DD158255A1 - Entschaeumer fuer fermentationsprozesse - Google Patents
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Abstract
Die Erfindung betrifft Entschaeumer fuer Fermentationsprozesse, bei denen Mikroorganismen oder ihre Stoffwechselprodukte als Nahrungsmittel, insbesondere fuer d. menschliche Ernaehrung, genutzt werden. Es ist d. Ziel der Erfindung, durch Schaumbildung verursachte Stoerungen im Fermentationsprozess zu verhindern, sowie Flotationserscheinungen und Inhomogenitaeten des Fermentationsmediums auszuschalten. Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, durch Einsatz von Substanzen, die auf Mikroorganismen nicht nachteilig wirken, eine Langzeitwirkung im Fermentationsprozess besitzen und bei der Applikation der Fermentationsprodukte unbedenklich sind, das Schaumbildungsvermoegen zu reduzieren. Erfindungsgemaess wird die Aufgabe so geloest, dass als Entschaeumer eine waessrige oder unter Verwendung anderer mit Wasser mischbarer organischer Loesungsmittel hergestellte Loesung eines Mischpolymerisates eingesetzt wird, wobei es sich um Mischpolymerisate von zyklischen Acetalen der Paare 1,4 Butylenglykolformal/Diethylenglykolformal, 1,4 Butylenglykolformal/Ethylenglykolformal, 1,5 Pentamethylenglykolformal/Diethylenglykolforma u. 1,5 Pentamethylenglykolformal/Ethylenglykolformal, die durch die modifizierbare Struktur dem jeweiligen Fermentationssystem angepasst in Konzentrationen von 5 bis 20 mg/kg Medium entschaeumend wirken und sowohl fuer aerobe als auch anaerobe Fermentationen verwendet werden koennen handelt.
Description
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Titel
Entschäumer für Fermentationsprozesse
Die vorliegende Erfindung betrifft Entschäumer für Prozesse der Submerszüchtung von Mikroorganismen* Besonders geeignet ist die vorliegende Erfindung für solche Fermentationsprozesse, bei denen die Mikroorganismen oder deren Stoffwechselprodukte als Nahrungsmittel, insbesondere für die menschliche Ernährung, verwendet werden. Sie kann in die IPK C 12 IT eingeordnet werden·
Es ist bekannt, daß bei nahezu allen "Verfahren zur Züchtung von Mikroorganismen eine Schaumbildung eintritt. Diese Schaumbildung ist besonders stark ausgeprägt, wenn das Nähr medium zur Züchtung von Mikroorganismen komplexe Bestandteile wie beispielsweise Maisquellwasser, Weizenkleie, Melasse oder andere Pflanzen oder Tierbestandteile in vorbehandelter oder unvorbehandelter Form enthält. Bei intensiven mikrobiologischen Prozessen, welche eine höh spezifische Belüftungsrate erfordern, um den notwendigen Stoffaustausch zwischen der Gasphase und der wäßrigen Phase zu erreichen, ist die Schaumbildung ebenfalls besonders sta ausgeprägt
Intensive Schaumbildung kann aber auch bei mikrobiologische Prozessen auftreten, die anaerob durchgeführt werden, aber merklich Gas, wie zum Beispiel COp, entwickeln.
Da diese Schaumbildung bekanntermaßen sich nachteilig auf die sichere Beherrschung und Durchführung des jeweiligen Fermentationsprozesses auswirkt, wurden zur Bekämpfung dieser Schaumbildung verschiedene Verfahren entwickelt. Beispielsweise werden Substanzen mit schaumzerstörender Wirkung dem Fermentationsmedium zugesetzt. So fügten J.M. MYSTROM und A.L. ALLEN; Biotechnology and Bioengineering Symposium Uo. 6; 1976, bei der Cellulasefermentation mittels Pilzen Polypropylenglykol mit einem Molekulargewicht von etwa 2000 als Ent-
10, schäumer zu.
Für die Schaumbekämpfung bei Fermentationsprozessen sind auch andere Tenside bzw. Tensidgemische sowie Fette und Öle mit schaumzerstörender Wirkung bekannt, beispielsweise Fettalkohole, Silikonöle, Pflanzenöle, Blockpolymerisate aus Ethylenoxid und Propylenoxid und deren Derivate (DE-OS 2723139). Die bisher bekannten Entschäumer haben jedoch den Nachteil, daß sie nicht als Beimengungen in Substanzen für die menschliche Nahrung geeignet sind und gleichzeitig in sehr geringer Konzentration schaumzerstörend wirken und gleichzeitig wirtschaftlich aus den Abwässern beseitigt werden können.
So wird beispielsweise Rapsöl oder Sonnenblumenöl als Entschäumer bei solchen Verfahren eingesetzt, wo mikrobielles Eiweiß oder mikrobielle Stoffwechselprodukte für die menschliche Nahrung verwendet werden. Diese Pflanzenöle hab.en jedoch den Nachteil, daß die schaumzerstörende Wirkung schwach ausgeprägt ist und daß somit große Mengen dieser Substanzen zur Schaumbekämpfung benötigt werden, ..welche bei den erforderlichen Konzentrationen zu technologischen Nachteilen im Fermentationsprozeß führen. So wird die Sedimentation der Biomasse, beispielsweise in Form von Pilzmycel, durch den emulgierten Entschäumer erschwert. Ebenfalls wird die Abtrennung von Stoffwechselprodukten, beispielsweise von Enzymen mittels Ultrafiltration, Dialyse oder Gelfiltration erschwert.
Silikonöle haben den Nachteil, daß sie die StoffÜbertragungseigenschaften des Fermentationsmediums verschlechtern. Alle diese Nachteile der bisher bekannten Mittel zur Schaumbekämpfung sind bekannt.
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Deshalb wurde ein Verfahren entwickelt, bei welchem völlig ohne Zugabe von schaumzerstörender Substanz unter der Voraussetzung fermentiert wird, daß der Fermentationstank nur teilweise beschickt wird (DE-OS 2734 290). Dieses Verfahren erfordert jedoch erhöhte Investkosten und ist somit ökonomisch unvorteilhaft*
Es sind auch verschiedene Vorrichtungen zur mechanischen Schaumbekämpfung bekannt. Beispielsweise dient ein als : Scherpaar ausgebildetes Stator-Rotor-Sy3tem (DD-PS 137942; DD-PS 137943), oder ein Rotor mit Hohlwelle (DE-OS 2719112) zur Bekämpfung des Schaumes. Diese Vorrichtungen zur mechanischen Schaumbekämpfung haben jedoch den Nachteil, daß sie nicht in allen Fermentoren einsetzbar sind und daß sie bei sehr starker Schaumentwicklung nicht in der Lage sind, den Schaum zu zerstören.
Das Ziel der Erfindung besteht darin, die durch Schaumbildung verursachten Störungen des Fermentationsprozesses sowie Schaden an Anlagenteilen unabhängig von der Art des KuI-tivierungsbehälters zu vermeiden, das Fermentorvolumen effektiv auszunutzen sowie Inhomogenitäten und Flotationserscheinungen des Fermentationsmediums auszuschalten, ohne das durch Art und Menge des schaumzerstörenden Mittels nachteilige Wirkungen in der Fermentation als auch bei der Weiterverarbeitung und Verwendung der Fermentationsprodukte entstehen.
Darlegung des
i
Wesens der Erfindung,
Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, durch Auswahl und Einsatz von Substanzen, die auf Mikroorganismen nicht nachteilig wirken, eine Langzeitwirkung im Fermentationsprozeß besitzen und bei der Applikation der Fermentationsprodukte unbedenklich sind, das Schaumbildungsvermögen zu reduzieren Erfindungsgemäß wird die Aufgabe so gelöst, daß überraschen' eine Substanzklasse gefunden wurde, die als Entschäumer bei
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sehr geringen Konzentrationen hohe Entschäumerwirkung besitzt und auch bei der Nachverarbeitung und der Verwendung des Fermentationsproduktes keine nachteilige Wirkung zeigt. Die chemische Struktur der erfindungsgemäß beschriebenen Substanzklasse gestattet den acidolytischen Abbau, was zur besonderen Erleichterung ihrer Beseitigung im Prozeßabwasser führt. Es handelt sich erfindungsgemäß um Polyformale, die durch ionische Polymerisation folgender Monomerenpaare zyklischer Pormale erhalten werden:
1,4 Butylenglykolformal/Diethylenglykolformal, 1,4 Butylenglykolformal/Ethylenglykolformal, 1,5 Pentamethylenglykolformal/Diethylenglykolformal und 1,5 Pentamethylenglykolformal/ Ethylenglykolformal♦ Die genannten Monomerenpaare stellen stets die Kombination einer hydrophoben mit einer hydrophilen Substanz dar, wodurch Mischpolymerisate in Abhängigkeit von der Monomerenzusammensetzung mit mehr oder weniger hydrophoben oder hydrophilen Eigenschaften in gradueller Abstufung erhalten werden, was zur optimalen Anpassung an das jeweilige Entschäumerproblem ausgenutzt wird.
Die erfindungsgemäß beanspruchten Polyformale mit Entschäumerwirkung weisen folgende allgemeine Strukturformel auf:
wobei gilt: R1 = OH
R2 = H, (CHg)1OH; i = 2-10, CH2-(CHOH)1-CH2OH; i = 1-4, C1H21+1CO; i = 1-30
η = 4;5 m = 1;2
k;l = % Anteile der Monomeren im statistisch alternierenden Mischpolymerisat ; k = 100-1 ρ = 2-10 000; Durchschnittspolymerisationsgrad
Die hohe Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Polyformale kommt insbesondere durch die den Entschäumereffekt auslösenden ge-
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ringen Einsatzmengen zum Aasdruck. In der Regel genügen 5 bis 10 mg Polyformal in 1 kg Fermentationsmedium, um Schaum wirkungsvoll zu zerstören oder in seiner Entwicklung stark zurückzudrängen·
Die Zugabe der genannten Entschäumer zum Fermentationsmedium erfolgt wegen der besseren Dosierung und Verteilung in gelbster oder emulgierter Form· Als Lösungsmittel dienen je nach der gewählten Polymerenzusammensetzung Wasser oder mit Y/asser mischbare organische Lösungsmittel, wie beispielsweise Ethanol· Vorteilhaft hat sich die separate Zugabe der Entscbäumerlösung nach Bedarf erwiesen, deren Steuerung dabei mittels bekannter Regeleinrichtungen für den Entachäu« Bierzusatz erfolgt,
In einem Rührfermentor mit 30 1 Gesamtvolumen und einem Durchmesser von 260 mm wird ein Pilz der Gattung Trametes versicolor diskontinuierlich unter sterilen Bedingungen wie folgt kultiviert: Die Durchmischung des Fermentationsmediums erfolgt mit einem Sechsblatt-Scheibenrührer von 90 mm Durchmesser· Zur Vermeidung einer Trombenbildung ist der Fermentor bewehrt· Die Ruh· rerdrehzahl wird auf 1200 Umdrehungen pro Minute eingestellt die Begasungsintensität über Bodenbegasung beträgt 1200 1 Luft/h; die Fermentorfüllmenge beträgt 14 kg· Die wäßrige Nährlösung setzt sich folgendermaßen zusammen: Ein Liter Lösung enthält:
1,04 | g | KH2PO4 | 7 | ,5 | mg | FeSO4 | . 7 | H2O |
0,42 | g | (NH4)H2PO4 | 3 | mg | MnSO4 | . H | 2° | |
2,0 | g | (HH4)2S04 | 3 | mg | ZnSO4 | . 7 | H2O | |
0,75 | g | MgSO4 .7E2O | 3 | mg | CoCl2 | |||
2,0 | g | Hefeextrakt | 1 | ,5 | mg | CuSO. | . 5 | H2O |
0,75 | g | peptischea Pepton | ||||||
30,0 | g | Rohzucker |
Die Beimpfung des Fermentationsmediums erfolgte in bekannter Weise mittels einer MyGelsuspension.
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Die Temperatur wird auf 30° C eingestellt, der pH-Wert auf 4,5· Die Messung des pH-Wertes erfolgt mittels dampfsterilisierter Glaselektrode, welche direkt im Permentor eingebaut ist. Die Konstanthaltung des pH-Wertes wird durch die geregelte Zugabe von 10 %igen wäßrigen Ammoniak gesichert. Die einsetzende Schaumbildung wird mit Hilfe eines Regelkreises bekämpft, der aus Leitfähigkeitselektroden zur Schaumsignalisierung und einer geeigneten Dosiervorrichtung zur Zugabe des Entschäumers besteht.
Als Entschäumer diente eine 1 %ige wäßrige Emulsion des erfindungsgemäßen Mischpolymerisates aus 60 Gew. % 1,4 Butylenglykolformal und 40 Gew. % Diethylenglykolformal mit einem Durchschnittsmolekulargewicht von 10 000, die als stabile Emulsion durch Einleiten von erhitztem Wasserdampf hergestellt wurde.
Nach Beendigung der Fermentation ließ sich die Biomasse in Form des Pilzmycels von der wäßrigen Phase durch einfache Filtration abtrennen. Insgesamt betrug der Verbrauch an 1 %iger Entschäumerlösung 9,5 ml, das entspricht einer Endkonzentration im Fermentationsmedium von 7,2 mg/1.
Für die Herstellung von Cellulase-Enzymlösung wird in einem 30 1 Rührfermentor der Pilzstamm Gliocladium sp. in 20 1 eines Uährmediums, das Cellulosepulver, alkalisch aufgeschlossenes Grünmehl und Nährsalze enthält über 5 Tage unter sterilen Bedingungen diskontinuierlich kultiviert. Am 2. und 3. Tag setzt starke Schaumbildung ein, die durch Elektroden unterhalb des Fermentordeckels signalisiert und durch automatische Zugabe von Entschäumer bekämpft wird. Als Entschäumer wird erfindungsgemäß eine 2 %ige Lösung in Ethanol/Wasser 1 : 1 eines Mischpolymerisates aus 55 Gew. % 1,4 Butylenglykolformal und 45 Gew. % Diethylenglykolformal mit einem Durchschnittsmolekulargewicht von 25 000 eingesetzt. Der Gesamtbedarf an diesem Entschäumer beträgt für den Ansatz 8 ml der 2 %igen Lösung, das entspricht einem Durchschnittsbedarf von 8 mg Entschäumer pro Liter Medium.
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Nach Abtrennung des Pilzmycels durch einfache Filtration, wurde ein cellulasehaltiges Kulturfiltrat gewonnen, das durch Ultrafiltration problemlos ohne nachteilige Wirkung auf die Enzymaktivität aufkonzentriert werden konnte.
In einem 40 1 Fermentor wurde ein Inokolum der Hefe Saccharomyces cerevisiae anaerob gezüchtet bis in den 20 1 Medium 4 g HTS/1 als Ausgangsmaterial für die diskontinuierliche aen be Züchtung der Hefe zur Verfügung standen.
Vor dem Beginn erfolgte eine 4stündige Belüftung. Anschließen* '"^ wurde stündlich eine um 10 % gesteigerte Menge an Nährlösung, beginnend mit 160 ml, zugegeben. Die Nährlösung enthielt 140 ; utilisierbare Kohlehydrate durch Melassezusatz und war durch Schwefelsäurezusatz auf pH 3 - 3,5 angesäuert worden. Die Fährlösung enthält anorganische Nährstoffe für 18 g HTS/1 sowie 100 mg Ammoniumstickstoff pro Liter. Die restliche Stickst off Versorgung erfolgt über die pH-Regelung mittels wäßrigem Ammoniak, Die diskontinuierliche Züchtung der Hefe wurde bei folgenden Bedingungen durchgeführt:
pH-Wert 4,5» ΡβπηβηΪ3Ϊίοη3ΐβπιρβΓΒΪμΓ 30° C; spezifische Begasung 30 - 50 1 Luft/kg . h; Rührerdrehzahl 1000 m"*1. Kontrolliert wurden außerdem Gelöst-Op~Konzentration und Etha- ) nolkonzentration im Medium. Nach 13 Stunden war die Biomassekonzentration auf 14,5 g HTS/kg angestiegen und die Fermentorfüllung betrug 24 kg.
Die während des Prozesses auftretende starke Schaumentwicklung wurde durch die im Beispiel 1 erläuterte Schaumsignalisierung und Vorrichtung zur Schaumbekämpfung auf ein bestimmtes unteres Niveau gehalten. Für die Schaumregulierung kam eine 1 %ige wäßrige Suspension eines Mischpolymerisates aus 45 Gew. % 1,4 Butylenglykolformal und 55 Gew. % Diethylenglykolformal mit einem Durchschnittsmolekulargewicht von 5000 zum Einsatz. Insgesamt wurden während der 13stündigen Kultivierung 16 ml der 1 %igen Entschäumerlösung verbraucht, damit betrug die wirksame Konzentration 7 - 8 mg Polyformal pro kg.
In einem für aerobe Fermentationen unter erhöhtem Druck geeignetem Rührreaktor von 10 1 Fassungsvermögen wurde die kontinuierliche Züchtung der Hefe Candida utilis auf der C-Quel-Ie Melasse/Ethanol ohne jegliche Schaumbildung bei hoher Raum-Zeit-Ausbeute unter den nachfolgend beschriebenen Bedingungen durchgeführt.
Bei einer Füllmasse von 6 kg wurde unter kontinuierlichen Fermentationsbedingungen bei einem Verdünnungsgrad von D = 0,3
—1 ο
10; b , einer Fermentationstemperatur von 32 C, einem pH-Wert von 4,5, einem Druck von 3,03 · 1Cr Pa, einer ständigen Begasung mit Luft, einer Gelöst-02-Konzentration von - 2 mg/kg Fermentationsmedium und unter ständigem Rühren wurde dem Fermentor eine Nährlösung folgender Zusammensetzung zugeführt:
15 4,3 g K2HPO4 5,0 g H3PO4 80 %±g 1,74 g MgSO4 0,09 g NaCl
Die aufgeführten Salze befanden sich zusammen mit der C-Quel-Ie in 1 Liter Nährlösung mit dem pH-Wert von 3,5. Der Anteil der C-Quelle im Liter betrug 137 g in Form eines Gemisches aus Melasse/Ethanol im Verhältnis 1 : 0,5· Die Stickstoffversorgung des Prozesses erfolgte ausschließlich durch die pH-Wert-Regelung mit wäßrigem Ammoniak der Konzentration 120 g NH-/1. Der wäßrige Ammoniak enthielt außerdem den erfindungsgemäß beanspruchten Entschäumer in Form von 1,6 g/l des wasserlöslichen Mischpolymerisates aus 60 Gew..% * Diethylenglykolformal und 40 Gew. % 1,4 Butylenglykolformal mit einem Durchschnittsmolekulargewicht von 6OOO. Bei der erzielten Produktivität von 25 g HTS/kg . h betrug der durchschnittliche spezifische Ammoniakverbrauch ca. 25 ml/kg . h, damit ergab sich als wirksame Entschäumerkonzentration 10 11 mg/kg Fermentationsmedium
Nach Separation der Hefezellen aus dem 82,5 g Trockenhefe enthaltenden Ablauf, liegt ein zellfreies Prozeßwasser vom pH-Wert 5 - 5»5 mit nahezu der genannten Menge Entschäumer pro Liter vor.
0,024 | ε | FeSO4 | . 7 | H2O |
0,036 | g | ZnSO4 | . 7 | H2O |
0,012 | g | CuSO4 | . 5 | H2O |
0,015 | g | MnSO4 | . 4 | H2O |
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Bei der Zuführung dieses Prozeßwassers in die Abwasseraufbereitung, kann durch Ansäuern auf einen pH-Wert von 2 bei 20 bis 30 C eine säurekatalysierte Spaltung des als Entschäumer eingesetzten Polyacetals in wenigen Minuten erreicht werden.
Die niedermolekularen Spaltprodukte wie Aldehyd und Diol können in der vorliegenden geringen Konzentration bekanntermaßen leicht in einer biologischen Abwasserreinigung abgebaut werden.
Claims (2)
1. Entschäumer für Fermentationsprozesse, bei denen die Mikroorganismen oder deren Stoffwechselprodukte insbesondere auch für die menschliche Ernährung genutzt
•5' werden, gekennzeichnet dadurch, daß eine wäßrige oder unter Verwendung anderer mit Wasser mischbarer organischer Lösungsmittel, beispielsweise Ethanol, hergestellte Lösung oder Emulsion eines Mischpolymerisates eingesetzt wird, wobei das Mischpolymerisat aus den Monomerenpaaren 1,4 Butylenglykolformal/Diethylengly-. kolformal, 1,4 Butylenglyko!formal/Ethylenglyko!formal, 1,5 Pentamethylenglykolformal/Diethylenglykolformal und 1,5 Pentamethylenglykolformal/Ethylenglykolformal in einem beliebigen Mischungsverhältnis jedoch vorzugsweise in einem solchen besteht, daß Wasserlöslichkeit gerade noch oder partiell vorhanden ist, einen mittleren Polymerisationsgrad von 2 bis 10000 besitzt und im Konzentrationsbereich von 5 bis 100mg/ pro kg Medium, bevorzugt 5 bis 20 mg pro kg Medium wirksam ist«
2· Entschäumer für Fermentationsprozesse nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß diese im Prozeßwasser durch Säurekatalyse in biologisch leicht abbaubare Spaltstücke überführt werden.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD22917481A DD158255A1 (de) | 1981-04-13 | 1981-04-13 | Entschaeumer fuer fermentationsprozesse |
Applications Claiming Priority (1)
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DD22917481A DD158255A1 (de) | 1981-04-13 | 1981-04-13 | Entschaeumer fuer fermentationsprozesse |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
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DD158255A1 true DD158255A1 (de) | 1983-01-05 |
Family
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Family Applications (1)
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DD22917481A DD158255A1 (de) | 1981-04-13 | 1981-04-13 | Entschaeumer fuer fermentationsprozesse |
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DD (1) | DD158255A1 (de) |
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1981
- 1981-04-13 DD DD22917481A patent/DD158255A1/de not_active IP Right Cessation
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