DD156706A5 - METHOD OF MANUFACTURING AN INHIBITOR FOR ANGIOTENSE CONVERTING ENZYME - Google Patents

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Herstellen eines Inhibitors fuer das Angiotensin umwandelnde Enzym mit antihypertensiver Wirkung zur Behandlung von Bluthochdruck. Ziel der Erfindung ist die Herstellung neuer Inhibitoren, die bei allen Patienten, unabhaengig von der Verabreichungsform und ohne Nebenwirkungen, zur Blutdrucksenkung angewandt werden koennen. Erfindungsgemaess werden als neue Inhibitoren Verbindungen der Formel I hergestellt, worin beispielsweise bedeuten: R Wasserstoff, Benzoyl, Cyclopentancarbonyl, tert.-Butyloxycarbonyl, Cyclopentancarbonyl-L-Iysyl u. a.; A Glycyl, Phenylalanyl, Tryptophyl u. a.; S ein mit den Resten A und Z in Thioesterbildung verknuepftes Schwefelatom, Z einen Rest II, worin R tief 1 und R tief 1' Wasserstoff oder ein Halogen, R tief 2 Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl, R tief 3 Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl, R tief 23 Wasserstoff oder Niederalkyl darstellen, sowie zahlreiche weitere Reste aehnlicher Konstitution.The invention relates to a method for producing an inhibitor of angiotensin converting enzyme having antihypertensive activity for the treatment of hypertension. The aim of the invention is the preparation of new inhibitors that can be used in all patients, regardless of the form of administration and without side effects, to lower blood pressure. According to the invention, compounds of the formula I are prepared as novel inhibitors, in which, for example: R is hydrogen, benzoyl, cyclopentanecarbonyl, tert-butyloxycarbonyl, cyclopentanecarbonyl-L-ysyl and the like. al .; A glycyl, phenylalanyl, tryptophyl u. al .; S is a sulfur atom linked to the radicals A and Z in thioester formation, Z is a radical II, in which R is 1 and R 1 'is hydrogen or halogen, R 2 is lower-valent hydrogen, lower-alkyl or trifluoromethyl, R 3 is lower-valent, lower-alkyl or trifluoromethyl, R deep 23 represent hydrogen or lower alkyl, as well as numerous other radicals of similar constitution.

Description

AP C 07 C/228 053/0 A- 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 A- 58 911/11

Herstellungsverfahren für einen Inhibitor für Angiotensin umwandelndes EnzymPreparation process for an inhibitor of angiotensin converting enzyme

Anvveηd_tun_rqsgebiet der ErfindungAnvveηd _t un _r qsgebiet the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Herstellen eines Inhibitors für das Angiotensin umwandelnde Enzym* Die erfindungsgemäß hergestellte Verbindung wird angewandt als Arzneimittel, insbesondere als anti~hypertensiv wirkendes Mittel zur Behandlung von Bluthochdruck«The invention relates to a process for preparing an inhibitor of the enzyme converting angiotensin. The compound prepared according to the invention is used as a medicament, in particular as an anti-hypertensive agent for the treatment of hypertension.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen Characteristic of the known technical solu tions

Das Angiotensin umwandelnde Enzym (eine im folgenden als ACE bezeichnete Peptidyldipeptidhydrolase) spielt in der Physiologie überhöhten Blutdrucks eine zentrale Rolle und ist in der Lage-, das die AminosäuresequenzThe angiotensin converting enzyme (a peptidyl dipeptide hydrolase, hereinafter referred to as ACE) plays a central role in the physiology of elevated blood pressure and is capable of producing the amino acid sequence

AspArgValTyrlleHisProPheHisLeuAspArgValTyrlleHisProPheHisLeu

besitzende Decapeptid Angiotensin I dadurch in ein Octapeptid, das Angiotensin II* überzufuhren* daß es die Hydrolyse der vorletzten Poptidbindung im Angiotensin I katalysiert und damit den endständigen Carbonsäurerest HisLou abspaltet«possessing decapeptide angiotensin I thereby into an octapeptide which transduces angiotensin II * * that it catalyzes the hydrolysis of penultimate poptide binding in angiotensin I, thus splitting off the terminal carboxylic acid residue HisLou. «

Es werden folgende Symbole für verschiedene Reste von Aminosäuren verwendet«The following symbols are used for different residues of amino acids «

AIa = L~Alanin Arg = L-Arginin Asp ü L-Asparaginsäure CGlu = Pyro-~L-glutaminsäureAla = L ~ alanine Arg = L-arginine Asp ü L-aspartic acid CGlu = pyro ~ L-glutamic acid

E- £. U U *J +J ^v 4,8,1981E £. UU * J + J ^v 4,8,1981

AP C 07 C/228 053/0 - 2 - 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 - 2 - 58 911/11

GIy = GlycinGly = glycine

Hip = Hippursäure (Benzoyl-glycin) His = L-Histidin He = L-Isoleucin Leu = L~Leucin Phe = L-Phenylalanin Pro - L~Prolin Δ Pro = L~3_t4*"Dehydroprolin Ser = L-Serin Trp = L-Tryptophan Tyr = L-Tyrosin VaI a L-ValinHip = hippuric acid (benzoylglycine) His = L-histidine He = L-isoleucine Leu = L ~ leucine Phe = L-phenylalanine Pro - L ~ proline Δ Pro = L ~ 3 _t 4 * "dehydroproline Ser = L-serine Trp = L-tryptophan Tyr = L-tyrosine VaI a L-valine

Weiter werden folgende Symbole verwendet:Furthermore the following symbols are used:

ACE = Angiotensin umwandelndes Enzym Hepes = N~2-Hydroxyäthylpiperazin-N'-2-äthan» sulfonssureACE = angiotensin converting enzyme Hepes = N ~ 2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethane sulfonic acid

Angiotensin II ist ein stark wirksamer Pressor, also ein den Blutdruck erhöhender Stoff, und wirkt nicht nur blut-» druckerhöhend _f sondern stimuliert auch die Ausschüttung von Aldosteron, das Retention extrazellulärer Salze und Flüssigkeiten bewirkt und damit den Blutdruck erhöht« Angiotensin II ist im Blut normaler Menschen in meßbarer Menge nachweisbar und findet sich im Blut von Patienten mit renaler Hypertension in erhöhter Konzentration«,Angiotensin II is a potent pressor, so a blood pressure-increasing substance, and is not only blood- "increase pressure _f but also stimulates the release of aldosterone, causes the retention of extracellular salt and fluids and blood pressure increases," angiotensin II in the blood detectable in measurable quantities and found in the blood of patients with renal hypertension in increased

Der Pegel der ACE-VVirkung ist in der Regel sowohl in normalen Manschen als auch in an überhöhten Blutdruck leidenden Menschen höher^als er zum Aufrechtorhalten der beobachteten Konzentration an Angiotensin II erforderlich ist _f jedoch wurde festgestellt, daß der Blutdruck von an überhöhtem Blutdruck leidendenThe level of ACE VVirkung is ^ higher in both normal Marx's as well as suffering from excessive blood pressure people usually when he is required to Aufrechtorhalten the observed concentration of angiotensin II _f However, it was found that the blood pressure of at excessive blood pressure sufferer

Patienten durch Behandlung mit ACE-Inhibitoren /Gavras, I., et al., New Engl. J. Med. 291, 817 (1974^7 beträchtlich verringert werden kann.Patients can be considerably reduced by treatment with ACE inhibitors / Gavras, I., et al., New Engl. J. Med. 291, 817 (1974).

* Die Rolle von ACE in der Pathogenese von überhöhtem Blutdruck hat dazu geführt solche Inhibitoren für dieses Enzym aufzufinden, welche antihypertensiv wirken können (vgl. beispielsweise die US-PSen 3 891 616, 3 947 575, 4 052 511 und 4 053 651. Die Reaktionsfähigkeit von ACE schwankt in Abhängigkeit vom Substrat beträchtlich. Zahlreiche als Inhibitoren für die enzymatische Umwandlung von Angiotensin I in Angiotensin II bezeichnete Peptide besitzen aber eine niedrigere Michaelis-Konstante (K ) als Angiotensin I und sind daher zutreffender als konkurrenzierende Substrate zu bezeichnen. * The role of ACE in the pathogenesis of excessive blood pressure has led to finding such inhibitors of this enzyme which may be antihypertensive (see, for example, U.S. Patents 3,891,616, 3,947,575, 4,052,511 and 4,053,651 The reactivity of ACE varies considerably depending on the substrate, but many peptides designated as angiotensin I enzyme inhibitors in angiotensin II have a lower Michaelis constant (K) than angiotensin I and are therefore more appropriately termed competitive substrates.

In der US-PS 3 832 337 sind zahlreiche synthetisch hergestellte Peptide beschrieben, welche als ACE-Inhibitoren wirken. Ein äußerst stark v/irksamer und bei oraler Verabreichung hohe biologische Wirkung entfaltender Inhibitor ist das in der US-PS 4 046 889 und von Cushman, D.W. et al., in Biochemistry 16, 5484 (1977), und von Ondetti, M. et al., in Science 196, 441 (1977) beschriebene und im folgenden als SQ14225 bezeichnete D-3-Mercapto- -2-methylpropanoyl-L-prolin. Der Inhibitor SQ14225 besitzt einenNo. 3,832,337 describes numerous synthetically produced peptides which act as ACE inhibitors. An inhibitor of high bioavailability and high bioavailability by oral administration is disclosed in U.S. Patent 4,046,889 and by Cushman, D.W. et al., in Biochemistry 16, 5484 (1977) and D-3-mercapto-2-methylpropanoyl-L described by Ondetti, M. et al., Science 196, 441 (1977) and hereinafter referred to as SQ14225 proline. The inhibitor SQ14225 has one

— 8 I₁- -Wert von 2,3 . 10 molar, welcher gemäß der oben genannten Literaturstelle von Cushman et al. jene Inhibitorkonzentration ist, welche das Enzym unter normierten Versuchsbedingungen zu 50 % inhibiert wenn bei dem Versuch eine wesentlich oberhalb K liegende Substratkonzentration aufrechterhalten wird. Die Lq" -Werte sind direkt miteinander vergleichbar wenn alle die Reaktion wesentlich beeinflußenden Faktoren konstant gehalten werden, zu welchen die Enzymquelle und ihre Reinheit, das eingesetzte Substrat und dessen Konzentration und die Zusammensetzung des bei dem Versuch verwendeten Puffers gehören. Alle im folgenden angegebenen I_r -Werte wurden mit dem gleichen Versuchssystem und dem gleichen Enzym (ACE aus menschlichein Urin) und mit einem etwa 1/2 K entsprechenden Substratpegel ermittelt und sind damit grundsätzlich vergleichbar.- 8 I ₁ value of 2.3. 10 molar, which according to the above-mentioned reference by Cushman et al. is that inhibitor concentration which inhibits the enzyme to 50% under normalized experimental conditions when the assay maintains a substrate concentration substantially above K. The Lq "values are directly comparable with each other, keeping constant all the factors substantially affecting the reaction, including the enzyme source and its purity, the substrate used and its concentration, and the composition of the buffer used in the experiment _r values were determined with the same experimental system and the same enzyme (human urine ACE) and with a substrate level corresponding to about 1/2 K, and are thus fundamentally comparable.

Der Wirkmodus von SQ14 225 wurde auf ein in Analogie zum besser bekannten verwandten Enzym Carboxypeptidase A beruhendes Modell des WirkungsZentrums des ACE gegründet. Das Wirkungszentrum soll voraussetzungsqemäß einen kationischen Bereich zum AbbindenThe mode of action of SQ14 225 was based on a model of the action center of ACE based on the better known related enzyme carboxypeptidase A. The activity center should, as required, be a cationic area for setting

der endständigen Carboxygruppe des Substrats und eine Tasche bzw. einen Spalt zum Abbinden der Seitenkette der C-terminellen Aminosäure und zum besonders festen Binden des heterozyklischen Rings eines termineilen Prolinrestes aufweisen. In gleicher Weise wurde eine Tasche oder ein Spalt für den vorletzten Aminosäurerest vorausgesetzt, wobei auf Grund von veröffentlichten Daten eine ziemlich strenge sterische Forderung nahegelegt wird, da die D-Form des Inhibitors wesentlich stärker wirksam war als dessen Stereoisomer oder dessen 3-Methyl-derivat oder desen unsubstituierte Analoga. Die im Inhibitor vorliegende Sulfhydrylgruppe, welche an den nahe dem katalytisch wirkenden Zentrum gelegenen aktiven Bereich gebunden sein dürfte, spielt mutmaßlich eine zentrale Rolle bei der Inaktivierung des Enzyms durch Verknüpfung mit dem bekanntermaßen für die katalytische Wirkung wesentlichen Zinkrest. Substituenten an der Sulfhydrylgruppe, beispielsweise eine Methylgruppe oder eine Acetylgruppe am S-Atom, verringern die Wirksamkeit des Inhibitors beträchtlich (vgl. Cushman, D.W., et al., Biochemistry, oben). .the terminal carboxy group of the substrate and a pocket or a gap for setting the side chain of the C-terminal amino acid and for particularly tight binding of the heterocyclic ring of a termine Prolinrestes have. Similarly, a pocket or gap for the penultimate amino acid residue was anticipated, suggesting a fairly stringent steric requirement based on published data, since the D-form of the inhibitor was much more potent than its stereoisomer or its 3-methyl derivative or their unsubstituted analogs. The sulfhydryl group present in the inhibitor, which is likely to be bound to the active region near the catalytic site, is thought to play a central role in inactivating the enzyme by linking to the zinc radical known to be catalytic. Substituents on the sulfhydryl group, for example a methyl group or an acetyl group on the S atom, significantly reduce the effectiveness of the inhibitor (see Cushman, D.W., et al., Biochemistry, supra). ,

In vitro durchgeführte Untersuchungen über den der Inhibierung des ACE durch SQ14225 und seinen Analoga zugrundeliegenden Wirkungsmechanismus wurden durch die Instabilität dieser Moleküle unter den Umgebungsbedingungen ziemlich gestört. Beispielsweise wurde beobachtet, daß eine frisch bereitete wässerige Lösung von SQ14225, welche beispielsweise 1 mg SQ14225 pro ml enthält, bei einem pH-Wert von etwa 8 beim Stehenlassen während 30 Minuten einen starken Wirkungsabfall zeigt und die Wirksamkeit dieser Lösung bei noch längerem Stehenlassen immer weiter abfällt. Es wird angenommen, daß dieser Verlust an Wirksamkeit hauptsächlich durch eine an den endständigen Sulfhydrylgruppen ablaufende Dimer isierung bedingt ist, im Zuge derselben ein als Inhibitor im wesentlichen unwirksames Disulfid entsteht. Da die freie Sulfhydrylgruppe äußerst reaktionsfähig ist und leicht zu polaren Säureresten wie einer Sulfongruppe oder einer SuIfoxidgruppe oxidiert werden kann, kann ein Grund für den in vitro beobachteten Wirkungsverlust von wässerigen Lösungen von SQ14225 beim Stehen zum Teil eine Folge einer solchen Oxydationsreaktion oder mehrerer solcher Oxydationsreaktionen sein, im Zuge derselben ein nicht als Inhibitor für ACE geeignetes SuIfon oder Suloxid entsteht.In vitro studies on the mechanism of action underlying the inhibition of ACE by SQ14225 and its analogs were quite disturbed by the instability of these molecules under ambient conditions. For example, it has been observed that a freshly prepared aqueous solution of SQ14225 containing, for example, 1 mg of SQ14225 per ml at pH about 8 when left to stand for 30 minutes shows a large decrease in efficacy and the efficacy of this solution continues on prolonged standing drops. It is believed that this loss of activity is mainly due to dimerization occurring at the terminal sulfhydryl groups, in the course of which a disulfide substantially ineffective as an inhibitor is formed. Since the free sulfhydryl group is highly reactive and can be easily oxidized to polar acid residues such as a sulfonic group or a sulfoxide group, one reason for the in vitro observed loss of aqueous solution of SQ14225 on standing may be due, in part, to such an oxidation reaction or several such oxidation reactions , in the course of which a suicide or suloxide which is not suitable as an inhibitor of ACE is formed.

:^ii^^: ^ Ii ^^

Derzeit für SQ14225 zur Verfugung stehende Versuchsberichte, in einigen derselben diese Verbindung als "Captopril" bezeichnet ist, besagen, daß diese Verbindung im normalen Magen- und Darmtrakt der meisten Patienten hinreichend stabil ist und bei oraler Verabreichung ein gut wirksamer Inhibitor für ACE ist. Es ist jedoch noch nicht klar ob es nicht doch Patienten gibt, bei welchen SQ14225 im wesentlichen unwirksam bleibt. Wegen der höhten Reaktionsfähigkeit der freien SuIfhydrylgruppen in SQ14225 kann diese Verbindung mit Serum- und Zellproteinen oder -peptiden oder mit anderen eine freie Sulfhydrylgruppe aufweisenden Substanzen im Magen- oder Darmkanal gemischte Disulfide zusätzlich zu Dimeren durch oxydativen Abbau bilden. Ein gemischtes Disulfid mit einem Protein kann ein Antigen darstellen und es wurden auch schon gelegentlich klinisch allergische Reaktionen beobachtet (vgl. Gavras, et al., Nev/ England J. Med. 298, 991 (1978)). Allenfalls entstandene Disulfide und Oxydationsprodukte von SQ14225 können bestenfalls nur als Inhibitoren weitgehend unwirksame Stoffe darstellen. Dementsprechend kann angenommen werden, daß bei Verabreichung von SQ14225 das Ansprechen einzelner Patienten auf die verabreichte Dosis von der Verabreichungsart und vorn jeweiligen Patienten abhängig ist. Darüber hinaus können in zumindest einigen Patienten unerwünschte Nebeneffekte auftreten, wobei es auch schwierig sein kann im Körper eine hinreichend wirksame Inhibitorkonzentration aufrechtzuerhalten.Current SQ14225 available experimental reports, in some of which this compound is termed "captopril", indicate that this compound is sufficiently stable in the normal gastrointestinal tract of most patients and is a potent inhibitor of ACE when administered orally. However, it is still unclear whether there are still patients in which SQ14225 remains essentially ineffective. Because of the increased reactivity of the free sulfhydryl groups in SQ14225, this compound can form mixed disulfides in addition to dimers by oxidative degradation with serum and cell proteins or peptides or with other substances having a free sulfhydryl group in the gastric or intestinal tract. A mixed disulfide with a protein can be an antigen and occasionally clinically allergic reactions have been observed (see Gavras, et al., Nev / England J. Med. 298, 991 (1978)). At best, disulfides and oxidation products of SQ14225 formed at best only as inhibitors largely ineffective substances. Accordingly, it can be assumed that when SQ14225 is administered, the response of individual patients to the dose administered will depend on the mode of administration and the particular patient. In addition, undesirable side effects may occur in at least some patients, and it may also be difficult to maintain a sufficiently effective inhibitor concentration in the body.

Thioester werden allgemein als stark reaktionsfähig bezeichnet, da die Thioestergruppe leicht in einen SuIfhydrylrest und in einen Carbonsäurerest gespalten wird. Thioester werden deshalb häufig als Zwischenprodukt für das Acylieren unter milden Bedingungen eingesetzt. Solche Gruppen wie beispielsweise die Acetylthiogruppe wurden deshalb auch gemäß den US-PSen 3 832 und 4 046 889 als Schutzgruppen vorgesehen. Es wird weiters angenommen, daß Thioester auch als Zwischenprodukte bei der Biosynthese cyclischer Peptide wie Tyrocidin oder Gramicidin S /vgl. Lipmann, F. in Accounts Chem. Res. 6, 361 (197 3YJ auftreten.Thioesters are generally referred to as highly reactive because the thioester group is readily cleaved to a sulfhydryl residue and a carboxylic acid residue. Thioesters are therefore often used as an intermediate for the acylation under mild conditions. Such groups as, for example, the acetylthio group have therefore also been provided as protective groups according to US Pat. Nos. 3,832 and 4,046,889. It is further believed that thioesters may also be used as intermediates in the biosynthesis of cyclic peptides such as tyrocidine or gramicidin S / cf. Lipmann, F. in Accounts Chem. Res. 6, 361 (197 3 YJ) .

Dem SQ14225 verwandte Verbindungen sind in den US-PSen 4 046 889, 4 052 511, 4 053 651, 4 113 715 und 4 154 840 beschrieben, wobei jene Analoga von SQ14225 von besonderem Interesse sind, in welchen der fünfgliedrige heterocyclische Ring des Prolins durchCompounds related to SQ14225 are described in U.S. Patent Nos. 4,046,889, 4,052,511, 4,053,651, 4,113,715 and 4,154,840, of which those analogs of SQ14225 are of particular interest, in which the five-membered heterocyclic ring of the proline is

AP C 07 C/228 053/0 - 6 - 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 - 6 - 58 911/11

einen viergliedrigen oder sechsgliedrigen Ring ersetzt ist. Die Inhibitorwirkung solcher Analoga ist nicht mit jener des SQ14225 verglichen« Es ist weiterhin berichtet worden, daß beim Austausch des L~Prolinrestes gegen den D-Prolin« rest die Inhibitorwirkung von 3-Mercaptopropanoyl-aminosäuren (Cushman, D_e IV«,, et al«, oben) drastisch verringert wird.a four-membered or six-membered ring is replaced. The inhibitory effect of such analogues is not compared with that of SQ14225. It has also been reported that in replacing the L-proline residue with the D-proline residue, the inhibitory effect of 3-mercaptopropanoyl-amino acids (Cushman, D _e IV, et al, above) is drastically reduced.

Bis zum derzeitigen Zeitpunkt ist der Einfluß der links vom Schwefelatom in Thioesterverbindungen stehenden Aminosäure noch nicht bestimmt worden« Es wird angenommen, daß diese Aminosäure als zusätzliche Erkennungsstelle für das Enzym wirkte Falls dies zutrifft» wäre zu erwarten, daß eine an dieser Stelle einen Aminosäurerest aufweisende Verbindung einen besseren Inhibitor darstellt«To date, the influence of the amino acids to the left of the sulfur atom in thioester compounds has not yet been determined. It is believed that this amino acid acts as an additional recognition site for the enzyme. If so, one would expect to have an amino acid residue at this site Compound is a better inhibitor «

Zxelder Erfindung Zxelder invention

Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines neuen Inhibitors für Angiotensin umwandelndes Enzym mit anti»- hypertensiver Wirkung, der ohne Ausnahme für alle Patienten unabhängig von der Verabreichungsform und ohne irgendwelche Nebenwirkungen zu veranlassen* für die Behandlung von Blut~ hochdruck angewandt werden kann,The object of the invention is to provide a novel inhibitor of angiotensin converting enzyme having antihypertensive activity which can be applied without exception to all patients irrespective of the form of administration and without causing any side effects for the treatment of high blood pressure.

Darlequnq des Wesens der ErfindungLoan of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde_s neue Verbindungen, die als Inhibitoren für Angiotensin umwandelndes Enzym ge~ eignet sind,, und Verfahren zu ihrer Herstellung aufzufinden*The object underlying the invention is _s new compounds which are useful as inhibitors of angiotensin converting enzyme ge ~ ,, and processes for their preparation locate *

ίώί^ν^ίώί ^ ν ^

AP C 07- C/228 053/Ü £-. 58 911/11AP C 07- C / 228 053 / Ü £ -. 58 911/11

Die Patentinhaberin hat gefunden, daß verschiedenste Aminosäuren wirksam sind und daß Hydroxyproline, Prolin, L- und D,L«3,4-Dehydroprolin, Thiazolidin~4-carbonsäure und L-S-Oxo-prolin^derivate durchivegs antihypertensiv wirkende Stoffe mit hoher Inhibitorwirkung für ACE ergeben»The patentee has found that various amino acids are effective and that hydroxyproline, proline, L- and D, L "3,4-dehydroproline, thiazolidine ~ 4-carboxylic acid and LS-oxo-proline derivatives by means of anti-hypertensive substances with high inhibitory activity for ACE result »

Die erfindungsgemäß herstellbaren neuen Inhibitoren des ACE entsprechen der allgemeinen FormelThe novel inhibitors of ACE which can be prepared according to the invention correspond to the general formula

R-A- S-Z (I)_t RA-SZ (I) _t

in welcherin which

R Wasserstoff, Formyl-, Acetyl-, Propanoyl-, ßutanoyl«, Phenylacetyl«, Phenylpropanoyl«, Benzoyl«^ Cyclopentane carbonyl-, tert«-Butyloxycarbonyl-, Cyclopentancarbonyl-L-lysyl, Pyro-L-glutamyl-L-lysyl-, L«-Arginyl"i L-Lysyl- oder Pyro~=L~glutamyldarstellt, R is hydrogen, formyl, acetyl, propanoyl, butanoyl, phenylacetyl, phenylpropanoyl, benzoyl, cyclopentane carbonyl, tert-butyloxycarbonyl, cyclopentanecarbonyl-L-lysyl, pyro-L-glutamyl-L-lysyl , L "-arginyl" i represents L-lysyl- or pyro ~ = L-glutamyl ,

A Prolin, 3,4-Dehydroprolin_f o4«Methyl-prolin_t Thiazolidin-4-carbonsäuresi Cycloleucin, Pyroglutaminsäure, l-Amino-Ί-cy el op rop a ncarbon sä u rc _f i~AminO"l->cyclobutancarbonsäure, l-AminO'-l-cyclohexan-carbonsäure, ein durch Halogen oder die Hydroxygruppe substituiertes Prolin_s Phenylglycin* ß-Bsnzylasparaginsäure_£ <>-Benzylglutaminsäure_£ S-Benzyl~ cystein» O-ßsnzyl-serin, O-Benzyl-tyrosin _s O«Benzyl~ threonin, ß'-Phanyl-soritii Thyronin, ß-2-.Thienylserin, ß-2-Tfionylalaninj; £< «Möthyl~histidin_t <* ~Mathyl~tyrosin_f c-C-Msthyl-phs-nylalanin, U.-MethyI-1ryptophan ₉ durch Halogen, die Nitrogruppe, Metho.xygruppe oder die Hydroxygruppe substituiertes Tyrosin, durch Halogen, dio Nitrogruppe, Aminogruppe oderA proline, 3,4-dehydroproline _f o4 'methylene-proline _t thiazolidine-4-carbonsäuresi cycloleucine, pyroglutamic acid, l-amino-Ί-cy el op rop a ncarbon sä u rc _f i ~ amino "l-> cyclobutane carboxylic acid, l -AminO'-l-cyclohexane carboxylic acid, substituted by halogen or hydroxy proline _s phenylglycine * ß-Bsnzylasparaginsäure _£ <> - benzylglutamic _£ S-benzyl cysteine ~ »O-ßsnzyl-serine, O-benzyl-tyrosine O _s' Benzyl-threonine, β-phanyl-soritii thyronin, β-2-thienylserine, β-2-tfionylalanine; £ < "methyl-histidine _t " * mathyl-tyrosine _f cC-methyl-n-nylalanine, U. MethyI-1ryptophan ₉ by halogen, the nitro group, methoxy or hydroxy-substituted tyrosine, by halogen, dio nitro group, amino group or

Methoxygruppe substituiertes Phenylalanin, durch Fluor, Methyl oder Methoxy substituiertes Tryptophan , Methionin, Cystein, Arginin, <λ)-Nitro-arginin, Lysin, Ornithin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, Homocystein, Penicillamin, Norleucin, Serin, ß-Alanin, Äthionin, Homoserin, Isoserin, Norvalin, Threonin, o^-Amino-buttersäure, oi-Amino-isobuttersäure, ß-Cyclohexanylalanin, O-Phosphothreonin, S-Äthyl-cystein, Vinylglycin, das pi-Methyl-derivat von Valin, Leucin, Isoleucin, Cystein, Methionin, Threonin, Asparaginsäure, Glutaminsäure, Asparagin, Glutamin, Lysin oder Arginin oder Phenylalanyl, Glycyl, Alanyl, Tryptophyl, Tryosyl, Isoleucyl, Leucyl, Histidyl oder Valyl darstellt und die ©(-Aminogruppe oder Iminogruppe dieser Reste oder die ß-Aminogruppe des ß-Alanins relativ zu R in Amid- oder Imidbindung vorliegt und die Carboxygruppe dieser Reste mit dem S-Atom in Thioesterbindung vorliegt,Methoxy substituted phenylalanine, fluoro, methyl or methoxy substituted tryptophan, methionine, cysteine, arginine, <λ) -nitro-arginine, lysine, ornithine, aspartic acid, asparagine, glutamic acid, glutamine, homocysteine, penicillamine, norleucine, serine, β-alanine , Ethionine, homoserine, isoserine, norvaline, threonine, α'-amino-butyric acid, α-amino-isobutyric acid, β-cyclohexanyl-alanine, O-phosphothreonine, S-ethyl-cysteine, vinyl glycine, the pi-methyl derivative of valine, leucine , Isoleucine, cysteine, methionine, threonine, aspartic acid, glutamic acid, asparagine, glutamine, lysine or arginine or phenylalanyl, glycyl, alanyl, tryptophyl, tryosyl, isoleucyl, leucyl, histidyl or valyl and the © (amino or imino group of these radicals or the β-amino group of the β-alanine is present in the amide or imide bond relative to R and the carboxy group of these radicals is in thioester bond with the S atom;

S ein mit den Resten A und Z in Thioesterbindung verknüpftes Schwefelatom bedeutet undS is a sulfur atom linked to the radicals A and Z in thioester bond and

Z für einen der ResteZ for one of the radicals

χ· χ ·

(CH)(CH)

R.,R.,

- CH - C -- CH - C -

(CH₂)₂ (CH ₂ ) ₂

XOORXOOR

2323

(II),(II)

-(CH) ¹V,- (CH) ¹ V,

CHCH

Rrrr

IlIl

C - NH - N - CH - COORC - NH - N - CH - COOR

/ I/ I

CH₂-(CH)CH ₂ - (CH)

2323

(III),(III)

.;j.Äi..-Ä-i:i^:;£^:,oää^^. j.Äi ..- Ä-i: ^{i:; £:,} oää ^^

11 *11 *

(CH) - CH - C - N - CH - COOR. m _χ (CH 2) - CH - C - N - CH - COOR. m _χ

(R₂₅)₂ (R ₂₅ ) ₂

2323

(IV)₁ (IV) ₁

R-R-

-N-R-NO

(CH₀) -CH --C-N- CH- COOR(CH ₀ ) -CH - CN-CH-COOR

I'm ^R10 I'm ^R 10

^R8 ^R9 ^R 8 ^R 9

X-RX-R

1111

-(CH₀) - CH - C- (CH ₀ ) - CH - C

(CH₂)_p (CH ₂ ) _p

-N-CH- COOR-N-CH-COOR

1212

(VI),(VI)

2805328053

- CH I Rr- CH I Rr

Il cIl c

VcVc

N-CH- COOH I IN-CH-COOH I I

R₁₃ ^R1A (VII),R ₁₃ ^R 1A (VII),

<< CC -- HH 7C7C (CH)_v (CH) _v -CH--CH- C-N-C-N CH - CORCH - COR II \\ CH₂-CH ₂ - ^R15 ^R 15 ^R16 ^R 16

17 (VIII),17 (VIII),

2020

-CH_n -CH-C-N-C- COOH-CH _n -CH-CNC-COOH

1818

₂₁ (IX), ₂₁ (IX),

IlIl

-CK-C-R-CK-C-R

26 (X), oder26 (X), or

'22'22

-CH₀ - CH - S - N - CH - COOR₉O (XI),-CH ₀ -CH-S-N-CH-COOR ₉ O (XI),

² I Il / I ² I II / I

R₁₀ 0 CH₂-(CH₂)₂ R ₁₀ 0 CH ₂ - (CH ₂ ) ₂

steht und in den obigen Formeln II bis XIand in the above formulas II to XI

R. Wasserstoff oder Halogen bedeutet, R₁' Wasserstoff oder Halogen darstellt,R. is hydrogen or halogen, R ₁ 'is hydrogen or halogen,

R„ Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl ist,R "is hydrogen, lower alkyl or trifluoromethyl,

R^ Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl mit der Maßgabe bedeutet, daß'nicht mehr als einer der Reste R» und R., für Trifluormethyl steht und zumindest einer der Reste R₁, R₁', Rp oder R-, für ein Halogen oder die Trif luormethy!gruppe steht soweit diese Symbole diese Bedeutung haben,R ^ denotes hydrogen, lower alkyl or trifluoromethyl with the proviso that 'not more than one of the radicals R' and R 'stands for trifluoromethyl and at least one of the radicals R ₁ , R ₁ ', Rp or R-, represents a halogen or the Trif luormethy! group stands as far as these symbols have this meaning,

R. Wasserstoff, Niederalkyl oder Phenyl-niederalkylen bedeutet,R. is hydrogen, lower alkyl or phenyl-lower alkylene,

R Wasserstoff, Niederalkyl oder Phenyl-niederalkylen darstellt,R represents hydrogen, lower alkyl or phenyl lower alkylene,

R, Wasserstoff oder Hydroxy oder, falls η gleich ist 2, auch ein Halogen bedeutet,R, hydrogen or hydroxy or, if η is 2, also a halogen,

R₇ Wasserstoff, niederes Alkanoyl oder Amino (imino)- -methyl darstellt,R _{7 represents} hydrogen, lower alkanoyl or amino (imino) - methyl,

R₀ Wasserstoff, niederes Alkyl oder niederes Hydroxy-R _{0 is} hydrogen, lower alkyl or lower hydroxy

alkylen bedeutet,alkylene means

R_q Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Phenyl-niederalkylen, Hydroxy-niederalkylen, Hydroxyphenyl-niederalkylen, Amino-niederalkylen, Guanidino-niederalkylen, Mercapto-niederalky lon , Niedercilky 1-thio-niederalky len , Imidazoly 1-niederalkylen, Indolyl-niederalkylen, Carbamoyl-niederalkylen oder Carboxy-niederalkylen darstellt,R _{q is} hydrogen, lower alkyl, phenyl, phenyl-lower alkylene, hydroxy-lower alkylene, hydroxyphenyl-lower alkylene, amino-lower alkylene, guanidino-lower alkylene, mercapto-lower alkyl, Niedercilky 1-thio-lower alkylene, Imidazoly 1-lower alkylene, indolyl lower alkylene Represents carbamoyl-lower alkylene or carboxy-lower alkylene,

- -fa-- -fa-

oder R_fi und R_ gemeinsam ein zusammen mit dem diese Reste tragenden Stickstoffatom und Kohlenstoffatom ein einem 5 oder 6 Ringatom aufweisenden Ring vervollständigendes Brückenglied der Formel (CH ) bilden und, falls ν gleich ist 4, ein Kohlenstoffatom gegebenenfalls eine Hydroxygruppe trägt und, falls ν gleich ist 3, ein Kohlenstoffatom gegebenenfalls eine Hydroxygruppe oder ein Halogenatom trägt,or R _fi and R_ together form together with the nitrogen atom and carbon carrying these radicals a bridging member of the formula (CH) completing a 5 or 6 ring atom and, if ν is equal to 4, a carbon atom optionally bearing a hydroxy group and, if ν is 3, a carbon atom optionally bears a hydroxy group or a halogen atom,

R₁ für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,R _{1 is} hydrogen or lower alkyl,

R₁₁ Wasserstoff, niederes Alkyl oder niederes Alkanoyl bedeutet,R _{11 is} hydrogen, lower alkyl or lower alkanoyl,

R₁₂ Carboxy, nieder-Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-substituiertes Carbamoyl oder Cyano darstellt,R _{12 represents} carboxy, lower alkoxycarbonyl, carbamoyl, N-substituted carbamoyl or cyano,

R₁- für Wasserstoff, niederes Alkyl oder Phenyl-niederalkylen steht,R ₁ - represents hydrogen, lower alkyl or phenyl lower alkylene,

R₁- Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl-niederalkylen, Hydroxy-niederalkylen, Amino-niederalkylen, Guanidino-niederalkylen, Imidazolyl-niederalkylen, Indolyl-niederalkylen, Mercapto-niederalkylen, Niederalkylthio-niederalkylen, Carbamoyl- -niederalkylen oder Carboxy-niederalkylen bedeutet,R _{1 is} hydrogen, lower alkyl, phenyl-lower alkylene, hydroxy-lower alkylene, amino-lower alkylene, guanidino-lower alkylene, imidazolyl-lower alkylene, indolyl-lower alkylene, mercapto-lower alkylene, lower alkylthio-lower alkylene, carbamoyl-lower alkylene or carboxy-lower alkylene,

R₁C- Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl- -niederalkenylen bedeutet,R _{1 is} C-hydrogen, lower alkyl, phenyl or phenyl-lower alkenylene,

R₁, Wasserstoff, Niederalkyl, Phenyl oder Phenyl-niederalkenylen darstellt,R _{1 represents} hydrogen, lower alkyl, phenyl or phenyl lower alkenylene,

• oder R₁Q und R zusammen mit dem diese Reste tragenden Kohlenstoffatom ein einen 5-gliedrigen Ring vervollständigendes Brückenglied der Formel (CH„) bilden,Or R ₁ Q and R together with the carbon atom carrying these radicals form a bridge member of the formula (CH ") which completes a 5-membered ring,

oder R_1Q und R₀₁ zusammen mit dem diese Reste tragenden Stickstoffatom bzw. Kohlenstoffatom · ein einen 5-gliedrigen Ringor R _1Q and R ₀₁ together with the nitrogen atom or carbon atom bearing these radicals form a 5-membered ring

ergänzendes Brückenglied der Formel (CH₉) bilden, R₀₀ Wasserstoff oder Niederalkyl bedeutet, R₀₀ Wasserstoff oder Niederalkyl ist, R„, für Hydroxy, Amino oder Niederalkoxy steht, R_oc- Wasserstoff oder, wenn m=1 , p=0, R_-1 = H und R =Nieder-form complementary bridge member of formula (CH ₉ ), R _{00 is} hydrogen or lower alkyl, R _{00 is} hydrogen or lower alkyl, R ", is hydroxy, amino or lower alkoxy, R _oc - hydrogen or, if m = 1, p = 0, R _-1 = H and R = low

alkanoyl gilt, R Viasserstoff oder Niederalkyl darstellt,alkanoyl, R represents hydrogen or lower alkyl,

-S-S

₀, für N /(CH₀) , N '-COOR₀, oder ₀ , for N / (CH ₀ ), N '-COOR ₀ , or

COOR₀.-COOR ₀ .-

- ^Λι - ^Λι

steht,stands,

X O oder S bedeutet,X is O or S,

πι, t und u unabhängig voneinander für Null oder 1 stehen, η und s unabhängig voneinander 1, 2 oder 3 bedeuten,πι, t and u independently of one another are zero or 1, η and s independently of one another denote 1, 2 or 3,

ρ gleich ist 0, 1, 2, 3 oder 4,ρ is equal to 0, 1, 2, 3 or 4,

q und r unabhängig voneinander 0, 1 oder 2 darstellen,q and r are independently 0, 1 or 2,

ν gleich ist 3 oder 4 ,ν is equal to 3 or 4,

w gleich ist 4,w is 4,

χ gleich ist 3 undχ equals 3 and

ζ gleich ist 2 oder 3,ζ equals 2 or 3,

wobei, falls A für Phenylalanyl, Glycyl, Alanyl, Tryptophyl, Tyrosyl, Isoleucyl, Leucyl, Histidy1 oder VaIy1 steht, r nicht Null ist, wenn R_. für Hydroxy steht, s gleich ist 2, R _ Wasserstoff oder Hydroxy bedeutet und R., Methyl darstellt und wobei r nicht gleich ist 1 wenn R , für Hydroxy steht, s gleich ist 2, R₁,- Wasserstoff darstellt, R₁₇ Wasserstoff oder Hydroxy bedeutet und R₁^ für Wasserstoff oder Methyl steht und wobei t nicht gleich ist Null wenn R^-, Wasserstoff bedeutet, u gleich ist Null und R₉₉ für Methyl steht und wobei t nicht gleich ist 1 wenn R_ Wasserstoff bedeutet, u gleich ist Null und R„~ für Wasserstoff oder Methyl steht und wobei in Formel IV zumindest einer der Indices m und ρ eine andere Bedeutung als die Bedeutung Null besitzt und wobei die Sterne asymmetrische Kohlenstoffatome bedeuten.wherein, when A is phenylalanyl, glycyl, alanyl, tryptophyl, tyrosyl, isoleucyl, leucyl, histidy1 or VaIy1, r is not zero when R_. is hydroxy, s is 2, R _ is hydrogen or hydroxy and R, is methyl and r is not equal to 1 when R, is hydroxy, s is 2, R _1, - represents hydrogen, R ₁₇ is hydrogen or hydroxy and R ₁ ^ is hydrogen or methyl, and t is not equal to zero when R ^ is hydrogen, u is zero and R _{99 is} methyl and t is not equal to 1 when R_ is hydrogen, u is equal to zero and R "~ is hydrogen or methyl and wherein in formula IV at least one of the indices m and ρ has a meaning other than the meaning zero and wherein the stars are asymmetric carbon atoms.

Die angegebenen Verbindungen sind Inhibitoren für ACE und als Antihypertensiva brauchbar.The indicated compounds are inhibitors of ACE and useful as antihypertensives.

Die Erfindung umfaßt in ihrem weitersten Umfang Thioesterverbindungen, welche zumindest eine Aminosäure oder eine dieser nahe verwandte Struktur, also ein Aminosäureanalogon, und vorzugsweise zwei Aminosäuren enthalten. Diese Aminosäuren können substituiert oder unsubstituiert sein. Die im vorliegenden Falle beschriebenen Thioesterverbindungen enthalten durchwegs eine vom Rest A in Formel (I) gebildete Aminosäure oder einen dieser Aminosäure nahe verwandten Baustein. Vorzugsweise enthalten Thio-The invention broadly encompasses thioester compounds which contain at least one amino acid or a closely related structure, ie an amino acid analog, and preferably two amino acids. These amino acids may be substituted or unsubstituted. The thioester compounds described in the present case consistently contain an amino acid formed from radical A in formula (I) or a building block closely related to this amino acid. Preferably, thio

esterverbindungen der Erfindung ein vom Rest R-A in Formel (I) gebildetes Acylderivat des Restes A. Es ist weiters bevorzugt, daß diese Thioesterverbindungen einen weiteren Aminosäurerest enthalten. Falls ein solcher zweiter Aminosäurerest vorliegt, befindet er sich vorzugsweise in der vom Rest Z in Formel (I) gebildeten Gruppe.ester compounds of the invention is an acyl derivative of the radical A formed from the radical R-A in the formula (I). It is further preferred that these thioester compounds contain a further amino acid radical. If such a second amino acid residue is present, it is preferably in the group formed by the radical Z in formula (I).

Der Baustein A dieser Thioesterverbindungen kann aus der im Zusammenhang mit Formel (I) angegebenen Gruppe von Verbindungen ausgev/ählt sein. Beispiele für unsubstituierte Aminosäuren sind unter anderem Phenylalanin, Glycin, Alanin, Tryptophan, Tyrosin, Isoleucin, Leucin, Histidin, Valin (von diesen neun Aminosäuren ist Phenylalanin bevorzugt), Prolin, Methionin, Threonin, Ornithin und Glutaminsäure. Beispiele für substituierte Aminosäuren sind unter anderem 4-Nitro-phenylalanin, 5-Fluor-tryptophan, 0-Benzyl-threonin, 3-Hydroxy-prolin, Cyclohexanyl-alanin und Vinylglycin. Beispiele für Analoga von Aminosäuren sind unter anderem Cycloleucin, /-Aminobuttersäure und Penicillamin. Das bevorzugte Acylderivat R der oben beschriebenen Art liegt in Amid- oder Imidbindung mit der o£- oder ß-Aminogruppe oder ^-Iminogruppe des Restes A vor. Von diesen Acylderivaten v/ird das Benzoylderivat bevorzugt. Obzwar der Rest A vorzugsweise in L-Form vorliegt, kann er dennoch auch in der D-Form oder in racemischer Form vorliegen.The building block A of these thioester compounds can be selected from the group of compounds indicated in connection with formula (I). Examples of unsubstituted amino acids include phenylalanine, glycine, alanine, tryptophan, tyrosine, isoleucine, leucine, histidine, valine (out of these nine amino acids, phenylalanine is preferred), proline, methionine, threonine, ornithine and glutamic acid. Examples of substituted amino acids include 4-nitro-phenylalanine, 5-fluoro-tryptophan, 0-benzyl-threonine, 3-hydroxyproline, cyclohexanyl-alanine and vinylglycine. Examples of analogs of amino acids include cycloleucine, / aminobutyric acid and penicillamine. The preferred acyl derivative R of the type described above is in the amide or imide bond with the o £ or β-amino group or ^ -imino group of the A radical. Of these acyl derivatives, the benzoyl derivative is preferred. Although the A group is preferably in the L-form, it may still be in the D-form or in the racemic form.

Falls die Reste des Prolins, des Tyrosins oder des Phenylalanins durch ein Halogen substituiert sind, kann das Halogen von F, Cl, Br oder J gebildet sein. Prolin ist vorzugsweise in 3- oder 4-Stellung des Pyrrolidinrings substituiert, falls als Substituent ein Halogen oder die Hydroxygruppe vorliegt. Prolin kann auch disubstituiert sein und ist vorzugsweise in 3- und 4-Stellung des Pyrrolidinringes substituiert, wenn als Substituent Halogen vorliegt. Wenn Phenylalanin durch Halogen, Nitro, Amino oder Methoxy substituiert ist, dann liegt dieser Substituent vorzugsweise in 4-Stellung des Pheny!ringes vor. Vorzugsweise ist das Tyrosin in 3-Stellung des Phenylringes substituiert wenn der Substituent von Halogen, Nitro, Hydroxy oder Methoxy gebildet ist. Tyrosin kann auch disubstituiert und vorzugsweise in 3- und 5-Stellung des Phenylringes substituiert sein, falls der Substituont Halogen ist. Falls Tryptophan durch Fluor substituiert ist,If the residues of proline, tyrosine or phenylalanine are substituted by a halogen, the halogen may be formed by F, Cl, Br or J. Proline is preferably substituted in the 3- or 4-position of the pyrrolidine ring if the substituent is a halogen or the hydroxy group. Proline may also be disubstituted and is preferably substituted in the 3- and 4-position of the pyrrolidine ring when halogen is present as a substituent. When phenylalanine is substituted by halogen, nitro, amino or methoxy, then this substituent is preferably in the 4-position of the phenyl ring. Preferably, the tyrosine is substituted in the 3-position of the phenyl ring when the substituent of halogen, nitro, hydroxy or methoxy is formed. Tyrosine may also be disubstituted and preferably substituted in the 3- and 5-position of the phenyl ring if the substituent is halogen. If tryptophan is substituted by fluorine,

ist vorzugsweise die 5- oder 6-Stellung des Indolringes substituiert. Eine als Substituent vorliegende Methylgruppe kann in 4-, 5-, 6- oder 7-Stellung des Indolringes gebunden sein. Eine als Substituent des Tryptophans vorliegende Methoxygruppe ist vorzugsweise an die 5-Stellung des Indolringes gebunden.Preferably, the 5- or 6-position of the indole ring is substituted. A methyl group present as a substituent may be bonded in the 4-, 5-, 6- or 7-position of the indole ring. A methoxy group present as a substituent of the tryptophan is preferably attached to the 5-position of the indole ring.

Der restliche Teil des Moleküls der erfindungsgemäßen Thioesterverbindungen ist vom Rest Z in Formel (I) gebildet. Z wird aus jener Gruppe von Verbindungen ausgewählt, welchen eine der Formeln (II) bis (XI) zukommt. Vorzugsweise enthält der Rest Z eine Aminosäure (Aminosäurerest). Obzwar allgemein irgendeine Aminosäure im Rest Z vorliegen kann, v/ird doch Prolin, Hydroxy- -prolin, 3,4-Dehydroprolin, 5-Oxo-prolin oder eine nahe verwandte Molekülstruktur wie Thiazolidin-4-carbonsäure bevorzugt. Die im Rest Z befindliche Aminosäure liegt vorzugsweise in L-Form vor.The remainder of the molecule of the thioester compounds of the invention is formed by the radical Z in formula (I). Z is selected from the group of compounds to which one of the formulas (II) to (XI) belongs. Preferably, the radical Z contains an amino acid (amino acid residue). While generally any amino acid may be present in Z, proline, hydroxyproline, 3,4-dehydroproline, 5-oxo-proline, or a closely related molecular structure such as thiazolidine-4-carboxylic acid are preferred. The amino acid present in the radical Z is preferably in L-form.

Die in irgendeinem der oben angegebenen Reste allenfalls vorhandenen niederen Alkylgruppen können geradkettige oder verzweigtkettige Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 7 C-Atomen sein. Niedere Alkylengruppen sind von der gleichen Art und besitzen ebenfalls 1 bis 7 C-Atome. Ähnlich sind auch niedere Alkoxygruppen von der gleichen Art und besitzen 1 bis 7 C-Atome, von welchen eines an Sauerstoff geknüpft ist. Die niederen Alkanoylgruppen sind die Acylreste niederer Fettsäuren mit 1 bis 7 C-Atomen. Die für R₇ stehende Amino (imino)-methylgruppe ist der Rest einer Gua-The lower alkyl groups present in any of the radicals mentioned above may be straight-chain or branched-chain hydrocarbon radicals having 1 to 7 carbon atoms. Lower alkylene groups are of the same type and also have 1 to 7 carbon atoms. Similarly, lower alkoxy groups are of the same type and have 1 to 7 C atoms, one of which is linked to oxygen. The lower alkanoyl groups are the acyl radicals of lower fatty acids having 1 to 7 carbon atoms. The amino (imino) -methyl group standing for R ₇ is the remainder of a gua

NH ti nidinogruppe (-C-NH^). Die von R..„ gebildete substituierte Carbamoylgruppe ist am Stickstoffatom durch eine niedere Alkylgruppe oder eine Phenyl-niederalkylengruppe substituiert. Das Halogen kann von F, Cl, Br oder J gebildet sein.NH-nidino group (-C-NH ^). The substituted carbamoyl group formed by R "is substituted on the nitrogen atom by a lower alkyl group or a phenyl-lower alkylene group. The halogen may be formed by F, Cl, Br or J.

Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können nach verschiedenen Methoden synthetisiert werden. Entsprechend einer bevorzugten Methode werden R-A (R-A- OH) und HS - Z zur Verbindung R-A-S-Z gekuppelt. Bei dieser Kupplungsreaktion können übliche Kupplungsreagentien verwendet werden, v/ob ei vorzugsweise in einem wasserfreien Medium gearbeitet wird. Eine weitere bevorzugte Methode besteht im Kuppeln der Verbindungen R-A- SII mit HaIo-Z zur Verbindung R-Zi-S-Z nach üblichen Kupplungsmethoden. Gemäß einer weiteren bevorzugten Methode v/ird R - A - SH mit Vinyl - Z unter Erwärmen zu R - Λ - S - Z gekuppelt.Compounds of the general formula (I) can be synthesized by various methods. According to a preferred method R-A (R-A-OH) and HS-Z are coupled to the compound R-A-S-Z. Conventional coupling reagents can be used in this coupling reaction, preferably when working in an anhydrous medium. A further preferred method consists in coupling the compounds R-A-SII with Halo-Z to the compound R-Zi-S-Z according to customary coupling methods. According to another preferred method, R - A - SH is coupled with vinyl - Z to R - Λ - S - Z with heating.

^i^i'Äv-a^i;^^^ I ^ i'Äv-a ^ i; ^^

⁹ 4_#8,1981 ⁹ 4 _# 8,1981

AP C 07 C/228 053/0 - 46 - 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 - 46 - 58 911/11

Zwecks Herstellung einer speziell gewünschten Thioester- \ verbindung kann eine Methode gegenüber den anderen bevorzugt anwendbar sein« Beispiele für geeignete Kupplungsmittel sind Ι,Ι'-Carbonyl-diimidazol, Dicyclohexylcarbo- ! diirnid, Athoxyacetylen oder Diphenylphosphorylazid,, \ Beispiele für geeignete wasserfreie Medien sind Tetrahydrofuran (THF)_S Dichlormethan, Dioxan oder Dimethylformamid (DMF), obzwar auch andere wasserfreie Medien geeignet sein können*For the purpose of preparing a specifically desired thioester compound, one method may be used in preference to the other. Examples of suitable coupling agents are Ι, Ι'-carbonyldiimidazole, dicyclohexylcarbo-! diirnid, Athoxyacetylen or diphenylphosphoryl ,, \ Examples of suitable water-free media are tetrahydrofuran (THF) _S dichloromethane, dioxane or dimethylformamide (DMF), although other water-free media may be suitable *

Der Gruppe R — A£ worin R für Benzoyl steht» entsprechende : Verbindungen sind im Handel erhältlich oder können nach den Angaben in der älteren Patentanmeldung APA 61 K/215 hergestellt werden«, Der Gruppe R ~ A₉ worin R für Formyl, Acetyl„ Propanoyl* Butanoyl_t Phenylacetyl. Phenylpropanoyl odor tert«-Butyloxycarbonyl (Boc) steht« entsprechende Verbindungen sind entweder im Handel erhältlich oder können entsprechend der älteren Anmeldung APA 61 K/215 457 hergestellt werden»The group R - A £ wherein R is benzoyl »corresponding: compounds are commercially available or can be prepared as described in the earlier patent application APA 61 K / 215«, the group R ~ A ₉ where R is formyl, acetyl Propanoyl * Butanoyl _t Phenylacetyl. Phenylpropanoyl or tert-Butyloxycarbonyl (Boc) is "corresponding compounds are either commercially available or can be prepared according to the earlier application APA 61 K / 215 457"

Der Gruppe R - A_f worin R für Cyclopentancarbonyl steht _t entsprechende Verbindungen können nach den Angaben in der Anmeldung APA 61 K/215 457 hergestellt werden* Der Gruppe R ~ A, worin R für Cyclopentancarbonyl-L^lysyl- oder Pyro-L-glutamyl~L«-lysyl steht _t' entsprechende Verbindungen können nach den Angaben in der Anmeldung APA 61 K/215 457 hergestellt werden»The group R - A _f where R is cyclopentanecarbonyl is _t corresponding compounds can be prepared according to the information in the application APA 61 K / 215,457 * the group R ~ A, where R is cyclopentanecarbonyl-L ^ lysyl or pyro-L- glutamyl ~ L 'is lysyl _t' corresponding compounds can be prepared according to the information in the application APA 61 K / 215457 »

Der Gruppe R - A,- worin R für L~Arginyl_? L-Lysyl oder Pyro-L-glutatayl steht_t entsprechende Verbindungen können nach den Angaben in der Anmeldung APA 61 K/215 457 hergestellt werden,The group R - A, - where R is L ~ arginyl _? L-lysyl or pyro-L-glutatayl is _t corresponding compounds can be prepared according to the information in the application APA 61 K / 215 457,

Verbindungen der Formel HS ·» Z können nach verschiedenen Methoden synthetisiert vverden« Die Synthese von VerbindungenCompounds of the formula HS · »Z can be synthesized by various methods« The synthesis of compounds

4.8*19814.8 * 1981

AP C 07 C/228 053/0AP C 07 C / 228 053/0

58 911/1158 911/11

der Formel HS - Z_f worin 2 der Formel (VIII) entspricht, wird lediglich zur Illustration verwendet« Verbindungen der Formel HS ~ Z, worin Z irgendeiner der Formeln (II) bis (XI) entspricht, werden in ähnlicher Weise synthetisiert«of the formula HS - Z _f wherein 2 corresponds to the formula (VIII), is used for illustration purposes only. Compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to any of the formulas (II) to (XI) are synthesized in a similar manner.

Entsprechend einer bevorzugten Ausführungsform wird eine oer Iminogruppö in Formel (VIII) entsprechende Verbindung oer According to a preferred embodiment, an oer imino group in formula (VIII) corresponding compound oer

8 0538 053

Formelformula

NH - CH - COR₀₄ NH - CH - COR ₀₄

I " , (XU)I ", (XU)

CH₀-(CH)₀ CH ₀ - (CH) ₀

R₁₇ R ₁₇

worin R_1n, R₀. und swherein R _1n , R ₀ . and s

die oben angegebene Bedeutung besitzen,- mit einer Säure der Formelhave the abovementioned meaning, - with an acid of the formula

R₂₇-S- (CH)_r - CH - COOH _t R ₂₇ -S- (CH) _r - CH - COOH _t

/ ^R15 ^R16/ ^R 15 ^R 16

worin R₁₅/ ^Ric ^{und r} wherein R ₁₅ / ^R i c ^{and r}

die oben angegebene Bedeutung besitzen und R₀₇ Wasserstoff, Niederalkyl, Phenyl oder durch Halogen, Niederalkyl, Phenyl-niederalkylen, Diphenyl-niederalkylen, Triphenyl-niederalkylen, Niederalkyl- -thiomethyl, Phenyl-niederalkylthiomethy1, Niederalkinoyl-amidomethyl oder R_oft ^ » mit der Bedeutung von Wasserstoff, Hydroxy oder Niederalkyl für R „ substituiertes Phenyl bedeutet, umgesetzt. Vorzugsweise steht R₀₇ für Acetyl. Die Acylierung kann in einem wasserfreien Medium in Anwesenheit eines Kupplungsmittels durchgeführt werden, wobei irgendeines.der bereits erwähnten Kupplungsmittel bzw. wasserfreien Medien eingesetzt werden kann. Es ist auch möglich die Säure der Formel (XIII) vor der Umsetzung mit der Aminogruppe der Verbindung der Formel (XII) durch Überführen in ein gemischtes Anhydrid, ein symmetrisches Anhydrid, ein Säurechlorid, einen aktiven Ester oder in ein Woodward-Reagens K od.dgl. zu aktivieren. Geeignete Acylierungsmethoden sind beispielsweise inhave the abovementioned meaning and R _{07 is} hydrogen, lower alkyl, phenyl or by halogen, lower alkyl, phenyl-lower alkylene, diphenyl-lower alkylene, triphenyl-lower alkylene, lower alkylthiomethyl, phenyl-Niederalkylthiomethy1, Niederalkinoyl-amidomethyl or R _often ^ »with the Meaning of hydrogen, hydroxy or lower alkyl for R "substituted phenyl means reacted. Preferably, R _{07 is} acetyl. The acylation may be carried out in an anhydrous medium in the presence of a coupling agent, and any of the aforementioned anhydrous or non-aqueous media may be employed. It is also possible that the acid of formula (XIII) prior to reaction with the amino group of the compound of formula (XII) by conversion to a mixed anhydride, a symmetrical anhydride, an acid chloride, an active ester or in a Woodward reagent K od. like. to activate. Suitable acylation methods are, for example, in

Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Bd. XV, Teil II, Seite 1 ff. (1974) angegeben. Das Abspalten von Schutzgruppen, also das Abspalten eines nicht Wasserstoff bedeutenden Restes R₀₇/ nach dem Acylieren der Verbindung (XII) mit der Verbindung (XIII) kann in üblicher Weise, beispielsweise mit heißer Trifluoressigsäure, kalter Trifluormethansulfonsäure, Mercuriacetat, Natrium in flüssigem Ammoniak od.dgl., vorgenommen werden. Für diesen Zweck geeignete Methoden sind unter anderem in Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Bd. XV, Teil I, Seite 376 ff. (1974) beschrieben. Falls für R„^ die bevorzugte Gruppe R„_R η steht, wi.rd aus der erhaltenen Verbindung die .Schutzgruppe vorzugsweise durch Ammonolyse abgespalten.Methods of Organic Chemistry (Houben-Weyl), Vol. XV, Part II, page 1 et seq. (1974). The removal of protective groups, that is, the cleavage of a non-hydrogen radical R ₀₇ / after the acylation of the compound (XII) with the compound (XIII) od in a conventional manner, for example with hot trifluoroacetic acid, trifluoromethanesulfonic acid, mercuriacetate, sodium in liquid ammonia od .dgl., Are made. Suitable methods for this purpose are described inter alia in Methods of Organic Chemistry (Houben-Weyl), Vol. XV, Part I, page 376 ff. (1974). If R "is the preferred group R" _R η, the protecting group from the compound obtained is preferably cleaved off by ammonolysis.

Ein weiteres Verfahren zum Herstellen einer dem Rest Z der Formel (VIII) entsprechenden Verbindung der Formel HS - Z besteht darin eine Verbindung der Formel (XII) mit einer 60-Halogenalkansäure der FormelA further process for preparing a compound of the formula HS-Z corresponding to the radical Z of the formula (VIII) consists of a compound of the formula (XII) with a 60-haloalkanoic acid of the formula

Y - (CH) - CH - COOH , (XIV)Y - (CH) - CH - COOH, (XIV)

ι ^r ιι ^r ι

^R15 ^R16 ^R 15 ^R 16

worin Y für Brom, Chlor oder Jod steht, zu einer Verbindung derwherein Y is bromine, chlorine or iodine, to a compound of

Formel 0Formula 0

IlIl

Y - (CH) -CH-C-N-CH- COR₉, , (XV)Y - (CH) -CH-CN-CH-COR ₉ , (XV)

I ^r I / \I ^r \ / \

₁₅ R₁₆ CH_{2 15} R ₁₆ CH ₂

R₁₇ R ₁₇

umzusetzen, die dann mit einem Thiol oder einer Thiosäure der Formel R_?7 - SH umgesetzt wird, um den Rest R - S an Stelle von Y zu setzen. Hiebei wird die Säure der Formel (XIV) zunächst in der oben beschriebenen Weise aktiviert. Die Umsetzung der Verbindung (XIV) und der Verbindung (XII) wird in einem alkalischen Mediur beispielsweise in Anwesenheit eines Alkalimetallhydroxyds, eines Alkalimetallcarbonats oder eines Erdalkalirnetallcarbonats vorgenommen. Die Umsetzung der Verbindung (XV) mit der Verbindung R^₇ - SH wird ebenfalls in einem alkalischen Medium, vorzugsweise in Anwesenheit eines Alkalimetallcarbonats, vorgenommen. Schutzgruppen werden in der oben angegebenen Weise abgespalten.which is then reacted with a thiol or a thioacid of the formula R _{? 7} -SH to substitute the radical R - S for Y. Hiebei the acid of formula (XIV) is first activated in the manner described above. The reaction of the compound (XIV) and the compound (XII) is carried out in an alkaline medium, for example in the presence of an alkali metal hydroxide, an alkali metal carbonate or an alkaline earth metal carbonate. The reaction of the compound (XV) with the compound R ^ ₇ -SH is also carried out in an alkaline medium, preferably in the presence of an alkali metal carbonate. Protecting groups are cleaved in the manner indicated above.

Eine weitere Möglichkeit zum Herstellen von dem Rest Z der obigen Formel (VIII) entsprechenden Verbindungen der Formel HS - Z besteht darin eine Verbindung der Formel (XII) an der Aminogruppe mit einem Thiolactqn der FormelA further possibility for preparing compounds of the formula HS - Z corresponding to the radical Z of the above formula (VIII) is a compound of the formula (XII) on the amino group with a thiolactone of the formula

^:*15 ^R16 (CM) CH , (XVI) ^: * 15 ^R 16 (CM) CH, (XVI)

I ^r II ^r

S C = OS C = O

umzusetzen, wobei die umsetzung in einem wasserfreien Medium wie Tetrahydrofuran u.dgl. vorgenommen v/erden kann.wherein the reaction in an anhydrous medium such as tetrahydrofuran and the like. can be made.

Eine Abänderung dieser Methode besteht darin als einen der Ausgangsstoffe eine Acrylsäure der FormelA modification of this method is as one of the starting materials an acrylic acid of the formula

2805328053

^R15 ^R16 ^R 15 ^R 16

, (XVII) CH = G - COOH, (XVII) CH = G - COOH

einzusetzen, diese Acrylsäure zunächst in ein entsprechendes Säurehalogenid überzuführen und dieses Säurehalogenid mit der Aminogruppe der Verbindung der Formel (XII) zu einer Verbindung der Formelto convert this acrylic acid first into a corresponding acid halide and this acid halide with the amino group of the compound of formula (XII) to give a compound of formula

^R15 ^R16 0 ^R 15 ^R 16 0

CH.= C - C - N - CH - COR₂₄ , (XVIII)CH. = C - C - N - CH - COR ₂₄ , (XVIII)

CH₀-(CH) 2 , sCH ₀ - (CH) 2, s

^R27 ^R 27

umzusetzen, die dann in der oben angegebenen Weise mit einem Thiol oder einer Thiosäure der Formel R _ - SH in der oben angegebenen Weise umgesetzt wird. Die Umsetzung der Acrylsäure oder eines reaktionsfähigen Carboxylderivats hievon mit der Verbindung der Formel (XII) wird in einem alkalischen Medium, vorzugsweise in Anwesenheit eines Alkalimetallcarbonats, durchgeführt.which is then reacted in the manner indicated above with a thiol or a thioacid of the formula R _ - SH in the manner indicated above. The reaction of the acrylic acid or a reactive carboxyl derivative thereof with the compound of the formula (XII) is carried out in an alkaline medium, preferably in the presence of an alkali metal carbonate.

Eine weitere Möglichkeit besteht darin eine Acrylsäure der Formel (XVII) mit einer Thiosäure der Formel R_₇ - SH zu einer Verbindung der FormelAnother possibility is to use an acrylic acid of the formula (XVII) with a thioacid of the formula R - ₇ - SH to give a compound of the formula

R„_ - S - CH - CH - COOH , (XIX)R "_ - S - CH - CH - COOH, (XIX)

²⁷ ι ι ²⁷ ι ι

^R15 ^R16 ^R 15 ^R 16

umzusetzen, worauf diese Verbindung in ein Säurehalogenid übergeführt und das erhaltene Säurehalogenid mit der Aminogruppe der Verbindung der Formel (XII) umgesetzt wird.whereupon this compound is converted into an acid halide and the resulting acid halide is reacted with the amino group of the compound of the formula (XII).

Falls eine der Formel (XII) entsprechende Säure, also eine Verbindung der Formel (XII) mit der Bedeutung der Hydroxygruppe für R-,w als Ausgangsstoff eingesetzt wird, kann das in Form der freien Carbonsäure erhaltene Endprodukt, beispielsweise durch Verestern mit einem Diazoalkan wie Diazomethan, oder mit einem 1-Alkyl-3-p-tolyitriazen wie 1-n-Butyl-3-p-tolyltriazen od.dgl., verestert werden. Durch Umsetzen des erhaltenen Esters, vorzugsweise des Methylesters, mit einer alkoholischen AmmoniaklösungIf an acid corresponding to formula (XII), ie a compound of formula (XII) with the meaning of the hydroxy group for R-, w is used as starting material, the end product obtained in the form of the free carboxylic acid, for example by esterification with a diazoalkane such Diazomethane, or with a 1-alkyl-3-p-tolyitriazen such as 1-n-butyl-3-p-tolyltriazene or the like., Are esterified. By reacting the resulting ester, preferably the methyl ester, with an alcoholic ammonia solution

v/ird die freie Säure in das entsprechende Amid übergeführt, in welchem R». für -NH_ steht. Wenn als Ausgangsstoff ein Ester der Formel (XII) eingesetzt wird, kann durch Behandeln des erhaltenen Endproduktes mit Trifluoressigsäure und Anisol die Estergruppe (R_.) abgespalten und die entsprechende freie Carbonsäure erhalten werden.The free acid is converted into the corresponding amide, in which R ». stands for -NH_. If the starting material used is an ester of the formula (XII), the ester group (R_.) Can be eliminated by treating the resulting end product with trifluoroacetic acid and anisole, and the corresponding free carboxylic acid can be obtained.

Thioester der Formel H-A-S-Z, also Verbindungen der Formel (I) mit der Bedeutung von Wasserstoff für R₁ werden vorzugsweise durch Abspalten der Schutzgruppe von Thioesterverbindungen der Formel N^ -tert-Butyloxycarbonyl-A-S-Z hergestellt. Eine Möglichkeit zum Abspalten der Schutzgruppe aus solchen Verbindungen ist in der älteren Anmeldung APA 61 K/215 457 beschrieben.Thioesters of the formula HASZ, ie compounds of the formula (I) which have the meaning of hydrogen for R _1, are preferably prepared by cleaving off the protective group of thioester compounds of the formula N 1 -tert-butyloxycarbonyl-ASZ. One way to cleave the protecting group from such compounds is described in the earlier application APA 61 K / 215 457.

Falls der Rest Z der Formel (XI) entspricht, wird die diesem Rest entsprechende Verbindung der Formel HS - Z vorzugsweise durch Umsetzen der Aminogruppe einer Verbindung der Formel (XII) mit einem Halogenalkylsulfonylhalogenid in einer organischen Base wie N,N-Dimethylanilin, N-Methylmorpholin od.dgl. in einem inerten organischen Lösungsmittel wie Tetrahydrofuran, Dioxan, Dichlormethan od.dgl. und anschließendes, oben bereits beschriebenes Umsetzen des Reaktionsproduktes mit einer Verbindung der Formel R„₇ - SH in Anwesenheit einer organischen Base und eines organischen Lösungsmittels hergestellt.If the radical Z corresponds to the formula (XI), the compound of the formula HS-Z corresponding to this radical is preferably prepared by reacting the amino group of a compound of the formula (XII) with a haloalkylsulfonyl halide in an organic base such as N, N-dimethylaniline, N- Methylmorpholine or the like. in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, dichloromethane or the like. and then, as described above, reacting the reaction product with a compound of the formula R " ₇ -SH in the presence of an organic base and an organic solvent.

Die Aminogruppe im Rest der der Formel (III) entsprechenden Verbindung wird aus Nitrosoazetidin-2-carbonsäure, Nitrosoprolinen oder Nitrosopipecolinsäuren der FormelThe amino group in the remainder of the compound of formula (III) is selected from nitrosoazetidine-2-carboxylic acid, nitrosoprolines or nitrosopipecolic acids of formula

R_r R _r

HC (CH) , (XX)HC (CH), (XX)

N CH - COOHN CH - COOH

hergestellt, die ihrerseits aus der entsprechenden Acetidin-2- -carbonsäure, dem entsprechenden Prolin oder der entsprechenden Pipecolinsäure und Nitroxyl-tetrafluoroborat nach der von Lijinsky et al., in Tetrahedron 26, 5137 (1970) angegebenen Methode aber auch nach der von Nagasav/a et al., in J. Med. Chem 16, 583 (1973) angegebenen Methode hergestellt werden können.prepared in turn from the corresponding acetidine-2-carboxylic acid, the corresponding proline or the corresponding pipecolic acid and nitroxyl tetrafluoroborate according to the method described by Lijinsky et al., Tetrahedron 26, 5137 (1970) but also according to Nagasav / a et al., in J. Med. Chem. 16, 583 (1973).

280280

Die erhaltenen Nitrosoaminosäuren werden sodann, beispielsweise mittels Zink und Essigsäure nach der von Klosterman et al., in Biochemistry 6, 173, (1967) beschriebenen Methode, zum entsprechenden N-Amino-derivat der FormelThe nitroso amino acids obtained are then, for example, by means of zinc and acetic acid according to the method described by Klosterman et al., Biochemistry 6, 173, (1967), to the corresponding N-amino derivative of the formula

I⁶ I ⁶

_{H c} (_CH) _{H c} ( _CH )

2. . ι η2.. η η

N CH -? COOHN CH -? COOH

umgesetzt.implemented.

Verbindungen der Formel R-A-SH können nach verschiedensten Methoden hergestellt werden. Eine mögliche Herstellungsmethode für Verbindungen der Formel R-A-SH ist folgende.Compounds of the formula R-A-SH can be prepared by various methods. One possible method of preparation of compounds of the formula R-A-SH is as follows.

Zunächst wird eine Verbindung hergestellt, in welcher R für N⁰^- -tert-Butyloxycarbonyl (Boc) und A für den Rest von Norleucin steht. Entsprechend einer bevorzugten Ausführungsform wird Thiophenol unter Verwendung üblicher Kupplungsreagentien mit NoC -Boc-norleucin zum N<^ -Boc-thionorleucin-phenylester verknüpft, wobei die Kupplungsreaktion vorzugsweise unter Verwendung des gemischten Anhydrids in Äthanol durchgeführt wird, worauf anschließend das Reaktionsprodukt in Stickstoffatmosphäre und in Äthanol mit NaSH zum N ⁰^ -Boc-thionorleucin umgesetzt wird. Eine weitere Methode zum Herstellen von N ⁰^ -Boc-thionorleucin besteht darin entsprechend den Angaben von Cronyn, M.V7. , et al., in Am. Chem. Soc. 74, 4726 (1952) N⁰^- -Boc-norleucin unter Verwendung eines gemischten Anhydrids mit H„S umzusetzen und das erhaltene N«—Boc-thionorleucin mit einer Verbindung der Formel (XVIII), beispielsweise unter Erwärmen in Toluol, zur Verbindung N^ -Boc- -norleucin-S-Z umzusetzen. Eine weitere Möglichkeit besteht darin das N^ -Boc-thionorleucin mit einer Verbindung der Formel (XV) zu der Verbindung ISI -Boc-norleucin-S-Z umzusetzen. Diese Arbeitsweise ist in der Anmeldung APA 61 K/215 4 57 näher beschrieben.First, a compound is prepared in which R is N ⁰ ^ - tert-butyloxycarbonyl (Boc) and A is the residue of norleucine. According to a preferred embodiment, thiophenol is linked to N 4 -boc-thionorleucine phenyl ester using conventional coupling reagents with NoC-Boc-norleucine, the coupling reaction preferably being carried out using the mixed anhydride in ethanol, followed by reaction of the reaction product in nitrogen atmosphere and in water Ethanol is reacted with NaSH to N ⁰ ^ -Boc-thionorleucine. Another method for producing N ⁰ ^ -Boc-thionorleucin is as described by Cronyn, M.V7. , et al., in Am. Chem. Soc. 74, 4726 (1952) N ⁰ ^ - Boc-norleucine using a mixed anhydride with H "S implement and the resulting N" -Boc-thionorleucin with a compound of formula (XVIII), for example with heating in toluene, to the compound N ^ -Boc -norleucine SZ implement. Another possibility is to react the N 1 -Boc-thionorleucine with a compound of the formula (XV) to form the compound ISI-Boc-norleucine-SZ. This procedure is described in detail in the application APA 61 K / 215 4 57.

Sodann wird eine Verbindung hergestellt in welcher R für Benzoyl und A für Phenylalanin steht. Entsprechend einer bevorzugten Arbeitsweise wird Thiophenol unter Verwendung üblicher Kupplungsreagentien an N^-tert-Butyloxycarbonyl-phenylalaninThen, a compound is prepared in which R is benzoyl and A is phenylalanine. According to a preferred procedure, thiophenol is synthesized using standard coupling reagents on N 2 -tert-butyloxycarbonyl-phenylalanine

geknüpft und hiebei N⁰^-Boc-Phe-S- (θ) erhalten, wobei vorzugsweise unter Verwendung des gemischten Anhydrids in Äthylace.tat gearbeitet wird und von der erhaltenen Verbindung zunächst mittels Trifluoressigsäure und Anisol die Schutzgruppe abgespalten und dann die erhaltene Verbindung mittels Chlorwasserstoff in Äthanol in das Hydrochlorid der Verbindung H-Phe-S- \0/ übergeführt wird, die dann in Äthylacetat und in Anwesenheit von Natriumcarbonat mit Benzoylchlorid zur Verbindung N^-Benzoyl-Phe-S- \0y umgesetzt wird, aus der dann mittels NaSH in Äthanol unter Stickstoffatmosphäre die Thiophenolgruppe abgespalten wird, um schließlich die Verbindung N^-Benzoyl-Phe-SH zu erhalten.and thereby obtained N ⁰ ^ -Boc-Phe-S- (θ), preferably using the mixed anhydride in Äthylace.tat is worked and first cleaved from the resulting compound by means of trifluoroacetic acid and anisole the protecting group and then the compound obtained Hydrogen chloride in ethanol in the hydrochloride of the compound H-Phe-S- \ 0 / is converted, which is then reacted in ethyl acetate and in the presence of sodium carbonate with benzoyl chloride to the compound N ^ -Benzoyl-Phe-S- \ 0y , then from by means of NaSH in ethanol under a nitrogen atmosphere, the thiophenol group is cleaved to finally obtain the compound N ^ -Benzoyl-Phe-SH.

Eine weiter Möglichkeit zum Herstellen der Verbindung N°^-Benzoyl-Phe-SH besteht darin N^-Benzoyl-Phe mit H„S nach der Mischanhydridmethode zum gewünschten Produkt umzusetzen. Eine dritte Möglichkeit besteht im Umsetzen von N°^ -Boc-Phe mit H~S nach der oben beschriebenen Mischanhydridmethode, anschließende Umsetzung mit Chlorwasserstoff in Äthanol und schließliches Umsetzen mit Benzoylchlorid in der oben beschriebenen Weise.A further possibility for preparing the compound N'-benzoyl-Phe-SH is to react N, -Benzoyl-Phe with H "S according to the mixed anhydride method to give the desired product. A third possibility consists in reacting N ° ^ -Boc-Phe with H ~ S by the mixed anhydride method described above, followed by reaction with hydrogen chloride in ethanol and finally reacting with benzoyl chloride in the manner described above.

Die erhaltene Verbindung N^-Benzoyl-Phe-SH wird dann, beispielsweise durch Erhitzen in dem bevorzugt als Lösungsmittel verwendeten Toluol, mit einer Verbindung der Formel (XVIII) zur Verbindung N ⁰^--Benzoyl-Phe-S-Z umgesetzt. Weiters kann die Verbindung N^-Benzoyl-Phe-SH mit einer Verbindung der Formel (XV) zur Verbindung N"*—Benzoyl-Phe-S-Z umgesetzt werden. Auch diese Umsetzung ist in der erwähnten Anmeldung näher erläutert.The resulting compound N, -Benzoyl-Phe-SH is then reacted, for example, by heating in the toluene, preferably used as a solvent, with a compound of formula (XVIII) to the compound N ⁰ ^ - benzoyl-Phe-SZ. Furthermore, the compound N 1 -Benzoyl-Phe-SH can be reacted with a compound of the formula (XV) to give the compound N * * - benzoyl-Phe-SZ This reaction is also explained in more detail in the cited application.

Thioester der allgemeinen Formel (I) besitzen zumindest ein asymmetrisches Kohlenstoffatom, was im folgenden für eine Verbindung der Formel (I) erläutert wird, in welcher R für Benzoyl und A für Phe steht und Z der Formel (VIII) entspricht. Diese Verbindung besitzt die allgemeine FormelThioesters of the general formula (I) have at least one asymmetric carbon atom, which is explained below for a compound of the formula (I) in which R is benzoyl and A is Phe and Z corresponds to the formula (VIII). This compound has the general formula

0 0 00 0 0

H * Il * * Jl * H * Il * * Jl *

C - NH - CH - C - S - (CH) - (CH) - C - NH - CH - COFL·.C - NH - CH - C - S - (CH) - (CH) - C - NH - CH - COFL ·.

^r i Il ^r i Il

CO)CO)

^{V R}17 ^VR 17

in welcher die möglichen asymmetrischen Kohlenstoffatome durchin which the possible asymmetric carbon atoms through

228053 0228053 0

eine Stern gekennzeichnet sind. Falls R₁C-/ R₁₆ und R₁₇ eine andere Bedeutung als die Bedeutung von Wasserstoff besitzen, ist das diese Reste tragende Kohlenstoffatom ein asymmetrisches Kohlenstoffatom. Die anderen durch einen Stern gekennzeichneten Kohlenstoff atome sind jedenfalls asymmetrische Kohlenstoffatome. Diese Verbindungen existieren dementsprechend in Form einzelner Stereo- '' isomerer oder in Form von racemischen Gemischen. Alle diese Formen fallen in den Rahmen der Erfindung. Im Rahmen der oben angegebenen Herstellungsmethode können die Ausgangsstoffe in Form des Racemats oder in Form eines der Enantiomeren eingesetzt werden. Falls als Ausgangsstoff ein racemisches Gemisch eingesetzt wird, wird auch ein Endprodukt in Form eines racemischen Gemisches erhalten, wobei es möglich ist die im Endprodukt enthaltenen Stereoisomeren in üblicher Weise durch Chromatographieren oder fraktionierendes Kristallisieren voneinander zu trennen. Im allgemeinen stellt das bezogen auf das Kohlenstoffatom der Aminogruppe existierende L-Isomer das bevorzugte Isomer dar. Auch das D-Isomer, bezogen auf das (^-Kohlenstoffatom in der Acyl-Seitenkette, beispielsweise das im obigen Beispiel den Rest R_1fi tragende Kohlenstoffatom, ist bevorzugt.a star are marked. If R ₁ C- / R ₁₆ and R _{17 have} a meaning other than the meaning of hydrogen, the carbon atom carrying these radicals is an asymmetric carbon atom. The other carbon atoms marked by a star are in any case asymmetric carbon atoms. These compounds accordingly exist in the form of single stereo '' isomeric or in the form of racemic mixtures. All of these forms are within the scope of the invention. In the context of the above-mentioned production method, the starting materials can be used in the form of the racemate or in the form of one of the enantiomers. If a racemic mixture is used as the starting material, an end product in the form of a racemic mixture is also obtained, it being possible to separate the stereoisomers contained in the end product in a conventional manner by chromatography or fractional crystallization from each other. In general, the L isomer present relative to the carbon atom of the amino group is the preferred isomer. Also, the D isomer, based on the (^ -carbon atom in the acyl side chain, for example the carbon atom bearing the radical R _1fi in the above example, is preferred.

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen bilden Salze mit verschiedenen anorganischen und organischen Basen, und diese Salze fallen ebenfalls in den Rahmen der Erfindung. Solche Salze sind beispielsweise Ammoniumsalze, Alkalimetallsalze v/ie Natrium- und Kaliumsalze (welche bevorzugt sind), Erdalkalimetallsalze wie Calcium- und Magnesiumsalze, Salze mit organischen Basen wie Dicyclohexylamin, Benzathin, N-Methyl-D-glucamin, Hydrabamin und Salze mit Aminosäuren wie Arginin, Lysin u.dgl..The compounds according to the invention form salts with various inorganic and organic bases, and these salts are also within the scope of the invention. Such salts include, for example, ammonium salts, alkali metal salts, sodium and potassium salts (which are preferred), alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium salts, salts with organic bases such as dicyclohexylamine, benzathine, N-methyl-D-glucamine, hydrabamine and salts with amino acids such as Arginine, lysine and the like

Bevorzugt werden nicht toxische, physiologisch annehmbare Salze obzwar auch andere Salze, beispielsweise beim durch die Beispiele für den Fall des Dicyclohexylaminsalzes erläuterten Isoliere oder Reinigen des Produkts, brauchbar sind.Preferred are non-toxic, physiologically acceptable salts, although other salts are useful, for example, in the isolation or purification of the product exemplified by the examples of the case of the dicyclohexylamine salt.

Solche Salze werden in üblicher Weise durch Umsetzen der in Form der freien Säure vorliegenden Verbindung mit zumindest einem Äquivalent der entsprechenden Base hergestellt, wobei entweder in einem das gewünschte Salz nicht lösenden Lösungsmittel oder Reaktionsmedium gearbeitet wird oder beim Arbeiten mit Wasser als Lösungsmittel das Wasser durch Gefriertrocknen entfernt wird.Such salts are prepared in a conventional manner by reacting the free acid compound with at least one equivalent of the corresponding base, either operating in a solvent or reaction medium which does not dissolve the desired salt, or by freeze-drying the water when working with water as the solvent Will get removed.

Durch Neutralisieren des Salzes mit einer unlöslichen Säure wie einem in Η-Form vorliegenden Kationenaustauschharz, z.B. einem Polystyrolsulfonsäureharz wie Dowex 50, oder mit einer wässerigen Lösung einer Säure und Extrahieren des Reaktionsgemisches mit einem organischen Lösungsmittel wie Äthylacetat, Dichlormethan od.dgl. kann die freie Säure erhalten und dann gewünschtenfalls ein anderes Salz hergestellt werden.By neutralizing the salt with an insoluble acid such as a cation exchange resin in Η-form, e.g. a polystyrenesulfonic acid resin such as Dowex 50, or with an aqueous solution of an acid and extracting the reaction mixture with an organic solvent such as ethyl acetate, dichloromethane or the like. the free acid can be obtained and then, if desired, another salt prepared.

Weitere Versuchsdaten sind in den, bevorzugte Ausführungsformen betreffenden Beispielen enthalten, welche auch als Arbeitshinweise zum Herstellen weiterer Verbindungen der gewünschten Art aufzufassen sind.Further experimental data are contained in the examples relating to preferred embodiments, which are also to be understood as working instructions for producing further compounds of the desired type.

Eri'indungsgemäß herstellbare Verbindungen inhibieren die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin I in Angiotensin II und sind deshalb dazu geeignet durch Angiotensin bewirkten überhöhten Blutdruck zu verringern oder zu beseitigen. Unter der Wirkung des Enzyms Renin auf das im Blutplasma enthaltende Pseudoglobulin Angiotensinogen wird Angiotensin I erzeugt. Angiotensin I wird durch das Angiotensin umwandelnde Enzym (ACE) in Angiotensin II übergeführt, welches ein starker Pressor (eine Blutdruckerhöhende Substanz) ist, die als eine der Hauptursachen für verschiedenste Formen überhöhten Blutdrucks in verschiedenen Arten von Säugetieren, beispielsweise Ratten und Hunde, anzusehen ist. Die erfindungsgemäße Verbindungen greifen in die ReaktionsfolgeCompounds which can be prepared according to the invention inhibit the conversion of the decapeptide angiotensin I into angiotensin II and are therefore suitable for reducing or eliminating excessive blood pressure caused by angiotensin. Angiotensin I is produced under the action of the enzyme renin on the blood plasma-containing pseudoglobulin angiotensinogen. Angiotensin I is converted to angiotensin II by the angiotensin converting enzyme (ACE), which is a potent pressor (a blood pressure-raising substance) which is considered to be a major cause of various forms of excessive blood pressure in various species of mammals such as rats and dogs , The compounds of the invention engage in the reaction sequence

Angiotensinogen — —> Angiotensin I—-—-——> Angiotensin IIAngiotensinogen - - > Angiotensin I ------> Angiotensin II

durch Inhibieren des das Angiotensin umwandelnden Enzyms und durch teilweise oder vollständige Unterdrückung des Entstehens der Presse substanz Angiotensin II ein. Durch Verabreichen eines zumindest ein Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch annehmbaren Salzes hievon enthaltenden Präparats kann in an Hypertension leidender Säugetieren auf Angiotensin zurückzuführende Hypertension beseitigt oder gemildert werden. Durch Verabreichen von Verbindungen der Formel (I) in einer Menge von etwa 0,1 bis 100 mg, vorzugsweise etwa 1 bis 50 mg, pro kg Körpergewicht und Tag in Form einer Einzeldosis oder vorzugsweise in Form von zwei bis vier entsprechend kleineren Einzeldosen pro Tag kann der Blutdruck verringert v/erden und der Effekt kann nach der von S. L. Engel, T. R. Schaeffer, M. H. Waugh und B. Rubin, in Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 143, 4 83 (197:by inhibiting the angiotensin converting enzyme and by partially or completely suppressing the formation of the press substance angiotensin II. By administering a preparation containing at least one compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt thereof, hypertension due to angiotensin in hypertensive mammals can be eliminated or alleviated. By administering compounds of the formula (I) in an amount of about 0.1 to 100 mg, preferably about 1 to 50 mg, per kg of body weight and day in the form of a single dose or preferably in the form of two to four correspondingly smaller individual doses per day the blood pressure can be reduced and the effect can be determined by the method described by SL Engel, TR Schaeffer, MH Waugh and B. Rubin, in Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 143, 4 83 (197:

Zn 05 J U -xr-μ- Zn 05 JU -xr-μ-

für Tierversuche beschriebenen Methode gemessen werden. Verbindung gen der Formel (I) werden vorzugsweise oral verabreicht, jedoch können diese Verbindungen auch parenteral, beispielsweise subcutan, intramuskulär, intravenös oder intraperitoneal verabreicht werden.measured for animal experiments. Compounds of the formula (I) are preferably administered orally, but these compounds may also be administered parenterally, for example, subcutaneously, intramuscularly, intravenously or intraperitoneally.

Verbindungen der Formel (I) können zwecks Verringerung des Blutdrucks in verschiedensten Verabreichungungsformen, beispielsweise in Form von Tabletten oder Kapseln, in Form von oral zu verabreichenden Elixieren oder in Form von sterilen Lösungen oder Suspensionen zwecks parenteraler Verabreichungen verabreicht werden.Compounds of formula (I) may be administered for the purpose of reducing blood pressure in a variety of forms, for example in the form of tablets or capsules, in the form of orally administered elixirs or in the form of sterile solutions or suspensions for parenteral administration.

Eine Einheitsdosis, welche der pharmazeutischen Praxis entspricht, kann 10 bis 500 mg einer Verbindung der Formel (I) oder eines Gemisches von Verbindungen der Formel (I) oder physiologisch annehmbare Salze hievon zusammen mit einem physiologisch annehmbaren Vehikel, Träger, Exzipiens, Bindemittel, Konservierungsmittel, Stabilisator, Geschmacksstoff usw. enthalten. Die Menge an Wirkstoff in solchen Mischungen oder Präparaten ist eine solche, daß eine Dosierung innerhalb des oben angegebenen Bereiches möglich ist.A unit dose corresponding to pharmaceutical practice may comprise 10 to 500 mg of a compound of formula (I) or a mixture of compounds of formula (I) or physiologically acceptable salts thereof together with a physiologically acceptable vehicle, carrier, excipient, excipient, preservative , Stabilizer, flavoring, etc. included. The amount of active ingredient in such mixtures or preparations is such that dosage within the range given above is possible.

Beispiele für in Tabletten, Kapseln u.dgl. verwendbare Zusatzstoffe sind Bindemittel wie Traganth, Akaziengummi, Maisstärke oder Gelatine, Exzipientia wie Dicalciumphosphat, zerfallsbeschleunigende Stoffe wie Maisstärke, Kartoffelstärke, Alginsäure u.dgl., Schmiermittel wie Magnesiumstearat, Süßstoffe wie Saccharose, Lactose oder Saccharin, Geschmacksstoffe wie Pfefferminz oder Öle wie Wintergrünöl oder Kirschenöl. Falls als Einheitsdosis eine Kapsel vorgesehen ist, kann darin zusätzlich zu den oben angegebenen Materialien ein flüssiger Träger wie ein fettes Öl enthalten sein. Um die physikalische Form der Einheitsdosis zu modifizieren, können verschiedene andere Materialien, beispielsweise in Form von Überzügen, vorgesehen sein. Beispielsweise könner Tabletten mit Schellack oder Zucker oder mit beiden beschichtet sein. Ein Sirup oder Elixier kann den Wirkstoff, als Süßstoff Saccharose, als Konservierungsmittel Methyl- oder Propyl-paraben, einen Farbstoff und einen Geschmacksstoff v/ie Kirsch- oder Orangegeschmack enthalten.Examples of in tablets, capsules and the like. usable additives are binders such as tragacanth, acacia, corn starch or gelatin, excipients such as dicalcium phosphate, disintegrants such as corn starch, potato starch, alginic acid and the like, lubricants such as magnesium stearate, sweeteners such as sucrose, lactose or saccharin, flavorings such as peppermint or oils such as wintergreen oil or cherry oil. If a capsule is provided as a unit dose, it may contain, in addition to the above materials, a liquid carrier such as a fatty oil. In order to modify the physical form of the unit dose, various other materials, for example in the form of coatings, may be provided. For example, tablets may be coated with shellac or sugar or both. A syrup or elixir may contain the active ingredient, as a sweetener sucrose, as a preservative methyl or propyl paraben, a dye and a flavoring, cherry or orange flavor.

Sterile Präparate für Inj ektionszv/eckc können nach in derSterile preparations for injection z / eckc can after in the

4*8.19814 * 8.1981

AP C 07 C/228 053/0AP C 07 C / 228 053/0

Pharmazie üblichen Methoden durch Auflösen oder Suspendieren des Wirkstoffes in einem Vehikel, wie Wasser für Injektionszwecke, einem natürlichen pflanzlichen öl, wie Sasamöl, Kokosnußöl_t Erdnußöl, Baumwollsatnenöl usw„ oder einem synthetischen Fett,, wie Äthyloleat oder dgl«, hergestellt werden«, Hierbei können Puffer_f Konservierungsmittel und dgl« nach Bedarf eingemischt werden.Pharmaceutics conventional methods by dissolving or suspending the active ingredient in a vehicle, such as water for injection, a natural vegetable oil such as Sasamöl, coconut oil _t peanut oil, cottonseed oil etc "or a synthetic fat, such as Äthyloleat or the like,", " buffers _for preservatives and the like may be mixed as needed.

Die Erfindung wird im folgenden durch Ausführungsbeispiele näher erläuterte Die Reaktionsteilnehmer wurden in der Regel in molaren Äquivalenten eingesetzt«.The invention is explained in more detail below by exemplary embodiments. The reactants were generally used in molar equivalents.

Die Beispiele 1 bis 44 betreffen die Synthese von dem Rest R~A~ entsprechenden Verbindungen unter Verwendung von verschiedenen, die Gruppe R enthaltenden Ausgangsstoffen und von verschiedenen, die Gruppe A enthaltenden Ausgangsstoffen„ Eg soll jedoch darauf .hingewiesen werden, daß der Fachmann ohne weiteres in der Lage ist, weitere in Frage kommende Verbindungen herzustellen und hierbei Ausgangsstoffe mit entsprechenden anderen Gruppen R und A einzusetzen* Dem Rast A entsprechende Verbindungen werden an den nicht umzusetzenden funktionsllen Gruppen geschützt eingesetzt«Examples 1 to 44 relate to the synthesis of compounds corresponding to the radical R ~ A ~ using different starting materials containing the group R and of various starting materials containing the group A "However, it should be noted that the person skilled in the art can readily is able to produce other compounds in question and to use starting materials with corresponding other groups R and A. * Compounds corresponding to rest A are used on the non-functional groups to be used «

Beispiel 1: Herstellung von N^~B3nzoyl~thiazolidin~4~carbon--Ga ureExample 1: Preparation of N, N'-B3nzoyl-thiazolidine-4-carboxylic acid

Ein Gemisch aus 3,0 nmol Thia2olidia--4~carbonsäure, 10 mrnol Na_oC0._T , Wasser und Tetrahydrofuran (THF) wurde bei Raumtemperatur gerührt v.r.d dann bei Raumtemperatur unter wei~ to rom Rühren allmählich Pit einer Lösung von 1.0 r.imol ßenzoyl·A mixture of 3.0 nmol thia2olidia - 4 - carboxylic acid, 10 mmol Na _o C0. _T, water and tetrahydrofuran (THF) was stirred at room temperature vrd then at room temperature under wei ~ rom stirring to gradually Pit a solution of 1.0 r.imol ßenzoyl ·

AP C 07 C/228 053/0 - 28 - 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 - 28 - 58 911/11

Chlorid in wasserfreiem Tetrahydrofuran versetzt, worauf das Reaktionsgemisch bis zur abgeschlossenen Umsetzung gerührt wurde, wobei das Ende der Reaktion durch Dünnschichtchromatographie festgestellt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde sodann bei 30 C mittels eines Dünnschichtverdampfers vom Lösungsmittel befreit, worauf der Rückstand mit Wasser versetzt, das erhaltene Gemisch mehrmals mit Äthylacetat extrahiert und die abgetrennte wäßrige Phase mit 1 η HCl auf einen pH-Wert von 2 eingestellt wurde. Der hierbei entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und nach dem Waschen mit verdünnter Salzsäure und mit kaltem Wasser in einem Vakuumexsikkator über Pp°c getrocknet. Laut Dünnschichtchromatogramm war der Niederschlag homogen« Bei dieser Umsetzung wurde das Racemat erhalten«Chloride in anhydrous tetrahydrofuran and the reaction mixture was stirred until the reaction was complete, the end of the reaction being determined by thin layer chromatography. The reaction mixture was then freed at 30 C by means of a thin-film evaporator the solvent was evaporated and the residue treated with water, the resulting mixture was extracted several times with ethyl acetate and the separated aqueous phase was adjusted with 1 η HCl to a pH value of the second The resulting precipitate was filtered off and dried after washing with dilute hydrochloric acid and with cold water in a vacuum desiccator over Pp ° c. According to the thin-layer chromatogram, the precipitate was homogeneous. "In this reaction, the racemate was obtained."

Die optische Aktivität kann unverändert gehalten werden, wenn Benzoylchlorid und Thiazolidin—4~carbonsäure im molaren Ver«The optical activity can be kept unchanged when benzoyl chloride and thiazolidine-4-carboxylic acid in a molar ratio.

hältnis in Natronlauge nach der von Carter, H.E., et al., in J. Biol. Chem., 138, 626 (1941) beschriebenen Weise umgesetzt werden, wobei bei Verwendung von L-Thiazolidin-4-carbonsäure oder D-Thiazolidin-4-carbonsäure als Ausgangsstoff N^&—Benzoyl-L-thiazolidin-4-carbonsäure oder N°^-Benzoyl-D-thiazolidin-4-carbonsäure erhalten wird. ;:;in sodium hydroxide solution according to the manner described by Carter, HE, et al., J. Biol. Chem., 138, 626 (1941), using L-thiazolidine-4-carboxylic acid or D-thiazolidine-4 Carboxylic acid is obtained as starting material N ^& benzoyl-L-thiazolidine-4-carboxylic acid or N ° ^ -Benzoyl-D-thiazolidine-4-carboxylic acid. ;:;

Wenn an Stelle des Benzoylchlorids der Benzoyl-N-hydroxy- / succinimidester oder ein anderer aktiver Ester der Benzoesäure eingesetzt wird, bleibt die optische Aktivität ebenfalls erhalten.If benzoyl-N-hydroxy / succinimide ester or another active ester of benzoic acid is used instead of benzoyl chloride, the optical activity is retained as well.

Beispiel 2: Herstellung von N°^-Benzoyl-O-benzyl-threoninExample 2: Preparation of N ° -benzoyl-O-benzyl-threonine

Wenn statt der gemäß Beispiel 1 eingesetzten Thiazolidin- -4-carbonsäure O-Benzyl-threonin eingesetzt wurde, wurde im Rahmen der Arbeitsweise gemäß Beispiel 1 N⁰^ -Benzoyl-O-benzyl-threonin erhalten.If instead of the thiazolidine-4-carboxylic acid used according to Example 1 O-benzyl-threonine was used, was obtained in the procedure of Example 1 N ⁰ ^ -Benzoyl-O-benzyl-threonine.

Ähnlich wie in Beispiel 1 kann die optische Aktivität der Ausgangsstoffe beibehalten werden, wenn molare Mengen von Benzoylchlorid und O-Benzyl-threonin in Natronlauge umgesetzt werden, wobei aus den Ausgangsstoffen O-Benzyl-L-threonin bzw. Q-Benzyl-D- -threonin, N -Benzoyl-O-benzyl-L-threonin bzw. N°^--Benzoyl-O- -benzyl-D-threonin erhalten wird.Similar to Example 1, the optical activity of the starting materials can be maintained when molar amounts of benzoyl chloride and O-benzyl-threonine are reacted in sodium hydroxide, wherein the starting materials O-benzyl-L-threonine or Q-benzyl-D- threonine, N-benzoyl-O-benzyl-L-threonine or N ° ^ - benzoyl-O-benzyl-D-threonine is obtained.

Wenn an Stelle des gemäß Beispiel 2 eingesetzten Benzylchlorids der Benzoyl-N-hydroxysuccinimidester oder ein anderer aktiver Ester der Benzoesäure eingesetzt wird, bleibt ebenfalls die optische Aktivität erhalten.If the benzoyl-N-hydroxysuccinimide ester or another active ester of benzoic acid is used instead of the benzyl chloride used according to Example 2, the optical activity is likewise retained.

Beispiel 3: Herstellung von N⁰"^ -Benzoyl-norleucinExample 3: Preparation of N ⁰ "^ -benzoyl-norleucine

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 1 statt der Thiazolidin-4-carbonsäure Norleucin eingesetzt v/urde, wurde bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 1 N⁰^- -Benzoyl-norleucin erhalten.If norleucine was used instead of the thiazolidine-4-carboxylic acid in the procedure of Example 1, N ⁰ ^ - benzoyl-norleucine was obtained in the procedure of Example 1.

Ebenso wie in Beispiel 1 bleibt die optische Aktivität erhalten, wenn Benzoylchlorid und Norleucin in Natronlauge im molaren Verhältnis miteinander umgesetzt werden, wobei bei Verwendung der Ausgangsstoffe L-Norleucin bzw. D-Norleucin, N°^ -Benzoyi- -L-norleucin bzv;. N ^- -Benzoyl-D-norleucin erhalten wird.As in Example 1, the optical activity is maintained when benzoyl chloride and norleucine are reacted in sodium hydroxide in a molar ratio with each other, wherein using the starting materials L-norleucine or D-norleucine, N ° ^ -Benzoyi- L-norleucine bzv; , N ^ - benzoyl-D-norleucine is obtained.

Wenn statt des gemäß Beispiel 3 eingesetzten Benzoylchlorid der Benzoyl-N-hydroxysuccinimidester oder ein anderer aktiver EsterIf, instead of the benzoyl chloride used according to Example 3, the benzoyl-N-hydroxysuccinimidester or another active ester

2 8 053 02 8 053 0

der Benzoesäure eingesetzt wurde, blieb die optische Aktivität ebenfalls erhalten.the benzoic acid was used, the optical activity was also maintained.

Beispiel 4:Example 4:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 1 statt der Thiazolidin-4-carbonsäure eine der Gruppe A entsprechende Verbindung oder eine entsprechende geschützte Verbindung eingesetzt wurde, wurden die entsprechenden N"*· -Benzoyl-derivate von dem Rest A entsprechenden Verbindungen erhalten.When in the procedure of Example 1 instead of the thiazolidine-4-carboxylic acid, a compound corresponding to the group A or a corresponding protected compound was used, the corresponding N "* · benzoyl derivatives of compounds corresponding to the rest A were obtained.

Beispiel 5:Example 5:

Wein bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 1 statt des gemäß den Beispielen 1, 2, 3 und 4 eingesetzten Benzoylchlorids Formyl-, Acetyl-, Propanoyl-, Butanoyl-, Phenylacetyl-, Phenylpropanoyl- oder tert-Butyloxycarbonyl(Boc)-chlorid oder der entsprechende Acyl-N-hydroxysuccinimidester oder ein anderer aktiver Ester von diesen Säureresten entsprechenden Säuren eingesetzt wurde, wurden die entsprechenden Acylderivate von dem Rest A entsprechenden Verbindungen erhalten.Wine in the procedure of Example 1 instead of the used according to Examples 1, 2, 3 and 4 benzoyl chloride formyl, acetyl, propanoyl, butanoyl, phenylacetyl, phenylpropanoyl or tert-butyloxycarbonyl (Boc) chloride or the corresponding Acyl-N-hydroxysuccinimide ester or other active ester of acids corresponding to these acid radicals, the corresponding acyl derivatives were obtained from compounds corresponding to residue A.

Beispiel 6: Herstellung von N^-Benzoyl-phenylalaninExample 6: Preparation of N, -benzoyl-phenylalanine

Ein Gemisch aus 8,21 g Phenylalanin, 5,565 g Na-CO-., 40 ml Wasser und 20 ml Tetrahydrofuran (THF) wurde bei Raumtemperatur gerührt und dann bei Raumtemperatur unter weiterem Rühren innerhalb 45 Minuten allmählich mit einer Lösung von 7,73 g Benzoyl chlorid in 20 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst eine weitere Stunde gerührt und dann bei 30 C in einem rotierenden Verdampfer vom Tetrahydrofuran befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in Wasser aufgenommen, worauf das erhaltene Gemisch 4-mal mit Äthylacetat extrahiert, die erhaltene wässerige Phase mit 3n-HCl auf einen pH-Wert von 2 eingestellt, der hiebei erhaltene weiße kristalline Niederschlag abfiltriert, 3-mal mit kalter verdünnter Salzsäure und 3-mal mit kaltem Wasser gewaschen und schließlich in einem Vakuumofen bei etwa 50 C über P₉O getrocknet und das getrocknete Produkt aus wässerigem Äthanol umkristallisiert wurde. Das in einer Menge voa 8,37 g und mit Fp = 183 bis 184°C erhaltene Produkt wanderte bei der Dünnschichtchromatographie unter Verwendung fünf verschiedenerA mixture of 8.21 g of phenylalanine, 5.565 g of NaCO 2, 40 ml of water and 20 ml of tetrahydrofuran (THF) was stirred at room temperature and then gradually stirred at room temperature over 45 minutes with a solution of 7.73 g Benzoyl chloride in 20 ml of anhydrous tetrahydrofuran, whereupon the reaction mixture was first stirred for a further hour and then freed from the tetrahydrofuran at 30 C in a rotary evaporator. The resulting residue was taken up in water and the resulting mixture was extracted 4 times with ethyl acetate, the resulting aqueous phase was adjusted to pH 2 with 3N HCl, and the white crystalline precipitate obtained was filtered off 3 times with cold hydrochloric acid and washed three times with cold water and finally dried in a vacuum oven at about 50 C over P ₉ O and the dried product was recrystallized from aqueous ethanol. The product obtained in an amount of 8.37 g and mp = 183 to 184 ° C migrated in thin layer chromatography using five different

Lösungsinittelsystcnie als eine einzige Verbindung. Bei dieser Umsetzung wurde das Racemat erhalten.Solubilization system as a single compound. In this reaction, the racemate was obtained.

Falls bei der obigen Arbeitsweise statt in Na₉CO-.-Lösung in NaOH-Lösung und nach den Angaben von Carter, H.E., et al., in J. Biol. Chem. 138, 627 (1974) gearbeitet wurde, blieb die optische Aktivität erhalten, wobei aus den Ausgangsstoffen L-Phe bzw.Z D-Phe, N^ -Benzoyl-L-Phe bzw. N⁰^- -Benzoyl-D-Phe entstand. ./If in the above procedure, instead of in Na ₉ CO -.- solution in NaOH solution and according to the instructions of Carter, HE, et al., J. Biol. Chem., 138, 627 (1974) worked, remained the optical Activity obtained, from the starting materials L-Phe or Z D-Phe, N ^ -Benzoyl-L-Phe or N ⁰ ^ - benzoyl-D-Phe originated. ./

Wenn bei der o.bigen Arbeitsweise statt des Benzoylchlorids der Benzoyl-N-hydroxysuccinimidester eingesetzt wurde, blieb ebenfalls die optische Aktivität erhalten.When benzoyl-N-hydroxysuccinimide ester was used instead of benzoyl chloride in the above procedure, the optical activity was retained as well.

Beispiel 7:Example 7:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 6 statt des Phe eine spezielle andere der Gruppe A entsprechende Verbindung oder der geschützten Gruppe A entsprechende Verbindung eingesetzt wurde, wurden die N⁰*- -Benzoyl-derivate dieser Verbindungen erhalten.When, in the procedure of Example 6, a specific other compound corresponding to Group A or the compound corresponding to Group A was used instead of the Phe, the N ⁰ * - benzoyl derivatives of these compounds were obtained.

Beispiel 8:Example 8:

Obzwar die Formyl-, Acetyl-, Propanoyl-, Butanoyl-, Phenylacetyl-, Phenylpropanoyl- und tert-Butyloxycarbonyl(Boc)-derivate von dem Rest A entsprechenden Verbindungen im Handel erhältlich sind können diese Verbindungen auch dadurch hergestellt werden, daß bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 6 das gemäß den Beispielen 6 und 7 eingesetzte Benzoylchlorid durch das entsprechende Säurechlorid oder den entsprechenden Acyl-N-hydroxysuccinimidester ersetzt wird.Although the formyl, acetyl, propanoyl, butanoyl, phenylacetyl, phenylpropanoyl and tert-butyloxycarbonyl (Boc) derivatives of compounds corresponding to the A radical are commercially available, these compounds can also be prepared by reacting in the procedure according to Example 6, the benzoyl chloride used according to Examples 6 and 7 is replaced by the corresponding acid chloride or the corresponding acyl-N-hydroxysuccinimide ester.

Beispiel 9: Herstellung von N⁰^ -Cyclopentancarbonyl-cycloleucinExample 9: Preparation of N ⁰ -cyclopentanecarbonyl-cycloleucine

Bei -5 C wurde eine Lösung von 15 mniol Cyclopentancarbonsäure in Dichlormethan mit einer Lösung von 15 rnmol Dicyclohexylcarbodiimid in Dichlormethan versetzt, worauf der erhaltenen Lösunc eine mit N-Äthyl-morpholin neutralisierte Lösung von 15 mmol Cycloleucinbenzylester-Toluolsulfonat in Dimethylformamid zugesetzt und dann das Reaktionsgemisch zunächst bei 0^vC und dann bei Raumtemperatur bis zur laut Dünnschichtchromatogramm abgeschlossenen Umsetzung gerührt, dann durch Filtieren von ausgefälltem Dicyclohexylharnstoff .befreit und schließlich das Filtrat mit 50 ml Äthylacetat versetzt wurde..Die abgetrennte organische Phase wurde bisA solution of 15 mmol of cyclopentanecarboxylic acid in dichloromethane was added to a solution of 15 mmol of dicyclohexylcarbodiimide in dichloromethane at -5 C, whereupon a N-ethyl-morpholine neutralized solution of 15 mmol of cycloleucine benzyl ester toluenesulfonate in dimethylformamide was added to the resultant solution and then the reaction mixture first stirred at 0 ^v C and then at room temperature to the final reaction by thin-layer chromatography, then freed by precipitation of precipitated dicyclohexylurea and finally the filtrate with 50 ml of ethyl acetate was added .. The separated organic phase was until

228 053 0228 053 0

zur neutralen Reaktion gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet und dann filtriert, worauf vom Filtrat das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrennt und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Hexan umkristallisiert wurde.washed to neutral reaction, over anhydrous MgSO 4. dried and then filtered, whereupon the solvent was separated from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and hexane.

Der Benzylester wurde durch katalytisches Hydrieren in absolutem Äthanol unter Verwendung von 10 % Palladium auf Kohle als Katalysator gespal-ten, worauf der Katalysator abfiltriert, das Äthanol vom Filtrat mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der erhaltene Rückstand aus Äther und Hexan umkri-· stallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.The benzyl ester was split by catalytic hydrogenation in absolute ethanol using 10% palladium on carbon as a catalyst, whereupon the catalyst was filtered off, the ethanol was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the resulting residue was recrystallized from ether and hexane , In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 10: Herstellung von N -Cyclopentancarbonyl-norvalinExample 10: Preparation of N-cyclopentanecarbonyl-norvaline

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 9 das Cycloleucin durch Norvalin ersetzt wurde, wurde N^-Cyclopentancarbonyl- -norvalin erhalten.When the cycloleucine was replaced by norvaline in the procedure of Example 9, N ^ cyclopentanecarbonylnorvaline was obtained.

Beispiel 11:Example 11:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 9 das Cycloleucin durch eine der Gruppe A entsprechende Verbindung bzw. geschützte Verbindung ersetzt wurde, wurden die N⁰^--Cyclopentancarbonyl (cpc) -derivate der den Rest A aufweisenden Verbindungen erhalten.When in the procedure of Example 9, the cycloleucine was replaced by a compound corresponding to the compound A or a protected compound, the N ⁰ ^ - cyclopentanecarbonyl (cpc) derivatives of the compounds containing the residue A were obtained.

Beispiel 12: Herstellung von N⁰^--Cyclopentancarbonyl-4-chlorphenylalaninExample 12: Preparation of N ⁰ ^ - cyclopentanecarbonyl-4-chlorophenylalanine

Bei -5 C wurde eine Lösung von 15 mmol Cyclopentancarbonsäure in Dichlormethan mit einer kalten Lösung von 15 mmol Dicyclohexylcarbodiimid in Dichlormethan versetzt, worauf das erhaltene Gemisch mit einer Lösung von 15 mmol· des zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Toluolsulfonats des 4-Chlor-phenylalanin-t- -butylesters versetzt und das Reaktionsgemisch zunächst bei 0 C und dann bei Raumtemperatur bis zur laut Dünnschichtchromatografie abgeschlossenen Umsetzung gerührt, dann vom Filtrat der entstandene Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, das Filtrat mit 50 ml Äthylacetat versetzt, die abgetrennte organische Phase bis zur neutralen Reaktion gewaschen, über' wasserfreiem MgSO. getrocknet und filtriert, voin Filtrat das Lösungsmittel mittels eines rotierendenAt -5 C, a solution of 15 mmol cyclopentanecarboxylic acid in dichloromethane was treated with a cold solution of 15 mmol dicyclohexylcarbodiimide in dichloromethane, whereupon the resulting mixture was treated with a solution of 15 mmol · of the previously neutralized with N-ethyl-morpholine toluenesulfonate of 4-chloro phenylalanine t-butyl ester and the reaction mixture was first stirred at 0 C and then at room temperature to completion by thin layer chromatography reaction, then filtered from the filtrate, the resulting dicyclohexylurea, the filtrate with 50 ml of ethyl acetate, the separated organic phase to neutral Reaction washed over 'anhydrous MgSO4. dried and filtered, voin filtrate, the solvent by means of a rotating

Verdampfers abgedampft und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Hexan umkristallisiert wurde.Evaporator was evaporated and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and hexane.

Der erhaltene t-Butylester wurde in wasserfreiem HF in Anwesenheit von Anisol gespalten, worauf die Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrennt und der hiebei erhaltene Rückstand aus Äther und Hexan umkristallisiert v/urde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.The obtained t-butyl ester was cleaved in anhydrous HF in the presence of anisole, whereupon the solvents were separated by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from ether and hexane. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 13:Example 13:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 12 statt des 4-Chlorphenylalanins eine einem speziellen Rest A entsprechende Verbindung oder geschützte Verbindung eingesetzt wurde, wurde das entsprechende N^ -Cyclopentan-carbonyl(cpc)derivat der den Rest A aufweisenden Verbindung erhalten.When a compound or protected compound corresponding to a specific radical A was used instead of 4-chlorophenylalanine in the procedure of Example 12, the corresponding N ^ -cyclopentan-carbonyl (cpc) derivative of the compound having the radical A was obtained.

Beispiel 14: Herstellung von N⁰^--Cyclopentancarbony!phenylalaninExample 14: Preparation of N ⁰ ^ -cyclopentanecarbonyphenylalanine

Bei -5 C v/urde eine Lösung von 1,4114 g Cyclopentancarbonsaure in 5 ml Dichlormethan mit einer kalten Lösung von 2,06 g Dicyclohexylcarbodiimid in 10 ml Dichlormethan versetzt, worauf das erhaltene Gemisch mit einer zuvor mit 1,36 ml N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 4,28 g des Toluolsulfonats des Phenylalaninbenzylesters in 10 ml Dimethylformamid versetzt, dann das Reaktionsgemisch zunächst eine Stunde bei 0 C und dann 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, vom Reaktionsgemisch Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, das Filtrat mit 50 ml Äthylacetat versetzt, die abgetrennte organische Phase bis zur neutralen Reaktion gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet und filtriert, vom Filtrat das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 2,35 g weiße Kristalle mit Fp = 88 bis 89°C erhalten, ber.: Analyse: 75,19 % C, 7,17 % H, 3,9855 % N gef.: 7 4,96 % C, 7,17 % H, 4,09 % NAt -5 ° C, a solution of 1.4114 g of cyclopentanecarboxylic acid in 5 ml of dichloromethane was treated with a cold solution of 2.06 g of dicyclohexylcarbodiimide in 10 ml of dichloromethane, whereupon the resulting mixture was treated with 1.36 ml of N-ethyl -morpholine neutralized solution of 4.28 g of the toluenesulfonate of Phenylalaninbenzylesters in 10 ml of dimethylformamide added, then the reaction mixture first for 1 hour at 0 C and then stirred for 3 hours at room temperature, filtered from the reaction mixture dicyclohexylurea, the filtrate mixed with 50 ml of ethyl acetate, the separated organic phase until neutral reaction, over anhydrous MgSO4. dried and filtered, the solvent was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and hexane. In this way, 2.35 g of white crystals with mp = 88 to 89 ° C were obtained, calc .: analysis: 75.19% C, 7.17% H, 3.9855 % N found: 7 4.96% C, 7.17 % H, 4.09% N

Der Benzylester wurde in absolutem Alkohol in Anwesenheit von 2 g eines 10 % Palladium auf Kohle enthaltenden Katalysators durch Hydrieren gespalten, worauf der Katalysator abfiltriert, vom Filtrat das Äthanol mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der erhaltene Rückstand aus Äther und Hexan umkri-The benzyl ester was cleaved by hydrogenation in absolute alcohol in the presence of 2 g of a catalyst containing 10 % palladium on carbon, whereupon the catalyst was filtered off, the ethanol was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the resulting residue was recrystallized from ether and hexane.

228053 0228053 0

stallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 1,15 g der gewünschten Verbindung in Form weißer Kristalle und mit Fp = 107 bis 1O8°Cwas stalled. In this way, 1.15 g of the desired compound were in the form of white crystals and mp = 107 to 1080 ° C.

erhalten.receive.

ber.: Analyse: 68,94% C, 7,33% H, 5,36% NCalc .: Analysis: 68.94% C, 7.33% H, 5.36% N

gef.: 68,90 % C, 7,32 % H, 5,34 % Nfound: 68.90% C, 7.32% H, 5.34% N

Die erhaltene Verbindung erwies sich bei der Papierelektrophorese und bei den mit drei verschiedenen Lösungsmittelsystemen durchgeführten Dünnschichtchromatogragrammen als homogen. Diese Verbindung wird abgekürzt mit N^—cpc-L-Phe bezeichnet.The compound obtained proved to be homogeneous in paper electrophoresis and in thin-layer chromatograms carried out with three different solvent systems. This compound is abbreviated to N ^ -cpc-L-Phe.

Beispiel 15:Example 15:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 14 Phe durchWhen in the operation of Example 14 Phe by

eine spezielle, die Gruppe A aufweisende Verbindung oder geschützte Verbindung ersetzt dieser Aminosäuren erhalten.a special group A containing compound or protected compound replaces these amino acids.

schützte Verbindung ersetzt wurde, wurden die N -cpc-derivatereplaced protected compound, the N -cpc derivatives

Beispiel 16: Herstellung des N-Hydroxysuccinimidesters des CyclopentancarbonsäureExample 16: Preparation of N-hydroxysuccinimide ester of cyclopentanecarboxylic acid

Bei 0 C wurde ein Gemisch aus 20 mmol Cyclopentancarbonsäure, 20 mmol N-Hydroxysuccinimid und DMF tropfenweise mit einer kalten Lösung von 20 mmol Dicyclohexylcarbodiimid in Dimethylformamid (DMF) versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst 30 Minuten bei 0 C und dann über Nacht bei 4 C gerührt, der auskristallisierte Dicyclöhexylharnstoff abfiltriert und der Filterrückstand mit Äthylacetat gewaschen, das Lösungsmittel vom mit der Waschflüssigkeit vereinigten Filtrat unter vermindertem Druck abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Benzol und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.At 0 C, a mixture of 20 mmol cyclopentanecarboxylic acid, 20 mmol N-hydroxysuccinimide and DMF was added dropwise with a cold solution of 20 mmol dicyclohexylcarbodiimide in dimethylformamide (DMF), whereupon the reaction mixture first at 0 C for 30 minutes and then at 4 C overnight stirred, the crystallized Dicyclöhexylharnstoff filtered off and the filter residue washed with ethyl acetate, the solvent was removed from the filtrate combined with the washing liquid under reduced pressure and the resulting residue was recrystallized from benzene and hexane. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 17: Herstellung des N-Hydroxysuccinimidesters der CyclopentancarbonsäureExample 17: Preparation of the N-hydroxysuccinimide ester of cyclopentanecarboxylic acid

Bei 0 C wurde ein Gemisch aus 5,71 g Cyclopentancarbonsäure 5,7 6 g N-Hydroxysuccinimid und DMF tropfenweise mit einer kalten Lösung von 11,4 g Dicyclohexylcarbodiimid in DMF (Dimethylformamid) versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst 30 Minuten bei 0 C und dann über Nacht bei 4 C gerührt, der auskristallisierte Dicyclöhexylharnstof f abfiltriert und der Filterrückstand mit Äthyl-At 0 C, a mixture of 5.71 g of cyclopentanecarboxylic acid 5.7 g of N-hydroxysuccinimide and DMF was added dropwise with a cold solution of 11.4 g of dicyclohexylcarbodiimide in DMF (dimethylformamide), whereupon the reaction mixture was initially at 0 C and 30 minutes then stirred overnight at 4 C, the crystallized Dicyclöhexylharnstof f filtered off and the filter residue with ethyl

acetat gewaschen, vom mit der Waschflüssigkeit vereinigten FiI-trat die Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Benzol und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 5,77 g weißer Kristalle mit Fp = 72,5 bis 73 C erhalten. Das Infrarotabsorptionsspektrum in Chloroform war für das Spektrum eines N-Hydroxysuccinimids typisch, ber.: Analyse: 56,86 % C, 6,20 % H, 6,63 % N gef.: 56,77 % C, 6,07 % H, 6,66 % Nwashed acetate from the Fii-combined with the washing liquid, the solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was recrystallized from benzene and hexane. In this way, 5.77 g of white crystals with mp = 72.5 to 73 C were obtained. The infrared absorption spectrum in chloroform was typical for the spectrum of an N-hydroxysuccinimide, calc .: analysis: 56.86% C, 6.20% H, 6.63% N found: 56.77% C, 6.07% H , 6.66% N

Beispiel 18: Herstellung von N°^- -Cyclopentancarbonyl-N -tert- -butyloxycarbonyl-L-lysinExample 18: Preparation of N ° -cyclopentanecarbonyl-N-tert-butyloxycarbonyl-L-lysine

Eine Lösung von 10 mmol N^-tert-Butyloxycarbonyl-L-lysin und 10 mmol NaHCO., in einem Gemisch aus Wasser und Tetrahydrofuran wurde in einem Eisbad unter Rühren gekühlt und dann mit einer kalten Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 17 hergestellten Verbindung in THF versetzt, worauf das erhaltene Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und nach dem Abtrennen des Tetrahydrofurans mittels eines rotierenden Verdampfers bei 35 C mit Wasser versetzt und der pH-Wert des erhaltenen Gemisches mit festem NaHCO., auf 9 eingestellt wurde. Die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte wässerige Phase wurde 3-mal mit Äthylacetat extrahiert, wobei die organische Phase verworfen wurde. Die verbliebene wässerige Lösung wurde in einem Eisbad gekühlt und dann in Anwesenheit von Äthylacetat mit In-HCl auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, worauf die abgetrennte organische Phase zunächst 2-mal mit Eiswasser und dann 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet und dann filtriert, vom Filtrat das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Äther und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A solution of 10 mmol of N 2 -tert-butyloxycarbonyl-L-lysine and 10 mmol NaHCO 3, in a mixture of water and tetrahydrofuran was cooled in an ice bath with stirring and then with a cold solution of 10 mmol of the compound prepared according to Example 17 in THF, whereupon the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight and after separation of the tetrahydrofuran by means of a rotary evaporator at 35 C with water and the pH of the resulting mixture with solid NaHCO., Was adjusted to 9. The aqueous phase separated from the resulting mixture was extracted 3 times with ethyl acetate, whereby the organic phase was discarded. The remaining aqueous solution was cooled in an ice-bath and then acidified to pH 2 in the presence of ethyl acetate with In-HCl, after which the separated organic phase was washed twice with ice-water and then twice with brine anhydrous MgSO4. dried and then filtered, the solvent was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from ether and hexane. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 19: Herstellung von N -Cyclopentancarbonyl-N^ -tert- -butyloxycarbonyl-L-lysinExample 19: Preparation of N-cyclopentanecarbonyl-N'-tert-butyloxycarbonyl-L-lysine

Eine Lösung von 1,2316 g N <- -tert-Butyloxycarbonyl-L-lysin und 4 20 mg NaIICO-, in 10 ml Wasser und 5 ml TIIF wurde unter Rühren in einem Eisbad gekühlt und dann mit einer kalten Lösung von 1,19 g der gemäß Beispiel 17 hergestellten Verbindung in 10 mlA solution of 1.2316 g of N -tert-butyloxycarbonyl-L-lysine and 4 20 mg of NaIICO 2 in 10 ml of water and 5 ml of TIIF was cooled with stirring in an ice bath and then with a cold solution of 1.19 g of the compound prepared according to Example 17 in 10 ml

22 8 05 3 022 8 05 3 0

Tetrahydrofuran versetzt, worauf das Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, dann vom Reaktionsgemisch bei 35 C das Tetrahydrofuran in einen rotierenden Verdampfer abgedampft, der erhaltene Rückstand in etwa.20 ml Wasser aufgenommen, der pH-Wert des erhaltenen Gemisches mit festem NaHCO- auf 9 eingestellt, die erhaltene wässerige Phase 3-mal mit Äthylacetat gewaschen und die hiebei erhaltene organische Phase verworfen, die wässerige Phase in einem Eisbad gekühlt und dann in Anwesenheit von Äthylacetat mittels In-HCl auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, die erhaltene organische Phase zunächst 2-mal mit Eiswasser und dann 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, dann über wasserfreiem MgSO. getrocknet und dann filtriert und schließlich mit einem rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand aus Äther und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 1,135 g weißer Kristalle mit Fp = 104,5 bis 105,5°C erhalten.Thereafter, the reaction mixture was stirred at room temperature overnight, then evaporated from the reaction mixture at 35 C, the tetrahydrofuran in a rotary evaporator, the residue obtained in about 20 ml of water, the pH of the resulting mixture with solid NaHCO- to 9 the aqueous phase obtained was washed 3 times with ethyl acetate and the resulting organic phase was discarded, the aqueous phase was cooled in an ice bath and then acidified to pH 2 in the presence of ethyl acetate using In-HCl, the resulting organic phase first with ice water twice and then twice with brine, then over anhydrous MgSO 4. dried and then filtered and finally freed from the solvent with a rotary evaporator and the resulting residue was recrystallized from ether and hexane. In this way, 1.135 g of white crystals with mp = 104.5 to 105.5 ° C were obtained.

ber.: Analyse: 59,63 % C, 8,83 % H, 8,18 % N gef.: 59,74 % C, 8,85 % H, 8,24 % Ncalc .: analysis: 59.63% C, 8.83% H, 8.18% N found .: 59.74% C, 8.85% H, 8.24% N

Die erhaltene Verbindung erwies sich bei der Papierelektrophorese und bei der mit drei verschiedenen Lösungsmittelsystemen durchgeführten Dünnschichtchromatographie als homogen.The resulting compound was found to be homogeneous in paper electrophoresis and in thin layer chromatography with three different solvent systems.

Beispiel 20: Herstellung von N¹^ -Cyclopentancarbonyl-N^- -tertbutyloxycarbonyl-L-Iysin-N-hydroxysuccinimidesterExample 20: Preparation of N ¹ -cyclopentanecarbonyl-N 1 -tertbutyloxycarbonyl-L-Iysine-N-hydroxysuccinimide ester

Eine auf -5°C gekühlte Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 18 hergestellten Verbindung und 10 mmol N-Hydroxysuccinimid in CH-Cl- wurde unter Rühren mit einer kalten Lösung von 10 mmol Dicyclohexylcarbodiimid in CH-Cl- versetzt, worauf das Reaktionsgemisch 30 Minuten bei 0°C und dann über Nacht bei 4 C gerührt, der hiebei auskristallisierte Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, das mit der Waschflüssigkeit vereinigte FiI-trat 2-mal mit 1,0 n-NaHCO^-lösung, dann 2-mal mit Wasser und schließlich mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, die erhaltene organische Phase über wasserfreiem MgSO. getrocknet, filtriert und mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand·aus Isopropanol umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A cooled to -5 ° C solution of 10 mmol of the compound prepared according to Example 18 and 10 mmol N-hydroxysuccinimide in CH-Cl- was added with stirring with a cold solution of 10 mmol dicyclohexylcarbodiimide in CH-Cl-, whereupon the reaction mixture 30 Stirred minutes at 0 ° C and then overnight at 4 C, the crystallized hereby dicyclohexylurea filtered off and washed with ethyl acetate, the FiI-step combined with the washing liquid 2 times with 1.0 N NaHCO ^ solution, then 2 times washed with water and finally with saturated brine, the resulting organic phase over anhydrous MgSO4. dried, filtered and freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol. In this way, the desired compound was obtained.

_ 37 -_ 37 -

Beispiel 21: Herstellung von Ν¹*· -Cyclopentancarbonyl-N ^ -tert- -butyloxycarbony1-L-Iysin-N-hydroxysuccinimidesterExample 21: Preparation of Ν ¹ * -cyclopentanecarbonyl-N'-tert-butyloxycarbony1-L-lysine N-hydroxysuccinimide ester

Eine auf -5 C gekühlte Lösung von 1,027 g der gemäß Beispiel 19 hergestellten Verbindung und 346 mg N-Hydroxysuccinimid in 10 ml CH_C1„ wurde unter Rühren mit einer kalten Lösung von '; 680 mg Dicyclohexylcarbodiimid in 5 ml CH„C1„ versetzt, worauf das Reaktionsgemisch 30 Minuten bei 0 C und dann über Nacht bei 4 C gerührt, vom Reaktionsgemisch auskristallisierter Dicyclohexy!harnstoff abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat 2-mal mit 1,0 n-NaHCO^- Lösung, 2-:nal mit Wasser und schließlich mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, die organische Phase über wasserfreiem MgSO. getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel mittels eines rotieren den Verdampfers abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol umkristallisiert v/urde. Auf diese Weise wurden 0,844 g weißer Kristalle mit Fp = 140,5 C erhalten, welche in Chloroform das für N-Hydroxysuccinimidester typische Infrarotabsorptionsspektrum zeigten.A cooled to -5 C solution of 1.027 g of the compound prepared according to Example 19 and 346 mg of N-hydroxysuccinimide in 10 ml CH_C1 "was stirred with a cold solution of '; 680 mg of dicyclohexylcarbodiimide in 5 ml of CH "C1", whereupon the reaction mixture was stirred at 0 C for 30 minutes and then at 4 C overnight, filtered from the reaction mixture crystallized dicyclohexyl! Urea and washed with ethyl acetate, the filtrate combined with the washing liquid 2 times with 1.0 N NaHCO 3 solution, 2-: once with water and finally with saturated brine, the organic phase over anhydrous MgSO 4. dried, filtered and the solvent was driven off by means of a rotary evaporator and the resulting residue was recrystallized from isopropanol v / urde. In this way, 0.844 g of white crystals with mp = 140.5 C were obtained, which showed in chloroform the typical for N-hydroxysuccinimide ester infrared absorption spectrum.

ber.: Analyse: 57,39 % C, 7,57 % H, 9,56 % N gef.: 57,10 % C, 7,57 % H, 9,61 % Ncalc .: analysis: 57.39% C, 7.57% H, 9.56% N found: 57.10% C, 7.57% H, 9.61% N

Beispiel 22: Herstellung von N ⁰^- - (N⁰^ -cyclopentancarbonyl-N -tert-butyloxycarbony1-L-IysyI)-6-methyl-tryptophanExample 22: Preparation of N ⁰ ^ - - (N ⁰ -cyclopentanecarbonyl-N-tert-butyloxycarbony1-L-Iysyl) -6-methyl-tryptophan

Ein Gemisch aus 10 mmol 6-Methyl-tryptophan, 10 mmol NaHCO₃, Wasser und DMF v/urde tropfenweise mit einer Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 20 hergestellten Verbindung in Dioxan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann mittels eines rotierenden Verdampfers bei 35 C vom Dioxan befreit, der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch nach dem Kühlen mit, 0,In-HCl auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, die hiebei erhaltene wässerige Phase verworfen, die organische Phase mit kaltem Wasser und mit gesättigter Kochsalzlösung gev/aschen und dann über wasserfreiem MgSO. getrocknet und mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand aus einem Gemisch aus Äther und Hexan umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbinduncr erhalten.A mixture of 10 mmol 6-methyl-tryptophan, 10 mmol NaHCO ₃ , water and DMF v / urde dropwise with a solution of 10 mmol of the compound prepared according to Example 20 in dioxane, whereupon the reaction mixture was stirred overnight at room temperature and then Of a rotating evaporator at 35 C from the dioxane, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling with, 0, In-HCl acidified to a pH of 2, the aqueous phase obtained here discarded, the organic phase with water and saturated brine, then anhydrous MgSO4. dried and freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from a mixture of ether and hexane. In this way the desired connection was obtained.

228053 0228053 0

Beispiel 23: Herstellung von N^- - (N^ -Cyclopentancarbonyl-N^- -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl)-methioninExample 23: Preparation of N ^ - - (N'-cyclopentanecarbonyl-N'-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -methionine

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 22 statt des 6-Methyl-tryptophans Methionin eingesetzt wurde, wurde die gewünschte Verbindung erhalten.When methionine was used instead of the 6-methyl-tryptophan in the procedure of Example 22, the desired compound was obtained.

Beispiel 24: Herstellung von N^ - (N⁰^-Cyclopentancarbonyl-N^-- -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl)-prolinExample 24: Preparation of N ^ - (N ⁰ -cyclopentanecarbonyl-N 1 -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -proline

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 22 statt des 6- -Methyl-tryptophans Prolin eingesetzt wurde, wurde die gewünschte Verbindung erhalten. " When proline was used instead of the 6-methyl-tryptophan in the procedure of Example 22, the desired compound was obtained. "

Beispiel 25:Example 25:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 22 statt des 6-Methyl-tryptophans eine spezielle, die Gruppe A aufweisende Verbindung oder geschützte Verbindung eingesetzt wurde, wurde das N^-cpc-N ^-Boc-L-Lys-derivat der jeweiligen den Rest A aufweisenden Verbindung erhalten.When a specific group A-containing compound or protected compound was used in the procedure of Example 22 instead of the 6-methyl-tryptophan, the N ^ -cpc-N'-Boc-L-Lys derivative of each of the residues A containing compound.

Beispiel 26:Example 26:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 16, 18 und 20 statt der gemäß Beispiel 16 eingesetzten Cyclopentancarbonsäure Pyro-L-glutaminsäure eingesetzt wurde, wurde der entsprechende N^-Pyro-L-glutamyl-N£ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysin-N-hydroxysuccinimidester erhalten. Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 22 der gemäß den Beispielen 22 bis 25 eingesetzte N^-cpc-N^ -Boc-L-Lys-N-hydroxysuccinimidester durch den N°^ -Pyro-L-glutamyl- -N £-tert-butyloxycarbonyl-L-lysin-N-hydroxysuccinimidester ersetzt wurde, wurden die jeweiligen N^-Pyro-L-glutamyl-N ^-Boc- -L-Lys-derivate der den Rest A aufweisenden Verbindungen erhalten.When pyro-L-glutamic acid was used instead of the cyclopentanecarboxylic acid used according to Example 16 in the procedure according to Example 16, 18 and 20, the corresponding N ^ -Pyro-L-glutamyl-N-tert-butyloxycarbonyl-L-lysine-N hydroxysuccinimide ester. When in the procedure according to Example 22 of the N ^ -cpc-N ^ -Boc-L-Lys-N-hydroxysuccinimide ester used according to Examples 22 to 25 by the N ° ^ -Pyro-L-glutamyl-N £ tert- butyloxycarbonyl-L-lysine N-hydroxysuccinimide ester was replaced, the respective N ^ -Pyro-L-glutamyl-N ^ -Boc- L-Lys were obtained derivatives of the compounds A having the rest.

Beispiel 27: Herstellung von N^-Cyclopentancarbonyl-N ^- -tert- -butyloxycarbonyI-L-Iysy1phenylalaninExample 27: Preparation of N 1 -cyclopentanecarbonyl-N 1 - -tert -butyloxycarbonyl-L-Iysyl-phenylalanine

Ein Gemisch aus 99,1 mg Phenylalanin, 51 mg NaHCO.,, 2 ml Wasser und 1 ml DMF wurde tropfenweise mit einer Lösung von 220 mg der gemäß Beispiel 21 hergestellten Verbindung in 2 ml Dioxan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann bei 3 5 C mittels eines rotierenden VerdampfersA mixture of 99.1 mg of phenylalanine, 51 mg of NaHCO 3, 2 ml of water and 1 ml of DMF was added dropwise with a solution of 220 mg of the compound prepared according to Example 21 in 2 ml of dioxane, whereupon the reaction mixture was stirred overnight at room temperature and then at 3 5 C by means of a rotary evaporator

L Ö U Ό O U L Ö U Ό O U

vom Dioxan befreit, der erhaltene Rückstand in 10 ml Äthylacetat aufgenommen, das erhaltene Gemisch nach dem Kühlen mit 0,In-FlCl auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, die hiebei erhaltene wässerige Phase verworfen, die erhaltene organische Phase mit Eiswasser und mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet und mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand aus einem Gemisch aus Äther und Petroläther (Siedebereich 30 bis 60°C) umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 95 mg eines bei 90 bis 92 C· schmelzenden weißen Feststoffes erhalten, der sich bei der Papierelektrophorese und bei der mit vier verschiedenen Lösungsmit;elsystemen durchgeführten Dünnschichtchromatographie als homogen erwies.from dioxane, the residue obtained was taken up in 10 ml of ethyl acetate, the resulting mixture after cooling with 0, In-FlCl acidified to a pH of 2, the aqueous phase obtained here discarded, the resulting organic phase with ice water and with saturated Brine, washed over anhydrous MgSO4. dried and freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from a mixture of ether and petroleum ether (boiling range 30 to 60 ° C). In this way, 95 mg of a white solid melting at 90 ° to 92 ° C. were obtained, which proved to be homogeneous in paper electrophoresis and in thin-layer chromatography carried out with four different solvent systems.

ber.: Analyse: 63,78 % C, 8,03 % H, 8,58 % N gef.: 63,40 % C, 8,07 % H, 8,34 % Ncalc .: analysis: 63.78% C, 8.03% H, 8.58% N found .: 63.40% C, 8.07% H, 8.34% N

Diese Verbindung wird abgekürzt als N^ -cpc-N^--Boc-L-Lys-L-Phe bezeichnet.This compound is abbreviated as N 1 -cpc-N 1 -Boc-L-Lys-L-Phe.

Beispiel 28:Example 28:

Falls bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 27 das gemäß Beispiel 27 eingesetzte Phe durch eine spezielle den Rest A aufweisende Verbindung oder geschützte Verbindung ersetzt wurde, wurden die entsprechenden N⁰^ -cpc-N ^--Boc-L-Lys-derivate der entsprechenden Aminosäure erhalten.If, in the procedure of Example 27, the Phe used according to Example 27 was replaced by a specific compound or protected compound containing the residue A, the corresponding N ⁰ 1 -cpc-N 1 -Boc-L-Lys derivatives of the corresponding amino acid receive.

Beispiel 29:Example 29:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 17, 19 und 21 die gemäß Beispiel 17 eingesetzte Cyclopentancarbonsäure durch Pyro-L-glutaminsäure ersetzt wurde, wurde der entsprechende N^ -Pyro-L-glutamyl-N£-tert-butyloxycarbonyl-L-Iysin-N-hydroxysuccini midester erhalten. Wenn diese Verbindung bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 27 statt des gemäß den Beispielen 27 und 28 eingesetzten N^^v -cpc-N ^c- -Boc-L-Lys-N-hydroxysuccinimidesters eingesetzt wurde, wurden die entsprechenden N°^-Pyro-L-glutamyl-N£- -Boc-L-Lys-derivate der entsprechenden Aminosäuren erhalten.When the cyclopentanecarboxylic acid used according to Example 17 was replaced by pyro-L-glutamic acid in the procedure according to Examples 17, 19 and 21, the corresponding N, -Pyro-L-glutamyl-N-tert-butyloxycarbonyl-L-lysine N-hydroxysuccini midester obtained. When this compound was used in the procedure of Example 27 instead of the used in Examples 27 and 28 N ^ ^v -cpc-N ^c - -Boc-L-Lys-N-hydroxysuccinimide ester, the corresponding N ° ^ -Pyro-L -glutamyl-N-Boc-L-Lys derivatives of the corresponding amino acids.

Beispiel 30: Herstellung von N ⁰^--Pyro-L-glutamyl-phenylglycinbenζνIesterExample 30: Preparation of N ⁰ ^ -pyro-L-glutamyl-phenylglycine benzene ester

228053 0228053 0

- yr -ko- - yr -ko-

Eine unter Rühren in einem Eisbad gekühlte und mit N-Äthylmorpholin neutralisierte Lösung von 20 mmol Pyro-L-glutami,nsäure und 20 mmol des toluolsulfonsauren Salzes des Phenylglycinbenzylesters in einem im Volumsverhältnis von 4:1 aus Dichlormethan und DMF bestehenden Lösungsmittelgemisch wurde mit einer Lösung von 20 mmol Dicyclohexylcarbodiimid in Dichlormethan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde in einem Eisbad und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, vom Reaktionsgemisch der entstandene Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat bei 40 C unter vermindertem Druck mittels eines rotierenden Verdampfers von Lösungsmitteln befreit, der erhaltene Rückstand in Äthylacetat aufgenommen, die erhaltene Lösung mit Wasser bis zur neutralen Reaktion gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet, filtriert und mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Äther umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A cooled with stirring in an ice bath and neutralized with N-ethylmorpholine solution of 20 mmol Pyro-L-glutami, acid and 20 mmol of toluolsulfonsauren salt of Phenylglycinbenzylesters in a volume ratio of 4: 1 of dichloromethane and DMF existing solvent mixture was mixed with a solution of 20 mmol dicyclohexylcarbodiimide in dichloromethane, whereupon the reaction mixture was stirred for one hour in an ice bath and then overnight at room temperature, filtered from the reaction mixture, the resulting dicyclohexylurea and washed with ethyl acetate, the combined with the washing liquid filtrate at 40 C under reduced pressure by means of a rotating Solvent evaporator of solvents, the residue obtained was taken up in ethyl acetate, the resulting solution was washed with water until neutral, over anhydrous MgSO4. dried, filtered and freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and ether. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 31: Herstellung von N -Pyro-L-glutamyl-phenylglycinExample 31: Preparation of N-pyro-L-glutamyl-phenylglycine

Der gemäß Beispiel 30 hergestellte Benzyläther wurde mit absolutem Äthanol unter Verwendung eines 10 % Palladium auf Kohle enthaltenden Katalysators durch Hydrieren katalytisch gespalten, worauf der Katalysator vom Reaktionsgemisch abgetrennt, vom Filtrat das Äthanol mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Benzol umkristallisiert wurde. Auf diese Weise v/urde die gewünschte Verbindung erhalten.The benzyl ether prepared according to Example 30 was catalytically cleaved with absolute ethanol using a catalyst containing 10% palladium on carbon, whereupon the catalyst was separated from the reaction mixture, the ethanol was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and benzene has been. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 32:Example 32:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 30 und 31 die gemäß Beispiel 30 eingesetzte Pyro-L-glutaminsäure durch N^, N £· -Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysin (abgekürzt bis-Boc-L-Lys) oder N⁰^· , N⁰*- , N ^-Triadamantyloxycarbonyl-L-arginin (abgekürzt Tri- -Adoc-L-arginin) ersetzt wurde, wurde das entsprechende Bis-Boc- -L-Lys- bzw. Tri-Adoc-L-Arg-derivat des Phenylglycins erhalten. Bis-Boc-L-Lys ist im Handel erhältlich. Tri-Adoc-L-Arg wird nach den Angaben von Jäger, G. und Geiger, R., in Chem.Ber. 102, 1727 (1970) hergestellt.When in the procedure according to Examples 30 and 31, the pyro-L-glutamic acid used according to Example 30 by N ^, N · -Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysine (abbreviated bis-Boc-L-Lys) or N ⁰ ^ ·, N ⁰ * -, N ^ -triadamantyloxycarbonyl-L-arginine (abbreviated tri-Adoc-L-arginine) was replaced, the corresponding bis-Boc-L-Lys or Tri-Adoc-L- Arg derivative of phenylglycine obtained. Bis-Boc-L-Lys is commercially available. Tri-Adoc-L-Arg is prepared according to the instructions of Jäger, G. and Geiger, R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970).

Beispiel 33:Example 33:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 30, 31 und 32 das gemäß den Beispielen 30 und 32 eingesetzte Phenylglyciri durch den Benzylester einer speziellen, den Rest A aufweisenden Verbindung oder geschützten Verbindung ersetzt wird, wird das entsprechende Pyro-L-glutamyl- ,Bis-Boc-L-Lys- bzw. Tri-Adoc-L- '· -Arg-derivat der den Rest A aufweisenden Verbindung erhalten.When in the procedure according to Examples 30, 31 and 32 the phenylglyciri used according to Examples 30 and 32 is replaced by the benzyl ester of a particular compound or protected compound having the radical A, the corresponding pyro-L-glutamyl-, bis- Boc-L-Lys or Tri-Adoc-L- '· -Arg derivative of the compound A containing the rest.

Beispiel 34: Herstellung von N⁰^- -Pyro-L-glutamyl-S-acetyl-penicillamin-t-butylesterExample 34: Preparation of N ⁰ 1 -Pyro-L-glutamyl-S-acetyl-penicillamine t-butyl ester

Eine in einem Eisbad unter Rühren gekühlte und zuvor mit N-Äthyl-rao::pholin neutralisierte Lösung von 20 mmol Pyro-L-glutaminsäureund 20 mmol S-Acetyl-penicillamin-t-butyl-ester.Toluolsulfonsäure in einem Volumsverhältnis von 4:1 aus Dichlormethan und DMF bestehenden Lösungsmittelgemisch wurde mit einer Lösung von 20 mmol Dicyclohexylcarbodiimid in Dichlormethan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde in einem Eisbad und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, ausgefällter Dicyclohexylharnstoff vom Reaktionsgemisch abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, vom mit der Waschflüssigkeit vereinigten Filtrat die Lösungsmittel in einem rotierenden Verdampfer bei 40 C unter vermindertem Druck abgetrieben, der erhaltene Rückstand in Äthylacetat aufgenommen, die erhaltene Lösung bis zur neutralen Reaktion gewaschen, die hiebe! erhaltene organische Phase über wasserfreiera MgSO. getrocknet, filtriert und mittels eines rotierenden Verdampfe vom Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand aus einem Gemisch aus Isopropanol und Äther umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A solution of 20 mmol of pyro-L-glutamic acid and 20 mmol of S-acetyl-penicillamine-t-butyl-ester. Toluenesulfonic acid in a volume ratio of 4: 1, cooled in an ice bath with stirring and previously neutralized with N-ethyl-rao :: pholine from dichloromethane and DMF existing solvent mixture was treated with a solution of 20 mmol dicyclohexylcarbodiimide in dichloromethane, whereupon the reaction mixture stirred for one hour in an ice bath and then at room temperature overnight, precipitated dicyclohexylurea filtered from the reaction mixture and washed with ethyl acetate, from the filtrate combined with the washing liquid The solvents were removed in a rotary evaporator at 40 C under reduced pressure, the residue obtained was taken up in ethyl acetate, the resulting solution was washed until neutral, the bats! obtained organic phase over anhydrous MgSO 4. dried, filtered and freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained from a mixture of isopropanol and ether was recrystallized. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 35: Herstellung von N⁰^ -Pyro-L-glutainyl-S-acetyl-penicillaminExample 35: Preparation of N ⁰ 1 -Pyro-L-glutainyl-S-acetyl-penicillamine

Die in der gemäß Beispiel 34 hergestellten Verbindung enthaltene Schutzgruppe (t-Butylestergruppe) wurde mittels wasserfreier Trifluoressigsäure in Anwesenheit von Anisol abgespalten, worauf vom Reaktionsgeraisch die Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Benzol umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.The protective group (t-butyl ester group) contained in the compound prepared according to Example 34 was cleaved off by anhydrous trifluoroacetic acid in the presence of anisole, whereupon the solvent was removed from the reaction mixture by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and benzene. In this way, the desired compound was obtained.

228 053 O228 053 O

Beispiel 36:Example 36:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 34 undWhen working in accordance with Examples 34 and

35 die gemäß Beispiel 34 eingesetzte Pyro-L-glutaminsäure durch N ⁰^ , N ^--Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysin (abgekürzt Bis-35 the pyro-L-glutamic acid according to Example 34 by N ⁰ ^, N ^ - bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysine (abbreviated Bis-

-Boc-L-Lys) bzw. N⁰^ , N^, N *--Triadamantyloxycarbonyl-L-arginin (abgekürzt Tri-Adoc-L-arginin) ersetzt wurde, wurde das entsprech ende L-Lys- oder L-Arg-derivat des S-Acetylpenicillamins erhalten Bis-Boc-L-Lys ist im Handel erhältlich. Tri-Adoc-L-Arg kann nach den Angaben von Jäger, G. und Geiger, R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970) hergestellt werden.-Boc-L-Lys) or N ⁰ ^, N ^, N * - Triadamantyloxycarbonyl-L-arginine (abbreviated Tri-Adoc-L-arginine) was replaced, the corresponding L-Lys or L-Arg S-acetylpenicillamine derivative obtained Bis-Boc-L-Lys is commercially available. Tri-Adoc-L-Arg can be prepared according to the instructions of Jäger, G. and Geiger, R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970).

Beispiel 37:Example 37:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 34, 35 undWhen working in accordance with Examples 34, 35 and

36 das gemäß den Beispielen 34 und 36 eingesetzte S-Acetyl-penicillamin durch den t-Butylester einer speziellen die Gruppe A aufweisenden Verbindung oder geschützten Verbindung ersetzt wird, wird das entsprechende Pyro-L-glutamyl-,Bis-Boc-L-Lys- bzw. Tri- -Adoc-L-Arg-derivat der die Gruppe A aufweisenden Verbindung erhalten.If the S-acetyl-penicillamine used according to Examples 34 and 36 is replaced by the t-butyl ester of a particular compound or protected compound containing the group A, the corresponding pyro-L-glutamyl, bis-Boc-L-lysyl or tri-Adoc-L-Arg derivative of the group A containing compound.

Beispiel 38: Herstellung von N°^-Pyro-L-glutamyl-3-brom-prolin- benzylesterExample 38: Preparation of N ° ^ -pyro-L-glutamyl-3-bromo-proline benzyl ester

Wenn in Beispiel 30 das Phenylglycin durch 3-Brom-prolin ersetzt wird, wird die gewünschte Verbindung erhalten.In Example 30, when the phenylglycine is replaced by 3-bromo-proline, the desired compound is obtained.

Beispiel 39: Herstellung von N⁰^ -Pyro-L-glutamyl-3-brom-prolinExample 39: Preparation of N ⁰ ^ -pyro-L-glutamyl-3-bromo-proline

Die in der gemäß Beispiel 38 hergestellten Verbindung als Schutzgruppe vorliegende Benzylestergruppe wurde durch Hydrieren in absolutem Äthanol unter Verwendung von 10 % Palladium auf Kohle als Katalysator katalytisch abgespalten, worauf der Katalysator abfiltriert, vom Filtrat das Äthanol mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben und der erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Benzol umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.The benzyl ester group present in the compound prepared according to Example 38 was catalytically cleaved by hydrogenating in absolute ethanol using 10% palladium on carbon as catalyst, whereupon the catalyst was filtered off, the ethanol was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained Isopropanol and benzene was recrystallized. In this way, the desired compound was obtained.

Beispiel 40:Example 40:

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 38 und 39 die gemäß Beispiel 38 eingesetzte Verbindung durch N^IV , N^- -Bis- -t-butyloxycarbonyl-L-lysin (abgekürzt Bis-Boc-L-Lys) bzw. N**-, N^, N t- -Triadamantyloxy-L-glutaminsäure ersetzt wurde, wurdeWhen, in the procedure according to Examples 38 and 39, the compound used according to Example 38 was replaced by N ^IV , N 2 -Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysine (abbreviated Bis-Boc-L-Lys) or N ** , N, N t -triadadyloxy-L-glutamic acid was replaced

: ^r>j;:^wi^j:«&: ^ r> j;: ^ wi ^ j: «&

28052805

das entsprechende Bis-Boc-L-Lys- bzw. Tri-Adoc-L-Arg-derivat des 3-Brom-prolins erhalten. Bis-Boc-L-Lys ist im Handel erhältlich. Tri-Adoc-L-Arg wird entsprechend den Angaben von Jäger, G. und Geiger R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970) hergestellt.the corresponding bis-Boc-L-Lys or Tri-Adoc-L-Arg derivative of 3-bromo-proline obtained. Bis-Boc-L-Lys is commercially available. Tri-Adoc-L-Arg is prepared according to the instructions of Jäger, G. and Geiger R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970).

Beispiel 41: Herstellung von Pyro-L-glutamyl-phenylalaninbenzylesterExample 41: Preparation of pyro-L-glutamyl-phenylalanine benzyl ester

Eine in einem Eisbad unter 'Rühren gekühlte Lösung von 0,52 g Pyro-L-glutaminsäure, 1,72 g Phenylalaninbenzylester.Toluolsulfonsäure und 0,55 g N-Äthylmorpholin in 5 ml Dimethylformamid (DMF) und 20 ml Dichlormethan wurde mit einer Lösung von 0,826 g Dicyclohexylcarbodiimid in 2 ml Dichlormethan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch in einem Eiswasserbad eine Stunde und dann bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, der Dicyclohexylharnstoff vom Reaktionsgemisch abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers unter vermindertem Druck von den Lösungsmitteln befreit, der erhaltene Rückstand in 25 ml Äthylacetat gelöst, die erhaltene Lösung bis zur neutralen " Reaktion gewaschen, über wasserfreiem MgSO. getrocknet, filtriert und mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Äther umkristallisiert wurde. Auf diese Weise wurden 1,01 g weißer Nadeln mit Fp = 103 bis 104,5°C erhalten. Die erhaltene Verbindung erwies sich bei der Papierelektrophorese und bei der mit fünf verschiedenen Lösungsmittelsystem durchgeführten Dünnschichtchromatographie als homogen, ber.: Analyse: 68,84 % C, 6,05 % H, 7,64 % N gef.: 68,58 % C, 6,05 % H, 7,56 % NA solution of 0.52 g of pyro-L-glutamic acid cooled in an ice bath with stirring, 1.72 g of phenylalanine benzyl ester. Toluenesulfonic acid and 0.55 g of N-ethylmorpholine in 5 ml of dimethylformamide (DMF) and 20 ml of dichloromethane was treated with a solution of 0.826 g of dicyclohexylcarbodiimide in 2 ml of dichloromethane, whereupon the reaction mixture was stirred in an ice-water bath for one hour and then at room temperature overnight, the dicyclohexylurea filtered off from the reaction mixture and washed with ethyl acetate, the filtrate combined with the washing liquid at 40 C by means of a rotary evaporator The residue obtained was dissolved in 25 ml of ethyl acetate, the resulting solution was washed until neutral, dried over anhydrous MgSO 4, filtered and the solvent was removed by means of a rotary evaporator and the residue obtained from isopropanol and ether was recrystallized on this Thus, 1.01 g of white needles were obtained with mp = 103 to 104.5 ° C. The resulting compound was found to be homogeneous in paper electrophoresis and thin layer chromatography with five different solvent systems, as follows: Analysis: 68.84% C, 6.05% H, 7.64% N Found: 68.58% C , 6.05% H, 7.56% N

Beispiel 42: Herstellung von Pyro-L-glutamyl-phenylalaninExample 42: Preparation of pyro-L-glutamyl-phenylalanine

Aus 1,0 g der gemäß Beispiel 41 hergestellten Verbindung wurde die als Schutzgruppe vorliegende Benzylestergruppe durch katalytisches Hydrieren bei Raumtemperatur über Nacht bei einem Wasserstoffdruck von 1,4 bar unter Verwendung von 150 mg eines Gew.-? Palladium auf Kohle enthaltenden Katalysator in einem Gemisch aus 0,15 ml Eisessig und 15 ml Äthanol abgespalten, woraufFrom 1.0 g of the compound prepared according to Example 41, the protective benzyl ester group was prepared by catalytic hydrogenation at room temperature overnight at a hydrogen pressure of 1.4 bar using 150 mg of a weight. Cleavage catalyst containing palladium on carbon in a mixture of 0.15 ml of glacial acetic acid and 15 ml of ethanol, whereupon

228053 0228053 0

der Katalysator abfiltriert, vom Filtrat das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgedampft und der erhaltene Rückstand aus Isopropanol und Benzol umkristallisiert wurde. Hiebei wurden insgesamt 402 mg weißer Kristalle mit Fp = 147 bis 149°C erhalten. Die erhaltene Verbindung erwies sich bei der Papierelektrophorese und bei der mit drei verschiedenen Lösungsmittelsystemen durchgeführten Dünnschichtchromatographie als homogen, ber.: Analyse: 60,86 % C, 5,84 % H, 10,14 % N gef.: 60,37 % C, 5,85 % H, 9.98 % Nthe catalyst was filtered off, the solvent was removed from the filtrate by means of a rotary evaporator and the residue obtained was recrystallized from isopropanol and benzene. Hiebei a total of 402 mg of white crystals were obtained with mp 147-149 ° C. The resulting compound was found to be homogeneous in paper electrophoresis and in thin layer chromatography with three different solvent systems, as follows: Analysis: 60.86% C, 5.84% H, 10.14% N Found: 60.37% C , 5.85% H, 9.98% N

Beispiel 43: /Example 43: /

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 41 und 42 die gemäß Beispiel 41 eingesetzte Pyro-L-glutaminsäure durch N "K-, N^-Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysin (abgekürzt Bis-Boc-L-Lys)When in the procedure according to Examples 41 and 42, the pyro-L-glutamic acid used according to Example 41 by N "K, N ^ -Bis-t-butyloxycarbonyl-L-lysine (abbreviated Bis-Boc-L-Lys)

bzw. N'·*- , N=N- , Ν^ω -Triadamantyloxycarbonyl-L-arginin (abgekürzt Tri-Adoc-L-arginin ersetzt wurde, wurden die entsprechenden Bis- -Boc-L-Lys- bzw. Tri-Adoc-L-Arg-derivate von Phe erhalten. Bis- -Boc-L-Lys ist im Handel erhältlich. Tri-Adoc-L-Arg ist nach den Angaben von Jäger, G. und Geiger, R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970) herstellbar.or N '· * -, N = N-, Ν ^ω -triadroxyloxycarbonyl-L-arginine (abbreviated Tri-Adoc-L-arginine was replaced, the corresponding bis-Boc-L-Lys or Tri-Adoc Bis-Boc-L-Lys is commercially available Tri-Adoc-L-Arg is as described by Jäger, G. and Geiger, R., in Chem. Ber. 102, 1727 (1970) can be produced.

Beispiel 44:Example 44:

Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 41, 42 und 43 das gemäß den Beispielen 41 und 43 eingesetzte Phe durch den Benzylester einer speziellen die Gruppe A aufweisenden Verbindung oder geschützten Verbindung ersetzt wurde, wurde das entsprechende Pyro-L-glutamyl-,Bis-Boc-L-Lys- bzw. Tri-Adoc-L-Arg- -derivat der entsprechenden Aminosäure erhalten.In the procedures of Examples 41, 42 and 43, when the Phe employed in Examples 41 and 43 was replaced by the benzyl ester of a particular compound or protected compound containing Group A, the corresponding pyro-L-glutamyl, Bis-Boc L-Lys or Tri-Adoc-L-Arg derivative of the corresponding amino acid.

Mit den folgenden Beispielen 45 bis 55 wird die Synthese von Verbindungen der Formel HS-Z erläutert, in welcher Z der Formel VIII entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltene Arbeitsweise ist in den US-PSen 4 046 889 und 4 105 776 beschrieben.The following Examples 45 to 55 illustrate the synthesis of compounds of the formula HS-Z in which Z corresponds to the formula VIII. The procedure followed in these examples is described in US Pat. Nos. 4,046,889 and 4,105,776.

Beispiel 45: Herstellung von N-(2-Benzoylthioacetyl)-L-prolinExample 45: Preparation of N- (2-benzoylthioacetyl) -L-proline

Eine in einem Gemisch aus Eis und Wasser gekühlte Lösung von 5,75 g L-Prolin in 50 ml 1,0 η-Natronlauge wurde mit 26 ml 2n-Natronlauge und 5,65 g Chloracetylchlorid versetzt, worauf das erhaltene Gemisch zunächst 3 Stunden bei Raumtemperatur kräftigA cooled in a mixture of ice and water solution of 5.75 g of L-proline in 50 ml of 1.0 η sodium hydroxide solution was treated with 26 ml of 2N sodium hydroxide solution and 5.65 g of chloroacetyl chloride, whereupon the resulting mixture at first for 3 hours Room temperature strong

gerührt und anschließend mit einer Suspension 'von 7,5 Thiobenzoesäure und 4,8 g Kaliumcarbonat in 50 ml Wasser versetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde sodann 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann angesäuert, worauf das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert, der erhaltene Extrakt mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingeengt, der hiebei in einer Menge von 14,6 g erhaltene Rückstand in 150 ml Äthylacetat gelöst und die erhaltene Lösung mit 11 ml Dicyclohexylamin versetzt wurde und die hiebei entstandenen Kristalle abfiltriert und aus Äthylacetat umkristallisiert wurden. Die in einer Menge von 5,7 g und mit Fp = 151 bis 152°C erhaltenen Kristalle wurden in einem Gemisch aus 100 ml einer 5%igen wässerigen Kaliurnbisulfatlösung und 300 ml Äthylacetat gelöst, worauf die abgetrennte organische Phase einmal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingeengt wurde, womit 3,45 g der dem eingesetzten Salz entsprechenden Säure erhalten wurden.was stirred and then treated with a suspension 'of 7.5 thiobenzoic acid and 4.8 g of potassium carbonate in 50 ml of water. The reaction mixture was then stirred at room temperature for 18 hours and then acidified, whereupon the acidified mixture was extracted with ethyl acetate, the extract obtained washed with water, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness in vacuo, the residue being 14.6 g Dissolved in 150 ml of ethyl acetate and the resulting solution with 11 ml of dicyclohexylamine was added and the crystals formed hereby filtered off and recrystallized from ethyl acetate. The crystals obtained in an amount of 5.7 g and mp = 151 to 152 ° C were dissolved in a mixture of 100 ml of a 5% aqueous potassium bisulfate and 300 ml of ethyl acetate, whereupon the separated organic phase washed once with water, over Dried magnesium sulfate and concentrated to dryness in vacuo, whereby 3.45 g of the acid corresponding to the salt used were obtained.

Beispiel 46: Herstellung von N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolinExample 46: Preparation of N- (2-mercaptoacetyl) -L-proline

3,4 g N-(2-Benzoylthioacetyl)-L-prolin wurden in einem Gemisch aus 10,5 ml Wasser und 6,4 ml konzentrierten Ammoniaks gelöst. Eine Stunde später wurde das Reaktionsgemisch mit Wasser verdünnt und filtriert, worauf das Filtrat mit Äthylacetat extrahiert und dann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert wurde, das angesäuerte Gemisch mit Natriumchlorid gesättigt und dann 2-mal mit Äthylacetat extrahiert wurde und die erhaltenen Äthylacetatextrakte mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und dann zur Trockene eingedampft wurden. Auf diese Weise wurden 1,5 g N-(2-Mercaptoacetyl)- -L-prolin erhalten, welches nach dem Umkristallisieren aus Äthylacetat mit Fp = 133 bis 13 5°C vorlag.3.4 g of N- (2-benzoylthioacetyl) -L-proline were dissolved in a mixture of 10.5 ml of water and 6.4 ml of concentrated ammonia. One hour later, the reaction mixture was diluted with water and filtered, whereupon the filtrate was extracted with ethyl acetate and then acidified with concentrated hydrochloric acid, the acidified mixture was saturated with sodium chloride and then extracted twice with ethyl acetate, and the obtained ethyl acetate extracts were washed with saturated brine and then evaporated to dryness. In this way, 1.5 g of N- (2-mercaptoacetyl) - L-proline obtained after recrystallization from ethyl acetate with mp = 133 to 13 5 ° C was present.

Beispiel 47: Herstellung von N-(2-Benzoylthioacetyl)-L-prolinmethylesterExample 47: Preparation of N- (2-benzoylthioacetyl) -L-proline methyl ester

Das gemäß Beispiel 45 erhaltene N-(2-Benzoylthioacetyl)- -L-prolin wurde in Methanol gelöst, worauf die erhaltene Lösung bis zur bleibenden Gelbfärbung mit einer ätherischen Lösung von Diazomethan versetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Minuten später mit einigen Tropfen Essigsäure versetzt, worauf das Lösungs-The obtained according to Example 45 N- (2-benzoylthioacetyl) - L-proline was dissolved in methanol, and the resulting solution was added to a permanent yellow coloration with an ethereal solution of diazomethane. The reaction mixture was added 15 minutes later with a few drops of acetic acid, whereupon the solution

228053 0228053 0

mittel im Vakuum abgetrieben wurde.. Auf diese Weise wurde der N-(2-Benzoylthioacetyl)-L-prolin-methylester erhalten.was driven off in vacuo. In this way, the N- (2-benzoylthioacetyl) -L-proline methyl ester was obtained.

Beispiel 48: Herstellung von N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolinamidExample 48: Preparation of N- (2-mercaptoacetyl) -L-prolinamide

Die gemäß Beispiel 47 erhaltene Verbindung wurde in einer 10%igen Lösung von Ammoniak in Methanol gelöst, worauf die erhaltene Lösung bei Raumtemperatur in einer Druckflasche gelagert wurde. Sobald durch Dünnschichtchromatographie angezeigt wurde, daß die beiden Estergruppen mit Ammoniak vollständig umgesetzt worden waren, wurde das Reaktionsgemisch zur Trockene eingeengt, womit als Rückstand N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolinamid verblieb.The compound obtained in Example 47 was dissolved in a 10% solution of ammonia in methanol, and the resulting solution was stored at room temperature in a pressure bottle. Once indicated by thin layer chromatography that the two ester groups had been fully reacted with ammonia, the reaction mixture was concentrated to dryness, leaving as residue N- (2-mercaptoacetyl) -L-prolinamide.

Beispiel 49: Herstellung von N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-prolin- -tert-butylesterExample 49: Preparation of N- (3-mercaptopropanoyl) -L-proline tert-butyl ester

Eine in einem Eisbad gekühlte Lösung von 3,42 g L-prolin- -tert-buty!ester in 10 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde mit 1,76 g Propiothiolacton versetzt, worauf das Reaktionsgemisch fünf Minuten im Eisbad und dann noch drei Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen und anschließend mit 200 ml Äthylacetat verdünnt wurde. Die beim Waschen des verdünnten Gemisches mit 5%iger Kaliumbisulfatlösung und Wasser verbliebene organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingeengt, womit ein Rückstand verblieb, der beim Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Äther und Hexan 3,7 g N-(3-Mercaptopropanoyl) -L-prolin-tert-butylester mit Fp = 57 bis 58 C lieferte.A solution of 3.42 g of L-proline tert-butyl ester cooled in an ice bath in 10 ml of dry tetrahydrofuran was admixed with 1.76 g of propiothiolactone, whereupon the reaction mixture was allowed to stand for five minutes in an ice bath and then for three hours at room temperature and then diluted with 200 ml of ethyl acetate. The organic phase remaining on washing the dilute mixture with 5% potassium bisulfate and water was dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness in vacuo to leave a residue which, on recrystallization from a mixture of ether and hexane, yielded 3.7 g of N- (3 Mercaptopropanoyl) -L-proline tert-butyl ester of mp = 57 to 58 ° C.

Beispiel 50: Herstellung von 3-Acetylthio~2-methylpropansäureExample 50: Preparation of 3-acetylthio-2-methylpropanoic acid

Ein Gemisch aus 50 g Thioessigsäure und 40,7 g Methacryl-. säure wurde auf einem Dampfbad eine Stunde erwärmt und dann bei Raumtemperatur 18 Stunden stehengelassen. Sobald durch NMR-Spektroskopie die vollständige Umsetzung der Methacrylsäure bestätigt worden war, wurde das Reaktionsgemisch im Vakuum destiliert, wobei als bei 2,6 mrnHg und bei 12 8,5 bis 131 C übergehende Fraktion 64 g 3-Acetylthio-2-methylpropansäure erhalten wurden.A mixture of 50 g of thioacetic acid and 40.7 g of methacrylic. acid was heated on a steam bath for one hour and then allowed to stand at room temperature for 18 hours. Once the complete reaction of the methacrylic acid was confirmed by NMR spectroscopy, the reaction mixture was distilled in vacuo to give 64 g of 3-acetylthio-2-methylpropanoic acid as the fraction passing through 2.6 mrnHg and 12 8.5-131C ,

Beispiel 51: Herstellung von N-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-L- -prolin-tert-butylesterExample 51: Preparation of N- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -L-proline-tert-butyl ester

Eine Lösung von 5,1 g L-Prolin-t-butylester in 40 ml Di-A solution of 5.1 g of L-proline t-butyl ester in 40 ml of di-

chlormethan wurde unter Rühren in einem Eisbad gekühlt und dann mit einer Lösung von 6,2 g Dicyclohexylcarbodiirnid in 15 ml Dichlormethan versetzt, worauf das Gemisch sofort mit einer Lösung von 4,9 g 3-Acetylthio-2-methylpropansäure in 5 ml Dichlormethan versetzt wurde. Nachdem das Reaktionsgemisch 15 Minuten im Eisbad und 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt v/orden v/ar, wurde der Niederschlag abfiltriert, das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingeengt, der erhaltene Rückstand in Äthylacetat gelöst, die erhaltene Lösung bis zur neutralen Reaktion gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Tro.ckene eingedampft und der erhaltene Rückstand an N-(3-Acetylthio-2-methylpropanoyl)-L- -prolin-tert-butylester durch Säulenchromatographie (Silicagel, Chloroform) gereinigt, wobei eine Ausbeute von 7,9 g erzielt v/urde. Die gewünschte Verbindung v/urde sodann nach der Arbeitsv/eise gemäß Beispiel 46 hergestellt.Chloromethane was cooled with stirring in an ice bath and then treated with a solution of 6.2 g of dicyclohexylcarbodiirnide in 15 ml of dichloromethane, and the mixture was immediately treated with a solution of 4.9 g of 3-acetylthio-2-methylpropanoic acid in 5 ml of dichloromethane , After the reaction mixture was stirred for 15 minutes in an ice bath and 16 hours at room temperature, the precipitate was filtered off, the filtrate concentrated to dryness in vacuo, the residue obtained was dissolved in ethyl acetate, the resulting solution was washed until neutral, over Dried magnesium sulfate and evaporated in vacuo to Tro.ckene and the resulting residue of N- (3-acetylthio-2-methylpropanoyl) -L- proline tert-butyl ester by column chromatography (silica gel, chloroform) to give a yield of 7, 9 g scored. The desired compound was then prepared according to the method of Example 46.

Beispiel 52: Herstellung von N-(3-Mercapto-2-D,L-methylpropanoyl)- -L-prolinExample 52: Preparation of N- (3-mercapto-2-D, L-methylpropanoyl) -L-proline

Eine in einem Eiswasserbad gekühlte Lösung von 3,45 g L-Prolin in einem Gemisch aus 100 ml Wasser und 12 g Natriumbicarbonat wurde unter kräftigem Rühren mit 4,16 g Methacryloylchlorid versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zwei Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann mit Äther extrahiert wurde. Die wässerige Phase wurde sodann mit 1,On-Salzsäure angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert, worauf der erhaltene Extrakt im Vakuum zur Trockene eingeengt, der erhaltene Rückstand mit 3,5 g.Thioessigsäure vermischt, das erhaltene Gemisch mit einigen Kristallen' Azobisisobutyronitril versetzt und dann zwei Stunden am Wasserbad erhitzt und dann in einem im Volumsverhältnis 75:25 aus Benzol und Essigsäure bestehenden Gemisch gelöst und die Lösung auf eine mit Silicagel gefüllte Kolonne aufgegeben v/urde. Beim Eluieren der Kolonne mit dem gleichen Lösungsmittelgemisch v/urde N-(3-Acetylthio-2-D,L-methylpropanoyl)-L-prolin erhalten, aus welcher die gewünschte Verbindung nach der in Beispiel 46 angegebenen Arbeitsweise hergestellt wurde.  A solution of 3.45 g of L-proline cooled in an ice-water bath in a mixture of 100 ml of water and 12 g of sodium bicarbonate was added with vigorous stirring to 4.16 g of methacryloyl chloride, whereupon the reaction mixture was stirred for two hours at room temperature and then extracted with ether has been. The aqueous phase was then acidified with 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate, the resulting extract concentrated to dryness in vacuo, the resulting residue mixed with 3.5 g. Thioacetic acid, the mixture obtained admixed with a few crystals of azobisisobutyronitrile and then The mixture was heated for two hours on a water bath and then dissolved in a 75:25 volume ratio mixture of benzene and acetic acid, and the solution was applied to a column filled with silica gel. Upon elution of the column with the same solvent mixture, N- (3-acetylthio-2-D, L-methylpropanoyl) -L-proline was obtained, from which the desired compound was prepared according to the procedure given in Example 46.

Beispiel 53: Herstellung von N-(3-^\cctylthiq/-2-methylpropanoyl)- -DiL-pipecolinsäureExample 53: Preparation of N- (3-octylthiq / 2-methylpropanoyl) -DiL-pipecolic acid

228053 0228053 0

- 48 -- 48 -

Eine Suspension von 6,5 g (0,5 mol) Pipecolinsäure in 200 mg Dimethylacetamid wurde tropfenweise mit 9,0 g (0,5 mol) 3-Acetylthio-2-methylpropanoylchlorid versetzt, wobei die Temperatur auf 29 C anstieg und eine klare Lösung entstand, welcher sodann 10,1 g N-Methylmorpholin in einem Zuge zugesetzt wurden, wobei die Temperatur des Reaktionsgemisches auf 34 C anstieg. Beim Erhitzen des Reaktionsgemisches am Wasserbad während einer Stunde entstand eine klare Lösung, aus welcher beim Stehenlassen über Nacht bei Raumtemperatur ein Feststoff ausgefällt wurde, welcher in einer Menge von 6,1 g und mit Fp = 203 bis 204 C anfiel. Das Lösungsmittel wurde abgetrieben und der viskose Rückstand wurde mit Wasser und 20%iger Salzsäure verrieben. Das entstandene gelbe Öl wurde 3--mal mit je 150 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextrakte wurden mit Magnesiumsulfat getrocknet und lieferten beim Abtreiben des Lösungsmittels 14g N-(3-/Acetylthio7-2-methylpropanoyl)-D,L-pipecolinsäure in Form eines viskosen Öles.A suspension of 6.5 g (0.5 mol) of pipecolic acid in 200 mg of dimethylacetamide was added dropwise with 9.0 g (0.5 mol) of 3-acetylthio-2-methylpropanoyl chloride, the temperature rising to 29 C and a clear Solution was formed, which was then added 10.1 g of N-methylmorpholine in one pass, the temperature of the reaction mixture to 34 C increased. Upon heating the reaction mixture on a water bath for one hour, a clear solution was formed, from which when allowed to stand overnight at room temperature a solid was precipitated, which was in an amount of 6.1 g and Fp = 203 to 204 C incurred. The solvent was removed and the viscous residue was triturated with water and 20% hydrochloric acid. The resulting yellow oil was extracted 3 times with 150 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate extracts were dried with magnesium sulfate, yielding 14g of N- (3- / acetylthio-7-2-methylpropanoyl) -D, L-pipecolic acid in the form of a viscous oil on removal of the solvent.

Beispiel 54: Herstellung von N-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)- -D,L-pipecolinsäureExample 54: Preparation of N- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -D, L-pipecolic acid

Eine aus 30 ml Wasser und 20 ml konzentriertem Ammoniak hergestellte wässerige Lösung von Ammoniak wurde unter Stickstoffatmosphäre bei 10°C 15 Minuten gerührt und dann zu 13,0 g (0,05 mol N-(3-/Acetylthig7-2-methylpropanoyl)-D,L-pipecolinsäure zugesetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 10 Minuten unter Stickstoffatmosphäre und dann 50 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann mit Wasser und 20%iger Kochsalzlösung behandelt wurde. Das entstandene gelbe Öl wurde 3-mal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert, worauf der erhaltene Äthylacetatextrakt über Magnesiumsulfat getrocknet und vom Äthylacetat befreit wurde. Es wurden so 11,1 g N-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-D^-pipecolinsäure in Form eines viskosen Öles mit R_ = 0,62 (Silicagel, Benzol :Essigsäure = 7:2) erhalten.An aqueous solution of ammonia prepared from 30 ml of water and 20 ml of concentrated ammonia was stirred under nitrogen atmosphere at 10 ° C for 15 minutes and then added to 13.0 g (0.05 mol of N- (3-acetylthyl) -2-methylpropanoyl). D, L-pipecolic acid was added and the resulting solution was stirred for 10 minutes under a nitrogen atmosphere and then for 50 minutes at room temperature and then treated with water and 20% saline solution The resulting yellow oil was extracted 3 times with 50 ml of ethyl acetate each time. The resulting ethyl acetate extract was dried over magnesium sulfate and the ethyl acetate was removed to give 11.1 g of N- (3-mercapto-2-methylpropanoyl) -D ^ -pipecolic acid in the form of a viscous oil with R_ = 0.62 (silica gel, Benzene: acetic acid = 7: 2).

Beispiel 55:Example 55:

Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 45 bis 48 das gemäß Beispiel 45 eingesetzte Chloracetylchlorid durch die entsprechende, eine aktivierte Acylgruppe aufweisende Verbindung und das gemäß Beispiel 45 eingesetzte L-Pro durch die entsprechen-If, in the procedures according to Examples 45 to 48, the chloroacetyl chloride used according to Example 45 was replaced by the corresponding compound having an activated acyl group and the L-Pro used according to Example 45 by the corresponding

de Verbindung, ersetzt wurde, wurden die in der folgenden Tabelle I angegebenen Mercaptoverbindungen der Formel HS - Z (VIII) erhalten.de compound was replaced, the mercapto compounds of the formula HS - Z (VIII) given in the following Table I were obtained.

Tabelle ITable I

(D H(D H

(2) H(2) H

(3) H(3) H

(A) H(A) H

(5) H(5) H

(6) CH₃ (6) CH ₃

(7) CH₃ (7) CH ₃

(8) CH₃ (8) CH ₃

(9) C₂H₅ (9) C ₂ H ₅

(10) H(10) H

(11) H(11) H

(12) H(12) H

(13) H, CH₃ (13) H, CH ₃

(14) CH₃, CH₃ (14) CH _3, CH ₃

(15) H(15) H

(16) H, C₂H₅ (16) H, C ₂ H ₅

(17) H(17) H

(18) -(18) -

(19) -(19) -

(20) -(20) -

(21) -(21) -

(22) -(22) -

Blfi. ^12Blfi. ^ 12

H H, 3-OHH H, 3-OH

H ' HH'H

H HH H

H OHOH

C₂H₅ HC ₂ H ₅ H

H ClH Cl

CH₃ ' HCH ₃ 'H

C₆H₅CH₂ HC ₆ H ₅ CH ₂ H

H HH H

C4H9 HC4H9 H

H HH H

H _ H, 3-FH _ H, 3-F

H H₁ 3-OHHH ₁ 3-OH

C₂H₅ C ₂ H ₅

CH₃ CH ₃

CH₃ CH ₃

CH₃ CH ₃

CH₃ CH ₃

CaH₉ CaH ₉

H H H l2A OHHHH l2A OH

OH OH OHOH OH OH

OHOH

OC₂H₅ OC ₂ H ₅

OHOH

OHOH

OHOH

OHOH

NH₂ NH ₂

OHOH

OHOH

OHOH

OHOH

OCH₃ OCH ₃

H,. H, 3-OH OCK₃ H,. H, 3-OH OCK ₃

H OHOH

H₁ H₁ A-OK OHH ₁ H ₁ A-OK OH

H OC₂H₅ H OC ₂ H ₅

H NH₂ H NH ₂

H, A-Br OnH, A-Br On

228 05 3 0 -«So- 228 05 3 0 - «So-

Tabelle I (Fortsetzung)Table I (continued)

(23) - HH, A-CH₃ OH 0-2(23) - HH, A-CH ₃ OH 0-2

(24) - CH₃ OH OH 0 1(24) - CH ₃ OH OH 0 1

(25) C₃H₇ H H NH₂ 1 ₂ (25) C ₃ H ₇ HH NH ₂ 1 ₂

(26) H CH₃ H, H, 5-OH OH 1 ₃ (26) H CH ₃ H, H, 5-OH OH 1 ₃

(27) H CH₃-H_-OH 2 2 (28)CeH₅-C₂H₅ H H, A-OH OC₃H₇ 1 ₂ (29) CH₃ H C₂H₅ NH₂ 1 l (3O)H, C₅H₁₁ CH₃ H₁ 3-C4H9 OH 2 2(27) H CH ₃ -H _- OH 2 2 (28) CeH ₅ -C ₂ H ₅ HH, A-OH OC ₃ H ₇ 1 ₂ (29) CH ₃ HC ₂ H ₅ NH ₂ 1 l (30) H , C ₅ H ₁₁ CH ₃ H ₁ 3-C4H9 OH 2 2

Mit den Beispielen 56 bis 58 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel SH-Z erläutert, in welcher Z der Formel XI entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltene Arbeitsweise ist in der US-PS 4 070 361 beschrieben.Examples 56 to 58 illustrate the preparation of compounds of the formula SH-Z in which Z corresponds to the formula XI. The procedure followed in these examples is described in US Pat. No. 4,070,361.

Beispiel 56: Herstellung von N-//2-(Acetylthio)-athyl7-sulf onyl7~ -L-prolinExample 56: Preparation of N - // 2- (acetylthio) -ethyl-7-sulfonyl-7-L-proline

a. N-(Vinylsulfonyl)-L-prolin-t-butylestera. N- (vinylsulfonyl) -L-proline t-butyl ester

Eine Lösung von 6,9 g (0,04 mol) L-Prolin-t-butylester und 14 ml (0,1 mol) Triäthylamin in 200 ml Dichlormethan wurde unter Kühlen in einem Eisbad und unter Rühren innerhalb 20 Minuten mit einer Lösung von 8,2 g (0,05 mol) 2-Chloräthansulfonylchlorid in 100 ml Dichlormethan versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zwei Stunden gerührt, dann mit 5%iger Kaliumbisulfatlösung, gesättigter Natriumbicarbonatlösung und gesättigter Kochsalzlösung gewaschen' und sodann im Vakuum eingedampft wurde. Der hiebei erhaltene halbfeste Rückstand wurde unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 1:1 aus Äthylacetat und Hexan bestehenden Eluiermittels an 350 ml Silicagel chromatographiert, wobei der aus der Hauptfraktion abgetrennte N-(Vinylsulfonyl)-L-prolin-t-butylester beim Umkristallieren aus einem Gemisch aus Äther und Hexan in einer Menge von 7,1 g (Ausbeute 68 %) und mit Fp = 84 bis 87°C erhalten v/urde.A solution of 6.9 g (0.04 mol) of L-proline t-butyl ester and 14 ml (0.1 mol) of triethylamine in 200 ml of dichloromethane was added under cooling in an ice bath and with stirring within 20 minutes with a solution of 8.2 g (0.05 mol) of 2-chloroethanesulfonyl chloride in 100 ml of dichloromethane was added, whereupon the reaction mixture was stirred for two hours, then washed with 5% potassium bisulfate solution, saturated sodium bicarbonate solution and saturated brine, then evaporated in vacuo. The resulting semisolid residue was chromatographed on 350 ml of silica gel using a 1: 1 by volume ethyl acetate / hexane eluent, with the N- (vinylsulfonyl) -L-proline t-butyl ester separated from the major fraction recrystallized from a Mixture of ether and hexane in an amount of 7.1 g (yield 68%) and with mp = 84 to 87 ° C obtained v / urde.

-Si te. N-/-/2- (Acetylthio)-äthyl7-sulfonyl7-L*-prolin-t-butylester -Si te. N - / - / 2- (acetylthio) -ethyl-7-sulfonyl-7-L * -proline-t-butyl ester

5,0 g (0,0192 mol) N-(Vinylsulfonyl)-L-prolin-t-butylester, 2,8 ml (0,02 mol) Triäthylamin und 1,43 ml (0,02 mol) Thioessigsäure wurden in 100 ml Äther miteinander vermischt, worauf das erhaltene Gemisch über Nacht stehengelassen, dann mit 5%iger Kaliumbisulfatlösung, gesättigter Natriumbicarbonatlösung und gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und dann im Vakuum eingedampft wurde, womit ein gelbes Öl als Rückstand erhalten wurde. Diese Arbeitsweise wurde unter Verwendung der Hälfte der oben angegebenen Menge an Triäthylamin und Thioessigsäure wiederholt. Beim Aufarbeiten des Gemisches nach der in Abschnitt (a) angegebenen Methode wurde roher N-/X2-(Acetylthio)-äthyl_7-sulf onyl7~ -L-prolin-t-butylester erhalten, der beim Filtrieren über eine kurze Silicagelsäule und anschließendem Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Äther und Hexan in einer Menge von 2,9q(Ausbeute 45 %) und mit Fp = 46 bis 50 C erhalten wurde. c . N-//~2-Acetylthio) -äthyl/-sulf onyl/-L-prolin 2,9 g (0,0086 mol) des gemäß Punkt (b) erhaltenen t-Butylesters wurden in 15 ml Anisol und 45 ml Trifluoressigsäure gelöst, worauf die erhaltene Lösung eine Stunde stehengelassen und dann im Vakuum eingedampft wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in Äthylacetat aufgenommen, worauf das ganze mit einer großen Volumsmenge Hexan behandelt wurde. Die überstehende Flüssigkeit wurde sodann abzentrifugiert, worauf der gleiche Vorgang wiederholt wurde. Der erhaltene halbfeste Stoff wurde aus einem Gemisch aus Äthylacetat und Hexan umkristallisiert und lag dann mit Fp = 63 bis 67°C vor.5.0 g (0.0192 mol) of N- (vinylsulfonyl) -L-proline t-butyl ester, 2.8 ml (0.02 mol) of triethylamine and 1.43 ml (0.02 mol) of thioacetic acid were added in 100 ml of ether, and the resulting mixture was allowed to stand overnight, then washed with 5% potassium bisulfate solution, saturated sodium bicarbonate solution and saturated brine, and then evaporated in vacuo to give a yellow oil as a residue. This procedure was repeated using half the amount of triethylamine and thioacetic acid indicated above. The work-up of the mixture by the method given in section (a) gave crude N- / X 2 - (acetylthio) -ethyl-7-sulfonyl-7-L-proline t-butyl ester which was obtained by filtration through a short silica gel column followed by recrystallization a mixture of ether and hexane in an amount of 2.9q (yield 45%) and with Fp = 46 to 50 C was obtained. c. N - / 2-Acetylthio) -ethyl / -sulfonyl / -L-proline 2.9 g (0.0086 mol) of the t-butyl ester obtained in (b) was dissolved in 15 ml of anisole and 45 ml of trifluoroacetic acid , whereupon the resulting solution was allowed to stand for one hour and then evaporated in vacuo. The residue obtained was taken up in ethyl acetate, after which the whole was treated with a large volume of hexane. The supernatant was then removed by centrifugation and the same procedure repeated. The resulting semi-solid matter was recrystallized from a mixture of ethyl acetate and hexane and was then present at mp 63-67 ° C.

Beispiel 57: Herstellung von N-/7(2-Mercaptoäthyl) -sulf onyl7~L- -prolinExample 57: Preparation of N- / 7 (2-mercaptoethyl) sulfonyl-7-L-proline

Eine Lösung von 640 mg (0,0023 mol) N-//2-(Acetylthio)- -äthyl7-sulfonyl7-L-prolin in 5 ml Wasser und 5 ml konzentriertem Ammoniak wurde unter Stickstoffatmosphäre eine Stunde gerührt und dann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, worauf das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert, die erhaltenen Extrakte mit Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO. getrocknet und zur Trockene eingedampft und der hiebei erhaltene ölige RückstandA solution of 640 mg (0.0023 mol) of N - // 2- (acetylthio) -ethyl-7-sulfonyl-7-L-proline in 5 ml of water and 5 ml of concentrated ammonia was stirred under nitrogen atmosphere for one hour and then acidified with concentrated hydrochloric acid , then the acidified mixture extracted with ethyl acetate, the extracts obtained washed with brine, over MgSO4. dried and evaporated to dryness and the resulting oily residue

228 05 3 0228 05 3 0

auf eine mit 75 ml Silicagel gefüllte Kolonne aufgegeben wurde, die sodann mit einem 10 % Essigsäure enthaltendem Gemisch aus Essigsäure und Benzol eluiert wurde. Die aus der beim Eluieren der Kolonne erhaltenen Hauptfraktion isolierte Substanz wurde aus einem Gemisch aus Chloroform und Hexan urakristallisiert und lie- : ferte hiebei mit einer Ausbeute von 81 % 440 mg 1-/^(2-Mercapto- ! äthyl)-sulfonyl7-L-prolin mit Fp = 99 bis 101°C.was charged to a 75 ml silica gel column, which was then eluted with a mixture of acetic acid and benzene containing 10% acetic acid. The substance isolated from the main fraction obtained when eluting the column was uracilified from a mixture of chloroform and hexane and yielded 440 mg of 1 - / (2-mercapto-ethyl) -sulfonyl-7-L in a yield of 81% -proline with mp = 99 to 101 ° C.

Beispiel 58:Example 58:

Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 56 bis das gemäß Beispiel 56 eingesetzte 2-Chloräthansulfonylchlorid durch das entsprechende Halogenalkylsulfonylhalogenid und der gemäß Beispiel 56 eingesetzte L-Pro-t-butylester durch eine ent-'-.y sprechende eine Aminogruppe aufweisende Verbindung ersetzt wurde, wurden die in der folgenden Tabelle II angegebenen Mercaptoverbindungen HS-Z (XI) erhalten.When, in the procedures of Examples 56 to 2-Chloräthansulfonylchlorid used according to Example 56 was replaced by the corresponding Halogenalkylsulfonylhalogenid and the used according to Example 56 L-Pro-t-butyl ester by a de''-y speaking amino-containing compound, the mercapto compounds HS-Z (XI) given in Table II below were obtained.

_MM Tabelle IITable II 22 CH₃ CH ₃ 22 (D(D HH HH 22 (2)(2) C₃H₇ C ₃ H ₇ CH₃ CH ₃ 22 (3)(3) C₂H₅ C ₂ H ₅ HH 22 (A)(A) C₄H₉ C ₄ H ₉ C₂H₅ C ₂ H ₅ 22 (5)(5) HH HH 33 (6)(6) CH₃ CH ₃ H 'H ' 33 (7)(7) CH₃ CH ₃ C₅H₁₁ C ₅ H ₁₁ 33 (8)(8th) C₄H₉ C ₄ H ₉ HH 33 (9)(9) CHoCHO CH₃ CH ₃ 33 (10)(10) CHoCHO

Mit den Beispielen 59 bis 64 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, in v/elcher Z der Formel II entspricht. Die bei diesen Beispielen befolgte Arbeitsweise ist in der US-PS 4 154 935 beschrieben.Examples 59 to 64 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to formula II. The procedure followed in these examples is described in U.S. Patent 4,154,935.

28052805

-S3--S3-

Beispiel 59: Herstellung von 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäureExample 59: Preparation of 3-acetylthio-2-trifluoromethylpropanoic acid

Ein Gemisch aus 50 g Thioessigsäure und 66 g 2-Triflourmethylacrylsäure /M.W.Buxton, et al., J. Chera. Soc, 366 (1954)J7 wurde im Wasserbad eine Stunde erwärmt und dann 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen, worauf das Reaktionsgemisch im Vakuum destiliert wurde, wobei 3-Acetylthio-2-trifluormethylprppansäure erhalten wurde.A mixture of 50 g of thioacetic acid and 66 g of 2-trifluoromethylacrylic acid / M.W. Luxton, et al., J. Chera. Soc, 366 (1954) J7 was heated in a water bath for one hour and then allowed to stand at room temperature for 18 hours whereupon the reaction mixture was distilled in vacuo to give 3-acetylthio-2-trifluoromethylprppanic acid.

Beispiel 60: Herstellung von N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin-tert-buty!esterExample 60: Preparation of N- (3-acetylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline tert-butyl ester

Eine Lösung von 5,1 g L-Prolin-tert-butylester in 40 ml Dichlormethan wurde in einem Eisbad und Rühren gekühlt und mit einer Lösung von 6,2 g Dicyclohexylcarbodixmid in 15 ml Dichlormethan versetzt, worauf dem so hergestellten Gemisch unmittelbar anschließend eine Lösung von 6,5 g 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäure in 5 ml Dichlormethan zugesetzt und das erhaltene Reaktionsgemisch 15 Minuten im Eisbad und dann 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt wurde. Der hiebei entstandene Niederschlag wurde abfiltriert, worauf das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingeengt, der hiebei erhaltene Rückstand bis zur neutralen Reaktion gewaschen und die erhaltene organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde, womit als Rückstand N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L- -prolin-tert-butylester erhalten wurde.A solution of 5.1 g of L-proline tert-butyl ester in 40 ml of dichloromethane was cooled in an ice bath and stirring and treated with a solution of 6.2 g of dicyclohexylcarbodixmide in 15 ml of dichloromethane, whereupon the mixture thus prepared immediately followed by a solution of 6.5 g of 3-acetylthio-2-trifluoromethylpropanoic acid in 5 ml of dichloromethane, and the resulting reaction mixture was stirred for 15 minutes in an ice bath and then at room temperature for 16 hours. The resulting precipitate was filtered off, whereupon the filtrate was concentrated to dryness in vacuo, the residue obtained was washed until neutral and the resulting organic phase was dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness in vacuo, yielding as residue N- (3). Acetylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline-tert-butyl ester.

Beispiel 61: Herstellung von N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl) -L-prolinExample 61: Preparation of N- (3-acetylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline

Eine Lösung von 8 g N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin-tert-butylester in einem Gemisch aus 55 ml Anisol und 110 ml Trifluoressigsäure wurde nach einstündigem Stehen bei Raumtemperatur im Vakuum vom Lösungsmittel befreit, worauf der erhaltene Rückstand mehrmals aus einem Gemisch aus Äther und Hexan ausgefällt wurde. Hiebei wurde N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin erhalten.A solution of 8 g of N- (3-acetylthio-2-trifluoromethylpropanoyl) -L-proline tert-butyl ester in a mixture of 55 ml of anisole and 110 ml of trifluoroacetic acid was freed after one hour of standing at room temperature in vacuo, whereupon the resulting The residue was precipitated several times from a mixture of ether and hexane. This gave N- (3-acetylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline.

Beispiel 62: Herstellung von N-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropano.yl) -L-prolinExample 62: Preparation of N- (3-mercapto-2-trifluoromethylpropano.yl) -L-proline

28 053 028 053 0

Unter einer Stickstoffdecke wurde eine Lösung von 4 g N-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin in einem Gemisch aus 8 ml Wasser und 8 ml konzentriertem wässerigen Ammoniak hergestellt, worauf das erhaltene Gemisch 25 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, dann gekühlt und schließlich angesäuert und das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert wurde. Der erhaltene Extrakt wurde im Vakuum zur Trockene eingeengt und lieferte hiebei als Rückstand N-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl) -L-prolin .Under a nitrogen blanket, a solution of 4 g of N- (3-acetylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline in a mixture of 8 ml of water and 8 ml of concentrated aqueous ammonia was prepared, and the resulting mixture was stirred at room temperature for 25 minutes, then cooled and finally acidified and the acidified mixture was extracted with ethyl acetate. The resulting extract was concentrated to dryness in vacuo to yield, as residue, N- (3-mercapto-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline.

Beispiel 63: Herstellung von N-(2-Mercapto-3,3,3-trifluorpropanoyl) -L-prolin 'Example 63: Preparation of N- (2-mercapto-3,3,3-trifluoropropanoyl) -L-proline '

Eine in einem Gemisch aus Eis und Wasser gekühlte Lösung von 5,75 g L-Prolin in 50 ml 1n-Natronlauge wurde mit 12g 2-Brom- -3,3,3-trifluorpropansäurechlorid versetzt, worauf das erhaltene Gemisch bei Raumtemperatur drei Stunden kräftig gerührt und dann mit einer Lösung von 4 ml Thioessigsäure und 4,8 g Kaliumcarbonat in 50 ml Wasser versetzt und das nunmehr vorliegende Gemisch 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, dann mit Äthylacetat extrahiert und nach dem Extrahieren mit konzentrierter Salzsäure angesäuert wurde. Das angesäuerte Gemisch wurde nun mit Äthylacetat extrahiert worauf der nunmehr erhaltene Extrakt über Magnesiumsulfat getrockne und im Vakuum zur Trockene eingeengt wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde an einer mit Silicagel gefüllten Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Benzol und Essigsäure bestehenden Gemisch chromatographiert und lieferte N-(2-Acetylthio-3,3,3- -trifluorpropanoyl)-L-prolin, aus welcher die gewünschte Verbindung nach der in Beispiel 62 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt wurde.A solution of 5.75 g of L-proline in 50 ml of 1N sodium hydroxide solution, cooled in a mixture of ice and water, was admixed with 12 g of 2-bromo-3,3,3-trifluoropropanoic acid chloride, whereupon the resulting mixture was vigorously stirred at room temperature for three hours stirred and then treated with a solution of 4 ml of thioacetic acid and 4.8 g of potassium carbonate in 50 ml of water and the now present mixture was stirred for 16 hours at room temperature, then extracted with ethyl acetate and acidified after extraction with concentrated hydrochloric acid. The acidified mixture was then extracted with ethyl acetate, whereupon the extract now obtained was dried over magnesium sulphate and concentrated to dryness in vacuo. The resulting residue was chromatographed on a column filled with silica gel with a 7: 2 by volume mixture of benzene and acetic acid to give N- (2-acetylthio-3,3,3-trifluoropropanoyl) -L-proline which the desired compound was prepared according to the procedure described in Example 62.

Beispiel 64:Example 64:

Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß Beispiel 63 bzw. gemäß Beispiel 60 bis 62 das gemäß Beispiel 63 eingesetzte 2-Brom-3,3,3- -trifluorpropansäurechlorid durch die entsprechende aktivierte Acylgruppe oder die gernäß Beispiel 60 eingesetzte 3-Acetylthio- -2-trifluormethylpropansäure durch die entsprechende Thio-acylgruppe ersetzt wurde und weiters das gemäß Beispiel 6 3 eingesetzte L-Pro oder der gemäß Beispiel 60 eingesetzte L-Pro-t-If in the procedures of Example 63 or according to Example 60 to 62, the 2-bromo-3,3,3-trifluoropropansäurechlorid used in Example 63 by the corresponding activated acyl group or according to Example 60 used 3-acetylthio-2-trifluoromethylpropanoic acid was replaced by the corresponding thio-acyl group and further the L-Pro used according to Example 6 3 or the used according to Example 60 L-Pro-t-

-butylester durch die entsprechende eine Aminogruppe aufweisende Verbindung ersetzt wurde, wurden Mercaptoverbindungen HS - Z (II) der in Tabelle III zusammengefaßten Art erhalten.butyl ester was replaced by the corresponding amino group-containing compound, mercapto compounds HS - Z (II) of the kind summarized in Table III were obtained.

(1)(1) -- ' ' -- HH (2)(2) -- CF₃ CF ₃ FF (3)(3) -- CF₃ CF ₃ CF₃ CF ₃ (A)(A) C₂H₅ C ₂ H ₅ C₂H₅ C ₂ H ₅ (5)(5) HH CH₃ CH ₃ (6)(6) CF₃ CF ₃ CaH₉ CaH ₉ (7)(7) C₅H₁₁ C ₅ H ₁₁ CF₃ CF ₃ (δ)(Δ) HH HH (9)(9) CH₃ CH ₃ C₃H₇ C ₃ H ₇ (10)(10) CH₃ CH ₃ (11)(11) HH (12)(12) HH (13)(13) CF₃ CF ₃ (IA)(IA) CH₃ CH ₃ (15)(15) C₂H _t C ₂ H _t

Tabelle IIITable III RjlLRjlL Mlml inin RiRi FF HH 00 FF ' F'F C₂H₅ C ₂ H ₅ OO FF HH HH OO FF FF CH₃ CH ₃ OO FF HH HH OO FF FF HH 00 FF HH C₃H₇ C ₃ H ₇ OO FF FF HH 11 HH FF CH₃ CH ₃ 11 FF FF HH 11 FF FF HH 11 FF H'H' C₄H₉ C ₄ H ₉ 11 HH HH HH 11 FF HH HH 11 FF HH CH₃ CH ₃ 11 FF

Mit den Beispielen 65 bis 69 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, worin Z der Formel (III) entspricht. Die in diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 154 934 beschrieben.Examples 65 to 69 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to the formula (III). The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent 4,154,934.

Beispiel 65: Herstellung von N-Nitroso-L-prolinExample 65: Preparation of N-nitroso-L-proline

Eine gekühlte Suspension von 23,2 g Nitrosyl-tetrafluoroborat in 300 rnl trockenem Acetonitril wurde unter kräftigem Rühren innerhalb 10 Minuten mit 18,4 g L-Prolin und anschließend inner-A cooled suspension of 23.2 g of nitrosyl tetrafluoroborate in 300 ml of dry acetonitrile was added with vigorous stirring within 10 minutes with 18.4 g of L-proline and then intravenously.

* .vOV^i^¹ Tjif- fίΛΪλ*ΰίλίΐΗ·^.'^^«1>ίΓ'—ϋ1ΛΛΛΓν ?VV£l\2h&ft"tfEül * .vOV ^ i ^ ¹ Tjiff ίΛΪλ * ΰίλίΐΗ · ^. '^^ «1>ίΓ'-ϋ1ΛΛΛΓν? VV £ l \ 2h

228053 0228053 0

- 56 -- 56 -

halb 10 Minuten mit 18,4 g L-Prolin und anschließend innerhalb 15 Minuten mit einer Lösung von 19 g Pyridin in 50 ml Acetonitril versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde gerührt und dann unter vermindertem Druck zu einem Rückstand eingeengt wurde, der dreimal mit je 200 ml Äthylacetat extrahiert wurde. Die miteinander vereinigten Äthylacetatextrakte wurden zweimal mit durch Zusetzen konzentrierter Salzsäure schwach angesäuerter gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, dann über v/asserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und bei Raumtemperatur unter vermindertem Druck zur Trockene eingeengt. Das so erhaltene N-Nitroso-L-prolin schmilzt nach dem Umkristallisieren aus einem Gemisch von Äther und Petroläther (Siedebereich 30 bis 60 C) bei 108 bis 109⁰C unter Zersetzung.18.4 g of L-proline and then within 15 minutes with a solution of 19 g of pyridine in 50 ml of acetonitrile was added, then the reaction mixture was stirred for a further hour and then concentrated under reduced pressure to a residue which was washed three times with each 200 ml of ethyl acetate was extracted. The combined ethyl acetate extracts were washed twice with brine acidly acidified by adding concentrated hydrochloric acid, then dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated to dryness under reduced pressure at room temperature. The resulting N-nitroso-L-proline melts after recrystallization from a mixture of ether and petroleum ether (boiling range 30 to 60 C) at 108 to 109 ⁰ C with decomposition.

Beispiel 66: Herstellung von N-Amino-L-prolinExample 66: Preparation of N-amino-L-proline

Eine in einem Eisbad gekühlte Lösung von 10 g N-Nitroso- -L-prolin in 500 ml 50%iger Essigsäure wurde in einem Eisbad unter kräftigem Rühren allmählich mit solcher Geschwindigkeit mit 40 g Zinkstaub versetzt, daß die Temperatur des Reaktionsgemisches unterhalb 10°C blieb. Für das Zusetzen des Zinkstaubes waren etwa 15 Minuten erforderlich. Nicht umgesetzter Zinkstaub wurde sodann abfiltriert, worauf aus dem Filtrat in Lösung gegangenes Zink mittels Schwefelwasserstoff als Zinksulfid ausgefällt, das ausgefällte Zinksulfid abfiltriert und das Filtrat zur Trockene eingedampft wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in 30 ml absolutem Äthanol gelöst, worauf die erhaltene Lösung über Nacht bei 5 C stehengelassen wurde. Das in Form gelber Kristalle auskristal-' lisierte N-Amino-L-prolin wurde abfiltriert uns schmolz nach dem. Trocknen bei 153 bis 154 C.A cooled in an ice bath solution of 10 g of N-nitroso-L-proline in 500 ml of 50% acetic acid was gradually added in an ice bath with vigorous stirring with 40 g of zinc dust at such a rate that the temperature of the reaction mixture below 10 ° C. remained. It took about 15 minutes to add the zinc dust. Unreacted zinc dust was then filtered off, whereupon zinc precipitated from the filtrate was precipitated by hydrogen sulfide as zinc sulfide, the precipitated zinc sulfide was filtered off and the filtrate was evaporated to dryness. The residue obtained was dissolved in 30 ml of absolute ethanol and the resulting solution was allowed to stand overnight at 5 ° C. The crystals of N-amino-L-proline crystallized out in the form of yellow crystals were filtered off and melted. Dry at 153-154C.

Beispiel 67: Herstellung von N-/"/"-3- (Acetylmercapto) -1 -oxopropyl/- -amino_7-L- prolinExample 67: Preparation of N - / "-" - 3- (acetylmercapto) -1-oxopropyl / - amino-7-L-proline

Eine Suspension von 3,9 g N-Amino-L-prolin und 6,06 g N-Methylmorpholin in 200 ml· Dimethylacetamid wurde mit 4,9 8 g 3-Acetylthiopropionylchlorid versetzt, wobei die Temperatur des Reaktionsgemisches spontan auf 34 C anstieg. Das Reaktionsgemisch wurde sodann 5 Stunden auf 90 C erwärmt und dann über Nacht auf Raumtemperatur abkühlen gelassen, v/orauf der hiebei entstandeneA suspension of 3.9 g of N-amino-L-proline and 6.06 g of N-methylmorpholine in 200 ml of dimethylacetamide was admixed with 4.9 g of 3-acetylthiopropionyl chloride, the temperature of the reaction mixture rising spontaneously to 34 ° C. The reaction mixture was then warmed to 90 ° C for 5 hours and then allowed to cool to room temperature overnight, v / on the resulting

kristalline Feststoff, u.zw. N-Morpholin.Hydrochloric!, abfiltriert, das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt, der hiebei erhaltene Rückstand in möglichst wenig 20%iger Salzsäure gelöst, die erhaltene wässerige Lösung dreimal mit je 150 ml Äthylacetat eSctraiiiert und der erhaltene Extrakt über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft wurde. Auf diese Weise wurde das gewünschte N-//3-(Acetylmercapto)-1-oxopropyl7-aminq7-L-prolin erhalten.crystalline solid, u.zw. N-Morpholin.Hydrochloric !, filtered off, the filtrate concentrated under reduced pressure, the residue obtained here in as little as 20% hydrochloric acid, the resulting aqueous solution eSctraiii three times with 150 ml of ethyl acetate and the resulting extract dried over anhydrous magnesium sulfate and was evaporated down under reduced pressure. In this way the desired N - // 3- (acetylmercapto) -1-oxopropyl-7-aminq7-L-proline was obtained.

Beispiel 63: Herstellung von Ν-/Ί[3-Mercapto-1 -oxopropy 1) -amino_7- -L-prolin .. · Example 63: Preparation of Ν- / Ί [3-mercapto-1-oxopropyl-1-amino-7-L-proline.

Eine Lösung von 12 ml konzentriertem v/ässerigen Ammoniak in 25 ml Wasser wurde bei 10 C während 15 Minuten mit Stickstoff durchgespült und dann unter Stickstoffatmosphäre mit 5,8 g N-/2~(3- -Acetylmercapto)-1-oxopropyl7-aminq7-L-prolin versetzt, worauf das erhaltene Gemisch in Stickstoffatmosphäre 2,5 Stunden gerührt und nach dem Kühlen mit einem Eisbad mittels 20%iger Salzsäure stark angesäuert wurde. Das angesäuerte Gemisch v/urde dreimal mit je 150 ml Äthylacetat extrahiert, worauf die miteinander vereinigten Äthylacetatextrakte über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt wurden. Der hiebei erhaltene ölige Rückstand wurde mit Äther verrieben, worauf der Äther abdekantiert und letzte Spuren von Äther unter vermindertem Druck abgetrieben wurden. Der nunmehr vorliegende ölige Rückstand wurde nunmehr in Wasser gelöst. Durch Gefriertrocknen der erhaltene wässerigen Lösung wurde N-/~(3-Mercapto-1 -oxopropy 1) -aming7-L-prolirj in Form eines viskosen Öles erhaltenA solution of 12 ml of concentrated aqueous ammonia in 25 ml of water was sparged with nitrogen at 10 ° C. for 15 minutes and then under nitrogen atmosphere with 5.8 g of N- / 2 - (3-acetylmercapto) -1-oxopropyl-7-amine q7 L-proline was added, whereupon the resulting mixture was stirred in a nitrogen atmosphere for 2.5 hours and after cooling with an ice bath with 20% hydrochloric acid was strongly acidified. The acidified mixture was extracted three times with 150 ml each of ethyl acetate, and then the combined ethyl acetate extracts were dried over anhydrous magnesium sulfate and then concentrated under reduced pressure. The resulting oily residue was triturated with ether, after which the ether was decanted off and the last traces of ether were driven off under reduced pressure. The now present oily residue was now dissolved in water. By freeze-drying the resulting aqueous solution, N- / (3-mercapto-1-oxopropyl-1) -amino-7-L-proliryl in the form of a viscous oil was obtained

ber.: Analyse: CgH₁4N₃O₃S.1/2 H₃O: 42,27 % C, 6,65 % H, 12,32 % N,calc .: analysis: CgH ₁ 4N ₃ O ₃ S.1 / 2 H ₃ O: 42.27% C, 6.65% H, 12.32% N,

14,11 % S gef.: 42,59 % C, 6,68 % H, 12,29 % N, 14,29 % S14.11% yield: 42.59% C, 6.68% H, 12.29% N, 14.29% S

Beispiel 69:Example 69:

Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 6 5 bis 68 entsprechende geeignete Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle IV engegebenen Mercaptoverbindungen AS - Z (III) erhalten.When appropriate starting materials were used in the procedures according to Examples 6 5 to 68, the mercapto compounds AS - Z (III) given in the following Table IV were obtained.

228053 0228053 0

-5B--5b-

Tabolle IVTabule IV

M *23. H EM * 23. H E

(1) - C₂H₅ H . H 0(1) - C ₂ H ₅ H. H 0

(2) - CH₃ OH CH3 0 1(2) - CH ₃ OH CH ₃ O 1

(3) - H H C₃H₇ C 1 (A) - Η" H H 0 2(3) - HHC ₃ H ₇ C 1 (A) - Η "HH 0 2

(5) - CH₃ H, 3-OH H 0 2(5) - CH ₃ H, 3-OH H 0 2

(6) - H H₁ A-OH CH₃ 0 2(6) - HH ₁ A-OH CH ₃ O 2

(7) - C₆H₅CH₂ H H 0 2(7) -C ₆ H ₅ CH ₂ HH 0 2

(8) - H H CaH₉ 0 3(8) - HH CaH ₉ 0 3

(9) . C₃H₇ H₁ H₁ 5-OH H 0 3(9). C ₃ H ₇ H ₁ H ₁ 5-OH H 0 3

(10) H H HHIl(10) H H HHIl

(11) H H OH CH₃ 1 1(11) HH OH CH ₃ 1 1

(12) C₂H₅ CH₃ H H 11(12) C ₂ H ₅ CH ₃ HH 11

(13) H CH₃ H, 3-1 H(13) H CH ₃ H, 3-1 H

(IA) H H H, 3-OH C₂H₅ 1 2(IA) HHH, 3-OH C ₂ H ₅ 1 2

(15) C₂H₅ C₂H₅ H H 12(15) C ₂ H ₅ C ₂ H ₅ HH 12

(16) C₆H₅CH₂CH₂ H .H, A-OH CH₃ 1 2(16) C ₆ H ₅ CH ₂ CH ₂ H .H, A-OH CH ₃ 1 2

(17) CH₃ .H H H 13(17) CH ₃ .HHH 13

(18) H H H, H, 3-OH C₃H₇ 1 3(18) HHH, H, 3-OH C ₃ H ₇ 1 3

(19) H C4H9 H, H₁ A-OH H 13(19) H C4H9 H, H ₁ A-OH H 13

(20) CH₃ C₂H₅ H H 13(20) CH ₃ C ₂ H ₅ HH 13

Mit den folgenden Beispielen 70 bis 73 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, worin Z der Forinel X entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 129 566 beschrieben.The following Examples 70 to 73 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to Forinel X. The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent No. 4,129,566.

Beispiel 70: Herstellung von N-(3-Acetylthio-2-äthylpropanoyl)-L- -3,4-dehydroprolinExample 70: Preparation of N- (3-acetylthio-2-ethylpropanoyl) -L -3,4-dehydroproline

Eine Lösung von 3,4 g L-3,4-Dehydroprolin in 30 ml 1,On- -Natronlauge wurde in einem Gemisch aus Eis und Wasser gekühlt und dann mit 5,84 g 3-Acetylthio-2-äthylpropanoylchlorid und mit 15 ml 2n-Natronlauge versetzt, worauf das erhaltene Gemisch zunächst drei Stunden bei Raumtemperatur gerührt und nach dem Extrahieren mit Äther angesäuert wurde. Die durch Extrahieren des angesäuerten Reaktionsgemisches mit Äthylacetat erhaltene organische Phase wurde nach dem Trocknen über Magnesiumsulfat zur Trocken eingedampft und lieferte als Rückstand N-(3-Acetylthio-2-äthylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin.A solution of 3.4 g of L-3,4-dehydroproline in 30 ml of 1, on-sodium hydroxide solution was cooled in a mixture of ice and water and then with 5.84 g of 3-acetylthio-2-ethylpropanoyl chloride and with 15 ml 2n sodium hydroxide solution was added, whereupon the resulting mixture was initially stirred for three hours at room temperature and acidified after extraction with ether. The organic phase obtained by extracting the acidified reaction mixture with ethyl acetate, after drying over magnesium sulfate, was evaporated to dryness to give, as residue, N- (3-acetylthio-2-ethyl-propanoyl) -L-3,4-dehydroproline.

3eispiel 71: Herstellung von N-(2-Äthyl-3-mercaptopropanoyl)-L- -3 , 4-dehydroprolin \ -.-Example 71: Preparation of N- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L--3,4-dehydroproline -.-

3 g N-(Acetylthio-2-äthylpropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin wurden unter einer Stickstoffdecke in einem Gemisch aus 10 ml Wasser und 10 ml konzentriertem Ammoniak gelöst. Nach 25 Minuten wurde, das Reaktionsgemisch angesäuert und das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert. Durch Eindampfen des über Magnesiumsulfat getrockneten organischen Extrakte wurde N-(2-Äthyl-3- -mercaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolin erhalten.3 g of N- (acetylthio-2-ethylpropanoyl) -L-3,4-dehydroproline were dissolved under a nitrogen blanket in a mixture of 10 ml of water and 10 ml of concentrated ammonia. After 25 minutes, the reaction mixture was acidified and the acidified mixture extracted with ethyl acetate. Evaporation of the dried over magnesium sulfate organic extracts N- (2-ethyl-3 -mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline was obtained.

Beispiel 72: Herstellung von N-(2-Mercaptopropanoyl)-D,L-4,5- -dehydropiperidin-2-carbonsäureExample 72: Preparation of N- (2-mercaptopropanoyl) -D, L-4,5-dehydropiperidine-2-carboxylic acid

Eine in einem Gemisch aus Eis und Wasser unter Rühren gekühlte Lösung von 5,65 g D,L-4,5-Dehydropiperidin-2-carbonsäure in 50 ml wässeriger 1n-Natronlauge wurde mit 25 ml 2n-Natronlauge und 8,57 g 2-Brom-propanoylchlorid versetzt, worauf das erhaltene Gemisch zunächst eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt und dann mit einem Gemisch aus 4,18 g Thioessigsäure, 4,8 g Kaliumcarbonat und 50 ml Wasser versetzt v/urde. Das nunmehr vorliegende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 18 Stunden gerührt und dann angesäuert, worauf das eingesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene 'Extrakt über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum zur Trockene eingedampft v/urde. Hiebei wurde als Rückstand N- (Acetylthiopropanoyl).-D,L-4,5-dohydropiperidin-2-carbonsäure erhalten, welche sodann nach der Arbeitsweise gemäß Beispiel 71 in die gewünschte Vorbindung übergeführt wurde.A solution of 5.65 g of D, L-4,5-dehydropiperidine-2-carboxylic acid in 50 ml of aqueous 1N sodium hydroxide solution, cooled in a mixture of ice and water while stirring, was mixed with 25 ml of 2N sodium hydroxide solution and 8.57 g of 2N Bromo-propanoyl chloride, whereupon the resulting mixture was first stirred for one hour at room temperature and then treated with a mixture of 4.18 g of thioacetic acid, 4.8 g of potassium carbonate and 50 ml of water v / urde. The now present mixture was stirred at room temperature for 18 hours and then acidified, whereupon the acidified mixture was extracted with ethyl acetate and the resulting extract dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness in vacuo. Hiebei as the residue N- (acetylthiopropanoyl) .- D, L-4,5-dohydropiperidine-2-carboxylic acid was obtained, which was then converted according to the procedure of Example 71 in the desired Vorbindung.

228053 0228053 0

Beispiel 73: · 'Example 73:

Wenn bei der*, durch die Beispiele 70 bis 72 erläuterten Arbeitsweisen entsprechend andere Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle V angegebenen Verbindungen der Formel HS-Z (X) erhalten.When other starting materials were used correspondingly in the procedures explained by Examples 70 to 72, the compounds of the formula HS-Z (X) given in Table V below were obtained.

Tabelle VTable V

R₂₂ R₂₃ R₂₆ t uR ₂₂ R ₂₃ R ₂₆ tu

(1) H C₂H₁- N J(CH₂) O O(1) HC ₂ H ₁ - NJ (CH ₂ ) OO

COOR₂₃ COOR ₂₃

(2) H C₂H₅ O^^X 0(2) HC ₂ H ₅ O ^^ X 0

N COOR₂₃ N COOR ₂₃

(3) CH₀ H N (CH₀) 0 0(3) CH ₀ HN (CH ₀ ) 0 0

COOR₂₃ COOR ₂₃

CH H j (CH₉) 0 0CH H j (CH ₉ ) 0 0

COOR₂₃ COOR ₂₃

(5) H H I (CH₂)_u 0 0(5) HHI (CH ₂ ) _u 0 0

COOR₂₃ COOR ₂₃

(6) H H N ¹COOR₉₃ 0(6) HHN ¹ COOR ₉₃ 0

(7) CH., H N (Ct! ) 0(7) CH., H N (Ct!) 0

^y 3 -ν. χ- V u ^y 3 -ν. χ- V u

COOR₂₃ COOR ₂₃

Tabelle V FortsetzungTable V continued

(8) C₃H₇ H ' 'N_nU)(8) C ₃ H ₇ H '' N _n U)

2-u2-u

ο ιο ι

COORCOOR

2323

(9) H C,H, 4 4 (9) HC, H, 4 4

ο ιο ι

(10) H C,H(10) H C, H

44

(11) CH₃ C₃H₇ N (CH₀).. O COOR(11) CH ₃ C ₃ H ₇ N (CH ₀₎ .. O COOR

11

COORCOOR

(12) C₁-H₁₁ H(12) C ₁ -H ₁₁ H

11

COORCOOR

(13) H CH(13) H CH

N (CHO- 1N (CHO-1

^v 2 u ^v 2 u

2323

COORCOOR

<^1Α) ^CH3 ^C3^H7 "Ν LcOOR₀, 1< ^1Α ) ^CH 3 ^C 3 ^H 7 "Ν LcOOR ₀ , 1

₂₃₂₃

(15) C₁-H,, H(15) C ₁ -H ,, H

XOOR₉₃ XOOR ₉₃

(16) C₂H₅ H(16) C ₂ H ₅ H

228 05 3 0228 05 3 0

Tabelle V Fortsetzung Tabel le V continuation

(17)(17) CH₃ CH ₃ HH HH M ( ( W jM ( ( W j 11 11 COOR₂₃ COOR ₂₃ (18)(18) C₂H₅ C ₂ H ₅ N_x^(CH₂)N _x ^ (CH ₂ ) 11 11 COOR,.COOR ,.

(19) CH₃ CH₃ ^N\/^(CH2⁾u(19) CH ₃ CH ₃ ^N / ^(CH 2 ⁾ u

COOR.,.COOR.,.

(20) CH₃ CH_{3 N} L-COOR₂₃ 0(20) CH ₃ CH _{3 N} L-COOR ₂₃ 0

Mit den Beispielen 74 bis 77 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS-Z erläutert, worin Z der Formel IX entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 108 886 beschrieben.Examples 74 to 77 illustrate the preparation of compounds of the formula HS-Z in which Z corresponds to the formula IX. The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent No. 4,108,886.

Beispiel 74: Herstellung von 2-/J!3-Benzoylthiopropanoyl) -amincjy⁷- -2-methylpropansäureExample 74: Preparation of 2- / J! 3-benzoylthiopropanoyl) -amino-cyano- ^7-2 -methylpropanoic acid

Zunächst wurden 5,15 g o^-Amino-isobuttersäure unter Rühren und Kühlen in einem Eisbad in 59 ml 0,85 η-Natronlauge gelöst,worau: die erhaltene Lösung mit 25- ml 2n-Natronlauge und anschließend noch mit 8,5 g 3-Broin-propionylchlorid versetzt wurde. Das Kühlbad wurde sodann entfernt, worauf das Reaktionsgemisch mit 2n-Natronlauge auf einen pH-Wert von 7,3 gebracht wurde. Zwei Stunden später wurde das erhaltene Gemisch mit einer Lösung von 7,5 g Thiobenzoesäure und 4,8 g Kaliumcarbonat in 50 ml Wasser versetzt, worauf das Reaktions gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, das angesäuerte Gemisch mit Äthylace tat extrahiert und der erhaltene Extrakt getrocknet und zur Trocken eingedampft wurde. Durch Umkristallisieren des in einer Menge von 13,1 g erhaltenen Rückstands aus einem Gemisch aus Äthylacetat und Äther wurden 5,4 g 2-/(3-Benzoylthiopropanoyl)-amino/^-methylpropansäure mit Fp = 142 bis 143 C erhalten.First, 5.15 g of ^ -amino-isobutyric acid were dissolved with stirring and cooling in an ice bath in 59 ml of 0.85 g sodium hydroxide solution, whereupon the solution obtained was washed with 25 ml of 2N sodium hydroxide solution and then with 8.5 g of 3 -Broin-propionyl chloride was added. The cooling bath was then removed and the reaction mixture was brought to pH 7.3 with 2N sodium hydroxide solution. Two hours later, the resulting mixture was added with a solution of 7.5 g of thiobenzoic acid and 4.8 g of potassium carbonate in 50 ml of water, whereupon the reaction mixture was stirred overnight at room temperature and then acidified with concentrated hydrochloric acid, the acidified mixture was treated with ethyl acetate extracted and the resulting extract was dried and evaporated to dryness. Recrystallization of the residue obtained from a mixture of ethyl acetate and ether in an amount of 13.1 g of 5.4 g of 2- / (3-benzoylthiopropanoyl) amino / ^ -methylpropanoic acid having mp = 142 to 143 C were obtained.

28053 028053 0

Beispiel 75: Herstellung von 2-/~(3-Mercaptopropanoyl) -amino/-2- -methyl-propansäureExample 75: Preparation of 2- / ~ (3-mercaptopropanoyl) amino / 2-methylpropanoic acid

2,8 g der gemäß Beispiel 45 hergestellten Verbindung wurden unter einer Argondecke während einer Stunde mit einem Gemisch aus 20 ml Wasser und 20 ml konzentrierter Ammoniaklösung behandelt, worauf das ausgefüllte Benzamid abfiltriert und das Filtrat zweimal mit Äthylacetat extrahiert wurde. Die wässerige Phase wurde im Vakuum eingeengt und nach dem Ansäuern mit konzentrierter Salzsäure mit Äthylacetat extrahiert, worauf der erhaltene Extrakt getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand lieferte beim Umkristallisieren aus Acetonitril 1,2 g 2-/"(3-Mercaptopropanoy 1) -aminq-7-2- -methyl-propansäure mit Fp =169 bis 170 C.2.8 g of the compound prepared according to Example 45 were treated under an argon blanket for one hour with a mixture of 20 ml of water and 20 ml of concentrated ammonia solution, whereupon the filled benzamide was filtered off and the filtrate was extracted twice with ethyl acetate. The aqueous phase was concentrated in vacuo and, after acidification with concentrated hydrochloric acid, extracted with ethyl acetate, whereupon the extract obtained was dried and evaporated to dryness in vacuo. The residue obtained on recrystallization from acetonitrile gave 1.2 g of 2 - / (3-mercaptopropanoyl) -aminq-7-2-methylpropanoic acid of mp = 169 to 170 ° C.

Beispiel 76: Herstellung von 1 -/"(3-Mercaptopropanoy 1) -amincy-cyclopentancarbonsäureExample 76: Preparation of 1 - / "(3-Mercaptopropanoy 1) -aminocyclopentanecarboxylic acid

Eine in einem Eisbad unter Rühren gekühlte Lösung von 6,4 5 g. 1-Aminocyclopentan-I-carbonsäure in 50 ml 1 n-Natronlauge wurde zunächst mit 25 ml 2n-Natronlauge und unmittelbar anschließend mit 8,5 g 3-Brom-propionylchlorid versetzt, worauf das Eisbäd entfernt und der pH-Wert des Reaktionsgemisches auf etwa 7 eingestellt wurde, womit sich einige Kristalle ausschieden. Nach 3,5- -stündigem Stehenlassen des Reaktionsgemisches bei Raumtemperatur wurden dem Reaktionsgemisch 54 ml 1 η-Natronlauge zugesetzt, womit alles in Lösung ging. Unmittelbar anschließend wurden dem erhaltenen Gemisch 4,12 g Thioessigsäure zugesetzt und durch Zusetzen von weiteren 5 ml 1 η-Natronlauge der pH-Wert nahe an 8 gebracht. Das Reaktionsgemisch wurde nach dem Abstehen über Nacht mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, worauf das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Trocknen über Magnesiumsulfat im Vakuum zur Trockene eingeengt wurde. Die als Rückstand erhaltene 1-/3-Acetylthiopropanoyl)-amino-- -cyclopentancarbonsäure wurde zunächst aus Äthylacetat und Hexan und anschließend nochmals aus Äthylacetat umkristallisiert und wurde hiebei in einer Menge von 3,655 g mit Fp =127 bis 128°C erhalten. Aus der so erhaltenen Verbindung wurde die gewünschte Vorbindung nach der im Beispiel 7 5 beschriebenen Arbeitsweise herαesteilt.A cooled in an ice bath with stirring solution of 6.4 5 g. 1-aminocyclopentane-1-carboxylic acid in 50 ml of 1 N sodium hydroxide solution was first treated with 25 ml of 2N sodium hydroxide solution and immediately afterwards with 8.5 g of 3-bromo-propionyl chloride, whereupon the Eisbäd removed and the pH of the reaction mixture to about 7 was set, which was eliminated some crystals. After allowing the reaction mixture to stand at room temperature for 3.5 hours, 54 ml of 1N sodium hydroxide solution were added to the reaction mixture, whereby everything went into solution. Immediately thereafter, 4.12 g of thioacetic acid were added to the resulting mixture and the pH was brought close to 8 by addition of a further 5 ml of 1N sodium hydroxide solution. The reaction mixture was acidified after standing overnight with concentrated hydrochloric acid, whereupon the acidified mixture was extracted with ethyl acetate and the extract obtained after drying over magnesium sulfate was concentrated in vacuo to dryness. The residue obtained 1- / 3-Acetylthiopropanoyl) -amino-cyclopentancarbonsäure was first recrystallized from ethyl acetate and hexane and then again from ethyl acetate and hiebei was obtained in an amount of 3.655 g with mp = 127 to 128 ° C. From the compound thus obtained, the desired pre-binding was determined by the procedure described in Example 7 5.

228053 0228053 0

Beispiel 77: Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 74 und 75 der gemäß Beispiel 74 eingesetzte Ausgangsstoff durch einen anderen geeigneten Ausgangsstoff ersetzt wurde, wurden die in der folgenden Tabelle VI angegebenen Mercaptoverbindungen HS-Z (IX) erhalten.Example 77: In the procedures of Examples 74 and 75, when the starting material used in Example 74 was replaced with another suitable starting material, the mercapto compounds HS-Z (IX) shown in Table VI below were obtained.

pipi

σ-Piσ Pi-

- GS- - GS-

roro

rcrc

coco

CN)CN)

roro

•X.• X.

cjcj

U X! β U X! β

CDCD

CNCN

Pi IPi I

CNCN

CNCN

''

roro CNCN »χ-"χ- roro

roro

pil οpil ο

CNCN

CJCJ

ro zz ro zz

ZZ ro ZZ ro

U OU O

Pipi

roro roro CNCN OO CJCJ UU

cccc

roro roro roro ZCZC CJCJ cj rccj rc CJCJ

roro CJ XCJ X CNCN CJCJ CJCJ

CNCN

cccc

228053 0228053 0

Mit den Beispielen 78 bis 81 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, worin Z der Formel (VII) entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 053 651 beschrieben.Examples 78 to 81 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to the formula (VII). The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent 4,053,651.

Beispiel 78: Herstellung von N-(3-Benzoylthiopropanoyl)-L-alaninExample 78: Preparation of N- (3-benzoylthiopropanoyl) -L-alanine

Eine in einem Eisbad unter Rühren gekühlte Lösung von 4,45 g L-Alanin in 50 ml wässeriger Natronlauge wurde aufeinanderfolgend mit 27 ml 2n-Natronlauge und 8,5 g 3-Brom-propionylchlorid versetzt, worauf das erhaltene Gemisch vom Eisbad entfernt, dann noch 3,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und schließlich noch mit einem Gemisch aus 7,5 g Thiobenzoesäure, 4,8 g Kaliumcarbonat und 50 ml Wasser versetzt wurde. Nachdem das erhaltene Reaktionsgemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt worden wor, wurde das Reaktionsgemisch mit konzentrierter wässeriger Salzsäure angesäuert und das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert. Der durch Waschen des erhaltenen Extraktes mit Wasser, Trocknen des Extraktes und Eindampfen desselben zur Trockene in einer Menge von 14,9 g erhaltene Rückstand lieferte beim Umkristallisieren aus Äther 7,1 g N-(3-Benzoylthiopropanoyl)-L-alanin mit Fp = 99 bis 100°C.A cooled in an ice bath with stirring solution of 4.45 g of L-alanine in 50 ml of aqueous sodium hydroxide solution was added successively with 27 ml of 2N sodium hydroxide solution and 8.5 g of 3-bromo-propionyl chloride, whereupon the resulting mixture removed from the ice bath, then stirred for a further 3.5 hours at room temperature and finally treated with a mixture of 7.5 g of thiobenzoic acid, 4.8 g of potassium carbonate and 50 ml of water. After the resulting reaction mixture was stirred overnight at room temperature, the reaction mixture was acidified with concentrated aqueous hydrochloric acid and the acidified mixture was extracted with ethyl acetate. The residue obtained by washing the obtained extract with water, drying the extract and evaporating it to dryness in an amount of 14.9 g gave on recrystallization from ether 7.1 g of N- (3-benzoylthiopropanoyl) -L-alanine with Fp = 99 to 100 ° C.

Beispiel 79: Herstellung von N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-alaninExample 79: Preparation of N- (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine

Eine Lösung von 4,2 g N-(3-Benzoylthiopropanoyl)-L-alanin in einem Gemisch aus 7 ,.5 ml Wasser und 6 ml konzentrierten wässerigen Ammoniaks wurde eine Stunde nach der Herstellung mit Wasser verdünnt, worauf das verdünnte Gemisch filtriert, das erhaltene Filtrat mit Äthylacetat extrahiert, die verbliebene wässerige Phase mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Waschen mit Wasser und nach dem Trocknen im Vakuum zu einem trockenen Rückstand eingeengt wurde, der beim Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Äthylacetat und Hexan 1,87 g N-.(3-Mercaptopropanoyl)- -L-alanin mit Fp = 79 bis 81°C ergab.A solution of 4.2 g of N- (3-benzoylthiopropanoyl) -L-alanine in a mixture of 7.5 ml of water and 6 ml of concentrated aqueous ammonia was diluted with water one hour after preparation, whereupon the diluted mixture was filtered, extracted the resulting filtrate with ethyl acetate, acidified the remaining aqueous phase with concentrated hydrochloric acid, extracted the acidified mixture with ethyl acetate and the resulting extract was concentrated after washing with water and after drying in vacuo to a dry residue which upon recrystallization from a mixture from ethyl acetate and hexane gave 1.87 g of N - (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine with mp = 79 to 81 ° C.

Beispiel 80: Herstellung von N-(3-Mercapto-2-methyl-propanoyl)- -L-valinExample 80: Preparation of N- (3-mercapto-2-methyl-propanoyl) -L-valine

Eine unter Kühlen in einem Eisbad unter kräftigem Rühren hergestellte Lösung von 88 g L-Valin und 40 g Natriumcarbonat in 1 1 Wasser wurde mit 135 g 3-Acetylthio-2-methyl-propanoylchlorid und einer Lösung von 120 g Natriumcarbonat in 500 ml Wasser inner halb eines Zeitraumes von 15 min,auf fünf gleiche Teile verteilt, versetzt. 1,5 Stunden später wurde das Reaktionsgemisch mit Äthyl acetat extrahiert, die wässerige Phase mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Waschen mit Wasser und nach dem Trocknen zu 190 g eines trockenen Rückstandes an N-(3- -Acetylthio-2-methyl-propanoyl)-L-valin eingeengt. Aus der so her gestellten Verbindung wurde die gewünschte Verbindung nach der in Beispiel 79 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt.A solution of 88 g of L-valine and 40 g of sodium carbonate in 1 liter of water, prepared with cooling in an ice bath with vigorous stirring, was treated with 135 g of 3-acetylthio-2-methylpropanoyl chloride and a solution of 120 g of sodium carbonate in 500 ml of water over a period of 15 minutes, distributed over five equal parts. 1.5 hours later, the reaction mixture was extracted with ethyl acetate, the aqueous phase acidified with concentrated hydrochloric acid, the acidified mixture extracted with ethyl acetate, and the extract obtained after washing with water and after drying to 190 g of a dry residue of N- (N-). 3-acetylthio-2-methyl-propanoyl) -L-valine. From the compound thus prepared, the desired compound was prepared according to the procedure described in Example 79.

Beispiel 81: Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 78 bis 80 statt der gemäß den Beispielen 78 oder 80 eingesetzten Ausgangsstoffe andere geeignete Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle VII angegebenen Mercaptoverbindungen der Formel HS-Z (VII) erhalten.Example 81: If other suitable starting materials were used instead of the starting materials used according to Examples 78 or 80 in the procedures according to Examples 78 to 80, the mercapto compounds of the formula HS-Z (VII) given in Table VII below were obtained.

228 05 3 0 -«-228 05 3 0 - «-

crt οcrt ο

CMCM

CSICSI

W CQ < W CQ <

CdCD

CMCM

X UX U

Ο"!Ο "!

*CNl* CNl CMCM CMCM II OO OO OO roro UU II inin I I II II CMCM U 'U ' ZZ -τ-¹ -τ- ¹ vOvO 11 OO OO roro II υυ CMCM CNlCNl χχ υυ OO ιι II

roro

CMCM

CMCM

X U CMX U CM

COCO

roro

CMCM

O=OO = O

CMCM

O ιO ι

CM OCM O

JPJP

toto

CM OCM O

X. co O X. co O

roro

CMCM XX roro αα —-*- * inin Lnln αα XX CMCM OO OO

ro r:ro r:

χ inχ in

roro

I ι X UI ι X U

roro

CMCM

U CM U CM

inin

cm ro <r L-ocm ro <r L-o

CMCM

roro

- τ&β. -- τ & β. -

TABELLE VII (Fortsetzung)TABLE VII (continued)

(15) (16)(15) (16)

H ClI₃ H Cl I ₃

C₃H₇ C₂H₅ C ₃ H ₇ C ₂ H ₅

H C₆H₅CH₂ HC ₆ H ₅ CH ₂

HOX O >CH₂- -CH(CH₃)(C₂H₅)HOX O> CH ₂ - -CH (CH ₃ ) (C ₂ H ₅ )

228053 0228053 0

Mit den Beispielen 82 bis 97 wird die Synthese von Verbindungen der Formel HS-Z erläutert, worin Z der Formel IV entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in den US-PSen 4 113 715 und 4 146 611 beschrieben.Examples 82 to 97 illustrate the synthesis of compounds of the formula HS-Z in which Z corresponds to the formula IV. The procedures followed in these examples are described in U.S. Patents Nos. 4,113,715 and 4,146,611.

Beispiel 82: Herstellung von N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin- -tert.-butylesterExample 82: Preparation of N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline tert-butyl ester

Eine in einem Eisbad gekühlte Lösung von 0,85 g L-Prolin- -tert.-butylester und 0,67 g Hydroxybenzotriazol in 10 ml Methylenchlorid wurde in der angegebenen Reihenfolge mit 1,03 g Dicyclohexylcarbodiimid und 1,7 g N,S-Diacetyl-D,L-cystein versetzt. 15 min später wurde das Eisbad entfernt und das erhaltene Gemisch über Nachl gerührt. Der hiebei entstandene Niederschlag wurde abfiltriert, worauf das Filtrat in der angegebenen Reihenfolge mit 10%iger Kaliumbisulfatlösung, Wasser, gesättigter Natriumbicarbonatlösung und Wasser gewaschen und die erhaltene organische Phase nach dem Trocknen im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde. Auf diese Weise wurde N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin-tert.-butylester in Form eines Öles und mit R^ = 0,25 (Silicagel, Äthylacetat) erhalten.A solution of 0.85 g of L-proline tert-butyl ester cooled in an ice-bath and 0.67 g of hydroxybenzotriazole in 10 ml of methylene chloride was charged in the order listed with 1.03 g of dicyclohexylcarbodiimide and 1.7 g of N, S- Diacetyl-D, L-cysteine added. 15 minutes later, the ice bath was removed and the resulting mixture was stirred over broth. The resulting precipitate was filtered off, whereupon the filtrate was washed in the order given with 10% potassium bisulfate solution, water, saturated sodium bicarbonate solution and water, and the resulting organic phase was evaporated to dryness in vacuo to dryness. In this way N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline tert-butyl ester was obtained in the form of an oil and with R 1 = 0.25 (silica gel, ethyl acetate).

Beispiel 83: Herstellung von N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolinExample 83: Preparation of N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline

1,9 g N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin-tert.-butylester wurden in einem Gemisch aus 6 ml Anisol und 12 ml Trifluoressigsäure gelöst, worauf die erhaltene Lösung eine Stunde bei Raumtemperatur stehengelassen und dann im Vakuum von Lösungsmitteln befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in einem Gemisch aus Äthylacetat, Äther und Hexan gefällt und lieferte hiebei 1,08 g N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin mit Fp = 80 bis 140°C.1.9 g of N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline tert-butyl ester were dissolved in a mixture of 6 ml of anisole and 12 ml of trifluoroacetic acid, whereupon the resulting solution was allowed to stand for one hour at room temperature and then in Vacuum was removed from solvents. The residue obtained was precipitated in a mixture of ethyl acetate, ether and hexane to give 1.08 g of N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline having mp = 80 to 140 ° C.

Beispiel 84: Herstellung von N-Acetyl-D,L-cysteinyl-L-prolinExample 84: Preparation of N-acetyl-D, L-cysteinyl-L-proline

0,3 g N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin wurden unter einer Argondecke in einem Gemisch aus 4 ml Wasser und 4 ml konzentriertem Ammoniak gelöst, worauf die erhaltene Lösung 30 min bei Raumtemperatur stehengelassen und dann mit Natriumchlorid gesättigt und dann die erhaltene Lösung mit Äthylacetat und Chloroform extrahiert wurde. Die organischen Schichten wurden mitein-0.3 g of N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline was dissolved under a blanket of argon in a mixture of 4 ml of water and 4 ml of concentrated ammonia, whereupon the resulting solution was allowed to stand at room temperature for 30 minutes and then with sodium chloride saturated and then the resulting solution was extracted with ethyl acetate and chloroform. The organic layers were included

ander vereint und lieferten beim Eindampfen im Vakuum zur Trockene 0,1 g N-Acetyl-D/L-cysteinyl-L-prolin mit R_f = 0,25 Silicagel, Benzol.-Essigsäure = 75:25.0.1 g of N-acetyl-D / L-cysteinyl-L-proline with R _f = 0.25 silica gel, benzene.-acetic acid = 75:25 when evaporated to dryness under vacuum.

Beispiel 85: Herstellung von N^Acetyl-S-acetylthiovalyl-L-prolin- -t-butylesterExample 85: Preparation of N, acetyl-S-acetylthiovalyl-L-proline t-butyl ester

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 82 N,S-Diacetyl- -penicillamin statt des N,S-Diacetyl-D,L-cysteins eingesetzt wurde, wurde der N^-Acetyl-S-acetylthiovalyl-L-prolih-t-butylester erhalten.When N, S-diacetylpenicillamine was used instead of the N, S-diacetyl-D, L-cysteine in the procedure of Example 82, the N, -acetyl-S-acetylthiovalyl-L-prolh-t-butyl ester was obtained ,

Beispiel 86: Herstellung von N°*-Acetyl-3-inercaptovalyl-L—prolinExample 86: Preparation of N ° * -acetyl-3-inercaptovalyl-L-proline

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß den Beispielen 83 und 84 statt des N,S-Diacetyl-D,L-cysteinyl-L-prolin-t-butylester die gemäß Beispiel 85 hergestellte Verbindung eingesetzt wurde, wurde die gewünschte Verbindung erhalten.When the procedure according to Examples 83 and 84 instead of the N, S-diacetyl-D, L-cysteinyl-L-proline t-butyl ester the compound prepared according to Example 85 was used, the desired compound was obtained.

Beispiel 87: Herstellung von Methyl-,/Ν-(p-methoxybenzyl)-nipecotatj, .HydrochloridExample 87: Preparation of methyl, / Ν- (p-methoxybenzyl) -nipecotate, .hydrochloride

Ein Gemisch aus 23 g Methylnipecotat, 24,3 g Kaliumcar- · bonat und 52 g p-Methoxybenzyl-trichloracetat in 800 ml Toluol wurde unter Stickstoff 72 Stunden auf Rückflußtemperatur erhitzt, worauf das Reaktionsgemisch abgekühlt und dann vom Reaktionsgemisch im Vakuum das Toluol abdestilliert, der erhaltene Rückstand in Chloroform gelöst, die erhaltene Lösung einmal mit 400 ml wässeriger Kaliumcarbonatlösung und dann mit 400 ml 10%iger Salzsäure gewaschen, die gewaschene Chloroformlösung im Vakuum zu einem zähflüssigen braunen Öl eingeengt und das erhaltene öl mit Äthylacetat verrieben wurde, wobei 30,7 g des Methyl-/N-(p-methoxybenzyl) '-nipecotaty'.HycäTOchlorids in Form eines weißstichigen kristallinen Festkörpers erhalten wurde. Durch Umkristallisieren der erhaltenen Verbindung aus Äthylacetat wurde ein analysenreiner Stoff mit Fp = 150 bis 154°C erhalten.A mixture of 23 g of methyl nipecotate, 24.3 g of potassium carbonate and 52 g of p-methoxybenzyltrichloroacetate in 800 ml of toluene was heated at reflux for 72 hours under nitrogen, whereupon the reaction mixture was cooled and the toluene was distilled off from the reaction mixture under reduced pressure. the residue obtained was dissolved in chloroform, the solution obtained was washed once with 400 ml of aqueous potassium carbonate solution and then with 400 ml of 10% hydrochloric acid, the washed chloroform solution was concentrated in vacuo to a viscous brown oil and the resulting oil was triturated with ethyl acetate, 7 g of the methyl / N- (p-methoxybenzyl) nipecotatyl HycäTOchlorids was obtained in the form of a whitish crystalline solid. By recrystallization of the resulting compound from ethyl acetate an analytically pure substance with mp = 150 to 154 ° C was obtained.

Beispiel 88: Herstellung von ΓΙ-(p-Methoxybenzyl)-3-methylen-2- -piperidonExample 88: Preparation of ΓΙ- (p-methoxybenzyl) -3-methylene-2-piperidone

Eine Lösung von 30,7 g Methyl-/N-(p-methoxybenzoyl)-nipccotcit/. Hydrochlorid und 8,4 g Natriumhydroxyd in einem GemischA solution of 30.7 g of methyl / N- (p-methoxybenzoyl) -nipocotcite. Hydrochloride and 8.4 g of sodium hydroxide in a mixture

228 05 3 O228 05 3 O

aus 900 ml Methanol und 4 5 ml Wasser wurde bei Raumtemperatur 17 Stunden gerührt und dann im Vakuum zur Trockene eingedampft, worauf der erhaltene Rückstand mit Toluol verdünnt und das erhaltene Gemisch erneut im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde. Dem erhaltenen Rückstand wurde 1 1 Essigsäureanhydrid und 140 ml Triäthylamin zugesetzt, worauf das erhaltene Gemisch unter Rückfluß vier Stunden erwärmt, das Reaktionsgemisch dann im Vakuum zur Trockene eingedampft, der erhaltene Rückstand in Chloroform aufgenommen, das erhaltene Gemisch mit Wasser gewaschen, getrocknet und im Vakuum eingeengt und das hiebei als Rückstand erhaltene Öl an Silicagel unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 1:1 aus Hexan und Äthylacetat bestehenden Gemisches als Eluiermittel chromatographiert wurde. Auf diese Weise wurden 16,9 g N-(p-Methoxybenzyl)-3-methylen-2-piperidon in Form eines chromatographisch reinen gelben Öles erhalten, das beim Destillieren im Vakuum analytisch reines N-(p-Methoxybenzyl)-3-methylen-2- -piperidon mit Kp = 145 bis 155°C/O,O5 mm. Hg ergab.from 900 ml of methanol and 4 5 ml of water was stirred at room temperature for 17 hours and then evaporated to dryness in vacuo, whereupon the resulting residue was diluted with toluene and the resulting mixture was again evaporated to dryness in vacuo. The resulting residue was added 1 1 acetic anhydride and 140 ml of triethylamine, whereupon the resulting mixture heated under reflux for four hours, the reaction mixture was then evaporated to dryness in vacuo, the residue obtained was taken up in chloroform, the resulting mixture washed with water, dried and in vacuo was concentrated by evaporation and the oil obtained as residue on silica gel was chromatographed using a mixture of 1: 1 by volume of hexane and ethyl acetate as eluent. In this way, 16.9 g of N- (p-methoxybenzyl) -3-methylene-2-piperidone were obtained in the form of a chromatographically pure yellow oil, which on distillation in vacuo analytically pure N- (p-methoxybenzyl) -3-methylene -2- piperidone with Kp = 145 to 155 ° C / O, O5 mm. Hg revealed.

Beispiel 89: Herstellung von 3-Methylen-piperid-2-onExample 89: Preparation of 3-methylene-piperid-2-one

Eine Lösung von 16,9 g N-(p-Methoxybenzyl)-3-methylenpiperid-2-on und 21,3 g Anisol in 400 ml Trifluoressigsäure wurde in Stickstoffatmosphäre 48 Stunden auf Rückflußtemperatur erhitzt und dann im Vakuum zur Trockene eingedampft, worauf der erhaltene Rückstand an 900 g Silicagel unter Verwendung von Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wurde. Auf diese Weise wurden 6,5 g 3-Methylen-piperid-2-on als kristalliner Feststoff erhalten.-A solution of 16.9 g of N- (p-methoxybenzyl) -3-methylene-piperid-2-one and 21.3 g of anisole in 400 ml of trifluoroacetic acid was heated at reflux for 48 hours in a nitrogen atmosphere and then evaporated to dryness in vacuo, whereupon the mixture was refluxed The residue obtained was chromatographed on 900 g of silica gel using ethyl acetate as the eluent. In this way, 6.5 g of 3-methylene-piperid-2-one were obtained as a crystalline solid.

Beispiel 90: Herstellung von 2-Methylen-5-aminopentansäure.HydrochloridExample 90: Preparation of 2-methylene-5-aminopentanoic acid. Hydrochloride

Eine Lösung von 2,6 g 3-Methylen-piperidin-2-on in 150 ml 6n-Salzsäure wurde 24 Stunden auf Rückflußtemperatur erhitzt, worauf die erhaltene Lösung gekühlt und mit Chloroform extrahiert und die verbliebene wässerige Phase im Vakuum eingedampft wurde. Der hiebei in einer Menge von 3,8 g als Rückstand erhaltene glasige Schaum wurde zusammen mit Methanol erwärmt, v/orauf das erhaltene Gemisch zwecks Abtrennens einer geringen Menge an Unlöslichem über Celite (Diatomeenerde als Klärmittel) filtriert undA solution of 2.6 g of 3-methylene-piperidin-2-one in 150 ml of 6N hydrochloric acid was heated to reflux for 24 hours, whereupon the resulting solution was cooled and extracted with chloroform, and the remaining aqueous phase was evaporated in vacuo. The glassy foam obtained as residue in an amount of 3.8 g was heated together with methanol, filtered on the resulting mixture to remove a small amount of insoluble matter over celite (diatomaceous earth as a clarifying agent) and

3 ^ ν -13- 3 ^ ν -13-

das erhaltene Filtrat im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde. Auf diese V/eise wurden 2,5 g 2-Methylen-5-aminopentansäure .Hydrochlorid in Form eines hellbraunen kristallinen Feststoffes erhalten, der beim Umkristallisieren aus Isopropanol diese Verbindung analysenrein mit Fp = 138 bis 144 C lieferte.the resulting filtrate was evaporated to dryness in vacuo. In this way, 2.5 g of 2-methylene-5-aminopentanoic acid .Hydrochloride were obtained in the form of a light brown crystalline solid, which on recrystallization from isopropanol this compound analytically with mp = 138 to 144 C provided.

Beispiel 91: Herstellung von 2-Methylen-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-aminopentansäureExample 91: Preparation of 2-methylene-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) aminopentanoic acid

Eine Lösung von 8,8 g 2-Methylen-5-amino-pentansäure.Hydrochlorid in 100 ml Wasser wurde unter Rühren mit 6,3 6 g Magnesiumoxid und anschließend mit einer Lösung von 12,2 g p-Methoxybenzyloxycarbonylazid in 100 ml Dioxan versetzt, v/o rauf das erhaltene Gemisch bei Raumtemperatur zwei Tage gerührt, dann das Reaktionsgemisch filtriert, das erhaltene Filtrat mit 200 ml Äthylacetat verdünnt, das verdünnte Gemisch mit zwei Äquivalenten des Ionenaustauschharzes Dowex 50 versetzt, das erhaltene Gemisch zv/ei Stunden bei Raumtemperatur gerührt, dann das Ionenaustauschharz abfiltriert und mit Wasser gewaschen, die wässerige Schicht des Filtrats abgetrennt und zweimal mit Äthylacetat extrahiert und die miteinander vereinigten organischen Phasen getrocknet und dann im Vakuum eingeengt wurden. Auf diese Weise v/urden 18,2 g 2-Methylen-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-aminopentansäure in Form eines beim Stehenlassen kristallisierenden amberfarbenen Öles erhalten, das ohne v/eitergehende Reinigung v/eiterverarbeitet wurde.A solution of 8.8 g of 2-methylene-5-amino-pentanoic acid. Hydrochloride in 100 ml of water was added with stirring 6.3.3 g of magnesium oxide and then with a solution of 12.2 g of p-Methoxybenzyloxycarbonylazid in 100 ml of dioxane The mixture was stirred at room temperature for two days, then the reaction mixture was filtered, the resulting filtrate was diluted with 200 ml of ethyl acetate, the diluted mixture was admixed with two equivalents of Dowex 50 ion exchange resin, and the resulting mixture was stirred at room temperature for one hour and a half , then the ion exchange resin was filtered off and washed with water, the aqueous layer of the filtrate was separated and extracted twice with ethyl acetate, and the combined organic phases were dried and then concentrated in vacuo. In this way, 18.2 g of 2-methylene-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -aminopentanoic acid were obtained in the form of an amber-colored oil which crystallized upon standing and which was further processed without complete purification.

Beispiel 92: Herstellung von 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentansäureExample 92: Preparation of 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid

Eine Lösung von 53 mmöl 2-Methylen-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentansäure in 50 ml Thioessigsäure wurde bei Raumtemperatur 4 8 Stunden stehengelassen und dann im Vakuum zur Trockene eingedampft, worauf der erhaltene Rückstand in Chloroform aufgenommen und das erhaltene Gemisch auf eine mit 700 g Silicagel gefüllte Kolonne aufgegeben wurde. Beim Eluieren der Kolonne mit 5 % Methanol enthaltendem Chloroform v/urden 14,2 g 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-amino-pentansäure in Form eines Öles erhalten, das beim Behandeln mit Dicyclohcxylamin in Äther und beim anschließenden Umkristallisieren aus Äthylacetat das entsprechende Dicyclohexylaminsalz mit Fp = 112 bis 114 C lieforA solution of 53 mmole of 2-methylene-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid in 50 ml of thioacetic acid was allowed to stand at room temperature for 4-8 hours and then evaporated to dryness in vacuo, whereupon the residue obtained was taken up in chloroform and the resulting mixture was placed on a filled with 700 g of silica gel column. When the column was eluted with chloroform containing 5% methanol, 14.2 g of 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid were obtained in the form of an oil, which was treated with dicyclohexylamine in ether and then recrystallized Äthylacetat the corresponding Dicyclohexylaminsalz with Fp = 112 to 114 C liefor

228053 0228053 0

Beispiel 93: Herstellung von 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-amino-pentansäure-N-hydroxysuccinimidesterExample 93: Preparation of 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid N-hydroxysuccinimide ester

Eine Lösung von 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-amino-pentansäure und 1,21 g N-Hydroxysuccinimid in 60 ml Dichlormethan wurde bei 0 bis 5 C unter Rühren innerhalb 20 min mit 2,16 g N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt, worauf das erhaltene Gemisch über Nacht bei O bis 5°C gerührt, der ausgefällte Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, das Filtrat im Vakuum eingeengt, der erhaltene Rückstand in Äthylacetat aufgenommen und die erhaltene Lösung durch eine mit Silicagel gefüllte Kolonne hindurchgespült wurde. Auf diese Weise wurden 4,6 g 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonyl)-amino-pentansäure-N- -hydroxysuccinimidester erhalten, welcher beim Verreiben mit Äther kristallisierte und beim Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Äthylacetat und Hexan analysenrein mit Fp = 85 bis 87 C erhalten wurde.A solution of 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid and 1.21 g of N-hydroxysuccinimide in 60 ml of dichloromethane was stirred at 0-5 C with stirring over 20 min with 2.16 g N, N '. -Dicyclohexylcarbodiimide, whereupon the resulting mixture stirred overnight at 0 to 5 ° C, the precipitated dicyclohexylurea filtered off, the filtrate was concentrated in vacuo, the residue obtained was taken up in ethyl acetate and the resulting solution was rinsed through a column filled with silica gel. In this way, 4.6 g of 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -amino-pentanoic acid N-hydroxysuccinimide ester was obtained, which crystallized on trituration with ether and on recrystallization from a mixture of ethyl acetate and hexane reagent grade with Fp = 85 to 87 C was obtained.

Beispiel 94: Herstellung von N-/T(2-Acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino)-pentanoyl)J7-L-prolin.tert.-butylesterExample 94: Preparation of N- / T (2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino) -pentanoyl) J7-L-proline tert-butyl ester

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 82 das N,S-Diacetyl-D,L-cystein durch 2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonylamino)-pentansäure ersetzt wurde, wurde N-/2-Acetylthiomethyl-5-(p-methoxybenzyloxycarbonylamino)-pentanoylZ-L-prolin —tert.-butylester erhalten.When in the procedure of Example 82 the N, S-diacetyl-D, L-cysteine was replaced by 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino) -pentanoic acid, N- / 2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino ) -pentanoylZ-L-proline tert-butyl ester.

Beispiel 95: Herstellung von N-^-Acetylthiomethyl-S-aminopentanoyl)-L-prolin.TrifluoracetatExample 95: Preparation of N - ^ - acetylthiomethyl-S-aminopentanoyl) -L-proline. Trifluoroacetate

Eine Lösung von 2 g N-/[2-Acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino) -pentanoyy-L-prolin-.-tert.-butylester in einem Gemisch aus 15 ml Trifluoressigsäure und 6 ml Anisol wurde eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum' von den Lösungsmitteln befreit, worauf der erhaltene Rückstand aus einem Gemisch aus Äthylacetat und Äther urr.gefällt wurde, womit N-(2- -Acetylthiomethyl-5-aininopentanoyl) -L-prolin.Trif luoracetat erhalten v/urde.A solution of 2 g of N - / [2-acetylthiomethyl-5- (p-methoxybenzyloxycarbonylamino) pentanoylo-L-proline tert-butyl ester in a mixture of 15 ml of trifluoroacetic acid and 6 ml of anisole was stirred for one hour at room temperature and then freed from the solvents in vacuo, whereupon the residue obtained was precipitated from a mixture of ethyl acetate and ether to give N- (2-acetylthiomethyl-5-ayninopentanoyl) -L-proline trifluoroacetate ,

Beispiel 96: Herstellung von N-(5-Amino-2-mercaptomethylpentanoyl) -L-prolinExample 96: Preparation of N- (5-amino-2-mercaptomethylpentanoyl) -L-proline

Eine unter einer Argondecke hergestellte Lösung von 1 g N-(2-Acetylthiomethyl-5-aminopentanoyl)-L-prolin.Trifluoracetat in 12 ml Wasser und 12 ml konzentriertem Ammoniak wurde bei Raumtemperatur 20 min stehengelassen und dann auf 5 ml eingeengt, worauf das Konzentrat auf eine mit dem in Η-Form vorliegenden Ionenaustauschharz Dowex 50 gefüllte Kolonne aufgegeben, die Kolonne zunächst mit Wasser durchgespült und dann aus der Kolonne das N-(5-Amino-2-mercaptomethylpentanoyl)-L-prolin mit einem einen pH-Wert von 6,5 besitzenden Puffer aus Pyridin und Essigsäure eluiert wurde.A solution of 1 g of N- (2-acetylthiomethyl-5-aminopentanoyl) -L-proline trifluoroacetate in 12 ml of water and 12 ml of concentrated ammonia, prepared under an argon blanket, was allowed to stand at room temperature for 20 minutes and then concentrated to 5 ml Concentrate on a filled with the present in Η-form ion exchange resin Dowex 50 column filled, the column first rinsed with water and then from the column, the N- (5-amino-2-mercaptomethylpentanoyl) -L-proline with a one pH was eluted from 6.5 containing buffer of pyridine and acetic acid.

Beispiel 97: Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 82 bis 96 statt der gemäß diesen Beispielen 82 bis 96 eingesetzten Ausgangsstoffen geeignete andere Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle VIII angegebenen Mercaptoverbindungen HS-Z (IV) erhalten.Example 97: If other starting materials were used instead of the starting materials used according to these Examples 82 to 96 in the procedures according to Examples 82 to 96, the mercapto compounds HS-Z (IV) indicated in the following Table VIII were obtained.

228053 Ö228053 Ö

ο οο o

O r-lO r-l

E!E!

O OO O

ei^{1 1}

CNlCNl

coco

ρ:ρ:

Cs!Cs!

er«he"

Q) AiQ) Ai

S-I βS-I β

>1-P0)> 1-P0)

pipi

'col pi'col pi

OO OO I coI co inin coco CNlCNl y"s CsJy's CsJ cn; rccn; rc οο υυ OO

I II i

CsICsI

Pi IPi I COCO OO CsJCsI CJCJ O ^O ^ δ cm CNl X rc υδ cm CNl X rc υ HH r ^ ιr ^ ι VIIVII M tJM tJ .4 W CQ.4 W CQ <<

CNlCNl

CsICsI

CNlCNl

0000

Pipi

coco

ι 5:ι 5:

(Nl(Nl

O -O -

O =O =

ζ —ζ -

CNlCNl

Pipi

ro Oro o

/-N/ -N

ro CNJro CNJ

coco

(11) H(11) H

(12) CH,(12) CH,

(13) C₆? (U) H(13) C ₆ ? (U) H

(15) H(15) H

(16) CH.(16) CH.

(17) H(17) H

(18) H(18) H

(19) CH.(19) CH.

O IiO II

NH H -C-NH-NH-C-NH-

TABELLE VIII (Fortsetzung)TABLE VIII (continued)

-CH CH(CH₃)₂ -CH CH (CH ₃ ) ₂

HOHO

C,H_CCH 6 5C, H _C CH 6 5

CH -CH -

Methylenbrückemethylene bridge

^R7 ^R 7 OO ^R8 ^R 8 ^R9 ^R 9 - CH₂-- CH ₂ - V^R9V ^R 9 ^!7^C- ^{! 7C} - π—π- C₃!C ₃ ! ^C2^H5 ^C 2 ^H 5 I 1 N. N VI 1 N. N V -- HH HH -CH(CH ) 3 2-CH (CH) 3 2 --

, A-F, A-F

(CH₂)(CH ₂ )

•^R23• ^R 23

CH,CH,

H"H"

R 9R 9 0 U C-NH 2 20 U C-NH 2 2 V^R9V ^R 9 -CH-CH -- NH IlNH Il

TABELLE VIII (Fortsetzung) ' ^~*TABLE VIII (continued) '^ ~ *

Methylenbrückemethylene bridge

^R7 ^Kl A V^R9 . ^R23 ^R7 ^K l A V^R9.^R23

O UO U

(20) H CIIC- H -CH C-NH - CH 0 A U (20) H CIIC-H-CH C-NH-CH 0 A U

' I'I

(21) H H H -CH₂(CH₂) NHCNH₂ - -· H(21) HHH -CH ₂ (CH ₂₎ NHCNH ₂ - - · H

0 I!0 I!

(22) H HC- -CH OH CH- - H 1 4 |(22) H HC- CH OH CH- - H 1 4 |

. I, I

Mit den folgenden Beispielen 98 bis 107 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, worin Z der Formel (V) entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 116 962 beschrieben.The following Examples 98 to 107 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to the formula (V). The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent 4,116,962.

Beispiel 98: Herstellung von 2-(Acetylthiomethyl)-3-(acetylthio)- -propansäureExample 98: Preparation of 2- (acetylthiomethyl) -3- (acetylthio) -propanoic acid

Eine Lösung von 2-Brommethyl-3-brom-propansäure in 20 ml 1 ,On-Kalilauge v/urde tropfenweise mit einer Lösung von 3,36 g (40 rnmol) Thioessigsäure in 40 ml 1 η-Kalilauge versetzt, worauf das erhaltene Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Trocknen im Vakuum zu einem Rückstand eingeengt v/urde, der in das bei 116 bis 118 C schmelzende Dicyclohexylammoniumsalz übergeführt wurde, aus welchem durch Verteilung zwischen Äthylacetat und 10%iger Kaliumbisulfatlösung die Säure, also 2-(Acetylthiomethyl) -3- (acetylthio) -propansäure wieder freigesetzt wurde.A solution of 2-bromomethyl-3-bromopropanoic acid in 20 ml of 1-on-potassium hydroxide was added dropwise with a solution of 3.36 g (40 mmol) of thioacetic acid in 40 ml of 1 η-potassium hydroxide solution, whereupon the resulting mixture stirred overnight at room temperature and then acidified with concentrated hydrochloric acid, the acidified mixture extracted with ethyl acetate and the resulting extract was concentrated after drying in vacuo to a residue which was converted into the 116 to 118 C melting dicyclohexylammonium, from which by distribution between ethyl acetate and 10% potassium bisulfate solution, the acid, ie 2- (acetylthiomethyl) -3- (acetylthio) propanoic acid was released again.

Beispiel 99: Herstellung von N-,/(2-Acetylthiomethyl)-3-(acetylthio) -propanoyl7~L-prolinExample 99: Preparation of N-, / (2-acetylthiomethyl) -3- (acetylthio) -propanoyl-7-L-proline

Eine Lösung von 1,44 g L-Prolin und 2,7 g Natriumcarbonat in 25 ml Wasser wurde unter Kühlen in einem Eisbad mit 3,9 g des aus 2-(Acetylthiomethyl)-3-(acetylthio)-propansäure und Thionylchlorid hergestellten 3- (Acetylthio)-propansäurechlorid^versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zwei Stunden bei Raumtemperatur kräftig gerührt und die durch Extrahieren des Reaktionsgemisches mit Äthylacetat erhaltene wässerige Phase zunächst angesäuert und dann mit Äthylacetat extrahiert v/urde. Der durch Trocknen des erhaltenen Extraktes und Eindampfen desselben zur Trockene erhaltene Rückstand v/urde an einer mit Silicagcl gefüllten Kolonne unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 7:1 aus Benzol und Essigsäure bestellenden Geraisches als Eluiermittel chromatographiert. Die"den gewünschten Stoff enthaltenden Fraktionen wurden miteinander vereinigt und lieferten beim Eindampfen zur Trockene 1,3 g N-/"(2-Acetylthiomothyl) -3- (acetylthio) -propanovlZ-L-prolin mit R_f = 0,3 (Silicagel, Benzol:Essigsäure - 75:25).A solution of 1.44 g of L-proline and 2.7 g of sodium carbonate in 25 ml of water was added under cooling in an ice bath with 3.9 g of the 3-substituted 3-acetylthio) -propanoic acid and thionyl chloride prepared from 2- (acetylthiomethyl) - (Acetylthio) -propansäurechlorid ^, whereupon the reaction mixture stirred vigorously for two hours at room temperature and the aqueous phase obtained by extracting the reaction mixture with ethyl acetate first acidified and then extracted with ethyl acetate v / urde. The residue obtained by drying the resulting extract and evaporating it to dryness, was chromatographed on a column packed with silica gel using a slurry of benzene and acetic acid in a volume ratio of 7: 1 as the eluent. The fractions containing the desired material were combined to give, when evaporated to dryness, 1.3 g of N - / (2-acetylthiomothyl) -3- (acetylthio) -propanovlZ-L-proline with R _f = 0.3 (silica gel , Benzene: acetic acid - 75:25).

228053 0228053 0

- 8ο-- 8ο-

Beispiel 100: Herstellung von N-^-Mercaptomethyl-S-mercapto- -propanoyl)-L-prolinExample 100: Preparation of N - ^ - mercaptomethyl-S-mercapto-propanoyl-L-proline

Eine aus 1 ,2 g N-^"(2-Acetylthiomethyl-3-(acetylthio)- -propanoylZ-L-prolin, 12 ml Wasser und 12 ml konzentriertem Ammoniak in Argonatmosphäre hergestellte Lösung wurde 20 min später mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Der hiebei entstandene kristalline Niederschlag an N-^-Mercaptomethyl-S-mercapto-propanoyl)-L-prolin wurde abfiltriert und getrocknet. Die gewünschte Verbindung wurde in einer Menge von 0,63 g mit Fp = 138 bis 140°C erhalten.A solution prepared from 1.2 g of N- (2-acetylthiomethyl-3- (acetylthio) -propanoylZ-L-proline, 12 ml of water and 12 ml of concentrated ammonia in an argon atmosphere was acidified 20 minutes later with concentrated hydrochloric acid The resulting crystalline precipitate of N - ^ - mercaptomethyl-S-mercapto-propanoyl-L-proline was filtered off and dried to give the desired compound in an amount of 0.63 g with mp = 138-140 ° C.

Beispiel 101: Herstellung von 3-(Acetylthio)-2-(methylthiomethyl)- -propansäureExample 101: Preparation of 3- (acetylthio) -2- (methylthiomethyl) -propanoic acid

Ein Gemisch aus 5,5 g 3-(Methylthiomethyl)-acrylsäure und 5 ml Thioessigsäure wurde auf einem Wasserbad erhitzt, bis im NMR-Spektrum keine Absorption durch Vinylprotonen mehr feststellbar war. Vom erhaltenen Gemisch wurde überschüssige Thioessigsäure abgetrieben, womit als Rückstand 3-(Acetylthio)-2-(methylthiomethyl) -propansäure verblieb.A mixture of 5.5 g of 3- (methylthiomethyl) -acrylic acid and 5 ml of thioacetic acid was heated on a water bath until absorption by vinyl protons was no longer detectable in the NMR spectrum. Excess thioacetic acid was driven off from the resulting mixture, leaving 3- (acetylthio) -2- (methylthiomethyl) -propanoic acid as the residue.

Beispiel 102: Herstellung von N-(3-Acetylthio)-2-methylthiomethyl)- -propanoyl)-L-prolinExample 102: Preparation of N- (3-acetylthio) -2-methylthiomethyl) - propanoyl) -L-proline

Eine Lösung von 1,44 g L-Prolin und 2,7 g Natriumcarbonat in 25 ml Wasser wurde in einem Eisbad mit 3,6 g des aus der gemäß Beispiel 101 erhaltenen Säure und Thionylchlorid hergestellten 3-(Acetylthio)-2-(methylthiomethyl)-propansäurechlorids versetzt, · worauf das Reaktionsgemisch zwei Stunden bei Raumtemperatur kräftig gerührt und mit Äthylacetat extrahiert, die verbliebene wässerige Phase angesäuert und die angesäuerte Phase mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft wurde. Auf diese Weise wurde N-(3-Acetylthio)- -2-methylthiomethyl)-propanoyl)-L-prolin erhalten.A solution of 1.44 g of L-proline and 2.7 g of sodium carbonate in 25 ml of water was dissolved in an ice bath with 3.6 g of the 3- (acetylthio) -2- (methylthiomethyl) prepared from the acid and thionyl chloride obtained according to Example 101 The reaction mixture was stirred vigorously for two hours at room temperature and extracted with ethyl acetate, the remaining aqueous phase acidified and the acidified phase extracted with ethyl acetate and the resulting extract was dried and evaporated to dryness in vacuo. In this way, N- (3-acetylthio) -2-methylthiomethyl) propanoyl-L-proline was obtained.

Beispiel 103: Herstellung von N-/3-Mercapto-2-(methylthiomethyl)- -propanoyl/-L-prolinExample 103: Preparation of N- / 3-mercapto-2- (methylthiomethyl) -propanoyl / -L-proline

Eine unter einer Argondecke hergestellte Lösung von 1,2 g N-£3-Acetylthio)-2-(methylthiomethyl)-propanoyly-L-prolin in einemA prepared under an argon blanket solution of 1.2 g of N- £ 3-acetylthio) -2- (methylthiomethyl) propanoyly-L-proline in one

ÖUOJ U -jx-H- ÖUOJ U- jx-H

Geraisch aus 12 ml Wasser und 12 ml konzentriertem Ammoniak wurde 20 min später angesäuert, worauf das angesäuerte Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Trocknen zur Trockene eingedampft wurde, womit sich als Rückstand N-/§-Mercapto-2- (methylthiomethyl) -propanoy.l7-L-prolin ergab.Geraisch from 12 ml of water and 12 ml of concentrated ammonia was acidified 20 minutes later, whereupon the acidified mixture extracted with ethyl acetate and the resulting extract was evaporated to dryness after drying, which as residue N- / §-mercapto-2- (methylthiomethyl ) -propanoy.l7-L-proline.

Beispiel 104: Herstellung von N-(2-Hydroxymethyl-3-mercapto- -propanoyl)-L-prolinExample 104: Preparation of N- (2-hydroxymethyl-3-mercapto-propanoyl) -L-proline

Eine unter einer Argondecke hergestellte Lösung von 1,5 g N-/2-Acetoxymethyl-3-(acetylthio)~propanoyl/-L-prolin in einem Gemisch aus 12 ml Wasser und 12 ml konzentriertem Ammoniak wurde eine Stunde später nahezu zur Trockene eingedampft, worauf das erhaltene Konzentrat mit Wasser verdünnt und die erhaltene Lösung auf eine mit dem in Η-Form vorliegenden Kationenaustauschhärz Dowex 50 gefüllte Kolonne aufgegeben und die Kolonne mit Wasser eluiert wurde. Das erhaltene Eluat wurde auf ein kleines Volumen eingeengt und dann gefriergetrocknet, womit N-(2-Hydroxymethyl- -3-mercapto-propanoyl)-L-prolin erhalten wurde.A solution of 1.5 g of N- / 2-acetoxymethyl-3- (acetylthio) -propanoyl / -L-proline prepared under an argon blank in a mixture of 12 ml of water and 12 ml of concentrated ammonia was evaporated to near dryness one hour later , whereupon the concentrate obtained was diluted with water and the resulting solution was applied to a column filled with the cation exchange resin Dowex 50 in the form of und and the column was eluted with water. The obtained eluate was concentrated to a small volume and then freeze-dried to obtain N- (2-hydroxymethyl-3-mercapto-propanoyl) -L-proline.

Beispiel 105: Herstellung von N-,/2-Benzoylthio-3-methoxy-butanoyl7- -L-prolinExample 105: Preparation of N-, / 2-benzoylthio-3-methoxy-butanoyl-7-L-proline

Eine Lösung von 5,7 5 g L-Prolin in 50 ml 1n-Natronlauge wurde unter Kühlen in einem Eisbad mit 25 ml 2n-Natronlauge und mit 10,7 g des aus 2-Brom-3-methoxy-buttersäure /j. Am. Chem. Soc, 71, 1096, (1949)_7 und Thionylchlorid hergestellten 2-Brom-3-methoxy· buttersäurechlorids unter kräftigem Rühren versetzt, worauf das Gemisch drei Stunden später mit 7,5 g Thiobenzoesäure und 4,8 g Kaliumcarbonat versetzt und das nunmehr vorliegende Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde angesäuert und danach mit /ithylacetat extrahiert, worauf der erhaltene Extrakt zur Trockene eingedampft und der Rückstand in einer Silicagelkolonne mit einem Gemisch aus Benzol und Essigsäure chromatographiert wurde. Auf diese Weise wurde N-/5~Benzoyl~ thio-3-methoxy-butanoy]_7~L-prolin erhalten.A solution of 5.7 g of L-proline in 50 ml of 1N sodium hydroxide was added under cooling in an ice bath with 25 ml of 2N sodium hydroxide solution and with 10.7 g of 2-bromo-3-methoxy-butyric acid / j. At the. Chem. Soc, 71, 1096, (1949) _7 and thionyl chloride 2-bromo-3-methoxy.buttersäurechlorids added with vigorous stirring, whereupon three hours later, the mixture with 7.5 g of thiobenzoic acid and 4.8 g of potassium carbonate and the now present mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was acidified and then extracted with ethyl acetate, and the resulting extract was evaporated to dryness and the residue was chromatographed in a silica gel column with a mixture of benzene and acetic acid. In this way, N- / 5-benzoylthio-3-methoxy-butanoylo-7-L-proline was obtained.

Beispiel 106: Herstellung von N-/"2-Mercapto-3-methoxybutanoyl7-L-prolinExample 106: Preparation of N - / "2-mercapto-3-methoxybutanoyl-7-L-proline

228053 0228053 0

-32--32-

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 103 N-/2-Benzoylthio-3-methoxy-butanoyl/-L-prolin statt des N-^3-Acetylthio-2- -(methylthiomethyl)-propanoylZ-L-prolins eingesetzt wurde, wurde N-Z^-Mercapto-S-methoxybutanoyl^-L-prolin erhalten.When N- / 2-benzoylthio-3-methoxy-butanoyl / -L-proline was used instead of N- ^ 3-acetylthio-2- (methylthiomethyl) -propanoylZ-L-proline in the procedure of Example 103, NZ ^ -Mercapto-S-methoxybutanoyl ^ -L-proline.

Beispiel 107: Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 98 bis 106 statt der gemäß diesen Beispielen 98 bis 106 eingesetzten Ausgangsstoffe andere geeignete Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle IX angegebenen Verbindungen der Formel HS - Z (V) erhalten.Example 107 If other suitable starting materials were used instead of the starting materials used according to these Examples 98 to 106 in the procedures according to Examples 98 to 106, the compounds of the formula HS - Z (V) given in Table IX below were obtained.

XJ <J «JXJ <J "J

CU O O CU OO

O O rH rH CNO RHR CN

CN CN CSlCN CN CSl

El ο οEl ο o

r-t O r-lr -t O r-l

O ^O ^

S?S?

x rcx rc

CN Oer»CN Oer »

ω λ: οω λ: ο

rHrh

rcrc

Pipi

CNCN

roro

CNCN

CN UCN U

roro

coco

I II i

Q)Q)

§1 S§1 p

tutu

CN O UCN OU

CNCN

Ö ιÖ ι

roCNroCN

OO z-vOO z-v

CN CNCN CN

G GG G

CNCN

x G ιx G ι

cncn

ο ~ο ~

ro Gro G

COCO

O — LJO - LJ

CNCN

9 cdi t9 cdi t

r ι υr ι υ

ro Groro Gro

do Odo o

m O oo m O oo

00 LO O00 LO O

0000

CNCN

incc c> τ—ιincc c> τ-ι

(13)(13) SS HH O i! C3II7C-O i! C3II7C- -- -- (14)(14) OO HH HH HH CH₃SCH₂ CH ₃ SCH ₂ (15)(15) OO HH CH₃ CH ₃ ^C3^H7 ^C 3 ^H 7 -CH₂CH₂SCH₃ -CH ₂ CH ₂ SCH ₃ (16)(16) OO HH HH HH C₆H₅CH₂ C ₆ H ₅ CH ₂ (17)(17) OO HH HH HH -CH(CH₃)(C₂H₅)-CH (CH ₃ ) (C ₂ H ₅ ) (18)(18) SS HH O M CH₃C-O M CH ₃ C- HH CH₃ CH ₃

(CH₃)2 (CH ₃ ) 2

TABELLE IX (Fortsetzung)TABLE IX (continued)

Methylenbrücke X Rl η Ell M Ü9. , *2c3°L *21 ¹EMethylene bridge X Rl η Ell M Ü9. , * 2c3 ° L * 21 ¹ E

, 5-OH, 5-OH

HH 11 33 CH₃ CH ₃ 11 33 HH OO 44 H .H . OO 44 HH 11 44

_ 85- _ 85-

Mit den folgenden Beispielen 108 bis 112 wird die Herstellung von Verbindungen der Formel HS - Z erläutert, worin Z der Formel (VI) entspricht. Die bei diesen Beispielen eingehaltenen Arbeitsweisen sind in der US-PS 4 091 024 beschrieben.The following Examples 108 to 112 illustrate the preparation of compounds of the formula HS - Z in which Z corresponds to the formula (VI). The procedures followed in these examples are described in U.S. Patent 4,091,024.

Beispiel 108: Herstellung von 3-Acetylthio-2-methoxycarbonylmethyl~ -propansäureExample 108: Preparation of 3-acetylthio-2-methoxycarbonylmethyl -propanoic acid

Ein Gemisch aus 12,5 g Thioessigsäure und 17,1 g 3-Methoxycarbonyl-2-methylen-propansäure wurde zwei Stunden am Wasserbad erhitzt, worauf das Reaktionsgemisch im Vakuum eingeengt, der erhaltene Rückstand in 125 ml Äthylacetat gelöst und die erhaltene Lösung mit 35 ml Dicyclohexylamin versetzt wurde. Die hiebei entstandenen Kristalle wurden abfiltriert, getrocknet und aus Äthylacetat umkristallisiert, womit 37,8 g des Dicyclohexylammoniumsalzes der 3-Acetylthio-2-methoxycarbonylmethyl-propansäure mit Fp = 120 bis 121 C erhalten wurden. Dieses Salz wurde durch Verteilen zwischen Äthylacetat und 10%iger wässeriger Kaliumbisulfatlösung in die freie Säure übergeführt.A mixture of 12.5 g of thioacetic acid and 17.1 g of 3-methoxycarbonyl-2-methylene-propanoic acid was heated for two hours on a water bath, whereupon the reaction mixture was concentrated in vacuo, the residue obtained dissolved in 125 ml of ethyl acetate and the resulting solution with 35 ml of dicyclohexylamine was added. The resulting crystals were collected by filtration, dried and recrystallized from ethyl acetate, whereby 37.8 g of the dicyclohexylammonium salt of 3-acetylthio-2-methoxycarbonylmethyl-propanoic acid having melting point = 120 to 121 ° C. were obtained. This salt was converted to the free acid by partitioning between ethyl acetate and 10% aqueous potassium bisulfate solution.

Beispiel 109: Herstellung von N-^3~(kcetylthio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl/-L-prolin-t-butylesterExample 109: Preparation of N- [3- (cetylthio) -2- (methoxycarbonylmethyl) propanoyl / -L-proline t -butyl ester

Eine Lösung von 1,71 g L-Prolin-t-butylester und 1,35 g 3-Hydroxy-benzotriazol .in 15 ml Dichlormethan wurde mit 2,06 g Dicyclohexylcarbodiimid und 2,2 g der gemäß Beispiel 108 hergestellten Verbindung versetzt, worauf das erhaltene Gemisch 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, der hiebei entstandene Niederschlag abfiltriert und das hiebei erhaltene Filtrat bis zur neutralen Reaktion gewaschen, getrocknet und zur Trockene eingedampft wurde. Auf diese Weise wurden 3,7 g der gewünschten Verbindung mit R_f = 0,8 (Silicagel, Äthylacetat) erhalten.To a solution of 1.71 g of L-proline t-butyl ester and 1.35 g of 3-hydroxybenzotriazole in 15 ml of dichloromethane was added 2.06 g of dicyclohexylcarbodiimide and 2.2 g of the compound prepared according to Example 108, whereupon the resulting mixture was stirred for 18 hours at room temperature, the resulting precipitate was filtered off and the resulting filtrate was washed until neutral, dried and evaporated to dryness. In this way, 3.7 g of the desired compound with R _f = 0.8 (silica gel, ethyl acetate) were obtained.

Beispiel 110: Herstellung von N-/5-(Acetylthio)-2-(methoxycarbonylmethyl) -propanoyl7-L-prolinExample 110: Preparation of N- / 5- (acetylthio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl-7-L-proline

Eine Lösung von 2,9 σ dor gemäß Beispiel 109 hergestellten Verbindung in einem Gemisch aus 17,5 ml Trifluoressigsäure und 8,4 ml Anisol wurde eine Stunde bei Raumtemperatur stehengelassen und dann im Vakuum von überschüssiger Trifluoressigsäure befreit,A solution of 2.9 σ dor prepared according to Example 109 compound in a mixture of 17.5 ml of trifluoroacetic acid and 8.4 ml of anisole was allowed to stand for one hour at room temperature and then freed from excess trifluoroacetic acid in vacuo,

228053 0228053 0

worauf der erhaltene Rückstand zweimal aus einem Gemisch aus Äther und Hexan umgefällt wurde. Auf diese Weise wurden 2,1 g der gewünschten Verbindung mit R^ = 0,4 (Silicagel, Benzol:Essigsäure = 75:25) erhalten.whereupon the resulting residue was reprecipitated twice from a mixture of ether and hexane. In this way, 2.1 g of the desired compound was obtained with R 1 = 0.4 (silica gel, benzene: acetic acid = 75: 25).

Beispiel 111: Herstellung von N-/3-Mercapto-2-(methoxycarbonylmethyl)-propanoyl/-L-prolinExample III: Preparation of N- / 3-mercapto-2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl / -L-proline

Eine unter einer Argondecke hergestellte Lösung von 2,1 g der gemäß Beispiel .110 hergestellten Verbindung in einem Gemisch aus 3 5 ml Wasser und 3 5 ml konzentriertem Ammoniak wurde 20 min später in einem Eisbad gekühlt und dann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und mit Kochsalz gesättigt, worauf das erhaltene Gemisch mit Äthylacetat extrahiert und der erhaltene Extrakt nach dem Trocknen im Vakuum zur Trockene eingeengt wurde, womit 1,1 g der gewünschten Verbindung erhalten wurden, die beim Chromatographieren an Silicagel (Benzol:Essigsäure = 75:25) die gewünschte Verbindung mit R^ = 0,35 (Silicagel, Benzol:Essigsäure = 75:25) lieferte.A solution prepared under an argon blanket of 2.1 g of the compound prepared according to Example .110 in a mixture of 35 ml of water and 3 ml of concentrated ammonia was cooled 20 minutes later in an ice bath and then acidified with concentrated hydrochloric acid and saturated with brine and the resulting extract was concentrated to dryness in vacuo to dryness, yielding 1.1 g of the desired compound which, when chromatographed on silica gel (benzene: acetic acid = 75:25), gave the desired compound with R ^ = 0.35 (silica gel, benzene: acetic acid = 75:25).

Beispiel 112: Herstellung von N-Zl-Carboxymethyl-S-mercaptopropanoyl7~L-prolinExample 112: Preparation of N-Zl-carboxymethyl-S-mercaptopropanoyl-7-L-proline

Eine Lösung von 3,0 g der gemäß Beispiel 110 hergestellten Verbindung in 60 ml Methanol wurde mit 60 ml 1 η-Natronlauge versetzt, worauf das erhaltene Gemisch vier Stunden stehengelassen und dann auf eine mit dem in Η-Form befindlichen Ionenaustauschharz Dowex 50 gefüllte Kolonne aufgegeben wurde. Durch Eluieren der Kolonne mit Wasser wurden 2,3 g der gewünschten Verbindung mit Rr: = 0,2 (Silicagel, Benzol :Essigsäure = 75:25) erhalten.A solution of 3.0 g of the compound prepared according to Example 110 in 60 ml of methanol was treated with 60 ml of 1 η sodium hydroxide solution, whereupon the resulting mixture was allowed to stand for four hours and then onto a column filled with the Dowex 50 ion exchange resin was abandoned. By eluting the column with water, 2.3 g of the desired compound with Rr: = 0.2 (silica gel, benzene: acetic acid = 75:25) were obtained.

Beispiel 113: Herstellung von N-/2-Carbamoylmethyl-3-mercaptopropanoylJ-L-prolinExample 113: Preparation of N- / 2-carbamoylmethyl-3-mercaptopropanoyl J-L-proline

Eine Lösung von 2,1 g der gemäß Beispiel 110 hergestellten Verbindung in einem Gemisch aus 40 ml Wasser und 40 ml konzentriertem Ammoniak wurde eine Stunde nach der Herstellung auf ein Drittel ihres Volumens eingeengt und dann auf eine mit dem in Η-Form vorliegenden Ionenaustauschharz Dowex 50 gefüllte Kolonne aufgegeben, aus welcher die gewünschte Verbindung mit WasserA solution of 2.1 g of the compound prepared according to Example 110 in a mixture of 40 ml of water and 40 ml of concentrated ammonia was concentrated one-third of its volume one hour after preparation and then concentrated on a Dowex® ion exchange resin in the Η-form 50 filled column abandoned, from which the desired compound with water

- or - or

eluiert wurde. Das wässerige Eluat wurde mit Äthylacetat extrahiert. Durch Eindampfen des Extrakts zur Trockene wurden 1,4 g der gewünschten Verbindung mit R_f = 0,50 (Silicagel, Chloroform: :Methanol:Essigsäure:Wasser) erhalten.was eluted. The aqueous eluate was extracted with ethyl acetate. Evaporation of the extract to dryness gave 1.4 g of the desired compound with R _f = 0.50 (silica gel, chloroform:: methanol: acetic acid: water).

Beispiel 114: Herstellung von N-/2- (/N-Butylcarbamoy]_)^f-methyl) -3- -mercaptopropanoyiy-L-prolinExample 114: Preparation of N- / 2- (/ N-butylcarbamoyl) _) ^f -methyl) -3-mercaptopropanoylo-L-proline

Wenn bei den Arbeitsv/eisen gemäß den Beispielen 109 bis 111 3-(Acetylthio)-2-/(N-butylcarbamoyl)-methyl}-propansäure statt der 3-(Acetylthio)-2-(methoxycarbonylmethyl)-propansäure eingesetzt wurde, wurde die gewünschte Verbindung erhalten.When 3- (acetylthio) -2- / (N-butylcarbamoyl) -methyl} -propanoic acid was used instead of 3- (acetylthio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoic acid in the working iron according to Examples 109-111 obtained the desired compound.

Beispiel 115: Wenn bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 108 bis 114 statt der gemäß diesen Beispielen 108 bis 114 eingesetzten Ausgangsstoffe andere geeignete Ausgangsstoffe eingesetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle X angegebenen Verbindungen der Formel HS-Z (VI) erhalten.Example 115 If other suitable starting materials were used instead of the starting materials used according to these Examples 108 to 114 in the procedures according to Examples 108 to 114, the compounds of the formula HS-Z (VI) given in Table X below were obtained.

TABELLE XTABLE X

(D(D CNCN (2)(2) CO₂HCO ₂ H (3)(3) O W -C-NHC3H7O W -C-NHC 3 H 7 (A)(A) O Il -C-OC₂H₅ O Il -C-OC ₂ H ₅ (5)(5) O Il -C-NH₂ O-C-NH ₂ (6)(6) CO₂HCO ₂ H (7)(7) O U -C-OC₅H₁₁ OU-C-OC ₅ H ₁₁ O ilOil (O)(O) i\ -C-NHCH3i \ -C-NHCH3 (9)(9) 0 \\ -C-NH₂ 0 \\ -CNH ₂

H HH H

(10) Ct!(10) Ct!

CH₃ HCH ₃ H

-CH(CH₃)2-CH (CH ₃ ) 2

-CH₂OH-CH ₂ OH

C3H7 -CH₂-SHC3H7 -CH ₂ -SH

-CH₂C-NH₂ -CH ₂ C-NH ₂

Methylenbrücke RR-RqMethylene bridge RR-Rq

(CH₂)(CH ₂ )

(CH₂)3, 3-0H(CH ₂ ) 3, 3-0H

R? 3R? 3 mm HH 00 HH 00

CH₃ CH ₃

C₂H₅ C ₂ H ₅

2.Second

0,0

00 11 \\ C4H9C4H9 00 11 HH

22

22

22

22

TABELLE X (Fortsetzung)TABLE X (continued)

(11) CO₂H(11) CO ₂ H

(12) -C-NH ·(12) -C-NH ·

(13) CN(13) CN

IlIl

(14) -C-OCH₀ (14) -C-OCH ₀

IIII

Rqrq

-CH₂CO₂H-CH ₂ CO ₂ H

NH Il -(CH₂^NHCNH₂ NH II - (CH ₂ ^ NHCNH ₂

CH₂-CH ₂ -

Methylenbrückemethylene bridge

, 4-OH, 4-OH

m οm o

O 3O 3

0 30 3

1 3 O 4"1 3 O 4 "

(15) -C-NHC₂H₅ (15) -C-NHC ₂ H ₅

CH₃ CH ₃

C₆H₅CH₂-C ₆ H ₅ CH ₂ -

1 41 4

228053 0228053 0

- β? -9ο- - β? -9ο-

Mit den folgenden Beispielen wird die Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel R-A-S-Z (I) erläutert.The following examples illustrate the preparation of compounds of general formula R-A-S-Z (I).

Beispiel 116: Herstellung von N^-/3-(N⁰^ -ßenzoyl-tryptophyl)-thioacetyl7-L-prolinExample 116: Preparation of N ^ - / 3- (N ⁰ ^ -enzenzoyl-tryptophyl) -thioacetyl-7-L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -2O°C gekühlte Lösung von 62 mg N* -Benzoyl-tryptophan in 0,5 ml frisch destillierten Formamids (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 35 ml 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 48 mg des gemäß Beispiel 46 hergestellten N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolins zugesetzt und das erhaltene Reaktionsgemisch zunächst eine weitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt wurde. Vom Reaktionsgemisch wurde sodann das Lösungsmittel bei 40°C unter vermindertem Druck abgetrieben, worauf der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt, mit 0,In-HCl und dann noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. in einem rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol v/eitergereinigt wurde. Von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgetrieben, womit die gewünschte Verbindung in Form eines schaumartigen Materials erhalten wurde.A solution of 62 mg of N * -benzoyl-tryptophan in 0.5 ml of freshly distilled formamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -2O ° C was treated with a cold solution of 35 ml of 1,1'- Carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the resulting solution was stirred for two hours at -10 C and then a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 48 mg of prepared according to Example 46 N- (2-mercaptoacetyl) -L Proline added and the resulting reaction mixture was first stirred for a further hour at -10 C and then slowly warmed to room temperature. The solvent was then removed from the reaction mixture at 40 ° C under reduced pressure, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture cooled in an ice bath, with 0, In-HCl and then washed 3 times with saturated brine and after the Dry over anhydrous MgSO4. freed of solvent in a rotary evaporator and the resulting residue was purified by liquid chromatography in a Sephadex LH-20 filled column of 1.2 cm diameter and 95 cm in length with elution of the column with isopropanol v / eitergerein. From the combined crumbly fractions, the solvent was removed under reduced pressure to obtain the desired compound in the form of a foam-like material.

Beispiel 117: Herstellung von W^- - (/2- (N^-Benzoylglycyl-thioäthyl/- -sulfonyl)-L-prolinExample 117: Preparation of W ^ - - (/ 2- (N'-benzoylglycyl-thioethyl / - sulfonyl) -L-proline

Diese Verbindung wurde nach der in Beispiel 116 angegebenen Arbeitsweise hergestellt, wobei jedoch (1) 33 mg N^ -Benzoyl- -glycin statt 62 mg N^ -Benzoyl-tryptophan und (2) N-_i/~(2-i^vercaptoäthyl)-sulfonyl/-L-prolin(aus Beispiel 57) statt N-(2-Mercapto- -acetyl)-L-prolin (aus Beispiel 46) eingesetzt wurden.This compound was prepared according to the procedure given in Example 116 except that (1) 33 mg of N, -benzoyl-glycine instead of 62 mg of N, -Benzoyl-tryptophan and (2) N- _i / ~ (2-i ^v ercaptoäthyl ) -sulfonyl / -L-proline (from Example 57) instead of N- (2-mercapto-acetyl) -L-proline (from Example 46).

Beispiel 118: Herstellung von N^-/3-(N^-Benzoyl-prolyl)-thioacetyl_7-L-prolinExample 118: Preparation of N ^ - / 3- (N, -benzoyl-prolyl) -thioacetyl-7-L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 15 mmol N^ -Benzoyl-prolin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 15 mmol, 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das erhaltene Gemisch zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 15 mmol des gemäß Beispiel 46 hergestellten N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolins in DMF versetzt,*das Reaktionsgemisch bei -10 C eine weitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit und der Rückstand in Äthylacetat aufgenommen wurde. Das hiebei erhaltene Gemisch wurde in einem Eisbad gekühlt, und dann zunächst mit 0,In-HCl und dann noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und schließlich nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. in einem rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit. Der erhaltene Rückstand wurde·durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge und unter Verwendung von Isopropanol als Eluiermittel gereinigt. Durch Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung in Form eines schaumartigen Materials erhalten.A solution of 15 mmol of N-benzoylproline in redistilled dimethylformamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C was treated with a cold solution of 15 mmol, 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF. whereupon the resulting mixture was stirred for 2 hours at -10 C and then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 15 mmol of prepared according to Example 46 N- (2-mercaptoacetyl) -L-proline in DMF, * the reaction mixture stirred at -10 C for a further hour, then slowly warmed to room temperature and then freed under reduced pressure at 40 C from the solvent and the residue was taken up in ethyl acetate. The resulting mixture was cooled in an ice bath and then washed first with 0, 1N HCl and then 3 times with brine, and finally dried over anhydrous MgSO 4. freed from solvent in a rotating evaporator. The resulting residue was purified by liquid chromatography on a Sephadex LH-20 filled 1.2 cm diameter by 95 cm long column and using isopropanol as the eluent. Evaporation of the solvent under reduced pressure from the merged peak fractions gave the desired compound in the form of a foam-like material.

Beispiel 119: Herstellung von N°^ -(/2-N^ -Benzoyl-thiazolidin-4- -carbonyl)-thioäthyl/-sulfonyl)-L-prolin Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°C-Example 119: Preparation of N ° ^ - (/ 2-N, -benzoyl-thiazolidine-4-carbonyl) -thioethyl / -sulfonyl) -L-proline A in a bath of ice, dry ice and acetone at -20 ° C -

gekühlte Lösung von 10 mmol N⁰^-Benzoyl-thiazolidin-4-carbonsäure in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 10 inmol des gemäß Beispiel 57 hergestellten N-/~{2-Mercaptoäthyl)-sulfonyl/-L~prolins versetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde sodann eine weitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und schließlich unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, vorauf der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch in einemcooled solution of 10 mmol N ⁰ ^ -Benzoyl-thiazolidine-4-carboxylic acid in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 10 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution for two hours at -10 C was stirred and then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 10 inmol of the prepared according to Example 57 N- / ~ {2-mercaptoethyl) -sulfonyl / -L ~ proline. The reaction mixture was then stirred for a further hour at -10 C and then slowly warmed to room temperature and finally freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, before the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture in a

228053 0228053 0

-32--32-

Eisbad gekühlt und dann zunächst mit O,In-HCl und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex LH-2O gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels unter vermindertem Druck von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Cooled ice bath and then washed first with O, In-HCl and then 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained by liquid chromatography on a filled with Sephadex LH-2O column of 1.2 cm diameter and 95 cm in length eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture was cleaned. By dissipating the solvent under reduced pressure from the confluent peak fractions, the desired compound was obtained.

Beispiel 120: Herstellung von Ν·^/3-N<*-ter t-Bu ty loxycar bony 1-1-amine -eyelopropancarbonylthio)-2-trifluormethyl-propanoyl7~L-prolinExample 120 Preparation of ΝΝ ^ / 3-N-tert-butyl-oxycarbonyl 1-1-amine-ε-octopropanecarbonylthio) -2-trifluoromethyl-propanoyl-7-L-proline

Diese Verbindung wurde nach den Angaben in Beispiel hergestellt, wobei jedoch (1) 20 mmol N^-tert-Butyloxycarbonyl- -1 -amino-1 -cyclopropancarbonsäure (N⁰^- -Boc-1 -Amino-1 -cyclopropancarbonsäure) statt der 10 mmol N°--Benzoyl-thiazolidin-4-carbonsäure, (2) 20 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF statt der 10 mmol in Beispiel 119 und (3) 20 mmol N-(3-Mercapto-2-trifluormethyl)- -propanoyl-L-prolin (aus Beispiel 62) statt der 10 mmol N-/J2- -Mercaptoäthyl)-sulfonyl/-L-prolin (aus Beispiel 57) eingesetzt wurden.This compound was prepared as described in Example 1 except that (1) 20 mmol of N 2 -tert-butyloxycarbonyl-1-amino-1-cyclopropanecarboxylic acid (N ⁰ 1 -Boc-1-amino-1-cyclopropanecarboxylic acid) instead of 10 mmol N ° - benzoyl-thiazolidine-4-carboxylic acid, (2) 20 mmol 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF instead of 10 mmol in Example 119 and (3) 20 mmol N- (3-mercapto-2-trifluoromethyl ) - Propanoyl-L-proline (from Example 62) instead of the 10 mmol N- / J2- -Mercaptoäthyl) -sulfonyl / -L-proline (from Example 57) were used.

Beispiel 121: Herstellung von N¹*- - (3-/T-Amino-1 -cyclopropancarbonyl_7-thio-2-trif luorme thy lpropanoyl) -L-prolinExample 121: Preparation of N ¹ * - (3- / T-amino-1-cyclopropanecarbonyl-7-thio-2-trifluoromethylpropanoyl) -L-proline

Aus der gemäß Beispiel 120 hergestellten Verbindung wurde die Schutzgruppe dadurch abgespalten, daß ein Gemisch aus 30 mg dieser Verbindung, 50 /ul Anisol und 200 /ul v/asserfreier Trifluoressigsäure eine Stunde auf Raumtemperatur gehalten wurde. Vom Reaktionsgemisch wurde sodann das Anisol und die Trifluoressigsäure bei 35 C unter vermindertem Druck abgetrieben, worauf der Rückstand mit wasserfreiem Äther verrieben wurde. Der erhaltene weiße Rückstand wurde durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge und unter Verwendung 5%iger Essigsäure als Eluiermittel gereinigt. Durch Gefriertrocknen der miteinander vereinigtenFrom the compound prepared according to Example 120, the protecting group was cleaved by keeping a mixture of 30 mg of this compound, 50 / μl of anisole and 200 / μl of anhydrous trifluoroacetic acid for one hour at room temperature. The anisole and the trifluoroacetic acid were then removed from the reaction mixture at 35 ° C. under reduced pressure, whereupon the residue was triturated with anhydrous ether. The resulting white residue was purified by liquid chromatography on a 1.2 cm diameter by 95 cm long column filled with Sephadex G-10 and using 5% acetic acid as the eluent. By freeze drying the combined

2 2 8 Q 5 j u -^-93-2 2 8 Q 5 j u - ^ - 93-

Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Crest fractions, the desired compound was obtained.

Beispiel 122: Herstellung von N"- -(/3-N^ -Acetyl-pyroglutamylthio)- -1-oxopropyl·/" amino)-L-prolinExample 122: Preparation of N "- - (/ 3-N-acetyl-pyroglutamylthio) -1-oxo-propyl / amino-L-proline

Die genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 119 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt, wobei jedoch (1) 5 mmol N* -Acetyl-pyroglutaminsäure statt der 10 mmol N^-Benzoyl-thiazolidin-4-carbonsäure, (2) 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol statt der 10 mmol in Beispiel 119 und (3) 5 mmol N-/~(3-Mercapto-1 -oxypropyl)-aminq_/-L-prolin (aus Beispiel 68) statt des 10 mmol N-/~(2-Mercaptoäthyl) -sulf onyl-L-prolins (aus Beispiel 57) eingesetzt wurden.The title compound was prepared according to the procedure described in Example 119 except that (1) 5 mmol of N * -acetyl-pyroglutamic acid instead of the 10 mmol of N, -benzoyl-thiazolidine-4-carboxylic acid, (2) 5 mmol of 1,1 '. -Carbonyldiimidazole instead of the 10 mmol in Example 119 and (3) 5 mmol N- / ~ (3-mercapto-1-oxypropyl) -aminq _ / - L-proline (from Example 68) instead of the 10 mmol N- / ~ (2 -Mercaptoäthyl) -sulfonyl-L-proline (from Example 57) were used.

Beispiel 123: Herstellung von N⁰^-(/2-N⁰^ -Benzoyl-cysteinyl)-thioäthyl/-sulfonyl)-L-prolinExample 123: Preparation of N ⁰ ^ - (/ 2-N ⁰ ^ -benzoyl-cysteinyl) -thioethyl / -sulfonyl) -L-proline

Die genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 119 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt, wobei jedoch (1) 25 mmol N^ -Benzoyl-S-acetyl-Cystein statt der 10 mmol N^-Benzoyl-thiazolidin-4-carbonsäure, (2) 25 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol statt der 10 mmol in Beispiel 119 und (3) 25 mmol N-/2-Mercaptoäthyl)- -sulfonyl/-L-prolin (aus Beispiel 57) statt der 10 mmol· in Beispiel· 119 eingesetzt wurden.The title compound was prepared according to the procedure described in Example 119 except that (1) 25 mmol N, -Benzoyl-S-acetyl-cysteine instead of 10 mmol N-benzoyl-thiazolidine-4-carboxylic acid, (2) 25 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazole instead of the 10 mmol in Example 119 and (3) 25 mmol N- / 2-mercaptoethyl) - sulfonyl / -L-proline (from Example 57) instead of the 10 mmol · were used in Example 119 ,

Die ais Schutzgruppe vorlegende Acetyigruppe wurde nach der in Beispiel· 84 beschriebenen Arbeitsv/eise abgespalten.The acyl group having the protective group was cleaved according to the procedure described in Example x 84.

Beispiel 124: Herstel^ng von Ν⁰*- -/S-N^-tert-Butyioxycarbonyl·- norieucy^thio) -2-trif l·uormethyl·propanoyl·/-L-pröl·inExample 124: Preparation of Ν ⁰ * - - / SN 2 -tert-butyioxycarbonyl-norieucylthio) -2-trifluoromethyl-propanoyl / L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°C gekühite Lösung von 10 mmol· Ν⁰*- -tert-Butyl·oxycarbonyl·-norl·eucin (NCC -ßoc-norleucin) in redesti^iertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kaiten Lösung von 10 mmol· 1,1'-Carbonyl·diimidazol· in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei --10 C gerührt und dann, mit einer zuvor mit N-Xthyl-morpholin neutralisierten kaitcn,Lösung von 10 mmol· N-(3-Mercapto-2-trifluormethyl) -propanoyl-L-proiin (aus Beispiel· 62) in DMF versetzt, das Roaktionsgemisch bei -10 C eine v/eitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unterA gekühite in a bath of ice, dry ice and acetone at -20 ° C solution of 10 mmol · Ν ⁰ * - tert-butyl oxycarbonyl · · · -norl eucin (NCC -ßoc-norleucine) in redesti ^ iertem dimethylformamide (DMF ) was treated with a kaiten solution of 10 mmol · 1,1'-carbonyl · diimidazole · in DMF, whereupon the resulting solution was stirred for two hours at -10 C and then, with kaitcn previously neutralized with N-Xthyl-morpholine , Solution of 10 mmol. N- (3-mercapto-2-trifluoromethyl) -propanoyl-L-pro-amine (from Example. 62) in DMF, the crude mixture stirred at -10 C for one v / ee hour, then slowly to room temperature heated and then under

228053 0228053 0

vermindertem Druck bei 4O°C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt, dann mit O,In-HCl und schließlich noch 3-mal mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und nach dem Trocknen über MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtrennen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.freed of solvent at 4O ° C, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture cooled in an ice bath, then washed with O, In-HCl and finally 3 times with saturated sodium chloride solution and dried over MgSO4. freed of solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained by liquid chromatography on a Sephadex G-10 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length, eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol Solvent mixture was purified. By separating the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel 125: Herstellung von N^ -(3-Norleucylthio-2-trifluormethyl-propanoyl)-L-prolinExample 125: Preparation of N, - (3-norleucylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline

Aus der gemäß Beispiel 124 hergestellten Verbindung wurde durch.Abspalten der Schutzgruppe nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise die gewünschte Verbindung erhalten.From the compound prepared according to Example 124, the desired compound was obtained by cleaving the protective group according to the procedure described in Example 121.

Beispiel 126: Herstellung von -N^ - (/3-N°^-Acetyl-methionylthio)- -1 -oxopropylj⁷-amino) -L-prolinExample 126: Preparation of -N ^ - (/ 3-N'-acetyl-methionylthio) -1-oxopropyl- ^7- amino) -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 10 mmol N⁰^- -Acetyl-methionin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 10 mmol des gemäß Beispiel 68 hergestellten N-/_(3-Mercapto-1 -oxopropyl)-aminq7-L-prolins versetzt, das Reaktionsgemisch bei -10 C eine weitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das hiebei erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt und dann mit O₁In-HCl und schließlich noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlöslung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom organischenA cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C solution of 10 mmol N ⁰ ^ - acetyl-methionine in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 10 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF , whereupon the resulting solution was stirred for two hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 10 mmol of N / / (3-mercapto-1 -oxopropyl) -aminq7 prepared according to Example 68 L-proline, the reaction mixture stirred at -10 C for a further hour, then slowly warmed to room temperature and then freed from solvent under reduced pressure, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture was cooled in an ice bath and then with O ₁ In-HCl and finally washed 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO 4. by means of a rotating evaporator of organic

228053228053

-35--35-

Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren an einer mit Sephadex LH-2O gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Solvent was liberated and the residue obtained by chromatography on a column filled with Sephadex LH-2O column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length while eluting the column was purified with isopropanol. By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel" 1 27 : Herstellung von N^- ~/ß~ (N^-Benzoyl-5-methyl-tryptophyl)-thioacetylT-L-prolinExample "1 27: Preparation of N" - "- / ß ~ (N, -Benzoyl-5-methyl-tryptophyl) -thioacetyl-T-L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 10 mmol N⁰^- -Benzoyl-5-methyl-tryptophan in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei-—10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 10 mmol des gemäß Beispiel 46 hergestellten N-(2-Mercaptoacetyl)-L-prolins in DMF versetzt, das Reaktionsgemisch bei -10 C'eine weitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und schließlich unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt und zunächst mit 0,In-FICl und dann 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und schließlich nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO, mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Iso- . propanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung in Form eines schaumartigen Materials erhalten.A solution of 10 mmol N ⁰ ^ - benzoyl-5-methyl-tryptophan in redistilled dimethylformamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C was treated with a cold solution of 10 mmol 1,1'- Carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 ° C. and then mixed with a cold solution of 10 mmol of the N- (2-mercaptoacetyl) -L- prepared according to Example 46, previously neutralized with N-ethylmorpholine. Proline in DMF, the reaction mixture at -10 C 'stirred for an additional hour, then slowly warmed to room temperature and finally freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the residue obtained herewith admixed with ethyl acetate, the resulting mixture cooled in an ice bath and washed first with 0, In-FICl and then 3 times with saturated brine and finally, after drying over anhydrous MgSO4, by means of a rotary evaporator from the solvent t and hiebei obtained residue by liquid chromatography on a column filled with Sephadex LH-20 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length while eluting the column with iso. propanol was purified. By driving the solvent off the crest fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained in the form of a foam-like material.

Beispiel 128: Herstellung von N ¹^ - (//Z- (N^ -Benzoyl-phenylglycyl) -thioäthy!/-sulfonyl)-L-prolinExample 128: Preparation of N ¹ - (Z- (N 1 -Benzoylphenylglycyl) thioethyl / sulfonyl) -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 5 mmol N^-Benzoyl-pheny!glycin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 5 min öl 1 ,1 '-Carbonyldiimidazol in DMF vorsetzt, worauf die erhaltenA solution of 5 mmol of N-benzoyl-phenylglycine in redistilled dimethylformamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C was treated with a cold solution of 5 'oil 1, 1'-carbonyldiimidazole in DMF what they receive

228053 0228053 0

-96--96-

Lösung zunächst zwei Stunden bei -1O°C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel 57 hergestellten N-/~(2-Mercaptoäthyl) -sulfonyl/-L-prolins versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und schließlich bei 40 C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt, dann mit O,In-HCl und schließlich noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie an einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abdampfen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Solution first stirred for two hours at -1O ° C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 5 mmol of the prepared according to Example 57 N- / ~ (2-mercaptoethyl) -sulfonyl / -L-proline added, The reaction mixture was stirred for a further hour at -10 C, then slowly warmed to room temperature and finally freed at 40 C under reduced pressure from the solvent, the residue obtained herewith admixed with ethyl acetate, the resulting mixture was cooled in an ice bath, then with O, In HCl and finally washed 3 times with brine and after drying over anhydrous MgSO 4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained by liquid chromatography on a column of 1.2 cm diameter and 95 cm length filled with Sephadex LH-20, eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol Solvent mixture was purified. Evaporation of the solvent from the coalesced parent fractions gave the desired compound.

Beispiel 129: Herstellung von N ³^- -/3- (N*- -tert-Butyloxycarbonyl- -4-nitro-phenylalanylthioV2-trif luormethylpropanoyl_/-L-prolin Eine in einem Bad aus Trockeneis und Aceton auf -20 CExample 129: Preparation of N ³ ^ - - / 3- (N * - tert -butyloxycarbonyl-4-nitro-phenylalanylthioV 2 -trifluoromethylpropanoyl) / L-prolinine A in a bath of dry ice and acetone at -20 ° C

gekühlte Lösung von 15.mmol N°£ -tert-Butyloxycarbonyl-4-nitro- -phenylalanin (N⁰^ -Boc-4-nitro-phenylalanin) in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 15 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 15 mmol des gemäß Beispiel 62 hergestellten N-(3-Mercapto-2-trifluormethyl)-propanoyl-L-prolins versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt, dann zunächst mit 0,In-HCl und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über vrasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vomCooled solution of 15. mmol N ° -tert-butyloxycarbonyl-4-nitro-phenylalanine (N ⁰ ^ -Boc-4-nitro-phenylalanine) in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 15 mmol 1.1 The resulting solution was stirred for two hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 15 mmol of N- prepared according to Example 62 (3-mercapto-2-carbonyl). Trifluoromethyl) -propanoyl-L-proline added, the reaction mixture stirred for a further hour at -10 C, then slowly warmed to room temperature and then freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the residue obtained herewith admixed with ethyl acetate, the mixture thus obtained cooled in an ice bath, then washed first with 0, in-HCl and then 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO 4. by means of a rotating evaporator from

Lösungsmittcl befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtrennen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Schei telfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Solvent was freed and the resulting residue was purified by chromatography in a column filled with Sephadex G-10 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length with elution of the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture. By separating the solvent from the combined plate fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel 130: Herstellung von N¹^· - (S-^- -2-trifluormethyl-propanoyl)-L-prolinExample 130: Preparation of N ¹ ^ · - (S - ^ - -2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline

Aus der gemäß Beispiel 129 hergestellten Verbindung v/urde die Schutzgruppe nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise abgespalten, womit die gewünschte.Verbindung erhalten wurde.From the compound prepared according to Example 129, the protecting group was cleaved by the procedure described in Example 121, whereby the desired compound was obtained.

Beispiel 131: Herstellung von N⁰^ - (/ß- (N⁰^ -Acetyl-3-chlor-tyrosylthio)-1-oxopropyl7-amino)-L-prolinExample 131: Preparation of N ⁰ ^ - (/ β- (N ⁰ -acetyl-3-chloro-tyrosylthio) -1-oxopropyl-7-amino) -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 20 mmol N* -Acetyl-3-chlor-tyrosin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) v/urde mit einer kalten Lösung von 20 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst bei -10 C zv/ei Stunden gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthy.l-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 20 mmol des gemäß Beispiel 68 hergestellten N-/73-Mercapto-1- -oxopropyl)-aminoZ-L-prolinsin DMF versetzt, das erhaltene Reaktionsgemisch bei -10 C eine weitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erv/ärmt und anschließend bei 40 C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt und dann mit 0,In-HCl und anschließend noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom organischen Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelf raktionon unter vermindertem Druck wurde die gewünschteA solution of 20 mmol of N-acetyl-3-chlorotyrosine in redistilled dimethylformamide (DMF), cooled to -20 ° C. in a bath of ice, dry ice and acetone, was treated with a cold solution of 20 mmol of 1,1'- Carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution was stirred first at -10 C zv / ei hours and then with a previously neutralized with N-Äthy.l-morpholine cold solution of 20 mmol of prepared according to Example 68 N- / 73-mercapto 1 -oxopropyl) -aminoZ-L-proline in DMF, the resulting reaction mixture stirred at -10 C for a further hour, then slowly to room temperature erv / heated and then freed at 40 C under reduced pressure from the solvent, the residue obtained herewith Ethyl acetate added, the resulting mixture was cooled in an ice bath and then washed with 0, In-HCl and then 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO4. freed of the organic solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was purified by chromatography in a Sephadex LH-20 filled column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length, eluting the column with isopropanol. By driving off the solvent from the coalesced crimp reaction under reduced pressure became the desired

228053 0228053 0

Verbindung erhalten.Received connection.

Beispiel 132: Herstellung von N^-/3- (L-o(-Glutamylthio) -2-D-methyl- -propanoyl/-L-prolinExample 132: Preparation of N ^ - / 3- (L-o (-glutamylthio) -2-D-methyl-propanoyl / -L-proline

Eine in einem Eisbad unter Rühren gekühlte Lösung von 160,2 mg (0,4 mmol) <λ -N-Hydroxysuccinimido-^-t-butyl-N^t-butyloxycarbonyl-L-glutamat und 87 mg (0,4 mmol) D-3-Mercapto-2-methyl- -propanoyl-L-prolin in 1,5 ml redestilliertem Dioxan wurde mit 0,055 ml (0,4 mmol) N-Äthyl-morpholin versetzt, worauf das Gemisch zunächst 5 min bei 0°C und dann noch eine Woche bei Raumtemperatur gerührt wurde. Der durch Abdampfen des Lösungsmittels vom Reaktionsgemisch bei 30 C mittels eines rotierenden Verdampfers erhaltene Rückstand wurde in einem Gemisch aus 4 ml H~0 und 1 ml 1 n-NaHCO-,-Lösung gelöst, worauf die erhaltene Lösung 3-mal mit 1 ml Äthylacetat extrahiert wurde. Die hiebei erhaltene wässerige Phase wurde sodann mit 5 ml Äthylacetat versetzt, worauf das erhaltene Gemisch mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von 2.angesäuert, die organische Phase beiseitegestellt und die wässerige Phase nochmals mit 5 ml Äthylacetat extrahiert wurde. Die miteinander vereinigten organischen Phasen wurden 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers zur Trockene eingedampft. Der hiebei erhaltene ölige Rückstand wurde mit 0,1 ml Anisol und 0,4 ml Trifluoressigsäure versetzt, worauf die erhaltene Lösung kurzzeitig bei 0 C und dann noch eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt wurde. Von der erhaltenen Lösung wurde · das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers bei 30 C im Hochvakuum abgedampft. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in einem Vakuumexsiccator mehrere Stunden über NaOH und P^O_n. verwahrt, um letzte Spuren des Lösungsmittels zu entfernen. Der erhaltene Rückstand wurde sodann durch Verteilungschromatographie in einer Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Verwendung von Sephadex G-2 5, welches mit einem im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisch ins Gleichgewicht gebracht worden war, gereinigt, wobei die so vorbereitete Kolonne für die ersten 26 Fraktionen mit der oberen Lösungsmittelphase und darauffolgend mit der unterenA solution of 160.2 mg (0.4 mmol) of <λ- N-hydroxysuccinimido-α-t-butyl-N'-t-butyloxycarbonyl-L-glutamate, cooled in an ice bath with stirring, and 87 mg (0.4 mmol) D-3-Mercapto-2-methyl-propanoyl-L-proline in 1.5 ml of redistilled dioxane was treated with 0.055 ml (0.4 mmol) of N-ethyl-morpholine, whereupon the mixture was initially stirred for 5 min at 0 ° C and then stirred for a week at room temperature. The residue obtained by evaporation of the solvent from the reaction mixture at 30 ° C. by means of a rotary evaporator was dissolved in a mixture of 4 ml of H 2 O and 1 ml of 1 N NaHCO 3 solution, whereupon the resulting solution was washed 3 times with 1 ml of ethyl acetate was extracted. The aqueous phase obtained was then admixed with 5 ml of ethyl acetate, whereupon the resulting mixture was acidified to pH 2. with concentrated hydrochloric acid, the organic phase was removed and the aqueous phase was extracted again with 5 ml of ethyl acetate. The combined organic phases were washed 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO 4. evaporated to dryness by means of a rotary evaporator. The resulting oily residue was admixed with 0.1 ml of anisole and 0.4 ml of trifluoroacetic acid, whereupon the resulting solution was stirred briefly at 0 C and then for one hour at room temperature. From the resulting solution, the solvent was evaporated by means of a rotary evaporator at 30 C under high vacuum. The residue obtained was concentrated in a vacuum desiccator over NaOH and P 2 O _{n for} several hours. stored to remove final traces of the solvent. The resulting residue was then purified by partition chromatography in a 1.2 cm diameter, 95 cm length column using Sephadex G-2 5, which was a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water Purified, with the thus prepared column for the first 26 fractions with the upper solvent phase and then with the lower

Lösungsmittelphase entwickelt. wurde. Es wurden Fraktionen zu je 2,05 ml aufgefangen, von welchen die Fraktionen 60 bis 64 die gewünsche Verbindung lieferten und aus welchen das Lösungsmittel mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben wurde. Durch Gefriertrocknen einer wässerigen Lösung des erhaltenen Produktes wurden 29 mg der gewünschten Verbindung erhalten, die sich bei der bei einem pH-Wert von 2 und bei einem pH-Wert von 5 durchgeführten Papierelektrophorese und beim Dünnschichtchromatographieren an Silicagelplatten mittels drei verschiedener Lösungsmittelsysteme als reine Substanz erwies.Solvent phase developed. has been. Fractions of 2.05 ml each were collected, of which fractions 60 to 64 provided the desired compound and from which the solvent was removed by means of a rotary evaporator. By freeze-drying an aqueous solution of the resulting product, 29 mg of the desired compound were obtained, which proved to be a pure substance at pH 2 and pH 5 by paper electrophoresis and thin-layer chromatography on silica gel plates using three different solvent systems ,

Beispiel 133: Herstellung von N⁰^- ~/j>~ (N^ -tert-Butyloxycarbonyl- -phenylalanylthio)-2-trifluormethylpropanoyl/-L-prolinExample 133: Preparation of N ⁰ ^ - ~ / j> ~ (N 1 -tert-butyloxycarbonyl-phenylalanylthio) -2-trifluoromethyl-propanoyl / -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 133 mg N^ -tert-Butyloxycarbonyl-phenylalanin (N⁰^ -Boc-phenylalanin) in 0,5 ml redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 87 mg 1 ,1 '-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl- -morpholin neutralisierten kalten Lösung von 119,5 mg gemäß Beispiel 68 hergestelltem N-(3-Mercapto-2-trifluormethyl)-prop ionyl- -L-prolin in 1 ml DMF versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch in einem Eisbad gekühlt, dann mit O₇In-HCl und schließlich 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie in einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtrennen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A solution of 133 mg of N 2 -tert-butyloxycarbonyl-phenylalanine (N ⁰ 1 -Boc-phenylalanine) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 ° C. in 0.5 ml of redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold Solution of 87 mg of 1, 1 'carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 119.5 mg N- (3-mercapto-2-trifluoromethyl) -propyl-L-proline prepared in Example 68 in 1 ml of DMF, the reaction mixture stirred for a further hour at -10 C, then slowly warmed to room temperature and under reduced pressure at 40 C was removed from the solvent, the residue obtained was admixed with ethyl acetate, the resulting mixture was cooled in an ice bath, then washed with O ₇ In HCl and finally 3 times with saturated brine and dried over anhydrous MgSO 4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained by liquid chromatography in a filled with Sephadex G-10 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture was cleaned. By separating the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

228053 0228053 0

_ AQO - _ AQO -

Beispiel 134: Herstellung von N<* -(3-phenylalanylthio-2-trifluormethyl-propanoyl)-L-prolinExample 134: Preparation of N <* - (3-phenylalanylthio-2-trifluoromethyl-propanoyl) -L-proline

Aus der gemäß Beispiel 133 erhaltenen Verbindung-wtträe durch Abspalten der Schutzgruppe nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise die gewünschte Verbindung erhalten.From the compound wtc obtained according to Example 133, the desired compound was obtained by cleavage of the protective group according to the procedure described in Example 121.

Beispiel 135: Herstellung von N^ -(/3-(N^ -Acetyl-tyrosylthio)-1- -oxopropylj^-amino) -L-prolinExample 135: Preparation of N, - (/ 3- (N, -acetyl-tyrosylthio) -1-oxopropyl-1-amino) -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -2O°C gekühlte Lösung von 41,5 mg N⁰^-Acetyl-tyrosin in 0,5 ml redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 35 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 48 mg des gemäß Beispiel 68 hergestellten N-/"(3-Mercapto-1 -oxopropyl)-amino/'-L-prolins versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10°C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und bei 40 C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eisbad mit 0,In-HCl und anschließend noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom organischen Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels aus den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A solution of 41.5 mg of N, ^0- acetyl-tyrosine in 0.5 ml of redistilled dimethylformamide (DMF), cooled to -2 ° C. in a bath of ice, dry ice and acetone, was treated with a cold solution of 35 mg of 1.1 1.0 ml of DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 ° C. and then admixed with a N-ethylmorpholine neutralized cold solution of 48 mg of the N - / ( 3-mercapto-1 -oxopropyl) -amino / '- L-proline, the reaction mixture stirred for a further hour at -10 ° C and then slowly warmed to room temperature and freed at 40 C under reduced pressure from the solvent, the residue obtained hereby with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling in an ice bath with 0, In-HCl and then washed 3 times with saturated brine and freed after drying over anhydrous MgSO.sub.4 by means of a rotary evaporator from the organic solvent and the residue obtained was purified by chromatography in a Sephadex LH-20 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length, eluting the column with isopropanol. By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel 136: Herstellung von N⁰C ~<^3- (N^ -Cyclopentancarbonyl-isoleucylthio)-2-äthylpropanoyl7-L-3,4-dehydroprolinExample 136: Preparation of N ⁰ C ~ <3- (N 1 -cyclopentanecarbonyl-isoleucylthio) -2-ethyl-propanoyl-7-L-3,4-dehydroproline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°C gekühlte Lösung von 52,5 mg N^-Cyclopentancarbonyl-isoleucin in 0,5 ml redestillicrtem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 34 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührtA solution of 52.5 mg of N 2 -cyclopentanecarbonyl-isoleucine in 0.5 ml of redistilled dimethylformamide (DMF), cooled to -20 ° C. in a bath of ice, dry ice and acetone, was treated with a cold solution of 34 mg 1,1 '. Carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the resulting solution was stirred at -10 C for 2 hours

228 053 0228 053 0

und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 45,6mj des gemäß Beispiel 71 hergestellten N-(2-Äthyl-3-mercaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolins versetzt, das Reaktionsgernisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das hiebei erhaltene Gemisch nach dem Kühlen mit 0,In-HCl und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiemMgSO₄ mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abdampfen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.and then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 45.6mj of prepared according to Example 71 N- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline, the Reaktionsergernisch for another hour at Stirred -10 C, then slowly warmed to room temperature and then freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling with 0, In-HCl and then 3 times with saturated Brine and, after drying, freed of solvent over anhydrous MgSO ₄ using a rotary evaporator and the residue obtained was purified by chromatography in a Sephadex LH-20 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length eluting the column with isopropanol , Evaporation of the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure gave the desired compound.

Beispiel 137: Herstellung von N&- -/3- (N°^-Cyclopentancarbonyl-3- -hydroxy-prolylthio)-2-Äthyl-propanoyl/-L-3,4-dehydroprolin Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 CExample 137: Preparation of N & - - / 3- (N ° -cyclopentanecarbonyl-3-hydroxy-prolylthio) -2-ethyl-propanoyl / -L-3,4-dehydroproline One in a bath of ice, dry ice and acetone at -20 C

gekühlte Lösung von 2 5 mmol N^ -Cyclopentancarbonyl-3-hydroxy- -prolin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 25 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 25 mmol des gemäß Beispiel 71 hergestellten N-(2-Äthyl-3-mercaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolins versetzt, das Reaktionsgemisch eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und dann unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das hiebei erhaltene Gemisch nach dem.Kühlen mit 0,In-HCl und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde.cooled solution of 2 5 mmol N ^ -cyclopentanecarbonyl-3-hydroxy-proline in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 25 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution for 2 hours at - 10 C stirred and then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 25 mmol of the prepared according to Example 71 N- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline, the reaction mixture stirred at -10 C for an additional hour and then warmed slowly to room temperature and then freed of solvent under reduced pressure at 40 C, the residue obtained was admixed with ethyl acetate, the mixture obtained after cooling with O, In-HCl and then Washed 3 times with brine and after drying over anhydrous MgSO 4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained in a Sephadex LH-20-filled column of 1.2 cm in diameter and 95 cm in length was purified while eluting the column with isopropanol.

228 05 3 0228 05 3 0

Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel 138: Herstellung von Νσ( -Jj>- (N⁰^- -Cyclopentancarbonyl- -serylthio)-2-äthylpropanoyl7-L-3,4-dehydroprolin Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -2O°CExample 138: Preparation of Νσ ( -Jj> - (N ⁰ ^ - cyclopentanecarbonyl -serylthio) -2-ethylpropanoyl-7-L-3,4-dehydroproline One in a bath of ice, dry ice and acetone at -2 ° C

gekühlte Lösung von 5 mmol Ν<* -Cyclopentancarbonyl-O-acetyl-serin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -IOC gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel 71 hergestellten N-(2-Äthyl- -3-mercaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolins in DMF versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch nach dem Kühlen mit 0,In-HCl und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten, aus v/elcher dann noch die als Schutzgruppe vorliegende Acetylgruppe mittels wasserfreiem HF in Anwesenheit von Anisol abgespalten wurde.cooled solution of 5 mmol Ν <* -Cyclopentancarbonyl-O-acetyl-serine in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 5 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution for 2 hours at -IOC stirred and then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 5 mmol of the prepared according to Example 71 N- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline in DMF, the reaction mixture a stirred at -10 C for a further hour, then slowly warmed to room temperature and then freed from the solvent under reduced pressure at 40 C, the residue obtained was admixed with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling with 0, In-HCl and then 3- washed with saturated brine and dried over anhydrous MgSO4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was purified by chromatography in a column of 1.2 cm diameter and 95 cm length filled with Sephadex LH-20, eluting the column with isopropanol. By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained, from which then the protective acetyl group was cleaved off by means of anhydrous HF in the presence of anisole.

Beispiel 139: Herstellung von N^ ~fj>~ (^N -Cyclopentancarbonyl-O- -benzyl-tyrosylthio)-2-äthylpropanoyl7-L-3,4-dehydroprolinExample 139: Preparation of N ^ ~ fj> ~ ^(N -Cyclopentancarbonyl-O- benzyl-tyrosylthio) -2-äthylpropanoyl7-L-3,4-dehydroproline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°C gekühlte Lösung von 5 mmol N^-Cyclopentancarbonyl-O-benzyl-tyrosin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt undA solution of 5 mmol N 2 -cyclopentanecarbonyl-O-benzyl-tyrosine in redistilled dimethylformamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 ° C was treated with a cold solution of 5 mmol 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution is stirred for 2 hours at -10 C and

-403--403-

dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel 71 hergestellten N-(2-Äthyl- -3-mercaptopropanoyl)-L-3,4-dehydroprolins versetzt, das Reaktionsgemisch zunächst eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam erwärmt und unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch gekühlt und mit 0,1n-HCl und dann 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chroinatographieren an einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne mit 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit Isopropanol gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.then treated with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 5 mmol of the prepared according to Example 71 N- (2-ethyl-3-mercaptopropanoyl) -L-3,4-dehydroproline, the reaction mixture first v / eitere Stirred at -10 C, then slowly heated and freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture was cooled and washed with 0.1 N HCl and then 3 times with saturated brine and after drying with anhydrous MgSO 4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained was purified by chroinatography on a column packed with Sephadex LH-20 1.2 cm in diameter and 95 cm in length while eluting the column with isopropanol. By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Beispiel 140: Herstellung von {{j>- (N⁰*- -Cyclopentancarbonyl-N^-tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-histidyl)-thiopropanoylj-amino)-2-methyl- -propansäureExample 140: Preparation of {{j> - (N ⁰ * - -Cyclopentancarbonyl-N ^ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-histidyl) -thiopropanoylj-amino) -2-methyl-propanoic

Eine in einem Bad aus .Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 73,5 mg N⁰^ -Cyclopentancarbonyl-N^· -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-histidin in 0,5 ml redestilliertern Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 26 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, v/orauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10°C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 36 mg der gemäß Beispiel 75 ^hergestellten 2-^~(3-Mercaptopropanoyl) -amincy⁷- -2-methylpropansäure versetzt, das Reaktionsgemisch zunächst eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und schließlich unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eisbad mit 1 n-Zitrorfensäure und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO, mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren inA cooled in a bath of. Ice, dry ice and acetone to -20 C solution of 73.5 mg N ⁰ ^ -Cyclopentancarbonyl-N ^ - tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-histidine in 0.5 ml of redistilled dimethylformamide (DMF ) was added to a cold solution of 26 mg of 1,1'-carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, v / or stirred on the resulting solution for 2 hours at -10 ° C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 36 mg of prepared according to Example 75 ^ 2- ^ ~ (3-mercaptopropanoyl) -amincy ⁷ - 2-methylpropanoic acid, the reaction mixture was first for e / ee hour at -10 C stirred, then slowly warmed to room temperature and finally freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture washed after cooling in an ice bath with 1 N-Zitrorfensäure and then 3 times with saturated brine and dried after drying over anhydrous MgSO, freed by a rotary evaporator from the solvent and the residue obtained by chromatography in

228053 0228053 0

_ _w ^AOHr- _ _w ^ AOHr-

einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt Wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.a column filled with Sephadex LH-20 of 1.2 cm in diameter and 95 cm in length with elution of the column was purified with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture. By aborting the solvent from the merged peak fractions, the desired compound was obtained.

Beispiel 141: Herstellung von (/ß- (Ν<*' -Cyclopentancarbonyl-L- -lysyl-histidyl)-thiopropanoyl7-amino)-2-methyl-propansäureExample 141: Preparation of (/ β- (Ν * -cyclopentanecarbonyl-L-lysyl-histidyl) -thiopropanoyl-7-amino) -2-methyl-propanoic acid

Von 30 mg der gemäß Beispiel 140 hergestellten Verbindung wurde die den Lysinrest schützende N^- -Boc-Gruppe mittels 50 /al Anisol und 200 /al wasserfreier Trif luoressigsäure bei Raumtemperatur innerhalb einer Stunde abgespalten, worauf vom Reaktionsgemisch das Anisol und die Trifluoressigsäure bei 55 C unter vermindertem Druck abgetrieben, der erhaltene Rückstand mit v/asserfreiem Äther verrieben und der nunmehr vorliegende Rückstand durch Flüssigchromatographie in einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 9 5 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit 5%iger Essigsäure gereinigt wurde. Die miteinander vereinigten Scheitelfraktionen lieferten beim Gefriertrocknen die gewünschte Verbindung.30 mg of the compound prepared in Example 140 was the lysine residue protected N ^ - Boc-group using 50 / al anisole and 200 / al anhydrous Trif luoressigsäure cleaved at room temperature within one hour, whereupon the reaction mixture, the anisole and trifluoroacetic acid at 55 C is removed under reduced pressure, the resulting residue is triturated with water / ether free ether and the present residue by liquid chromatography in a filled with Sephadex G-10 column 1.2 cm in diameter and 9 5 cm in length eluting the column with 5% Acetic acid was purified. The merging crest fractions provided the desired compound during freeze-drying.

Beispiel 142: Herstellung von £(3-(N^ -Cyclopentancarbonyl-N^-tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-brom-prolyl)-thiopropanoy ij-amino)-2- -methyl-propansäureExample 142: Preparation of ε (3- (N, -cyclopentanecarbonyl-N'-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-bromo-prolyl) -thiopropanoylo - amino) -2-methyl-propanoic acid

Ein«! in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 10 mmol N^ -Cyclopentancarbonyl-N^-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-brom-prolin in redestiiliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1 ,1 '-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 7 5 hergestellten 2-/"(3-Mercaptopropanoyl)-amino_/- -2-methylpropansäure versetzt, das Reaktionsgemisch eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend bei -4 C unter vermindertem Druck das Lösungsmittel entfernt, dor erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt,On"! in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C cooled solution of 10 mmol N ^ -cyclopentanecarbonyl-N ^ tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-bromo-proline in redistiiliertem dimethylformamide (DMF) was mixed with a cold solution of 10 mmol of 1, 1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 10 mmol of the prepared according to Example 7 5 2- / (3-mercaptopropanoyl) -amino-2-methylpropanoic acid, the reaction was stirred at -10 C for one hour, then slowly warmed to room temperature and then the solvent was removed at -4 C under reduced pressure to give the resulting product Residue is mixed with ethyl acetate,

2805328053

-ΑΌ5 - -5 -

das so erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Bad aus Eis und Wasser mit 1 η-Zitronensäure und 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels" eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand in einer mit Sephadex LH-2O gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde die gewünschte Verbindung erhalten.the resulting mixture after cooling in a bath of ice and water with 1 η-citric acid and washed 3 times with saturated brine and after drying over anhydrous MgSO4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained in a Sephadex LH-2O column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length, eluting the column with a 3: 7 in volume ratio of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, the desired compound was obtained.

Eeispiel 143: Herstellung von {(j>- (N^ -Cyclopentancarbonyl-L-lysyl- -4-brom-prolyl)-thiopropanoyl7-amino)-2-methyl-propansäureExample 143: Preparation of {(j> - (N ^ -cyclopentanecarbonyl-L-lysyl-4-bromoprolyl-prolyl) -thiopropanoyl-7-amino) -2-methyl-propanoic acid

Wenn bei der Arbeitsweise gemäß Beispiel 141 statt der gemäß Beispiel 140 erhaltenen Verbindung die gemäß Beispiel 142 erhaltene Verbindung eingesetzt wurde, wurde durch Abspalten der N^ -Boc-Gruppe die gewünschte Verbindung erhalten.When in the procedure of Example 141 instead of the compound obtained according to Example 140, the compound obtained according to Example 142 was used, the desired compound was obtained by cleavage of the N ^ -Boc group.

Beispiel 144: Herstellung von (/3-(N⁰^ -Cyclopentancarbonyl-N^ -tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-norvalyl)-thiopropanoyl7-amino)-2- -methyl-propansäureExample 144: Preparation of (/ 3- (N ⁰ -cyclopentanecarbonyl-N 1 -tert -butyloxycarbonyl-L-lysyl-norvalyl) -thiopropanoyl-7-amino) -2-methyl-propanoic acid

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 COne in a bath of ice, dry ice and acetone at -20 C

gekühlte Lösung von 10 mm öl N⁰^ -Cyclopentancarbonyl-N ^- -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl~norvalin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimi- dazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl- -morpholin neutralisierten Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 75 hergestellten 2-^73-Mercaptopropanoyl)-amino/^-methyl-propansäure versetzt, das Reaktionsgemisch sodann bei -10 C eine weitere Stunde stehengelassen, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C vom Lösungsmittel befreit, das hiebei erhaltene Gemisch in einem Eiswasserbad gekühlt, dann mit 1n-Ziüronensäure und anschließend 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO- schließlich mittels einescooled solution of 10 mm oil N ⁰ ^ ^ -Cyclopentancarbonyl-N - tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl ~ norvaline in redistilled dimethylformamide (DMF) was added in DMF dazol with a cold solution of 10 mmol of 1,1'-Carbonyldiimi- , whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 10 mmol of prepared according to Example 75 2- ^ 73-mercaptopropanoyl) amino / ^ - methyl-propanoic acid The reaction mixture was then allowed to stand at -10 C for a further hour, then slowly warmed to room temperature and then freed under reduced pressure at 40 C from the solvent, the resulting mixture was cooled in an ice-water bath, then with 1n-Ziüronensäure and then 3 times washed with saturated brine and after drying over anhydrous MgSO- finally by means of a

228053 0228053 0

- tee -406- - tea -406-

rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-2O gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.The solvent was removed from the rotary evaporator and the residue obtained was purified by chromatography in a column of 1.2 cm diameter and 95 cm length filled with Sephadex LH-2O to elute the column with a solvent mixture consisting of tetrahydrofuran and isopropanol in a volume ratio of 3: 7 , By aborting the solvent from the merged peak fractions, the desired compound was obtained.

Beispiel 145: Herstellung von {/ß-(N^ -Cyclopentancarbonyl-L-lysyl- -norvalyl)-thiopropanoyl/-amino)-2-methyl-propansäureExample 145: Preparation of {/ β- (N'-cyclopentanecarbonyl-L-lysyl-norvalyl) thiopropanoyl / amino) -2-methyl-propanoic acid

Aus 30 mg der gemäß Beispiel 144 hergestellten Verbindung wurde die als Schutzgruppe des Lysinrestes vorliegende N^-Boc- -Gruppe mittels 50 /ut· Anisol und 200 yui,wasserfreier Trifluoressigsäure bei Raumtemperatur innerhalb einer Stunde abgespalten, worauf das Anisol und die Trifluoressigsäure unter vermindertem Druck bei 3 5°C abgetrieben, der erhaltene Rückstand mit wasserfreiem Äther verrieben und der erhaltene Rückstand durch Flüssigchromatographie in einer mit Sephadex G-10 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit 5%iger Essigsäure gereinigt wurde. Durch Gefriertrocknen der miteinander vereinigten Scheitelfraktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.From 30 mg of the compound prepared according to Example 144, the present as protecting group of Lysinrestes N ^ -Boc- group was removed by means of 50 / ul · anisole and 200 yui, anhydrous trifluoroacetic acid at room temperature within one hour, whereupon the anisole and the trifluoroacetic under reduced Dried off pressure at 3 5 ° C, triturated the residue obtained with anhydrous ether and the residue obtained by liquid chromatography in a column filled with Sephadex G-10 column of 1.2 cm diameter and 95 cm in length with elution of the column with 5% acetic acid has been. The desired compound was obtained by freeze-drying the coalesced cristal fractions.

Beispiel 146: Herstellung von (/3-N^ -Cyclopentancarbonyl-N*--tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-ß-2-thienyl-alanyl)-thiopropanoyl7-amino) -2-methyl-propansäureExample 146: Preparation of (/ 3-N'-cyclopentanecarbonyl-N * - tert -butyloxycarbonyl-L-lysyl-β-2-thienyl-alanyl) -thiopropanoyl-7-amino) -2-methyl-propanoic acid

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°COne in a bath of ice, dry ice and acetone at -20 ° C

gekühlte Lösung von 10 mmol N⁰^-Cyclopentancarbonyl-N^-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-ß-2-thienyl-alanin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1 '-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 10 mmol der gemäß Beispiel 46 hergestellten 2-/73-Mercaptopropanoyl)-amino/-2- -methyl-propansäure in DMF versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatucooled solution of 10 mmol N ⁰ ^ -cyclopentanecarbonyl-N'-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-β-2-thienyl-alanine in redistilled dimethylformamide (DMF) was treated with a cold solution of 10 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF is added, whereupon the resulting solution is stirred for 2 hours at -10 C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 10 mmol of prepared according to Example 46 2- / 73-mercaptopropanoyl) amino / -2- -methyl-propanoic acid in DMF, the reaction mixture stirred for a further hour at -10 C and then slowly to room temperature

erwärmt und anschließend bei 40 C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eiswasserbad zunächst mit 1 η-Zitronensäure und dann 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO₄ mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und IsopropanoT. bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfrciktionen wurde die gewünschte Verbindung erhalten.heated and then freed from solvent at 40 C under reduced pressure, the residue obtained is treated with ethyl acetate, the mixture thus obtained after cooling in an ice-water bath first with 1 η-citric acid and then washed 3 times with saturated brine and after drying over anhydrous MgSO _{4 was} freed from the solvent by means of a rotary evaporator, and the residue obtained was purified by chromatography in a column of 1.2 cm diameter and 95 cm length filled with Sephadex LH-20, eluting the column in a volume ratio of 3: 7 from tetrahydrofuran and isopropanoT. existing solvent mixture was purified. By aborting the solvent from the combined peak fractions, the desired compound was obtained.

Beispiel 147: Herstellung von (^3-(N-"* -Cyclopentancarbonyl-L-lysyl- -thiopropanoyl/-amino)-2-methyl-propansäureExample 147: Preparation of (3- (N - "* -cyclopentanecarbonyl-L-lysyl-thiopropanoyl / amino) -2-methyl-propanoic acid

Wenn entsprechend der Arbeitsweise in Beispiel 145 die als Schutzgruppe des Lysinrestes dienende N -Boc-Gruppe aus der gemäß Beispiel '-4 6 hergestellten Verbindung abgespalten wird, wird die gewünschte Verbindung erhalten.According to the procedure of Example 145, when the N -Boc group serving as the protective group of the lysine residue is cleaved from the compound prepared in Example '-4 6, the desired compound is obtained.

Beispiel 148: Herstellung von N°^ ~/j>- (Pyro-L-glutamyl-valyl) -thiopropanoyl7~L-alaninExample 148: Preparation of N ° C ~ / j> - (pyro-L-glutamyl-valyl) -thiopropanoyl-7-L-alanine

Eine Lösung von 139 mg Pyro-L-glutamyl-valin in 0,5 ml DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 87 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit einem Gemisch von 119,5 mg des gemäß Beispiel 79 hergestellten N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-alanins, 0,072 ml N-Äthyl-morpholin und 1 ml DMF versetzt und das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch zunächst eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt wurde. Das DMF wurde sodann vom Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers abgetrieben, worauf der erhaltene"Rückstand mit 7 ml Äthylacetat und mit 2 ml 1n-Zitronensäure versetzt wurde. Die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase wurde 2-mal mit 1n-Zitronehsäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dom Trocknen mitA solution of 139 mg of pyro-L-glutamyl-valine in 0.5 ml of DMF was treated at -15 C with a solution of 87 mg of 1,1'-carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the reaction mixture was incubated for one hour at - 10 C stirred and then admixed with a mixture of 119.5 mg of prepared according to Example 79 N- (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine, 0.072 ml of N-ethyl-morpholine and 1 ml of DMF and the now present reaction mixture, first v stirred for a further hour at -10 C and then slowly warmed to room temperature. The DMF was then driven off from the reaction mixture under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, and 7 ml of ethyl acetate and 2 ml of 1N-citric acid were added to the residue and the organic phase separated from the resulting mixture was washed twice with 1N Citric acid and washed twice with brine and dried with dom

228053 0228053 0

_ ΛΟ8 -_ ΛΟ8 -

wasserfreiem MgSO. und nach dem anschließenden Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit. Durch Reinigen des erhaltenen Rückstandes durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge wurde unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisch die gewünschte Verbindung erhalten.anhydrous MgSO4. and freed from the solvent after subsequent filtration using a rotary evaporator. Purification of the resulting residue by partition chromatography in a Sephadex G-25 column 1.2 cm in diameter and 99 cm in length eluted the column with a 4: 1: 5 by volume of n-butanol, acetic acid and water Solvent mixture obtained the desired compound.

Beispiel 149: Herstellung von Ν⁵*- -/Pyro-L-glutamyl-3 ,4-dehydroprolyl)-thiopropanoyl7~L-alaninExample 149: Preparation of Ν ⁵ * - - / pyro-L-glutamyl-3,4-dehydroprolyl-thiopropanoyl-7-L-alanine

Eine Lösung von 5 mmol Pyro-L-glutamyl-3,4-dehydroprolin in DMF wurce bei -15°C mit einer Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel 7 9 hergestellten N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-alaninsversetzt und das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt wurde. Vom nunmehr vorliegenden Gemisch wurde das DMF unter vermindertem Druck bei -4 C in einem rotierenden Verdampfer abgetrennt, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1 η-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt wurde. Die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase wurde 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, anschließend mit wasserfreiem MgSO, getrocknet, dann filtriert und. in einem rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 9 9 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt, wobei die gewünschte Verbindung erhalten wurde.A solution of 5 mmol of pyro-L-glutamyl-3,4-dehydroproline in DMF wurce at -15 ° C with a solution of 5 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture stirred at -10 C for one hour and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 5 mmol of prepared according to Example 7 9 prepared N- (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine and stirred the reaction mixture present for a further hour at -10 C and then slowly Room temperature was heated. From the present mixture, the DMF was removed under reduced pressure at -4 C in a rotary evaporator, whereupon the residue obtained with a volume ratio of 7: 2 of ethyl acetate and 1 η-citric acid mixture was added. The organic phase separated from the resulting mixture was washed twice with 1N-citric acid and twice with brine, then with anhydrous MgSO 4, dried, then filtered and. freed from solvent in a rotating evaporator. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 column 1.2 cm in diameter and 9 9 cm in length using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water solvent mixture, whereby the desired compound was obtained.

Beispiel 150: Herstellung von N⁰^ ~/j>~ (N ⁰^ -Pyro-L-glutamyl-lysyl) -thiopropanoyiy-L-alaninExample 150: Preparation of N ⁰ ^ ~ / j> ~ (N ⁰ ^ -Pyro-L-glutamyl-lysyl) -thiopropanoylo-L-alanine

Eine Lösung von 20 mmol N⁰^-Pyro-L-glutamyl-N ^-Boc-lysinA solution of 20 mmol N ⁰ ^ -Pyro-L-glutamyl-N ^ -Boc-lysine

in DMF wurde bei -15°C rait einer Lösung von 20 mraol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10°C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl- -morpholin neutralisierten Lösung von 20 mmol des gemäß Beispiel 79 hergestellten N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-alanins in DMF versetzt und das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch zunächst eine weitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt wurde. Vom so erhaltenen Gemisch wurde das DMF unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers abgedampft, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1 η-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt wurde. Die vom hiebei entstandenen Gemisch abgetrennte organische Phase wurde 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO. filtriert und dann unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Vom Lysinrest der so erhaltenen Verbindung wurde die N^ -Boc-Gruppe in der in Beispiel 145 beschriebenen Weise abgespalten.in DMF was added at -15 ° C rait a solution of 20 mbar 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture was stirred for one hour at -10 ° C and then with a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 20 mmol of the prepared according to Example 79 N- (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine in DMF and the now present reaction mixture was stirred for a further hour at -10 C and then slowly warmed to room temperature. From the mixture thus obtained, the DMF was evaporated under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, and the resulting residue was admixed with a mixture of 7: 2 in volume ratio of ethyl acetate and 1 η-citric acid. The organic phase separated from the mixture was washed twice with 1N-citric acid and twice with saturated brine, after drying with anhydrous MgSO 4. filtered and then freed using a rotary evaporator from the solvent. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 packed 1.2 cm diameter by 99 cm long column using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. From the lysine residue of the compound thus obtained, the N 1 -Boc group was cleaved in the manner described in Example 145.

Beispiel 151: Herstellung von N<* -{j>~ (Pyro-L-glutamyl-3 , 5-dibrom- -tyrosyl-thiopropanoyj^-L-alaninExample 151: Preparation of N <* - {j> ~ (pyro-L-glutamyl-3,5-dibromo-tyrosyl-thiopropanoyl} -L-alanine

Eine Lösung von 5 mmol Pyro-L-glutamyl-3,5-dibrom-tyrosin in DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 5 nun öl des gemäß Beispiel 79 hergestellten N-(3-Mercaptopropanoyl)-L-alanins in DMF versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt und dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt, worauf das DMF mittels eines rotierenden Verdampfers bei verringertem Druck und bei 40 C abgetrieben und der erhaltene Rückstand mit ein« im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1n-ZitronensäureA solution of 5 mmol of pyro-L-glutamyl-3,5-dibromo-tyrosine in DMF was treated at -15 C with a solution of 5 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole, whereupon the reaction mixture was stirred at -10 C for one hour and was then added to a previously neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 5 now oil of the prepared according to Example 79 N- (3-mercaptopropanoyl) -L-alanine in DMF. The present reaction mixture was stirred at -10 C for one hour and then slowly warmed to room temperature, whereupon the DMF was removed by rotary evaporator at reduced pressure and at 40 ° C and the residue obtained was 7: 2 by volume from ethyl acetate and 1n-citric acid

228 05 3 O228 05 3 O

bestehenden Geraisch versetzt wurde. Die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase wurde 2-mal mit 1n-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO. filtriert und dann unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge unter Verwendung eine im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt, womit die gewünschte Verbindung erhalten wurde.existing Geraisch was shifted. The organic phase separated from the resulting mixture was washed twice with 1N-citric acid and twice with saturated brine, after drying with anhydrous MgSO 4. filtered and then freed using a rotary evaporator from the solvent. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 column 1.2 cm in diameter and 99 cm in length using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water the desired compound was obtained.

Beispiel 152: Herstellung von N^ - {[2- (L-Lysyl-leucyl) -thiomethylj⁷- -5-aminopentanoyl)-L-prolinExample 152: Preparation of N ^ - {[2- (L-lysyl-leucyl) -thiomethyl- ⁷ -5-aminopentanoyl) -L-proline

Eine Lösung von 139 mg Bis-Boc-L-lysyl-leucin in 0,5 ml DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 87 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit einem Gemisch aus 119,5 mg gemäß Beispiel 96 hergestellten N- (S-Amino^-mercaptomethylpentanoyl)-L-prolins und 0,072 ml N-Äthyl-morpholin in 1 ml DMF versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde eine weitere .Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter verringertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit 7 ml Äthylacetat und 2 ml 1 η-Zitronensäure versetzt und die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Natriumchlorid lösung gewaschen und nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO- und anschließendem Filtrieren mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Aus der erhaltenen Verbindung wurde die gewünschte Verbindung nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise durch Abspalten der Bis-Boc-Schutzgruppe mittels Trifluoressigsäure und Anisol hergestellt·A solution of 139 mg of bis-Boc-L-lysyl-leucine in 0.5 ml of DMF was added at -15 C with a solution of 87 mg of 1,1'-carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the reaction mixture for one hour stirred at -10 C and then treated with a mixture of 119.5 mg according to Example 96 prepared N- (S-amino ^ -mercaptomethylpentanoyl) -L-proline and 0.072 ml of N-ethyl-morpholine in 1 ml of DMF. The reaction mixture was then stirred for a further hour at -10 ° C., then slowly warmed to room temperature and then freed from the DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained was admixed with 7 ml of ethyl acetate and 2 ml of 1. Citric acid was added and the separated from the resulting mixture organic phase washed twice with 1 η-citric acid and twice with saturated sodium chloride solution and freed after drying with anhydrous MgSO and then filtered by means of a rotary evaporator from the solvent. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 packed 1.2 cm diameter by 99 cm long column using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. From the compound obtained, the desired compound was prepared by the procedure described in Example 121 by cleaving the bis-Boc protecting group using trifluoroacetic acid and anisole.

Beispiel 153: Herstellung von N^ -/3-/L-Arginyl-alanyl7-thio)-2- -(methylthiomethyl)-propanoyiy-L-prolinExample 153: Preparation of N ^ - / 3- / L-Arginyl-alanyl-7-thio) -2- (methylthiomethyl) -propanoylo-L-proline

Eine Lösung von 139 mg Tri-Adoc-L-arginyl-alanin in 0,5 ml DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 87 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10°C gerührt und dann mit einem Gemisch aus 119,5 mg gemäß Beispiel 103 hergestelltem N-/3-Mercapto-2-(methylthiomethylpropanoyl7-L-prolin und einer Lösung von O,O72ml N-Äthyl-morpholin in 1 ml DMF versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde sodann eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam au: Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit 7 ml Äthylacetat und 2 ml 1 η-Zitronensäure versetzt und die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO. und dem Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Durch Abspalten der Tri-Adoc-Schutzgruppe von der so erhaltenen Verbindung mittels Trifluoressigsäure und Anisol entsprechend der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A solution of 139 mg of tri-Adoc-L-arginyl-alanine in 0.5 ml of DMF was treated at -15 C with a solution of 87 mg of 1,1'-carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the reaction mixture was incubated for one hour stirred at -10 ° C and then with a mixture of 119.5 mg according to Example 103 prepared N- / 3-mercapto-2- (methylthiomethylpropanoyl7-L-proline and a solution of O, O72ml N-ethyl-morpholine in 1 ml The reaction mixture was then stirred at -10 ° C. for a further 1 hour, then slowly warmed to room temperature and then freed from DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained was admixed with 7 ml Ethyl acetate and 2 ml of 1 η-citric acid and the organic phase separated from the resulting mixture was washed twice with 1 η-citric acid and twice with brine and after drying with anhydrous MgSO 4 and filtration using a rotating Ve rdampfers was freed from the solvent. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 packed 1.2 cm diameter by 99 cm long column using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. By cleavage of the tri-Adoc protecting group from the compound thus obtained by trifluoroacetic acid and anisole according to the procedure described in Example 121, the desired compound was obtained.

Beispiel 154: Herstellung von N<* - ( 3-/N⁰^ -Pyro-L-glutamyl-L-lysyl- -phenylalanyl-thio)- 2-(methoxycarbonylmethyl)-propanoyl/-L-prolinExample 154: Preparation of N <* - (3- / N ⁰ ^ -pyro-L-glutamyl-L-lysyl-phenylalanyl-thio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl / -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20°C gekühlte Lösung von 73,5 mg Ν^τ(χ -Pyro-L-glutamyl-N ^ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanin in 0,5 ml redestilliertem Dimethyl formamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 26 mg 1,1'-Carbonyldiimidazol in 1,0 ml DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer zuvor mit N-Äthyl- -morpholin neutralisierten kalten Lösung von 36 mg des gemäß Beispiel 111 hergestellten N-₍/3-Mercapto-2-(methoxycarbonylmethyl) -A cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 ° C solution of 73.5 mg Ν ^{τ (χ} -Pyro-L-glutamyl-N ^ tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanine in 0.5 ml A solution of dimethylformamide (DMF) redistilled was treated with a cold solution of 26 mg of 1,1'-carbonyldiimidazole in 1.0 ml of DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 ° C. and then mixed with a solution of N-ethyl- morpholine neutralized cold solution of 36 mg of the N- ₍ / 3-mercapto-2- (methoxycarbonylmethyl)

228053 0228053 0

- -H3 - - -H3 -

-propanoylJ-L-prolins in 1 ml DMF versetzt, das Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann auf Raumtemperatur erv/ärmt und anschließend bei 40°C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eiswasserbad mit 1n-Zitronensäure und dann 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO₄ mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex L.H-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren miteinem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Beim Abdampfen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde N^ -/7(3-/N⁰^- -Pyro-L-glutamyl-N^-tertbutyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanyl7-thio-2-(methoxycarbonylmethyl)- -propanoyiy-L-prolin erhalten. Durch Abspalten der als Schutzgruppe dienenden tert-Butyloxycarbonylgruppe aus der so hergestellten Verbindung in der in Beispiel 145 beschriebenen Weise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.propanoyl-1-L-proline in 1 ml of DMF, the reaction mixture stirred for a further hour at -10 C, then warmed to room temperature and then freed at 40 ° C under reduced pressure from the solvent, the residue obtained herewith admixed with ethyl acetate, the mixture obtained after cooling in an ice-water bath with 1N-citric acid and then washed 3 times with saturated brine and freed after drying over anhydrous MgSO ₄ by means of a rotary evaporator from the solvent and the residue obtained by chromatography in a Sephadex with LH- 20 column filled 1.2 cm in diameter and 95 cm in length with elution with a solvent mixture consisting of tetrahydrofuran and isopropanol in the volume ratio of 3: 7 was purified. Evaporation of the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure gave N, - / 7 (3- / N ⁰ ^ - pyro-L-glutamyl-N 1 -but-butyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanyl-7-thio-2- (methoxycarbonylmethyl The desired compound was obtained by cleaving the protecting tert-butyloxycarbonyl group from the compound thus prepared in the manner described in Example 145.

Beispiel 155: Herstellung von N⁰^ -{{2-(L-Lysyl-3,4-dichlorprolyl)- -thiomethy^-S-aminopentanoyl) -L-prolinExample 155: Preparation of N ⁰ ^ - {{2- (L-Lysyl-3,4-dichloroprolyl) -thiomethyl-S-aminopentanoyl) -L-proline

Eine Lösung von 5 mmol Bis-Boc-L-lysyl-3,4-dichlorprolin in DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 5 mmol 1,1^f-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch 1 Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 5 mmöl des gemäß Beispiel 96 hergestellten und mit einer Lösung von N-Äthyl-morpholin in DMF neutralisierten N-(5-N-Boc-Amino-2-mercaptomethylpentanoyl)-L-prolins versetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde sodann eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1 η-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt und die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1n-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen undA solution of 5 mmol of bis-Boc-L-lysyl-3,4-dichlorprolin in DMF was treated at -15 C with a solution of 5 mmol of 1,1-carbonyldiimidazole in DMF ^f, whereupon the reaction mixture for 1 hour at -10 C and then treated with 5 mmole of the prepared according to Example 96 and neutralized with a solution of N-ethyl-morpholine in DMF neutralized N- (5-N-Boc-amino-2-mercaptomethylpentanoyl) -L-proline. The reaction mixture was then stirred for a further hour at -10 C, then slowly warmed to room temperature and then freed from the DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained had a volume ratio of 7: 2 from ethyl acetate and 1 η-citric acid mixture and the organic phase separated from the resulting mixture washed twice with 1N-citric acid and twice with brine, and

-Ί13--Ί13-

nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. und dem anschließenden Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 on Durchmesser und 99 cm Länge durch Verteilungschromatographie unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und* tyasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Aus der so erhaltenen Verbindung wurde durch Abspalten der von Boc gebildeten Schutzgruppe mittels Trifluoressigsäure in Anisol nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise die gewünschte Verbindung erhalten.after drying over anhydrous MgSO 4. and the subsequent filtration using a rotary evaporator was freed from the solvent. The resulting residue was purified in a Sephadex G-25 column of 1.2 on diameter and 99 cm in length by partition chromatography using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. From the compound thus obtained, the desired compound was obtained by cleaving the protecting group formed by Boc by means of trifluoroacetic acid in anisole according to the procedure described in Example 121.

Beispiel 156: Herstellung von N^ -/~[3-/L-Arginyl-prolyl~7-thio) -2-(methyl-thiomethyl)-propanoyl7~L-prolinExample 156: Preparation of N 1 - / - [3- / L-Arginyl-prolyl-7-thio] -2- (methylthiomethyl) -propanoyl-7-L-proline

Eine Lösung von 10 mmol Tri-Adoc-L-arginyl-prolin in DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 10 mmol des gemäß Beispiel 103 - hergestellten und zuvor mit einer Lösung von N-Äthyl-morpholin in DMF neutralisierten N-/3-Mercapto-2-(methylthiomethylpropanoyl7- -L-prolins versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1 η-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt und · die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem anschließenden Trocknen über wasserfreiem MgSO. und nach dem Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit v/urde. Der hiebei erhaltene Rückstand v/urde in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2- cm Durchmesser und 99 cm Länge durch Verteilungschromatographie und unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Durch Abspalten der in dor so erhaltenen Verbindung als Schutzgruppe vorhandenen Adoc-Gruppc mit Trifluor-A solution of 10 mmol of tri-Adoc-L-arginyl-proline in DMF was treated at -15 C with a solution of 10 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture was stirred at -10 C for one hour and then with 10 mmol of the N-3-mercapto-2- (methylthiomethyl-propanoyl-7-L-proline, which was prepared according to Example 103 and previously neutralized with a solution of N-ethylmorpholine in DMF, were added to the present reaction mixture for a further hour Stirred -10 C, then slowly warmed to room temperature and freed under reduced pressure at 40 C by means of a rotary evaporator from the DMF, whereupon the residue obtained with a volume ratio of 7: 2 of ethyl acetate and 1 η-citric acid mixture and the The organic phase separated from the resulting mixture is washed twice with 1 η-citric acid and twice with saturated brine, and then dried over anhydrous MgSO 4 and after filtration free from solvent using a rotary evaporator. The residue obtained was purified in a Sephadex G-25 column 1.2 cm in diameter and 99 cm in length by partition chromatography using a 4: 1: 5 by volume of n-butanol, acetic acid and water Solvent mixture cleaned. By cleavage of the compound thus obtained as a protecting group existing Adoc group with trifluoro-

228053 0228053 0

essigsäure in Anisol nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.acetic acid in anisole according to the procedure described in Example 121, the desired compound was obtained.

Beispiel 157: Herstellung von N^ -/"(3-/N^ -Pyro-L-glutamyl-L-lysyl- -4-hydroxyprolyl_v7-thio) -2- (methoxycarbonylmethyI) -propanoyl/-L- -prolinExample 157: Preparation of N ^ - / "(3- / N ^ pyro-L-glutamyl-L-lysyl -4-hydroxyprolyl _v 7-thio) -2- (methoxycarbonylmethyI) -propanoyl / -L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -2O°C gekühlte Lösung von 5 mmol N^ -Pyro~L-glutamyl-N^£-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-hydroxyprolin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -1O°C gerührt und dann mit einer mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel 111 hergestellten N-/"( 3 -Mercapto- 2 -methoxy car bony 1-me thy 1) -propanoylJ-L- -prolins versetzt, das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -1O°C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend bei 4O°C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das hiebei erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eiswasserbad mit 1 η-Zitronensäure und 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. in einem rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge und unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden' Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abdampfen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde N ^ -£"(3-N⁰^ -Pyro-L-glutamyl-N ^ -tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanyiy-thio-^-methoxy-carbonylmethyl-propanoyl_7-L-prolin erhalten, woraus durch Abspalten der von der tert-Butyloxycarbonylgruppe gebildeten Schutzgruppe nach der in Beispiel 145 beschriebenen Arbeitsweise die gewünschte Verbindung hergestellt wurde.A cooled in a bath of ice, dry ice and acetone at -2O ° C solution of 5 mmol of N ^ ~ pyro L-glutamyl-N ^£ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-4-hydroxyproline in redistilled dimethylformamide (DMF) was with a cold solution of 5 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution was stirred for 2 hours at -1O ° C and then with a neutralized with N-ethyl-morpholine solution of 5 mmol of the prepared according to Example 111 N - / "(3-mercapto-2-methoxy carbony 1-my-1-yl-1-propanoyl) -L-proline added, the now present reaction mixture stirred for a further hour at -1O ° C, then slowly warmed to room temperature and then freed of solvent at 40 ° C. under reduced pressure, the residue obtained was admixed with ethyl acetate, the mixture obtained after cooling was washed in an ice-water bath with 1N-citric acid and 3 times with saturated common salt solution and after drying over anhydrous MgSO 4 in a rotary evaporator from the solvent and the residue obtained by chromatography in a Sephadex LH-20-filled column of 1.2 cm in diameter and 95 cm in length and eluting the column with a volume ratio of 3: 7 out Tetrahydrofuran and isopropanol existing 'solvent mixture was purified. £ "(3-N ⁰ ^ pyro-L-glutamyl-N ^ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanyiy-thio - - ^ - N ^ was by evaporation of the solvent from the combined fractions under reduced pressure, with each vertex methoxy carbonylmethyl-propanoyl-7-L-proline, from which the desired compound was prepared by cleaving the protecting group formed by the tert-butyloxycarbonyl group according to the procedure described in Example 145.

Beispiel 158: Herstellung von N^-{{2-(L-Lysyl-S-äthyl-cysteinyl)- -thionaethyiy-S-amino-pentanoyl) -L-pro!inExample 158: Preparation of N, - {{2- (L-Lysyl-S-ethyl-cysteinyl) -thionethoxy-S-amino-pentanoyl) -L-Pro! In

- -Η-2- - Μ5- - -Η-2- - Μ5-

Eine auf -15 C gekühlte Lösung von 5 mmol Bis-Boc-L- -lysyl-S-äthyl-cystein in DMF wurde mit einer Lösung von 5 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch· zunächst 1 Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 5 mmol des gemäß Beispiel 9 6 hergestellten und mit einer Lösung von N-Äthyl-morpholin in DMF neutralisierten N⁰^-(5-N-Boc-amino- -2-mercaptomethyl-pentanoyl)-L-prolins versetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde sodann eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, v/orauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1n-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt und die von der erhaltenen Mischung abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1n-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem anschließenden Trocknen mittels wasserfreiem MgSO. und darauffolgendes Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 99 cm Länge durch Verteilungschromatographie unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Durch Abspalten der in der so hergestellten Verbindung als Schutzgruppe vorliegenden Boc-Gruppe mittels Trifluoressigsäure in Anisol nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.A cooled to -15 C solution of 5 mmol bis-Boc-L-lysyl-S-ethyl cysteine in DMF was treated with a solution of 5 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture · first 1 hour stirred at -10 C and then with 5 mmol of prepared according to Example 9 6 and neutralized with a solution of N-ethyl-morpholine in DMF N ⁰ ^ - (5-N-Boc-amino-2-mercaptomethyl-pentanoyl) - L-proline was added. The reaction mixture was then stirred at -10 C for a further 1 h, then slowly warmed to room temperature and then freed from the DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, v / on the residue obtained in a 7: 2 volume ratio of ethyl acetate and 1n-citric acid mixture, and the organic phase separated from the obtained mixture is washed twice with 1N-citric acid and twice with saturated brine, followed by drying with anhydrous MgSO 4. and subsequent filtration was freed from the solvent using a rotary evaporator. The resulting residue was purified in a Sephadex G-25 packed 1.2 cm diameter by 99 cm long column by partition chromatography using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. The desired compound was obtained by cleavage of the Boc group present in the compound thus prepared as protective group by means of trifluoroacetic acid in anisole according to the procedure described in Example 121.

Beispiel 159: Herstellung von N ⁰^ -/~(3-/L-Arginyl-0-phospho- -threonyl7-thio) -2- (methylthioinethyl) -propanoyiy-L-prolinExample 159: Preparation of N ⁰ - / - (3- / L-Arginyl-O-phospho-threonyl-7-thio) -2- (methylthio-ethyl) -propanoylo-L-proline

Eine Lösung von 15 mmol Tri-Adoc-L-arginyl-O-phospho- -threonin in DMF wurde bei -15°C mit einer Lösung von 15 mmol· 1,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst 1 Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 15 mmol des gemäß Beispiel 103 hergestellten und mit einer Lösung von H-Äthyl-morpholin in DMF neutralisierten N-/ß-Mercapto-2-(methylthiomethylpropanoyl7-L-prolins versetzt v/urde. Das erhaltene Reaktionsgemisch v/urde dann zunächst eine v/eitere Stunde bei -10 tG gerührt, anschließend langsam auf Raumtemperatur erwärmtA solution of 15 mmol of tri-Adoc-L-arginyl-O-phospho-threonine in DMF was treated at -15 ° C with a solution of 15 mmol · 1,1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture initially for 1 hour The mixture was stirred at -10 ° C. and then admixed with 15 mmol of the N- / β-mercapto-2- (methylthiomethylpropanoyl-7-L-proline prepared according to Example 103 and neutralized with a solution of H-ethylmorpholine in DMF The reaction mixture was then stirred for a fourth hour at -10 tG, then slowly warmed to room temperature

ii^ Ä>ii*>i-ii-^: ii ^ Ä> ii *> i-ii- ^:

228053 0228053 0

und anschließend unter verringertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1n-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt und die vom hiebei erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1n-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem anschließenden Trocknen mit wasserfreiem MgSO. und darauffolgendem Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit wurde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 9 9 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt. Durch Abspalten der in der so hergestellten Verbindung als Schutzgruppe vorliegenden Tri-Adoc-Gruppe mit Trifluoressigsäure in Anisol nach der in Beispiel beschriebenen Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.and then freed from the DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained is admixed with a 7: 2 by volume mixture of ethyl acetate and 1N-citric acid, and the organic phase separated from the mixture obtained is stirred twice 1N citric acid and washed twice with brine and then dried with anhydrous MgSO 4. and subsequent filtration was freed from the solvent using a rotary evaporator. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 column 1.2 cm in diameter and 9 9 cm in length using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water. The desired compound was obtained by cleavage of the tri-adoc group present in the compound thus prepared as a protective group with trifluoroacetic acid in anisole by the procedure described in Example 1.

Beispiel 160: Herstellung von N^ -/^3-/Ji ⁰^ -Pyro-L-glutamyl-L- . -Iysyl-ß-alanyl7~thio)-2-(methoxycarbonylmethyl)-propanoyl^- -L-prolinExample 160: Preparation of N ^ - / ^ 3- / Ji ⁰ ^ -pyro-L-glutamyl-L-. -Isyl-β-alanyl-thio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl-L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 10 mmol N -Pyro-L-glutamyl-N £--tert- -butyloxycarbonyl-L-lysyl-/3-alanin in redestilliertem Dimethylformamid (DMF) wurde mit einer kalten Lösung von 10 mmol 1,1'- -Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst zwei Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 10 mmol des gemäß Beispiel 111 hergestellten N-^3-Mercapto-2-(methoxycarbonylmethyl) -propanoyl7-L-prolins versetzt, das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch eine weitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend bei 40 C unter vermindertem Druck' vom Lösungsmittel befreit, der hiebei erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das so erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eiswasserbad mit 1n-Zitronensäure und dann noch 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und schließlich nach dem Trocknen über wasserfreiemA solution of 10 mmol of N-pyro-L-glutamyl-N-tert-butyl-oxycarbonyl-L-lysyl-3-alanine in redistilled dimethylformamide (DMF) cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 ° C. was added to a cold solution of 10 mmol of 1,1'- carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the resulting solution was stirred for two hours at -10 C and then with a neutralized with N-ethyl-morpholine cold solution of 10 mmol of the example 111 prepared N- ^ 3-mercapto-2- (methoxycarbonylmethyl) propanoyl-L-proline, the now present reaction mixture stirred for a further hour at -10 C, then slowly warmed to room temperature and then at 40 C under reduced pressure 'from Solvent, the residue obtained herewith admixed with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling in an ice-water bath with 1N-citric acid and then washed 3 times with saturated sodium chloride solution and finally after drying üb he is anhydrous

MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hicbei erhaltene Rückstand in einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abdampfen des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde U^c<--/j3-/N°^- -Pyro-L-glutamyl-N ^--tertbutyloxycarbonyl- -L-lysyl-/S-alanin/-thio-2-(methoxycarbonylmethyl)-propanoyl7- -L-prolin erhalten, woraus durch Abspalten der von der tert-Butyloxycarbonylgruppe gebildeten Schutzgruppe nach der in Beispiel 145 beschriebenen Arbeitsweise die gewünschte Verbindung erhalten wurde.MgSO. freed from the solvent by means of a rotating evaporator and the hicbei obtained residue in a column filled with Sephadex LH-20 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length while eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture has been. Evaporation of the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure gave U ^{c <} - / j 3 - / N ° - - pyro-L-glutamyl-N - tert -butyloxycarbonyl-L-lysyl- / S-alanine / - thio-2- (methoxycarbonylmethyl) propanoyl-7-L-proline, from which the desired compound was obtained by cleaving the protecting group formed by the tert-butyloxycarbonyl group according to the procedure described in Example 145.

Beispiel 161: Herstellung von N^ - (/jS- (L-Lysyl-6-f luor-tryptophyl)-thiomethyiy-S-aminopentanoyl)-L-prolinExample 161: Preparation of N 1 - (/ jS- (L-lysyl-6-fluorourethypophyl) thiomethyl-S-aminopentanoyl) -L-proline

Eine Lösung von 15 mmol Bis-Boc-L-lysyl-6-fluor-tryptophan in DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 15 mmol 1 ,1'-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst 1 Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 15 mmol des gemäß Beispiel 96 hergestellten und mit einer Lösung von N-Xthyl-morpholin in DMF neutralisiertem N-(S-N-Boc-amino^-mercaptomethyl-pentanoyl)-L-prolins versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde eine v/eitere Stunde bei -10 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers von DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit einem im Volumsverhältnis von 7:2 aus Äthylacetat und 1 η-Zitronensäure bestehenden Gemisch versetzt, und die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1 η-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen über wasserfreiem MgSO. und darauffolgendem Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit v/urde. Der hiebei erhaltene Rückstand wurde durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 9 9 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n-Butanol, Essigsäure und 'Wasser bestehenden Lösungsmittelgemischcs gereinigt·. Durch Abspalten der i-n der so hergestellten Verbindung als Schutzgruppen enthaltenen Boc-Gruppen mitA solution of 15 mmol of bis-Boc-L-lysyl-6-fluoro-tryptophan in DMF was treated at -15 C with a solution of 15 mmol of 1, 1'-carbonyldiimidazole in DMF, whereupon the reaction mixture initially at -10 C. and then treated with 15 mmol of the N- (SN-Boc-amino-mercaptomethyl-pentanoyl) -L-proline prepared according to Example 96 and neutralized with a solution of N-x-thyl-morpholine in DMF. The reaction mixture was stirred at -10 ° C. for one hour and then slowly warmed to room temperature and then freed from DMF under reduced pressure at 40 ° C. by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained had a volume ratio of 7: 2 Ethyl acetate and 1 η-citric acid mixture, and the organic phase separated from the resulting mixture washed twice with 1 η-citric acid and twice with brine and dried over anhydrous MgSO4. and subsequent filtration using a rotary evaporator freed of solvent. The resulting residue was purified by partition chromatography in a Sephadex G-25 packed 1.2 cm diameter by 9 9 cm long column using a 4: 1: 5 by volume mixture of n-butanol, acetic acid and water ·. By cleaving the i-n of the compound thus prepared as protecting groups contained Boc groups with

228053 0228053 0

- 118 -- 118 -

Trifluoressigsäure in Anisol nach der in Beispiel 121 beschriebene Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Trifluoroacetic acid in anisole according to the procedure described in Example 121, the desired compound was obtained.

Beispiel 162: Herstellung von Ν«*--/^-/L-Arginyl-S-methoxytryptophyl7~thio)-2-(methyl-thiomethyl)-propanoyl7-L-prolin Eine Lösung von 10 mmol Tri-Adoc-L-arginyl-5-methoxy- -tryptophan in 0,5 ml DMF wurde bei -15 C mit einer Lösung von 10 mmol 1,1'-Carbonyldiimidazol in.DMF versetzt, worauf das Reaktionsgemisch zunächst eine Stunde bei -10 C gerührt und dann mit 10 mmol des gemäß Beispiel 103 hergestellten und mit einer Lösung von N-Äthyl-morpholin in DMF neutralisierten N-/3-Mercapto-2- -(methylthiomethylpropanoyl7~L-prolins versetzt wurde. Das nunmehr vorliegende Reaktionsgemisch wurde zunächst bei -10 C eine weitere Stunde gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend unter vermindertem Druck bei 40 C mittels eines rotierenden Verdampfers vom DMF befreit, worauf der erhaltene Rückstand mit 7 ml Äthylacetat und 2 ml 1n-Zitronensäure versetzt, die vom erhaltenen Gemisch abgetrennte organische Phase 2-mal mit 1n-Zitronensäure und 2-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem Trocknen mit wasserfreiem MgSO. und darauffolgendem Filtrieren unter Verwendung eines rotierenden Verdampfer vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Verteilungschromatographie in einer mit Sephadex G-25 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 9 9 cm Länge unter Verwendung eines im Volumsverhältnis von 4:1:5 aus n--Butanol, Essigsäure und Wasser bestehenden Lösungsmittelgemisches gereinigt wurde. Beim Abspalten der in der so hergestellten Verbindung als Schutzgruppe vorliegenden Tri-Adoc-Gruppe mit Trifluoressigsäure in Anisol nach der in Beispiel 121 beschriebenen Arbeitsweise wurde die gewünschte Verbindung erhalten.Example 162: Preparation of ΝΝ * - / --- / L-Arginyl-S-methoxytryptophyl-7-thio) -2- (methylthiomethyl) -propanoyl-7-L-proline A solution of 10 mmol of tri-Adoc-L-arginyl -5-methoxy-tryptophan in 0.5 ml of DMF was added at -15 C with a solution of 10 mmol of 1,1'-carbonyldiimidazole in.DMF, after which the reaction mixture was stirred first at -10 C for one hour and then with 10 mmol of the N-3-mercapto-2- (methylthiomethylpropanoyl) -L-proline prepared in accordance with Example 103 and neutralized with a solution of N-ethylmorpholine in DMF Stirred, then slowly warmed to room temperature and then freed from the DMF under reduced pressure at 40 C by means of a rotary evaporator, whereupon the residue obtained with 7 ml of ethyl acetate and 2 ml of 1N-citric acid, the organic phase separated from the resulting organic phase 2 times with 1n citric acid and 2 times with saturated Brine and after drying with anhydrous MgSO4. and subsequent filtration using a rotary evaporator freed from the solvent and the residue obtained by partition chromatography in a Sephadex G-25 column of 1.2 cm diameter and 9 9 cm length using a volume ratio of 4: 1: 5 n - Butanol, acetic acid and water existing solvent mixture was purified. Upon cleavage of the tri-adoc group present in the compound thus prepared as a protecting group with trifluoroacetic acid in anisole by the procedure described in Example 121, the desired compound was obtained.

Beispiel 163: Herstellung von N⁰^- -£{3-/ß -Pyro-L-glutamyl-L- -lysyl-3,5-dibrom-tyrosyl7-thio)-2-(methoxycarbonylmethyl)- -propanoylj/⁷-L-prolinExample 163: Preparation of N ⁰ - £ (3-β- pyro-L-glutamyl-L-lysyl-3,5-dibromo-tyrosyl-7-thio) -2- (methoxycarbonylmethyl) -propanoylj / ⁷ L-proline

Eine in einem Bad aus Eis, Trockeneis und Aceton auf -20 C gekühlte Lösung von 5 mmol N^ -Pyro-L-glutarnyl-N^ -tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-3,5-dibrom-tyrosin in redestilliertem Dimethylf.ormamid (DMF) wurde mit einer kalten. Lösung von 5 mmol 1,1'-A solution of 5 mmol of N-pyro-L-glutaryl-N'-tert-butyloxycarbonyl-L-lysyl-3,5-dibromo-tyrosine cooled in a bath of ice, dry ice and acetone to -20 C in redistilled dimethylf. Ormamide (DMF) was mixed with a cold. Solution of 5 mmol 1,1'-

-Carbonyldiimidazol in DMF versetzt, worauf die erhaltene Lösung zunächst 2 Stunden bei -10 C gerührt und dann mit einer mit N-Äthyl-morpholin neutralisierten kalten Lösung von 5 mmol des gemäß Beispiel -111 hergestellten N-/_3-Mercapto-2- (methoxycarbonylmethyl)-propanoyl7-L-prolins versetzt, das erhaltene Reaktions-Carbonyldiimidazole in DMF, after which the resulting solution was stirred for 2 hours at -10 ° C. and then treated with a N-ethylmorpholine-neutralized cold solution of 5 mmol of the N - / - 3-mercapto-2- prepared according to Example -111. methoxycarbonylmethyl) -propanoyl-7-L-proline, the reaction mixture obtained

gemisch eine weitere Stunde bei 110 C gerührt, dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und anschließend- bei 40 C unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit, der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat versetzt, das hiebei erhaltene Gemisch nach dem Kühlen in einem Eiswasserbad zunächst mit 1n-Zitronensäure und dann 3-mal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen und nach dem darauf folgenden Trocknen über wasserfreiem MgSO. mittels eines rotierenden Verdampfers vom Lösungsmittel befreit und der hiebei erhaltene Rückstand durch Chromatographieren an einer mit Sephadex LH-20 gefüllten Kolonne von 1,2 cm Durchmesser und 95 cm Länge und unter Eluieren der Kolonne mit einem im Volumsverhältnis von 3:7 aus Tetrahydrofuran und Isopropanol bestehenden Lösungsmittelgemisch gereinigt wurde. Durch Abtreiben des Lösungsmittels von den miteinander vereinigten Scheitelfraktionen unter vermindertem Druck wurde N -£~(3-/ß*^ -Pyro-L-glutamyl-N^-tertbutyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanyrZ-thio^-(methoxycarbonylmethyl)-propanoyl7~L-prolin erhalten, woraus durch Abspalten der als Schutzgruppe vorliegenden tert-Butyloxycarbonylgruppe die gewünschte Verbindung hergestellt wurde.stirred for a further hour at 110 C, then slowly warmed to room temperature and then freed at 40 C under reduced pressure from the solvent, the residue obtained with ethyl acetate, the resulting mixture after cooling in an ice-water bath with 1n-citric acid and then washed 3 times with brine and then dried over anhydrous MgSO 4. freed from the solvent by means of a rotary evaporator and the residue obtained by chromatography on a Sephadex LH-20 column 1.2 cm in diameter and 95 cm in length and eluting the column with a volume ratio of 3: 7 of tetrahydrofuran and isopropanol existing solvent mixture was purified. By driving off the solvent from the combined crumb fractions under reduced pressure, N - ε ~ (3- / β * ^ -pyro-L-glutamyl-N'-tertbutyloxycarbonyl-L-lysyl-phenylalanylZ-thio) - (methoxycarbonylmethyl) -propanoyl7 ~ L-proline, from which the desired compound was prepared by cleavage of the tert-butyloxycarbonyl protecting group.

Beispiel 164:Example 164:

Falls bei den Arbeitsweisen gemäß den Beispielen 116 bis 163 die gemäß diesen Beispielen 116 bis 163 eingesetzten Ausgangsstoffe durch geeignete und gegebenenfalls allenfalls erforderliche Schutzgruppen aufweisende Ausgangsstoffe aus den Beispielen 1 bis 115 ersetzt wurden, wurden die in der folgenden Tabelle XI angegebenen Thioesterverbindungen der Formel R-A-S-Z erhalten.If, in the procedures according to Examples 116 to 163, the starting materials used according to these Examples 116 to 163 were replaced by suitable and optionally required protective groups starting materials from Examples 1 to 115, the thioester compounds of the formula RASZ given in Table XI below were obtained ,

.-.- -:^:i;äii«Msäi&v Ά·;.. .-.- -: ^: i; äii «Msäi & v Ά ·; ..

228053 O -««228053 O - «« RR -1Z0--1Z0- AA Beispielexample 4949 -- Tabelletable HH XIXI PhePhe Beispielexample 5151 Formylformyl AIaAla Beispielexample 5454 L-ArginylL-arginyl HisHis Beispielexample 5555 Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl LeuLeu Beispielexample 5555 Propanoylpropanoyl PhePhe Beispielexample 55.55th Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl TyrTyr Beispielexample 5555 (2)(2) Formylformyl PhePhe Beispielexample 5555 (8)(8th) L-LysylL-lysyl GIyGly Beispielexample 5858 (15)(15) Butanoylbutanoyl TrpTrp Beispielexample 5858 (21)(21) Phenylacetylphenylacetyl PhePhe -Beispiel  -Example 5858 (29)(29) L-LysylL-lysyl PhePhe Beispielexample 6363 (1.)(1.) Acetylacetyl VaIVal Beispielexample 6464 (5)(5) Pyro-L-glutamyl-L-lysylPyro-L-glutamyl-L-lysyl HeHe Beispielexample 6464 (9)(9) Acetylacetyl HisHis Beispielexample 6464 t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl PhePhe Beispielexample 6969 (4)(4) Benzoylbenzoyl PhePhe Beispielexample 6969 (10)(10) Phenylpropanoylphenylpropanoyl GIyGly Beispielexample 6969 (14)(14) Cyclopentancarbonyl-L-lysylCyclopentanecarbonyl-L-lysyl VaIVal Beispielexample 6969 (D(D HH HisHis Beispielexample 6969 (6)(6) Benzoylbenzoyl TrpTrp Beispielexample 7272 (11)(11) HH TyrTyr Beispielexample 7373 (16)(16) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl LeuLeu Beispielexample 7373 (19)(19) L-LysylL-lysyl PhePhe Beispielexample 7373 Pyro-L-glutamyl-L-lysylPyro-L-glutamyl-L-lysyl GIyGly Beispielexample 7676 (3)(3) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl TrpTrp Beispielexample 7777 (7)(7) Benzoylbenzoyl AIaAla Beispielexample 7777 (11)(11) Benzoylbenzoyl PhePhe Beispielexample 7777 HH HeHe Beispielexample 8080 (2)(2) Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl HisHis Beispielexample 8181 (9)(9) Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl GIyGly Beispielexample 8181 (10)(10) Phenylacetylphenylacetyl AlaAla Beispielexample 8484 Benzoylbenzoyl VaIVal Beispielexample 8686 (1)(1) L-ArginylL-arginyl TrpTrp Beispielexample 9797 (7)(7) Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl PhePhe Beispielexample 9797 Formylformyl HisHis Beispielexample 9797 Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl TyrTyr (3)(3) (11)(11) (15)(15)

Tabelle XI FortsetzungTable XI continued

RR AA TrpTrp ZZ 97 (22)97 (22) Benzoylbenzoyl AlaAla HeHe Beispielexample 100100 Propanoylpropanoyl PhePhe HisHis Beispielexample 104104 L-LysylL-lysyl HeHe LeuLeu Beispielexample 107 (2)107 (2) Butanoylbutanoyl VaIVal AlaAla Beispielexample 107 (8)107 (8) HH GIyGly PhePhe Beispielexample 107 (14)107 (14) Cyclopentancarbonyl-L-lysyl PheCyclopentanecarbonyl-L-lysyl Phe 3-Hydroxyprolin3-hydroxyproline Beispielexample 107 (18)107 (18) Phenylpropanoylphenylpropanoyl Cycloleucincycloleucine Beispielexample 112112 L-LysylL-lysyl 3,4-Dehydroprolin3,4-dehydro Beispielexample 114114 Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl 1-Amino-1-cyclohexan-1-amino-1-cyclohexane- Beispielexample 115 (1)115 (1) Benzoylbenzoyl carbonsäurecarboxylic acid Beispielexample 115 (5)115 (5) HH 4-Fluorprolin4-fluoroproline Beispielexample 115 (11)115 (11) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl Prolinproline Beispielexample 5151 Propanoylpropanoyl 3,4-Dibromprolin3,4-Dibromprolin Beispielexample 55 (3)55 (3) Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl Cycloleucincycloleucine Beispielexample 58 (7)58 (7) HH cL-Methyl-prolin cL -methyl-proline Beispielexample 64 (2)64 (2) Benzoylbenzoyl Thiazolidin-4-carbon-Thiazolidine-4-carboxylic Beispielexample 64 (13)64 (13) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl Beispielexample 69 (4)'69 (4) ' L-LysylL-lysyl Beispielexample 69 (18)69 (18) Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl Beispielexample 73 (2)73 (2) Acetylacetyl Beispielexample 73 (6)73 (6) Benzoylbenzoyl Beispielexample 77 (8)77 (8) L-ArginylL-arginyl Beispielexample

Cyclopentancarbonyl- -L-lysyl Forrayl Benzoyl H 'Cyclopentanecarbonyl-L-lysyl forrayl benzoyl H '

Phenylacetyl t-Butyloxycarbonyl Pyro-L-glutamyl-L-lysyl BenzoylPhenylacetyl t-butyloxycarbonyl pyro-L-glutamyl-L-lysyl benzoyl

H BenzoylH benzoyl

säureacid

3,4-Dehydroprolin3,4-dehydro

Pyroglutaminsäurepyroglutamic

3-ChIor-4-jod-prolin3-chloro-4-iodo-proline

Ί-Amino-1-cyclobutancarbonsäure 4-Hydroxyprolin Prolin PyroglutaminsäureΊ-amino-1-cyclobutanecarboxylic acid 4-hydroxyproline proline pyroglutamic acid

1-Amino-1-cyclopropan- -carbonsäure1-amino-1-cyclopropane-carboxylic acid

oL-Ami no-bu 11 er s ä ur e Homoserin He is a homosexual

Beispiel 81 (6)Example 81 (6)

Beispiel 86 Beispiel 97 (6) Beispiel 97 (17)Example 86 Example 97 (6) Example 97 (17)

Beispiel 107 (3)Example 107 (3)

Beispiel 107 (17)Example 107 (17)

Beispiel 115 (3)Example 115 (3)

Beispiel 115 (10)Example 115 (10)

Beispiel 49 Beispiel 54Example 49 Example 54

228053 0228053 0

Tabelle XI FortsetzungTable XI continued

L-LysylL-lysyl Argininarginine Beispielexample 5555 (5)(5) HH o^ -Methyl-cysteino ^ methyl cysteine Beispielexample 5555 (15)(15) Formy1Formy1 Äthioninethionine Beispielexample 5555 (23)(23) Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl oC -Methyl-lysin oC-methyl -lysine Beispielexample 5858 (2)(2) Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl Asparaginasparagine Beispielexample 5858 (8)(8th) L-ArginylL-arginyl Λ -AcetylpenicillamΛ-Acetylpenicillam Beispielexample 6464 (3)(3) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl Homocysteinhomocysteine Beispielexample 6464 (15)(15) Butanoylbutanoyl Asparaginsäureaspartic acid Beispielexample 6969 (3)(3) Benzoylbenzoyl o4"Methy1-methionino4 "methy1-methionine Beispielexample 6969 (16)(16) Pyro-L-glutamyl-L-lysylPyro-L-glutamyl-L-lysyl Threoninthreonine Beispielexample 6969 (20)(20) Benzoylbenzoyl Argininarginine Beispielexample 7373 (2)(2) Formylformyl Ornithinornithine Beispielexample 7373 (10)(10) CyclopentyIcarbonyl-L- -lysylCyclopentylcarbonyl-L-lysyl Methioninmethionine Beispielexample 7777 (3).(3). HH Vinylglycinvinyl glycine Beispielexample 7777 (9)(9) Phenylpropanoylphenylpropanoyl LJ-Nitro-argininLJ-nitro-arginine Beispielexample 8181 (2)(2) Benzoylbenzoyl P -AlaninP-alanine Beispielexample 8484 t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl Isoserinisoserine Beispielexample 9797 (4)(4) HH o^ -Methyl-threonino-methylthreonine Beispielexample 9797 (13)(13) Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl Lysinlysine Beispielexample 9797 (21)(21) L-LysylL-lysyl Glutaminglutamine Beispielexample 100100 Benzoylbenzoyl <K -Amino-isobutter- säure <K -amino-isobutyric acid Beispielexample 107107 (7)(7) Acetylacetyl öl- -Methyl -leucin oil methyl-leucine Beispielexample 107107 (16)(16) Pyro-L-glutamylPyro-L-glutamyl d. -Methyl-valin d. Methyl-valine Beispielexample 114114 Phenylacetylphenylacetyl ^l -Methyl-glutamin 1- methyl-glutamine Beispielexample 1 151 15 (7)(7) t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl 3-Hydroxy-tyrosin3-hydroxy-tyrosine Beispielexample 4848

Am O §J$ «./ On the O §J $ «./

Tabelle XI FortsetzungTable XI continued

R L-LysylR L-lysyl

Formyl ButanoylFormyl butanoyl

Benzoyl Pyro-L-glutamylBenzoyl pyro-L-glutamyl

Cyclopentancarbonyl- -L-lysyl Phenylpropanoyl L-ArginylCyclopentanecarbonyl-L-lysyl phenylpropanoyl L-arginyl

Formyl Cyclopentancarbonyl Benzoyl t-ButyloxycarbonylFormyl cyclopentanecarbonyl benzoyl t-butyloxycarbonyl

Pyro-L-glutamyl-L- -lysylPyro-L-glutamyl-L-lysyl

Benzoyl·benzoyl · 4-Methoxy-phenylala4-methoxy-phenylala ninnin L-lysylL-lysyl o^-Methyl-histidino ^ methyl-histidine Acetyl·acetyl · 3-Chlor-5-brom-tyro3-chloro-5-bromo-tyro sinsin Cyclopentancarbonylcyclopentanecarbonyl 4-Jod-phenyl·alanin4-iodo-phenyl alanine · L-LysylL-lysyl 3-Methoxy-tyrosin3-methoxy-tyrosine Benzoyl·benzoyl · cX. -Methyl-tyrosincX. Methyl-tyrosine Propanoylpropanoyl O-Benzvl-serinO-Benzyl-serine

ß-Benzyl-asparagin- Beispiel 55 (6) säureβ-Benzyl-asparagine Example 55 (6) Acid

(X-Methyl-phenylalanin Beispiel 55 (14)(X-Methyl-phenylalanine Example 55 (14)

Thyronin Beispiel 55 (23)Thyronine Example 55 (23)

1-Methyl-tryptophan Beispiel 58 (3)1-methyl-tryptophan Example 58 (3)

3-Fluor-tyrosin Beispiel 58 (10) Phenylgl·ycin Beispiel· 633-fluoro-tyrosine Example 58 (10) phenylglicin Example 63

S-Benzyl-cystein Beispiel· 64 (1)S-benzyl cysteine Example · 64 (1)

Beispiel· 64 (12)Example · 64 (12)

Beispiel 69 (5)Example 69 (5)

Beispiel 69 (11)Example 69 (11)

Beispiel 69 (15)Example 69 (15)

Beispiel 73 (1)Example 73 (1)

Beispiel 73 (5)Example 73 (5)

Beispiel 73 (11) Beispiel 76Example 73 (11) Example 76

Beispiel 77 (6)Example 77 (6)

Beispiel· 81 (3)Example · 81 (3)

Beispiel· 81 (10)Example · 81 (10)

Beispiel. 81 (16)Example. 81 (16)

Beispiel· 96Example · 96

Beispiel· 97 (4)Example 97 (4)

Beispiel· 97 (11)Example · 97 (11)

Beispiel· 97 (16)Example · 97 (16)

-Benzyl-glutamatBenzyl-glutamate

4-Amino-phenylalanin4-amino-phenylalanine

o/ -Methyl-tryptophan β -Phenyl-serin O-Benzyl-tyrosin 3-Nitro-tyrosin 5-Fluor-tryptophan 3,5-Dichlor-tyrosino / -methyl-tryptophan β -phenyl-serine O-benzyl-tyrosine 3-nitro-tyrosine 5-fluoro-tryptophan 3,5-dichloro-tyrosine

O-Benzyl-threoninO-benzyl-threonine

228053 0228053 0

Cyclopentancarbonyl -L-lysylCyclopentanecarbonyl-L-lysyl

H BenzoylH benzoyl

t-Butyloxycarbonylt-butyloxycarbonyl

4-Nitro-phenylalanin Beispiel 1024-nitro-phenylalanine Example 102

ß-2-Thienyl-serinbeta-2-thienyl-serine

3-Methoxy-tryptophan3-methoxy-tryptophan

ß-2-Thienyl-alaninbeta-2-thienyl-alanine

Beispiel 107 (5) Beispiel 115 (6)Example 107 (5) Example 115 (6)

Beispiel 115 (13)Example 115 (13)

Beispiel 165: Die Inhibitionswirkung von N -£i-(L-oC- -Glutamylthio)-2-D-methyl-propanoylJ -L-prolin wurde in vitro in folgender Weise bestimmt.Example 165: The inhibitory effect of N - £ i - (L-oC - -glutamylthio) -2-D-methyl-propanoyl-J-L-proline was determined in vitro in the following manner.

— 9 Der I -Wert ergab sich zu 2,1.10 molar. ACE aus- 9 The I value was found to be 2.1.10 molar. ACE off

menschlichem Urin, wurde nach den Angaben von Ryan, J.W., et al, in Tissue and Cell 10, 555 (1978), hergestellt. Das Enzym wurde in 0,05-molarem Hepes-Puffer vom pH 8,0, welcher an NaCl 0,1-molar und an Na₉SO₄ 0,75-molar war, geprüft. Als Substrat wurde Hippuryl-His-Leu mit einer Endkonzentration vonhuman urine was prepared as described by Ryan, JW, et al in Tissue and Cell 10, 555 (1978). The enzyme was assayed in 0.05 M Hepes pH 8.0 buffer, 0.1 M in NaCl and 0.75 mol in Na ₉ SO ₄ . Hippuryl-His-Leu was used as substrate with a final concentration of

-4 -4-4 -4

1.10 -molar (Km = 2.10 -molar) zusammen mit etwa 130 000 cpm £ Hj-Hippuryl-His-Leu (25 C/mmol) verwendet. Das Enzym wurde im obigen Puffer solcherart verdünnt, daß 40 pi des gepufferten Enzyms in der Lage waren bei 37 C innerhalb 15 Minuten 13 % des Substrats zu hydrolysieren. Um den Versuch einzuleiten wurden 40 μΐ Enzym und 10 μΐ Wasser oder in Wasser gelöster Inhibitor 5 Minuten auf 37 C gehalten, worauf zwecks Einleitung der Reaktion 50 pl Substrat zugesetzt und die Lösung 15 Minuten auf 37 C gehalten wurde. Die Reaktion wurde durch Zusetzen von 1 ml 0,1-molarer HCl und anschließendes Zusetzen von 1 ml Äthylacetat zum Reaktionsgemisch beendet. Die Mischung wurde auf einem rotierenden Mischer geschüttelt und zuletzt zwecks Phasentrennung kurz zentrifugiert.1.10-molar (Km = 2.10-molar) along with about 130,000 cpm of £ Hj-Hippuryl-His-Leu (25 C / mmol). The enzyme was diluted in the above buffer such that 40 pi of the buffered enzyme was capable of hydrolyzing 13 % of the substrate at 37 ° C over 15 minutes. To initiate the experiment, 40 μΐ of enzyme and 10 μΐ of water or inhibitor dissolved in water were held at 37 ° C for 5 minutes, whereupon 50 μl of substrate was added to initiate the reaction and the solution was kept at 37 ° C for 15 minutes. The reaction was stopped by adding 1 ml of 0.1 M HCl and then adding 1 ml of ethyl acetate to the reaction mixture. The mixture was shaken on a rotary mixer and finally briefly centrifuged for the purpose of phase separation.

Ein aliquoter Anteil, u.zw. 500 ^uI, der Äthylacetatschicht wurde in ein 10 ml Riafluor (Handelsmarke New England Nuclear Corporation, Boston, Massachusetts) enthaltendes Szintillationszählrohr eingebracht. Zwecks Bestimmung der Ij- -Werte wurde die sich bei verschiedenen Inhibitorkonzentrationen ergebende Enzymaktivität mit der sich in Abwesenheit eines Inhibitors ergebenden Enzymaktivität verglichen. Beim Auswerten eines die Abhängigkeit der erzielten Inhibition in % von der Inhibitorkonzentration veranschaulichten DiaarammsAn aliquot, u.zw. 500 μl, the ethyl acetate layer was placed in a scintillation counter tube containing 10 ml of Riafluor (trademark New England Nuclear Corporation, Boston, Massachusetts). For the purpose of determining the Ij values, the enzyme activity resulting at different inhibitor concentrations was compared with the enzyme activity resulting in the absence of an inhibitor. In evaluating a diaogram represented by the dependence of inhibition achieved in % on the inhibitor concentration

wurde der I₁- -Wert erhalten.the I ₁ value was obtained.

Beispiel 166: Wirkung von Ν^Λ - (3- (L-c*. -Glutamylthio) -2-D-Methyl- -propanoyl)-L-prolin bei oraler VerabreichungExample 166: Effect of Ν ^Λ - (3- (Lc *. -Glutamylthio) -2-D-methyl-propanoyl) -L-proline on oral administration

Ein Körpergewicht von 190 bis 290 g besitzende Ratten wurden über Nacht nüchtern gehalten, dann durch xnterperitoneale Verabreichung von Pentobarbital in einer Menge von 50 bis 60 rag/kg anästhesiert. Nach der Tracheostomie wurden die Tiere mechanisch mit Luft versorgt.Eine Kanüle wurde in die Femorvene zwecks Injizierens von Angiotensin I und eine zweite Kanüle wurde zwecks direkter Messung des arteriellen Blutdrucks in eine gemeinsame Carotidarterie eingeführt. Um die Koagulation zu verhindern, wurdeüber die Femorvene 1000 Einheiten Heparin zugeführt. Der Blutdruck wurde mittels eines an einen Vielfachschreiber angeschlossenen Druckgeber gemessen. Den Ratten wurden 400 ng/ml Angiotensin I in 20 /al 0,9 gewichtsprozentiger Kochsalzlösung injiziert, wobei die verabreichte Menge an Angiotensin I ausreichend war den mittleren arteriellen BIi druck um 38 mmHg zu erhöhen. Sobald die jeweils betrachtete Ratte auf Angiotensin I angesprochen hatte, wurde die zu prüfende Verbindung in einer Menge von 10 /umol/kg in einer Mischung aus 0,15 ml Wasser und 10 /ul 1 n-NaHCO-,-Lösung gelöst über einen Magenschlauch verabreicht. In bestimmten Zeitabständen wurde die Wirkung von 400 ng/kg Angiotensin I auf den mittleren arteriellen Blutdruck bestimmt. Die erhaltenen Ergebnisse sind unten angegeben.A body weight of 190 to 290 g possessing rats were kept fasted overnight, then anaesthetized by xerperitoneal administration of pentobarbital in an amount of 50 to 60 rags / kg. After tracheostomy, the animals were mechanically air-fed. One cannula was inserted into the femoral vein to inject angiotensin I and a second cannula was inserted into a common carotid artery for direct measurement of arterial blood pressure. To prevent coagulation, 1000 units of heparin were delivered via the femoral vein. The blood pressure was measured by means of a pressure transducer connected to a multiple recorder. The rats were injected with 400 ng / ml of angiotensin I in 20 / al 0.9 percent by weight saline, the amount of angiotensin I administered being sufficient to increase the mean arterial pressure by 38 mmHg. Once the subject rat had responded to angiotensin I, the compound to be tested was dissolved at 10 / umol / kg in a mixture of 0.15 ml of water and 10 / μl of 1N NaHCO 3 solution via a gastric tube administered. At certain intervals, the effect of 400 ng / kg angiotensin I on mean arterial blood pressure was determined. The results obtained are given below.

228053 0228053 0

Zeit nach oraler Verabreichung .......Blutdruckänderimg auf 400 ngAg an ver-Time after oral administration ...... blood pressure change to 400 ngAg

in Minuten [ abreichter Menge an Angiotensin I in minutes [ administered amount of angiotensin I

(in (in % % des Verqleichsversuchs)of the comparative experiment)

-5 1OO (38 mmHg)-5 1OO (38 mmHg)

+9 66+9 66

18 3918 39

26 3926 39

"33 26"33 26

39 1839 18

45 18 -.45 18 -.

53 1353 13

64 -.- 1364 -.- 13

) 77 26) 77 26

89 2689 26

2424

· 26· 26

Beispiel 167: Wirksamkeit bei intravenöser Verabreichung von N⁰⁶- (3- (L-06-Glutamylthio) -2-D-methylpropanoylJ-L-prolin.Example 167: Efficacy of Intravenous Administration of N ⁰⁶ - (3- (L-O-glutamylthio) -2-D-methylpropanoyl J-L-proline.

Die intravenöse Wirksamkeit dieser Verbindung wurde grundsätzlich nach den Angaben in Beispiel 166 bestimmt, wobei jedoch diese Verbindung in einer Menge von 1 pmol/kg intravenös verabreicht wurdeThe intravenous efficacy of this compound was determined in principle as described in Example 166 except that this compound was administered intravenously in an amount of 1 pmol / kg

Zeit (IV) nach Verabreichung Blutdruckänderung auf 400 ng/kg an ver- Time (IV) after administration changes blood pressure to 400 ng / kg at

(in Minuten) abreichter Menge an Angiotensin I (in minutes) amount of angiotensin I

(in % des Verqleichsversuchs) (as % of the experiment)

-5 100 (38 mmHg)-5 100 (38 mmHg)

+0,5+0.5

33

77

1111

2222

2828

3737

4747

56 '56 '

8282

9292

^^^.^iikrhiäaii^ -^^^. ^ iikrhiäaii ^ -

Die Erfindung wurde lediglich im Zusammenhang mit speziellen Ausführungsformen erläutert, jedoch sind selbstverständlich Abänderungen durchaus möglich-The invention has been explained only in connection with specific embodiments, but of course modifications are quite possible-

Claims (4)

1, Verfahren zum Herstellen eines Inhibitors für das Angiotensin umwandelnde Enzym der allgemeinen Formel1, A method for preparing an angiotensin converting enzyme inhibitor of the general formula R-A-S-Z (I),R-A-S-Z (I), in welcherin which R Wasserstoff* Formyl-, Acetyl-, Propanoyl-, Butanoyl-, Phenylacetyl-, Phenylpropanoyl-, Benzoyl-, Cyclopentancarbonyl, tert«-Butyloxycarbonyl-, Cyclopentancarbonyl-L-lysyl, Pyro-L-glutamyl-L-lysyl-, L-Arginyl-, L-Lysyl- oder Pyro-L-glutamyl-,
darstellt,R is hydrogen * formyl, acetyl, propanoyl, butanoyl, phenylacetyl, phenylpropanoyl, benzoyl, cyclopentanecarbonyl, tert -butyloxycarbonyl, cyclopentanecarbonyl-L-lysyl, pyro-L-glutamyl-L-lysyl, L -Arginyl, L-lysyl or pyro-L-glutamyl,
represents, A Prolin, 3,4-Dehydroprolin, et- -Methyl-prolin, Thiazolidin-4~carbonsäure, Cycloleucin, Pyroglutaminsäure, l-Amino-l-cyclopropancarbonsäure, 1-Amino-l-cyclobutancarbonsäure, l-Amino-l-cyclohexancarbonsäure, ein durch Halogen oder die Hydroxygruppe substituiertes Prolin, Phenylglycin, ß~Benzylasparaginsäure_r ^--Benzylglutaminsäure, S-Benzylcystein, O-Benzylserin, O-Benzyl« tyrosin, O-Benzylthreonin, ß~Phenylserin, Thyronin, ß-2-Thienylserin, ß-2-Thienylalanin, ©C-Methylhistidin, e<-Methyltyrosin, oi -Methylphenylalanin, ^--Methyltryptophan, durch Halogen, die Nitrogruppe, Methoxygruppe oder die Hydroxygruppe substituiertes Tyrosin, durch Halogen, die Nitrogruppe, Aminogruppe oder Methoxygruppe substituiertes Phenylalanin, durch Fluor, Methyl oder Methoxy substituiertes Tryptophan, Methionin, Cystein, Arginin, Nitro-arginin-lysin, Ornithin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, Homocystein, Penicillamin, Norleucin, Serin, ß-Alanin, Äthionin,A proline, 3,4-dehydroproline, et- methylproline, thiazolidine-4-carboxylic acid, cycloleucine, pyroglutamic acid, 1-amino-1-cyclopropanecarboxylic acid, 1-amino-1-cyclobutanecarboxylic acid, 1-amino-1-cyclohexanecarboxylic acid, a halogenated or hydroxy-substituted proline, phenylglycine, β-benzylaspartic acid, _r ^ -benzylglutamic acid, S-benzylcysteine, O-benzylserine, O-benzyl-tyrosine, O-benzylthreonine, β-phenylserine, thyronine, β-2-thienylserine, β-2-thienylalanine, © C-methylhistidine, e <-methyltyrosine, oi-methylphenylalanine, ^ - methyltryptophan, tyrosine substituted by halogen, nitro group, methoxy group or hydroxy group, phenylalanine substituted by halogen, nitro group, amino group or methoxy group, fluoro, methyl or methoxy-substituted tryptophan, methionine, cysteine, arginine, nitro-arginine-lysine, ornithine, aspartic acid, asparagine, glutamic acid, glutamine, homocysteine, penicillamine, norleucine, serine, β-alanine, ethionine, 2 ₍ η2 ₍ η (IV),(IV), (CH₀) - CH - C - N - CH - COOR₉,(CH ₀ ) - CH - C - N - CH - COOR ₉ , ^R10 " ⁽ί^Η)ρ ^R8 ^R9 ^R 10 " ⁽ ί ^Η) ρ ^R 8 ^R 9 P
X - R_n (V),P
X - R _n (V), (VII),(VII) (VIII),(VIII) o R₂oo R ₂ o H IHI -CH₉ -CH-C-N-C- COOH (IX)₁ -CH ₉ -CH-CNC-COOH (IX) ₁ I Il Rl8 ^R21 ^R19I Il Rl8 ^R 21 ^R 19 IlIl (CHO _r - CH - C - R₂₆ (X), ^oder (CHO _r - CH - C - R ₂₆ (X), ^or I
R22I
R22 O /]O /] -CH₉ - CH - S - N - CH - COOR₉^ (XI),-CH ₉ -CH-S-N-CH-COOR ₉ (XI), I // / \ R₁₀ O CH₂-(CH₂)_z I // / \ R ₁₀ O CH ₂ - (CH ₂ ) _z steht und in den obigen Formeln II bis XIand in the above formulas II to XI R, Wasserstoff oder ein Halogen bedeutet,R is hydrogen or a halogen, R.' Wasserstoff oder ein Halogen darstelltR. ' Represents hydrogen or a halogen R₂ Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl ist,R _{2 is} hydrogen, lower alkyl or trifluoromethyl, 228 05 3 0228 05 3 0 R₃ Wasserstoff, Niederalkyl oder Trifluormethyl mit der Maßgabe bedeutet, daß nicht mehr als einer der Reste R₉ und R für Trifluormethyl steht und zumindest einer der Reste R₁, R ', R„ oder R für ein Halogen oder die Trifluormethylgruppe steht soweit diese Symbole diese Bedeutung haben.R _{3 is} hydrogen, lower alkyl or trifluoromethyl with the proviso means that not more than one of R ₉ and R is trifluoromethyl and at least one of R ₁ , R ', R "or R is a halogen or the trifluoromethyl group as far as these Symbols have this meaning. R. Wasserstoff, Niederalkyl oder Phenyl-niederalkylen bedeutet, R. is hydrogen, lower alkyl or phenyl-lower alkylene, R₁. Wasserstoff, Niederalkyl oder Phenyl-niederalkylen darstellt, R ₁ . Represents hydrogen, lower alkyl or phenyl lower alkylene, R_fi Wasserstoff oder Hydroxy oder, falls η gleich ist.2, auch ein Halogen bedeutet,R _{fi is} hydrogen or hydroxy or, if η is 2, also a halogen, R₇ Wasserstoff, niederes Alkanoyl oder Amino(imino)-methyl darstellt,R _{7 represents} hydrogen, lower alkanoyl or amino (imino) methyl, R„ Wasserstoff, niederes Alkyl oder niederes Hydroxyalkylen bedeutet,R "is hydrogen, lower alkyl or lower hydroxyalkylene, Rg Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl, Phenyl-niederalkyl, Hydroxy-niederalkylen, Hydroxyphenyl-niederalkylen, Amino-niederalkylen, Guanidino-niederalkylen, Mercapto-niederalkylen, Nieder- -alkyl-thio-niederalkylen, Imidazolyl-niederalkylen, Indolyl- -niederalkylen, Carbaitioyl -niederalkylen oder Carboxy-niederalkylen Rg is hydrogen, lower alkyl, phenyl, phenyl-lower alkyl, hydroxy-lower alkylene, hydroxyphenyl-lower alkylene, amino-lower alkylene, guanidino-lower alkylene, mercapto-lower alkylene, lower-alkyl-thio-lower alkylene, imidazolyl-lower alkylene, indolyl-lower alkylene, Carbaitioyl-lower alkyl or carboxy-lower alkylene oder R₀ und R_n gemeinsam ein zusammen mit dem diese Reste ο yor R ₀ and R _n together form together with these radicals ο y tragenden Stickstoffatom und Kohlenstoffatom einen 5- oder 6-Ringatome aufweisenden Ring vervollständigendes Brückenglied der Formel (CH₂) bilden und falls ν gleich ist 4, ein Kohlenstoffatom gegebenenfalls eine Hydroxygruppe trägt, und falls ν gleich ist 3, ein Kohlenstoffatom gegebenenfalls eine Hydroxygruppe oder ein Halogenatom trägt,supporting nitrogen atom and carbon atom form a 5- or 6-ring ring -comprising bridging member of the formula (CH ₂ ) and if ν is equal to 4, a carbon optionally carries a hydroxy group, and if ν is equal to 3, a carbon atom optionally a hydroxy group or a Carries halogen atom, für Wasserstoff oder niederes Alkyl steht,is hydrogen or lower alkyl, bedeutet, R₁ means R ₁ tuiertes Carbamoyl oder Cyano darstellt,represents substituted carbamoyl or cyano, R len steht,R len stands, R Wasserstoff, niederes Alkyl oder niederes AlkanoylR is hydrogen, lower alkyl or lower alkanoyl Carboxy, (niederes)-Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-substi-R für Wasserstoff, niederes Alkyl oder Phenyl-niederalky-Carboxy, (lower) alkoxycarbonyl, carbamoyl, N-substi-R for hydrogen, lower alkyl or phenyl-lower alkyl R₁ Viasserstoff, Niederalkyl, Phenyl-niederalkylen, Hydroxyniederalkylen, Amino-niederalkylen, Guanidino-niederalkylen, Imid. z.olyl-niederalkylen, IndoIyI-niederalkylen, Mercapto-niederalkyle: Niederalkylthio-niederalkylen, Carbamoyl-niederalkylen oder Carboxy-niederalkylen darstellt,R ₁ Vihydrogen, lower alkyl, phenyl-lower alkylene, Hydroxyniederalkylen, amino-lower alkylene, guanidino-lower alkylene, imide. zolyl lower alkylene, lower alkylalkylene, mercapto lower alkyls: lower alkylthio lower alkylene, carbamoyl lower alkylene or carboxy lower alkylene, - Ί33"- Ί33 " R_1r Wasserstoff, niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl-niederalkylen bedeutet,R _{1r is} hydrogen, lower alkyl, phenyl or phenyl lower alkylene, R_1fi Wasserstoff, Niederalkyl, Phenyl oder Phenyl-niederaWcylen darstellt,R _{1fi is} hydrogen, _{lower alkyl} , phenyl or phenyl-lower-alkylene, R₁₇ für Wasserstoff, Hydroxy oder Niederalkyl oder falls s gleich ist 2 auch für Halogen steht,R _{17 represents} hydrogen, hydroxy or lower alkyl or if s is the same 2 also represents halogen, R₁₈ Wasserstoff oder Niederalkyl bedeutet,R _{18 is} hydrogen or lower alkyl, R₁Q Niederalkyl ist,R _{1 is} lower alkyl, R₂ Niederalkyl ist,R _{2 is} lower alkyl, R^₁ Wasserstoff oder Niederalkyl bedeutetR ^ _{1 is} hydrogen or lower alkyl oder R₁₍, und R„_n zusammen mit dem diese Reste tragenden Kohlenstoffatom ein einen 5-gliedrigen Ring vervollständigendes Brückenglied der Formel (CH„) bilden,or R _{1 (} , and R " _n together with the carbon atom carrying these radicals form a bridge member of the formula (CH") which completes a 5-membered ring, oder R_1q und R₁ zusammen mit dem diese Reste tragenden Stickstoffatom bzw. Kohlenstoffatom ein einen 5-gliedrigen Ring ergänzendes Brückenglied der Formel (CH„) bilden, R-- Wasserstoff oder Niederalkyl bedeutet,or R _1q and R _1, together with the nitrogen atom or carbon atom bearing these radicals, form a bridge member of the formula (CH 2) which adds a 5-membered ring, R-- denotes hydrogen or lower-alkyl, R₉-. Wasserstoff oder Niederalkyl ist, • R^, für Hydroxy, Amino oder Niederalkoxy steht,R ₉ -. Is hydrogen or lower alkyl, R 1 is hydroxy, amino or lower alkoxy, R,,,- Wasserstoff oder, wenn m=1 , p=0, R₄=H und R =Niederalkanoyl gilt, R₁. Wasserstoff oder Niederalkyl darstellt,R ,,, - hydrogen or, if m = 1, p = 0, R ₄ = H and R = lower alkanoyl, R ₁ . Represents hydrogen or lower alkyl, R₂₆ für ν (CH₂)_u R ₂₆ for ν (CH ₂ ) _u COORCOOR 2323 N- ^LC00RN- ^L C00R oderor COORCOOR stehtstands X 0 oder S bedeutet,X is 0 or S, ra, t und u unabhängig voneinander für Null oder 1 stehen, η und s unabhängig voneinander 1, 2 oder 3 bedeuten,ra, t and u independently of one another are zero or 1, η and s are each independently 1, 2 or 3, 228 05 3 0 ₄.₈.₁₉₈₁ 228 05 3 0 ₄ . ₈ . ₁₉₈₁ AP C 07 C/228 053/0 ~ 43*1·- 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 ~ 43 * 1 · - 58 911/11 ρ gleich ist O, 1, 2, 3 oder 4,ρ is equal to O, 1, 2, 3 or 4, q und r unabhängig voneinander O, 1 oder 2 darstellen, q and r independently of one another represent O, 1 or 2, ν gleich ist 3 oder 4, w gleich ist 4, χ gleich ist 3 und ζ gleich ist 2 oder 3,ν equals 3 or 4, w equals 4, χ equals 3 and ζ equals 2 or 3, wobei, falls A für Phenylalanyl, Glycyl, Alanyl, Tryptophyl, Tyrosyl, Isoleucyl, Leucyl, Histidyl oder Valyl steht, r nicht Null ist, wenn Rp₄ für Hydroxy steht, s gleich ist 2, R._ Wasserstoff oder Hydroxy bedeutet und R^₆ Methyl darstellt und wobei r nicht gleich ist 1, wenn R₂₄ für Hydroxy steht,, s gleich ist 2, R₁₅ Wasserstoff darstellt, R₁₇ Wasserstoff oder Hydroxy bedeutet und R^₆ für Wasserstoff oder Methyl steht und wobei t nicht gleich ist Null, wenn R₂₃ Wasserstoff bedeutet, u gleich ist Null und R₂₂ für Methyl steht und wobei t nicht gleich ist 1, wenn R₂₃ Wasserstoff bedeutet, u gleich ist Null und R₂₂ für Wasserstoff oder Methyl steht und wobei in Formel IV zumindest einer oer Indices m und ρ eine andere Bedeutung als die Bedeutung Null besitzt, gekennzeichnet dadurch, daß eine gegebenenfalls an nicht umzusetzenden funktionellen Gruppen geschützte Verbindung der allgemeinen Formelwhen A is phenylalanyl, glycyl, alanyl, tryptophyl, tyrosyl, isoleucyl, leucyl, histidyl or valyl, r is not zero, when Rp _{4 is} hydroxy, s is 2, R._ is hydrogen or hydroxy and R is ^ _{6 is} methyl and where r is not 1, when R _{24 is} hydroxy, s is 2, R _{15 is} hydrogen, R _{17 is} hydrogen or hydroxy, and R _{6 is} hydrogen or methyl and t is not the same is zero when R _{23 is} hydrogen, u is zero, and R _{22 is} methyl and t is not equal to 1 when R _{23 is} hydrogen, u is zero and R _{22 is} hydrogen or methyl, and wherein in formula IV at least one oer indices m and ρ a meaning other than the meaning zero has, characterized in that an optionally not be converted to functional groups protected compound of general formula R-AH (II)«R-AH (II) « worin R und A die in Punkt 1 angegebene Bedeutung besitzen, mit einer gegebenenfalls an nicht umzusetzenden funktioneilen Gruppen geschützten Verbindung der allgemeinen Formelwherein R and A have the meaning given in point 1, with a compound optionally protected to unreacted functional groups of the general formula «Ti
U"Ti
U 4.8,19814.8,1981 AP C 07 C/228 053/0AP C 07 C / 228 053/0 HS-ZHS-Z (III)(III) worin Z die in Punkt 1 angegebene Bedeutung besitzt _a vorzugsweise in Anwesenheit eines Kondensationsmittels» umgesetzt wird, worauf allenfalls vorhandene Schutz« gruppen gegebenenfalls abgespolten werden.wherein Z has the meaning given in point 1 _a preferably in the presence of a condensing agent »is reacted, whereupon any protection groups are optionally abgespolten. Verfahren nach Punkt 1* gekennzeichnet dadurch, daß durch Wahl entsprechender Ausgangsstoffe und Ver« führonsschrifte Verbindungen der allgemeinen Formel (I) hergestellt werden, worin Z einer der Formeln (IV)₁, (V) oder (VI) entspricht, wobei Rg und R gemeinsam zusammen mit dem diese Reste tragenden Stickstoffatom und Kohlenstoffaton) eine einen fünf Ringatome aufweisenden Ring vervollständigende -CH^C-HpCH-Brücko bilden und ein Kohlenstoff atom gegebenenfalls eine Hydroxygruppen oder ein Halogen trägt»Process according to item 1 *, characterized in that compounds of the general formula (I) are prepared by selecting appropriate starting materials and compounds, wherein Z corresponds to one of the formulas (IV) ₁ , (V) or (VI), where Rg and R together with the nitrogen atom and Kohlenstoffaton carrying these radicals) form a ring having a five ring atoms and form a -CH ^ C-HpCH-Brücko and a carbon atom optionally carries a hydroxyl group or a halogen » ^- 2 ö ö 5 3 O 4.8.1981^ - 2 ö ö 5 3 O 4.8.1981 AP C 07 C/228 053/0 58 911/11AP C 07 C / 228 053/0 58 911/11 Homoserin, Isoserin, Norvalin, Threonin, o£~Aminobuttersäure« oC-Amino-iso-buttersäure, ß-Cyclohexanylalanin, O-Phocphothreonin, S-Athyl-cystein, Vinylglycin, das «^-Methyl-derivat von Valin, Leucin, Isoleucin, Cystein, Methionin, Threonin, Asparaginsäure, Glutaminsäure, Asparagin, Glutamin, Lysin oder Arginin, oder Phenylalanyl, Glycyl, Alanyl, Tryptophyl, Tyrosyl, Isoleucyl, Leucyl, Histidyl oder Valyl darstellt und die «j4~Aminogruppe oder Iminogruppe dieser Reste oder die ß-Aminogruppe des ß-AlaninsHomoserine, isoserine, norvaline, threonine, o-aminobutyric acid, oC-amino-isobutyric acid, beta-cyclohexanylalanine, o-phocphothreonine, s-ethyl-cysteine, vinylglycine, the methyl-derivative of valine, leucine, isoleucine , Cysteine, methionine, threonine, aspartic acid, glutamic acid, asparagine, glutamine, lysine or arginine, or phenylalanyl, glycyl, alanyl, tryptophyl, tyrosyl, isoleucyl, leucyl, histidyl or valyl; and the amino group or imino group of these radicals or the β-amino group of β-alanine ' ' '-V-r-r-'' '-V-r-r- 05 3 005 3 0 - ΛΙΟ -- ΛΙΟ - relativ zu R in Amid- oder Imidbindung vorliegt und die Carboxygruppe dieser Reste mit dem S-Atom in Thioesterbindung vorliegt, S ein mit den Resten A und Z in Thioesterbindung verknüpftes Schwefelatom bedeutet und
Z für einen der Resteis present in the amide or imide bond relative to R and the carboxy group of these radicals is in thioester bond with the S atom, S is a sulfur atom linked to the radicals A and Z in thioester bond and
Z for one of the radicals 23 (H),23 (H), (CH)_m - CH - C - NH - N - CH - COOR₂₃ (CH) _m - CH - C - NH - N - CH - COOR ₂₃ :h_o-(ch) (hi).: h _o - (ch) (hi). 3« Verfahren nach Punkt l_t gekennzeichnet dadurch^ daß durch Wahl entsprechender Ausgangsatoffe und Verfahronsschritte Verbindungen der allgemeinen Formel (I) hergestellt iverden.* worin Z der Formel (IX) entspricht, wobei R^o und Rp,, gemeinsam zusammen mit dem diese Reste tragenden Stickstoffatom und Kohlenstoffatom eine einen fünf Ringatome aufweisenden Ring vervollständigende -CI-^CHpCHp-Brücke bilden«3 "process according to point l _t, characterized in that compounds of the general formula (I) are prepared by selecting appropriate starting materials and process steps. * Wherein Z is of the formula (IX), where R ^ o and Rp ,, together with the latter Residual nitrogen atom and carbon atom form a -CI- CHpCHp bridge that completes a ring containing five ring atoms « 4« Verfahren) nach Punkt l_t gekennzeichnet dadurch, dcß durch Wahl ent sprechender Ausgangsstoffg und Verfahrens-Gchrilto Verbindungen der allgemeinen Formel (I) hergestellt werden^ worin 7 einen Rest einer der Aminosäuren P ro'iin, Hyd roxyp rolin _t 3 ^--Dghycroprolin - 5-0xc~p rolin odsr einen Rest einer nahe verwandten Holekülstruktur »vie der Thiazolidin^4~carbonGöure enthalte4 "method) according to point l _t, characterized in that compounds of the general formula (I) are prepared by choice of ent speaking Ausgangsstoffg and process Gchrilto ^ wherein 7 is a radical of one of the amino acids P ro'iin, Hyd roxyp rolin _t 3 ^ - -Dghycroproline - 5-oxycarbonyl, or a residue of a closely related structural group, as well as the thiazolidine ^ 4 ~ carbonic acid