CZ35153U1 - Výživová kompozice - Google Patents

Výživová kompozice Download PDF

Info

Publication number
CZ35153U1
CZ35153U1 CZ201936810U CZ201936810U CZ35153U1 CZ 35153 U1 CZ35153 U1 CZ 35153U1 CZ 201936810 U CZ201936810 U CZ 201936810U CZ 201936810 U CZ201936810 U CZ 201936810U CZ 35153 U1 CZ35153 U1 CZ 35153U1
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
hmo
nutritional composition
composition according
mass
hmos
Prior art date
Application number
CZ201936810U
Other languages
English (en)
Inventor
Stefan Jennewein
Original Assignee
Jennewein Biotechnologie Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP17206124.4A external-priority patent/EP3494804A1/en
Priority claimed from EP17206223.4A external-priority patent/EP3494806A1/en
Priority claimed from EP17206159.0A external-priority patent/EP3494805A1/en
Priority claimed from EP17206414.9A external-priority patent/EP3494807A1/en
Priority claimed from EP18155669.7A external-priority patent/EP3524067A1/en
Application filed by Jennewein Biotechnologie Gmbh filed Critical Jennewein Biotechnologie Gmbh
Publication of CZ35153U1 publication Critical patent/CZ35153U1/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/20—Dietetic milk products not covered by groups A23C9/12 - A23C9/18
    • A23C9/206—Colostrum; Human milk
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/40—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by drying or kilning; Subsequent reconstitution
    • A23L3/46—Spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
    • A23L33/21—Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A23L5/27—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption
    • A23L5/273—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption using adsorption or absorption agents, resins, synthetic polymers, or ion exchangers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
    • A23P10/40—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products free-flowing powder or instant powder, i.e. powder which is reconstituted rapidly when liquid is added
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P30/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the process or apparatus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
    • B01D61/02—Reverse osmosis; Hyperfiltration ; Nanofiltration
    • B01D61/027—Nanofiltration
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
    • B01D61/14—Ultrafiltration; Microfiltration
    • B01D61/145—Ultrafiltration
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
    • B01D61/42—Electrodialysis; Electro-osmosis ; Electro-ultrafiltration; Membrane capacitive deionization
    • B01D61/422—Electrodialysis
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
    • B01D61/58—Multistep processes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • B01D9/0018—Evaporation of components of the mixture to be separated
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • B01D9/005—Selection of auxiliary, e.g. for control of crystallisation nuclei, of crystal growth, of adherence to walls; Arrangements for introduction thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
    • C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
    • C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/10—Drying, dehydrating
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/38—Multiple-step
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • B01D2009/0086—Processes or apparatus therefor
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D2311/00—Details relating to membrane separation process operations and control
    • B01D2311/02—Specific process operations before starting the membrane separation process
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D2311/00—Details relating to membrane separation process operations and control
    • B01D2311/26—Further operations combined with membrane separation processes
    • B01D2311/2623—Ion-Exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D2311/00—Details relating to membrane separation process operations and control
    • B01D2311/26—Further operations combined with membrane separation processes
    • B01D2311/2626—Absorption or adsorption

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Description

Výživová kompozice
Oblast techniky
Předkládané technické řešení se týká výživové kompozice, ve formě sprejově sušeného prášku, která obsahuje směs strukturně odlišných lidských mléčných oligosacharidů.
Dosavadní stav techniky
Lidské mateřské mléko obsahuje podstatná množství sacharidů. Sacharidy, které jsou přítomné v lidském mateřském mléku, zahrnují monosacharidy, jako je L-fukóza a A-acetylneuraminová kyselina, disacharid laktózu, a až 20 g/1 oligosacharidů, takzvaných „lidských mléčných oligosacharidů (HMO)“. HMO představují třetí nejhojnější složku lidského mateřského mléka. Předpokládá se, že v lidském mléku je přítomno více než 150 strukturně odlišných oligosacharidů. Vybrané HMO jsou uvedené v tabulce 1. Každý z přibližně 10 až 13 těchto HMO je přítomných v lidském mléku v koncentraci mezi několika stovkami miligramů až gramy na litr (Thurl et al., (2017), Nutrition Reviews 75(11) 920-933). Mezi HMO jsou známé neutrální HMO, jakož i kyselé HMO, které obsahují alespoň jednu skupinu N-acetylneuraminové kyseliny (NeuAc). Strukturní složitost a velké množství těchto oligosacharidů je pro lidské mléko jedinečné a nenalezené v mléku ostatních savců, jako jsou - například - domestikovaná mléčná zvířata.
Protože nejsou HMO pro lidi stravitelné, je fyziologická role těchto sacharidů po několik desetiletí předmětem výzkumu. Prebiotický účinek HMO se objevil před více než 100 lety. Po požití jsou HMO schopné modulovat kompozici lidského střevního mikrobiomu podporováním růstu prospěšných bakterií.
Tabulka 1: Struktury významných oligosacharidů v lidském mateřském mléku
Název Chemická struktura
2'-FL Fuc (al,2) Gal (β1,4) Glc
3-FL Gal (β1,4) (Fuc (al,3)) Glc
DFL Fuc (al ,2) Gal (β 1,4) Glc (al,2) 1 Fuc
LNT Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LN«T Gal (β1,4) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LNFP-I Fuc (al,2) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LNFP-II Gal (β1,3) (Fuc (al,4)) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LNFP-III Gal (β1,4) (Fuc (al,3)) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LNFP-V Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) (Fuc (al,3)) Glc
3'-SL NeuAc (a2,3) Gal (β1,4) Glc
6'-SL NeuAc (a2,6) Gal (β1,4) Glc
LSTa NeuAc (a2,3) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LSTb NeuAc I(a2,6) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LSTc NeuAc (a2,6) Gal (β1,4) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
LNDFH-I Fuc (al,2) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc Kal,4) Fuc
LNDFH-II Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc l(al,4) (al,3)l Fuc Fuc
LNDFH-III Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
-1 CZ 35153 UI
l(al,3) (al,3)l Fuc Fuc
F-LSTa NeuAc (a2,3) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc Kal,4) Fuc
F-LSTb NeuAc I(a2,6) Fuc (al,2) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
F-LSTc NeuAc (a2,6) Gal (β1,4) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc (al,3)l Fuc
FSL NeuAc (a2,3) Gal (β1,4) Glc (al,3)l Fuc
DS-LNT NeuAc I(a2,6) NeuAc (a2,3) Gal (β1,3) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
FDS-LNT-I NeuAc
(a2,6) NeuAc (a2,3) Gal (β1,4) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc
FDS-LNT-II NeuAc I(a2,6) NeuAc (a2,3) Gal (β1,4) GlcNAc (β1,3) Gal (β1,4) Glc (al,3)l Fuc
V posledních letech bylo odhaleno několik dalších funkčních účinků HMO, obzvláště jejich účinek na vývoj novorozenců. HMO jsou známé tím, že působí jako návnady pro snížení rizika infekcí bakteriálními a virovými patogeny, které se lepí na lidské buňky navázáním těchto glykoproteinů buněčného povrchu. Dále, různé HMO mají protizánětlivý účinek a působí jako imunomodulátory. Proto se navrhlo, že HMO redukují rizika vývoje potravinových alergií. O pozitivním účinku sialylovaných HMO na vývoj centrálního nervového systému novorozenců se také intenzivně diskutuje (recenzováno v „Prebiotics and Probiotics in Human Milk, Origins and functions of milkborne oligosaccharides and bacteria“, Academic Press (2017) editoři: McGuire M., McGuire M., a Bode L.).
Aby se využily příznivé účinky HMO, vyvíjí se úsilí o přidání jednotlivých HMO do výživové kompozice, zejména do umělé kojenecké výživy. Nicméně suplementace výživových kompozic kombinací různých HMO by byla lepší, protože se takové kompozice těsněji podobají přírodnímu zdroji HMO, tj. lidskému mléku, a pravděpodobněji mají lepší účinky na osobní zdraví a vývoj než kompozice, které obsahují pouze jeden druh HMO.
Omezená zásoba HMO pro suplementaci výživových kompozic vedla k rozvoji postupů pro chemické syntézy HMO. Nevýhody u takových chemických syntéz vedou k biokatalytickým přístupům, při kterých jsou HMO syntetizované in vitro za použití purifikovaných enzymů, jako jsou glykosyltransferázy. Dnes se jednotlivé HMO vyrábějí v průmyslovém měřítku za použití fermentace genetický upravených mikrobiálních buněk (WO 2015/150328 AI, WO 2010/070104 Al, WO 2012/097950 AI). HMO se syntetizují geneticky upravenými mikrobiálními buňkami a mohou se izolovat z fermentačního média a/nebo buněčného lyzátu za zisku v podstatě čistého preparátu HMO.
-2CZ 35153 UI
V průběhu jejich izolace z fermentačního bujónujsouHMO obvykle přítomné ve formě kapalného procesního proudu, např., vodný roztok, který obsahuje HMO, o který je zájem, a který může také obsahovat nežádoucí HMO, což jsou vedlejšími produkty, které se vytvořily v průběhu fermentační výroby požadovaného HMO. Společně s izolací požadovaného HMO, tj., HMO, o který je zájem, se zvýší jeho koncentrace v procesním proudu a jeho čistota. Nicméně, vodný roztok, který obsahuje HMO, je náchylný k bakteriální nebo plísňové kontaminaci. Proto je výhodné poskytnout požadované HMO jako suchý nebo pevný produkt, který obsahuje nízké množství vody. Růst mikrobiálních organismů je na/v takovém pevném produktu stěží možný.
Typicky se získá sacharid v pevné formě prostřednictvím krystalizace. Krystalizace jednotlivých HMO z vodného roztoku byla popsaná pro 3-fůkosyllaktózu (WO 2014/075680 A), pro 2'-fůkosyllaktózu (WO 2011/150939 A), di-fukosyllaktózu (WO 2016/086947 A), lakto-A-tetraózu (WO 2017/101953 A), lakto-V-«eotetraózu (WO 2014/094783 A). Krystalizace HMO zahrnuje použití organických rozpouštědel, jako jsou alkoholy, zejména ethanol nebo methanol, nebo organické kyseliny, jako je ledová kyselina octová. Nicméně, použití alkoholů, obzvláště methanolu, pro krystalizaci HMO na konci izolačního procesu, je nevhodné, pokud se mají HMO použít pro lidskou spotřebu. Kromě toho jsou nákup a likvidace organických rozpouštědel drahé. Také jsou organická rozpouštědla škodlivá pro životní prostředí a pro osoby, které s nimi nakládají. A tak je krystalizace HMO nevýhodou při výrobě HMO v průmyslovém měřítku a mělo by se jí vyhýbat, obzvláště na konci izolačního procesu požadovaného HMO.
Proto existuje potřeba po způsobu, který poskytuje směs HMO, výhodně v kombinaci s alespoň jedním monosacharidem, v pevné formě, s tím, že tento způsob je aplikovatelný při výrobě v průmyslovém měřítku a nezahrnuje použití organického rozpouštědla na konci purifikace jednoho nebo více HMO, aby se získal pevný preparát uvedených HMO.
Tohoto cíle se dosáhlo způsobem pro výrobu sprejově sušeného prášku, který zahrnuje směs strukturně odlišných HMO.
Podstata technického řešení
V prvním aspektu se poskytuje sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě z, nebo, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO.
V druhém aspektu se poskytuje způsob pro výrobu sprejově sušeného prášku, který sestává v podstatě z, nebo, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO.
Ve třetím aspektu se poskytuje použití sprejově sušeného prášku, který sestává v podstatě z, nebo, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO pro výrobu výživové kompozice.
Ve čtvrtém aspektu se poskytuje výživová kompozice, která zahrnuje sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě z, nebo, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO.
Podle prvního aspektu se poskytuje sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě z, nebo, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO.
V jednom provedení sprejově sušený prášek sestává v podstatě ze směsi strukturně odlišných HMO.
Výraz „který sestává v podstatě z“, jak se používá v tomto textu, se týká kompozic, které sestávají ze sloučeniny (sloučenin) uvedené po uvedeném výrazu, a - případně - nevyhnutelné vedlejší produkty. Uvedené nevyhnutelné vedlejší produkty zahrnují - například - sloučeniny, které se vytvořily v průběhu mikrobiální fermentace pro výrobu jednoho nebo více z HMO, jakož i sloučeniny, které se zavedly do procesního proudu, z kterého se izoluje/izolují HMO, ale které se
-3 CZ 35153 UI z něho nemohly odstranit. Výraz „který sestává v podstatě z” s ohledem na sprejově sušené prášky zahrnuje sprejově sušené prášky, které obsahují s ohledem na sušinu sprejově sušeného prášku alespoň 80 % hmota., alespoň 85 % hmota., alespoň 90 % hmota., alespoň 93 % hmota., alespoň 95 % hmota, nebo alespoň 98 % hmota. HMO. Výraz „který sestává v podstatě z“ se rovněž používá s ohledem na sprejově sušené prášky, procesní proudy a roztoky, které obsahují HMO.
V dalším a/nebo alternativním provedení směs strukturně odlišných HMO sestává ze dvou, tří, čtyř, pěti, šesti, sedmi nebo více než sedmi strukturně odlišných HMO. Strukturně odlišné HMO zahrnují neutrální HMO a sialylované HMO. A tak může směs HMO obsahovat alespoň jeden neutrální HMO a/nebo alespoň jeden kyselý HMO.
Tento alespoň jeden neutrální HMO se může vybrat ze skupiny sestávající z 2'-fukosyllaktózy (2'-FL), 3-fukosyllaktózy (3-FL), lakto-A-tetraózy (LAT), lakto-A-weotetraózy (LAnT) a lakto-A-fukopentaózy I (LAPFI).
Tento alespoň jeden kyselý HMO se může vybrat ze skupiny sestávající ze sialylovaných HMO, výhodně ze skupiny sestávající z 3'-sialyllaktózy (3'-SL), 6'-sialyllaktózy (6'-SL), sialyllakto-A-tetraózy a (LST-a), sialyllakto-A-tetraózy b (LST-b), sialyllakto-A-tetraózy c (LST-c) a disialyllakto-N-tetraózy (DSLNT).
A proto se mohou strukturně odlišné HMO ze směsi strukturně odlišných HMO vybrat ze skupiny sestávající z 2’-FL, 3-FL, LAT, LAnT, LAFPI, 3’-SL, 6'-SL, LST-a, LST-b, LST-c a DSLNT.
V dalším a/nebo alternativním provedení směs strukturně odlišných HMO obsahuje nebo sestává v podstatě z pěti strukturně odlišných HMO. V dalším provedení jsou uvedenými pěti strukturně odlišnými HMO 2'-FL, 3-FL, LAT, 3'-SL a 6'-SL. V příkladné kompozici této směsi je ve směsi strukturně odlišných HMO přítomno pět strukturně odlišných HMO v množstvích, jak se uvádějí v tabulce 2.
Tabulka 2: Kompozice příkladné směsi, která sestává z pěti strukturně odlišných HMO
HMO % hmota.
2'-FL 52,2
3-FL 13,0
LAT 26,1
3'-SL 3,5
6'-SL 5,2
Celkem 100,0
V dalším a/nebo alternativním provedení, směs strukturně odlišných HMO obsahuje nebo sestává v podstatě ze sedmi strukturně odlišných HMO. V dalším provedení jsou uvedenými sedmi strukturně odlišnými HMO 2'-FL, 3-FL, LAT, LAnT, LAFPI, 3'-SL a 6'-SL. V příkladné kompozici této směsi je ve směsi přítomno sedm strukturně odlišných HMO v množstvích, jak se uvádějí v tabulce 3.
Tabulka 3: Kompozice příkladné směsi, která sestává ze sedmi strukturně odlišných HMO
HMO % hmota.
2'-FL 39,0
3-FL 12,0
LAT 23,0
LAnT 2,0
LAFPI 16,0
-4CZ 35153 UI
3'-SL 3,0
6'-SL 5,0
Celkem 100,0
V dalším a/nebo alternativním provedení, sprejově sušený prášek obsahuje nebo sestává v podstatě ze směsi strukturně odlišných HMO a alespoň jednoho monosacharidu. Výhodně se uvedený 5 alespoň jeden monosacharid vybere ze skupiny sestávající z L-fukózy a V-acetylneuraminové kyseliny (NeuAc). V dalším a/nebo alternativním provedení obsahuje sprejově sušený prášek monosacharidy L-fukózu a/V-acetylneuraminovou kyselinu.
V konkrétním provedení sprejově sušený prášek sestává v podstatě z HMO 2'-FL, 3-FL, LAT, 10 LVnT, LAFPI. 3'-SL a 6'-SL, a monosacharidů L-fukózy a/V-acetylneuraminové kyseliny.
V příkladné kompozici je sedm strukturně odlišných HMO a dva monosacharidy přítomno v množstvích, jak se uvádějí v tabulce 4.
Tabulka 4: Kompozice příkladné směsi, která obsahuje HMO a monosacharidy
HMO % hmota.
2'-FL 33,6
3-FL 10,7
LAT 20,1
LMiT 2,0
LAFPI 13,4
3'-SL 2,7
6'-SL 4,0
NeuAc 8,1
L-fukóza 5,4
Celkem 100,0
V dalším a/nebo alternativním provedení, sprejově sušený prášek obsahuje nebo sestává v podstatě z kompozice uvedené v tabulce 5.
Tabulka 5: Příkladné kompozice sprejově sušeného prášku
sacharid A [hmota. %] B [hmota. %]
2'-FL 30,0-55,0 33,6-52,2
3-FL 10,0-15,0 10,7-13,0
LAT 20,0-30,0 20,1-26,1
LMiT 0,0-5,0 0,0-2,0
LAFPI 0,0 - 20,0 0,0 - 16,0
3'-SL 2,0-4,0 2,7-3,5
6'-SL 4,0-6,0 4,0-5,2
NeuAc 0,0 - 10,0 0,0-8,1
L-takóza 0,0-6,0 0,0-5,4
V dalším a/nebo alternativním provedení se alespoň jeden z HMO ze směsi strukturně odlišných HMO a/nebo ze sprejově sušeného prášku vyrábí mikrobiální fermentací. V konkrétním provedení se všechny HMO ze směsi strukturně odlišných HMO a/nebo ze sprejově sušeného prášku vyrábí mikrobiální fermentací.
-5 CZ 35153 UI
V dalším a/nebo alternativním provedení, ve kterém sprejově sušený prášek obsahuje alespoň jeden monosacharid, stím, že se uvedený alespoň jeden monosacharid vyrobil mikrobiální fermentací. V jiném provedení, ve kterém sprejově sušený prášek obsahuje L-fukózu a A-acetylneuraminovou kyselinu, se oba monosacharidy vyrobily mikrobiální fermentací.
A proto, v konkrétním provedení se všechny sacharidy, které jsou přítomné ve sprejově sušeném prášku, tj., HMO nebo HMO a monosacharidy, vyrobily mikrobiální fermentací.
V dalším a/nebo alternativním provedení, alespoň jeden z HMO ve sprejově sušeném prášku, výhodně všechny HMO ve sprejově sušeném prášku, jsou přítomné v amorfní formě. V těchto provedeních, ve kterých sprejově sušený prášek obsahuje L-fukózu a/nebo A-acetyl-neuraminovou kyselinu, monosacharid, je v amorfní formě přítomný alespoň jeden z monosacharidů nebo oba monosacharidy.
V dalším a/nebo alternativním provedení, sprejově sušený prášek obsahuje nízké množství vody. Výraz „nízké množství vody“ se týká množství < 15 % hmota, vody, výhodně < 10 % hmota, vody, výhodněji < 7 % hmota, vody, nejvýhodněji < 5 % hmota, vody.
V dalším a/nebo alternativním provedení, sprejově sušený prášek je bez geneticky upravených mikroorganismů a bez molekul nukleových kyselin odvozených z geneticky upravených mikroorganismů.
Sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě ze směsi strukturně odlišných HMO, případně v kombinaci s alespoň jedním monosacharidem, je výhodný oproti kapalným kompozicím, v tom, že je uvedený sprejově sušený prášek méně náchylný k mikrobiální kontaminaci. Uvedený sprejově sušený prášek je také výhodný oproti práškům, které mají stejnou kompozici složek, které se získaly sušením mrazem nebo lyofilizací, vtom, že je tento sprejově sušený prášek méně hygroskopický a zůstává mnohem déle roztékavý.
Podle druhého aspektu se poskytuje způsob výroby sprejově sušeného prášku, který sestává v podstatě z nebo který obsahuje směs strukturně odlišných HMO, s tím, že alespoň jeden ze strukturně odlišných HMO, výhodně všechny ze strukturně odlišných HMO, se vyrábí mikrobiální fermentací.
Tento způsob zahrnuje kroky:
a) Izolaci alespoň jednoho ze strukturně odlišných HMO z fermentačního bujónu;
b) Poskytnutí vodného roztoku alespoň jednoho HMO z kroku a); a
c) Podrobení roztoku z kroku b) sprejovému sušení.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje purifikace alespoň jednoho HMO z fermentačního bujónu (krok a) jeden nebo více kroků
i) Odstranění mikrobiálních buněk z fermentačního bujónu za zisku procesního proudu;
ii) Podrobení procesního proudu alespoň jedné ultrafiltraci;
iii) Zpracování procesního proudu alespoň jednou s kationtově výměnnou pryskyřicí a/nebo alespoň jednou s aniontově výměnnou pryskyřicí;
iv) Podrobení procesního proudu alespoň jedné nanofiltraci;
v) Podrobení procesního proudu alespoň jedné elektrodialýze;
ví) Zpracování procesního proudu alespoň jednou s aktivním uhlím;
a/nebo vii) Podrobení procesního proudu alespoň jednou krystalizačnímu a/nebo precipitačnímu kroku.
Alespoň jeden HMO nebo kterýkoliv ze strukturně odlišných HMO ze směsi se může vyrobit mikrobiální fermentací, stím, že se geneticky upravený mikroorganismus, který je schopný
-6 CZ 35153 UI syntetizovat HMO, kultivuje v kultivačním médiu (fermentační bujón) a za podmínek, které jsou přípustné pro syntézu uvedeného HMO uvedeným geneticky upraveným mikroorganismem. Purifikace HMO, který se syntetizoval buňkami geneticky upraveného mikroorganismu, zahrnuje krok separace mikrobiálních buněk z fermentačního bujónu za zisku procesního proudu. Tento procesní proud je v podstatě bez buněk a obsahuje uvedený/uvedené HMO. Tento krok je prvním krokem v procesu purifikace požadovaného HMO.
Vhodné způsoby pro separaci mikrobiální buněk z fermentačního bujónu zahrnují odstředění, při kterém se získají mikrobiální buňky jako peleta a fermentační bujón jako supernatant. V dalším a/nebo alternativním provedení se mikrobiální buňky separují z fermentačního bujónu prostřednictvím filtrace. Vhodné filtrační způsoby pro separaci buněk z fermentačního bujónu zahrnují mikrofiltraci aultrafiltraci.
Mikrofiltrace jako taková je fýzikální filtrační proces, kdy tekutina, která obsahuje částice, se nechá procházet přes speciální membránu s velikostí pórů pro separaci částic z této tekutiny. Výraz „mikrofiltrace“, jak se používá v tomto textu, se týká fyzikálního filtračního procesu, kdy se separují buňky z fermentačního bujónu.
Ultrafiltrace je druh membránové filtrace a v zásadě se neliší. Při ultrafiltraci vedou síly jako je tlak nebo koncentrační gradienty k separaci přes polopropustnou membránu. Buňky, suspendované pevné látky a rozpuštěné látky s vysokou molekulární hmotností se uchovávají v takzvaném retentátu, zatímco voda a rozpuštěné látky s nízkou molekulární hmotností, jako je požadovaný sialylovaný oligosacharid, procházejí přes membránu v permeátu (filtrátu).
Ultrafiltrační membrány jsou definovány mezní molekulární hmotností (MWCO) použité membrány. Ultrafiltrace se aplikuje v režimu cross-flow nebo dead-end.
Typicky, mikrobiální buňky syntetizují HMO intracelulámě. V závislosti na struktuře HMO se HMO dodává buď do fermentačního bujónu, nebo zůstávají uvnitř mikrobiální buňky. V prvním případě je takto vyrobený HMO přítomný ve fermentačním bujónu na konci fermentace, a může se izolovat z fermentačního bujónu, který se tak stává procesním proudem. V druhém případě se mikrobiální buňky, které nesou HMO, separují od fermentačního bujónu a lyžují se, aby se uvolnily HMO. A tak buněčný lyzát obsahuje HMO a stává se procesním proudem pro purifíkaci HMO, jak se popisuje v tomto textu dále.
Bez ohledu na to, že se tento způsob používá pro purifíkaci HMO, které se vyrobily mikrobiální fermentací, může se tento způsob také použít pro purifíkaci HMO, které se vyrobily enzymatickou katalýzou in-vitro. HMO se pak může purifíkovat z reakční směsi na konci biokatalytické reakce. Uvedená reakční směs se podrobí způsobu pro purifíkaci jako procesní proud.
Tento procesní proud obsahuje požadovaný (požadované) HMO, jakož i vedlejší produkty a nežádoucí nečistoty, jako jsou - například - monosacharidy, disacharidy, nežádoucí oligosacharidové vedlejší produkty, ionty, aminokyseliny, polypeptidy, proteiny a/nebo molekuly nukleových kyselin.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifíkaci HMO krok alespoň jednoho kationtově výměnného zpracování, aby se odstranily kladně nabité sloučeniny z vyčeřeného procesního proudu.
Vhodné kationtově výměnné pryskyřice pro odstranění kladně nabitých sloučenin z procesního (R) + (R) proudu zahrnují Lewatit S 6368 A (Uanxess AG, Cologne, DE) v H formě; Lewatit S 2568 (H+) (Uanxess AG, Cologne, DE).
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifíkaci HMO krok aniontově výměnného zpracování, aby se odstranily nežádoucí záporně nabité sloučeniny z vyčeřeného
-7 CZ 35153 UI procesního proudu.
(R)
Vhodné aniontově výměnné pryskyřice zahrnují Lewatit S 2568 (Cl ) (Lanxess AG, Cologne, DE) Lewatit® S 6368 A (Lanxess AG, Cologne, DE), Lewatit® S 4268 (Lanxess AG, Cologne, DE), Lewatit® S 5528 (Lanxess AG, Cologne, DE), Dowex® AG 1x2 (Mesh 200-400), Dowex® 1x8 (Mesh 100-200), Purolite® Chromalite® CGA 100x4 (Purolite GmbH, Ratingen, DE), Dow® AmberliteTM FPA51 (Dow Chemicals, MI, USA).
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci HMO krok nanofiltrace a/nebo diafiltrace, aby se odstranily nečistoty, které mají nízkou molekulární hmotnost, a aby se zakoncentroval požadovaný HMO.
Diafiltrace zahrnuje přidání čerstvé vody do roztoku za účelem odstranění (vypláchnutí) membránově permeabilních složek. Diafiltrace se může použít pro separaci složek na základě jejich molekulární velikosti a náboje prostřednictvím použití vhodných membrán, s tím, že se účinně zadrží jedna nebo více látek, a ostatní látky jsou membránově permeabilní. Zejména je pro separaci sloučenin s nízkou molekulární hmotností, jako je malá molekula nebo soli, účinná diafiltrace za použití nanofiltrační membrány. Nanofiltrační membrány mají obvykle mezní molekulární hmotnost v rozmezí 150 až lOOODaltonů. Nanofiltrace se široce používá v mlékárenském průmyslu pro zakoncentrování a demineralizaci syrovátky.
Vhodné membrány pro nanofiltraci a/nebo diafiltraci zahrnují Dow® Filmtec^^ NF270-4040, Trisep® 4040-XN45-TSF (Microdyn-Nadir GmbH, Wiesbaden, DE), GE4040F30 a GH4040F50 (GE Water & Process Technologies, Ratingen, DE).
Zjistilo se, že je diafiltrace za použití nanofiltračních membrány účinná jako předzpracování, aby se odstranila významná množství kontaminantů před zpracováním roztoku, který obsahuje oligosacharid, elektrodialýzou. Toto použití nanofiltračních membrán pro zakoncentrování a diafiltraci v průběhu purifikace HMO má za následek nižší energetické a procesní náklady, a lepší kvalitu produktu kvůli redukovanému tepelnému vystavení, což vede k redukovaným Maillardovým reakcím a aldolovým reakcím.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci HMO alespoň jeden krok elektrodialýzy.
Elektrodialýza (ED) kombinuje dialýzu a elektrolýzu a může se použít pro separaci nebo zakoncentrování iontů v roztocích na základě jejich selektivní elektromigrace přes semipermeabilní membrány.
Základní princip elektrodialýzy sestává z elektrolytického článku, který zahrnuje pár elektrod ponořených do elektrolytu pro vedení iontů, připojeného ke generátoru stejnosměrného proudu. Ta elektroda připojená ke kladnému pólu generátoru stejnosměrného proudu je anoda, a ta elektroda připojená k zápornému poluje katoda. Elektrolytový roztok podporuje tok proudu, který vychází z pohybu záporných a kladných iontů směrem k anodě nebo katodě. Membrány používané pro elektrodialýzu jsou v podstatě desky porézních iontově výměnných pryskyřic se skupinami se záporným nebo kladným nábojem, a jsou proto popsané jako kationtové nebo aniontové membrány, v daném pořadí. Iontově výměnné membrány jsou obvykle vyrobené z polystyrenu, který nese vhodnou fúnkční skupinu (jako je kyselina sulfonová pro kationtové membrány nebo kvartémí amoniová skupina pro aniontové membrány) zesítěného divinylbenzenem. Elektrolytem může být, například, chlorid sodný, octan sodný, propionát sodný nebo sulfamová kyselina. Elektrodialýzní stoh se pak sestaví takovým způsobem, že jsou aniontové a kationtové membrány paralelní jako ve filtračním lisu mezi dvěma elektrodovými bloky, tak, že se proud podstupující iontovou depleci dobře separuje od proudu podstupujícího iontovým obohacením (dva roztoky se
-8 CZ 35153 UI také označují jako diluát (podstupující iontovou depleci) a koncentrát (podstupující iontové obohacení)). Podstatou elektrodialýzního procesu je membránový stoh, který sestává z několika aniontově výměnných membrán a kationtově výměnných membrán oddělených pomocí spacerů, instalovaných mezi dvěma elektrodami. Aplikováním stejnosměrného elektrického proudu budou anionty a kationty migrovat přes membrány směrem k elektrodám.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci HMO dále krok kontinuální chromatografie jako je SMB chromatografie (z angl. „simulated bed moving“, se simulovaným pohyblivým ložem).
SMB chromatografie (se simulovaným pohyblivým ložem) vznikla v petrochemickém průmyslu a průmyslu nerostných surovin. Dnes se SMB chromatografie používá farmaceutickým průmyslem pro izolaci enantiomerů z racemických směsí. SMB chromatografie ve velkém měřítku se již používá pro separaci monosacharidu fruktózy z fruktózo-glukózových roztoků a pro separaci disacharidu sacharózy ze sirupů cukrové řepy nebo cukrové třtiny.
SMB chromatografické procesy používané pro separaci sacharidů používají, např. vápníkové nabité, zesítěné polystyrénové pryskyřice, aniontové pryskyřice v hydrogensiřičitanové formě (Bechthold M., et al., Chemie Ingenieur Technik, 2010, 82, 65-75), nebo polystyrénovou gelovou silně kyselou kationtovou pryskyřici ve vodíkové formě (Purolite® PCR833H) (Purolite, Bala Cynwyd, USA).
Vzhledem ke kontinuálnímu režimu operace, recyklaci mobilní fáze a také potenciálu pro použití velkých kolonových velikostí, se může u SMB chromatografických systémů v zásadě zvětšit měřítko, aby se dosáhlo produkčních objemů stovek tun.
Procesní krok chromatografie se simulovaným pohyblivým ložem je výhodný v tom, že tento procesní krok umožňuje další odstranění oligosacharidů, které jsou strukturně úzce příbuzné k požadovanému oligosacharidů.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO zpracování procesního proudu s aktivním uhlím, aby se odstranily kontaminující látky, jako jsou barviva, z procesního proudu.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO alespoň jeden krok krystalizace nebo precipitace HMO z procesního proudu.
Krystalizace nebo precipitace alespoň jednoho HMO z procesního proudu se může provádět přidáním vhodného množství organického rozpouštědla, které je mísitelné s vodou, do procesního proudu, který obsahuje alespoň jeden HMO. Organické rozpouštědlo se může vybrat ze skupiny sestávající z Ci- až Ce-alkoholů a Ci- až C4-karboxylových kyselin. Krok krystalizace nebo precipitace alespoň jednoho HMO se neprovádí na konci izolačního procesu, takže se zbytková množství organického rozpouštědla nebo karboxylové kyseliny mohou odstranit pomocí následných procesních kroků.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO krokovou sterilní filtraci a/nebo endotoxinové odstranění, výhodně filtraci procesního proudu přes 3 kDa filtr nebo 6 kDa filtr.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO krok zvýšení koncentrace alespoň jednoho HMO v procesním proudu. Tato koncentrace alespoň jednoho HMO v procesním proudu se může zvýšit podrobením procesního proudu vakuovému odpaření, reverzní osmóze nebo nanofiltraci (např., nanofiltrace s nanofiltrační membránou, která má limit propustnosti SEL (z angl. size exclusion limit) < 20 Á). Alternativně se vykrystalizované nebo precipitované HMO rozpouštějí ve vodě za zisku vodného roztoku alespoň jednoho HMO,
-9 CZ 35153 UI s tím, že tento vodný roztok má požadovanou koncentraci uvedeného alespoň jednoho HMO.
V dalším a/nebo alternativním provedení je výsledným procesním proudem vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO v koncentraci > 20 g/1, > 25 g/1, > 30 g/1, > 40 g/1, > 60 g/1, > 100 g/1, > 200 g/1 nebo dokonce > 300 g/1.
V dalším a/nebo alternativním provedení obsahuje vodný roztok alespoň jeden HMO při čistotě alespoň 80 %, alespoň 85 %, alespoň 90 %, alespoň 93 %, alespoň 95 % nebo alespoň 98 % vzhledem k hmotnosti sušiny/rozpuštěných látek v roztoku.
Výraz „čistota“, jak se používá v tomto textu, se týká chemické čistoty, tj. stupeň, na který je látka nenaředěná nebo nenamíchaná s vnějším materiálem. A proto je chemická čistota ukazatelem vztahu mezi alespoň jedním HMO a vedlejšími produkty/nečistotami. Chemická čistota je vyjádřená jako procento (%) a je vyjádřená za použití následující vzorce:
Hmotnost požadované sloučeniny ve vzorku
Čistota v procentech = 100 x--------------—----------------------Celková hmotnost vzorku
Čistota HMO v preparátu se může stanovit kterýmkoliv vhodným způsobem, který je pro zkušeného odborníka známý, například použitím HPLC a výpočtem poměru plochy pod pikem (píky), který představuje množství HMO, ku součtu ploch pod píky, které představují HMO a všechny další sloučeniny než uvedený (uvedené) HMO ve stejném chromatogramu.
Vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO, se může skladovat za vhodných podmínek, například, se může uvedený vodný roztok zmrazit.
Způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO je nákladově efektivní a snadno se zvýší měřítko, což ho činí vhodným jako základ pro výrobní proces ve více tunovém měřítku.
Způsob pro purifikaci alespoň jednoho HMO je také výhodný vtom, že je vodný roztok bez geneticky upravených mikroorganismů a molekul nukleových kyselin odvozených z geneticky upravených mikroorganismů. Kromě toho je tento vodný roztok bez proteinů. Celkové odstranění proteinů eliminuje riziko způsobení alergií potenciálnímu spotřebiteli.
Způsob pro výrobu sprejově sušeného prášku zahrnuje krok poskytnutí vodného roztoku, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, a - případně - alespoň jeden monosacharid.
V dalším a/nebo alternativním provedení je alespoň jeden HMO vybraný ze skupiny sestávající z 2'-FL, 3-FL, LAT, LAnT, LAFPI, 3'-SL, 6'-SL, LST-a, LST-b, LST-c aDSLNT.
V dalším a/nebo alternativním provedení, směs strukturně odlišných HMO sestává z pěti strukturně odlišných HMO, výhodně z 2'-FL, 3-FL, LAT, 3'-SL a 6'-SL. V jiném provedení, směs strukturně odlišných HMO sestává ze sedmi strukturně odlišných HMO, výhodně z 2'-FL, 3-FL, LAT, LAnT, LAFPI, 3'-SL a 6'-SL.
V dalším a/nebo alternativním provedení, vodný roztok dále obsahuje alespoň jeden monosacharid výhodně vybraný ze skupiny sestávající z L-fukózy a N-acetylneuraminové kyseliny. V jiném provedení, vodný roztok dále obsahuje L-fukózu a N-acetylneuraminovou kyselinu.
V dalším a/nebo alternativním provedení obsahuje vodný roztok alespoň jeden HMO nebo směs HMO, a/nebo alespoň jeden monosacharid, v množství, které sčítá sacharidové množství alespoň 20 % (w/v), 30 % (w/v), 35 % (w/v) a až 45 % (w/v), 50 % (w/v), 60 % (w/v).
V dalším a/nebo alternativním provedení obsahuje vodný roztok alespoň jeden HMO nebo směs
-10CZ 35153 UI
HMO v čistotě alespoň 80 %, alespoň 85 %, alespoň 90 %, alespoň 93 %, alespoň 95 % nebo alespoň 98 % s ohledem na hmotnost sušiny/rozpuštěných látek v roztoku.
V dalším a/nebo alternativním provedení, vodný roztok neobsahuje geneticky upravené mikroorganismy, molekuly nukleových kyselin odvozené z geneticky upravených mikroorganismů a proteiny.
Ve způsobu pro výrobu sprejově sušeného prášku se vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, podrobí sprejovému sušení.
Sprejové sušení je způsob pro získání suchých prášků, s tím, že ten roztok, který obsahuje látku, o kterou je zájem, se nejprve rozstříkne do kapek, které se rychle suší horkým vzduchem.
Sprejové sušení je velmi rychlé a vystavení látky, která se má sušit, vysokým teplotám, je docela krátké.
V dalším a/nebo alternativním provedení se vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, sprejově suší při teplotě trysky alespoň 110 °C, výhodně alespoň 120 °C, výhodněji alespoň 125 °C a méně než 150 °C, výhodně méně než 140 °C a výhodněji méně než 135 °C.
V dalším a/nebo alternativním provedení se vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, sprejově suší při výstupní teplotě alespoň 60 °C, výhodně alespoň 65 °C, a menší než 80 °C, výhodně menší než 70 °C. V konkrétně výhodném provedení se vodný roztok, který obsahuje HMO, sprejově suší při teplotě trysky okolo 68 °C až okolo 70 °C.
Rozumí se, že každá látka ze strukturně odlišných HMO - případně v kombinaci s alespoň jedním monosacharidem - se může purifikovat a sprejově sušit samostatně, a že se výsledné sprejově sušené prášky mohou smíchat v libovolném požadovaném poměru. V alternativním provedení, vodný roztok obsahuje všechny strukturně odlišné HMO, a výsledný vodný roztok, který obsahuje směs strukturně odlišných HMO v požadovaném poměru, se podrobí sprejovému sušení.
V dalším a/nebo alternativním provedení, vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, dále obsahuje alespoň jeden monosacharid, jako je - například L-fůkóza a/nebo N-acetylneuraminová kyselina. Vodný roztok, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, a alespoň jeden monosacharid, se pak podrobí sprejovému sušení, aby se získal sprejově sušený prášek sestávající v podstatě z alespoň jednoho HMO a alespoň jednoho monosacharidu, nebo směsi strukturně odlišných HMO a alespoň jednoho monosacharidu.
Poměr sacharidů (HMO a monosacharid (monosacharidy)) ve výsledném sprejově sušeném prášku odpovídá poměru těchto sacharidů ve vodném roztoku.
Naposledy uvedený postup je výhodný v tom, že monosacharidy, které se nemohou sprejově sušit samostatně, se stanou sprejově sušitelnými v přítomnosti jednoho nebo více HMO.
Sprejové sušení vodného roztoku, který obsahuje alespoň jeden HMO nebo směs strukturně odlišných HMO, poskytuje prášek o nízké hygroskopii, s tím, že je přítomný HMO v amorfní formě, a s tím, že je velikost částic homogenní. Sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě z alespoň jednoho HMO nebo směsi strukturně odlišných HMO, je méně hygroskopický než prášek identické kompozice, který se získal sušením mrazem. A tak jsou sprejově sušené prášky, jak se popisují v tomto textu, výhodné s ohledem na jejich další použití a zpracování.
Podle třetího aspektu se poskytuje použití sprejově sušeného prášku, který sestává v podstatě ze směsi strukturně odlišných HMO, nebo který obsahuje směs strukturně odlišných HMO a alespoň
-11CZ 35153 UI jeden monosacharid, výhodně L-fukózu a/nebo N-acetylneuraminovou kyselinu, pro výrobu výživové kompozice. Sprejově sušený prášek, který sestává v podstatě ze směsi strukturně odlišných HMO - a případně alespoň jednoho monosacharidu, výhodně vybraného ze skupiny sestávající z L-fukózy a N-acetylneuraminové kyseliny, je vhodný pro lidskou spotřebu, atak 5 mohou být zahrnuty do preparátů pro lidskou spotřebu, jako jsou lékařské formulace, umělá kojenecká výživa, mléčné nápoje a potravinové doplňky.
Podle čtvrtého aspektu se poskytují výživové kompozice, které obsahují sprejově sušený prášek, jak se popisuje v prvním aspektu a/nebo jak se vyrobí podle druhého aspektu.
V dalším a/nebo alternativním provedení zahrnuje výživová kompozice směs, která sestává v podstatě zNeu5Ac, 2'-FL, 3-FL, LAT, LAnT, LAFPI, 3'-SL, 6'-SL aL-fůkózy. Kompozice, která obsahuje výhodná množství každé z uvedených sloučenin, se uvádí v tabulce 6.
Kompozice podle druhého sloupce v tabulce 6 je obzvláště výhodná pro suplementaci umělé kojenecké výživy, aby konečná umělá kojenecká výživa pro přímou spotřebu mohla obsahovat sloučeniny ze směsi v koncentracích, jak se uvádějí ve třetím sloupci z tabulky 6.
Tabulka 6: Kompozice reprezentativní směsi, která obsahuje Neu5AC vhodný pro umělou 20 kojeneckou výživu
Sloučenina Poměr ve směsi (hmotnostní procenta) Konečná koncentrace v umělé kojenecké výživě (g/1)
2'-FL 34 2,5
3-FL 11 0,8
LAT 20 1,5
LAnT 2 0,15
LAFPI 13 1,0
3'-SL 3 0,2
6'-SL 4 0,3
Neu5Ac 8 0,6
L-Fukóza 5 0,4
Celkem 100 7,45
V dalším a/nebo alternativním provedení obsahuje výživová kompozice jednu nebo více dodatečných látek. Uvedené jedna nebo více dodatečných látek jsou vybrané ze skupiny sestávající 25 z oleje, tuku a mastných kyselin (jako je olivový olej, slunečnicový olej, kokosový olej, ořechový olej, řepkový olej, palmový olej, lněný olej, rybí olej, linolenová kyselina, sójový olej atd.), sacharidů (jako je glukóza, fruktóza, laktóza, maltodextrin, škrob, sacharóza, inositol atd.), proteinů (z odstředěného mléka, syrovátky, kaseinu (odvozený z kterýchkoliv domestikovaných mléčných zvířat), nebo ze sójového bobu), vitaminů (A, Bl, B2, B5, B6, B12, C, D, E, K, biotin, 30 folová kyselina, niacin, cholin), minerálních látek a stopových prvků (sodík, draslík, chlorid, vápník, fosfor, hořčík, železo, zinek, mangan, fluorid, selen, jód, měď).
Ve výhodném provedení je výživovou kompozicí, která obsahuje sprejově sušený prášek, který obsahuje/sestává v podstatě z alespoň jednoho lidského mléčného oligosacharidu nebo směsi 35 lidských mléčných oligosacharidů nebo směsi alespoň jednoho mléčného oligosacharidu s alespoň jedním monosacharidem nebo směsi strukturně odlišných lidských mléčných oligosacharidů s dalšími vlákny, umělá kojenecká výživa, která splňuje kompoziční požadavky stanovené Nařízením (EU) 2016/127 a/nebo v Kodexu federálních předpisů (USA), hlava 21 107.100 (specifikace živin).
Reprezentativní kompozice umělé kojenecké výživy jsou uvedené v tabulkách 7 a 8.
-12CZ 35153 UI
Tabulka 7: Složky reprezentativní umělé kojenecké výživy
Umělá kojenecká výživa: odstředěné mléko rostlinné oleje (palmový olej, řepkový olej, slunečnicový olej) lidské mléčné oligosacharidy
3-fukosyllaktóza prášek z odstředěného mléka olej z Mortierella alpine rybí olej uhličitan vápenatý chlorid draselný vitamin C chlorid sodný vitamin E octan železnatý síran zinečnatý Niacin D-panthothenát vápenatý síran měďnatý vitamin A vitamin B1 vitamin B6 síran hořečnatý jodičnan draselný folová kyselina vitamin K seleničitan sodný vitamin D
Tabulka 8: Kompozice reprezentativní umělé kojenecké výživy. Konečná koncentrace je založená na preparátu z 13,5 g prášku v 90 ml vody
na 100 g prášku na 100 ml umělé dětské výživy
Energie kJ 2094-2145 283
kcal 500-512 67-68
Tuky, z toho: g 24,2-26,2 3,3-3,5
Nasycené mastné kyseliny g 8,7-9,4 1,2-1,3
Mononenasycené mastné kyseliny g 10,4 1,4
Polynenasycené mastné kyseliny g 5,5-5,9 0,7-0,8
Sacharidy, z toho: g 56-58 7,4-7,9
Cukry, z toho: g 44-56 6-7,4
Laktóza g 44-56 6-7,4
Neu5Ac mg 440 60
L-fukóza mg 300 40
HMO, z toho: g 4,22-4,81 0,57-0,65
2'-FL g 1,85-2,22 0,25-0,30
3-FL mg 555,56-592,6 75-80
LAT g i,n 0,15
LAnT mg 0-111,11 0-15
LAPF-I mg 0-740,74 0-100
3'-SL mg 148,15-170,37 20-23
6'-SL mg 207,4-222,22 28-30
-13CZ 35153 UI
Protein g 11,11-11,85 1,5-1,6
Sůl g 0,47-0,59 0,06-0,08
Vitaminy
Vitamin A ůg 357-358 47,3-48,2
Vitamin D ůg 7,8 1,05
Vitamin E mg 8,15 1,1
Vitamin K ůg 43,7-44,4 5,9-6,0
Vitamin C mg 115-118 15-16
Vitamin B1 mg 0,51-0,60 0,068-0,079
Vitamin B2 mg 1,3-1,7 0,18-0,23
Niacin mg 3,63 0,49
Vitamin B6 ůg 526-600 71-81
Folová kyselina ůg 160-164 21,6-21,7
Vitamin B12 ůg 1,7-1,9 0,23-0,25
Biotin ůg 22-30 3,0-3,9
Panthothenová kyselina mg 4,6-5,4 0,62-0,72
Minerální látky
Sodík mg 187-236 25,3-31,2
Draslík mg 673-675 88,8-91,2
Chlorid mg 327-333 43,1-44,9
Vápník mg 460-504 62,1-66,5
Fosfor mg 335-352 45,2-46,5
Hořčík mg 49,3-56,3 6,66-7,43
Železo mg 4,15 0,56
Zinek mg 3,7-3,8 0,49-0,51
Měď ůg 274 37
Mangan ůg 96,3 13
Fluorid ůg 30,4-32,6 4,1-4,4
Selen ůg 11,1-12,3 1,5-1,6
Jód ůg 101,5-103,7 13,7-14
V dalším a/nebo alternativním provedení, výživová kompozice také obsahuje mikroorganismy, výhodně probiotické mikroorganismy. Pro aplikace v rámci kojeneckých potravin jsou výhodné mikroorganismy odvozené z nebo se mohou nacházet v mikrobiomu zdravého člověka. Výhodně, ale bez jakýchkoliv omezení, jsou mikroorganismy vybrané z rodů Bifidobacterium, Lactobacillus, Enterococcus, Streptococcus, Staphylococcus, Peptostreptococcus, Leuconostoc, Clostridium, Eubacterium, Veilonella, Fusobacterium, Bacterioides, Prevotella, Escherichia, Propionibacterium a Saccharomyces. V dalším a/nebo alternativním provedení je tento mikroorganismus vybraný ze skupiny sestávající z Bifidobacterium adolescentis, B. animalis, B. bifidum, B. breve, B. infantis, B. lactis, B. longum; Enterococcus faecium', Escherichia coli', Kluyveromyces marxianus', Lactobacillus acidophilus, L. bulgaricus, L. casei, L. crispatus, L. fermentum, L. gasseri, L. helveticus, L. johnsonii, L. paracasei, L. plantarum, L. reuteri, L. rhamnosus, L. salivarius, L. sakev, Lactococcus lactis (včetně, ale bez omezení na, poddruhy lactis, cremoris a diacetylactis)·, Leuconostoc mesenteroides (včetně, ale bez omezení na, poddruhy mesenteroides)·, Pedicoccus acidilactici, P. pentosaceus; Propionibacterium acidipropionici, P. freudenreichii ssp. shermanii', Staphylococcus carnosus', a Streptococcus thermophilus.
Kromě kombinačně žijících organismů může výživová kompozice také obsahovat kultury mrtvých buněk. V oblasti probiotik se někdy používají kultury usmrcených buněk (např. tyndalizované bakterie). Tyto usmrcené kultury mohou poskytovat proteiny, peptidy, oligosacharidy, fragmenty buněčné vnější stěny a přírodní produkty, které vedou ke krátkodobé stimulaci imunitního systému.
Zahrnutí probiotických mikroorganismů ve výživové kompozici, obzvláště v přítomnosti HMO, je
-14CZ 35153 UI zejména výhodné v tom, že to také podporuje založení zdravého střevního mikrobiomu.
V dalším a/nebo alternativním provedení, výživová kompozice také obsahuje prebiotika, jako jsou galaktooligosacharidy (GOS), fruktooligosacharidy (FOS), inulin nebo jejich kombinace.
Výživová kompozice se může předkládat v kapalné formě nebo v pevné formě, včetně, ale bez omezení na prášky, granule, vločky a pelety.
V dalším provedení je výživová kompozice vybraná ze skupiny sestávající z lékařských formulací, umělé kojenecké výživy a potravinových doplňků. V dalším provedení je výživová kompozice vybraná ze skupiny sestávající z lékařských formulací, umělé kojenecké výživy a potravinových doplňků.
Předkládané technické řešení se bude popisovat s ohledem na konkrétní provedení a s odkazem na výkresy, ale technické řešení na ně není omezeno, aleje omezený pouze nároky na ochranu. Navíc výrazy první, druhý a podobně v popisu a v nárocích na ochranu se používají pro rozlišení mezi podobnými prvky, a ne nutně pro popis sekvence, buď časově, prostorově, v pořadí, nebo jakýmkoliv jiným způsobem. Má se rozumět tomu, že takto používané výrazy jsou zaměnitelné za vhodných okolností a že jsou provedení podle technického řešení popsaná v tomto textu schopná provozu v jiných sekvencích než v sekvencích popsaných nebo ilustrovaných v tomto textu.
Je třeba poznamenat, že výraz „zahrnující“, jak se používá v nárocích na ochranu, by se neměl interpretovat jako, že je omezený na prostředky uvedené za tímto výrazem; nevylučuje další prvky nebo kroky. A tak se má interpretovat tak, že specifikuje přítomnost uvedených znaků, celých čísel, kroků nebo složek, jak se označují, ale ne zabraňuje přítomnosti nebo přidání jednoho nebo více dalších znaků, celých čísel, kroků nebo složek, nebo jejich skupin. A tak by se neměl rozsah výrazu „zařízení, které zahrnuje prostředky A a B“ omezovat na zařízení, která sestávají pouze ze složek A a B. Znamená, že s ohledem na předkládané technické řešení, jsou jedinými relevantními součástmi zařízení A a B.
Odkaz v celém tomto popisu na Jedno provedení“ nebo „provedení“ znamená, že konkrétní znak, struktura nebo charakteristika popsaná ve spojení s tímto provedením jev alespoň jednom provedení podle předkládaného technického řešení zahrnuta. A tak výskyt frází „vjednom provedení“ nebo „v provedení“ na různých místech v celém tomto popisu se nutně netýká vždy stejného provedení. Navíc, konkrétní znaky, struktury nebo charakteristicky se mohou kombinovat kterýmkoliv vhodným způsobem, jak by bylo zřejmé odborníkovi běžně zkušenému v oboru z tohoto popisu, v jednom nebo ve více provedeních.
Podobně je třeba si uvědomit, že v popisu reprezentativních provedení podle technického řešení jsou různé znaky podle technického řešení někdy seskupeny dohromady v jednom provedení, obrázku nebo jeho popisu za účelem zefektivnění popisu a zjednodušení porozumění jednoho nebo více z různých inventivních aspektů. Tento způsob popisu se nemá interpretovat tak, že odráží záměr, že nárokované technické řešení vyžaduje více znaků, než kolik se výslovně uvádí v každém nároku. Namísto toho, jak odrážejí následující nároky na ochranu, inventivní aspekty mohou vyžadovat méně než všechny znaky z kteréhokoliv výše uvedeného provedení. A tak nároky na ochranu, které následují podrobný popis, jsou tímto výslovně začleněny do tohoto podrobného popisu, s tím, že každý nárok stojí sám o sobě jako samostatné provedení podle tohoto technického řešení.
Navíc, zatímco některá provedení popsaná v tomto textu zahrnují některé, ale ne další znaky zahrnuté v dalších provedeních, rozumí se, že kombinace znaků z různých provedení spadá do rozsahu tohoto technického řešení, a tvoří různá provedení, jak by se rozumělo odborníky dobře obeznámenými soborem. Například, v následujících nárocích na ochranu se může kterékoliv z nárokovaných provedení použít v libovolné kombinaci.
-15CZ 35153 UI
Navíc se v tomto textu popisují některá z provedení jako způsob nebo kombinace prvků ze způsobu, která se mohou implementovat procesorem počítačového systému nebo dalšími prostředky pro provedení funkce. A tak procesor s nezbytnými instrukcemi pro provedení takového způsobu nebo prvku ze způsobu tvoří prostředek pro provedení tohoto způsobu nebo prvku ze způsobu. Navíc, prvkem popsaným v tomto textu z přístrojového provedení je příklad prostředků pro provedení funkce vykonávané tímto prvkem za účelem provedení tohoto technického řešení.
V tomto popisu a výkresech uvedených v tomto textu se uvádí mnoho specifických podrobností. Nicméně se rozumí tomu, že provedení podle technického řešení se může provádět bez těchto specifických podrobností. V dalších případech se podrobně ukazují dobře známé způsoby, struktury a techniky, aby se usnadnilo porozumění tomuto popisu a výkresů.
Toto technické řešení se bude nyní popisovat podrobným popisem několika provedení podle technického řešení. Je jasné, že se další provedení podle technického řešení mohou nakonfigurovat podle znalostí odborníků zkušených v oboru, aniž by došlo k odchýlení se od pravého ducha nebo technické podstaty tohoto technického řešení, s tím, že toto technické řešení je omezeno pouze z hlediska připojených nároků na ochranu.
Objasnění výkresů
Na připojených výkresech obr. 1 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené 3-fůkosyllaktózy; obr. 2 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené lakto-A-tctraózy: obr. 3 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené 6'-sialyllaktózy; obr. 4 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené 3'-sialyllaktózy; obr. 5 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené směsi 2'-fůkosyllaktózy a lakto-A-tctraózy: a obr. 6 ukazuje graf, který ilustruje výsledky z rentgenové práškové difrakce sprejově sušené směsi 2'-fukosyllaktózy, 3-fukosyllaktózy, lakto-A-tctraózy. 3'-sialyllaktózy a 6’-sialyllaktózy.
Příklady uskutečnění technického řešení
Příklad 1: Purifikace 2’-fůkosyllaktózy z fermentačního bujónu
Výroba 2'-fukosyllaktózy prostřednictvím fermentace za použití geneticky modifikovaného E. coli kmene se provedla tak, jak se popisuje v evropské patentové přihlášce EP 16196486 2’-fukosyllaktóza se purifikovala z fermentačního bujónu pomocí filtrace, iontově výměnné chromatografie, nanofiltrace, diafiltrace nebo elektrodialýzy, a pomocí zpracování s uhlím, jak se popisuje ve WO 2015/106943 AI. Výsledný roztok, který obsahoval 2’-fůkosyllaktózu, se podrobil sprejovému sušení za zisku stabilního pevného produktu.
Příklad 2: Purifikace 3-fůkosyllaktózy z fermentačního bujónu
3-fůkosyllaktóza se vyrobila prostřednictvím fermentace za použití geneticky modifikovaného E. coli kmene, jak se popisuje v evropské patentové přihlášce EP 16196486.
Buňky se oddělily z kultivačního média pomocí ultrafiltrace (mezní hodnota 0,05 pm) (CUT membrane technology, Erkrath, Německo) s následným cross-flow filtrem s MWCO 150 kDa (Microdyn-Nadir, Wiesbaden, Německo). Fermentační médium bez buněk, které obsahovalo okolo 30 g/1 3-fůkosyllaktózy, se nechalo procházet přes silný kationtový iontoměnič (Lewatit S 2568 (Lanxess, Cologne, Německo) v H+ formě, aby se odstranily kladně nabité kontaminanty. Poté se tento roztok upravil na pH 7,0 za použití hydroxidu sodného a aplikoval na
-16CZ 35153 UI aniontový iontoměnič (Lewatit S6368 A, Lanxess) v chloridové formě. Oba iontoměniče se použily v objemu 200 1. Po druhé filtraci (150 kDa; Microdyn-Nadir, Wiesbaden, Německo) se roztok bez částic zakoncentroval 5násobně pomocí nanofiltrace za použití Filmtech NF270 membrány (Dow, Midland, USA) a2,5násobně pomocí vakuového odpaření. Zakoncentrovaný roztok a vodivost okolo 15 mScm1 se zfiltroval (10 kDa; Microdyn-Nadir, Wiesbaden, Německo), vyčeřil aktivním uhlím (CAS:7440-44-0, Carl Roth, Karlsruhe, Německo) adeionizoval pomocí elektrodialýzy. Proto se použil PC-Cell BED 1-3 přístroj pro elektrodialýzu (PC-Cell, Heusweiler, Německo) s PC-Cell E200 membránovým stohem, který obsahoval následující membrány: kationtově výměnná membrána CEM:PC SK a aniontová membrána AEM:PCAcid60. Při tomto procesu se jako elektrolyt použila 0,25M sulfamová kyselina. Pro redukci nahnědlého zabarvení způsobeného Maillardovými reakcemi a aldolovými produkty, které vznikají z fermentačního procesu, se provedlo druhé kolo iontově výměnné chromatografie za použití stejného iontoměničového materiálu, jak se uvádí výše, v Na+ a CF formě, nicméně v objemu 50 1. Po zakoncentrování cukerného roztoku prostřednictvím odpaření se znovu snížila vodivost z 4 mScm1 na 0,4 mScm1 nebo méně pomocí elektrodialýzy za použití PC-Cell BED 1-3 uvedeného výše. Pro další odbarvení se roztok smíchal s aktivním uhlím (CAS:7440-44-0, Carl Roth, Karlsruhe, Německo) a pomocí filtrace se získal téměř bezbarvý roztok.
Příklad 3: Purifikace lakto-A-tctraózy z fermentačního bujónu
Fermentační výroba lakto-A-tctraózy se provedla za použití geneticky modifikovaného E. coli BL21 (DE3) \lacZ kmene, s genomově integrovanými geny podstatnými pro in vivo syntézu lakto-N-tetraózy, jmenovitě A-acetylglukosamin glykosyltransferáza (IgtA z Neisseria meningitidis MC58), β-1,3-galaktosyltransferáza (wbdO z Salmonella enterica subsp. salamae serovar Greenside), lacY zE. coli K12, UDP-glukóza-4-epimeráza galE, a UTP-glukóza-1-fosfát uridyltransferáza galU, obě z E. coli K12. Pro fermentační výrobu lakto-N-tetraózy se kmen nechal růst v definovaném médiu s minerálními solemi, které obsahovalo 7 gl1 NH4H2PO4, 7 gl1 K2HPO4, 2gl-1 KOH, 0,3 gl1 citrónové kyseliny, 5 gl1 NH4CI, 0,1 mM CaCL. 8 mM MgSO4, stopové prvky (0,101 gl1 nitrilotrioctové kyseliny, pH 6,5, 0,056 gl1 citronanu amonno-železitého, 0,01 gl4 MnCl2 x 4 H2O, 0,002 gl1 C0CI2 x 6 H2O, 0,001 gl1 CuCl2 x 2 H2O, 0,002 gl1 kyseliny borité, 0,009 gF1 ZnSO4 x 7 H2O, 0,001 gl1 Na2MoO4 x 2 H2O, 0,002 gl1 Na2SeO3, 0,002 gl1 N1SO4 x 6 H2O) a 2 % glukózy jako zdroj uhlíku. Když bylo potřeba, přidalo se protipěnidlo (Struktol J673, Schill + Seilacher). pH se kontrolovalo za použití 25% roztoku amoniaku. Po krocích se přidávala laktóza do konečné koncentrace 15 mM z 216 gl1 laktózového zásobního roztoku, koncentrace laktózy v kultivačním médiu se udržovala konstantní po celý fermentační proces. Zbytková laktóza a lakto-N-trióza II, akumulace v průběhu tohoto procesu jako vedlejší produkt, se hydrolyzovaly druhým E. coli kmenem, který se přidal do fermentoru. Tento kmen exprimoval funkční beta-laktamázu, beta-A-acetylhexosaminidázu (bbhl z Bifidobacterium bifidum JCM1254), a funkční gal-operon pro degradaci monosacharidů (EP 2845905 AI).
Buňky se oddělily od fermentačního bujónu a tekutina, která obsahovala lakto-N-tetraózu, se purifikovala na čistotu 75 až 80 %, stanovenou hmotnostní bilancí, podle postupu popsaného v příkladu 2.
Kontaminující sacharidové vedlejší produkty, které vycházely z neúčinné enzymatické degradace a metabolizace, se odstranily pomocí chromatografie za použití SMB chromatografie (se simulovaným pohyblivým ložem), podle WO 2015/049331. Alternativně se lakto-A-tctraóza purifikovala krystalizací s isopropanolem. Pro krystalizaci se roztok, který obsahoval lakto-N-tetraózu, zakoncentroval odpařením na koncentraci 20 % a sprejově sušil. Za použití NUBILOSA LTC- GMP sprejově sušárny (NUBILOSA, Konstanz, Německo) se tento roztok nechal procházet pod proudem dusíku přes trysky sprejově sušárny se vstupní teplotou 130 °C, zatímco produktový proud se kontroloval, aby se udržovala výstupní teplota 67 až 68 °C.
Tento pevný materiál se přidal do směsi isopropanolu a vody (3:1 (obj ./obj.)) v poměru 1 kg prášku
-17CZ 35153 UI v 12 1 isopropanolu/vody. Suspenze se intenzivně míchala, pak se nerozpustná lakto-A-tetraóza zfiltrovala a sušila při 40 °C. Pokud se začínalo se 73 až 89% čistým materiálem, purifikovala se vykrystalizovaná lakto-A-tetraóza na okolo 95 %, s izolací 85 %. Tento cukr se rozpustil ve vodě na koncentraci 25 % a nechal postupně procházet přes 6kDa filtr (Pali Microza ultrafiltrační modul SIP-2013, Pali Corporation, Dreieich, Německo) a 0,2pm sterilní filtr. Pevný materiál se získal sprejovým sušením tohoto sterilního materiálu za výše uvedených podmínek.
Příklad 4: Purifikace 3’- a 6’-sialyllaktózy z fermentačního bujónu
Pro výrobu 3’- a 6’-sialyllaktózy se použily rekombinantní E. coli BL21 (DE3) \lacZ kmeny. Tyto kmeny měly společné genetické modifikace: chromozomální, konstitutivní exprese glukosamin-6-fosfát syntházy GlmS z E. coli, A-acetylglukosamin 2-epimerázy Slrl975 z Synechocystis sp., glukosamin 6-fosfát A-acetyltransferázy Gnal z Saccharomyces cerevisiae, fosfoenolpyruvát syntházy PpsA z E. coli, A-acetylneuraminát syntházy NeuB a CMP-sialová kyselina synthetázy NeuA, dva naposledy uvedené z Campylobacter jejuni. Navíc k tomu byly geny, které kódovaly laktóza permeázu LacY z A. coli, cscB (sacharóza permeáza), cscK (fruktokináza), cscA (sacharóza hydroláza) a cscR (transkripční regulátor) z E. coli W, a funkční ga/-operon, sestávající z genů galE (UDP-glukóza-4-epimeráza), galT (galaktóza-1-fosfát uridylyltransferáza), galK (galaktokináza), agalM (galaktóza-1-epimeráza) z A. coli K12, integrované do genomu BL21 kmene a konstitutivně exprimované.
Kmen, který syntetizuje 3’-sialyllaktózu, nese 3’-sialyltransferázový gen z Vibrio sp. JT-FAJ-16, zatímco kmen, který produkuje 6’-sialyllaktózu, obsahuje alfa-2,6-sialyltransferázu plsT6 z. Photobacterium leiognathi JT-SHIZ-119.
Kmeny, které produkují sialyllaktózu, se nechaly růst v definovaném médiu s minerálními solemi, které obsahovalo 7 gl1 NH4H2PO4, 7 gl1 K2HPO4, 2 gl1 KOH, 0,3 gl1 citrónové kyseliny, 5 gl1 NH4CI, 1 mil1 protipěnidla (Struktol J673, Schill + Seilacher), 0,1 mM CaCfi, 8 mM MgSO4, stopové prvky a 2 % sacharózy jako zdroj uhlíku. Přívod sacharózy (500 gl1), přivedený ve fázi přivedené vsádky se suplementoval 8 mM MgSO4, 0,1 mM CaCfi, stopovými prvky a 5 gl1 NH4CI.
Stopové prvky sestávaly z 0,101 gl1 nitrilotriaoctové kyseliny, pH 6,5, 0,056 gl1 citronanu amonno-železitého, 0,01 gl1 MnCL x 4 H2O, 0,002 gl1 C0CI2 x 6 H2O, 0,001 gl1 CuCL x 2 H2O, 0,002 gl-1 kyseliny borité, 0,009 g!1 ZnSO4 x 7 H2O, 0,001 gl1 Na2MoO4 x 2 H2O, 0,002 g!1 Na2SeO3, 0,002 gl1 NiSO4 x 6 H2O.
Pro vytvoření sialyllaktózy se použil přívod laktózy 216 gl . pH se kontrolovalo použitím roztoku amoniaku (25 % v/v). Fermentace přivedené vsádky se provedla při 30 °C za konstantního provzdušňování a míchání. Aby se odstranila zbytková laktóza na konci fermentace, přidala se do fermentační nádoby β-galaktosidáza. Výsledné monosacharidy se metabolizovaly produkčním kmenem.
Kapalina bez buněk se pak deionizovala iontově výměnou chromatografií. Nejprve se odstranily kationtové kontaminanty na silném kationtovém měniči v objemu 2001 (Lewatit® S 2568 (Lanxess, Cologne, Německo) v H+ formě. Za použití NaOH se pH získaného roztoku upravilo na 7,0. V druhém kroku se z roztoku odstranily aniontové ionty a nežádoucí barviva za použití silného aniontového měniče Lewatit® S 6368 S (Lanxess, Cologne, Německo) v chloridové formě, lontoměnič měl objem lože 200 1. Za použití druhého filtračního kroku na cross-flow filtru (mezní hodnota 150 kDa) (Microdyn-Nadir, Wiesbaden, Německo) se odstranily sraženiny, které pocházely z okyselení roztoku. Pro zakoncentrování cukru se tento roztok nanofiltroval na Dow FILMTECH NF270-4040 (Inaqua, Mónchengladbach, Německo), nebo, alternativně, na Trisep 4040-XN45-TSF Membráně (mezní hodnota 0,5 kDa) (Microdyn-Nadir, Wiesbaden, Německo). Za použití naposledy uvedené membrány se z produktu oddělil monosacharid
-18CZ 35153 UI
A-acetylglukosamin, který pocházel z fermentačního procesu a který znečišťoval sialyllaktózový roztok. Zakoncentrovaný sialyllaktózový roztok se pak zpracoval s aktivním uhlím (CAS:7440-44-0, Carl Roth, Karlsruhe, Německo), aby se odstranila barviva, jako jsou produkty Maillardových reakcí a produkty aldolových reakcí. Za účelem oddělení sialyllaktózy od vedlejších produktů, které pocházely z fermentačního procesu, jako je sialová kyselina a A-acetylglukosamin, se roztok zfiltroval na membráně GE4040F30 s mezní hodnotou 1 kDa (GE water & process technologies, Ratingen, Německo), a diafiltroval na vodivost 0,6 až 0,8 mScm1. Naředěný roztok se zakoncentroval na rotační odparce na koncentraci okolo 300 gl1. Při závěrečné chromatografické separaci se odstranily další kontaminující cukry, jako je disialyllaktóza. Proto se zakoncentrovaný roztok aplikoval na slabou aniontově výměnnou pryskyřici v acetátové formě (Amberlite FPA51, Dow Chemical, Michigan, USA). Zatímco se sialyllaktóza vzácně váže na tuto pryskyřice, disialyllaktóza se adsorbuje. A tak se tato sialyllaktóza eluuje pomocí 10 mM octanu amonného, zatímco disialyllaktóza se eluuje pomocí 1 M octanu amonného. Pro odstranění tohoto octanu amonného se sialyllaktóza vysrážela lOnásobným přebytkem ethanolu. Pevná frakce se zfiltrovala a sušila.
Produkt se dokončil tím, že se nechal 20% sialyllaktózový roztok procházet postupně přes 6 kDa filtr (Pali Microza ultrafiltrační modul SIP-2013, Pali Corporation, Dreieich, Německo) a přes 0,2 pm sterilní filtr.
Část roztoku se sprej ově sušila za použití Bůchi sprej ové sušárny (Bůchi Mini Spray Dryer B-290) (Bůchi, Essen, Německo), za aplikace následující parametrů: vstupní teplota: 130 °C, výstupní teplota 67 až 71 °C, průtok plynu 670 1/h, odsávač 100 %.
Sprejově sušená 6'-sialyllaktóza měla čistotu 91 %, zatímco 3'-sialyllaktózový materiálměl čistotu 93 %.
Příklad 5: Příprava HMO směsí
Směsi různých HMO se připravily z pevných produktů. Proto se jednotlivé HMO sprejově sušily a získané prášky se smíchaly. HMO-Směs I obsahovala 2’-fúkosyllaktózu a lakto-A-tetraózu v poměru 70 % hmota, až 30 % hmota.; HMO-Směs II obsahovala 2’-fukosyllaktózu (52 % hmota.), 3-fukosyllaktózu (13 % hmota.), lakto-A-tetraózu (26 % hmota.), 3’-sialyl-laktózu (4 % hmota.) a 6’-sialyllaktózu (5 % hmota.). Směsné prášky se rozpustily ve vodě do roztoku, který obsahoval 20 % hmota. HMO, a výsledný roztok se znovu sprejově sušil za použití Bůchi sprejově sušárny, jak se popisuje v příkladu 4.
Analýza výsledného sprejově sušeného prášku odhalila, že měl stejnou kompozici s ohledem na poměr různých HMO jako roztok podrobený sprejovému sušení.
Příklad 6: Příprava sacharidových směsí g 2'-FL a 1 g L-fukózy se rozpustily v 50 ml destilované vody. Výsledný roztok se sprejově sušil za použití Bůchi sprejově sušárny, jak se popisuje v příkladu 4. Získal se sprejově sušený prášek, který sestával v podstatě z 2'-FL a L-fúkózy, s tím, že poměr 2'-FL a L-fukózy ve sprejově sušeném prášku byl identický jako poměr 2'-FL a L-fukózy v roztoku, který se podrobil sprejovému sušení. A tak se může L-fukóza sprejově sušit v přítomnosti HMO.
Příklad 7: Charakterizace sprejově sušených lidských mléčných oligosacharidů
1. Diferenciální skenovací kalorimetrie (DSC)
Za použití diferenciální skenovací kalorimetrie (DSC) na Mettler Toledo 82 le (Mettler Toledo, Giessen, Německo) se stanovily tepelné události sprejově sušených lidských mléčných oligosacharidů, jmenovitě 3-fukosyllaktózy, 6’-sialyllaktózy, 3’-sialyllaktózy, lakto-A-tetraózy,
-19CZ 35153 UI a sprejově sušených směsí lidských mléčných oligosacharidů, směsi (HMO-Směs I) 2‘-fukosyllaktózy/lakto-A-tetraózy, a směsi (HMO Směs II) 2’-fukosyllaktózy, 3-fukosyl-laktózy, lakto-A-tetraózy, 6‘-sialyllaktózy, 3‘-sialyllaktózy, v daném pořadí.
Mettler Toledo 82le (Mettler Toledo, Giessen, Německo) se použil pro stanovení tepelných událostí sprejově sušených produktů (teplota skelného přechodu (Tg), dále exo- a endotermní události).
Přibližně 25 mg sprejově sušených lidských mléčných oligosacharidů se analyzovalo ve zvlněných AI-kelímcích (Mettler Toledo, Giessen, Německo). Vzorky se ochladily na 0 °C s 10 K/min a předehřály na 100 °C se skenovací rychlostí 10 K/min. Po ochlazení vzorků na 0 °C v druhém zahřívacím cyklu se vzorky předehřály na 150 °C. Uprostřed endotermního posunu z výchozí hodnoty v průběhu zahřívání se vzal sken jako teplota skelného přechodu (Tg).
Exotermní a endotermní píky se zaznamenají prostřednictvím píkové teploty a normalizované energie události.
První zahřívací sken u všech vzorků vykázal hlavní událost skelného přechodu v celkovém tepelném toku, jak bylo dokázáno hlavním krokovým přechodem v rozmezí přibližně 48 až 58 °C, u většiny vzorků, hlavní událost skelného přechodu pozorovaná v prvním zahřívacím skenu se znovu vyskytla v druhém zahřívacím skenu. Výsledky DSC analýz jsou shrnuté v tabulce 9.
Tabulka 9: Tepelné události HMO, jak se stanovily diferenciální skenovací kalorimetrií
Vzorek 1. zahřívací sken 2. zahřívací sken
Tg [°C] Tg [°C]
3-fúkosyllaktóza 57,6 59,9
lakto-N-tetraóza 49,9 79,4
6’-sialyllaktóza 47,6 49,6
3’-sialyllaktóza 48,8 54,3
2 ’ -fukosyllaktóza/lakto -N-te t raóza 56,3 59
HMO Směs 54,2 55,6
Pro 3-fukosyllaktózu se detekoval endotermální relaxační pík po Tg v prvním zahřívacím skenu. Pro lakto-A-tetraózu se detekovala mnohem vyšší Tg okolo 79 °C ve 2. zahřívacím skenu ve srovnání s Tg dalších vzorků. Toto mohlo být způsobeno endotermální událostí v průběhu prvního zahřívacího skenu při okolo 89 °C (-6,04 J/g). Jako pro 3-fůkosyllaktózu se také pro 6’-sialyllaktózu detekoval endotermální relaxační pík po Tg, nicméně, v tomto vzorku se navíc vyskytla endodermální událost při 77 °C (-0,22 J/g). Žádné endotermální události se nedetekovaly pro 3’-sialyllaktózu a HMO-Směs I, pro HMO-Směs II byla endotermální událost v průběhu 1. zahřívacího skenu při 79 °C (0,34 J/g).
2. Rentgenová prášková difrakce (XRD)
Širokoúhlá rentgenová prášková difrakce (XRD) se použila pro studii morfologie lyofilizovaných produktů. Použil se rentgenový difraktometr Empyrean (Panalytical, Almelo, Holandsko) vybavený měděnou anodou (45 kV, 40 mA, Kal emise při vlnové délce 0,154 nm) a PIXcel3D detektorem. Přibližně 100 mg sprejově sušených prášků se analyzovalo v reflexním módu v úhlovém rozmezí od 5 až 45° 20, s velikostí kroku 0,04° 20 a dobou počítání 100 vteřin na krok.
Všechny jednotlivé oligosacharidy, jakož i HMO Směsi I a II, vykázaly zcela amorfní stav (obrázky 1 až 6). Pro lakto-A-tetraózu se detekoval druhý (amorfní) signál okolo 9-10 °.
-20CZ 35153 UI
3. Laserová difrakce
Velikost částic prášku se hodnotila laserovou difrakcí. Systém detekuje rozptýlené a ohnuté světlo polem soustředně uspořádaných senzorových prvků. Softwarový algoritmus je pak aproximací počtu částic pomocí výpočtu z-hodnot z hodnot světelné intenzity, které se dostanou k různým senzorovým prvkům. Analýza se provedla za použití SALD-7500 Aggregate Sizer (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japansko) kvantitativního laserového difrakčního systému (qLD).
Malé množství (špička špachtle) každého vzorku se dispergovalo v 2 ml izooktanu a homogenizovalo ultrazvukem po dobu pěti minut. Disperze se přenesla do dávkové buňky naplněné izooktanem a analyzovala v manuálním módu.
Nastavení pro získání údajů bylo následující: Průměrný počet signálů na měření: 128, Akumulační počet signálů: 3, a Interval: 2 vteřiny.
Před měřením se systém vyčistil izooktanem. Každý vzorek disperze se změřil 3krát a zaznamenají se průměrné hodnoty a standard odchylka. Údaje se vyhodnotily za použití softwaru WING SALD II verze V3.1. Protože byl index lom vzorku neznámý, použil se index lomu cukerných (disacharidových) částic (1,530) pro stanovení profilů distribuce velikosti. Zaznamenají se hodnoty velikosti pro průměrný a střední průměr.
Průměrné velikosti částic pro všechny vzorky byly velmi podobné, mírně nižší hodnoty se naměřily pro HMO-Směs II. Charakteristiky velikosti částic jsou shrnuté v tabulce 10. Kromě toho, distribuce velikosti částic ukázala přítomnost jedné populace hlavní velikosti pro všechny vzorky.
Tabulka 10: Velikost částic HMO, jak se stanovila laserovou difrakcí
Velikost 3-FL LNT 6’-SL 3’-SL HMO- Směs I HMO Směs II
Průměrná [nm] 119,2 ±0,5 117,3 ± 0,7 113,8 ±1,5 115,4 ±0,6 113,1 ±0,3 97,3 ±5,3
Střední [nm] 141,3 ±0,0 141,3 ± 0,0 141,3 ±0,0 121,9 ± 16,7 141,3 ±0,0 112,2 ± 0,0

Claims (18)

  1. NÁROKY NA OCHRANU
    1. Výživová kompozice, ve formě sprejového sušeného prášku, která obsahuje směs strukturně odlišných lidských mléčných oligosacharidů - HMO, vyznačující se tím, že HMO jsou vybrány ze skupiny sestávající 2'-fukosyllaktózy 2’-FU, 3-fukosyllaktózy 3-FU, lakto-A-tctraózy LAT. lakto-V-«eotetraózy UAnT, lakto-A-fůkopentaózy LA'FP-1.
    3'-sialyllaktózy 3'-SU, 6'-sialyllaktózy 6'-SU,
  2. 2. Výživová kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že HMO dále obahuje sialyllakto-A-tetraózy a UST-a, sialyllakto-A-tetraózy b UST-b, sialyllakto-A-tetraózy c UST-c a disialyllakto-N-tetraóz DSUNT.
  3. 3. Výživová kompozice podle nároku 1 a 2, vyznačující se tím, že dále obsahuje jeden monosacharid vybraný ze skupiny sestávající z Ufukózy a A-acetylneuraminové kyseliny - NeuAc.
  4. 4. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 a 3, vyznačující se tím, že HMO sestává z:
    sacharid A [hmota. %] B [hmota. %]
    2'-FU 30,0 - 55,0 33,6 -52,2
    3-FU 10,0- 15,0 10,7 - 13,0
    LAT 20,0 - 30,0 20,1 -26,1
    LMiT 0,0-5,0 0,0 - 2,0
    UAFP-I 0,0 - 20,0 0,0 - 16,0
    3'-SL 2,0 - 4,0 2,7 - 3,5
    6'-SL 4,0 - 6,0 4,0 - 5,2
    NeuAc 0,0 - 10,0 0,0-8,1
    U-fůkóza 0,0 - 6,0 0,0 - 5,4
  5. 5. Výživová kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že HMO obsahuje 52,2 % hmota. 2'-FU, 13,0 % hmota. 3-FU, 26,1 % hmota. LAT. 3,5 % hmota. 3'-SU a 5,2 % hmota. 6'-SU
  6. 6. Výživová kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že HMO obsahuje 39,0 % hmota. 2'-FU, 12,0 % hmota. 3-FU, 23,0 % hmota. UAT, 2,0 % hmota. LM1T, 16,0 % hmota. LAFP-I. 3,0 % hmota. 3'-SU a 5,0 % hmota. 6'-SU
  7. 7. Výživová kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že HMO obsahuje 33,6 % hmota. 2'-FU, 10,7 % hmota. 3-FU, 20,1 % hmota. LAT. 2,0 % hmota. LM1T, 13,4 % hmota. LAFP-I. 2,7 % hmota. 3'-SU, 4,0 % hmota. 6'-SU, 8,1 % hmota. NeuAc a 5,4 % hmota. Ufukózy.
  8. 8. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň 80 % hmota., alespoň 85 % hmota., alespoň 90 % hmota., alespoň 93 % hmota., alespoň 95 % hmota, nebo alespoň 98 % hmota. HMO(ů).
  9. 9. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že alespoň jeden HMO, výhodně kterýkoliv z HMO(ů), je bez geneticky upravených mikroorganismů a bez molekul nukleových kyselin odvozených z geneticky upravených mikroorganismů.
  10. 10. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že alespoň jeden HMO, výhodně všechny HMO(y), a případně alespoň jeden monosacharid jsou v amorfní formě.
  11. 11. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jeden probiotický mikroorganismus.
    - 22 CZ 35153 UI
  12. 12. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že obsahuje jednu nebo více dodatečných látek vybraných ze skupiny sestávající z oleje, tuku, mastných kyselin, sacharidů, proteinů, vitaminů, minerálních látek a stopových prvků.
  13. 13. Výživová kompozice podle nároku 12, vyznačující se tím, že proteiny jsou vybrané ze skupiny proteinů, které pocházejí z odstředěného mléka, syrovátky, kaseinu a sójových bobů.
  14. 14. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jedno prebiotikum vybrané ze skupiny sestávající z galakto-oligosacharidů, frukto-oligosacharidů a inulinu.
  15. 15. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, vyznačující se tím, že je ve formě prášku, granulí, vloček nebo pelet.
  16. 16. Výživová kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, vyznačující se tím, že je v kapalné formě.
  17. 17. Potravinový doplněk nebo lékařská formulace, vyznačující se tím, že obsahuje výživovou kompozici definovanou v nárocích 1 až 16.
  18. 18. Umělá kojenecká výživa, vyznačující se tím, že obsahuje výživovou kompozici definovanou v nárocích 1 až 16.
CZ201936810U 2017-12-08 2018-12-07 Výživová kompozice CZ35153U1 (cs)

Applications Claiming Priority (10)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17206124.4A EP3494804A1 (en) 2017-12-08 2017-12-08 Spray-dried 3-fucosyllactose
EP17206223.4A EP3494806A1 (en) 2017-12-08 2017-12-08 Spray-dried lacto-n-fucopentaose
EU17206124 2017-12-08
EU17206223 2017-12-08
EP17206159.0A EP3494805A1 (en) 2017-12-08 2017-12-08 Spray-dried tetrasaccharides
EU17206159 2017-12-08
EU17206414 2017-12-11
EP17206414.9A EP3494807A1 (en) 2017-12-11 2017-12-11 Spray-dried sialyllactose
EP18155669.7A EP3524067A1 (en) 2018-02-08 2018-02-08 Spray-dried mixture of human milk oligosaccharides
EU18155669 2018-02-08

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ35153U1 true CZ35153U1 (cs) 2021-06-15

Family

ID=64564901

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ201936810U CZ35153U1 (cs) 2017-12-08 2018-12-07 Výživová kompozice

Country Status (16)

Country Link
US (5) US20200384041A1 (cs)
EP (5) EP3720298A1 (cs)
JP (8) JP2021505171A (cs)
KR (5) KR20200096771A (cs)
CN (5) CN111447845B (cs)
AT (1) AT17129U1 (cs)
AU (5) AU2018380959A1 (cs)
BR (5) BR112020011300A2 (cs)
CZ (1) CZ35153U1 (cs)
DE (1) DE202018006272U1 (cs)
DK (2) DK201900079Y4 (cs)
MX (5) MX2020005995A (cs)
NZ (1) NZ764680A (cs)
PH (5) PH12020550843A1 (cs)
SG (5) SG11202004659QA (cs)
WO (5) WO2019110800A1 (cs)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3546060A1 (en) * 2018-03-27 2019-10-02 DuPont Nutrition Biosciences ApS Process for spray drying fucosyllactose solutions and related product compositions
EP3741770A1 (en) * 2019-05-21 2020-11-25 Jennewein Biotechnologie GmbH Purification of oligosaccharides from a fermentation broth by using filtration
EP3789495A1 (en) * 2019-09-03 2021-03-10 Jennewein Biotechnologie GmbH Production of sialylated oligosaccharides in bacillus cells
WO2021045968A1 (en) * 2019-09-04 2021-03-11 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for removing an antifoam agent from a solution comprising a human milk oligosaccharide and related compositions
EP3821717A1 (en) * 2019-11-15 2021-05-19 Jennewein Biotechnologie GmbH A method for drying human milk oligosaccharides
GB2590375B (en) * 2019-12-11 2024-05-08 Mjn Us Holdings Llc Staged nutritional compositions containing human milk oligosaccharides and uses thereof
GB2623899A (en) * 2019-12-11 2024-05-01 Mjn Us Holdings Llc Staged nutritional compositions containing human milk oligosaccharides and uses thereof
EP4077702A4 (en) * 2019-12-19 2023-11-01 Glycom A/S SEPARATION OF SIALYLATED OLIGOSACCHARIDES FROM A FERMENTATION BROTH
WO2021155157A1 (en) * 2020-01-29 2021-08-05 Dsm Ip Assets B.V. Process for recovering & purifying human milk oligosaccharides
US20230133446A1 (en) * 2020-03-20 2023-05-04 Glycom A/S Methods for providing a solid hmo product, and solid hmo products obtained thereby
WO2022057444A1 (zh) * 2020-09-18 2022-03-24 中国科学院过程工程研究所 糖链及其组合物以及在预防和/或治疗冠状病毒感染中的应用
WO2022096613A1 (en) * 2020-11-09 2022-05-12 Basf Se Obtaining highly concentrated hmo solutions by reverse osmosis
CN116847854A (zh) 2020-12-11 2023-10-03 高级蛋白质技术公司 包含岩藻糖基乳糖作为有效成分的抗病毒组合物
EP4346450A1 (en) * 2021-06-04 2024-04-10 N.V. Nutricia Infant formula for feeding infants receiving infant formula and human breast milk
CN114014896B (zh) * 2021-10-09 2023-12-05 中国科学院合肥物质科学研究院 一种高纯度3`-唾液酸乳糖的分离纯化方法
CN114539433B (zh) * 2021-12-29 2022-11-01 北京三元食品股份有限公司 一种乳低聚糖的制备方法及制备的低聚糖粉、食品
KR102645729B1 (ko) 2022-05-11 2024-03-12 (주)에이피테크놀로지 코리네박테리움 글루타미쿰을 이용한 락토-n-테트라오스 및 락토-n-네오테트라오스의 생산 방법
WO2023219437A1 (ko) 2022-05-11 2023-11-16 (주)에이피테크놀로지 코리네박테리움 글루타미쿰을 이용한 락토-n-테트라오스 및 락토-n-네오테트라오스의 생산 방법
KR20240081664A (ko) * 2022-11-30 2024-06-10 씨제이제일제당 (주) 발효 제품 제조 공정 및 제조 장치
CN117088923B (zh) * 2023-10-20 2024-02-13 山东星光首创生物科技有限公司 一种高流动性2’-岩藻糖基乳糖的生产方法

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003047402A (ja) 2001-08-06 2003-02-18 Meiji Milk Prod Co Ltd 中性オリゴ糖含有育児用調製乳
CN102257128A (zh) 2008-12-19 2011-11-23 詹内怀恩生物技术股份有限公司 岩藻糖化化合物的合成
GB0904562D0 (en) * 2009-03-17 2009-04-29 Separation Technologies Invest Isolation and purification of components of whey
RU2012140011A (ru) * 2010-02-19 2014-03-27 Глюком А/С Получение 6'-о-сиалиллактозы и промежуточные соединения
WO2011136647A1 (en) 2010-04-27 2011-11-03 N.V. Nutricia Use of 6'-sialyl lactose in infant and toddler nutrition
WO2011150939A1 (en) 2010-06-01 2011-12-08 Glycom A/S Polymorphs of 2'-o-fucosyllactose and producing thereof
EP2455387A1 (en) 2010-11-23 2012-05-23 Nestec S.A. Oligosaccharide mixture and food product comprising this mixture, especially infant formula
NZ612386A (en) 2010-12-31 2015-02-27 Abbott Lab Synbiotic combination of probiotic and human milk oligosaccharides to promote growth of beneficial microbiota
CN102154163A (zh) * 2010-12-31 2011-08-17 朱莉 一种3′-唾液酸乳糖的制备方法
EP2479263B1 (en) 2011-01-20 2013-11-27 Jennewein Biotechnologie GmbH Novel Fucosyltransferases and their applications
DE12746649T1 (de) * 2011-02-16 2016-09-29 Glycosyn LLC Biosynthese menschlicher milcholigosaccaride in manipulierten Bakterien
EP2522232A1 (en) 2011-05-13 2012-11-14 Nestec S.A. Nutritional products comprising human milk oligosaccharides and methods for manufacture thereof
TW201249349A (en) * 2011-05-24 2012-12-16 Nestec Sa Milk oligosaccharide-galactooligosaccharide composition for infant formula containing the soluble oligosaccharide fraction present in milk, and having a low level of monosaccharides, and a process to produce the composition
DE202013012827U1 (de) * 2012-06-14 2020-02-13 Glycom A/S Verbesserung der Stabilität und Reinheit sowie Erhöhung der Bioverfügbarkeit von menschlichen Milch-Oligosacchariden oder Vorläufern oder Mischungen davon
CN104812768B (zh) 2012-11-13 2019-06-21 格礼卡姆股份公司 晶体3-o-岩藻糖基乳糖
WO2014086373A1 (en) * 2012-12-07 2014-06-12 Glycom A/S Crystallisation of human milk oligosaccharides (hmo)
WO2014100191A1 (en) 2012-12-18 2014-06-26 Abbott Laboratories Nutritional compositions comprising neuroprotective dietary oligosaccharides
TW201438719A (zh) 2012-12-18 2014-10-16 Abbott Lab 改善壓力症狀之母乳寡糖
US9815862B2 (en) 2012-12-18 2017-11-14 Glycom A/S Polymorphs of LNnT
EP3572521A1 (en) 2013-09-10 2019-11-27 Jennewein Biotechnologie GmbH Production of oligosaccharides
EP2857410A1 (en) 2013-10-04 2015-04-08 Jennewein Biotechnologie GmbH Process for purification of 2´-fucosyllactose using simulated moving bed chromatography
CN114468302A (zh) * 2013-11-15 2022-05-13 雀巢产品有限公司 用于预防或治疗有风险婴儿或幼儿的urt感染的组合物
US11135232B2 (en) * 2013-11-15 2021-10-05 Societe Des Produits Nestle S.A. Compositions for use in the prevention or treatment of necrotizing enterocolitis in infants and young children
MX2016006220A (es) 2013-11-15 2016-08-08 Nestec Sa Composiciones para usar en la prevencion o tratamiento de la enterocolitis necrotizante en infantes y niños pequeños nacidos por cesarea.
US10758555B2 (en) * 2013-11-15 2020-09-01 Societe Des Produits Nestle S.A. Compositions for preventing or treating allergies in infants from or fed by non secretor mothers by providing fucosylated-oligosaccharides in particular among infants at risk or born by C-section
EP2896628B1 (en) * 2014-01-20 2018-09-19 Jennewein Biotechnologie GmbH Process for efficient purification of neutral human milk oligosaccharides (HMOs) from microbial fermentation
EP2927316B1 (en) 2014-03-31 2018-11-07 Jennewein Biotechnologie GmbH Total fermentation of oligosaccharides
US20150305385A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 Mead Johnson Nutrition Company Pediatric nutritional composition with human milk oligosaccahrides, prebiotics and probiotics
AU2015315110B2 (en) 2014-09-09 2021-04-08 Glycosyn LLC Alpha (1,3) fucosyltransferases for use in the production of fucosylated oligosaccharides
CN115364113A (zh) 2014-10-29 2022-11-22 格礼卡姆股份公司 合成组合物以及用于治疗肠易激综合症的方法
US10500221B2 (en) 2014-12-05 2019-12-10 Glycom A/S Crystalline difucosyllactose
WO2017043382A1 (ja) 2015-09-09 2017-03-16 カルソニックカンセイ株式会社 流体加熱装置及びその製造方法
US11432578B2 (en) * 2015-12-15 2022-09-06 Glycom A/S Mixture of HMOs
WO2017101953A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Glycom A/S Crystalline forms of lnt
EP3390652A4 (en) * 2015-12-18 2019-06-12 Glycom A/S Fermentative preparation of oligosaccharides
CN105532883A (zh) * 2015-12-21 2016-05-04 海普诺凯营养品有限公司 一种婴幼儿用配方羊奶粉及其制备方法
DE202017007249U1 (de) * 2016-03-07 2020-04-23 Glycom A/S Abtrennung von Oligosacchariden aus der Fermentationsbrühe
US11224605B2 (en) * 2016-05-19 2022-01-18 Glycom A/S Synthetic composition
EP3450443A1 (en) 2017-08-29 2019-03-06 Jennewein Biotechnologie GmbH Process for purifying sialylated oligosaccharides
EP3486326A1 (en) 2017-11-21 2019-05-22 Jennewein Biotechnologie GmbH Method for the purification of n-acetylneuraminic acid from a fermentation broth
EP3494804A1 (en) 2017-12-08 2019-06-12 Jennewein Biotechnologie GmbH Spray-dried 3-fucosyllactose
EP3494807A1 (en) 2017-12-11 2019-06-12 Jennewein Biotechnologie GmbH Spray-dried sialyllactose
EP3494806A1 (en) 2017-12-08 2019-06-12 Jennewein Biotechnologie GmbH Spray-dried lacto-n-fucopentaose
EP3494805A1 (en) 2017-12-08 2019-06-12 Jennewein Biotechnologie GmbH Spray-dried tetrasaccharides

Also Published As

Publication number Publication date
JP2021505177A (ja) 2021-02-18
AU2018380960A1 (en) 2020-06-04
MX2020005783A (es) 2020-08-20
RU2020119946A3 (cs) 2022-04-28
DK201900079U1 (en) 2019-10-15
PH12020550849A1 (en) 2021-05-17
US20210171992A1 (en) 2021-06-10
KR20200096770A (ko) 2020-08-13
EP3720301A1 (en) 2020-10-14
US20200384041A1 (en) 2020-12-10
MX2020005995A (es) 2020-08-17
JP2023182675A (ja) 2023-12-26
DK201900079Y4 (da) 2023-02-02
DE202018006272U1 (de) 2019-12-20
CN111465331A (zh) 2020-07-28
JP2024023444A (ja) 2024-02-21
EP3720299A1 (en) 2020-10-14
US20220232870A1 (en) 2022-07-28
MX2020005788A (es) 2020-08-20
RU2020119954A3 (cs) 2022-04-05
SG11202004914RA (en) 2020-06-29
BR112020011296A2 (pt) 2020-11-24
RU2020119946A (ru) 2022-01-10
PH12020550840A1 (en) 2021-07-05
WO2019110806A1 (en) 2019-06-13
AT17129U1 (de) 2021-06-15
MX2020005782A (es) 2020-08-20
SG11202004659QA (en) 2020-06-29
EP3720297A1 (en) 2020-10-14
DK201900113U8 (en) 2020-11-05
KR20200096779A (ko) 2020-08-13
JP2021505174A (ja) 2021-02-18
PH12020550843A1 (en) 2021-05-17
SG11202004650SA (en) 2020-06-29
CN111447844A (zh) 2020-07-24
MX2020005781A (es) 2020-08-20
BR112020011300A2 (pt) 2020-11-17
RU2020119944A (ru) 2022-01-10
SG11202004655PA (en) 2020-06-29
AU2018380957B2 (en) 2023-04-13
WO2019110804A1 (en) 2019-06-13
EP3720298A1 (en) 2020-10-14
BR112020011242A2 (pt) 2020-11-17
KR20200096772A (ko) 2020-08-13
US20210161192A1 (en) 2021-06-03
KR20200096793A (ko) 2020-08-13
JP2024016240A (ja) 2024-02-06
AU2018380959A1 (en) 2020-06-18
BR112020011202A2 (pt) 2020-11-17
RU2020119954A (ru) 2022-01-10
WO2019110801A1 (en) 2019-06-13
JP2021505171A (ja) 2021-02-18
AU2018380956A1 (en) 2020-06-11
CN111447845B (zh) 2022-10-28
WO2019110803A1 (en) 2019-06-13
US20200383367A1 (en) 2020-12-10
RU2020119944A3 (cs) 2022-04-27
PH12020550848A1 (en) 2021-05-17
RU2020119953A (ru) 2022-01-10
EP3720300A1 (en) 2020-10-14
CN111447843A (zh) 2020-07-24
RU2020119951A3 (cs) 2022-04-28
RU2020119953A3 (cs) 2022-04-05
SG11202004414PA (en) 2020-06-29
JP7291702B2 (ja) 2023-06-15
CN111447845A (zh) 2020-07-24
DK201900113U1 (en) 2020-01-07
BR112020011236A2 (pt) 2020-11-17
AU2018380962A1 (en) 2020-06-11
WO2019110800A1 (en) 2019-06-13
JP2021505170A (ja) 2021-02-18
AU2018380957A1 (en) 2020-06-11
CN111432663A (zh) 2020-07-17
RU2020119951A (ru) 2022-01-10
US11582994B2 (en) 2023-02-21
KR20200096771A (ko) 2020-08-13
NZ764680A (en) 2023-06-30
JP2021505173A (ja) 2021-02-18
PH12020550839A1 (en) 2021-07-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11582994B2 (en) Spray-dried 3-fucosyllactose
EP3494805A1 (en) Spray-dried tetrasaccharides
EP3494807A1 (en) Spray-dried sialyllactose
EP3494806A1 (en) Spray-dried lacto-n-fucopentaose
EP3524067A1 (en) Spray-dried mixture of human milk oligosaccharides
EP3494804A1 (en) Spray-dried 3-fucosyllactose
US20230148644A1 (en) Spray-Dried Tetrasaccharides
RU2803849C2 (ru) Высушенная распылением смесь олигосахаридов грудного молока
RU2812853C2 (ru) Высушенные распылением тетрасахариды
RU2812864C2 (ru) Высушенная распылением лакто-n-фукопентаоза
RU2802680C2 (ru) Высушенная распылением сиалиллактоза
RU2810298C2 (ru) Высушенная распылением 3-фукозиллактоза

Legal Events

Date Code Title Description
FG1K Utility model registered

Effective date: 20210615

ND1K First or second extension of term of utility model

Effective date: 20221128