DD301391A7 - ENZYMMIC FAST DETERGENT - Google Patents

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DD301391A7
DD301391A7 DD28422685A DD28422685A DD301391A7 DD 301391 A7 DD301391 A7 DD 301391A7 DD 28422685 A DD28422685 A DD 28422685A DD 28422685 A DD28422685 A DD 28422685A DD 301391 A7 DD301391 A7 DD 301391A7
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enzymatic
indicator
warfare agents
enzyme
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DD28422685A
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Hans-Georg Dr Sc Med Neymeyer
Gerhard Dr Rer Na Moeschwitzer
Helmut Dr Sc Med Reichelt
Reinhard Dr Med Uhlig
Juergen Dr Rer Nat Dipl-C Pelz
Hans-Georg Dr Rer Nat Mueller
Horst Dr Rer Nat Guentherberg
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Br Deutschland Vertr Durch D B
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Abstract

Die Erfindung betrifft einen enzymatischen Schnelltest zum Nachweis chemischer Kampfstoffe. Das Ziel besteht darin, einen sicheren und schnellen Nachweis chemischer Kampfstoffe zu gewährleisten. Daraus leitet sich die Aufgabe ab, die Inkubationsphase gezielt zu steuern. Erfindungsgemäß werden die funktionellen Schichten (Substrat-, Enzym- und gegebenenfalls Indikatorschicht) voneinander durch eine quellfähige Sperrschicht getrennt.The invention relates to an enzymatic rapid test for the detection of chemical warfare agents. The aim is to ensure safe and rapid detection of chemical warfare agents. This leads to the task of controlling the incubation phase in a targeted manner. According to the invention, the functional layers (substrate, enzyme and optionally indicator layer) are separated from one another by a swellable barrier layer.

Description

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein enzymatisches Schnellnachwoismittel zum qualitativen und semiquantitativen Nachweis chemischer Kampfstoffe (Schnelltest).The invention relates to an enzymatic Schnellnachwoismittel for qualitative and semi-quantitative detection of chemical warfare agents (rapid test).

Charakteristik der bekannten technischen LösungenCharacteristic of the known technical solutions

Das Nachweisprinzip für bestimmte chemische Kampfstoffe beruht auf der durch Cholinesterase bewirkten Spaltung eines geeigneten Substrates, die durch einen pH-Indikator sichtbar gemacht wird. Bei der Hemmung des Enzyms, z. B. durch Kampfstoffe oder andere Inhibitoren, trifft die pH-Änderung durch die verzögerte Substratspaltung erheblich verspätet ein.The detection principle for certain chemical warfare agents is based on the cholinesterase-induced cleavage of a suitable substrate, which is visualized by a pH indicator. In the inhibition of the enzyme, for. As by warfare agents or other inhibitors, the change in pH due to the delayed substrate cleavage is significantly delayed.

Ziel der ErfindungObject of the invention Es ist Ziel der Erfindung, einen sicheren und schnellen Nachweis von chemischen Kampfstoffen zu gewährleisten.It is an object of the invention to ensure a safe and rapid detection of chemical warfare agents. Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention Die technische Aufgabe, die durch die Erfindung gelöst wird.The technical problem which is solved by the invention. Es ist Aufgabe der Erfindung, die Inkubationsphase, in der zunächst die Enzym-Hemmstoff-Kopplung erfolgt und danach dieIt is an object of the invention, the incubation phase in which first the enzyme-inhibitor coupling takes place and then the Diffusion von Substrat in die Enzymschicht einsetzt, gezielt zu steuern.Diffusion of substrate in the enzyme layer uses targeted to control. Merkmale der ErfindungFeatures of the invention Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch erreicht, daß die funktionellen Schichten voneinander durch eine SperrschichtAccording to the invention the object is achieved in that the functional layers from each other by a barrier layer

getrennt sind. Die funktionellen Schichten befinden sich auf einem transparenten Träger.are separated. The functional layers are on a transparent support.

Die funktionellen Schichten bestehen aus einer Substrat-, Enzym- und Indikatorschicht, wobei sich die Sperrschicht zwischen derThe functional layers consist of a substrate, enzyme and indicator layer, with the barrier layer between the Substrat- und Enzymschicht befindet. Der pH-Indikator kann sich sowohl in einer selbständigen Indikatorschicht befinden alsSubstrate and enzyme layer is located. The pH indicator can be both in a self-contained indicator layer than

auch in den beiden anderen funktionellen Schichten angeordnet sein.also be arranged in the other two functional layers.

Als Sperrschicht wird entweder eine mechanisch zu entfernende oder durchlässig zu machende Schicht oder eine enzymatischAs a barrier layer is either a mechanically removed or permeable layer or an enzymatic

zu desintegrierende oder durch Quellung permeirfähig zu mach'ende Schicht verwendet.used for disintegrating or permeable by swelling layer to be made.

Das erfindungsgemäße Schnellnachweismittel gestattet einen sicheren Nachweis von chemischen Kampfstoffen. EinThe rapid detection means according to the invention allows a safe detection of chemical warfare agents. On

semiquantitativer Nachweis ist durch die Bewertung der Zeitdauer bis zu einer erkennbaren Indikatorreaktion möglich. DieseSemiquantitative detection is possible by evaluating the time to a detectable indicator reaction. These

Auswertung erfolgt durch Vergleichslösungen bekannter Konzentration, mit der der Test vom Hersteller calibriert wurde.Evaluation is carried out by comparison solutions of known concentration, with which the test was calibrated by the manufacturer. Ausführungsbeispielembodiment Auf einen transparenten Träger, beispielsweise aus Terephtalat oder Azetatcellulose, wird eine Substratschicht, bestehend ausOn a transparent support, for example of terephthalate or acetate cellulose, is a substrate layer consisting of

einem Polymer wie z. B. Gelatine, Agarose oder vernetzten Gelen, aus einer Sperrschicht, bestehend aus einer inerten Plastfolie bzw. einer gelösten Gelatinoschicht sowie einer Enzymschicht, bestehend aus Gelatine oder Agarose oder anderen Polymeren enthaltend Cholinesterase definierter Acetylcholinesterase-fPseudocholinesterase-IAktivität, aufgebracht.a polymer such as. As gelatin, agarose or crosslinked gels, from a barrier layer, consisting of an inert plastic film or a dissolved Gelatinoschicht and an enzyme layer consisting of gelatin or agarose or other polymers containing cholinesterase defined Acetylcholinesterase fPseudocholinesterase IAktivität applied.

Hierbei sind hochaktive Enzympräparate definierter Cholinesterase-Isoenzymmuster geeignet, vorzugsweise sind mikrobielleIn this case, highly active enzyme preparations of defined cholinesterase isoenzyme patterns are suitable, preferably microbial Präparate einsotzbar.Preparations are ineffective. Der pH-Indikator wird der Enzymschicht zugesetzt. Auf die äußere Enzymschicht wird eine flüssige Probe aufgebracht. InfolgeThe pH indicator is added to the enzyme layer. A liquid sample is applied to the outer enzyme layer. As a result

von Quellvorgängen diffundiert innerhalb einer Inkubationsphase aus einer folgenden Schicht Substrat zum Enzym. Die erfolgende Substratspaltung wird durch die Indikatorverfärbung sichtbar. Damit ist ein qualitativer Nachweis von chemischenof swelling processes diffuses within an incubation phase from a following layer of substrate to the enzyme. The resulting substrate cleavage becomes visible through the indicator staining. This is a qualitative proof of chemical

Kampfstoffen möglich. Die Bewertung der Zeitdauer bis zu einer erkennbaren Indikatorreaktion gestattet semiquantitativeWarfare agents possible. The evaluation of the time duration until a recognizable indicator reaction allows semiquantitative Aussagen über die Kampfstoff-Konzentration.Statements about the concentration of warfare agents.

Claims (4)

1. Enzymatischar Schnelltest zum Nachweis chemischer Kampfstoffe, dadurch gekennzeichnet, daß die funktioneilen Schichten (Substrat- und Enzymschicht) voneinander durch eine quellfähige Sperrschicht getrennt sind.1. Enzymatic rapid test for the detection of chemical warfare agents, characterized in that the functional layers (substrate and enzyme layer) are separated from each other by a swellable barrier layer. 2. Enzymatischer Schnelltest nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß die funktioneilen Schichten auf einem transparenten Träger angeordnet sind.2. enzymatic rapid test according to item 1, characterized in that the functional layers are arranged on a transparent support. 3. Enzymatischer Schnelltest nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß der pH-Indikator Bestandteil von einer der funktionellen Schichten ist.3. Enzymatic rapid test according to item 1, characterized in that the pH indicator is part of one of the functional layers. 4. Enzymatischer Schnelltest nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß der pH-Indikator in einer selbständigen Indikatorschicht enthalten ist.4. enzymatic rapid test according to item 1, characterized in that the pH indicator is contained in a self-contained indicator layer.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000065081A2 (en) * 1999-04-26 2000-11-02 U.S. Army Medical Research And Materiel Command Immobilized enzymes as biosensors for chemical toxins
DE102016121553A1 (en) * 2016-11-10 2018-05-17 Technische Universität Darmstadt Competitive test of an enzyme substrate with internal compensation of enzyme activity

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