leiden, Netherlands), "Dulbecco's modified Eagle's Medium" with 4.5 g / L glucose (DMEM / HG) from Sigma-Aldrich (Taufkirchen, Germany) and the antibodies "mouse anti-neurofilament" (68 kDa) and "mouse anti-glial fibrillary acidic protein" (anti-GFAP) from Roche Diagnostics (Mannheim, Germany).

Zellen: Die kortikale Zellkultur wurde aus den Gehirnen von 17–18 Tage alten Rattenembryonen nach R. I. Freshney (In: Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique (Hrsg.: R. I. Freshney), A. R. Liss Inc., New York, 1987, S. 257–288) erhalten; die Methode wurde leicht modifiziert (S. Perovic, C. Schleger, G. Pergande, S. Iskric, H. Ushijima, P. Rytik, W. E. G. Müller, Eur. J. Pharmacol. (Mol. Pharmacol. Sec.) 1994, 288, 27–33). Zusammenfassend wurden die Neuronen aus den Cerebral-Hemisphären isoliert und diese in "Hank's balanced salt solution" ohne Ca²⁺ und Mg²⁺ (HBSS) überführt. Die Zellen wurden in HBSS mit Hilfe von 0,025% (w/v) Trypsin (10 Min.; 37°C) dissoziiert. Die proteolytische Reaktion wurde mit 10% (v/v) fötalem Kälberserum (FKS) beendet. Die Einzelzell-Suspension wurde zentrifugiert und das resultierende Pellet mit DMEM/HG/10% FKS-Medium aufgenommen. Die Zellen wurden in eine mit Poly-L-Lysin (5 μg/ml, 300 μl/cm²) beschichtete Kammer mit einer Zelldichte von 2,0 × 10⁵ Zellen/cm² ausplattiert. Das DMEM/HG/10% FKS-Medium wurde zwei Tage nach der Isolierung entfernt und durch DMEM/HG/serumfreies Medium ersetzt. Sieben Tage nach der Isolierung erfolgte eine Immunfärbung mit "Anti-Neurofilament"-Antikörper (gegen ein 68-kDa-Protein) als Marker für Neuronen und "Anti-GFAP" als Marker für Gliazellen. Die Kulturen enthielten >80% Neuronen; die restlichen Zellen waren GFAP-positiv und stellten hauptsächlich Astrozyten dar.Cells: The cortical cell culture was isolated from the brains of 17-18 day old rat embryos according to RI Freshney (In: Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique (Ed .: RI Freshney), AR Liss Inc., New York, 1987, Pp. 257-288); the method was slightly modified (S. Perovic, C. Schleger, G. Pergande, S. Iskric, H. Ushijima, P. Rytik, WEG Müller, Eur. J. Pharmacol. (Mol. Pharmacol. Sec.) 1994, 288 , 27-33). In summary, the neurons were isolated from the cerebral hemispheres and transferred to Hank's balanced salt solution without Ca ²⁺ and Mg ²⁺ (HBSS). The cells were dissociated in HBSS using 0.025% (w / v) trypsin (10 min, 37 ° C). The proteolytic reaction was stopped with 10% (v / v) fetal calf serum (FCS). The single cell suspension was centrifuged and the resulting pellet taken up with DMEM / HG / 10% FCS medium. The cells were plated in a poly-L-lysine (5 μg / ml, 300 μl / cm ² ) coated chamber at a cell density of 2.0 x 10 ⁵ cells / cm ² . The DMEM / HG / 10% FCS medium was removed two days after isolation and replaced with DMEM / HG / serum-free medium. Seven days after isolation, immunostaining with anti-neurofilament antibody (against a 68 kDa protein) was performed Markers for neurons and "anti-GFAP" as markers for glial cells. The cultures contained> 80% neurons; the remaining cells were GFAP-positive and represented mainly astrocytes.

Beladen von Neuronen mit Fura-2-AM: Die intrazelluläre Ca²⁺-Konzentration ([Ca²⁺]_i) wurde durch Fluoreszenzmessungen bestimmt. Als Parameter wurde das Verhältnis der Fluoreszenz des Ca²⁺-Indikatorfarbstoffes Fura-2-AM bei den Wellenlängen von 340 und 380 nm herangezogen (G. Grynkiewicz, M. Poenie, R.Y. Tsien, J. Biol. Chem. 1985, 260, 3440–3450). Die Neuronen wurden mit 6 μM Fura-2-AM in DMEM/HG/serumfreiem Medium (plus 1% Rinderserumalbumin) 60 Minuten lang bei 37°C beladen. Nach der Inkubation wurden die Zellen zweimal mit Medium gewaschen und weitere 45 Minuten bei 37°C inkubiert. Diese Inkubationszeit ist ausreichend, um die Neuronen zu beladen (inaktives Fura-2-AM) und den Acetoxymethylester (aktives Fura-2) zu hydrolysieren.Loading neurons with fura-2-AM: The intracellular Ca ²⁺ concentration ([Ca ²⁺ ] _i ) was determined by fluorescence measurements. The parameter used was the ratio of the fluorescence of the Ca ²⁺ indicator dye fura-2-AM at the wavelengths of 340 and 380 nm (Grynkiewicz, G. Poenie, RY Tsien, J. Biol. Chem. 1985, 260, 3440 -3450). The neurons were loaded with 6 μM fura-2-AM in DMEM / HG / serum-free medium (plus 1% bovine serum albumin) for 60 minutes at 37 ° C. After incubation, the cells were washed twice with medium and incubated for a further 45 minutes at 37 ° C. This incubation time is sufficient to load the neurons (inactive fura-2-AM) and to hydrolyze the acetoxymethyl ester (active fura-2).

Eine Calcium-Kalibrierungskurve wurde nach der Methode von Grynkiewicz et al. (G. Grynkiewicz, M. Poenie, R.Y. Tsien, J. Biol. Chem. 1985, 260, 3440–3450) erstellt. Fluoreszenzbilder wurden bei 340 und 380 nm erhalten. Der Quotient aus den bei den Fluoreszenzdaten (340/380 nm) wurde berechnet und für die Erstellung der Kalibrierungskurve eingesetzt. Ein Quotient (Ratio) von 1,0 entsprach 228 nM [Ca²⁺]_i.A calcium calibration curve was prepared by the method of Grynkiewicz et al. (Grynkiewicz G., M. Poenie, Ry Tsien, J. Biol. Chem., 1985, 260, 3440-3450). Fluorescence images were obtained at 340 and 380 nm. The quotient from the fluorescence data (340/380 nm) was calculated and used to generate the calibration curve. A quotient (ratio) of 1.0 corresponded to 228 nM [Ca ²⁺ ] _i .

Versuchsansatz-Änderungen des Calciumspiegels in Neuronen: In dieser Versuchsreihe wurden die Zellen zuerst mit Fura-2-AM beladen und anschließend mit den Testsubstanzen (in Locke's Lösung; 154 mM NaCl; 5,6 mM KCl; 3,6 mM NaH-CO₃; 5,6 mM Glucose und 10 mM HEPES; pH 7,4; ohne CaCl₂) behandelt. Daminin (24) wurde in Wasser (Konzentration: 10 mg/ml) gelöst und bei 4°C gelagert. Neuronen wurden im ersten Ansatz (Kontrollen) nach 10 Minuten mit 200 μl L-Glutaminsäure (L-Glu) oder 200 μM N-Methyl-D-Asparaginsäure (NMDA) und 2,4 mM CaCl₂ stimuliert. Im Testansatz wurden die Zellen mit dem Daminin (24) zunächst vorinkubiert (5 Minuten mit 0,5; 1,0; 3,0 μg/ml Daminin); anschließend wurden 200 μM L-Glu oder 200 μM NMDA und 2,4 mM CaCl₂ zu den Ansätzen zugegeben (für 10 Minuten), und es wurde die Änderung des Calciumspiegels der vorinkubierten Neuronen bestimmt. Die Versuchsdauer zur Messung des [Ca²⁺]_i-Spiegels betrug 20–27 Minuten.Experimental changes in the level of calcium in neurons: In this series of experiments, the cells were first loaded with fura-2-AM and then with the test substances (in Locke's solution, 154 mM NaCl, 5.6 mM KCl, 3.6 mM NaHCO ₃ 5.6 mM glucose and 10 mM HEPES, pH 7.4, without CaCl ₂ ). Daminine (24) was dissolved in water (concentration: 10 mg / ml) and stored at 4 ° C. Neurons were stimulated in the first batch (controls) after 10 minutes with 200 μl L-glutamic acid (L-Glu) or 200 μM N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) and 2.4 mM CaCl ₂ . In the assay, the cells were first preincubated with daminin (24) (5 minutes with 0.5, 1.0, 3.0 μg / ml daminine); then 200 μM L-Glu or 200 μM NMDA and 2.4 mM CaCl ₂ were added to the batches (for 10 minutes) and the change in calcium level of the pre-incubated neurons was determined. The experimental time to measure the [Ca ²⁺ ] _i level was 20-27 minutes.

Zur Durchführung wurden die Zellen auf mit Poly-L-Lysin beschichteten Deckgläsern im 4-Kammer-System (Lab-Tek^® Chamber Slide^TM-System; Nunc, Wiesbaden, Deutschland) kultiviert. Mit einem "inverted-stage"-Mikroskop Olympus IX70 mit apochromatisch reflektierendem Licht und dem Fluoreszenzobjektiv UApo40X/340 wurden die Fluoreszenzmessungen durchgeführt. Die Zellen wurden alternierend mit Licht der Wellenlängen 340 und 380 nm mit Hilfe eines computergesteuerten Schmalband-Interferenzfilters vor einer 100-W-Xenon-Lampe beleuchtet. Zusätzlich wurde ein 0,25-ND-Filter für 380 nm benutzt. Die Fluoreszenzemissionen bei 510 nm wurden mit einer CCD-Kamera (Modell C2400-87; Hamamatsu, Herrsching, Deutschland) aufgezeichnet. Die Bilder wurden computergestützt, mit dem Imaging-System Argus 50, Hamamatsu, digitalisiert als 256 × 256 pixels mit 8-bit-Arrays. Der Quotient (Ratio) 340/380 nm wurde durch Division der Bilderpaare ermittelt.The cells were cultured on poly-L-lysine-coated coverslips in the 4-chamber system (Lab- ^Tek® Chamber Slide ^™ system, Nunc, Wiesbaden, Germany). Fluorescence measurements were taken with an Olympus IX70 inverted-stage microscope with apochromatic reflecting light and the UApo40X / 340 fluorescence objective. The cells were alternately illuminated with 340 and 380 nm wavelength light using a computer controlled narrow band interference filter in front of a 100 W xenon lamp. In addition, a 0.25 ND filter was used for 380 nm. The fluorescence emissions at 510 nm were recorded with a CCD camera (model C2400-87, Hamamatsu, Herrsching, Germany). The images were computerized, using the Argus 50, Hamamatsu imaging system, digitized as 256 × 256 pixels with 8-bit arrays. The quotient (ratio) 340/380 nm was determined by dividing the image pairs.

Statistik: Die Ergebnisse wurden mittels eines gepaarten Student's t-test (L. Sachs, Angewandte Statistik (Springer, Berlin) (1984) Seite 1-552 ausgewertet.Statistics: The results were obtained using a paired Student's t-test (L. Sachs, Applied Statistics (Springer, Berlin) (1984) page 1-552 evaluated.

Ergebnisse: Die Neuronen wurden mit dem neuen Pyrrolalkaloid Daminin (24) vorinkubiert (5 Minuten) und anschließend mit L-Glutamat (200 μM) oder N-Methyl-D-Asparaginsäure (NMDA; 200 μM) in Anwesenheit von 2,4 mM CaCl₂ behandelt. Wurde L-Glutamat als Agonist eingesetzt und die Neuronen ohne Pyrrolalkaloid inkubiert, wurde ein Anstieg von intrazellulärem Calcium ([Ca²⁺]_i) von einem Ratio-Quotient von 0,75 ± 0,07 auf ein Ratio-Quotient von 2,29 ± 0,13 (305%) ermittelt (1). Wurde hingegen NMDA eingesetzt, wurde ein Anstieg des Ratio-Quotientes von 0,83 ± 0,04 auf 1,95 ± 0,08 (235%) gemessen (2). Die Kontrollen wurden dabei als 100% angenommen.Results: The neurons were preincubated with the new pyrrole alkaloid daminin (24) (5 minutes) and then with L-glutamate (200 μM) or N-methyl-D-aspartic acid (NMDA; 200 μM) in the presence of 2.4 mM CaCl ₂ treated. When L-glutamate was used as an agonist and the neurons were incubated without pyrrolo alkaloid, an increase of intracellular calcium ([Ca ²⁺ ] _i ) from a ratio quotient of 0.75 ± 0.07 to a ratio quotient of 2.29 ± 0.13 (305%) determined ( 1 ). In contrast, when NMDA was used, an increase in the ratio quotient of 0.83 ± 0.04 to 1.95 ± 0.08 (235%) was measured ( 2 ). The controls were assumed to be 100%.

Eine Präinkubation der Neuronen mit 0,5, 1,0 und 3,0 μg/ml Daminin (24) zeigte einen Abfall des (Ca²⁺]_i-Spiegels nach der Zugabe von 200 μM L-Glu und 2,4 mM CaCl₂ (1). Der Abfall des [Ca²⁺]_i-Spiegels war signifikant und betrug etwa 65,7% bei 0,5 μg/ml (p<0,05); 58,0% bei 1,0 μg/ml (p<0,001) und 25,1% bei 3,0 μg/ml (p<0,001; 1).Preincubation of the neurons with 0.5, 1.0 and 3.0 μg / ml daminine (24) showed a decrease in the (Ca ²⁺ ) _i level after the addition of 200 μM L-Glu and 2.4 mM CaCl 2 ₂ ( 1 ). The decrease in [Ca ²⁺ ] _i level was significant, being about 65.7% at 0.5 μg / ml (p <0.05); 58.0% at 1.0 μg / ml (p <0.001) and 25.1% at 3.0 μg / ml (p <0.001; 1 ).

Die Abnahme der freien Calciumkonzentration in Neuronen nach Präinkubation mit 1,0 μg/ml Daminin (24) und anschließender Inkubation mit 200 μM NMDA war ebenfalls signifikant; im Vergleich zur Kontrolle waren die Werte um 36,5% (p<0,05; 2;) gesunken.The decrease in free calcium concentration in neurons after preincubation with 1.0 μg / ml daminine (24) and subsequent incubation with 200 μM NMDA was also significant; compared to the control, the values were 36.5% (p <0.05; 2 ;) dropped.

Aus den in der 1 (Agonist: L-Glutamat) zusammengefassten Daten geht hervor, dass das neuen Pyrrolalkaloid Daminin (24) bereits in den niedrigen Konzentrationen von 0,5 μg/ml signifikant den Anstieg an intrazellulären Calcium-Ionen reduziert. Bei höheren Konzentrationen ist dieser protektive Effekt noch stärker.From the in the 1 (Agonist: L-glutamate) summarized data shows that the new Pyrimide alkaloid Daminin (24) already in the low concentrations of 0.5 μg / ml significantly reduced the increase in intracellular calcium ions. At higher concentrations, this protective effect is even stronger.

Auch aus dieser Serie muß der Schluß gezogen werden, daß das neue Pyrrolalkaloid Daminin (24) auch in dem Versuchssystem mit dem NMDA-Agonisten eine sehr ausgeprägte Protektionswirkung gegenüber NMDA besitzt (2; Agonist: NMDA).It must also be concluded from this series that the new pyrrole alkaloid daminine (24) also has a very pronounced protective effect on NMDA in the experimental system with the NMDA agonist ( 2 ; Agonist: NMDA).

Insgesamt zeigen diese Ergebnisse, daß die Vorinkubation von Neuronen mit niedrigen Konzentrationen des neuen Pyrrolalkaloids Daminin (24) eine signifikante Neuroprotektion bewirkt.All in all these results show that the Preincubation of neurons with low concentrations of the new Pyrrolalkaloids Daminin (24) causes a significant neuroprotection.

Claims (13)

Verbindung der allgemeinen Formel 23:

worin R¹ bis R¹¹ unabhängig voneinander entweder Wasserstoff, ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈ Alkenyl, wobei das Alkyl beziehungsweise Alkenyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Aryl- oder Heteroarylrest, ein über ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C-C₁₈-Alkenyl gebundener Aryl- oder Heteroarylrest, eine Acylgruppe, ausgewählt aus Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, eine Sulfonylgruppe, ausgewählt aus -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder -SO₂C₆H₄CH₂Br, oder Fluor, Chlor, Brom, Jod, -CN, NO₂, eine Alkoxygruppe -OR oder eine Thioethergruppe -SR oder eine Aminogruppe -NRR', deren Reste R und R' jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈-Alkenyl, wobei das Alkyl beziehungsweise Alkenyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Aryl- oder Heteroarylrest, ein über ein C₁-C₁₈-Alkyl oder C₁-C₁₈-Alkenyl gebundener Aryl- oder Heteroarylrest, eine Acylgruppe, ausgewählt aus Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, oder eine Sulfonylgruppe, ausgewählt aus -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder -SO₂C₆H₄CH₂Br sein können, sind, wobei im Falle von R⁶ unterschiedlich von R⁷ oder R⁴ unterschiedlich von R⁵ oder bei ste risch sperrigen Arylresten R¹-R³ sowie R⁸-R¹¹ die Verbindung zentro- oder axialchiral sein kann, sowie alle auftretenden Stereoisomere und racemischen Gemische davon, jeweils R¹-R³ sowie R⁴-R⁷ und R⁸-R¹¹ so untereinander in der Art verknüpft sein können, dass dadurch ein iso- oder heteroaromatischer oder gesättigter Ring gebildet ist, mit der Maßgabe, dass Formel 23 nicht die folgende Formel 22 bedeutet:

Agelongin (22) Compound of General Formula 23:

wherein R ¹ to R ¹¹ are independently either hydrogen, a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁ -C ₁₈ alkenyl, said alkyl or alkenyl straight, branched or may be cyclic, aryl or heteroaryl, a a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁₈ alkenyl-linked aryl or heteroaryl group, an acyl group selected from formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, maleyl, succinyl, benzoyl, a sulfonyl group selected from -SO ₃ H, -SO ₂ Me , -SO ₂ CF ₃ , -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₃ or -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₂ Br, or fluorine, chlorine, bromine, iodine, -CN, NO ₂ , an alkoxy group -OR or a thioether group -SR or an amino group -NRR ', whose radicals R and R' are each independently of one another hydrogen, a C ₁ -C ₁₈ -alkyl or C ₁ -C ₁₈ -alkenyl, where the alkyl or alkenyl can be straight, branched or cyclic, an aryl or heteroaryl group, an aryl or heteroaryl group attached via a C ₁ -C ₁₈ alkyl or C ₁ -C ₁₈ alkenyl, an acyl group from formyl, acetyl, trichloroacetyl, fumaryl, maleyl, succinyl, benzoyl, or a sulfonyl group selected from -SO ₃ H, -SO ₂ Me, -SO ₂ CF ₃ , -SO ₂ C ₆ H ₄ CH ₃ or -SO ₂ In the case of R ⁶ different from R ⁷ or R ^4, different from R ⁵ or in the case of sterically bulky aryl radicals R ¹ -R ³ and R ⁸ -R ^11, the compound can be C ₆ H ₄ CH ₂ Br. or axial chiral, as well as all occurring stereoisomers and racemic mixtures thereof, each R ¹ -R ³ and R ⁴ -R ⁷ and R ⁸ -R ¹¹ may be linked to each other in such a way that thereby an iso or heteroaromatic or saturated Ring is formed with the proviso that formula 23 does not mean the following formula 22:

Agelongin (22) Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel 24:

Daminin (24) A compound according to claim 1 having the formula 24:

Daminin (24) Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel 23 nach Anspruch 1, umfassend die Isolierung der Verbindung aus einem Schwamm der Gattung Axanella, insbesondere Axinella damicornis., unter Verwendung an sich bekannter Verfahrensschritte.Process for the preparation of a compound of the general Formula 23 according to claim 1 comprising the isolation of the compound from a sponge of the genus Axanella, in particular Axinella damicornis., using known method steps. Verfahren nach Anspruch 3 zur Isolierung von Agelongin (22) und Daminin (24).Process according to claim 3 for the isolation of agelongin (22) and Daminin (24). Verfahren zur Synthese einer Verbindung der allgemeinen Formel 23 nach Anspruch 1 dadurch gekennzeichnet, dass man gemäß dem folgenden allgemeinen Schema a) eine Pyrrolcarbonsäure der allgemeinen Formel 25 mit einem Diol der allgemeinen Formel 27 zu einer Verbindung der allgemeinen Formel 28 verestert, b) eine Verbindung der allgemeinen Formel 28 durch Hydroxy/Halogenaustausch zu einem Halogenid der allgemeinen Formel 29 umsetzt, und c) eine Halogenverbindung der allgemeinen Formel 29 mit einem Pyridinderivat der allgemeinen Formel 30 unter nucleophiler Substitution zu einem Pyridiniumsalz der allgemeinen Formel 23 umsetzt,

wobei in den allgemeinen Formeln 25, 27, 28, 29 und 30 die Reste R¹ bis R¹¹ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben.Process for the synthesis of a compound of general formula 23 according to claim 1, characterized in that according to the following general scheme a) a pyrrolecarboxylic acid of general formula 25 is esterified with a diol of general formula 27 to give a compound of general formula 28, b) a compound of the general formula 28 by hydroxy / halogen exchange to give a halide of the general formula 29, and c) reacting a halogen compound of the general formula 29 with a pyridine derivative of the general formula 30 under nucleophilic substitution to give a pyridinium salt of the general formula 23,

wherein in the general formulas 25, 27, 28, 29 and 30, the radicals R ¹ to R ^{11 have} the meanings given in claim 1. Verfahren zur Synthese einer Verbindung der allgemeinen Formel 23 nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man gemäß dem folgenden allgemeinen Schema a) eine Pyridin-Verbindung der allgemeinen Formel 30 mit einem Halogenid der allgemeinen Formel 31 oder mit einer Epoxid-Verbindung der allgemeinen Formel 32 unter Epoxid-Öffnung zu einer Pyridinium-Verbindung der allgemeinen Formel 33 umsetzt, und b) eine Verbindung der allgemeinen Formel 33 mit einer Pyrrolcarbonsäure der allgemeinen Formel 25 zu einer Verbindung der allgemeinen Formel 23 unter Veresterung umsetzt,

wobei in den allgemeinen Formeln 25, 30, 31, 32 und 33 die Reste R¹ bis R¹¹ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben.A process for the synthesis of a compound of general formula 23 according to claim 1, which comprises, according to the following general scheme a), a pyridine compound of general formula 30 with a halide of general formula 31 or with an epoxide compound of general formula 32 converts epoxide opening to a pyridinium compound of the general formula 33, and b) reacting a compound of the general formula 33 with a pyrrolecarboxylic acid of the general formula 25 to give a compound of the general formula 23 by esterification,

wherein in the general formulas 25, 30, 31, 32 and 33, the radicals R ¹ to R ^{11 have} the meanings given in claim 1. Verfahren nach Anspruch 5 oder 6, weiterhin umfassend eine anschließende synthetische Derivatisierung der dargestellten Verbindungen.The method of claim 5 or 6, further comprising a subsequent one synthetic derivatization of the compounds shown. Verbindung nach Anspruch 1 oder 2 als Medikament zur Prävention oder Behandlung von Erkrankungen.A compound according to claim 1 or 2 as a medicament for prevention or treatment of diseases. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, gegebenenfalls zusammen mit geeigneten Zusatz- oder Hilfsstoffen.A pharmaceutical composition comprising a therapeutic effective amount of a compound according to claim 1 or 2, optionally together with suitable additives or auxiliaries. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindung in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz vorliegt.Pharmaceutical composition according to claim 9, characterized in that the compound in the form of a depot substance or as a precursor together with a suitable, pharmaceutically acceptable Dilution solution or vehicle is present. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, dass sie als Oberflächenbeschichtung von medizinischen Vorrichtungen, als Zusatz von Werkstoffen oder Spüllösung vorliegt.Pharmaceutical composition according to claim 9 or 10, characterized in that they are used as a surface coating of medical devices, as an additive of materials or Rinsing solution is present. Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 9 bis 11 in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- oder Infusionszubereitungen zur peroralen, rektalen oder parenteralen Verwendung.A pharmaceutical composition according to any one of claims 9 to 11 in the form of tablets, dragees, capsules, drop solutions, Suppositories, injectables or infusion preparations for oral, rectal or parenteral use. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1 oder 2 zur Behandlung und Prävention von neurodegenerativen Erkrankungen.Use of a compound according to claim 1 or 2 for the treatment and prevention of neurode generative diseases.