DE10029709A1

DE10029709A1 - Process for the production of dendritic structures

Info

Publication number: DE10029709A1
Application number: DE10029709A
Authority: DE
Inventors: Manfred Wiesler; Stefan Raddatz
Original assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ
Current assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ
Priority date: 2000-06-16
Filing date: 2000-06-16
Publication date: 2002-01-03
Also published as: WO2001096262A1

Abstract

The invention relates to a method wherein high-substituted alkynyl halogenides are reacted with CH-acid carbonyl compounds in the presence of a reducing agent.

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von dendritischen Strukturen.The invention relates to a method for producing dendritic structures.

Für biologische Anwendungen haben dendritische Strukturen, insbesondere dendritische Saccharidstrukturen, in den letzten Jahren eine zunehmende Bedeu tung erfahren. Man hat erkannt, daß dendritische Strukturen für biologische Erken nungsprozesse eine Rolle spielen, z. B. bei der Metastatisierung oder bei Infektio nen durch Viren bzw. Bakterien (Varki, Glycobiology 1993, 3, 97). Die zum Aufbau dieser Strukturen verwendeten Reaktionen leiden jedoch allesamt unter dem Nachteil, daß sie keine Möglichkeit bieten, verschiedenste (Zucker)strukturen in wenigen Reaktionsschritten einzuführen.For biological applications have dendritic structures, in particular dendritic saccharide structures, an increasing importance in recent years experience. It has been recognized that dendritic structures for biological ores processes play a role, e.g. B. in metastatization or infection by viruses or bacteria (Varki, Glycobiology 1993, 3, 97). The one to build however, reactions used in these structures all suffer from the Disadvantage that they offer no possibility of different (sugar) structures in introduce a few reaction steps.

Der vorliegenden Erfindung liegt somit die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren bereitzustellen, mit dem dendritische Strukturen (insbesondere dendritische Sac charidstrukturen mit hoher Variabilität) einfach, kostengünstig, in hoher Variabilität und in guten Ausbeuten darzustellen sind.The present invention is therefore based on the object of a method provide with the dendritic structures (especially dendritic Sac charid structures with high variability) simple, inexpensive, with high variability and can be represented in good yields.

Erfindungsgemäß wird dies durch die Gegenstände in den Patentansprüchen erreicht.According to the invention, this is the subject of the claims reached.

Gegenstand der vorliegenden Anmeldung ist somit ein Verfahren, bei dem hoch substituierte Alkinylhalogenide mit CH-aciden Carbonylverbindungen in Gegenwart einer starken Base umgesetzt werden.The subject of the present application is thus a method in which high substituted alkynyl halides with CH-acidic carbonyl compounds in the presence a strong base.

Dendrimere/dendritische Strukturen sind dreidimensionale, hoch geordnete oligo mere bzw. -polymere Verbindungen. Diese weisen mehrere reaktionsfähige Grup pen auf. An diese Gruppen werden Substanzen gebunden. Auf diese Weise werden Dendrimere der ersten Generation erhalten. An die Substanzen des Den drimers der ersten Generation können weitere Substanzen gebunden werden, die dann mit weiteren Substanzen verknüpft werden können. Dabei werden Den drimere der zweiten Generation erhalten. Durch Wiederholung dieser Reaktions folge werden Dendrimere höherer Generationen erhalten.Dendrimers / dendritic structures are three-dimensional, highly ordered oligo mer or polymeric compounds. These have several reactive groups pen on. Substances are bound to these groups. In this way first-generation dendrimers will be obtained. To the substances of the den First generation drimers can bind other substances that can then be linked to other substances. Doing so preserved second generation drimers. By repeating this reaction As a result, dendrimers of higher generations are obtained.

Die vorliegende Erfindung basiert auf dem Befund, daß auch hochsubstituierte Alkinylhalogenide in guten bis sehr guten Ausbeuten reaktive C-H-acide Verbindun gen mehrfach (z. B. bis zu viermal) alkylieren können. Anschließend können ggf. vorhandene Estergruppierungen oder Schutzgruppen abgespalten und die ver bleibende Ketofunktion reduziert werden, so daß eine Alkoholfunktion entsteht. Diese Alkoholfunktion kann erneut mit einem reaktiven Alkinylhalogenid alkyliert werden, was die Generierung eines Spacers in der entstehenden dendrimeren Struktur bedeutet. Als Spacer kommen deshalb bevorzugt gesättigte oder ungesät tigte Kohlenwasserstoffketten, vorzugsweise C₂-C₁₈-Gruppen, die ggf. Hetero atome, wie Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoffatome enthalten, vor. Das zugrunde liegende Reaktionsschema ist in Fig. 1 gezeigt. Ein bevorzugtes Reaktionsschema zur Herstellung dendrimerer Saccharidstrukturen ist in Fig. 2 gezeigt.The present invention is based on the finding that even highly substituted alkynyl halides can alkylate reactive CH-acidic compounds several times (e.g. up to four times) in good to very good yields. Then existing ester groups or protective groups can be split off and the remaining keto function can be reduced so that an alcohol function is formed. This alcohol function can be alkylated again with a reactive alkynyl halide, which means the generation of a spacer in the resulting dendrimeric structure. Preferred spacers are therefore saturated or unsaturated hydrocarbon chains, preferably C ₂ -C ₁₈ groups, which may contain hetero atoms, such as oxygen, sulfur or nitrogen atoms. The underlying reaction scheme is shown in Fig. 1. A preferred reaction scheme for the production of dendrimeric saccharide structures is shown in FIG. 2.

Erfindungsgemäß soll unter einer C-H-aciden Carbonylverbindung jeglicher Kohlen wasserstoff mit einer -C=O-Gruppierung verstanden werden, bei denen die Ab spaltung eines oder mehrerer Protonen erleichtert ist. Bevorzugte C-H-acide Verbindungen sind Acetondicarbonsäurediethylester, Acetessigester, Malonsäure diethylester, Acetondicarbonsäuredi(2-trimethylsilylethyl)ester, Acetondicarbonsäu redi-t-butylester.According to the invention under a C-H-acidic carbonyl compound any carbon hydrogen with a -C = O group can be understood, in which the Ab cleavage of one or more protons is facilitated. Preferred C-H-acidic Compounds are diethyl acetone dicarboxylate, acetoacetic ester, malonic acid diethyl ester, acetone dicarboxylic acid di (2-trimethylsilylethyl) ester, acetone dicarboxylic acid redi-t-butyl ester.

Erfindungsgemäß sollen unter einem Alkinylhalogenid alle aliphatischen, alicycli schen oder aromatischen Kohlenwasserstoffe verstanden werden, die eine minde stens bisubstituierte C-C-Dreifachbindung aufweisen und einen Halogen-Sub stituenten aufweisen. Der Halogensubstituent kann Fluorid, Bromid, Chlorid oder Iodid sein, wobei Bromid bevorzugt ist. Ganz bevorzugte Verbindungen sind 2- Alkinylhalogenide, wie 1-Brom-2-butin-4-ol oder 1-Brom-2-hexin-6-ol. Die Alkinyl halogenide weisen bevorzugt an mindestens einem ihrer Ende eine Modifikation R auf. Bevorzugt haben die Alkinylhalogenide deshalb folgende Struktur: Hal-CH₂-C∼C-R [mit R = chemische Schutzgruppen (z. B. Acylgruppen (z. B. Benzoyl), Alkylgruppen (z. B. Methyl-, Ethyl-, n-Propyl, iso-Propyl), tert-Butylgruppen, Benzyl gruppen, Silylgruppen), pharmazeutische Wirkstoffe, wie z. B. Peptide oder Glyco peptide, bevorzugt ist R = Saccharid]. Der Ausdruck "Saccharid" umfaßt Sac charide jeglicher Art, insbesondere Monosaccharide in allen stereoisomeren und enantiomeren Formen, z. B. Pentosen und Hexosen, wie α- und β-D-Glukose und Derivate davon, wie mit Schutzgruppen, z. B. Benzyl geschützte Saccharide und/oder mit funktionellen Gruppen, wie Aminogruppen, Phosphatgruppen oder Haloge nidgruppen, modifizierte Saccharide. Als Saccharide gelten hier besonders Inosite, ganz besonders optisch aktive Derivate von myo-Inosit und Quebrachitol, z. B. aus Galactinolen, sowohl aus pflanzlichen Quellen, wie Zuckerrüben, als auch aus Milchprodukten, oder durch enzymatische Enantiomerentrennung gewonnene Derivate. Die Saccharide können gleich oder verschieden voneinander sein. Zwischen dem eigentlichen Alkylhalogenid und der Modifikationen können sich zur Verminderung von sterischen Wechselwirkungen auch Linker bzw. Spacer, wie (CH₂)_n-Gruppen mit n = 1-20, befinden, wobei diese auch Heteroatome, wie N, O und S enthalten können.According to the invention, an alkynyl halide is to be understood to mean all aliphatic, alicyclic or aromatic hydrocarbons which have an at least bis-substituted CC triple bond and have a halogen substituent. The halogen substituent can be fluoride, bromide, chloride or iodide, with bromide being preferred. Very preferred compounds are 2-alkynyl halides, such as 1-bromo-2-butyn-4-ol or 1-bromo-2-hexin-6-ol. The alkynyl halides preferably have a modification R at at least one of their ends. The alkynyl halides therefore preferably have the following structure: Hal-CH ₂ -C∼CR [with R = chemical protective groups (e.g. acyl groups (e.g. benzoyl), alkyl groups (e.g. methyl, ethyl, n- Propyl, iso-propyl), tert-butyl groups, benzyl groups, silyl groups), active pharmaceutical ingredients, such as. B. peptides or glyco peptides, preferably R = saccharide]. The term "saccharide" encompasses saccharides of all kinds, especially monosaccharides in all stereoisomeric and enantiomeric forms, e.g. B. pentoses and hexoses such as α- and β-D-glucose and derivatives thereof, such as with protecting groups, e.g. B. benzyl protected saccharides and / or with functional groups such as amino groups, phosphate groups or halide groups, modified saccharides. As saccharides in particular inositol, especially optically active derivatives of myo-inositol and quebrachitol, e.g. B. from galactinols, both from plant sources, such as sugar beet, and from milk products, or derivatives obtained by enzymatic enantiomer separation. The saccharides can be the same or different from one another. Linkers or spacers, such as (CH ₂ ) _n groups with n = 1-20, can also be located between the actual alkyl halide and the modifications in order to reduce steric interactions, and these may also contain heteroatoms, such as N, O and S. ,

In einer bevorzugten Ausführungsform einer erfindungsgemäß hergestellten den drimeren Struktur liegt zwischen der aus der C-H-aciden Verbindung stammenden Kernstruktur und einem bis maximal allen der Endmodifikationen (z. B. Sacchariden) ein wie vorstehend definierter Spacer vor. Liegen mehrere Spacer vor, können diese gleich oder verschieden voneinander sein.In a preferred embodiment of a manufactured according to the invention The third structure lies between that originating from the C-H-acidic compound Core structure and one to at most all of the final modifications (e.g. saccharides) a spacer as defined above. If there are several spacers, you can these are the same or different from each other.

Zur Kopplung der bisubstituierten Alkin-Bausteine an die C-H-aciden Verbindungen hat es sich als bevorzugt herausgestellt in einem polaren, aprotischen organischen Lösungsmittel (z. B. DMF, DMSO) unter basischen Bedingungen (z. B. unter Zusatz von NaH, Natriumethylat, Deazabicycloundecan (DBU), LIH, wobei NaH bevorzugt ist) zu arbeiten. Allgemein wurde die mehrmalige Reaktion zwischen einer C-H- aciden Verbindung und einem unsubstituierten Alkinylbromid bereits von R. K. Singh in Synthesis 1985, 54 beschrieben. Diese Reaktion läuft jedoch unter Pha sentransferkatalyse ab. Alle organischen Stoffe sind in einer organischen Phase, die notwendige Base (z. B. Hydroxid) ist in Wasser gelöst. Durch intensives Rühren erzeugt man ein Suspension, wobei das Hydroxid mit Hilfe eines geeigneten Gegenions (meist Tetrabutylammonium = Phasentransferkatalysator) in die organi sche Phase "geschleppt" werden kann und dort ein Proton abstrahieren kann. Da bei dieser Reaktion die Natronlauge in mindestens 10-20fachem Überschuß eingesetzt wird, läßt sich bei der Alkylierung von z. B. Malonestern keine monosub stituierte Spezies, sondern fast immer nur die bialkylierte Spezies isolieren.For coupling the bis-substituted alkyne building blocks to the C-H-acidic compounds it has been found to be preferred in a polar, aprotic organic Solvents (e.g. DMF, DMSO) under basic conditions (e.g. with addition of NaH, sodium ethylate, deazabicycloundecane (DBU), LIH, with NaH preferred is) to work. In general, the multiple reaction between a C-H acidic compound and an unsubstituted alkynyl bromide already from R. K. Singh in Synthesis 1985, 54. However, this reaction runs under Pha transfer catalysis. All organic matter is in an organic phase, the necessary base (e.g. hydroxide) is dissolved in water. Through intensive stirring to produce a suspension, the hydroxide using a suitable Counterions (mostly tetrabutylammonium = phase transfer catalyst) into the organi cal phase can be "dragged" and there can abstract a proton. There in this reaction, the sodium hydroxide solution in at least 10-20 times excess is used can be in the alkylation of z. B. Malone star no monosub substituted species, but almost always isolate only the bialkylated species.

Die Verhältnisse, in denen die Komponenten miteinander reagieren, können von einem Fachmann bestimmt werden. Vorzugsweise liegt das Verhältnis der Kompo nenten bei:
The conditions in which the components react with one another can be determined by a person skilled in the art. The ratio of the components is preferably:

Die Reaktionszeiten können zwischen 2 und 24, bevorzugt zwischen 5 und 20, ganz bevorzugt 8 bis 15 Stunden betragen.The reaction times can be between 2 and 24, preferably between 5 and 20, most preferably 8 to 15 hours.

Die Reaktionstemperaturen liegen zwischen 0°C und 60°C, bevorzugt zwischen 20 und 40°C, ganz bevorzugt bei Raumtemperatur bis ca. 30°C.The reaction temperatures are between 0 ° C and 60 ° C, preferably between 20 and 40 ° C, most preferably at room temperature to about 30 ° C.

Im Laufe der Reaktion müssen weniger alkylierte Spezies dann nicht abgetrennt werden, wenn 2 (z. B. ausgehend vom Malonester) oder 4 (ausgehend von Aceton dicarbonsäureester) gleiche Reste angefügt werden sollen. Dann handelt es sich um eine sog. erschöpfende Alkylierung, die als "Ein-Topf-Reaktion" stattfinden kann. Sollen jedoch Spezies mit verschiedenen Dendrimerarmen synthetisiert werden, sollte nach jedem Alkylierungsschritt gereinigt werden. Diese Reinigung, wie auch die Reinigung jeglicher Zwischen- oder Endprodukte, kann mittels Säu lenchromatographie erfolgen, z. B. über Kieselgel 60 (Fa. Machery-Nagel) mit Petrolether/Essigester als Laufmittel. In the course of the reaction, less alkylated species then do not have to be separated if 2 (e.g. starting from the malonic ester) or 4 (starting from acetone same residues should be added. Then it is a so-called exhaustive alkylation, which takes place as a "one-pot reaction" can. However, species with different dendrimer arms should be synthesized should be cleaned after each alkylation step. This cleaning, as well as the cleaning of any intermediate or end product can be done with acid Lench chromatography done, for. B. over silica gel 60 (Machery-Nagel) with Petroleum ether / ethyl acetate as eluent.

Bevorzugte Verbindungen, die gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren her gestellt bzw. umgesetzt werden, sind die in den nachfolgenden Beispielen ge zeigten Verbindungen 43α, 43β, 44, 47, 48, 49 und 50.Preferred compounds prepared according to the method of the invention are put or implemented, the ge in the following examples showed compounds 43α, 43β, 44, 47, 48, 49 and 50.

Das erfindungsgemäße Verfahren bietet je nach Wahl der Ausgangsverbindungen verschiedene Möglichkeiten: Bei der Wahl einer unsymmetrischen C-H-aciden Verbindungen (z. B. Acetessigester) ist es möglich, Deprotonierung und Alkylierung zu steuern, so daß man nach und nach vier einzelne und auch unterschiedlich substituierte Alkinylhalogenide regioselektiv ankoppeln kann. Dies bietet die Möglichkeit, unterschiedliche Spacerlängen und z. B. Zuckergruppierungen ein zusetzen. Die Konfiguration am anomeren Zentrum wird vorher bei der Anbindung des Zuckerbausteins an das Alkinylbromid festgelegt, so daß anomerenreine Verbindungen gewonnen werden können. Nach Abspaltung eventuell vorhandener Estergruppen wird die Keto-Gruppe in die Alkoholfunktion übergeführt, so daß ein weiterer Spacer eingeführt werden kann, an den z. B. ein gewünschter Wirkstoff gekoppelt sein kann. Eine solches Reaktionsschema ist in Fig. 3 gezeigt.Depending on the choice of the starting compounds, the process according to the invention offers various possibilities: When choosing an asymmetrical CH-acidic compound (e.g. acetoacetic ester), it is possible to control deprotonation and alkylation, so that one after the other four individual and also differently substituted ones Can couple alkynyl halides regioselectively. This offers the possibility of different spacer lengths and z. B. add sugar groups. The configuration at the anomeric center is determined beforehand when the sugar unit is attached to the alkynyl bromide, so that anomerically pure compounds can be obtained. After elimination of any ester groups present, the keto group is converted into the alcohol function, so that a further spacer can be introduced, to which, for. B. a desired active ingredient can be coupled. Such a reaction scheme is shown in Fig. 3.

Erfindungsgemäß hergestellte Dendrimere zeichnen sich durch eine Reihe von vorteilhaften Eigenschaften aus. Sie sind biologisch abbaubar. Daher sind sie leicht zu entsorgen. Desweiteren sind sie im wesentlichen aus nachwachsenden Roh stoffen hergestellt. Somit werden fossile Rohstoffe geschont und die CO₂-Bilanz neutral gehalten. Weiterhin liegen die erfindungsgemäßen Dendrimere in genau definierten Strukturen vor, d. h. es gibt keine Fehlstellen und/oder inter- oder intramolekulare Bindungen. Ferner weisen erfindungsgemäße Dendrimere chirale C-Atome auf. Darüberhinaus können sie aufgrund ihres Aufbaus chemische Verbin dungen gut binden und unter geeigneten Bedingungen leicht wieder abgeben. Desweiteren sind erfindungsgemäße Dendrimere in der Lage, selektive Wechsel wirkungen mit Zucker-spezifischen Rezeptoren einzugehen und somit z. B. an Viren, Bakterien und Zellen zu binden.Dendrimers produced according to the invention are notable for a number of advantageous properties. They are biodegradable. Therefore, they are easy to dispose of. Furthermore, they are mainly made from renewable raw materials. This conserves fossil raw materials and keeps the CO ₂ balance neutral. Furthermore, the dendrimers according to the invention are present in precisely defined structures, ie there are no defects and / or inter- or intramolecular bonds. Furthermore, dendrimers according to the invention have chiral C atoms. In addition, due to their structure, they can bind chemical compounds well and easily release them under suitable conditions. Furthermore, dendrimers according to the invention are able to enter into selective interactions with sugar-specific receptors and thus, for. B. to viruses, bacteria and cells.

Daher eignen sich erfindungsgemäß hergestellten Dendrimere bestens als Säulen material zur Abtrennung von Stoffen aus Gemischen von Produkten, insbesondere zur Trennung von Racematen in Enantiomere. Ferner können sie aufgrund ihrer Wechselwirkungen mit Rezeptoren für die affinitätschromatographische Isolation von Lektinen und anderen Glycoproteinen sowie als Zelladhäsionsinhibitoren, z. B. von Viren und Bakterien zum Infektionsschutz, eingesetzt werden.Dendrimers produced according to the invention are therefore very suitable as columns material for separating substances from mixtures of products, in particular for the separation of racemates into enantiomers. Furthermore, due to their Interactions with receptors for affinity chromatographic isolation of lectins and other glycoproteins as well as cell adhesion inhibitors, e.g. B. of viruses and bacteria to protect against infection.

Darüberhinaus können erfindungsgemäß hergestellte Dendrimere für eine Vielzahl weiterer Verwendungen vorgesehen werden. Beispielsweise können sie als Kataly satoren bei der enatioselektiven Synthese eingesetzt werden. Auch eignen sie sich im medizinischen Bereich, z. B. als Träger von Arzneistoffen, insbesondere zum Einsatz bei Depotmedikamenten und zur gezielten Einschleusung von Wirkstoffen in Zielzellen (drug-targeting). Desweiteren können sie zur Verhinderung von Ab stoßungsreaktionen bei Organtransplantationen eingesetzt werden. Auch können erfindungsgemäße Dendrimere zur Oberflächenbeschichtung wäßriger Medien und als Micellen verwendet werden. Weiterhin können sie, insbesondere wenn sie in der äußersten Schale funktionelle Gruppen, wie Amino-Gruppen tragen, zur Trans fektion, als multi-antigene Determinanten, künstliche Vaccinen oder Enzymmodelle in Analogie zu Cyclodextrinen eingesetzt werden. Ferner können erfindungs gemäße Dendrimere, die Festphasen-konjugiert sind, insbesondere Derivate von Inositol, zur Aufbereitung Bakterien-verseuchten Trinkwassers verwendet werden. Desweiteren können erfindungsgemäße Dendrimere, wenn sie mit Farbstoffen verknüpft sind, zur Markierung von Lektinen in histochemischen und zytoche mischen Verfahren eingesetzt werden.In addition, dendrimers produced according to the invention can be used for a large number further uses are envisaged. For example, as Kataly be used in enatioselective synthesis. They are also suitable in the medical field, e.g. B. as a carrier of drugs, especially for Use with depot medication and for the targeted introduction of active substances in target cells (drug targeting). Furthermore, they can be used to prevent Ab rejection reactions are used in organ transplants. Can too Dendrimers according to the invention for the surface coating of aqueous media and can be used as micelles. Furthermore, they can, especially if they are in the outer shell functional groups, such as amino groups, to trans fection, as multi-antigenic determinants, artificial vaccines or enzyme models be used in analogy to cyclodextrins. Furthermore, fiction appropriate dendrimers that are solid-phase conjugated, especially derivatives of Inositol, used to treat bacteria-contaminated drinking water. Furthermore, dendrimers according to the invention, when used with dyes are linked to mark lectins in histochemical and cytoche mixing processes are used.

Kurze Beschreibung der ZeichnungenBrief description of the drawings

Fig. 1 allgemeines Reaktionsschema, Fig. 1 general reaction scheme

Fig. 2 Aufbau einer dendrimeren Struktur ausgehend von einem Galactose- modifizierten Alkinylbromid und Acetondicarbonsäurester, Fig. 2 structure of a dendrimeric structure based on a modified galactose Alkinylbromid and Acetondicarbonsäurester,

Fig. 3 Aufbau einer dendrimeren Struktur ausgehend von einem Zucker- modifizierten Alkinylbromid und Acetessigester. Fig. 3 structure of a dendrimeric structure based on a modified sugar Alkinylbromid and ethyl acetoacetate.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.The following examples illustrate the invention.

Beispiel 1example 1 Herstellung von 1-Brom-4[2',3',4',6'-tetra-O-benzyl-α-D-glucopyra nosyl]-but-2-in (43α) und 1-Brom-4[2',3',4',6'-tetra-O-benzyl-β-D- glucopyranosyl]-but-2-in (43β)Preparation of 1-bromo-4 [2 ', 3', 4 ', 6'-tetra-O-benzyl-α-D-glucopyra nosyl] -but-2-in (43α) and 1-bromo-4 [2 ', 3', 4 ', 6'-tetra-O-benzyl-β-D- glucopyranosyl] but-2-in (43β)

1.23 g (1.80 mmol) 2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-α(-bzw. β-)-D-glucopyranosyl-trichlora cetimidat [Schmidt et al., Angew. Chem. 1980, 92, 763] und 373 mg (2,50 mmol) 1-Brombut-2-in-4-ol wurden in 16 ml Dichlormethan unter Argon gelöst und auf -30°C abgekühlt. Über ein Septum gab man tropfenweise 60 µl (72 mg, 0.32 mmol) Trimethylsilyltrifluormethansulfonat dazu. Unter Rühren ließ man den Ansatz über Nacht auf RT erwärmen. Man schüttelte die Reaktionsmischung mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung aus und trennte die organische Phase ab. Die wäßrige Phase wurde noch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Man vereinigte die organischen Phasen und trocknete über wasserfreiem Natriumsulfat. Es wurde eingeengt und der Rückstand mittels Säulenchromatrographie getrennt.
SC: KG, PE/EE (17 : 3)
43α:
Ausbeute: 501 mg (41%)
DC: R_f (PE/EE 17 : 3): 0.17
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CDCl₃): 3.57-3.80, 3.94-4.03 (4H, 2H, je m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6); 3.89 (2H, t, H-10); 4.30 (2H, t, H-7); 4.43-5.00 (8H, m, H-11a . . . d); 5.04 (1H, d, H-1); 7.11-7.39 (20H, m, H-13a . . . d, H-14a . . . d, H-15a . . . d), J_7,10 = 1.9 Hz, J_1,2 = 3.6 Hz
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CDCl₃): 14.0 (C-10); 54.7 (C-7); 68.4 (C-6).; 70.7, 77.5, 79.3, 81.6 (C-2, C-3, C-4, C-5); 72.9, 73.4, 75.0, 75.7 (C-11a . . . d); 81.5, 82.1 (C-8, C-9); 95.4 (C-1); 127.5, 127.6, 127.6, 127.8, 127.9, 128.1, 128.3, 128.4 (C-13a . . . d, C-14a . . . d, C-15a . . . d); 137.8, 137.9, 138.2, 138.7 (C-12a . . . d)
1.23 g (1.80 mmol) 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-α (or β -) - D-glucopyranosyl-trichlora cetimidate [Schmidt et al., Angew. Chem. 1980, 92, 763] and 373 mg (2.50 mmol) of 1-bromobut-2-yn-4-ol were dissolved in 16 ml of dichloromethane under argon and cooled to -30 ° C. 60 μl (72 mg, 0.32 mmol) of trimethylsilyltrifluoromethanesulfonate were added dropwise over a septum. The mixture was allowed to warm to RT overnight with stirring. The reaction mixture was shaken with saturated sodium bicarbonate solution and the organic phase was separated off. The aqueous phase was extracted twice more with dichloromethane. The organic phases were combined and dried over anhydrous sodium sulfate. The mixture was concentrated and the residue was separated by means of column chromatography.
SC: KG, PE / EE (17: 3)
43α:
Yield: 501 mg (41%)
DC: R _f (PE / EE 17: 3): 0.17
¹ H-NMR: δ _H (250.13 MHz; CDCl ₃ ): 3.57-3.80, 3.94-4.03 (4H, 2H, each m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6) ; 3.89 (2H, t, H-10); 4.30 (2H, t, H-7); 4.43-5.00 (8H, m, H-11a... D); 5.04 (1H, d, H-1); 7.11-7.39 (20H, m, H-13a.. D, H-14a... D, H-15a... D), J _7.10 = 1.9 Hz, J _1.2 = 3.6 Hz
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CDCl ₃ ): 14.0 (C-10); 54.7 (C-7); 68.4 (C-6) .; 70.7, 77.5, 79.3, 81.6 (C-2, C-3, C-4, C-5); 72.9, 73.4, 75.0, 75.7 (C-11a... D); 81.5, 82.1 (C-8, C-9); 95.4 (C-1); 127.5, 127.6, 127.6, 127.8, 127.9, 128.1, 128.3, 128.4 (C-13a... D, C-14a... D, C-15a... D); 137.8, 137.9, 138.2, 138.7 (C-12a... D)

C₃₈H₃₉BrO₆. M = 672.6
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₃₈H₃₉ ⁸¹BrO₆Na [M+Na⁺]: 695.181
Gefunden: 695.181
Berechnet für C₃₈H₃₉ ⁷⁹BrO₆Na [M+Na⁺]: 693.182
Gefunden: 693.182
43β:
Ausbeute: 392 mg (32%)
DC: R_f (PE/EE 17 : 3): 0.20
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CDCl₃): 3.43-3.76 (6H, m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6); 3.89 (2H, t, H-10); 4.46-4.97 (11H, m, H-1, H-7, H-11a . . . d); 7.12-7.40 (20H, m, H-13a . . . d, H-14a . . . d, H-15a . . . d); J_7,10 = 2.0 Hz
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CDCl₃): 14.0 (C-10); 56.3 (C-7); 68.8 (C-6); 73.5, 74.7, 74.9, 75.6 (C-11a . . . d); 74.9, 77.6, 82.0, 84.6 (C-2, C-3, C-4, C-5), 81.7, 82.0 (C-8, C-9); 101.6 (C-1); 127.6, 127.6, 127.6, 127.7, 127.7, 127.8, 127.9, 128.2, 128.3 (C-13a . . . d, C-14a . . . d, C-15a . . . d); 138.1, 138.4, 138.6 (C-12a . . . d)
C ₃₈ H ₃₉ BrO ₆ . M = 672.6
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₃₈ H ₃₉ ⁸¹ BrO ₆ Na [M + Na ⁺ ]: 695.181
Found: 695.181
Calculated for C ₃₈ H ₃₉ ⁷⁹ BrO ₆ Na [M + Na ⁺ ]: 693.182
Found: 693.182
43β:
Yield: 392 mg (32%)
DC: R _f (PE / EE 17: 3): 0.20
¹ H NMR: δ _H (250.13 MHz; CDCl ₃ ): 3.43-3.76 (6H, m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6); 3.89 (2H, t, H-10); 4.46-4.97 (11H, m, H-1, H-7, H-11a ... d); 7.12-7.40 (20H, m, H-13a.. D, H-14a.. D, H-15a... D); J _7.10 = 2.0 Hz
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CDCl ₃ ): 14.0 (C-10); 56.3 (C-7); 68.8 (C-6); 73.5, 74.7, 74.9, 75.6 (C-11a... D); 74.9, 77.6, 82.0, 84.6 (C-2, C-3, C-4, C-5), 81.7, 82.0 (C-8, C-9); 101.6 (C-1); 127.6, 127.6, 127.6, 127.7, 127.7, 127.8, 127.9, 128.2, 128.3 (C-13a... D, C-14a... D, C-15a... D); 138.1, 138.4, 138.6 (C-12a... D)

C₃₈H₃₉BrO₆
M = 672.6
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₃₈H₃₉ ⁷⁹BrO₆Na [M+Na⁺]: 693.183
Gefunden: 693.181
Berechnet für C₃₈H₃₉ ⁸¹BrO₆Na [M+Na⁺]: 695.181
Gefunden: 695.183C ₃₈ H ₃₉ BrO ₆
M = 672.6
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₃₈ H ₃₉ ⁷⁹ BrO ₆ Na [M + Na ⁺ ]: 693.183
Found: 693.181
Calculated for C ₃₈ H ₃₉ ⁸¹ BrO ₆ Na [M + Na ⁺ ]: 695.181
Found: 695.183

Beispiel 2Example 2 Herstellung von 1-Brom-4-[2',3',4',6'-Tetra-(O)-benzyl-α-D-galacto pyranosyl]-but-2-in (44)Preparation of 1-bromo-4- [2 ', 3', 4 ', 6'-tetra- (O) -benzyl-α-D-galacto pyranosyl] but-2-in (44)

3.51 g (5.12 mmol) [2,3,4,6-Tetra-(O)-benzyl-β-D-galactogyranosyl]-trichloraceti midat [Schmidt 1980] und 879 mg (10.2 mmol) 2-Butin-1,4-diol wurden in 15 ml abs. Acetonitril suspendiert. Man kühlte auf 15°C ab und tropfte 150 µl (≈ 184 mg, 0.82 mmol) Trimethylsilyltrifluormethansulfonat dazu. Nach dreißig Minuten brach man die Reaktion durch Zugabe von 250 mg festem Natriumhydrogencarbonat ab. Nach weiteren 30 Minuten ließ man auf Raumtemperatur erwärmen und filtrierte. Das Filtrat wurde am Rotationsverdampfer eingeengt und der Rückstand durch Säulenchromatographie über Kieselgel mit PE/EE 7 : 3 gereinigt. Das Gemisch der beiden anomeren Produkte wurde als farbloses Öl mit der Masse 2.55 g gewon nen, der R-Wert betrug 0.21 auf dem DC mit PE/EE 2 : 1. Im ESI-Massenspektrum fand man für die errechnete Molmasse M = 608.7 des Zwischenproduktes erwar tungsgemäß die Signale für [M+H]⁺, [M+NH4]⁺ und [M+Na]⁺.3.51 g (5.12 mmol) [2,3,4,6-tetra- (O) -benzyl-β-D-galactogyranosyl] trichloroacetimidate [Schmidt 1980] and 879 mg (10.2 mmol) 2-butyne-1,4 -diol were abs in 15 ml. Acetonitrile suspended. The mixture was cooled to 15 ° C. and 150 μl (≈ 184 mg, 0.82 mmol) of trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate were added dropwise. After thirty minutes, the reaction was stopped by adding 250 mg of solid sodium hydrogen carbonate. After a further 30 minutes, the mixture was allowed to warm to room temperature and filtered. The filtrate was concentrated on a rotary evaporator and the residue was purified by column chromatography over silica gel with PE / EE 7: 3. The mixture of the two anomeric products was obtained as a colorless oil with a mass of 2.55 g, the R value was 0.21 on TLC with PE / EE 2: 1. In the ESI mass spectrum, M = 608.7 of the intermediate was found for the calculated molar mass As expected, the signals for [M + H] ⁺ , [M + NH4] ⁺ and [M + Na] ⁺ .

307 mg des Zwischenproduktes wurden in 3 ml abs. CH₂Cl₂ gelöst. Zu dieser Lösung gab man zunächst 327 mg (0.986 mmol) Tetrabrommethan und nach dessen Auflösung 318 mg (1.21 mmol) Triphenylphosphin portionsweise über 10 Minuten in fester Form. Man ließ 24 Stunden rühren und engte anschließend am Rotationsverdampfer ein. Der Rückstand wurde mit Diethylether versetzt und 30 min intensiv gerührt. Man filtrierte den Niederschlag ab und engte das Filtrat ein. Die Aufreinigung erfolgte mittels Säulenchromatographie. Nur ein kleiner Teil des Eluats enthielt reines Produkt [DC: R_f (PE/Et₂O 8 : 2): 0.09], der Hauptteil bildete Mischfraktionen mit einem Nebenprodukt, vermutlich mit dem entsprechenden α- Anomer [DC: R₁ (PE/Et₂O 8 : 2): 0.075], die verworfen wurden.
Ausbeute: 56.0 mg (14% über zwei Stufen)
DC: R_f(PE/Et₂O 8 : 2): 0.09
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CDCl₃): 3.51-3.60, 3.79-3.89 (je 4H, je m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-7, H-10); 4.40-4.79, 4.91-4.96 (11H, je m, H-1, H-6, H-11a . . . d); 7.27-7.42 (20H, m, H-13a . . . d, H-14a . . . d, H-15a . . . d)
¹⁵C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CDCl₃): 14.1 (C-10); 56.0 (C-7); 68.7 (C-6); 73.1, 73.5, 74.4, 75.0 (C-11a . . . d); 73.4, 73.4, 79.2, 82.1 (C-2, C-3, C-4, C-5); 81.4, 82.4 (C-8, C-9); 101.7 (C-1); 127.5, 127.7, 127.8, 128.1, 128.2. 128.2, 128.3, 128.4 (C-13a . . . d, C14a . . . d, C-15a . . . d; 137.8, 138.4, 138.5, 138.7 (C-12a . . . d)
307 mg of the intermediate were abs in 3 ml. CH ₂ Cl ₂ dissolved. 327 mg (0.986 mmol) of tetrabromomethane were first added to this solution and, after its dissolution, 318 mg (1.21 mmol) of triphenylphosphine were added in portions in solid form over a period of 10 minutes. The mixture was stirred for 24 hours and then concentrated on a rotary evaporator. The residue was mixed with diethyl ether and stirred intensively for 30 min. The precipitate was filtered off and the filtrate was concentrated. The purification was carried out by means of column chromatography. Only a small part of the eluate contained pure product [DC: R _f (PE / Et ₂ O 8: 2): 0.09], the main part formed mixed fractions with a by-product, presumably with the corresponding α-anomer [DC: R ₁ (PE / Et ₂ O 8: 2): 0.075], which were discarded.
Yield: 56.0 mg (14% over two stages)
TLC: R _f (PE / Et ₂ O 8: 2): 0.09
¹ H-NMR: δ _H (250.13 MHz; CDCl ₃ ): 3.51-3.60, 3.79-3.89 (each 4H, each m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-7, H -10); 4.40-4.79, 4.91-4.96 (11H, each m, H-1, H-6, H-11a.. D); 7.27-7.42 (20H, m, H-13a... D, H-14a... D, H-15a... D)
¹⁵ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CDCl ₃ ): 14.1 (C-10); 56.0 (C-7); 68.7 (C-6); 73.1, 73.5, 74.4, 75.0 (C-11a... D); 73.4, 73.4, 79.2, 82.1 (C-2, C-3, C-4, C-5); 81.4, 82.4 (C-8, C-9); 101.7 (C-1); 127.5, 127.7, 127.8, 128.1, 128.2. 128.2, 128.3, 128.4 (C-13a... D, C14a... D, C-15a... D; 137.8, 138.4, 138.5, 138.7 (C-12a... D)

C₃₈H₃₉BrO₅
M = 672.6
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₃₈H₄₀ ⁷⁹BrO₆ [M+H]⁺: 671.201
Gefunden: 671.193
Berechnet für C₃₈H₄₀ ⁸¹BrO₆[M+H]⁺: 673.199
Gefunden: 673.199. C ₃₈ H ₃₉ BrO ₅
M = 672.6
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₃₈ H ₄₀ ⁷⁹ BrO ₆ [M + H] ⁺ : 671.201
Found: 671.193
Calculated for C ₃₈ H ₄₀ ⁸¹ BrO ₆ [M + H] ⁺ : 673.199
Found: 673.199.

Beispiel 3Example 3 2,2-Bis[4'-(2",3",4",6"-Tetra-(O)-benzyl-α-D-glucosyl)-but-2'-inyl]- malonsäuredi-tert.-butylester (47)2,2-bis [4 '- (2 ", 3", 4 ", 6" -tetra (O) -benzyl-α-D-glucosyl) -but-2'-inyl] - di-tert.-butyl malonate (47)

54 mg (80 µmol) 1-Brom-4-[2',3',4',6'-tetra-(O)-benzyl-α-D-glucosyl]-but-2-in 43 und 6.9 mg (32 µmol) Malonsäure-di-tert.-butylester wurden in 0.5 ml DMF gelöst. Man fügte 3.2 mg 60%ige NaH-Suspension (80 µmol) in fester Form hinzu und ließ bei RT 16 Stunden rühren. Die Reaktion wurde durch Zugabe von 2 ml Wasser und 2 ml Diethylether abgebrochen. Man trennte die organische Phase ab und ex trahierte die wäßrige Phase noch zweimal mit Diethylether. Die vereinigten organi schen Extrakte wurden mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsul fat getrocknet. Nach dem Einrotieren reinigte man den Rückstand mittels Säulen chromatographie.
Ausbeute: 25.1 mg (56%)
SC: KG, PE/EE, 5 : 1
DC: R_f (PE/EE 5 : 1): 0.24
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CDCl₃): 1.43 (18H, s, H-14); 2.92 (4H, m, H-10); 3.56-3.99 (10H, 2H, je m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6); 4.18 (4H, m, H-7); 4.42-4.98 (16H, m, H-11a . . . d); 5.04 (2H, d, H-1); 7.11-7.39 (20H, m, H-13a . . . d, H-14a . . . d, H- 15a . . . d); J_1,2 = 3.6 Hz
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CDCl₃): 22.9 (C-10); 27.8, (C-14), 54.5 (C-7); 57.2 (C-11); 68.4 (C-6); 70.6, 77.5, 79.4, 81.9 (C-2, C-3, C-4, C-5); 72.7, 73.5, 74.9, 75.6 (C-11a . . . d); 78.3, 81.6, 82.1 (C-8, C-9, C-13); 94.8 (C-1); 127.5, 127.5, 127.6, 127.8, 127.8, 127.9, 128.1, 128.3, 128.3, 128.3 (C-13a . . . d, C-14a . . . d, C-15a . . . d); 138.0, 138.1, 138.3, 138.8 (C-12a . . . d), 167.8 (C-12)
54 mg (80 µmol) 1-bromo-4- [2 ', 3', 4 ', 6'-tetra- (O) -benzyl-α-D-glucosyl] -but-2-in 43 and 6.9 mg ( 32 µmol) malonic acid di-tert-butyl ester were dissolved in 0.5 ml DMF. 3.2 mg of 60% strength NaH suspension (80 μmol) were added in solid form and the mixture was stirred at RT for 16 hours. The reaction was stopped by adding 2 ml of water and 2 ml of diethyl ether. The organic phase was separated off and the aqueous phase was extracted twice more with diethyl ether. The combined organic extracts were washed with water and dried over anhydrous sodium sulfate. After spinning in, the residue was purified by column chromatography.
Yield: 25.1 mg (56%)
SC: KG, PE / EE, 5: 1
DC: R _f (PE / EE 5: 1): 0.24
¹ H NMR: δ _H (250.13 MHz; CDCl ₃ ): 1.43 (18H, s, H-14); 2.92 (4H, m, H-10); 3.56-3.99 (10H, 2H, each m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6); 4.18 (4H, m, H-7); 4.42-4.98 (16H, m, H-11a... D); 5.04 (2H, d, H-1); 7.11-7.39 (20H, m, H-13a.. D, H-14a.. D, H-15a... D); J _1.2 = 3.6 Hz
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CDCl ₃ ): 22.9 (C-10); 27.8, (C-14), 54.5 (C-7); 57.2 (C-11); 68.4 (C-6); 70.6, 77.5, 79.4, 81.9 (C-2, C-3, C-4, C-5); 72.7, 73.5, 74.9, 75.6 (C-11a... D); 78.3, 81.6, 82.1 (C-8, C-9, C-13); 94.8 (C-1); 127.5, 127.5, 127.6, 127.8, 127.8, 127.9, 128.1, 128.3, 128.3, 128.3 (C-13a... D, C-14a... D, C-15a... D); 138.0, 138.1, 138.3, 138.8 (C-12a... D), 167.8 (C-12)

C₈₇H₉₆O₁₆
M = 1397.7
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₈₇H₉₆O₁₆Na [M+Na]⁺: 1419.660
Gefunden: 1419.664 C ₈₇ H ₉₆ O ₁₆
M = 1397.7
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₈₇ H ₉₆ O ₁₆ Na [M + Na] ⁺ : 1419.660
Found: 1419.664

Beispiel 4Example 4 Herstellung von 2,2-Bis[4'-α-D-glucopyranosyl-butyl]-malonsäure di-tert.-butylester (48)Preparation of 2,2-bis [4'-α-D-glucopyranosyl-butyl] -malonic acid di-tert-butyl ester (48)

20.2 mg (14.5 µmol) 2,2-Bis[4'-(2",3",4",6"-Tetra-(O)-benzyl-α-D-glucosyl)-but-2'- inyl]malonsäuredi-tert.-butylester 47 und 6.9 mg 20%iges Pd/C wurden unter einer Wasserstoffatmosphäre in 1.0 ml Aceton/Wasser (9 : 1) suspendiert. Man ließ 16 Stunden bei RT rühren. Nach gründlichem Spülen des Kolbens mit Argon wurde die Reaktionsmischung über einen Membranfilter filtriert und das Filtrat am Rota tionsverdampfer eingeengt. Der Rückstand konnte durch Filtration über Kieselgel mit Methanol als Eluent gereinigt werden. Man isolierte ein farbloses Öl.
Ausbeute: 9.8 mg (99%)
SC: KG, EE/MeOH, 4 : 1
DC: R_f (EE/MeOH 4 : 1): 0.19
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CD₃OD): 1.20-1.29, 1.60-1.79 (12H, je m, H-8, H-9, H-10); 1.43 (18H, s, H-14); 3.22-3.81 (16H, m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6, H-7); 4.75 (2H, d, H-1); J_1,2 = 3.6 Hz
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CD₃OD): 21.9, 31.1, 33.0 (C-8, C-9, C-10); 28.3 (C-14); 59.8 (C-11); 62.7 (C-6); 68.9 (C-7); 71.9 (C-3); 73.6, 73.7 (C-2, C-5); 75.2 (C-4); 82.4 (C-13); 100.2 (C-1); 172.6 (C-12)
20.2 mg (14.5 µmol) 2,2-bis [4 '- (2 ", 3", 4 ", 6" -Tetra- (O) -benzyl-α-D-glucosyl) but-2'-ynyl] malonic acid di-tert-butyl ester 47 and 6.9 mg of 20% Pd / C were suspended in 1.0 ml of acetone / water (9: 1) under a hydrogen atmosphere. The mixture was stirred at RT for 16 hours. After thoroughly flushing the flask with argon, the reaction mixture was filtered through a membrane filter and the filtrate was concentrated on a rotary evaporator. The residue could be purified by filtration through silica gel using methanol as the eluent. A colorless oil was isolated.
Yield: 9.8 mg (99%)
SC: KG, EE / MeOH, 4: 1
TLC: R _f (EE / MeOH 4: 1): 0.19
¹ H NMR: δ _H (250.13 MHz; CD ₃ OD): 1.20-1.29, 1.60-1.79 (12H, each m, H-8, H-9, H-10); 1.43 (18H, s, H-14); 3.22-3.81 (16H, m, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6, H-7); 4.75 (2H, d, H-1); J _1.2 = 3.6 Hz
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CD ₃ OD): 21.9, 31.1, 33.0 (C-8, C-9, C-10); 28.3 (C-14); 59.8 (C-11); 62.7 (C-6); 68.9 (C-7); 71.9 (C-3); 73.6, 73.7 (C-2, C-5); 75.2 (C-4); 82.4 (C-13); 100.2 (C-1); 172.6 (C-12)

C₃₁H₅₆O₁₆
M = 684.8
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₃₁H₅₆O₁₆Na [M+Na]⁺: 707.347
Gefunden: 707.350 C ₃₁ H ₅₆ O ₁₆
M = 684.8
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₃₁ H ₅₆ O ₁₆ Na [M + Na] ⁺ : 707.347
Found: 707.350

Beispiel 5Example 5 Herstellung von 2,2,4,4-Tetrakis[4'-(2",3",4",6"-Tetra-(O)-benzyl- α-D-glucapyranosyl)-but-2'-inyl]-3-oxoglutarsäuredi-tert.-butylester (49)Preparation of 2,2,4,4-tetrakis [4 '- (2 ", 3", 4 ", 6" -Tetra- (O) -benzyl- α-D-glucapyranosyl) -but-2'-inyl] -3-oxoglutarsäuredi tert-butyl ester (49)

90 mg (134 µmol) 1-Brom-4-[2',3',4',6'-tetra-(O)-benzyl-α-D-glucosyl]-but-2-in 43 und 5.7 mg (22 µmol) 3-Oxoglutarsäuredi-tert.-butylester wurden in 0.5 ml DMF gelöst. Man fügte 4.6 mg 60%ige NaH-Suspension (110 µmol) in fester Form hinzu und ließ bei RT 24 Stunden rühren. Die Reaktion wurde durch Zugabe von 2 ml Wasser und 2 ml Diethylether abgebrochen. Man trennte die organische Phase ab und extrahierte die wäßrige Phase nach zweimal mit Diethylether. Die verunreinig ten organischen Extrakte wurden mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Einrotieren reinigte man den Rückstand mittels Säulenchromatographie.
Ausbeute: 19.8 mg (33%)
SC: KG, PE/EE, 4 : 1
DC: R_f (PE/EE 4 : 1): 0.12
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CDCl₃): 1.44 (18H, s, H-14); 2.91-3.15 (8H, m, H-10, H-10a); 3.55-3.97 (20H, 4H, je m, H-2, H-2a, H-3, H-3a, H-4, H-4a, H-5, H-5a, H-6, H-6a); 4.15 (4H, m, H-7, H-7a); 4.39-4.96 (32H, m, H-11a . . . h); 5.05, 5.06 (je 2H, je d, H-1); 7.09-7.37 (80H, m, H-13a . . . h, H-14a . . . h, H-15a . . . h); J_1,2 = 3.3 Hz
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CDCl₃): 24.7, 24.8 (C-10, C-10a); 27.8 (C-15), 54.5 (C-7); 62.6 (C-11); 68.5 (C-6); 70.6, 77.5, 79.4, 81.9 (C-2, C-2a, C-3, C-3a, C-4, C-4a, C-5, C-5a); 72.5, 73.5, 74.9, 75.6 (C-16a . . . h); 79.2, 79.2, 81.6, 81.7 (C-8, C-8a, C-9, C-9a); 83.9 (C-14); 94.8 (C-1, C-1a); 127.5, 127.5, 127.6, 127.8, 127.8, 127.9, 128.0, 128.3, 128.3, 128.3, 128.4 (C-13a . . . h, C-14a . . . h, C-15a . . . h); 138.0, 138.1, 138.4, 138.9 (C-12a . . . h), 167.6 (C-13); 197.0 (C-12)
90 mg (134 µmol) 1-bromo-4- [2 ', 3', 4 ', 6'-tetra- (O) -benzyl-α-D-glucosyl] -but-2-in 43 and 5.7 mg ( 22 µmol) 3-oxoglutaric acid di-tert-butyl ester was dissolved in 0.5 ml DMF. 4.6 mg of 60% NaH suspension (110 μmol) in solid form were added and the mixture was stirred at RT for 24 hours. The reaction was stopped by adding 2 ml of water and 2 ml of diethyl ether. The organic phase was separated off and the aqueous phase was extracted twice with diethyl ether. The contaminated organic extracts were washed with water and dried over anhydrous sodium sulfate. After spinning in, the residue was purified by column chromatography.
Yield: 19.8 mg (33%)
SC: KG, PE / EE, 4: 1
DC: R _f (PE / EE 4: 1): 0.12
¹ H NMR: δ _H (250.13 MHz; CDCl ₃ ): 1.44 (18H, s, H-14); 2.91-3.15 (8H, m, H-10, H-10a); 3.55-3.97 (20H, 4H, each m, H-2, H-2a, H-3, H-3a, H-4, H-4a, H-5, H-5a, H-6, H-6a ); 4.15 (4H, m, H-7, H-7a); 4.39-4.96 (32H, m, H-11a.. H); 5.05, 5.06 (each 2H, each d, H-1); 7.09-7.37 (80H, m, H-13a.. H, H-14a.. H, H-15a.. H); J _1.2 = 3.3 Hz
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CDCl ₃ ): 24.7, 24.8 (C-10, C-10a); 27.8 (C-15), 54.5 (C-7); 62.6 (C-11); 68.5 (C-6); 70.6, 77.5, 79.4, 81.9 (C-2, C-2a, C-3, C-3a, C-4, C-4a, C-5, C-5a); 72.5, 73.5, 74.9, 75.6 (C-16a.. H); 79.2, 79.2, 81.6, 81.7 (C-8, C-8a, C-9, C-9a); 83.9 (C-14); 94.8 (C-1, C-1a); 127.5, 127.5, 127.6, 127.8, 127.8, 127.9, 128.0, 128.3, 128.3, 128.3, 128.4 (C-13a.. H, C-14a.. H, C-15a.. H); 138.0, 138.1, 138.4, 138.9 (C-12a.. H), 167.6 (C-13); 197.0 (C-12)

C₁₆₅H₁₇₄O₂₉
M = 2621.4
MS (ESI):
Berechnet für C₁₆₅H₁₇₄O₂₉Na [M+Na⁺]: 2644.4
Gefunden: 2644.2C ₁₆₅ H ₁₇₄ O ₂₉
M = 2621.4
MS (ESI):
Calculated for C ₁₆₅ H ₁₇₄ O ₂₉ Na [M + Na ⁺ ]: 2644.4
Found: 2644.2

Beispiel 6Example 6 Herstellung von 2,2,4,4-Tetrakis[4'-(α-D-glucopyranosyl)-butyl]-3- oxoglutarsäuredi-tert-butylester (50)Preparation of 2,2,4,4-tetrakis [4 '- (α-D-glucopyranosyl) butyl] -3- di-tert-butyl oxoglutarate (50)

17.2 mg (6.56 µmol) 2,2,4,4-Tetrakis[4'-(2",3",4",6"-Tetra-(O)-benzyl-α-D-gluco pyranosyl)-but-2'-inyl]-3-oxoglutarsäuredi-tert.-butylester (49) und 5.8 mg 20%iges Pd/C wurden unter einer Wasserstoffatmosphäre in 1.0 ml Aceton/Wasser (9 : 1) suspendiert und analog Vorschrift 48 umgesetzt und aufgearbeitet. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt. Man isolierte ein farbloses Öl.
Ausbeute: 2.1 mg (27%)
SC: KG, PE/EE, 2 : 1
DC: R_f (PE/EE 2 : 1): 0.15
¹H-NMR: δ_H (250.13 MHz; CD₃OD): 1.20-1.37, 1.58-1.63 (24H, je m, H-8, H-8a, H-9, H-9a, H-10, H-10a); 1.45 (18H, s, H-15); 3.22-3.81 (16H, m, H-2, H-2a, H-3, H-3a, H-4, H-4a, H-5, H-5a, H-6, H-6a, H-7, H-7a); Signal für H-1 und H-1a, erwartet bei δ = 4.75, wird vermutlich vom starken Lösungsmittelsignal bei δ = 4.78 überdeckt
¹³C-NMR: δ_C (62.90 MHz; CD₃OD): 22.3, 31.3, 34.1 (C-8, C-9, C-10); 28.6 (C-15); 62.9 (C-6); 66.6 (C-11); 69.1 (C-7); 72.0 (C-3); 73.8, 73.8 (C-2, C-5); 75.3 (C-4); 83.4 (C-14); 100.3 (C-1); 172.8 (C-13), 208.6 (C-12)
17.2 mg (6.56 µmol) 2,2,4,4-tetrakis [4 '- (2 ", 3", 4 ", 6" -Tetra- (O) -benzyl-α-D-gluco pyranosyl) -but- 2'-Inyl] -3-oxoglutaric acid di-tert-butyl ester (49) and 5.8 mg of 20% Pd / C were suspended in a hydrogen atmosphere in 1.0 ml of acetone / water (9: 1) and reacted and worked up in accordance with regulation 48. The residue was purified by column chromatography. A colorless oil was isolated.
Yield: 2.1 mg (27%)
SC: KG, PE / EE, 2: 1
DC: R _f (PE / EE 2: 1): 0.15
¹ H-NMR: δ _H (250.13 MHz; CD ₃ OD): 1.20-1.37, 1.58-1.63 (24H, each m, H-8, H-8a, H-9, H-9a, H-10, H -10a); 1.45 (18H, s, H-15); 3.22-3.81 (16H, m, H-2, H-2a, H-3, H-3a, H-4, H-4a, H-5, H-5a, H-6, H-6a, H- 7, H-7a); Signal for H-1 and H-1a, expected at δ = 4.75, is probably covered by the strong solvent signal at δ = 4.78
¹³ C NMR: δ _C (62.90 MHz; CD ₃ OD): 22.3, 31.3, 34.1 (C-8, C-9, C-10); 28.6 (C-15); 62.9 (C-6); 66.6 (C-11); 69.1 (C-7); 72.0 (C-3); 73.8, 73.8 (C-2, C-5); 75.3 (C-4); 83.4 (C-14); 100.3 (C-1); 172.8 (C-13), 208.6 (C-12)

C₅₃H₉₄O₂₉
M = 1195.3
HR-MS (FAB):
Berechnet für C₅₃H₉₄O₂₉Na [M+Na⁺]: 1217.578
Gefunden: 1217.581C ₅₃ H ₉₄ O ₂₉
M = 1195.3
HR-MS (FAB):
Calculated for C ₅₃ H ₉₄ O ₂₉ Na [M + Na ⁺ ]: 1217.578
Found: 1217.581

Claims

1. Verfahren zur Herstellung von dendritischen Strukturen umfassend die Reaktion eines mindestens bisubstituierten Alkinylhalogenids mit einer C-H- aciden Carbonylverbindung in Gegenwart einer Base.1. Process for the production of dendritic structures comprising the Reaction of an at least bisubstituted alkynyl halide with a C-H acidic carbonyl compound in the presence of a base.

2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Base NaH, Natriumethylat, DBU oder LiH ist.2. The method according to claim 1, wherein the base is NaH, sodium ethylate, DBU or LiH is.

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei die C-H-acide Carbonylverbin dung Acetondicarbonsäurediethylester, Acetessigester, Malonsäurediethyle ster, Acetondicarbonsäuredi(2-trimethylsilylethyl)ester oder Acetondicarbon säuredi-t-butylester ist.3. The method according to claim 1 or 2, wherein the C-H-acidic carbonyl verb dung Acetondicarbonsäurediethylester, Acetessigester, Malonsäurediethyle ster, acetone dicarboxylic acid di (2-trimethylsilylethyl) ester or acetone dicarbonate acid di-t-butyl ester.

4. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei das mindestens bisubstituierte Alkinylhalogenid sich von 1-Brom-2-butin-4-ol oder 1-Brom-2-hexin-6-ol ableitet.4. The method according to claim 1 or 2, wherein the at least bisubstituted Alkynyl halide is derived from 1-bromo-2-butyn-4-ol or 1-bromo-2-hexin-6-ol derives.

5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei das mindestens bisubstituierte Alkinylhalogenid folgende Struktur hat:
Hal-CH₂-C∼C-R
mit R = Benzoyl-, Ethyl-, tert-Butyl-, Benzyl-, Silylgruppe, pharmazeutische Wirkstoffe, Saccharid.5. The method according to claim 1 or 2, wherein the at least bisubstituted alkynyl halide has the following structure:
Hal-CH ₂ -C∼CR
with R = benzoyl, ethyl, tert-butyl, benzyl, silyl group, active pharmaceutical ingredients, saccharide.

6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei die Reaktion in einem polaren, aprotischen, organischen Lösungsmittel stattfindet.6. The method according to any one of claims 1 to 5, wherein the reaction in one polar, aprotic, organic solvent takes place.

7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei die Komponenten C-H- acide Carbonylverbindung, Alkinylhalogenid und Base im Verhältnis 1 : < 4 : < 4,5 umgesetzt werden.7. The method according to any one of claims 1 to 6, wherein the components C-H acidic carbonyl compound, alkynyl halide and base in the ratio 1: <4: <4.5 be implemented.