DD286509A5 - METHOD FOR THE PRODUCTION OF ACTIVITY-STABILIZED, EFFICIENT-EXPLOSED RECTALLY APPLICABLE INSULIN PREPARATIONS - Google Patents

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von aktivitaetsstabilisierten, wirkungsverlaengerten rektal applizierbaren Insulinpraeparationen aus Komplexen zwischen Insulin und Polyaminosaeuren, die in der Diabetestherapie Anwendung finden. Die erfindungsgemaesze Aufgabe wird dadurch geloest, dasz die Polyaminosaeure mit einem Insulinanteil von 50-60% zusammen mit einem Resorptionsvermittler * bezogen auf die Gesamtsuppositorienmasse) in hydrophilen Suppositorien eingesetzt wird. Vorteile der Erfindung sind, dasz sich Dosiseinsparungen bei gleichzeitiger Wirkungsverlaengerung erzielen lassen.{rektale Insulinpraeparation; Polyaminosaeure-Insulin-Komplexe; Diabetestherapie; Wirkungsverlaengerung; Dosiseinsparung}The invention relates to a process for the preparation of activity-stabilized, effect-prolonged rectally administrable insulin preparations from complexes between insulin and polyamine acids, which are used in diabetes therapy. The object of the present invention is achieved by using the polyamine acids having an insulin content of 50-60% together with a resorption mediator * relative to the total suppository mass) in hydrophilic suppositories. Advantages of the invention are that dose savings can be achieved with concomitant prolongation of action. {Rectal Insulin Preparation; Polyamino-insulin complexes; Diabetes therapy; Wirkungsverlaengerung; Dose reduction}

Description

Körpergewicht erhielt. Den Kontrollieren wurden Suppositorien gleicher Insulindosierung und Tensidkonzentration, jedoch ohne Komplexierung des Hormons appliziert. Die Blutglukosespiegelwerte wurden nach Normierung auf den Anfangsblutzuckerwert im Nüchternzustand mittels des Fermognost-Blutzuckerbestecks bestimmtBody weight received. The controls were suppositories same insulin dosage and surfactant concentration, but applied without complexation of the hormone. The blood glucose levels were determined after normalization to the initial fasting blood glucose level using the Fermognost blood sugar control kit

Es ergab sich keine signifikante Verbesserung des Blutglukosesenkungsprofils gegenüber der Kontrollgruppe. There was no significant improvement in the blood glucose lowering profile over the control group.

Beispiel 2Example 2

Entsprechend Beispiel 1 wird ein 20%iger Insulin-Polyglycin-Komplex durch Suspendieren von 165mg Polyglycin (M = 4000) in 5 ml 85%iger Ameisensäure unter Zugabe von 0,16 mi Insulinlösung (250 mg/ml 85%iger Ameisensäure) hergestellt. 15,6mg des so erhaltenen Komplexes werden in 3ml Citrat-Phosphat-Puffer suspendiert und zusammen mit 1,5g Lauroylleucin dem Gießansatz zugesetzt, homogen vermischt und anschließend zu Suppositorien vergossen. Bei einer Insulindosierung von 1,2 ΙΕ/kg ergab sich keine signifikante Veränderung des Blutglukosesenkungsprofils gegenüber der Kontrollgruppe.According to Example 1, a 20% insulin-polyglycine complex is prepared by suspending 165 mg of polyglycine (M = 4000) in 5 ml of 85% formic acid with the addition of 0.16 ml of insulin solution (250 mg / ml of 85% formic acid). 15.6 mg of the complex thus obtained are suspended in 3 ml of citrate-phosphate buffer and added together with 1.5 g of lauroylleucin to the casting mixture, mixed homogeneously and then poured into suppositories. At an insulin dose of 1.2 ΙΕ / kg, there was no significant change in the blood glucose lowering profile compared to the control group.

Belsptel 3Belsptel 3

Analog zu Beispiel 1 wurde ein 55%iger Insulin-Polyglycin-Komplex durch Suspendieren von 260 mg Polyglycin (M = 4000) inAnalogous to Example 1, a 55% insulin-polyglycine complex was prepared by suspending 260 mg of polyglycine (M = 4000) in

7,5ml 85%iger Ameisensäure unter Zugabe von 1,1 ml Insulinlösung (250 mg/ml 85%iger Ameisensäure) erhalten. 5,7 mg dieses7.5 ml of 85% formic acid with the addition of 1.1 ml of insulin solution (250 mg / ml of 85% formic acid). 5.7 mg of this

Komplexes wurden dem Gießansatz wie unter Beispiel I zugesetzt und zu Suppositorien vergossen. Bei einer InsulindosierungComplexes were added to the casting batch as in Example I and shed into suppositories. With an insulin dosage

von 1,2IE/kg Körpergewicht ergab sich eine 3stündige Blutglukosesenkung um 40% mit Erreichen des Anfangsniveaus nachof 1.2 IU / kg of body weight resulted in a 3-hour blood glucose lowering by 40% upon reaching the initial level

5 Stunden. Die Kontrolltiere zeigten eine Istündige Glukosesenkung um 30% mit Erreichen des Anfangsniveaus nach5 hours. The control animals showed a 1-hour glucose lowering by 30% with reaching the initial level

2,5 Stunden.2.5 hours.

Beispiel 4Example 4

11,4mg eines 55%igen Insulin-Polyglycin-Komplexes und 300mg Lauroylleucin wurden in Analogie zu Beispiel 1 dem •Suppositorienonsatz so zugesetzt, daß Suppositorien mit einer Dosierung von 10IE Insulin erhalten wurden11.4 mg of a 55% insulin-polyglycine complex and 300 mg of lauroylleucine were added to the suppository formulation in analogy to Example 1 in such a way that suppositories were obtained with a dosage of 10 IU insulin

Nach Applikation, bei einer Insulindosierung von 2,5IE/kg Körpergewicht, zeigten die Versuchstiere eine 4stündigo Bluiglukosesenkunp um 50% mit Erreichen des Anfangsniveaus nach 7 Stunden. Im Kontrollversuch ergab sich eine 45%ige Blutglukosesenkung über 2 Stunden mit dem Erreichen des Ausgangswertes nach 4 Stunden. After administration, with an insulin dosage of 2.5 IU / kg body weight, the experimental animals showed a 4-hour reduction in blood glucose by 50% when reaching the initial level after 7 hours. In the control experiment, there was a 45% blood glucose reduction over 2 hours after reaching the initial value after 4 hours.

Beispiel 5Example 5

Zur Hurstellung eines 55%igen Insulin-Polylysin-Komplexes wurden 450mg Polylysin (M = 4000) in 20ml destilliertem Wasser gelöst und der Lösung 560mg Insulin zugegeben. Es wurde noch 30 Minuten gerührt und anschließend gefriergetrocknet. Der Ins'jlingehalt des Komplexes wurde durch die Aminosäureanalyse bestätigt. 11,4 mg des so erhaltenen Komplexes wurden zusammmen mit 300mg Lauroylleucin dem Gießansatz zugesetzt und wie unter Beispiel 1 aufgearbeitet. Bei einer Insulindosierung von 2,5 ΙΕ/kg Körpergewicht zeigten die Versuchstiere eine 60%ige Blutglukosesenkung über 3 Stunden, wobei das Ausgangsniveau nach 6 Stunden wieder erreicht wurde. Der Kontrollversuch ist unter Beispiel 4 ausgewien.-n.To hurl a 55% insulin-polylysine complex, 450 mg polylysine (M = 4000) was dissolved in 20 ml distilled water and 560 mg insulin was added to the solution. It was stirred for a further 30 minutes and then freeze-dried. The inslethal content of the complex was confirmed by amino acid analysis. 11.4 mg of the complex thus obtained were added together with 300 mg of lauroylleucine to the casting batch and worked up as in Example 1. At an insulin dosage of 2.5 ΙΕ / kg body weight, the test animals showed a 60% blood glucose reduction over 3 hours, the initial level after 6 hours was reached again. The control experiment is selected under Example 4-n.

Beispiel βExample β

Durch Suspendieren von 75mg Polyglycin (M = 4000) in 2,5ml 85%igor Ameisensäure und Hinzugeben von 0,7ml InsulinlösungSuspend 75 mg polyglycine (M = 4000) in 2.5 ml 85% formic acid and add 0.7 ml insulin solution

(250mg/ml 85%lger Ameisensäure) wurde ein 70%iger Insulin-Polyglycin-Komplex erhalten. 8,9 mg dieses Komplexes wurdendem Gießansatz wie im Beispiel zugesetzt und Suppositorien mit einer Insulindosierung von 2,5 ΙΕ/kg hergestellt, die acht(250 mg / ml 85% formic acid), a 70% insulin-polyglycine complex was obtained. 8.9 mg of this complex was added to the casting mix as in the example and suppositories were prepared with an insulin dosage of 2.5 ΙΕ / kg, the eight

männlichen Kaninchen appliziert wurden. Es ergab sich keine Verbesserung des Blutglukosesenkungsprofiles im Vergleich zurmale rabbits were administered. There was no improvement in the blood glucose reduction profile compared to

Kontrollgruppe.Control group.

Claims (2)

1. Verfahre'· zur Herstellung von aktivitätsstabilisierten, wirkungsverlängerten, rektal applizierbaren lnsu'!;ipräparationen aus Komplexen zwischen Insulin und Polyaminosäuren, insbesondere Poiyglycin oder Polylysin mit mittleren Molmassen von 2000-4000 und Gelatine oder Agar als Suppositoriengrundlage und Resorptionsvermittler, dadurch gekennzeichnet, daß die Polyaminosäure mit einem Insulinanteil von 50-60% und als Resorptionsvermittler Stearoyl-, Pajmitoyl- oder Lauroylaminosäuren verwendet werden.For the preparation of activity-stabilized, effect-prolonged, rectally administrable preparations of complexes between insulin and polyamino acids, in particular polyglycine or polylysine having average molecular weights of 2000-4000 and gelatin or agar as suppository base and absorption mediator, characterized in that the polyamino acid with an insulin content of 50-60% and be used as a resorption promoter stearoyl, pajmitoyl or Lauroylaminosäuren. 2. Verfahren nach Anspruch 1, gekennzeichnet dadurch, daß 1-5% des Resorptionsvermittlers, bezogen auf die Gesamtsuppositorienmasse, eingesetzt werden.2. The method according to claim 1, characterized in that 1-5% of the absorption promoter, based on the total suppository mass, are used. Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von insulinhaltigen Suppositorien für die Diabetestherapie mit verbesserten pharmakologischen Eigenschaften.The invention relates to a process for the preparation of insulin-containing suppositories for diabetes therapy with improved pharmacological properties. Charakterisierung des bekannten Standes der TechnikCharacterization of the known prior art In der Patentschrift DD 257197 wird ein Verfahren zur Herstellung von immobolisierten, in ihrer biologischen Aktivität stabilisierten und in ihren pharmakologischen Eigenschaften modifizierten Insulinpräparationen beschrieben, deren wesentliches Merkmal die Komplexierung des Hormons mit Polyaminosäuren ist und sich für eine parenteral Anwendung eignet. Für den Einsatz dieser Insulin-Polyaminosäurekomplexe für rektal applizierbare Insulinpräparationen sind dabeiThe patent DD 257197 describes a process for the production of immobilized, in their biological activity stabilized and modified in their pharmacological properties insulin preparations whose essential feature is the complexation of the hormone with polyamino acids and is suitable for parenteral administration. For the use of these insulin-polyamino acid complexes for rectally administrable insulin preparations are there zusätzliche, dieser Anwendungsform speziell angepaßte und nicht ohne weiteres erkennbare Voraussetzungen notwendig.additional, this application form specially adapted and not readily apparent prerequisites necessary. Ziel der ErfindungObject of the invention Ziel der Erfindung ist es, ein Herstellungsverfahren zu entwickeln, das es ermöglicht, speziell rektal applizierbare Insulinpräparationen mit verbesserten pharmakologischen Eigenschaften zu gewinnen.The aim of the invention is to develop a production process which makes it possible to obtain especially rectally administrable insulin preparations with improved pharmacological properties. Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention Aufgabe der Erfindung ist es, ein Verfahren zur Herstellung von rektal applizierbarrn Insulinpräparationen mit aktivitätsstabilisierten und wirkungsverlängerten Eigenschaften zu entwickeln. Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß Insulin-Polyaminosäurekomplexe mit einem Insulingehalt von 50-60% und einer mittleren Molmasse der Polyaminosäuren Poiyglycin oder Polylysin von 2000-4000 zur Anwendung gelangen, der jeweilige Komplex in einem hydrophilen, zur Wasseraufnahme befähigten Gel, wie z.B. Gelatine oder Agar unter Aufrechterlialtung neutraler pH-Werte dispergiert und dabei ein Mengenverhältnis eingehalten wird, das pro Suppositorium Dosen S2.5IE Insulin/kg Körpergewicht gewährleistet sind. Gleichzeitig wird dem Gesamtansatz der Suppositoriengrundlage 1-5% eines Resorptionsvermittlers, insbesondere durch höhere Fettsäuren acylierte Aminosäuren, wie z. B. Stearoyl-, Palmitoyl- oder Lauroylaminosäuren zugesetzt.The object of the invention is to develop a process for the preparation of rectally administrable insulin preparations with activity-stabilized and effect-prolonged properties. According to the invention, the object is achieved by using insulin-polyamino acid complexes having an insulin content of 50-60% and an average molar mass of the polyamino acids polyglycine or polylysine of 2000-4000, the respective complex being in a hydrophilic, water-receptive gel, e.g. Gelatin or agar while maintaining neutral pH values are dispersed while maintaining a quantitative ratio, which ensures per dose suppositories S2.5IE insulin / kg body weight. At the same time the overall approach of the suppository base 1-5% of a resorption mediator, in particular by higher fatty acids acylated amino acids such. B. stearoyl, palmitoyl or Lauroylaminosäuren added. Überraschend wurde dabei gefunden, daß nur innerhalb eines engen Bereiches der Variablen Beladungsgrad des Komplexes und der Konzentration des Resoroptionsvermittlers sich durch den Immobilisierungs- und Stabilisierungseffekt des Komplexes gegenüber Suppositorien mit gleicher Rezeptur, jedoch mit freiem, nicht komplexiertem Insulin erhebliche Dosiseinsparung bzw. Wirkungsverlängert ngen erzielen lassen. Dabei ist es charakteristisch für das Verfahren, daß sich die pharmakologischen Vorteile nur in der speziellen Kombination der beanspruchten Zusammensetzung erreicht werden und dadurch eine rektale, den speziellen klinischen Bedürfnissen der Diabetiker angepaßte Insulinapplikation ermöglicht wird.Surprisingly, it has been found that only within a narrow range of the variable loading level of the complex and the concentration of resoroption mediator achieved by the immobilization and stabilization effect of the complex compared to suppositories with the same recipe, but with free, not complexed insulin considerable dose saving or extended Wirkgenängert to let. It is characteristic of the process that the pharmacological benefits are achieved only in the specific combination of the claimed composition and thereby a rectal, adapted to the specific clinical needs of diabetics insulin application is possible. AusführungsbeispleleAusführungsbeisplele Beispiel 1example 1 Zur Herstellung der Insulin-Polyglycin-Komplexe werden 1,9g Poiyglycin (M = 4000) in 57ml 85%iger Ameisensäure bei 25⁰C suspendiert und 0,4ml Insulinlösung (250mg/ml 85%iger Ameisensäure) zugegeben. Nach 3üminütigem Rühren wird der Komplex unter weiterem Rühren mit 380ml absolutem Ether gefällt. Noch Absaugen des Komplexes wäscht man 5x mit 50ml sbiolutom Ether und trocknet im Vakuum über P₂O₅ bei 1 Torr und 20°C bis zur Gewichtskonstanz. Die auf diese Weise hergestellten Insulin-Polyglycin-Komplexe enthalten laut Aminosäureanalyse 5% Insulin. Zur Herstellung der insulinhaltigen Suppositorien wurde ein Gemisch von 7,5g Glycerol sowie 8,9g Citrat-Phosphat-Puffer (pH 7,5) vorgelegt, 9g Gelatine eingerührt und 1 h bei Raumtemperatur zum Quellen stehen gelassen. Anschließend wird bei 60^cC innerhalb von 30 Minuten homogenisiert, der Gewichtsverlust durch destilliertes Wasser ergänzt und auf 40°C abgekühlt. Der Ansatz wird mit 1,5g Lauroyllßucin homogen vermischt und 62,5mg des Insulin-Polyglycin-Komplexes der Siebfraktion 0-160pm in 3ml Citrat-Phosphat-Puffer untergerührt und anschließend zu Suppositorien vergossen. A cht männlichen Kaninchen von etwa 4 kg Körpermasse, gleicher Rasse, wurden die Suppositorien so appliziert, daß jedes Versuchstier eine Insulindosis von 1,2 IE/kgFor the preparation of insulin-polyglycine complexes 1.9g Poiyglycin (M = 4000) in 57 ml 85% formic acid at 25 ⁰ C (ml 85% formic acid 250mg /) are suspended and 0.4 ml of insulin solution were added. After stirring for 3 minutes, the complex is precipitated with further stirring with 380 ml of absolute ether. Still aspirate the complex is washed 5x with 50ml sbiolutom ether and dried in vacuo over P ₂ O ₅ at 1 Torr and 20 ° C to constant weight. The insulin-polyglycine complexes prepared in this way contain 5% insulin according to amino acid analysis. To prepare the insulin-containing suppositories, a mixture of 7.5 g of glycerol and 8.9 g of citrate-phosphate buffer (pH 7.5) was introduced, 9 g of gelatin were stirred in and allowed to stand for 1 h at room temperature to swell. The mixture is then homogenized at 60 ^c C within 30 minutes, the weight loss added by distilled water and cooled to 40 ° C. The mixture is homogeneously mixed with 1.5 g Lauroyllßucin and stirred under 62.5 mg of the insulin-polyglycine complex of the sieve fraction 0-160pm in 3 ml citrate-phosphate buffer and then poured into suppositories. In the case of male rabbits of about 4 kg body mass of the same breed, the suppositories were applied so that each test animal had an insulin dose of 1.2 IU / kg