CZ36551U1 - Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction - Google Patents

Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction Download PDF

Info

Publication number
CZ36551U1
CZ36551U1 CZ2022-40301U CZ202240301U CZ36551U1 CZ 36551 U1 CZ36551 U1 CZ 36551U1 CZ 202240301 U CZ202240301 U CZ 202240301U CZ 36551 U1 CZ36551 U1 CZ 36551U1
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
seq
allele
alleles
additional
fluorescently labeled
Prior art date
Application number
CZ2022-40301U
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Jana Čmejlová
Jana RNDr. Čmejlová
Boris Krška
Boris prof. Dr. Ing. Krška
Pavol Suran
Pavol Ing. Suran
Original Assignee
VÝZKUMNÝ A ŠLECHTITELSKÝ ÚSTAV OVOCNÁŘSKÝ HOLOVOUSY s.r.o.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by VÝZKUMNÝ A ŠLECHTITELSKÝ ÚSTAV OVOCNÁŘSKÝ HOLOVOUSY s.r.o. filed Critical VÝZKUMNÝ A ŠLECHTITELSKÝ ÚSTAV OVOCNÁŘSKÝ HOLOVOUSY s.r.o.
Priority to CZ2022-40301U priority Critical patent/CZ36551U1/en
Publication of CZ36551U1 publication Critical patent/CZ36551U1/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6858—Allele-specific amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Sada primerů pro stanovení S-alel u višně obecné (Prunus cerasus L.) v jediné reakciA set of primers for determination of S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction

Oblast technikyField of technology

Řešení se týká sady primerů navržených pro detekci jednotlivých S-alel zodpovědných za samosprašnost/cizosprašnost u višně obecné (Prunus cerasus L.), kdy je tato detekce prováděna fragmentační analýzou v jediné reakci.The solution concerns a set of primers designed for the detection of individual S-alleles responsible for self-pollination/cross-pollination in sour cherry (Prunus cerasus L.), when this detection is performed by fragmentation analysis in a single reaction.

Dosavadní stav technikyCurrent state of the art

Višeň obecná patří mezi nejvýznamnější ovocné plodiny v našem klimatickém pásu. Plody tohoto ovocného stromu mají široké využití převážně v potravinářském průmyslu, kde jsou zpracovávány na džemy, marmelády, kompoty a různé likéry, případně jsou přímo používány plody, např. jsou sušeny či nakládány do lihovin. Z plodů višně může být připravováno i přírodní barvivo. Vzhledem k oblibě višní dosahuje jejich sklizeň v České republice průměrně 5 000 tun ročně (Sklizen ovoce 2021 vcetne 3 a 5letych srovnani.pdf (eagri.cz)), což je řadí na čtvrté místo mezi ovocem sklízeným v sadech po jablkách, hruškách a švestkách + slívách.Sour cherry is one of the most important fruit crops in our climate zone. The fruits of this fruit tree are widely used mainly in the food industry, where they are processed into jams, marmalades, compotes and various liqueurs, or the fruits are used directly, e.g. they are dried or added to spirits. A natural dye can also be prepared from sour cherry fruits. Due to the popularity of sour cherries, their harvest in the Czech Republic reaches an average of 5,000 tons per year (Fruit harvest 2021 including 3 and 5-year comparisons.pdf (eagri.cz)), which ranks them in fourth place among fruit harvested in orchards after apples, pears and plums + plums.

Višeň obecná vznikla přirozenou hybridizací dvou blízce příbuzných druhů, třešně ptačí (Prunus avium L.) a třešně křovité (Prunus fruticosa Pall.). Její genom je tetraploidní, tj. obsahuje 4 sady chromozómů (Oldén EJ, 1968). Z hlediska opylení a následného oplození existují cizosprašné i samosprašné odrůdy višně. Cizosprašnost je systém vyvinutý rostlinami za účelem zabránění samoopylení, aby byla zajištěna co nejvyšší výměna genů v rámci populace (De Nettancourt D, 1997). Cizosprašnost však má dalekosáhlé negativní důsledky pro komerční pěstování višní. Pro úspěšné pěstování určité odrůdy jsou vždy uváděny experimentálně zjištěné vhodné opylovací odrůdy, které je nezbytné do komerčních sadů vysadit, aby bylo dosaženo maximální možné produkce plodů. Obvyklé zastoupení stromů opylovací odrůdy je 10 %, nebo je realizována výsadba sadu s kombinacemi odrůd v jednotlivých řadách, tedy v poměru 1:1. I v případě výsadby vhodné opylovací odrůdy však může sklizeň ohrozit mimo jiné odlišnost doby kvetení, délky kvetení nebo intenzity kvetení, které jsou ovlivněny mnoha faktory, ať již biotickými, nebo abiotickými. Výsadba dvou odrůd višní v komerčním sadu může být komplikací i pro sklizeň, kdy obě odrůdy zpravidla dozrávají v odlišnou dobu, nebo se plody liší významně charakteristikami plodu a produkci není možné smíchat. Opylovací odrůda navíc nemusí mít plody tržní kvality, což by v důsledku snižovalo možný hektarový výnos. Proto je jedním z trendů moderního šlechtitelství produkce samosprašných odrůd, které značně zjednodušují management višňových sadů. Již v současné době jsou v sadech téměř výhradně pěstovány samosprašné odrůdy, při šlechtění nových odrůd jsou obvykle cizosprašní hybridi eliminováni coby neperspektivní. Identifikovat vhodné opylovací odrůdy, popřípadě prokázat samosprašnost klasickými opylovacími metodami je však pracné a velmi časově náročné (obvykle je třeba víceleté ověřování), z tohoto důvodu byly pro usnadnění nalezení vhodné opylovací odrůdy, případně pro prokázání samosprašnosti, zavedeny laboratorní metody schopné identifikovat samosprašnost během velmi krátké doby (i během jednoho dne).Common cherry was created by natural hybridization of two closely related species, bird cherry (Prunus avium L.) and bush cherry (Prunus fruticosa Pall.). Its genome is tetraploid, i.e. it contains 4 sets of chromosomes (Oldén EJ, 1968). In terms of pollination and subsequent fertilization, there are cross-pollinated and self-pollinated cherry varieties. Cross-pollination is a system developed by plants to prevent self-pollination to ensure the highest possible exchange of genes within a population (De Nettancourt D, 1997). However, cross-pollination has far-reaching negative consequences for the commercial cultivation of sour cherries. For the successful cultivation of a certain variety, experimentally determined suitable pollinating varieties are always indicated, which are necessary to plant in commercial orchards in order to achieve the maximum possible fruit production. The usual representation of trees of the pollinating variety is 10%, or an orchard is planted with combinations of varieties in individual rows, i.e. in a 1:1 ratio. However, even in the case of planting a suitable pollinating variety, the harvest can be jeopardized by, among other things, differences in flowering time, length of flowering or intensity of flowering, which are influenced by many factors, whether biotic or abiotic. Planting two cherry varieties in a commercial orchard can be a complication even for harvesting, when both varieties usually ripen at different times, or the fruits differ significantly in terms of fruit characteristics and it is not possible to mix the production. In addition, the pollinated variety may not have marketable quality fruits, which would consequently reduce the possible yield per hectare. Therefore, one of the trends in modern breeding is the production of self-fertilizing varieties, which greatly simplify the management of cherry orchards. Even now, self-pollinated varieties are almost exclusively grown in orchards, when breeding new varieties, cross-pollinated hybrids are usually eliminated as unpromising. However, identifying suitable pollinating varieties, or proving self-pollination using classic pollination methods is laborious and very time-consuming (multi-year verification is usually required), for this reason, laboratory methods capable of identifying self-pollination within a very short periods of time (even within one day).

U višně, stejně jako u třešně ptačí (Prunus avium L.), je cizosprašnost primárně dána multialelickým S-lokem (konkrétní alely se označují jako S-alely a odlišují se čísly, popřípadě dalšími znaky). Tento lokus nese v rámci nerekombinujícího haplobloku dva geny kódující proteiny zodpovědné za cizosprašnost, tj. gen pro S-RNázu zodpovědný za samičí (pestíkovou) část cizosprašnosti a gen pro S-haplotypově specifický F-box (SFB) zajišťující samčí (pylovou) část cizosprašnosti (Ushijima K, 2003, Yamane H, 2003a). K úspěšnému opylení a oplození dojde, pokud jsou obě S-alely v genomu diploidního pylového zrna odlišné od všech čtyř S-alel pestíku, popřípadě mohou být jedna nebo obě S-alely pylového zrna nefunkční, tj. samosprašné, pak jejich odlišnost od S-alel pestíku není nezbytná a oplození proběhne. U višní bylo zatím identifikováno 12 funkčních, tj. cizosprašných S-haplotypů (S1, S4, S6, S9, S12, S13, S14, S16 a S34 pocházejícíIn sour cherry, as well as in bird cherry (Prunus avium L.), cross-pollination is primarily determined by the multiallelic S-locus (specific alleles are referred to as S-alleles and are distinguished by numbers or other characters). This locus carries within the non-recombining haploblock two genes encoding proteins responsible for pollination, i.e. the gene for S-RNase responsible for the female (pistil) part of pollination and the gene for the S-haplotype-specific F-box (SFB) ensuring the male (pollen) part of pollination (Ushijima K, 2003, Yamane H, 2003a). Successful pollination and fertilization will occur if both S-alleles in the genome of the diploid pollen grain are different from all four S-alleles of the pistil, or one or both S-alleles of the pollen grain may be non-functional, i.e. self-pollinating, then their difference from S- the pistil allele is not necessary and fertilization will occur. So far, 12 functional, i.e. cross-pollinated S-haplotypes (S1, S4, S6, S9, S12, S13, S14, S16 and S34 coming from

- 1 CZ 36551 U1 z třešně ptačí; S26, S33 a S35 z třešně křovité) a 9 nefunkčních S-haplotypů (S1', S6m, S6m2, S13', S13m, S36a, S36b, S36b2 a S36b3, žádný z nich nebyl pozorován u třešně ptačí) (Lisek A, 2017). Samosprašné S-alely pocházející z třešně ptačí nebyly dosud u višní identifikovány.- 1 CZ 36551 U1 from bird cherry; S26, S33 and S35 from bush cherry) and 9 non-functional S-haplotypes (S1', S6m, S6m2, S13', S13m, S36a, S36b, S36b2 and S36b3, none of them were observed in bird cherry) (Lisek A, 2017 ). Self-pollinated S-alleles originating from bird cherry have not yet been identified in sour cherries.

Co se týče u višní pozorovaných samosprašných S-alel a jejich odlišností od jejich rodičovských funkčních protějšků, alela S1' se liší od S1 inzercí 615 nukleotidů v kódující oblasti SFB genu. Tato inzerce vytváří předčasný stop kodon a zachovává pouze 75 z 375 původních aminokyselin SFB proteinu (Hauck NR, 2006). S6m vykazuje přibližně 2 700 bp dlouhou inzerci nacházející se přibližně 800 bp před S-RNázou, kdy tato inzerce inhibuje transkripci S-RNázy (Yamane H, 2003b). S6m2 obsahuje 1 bp deleci v S-RNáze vedoucí k posunu čtecího rámce, takže je vznikající S-RNáza zkrácena a obsahuje pouze 64 z 223 původních aminokyselin (Tsukamoto T, 2006). S13m alela se vyznačuje delecí dlouhou 23 bp, která způsobuje posun čtecího rámce a zkrácení S-RNázy, kdy mutovaná verze obsahuj e jen 130 z 225 původních aminokyselin (T sukamoto T, 2006). V alele S13' způsobuje jednonukleotidová substituce v SFB genu předčasný stopkodon, zachováno je 245 z 376 aminokyselinových zbytků (Tsukamoto T, 2006). Alely S36 se mezi sebou liší bodovými mutacemi jak v S-RNáze, tak v SFB genu. Jelikož jsou všechny čtyři alely S36 samosprašné a funkční alela S36 dosud nebyla identifikována, předpokládá se, že za inaktivitu známých alel S36a, S36b, S36b2 a S36b3 jsou zodpovědné záměny aminokyselin v konzervovaných místech obou příslušných proteinů (Tsukamoto T, 2010). Ať již je dopad těchto mutací na proteinové úrovni jakýkoliv, projevují se všechny tyto mutace schopností samoopylení.Regarding the self-pollinated S-alleles observed in sour cherries and their differences from their parental functional counterparts, the S1' allele differs from S1 by the insertion of 615 nucleotides in the coding region of the SFB gene. This insertion creates a premature stop codon and preserves only 75 of the original 375 amino acids of the SFB protein (Hauck NR, 2006). S6m exhibits an approximately 2700 bp insertion located approximately 800 bp upstream of S-RNase, which inhibits S-RNase transcription (Yamane H, 2003b). S6m2 contains a 1 bp deletion in the S-RNase resulting in a frameshift so that the nascent S-RNase is truncated and contains only 64 of the original 223 amino acids (Tsukamoto T, 2006). The S13m allele is characterized by a 23-bp deletion that causes frameshift and truncation of S-RNase, with the mutated version containing only 130 of the original 225 amino acids (T sukamoto T, 2006). In the S13' allele, a single nucleotide substitution in the SFB gene causes a premature stop codon, 245 of 376 amino acid residues are preserved (Tsukamoto T, 2006). The S36 alleles differ from each other by point mutations in both the S-RNase and the SFB gene. As all four S36 alleles are self-pollinating and a functional S36 allele has not yet been identified, it is assumed that the inactivity of the known S36a, S36b, S36b2 and S36b3 alleles is due to amino acid substitutions in conserved sites of both respective proteins (Tsukamoto T, 2010). Whatever the impact of these mutations at the protein level, all of these mutations show self-pollination abilities.

Pro úspěšné opylení je znalost S-alel jednotlivých odrůd zcela zásadní, a to jak pro pěstitele, tak pro šlechtitele višní, neboť řada kulturních odrůd nese (částečně) stejné S-alely a nejsou tak schopné se navzájem opylit, nebo jen v omezené míře. S-alely byly nejprve zkoumány u třešní a získané znalosti byly posléze aplikovány na višně. S-alely třešní byly prvotně identifikovány biochemickými metodami (Boškovic R, 1996). V novém tisíciletí se postupně začaly jednotlivé S-alely identifikovat molekulárně genetickými metodami, a to buď polymerázovou řetězovou reakcí (PCR) s univerzálními primery s rozlišením jednotlivých S-alel na základě délkového polymorfizmu intronů v genu pro S-RNázu (Sonneveld T, 2003; Sonneveld T, 2006), případně v 5' UTR genu pro SFB (Vaughan SP, 2006), nebo PCR s S-alelicky specifickými primery (např. Sonneveld T, 2001; Sonneveld T, 2003; Szikriszt B, 2013). Nejmodernější způsob umožňující identifikaci třešňových S-alel včetně samosprašných v jediné reakci, který využívá fragmentační analýzu s rozpoznáním fragmentů na kapilárním genetickém analyzátoru, byl nárokován v PUV 2020-34519, který vlastní přihlašovatel této přihlášky. Sadu primerů z PUV 2020-34519 lze kombinovat v jediné reakci i s primery nárokovanými v PUV 2021-34908 přihlašovatele této přihlášky, aby byla sada pro identifikaci třešňových S-alel kompletní. Co se týče višňových S-alel nevyskytujících se u třešně ptačí, běžně jsou pro detekci používány primery specifické pro jednotlivé S-alely (Hauck NR, 2006; Tsukamoto T, 2008a; Tsukamoto T, 2008b; Tsukamoto T, 2010). Po PCR amplifikaci jsou produkty analyzovány elektroforézou na agarózovém gelu, popřípadě jsou před tím ještě štěpeny restrikční endonukleázou. Identifikace S-alel u višní tak vyžaduje hned několik jednotlivých PCR reakcí a následných analýz (Lisek A, 2017), což je velmi nepraktické, komplikované a finančně i časově náročné, zejména při neznalosti původu odrůdy a možného složení S-alel.For successful pollination, knowledge of the S-alleles of individual varieties is absolutely essential, both for growers and breeders of sour cherries, as many cultivated varieties carry (partially) the same S-alleles and are thus unable to pollinate each other, or only to a limited extent. S-alleles were first investigated in cherries and the knowledge gained was then applied to sour cherries. S-alleles of cherries were initially identified by biochemical methods (Boškovic R, 1996). In the new millennium, individual S-alleles gradually began to be identified by molecular genetic methods, either by polymerase chain reaction (PCR) with universal primers with the distinction of individual S-alleles based on the length polymorphism of introns in the S-RNase gene (Sonneveld T, 2003; Sonneveld T, 2006), possibly in the 5' UTR of the SFB gene (Vaughan SP, 2006), or PCR with S-allele-specific primers (e.g. Sonneveld T, 2001; Sonneveld T, 2003; Szikriszt B, 2013). A state-of-the-art method enabling the identification of cherry S-alleles including self-pollination in a single reaction, which uses fragmentation analysis with fragment recognition on a capillary genetic analyzer, was claimed in PUV 2020-34519 owned by the applicant of this application. The set of primers from PUV 2020-34519 can also be combined in a single reaction with the primers claimed in PUV 2021-34908 of the applicant of this application to make the set for the identification of cherry S-alleles complete. Regarding sour cherry S-alleles not found in bird cherry, primers specific for individual S-alleles are commonly used for detection (Hauck NR, 2006; Tsukamoto T, 2008a; Tsukamoto T, 2008b; Tsukamoto T, 2010). After PCR amplification, the products are analyzed by electrophoresis on an agarose gel, or they are cleaved with a restriction endonuclease before that. The identification of S-alleles in sour cherries thus requires several individual PCR reactions and subsequent analyzes (Lisek A, 2017), which is very impractical, complicated and financially and time-consuming, especially when the origin of the variety and the possible composition of S-alleles are unknown.

Z tohoto důvodu existuje potřeba vyvinout nový detekční systém pro stanovení S-alel u višní, který by řešil potřebu jednoduché detekce známých S-alel, ideálně v jediné reakci.For this reason, there is a need to develop a new detection system for the determination of S-alleles in sour cherries, which would address the need for simple detection of known S-alleles, ideally in a single reaction.

Podstata technického řešeníThe essence of the technical solution

Výše uvedené nedostatky současného stavu techniky odstraňuje sada primerů pro stanovení známých S-alel u višně obecné (Prunus cerasus L.) v jediné reakci s detekcí příslušných PCR produktů fragmentační analýzou s využitím kapilárního genetického analyzátoru. Tato sada kombinuje: 1) redukovanou sadu primerů nárokovanou v PUV 2020-34519 doplněnou primery nárokovanými v PUV 2021-34908 pro detekci S-alel pocházejících z třešně ptačí, a to i těch, kteréThe aforementioned shortcomings of the current state of the art are eliminated by a set of primers for the determination of known S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction with the detection of the relevant PCR products by fragmentation analysis using a capillary genetic analyzer. This set combines: 1) the reduced set of primers claimed in PUV 2020-34519 supplemented with the primers claimed in PUV 2021-34908 for the detection of bird cherry-derived S-alleles, including those that

- 2 CZ 36551 U1 nebyly dosud v literatuře u višní popsány (některé primery byly patřičně upraveny pro rozpoznávání i višňových alel, jiné byly pro nadbytečnost ze sady pro analýzu višní vynechány); 2) sadu primerů vyvinutou pro identifikaci S-alel S1', S6m, S6m2, S13', S13m, S26, S33, S35, S36a, S36b, S36b2 a S36b3, které se u třešně ptačí nevyskytují. Tato sada umožňuje identifikaci všech známých S-alel u višní, kdy jsou tyto alely identifikovány přítomností jednoho nebo více fragmentů pro danou alelu. Celá sada pro detekci S-alel u višní obsahuje primery, jejichž sekvence jsou:- 2 CZ 36551 U1 have not yet been described in the literature for sour cherries (some primers were modified accordingly to recognize sour cherry alleles, others were omitted from the set for sour cherry analysis due to redundancy); 2) a set of primers developed to identify S-alleles S1', S6m, S6m2, S13', S13m, S26, S33, S35, S36a, S36b, S36b2 and S36b3, which do not occur in bird cherry. This set allows the identification of all known S-alleles in sour cherry, when these alleles are identified by the presence of one or more fragments for a given allele. The entire set for the detection of S-alleles in sour cherries contains primers whose sequences are:

CTTGTTCTTGSTTTYGYTTTCTTC CTTGTTCTTGSTTTYGYTTTCTTC (SEQ ID NO. 1) (SEQ ID NO. 1) CCATTGTTGCACAAATTGAAA CCATTGTTGCACAAATTGAAA (SEQ ID NO. 2) (SEQ ID NO. 2) GTATCRTTGCCACYTTCCACG GTATCRTTGCCACYTTCCACG (SEQ ID NO. 3) (SEQ ID NO. 3) TGAACGAAATCTCAACTCATAAATC TGAACGAAATCTCAACTCATAAATC (SEQ ID NO. 4) (SEQ ID NO. 4) TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAATT TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAATT (SEQ ID NO. 5) (SEQ ID NO. 5) GCTAACCCTTACATTTTGACCC GCTAACCCTTACATTTGACCC (SEQ ID NO. 6) (SEQ ID NO. 6) CCACAATTTGAACGTCAGAAC CCACAATTTGAACGTCAGAAC (SEQ ID NO. 7) (SEQ ID NO. 7) TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC (SEQ ID NO. 8) (SEQ ID NO. 8) TCTAGCTTTTATTCTTGCGAGG TCTAGCTTTATTCTTGCGAGG (SEQ ID NO. 9) (SEQ ID NO. 9) GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA (SEQ ID NO. 10) (SEQ ID NO. 10) GCTTGGACAAAATTGACTTGTG GCTTGGACAAAATTGACTTGTG (SEQ ID NO. 11) (SEQ ID NO. 11) GATCACAATCACCCAAAGGAGG GATCACAATCACCCAAAGGAGG (SEQ ID NO. 12) (SEQ ID NO. 12) CTCTCTTTGGTCTTCTTCTTGTGC CTCTCTTTGGTCTTCTTCTTGTGC (SEQ ID NO. 13) (SEQ ID NO. 13) GCTTGCTGATTGTAAATAAACTGC GCTTGCTGATTGTAAATAAACTGC (SEQ ID NO. 14) (SEQ ID NO. 14) GACTACCTACAAAGTCCCTCG GACTACCTACAAAGTCCCTCG (SEQ ID NO. 15) (SEQ ID NO. 15) GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC (SEQ ID NO. 16) (SEQ ID NO. 16) CGGTGCGGTGTAGTGTAAAAC CGGTGCGGTGTAGTGTAAAAC (SEQ ID NO. 17) (SEQ ID NO. 17) ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC (SEQ ID NO. 18) (SEQ ID NO. 18) CGGTTCAACCCGATTTATGGC CGGTTCAACCCGATTTATGGC (SEQ ID NO. 19) (SEQ ID NO. 19) CATTGACTTGGCAGTTTGACG CATTGACTTGGCAGTTTGACG (SEQ ID NO. 20) (SEQ ID NO. 20) TTAATGGTTGGGTGTATAATTGCTGTT TTAATGGTTGGGTGTATAATTGCTGTT (SEQ ID NO. 21) (SEQ ID NO. 21) CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC (SEQ ID NO. 22) (SEQ ID NO. 22) ATACTTCGAGCGATCCCACGA ATACTTCGAGCGATCCCACGA (SEQ ID NO. 23) (SEQ ID NO. 23) GACCGTGTAAGCCATTTTGAGAG GACCGTGTAAGCCATTTTGAGAG (SEQ ID NO. 24) (SEQ ID NO. 24) GATGCGTACCAACAAAAATACCTTA GATGCGTACCAAAAAAATACCTTA (SEQ ID NO. 25) (SEQ ID NO. 25) GGCATCTGGTGCTATGAACTAT GGCATCTGGTGCTATGAACTAT (SEQ ID NO. 26) (SEQ ID NO. 26) TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT (SEQ ID NO. 27) (SEQ ID NO. 27) CAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAG CAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAG (SEQ ID NO. 28) (SEQ ID NO. 28) CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC (SEQ ID NO. 29) (SEQ ID NO. 29) TAAGGTGGACACATGACCATATTTAAG TAAGGTGGCACACATGACCATATTTAAG (SEQ ID NO. 30) (SEQ ID NO. 30) GAATCCATCGATCAGGAAATTTATAA GAATCCATCGATCAGGAAATTTATAA (SEQ ID NO. 31) (SEQ ID NO. 31) GTCCGTTCCAAGACTAAAAAAC GTCCGTTCCAAGACTAAAAAAC (SEQ ID NO. 32) (SEQ ID NO. 32) AGTACATTTTCTAACGGAGTAGCAT AGTACATTTTCTAACGGAGTAGCAT (SEQ ID NO. 33) (SEQ ID NO. 33) CCTCACAACCATAGAATCTAAAAGG CCTCACAACCATAGAATCTAAAAGG (SEQ ID NO. 34) (SEQ ID NO. 34) GGACTTGATCTAACGCACCACA GGACTTGATCTAACGCACCCA (SEQ ID NO. 35) (SEQ ID NO. 35) GATAAATCCTGATGTTGCTTTATCCCA GATAAATCCTGATGTTGCTTTATCCCA (SEQ ID NO. 36) (SEQ ID NO. 36) CCTAGGCTCGCCTCTCAC CCTAGGCTCGCTCTCAC (SEQ ID NO. 37); (SEQ ID NO. 37);

přičemž:whereas:

pro identifikaci alely S1 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 a SEQ ID NO. 16, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 15 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S1 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 and SEQ ID NO. 16, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 15 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

- 3 CZ 36551 U1 pro identifikaci alely SK obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 a SEQ ID NO. 17, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 15 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;- 3 CZ 36551 U1 for identification of the SK allele contains a set of primers SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 and SEQ ID NO. 17, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 15 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 4, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S2 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 4, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S3 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 7 a SEQ ID NO. 8, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 8 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S3 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 7 and SEQ ID NO. 8, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 8 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S3' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S3' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S4 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 a SEQ ID NO. 10, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 9 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S4 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 and SEQ ID NO. 10, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 9 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S4' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 a SEQ ID NO. 10, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 9 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S4' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 and SEQ ID NO. 10, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 9 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S5 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 11 a SEQ ID NO. 12, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 12 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S5 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 11 and SEQ ID NO. 12, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 12 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S5' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S5' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S6 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 20 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S6 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 20 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S6m obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 19 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S6m allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 19 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S6m2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 18, SEQ ID NO. 20 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S6m2 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 18, SEQ ID NO. 20 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S7 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S7 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S9 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S9 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

- 4 CZ 36551 U1 pro identifikaci alely S10 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;- 4 CZ 36551 U1 for identification of the S10 allele contains a set of primers SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S12 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 6, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S12 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 6, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S13 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 23 a SEQ ID NO. 24, z nichž SEQ ID NO. 24 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S13 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 23 and SEQ ID NO. 24, of which SEQ ID NO. 24 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S13' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 23, SEQ ID NO. 24, SEQ ID NO. 25 a SEQ ID NO. 26, z nichž SEQ ID NO. 24 a SEQ ID NO. 25 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S13' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 23, SEQ ID NO. 24, SEQ ID NO. 25 and SEQ ID NO. 26, of which SEQ ID NO. 24 and SEQ ID NO. 25 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S13m obsahuje sada primery SEQ ID NO. 22 a SEQ ID NO. 24, z nichž SEQ ID NO. 24 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S13m allele, the primer set contains SEQ ID NO. 22 and SEQ ID NO. 24, of which SEQ ID NO. 24 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S14 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S14 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S16 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S16 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S22 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S22 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S23 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S23 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S24 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S24 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S25 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S25 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S26 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 27, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S26 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 27, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S33 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 28, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S33 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 28, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S34 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S34 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

- 5 CZ 36551 U1 pro identifikaci alely S35 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 29, z nichž SEQ ID NO. 3 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;- 5 CZ 36551 U1 for identification of the S35 allele contains a set of primers SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 29, of which SEQ ID NO. 3 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S36a obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 31 a SEQ ID NO. 32, z nichž SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 31 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S36a allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 31 and SEQ ID NO. 32, of which SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 31 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S36b obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33 a SEQ ID NO. 34, z nichž SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 33 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S36b allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33 and SEQ ID NO. 34, of which SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 33 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S36b2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34 a SEQ ID NO. 35, z nichž SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 33 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S36b2 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34 and SEQ ID NO. 35, of which SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 33 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S36b3 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34, SEQ ID NO. 36 a SEQ ID NO. 37, z nichž SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 33 a SEQ ID NO. 36 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších Salel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S36b3 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34, SEQ ID NO. 36 and SEQ ID NO. 37, of which SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 33 and SEQ ID NO. 36 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional Salels during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely S38 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S38 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis;

pro identifikaci alely STěchl obsahuje sada primery SEQ ID NO. 13 a SEQ ID NO. 14, z nichž SEQ ID NO. 13 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy.for identification of the STěchl allele, the primer set contains SEQ ID NO. 13 and SEQ ID NO. 14, of which SEQ ID NO. 13 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis.

Návrh sady primerů podle technického řešení pro stanovení S-alel u višně obecné byl proveden v několika krocích: 1) porovnání sekvencí genů pro jednotlivé S-RNázy, respektive SFB geny u známých S-alel; 2) vytipování oblastí dostatečně konzervovaných, popřípadě dostatečně heterogenních pro návrh univerzálních, resp. alelicky specifických primerů; 3) lokalizace mutací vyskytujících se u samosprašných S-alel; 4) návrh primerů pro detekci jednotlivých S-alel, přičemž byla brána do úvahy potřeba univerzálnosti, respektive specifity jednotlivých primerů dle požadavků navrhovaného systému. Současně byla provedena analýza využitelnosti dříve nárokovaného systému pro analýzu S-alel u třešně ptačí (PUV 2020-34519 a PUV 2021-34908) a nezbytnosti použití všech primerů této sady, kdy některé z primerů mohly být vynechány z důvodu použití nově navržených primerů detekujících specificky i příslušné samosprašné S-alely višní. Při návrhu musela být zohledněna i délka vznikajících amplikonů a jejich fluorescenční značení, aby byla umožněna současná detekce všech rozpoznávaných S-alel v jedné reakci; 5) optimalizace PCR podmínek. Univerzální podmínky, které by měly být splněny při navrhování primerů pro multiplexní amplifikaci DNA, jsou následující: 1) vysoká specifita primerů eliminující necílené amplifikace; 2) obdobná teplota tání všech primerů; 3) eliminace tvorby dimerů mezi jednotlivými primery. Při navrhování byly brány do úvahy všechny dostupné sekvence S-alel uvedené v databázi GenBank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/), případně získané v laboratoři přihlašovatele užitného vzoru. Nárokovaná sada primerů byla navržena tak, aby bylo možné u višní jednoznačně stanovit cizosprašné S-alely S1, S2, S3, S4, S5, S6, S7, S9, S10, S12, S13, S14, S16, S22, S23, S24, S25, S34, S38 a STěchl a popřípadě i samosprašné alely S3', S4' a S5', všechny pocházející z třešně ptačí, a zároveň cizosprašné S-alely S26, S33 a S35 a samosprašné alely S1', S6m, S6m2, S13', S13m, S36a, S36b, S36b2 a S36b3 nevyskytující se u třešně ptačí. Tento výčet S-alel zahrnuje nejen všechny S-alely identifikované doposud u višní, ale také další, původně třešňové S-alely zatím u višní nepozorované. Primery pro amplifikaci těchto S-alel nebylyThe design of a set of primers according to the technical solution for determining S-alleles in sour cherry was carried out in several steps: 1) comparison of gene sequences for individual S-RNases, respectively SFB genes for known S-alleles; 2) selection of sufficiently conserved areas, or sufficiently heterogeneous for the design of universal, or allelic specific primers; 3) localization of mutations occurring in self-pollinated S-alleles; 4) the design of primers for the detection of individual S-alleles, taking into account the need for universality and the specificity of individual primers according to the requirements of the proposed system. At the same time, an analysis was made of the usability of the previously claimed system for S-allele analysis in bird cherry (PUV 2020-34519 and PUV 2021-34908) and the necessity of using all primers of this set, when some of the primers could be omitted due to the use of newly designed primers detecting specifically and the corresponding self-pollinated S-alleles of sour cherry. During the design, the length of the emerging amplicons and their fluorescent labeling had to be taken into account, in order to enable the simultaneous detection of all recognized S-alleles in one reaction; 5) optimization of PCR conditions. Universal conditions that should be met when designing primers for multiplex DNA amplification are the following: 1) high specificity of primers eliminating off-target amplifications; 2) similar melting temperature of all primers; 3) elimination of the formation of dimers between individual primers. All available S-allele sequences listed in the GenBank database (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/), possibly obtained in the utility model applicant's laboratory, were taken into account when designing. The claimed set of primers was designed in such a way that it was possible to unambiguously determine the foreign S-alleles S1, S2, S3, S4, S5, S6, S7, S9, S10, S12, S13, S14, S16, S22, S23, S24, S25, S34, S38 and STěchl and possibly also self-pollinated alleles S3', S4' and S5', all originating from bird cherry, and at the same time cross-pollinated S-alleles S26, S33 and S35 and self-pollinated alleles S1', S6m, S6m2, S13' , S13m, S36a, S36b, S36b2 and S36b3 not occurring in bird cherry. This list of S-alleles includes not only all S-alleles identified so far in sour cherries, but also other, originally cherry S-alleles not yet observed in sour cherries. There were no primers for the amplification of these S-alleles

- 6 CZ 36551 U1 z původní sady pro amplifikaci S-alel u třešní vynechány, a to z toho důvodu, že byly zatím publikovány S-alely pouze u cca 80 odrůd višní (Lisek A, 2017). V genofondových sbírkách přihlašovatele však byly u některých odrůd višně identifikovány původně třešňové S-alely, které nebyly doposud u višní popsány, proto se jeví ponechání primerů pro detekci všech původně třešňových S-alel v sadě pro detekci S-alel u višní jako odůvodněné. Možná je i existence dalších S-alel, které nebyly dosud popsány, tyto doposud neznámé S-alely by mohly být zachyceny pomocí univerzálních primerů v reakci (např. SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2).- 6 CZ 36551 U1 from the original set for the amplification of S-alleles in cherries omitted, for the reason that S-alleles have been published so far in only about 80 cherry varieties (Lisek A, 2017). However, in the gene pool collections of the applicant, originally cherry S-alleles were identified in some varieties of sour cherry, which have not been described in sour cherries so far, therefore the retention of primers for the detection of all originally cherry S-alleles in the set for the detection of S-alleles in sour cherries appears to be justified. It is also possible that there are other S-alleles that have not yet been described, these hitherto unknown S-alleles could be detected using universal primers in the reaction (eg SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2).

Prvním krokem pro stanovení S-alel u višně obecné je izolace genomové DNA, následuje PCR s využitím navržené sady primerů pro specifickou amplifikaci výše uvedených S-alel a stanovení délky amplikonů pomocí fragmentační analýzy za využití kapilární elektroforézy. Finálním krokem je vyhodnocení přítomnosti jednotlivých S-alel. Příklady provedení technického řešení jsou zde uvedeny pouze pro ilustraci a žádným způsobem neomezují rozsah této přihlášky, který je vymezen připojeným nárokem a podrobně popsán v popisu technického řešení. Odborník v oboru bude schopen učinit různé modifikace použitého způsobu PCR, uvedených primerů a fluorescenčního označení primerů tak, aby nedošlo ke snížení specifity PCR detekce jednotlivých S-alel. Odborník v oboru bude schopen též snížit počet současně detekovaných S-alel v jedné reakci, např. z důvodu uzpůsobení nárokované sady primerů pro detekci pouze určitých S-alel v potomstvu určitého křížení, a to dle typu rodičovských S-alel. Popřípadě může odborník v oboru použít místo degenerovaných primerů jednotlivé primery se sekvencemi odpovídajícími příslušnému degenerovanému primeru, avšak s odpovídajícími alternativními nukleotidy v místě degenerace.The first step for determination of S-alleles in sour cherry is the isolation of genomic DNA, followed by PCR using a designed set of primers for specific amplification of the above-mentioned S-alleles and determination of amplicon length by means of fragmentation analysis using capillary electrophoresis. The final step is the evaluation of the presence of individual S-alleles. Examples of implementation of the technical solution are given here only for illustration and do not in any way limit the scope of this application, which is defined by the attached claim and described in detail in the description of the technical solution. An expert in the field will be able to make various modifications to the PCR method used, the mentioned primers and the fluorescent labeling of the primers so as not to reduce the specificity of the PCR detection of individual S-alleles. An expert in the field will also be able to reduce the number of simultaneously detected S-alleles in one reaction, e.g. due to adapting the claimed set of primers to detect only certain S-alleles in the offspring of a certain cross, according to the type of parental S-alleles. Optionally, one skilled in the art can use individual primers with sequences corresponding to the respective degenerate primer, but with corresponding alternative nucleotides at the site of degeneracy, instead of degenerate primers.

Objasnění výkresůClarification of drawings

Obr. 1-1 až 1-24: Výseky sekvencí, popřípadě porovnání výseků příbuzných sekvencí jednotlivých S-alel (S-RNázy, v případě jeho amplifikace i SFB) obsahující místa nasedání nárokovaných primerů. Vyznačené sekvence (tučně, podtrženě) reprezentují místa nasedání primerů s uvedením jejich SEQ ID NO., reverzní primery jsou znázorněny v reverzně komplementární orientaci. Případné mutace v místě nasedání primerů jsou buď provedeny záměrně, nebo nejsou překážkou pro úspěšnou amplifikaci příslušné alely. V případě převzatých sekvencí je kromě jejich SEQ ID NO. uvedeno i jejich identifikační číslo v databázi GenBank, zbylé úseky byly sekvenovány v laboratoři přihlašovatele.Giant. 1-1 to 1-24: Sections of sequences, or comparison of sections of related sequences of individual S-alleles (S-RNase, in the case of its amplification also SFB) containing the annealing sites of the claimed primers. Marked sequences (bold, underlined) represent primer insertion sites with their SEQ ID NO., reverse primers are shown in reverse complementary orientation. Any mutations in the primer insertion site are either done intentionally or are not an obstacle for the successful amplification of the relevant allele. In the case of adopted sequences, in addition to their SEQ ID NO. their identification number in the GenBank database is also indicated, the remaining sections were sequenced in the applicant's laboratory.

Příklady uskutečnění technického řešeníExamples of implementing a technical solution

Příklad 1: Návrh sekvencíprimerůExample 1: Design of sequencing primers

Pro detekci S-alel višně obecné v jediné reakci byly pomocí programu Geneious Prime® navrženy primery pro PCR amplifikaci tak, aby celý systém fungoval ve své komplexnosti a amplifikované fragmenty měly správnou délku umožňující jejich jednoznačnou identifikaci pomocí fragmentační analýzy na kapilárním genetickém analyzátoru. Genové sekvence jednotlivých S-alel (S-RNázy i SFB) byly získány z veřejně dostupné databáze The National Center for Biotechnology Information, databáze GenBank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide), případné nezbytné chybějící úseky genů pro S-RNázu a SFB byly sekvenovány na pracovišti přihlašovatele (tam, kde to bylo možné díky výskytu příslušné S-alely v genofondových sbírkách třešní, respektive višní přihlašovatele). Referenční čísla jednotlivých sekvencí pro S-RNázu a SFB jsou uvedena v tabulce 1, včetně původu uvedené sekvence.For the detection of S-alleles of sour cherry in a single reaction, primers for PCR amplification were designed using the Geneious Prime® program so that the entire system worked in its complexity and the amplified fragments had the correct length enabling their unambiguous identification using fragmentation analysis on a capillary genetic analyzer. Gene sequences of individual S-alleles (S-RNase and SFB) were obtained from the publicly available database The National Center for Biotechnology Information, the GenBank database (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide), any necessary missing sections genes for S-RNase and SFB were sequenced at the applicant's workplace (where this was possible due to the occurrence of the relevant S-allele in the applicant's cherry and sour cherry gene pool collections). The individual sequence references for S-RNase and SFB are listed in Table 1, including the origin of the sequence.

Tabulka 1 - Referenční sekvence (kódy dle přístupového čísla v databázi GenBank) jednotlivých alel S-RNázy pro promotorovou oblast, oblast prvního až druhého exonu; pro oblast druhého až třetího exonu; respektive SFB genu. Jsou uvedeny všechny S-alely s publikovanou sekvencí v této oblasti, přestože některé z nich neobsahují místo nasedání některého primeru. V případě potřebyTable 1 - Reference sequence (codes according to the accession number in the GenBank database) of individual S-RNase alleles for the promoter region, first to second exon region; for the second to third exon region; respectively SFB gene. All S-alleles with published sequence in this region are listed, although some of them do not contain a primer annealing site. If necessary

- 7 CZ 36551 UI byla patřičná oblast osekvenována v laboratoři přihlašovatele. Sekvence pocházející z višně obecné jsou uvedeny tučně.- 7 CZ 36551 UI, the relevant area was sequenced in the applicant's laboratory. Sequences derived from sour cherry are shown in bold.

Referenční sekvence Reference sequence Organizmus Organism S-alela S-allele Promotor SRNázy SRNase promoter S-RNáza (Exon 1 až Exon 2) S-RNase (Exon 1 to Exon 2) S-RNáza (Exon 2 až Exon 3) S-RNase (Exon 2 to Exon 3) SFB SFB P. avium L. P. avium L. S1 S1 AJ635282 AJ635282 AJ635281 AJ635281 AB111518 DQ827715 AB111518 DQ827715 P. avium L. P. cerasus L. P. avium L. P. cerasus L. sr sr DQ827716 DQ827716 P. cerasus L. P. cerasus L. S2 S2 AJ635284 AJ635284 AJ635283 AJ635283 AB111519 AB111519 P. avium L. P. avium L. S3 S3 AY571663 AY571663 AJ635285 AJ635285 AY571665 AY571665 P. avium L. P. avium L. S3' S3' S4 S4 AJ635288 AJ635288 AJ635287 AJ635287 AB111521 AB111521 P. avium L. P. avium L. S4' S4' AY649873 AY649873 P. avium L. P. avium L. S5 S5 AJ635290 AJ635290 AJ635289 AJ635289 AB111520 AB111520 P. avium L. P. avium L. S5' S5' EU077235 EU077235 EU077235 EU077235 EU077237 EU077237 P. avium L. P. avium L. S6 S6 AB270744 AB270744 AY571664 AY571664 AJ635291 AJ635291 AY571666 AY571666 P. avium L. P cerasusL. P. avium L. P cerasus L. S6m S6m AB270745 AB270745 KY965070 KY965070 P cerasusL. P cerasus L. S6m2 S6m2 KY965069 KY965069 P cerasusL. P cerasus L. S7 S7 EU035974 EU035974 AJ635268 AJ635268 EU035976 EU035976 P. avium L. P. avium L. S9 S9 AJ635271 AJ635271 AJ635270 AJ635270 DQ422809 DQ422809 P. avium L. P. avium L. S10 S10 JQ280519 JQ280519 AJ635272 AJ635272 AY805053 AY805053 P. avium L. P. avium L. S12 S12 AY259115 AY259115 AJ635274 AJ635274 AY805054 AY805054 P. avium L. P. avium L. S13 S13 JQ280526 JQ280526 JQ280526 JQ280526 DQ385844 DQ385844 P. avium L. P. avium L. S13m S13m DQ385843 DQ385843 DQ385843 DQ385843 P cerasusL. P cerasus L. S13' S13' DQ385845 DQ385845 P cerasusL. P cerasus L. S14 S14 AJ635278 AJ635278 AJ635277 AJ635277 P. avium L. P. avium L. S16 S16 AJ635280 AJ635280 AJ635279 AJ635279 AY805056 AY805056 P. avium L. P. avium L. S17 S17 AJ862656 AJ862656 P. avium L. P. avium L. S18 S18 AJ862657 AJ862657 P. avium L. P. avium L. S19 S19 AJ862658 AJ862658 P. avium L. P. avium L. S20 S20 AJ862659 AJ862659 P. avium L. P. avium L. S21 S21 AJ863119 AJ863119 P. avium L. P. avium L. S22 S22 EF429142 EF429142 DQ336138 DQ336138 P. avium L. P. avium L. S23 S23 AY259114 AY259114 AY259114 AY259114 P. avium L. P. avium L. S24 S24 AY259112 AY259112 AY259112 AY259112 P. avium L. P. avium L. S25 S25 AY259113 AY259113 AY259113 AY259113 P. avium L. P. avium L. S26 S26 EU035975 EU035975 EU035975 EU035975 EU035977 EU035977 P cerasusL. P cerasus L. S28 S28 DQ266440 DQ266440 DQ266440 DQ266440 P. avium L. P. avium L. S30 S30 DQ266442 DQ266442 DQ266442 DQ266442 P. avium L. P. avium L. S31 S31 JQ280529 JQ280529 DQ266443 DQ266443 P. avium L. P. avium L. S33 S33 EU054325 EU054325 EU054325 EU054325 EU054328 EU054328 P cerasusL. P cerasus L. S34 S34 JQ280525 EU054326 JQ280525 EU054326 JQ280525 EU054326 JQ280525 EU054326 P. avium L. P cerasusL. P. avium L. P cerasus L. S35 S35 EU054327 EU054327 EU054327 EU054327 EU054330 EU054330 P cerasusL. P cerasus L. S36a S36a EU042127 EU042127 EU042127 EU042127 EU042131 EU042131 P. cerasus L. P. cerasus L. S36b S36b EU042128 EU042128 EU042128 EU042128 EU042132 EU042132 P. cerasus L. P. cerasus L. S36b2 S36b2 EU042129 EU042129 EU042129 EU042129 EU042133 EU042133 P. cerasus L. P. cerasus L. S36b3 S36b3 EU042130 EU042130 EU042130 EU042130 EU042134 EU042134 P. cerasus L. P. cerasus L. S37 S37 JQ280522 JQ280522 P. avium L. P. avium L. S38 S38 JQ280517 JQ280517 P. avium L. P. avium L.

-8CZ 36551 U1-8CZ 36551 U1

Sekvence pro jednotlivé geny pocházející z třešně ptačí a višně obecné byly porovnány programem Clustal Omega (https://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo). Na základě porovnání sekvencí S-RNáz byla zrevidována místa nasedání primerů pro identifikaci S-alel pocházejících z třešně ptačí (nárokovány v PUV 2020-34519 a PUV 2021-34908) a případné nekomplementarity byly řešeny degenerací původních primerů. Poté byly vytipovány oblasti vhodné pro návrh jednotlivých primerů pro odlišení všech S-alel vyskytujících se ve višních, tedy oblasti dostatečně konzervované pro návrh univerzálních primerů a oblasti specifické pro jednotlivé S-alely. Dále bude popsána identifikace jednotlivých S-alel vyskytujících se u višní, případně s možným výskytem u višní, a způsob jejich rozlišení. Nasedání všech primerů je zachyceno na Obr. 1-1 až 1-24 v tomto dokumentu.Sequences for individual genes from bird cherry and sour cherry were aligned with the Clustal Omega program (https://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo). Based on the comparison of the S-RNase sequences, the annealing sites of the primers were revised for the identification of S-alleles originating from bird cherry (claimed in PUV 2020-34519 and PUV 2021-34908) and possible non-complementarities were solved by degeneracy of the original primers. After that, regions suitable for the design of individual primers to distinguish all S-alleles occurring in sour cherries were selected, i.e. regions sufficiently conserved for the design of universal primers and regions specific for individual S-alleles. Furthermore, the identification of individual S-alleles occurring in sour cherries, possibly with possible occurrence in sour cherries, and the method of their differentiation will be described. The annealing of all primers is shown in Fig. 1-1 to 1-24 in this document.

Samosprašná alela S1' (SEQ ID NO. 40 pro S-RNázu, resp. SEQ ID NO. 41 pro SFB) se liší od cizosprašné alely S1 (SEQ ID NO. 38 pro S-RNázu, resp. SEQ ID NO. 39 pro SFB) inzercí 615 nt v SFB genu (Hauck, 2006), pro jejich rozlišení byl navržen společný fluorescenčně značený forward primer nacházející se před touto inzercí (SEQ ID NO. 15), reverzní primery jsou specifické pro S1' (primer se nachází v inzerci, SEQ ID NO. 17), respektive S1 (primer se nachází za inzercí, tj. ve společné oblasti alel S1 a S1' SFB, nicméně při amplifikaci S1' by vznikal příliš dlouhý fragment pro detekci na kapilárním genetickém analyzátoru, tj. >600 bp, SEQ ID NO. 16) (Obr. 1-1). Obě tyto alely jsou amplifikovány i univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2).The self-pollinated allele S1' (SEQ ID NO. 40 for S-RNase, respectively SEQ ID NO. 41 for SFB) differs from the cross-pollinated allele S1 (SEQ ID NO. 38 for S-RNase, respectively SEQ ID NO. 39 for SFB) by an insertion of 615 nt in the SFB gene (Hauck, 2006), to distinguish them, a common fluorescently labeled forward primer located before this insertion (SEQ ID NO. 15) was designed, the reverse primers are specific for S1' (the primer is located in the insertion , SEQ ID NO. 17), respectively S1 (the primer is located behind the insertion, i.e. in the common region of the S1 and S1' SFB alleles, however, amplification of S1' would result in a fragment too long for detection on the capillary genetic analyzer, i.e. >600 bp, SEQ ID NO.16) (Figure 1-1). Both of these alleles are also amplified with universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2).

Alela S2 (SEQ ID NO. 42 pro oblast prvního intronu S-RNázy, resp. SEQ ID NO. 43 pro oblast druhého intronu S-RNázy) je detekována univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2) a univerzálním primerem SEQ ID NO. 3 v kombinaci se specifickými primerem SEQ ID NO. 4 (Obr. 1-2).The S2 allele (SEQ ID NO. 42 for the first S-RNase intron region, respectively SEQ ID NO. 43 for the second S-RNase intron region) is detected by universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2) and universal primer SEQ ID NO. 3 in combination with specific primer SEQ ID NO. 4 (Fig. 1-2).

Alela S3' (SEQ ID NO. 46 pro S-RNázu) se liší od S3 (SEQ ID NO. 44 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 45 pro SFB) delecí v SFB genu neznámého rozsahu. Obě jsou detekovány univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2), pro identifikaci S3 jsou použity primery SEQ ID NO. 7 a SEQ ID NO. 8, které nejsou schopné amplifikovat S3' (Sonneveld T, 2005) (Obr. 1-3).The S3' allele (SEQ ID NO. 46 for S-RNase) differs from S3 (SEQ ID NO. 44 for S-RNase, SEQ ID NO. 45 for SFB) by a deletion in the SFB gene of unknown extent. Both are detected by universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2), for S3 identification primers SEQ ID NO. 7 and SEQ ID NO. 8 that are unable to amplify S3' (Sonneveld T, 2005) (Fig. 1-3).

Alela S4' (SEQ ID NO. 49 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 50 pro SFB) obsahuje deleci 4 nukleotidů v SFB genu, kterou se liší od mateřské alely S4 (SEQ ID NO. 47 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 48 pro SFB) (Sonneveld T, 2005). Také obě tyto alely jsou amplifikovány univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2), rozlišení mezi nimi zajišťují primery SEQ ID NO. 9 a SEQ ID NO. 10 navržené před, respektive za touto delecí (Obr. 1-4).The S4' allele (SEQ ID NO. 49 for S-RNase, SEQ ID NO. 50 for SFB) contains a deletion of 4 nucleotides in the SFB gene, which differs from the maternal allele S4 (SEQ ID NO. 47 for S-RNase, SEQ ID NO. 48 for SFB) (Sonneveld T, 2005). Also, both of these alleles are amplified by universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2), the distinction between them is provided by primers SEQ ID NO. 9 and SEQ ID NO. 10 proposed before and after this deletion (Fig. 1-4).

Alela S5' (SEQ ID NO. 53 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 54 pro SFB) se oproti sekvenci S5 (SEQ ID NO. 51 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 52 pro SFB) vyznačuje bodovou mutací v SFB genu, která vede k tvorbě stopkodonu (Marchese A, 2007). Po amplifikaci univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2) se alely S5 a S5' liší o jeden nukleotid, pro jednoznačnost jejich rozlišení je přidán pár primerů SEQ ID NO. 11 a SEQ ID NO. 12, schopný amplifikovat pouze alelu S5 (Obr. 1-5).The S5' allele (SEQ ID NO. 53 for S-RNase, SEQ ID NO. 54 for SFB) differs from the S5 sequence (SEQ ID NO. 51 for S-RNase, SEQ ID NO. 52 for SFB) by a point mutation in SFB gene that leads to the formation of a stop codon (Marchese A, 2007). After amplification with universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2), the S5 and S5' alleles differ by one nucleotide, a pair of SEQ ID NO primers is added to clearly distinguish them. 11 and SEQ ID NO. 12, able to amplify only the S5 allele (Figs. 1-5).

Alela S6 se vyskytuje ve višních ve třech různých formách - původně třešňová alela S6 (SEQ ID NO. 55 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 56 pro promotorovou oblast S-RNázy) je cizosprašná, višňové alely S6m (SEQ ID NO. 57 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 58 pro promotorovou oblast S-RNázy) a S6m2 (SEQ ID NO. 59 pro S-RNázu, SEQ ID NO. 60 pro promotorovou oblast S-RNázy) vznikly jejími mutacemi a umožňují samosprašnost, potenciálně tak může dojít k výskytu více alel odvozených od S6 v jednom genotypu. Navrhovaná sada primerů tak musí být schopna odlišit i kombinace těchto S-alel. Alela S6m se liší inzercí sekvence podobné transpozonu o délce cca 2 700 nt v promotorové oblasti genu pro S-RNázu (Yamane, 2003b). Pro amplifikaci S6m byl navržen forward primer v inzertované sekvenci (SEQ ID NO. 19), reverzní se pak nachází veThe S6 allele occurs in sour cherries in three different forms - originally the cherry S6 allele (SEQ ID NO. 55 for S-RNase, SEQ ID NO. 56 for the promoter region of S-RNase) is heterozygous, the sour cherry S6m alleles (SEQ ID NO. 57 for S-RNase, SEQ ID NO. 58 for S-RNase promoter region) and S6m2 (SEQ ID NO. 59 for S-RNase, SEQ ID NO. 60 for S-RNase promoter region) arose from its mutations and allow self-pollination, potentially thus, multiple S6-derived alleles may occur in a single genotype. The proposed set of primers must therefore be able to distinguish even combinations of these S-alleles. The S6m allele differs by the insertion of a transposon-like sequence of approximately 2,700 nt in the promoter region of the S-RNase gene (Yamane, 2003b). For the amplification of S6m, a forward primer was designed in the inserted sequence (SEQ ID NO. 19), the reverse primer is found in

- 9 CZ 36551 U1 společné části všech tří S6 alel (SEQ ID NO. 21). Pro odlišení zbylých dvou alel S6 byl navržen i specifický primer umožňující detekci promotorové oblasti alel S6 a S6m2 (SEQ ID NO. 20). Tento primer rozpoznává i alelu S6m, amplifikovaný úsek by však byl příliš dlouhý pro detekci na kapilárním genetickém analyzátoru, tj. >600 bp (Obr. 1-6). Alela S6m2 se liší od obou zbývajících S6 alel delecí 1 bp v kódující sekvenci S-RNázy (Tsukamoto, 2006). Specifický forwardový primer (SEQ ID NO. 18) pro amplifikaci pouze alely S6m2 byl navržen v oblasti této delece, reverzním primerem je univerzální primer ze třetího exonu S-RNázy (SEQ ID NO. 3) (Obr. 1-6). Použití specifických primerů pro amplifikaci S6m a S6m2 v jediné reakci umožňuje přímou identifikaci i genotypů nesoucích obě tyto samosprašné S-alely. Alela S6 je detekována pouze společným fragmentem vzniklým po amplifikaci univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2), nevykazuje žádný pro ni specifický fragment. Současný výskyt cizosprašné alely S6 a jedné ze samosprašných alel téhož druhu není vzhledem k předpokládanému mechanizmu cizosprašnosti pravděpodobný.- 9 CZ 36551 U1 common parts of all three S6 alleles (SEQ ID NO. 21). In order to distinguish the remaining two S6 alleles, a specific primer enabling the detection of the promoter region of the S6 and S6m2 alleles was also designed (SEQ ID NO. 20). This primer also recognizes the S6m allele, however, the amplified region would be too long for detection on the capillary genetic analyzer, i.e. >600 bp (Fig. 1-6). The S6m2 allele differs from both remaining S6 alleles by a 1 bp deletion in the S-RNase coding sequence (Tsukamoto, 2006). A specific forward primer (SEQ ID NO. 18) for amplification of only the S6m2 allele was designed in the region of this deletion, the reverse primer is a universal primer from the third exon of S-RNase (SEQ ID NO. 3) (Fig. 1-6). The use of specific primers for the amplification of S6m and S6m2 in a single reaction enables the direct identification of genotypes carrying both of these self-pollinated S-alleles. The S6 allele is detected only by the common fragment resulting from amplification with universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2), it does not show any fragment specific for it. The simultaneous occurrence of the cross-pollinated allele S6 and one of the self-pollinated alleles of the same species is unlikely due to the assumed mechanism of cross-pollination.

Alely S7 (SEQ ID NO. 61 pro S-RNázu), S9 (SEQ ID NO. 62 pro oblast prvního intronu S-RNázy, SEQ ID NO. 63 pro oblast druhého intronu S-RNázy), S10 (SEQ ID NO. 64 pro S-RNázu) a S12 (SEQ ID NO. 65 pro S-RNázu) jsou detekovány univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2) (Obr. 1-7 až 1-10), přičemž výskyt alely S9 je potvrzen fragmentem vznikajícím z primerů SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5. Alela S12 je dourčena amplifikací z primerů SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 6.Alleles S7 (SEQ ID NO. 61 for S-RNase), S9 (SEQ ID NO. 62 for S-RNase first intron region, SEQ ID NO. 63 for S-RNase second intron region), S10 (SEQ ID NO. 64 for S-RNase) and S12 (SEQ ID NO. 65 for S-RNase) are detected by universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2) (Figs. 1-7 to 1-10), with the occurrence allele S9 is confirmed by the fragment resulting from primers SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5. The S12 allele is determined by amplification from primers SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 6.

Alelu S13 je možné najít u višní taktéž ve třech různých formách. Původní třešňová alela S13 (SEQ ID NO. 66 pro SFB, SEQ ID NO. 67 pro S-RNázu) je cizosprašná, alely S13' (SEQ ID NO. 68 pro SFB, SEQ ID NO. 69 pro S-RNázu) a S13m (SEQ ID NO. 70 pro SFB, SEQ ID NO. 71 pro S-RNázu) jsou pak specifické pro višně a umožňují samosprášení. I v tomto případě existuje potenciální možnost nalézt více typů alely S13 v jednom genotypu, navrhovaná sada primerů tak musí umožnit identifikaci i jejich kombinací. Mutovaná alela S13m se vyznačuje delecí v exonu 3 o délce 23 bp v genu pro S-RNázu. Pro její rozpoznání je navržen specifický forward primer překlenující tuto deleci, tj. začíná před touto delecí a končí za ní (SEQ ID NO. 22). Pro alely S13 a S13' je navržen forwardový primer nacházející se uvnitř této deletované oblasti (SEQ ID NO. 23), reverzní primer je schopen rozpoznávat všechny tři varianty S13 (SEQ ID NO. 24) (Obr. 1-11). Alela S13' vznikla bodovou mutací v SFB genu, která způsobuje předčasný stop kodon (Tsukamoto, 2006). Pro odlišení S13' od S13 a S13m je navržen v oblasti této mutace specifický reverse primer rozpoznávající pouze alelu S13' (SEQ ID NO. 26). Z důvodu dostatečné specifity je do primeru umístěna destabilizující mutace. Navržený forwardový primer rozpoznává všechny tři varianty S13 (SEQ ID NO. 25) (Obr. 1-11). Použití specifických primerů pro identifikaci obou samosprašných alel S13' a S13m v jediné reakci umožňuje přímou identifikaci genotypů nesoucích obě tyto samosprašné S-alely. Alela S13 je detekována pouze společným fragmentem, nevykazuje žádný pro ni specifický fragment. Současný výskyt cizosprašné alely S13 a jedné ze samosprašných alel téhož druhu není předpokládán.The S13 allele can also be found in sour cherries in three different forms. The original cherry allele S13 (SEQ ID NO. 66 for SFB, SEQ ID NO. 67 for S-RNase) is cross-pollinated, the alleles S13' (SEQ ID NO. 68 for SFB, SEQ ID NO. 69 for S-RNase) and S13m (SEQ ID NO. 70 for SFB, SEQ ID NO. 71 for S-RNase) are then specific for sour cherries and allow self-pollination. Even in this case, there is a potential possibility of finding multiple S13 allele types in one genotype, so the proposed set of primers must enable identification of their combination as well. The mutated allele S13m is characterized by a 23 bp deletion in exon 3 of the S-RNase gene. For its recognition, a specific forward primer spanning this deletion is designed, i.e. it starts before this deletion and ends after it (SEQ ID NO. 22). For the S13 and S13' alleles, a forward primer located inside this deleted region (SEQ ID NO. 23) is designed, a reverse primer capable of recognizing all three S13 variants (SEQ ID NO. 24) (Fig. 1-11). The S13' allele was created by a point mutation in the SFB gene, which causes a premature stop codon (Tsukamoto, 2006). To distinguish S13' from S13 and S13m, a specific reverse primer recognizing only the S13' allele (SEQ ID NO. 26) is designed in the region of this mutation. For reasons of sufficient specificity, a destabilizing mutation is placed in the primer. The designed forward primer recognizes all three variants of S13 (SEQ ID NO. 25) (Fig. 1-11). The use of specific primers to identify both S13' and S13m self-pollinated alleles in a single reaction allows direct identification of genotypes carrying both of these self-pollinated S-alleles. The S13 allele is detected only by the common fragment, it does not show any fragment specific to it. The simultaneous occurrence of cross-pollinated allele S13 and one of the self-pollinated alleles of the same species is not assumed.

Původně třešňové S-alely S14 (SEQ ID NO. 72 pro S-RNázu), S16 (SEQ ID NO. 73 pro S-RNázu), S22 (SEQ ID NO. 74 pro S-RNázu), S23 (SEQ ID NO. 75 pro S-RNázu), S24 (SEQ ID NO. 76 pro S-RNázu), S25 (SEQ ID NO. 77 pro S-RNázu), S34 (SEQ ID NO. 80 pro S-RNázu) a S38 (SEQ ID NO. 92 pro S-RNázu) jsou všechny určeny amplifikací univerzálními degenerovanými primery (SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2) (Obr. 1-12 až 1-17, 1-20, respektive 1-23), alela S22 je potvrzena i fragmentem vznikajícím z primerů SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5.Originally cherry S-alleles S14 (SEQ ID NO. 72 for S-RNase), S16 (SEQ ID NO. 73 for S-RNase), S22 (SEQ ID NO. 74 for S-RNase), S23 (SEQ ID NO. 75 for S-RNase), S24 (SEQ ID NO. 76 for S-RNase), S25 (SEQ ID NO. 77 for S-RNase), S34 (SEQ ID NO. 80 for S-RNase) and S38 (SEQ ID NO. 92 for S-RNase) are all determined by amplification with universal degenerate primers (SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2) (Figures 1-12 to 1-17, 1-20 and 1-23, respectively), the allele S22 is also confirmed by the fragment resulting from primers SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5.

Alely S26 (SEQ ID NO. 78 pro S-RNázu), S33 (SEQ ID NO. 79 pro S-RNázu) a S35 (SEQ ID NO. 81 pro S-RNázu) pocházejí z třešně křovité a jsou plně funkční, tj. cizosprašné, všechny tři S-alely jsou rozpoznávány specifickými primery. Alela S26 je amplifikována kombinací specifického primeru navrženého v prvním intronu S-RNázy (SEQ ID NO. 27) a univerzálního reverzního primeru z exonu 2 tohoto genu (SEQ ID NO. 2) (Obr. 1-18). Alela S33 je také amplifikována kombinací specifického primeru navrženého v prvním intronu S-RNázy (SEQ ID NO. 28) a univerzálního reverzního primeru z exonu 2 tohoto genu (SEQ ID NO. 2) (Obr. 1-19).Alleles S26 (SEQ ID NO. 78 for S-RNase), S33 (SEQ ID NO. 79 for S-RNase) and S35 (SEQ ID NO. 81 for S-RNase) originate from bush cherry and are fully functional, i.e. cross-pollinated, all three S-alleles are recognized by specific primers. The S26 allele is amplified by a combination of a specific primer designed in the first intron of S-RNase (SEQ ID NO. 27) and a universal reverse primer from exon 2 of this gene (SEQ ID NO. 2) (Fig. 1-18). The S33 allele is also amplified by a combination of a specific primer designed in the first intron of S-RNase (SEQ ID NO. 28) and a universal reverse primer from exon 2 of this gene (SEQ ID NO. 2) (Fig. 1-19).

- 10 CZ 36551 U1- 10 CZ 36551 U1

Pro identifikaci alely S35 byl navržen specifický primer v druhém intronu S-RNázy (SEQ ID NO. 29), který se v reakci použije v kombinaci s univerzálním reverzním primerem z exonu 3 tohoto genu (SEQ ID NO. 3) (Obr. 1-21).To identify the S35 allele, a specific primer in the second intron of S-RNase (SEQ ID NO. 29) was designed, which will be used in the reaction in combination with a universal reverse primer from exon 3 of this gene (SEQ ID NO. 3) (Fig. 1- 21).

Alela S36 je u višní reprezentována 4 typy S-alel lišícími se navzájem převážně bodovými mutacemi v S-RNáze i SFB genu, a to S36a (SEQ ID NO. 82 pro SFB, SEQ ID NO. 83 pro S-RNázu), S36b (SEQ ID NO. 84 pro SFB, SEQ ID NO. 85 pro S-RNázu), S36b2 (SEQ ID NO. 87 pro SFB, SEQ ID NO. 86 pro S-RNázu) a S36b3 (SEQ ID NO. 88 pro SFB, SEQ ID NO. 89 pro S-RNázu). Všechny tyto S-alely jsou samosprašné a může se tedy vyskytovat více různých S36 alel v jednom genotypu, jak bylo popsáno např. v Lisek, 2017. Je tedy nezbytné věnovat velkou pozornost návrhu primerů pro specifickou detekci těchto S-alel i jejich kombinací, vzhledem k typu mutací je pro jejich jednoznačnou identifikaci nezbytné použít více párů primerů (Obr. 1-22). Pro prvotní odlišení alel S36a a S36b od alel S36b2 a S36b3 je navržen primer v druhém intronu S-RNázy amplifikující všechny alely S36 (SEQ ID NO. 30). Ten je v reakci použit v kombinaci s univerzálním primerem navrženým v exonu 3 tohoto genu (SEQ ID NO. 3). Alely S36b2 a S36b3 v této oblasti vykazují deleci 2 bp, která je při fragmentační analýze na kapilárním genetickém analyzátoru jasně odlišitelná. Pro dourčení alely S36a se využijí specifické primery pro amplifikaci části SFB genu (SEQ ID NO. 31 a SEQ ID NO. 32). Alela S36b je identifikována na základě délky fragmentu S-RNázy amplifikovaného prvním uvedeným párem primerů pro alely S36 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) a specifických primerů pro amplifikaci všech tří alel s označením S36b v oblasti SFB genu (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34). Přítomnost S36b2 lze jednoznačně stanovit pomocí specifického primeru v oblasti prvního intronu S-RNázy (SEQ ID NO. 35) v kombinaci s univerzálním primerem z exonu 2 téhož genu (SEQ ID NO. 2). S36b3 je pak amplifikována použitím specifického reverzního primeru (SEQ ID NO. 37) v kombinaci s forward primerem schopným rozpoznat alely S36a, S36b a S36b3 (SEQ ID NO. 36). V případě detekce jednonukleotidových záměn mezi jednotlivými alelami S36 jsou do sekvence primerů záměrně umístěny destabilizující mutace, aby byla detekce příslušné S-alely specifická.In sour cherries, the S36 allele is represented by 4 types of S-alleles differing from each other mainly by point mutations in the S-RNase and SFB gene, namely S36a (SEQ ID NO. 82 for SFB, SEQ ID NO. 83 for S-RNase), S36b ( SEQ ID NO. 84 for SFB, SEQ ID NO. 85 for S-RNase), S36b2 (SEQ ID NO. 87 for SFB, SEQ ID NO. 86 for S-RNase) and S36b3 (SEQ ID NO. 88 for SFB, SEQ ID NO.89 for S-RNase). All these S-alleles are self-pollinating, and thus several different S36 alleles can occur in one genotype, as described e.g. in Lisek, 2017. It is therefore necessary to pay great attention to the design of primers for the specific detection of these S-alleles and their combinations, considering for the type of mutations, it is necessary to use several pairs of primers for their unambiguous identification (Fig. 1-22). For initial differentiation of S36a and S36b alleles from S36b2 and S36b3 alleles, a primer in the second intron of S-RNase amplifying all S36 alleles is designed (SEQ ID NO. 30). This is used in the reaction in combination with a universal primer designed in exon 3 of this gene (SEQ ID NO. 3). The S36b2 and S36b3 alleles in this region show a 2 bp deletion that is clearly distinguishable by fragmentation analysis on a capillary genetic analyzer. To determine the S36a allele, specific primers are used to amplify part of the SFB gene (SEQ ID NO. 31 and SEQ ID NO. 32). The S36b allele is identified based on the length of the S-RNase fragment amplified by the first indicated pair of primers for S36 alleles (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) and specific primers for amplification of all three S36b labeled alleles in the SFB gene region (SEQ ID NO.33 + SEQ ID NO.34). The presence of S36b2 can be unambiguously determined using a specific primer in the region of the first intron of S-RNase (SEQ ID NO. 35) in combination with a universal primer from exon 2 of the same gene (SEQ ID NO. 2). S36b3 is then amplified using a specific reverse primer (SEQ ID NO. 37) in combination with a forward primer capable of recognizing the S36a, S36b and S36b3 alleles (SEQ ID NO. 36). In the case of detection of single-nucleotide substitutions between individual S36 alleles, destabilizing mutations are intentionally placed in the primer sequence to make the detection of the respective S-allele specific.

Pro potvrzení alely STěchl (SEQ ID NO. 91) se v reakci použijí primery SEQ ID NO. 13 a SEQ ID NO. 14 (Obr. 1-24).To confirm the STěchl allele (SEQ ID NO. 91), primers SEQ ID NO. 13 and SEQ ID NO. 14 (Fig. 1-24).

Jak již bylo uvedeno výše, mutace v místě nasedání primerů mohou být provedeny záměrně pro zvýšení specifity, případně nejsou překážkou pro úspěšnou amplifikaci příslušné alely. Předpokládané délky jednotlivých PCR amplifikovaných fragmentů podle analýzy referenčních sekvencí jsou uvedeny v Tabulce 2.As already mentioned above, mutations in the place of insertion of the primers can be made intentionally to increase the specificity, or they are not an obstacle for the successful amplification of the relevant allele. The expected lengths of individual PCR amplified fragments according to the analysis of reference sequences are shown in Table 2.

Tabulka 2 - Předpokládané délky jednotlivých PCR amplifikovaných fragmentů podle analýzy referenčních sekvencí - uvedeno v nukleotidech ve sloupcích s příslušným fluorescenčním značením, včetně primerů použitých pro amplifikaci příslušného fragmentu (uvedeny v závorce).Table 2 - Predicted lengths of individual PCR-amplified fragments according to the analysis of reference sequences - indicated in nucleotides in the columns with the appropriate fluorescent marking, including the primers used for amplification of the respective fragment (indicated in parentheses).

- 11 CZ 36551 UI- 11 CZ 36551 UI

Bana Bana Černá (NED) Black (NED) 184 (SEQ ID NO. 9 + SEQIDNO. 10) 184 (SEQ ID NO. 9 + SEQ ID NO. 10) Červená (PET) Red (PET) 303 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 4) 303 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 4) Zelená (VIC) Green (VIC) Zelená (VIC) Green (VIC) Modrá (FAM) Blue (FAM) 249 (SEQIDNO. 15 + SEQIDNO. 16) 249 (SEQIDNO. 15 + SEQIDNO. 16) 337 (SEQIDNO. 15 + SEQ ID NO. 17) 337 (SEQ ID NO. 15 + SEQ ID NO. 17) 125 (SEQ ID NO. 7 + SEQIDNO. 8) 125 (SEQ ID NO. 7 + SEQ ID NO. 8) Modrá (FAM) Blue (FAM) 377 (SEQ ID NO. I + SEQIDNO. 2) 377 (SEQ ID NO. I + SEQ ID NO. 2) 377 (SEQ IDNO.1 + SEQ ID NO. 2) 377 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 342 (SEQ IDNO.1 + SEQ ID NO. 2) 342 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 232 (SEQ ID NO. I + SEQIDNO. 2) 232 (SEQ ID NO. I + SEQ ID NO. 2) 232 (SEQ ID NO. I + SEQ ID NO. 2) 232 (SEQ ID NO. I + SEQ ID NO. 2) 449 (SEQ IDNO.1 + SEQ ID NO. 2) 449 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) S-alela S-allele co what SI' SI' S2 S2 S3 S3 S3’ S3' S4 S4

- 12 CZ 36551 UI- 12 CZ 36551 UI

180 (SEQ ID NO. 9 + SEQIDNO, 10) 180 (SEQ ID NO. 9 + SEQ ID NO, 10) 327 (SEQ ID NO. 3 + SEQIDNO. 18) 327 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 18) 267 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 5) 267 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 5) 421 (SEQ ID NO. 20 + SEQ ID NO. 21) 421 (SEQ ID NO. 20 + SEQ ID NO. 21) 443 (SEQ ID NO. 19 + SEQ ID NO. 21) 443 (SEQ ID NO. 19 + SEQ ID NO. 21) 421 (SEQ ID NO. 20 + SEQ ID NO. 21) 421 (SEQ ID NO. 20 + SEQ ID NO. 21) 90 (SEQIDNO. 11 + SEQIDNO. 12) 90 (SEQIDNO. 11 + SEQIDNO. 12) 449 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 449 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 391 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 391 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 390 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 390 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 nebo 443* (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 or 443* (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 441 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 343 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 343 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 354 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) 354 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO, 2) S4' S4' ÍS ÍS co what co what =1 CO =1 WHAT r i s co r i s what S7 S7 6S 6S

- 13 CZ 36551 UI- 13 CZ 36551 UI

148 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 6) 148 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 6) 260 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 5) 260 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 5) 440 (SEQ ID NO. 23 + SEQ ID NO. 24) 440 (SEQ ID NO. 23 + SEQ ID NO. 24) 440 (SEQ ID NO. 23 + SEQ ID NO. 24) 440 (SEQ ID NO. 23 + SEQ ID NO. 24) 431 (SEQ ID NO. 22 + SEQ ID NO. 24) 431 (SEQ ID NO. 22 + SEQ ID NO. 24) 229 (SEQ ID NO. 25 + SEQ ID NO. 26) 229 (SEQ ID NO. 25 + SEQ ID NO. 26) 362 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 362 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 343 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 343 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 329 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 329 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 411 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 411 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 420 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 420 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) S10 S10 S12 S12 S13 S13 S13' S13' SI 3m SI 3 m S14 S14 S16 S16 S22 S22

- 14 CZ 36551 UI- 14 CZ 36551 UI

163 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 29) 163 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 29) 253 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 253 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 329 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 329 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 420 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 420 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 373 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 373 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 118 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 27) 118 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 27) 171 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 28) 171 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 28) 376 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 376 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 180 (SEQ ID NO. 31 + SEQ ID NO. 32) 180 (SEQ ID NO. 31 + SEQ ID NO. 32) S23 S23 S24 S24 S25 S25 S26 S26 S33 S33 S34 S34 S35 S35 CO WHAT

- 15 CZ 36551 UI- 15 CZ 36551 UI

Barva Color Černá (MED) Black (MED) * v závislosti na počtu opakování repetitivni sekvence, inzerce dvou nukleotidů nemá vliv na * depending on the number of repetitions of the repetitive sequence, the insertion of two nucleotides does not affect the Če rvená (PET) Red (PET) 253 (SEQ ID HO. 3 + SEQ ID NO. 30) 253 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 251 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 251 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 251 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 251 (SEQ ID NO. 3 + SEQ ID NO. 30) 251 (SEQ ID NO. 13 + SEQ ID NO. 14) 251 (SEQ ID NO. 13 + SEQ ID NO. 14) Zelená (VIC) Green (VIC) Zelená (VIC) Green (VIC) 114 (SEQ ID NO. 36 + SEQ ID NO. 37) 114 (SEQ ID NO. 36 + SEQ ID NO. 37) Modrá (KAM) Blue (KAM) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) Modrá (KAM) Blue (KAM) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) 186 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 35) 186 (SEQ ID NO. 2 + SEQ ID NO. 35) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) 193 (SEQ ID NO. 33 + SEQ ID NO. 34) 308 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) 308 (SEQ ID NO. 1 + SEQ ID NO. 2) S-alela S-allele Jí ίΏ 01 She eats ίΏ 01 CM Jí ίΏ 01 CM She ίΏ 01 CO Jí ίΏ 01 WHAT HAS ίΏ 01 Ξ38 Ξ38 STěchl St

kódující sekvencicoding sequence

-16CZ 36551 UI-16CZ 36551 UI

Odborníkovi v oboru je známo, že velikost analyzovaných PCR fragmentů vyhodnocená při kapilární elektroforéze závisí kromě skutečné délky sekvence i na sekvenčních vlastnostech amplifikováného fragmentu, použitém fluorescenčním značení, použitém přístroji a podmínkách elektroforézy (viz www.thermofisher.com). Může se tedy lišit od délek uvedených v Tabulce 2 a je 5 vhodné systém vždy ověřit na referenčních odrůdách, popřípadě sekvenováním jednotlivých PCR fragmentů. Rovněž je vhodné osekvenovat fragmenty s neznámou délkou, může se jednat o dosud nepopsané S-alely.It is known to a person skilled in the art that the size of the analyzed PCR fragments evaluated by capillary electrophoresis depends, in addition to the actual length of the sequence, on the sequence properties of the amplified fragment, the fluorescent label used, the instrument used and the electrophoresis conditions (see www.thermofisher.com). It can therefore differ from the lengths listed in Table 2 and it is advisable to always verify the system on reference varieties, possibly by sequencing individual PCR fragments. It is also advisable to sequence fragments of unknown length, they may be undescribed S-alleles.

Příklad 2: StanoveníS-alel u odrůd višně obecné (Prunus cerasus L.)Example 2: Determination of S-alleles in sour cherry varieties (Prunus cerasus L.)

Pro amplifikaci S-alel byla použita DNA izolovaná z lýka višně obecné soupravou Exgene Plant SV (GeneAll) podle návodu výrobce. Připravená DNA sloužila jako templát pro PCR reakci s následujícími reakčními podmínkami: 2 μΐ DNA (10 ng/μΐ); 5 μΐ Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix (ThermoFisher Scientific, kat. č. F548S), primery v koncentracích 15 a fluorescenčně označené dle Tabulky 3, PCR voda do celkového objemu 10 μΐ.For the amplification of S-alleles, DNA isolated from the bran of sour cherry with the Exgene Plant SV kit (GeneAll) was used according to the manufacturer's instructions. The prepared DNA served as a template for the PCR reaction with the following reaction conditions: 2 μΐ DNA (10 ng/μΐ); 5 μΐ Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix (ThermoFisher Scientific, cat. no. F548S), primers in concentrations of 15 and fluorescently labeled according to Table 3, PCR water to a total volume of 10 μΐ.

Tabulka 3 - Koncentrace a fluorescenční značení použitých primemTable 3 - Concentration and fluorescent labeling of used primers

Primer Primer Fluorescenční značení Fluorescent marking Výsledná koncentrace (nM) Resulting concentration (nM) SEQ ID NO. 1 SEQ ID NO. 1 - - 210 210 SEQ ID NO. 2 SEQ ID NO. 2 FAM FAM 210 210 SEQ ID NO. 3 SEQ ID NO. 3 PET FIVE 240 240 SEQ ID NO. 4 SEQ ID NO. 4 - - 210 210 SEQ ID NO. 5 SEQ ID NO. 5 - - 450 450 SEQ ID NO. 6 SEQ ID NO. 6 - - 150 150 SEQ ID NO. 7 SEQ ID NO. 7 - - 200 200 SEQ ID NO. 8 SEQ ID NO. 8 FAM FAM 200 200 SEQ ID NO. 9 SEQ ID NO. 9 NED SUN 190 190 SEQ ID NO. 10 SEQ ID NO. 10 - - 190 190 SEQ ID NO. 11 SEQ ID NO. 11 - - 200 200 SEQ ID NO. 12 SEQ ID NO. 12 FAM FAM 200 200 SEQ ID NO. 13 SEQ ID NO. 13 PET FIVE 130 130 SEQ ID NO. 14 SEQ ID NO. 14 - - 130 130 SEQ ID NO. 15 SEQ ID NO. 15 FAM FAM 90 90 SEQ ID NO. 16 SEQ ID NO. 16 - - 90 90 SEQ ID NO. 17 SEQ ID NO. 17 - - 75 75 SEQ ID NO. 18 SEQ ID NO. 18 - - 200 200 SEQ ID NO. 19 SEQ ID NO. 19 - - 120 120 SEQ ID NO. 20 SEQ ID NO. 20 - - 110 110 SEQ ID NO. 21 SEQ ID NO. 21 víc more 110 110 SEQ ID NO. 22 SEQ ID NO. 22 - - 170 170 SEQ ID NO. 23 SEQ ID NO. 23 - - 75 75 SEQ ID NO. 24 SEQ ID NO. 24 víc more 75 75 SEQ ID NO. 25 SEQ ID NO. 25 víc more 180 180 SEQ ID NO. 26 SEQ ID NO. 26 - - 180 180 SEQ ID NO. 27 SEQ ID NO. 27 - - 180 180 SEQ ID NO. 28 SEQ ID NO. 28 - - 220 220 SEQ ID NO. 29 SEQ ID NO. 29 - - 160 160 SEQ ID NO. 30 SEQ ID NO. 30 - - 500 500 SEQ ID NO. 31 SEQ ID NO. 31 FAM FAM 180 180 SEQ ID NO. 32 SEQ ID NO. 32 - - 180 180 SEQ ID NO. 33 SEQ ID NO. 33 FAM FAM 175 175

- 17CZ 36551 UI- 17CZ 36551 UI

SEQ ID NO. 34 SEQ ID NO. 34 - - 175 175 SEQ ID NO. 35 SEQ ID NO. 35 - - 170 170 SEQ ID NO. 36 SEQ ID NO. 36 víc more 90 90 SEQ ID NO. 37 SEQ ID NO. 37 - - 90 90

PCR amplifikace probíhala v PCR cykleru C1000 (Biorad) s následujícím teplotním profilem: 98 °C/30 s; cyklování: 24x (98 °C/10 s, 60 °C/10 s, 72 °C/15 s); závěrečná extenze 72 °C/15 s. Po amplifikaci byl 1 pl PCR reakce přidán k 15 μΐ Hi-Di™ Formamide (ThermoFisher Scientific, kat č. 4311320) a 0,5 pl velikostního markéru GeneScan™ 600 LIZ™ Dye Size Standard (ThermoFisher Scientific, kat. č. 4366589). Vzorky byly před fragmentační analýzou denaturovány 2 minuty při 95 °C v PCR cykleru Cl 000 (Biorad).PCR amplification took place in a C1000 PCR cycler (Biorad) with the following temperature profile: 98 °C/30 s; cycling: 24x (98 °C/10 s, 60 °C/10 s, 72 °C/15 s); final extension 72 °C/15 s. After amplification, 1 µl of the PCR reaction was added to 15 µΐ Hi-Di™ Formamide (ThermoFisher Scientific, cat. no. 4311320) and 0.5 µl of GeneScan™ 600 LIZ™ Dye Size Standard ( ThermoFisher Scientific, Cat. No. 4366589). Samples were denatured for 2 min at 95°C in a Cl 000 PCR cycler (Biorad) prior to fragmentation analysis.

Fragmentační analýza amplikonů proběhla s využitím genetického analyzátoru AB3500 (ThermoFisher Scientific) podle doporučení výrobce. Detekce S-alel v daném vzorku byla provedena pomocí GeneMapper® Software 5 (ThermoFisher Scientific) na základě tabulky 2 pro vyhodnocení S-alel (viz výše). Všechny PCR amplifikované fragmenty u pozorovaných S-alel byly navíc ověřeny sekvenováním s primery použitými pro amplifikaci jednotlivých fragmentů.Fragmentation analysis of amplicons was performed using the AB3500 genetic analyzer (ThermoFisher Scientific) according to the manufacturer's recommendations. Detection of S-alleles in a given sample was performed using GeneMapper® Software 5 (ThermoFisher Scientific) based on Table 2 for S-allele evaluation (see above). All PCR amplified fragments for the observed S-alleles were additionally verified by sequencing with the primers used for amplification of individual fragments.

Navrhovaná sada primerů byla ověřena na referenčních odrůdách s S-alelami známými z literatury, které jsou uvedeny v Tabulce 4. Všechny alely byly identifikovány a shodovaly se s údaji známými z literatury. Zároveň byla navrhovaná sada primerů použita pro identifikaci S-alel v celé genofondové sbírce přihlašovatele a byly nalezeny i další původně třešňové S-alely, které nebyly dosud u višní popsány.The proposed set of primers was verified on reference varieties with S-alleles known from the literature, which are listed in Table 4. All alleles were identified and matched the data known from the literature. At the same time, the proposed set of primers was used for the identification of S-alleles in the entire gene pool collection of the applicant, and other originally cherry S-alleles that had not yet been described in sour cherries were also found.

- 18 CZ 36551 UI- 18 CZ 36551 UI

Tabulka 4 - Odrůdy višně obecné (Primus cerasus L.) použité pro ověření navržené sady primemTable 4 - Varieties of sour cherry (Primus cerasus L.) used for verification of the proposed set of prims

Reference Reference Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Sebolt AM, 2017 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Sebolt AM, 2017 Halász J, 2019 Halász J, 2019 Lišek A, 2017 Lišek A, 2017 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Lísek A, 2017; Sebolt AM, 2017; Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Lísek A, 2017; Sebolt AM, 2017; Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Sebolt AM, 2017 Tsukamoto T, 2008; Tsukamoto T, 2010; Sebolt AM, 2017 Halász J, 2019 Halász J, 2019 Lišek A, 2017 Lišek A, 2017 Halász J, 2019 Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Sebolt AM, 2017; Halász J, 2019 Tsukamoto T, 2008; Sebolt AM, 2017; Halász J, 2019 Lišek A, 2017 Lišek A, 2017 Lišek A, 2017; Sebolt AM. 2017 Lišek A, 2017; Sebolt AM. 2017 S-alely dle literatury S-alleles according to literature r i <5 cr> CO n cz? r i 5 Ό QO r i <5 cr> WHAT n cz? r i 5 Ό QO Cl •o CZ? co n ÍZ? O', CZ? r i 5 Ό CZ? Cl •O CZ? what about IZ? Oh, CZ? r i 5 Ό CZ? Pd on í/j m co 1 cz? 3 Ό CZ? P.S he/she m what 1 cz? 3 Ό CZ? Cd SO m CO Ό CO 1 cz? CZ? Cd SO m CO Ό WHAT 1 cz? CZ? SO CZ? CO ------------1 CZ! Ό CZ! ------------1 CZ! Sat CZ? WHAT ------------1 CZ! Ό CZ! ------------1 CZ! <O cz? m ---------1 cz? ri —1 CZ? ---------1 CZ! <O cz? m ---------1 cz? ri —1 CZ? ---------1 CZ! 05 SO m CO un m CO m —1 CZ! ------------1 CZ! 05 SO m CO un m CO m —1 CZ! ------------1 CZ! _© CO cn CZ? Ό Cl CZ! cn —1 CZ! CZ? _© WHAT cn CZ? Ό Cl CZ! cn —1 CZ! CZ? C5 SO co VJ CO 1 cz? ---------1 CZ! C5 SO what VJ WHAT 1 cz? ---------1 CZ! '© CZ) CZ! a m —1 CZ! Ό CZ! © CZ) CZ! and m —1 CZ! Ό CZ! 05 so m CO un m CQ m —1 CZ! rr cz? 05 Sat m CO un m CQ m —1 CZ! yy cz? 05 so ΓΌ CO un m CO m —4 CZ! CZ? 05 sat ΓΌ CO un m CO m —4 CZ! CZ? Identifikované Salely Identified Salels rj O CZ) CO ri CZ? CZ) r i Ό cz? reg O CZ) WHAT ri CZ? CZ) r i О cz? Cl o CZ? CO ri CZ? CTí CZ? r i s© cz? Cl O CZ? What about CZ? CTí CZ? r i s© cz? pd O c/l· C2 ťn 1 cz? so cz? by O c/l C2 ťn 1 cz? with cz? 05 SO CO m CA 1 CZ! ΤΓ lZ? 05 Sat WHAT m ca 1 CZ! ΤΓ lZ? SO cn cz? cn ------------1 CZ! s© CZ! ------------1 cz? SO cn cz? cn ------------1 CZ! s© CZ! ------------1 cz? m ϋθ m 4 CZ? Cl >—1 CZ! ---------1 cz? m ϋθ m 4 CZ? Cl >—1 CZ! ---------1 ch? Ό m CZ? <© QO —1 CZ! ------------1 cz? What about CZ? <© QO —1 CZ! ------------1 cz? -O Ό m CZ? \o Cl QO —1 CZ! TT cz? -About CZ? \o Cl QO —1 CZ! TT cz? 05 SO CO co 1 CZ! ---------1 cz? 05 Sat WHAT what 1 CZ! ---------1 ch? cd O co co a >—1 CZ! CO cz? CD O what what a >—1 CZ! what cz? cS c© rn CZ? i© Γ© ’—1 CZ! ^r cz? cS c© rn CZ? i© Γ© ’—1 CZ! ^r cz? a; Ό co CZ? <Zj r^j ’—1 CZ! tT cz? and; What about CZ? <Zj r^j ’—1 CZ! tT cz? Referenční odrůda Reference variety o, 60 - —4 ω O, 60 - —4 ω Cigany Meggy 404 Gypsies Meggy 404 -o a o > - about and about > -4—· =o —-H -4—· =o —-H S i -O -—> —1 3—1 With i -O -> —1 3—1 Érdi nagygyúmólcsu Érdi nagygyúmólcsu 4—· ξ 4—· ξ i and ’S -S 3—1 O £ <l> £ 'WITH -WITH 3—1 About £ <l> £ a a> i—, O Ξ o £ and a> i—, O Ξ by £ i o £ even by £ § §

- 19CZ 36551 UI- 19CZ 36551 UI

U—J U—J d d o O U AT co what 1/3 1/3 o' O' J J o O Os axis o O ---------1 ---------1 ri ri o O 1 1 o 4—· O 4—· o O IS] IS] o O ί/ΐ ί/ΐ Φ Φ -TO -IT =5 =5 :=1 :=1 1 TO 1 IT to it s with K TO Ji- Her- (Λ (Λ i= i= p^-«_ p^-«_ 1—| 1—| E^ E^ ——1 ——1 OO o o rs OO o o rs 6o g 6o g ri s ri s os axis < < —1 —1 4—· 4—· o O —1 —1 n n o O o O o O O —1 About —1 b b o O a o —1 l-J and by —1 l-J co what C/3 C/3 TO IT r. year -es -es << · << · f F = *> = *> s with ---------1 ---------1 Ts Al TS Al Ts Ts 20 20 TO IT so Sat so Sat r·*} r*} m m so Sat CO WHAT co what m m *5 *5 co what Ό Ό Γ*Ί Γ*Ί ΓΌ CO ΓΌ CO co what CO WHAT un un r<j r<j m m 1 1 GO GO CO WHAT co what d d d d CO WHAT co what CO WHAT -O -O TO IT so Sat Ό Ό nO nO Γ*Ί Γ*Ί m m SO Sat CO WHAT co what TO IT co what Ό Ό Γ*Ί Γ*Ί m CO m CO co what co what m m ΓΌ ΓΌ 1 1 GO GO co what co what co what co what co what 1/3 1/3 -p - Mr t; t; čtí reads o O C/3 C/3 o O t; t; g G -id -id TO IT ,<u , 5—1 s 5—1 p S1L S1L é? E?

-20CZ 36551 U1-20CZ 36551 U1

Průmyslová využitelnostIndustrial applicability

Nárokovaná sada primerů výrazně zjednodušuje stanovení S-alel u odrůd višně obecné, protože umožňuje identifikaci S-alel v jediné reakci, a to metodou fragmentační analýzy s analýzou na kapilárním genetickém analyzátoru. Navrhovaná sada primerů tak jednoznačně přináší zdokonalení dosavadního stavu techniky, kdy doposud probíhala analýza S-alel u višní v několika reakcích, což bylo pracné a finančně i časově náročné. Kromě rutinního stanovení S-alel u jednotlivých odrůd višně pro určení jejich samosprašnosti, respektive cizosprašnosti je nárokovaná sada primerů velmi dobře použitelná i pro tzv. molekulárními markery asistované šlechtění (MAS) višní. V případě analýzy hybridů ze šlechtění zaměřeného na produkci samosprašných odrůd višní totiž umožňuje velkokapacitní testování produkovaných hybridů s možností vyselektovat perspektivní samosprašné semenáče již po několika týdnech růstu, a to ve stádiu prvních listů. Bez molekulárních analýz je třeba veškeré potomstvo obsahující i nežádoucí cizosprašné genotypy udržovat ve výsadbě po dobu cca 6 let, kdy je teprve možné provést první polní zkoušky samosprašnosti, jejichž výsledky však obvykle bývá nezbytné v následujících letech ověřit. Takto raná selekce šlechtitelského materiálu přináší nemalé finanční úspory díky tomu, že šetří práci, materiál i prostor nezbytné pro pěstování semenáčů třešní. S-alely je však důležité stanovovat i u cizosprašných višní z důvodu výběru vhodných opylovacích odrůd, a to jak pro účely šlechtění, tak pro komerční produkci višní. Nárokovaná sada primerů je tedy průmyslově využitelná jak ve šlechtitelské, tak i v pěstitelské praxi.The claimed set of primers significantly simplifies the determination of S-alleles in sour cherry varieties, as it enables the identification of S-alleles in a single reaction, by the method of fragmentation analysis with analysis on a capillary genetic analyzer. The proposed set of primers thus clearly improves the current state of the art, when up to now the analysis of S-alleles in sour cherries was carried out in several reactions, which was laborious and time-consuming. In addition to the routine determination of S-alleles in individual sour cherry varieties to determine their self-pollination or cross-pollination, the claimed set of primers is also very well usable for so-called molecular marker-assisted breeding (MAS) of sour cherries. In the case of the analysis of hybrids from breeding aimed at the production of self-pollinated cherry varieties, it enables large-scale testing of produced hybrids with the possibility of selecting promising self-pollinated seedlings after only a few weeks of growth, namely at the stage of the first leaves. Without molecular analyses, all progeny including unwanted cross-pollinated genotypes must be kept in the planting for about 6 years, when it is only possible to carry out the first self-pollinated field tests, the results of which, however, usually need to be verified in the following years. This early selection of breeding material brings significant financial savings thanks to the fact that it saves labor, material and space necessary for growing cherry seedlings. However, it is important to determine S-alleles also in cross-pollinated sour cherries for the purpose of selecting suitable pollinating varieties, both for breeding purposes and for commercial production of sour cherries. The claimed set of primers is therefore industrially usable both in breeding and in growing practice.

- 21 CZ 36551 UI- 21 CZ 36551 UI

Seznam sekvencí genomické sekvence primerů, jednotlivých S-RNáz a SFB genů jsou shodné se sekvencemi současně podaného elektronického souboru dle standardu WIPO ST.26 připojeného ktéto přihlášce <SEQ ID NO. l-primer; DNA; Prunus avium L>The list of sequences of the genomic sequence of the primers, individual S-RNases and SFB genes are identical to the sequences of the simultaneously submitted electronic file according to the WIPO ST.26 standard attached to this application <SEQ ID NO. l-primer; DNA; Prunus avium L>

cttgttcttgstttygctttcttc <SEQ ID NO. S-primer; DNA; Prunus avium L>cttgttcttgstttygctttcttc <SEQ ID NO. S-primer; DNA; Prunus avium L>

CCATTGTTGCACAAATTGAAA <SEQ ID NO. 3-primer; DNA; Prunus cerasus L.>CCATTGTTGCACAAATTGAAA <SEQ ID NO. 3-primer; DNA; Prunus cerasus L.>

GTATCRTTGGCACYTTCCACG <SEQ ID NO. 4-prim&r; DNA; Prunus avium L>GTATCRTTGGCACYTTCCACG <SEQ ID NO. 4-prime&r;DNA; Prunus avium L>

TGAACGAAATCTCAACTCATAAATC <SEQ ID NO. 5-primer; DNA; Prunus avium L>TGAACGAAATCTCAACTCATAAATC <SEQ ID NO. 5-primer; DNA; Prunus avium L>

TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAA1T <SEQ ID NO. č-primer; DNA; Prunus avium L>TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAA1T <SEQ ID NO. n-primer; DNA; Prunus avium L>

GCTAACCC1TACATTTTGACCC <SEQ ID NO. V-primer; DNA; Prunus avium L>GCTAACCC1TACATTTTGACCC <SEQ ID NO. V-primer; DNA; Prunus avium L>

CCACAATITGAACGTCAGAAC < SEQ ID NO. 8-primer; DNA; Prunus avium L>CCACAATITGAACGTCAGAAC < SEQ ID NO. 8-primer; DNA; Prunus avium L>

TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC < SEQ ID NO. 9-primer; DNA; Prunus avium L>TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC < SEQ ID NO. 9-primer; DNA; Prunus avium L>

TCTAGCTTTTATTCTTGCGAGG < SEQ ID NO. 10-primer: DNA; Prunus avium L >TCTAGCTTTTATTCTTGCGAGG < SEQ ID NO. 10-primer: DNA; Prunus avium L >

GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA < SEQ ID NO. 1 1-primer: DNA; Prunus avium L >GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA < SEQ ID NO. 1 1-primer: DNA; Prunus avium L >

GCTTGGACAAAATTGACITGTG < SEQ ID NO. 12-primer: DNA; Prunus avium L >GCTTGGACAAAATTGACITGTG < SEQ ID NO. 12-primer: DNA; Prunus avium L >

GATCACAATCACCCAAAGGAGG < SEQ ID NO. 13-primer: DNA; Prunus avium L >GATCACAATCACCCAAAGGAGG < SEQ ID NO. 13-primer: DNA; Prunus avium L >

CTCTCTTTGGTCrTCTTCTTGTGC < SEQ ID NO. 14-primer: DNA; Prunus avium L >CTCTCTTTGGTCrTCTTCTTGTGC < SEQ ID NO. 14-primer: DNA; Prunus avium L >

GCTTGCTGATTGTAAATAAACTGG < SEQ ID NO. 15-primer: DNA; Prunus cerasus L >GCTTGCTGATTGTAAATAAACTGG < SEQ ID NO. 15-primer: DNA; Prunus cerasus L >

-22 CZ 36551 UI-22 CZ 36551 UI

GACTACCTACAAAGTCCCTCG < SEQ ID NO. 16-primer; DMA; Primus cerasus L.>GACTACCTACAAAGTCCCTCG < SEQ ID NO. 16-primer; DMA; Primus cerasus L.>

GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC < SEQ ID NO. 17-primer; DMA; Primus cerasus L>GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC < SEQ ID NO. 17-primer; DMA; Primus cerasus L>

CGGTGCGGTGTAGTGTAAAAC < SEQ ID NO. 18-primer; DMA; Primus cerasus L>CGGTGCGGTGTAGTGTAAAAC < SEQ ID NO. 18-primer; DMA; Primus cerasus L>

ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC < SEQ ID NO. 19-primer; DMA; Primus cerasus L>ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC < SEQ ID NO. 19-primer; DMA; Primus cerasus L>

CGGTTCAACCCGATTTATGGC < SEQ ID NO. 20-primer; DMA; Primus cerasus L.>CGGTTCAACCCGATTTATGGC < SEQ ID NO. 20-primer; DMA; Primus cerasus L.>

CATTGACTTGGCAGTTTGACG < SEQ ID NO. 21-primer; DMA; Primus cerasus L.>CATTGACTTGGCAGTTTGACG < SEQ ID NO. 21-primer; DMA; Primus cerasus L.>

TTAATGGTTGGGTGTATAATTGCTGTT < SEQ ID NO. 22-primer; DMA; Primus cerasus L>TTAATGGTTGGGTGTATAATTGCTGTT < SEQ ID NO. 22-primer; DMA; Primus cerasus L>

CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC < SEQ ID NO. 23-primer; DMA; Primus cerasus L.>CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC < SEQ ID NO. 23-primer; DMA; Primus cerasus L.>

ATACTTCGAGCGATCCCACGA < SEQ ID NO. 24-primer; DMA; Primus cerasus L.>ATACTTCGAGCGATCCCACGA < SEQ ID NO. 24-primer; DMA; Primus cerasus L.>

GACCGTGTAAGCCATTTTGAGAG < SEQ ID NO. 25-primer; DMA; Primus cerasus L>GACCGTGTAAGCCATTTTGAGAG < SEQ ID NO. 25-primer; DMA; Primus cerasus L>

GATGCGTACCAACAAAAATACCTTA < SEQ ID NO. 2ó-primer; DMA; Primus cerasus L>GATGCGTACCAAAAAAATACCTTA < SEQ ID NO. 20-primer; DMA; Primus cerasus L>

GGCATCTGGTGCTATGAACTAT < SEQ ID NO. 27-primer; DNA; Primus cerasus L>GGCATCTGGTGCTATGAACTAT < SEQ ID NO. 27-primer; DNA; Primus cerasus L>

TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT < SEQ ID NO. 2S-primer, DMA; Primus cerasus L.>TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT < SEQ ID NO. 2S-primer, DMA; Primus cerasus L.>

CAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAG < SEQ ID NO. 29-primer; DMA; Primus cerasus L>CAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAG < SEQ ID NO. 29-primer; DMA; Primus cerasus L>

CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC < SEQ ID NO. 30-primer; DMA; Primus cerasus L>CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC < SEQ ID NO. 30-primer; DMA; Primus cerasus L>

TAAGGTGGACACATGACCATATTTAAG < SEQ ID NO. 31-primer; DMA; Primus cerasus L>TAAGGTGGCACACATGACCATATTTAAG < SEQ ID NO. 31-primer; DMA; Primus cerasus L>

GAATCCATCGATCAGGAAAITTATAA < SEQ ID NO. 32-primer; DMA; Primus cerasus L.>GAATCCATCGATCAGGAAAITTATAA < SEQ ID NO. 32-primer; DMA; Primus cerasus L.>

-23 CZ 36551 UI-23 CZ 36551 UI

GTCCGTTCCAÁGACTAAAAAAC <SEQ ID NO. 33-prinier; DMA; Primus cerasus L.>GTCCGTTCCAÁGACTAAAAAAC <SEQ ID NO. 33-prinier; DMA; Primus cerasus L.>

AGTACATTTTCTAACGGAGTAGCAT <SEQ ID NO. 34-primer; DNA; Primus cerasus L.>AGTACATTTTCTAACGGAGTAGCAT <SEQ ID NO. 34-primer; DNA; Primus cerasus L.>

CCTCACAACCATAGAATCTAAAAGG <SEQ ID NO. 35-primer, DNA; Primus cerasus L.>CCTCACAACCATAGAATCTAAAAGG <SEQ ID NO. 35-primer, DNA; Primus cerasus L.>

GGACTTGATCTAACGCACCACA <SEQ ID NO. 36-primer; DNA; Primus cerasus L.>GGACTTGATCTAACGCACCACA <SEQ ID NO. 36-primer; DNA; Primus cerasus L.>

GATAAATCCTGATGTTGCTTTATCCCA <SEQ ID NO. 37-primer; DNA; Primus cerasus L.>GATAAATCCTGATGTTGCTTTATCCCA <SEQ ID NO. 37-primer; DNA; Primus cerasus L.>

CCTAGGCTCGCCTCTCAC <SEQ ID NO. 3S-partial sequence of S-RNase S1 (částečná sekvence S-RNázy SI); DNA; Primus avium L>CCTAGGCTCGCCTCTCAC <SEQ ID NO. 3S-partial sequence of S-RNase S1 (partial sequence of S-RNase SI); DNA; Primus avium L>

CTAAGTATGGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTG1TCTTGCTTTTGCTTTCT TCTTTTGTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCTTCTGCTATATCCTAT ATGCATATAATCAGCATTGCATTTTTCACTTATATATTTTGTTCAGAGAACTATTGTG TGTATTCGATGATATATCACATGACATGCGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTTT CATTTAATCTAACGCACAACTTTCTTTGGATGAGTAAGTATTTGGGGATTGTTTrTCT GCATGTCCTTTTTATATTITCATCCTCTTTTGTTCTTTCTGATATTTGTnTAATAAGTG CAGTCTATTCATCACAATAATTTTGGCAGGATCTTATGACTACTTTCAATTTGTGCAA CAATGGCCACC <SEQ ID NO. 39-partial sequence of SEB SI (částečná sekvence SEB SI); DNA; Primus cerasus L>CTAAGTATGGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTG1TCTTGCTTTTGCTTTCT TCTTTTGTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCTTCTGCTATATCCTAT ATGCATATAATCAGCATTGCATTTTTCACTTATATATTTTGTTCAGAGAACTATTGTG TGTATTCGATGATATATCACATGACATGCGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTTT CATTTAATCTAACGCACAACTTTCTTTGGATGAGTAAGTATTTGGGGATTGTTTrTCT GCATGTCCTTTTTATATTITCATCCTCTTTTGTTCTTTCTGATATTTGTnTAATAAGTG CAGTCTATTCATCACAATAATTTTGGCAGGATCTTATGACTACTTTCAATTTGTGCAA CAATGGCCACC <SEQ ID NO. 39-partial sequence of SEB SI (partial sequence of SEB SI); DNA; Primus cerasus L>

ATGGCATTTACAATACGTAAGAAAGAAATCTTAATCGACATCCTGGTGAGACTACCT ACAAAGTCCCTCGTTCGATTTCTGTGTACATGCAAGTCATGGAGTGATTTTATTGGCA GCTCGAGTTTTGTTAGCACACACCTTGATAGGAATGTCACAAAACATGCCCATGTCT ATCTACTCTGCCTCGACCACCCAAATTTTGAATGTCACGTCGACCCTGATGACCCATA TGTTAAAAAAGAATTTCAATGGTCTCTTTTTCCCAATCAAACATGTGAGGTGTTCTAC AAGTTAAGCCATCCCTTAGGGAACACAGAACATTATGGGATATATGGTTCAAGCAAT <SEQ ID NO. 40-partial sequence of £-RNase SI' (částečná sekvence S-RNázy SI'); DNA; Pnmus cerasus L>ATGGCATTTACAATACGTAAGAAAAGAATCTTAATCGACATCCTGGTGAGACTACCT ACAAAGTCCCTCGTTCGATTTCTGTGTACATGCAAGTCATGGAGTGATTTTATTGGCA GCTCGAGTTTTGTTAGCACACACCTTGATAGGAATGTCACAAAACATGCCCATGTCT ATCTACTCTGCTCGACCACCCAAATTTTGAATGTCACGTCGACCCTGATGACCCATA TGTTAAAAAAAATTTCAATGGTCTCTTTTCCAATCAAACATGTGAGGTTTCTAC AAGTTAAGCCATCCCTTAGGGAACAGAACATTATGGATATATGGTTCAAGCAAT <SEQ ID NO. 40-partial sequence of £-RNase SI' (partial sequence of S-RNase SI'); DNA; Pnmus cerasus L>

CTAAGTATGGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCT TCTTTTGTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACA4TCTTCTGCTATATCCTAT ATGCATATAATCAGCATTGCATTTTTCACTTATATATTTTGTTCAGAGAACTATTGTG TGTATTCGATGATATATCACATGACATGGGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTTT CATTTAATCTAACGCACAACITTCTTTGGATGAGTAAGTATTTGGGGATTGTnTTCT GCATGTCCTTTTTATATnTCATCCTCTTTTGTTCTTTCTGATATTTGTnTAATAAGTG CAGTCTATTCATCACAATAATTTTGGCAGGATC1TATGACTACTTTCAATTTGTGCAA CAATGGCCACCCTAAGTATGGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCT TCTTTTGTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACA4TCTTCTGCTATATCCTAT ATGCATATAATCAGCATTGCATTTTTCACTTATATATTTTGTTCAGAGAACTATTGTG TGTATTCGATGATATATCACATGACATGGGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTTT CATTTAATCTAACGCACAACITTCTTTGGATGAGTAAGTATTTGGGGATTGTnTTCT GCATGTCCTTTTTATATnTCATCCTCTTTTGTTCTTTCTGATATTTGTnTAATAAGTG CAGTCTATTCATCACAATAATTTTGGCAGGATC1TATGACTACTTTCAATTTGTGCAA CAATGGCCACC

-24 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 41-p-artiaJ sequence of SFB 3Γ (částečná sekvence SFE ST); DNA; Primus cerasus L> ATGGCAITTACAAIACGTAAGAAAGAAATCTTAATCGACATCCTGGIGAGACTACCTACAAA GTCCCTCGTTCGAITTCTGTGTACATGCAAGICATGGAGTGATTTTAITGGCAGCTCGAGTTTT GTTAGCACACACCTIGATAGGAATGTCACAAAACATGCCCATGTCTATCTACTCTGCCTCCAC CACCCAAATTTTGAATGTGACGTCGACCCIGATGACTAGGGGTGGGCAICGGGACCGGAAAA CCGGAACACCGAACCGAATCGGTGAAAAAAAACCGGAAAAAAAACCGGTTGACCAAAAAAG TCAACAAACCGGACCGGACCGGACCGAACCGGTTCCAACCGGTTCCGGITCCGGTTTTACACT ACACCGCACCGGACCGGACCGAACCGGACCGGTCATATTTITTTArTTTITTTTTATriTTTTT AITmTATTTACAAATITrTAAAATAIAATCTCATATrTTAAATGTrATAATCACIATAGTTCA ACTTCAAAAAATTICTAAATGTATGAATIGGATTATTTGTIAATTTTTAAGCCAAAAAAATAA ΟΊΤΑΊΤΤΑΤΤΑΤΑΑΑΊΤΤΊΤΑΑΙΤΑΑΑΑΑΑΑΙΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΙΊΤΤΤΑΑΑΑΑΑΑΤΑΑΑΑ AAATAATTAAAAAATAAAAAATTAATAAACCGGTTCAAAACCGGAACCGGTCAGAACCGGAC CGGAACCGGTCAGAACCGAACCGGCCGGTTTITGAATrTTTTTTTACTIAAACCGGACCGAAC CGGACCGGTTAAATAGTACCGATTTCGGTTCCGGTTTAAGGTCAGAACCGGACCGAACCGGA CCGCGCCCACCCCIACTGATGACCCATATGTIAAAAAAGAATTTCAAIGGTCTCIITrTCCCA ATCAAACATGIGAGGTGTrCTACAAGTTAAGCCATCCCITAGGGAACACAGAACAITATGGG ATATATGGTTCAAGCAAT «SEQ ID NO. 42-partial sequence of 3-RNase S2-the first intron region (částečná sekvence 3-RNázy S2oblast pmnho intronu); DNA; Primus avium L> TCrAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCITTTGCTTTCTICTTGT GITICATTATGAGCACTGGTGATGGTGGGTTGCATTACAATCCTITGCTCTATATATCCTACAT GCGTATAATCAGCATTGCGTTTITCTACTIGTATTTTTTTGTTCAGAGAAACTATTGTGCGTGT TCGATGATATATCACATGGCATGCGGTGTATTGACTTCACCCACATATTTITCATTTAATCTAA CGCACAACTTTCTITGGATAAGTAAGTAIIGGGAATTGCTITTTCTGCATGTCCTCAATTTArT TrCATCCTCTTTTTATTTGGCAGGATCTTACGACTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCG ACCAACTGCAGAGTTCGCATCAAGCGACCIIGCTC <SEQ ID NO. 43 -partial sequence of S-RNase S2-the second intron region (částečná sekvence S-RNázy S2oblast druhého intronu); DNA; Primus avium L> ATCAIATGAGCCACTTCTTGACATGCGCTCACICTACCCICTAAAAAriGAACGAAATCICAA CTCATAAATCAAATIATTTrTAAGAATCCTATAGATGGCATGAGTAGACATAAATATCCCCCA CGAGAGGCACCTGCTTACTTTGTCACGCAAITGAATGTATCCTTGAAITGTGGTAGGIATTAA ACTACAGGCAGAGAICGAATTAAITTATCACTCATAATCIAACTATCGCTTAAGrTTGTACTTr CTCrCAAAATATTTATATArTGCITGGATGTCTCAGTCACCTCAGTTGCGAGCCAAACTGAAG AGATCTTGGCCCGACGTGGAAAGTGGCAAIGATACAAGAITTTG <SEQ ID NO. 44-partial sequence of S-RNase S3 (částečná sekvence 3-RNázv S3); DNA Primus avium L>-24 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 41-p-artiaJ sequence of SFB 3Γ (partial sequence of SFE ST); DNA; Primus cerasus L> ATGGCAITTACAAIACGTAAGAAAGAAATCTTAATCGACATCCTGGIGAGACTACCTACAAA GTCCCTCGTTCGAITTCTGTGTACATGCAAGICATGGAGTGATTTTAITGGCAGCTCGAGTTTT GTTAGCACACACCTIGATAGGAATGTCACAAAACATGCCCATGTCTATCTACTCTGCCTCCAC CACCCAAATTTTGAATGTGACGTCGACCCIGATGACTAGGGGTGGGCAICGGGACCGGAAAA CCGGAACACCGAACCGAATCGGTGAAAAAAAACCGGAAAAAAAACCGGTTGACCAAAAAAG TCAACAAACCGGACCGGACCGGACCGAACCGGTTCCAACCGGTTCCGGITCCGGTTTTACACT ACACCGCACCGGACCGGACCGAACCGGACCGGTCATATTTITTTArTTTITTTTTATriTTTTT AITmTATTTACAAATITrTAAAATAIAATCTCATATrTTAAATGTrATAATCACIATAGTTCA ACTTCAAAAAATTICTAAATGTATGAATIGGATTATTTGTIAATTTTTAAGCCAAAAAAATAA ΟΊΤΑΊΤΤΑΤΤΑΤΑΑΑΊΤΤΊΤΑΑΙΤΑΑΑΑΑΑΑΙΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΑΙΊΤΤΤΑΑΑΑΑΑΑΤΑΑΑΑ AAATAATTAAAAAATAAAAAATTAATAAACCGGTTCAAAACCGGAACCGGTCAGAACCGGAC CGGAACCGGTCAGAACCGAACCGGCCGGTTTITGAATrTTTTTTTACTIAAACCGGACCGAAC CGGACCGGTTAAATAGTACCGATTTCGGTTCCGGTTTAAGGTCAGAACCGGACCGAACCGGA CCGCGCCCACCCCIACTGATGACCCATATGTIAAAAAAGAATTTCAAIGGTCTCIITrTCCCA ATCAAACATGIGAGGTGTrCTACAAGTTAAGCCATCCCITAGGGAACACAGAACAITATGGG ATATATGGTTCAAGCAAT «SEQ ID NO. 42-partial sequence of 3-RNase S2-the first intron region (partial sequence of 3-RNase S2-the first intron region); DNA; Primus avium L> TCrAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCITTTGCTTTCTICTTGT GITICATTATGAGCACTGGTGATGGTGGGTTGCATTACAATCCTITGCTCTATATATCCTACAT GCGTATAATCAGCATTGCGTTTITCTACTIGTATTTTTTTGTTCAGAGAAACTATTGTGCGTGT TCGATGATATATCACATGGCATGCGGTGTATTGACTTCACCCACATATTTITCATTTAATCTAA CGCACAACTTTCTITGGATAAGTAAGTAIIGGGAATTGCTITTTCTGCATGTCCTCAATTTArT TrCATCCTCTTTTTATTTGGCAGGATCTTACGACTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCG ACCAACTGCAGAGTTCGCATCAAGCGACCIIGCTC <SEQ ID NO. 43 -partial sequence of S-RNase S2-the second intron region (partial sequence of S-RNase S2-the second intron region); DNA; Primus avium L> ATCAIATGAGCCACTTCTTGACATGCGCTCACICTACCCICTAAAAAriGAACGAAATCICAA CTCATAAATCAAATIATTTrTAAGAATCCTATAGATGGCATGAGTAGACATAAATATCCCCCA CGAGAGGCACCTGCTTACTTTGTCACGCAAITGAATGTATCCTTGAAITGTGGTAGGIATTAA ACTACAGGCAGAGAICGAATTAAITTATCACTCATAATCIAACTATCGCTTAAGrTTGTACTTr CTCrCAAAATATTTATATArTGCITGGATGTCTCAGTCACCTCAGTTGCGAGCCAAACTGAAG AGATCTTGGCCCGACGTGGAAAGTGGCAAIGATACAAGAITTTG <SEQ ID NO. 44-partial sequence of S-RNase S3 (partial sequence 3-RNase S3); DNA Primus avium L>

GTTGAAATCGTCACICTCTrTCCTTGTTCTTGGTTTTGCTITCTTCTTGTGTTTCATIATCAGCG CTGGTGATGGTGGGTTGCCTTACAATCITTTGCTCTATATATCCTATAIGCATATAATCAGCAT TGCGimTCTACTTGTATrTmGTTCAGAGAAACTArATTGTGrGrGTTGCAATAAGTGCAG TCrATICATCACAAIAATTITCGCAGGATCITATGTCTAITITCAATITGTGCAACAATGGCCA CCGACCACCTGCAGAGTACAGAAGAAATGCTCTAAACCCCGGC <SEQ ID NO. 45-partiaJ sequence of SFB 33 (částečná sekvence SFB S3); DNA; Primus avium L> ATGCICATGTCTATCTACTTTGCCTTCACCACCCACAATTTGAACGTCAGAACGACAATGATG ACCCATATGATAIAGAAGAACriCAGTGGICACTITTTrCCAATGAAAAGTTTGAGCAGTTCT CCAATITAAGCCAICCmAGAAAACACAGAGCATTITAGAATATATGGTTCAA <SEQ ID NO. 4č-paitial sequence of S-RNase S3' (částečná sekvence S-RNázy S3 0; DNA; Primus avium L>GTTGAAATCGTCACICCTrTCCTTGTTCTTGGTTTTGCTITCTTCTTGTGTTTCATIATCAGCG CTGGTGATGGTGGGTTGCCTTACAATCITTTGCTCTATATATCCTATAIGCATATAATCAGCAT TGCGimTCTACTTGTATrTmGTTCAGAGAAACTArATTGTGrGrGTTGCAATAAGTGCAG TCrATICATCACAAIAATTITCGCAGGATCITATGTCTAITTCAATITGTGCAACAATGCCA CCGACCACCTGCAGAGTACAGAAGAAATGCTCTAAACCCCGGC <SEQ ID NO. 45-partiaJ sequence of SFB 33 (partial sequence of SFB S3); DNA; Primus avium L> ATGCICATGTCTATCTACTTTGCCTTCACCACCCACAATTTGAACGTCAGAACGACAATGATG ACCCATATGATAIAGAAGAACriCAGTGGICACTITTTrCCAATGAAAGTTTGAGCAGTTCT CCAATITAAGCCAICCmAGAAACACAGGCATTITAGAATATATGGTTCAA <SEQ ID NO. 4ch-partial sequence of S-RNase S3' (partial sequence of S-RNase S3 0; DNA; Primus avium L>

-25 CZ 36551 UI-25 CZ 36551 UI

GTTGAAATCGTCACTCTCTTTCCTTGTTCTTGGTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCAriATCAGCG CTGGTGATGGTGGGITGCCTIACAATCITTIGCTCTATAIAICCTATAIGCATATAAICAGCAT TGCGTTTTTCTACITGTATTTITTGTTCAGAGAAACrArATTGTGrGTGTTGCAATAAGTGCAG TCTATTCATCACAATAATTTTCGCAGGArCTTATGTCTATriTCAAriTGTGCAACAATGGCCA CCGACCACCTGCAGAGTACAGAAGAAATGCTCTAAACCCCGGC <SEQ ID NO. 47-partial sequence of S-RNase S4 (částečná sekvence 3-RNázv S4); DNA Primus avium L>GTTGAAATCGTCACTCTCTTTCCTTGTTCTTGGTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCAriATCAGCG CTGGTGATGGTGGGITGCCTIACAATCITTIGCTCTATAIAICCTATAIGCATATAAICAGCAT TGCGTTTTTCTACITGTATTTTITTGTTCAGAGAAACrArATTGTGrGTGTTGCAATAAGTGCAG TCTATTCATCACAATAATTTTCGCAGGArCTTATGTCTATriTCAAriTGTGCAACAATGCCA CCGACCACCTGCAGAGTACAGAAGAAATGCTCTAAACCCCGGC <SEQ ID NO. 47-partial sequence of S-RNase S4 (partial sequence 3-RNase S4); DNA Primus avium L>

GTATGGCGATGTTGAAATCCACxACTCGCTTrCCTTGTTCTIGCTTTCGCTTTCTTCATTIGTTAC GTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAArCITCTGCTCTTTAAATCrTATATGCATATAATCA GCATTGCGTTTTTCTACGTGTATTTTTTTGTTOAGAGGA\CTGTTGTGIGCGTTCAATGATATA TCACAIGAACATGCCGTGTATCGAATTCACCCACATATTTTTCAITTAATCTAACGCACAACTT TCTTCGGATGAGTAAGTATrTGGGGATrGrATTTTGCAIGTCCTCTTTTTATTITCATCCTCTIT xACTTriGTTTATrCTGATAATTGTTACAArAAGTTCAGCCTACTGGAAAGCTAAAGTTATATGT TCTTTATTCTTGAAATCCTTAmATGATAGCATTAACATTCTCACAATAATTTTGGCAGGATC TrArGACTAmiCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAATAAACC TTGrACCAAACCCCGGCCATTACAAAA <SEQ ID NO. 4S-partiaJ sequence of SFB 34 (částečná sekvence SFB 34); DNA; Primus avium L> AGGAACAAATTTGCITGCTrrCTAGCTTTTATTCTTGCGAGGAGAAGGGTATGCGAAAAATTG ACTTCTGGGTTCTGCAAGAAAAACGGTGGAAACAATTGTGTCCTTTrATTTATCCTrCTCATTA TrArGGTACACICGGTATTAGIAAAGATAACGAACTCTTAATGGAAAAGAGAGArTTCTCTAG GGGCAIAGGAGATCTGCArTTGTGTAATTACGAATCCAAGCAAGrTCTrGGTATGGCGATGTTGAAATCCACxACTCGCTTrCCTTGTTCTIGCTTTCGCTTTCTTCATTIGTTAC GTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAArCITCTGCTCTTTAAATCrTATATGCATATAATCA GCATTGCGTTTTTCTACGTGTATTTTTTTGTTOAGAGGA\CTGTTGTGIGCGTTCAATGATATA TCACAIGAACATGCCGTGTATCGAATTCACCCACATATTTTTCAITTAATCTAACGCACAACTT TCTTCGGATGAGTAAGTATrTGGGGATrGrATTTTGCAIGTCCTCTTTTTATTITCATCCTCTIT xACTTriGTTTATrCTGATAATTGTTACAArAAGTTCAGCCTACTGGAAAGCTAAAGTTATATGT TCTTTATTCTTGAAATCCTTAmATGATAGCATTAACATTCTCACAATAATTTTGGCAGGATC TrArGACTAmiCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAATAAACC TTGrACCAAACCCCGGCCATTACAAAA <SEQ ID NO. 4S-partiaJ sequence of SFB 34 (partial sequence of SFB 34); DNA; Primus avium L> AGGAACAAATTTGCITGCTrrCTAGCTTTATTCTTGCGAGGAGAAGGGTATGCGAAAAAATTG ACTTCTGGGTTCTGCAAGAAAAACGGTGGAAACAATTGTGTCCTTTrATTTATCCTrCTCATTA TrArGGTACACICGGTATTAGIAAAGATAACGAACTCTTAATGGAAAGAGAGArTTCTCTAG GGGCAIGGAGATCTGCArTTGTGTAATTACGAATCCAAGCAAGrTCTrG

ASEQ ID NO. 49-paitial sequence of S-RNase 34 (částečná sekvence S-RNázy S4/); DNA; Primus avium L>ASEQ ID NO. 49-partial sequence of S-RNase 34 (partial sequence of S-RNase S4/); DNA; Primus avium L>

GTATGGCGATGTTGAAATCCACACTCGCTTTCCTTGTTCriGCTTTCGCTTTCTTCATTIGTTAC GTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAArCITCTGCTCTTTAAATCrTATATGCATATAATCA GCAriGCGTT1TTCTACGTGTA1TT1TTTGTTCAGAGG.AACTGTTGTGIGCGTTCAATGATATA TCACAIGAACATGCCGTGTATCGAATTCACCCACATATTTTTCATrTAATCTAACGCACAACTT TCTTCGGATGAGTAAGTATITGGGGATrGrATTITGCAIGTCCTCTTTITATTITCATCCTCTIT ACTITTGTITATrCTGATAAITGITACAArAAGTTCAGCCTACTGGAAAGCTAAAGITATATGT TCTTTATTCTTGAAATCCTTATTIATGATAGCATTAACATTCTCACAAIAATTTTGGCAGGATC ITArGACTAnTICAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAATA^ACC TrGTACCAAACGCCGGCCATTACAAAAGTATGGCGATGTTGAAATCCACACTCGCTTTCCTTGTTCriGCTTTCGCTTTCTTCATTIGTTAC GTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAArCITCTGCTCTTTAAATCrTATATGCATATAATCA GCAriGCGTT1TTCTACGTGTA1TT1TTTGTTCAGAGG.AACTGTTGTGIGCGTTCAATGATATA TCACAIGAACATGCCGTGTATCGAATTCACCCACATATTTTTCATrTAATCTAACGCACAACTT TCTTCGGATGAGTAAGTATITGGGGATrGrATTITGCAIGTCCTCTTTITATTITCATCCTCTIT ACTITTGTITATrCTGATAAITGITACAArAAGTTCAGCCTACTGGAAAGCTAAAGITATATGT TCTTTATTCTTGAAATCCTTATTIATGATAGCATTAACATTCTCACAAIAATTTTGGCAGGATC ITArGACTAnTICAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAATA^ACC TrGTACCAAACGCCGGCCATTACAAAA

ASBQ ID NO. 5Q-partiaJ sequence of SFB 34' (částečná sekvence SFB S4); DNA; Primus avium L> AGGAACAA4TTTGCITGCTTICIAGCTTTTATTCTTGCGAGCAGA\GCKjIATGCT^ASBQ ID NO. 5Q-partiaJ sequence of SFB 34' (partial sequence of SFB S4); DNA; Primus avium L> AGGAACAA4TTTGCITGCTTICIAGCTTTTATTCTTGCGAGCAGA\GCKjIATGCT^

ACTTCTGGGTTCTGCAAGAAAAACGGTGGAAACAATTGTGTCCTTTTATCCTTCTCATTATrAT GGrACACTCGGTATIAGTAAAGAIAACGAACTCTTAATGGAAAAGAGAGAnTCTCTAGGGG CATAGGAGATCTGCATTTGTGTAATTACGAAICCAAGCAAGTTCTIGACTTCTGGGTTCTGCAAGAAAAACGGTGGAAACAATTGTGTCCTTTTATCCTTCTCATTAtrAT GGrACACTCGGTATIAGTAAAGAIAACGAACTCTTAATGGAAAGAGAGAnTCTCTAGGGG CATAGGAGATCTGCATTTGTGTAATTACGAAICCAAGCAAGTTCTIG

4SEQ ID NO. 51-partial sequence of S-RNase 35 (částečná sekvence S-RNázy S5); DNA Primus avium L>4SEQ ID NO. 51-partial sequence of S-RNase 35 (partial sequence of S-RNase S5); DNA Primus avium L>

CTTGTICTTGCTriCGCTTTCIICTTTTGTTATGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCT TrTCCTCTTTATATCCTATAAATGTGCATArAATCAGCAITGCGITIITCTGCTriTATAITTTG TrTAIAGAAACTAITGTGTGTGITAGATGATATATATCAAACGACAIGCGGTGTAITGAATTC ACCCACATAITriGCATTTAArCTAACGCACAACTITCCIIGGATGAGTAAGTATTTTGGTGAT TGTmTCTGCATGTCCTCTITTTATITrCATAATCTTITGITTATTCTGGTAATrGTTTGCAATA AGCGCAGTCTATTCATCACAAIAATTTTGGCAGGATCriATGACTATTTTCAATlTGTGCAACA ATGGCCACCGACCAACTGCAGAGITCGAACGAACTTGTICTTGCTriCGCTTTCIICTTTTGTTATGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCT TrTCCTCTTTATATCCTATAAATGTGCATArAATCAGCAITGCGITIITCTGCTriTATAITTTG TrTAIAGAAACTAITGTGTGTGITAGATGATATATATCAAACGACAIGCGGTGTAITGAATTC ACCCACATAITriGCATTTAArCTAACGCACAACTITCCIIGGATGAGTAAGTATTTTGGTGAT TGTmTCTGCATGTCCTCTITTTATITrCATAATCTTITGITTATTCTGGTAATrGTTTGCAATA AGCGCAGTCTATTCATCACAAIAATTTTGGCAGGATCriATGACTATTTTCAATlTGTGCAACA ATGGCCACCGACCAACTGCAGAGITCGAACGAA

-26CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 52-partial sequence of SFB S5 (částečná sekvence SEB S3); DNA; Piunns avium L>-26CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 52-partial sequence of SFB S5 (partial sequence of SEB S3); DNA; Piunns avium L>

CAATGACCAAATTTGCTrGCnTCTGGAITrTATGGTTGTGAGGATGAGGGCTTGGAC AAAATTGACrTATGGGTTTTGCAAGAAAAACAGTGGAAAGAATTGTGTCCrGTTATT TTTCCTCCTTIGGGTGATTGTGATCGTATAATCGGGATTAGTATAGGTATTGAACTCT TAATGGA <SEQ ID NO. 53-partial sequence of S-RNase S5' (částečná sekvence S-RNázy 3 3'); DNA Prumis aviumL>CAATGACCAAATTTGCTrGCnTCTGGAITrTATGGTTGTGAGGATGAGGGCTTGGAC AAAATTGACrTATGGGTTTTGCAAGAAAAACAGTGGAAAGAATTGTGTCCrGTTATT TTTCCTCCTTIGGGTGATTGTGATCGTATAATCGGGATTAGTATAGGTATTGAACTCT TAATGGA <SEQ ID NO. 53-partial sequence of S-RNase S5' (partial sequence of S-RNase 3 3'); DNA Prumis aviumL>

CTTGTTCTTGCTTTOGCTTTCTTCTTTTGTTATGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTA CAATCTTTTGCTCTTTATATCCTArAAATGTGCATATAATCAGCATTGCGTTITTCTGC TTTTATATTTIGTTTArAGAAACTATTGrGTGTGTTAGATGATATATATGAAATGACA TGCGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTGCATTTAATCTAACGCACAACTTTCTTT GGATGAGTAAGTATTTGGTGATTGTTTTTCTGCATGTCCTCTTTTTATTTTCATAATCT TTTGTTTATTCTGGTAATTGTTTGCAATAAGCGCAGTCTATTCATCACAATAArTTTG GCAGGATCTTATGACrATTTTCAATTTGIGCAACAATGGCCACCGACCAACIGCAGA GTTCGAAOGAA <SEQ ID NO. 54-partial sequence of SFB 35' (částečná sekvence SFB 35'); DNA Primus avium L>CTTGTTCTTGCTTTOGCTTTCTTCTTTTGTTATGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTA CAATCTTTTGCTCTTTATATCCTArAAATGTGCATATAATCAGCATTGCGTTITTCTGC TTTTATATTTIGTTTArAGAAACTATTGrGTGTGTTAGATGATATATATGAAATGACA TGCGGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTGCATTTAATCTAACGCACAACTTTCTTT GGATGAGTAAGTATTTGGTGATTGTTTTTCTGCATGTCCTCTTTTTATTTTCATAATCT TTTGTTTATTCTGGTAATTGTTTGCAATAAGCGCAGTCTATTCATCACAATAArTTTG GCAGGATCTTATGACrATTTTCAATTTGIGCAACAATGGCCACCGACCAACIGCAGA GTTCGAAOGAA <SEQ ID NO. 54-partial sequence of SFB 35' (partial sequence of SFB 35'); DNA Primus avium L>

C*AATGACCAAATTTGCTTGCTTTCTGGATTrTATGGTTGTGAGGATGAGGGCTTGGAC AAAATTGACrTATAGGTTTTGCAAGAAAAACAGTGGAAAGAATTGTGTCCrGTTATT TTTCCTCCTTIGGGTGATTGrGATCGTATAATCGGGATTAGTATAGGTArTGAACTCT TAATGGA <SEQ ED NO. 55-partial sequence of S-RNase S6 promoter (částečná sekvence promotoru SRNazy S6),DNA Primus cerasusL >C*AATGACCAAATTTGCTTGCTTTCTGGATTrTATGGTTGTGAGGATGAGGGCTTGGAC AAAATTGACrTATAGGTTTTGCAAGAAAAAACAGTGGAAAGAATTGTGTCCrGTTATT TTTCCTCCTTIGGGTGATTGrGATCGTATAATCGGGATTAGTATAGGTArTGAACTCT TAATGGA <SEQ ED NO. 55-partial sequence of S-RNase S6 promoter, DNA Primus cerasusL >

ACCGCAAIAOČATCATTCCATGTGGCCATTGACTTGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGA ATAGCATAAAGGAACTATTACAACTCTATGACAAAAGGTAATTTTTGATCGGTATGA AAACTITACTACTTCGITCTAAAAGATCTAAAAGATAGGATGCTTCCAATCGGAACT TTTTGCTCACCATGCAATTGCTTTTAACCATTTGATTACAAOGTTCTTATTACCATTTG AITACAAATTrCTTATTATrACATrCCTCTTIAGITCAAATCTAGTGATACCTACTCTr TAAATITAITrCCTTGAACTATCTAGATGACTAGCTCAAAAACAlTTTATAGTGAATA TAATTATGTCCCACTTAATTIAAGTATGIAATAAATTrGGAITITCCCClTrAATAGC AACAAACTTTTGTTAACAGCAATTATACACCCAACCATT.AAAGG1TAAGTGGTGTCT ΤΓ <SEQ ID NO. 56-partial sequence of S-RNase S6 (částečná sekvence S-RNázy Sč): DNA; Pturms anum L.-~-ACCGCAAIAOČATCATTCCATGTGGCCATTGACTTGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGA ATAGCATAAAGGAACTATTACAACTCTATGACAAAAGGTAATTTTTGATCGGTATGA AAACTITACTACTTCGITCTAAAAGATCTAAAAGATAGGATGCTTCCAATCGGAACT TTTTGCTCACCATGCAATTGCTTTTAACCATTTGATTACAAOGTTCTTATTACCATTTG AITACAAATTrCTTATTATrACATrCCTCTTIAGITCAAATCTAGTGATACCTACTCTr TAAATITAITrCCTTGAACTATCTAGATGACTAGCTCAAAAACAlTTTATAGTGAATA TAATTATGTCCCACTTAATTIAAGTATGIAATAAATTrGGAITITCCCClTrAATAGC AACAAACTTTTGTTAACAGCAATTATACACCCAACCATT.AAAGG1TAAGTGGTGTCT ΤΓ <SEQ ID NO. 56-partial sequence of S-RNase S6 (partial sequence of S-RNase Sč): DNA; Pturms anum L.-~-

GCTTTCCTTGITCTTGCTTnGCTTrCTrCTTGTGTITCATTATGAGCAATGGTGGGGr TGCATrGCAriACAATCmTGCTCTTIATAATATGTGCATACAATTGATrCTAAAAA AATATGCATATAATTTGCATTGTATlTrrCTACITCTATITrATGlTrGGATAAiTATr GIGTGTGTTCGATGATATATATATCATGTAACGGAGGA1TTTGATCTAGCGCAC.AAC CTTCTTTGACIGAGT.AACTACTTGGGAAITACTTTrCTGCATGTGTTITCnTCGITrA CTCTAGTrGTTGTTGCAAIAAGTGOAGCGGAAATrATGTTCTCTATACAICAAATCCT TATnAAGATCrilTAGAIAATmGGCAGGATCrTATGTCTATTITCAATAATTlTGG CAGGATCITATGTCTATTITCAATITGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAG TrCGCATCAAGCGACCTrGCTCCAGTCCCCGGCCATTACAATATrTCACCATTCATGG CCTTTGGCCAAGTAATTAITCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCA AITrAAGCGAATATTGGTATGrAITGTrTCATITTGITTTCCACCTACCCnTAGCrTT TxAGTTTTTxACCAAATTAGATTGTTAGTATGAACATATATAATATACTCTTTTTTTATA ACATTOGTCATCTGGTTAGGCACACACATTATCTTGAATATATATCTAAGTACAAAAT TGCTTGGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCITGGCCGGA raTGGAAAGIGGCAATGATACAAAGGCTTTCCTTGITCTTGCTTnGCTTrCTrCTTGTGTITCATTATGAGCAATGGTGGGGr TGCATrGCAriACAATCmTGCTCTTIATAATATGTGCATACAATTGATrCTAAAAA AATATGCATATAATTTGCATTGTATlTrrCTACITCTATITrATGlTrGGATAAiTATr GIGTGTGTTCGATGATATATATATCATGTAACGGAGGA1TTTGATCTAGCGCAC.AAC CTTCTTTGACIGAGT.AACTACTTGGGAAITACTTTrCTGCATGTGTTITCnTCGITrA CTCTAGTrGTTGTTGCAAIAAGTGOAGCGGAAATrATGTTCTCTATACAICAAATCCT TATnAAGATCrilTAGAIAATmGGCAGGATCrTATGTCTATTITCAATAATTlTGG CAGGATCITATGTCTATTITCAATITGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAG TrCGCATCAAGCGACCTrGCTCCAGTCCCCGGCCATTACAATATrTCACCATTCATGG CCTTTGGCCAAGTAATTAITCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCA AITrAAGCGAATATTGGTATGrAITGTrTCATITTGITTTCCACCTACCCnTAGCrTT TxAGTTTTTxACCAAATTAGATTGTTAGTATGAACATATATAATATACTCTTTTTTTATA ACATTOGTCATCTGGTTAGGCACACACATTATCTTGAATATATATCTAAGTACAAAAT TGCTTGGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCITGGCCGGA raTGGAAAGIGGCAATGATACAAAG

-27CZ 36551 UI <SEQ ID NO.57-partial sequence of S-RNase Sám promoter (částečná sekvence promotoru S-RNázy 36m); DNA; Primus cerasus L- ACCGCAATACCATCATTCCATGTGGCCATrGACTrGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGAATAGC ATAAAGGAACrATIACAACTCTATCACAAAAGGTAATTITTGATCGGTATGAAAACITTACTA CTTCGTTCTAAAAGATCTAAAAGATAGGGGIGAACACGGGTCGGGTCGGGTCGGGIAIAGGC CCAAACCGCTCTCCGAACCGACTATGTCGGCAGGCCCATTGGGCAAACCGTACACTGCACTTT TAGGCCCAAT1TCGAATGAAATCGAAACCCGATATGTCGGGTCGGGTTGGGTCGGCCTGCGG GTTIICTACCGAGGCCCAAAAACAGCAACTGGAGTTGGIITTTTCTAAAAATATTTCCATGCA CATTTITTTGGGGTCAGArTTCTAGGCCCATTCAAGTTTAGGACTCGTGTATATTCTICCAGTT TATGTACTTCTGCATAATTTTAGCACATATCATTCAAATACAAATAAAAACTTGAAAATCATA AACCATCACATGICCAAATTCACAGAAATAIAIATTACAGACCAAGCAAATTGTGAGAGTAA TCTCAATCACAAlTIGCATACCTGCAAAGriAAAAACCTAAGAAAATCAICATCCArCACACA AGrCCAAATTCACAGAAATTATTACAGACCAIAACAGAAAATCAAATCAAAAGAAGIAAATT TTCATIACATATAGAAATAAAATICCATGAGITTCATACTCCTCCCrCAAATCAAAITAGCAC CTCIGCATAAAGAAAAAAAAGGTTAATAAATATATGAATAATAGGIGIAAACAAGTTAAAGG TGGAAGAAAAGCACAGAGGGCAIAGAGAACAAGTGACTCACATGGGACIAGTAGTCCAGGG AAGGICCTGAACAATATCCAGAGCAGCATGIAATATGAACTGATGCAGTTGAGCAGCATCTT CTCrCIGTCAAGIGICAACCCCAITATTAAGACATAAGTAITTAGCCArATAAArTAIATATTT TGATGAATTTAAAAGTTATTAACAAACCCCATAACAGAAATTGAACAAAGCATTGCAGATGC AGAGATTGCCAAGAAATGAAGAAACCCArTTTAATTAATTGCAAATGGATGCArTTTGGCATA AAAAIAAAAAAITACACTAATGGAAAAGCATITGAATGTTACAAGTCTGAATCTTTGAGTCTC TAAACACACAAGTAACAAAAAAIGGGCAriGCAGATGAAIATGGAAATCAGAAAAAIGCAA TTGAAATTAGAAATTACAAAGGAAAAGGAACTGATGCAATATCCAGAGCAGCATGTAATATG AACTGATGCAGCTGAGCAGCATCTTCTCTCTGTCAAGTGTCAACCCAriAITAAGAIAIAAGT ATTrAGCCATArAAATTATAIAIlTTGATGAATTTAAAAGTTATTAACAAACTCCATAACAGA AAriGAACAAAGCATTGCAGATGCAGAGATTGCCAAGAAATGAAGAAACCCATTTTAATTAA TTGCAAATGGATGCATTTTGGCATAAAAATIACACTAATGGAAAAGCAITTGAATGITACAAG TCTGAATCTTTGAGTCTCTAAACACACAAGTAACAAAAAAIGGGCArTGCAGATGAATATGG AAATCAGAAAAAIGCAATTGAAATTAGAAAITACAAAGGAAAAGGAGAAGGAAAAGGAACG ATACITACTTTGGCAGCGGATCCGACTTCAGGTTCGTAAATAGGGATGICGTTrcrGCTGACG ATGACGAAACArGCTGTGGTTGCCAGCTGCTGCTATTTIACCTGCTATGCCTTCCACriCCGGC GACTCICTCTCACAGAGATGAIGAAAGATCTTCTAGTTICTGCCTTCCACITCCTCAAAAACIT TAGTAACCTTTTGTAACCTTCAGAAATTTACCGGAAATAAAAGCACAACCGGCAACTAAAAA TAACAACTrCCACAAGAACCAAAAAAATACAGAAATTTACCAGAAATAAAAGCACGGCCAGC AGCAACTAAAATIAACAACTAAACCAAGAACCAAAAAAATACAGAAAITTACCAAAAATAA AAGCGCGACCAGCAGCAACrAACTTCCTITCCTITGGGITCAAAATCAATCTGTCCAGAAATA AAAAAAAATCACAACATAGTCAGACTCGTGAAATCACAACCAGAATAATCAATCTGTCCATA ATAAAAATCACAACCAGCAGCCCIAAATTriTGGAATCAAGITTTCGAGATATTAGTACCTCA AAGCCCTAACTCGTGAAATGAGAATTTGCGGCTCAATTrGACAGTGAGAGAGAGTGACCGTG AGAGAGAGTGAGAGTGACAGAGAGAGAGCGAGAGTGACCGTGAGAGAGAGCAGAGAGAGA GAGCCACGCTGCGACTTTGCGAGAGTGACTGAGAGAGAGAGGGAGCGACAGTGACTCGAAG AAGGAAGAAGAAGTCGACGGAITTGGTCGGGGAGAGGAGGTTCAGrGAGAGGCAGATCTGA TGGAGAGAAGAGAAGAGACTCGAAGAAGGAAGAAGTGAAGAGAAAAAAAAAArCGAGCGG CTGAATGAATGTIAGGGTTrCGCGAGGAATCAAGTGTGGCAAGGCGIAIACTTGGGAIAAAA TGGACGAATCCGCCGGTGCCACGTATATTAATTTATTTriAAATAATATAAlTTTAAAATGTCG GTCCGGTCCGGmTCGCCGGimGAGAAAATTAAACCGGTTCAACCCGATTTArGGCCGGT TCGGCCGGGTTTTITACCGATTITTGGArTTTIAATTATAAAAACCGAACCAAACCACCAAAA ACGGTCCAGTTCGGTCGGTTCGGICGGGTTTICGGTAAIAATGCCCACCCCTAAAAGAIAGGA TGCTTCCAATCGGAACTTTrTGCICACCATGCAATTGCTITTAACCATITGATTACAACGTTCT TATrACCATTTGATTACAAATTTCTTATTATIACATTCCICTTTAGTrCAAATCTAGTGATACCT ACTCTTTAAATrTATTTCCTrGAACTATCTAGATGACrAGCTCAAAAACATrTTATAGTGAATA TAAITATGTCCCACITAATTTAAGTATGTAAIAAATTTGGATITTCCCCITTAATAGCAACAAA CTTITGTTAACAGCAATTArACACCCAACCAITAAAGGTIAAGTGGrGTCTTT-27CZ 36551 UI <SEQ ID NO.57-partial sequence of S-RNase Promoter itself (partial sequence of S-RNase promoter 36m); DNA; Primus cerasus L- ACCGCAATACCATCATTCCATGTGGCCATrGACTrGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGAATAGC ATAAAGGAACrATIACAACTCTATCACAAAAGGTAATTITTGATCGGTATGAAAACITTACTA CTTCGTTCTAAAAGATCTAAAAGATAGGGGIGAACACGGGTCGGGTCGGGTCGGGIAIAGGC CCAAACCGCTCTCCGAACCGACTATGTCGGCAGGCCCATTGGGCAAACCGTACACTGCACTTT TAGGCCCAAT1TCGAATGAAATCGAAACCCGATATGTCGGGTCGGGTTGGGTCGGCCTGCGG GTTIICTACCGAGGCCCAAAAACAGCAACTGGAGTTGGIITTTTCTAAAAATATTTCCATGCA CATTTITTTGGGGTCAGArTTCTAGGCCCATTCAAGTTTAGGACTCGTGTATATTCTICCAGTT TATGTACTTCTGCATAATTTTAGCACATATCATTCAAATACAAATAAAAACTTGAAAATCATA AACCATCACATGICCAAATTCACAGAAATAIAIATTACAGACCAAGCAAATTGTGAGAGTAA TCTCAATCACAAlTIGCATACCTGCAAAGriAAAAACCTAAGAAAATCAICATCCArCACACA AGrCCAAATTCACAGAAATTATTACAGACCAIAACAGAAAATCAAATCAAAAGAAGIAAATT TTCATIACATATAGAAATAAAATICCATGAGITTCATACTCCTCCCrCAAATCAAAITAGCAC CTCIGCATAAAGAAAAAAAAGGTTAATAAATATATGAATAATAGGIGIAAACAAGTTAAAGG TGGAAGAAAAGCACAGAGGGCAIAGAGAACAAGTGACTCACATGGGACIAGTAGTCCAGGG AAGGICCTGAACAATATCCAGAGCAGCATGIAATATGAACTGATGCAGTTGAGCAGCATCTT CTCrCIGTCAAGIGICAACCCCAITATTA AGACATAAGTAITTAGCCArATAAArTAIATATTT TGATGAATTTAAAAGTTATTAACAAACCCCATAACAGAAATTGAACAAAGCATTGCAGATGC AGAGATTGCCAAGAAATGAAGAAACCCArTTTAATTAATTGCAAATGGATGCArTTTGGCATA AAAAIAAAAAAITACACTAATGGAAAAGCATITGAATGTTACAAGTCTGAATCTTTGAGTCTC TAAACACACAAGTAACAAAAAAIGGGCAriGCAGATGAAIATGGAAATCAGAAAAAIGCAA TTGAAATTAGAAATTACAAAGGAAAAGGAACTGATGCAATATCCAGAGCAGCATGTAATATG AACTGATGCAGCTGAGCAGCATCTTCTCTCTGTCAAGTGTCAACCCAriAITAAGAIAIAAGT ATTrAGCCATArAAATTATAIAIlTTGATGAATTTAAAAGTTATTAACAAACTCCATAACAGA AAriGAACAAAGCATTGCAGATGCAGAGATTGCCAAGAAATGAAGAAACCCATTTTAATTAA TTGCAAATGGATGCATTTTGGCATAAAAATIACACTAATGGAAAAGCAITTGAATGITACAAG TCTGAATCTTTGAGTCTCTAAACACACAAGTAACAAAAAAIGGGCArTGCAGATGAATATGG AAATCAGAAAAAIGCAATTGAAATTAGAAAITACAAAGGAAAAGGAGAAGGAAAAGGAACG ATACITACTTTGGCAGCGGATCCGACTTCAGGTTCGTAAATAGGGATGICGTTrcrGCTGACG ATGACGAAACArGCTGTGGTTGCCAGCTGCTGCTATTTIACCTGCTATGCCTTCCACriCCGGC GACTCICTCTCACAGAGATGAIGAAAGATCTTCTAGTTICTGCCTTCCACITCCTCAAAAACIT TAGTAACCTTTTGTAACCTTCAGAAATTTACCGGAAATAAAAGCACAACCGGCAACTAAAAA TAACAACTrCC ACAAGAACCAAAAAAATACAGAAATTTACCAGAAATAAAAGCACGGCCAGC AGCAACTAAAATIAACAACTAAACCAAGAACCAAAAAAATACAGAAAITTACCAAAAATAA AAGCGCGACCAGCAGCAACrAACTTCCTITCCTITGGGITCAAAATCAATCTGTCCAGAAATA AAAAAAAATCACAACATAGTCAGACTCGTGAAATCACAACCAGAATAATCAATCTGTCCATA ATAAAAATCACAACCAGCAGCCCIAAATTriTGGAATCAAGITTTCGAGATATTAGTACCTCA AAGCCCTAACTCGTGAAATGAGAATTTGCGGCTCAATTrGACAGTGAGAGAGAGTGACCGTG AGAGAGAGTGAGAGTGACAGAGAGAGAGCGAGAGTGACCGTGAGAGAGAGCAGAGAGAGA GAGCCACGCTGCGACTTTGCGAGAGTGACTGAGAGAGAGAGGGAGCGACAGTGACTCGAAG AAGGAAGAAGAAGTCGACGGAITTGGTCGGGGAGAGGAGGTTCAGrGAGAGGCAGATCTGA TGGAGAGAAGAGAAGAGACTCGAAGAAGGAAGAAGTGAAGAGAAAAAAAAAArCGAGCGG CTGAATGAATGTIAGGGTTrCGCGAGGAATCAAGTGTGGCAAGGCGIAIACTTGGGAIAAAA TGGACGAATCCGCCGGTGCCACGTATATTAATTTATTTriAAATAATATAAlTTTAAAATGTCG GTCCGGTCCGGmTCGCCGGimGAGAAAATTAAACCGGTTCAACCCGATTTArGGCCGGT TCGGCCGGGTTTTITACCGATTITTGGArTTTIAATTATAAAAACCGAACCAAACCACCAAAA ACGGTCCAGTTCGGTCGGTTCGGICGGGTTTICGGTAAIAATGCCCACCCCTAAAAGAIAGGA TGCTTCCAATCGGAACTTTrTGCICACCATGCAATTGCTITTAACCATITGATTACAACGTTCT TATrA CCATTTGATTACAAATTTCTTATTATIACATTCCICTTTAGTrCAAATCTAGTGATACCT ACTCTTTAAATrTATTTCCTrGAACTATCTAGATGACrAGCTCAAAAACATrTTATAGTGAATA TAAITATGTCCCACITAATTTAAGTATGTAAIAAATTTGGATITTCCCCITTAATAGCAACAAA CTTITGTTAACAGCAATTArACACCCAACCAITAAAGGTIAAGGTGGrGTCTTT

-28 CZ 36551 UI <SEQ ED NO. 58-partial sequence of S-RNase S6tn (částečná sekvence S-RNázy S6tn); DNA; Pmnus cerasus L>-28 CZ 36551 UI <SEQ ED NO. 58-partial sequence of S-RNase S6tn (partial sequence of S-RNase S6tn); DNA; Pmnus cerasus L>

CTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCAATGGTGGGGTTGCATT GCATTACAATCTTTTGCTCTTTATAATATGTGCATACAATTGATTCTAAAAAAATATG CATATAATTTGCATTGTATTTTTCTACTTCTATTTTATGTTTGGATAAATATTGTGTGT GTTCGATGATATATATATATCATGTAACGGAGGATTTTGATCTAGCGCACAACCTTCT TTGACTGAGTAACTACTTGGGAATTACTTTTCTGCATGTGTTTTCTTTCGTTTACTCTA GTTGTTGTTGCAATAAGTGCAGCGGAAATTATGTTCTCTATACATCAAATCCTTAITT AAGATCTTTTAGATAATTTTGGCAGGATCTTATGTCTATTTTCAATAATTTTGGCAGG ATCTTATGTCTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGC ATCAAGCGACCTTGCTCCAGTCCCCGGCCATTACAATATTTCACCATTCATGGCCTTT GGCCAAGTAATTATTCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCAATTTA AGCGAATATTGGTATGTATTGTTTCATTTTGTTTTCCACCTACCCTTTAGCTTTTAGTT TITACCAAATTAGATTGTTAGTATGAACATATATAATATACTCTTTTTTTATAACATT CGTCATCTGGTTAGGCACACACATTATCTTGAATATATATCTAAGTACAAAATTGCTT GGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCTTGGCCGGACGTGG AAAGTGGCAATGATACAAAG <SEQ ID NO. 59-partial sequence of S-RNase £6m2 promoter (částečná sekvence promotoru SRNázy Sůmlj; DNA; Pmnus cerasus L>CTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCAATGGTGGGGTTGCATT GCATTACAATCTTTTGCTCTTTATAATATGTGCATACAATTGATTCTAAAAAAATATG CATATAATTTGCATTGTATTTTTCTACTTCTATTTTATGTTTGGATAAATATTGTGTGT GTTCGATGATATATATATATCATGTAACGGAGGATTTTGATCTAGCGCACAACCTTCT TTGACTGAGTAACTACTTGGGAATTACTTTTCTGCATGTGTTTTCTTTCGTTTACTCTA GTTGTTGTTGCAATAAGTGCAGCGGAAATTATGTTCTCTATACATCAAATCCTTAITT AAGATCTTTTAGATAATTTTGGCAGGATCTTATGTCTATTTTCAATAATTTTGGCAGG ATCTTATGTCTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGC ATCAAGCGACCTTGCTCCAGTCCCCGGCCATTACAATATTTCACCATTCATGGCCTTT GGCCAAGTAATTATTCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCAATTTA AGCGAATATTGGTATGTATTGTTTCATTTTGTTTTCCACCTACCCTTTAGCTTTTAGTT TITACCAAATTAGATTGTTAGTATGAACATATATAATATACTCTTTTTTTATAACATT CGTCATCTGGTTAGGCACACACATTATCTTGAATATATATCTAAGTACAAAATTGCTT GGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCTTGGCCGGACGTGG AAAGTGGCAATGATACAAAG <SEQ ID NO. 59-partial sequence of S-RNase £6m2 promoter (partial sequence of SRNase Sůmlj promoter; DNA; Pmnus cerasus L>

ACCGCAATACCATCATTCCATGTGGCCATTGACTTGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGA ATAGCATAAAGGAACTATTACAACTCTATCACAAAAGGTAATTTTTGATCGGTATGA AAACTTTACTACTTCGTTCTAAAAGATCT.AAAAGATAGGATGCTTCCAATCGGAACT TITTGCTCACCATGCAATTGCTTTTAACCATTTGATTACAACGTTCTTATTACCATTTG ATTACAAMTTCTTATTATTACA1TCCTCTTTAGTTCAAATCTAGTGATACCTACTCTT TAAATTTATTTCCTTGAACTATCTAGATGACTAGCTCAAAAACATTTTATAGTGAATA TAATTATGTCCCACTTAATTTAAGTATGTAATAAATTTGGATTTTCCCCTTTAATAGC AACAAACmTGTTAACAGCAATTATACACCCAACCATTAAAGGTTAAGTGGTGTCT TT <SEQ ID NO. íď-partial sequence of S-RNase S6m2 (částečná sekvence S-RNázy £6m2); DNA; Pmnus cerasus L>ACCGCAATACCATCATTCCATGTGGCCATTGACTTGGCAGTTTGACGTCTTAGCCTGA ATAGCATAAAGGAACTATTACAACTCTATCACAAAAGGTAATTTTTGATCGGTATGA AAACTTTACTACTTCGTTCTAAAAGATCT.AAAAGATAGGATGCTTCCAATCGGAACT TITTGCTCACCATGCAATTGCTTTTAACCATTTGATTACAACGTTCTTATTACCATTTG ATTACAAMTTCTTATTATTACA1TCCTCTTTAGTTCAAATCTAGTGATACCTACTCTT TAAATTTATTTCCTTGAACTATCTAGATGACTAGCTCAAAAACATTTTATAGTGAATA TAATTATGTCCCACTTAATTTAAGTATGTAATAAATTTGGATTTTCCCCTTTAATAGC AACAAACmTGTTAACAGCAATTATACACCCAACCATTAAAGGTTAAGTGGTGTCT TT <SEQ ID NO. íď-partial sequence of S-RNase S6m2 (partial sequence of S-RNase £6m2); DNA; Pmnus cerasus L>

GCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCAATGGTGGGGT TGCATTGCATTACAATCTTTTGCTCTTTATAATATGTGCATACAATTGATTCTAAAAA AATATGCATATAATTTGCATTGTATTTTTCTACTTCTATTTTATGTTTGGATAAATATT GTGTGTGTTCGATGATATATATATCATGTAACGGAGGATTTTGATCTAGCGCACAAC CTTCTTTGACTGAGTAACTACTTGGGA^TTACTTTTCTGCATGTGTTTTCTTTCGTTTA CTCTAGTTGTTGTTGCAATAAGTGCAGCGGAAATTATGTTCTCTATACATCAAATCCT TATTTAAGATCTTTTAGATAATTTTGGCAGGATCTTATGTCTATTTTCAATAATTTTGG CAGGATCTTATGTCTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAG ITCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAGTCCCCGGCCAlTACAATATTTCACCATTCATGG CCTTTGCCAAGTAATTATTCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCAA TTTAAGCGAATATTGGTATGTATTGTTTCATTTTGTTTTCCACCTACCCTTTAGCTTTT AGTTTITACCAAATTAGAITGTTAGTATGAACATATATAATATACTTTTTTTTTATAA CATTCGTCATCTGGTTAGGGACACACATTATTTTGAATATATATCTAAGTACAAAATT GCTTGGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCTTGGCCGGAC GTGGAAAGTGGCAATGATACAAAGGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCAATGGTGGGGT TGCATTGCATTACAATCTTTTGCTCTTTATAATATGTGCATACAATTGATTCTAAAAA AATATGCATATAATTTGCATTGTATTTTTCTACTTCTATTTTATGTTTGGATAAATATT GTGTGTGTTCGATGATATATATATCATGTAACGGAGGATTTTGATCTAGCGCACAAC CTTCTTTGACTGAGTAACTACTTGGGA^TTACTTTTCTGCATGTGTTTTCTTTCGTTTA CTCTAGTTGTTGTTGCAATAAGTGCAGCGGAAATTATGTTCTCTATACATCAAATCCT TATTTAAGATCTTTTAGATAATTTTGGCAGGATCTTATGTCTATTTTCAATAATTTTGG CAGGATCTTATGTCTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAG ITCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAGTCCCCGGCCAlTACAATATTTCACCATTCATGG CCTTTGCCAAGTAATTATTCAAACCCGAGGATGCCCAGTAATTGCACTGGACCGCAA TTTAAGCGAATATTGGTATGTATTGTTTCATTTTGTTTTCCACCTACCCTTTAGCTTTT AGTTTITACCAAATTAGAITGTTAGTATGAACATATATAATATACTTTTTTTTTATAA CATTCGTCATCTGGTTAGGGACACACATTATTTTGAATATATATCTAAGTACAAAATT GCTTGGATGTCTCAGTCCCCTCAACTGCGATCCAAACTGCAGACATCTTGGCCGGAC GTGGAAAGTGGCAATGATACAAAG

-29CZ 36551 UI <SEQ ID NO. (Sl-partial sequence of S-RNase ST (částečná sekvence S-RNázy ST); DNA; Prunus avium L.>-29CZ 36551 UI <SEQ ID NO. (Sl-partial sequence of S-RNase ST (partial sequence of S-RNase ST); DNA; Prunus avium L.>

CGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCACTG GTGGGTTGCATTACAATATTTTCCTCTTTTATCCTATATGCATGTAA1TCGAATTGCA ATTTTCTACATCTGTTTTATGTTTAGAAAAATAITGTGCGTGITCAATGATATATCAA GTAACGGAGGACTTGATCTATCCCACAACTTCTCCGGATGAGTAACTAITrGGGAAT TACTTTTTCGATAGTTGTTGCTAAAATTATGTTCTCTATACATCAAATACTTA4GATA CCATTAAACCTTCTCACAACAATTTTGGCAGGATCTTATGACTATTTTCAATITGTGC AACAATGGCCA <SEQ ED NO. 62-partial sequence of S-RNase S9-the first intron region (částečná sekvence SRNázy S9-oblast prvního intronu); DNA; Prunus avium L.> CTAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTGTGCTTTCTr CTTTTGTTACGITATGAGCAGCAGTGGTGGGTTGCAITACAATCTTTTGCTCTTTAAA TATCCTATAATCAGCAlTGCGTnTTCTACITGTGCTTTTTGITCATAGAAACAATTGT GTGTCTGATGATAGATCACATGACATGTTGAATTCACCCACATATTTTTCATTTAATC AAACGCACAACTTTATATGGATGAGTAAGTAITCGGGGATTGCTITCGTGCATGTCC TCTTTTGTTTATTCTGATAATTGTTGCAATAAGTGCAGTCTATTCATCACAATAA1TTT CGCAGGATCTTACGACTAinTCAAITTGTGCAACAATGGCCGCCGACCAACTGCAG AGCTCGAAAGAGA <SEQ ID NO. 63-partial sequence of S-RNase S9-the second intron region (částečná sekvence SRNázy S9-oblast druhého intronu), DNA; Prunus avium L.>CGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCACTG GTGGGTTGCATTACAATATTTTCCTCTTTTATCTATATGCATGTAA1TCGAATTGCA ATTTTCTACATCTGTTTTATGTTTAGAAAAATAITGTGCGTGAATGATATATCAA GTAACGGAGGACTTGATCTATCCCACAACTTCTCGGGATGAGTAACTAITrGGGAAT TACTTTTCGATAGTTGTTGCTAAAATTATGTTCTCTATACATCAAATAACTTA4GATA CCATTAAACCTTCCACAACATTTTGGCAGGATCTTGTC EDCTAATCCATA <. 62-partial sequence of S-RNase S9-the first intron region (partial sequence of SRNase S9-region of the first intron); DNA; Prunus avium L.> CTAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTGTGCTTTCTr CTTTTGTTACGITATGAGCAGCAGTGGTGGGTTGCAITACAATCTTTTGCTCTTTAAA TATCCTATAATCAGCAlTGCGTnTTCTACITGTGCTTTTTGITCATAGAAACAATTGT GTGTCTGATGATAGATCACATGACATGTTGAATTCACCCACATATTTTTCATTTAATC AAACGCACAACTTTATATGGATGAGTAAGTAITCGGGGATTGCTITCGTGCATGTCC TCTTTTGTTTATTCTGATAATTGTTGCAATAAGTGCAGTCTATTCATCACAATAA1TTT CGCAGGATCTTACGACTAinTCAAITTGTGCAACAATGGCCGCCGACCAACTGCAG AGCTCGAAAGAGA <SEQ ID NO. 63-partial sequence of S-RNase S9-the second intron region, DNA; Prunus avium L.>

TATTAITITGAITATATACCGAAAGTATAAATTTGITAATACAITrACATTTGTATCA ATGTAATAATGGATCTGCTCATCTAATTGAAGGACCTGCGTATATTCAAAATATTGT ACATAArGAAAGGTTTAAAACCAAAACGCAGTTTAATACTCAGGITrAGTGAAGAA AAAAAACAATCTTGTTCAAAAATGAAAATTGAAGTACCCCTAAATITGTTTCGTTTTT ATCAAAATATGTATATATTGIITGGATGTCTCAGTACCCTAAATTGCGATCCAAACTG AAGAGATCTTGGCCGGACGTGGAAAGTGGCAATGATACAAGGTTTTGGGAAGGCGA ATGGAACAAACATGGTA <SEQ ID NO. 64-partial sequence of S-RNase SID (částečná sekvence S-RNázy S10); DNA, Prunus avium L >TATTAIITTGAITAATACCGAAAGTATAAATTTGITAATACAITrACATTTGTATCA ATGTAATAATGGATCTGCTCATCTAATTGAAGGACCTGCGTATATTCAAAATATTGT ACATAArGAAAGGTTTAAAACCAAAACGCAGTTTAATACTCAGGITrAGTGAAGAA AAAAAACAATCTTGTTCAAAAATGAAAATTGAAGTACCCCTAAAATITGTTTCGTTTTT ATCAAAAATGTATATATTGIITGGATGTCTCAGTACCCTAAAATTGCGATCCAAACTG AAGAGATCTTGGCCGGACGTGGAAGTGGCAATGATACAAGGTTTTGGGAAGGTAGCGA ATGGA NOAAC <SEQ IDACCA. 64-partial sequence of S-RNase SID (partial sequence of S-RNase S10); DNA, Prunus avium L >

ACTTGTTCTTGCTTTCGCTTPCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCACTGGTGAGTTGCATT ACAATCTTTCGCTCITrATAATATGCGrATAAITTGCATTGTATTTTTCTACTTCTCTT TTATGTTTGGAGAAATATTATGTATGTTCGATTCGATGATATCTAGCGCATAACTTTC TITGGCCGAGTAACTACTTGGGCATTACnTrCTGCATGClTrCTTTCGTTTACTCTGA TAGTTATTGCAATAAGTGCTGCGGAAATTATGTTCTTrATACATCAAATTCTTATTTA AGATACCATTAACCTTCTCACAATAGTTTTCGCAGGATCTTATGTTTATITTCAATTT GTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAACAAGCGACCTTGCTCCAAT CCCCGGCCATTAACTTGTTCTTGCTTTCGCTTPCTTCTTGTGTTTCATTATGAGCACTGGTGAGTTGCATT ACAATCTTTCGCTCITrATAATATGCGrATAAITTGCATTGTATTTTTCTACTTCTCTT TTATGTTTGGAGAAATATTATGTATGTTCGATTCGATGATATCTAGCGCATAACTTTC TITGGCCGAGTAACTACTTGGGCATTACnTrCTGCATGClTrCTTTCGTTTACTCTGA TAGTTATTGCAATAAGTGCTGCGGAAATTATGTTCTTrATACATCAAATTCTTATTTA AGATACCATTAACCTTCTCACAATAGTTTTCGCAGGATCTTATGTTTATITTCAATTT GTGCAACAATGGCCACCGACCAACTGCAGAGTTCGCAACAAGCGACCTTGCTCCAAT CCCCGGCCATTA

-30CZ 36551 UI <SEQ ED TO. 65-partial sequence of S-RNase S12 (částečná sekvence S-RNázy S12); DNA; Primus avium L> TATGGGGATGCTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCA TCATGAGCGCTGGCGATGGTGAGTTGCGTTACAATCTTTTGCTCTATATATCCTCTATGCATAT AATCAGCATTGCGTTTTTCTACTTGTATTTTTTGTTCAGAGAAACTATTGTGTATGTTCGATGA TATATCACATGACATGCGGTGTATTGACTTCACCCACATATTTTTGATTTAATAATCTAACGCA CAACTTTCTTTGGATAAGTAAGTATTGGGAATTGCTTTTCTGCATGTCCTCTTTTTATTTTCATC CTCTTTTTACTTGGCAGGATCTTACGACTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAAC TGCAGAGTTCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAACCCCCGGCCATTACAATATTCCACCATCCAT GGC CTATGGC C AAGT AATT ATTCAAAC C C AAC G AAGCCCAGT AATTGC AATGGGTTGA AATTT GAGGCAAAGAAATTGGTAAGTACTAATTACTTCGTTTTAGGTTATTTTTTATTATAGGGATTTT AGGTTAATTTGGAACAATGACCTCTGAATTTATTGCGAGTTACATTTTATTCTCTCAACTCAAT TTTTAAGTTCTCTCATTAAAAATGAAACCCTCAATTTATAGTCCATGTAGTCCTTTAAAATAAA AACTAAAGAACCAAAAAACAAAACATTAAATAAAGTAAAAAGCAATGGGAAAACATTATTC TCTC AACC CC AACTGGCGG AC CTAGT AGCTTTTC TTTTGGGGGG AGT AGTACC AT AATTTC AA GGTTATATATATTTATATTTAAACTGATATTGTAGCAGCTGCTTAAGAGTAATGGTTTTTTCAT GGAGCTTGGGGCCATGGCCATTGCAGGTATGTATGTGGCTCCGCCCCCTAAGCCACTACAAAC ATTCACACCTCCACTGCAAACTTGCACCTCCTCCGTCTAGCTTTTACCTCGAGCAACCCCACTC ACCCACAACCTTTTTTCCTACACCTGCCAAAGTGTAACCAAGTCAAGCTCGTCGAAGAAGTCG TC ACC AGT ACCTCTGTC ACCTCCCAAGC CC AC AAACACCGC AATCTCT AATCTCCC ACC CTC C CCAGCCATGAAACCACCCTCACCCTCCCTCACCGCTCATGAAACGCACCACCAAACCCACACC CTCT CCTC AAAGTCTCTGATTC CC AATC ACCCCTCACT CTTGTTTTCAGTTTTTTGTTTGTTTGT TATGTTTTATTTTTAAATTTTTTGAAGGACTACATCAACTAAAACGAGTTGACGAACTAAAATT TAACTCGTTAATAAGTTCAGGAACCATCTATCCAAACAAGCCATTAATTTTTAAAGATGTGAG GTGAAATTCTT AATTT AACCCTAAGATTAACAGAAAAATTAGAAGTGACGAAAACTAAACGT ACAACACATGATCGAGTTAAAGGCATTTAGGAACTAAAAAAAAATTATGGGACTAAAATATA ATTCGCGGACAAGTTCATAGATCATTTACTCCAAATTGACCTTCATTTTATTTTCATAGTCTCT AGCATTTTATTAACATAATATACTTTTTTCAATAAACCTTGGGTATTATATAAAATTCTGATGC TGGTCCTATAGTTAGGCATATATTGTTTTGAATTTATACAAAAGTATAATTAAGGGACCTATA TTGTATACAATAAAATGACCACAATTAAAATTAAATTTAATACTCAGTTTAATTGAAGAAAAC AATCTTGTCCAAGAATGAAAATCCAGCTAACCCTTACATTTTGACCCA4AAAAAAAAATACTT ACGTTTTACTTTTTCTCAAAATATGTATATATTGCTTGGGTGTCTCAGTCCCCTGAAATGCAAA CCAAACTGAAGAAATCTTGGCCGGACGTGGAAAGTGGCAATGATACAAAATTTTGGGAAGGC GAATGGAACAAAC <SEQ ID NO. fió-partial sequence of SFB S13 (částečná sekvence SEB S13), DNA; Primus avium L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCCTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCATACCACATCATTCAGAAAGGTCCTATATTCAGCATTATGT CTTTTGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCACCAGATGCCAT <SEQ ED NO. 67-partial sequence of S-RNase S13 (částečná sekvence S-RNázy S13); DNA; Pnmus avium L>-30CZ 36551 UI <SEQ ED TO. 65-partial sequence of S-RNase S12 (partial sequence of S-RNase S12); DNA; Primus avium L> TATGGGGATGCTGAAATCGTCACTCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTGTGTTTCA TCATGAGCGCTGGCGATGGTGAGTTGCGTTACAATCTTTTGCTCTATATATCCTCTATGCATAT AATCAGCATTGCGTTTTTCTACTTGTATTTTTTGTTCAGAGAAACTATTGTGTATGTTCGATGA TATATCACATGACATGCGGTGTATTGACTTCACCCACATATTTTTGATTTAATAATCTAACGCA CAACTTTCTTTGGATAAGTAAGTATTGGGAATTGCTTTTCTGCATGTCCTCTTTTTATTTTCATC CTCTTTTTACTTGGCAGGATCTTACGACTATTTTCAATTTGTGCAACAATGGCCACCGACCAAC TGCAGAGTTCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAACCCCCGGCCATTACAATATTCCACCATCCAT GGC CTATGGC C AAGT AATT ATTCAAAC C C AAC G AAGCCCAGT AATTGC AATGGGTTGA AATTT GAGGCAAAGAAATTGGTAAGTACTAATTACTTCGTTTTAGGTTATTTTTTATTATAGGGATTTT AGGTTAATTTGGAACAATGACCTCTGAATTTATTGCGAGTTACATTTTATTCTCTCAACTCAAT TTTTAAGTTCTCTCATTAAAAATGAAACCCTCAATTTATAGTCCATGTAGTCCTTTAAAATAAA AACTAAAGAACCAAAAAACAAAACATTAAATAAAGTAAAAAGCAATGGGAAAACATTATTC TCTC AACC CC AACTGGCGG AC CTAGT AGCTTTTC TTTTGGGGGG AGT AGTACC AT AATTTC AA GGTTATATATATTTATATTTAAACTGATATTGTAGCAGCTGCTTAAGAGTAATGGTTTTTTCAT GGAGCTTGGGGCCATGGCCATTGCAGGTATGTATGTGGCTCCGCCCCCTAAGC CACTACAAAC ATTCACACCTCCACTGCAAACTTGCACCTCCTCCGTCTAGCTTTTACCTCGAGCAACCCCACTC ACCCACAACCTTTTTTCCTACACCTGCCAAAGTGTAACCAAGTCAAGCTCGTCGAAGAAGTCG TC ACC AGT ACCTCTGTC ACCTCCCAAGC CC AC AAACACCGC AATCTCT AATCTCCC ACC CTC C CCAGCCATGAAACCACCCTCACCCTCCCTCACCGCTCATGAAACGCACCACCAAACCCACACC CTCT CCTC AAAGTCTCTGATTC CC AATC ACCCCTCACT CTTGTTTTCAGTTTTTTGTTTGTTTGT TATGTTTTATTTTTAAATTTTTTGAAGGACTACATCAACTAAAACGAGTTGACGAACTAAAATT TAACTCGTTAATAAGTTCAGGAACCATCTATCCAAACAAGCCATTAATTTTTAAAGATGTGAG GTGAAATTCTT AATTT AACCCTAAGATTAACAGAAAAATTAGAAGTGACGAAAACTAAACGT ACAACACATGATCGAGTTAAAGGCATTTAGGAACTAAAAAAAAATTATGGGACTAAAATATA ATTCGCGGACAAGTTCATAGATCATTTACTCCAAATTGACCTTCATTTTATTTTCATAGTCTCT AGCATTTTATTAACATAATATACTTTTTTCAATAAACCTTGGGTATTATATAAAATTCTGATGC TGGTCCTATAGTTAGGCATATATTGTTTTGAATTTATACAAAAGTATAATTAAGGGACCTATA TTGTATACAATAAAATGACCACAATTAAAATTAAATTTAATACTCAGTTTAATTGAAGAAAAC AATCTTGTCCAAGAATGAAAATCCAGCTAACCCTTACATTTTGACCCA4AAAAAAAAATACTT ACGTTTTACTTTTTCTCAAAATATGTATATATTGCTTGGGTGTCTCAGTCCCCTGAAATGCAAA CCAA ACTGAAGAAATCTTGGCCGGACGTGGAAAGTGGCAATGATACAAAATTTTGGGAAGGC GAATGGAACAAAC <SEQ ID NO. fió-partial sequence of SFB S13 (partial sequence of SEB S13), DNA; Primus avium L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCCTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCATACCACATCATTCAGAAAGGTCCTAATTCAGCATTATGT CTTTTGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCACCAGATGCCAT <SEQ ED NO. 67-partial sequence of S-RNase S13 (partial sequence of S-RNase S13); DNA; Pnmus avium L>

GGC GAATGG AAC AAACATGGTAAATGTTCCGAACAGACACTT AACC AATTC C AATACTTC GA GCGATCCCACGACATGTGGATGTCGTACAATATTACTGAGGTCCTTAAAAACGCTTCAATCGT ACCAAATGCAAAACAAAGATGGAAGTACTCGGACATAGTATCACCCATTAAAGGGGCAACTG G AAG AAC AC C CCTCCTTCGTTGCAAAC GTG ATCC GGCAACT AAT ACCGAGTTGTT AC ATG AAG TGGTATTTTGTTATGAATATAATGCGTTAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGATGCA AAAATCAACGAGCCATCTCCTTTCAATAAAATTATAGCTTTCTAATTAAGTCATAATAAAGCC GTATGGTTCAGTATGGTACAAGTGTAATAAAACAAAAGGCTTCTTAGGAGCTATGGTTTCTGA ACTTCGTGTCACTTTACTTTTAGTCCCGCAACTCTCAAAATGGCTTACACGGTCCCTCAACTCC ACTTTCTTTAGTAGCAAAAATCCTAGAGTAACTTCTCGGC GAATGG AAC AAACATGGTAAATGTTCCGAACAGACACTT AACC AATTC C AATACTTC GA GCGATCCCACGACATGTGGATGTCGTACAATATTACTGAGGTCCTTAAAAACGCTTCAATCGT ACCAAATGCAAAACAAAGATGGAAGTACTCGGACATAGTATCACCCATTAAAGGGGCAACTG G AAG AAC AC C CCTCCTTCGTTGCAAAC GTG ATCC GGCAACT AAT ACCGAGTTGTT AC ATG AAG TGGTATTTTGTTATGAATATAATGCGTTAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGATGCA AAAATCAACGAGCCATCTCCTTTCAATAAAATTATAGCTTTCTAATTAAGTCATAATAAAGCC GTATGGTTCAGTATGGTACAAGTGTAATAAAACAAAAGGCTTCTTAGGAGCTATGGTTTCTGA ACTTCGTGTCACTTTACTTTTAGTCCCGCAACTCTCAAAATGGCTTACACGGTCCCTCAACTCC ACTTTCTTTAGTAGCAAAAATCCTAGAGTAACTTCTC

-31 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 68-partiaJ sequence of SFB 313' (částečná sekvence SFB S13DNA; Primus cerasus L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCGTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCAIACCACATCATTCAGAAAGGTCCTATATTCAGCATTATGT CTriTGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAATAATTCArAGCACCAGATGCCAT <SEQ ID NO. 69-partial sequence of S-RNase S13 ’ (částečná sekvence S-RNázy 813 O; DNA; Pnmus cerasus L >-31 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 68-partiaJ sequence of SFB 313' (částečná sekvence SFB S13DNA; Primus cerasus L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCGTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCAIACCACATCATTCAGAAAGGTCCTATATTCAGCATTATGT CTriTGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAATAATTCArAGCACCAGATGCCAT <SEQ ID NO. 69-partial sequence of S-RNase S13 ' (částečná sekvence S-RNázy 813 O; DNA; Pnmus cerasus L>

GGCGAATGGAACAAACATGGTAAATGTTCCGAACAGACACTTAACCAATTCCAATACTTCGA GCGATCCCACGACATGTGGATGTCGTACAATAITACTGAGGTCCTTAAAAACGCTICAATCGT ACCAAATGCAAAACAAAGATGGAAGTACTCGGACATAGIATCACCCATTAAAGGGGCAACTG GAAGAACACCCCTCCTTCGTTGCAAACGTGATCCGGCAACIAATACCGAGTTGTTACATGAAG TGGTAITTTGTTATGAATATAATGCGTTAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGATGCA AAAATCAACGAGCCATCTCCmCAATAAAATTATAGCITTCTAATTAAGTCATAATAAAGCC GTATGGTTCAGTATGGTACAAGTGTAATAAAACAAAAGGCTTCTTAGGAGCTArGGTTTCTGA ACTTCGTGTCACTTTACTTITAGTCCCGCAACICTCAAAAIGGCTTACACGGTCCCICAACTCC ACnTCTTTAGTAGCAAAAATCCIAGAGTAACITCTC «EQ ID NO. 7(l-partial sequence of SFB S13m (částečná sekvence SFB SBm); DNA; Pnmus cerasus L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCGTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCAIACCACATCATTCAGAAAGGTCCTATATTCAGCATTATGT CTTITGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCACCAGAIGCCAT <SEQ ID NO. 71-partial sequence of S-RNase S13m (částečná sekvence S-RNázy S13m); DNA; Pnmus cerasus L >GGCGAATGGAACAAACATGGTAAATGTTCCGAACAGACACTTAACCAATTCCAATACTTCGA GCGATCCCACGACATGTGGATGTCGTACAATAITACTGAGGTCCTTAAAAACGCTICAATCGT ACCAAATGCAAAACAAAGATGGAAGTACTCGGACATAGIATCACCCATTAAAGGGGCAACTG GAAGAACACCCCTCCTTCGTTGCAAACGTGATCCGGCAACIAATACCGAGTTGTTACATGAAG TGGTAITTTGTTATGAATATAATGCGTTAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGATGCA AAAATCAACGAGCCATCTCCmCAATAAAATTATAGCITTCTAATTAAGTCATAATAAAGCC GTATGGTTCAGTATGGTACAAGTGTAATAAAACAAAAGGCTTCTTAGGAGCTArGGTTTCTGA ACTTCGTGTCACTTTACTTITAGTCCCGCAACICTCAAAAIGGCTTACACGGTCCCICAACTCC ACnTCTTTAGTAGCAAAAATCCIAGAGTAACITCTC «EQ ID NO. 7(l-partial sequence of SFB S13m (částečná sekvence SFB SBm); DNA; Pnmus cerasus L> TGTAAGGATGATGCGTACCAACAAAAATACCTTAGCGGTTGAGGTTTATAGTCTTAAAACAG ACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCGTCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAGCATCTTAAGG GTACAATTTTTAATGGAGTAGCAIACCACATCATTCAGAAAGGTCCTATATTCAGCATTATGT CTTITGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCACCAGAIGCCAT <SEQ ID NO. 71-partial sequence of S-RNase S13m (částečná sekvence S-RNázy S13m); DNA Pnmus cerasus L >

GGCGAATGGAACAAACATGGTAAATGTICCGAACAGACACTTAACCAATTCCATGTGGATGT CGTACAATATTACTGAGGTCCTTAAAAACGCTTCAATCGTACCAAATGCAAAACAAAGATGG AAGTACTCGGACAIAGTATCACCCATTAAAGGGGCAACTGGAAGAACACCCCTCCTTCGTTGC AAACGIGATCCGGCAACTAATACCGAGTTGTIACATGAAGTGGTAIITTGTTATGAAIATAAT GCGriAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGArGCAAAAArCAACGAGCCAICICCTT TCAAIAAAATTAIAGCTTTCTAAITAAGTCATAATAAAGCCGTATGGTTCAGTATGGIACAAG TGTAAIAAAACAAAAGGCTICTTAGGAGCTATGGTTICIGAACTTCGTGTCACTTTACTTTTAG TCCCGCAACTCTCAAAATGGCTTACACGGTCCCTCAACrCCACTTTCTriAGTAGCAAAAATC CTAGAGTAACTTCTC <SEQ ID NO. 72-partial sequence of S-RNase S14 (částečná sekvence S-RNázy 814); DNA; Pnmus avium L>GGCGAATGGAACAAACATGGTAAATGTICCGAACAGACACTTAACCAATTCCATGTGGATGT CGTACAATATTACTGAGGTCCTTAAAAACGCTTCAATCGTACCAAATGCAAAACAAAGATGG AAGTACTCGGACAIAGTATCACCCATTAAAGGGGCAACTGGAAGAACACCCCTCCTTCGTTGC AAACGIGATCCGGCAACTAATACCGAGTTGTIACATGAAGTGGTAIITTGTTATGAAIATAAT GCGriAAAGCAGATTGACTGTAATCGAACAGCAGGArGCAAAAArCAACGAGCCAICICCTT TCAAIAAAATTAIAGCTTTCTAAITAAGTCATAATAAAGCCGTATGGTTCAGTATGGIACAAG TGTAAIAAAACAAAAGGCTICTTAGGAGCTATGGTTICIGAACTTCGTGTCACTTTACTTTTAG TCCCGCAACTCTCAAAATGGCTTACACGGTCCCTCAACrCCACTTTCTriAGTAGCAAAAATC CTAGAGTAACTTCTC <SEQ ID NO. 72-partial sequence of S-RNase S14 (partial sequence of S-RNase 814); DNA; Pnmus avium L>

TCrAAGTATGGCGATGTTGAAATCGACACrCGCTTTCCTrGTTCTTGCTTTTGCITTCTTCTTIT GTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTGGCATrACAACCmTGCTCTTTATATCCTATATGCATAr ATATAIATAATCAGCACTGCGTITTACrACrTGTATITriTGITCACAGAACTATTGIGTGTGr TCGAIGATATATCATATGACATGCGGTGTATTTGGTGAITGTTTTrcrGCCTGTCCrcnTTTAT TITCATCATCmCGTITATTCrGATAACrGTITGCAATAAGTGCAGTCTATTGArCACAATAA TirrGGCAGGATCTTATGACTATTTTCAAriTGTGGAACAATGGCCACCGACCAACIGCAGAG TrCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAATCCCCGGCCA <SEQ ID NO. 73-partial sequence of S-RNase S16 (částečná sekvence S-RNázy 816); DNA; Pnmus avium L>TCrAAGTATGGCGATGTTGAAATCGACACrCGCTTTCCTrGTTCTTGCTTTTGCITTCTTCTTIT GTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTGGCATrACAACCmTGCTCTTTATATCCTATATGCATAr ATATAIATAATCAGCACTGCGTITTACrACrTGTATITriTGITCACAGAACTATTGIGTGTGr TCGAIGATATATCATATGACATGCGGTGTATTTGGTGAITGTTTTrcrGCCTGTCCrcnTTTAT TITCATCATCmCGTITATTCrGATAACrGTITGCAATAAGTGCAGTCTATTGArCACAATAA TirrGGCAGGATCTTATGACTATTTTCAAriTGTGGAACAATGGCCACCGACCAACIGCAGAG TrCGCATCAAGCGACCTTGCTCCAATCCCCGGCCA <SEQ ID NO. 73-partial sequence of S-RNase S16 (partial sequence of S-RNase 816); DNA; Pnmus avium L>

CTAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGGTTATCTTGTTCTTGCITTTGCTTTCTTCTTGTG TITCATTATGAGCACTGGTGATGGTGGGriGCATTACAAICTTTTGCICCITATTITCTATATG CATAAAATTAGCATTGCATTTGTCTACrTTTATGTTArGTITAGAGAAAIGTTGTGTGTGTTCG ATGATATATATATATAGGTAAIGGAGGACITGATCTAGCGCACAACnTCTITGGATGAGTAA CTATTTGGGAACTTTITAGTCCGCATGGITTCIlTCGTTIACTCTGArAGITGTIGCCATAAGT GCAGTATTCATTATTGGTAGCTACGATTATGTrCTITATACATCAAAICCITATTTAAGATACC ATCAACCTTCTCACAATrATriTGGCAGGATCTTATGTCIAIITTCAAmGTGCAACAATGGC CACCGATCACCTGCAGATTTAGCCGGAAACCICTAAGTATGGCGATGTTGAAATCGTCACTCGGTTATCTTGTTCTTGCITTTGCTTTCTTCTTGTG TITCATTATGAGCACTGGTGATGGTGGGriGCATTACAAICTTTTGCICCITATTITCTATATG CATAAAATTAGCATTGCATTTGTCTACrTTTATGTTArGTITAGAGAAAIGTTGTGTGTGTTCG ATGATATATATATATAGGTAAIGGAGGACITGATCTAGCGCACAACnTCTITGGATGAGTAA CTATTTGGGAACTTTITAGTCCGCATGGITTCIlTCGTTIACTCTGArAGITGTIGCCATAAGT GCAGTATTCATTATTGGTAGCTACGATTATGTrCTITATACATCAAAICCITATTTAAGATACC ATCAACCTTCTCACAATrATriTGGCAGGATCTTATGTCIAIITTCAAmGTGCAACAATGGC CACCGATCACCTGCAGATTTAGCCGGAAACCI

-32CZ 36551 UI-32CZ 36551 UI

-SEQ ID NO. 74-partial sequence of S-RNase S22 (částečná sekvence S-RNázy S22); DNA, Prunus avium L >- SEQ ID NO. 74-partial sequence of S-RNase S22 (partial sequence of S-RNase S22); DNA, Prunus avium L >

CGTCACTCGCGTTCCTTGTTCITGCTTITGTTTTCTTCTTGTGITrCATTATGAGCACT GGTGGGITGCATTACAATCTinTCTCGITATATCCTATACGCTAAITAGCATGAATT GCAITITTCTACITCTAATGTTTAGAGAAATATCATGTGTATrAGATGATACAGGTGG CATGCGCTGTATTGAATCAGCCCATATTTTTCATTTGATCTATCGCATAACTTTGTITG GATGAGTAACTATTTTGGGAATTATTTTTCTGCATGGTTTCTITCGTTTACTCTGAAA GTTGTACCGATAAGTGCAGTATTCATCATTGGAAGCTAAAAATATGTTATITATACAT CACATACITATTTAAGATACCATTAACCTTCTCACAATAATTCTGGCAGGATCITATG TCTATTTTCAATITGTGCAACAATGGCCACCGGCCACCTGCATACGTAGCAACAAAC CTTGCTCCAAACACCGGCCATTACAAATTTTCACCAITCATGGCCTATGGCCAAGCA ATTATTCAAACCCAAAGATGCCCAGTACTTGCACGGGGGCGCGATTrAACTrTACTA AAGTGGTATGTATTGITrCTTTTTTCACTTACTATTTAGCAITrAGITCTGGAAAATTA GACTGTCATTTGAAAGTCCTCAAACTCACAAGTGGACCCTAAATTT1TGTCCAATATA GGTCCCTACATTTTCTATTTCCTAGACATATACCCACTCTATAAATCTATGTGTAAAA TCCGATTTCAAATITAAATAACCAGTAGGATATAAGAGGCCATAGTAITrCTATGTTT TTACATCGTTGCCAITAGACTTCATATTTTATTTATAATTTATTTCAAGCATTTCATTA ACTGCCATAATTGTAAITAATACTCCCTATTAATGGCATATCAATCACCCCATTTCTr 1TGGITGCCATTCCCTCTAACAAATAGCCCACTAAAATTGCAAAAAAAAAAGAAAAA AGCAAATTACATATCCAATAATGTACCTATGAAAAATATAAATAAATAAATAAATGT ATATATATATATTAAATITGGAAAITGGTATAAATAAAAGGAAATAAATAAGCTATC AATTTGAAAA1TAAAATACGAATTGATCAAGTAGTCAAATTTGAAAAAAAAACCGA GTATATTATTGGTTTTTAAAGGAACAACGACTAGATTCAAACCAAA.CGGCAGTAATT ACACCAAGCITTAATTACTTTTTTAAAAAATAAGGAAAAAACTGACCCATTAAATCT TTGGAATCTATACAAAATTGAAACACAAITAATCGGCATTGAAITGTAGCTAATTTC ITAAACAAATCACGITrAAAATGTCAITAAGGGTATTATAGGAAITTAAAAAATATA ACATITAACACATTAAGCTTGATTAGGAAATTTGATGAGTTGGATCCTAGTCATTGG GTTTTATITATAGAAAAATAAAACGATGGGTTGTAGGTAAGAAAAAATTAATTTGAA GGGGAAGAGTCAAATTTACTAATTTTAAAAAGTCATCATTTTAATTCTCAAGCTCTCA AATCAATCAATATGGTGCnTATCTTTGGGCACATCAATTTGATCCTATTGTTGCATT ATGACAATTTTTTTTTATTAAATTTGGTCATATGTCATCACGTAACCAACTTTATAGG GATATTCTCATTAAAATATAGCTCGTCTGAGTCCTAAAGCTCACGTGTTTGCTCAACA GTATCATA1TCTCCCTATTTAGGGTTTCGCATTGGGGTCCCATTCAAAAGAGTAAATA GCCTTATTGAGCAAAAGACTTGAGCTITACTTTGTGTCATGGATGGATAGGTTGTATT TTGATGAAAATATCGCATTAAAGTTGGTCACATGTCATACATTACCAATTTTAACGA AGATTTTGATGGAATGGAACGAGAGGGACCAACCTGATGTGTGAACTAGAAAATTA AAGACCACAITGAITGAITrGAAAGIITGAGGACTCAATTAAATACTTTTAATTTGA AAAGTTCAAGAACCCTTCGTCATAAAAACATAAAATAAAATAAAAACCAAACAAAG 1TACAAAAAATAGTAAGAACTGAACATATTCATTAAGTAAGGGTAATATAGTAAATT ACTAATAATAAATAAATAAAACCCAAITGGCAAGGGGCTAGTATACTTAAAGTATA AATTTGTAATACATTTATATTCGTATGTATATTAATGTACTATATA1TTCTAATAATG GATCTGCTCATCTAATTAAAGGACCTG1TATTTTGTACTTGCGTATATAGTCAAAGGA TTATACATAGTGGAAGGATTAAAAITAATATTCAAGTTrAATTTAAAATTTTTATTTG ITrGTGITGGAATTACAAAATATTAITCAAAAATGAAAATTAAGCATCCCTAAATTT ATTTATmTCTCAGTACCCTCAATTGCG.AUAAGATCTG.AAG.UUATCTTGGCCCGACG TGGAAAGTGGCAATGATACAAAATTTTGGGAAGGCGAATGGAACAACGTCACTCGCGTTCCTTGTTCITGCTTITGTTTTCTTCTTGTGITrCATTATGAGCACT GGTGGGITGCATTACAATCTinTCTCGITATATCCTATACGCTAAITAGCATGAATT GCAITITTCTACITCTAATGTTTAGAGAAATATCATGTGTATrAGATGATACAGGTGG CATGCGCTGTATTGAATCAGCCCATATTTTTCATTTGATCTATCGCATAACTTTGTITG GATGAGTAACTATTTTGGGAATTATTTTTCTGCATGGTTTCTITCGTTTACTCTGAAA GTTGTACCGATAAGTGCAGTATTCATCATTGGAAGCTAAAAATATGTTATITATACAT CACATACITATTTAAGATACCATTAACCTTCTCACAATAATTCTGGCAGGATCITATG TCTATTTTCAATITGTGCAACAATGGCCACCGGCCACCTGCATACGTAGCAACAAAC CTTGCTCCAAACACCGGCCATTACAAATTTTCACCAITCATGGCCTATGGCCAAGCA ATTATTCAAACCCAAAGATGCCCAGTACTTGCACGGGGGCGCGATTrAACTrTACTA AAGTGGTATGTATTGITrCTTTTTTCACTTACTATTTAGCAITrAGITCTGGAAAATTA GACTGTCATTTGAAAGTCCTCAAACTCACAAGTGGACCCTAAATTT1TGTCCAATATA GGTCCCTACATTTTCTATTTCCTAGACATATACCCACTCTATAAATCTATGTGTAAAA TCCGATTTCAAATITAAATAACCAGTAGGATATAAGAGGCCATAGTAITrCTATGTTT TTACATCGTTGCCAITAGACTTCATATTTTATTTATAATTTATTTCAAGCATTTCATTA ACTGCCATAATTGTAAITAATACTCCCTATTAATGGCATATCAATCACCCCATTTCTr 1TGGITGCCATTCCCTCTAACAAATAGCCCACTAAAATTGCAAAAAAAAAAGAAAA A AGCAAATTACATATCCAATAATGTACCTATGAAAAATATAAATAAATAAATAAATGT ATATATATATATTAAATITGGAAAITGGTATAAATAAAAGGAAATAAATAAGCTATC AATTTGAAAA1TAAAATACGAATTGATCAAGTAGTCAAATTTGAAAAAAAAACCGA GTATATTATTGGTTTTTAAAGGAACAACGACTAGATTCAAACCAAA.CGGCAGTAATT ACACCAAGCITTAATTACTTTTTTAAAAAATAAGGAAAAAACTGACCCATTAAATCT TTGGAATCTATACAAAATTGAAACACAAITAATCGGCATTGAAITGTAGCTAATTTC ITAAACAAATCACGITrAAAATGTCAITAAGGGTATTATAGGAAITTAAAAAATATA ACATITAACACATTAAGCTTGATTAGGAAATTTGATGAGTTGGATCCTAGTCATTGG GTTTTATITATAGAAAAATAAAACGATGGGTTGTAGGTAAGAAAAAATTAATTTGAA GGGGAAGAGTCAAATTTACTAATTTTAAAAAGTCATCATTTTAATTCTCAAGCTCTCA AATCAATCAATATGGTGCnTATCTTTGGGCACATCAATTTGATCCTATTGTTGCATT ATGACAATTTTTTTTTATTAAATTTGGTCATATGTCATCACGTAACCAACTTTATAGG GATATTCTCATTAAAATATAGCTCGTCTGAGTCCTAAAGCTCACGTGTTTGCTCAACA GTATCATA1TCTCCCTATTTAGGGTTTCGCATTGGGGTCCCATTCAAAAGAGTAAATA GCCTTATTGAGCAAAAGACTTGAGCTITACTTTGTGTCATGGATGGATAGGTTGTATT TTGATGAAAATATCGCATTAAAGTTGGTCACATGTCATACATTACCAATTTTAACGA AGATTTTGATGGAATGGAACGAGAGGGACCAACCTGATGTGTGAACTAGAAAATTA AAGACCAC AITGAITGAITrGAAAGIITGAGGACTCAATTAAATACTTTTAATTTGA AAAGTTCAAGAACCCTTCGTCATAAAAACATAAAATAAAATAAAAACCAAACAAAG 1TACAAAAAATAGTAAGAACTGAACATATTCATTAAGTAAGGGTAATATAGTAAATT ACTAATAATAAATAAATAAAACCCAAITGGCAAGGGGCTAGTATACTTAAAGTATA AATTTGTAATACATTTATATTCGTATGTATATTAATGTACTATATA1TTCTAATAATG GATCTGCTCATCTAATTAAAGGACCTG1TATTTTGTACTTGCGTATATAGTCAAAGGA TTATACATAGTGGAAGGATTAAAAITAATATTCAAGTTrAATTTAAAATTTTTATTTG ITrGTGITGGAATTACAAAATATTAITCAAAAATGAAAATTAAGCATCCCTAAATTT ATTTATmTCTCAGTACCCTCAATTGCG.AUAAGATCTG.AAG.UUATCTTGGCCCGACG TGGAAAGTGGCAATGATACAAAATTTTGGGAAGGCGAATGGAACAA

-33 CZ 36551 UI-33 CZ 36551 UI

-4SEQ ID NO. 75-partial sequence of S-RNase 323 (částečná sekvence S-RNázy S23); DNA; Primus avium L>-4 SEQ ID NO. 75-partial sequence of S-RNase 323 (partial sequence of S-RNase S23); DNA; Primus avium L>

ATGGCGATTTTGAACTCGACACICGCTTTCCTIGTTCTTGCTTTTGCTIICTTCTTTIGTTACGT TATGAGCAGTGGTGGGTGGCATIACAACCTTTTGCTCTTTATATCCTATATGCATAIAIATAIA TAATCAGCATTGCGTmACTACTTGTArrmTGTTCACAGAACTATTGTGTGTGTICGATGA TATATCATATGACATGCGGTGTATTTGGTGAATGTTTTTCTGCCTGICCCCTTTITAITTTCAIC ATCTTICGTTTATTCTGATAACIGTTTGCAATAAGTGCAGTCTATTGAICACAATAATITTGGG AGGATCTTATGACTATITICAAITTGTGCAACAATGGC <SEQ ID NO. 76-partial sequence of S-RNase S24 (částečná sekvence S-RNázy S24); DNA; Pnmus avium L>ATGGCGATTTTGAACTCGACACCGCTTTCCTIGTTCTTGCTTTTGCTIICTTCTTTIGTTACGT TATGAGCAGTGGTGGGTGGCATIAACCTTTTGCTCTTTATATCCTATATGCATAIAIATAIA TAATCAGCATTGCGTmACTACTTGTArrmTGTTCACAGAACTATTGTGTGTGTICGATGA TATATCATATGACATGCGGTGTTATTGGTAGATGTTTTTCTGCCCTTTTITAITTTCAIC ATCTTICGTTTATTCTGATAACIGTTTGCAATAAGTGCAGTCATTATTGGAICACAATAATITTGGG AGGATCTATC ID SEQ. 76-partial sequence of S-RNase S24 (partial sequence of S-RNase S24); DNA; Pnmus avium L>

CACTCGCGTTCCTTGTTCTTGCITTTGTTTTCTTCTTGIGriTCATTATGAGCACTGGTGGGTTG CATTACCCTCTmTCTCGrTAIATCCTATACGCTAAlTAGCATGAATTGCATTITrCTACTTCT AATGTITAGAGAAATATCAIGTGTATTAGATGATACAGGTGGCATGCGCTGTArTGAATCAGC CCATAITTTTCAITTGATCTATCGCATAACTTIGTTTGGATGAGTAACTATTTTGGGAATTATTT TTCIGCATGGTTICITTCGmACTCTGAAAGTTGTACCGATAAGTGCAGTATTCATCATTGGA AGCrAAAAATATGTTATTTATACATCACArACTTATTTAAGATACCATTAACCTTCTCACAATA ATTCTGGCAGGATCITATGTCTATTTTCAAriTGTGCAACAATGGCCACCGGCCACCTGCATAC GTAGCAACAAACCTTGCTCCAAACACCGGCCACTCGCGTTCCTTGTTCTTGCITTTGTTTTCTTCTTGIGriTCATTATGAGCACTGGTGGGTTG CATTACCCTCTmTCTCGrTAIATCCTATACGCTAAlTAGCATGAATTGCATTITrCTACTTCT AATGTITAGAGAAATATCAIGTGTATTAGATGATACAGGTGGCATGCGCTGTArTGAATCAGC CCATAITTTTCAITTGATCTATCGCATAACTTIGTTTGGATGAGTAACTATTTTGGGAATTATTT TTCIGCATGGTTICITTCGmACTCTGAAAGTTGTACCGATAAGTGCAGTATTCATCATTGGA AGCrAAAAATATGTTATTTATACATCACArACTTATTTAAGATACCATTAACCTTCTCACAATA ATTCTGGCAGGATCITATGTCTATTTTCAAriTGTGCAACAATGGCCACCGGCCACCTGCATAC GTAGCAACAAACCTTGCTCCAAACACCGGC

-4SEQ ID NO. 77-partial sequence of S-RNase 325 (částečná sekvence S-RNázy S25); DNA; Pnmus avium L>-4 SEQ ID NO. 77-partial sequence of S-RNase 325 (partial sequence of S-RNase S25); DNA; Pnmus avium L>

TCrAAGTATGGGGATGTTGAAATCGTCAGrCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTTT GTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCTTTTGCTCTTTATATCCTATATGCATGr AATCAGCATTGCGTITTTCTACITGTATTriTTATTCAGAGAAACTATTGTGTGTGTTGGATGA CATGCAGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTICATTTAATCTAACGCACAACTTTGTITGGAT GAGCAAGTATTTGGTGATTGTTTTTCTGCAIGTCCTCTTTTTATTTTCTIAATCriTTGTTTATTC TGATAATTGTTTGCAATAAGTGCAGTCTTATTCATCACAATAATTrTGGCAGGATCTTATGACT ATTIICAATTTGIGCAACAATGGCCACCGACCA <SEQ LD NO. 78-partial sequence of S-RNase S26 (částečná sekvence S-RNázv 326); DNA; Prunus cerasus L>TCrAAGTATGGGGATGTTGAAATCGTCAGrCGCTTTCCTTGTTCTTGCTTTTGCTTTCTTCTTTT GTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATTACAATCTTTTGCTCTTTATATCCTATATGCATGr AATCAGCATTGCGTITTTCTACITGTATTriTTATTCAGAGAAACTATTGTGTGTGTTGGATGA CATGCAGTGTATTGAATTCACCCACATATTTTICATTTAATCTAACGCACAACTTTGTITGGAT GAGCAAGTATTTGGTGATTGTTTTTCTGCAIGTCCTCTTTTTATTTTCTIAATCriTTGTTTATTC TGATAATTGTTTGCAATAAGTGCAGTCTTATTCATCACAATAATTrTGGCAGGATCTTATGACT ATTIICAATTTGIGCAACAATGGCCACCGACCA <SEQ LD NO. 78-partial sequence of S-RNase S26 (partial sequence of S-RNase 326); DNA; Prunus cerasus L>

TGCATTAACCAAGAGCATrTTCTGGTATTTIGAATATTTIACCATTCICTATATTCTGCTTTATA TATATAGATTAAGATACCATTAACCTTCTCACAATAATTTIGGCAGGATCTTATGTCTATTTTC AATTTGTGCAACAATGGCCAACGACCACCTGCATACTTCGCAAGAAATGCT <SEQ LD NO. 79-partial sequence of S-RNase S3 3 (částečná sekvence S-RNázv 333); DNA; Prunus cerasus L>TGCATTAACCAAGAGCATrTTCTGGTATTTIGAATATTTIACCATTCICTAATTCTGCTTTATA TATATAGATTAAGATACCATTAACCTTCCACAATAATTTIGGCAGGATCTTATGTCTATTTTTC AATTTGTGCAACAATGGCCAACGACCACCTGCATACTTCGCAAGAAATGCT <SEQ LD NO. 79-partial sequence of S-RNase S3 3 (partial sequence of S-RNase 333); DNA; Prunus cerasus L>

TTTAATTTATAAAAITGAATTCAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAGIAITCGAGAITGTTTTT CTGCAITrCGTCrTTTTATITGCATCCITriTGITTArTCTGATAATrGTTGCAATAAGTGCAGT CTGITCATCACAATATAAITTTGGCAGGATCITATAACTATITTCAAITTGTGCAACAATGGCC ACCGACCACCrGCACAGTTCGCAAGAAATGCTCCAAAGCCCGGCCAr <SEQ LD NO. SO-partial sequence of S-RNase S3 4 (částečná sekvence S-RNázv 334); DNA; Prunus cerasus L>TTTAATTTATAAAAITGAATTCAAGTAAGATACCAAACTGACCTAAGIAITCGAGAITGTTTTT CTGCAITrCGTCrTTTTATITGCATCCITriTGITTArTCTGATAATrGTTGCAATAAGTGCAGT CTGITCATCACAATATAAITTTGGCAGGATCITATAACTATITTCAAITTGTGCAACAATGGCC ACCGACCACcrGCACAGTTCGCAAGAAATGCTCCAAAGCCCGCCAr <SEQ LD NO. SO-partial sequence of S-RNase S3 4 (partial sequence of S-RNase 334); DNA; Prunus cerasus L>

TATrCICTAAGTATGGCGATGITGAAATCGICACTCGCCTGCCTTGTTCITGCTTITGCITTCIT CTrTTGTTACGTTATGAGCAGrGGTGGGTTGCAlTACAATCTITTGCTATATATGCTATATGTA TATAAICAGCATTGCGTITTTCTACITGTAITIITTGrTCAGAGAAACTATTGTGAGITGGATG ATAIAICACATGACATGCGGIGTATTGA4lITCACCCACATATrTGGCAI,n,.^ATCTA4LCGCAC AACrATTTTTGGATGAGTATITGGTGATTGIITTTCTGCATGTCCTCTrTITATnTAITAATCT TTTGTTTATTTTGATAATTGrTTGCAATAAGTGCAGrCIATTCATCACAATAATTrTGGCAGGA TCrTACGAGTATTTTCAATITGTGCAACAAIGGCCTATrCICTAAGTATGGCGATGITGAAATCGICACTCGCCTGCCTTGTTCITGCTTITGCITTCIT CTrTTGTTACGTTATGAGCAGrGGTGGGTTGCAlTACAATCTITTGCTATATATGCTATATGTA TATAAICAGCATTGCGTITTTCTACITGTAITIITTGrTCAGAGAAACTATTGTGAGITGGATG ATAIAICACATGACATGCGGIGTATTGA4 l ITCACCCACATATrTGGCAI , n , .^ATCTA4 L CGCAC AACrATTTTTGGATGAGTATITGGTGATTGIITTTCTGCATGTCCTCTrTITATnTAITAATCT TTTGTTTATTTTGATAATTGrTTGCAATAAGTGCAGrCIATTCATCACAATAATTrTGGCAGGA TCrTACGAGTATTTTCAATITGTGCAACAAIGGCC

-34CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 81-partial sequence of S-RNase S3 5 (částečná sekvence S-RNázy S3 5); DNA Ptunius cerasus L >-34CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 81-partial sequence of S-RNase S3 5 (partial sequence of S-RNase S3 5); DNA Ptunius cerasus L >

TTGGGTGGCTAATIGCAATGGGACCCGATTTAGCAATAGTrTG&TArAAATTCTCrTG CTTTTCTGTrTADCTTTTTGTmTrTGTrilTGICACAAAATATArTTGrTGClTGGAT GICICAGICTCCIGCACTGGAGICCAAACTGAAGAAATCTTGGCCCGACGTGGAAAG TGGCAACGATACAGACTTTIGGGGACGTGAATGGAACAAACACGGTACATGTTCCG AACAAACAC <8EQ ID NO. 82-partial sequence of SFB S36a (částečná sekvence SFB S3ůa); DNA Ptnmus cerasus L.>TTGGGTGGCTAATIGCAATGGGACCCGATTTAGCAATAGTrTG&TArAAATTCTCrTG CTTTTCTGTrTADCTTTTTGTmTrTGTrilTGICACAAAATATrTTGrTGClTGGAT GICICAGICTCCIGCACTGGAGICCAAACTGAAGAAATCTTGGCCCGACGTGGAAAG TGGCAACGATACAGACTTTIGGGACGTGAATGGAACAAACACGGTACATGTTCCG AACAAACAC <8EQ ID NO. 82-partial sequence of SFB S36a (partial sequence of SFB S3ůa); DNA of Ptnmus cerasus L.>

AIGGCITAGITTGCATITCGGATGAGATATTGAAITrCGATAGICCTATACACATATG GAATCCATCGATCAGGAAATTTAGAACCCCTCCAATGAGCACCGACATTAACATTAA ACATAGTTATGTTGCrCICCAATTCGGGTTCCACCCOCGGGTTAATGACTACAAGAIT GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGCCGTIGAGTTTTITAGrCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGATTGAAGGAATTCCGCCITGGTrAAAATGCACTIGGCAG CATCAAATGAGIATATTTICIAACGGAGIAGCGTACCACCTCCTTAGGAAAGGTCCT AIATTCAGCATTATGTCATTCGATTCAGGCAGIGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCA CCAGATGCCATrTGCAGTTCATGGGGGTIATGTAITGACGrTTACAAGGAACACATA TGCITGCTTTTTAGATTCTAIGGTTGTGAGGAGGAGGGCATGGAACAAGITGACriA TGGGTCCIAAAAGAAAAACGGIGGA <SEQ ID NO. £j-partial sequence of S-RNase S36a (částečná sekvence S-RNázy S36a); DNA Ptunus cerasus L.^AIGGCITAGITTGCATITCGGATGAGATATTGAAITrCGATAGICCTATACACATATG GAATCCATCGATCAGGAAATTTAGAACCCCTCCAATGAGCACCGACATTAACATTAA ACATAGTTATGTTGCrCICCAATTCGGGTTCCACCCOCGGGTTAATGACTACAAGAIT GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGCCGTIGAGTTTTITAGrCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGATTGAAGGAATTCCGCCITGGTrAAAATGCACTIGGCAG CATCAAATGAGIATATTTICIAACGGAGIAGCGTACCACCTCCTTAGGAAAGGTCCT AIATTCAGCATTATGTCATTCGATTCAGGCAGIGAAGAATTCGAAGAATTCATAGCA CCAGATGCCATrTGCAGTTCATGGGGGTIATGTAITGACGrTTACAAGGAACACATA TGCITGCTTTTTAGATTCTAIGGTTGTGAGGAGGAGGGCATGGAACAAGITGACriA TGGGTCCIAAAAGAAAAACGGIGGA <SEQ ID NO. £j-partial sequence of S-RNase S36a (partial sequence of S-RNase S36a); DNA of Ptunus cerasus L.^

TCCTAITTTATGIITAGGGAATATTGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGArCTAACGCACTAGTCrTIGGGAATTATrTITCTGCAATAAGTGCAGIArTC AICATrGGA^GCCAAAAITATGTrCTITATACATAAkAAAATCCITATITTAGATACC AITTCCITCITACAATATATAArTITCGCAGGATCrTATGACrAITrTCAArTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCIACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCTCAAATCTTCACCATCCATGGOCTATGGCCAAGTAACTATTCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAAITGCAGGGGGTCGCrATTTGAITCAAGGAAAGTGGTAIGrAITGArTT miCTCACTTACTCTTrAGCAmAGTTTAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCmCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCCTGATGITGCIITATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAATrCTCrCCACTCTTTmCT ITGATACAAGGGGAGGGGGAGGTGAGCCTAGGACArCGGGTGCATAGATAAATGCC mAACTACTTATTrGAAAGTCCTTrCCmTTAATTTAAGTTTTTCACTrTTATAAITT TATTrCATAAGATAAAAATTAAGTAATTAGTCCAGCTGTAAAAAATAAATTTTTITTT mAAGGTGGACACATGACCATAmAAGTGGGAGTACCAITATTGriACATATTTTA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATTCAGTATAGTACTCAGGTTIAACGTAAAAATTAT CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTCTTAAGirrTTACTAITCCITAAAATATGIATG AATTGCTTGGATGTCrCAGTACCCTCAGTTGCGArTGAATCTGAAGATAICTTGGCCC AACGTGAAAAGIGGCAAIGATACAGAArTTTGGG <SEQ ID NO. 84-partial sequence of SFB 336b (částečná sekvence SFB S36b): DNA Ptunus cerasus L>TCCTAITTTATGIITAGGGAATATTGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGArCTAACGCACTAGTCrTIGGGAATTATrTITCTGCAATAAGTGCAGIArTC AICATrGGA^GCCAAAAITATGTrCTITATACATAAkAAAATCCITATITTAGATACC AITTCCITCITACAATATATAArTITCGCAGGATCrTATGACrAITrTCAArTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCIACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCTCAAATCTTCACCATCCATGGOCTATGGCCAAGTAACTATTCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAAITGCAGGGGGTCGCrATTTGAITCAAGGAAAGTGGTAIGrAITGArTT miCTCACTTACTCTTrAGCAmAGTTTAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCmCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCCTGATGITGCIITATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAATrCTCrCCACTCTTTmCT ITGATACAAGGGGAGGGGGAGGTGAGCCTAGGACArCGGGTGCATAGATAAATGCC mAACTACTTATTrGAAAGTCCTTrCCmTTAATTTAAGTTTTTCACTrTTATAAITT TATTrCATAAGATAAAAATTAAGTAATTAGTCCAGCTGTAAAAAATAAATTTTTITTT mAAGGTGGACACATGACCATAmAAGTGGGAGTACCAITATTGriACATATTTTA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATTCAGTATAGTACTCAGGTTIAACGTAAAAATTAT CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTCTTAAGirrTTACTAITCCITAAAATATGIATG AATTGCTTGGATGTCrCAGTACCCTCAGTTGCGArTGAATCTGAAGATAICTTGGCCC AACGTGAAAAGIGGCA AIGATACAGAArTTTGGG <SEQ ID NO. 84-partial sequence of SFB 336b (partial sequence of SFB S36b): DNA Ptunus cerasus L>

AIGGCITAGmGCAriTCGGATGAGATATTGAAmCGATAGICCTATACACATATG GAAICCATCGATCAGGAAATTTAGGACCOCTCCAATGAGCACCGACAITAACATTAA ACATAGTrATGITGCrCICCAATTCGGGITCCACCCOCGGGTTAAIGACIACAAGATr GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGOCGTIGAGGTITrTAGTCITGGA ACGGACTCTTGGAAGATGArTGAAGCAATTCCGCCTTGGTrAAAATGCACriGGCAG CATCAAATGAGIACAimCTAACGGAGTAGCATACCACCrCCTrAGGAAAGGICCT AIATTCAGCATTATGrCATTCGATrCAGGCAGIGAAGAATTCOAAGAAITCATAGCA CCAGATGCCATriGCAGTTCATGGGGGTIATGTAITGACGrTTACAAGGAACACATA TGCITGCCTriTAGATICIArGGTTGIGAGGAGGAGGGCArGGAACAAGITGAClTA TGGGTCCTAAAAGAAAAACGGTGGAAIGGCITAGmGCAriTCGGATGAGATATTGAAmCGATAGICCTATACACATATG GAAICCATCGATCAGGAAATTTAGGACCOCTCCAATGAGCACCGACAITAACATTAA ACATAGTrATGITGCrCICCAATTCGGGITCCACCCOCGGGTTAAIGACIACAAGATr GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGOCGTIGAGGTITrTAGTCITGGA ACGGACTCTTGGAAGATGArTGAAGCAATTCCGCCTTGGTrAAAATGCACriGGCAG CATCAAATGAGIACAimCTAACGGAGTAGCATACCACCrCCTrAGGAAAGGICCT AIATTCAGCATTATGrCATTCGATrCAGGCAGIGAAGAATTCOAAGAAITCATAGCA CCAGATGCCATriGCAGTTCATGGGGGTIATGTAITGACGrTTACAAGGAACACATA TGCITGCCTriTAGATICIArGGTTGIGAGGAGGAGGGCArGGAACAAGITGAClTA TGGGTCCTAAAAGAAAAACGGTGGA

-35 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. Si-partial sequence of S-RNase S36b (částečná sekvence S-RNázy S36b); DNA Prunus cerasus L >-35 CZ 36551 UI <SEQ ID NO. Si-partial sequence of S-RNase S36b (partial sequence of S-RNase S36b); DNA Prunus cerasus L >

TCCTxAITTTATGITTAGGGAATATTGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGATCTAACGCACTAGTCTTIGGGAATTATTTITCTGCAATAAGTGCAGTArTC AICATrGGAAGCCAAAATTATGTICTTTATACATAAAAAAATCCTTATTTTAGATACC AITTCCTTCTTACAATATATAArTTTCGCAGGATCrTATGACTATTTICAArTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCrACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCrCAAATCTTCACCATCCATGGOCTATGGCCAAGTAACTAITCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTAITTGATTCAAGGAAAGTGGTAIGTAITGArTT TTTICTCACTTACTCTTTAGCATTTAGTTIAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCITrCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCCTGATGTTGCTTTATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGrGGTTGTATGTTAGGAAATICrcrCCACICIlTmCI TTGATACAAGGGGAGGGGGAGGTGAGCCTAGGACArCGGGTGCATAGATAAATGCC ITTAACTACITAITrGAAAGTCCITrCCITTTTAAlTrAAGITTTTCACTrTTArAATIT TATTrCATAAGATAAAAATTAAGTAAITAGTCCAGCTGTAAAAAATAAmTTmTT TTTAAGGIGGACACATGACCATATTTAAGTGGGAGTACCAITATTGriACAIATTITA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATrCAGTATAGTACTCAGGTriAACGTAAAAAlTAI CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTCITAAGTITTTACTAITCCTTAAAATATGIATG AATTGCTTGGATGTCICAGrACCCICAGITGCGATTGAATCTGAAGATAICTTGGCCC AACGTGAAAAGIGGCAAIGATACAGAATTTTGGG <SEQ ED NO. Eů-partial sequence of S-RNase S3 6b2 (částečná sekvence S-RNázy S3 6b2); DRA Prunus cerasus L >TCCTxAITTTATGITTAGGGAATATTGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGATCTAACGCACTAGTCTTIGGGAATTATTTITCTGCAATAAGTGCAGTArTC AICATrGGAAGCCAAAATTATGTICTTTATACATAAAAAAATCCTTATTTTAGATACC AITTCCTTCTTACAATATATAArTTTCGCAGGATCrTATGACTATTTICAArTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCrACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCrCAAATCTTCACCATCCATGGOCTATGGCCAAGTAACTAITCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTAITTGATTCAAGGAAAGTGGTAIGTAITGArTT TTTICTCACTTACTCTTTAGCATTTAGTTIAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCITrCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCCTGATGTTGCTTTATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGrGGTTGTATGTTAGGAAATICrcrCCACICIlTmCI TTGATACAAGGGGAGGGGGAGGTGAGCCTAGGACArCGGGTGCATAGATAAATGCC ITTAACTACITAITrGAAAGTCCITrCCITTTTAAlTrAAGITTTTCACTrTTArAATIT TATTrCATAAGATAAAAATTAAGTAAITAGTCCAGCTGTAAAAAATAAmTTmTT TTTAAGGIGGACACATGACCATATTTAAGTGGGAGTACCAITATTGriACAIATTITA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATrCAGTATAGTACTCAGGTriAACGTAAAAAlTAI CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTCITAAGTITTTACTAITCCTTAAAATATGIATG AATTGCTTGGATGTCICAGrACCCICAGITGCGATTGAATCTGAAGATAICTTGGCCC AACGT GAAAAGIGGCAAIGATACAGAATTTTGGG <SEQ ED NO. Eů-partial sequence of S-RNase S3 6b2 (partial sequence of S-RNase S3 6b2); DRA Prunus cerasus L >

TCCTATTnATGnTAGGGAATAITGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACITGATCTAACGCACCACAGTCTTIGGGAATTATrTTrCTGCAATAAGTGCAGIAT TCATCATrGGAAGCCAAAATrAIGTTCTITATACATAAAAAAATCCTTATTTTAGATA OCArTICCITCTTACAATATATAAlTriCGCAGGATClTATGACTAnTrCAAlTTGTG CAACAATGGCCACCGGCTACCTGCAGICITAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGG CCACCTCAAATCTTCACCATCCATGGCCTATGACC.;iAGTAACTATTCAAACCCAAíG AGGCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTATTTGAITCAAGGAAAGTGGTATGTAITGAT TTTITTCTCACTIACTCTTIAGCAmAGITrAAAATAAAAGTrAGATTGICATATGA AGACGTACACTCmCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCATGATGITGCmAI CCAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAAITCTCTCCACTCTmTT C1TTGATACAAGGGGAGGGGGAGGCGAGCCTAGGACATCGGGGGCATAGATAAATG CCTITAACTACITAITrGAAAGICCTTrCCITrrTAATITAAGTnTTCACnTrATAA TTTIATTTCATAAGATAAAAATrAAGTAATCAGTCCAGCTGTAAAAAATAATITAAri TTTIITAAGGTGGACACAIGACCATAIITAAGIGGGAGTACCATTAITGITACATAIT TTATTAITGTAAArCAAAArCACTAAlTCAGTATAGTACTCAGGlTTAACGTAAAAAI TATCTTAITCAAGAACGGAAATCTCTCITAAGmTTACTAITCCITAAAATATGTAT GAATTGCTTGGATGTCTCAGTACCCTCAGTTGCGATTGAATCTGAAGATATCTTGGCC CAACGTGAAAAGTGGCAATGAIACAGAATTTTGGG <SEQ ED NO. 8 7-partial seqjience of SFE S3 fih? (částečná sekvence SFB S336b2); DNA; Ptanus cerasus L>TCCTATTnATGnTAGGGAATAITGIGAGrGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACITGATCTAACGCACCACAGCTCTTIGGAATTATrTTrCTGCAATAAGTGCAGIAT TCATCATrGGAAGCCAAAAtrAIGTTCTITATACATAAAAAAATCCTTATTTTAGATA OCArTICCITCTTACAATATATAAlTriCGCAGGATClTATGACTAnTrCAAlTTGTG CAACAATGGCCACCGGCTACCTGCAGICITAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCGG CCACCTCAAATCTTCACCACCATCCGCCTATTG ; iAGTAACTATTCAAACCCAAíG AGGCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTATTTGAITCAAGGAAAGTGGTATGTAITGAT TTTITTCTCACTIACTCTTIAGCAmAGITrAAAATAAAAGTrAGATTGICATATGA AGACGTACACTCmCGATAAAACCTTGGGTGITAGATAAATCATGATGITGCmAI CCAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAAITCTCTCCACTCTmTT C1TTGATACAAGGGGAGGGGGAGGCGAGCCTAGGACATCGGGGGCATAGATAAATG CCTITAACTACITAITrGAAAGICCTTrCCITrrTAATITAAGTnTTCACnTrATAA TTTIATTTCATAAGATAAAAATrAAGTAATCAGTCCAGCTGTAAAAAATAATITAAri TTTIITAAGGTGGACACAIGACCATAIITAAGIGGGAGTACCATTAITGITACATAIT TTATTAITGTAAArCAAAArCACTAAlTCAGTATAGTACTCAGGlTTAACGTAAAAAI TATCTTAITCAAGAACGGAAATCTCTCITAAGmTTACTAITCCITAAAATATGTAT GAATTGCTTGGATGTCTCAGTACCCTCAGTTGCGATTGAATCTGAAGATATCTTGGCC CAACGTGAAAAGTGGCAATGAIACAGAATTTTGGG <SEQ ED NO. 8 7-partial seqjience of SFE S3 fih? (partial sequence of SFB S336b2); DNA; Ptanus cerasus L>

AIGGCITAGTTTGCAIITCGGATGAGATATIGAAlTrCGAIAGICCTATACACATATG GAAICCATCGATCAGGAAATTTAGGACCCCTCCAATGAGCACCGACATrAACATTAA ACATAGTTATGITGCICrCCAATTCGGGlTCCACCCCCGGGTTAAIGACIACAAGATI GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGCCGTTGAGGTnTTAGTCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGArTGAAGCAATTCCGCCTTGGTrAAAATGCACriGGCAG CATCAAATGAGIACAmTCTAACGGAGTAGCATACCACCrCCTTAGGAAAGGTCCT AIATTCAGCAITATGTCATTCGATrCAGGCAGIGAAGAAlTCGAAGAATrCATAGCA OCAGATGCCATrTGCAGTTCATGGGGGTIATGTATTGACGITTACAAGGAACACATA TGCTTGCCTTITAGATICIArGGTTGrGAGGAGGAGGGCAIGGAACAAGTrGAClTA TGGGTCCIAAAAGAAAAACGGTGGAAIGGCITAGTTTGCAIITCGGATGAGATATIGAAlTrCGAIAGICCTATACACATATG GAAICCATCGATCAGGAAATTTAGGACCCCTCCAATGAGCACCGACATrAACATTAA ACATAGTTATGITGCICrCCAATTCGGGlTCCACCCCCGGGTTAAIGACIACAAGATI GIAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCCTTCGCCGTTGAGGTnTTAGTCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGArTGAAGCAATTCCGCCTTGGTrAAAATGCACriGGCAG CATCAAATGAGIACAmTCTAACGGAGTAGCATACCACCrCCTTAGGAAAGGTCCT AIATTCAGCAITATGTCATTCGATrCAGGCAGIGAAGAAlTCGAAGAATrCATAGCA OCAGATGCCATrTGCAGTTCATGGGGGTIATGTATTGACGITTACAAGGAACACATA TGCTTGCCTTITAGATICIArGGTTGrGAGGAGGAGGGCAIGGAACAAGTrGAClTA TGGGTCCIAAAAGAAAAACGGTGGA

-36CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 8S-partial sequence of SFB S36b3 (částečná sekvence SFB S36b3); DNA, Prunus cerasus L>-36CZ 36551 UI <SEQ ID NO. 8S-partial sequence of SFB S36b3 (partial sequence of SFB S36b3); DNA, Prunus cerasus L>

ATGGCTTAGTTTGCATTTCGGATGAGATATTGAATTTCGATAGTCCTATACACATATG GAATCCATCGATCAGGAAATTTAGGACCCCTCCAATGAGCACCGACATTAACATTAA ACATAGTTATGTTGCTCTCCAATTCGGGTTCCACCCCCGGGTTAATGACTACAAGATT GTAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCC1TCGCCGTTGAGGTTTTTAGTCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCCGCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAG CATCAAATGAGTACATTTTCTAACGGAGTAGCATACCACCTCCTTAGGAAAGGTCCT ATA1TCAGCATTATGTCATTCGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGA4TTCATAGCA CCAGATGCCATTTGCAGTTCATGGGGGTTATGTATTGACGTTTACAAGGAACACATA TGCTTGCCTTTTAGATTCTATGGTTGTGAGGAGGAGGGCATGGAACAAGTTGACTTA TGGGTCCTAAAAGAAAAACGGTGGA <SEQIDNO. 89-partial sequence of S-RNase S36b3 (částečná sekvence S-RNázy S36b3); DNA; Prunus cerasus L>ATGGCTTAGTTTGCATTTCGGATGAGATATTGAATTTCGATAGTCCTATACACATATG GAATCCATCGATCAGGAAATTTAGGACCCCTCCAATGAGCACCGACATTAACATTAA ACATAGTTATGTTGCTCTCCAATTCGGGTTCCACCCCCGGGTTAATGACTACAAGATT GTAAGAATGATGCGTACCAACAAAGATGCC1TCGCCGTTGAGGTTTTTAGTCTTGGA ACGGACTCTTGGAAGATGATTGAAGCAATTCCGCCTTGGTTAAAATGCACTTGGCAG CATCAAATGAGTACATTTTCTAACGGAGTAGCATACCACCTCCTTAGGAAAGGTCCT ATA1TCAGCATTATGTCATTCGATTCAGGCAGTGAAGAATTCGAAGA4TTCATAGCA CCAGATGCCATTTGCAGTTCATGGGGGTTATGTATTGACGTTTACAAGGAACACATA TGCTTGCCTTTTAGATTCTATGGTTGTGAGGAGGAGGGCATGGAACAAGTTGACTTA TGGGTCCTAAAAGAAAAACGGTGGA <SEQIDNO. 89-partial sequence of S-RNase S36b3 (partial sequence of S-RNase S36b3); DNA; Prunus cerasus L>

TCCTATTTTATGTTTAGGGAATATTGTGAGTGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGATCTAACGCACTAGTCTTTGGGAATTATTTTTCTGCAATAAGTGCAGTATTC ATCATTGGAAGCCAAAATTATGTTCTTTATACATAAAAAAATCCITATTTTAGATACC ATTTCCTTCTTACAATATATAATTTTCGCAGGATCTTATGACTATT1TCAATTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCTACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCTCAAATCTTCACCATCCATGGCCTATGGCCAAGTAACTATTCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTATTTGATTCAAGGAAAGTGGTATGTATTGATTT TTTTCTCACTTACTCTTTAGCATTTAGTTTAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCTTTCGATAAAACCTTGGGTGTTAGATAAATCCTGATGTTGCTTTATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAATTCTCTCCACTCTTTTTTCT TTGATACAAGGGGAGTGGGAGGCGAGCCTAGGACATCGGGTGCATAGATAAATGCC TTTAACTACTTATTTGAAAGTCmTCCTTTTTAATTTAAGTTTTTCACTTTTATAATTT TATTTCATAAGATAAAAATTAAGTTATTAGTCCAGCTGTAAAAAATAATTTAATTTTT TTTAAGGTGGACACATGACCATATTTAAGTGGGAGTACCATTATTGTTACATATTTTA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATTCAGTATAGTACTCAGGTTTAACGTAAAAATTAT CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTTAAGTTTTTACTATTCCTTAAAATATGTATGAA TTGCTTGGATGTCTCAGTACCCTCAGTTGCGATTGAATCTGAAGATATCTTGGCCCAA CGTGAAAAGTGGCAATGATACAGAATTTTGGG <SEQ ID NO. 90-partial sequence of S-RNase S3S (částečná sekvence S-RNázy S38), DNA; Prunus avium L>TCCTATTTTATGTTTAGGGAATATTGTGAGTGTCCGATGAAATATCAGGTAACGAAG GACTTGATCTAACGCACTAGTCTTTGGGAATTATTTTTCTGCAATAAGTGCAGTATTC ATCATTGGAAGCCAAAATTATGTTCTTTATACATAAAAAAATCCITATTTTAGATACC ATTTCCTTCTTACAATATATAATTTTCGCAGGATCTTATGACTATT1TCAATTTGTGCA ACAATGGCCACCGGCTACCTGCAGTCTTAGCAGGACACCTTGCTACAAACCCCGGCC ACCTCAAATCTTCACCATCCATGGCCTATGGCCAAGTAACTATTCAAACCCAAAGAG GCCCAGTAATTGCAGGGGGTCGCTATTTGATTCAAGGAAAGTGGTATGTATTGATTT TTTTCTCACTTACTCTTTAGCATTTAGTTTAAAAAAAAGTTAGATTGTCATATGAAGA CAGTACACTCTTTCGATAAAACCTTGGGTGTTAGATAAATCCTGATGTTGCTTTATCC CAACATAGGGGGAGGAGGGGTGGTTGTATGTTAGGAAATTCTCTCCACTCTTTTTTCT TTGATACAAGGGGAGTGGGAGGCGAGCCTAGGACATCGGGTGCATAGATAAATGCC TTTAACTACTTATTTGAAAGTCmTCCTTTTTAATTTAAGTTTTTCACTTTTATAATTT TATTTCATAAGATAAAAATTAAGTTATTAGTCCAGCTGTAAAAAATAATTTAATTTTT TTTAAGGTGGACACATGACCATATTTAAGTGGGAGTACCATTATTGTTACATATTTTA TTATTGTAAATCAAAATCACTAATTCAGTATAGTACTCAGGTTTAACGTAAAAATTAT CTTATTCAAGAACGGAAATCTCTCTTAAGTTTTTACTATTCCTTAAAATATGTATGAA TTGCTTGGATGTCTCAGTACCCTCAGTTGCGATTGAATCTGAAGATATCTTGGCCCAA CG TGAAAAGTGGGCAATGATACAGAATTTTGGG <SEQ ID NO. 90-partial sequence of S-RNase S3S (partial sequence of S-RNase S38), DNA; Prunus avium L>

ACTTGTTCTTGGTTTCGCTTTCTTCCTTTGTTACGTTATGAGCAGTGGTGGGTTGCATT ACATTCTTTTGCTCTTTAAATC1TATATGCATATAATCAACATTGTGTTTTTCTACTTG TATTTTTTGGGGATTGTATTCTGCATGTCCTCTTTTGTTTATTCTGATAATTGTTACAA TAACTGCAGCCTACTGGAAACCTAAAGTTAATTATGTTCTTTATTCTTCAAATCCTTA TTTATGATAGCATTAATATTCTCACAATAATTTTGGCAGGATCTTATGACTATTTTCA ATTTGTGCAACAATGGCCACCAACCAACTGCAAATTTCGTAA^TGCTCCAAACCCCG GCCTTTAC.AA <SEQIDNO. 91-partial sequence of S-RNase STechl (částečná sekvence S-RNázy STěchl); DNA; Prunus avium L>ACTTGTTCTTGGTTTCGCTTTCTTCCTTGTTACGTTATGAGCAGTGGGTGGGTTGCATT ACATTCTTTTGCTCTTTAAATC1TATATGCATATAATCAACATTGTGTTTTTCTACTTG TATTTTTTGGGGATTGTATTCTGCATGTCCTCTTTTGTTTATTCTGATAATTGTTACAA TAACTGCAGCCTACTGGAAACCTAAAGTTAATTATGTTCTTATTCTTTCAAATCCTTA TTTATGATAGCATTAATATTCTCACAATAATTTTGGCAGGATCTTATGACTATTTTCA <ATTTGTCCAAACAATGGCCAACCAACCAAACTGCAAACATTTCGCCID. 91-partial sequence of S-RNase STechl (partial sequence of S-RNase STechl); DNA; Prunus avium L>

CTAAGTATGGCGATGITGAAATCGTCACTCGCTTTCAATATTCTCTCTTTGGTCITCTT CTTGTGCTTCATTATGAGCGCTGGTGGGTAAAATGTGTGCTCTATGGTATATTAAATT TAGTTTATTATTGTTAACGCACGACTTTGTTTTCITTGGATCAAGTAACTATTTGTAGT AGTTGAAATAAATGCAGTTTATTTACAATCAGCAAGCTAAAATTATGTTTTTTACGCA GGATCTCTAAGTATGGCGATGITGAAATCGTCACTCGCTTTCAATATTCTCTCTTTGGTCITCTT CTTGTGCTTCATTATGAGCGCTGGTGGGTAAAATGTGTGCTCTATGGTATATTAAATT TAGTTTATTATTGTTAACGCACGACTTTGTTTTCITTGGATCAAGTAACTATTTGTAGT AGTTGAAATAAATGCAGTTTATTTACAATCAGCAAGCTAAAATTATTGTTTTTACGCA GGATCTT

-37CZ 36551 U1-37CZ 36551 U1

Seznam použité literaturyList of used literature

PUV 2020-34519: Sada primerů pro stanovení S-alel a alel promotoru genu MGST u třešně ptačí (Prunus avium L.) v jediné reakciPUV 2020-34519: Set of primers for determination of S-alleles and MGST gene promoter alleles in bird cherry (Prunus avium L.) in a single reaction

PUV 2021-34908: Sada primerů pro stanovení nové S-alely identifikované u genotypu 'Těchlovická I' třešně ptačí (Prunus avium L.)PUV 2021-34908: Set of primers for the determination of the new S-allele identified in the genotype 'Těchlovická I' of bird cherry (Prunus avium L.)

Boškovic R, Tobutt KR (1996) Correlation of stylar ribonuclease zymograms with incompatibility alleles in sweet cherry. Euphytica 90 (2): 245-250Boškovic R, Tobutt KR (1996) Correlation of stylar ribonuclease zymograms with incompatibility alleles in sweet cherry. Euphytica 90(2): 245-250

De Nettancourt D (1997) Incompatibility in angiosperms. Sexual Plant Reproduction. 10, 185-199 Halász J, Balogh E, Makovics-Zsohár N, Hegedus A. (2019) S-genotyping of Hungarian sour cherry cultivars. Acta Horticulturae. 1231. 161-166De Nettancourt D (1997) Incompatibility in angiosperms. Sexual Plant Reproduction. 10, 185-199 Halász J, Balogh E, Makovics-Zsohár N, Hegedus A. (2019) S-genotyping of Hungarian sour cherry cultivars. Acta Horticulturae. 1231. 161-166

Hauck NR, Ikeda K, Tao R, lezzoni AF (2006) The Mutated S1-Haplotype in Sour Cherry Has an Altered S-Haplotype-Specific F-Box Protein Gene, Journal of Heredity, 97 (5), 514-520Hauck NR, Ikeda K, Tao R, lezzoni AF (2006) The Mutated S1-Haplotype in Sour Cherry Has an Altered S-Haplotype-Specific F-Box Protein Gene, Journal of Heredity, 97 (5), 514-520

Lisek A, Kucharska D, Glowacka A, Rozpara E (2017) Identification of S-haplotypes of European cultivars of sour cherry. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 92:5, 484-492Lisek A, Kucharska D, Glowacka A, Rozpara E (2017) Identification of S-haplotypes of European cultivars of sour cherry. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 92:5, 484-492

Marchese A, Boškovic RI, Caruso T, Raimondo A, Cutuli M, Tobutt KR (2005) A new selfcompatibility haplotype in the sweet cherry ‘Kronio’, S5', attributable to a pollen-part mutation in the SFB gene. Journal of Experimental Botany 58 (15-16): 4347-4356Marchese A, Boškovic RI, Caruso T, Raimondo A, Cutuli M, Tobutt KR (2005) A new selfcompatibility haplotype in the sweet cherry 'Kronio', S5', attributable to a pollen-part mutation in the SFB gene. Journal of Experimental Botany 58(15-16): 4347-4356

Oldén EJ, Nybom, N (1968) On the origin of Prunus cerasus L. Hereditas. 59, 327-345Oldén EJ, Nybom, N (1968) On the origin of Prunus cerasus L. Hereditas. 59, 327-345

Sebolt AM, Iezzoni AF, Tsukamoto T (2017). S-genotyping of cultivars and breeding selections of sour cherry (Prunus cerasus L.) in the Michigan State University sour cherry breeding program. Acta Hortic. 1161, 31-40Sebolt AM, Iezzoni AF, Tsukamoto T (2017). S-genotyping of cultivars and breeding selections of sour cherry (Prunus cerasus L.) in the Michigan State University sour cherry breeding program. Acta Hortic. 1161, 31-40

Sonneveld T, Robbins TP, Bokvis R, Tobutt KR (2001) Cloning of six cherry self-incompatibility alleles and development of allele-specific PCR detection. Theor Appl Genet 102: 1046-1055Sonneveld T, Robbins TP, Bokvis R, Tobutt KR (2001) Cloning of six cherry self-incompatibility alleles and development of allele-specific PCR detection. Theor Appl Genet 102: 1046-1055

Sonneveld T, Tobutt KR, Robbins TP (2003) Allele-specific PCR detection of sweet cherry selfincompatibility (S) alleles S1 to S16 using consensus and allele-specific primers. Theor Appl Genet. 107(6): 1059-70Sonneveld T, Tobutt KR, Robbins TP (2003) Allele-specific PCR detection of sweet cherry self-incompatibility (S) alleles S1 to S16 using consensus and allele-specific primers. Theor Appl Genet. 107(6): 1059-70

Sonneveld T, Tobutt KR, Vaughan SP, Robbins TP. (2005) Loss of pollen-S function in two selfcompatible selections of Prunus avium is associated with deletion/mutation of an S haplotypespecific F-box gene. Plant Cell. 17(1): 37-51Sonneveld T, Tobutt KR, Vaughan SP, Robbins TP. (2005) Loss of pollen-S function in two self-compatible selections of Prunus avium is associated with deletion/mutation of an S haplotype-specific F-box gene. Plant Cell. 17(1): 37-51

Sonneveld T, Robbins TP, Tobutt KR (2006) Improved discrimination of self-incompatibility SRNáza alleles in cherry and high throughput genotyping by automated sizing of first intron polymerase chain reaction products. Plant Breeding 125(3): 305-307Sonneveld T, Robbins TP, Tobutt KR (2006) Improved discrimination of self-incompatibility SRNase alleles in cherry and high throughput genotyping by automated sizing of first intron polymerase chain reaction products. Plant Breeding 125(3): 305-307

Szikriszt B, Dogan A, Ercisli S, Akcay ME, Hegedus A, Halász J (2013) Molecular typing of the self-incompatibility locus of Turkish sweet cherry genotypes reflects phylogenetic relationships among cherries and other Prunus species. Tree Genetics and Genomes, 9(1): 155-165Szikriszt B, Dogan A, Ercisli S, Akcay ME, Hegedus A, Halász J (2013) Molecular typing of the self-incompatibility locus of Turkish sweet cherry genotypes reflects phylogenetic relationships among cherries and other Prunus species. Tree Genetics and Genomes, 9(1): 155-165

Tsukamoto T, Hauck NR, Tao R, Jiang N, Iezzoni AF (2006) Molecular characterization of three non-functional S-haplotypes in sour cherry (Prunus cerasus L.). Plant Mol Biol 62:371-383Tsukamoto T, Hauck NR, Tao R, Jiang N, Iezzoni AF (2006) Molecular characterization of three non-functional S-haplotypes in sour cherry (Prunus cerasus L.). Plant Mol Biol 62:371-383

- 38 CZ 36551 U1- 38 CZ 36551 U1

Tsukamoto T, Potter D, Tao R, Vieira CP, Vieira J, lezzoni AF. (2008a) Genetic and molecular characterization of three novel S-haplotypes in sour cherry (Prunus cerasus L.). J Exp Bot. 59(11):3169-3185Tsukamoto T, Potter D, Tao R, Vieira CP, Vieira J, Lezzoni AF. (2008a) Genetic and molecular characterization of three novel S-haplotypes in sour cherry (Prunus cerasus L.). J Exp Bot. 59(11):3169-3185

Tsukamoto T, Tao R, Iezzoni A (2008b) PCR markers for mutated S-haplotypes enable discrimination between self-incompatible and self-compatible sour cherry selections. Molecular Breeding. 21: 67Tsukamoto T, Tao R, Iezzoni A (2008b) PCR markers for mutated S-haplotypes enable discrimination between self-incompatible and self-compatible sour cherry selections. Molecular Breeding. 21: 67

Tsukamoto T, Hauck NR, Tao R, Jiang N, Iezzoni AF (2010) Molecular and genetic analyses of four nonfunctional S haplotype variants derived from a common ancestral S haplotype identified in sour cherry (Prunus cerasus L.). Genetics. 184(2):411-427Tsukamoto T, Hauck NR, Tao R, Jiang N, Iezzoni AF (2010) Molecular and genetic analyzes of four nonfunctional S haplotype variants derived from a common ancestral S haplotype identified in sour cherry (Prunus cerasus L.). Genetics. 184(2):411-427

Ushijima K, Sassa H, Dandekar AM, Gradziel TM, Tao R, Hirano H (2003) Structural and Transcriptional Analysis of the Self-Incompatibility Locus of Almond: Identification of a PollenExpressed F-Box Gene with Haplotype-Specific Polymorphism. Plant Cell 15(3): 771-81Ushijima K, Sassa H, Dandekar AM, Gradziel TM, Tao R, Hirano H (2003) Structural and Transcriptional Analysis of the Self-Incompatibility Locus of Almond: Identification of a PollenExpressed F-Box Gene with Haplotype-Specific Polymorphism. Plant Cell 15(3): 771-81

Vaughan SP, Russell K, Sargent DJ, Tobutt KR. (2006) Isolation of S-locus F-box alleles in Prunus avium and their application in a novel method to determine self-incompatibility genotype. Theor Appl Genet. 112(5): 856-66.Vaughan SP, Russell K, Sargent DJ, Tobutt KR. (2006) Isolation of S-locus F-box alleles in Prunus avium and their application in a novel method to determine self-incompatibility genotype. Theor Appl Genet. 112(5): 856-66.

Yamane H, Ikeda K, Ushijima K, Sassa H, Tao R. (2003a) A pollen-expressed gene for a novel protein with an F-box motif that is very tightly linked to a gene for S-RNáza in two species of cherry, Prunus cerasus and P. avium. Plant Cell Physiol. 44(7): 764-9Yamane H, Ikeda K, Ushijima K, Sassa H, Tao R. (2003a) A pollen-expressed gene for a novel protein with an F-box motif that is very tightly linked to a gene for S-RNase in two species of cherry , Prunus cerasus and P. avium. Plant Cell Physiol. 44(7): 764-9

Yamane H, Ikeda K, Hauck N, Iezzoni A, Tao R (2003b) Self-incompatibility (S) locus region of the mutated S6-haplotype of sour cherry (Prunus cerasus) contains a functional pollen S allele and a non-functional pistil S allele. Journal of Experimental Botany. 54: 2431-7Yamane H, Ikeda K, Hauck N, Iezzoni A, Tao R (2003b) Self-incompatibility (S) locus region of the mutated S6-haplotype of sour cherry (Prunus cerasus) contains a functional pollen S allele and a non-functional pistil S allele. Journal of Experimental Botany. 54: 2431-7

Claims (5)

1. Sada primerů pro stanovení cizosprašných S-alel SI, S1. A set of primers for the determination of cross-pollinated S-alleles SI, S 2, S2, S 3, S3, S 4, S5, S6, S7, S9, S10, S12, S13, S14, S16, S22, S23, S24, S25, S26, S33, S34, S35, S38 a STěch a samosprašných alel Sl',4, S5, S6, S7, S9, S10, S12, S13, S14, S16, S22, S23, S24, S25, S26, S33, S34, S35, S38 and STech and self-pollinating alleles Sl', 5 S3', S4', S5', S6m, S6m2, S13', S13m, S36a, S36b, S36b2 a S36b3u višně obecné (Prunus cerasus L.) v jediné reakci metodou fragmentační analýzy vyznačující se tím, že obsahuje primery, jejichž sekvence jsou5 S3', S4', S5', S6m, S6m2, S13', S13m, S36a, S36b, S36b2 and S36b3u of common sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction by the method of fragmentation analysis characterized by the fact that it contains primers whose sequence they are CTTGTTCTTGSTTTYGYTTTCTTC CCATTGTTGCACAAATTGAAA GTATCRTTGCCACYTTCCACG TG A ACGA A ATC TC A ACTC AT A A ATC TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAATT GCTAACCCTTACATTTTGACCC CCACAATTTGAACGTCAGAAC TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC TCTAGCTTTTATTCTTGCGAGG GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA GCTTGGACAAAATTGACTTGTG GATC AC AATC ACC C AAAGG AGG C TCTCT TTGGTCTTC TT CTTGTGC GC TTGCTGATTGT AAAT AAACTGC GAC TAC CTACAAAGTCCCTCG GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC CGGTGC GGTGT AGTGT AAAAC ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC CGGTTCAACCCGATTTATGGC CATTGACTTGGCAGTTTGACG ttaatggttgggtgtataattgctgtt CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC ATACTTCGAGCGATCCCACGA G ACCGTGT A AGC C ATTTTGAG AG GATGCGTACCAACAAAAATACCTTA GGCATCTGGTGCTATGAACTAT TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT C AAGTAAG AT AC C AAACTGACCTAAG CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC T AAGGTGG AC AC ATG ACC AT ATTT A AG G AATC CATCGATC AGG AAATTTATAA GTC CGTTC C A AG ACT A A A A A AC AGT AC ATTTTCT AACGG AGTAG CAT CCTCACAACCATAGAATCTAAAAGG GG ACTTG ATC T A ACGC ACC AC A G AT AA ATCCTG ATGTTGCT TT ATCCC A CCT AGGCTCGCCTC TC AC (SEQ ID NO. 1) (SEQ ID NO. 2) (SEQ ID NO. 3) (SEQ ID NO. 4) (SEQ ID NO. 5) (SEQ ID NO. 6) (SEQ ID NO. 7) (SEQ ID NO. S) (SEQ ID NO. 9) (SEQ ID NO. 10) (SEQ ID NO. 11) (SEQ ID NO. 12) (SEQ ID NO. 13) (SEQ ID NO. 14) (SEQ ID NO. 15) (SEQ ID NO. 16) (SEQ ID NO. 17) (SEQ ID NO. IS) (SEQ ID NO. 19) (SEQ ID NO. 20) (SEQ ID NO. 21) (SEQ ID NO. 22) (SEQ ID NO. 23) (SEQ ID NO. 24) (SEQ ID NO. 25) (SEQ ID NO. 26) (SEQ ID NO. 27) (SEQ ID NO. 28) (SEQ ID NO. 29) (SEQ ID NO. 30) (SEQ ID NO. 31) (SEQ ID NO. 32) (SEQ ID NO. 33) (SEQ ID NO. 34) (SEQ ID NO. 35) (SEQ ID NO. 36) (SEQ ID NO. 37);CTTGTTCTTGSTTTYGYTTTCTTC CCATTGTTGCACAAATTGAAA GTATCRTTGCCACYTTCCACG TG A ACGA A ATC TC A ACTC AT A A ATC TCTAATAATGGATCTGCTCATCTAATT GCTAACCCTTACATTTTGACCC CCACAATTTGAACGTCAGAAC TCTGTGTTTTCTAAAGGATGGC TCTAGCTTTTATTCTTGCGAGG GATCTCCTATGCCCCTAGAGAA GCTTGGACAAAATTGACTTGTG GATC AC AATC ACC C AAAGG AGG C TCTCT TTGGTCTTC TT CTTGTGC GC TTGCTGATTGT AAAT AAACTGC GAC TAC CTACAAAGTCCCTCG GCTTAACTTGTAGAACACCTCAC CGGTGC GGTGT AGTGT AAAAC ATATTTCACCATTCATGGCCTATGC CGGTTCAACCCGATTTATGGC CATTGACTTGGCAGTTTGACG ttaatggttgggtgtataattgctgtt CTTAACCAATTCCATGTGGATGTC ATACTTCGAGCGATCCCACGA G ACCGTGT A AGC C ATTTTGAG AG GATGCGTACCAACAAAAAATACCTTA GGCATCTGGTGCTATGAACTAT TTGAATATTTTACCATTCTCTATATTCTGCT C AAGTAAG AT AC C AAAACTGACCTAAG CCGATTTAGCAATAGTTTGGTATAAATTC T AAGGTGG AC AC ATG ACC AT ATTT A AG G AATC CATCGATC AGG AAATTTATAA GTC CGTTC C A AG ACT A A A A A AGT AC ATTTTCT AACGG AACGGAAAAAG ATTCCT CCCTGGATAGACA GGACC T A ACGC ACC AC A G AT AA ATCCTG ATGTTGCT TT ATCCC A CCT AGGCTCGCCTC TC AC (SEQ ID NO. 1) (SEQ ID NO. 2) (SEQ ID NO. 3) (SEQ ID NO. 4) (SEQ ID NO. 5) (SEQ ID NO. 6) (SEQ ID NO. 7) (SEQ ID NO. S ) (SEQ ID NO. 9) (SEQ ID NO. 10) (SEQ ID NO. 11) (SEQ ID NO. 12) (SEQ ID NO. 13) (SEQ ID NO. 14) (SEQ ID NO. 15) (SEQ ID NO. 16) (SEQ ID NO. 17) (SEQ ID NO. IS) (SEQ ID NO. 19) (SEQ ID NO. 20) (SEQ ID NO. 21) (SEQ ID NO. 22) ( SEQ ID NO. 23) (SEQ ID NO. 24) (SEQ ID NO. 25) (SEQ ID NO. 26) (SEQ ID NO. 27) (SEQ ID NO. 28) (SEQ ID NO. 29) (SEQ ID NO. ID NO. 30) (SEQ ID NO. 31) (SEQ ID NO. 32) (SEQ ID NO. 33) (SEQ ID NO. 34) (SEQ ID NO. 35) (SEQ ID NO. 36) (SEQ ID NO. 37); io přičemž:and while: pro identifikaci alely SI obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 a SEQ ID NO. 16, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 15 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the SI allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 and SEQ ID NO. 16, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 15 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely Sl' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 a SEQ ID NO. 17, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 15 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the Sl' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 15 and SEQ ID NO. 17, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 15 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; -40CZ 36551 U1 pro identifikaci alely S2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 4, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;-40CZ 36551 U1 for identification of the S2 allele contains a set of primers SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 4, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S3 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 7 a SEQ ID NO. 8, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 8 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S3 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 7 and SEQ ID NO. 8, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 8 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S3' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S3' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S4 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 a SEQ ID NO. 10, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 9 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S4 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 and SEQ ID NO. 10, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 9 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S4' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 a SEQ ID NO. 10, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 9 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S4' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 9 and SEQ ID NO. 10, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 9 are appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S5 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 11 a SEQ ID NO. 12, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 12 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S5 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 11 and SEQ ID NO. 12, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 12 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S5' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S5' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S6 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 20 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S6 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 20 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S6m obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 19 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S6m allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 19 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S6m2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 18, SEQ ID NO. 20 a SEQ ID NO. 21, z nichž SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 21 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S6m2 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 18, SEQ ID NO. 20 and SEQ ID NO. 21, of which SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 21 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S7 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S7 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S9 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S9 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S10 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S10 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S12 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 6, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S12 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 6, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S13 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 23 a SEQ ID NO. 24, z nichž SEQ ID NO. 24 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S13 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 23 and SEQ ID NO. 24, of which SEQ ID NO. 24 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S13' obsahuje sada primery SEQ ID NO. 23, SEQ ID NO. 24, SEQ ID NO.for identification of the S13' allele, the primer set contains SEQ ID NO. 23, SEQ ID NO. 24, SEQ ID NO. 25 a SEQ ID NO. 26, z nichž SEQ ID NO. 24 a SEQ ID NO. 25 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;25 and SEQ ID NO. 26, of which SEQ ID NO. 24 and SEQ ID NO. 25 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S13m obsahuje sada primery SEQ ID NO. 22 a SEQ ID NO. 24, z nichž SEQ ID NO. 24 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S13m allele, the primer set contains SEQ ID NO. 22 and SEQ ID NO. 24, of which SEQ ID NO. 24 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S14 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S14 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S16 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S16 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; - 41 CZ 36551 U1 pro identifikaci alely S22 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 5, z nichž SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 3 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;- 41 CZ 36551 U1 for identification of the S22 allele contains a set of primers SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 5, of which SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 3 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S23 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S23 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S24 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S24 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S25 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S25 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S26 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 27, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S26 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 27, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S33 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2 a SEQ ID NO. 28, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S33 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2 and SEQ ID NO. 28, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S34 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S34 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S35 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 29, z nichž SEQ ID NO. 3 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S35 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 29, of which SEQ ID NO. 3 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S36a obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO.for identification of the S36a allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 31 a SEQ ID NO. 32, z nichž SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 31 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;31 and SEQ ID NO. 32, of which SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 31 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S36b obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO.to identify the S36b allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33 a SEQ ID NO. 34, z nichž SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 33 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;33 and SEQ ID NO. 34, of which SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 33 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S36b2 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34 a SEQ ID NO. 35, z nichž SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 a SEQ ID NO. 33 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S36b2 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34 and SEQ ID NO. 35, of which SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 3 and SEQ ID NO. 33 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S36b3 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34, SEQ ID NO. 36 a SEQ ID NO. 37, z nichž SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 33 a SEQ ID NO. 36 jsou vhodně fluorescenčně označeny pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;to identify the S36b3 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 30, SEQ ID NO. 33, SEQ ID NO. 34, SEQ ID NO. 36 and SEQ ID NO. 37, of which SEQ ID NO. 3, SEQ ID NO. 33 and SEQ ID NO. 36 are suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely S38 obsahuje sada primery SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO. 2, z nichž SEQ ID NO. 2 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy;for identification of the S38 allele, the primer set contains SEQ ID NO. 1 and SEQ ID NO. 2, of which SEQ ID NO. 2 is appropriately fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis; pro identifikaci alely STěchl obsahuje sada primery SEQ ID NO. 13 a SEQ ID NO. 14, z nichž SEQ ID NO. 13 je vhodně fluorescenčně označena pro současnou detekci dalších S-alel v průběhu fragmentační analýzy.for identification of the STěchl allele, the primer set contains SEQ ID NO. 13 and SEQ ID NO. 14, of which SEQ ID NO. 13 is suitably fluorescently labeled for simultaneous detection of additional S-alleles during fragmentation analysis.
CZ2022-40301U 2022-10-03 2022-10-03 Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction CZ36551U1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2022-40301U CZ36551U1 (en) 2022-10-03 2022-10-03 Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2022-40301U CZ36551U1 (en) 2022-10-03 2022-10-03 Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ36551U1 true CZ36551U1 (en) 2022-11-14

Family

ID=84104979

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2022-40301U CZ36551U1 (en) 2022-10-03 2022-10-03 Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ36551U1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10959386B2 (en) Melon plants with improved disease tolerance
AU2015317635B2 (en) Tomato plants with improved agronomic traits
RU2748688C2 (en) Genetic locus associated with root and stem rot due to phytophthora in soy
US8710295B2 (en) Soybean sequences associated with the FAP3 locus
US8809623B2 (en) Genetic loci associated with resistance to tropical rust in maize
JP4775945B2 (en) A method for identifying rice blast resistance using as a marker a molecular marker linked to the Pb1 gene
EP3138392A1 (en) Downy mildew resistant lettuce plants
EP3682733A1 (en) Green bean plants with improved disease resistance
US20230250446A1 (en) Tomato plants with resistance to mi-1 resistance-breaking root-knot nematodes
Mori et al. Mapping of QTLs controlling epicotyl length in adzuki bean (Vigna angularis)
US20210324395A1 (en) Tomato plants with improved traits
KR102680459B1 (en) Tomato plants with improved disease resistance
US20240090396A1 (en) Clubroot resistance in brassica
CZ36551U1 (en) Primers for determining S-alleles in sour cherry (Prunus cerasus L.) in a single reaction
AU2015333748B2 (en) Tomato plants with improved disease resistance
CN115820897B (en) Molecular marker closely linked with corn female spike and sword leaf length and application thereof
JP4886941B2 (en) Method of selecting tobacco-resistant tobacco
US20240065219A1 (en) Novel loci in grapes
CN115820895B (en) Molecular marker closely linked with chlorophyll content of corn and application thereof
US12048280B2 (en) Green bean plants with improved disease resistance
RU2821992C2 (en) Tomato plants with improved traits
CZ34519U1 (en) Primers for determining S-alleles and alleles of the MGST gene promoter in bird cherry (Prunus avium L.) in a single reaction
Abbasi Molecular markers associated with male-sterile cytoplasms and male-fertility restorer locus in onion (Allium cepa): a review
CZ34908U1 (en) Primers for determining a new S-allele identified in the genotype ´Techlovická I´ bird cherry (Prunus avium L.
US20140259232A1 (en) Molecular markers associated with earliness in maize

Legal Events

Date Code Title Description
FG1K Utility model registered

Effective date: 20221114